Brevet FR2819724A1 — publié le 20020726

r MOYENS POUR INDUIRE UNE RÉPONSE IMMUNE AUX ANTIGÈNES BACTÉRIENS POLYSACCHARIDIQUES ET AUX STRUCTURES PROTÉIQUES DES CAPSIDES DE VIRUS DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne le domaine de l'immunisation des animaux à sang chaud, y compris l'homme, contre des agents infectieux. Elle concerne plus particulièrement des moyens pour le déclenchement et/ou le renforcement des réponses immunes contre les infections et les maladies provoquées par des bactéries encapsulées à motifs polysaccharidiques et/ou par les structures protéiques des capsides de virus. ARRIÈRE-PLAN TECHNOLOGIQUE DE L'INVENTION La réponse immune aux antigènes polysaccharidiques se développe graduellement au cours des premières années de la vie (Hidalgo, H. et al., Pre and post-immunization antibody titers in children withrecurrent infections, Ann. All. Asthma. Immunol., 1996,76 : 341-346) et implique principalement les IgG2. Les enfants âgés de moins de 2 ans et les personnes âgées ne peuvent se défendre contre les bactéries encapsulées à motifs polysaccharidiques, alors que ces individus peuvent répondre aux antigènes T-dépendants (protéiques). Ce phénomène, qui a des conséquences cliniques n'a pas été complètement élucidé à ce jour. Or, le pneumocoque, le méningocoque, l'hémophilus influenzae et les streptocoques sont des germes à capsule polysaccharidique à motifs variables selon les souches. A titre d'exemple, on a ainsi identifié 84 sérotypes différents du pneumocoque. Or ce germe est la principale cause de pneumopathies, méningites, sinusites et otites bactériennes. Parmi ces affections, les pneumonies à pneumocoque représenteraient près de 5000 décès par an en France, dont 90 % chez des sujets de plus de 65 ans, et 1 million de décès par an dans le monde chez les enfants de moins de 5 ans (Lancet, éditorial, 1999,354 : 2011 ; Shann, F., Pneumococcal vaccine : time for another controlled trial, Lancet, 1998,351 : 1600-1601 ; Siber, G. R., Pneumococcal disease : Prospects for a new generation of vaccines, Science, 1994,265 : 1385-1387). r Les résistances aux antibiotiques du pneumocoque, autrefois exceptionnelles, sont désormais de plus en plus fréquentes, et atteignent 20 à 35 % des souches pour les antibiotiques les plus utilisés, pénicilliniques et macrolides, ce qui ramène au premier plan le problème des vaccinations antipneumococciques et également antiméningococciques. Les premiers vaccins étaient dirigés contre les antigènes polysaccharidiques des capsules des virus, et ils sollicitaient une réponse B, T-indépendante. Ces vaccins 14-, puis 23-valents, qui visaient à couvrir 90 % des sérotypes, avaient été présentés comme efficaces il y a 20 ans. Or, on sait maintenant (Shann, 1998, supra) qu'ils ne protègent que partiellement contre les formes septicémiques, et même qu'ils n'ont pas montré d'efficacité dans les formes non septicémiques, qui sont de loin les plus fréquentes, et qu'ils se sont en particulier avérés être inactifs chez des sujets de moins de 2 ans ou de plus de 50 ans (Örtqvist, A. et al., Randomise trial of 23-valent pneumococcal capsular polysaccharide vaccine in prevention of pneumonia in middle-aged and ederly people, Lancet, 1998,352 : 399-403) et que, dans les meilleurs des cas, leur durée d'action est faible. Il en résulte une inefficacité ou une durée d'efficacité très limitée, nécessitant de multiples revaccinations, dans le cas des vaccins traditionnels dirigés contre les antigènes polysaccharidiques des capsules des virus chez des sujets de moins de 2 ans ou de plus de 50 ans environ. Pour toutes ces raisons, la politique vaccinale dans le monde reste confuse. Alors que les autorités sanitaires d'Italie, d'Espagne et de Belgique ont développé des programmes de vaccination systématique, celles d'Allemagne, des Pays-Bas et de France, s'en sont à peu près complètement désintéressées (Lancet, éditorial, 1999, supra), alors même que la France est le principal producteur européen de vaccins. Cette situation de quasi-échec pour la prévention et le traitement des infections, notamment à pneumocoques et méningocoques, chez les sujets jeunes et les sujets âgés, constitue pourtant un problème majeur de santé publique. Plusieurs stratégies sont alors apparues possibles (Siber, 1994, supra) : Les vaccins conjugués, sur le modèle du vaccin anti-Hémophilus B, dont l'efficacité est clairement établie, concernent les 7 ou 9 sérotypes les plus fréquents, couplés chacun à une protéine antigénique, et permettent ainsi r d'obtenir une réponse immunologique beaucoup plus forte, en sollicitant les lymphocytes B, T-indépendants. Ils posent cependant des problèmes considérables de technologie et de coût de production, car chaque antigène polysaccharidique doit être couplé sélectivement à la protéine antigénique e une concentration appropriée, si bien que le vaccin ainsi constitué est en réalité un mélange de plusieurs, en pratique 7, vaccins différents, ce qui est techniquement très difficile à réaliser. De plus, avec de tels vaccins, d'autres problèmes surgissent. C'est ainsi que la dose d'antigène protéique, nécessairement élevée, peut induire des réactions sévères. De plus, on est confronté à un problème de compétition antigénique entre les divers sousvaccins. Mais aussi, et surtout, un problème majeur est celui de la difficulté du choix des protéines antigéniques, toxines diphtériques ou tétaniques ou protéines de l'enveloppe extérieure du méningocoque (Siber, 1994, supra ; Shann, 1998, supra). . Une solution alternative consiste à renoncer à viser les antigènes polysaccharidiques et à utiliser les enzymes ou protéines pneumococciques, pneumolysine, neuraminidase, autolysine, hyaluronidase, protéine de surface A, adhésine de surface A, etc., . Or, jusqu'à maintenant, aucun des essais d'immunisation s'appuyant sur ces choix n'a fait la preuve expérimentale de son efficacité (Siber, 1994, supra ; Shann, 1998, supra). 'Une troisième solution envisagée serait d'injecter simultanément avec des vaccins classiques des anticorps anti-CD40, susceptibles d'entraîner une activation polyclonale B (Shann, 1998, supra). Aucune d'entre elles n'a cependant apporté des réponses pleinement satisfaisantes à la problématique sanitaire rappelée plus haut. On a maintenant trouvé de manière inattendue que l'on peut induire et/ou stimuler, ou encore soumettre à une régulation négative une réponse immune aux antigènes polysaccharidiques et aux structures protéiques des capsides de virus en stimulant ou respectivement inhibant spécifiquement une sous-population de cellules B, à savoir la sous-population de cellules B M+D+27+, y compris les cellules d'une telle sous-population de cellules B qui ne sont pas dans un centre germinatif, avantageusement de manière ciblée pour qu'elle apporte une réponse anti-bactérienne T-indépendante. On a ainsi élaboré des moyens pour déclencher et/ou renforcer une telle réponse immune chez des sujets démunis de réponse immune propre, r ou chez lesquels la réponse immune concernée est insuffisante-ce qui est le cas des enfants de moins de deux ans ainsi que des personnes âgées de plus de 65 ans-, ainsi que des moyens pour tester si une réponse immune appropriée est intervenue, aussi bien sous l'effet d'une réponse immune naturelle que sous l'action de l'induction et/ou stimulation d'une réponse immune conformément à la présente invention, c'est-à-dire à l'encontre des antigènes polysaccharidiques bactériens et des structures protéiques des capsides de virus. L'invention a pour objets un nouveau concept immunogène et vaccinal, un vaccin y relatif, ainsi qu'un protocole de test pour le diagnostic soit des états nécessitant une vaccination selon l'invention, soit de l'efficacité d'une vaccination selon l'invention chez un sujet qui y a été soumis. L'invention a également pour objet l'application du dit concept immunogène particulier à la préparation de moyens pour l'inhibition d'une réponse autoimmune. RÉSUMÉ DE L'INVENTION Les moyens selon l'invention pour l'immunisation des animaux à sang chaud, y compris l'homme, contre les infections et les maladies provoquées par des bactéries encapsulées à motifs polysaccharidiques et/ou par les structures protéiques des capsides de virus, comportent ainsi, d'une part un moyen vaccinal original, d'autre part des moyens diagnostiques pour la l'évaluation des états nécessitant une vaccination selon l'invention et/ou pour l'évaluation de l'efficacité d'une vaccination selon l'invention sur des prélèvements sanguins effectués sur un sujet donné. BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS L'invention est illustrée ci-après plus en détail, en référence aux planches de dessins annexées, dans lesquelles : Fig. 1 représente la distribution de mutations dans des segments de gène VH3-23 réarrangés provenant de donneurs témoins et de patients XHIM. Dans cette figure, chaque histogramme représente le pourcentage de séquences de VH3-23 manifestant le nombre de mutations indiqué dans un intervalle donné. Etant donné son profil de mutation remarquable, le patient r C. Q. a été considéré séparément des autres patients XHIM, tandis que le patient Z. A. dont la fréquence des mutations était proche du niveau de base n'a pas été inclus dans cette analyse. Le nombre de séquences V analysées dans chaque groupe était : enfants, n=33 ; adultes témoins, n=37 ; patients XHIM, n=125 ; patient C. Q., n=28. Fig. 2 représente un schéma proposé pour le développement de cellules B humaines conduisant à une hypermutation de gène des Ig. Dans cette figure, la voie I correspond à des réponses T-dépendantes se produisant dans les centres germinatifs (CG), tandis que la voie II est proposée comme correspondant à des réponses T-indépendantes qui peuvent comporter l'assistance non-conventionnelle de cellules NK ou T. La zone marginale splénique (ZM) ou des sites équivalents dans les plaques de Peyer ou les ganglions lymphatiques pourraient être le site d'activation des cellules B. Une hypermutation de gènes des Ig a lieu dans chacune de ces deux voies. DESCRIPTION DÉTAILLÉE DE L'INVENTION Le principe théorique qui est à la base de la présente invention est la mutation des gènes des Ig d'une sous-population B définie en l'absence de collaboration T-B classique. La population lymphocytaire B comprend, chez l'homme, quatre souspopulations (Klein, U. et al., 1998, J. Exp. Med. 188 : 1679-1689) : 'La première consiste en des cellules naïves, toujours CD27-et IgM+ IgD+ (M+D+27-), qui proviennent de la moelle osseuse et représentent environ 60 % des lymphocytes B. Elles peuvent être CD5+ (pour environ 15 %) ou CD5- (pour environ 45 %). 'Les trois autres consistent en des cellules à mémoire, qui représentent les 40 % restants, et qui sont toutes CD27+, avec environ 15 % de cellules qui ont effectué la commutation isotypique (M-D-27+) et environ 25 % qui ne l'ont pas effectuée (M+D+27+ pour environ 15 % et M+D-27+ pour environ 10%). Il est intéressant de noter que ce compartiment mémoire, qui représente ainsi environ 40 % des lymphocytes B, n'en représente que quelques pour cent chez la souris. Contrairement à celle-ci, l'homme est r capable de muter dans ses centres germinatifs toutes les cellules B M+27+, aussi bien D+ que D-. D'une part il est connu que le CD40 ligand (L) est la molécule-clé de l'interaction T-B dans les réponses T-dépendantes. Les patients humains mâles atteints du syndrome d'hyper IgM, avec une mutation mutilante sur le CD40 L situé sur le chromosome X et les souris knock-out pour ce gène, ne forment pas de centres germinatifs et, faute de collaboration T-B, ne commutent pas les isotypes des chaînes lourdes, ne mutent pas leurs gènes des immunoglobulines, et ne possèdent pratiquement pas d'IgG circulantes. D'autre part, les inventeurs de la présente invention ont isolé par des techniques connues la population M+D+27+ de tels patients humains mâles atteints du syndrome d'hyper IgM et ils ont montré que la fréquence des mutations somatiques y était plus ou moins normale suivant les patients. Face à ce résultat extrêmement surprenant, ils ont émis l'hypothèse que cette population M+D+27+, qui représente environ 40 % des cellules mutées chez l'adulte normal, se développe et se diversifie malgré l'absence de centre germinatif. D'autre part encore, les inventeurs de la présente invention ont également pris en compte le fait que les cellules M+D+27+ représentent chez l'homme, à la naissance environ 1 % des cellules B du cordon ombilical, et peuvent montrer un taux de mutations d'environ 0,5 par séquence (variable) d'environ 300 pb, tandis que pour des sujets à l'âge adulte elles ont diversifié leurs gènes d'immunoglobulines et représentent environ 5 à 25 % du compartiment B, avec 5 à 10 mutations par séquence (variable). On a alors établi selon la présente invention que le développement de cette population est parallèle à l'apparition des réponses aux antigènes T-indépendants, d'où l'hypothèse que ces cellules pouvaient être responsables des réponses immunes aux bactéries à capsules polysaccharidiques, streptocoques, pneumocoques, méningocoques, hémophilus influenzae et autres bactéries encapsulées polysaccharidiques, dont les résidus saccharidiques ne peuvent être présentés par les molécules du CMH, et qu'elles pouvaient également être à la base de la réponse à des virus à structure capsidique répétitive, qui déclenchent une réponse essentiellement T-indépendante, tels que notamment le poliovirus, le virus de la grippe, le virus de l'encéphalomyocardite, et autres (Bachmann, M. F. et r al., The influence of virus structure on antibody responses and virus serotype formation, Immunol. Today, 1996, 17 (12) : 553-558). Effectivement, les inventeurs ont observé que ceux des patients qui présentent une forte expansion de la population de cellules B M+D+27+, avec un taux élevé de mutations, sont mieux protégés que les autres contre les différents types d'infections pulmonaires ou d'infections ORL généralement observées chez les patients immunodéficients substitués aux IgG. Enfin, dans la mesure où la réponse aux vaccins antipolysaccharidiques bactériens ne se manifeste pas chez des patients splénectomisés (Molrine, D. et al., Normal IgG and impaired IgM responses to polysaccharide vaccines in asplenic patients, J. Inf. Dis., 1999,179 : 513-517), on peut admettre que la rate, et notamment sa zone marginale, pourrait être le lieu où sont produites ou stockées ces cellules M+D+27+. Sans vouloir être lié par une quelconque théorie, on estime plausible un modèle de développement des cellules B d'un animal à sang chaud, y compris l'homme, en deux compartiments correspondant aux différents types d'agressions extérieures auxquelles le sujet concerné sera confronté durant sa vie. L'homme, entre autres, devrait avoir ainsi développé deux systèmes B, l'un pouvant se diversifier dans les centres germinatifs afin de répondre avec une forte affinité aux antigènes peptidiques thymodépendants, et l'autre semblable à celui des tissus lymphoïdes associés à l'intestin (couramment dénommés GALT) et développé au cours de l'ontogenèse chez de nombreuses espèces (notamment le lapin, le mouton, les bovins), pouvant se diversifier de façon indépendante des centres germinatifs et pouvant assurer aux sujets chez lesquels de telles cellules sont actives une protection contre les antigènes T-indépendants. On a, pour ce faire, pris en compte des résultats procurés par la mise en oeuvre de la présente invention, selon lesquels des malades Hyper IgM ayant un taux de cellules M+D+27+ élevé et portant un récepteur d'Ig diversifié résistent mieux aux infections que ne le font d'autres malades non Hyper IgM recevant pourtant régulièrement des substitutions d'IgG. r Les expérimentations relatées ci-après servent à illustrer des aspects de la présente invention et ne doivent en aucune manière être considérées comme limitant celle-ci. Analyse par séparation et cytométrie de flux de cellules B IgM+IgD+CD27+ Un triage de cellules B M+D+27+ a été effectué par tachage bicolore sur des suspensions de cellules purifiées au Ficoll-isopaque enrichies en cellules B à 95-98% par séparation magnétique des cellules au moyen du système MiniMACS (Miltenyi Biotech), et l'un des réactifs suivants : 1) IgD anti-humain-FITC (Caltag) et CD27 anti-humain biotinylé (Ancell) plus Streptavidine-TriColor (Caltag) ; et 2) anti-IgD-FITC, CD27 anti-humain-PE (Coulter-Immunotech). On préférait cette dernière combinaison pour le triage de cellules de patients XHIM, étant donné que la coloration des populations CD27+ présentes à un faible pourcentage était quelquefois artificiellement renforcée avec le CD27-TriColor, d'après nos propres observations. L'absence de cellules B mémoire IgD-CD27+ a été suivie sur PBMC purifiée au Ficoll par coloration avec de l'anti-CD19-PC5 (Coulter- Immunotech), anti-IgD-FITC et anti-CD27-PE. Une analyse à trois couleurs a été effectuée sur des cellules B positives au CD19-PC5. Une autre caractérisation a été réalisée sur des cellules B enrichies en CD19, colorées avec de l'anti-IgD-FITC, IgM anti-humain-PE (Caltag) et anti-CD27 biotinylé, suivie par Streptavidine-TriColor. Une analyse en trois couleurs a été effectuée sur des cellules positives au CD27-TriColor barrière. Etant donné que les cellules IgD+CD27+ co-expriment l'IgM (données non représentées), cette population est dénommée IgM+IgD+CD27+ (ou en abrégé M+D+27+). Analyse de séquences de segments de gène VH3-23 réarrangés. De l'ADN génomique a été extrait de cellules B D+27+ triées par digestion par la protéinase K. Des segments de gène VH3-23 réarrangés ont été amplifiés à partir d'approximativement 3000 cellules via une polymérase Pfu Turbo (Stratagene), selon une stratégie d'ACP semi-nidifiée (seminested). Pour le premier round d'amplification, une amorce de tête de VH3- 23 (5'-GGCTGAGCTGGCTTTTTCTTGTGG-3') et un mélange d'amorces 3'JH (5'-TGAGGAGACGGTGACCAGGG-3'et 5'-TGAGGAGACGGTGACC- GTGG-3'dans un rapport de 3 : 1) ont été utilisés (45 s à 95OC, 60 s à 64OC, 90 s : à 72OC sur 25 cycles). Le second round d'amplification a été mis en oeuvre sur 1/10 du premier mélange réactionnel au moyen du même mélange d'amorces 3'JH et d'une amorce intronique VH3-23 (5'- GTGGAATGGATAAGAGTGA-3') (4 (s à 95OC, 60 s à 55OC, et 90 s à 72 C sur 25 cycles). La valeur de l'erreur d'ACP de fond a été déterminée dans les mêmes conditions expérimentales sur des cellules B D+27-provenant de sang du cordon, avec la même taille d'échantillon (soit 3000 cellules). Les produits d'ACP purifiés sur gel ont été clonés au moyen du kit de clonage de produits d'ACP Zero blunt TOPO PCR (Invitrogen). Les séquences des colonies positives au VH3-23 ont été obtenues au moyen du kit de séquençage à cycles BigDye (Perkin-Elmer) et analysées avec un analyseur génétique AB1310. Les séquences obtenues ont été comparées au gène VH3- 23 de lignée germinale sur 288 paires de bases (pb) (de Glu1 à Cys92). En mettant en oeuvre ces matériels et méthodes, on a analysé des mutations somatiques sur des séquences de VH3-23 réarrangés, amplifiées à partir d'ADN génomique de cellules B M+D+27+. Un patient (Z. A.) présentait un niveau de mutation proche de la base, déterminée dans les mêmes conditions expérimentales sur la population M+D+27- ; ce patient avait un passé médical particulier, étant donné qu'il avait reçu et rejeté une greffe de moelle osseuse trois ans avant le présent échantillonnage sanguin. Tous les autres patients, quel que soit leur âge, présentaient un niveau de mutation semblable à celui observé chez des enfants témoins (0, 5-1, 7 % pour les séquences totales et 0,9-1, 9 % pour les séquences mutées, avec 0-15 mutations par séquence V), sauf un qui, de façon assez frappante étant donné son jeune âge (C. Q., 5 ans), présentait une fréquence de mutations proche de celle d'un adulte témoin (2,2 % pour les séquences totales, 3,27 % pour les séquences mutées, 0-18 mutations par séquence V) (voir Tableau I et Fig. 1). L'analyse d'ensemble des séquences a révélé une distribution normale des mutations avec un groupement ou agrégation et une sélection pour les des mutations de remplacement dans les CDR. Chez tous les patients, la plupart des séquences présentaient différentes jonctions VH-D-JH, ce qui indiquait l'absence d'une expansion clonale VH3-23 spécifique. ------ 1 Tableau 1. Mutations somatiques dans des gènes VH3-23 réarrangés dans des cellules B de sang périphérique IgD+lgM+CD27+ de patients XHIM Donneur Age % de cellules B Nombre de séquences Mutations D#M#27# (ans) Total Mutées gamme nombre fréquence/séquen-fréquence/séquences ces totales (%) mutées (%) Patients XHIM C. Q. 5 1 28 19 (67%) 0-18 179 2.2 3.27 C.R. 7 1.5 18 16 (89%) 0-13 90 1. 7 1. 9 LP. 7 2 19 13 (68%) 0-12 61 1. 1 1. 62 A. N. 7 2 18 9 (50%) 0-7 27 0.52 1 L.Ch. 8 1 27 16 (60%) 0-10 41 0. 52 0. 89 Va 15 2 24 12 (50%) M 12 0. 17 0.34 B. M. 16 4 23 10 (43%) 0-15 40 0.6 1.33 F. F. 21 60 20 19 (95%) 0-9 75 1. 3 1. 37 Témoins sains D1 4 7 15 8 (54%) 0-14 45 1 1.95 D2 5 7 19 17 (89%) 0-13 78 1. 5 1. 7 D3 16 7 14 13 (93%) 0-19 130 3. 22 3.47 D4 adulte 10 23 19 (83%) 0-22 182 2.75 3. 34 Sang du cordon ombilical C1 1 17 11 (64%) 0-2 12 0.24 0.37 C2 1 25 5 (20%) 0-2 6 0.08 0. 4 C3 1 16 4(25%) 0-1 4 0.08 0.34 (cellules B D+27-) 44 12(27%) 0-2 14 r La proportion variable de séquences non-mutées obtenues dans la population M+D+27+ (5 à 60 %) pourrait correspondre à la pureté variable de la population triée lorsqu'elle est présente à une basse fréquence. Cette proportion était considérablement réduite lorsque des cellules M+D+27+ étaient présentes en grand nombre (par exemple, le patient F. F. avec 60 % de cellules B M+D+27+ avait 95 % de séquences V mutées ; voir Tableau I). D'après trois échantillons de sang de cordon ombilical témoins, la fréquence des mutations dans la population de M+D+27+ était proche de la base dans deux cas, et légèrement au-dessus dans un cas (deux fois le niveau de base). On a ainsi montré que cette population particulière de cellules B M+D+27+ a une voie de différenciation qui lui est propre. Elle présente un certain nombre de récepteurs qui lui sont uniques et qui à leur tour peuvent être utilisés spécifiquement. L'homme du métier est apte à sélectionner, sur la base des enseignements contenus ici et de ses connaissances propres, au besoin en effectuant des essais itératifs, des marqueurs de surfaces propres à cette sous-population de cellules B, dont la mobilisation et/ou la stimulation par les moyens selon l'invention est apte à procurer un traitement bénéfique pour les patients concernés. A titre indicatif, et non limitatif, de tels marqueurs peuvent être le CD21, l'IgD associé au CD27, entre autres. Etant donné l'observation critique selon laquelle cette population mute ses gènes de l'Ig de façon indépendante, les moyens de vaccination mis en oeuvre dans la technique d'immunisation selon l'invention sont aptes à améliorer considérablement les anticorps produits, en induisant la prolifération spécifique des clones concernés et en augmentant ainsi le taux de mutation. Un vaccin selon l'invention peut comporter une composition immunogène contenant un conjugué. Selon une forme de réalisation du dit vaccin, l'agent apte à procurer une réponse immune T-indépendante peut être fixé par covalence à des liposomes. La composition immunogène ainsi mise en oeuvre peut être combinée avec un support pharmaceutiquement acceptable dans une composition pharmaceutique. D'autre part, des moyens diagnostiques fondés sur la présente invention, permettant l'identification et/ou la quantification de cette r population de cellules B particulières présente dans le sang, permettent de tester/diagnostiquer l'efficacité d'une vaccination. En pratique, on effectue pour ce faire l'analyse des gènes VH spécifiquement engagés dans ces réponses, aussi bien au niveau de leur taux de mutation qu'au niveau de l'expansion du clone concerné. Pour la mise en oeuvre d'une tel diagnostic, on peut opérer sur des prélèvements d'environ 10 ml de sang non coagulé, duquel on a extrait les leucocytes, tandis que les essais ou les contrôles bactéricides sont pratiqués selon des méthodes connues de l'homme du métier. De plus, étant donné le rôle de cette population de cellules B spécifique dans les réponses antibactériennes et/ou antivirales considérées ici, l'expansion anormale de cette population de cellules B s'observe dans certaines manifestations auto-immunes. Là encore, la quantification de cette population de cellules sanguines permet de diagnostiquer très simplement la présence et/ou l'importance de ces populations anormales. Au lieu, cette fois-ci, d'induire la prolifération de cette souspopulation de cellules B considérée dans le cadre d'une vaccination, on peut également, au moyen de molécules inhibitrices spécifiques pour cette population, inhiber la prolifération de ces cellules dans ces pathologies. L'homme du métier est apte à rechercher et tester, pour en faire la sélection, de telles molécules inhibitrices spécifiques de la sous-population de cellules B M+D+27+. A ce propos, il faut en outre noter qu'une certaine proportion de lymphomes B émergent au cours de ces syndrome auto-immuns et que le phénotype de ces lymphomes s'est avéré correspondre souvent à celui des cellules B M+D+27+. L'invention vise donc également des moyens pour réguler la croissance de ces cellules soit dans la période d'hyperplasie, soit dans la période tumorale, ces moyens reposant sur des inhibiteurs spécifiques de la sous-population de cellules B M+D+27+. L'invention a par conséquent également pour objet une composition pour inhiber ou réguler négativement une réponse auto-immune aux antigènes polysaccharidiques bactériens et aux structures protéiques des capsides de virus, comprenant une quantité efficace de molécules inhibitrices spécifiques pour la sous-population de cellules B M+D+27+. Tant pour la stimulation ou mobilisation que pour l'inhibition selon l'invention des dites cellules B spécifiques, on peut par exemple procéder par r injection intradermique de polysaccharide bactérien méningococcique, pneumococcique, etc., avec des molécules aptes à stimuler spécifiquement ladite population M+D+27+. En pratique, et à titre d'exemple uniquement, une dose de composition immunogène d'environ 0, 01 jug à environ 10 ng par kilogramme de poids corporel de l'individu traité est appropriée. Le support de la composition immunogène peut être quelconque, notamment une solution salée, la solution de Ringer ou une solution salée tamponnée au phosphate. En pratique, la composition immunogène comporte avantageusement un adjuvant. Ladite composition immunogène peut comporter un conjugué immunogène et elle peut être administrée à un individu, par exemple, à une dose d'agent immunogène d'environ 0, 01 pug à environ 10 pig par kilogramme de poids corporel. Même chez les patients humains âgés de 2 à 60 ans, les compositions injectables élaborées conformément à l'invention permettent de renforcer efficacement, en fonction des récepteurs spécifiques utilisés, soit la stimulation ou mobilisation soit l'inhibition des cellules B M+D+27+ inductrices d'une réponse immune chez le patient traité. L'originalité du concept selon l'invention consiste à considérer que les cellules B responsables de la réponse antibactérienne et partiellement antivirale explicitées plus haut sont de fait déjà présentes dès le plus jeune âge (avant 1 an chez les enfants) avec des récepteurs bien diversifiés et que l'on peut à l'aide des marqueurs spécifiques de ces populations les stimuler et protéger ainsi les très jeunes enfants avec des antigènes polysaccharidiques non couplés, ce qui n'était pas le cas jusqu'à maintenant. H n'y a par ailleurs pas de raison de suspecter une toxicité particulière aux produits et aux moyens selon la présente invention. En conclusion, on a montré selon l'invention qu'il est possible d'induire ou de renforcer une réponse immunitaire anti-bactérienne T-indépendante chez les animaux à sang chaud, y compris l'homme, et plus particulièrement chez les jeunes enfants de moins de 2 ans et chez les personnes âgées de plus de 65 ans, en leur administrant une quantité vaccinale appropriée susceptible de mobiliser spécifiquement les cellules B M+D+27+. L'administration des moyens d'immunisation selon l'invention r peut s'effectuer par injection par les voies classiques, notamment mais non exclusivement par voie intraveineuse, intrapéritonéale, intradermique, intramusculaire, ainsi que par d'autres voies traditionnelles d'administration, pour autant que les vecteurs ou supports, ainsi que les adjuvants utilisés soient adaptés au cas par cas, par l'homme du métier qui recourt pour ce faire à ses connaissances propres et peut être amené à pratiquer des essais en vue de la mise au point d'un mode d'administration et des quantités préconisées. L'invention permet également, si on le souhaite, d'inhiber spécifiquement l'action de ces cellules B M+D+27+. In vitro, cette même sous-population de cellules B peut être utilisée pour diagnostiquer un état infectieux par antigènes polysaccharidiques, et également pour tester l'efficacité d'une vaccination telle que susdite sur un prélèvement de sang d'un sujet immunodéficient traité selon l'invention, par comparaison des résultats des tests, par exemple selon une méthodologie ELISA, avec des prélèvements de sang de sujets manifestant une réponse immune naturelle aux mêmes antigènes polysaccharidiques et testés en parallèle. r REVENDICATIONS r 1. Composition immunogène apte à procurer une réponse immune aux antigènes polysaccharidiques et/ou aux structures protéiques des capsides des virus, caractérisée en ce qu'elle comporte, dans un support pharmaceutiquement acceptable, une quantité thérapeutiquement efficace d'au moins un marqueur de surface spécifique pour les cellules B de sous-population M+D+27+, y compris les cellules d'une telle sous- population de cellules B qui ne sont pas dans un centre germinatif. 2. Composition immunogène selon la revendication 1, dans laquelle le support est choisi dans le groupe consistant en une solution salée, la solution de Ringer et une solution salée tamponnée au phosphate. 3. Composition immunogène selon l'une des revendications 1 ou 2, dans laquelle la composition immunogène comprend en outre un adjuvant. 4. Composition immunogène selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comporte un conjugué immunogène. 5. Composition immunogène selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comporte des marqueurs de surface spécifiques pour les récepteurs des cellules B de sous-population M+D+27+, notamment des marqueurs choisis parmi le CD21 et l'IgD associé au CD27. 6. Vaccin pour procurer une protection contre les infections anti- bactériennes T-indépendantes, comprenant une quantité de la composition immunogène selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 apte à procurer une réponse immune T-indépendante. 7. Vaccin selon la revendication 6, dans lequel ladite composition immunogène comporte un conjugué. r 8. Vaccin selon la revendication 6, dans lequel l'agent apte à procurer une réponse immune T-indépendante est fixé par covalence à des liposomes. 9. Utilisation de la composition immunogène selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 pour la préparation d'un médicament pour procurer aux animaux à sang chaud, y compris l'homme, des réponses immunes aux antigènes polysaccharidiques bactériens et aux structures protéiques des capsides de virus. 10. Utilisation selon la revendication 9, dans laquelle ladite composition immunogène est administrée à un individu à une dose d'agent immunogène d'environ 0, 01 ng à environ 10 ug par kilogramme de poids corporel. 11. Utilisation du vaccin selon l'une quelconque des revendications 6 à 8 pour la préparation d'un médicament pour procurer aux animaux à sang chaud, y compris l'homme, des réponses immunes aux antigènes polysaccharidiques bactériens et aux structures protéiques des capsides de virus. 12. Utilisation du vaccin selon l'une quelconque des revendications 6 à 8 pour la préparation d'un médicament pour la protection contre une infection par streptocoques, pneumocoques, méningocoques ou hémophilus influenzae. 13. Composition pharmaceutique comprenant une composition immunogène selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et un support pharmaceutiquement acceptable. 14. Procédé de diagnostic in vitro, soit des états nécessitant une vaccination, soit de l'efficacité d'une vaccination contre un état infectieux par antigènes polysaccharidiques, caractérisé en ce qu'il comporte la détection et/ou la quantification dans un prélèvement sanguin de cellules B de sous-population M+D+27+. r 15. Procédé de diagnostic in vitro selon la revendication 14, caractérisé en ce qu'il comporte l'analyse des gènes VH spécifiquement engagés dans ladite réponse immune, avantageusement tant au niveau de leur taux de mutation qu'au niveau de l'expansion du clone concerné. 16. Procédé de diagnostic in vitro selon l'une des revendications 14 ou 15, caractérisé en ce qu'on le met en oeuvre sur un prélèvement de sang d'un sujet immunodéficient et on compare les résultats du test avec ceux de prélèvements de sang de sujets manifestant une réponse immune naturelle aux mêmes antigènes polysaccharidiques. 17. Procédé de diagnostic in vitro selon la revendication 16, caractérisé en ce qu'on utilise un prélèvement de sang d'environ 10 ml. 18. Utilisation de la composition immunogène selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 pour la préparation d'un médicament ayant une action d'inhibition sur la réponse auto-immune chez un sujet, par inhibition spécifique de l'action des cellules B M+D+27+.