Brevet FR2809399A1 — publié le 20011130

La présente invention concerne des compositions pharmaceutiques à base de composés polyaromatiques utiles notamment comme médicaments antitumoraux. En 1999, les traitements cytotoxiques (chimiothérapie) utilisés pour réduire la taille des tumeurs cancéreuses, contenir le développement du processus tumoral voire, dans trop peu de cas encore, supprimer les amas de cellules cancéreuses et le risque de métastases, combinent des substances chimiques d'introduction récente avec d'autres qui sont utilisées depuis quelques dizaines d'années. Par exemple, au 5-fluorouracil (5-FU), reconnu depuis près de 40 ans comme l'un des traitements les plus actifs du cancer colo-rectal, peut être substitué l'un ou l'autre des inhibiteurs spécifiques de la topoisomérase I (irinotécan ou topotécan) lorsque la tumeur n'est plus sensible au 5-FU. Plus généralement, l'arsenal thérapeutique disponible pour traiter les tumeurs colo-rectales va également s'enrichir avec la mise à disposition de l'oxaliplatine, des nouveaux "donneurs" in situ de 5-FU ou des inhibiteurs sélectifs de la thymidylate synthétase. Cette coexistence ne se limite pas au traitement des cancers colo-rectaux puisque, également, la chimiothérapie des cancers du sein, de l'ovaire, du poumon fait maintenant largement appel à la famille des dérivés des taxanes (paclitaxel, docetaxel). Le besoin de traitements plus efficaces et mieux tolérés, améliorant ainsi la survie et la qualité de vie des malades est impérieux puisque, en prenant toujours l'exemple des tumeurs colo-rectales, il a été estimé (S. L. Parker, T. Tong, S. Bolden et al., CA Cancer J. Clin., 1997) que, rien qu'aux Etats-Unis plus de 131 000 nouveaux cas ont été diagnostiqués en 1997, dont 54 000 étaient responsables du décès des patients. C'est la connaissance de cette situation qui a incité les inventeurs à s'intéresser à une famille de composés polyaromatiques encore peu étudiés, identifiés chez des Ascidies de mers chaudes, pour développer une chimie médicinale originale destinée à sélectionner des composés synthétiques issus d'un travail de conception/modulation chimique et doués d'une activité cytotoxique significative au plan thérapeutique. Les mers et les océans qui couvrent plus de 70 % de la surface du globe, hébergent des plantes marines et des éponges dont l'étude pharmacognosique systématique progressive montre que ces espèces vivantes peuvent contenir des alcaloïdes complexes présentant des propriétés pharmacologiques intéressantes. Par exemple, les éponges Cryptotheca crypta et Halichondria okadai font l'objet d'études approfondies depuis la découverte de la présence, dans leurs cellules, de cytarabine ou d'halichondrine B. Il en est de même pour la famille des tuniciers, depuis l'isolement de l'aplidine du tunicier Aplidium albicans qui vit dans les îles Baléares (Espagne). Des alcaloïdes à structure tétrahydroisoquinolone ont été isolés de l'ascidie Ecteinascidia turbinata. Parmi ceux-ci, l'ecteinascidin- 743 fait l'objet de travaux pré-cliniques approfondis (E. Igbicka et al., NCI-EORTC symposium, 1998 ; 130 p.34), ainsi que d'essais cliniques destinés à définir son potentiel thérapeutique comme médicament anticancéreux (A. Bowman et al., NCI-EORTC symposium, 1998 ; 452 p.118 ; M.Villanova-Calero et al., NCI-EORTC symposium, 1998 ; 453 p.118 ; M. J.X. Hillebrand et aL, NCIEORTC symposium, 1998 ; 455 p.119 ; Citkovic et al., NCI-EORTC symposium, 1998 ; 456 p.119). De nouveaux dérivés d'acridines pentacycliques font également l'objet de travaux de pharmaco-chimie (D.J. Hagan et al., J. Chem. Soc., Perkin Transf., 1997 ; 1 : 2739-2746). Autre alcaloïde naturel d'origine marine, l'ascididémine a été extraite du tunicier Didemnum sp. (J. Kobayashi et al., Tetrahedron Lett. 1988 ; 29 : 1177- 80) et de l'ascidie Cystodytes dellechiajei (I. Bonnard et al, Anti-cancer Drug design 1995 ; 333-46). L'ascididémine possède des propriétés antiprolifératives mises en évidence sur le modèle de leucémie murine (lignées P388 ou L1210) et décrites par F. Schmitz et al. (J. Org. Chem. 1991 ; 804- 8), B. Lindsay et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 1995 ; 5 : 739-42) et J. Kobayashi et al. (Tetrahedron Lett. 1988 ; 1177-80) et sur le modèle de leucémie humaine décrites par I. Bonnard et al. (Anti-cancer Drug design 1995 ; 10 : 333- 46). Plusieurs voies de synthèse de l'ascididémine ont été rapportées par différents auteurs : F. Bracher et al. (Heterocycles 1989 ; 29 : 2093-95), C.J. Moody et al. (Tetrahedron Lett. 1992 ; 48 : 3589-602) et G. Gellerman et al. (Synthesis 1994 ; 2391). On peut également citer la 2-bromoleptoclinidone (selon la dénomination de S. J. Bloor et al. 1987), isolée de l'ascidie Leptoclinides sp. par S.J. Bloor et al. (J. Ann. Chem. Soc. 1987 ; 109 : 6134-6) et synthétisée par F. Bracher et al. (Hétérocycles 1989 ; 29 : 2093-95) puis par M. E. Jung étal. (Hétérocycles 1994 ; 39 ; 2 : 767-778). La 2-bromoleptoclinidone présente une cytoxicité sur le modèle cellulaire de leucémie avec une DE 50 de 0,4 ug/ml. Les propriétés cytotoxiques ont été confirmées, par F. Bracher (Pharmazie 1997 ; 57-60) aussi bien in vitro - sur soixante lignées cellulaires tumorales en culture - que in vivo sur les modèles de xénogreffes de lignées cellulaires tumorales humaines (tumeurs du colon SW-620 et HTC116, tumeur rénale A498 et mélanome LOX IM VI) implantées chez des souris. D'autres composés dérivés de l'ascididémine tels que la 11-hydroxy ascididémine, la 11-méthoxy ascididémine, les 11-phényle et 11-nitrophényle ascididémines, les 1-nitro et 3-nitro ascididémines et la néocalliactine ont été décrits au plan chimique (selon la numérotation de S.J. Bloor et al. 1987) par différentes équipes telles que celles de F. J. Schmitz (J. Org. Chem. 1991 ; 804-8) et de Y. Kitahara et al. (Heterocycles 1993 ; 36 : 943-46 ; Tetrahedron Lett. 1997 ; 17029-38), G. Gellerman et al. (Tetrahedron Lett. 1993 ; 1827-30), S. Nakahara et al (Heterocycles 1993 ; 36 : 1139-44), I. Spector et al. (US Patent Number : 5,432,172, Jul. 11,1995). Récemment, les synthèses de la 5-acétoxymethylascididémine et de la 5-formylascididémine ont été décrites par B.S. Lindsay et al. (Tetrahedron 2000 ; 56 : 497-505). La 5acétoxymethylascididémine présente une activité équivalente à celle de l'ascididémine dans les tests in vitro d'inhibition de la croissance cellulaire tumorale. La présente invention a pour objet une composition pharmaceutique comprenant une quantité efficace d'un composé choisi parmi les composés de formule générale suivante : dans laquelle : - X est choisi parmi l'oxygène, le groupe =NH, le groupe-N-OH, - R1 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, le groupe nitro et les groupes -NRgRg dans lesquels R8 et Rg sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène et les groupes alkyle (C1-C4), - R2 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, - R3 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, les groupes alkyle (C1-C4), les groupes alcoxy (C1-C6), un groupe guanidino, les groupes -NR10R11dans lesquels R10 et R11 sont choisis, indépendamment l'un de l'autre, parmi l'hydrogène, les groupes alkyle (C1-C4), phénylalkyle (C1-C4), et les groupes - (CH2)n-Y avec Y choisi parmi les halogènes et les groupes CN, -CH(O-Et)2, alcoxy(C1-C6), -O-(CH2)2-N(CH3)2, -N(CH3)2 et n = 1 à 3, - R4 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, le groupes nitro, et les groupes -NR12R13 dans lesquels R12 et R13 sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène et les groupes alkyle (C1-C4), - R5, R6 et R7 sont choisis parmi : l'hydrogène, un atome d'halogène, les groupes alkyle en C1-C6, hydroxyle, alcoxy en C1-C6, -CHO, COOH,-CN, -C02R14, -CONHR14, -CONR14R15, les groupes -NHCOR14 et NR14R15, dans lesquels R14 et R15 sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène, les groupes alkyle (C1-C6) et -CH2-CH2-N(CH3)2, les groupes -phényl-CO-CH3 ou -phényl-CO-CH=CH-N(CH3)2, morpholino, nitro, S03H, les groupes : R16 et R17 étant choisis parmi les groupes alkyle en Ci-Ce et Ar étant un groupe aryle en C6-C14, à l'exclusion des composés dans lesquels existe la combinaison : X = O, et, ou bien : R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 = H, ou bien : R1, R3, R4, R5, R6, R7 = H et R2 = Br, et les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceutiquement acceptables. La présente invention a plus particulièrement pour objet une composition pharmaceutique comprenant une quantité efficace d'un composé choisi parmi les composés de formule # dans laquelle : - X représente l'oxygène, - R1 est choisi parmi l'hydrogène et le groupe amino, - R2 est choisi parmi l'hydrogène et les halogènes, - R3 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, les groupes alkyle (C1-C4), les groupes alcoxy (Ci-Ce), un groupe guanidino, les groupes -NR10R11dans lesquels R10 et R11 sont choisis, indépendamment l'un de l'autre, parmi l'hydrogène, les groupes méthyle, phénylalkyle (C1-C4) et les groupes - (CH2)n-Y avec Y choisi parmi les halogènes et les groupes CN, -CH(O-Et)2, alcoxy(C1-C6), -O-(CH2)2-N(CH3)2, -N(CH3)2 et n = 1 à 3, - R4 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes et les groupes nitro et amino, - R5, R6 , R7 représentent un hydrogène, à l'exclusion des composés dans lesquels R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 = H, ou R1, R3, R4, R5, R6. R7 = H et R2 = Br, et les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceutiquement acceptables. Les "sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables" désignent les sels qui donnent les propriétés biologiques des bases libres, sans avoir d'effet indésirable. Ces sels peuvent être notamment ceux formés avec des acides minéraux, tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique; des sels métalliques acides, tels que l'orthophosphate disodique et le sulfate monopotassique, et des acides organiques. La présente invention a également pour objet les composés de formule 1 telle que définie précédemment à l'exclusion des composés dans lesquels X = 0, et, ou bien R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 = H, ou bien R1, R3, R4, R5, R6, R7 = H et R2 = Br, ou bien R1, R2, R4, R5, R6, R7 = H et R3 = OCH3,ou bien R1, R2, R3, R4, R6, R7 = H et R5 = OH ou OCH3, ou bien R1,= N02 et R2, R3, R4, R5, R6, R7 = H. De manière générale, les composés de formule # sont obtenus selon le schéma réactionnel général décrit par F. Bracher et al (Heterocycles 1989 ; 29 : 2093-95) pour l'ascididémine. Selon ce schéma, les composés sont préparés par amination oxydative d'une 5,8-quinone substituée avec une orthoaminoacétophénone substituée, suivi de la cyclisation de la diaryl amine obtenue (composés de formule Il) en quinone tétracyclique intermédiaire (composés de formule III). L'énamine formée par réaction du composé de formule III avec le diéthyl acétal du diméthylformamide conduit au dérivé final (formule #) par cyclisation : L'ascididémine a été préparée selon le procédé décrit par F. Bracher et al. (Heterocycles 1989 ; 29 : 2093-95) et est référencée, dans le présent document, sous le numéro CRL 8274. Certains composés peuvent également être préparés directement à partir de l'ascididémine ou à partir d'un composé de formule 1 utilisé comme intermédiaire de synthèse. C'est ainsi en particulier que les composés de formule # dans lesquels R3 = -NR10R11 avec Rio et/ou R11 différents de l'hydrogène, peuvent être obtenus à partir d'un composé de formule 1 dans laquelle R3 =-NH2. EXEMPLE 1 5-bis(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénan-throlin-9-one (CRL 8422) 1 - Synthèse de la 5-bromo-9H-quino [4,3,2-cfe] [1,10] phénantrolin-9-one (CRL 8248) A une solution d'ascididémine (0,5 g, 1,77 mmol) dans 20 ml d'acide acétique, on ajoute goutte à goutte une solution de brome (0,2 ml, 3,88 mmol) dans 5 ml d'acide acétique. Le milieu réactionnel est porté à reflux (réfrigérant bouché) 24 heures. Après refroidissement, on neutralise par une solution saturée de NaHC03 et on extrait 4 fois au dichlorométhane CH2CI2. Les phases organiques sont séchées sur sulfate de magnésium MgS04 puis évaporées. Le brut obtenu est purifié par flash-chromatographie sur colonne de silice (CH2CI2/MeOH 96 : 4) pour donner 0,548 g de dérivé bromé attendu sous forme d'un solide jaune. # Rendement = 86 %. # Point de fusion = 208 C. . RMN 1 H (CDCI3) : 7,68 (dd, 1 H, J = 4,4 et 8 Hz), 8,09 (dd, 1 H, J = 8,8 Hz, J = 2 Hz), 8,48 (d, 1 H, J = 8,8 Hz), 8,49 (d, 1 H, J = 6Hz), 8,79 (dd, 1 H, J = 2 et 8 Hz), 8,82 (d, 1 H, J = 2 Hz), 9,18 (dd, 1 H, J = 2 Hz, J = 4,4 Hz), 9,30 (d, 1 H, J = 6 Hz). . RMN 13C (CDCI3) : 116,76 ; 117,04 ; 118,26 ; 124,76 ; 125,81 ; 125,93 ; 129,05 ; 134,52 ; 135,43 ; 136,72 ; 137,01 ; 144,41 ; 146,24 ; 149,93 ; 150,12 ; 152,27; 155,67; 181,69. # SM (m/z) : 363 (99) ; 362 (83) ; 361 (100) ; 360 (27) ; 255 (9) ; 254 (51). 2 - Synthèse de la 5-amino-9H-quino[4,3,2-de][1,10]phénanthrolin-9-one (CRL 8347) A une solution de 5-bromo-9H-quino [4,3,2-de] [1,10] phénantrolin-9-one (2,3 g, 6,33 mmol) dans 460 ml de diméthylformamide DMF, on ajoute l'azidure de sodium (2,34 g, 36,1 mmol). Le milieu réactionnel est porté à reflux pendant 4 heures. Après refroidissement, on évapore à sec et on reprend le solide obtenu à l'eau. On extrait 4 fois au dichlorométhane CH2CI2. Après séchage sur sulfate de magnésium MgS04 et évaporation du solvant, le brut est purifié par flash chromatographie sur colonne de silice (HCCl3/MeOH 90 : 10) pour donner 115 mg de produit attendu sous forme d'une poudre noire. # Rendement = 6 %. # point de fusion > 260 C. # RMN 1 H (CDC13) : 7,43 (dd, 1 H, J = 8,8 et 2,4 Hz), 7,74 (dd, 1 H, J = 4,8 et 8 Hz), 7,81 (d, 1 H, J = 2,4 Hz), 8,48 (d, 1 H, J = 6Hz), 8,50 (d, 1 H, J = 8,8 Hz), 8,90 (dd, 1 H, J = 2 et 8 Hz), 9,25 (dd, 1 H, J = 2 et 4,8 Hz), 9,29 (d, 1 H, J = 6 Hz). # RMN 13C (DMSO) : 102,26 ; 117,13 ; 118,54 ; 121,62 ; 123,20 ; 125,34 ; 126,11 ; 129,18 ; 133,80 ; 134,83 ; 135,47 ; 138,42 ; 147,65 ; 148,29 ; 151,63 ; 152,39 ; 154,32 ; 180,35. # SM (m/z) : 298 (32); 297 (100); 269 (4) ; 268 (0,5). 3 - Synthèse de la 5-bis(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]- phénanthrolin-9-one (CRL 8422) A une solution de 5-amino-9H-quino[4,3,2-de][1,10]phénanthrolin-9-one (1 g, 3,95 mmol) et de chloroacétaldéhyde (50 % aqueux, 2,6 ml ; 16,8 mmol) dans l'acide acétique (30 ml), sont ajoutées, par petites portions et à 0 C, 10 mmol de cyanoborohydrure de sodium NaBH3CN (0,63 g). Le milieu réactionnel est maintenu sous agitation à 0 C pendant 5 minutes, puis à température ambiante pendant 30 minutes. Ensuite, le milieu est alcalinisé par une solution saturée de carbonate acide de sodium NaHC03, puis extrait par un mélange CHCl3/MeOH 95 : 5. Les phases organiques sont séchées sur sulfate de magnésium MgS04 et concentrées à l'évaporateur rotatif. Le brut obtenu est purifié par filtration sur silice (CHC13 puis CHCI3/MeOH 99 : 1) pour donner successivement deux composés : CRL 8422 et CRL 8423 (décrit dans l'exemple 2). La 5-bis(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one (CRL 8422) a été obtenue sous forme de poudre rose (0,14 g) : # Rendement = 10%. # Point de fusion = 220 C. # IR (KBr) :1666 ; 1650 cm-1. . RMN 1 H (CDC13) : 3,83 (t, 4H, J = 7,0 Hz) ; 4,04(t, 4H, J = 7,0 Hz) ; (dd, 1 H, J = 9,5 et 2,9 Hz) ; 7,66 (dd, 1 H, J = 8,0 et 4,4 Hz) ; (d, 1 H, J = 2,9 Hz) ; 8,42 (d, 1 H, J = 5,6 Hz) ; 8,50 (d, 1 H, J = 9,5 Hz) ; 8,81 (dd, 1 H, J = 8,0 et 1,8 Hz) ; 9,16 (dd, 1H, J = 4,4 et 1,8 Hz) ; 9,23 (d, 1H, J = 5,6 Hz). # RMN 13C (CDC13) : 40,16 ; 53,60 ; 101,70 ; 116,60 ; 118,37 ; 118,68 ; 125,39 ; 125,91 ; 129,25 ; 135,13 ; 136,12 ; 136,38 ; 139,42 ; 141,93 ; 148,24 ; 148,73 ; 149,34 ; 152,22 ; 155,08 ; 181,43. EXEMPLE 2 5-(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one (CRL 8423) A partir du filtrat de l'exemple 1,0,22 g de composé CRL 8423 sont obtenus sous forme de poudre violette. Les caractéristiques du composé CRL 8423 sont les suivantes : # Rendement = 18 %. * point de fusion = 196 C. #IR (KBr) 3413 ; 3275 ; 1654 ; 1617cm-1. . RMN 1 H (CDCI3) : 3,81 (t, 2H, J = 5,5 Hz) ; (t, 2H, J = 5,5 Hz) ; 5,01(slarge, 1 H) ; 7,34 (dd, 1 H, J = 8,8 et 2,5 Hz) ; (d, 1 H, J = 2,5 Hz) ; (dd, 1 H, J = 7,5 et 4,4 Hz) ; 8,41 (d, 1 H, J = 5,8 Hz) ; (d, 1 H, J = 8,8 Hz) ; (dd, 1 H, J = 7,5 et 1,5 Hz) ; 9,15 (dd, 1 H, J = 4,4 et 1,5 Hz) ; 9,21 (dd, 1 H, J = 5,8 Hz). . RMN 13C (CDCI3) : 42,83 ; 45,01 ; 100,76 ; 116,81 ; 118,78 ; 120,85 ; 125,38 ; 126,35 ; 129,35 ; 135,04 ; 136,04 ; 136,43 ; 140,22 ; 141,56 ; 148,49 (2C); 149,41 ; 152,30 ; 155,07 ; 181,57. Les résultats des essais pharmacologiques, présentés ci-après, mettent en évidence les propriétés cytotoxiques des composés de formule I, ainsi que les doses maximales tolérées. Ces données permettent d'apprécier l'intérêt thérapeutique des composés revendiqués. 1- Détermination de la dose maximale tolérée (DMT) L'évaluation de la dose maximale tolérée a été réalisée chez des souris B6D2F1/Jico âgées de 4 à 6 semaines. Les composés ont été administrés par voie intrapéritonéale à des doses croissantes s'échelonnant de 2,5 à 160 mg/kg. La valeur de la DMT (exprimée en mg/kg) est déterminée à partir de l'observation du taux de survie des animaux sur une période de 14 jours après une administration unique du produit considéré. L' évolution pondérale des animaux est également suivie pendant cette période. Lorsque la valeur de la DMT est supérieure à 160 mg/kg, la valeur de la DMT est assimilée à 160 mg/kg par défaut. Les résultats de l'estimation de la dose maximale tolérée (DMT) sont rassemblés dans le tableau # suivant : TABLEAU Composés CRL DMT (mg/kg) CRL 8274 (Ascididémine) 20 CRL 8269(2-bromoleptoclinidone) 40 CRL 8422 (Exemple 1) >160 CRL 8423 (Exemple 2) >160 Ces deux composés originaux incorporés à la famille de l'ascididémine ne présentent pas de toxicité directe (DMT > 160 mg/kg), à la différence de l'ascididémine naturelle et de la 2-bromoleptoclinidone naturelle. Ils peuvent donc être utilisés in vivo à des posologies fortes permettant ainsi d'obtenir des concentrations tissulaires plus élevées, que celles obtenues lors de l'administration de l'ascididémine naturelle. L'activité thérapeutique antitumorale est donc de plus grande puissance. 2- Activité cytotoxique sur des lignées cellulaires tumorales en culture L'influence des composés de formule # sur les cellules néoplasiques a été évaluée à l'aide du test colorimétrique MTT. Le principe du test MTT est basé sur la réduction mitochondriale par les cellules vivantes métaboliquement actives du produit MTT (3-(4,5-diméthylthiazol-2-yl)-2,5 diphényltétrazolium bromide) de couleur jaune en un produit de couleur bleue, le formazan. La quantité de formazan ainsi obtenue est directement proportionnelle à la quantité de cellules vivantes présentes dans le (ou les) puit (s) de culture. Cette quantité de formazan est mesurée par spectrophotométrie. Les lignées cellulaires sont maintenues en culture monocouche à 37 C dans des boîtes de culture à bouchon fermé contenant du milieu de base MEM 25 MM HEPES (Minimum Essential Medium). Ce milieu, adapté à la croissance d'une gamme variée de cellules diploïdes ou primaires de mammifères, est ensuite additionné : - d'une quantité de 5% de SVF (Sérum de Veau Foetal) décomplémenté à 56 C pendant 1 heure, - de 0,6 mg/ml de L-glutamine, - de 200 IU/ml de pénicilline, - de 200 mg/ml de streptomycine, - de 0,1 mg/ml de gentamicine. Les 12 lignées cellulaires cancéreuses humaines utilisées ont été obtenues auprès de l'American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD, USA). Ces 12 lignées cellulaires sont : - U-373MG (code ATCC : et U-87MG (code ATCC : qui sont deux glioblastomes, - SW1088 (code ATCC : HTB-12) qui est un astrocytome, - A549 (code ATCC : CCL-185) et A-427 (code ATCC : qui sont deux cancers du poumon non-à-petites-cellules, - HCT-15 (code ATCC : CCL-225) et LoVo (code ATCC : CCL-229) qui sont deux cancers colorectaux, - T-47D (code ATCC : et MCF7 (code ATCC : HTB-22) qui sont deux cancers du sein, - J82 (code ATCC : HTB-1) et T24 (code ATCC : qui sont deux cancers de la vessie, - PC-3 (code ATCC : CRL-1435) qui est un cancer de la prostate. Au plan expérimental : 100 l d'une suspension cellulaire contenant 20 000 à 50 000 (selon le type cellulaire utilisé) cellules/ml de milieu de culture sont ensemencés en plaques multi-puits de 96 puits à fond plat et sont mis à incuber à 37 C, sous atmosphère comprenant 5% de C02 et 70% d'humidité. Au bout de 24 heures d'incubation, le milieu de culture est remplacé par 100 l de milieu frais contenant soit les différents composés à tester à des concentrations variant de 10 5 à 10-10 M soit le solvant ayant servi à la mise en solution des produits à tester (condition contrôle). Après 72 heures d'incubation dans les conditions précédentes, le milieu de culture est remplacé par 100 l d'une solution jaunâtre de MTT dissous à raison de 1 mg/ml dans du RPMI 1640. Les microplaques sont remises à incuber pendant 3 heures à 37 C puis centrifugées pendant 10 minutes à 400 g. La solution jaunâtre de MTT est éliminée et les cristaux de formazan bleu formés au niveau cellulaire sont dissous dans 100 l de DMSO. Les microplaques sont ensuite mises sous agitation pendant 5 minutes. L'intensité de la coloration bleue résultant donc de la transformation du produit MTT jaune en formazan bleu par les cellules encore vivantes au terme de l'expérience est quantifiée par spectrophotométrie à l'aide d'un appareil de type DYNATECH IMMUNOASSAY SYSTEM aux longueurs d'onde de 570 nm et 630 nm correspondant respectivement aux longueurs d'ondes d'absorbance maximale du formazan et au bruit de fond. Un logiciel intégré au spectrophotomètre calcule les valeurs moyennes de densité optique ainsi que les valeurs de déviation standard (Dév. Std. ) et d'erreur standard sur la moyenne (ESM). L'activité inhibitrice de la croissance cellulaire des composés de formule 1 sur les différentes lignées cellulaires tumorales a été comparée à celle du produit naturel, l'ascididémine. A également été mesurée, l'activité inhibitrice de la 2bromoleptoclinidone naturelle. Les composés présentent une activité inhibitrice significative de la prolifération cellulaire des 12 lignées tumorales humaines : U- 87MG, U-373MG, SW 1088, T24, J82, HCT-15, LoVo, MCF7, T-47D, A549, A- 427 et PC-3 avec une concentration inhibitrice 50 % (CI 50) qui est comprise entre 10-6M et 10-9M, selon lignées tumorales testés. A titre d'exemple, les valeurs des concentrations encadrant les Cl50 obtenues sur les différentes lignées cellulaires sont données dans le tableau Il TABLEAU II COMPOSES (Concentration M) LIGNEES CELLULAIRES CRL8274 CRL8269 CRL8422 CRL8423 Ascididémine 2-bromoleptoclinidone U-87MG [10-7,10"8] [10-6,10-7] [10-7@10-11 [10-8,10-9] U-373MG [10-6,10-7] [106,10'] [10'',108] [109] SW1088 [10.6,10-7] [1O-.,1O-7J [10-',108] [10-9] T24 [10-7@10-1] [10-7,1O-8J [10"7,10-8] [10'9] J82 [10.6,10-7] [10-.,10"] [10-7,10-8] [10.8] HCT-15 (10'8,10-9] [10.7,10-8] [10-",10-11 [1O-1O.9] LoVo [10-6,107] [10 ,10"] [10- ,10"] [10- ,10-8) MCF7 [10-7,10-8] [10.7,10'8] -10-6,10''j ~ [10-8] T-47D [10"6,10.7] [10'7,10.8] ~~~ [10~6,10'] [10-5,10-6] A549 [10-6,10-7] [10-1@10-71 [10.7,10-8) [î?8] A-427 [10-1,10-8] [10-7,10'8] [10-7,10-8] [10-9J PC-3 [10-8,10-9J [l0"7,10'J [10-6,10"J [10"7,10"s] Sont reportés, dans le tableau III, les résultats des Cl50 (en nM) moyennes (calculées à partir de l'activité cytotoxique sur les 12 lignées tumorales étudiées) et les ratios DMT/CI50 (ces ratios sont calculés en faisant le rapport des DMT et des Cl50 exprimées en nombres sans dimension). TABLEAU III Composés CRL CI 50 (nM) DMT/CI50 DMT/CI50* CRL 8274 (Ascididémine) 100 0,20 1 CRL 8269 120 0,33 -2 (2-bromoleptoclinidone) CRL 8422 (Exemple 1) 100 1,6 8 CRL 8423 (Exemple 2) 7 22,9 114 *: le ratio DMT/IC50 des différents composés a été estimé en prenant comme référence un ratio égal à 1 pour l'ascididémine. Les composés décrits présentent, sur les modèles de lignées cellulaires tumorales, des CI 50 (nM) supérieures ou équivalentes à celle de l'ascididémine. Les doses maximales tolérées des composés décrits, considérées par défaut équivalentes à 160 mg/kg, sont nettement supérieures à celle de l'ascididémine (20 mg/kg). Ces résultats suggèrent que cette nouvelle famille de composés ne présentent pas de toxicité directe. En conséquence, les ratios tolérance/activité cytotoxique des composés exemplifiés dans la présente invention, sont nettement supérieurs à celui de l'ascididémine naturelle. Ces composés peuvent donc être utilisés comme médicament anti-tumoraux, pour leurs propriétés cytotoxiques à des concentrations tissulaires plus élevées que celles induites par l'ascididémine naturelle. Ils sont donc caractérisés par une meilleure maniabilité thérapeutique. Grâce à leurs propriétés cytotoxiques, les composés de formules I tels que décrits ou sous forme de sels ou solvates pharmaceutiques acceptables, peuvent être utilisés comme principes actifs de médicaments. Les composés de formules # sont généralement administrés en unités de dosage établies soit par m2de surface corporelle, soit par kg de poids. Les dites unités de dosage sont de préférence formulées dans des compositions pharmaceutiques dans lesquelles le principe actif est mélangé avec un (ou plusieurs) excipient(s) pharmaceutique(s). Les composés de formule # peuvent être utilisés selon la pathologie cancéreuse du sujet à traiter à des doses comprises entre 0,05 et 350 mg/m2 de surface corporelle, de préférence à des doses de 0,5 à 50 mg/m2/jour pour un traitement curatif dans sa phase aiguë en fonction du nombre de cycles de traitement de chaque cure. Pour un traitement d'entretien, on utilisera avantageusement les composés de formule # à des doses de 0,05 à 25 mg/m2/jour, de préférence à des doses de 0,1 à 1,5 mg/m2/jour selon le nombre de cycles de traitement de la cure. Ils pourront être associés aux médicaments anti-tumoraux utilisés dans les protocoles validés de polychimiothérapie intensive. Dans les compositions pharmaceutiques de la présente invention pour l'administration par voie intraveineuse et/ou orale, les principes actifs peuvent être administrés sous formes unitaires d'administration, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques adaptés à la thérapeutique humaine. Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes d'administration intraveineuse et les formes pour voie orale telles que les comprimés, éventuellement sécables, ou les gélules, les implants etc... Pour une administration parentérale (perfusion intraveineuse à débit constant), on utilise des suspensions aqueuses stériles, des solutions salines isotoniques stériles ou des solutions stériles et injectables qui contiennent des agents de dispersion et/ou des agents solubilisants pharmacologiquement compatibles, par exemple le propylèneglycol, le polyéthylèneglycol, ou une (3 cyclodextrine. Ainsi, pour préparer une solution aqueuse injectable par voie intraveineuse et destinée à une perfusion réalisée sur 1 à 24 h, on peut utiliser un cosolvant : un alcool tel que l'éthanol, un glycol tel que le polyéthylèneglycol ou le propylèneglycol et un tensioactif hydrophile tel que le Tween 80. Lorsque l'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on peut ajouter au principe actif, micronisé ou non, un agent mouillant tel que le laurylsulfate de sodium et on mélange le tout avec un véhicule pharmaceutique tel que la silice, la gélatine, l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues. On peut enrober les comprimés de saccharose, de divers polymères ou d'autres matières appropriées ou encore les traiter de telle sorte qu'ils aient une activité prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité prédéterminée de principe actif. On obtient une préparation en gélules en mélangeant le principe actif avec un diluant tel qu'un glycol ou un ester de glycérol et en incorporant le mélange obtenu dans des gélules molles ou dures. Le principe actif peut être formulé également sous forme de microcapsules ou microsphères, éventuellement avec un ou plusieurs supports ou additifs. Le principe actif peut être également présenté sous forme de complexe avec une cyclodextrine, par exemple a-, ss- ou y-cyclodextrine, 2-hydroxypropyl-p- cyclodextrine ou méthyI-(3-cyclodextrine. Les composés de formules1 seront utilisés dans le traitement de la plupart des tumeurs solides du fait de leurs activités cytotoxiques puissantes, en particulier pour traiter les tumeurs cérébrales, les cancers du poumon, les tumeurs de l'ovaire et du sein, les cancers de l'endomètre, les cancers colo-rectaux, les cancers de la prostate et les tumeurs testiculaires (liste non limitative). REVENDICATIONS 1 - Composition pharmaceutique comprenant une quantité efficace d'un composé choisi parmi les composés de formule 1 pour traiter, grâce à leurs propriétés cytotoxiques, les tumeurs cancéreuses et leurs métastases : dans laquelle : - X est choisi parmi l'oxygène, le groupe =NH, le groupe-N-OH, - R1 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, le groupe nitro et les groupes -NRgRg dans lesquels R8 et Rg sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène et les groupes alkyle (C1-C4) ; - R2 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, - R3 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, les groupes alkyle (C1-C4), les groupes alcoxy (Ci-Ce), un groupe guanidino, les groupes -NR10R11 dans lesquels R10 et R11 sont choisis, indépendamment l'un de l'autre, parmi l'hydrogène, les groupes alkyle (C1-C4), phénylalkyle (C1-C4) et les groupes -(CH2)n-Y avec Y choisi parmi les halogènes et les groupes CN, -CH(O-Et)2, alcoxy(C1-C6), -0-(CH2)2-N(CH3)2. -N(CH3)2 et n = 1 à 3, - R4 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, le groupe nitro, et les groupes -NR12R13 dans lesquels R12 et R13 sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène et les groupes alkyle (C1-C4) ; - R5, R6 et R7 sont choisis parmi : l'hydrogène, un atome d'halogène, les groupes alkyle en Ci-Ce, hydroxyle, alcoxy en Ci-Ce, -CHO, COOH,-CN, -C02R14, -CONHR14, -CONR14R15, les groupes -NHCOR14 etNR14R15 dans lesquels R14 et R15 sont choisi indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène, les groupes alkyle (C1-C6) et-CH2-CH2-N(CH3)2, les groupes -phényl-CO-CH3 ou -phényl-CO-CH=CH-N(CH3)2, morpholino, nitro, S03H, les groupes : R16 et R17 étant choisis parmi les groupes alkyle en C1-C6 et Ar étant un groupe aryle en C6-C14, à l'exclusion des composés dans lesquels existe la combinaison X = 0, et, ou bien R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 = H, ou bien R1, R3, R4, R5, R6, R7 = H et R2 = Br, et les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 2 - Composition pharmaceutique selon la revendication 1 comprenant une quantité efficace d'un composé choisi parmi les composés de formule # dans laquelle : - X représente l'oxygène, - R1 est choisi parmi l'hydrogène et le groupe amino, - R2 est choisi parmi l'hydrogène et les halogènes, - R3 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, les groupes alkyle (C1-C4), les groupes alcoxy (Ci-Ce), un groupe guanidino, les groupes -NR10R11dans lesquels R10 et R11 sont choisis, indépendamment l'un de l'autre, parmi l'hydrogène, les groupes méthyle, phénylalkyle (C1-C4) et les groupes -(CH2)n-Y avec Y choisi parmi les halogènes et les groupes CN, -CH(O-Et)2, alcoxy(C1-C6), -O-(CH2)2-N(CH3)2, -N(CH3)2 et n = 1 à 3, - R4 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes et les groupes nitro et amino, - R5, R6 , R7 représentent un hydrogène, à l'exclusion des composés dans lequels R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 = H, ou R1, R3, R4, R5, R6, R7 = H et R2 = Br, et les sels d'addition de ces composés avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 3 - Composition selon la revendication 2 dans laquelle les composés sont choisis parmi : la 5-bis(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one, et la 5-(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one, et leurs sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 4 - Utilisation d'un composé tel que défini à la revendication 1 ou la revendication 2 pour la fabrication d'un médicament anticancéreux. 5 - Utilisation selon la revendication 4 dans laquelle les composés sont choisis parmi : la 5-bis(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one, et la 5-(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one, et leurs sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 6 - Composés de formule générale # dans laquelle : - X est choisi parmi l'oxygène, le groupe =NH, le groupe-N-OH, - R1 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, le groupe nitro et les groupes -NRgRg dans lesquels R8 et Rg sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène et les groupes alkyle (C1-C4) ; - R2 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, - R3 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, les groupes alkyle (C1-C4), les groupes alcoxy (Ci-Ce), un groupe guanidino, les groupes -NR10R11dans lesquels R10 et R11 sont choisis, indépendamment l'un de l'autre, parmi l'hydrogène, les groupes alkyle (Ci-C4), phénylalkyle (Ci-C4) et les groupes -(CH2)n-Y avec Y choisi parmi les halogènes et les groupes CN, -CH(O-Et)2, alcoxy(C1-C6), -O-(CH2)2-N(CH3)2, -N(CH3)2 et n = 1 à 3, - R4 est choisi parmi l'hydrogène, les halogènes, le groupes nitro, et les groupes -NR12R13 dans lesquels R12 et R13 sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène et les groupes alkyle (C1-C4); - R5, R6 et R7 sont choisis parmi : l'hydrogène, un atome d'halogène, les groupes alkyle en Ci-Ce, hydroxyle, alcoxy en Ci-Ce, -CHO, COOH,-CN, -C02R14, -CONHR14, -CONR14R15, les groupes -NHCOR14 etNR14R15, dans lesquels R14 et R15 sont choisis indépendamment l'un de l'autre parmi l'hydrogène, les groupes alkyle (Ci-Ce) et -CH2-CH2-N(CH3)2, les groupes -phényl-CO-CH3 ou -phényl-CO-CH=CH-N(CH3)2, morpholino, nitro, S03H, les groupes : R16 et R17 étant choisis parmi les groupes alkyle en Ci-Ce et Ar étant un groupe aryle en C6-C14, à l'exclusion des composés dans lesquels existe la combinaison X = 0, et, ou bien R1, R2, R3, R4. R5, R6, R7 = H, ou bien R1, R3, R4, R5, R6, R7 = H et R2 = Br, ou bien R1, R2, R4, R5, R6, R7 = H et R3 = OCH3,ou bien R1, R2, R3, R4, R6, R7 = H et R5 = OH ou OCH3, ou bien R1,= N02 et R2, R3, R4, R5, R6, R7 = H, et leurs sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 7 - Composés selon la revendication 6 qui sont : la 5-bis(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one, et la 5-(2-chloroéthyl)amino-9H-quino[4,3,2de][1,10]phénanthrolin-9-one, et leurs sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables.