Brevet FR2817867A1 — publié le 20020614

La présente invention concerne de nouveaux composés inhibiteurs de la production de peptide amyloïde ss, leur préparation et leurs utilisations. Elle concerne également des procédés pour l'identification ou la caractérisation de composés inhibiteurs de la production de peptide amyloïde ss, en particulier inhibiteurs sélectifs de la production de peptide amyloïde ss (et notamment non toxiques pour le développement embryonnaire). L'invention est également relative à des méthodes et utilisations des composés pour le traitement de désordres du système nerveux, en particulier de pathologies neurodégénératives telles la maladie d'Alzheimer. La recherche d'inhibiteurs de protéases agissant sur le clivage gamma de la protéine APP et utilisables dans la maladie d'Alzheimer représente un enjeu thérapeutique majeur. L'un des signes constants de la maladie d'Alzheimer est l'existence chez les patients de dépôts amyloïdes (plaques séniles) dont le principal constituant est le peptide amyloïde P (peptide Ap, notamment Ass42, qui se rencontre majoritairement dans la formation de la plaque sénile). Le peptide Ass est issu d'un processus protéolytique d'un ou plusieurs isoformes de l'APP. Les isoformes de l'APP sont des sialoglycoprotéines transmembranaires qui sont codées par un simple gène sur le chromosome 21 qui contient 19 exons. Les 3 isoformes de l'APP sont APP APP7i et l'APP Le clivage proteolytique de l'APP fait intervenir 3 protéases, appelées secretases a, ss et y. Le peptide Ass résulte du clivage ss et y (Murphy et al (1999)"y-secretase, evidence for multiple proteolytic activities and influence of membrane positioning of substrate on generation of amyloid ss peptides of varying length" J. Biol. Chem. 274 (17) 11914-11923). Le peptide Ap (forme Ass42 ou Ass40) est toxique pour les neurones ainsi que d' autres fragments du clivage par la y secrétase, libérés dans le cytoplasme. Il serait donc particulièrement avantageux de disposer de composés capables d'inhiber la production de ces peptides, qui ne soient pas toxiques sur les organes ou les processus qui mettent en jeu les mêmes enzymes ou des enzymes similaires. Cet objectif n'est pas trivial car les preuves se sont accumulées tendant à rapprocher ou à identifier la y sécretase et la présélinine-l, ce qui laisse à penser que les inhibiteurs de la y secrétase seront aussi des inhibiteurs des voies métaboliques où intervient la préséniline-1, notamment la voie Notch Delta. Cette voie se retrouve dans le développement embryonnaire et dans l'hématopoïèse. A cet égard, les inhibiteurs de la y secrétase décrits jusqu'ici sont également toxiques pour la voie NotchDelta et sont le plus souvent peu spécifiques, inhibant aussi bien la chymotrypsine, l'élastase ou les calpaïnes. Il existe donc un réel besoin pour des composés ayant des propriétés pharmacologiques améliorées, assurant une meilleure sélectivité et une toxicité moindre lors d'utilisations thérapeutiques. De façon surprenante la demanderesse maintenant a trouvé, en utilisant une méthode originale, des composés inhibiteurs ayant des propriétés biologiques améliorées, du point de vue de l'efficacité, la sélectivité et/ou de la toxicité. Plus particulièrement, la présente demande décrit une nouvelle sous famille d'iso-coumarines ayant des propriétés améliorées inhibitrices de la production de peptide amyloïde ss. Il s'agit plus spécifiquement des composés formule générale (I) ci-après : dans laquelle : - RI et R2, indépendamment l'un de l'autre, sont choisis parmi un atome d'hydrogène, un groupe (CI-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-CI5) cycloalkyle, (C5-C 12) aryle, (C5-Cl2) aryle (CI-C24) alkyle, (C5-CI2) aryle (C2-C24) alkényle, (C3-C15) alkoxy, (C3-CI5) thioalkoxy, COR', COOR'ou CONHR', R'étant un atome d'hydrogène ou un groupe (CI-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3- C15) cycloalkyle, (C5-C12) aryle, (C5-CI2) aryle (CI-C24) alkyle, (C5-CI2) aryle (C2- C24) alkényle, un acide gras, saturé ou insaturé, ou un acide aminé, protégé ou non, ou, RI et R2 pris ensemble forment un système monocyclique ou bicyclique ayant de 5 à 15 chaînons dont éventuellement 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi N, 0 et S, - R3 représente un groupe (CI-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-CI5) cycloalkyle (C5-C12) aryle, (C5-C12) aryle (CI-C24) alkyle, (C5-C12) aryle (C2-C24) alkényle ou un hétérocyle en (C3-Cl5) ayant de 1 à 3 hétéroatomes identiques ou différents choisis parmi N, 0 et S, - A représente un atome d'azote, de phosphore ou un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène (de préférence un atome de chlore) ou un groupe OR", R"étant un atome d'hydrogène ou un groupement (C5-CI2) aryle, (Cl-C6) alkyle ou tosyle, et - Y représente un atome d'oxygène, de soufre ou d'azote, les groupes alkyle, alkényle, cycloalkyle, aryle, alkoxy, thioalkoxy et le système cyclique formé éventuellement par RI et R2 étant non substitués ou substitués par un ou plusieurs substituants choisis de préférence parmi un atome d'halogène, un groupe (Cl-C6) alkyle, (C3-C15) cycloalkyle, (C5-C12) aryle, (C3-C15) alkoxy, (C3-C15) thioalkoxy, amino, amino (Cl-C15) (cyclo) alkyle, aminodi (C 1-C 15) (cyclo) alkyle, COOH, (Cl-C15) acyle, (ClC15) acyloxy, nitro et trifluorométhyle, ainsi que leurs sels et, le cas échéant, énantiomères. L'invention a donc pour objet les composés ci-dessus en tant qu'inhibiteurs de la production de peptide amyloïde Ap. L'invention a en outre pour objet des composés nouveaux particuliers répondant à la formule générale (I) ci-dessus, ayant des propriétés avantageuses. Selon l'invention, le terme"alkyle"désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié ayant de 1 à 24 atomes de carbone. Il peut s'agir d'un alkyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone, tel que méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tert-butyle, pentyl, néopentyle, n-hexyle. Les groupes en C ;-C sont préférés. Il peut s'agir également d'un alkyle à chaîne aliphatique, linéaire ou ramifiée, comprenant par exemple de 12 à 24 atomes de carbone, préférentiellement de 12 à 20. On peut citer notamment les groupes linoléyl, linolényl ou oléyl. Selon l'invention, le terme"alkylène"désigne un radical hydrocarboné insaturé, linéaire ou ramifié, ayant de 1 à 24 atomes de carbone. Il peut comporter une ou plusieurs doubles liaisons, Il peut s'agir d'un alkylène inférieur ayant de 2 à 6 atomes de carbone, tel que méthylène, éthylène, propylène, butylène, etc. Il peut s'agir également d'un alkylène à chaîne aliphatique insaturée, linéaire ou ramifiée, comprenant par exemple de 12 à 24 atomes de carbone, préférentiellement de 12 à 20. On peut citer notamment les groupes palmityl, arachidonyl, etc. Le terme cycloalkyle désigne tout système hydrocarboné cyclique, pouvant comprendre typiquement de 3-15 atomes de carbone et être mono-ou poly-cyclique. Un cycloalkyle préféré est le groupe adamantyle. Les groupes aryle sont des systèmes hydrocarbonés aromatiques mono-, bi-ou tricycliques ayant de 2 à 18 atomes de carbone et éventuellement un ou plusieurs hétéroatomes, de préférence de 5 à 12 atomes de carbone. Le terme arylalkyle ou arylalkylène désigne tout groupe alkyle ou alkylène tel que défini ci-avant, dans lequel est incorporé un ou plusieurs groupes aryle tels que définis ciavant. Les groupes"acyle"sont des groupes CO- (cyclo) alkyle ou CO-aryle, (cyclo) alkyle et aryle étant tels que définis ci-avant. Les groupes alkoxy correspondent aux groupes (cyclo) alkyle définis ci-dessus reliés au noyau par l'intermédiaire d'une liaison-0- (éther). Les groupes"thioalkoxy"correspondent aux groupes (cyclo) alkyle définis ci-dessus reliés au noyau par l'intermédiaire d'une liaison-S- (thio). Par hétérocycle, on entend tout système mono-ou multicyclique carboné contenant avantageusement de 3 à 15 chaînons, dont éventuellement 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi 0, N et S. On peut citer notamment les groupes pyridinyl, pyrimidyl, imidazolyl, benzymidazolyl, piperazinyl, etc. Par halogène , on entend un atome de fluor, de chlore, de brome ou d'iode. Par acide aminé , on entend tout acide aminé naturel, notamment alanine, valine, proline, tryptophane, glutamine, etc. Par hétéroatome on entend un atome choisi parmi 0, N et S. Comme il est illustré dans les exemples, les composés préférés selon l'invention sont dotés des propriétés requises d'inhibition de la production de peptide Ap, mais respectent le développement embryonnaire. A cet égard, la présente invention montre en effet de manière avantageuse et inattendue qu'il est possible de discriminer entre l'action sur la production de peptide Ap et sur d'autres phénomènes où intervient aussi la présénilinel (par exemple la voie Notch Delta, le développement embryonnaire ou l'hématopoïèse), et de produire ou sélectionner des composés présentant un profil pharmacologique particulièrement avantageux. L'invention a donc également pour objet une méthode de sélection, identification, caractérisation ou qualification de composés inhibiteurs de protéase sélectifs, consistant en un double test du composé d'une part sur la production de peptide Ap (à partir d'APP) et d'autre part sur une activité toxique dépendant de protéase. L'invention a également pour objet des compositions, notamment pharmaceutiques comprenant les composés tels que définis ci-avant, ou obtenus par la méthode décrite ciavant. L'invention concerne en outre l'utilisation de ces composés ou compositions pour le traitement de pathologies neurodégénératives, notamment pour l'inhibition du clivage de l'APP chez des sujets, en particulier pour traiter ou inhiber ou prévenir l'apparition ou le développement de la maladie d'Alzheimer. Des composés inhibiteurs particulièrement préférés au sens de l'invention sont des composés de formule générale (I) ci-avant, dans laquelle : - Y représente 0 ou N, plus préférentiellement 0, et/ou - A représente un atome d'azote ou un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène (de préférence un atome de chlore) ou un groupe OR", R"étant un atome d'hydrogène ou un groupement (Cl-C3) alkyle ou tosyle, et/ou - RI est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle ou alkylene comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, de préférence un atome d'hydrogène, et/ou - R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe COOR'dans lequel R'est un groupe (C l-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-C15) cycloalkyle, (C5-C12) aryle, (C5- C12) aryle (Cl-C24) alkyle ou (C5-CI2) aryle (C2-C24) alkényle, encore plus préférentiellement un groupe (C3-C15) cycloalkyle, notamment adamantyle, et/ou - R3 est un groupe alkyle substitué, de préférence un groupe alkylalkoxy. Dans un autre mode particulier, les composés répondent à la formule générale (I) dans laquelle R2 est un groupe CONHR', R'étant un atome d'hydrogène ou un groupe (Cl- C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-CI5) cyc1oalkyle, (C5-CI2) aryle, (C5-CI2) aryle (ClC24) alkyle ou (C5-C12) aryle (C2-C24) alkényle. Dans un autre mode particulier, les composés répondent à la formule générale (I) dans laquelle R2 est un groupe COR', COOR'ou CONHR', R'étant, un acide gras, saturé ou insaturé, ou un acide aminé, protégé ou non. Dans un mode particulier de mise en oeuvre, R3 représente un groupe alkyle, alkényle ou aryle oméga-fonctionnalisé par une fonction terminale alcool, acide ou amine. Dans un autre mode plus préféré des composés selon la formule générale (I), A représente un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène, de préférence un atome de chlore. Une famille particulièrement avantageuse de composés est en effet constituée d'isocoumarines halogénées. Une famille particulièrement préférée est celle dans laquelle A représente un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène, de préférence un atome de chlore, et Y représente 0 ou N, plus préférentiellement O. Enclore plus préférentiellement, il s'agit d'une famille dans laquelle RI représente en outre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle ou alkylene comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, de préférence un atome d'hydrogène. Des composés préférés sont caractérisés par un noyau 4 chloro-isocoumarine substitué en position 7 par une amine qui peut être engagée dans une liaison carbamate ou amide. Il est particulièrement préféré que cette structure hydrophobe soit constituée d'un carbamate d'alcool hydrophobe, tel que le substituant adamantyle. Une famille particulièrement préférée est constituée de composés de formule générale (I) telle que définie ci-avant, dans laquelle A est un groupe C-Cl, RI est un atome d'hydrogène, R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe COOR'dans lequel R'est un groupe (C3-CI5) cycloalkyle, Y est un atome d'oxygène, et R3 est un groupe alkyle substitué, de préférence un groupe alkylealkoxy. De tels composés constituent en outre un objet particulier de la présente invention. Les composés de l'invention peuvent être synthétisés à partir de matériaux du commerce, tels que l'acide homophtalique en utilisant des procédés classiques de la chimie organique, comme illustré dans les exemples. Ainsi, il est possible, à partir de l'acide homophtalique, de synthétiser le noyau 7-amino-4-chloro-3-substitué alkyl isocoumarine selon le protocole décrit par Powers et al. (Powers et al. (1990) Biochemistry, 29, 3108- 3118). A partir de ce synthon clé,"l'habillage"de la fonction amine aromatique peut être réalisé selon la réaction d'acylation déjà très longuement décrite à l'aide de chlorure d'acide, et la formation d'urée par l'utilisation d'isocyanates. Il est entendu que toute autre voie de synthèse conventionnelle, connue de l'homme du métier, peut être utilisée pour la réalisation des composés ci-dessus. Les propriétés biologiques des composés de l'invention peuvent être vérifiées et testées selon différents modèles ou tests. A cet égard, l'activité inhibitrice de la production de peptide Ap peut être déterminée par exemple par l'un des tests suivants, décrits dans la littérature : - Immunoprécipitation-électrophorèse des produits radiomarqués, selon la technique décrite par M. E. Figueiredo-Pereira & al. (1999), Distinct secretases, a cystein protease and a serine protease, generate the C-termini of amyloiä ss-proteins Ass 1-40 and Ass 1-42 respectively ; J. Neurochem. 72,1417-1422 ; - ELISA, détection fluorescence, selon la méthode proposée par G. Christie, & al. (1999), Alzheimer disease : correlation of the suppression b-amylO peptide secretion from cultured cells with inhibition of the chymotrypsin-like activity of the proteasome ; J. of Neurochemistry, 73,195-204 ; - Immunoprécipitation-spectro de masse, selon la technique de Ron Wang et al. (1996) The profile of soluble Amyloid ? Protein in cultured cell media, detection and quantification of amyloid ss protein and variants by immunoprecipitation-mass spectrometry. J. Biol. Chem. 271, 31894-31902 ou de Michael P. Murphy & al. (1999), ySecretase, evidence for multiple proteolytic activities and influence of membrane positioning of substrate on generation of amyloiä ss peptides of varying length, J. Biol. Chem. 274, 11914-11923. Ces différents tests, seuls ou en combinaison (s), permettent d'évaluer l'activité inhibitrice des composés de l'invention. Il est entendu que le caractère inhibiteur englobe l'inhibition totale ou partielle de l'activité. Toutefois, on préfère, dans le cadre de l'invention, des composés capables d'inhiber au moins 25%, plus préférentiellement au moins 45% de la production de peptide Ap, notamment de la forme Ass42. Comme indiqué précédemment, les composés selon l'invention sont préférentiellement des inhibiteurs sélectifs de la production de peptide Ap. Le terme sélectif indique que les composés préférés selon l'invention ont une action inhibitrice de l'activité d'hydrolyse de la protéine APP supérieure à leur action inhibitrice éventuelle d'autres processus protéolytiques (autres substrats et/ou autres enzymes, telles que élastase, calpaïne et/ou chymotrypsine, par exemple). Des composés préférés au sens de l'invention sont des composés essentiellement inactifs ou sans effet sur la fonction Notch Delta ou la segmentation ou l'expression du gène lunatic fringe. La toxicité ou la non-toxicité sur les voies dépendant des enzymes peuvent s'apprécier par injection à des embryons ou des femelles gestantes, suivie de l'observation des perturbations du développement embryonnaire. Un test préféré selon l'invention est le blocage du développement embryonnaire observé sur un oeuf récemment embryonné, tel que décrit dans R. Jelinek & al. (1985), Indian Journal of experimental biology, 23,588- 595. Cette propriété peut également être déterminée en testant l'effet des composés sur une fonction connue pour être importante dans l'embryogenèse, telle que la segmentation, comme décrit ci-après. Ainsi, un test préféré de toxicité est basé sur des profils d'expression de gènes durant la somitogénèse de l'embryon de poulet (MJ Mc Grew & al (1998) Curr. Biol., 8,979-982 ; Caroline Jouve, Thèse Université de la Méditerranée, 28 sept 2000). A cet égard, l'équipe du Dr. Pourquié, inventeur de la présente demande, a mis en évidence l'expression, en vague de propagation, du gène lunatic fringe dans le mésoderme présomitique, qui précède la somitogenèse. Un test particulier au sens de l'invention réside plus particulièrement dans une mesure de l'expression (ou de la vague de propagation) du gène lunatic fringe, à partir d'embryons. La mesure de l'expression de ce gène peut être réalisée par toute technique connue (sondes marquées, amplification, électrophorèse, puces, hybridation in situ, etc. ). Pour cela, on sépare des embryons de poulet de 2 jours selon l'axe sagittal en leurs 2 moitiés. Une moitié est fixée immédiatement alors que la moitié contralatérale est mise en culture pendant 90 minutes. On observe la propagation de l'expression de Lunatic Fringe, vue par hybridation in situ, dans la moitié expérimentale par rapport à la moitié contrôle fixée. Selon l'invention on cultive les deux moitiés de l'embryon en parallèle pendant 2 heures, une moitié sert de témoin et l'autre est cultivée en présence d'un composé test sélectionné en b). L'analyse de l'image permet de quantifier l'effet du composé test. Lorsque l'on observe une modification de l'expression de lunatic fringe, il y a présomption de toxicité. On peut aussi utiliser un test cellulaire de la fonction Notch Delta tel que décrit dans Bart de Strooper & al. (1991) Nature 398,518-525. Un autre objet de l'invention concerne des méthodes pour la sélection, l'identification, la caractérisation ou la qualification de composés inhibiteurs de protéase sélectifs, en particulier de la production de peptide Ap à partir d'APP. Plus particulièrement, il s'agit de méthodes permettant de sélectionner, identifier, caractériser ou qualifier des composés inhibiteurs de la production de peptide Ap et essentiellement inactif sur le développement embryonnaire, notamment sur l'expression du gène lunatic fringe chez l'embryon ou sur la voie Notch. Comme indiqué précédemment, l'invention montre, de manière inattendue et avantageuse, qu'il est possible de discriminer entre l'action sur la production de peptide Ap et sur d'autres phénomènes où intervient aussi la présénilinel (par exemple la voie Notch Delta, le développement embryonnaire ou l'hématopoïèse), et de produire ou sélectionner des composés présentant un profil pharmacologique particulièrement avantageux. Les méthodes de l'invention comprennent plus particulièrement : a) une détermination de l'action d'un ou plusieurs composés tests sur la production de peptide Ap (par exemple la forme Ass40 ou Ass42, notamment Ass42), en particulier par clivage de l'APP (sauvage ou d'un isoforme ou mutant), b) la sélection de composés tests capables d'inhiber l'activité de production en a), c) une détermination de l'action de composés sélectionnés en b) sur le développement embryonnaire ou l'expression de voies métaboliques associées au développement embryonnaire, et d) la sélection de composés ayant une activité d'inhibition de la production de peptide Ap en a) supérieure à l'activité d'inhibition sur le développement embryonnaire en c). Plus préférentiellement, l'action d'inhibition de la production de peptide Ap en a) est fortement supérieure à l'activité d'inhibition sur le développement embryonnaire en c), de préférence d'un facteur 2 ou plus. Encore plus préférentiellement, les composés sélectionnés en d) sont essentiellement dépourvus d'effet ou d'action dans le test c), et présentent donc une toxicité faible et une sélectivité élevée pour le clivage de l'APP. La détermination de l'action inhibitrice de l'étape a) peut être effectuée selon différentes méthodes, telles que les techniques d'immunoprécipitation-électrophorèse, ELISA, ou immunoprécipitation-spectrométrie de masse mentionnée ci-avant. Préférentiellement, l'effet inhibiteur de la production de peptide Ap est déterminé en utilisant une cellule de mammifère, préférentiellement d'origine neuronale (par exemple un neuroblastome), exprimant et/ou transfectée par un acide nucléique codant l'APP humaine, portant ou non une mutation favorisant le (s) clivage (s) ss et/ou y. Une autre réalisation préférée consiste en l'utilisation de neurones corticaux débarrassés des cellules gliales. En effet il est important de vérifier que l'inhibition est efficace sur les neurones mêmes, une inhibition limitée aux cellules gliales ne serait pas suffisante, car même si elle aboutit à une réduction significative des dépôts amyloïdes elle n'empêcherait pas le neurone de mourir des fragments cytoplasmiques de l'APP, dont on a démontré récemment la toxicité (PCT/FROO/02174). Les produits formés, après extraction et immunoprécitation sont analysés par spectrométrie de masse/électro-spray. Dans l'étape b), on réalise une sélection des composés capables d'inhiber au moins partiellement la production de peptide Ap. Préférentiellement, on sélectionne les composés capables d'inhiber au moins 25%, plus préférentiellement au moins 45% de la production de peptide Ap observée dans les mêmes conditions mais en l'absence du composé test. Encore plus préférentiellement, on sélectionne les composés capables d'inhiber la production du peptide Ass42 ou Ass40, plus préférentiellement Ass42, qui est majoritairement présent dans les plaques séniles. Dans l'étape c), la détermination de l'action des composés sélectionnés sur le développement embryonnaire ou l'expression de voies métaboliques associées au développement embryonnaire peut être réalisée selon les techniques mentionnées ci-avant. Un test préféré est basé sur la détermination de l'effet des composés tests sur une fonction ou une voie métabolique impliquée dans l'embryogénèse, notamment sur l'expression du gène lunatic fringe. La méthode décrite ci-avant peut être appliquée à différents types de composés tests, d'origine et de structure variées. Il peut s'agir d'acides nucléiques, polypeptides ou peptides, lipides, sucres, acides gras, extraits biologiques, échantillons environnementaux, molécules synthétiques ou semi-synthétiques, composés organiques ou minéraux, etc. Les tests peuvent être réalisés sur plusieurs composés en parallèle (ou en mélange), par exemple dans des plaques de dosage (multi-puits) ou tout autre dispositif. La méthode selon l'invention peut être utilisée pour caractériser ou profiler des composés connus pour leur activité inhibitrice de la production de peptide Ap, dans le but de sélectionner des composés ayant un profil de sélectivité/toxicité approprié. Il est entendu que l'ordre des étapes peut être inversé, le test d'inhibition de la production de peptide Ap étant réalisé en second. D'autre part, le procédé peut inclure des étapes supplémentaires de détermination de l'activité des composés sur d'autres substances (e. g., enzymes) ou d'autres substrats. A cet égard, un objet de l'invention réside également dans l'utilisation de composés inhibiteurs sélectifs de la production de peptide Ap (en particulier inhibiteurs de l'activité d'hydrolyse de l'APP par la gamma sécrétase et essentiellement inactifs ou sans effet sur la fonction Notch Delta ou la segmentation ou l'expression du gène lunatic fringe) pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement de pathologies neurodégénératives, notamment de pathologies associées à l'hydrolyse de l'APP, en particulier de la maladie d'Alzheimer. Un autre objet de l'invention réside également dans une composition, notamment une composition pharmaceutique, comprenant un composé tel que défini ci-avant. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention comprennent avantageusement un véhicule ou excipient ainsi que, le cas échéant, d'autres principes actifs. Ainsi, les composés selon l'invention peuvent être utilisés seuls ou en combinaison (s), notamment avec d'autres agents ou principes actifs sur certains troubles du système nerveux. Les principes actifs peuvent être utilisés simultanément (et dans ce cas conditionnés ensemble ou de manière séparée), ou de façon séparée ou espacée dans le temps. Les composés ou compositions selon l'invention peuvent être administrés de différentes manières et sous différentes formes. Ainsi, ils peuvent être injectés par voie systémique, comme par exemple par voie intraveineuse, intra-musculaire, sous-cutanée, trans-dermique, intra-artérielle, intracérébrale, etc., ou administrés par voie orale, les voies orales, intraveineuse, intra-musculaire et sous-cutanée étant préférées. Pour les injections, les composés sont généralement conditionnés sous forme de suspensions liquides, qui peuvent être injectées au moyen de seringues ou de perfusions, par exemple. A cet égard, les composés sont généralement dissous dans des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier. Ainsi, les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, stabilisants, conservateurs, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations liquides et/ou injectables sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, l'acacia, etc. Les composés peuvent également être administrés sous forme de gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, etc., éventuellement au moyen de formes galéniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons. Il est entendu que le débit et/ou la dose administrée peuvent être adaptés par l'homme du métier en fonction du patient, de la pathologie concernée et de son stade d'évolution, du mode d'administration, etc. Typiquement, les composés sont administrés à des doses pouvant varier entre 0.1 llg et 100 mg/kg de poids corporel, plus généralement de 0, 01 à 10 mg/kg, typiquement entre 0,1 et 10 mg/kg. En outre, des administrations répétées peuvent être réalisées, le cas échéant. La présente invention peut être utilisée pour le traitement ou la prise en charge, à titre préventif ou curatif, de pathologies du système nerveux, notamment de pathologies neurodégénératives, encore plus préférentiellement de pathologies liées à la présence de formes clivées de la protéine APP (notamment du peptide amyloïde Ass), spécifiquement de la maladie d'Alzheimer. Le terme traitement désigne au sens de l'invention le traitement des symptômes, la réduction de la progression ou des symptômes, la diminution du développement ou de l'apparition de la pathologie, l'amélioration de la qualité et/ou de la durée de vie, etc. Ainsi, un objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un composé tel que défini ci-avant pour la préparation d'une composition destinée au traitement de pathologies du système nerveux, notamment de pathologies neurodégénératives, encore plus préférentiellement de pathologies liées à la présence de formes clivées de la protéine APP. L'invention est particulièrement adaptée au traitement de la maladie d'Alzheimer. Un autre objet de l'invention réside dans une méthode de traitement de pathologies du système nerveux, notamment de pathologies neurodégénératives, encore plus préférentiellement de pathologies liées à la présence de formes clivées de la protéine APP, comprenant l'administration à un sujet d'une quantité efficace d'un composé tel que défini ci-avant. Le sujet peut être tout mammifère, de préférence humain. Comme indiqué ciavant, le procédé de l'invention est particulièrement approprié pour réduire ou ralentir l'apparition, la progression ou le développement de la pathologie, notamment de la maladie d'Alzheimer. D'autres aspects et avantages de la présente invention seront décrits en détails dans les exemples qui suivents, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs. Exemples Exemplel-Synthèse de l'acide 4-Nitro-homophtalique Acide 4-Nitro-homophtalique 1 Formule brute : C9H7NO6 Masse moléculaire : 225. 15 g/mol NcooH COOH A une solution d'acide nitrique fumant à 0 C est additionné l'acide homophtalique (5g, 31mmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation magnétique à température ambiante pendant 4 heures. La solution est alors jetée sur 1g de glace pilée. Le solide résultant est filtré puis séché sous pression réduite pour donner 1 (3. 88g, 88%) sous la forme d'une poudre blanche. Rf (méthanol 1/dichlorométhane 1) = 0, 6 RMN'H (250 MHz, DMSO) ô : 8. 43 (d, 1H, J=2. 4Hz, CH=C-COOH), 8. 18 (dd, 1H, J=2. 4Hz, J'=8. 4Hz, N02-C-CH=CH), 7. 48 (d, 1H, J=8. 4Hz, N02-C-CH=CH), 3. 93 (s, 2H, CHJ IR : 1681, 1513, 1412, 1340, 902 cm-' Spectre de masse (GT-FAB > O) : (M+H) 226 Mp : 217OC Log P (n-octanol/H2O) = 1. 11 0, 33 Exemple 2-Synthèse d'acide 2- (2-Methoxy-ethoxycarbonylmethyl)-5-nitro-benzoïque Acide 2- (2-Methoxy-ethoxycarbonylmethyl)-5-nitro-benzoïque 2 Formule brute : C12H13N07 O'NlXl Masse moléculaire : 283, 24 g/mol 1 0 1 1 A une solution de 1 (2. 19g, 9. 73mmol) dans du 2-Méthoxyéthanol (20ml), on ajoute de l'acide sulfurique (95%, 150 l, 2. 76mmol). Le mélange réactionnel est chauffé à 100oC, sous agitation magnétique, pendant 2 heures. 10ml d'AcOEt sont ajouté au mélange et la solution est extraite avec 3xl0ml d'une solution de NaHC03 5%. Les phases aqueuses sont réunies et acidifiées par une solution d'acide citrique jusqu'à obtenir un pH=3. Cette solution est alors extraite avec 3x15ml d'AcOEt, les phases organiques sont réunies et séchées sur sulfate de magnésium, filtrées et évaporées sous pression réduite. On obtient ainsi 2 (2.40g, 87%) sous la forme d'une poudre blanche. Rf (méthanol 2/dichlorométhane 14) = 0,70 RMN H (250 MHz, CD30D) # : 8.99 (d, 1H, J=2. 51Hz, CH=C-COOH), 8.52 (dd, IH, J=2. 50Hz, J'=8. 41Hz, N02-C-CH=CH), 7.77 (d, IH, J=8.43Hz, N02-C-CH=CH), 4.38 (s, 2H, CH-COO), 4.38 (t, 2H, COOCH), 3.76 (t, 2H, J=4.63Hz, CH2-OMe), 3.52 (s, 3H, OCH3) Spectre de masse (NOBA-FAB > 0) : (M+H) = 284 Mp : 55 C Log P (n-octanol/H2O) = 1. 58 0, 37 Exemple 3-Synthèse de 4-Chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-7-nitro-isochromen-1-one 4-Chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-7-nitro-isochromen-l-one 3 Formule brute : C12HIOC1N06 Masse moléculaire : 299. 66 g/mol 02N 1 10 0 0 15C ! CI A une solution de 2 (2. 4g, 8. 49mmol) dans du toluène (50ml), on ajoute PC15 (4. 4g, 21.22mmol). Le mélange réactionnel est porté à reflux pendant 15 heures. Le solvant est évaporé sous pression réduite et 10ml d'eau sont ajoutés au résidu. La solution hétérogène est portée à reflux pendant 1 heure et le mélange est extrait avec 2x20ml d'AcOEt. Les phases organiques sont réunies et lavées avec 3x10ml de brine, puis séchées sur Sulfate de magnésium et évaporées sous vide. Le résidu est recristallisé à chaud dans le méthanol pour donner 3 (1.77mg, 69%) sous la forme d'une poudre jaune. Rf (Acétate d'éthyle 7/dichlorométhane 3/hexane 12) = 0,37 RMN'H (250 MHz, CDCl) 8 : 8.95 (d, 1H, J=2.32Hz, CH=C-COO-), 8.45 (dd, IH, J=2.37Hz, J'=8. 97Hz, N02-C-CH=CH), 7.78 (d, 1H, J=8.95Hz, N02-C-CH=CH), 4.54 (t, 2H, J= 4. 40Hz, O-CH2-CH2-OMe), 3.71 (t, 2H, J=4. 44Hz,-CH2-OMe), 3.37 (s, 3H, OCH) OL) RMN 13C (250MHz, CDCI3) 8 : 157. 488,155. 788,149. 891,143. 143,129. 819, 126.388, 123.683, 116.947, 90.406, 70.508, 69.991, 59.340 IR : 2919,1737, 1102,843 cm-' Spectre de masse (NOBA-FAB > O) : (M+H) += 300 Mp : 127 C Log P (n-octanol/H2O) = 2.25 # 0,75 Exemple 4-Synthèse de 7-Amino-4-chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-isochromen-7-one 7-Amino-4-chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-isochromen-l-one 4 Formule brute : CH, 2CINO4 Masse moléculaire : 269. 68 g/mol H2N o ooMe A une solution de 3 (500g, 1. 66mmol) dans du THF (30ml), on ajoute le palladium activé sur charbon (10% Pd, 50mg). Le mélange réactionnel est hydrogéné à température ambiante pendant 6 heures puis filtré sur célite. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est purifié par chromatographie sur colonne de silice (acétate d'éthyle 9/ cyclohexane 12) pour donner 4 (447mg, 100%) sous la forme d'une poudre jaune. Rf (Acétate d'éthyle 9/hexane 12) = 0, 39 RMN tH (250 MHz, CDCI3) : 7. 48 (d, 1H, J=8. 57Hz, NH2-C-CH=CH), 7. 38 (d, 1H, J=2. 42Hz, NH2-C-CH=C-C02), 7. 05 (dd, 1H, J=2. 47Hz, J'=8. 57Hz, NH2-C-CH=CH), 4. 39 (t, 2H, J=4. 52Hz, O-CHrCHOMe), 3. 68 (t, 2H, J= 4. 51Hz,. O-CH2-CH-OMe), 3. 38 (s, 3H, 0-CHJ IR : 1799, 1748cm'' Spectre de masse (NOBA-FAB > O) : (M+H) += 270 Mp : 127OC Log P (n-octanol/H2O) = 1. 37 0, 75 Exemple 5-Synthèse de [4-Chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-1-oxo-77 isochromen-7-yl]carbamic acid adamantan-1-yl ester 4-Chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-l-oxo-lH-isochromen-7-yl]-carbamicacid adamantan-1-yl ester 5 Formule brute : CHCINOo Masse moléculaire : 447. 91 g/mol s /7 ! i 1 Cl A une solution de 4 (50g, 0. 22mmol) dans du THF (1. 25ml), on ajoute le l-Adamantyl fluoroformate (225mg, 2. 1mmol) et la TEA (1401, Immol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation magnétique à température ambiante pendant 3jours. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est solubilisé dans 10ml d'AcOEt. La solution organique est alors lavée avec 2x10ml d'une solution de NaHC03 5%, puis avec 2x10ml de Brine et enfin avec 2x10ml d'acide citrique puis elle est séchée sur sulfate de magnésium et évaporée sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie sur colonne de silice (acétate d'éthyle 6/cyclohexane 12) pour donner 5 (50mg, 50%) sous la forme d'une poudre jaune. Rf (Acétate d'éthyle 6/hexane 12) = 0.59 RMN'H (250 MHz, CDC) : 7.93 (d, IH, J=2.25Hz, NH-C-CH=C-COO), 7.73 (dd, IH, J=8.69Hz, NH-C=CH-CH), 7.47 (d, IH, J=8.74Hz, NH-C=CH-CH), 6.59 (s, 1H,- NH), 4.31 (t, 2H, J=4.45Hz, O-CH-CH2-OMe), 3.58 (t, 2H, J=4.48Hz, O-CH2-CH- OMe), 3.27 (s, 3H, OCH3) IR : 3335,2912, 1820,1755, 1732,1651, 1064 cm-' Spectre de masse (NOBA-FAB > O) : (M+H)+ = 449 Mp : 140OC Log P (n-octanol/H2O) = 5.14 # 0,75 Exemple 6-Inhibition de la production de peptide AP L'activité des composés sur la production de peptide Ap est mesurée selon le protocole de Nigel J. Clarke et al. (1998) Febs Letters 430, 419-423 (appareil LC-MS Waters équipé d'un système electrospray-résonance quadrupolaire ZMD 2000) ou de Christie et al. (1999) J. of Neurochemistry, 73,195-204. Les composes 4 et 5 sont actifs et possèdent la capacité d'inhiber la production de peptide Ap. Exemple 7-Non-inhibition du développement de l'embryon. On utilise des oeufs (JA57) fraîchement pondus (max 2 jours) ou maintenus à 15 C depuis la ponte. Les oeufs sont incubés pendant 60 heures puis une ouverture est faite dans la coquille à l'endroit où l'embryon aura été localisé par gravité. On injectez d'une solution à 1 mM de la substance à tester dans l'embryon. Ensuite, les oeufs sont refermés et on laisse se poursuivre le développement à 37 C. 24 heures après l'injection, les oeufs sont ouverts et les embryons observés, on examine alors la toxicité de la substance, puis les oeufs sont refermés et replacés à 37 C pour effectuer un autre point d'observation 4 jours après l'injection. L'activité des composés est comparée à celle de composés de référence MG132 (Calbiochem 474790) et MW167 (Enzyme System DFK-167). Les résultats sont présentés dans le tableau ci-dessous. Survie 24 h Survie 4 jours MW 167 0/5 0 MG132 0/9 0 Composée 11/15 6/15 Composées 10/12 8/12 Les composés de l'invention sont donc beaucoup moins toxiques que les composés de référence sur le développement embryonnaire. REVENDICATIONS 1. Composés formule générale (I) ci-après : dans laquelle : - RI et R2, indépendamment l'un de l'autre, sont choisis parmi un atome d'hydrogène, un groupe (CI-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-CI5) cycloalkyle, (C5-C12)aryle, (C5-C12)aryle, (C1-C24) alkyle, (C5-C 12) aryle (C2-C24) alkényle, (C3-C15) alkoxy, (C3-C15) thioalkoxy, COR', COOR'ou CONHR', R'étant un atome d'hydrogène ou un groupe (Cl-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3C15) cycloalkyle, (C5-C12) aryle, (C5-C12) aryle (CI-C24) alkyle, (C5-CI2) aryle (C2C24) alkényle, un acide gras, saturé ou insaturé, ou un acide aminé, protégé ou non, ou, RI et R2 pris ensemble forment un système monocyclique ou bicyclique ayant de 5 à 15 chaînons dont éventuellement 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi N, 0 et S, R3 représente un groupe (CI-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-C15) cycloalkyle (C5-C12) aryle, (C5-C12)aryle (Cl-C24)alkyle, (C5-C12)aryle (C2-C24) alkényle ou un hétérocyle en (C3-CI5) ayant de 1 à 3 hétéroatomes identiques ou différents choisis parmi N, 0 et S, A représente un atome d'azote, de phosphore ou un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène (de préférence un atome de chlore) ou un groupe OR", R"étant un atome d'hydrogène ou un groupement (C5-CI2) aryle, (CI-C6) alkyle ou tosyle, et Y représente un atome d'oxygène, de soufre ou d'azote, les groupes alkyle, alkényle, cycloalkyle, aryle, alkoxy, thioalkoxy et le système cyclique formé éventuellement par RI et R2 étant non substitués ou substitués par un ou plusieurs substituants choisis de préférence parmi un atome d'halogène, un groupe (Cl-C6) alkyle, (C3-C15) cycloalkyle, (C5-C12) aryle, (C3-C15) alkoxy, (C3-C15) thioalkoxy, amino, amino (CI-CI5) (cyclo) alkyle, aminodi (CI-C15) (cyclo) alkyle, COOH, (Cl-C15) acyle, (ClCul5) acyloxy, nitro et trifluorométhyle, ainsi que leurs sels et, le cas échéant, énantiomères, en tant qu'inhibiteurs de la production de peptide amyloïde Ag. 2. Composés de formule générale (I) selon la revendication 1, caractérisés en ce que Y représente 0 ou N, de préférence O. 3. Composés de formule générale (I) selon la revendication 1 ou 2, caractérisés en ce que A représente un atome d'azote ou un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène, de préférence un atome de chlore ou un groupe OR", R"étant un atome d'hydrogène ou un groupement (CI-C3) alkyle ou tosyle. 4. Composés de formule générale (I) selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisés en ce que RI est un atome d'hydrogène. 5. Composés de formule générale (I) selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisés en ce que R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe COOR'dans lequel R'est un groupe (Cl-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-CI5) cycloalkyle, (C5-CI2) aryle, (C5C12) aryle (Cl-C24) alkyle ou (C5-C12) aryle (C2-C24) alkényle. 6. Composés selon la revendication 5, caractérisés en ce que R2 est un groupe COOR' dans lequel R'est un groupe (C3-C15) cycloalkyle, de préférence adamantyle. 7. Composés de formule générale (I) selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisés en ce R3 est un groupe alkyle substitué, de préférence un groupe alkylealkoxy. 8. Composés de formule générale (I) selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisés en ce R3 est un groupe alkyle, alkényle ou aryle oméga-fonctionnalisé par une fonction terminale alcool, acide ou amine. 9. Composés de formule générale (I) telle que représentée dans la revendication 1, caractérisés en ce que A est un groupe C-Cl, RI est un atome d'hydrogène, R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe COOR'dans lequel R'est un groupe (C3-C15) cycloalkyle, Y est un atome d'oxygène, et R3 est un groupe alkyle substitué, de préférence un groupe alkylealkoxy. 10. Méthode pour la sélection, l'identification, la caractérisation ou la qualification de composés inhibiteurs de la production de peptide amyloïde Ap, caractérisée en ce qu'elle comprend : a) une détermination de l'action d'un ou plusieurs composés tests sur la production de peptide Ap, en particulier par clivage de l'APP, b) la sélection de composés tests capables d'inhiber l'activité de production en a), c) une détermination de l'action de composés sélectionnés en b) sur le développement embryonnaire ou l'expression de voies métaboliques associées au développement embryonnaire, et d) la sélection de composés ayant une activité d'inhibition de la production de peptide Ap en a) supérieure à l'activité d'inhibition sur le développement embryonnaire en c). 11. Méthode selon la revendication 10, caractérisée en ce que les composés sélectionnés en d) sont essentiellement dépourvus d'effet ou d'action dans le test c). 12. Méthode selon la revendications 10 ou 11, caractérisée en ce que l'effet inhibiteur de la production de peptide Ap est déterminé par mise en contact du ou des composés tests avec une cellule mammifère exprimant un acide nucléique codant l'APP humaine sauvage ou un isoforme ou mutant de celle-ci, et détermination de l'apparition de forme clivée de la protéine APP. 13. Méthode selon la revendication 12, caractérisée en ce que la cellule mammifère est une cellule nerveuse, éventuellement recombinante. 14. Méthode selon l'une des revendications 10 à 13, caractérisée en ce qu'elle comprend en a) la détermination de l'action du ou des composés tests sur la production du peptide Ass40 ou Ass42, notamment Ass42, à partir de l'APP. 15. Méthode selon l'une des revendications 10 à 14, caractérisée en ce que l'étape c) comprend la détermination de l'effet du ou des composés tests sur l'expression (ou la vague de propagation) du gène lunatic fringe à partir d'embryons, ou dans un test cellulaire de la fonction Notch Delta ou dans un test de blocage du développement embryonnaire observé sur un oeuf récemment embryonné. 16. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé selon l'une des revendications 1 à 9 17. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé obtenu par la méthode selon l'une des revendications 10 à 15. 18. Utilisation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 9 ou d'un composé obtenu par la méthode selon l'une des revendications 10 à 15 pour la préparation d'une composition destinée au traitement de pathologies neurodégénératives, notamment pour l'inhibition du clivage de l'APP chez des sujets, en particulier pour traiter ou inhiber ou prévenir l'apparition ou le développement de la maladie d'Alzheimer.