Brevet FR2810549A1 — publié le 20011228

Composition présentant une activité antiparasitaire et biologique. La présente invention concerne une composition présentant une activité antiparasitaire et biologique. Dans les années 1880, furent synthétisées les premières phénothiazines colorées, dont la plus célèbre était le bleu de méthylène. Une grande partie de ces phénothiazines a été, ou est encore utilisée en histologie (azures, bleu de toluidine, etc..). Le bleu de méthylène est toujours un colorant de routine, très spécifique des structures acides nucléiques. Le bleu de méthylène présente une activité antiseptique modérée, en voie externe mais aussi en voie interne, qui le fit inscrire dans de nombreuses pharmacopées durant près d'un siècle. Les premières applications médicales datent de cette époque, et valurent à P. Ehrlich le prix Nobel de médecine dans les années 1920. Il postula que la coloration spécifique d'un organite ou d'une structure biologique indiquait l'existence d'une interaction réversible colorant-structure biologique, qui allait donner la théorie ligands-recepteurs. Une autre activité, anti-parasitaire celle là, fut étudiée vers cette époque, contre le genre Plasmodium, hématozoaire endémique dans la quasi-totalité de la ceinture tropicale et subtropicale, et qui concerne encore plusieurs milliards d'êtres humains. Cette maladie, transmise par les moustiques hématophages, donne un tableau clinique complexe, dominé par une pancytopénie sanguine chronique, évoluant par poussées, et dont la mortalité-morbidité est incommensurable dans les pays touchés. Surtout, il existe une forme gravissime de la maladie, due au Plasmodium falciparum, l'accès pernicieux ou neuropaludisme, qui consiste en une encéphalopathie gravissime et de signes variés (coma, stupeur, convulsions, paresthésies, paralysie, etc.).En médecine vétérinaire existe une parasitose très proche, la babésiose, qui peut aussi donner un tableau clinique gravissime, la neurobabésiose. La mortalité est de l'ordre de 50%, le pourcentage des séquelles neurologique atteint 20% ; c'est donc une urgence médicale, alors que le traitement reste le même depuis plus d'un siècle, et consiste presque exclusivement en l'administration des sels de quinine. Le mécanisme de cette encéphalopathie est toujours mal connu, compris et documenté, et aucune hypothèse globale n'a permis d'élucider le problème (micro thrombus d'hématies parasitées, etc.). L'aspect toxicologique, qui assimile l'encéphalopathie à un tableau d'intoxication, est mieux décrit et plus conséquent. Lors de l'accès palustre, il y a indéniablement excès de methémoglobine (dans laquelle le fer de l'hémoglobine est sous forme Fe+++ au lieu de Fe++) ( cf. Anstey NM, et al ; Elevated levels of methaemoglobin in Tanzanian children with 1996 Mar-Apr;90(2):147-51). Il existe également un excès de production de cytokines proinflammatoires ou non. Cette hyperproduction, entraîne un phénomène de cascade biochimique et immunologique (interleukines, facteurs pro inflammatoires, etc. ) qui aboutit à la libération massive des effecteurs cytotoxiques, type radicaux libres, entraînant un état de choc. Ces radicaux libres effecteurs cytotoxiques sont généralement des radicaux oxygène, superoxyde, hydroxyle, et nitrites. Les radicaux nitrites induisent une méthémoglobinémie. Une quantité anormale de nitrites est couramment rencontrée chez les malades en accès pernicieux, (cf. Senaldi G, et al. Nitric oxide and cerebral malaria. Lancet. 1992 Dec 19-26;340(8834-8835):1554 ; Mulder B, et al, The role of nitric oxide in cerebral malaria, Med Trop (Mars). 1995;55(4 Suppl):114-5 ; Moskowitz MA, et al., Nitric oxide and cerebral ischemia, Adv Neurol. 1996;71:365-7; discussion 367-9. Anstey NM, et al, Nitric oxide in Tanzanian children with malaria : relationship between malaria severity and nitric oxide production/nitric oxide synthetase type 2 expression, J Exp Med. 1996 Aug 1;184(2):557-67). Le bleu de méthylène est un colorant spécifique du parasite et fut utilisé dès 1891 contre le paludisme, avec des résultats convaincants, (cf. Guttmann P., Ehrlich P. Ueber die Wirkung des Methylenblau bei Malaria, Berliner klinische Wochenschrift 1891 39 :28 september.) Surtout, il se révéla actif en voie IV, sur les accès pernicieux résistants à la quinine, (cf. Couto M., Les injections endo-veineuses du bleu de méthylène dans le paludisme, Bulletin de la société de pathologie exotique 1908 I,4 :292-295.) Cette indication fut cependant rapidement abandonnée, si tant est qu'elle fut bien connue, pour des raisons peu compréhensibles, dues peut-être au peu de maniabilité du produit ou encore au fait qu'il devint très vite banal comme agent de désinfection. La mise au point d'autres antipaludéens de synthèse (amino-8 et amino-4-quinoléïne) firent oublier cette indication, pourtant très intéressante. Le produit en lui-même est bon marché, présente expérimentalement un coefficient thérapeutique élevé, est utilisable par toutes les voies entérales et parentérales. Surtout, il n'est pratiquement pas toxique, et n'est contreindiqué que dans des cas rares (déficit en G6PD par exemple) A partir de ces observations, le présent inventeur a porté son attention sur le développement d'une activité biologique des dérivés du bleu de méthylène, et notamment sur son dérivé déméthylé, l'azure B. La présente invention a donc pour but de proposer une composition présentant une activité antiparasitaire et biologique utile en tant que composition thérapeutique en médecine humaine et vétérinaire. Ainsi, l'invention a pour objet une composition destinée au traitement et à la prévention des affections concernées par une activité anti-parasitaire directe et indirecte sur tous les hématozoaires, notamment le genre Plasmodium et Babesia, Toxoplasma, Trypasosoma, Onchocerca, Filaires, Leishmanies, Nématodes, Plathelminthes et Némathelminthes, caractérisée en ce qu'elle comprend en tant que substance active dans une méthode de traitement ou de prévention du corps humain ou animal qui présente une activité anti-parasitaire, par action indirecte et par action directe sur le métabolisme, et la génétique des organismes pathogènes, et effet du type, poison respiratoire au moins un composé de formule générale (I) ou l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptable (I) dans laquelle X est un anion minéral ou organique. De manière avantageuse, la composition renfermant le composé de formule (I) ou azure B, selon la présente invention montre une activité très supérieure à celle du bleu de méthylène. En particulier, l'action indirecte de la composition selon l'invention se caractérise par une activité antiradicaux libres, surtout contre les agents methémoglobinisants, par inhibition terminale non spécifique des effecteurs cytotoxiques des réactions immunologiques et immunopathologiques spécifiques ou non spécifiques, en médecine humaine et vétérinaire. L'azure B et ses sels, sont généralement hydrosolubles, toujours actifs par voie entérale et parentérale (IV, SC, etc. ) et ils n'ont jamais induit une toxicité aiguë ou chronique ni d'effets indésirables, à des doses comprises entre 0,005 mg/Kg et 0,5 mg/Kg. La composition selon l'invention présente en particulier une activité anti-parasitaire double, par action directe sur la structure et le métabolisme parasitaire, et est utilisable pour le traitement et la prévention des affections concernées par l'action anticytokines pro-inflammatoires ou non, anti- interférons(s) (INFs), par effet sur les effecteurs terminaux cytotoxiques. Des études ont été menées à la fois in vitro et in vivo sur Plasmodium falciparum, mais aussi sur Babesia canis et Babesia bovis, hématozoaires très proches du plasmodium, et agent de la piroplasmose (ou babésiose) du chien et des bovins. La clinique de cette maladie, transmise par des tiques, est extrêmement proche de celle du paludisme, et il existe une neurobabésiose , ce qui en fait un modèle expérimental animal très précieux. On a ainsi pu observer que : In vivo, la composition renfermant l'azure B et ses sels est active à 100% sur la neurobabésiose déclarée, qui est normalement incurable avec les traitements classiques. In vitro, elle inhibe totalement les cultures de Plasmomdium falciparum et Babesia bovis à des concentrations de la dizaine de ppm. In vitro, les hématies traitées par la composition renfermant l'azure B ou ses sels à ces mêmes concentrations, sont totalement réfractaires à la culture des deux hématozoaires, tout en restant parfaitement fonctionnelles. A ces fins thérapeutiques, la composition selon l'invention renfermant l'azure B et ses sels, seuls ou en association avec d'autres principes actifs, est administrée par voie injectable, parentérale, buccale, locale sous forme de compositions pharmaceutiques adaptées à la voie d'administration. L'azure B est mélangé ou ajouté ou dissous dans tous véhicules, dispositifs ou excipients inertes non toxiques, pharmaceutiquement acceptable, type solutés injectables, comprimés, gélules, poudres aromatisées, sirops comprimés effervescents, comprimés à matrice inerte, lyocs, implants, dispositifs transdermiques, etc, sans que cette liste de formes galéniques soit exhaustive. La présente invention a également pour objet l'utilisation dans une composition destinée au traitement et à la prévention en médecine humaine et vétérinaire, des affections concernées par l'action anti-parasitaire directe et indirecte sur tous les hématozoaires, notamment le genre Plasmodium et Babesia, ainsi que les genres et familles Toxoplasma, Trypasosoma, Onchocerca, Filaires, Leishmanies, Nématodes, Plathelminthes et Némathelminthes, du composé de formule générale (I) dans laquelle X est un anion minéral ou organique. dans laquelle X est un anion minéral ou organique. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle présente une activité antiradicaux libres, en particulier contre les agents methémoglobinisants, par inhibition terminale non spécifique des effecteurs cytotoxiques des réactions immunologiques et immunopathologiques spécifiques ou non spécifiques, en médecine humaine et vétérinaire. 3. Composition selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce qu'elle est administrable par voie injectable, parentérale, buccale, locale. 4. Utilisation pour l'obtention d'une composition destinée au traitement et à la prévention en médecine humaine et vétérinaire, des affections concernées par l'action antiparasitaire directe et indirecte sur tous les hématozoaires, notamment le genre Plasmodium et Babesia, ainsi que les genres et familles Toxoplasma, Trypasosoma, Onchocerca, Filaires, Leishmanies, Nématodes, Plathelminthes et Némathelminthes, du composé de formule générale (I) ou l'un de ses sels. (I) dans laquelle : X est un anion organique ou minéral. 5. Utilisation selon la revendication 4 pour l'obtention d'une composition destinée au traitement et à la prévention des affections concernées par l'action anticytokines proinflammatoires ou non, anti-interféron(s) (INFs) par effet sur les effecteurs terminaux cytotoxiques.