Brevet FR2817167A1 — publié le 20020531

L'invention appartient au domaine de la production, des applications et de l'analyse des gaz. La qualité bactériologique des gaz et de l'air en particulier, devient une nécessité. Il existe des appareils commerciaux, qui permettent de contrôler la qualité microbiologique de l'air ambiant. Ces appareils sont utilisés dans les hôpitaux, les laboratoires pharmaceutiques, dans l'industrie agroalimentaire et dans toute activité devant être s'effectuée dans des "salles blanches", comme la fabrication des composants électroniques. Ces appareils fonctionnent selon deux méthodes :la méthode de filtration (appareils MILLIPORE# et appareils SARTORIUSTM) et la méthode d'impaction. La méthode de filtration consiste à faire traverser un gaz à travers un porte filtre équipé d'un filtre de porosité comprise entre environ 0,22 m et 0,45 m. Les micro-organismes véhiculés par le flux gazeux et dont la taille est supérieure à celle des pores, sont retenus par le filtre. Le filtre est ensuite recueilli en conditions aseptiques, et il est soit lavé pour récupérer les micro-organismes soit mis directement en culture sur boîte de pétri. Après une période déterminée d'incubation à l'étuve, on compte le nombre d'unités formant colonies (UFC) et on identifie les germes présents. On en déduit un nombre d'unités formant colonie par volume de gaz prélevé exprimé en UFC/ m3. Dans une variante de cette méthode on utilise un filtre hydrosoluble à base de gélatine ce qui permet après addition d'eau, de mettre directement le filtre en culture ou encore de le déposer sur une boîte de pétri. La méthode d'impaction consiste à prélever le gaz, à accélérer fortement son flux et à le diriger vers une cible enduite de gélose. Les particules et microorganismes ayant une quantité de mouvement suffisante quittent le flux d'air et sont projetés sur la surface de la cible enduite de gélose. Il existe deux variantes de cette méthode : "l'impaction par crible" selon laquelle le gaz passe au travers d'une plaque percée de trous. Chaque trou initiant un jet de gaz qui impacte la cible (appareil AIR TESTTM OMEGA) et "l'impaction par centrifugation" ou par "rotation du flux" selon laquelle les particules sont séparées du flux gazeux pour projeter par centrifugation, sur une bandelette de gélose (appareils RCS High Flow# de Biotest ou BIAPTM d'ECOMESURE). Pour le contrôle microbiologique de l'air ambiant, la plupart des appareils fonctionnent selon la méthode par impaction. Cependant, ces appareils ne permettent pas de déterminer de façon complète la contamination de l'air. Il existe aussi des appareils, par exemple le BIO-IMPACTORT"" de chez AIR STRATEGIETM, fonctionnant selon cette même méthode, pour contrôler la qualité des gaz comprimés. L'appareil précité est conçu pour travailler à la pression du réseau sur lequel il est connecté, avec un débit de gaz constant de 28 litres / minute. Cependant, les résultats obtenus avec ces appareils sont peu reproductibles car ils dépendent d'un grand nombre de facteurs, comme la taille des particules viables à analyser, le type et la sensibilité des micro-organismes, le niveau de la contamination, les conditions environnantes, la précision et l'efficacité du prélèvement de l'opérateur, le type et la hauteur de gélose recouvrant la cible, la vitesse d'impaction des particules et le volume de gaz prélevé par sa capacité à sécher plus ou moins la gélose. C'est pourquoi les résultats varient pour un même gaz d'un appareil à l'autre, qu'ils soient identiques ou différents. De plus, bien que les pompes et les systèmes d'aspiration de ces appareils soient étalonnés et contrôlés de manière à prélever un volume précis de gaz en un temps donné avec une vitesse constante, il n'existe pas de rapport d'étalonnage permettant de déterminer de façon précise le taux récupération des micro-organismes vivants réellement présents dans le volume l'air analysé. Certains fournisseurs ont défini les taux de récupération en fonction de la taille des particules, mais l'efficacité biologique, qui représente la capacité du collecteur à maintenir la viabilité des microorganismes collectés durant toute la procédure de prélèvement, n'a été que peu ou pas validée. Enfin, il n'existe aujourd'hui aucune norme définissant un nombre maximum de microorganismes à ne pas dépasser par m3 d'air ambiant ou par m3 de gaz analysé, que ce soit dans l'industrie agroalimentaire, dans l'industrie pharmaceutique ou même dans le milieu médical. N'ayant pas de normes spécifiques à l'aérobiocontamination, (à l'exception des salles blanches), il est nécessaire d'établir une cartographie de cette contamination. Les seules normes existantes sont relatives à l'empoussièrement. La demanderesse a donc cherché à développer un procédé de séparation de particules d'un gaz ou d'un mélange de gaz. C'est pourquoi, l'invention a pour objet un procédé de séparation par impaction, de particules vivantes et revivifiables d'un gaz ou d'un mélange de gaz sous pression en contenant, caractérisé en ce qu'il comprend : - Une étape (a), d'accélération en un étage et selon un axe (x), d'un monoflux du gaz ou du mélange de gaz dans un volume confiné (V), pour atteindre une vitesse supérieure ou égale à la vitesse du son, - Une étape (b), de décélération brutale dudit monoflux issu de l'étape (a) dans ledit volume, selon substantiellement le même axe (x), à pression atmosphérique, - Une étape (c), de changement de la direction de l'écoulement du gaz ou du mélange de gaz à la sortie du volume (V), qui devient radial en moyenne, et - Une étape (d) de piégeage desdites particules séparées de l'écoulement lors de l'étape (c), sur une cible. Par gaz ou mélange de gaz sous pression, on désigne un gaz ou un mélange de gaz à une pression totale supérieure à 1 atmosphère (environ 105 Pa) généralement à une pression totale inférieure ou égale à 200 atmosphères, et plus particulièrement à une pression totale inférieure ou égale à 10 atmosphères. Par brutale, on entend dans la présente demande de brevet, une décélération qui permet de réduire la vitesse d'un écoulement gazeux, ayant un nombre de mach compris entre 1 et 3, à une vitesse axiale nulle sur la cible. Par volume confiné (V), dans lequel se déroulent les étapes (a) et (b) et à l'extrémité duquel se déroule l'étape (c), on entend dans la présente invention, un volume fini délimité par une surface latérale finie et ladite surface latérale est une surface de révolution autour de l'axe (x). Selon un premier aspect particulier, le volume confiné consiste en une première fraction de volume (Va) dans laquelle est mise en #uvre l'étape (a), délimitée par deux bases (B1) et (B2), de surfaces Si et S2, avec Si supérieure ou égale à S2 et une deuxième fraction de volume (Vb) contiguë à (Va), dans laquelle est mise en oeuvre l'étape (b) délimitée par (B2) et une base (B3) de surface S3 avec S3 supérieure ou égale à S2. Lorsque Si et 82 sont égales, Si est inférieure à la section du flux de gaz circulant en amont du volume (V). Selon un mode particulier du procédé objet de la présente invention, la vitesse du flux du gaz ou du mélange de gaz à l'issue de l'étape (a), est supérieure à la vitesse du son. Selon un autre mode particulier du procédé objet de la présente invention, la vitesse axiale selon l'axe (x), du flux du gaz ou du mélange de gaz à l'issue de l'étape (b), tend vers zéro. Selon un autre mode particulier de procédé tel que défini précédemment, L'étape (d) de piégeage est mise en #uvre sur une surface cible capable de fixer lesdites particules. Par particules vivantes et revivifiables, on désigne des microorganismes de tous ordres, capables de se reproduire dans des conditions de pression et de température appropriées. De préférence la surface-cible est celle d'un milieu nutritif permettant le développement et la reproduction des microorganismes piégés. Il peut s'agir d'un milieu liquide ou d'un milieu solide comme la gélose. L'invention a aussi pour objet une variante du procédé tel que défini précédemment comprenant en outre une étape (e) de comptage des particules piégées lors de l'étape (d). L'étape (e) consiste de préférence, en une étape e1 de cultures des particules vivantes et revivifiables piégées à l'issue de l'étape (d) suivie d'une étape (e2) de comptage des unités formant colonies. L'étape de culture peut consister au maintien du milieu nutritif contenant les particules piégées à une température permettant la reproduction des microorganismes pendant un temps déterminé. Le procédé tel que défini précédemment, permet de séparer efficacement des microorganismes ayant des dimensions comprises entre 0,05 m et 25 m et plus particulièrement entre 0.2 m et 12 m. Comme exemples de microorganismes dont on a déterminé la concentration dans un gaz sous pression, par la variante du procédé tel que décrit précédemment, il y a les levures telles que Cryptococcus albidus, hansenula polymor- pha, Rhodotorula mucilaginosa, Rhodotorula mucilaginosa ou Candida kefyr ; les bactéries Gram+ telles que Brevibacillus brevis, Bacillus sphaericus, Bacillus Cereus, Bacillus antracis, Bacillus subtilis, Bacillus coagulans, Staphilococcus epidermis, Staphilococcus xylosus, Staphilococcus haemolyticus, Staphilococcus saprophvticus, Staphilococcus hominis ou Staphilococcus warneri ; les bactéries Gram telles que Acinetobacter sp ou Chrvseomonas luteola. Selon un autre objet de la présente invention celle-ci a pour objet un procédé de détermination de la qualité microbiologique d'un gaz ou d'un mélange de gaz sous pression, par mise en oeuvre de la variante du procédé de séparation telle que décrite précédemment. Le procédé et sa variante permettent la collecte sur boîte de Pétri de germes présents dans un gaz sous pression. Le gaz analysé peut provenir de bouteilles, de cadres ou d'un réseau (primaire ou secondaire), et plus particulièrement d'un réseau d'alimentation en gaz médicaux tels qu'ils se trouvent dans les établissements de soins, comme les hôpitaux, les dispensaires ou les cliniques. Le gaz n'a pas besoin d'être détendu à la pression atmosphérique pour être analysé par le procédé décrit précédemment. Selon un autre aspect de la présente invention, celle-ci a pour objet un dispositif (D), apte à la mise en #uvre du procédé et de sa variante tels que définis précédemment. Le dispositif (D) comprend : - Un élément (D1) dans lequel le monoflux de gaz subit successivement les étapes (a) et (b), - Un élément (D2) constituant la cible sur laquelle les particules vivantes ou revivifiables sont piégées selon l'étape (d) et, - Des moyens d'attaches permettant de solidariser (D1) et (D2) tout en permettant à l'écoulement du gaz ou du mélange de gaz de changer de direction selon l'étape (c). L'élément (D1) du dispositif (D) est une surface SL latérale définissant un volume confiné (V) ayant des sections orthogonales polygonales, elliptiques ou cylindriques, dans lequel se déroulent les étapes (a) et (b) du procédé tel que défini précédemment et à l'extrémité duquel se déroule l'étape (c). La surface SL est plus particulièrement, soit une surface de révolution autour d'un axe (x) soit une surface latérale d'un polyèdre régulier d'axe de symétrique (x), soit un ensemble d'une ou plusieurs surfaces de révolution et/ou une ou plusieurs surfaces de polyèdres réguliers, de même axe de symétrie (x), définissant le volume (V). La surface SL peut être en tout matériau que ce soit un plastique un métal ou un alliage de métaux. Elle est de préférence en un matériau stérilisable à chaud. L'élément (D1) du dispositif (D) est plus particulièrement une surface latérale SL définissant une première fraction de volume (Va) de forme tronconique ou cylindrique, dans laquelle est mise en #uvre l'étape (a), et une deuxième fraction de volume (Vb) contiguë à (Va), de forme tronconique, dans laquelle est mise en oeuvre l'étape (b). L'élément (D1) du dispositif (D) a tout particulièrement une forme définissant une première fraction de forme cylindrique de hauteur h et de diamètre w, dans laquelle est mise en #uvre l'étape (a), et une deuxième fraction de forme tronconique de hauteur H de petite base de diamètre w et de grande base de diamètre W dans laquelle est mise en #uvre l'étape (b). Le rapport h/w est en général, compris entre 10/1 et 1/10. Il est plus particulièrement compris entre 10/2 et 2/10. Le rapport W/w est, en général, compris entre 50/1 et 5/1. Il est plus particulièrement compris entre 25/1 et 10/1. Le rapport H/w est, en général, compris entre 5/1 et 50/1. Il est plus particulièrement compris entre 10/1 et 40/1. H est, en général, compris entre 10 mm et 200 mm, plus particulièrement entre 30 mm et 120 mm et tout particulièrement entre 40 mm et 100 mm. Lorsque la pression totale du gaz entrant dans le dispositif est inférieure à 5 atmosphères, dans l'élément (Di) du dispositif (D) utilisé pour mettre en #uvre le procédé tel que défini précédemment, la valeur de w est, en général, comprise entre 2 et 5 mm environ et elle est plus particulièrement égale à environ 4 mm, L'élément (D2) du dispositif (D) est de préférence de forme cylindrique et de diamètre W1 supérieur ou égal à W. En général, W1 est inférieur ou égal 90 mm. W est, en général, compris en 50 mm et 90 mm. Il s'agit de préférence d'une boite Pétri. L'élément (D2) contient en général un milieu nutritif pour les microorganismes et plus particulièrement de la gélose. Les moyens d'attaches permettant de solidariser Di et D2 tout en permettant à l'écoulement du gaz ou du mélange de gaz de changer de direction selon l'étape (c) du procédé tel que défini précédemment sont par exemple des plots. Ils permettent de maintenir l'élément D2 à une distance d de Di suffisante pour permettre l'entier écoulement du gaz ou du mélange de gaz à la sortie de l'élément Di de façon radiale en moyenne à l'axe (x). Le rapport H/d est, en général, compris entre 2/1 et 20/1. Il est plus particulièrement compris entre 3/1 et 15/1. Les plots permettent de préférence la désolidarisation des éléments D2 et Di afin d'effectuer plus facilement la culture des particules vivantes et revivifiables. Le dispositif (D) tel que défini précédemment peut comprendre en outre un élément (Do) de connexion tel que par exemple une prise crantée capable de s'adapter à une prise de gaz médical, un tube de petit diamètre capable de s'adapter à la sortie d'un manodétendeur et plus généralement tout raccord capable de s'adapter à tout dispositif de délivrance de gaz sous pression. Le dispositif (D) tel que défini précédemment peut comprendre en outre un manodétendeur placé entre l'élément de connexion (Do) et l'élément (Di). Selon un dernier aspect de la présente invention, celle-ci a pour objet l'utilisation du dispositif (D) pour déterminer la qualité microbiologique d'un gaz ou d'un mélange de gaz sous pression. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Exemple de dispositif selon l'invention. La figure 1A illustre un dispositif selon l'invention. Il est constitué d'un col, d'un diffuseur et d'une boite de Pétri. Le dispositif fonctionne de façon à ce que la vitesse du jet continue d'augmenter, tant que sa pression n'a pas atteint la pression ambiante. La pression totale d'alimentation est de 3. 5 bars. La température totale est de 300 K. Un dispositif pour lequel H est égal 80 mm est présenté sur la photo de la figure 1 B. La figure 2 met en évidence, les champs de vitesse dans le dispositif selon l'invention. Dans le col, le fluide va accélérer jusqu'à la vitesse du son à la sortie du col, ensuite, il y a des zones de pression/détente faible où l'écoulement va être alternativement accéléré et ralenti. Cette zone est définie ici comme zone potentiel de longueur Lp, la turbulence ne joue pas. Plusieurs simulations ont été effectuées pour des longueurs de diffuseur de 40 mm, 60 mm, 80 mm, 100 mm et 120 mm. De même que des mesures expérimentales d'efficacité d'impaction ont été réalisées pour des valeurs de 60 mm, 80 mm, 100 mm, 120 mm et 160 mm. On définit une nouvelle formulation du nombre de Stockes pour ce type d'impacteur par la formule ; avec C compris entre 1 et 5 et Lp la longueur de la zone potentiel. Lp peut être calculé pour cet exemple par la formule : dans où l'indice j correspond à l'état après une détente isentropique de la pression génératrice à la pression atmosphérique. Elle constitue une généralisation de la formule empirique donnée par Lau, Morris et Fisher : avec V, max la vitesse maximum du jet pleinement développé, K étant compris entre 0. 1 et 2, p étant le diamètre des particules, pp la densité de ces particules. La viscosité du fluide transportant lesdites particules. H est calculé tel que #St >0.2. La figure 3 représente la courbe d'efficacité du dispositif selon l'invention, en fonction de H, d étant fixé à 13 mm. La figure 4 représente la courbe de la vitesse axiale maximum du monoflux dans le dispositif selon l'invention en fonction de H. La figure 5 représente la courbe de la pression totale sur la cible dans le dispositif selon l'invention en fonction de H Pour la pression totale, afin de préserver l'intégrité de la gélose utilisée dans cette application particulière, on cherche à avoir Pt Détermination de la qualité bactériologique d'un gaz. On utilise le banc d'essai présenté sur la photo de la figure 7A muni du dispositif selon l'invention. Ce banc d'essai se connecte directement sur une prise réseau ou à la sortie d'un manodétenteur. Le dispositif présenté sur la figure 1A est connecté à l'extrémité du banc d'essai. On effectue un prélèvement pendant un temps déterminé ce qui correspond à une quantité de gaz analysé parfaitement connue (généralement 100L). La boîte de Pétri qui a servi à la collecte des germes, est ensuite placé à l'étuve. Les paramètres de cultures des microorganismes ( choix du milieu de culture, température et temps d'incubation) sont choisis en fonction du type de germes à identifier. Les boîtes de Pétri sur lesquelles se sont impactées les particules contenues dans le flux gazeux, sont mises en culture. Après incubation, on compte le nombre d'UFC et l'on ramène ensuite ce nombre au volume de gaz analysé. Ceci permet de déterminer un nombre d'UFC/ m3 de gaz. Chaque colonie peut être ensuite repiquée pour identification. En fonction de la pression du gaz à analyser, on détermine un temps de prélèvement en général compris entre 10 secondes et 3 minutes pour que le volume de gaz à analyser soit suffisant en général inférieur à 500L. Un volume connu d'une suspension de bactéries en quantité déterminée est nébulisé pendant qu'un volume de gaz défini est injecté dans le banc d'essais. En sortie du banc, on dispose donc d'un volume connu de gaz contenant un nombre parfaitement déterminé de microorganismes en suspension dans ce volume. On récupère à la sortie de la canalisation, les bactéries par le dispositif selon l'in- vention. Connaissant la quantité de micro organismes injectée et la quantité recueillie par le collecteur on peut en déduire le taux de récupération du dispositif.. Plusieurs longueurs de cône ont été essayées . Le cône de longueur 50 mm donne un taux de récupération de 20% Le cône de longueur 80 mm donne un taux de récupération de 40% Le cône de longueur 170 mm donne un taux de récupération de 20% Nous avons également étudie le diamètre d'entrée du cône. Nous avons testé des diamètres de 2 mm et 4mm. Le diamètre 4 mm (pour une longueur de 80 mm ) donne un taux de récupération de 40% Le diamètre 2 mm (pour une longueur de 80 mm ) donne un taux de récupération de 12% C'est donc un cône de 80 mm de longueur et un orifice de 4 mm qui donne le meilleur taux de récupération. Une série de 35 mesures est effectuée. Le taux de récupération est de 40 %. La plupart des points ( 88 % ) se situent entre + 1 écart type et - 1 écart type. Les résultats sont représentés sur la courbe de la figure 6. Ces résultats mettent en lumière les avantages du dispositif selon l'invention :IIlimite l'entraînement de l'air ambiant qui pollue le gaz, permet d'obtenir une décélération très brutale du flux de gaz, limite la pression totale sur la gélose à une valeur de l'ordre de 7500 Pa et évite d'avoir un réentrainement des microorganismes en limitant le taux de cisaillement sur la gélose à 80 Pa. On obtient des taux de récupération centrés autour de 40% et reproductibles ; ceci constitue un résultat nettement supérieur aux résultats décrits dans l'état de la technique qui dépassent rarement 20% et d'une façon non reproductible. Les figures 8 et 9 représentent des dispositifs selon l'invention de forme de révolution non tronconique. Dans le dimensionnement du dispositif de la figure 8, la distance entre le col et le choc droit représente Lp. H est déterminé tel que #St>0.2. Revendications 1 - Procédé de séparation par impaction, de particules vivantes et revivifiables d'un gaz ou d'un mélange de gaz sous pression en contenant, caractérisé en ce qu'il comprend : - Une étape (a), d'accélération en un étage et selon un axe (x), d'un monoflux du gaz ou du mélange de gaz dans un volume confiné (V), pour atteindre une vitesse supérieure ou égale à la vitesse du son, - Une étape (b), de décélération brutale dudit monoflux issu de l'étape (a) dans ledit volume, selon substantiellement le même axe (x), à pression atmosphérique, - Une étape (c), de changement de la direction de l'écoulement du gaz ou du mélange de gaz à la sortie du volume (V), qui devient radial en moyenne, et - Une étape (d) de piégeage desdites particules séparées de l'écoulement lors de l'étape (c), sur une cible. 2 - Procédé tel que défini à la revendication 1, dans lequel le volume (V) consiste en une première fraction de volume (Va) dans laquelle est mise en oeuvre l'étape (a), délimitée par deux bases (B1) et (B2), de surfaces Si et S2, avec Si supérieure ou égale à S2 et une deuxième fraction de volume (Vb) contiguë à (Va), dans laquelle est mise en oeuvre l'étape (b) délimitée par (B2) et une base (B3) de surface S3 avec S3 supérieure ou égale à S2 3 - Procédé tel que défini à la revendication 2, pour lequel, lorsque S1 et S2 sont égales, S1 est inférieure à la section du flux de gaz circulant en amont du volume (V). 4 - Procédé tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel la vitesse du flux du gaz ou du mélange de gaz à l'issue de l'étape (a), est supérieure à la vitesse du son. 5 - Procédé tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans lequel la vitesse axiale selon l'axe (x), du flux du gaz ou du mélange de gaz à l'issue de l'étape (b), tend vers zéro. 6 - Procédé tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel l'étape (d) de piégeage est mise en oeuvre sur une surface cible capable de fixer lesdites particules. 7 - Variante du procédé tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 6, comprenant en outre une étape (e) de comptage des particules piégées lors de l'étape (d). 8 - Variante du procédé telle que définie à la revendication 7, dans laquelle l'étape (e) consiste, en une étape e1 de cultures des particules vivantes et revivifiables piégées à l'issue de l'étape (d), suivie d'une étape (e2) de comptage des unités formant colonies. 9 - Procédé de détermination de la qualité microbiologique d'un gaz ou d'un mélange de gaz sous pression caractérisée en ce qu'il met en #uvre la variante du procédé telle que décrite à l'une des revendications 7 ou 8. 10 - Dispositif (D), apte à la mise en #uvre du procédé et sa variante tels que définis à l'une quelconque des revendications 1 à 8, comprenant : - Un élément (Di) dans lequel le monoflux de gaz subit successivement les étapes (a) et (b), - Un élément (D2) constituant la cible sur laquelle les particules vivantes ou revivifiables sont piégées selon l'étape (d), et - Des moyens d'attaches permettant de solidariser (Di) et (D2) tout en permettant à l'écoulement du gaz ou du mélange de gaz de changer de direction selon l'étape (c). 11 - Dispositif tel que défini à la revendication 10, dans lequel l'élément (D1) est une surface SL latérale définissant un volume confiné (V) ayant des sections orthogonales polygonales, elliptiques ou cylindriques, dans lequel se déroulent les étapes (a) et (b) et à l'extrémité duquel se déroule l'étape (c). 12 - Dispositif tel que défini à la revendication 11, dans lequel la surface SL est, soit une surface de révolution autour d'un axe (x), soit une surface latérale d'un polyèdre régulier d'axe de symétrique (x), soit un ensemble d'une ou plusieurs surfaces de révolution et/ou d'une ou plusieurs surfaces latérales de poly- èdres réguliers, de même axe de symétrie (x). 13 - Dispositif tel que défini à la revendication 12, dans lequel la surface latérale SL, définit une première fraction de volume (Va) de forme tronconique ou cylindrique, dans laquelle est mise en oeuvre l'étape (a), et une deuxième fraction de volume (Vb) contiguë à (Va), de forme tronconique, dans laquelle est mise en #uvre l'étape (b). 14 - Dispositif tel que défini à la revendication 13, dans lequel l'élément D1 a une forme définissant une première fraction de forme cylindrique de hauteur h et de diamètre w, et une deuxième fraction de forme tronconique de hauteur H de petite base de diamètre w et de grande base de diamètre W 15 - Dispositif tel que défini à la revendication 14, dans lequel le rapport h/w est compris entre 10/1 et 1/10 et plus particulièrement entre 10/2 et 2/10. 16 - Dispositif tel que défini à l'une quelconque des revendications 14 ou 15, dans lequel le rapport W/w est compris entre 50/1 et 5/1 et plus particulièrement entre 25/1 et 10/1. 17 - Dispositif tel que défini à l'une des revendications 14 à 16, dans lequel le rapport H/w est compris entre 5/1 et 50/1 et plus particulièrement entre 10/1 et 40/1. 18 - Dispositif tel que défini à l'une des revendications 14 à 17, dans lequel H est compris entre 10 mm et 200 mm, plus particulièrement entre 30 mm et 120 mm et tout particulièrement entre 40 mm et 100 mm. 19 - Dispositif tel que défini à l'une quelconque des revendications 14 à 18, dans lequel w est compris entre environ 2 mm et 5 mm et plus particulièrement dans lequel w est égal à 4 mm. 20 - Dispositif tel que défini à l'une des revendications 14 à 19, dans lequel l'élément (D2) du dispositif (D) est de forme cylindrique et de diamètre W1 supérieur ou égal à W et est plus particulièrement une boite de Pétri. 21 - Dispositif tel que défini à l'une des revendications 14 à 20, dans lequel l'élément (D2) contient un milieu nutritif pour les microorganismes et plus particulièrement de la gélose. 22 - Dispositif tel que défini à l'une des revendications 14 à 21, dans lequel les moyens d'attaches permettant de solidariser (D1) et (D2) tout en permettant à l'écoulement du gaz ou du mélange de gaz de changer de direction selon l'étape (c), maintiennent l'élément (D2) à une distance d de (D1) suffisante pour permettre l'entier écoulement du gaz ou du mélange de gaz à la sortie de l'élément (D1) de façon radiale en moyenne à l'axe (x) dans un rapport H/d compris entre 2/1 et 20/1 et plus particulièrement compris entre 3/1 et 15/1. 23 - Dispositif tel que défini à l'une des revendications 10 à 22, dans lequel comprenant en outre un élément (D0) de connexion capable de s'adapter à tout dispositif de délivrance de gaz sous pression. 24 - Dispositif tel que défini à l'une des revendications 10 à 23, comprenant en outre un manodétendeur placé entre l'élément de connexion (Do) et l'élément (Di). 25 - Utilisation du dispositif tel que défini à l'une quelconque des revendications 10 à 24, pour déterminer la qualité microbiologique d'un gaz ou d'un mélange de gaz sous pression.