Brevet FR2817748A1 — publié le 20020614

L'invention concerne l'utilisation dans une composition cosmétique et/ou dermatologique, ou pour la préparation d'une telle composition, d'une quantité efficace d'un extrait d'artemis salina, l'extrait ou la composition étant destinés à activer et/ou faciliter la pénétration des ions dans la cellule. Les ions représentent un pourcentage non négligeable de la masse sèche de l'homme. Par exemple, le calcium peut être estimé à 1050 grammes pour un corps de 70 kg, et pour le même corps, le potassium représente 245 grammes et le sodium 105 grammes. Ces ions interviennent dans de nombreux mécanismes parmi lesquels l'homéostasie cellulaire. Le sodium et le potassium règlent la teneur en eau de l'organisme, et contribuent au maintien de l'équilibre acido-basique. Ils sont nécessaires à l'excitabilité des fibres nerveuses et musculaires. Il est également nécessaire à la synthèse des protéines et au stockage du glycogène. Le calcium est, quant à lui, impliqué entre autre dans la différentiation des kératinocytes. Au niveau cellulaire, la concentration intracellulaire en potassium est de 140 mM, alors que la concentration extracellulaire est de 5 mM. Pour le sodium elle est de 5 à 15 mM contre 145 mM extracellulaire, alors que pour le calcium, elle est inférieure à 0. 0001 mM contre 1 à 2 mM extracellulaire. La bonne régulation des flux de ces ions à travers la membrane cellulaire est nécessaire à la vie en général et à la peau en particulier. Cette régulation s'effectue par des transports actifs et passifs à travers la membrane cellulaire, notamment au moyen des canaux ioniques. L'industrie cosmétique et dermatologique est très attentive à l'équilibre hydro-minéral de la peau. De très nombreuses préparations contiennent de fortes concentrations ioniques apportées par des minéraux ou des extraits végétaux ou animaux. Ces préparations tendent à établir un gradient osmotique pour faciliter la pénétration des ions dans les cellules. Plusieurs études ont montré l'influence néfaste de certains ions, en application topique, sur la barrière cutanée, dont une des conséquences est l'augmentation de la perte insensible en eau, signe de la déshydratation de la peau. Or, l'hydratation est un élément essentiel de la cosmétique et de la dermatologie. On constate donc que subsiste le besoin d'une composition apportant des ions dans les cellules cutanées, mais sans les inconvénients de l'art antérieur. La demanderesse a trouvé, de façon surprenante, que l'application d'une quantité efficace d'un extrait d'Artemia salina permet d'activer et/ou de faciliter la pénétration des ions dans la cellule, sans augmenter la perte insensible en eau, donc sans déshydrater la peau. Les extraits d'Artemia sa/M sont déjà utilisés en cosmétique, mais personne n'a, jusqu'à ce jour, établi un lien entre un extrait d'Artemia salina et la pénétration intracellulaire des ions. Aussi, la présente invention se rapporte à l'utilisation dans une composition cosmétique et/ou dermatologique, ou pour la préparation d'une telle composition, d'une quantité efficace d'un extrait d'Artemia salina, l'extrait ou la composition étant destinés à activer et/ou faciliter la pénétration des ions dans la cellule. Par la suite, le terme extrait d'Artemia Mina doit s'entendre par extrait d'Artemia salina dans un état de dormance . En effet, l'Artemia salina est un petit crustacé qui vit dans les eaux saumâtres. Lorsque les conditions environnementales deviennent difficiles (déshydratation, augmentation de la teneur en minéraux), l'Artémia s'encapsule et entre dans une phase de dormance, dans laquelle il peut rester plusieurs années. On parle alors souvent d'oeuf d'Artémia . Lorsque les conditions redeviennent favorables, l'Artémia se réhydrate et reprend son cycle de développement harmonieusement. Un des principaux biotopes pour l'artemis salina est le Great Salt Lake, un lac salé dans l'Utah, Etats-Unis. Ce lac salé subit un processus naturel d'évaporation de l'eau, ce qui produit une très forte concentration des minéraux dans le lac. On estime que Great Salt Lake renferme cinq millions de tonnes de minéraux, soit une concentration environ huit fois supérieure à celle observée dans l'océan. Ces fluctuations font que seuls quelques organismes comme Artemia salina sont adaptés à cet environnement hyperminéralisé. En raison de son environnement, l'Artemia salina a su développer d'importantes facultés d'adaptation : Il s'est doté d'une parade moléculaire : la synthèse de GP4G (diguanosine tétraphostate), molécule énergétique précurseur d'ATP, de GTP et activateur des protéines G. (1) Il possède des cellules spécialisées dans la régulation de l'osmolarité, corollaire du bon équilibre hydro-minéral du plancton. (2) (1) AP4A and other dinucleotides tetraphosphates-McLennan CRC press (2) De novo purine synthesis in the crustacean Artemia : Influence of the salinity and geographical origin-J Comp Physiology B (1992) 162 263-266 L'Artemia salina va être utilisé dans son état de dormance, pour réaliser un extrait destiné à activer et/ou faciliter la pénétration des ions dans la cellule. Par pénétration des ions dans la cellule , on entend tout transport actif ou passif des ions à travers la membrane cellulaire. Par exemple, on peut citer les canaux potassiques. Les canaux potassiques sont présents dans toutes les cellules vivantes, ils agissent sur un grand nombre de fonctions parmi lesquelles la régulation du volume cellulaire, du flux ionique et de la différentiation cellulaire. Cette diversité d'action provient entre autre de la multiplicité des formes de canaux. Chez les mammifères, il existe 3 familles de canaux potassiques : La famille shaker (6TMS/1P) est la plus étendue avec plus de 25 gènes codant pour des protéines à 6 domaines transmembranaires et une région courte (domaine P) impliquée dans la formation du pore sélectif K+. La famille IRK mward rectifier K+ d'au moins 14 gènes codant pour des protéines à 2 domaines transmembranaires et un domaine P (2TMS/1P). La troisième famille (4TMS/2P), découverte plus récemment, regroupe plusieurs gènes codant des protéines à 4 domaines transmembranaires et deux domaines P. Activation des canaux : (Arrighi et coll., 1998) Les canaux shaker sont soit voltage-dépendants, soit activés par les ions Ca2+. Les canaux de la famille IRK sont soit couplés aux protéines G, soit dépendants de l'ATP (Challinor-Rogers et McPherson, 1994). Les canaux de la famille 4TMS/2P bien qu'encore peu étudiés, sont connus pour être activés par les ions K+. Plusieurs études mettent en évidence la présence des canaux potassiques au niveau de la peau humaine. Au niveau cellulaire, des études ont été menées sur des kératinocytes (Harmon et coll., 1993 ; Mauro et coll., 1997), des fibroblastes (Estacion, 1991) et des cellules épithéliales de glandes sudoripares (Huang et coll., 1999). Une étude sur la barrière cutanée montre l'importance des canaux potassiques dans l'homéostasie liée à la perméabilité de la barrière épidermique (Lee et coll., 1994). L'extrait d'Artémia va permettre l'activation des trois types de canaux potassiques : - certains canaux shaker seront activés par les ions Ça, - les canaux des la famille IRK seront activés car ils sont couplés aux protéines G, ou dépendants de l'ATP, - les canaux de la famille 4TMS/2P seront activés par les ions K+. En effet, de par son biotope, l'Artémia est naturellement riche en ions, entre autres Ca et K+, qui vont pouvoir activer les canaux ioniques. De plus, les propriétés du GP4G sur les protéines G et FATP, permettront de faciliter encore plus le transport des ions à travers la membrane cellulaire. Outre le transport des ions K+, l'extrait d'Artémia va faciliter le transport des ions Ca++. En effet, la demanderesse a pu démontrer que l'extrait d'Artémia induit la différentiation des kératinocytes (ralentissement de la croissance cellulaire, augmentation de l'expression des kératines). Or, cette différentiation est fonction des ions Ça. Ces études in vitro ont été réalisées sur des kératinocytes en culture par immunoblottmg, montrant l'augmentation des kératines. D'autres études, ex vivo, ont mis en évidence l'augmentation de la kératine par coloration à l'hématoxyline et éosine, et ont montré par immunomarquage, l'augmentation de l'expression de la Pan-kératine et de la Filaggrine (marqueurs de différentiation cellulaire). Cependant, il ne faut pas oublier qu'une concentration trop importante en ions Ca et K+ à la surface de la peau va entraîner un déséquilibre de la barrière cutanée qui se traduit par une augmentation de la perte insensible en eau. L'extrait d'Artémia utilisé par la demanderesse, bien que riche en ions, n'affecte pas l'équilibre de la barrière cutanée, ainsi que montré dans l'exemple 2. L'invention a également pour objet l'utilisation dans une composition cosmétique et/ou dermatologique, ou pour la préparation d'une telle composition, d'une quantité efficace d'un extrait d'Artemia salina, caractérisée en ce que la pénétration des ions dans la cellule va hydrater la cellule. Les mécanismes de transport des ions, vus plus haut, vont faciliter le passage des ions à travers la membrane cellulaire, et ce faisant ils véhiculent des molécules d'eau qui vont venir hydrater la cellule. En effet, par un phénomène de solvatation, les ions vont fixer un certain nombre de molécules d'eau, en fonction entre autre, de leur degré d'électronégativité. Donc en un temps très court, un léger phénomène d'hydratation va accompagner le transport des ions vers l'intérieur de la cellule. Ce résultat est repris dans l'exemple 3. Dans un second temps, la différentiation des kératinocytes accompagnant le transport intracellulaire des ions Cash, va renforcer la barrière cutanée et limiter ainsi la déshydratation de l'épiderme. Pour donner un ordre de grandeur, dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques de la présente invention on peut utiliser un extrait tel que défini précédemment, en une quantité représentant de 0,01 % à 20 % du poids total de la composition et préférentiellement en une quantité représentant de 0,1 % à 10 % du poids total de la composition. De préférentiellement, les compositions selon la présente invention se présenteront sous une forme adaptée à l'administration par voie topique cutanée, et couvrent toutes les formes cosmétiques ou dermatologiques. Ces compositions pourront notamment se présenter sous la forme de crèmes, émulsions H/E, E/H ou émulsions multiples, solutions, suspensions, gels, laits, lotions, sticks ou encore poudres, adaptés à une application sur la peau, les lèvres et/ou les cheveux. Ces compositions comprennent les excipients nécessaires à leur formulation, tels que solvants, épaississants, diluants, tensioactifs, anti-oxydants, colorants, conservateurs, parfums. Bien entendu, l'homme de métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses de l'extrait d'ArtemMa salina ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples donnés à titre illustratif et non limitatif. EXEMPLE 1-PREPARATION D'UN EXTRAIT D'ARTEMIA SALINA 50 grammes d' oeufs d'Artémia , donc d'Artemia salina dans un état de dormance, sont réhydratés de 30 minutes à 6 heures dans 1 litre d'eau distillée, à une température allant de 30 oC à 75 cl, dans un milieu adapté, principalement constitué d'eau, et à un pH compris entre 4 et 7. Ensuite, ces oeufs sont broyés. L'extrait ainsi obtenu est centrifugé et filtré. L'extrait est ensuite traité et stérilisé pour se conformer aux exigences cosmétiques (couleur, odeur, aspect, stérilité...). EXEMPLE 2-EFFET DE L'EXTRAIT DE L'EXEMPLE 1 SUR LA PERTE INSENSIBLE EN EAU (TEWL) L'étude permet d'évaluer l'efficacité du produit sur la perte insensible en eau de la peau. L'étude a été conduite sur 12 volontaires dont 7 hommes et 5 femmes, âgés de 21 à 52 ans. Selon les volontaires, la nature des peaux était normale ou sèche, sans pathologie cutanée, et l'indice mélanique de 2 à 4. Le test a été réalisé en simple aveugle, et sa durée a été de 2 heures. Des surfaces de 30 cm2 ont été délimitées sur les avant-bras droits et gauches, au niveau des poignets. L'extrait d'Artemia salina de l'exemple 1 a été appliqué sur un côté, et le placebo sur l'autre. La quantité de produit appliquée a été de 2, 3 mg par cm2 soit 70 (il pour 30 cm2 La perte insensible en eau (TEWL Trans Epidermal Water Loss) a été évaluée à l'aide de l'évaporimètre Dermalabo (Cortex Technology). La mesure est exprimée en g/m/h et s'interrompt quand l'écart type est de 0,1 ou après 60 secondes. La mesure a été pratiquée sous des conditions contrôlées de température et d'humidité (22 C 1 et 50 % 5). Mode opératoire : 1) Mesures basales, 2) Application des produits, 3) Mesures à T15mn, à T30mn et à T2h. Résultat : Pas de modification de la TEWL entre les deux bras sur les 12 volontaires. Conclusion : L'extrait d'Artemia salina ne modifie pas la perte insensible en eau de la peau, donc il ne déséquilibre pas la barrière cutanée. EXEMPLE 3-EFFET DE L'EXTRAIT DE L'EXEMPLE 1 SUR L'HYDRATATION CUTANEE L'étude permet d'évaluer l'efficacité du produit sur l'hydratation de la peau. L'étude a été conduite sur 12 volontaires dont 7 hommes et 5 femmes, âgés de 21 à 52 ans. Selon les volontaires, la nature des peaux était normale ou sèche, sans pathologie cutanée, et l'indice mélanique de 2 à 4. Le test a été réalisé en simple aveugle, et sa durée a été de 2 heures. Des surfaces de 30 cm2 ont été délimitées sur les avant-bras droits et gauches, au niveau des poignets. L'extrait d'M. salina de l'exemple 1 a été appliqué sur un côté, et le placebo sur l'autre. La quantité de produit appliquée a été de 2,3 mg par cm2 soit 70 cl pour 30 cm2. L'hydratation de la peau a été quantifiée à l'aide du Cornéomètre CM825 (Courage and Khazaka Electronic, Köln, Germany). La capacitance (unité internationale), est une mesure de la teneur en eau du stratum corneum. La valeur obtenue est la moyenne de 3 mesures répétées successivement sur la même zone. Mode opératoire : 1) Mesures basales, 2) Application des produits, 3) Mesures à T15mn, à T30mn et à T2h. Résultat : Après 15 minutes, il y a une augmentation moyenne de l'hydratation de 8,3 %, qui augmente à 10,6 % après 30 minutes pour redescendre à 8,0 % après 2 heures. Ces valeurs s'entendent en retranchant l'hydratation due à l'eau à celle due à l'extrait d'Artémia. Conclusion : L'extrait d'artemis salina possède un léger effet hydratant sur la peau, en adéquation avec l'augmentation du transport des ions à travers la membrane cellulaire. EXEMPLE 4-EXEMPLE DE COMPOSITIONS Ces compositions ont été obtenues par simple mélange des différents composants. Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. 1-Emulsion huile dans eau Phase huileuse : * Montanov 68 (Cetearyl Alcohol and Cetearyl Glucoside) 5.00 % # Huile de Jojoba 5. 00 % # Huile de Vaseline 5. 00 % "Isopropyl Palmitate 7.00 % Phase aqueuse : Glycérine 5. 00 % Allantoïne 0. 10 % Extrait de l'exemple 1 5.00 % Sepigel 305 (Polyacrylamide and C13-14 Isoparaffin and Laureth-7) 0.30 % Conservateur 0. 50 % Parfum 0. 50 % Eau qsp 100 % 2-Gel Carbopol Ultrez 10 (sol. à 2%) 25. 00 % Triéthanolamine 0. 50 % Extrait de l'exemple 1 5. 00 % Conservateur 0. 20 % EDTA (sequestrant) 0. 10 % Parfum 0. 50 % Eau qsp 100 % 3-Lotion * Mono Propylene Glycol 1. 00 % . Allantoïne 0. 30 % . Glycerine 1. 00 % Cetiol HE (PEG-7 Glyceryl Cocoate) 1. 00 % "Extrait de l'exemple 1 5. 00 % "Conservateur 0. 20 % . Parfum 0. 50 % M Eau qsp 100 % REVENDICATIONS 1. Utilisation dans une composition cosmétique et/ou dermatologique, ou pour la préparation d'une telle composition, d'une quantité efficace d'un extrait d'Artemia salina, l'extrait ou la composition étant destinés à activer et/ou faciliter la pénétration des ions dans la cellule. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que la pénétration des ions dans la cellule va hydrater la cellule. 3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait d'Artemia salina est utilisé en une quantité représentant de 0,01 % à 20 % du poids total de la composition. 4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que l'extrait d'Artemia satina est utilisé en une quantité représentant de 0,1 % à 10 % du poids total de la composition. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'Artemia salina va être utilisé dans son état de dormance.