Brevet FR2811226A1 — publié le 20020111

COMPOSITION COSMETIQUE HYDRATANTE COMPRENANT UN INHIBITEUR DE TRYPSINE VÉGÉTAL. La présente invention concerne des compositions cosmétiques, éventuellement dermatologiques, pour le soin de la peau, notamment pour lutter contre le vieillissement ou pour hydrater la peau à base d'extrait de plante. Plus particulièrement, les compositions de l'invention sont basées sur la compréhension du rôle du collagène cutané notamment du fait de son aptitude à fixer de l'eau et de l'impact de sa dégradation au cours du vieillissement (C. Durandeau et al., S.T.P. Pharma 5(89), 541-547, 1989). Il a ainsi été proposé dans l'art antérieur de nombreuses préparations cosmétiques à base de collagène pour leur pouvoir hydratant. La Demanderesse s'est maintenant intéressée au phénomène de destruction de fibres cutanées par les protéases et plus particulièrement du collagène de la peau par les collagénases (L. Robert et A.M Robert, J. Med. Est. Et Chir. Derm., Vol. XX, 80, Décembre 93, 211-217). Or, la maturation cutanée des collagénases nécessite l'intervention d'une autre enzyme protéolytique qui est la trypsine. En effet, cette protéase joue un rôle particulier au niveau de la peau o les fibroblastes synthétisent de nombreuses enzymes, la collagénase dont on connaît la fonction essentielle dans le renouvellement de la matrice extracellulaire et le vieillissement de la peau. Comme beaucoup d'enzymes, elle est élaborée sous une forme de pro-collagénase inactive qui est clivée par la trypsine pour être active. La présente invention a donc pour objet une composition cosmétique pour la peau caractérisée en ce qu'elle comprend une protéine végétale ou un extrait végétal présentant une activité inhibitrice de la trypsine. L'invention envisage bien entendu une protéine végétale cosmétiquement acceptable et de préférence un extrait végétal riche en une telle protéine. Une composition cosmétique selon l'invention est donc remarquable en ce qu'elle permet de contrôler l'activité collagénasique dans les tissus en abaissant le taux de trypsine ou en l'inhibant de façon à bloquer la cascade de l'activation des protéases de matrice extracellulaire et ainsi régénérer le collagène de la peau. L'invention offre ainsi de nouveaux procédés de traitement cosmétique du vieillissement ou de la déshydratation de la peau par application topique chez un sujet d'une quantité efficace d'un inhibiteur de trypsine végétal ou d'un extrait de plante contenant un tel inhibiteur, et tout particulièrement ceux décrits ci-après. La Demanderesse s'est intéressée tout particulièrement à une classe d'inhibiteurs de protéase, désignés inhibiteurs de Bowman-Birk. Ces inhibiteurs ont déjà été décrits comme présentant des activités anti- élastasique, anti-inflammatoire. Les inhibiteurs de cette classe présentent en outre deux sites actifs capables d'inhiber chacun une protéase. Ainsi en présence d'inhibiteur Bowman-Birk, la trypsine et la chymotrypsine perdent leur activité lytique. L'invention a donc pour objet l'utilisation d'un inhibiteur de trypsine végétal, notamment un inhibiteur de type Bowman-Birk ou d'un extrait végétal riche en l'un de ces inhibiteurs comme agent actif dans la protection ou la régénération du collagène de la peau et donc utile pour la préparation d'une composition cosmétique, notamment anti-vieillissement ou hydratatante. Parmi les inhibiteurs de Bowman-Birk, l'invention vise spécifiquement une protéine végétale dénommée la prohibine dont la présence a été décrite chez plusieurs légumineuses comme le soja, le pois et la féverole, toute partageant une grande homologie de séquence. L'invention s'intéresse tout préférentiellement à la prohibine de Phaseolus lunatus dont le nom commun est Lima bean. Phaseolus lunatus est répandue en Amérique Centrale et en Amérique du Sud. Il s'agit d'une plante buissonnante atteignant 50 cm à maturité et produisant des gousses dont on tire les fèves accommodables dans diverses préparations culinaires. La fève est riche en protéine (21%) , en carbohydrates (63%) et en sels minéraux (2,4%) mais ne contient que très peu de lipides (0,6%). La prohibine est une protéine synthétisée par la plante probablement en tant que système stabilisateur de la graine en attente de la germination ou bien est utilisée comme défense contre les attaques d'insectes qui produisent des protéinases. La présente invention se rapporte donc tout spécialement à une composition cosmétique comprenant une protéine végétale inhibant la trypsine appartenant à la classe des inhibiteurs de Bowman-Birk ou un extrait végétal riche en cette protéine. Avantageusement, l'invention concerne une composition comprenant un extrait de légumineuse comme le soja, le pois, la féverole, ou de façon toute préférée, de Phaseolus lunatus. Il s'agit d'un extrait protéique ou d'un extrait riche en protéine présentant une activité inhibitrice de trypsine qui peuvent être obtenus par extraction et isolement, voire purification plus ou moins poussée, selon des techniques connues de l'homme du métier. Il a été montré dans le cadre de la présente invention, que les activités enzymatiques de la trypsine et de la chymotrypsine diminuent de manière dose dépendante, l'inhibition étant totale à 0,01% et déjà significative à 0,0005%. Une composition cosmétique selon l'invention comprend donc de 0,05 à 10% et de préférence de 0,1 à 5% en poids de la composition totale de protéine végétale ou d'extrait de plante riche en cette protéine. La prohibine est une protéine d'environ 8000 daltons qui ne possède pas d'activité enzymatique directe, mas sa structure tridimensionnelle lui confère une conformation dans l'espace qui la rend affine pour les deux enzymes protéolytiques que sont la trypsine et la chymotrypsine. En conséquence, pour être active, la prohibine doit être avantageusement solubilisé dans un milieu lui permettant de conserver sa conformation. Or la solubilisation de la prohibine dans un milieu compatible avec une formulation cosmétique pose des difficultés que se propose précisément de résoudre la présente invention. En effet, la prohibine est un produit hydrosoluble peu compatible avec des tensio-actifs qui constituent un environnement défavorable par déformation de la structure tertiaire et conduisent à une inactivation de la protéine. L'invention se rapporte à cet effet tout préférentiellement à une composition cosmétique comprenant une phase aqueuse contenant une protéine végétale ou un extrait végétal présentant une activité inhibitrice de trypsine. Il peut alors s'agir d'une lotion, mais avantageusement, une composition cosmétique selon l'invention comprend deux phases distinctes, ladite phase aqueuse et une phase huileuse, qui sont mélangées par agitation avant emploi. La phase huileuse ou phase grasse permet de donner à la composition de l'invention davantage de " glisse " et de " richesse ". De préférence, le rapport pondérai entre la phase huileuse et la phase aqueuse est de l'ordre de 20/80. Une composition selon l'invention peut comprendre d'autres agents actifs, notamment des agents hydratants comme: - Un extrait d'algue, par exemple un extrait d'Himanthalia elongata, qui est une algue brune de la famille des fucales dont on extrait et purifie le contenu intracellulaire. Un tel extrait est riche en protéines, oligoéléements, mannitol et vitamines ce qui lui confère des propriétés hydratantes. Une composition selon l'invention peut comprendre de l'ordre de 0,1 à 5% d'un tel extrait. - Un extrait de Pinus Lambertiana ou de Pinus Sylvestris, qui est un pin de Nouvelle-Zélande, dont un extrait du tronc et des feuilles est très riche en cyclidol (D-pintol). Il s'agit d'un sucre constituant un oligosacharide majeur qui contribue à la survie de certaines espèces soumises à un stress salin. Ce sucre présente aussi des propriétés stabilisatrices des membranes qui confèrent à cet extrait des propriétés hydratantes au niveau cutané. Une composition selon l'invention peut comprendre de l'ordre de 0,1 à 5% d'un tel extrait. - Un extrait de fleur de cactus, plus particulièrement de Cereus gandiflorus originaire des Antilles et d'Amérique Centrale. Il s'agit d'un extrait glycolique des fleurs de cactus qui renferme des composés phénoliques et des alcaloïdes adoucissants et hydratants pour la peau. Une composition selon l'invention peut comprendre de l'ordre de 0,1 à 5% d'un tel extrait. - Un extrait de lupin blanc. Il s'agit d'un extrait protéique de lupinus albus riche en peptides glutaminés de faible poids moléculaire et en oligosaccharides. Il renforce la barrière cutanée par stimulation de la synthèse des lipides et protéines spécifiques de l'épiderme, limitant ainsi les pertes hydriques et donc permettant une meilleure hydratation du stratum corneum. Une composition selon l'invention peut comprendre de l'ordre de 0,1 à 5% d'un tel extrait. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront des exemples qui suivent concernant l'activité anti-trypsine et antichymotrypsine de la prohibine et de compositions selon l'invention. 1) Activité anti-trypsine et anti-chymotrypsine de la prohibine. La capacité d'inhibition de la trypsine et de la chymotrypsine par la prohibine a été démontrée in vitro. Deux esters d'amines substitués, la N-x-benzoyl-arginine éthyl ester (BAE) pour la trypsine et la N-X-benzoyl- tyrosine éthyl ester(BTEE) pour la chymotrypsine, ont été utilisés comme substrats spécifiques. Après hydrolyse de la fonction ester, l'apparition de l'amine-benzoyle libérée est suivie par densité optique à 256 nm. La protéine a été testée à 6 concentrations différentes et les activités trypsine et chymotrypsine ont été évaluées par leur capacité à libérer l'amine spécifique. La figure 1 en annexe représente le pourcentage des vitesses d'hydrolyse en présence de concentrations croissantes de prohibine par rapport à la vitesse maximum d'hydrolyse des enzymes sans prohibine. Pour la chymotrypsine, qui est l'enzyme la plus fortement inhibée, la diminution d'activité mesurée par la vitesse d'hydrolyse du substrat aminé est donnée dans le tableau 1 ci-dessous. Tableau 1 Protéine (prohibine) (%) Chymotrypsine (%) 10-4 - 38 1,2. 10-3 - 62 2,5. 10-3 - 90 10-3 - 96 -2 - 100 2) Exemple d'un sérum hydratant biphase selon 1' invention. Phase aqueuse Eau purifiée QSP 100,000 Polymère synthétique hydratant filmogène 10,000 Glycérine 10,000 PCANa 9,000 Dipropylène glycol 5,000 Prohibine 1,000 Himanthalia elongata 2,000 Extrait de fleurs de cactus 1, 000 Extrait de lupin blanc 1,000 Extrait de Pinus sylvestris 1,000 Triethanolamine 0,300 Chlorure de sodium 0,300 Gomme xanthane 0,200 Conservateurs 0,500 Agent séquestrant 0,100 Solution colorante 0,200 Phase Huileuse Perhydrosqualène 40,000 Isohexadecane 37,000 Ester d'acide gras 20,000 Parfum 1,800 Dérivé de vitamine E 1,000 Anti-oxydant 0,200 REVENDICATIONS 1) Composition cosmétique pour la peau caractérisée en ce qu'elle comprend une protéine végétale ou un extrait végétal présentant une activité inhibitrice de la trypsine. 2) Composition cosmétique selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend une protéine végétale inhibant la trypsine appartenant à la classe des inhibiteurs de Bowman-Birk ou un extrait végétal riche en cette protéine. 3) Composition cosmétique selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce qu'elle comprend une protéine ou un extrait de légumineuse comme le soja, le pois, la féverole, ou de Phaseolus lunatus. 4) Composition cosmétique selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comprend une protéine de Phaseolus lunatus de poids moléculaire d'environ 8000 présentant une activité inhibitrice de la trypsine et de la chymotrypsine ou un extrait protéique de Phaseolus lunatus contenant cette protéine. ) Composition cosmétique selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comprend de 0,05 à 10% et de préférence de 0,1 à 5% en poids de la composition totale, d'une protéine végétale ou d'un extrait végétal riche en cette protéine. 6) Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend une phase aqueuse contenant une protéine végétale ou un extrait végétale présentant une activité inhibitrice de trypsine. 7) Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend deux phases distinctes, une phase aqueuse et une phase huileuse, ladite phase aqueuse contenant une protéine végétale ou un extrait végétale présentant une activité inhibitrice de trypsine. 8) Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend un ou plusieurs agents actifs choisis parmi: un extrait d'algue, par exemple un extrait d'Himanthalia elongata, un extrait de Pinus Lambertiana ou de Pinus Sylvestris, un extrait de fleur de cactus, un extrait de lupin blanc. 9) Utilisation d'un inhibiteur de trypsine végétal ou d'un extrait de plante contenant un tel inhibiteur comme agent actif dans la protection ou la régénération du collagène de la peau. ) Procédé de traitement cosmétique du vieillissement ou de la déshydratation de la peau par application topique chez un sujet d'une quantité efficace d'un inhibiteur de trypsine végétal ou d'un extrait de plante contenant un tel inhibiteur.