Brevet FR2813758A1 — publié le 20020315

Composition antagoniste d'Armillariella Mellea, son procédé de fabrication et son utilisation. La présente invention concerne une composition antagoniste d'Armillariella Mellea, du type constituée d'un substrat ensemencé en Trichoderma, son procédé de fabrication et son utilisation en tant qu'agent actif pour le traitement des sols. Le Pourridié, encore appelé Pourridié Agaric, est une maladie se traduisant par un pourrissement des racines des cultures, en particulier les racines de la vigne et des espèces fruitières. Cette maladie est due à un parasite, l'Armillariella Mellea, encore appelé Armillaire de Miel. on sait par ailleurs qu'un champignon, le Trichoderma, présente une action antagoniste de l'Armillariella Mellea. Divers apports artificiels de Trichoderma dans des sols, cultivés ou non, ont été réalisés en vue de lutter biologiquement contre l'Armillaire, en particulier en inhibant la croissance des rhizomorphes souterrains de l'Armillaire. Ces essais ont permis de démontrer que la nature du substrat dans lequel le Trichoderma était apporté constituait un élément fondamental de l'action de ce Trichoderma. Toutefois, jusqu'à présent aucun substrat utilisé n'a donné entière satisfaction pour provoquer l'éradication de la maladie et empêcher une réinfestation des terres traitées pendant une durée importante au moins égale à deux ans. Le but de la présente invention est donc de proposer une composition de traitement et de protection des sols contre le Pourridié agissant uniquement par voie biologique, cette composition permettant soit d'éradiquer complètement la maladie des sols traités, soit d'empêcher son apparition et ce pendant plusieurs années. Un autre but de la présente invention est de proposer un procédé de fabrication d'une composition biologique pour le traitement ou la prévention du Pourridié qui est simple à mettre en oeuvre. A cet effet l'invention a pour objet une composition antagoniste d'Armillariella Mellea, du type constituée d'un substrat ensemencé en Trichoderma, caractérisée en ce que le substrat est constitué essentiellement de grains d'orge cuits en vue d'obtenir un ramollissement et un éclatement des grains d'orge favorisant la culture et la prolifération de Trichoderma notamment après épandage, de préférence souterrain, de la composition sur des sols à protéger ou à traiter. La nature purement biologique de cette composition permet de traiter les sols, de manière parfaitement naturelle sans introduire d'éléments chimiques susceptibles de modifier les natures des sols. L'invention a encore pour objet un procédé de fabrication d'une composition antagoniste d'Armillariella Mellea du type précité, caractérisé en ce qu'on soumet le substrat constitué essentiellement de grains d'orge à une cuisson par immersion dans un milieu aqueux chauffé à température d'ébullition jusqu'à éclatement et ramollissement des grains, en ce qu'on laisse, après séparation du substrat de son milieu de cuisson, le dit substrat à refroidir, en ce qu'on ensemence, après refroidissement, le substrat en Trichoderma et en ce que l'on laisse à incuber, de préférence à température et lumière ambiantes pendant au moins trois jours, la dite composition avant mise en contact avec le sol à protéger ou à traiter. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'une composition antagoniste d'Armillariella Mellea, du type constituée d'un substrat à base de grains d'orge cuits ensemencé en Trichoderma, comme agent actif pour le traitement ou la protection contre le Pourridié de sols cultivés ou destinés à la culture, en particulier de vignes ou de cultures fruitières. L'invention sera bien comprise à la lecture de la description suivante d'un exemple de réalisation de l'invention. Comme mentionné ci-dessus, la composition, objet de l'invention, a pour objet d'empêcher l'apparition ou de provoquer la disparition du Pourridié dans des sols cultivés ou destinés à être mis en culture. Cette composition, à base essentiellement de grains d'orge cuits ensemencés en Trichoderma peut être préparée comme suit On dispose 400 kg de grains d'orge sec directement issus de récolte dans deux paniers plongeurs à raison de 200 kg par panier. On introduit chaque panier plongeur dans un cuiseur rempli d'un milieu de cuisson en quantité sensiblement identique à la quantité d'orge. Ainsi, pour 400 kg d'orge, le cuiseur sera rempli d'environ 400 litres d'eau. L'ensemble est porté à ébullition et on maintient ainsi les grains d'orge dans leur milieu de cuisson porté à ébullition pendant au moins 15 minutes. L'ébullition est contrôlée par mesure de la température du milieu de cuisson. Au cours de cette cuisson, il peut être procédé à un brassage de manière à rendre la cuisson homogène. La cuisson est destinée à provoquer un éclatement et un ramollissement des grains d'orge. Une fois le temps de cuisson écoulé, on extrait les paniers plongeurs du milieu de cuisson en vue de séparer les grains d'orge du milieu de cuisson et d'assurer un égouttage de ces derniers. Cette opération d'extraction des paniers plongeurs du cuiseur peut s'effectuer au moyen d'un engin de levage. L'égouttage ne dure que quelques minutes de manière à laisser l'orge encore largement imprégné du milieu de cuisson. Après égouttage, on laisse à refroidir le substrat séparé de son milieu de cuisson pendant au moins trois heures. Le refroidissement peut être effectué en disposant, à la surface d'un sol cimenté ou d'une dalle d'un hangar couvert, les grains d'orge cuits sous forme d'une couche d'une dizaine de centimètres d'épaisseur. Une fois le refroidissement effectué, on ensemence le substrat par aspersion d'une suspension de Trichoderma à l'état essentiellement sporulé. Cette suspension peut être préparée par dilution du contenu de boîtes de Pétri préparées comme suit Le milieu de culture ou substrat des boîtes de Pétri est constitué, pour 1 litre d'eau, de 20g d'agar et de 20g d'extrait de malt. Le tout est stérilisé à l'autoclave puis refroidi. Le milieu de culture est ensemencé à raison de 107 propagules de Trichoderma par gramme de milieu de culture et laissé à incuber pendant 6 à 8 jours. Une fois l'incubation achevée, il peut être procédé en l'ensemencement du substrat de la composition. Il est à noter que l'innoculum de Trichoderma servant à l'ensemencement du substrat est constitué d'une suspension de Trichoderma, de préférence Harzianum, à l'état sporulé. Pour ce faire, on dilue le contenu de 8 boîtes de Pétri du type décrit ci-dessus dans 80 litres d'eau pour permettre l'ensemencement par aspersion de 400 kg de substrat préparé comme mentionné ci-dessus. Une fois l'ensemencement effectué, l'ensemble est laissé à incuber pendant une durée variable en fonction de la température ambiante. Généralement, une telle composition est préparée au printemps ou à l'automne, période où les températures favorisent la culture et la croissance du Trichoderma. Au cours de cette période d'incubation, il est préférable de soumettre, de temps à autre, la composition disposée sous forme de couche à la surface du sol à des brassages afin d'éviter toute surchauffe ou pourrissement de la composition. L'incubation s'effectue dans des conditions de température et lumière ambiantes et a généralement lieu dans un hangar. Après incubation, cette incubation pouvant varier entre trois à quinze jours, on applique, généralement par épandage souterrain, le substrat ensemencé en Trichoderma dans le sol à traiter ou à protéger, à raison d'une quantité de composition obtenue à partir de 300 kg d'orge sec par hectare de terre à traiter ou à protéger. L'épandage souterrain est préférable à un épandage aérien pour protéger le Trichoderma des intempéries mais également des désherbants et autres produits chimiques. Cet épandage souterrain peut s'effectuer en deux opérations successives, à savoir une opération d'épandage suivie d'une opération de labour ou en une seule et même opération grâce aux épandeurs équipés d'organes de retournement de la terre. La composition peut être appliquée sur des sols cultivés ou non. Les essais réalisés ont démontré qu'aucune réinfestation des sols ou apparition de la maladie du Pourridié n'étaient constatée pendant au moins les 5 années suivant l'application de la dite composition. Le procédé de fabrication est relativement peu onéreux puisque l'incubation nécessaire à la croissance et à la prolifération du Trichoderma ensemencé à l'état sporulé peut se faire dans des conditions de lumière et température ambiantes, en évitant les périodes de fortes chaleurs et de grand froid. La période d'incubation est estimée comme achevée lorsque le Trichoderma s'est développé sur le substrat à la fois sous forme de mycélium blanc présentant un aspect de toiles d'araignées et de spores se présentant sous forme d'une couleur verte. Généralement, le mycélium se développe au coeur du substrat tandis que les spores apparaissent à la surface du substrat. Des analyses ont démontré qu'une composition bien innoculée convoie dans le sol un nombre de spores de 3000 x 1011 spores à l'hectare. Les périodes de traitement au moyen d'une telle composition s'étaleront généralement de mars à juin et de septembre à novembre. En effet, le développement du Trichoderma peut être gêné par une chaleur excessive accompagnée de sécheresse du sol. De basses températures stoppent également sa croissance. REVENDICATIONS 1. Composition antagoniste d'Armillariella Mellea, du type constituée d'un substrat ensemencé en Trichoderma caractérisée en ce que le substrat est constitué essentiellement de grains d'orge cuits en vue d'obtenir un ramollissement et un éclatement des grains d'orge favorisant la culture et la prolifération de Trichoderma, notamment après épandage, de préférence souterrain, de la composition sur des sols à protéger ou à traiter. 2. Composition antagoniste selon la revendication 1, caractérisée en ce que les grains d'orge du substrat sont cuits par immersion dans un milieu aqueux porté à ébullition. 3. Composition antagoniste selon la revendication 2, caractérisée en ce que les grains d'orge sont maintenus dans leur milieu de cuisson pendant au moins 15 minutes à compter de l'ébullition de ce dernier. 4. Composition antagoniste selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l'innoculum de Trichoderma servant à l'ensemencement du substrat est constitué d'une suspension de Trichoderma Harzianum à l'état sporulé. 5. Procédé de fabrication d'une composition antagoniste d'Armillariella Mellea, du type constituée d'un substrat ensemencé en Trichoderma conformément à l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'on soumet le substrat constitué essentiellement de grains d'orge à une cuisson par immersion dans un milieu aqueux chauffé à température d'ébullition jusqu'à éclatement et ramollissement des grains, en ce qu'on laisse, après séparation du substrat de son milieu de cuisson, le dit substrat à refroidir, en ce qu'on ensemence, après refroidissement, le substrat en Trichoderma et en ce que l'on laisse à incuber, de préférence à température et lumière ambiantes pendant au moins trois jours la dite composition avant mise en contact avec le sol à protéger ou à traiter. 6. Procédé de fabrication selon la revendication 5, caractérisé en ce qu'on dispose des grains d'orge secs dans au moins un panier plongeur, en ce qu'on introduit le dit panier plongeur dans un cuiseur rempli d'un milieu de cuisson en quantité sensiblement identique à la quantité d'orge, en ce qu'on maintient les grains d'orge dans leur milieu de cuisson porté à ébullition pendant au moins 15 minutes, en ce qu'on extrait le panier plongeur du milieu de cuisson en vue de séparer les grains d'orge du milieu de cuisson et d'assurer un égouttage de ces derniers. 7. Procédé de fabrication sur l'une des revendications 5 et 6, caractérisé en ce qu'on laisse à refroidir le substrat, séparé de son milieu de cuisson, pendant au moins 3 heures. 8. Procédé de fabrication selon l'une des revendications 5 à 7, caractérisé en ce qu'on ensemence le substrat par aspersion d'une suspension de Trichoderma à l'état essentiellement sporulé. 9. Procédé de fabrication selon l'une des revendications 5 à 8, caractérisé en ce qu'après incubation, on applique, généralement par épandage souterrain, le substrat ensemencé en Trichoderma dans le sol à traiter ou à protéger à raison d'une quantité de composition obtenue à partir de 300 kg d'orge sec [par hectare de terre à traiter ou à protéger]. 10. Utilisation d'une composition antagoniste d'Armillariella Mellea, du type constituée d'un substrat ensemencé en Trichoderma conforme à lune de revendications 1 à 4 comme agent actif pour le traitement ou la protection contre le pourridié de sols cultivés ou destinés à la culture en particulier de vignes ou de cultures fruitières.