Brevet FR2816213A1 — publié le 20020510

Médicament anti-inflammatoire et cicatrisant Les problèmes liés au traitement des maladies inflammatoires correspondant à des réactions inflammatoires non spécifiques sont loin d'être résolus. En effet, les médicaments proposés à cet effet présentent tous des effets secondaires qui en limitent l'application. Parmi ces médicaments, le praticien a souvent recours aux corticostéroides ou aux anti-inflammatoires non stéroidiens (AINS) dont l'efficacité est souvent spectaculaire mais dont les inconvénients et la mauvaise compliance limitent leur utilisation. Ces inconvénients se traduisent fréquemment pour les corticostéroides utilisés par voie générale par des troubles métaboliques, endocriniens, digestifs ainsi qu'un réveil des infections. Par voie locale les corticoïdes peuvent induire des dermites, un effet rebond à l'arrêt du traitement ainsi qu'un développement favorisé des infections. Pour les AINS, on peut observer lorsqu'ils sont utilisés par voie locale, des réactions cutanées érythémateuses, des réactions allergiques locales de type eczéma et par voie générale, des troubles digestifs, des prurits, des éruptions 2 0 cutanées. Il existe donc un besoin permanent d'enrichir la panoplie actuelle de ces médicaments, si possible par des produits au moins aussi efficaces que les corticostéroides mais dépourvus autant que faire se peut des inconvénients de ces derniers. C'est ce but qu'à poursuivi la Société Demanderesse. 2 2816213 Et elle a eu le mérite de trouver que, de façon surprenante et inattendue, certains polysaccharides sulfatés, définis ci-après et déjà connus pour d'autres activités pharmacologiques, répondaient à ce besoin. L'invention a donc pour objet l'utilisation pour la préparation d'un médicament pour le traitement des maladies inflammatoires relevant de réactions inflammatoires non spécifiques, c'est-à-dire antigène- indépendantes, d'un polysaccharide sulfaté, notamment d'un 3-1,3-glucane sulfaté et plus particulièrement d'un sulfate de phycarine, de degré de sulfatation supérieur ou égal à 1 et de degré de polymérisation identique à celui de la molécule naturelle. Les polysaccharides sulfatés utilisés conformément à l'invention et notamment le sulfate de phycarine ont une activité anti-inflammatoire qui est comparable à celle de l'indométacine mais qui se manifeste à des concentrations moléculaires nettement plus faibles; de plus, ils ne sont pas cytotoxiques aux concentrations les plus élevées mises en oeuvre, et leur activité anticoagulante est suffisamment faible comparée à celle de l'héparine pour ne pas constituer un inconvénient dans le cadre de l'utilisation conforme à l'invention. Suivant un mode de réalisation avantageux de l'utilisation conforme à l'invention, le polysaccharide sulfaté, notamment le 3-1,3-glucane et plus particulièrement le sulfate de phycarine est mis en oeuvre par le biais de formes pharmaceutiques adaptées à l'administration par voie locale ou générale et plus particulièrement par voie orale: les comprimés, sirops, solutions ou suspensions buvables, capsules, gélules, sachets... par voie parentérale: les solutions injectables (sous-cutanées, intramusculaires, intra-articulaires, intra-veineuses...) par voie cutanée les émulsions, 3 2816213 pommades, gels, dispositifs transdermiques... par voie pulmonaire: les aérosols, par voie rectale: les suppositoires, lavements... La concentration en substance active est choisie en vue de rendre possible l'administration quotidienne en une ou plusieurs applications ou prises, d'une quantité de substance active par kg de poids corporel du patient de 2 à 20 mg/kg/j par voie orale et de 1 à 100 mg/g de produit dans une forme à usage local. Concernant la préparation des polysaccharides sulfates, on décrit ci- après, à titre d'exemple, celle du sulfate de phycarine. Les activités in-vitro ainsi que l'activité anti-inflammatoire in vivo sont ensuite examinées successivement. I - Préparation du sulfate de phycarine selon l'invention Le sulfate de phycarine est préparé par extraction de la phycarine à partir des algues brunes et par sulfatation de la phycarine ainsi extraite. L'extraction de la phycarine peut être réalisé par mise en oeuvre du procédé décrit dans le brevet FR 92 08387. La sulfatation de la phycarine peut être effectuée par mise en oeuvre du procédé décrit dans les publications suivantes: - Alban S, Kraus J, Franz G: Synthesis of laminarin sulfates with antocoagulant activity, ArzneimForsch/drug Res (1992) 42; 1005-1008. - Alban S, Franz G. Gas-liquid chromatography-mass spectrometry analysis of anticoagulant active curdlansulfates. Sermin Thromb Hermst (1994) 20; 152-158. 4 2816213 Pour aboutir à une sulfatation efficace sans dégradation des chaînes polysaccharidiques, la réaction de sulfatation doit être effectuée sous des conditions correspondant à une absence absolue d'eau. Avant la sulfatation, la phycarine est séchée sur pentoxide de phosphore (P205) et ensuite dissoute dans du diméthylformanide ou DMF. De par ses effets alternatifs sur le polysaccharide, le DMF a une influence activante sur la substitution. En effet, l'association du DMF polaire avec les groupes OH conduit à la coupure des liaisons hydrogène intra et inter moléculaires et à la désintégration de structures supérieures. Pour mettre en oeuvre la réaction de sulfatation, on peut avoir recours avantageusement au complexe S03-pyridine. Par suite de la coordination de l'accepteur d'électrons S03 avec le donneur d'électrons pyridine, la réactivité difficilement contrôlable du S03 qui se traduit par des réactions fortement exothermiques entraînant des dégradations, se trouve réduite. Le complexe S03-pyridine présente par rapport à d'autres complexes l'avantage d'être ni trop réactif ni trop stable c'est-à-dire trop lent du point de vue réaction. En raison du fait que le degré de sulfatation obtenu est proportionnel à l'excès molaire en réactif de sulfatation et étant donné que l'on cherche à 2 0 obtenir un degré de substitution supérieur à 1, on met avantageusement en oeuvre une concentration de 6 moles de SO3-pyridine/par mole de glucose. Pour garantir l'absence d'eau, on travaille sous une atmosphère d'argon. La réaction est effectuée dans le DMF qui non seulement active le polysaccharide mais de plus catalyse la réaction de sulfatation. De plus, on ajoute dès le début de la réaction de la pyridine au réactif de sulfatation et ce, en quantité équimolaire en vue de capter directement 5.2816213 l'acide sulfurique qui pourrait se former par réaction du complexe S03- pyridine avec l'eau. Tant la concentration de la phycarine que celle du réactif de sulfatation doivent être aussi élevées que possible, la solubilité du polysaccharide et du réactif de sulfatation, étant limitants. Pour éviter au début de la réaction un refroidissement du mélange qui pourrait entraîner des problèmes de solubilité et pour obtenir une substitution la plus régulière possible, la solution du complexe S03-pyridine dans le DMF n'est pas ajoutée en une seule fois mais de manière continue pendant une durée de 4 heures. La réaction de sulfatation est effectuée à 60 C. Des températures plus élevées entraînent une substitution plus efficace mais également une dégradation des chaînes. Après l'addition, en 4 heures, du réactif de sulfatation, on continue à agiter le mélange pendant 6 heures à 60 C. A cette température, il se produit une substitution supplémentaire sans dégradation des chaînes. Le surnageant du mélange est séparé par décantation. Le résidu est dissous dans 2,5 M de NaOH puis mélangé avec 10 fois son volume d'éthanol à 99%. Le précipité qui se produit à une température de 4-8 C pendant la nuit est isolé puis dissous dans de la soude diluée (solution de pH d'environ 9). La solution est dialysée pour enlever les sels et les molécules de bas poids moléculaire grâce une membrane de type Spectrapor à seuil de coupure 1000 D puis amenée à un pH de 7,0 par addition de NaOH et ensuite lyophilisée. Le sulfate de phycarine résultant se présente sous forme de sel de sodium. Le poids moléculaire de la macromolécule est déterminé en tant que volume hydrodynamique par chromatographie sur gel avec mise en oeuvre 6 2816213 d'un système dit " Fast Protein Liquid Chromatography " ou FPLC commercialisé par la Société Pharmacia. La détection du profil d'élution (éluant: 0,lM NaCI avec 0,05% d'azide de sodium, 30ml/h) à l'aide d'un dispositif connu sous la marque Superdex 75HRO10/30 (domaine de séparation 3-70kd) est effectuée par la mesure de l'indice de réfraction. Le sulfate de phycarine correspond à un pic étroit symétrique. Le poids moléculaire relatif est déterminé à l'aide d'une courbe standard avec des pullulans (polymère standard: 5800-853000 d, Polymer Laboratories, Separation Science Division). Par suite de la présence des groupes sulfates l0 fortement hydratés, le volume hydrodynamique est supérieur à la masse moléculaire réelle. Le degré de sulfatation est déterminé par voie de titration conductimétrique de l'acide libre du polysaccharide sulfaté en utilisant de la soude 0,1N ou par chromatographie ionique après hydrolyse en utilisant un système HPLC. La première méthode présente l'avantage d'être également propre à des recherches relatives à la stabilité (la consommation de soude s'accroît lorsque des groupes sulfates sont éliminés) alors que la méthode HPLC nécessite moins de substance et peut être automatisée. A titre de contrôle, il est possible de déterminer la teneur en soufre par o analyse élémentaire. Il est de plus possible de contrôler l'homogénéité de la sulfatation et la répartition des groupes sulfate sur les différentes positions dans la molécule de glucose par une forme modifiée de l'analyse de méthylation suivie d'un examen GC-MS (à savoir Chromatographie Gaz, Spectrométrie de Masse). Des produits synthétisés à l'aide de la méthode venant d'être décrite, ne comportent qu'une faible proportion de molécules de glucose 7 2816213 non sulfatées. La sulfatation se produit dans le cas présent en premier lieu en position 6. Lors de la substitution des groupes OH secondaires, la position 2 est légèrement préférée à la position 4. II Etude des activités in-vitro du sulfate de phycarine On a montré l'activité anti-inflammatoire du sulfate de phycarine par 3 tests in vitro et un test in vivo. Ainsi, il a été démontré que le sulfate de phycarine: * inhibe l'activation du complément, processus important dans le début des phénomènes inflammatoires (Test 1) > inhibe la chimiotaxie des polynucléaires neutrophiles, cellules caractéristiques de l'infiltrat dans la réaction inflammatoire aiguë (Test 2) > inhibe l'adhésion des cellules induite par les sélectines E et P (Test 3) Le sulfate de phycarine inhibe donc à 3 étapes différentes la réaction inflammatoire et ce de façon beaucoup plus importante que l'héparine de bas poids moléculaire (HBPM), commercialisée sous le nom Certoparin par la Société Novartis, polysaccharide sulfaté de référence. De plus, comparativement à l'HBPM, son activité anticoagulante est nettement plus faible (Test 4). Le sulfate de phycarine présente donc un 2 5 rapport bénéfice / risque nettement supérieur à celui de l'HBPM. 8 2816213 Test 1: Mesure de l'activité anti-complémentaire Le système complément joue un rôle clef dans les procédés inflammatoires induit par les infections. Les substances inhibant l'activation du complément in vitro sont des produits potentiellement anti- inflammatoires in vivo. L'activation du complément peut se faire par la voie classique (qui fait intervenir le système antigène - anticorps) ou par la voie alterne. Nous avons étudié, in vitro, l'activité anti-complémentaire du sulfate de phycarine comparativement à celle d'une héparine de bas poids moléculaire (HBPM), polysaccharide sulfaté de référence. L'évaluation de l'activité anti-complémentaire a été effectuée par la mesure photométrique ou colorimétrique de l'hémoglobine libérée par la lyse des érythrocytes. On utilise des érythrocytes de mouton anticorps- sensibilisés pour la voie classique et des érythrocytes de lapin pour la voie alterne. Dans un premier temps, le produit à tester et le système complément (issu de sérum humain) sont mis en contact 30 minutes puis dans un second temps, ils sont mis au contact des érythrocytes pendant 45 minutes. Plus le produit testé inhibe le complément, plus la lyse des érythrocytes est faible et moins la quantité d'hémoglobine libérée est importante. L'activité anti-complémentaire est exprimée en IC(50) soit la concentration en Mg / ml de produit nécessaire pour inhiber de 50% l'activité du complément.(Figure 1) 9 2816213 Résultats Inhibition de l'activation du complément par la voie classique: L'IC (50) du sulfate de phycarine est de 0,39 ptg/ml, celle de l'HBPM est de 23,07 pag/ml. Conclusion: le sulfate de phycarine est 60 fois plus actif sur l'inhibition du complément par la voie classique que l'héparine de bas poids moléculaire. Inhibition par la voie alterne: L'IC (50) du sulfate de phycarine est de 74,2 pg/ml, celle de l'HBPM est de 427 pg/ml. Conclusion: le sulfate de phycarine est 5,8 fois plus actif sur l'inhibition du complément par la voie alterne que l'héparine de bas poids moléculaire. Influence des composés sur l'activation du complément dans du sérum humain: Dès que le sérum est décongelé, l'activation du complément débute. Cependant, les protéines du complément ne sont stables que pendant un temps limité (du fait de l'inhibition par inhibiteurs endogènes). Par conséquent, on observe une perte de l'activité complémentaire au cours du temps. Or, nous avons observé une prolongation de l'activité du complément dans l'activation par voie alterne de plus de 100 % quand on introduit du sulfate de phycarine à des concentrations faibles. On peut en conclure que le sulfate de phycarine empêche la consommation du complément. Le sulfate de phycarine est non seulement un inhibiteur de l'activation du complément par la voie alterne mais il empêche également l'inactivation des protéines du complément. 2816213 Test 2: Influence sur la chimiotaxie des Granulocytes Les polynucléaires neutrophiles sont les cellules caractéristiques de l'infiltrat de l'inflammation aiguë. Le mouvement des neutrophiles de la lumière des vaisseaux vers les tissus est provoqué par des molécules dites chimiotaxines. Deux chimiotaxines sont particulièrement importantes pour les polynucléaires neutrophiles: le fragment CSa du complément et l'interleukine 8 (IL-8). Le mouvement des neutrophiles peut être aléatoire (chimiokinésie) ou orienté le long d'un gradient de chemokines. Les molécules susceptibles d'inhiber cette migration des neutrophiles peuvent être utilisées dans la prévention de l'induction de la réponse inflammatoire. On a exploré le pouvoir d'inhibition de la chimiotaxie du sulfate de phycarine in vitro par le test de la chambre Boyden, le CSa étant utilisé comme chimiotaxine. La chambre Boyden comprend 2 compartiments séparés par une membrane en polycarbonate (figure 2). Les pores de cette membrane permettent le passage actif des cellules mais pas leur diffusion passive. Les polynucléaires neutrophiles (PN) sont placés dans le compartiment supérieur avec la substance à tester à doses variables. Le C5a 2 0 est placé dans le compartiment inférieur. Au cours du temps, le CSa diffuse dans le compartiment supérieur et les PN migrent activement à travers la membrane dans le compartiment inférieur. La mesure de l'inhibition de la chimiotaxie se fait par comptage des cellules qui ont été attirées dans le compartiment inférieur. Les cellule sont comptées par une réaction à la 2 5 peroxydase avec de l'ABTS (Boeringher Mannheim) l 2816213 Nous avons évalué le pouvoir d'inhibition de la chimiotaxie du sulfate de phycarine et de l'héparine de bas poids moléculaire à différentes concentrations. En présence de sulfate de phycarine à 4,2 gg/ml, 38 % des PN ont migré. En présence d'héparine de bas poids moléculaire à la même concentration, 98 % des PN ont migré. L'effet inhibiteur du sulfate de phycarine est dose-dépendant. On a pu montrer que cette inhibition du recrutement des PN est basé sur une suppression de la chimiokinésie et que cet effet est probablement lié à une interaction du sulfate de phycarine avec les PN et non avec le CSa. Test 3: Influence sur l'adhésion des cellules induite par la sélectine. Les sélectines sont responsables de l'adhésion des leucocytes à la paroi des vaisseaux. Les sélectines reconnaissent les ligands oligosaccharidiques de la surface cellulaire. Cette liaison est labile ce qui permet aux leucocytes de se déplacer lentement le long de l'endothélium vasculaire, c'est ce qu'on appelle le "rolling" des leucocytes. Il existe trois familles de sélectines: les L- sélectines, les P- sélectines, les E- sélectines. Elles sont exprimées par différentes cellules: les L- Sélectines par les leucocytes, les P- sélectines par les plaquettes les cellules endothéliales vasculaires, les E- sélectines par les cellules endothéliales vasculaires. Contrairement à la plupart des molécules d'adhésion, la fonction des sélectines est limitée à l'interaction des leucocytes avec l'endothélium vasculaire. Cette spécificité fait des molécules agissant sur les sélectines des candidats intéressants pour des médicaments anti-inflammatoires. 12 2816213 On a étudié l'effet du sulfate de phycarine par la quantification directe des cellules liées aux sélectines immobilisées sur microplaques (figure 3) . Les cellules tumorales de la lignée U-937 sont utilisées pour l'étude des E- et des P-sélectines, les cellules LS-180 sont utilisées pour l'étude des L-sélectines. On a utilisé une P- sélectine humaine (R&D Systems) et on a développé une méthode basée sur la technique ELISA. La quantification des cellules U937 ayant adhéré est effectuée par mesure de l'activité lactate déhydrogénase. Les molécules sont testées à 5 pg/ml et 25 fg/ml. Résultats A la dose de 5 gg/ml, le sulfate de phycarine inhibe de 50 % l'adhésion des cellules lié à la P- sélectine, l'HBPM n'a aucune activité, le Pentosan polysulfate (Bene Pharma) inhibe de 30 % l'adhésion. Dans l'essai L-sélectine, le sulfate de phycarine à 25 gg/ml est aussi efficace que le HDexS (High molecular weight dextran sulfate - Serva), polysaccharide sulfaté de référence à la même concentration, c'est à dire que ces deux composés bloquent totalement l'adhésion des cellules. 13 2816213 Test 4: Etude de l'activité anti-coagulante. Etant donné que lors de la mise à profit de l'activité inhibitrice de l'inflammation dont fait preuve le sulfate de phycarine, l'activité anti- coagulante pourrait entrer en considération comme effet secondaire, on a étudié l'influence du sulfate de phycarine sur la coagulation. L'activité inhibitrice de la coagulation dépendant de la concentration est déterminée en comparaison avec celle de l'héparine, par " le temps de thromboplastine activée partiel " qui est un test de coagulation globale. Les résultats des expériences réalisées dans le cadre de l'invention montrent que la phycarine est nettement moins inhibitrice de la coagulation que l'héparine (l'activité anti-coagulante du sulfate de phycarine représente seulement 30 % de celle de l'héparine). Par conséquent les propriétés anti-inflammatoires du sulfate de 1 5 phycarine pourront être avantageusement mises à profit sans craindre des effets secondaires indésirables sur la coagulation. III Etude in vivo de l'activité anti-inflammatoire. L'activité topique, inhibitrice de l'inflammation, présentée par le sulfate de phycarine a été testée dans le modèle constitué par l'oedème de l'oreille de la souris induit avec de l'huile de croton. En tant que témoin, on a recours à l'indométacine. Les animaux utilisés sont des souris mâles du type Swiss CD- 1 pesant de 20 à 25g. On travaille sur quatre groupes de tests: 14 2816213 Le premier groupe est un groupe témoin négatif dans lequel on applique uniquement l'agent pro-inflammatoire constitué par l'huile de croton. Le deuxième groupe est un groupe témoin positif et comprend l'application d'huile de croton et d'indométacine (respectivement nMol/oreille et 71,56 gg/oreille). Le troisième groupe comprend l'application d'huile de croton et de dexaméthasone, corticoide de référence (respectivement 70 Mg pour l'huile de croton et 10 et 100 gg/oreille pour la dexaméthasone). Le quatrième groupe est relatif à l'utilisation du sulfate de phycarine et comprend l'application de 70 pg d'huile croton et de sulfate de phycarine (à des doses croissantes de 100, 250, 500, 750 et 1000 pg/oreille). Pour les témoins, pour les groupes de référence et pour les différentes concentration de sulfate de phycarine, on utilise chaque fois des groupes de 10 souris. Douze heures avant l'expérimentation, les animaux ne reçoivent plus de nourriture mais de l'eau à volonté. Sur chaque oreille (surface d'environ lcm2) on applique 70 gg d'huile de croton en même temps que de l'indométacine ou du sulfate de phycarine ou de la dexaméthasone. Au bout de quatre heures, on découpe des échantillons d'un diamètre de 7mm et on les pèse. Pour l'exploitation statistique on effectue une analyse de variance (ANOVA) et le test de Scheffe. 15. 2816213 On a évalué l'intensité de l'inhibition de l'inflammation exprimée en pourcentage pour différentes quantités de produits testés (indométacine, sulfate de phycarine et dexaméthasone). Il apparaît qu'une concentration de 250gg de sulfate de phycarine par oreille est équipotente à celle de 72gg d'indométacine par oreille. D'un point de vue molaire, le sulfate de phycarine est pour cette concentration, à savoir 22n Mol, neuf fois plus actif que l'indométacine, à savoir 200n Mol. Par ailleurs, à concentration équimolaire (0,12 pmol/oreille), le sulfate de phycarine est plus efficace que la dexaméthasone. Dans une expérience témoin, dans laquelle le sulfate de phycarine n'est pas appliqué à l'oreille simultanément à l'huile de croton, mais après cette dernière, on ne constate aucune différence du point de vue de 1.5 l'activité inhibitrice. Il s'ensuit qu'un effet faussement positif en raison d'une interaction physique avec l'huile de croton peut être considéré comme exclu. ** En résumé, on a donc préparé du sulfate de phycarine ayant un degré de sulfatation supérieur ou égal à 1,0 et un degré de polymérisation égal à celui de la molécule naturelle, en ayant recours à une synthèse partielle par sulfatation de phycarine extraite d'algues brunes, matière première naturelle végétale dont la source est particulièrement abondante et renouvelable. 16 2816213 Ce nouveau produit est en mesure d'agir de façon inhibitrice à différentes étapes de l'inflammation. Il inhibe l'activité complémentaire aussi bien dans le cas d'une activation par la voie classique que dans le cas d'une activation alterne et interagit par conséquent, déjà à un moment très précoce, avec le processus inflammatoire. De plus, il inhibe la chimiotaxie de granulocytes à noyaux polymorphes induite par du sérum activé au zymosan et est donc capable d'entraver la migration de cellules inflammatoires dans le tissu. Enfin, le sulfate de phycarine empêche la liaison des cellules à la Psélectine et à la E-sélectine et, par voie de conséquence, l'étape initiale de la cascade des adhésions. Les effets démontrés in vitro relativement à une activité inhibitrice de l'inflammation sont confirmés par l'efficacité marquée dudit sulfate de phycarine dans le modèle à l'oedème de l'oreille de souris induit par l'huile de croton. Dans ces expériences, le sulfate de phycarine est supérieur à l'héparine. Son activité anti-coagulante est toutefois nettement plus faible que celle de l'héparine, ce par suite de quoi le sulfate de phycarine présente un rapport " bénéfice/risque " nettement meilleur. Il est a remarquer que le sulfate de phycarine ne présente aucune propriété cytotoxique, même aux concentrations les plus élevées. A titre d'exemples non limitatifs mais correspondant à des modes de réalisation avantageux, on indique ci-après la composition d'une crème, d'un sachet et d'une solution pour aérosol. 17 2816213 1. Composition d'une crème conforme à l'invention Eau déminéralisée 69,5 % Glycérine 5,0 % Acrylate 0,2 % Sulfate de phycarine 1,0 % PEG 100 stéarate 4,0 % Cetearyl alcohol 2,0 % Conservateur 1,0 % PEG 40 stéarate 3,0 % Acétate de vitamine E 0,5 % C 12-15 alkyl benzoate 6,5 % Caprylic/capric triglycérides 5,5 % Soude 1,8 % 2. Composition d'un sachet conforme à l'invention Sulfate de phycarine 0,150 g Saccharose 2, 850 g o Arôme orange qs 3. Composition d'une solution pour aérosol conforme à l'invention Sulfate de phycarine 1 g Chlorure de sodium 0,9 g Eau ppi 100 ml g1 2816213 La posologie des formes ci-dessus est avantageusement la suivante: Crème: 2 à 3 applications par jour; Sachet: 1 à 3 sachets par jour pour un adulte; Aérosol: 1 500 à 7 000 ig/j -13g 2816213 REVENDICATIONS 1. Utilisation pour la préparation d'un médicament pour le traitement des maladies inflammatoires relevant de réactions inflammatoires non spécifiques, c'est-à-dire antigène-indépendantes, d'un polysaccharide sulfaté, notamment d'un [-1,3-glucane sulfaté, de degré de sulfatation supérieur ou égal à 1 et de degré de polymérisation identique à celui de la molécule naturelle. 2. Utilisation pour la préparation d'un médicament pour le traitement des maladies inflammatoires relevant de réactions inflammatoires non spécifiques, c'est-à-dire antigène-indépendantes d'un sulfate de phycarine, de degré de sulfatation supérieur ou égal à 1 et de degré de polymérisation identique à celui de la molécule naturelle. 3. Utilisation pour la préparation d'un médicament pour le traitement des maladies inflammatoires relevant de réactions inflammatoires non spécifiques, c'est-à-dire antigène-indépendantes et inhibant l'activation du complément par la voie classique ou par la voie alterne, d'un sulfate de phycarine de degré de sulfatation supérieur ou égal à 1 et de degré de polymérisation identique à celui de la molécule naturelle. 4. Utilisation pour la préparation d'un médicament pour le traitement des maladies inflammatoires relevant de réactions inflammatoires non spécifiques, c'est-à-dire antigène-indépendantes et inhibant la chimiotaxie des granulocytes, d'un sulfate de phycarine de degré de sulfatation supérieur ou égal à 1 et de degré de polymérisation identique à celui de la molécule naturelle. 2816213 5. Utilisation pour la préparation d'un médicament pour le traitement des maladies inflammatoires relevant de réactions inflammatoires non spécifiques, c'est-à-dire antigène-indépendantes et inhibant l'adhésion des sélectines E et P, d'un sulfate de phycarine de degré de sulfatation supérieur ou égal à 1 et de degré de polymérisation identique à celui de la molécule naturelle. 6. Utilisation pour la préparation d'un médicament pour le traitement des maladies inflammatoires relevant de réactions inflammatoires non lo spécifiques, c'est-à-dire antigène-indépendantes et inhibant l'oedème de l'oreille de la souris induit par l'huile de croton, d'un sulfate de phycarine de degré de sulfatation supérieur ou égal à 1 et de degré de polymérisation identique à celui de la molécule naturelle. 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 6, le médicament obtenu étant adapté soit à l'administration par voie locale ou générale et plus particulièrement par voie orale sous forme de comprimés, sirops, solutions ou suspensions buvables, capsules, gélules et sachets, soit à l'administration par voie parentérale sous forme de solutions injectables sous-cutanées, intramusculaires, intra-articulaires et intra-veineuse soit à l'administration par voie cutanée sous forme d'émulsions, pommades, gels, dispositifs transdermiques soit encore à l'administration par voie pulmonaire sous forme d'aérosols, soit enfin à l'administration par voie rectale sous forme de suppositoires et de lavements.