Brevet FR2805463A1 — publié le 20010831

La présente invention concerne l'utilisation de la trimétazidine ou d'un de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable pour l'obtention de compositions pharmaceutiques destinées à inhiber l'acyl-CoA acétyltransférase. Le dichlorhydrate de trimétazidine est actuellement utilisé en thérapeutique pour le traitement prophylactique de la crise d'angine de poitrine, et le traitement symptomatique d'appoint des vertiges et des acouphènes. La demanderesse a maintenant découvert, que de façon surprenante, la trimétazidine inhibe de façon spécifique l'action de l'acyl-CoA acétyltransférase et permet de réduire la ssoxydation des acides gras. La trimétazidine agit au niveau de la mitochondrie où a lieu la (3-oxydation des acides gras. Ce processus biochimique consiste à faire subir aux acides gras une élimination oxydative de deux unités carbonées successives sous forme d'acétyl-CoA, en commençant par l'extrémité carboxylique de la chaîne acylée. Les acides gras à chaînes longues pénètrent dans la mitochondrie au moyen du transporteur acylcarnitine/carnitine. Cette étape est rendue limitante par l'activité de l'enzyme carnitine acyltransférase 1 (CAT-1) et se termine par le transfert du groupe acyl sur le coenzyme A par la carnitine acyltransférase II. Le processus de la (3-oxydation conduit à la réduction de la chaîne carbonée de 2 carbones avec formation d'un acétylCoA. Ce processus nécessite l'activité successive de quatre enzymes : l'acylCoA déhydrogénase, l'énoylCoA hydratase, l'hydroxyacylCoA déhydrogénase et les transférases. Dans la dernière et quatrième étape de la (3-oxydation, le P-cétoacyl-CoA (3-ketoacylCoA) issu des trois étapes précédentes réagit avec une molécule de coenzyme A libre pour couper le fragment dicarboné à l'extrémité carboxylique terminale de l'acide gras initial. Cette thiolyse est catalysée par l'acyl-CoA acétyltransférase (3-ketoacyl-CoA thiolase ou EC 2.3.1.16). L'activité des transférases a fait l'objet de nombreux travaux. Deux transférases ont été décrites, l'acyl-CoA acétyltransférase ou transférase 1 active sur des substrats à chaînes carbonées variables et l'acétoacétylCoA transférase (acétoacétylCoA thiolase ou EC 2. 3.1.9) ou transférase II qui agit uniquement sur l'acétoacétylCoA des corps cétoniques et dans le métabolisme de l'isoleucine. Il a été montré que la trimétazidine inhibait spécifiquement l'activité de l'acyl-CoA acétyltransférase sur les acides gras à chaînes longues. Cette enzyme catalyse la dernière étape de la (3-oxydation. La trimétazidine n'a aucun effet notable sur les trois autres enzymes impliquées dans le processus de la p-oxydation. L'inhibition partielle de la (3-oxydation, induite au travers de la réduction de l'activité de l'acyl-CoA acétyltransférase, permet de limiter l'utilisation excessive des acides gras. Celle-ci survient, entre autres, après une période d'ischémie et conduit à une stimulation de l'oxydation du glucose, reconnue comme favorable au cours de la reperfusion (Stanley WC, Lopaschuk GD, Hall JL, McCormack JG : Régulation of myocardial carbohydrate metabolism under normal and ischémie conditions. Potential for pharmacological interventions . Cardiovasc Res 1997;33:243-257). Le caractère spécifique et partiel permet d'éviter la survenue des effets délétères de l'inhibition des acides gras rencontrée lors des déficits héréditaires des enzymes de la ss- oxydation (Przyrenbel H, Sewel AC : Defects in long chain fatty acid oxidation as a cause of cardiomyopathy . In Bôhles H, Hofstetter R, Sewel AC, Eds. Metabolic cardiomyopathy. Stuttgart : Wissenschaftlicher-Verlag, 1995 :77-85) ou lors de l'utilisation d'inhibiteurs non spécifiques de la p-oxydation, comme l'hypoglycine, l'acide bromocrotonique ou l'acide penténoïque (Schulz H : Beta oxidation of fatty acids . BiochimBiophysActa 1991;1081:109-120). Cet effet particulièrement intéressant permet donc d'obtenir un bénéfice thérapeutique dans des pathologies comme les cardiomyopathies ischémiques, les cardiomyopathies diabétiques, l'insuffisance coronarienne, l'insuffisance cardiaque, les angiopathies, la claudication intermittente, les troubles de l'orientation et de l'équilibre, la dégénérescence maculaire liée à l'âge, la rétinopathie diabétique ou toute pathologie où l'amélioration du métabolisme énergétique cellulaire est impliquée. La trimétazidine ou l'un de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable sont présentés sous des formes pharmaceutiques convenant pour l'administration par voie orale, parentérale, per ou transcutanée, nasale, rectale, perlinguale, oculaire ou respiratoire et notamment les comprimés, les comprimés sublinguaux, les gouttes, les préparations injectables, les aérosols, les gouttes oculaires ou nasales, les glossettes, les gélules, les capsules, les tablettes, ...etc, ces formes permettant la libération immédiate ou retardée du principe actif. La trimétazidine se trouve préférentiellement sous la forme de dichlorhydrate. La posologie varie selon l'âge et le poids du patient, la voie d'administration, la nature de l'indication thérapeutique et des traitements associés et s'échelonne de 20 à 1 000 mg par prise, 1 à plusieurs fois par jour. Effet de la trimétazidine sur l'acyl-CoA acétyltransférase Cette expérience met en évidence l'effet inhibiteur direct de la trimétazidine sur l'acyl-CoA acétyltransférase. La mesure de l'activité de l'acyl-CoA acétyltransférase a été réalisée à partir de fractions mitochondriales membranaires et solubles, selon la technique décrite par Venizelos et col. (Venizelos N, Ijlst L, Wanders RJA, Hagenfeldt L : p-oxidation enzymes in fibroblasts from patients with 3-hydroxydicarboxylic aciduria . Pediatr Res, 1994;36:111-114). La méthode est basée sur la mesure de la disparition du complexe enolate-Mg2+ à partir des substrats P-cétoacyl-CoA. Cette réaction est catalysée par l'acyl-CoA acétyltransférase en présence de ses cofacteurs. Le dichlorhydrate de trimétazidine a été ajouté au milieu avec des concentrations croissantes de 10-8 M à 10-6 M. Le démarrage de la réaction s'est effectué en ajoutant dans le milieu d'incubation le substrat approprié (p-cétohéxadécanoyl- CoA à 50 M pour l'isomère chaîne longue). Un contrôle positif de l'inhibition a été effectué en présence d'un inhibiteur non sélectif connu (acide 4-penténoïque). La vitesse de la thiolyse a été mesurée en suivant la diminution de la densité optique à 303 nm à l'aide d'un spectrophotomètre. Résultats : La trimétazidine inhibe l'acyl-CoA acétyltransférase spécifique des acides gras à chaînes longues avec une concentration inhibitrice 50 % (CIso) de 75 nM. Toutefois, une fraction d'activité de l'ordre de 30% reste opérationnelle. Par ailleurs, une concentration de 10 M a été nécessaire pour inhiber significativement l'isomère chaîne moyenne. Une concentration supérieure à 100 M a été requise en ce qui concerne l'isomère chaîne courte. Conclusion : La trimétazidine inhibe partiellement et spécifiquement l'isoforme chaîne longue de l'acylCoA acétyltransférase avec une CIso de 75 nM. Effets de la trimétazidine sur des coeurs isolés perfusés Des c#urs isolés de rats mâles Sprague-Dawley ont été perfusés en mode travaillant avec une solution contenant 5 mM de glucose, 100 uU/ml d'insuline, et des concentrations variables d'un acide gras pendant 90 minutes (palmitate 0,4 ou 1,2 mM ; octanoate0,8 mM ; butyrate 1,6 mM). Certains c#urs ont été soumis à une ischémie bas flux (0,5 ml.mn-1i) de 60 minutes. Le dichlorhydrate de trimétazidine a été ajouté à la concentration de 1 à 100 M. Les vitesses de la glycolyse et de l'oxydation du glucose ont été déterminées simultanément par la mesure de la quantité de radioactivité de 3H20 et 14CO2 produite par les c#urs perfusés avec un tampon contenant du glucose radiomarqué. La vitesse de la [3-oxydation a été mesurée en parallèle au cours d'une perfusion identique des c#urs dont le tampon contenait des acides radiomarqués. Résultats : L'ajout de 1 M de trimétazidine produit une diminution de l'oxydation du palmitate ainsi qu'une augmentation de l'oxydation du glucose. La vitesse de la glycolyse reste inchangée. Ces effets ne sont significatifs qu'en présence de palmitate. Au cours de l'ischémie, l'oxydation du glucose est fortement stimulée (+ 210 %). Conclusion : La trimétazidine réduit la (3-oxydation des acides gras à chaînes longues. Ceci est associé à une stimulation de l'oxydation du glucose, en aérobie comme lors d'une période d'ischémie. La glycolyse restant inchangée, un meilleur couplage avec l'oxydation du glucose est attendu. REVENDICATIONS 1. Utilisation de la trimétazidine ou d'un de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable pour l'obtention de compositions pharmaceutiques destinées à inhiber l'acyl-CoA acétyltransférase. 2. Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que les compositions pharmaceutiques sont destinées au traitement des cardiomyopathies ischémiques, des cardiopathies diabétiques, de l'insuffisance coronarienne, de l'insuffisance cardiaque, des angiopathies, de la claudication intermittente, des troubles de l'orientation et de l'équilibre, de la dégénérescence maculaire liée à l'âge, de la rétinopathie diabétique ou de toute pathologie où l'amélioration du métabolisme énergétique cellulaire est impliquée. 3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 caractérisée en ce que la trimétazidine est sous forme de dichlorhydrate. 4. Composition pharmaceutique utilisable selon l'une quelconque des revendications 1, 2 ou 3 contenant comme principe actif la trimétazidine ou l'un de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable ainsi qu'un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables. 5. Composition pharmaceutique selon la revendication 4 caractérisée en ce que le principe actif est la trimétazidine sous forme de dichlorhydrate.