Brevet FR2806623A1 — publié le 20010928

PROCEDE D'EXTRACTION D'UN PRINCIPE ACTIF A PARTIR DE CAPUCINES, NOTAMMENT POUR LE TRAITEMENT DE LA PIGMENTATION, PRINCIPE ACTIF OBTENU, COMPOSITIONS COSMETIQUES OBTENUES La présente invention concerne un procédé d'extraction principe actif à partir capucines, notamment pour le traitement de la pigmentation. L'invention couvre aussi le principe actif obtenu et les compositions cosmétiques utilisant ledit principe actif. On sait la peau, les cheveux, les poils sont colorés un pigment synthétisé mélanocytes : la mélanine. La melanogénèse relève de mécanismes complexes mais façon générale, la synthèse des mélanocytes est effectuée par l'organisme façon adaptée pour assurer une bonne protection contre les radiations solaires. Néanmoins, lors de dérèglements, il se produit une hyperpigmentation qui conduit a formation de tâches de rousseur, de sénescence, chloasma ou masque de grossesse. Ces troubles de la pigmentation peuvent survenir avec l'âge, nature de la peau ou perturbations hormonales. Des études ont montré que dans les cas d'hyperpigmentation, l'augmentation la mélanogénèse s'accompagne d'une augmentation de l'activité de la tyrosinase. II faut donc agir sur trois fronts simultanément - bloquer I activité des mélanocytes, - orienter synthèse de phaeomélanines, et - inhiber 1 activité de la tyrosinase. Les dérivés phénoliques, par exemple l'hydroquinone, ont des propriétés dépigmentantes mais présentent de nombreux inconvénients. Ces composés ne sont en effet utilisables qu'en faible concentration et à cette faible concentration, l'activité est irrégulière, la cytotoxicité est élevée et même des effets secondaires peuvent être observés. Pour traiter de tels effets, on est à la recherche d'autres composes dépigmentants. Les autres produits actuellement connus comme l' oxygénée produisent des effets éclaircissants, notamment sur les poils et les cheveux, mais ils sont difficiles à utiliser en cosmétique pour des raisons de toxicité, de tolérance et de difficulté de mise en oeuvre. D'autres produits susceptibles de donner des effets dépigmentants sont instables ou non tolérés, ce qui exclut leur utilisation en cosmétologie. La présente invention vise à proposer un procédé d'extraction d'un principe actif qui produit des effets dépigmentants de la peau, à partir de végétaux, en l'occurrence à partir de fleurs de capucines. Comme il s'agit de produits naturels et totalement contrôlés, cytotoxicité est nulle et les effets secondaires tels que irritation, allergie autres instabilités sont parfaitement contrôlées. L'invention couvre aussi le principe actif obtenu par ce procédé et moins une composition cosmétique mettant en oeuvre ce principe actif. La présente invention couvre aussi l'utilisation de ces compositions pour obtenir des effets dépigmentants et éclaircissants de la peau. La présente invention est maintenant décrite en détail en explicitant effets recherchés et obtenus grâce au principe actif extrait. Les différentes figures 1, 2 et 3 annexées regroupent les résultats obtenus pour les différents tests. II PROCEDE D'EXTRACTION Le procédé d'extraction selon la présente invention comprend les étapes suivantes - décoction de poudre de plante entière de capucines dans l'eau à raison d'au moins 50 g/1, - séparation des phases soluble et insoluble, - concentration de la fraction active contenue dans la phase soluble, - filtration stérilisante. De préférence, il est utilisé uniquement les parties florales de capucines. La séparation mise en oeuvre est une filtration, une centrifugation une décantation. II/ CARACTERISATION DU PRINCIPE ACTIF Le principe actif ainsi obtenu est caractérisé par les paramètres analytiques suivants I Matière sèche Taux de matière sèche : compris entre 20 et 400 g/1 plus particulièrement entre 20 et 200 g/1 principalement entre 60 et 80 g/1. Ce taux est obtenu par passage à l'étuve à 105 C jusqu'à obtention d'un poids constant, 2/ pH La valeur du pH est comprise entre 4,0 et 10,0 plus particulièrement entre 4,0 et 8,0, notamment entre 5,0 et 6,0, obtenue par la méthode potentiométrique, à température ambiante. 3/ Polyphénols totaux composés phénoliques forment des complexes colorés en présence de ferricyanure de potassium, dont l'intensité peut-être détectée à 715 nm. Ceci permet de déterminer la quantité de composés phénoliques sur une courbe étalon. Cette courbe est obtenue à partir d'une gamme étalon d'acide gallique allant de 40 à 120 mg/I. La teneur en composés phénoliques est ainsi exprimée en mg d'acide gallique. La valeur obtenue est comprise entre 50 et 5 000 mg/l, plus particulièrement entre 50 et 2 500 mg/I, notamment entre 70 et 2000 mg/I. / Stabilité le principe actif est stable aux pH de 2 à 10 et aux températures inférieures à 800C. - le principe actif est stable dans un mélange d'éthanol et d'eau avec des proportions fortes d'éthanol jusqu'à 60 pour des quantités en volume de 3% de principe actif, à 20 C et au pH de solution. III/ EFFETS DEPIGMENTANTS DU PRINCIPE ACTIF EXTRAIT 1l Evaluation in vitro de l'activité dépiamentante On procède à l'étude de cette activité des cultures de mélanocytes en mesurant d'une part l'activité anti-tyrosinase du principe actif selon la présente invention et d'autre part le taux de melanine synthétisée en présence de ce même principe actif. On peut comparer ces résultats avec ceux obtenus avec un témoin positif tel que l'acide kojique à 0,5 g/1 et un polyphénols constitutifs du principe actif, l'acide para-coumarique. Dans des cultures de mélanocytes, on ajoute soit 1, 2 et 3% de principe actif selon la présente invention, soit de l'acide kojique à 0,5 g/l, soit encore de l'acide para-coumarique à 10 g/1. Après incubation, on procède à une trypsination cellulaire de chaque culture. Les culots cellulaires sont lysés puis centrifugés. Le surnageant est récupéré pour le dosage de la tyrosinase et le culot restant est utilisé pour le dosage du taux de mélanine. 1.1 Dosage de la tyrosinase On ajoute au surnageant de la L-DOPA dans un tampon phosphate et on mesure l'activité enzymatique de la tyrosinase à 490 nm. Les résultats sont exprimés dans le tableau de la figure 1 qui représente les résultats obtenus. On constate que l'acide kojique (ak), qui est la référence, conduit à un résultat de 63 % d'activité anti-tyrosinase et que le principe actif (PA) selon l'invention, à 3%, présente un résultat supérieur à 72%. Dès 2%, on note que le principe actif selon la présente invention est supérieur à l'acide para-coumarique à 10g/1 (ap). On constate que le principe actif selon la présente invention procure un effet inhibant de l'activité de la tyrosinase, enzyme de la mélanogénèse. Cet effet inhibant se traduit par une activité dépigmentante proche de celle l'acide kojique qui est la molécule de référence. 1.2 Dosage de la mélanine synthétisée taux de mélanine des échantillons est déterminé au moyen d'une gamme étalon de mélanine synthétique de 0 à 500,ug/ml. Les résultats sont indiqués dans le tableau de la figure 2. constate une diminution importante du taux de synthèse de la mélanine quasiment identique à celui de l'acide kojique (ak) et de l'acide para- coumarique (ap), dès 2 % de principe actif (PA) selon la présente invention. Par sa richesse en polyphénols, le principe actif assure une inhibition certaine de la synthèse de la mélanine. 2I Etudes cutanées des effets dépigmentants Cette étude consiste à mette en évidence sur l'homme, variations de la couleur des tâches de sénescence cutanée sur le dos de la main. Dans le cadre de l'essai, le principe actif selon 1a présente invention est formulé à 5 % en crème blanche. Pour mesurer ces variations, on utilise un chromamètre commerce qui convertit les couleurs situées dans la plage de perception humaine en un code numérique à deux paramètres l'un L d'intensité (sombre au pâle) et l'autre _b de chrominance (gamme des bleus aux jaunes). On mesure les paramètres colorimétriques des tâches sénescence de chaque personne testée, ceci avant le traitement. Une main ensuite est traitée avec placebo et l'autre est traitée avec la crème contenant principe actif selon la présente invention. L'application est effectuée deux fois par jour pendant plusieurs semaines, en l'occurrence huit semaines. Les paramètres colorimétriques des tâches retenues sont à nouveau mesurés. Les résultats sont regroupés dans le tableau de la figure 3. L'étude est effectuée sur 15 volontaires et le tableau fait apparaître les moyennes obtenues. constate la diminution significative du paramètre de chrominance b_ -0, et une augmentation de l'intensité _L de 0,26% tâches de sénescence apparaissent moins colorées pour 78% volontaires. sa richesse en polyphénols, le principe actif inhibe la tyrosinase est l'enzyme-clé de la mélanogénèse et limite la synthèse de la mélanine. plus, ce principe actif est stable, non irritant et non cytotoxique. principe actif peut être utilisé avec toute formulation telle que crème, onguent, lotion, lait, émulsion ou solution, à raison d'une quantité de principe actif compris entre 0,1 et 20 l0. REVENDICATIONS 1. Procédé d'extraction d'un principe actif ayant une action dépigmentante et éclaircissante, caractérisé en ce que réalise les étapes suivantes - décoction de poudre de plante entière de capucines dans l'eau à raison d'au moins 50 g/1, - séparation des phases soluble et insoluble, - concentration de la fraction active contenue dans phase soluble, et - filtration stérilisante. 2. Procédé d'extraction selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on utilise uniquement les parties florales de capucines. 3. Procédé d'extraction selon la revendication 1 ou caractérisé en ce que la séparation des phase soluble et insoluble est filtration par centrifugation ou par décantation. 4. Principe actif obtenu par le procédé selon la revendication 1, 2 ou 3 caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de capucines et en ce que - le taux de matière sèche est compris entre 20 et 400 g/l, - la quantité de polyphénols totaux est comprise entre 50 et 5 000 mg/1 - le pH est compris entre 4,0 et 10,0. 5. Principe actif obtenu par le procédé selon la revendication 1, 2 ou 3 caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de capucines et en ce que - le taux de matière sèche est compris entre 20 et 200 g/1, - la quantité de polyphénols totaux est comprise entre 50 et 2 500 mg/l, - le pH est compris entre 4,0 et 8,0. 6. Principe actif obtenu par le procédé selon la revendication 1, 2 ou 3 caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de capucines et en ce que - le taux de matière sèche est compris entre 60 et 80 g/l, - la quantité de polyphénols totaux est comprise entre 70 et 2 000 mg/1, - le pH est compris entre 5,0 et 6,0. Composition cosmétique mettant en oeuvre le principe actif selon la revendication 4, 5 ou 6 extrait selon le procédé de la revendication , 2 ou 3, caracterisée en ce qu'elle se présente sous forme de crème, onguent, lotion, lait, émulsion ou solution. Composition cosmétique selon la revendication 7, caracterisée en ce que le principe actif extrait est présent à raison d'une quantité comprise entre 0,1 et Utilisation d'une composition selon la revendication 7 ou 8 en vue d'obtenir des effets de dépigmentation et d'éclaircissement de la peau, caracterisée en ce que l'on met en contact ladite composition avec la peau.