Brevet FR2797401A1 — publié le 20010216

La présente invention concerne des compositions pharmaceutiques utilisées pour la prévention et/ou le traitement de maladies d'ulcères gastroduodénaux. Plus particulièrement, l'invention concerne l'utilisation de ginseng américain ou son extrait comme composant actif pour la prévention et le traitement de maladies d'ulcères gastroduodénaux. Le ginseng américain (panax quinquefolium L.) est une espèce d'araliacées qui est une variété nord-américaine de ginseng originaire des Etats-Unis et du Canada. Les plantes panax parmi les araliacées telles que le ginseng panax, le quinquefolium panax, le pseudo-ginseng panax, etc. ont été longtemps utilisées en Chine comme forme de médecine tonique, le ginseng panax étant considéré traditionnellement comme une substance médicinale de valeur en Chine, au Japon et en Corée. Après la récolte, le ginseng panax de bonne qualité est généralement traité avec de l'eau bouillante ou avec de la vapeur pour donner du ginseng rouge. Le ginseng panax qui a été séché à l'air chaud ou à la lumière du soleil est appelé ginseng blanc ou ginseng non traité. Le ginseng américain est une plante herbacée vivace et sa racine est utilisée principalement comme agent tonique nutritif. Sa morphologie est semblable à celle du ginseng panax mais il a moins de racines en forme de fibres ou racines latérales. A présent, le ginseng américain est cultivé de façon artificielle aux Etats-Unis, en Chine continentale et en Russie. De nombreux rapports ont montré que certains composants du ginseng américain sont semblables à ceux du ginseng panax, y compris plusieurs types de saponines de ginseng, des oligosaccharides, des huiles volatiles, des aminoacides, des vitamines et des oligo-éléments. On pense traditionnellement que à la fois le ginseng américain et le ginseng panax ont des effets permettant d'augmenter la résistance physique, d'entretenir et de préserver la santé et de prolonger la vie. Par conséquent, ces deux plantes sont considérées comme des toniques doux utilisés pour une diète quotidienne ou comme remède médicinal. Récemment, un certain nombre de rapports scientifiques montrent que le ginseng américain possède en fait une variété d'activités physiologiques ou pharmaceutiques, y compris un effet antivieillissement (Xiao P. G. et coll., 1993, Journal of Ethnopharmacology 38 (2-3) : 167-75) ; la prévention de l'athérosclérose et de l'hyperlipidémie (Li J. et coll., 1999, Life Science 64 (1) : 53- 62) ; la protection contre des lésions du foie (Yoshikawa M. et colt., 1998, Chemical and Pharmaceutical Bulletin 46 (4) : 647-54) ; la stimulation de la fonction du système cardiovasculaire (Kwan C. Y., 1995, Clinical and Expérimental Pharmacology and Physiology - Supplément 1 : S297-9 ; Yang S., 1992, China Journal of Chinese Material Medica 17 (9) : 555-7 et le brevet US N 4 708 949) ; la prévention des dysfonctionnements de la mémoire et la prévention de la démence (Benishin C. G., 1991, Pharmacology 42 (4) : 223-9 ; Li Z. et coll., 1999, Journal of Pharmacy and Pharmacology 51 (4) : 435-40 ; Lewis R. et coll., 1999, Phytotherapy Research 13 (1) :59-64) ; la diminution de l'hyperglycémie (Oshima Y. et colt., 1987, Journal of Natural Products 50 (2) : 188-90 ; Martinez S. et Staba E. J., 1984, Japanese Journal of Pharmacology 35 (2) : 79-85) ; du développement des cellules du cancer du sein (Duda R. B. et coll., 1996, Annals of Surgical Oncology 3 (6) : 515-20) ; stimulation de la résistance physique ; activité antivirale (brevet US N 5 071 839) ; antioxydation ; diminution des effets secondaires de la chimiothérapie et de la radiothérapie contre le cancer (brevet US N 4 945 115) ; modulation de la digestion gastrique (Yuan C. S. et coll., 1998, American Journal of Chinese Medicine 26 (1) : 47-55) ; et augmentation de la fonction immunitaire (brevet US N 4 795 742), etc. Récemment, la population souffrant de maladies gastro-intestinales a été en augmentation, notamment dans les pays très développés. Les causes d'ulcères gastroduodénaux englobent une pression quotidienne non soulagée ; une irritation excessive due à l'alcool ; les effets secondaires de médicaments tels que l'aspirine ou des médicaments anti-inflammatoires non stéroïdiens ; ou une infection de type helicobacter pyroli. Les principaux médicaments utilisés pour traiter des ulcères gastroduodénaux comprennent des anti-muscariniques tels que du bromure de méthscopolamine ; des antagonistes H2 tels que de la cimétidine ; des antiacides tels que de l'hydroxyde d'aluminium ou de l'hydroxyde de magnésium ; un inhibiteur H+/K+ ATPase tel que de l'oméprazole ; des médicaments antibactériens tels qu'un mélange d'amoxicilline et de métronidazole. De tels médicaments peuvent être classifiés en deux catégories : une catégorie est utilisée pour la protection physique de la muqueuse gastrique, afin de soulager l'irritation de l'acide gastrique au niveau du siège de l'ulcère de la muqueuse, l'autre catégorie de médicaments étant utilisée pour empêcher chimiquement la sécrétion de l'acide gastrique, pour éviter une ulcération due à une érosion d'acide gastrique excessive. La prévalence d'ulcères gastroduodénaux et leur taux élevé de récurrence peuvent être dus au style de vie des patients ou être dus aux changements de saison, de nombreux patients souffrant d'ulcères gastroduodénaux de manière répétée. Par conséquent, il est nécessaire de trouver un médicament qui soit sans danger, doux et efficace pour traiter et prévenir les ulcères gastroduodénaux. Un but de la présente invention consiste à réaliser des compositions pharmaceutiques qui soient efficaces pour prévenir et/ou traiter des maladies d'ulcères gastroduodénaux, ces compositions comprenant une quantité efficace de ginseng américain et/ou son extrait et un support physiologiquement ou pharmaceutiquement acceptable. Un but supplémentaire de la présente invention consiste à réaliser un processus de préparation des extraits du ginseng américain décrit précédemment, ce processus comprenant les étapes consistant : (a) à extraire du ginseng américain avec un solvant ayant une polarité supérieure à 0,88 pour obtenir un extrait ; (b) à filtrer l'extrait pour obtenir un filtrat ; et (c) à centrifuger le filtrat pour obtenir un surnageant (extrait total). Le processus de préparation selon la présente invention peut comprendre en outre des moyens d'ultrafiltration, de dialyse, de précipitation avec de l'éthanol ou la réalisation d'une chromatographie en phase inverse, pour obtenir certaines fractions de l'extrait de ginseng américain. Un autre but de la présente invention consiste à réaliser des procédés pour prévenir et/ou traiter un patient souffrant d'un ulcère gastroduodénal, ces procédés comprenant l'administration audit patient, d'une quantité efficace de ginseng américain et/ou d'extraits de celui-ci. En conformité avec la présente invention, on réalise un processus de préparation des compositions pharmaceutiques comprenant du ginseng américain ou son extrait. En premier lieu, le ginseng américain est extrait avec un solvant ayant une polarité supérieure à 0,88, pour obtenir un extrait. Le solvant approprié comprend de l'eau, de l'éthanol, du méthanol ou des mélanges de ces éléments, de préférence de l'eau ou de l'éthanol et, de façon plus préférable, une solution aqueuse contenant entre 10 % et 80 % d'éthanol. Ensuite, l'extrait est filtré pour éliminer les résidus de plantes, puis centrifugé pour éliminer les microparticules et les impuretés. Le surnageant obtenu (extrait total) est concentré suivant une concentration appropriée, puis traité en outre par un ou plusieurs des processus suivants : ultrafiltration, dialyse, précipitation avec de l'éthanol ou réalisation d'une chromatographie en phase inverse, pour obtenir diverses fractions de l'extrait de ginseng américain. Dans le processus décrit précédemment, l'ultrafiltration est une étape au cours de laquelle l'extrait total est filtré par la membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 1000 ou de 3000, pour donner un rétentat et un filtrat. La dialyse est une étape au cours de laquelle l'extrait total est dialysé par une membrane ou par une poche de dialyse ayant une limite de poids moléculaire de 500, pour éliminer des molécules plus petites. La précipitation avec de l'éthanol est une étape au cours de laquelle le filtrat obtenu par ultrafiltration est concentré pour sécher, puis dissous avec une quantité d'éthanol variant entre 50 % et 100 %, pour obtenir la partie soluble. La réalisation de la chromatographie en phase inverse est une étape au cours de laquelle le filtrat obtenu par ultrafiltration est chargé sur une colonne de résine polyaromatique de phase inverse, une colonne telle que celle du type Diaion HP-20 (Sigma, Cat. N 1-3605), pour éluer la fraction active de l'extrait de ginseng américain. Tous les extraits de ginseng américain obtenus par des processus variés de la présente invention ont un effet anti-ulcère gastroduodénal. De plus, on peut ajouter à ces extraits, un support physiologiquement acceptable et/ou on peut les formuler avec un excipient pharmaceutiquement acceptable, pour obtenir une composition pharmaceutique qui soit efficace pour traiter ou prévenir des ulcères gastroduodénaux. L'expression "ulcère gastroduodénal" utilisée précédemment et par la suite fait référence à des ulcères gastriques et/ou à des ulcères duodénaux. Sans que l'on ait l'intention de limiter l'invention de quelque manière que ce soit, la présente invention sera en outre illustrée par les exemples suivants qui sont associés à la conception de l'étape ou des étapes d'extraction et à l'évaluation de l'activité pharmacologique. EXEMPLE 1 Une quantité de 2000 ml d'eau déionisée a été ajoutée à 200 g de ginseng américain découpé, puis chauffée jusqu'à ébullition et retenue ensuite pendant 1 heure. La décoction a été filtrée à travers un calibre de tamis de N 200 (pore du tamis de 0,074 mm), le filtrat (premier filtrat) ayant été ensuite collecté. Une quantité supplémentaire de 2000 ml d'eau déionisée a été ajoutée au résidu de ginseng américain décrit précédemment, puis a été retenue et filtrée comme décrit précédemment pour donner le second filtrat. Ces deux filtrats ont été combinés et centrifugés à une vitesse de 10 000 tr/mn pendant 30 minutes, pour éliminer les microparticules et les impuretés. Le surnageant (extrait total) a été filtré ensuite à travers la membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 1000 (Amicon, Cat. N S1Y1), pour éliminer des substances ayant un poids moléculaire inférieur à 1000 daltons. Le rétentat contenant des substances ayant un poids moléculaire supérieur à 1000 daltons a été concentré à pression réduite, pour donner l'extrait I. Le filtrat contenant des substances ayant un poids moléculaire inférieur à 1000 daltons a été concentré pour sécher, puis on a ajouté une solution de 90 % d'éthanol pour dissoudre ces substances. La solution d'éthanol a été filtrée (Advantec N 2) pour obtenir la partie soluble, la partie soluble obtenue ayant été ajoutée dans l'extrait I décrit précédemment. Le mélange a été concentré à pression réduite, pour donner l'extrait II. EXEMPLE 2 L'extrait total décrit dans l'exemple 1 a été traité à travers une membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 3000 (Amicon, Cat. N S1Y3), pour éliminer des substances ayant un poids moléculaire inférieur à 3000 daltons. Le rétentat contenant des substances ayant un poids moléculaire supérieur à 3000 daltons a été concentré à pression réduite, pour donner l'extrait III. Le filtrat contenant des substances ayant un poids moléculaire inférieur à 3000 daltons a été chargé sur une colonne garnie de résine de type Diaion HP-20 (Sigma, Cat. N 1-3605). La colonne a été d'abord éluée avec de l'eau déionisée jusqu'à ce que l'éluat soit incolore, puis éluée avec 95 % d'éthanol, l'éluat ayant été ensuite collecté. L'éluat à 95 % d'éthanol a été ajouté dans l'extrait III décrit précédemment. Le mélange a été concentré à pression réduite, pour donner l'extrait IV. EXEMPLE 3 L'extrait total décrit dans l'exemple 1 a été chargé dans une poche de dialyse ayant une limite de poids moléculaire de 500 (Spectra/Por#, Caf. N 131 057). Les deux extrémités de la poche ont été obturées avec des pinces. La poche a été placée dans un bac contenant de l'eau déionisée où le rapport du surnageant et de l'eau déionisée était de 1 :10. L'extraittotal a été dialysé à 4 C en mélangeant trois fois, à chaque fois pendant 20 heures. La solution restant dans la poche de dialyse a été collectée et concentrée à pression réduite pour donner l'extrait. EXEMPLE 4 Une quantité de 1000 ml d'une solution de 80 % d'éthanol a été ajoutée à 100 g de ginseng américain découpé, ce mélange ayant été chauffé jusqu'à ébullition, puis retenu pendant 1 heure. La décoction a été filtrée à travers un calibre de tamis de ? 200, le filtrat (premier filtrat) ayant été ensuite collecté. Une quantité supplémentaire de 1000 ml d'une solution de 80 % d'éthanol a été ajoutée au résidu de ginseng, puis extraite comme décrit précédemment pour donner le second filtrat. Ces deux filtrats ont été combinés et concentrés à pression réduite pour donner l'extrait V. EXEMPLE 5 Evaluation de l'activité pharmacologique anti-ulcère gastroduodénal : L'activité anti-ulcère gastroduodénal du ginseng américain, qui est résumée ciaprès, a été évaluée en utilisant les procédés décrits par Robert A. et coll. (1979, Gastroenterology 77 : 433-443) et par Takagi I. et Okabe S. (1968, Japan J. Pharmacol. 18: 9-18). (1) Evaluation de l'ulcère dû au stress : On a administré, par voie orale, des extraits de ginseng américain à des rats mâles de type Long Evans, pesant 150 20 g, qui, auparavant, avaient été privés de nourriture pendant 18 heures, tandis que l'on a administré aux rats témoins, par voie orale, le même volume d'eau distillée. Au bout de 1 heure, les rats ont été placés dans un support et partiellement immergés pendant 4 heures dans une eau comprise entre 22 C et 24 C. Les rats ont été ensuite sacrifiés et leurs estomacs ont été ouverts en suivant la grande courbure, pour évaluer le degré d'ulcération. L'ulcération gastrique a été notée suivant un système arbitraire : 0 = aucun saignement 1 = saignement par endroits 2 = léger saignement 3 = saignement important et la moitié de l'estomac est teintée de sang 4 = saignement très important et tout l'estomac est teinté de sang Tableau 1 effet d'extraits de ginseng américain sur un ulcère dû au stress chez le rat traitement dose N inhibition Va) (g/kg) extrait total 4 10 27,5 ~ 2,4 extrait 4 10 42,5 3,6 extrait I 4 6 37,5 ~ 5,1 extrait III 4 10 42,5 3,6 extrait IV 4 6 51,2 ~ 3,8 extrait V 4 4 37,5 ~ 6,3 a : le taux d'inhibition (%) est calculé par l'équation suivante : [(note de l'animal témoin) - (note de l'animal expérimental)] / (note de l'animal témoin) x 100 %. Toutes les notes d'ulcères des rats témoins étaient égales à 4. (2) Evaluation de l'ulcère dû à l'éthanol: On a administré, par voie orale, des extraits de ginseng américain à des rats mâles de type Long Evans, pesant 150 20 g, qui, auparavant, avaient été privés de nourriture pendant 18 heures, tandis que l'on a administré à des rats témoins, par voie orale, le même volume d'eau distillée. Au bout de 15 minutes, on a administré aux rats 1 ml d'éthanol absolu. Au bout de 1 heure, les rats ont été sacrifiés et l'ulcération gastrique a été notée selon un système arbitraire : 0 = aucune lésion 1 = hyperhémie 2 = une ou deux lésions peu importantes 3 = plus de deux lésions peu importantes ou graves 4 = lésions très graves Tableau 2 effet de l'extrait de ginseng américain sur l'ulcère dû à l'éthanol chez le rat doseN'b' . traitement dose N inhibition (%) extrait total 4 10 50,0 ~ 0,0 extrait 4 10 50,0 ~ 0,0 extrait)! 4 6 45,8 3,8 extrait))) 4 10 40,0 ~ 5,2 a : le taux d'inhibition (%) est calculé par l'équation suivante : [(note de l'animal témoin) - (note de l'animal expérimental)] / (note de l'animal témoin) x 100 %. Toutes les notes d'ulcères des rats témoins étaient égales à 4. Les résultats de l'évaluation pharmacologique montrés dans les tableaux 1 et 2 .révèlent que des extraits de ginseng américain de la présente invention possèdent d'excellents effets d'inhibition d'ulcères gastriques dus au stress et à l'alcool. En outre, selon la présente invention, le ginseng américain - extrait avec de l'eau ou avec une solution d'éthanol, puis traité par ultrafiltration, par dialyse, par précipitation avec de l'éthanol ou par chromatographie en phase inverse - possède d'excellents effets anti-ulcère gastroduodénal. Alors que l'invention a été particulièrement montrée et décrite en faisant référence à son mode de réalisation préféré, il est clair pour l'homme de l'art que divers changements de forme et de détail peuvent être apportés sans s'écarter de l'esprit et du domaine d'application de l'invention. REVENDICATIONS 1. Composition pharmaceutique pour prévenir et/ou traiter un ulcère gastroduodénal, comprenant : (i) une quantité efficace de ginseng américain et/ou son extrait ; et (ii)un support ou excipient physiologiquement ou pharmaceutiquement acceptable. 2. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, dans laquelle ledit ginseng américain est du panax quinquefolium L. 3. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec un solvant ayant une polarité supérieure à 0,88. 4. Composition pharmaceutique selon la revendication 3, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec une solution aqueuse contenant entre 10 % et 80 % d'éthanol. 5. Composition pharmaceutique selon la revendication 3, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec de l'eau. 6. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec de l'eau ou avec une solution aqueuse contenant entre 10 % et 80 % d'éthanol, l'extrait étant centrifugé et filtré à travers une membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 1000, pour donner un rétentat contenant des substances ayant un poids moléculaire supérieur à 1000 daltons, le rétentat étant concentré pour donner un extrait I. 7. Composition pharmaceutique selon la revendication 6, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec de l'eau ou avec une solution aqueuse contenant entre 10 % et 80 % d'éthanol, l'extrait étant centrifugé et filtré à travers une membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 1000, pour donner un filtrat contenant des substances ayant un poids moléculaire inférieur à 1000 daltons, le filtrat étant concentré pour sécher, la solution d'éthanol étant ajoutée pour dissoudre lesdites substances, ladite solution d'éthanol étant filtrée pour obtenir une partie soluble, ladite partie soluble étant ajoutée dans ledit extrait I selon la revendication 6, pour obtenir un mélange, ledit mélange étant concentré pour donner l'extrait Il. 8. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec de l'eau ou avec une solution aqueuse contenant entre 10 % et 80 % d'éthanol, l'extrait étant centrifugé et filtré à travers une membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 3000, pour donner un rétentat contenant des substances ayant un poids moléculaire supérieur à 3000 daltons, le rétentat étant concentré pour donner un extrait III. 9. Composition pharmaceutique selon la revendication 8, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec de l'eau ou avec une solution aqueuse contenant entre 10 % et 80 % d'éthanol, l'extrait étant centrifugé et filtré à travers une membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 3000, pour donner un filtrat contenant des substances ayant un poids moléculaire inférieur à 3000 daltons, le filtrat étant chargé sur une colonne de phase inverse, élué avec de l'eau puis avec une solution d'éthanol ; l'éluat ayant été collecté, la solution de 95 % d'éthanol est combinée ensuite avec ledit extrait III selon la revendication 8 et le mélange est concentré pour donner l'extrait IV. 10. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, dans laquelle ledit extrait de ginseng américain est extrait avec une solution aqueuse contenant entre 30 % et 90 % d'éthanol, l'extrait étant soumis ensuite à une filtration et à une concentration pour donner l'extrait V. 11. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, dans laquelle ledit ulcère gastroduodénal est un ulcère gastrique ou un ulcère duodénal. 12. Processus de préparation d'un extrait de ginseng américain pour prévenir et/ou traiter des ulcères gastroduodénaux, comprenant les étapes consistant : (a) à extraire le ginseng américain avec un solvant ayant une polarité supérieure à 0,88 pour obtenir un extrait ; (b) à filtrer ledit extrait pour obtenir un filtrat ; et (c) à centrifuger ledit filtrat et à collecter le surnageant pour donner l'extrait total. 13. Processus selon la revendication 12, comprenant en outre l'étape d'ultrafiltration dudit extrait total, pour donner un rétentat et un filtrat. 14. Processus selon la revendication 13, dans lequel ladite ultrafiltration est une étape au cours de laquelle ledit extrait total est filtré au moyen d'une membrane d'ultrafiltration ayant une limite de poids moléculaire de 1000 ou de 3000, pour éliminer des molécules plus petites. 15. Processus selon la revendication 12, comprenant en outre l'étape de dialyse dudit extrait total. 16. Processus selon la revendication 15, dans lequel ladite dialyse est une étape au cours de laquelle ledit extrait total est dialysé au moyen d'une membrane de dialyse ayant une limite de poids moléculaire de 500, pour éliminer des molécules plus petites. 17. Processus selon la revendication 13, comprenant en outre une étape de précipitation au cours de laquelle ledit filtrat est concentré pour sécher, puis dissous avec une solution contenant entre 50 % et 100 % d'éthanol, pour obtenir la partie soluble. 18. Processus selon la revendication 13, comprenant en outre l'étape de réalisation d'une chromatographie en phase inverse dudit filtrat. 19. Processus selon la revendication 18, dans lequel ladite chromatographie en phase inverse est réalisée avec une colonne de résine polyaromatique de phase inverse. 20. Processus selon la revendication 12, dans lequel ledit extrait de ginseng américain est extrait avec une solution aqueuse contenant entre 10 % et 80 % d'éthanol. 21. Processus selon la revendication 12, dans lequel ledit extrait de ginseng est extrait avec de l'eau. 22. Procédé pour prévenir et/ou traiter un patient souffrant d'un ulcère gastroduodénal, ce procédé comprenant l'administration audit patient, d'une quantité efficace de ginseng américain et/ou d'extraits de celui-ci.