Brevet FR2802100A1 — publié le 20010615

AMYLASE ACTIVÉE La présente invention a pour objet une nouvelle association remarqua ble en ce qu'elle contient de l'amylase et un sel de calcium. L'amylase est un ferment soluble depuis longtemps utilisé en thérapeu tique pour ses propriétés anti-inflammatoires et anti-oedémateuses et pour faciliter la digestion des matières amylacées. La demanderesse a constaté que l'activité enzymatique de l'amylase était accrue dans des proportions importantes en présence de l'ion calcium. Cette activation de l'amylase a été étudiée selon la méthode de Walker (Walker J.A., Harmon D.L., "Technical note: A simple, rapid assay for a-amyIase in bovine pancreaticjuice" J. Anim. Sci., (1996), 74 (3), 658-662) qui fait agir l'enzyme sur son substrat naturel à savoir, l'amylopectine de pomme de terre, l'activité enzymatique étant mesurée par les variations de densité optique de la solution aqueuse contenant les différents constituants. Deux séries de tests ont été effectuées en faisant varier les concentra tions en amylase et en ion calcium, les pourcentages d'activation étant déter minés par comparaison avec les tests témoins réalisés en l'absence de l'ion calcium. A titre d'exemple non limitatif, les tests ont été réalisés avec le chlorure de calcium, ce dernier pouvant être remplacé par n'importe quel sel de cal cium, tels que le gluconate, le sulfate, le carbonate, le phosphate...etc. Le matériel utilisé est du modèle courant (conteneur et agitateur), les différentes mesures étant effectuées en fin de brassage dont la durée est fonc tion du volume des masses en présence. Les mesures de la densité optique ont été effectuées dans différentes so lutions comportant le substrat en faisant varier les concentrations en amylase et en chlorure de calcium. Les résultats sont donnés dans le tableau A ci-dessous. TABLEAU A Amylase H20 10-2 M CaC12 1 0-3 M Ca C12 densité optique activation d ensité optique activation 4.10-3 /L III 1,152 0,844 25% 0,818 30% 6.10-3 /L 0,966 0,663 30% 0 ,541 44% 8.10-3 g/L 0,819 0,472 42% 0,414 49% Les résultats mettent en évidence une activation significative de l'activi té enzymatique en présence de l'ion Ca++, cette activité étant maximale pour une concentration en amylase de 8.10-3 g/Litre. Afin de déterminer les conditions optimales d'activation, on a effectué les mesures de la variation de la densité optique dans différentes solutions en ne faisant varier que la concentration en chlorure de calcium, la concentra tion en amylase demeurant constante à 8.10-3 g/Litre. Les résultats de ces mesures sont données dans le tableau B ci-dessous. TABLEAU B 10-3 M CaC12 10-4 M CaC12 10-5 M CaC12 10-6 M CaC 12 10-7 M CaC12 densité activation densité activation densité activation densité activation densité activation optique optique optique optique optique 0,41 48% 0,414 48% 0,417 48% 0,43 46% 0,6 25% Les résultats montrent que l'activation est constante en présence de chlorure de calcium jusqu'à une concentration de 10-5 M. A des concentra tions moindres, l'effet potentialisateur diminue pour atteindre 25 % à la con centration de 10-7 M. De ces essais on peut conclure que l'activité du chlorure de calcium est optimale à une concentration de 10-5 M pour une concentration en amylase de 8.10-3 g/Litre, correspondant à des concentrations de 1,47 g de calcium pour 8 g d'amylase. A ces concentrations, la potentialisation de l'effet enzymatique de l'amylase est proche de 50 %. REVENDICATIONS 1. Association caractérisée en ce qu'elle contient de l'amylase et un sel de calcium. 2. Association selon la Revendication 1, caractérisée en ce que le sel de calcium est le chlorure de calcium. 3. Association selon l'une des Revendications précédentes, caractérisée en ce que l'activité enzymatique optimale est obtenue pour une concentration d'amylase dans le milieu réactionnel de 8.10-3 g/Litre. 4. Association selon les Revendications 2 et 3, caractérisée en ce que l'activité enzymatique optimale est obtenue pour une concentration de chlo rure de calcium dans le milieu réactionnel non inférieure à 10-5 M.