Brevet FR2805761A1 — publié le 20010907

La présente invention a pour objet des nanocapsules lipidiques, un procédé pour leur préparation et leur utilisation pour la fabrication d'un médicament, destiné notamment à être administré par voie injectable, orale ou nasale. Ces dernières années, de nombreux groupes ont développé la formulation de nanoparticules solides lipidiques ou nanosphères lipidiques (Müller, R.H. et Mehnert, European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 41(1) : 62-69, 1995 ; W., Gasco, M.R., Pharmaceutical Technology Europe : 52-57, décembre 1997 ; EP 605 497). Il s'agit d'une alternative à l'utilisation des liposomes ou des particules polymères. Ces particules lipidiques présentent l'avantage d'être formulées en l'absence de solvant. Elles ont permis d'encapsuler à la fois des produits lipophiles et hydrophiles sous forme de paires d'ions par exemple (Cavalli, R. et al, S. T.P. Pharma Sciences, 2(6): 514-518,1992; et Cavalli, R. et al, International Journal of Pharmaceutics, 117: 243-246,1995). Ces particules peuvent être stables sur plusieurs années à l'abri de la lumière, à 8 C (Freitas, C. et Müller, R.H., Journal of Microencapsulation, 1 (16) : 59-71,1999). Deux techniques sont couramment utilisées pour préparer des nanoparticules lipidiques : - l'homogénéisation d'une émulsion chaude (Schwarz, C. et al, Journal of Controlled Release, 30 : 83-96, 1994 ;Müller, R.H. et al, European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 41(1) :62-69, 1995) ou froide (Zur Mühlen, A. and Mehnert W., Pharmazie, 53 : 552-555, 1998; EP 605 497), ou - la trempe d'une microémulsion en présence de co-tensioactifs tels que le butanol. La taille des nanoparticules obtenues est en général supérieure à 100 nm (Cavalli, R et al, European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 43(2) : 110-115, 1996; Morel, S. et al, International Journal of Pharmaceutics, 132 :259-261, 1996). Cavalli et al. (International Journal of Pharmaceutics, 2(6) : 514- 518, 1992; et Pharmazie, 53: 392-396,1998) décrivent l'utilisation d'un sel biliaire, le taurodéoxycholate, non toxique par voie injectable pour la formation de nanosphères de taille supérieure ou égale à 55 nm. La présente invention concerne des nanocapsules et non des nanosphères. On entend par nanocapsules des particules constituées d'un c#ur liquide ou semi-liquide à température ambiante, enrobé d'un film solide à température ambiante, par opposition à des nanosphères qui sont des particules matricielles, i.e. dont la totalité de la masse est solide. Lorsque les nanosphères contiennent un principe pharmaceutiquement actif, celui-ci est finement dispersé dans la matrice solide. Dans le cadre de la présente invention, on entend par température ambiante, une température comprise entre 15 et 25 C. La présente invention a pour objet des nanocapsules, essentiellement constituées de composés lipidiques, de taille moyenne inférieure à 150 nm, de préférence inférieure à 100 nm, de préférence encore inférieure à 50 nm. Les nanocapsules sont chacune constituées d'un c#ur liquide ou semi-liquide à température ambiante, enrobé d'un film solide à température ambiante. Compte-tenu de leur taille, les nanocapsules de l'invention sont des particules lipidiques colloïdales. L'indice de polydispersité des nanocapsules de l'invention est avantageusement compris entre 5 et 15 %. L'épaisseur du film solide est avantageusement comprise entre 2 à 10 nm. Elle est égale environ au dixième du diamètre des particules. Le c#ur des nanocapsules est essentiellement constitué d'un corps gras liquide ou semi-liquide à température ambiante, par exemple un triglycéride ou un ester d'acide gras, représentant 20 à 60 %, préférentiellement 25 à 50 % en poids des nanocapsules. Le film solide enrobant les nanocapsules est, de préférence, essentiellement constitué d'un tensio-actif lipophile, par exemple une lécithine dont la proportion en phosphatidylcholine est comprise entre 40 et 80 %. Le film solide peut également contenir un tensio-actif hydrophile, par exemple le Solutol# HS 15. Le tensio-actif hydrophile contenu dans le film solide enrobant les nanocapsules représente de préférence entre 2 à 10 % en poids des nanocapsules, de préférence 8 % environ. Le triglycéride constituant le c#ur des nanocapsules est notamment choisi parmi les triglycérides en C8 à C12, par exemple des triglycérides des acides capriques et capryliques et leurs mélanges. L'ester d'acide gras est choisi parmi les esters d'acide gras en C8 à C18, par exemple le palmitate d'éthyle, l'oléate d'éthyle, le myristate d'éthyle, le myristate d'isopropyle, le myristate d'octyldodécyle, et leurs mélanges. L'ester d'acide gras est de préférence en Cs à C12. Les nanocapsules de l'invention sont particulièrement adaptées à la formulation de principes actifs pharmaceutiques. Dans ce cas, le tensioactif lipophile peut être avantageusement solide à 20 C et liquide à 37 C environ. La quantité de tensio-actif lipophile contenu dans le film solide enrobant les nanocapsules est fixée de telle sorte que le rapport massique corps gras liquide / composé tensio-actif solide est choisi entre 1 et 15, de préférence entre 1,5 et 13, plus préférentiellement entre 3 et 8. La présente invention a également pour objet un procédé de préparation des nanocapsules décrites précédemment Le procédé de l'invention est basé sur l'inversion de phase d'une émulsion huile/eau provoquée par plusieurs cycles de montée et de descente en température. Le procédé de l'invention consiste à a) - préparer une émulsion huile/eau contenant une phase grasse huileuse, un tensio-actif hydrophile non ionique, un tensio-actif lipophile solide à 20 C, - provoquer l'inversion de phase de ladite émulsion huile/eau par augmentation de la température jusqu'à une température T2 supérieure à la température d'inversion de phase (TIP) pour obtenir une émulsion eau/huile, suivie d'une diminution de la température jusqu'à une température T1, T1 - effectuer au moins un ou plusieurs cycles de température autour de la zone d'inversion de phase entre T1 et T2, jusqu'à observer une suspension translucide, b) effectuer la trempe de l'émulsion huile/eau à une température voisine de T1, de préférence supérieure à T1, pour obtenir des nanocapsules stables. Les nanocapsules obtenues selon le procédé de l'invention sont avantageusement dépourvues d'agents co-tensio-actifs, comme les alcools en Ci - C4. Le nombre de cycles appliqués à l'émulsion dépend de la quantité d'énergie nécessaire pour former les nanocapsules. L'inversion de phase peut être visualisée par l'annulation de la conductivité de la formulation lorsque l'émulsion eau/huile se forme. Le procédé de l'invention comprend deux étapes. La première étape consiste à peser l'ensemble des constituants, à les chauffer au delà d'une température T2 sous agitation douce (par exemple, magnétique) puis éventuellement à les refroidir à une température T1 (Ti L'inversion de phase entre l'émulsion huile/eau et l'émulsion eau/huile se traduit par une diminution de la conductivité quand la température augmente jusqu'à ce qu'elle s'annule. La température moyenne de la zone d'inversion de phase correspond à la température d'inversion de phase (TIP). L'organisation du système sous forme de nanocapsules se traduit visuellement par un changement d'aspect du système initial qui passe de blanc-opaque à blanc-translucide. Ce changement se produit à une température inférieure à la TIP. Cette température est située généralement entre 6 à 15 C en dessous de la TIP. T1 est une température à laquelle la conductivité est au moins égale à 90 - 95 % de la conductivité mesurée à 20 C. T2 est la température à laquelle la conductivité s'annule. La deuxième étape consiste en un refroidissement brusque (ou trempe) de l'émulsion huile/eau à une température voisine de T1, de préférence supérieure à T1, sous agitation magnétique, en la diluant entre 3 et 10 fois à l'aide d'eau désionisée à 2 C +/- 1 C jetée dans l'émulsion fine. Les particules obtenues sont maintenues sous agitation pendant 5 min. Dans un mode de réalisation préférée, la phase grasse est un triglycéride d'acide gras, le tensio-actif lipophile solide est une lécithine et le tensio-actif hydrophile est le Solutol# HS15. Dans ces conditions, T1 = 60 C, T2= 85 C et le nombre de cycles est égal à 3. Le rapport corps liquide / composé tensio-actif solide est choisi entre 1 et 15, de préférence entre 1,5 et 13, plus préférentiellement entre 3 et 8. L'émulsion huile/eau contient avantageusement 1 à 3 % de tensioactif lipophile, 5 à 15 % de tensio-actif hydrophile, 5 à 15 % de corps gras huileux, 64 à 89 % d'eau (les pourcentages sont exprimés en poids). Plus l'indice HLB du corps gras liquide est élevé, plus la température d'inversion de phase est élevée. En revanche, la valeur de l'indice HLB du corps gras ne semble pas avoir d'influence sur la taille des nanocapsules. Ainsi, lorsque la taille des groupements terminaux des triglycérides augmente, leur indice HLB diminue et la température d'inversion de phase diminue. L'indice HLB ou balance hydrophile-lipophile est tel que défini par C. Larpent dans le Traité K. 342 des Editions TECHNIQUES DE L'INGENIEUR. La taille des particules diminue quand la proportion en agent tensioactif hydrophile augmente et quand la proportion en agents tensio-actifs (hydrophile et lipophile) augmente. En effet, l'agent tensio-actif entraîne une diminution de la tension interfaciale et donc une stabilisation du système ce qui favorise l'obtention de petites particules. Par ailleurs, la taille des particules augmente quand la proportion d'huile augmente. Selon un mode de réalisation préférée, la phase grasse est le Labrafac# WL 1349, le tensio-actif lipophile est le Lipoïde S 75-3 et le tensio-actif hydrophile non ionique est le Solutol# HS 15. Ces composés présentent les caractéristiques suivantes : - Le Labrafac# lipophile WL1349 (Gattefossé, Saint-Priest, France). Il s'agit d'une huile composée de triglycérides à chaîne moyenne des acides capryliques et capriques (Ce et C10). Sa densité est de 0,930 à 0,960 à 20 C. Son indice HLB est de l'ordre de 1. - Le Lipoïde S 75-3 (Lipoid GmbH, Ludwigshafen, Allemagne). Le Lipoïde S 75-3 correspond à de la lécithine de soja. Cette dernière contient environ 69 % de phosphatidylcholine et 9 % de phosphatidyl éthanolamine. Ce sont donc des composés tensio-actifs. Ce constituant est le seul constituant solide à 37 C et à température ambiante dans la formulation. Il est couramment utilisé pour la formulation de particules injectables. - Le Solutol# HS 15 (Basf, Ludwigshafen, Allemagne). Il s'agit d'un 2-hydroxystéarate de polyéthylèneglycol-660. Il joue donc le rôle d'agent tensio-actif hydrophile non ionique dans la formulation. Il est utilisable par voie injectable (chez la souris en IV DL50 > 3,16 g/kg, chez le rat 1,0 La phase aqueuse de l'émulsion huile/eau peut également contenir 1 à 4 % d'un sel comme le chlorure de sodium. La modification de la concentration en sel entraîne un déplacement de la zone d'inversion de phase. Plus la concentration en sel augmente et plus la température d'inversion de phase est basse. Ce phénomène sera intéressant pour l'encapsulation de principes actifs thermosensibles hydrophobes. Leur incorporation pourra se faire à une température plus faible. Les nanocapsules de l'invention peuvent avantageusement contenir un principe actif et entrer dans la composition d'un médicament destiné à être administré par voie injectable, notamment intra-veineuse, par voie orale ou par voie nasale. Lorsque le principe actif est peu soluble dans la phase huileuse, on ajoute un co-solvant, par exemple la N,N-diméthylacétamide. Les nanocapsules de l'invention conviennent plus particulièrement pour l'administration des principes actifs suivants : - les anti-infectieux parmi lesquels les antimycosiques, les antibiotiques, - les anticancéreux, - les principes actifs destinés au Système Nerveux Central qui doivent passer la barrière hémato-encéphalique, tels que les antiparkinsoniens et plus généralement les principes actifs pour traiter les maladies neurodégénératives. La présente invention est illustrée par les exemples suivants en référence aux figures 1 à 4. La figure 1 est une photographie des nanocapsules de l'invention obtenues dans l'exemple 1. L'échelle est de 1 cm pour 50 nm. La figure 2 représente l'évolution de la taille moyenne des particules en fonction de la proportion en agent tensio-actif hydrophile (Solutol#). La figure 3 représente l'évolution de la conductivité en fonction de la température pour différentes concentrations en sel. Dans la courbe 1, la concentration en sel est de 2,0 % en poids. Dans la courbe 2, la concentration est de 3,4 % en poids. La figure 4 représente l'évolution de la conductivité d'une émulsion huile/eau (H/E) décrite dans l'exemple 1, en fonction de la température après trois cycles de montée et descente en température entre 60 et 85 C. Exemple 1 : Nanocapsules non chargées en principe actif A) Préparation des nanocapsules On réalise 5 g d'une émulsion contenant 75 mg de Lipoïde S75-3, 504 mg de Labrafac WL 1349 lipophile, 504 mg de Solutol HS 15,3,829 g d'eau et 88 mg de chlorure de sodium. L'ensemble est réuni dans un même bêcher et placé sous agitation magnétique. Un chauffage est appliqué jusqu'à atteindre une température de 85 C. Toujours sous agitation magnétique, on laisse refroidir le système jusqu'à une température de 60 C. Ce cycle (entre 85 C et 60 C) est réalisé jusqu'à ce que l'on observe l'annulation de la conductivité en fonction de la température (figure 4). L'inversion de phase se produit au bout de trois cycles. Au dernier refroidissement, on effectue une trempe en jetant 12,5 ml d'eau distillée à 2 C +/- 1 C sur le mélange à 70 C. Le système est alors maintenu sous agitation magnétique pendant 5 min. Les particules obtenues dans les conditions précédemment décrites, après trois cycles de température, ont une taille moyenne de 43 +/- 7 nm. Leur polydispersité de taille est de 0,071. La microscopie électronique à transmission en utilisant l'acide phosphotungstique nous a permis de mettre en évidence des particules de taille moyenne de l'ordre de 50 nm (voir figure 1 ). Par ailleurs, une observation faite en microscopie de force atomique en mode contact (appareillage Park Scientic Instruments, Genève, Suisse) montre que les nanocapsules sont effectivement solides à la température de 25 C. B) Modification des proportions d'agent tensio-actif hydrophile Le tableau # ci-dessous présente différentes formulations de nanocapsules préparées avec des concentrations variables en tensio-actif hydrophile. % massique Lipoïd# S75-3 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 1,51 Labrafac 1349 10,08 10,08 10,08 10,08 10,08 10,08 10,08 10,08 WL 1349 Solutol# HS 15 5,00 7,50 10,08 15,00 20,00 22,50 25,00 30,00 Eau 81,65 79,10 76,60 71,68 66,68 64,18 61,68 56,68 NaCI 1,76 1,76 1,76 1,76 1,76 1,76 1,76 1,76 TABLEAU La diminution de la concentration en Solutol# HS 15 entraîne une augmentation de la taille moyenne des particules (figure 2). On observe alors des tailles moyennes qui vont de 23 à 128 nm pour des proportions de Solutol# allant de 30 à 5 % de la formulation totale respectivement. La taille dépend donc de la concentration en agent tensioactif hydrophile C) Modifications des proportions d'agents tensio-actifs Lipoïd et Solutol Le tableau Il ci-dessous présente des formulations de nanocapsules préparées avec différentes concentrations d'agents tensioactifs. % massique A B C Lipoïd# S75-3 0, 78 % 1,51 % 2,35 % Labrafac# WL 1349 10,08 % 10,08 % 10,08 % Solutol HS 15 5,22 % 10,08 % 15,65 % Eau 82,16 % 76,60 % 10,16 % NaCI 1,76% 1,76% 1,76% Proportion en 6,00 11,59 18,00 agents tensio-actifs 6,00% 11,59% 18,00% TABLEAU II L'augmentation de la proportion d'agents tensioactifs dans la formulation entraîne une diminution de la taille moyenne. En effet, la formulation A permet d'obtenir des particules de taille moyenne 85 +/- 7 nm (P = 0,124). Pour les formulations B et C les tailles moyennes deviennent 43 +/- 7 nm (P = 0,071), et 29 +/- 8 nm (P = 0,148) respectivement. D) Modification de la concentration en NaCI Le tableau III ci-dessous présente deux formulations de nanocapsules préparées avec deux concentrations en sel NaCI différentes. % massique Lipoïd#S75-3 1,73 % 1,70 % Labraface WL 1349 5,76 % 2,84 % Solutol#HS15 2,88 % 5,68 % Eau 87,61 % 86,36 % NaCI 2,02 % 3,40 % TABLEAU III La modification de la concentration en sel entraîne un déplacement de la zone d'inversion de phase. Plus la concentration en sel augmente et plus la température d'inversion de phase est basse (figure 3) Ce phénomène sera intéressant pour l'encapsulation de principes actifs thermosensibles hydrophobes. Leur incorporation pourra se faire à une température plus faible. Ces formulations permettent d'obtenir des particules de taille similaire aux tailles précédentes malgré les concentrations en sel différentes. Exemple 2 : Encapsulation d'un principe actif lipophile, le Soudan III La formulation correspond à celle de l'exemple 1 : on réalise 5 g de l'émulsion initiale en pesant 75 mg de Lipoïd S75-3,504 mg de Labrafae lipophile et 504 mg de Solutolo, 3,829 g d'eau et 88 mg de chlorure de sodium. On ajoute 200 mg de Soudan III solubilisé dans de l'huile de vaseline. L'ensemble est pesé dans un même bêcher et placé sous agitation magnétique. Un chauffage est appliqué jusqu'à atteindre une température de 85 C. Toujours sous agitation magnétique, on laisse refroidir le système jusqu'à une température de 60 C. Ce cycle (entre 85 C et 60 C) est réalisé trois fois. Au dernier refroidissement on effectue une trempe à 70 C en jetant 12,5 ml d'eau distillée à 2 C +/- 1 C. Le système est alors maintenu sous agitation magnétique pendant 5 min. L'encapsulation de Soudan III nous a permis d'obtenir des particules de taille similaire aux particules de l'exemple 1, pour les mêmes proportions de tensioactifs et de phase grasse, soit 45 +/- 12 nm (P = 0,138). A l'oeil nu, l'échantillon apparaît rose homogène. Exemple 3 : Encapsulation de la progestérone. La formulation correspond à celle de l'exemple 1on réalise 5 g de l'émulsion initiale en pesant 75 mg de Lipoïd# S75-3, 504 mg de Labrafac lipophile et 504 mg de Solutol, 3,829 g d'eau et 88 mg de chlorure de sodium. On ajoute 10 mg de progestérone. L'ensemble est pesé dans un même bêcher et placé sous agitation magnétique. Un chauffage est appliqué jusqu'à atteindre une température de 85 C. Toujours sous agitation magnétique, on laisse refroidir le système jusqu'à une température de 60 C. Ce cycle (entre 85 C et 60 C) est réalisé trois fois. Au dernier refroidissement, on effectue une trempe à 70 C en jetant 12,5 ml d'eau distillée à 2 C +/- 1 C. Le système est alors maintenu sous agitation magnétique pendant 5 min L'encapsulation de progestérone permet d'obtenir des particules de tailles similaires aux particules de l'exemple 1, à savoir 45 +/- 12 nm (P = 0,112). La progestérone n'est pas retrouvée dans la phase aqueuse à une concentration supérieure à sa solubilité. En effet, une centrifugation à 200000 tr/min pendant 30 minutes permet d'obtenir un léger précipité dont la composition a été étudiée par DSC. Ce précipité ne contient pas de progestérone. La progestérone étant quasiment insoluble dans l'eau, cela indique une incorporation du principe actif dans les nanocapsules. Exemple 4 : Encapsulation d'une suspension de busulfan A) Suspension de busulfan (à une concentration de 0,25 mg/ml) La première étape de l'encapsulation de busulfan consiste à solubiliser celui-ci dans de la N,N-diméthyl-acétamide. On réalise donc une solution à 24 mg de busulfan par mL de N,N diméthyl acétamide. On prélève 175 mg de cette solution que l'on ajoute aux 504 mg de Labrafac. On pèse également 75 mg de Lipoïdo S75-3, 504 mg de Solutol#, 3,829 g d'eau et 88 mg de chlorure de sodium. L'émulsion initiale est donc à une concentration de 0,88 mg/g d'émulsion. L'ensemble est réuni dans un même bêcher et placé sous agitation magnétique. Un chauffage est appliqué jusqu'à atteindre une température de 85 C. Toujours sous agitation magnétique, on laisse refroidir le système jusqu'à une température de 60 C. Ce cycle (entre 85 C et 60 C) est réalisé trois fois. Au dernier refroidissement, on effectue une trempe à 70 C en jetant 12,5 ml d'eau distillée à 2 C +/- 1 C. Le système est alors maintenu sous agitation magnétique pendant 5 min. La concentration finale, c'est-à-dire après trempe donc dilution, est de 0,25 mg/ ml. La taille des particules obtenues est légèrement supérieure à celle de l'exemple 1 en raison de la proportion plus importante de phase grasse (63 +/- 5 nm). Comme pour la progestérone, le busulfan n'est pas retrouvé dans la phase aqueuse à une concentration supérieure à sa solubilité. En effet, aucun cristal n'est visible par microscopie optique dans la phase aqueuse après encapsulation. Or, le busulfan étant quasiment insoluble dans l'eau, cela indique une incorporation du busulfan dans les nanocapsules. B) Suspension de busulfan (à une concentration de 0,50 mg/ml) Une suspension de particules à 0,50 mg/l est préparée dans les mêmes conditions que précédemment après avoir solubilisé 50 mg de busulfan dans 1 ml de N,N-diméthyl-acétamide. On prélève 175 mg de cette solution que l'on ajoute aux 504 mg de Labrafac#. On pèse également 75 mg de Lipoïd# S75-3,504 mg de Solutol#, 3,829 g d'eau et 88 mg de chlorure de sodium. L'émulsion initiale est donc à une concentration de 1,76 mg/ml d'émulsion. L'ensemble est réuni dans un même bêcher et placé sous agitation magnétique Un chauffage est appliqué jusqu'à atteindre une température de 85 C. Toujours sous agitation magnétique, on laisse refroidir le système jusqu'à une température de 60 C. Ce cycle (entre 85 C et 60 C) est réalisé trois fois. Au dernier refroidissement, on effectue une trempe à 70 C en jetant 12,5 ml d'eau distillée à 2 C +/- 1 C. Le système est alors maintenu sous agitation magnétique pendant 5 min. La concentration finale, c'est-à-dire après trempage donc dilution, est de 0,50 mg / ml. Exemple 5 : Influence de la nature du corps gras sur la température d'inversion de phase On compare le Labrafac#, huile composée de triglycérides des acides capriques et capryliques, avec des esters d'acides gras. On a pu mettre en évidence l'importance de la taille de leurs groupements terminaux sur la température d'inversion de phase. On observe une augmentation de la température d'inversion de phase avec une augmentation de la taille des groupements. Ainsi, dans la série des myristates, le changement d'aspect est visible à 69,5 C pour l'ester éthylique, à 71,5 C pour l'ester isopropylique et à 86,5 C pour l'ester octyldodécylique. Cette augmentation signifie que nous obtenons plus facilement une émulsion huile dans eau lorsque l'huile possède un indice HLB plus faible (plus lipophile). En effet, ce caractère lipophile plus marqué entraîne une accentuation des liaisons hydrophobes entre l'agent tensio-actif et l'huile, et il faut donc plus d'énergie pour inverser ce système. Par ailleurs, la longueur de la chaîne carbonée de l'acide gras n'influence pas la taille des particules, ni la température d'inversion de phase (entre C14 et C18). Il semble cependant que la double liaison présente dans l'oléate d'éthyle augmente sensiblement la température d'inversion de phase. Les résultats sont consignés dans le tableau ci-dessous. Nb de T Taille des Doubles Huiles carbone changement particules liaisons (AcGras) d'aspect ( C) (nm) Labrafac 8/10 0 77,0 43 ~ 7 lipophile Palmitate 16 0 69, 0 37 15 d'éthyle Oléate 18 1 71,5 41 5 d'éthyle Myristate 14 0 69,5 35 ~ 13 d'éthyle Myristate 14 0 71,5 44 ~ 23 d'isopropyle Myristate d'octyl 14 0 86,5 42 ~ 16 dodécyle TABLEAU IV La valeur du HLB du corps gras ne semble pas affecter la taille des particules de manière significative. Exemple 6 : Influence de la nature du tensio-actif lipophile sur la taille des nanocapsules Différents types de lécithine dont les proportions en phosphatidylcholine varient de 40 à 90 % ont été utilisés La taille moyenne des particules augmente avec la teneur en phosphatidylcholine dans la lécithine (tableau V ci-dessous). En effet, pour 40 % de phosphatidylcholine, la taille des nanocapsules est de 35 +/- 8 nm tandis qu'elle est respectivement de 43 +/- 7 nm et 78 +/- 12 nm pour une proportion de 75 et 90 % de phosphatidylcholine dans la lécithine. En revanche, l'utilisation de molécules chargées n'a pas permis d'obtenir des nanocapsules. % de Taille moyenne des Type de Lipoïd phosphatidylcholine particules (nm) Lipoïd# S45 40 35 ~ 8 Lipoïd# S75-3 69 43 ~ 7 Lipoïd# S 100 90 78 ~ 12 Lipoïd# EPC 98 61 ~ 12 Lipoïd E80 80 72 18 TABLEAU V REVENDICATIONS 1. Nanocapsules, essentiellement constituées de composés lipidiques de taille moyenne inférieure à 150 nm, de préférence inférieure à 100 nm, de préférence encore inférieure à 50 nm, et chacune constituées d'un c#ur liquide ou semi-liquide à température ambiante, enrobé d'un film solide à température ambiante. 2. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 1, caractérisées en ce que leur indice de polydispersité est compris entre 5 et 15 %. 3. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 1 ou 2, caractérisées en ce que l'épaisseur du film solide est comprise entre 2 et 10 nm. 4. Nanocapsules lipidiques selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisées en ce que le c#ur des nanocapsules est essentiellement constitué d'un corps gras, tel qu'un triglycéride ou un ester d'acide gras, représentant 20 à 60 %, de préférence 25 à 50 % en poids des nanocapsules. 5. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 4, caractérisées en ce que le triglycéride constituant le c#ur des nanocapsules est choisi parmi les triglycérides en C8 à C12, par exemple des triglycérides des acides capriques et capryliques et leurs mélanges. 6. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 4, caractérisées en ce que l'ester d'acide gras constituant le c#ur des nanocapsules est choisi parmi les esters d'acide gras en C8 à C18, par exemple le palmitate d'éthyle, l'oléate d'éthyle, le myristate d'éthyle, le myristate d'isopropyle, le myristate d'octyldodécyle, et leurs mélanges. 7. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 6, caractérisées en ce que l'ester d'acide gras est en Ce à C12. 8. Nanocapsules lipidiques selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisées en ce que le film solide est essentiellement constitué d'un tensio-actif lipophile. 9. Nanocapsules selon la revendication 8, caractérisées en ce que le rapport corps gras / composé tensio-actif lipophile est choisi entre 1 et 15, de préférence entre 1,5 et 13, plus préférentiellement entre 3 et 8. 10. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 8 ou 9, caractérisées en ce que le tensio-actif lipophile est une lécithine dont la proportion en phosphatidylcholine est comprise entre 40 et 90 %. 11. Nanocapsules lipidiques selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisées en ce que le film solide contient en outre un tensio-actif hydrophile non ionique par exemple le Solutol# HS 15 représentant 2 à 10 % en poids des nanocapsules. 12. Nanocapsules lipidiques selon l'une des revendications 1 à 11, caractérisées en ce que qu'elles contiennent un principe pharmaceutiquement actif. 13. Procédé de préparation de nanocapsules qui consiste à a) - préparer une émulsion huile/eau contenant une phase grasse huileuse, un tensio-actif hydrophile non ionique, un tensio-actif lipophile solide à 20 C, - provoquer l'inversion de phase de ladite émulsion huile/eau par augmentation de la température jusqu'à une température T2 supérieure à la température d'inversion de phase (TIP) pour obtenir une émulsion eau/huile, suivie d'une diminution de la température jusqu'à une température T1, T1 - effectuer au moins un ou plusieurs cycles de température autour de la zone d'inversion de phase entre T1 et T2, jusqu'à observer une suspension translucide, b) effectuer la trempe de l'émulsion huile/eau à une température voisine de T1, de préférence supérieure à T1, pour obtenir des nanocapsules stables. 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que la phase grasse huileuse est un triglycéride en C8 à C12, par exemple des triglycérides des acides capriques et capryliques et leurs mélanges ou un ester d'acide gras en C8 à C18, par exemple le palmitate d'éthyle, l'oléate d'éthyle, le myristate d'éthyle, le myristate d'isopropyle, le myristate d'octyldodécyle, et leurs mélanges. 15. Procédé selon la revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que le tensio-actif hydrophile non ionique est le Solutol HS 15. 16. Procédé selon l'une des revendications 13 à 15, caractérisé en ce que le tensio-actif lipophile est une lécithine dont la proportion en phosphatidylcholine est comprise entre 40 et 90 %, par exemple le Labrafac# WL 1349. 17. Procédé selon l'une des revendications 13 à 16, caractérisé en ce que l'émulsion huile/eau contient : 1 à 3 % de tensio-actif lipophile, 5 à 15 % de tensio-actif hydrophile, 5 à 15 % de corps gras huileux, 64 à 89 % d'eau, les pourcentages étant exprimés en poids. 18. Procédé selon l'une des revendications 13 à 17, caractérisé en ce que l'émulsion huile/eau contient en outre de 1 à 4 % d'un sel, tel que le chlorure de sodium. 19. Procédé selon l'une des revendications 13 à 18, caractérisé en ce que le tensio-actif lipophile est solide à 37 C. 20. Utilisation des nanocapsules selon l'une des revendications 1 à 12, pour la fabrication d'un médicament administré par voie injectable, notamment intraveineuse, par voie orale ou par voie nasale.