Brevet FR2805158A1 — publié le 20010824

La présente invention concerne une composition plus particulièrement cosmétique, destinée au traitement des alopécies et des états apparentés, l'utilisation d'une composition pour la fabrication d'un médicament pour traiter ces désordres, un procédé de préparation desdites compositions, ainsi qu'un procédé de traitement cosmétique. La chute des cheveux peut être provoquée par des causes diverses telles que l'âge, une pathologie (pityriasis capitis), une agression extérieure (décoloration ou teinture). Elle peut être locale ou généralisée, et peut engendrer un simple désagrément d'ordre esthétique ou constituer une véritable pathologie. Un certain nombre de produits ont été proposés dans le passé pour stimuler la pousse des cheveux tant chez l'homme que chez la femme, mais aucun à ce jour n'a abouti à un résultat net dans une proportion importante de la population soumise au traitement. Il a été proposé des produits irritants (capsaïcine) ou vasodilateurs (pilocarpine) et aussi plus récemment des molécules antihypertensives (minoxidil et dérivés). Ces derniers produits se sont avérés provoquer une hypertrichose chez les patients traités pour une hypertension par voie systématique et stimuler la pousse des cheveux par voie topique chez les patients présentant une alopécie débutante ou plus ancienne. Toutefois, ces effets se sont montrés positifs sur une partie minoritaire des patients et relativement discrets dans tous les cas. Parallèlement à ces produits mis sur le marché de la cosmétique et de la pharmacie pour leurs effets réels ou supposés sur les cheveux, on peut citer io aussi le cas de molécules immunodépressives, la cyclosporine et le FK506 (macrolide fongique) qui ont un effet similaire. La cyclosporine est active par voie systémique et par voie locale, alors que le FK506 n'est actif que par voie locale. Ces produits induisent également de façon nette la pousse du poil chez la souris noire C571B16 qui est l'animal de référence pour les études de screening de molécules actives sur la pousse des cheveux. Cette induction de la pousse se manifeste par une transition de la phase télogène des poils à la phase anagène facile à observer et à mesurer grâce à la pigmentation des poils alors que la peau de la souris en phase télogène n'est pas ou peu pigmentée. Toutefois, les effets immunodépresseurs de la cyclosporine et du FK506 ne permettent pas leur utilisation en cosmétique ou même en médecine esthétique. La dépression du système immunitaire locale pouvant induire des désordres graves au niveau cutané comme des cancers ou des infections opportunistes, ces produits ne sont guère utilisables dans ces domaines. En conséquence, il serait très utile de disposer de produits capables de présenter un effet net sur la pousse des cheveux afin de traiter notamment les alopécies androgéniques qui représentent un des problèmes esthétiques les plus importants chez l'homme. C'est pourquoi la présente invention concerne une composition destinée à une application topique, notamment cosmétique, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre de principe actif, au moins une lactone sesquiterpénique ou un analogue des lactones sesquiterpéniques dans un milieu physiologiquement acceptable approprié pour une application topique, ladite composition étant plus particulièrement destinée à traiter l'alopécie, stimuler la croissance pilaire, stimuler la croissance capillaire et/ou traiter les états séborrhéïques ainsi que les états apparentés. Par " milieu physiologiquement acceptable approprié pour une application topique " on entend désigner un milieu compatible avec le principe actif et acceptable en cosmétique ou en pharmacie, notamment compatible avec la peau et le cuir chevelu. Les lactones sesquiterpéniques qui peuvent être utilisées dans les compositions selon la présente invention sont notamment décrites dans " Pharmacognosie, Phytochimie et Plantes Médicinales " de BRUNETON.J, Edition Lavoisier, PARIS 2ème édition 1993, pages 499-510. Par "analogues des lactones sesquiterpéniques" au sens de la présente invention, on entend les formes dérivées ou substituées de ces lactones possédant un groupe alpha-méthylène-gamma-lactone, ainsi que leurs dérivés bioéquivalents définis par les composés présentant une structure active possédant des propriétés vis-à-vis de la croissance pilaire (c'est- à-dire favorisant le passage du poil de la phase anagène à la phase télogène) similaires à celles mises en évidence dans le présent texte pour l'hélénaline, la déhydrohélénation, le parthénolide et la cnicine. Selon un mode de réalisation particulier de la présente invention, la lactone sesquiterpénique est choisie de préférence dans le groupe constitué par l'hélénaline, la dihydrohélénaline, le parthénolide, la cnicine et leurs dérivés, par " dérivés " on entend essentiellement les esters, notamment les esters d'acides gras de ces lactones. Les lactones sesquiterpéniques sont notamment présentes dans les extraits végétaux, en particulier chez les Asteracae et notamment dans les extraits d'Arnica montana, de Tanacetum parthenium et de Cnicus benedictus. C'est pourquoi l'invention concerne également une composition destinée à une application topique, notamment cosmétique, contenant comme principe actif un extrait de plante riche en lactone sesquiterpénique, notamment d'une plante de l'espèce végétale de la famille des Asteracae, par exemple Arnica montana, Tanacetum parthenium et Cnicus benedictus. De façon préférée, I'extrait de plante est un extrait de la fleur pour l'Arnica Montana et l'extrait des parties aériennes fleuries pour le Tanacetum parthenium et le Cnicus benedictus. Ces extraits obtenus à partir de différentes espèces végétales de la famille des Asteracae contiennent tous des composés appartenant à la famille chimique des lactones sesquiterpéniques. D'une façon tout à fait surprenante, ces substances d'origine végétale se sont avérées posséder un effet très marqué sur l'induction de la phase anagène du poil chez le lapin ou chez la souris C57/B16. Ces lactones sont connues pour posséder différentes propriétés pharmacologiques rattachées à l'effet anti-inflammatoire ou antitumoral, mais il n'a jamais été signalé que ces molécules pouvaient avoir une quelconque efficacité sur les cycles pileux ou la croissance pilaire. Sans vouloir être lié à aucune théorie, I'efficacité biologique en général de ces substances est à rattacher à la présence de certains groupes fonctionnels au sein de la molécule et en particulier le groupe alpha-méthylène-gamma-lactone. Bien que les principes actifs selon la présente invention puissent être obtenus s par synthèse chimique ou par hémisynthèse, on utilisera de préférence des extraits végétaux riches en lactones sesquiterpéniques. C'est pourquoi la présente invention concerne également des procédés de préparation d'extraits de plantes riches en lactones sesquiterpéniques, io notamment des extraits d'Asteracae obtenus par un procédé comprenant les étapes suivantes: a) extraction d'au moins une partie de la plante, notamment des fleurs et des parties aériennes de plantes de la famille des Asteracae, au moyen d'une solution hydro-organique contenant un solvant organique miscible à l'eau, suivie de l'évaporation dudit solvant et b) extraction de la phase aqueuse résultante au moyen d'un solvant organique non miscible à l'eau, puis c) récupération de l'extrait contenu dans ladite phase organique. Dans la mise en oeuvre du procédé tel que décrit précédemment la partie de la plante extraite sera de préférence la fleur ou les parties aériennes plus riches en lactones sesquiterpéniques. Le solvant organique miscible à l'eau utilisé pour les premières décoctions est choisi parmi les alcools contenant de 1 à 5 atomes de carbone, I'acétonitrile, le tétrahydrofurane et l'acétone. Ce solvant est de préférence un alcool de bas poids moléculaire tel que le méthanol, l'éthanol ou un alcool contenant de 3 à 5 atomes de carbone, de manière encore plus préférée on utilisera l'éthanol. La solution contenant de l'eau et un solvant organique miscible à l'eau contient de préférence de 40 à 60% d'eau en poids. L'étape a) peut comporter plusieurs extractions. L'extraction de la phase aqueuse obtenue est réalisée de préférence avec un solvant organique non miscible à l'eau choisi parmi les éthers tels que l'éther éthylique, d'autres solvants organiques peuvent néanmoins être utilisés, comme par exemple le chlorure de méthylène, le chloroforme et l'acétate d'éthyle. On obtient alors une phase organique contenant l'extrait riche en lactones sesquiterpéniques qui sera éventuellement purifiée, en particulier par chromatographie et par exemple par remise en solution et chromatographie de la solution. La chromatographie peut notamment être réalisée en utilisant comme support un gel de silice après fixation du principe actif dans un milieu de type alcane comme l'hexane puis élution à l'aide d'un solvant chloré tel que le chloroforme par exemple. 1i5 Il est possible de réaliser une étape additionnelle ou alternative de purification à l'aide d'une chromatographie préparative réalisée par exemple en utilisant comme support un gel lipophile (Sephadex LH20) dans un milieu de type solution hydro-organique comme le méthanol à 50%, puis élution avec cette même solution hydro-organique ou une autre solution hydro-organique comme I'éthanol à 70% ou organique pure comme de l'acétone. D'autres méthodes de purification peuvent, bien entendu, être utilisées pour purifier les extraits riches en lactones sesquiterpéniques. Les compositions topiques, notamment cosmétiques, selon la présente invention pourront bien entendu se présenter sous les formes qui sont habituellement connues pour ce type d'administration, c'est-à-dire notamment les lotions, les mousses, les gels, les dispersions, les sprays ou les crèmes par exemple, mais également pourront être administrées dans des shampooings, avec des excipients permettant notamment une pénétration cutanée afin d'améliorer les propriétés et l'accessibilité du principe actif. Ces compositions essentiellement destinées à une application topique contiennent, outre le principe actif, extrait végétal par exemple, un milieu physiologiquement acceptable, en général à base d'eau ou de solvant, par exemple des alcools, des éthers ou des glycols. Les compositions selon la présente invention contiennent de préférence de 0,001 à 10% en poids de lactone sesquiterpénique. Ces compositions peuvent également contenir: - des agents tensio-actifs, des conservateurs, - des agents stabilisants, - des émulsifiants et - des épaississants. Ces composants sont connus dans le domaine cosmétique, notamment pour la réalisation de compositions pour le traitement de la chute des cheveux. La présente invention concerne, en outre, un procédé de traitement cosmétique tel que l'on applique de façon topique, notamment sur le cuir chevelu, une composition cosmétique comprenant au moins une lactone sesquiterpénique selon l'invention et de préférence contenant un extrait riche en lactones sesquiterpéniques obtenu à partir d'une plante de la famille des Asteracae afin d'améliorer l'esthétique de la chevelure et/ou traiter l'alopécie. La présente invention concerne également des compositions contenant des lactones sesquiterpéniques ainsi que les extraits décrits précédemment dans une application de type pharmaceutique, il s'agira notamment des cas o l'alopécie ou les états séborrhéiques présentent un caractère pathologique. Ainsi, la présente invention concerne également l'utilisation d'une composition contenant au moins une lactone sesquiterpénique ou un analogue des lactones sesquiterpéniques pour la fabrication d'un médicament destiné à traiter l'alopécie, les états séborrhéiques, stimuler la croissance pilaire et la croissance capillaire ou les états apparentés lorsque ceux-ci présentent un caractère pathologique. Les compositions contenant au moins une lactone sesquiterpénique mentionnées précédemment pourront bien entendu être obtenues comme cela 1o a été décrit dans le cas des applications cosmétiques. Il s'agira, comme cela a été dit précédemment, de préférence de lactones sesquiterpéniques choisies dans le groupe constitué par l'hélénaline, la dihydrohélénaline, le parthénolide, la cnicine et leurs dérivés, parmi ces dérivés il faut citer plus particulièrement les esters et notamment les esters d'acides gras de ces lactones. Les médicaments contenant ces principes actifs pourront se présenter sous les formes appropriées pour leur administration, c'est-à-dire notamment des lotions, des crèmes, des sprays ou éventuellement si cela est nécessaire pourront être présentés sous des formes de type forme injectable, notamment intradermique. Enfin, la présente invention concarne les extraits de plantes de la famille des Asteracae riches en lactones sesquiterpéniques tels qu'ils peuvent être obtenus par le procédé décrit précédemment. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention résulteront de la lecture des exemples ci-après. EXEMPLE 1. On réalise une extraction d'un kilo de fleurs sèches d'Arnica montana par 4 décoctions à reflux pendant 30 minutes dans 5 litres d'éthanol à 50% d'eau. Les solutions extractives sont réunies et l'alcool est évaporé. La phase aqueuse est concentrée à un litre et extraite à contre-courant par de l'éther éthylique jusqu'à ce que l'éther ne contienne plus de résidu significatif à l'évaporation. La phase éthérée est séchée sur sulfate de sodium anhydre et évaporée. On obtient 9 a de résidu (produit 1). EXEMPLE 2. Dix grammes de produit 1 sont mis en solution-suspension dans 10 ml d'hexane et on ajoute dans un ballon de 1 g de gel de silice 60 pour chromatographie sur colonne. On évapore l'hexane à sec tout en agitant constamment afin d'assurer une parfaite homogénéisation de l'ensemble. On réalise alors une colonne de chromatographie avec du gel de silice dans de l'hexane de 4 cm de diamètre et 20 cm de hauteur. On place à la surface du gel le mélange produit 1-gel de chloroforme. On recueille la fraction qui est éluée par le chloroforme. On évapore le chloroforme. On obtient un résidu de 0, 19 g (produit 2). EXEMPLE 3. On réalise une chromatographie préparative du produit 2 sur couche de silice avec le solvant suivant: toluène - acétate d'éthyle 70-30 (v/v). On prélève la partie de support compris entre Rf 0,55 et le Rf 0,75 o l'on peut observer des tâches jaune-verdâtre. La silice ainsi obtenue est extraite 4 fois à reflux par 50 ml de méthanol pur. Le méthanol est évaporé à sec. On obtient 40 mg de résidu (produit 3). ANALYSES DES PRODUITS. Les trois produits sont analysés en chromatographie en phase gazeuse couplée à un spectromètre de masse. - Colonne: HP5 MS 5% phényl méthyl siloxane -Gaz vecteur: hélium, débit constant de 1 ml/min - Programme de température 1500C pendant 5min, puis augmentation de 5 C/min jusqu'à 250 C. - Détection: Courant ionique total entre 50 et 500 de masse ionique. Les spectres relatifs aux différents composants montrent la présence majoritaire de lactones sesquiterpéniques: I'hélénaline, dihydrohélénaline et leurs dérivés. Selon les études décrites dans la bibliographie, il s'agit probablement d'esters d'acides gras et de ces lactones. Par cette méthode de chromatographie, il a pu être montré que les produits 1, 2 et 3 contiennent respectivement 17,5%, 42,6% et 43% en masse d'hélénaline + dihydrohélénaline par rapport à la masse de la composition totale. La purification apportée entre les produits 2 et 3 consiste surtout en l'élimination des pigments chlorophylliens (décoloration). ETUDE PHARMACOLOGIQUE. 1. Test sur le lapin. On utilise des lapins de sexe mâle, de 12 semaines d'âge au moins, et d'âge identique pour que le poil de ces derniers soit en phase télogène, ce que l'on peut vérifier par la tonte des animaux. il On place les produits à tester en solution dans de l'éthanol pur à raison de 25 % de concentration (p/v). Puis, on réalise une dilution de cette solution 1/10 par de l'huile d'amande douce. On obtient alors une concentration en produit actif de 2,5%. 0,2 ml de ces solutions sont déposées sur une gaze appliquée sur la peau et on dépose également un témoin obtenu en préparant le même solvant que celui qui a servi à dissoudre les principes actifs. On laisse les produits et le témoin en contact avec le peau pendant 15 minutes, puis on enlève la gaze. Le traitement est effectué pendant 2 jours à raison de trois applications par jour à quatre heures d'intervalle. On évalue ensuite la différence entre le temps moyen mis par le poil pour pousser sur les parties traitées et les parties témoins. Pour les trois produits utilisés, on constate une différence de plus de 2 mois. Toutefois, la pousse est plus rapide pour les produits 2 et 3 que le produit 1. Comme on constate un net enrichissement en lactones sesquiterpéniques du produit 1 aux produits 2 et 3, on peut en conclure que ces substances sont responsables de l'activité. Une solution contenant 1% de parthénolide (Aldrich ref 38,428-3) commercial pur et une solution contenant 1% de cnicine commerciale pure (Extrasynthèse ref 8725), sont préparées dans le même excipient que l'extrait d'Arnica montana et soumis au test sur le lapin. On constate une pousse du poil sensiblement équivalente entre l'extrait d'Arnica et le parthénolide et une pousse environ deux fois inférieure pour la cnicine. 2. Tests sur la souris C57/BI6. On utilise des souris femelles de 5 semaines d'âge toutes identiques. Les souris sont tondues sur le dos de façon à rendre le poil inapparent. On dépose 0,2 ml d'un de chaque produit dans le même solvant que pour le test sur les lapins et à la même concentration, sur le dos des souris. On réalise ainsi un test par comparaison entre différentes souris contrairement au test sur le lapin o le même animal représente son propre témoin. On dépose le produit sur le dos sans utiliser de gaze une seule fois par jour pendant 5 jours d'affilée. On constate que chez les souris traitées, le poil pousse très rapidement. Il devient visible dès le deuxième jour de traitement pour atteindre environ 1 mm dès le troisième jour, alors que le poil ne commence à pousser chez les souris témoins qu'à partir de la troisième semaine après le début du traitement. De même que pour le lapin, on constate que l'effet est le plus net pour les produits 2 et 3 que le produit 1. Une solution contenant 1% de parthénolide (Aldrich ref 38,428-3) commercial pur et une solution contenant 1% de cnicine commerciale pure (Extrasynthèse ref 8725), sont préparées dans le même excipient que l'extrait d'Arnica montana et soumis au test sur le lapin. On constate une pousse du poil sensiblement équivalente entre l'extrait d'arnica à 2,5% et le parthénolide à 1% et une pousse environ deux fois inférieure pour la cnicine à 1%. Ces résultats montrent que les compositions étudiées sont efficaces pour le traitement des pathologies liées aux désordres pilaires. EXEMPLE 4. On réalise une extraction d'un kilo de parties aériennes fleuries de Tanacetum parthenium par quatre décoctions à reflux pendant 30 minutes dans litres d'éthanol à 50% d'eau. Les solutions extractives sont réunies et l'alcool est évaporé. La phase aqueuse est concentrée à un litre et extraite à contre-courant par de l'éther éthylique jusqu'à ce que l'éther ne contienne plus de résidu significatif à l'évaporation. La phase éthérée est séchée sur sulfate de sodium anhydre et évaporée. On obtient 26 g de résidu. La phase éthérée est reprise par un litre de méthanol à 50% d'eau et passée sur une colonne de 5 cm de diamètre contenant 100 g de Sephadex LH20 en suspension dans du méthanol à 50%. On élue par trois litres de ce même solvant. On évapore le solvant à sec sous pression réduite. On obtient 10,5 g de résidu. Ce résidu est soumis à l'analyse en chromatographie en phase gazeuse couplée à un spectromètre de masse: - Colonne: HP5 MS 5% phényl méthyl siloxane - Gaz vecteur: hélium, débit constant de 1ml/min - Programme de température: 150 C pendant 5 min, puis augmentation de C/min jusqu'à 250 C - Détection: courant ionique total entre 50 et 500 de masse ionique. Les spectres relatifs aux différents composants montrent la présence majoritaire de lactones sesquiterpéniques: parthénolide, secotanapartholide A, canine, tanaparthine-alpha-peroxyde et leurs dérivés. Par ailleurs, une quantification réalisée avec un témoin de parthénolide d'origine commerciale (Aldrich ref 38,428-3) indique que l'extrait final contient 32% de parthénolide. EXEMPLE 5. On réalise une extraction d'un kilo de parties aériennes fleuries de Cnicus benedictus par quatre décoctions à reflux pendant 30 minutes dans 5 litres de méthanol à 60% d'eau. Les solutions extractives sont réunies et le méthanol est évaporé. La phase aqueuse est concentrée à 0,5 litre et extraite à contre-courant par de l'éther éthylique jusqu'à ce que l'éther ne contienne plus de résidu significatif à l'évaporation. La phase éthérée est séchée sur sulfate de sodium anhydre et évaporée. On obtient 10,7 g de résidu. La phase éthérée est reprise par un litre de méthanol à 50% d'eau et passée sur une colonne de 5 cm de diamètre contenant 100g de Sephadex LH20 en suspension dans le méthanol à 50%. On élue par trois litres de ce même solvant. On évapore le solvant à sec sous pression réduite. On obtient 620 mg de résidu. Ce résidu est soumis à l'analyse en chromatographie en phase gazeuse couplée à un spectromètre de masse: - Colonne: HP5 MS 5% phényl méthyl siloxane - Gaz vecteur: hélium, débit constant de 1 ml/min - Programme de température: 150 C pendant 5 min, puis augmentation de 5 C/min jusqu'à 250 0C. - Détection: courant ionique total entre 50 et 500 de masse ionique. Les spectres relatifs aux différents composants montrent la présence majoritaire de lactones sesquiterpéniques:notamment la cnicine et ses dérivés. Par ailleurs, une quantification réalisée avec un témoin de cnicine d'origine commerciale (Extrasynthèse ref 8725) indique que l'extrait final contient 41% de cnicine. REVENDICATIONS 1. Composition destinée à une application topique, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif au moins une lactone sesquiterpénique ou un analogue des lactones sesquiterpéniques dans un milieu physiologiquement acceptable et approprié pour une application topique. 2. Composition selon la revendication I telle que la lactone sesquiterpénique est choisie dans le groupe constitué par l'hélénaline, la dihydrohélénaline, le parthénolide, la cnicine et leurs dérivés. 3. Composition selon l'une des revendications 1 ou 2 telle qu'elle est obtenue à partir d'un extrait d'une plante de l'espèce végétale de la famille des Asteracae, de préférence un extrait d'Arnica montana, de Tanacetum parthenium ou de Cnicus benedictus. 4. Composition selon l'une des revendications précédentes telle que l'extrait de plante est un extrait de la fleur ou des parties aériennes de la plante. 5. Composition selon l'une des revendications précédentes telle que l'extrait est obtenu par le procédé comprenant les étapes suivantes: a) extraction d'au moins une partie de la plante, notamment les fleurs et des parties aériennes de plantes de la famille des Asteracae, au moyen d'une solution hydro-organique contenant un solvant organique miscible à l'eau, suivie de l'évaporation dudit solvant et, b) extraction de la phase aqueuse résultante au moyen d'un solvant organique, non miscible à l'eau, puis c) récupération de l'extrait contenu dans ladite phase organique. 6. Composition selon la revendication 5 telle que l'extrait obtenu à I'étape c) est purifié par chromatographie pour obtenir une phase riche en lactones sesquiterpéniques. 7. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'il s'agit d'une composition cosmétique destinée à traiter l'alopécie, stimuler la croissance pilaire, stimuler la croissance capillaire et/ou traiter les états séborrhéiques. 8. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications 1 à 6 pour la fabrication d'un médicament destiné à traiter l'alopécie, stimuler la croissance pilaire, stimuler la croissance capillaire et/ou traiter les états séborrhéiques. 9. Procédé de préparation d'un extrait de plante de la famille des Asteracae comprenant au moins une lactone sesquiterpénique, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: a) extraction d'au moins une partie de la plante, notamment les fleurs et des parties aériennes de plantes de la famille des Asteracae, au moyen d'une solution hydro-organique contenant un solvant organique miscible à l'eau, suivie de l'évaporation dudit solvant et, b) extraction de la phase aqueuse résultante au moyen d'un solvant organique, non miscible à l'eau, puis c) récupération de l'extrait contenu dans ladite phase organique. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'extrait obtenu à l'étape c) est purifié par chromatographie pour obtenir une phase riche en lactones sesquiterpéniques. 11. Procédé de traitement cosmétique, caractérisé en ce que l'on applique de façon topique une composition selon l'une des revendications 1 à 8.