Brevet FR2789087A1 — publié le 20000804

La présente invention porte sur un milieu de culture qui est approprié pour cultiver Lactobacillus clearans, qui a été isolé et sélectionné par les inventeurs, ainsi que sur un procédé pour conserver Lactobacillus clearans. Le cycle du monde naturel est celui de la création et de la décomposition, dans lequel aucune substance biologique n'est épargnée. Egalement, des marécages débordant de boue provenant de la décomposition des protéines libérées dans le monde naturel, sont finalement purifiés, ce qui permet à la terre de rester belle à sa façon depuis des temps immémoriaux. Les mécanismes par lesquels ceci se produit sont restés longtemps inconnus, mais ils sont maintenant connus pour mettre en jeu principalement le comportement de microorganismes, ce qui a conduit au développement contemporain de divers systèmes de purification, comprenant des procédés à boue activée et leur application dans des installations de traitement pour les eaux résiduaires de la vie et les eaux résiduaires d'installations. Etant donné la complexité concernant la question de savoir quelle sorte de propriétés caractérise les bactéries mises en jeu dans une telle purification, il n'est pas étonnant qu'une nouvelle analyse et une nouvelle corroboration spécialisées soient rendues nécessaires. Une gamme large et variée de substances fait l'objet d'une telle purification, et il serait en fin de compte impossible de tester la totalité d'entre elles. Notre attention a été limitée en conséquence sur des substances odoriférantes (dont la plupart sont des produits de putréfaction et sont nocifs), qui sont facilement et rapidement déterminables par l'odeur, et sont classées d'une façon large en composés odoriférants du soufre, composés odoriférants de l'azote, et composés odoriférants du carbone. Après une recherche très approfondie, des études sur des composés odoriférants de faible masse moléculaire, à savoir des composés odoriférants du soufre, tels que le sulfure de sodium et le sulfure de méthyle, des composés odoriférants de l'azote, tels que l'ammoniaque, l'indole et le scatole, et des composés odoriférants du carbone, tels que l'acide acétique et l'acide butyrique, ont montré de façon décisive que les objectifs étaient suffisamment atteints, ce qui a permis un progrès spectaculaire dans la recherche sur la purification et la désodorisation. Autrement dit, les bactéries d'épuration capturent ces substances odoriférantes en tant que nourriture, non comme poison, et les utilisent comme composants cellulaires pour elles-mêmes ou comme source d'énergie, des bactéries à action particulièrement puissante ayant une capacité désodorisante. Un grand nombre de bactéries ayant de telles caractéristiques sont trouvées dans tout le monde naturel, et travaillent sans relâche au travail de purification auquel elles sont les plus appropriées. Nos corps mêmes sont un microcosme, le canal entérique en particulier étant un organe directement lié au monde externe en tant que partie de l'environnement naturel lui-même. Il ne serait donc pas étonnant que des "experts" en purification existent dans les intestins. Sur la base des découvertes ci-dessus, les inventeurs ont étudié des bactéries d'épuration entériques parmi les bactéries non pathogènes capables de vivre dans les intestins. Ainsi, les inventeurs ont choisi le genre Lactobacillus, qui se présente largement dans le monde naturel, de l'intérieur du corps vivant comme dans le canal entérique, la bouche et le vagin, aux herbes, feuilles des arbres, fruits de l'agriculture, produits alimentaires fermentés, sol et eaux d'égout. Comme résultat, ils ont constaté l'existence d'un groupe préalablement inconnu appartenant au genre Lactobacillus capable de manifester une capacité de purification puissante dans les intestins. Ces bactéries comprennent une gamme extrêmement large d'espèces couramment classées comme appartenant au genre Lactobacillus, telles que L. casei, L. salivarius, L. brevis et L. plantarum, et sont désignées collectivement comme étant Lactobacillus clearans. Les Lactobacillus clearans, qui sont de nouveaux lactobacilles capables de diminuer le sulfure de sodium et l'ammoniac (Demande de Brevet Japonais Examinée (Kokoku) 4- 632), sont des bactéries utiles qui manifestent une capacité de purification puissante dans les intestins grâce à leur capacité à diminuer le sulfure de sodium, le sulfure d'ammonium, le méthyl mercaptan, l'éthyl mercaptan, le sulfure de diméthyle, le sulfure de diéthyle, l'acétaldéhyde, le scatole, l'indole, la méthylamine, l'éthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine et similaires. Les inventeurs ont ainsi découvert ces espèces du genre Lactobacillus capables de manifester une capacité de purification puissante dans les intestins, ont découvert comme résultat d'une recherche bactériologique que ces espèces avaient des fonctions entièrement nouvelles, et ont obtenu un brevet pour ces espèces (1 714 731). Il est apparu à l'évidence que Lactobacillus clearans ne diminue pas simplement les substances nocives odoriférantes dans les intestins, mais encore sont un groupe formant la flore intestinale, qui synthétise des vitamines et des acides aminés et contrôle la croissance des bactéries extrinsèques, ayant un énorme effet sur des groupes tels que des bactéries qui peuvent être considérées comme des bactéries bénéfiques ayant une action qui est bonne pour le corps vivant, telle qu'une action immunoactivante, typiquement des groupes appartenant au genre Lactobacillus et au genre Bifidobacterium, et des bactéries qui à 1' inverse, peuvent être considérées nocives en raison de leur nature nocive et pathogène, typiquement des groupes appartenant à Veillonella et Clostridium, tels que Welchii, et contrôle en outre la croissance des bactéries pathogènes, réduisent leur toxicité etc. Le Tableau 1 montre les différences fonctionnelles entre Lactobacillus clearans et les espèces connues de façon classique du genre Lactobacillus. Tableau 1 Comparaison de fonctions entre Lactobacillus clearans et les espèces classiques du genre Lactobacillus Paramètre Lactobacillus clearans Espèce classique de Lactobacillus Vs. substances entérales Diminue la plupart des Utilise et dégrade les p u t r é f i a n t e s composés n o c 1 f composés du carbone odoriférantes, nocives -odoriférants - composés odoriférants, mais n'a pas composés du soufre du soufre, composés de d'action sur des composés de l'azote et l'azote et composés du composés nocifs composés du carbone carbone - odoriférants tels que les par utilisation, dégradation composés du soufre et les et dénaturation de ceux-ci composés de l'azote Désodorisation fécale + ± à ~ Action sur les bactéries Provoque une croissance Croissance lorsque les bénéfiques couramment très importante individus continuent à présentes dans les ingérer intestins # Bifidobacterium 2 à 10 fois 1 à 3 fois . Lactobacillus 10 à 100 fois 10 fois Action sur les bactéries Fortement diminuée par A une action de nocives couramment une croissance très diminution, mais pas présentes dans les importante de bactéries autant que celle à laquelle intestins bénéfiques on peut s'attendre # Veillonella 1/20 à 1/100 1 à 1/5 # Clostridium 1/20 à 1/100 1 à 1/5 Action anti-flatulente + ± à + Exigence nutritionnelle Faible à modérée nutrition élevée Capacité de croissance intestinale ± à + Aptitude stationnaire intestinale- à + Action sur les pathogènes Rendus non pathogènes Pas d'effet pendant la symbiose (conversion S-R) # Salmonella Pathogénicité inactivée par Eradiqués dans la lutte la 4-le' co-sous-culture avec les pathogènes sur plusieurs générations de sousculture avec tous les pathogènes # Schigella Pathogénicité inactivée par la 108eme co-sous-culture # E. Coli (0-157) Pathogénicité inactivée par la 18 co-sous-cufture En considérant pourquoi Lactobacillus clearans était capable d'être obtenu, on peut déduire ce qui suit. La terre à l'état fondu née il y a 4 600 000 000 d'années a refroidi, produisant de la vapeur d'eau, qui a formé les premières mers. Cependant il n'y avait pas encore d'oxygène, et la mer était composée d'eau chaude acide contenant du soufre, du fer et similaires produits par le magma. Des substances organiques telles que les acides aminés et les acides nucléiques ont été synthétisées à raison d'une petite quantité à la fois par des réactions chimiques dans la mer, lesquelles se sont agrégées et condensées sous la forme de gouttes huileuses. En fin de compte, les formes de vie sont nées de ces gouttes huileuses et ont poursuivi leur croissance, consommant des matières organiques s'accumulant dans la mer jusqu'à la limite de l'extinction. Cependant, parmi ces formes de vie, sont apparues des bactéries anaérobies capables d'utiliser des matières minérales telles que le soufre dissous dans la mer pour acquérir de l'énergie et de synthétiser des matières organiques à partir du dioxyde de carbone. Ces bactéries anaérobies ont évolué sur de longues périodes de temps, se différenciant entre les premières bactéries photosynthétiques qui utilisaient de l'énergie pour libérer de l'oxygène, et les prédécesseurs anciens du Lactobacillus genus produits aujourd'hui. Celles-ci ont joué un rôle actif dans la purification de substances nocives odoriférantes à partir du magma, grâce à quoi la plupart des substances nocives ont été précipitées sur le fond de l'océan, alors que l'oxygène augmentait également, permettant à un environnement hospitalier pour la vie de continuer à se développer progressivement et à former les blocs de construction pour le phénomène explosif subséquent de la vie. A un certain moment pendant ce processus, la plupart des Lactobacillus ont succombé dans la lutte pour la croissance avec les autres bactéries qui s'étaient acclimatées et s'étaient adaptées à l'environnement rude du monde naturel immense, s'échappant pour résider dans des zones riches en nutriments remplies par l'existence de glucides, d'acides aminés, de vitamines et similaires, et dans des zones avec un environnement plus constant, plus doux, après quoi leur puissance de purification propre, autrement dit la puissance de purification à l'encontre des composés du soufre odoriférants et nocifs et la puissance de purification à l'encontre des composés de l'azote odoriférants et nocifs, s'est progressivement perdue. Cependant, le genre Lactobacillus a conservé le pouvoir d'utiliser des composés carbonés odoriférants jusqu'à ce jour. Bien que divers procédés bien connus tels que la lyophilisation, la conservation par ultra-froid, ou les procédés par voie liquide, humide, semi-sèche et sèche ou similaires peuvent être utilisés comme procédés pour conserver Lactobacillus clearans, il est très important d'empêcher la perte de l'aptitude caractéristique de Lactobacillus clearans à diminuer les substances odoriférantes et nocives pendant le stockage, et la question suivante la plus importante est d'assurer une viabilité plus longue tout en conservant cette aptitude. La recherche par les inventeurs a révélé de façon nette la nécessité d'une considération particulière à cet effet. Etant donné la présence de substances amenant le titre en bactéries à décliner rapidement pendant la sous-culture bactérienne, non seulement le titre diminuera progressivement, mais sa survie même sera menacée, quel que soit le procédé de conservation utilisé. La lyophilisation est présentement la méthode prédominante de conservation des bactéries, et Lactobacillus n'est pas l'exception. Bien que la lyophilisation ait été utilisée pour tous les produits qui ont besoin d'être stockés pendant de longues périodes de temps tels que les anti-flatulents ou des souches de yaourt, l'aptitude à la conservation de Lactobacillus n'est fondamentalement pas considérée comme étant très bonne. En fait, des tentatives pour recueillir et faire revivre des cellules lyophilisées de Lactobacillus disponibles dans le commerce dans le pays et à l'étranger n'ont pas permis d'obtenir le nombre de cellules viables indiqué et ce pratiquement pour tous les produits, indépendamment de la date d'expiration, parmi lesquels il y a certains produits dans lesquels on n'a pas trouvé de cellules viables. Ceci était le cas, malgré la compétence et les résultats de la recherche des fabricants. Des études menées par les inventeurs sur Lactobacillus clearans ont révélé que non seulement on parvenait à un déclin des cellules viables à un stade antérieur en présence de conservateurs couramment utilisés, mais encore on parvenait à un déclin dans le titre. Les Lactobacillus clearans peuvent être supposés être les descendants, ou ce que l'on appelle des souches mutantes ataviques, qui ont survécu jusqu'à ce jour avec l'héritage continu de l'action de purification, que leurs ancêtres ont maintenus à tout prix, à l'encontre des composés odoriférants du soufre, des composés odoriférants de l'azote et des composés odoriférants du carbone. Il est impossible de prédire le destin du délicat Lactobacillus clearans, qui est maintenant dans un état de flux entre Lactobacillus ancien et contemporain, sous le contrôle humain. Différentes entreprises ont des milieux de culture pour cultiver de telles bactéries et des conservateurs pour les conserver. En fait, dans des essais sur ces bactéries, le titre a diminué à la fois pendant la sousculture et le stockage. Comme tel, les questions très importantes sont quelles conditions de sousculture permettraient au titre élevé de rester non affecté, et quelles conditions de stockage permettraient au titre élevé de rester non affecté. Comme résultat d'une recherche approfondie pour trouver une solution à ces problèmes, les inventeurs ont développé un milieu de culture capable d'entretenir le titre de Lactobacillus clearans en diminuant le sulfure de sodium et l'ammoniaque, ainsi qu'un procédé de conservation. Autrement dit, la présente invention concerne un milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans, comprenant l'addition d'au moins l'un parmi le sulfure de sodium et l'ammoniaque aqueuse, de telle sorte que, pendant la culture du Lactobacillus clearans, au moins l'un parmi le sulfure de sodium et l'ammoniaque soit diminué par Lactobacillus clearans dans les 24 heures de culture, et concerne un milieu de culture comprenant de préférence l'addition du sulfure de sodium dans une concentration de 500 ppm, le sulfure de sodium étant diminué de 10% ou davantage dans les 24 heures de culture de Lactobacillus clearans, et, de préférence, comprenant l'addition d'ammoniaque aqueuse dans une concentration de 500 ppm, l'ammoniaque étant diminuée de 10% ou davantage dans les 24 heures de culture de Lactobacillus clearans. Le milieu de culture comprend de préférence l'addition d'au moins l'un parmi un composé odoriférant du soufre, un composé odoriférant de l'azote, et un composé odoriférant du carbone, le composé odoriférant du soufre étant, de préférence, au moins l'un parmi le sulfure de sodium, le sulfure d'hydrogène, le sulfure d' ammonium, le méthyl mercaptan, l'éthyl mercaptan, le diméthyl mercaptan, le sulfure de diméthyle, le disulfure de diméthyle, le sulfure de diéthyle, le sulfure de dibutyle et leurs dérivés, le composé odoriférant de l'azote étant, de préférence, au moins l'un parmi l'ammoniaque, le scatole, l'indole, l'acétanilide, la méthylamine, la diméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine et leurs dérivés, et le composé odoriférant du carbone étant, de préférence, au moins l'un parmi l'acide formique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide butyrique, le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde, le crotonaldéhyde, le phénol, l'alcool butylique, l'alcool amylique et leurs dérivés. Le milieu de culture comprend également de préférence l'addition d'au moins l'un parmi un acide aminé contenant du soufre, l'acide glutamique, la lysine et l'acide aspartique en tant qu'acide aminé, de préférence l'addition d'au moins l'un parmi la Vitamine C, la Vitamine E, la Vitamine B12, le pantothénate de calcium, l'acide folique et le nicotinamide en tant que vitamine, de préférence l'addition d'au moins l'un parmi le manganèse, le zinc, le magnésium et le molybdène en tant que composant minéral, et, de préférence, l'addition d'au moins l'un parmi chlorella CGF, le lait de soja et la poudre de bile. La présente invention concerne également un procédé de conservation de Lactobacillus clearans, comprenant la mise en oeuvre d'au moins l'un parmi les acides aminés contenant du soufre, l'ovalbumine, la poudre de bile, le tréhalose, le raffinose, les cellules de levure mortes, chlorella, le son de riz, le son, le lait de soja et le jus de carotte en tant que conservateur autour du Lactobacillus clearans pendant la conservation de ce dernier, et, de préférence en plus du conservateur mentionné ci-dessus, l'addition d'au moins l'un parmi l'acide glutamique, la lysine, l'acide aspartique, la Vitamine C, la Vitamine E, la Vitamine B12, le pantothénate de calcium, l'acide folique, le nicotinamide, le manganèse, le zinc, le magnésium, le molybdène, le sulfure de sodium, le sulfure d'hydrogène, le sulfure d'ammonium, le méthyl mercaptan, l'éthyl mercaptan, le diméthyl mercaptan, le sulfure de diméthyle, le disulfure de diméthyle, le sulfure de diéthyle, le sulfure de dibutyle, l'ammoniaque, le scatole, l'indole, l'acétanilide, la méthylamine, la diméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine, l'acide formique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide butyrique, le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde, le crotonaldéhyde, le phénol, l'alcool butylique, l'alcool amylique et leurs dérivés autour du Lactobacillus clearans, et comprend en outre de préférence la mise en oeuvre d'au moins l'un parmi le lait écrémé en poudre d'origine animale, l'ovalbumine, le lactose, la poudre d'extrait de foie et le sérum, ainsi qu'au moins l'un parmi le petit-lait de soja d'origine végétale, le tréhalose, le raffinose, l'amidon, chlorella, chlorella CGF, le son de riz, le son, le jus de luzerne, le jus de trèfle, l'extrait de germe de blé, le lait de soja, lejus de tomate, lejus de carotte, le jus de raisin, la poudre d'aloès, la poudre de thé vert et les cellules de levure mortes comme conservateur, et en plus des conservateurs mentionnés ci-dessus, l'addition d'au moins l'un parmi l'acide glutamique, la lysine, l'acide aspartique, la Vitamine C, la Vitamine E, la Vitamine B12, le pantothénate de calcium, l'acide folique, le nicotinamide, le manganèse, le zinc, le magnésium, le molybdène, le sulfure de sodium, le sulfure d'hydrogène, le sulfure d'ammonium, le méthyl mercaptan, l'éthyl mercaptan, le diméthyl mercaptan, le sulfure de diméthyle, le disulfure de diméthyle, le sulfure de diéthyle, le sulfure de dibutyle, l'ammoniaque, le scatole, l'acétanilide, la méthylamine, la diméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine, l'acide formique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide butyrique, le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde, le crotonaldéhyde, le phénol, l'alcool butylique, l'alcool amylique et leurs dérivés autour du Lactobacillus clearans. En outre, le procédé de conservation de Lactobacillus clearans peut comprendre l'un parmi la lyophilisation, la conservation par ultra-froid et les procédés par voie liquide, par voie humide, par voie semi-sèche ou par voie sèche. BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS La Figure 1 est une illustration de culture avec le milieu de culture selon l'invention pour Lactobacillus clearans et l'essai de titrage dans celui-ci. DESCRIPTION DES MODES DE RÉALISATION PRÉFÉRÉS Les Lactobacillus clearans dont il est question dans la présente invention sont de nouvelles souches du genre Lactobacillus, qui ont les caractéristiques biochimiques suivantes (1), (2), (3) et (4). A savoir, ce sont des souches de Lactobacillus : (1) qui peuvent diminuer à la fois Na2S.9H2O et NHOH lorsque 0,5 g de Na2S.9H20 et/ou 0,5 m# de NH40H est ou sont ajoutés à 5 g d'extrait de viande, 5 g de peptone, 1 g de glucose, 1 g de CaC03 et 1 litre d'eau (pH neutre) ; (2) qui ne présentent pas d'action favorisant la croissance même lorsque 0,5 g de Na2S.9H2O et/ou 0,5 m# de NH40H est ou sont ajoutés durant la phase de croissance logarithmique durant la culture des bactéries dans un milieu comprenant 1 g d'acide casamino et des vitamines (A : 900 UI ; B1: 1 mg ; B2: 1 mg ; B6 : 1 mg ; B12 . 5 y ; nicotinamide : 16 mg ; de calcium : 8 mg ; C : 64 mg ; D2 : 120 UI) dans du milieu de Stephanson-Wetham (désigné par l'abréviation S-W ; 1 g de KH2PO4, 0,7 g de MgSO4.7H2O ; 1 g de NaCl ; g de (NH4)2HPO4 ; 0, 03 g de FeSO4.H2O ; 5 g de glucose) ; (3) les souches isolées naturelles présentent une résistance plus forte que les lactobacilles connus de façon classique et une résistance plus faible que Lactobacillus clearans à l'encontre de Na2S.9H20 ; et (4) qui sont Grampositives, des bacilles, non motiles, négatives à la catalase, qui ne provoquent pas de réduction de nitrates, pas de décomposition de la gélatine, pas de formation d'indole ni de sulfure d'hydrogène, et ont une aptitude élevée à former de l'acide lactique à partir du glucose et du lactose, ainsi qu'une croissance accélérée avec l'addition d'acide acétique (Demande de Brevet Japonais Examinée (Kokoku) 4-632). Les divers milieux donnés dans les Tableaux 2,3, 4,5 et 6, tels que les différents types de milieux classés en milieu nutritif faible, milieu nutritif modéré et milieu nutritif élevé, peuvent être utilisés pour la sous-culture de Lactobacillus clearans. Tableau 2 Composition de milieu de sous-culture (1) (composition pour 1 litre) Milieu de Stephanson-Wetham Tableau 3 Composition de milieu de sous-culture (2) (composition pour 1 litre) Milieu MSR Tableau 4 Composition de milieu de sous-culture (3) (composition pour 1 litre) Milieu nutritif faible Milieu Composition a-1 1 g d'acide casamino ajouté à du milieu de Stephanson-Wetham a-2 1 g d'extrait de levure ajouté à du milieu de Stephanson-Wetham a-3 1 g d'acide casamino 0,1 g de vitamine') ajoutés à du milieu de Stephanson-Wetham 1) comprend Vitamine A : 900UI ; Vitamine B1 :1 mg ; Vitamine B2: 1 mg, Vitamine B12 : 5 ug ; nicotinamide : 16 mg ; pantothénate de calcium : 8 mg ; Vitamine C : 16 mg ; Vitamine D2 : 120 UI dans 1 g. Tableau 5 Composition de milieu de sous-culture (4) (composition pour 1 litre) Milieu nutritif modéré Milieu Composition b-1 1 g d'acide casamino 0,1 g de vitamine 1) 5 g de lait écrémé ajoutés à du milieu de Stephanson-Wetham b-2 5 g d'extrait de viande 5 g de peptone 5 g de Glucose b-3 1 g de milieu MSR dilué à 1/2 1) comprend Vitamine A : 900 UI ; VitamineB1 : 1 mg ; VitamineB2 : 1 mg, Vitamine B12 : 5 ug ; nicotinamide : 16 mg ; de calcium : 8 mg ; VitamineC : 16 mg ; VitamineD2 120 UI dans 1 g. Tableau 6 Composition de milieu de sous-culture (5) (composition pour 1 litre) Milieu nutritif élevé Milieu Composition c-1 Milieu MRS c-2 100 g de lait écrémé c-3 30 g de lait écrémé ajoutés à du milieu MRS Le procédé de titrage de Lactobacillus clearans est décrit ci-dessous : dans ce qui suit, on donne des exemples des fonctions que ces bactéries possèdent : (1) la capacité de diminuer les substances nocives odoriférantes, telles que le sulfure de sodium en tant que composé du soufre et l'ammoniaque en tant que composé de l'azote ; (2) la capacité d'améliorer la flore intestinale, autrement dit la capacité d'augmenter les bactéries bénéfiques telles que Bifidobacterium et Lactobacillus, et de diminuer de façon marquée les bactéries nocives telles que Veillonella et Clostridium, y compris Welchii ; (3) la capacité à réprimer la croissance et la toxicité de bactéries pathogènes infectieuses intestinales. Bien que ces trois capacités puissent être dosées individuellement et évaluées de façon complète, les résultats d'une étude approfondie ont révélé que les capacités mentionnées précédemment de Lactobacillus clearans sont intimement corrélées. En tant que tel, le titrage a été limité à (1) la capacité à diminuer les substances nocives odoriférantes dans l'intestin, qui est facilement déterminé et produit des résultats rapides. Le milieu de titrage pour doser la capacité à diminuer les substances nocives odoriférantes dans l'intestin consistait en 0,5 g de sulfure de sodium ou 0, 5 ml d'ammoniaque aqueuse ajoutée au milieu comprenant 5 g d'extrait de viande, 5 g de peptone, 5 g de glucose, 3 g de butyrate de sodium et 3 g de carbonate de calcium. Le milieu a été inoculé avec les bactéries d'essai pour la culture anaérobie à 37 C, et la diminution du sulfure de sodium ajouté ou de l'ammoniaque ajoutée a été déterminée en fonction du temps. Le sulfure de sodium a été mesuré par la méthode à l'acétate de plomb ou la méthode de titration à l'iode selon JIS K 0102-1985, alors que l'ammoniaque a été mesurée par la méthode de Nestler ou la méthode d'absorbance du bleu d'indophénol selon JIS K 0102-1985. Les Lactobacillus clearans soumis à l'essai sont très divers ; le Tableau 7 donne le pourcentage de diminution du sulfure de sodium et de l'ammoniaque déterminé lorsque le titre de trois souches typiques, à savoir BHPH-L-1 (FERM P-17149, FERM BP-6971), BHPH-L-2 (FERM P-17148, FERM BP-6972), et BHPH-L-3 (FERM P-17150, FERM BP-6973), était élevé. Tableau 7 Pourcentage de diminution du sulfure de sodium et de l'ammoniaque par Lactobacillus clearans avec un titre élevé FERM No. Diminution (%) du sulfure de Diminution (%) de sodium l'ammoniaque 24 h 48 h 72 h 24 h 48 h 72 h P-17148 20 40 50 15 25 40 BP-6972 P-17149 30 50 55 25 40 50 BP-6971 P-17150 40 65 70 30 45 65 BP-6973 Le milieu de culture de base a idéalement une excellente croissance et une diminution minimale du titre. C'est le point le plus important corrélé au rendement des bactéries sur le plan pratique de la culture en masse (développement progressif). Lors de la recherche d'un milieu de culture idéal, nous avons trouvé la clé avec succès. Ainsi, comme indiqué dans le Tableau 8, il devient apparent que, lorsque la culture a été conduite avec l'addition de sulfure de sodium ou d'ammoniaque au milieu de base, il était essentiel pour les deux substances ajoutées d'être diminuées dans une certaine mesure en 24 heures, avec des sous-cultures dans des milieux sans diminution conduisant à une perte de titre très importante, les rendant finalement non utilisables. Le Tableau 8 montre que, dans les cas où 0, 5 g de sulfure de sodium et 0, 5 ml d'ammoniaque aqueuse ont été ajoutés à 1 litre de milieu, les substances odoriférantes servant de composants nutritifs inhérents, telles que les substances odoriférantes du soufre, de l'azote et du carbone, n'ont pas été utilisées comme sources nutritives dans des milieux nutritifs excessivement élevés, et que seules des sources nutritives facilement utilisables ont été utilisées, ce qui conduit à de plus grandes quantités de bactéries, mais avec la perte progressive et l'inactivation ultime des caractéristiques bactériennes. Ici, l'ammoniaque aqueuse se rapporte à une ammoniaque aqueuse réactive, telle qu'une solution aqueuse contenant 25,0 à 27,9 % en p/v d'ammoniaque. Tableau 8 Pourcentage de diminution du sulfure de sodium et de l'ammoniaque dans des milieux de culture auxquels ils avaient été ajoutés pour Lactobacillus clearans. Diminution initiale (%) Composés Composés Type Milieu Substance Bactérie d'essai odoriférants odoriférants Type Milieu ajoutée FERMNo. du soufre de l'azote 24 48 72 24 48 72 h h b h h h Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 10 15 25 10 20 30 a-1 et P-17149,BP-6971 15 20 35 15 30 40 Ammoniaque aqueuse P-17150.BP-6973 20 30 40 20 35 45 tif Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 10 15 25 10 15 20 a-2 et P-17149.BP-6971 15 20 30 15 25 40 Ammoniaqueaqueuse P-17150.BP-6973 25 35 40 20 30 40 Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 15 25 30 15 25 35 a-3 et P-17149.BP-6971 20 30 35 20 30 40 Ammoniaque aqueuse P-17150.BP-6973 25 35 10 20 35 45 Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 10 15 25 10 15 20 ré b-1 et P-17149.BP-6971 15 20 30 15 20 30 Ammoniaque aqueuse P-17150.BP-6973 20 25 30 15 2# .25 #################################### if Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 0 3 10 10 0 10 b-2 et P-17149,BP-6971 0 5 10 0 5 10 nu Ammoniaque aqueuse P-17150.BP-6973 0 5 15 0 5 10 ilie b-3 Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 5 10 15 5 7 10 b-3 et sodium P-17149.BP-6971 5 10 15 5 8 10 Ammoniaqueaqueuse P-17150.BP-6973 5 7 10 5 7 10 Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 0 2 7 0 3 5 @é c-1 et P-17149.BP-6971 0 0 3 0 0 Ammoniaque aqueuse P-17150.BP-6973 2 3 5 2 5 Sulfure de sodium P-17148,BP-6972 0 0 8 0 0 c-2 et P-17149,BP-6971 0 0 10 0 0 5 Ammoniaque aqueuse P-17150.BP-6973 0 0 7 0 0 Sulfure de sodium P-17148.BP-6972 0 0 5 0 0 5 c-3 et P-17149.BP-6971 0 0 5 0 0 Ammoniaqueaqueuse P-17150,BP-6973 0 0 10 0 0 5 Les acides aminés les plus importants constituant les cellules bactériennes ou les enzymes ont été étudiés par type pour leurs effets sur Lactobacillus clearans. Il s'est avéré que l'addition d'acides aminés spécifiques, à savoir d'acides aminés contenant du soufre tels que la cystine, la méthionine, la cystéine et la taurine, ainsi que l'acide glutamique, la lysine et l'acide aspartique, était extrêmement efficace lorsqu'elle était effectuée pendant la sous-culture, alors que l'addition de proline, de tyrosine et similaires conduisait à une diminution rapide du titre. Autrement dit, ils pourraient être grossièrement classés en trois groupes : certains types d'acides aminés qui aident à conserver le titre de Lactobacillus clearans, d'autres types qui ont moins d'effet, et encore d'autres qui entraînent une diminution significative de titre. Ceci a résolu avec succès la contradiction observée dans les expériences classiques, à savoir, la contradiction lorqu'un agent nutritif est amélioré pour faciliter la croissance des bactéries, l'agent nutritif est excellent pour les bactéries, mais la caractéristique distinctive de diminution des substances nuisibles est perdue. En conséquence, il n'a guère besoin d'être souligné que les acides aminés efficaces mentionnés ci-dessus pourraient être mélangés avec les composés odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone mentionnés ci-dessus pour empêcher le titre de diminuer encore. Nous avons recherché des substances capables d'une telle augmentation ou d'une telle potentiation et conduit une étude approfondie. Comme résultat, nous avons découvert que la Vitamine C, la Vitamine E, la Vitamine B12, le pantothénate de calcium, l'acide folique, le nicotinamide, et similaires étaient des vitamines efficaces. Il est apparu clairement que ces vitamines sont fortement mises en jeu dans la production d'enzymes qui diminuent les substances odoriférantes telles que les composés odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone. Il a également été découvert que le manganèse, le zinc, le magnésium, le molybdène et similaires sont des minéraux efficaces. Il est apparu clairement que ces minéraux sont fortement mis en jeu dans l'activité d'enzymes qui diminuent les substances odoriférantes telles que les composés odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone. Ceci a été confirmé par la culture de Lactobacillus clearans dans des milieux contenant les vitamines et minéraux efficaces mentionnés ci-dessus, et par l'élimination subséquente des bactéries, et ensuite par simple addition d'une fraction du bouillon de culture résultant à un liquide contenant une substance odoriférante telle qu'un composé odoriférant du soufre, de l'azote ou du carbone, ce qui a conduit à la diminution de telles substances odoriférantes. Il a également été découvert que chlorella CGF, le lait de soja, la poudre de bile et similaires étaient des substances efficaces pour maintenir le titre de Lactobacillus clearans. En outre pour l'étude des composants de culture, il est également préférable de soumettre les bactéries à une sous-culture, lors de la phase de croissance logarithmique, dans des milieux ultérieurs pendant la sous-culture ou la croissance dans le but d'empêcher toute diminution du titre. Il est également préférable d'éviter une dénaturation par la chaleur des composants du milieu pendant la fabrication et la stérilisation du milieu. Un procédé de conservation a ensuite été étudié, pour parvenir à la conclusion que le point le plus important est de produire d'abord un conservateur favorable. Des conservateurs couramment utilisés à l'heure actuelle pour les lactobacilles, tels que lactose, divers types d'amidon, et le lait écrémé, (1) sont faciles à manipuler, (2) sont peu coûteux, (3) peuvent être administrés directement dans le corps vivant et également ne produisent pas de gêne lorsqu'ils sont administrés. Pour ces raisons ainsi que pour d'autres, il y a une forte tendance à les utiliser, principalement pour la commodité humaine, même s'ils sont à la fois favorables et inappropriés pour les lactobacilles. A l'heure actuelle, ils peuvent être administrés sous la forme de capsules entériques, mais nous avons décidé de revoir ces conditions du point de vue des lactobacilles, sans donner une priorité à l'homme, comme manière d'attirer l'attention sur les lactobacilles. Ainsi une large variété de substances ont été testées en tant que conservateurs, en allant des substances à base de protéines couramment utilisées dans les cultures bactériennes aux composites de diverses substances animales et végétales et de saccharides, pour une large diversité de souches bactériennes, comprenant les trois souches typiques de Lactobacillus -clearans, à savoir, BHPH-L-1 (FERM P-17149, FERM BP-6971), BHPH-L-2 (FERM P-17148, FERM BP-6972), et BHPH-L-3 (FERM P-17150, FERM BP-6973). Les quantités dans lesquelles les conservateurs sont ajoutés varient dans une large mesure en fonction du type du conservateur, avec une plage d'aptitude variable, et, de ce fait, ne peuvent pas être déterminées comme matière de principe absolu, mais se situe d'une manière générale en termes du rapport en poids des solides conservateurs, de 1 à 500 fois celle des cellules bactériennes centrifugées. Les amidons dont il est question dans la présente invention ne sont pas limités à une quelconque matière de départ particulière, mais les exemples comprennent l'amidon soluble, l'amidon de maïs, l'amidon de pomme de terre et l'amidon de patate douce. Les cellules de levure mortes dont il est question dans la présente invention se rapportent à une levure dans un état non viable. Un exemple est la levure de boulanger, qui peut être détruite par 10 minutes de traitement par de l'eau chaude à 100 C, puis séchée. Cependant, après avoir été détruite, la levure de boulanger peut être soit dans un état sec soit dans un état humide. La poudre d'extrait de levure se rapporte à un extrait de levure qui a été séché et transformé en une poudre. Le procédé de séchage n'est pas particulièrement limité. EXEMPLES Les Lactobacillus clearans ont été soumis à des sous-cultures dans les divers milieux indiqués dans les Tableaux 2,3, 4,5 et 6, des milieux d'essai de titration ont été inoculés à chaque stade de la sous-culture, et le titre a été dosé de la première à la neuvième générations. Le mode opératoire est illustré sur la Figure 1, les résultats de l'essai de titration sont donnés dans le Tableau 9, et le Tableau 10 résume toutes les souches. Le titre est représenté par des cercles concentriques pour indiquer lorsqu'il n'y a pratiquement pas de diminution du titre, par un cercle pour indiquer une légère diminution mais suffisamment de conservation du titre, par un triangle pour indiquer une diminution progressive du titre qui était inappropriée à des fins pratiques, et par un "x" pour indiquer une perte très importante du titre. Dans le principe, une diminution de titre a été notée dans tous les milieux, augmentant dans l'ordre milieu nutritif faible, modéré, élevé. Les différences augmentaient rapidement avec les nouvelles sous-cultures. Tableau 9 Corrélation entre le nombre de sous-cultures et le titre de Lactobacillus clearans dans divers milieux Diminution (%)d a ns Nombre de sous-cultures les 72 h dans et titre Type Milieu Bactérie d'essai la 1ère génération @ FERM No. S1) N2) 1ère 3ème 6ème 9ème P-17148,BP-6972 50 40 # ### a-1 P-17149,BP-6971 50 45 # ### P-17150,BP-6973 65 60 ### O A 0 ############################################### P-17148,BP-6972 45 35 # # ### a-2 P-17149,BP-6971 45 40 ### # A P-17150,BP-6973 60 55 ### # A ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~############################## ####### P-17148,BP-6972 45 35 # ### a-3 P-17149,BP-6971 45 40 ### # A P-17150,BP-6973 55 50 ### ### A P-17148,BP-6972 40 30 # ### A b-1 P-17149,BP-6971 40 40 # ### A P-17150.BP-6973 50 45 # # ### A ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~############################## # ####### P-17148,BP-6972 75 30 ### ### ### b-2 P-17149,BP-6971 30 35 ### A ### P-17150,BP-6973 40 45 ### A X ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~#################################################i### ie P-17148,BP-6972 40 35 # ### A b-3 P-17149,BP-6971 40 45 # ### A P-17150,BP-6973 60 50 # ### A P-17148,BP-6972 35 30 # # A ### c-1 P-17149,BP-6971 35 40 # ### A ### é P-17150,BP-6973 50 50 # ### (D ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~####################### ########### if P-17148,BP-6972 30 30 A X X c-2 P-17149,BP-6971 25 20 # A X X P-17150,BP-6973 30 35 A ### X X ########-########################## ilie P-17148,BP-6972 30 30 # ### X X c-3 P-17149.BP-6971 35 30 # A X X P-17150,BP-6973 45 45 # A A X 1) Composés odoriférants du soufre ; 2) Composés odoriférants de l'azote Tableau 10 Culture de Lactobacillus clearans et corrélation globale des sous-cultures et du titre Nombre de sous-cultures et étendue du titre 1ème 3ème 6ème gème # ### ### ### Milieu nutritif faible Milieu nutritif modéré ### ### ### ### Milieu nutritif élevé ### ### ### ### Compte tenu de leurs caractéristiques, les Lactobacillus clearans ont été soumis à des sous-cultures avec l'addition des substances odoriférantes putréfiantes entériques comprenant des composés odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone ajoutés à des milieux de culture nutritifs faibles, modérés et élevés, les bactéries ont été transplantées sur des milieux pour déterminer le titre, et le titre a été déterminé, avec les résultats donnés dans le Tableau 11. Ici, les composants F sont ceux comprenant 0,2 g de sulfure de méthyle, 0,3 g de scatole et 1 g d'acide butyrique par litre de milieu. Autres que les composants F, des substances odoriférantes putréfiantes entériques comprenant des composés odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone, tels que le sulfure de sodium, les mercaptans, l'indole, l'acide acétique et l'acide propionique pouvaient être choisies pour l'essai sans différences majeures dans les résultats. Tableau 11 Corrélation entre le nombre de sous-cultures et le titre de Lactobacillus clearans dans un milieu contenant des composants F Diminution (%)dans , Nombre de souscultures Subst- Bactérie les 72 Type Milieu ance d'essai dans et titre ajoutée FERM No. ration ration ~~~~~~~~ S1) N2) 1ère 3ème 6ème 9ème Compo- P-17148.BP-6972 50 40 ### # a-1 sants P-17149,BP-6971 55 50 # ### # F P-17150,BP-6973 70 65 # ### ### ##### Compo- P-17148,BP-6972 50 40 ### # a-2 sants P-17149,BP-6971 50 75 # ### 3 F P-17150,BP-6973 65 60 ### 3 #########~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ Compo- P-17148,BP-6972 50 40 # ### # a-3 sants P-17149.BP-6971 50 50 ### ### F P-17150.BP-6973 65 60 ### Compo- P-17148,BP-6972 50 40 ### b-1 sants P-17149,BP-6971 50 45 # # ### dé F P-17150,BP-6973 60 60 0 ### mo ~~~~ ~~~~~ ~~~~~ tif Compo- P-17148,BP-6972 50 40 ### tri b-2 sants P-17149,BP-6971 55 50 # F P-17150,BP-6973 65 60 ### # Compo- P-17148,BP-6972 50 40 # # b-3 sants P-17149,BP-6971 50 50 # # ### F P-17150.BP-6973 65 60 # ### # Compo- P-17148,BP-6972 50 40 3 3 ### ### c-1 sants P-17149.BP-6971 50 45 # # # ### F P-17150,BP-6973 60 60 # ### Compo- P-17148,BP-6972 45 35 ### # ### # c-2 sants P-17149,BP-6971 45 45 ### ### # F P-17150,BP-6973 55 55 # # ### X Compo- P-17148,BP-6972 45 35 # # # X c-3 sants P-17149,BP-6971 45 45 # A X F P-17150,BP-6973 55 50 ### # A X 1) Composés odoriférants du soufre ; 2) Composés odoriférants de l'azote ; Le Tableau 11 montre que l'addition de composants F au milieu de base en tant que milieu de sousculture et de croissance était importante pour empêcher le titre de Lactobacillus clearans de diminuer, ceci étant particulièrement vrai lorsque le milieu de base était constitué de milieux nutritifs élevés. Il était également clair qu'il y avait une relativement moindre diminution du titre à la troisième génération de sous-culture lorsque les composants F ont été ajoutés. Le titre a cependant diminué rapidement par la suite. En termes de conservateurs, le Tableau 12 montre les variations de la viabilité de Lactobacillus clearans lorsque des conservateurs à base de protéines-acides aminés ont été ajoutés. Le Tableau 13 montre les variations de la viabilité de Lactobacillus clearans lorsque des saccharides et des conservateurs complexes protéine d'origine animalevitamine-minéral ont été ajoutés, et le Tableau 14 montre les variations de la viabilité de Lactobacillus clearans lorsque des conservateurs complexes protéine végétalevitamine-minéral et autres conservateurs ont été ajoutés. Ici, le jus de luzerne et le jus de trèfle se réfèrent à des liquides qui sont obtenus par addition à de l'herbe de luzerne ou à de l'herbe de trèfle de 10 fois leur quantité d'eau, pour fabriquer un jus, celui-ci étant utilisé en tant que jus de luzerne ou jus de trèfle. Les quantités dans lesquelles les conservateurs sont ajoutés sont exprimées en termes du rapport en poids du conservateur aux cellules viables. Par exemple, une quantité de 10 indique que le conservateur a été ajouté dans une quantité de 10 fois celle des cellules viables. La viabilité de Lactobacillus clearans est exprimée sous la forme d'un pourcentage, où 100% représente le comptage de cellules viables immédiatement après la lyophilisation. La viabilité pendant la lyophilisation est indiquée sous la forme de cercles concentriques lorsque la viabilité est de plus de 90%, sous la forme de deux cercles concentriques à un cercle lorsque le taux est de 80 à 90%, sous la forme d'un cercle lorsque le taux est de 60 à 80%, sous la forme d'un carré lorsque le taux est de 40 à 60%, sous la forme d'un triangle lorsque le taux est de 20 à 40%, et sous la forme de "x" lorsque le taux est inférieur à 20%. Des variations du titre de Lactobacillus clearans pendant le stockage sont indiquées par "++" lorsque le titre a été maintenu à un niveau élevé, par "+" lorsque le titre a diminué légèrement, par "" lorsque le titre a diminué nettement, par "-" lorsque le titre a diminué de façon très importante, et par "--" lorsque le titre a diminué rapidement. Tableau 12 Variations de viabilité de Lactobacillus clearans avec l'utilisation de conservateurs à base de protéines-acides aminés Conservateur Résultats ariations au cours du temps pendant le stockage pendant Viabilité % variations Quan- la Iyophi- Viabilité 10 Variations Type Me lisation 3 6 12 du ajoutée* mois mois mois titre . mois mois mois Peptone 10 # 30 10 2 Acide 20 casamino 35 20 ~ Cystine 20 0 70 50 35 + Cysteine 20 # 65 45 30 + Methionine 20 # 65 45 30 + Taurine 20 # 70 50 35 + Alanine 20 # 30 15 5 - Glycine 20 # 25 10 2Glutamate de 20 # 60 40 20 ~, sodium Acide amino- 20 # 65 45 25 ~ butyrique Leucine 20 # 25 10 3 Lysine 20 # 30 15 5 ~ Tryptophane 20 # 25 10 4 Arginine 20 # 20 5 2 Asparagine 20 # 55 30 15 ~ Ovalbumine 20 # 70 50 30 + Petit-lait # 60 45 25 de soja Jaune 100 # 50 40 30 ~ d'oeuf ####### Gélatine 10 X 10 3 0 exprimée en tant que rapport en poids du conservateur aux cellules viables. Tableau 13 Variations de viabilité de Lactobacillus clearans avec l'utilisation de saccharides et de conservateurs complexes protéine d'origine animale-vitamine-minéral Conservateur Résultats Variations au cours du temps pendant le stockage Quan- la lyophi- Viabilité (%) Varlations Type tité lisation 3 6 12 du ajoutée- '**" mois mois mois titre Saccharides Lactose 100 # 70 50 20 ~ Amidon soluble 100 # 60 40 15 ~ Amidon de pomme de 100 # 30 20 10 terre ~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ Sucrose 20 # 30 15 5 Glucose 20 # 25 15 5 Tréhalose 40 # 75 50 30 +' Complexes protéine. vitamine. minéral Lait écrémé en poudre 150 # 70 50 35 ~ Extrait de foie 10 60 40 20 Extrait de 10 # 50 30 20 ~ levure Extrait de 10 25 15 5 coeur Sérum équin 250 # 60 40 25 ~ Levure (cellules de levure de 100 0 60 50 30 + ) boulanger tuées ) * exprimée en tant que rapport en poids du conservateur aux cellules viables Tableau 14 Variations de viabilité de Lactobacillus clearans avec l'utilisation de complexe protéine végétale.vitamine. minéral et autres Conservateur Résultats Variations au cours du temps pendant le stockage Quan- pendant Viabilité (%) Variations Type Surf lisation 3 6 12 du titre -- ajoutée@ mois mo mois mois fifre Complexes protéine.vitamir e. minéral (végétal) Chlorella 50 0 65 45 35 + Chlorella CGF 20 # 60 40 30 ~ Son de riz 20 0 60 50 35 + Son 20 # 55 45 33 + Jus de luzerne 40 # 50 35 25 ~ (herbe) ~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ Miso en poudre 20 # 20 10 7 Poudre azuki 20 # 25 10 5 Farine de nouilles 20 X 20 5 1 desoba Jus de trèfle 250 # 60 45 25 ~ Extrait de 50 # 65 5 25 ~ germe de blé ~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~ Lait de soja 100 # 70 55 35 + Autre Jus de tomate 50 # 50 35 20 ~ Jus de carotte 50 # 55 40 25 + Jus d'orange 50 X 15 2 0,05 Jus de raisin 50 # 50 30 20 ~ Poudre d'aloès 10 # 35 20 10 ~ Poudre de 20 35 20 15 ::1: thé vert 2~0 Solution saline physiologique 1,7 * exprimée en tant que rapport en poids du conservateur aux cellules viables Il ressort des Tableaux 12,13 et 14 que l'utilisation de conservateurs fournissant une viabilité élevée pendant la lyophilisation de Lactobacillus clearans a également conduit à une bonne viabilité pendant le stockage, et que des diminutions moindres de titre ont été obtenues en même temps. Autrement dit, juste en déterminant la viabilité pendant la lyophilisation, il était possible de réaliser un progrès spectaculaire en recherche ultérieure par l'étude rapide de conditions telles que la sélection des conservateurs à la température de pré-congélation et lyophilisation, le temps de séchage et similaires, sans prendre beaucoup de temps. Comme résultat, il est apparu clairement que des méthodes couramment utilisées pour Lactobacillus connu de façon classique étaient appropriées pour des conditions telles que la température de précongélation et de lyophilisation et le temps de séchage pendant la manipulation de Lactobacillus clearans, mais que l'efficacité du conservateur était le facteur le plus important pour entretenir la viabilité et le titre. Des conservateurs sans effets conservateurs lorsqu'ils sont utilisés seuls ont été exclus, et les conservateurs restants ont été étudiés dans diverses combinaisons. Certains des résultats sont donnés dans les Tableaux 15,16 et 17. Ici, les quantités dans lesquelles les conservateurs ont été ajoutés sont exprimées en tant que rapport du poids du conservateur au poids des cellules viables. Par exemple une quantité de 10 indique que le conservateur a été ajouté dans une quantité de 10 fois celle des cellules viables. La viabilité de Lactobacillus clearans pendant la lyophilisation est indiquée sous la forme de deux cercles concentriques lorsque la viabilité est supérieure à 90%, sous la forme de deux cercles concentriques à un cercle lorsque le taux est de 80 à 90%, sous la forme d'un cercle lorsque le taux est de 60 à 80%, sous la forme d'un carré lorsque le taux est de 40 à 60%, sous la forme d'un triangle lorsque le taux est de 20 à 40%, et sous la forme d'un "x" lorsque le taux est inférieur à 20%. Une comparaison des Tableaux 13 et 14 révèle que les conservateurs ont procuré une meilleure viabilité lorsqu'ils ont été utilisés en combinaison que lorsqu'ils ont été utilisés seuls. L'utilisation combinée de conservateurs d'origine animale avec des conservateurs d'origine végétale a conduit à une bonne viabilité pendant la lyophilisation, naturellement, mais encore à de meilleurs effets pendant le stockage ultérieur. Les résultats sont donnés dans le Tableau 18, où les variations du titre de Lactobacillus clearans pendant le stockage sont indiquées par "++" lorsque le titre a été maintenu à un niveau élevé, par "+" lorsque le titre a diminué légèrement, par "" lorsque le titre a diminué nettement, par "-" lorsque le titre a diminué de façon très importante et par "-" lorsque le titre a diminué rapidement. Tableau 15 Variations de la viabilité de Lactobacillus clearans avec des combinaisons de deux types de conservateurs Type de Quantité ajoutée* Résultats durant la conservateur lyophilisation Ovalbumine 10 0 - # Tréhalose 20 Ovalbumine 10 0 Lait écrémé 100 Ovalbumine 10 Lait de soja 70 Ovalbumine 10 0 - Jus de carotte 35 Tréhalose 20 # # # Lait écrémé 100 Tréhalose 20 Lait de soja 70 Tréhalose 20 0 Jus de carotte 35 Lait écrémé 75 Lait de soja 50 Lait écrémé 100 0 - Jus de carotte 35 Lait de soja 70 0 Jus de carotte 35 exprimée en tant que rapport du poids du conservateur au poids des cellules viables Tableau 16 Variations de la viabilité de Lactobacillus clearans avec des combinaisons de trois types de conservateurs Type de Quantité ajoutée Résultats durant la conservateur lyophilisation Ovalbumine 7 Tréhalose 15 0 Lait écrémé 80 Ovalbumine 7 Tréhalose 15 # # @ Lait de soja 65 Ovalbumine 7 Tréhalose 15 # # @ Jus de carotte 30 Ovalbumine 7 Lait écrémé 70 Lait de soja 45 Ovalbumine 7 Lait écrémé 70 Jus de carotte 30 Tréhalose 15 Lait écrémé 70 Lait de soja 45 Tréhalose 15 Lait écrémé 70 # # Jus de carotte 25 Lait écrémé 15 Lait de soja 45 Jus de carotte 25 * exprimée en tant que rapport du poids du conservateur au poids des cellules viables. Tableau 17 Variations de la viabilité de Lactobacillus clearans avec des combinaisons de quatre à cinq types de conservateurs Type de Quantité ajoutée Résultats durant la conservateur lyophilisation Ovalbumine 7 Tréhalose 15. Lait écrémé 70 . Lait de soja 45 Ovalbumine 7 Tréhalose 15 # # @ Lait écrémé 70 Jus de carotte 25 Ovalbumine 7 Tréhalose 15 Lait de soja 45 Jus de carotte 25 Tréhalose 15 Lait écrémé 70 Lait de soja 45 Jus de carotte 25 Ovalbumine 7 Tréhalose 15 Lait écrémé 70 Lait de soja 45 Jus de carotte 25 * exprimée en tant que rapport du poids du conservateur au poids des cellules viables Tableau 18 Variations de la viabilité et du titre de Lactobacillus clearans avec l'utilisation de conservateurs fournissant une viabilité de plus de 90% pendant la lyophilisation Viabilité moyenne au cours du temps Variations #####!######i##### du titre 3 6 12 titre mois mois mois Lors de l'utilisation de conservateurs fournissant 90% 95 % 80 % 70 % + + de viabilité pendant la lyophilisation Il était évident que d'excellents effets conservateurs ont été obtenus avec l'utilisation conjointe de substances auxquelles les lactobacilles adhèrent et avec lesquelles elles vivent ensemble dans une relation de symbiose dans le monde naturel, telles que le son de riz, le son, la levure, chlorella, les herbes telles que le trèfle, et les fruits tels que les raisins, et de substances évaluées avec un seul cercle ou carré dans les Tableaux 12, 13 et 14 telles que le lait de soja. Il a également été confirmé que la conservation pourrait être encore améliorée lorsque des substances maintenant efficacement le titre, telles que des composés odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone, des acides aminés tels que des acides aminés contenant du soufre et l'acide glutamique, des vitamines telles que la Vitamine C et le pantothénate de calcium, des minéraux tels que le zinc et le magnésium et de la poudre de bile ont été ajoutées soit par eux-mêmes soit en combinaison, à des conservateurs hautement efficaces pendant la sous-culture de Lactobacillus clearans. Diverses formes de conservation ont été envisagées en plus de la lyophilisation en tant que procédés pour conserver Lactobacillus clearans, telles que la conservation par voie humide de liquides ou de masses cellulaires, la conservation par voie semi-sèche avec environ une teneur en humidité de 15%, une conservation par voie sèche avec une teneur en humidité d'environ 8%, et une conservation par ultra-froid à une température entre-40 et -196 C, mais des résultats fondamentalement bons ont été obtenus lors d'une conservation avec des conservateurs qui ont montré les excellents effets décrits pendant l'utilisation en lyophilisation. La présente invention est décrite en détail cidessous en référence à des exemples, mais la portée de l'invention n'est pas limitée à ces seuls exemples. EXEMPLE 1 10 litres de milieu (pH 7,0) comprenant 5 g d'extrait de viande (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 5 g de peptone (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 3 g de butyrate de sodium (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 1 ml d'ammoniaque aqueuse (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 10 g de glucose (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 0, 5 g de cystine (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), et 2 g d'extrait de levure (Nihon Seiyaku) par litre de milieu ont été inoculés avec Lactobacillus clearans (FERM P-17150,BP- 6973) pendant 72 heures de culture anaérobie à 37 C. Le bouillon de culture a été centrifugé, donnant 10 g d'une masse cellulaire. La masse a été lavée avec 500 ml de solution saline physiologique (préparée avec du chlorure de sodium provenant de Wako Pure Chemical Industries, LTD.) et centrifugée deux fois. La masse cellulaire purifiée résultante a été introduite dans une solution consistant en 500 ml de lait de soja (de Tsujimoto Shokuhin Kogyo), 50 g de lait écrémé (Snow Brand Milk Products, Co. ), 30 g de tréhalose (Hayashibara KK), et 0,5 g de cystine (Wako Pure Chemical Industries, LTD.) et soigneusement agitée. Le mélange a été lyophilisé sous vide par une méthode courante pour donner 133 g de préparation cellulaire bactérienne. Le comptage cellulaire a conduit à de 3,0 x 109 cellules/g. La préparation cellulaire a été stockée à la température ambiante avec du déshydratant gel de silice (Manabe Kaseihin) et un absorbant d'oxygène (Mitsubishi Gas Chemical Co.), le comptage des cellules viables a été étudié sur 18 mois pour calculer la viabilité, et le titre a été déterminé, avec les résultats donnés dans le Tableau 19. Le Tableau 19 montre qu'un titre élevé de Lactobacillus clearans a été maintenu pratiquement sans baisse. Tableau 19 Exemple de variations du nombre de cellules viables, de la viabilité et du titre de Lactobacillus clearans. Nombre de cellules viables/g #########.#####j######j######;###### Variations Immédiatement 3 6 12 18 du titre après mois mois mois mois préparation 3,0 x 109 2,8 x 109 2,5 x 109 2,0 x 109 1,5 x 109 Viabilité 83 66 50 EXEMPLE 2 10 litres de milieu (pH 7,0) comprenant 30 g de petit-lait de soja (Fuji Oil Co.), 1 g de peptone (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 1 g de cystine (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 3 g d'acétate de sodium (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 0,2 g de sulfure de sodium (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 0,01 g de pantothénate de calcium (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), et 2 g de levure de boulanger (Levure Orientale - Oriental Yeast) par litre de milieu ont été inoculés avec Lactobacillus clearans (FERM P-17149, BP-6971) pendant 72 heures de culture anaérobie à 37 C. Le bouillon de culture a été centrifugé, donnant 28 g d'une masse cellulaire consistant en Lactobacillus clearans et cellules de levure mortes. La masse a été lavée avec 500 ml de solution saline physiologique (préparée avec du chlorure de sodium de Wako Pure Chemical Industries, LTD. ) et centrifugée deux fois. La masse cellulaire purifiée résultante a été introduite dans 500 ml d'eau contenant 10 g de chlorella séchée (Yamaki), 25 g de tréhalose (Hayashibara KK), et 5 g d'amidon soluble (Wako Pure Chemical Industries, LTD.) et soigneusement agitée. Le mélange a ensuite été lyophilisé sous vide par une méthode courante pour donner 43 g de préparation de cellules bactériennes. Le comptage cellulaire a donné 10,0 x 109 cellules/g. La préparation cellulaire a été stockée à la température ambiante dans des jarres en verre protégées de la lumière conjointement avec du déshydratant gel de silice (Manabe Kaseihin) et un absorbant d'oxygène (Mitsubishi Gas Chemical Co.), le comptage des cellules viables a été étudié sur 18 mois pour calculer la viabilité, et le titre a été déterminé, avec les résultats donnés dans le Tableau 20. Le Tableau 20 montre qu'un titre élevé de Lactobacillus clearans a été maintenu pratiquement sans baisse. Tableau 20 Exemples de variations du nombre de cellules viables, de la viabilité et du titre de Lactobacillus clearans. Nombre de cellules viables/g Variation Immédiatement 3 6 12 18 du titre après mois mois mois mois préparation 10,0 x 109 9,5 x 109 8,5 x 109 7,0 x 109 5,0 x 109 ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ ++ Viabilité 85 70 50 EXEMPLE COMPARATIF 1 10 litres de milieu (pH 7,0) comprenant 10 g d'extrait de viande (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 10 g de peptone (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 3 g d'extrait de levure (Nihon Seiyaku), 10 g de glucose (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 2 g de K2HPO4, 1 g de MgSO4.7H2O, 1 g de NaC# et lg de CaC#2.2H2O par litre de milieu ont été inoculés avec Lactobacillus clearans (FERM P-17150, BP-6973) pendant 72 heures de culture anaérobie à 37 C. Le bouillon de culture a été centrifugé, donnant 18 g d'une masse cellulaire. La masse a été lavée avec 500 ml de solution saline physiologique (préparée avec du chlorure de sodium de Wako Pure Chemical Industries, LTD.) et centrifugée deux fois. La masse cellulaire purifiée résultante a été introduite dans 1000 ml d'une solution à 20% d'amidon soluble (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), et soigneusement agitée. Le mélange a été lyophilisé sous vide par une méthode courante pour donner 204 g d'une préparation de cellules bactériennes. Le comptage des cellules a donné 4,5 x 109 cellules/g. La préparation de cellules a été stockée à la température ambiante avec du déshydratant gel de silice (Manabe Kaseihin) et un absorbant d'oxygène (Mitsubishi Gas Chemical Co. ), le comptage des cellules viables a été étudié sur 18 mois pour calculer la viabilité, et le titre a été déterminé, avec les résultats donnés dans le Tableau 21. Le Tableau 21 montre non seulement que la viabilité a diminué rapidement, mais encore que le titre a diminué de façon très importante lorsque Lactobacillus clearans a été cultivé dans un milieu courant et conservé par un procédé courant. Tableau 21 Exemples de variations du nombre de cellules viables, de la viabilité et du titre de Lactobacillus clearans, en milieu courant et en conservation courante Nombre de cellules viables/g #########)######j###### Immédiatement 3 6 12 18 du titre après mois mois mois mois préparation 4,5 x 109 2,5 x 109 1,5 x 109 4,0 x 108 0 Viabilité 55 33 9 0 EXEMPLE COMPARATIF 2 10 litres de milieu (pH 7,0) comprenant 10 g d'extrait de viande (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 10 g de peptone (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 3 g d'extrait de levure (Nihon Seiyaku), 10 g de glucose (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), 2 g de K2HPO4, 1 g de MgSO4.7H2O, 1 g de NaC# et lg de CaC#2.2H2O par litre de milieu ont été inoculés avec Lactobacillus clearans (FERM P- 17150, BP-6973) pendant 72 heures de culture anaérobie à 37 C. Le bouillon de culture a été centrifugé, donnant 18 g d'une masse cellulaire. La masse a été lavée avec 500 ml de solution saline physiologique (préparée avec du chlorure de sodium de Wako Pure Chemical Industries, LTD.) et centrifugée deux fois. La masse cellulaire purifiée résultante a été introduite dans une solution consistant en 900 ml de lait de soja (de Tsujimoto Shokuhin Kogyo), 90 g de lait écrémé (Snow Brand Milk Products, Co. ), 54 g de tréhalose (Hayashibara KK), et 0,9 g de cystine (neutre) (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), et soigneusement agitée. Le mélange a été lyophilisé sous vide par une méthode courante pour donner 239 g de préparation de cellules bactériennes. Le comptage cellulaire a donné 5,0 x 109 cellules/g. La préparation cellulaire a été stockée à la température ambiante avec du déshydratant gel de silice (Manabe Kaseihin) et un absorbant d'oxygène (Mitsubishi Gas Chemical Co.), le comptage des cellules viables a été étudié sur 18 mois pour calculer la viabilité, et le titre a été déterminé, avec les résultats donnés dans le Tableau 22. Le Tableau 22 montre qu'une bonne viabilité a été obtenue bien que pas aussi bonne que dans l'Exemple 1, lorsque Lactobacillus clearans a été cultivé par un procédé courant et conservé par le procédé de la présente invention. Cependant, le titre a diminué quelque peu pendant la culture et par la suite tendait à continuer à diminuer, bien que progressivement. Tableau 22 Exemples de variations du nombre de cellules viables, de la viabilité et du titre de Lactobacillus clearans en milieu courant mais avec conservation par la présente invention Nombre de cellules viables/g Variations Immédiatement 3 6 12 18 du titre après mois mois mois mois préparation 5,0 x 109 4,5 x 109 3,8 x 109 2,5 x 109 2,0 x 109 ~ Viabilité 90 76 50 40 EXEMPLE COMPARATIF 3 10 litres de milieu (pH 7,0) comprenant 5 g d'extrait de viande (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 5 g de peptone (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 3 g de butyrate de sodium (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 1 g d'ammoniaque aqueuse (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 10 g de glucose (Wako Pure Chemical Industries, LTD.), 0,5 g de cystine (Wako Pure Chemical Industries, LTD. ), et 2 g d'extrait de levure (Nihon Seiyaku) par litre de milieu ont été inoculés avec Lactobacillus clearans (FERM P-17150, BP-6973) pendant 72 heures de culture anaérobie à 37 C. Le bouillon de culture a été centrifugé, donnant 10 g d'une masse cellulaire. La masse a ensuite été lavée avec 500 ml de solution saline physiologique (préparée avec du chlorure de sodium de Wako Pure Chemical Industries, LTD.) et centrifugée deux fois. La masse cellulaire purifiée résultante a été introduite dans 550 ml d'une solution à 20% d'amidon soluble (Wako Pure Chemical Industries, LTD.) et soigneusement agitée. Le mélange a été lyophilisé sous vide par un procédé courant pour donner 112 g de préparation de cellules bactériennes. Le comptage cellulaire a donné 2,5 x 109 cellules/g. La préparation cellulaire a été stockée à la température ambiante avec du déshydratant gel de silice (Manabe Kaseihin) et un absorbant d'oxygène (Mitsubishi Gas Chemical Co.), le comptage des cellules viables a été étudié sur 18 mois pour calculer la viabilité, et le titre a été déterminé, avec les résultats donnés dans le Tableau 23. Le Tableau 23 montre que la viabilité tendait à être la même que celle dans l'Exemple Comparatif 1 lorsque Lactobacillus clearans était cultivé dans le milieu de la présente invention et conservé par un procédé courant. Le titre n'a pas chuté aussi rapidement qu'il ne l'a fait dans l'Exemple Comparatif 1, mais il tendait à diminuer progressivement. Tableau 23 Exemples de variations du nombre de cellules viables, de la viabilité et du titre de Lactobacillus clearans, dans le milieu de la présente invention mais par une conservation courante Nombre de cellules viables/g Variations Immédiatement 3 6 12 18 du titre après mois mois mois mois préparation 2,5 x 109 2,5 x 109 1,0 x 109 3,8 x 108 1,0 x 108 Viabilité 60 40 15 0,4 Les Lactobacillus clearans sont de nouvelles souches de lactobacilles qui utilisent et dégradent les composés odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone, et ont été notés comme des souches efficaces démontrant une capacité de purification puissante dans les intestins en raison des fonctions ci-dessus. Cependant, il n'y a pas de procédé connu tel que celui objet de la présente invention pour obtenir des lactobacilles avec un titre élevé présentant de telles fonctions, ou de procédé pour entretenir le titre élevé pendant de longues périodes de temps. L'utilisation du milieu de culture de la présente invention permet à Lactobacillus clearans d'être cultivé avec un titre élevé et d'une manière stable, de telle sorte que des composés nocifs odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone peuvent être facilement dégradés et éliminés. En conséquence, non seulement les substances nuisibles odoriférantes entériques sont diminuées, mais encore des bactéries considérées comme étant bénéfiques pour la flore intestinales peuvent être augmentées de façon spectaculaire, alors que la croissance de bactéries nuisibles peut être fortement réprimée. L'utilisation du procédé de conservation de la présente invention permet à Lactobacillus clearans ayant un titre élevé d'être conservé pendant de longues périodes de temps, de telle sorte que des composés nocifs odoriférants du soufre, de l'azote et du carbone peuvent être facilement dégradés et éliminés chaque fois que cela est souhaité. REVENDICATIONS 1 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans, caractérisé par le fait qu'il comprend au moins l'un parmi le sulfure de sodium et l'ammoniaque aqueuse, de telle sorte que, pendant la culture du Lactobacillus clearans, au moins l'un parmi le sulfure de sodium et l'ammoniaque soit diminué par Lactobacillus clearans dans les 24 heures de culture. 2 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il comprend en outre au moins l'un parmi un composé odoriférant du soufre, un composé odoriférant de l'azote, et un composé odoriférant du carbone. 3 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon la revendication 2, caractérisé par le fait que le composé odoriférant du soufre est au moins l'un parmi le sulfure de sodium, le sulfure d'hydrogène, le sulfure d'ammonium, le méthyl mercaptan, l'éthyl mercaptan, le diméthyl mercaptan, le sulfure de diméthyle, le disulfure de diméthyle, le sulfure de diéthyle, le sulfure de dibutyle et leurs dérivés. 4 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon la revendication 2 ou 3, caractérisé par le fait que le composé odoriférant de l'azote est au moins l'un parmi l'ammoniaque, le scatole, l'indole, l'acétanilide, la méthylamine, la diméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine et leurs dérivés. 5 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 2 à 4, caractérisé par le fait que le composé odoriférant du carbone est au moins l'un parmi l'acide formique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide butyrique, le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde, le crotonaldéhyde, le phénol, l'alcool butylique, l'alcool amylique et leurs dérivés. 6 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé par le fait qu'il comprend de plus au moins l'un parmi un acide aminé contenant du soufre, l'acide glutamique, la lysine et l'acide aspartique en tant qu'acide aminé. 7 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé par le fait qu'il comprend au moins l'un parmi la Vitamine C, la Vitamine E, la Vitamine B12, le pantothénate de calcium, l'acide folique et le nicotinamide en tant que vitamine. 8 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé par le fait qu'il comprend au moins l'un parmi le manganèse, le zinc, le magnésium et le molybdène en tant que composant minéral. 9 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisé par le fait qu'il comprend au moins l'un parmi chlorella CGF, le lait de soja et la poudre de bile. 10 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé par le fait qu'il comprend le sulfure de sodium dans une concentration de 500 ppm, le sulfure de sodium étant diminué de 10% ou davantage dans les 24 heures de culture de Lactobacillus clearans. 11 - Milieu de culture pour cultiver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé par le fait qu'il comprend l'ammoniaque aqueuse dans une concentration de 500 ppm, l'ammoniaque étant diminuée de 10% ou davantage dans les 24 heures de culture de Lactobacillus clearans. 12 - Procédé de conservation de Lactobacillus clearans, caractérisé par le fait qu'il comprend la mise en oeuvre d'au moins l'un parmi un acide aminé contenant du soufre, l'ovalbumine, la poudre de bile, le tréhalose, le raffinose, les cellules de levure mortes, chlorella, le son de riz, le son, le lait de soja et le jus de carotte en tant que conservateur autour du Lactobacillus clearans pendant la conservation de ce dernier. 13 - Procédé de conservation de Lactobacillus clearans selon la revendication 12, caractérisé par le fait qu'il comprend en outre la mise en oeuvre d'au moins l'un parmi l'acide glutamique, la lysine, l'acide aspartique, la Vitamine C, la Vitamine E, la Vitamine B12, le pantothénate de calcium, l'acide folique, le nicotinamide, le manganèse, le zinc, le magnésium, le molybdène, le sulfure de sodium, le sulfure d'hydrogène, le sulfure d'ammonium, le méthyl mercaptan, l'éthyl mercaptan, le diméthyl mercaptan, le sulfure de diméthyle, le disulfure de diméthyle, le sulfure de diéthyle, le sulfure de dibutyle, l'ammoniaque, le scatole, l'indole, l'acétanilide, la méthylamine, la diméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine, l'acide formique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide butyrique, le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde, le crotonaldéhyde, le phénol, l'alcool butylique, l'alcool amylique et leurs dérivés, autour du Lactobacillus clearans. 14 - Procédé de conservation de Lactobacillus clearans, caractérisé par le fait qu'il comprend la mise en oeuvre d'au moins l'un parmi le lait écrémé en poudre d'origine animale, l'ovalbumine, le lactose, la poudre d'extrait de foie et le sérum, ainsi qu'au moins l'un parmi le petit-lait de soja d'origine végétale, le tréhalose, le raffinose, l'amidon, chlorella, chlorella CGF, le son de riz, le son, le jus de luzerne, le jus de trèfle, l'extrait de germe de blé, le lait de soja, le jus de tomate, le jus de carotte, le jus de raisin, la poudre d'aloès, la poudre de thé vert, la poudre d'extrait de levure et les cellules de levure mortes en tant que conservateur autour du Lactobacillus clearans pendant la conservation de Lactobacillus clearans. 15 - Procédé de conservation de Lactobacillus clearans selon la revendication 14, caractérisé par le fait qu'il comprend en outre la mise en oeuvre d'au moins l'un parmi l'acide glutamique, la lysine, l'acide aspartique, la Vitamine C, la Vitamine E, la Vitamine B12, le pantothénate de calcium, l'acide folique, le nicotinamide, le manganèse, le zinc, le magnésium, le molybdène, le sulfure de sodium, le sulfure d'hydrogène, le sulfure d'ammonium, le méthyl mercaptan, l'éthyl mercaptan, le diméthyl mercaptan, le sulfure de diméthyle, le disulfure de diméthyle, le sulfure de diéthyle, le sulfure de dibutyle, l'ammoniaque, le scatole, l'indole, l'acétanilide, la méthylamine, la diméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine, l'acide formique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide butyrique, le formaldéhyde, l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde, le crotonaldéhyde, le phénol, l'alcool butylique, l'alcool amylique et leurs dérivés, autour du Lactobacillus clearans. 16 - Procédé de conservation pour conserver Lactobacillus clearans selon l'une des revendications 12 à 15, caractérisé par le fait qu'il comprend la lyophilisation, la conservation par ultra-froid, une méthode par voie liquide, une méthode par voie humide, une méthode par voie semi-sèche ou une méthode par voie sèche.