Brevet FR2795965A1 — publié le 20010112

La présente invention a pour objet un procédé pour la préparation d'un extrait de la vigne concentré en resvératrol. Le resvératrol ou 3,5,4'-trihydroxystilbène se trouve à des teneurs très faibles, de l'ordre de quelques mg/1 dans les vins rouges. Le resvératrol présent dans la peau et dans les pépins des raisins est extrait par le vin rouge lors de la vinification. Cette molécule est particulièrement intéressante puisqu'on lui attribue les effets du French Paradox. Les premières études ont en effet montré ses effets dans la réduction du risque des maladies cardio-vasculaires. Le resvératrol améliore la fluidité du sang et donc la circulation du sang et réduit ainsi les risques d'obturation des vaisseaux par des caillots. Il diminue aussi le taux de lipides et de cholestérol dans le sang. Les propriétés et les bienfaits du resvératrol vont au delà, puisque des premières études ont montré des effets dans la prévention des cancers et de certaines maladies neurologiques, ainsi que son activité anti-oxydante. Enfin, le resvératrol qui est produit par la vigne en réponse à des attaques bactériennes par la bactérie Botyris cinerea, responsable de la maladie de la pourriture grise, a des propriétés fongicides et bactéricides. Le resvératrol se trouve aussi dans d'autres sources végétales comme par exemple : les cacahuètes, les mûres, et une plante utilisée par la médecine chinoise, le Polygonum Cuspitadum. Les extraits de la vigne proviennent de la peau et des pépins de raisin sont peu concentrés en resvératrol. La concentration maximale de l'ordre de 500 ppm, n'est pas compatible avec certaines applications industrielles. La concentration en resvératrol dans la plupart des autres végétaux, ne permet pas d'envisager la production d'extraits plus concentrés. Seuls les extraits provenant des racines de Polygomum Cuspitadum peuvent avoir des teneurs en resvératrol supérieures à 20 %. Cependant, ces extraits présentent l'inconvénient de contenir aussi de l'émodine. La présence de ce principe actif ne permet pas l'utilisation de ces extraits dans certaines applications industrielles. On s'est aperçu que la macération de sarments, de pédoncules et de feuilles de vigne dans un solvant possédant un radical carbonyle, comme par exemple les esters ou les cétones, ou dans un alcool, conduisait à un extrait contenant des teneurs élevées en resvératrol et en s-vinéfrine, qui est le dimère du resvératrol. La présente invention a pour objet un procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne concentré en resvératrol, à partir de sarments, de pédoncules et de feuilles de vigne. Le procédé comporte une étape d'extraction et deux étapes de purification. La matière végétale constituée par des sarments, des pédoncules et des feuilles de vigne est au préalable broyée pour faciliter le contact avec le solvant. Le broyage peut- être plus ou moins poussé, la granulométrie moyenne de la matière végétale après broyage est comprise entre 1 millimètre et plusieurs centimètres. Le terme vigne représente en particulier les familles de vigne Vitis Viniféra et Vitis Rupestris. Sans que cette liste soit limitative on peut citer les cépages Merlot, Sauvignon, Chardonnet, Gabemet, Cirat, Tanat. La matière végétale broyée est mise en contact avec un alcool ou un solvant ayant un radical carbonyle. Parmi les alcools et les solvants utilisables, on peut citer sans que cette liste soit exhaustive : l'éthanol, le méthanol, le butanol, l'isopropanol, l'acétate d'éthyle, l'acétone, la méthyléthylcétone ou la diéthylcétone. Le taux de solvant massique qui doit être suffisant pour imprégner la totalité du solide et permettre une agitation du mélange est généralement compris entre 5 et 15. Le contact est effectué à une température comprise entre la température ambiante et la température d'ébullition du solvant. Le temps de contact entre la matière végétale provenant de la vigne et le solvant d'extraction est compris entre quelques heures et 24 heures. Le solvant et la matière végétale provenant de la vigne sont ensuite séparés par filtration et le solvant est éliminé par évaporation. L'extrait brut obtenu a une teneur en resvératrol comprise entre 1 et 5 %. L'extrait brut qui a la texture d'une gomme verdâtre est ensuite purifié pour obtenir un produit moins coloré, se présentant sous la forme d'une poudre. La purification primaire est faite par dissolution dans un solvant qui est un mélange hydro-alcoolique. L'alcool est un alcool miscible à l'eau, il s'agit par exemple de l'éthanol. La teneur en alcool est comprise entre 10 et 80 %. La dissolution est faite à une température comprise entre 20 et 40 C. Les impuretés insolubles dans ce solvant sont séparées du surnageant par centrifugation. Le solide obtenu après élimination du solvant du surnageant par évaporation est une poudre de couleur marron clair, ayant une teneur en resvératrol comprise entre 7 et 20 %. Le rapport entre la teneur en resvératrol et la teneur en s-viniférine dans l'extrait purifié est de l'ordre de 1. Cet extrait est ensuite purifié une deuxième fois par dissolution de certaines impuretés dans un solvant de purification secondaire. Ce solvant est de l'eau ou un solvant hydro-alcoolique ayant une teneur en alcool plus faible que le solvant de purification primaire. La dissolution est faite à une température comprise entre 20 et 40 C. Le surnageant est séparé de la partie insoluble par centrifugation. Le solide obtenu après élimination du solvant du surnageant par évaporation est une poudre de couleur marron clair, ayant une teneur en resvératrol comprise entre 1 et 3 %. Le rapport entre la teneur en resvératrol et la teneur en g-viniférine est compris entre 1 et 4. L'extrait purifié obtenu après séchage de la partie insoluble a une couleur marron clair et se présente sous la forme d'une poudre. Sa teneur en resvératrol est comprise entre 25 et 50%, et le rapport entre la teneur en resvératrol et la teneur en s-viniférine est compris entre 0.25 et 0.75. L'invention permet des avantages par rapport à l'art antérieur, en ce sens qu'elle permet l'obtention d'extraits de la vigne 20 à 1000 fois plus concentrés en resvératrol. Cette invention permet la préparation de formulations liquides, en poudre ou en comprimés ayant des teneurs élevées en resvératrol extrait de la vigne, compatibles avec les applications visées. Elle s'applique notamment à des utilisations dans les domaines pharmaceutiques, diététiques et cosmétiques. Dans deux modes particuliers de réalisation de l'invention et sans que cette description puisse être limitative à la présente invention, le procédé revendiqué peut être mis en oeuvre de la façon suivante. Exemple 1 Un kilogramme de sarments de vigne, provenant d'un cépage Gabernet sont broyés à une granulométrie inférieure à 4 mm. Le solide est mélangé avec 7 litres d'éthanol. L'extraction est opérée pendant 20 heures à une température de 30 C, avec une agitation modérée. Le solide et le surnageant sont séparés par filtration. Après évaporation de l'éthanol, on obtient 28 grammes d'extrait brut ayant une couleur verdâtre, un aspect gommeux, et une teneur en resvératrol de 3 %. L'extrait brut est repris avec 225 millilitres d'un mélange eau / éthanol à 50 % en volume. Le mélange est maintenu à 25 C, sous agitation pendant une heure, puis le solide non dissous et le surnageant sont séparés par centrifugation. Après élimination du solvant du surnageant par évaporation, on obtient 8 grammes d'un extrait purifié ayant une teneur en resvératrol de 10 % et une teneur en s-viniférine de 7 %. L'extrait purifié a une couleur marron clair et se présente sous la forme d'une poudre. L'extrait purifié est repris dans 225 millilitres d'eau. Le mélange est maintenu à une température de 25 C sous agitation pendant une heure. Le solide non dissous et le surnageant sont séparés par centrifugation. Après séchage du solide non dissous, on obtient 2.5 grammes d'un extrait ayant une teneur en resvératrol de 28 % et une teneur en s-viniférine de 12 %. L'extrait purifié a une couleur marron clair et se présente sous la forme d'une poudre. Après élimination de l'eau du surnageant, on obtient 5.5 grammes d'un extrait ayant une teneur en resvératrol de 2 % et une teneur en s-viniférine de 5 %. L'extrait purifié a une couleur marron clair et se présente sous la forme d'une poudre. Exemple 2 Un kilogramme de sarments de vigne, provenant d'un cépage Gabernet sont broyés à une granulométrie inférieure à 4 mm. Le solide est mélangé avec 7 litres d'acétone. L'extraction est opérée pendant 20 heures à une température de 25 C, avec une agitation modérée. Le solide et le surnageant sont séparés par filtration. Après évaporation de l'acétone, on obtient 25 grammes d'extrait brut ayant une couleur verdâtre, un aspect gommeux, et une teneur en resvératrol de 3 %. L'extrait brut est repris avec 250 millilitres d'un mélange eau / éthanol à 50 % en volume. Le mélange est maintenu à 25 C, sous agitation pendant une heure, puis le solide non dissous et le surnageant sont séparés par centrifugation. Après élimination du solvant du surnageant par évaporation, on obtient 7 grammes d'un extrait purifié ayant une teneur en resvératrol de 11 % et une teneur en s-viniférine de 10 %. L'extrait purifié a une couleur marron clair et se présente sous la forme d'une poudre. L'extrait purifié est repris dans 250 millilitres d'eau. Le mélange est maintenu à une température de 25 C sous agitation pendant une heure. Le solide non dissous et le surnageant sont séparés par centrifugation. Après séchage du solide non dissous, on obtient 2.5 grammes d'un extrait ayant une teneur en resvératrol de 25 % et une teneur en s-viniférine de 15 %. L'extrait purifié a une couleur marron clair et se présente sous la forme d'une poudre. Après élimination de l'eau du surnageant, on obtient 6.5 grammes d'un extrait ayant une teneur en resvératrol de 2 % et une teneur en s-viniférine de 4 %. L'extrait purifié a une couleur marron clair et se présente sous la forme d'une poudre. Des nombreuses variantes peuvent être considérées en fonction des circonstances d'utilisation, en ce qui concerne les paramètre opératoires des différentes étapes du procédé. Le présente invention ne se limite pas aux détails des formes de réalisation ci-dessus considérées à titre d'exemple, mais s'étend au contraire aux modifications à la portée de l'homme de l'art. REVENDICATIONS 1) Procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne, caractérisé en ce qu'il comporte une étape d'extraction faite à partir de sarments, de pédoncules et de feuilles de vigne. 2) Procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne, suivant la revendication 1 caractérisé en ce qu'il comporte une étape d'extraction utilisant un alcool ou un solvant possédant un radical carbonyle, présent notamment dans les esters et les cétones. 3) Procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne, suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le solvant d'extraction est l'éthanol. 4) Procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne, suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comporte une étape de purification primaire utilisant un solvant de purification primaire qui est un mélange hydro- alcoolique. 5) Procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne, suivant la revendication 4, caractérisé en ce que l'alcool est l'éthanol. 6) Procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne, suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comporte une étape de purification secondaire utilisant un solvant de purification secondaire qui est un mélange hydro- alcoolique ayant une teneur en alcool plus faible que le solvant de purification primaire. 7) Procédé de fabrication d'un extrait naturel de la vigne, suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comporte une étape de purification secondaire utilisant un solvant de purification secondaire qui est l'eau. 8) Extrait naturel de la vigne, caractérisé en ce qu'il contient une teneur en resvératrol supérieure à 1 %. 9) Extrait naturel de la vigne, caractérisé en ce qu'il contient une teneur en s-viniférine, comprise entre 0.25 et 4 fois la teneur en resvératrol.