Brevet FR2786783A1 — publié le 20000609

La présente invention est relative à un dispositif de culture cellulaire ou bioréacteur permettant l'expansion tridimensionnelle in vitro de cellules notamment à usage thérapeutique. Différents systèmes de poches planes flexibles pour l'expansion cellulaire in vitro ont été conçus et se sont d'ores et déjà révélés performants notamment pour la préparation de cellules en vue d'une transplantation ultérieure desdites cellules. Comparativement aux boites et flacons de culture cellulaire conventionnels, une poche pour l'expansion cellulaire présente un certain nombre d'avantages notamment en matière de prévention des risques de contamination et des erreurs techniques de manipulation. L'utilisation d'une poche pour l'expansion cellulaire permet notamment d'ensemencer, de prélever des aliquotes, de récolter et de transférer des cellules selon les techniques de remplissage, d'échantillonnage et de transfert approuvées pour les produits transfusables. Cependant, ces différents systèmes de poches à simple comme à multiple compartiment, ne jouent le rôle que de simple container liquide. Ils ne confinent en aucun cas les cellules dans un microenvironnement capable de structurer une prolifération cellulaire dans des conditions comparables à celles des tissus physiologiques, et ne permettent pas de promouvoir des cultures de cellules in vitro à long terme, ni de conserver et d'exploiter le véritable potentiel desdites cellules. La présente invention remédie à cette lacune et répond mieux aux besoins de la pratique que les dispositifs de l'art antérieur, notamment en ce qu'elle conditionne une expansion tridimensionnelle des cellules in vitro selon des critères de l'histologie des tissus in vivo, tels qu'une haute densité cellulaire, des contacts cellule à cellule et cellule à stroma qui sont des caractéristiques histologiques majeures des tissus physiologiques indispensables à leur bon fonctionnement. De ce fait, la présente invention permet notamment un maintien amélioré à long terme des propriétés et fonctions physiologiques des cellules en culture in vitro. Le dispositif de culture cellulaire ou bioréacteur selon l'invention est constitué d'une poche plane flexible délimitant un espace de culture cellulaire dans lequel les cellules sont confinées et cultivées dans un milieu liquide. Le dispositif selon l'invention est caractérisé en ce que l'espace de culture cellulaire intègre un textile synthétique poreux biocompatible et comporte deux voies opposées d'accès direct dans ledit espace de culture cellulaire. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, la porosité du textile conditionne une prolifération cellulaire dans un espace tridimensionnel et favorise une culture à haute densité cellulaire et l'établissement de contacts cellule à cellule. $j99p 1 ne caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, ledit textile peut aussi favoriser l'adhi!sion de fractions cellulaires stromales, la reconstitution d'un stroma cellulaire et moléculaire (matrice extracellulaire) et, l'établissement de contacts cellule à stroma. -2 - Selon une autre caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, à volume égal de l'espace de culture cellulaire et comparativement aux dispositifs de l'art antérieur, ledit textile offre une surface accrue de culture cellulaire et conditionne les cellules dans un volume réduit de milieu de culture. Cela permet notamment l'obtention d'un plus grand nombre de cellules et une diminution du coût de l'expérimentation. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, les deux voies opposées d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire permettent l'inoculation des cellules et facilitent la récolte desdites cellules, notamment par l'administration d'un milieu liquide par l'une de ces deux voies tandis que la récolte s'opère simultanément par l'autre voie. Le dispositif selon l'invention est également caractérisé en ce que les deux voies opposées d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire permettent d'établir une perfusion directe de milieu de culture dans l'espace de culture cellulaire, le milieu circulant dans les pores et interstices libres du textile au contact des cellules. Les deux voies opposées d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire sont connectées à tout type de moyen de mise en circulation de milieux liquides et d'alimentation des cellules, pour une perfusion directe de milieu de culture dans ledit espace de culture cellulaire, sous un flux liquide favorable à la circulation du milieu de culture dans les pores et interstices libres du textile. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, la perfusion directe de milieu de culture dans le textile permet notamment le maintien de conditions stables de culture cellulaire par un apport continu ou intermittent de milieu frais et le retrait simultané du milieu de culture usagé. On entend par milieu frais, au sens du présent document, un milieu rigoureusement défini (sans sérum) ou non, contenant les molécules, nutriments et/ou facteurs de croissance adaptés spécifiquement aux besoins, à la prolifération et/ou la différenciation des cellules cultivées dans ledit dispositif. On entend par milieu usagé, au sens du présent document, le milieu appauvri en sortie de culture et contenant les métabolites excrétés par les cellules dont certains sont inhibiteurs et/ou potentiellement toxiques pour la culture. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, la perfusion directe de milieu de culture dans le textile permet aussi un apport aux cellules cultivées de tout type de gaz dissous dans ledit milieu de culture. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, la perfusion directe de milieu de culture dans le textile permet aussi un apport contrôlé aux cellules cultivées de toutes molécules ou entités chimiques ou biologiques afin de déterminer l'activité desdites molécules ou entités et/ou influer sur le développement cellulaire et/ou modifier la nature même des cellules cultivées (l'apport de vecteurs de thérapie génique à titre d'exemple non limitatif). Le dispositif selon l'invention est également caractérisé en ce que les deux voies opposées d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire permettent de conditionner une rétention partielle -3- des cellules dans le textile. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, ce concept novateur de rétention cellulaire partielle consiste à favoriser le maintien dans le textile d'une fraction cellulaire au détriment d'une autre du fait notamment de propriétés différentes d'adhérence et d'une contrainte de cisaillement exercée par la vitesse du flux liquide. A titre d'exemples non limitatifs d'application, ce concept de rétention cellulaire partielle permet de maintenir une culture cellulaire à long terme dans le dispositif selon l'invention par un phénomène de dilution permanent de la population cellulaire; de séparer et/ou récupérer des fractions cellulaires distinctes selon des propriétés variables d'adhérence dépendantes des propriétés du textile utilisé et/ou du stade de développement des cellules en terme de prolifération et/ou différenciation. Selon des modes particuliers de réalisation du dispositif selon l'invention La poche est totalement imperméable aux liquides comme aux gaz. La poche est imperméable aux liquides mais cependant perméable aux gaz (air, 02, N2, CO, CO2...etc.). Le textile peut occuper la totalité du volume de l'espace de culture cellulaire de sorte que le volume de conditionnement liquide du dispositif selon l'invention correspond au volume vide défini par le degré de porosité dudit textile. Le textile peut occuper une part variable du volume de l'espace de culture cellulaire de sorte que le volume de conditionnement liquide du dispositif selon l'invention est supérieur au volume vide défini par le degré de porosité dudit textile. La figure annexée illustre le dispositif selon l'invention. En référence à cette figure, le dispositif selon l'invention comporte une poche flexible délimitant un espace de culture cellulaire (1) dans lequel les cellules sont confinées et cultivées dans un milieu liquide. L'espace de culture cellulaire (1) délimité par la poche, est caractérisé en ce qu'il intègre un textile synthétique poreux biocompatible (2) qui conditionne notamment une expansion tridimensionnelle des cellules. L'espace de culture cellulaire (1) délimité par la poche, est aussi caractérisé en ce qu'il comporte deux voies opposées (3) d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire (1) qui permettent notamment l'ensemencement des cellules dans le textile (2) et la récolte desdites cellules. Dans la forme de réalisation du dispositif selon la figure, le textile (2) occupe la totalité du volume de l'espace de culture cellulaire (1) délimité par la poche, de sorte que le volume de conditionnement liquide dudit dispositif correspond au volume vide défini par le degré de porosité dudit textile (2). Les cellules qui peuvent être mises en culture dans le dispositif selon l'invention sont notamment les micro-organismes et les cellules humaines, animales ou végétales procaryotes et eucaryotes normales ou modifiées. Même si le dispositif selon l'invention est particulièrement destiné à la production et manipulation in vitro de cellules utilisées à des fins thérapeutiques dans Il. - -4- le cadre de la transplantation desdites cellules ou de la constitution d'organes bioartificiels, il peut être également recommandé pour la reconstitution in vitro de tissus cellulaires à base de cellules normales ou lignées cellulaires dans le cadre d'une recherche fondamentale, d'études de toxicocinétique, de pharmacocinétique, de biocompatibilité, de la production de métabolites cellulaires et de toutes autres expérimentations basées sur la reconstitution in vitro desdits tissus cellulaires. Dans un mode préféré mais non limitatif de réalisation du dispositif selon l'invention, la poche plane flexible délimitant l'espace de culture cellulaire (1) et le textile (2) incorporé dans ledit espace de culture cellulaire (1) sont constitués de matériaux stérilisables avantageusement sélectionnés notamment parmi les matériaux synthétiques à base de polymères et/ou copolymères, alliant de façon préférentielle mais non limitative des critères de transparence et de souplesse. La transparence des matériaux associée à une moindre épaisseur dudit dispositif, favorise une observation microscopique du développement de la culture cellulaire à l'intérieur dudit dispositif La souplesse des matériaux permet de malaxer manuellement la suspension cellulaire lors de son inoculation et de sa récolte pour faciliter respectivement, un ensemencement cellulaire homogène dans le textile (2) puis le détachement et la récupération des cellules. La souplesse des matériaux permet également l'application d'une contrainte mécanique par une torsion et/ou un étirement sur l'ensemble du dispositif pouvant concourir notamment au concept précédemment décrit de rétention partielle des cellules dans le textile (2). Des propriétés spécifiques du textile (2) sont obtenues par le choix du matériau, du traitement dudit matériau, d'une structure tissée ou non-tissée, du diamètre, du type et de l'orientation préférentielle des fibres textiles, de la densité volumique et de la taille des pores; ces critères non limitatifs sont adaptés en fonction de la population cellulaire à cultiver. La conception du textile (2) peut également résulter de la juxtaposition ou du mélange de plusieurs types de matériaux aux caractéristiques et propriétés différentes pour notamment conditionner la culture d'une population cellulaire hétérogène. Les deux voies opposées (3) d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire (1) sont compatibles avec les techniques de remplissage, d'échantillonnage et de transfert approuvées pour les produits transfusables et confèrent audit dispositif des critères d'application médicale. Le dispositif selon l'invention aura des dimensions de l'ordre de 10 cm pour la largeur et 18 cm pour la longueur pour une épaisseur inférieure au cm. Dans le cas d'une application d'une perfusion directe de milieu de culture dans le textile (2), les deux voies opposées (3) d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire (1) du dispositif selon l'invention, sont connectées par une tubulure à deux réservoirs de stockage adaptés permettant respectivement l'alimentation en milieu frais et la collecte du milieu usagé. La circulation des milieux du réservoir d'alimentation en milieu frais vers le dispositif de culture cellulaire selon l'invention puis vers le réservoir de stockage du milieu usagé, est assurée par un système de pompe péristaltique ou tout autre moyen de circulation des -n - - milieux liquides. Un système de filtration et/ou d'élimination des bulles d'air peut être établi en sortie du réservoir d'alimentation. La circulation du milieu de culture peut être également réalisée à l'aide d'un circuit en boucle fermée, connecté à tout type de moyens d'analyse et d'étalonnage de tout ou partie des paramètres du milieu variables au cours de la culture. Le dispositif selon l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; il s'adapte au contraire et de façon simple à toutes les variantes utiles à la réalisation et l'exploitation d'une culture cellulaire et/ou d'une expérimentation particulière. En particulier, les dimensions du dispositif selon l'invention et par conséquent le volume de conditionnement de l'espace de culture cellulaire (1), sont aisément extrapolables selon notamment le volume de la culture cellulaire, ce qui confère audit dispositif un potentiel d'application industrielle. Selon une variante non illustrée, le dispositif selon l'invention est caractérisé en ce que le textile intègre un réseau membranaire perméable ou semi-perméable de perfusion sélective de milieu de culture dont, l'espace intramembranaire est en communication de part et d'autre dudit réseau avec deux nouvelles voies d'accès ménagées dans ledit dispositif, ces voies d'accès sont en communication avec tout type de moyen de mise en circulation de milieux liquides sous un débit favorable à la filtration tangentielle du milieu de culture au travers des parois poreuses dudit réseau perméable. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, ce réseau membranaire permet d'établir une perfusion sélective de milieu de culture dans le textile. Utilisable aux mêmes fins que la perfusion directe de milieu de culture dans le textile, la perfusion sélective de milieu de culture dans le textile permet cependant d'appliquer une restriction spécifique à la perfusion en fonction du seuil de perméabilité membranaire. Cette perfusion sélective de milieu de culture dans le textile peut garantir notamment un confinement absolu des cellules dans l'espace de culture cellulaire dudit dispositif lors de la perfusion. Dans un mode préféré mais non limitatif de réalisation du dispositif selon l'invention, les membranes constituant le réseau membranaire sont sous la forme de capillaires ou fibres creuses. Ces capillaires ou fibres creuses sont constitués de matériaux stérilisables avantageusement sélectionnés notamment parmi les matériaux synthétiques à base de polymères et/ou copolymères alliant de façon préférentielle mais non limitative des critères de transparence et de souplesse. Ils possèdent une paroi au moins perméable aux molécules d'un poids moléculaire inférieur ou égal à OkDa. Ils sont répartis uniformément dans le textile par juxtaposition, tissage, tricotage ou jacquard, de manière à pourvoir une perfusion homogène de la culture cellulaire. L'espace intracapillaire dudit réseau est en communication de part et d'autre avec deux voies d'accès ménagées dans ledit dispositif, ces voies sont compatibles avec les techniques de remplissage, d'échantillonnage et de transfert approuvées pour les produits transfusables. La perfusion 1 oW - -6- sélective du milieu de culture dans le textile peut être notamment réalisée dans un circuit en boucle fermée, connecté à tout type de moyens d'analyse et d'étalonnage de tout ou partie des paramètres variables de la perfusion, selon un débit adapté pour garantir la filtration tangentielle du milieu de culture au travers des parois poreuses desdits capillaires ou fibres creuses. Le dispositif selon l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; il s'adapte au contraire et de façon simple à toutes les variantes utiles à la réalisation et l'exploitation d'une culture cellulaire et/ou d'une expérimentation particulière. A titre d'exemple non limitatif, les deux systèmes de perfusion directe et sélective de milieu de culture dans le textile, peuvent être utilisés simultanément en combinaison. Ainsi, un flux direct de milieu de culture entrant dans le textile peut être combiné avec un flux sélectif de milieu de culture sortant dudit textile par le réseau membranaire perméable ou réciproquement. Un flux direct de milieu de culture entrant dans le textile associé à un flux sélectif de milieu de culture sortant dudit textile peut notanunment favoriser l'accumulation dans la culture cellulaire d'une molécule ou entité chimique ou biologique apportée par le flux direct de milieu de culture entrant dans le textile, dans la mesure o le réseau membranaire conditionnant le flux sélectif de milieu de culture sortant dudit textile demeure imperméable pour ladite molécule ou entité (accumulation de vecteurs de thérapie génique dans une population cellulaire cible à modifier génétiquement à titre d'exemple non limitatif). Selon une autre variante non illustrée, le dispositif selon l'invention est caractérisé en ce que le textile intègre un réseau membranaire perméable ou semi-perméable d'alimentation gazeuse dont, l'espace intramembranaire est en communication de part et d'autre dudit réseau avec deux nouvelles voies d'accès ménagées dans ledit dispositif, ces voies d'accès sont en communication avec tout type de moyen de mise en circulation ou diffusion des gaz sous une tension favorable aux échanges gazeux avec la culture cellulaire au travers des parois dudit réseau perméable. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, ce réseau membranaire permet un apport gazeux contrôlé directement au sein du textile et facilite des échanges gazeux rapides avec la culture cellulaire en ce qui concerne notamment l'apport d'oxygène et le retrait de dioxyde de carbone. Dans un mode préféré mais non limitatif de réalisation de cette caractéristique, les membranes constituant ledit réseau sont sous la forme de capillaires ou fibres creuses. Ces capillaires ou fibres creuses sont constitués de matériaux stérilisables avantageusement sélectionnés notamment parmi les matériaux synthétiques à base de polymères et/ou copolymères alliant de façon préférentielle mais non limitative des critères de transparence et de souplesse. Ils possèdent une paroi hydrophobe perméable à l'air, 02, N2, CO, C02...etc. Ils sont répartis uniformément dans le textile par juxtaposition, tissage, tricotage ou jacquard, de manière a pourvoir une alimentation gazeuse homogène de la culture cellulaire. L'espace intracapillaire dudit réseau est en - 7communication de part et d'autre avec deux voies d'accès ménagées dans ledit dispositif, ces voies sont compatibles avec les techniques de remplissage, d'échantillonnage et de transfert approuvées pour les produits transfusables. Les gaz sont apportés par un générateur de gaz relié audit réseau et, connecté à tout type de moyens d'analyse et d'étalonnage de tout ou partie des paramètres variables de l'alimentation gazeuse. Le dispositif selon l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; il s'adapte au contraire et de façon simple à toutes les variantes utiles à la réalisation et l'exploitation d'une culture cellulaire et/ou d'une expérimentation particulière. A titre d'exemple non limitatif, l'alimentation gazeuse peut être conditionnée par la simple diffusion dans le réseau membranaire, de gaz générés dans une enceinte d'incubation dudit dispositif (une étuve à C02 à titre d'exemple non limitatif). Selon une variante non illustrée, le dispositif selon l'invention intègre l'un et l'autre des deux réseaux membranaires perméables ou semi-perméables précédemment décrits. Selon une caractéristique avantageuse du dispositif selon l'invention, ce double réseau de perfusion sélective de milieu de culture et d'apport gazeux dans le textile permet une gestion simultanée et/ou indépendante ou combinée des conditions de perfusion de milieu de culture et d'apport des gaz au sein de la culture cellulaire. Ce dispositif selon l'invention s'adapte de façon simple à toutes les variantes utiles à la réalisation et l'exploitation d'une culture cellulaire et/ou d'une expérimentation particulière. Le dispositif selon l'invention est également caractérisé en ce qu'il peut être monté en série avec l'établissement d'une communication de fluides liquides et/ou gazeux entre chaque dispositif du montage résultant. Selon une caractéristique avantageuse dudit montage conforme à l'invention, le montage permnet notamment la culture simultanée de plusieurs types cellulaires et la circulation d'un milieu de culture conditionné d'un dispositif à l'autre c'est à dire, d'une culture cellulaire à une autre. Ainsi, I'activité métabolique d'une culture cellulaire peut alors alimenter et/ou influer sur le développement d'une autre culture cellulaire sans contacts directs entre les différentes populations de cellules. Un système de filtration cellulaire peut être établi entre chaque dispositif pour garantir un confinement absolu des différentes populations cellulaires. Dans un mode préféré mais non limitatif de réalisation de cette caractéristique, les dispositifs selon l'invention utilisés pour ledit montage sont en communication liquide par l'intermédiaire d'un réseau membranaire perméable capillaire de perfusion sélective de milieu de culture dans le textile. L'espace intracapillaire dudit réseau sert alors à la conduite du milieu conditionné d'un dispositif à l'autre et garantit un confinement absolu des différentes populations cellulaires par la non circulation de cellules entre chaque dispositif. I_ w - -8- Ce montage en série de plusieurs dispositifs selon l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; il s'adapte au contraire et de façon simple à toutes les variantes utiles à la réalisation et l'exploitation de cultures cellulaires simultanées et/ou d'une expérimentation particulière. A titre de premier exemple non limitatif, ce montage est favorable à la circulation de vecteurs de thérapie génique issus d'un dispositif selon l'invention dans lequel des cellules productrices de ces vecteurs sont cultivées, vers un autre dispositif selon l'invention dans lequel les cellules cibles à modifier génétiquement sont cultivées. A titre de second exemple non limitatif, ce montage associé au concept de rétention cellulaire partielle, est favorable à la circulation de cellules d'un dispositif selon l'invention vers un autre. Dans un mode préféré mais non limitatif de réalisation de cet exemple, les cellules peuvent circuler d'un dispositif selon l'invention vers un autre par l'établissement d'une perfusion directe du milieu de culture dans le textile d'un espace de culture cellulaire à l'autre. Pour ce montage, le choix de dispositifs selon l'invention intégrant un réseau membranaire de perfusion sélective de milieu de culture et/ou un réseau membranaire d'apport gazeux permet alors l'application particulière d'une perfusion sélective de milieu de culture et/ou d'une alimentation gazeuse dans le textile de chacun desdits dispositifs. Les cellules circulent donc d'un dispositif à l'autre avec l'application de conditions distinctes et spécifiques de développement cellulaire dans chacun desdits dispositifs. La nature et les propriétés du textile peuvent également concourir aux conditions particulières de développement cellulaire dans chacun desdits dispositifs. La conception d'un tel montage est particulièrement adapté à l'expansion in vitro de populations cellulaires dont il convient de scinder notamment les étapes de prolifération et de différenciation qui relèvent de l'application de conditions de culture différentes. A titre d'exemple non limitatif, il s'adapte à l'expansion in vitro des cellules hématopolétiques avec l'établissement: dans un premier dispositif selon l'invention, de conditions de culture favorables en termes de milieu de culture et d'apport gazeux à l'expansion (étape d'amplification) du compartiment des cellules souches adhérentes sur un stroma; de la circulation des progéniteurs non adhérents pour un ensemencement continu d'un second dispositif selon l'invention; dans ce second dispositif, de conditions de culture spécifiques de la différenciation (étape de maturation) desdits progéniteurs permettant la préparation spécifique et la récupération de tous types de cellules sanguines matures ou substituts de plasma. -9- REVENDICATIONS 1) Dispositif de culture cellulaire ou bioréacteur pour l'expansion tridimensionnelle in vitro de cellules du type, constitué d'une poche plane flexible de volume variable délimitant un espace de culture cellulaire (1) dans lequel les cellules sont confinées et cultivées dans un milieu liquide, caractérisé en ce que cet espace de culture cellulaire intègre un textile synthétique poreux biocompatible (2) et comporte deux voies opposées (3) d'accès direct. 2) Dispositif selon la revendication I caractérisé en ce que la poche délimitant l'espace de culture cellulaire (1) comportant le textile (2) est totalement imperméable aux liquides comme aux gaz. 3) Dispositif selon la revendication I caractérisé en ce que la poche délimitant l'espace de culture cellulaire (1) comportant le textile (2) est imperméable aux liquides mais perméables aux gaz (air, 02, N2, CO, C02,...etc.). 4) Dispositif selon l'une quelconque des revendications I à 3 caractérisé en ce que le textile (2) occupe la totalité du volume de l'espace de culture cellulaire (1) de sorte que le volume de conditionnement liquide du dispositif selon l'invention correspond au volume vide défini par le degré de porosité dudit textile. ) Dispositif selon l'une quelconque des revendications I à 3 caractérisé en ce que le textile (2) occupe une part du volume de l'espace de culture cellulaire (1) de sorte que le volume de conditionnement liquide du dispositif selon l'invention est supérieur au volume vide défini par le degré de porosité dudit textile. 6) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que le textile (2) intègre un réseau membranaire permeable ou semi-perméable pour établir une perfusion sélective de milieu de culture dans ledit textile, l'espace intramenibranaire est en communication de part et d'autre dudit réseau avec deux nouvelles voies d'accès ménagées dans ledit dispositif, ces voies d'accès sont en communication avec tout type de moyen de mise en circulation de milieux liquides sous un débit favorable à la filtration tangentielle du milieu de culture au travers des parois poreuses dudit réseau perméable. 7) Dispositif selon la revendication 6 caractérisé en ce que les membranes constituant le réseau membranaire sont sous la forme de capillaires ou fibres creuses, possèdent une paroi au moins perméable aux molécules d'un poids moléculaire inférieur ou égal à 100kDa et, sont répartis uniformément dans le textile par juxtaposition. 8) Dispositif selon la revendication 6 caractérisé en ce que les membranes constituant le réseau membranaire sont sous la forme de capillaires ou fibres creuses, possèdent une paroi au moins perméable aux molécules d'un poids moléculaire inférieur ou égal à 10OkDa et, sont répartis uniformément dans le textile par tissage, tricotage ou jacquard. l[E - - 10- 9) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que le textile (2) intègre un réseau membranaire perméable ou semi-perméable pour établir une alimentation gazeuse, l'espace intramembranaire est en communication de part et d'autre dudit réseau avec deux nouvelles voies d'accès ménagées dans ledit dispositif, ces voies d'accès sont en communication avec tout type de moyen de mise en circulation ou diffusion des gaz sous une tension favorable aux échanges gazeux avec la culture cellulaire au travers des parois dudit réseau perméable. ) Dispositif selon la revendication 9 caractérisé en ce que les membranes constituant ledit réseau sont sous la forme de capillaires ou fibres creuses, possèdent une paroi hydrophobe perméable aux gaz (air, 02, N2, CO, C02...etc.) et, sont répartis uniformément dans le textile par juxtaposition. 1) Dispositif selon la revendication 9 caractérisé en ce que les membranes constituant ledit réseau sont sous la forme de capillaires ou fibres creuses, possèdent une paroi hydrophobe perméable aux gaz (air, 02, N2, CO, C02...etc.) et, sont répartis uniformément dans le textile par tissage, tricotage ou jacquard. 12) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que les différents compartiments dudit dispositif sont constitués de matériaux stérilisables et souples avantageusement sélectionnés parmi les matériaux textiles à base de polymères et/ou copolymères synthétiques. 13) Dispositif selon la revendication 12 caractérisé en ce que le textile (2) possède des propriétés spécifiques, définies par le choix du matériau, du traitement dudit matériau, d'une structure tissée ou non- tissée, du diamètre, du type et de l'orientation préférentielle des fibres textiles, de la densité volumique et de la taille des pores entre autres critères cruciaux et, adaptées en fonction de la population cellulaire cultivée. 14) Dispositif selon la revendication 13 caractérisé en ce que la conception du textile (2) résulte de la juxtaposition ou du mélange de plusieurs types de matériaux aux caractéristiques différentes et propriétés spécifiques. ) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce qu'il est transparent et permet une observation microscopique de la culture cellulaire directement dans ledit dispositif 16) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que les voies d'accès dans l'espace de culture cellulaire et dans l'espace intramembranaire des réseaux de perfusion sélective de milieu de culture ou d'alimentation gazeuse sont compatibles avec les techniques de remplissage, d'échantillonnage et de transfert approuvées pour les produits transfisables. !!- - 11 - 17) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que les deux voies opposées (3) d'accès direct dans l'espace de culture cellulaire (1) sont connectées à tout type de moyen de mise en circulation de milieux liquides et d'alimentation des cellules, pour une perfusion directe de milieu de culture dans ledit espace de culture cellulaire, sous un flux liquide favorable à la circulation du milieu de culture dans les pores et interstices libres du textile (2). 18) Dispositif selon la revendication 17 caractérisé en ce que la vitesse du flux liquide de la perfusion directe de milieu de culture dans l'espace de culture cellulaire (1) conditionne une rétention partielle des cellules dans le textile (2). 19) Dispositif selon la revendication 18 caractérisé par l'application d'une contrainte mécanique variable sur ledit dispositif concourant à la rétention partielle des cellules dans le textile (2). ) Dispositif selon la revendication 17 caractérisé en ce que les deux systèmes de perfusion directe et sélective de milieu de culture dans le textile sont utilisés simultanément en combinaison. 21) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé ce qu'il est monté en série par l'établissement d'une communication de milieux liquides et/ou gazeux entre chaque dispositif, selon l'une quelconque des revendications précédentes, du montage résultant. =!I[