Brevet FR2785618A1 — publié le 20000512

Gène humain htfIIIA et la protéine codée hTFIIIA La présente invention concerne le gène codant pour le facteur de transcription humain nommé ci-après gène htfIIIA (ou htfC2) et la protéine codée hTFIIIA ainsi que l'utilisation de ce gène htfIIIA et celui de la protéine codée hTFIIIA dans le diagnostic et l'identification de certaines maladies liées au mécanisme de la transcription. Nous appellerons ci-après tfIIIA (ou tfC2) le gène codant pour le facteur de transcription TFIIIA et htfIIIA le gène codant pour le facteur de transcription humain hTFIIIA. Le gène humain htfIIIA code donc pour la protéine correspondante hTFIIIA. Nous utiliserons également ci-après les abréviations suivantes : AA pour acides aminés, AN pour acides nucléiques, pb pour paires de bases, ADN pour acide désoxyribonucléique, ADNc pour ADN complémentaire, ARN pour acide ribonucléique et RNase pour ribonucléase et C pour désoxycytidine. On utilisera également le terme screening qui désigne une technique de criblage spécifique et le terme primer qui désigne un oligonécléotide utilisé en amorce. Le gène tfIIIA et la protéine correspondante TFIIIA seraient impliqués dans la régulation du mécanisme biologique de la transcription comme indiqué ci-après. Depuis que la protéine TFIIIA a été purifiée comme facteur de transcription pour la première fois en 1980 à partir d'ovocytes de Xénope [Segall et Al, J. Biol. Chem., 255,11986-11991 (1980) ], des travaux ont été menés in vivo et in vitro dans le Xénope pour étudier le mécanisme de contrôle de la transcription exercé par TFIIIA. On a ainsi montré que TFIIIA de Xénope est nécessaire pour l'initiation de la transcription du gène ARN 5S [Sakonji et al, Cell 19, 13-25 (1980) ] et se lie à une région de contrôle interne du gène ARN 5S [Bogenhagen et al, Cell, 19,27-35 (1980)]. La séquence en nucléotides de l'ADNc de tfIIIA de Xénope et la séquence correspondante d'acides aminés ont déjà été publiées [Ginberg et al, Cell 39,479-489 (1984) ]. On peut noter que ce gène code pour une structure en 9 doigts de zinc, un doigt de zinc correspondant à la répétition du motif CYS2 HIS2 (C2H2). Cette structure en doigt de zinc est considérée comme un domaine essentiel pour un groupe de protéines qui se lient à l'ADN (DNA binding proteins) [Miller et al, Embo J., 4, 1607-1614 (1985)]. On connaît ainsi dans l'être humain des facteurs de transcription se liant à l'ADN qui possèdent également cette structure en doigt de zinc tels que par exemple XT1 du gène de la tumeur humaine de Wilms, [Gessier et al, Nature, 343, 774-778 (1990) ], le répresseur humain de transcription YY1 [SHI et al, Cell, 67,377-388 (1991) ], la protéine MAZ associée au gène humain MYC [Bossone et al, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 89, 7452-7456 (1992) ] ou encore spl [Kuwahara et al, J. Biol. Chem., 29, 8627-8631 (1990)]. Des travaux ont été effectués afin d'isoler le gène humain htfIIIA, mais aucun jusqu'ici n'a abouti à mettre en évidence la véritable séquence du gène htfIIIA. On peut citer ainsi d'une part les travaux décrits dans la demande européenne EP 0704526 (Fujisawa et al), et repris dans l'article : Arakawa et al (1995), Cytogenet Cell Genet 70,235-238, qui ont abouti à une séquence que nous appellerons htfIIIA de Arakawa et d'autre part les travaux décrits dans l'article : DREW et al (1995), Gene 159,215-218, qui ont abouti à une séquence que nous appellerons htfIIIA de DREW. Ces séquences htfIIIA de DREW et de ARAKAWA sont représentées respectivement aux figures 4 et 5 ci-après. Les documents indiqués ci-dessus décrivent donc chacun une séquence du gène htfIIIA mais ces deux séquences diffèrent l'une de l'autre par quelques nucléotides et diffèrent du gène htfIIIA de la présente demande comme indiqué ci-après. La présente invention a permis d'isoler le gène codant pour le facteur de transcription humain hTFIIIA. La présente invention a également permis de révéler la séquence d'acides nucléiques du gène htfIIIA et également la séquence d'acides aminés de la protéine hTFIIIA codée par ce gène. La présente invention a ainsi pour objet la séquence d'ADN du gène htfIIIA codant pour une protéine ayant la fonction biologique du facteur de transcription humain hTFIIIA. La présente invention a précisément pour objet la séquence d'ADN du gène htfIIIA du facteur de transcription humain hTFIIIA telle que définie ci-dessus codant pour la séquence d'acides aminés SEQ ID N 2. Une telle séquence SEQ ID n 2 de la présente invention comprend donc 365 acides aminés. La présente invention a aussi pour objet la séquence d'ADN du gène htfIIIA comme défini ci-dessus correspondant à la séquence de nucléotides SEQ ID N 3. La séquence SEQ ID N 3 comprend donc 1273 nucléotides. La présente invention a notamment pour objet la séquence d'ADN du gène htfIIIA comme défini ci-dessus correspondant à la séquence de nucléotides SEQ ID N 4. La séquence SEQ ID N 4 comprend donc 1213 nucléotides. La séquence SEQ ID N 1 représente sur la ligne supérieure la séquence de nucléotides du gène htfFIIIA selon la présente invention soit SEQ ID N 3, et sur la ligne inférieure, la séquence correspondante en acides aminés (AA) de cette séquence de nucléotides soit SEQ ID N 2. Les figures 1 et 2 ci-après représentent sur la ligne supérieure la séquence d'AA codée par htfIIIA de la présente invention SEQ ID N 2 et sur la ligne inférieure, les séquences d'AA codées respectivement par les gènes htfIIIA de DREW, à la figure 1, et de ARAKAWA, à la figure 2, ces séquences de DREW et ARAKAWA étant telles que publiées dans les documents référencés ci-dessus. La figure 3 ci-après représente la comparaison des séquences d'AA codées respectivement par les gènes htfIIIA de DREW et de ARAKAWA avec sur la ligne supérieure, la séquence d'AA codée par htfIIIA de ARAKAWA et sur la ligne inférieure, la séquence d'AA codée par htfIIIA de DREW. La figure 2 montre donc que la séquence d'AA correspondante de htfIIIA selon la présente invention comporte des différences avec la séquence d'AA publiée dans l'article de ARAKAWA ou dans EP 0704 526, notamment aux positions respectives correspondantes 105 et 163,156 et 214, 320 à 329 et 378 à 387, ces positions étant données par rapport à la numérotation indiquée sur la figure 2. Cette figure 2 montre également que la séquence d'AA codée par htfIIIA de la présente invention débute en position 59 de la séquence en AA de htfIIIA de ARAKAWA. La figure 3 montre que les séquences d'AA codées par htfIIIA de ARAKAWA et de DREW comportent des différences aux positions respectives correspondantes 214 et 154,378-387 et 318-327, ces positions étant données par rapport à la numérotation indiquée sur la figure 3. La figure 5 montre que la séquence htfIIIA de ARAKAWA code pour une protéine dont la séquence en acides aminés, indiquée dans EP 0704 526, commence par l'AA méthionine spécifié par le codon ATG qui se trouve en position 20-22 et la traduction s'arrête à un codon TAA. Si l'on compare la séquence de nucléotides de htfIIIA selon la présente invention SEQ ID N 3 avec la séquence de nucléotides de EP 0704 526 soit htfIIIA de ARAKAWA représentée à la figure 5 (séquence pll-12-13 de EP 0704 526), on constate qu'il manque un nucléotide C à la position 127 de la séquence de EP 0704 526. Ce nucléotide C supplémentaire a pour conséquence un décalage dans la traduction en acides aminés de cette séquence de nucléotides : en effet, l'ATG qui se trouve à la position 20-22 de la séquence de ARAKAWA représentée à la figure 5 et qui est considéré comme codon initiateur de la synthèse protéique par ARAKAWA n'est donc plus, du fait de ce décalage, dans la même phase de lecture. En tenant compte de ce nucléotide supplémentaire C, la traduction en AA fait apparaître un codon de terminaison TGA en position 57-59 de la séquence de ARAKAWA représentée à la figure 5. Par conséquent, le codon initiateur de la synthèse protéique selon la présente invention est localisée en aval de ce codon de terminaison. Des expériences de traduction in vitro de SEQ ID N 4 et des tests d'expression dans des cellules de mammifères telles que des cellules Cos ont permis d'identifier le codon d'initiation de la synthèse protéique de hTFIIIA selon la présente invention. Ce codon initiateur de la synthèse protéique de hTFIIIA selon la présente invention est le codon CTG en position 176- 178 de SEQ ID N 3 (qui correspondrait à la position 194-196 de la séquence de ARAKAWA représentée à la figure 5). La partie codante du gène htfIIIA de la présente invention commence donc par ce codon CTG qui se trouve à la position 176-178 de SEQ ID N 3 qui devrait correspondre à l'AA Leucine et qui correspond en fait à l'AA Méthionine puisque ce codon est reconnu comme codon initiateur (ref : David S. Peabody The Journal of Biological Chemistry, vol. 264, n 9, pp. 5031-5035,1989). En conséquence, la protéine hTFIIIA de ARAKAWA est plus longue comme le montre la figure 2, que la protéine hTFIIIA de la présente invention. Par ailleurs, si l'on compare la protéine hTFIIIA de la présente invention et la protéine hTFIIIA de DREW, (comparaison représentée à la figure 1), on constate que l'acide aminé thréonine en position 105 de la protéine hTFIIIA de la présente invention correspond à un résidu asparagine en position 103 dans la séquence hTFIIIA de DREW et que les deux premiers AA, M et D de la protéine hTFIIIA de la présente invention n'ont pas été déterminés pour la protéine hTFIIIA de DREW. L'absence des codons spécifiant ces AA et notamment l'absence du codon initiateur de la synthèse protéique, ne permet pas l'expression de cette protéine. La séquence htfIIIA de DREW représentée à la figure 4 est donc incomplète, comme le reconnaissent les auteurs de la publication référencée ci-dessus (DREW et al à la page 216 lignes 39-41). On peut noter d'ailleurs que les auteurs de cet article pensent également que le codon initiateur de la séquence htfIIIA de DREW devrait correspondre à une méthionine codée par ATG comme dans la séquence de ARAKAWA. Le gène htfIIIA selon la présente invention est donc différent des gènes htfIIIA de DREW et ARAKAWA (EP 0704526) et code pour une protéine hTFIIIA dont la séquence en AA est différente de celle des protéines hTFIIIA de DREW et ARAKAWA. La présente invention a ainsi particulièrement pour objet la séquence d'ADN du gène htfIIIA comme défini cidessus contenant la séquence de nucléotides SEQ ID N 3. La présente invention a plus particulièrement pour objet la séquence d'ADN comme défini ci-dessus ayant la séquence commençant au nucléotide 176 et se terminant au nucléotide 1270 de SEQ ID N 3. Une telle séquence de la présente invention commence donc à un codon CTG et comprend donc 1095 nucléotides. La présente invention a également pour objet la séquence d'ADN codant pour le facteur de transcription humain hTFIIIA comme défini ci-dessus ainsi que les séquences d'ADN qui hybrident avec celle-ci et/ou présentent des homologies significatives avec cette séquence ou des fragments de celleci et codant pour des protéines ayant la même fonction. Par séquences qui hybrident, on inclut les séquences d'ADN qui hybrident avec l'une des séquences d'ADN ci-dessus sous des conditions standard de stringence élevée, moyenne ou basse. Par protéines ayant la même fonction, on inclut les polypeptides ayant la même fonction de facteur de transcription. Les conditions de stringence sont celles réalisées dans les conditions connues de l'homme du métier telles que celles décrites par Sambrook et al (1989) Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989. De telles conditions de stringence sont par exemple une hybridation à 65 C, pendant 18 heures dans une solution 5 x SSPE ; 10 x Denhardt's ; 100g/ml ADNss ; 1 % SDS suivie de 3 lavages pendant 5 minutes avec 2 x SSC ; 0,05 % SDS, puis 3 lavages pendant 15 minutes à 65 C dans 1 x SSC ; 0,1 % SDS. Les conditions de forte stringence comprennent par exemple une hybridation à 65 C, pendant 18 heures dans une solution 5 x SSPE ; 10 x Denhardt's ; 100g/ml ADNss ; 1 % SDS suivie de 2 lavages pendant 20 minutes avec une solution 2 x SSC ; 0,05 % SDS à 65 C suivis d'un dernier lavage pendant 45 minutes dans une solution 0,1 x SSC ; 0,1 % SDS à 65 C. Les conditions de stringence moyenne comprennent par exemple un dernier lavage pendant 20 minutes dans une solution 0,2 x SSC, 0,1 % SDS à 65 C. Par séquences qui présentent des homologies significatives, on inclut les séquences ayant une identité de séquence nucléotidique d'au moins 50 % avec l'une des séquences d'ADN ci-dessus et qui codent pour une protéine ayant la même fonction de facteur de transcription. La présente invention a également pour objet la séquence d'ADN comme défini ci-dessus comprenant des modifications introduites par suppression, insertion et/ou substitution d'au moins un nucléotide codant pour une protéine ayant la même activité biologique que le facteur de transcription humain hTFIIIA. La présente invention a notamment pour objet la séquence d'ADN telle que définie ci-dessus ainsi que les séquences d'ADN similaires qui ont une homologie de séquence nucléotidique d'au moins 50 % ou au moins 60 % et de préférence au moins 70 % avec ladite séquence d'ADN. La présente invention a ainsi également pour objet la séquence d'ADN telle que définie ci-dessus ainsi que les séquences d'ADN qui codent pour une protéine dont la séquence en AA a une homologie d'au moins 40 % et notamment de 45 % ou d'au moins 50 %, plutôt au moins 60 % et de préférence au moins 70 % avec la séquence en AA codée par ladite séquence d'ADN. Le gène de la présente invention est représenté comme une séquence ADN simple brin mais il est entendu que la présente invention inclut la séquence ADN complémentaire de cette séquence ADN simple brin et inclut également la séquence ADN dite double brin constituée de ces deux séquences ADN complémentaires d'une de l'autre. La séquence ADN de la présente invention est un exemple de combinaison de codons codant pour les acides aminés correspondant à la séquence d'acides aminés SEQ ID N 2 mais il est entendu également que la présente invention inclut toute autre combinaison arbitraire de codons codant pour cette même séquence d'acides aminés SEQ ID N 2. La séquence d'ADN telle que définie ci-dessus ou cette séquence d'ADN modifiée comme indiquée ci-dessus, peut être préparée selon les techniques connues de l'homme du métier et notamment celles décrites dans l'ouvrage de Sambrook, J. Fritsh, E. F. ≈Maniatis, T. (1989) intitulé : Molecular cloning : a laboratory manual , Laboratory, Cold Spring Harbor NY. Notamment la séquence d'ADN ci-dessus peut être une séquence d'ADNc obtenue par identification des parties 3' et 5' de la séquence codante, puis amplification de ces parties à l'aide d'une ADN polymérase telles que la pfu polymérase ou d'autres ADN polymérases. L'introduction, dans la séquence des oligonucléotides utilisés pour la PCR, de sites de restriction tels que Hind III ou SmaI permet le clonage de ces fragments dans des vecteurs adéquats et ensuite la reconstitution de la séquence complète recherchée. Une description détaillée des conditions opératoires dans lesquelles a été réalisée la présente invention est donnée ci-après. L'invention a tout particulièrement pour objet le polypeptide ayant la fonction de facteur de transcription humain hTFIIIA et ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID N 2 codée par la séquence d'ADN comme défini ci-dessus et les analogues de ce polypeptide. Par analogues, on entend les polypeptides dont la séquence d'acides aminés a été modifiée par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés mais qui conservent la même fonction biologique. De tels polypeptides analogues peuvent être produits spontanément ou peuvent être produits par modification post-transcriptionnelle ou encore par modification de la séquence ADN de la présente invention comme indiqué ci-dessus, en utilisant les techniques connues de l'homme du métier : parmi ces techniques, on peut citer notamment la technique de mutagénèse dirigée (Kramer, W., et al., Nucl. Acids Res., 12., 9441 (1984) ; Kramer, W. and Fritz, H. J. , Methods in Enzymology, 154 , 350 (1987) ; Zoller, M. J. and Smith, M. Methods in Enzymology, 100,468 (1983)). La synthèse d'ADN modifiés peut également être faite en utilisant des techniques de synthèse chimique bien connues telles que par exemple la méthode au phosphotriester [Letsinger, R. L and Ogilvie, K. K., K. Am. CHEM. Soc., 91,3350 (1969) ; Merrifield, R. B., Sciences, 150, 178 (1968) ] ou la méthode à la phosphoamidite [Beaucage, S. L and Caruthers, M .H., Tetrahedron Lett., 22,1859 (1981) ; McBRIDE, L. J. and Caruthers, M.H. Tetrahedron Lett., 24 245 (1983) ] ou encore par la combinaison de ces méthodes. Les polypeptides de la présente invention peuvent donc être préparés par les techniques connues de l'homme du métier, notamment partiellement par synthèse chimique ou encore par la synthèse de l'ADNc par expression dans une cellule hôte procaryote ou eucaryote comme indiqué ci-après. La présente invention a particulièrement pour objet le procédé de préparation de la protéine recombinante hTFIIIA ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID N 2. Ce procédé inclut l'expression de la séquence d'ADN comme défini cidessus dans un hôte approprié puis l'isolement et la purification de ladite protéine recombinante. Pour produire le polypeptide de la présente invention, on peut notamment utiliser les techniques de l'ADN recombinant en utilisant les méthodes de génie génétique et de culture cellulaire connues de l'homme du métier. On peut ainsi procéder par les étapes suivantes : d'abord préparation du gène approprié, puis incorporation de ce gène dans un vecteur, transfert du vecteur porteur du gène dans une cellule hôte appropriée, expression du gène et enfin, purification de la protéine codée par ce gène. Les séquences d'ADN selon la présente invention et notamment SEQ ID N 3 ou SEQ ID N 4 peuvent être préparées selon les techniques connues de l'homme du métier, notamment par synthèse chimique, par criblage d'une banque génomique ou d'une banque d'ADNc à l'aide de sondes d'oligonucléotides de synthèse par les techniques connues d'hybridation ou encore par réverse transcriptase à partir d'ARN messager (ARNm). L'avantage de la technique comprenant d'abord l'isolement d'ARNm par extraction des ARN totaux puis la synthèse d'ADNc à partir de ces ARNm par réverse transcriptase réside notamment dans le fait que l'ARNm ne contient pas les introns alors que ces séquences non codantes sont présentes dans l'ADN génomique. On peut donc notamment procéder comme suit. On extrait d'abord les ARN totaux provenant d'une lignée cellulaire telle que par exemple la lignée cellulaire Raji (RNA Plus, BIOPROBE) et à partir de ces ARN, on procède ensuite à la synthèse de l'ADNc recherché en utilisant notamment un kit tel que ARN PCR kit (Perkin Elmer). On peut noter que dans le cadre de la présente invention, deux oligonucléotides localisés aux extrémités de la séquence codante htfIIIA publiée par ARAKAWA (figure 5) ont été synthétisés soit OLT5 et OLT3 définis comme suit : - OLT5 : 5' CGGGGTACCAAAA ATG CGC AGC AGC GGC GCC GAC 3' soit SEQ ID N 5 et - OLT3 : 5' CGGTCTAGA TTA GCC AAG GGT AAG TAC TGC 3' soit SEQ ID N 9 mais ces deux oligo-nucléotides n'ont pas permis d'obtenir un produit d'amplification par PCR. Ainsi dans le cadre de la présente invention, la séquence codante de hTFIIIA a été isolée en deux étapes : d'abord identification de la partie 3' puis identification de la partie 5'. Après identification des parties 3' et 5', un site de restriction HindIII localisé sur chacun de ces fragments a ensuite permis de reconstituer la séquence complète recherchée comme indiqué ci-après dans la partie expérimentale. On a donc procédé comme suit : La partie 3' a été amplifiée à l'aide de la pfu polymérase (STRATAGENE) en utilisant comme amorce les oligonucléotides OLT5. 2 et TFIIIA 3'SmaI soit : - OLT5.2 : 5'TCCTTCCCTGACTGCAGCGCC 3' soit SEQ ID N 6 et - TFIIIA3'SmaI : 5'CCT CCC GGG GCC AAG GGT AAG TAC TGC AAC 3'soit SEQ ID N 10 Les amorces d'amplification ou primers sont choisies en fonction de la partie à amplifier selon des critères usuels pour l'homme du métier. Les amorces utilisées dans la présente invention ont été choisies dans la séquence htfIIIA de ARAKAWA représentée à la figure 5. Les séquences SEQ ID N 6, SEQ ID N 7 et SEQ ID N 8 sont situées respectivement aux positions 320-340 (5'#3'), 361- 380 (séquence réverse et complémentaire) et 391-410 (séquence réverse et complémentaire) de cette séquence htfIIIA de ARAKAWA. Les séquences SEQ ID N 5, SEQ ID N 9 et SEQ ID N 10 sont situées respectivement aux positions 20-40 (5'#3'), 1271 1291 (séquence réverse et complémentaire) et 1268-1288 (séquence réverse et complémentaire) de cette séquence htfIIIA de ARAKAWA. On peut noter que dans les séquences SEQ ID N 5, SEQ ID N 9 et SEQ ID N 10 contiennent les séquences correspondant aux sites d'enzymes de restriction soit respectivement KpnI, XbaI et SmaI. L'oligonucléotide TFIIIA 3' SmaI introduit un site de restriction SmaI en aval de la séquence codante. Ce site permet si nécessaire et si désiré la fusion de la séquence codant pour hTFIIIA avec une séquence codant pour un peptide épitope de l'hémaglutinine désigné TAG HA . L'expression de la séquence codant pour TFIIIA peut donc être associée à celle de la séquence codant pour TAG HA qui peut être détecté en analyse par Western blot, si le gène de fusion est exprimé. Pour l'identification de la partie 5', cette région a été isolée par la technique de PCR ancrée 5' (5 race System, GIBCO BRL ; pfu polymerase, STRATAGENE). Deux PCR successives ont été effectuées en utilisant comme amorce les oligonucléotides suivants : UAP et TFIIIAPCR5' pour la première PCR et UAP et TFIIIA SEQ2 pour la seconde PCR. UAP est un oligonucléotide fourni dans le kit. Ces oligonucléotides ont les séquences suivantes : - TFIIIAPCR5' : 5' CACAAACAAATGGTCTCC 3'soit SEQ ID N 8 - TFIIIA SEQ2 : 5' TGCACAGGTGCGCGTCAAGC 3'soit SEQ ID N 7. Les produits de ces PCR soit les fragments 5' et 3' amplifiés sont ensuite purifiés sur gel d'agarose et clonés en utilisant le TA cloning kit (INVITROGEN). On procède alors au séquençage : l'ADN plasmidique de plusieurs clones indépendants est préparé (QIAGEN Plasmids KIT) et les fragments correspondant à la séquence codante de hTFIIIA sont séquences sur les deux brins (Séquenceur ABI 377XL, PERKIN ELMER) . On peut donc procéder comme suit et selon les techniques usuelles de clonage connues de l'homme du métier et notamment on procède au clonage par insertion de chaque fragment dans un plasmide fourni avec le kit commercial (TA cloning Kit Invitrogen) puis transformation d'une souche bactérienne par le plasmide ainsi obtenu. On peut utiliser notamment la souche E. coli XL1 Blue. Les clones sont ensuite cultivés pour extraire l'ADN plasmidique selon les techniques classiques de l'homme du métier référencées ci-dessus (Sambrook, Fritsh et Maniatis). On procède au séquençage de l'ADN du fragment amplifié contenu dans l'ADN plasmidique. La compilation des données de la séquence ainsi obtenues fait apparaître qu'en 3', l'essentiel de la séquence isolée correspond à la séquence htfIIIA de Drew et al. En 5', la séquence la plus longue débute en position 80 de la séquence htfIIIA de Arakawa et al., représentée à la figure 2F, et fait apparaître l'insertion d'un nucléotide C en position 127 par rapport à cette séquence. Si l'on peut supposer que la synthèse de l'ADNc dans l'application de la technique décrite ci-dessus n'a pas été complète, l'insertion d'un nucléotide crée cependant un problème majeur. En effet, l'addition d'un nucléotide dans la séquence codante crée un décalage de la phase de lecture. Afin de vérifier la présence de ce nucléotide dans le gène htfIIIA, de l'ADN génomique humain a été analysé par PCR. Cet ADN a été soumis à une réaction PCR à l'aide de la pfu polymerase (STRATAGENE) ou de la Taq polymerase (Perkin Elmer) et en utilisant comme amorce les oligonucléotides OLT5 et TFIIIA SEQ2 nommés respectivement SEQ ID N 5 et SEQ ID N 7. Les deux produits PCR ont été clonés (TA cloning Kit) puis séquences. L'analyse des données de séquence confirme pour ces deux amplifications la présence de ce nucléotide C supplémentaire par rapport à la séquence htfIIIA de ARAKAWA. L'ATG décrit initialement comme codon initiateur de la synthèse protéique pour hTFIIIA de ARAKAWA ne peut donc plus être considéré comme tel. On procède ensuite à l'assemblage des séquences 5' et 3' et obtient un plasmide unique contenant la séquence recherchée de hTFIIIA de la présente invention. On reconstitue la séquence codante hTFIIIA complète de la façon suivante. On digère un clone issu de l'amplification de l'ADN génomique à l'aide des enzymes de restriction EcoRI et HindIII, et on obtient après purification, un fragment de 350 pb environ. On digère par ailleurs un clone issu de l'amplification de la partie 3' à l'aide des enzymes de restriction HindIII et SmaI et on obtient après purification, un fragment de 930 pb environ. On procède ensuite à la ligation de ces fragments dans le plasmide pYX223 (vecteur d'expression pour la levure RD) préalablement digéré par EcoRI et Smal. Un exposé détaillé des conditions dans lesquelles peuvent être menées les opérations indiquées ci-dessus est donné ci-après dans la partie expérimentale. On obtient ainsi un plasmide dans lequel est inséré le gène de la présente invention et on obtient ainsi également ce plasmide introduit dans une cellule hôte en opérant selon les techniques usuelles connues de l'homme du métier. Le polypeptide de la présente invention peut être obtenu par expression dans une cellule hôte contenant la séquence d'ADN codant pour le polypeptide de l'invention précédée d'une séquence promotrice convenable. La cellule hôte peut être une cellule procaryote, par exemple E. coli ou une cellule eucaryote telle que les levures comme par exemple les ascomycètes parmi lesquels les Saccharomyces cerevisiae ou encore des cellules mammifères comme les cellules Cos. La présente invention a particulièrement pour objet un vecteur d'expression contenant une séquence d'ADN comme défini ci-dessus. Ainsi un tel vecteur d'expression selon la présente invention contient une séquence d'ADN qui peut être la séquence de nucléotides SEQ ID N 3 ou la séquence commençant au nucléotide 176 et se terminant au nucléotide 1270 de SEQ ID N 3. Un tel vecteur d'expression selon la présente invention peut également contenir les séquences d'ADN qui hybrident avec les séquences définies ci-dessus et/ou présentent des homologies significatives avec ces séquences ou des fragments de celles-ci. Un tel vecteur d'expression selon la présente invention peut également contenir les séquences d'ADN qui comprennent des modifications introduites par suppression, insertion et/ou substitution d'au moins un nucléotide codant pour une protéine ayant la même activité biologique que le facteur de transcription humain hTFIIIA. Les vecteurs d'expression sont des vecteurs permettant l'expression de la protéine sous le contrôle d'un promoteur convenable. Un tel vecteur peut être un plasmide, un cosmide ou un ADN viral. Pour les cellules procaryotes, le promoteur peut être par exemple le promoteur lac, le promoteur trp, le promoteur tac, le promoteur P-lactamase ou le promoteur PL. Pour les cellules de levure, le promoteur peut être par exemple le promoteur PGK ou le promoteur GAL. Pour les cellules de mammifères, le promoteur peut être par exemple le promoteur SV40 ou les promoteurs de l'adénovirus. Des vecteurs type Baculovirus peuvent être aussi utilisés pour l'expression dans des cellules d'insectes. Les cellules hôtes sont par exemple des cellules procaryotes ou des cellules eucaryotes. Les cellules procaryotes sont par exemple E. coli, Bacillus ou Streptomyces. Les cellules hôtes eucaryotes comprennent des levures ainsi que des cellules d'organismes supérieurs, par exemple des cellules de mammifères ou des cellules d'insectes. Les cellules de mammifères sont par exemple des fibroblastes tels que des cellules CHO ou BHK de hamster et des cellules Cos de singe. Les cellules d'insectes sont par exemple des cellules SF9. La présente invention concerne donc un procédé qui comprend l'expression de la protéine hTFIIIA dans une cellule hôte transformée par un ADN codant pour la séquence polypeptidique correspondant à la séquence SEQ ID N 2. Pour la réalisation de la présente invention, les vecteurs utilisés peuvent être par exemple pGEX ou pBAD et la cellule hôte peut être E. coli ou par exemple le vecteur pYX223 et la cellule hôte peut être également S. cerevisiae. La présente invention a notamment pour objet une cellule hôte transformée avec un vecteur tel que défini ci-dessus contenant le gène htfIIIA selon la présente invention. La présente invention a très précisément pour objet le plasmide déposé à la CNCM sous le numéro 1-2071. Il s'agit ainsi de la souche XL1-Blue/pBShtfc2LHA renfermant le gène htfIIIA selon la présente invention. Les conditions opératoires dans lesquelles a été réalisée la présente invention sont décrites ci-après dans la partie expérimentale. La protéine hTFIIIA codée par le gène htfIIIA est donc un facteur de régulation de la transcription. En effet, la protéine hTFIIIA codée par le gène de la présente invention a un rôle biologique comme protéine se liant à l'ADN et le produit de ce gène est utile comme facteur de régulation de la transcription. En particulier, le gène de la présente invention est exprimé dans différents tissus et joue probablement un rôle important dans l'initiation de la transcription du gène de l'ARN ribosomal 5S et dans le maintien de la stabilité de la transcription d'autres gènes impliqués notamment dans des fonctions de contrôle. Un très grand nombre de maladies accompagnant un désordre dans le contrôle de la transcription ont récemment été mises en évidence. Ainsi on a constaté que certains produits oncogènes agissent comme des facteurs de régulation de la transcription et peuvent conduire à une cancérisation de cellules comme par exemple dans certaines leucémies ou encore que la production en trop grande quantité du facteur de régulation Hox2-4 induit une leucémie chez la souris. Par ailleurs, dans certaines maladies héréditaires, la protéine concernée peut être en elle-même normale, la pathogénicité résultant du mécanisme de transcription du gène codant pour cette protéine. Notamment, de nombreuses maladies héréditaires montrent une anomalie de la quantité de protéines synthétisées ce qui est probablement du à un désordre au niveau de la synthèse protéique pouvant notamment mettre en jeu le gène htfIIIA et la protéine codée en tant que facteurs impliqués dans le contrôle de la transcription de l'ARN 5S. Le gène de la présente invention peut ainsi être utilisé pour la recherche d'anomalies au niveau de la transcription des gènes et notamment pour l'identification de maladies héréditaires ou pour l'étude de maladies mettant en cause les facteurs de régulation et notamment la protéine codée par htfIIIA. Le gène de la présente invention peut également être utilisé pour le traitement de certaines maladies à travers le contrôle de la transcription ou dans l'analyse de la pathogénie de ces maladies. La présente invention prévoit donc une utilisation du gène htfIIIA de la présente invention et de la protéine hTFIIIA de la présente invention, notamment pour contribuer à la compréhension du mécanisme de la transcription chez l'homme et pour contribuer également à la compréhension, au diagnostic et au traitement de maladies liées à un dérèglement du mécanisme de transcription. Ainsi htfIIIA et la protéine hTFIIIA pourraient être utilisés dans le diagnostic ou l'identification de maladies héréditaires comme certains cancers ou d'autres maladies résultant d'un contrôle anormal de la transcription. Ces facteurs peuvent également être utiles dans l'analyse des mécanismes de régulation de la transcription. La présente invention a ainsi pour objet l'utilisation de la séquence d'ADN du gène du facteur de transcription humain htfIIIA ou du polypeptide ayant la fonction de facteur de transcription humain codé par ce gène ainsi qu'il est défini ci-dessus pour la préparation de compositions utiles pour le diagnostic ou le traitement de maladies liées à un désordre dans le contrôle de la transcription. De telles compositions sont préparées dans les conditions usuelles connues de l'homme du métier. La présente invention a plus précisément pour objet l'utilisation telle que définie ci-dessus pour laquelle la maladie concernée est le cancer. Les figures 1 à 5 ci-après présentent les illustrations suivantes. La figure 1 représente la comparaison de la protéine hTFIIIA La figure 1 représente la comparaison de la protéine hTFIIIA de la présente invention avec la protéine hTFIIIA de DREW. La figure 2 représente la comparaison de la protéine hTFIIIA de la présente invention avec la protéine hTFIIIA de ARAKAWA. La figure 3 représente la comparaison de la protéine hTFIIIA de DREW avec la protéine hTFIIIA de ARAKAWA. La figure 4 représente la séquence htfIIIA de DREW et la protéine hTFIIIA correspondante. La figure 5 représente la séquence htfIIIA de ARAKAWA et la protéine hTFIIIA correspondante. Les séquences indiquées dans la présente invention soit : SEQ ID N 1 à SEQ ID N 10 sont décrites ci-après. La partie expérimentale ci-après permet de décrire la présente invention sans toutefois la limiter. Partie expérimentale Exemple 1 : clonage et séquençage du gène hTFIIIA I) Extraction des ARN totaux provenant de la lignée cellulaire humaine RAJI (RNA Plus, BIOPROBE) La lignée cellulaire humaine RAJI a été choisie comme source d'ARN totaux. Les cellules RAJI utilisées ont été cultivées dans les conditions usuelles de culture de cette lignée que connaît l'homme du métier. Pour extraire les ARN totaux de ces cellules, on a procédé selon un protocole usuel en utilisant la solution d'extraction commerciale RNA Plus (BIOPROBE SYSTEMS). On a procédé de la manière suivante : a) homogénéisation : Les cellules cultivées en suspension sont sédimentées sans être lavées au préalable pour éviter les risques de dégradation des ARNm puis sont lysées par addition de la solution d'extraction du kit RNA plus à raison de 6 ml pour 107 cellules. Les échantillons obtenus d'homogénat peuvent être stockés à - 70 C. b) extraction de l'ARN : Après homogénéisation, on laisse l'homogénat obtenu en a) cidessus à 4 C pendant 5 minutes afin de permettre la complète dissociation des complexes nucléoprotéiques ; On ajoute ensuite 0. 2 ml de chloroforme pour 1 ml de la solution de RNA Plus ajoutée ci-dessus en a), on agite vigoureusement pendant 15 secondes et on laisse reposer dans la glace pendant 5 minutes. On centrifuge, à 12000 g et à 4 C, pendant 15 minutes. Il se forme alors deux phases bien visibles : l'ADN et les protéines sont retrouvés dans la phase organique(phase inférieure) et à l'interface . Les ARN sont dans la phase aqueuse (phase supérieure) qui représente environ 40 à 50 % du volume total. c) Précipitation de l'ARN On transfère la phase aqueuse obtenue en b) dans un tube neuf, on ajoute un volume d'isopropanol, et on place l'échantillon, à 4 C pendant 15 minutes. On centrifuge l'échantillon pendant 15 minutes à 4 C et 12000g. On obtient un précipité qui forme un culot blanc-jaunâtre au fond du tube. d) Lavage de l'ARN On élimine le surnageant de la solution obtenue en c) puis on lave le culot avec une solution d'éthanol à 75% en utilisant au moins 0.8 ml d'éthanol pour 50 à 100 microgrammes d'ARN. On mélange (vortex), on centrifuge 10 minutes à 7500 g à 4 C et sèche sous vide. L'ARN obtenu est alors repris dans 60 microlitres de Tris 10 mM EDTA 1 mM pH=7,5. II) Synthèse d'ADNc a) Réactifs utilisés Le kit commercial Gene Amp# RNA PCR Kit (Perken Elmer)a été utilisé pour cette synthèse d'ADNc. Par l'utilisation de ce kit, on obtient d'abord la réverse transcription de l'ARN en ADNc par la réverse transcriptase MuLV (Murine Leukemia Virus). Un inhibiteur de la RNase isolée à partir de placenta humain est inclus afin d'inhiber certaines RNases de mammifères. Les fragments d'ADNc sont amplifiés par réaction de polymérisation en chaîne (PCR). L'enzyme utilisée pour cette réaction est la pfu polymerase (Stratagène) . L'expression dNTP désigne les nucléotides dGTP, dATP, dTTP et dCTP. L'expression PCR Buffer désigne la solution renfermant 500 mM KC1 et 100 mM HCl à pH 8.3. L'expression Oligod(T)16 désigne une séquence nucléotidique constituée de 16 nucléotides dTTP. Des oligonucléotides sont utilisés comme amorces dans la technique décrite ci-après. Les concentrations indiquées ci-après représentent les concentrations finales dans le milieu réactionnel. b) Synthèse de l'ADNc par réversrancription 2 microlitres des ARN totaux (1 microgramme) obtenus cidessus en l)d) sont préincubés à 65 C pendant 5 minutes. On ajoute ensuite 8 microlitres de la solution réactionnelle suivante : 5mM MgCl2, lxPCR buffer, 1 mM de chaque dNTP, 5% de DMSO, 1 U/microlitre d'inhibiteur de RNase, 2. 5 U/microlitre de réverse transcriptase MuLV, 2. 5 microlitres de oligo (dT)16. On incube alors à 42 C pendant une heure, puis à 99 C pendant 5 minutes puis à 5 C pendant 5 minutes. III) Amplification par PCR, clonage et séquençage des séquences nucléotidiques 3' et 5' a) Conditions réactionnelles La bactérie Escherichia coli (E. coli) XL1- Blue type K12 (Stratagène) a été utilisée pour la préparation des plasmides de la présente invention. La croissance de cette bactérie a été effectuée selon les conditions usuelles en milieu liquide LB qui renferme 10g de bactotryptone, 5g d'extrait de levure et 10 g de NaCl pour un litre d'eau et qui renferme également 100microg/ml d'ampicilline (SIGMA). La colonie a été prélevée sur milieu solide LB + agar + ampicilline puis cultivée dans 100 ml de milieu LB et incubée jusqu'à DO (600nm) = 0. 8. L'incubation a été effectuée à 37 C sous atmosphère normale et agitation à 225 rpm. La viabilité de la souche est vérifiée lorsque la souche pousse sur milieu LB + ampicilline à 100 microg/ml, l'insert renfermant un gène de résistance à l'ampicilline bla. On peut noter qu'un gène de résistance à l'ampicilline bla fait partie du vecteur du kit (TA cloning Kit - Invitrogen) dans lequel sont clonés les fragments de htfIIIA. Ainsi, la sélection des souches renfermant les plasmides contenant le gène htfIIIA de la présente invention peut être opérée par la culture des souches dans ce milieu qui renfermant de l'ampicilline (100 microg/ml), un tel milieu permettant la survie uniquement des souches qui renferment le gène de résistance à l'ampicilline et ainsi uniquement des souches qui renferment le gène htfIIIA de la présente invention. Pour la conservation des souches obtenues, 15 % de glycérol sont ajoutés au milieu de culture : les cultures sont donc conservées dans le milieu de suspension LB +100 microgrammes/ml d'ampicilline + 15 % de glycérol à la concentration bactérienne de DO (600nm) = 0. 8 sous forme d'aliquots en cryotubes de 1ml par tube. Pour le séquençage, l'ADN plasmidique de plusieurs bactéries issues de chacun des clonages indiqués ci-après est préparé en utilisant un kit commercial (Qiagen Plasmids kit). Les fragments correspondant à la séquence codante de htfIIIA sont séquences sur les deux brins suivant les techniques classiques connues de l'homme du métier (utilisation du séquenceur ABI 377 XL, Perkin Elmer). b) Amplification par PCR, et clonage des séquences nucléotidiques 3' et 5' 1) Amplification et clonage de la séquence nucléotidique 3' Deux amorces d'amplification (primers) ont été choisies d'après la séquence publiée HTFIIIA de ARAKAWA. Ces amorces OLT3 ou TFIIIA3'SmaI et OLT5.2 sont nommées respectivement SEQ ID N 10 et SEQ ID N 6. Ces oligonucléotides sont choisis dans la séquence hTFIIIA publiée de ARAKAWA (figure 5) et sont synthétisés selon les méthodes classiques connues de l'homme du métier. L'oligonucléotide TFIIIA3'SmaI introduit un site de restriction SmaI en aval de la séquence codante. Ce site permettra la fusion de la séquence nucléotidique 3' de htfIIIA avec une séquence codant pour le peptide TAG hémaglutinine. Ainsi, le peptide résultant de l'expression de la séquence clonée comprendra donc à la fois la séquence de htfIIIA de la présente invention et celle du TAG HA et pourra ainsi être détecté en analyse par Western selon les techniques usuelles connues de l'homme du métier. On procède de la façon suivante : 2 microlitres d'ADNc obtenu ci-dessus en II)b) sont ajoutés à 50 microlitres de la solution réactionnelle suivante : 2mMMgCl2, lxPCR buffer, 200 nanogrammes/ml de chaque dNTP, les primers TFIIIA3'SMAI et OLT5. 2 à raison de 0.15 micromoles/1 pour chacun, 5 % de DMSO et 2. 5 U AmpliTaq ADN polymérase. L'ADNc est ainsi soumis à 30 cycles PCR d'abord à 94 C , pendant une minute puis à 65 C pendant 1 minute puis à 72 C pendant 1 minute. Les produits amplifiés par PCR ainsi obtenus sont donc des fragments 3' d'environ 970 paires de bases. Les fragments 3' obtenus ci-dessus sont clonés dans le vecteur pCRII en utilisant le TA cloning Kit (Invitrogen). Le plasmide ainsi obtenu est nommé 5.2 Raji 2. 9. Ce plasmide est transféré dans la souche E. coli XL1 Blue. On obtient donc ainsi la souche E. coli transformée par le plasmide 5.2 Raji 2. 9. 2) Amplification et clonage de la séquence nucléotidique 5' La portion 5' du gène htfIIIA de la présente invention a été isolée par la technique dite de PCR ancrée 5' en utilisant un kit commercial (5'RACE System, Rapid Amplification of ADNc Ends, GIBCO BRL). Deux amorces d'amplification (primers) ont été choisies dans la séquence publiée htfIIIA de ARAKAWA (cf. figure 5). Ces amorces TFIIIAPCR5' et TFIIIA SEQ2 sont nommées respectivement SEQ ID N 8 et SEQ ID N 7. Une chaîne homopolymérique est ajoutée à l'extrémité 3' de l'ADNc en utilisant du dATP et la Terminal desoxynucléotidyl transférase (TdT): 10 microlitres d'ADNc obtenu ci-dessus en II) b) sont incubés à 37 C pendant 10 minutes dans la solution réactionnelle 1 X tailing buffer (solution du Kit commercial)et 0. 2 mM de dATP et TdT. La TdT est inactivée pendant 10 minutes à 65 C et la réaction est ensuite mise à 4 C. La réaction est alors directement amplifiée par PCR : 10 microlitres de la réaction TdT sont ajoutés à 50 microlitres de solution réactionnelle PCR soit 1. 5 mM de MgCl2, lxPCR buffer, 200 nanomoles/ml de chaque dNTP, les primers UAP et TFIIIA PCR5' à raison de 0.2 micromoles/1 pour chacun, 5% de DMSO et 2. 5 U AmpliTaq ADNpolymérase. Le primer UAP est un oligonucléotide fourni avec le kit commercial. L'ADNc est ainsi soumis à 30 cycles PCR d'abord à 94 C pendant une minute, puis à 65 C pendant 1 minute puis à 72 C pendant 1 minute. Les produits amplifiés par cette première PCR soit PCR1 sont soumis à une seconde réaction d'amplification par PCR en utilisant le primer UAP et un primer spécifique TFIIIASEQ 2. On procède de la façon suivante : 5 microlitres de PCR1 sont ajoutés à 50 microlitres de la solution réactionnelle de PCR indiquée ci-dessous (1. 5 mM de MgCl2, lxPCR buffer, 200 micromoles/1 de chaque dNTP, les primers UAP et TFIIIA SEQ2 à raison de 0.2 micromoles/1 pour chacun, 5% de DMSO et 2. 5 U AmpliTaq ADN polymérase. L'ADN est alors soumis à 30 cycles PCR d'abord à 94 C pendant une minute, puis à 65 C pendant 1 minute puis à 72 C pendant 1 minute. Les produits amplifiés par cette seconde PCR soit PCR2 sont purifiés sur gel d'agarose. Des fragments 5' d'environ 380 paires de bases sont ainsi isolés. Les fragments 5' obtenus ci-dessus sont alors clonés dans le vecteur pCRII en utilisant le TA cloning Kit (Invitrogen). Le plasmide ainsi obtenu est nommé ADNc-DMSO-3 Ce plasmide est transféré dans la souche E. coli XL1 Blue. On obtient donc ainsi la souche E. coli transformée par le plasmide ADNc-DMSO-3. 3) Vérification de la séquence 5' par amplification d'ADN génomique - Construction du plasmide 5 geno-3 On extrait de l'ADN génomique humain à partir de cellules humaines de foie selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier. On procède à une amplification par PCR de l'ADN génomique humain de la façon suivante : 2 microgrammes d'ADN génomique humain obtenu comme indiqué ci-dessus sont ajoutés à 100 microlitres de la solution réactionnelle de PCR suivante : 2mM MgCl2,1 x native Pfu ADN polymerase buffer, 200 nanogrammes/ml de chaque dNTP, les primers OLT5 et TFIIIASEQ2 à raison de 0.15 micromoles/1 pour chacun, 5% de DMSO et 5 U pfu polymérase. OLT5 et TFIIIA SEQ2 sont nommés respectivement SEQ ID N 5 et SEQ ID N 7. Le milieu réactionnel est ainsi soumis à 30 cycles PCR d'abord à 94 C pendant une minute, puis à 60 C pendant 1 minute puis à 72 C pendant 1 minute. Les produits amplifiés par PCR ainsi obtenus sont des fragments d'ADN d'environ 360 paires de bases. Les fragments ainsi obtenus sont clonés dans le vecteur pCR- Script en utilisant le pCR-Script SK (+) kit (Stratagène) . Le plasmide ainsi obtenu est nommé 5 geno-3. Ce plasmide est transféré dans la souche E. coli XL1 Blue. On obtient donc ainsi la souche E. coli transformée par le plasmide 5 geno-3. 4) Clonage du gène htfIIIA selon la présente invention Construction du plasmide pYX TFIIIALHA On reconstitue la séquence codante htfIIIA complète par l'assemblage des deux fragments 3' et 5' obtenus ci-dessus en III) b)l) et III)b)3) Un site de restriction Hind III localisé sur chacun des fragments 3' et 5' obtenus ci-dessus permet de reconstituer la séquence complète. Le plasmide 5 geno-3 obtenu ci-dessus en III)b)3) est digéré par les enzymes de restriction EcoRl et HindIII. Le site EcoRl est situé à 11 nucléotides en amont de la séquence codante. On obtient après purification sur gel d'agarose des fragments d'environ 350 paires de bases. On procède alors à la ligation avec le vecteur pYX/EcoRI + HindIII et obtient le vecteur pYXTFIIIA5'. On procède ensuite à l'addition du fragment 3' sur le fragment 5' : le plasmide 5.2 Raji 2. 9 obtenu ci-dessus en III) b)l), est digéré par les enzymes de restriction HindIII et SmaI. Après purification sur gel d'agarose, on obtient un fragment d'environ 930paires de bases. Ce fragment est inséré dans le plasmide pYXTFIIIA5' obtenu ci-dessus préalablement digéré par les enzymes de restriction SmaI et HindIII. On obtient ainsi le plasmide pYXTFIIIALHA qui contient donc le gène hTFIIIA de la présente invention. Exemple 2 : Construction de la souche XL1 Blue/pYX TFIIIALHA Pour la préparation de la souche XLl-Blue/ pYX TFIIIALHA, on procède selon les techniques connues de l'homme du métier (ref ci-dessus : Sambrook, Fritsh et Maniatis) à partir de la souche E. Coli XL1- Blue type K12 (Stratagène) et introduit le plasmide pYX TFIIIALHA obtenu ci-dessus à l'exemple 1. Exemple 3 : Construction du plasmide pBS-tfC2LHA On utilise le vecteur pBS-SK+ (Stratagène) dans lequel on intègre un insert codant pour le gène htfIIIA de la présente invention. On procède comme suit : le plasmide pYXTFIIIALHA obtenu ci-dessus à l'exemple 1 est digéré par l'enzyme de restriction EcoRI, cette extrémité est remplie à l'aide de l'ADN Polymerase (fragment de Klenow) et en présence de dNTP. Ce plasmide est ensuite digéré par Nhe I et le fragment correspondant à la séquence de htfIIIA selon la présente invention est purifié. Ce fragment est inséré dans le vecteur pBS-SK+ préparé comme suit : le vecteur est digéré par EcoRI, ce site est rempli à l'aide de l'ADN polymérase puis digéré par XbaI. On obtient ainsi le plasmide pBS-tfC2LHA. Exemple 4 : Construction de la souche XL1-Blue/pBS-tfC2LHA Pour la préparation de la souche XL1-Blue/pBS-tfC2LHA, on procède selon les techniques connues de l'homme du métier à partir de la souche E. Coli XL1- Blue type K12 (Stratagène) et introduit le plasmide pBS-tfC2LHA obtenu ci-dessus à l'exemple 3. Un échantillon de la souche obtenue soit E. Coli XL1- Blue type K12 (Stratagène) contenant le vecteur pBS-SK+ (Stratagène) avec un insert codant pour tfC2 (partie codante ADNc contenant la région codante de htfIIIA) soit XL1- Blue/pBS-tfC2LHA a été déposé à l'Institut Pasteur 25, rue du Docteur ROUX Paris 75015 à la CNCM le 15 Septembre 1998 sous le numéro 1-2071. Exemple 5 : Identification du codon initiateur de la synthèse protéique. La purification de la protéine hTFIIIA a été décrite par Moorefield et al (1994) [référence . the Journal of Biological Chemistry, Vol.269, N 33, pp.20857-20865, 1994, Purification and Characterization of Human Transcription Factor IIIA, B. Moorefield and R. G. Roeder]. La protéine hTFIIIA identifiée par Moorefield a un poids moléculaire de 42 kDa. On peut noter que le poids moléculaire théorique de la protéine hTFIIIA codée par la séquence htfIIIA de ARAKAWA est de 47 kDa. La synthèse protéique est généralement initiée au niveau d'un codon ATG. Cependant la séquence codante de htfIIIA de la présente invention ne contient pas de codon ATG en phase. Il a été démontré que des codons différents de ATG, en particulier les codons CTG ou GTG sont des codons d'initiation de la traduction dans des transcrits cellulaires naturels. Par des techniques connues de l'homme du métier telles que des expériences de traduction in vitro de la séquence htfIIIA selon la présente invention obtenue ci-dessus à l'exemple 1 et par des tests d'expression dans des cellules de mammifères comme des cellules Cos, le codon initiateur de la synthèse protéique de hTFIIIA selon la présente invention a été mis en évidence. Dans le cadre de la présente invention, il a ainsi été mis en évidence que le codon initiateur de la synthèse protéique de hTFIIIA selon la présente invention est le codon CTG qui se trouve à la position 176-178 de SEQ ID N 3. Analyse des résultats L'analyse des résultats obtenus par les préparations des exemples indiqués ci-dessus fait apparaître les points suivants relatifs à la séquence codante de htfIIIA : - en 3' (ci-dessus en III)b)l)) l'essentiel de la séquence isolée dans la présente demande correspond à la séquence htfIIIA de DREW - en 5' (ci-dessus en III)b)3)) la séquence la plus longue des fragments obtenus par la préparation décrite ci-dessus en III)b)3) débute en position 20 de la séquence htfIIIA de ARAKAWA et fait apparaître l'insertion d'un nucléotide en position 127 de la séquence htfIIIA de ARAKAWA. Les résultats obtenus par les préparations décrites cidessus de htfIIIA selon la présente invention confirment qu'un nucléotide en position 127 omis dans la séquence de ARAKAWA existe bien dans le gène humain htfIIIA. REVENDICATIONS 1) Séquence d'ADN du gène htfIIIA codant pour une protéine ayant la fonction biologique du facteur de transcription humain hTFIIIA. 2) Séquence d'ADN du gène htfIIIA du facteur de transcription humain hTFIIIA selon la revendication 1 codant pour la séquence d'acides aminés SEQ ID N 2. 3) Séquence d'ADN du gène htfIIIA selon la revendication 1 ou 2 contenant la séquence de nucléotides SEQ ID N 3 4) Séquence d'ADN du gène htfIIIA selon les revendications 1 à 3 contenant la séquence de nucléotides SEQ ID N 4. 5) Séquence d'ADN selon la revendication 4 ayant la séquence commençant au nucléotide 176 et se terminant au nucléotide 1270 de SEQ ID N 3. 6) Séquence d'ADN codant pour le facteur de transcription humain hTFIIIA selon les revendications 1 à 5 ainsi que les séquences d'ADN qui hybrident avec celle-ci et/ou présentent des homologies significatives avec cette séquence ou des fragments de celle-ci et qui codent pour une protéine ayant la même fonction. 7) Séquence d'ADN selon les revendications 1 à 6 comprenant des modifications introduites par suppression, insertion et/ou substitution d'au moins un nucléotide codant pour une protéine ayant la même activité biologique que le facteur de transcription humain hTFIIIA. 8) Séquence d'ADN selon l'une des revendications 1 à 7 ainsi que les séquences d'ADN similaires qui ont une homologie de séquence nucléotidique d'au moins 50 % ou au moins 60 % et de préférence au moins 70 % avec ladite séquence d'ADN. 9) Séquence d'ADN selon l'une des revendications 1 à 8 ainsi que les séquences d'ADN similaires qui codent pour une protéine dont la séquence en AA a une homologie d'au moins 40 % et notamment de 45 % ou d'au moins 50 %, plutôt au moins 60 % et de préférence au moins 70 % avec la séquence en AA codée par ladite séquence d'ADN. 10) Polypeptide ayant la fonction de facteur de transcription humain hTFIIIA et ayant la séquence en acides aminés SEQ ID N 2 codée par la séquence d'ADN selon l'une des revendications 1 à 9 et les analogues de ce polypeptide. 11) Procédé de préparation de la protéine recombinante hTFIIIA ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID N 2 comprenant l'expression de la séquence d'ADN selon l'une des revendications 1 à 9 dans un hôte approprié puis l'isolement et la purification de ladite protéine recombinante 12) Vecteur d'expression contenant la séquence d'ADN selon l'une des revendications 3 à 9. 13) Cellule hôte transformée avec un vecteur selon la revendication 12 14) Plasmide déposé à la CNCM sous le numéro I-2071 15) Utilisation de la séquence d'ADN du gène htfIIIA selon l'une des revendications 1 à 9 ou du polypeptide ayant la fonction de facteur de transcription humain codé par ladite séquence d'ADN et tel que défini à la revendication 10 pour la préparation de compositions utiles pour le diagnostic ou le traitement de maladies liées à un désordre dans le contrôle de la transcription. 16) Utilisation selon la revendication 15 pour laquelle la maladie concernée est le cancer.