Brevet FR2793140A1 — publié le 20001110

La présente invention concerne la prévention de la prolifération néointimale consécutive à un trauma vasculaire et notamment à une angioplastie transluminale. L'angioplastie transluminale, opération visant à traiter les sténoses artérielles notamment coronaires, a connu depuis son apparition en 1979 un immense succès ; elle est utilisée actuellement de manière courante, avec un taux de réussite immédiate avoisinant les 95%. Malheureusement, la solution apportée par l'angioplastie au problème des sténoses coronaires a fait naître un nouveau problème : une resténose survenant chez 30 à 40% des patients dans les 6 mois qui suivent l'angioplastie. La resténose est le résultat final de l'ensemble des mécanismes déclenchés par l'angioplastie et dont le point de départ est l'abrasion de l'endothélium associée au traumatisme de la média artérielle sous-jacente induite par le passage du ballonnet gonflable. La dénudation endothéliale et la lésion de la média induisent une cascade d'événements qui mettent en jeu d'une part, les éléments sanguins (leucocytes, plaquettes, globules rouges et facteurs plasmatiques) et d'autre part, les constituants de la paroi artérielle (cellules endothéliales, cellules musculaires lisses artérielles (CMLA) et la matrice extracellulaire [MEC] ). L'apport de cytokines chimiotactiques et mitogènes par les plaquettes et les leucocytes qui adhèrent à la paroi lésée vont activer les CMLA, ces dernières migrant alors depuis la média jusqu'à l'intima, où elles prolifèrent et synthétisent de manière abondante la MEC (JS. Forrester et al. J. Am. Coll. Cardiol. 1991 ;17 : 758-769). La réponse plaquettaire induit également la formation d'un thrombus sur le site de lésion, ce dernier facilitant la stimulation des CMLA. En effet, la thrombine générée lors de la formation du thrombus stimule la prolifération des CMLA, active les plaquettes et attire les monocytes, source supplémentaire de facteurs de croissance, vers le site de la lésion. Les CMLA sont par ailleurs capables, une fois activées, de libérer localement des facteurs qui stimulent leur propre prolifération et leur migration. La lésion artérielle induit également la formation de radicaux libres oxygénés, ces derniers étant capables de stimuler le passage des CMLA du phénotype contractile au phénotype proliférant et sécrétoire. En plus de la prolifération, la migration cellulaire joue un rôle capital dans la formation de l'épaississement intimai qui aboutit à la resténose. La migration des cellules de la média permet à celles qui ne migrent pas d'échapper à l'inhibition de contact et de proliférer, et à celles qui vont coloniser l'intima d'avoir un contact rapide et proche avec les facteurs de croissance plasmatiques, plaquettaires et leucocytaires. L'ensemble de ces mécanismes complexes induits par l'angioplastie a donc pour cible principale les CMLA. L'activité anormale des CMLA qui en résulte aboutit à la formation d'une hyperplasie intimale (appelée prolifération néointimale), laquelle associée à un remodelage de la média artérielle provoque la resténose après l'angioplastie. Pour prévenir la resténose, plusieurs substances ont été utilisées chez l'homme, choisies en fonction de leurs propriétés à agir sur un ou plusieurs des mécanismes déclenchés par l'angioplastie, qu'il s'agisse de facteurs agissant sur les CMLA ou sur ces cellules elles-mêmes. Parmi les substances utilisées, celles ayant une activité anti-thrombotique ont été particulièrement étudiées (aspirine, dipyridamole, ticlopidine, héparine non fractionnée, coumadine). Malheureusement, toutes ses substances se sont avérées inefficaces en dépit de résultats encourageants lors d'expérimentations animales. Des produits ayant une activité anti-proliférante ont été également testés (stéroides, huiles de poissons, héparines non fractionnée et de bas poids moléculaire, trapidil), mais toujours sans succès. Cependant, quelques études ont montré qu'une inhibition de la prolifération cellulaire (par irradiation locale par exemple) induisait chez l'homme une inhibition de la prolifération néointimale, et de fait, de la resténose, suggérant qu'il s'agissait d'une cible thérapeutique intéressante. L'absence actuelle de molécules efficaces pour diminuer la fréquence de resténose chez l'homme est probablement liée à la complexité des phénomènes mis en jeu, lors de la cicatrisation de la sténose artérielle dilatée. La resténose est la conséquence de plusieurs événements induits par l'angioplastie dont les principaux sont : 1- l'infiltration des leucocytes dans la paroi artérielle lésée. 2- la migration des CMLA de la média dans l'intima artérielle. 3- la prolifération des CMLA dans l'intima. 4- la synthèse accrue de la MEC dans l'intima. L'inhibition de la resténose nécessite forcément une modulation de chacun de ces principaux phénomènes. Dans EP-A-0 661 981 et WO 95/26 193, on a décrit l'utilisation d'acide hyaluronique ou de fragments de haut poids moléculaire (150 000 à 225 000 daltons) pour éviter la resténose. L'acide hyaluronique naturel est un glycosaminoglycane de haut poids moléculaire (MW105 à 107 Daltons) présent dans de nombreux tissus de l'organisme. Ce polymère linéaire de longueur variable est constitué d' un enchaînement d'unités disaccharidiques composées d'acide D-glucuronique (GIcUA) et de N-acétyl-D-glucosamine (GIcNAc) dont la structure générale est : .....[Acide D-glucuronique ss 1#3 N-acétyl-D-glucosamine ss 1#4]n..... Par ailleurs, RC. Savani et EA. Turley (Int. J. Tiss. Reac. 1995; XVII (4) : 141-145) ont étudié les effets d'injections intraveineuses (iv) et sous-cutanées (sc) d'acide hyaluronique natif (dose = 30 mg/kg) sur l'hyperplasie néointimale artérielle induite, chez le rat, lors d'une angioplastie carotidienne expérimentale. Ils ont montré que l'administration d'acide hyaluronique non fractionné (iv ou se) permettait d'obtenir une concentration sérique maximale de 5000 g/ml (bolus iv) ou de 1500 g/ml (injection se) ainsi qu'une réduction significative (environ 50%) de l'épaississement intimai induit par l'abrasion causée par la dilatation de la carotide instrumentée par le ballonnet. Cependant, ces résultats n' ont pas pu être reproduits par la Demanderesse. La présente invention a pour objet un médicament destiné à limiter la prolifération néo-intimale consécutive à un trauma vasculaire et qui comprend une dose efficace d'un fragment (ou d'un mélange de fragments) d'acide hyaluronique comprenant de 4 à 100 motifs monosaccharidiques ou d'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. La présente invention a également pour objet l'utilisation, pour la fabrication d'un médicament destiné à limiter la prolifération néo-intimale consécutive à un trauma vasculaire, d'un fragment (ou d'un mélange de fragments) d'acide hyaluronique comprenant de 4 à 100 motifs monosaccharidiques ou d'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. Parmi les oligosaccharides constitués par des fragments d'acide hyaluronique et utilisables dans l'invention, on peut citer : - des oligosaccharides de formule : (GlcUA-GlcNAc)n1 avec n, de 2 à 8 et notamment (GlcUA-GlcNAc)5 la (GlcUA-GlcNAc)6 Ib ainsi que leurs différents mélanges ; - des nonasaccharides de formule : GlcNac-(GlcUA-GlcNAc)4 IIa (GlcUA-GlcNac)4-GlcUA Ilb - des oligosaccharides de formule : GlcNac-(GlcUA-GlcNAc)n2 III avec n2 de 5 à 9, ainsi que leurs mélanges ; - des oligosaccharides de formule : (GlcUA-GlcNAc)n3-GlcUA IV avec n3 de 5 à 9, - des oligosaccharides de formule : (GlcUA-GlcNAc)n4 V avec n4 = 9 à 50, - des oligosaccharides de formule : GlcNac-(GlcUA-GlcNAc)n5 Via (GlcUA-GlcNac) n5-GlcUA Vlb avec n5 = 10 à 49. Les sels pharmaceutiquement acceptables sont ceux obtenus avec des bases pharmaceutiquement acceptables et sont notamment les sels de sodium, potassium ou calcium. Les fragments d'acide hyaluronique peuvent être obtenus selon des procédés connus. La technique de dégradation de l'acide hyaluronique utilisée est classique et fait appel à une digestion enzymatique par la hyaluronidase. Cette technique, et les oligosaccharides qu'elle permet de préparer, ont été décrit, en 1985, dans la publication de P. Bertrand et B. Delpech (J. Neurochem. 1985 ; 439). L'acide hyaluronique extrait de cordon ombilical est mis en solution dans du tampon pH 5 (acétate de sodium 0,1 M/NaCI 0,15M), avant l'addition de hyaluronidase extraite de testicules de bovin (EC 3. 2.1.35). Le mélange est incubé à 37 C pendant 6 heures, puis la réaction d'hydrolyse est arrêtée par chauffage du milieu réactionnel à 100 C pendant 3 minutes. Le milieu réactionnel refroidi est alors centrifugé à 40.000g pendant 10 minutes. Le précipité contenant des oligosaccharides de très haut poids moléculaire et des protéines - est éliminé. Le mélange d'oligosaccharides de bas poids moléculaire contenu dans le surnageant est séparé par chromatographie sur colonne d' AcA 202 avec comme solvant d'élution un mélange d'acide acétique glacial 0,25M et de pyridine 0,28M de pH 5. L'identification de chaque fraction d'intérêt est réalisée par la mesure du contenu en acide glucuronique déterminé par la méthode au carbazol de T. Bitter et H.M. Muir (Anal. Biochem. 1962 ; 330-334). Cette méthode permet la préparation des fragments d'acide hyaluronique comportant de 2 à 8 unités disaccharidiques de formule I. Des fragments de même structure générale mais de masse moléculaire plus élevée, comprenant 9 à 50 unités disaccharidiques, sont obtenus par digestion enzymatique à la hyaluronidase en modifiant les conditions expérimentales décrites ci-dessus, en particulier en réduisant la durée de l'incubation enzymatique à 37 C. Le nonasaccharide GlcNAc-(GlcUA-GlcNAc)4 dont l'extrêmité non réductrice est un reste N-acétyl Glucosamine (GIcNAc) est préparé par la méthode initialement décrite par VC. Hascall et D. Heinegard (J. Biol. Chem 1974 ; 249 : 4520-56). Le décasaccharide (GlcUA-GlcNAc)5 est soumis à l'action de la p-glucuronidase (EC 3.1.3.1) pendant 3 heures à 37 C en tampon 0. 05M acétate de sodium/0.1% albumine bovine pH 5. 5, puis purifié par chromatographie sur colonne d'AcA 202. Le nonasaccharide (GlcUA-GlcNAc)4- GIcUA dont l'extrémité réductrice est un reste acide glucuronique (GIcUA) est préparé selon la méthode décrite par JE. Christner et al. (J. Biol. Chem. 1974; 254: 4624-30) par action pendant 4h à 37 C, de carbonate de sodium 0,25M sur le décasaccharide (GlcUA-GlcNAc)5 de départ. La réaction est arrêtée par le mélange (acide acétique glacial 0,25M/pyridine 0,28M) avant séparation chromatographique sur colonne d'AcA 202. Selon des procédures analogues, les oligosaccharides à nombre impair d'unités saccharidiques comprenant n = 11,13, 15,17 et 19 résidus monosaccharidiques sont préparés à partir de leurs oligomères homologues supérieur (n+1 ) comprenant un nombre pair d'unités saccharidiques (c'est à dire n = 12,14, 16,18, et 20 unités saccharidiques) : - soit par digestion enzymatique à la ss-glucuronidase (extraite de foie de bovin - EC 3.1.3.1) pendant 3 heures à 37 C; la structure des fragments obtenus est : GIcNAc-(GIcUA-GIcNAc)n avec n = 5,6, 7,8 ou 9. - soit par hydrolyse chimique pour obtenir des oligosaccharides de structure : (GIcUA-GIcNAc)n- GIcUA avec n = 5,6, 7,8 ou 9. Des fragments de même structure générale mais de masse moléculaire plus élevée, comprenant 10 à 49 unités disaccharidiques, sont obtenus par digestion enzymatique ou chimique selon les mêmes principes. L'exemple suivant illustre la présente invention. 1) Préparation des fragments Les fragments d'oligosaccharides obtenus selon la technique décrite par P. Bertrand et B. Delpech (J. Neurochem. 1985 ; 439) au cours d'une hydrolyse de 6 heures à 37 C en présence de hyaluronidase, sont majoritairement des fragments comprenant 3,4, 5 et 6 unités disaccharidiques. Ainsi, en partant d'une masse d'acide hyaluronique naturel égale à 100 mg, l'incubation avec la hyaluronidase testiculaire bovine (10 mg - EC 3.2.1.35) permet d'obtenir une masse de mélange de fragments, comprenant de 3 à 8 unités disaccharidiques - égale à 36,33 mg - soit un rendement utile d'environ 36 %. Cet ensemble est caractérisé par la répartition suivante, exprimée en nombre d'unités disaccharidiques (acide D-glucuronique + N-acétyl Dglucosamine) [soit (GlcUA-GlcNAc)n] : # fragments à 3 unités disaccharidiques 9,42 mg soit 25,93 % # fragments à 4 unités disaccharidiques : 6,57 mg soit 18,08 % # fragments à 5 unités disaccharidiques : 7,35 mg soit 20,23 % # fragments à 6 unités disaccharidiques : 5,92 mg soit 16,30 % # fragments à 7 unités disaccharidiques : 3,73 mg soit 10,27 % # fragments à 8 unités disaccharidiques : 2,80 mg soit 7,71 % Le sous-ensemble, considéré comme présentant la meilleure biodisponibilité, donc la plus grande incorporation dans le tissu artériel, est le sous-ensemble de fragments à 3,4, 5 et 6 unités disaccharidiques. Dans le mélange défini ci-dessus, ce sous-ensemble représente 80,54 % du total, les fragments à 7 et 8 unités disaccharidiques ne représentant que 10,3 et 7,7% du total, respectivement. La masse moléculaire moyenne (MW 2000 Da) de ce mélange résulte de la contribution prépondérante dans le mélange de fragments à 3,4, 5 et 6 unités disaccharidiques. 2) Effet des fragments d' acide hyaluronique sur l'épaississement artériel induit par l'angioplastie L'effet des fragments de bas poids moléculaire d' acide hyaluronique, obtenus après dégradation par la hyaluronidase a été étudié, sur la sténose de l'aorte de rat qui a subi une angioplastie. Le protocole adopté était le suivant : 2 injections de 30 mg/kg le jour de l'angioplastie (la première par voie veineuse en bolus 10 min avant le geste endoluminal et la seconde par voie sous-cutanée), puis une injection sous-cutanée tous les deux jours dès J2 jusqu'à J12. Trois groupes de rats ont été étudiés : un groupe témoin opération (JO, pas d'angioplastie), un groupe témoin ayant subi l'angioplastie mais ne recevant que du NaCI 0,9% contenant la hyaluronidase préalablement détruite (J14 Placebo) et un groupe ayant subi l'angioplastie et recevant le mélange d'oligosaccharides [acide hyaluronique dégradé par la hyaluronidase] (J14 FRAGAH); la préparation d'oligosaccharides par dégradation enzymatique de l'acide hyaluronique incluant une étape de destruction de la hyaluronidase avant injection aux animaux). Les résultats de cette étude sont résumés dans le tableau I. Tableau # Groupes JO J14Placebo J14 FragAH Effectif 12 14 16 Poids corporel au sacrifice 329 7,4 338 6,1 330 4,8 (g) AH (Jg/L) sérique (J1) - 244 46 2749 224a Poids frais de l'intima-média Total (mg) 27 0,9 35,8 1,2 31,8 0,8 % d'augmentation 0 +32,6 3,2 +17 ~ 2,4b ADN de l'intima-média Total ( g) 47,2 1,1 62,7 2,5 56 ~ 1,7e % d'augmentation 0 +32,6 4,2 +19,2 3,1d Les valeurs sont exprimées en moyennes ESM. JO : groupe de rats n'ayant pas subi l'angioplastie. J14Placebo : groupe de rats contrôle ayant subi l'angioplastie et ayant reçu du NaCI 0,9% contenant la hyaluronidase préalablement détruite. J14 FragAH : de rats ayant subi l'angioplastie et ayant reçu l'acide hyaluronique dégradé par la hyaluronidase (30 mg/kg toutes les 48 h, la hyaluronidase a été également détruite avant l'injection). Le test de Mann-Whitney a été utilisé. a, b, c, d,e signalent les différences entre les J14 FragAH et les J14Placebo (a 2p = 0,00005, b 2p = 0,0009, c 2p = 0,01, d 2p = 0,017, e 2p = 0,03). Ces résultats montrent que le traitement par des fragments d'acide hyaluronique réduit de manière significative l'épaississement artériel induit par l'angioplastie, comme en témoigne la baisse significative du poids frais de l'aorte et du contenu en ADN de l'intima-média. En effet la prolifération néointimale induite par l'angioplastie est significativement réduite (poids frais de l'aorte : 17 2,4% versus 32,6 3,2%, 2p = 0,0009 ; contenu en ADN : 19,2 3,1% versus 32,6 4,2%, 2p = 0,017) par administration de fragments d'acide hyaluronique sans modification de l'état général des rats (poids corporel similaire, absence d'effets indésirables). La mesure du taux sérique d'acide hyaluronique et/ou de ses fragments à J1 confirme la présence d'un taux élevé d'acide hyaluronique dès J1 (x11par rapport aux animaux témoins), comme l'a montré une étude de pharmacocinétique préalable. Ces résultats montrent que l'utilisation de fragments de bas poids moléculaires d'acide hyaluronique, chez le rat, limite la prolifération néointimale survenant après une angioplastie. L'originalité de cette étude tient au fait que l'on a utilisé des fragments de bas poids moléculaire d'acide hyaluronique (4 à 12 unités saccharidiques) dans cette indication. Les travaux de RC. Savani et EA. Turley (Int. J. Tiss. React.1995, XVII(4) 141-151) suggéraient que l'acide hyaluronique non fractionné pourrait être utile dans la prévention de la resténose post-angioplastie. Cependant, leurs résultats n'ont pas pu être reproduits probablement du fait de la variabilité interindividuelle (qui peut-être elle-même liée à la très forte viscosité de l'acide hyaluronique non fractionné) des paramètres pharmacocinétiques lors de l'utilisation de glycosaminoglycanes de haut poids moléculaire. Les résultats comparatifs sont donnés dans le Tableau II. Tableau Il Groupes JO J14 Témoins J14 Healon# Effectif 5 5 5 AH(ug/L) sérique (J3) ND 101 ~ 14,9 794 ~ 122@ Poids corporel (g) 342 18 339 10 335 6 Poids frais de l'aorte (mg) 26,9 0,36 34,5 1,8* 36,3 2,6* Contenu en ADN (pg) 57,5 ~ 2,1 78 ~ 4,1* 75 2,4' Les valeurs sont exprimées en moyennes ESM. JO : groupe de rats n'ayant pas subi l'angioplastie. J14 Témoins : de rats contrôle ayant subi l'angioplastie. J14 Healon : groupe de rats ayant subi l'angioplastie et ayant reçu l'acide hyaluronique non fractionné (Healon#). ND = Non Détecté. Le test de Mann-Whitney a été utilisé. * signale la différence entre les groupes angioplastie (J14 et J14Healon#) et le groupe JO (* 2p Les applications thérapeutiques de ces fragments d'acide hyaluronique ont comme principe général, de lutter contre la prolifération néo-intimale et donc de prévenir, en premier lieu, la resténose post-angioplastie transluminale. Si après une angioplastie coronaire - application la plus fréquente de l'angioplastie transluminale - les complications aiguës sont dues à la formation d'un thrombus artériel au site de la dilatation, les resténoses post-angioplasties sont des complications retardées qui apparaissent chez 20 à 30 % des patients traités par angioplastie. Ces resténoses traduisent l'hyperplasie intimale et le remodelage vasculaire qui apparaissent au site de l'angioplastie (T. Kimura et al., Circulation 1997 ; GS.Mintz et al. Am J Cardiol, 1996 ; GS. Mintz et al., Circulation 1996). La réocclusion vasculaire, immédiate ou retardée, touche 6,8 à 8,3 % des patients traités par angioplastie coronaire (PJ. de Feyter et al., Circulation 1991 ; Detre et al., Circulation 1990 ; AM. Lincoff et al., Circulation 1992) et on sait qu'il faut ré-intervenir une seconde fois (par angioplastie par ballonnement intra-coronaire) dans 4,5% des cas (The Epic Investigators, New. Eng. J. Med., 1994). A ce jour, aucun traitement médical n'a permis de réduire la fréquence des resténoses post angioplastie (JJ. Popma et al., Circulation, 1991 ; JR Herrman et al., Drugs, 1993 ; Lefkovits et EJ. Topol, Prog Cardiovasc Dis, 1997). Même si la pose d'un stent (endoprothèse artérielle) réduit la fréquence des resténoses (MP. Savage et al., N Engl J Med, 1997 ; DL.Fischman et al., N Engl J Med, 1994), un traitement destiné à bloquer la néo- prolifération intimale pourra améliorer le pronostic global de réussite des procédures de cardiologie interventionnelle. C'est un problème de santé publique important puisque, rien qu'aux Etats-Unis, plus de 600 000 stents coronaires ont été posés en 1998 chez des patients présentant des sténoses des artères coronaires. Sans que cette description soit limitative, ces applications pourront donc être mises en #uvre soit à l'aide du mélange de fragments d'acide hyaluronique décrits ci-dessus, soit d'un sous-ensemble comme, par exemple, celui constitué par les fragments comprenant 5 et 6 unités disaccharidiques ou par les nonasaccharides utilisés individuellement. L'indication thérapeutique privilégiée des fragments d'acide hyaluronique tels que définis ci-dessus sera donc la prévention des phénomènes resténotiques consécutifs à une angioplastie, dont l'intérêt médical est parfaitement démontré aujourd'hui, à côté des techniques chirurgicales de pontage aorto-coronaires, comme technique de revascularisation myocardique non chirurgicale assurant la dilatation d'une (ou de plusieurs) sténose(s) artérielle(s) coronaire(s) après abord percutané. L'injection sous-cutanée de fragments d'acide hyaluronique de bas poids moléculaire sera donc utile aux patients atteints d'angine d'effort stable, à ceux souffrant d'angor instable ou chez ceux dont l'infarctus est en voie de constitution, dès lors que l'indication d'angioplastie transluminale coronaire est posée. Le traitement par les fragments d'acide hyaluronique de bas poids moléculaire sera également efficace après pose d'un stent, pour éviter la prolifération néo-intimale consécutive à l'abrasion de l'intima artérielle, et après endartériectomie. Les fragments d'acide hyaluronique de la présente invention sont généralement administrés en unités de dosage établies soit par m2 de surface corporelle, soit par kg de poids. Les dites unités de dosage sont de préférence formulées dans des compositions pharmaceutiques dans lesquelles le principe actif est mélangé avec un (ou plusieurs) excipient(s) pharmaceutique(s). Ainsi, selon un autre de ses aspects, la présente invention concerne des compositions pharmaceutiques renfermant, en tant que principe actif, des fragments d'acide hyaluronique sous un de ses sels pharmaceutiquement acceptables (sodium, potassium, calcium). Les fragments d'acide hyaluronique ci-dessus peuvent être utilisés selon la pathologie du sujet à traiter à des doses comprises entre 0. 5 et 50 mg/kg de poids corporel et par jour ou 20 à 2000 mg/m2 de surface corporelle et par jour. La posologie pourra être avantageusement modulée en fonction du degré d'urgence de la procédure de cardiologie interventionnelle [intervention d'urgence (ex. angioplastie coronaire transluminale percutanée) ou réglée (pose d'une endoprothèse artérielle de type stent)]. En pratique d'urgence, le traitement pourra combiner un bolus intraveineux avant l'intervention, une perfusion intraveineuse continue pendant l'intervention et les 24 heures suivantes puis l'injection sous-cutanée quotidienne pendant 1 à 4 semaines après l'intervention. Ainsi, pour le traitement dans sa phase aiguë, les doses pourront être de 15 à 50 mg/kg/jour (soit 600 à 2000 mg/m2/jour) ; pour un traitement d'entretien, on utilisera les fragments d' acide hyaluronique à des doses de 0. 5 à 15 mg/kg/jour (soit 20 à 600 mg/m2/jour), de préférence, à des doses de 1 à 10 mg/kg/jour (soit 40 à 400 mg/m2/jour). Dans les compositions pharmaceutiques de la présente invention pour l'administration par voies intraveineuse ou sous-cutanée les principes actifs peuvent être administrés sous formes unitaires d'administration, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques adaptés à la thérapeutique humaine. Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes d'administration intraveineuse (solutions prêtes à l'emploi pour bolus iv et/ou se; soluté pour perfusion iv). Pour une administration parentérale (perfusion intraveineuse à débit constant), on utilise des solutions aqueuses salines isotoniques et stériles qui pourront contenir des excipients pharmacologiquement compatibles. REVENDICATIONS 1. Utilisation, pour la fabrication d'un médicament destiné à limiter la prolifération néo-intimale consécutive à un .trauma vasculaire, d'un fragment d'acide hyaluronique comprenant de 4 à 100 motifs monosaccharidiques ou d'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 2. Utilisation selon la revendication 1, pour la fabrication d'un médicament destiné à limiter la prolifération néo-intimale consécutive à une angioplastie transluminale. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2 d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : (GlcUA-GlcNAc)n1 avec n1 de 2 à 8. 4. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2 d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : GlcNac-(GlcUA-GlcNAc)4 lia ou (GlcUA-GlcNac)4-GlcUA Ilb 5. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2 d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : GlcNac-(GlcUA-GlcNAc)n2 III avec n2 de 5 à 9. 6. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2 d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : (GlcUA-GlcNAc)n3-GlcUA IV avec n3 de 5 à 9. 7. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2 d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : (GlcUA-GlcNAc)n4 V avec n4 = 9 à 50. 8. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2 d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : GicNac-(GIcUA-GIcNAc)n5 Via ou (GlcUA-GlcNac)n5-GlcUA Vlb avec n5 = 10 à 49. 9. Composition pharmaceutique destinée à limiter la prolifération intimale consécutive à un trauma vasculaire, comprenant une dose efficace d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : (GlcUA-GlcNAc)n1 avec n1 = 2 à 8. 10. Composition pharmaceutique destinée à limiter la prolifération intimale consécutive à un trauma vasculaire, comprenant une dose efficace d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : (GlcUA-GlcNAc)n3-GlcUA IV avec n3 = 4 à 9. 11. Composition pharmaceutique destinée à limiter la prolifération intimale consécutive à un trauma vasculaire, comprenant une dose efficace d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : (GlcUA-GlcNAc)n4 V avec n4 = 9 à 50. 12. Composition pharmaceutique destinée à limiter la prolifération intimale consécutive à un trauma vasculaire, comprenant une dose efficace d'un fragment d'acide hyaluronique de formule : GlcNac-(GlcUA-GlcNAc)n5 Via ou (GlcUA-GlcNac)n5-GlcUA Vlb avec n5 = 10 à 49.