Brevet FR2796556A1 — publié le 20010126

La présente invention concerne une association de fibrilline et d'un extrait de cyanophycées, son utilisation en tant que médicament en particulier pour le traitement du vieillissement cutané induit et/ou pour le traitement de certains processus cicatriciels comme les vergetures et un procédé de traitement cosmétique utilisant l'application d'une composition comprenant une association de fibrilline et d'un extrait de cyanophycées. Le vieillissement est un processus multi-factoriel. Parallèlement au vieillissement cutané intrinsèque, dit chronologique, qui est génétiquement programmé, il existe un vieillissement cutané induit auquel différents facteurs extrinsèques participent. Parmi ceux-ci, les U.V. et le stress oxydant jouent un rôle important (Les mécanismes du vieillissement: du génétique à l'épigénétique; application de nouveaux concepts au vieillissement cutané - L. Robert, A.M. Robert, J. Med. Esthe. et Chir. Derm., Vol XXIV, Juin 97, 75-78, 1994). Au niveau du derme, on observe avec l'âge une diminution d'activité du fibroblaste (baisse du taux de prolifération, de biosynthèse et d'échange avec la matrice extra-cellulaire), ainsi qu'une altération des fibres de soutien (tant qualitative que quantitative) (A. CHUTTANI, B. GILCHREST, Handbook ofphysiology-aging, chapter 11, p. 312-313). Au niveau de la jonction dermo-épidermique apparaît un aplatissement qui entraîne une diminution de la cohésion entre ces deux zones (derme et épiderme), avec raréfaction des éléments du derme et ainsi que des fibres d'ancrage, dont le collagène VII (Y.Q. CHEN, A. MAUVIEL, J. RYYNANEN, S. SOLLBERG, J. UITTO: Type VII collagen gene expression by human skin fibroblasts and keratinocytes in culture: Influence of donor age and cytokine responses, J. Invest. Dermatol. (1994), 102, (2), 205-209) Ce qui a pour conséquence une baisse des échanges métaboliques et la formation des rides Les vergetures semblent résulter d'une atteinte de la cellule fibroblastique associée à une altération prédominante du tissu collagénique et des glycoprotéines de structure. L'origine de la formation des vergetures semble être une modification du métabolisme du fibroblaste (entraînant alors une mauvaise cicatrisation) ainsi qu'une rupture de contact entre la cellule et la matrice. Une approche thérapeutique des vergetures consistant à l'amélioration ou l'activation du métabolisme fibroblastique a alors été suggérée (Les vergetures: maladie du fibroblaste ? Théories étiopathogéniques, Cohen-Letessier, Nouv. Dermatol., 17,431-435, 1998) Nous trouvons dans l'art antérieur de nombreuses propositions pour lutter contre le vieillissement cutané. L'une des plus récentes proposée par Sanofi Concept est un actif capable de relancer la communication cellulaire par le biais de l'interleukine-6, améliorant ainsi le renouvellement des cellules. Une association de rétinol et d'oligosaccharide est utilisée pour ses propriétés anti-âge, avec notamment une activité synergique sur la synthèse de collagène (brevet ROC n WO 98/38980). Un extrait de Bertholletia ( famille des Lecythidacées) est proposé pour stimuler le collagène VII de la jonction dermo-épidermique (brevet LVMH n FR 2752527). La présente demande de brevet se propose de trouver une solution au problème du vieillissement induit qui se traduit notamment par la diminution de l'activité du fibroblaste ainsi que la diminution des échanges entre la cellule et son environnement. De façon surprenante, il a été mis en évidence qu'une association de fibrilline et d'un extrait de cyanophycées permet de stimuler l'activité métabolique des cellules, améliore les échanges cellules-matrice et l'organisation des fibres de soutien (notamment l'élastine). Il a été montré que ces deux principes actifs agissent en synergie. La présente invention concerne une association (synergique) de fibrilline et d'un extrait de cyanophycées, la fibrilline étant éventuellement présente sous forme associée à du collagène, une composition pharmaceutique contenant cette association et une composition cosmétique la contenant. L'invention concerne plus particulièrement une composition contenant ladite association de fibrilline et d'un extrait de cyanophycées et plus particulièrement une composition contenant une solution de fibrilline de concentration comprise entre 0,0001 % et 20% en poids par rapport au poids total de la composition et une solution d'un extrait de cyanophycées de concentration comprise entre 0,0001 % et 20% en poids par rapport au poids total de la composition Ladite composition pharmaceutique peut se présenter sous la forme d'une crème, d'un sérum, d'un masque, d'un lait corporel d'un complément alimentaire, d'un dispositif transdermique. Ladite présente invention concerne encore un procédé de préparation de ladite association ou de ladite composition caractérisé en ce que l'on mélange au moins de la fibrilline et un extrait de cyanophycées. Ladite composition peut être utilisée à titre de médicament notamment destiné à lutter contre le vieillissement cutané, ou destiné à aider à la cicatrisation, notamment dans le cas de vergetures. Elle comprend alors de préférence au moins un adjuvant pharmaceutiquement acceptable choisi parmi les excipients, les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, les collagènes (dont le collagène V), les filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, les substituts hormonaux. Ladite composition peut aussi être utilisée en tant que composition cosmétique, elle comprend alors de préférence au moins un adjuvant cosmétiquement acceptable choisi parmi les excipients, les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, les collagènes (dont le collagène V), les filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, les substituts hormonaux. La présente invention concerne encore un procédé de traitement cosmétique comprenant l'administration de la composition cosmétique selon la présente invention, ce procédé de traitement cosmétique étant en particulier destiné à améliorer l'aspect de la peau et/ou des phanères ou encore destiné à diminuer les troubles liés au vieillissement cutané, et/ou aux complications de certains processus cicatriciels tels que les vergetures La fibrilline est une glycoprotéine trouvée au niveau dermique (Fibrilline, a new 350 kD glycoprotein, is a component of extracellular microfibrils, Lynn Y. Sakai, Douglas R. Keene and Eva Engvall, the journal of Cell. Biology., vol. 103, n 6 Pt 1, 2499-2509, Dec. 1986). Elle forme des microfibrilles de 10 nm de diamètre participant notamment à l'assemblage des fibres élastiques. Ces microfibrilles apparaissent avant l'élastine dans le développement des tissus et forment un échafaudage sur lequel les molécules d'élastine se déposent. On les trouve également isolées au niveau de la jonction dermo-épidermique. Le syndrome de Marfan, qui se traduit par des risques de rupture de tissus conjonctifs riches en fibres élastiques (paroi de l'aorte,...) est dû à une mutation du gène de la fibrilline. Les UV, responsables du photo-vieillissement, modulent l'expression de la fibrilline (UVB irradiation alters cellular responses to cytokines: rôle in extracellular matrix gene expression, V. P. Werth, K. J. Williams, E. A. Fisher, M. Bashir, S. Rosensloom and Xiaomei Shi, J. of Invest. Dermat, vol. 108, n 3, Mars 1997). Par ailleurs, il a été observé une diminution de fibrilline dans les vergetures (Fibrillin microfibrils are reduced in skin exhibiting striae distensae, R.EB. Watson, E.J. Parry, J.D. Humphries, C.J.P. Jones, D.W. Poison, C.M., Kielty, and C.E.M. Griffiths, British J. of Dermat, 138, 931- 937, 1998). Dans l'art antérieur, le gène codant la fibrilline a été introduit dans des fibroblastes pour aider au phénomène de cicatrisation (brevet UNIV.JEFFERSON THOMAS WO 9704647-A1). La structure et la fonction de la fibrilline ont été conservées au cours de l'évolution des espèces (An extracellular matrix protein of jellyfish homologous to the fibrilline forms different fibrils depending on the life stage of the animal, S. Reber-Muller, T. Spissinger, P. Schuchert, J. Spring & V. Schmid, Dev Biol, 169, 662-672, 1995). La fibrilline peut être obtenue par extraction à partir de cnidaires, notamment de méduses, où elle est responsable de l'élasticité de l'ombrelle. Dans ce type d'extraction, la fibrilline obtenue est associée à du collagène apparenté au type V des vertébrés dans un rapport pondéral fibrilline 15/collagène 85 On peut également, par divers procédés, augmenter la quantité de fibrilline et modifier ce rapport. On peut également utiliser de la fibrilline pure. La fibrilline utilisée dans la composition selon la présente invention peut se présenter sous forme de fibrilline pure ou associée à du collagène, le collagène n'est alors pas purifié et il contient une proportion non négligeable de fibrilline. La fibrilline utilisée dans la composition selon la présente invention peut être obtenue par la mise en #uvre du procédé de préparation de fibrilline décrit dans la demande de brevet FR 98 07078 déposée le 5 juin 1998 Elle peut aussi être utilisée sous forme de collagène préparé selon le procédé décrit dans le brevet FR 2 714 063, des analyses effectuées sur le collagène obtenu selon ce procédé ont révélées la présence de fibrilline dans des proportions suffisantes pour la préparation de la composition selon la présente invention (rapport pondéral fibrilline/ collagène : 15 /85). La fibrilline, sous forme de collagène, utilisée dans la composition selon la présente invention peut aussi être obtenue auprès de la société JAVENECH, ce produit est vendu sous la référence Fibriline-Javenech . Dans la présente invention, la fibrilline est utilisée dans des préparations dermo-cosmétiques pour ses propriétés d'organisation du tissu conjonctif, avec de manière surprenante des synergies d'activité en présence d'extrait de cyanophycées, comme le montrent les travaux qui vont suivre. Le procédé de préparation des extraits de cyanophycées et leur activité type facteur de croissance sont décrits dans le brevet FR 2643559; il s'agit d'extraits de cyanobactéries filamenteuses, notamment de l'espèce Phormidium, obtenus par fractionnement de leur contenu cytosolique. Etude de l'adhésion de fibroblastes humains à leur support matriciel: Synergie d'activité en présence d'extrait de cyanophycées Cette potentialisation a été mise en évidence sur un modèle cellulaire in vitro: le test d'adhésion de fibroblastes humains à un support matriciel (Majewski et al., Journal of lnvestigative Dermatology vol. 98 (1): 86-91, 1992). La matrice extracellulaire est un milieu primordial et essentiel entourant les cellules; en tant que support d'adhésion, elle engendre, par le biais de récepteurs cellulaires, des interactions cellules/matrice ou cellule/cellule, régissant ainsi certaines fonctions biologiques de notre organisme (Aumalley et al., Exp. Cell Research vol.181: 463-474, 1989). Les phénomènes d'adhérence moléculaire sont donc d'une importance capitale, en contribuant à l'intégrité structurale des tissus et des organes. Les fibroblastes sont préincubés avec l'extrait de cyanophycées et, ainsi traités, sont mis à adhérer sur un support collagénique supplémenté en fibrilline ou non. Le taux d'adhésion est évalué par comptage cellulaire. Une analyse statistique par le test de Student a été réalisée pour comparer l'effet de la fibrilline et de l'extrait de cyanophycées en synergie par rapport à l'effet additif fibrilline + extrait de cyanophycées. Le tableau suivant montre que l'association de fibrilline ( sous forme de solutions de concentrations : 1 g/ml; 2,5 g/ml, 5, g/ml) et d'extrait de cyanophycées sous forme de solution de concentration égale à 50 g/ml a un effet potentialisateur significatif, d'augmentation du taux d'adhésion des fibroblastes à leur support matriciel. Fibrilline seule fibrilline 1 g/ml 2,5 g/ml 5 pg/ml (concentration) % Adhésion 17% 30% 44% Extrait de cyanophycées seul Extrait de cyanophycées 50 g/ml (concentration) % Adhésion 12% Association Fibrilline/Extrait de cyanophycées (50 g/ml) Fibrilline 1 pg/ml 2,5 pg/ml 5 g/ml (concentration) Extrait 50 pg/ml 50 g/ml 50 g/ml cyanophycées (concentration) % Adhésion 60%* 52%* 80%* -~~ *: p Le protocole suivi est celui de la métabolisation du XTT (J. of Immunological Methods, 1993, 157, 225-231) en milieu DMEM sur une population fixe de fibroblastes lignée L929. La prolifération des cellules en présence de l'association selon l'invention a été comparée à la prolifération des cellules lorsque celles-ci sont soumises à la fibrilline seule ou à un extrait de cyanophycées seul. Les cellules étudiées sont une lignée L 929, l'augmentation de la prolifération des cellules a été mesurée 72 heures après avoir ajouté la fibrilline et/ou l'extrait de cyanophycées. La figure 1 illustre l'augmentation de la prolifération des cellules : la première mesure représente le pourcentage de prolifération des cellules lorsqu'une solution aqueuse d'un extrait de cyanophycées de concentration 1 mg pour 100 g est ajoutée au milieu. La deuxième mesure représente le pourcentage de prolifération des cellules lorsqu'une solution aqueuse de fibrilline de concentration 1 g pour 100 g est ajoutée au milieu. La troisième mesure représente le pourcentage de prolifération des cellules lorsque sont ajoutées au milieu une solution aqueuse d'un extrait de cyanophycées de concentration 1 mg pour 100 g et une solution de fibrilline de concentration 1 g pour 100 g. A la concentration de 1 mg pour 100 g en extrait de cyanophycées, on observe une augmentation de + 17% de la population cellulaire. Une solution aqueuse de fibrilline, à la concentration de 1 g pour 100 g, a une action de + 49%. Lorsque l'on associe l'extrait de cyanophycées à la fibrilline, aux mêmes doses que précédemment, l'activité est augmentée de + 81 %, ce qui traduit l'effet potentialisateur significatif de cette association sur la prolifération cellulaire Les formules de préparation à base d'association de fibrilline et d'extrait de cyanophycées présentées ci-dessous sont données à titre indicatif ; elles n'ont pas un caractère exhaustif et ne limitent donc en aucun cas la portée de la présente invention. Les composants de ces formules de préparation présentées sont exprimés en pourcentages pondéraux. Elle peuvent être étendues à l'ensemble des catégories de produits cosmétiques, de compléments par voie orale, de dispositifs transdermiques et de produits pharmaceutiques nécessitant une autorisation de mise sur le marché. CREME DE JOUR HYDRATANTE - Extrait de cyanophycées 0,0001 à 20% - Fibrilline 0,0001 à 20% - Acide pyrrolidone carboxylique 0,2 à 0,5% - Huile de ricin hydrogénée éthoxylée 1 à 5% - Huile de paraffine fluide 1 à 5% - Huile cyclopentasiloxane 5 à 12% - Squalane 1 à 5% - Polymère carboxyvinylique 0,1à 0,5% - Triethanolamine 0,2 à 0,5% - Glycérine 2 à 4% - Conservateur q.s. - Parfum q s - Eau purifiée q. s.p. 100g CREME NUTRITIVE POUR PEAUX TRES SECHES - Extrait de cyanophycées 0,0001 à 20 % - Fibrilline /Collagène ( 15/85) 0,0001à 20 % - Dérivé polysaccharidique 0,1 à 4 % - Acide stéarique 1 à 3 % - Stéarate de polyoxyéthylène glycol 2 à 6 % - Cire végétale 1 à 3 % - Blanc de baleine synthétique 1 à 2 % - Huile de jojoba 2 à 8 % - Glycérine 2 à 5 % - Conservateur, parfum, q s - Eau purifiée q s p 100 g MASQUE ANTI RIDES FERMETE - Extrait de cyanophycées 0,0001 à 20 % - Fibrilline 0,0001 à 20 % - Acide hyaluronique (sel Na) 0,01 à 0,2 % - Stéarate de sucrose 1 à 3 % - Distéarate de sucrose 2 à 5 % - Triglycérides caprique et carprylique 2 à 8 % - Paraffine liquide 5 à 12 % - Polyoxyéthylène glycol 600 2 à 10 % - Polymère carboxyvinylique 0,2 à 1 % - Triéthanolamine 0,5 à 1 % - Parfum q s - Conservateurs q s - Eau purifiée q. s. p. 100 g SERUM ANTI RIDES FERMETE - Extrait de cyanophycées 0,0001 % à 20% - Fibrilline / Collagène (90110) 0,0001 % à 20% - Protéines de blé 3% - Carrageenane (chondrus Cnspus) 3% - Colorant q. s - Conservateurs q. s. - Eau déminéralisée q. s. p 100 g SOIN ANTIVERGETURES Extrait de cyanophycées 0,0001 à 20% Fibrilline 0,0001 à 20% Acide glycolique 10% Carbonate de guanidine 10% Diméthicone copolyollcyclométhicone 5% Décaméthyle cyclopentasiloxane 10g Glycérol 20g Chlorure de sodium 1g Conservateurs q. s Colorants q. s Parfum q. s. Eau potable q.s.p. 100g LAIT CORPOREL ANTI VERGETURES - Extrait de cyanophycées 0,0001 % à 20 % - Fibrilline / Collagène(15/85) 0,0001 % à 20 % - Ester de sorbitan 1 à 2 % - Ester de sorbitan éthoxylé 1 à 3% - Huile de vaseline 4 à 6 % - Ester gras 1 à 5 % - Polymère carboxyvinylique 0,2 à 0,5 % - Glycérine 3 à 10% - Acétate de vitamine E 0,2 à 1 % - Conservateur q s - Colorant q. s. - Parfum q s - Eau purifiée q s.p. 100g REVENDICATIONS 1 ) Association de fibrilline et d'un extrait de cyanophycées . 2) Association selon la revendication 1, caractérisée en ce que la fibrilline est présente sous forme associée à du collagène. 3) Composition caractérisée en ce qu'elle contient une association selon la revendication 1 ou 2 4) Composition selon la revendication 3 caractérisée en ce qu'elle contient une solution de fibrilline de concentration comprise entre 0,0001 % et 20% en poids par rapport au poids total de la composition et une solution d'un extrait de cyanophycées de concentration comprise entre 0,0001 % et 20% en poids par rapport au poids total de la composition. 5) Composition selon l'une des revendications 3 à 4 caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'une crème, d'un sérum, d'un masque, d'un lait corporel d'un complément alimentaire, d'un dispositif transdermique. 6) Procédé de préparation de l'association selon la revendication 1 ou 2 ou de la composition selon l'une des revendications 3 à caractérisé en ce que l'on mélange au moins de la fibrilline et un extrait de cyanophycées. 7) Composition selon l'une des revendications 3 à 5 à titre de médicament. 8) Composition selon la revendication 7 caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un adjuvant pharmaceutiquement acceptable choisi parmi les excipients, les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, les collagènes (dont le collagène V), les filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, les substituts hormonaux. 9) Composition selon la revendication 7 ou 8 à titre de médicament destiné à lutter contre le vieillissement cutané. 10) Composition selon la revendication 7 ou 8 à titre de médicament destiné à aider à la cicatrisation, notamment dans le cas de vergetures. 11) Composition selon l'une des revendications 3 à 5 en tant que composition cosmétique 12) Composition cosmétique selon la revendication 11 caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un adjuvant cosmétiquement acceptable choisi parmi les excipients, les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, les collagènes (dont le collagène V), les filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, les substituts hormonaux 13) Procédé de traitement cosmétique caractérisé en ce qu'on administre une composition selon l'une des revendications 11 ou 12. 14) Procédé de traitement cosmétique selon la revendication 13 pour améliorer l'aspect de la peau et/ou des phanères. 15) Procédé de traitement cosmétique selon la revendication 13 destiné à diminuer les troubles liés au vieillissement cutané, et/ou aux complications de certains processus cicatriciels tels que les vergetures.