Brevet FR2793691A1 — publié le 20001124

L'invention concerne l'utilisation d'anticorps reconnaissant le récepteur de l'interleukine-2 dans la préparation d'un médicament destiné à la prévention et/ou au trai- tement des infections par un virus du SIDA, chez un mammifère. Les virus du SIDA incluent les virus de l'immunodéficience humaine (HIV), les virus de l'immunodéficience simienne (SIV) et les virus de l'immunodéficience féline (FIV). L'invention tire son origine de la découverte d'une analogie de structure tri- dimensionnelle entre des zones de l'interleukine-2 (IL-2) participant à la fixation de l'iL-2 sur les sous-unités act,, et y du récepteur de l'IL-2, et des protéines d'enveloppe des vi- rus du SIDA, notamment protéine gp41 pour HIV et SIV, gp36 pour FIV, lorsque ces protéines sont sous la forme de trimères. Ces trimères ont déjà été décrits dans la littéra- ture. Ces analogies de structure sont décrites plus particulièrement dans la de- mande de brevet FR-97 14387, déposée le 17 novembre 1997 par la demanderesse et dans la demande PCT/FR-9802447, déposée le 17novembre 1998, qui lui correspond. Le contenu de ces demandes de brevet est incorporé par référence à la description de la pré- sente demande. Dans les demandes de brevet qui viennent d'être mentionnées, on propose notamment de préparer un agent vaccinal contre le SIDA, à base d'un polypeptide com- prenant un fragment d'une zone immunodominante IL2-like d'une protéine d'enveloppe du virus, ce polypeptide étant modifié de façon à induire une réponse immunitaire dirigée contre la protéine d'enveloppe mais non contre l'IL-2. Une autre approche de la vaccina- tion contre les infections dues aux virus du SIDA, est un agent vaccinal à base d'un poly- peptide de la protéine d'enveloppe (ou d'un peptide analogue mimant ledit polypeptide) immunogène et non IL2-like. C'est le cas notamment du polypeptide 650-690, notamment 660-680 (en particulier 667-672) de la protéine gp41 de HIVI. La numérotation utilisée ici est celle de la banque SWISSPROT (version 34), et on fait référence notamment à la séquence ayant pour code ENVHVIBR. Bien entendu, on peut également utiliser tout peptide homologue de la protéine d'enveloppe de FIV ou SIV dans le cas d'un vaccin contre ces virus. La formulation des compositions vaccinales, et leur mode d'administra- tion sont connus en soi et ne seront pas décrits davantage ici. L'analogie de structure mentionnée ci-dessus a conduit les auteurs de la pré- sente invention à penser que le récepteur de l'interleukine-2 (RIL-2) joue un rôle dans la - 2 - 2793691 fixation du virus sur ses cellules cibles et/ou sa pénétration dans lesdites cellules cibles. Il existe plusieurs types de cellules, lymphocytes et autres, qui expriment à leur surface une ou plusieurs sous-unités du récepteur de l'IL-2. Il est donc possible d'utiliser des anticorps ou des fractions d'anticorps, conte- nant des paratopes dirigés contre le récepteur de I'IL-2, pour bloquer, sur les récepteurs des cellules cibles du virus, les sites d'interaction avec l'IL-2 et/ou leur voisinage, et em- pêcher ainsi la fixation des particules virales sur ces cellules et/ou la pénétration desdites particules virales dans lesdites cellules, afin de prévenir ou de limiter l'infection de sujets ayant été exposés, ou redoutant d'avoir été exposés, au virus. Le terme "infection" désigne ici la pénétration du virus dans les cellules ci- bles. Les anticorps ou fraction d'anticorps utilisés sont ceux qui reconnaissent l'une au moins des sous-unités a, 3 et y du récepteur de l'IL-2, y compris les anticorps qui re- connaissent plus précisément le site de fixation de l'IL-2 sur son récepteur. Dans les deux cas, ces anticorps peuvent empêcher la fixation du virus sur les cellules cibles, ne serait- ce que par empêchement stérique. L'invention s'étend à l'utilisation d'analogues des anticorps qui viennent d'être mentionnés. On entend ici par "analogue" tout peptide mimant les paratopes de ces anti- corps, ou encore tout peptide capable de se fixer sur l'une au moins des sous-unités a, 1P et y du récepteur de I'IL-2. De tels peptides incluent des fragments de l'IL-2 contenant son site de fixation sur le récepteur RIL-2, ainsi que tout peptide capable de mimer le site de fixation de l'IL-2 sur son récepteur. Cette définition des analogues exclut toutefois l'IL-2 elle-même, compte tenu des risques connus liés aux effets secondaires indésirables de l'IL-2, notamment à doses importantes. Les anticorps dirigés contre le récepteur de I'IL-2 du sujet à protéger (IL-2 humaine ou IL-2 animale selon les cas) peuvent être obtenus selon les méthodes usuelles. Certains ont déjà été décrits. Il peut s'agir notamment d'anticorps polyclonaux purifiés par chromatographie d'affinité, d'anticorps monoclonaux, d'anticorps chimères tels que dé- crits dans le brevet FR-2 641 468, ou d'anticorps bispécifiques reconnaissant deux des sous-unités du récepteur de l'IL-2. Bien entendu, l'invention s'étend à l'utilisation de tout fragment d'anticorps contenant un paratope dirigé contre le récepteur de l'IL-2, par exemple des fragments 3 2793691 Fab, Fab' et F(ab')2. Le traitement avec des anticorps anti-RIL-2 n'affaiblit pas les défenses immu- nitaires, car les auteurs de la présente invention ont montré que de tels anticorps n'ont pas, dans un premier temps, d'effet immunosuppresseur marqué. Les quantités d'anticorps ou de fractions d'anticorps nécessaires pour bloquer les sites RIL-2 peuvent être déterminées, pour chaque espèce et pour chaque anticorps, par de simples expériences de routine in vitro. Il en va de même pour les analogues pepti- diques de ces anticorps. Le médicament obtenu selon l'invention, peut se présenter sous la forme de solutions injectables ou sous la forme de préparations lyophilisées permettant de recons- tituer une solution injectable au moment de l'emploi. Un tel médicament peut être admi- nistré in vivo par voie intraveineuse, ou ex vivo par addition à des échantillons de sang destinés à être réinjectés. Dans le cas d'anticorps, on administre par exemple entre I et mg de principe actif par kg de poids corporel et par jour. Pour des fragments d'anti- corps ou d'autres analogues peptidiques, on utilise des doses molaires équivalentes à cel- les qui viennent d'être indiquées. Le traitement est poursuivi tant que la charge virale de l'individu traité est détectable. Pour montrer que le blocage des sites RIL-2 par des anticorps est susceptible d'empêcher la pénétration du virus dans ses cellules cibles, on peut utiliser par exemple le modèle expérimental suivant: Cellules infectables exprimant les sous-unités ct, 3, et y de l'IL-2: MT4 ou HUT 102. Anticorps anti-RIL2: 33B31 encore appelé ARIL-2 (anti-cxRIL2); clone A41 (anti-P3RIL2); MAB284 commercialisé par R&D SYSTEM (anti-yRIL2). Les cellules sont préincubées avec l'un au moins des anticorps anti-RIL2 à la température de 4 C, une heure avant la mise en contact avec le virus. On révèle la péné- tration intracellulaire éventuelle du virus avec un anticorps fluorescent (clone KC57 FITC) dirigé contre le core du virus. o4 2793691 REVENDICATIONS 1. Utilisation d'anticorps, ou de fragments ou d'analogues desdits anticorps, reconnaissant l'une au moins des sous-unités ca, P et y du récepteur de l'interleukine-2, dans la préparation d'un médicament destiné à la prévention et/ou au traitement des in- fections par les virus de l'immunodéficience, chez un mammifere. 2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle ledit médicament est destiné à prévenir et/ou traiter des infections par un virus choisi parmi HIV, SIV et FIV.