Brevet FR2778415A1 — publié le 19991112

[ La présente invention concerne des procédés pour identifier des micro- organismes, en particulier des procédés et des séquences d'acide nucléique permettant d'identifier Neisseria gonorrhoeae par amplification d'acide nucléique et hybridation d'acide nucléique. Neisseria gonorrhoeae, également nommé gonocoque (" GC "), est l'agent responsable de la gonorrhée. Il s'agit également de l'un des pathogènes bactériens sexuellement transmissibles les plus courants dans le monde; plus de 3 millions de cas sont signalés chaque année rien qu'aux Etats- Unis. GC envahit et colonise les surfaces muqueuses de l'urètre, du col utérin, du rectum, de la gorge et de la conjonctive. GC est extrêmement sensible à la sécheresse et aux changements de température, et est transmis presque exclusivement par contact direct des muqueuses, par exemple au cours de rapports sexuels. La sensibilité de l'organisme au dessèchement et aux changements de température s'est révélée problématique pour les méthodes de diagnostic, en particulier dans les pays peu développés o les échantillons ont souvent besoin d'être conservés pendant de longues périodes et/ou transportés vers un laboratoire de diagnostic avant analyse. Brock, Biology of Microorganisms 515-16 (3e éd., 1979); Jephcott, Genitourin. Med. 73, 245 (1997). La gonorrhée reste un problème de santé important dans le monde, même dans les pays dans lesquels un traitement médicamenteux efficace est facilement disponible. La symptomatologie de la gonorrhée diffère selon le sexe de la personne infectée. Chez les hommes, GC se manifeste le plus souvent par une infection douloureuse du canal urétral. A l'opposé, chez la femme, l'infection par GC est souvent asymptomatique ou ne provoque qu'une légère vaginite. Mais même chez les femmes asymptomatiques, l'infection par GC peut entraîner une maladie inflammatoire pelvienne, une infertilité, et une grossesse extra-utérine. Les femmes porteuses asymptomatiques peuvent sans le vouloir communiquer la maladie à leurs partenaires sexuels et leurs nouveau-nés lorsque le bébé traverse le col et le canal vaginal. Les enfants nés de femmes infectées par GC ont une fréquence accrue de conjonctivite et de pneumonie. Iwen et al., J. Clin. Microbiol. 33, 2587 (1995). Des méthodes précoces, rapides et bon marché d'identification d'une infection par GC chez les porteurs potentiels sont essentielles pour limiter la propagation de ce pathogène. Brock, Biology of Microorganisms 591-92 (3e éd., 1979); Crotchfelt et al., J. Clin. Microbiol. 35, 1536 (1997); Herrmann et al., J. Clin. Microbiol. 34, 2548 (1996). Des méthodes classiques d'identification de GC comprennent la coloration de Gram, l'analyse de la morphologie des colonies, la croissance sur milieux sélectifs, et l'analyse à la cytochrome oxydase. Les colonies de GC sont caractérisées comme des diplocoques gram-négatifs, oxydase-positifs. Les organismes issus de colonies présumées identifiées de GC sont souvent confirmés par fermentation des sucres, coloration avec anticorps fluorescent, et/ou coagglutination. Brock, Biology of Microorganisms (3e éd., 1979). Cependant, ces techniques de culture sont laborieuses, prennent du temps, et sont limitées par la faible viabilité des échantillons de GC. Une identification rapide et précoce de GC est souhaitable, notamment chez les individus asymptomatiques, pour ralentir la propagation de la maladie. De plus, du fait de la mauvaise viabilité des échantillons de GC stockés, les méthodes de diagnostic qui évitent la mise en culture d'organismes viables sont avantageuses. Pour éviter les problèmes afférents au diagnostic classique de GC, des tentatives ont été faites pour développer des méthodes de diagnostic basées sur les acides nucléiques, permettant d'identifier GC. Les tests diagnostiques à base d'acide nucléique, tels que l'hybridation de Southern, offrent des moyens rapides d'identification de micro-organismes, habituellement en moins d'un jour. Les méthodes basées sur la réaction en chaîne de la polymérase (PCR) sont encore plus sensibles et peuvent parfois donner des résultats en quelques heures. Cependant, les méthodologies basées sur les acides nucléiques sont souvent lourdes d'inconvénients. La plupart de ces méthodes sont coûteuses, ne sont disponibles que pour quelques espèces de micro-organismes, et ne peuvent résoudre qu'une espèce par échantillon analysé. Qui plus est, les tests basés sur les acides nucléiques exigent la mise au point de sondes ou d'amorces oligonucléotidiques qui sont spécifiques du micro- organisme concerné. Le brevet US n 5 536 638 de Rossau et al. enseigne un procédé d'identification de GC utilisant une sonde dirigée sur une séquence d'ARNr. Voir également le brevet US n 5 432 271 de Barns et al., le brevet US n 389 515 de Chmelo et al., le brevet US n 5 378 606 de Stern et al., et le brevet US n 5 173 401 de Wolff et ai. Jusqu'à 10000 copies des gènes d'ARNr sont présentes dans les bactéries; ainsi, les méthodes diagnostiques basées sur la détection des gènes d'ARNr de GC tirent parti de cette amplification naturelle. American Society for Microbiology, Diagnostic Molecular Microbiology: Principles and Applications (D.H. Persing et al., éd., 1993). De plus, les gènes des ARNr 16S ou 23S sont souvent utilisés pour mettre au point des sondes parce qu'il existe des régions variables dans ces gènes hautement conservés que l'on peut utiliser pour une détection spécifique d'espèce. Toutefois, pour certains organismes, il peut ne pas être possible d'obtenir des sondes hautement spécifiques et sensibles à partir des gènes des ARNr 16S et 23S, par exemple, car leur conservation de séquence d'acide nucléique évolutionnaire est trop grande. Une autre conséquence du caractère conservé de ces gènes est que la différenciation de deux organismes est souvent basée sur seulement une ou quelques erreurs d'appariement dans la séquence cible, ce qui impose des contraintes sur la stringence de l'hybridation. Un léger écart par rapport à ces conditions peut entraîner une erreur d'identification. Totten et al., J. Infectious Diseases 148, 462 (1983), enseignent un procédé d'identification de GC dans des échantillons cliniques par détection du " plasmide cryptique " couramment associé à GC. Cependant, les souches de GC ne contiennent pas toutes le plasmide cryptique. La présence de ce plasmide dans différentes souches de GC est extrêmement variable, allant d'environ 40% à environ 96%, selon l'emplacement géographique. Ainsi, cette méthode d'identification est d'une utilité limitée. Le brevet US n 5 256 536 de Miyada et al. enseigne un procédé pour détecter GC à l'aide d'une sonde d'acide nucléique. Cette sonde a été identifiée après hybridation soustractive d'ADN de GC par l'ADN de N. meningitidis. Le brevet US n 5 453 355 de Birkenmeyer et al. concerne des amorces et des sondes oligonucléotidiques pour détecter GC par amplification par PCR. Les sondes et les amorces de PCR décrites sont dirigées sur le gène pil E, qui code pour l'antigène de surface prédominant de GC. Stary et al., J. Clin. Microbiol. 35, 239 (1997), décrivent un procédé d'identification de GC basé sur une amplification par réaction en chaîne de la ligase (LCR) d'une séquence cible située dans le gène opa I. Buimer et al., J. Clin. Microbiol. 34, 2395 (1996), concerne un test diagnostique pour détecter simultanément à la fois GC et Chlamydia trachomatis par amplification par LCR en utilisant un groupe d'amorces dirigées contre les gènes opa de GC et un second groupe d'amorces ciblant le plasmide endogène de C. trachomatis. Crotchfelt et al., J. Clin. Microbiol. 35, 1536 (1997) et Iwen et al., J. Clin. Microbiol. 33, 2587 (1995), proposent des tests pour la détection simultanée de GC et de C. trachomatis, respectivement par coamplification par PCR et hybridation d'ARNr. En dépit des recherches décrites ci-dessus, il existe toujours un besoin dans la technique de procédés rapides, exacts et sensibles permettant l'identification de GC. La présente invention fournit une région nouvellement identifiée du génome de Neisseria gonorrhoeae (" GC ") qui peut être utilisée pour détecter des acides nucléiques de N. gonorrhoeae par des analyses d'hybridation ou d'amplification. Des sondes d'acides nucléiques et des amorces d'amplification ont été mises au point, qui aboutissent à l'identification, spécifique d'espèce, de GC sans réactivité croisée détectable avec des espèces non-GC. Un premier aspect de la présente invention est un procédé pour la détection, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comportant les étapes de: (a) hybridation d'une sonde oligonucléotidique aux acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae, la sonde consistant en au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae; puis (b) détection de l'hybridation entre la sonde oligonucléotidique et les acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae. Selon un deuxième aspect, la présente invention propose un procédé pour la détection, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comportant les étapes de: (a) hybridation à des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae d'au moins une amorce d'amplification comprenant une séquence de liaison à la cible, la séquence de liaison à la cible consistant en au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae; et (b) amplification des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae avec au moins unedite amorce d'amplification; puis (c) détection des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae amplifiés. Dans des modes de réalisation préférés, l'amorce d'amplification contient des séquences pour l'amplification des acides nucléiques cibles. Sont également préférés des procédés dans lesquels les acides nucléiques cibles sont amplifiés par une amplification par déplacement de brin thermophile (tSDA). Selon un troisième aspect, la présente invention propose un procédé pour la détection, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comportant les étapes de: (a) hybridation à des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae d'une première et d'une seconde amorce d'amplification, chacune des première et seconde amorces d'amplification comprenant une séquence de liaison à la cible et une séquence pour l'amplification des acides nucléiques cibles, o la séquence de liaison à la cible de la première amorce d'amplification est choisie dans le groupe constitué des séquences de liaison à la cible SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, et SEQ ID NO:22, et o la séquence de liaison à la cible de la seconde amorce d'amplification est choisie dans le groupe constitué des séquences de liaison à la cible SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, et SEQ ID NO:26; et (b) extension des première et seconde amorces d'amplification hybridées, sur les acides nucléiques cibles de Neisseria gonorrhoeae, moyennant quoi les acides nucléiques cibles sont amplifiés; puis (c) détection des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae amplifiés. Un quatrième aspect de la présente invention est un ADN isolé constitué de la séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae. Dans des modes de réalisation préférés, la séquence GC3 est choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10. Sont en outre décrites des sondes oligonucléotidiques et des amorces d'amplification comprenant une séquence de liaison à la cible comprenant au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3. De préférence, l'oligonucléotide a une séquence choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID N0:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID N0:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID N0:33. Un cinquième aspect de la présente invention est un groupe d'amorces pour l'amplification, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comprenant une première amorce d'amplification comprenant une séquence de liaison à la cible consistant en au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3 isolée. De préférence, la première amorce d'amplification est choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID N0:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33. Dans d'autres modes de réalisation, la première amorce d'amplification comprend en outre une séquence pour l'amplification des acides nucléiques cibles. Selon ce mode de réalisation, la première amorce d'amplification est de préférence choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, et SEQ ID NO:26. Sont en outre décrites des trousses pour la détection, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comprenant les sondes et amorces oligonucléotidiques de l'invention. Un sixième aspect de la présente invention est un groupe d'amorces pour l'amplification, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comprenant une première amorce d'amplification consistant en SEQ ID NO:22, une seconde amorce d'amplification consistant en SEQ ID NO:24, une première amorce tampon consistant en SEQ ID NO:27, et une seconde amorce tampon consistant en SEQ ID NO:28. Ces aspects et d'autres de la présente invention sont décrits avec plus de détails dans la description de l'invention présentée ci-dessous. La figure 1 représente un brin de la séquence d'ADN GC3 (SEQ ID NO:2) venant de la souche de GC ATCC 19424. Le codon d'arrêt (=codon STOP) (TAG) aux nucléotides 237-239 est souligné. La figure 2 montre l'alignement des séquences GC3 venant de six souches de GC (ATCC 19424 - SEQ ID NO:2; ATCC 35541 - SEQ ID NO:6; ATCC 43069 - SEQ ID NO:7; ATCC 43070 - SEQ ID NO:8; BDMS 2900 - SEQ ID NO:9; et CDC 111 - SEQ ID NO:10). Une séquence GC3 consensus (SEQ ID NO:5) a été obtenue à partir des six séquences individuelles et est présentée au sommet de l'alignement. La figure 3A montre les études de cartographie par PCR du fragment GC3. Les positions relatives (pas à l'échelle) des séquences cibles des 9 amorces de PCR sur le fragment GC3 sont représentées. Les amorces " L " (au dessus du fragment GC3) sont des amorces "de gauche", avec le sens 5' vers 3' de gauche à droite. De méme, les amorces " R " (en dessous du fragment GC3) sont des amorces " de droite ", avec le sens 5' vers 3' de droite à gauche. La figure 3B montre les séquences de nucléotides (SEQ ID NO:11 à SEQ ID NO:19) des 9 amorces de PCR utilisées dans les études de cartographie par PCR. On a évalué 4 amorces à gauche et 5 amorces à droite. La figure 4A présente les amorces de tSDA, les tampons, et les détecteurs du système de tSDA de GC3. Les séquences des amorces d'amplification par tSDA de GC3 (SEQ ID NO:20 à SEQ ID NO:26), des tampons (SEQ ID NO:27 à SEQ ID NO:29), et des détecteurs (SEQ ID NO:30 à SEQ ID NO:33) sont représentées. Les séquences de liaison à la cible et les sites Bso B1 des amorces d'amplification sont indiqués respectivement par un soulignement et une écriture en italique. La figure 4B montre le système de tSDA de GC3 choisi pour les études ultérieures. Cette série d'amorces d'amplification et de tampons cible une région recouvrant le codon d'arrêt et résulte en un produit d'amplification de 62 pb. Les séquences de nucléotides ne sont présentées ici que par un seul brin dans le sens 5' vers 3', de gauche à droite. Les nucléotides sont représentés ici de la manière recommandée par la Commission de Nomenclature Biochimique de l'UICPA-UIB, conformément à 37 C.F.R. 1.822 et l'usage établi. L'obtention et l'utilisation de gènes clonés, d'ADN recombiné, de vecteurs, de cellules hôtes transformées, de marqueurs de sélection, de protéines, et de fragments protéiques par génie génétique sont bien connues de l'homme du métier. Voir, par exemple, le brevet US n 4 761 371 de Bell et al. de la col. 6 ligne 3 à la col. 9 ligne 65; le brevet US n 4 877 729 de Clark et al. de la col. 4 ligne 38 à la col. 7 ligne 6; le brevet US n 4 912 038 de Schilling de la col. 3 ligne 26 à la col. 14 ligne 12; et le brevet US n 4 879 224 de Wallner de la col. 6 ligne 8 à la col. 8 ligne 59. On décrit dans la présente demande une région nouvellement identifiée de l'ADN génomique de Neisseria gonorrhoeae (" GC "), qui a été nommée " GC3 ". La séquence GC3 présente un haut degré d'homologie dans toutes les souches de GC. Les séquences GC3 décrites ici trouvent à s'utiliser dans des procédés de détection et de diagnostic de GC. Par exemple, ces séquences peuvent être utilisées pour concevoir des sondes d'hybridation susceptibles d'être utilisées dans des hybridations classiques de Southern ou Dot Blot, ou pour concevoir des amorces d'amplification susceptibles d'être utilisées dans des techniques d'amplification d'acide nucléique, telles que la réaction en chaîne de la polymérase (PCR), la réaction en chaîne de la ligase (LCR), l'amplification par déplacement de brin (SDA), ou l'amplification par déplacement de brin thermophile (tSDA). On décrit aussi ici des oligonucléotides, procédés et trousses pour la détection, de préférence la détection spécifique d'espèce, de GC. Les séquences GC3 décrites ici comprennent les séquences données sous les noms de SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10, et leurs séquences complémentaires. Tel qu'on l'utilise ici, le terme " séquences GC3 " englobe aussi les séquences GC3 dérivant de souches de GC autres que celles spécifiquement décrites ici. Autrement dit, les séquences GC3 de la présente invention englobent les produits d'amplification (c'est-à-dire les amplicons) résultant de l'amplification d'acides nucléiques de GC avec des amorces d'amplification spécifiques de GC3, telles que SEQ ID NO:3 et SEQ ID NO:4. Les séquences GC3 dérivant de souches de GC autres que celles spécifiquement décrites ici seront généralement homologues à au moins 75% environ (et plus préférentiellement homologues à 80%, 85%, 90% ou même %) à un segment continu d'ADN qui se trouve dans les séquences GC3 données ici sous les noms de SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:1O, et leurs séquences complémentaires, et seront capables de s'hybrider aux acides nucléiques de GC dans des conditions de stringence élevée, telles que définies ci-dessous. Les séquences GC3 de la présente invention englobent les séquences qui s'hybrident dans des conditions de stringence élevée aux acides nucléiques de GC et qui sont substantiellement homologues aux séquences GC3 spécifiquement décrites ici, et notamment les séquences GC3 décrites ici sous les noms de SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10, et leurs séquences complémentaires. Cette définition est destinée à couvrir les variations alléliques naturelles dans la séquence GC3. Comme on l'entend ici, les séquences nucléotidiques qui sont " substantiellement homologues " sont homologues à au moins 75%, et plus préférentiellement à %, 90% ou même 95%. Les conditions d'hybridation de stringence élevée qui permettront à des séquences d'ADN homologues de s'hybrider à une séquence d'ADN telle que donnée ici sont bien connues dans la technique. Par exemple, l'hybridation de ces séquences à l'ADN décrit ici peut être effectuée dans du formamide à 25%, SSC 5X, solution de Denhardt 5X, avec 100 pg/ml d'ADN simple brin, et 5% de sulfate de dextrane à 42 C, avec des conditions de lavage qui sont: formamide à 25%, SSC 5X, SDS 0,1% à 42 C pendant 15 minutes, pour permettre l'hybridation de séquences ayant environ 60% d'homologie. Des conditions plus stringentes sont représentées par une stringence de lavage de 0,3 M de NaC1, 0,03 M de citrate de sodium, 0,1% de SDS à 60 C, ou même 70 C. Voir Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (2e éd. 1989), incorporé ici par référence dans son intégralité. En général, les séquences GC3 qui s'hybrident aux séquences GC3 décrites ici seront homologues à au moins 75%, 80%, 85%, 90% ou même 95% ou plus avec les séquences GC3 décrites ici. Les sondes d'hybridation oligonucléotidiques sont également des aspects de la présente invention. Tel qu'on l'utilise ici, le terme " sonde " indique un oligonucléotide qui s'hybride à une séquence cible, typiquement pour faciliter sa détection. Tel qu'on l'entend ici, une " séquence cible " désigne une séquence d'acide nucléique à laquelle la sonde se lie spécifiquement. A la différence d'une amorce, une sonde n'est pas étendue par une polymérase. La sonde est souvent reliée (directement ou indirectement) à un marqueur détectable pour faciliter la détection ou la capture une fois qu'elle est hybridée à la séquence cible. Les sondes décrites ici s'hybrident aux acides nucléiques de GC3. Typiquement, les sondes de la présente invention s'hybrideront à des nucléotides consécutifs des séquences GC3 décrites ici dans des conditions stringentes, telles que définies ci-dessus. Autrement dit, les sondes de la présente invention seront homologues à au moins 75%, 80%, 85%, 90% ou même % ou plus avec des nucléotides consécutifs dans les séquences GC3 décrites ici, en particulier SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10, et leurs séquences complémentaires. Dans des modes de réalisation particuliers de l'invention, les sondes ont des séquences de nucléotides telles que données ici sous les noms de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33, et leurs séquences complémentaires. Puisque les acides nucléiques n'exigent pas une homologie complète pour s'hybrider, il apparaitra à l'évidence à l'homme de l'art que les séquences de sonde spécifiquement décrites ici peuvent être modifiées de façon à être substantiellement homologues aux séquences de sonde décrites ici sans perte de leur utilité comme sondes de GC. Il est bien connu dans la technique que l'hybridation de séquences d'acide nucléique homologues et partiellement homologues peut être accomplie en ajustant les conditions d'hybridation pour augmenter ou diminuer la stringence (à savoir, en ajustant la température d'hybridation ou la teneur en sel du tampon). Les sondes d'hybridation peuvent avoir une quelconque longueur appropriée. Il n'y a aucune limite inférieure ou supérieure particulière à la longueur de la sonde, pourvu que la sonde s'hybride aux acides nucléiques de GC3 ciblés et fonctionne effectivement comme une sonde (à savoir, facilite la détection). Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, la sonde comprend au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3, telle que définie ci-dessus. Les sondes de la présente invention peuvent être aussi courtes que 50, , 30, 20, 15, ou 10 nucléotides, ou plus courtes. De même, les sondes peuvent être aussi longues que 20, 40, , 60, 75, 100 ou 200 nucléotides, ou plus longues. La longueur maximale de la sonde est la longueur de la séquence GC3 particulière choisie. Par exemple, une sonde dérivant de la souche de GC ATCC 19424 (voir figure 1; SEQ ID NO:2) peut être aussi longue que 415 nucléotides. Dans un mode de réalisation préféré, la sonde est spécifique d'espèce, ce qui signifie que dans des conditions stringentes (telles que définies ci-dessus, par exemple une stringence de lavage de 0,3 M de NaCl, 0,03 M de citrate de sodium, 0,1% de SDS à 60 C), elle s'hybride seulement à des acides nucléiques de GC et ne s'hybride pas aux acides nucléiques d'une espèce non-GC quelconque, ou ne le fait qu'à un degré négligeable, de sorte qu'il n'y a qu'une hybridation ou détection insignifiante d'acides nucléiques de non-GC. Autrement dit, une sonde spécifique de GC ne s'hybride pas à ou ne détecte pas les acides nucléiques de non-GC (ou ne le fait qu'à un degré insignifiant) dans les mêmes conditions que celles dans lesquelles la sonde s'hybride à et détecte les acides nucléiques de GC. Un autre aspect de la présente invention est un procédé pour détecter GC au moyen d'une sonde de GC3, telle que définie ci-dessus. Selon ce mode de réalisation de l'invention, une sonde d'acide nucléique est hybridée à des acides nucléiques de GC, et l'hybridation entre la sonde et les acides nucléiques de GC est ensuite détectée. Un mode de réalisation préféré de l'invention est un procédé spécifique d'espèce (tel que défini ci-dessus) de détection de GC au moyen d'une sonde d'hybridation. L'hybridation peut être effectuée en employant toute méthodologie appropriée connue dans la technique. Typiquement, les hybridations seront réalisées dans des conditions de stringence élevée. L'homme du métier se rendra compte à l'évidence que les conditions d'hybridation peuvent être modifiées pour augmenter ou diminuer le degré d'hybridation, le niveau de spécificité de l'hybridation, et le niveau du bruit de fond de la liaison non spécifique (à savoir, en modifiant les concentrations en sel ou les températures de l'hybridation ou du lavage). De façon similaire, la détection de l'hybridation entre la sonde et les acides nucléiques de GC peut être effectuée par toute méthodologie connue dans la technique. La sonde peut contenir un marqueur détectable qui indiquera l'hybridation entre la sonde marquée et les acides nucléiques de GC. Le marqueur détectable de la sonde est un fragment qui peut être détecté soit directement soit indirectement. Pour une détection directe du marqueur, les sondes peuvent être marquées avec un radioisotope et détectées par autoradiographie. En variante, la sonde peut être marquée avec un fragment fluorescent et détectée par fluorescence, ainsi qu'il est connu dans la technique. Comme autre alternative, la sonde peut être indirectement détectée par marquageavec un marqueur qui nécessite des réactifs supplémentaires pour le rendre détectable. Des exemples de procédés de marquage indirect comprennent ceux utilisant des agents chimioluminescents, des enzymes qui produisent des produits réactionnels visibles, et des ligands (par exemple des haptènes, des anticorps ou des antigènes) qui peuvent être détectés par liaison à des partenaires de liaison spécifiques marqués (par exemple liaison d'un haptène à un anticorps marqué). Des marqueurs de type ligand sont également utiles pour la capture en phase solide de la sonde oligonucléotidique (à savoir, sondes de capture). Des exemples de marqueurs comprennent la biotine (détectable par liaison à l'avidine ou la streptavidine marquée) et des enzymes, comme la peroxydase de raifort ou la phosphatase alcaline (détectables par ajout des substrats d'enzyme pour produire un produit coloré). Les méthodes de marquage d'oligonucléotides sont bien connues dans la technique. Les amorces d'amplification de GC3 sont également visées par la présente invention. Une amorce d'amplification est un oligonucléotide utile pour l'amplification d'une séquence cible par extension de l'oligonucléotide après hybridation à la séquence cible, ou par ligature de plusieurs oligonucléotides qui sont adjacents une fois hybridés à la séquence cible. Les amorces oligonucléotidiques de la présente invention sont de préférence utilisées pour détecter GC par extension de l'amorce oligonucléotidique hybridée. Les copies de la séquence cible qui sont générées pendant la réaction d'amplification sont appelées " produits d'amplification ", " amplimères ", ou " amplicons ". Un produit d'extension désigne la copie d'une séquence cible produite par hybridation d'une amorce et extension de l'amorce par une polymérase utilisant la séquence cible comme matrice. Comme on l'entend ici, la " séquence cible " d'une amorce d'amplification désigne une séquence d'acide nucléique de GC à laquelle la " séquence de liaison à la cible " de l'amorce d'amplification se lie spécifiquement et que cette dernière amplifie spécifiquement. Celle-ci inclut la séquence d'acide nucléique initiale à amplifier et son deuxième brin complémentaire ainsi que l'un ou l'autre brin d'une copie de la séquence cible initiale générée au cours de la réaction d'amplification. La partie de l'amorce qui s'hybride à la séquence cible (à savoir, la séquence de liaison à la cible ou région d'appariement) peut aussi être utilisée comme sonde d'hybridation pour la détection d'acides nucléiques de GC cibles dans diverses méthodes d'hybridation d'acide nucléique, telles que décrites de manière plus détaillée ci-dessus. Ainsi, il sera évident pour l'homme du métier que les amorces et les sondes de la présente invention peuvent être structurellement similaires ou identiques. Les termes " amorce " et " sonde " se rapportent à la fonction de l'oligonucléotide. Un oligonucléotide peut fonctionner comme une sonde s'il est hybridé à une séquence cible pour capturer ou détecter la séquence cible. En variante, ce même oligonucléotide peut fonctionner comme une amorce s'il est utilisé pour amplifier la cible, comme décrit ci-dessous. Les bases appropriées pour préparer les sondes oligonucléotidiques ou les amorces d'amplification de la présente invention peuvent être choisies parmi les bases nucléotidiques naturelles telles que l'adénine, la cytosine, la guanine, l'uracile, et la thymine; et les bases nucléotidiques n'existant pas dans la nature ou " synthétiques " telles que la 8-oxo-guanine, la 6- mercaptoguanine, la 4-acétylcytidine, la 5- (carboxyhydroxyéthyl)uridine, la 2'-O-méthylcytidine, la carboxyméthylaminométhyl-2-thiouridine, la 5carboxyméthylaminométhyluridine, la dihydrouridine, la 2'-Ométhylpseudouridine, la j-D-galactosylquéosine, la 2'-O-méthylguanosine, l'inosine, la N6- isopentényladénosine, la 1-méthyladénosine, la 1- méthylpseudouridine, la 1-méthylguanosine, la 1- méthylinosine, la 2,2-diméthylguanosine, la 2- méthyladénosine, la 2-méthylguanosine, la 3- méthylcytidine, la 5-méthylcytidine, la N6- méthyladénosine, la 7-méthylguanosine, la 5- méthylaminométhyluridine, la 5-méthoxyaminométhyl-2- thiouridine, la O-D-mannosylquéosine, la 5- méthoxycarbonylméthyluridine, la 5-méthoxyuridine, la 2- méthylthio-N6-isopentényladénosine, la N-((9-3-D- ribofuranosyl-2-méthylthiopurine-6-yl)carbamoyl)- thréonine, la N-((9-j-D-ribofuranosylpurine-6-yl)N- méthylcarbamoyl)thréonine, l'ester méthylique de l'acide uridine-5oxyacétique, l'acide uridine-5-oxyacétique, la wybutoxosine, la pseudouridine, la quéosine, la 2- thiocytidine, la 5-méthyl-2-thiouridine, la 2- thiouridine, la 5-méthyluridine, la N-((9-p-D- ribofuranosylpurine-6-yl)carbamoyl)thréonine, la 2'-O- méthyl-5-méthyluridine, la 2'-O-méthyluridine, la wybutosine, et la 3-(3-amino-3-carboxypropyl)uridine. De même, on peut aussi employer des analogues chimiques d'oligonucléotides dans lesquels les liaisons phosphodiesters ont été modifiées (par exemple en méthylphosphonate, en phosphotriester, en phosphorothioate, en phosphorodithioate, ou en phosphoramidate). On peut obtenir une protection contre la dégradation en utilisant une stratégie de la " coiffe à l'extrémité 3' " par laquelle on substitue des liaisons résistantes aux nucléases aux liaisons phosphodiesters à l'extrémité 3' de l'oligonucléotide. Voir Tidd et Warenius, Br. J. Cancer 60, 343 (1989); Shaw et al., Nucleic Acids Res. 19, 747 (1991). Les liaisons phosphoramidates, phosphorothioates, et méthyl- phosphonates fonctionnent toutes convenablement de cette manière. Une modification plus généralisée du squelette phosphodiester s'est avérée conférer une certaine stabilité et peut donner aux oligonucléotides une affinité accrue et une perméation cellulaire accrue. Voir Milligan et al., J. Med. Chem. 36, 1923 (1993). Un grand nombre de stratégies chimiques différentes ont été employées pour remplacer le squelette phosphodiester entier par de nouvelles liaisons. Voir la référence précitée. Des analogues de squelette comprennent les liaisons phosphorothioate, phosphorodithioate, méthylphosphonate, phosphoramidate, boranophosphate, phosphotriester, formacétal, 3'-thioformacétal, 5'- thioformacétal, 5'-thioéther, carbonate, 5'-N-carbamate, sulfate, sulfonate, sulfamate, sulfonamide, sulfone, sulfite, sulfoxyde, sulfure, hydroxylamine, méthylène(méthylimino)(MMI) ou méthylèneoxy(méthylimino) (MOMI). Les oligonucléotides modifiés en phosphorothioate et méthylphosphonate sont particulièrement préférés en raison de leur disponibilité par synthèse d'oligonucléotides automatisée. Voir la même référence que ci-dessus. L'oligonucléotide peut également être un " acide nucléique peptidique " tel que décrit dans Nielsen et al., Science 254, 1497 (1991). La seule obligation est que la sonde oligonucléotidique doit posséder une séquence dont au moins une partie est capable de se lier à une partie de la séquence d'une molécule d'ADN cible. Les amorces d'amplification décrites ici s'hybrident à et amplifient les acides nucléiques de GC3. Lorsqu'un groupe de deux ou plusieurs amorces d'amplification est utilisé pour amplifier les acides nucléiques de GC3, on préfère que le groupe d'amorces d'amplification soit contenu dans une solution aqueuse commune. Typiquement, les amorces d'amplification s'hybrideront à des nucléotides consécutifs des séquences GC3 décrites ici dans des conditions stringentes, telles que définies ci-dessus. Autrement dit, les amorces de la présente invention seront homologues à au moins 75%, 80%, 85%, 90% ou même 95% ou plus avec des nucléotides consécutifs dans les séquences GC3 décrites ici, en particulier SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10, et leurs séquences complémentaires. Les amorces d'amplification peuvent avoir une quelconque longueur appropriée. Il n'y a aucune limite inférieure ou supérieure particulière à la longueur de l'amorce, pour autant que l'amorce s'hybride à l'ADN de GC3 cible et fonctionne effectivement comme une amorce d'amplification. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, les amorces comprennent au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3, telle que définie ci-dessus. Les amorces peuvent être aussi courtes que 50, 40, 30, 20, 15, ou 10 nucléotides, ou plus courtes. De même, les amorces peuvent être aussi longues que 20, 40, 50, 60, 75, 100 ou 200 nucléotides, ou plus longues. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, l'amorce d'amplification est spécifique d'espèce, ce qui signifie que dans des conditions stringentes (telles que définies ci-dessus), l'amorce d'amplification s'hybride à, amplifie, et détecte seulement des acides nucléiques de GC et ne s'hybride pas à, n'amplifie, et ne détecte pas les acides nucléiques d'une espèce non-GC quelconque, ou ne le fait qu'à un degré négligeable, de sorte qu'il n'y a qu'une hybridation, amplification et détection insignifiante d'acides nucléiques de non-GC. Autrement dit, une amorce d'amplification spécifique de GC ne s'hybride pas à, n'amplifie pas, et ne détecte pas les acides nucléiques de non-GC (ou ne le fait qu'à un degré insignifiant) dans les mêmes conditions que celles dans lesquelles l'amorce d'amplification s'hybride à, amplifie, et détecte les acides nucléiques de GC. Dans des modes ae réalisation particuliers de la présente invention, l'amorce d'amplification ou sa séquence de liaison à la cible a une séquence telle que donnée par SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:l 18, SEQ ID NO:19, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33, et leurs séquences complémentaires. En variante, l'amorce d'amplification a une séquence telle que donnée par SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25 ou SEQ ID NO:26, de préférence SEQ ID NO:22 ou SEQ ID NO:24, ou leurs séquences complémentaires. Dans d'autres modes de réalisation préférés, les amorces d'amplification sont choisies de façon qu'une amorce cible l'extrémité 5' du codon d'arrêt de GC3 (par exemple, le codon d'arrêt commençant au nucléotide 237 de SEQ ID NO:2) et qu'une seconde amorce cible l'extrémité 3' du codon d'arrêt, et dans le cas d'ADN double brin, sur le brin complémentaire du brin auquel s'hybride la première amorce d'amplification. Selon ce mode de réalisation, les amorces d'amplification amplifieront en travers du codon d'arrêt, et le produit d'amplification renfermera le codon d'arrêt. De préférence, l'une des amorces d'amplification a une séquence donnée sous le nom de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:11 ou SEQ ID NO:12, et la seconde amorce d'amplification a une séquence donnée sous le nom de SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18 ou SEQ ID NO:19. Sont également préférés des modes de réalisation dans lesquels la première amorce d'amplification a une séquence donnée sous le nom de SEQ ID NO:15 ou SEQ ID NO:16, et la seconde amorce d'amplification a une séquence donnée sous le nom de SEQ ID NO:13 ou SEQ ID NO:14. Plus préférentiellement, les première et seconde amorces d'amplification ont des séquences données sous les noms, respectivement, de SEQ ID NO:3 et SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11 et SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:11 et SEQ ID NO:19, ou SEQ ID NO:18 et SEQ ID NO:12. Puisque les acides nucléiques n'exigent pas une homologie complète pour s'hybrider, il apparaîtra à l'évidence à l'homme de l'art que les séquences d'amorce spécifiquement décrites ici peuvent être modifiées de façon à être substantiellement homologues aux séquences d'amorce décrites ici sans perte de leur utilité comme amorces d'amplification de GC. Il est bien connu dans la technique que l'hybridation de séquences d'acide nucléique homologues et partiellement homologues peut être accomplie en ajustant les conditions d'hybridation pour augmenter ou diminuer la stringence (à savoir, en ajustant la température d'hybridation ou la teneur en sel du tampon). Les amorces d'amplification de l'invention décrites ici peuvent être utilisées dans tout procédé d'amplification d'acide nucléique connu dans la technique. Ces procédés comprennent, sans y être limités, la réaction en chaîne de la polymérase (PCR; décrite dans les brevets US n 4 683 195, 4 683 202, 4 800 159, 4 965 188), l'amplification par déplacement de brin (SDA; décrite par Walker et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 392 (1992), incorporé ici par référence dans son intégralité; Walker et al, Nucl. Acids Res. 20, 1691 (1992), incorporé ici par référence dans son intégralité; brevet US n 5 270 184), l'amplification par déplacement de brin thermophile (tSDA; brevet US n 5 648 211 et demande de brevet européen n EP 0 684 315 de Frasier et al.), la réplication de séquence auto-entretenue (3SR; J.C. Guatelli et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 1874 (1990)), l'amplification basée sur séquence d'acide nucléique (NASBA; brevet US n 5 130 238 de Cangene), le système de la réplicase QD (P. Lizardi et al., BioTechnology 6, 1197 (1988)), et l'amplification basée sur la transcription (D.Y. Kwoh et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86, 1173 (1989)). De préférence, les amorces d'amplification de la présente invention sont utilisées pour réaliser une SDA ou une tSDA, la tSDA étant davantage préférée. Pour l'amplification par tSDA (ou SDA), les amorces oligonucléotidiques sont de préférence choisies de façon que la teneur en GC soit faible, de préférence inférieure à 70% de la composition en nucléotides totale de la sonde. De façon similaire, pour la tSDA la séquence cible a de préférence une faible teneur en GC pour minimiser la structure secondaire. Une amorce d'amplification à utiliser dans la tSDA comprend une séquence de liaison à la cible, un site de reconnaissance pour une endonucléase de restriction, et une queue. La séquence de liaison à la cible se trouve à l'extrémité 3' de l'amorce d'amplification par tSDA. Elle s'hybride à l'extrémité 3' de la séquence cible. La séquence de liaison à la cible confère une spécificité d'hybridation à l'amorce d'amplification. Un site de reconnaissance pour une endonucléase de restriction est en 5' de la séquence de liaison à la cible. L'endonucléase de restriction est une endonucléase qui va couper un brin d'un complexe d'ADN lorsque le site de reconnaissance est hémimodifié, comme décrit par Walker et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 392 (1992); Nucl. Acids Res. 20, 1691 (1992); ces deux publications étant incorporées ici par référence dans leur intégralité). La queue de l'amorce d'amplification est composée des nucléotides en 5' du site de reconnaissance d'endonucléase de restriction. La longueur et la séquence de la queue ne sont généralement pas critiques. La queue fonctionne comme un site de réamorçage de la polymérase lorsque le reste de l'amorce d'amplification est coupée et déplacée durant la tSDA. Telle qu'on l'utilise ici, une " amorce tampon " ou " amorce externe " est une amorce utilisée pour déplacer les produits d'extension d'amorce. L'amorce tampon s'hybride à une séquence cible en amont de la séquence cible de l'amorce d'amplification de sorte que l'extension de l'amorce tampon déplace l'amorce d'amplification située en aval et son produit d'extension. En général, il ne sera pas nécessaire que les amorces tampons utilisées dans les réactions de SDA et tSDA soient spécifiques de GC. Les amorces tampons ne sont requises que pour s'hybrider à leurs cibles en amont des amorces d'amplification, pour que lorsque les amorces tampons sont étendues elles déplacent l'amorce d'amplification et son produit d'extension. La séquence des amorces tampons n'est donc généralement pas critique, et peut dériver de toute séquence cible en amont qui est suffisamment proche du site de liaison de l'amorce d'amplification pour permettre le déplacement du produit d'extension de l'amorce d'amplification dès l'extension de l'amorce tampon. Les erreurs d'appariement occasionnelles avec la cible dans la séquence de l'amorce tampon ou une certaine hybridation croisée avec des séquences non-cibles n'ont généralement pas d'effet négatif sur l'efficacité de l'amplification pourvu que l'amorce tampon s'hybride toujours à la séquence cible spécifique. L'extension d'amorces tampons est une méthode pour déplacer les produits d'extension d'amorces d'amplification, mais le chauffage en est une autre qui convient aussi. Dans un mode de réalisation de l'invention, les amorces tampons comprennent au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3, telle que définie ci-dessus. Dans des modes de réalisation préférés, une ou plusieurs des amorces tampons ont des séquences telles que données ici par SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, et SEQ ID NO:29, de préférence SEQ ID NO:27 et SEQ ID NO:28. Les amorces tampons peuvent aussi être utilisées comme séquence de liaison à la cible d'une amorce d'amplification ou comme sonde d'hybridation, chacune telle que définie ci-dessus. Pour les procédés d'amplification qui ne demandent pas des séquences spécialisées aux extrémités de la cible (par exemple la PCR et la LCR), l'amorce d'amplification est typiquement essentiellement constituée de la séquence de liaison à la cible seule. Dans le cas de procédés d'amplification qui demandent des amorces contenant des séquences spécialisées en plus de la séquence de liaison à la cible, la séquence spécialisée peut être reliée à la séquence de liaison à la cible par des méthodes classiques de préparation d'oligonucléotides sans altérer la spécificité d'hybridation de la séquence de liaison à la cible. Des exemples représentatifs de procédés d'amplification demandant des séquences d'amorce spécialisées pour l'amplification comprennent: SDA et tSDA, 3SR, NASBA, et amplification basée sur la transcription. Ces séquences spécialisées ne s'hybrident pas aux acides nucléiques cibles, mais au lieu de cela remplissent une fonction distincte, qui est requise pour l'amplification (par exemple le site d'enzyme de restriction et la queue de l'amorce dans les amorces de SDA et de tSDA). Un autre aspect de la présente invention est un procédé pour détecter GC par hybridation d'au moins une amorce d'amplification comprenant une séquence de liaison à la cible à des acides nucléiques de GC, amplification des acides nucléiques de GC, puis détection des acides nucléiques de GC amplifiés. On préfère les procédés spécifiques d'espèce (comme défini ci-dessus) de détection de GC utilisant une ou des amorce(s) d'amplification. La ou les amorce(s) d'amplification s'hybride(nt) à, amplifie(nt), et détecte(nt) les acides nucléiques venant de la séquence GC3. Typiquement, la séquence cible de l'amorce d'amplification sera un ADN double brin de la séquence GC3 du génome de GC. De préférence, les procédés inventifs décrits ici emploient un groupe de deux ou plusieurs amorces d'amplification pour amplifier les séquences cibles de GC. En variante, une seule amorce d'amplification peut être utilisée pour mettre en ouvre la présente invention. Un " groupe d'amorces " comprend deux ou plusieurs amorces qui sont conçues ou adaptées pour fonctionner ensemble pour amplifier la séquence cible. Un groupe d'amorces peut seulement inclure des amorces d'amplification ou il peut aussi englober des amorces tampons (par exemple pour les réactions de SDA et tSDA). Comme autre alternative, un groupe d'amorces peut contenir une ou plusieurs amorces supplémentaires ou alternatives pour la mise en ouvre des procédés de l'invention. De préférence, le groupe d'amorces comprend deux amorces d'amplification pour la PCR ou deux amorces d'amplification et deux amorces tampons pour la SDA/tSDA. Les amorces d'amplification à utiliser pour mettre en oeuvre les procédés décrits ici sont telles que décrites ci-dessus. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, les amorces d'amplification sont hybridées aux acides nucléiques de GC et étendues. Des procédés d'amplification comportant des réactions d'extension comprennent, mais sans y être limités, la SDA et la tSDA. Tout protocole d'amplification qui repose sur une hybridation spécifique, cyclique, d'amorces à l'acide nucléique cible peut être utilisé, tel que la PCR, la SDA, la tSDA, la 3SR, le système de la réplicase Q0, ou l'amplification basée sur la transcription. L'amplification par SDA et tSDA est préférée, la tSDA étant davantage préférée. Les réactions de tSDA peuvent être réalisées de la façon décrite par le brevet US n 5 648 211 et la demande européenne n EP 0 684 315 de Frasier et al. En résumé, l'amplification par tSDA est basée sur 1) l'aptitude d'une endonucléase de restriction à couper le brin non modifié d'une forme hémiphosphorothioate de son site de reconnaissance double brin, et 2) l'aptitude de certaines polymérases à initier la réplication au niveau de l'entaille et à déplacer le brin non-matrice situé en aval. Dans les réactions de tSDA, l'extension d'amorces, la coupure d'un site de reconnaissance d'endonucléase de restriction hémimodifié, le déplacement de produits d'extension simples brins, l'appariement d'amorces aux produits d'extension et l'extension des amorces qui suit se produisent en même temps dans le mélange de réaction. Ceci est à l'opposé de la PCR, dans laquelle les étapes de la réaction ont lieu en phases ou en cycles distincts par suite des caractéristiques des cycles de température de la réaction. Les réactions d'amplification employant les amorces de la présente invention peuvent incorporer de la thymine, comme décrit dans Walker et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 392 (1992); Nucl. Acids Res. 20, 1691 (1992); ces deux publications étant incorporées ici par référence dans leur intégralité), ou elles peuvent substituer partiellement ou complètement du 2'- désoxyuridine-5'-triphosphate au TTP dans la réaction pour réduire la contamination croisée avec les produits d'amplification remontant aux réactions d'amplification antérieures dans les réactifs, les dispositifs de pipettage et les surfaces de laboratoire, par exemple, ainsi que l'enseigne le brevet européen n 0 624 643. La désoxyuridine (dU) est incorporée dans les produits d'amplification et peut être excisée par traitement avec l'uracile ADN glycosylase (UDG). Ces sites abasiques rendent tout produit d'amplification contaminant incapable d'être amplifié dans les réactions d'amplification ultérieures. L'UDG peut être inactivée par un inhibiteur d'UDG avant d'entreprendre l'amplification suivante pour empêcher l'excision de dU dans les produits d'amplification nouvellement formés. Dans un autre mode de réalisation préféré de l'invention, l'amplification est réalisée en hybridant deux ou plusieurs amorces d'amplification aux acides nucléiques de GC, de sorte que les amorces soient adjacentes les unes aux autres une fois hybridées à leurs séquences cibles respectives, puis en ligaturant les amorces d'amplification hybridées pour produire un produit d'amplification plus long. La présence de GC ou d'acides nucléiques de GC est détectée en déterminant la présence des acides nucléiques de GC amplifiés. Les produits d'amplification peuvent être détectés par hybridation à une sonde marquée, comme décrit plus haut. Lorsqu'on utilise une sonde pour détecter l'amplification, la sonde est typiquement choisie pour s'hybrider à une séquence qui se situe entre les amorces d'amplification (à savoir, une sonde interne). Lorsqu'on réalise l'amplification par LCR, on peut utiliser une sonde qui chevauche les deux amorces et ne détecte pas les amorces non ligaturées. En variante, les produits d'amplification peuvent être détectés par leur taille caractéristique, par exemple par électrophorèse suivie d'une coloration au bromure d'éthidium pour visualiser les différentes espèces d'acides nucléiques. C'est la méthode préférée de détection de produits d'amplification pour les procédés de LCR. Dans une autre alternative, on utilise une amorce d'amplification marquée. Dans une autre alternative encore, une amorce d'amplification/sonde interne marquée est étendue sur la séquence cible (amorce détecteur) pour la détection de produits d'amplification comme décrit dans Walker et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 392 (1992); Nucl. Acids Res. , 1691 (1992); ces deux publications étant incorporées ici par référence dans leur intégralité. Des exemples de procédés de détection spécifiques que l'on peut employer pour détecter des produits d'amplification comprennent un procédé chimioluminescent dans lequel les produits amplifiés sont détectés à l'aide d'une sonde de capture biotinylée et d'une sonde détecteur conjuguée à une enzyme comme décrit dans le brevet US n 5 470 723. Après hybridation de ces deux sondes à des sites différents de la région test de la séquence cible (à savoir, entre les sites de liaison des deux amorces d'amplification), le complexe est capturé sur une plaque de microtitration revêtue de streptavidine, et le signal chimioluminescent est développé et lu dans un luminomètre. Comme autre procédé alternatif, une amorce signal telle que décrite dans le brevet européen n 0 678 582 est incluse dans la réaction d'amplification pour faciliter la détection du produit d'amplification. Selon ce mode de réalisation, des produits d'amplification secondaires marqués sont générés au cours de l'amplification d'une manière qui dépend de l'amplification de la cible et peuvent être détectés en tant qu'indication de l'amplification de la cible au moyen du marqueur associé. La présente invention fournit aussi des trousses pour détecter des acides nucléiques de GC comprenant une sonde d'acide nucléique ou une amorce d'amplification, de préférence une paire d'amorces d'amplification ou un groupe d'amorces, chacune telle que décrite ci-dessus. On préfère des procédés, sondes, amorces d'amplification, et groupes d'amorces, qui soient tous spécifiques d'espèce, pour détecter GC, comme décrit ci- dessus. La trousse peut éventuellement contenir des moyens de détection des acides nucléiques de GC à l'aide d'une sonde oligonucléotidique ou d'une amorce d'amplification, comme décrit ci-dessus. De préférence, la sonde oligonucléotidique ou l'amorce d'amplification comprend au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3. Dans une variante de mode de réalisation, l'amorce d'amplification contient une séquence pour l'amplification d'un acide nucléique cible en plus d'une séquence de liaison à la cible, chacune telle que décrite ci-dessus. La trousse peut en outre inclure d'autres composants et réactifs permettant de mettre eneuvre le procédé d'hybridation ou d'amplification (par exemple, hybridation de Southern, hybridation ponctuelle (dot blot), PCR, SDA, etc., et analogues). A titre d'exemple représentatif, une telle trousse peut contenir au moins une amorce d'amplification selon la présente invention. Pour la détection par hybridation, une solution d'hybridation telle que: formamide à 25%, SSC X, solution de Denhardt 5X, 100 pg/ml d'ADN simple brin, et sulfate de dextrane à 5%, ou d'autres réactifs connus pour être utiles dans l'hybridation de sonde, peuvent aussi être inclus. Voir Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (2e éd. 1989); incorporé ici par référence dans son intégralité. En variante, des réactifs appropriés pour être utilisés avec l'un des procédés d'amplification d'acide nucléique connus peuvent être inclus avec des amorces d'amplification de GC3. Les composants de la trousse sont conditionnés ensemble dans un récipient commun, comprenant typiquement des instructions écrites pour mettre en oeuvre des modes de réalisation spécifiques choisis des procédés décrits ici. Des composants servant aux procédés de détec-:ion, tels que décrits plus haut, peuvent éventuellement être inclus dans la trousse, par exemple une deuxième sonde, et/ou des réactifs et des moyens pour réaliser une détection avec marqueur (par exemple, marqueur radioactif, substrats d'enzymes, anticorps, etc., et analogues). Les procédés, sondes, amorces d'amplification, et trousses décrits ici peuvent être utilisés pour détecter GC dans n'importe quel échantillon susceptible de contenir GC. Les échantillons peuvent comprendre des acides nucléiques isolés, des micro-organismes isolés, ou peuvent être des échantillons cliniques. Typiquement, les échantillons cliniques se présentent sous la forme de fluide ou de tissu biologique (par exemple, crachat, tissus mous, urine, écoulements). Les échantillons peuvent également être obtenus par écouvillonnage, par exemple avec des écouvillons pharyngiens, conjonctivaux, urétraux, vaginaux, cervicaux, génitaux ou ano-rectaux. Il est courant dans la technique de dépister N. gonorrhoeae conjointement avec une ou plusieurs autres maladies sexuellement transmissibles, en particulier Chlamydia trachomatis. Les sondes, amorces d'amplification, procédés, et trousses de diagnostic décrits ici pour détecter GC peuvent être utilisés seuls ou avec des moyens et techniques de diagnostic pour d'autres micro- organismes, de préférence d'autres pathogènes transmis sexuellement, plus préférentiellement Chlamydia trachomatis. Les exemples suivants sont proposés pour illustrer la présente invention et ne doivent pas être interprétés comme limitatifs de celle-ci. EXEMPLE 1 Identification d'un fragment d'ADN spécifique de N. gonorrhoeae (GC3) On a utilisé une réaction en chaîne de la polymérase amorcée arbitrairement (AP-PCR) pour créer une visualisation différentielle de produits d'amplification à partir de l'ADN génomique de 2 espèces de N. gonorrhoeae (" GC ") et de 2 espèces non-GC (tableau 1). L'amorce pour l'AP-PCR était la suivante: Amorce CRLll: 5' CGG TTG CCT CCA TGC AGA T 3' (SEQ ID NO:1) Les conditions pour la réaction d'amplification *sont données ci-dessous. Conditions de la réaction de PCR (50 l): Tris-HCl 10 mM, pH 8,3 (à 25 C) KC1 50 mM MgC12 1,5 mM gélatine 0,001% (poids/volume) les dNTP 0, 2 mM amorce CRLll marquée au 32p 0,2 iiM ADN génomique en tant que matrice, 100 ng ADN polymérase Taq Gold" (Perkin Elmer), 2,5 U Les amorces ont été radiomarquées en 5' (32p) suivant les instructions du fabricant (trousse de marquage Random Primed DNA, Boehringer Mannheim). L'AP- PCR a été effectuée dans un thermocycleur de Perkin- Elmer-Cetus (modèle 480), avec le profil d'amplification donné ci-dessous. Profil de la PCR: C 3 minutes puis passage à: 94 C 2 minutes 64 C 2 minutes 72 C 2 minutes 15 cycles puis passage à: 94 C 2 minutes 37 C 2 minutes 72 C 2 minutes 1 cycle puis passage à: 94 C 2 minutes C 2 minutes 72 C 2 minutes cycles puis passage à: 4 C pendant une nuit Les produits d'amplification ont été isolés et visualisés par électrophorèse sur un gel d'acrylamide dénaturant à 8% (100 W) pendant 4 heures, suivie d'une autoradiographie (exposition d'une nuit avec un film radiographique Fuji Medical). On a identifié une bande unique qui était présente dans les deux souches de GC, mais absente dans les espèces non-GC testées. Cette bande a été nommée " GC3 ". Tableau 1 Organismes cibles pour la réaction en chaîne de la polymérase amorcée arbitrairement Cibles N d'identification Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 Neisseria gonorrhoeae ATCC 35541 Neisseria lactamica ATCC 44418 Neisseria meningitidis ATCC 13077 EXEMPLE 2 Ré-amplification du fragment d'ADN GC3 par réaction en chaîne de la polymérase amorcée arbitrairement (AP-PCR) La bande GC3 a été découpée dans le gel, et l'ADN a été extrait en faisant bouillir la coupe de gel d'acrylamide dans 100 pl d'eau distillée stérile pendant minutes, puis en réalisant une précipitation à l'éthanol à l'aide de glycogène comme support. L'ADN extrait a été utilisé pour réamplifier la bande GC3 par AP-PCR à l'aide de l'amorce CRL11 (SEQ ID NO:l) de l'exemple 1. Les conditions de la réaction d'AP-PCR étaient telles que décrites dans l'exemple 1, avec 5 pl de l'ADN extrait utilisé comme matrice à la place des ng d'ADN génomique. Le profil d'amplification était tel que donné ci-dessous. Profil de la PCR: C 2 minutes puis passage à: 94 C 1 minute C 2 minutes 72 C 2 minutes cycles puis passage a: 4 C pendant une nuit Les produits d'amplification ont été isolés et visualisés de la façon décrite dans l'exemple 1. Un produit de PCR d'environ 450 pb (comme prévu) était visible, représentant le fragment GC3. EXEMPLE 3 Clonage du fragment GC3 Le fragment GC3 réamplifié de l'exemple 2 a été cloné dans le vecteur TA II' de PCR (Invitrogen; Carlsbad, CA) suivant les instructions du fabricant. Des cellules bactériennes ont été transformées avec le vecteur pTA II'-GC3. La région de clonage multiple du vecteur pTA IIm a deux sites Eco R1 flanquant l'insert, et la présence du fragment GC3 dans les colonies bactériennes transformées a été confirmée par digestion par Eco Rl. La digestion de restriction a libéré un fragment d'ADN d'une longueur d'environ 450 paires de bases, correspondant au fragment GC3. EXEMPLE 4 Séquençage du fragment GC3 Le fragment d'ADN GC3 cloné dans le vecteur pTA II a été séquencé à l'aide d'amorces conçues pour les promoteurs M13+ et ML3- situées dans le vecteur. La trousse de séquençage aux didésoxy par cycles ABI PRISM (Perkin-Elmer) a été utilisée pour soumettre la séquence du fragment d'ADN GC3 à une succession de cycles dans un thermocycleur de Perkin-Elmer-Cetus (modèle 480) en suivant les protocoles du fabricant. Les produits amplifiés ont été purifiés et passés sur un séquenceur d'ADN 373 de Applied Biosystems. La séquence GC3 (SEQ ID NO:2) d'une des souches de GC (ATCC 19424) est présentée sur la figure 1. La région en 5' du fragment GC3 a un cadre de lecture ouvert de 78 acides aminés et un codon d'arrêt commençant à la position 237. La région en 3' qui suit le codon d'arrêt ne contient pas, elle, de cadre de lecture ouvert. On n'a trouvé aucune séquence d'ADN similaire parmi plus de 600 entrées de séquence pour les espèces Neisseria dans GenBank. EXEMPLE 5 Amorces de PCR spécifiques de GC Sur la base des renseignements sur la séquence obtenus dans l'exemple 4, des amorces de PCR de GC3 ont été conçues (présentées ci-dessous), pour évaluer la spécificité d'espèce du fragment GC3. Les amorces ont été ciblées sur les extrémités 5' et 3' du fragment GC3. Amorce GC3-5': 5' CAT ACT GTA CCA TAG CGT T 3' (SEQ ID NO:3) Amorce GC3-3': 5' ATT CTG ACA TCC CAA GCT T 3' (SEQ ID NO:4) L'ADN génomique de 12 souches de GC et de 19 espèces non-GC a été amplifié à l'aide des amorces de GC3. Les conditions de la réaction de PCR étaient telles que décrites dans l'exemple 1, à ceci près que seuls 50 ng d'ADN matrice ont été amplifiés. Le profil d'amplification était tel que présenté ci-dessous. Profil de la PCR: C 3 minutes puis passage à: 94 C 1 minute C 2 minutes 72 C 2 minutes cycles puis passage à: 4 C pendant une nuit Les produits d'amplification par PCR ont été isolés et visualisés par électrophorèse et autoradiographie de la façon décrite ci-dessus dans l'exemple 1. Les résultats sont présentés ci-dessous dans le tableau 2. La totalité des souches de GC ont été amplifiées avec succès par PCR en ayant recours aux amorces de PCR spécifiques de GC3, tandis qu'aucune des espèces non-GC n'a donné un produit d'amplification détectable. Ces résultats démontrent que le fragment GC3 et les amorces de PCR de GC3 sont spécifiques d'espèce pour GC. Tableau 2 Spécificité d'espèce des amorces de PCR de GC3 ADN matrice N d'identification Amplification Souches de GC Neisseria gonorrhoeae CDC 111 + Neisserla gonorrhoeae BDMS 1632 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 + Neisseria gonorrhoeae BDMS 2900 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 25301 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 35541 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 35542 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 43069 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 43070 + Neisseria gonorrhoeae BDMS 454 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 + Neisseria gonorrhoeae ATCC 51109 + Espèces non-GC Branhamella catarrhalis ATCC 25238 Branhamella catarrhalis ATCC 25240 Chlamydia trachomatis Type B - Chlamydia trachomatis Type C - Chlamydia trachomatis Type D - Chlamydia trachomatis Type J - Chlamydia trachomatis Type L2 - Chlamydia trachomatis Type L3 - Kingella kingae ATCC 23330 - Moraxella lacunata ATCC 17967 - Neisseria flavescens ATCC 13120 - Neisseria lactamica ATCC 44418 - Neisseria lactamica ATCC 23970 - Neisseria meningitidis ATCC 13077 Neisseria meningitidis ATCC 13090 - Neisseria meningitidis ATCC 14632 - Neisseria sicca ATCC 29193 - Neisseria sicca ATCC 9913 - Neisseria subflava ATCC 14799 - EXEMPLE 6 Séquençage des fragments GC3 issus de six souches de GC Pour déterminer le degré d'homologie de séquence dans la région GC3 sur toutes les souches de GC, les produits d'amplification de GC3 ont été séquences à partir de six des souches de GC amplifiées avec les amorces d'amplification de PCR spécifiques de GC3 de l'exemple 5. Les six souches de GC utilisées pour le séquencage sont présentées dans le tableau 3. Les produits d'amplification par PCR ont été purifiés à l'aide du système Qiaex II de Qiagen (Qiagen; Santa Clarita, CA) suivant les instructions du fabricant. Chaque fragment d'ADN amplifié purifié a été utilisé comme amorce pour le séquençage par cycles tel que décrit dans l'exemple 4. Les fragments d'ADN ont été séquences à l'aide des amorces spécifiques de GC3 (GC3- ' et GC3-3') telles que présentées dans l'exemple 5. Tableau 3 Souches de GC utilisées comme matrice pour le séquençage de GC3 Souches de GC N d'identification Neisserla gonorrhoeae CDC 111 Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 Neisseria gonorrhoeae BDMS 2900 Neisseria gonorrhoeae ATCC 35541 Neisseria gonorrhoeae ATCC 43069 Neisseria gonorrhoeae ATCC 43070 Les séquences GC3 des six souches (SEQ ID NO:2 et SEQ ID NO:6 à SEQ ID NO:10) sont présentées sur la figure 2. Les séquences ont été alignées et une séquence GC3 consensus (SEQ ID NO:5) a été déterminée, présentée sur la figure 2. Parmi les six souches alignées, seule une base variante a été identifiée au sein des 240 pb avant le codon d'arrêt, indiquant une homologie > 99,5%. L'homologie au sein des séquences après le codon d'arrêt était d'environ 90%. EXEMPLE 7 Cartographie par PCR de la région GC3 Une série d'amorces de PCR a été conçue pour tester la spécificité/réactivité croisée du fragment d'ADN GC3. Les séquences des amorces (SEQ ID NO:11 à SEQ ID NO:19) et leurs emplacements relatifs dans la région GC3 sont illustrés sur la figure 3 (pas à l'échelle). Les expériences de cartographie par PCR ont été réalisées avec différentes combinaisons d'amorces, telles que présentées ci-dessous dans le tableau 4. Toutes les combinaisons d'amorces ont donné des résultats positifs avec toutes les souches de GC. Les combinaisons d'amorces PLl/PR1 et PLl/PR2 ont eu une réactivité croisée avec N. meningitidis. Ces 3 amorces ciblent toutes la moitié côté 5' du fragment GC3 (c'est- à-dire, avant le codon d'arrêt). Les combinaisons d'amorces PR3/BL3 et PR3/PL3 ont eu une réactivité croisée avec N. lactamica. Ces 3 amorces ciblent toutes la moitié côté 3' du fragment GC3 (c'est-à-dire, après le codon d'arrêt). Les combinaisons d'amorces PLl/PR3, PL1/BR3, PR3/PL2 ainsi que le groupe d'amorces précédemment testé GC3- 5'/GC3-3' n'ont eu de réactivité croisée avec aucune des espèces non-GC. Une caractéristique commune de tous ces groupes d'amorces est qu'ils ont une amorce située avant le codon d'arrêt et l'autre après le codon d'arrêt (voir figure 3). En résumé, les résultats indiquent que tout groupe d'amorces qui amplifie en travers du codon d'arrêt est spécifique de GC. Tableau 4 Cartographie par PCR de la région GC3 NG241 NG26 NG41 NG42 NM77 NL70 NF20 NS93 NSF43 BC88 CTD PL1/PR1 + + + + +... PL1/PR2 + + + + + - - - - - - PL1/PR3 + + + + - - - - - PL1/BR3 + + + + - -. - PR3/PL2 + + + + - - - - - - - PR3/BL3 + + + + - + - -. PR3/PL3 + nt2 + nt - + - nt nt - nt 1NG = N. gonorrhoeae; NM = N. meningitidis; NL = N. lactamica; NF = N. flavescens; NS = N. sicca; NSF = N. subflava; BC = Branhamella catarrhalis; CTD = C. trachomatis type D 2nt = non testé oo EXEMPLE 8 Procédure d'amplification par déplacement de brin thermophile (tSDA) Les réactions de tSDA ont été réalisées essentiellement de la façon décrite antérieurement dans le brevet US n 5 648 211 et la demande européenne n EP 0 684 315 de Frasier et al., avec substitution de dUTP à TTP pour permettre l'inactivation (décontamination) des amplicons transférés aux réactions suivantes en utilisant l'uracile ADN glycosylase (UDG). Pour chaque réaction de tSDA, l'ADN cible a été ajouté dans un tube contenant de l'ADN placentaire humain, du DMSO, du glycérol, et du phosphate de potassium. Le mélange réactionnel a été mis à bouillir pendant deux minutes pour dénaturer l'ADN puis transvasé dans un Thermallok réglé à 45 C. Le mélange de décontamination contenant du phosphate de potassium, du dGTP, du dATP, du thio-dCTP, des amorces, des amorces tampons, de la SAB, du DTT, du tréhalose, de l'UDG, et de l'acétate de magnésium a ensuite été ajouté et le mélange incubé pendant 30 minutes à 45 C. A la suite de l'incubation, le mélange d'amplification contenant du phosphate de potassium, du dUTP, de la SAB, du DTT, du tréhalose, de 1'UDI, de la Bso B1, de la Bst polymérase, et de l'acétate de magnésium a été ajouté, et le tube a été incubé à la température d'amplification (52 C) pendant 30 minutes. La réaction d'amplification a été stoppée en faisant bouillir le tube réactionnel pendant minutes. Ce protocole a été utilisé dans toutes les expériences. Mélange réactionnel final de tSDA (50 pl): phosphate de potassium 35 mM sérumalbumine bovine acétylée, 100 pg/ml thiodCTP 1,4 mM, dUTP 0, 5 mM, dGTP 0,2 mM, et dATP 0,2 mM acétate de magnésium 6 mM amorces et amorces tampons de tSDA, respectivement 0,5 AM et 0,05 AM ADN placentaire humain, 1000 ng par réaction glycérol 7% DMSO 7% Bst polymérase, 9 unités Bso Bl, 160 unités uracile-N-glycosylase, 1 unité inhibiteur d'uracile-N-glycosylase (UDI), 5 unités Température: 52 C Les produits d'amplification sont détectés avec une sonde de détection radiomarquée spécifique d'amplicon dans une réaction d'extension d'amorce telle que décrite ci-dessous dans l'exemple 9. En variante, les produits d'amplification peuvent étre détectés par un test immunologique sur latex, dans lequel une sonde détecteur est biotinylée et la seconde est conjuguée à l'antigène. EXEMPLE 9 Réactions d'extension de radiomarqueur Les sondes de détection ont été marquées en 5' au 32p au moyen de la polykinase de T4 pour faciliter la détection du produit d'amplification. Les conditions de radiomarquage étaient: oligonucléotide sonde détecteur 1 mM, 30 unités d'ADN polynucléotide kinase de T4, 70 pCi de y-32P-ATP, et du tampon PNK lX (tampon PNK 10X disponible chez United States Biochemical, Inc.). On a laissé les réactions se dérouler à 37C pendant 45 minutes, et on les a stoppées en chauffant les échantillons à 65 C pendant 10 minutes. La sonde de détection marquée a été stockée à -20 C et utilisée dans la semaine. Les réactions d'extension de radiomarqueur ont été effectuées en mélangeant 5 pl de l'échantillon de tSDA avec 5 pl du mélange de détection contenant la sonde de détection radiomarquée (mélange de détection = KPO4 50 mM, 0,2 mM de chaque a-thio-dATP, dCTP, et dGTP, 0,5 mM de dUTP, et 1 pl de sonde de détection radiomarquée). Les échantillons ont été ébouillantés pendant 2 minutes, opération suivie d'au moins 2 minutes d'équilibrage dans un bain-marie à 37 C. Un mélange d'enzymes (1 pl) a été ajouté à chaque réaction de détection et incubé à 37 C pendant 10 minutes (mélange d'enzymes = 2 unités d'exo- Klenow et tampon React 1 1X (tampon React 1 10X disponible chez BRL Life Technologies Inc.)). Les réactions ont été stoppées par ajout de 10 41 de mélange d'arrêt (disponible chez USB; 3X = formamide 95%, EDTA mM, bleu de bromophénol 0,05%, xylènecyanol 0,05%), puis par ébouillantage des échantillons pendant 2 minutes. Les produits d'extension radiomarqués ont été détectés en séparant les produits réactionnels sur un gel de polyacrylamide à 8% puis autoradiographie et quantification avec un phosphoimageur 455SI de Molecular Dynamics et le logiciel ImageQuant vl.1. EXEMPLE 10 Amplification de GC3 par déplacement de brin thermophile (tSDA) Des amorces d'amplification spécifiques de GC3, des amorces tampons, et des sondes de détection ont été conçues pour l'amplification par déplacement de brin thermophile (tSDA) de GC3, comme le montre la figure 4A. Le site de restriction Bso B1 dans chaque amorce est en italique, et la séquence de liaison à la cible est soulignée. Huit sur les 12 combinaisons d'amorces d'amplification possibles (3 amorces à gauche x 4 amorces à droite) ont été analysées. La totalité des combinaisons d'amorces testées amplifient en travers du codon d'arrêt dans la séquence GC3. On a observé une amplification positive avec chacune des 8 combinaisons d'amorces. La combinaison GC3L46N (SEQ ID NO:22) et GC3R44N (SEQ ID NO:24) a été choisie pour une étude plus poussée. Les amorces tampons GC3BL44 (SEQ ID NO:27) et GC3BR46 (SEQ ID NO:28), et le détecteur GC3D2R (SEQ ID NO:33), tels que présentés sur la figure 4A, ont également été choisis. Le système de tSDA de GC3 est illustré graphiquement sur la figure 4B. Le produit d'amplification fait 62 pb de long. EXEMPLE 11 Sensibilité du système de tSDA de GC3 Une courbe de titration de génome a été réalisée pour déterminer le nombre de copies de génome minimal qui pouvait être amplifié et détecté par le système de tSDA de GC3. L'ADN génomique de GC a été isolé et dilué dans 10 ng d'ADN placentaire humain. Des réactions de tSDA ont été réalisées de la façon décrite dans l'exemple 8 en utilisant 105, 104, 103, 102, 101 et 0 copies de génome par réaction. Une sensibilité de 10 copies de génome a été obtenue avec des sondes détecteurs en épingle à cheveux marquées au 32p dirigées contre les produits d'amplification. EXEMPLE 12 Réactivité croisée du système de tSDA de GC3 De l'ADN génomique collecté en provenance de 42 espèces non-GC a été testé dans 11 groupements quant à sa réactivité croisée avec le système de tSDA de GC3. L'ADN génomique venant de trois à quatre espèces non-GC, chacune au niveau de 107 copies de génome, a été déposé à la pipette dans un tube et amplifié à l'aide du système de tSDA de GC3 comme indiqué ci-dessous et sur la figure 4B. Groupe d'amorces/amorces tampons: GC3L46N, GC3R44N, GC3BL44, GC3BR46. Détecteur: GC3D2R. Pour empêcher l'apparition de faux négatifs due à une inhibition de l'amplification, un échantillon témoin a été introduit qui contenait le groupement non-GC avec 104 copies de génome de matrice GC ajoutées. Onze de ces groupements (42 espèces/souches) et leurs témoins correspondants (surcharges) ont été testés. Les résultats sont présentés ci-dessous dans le tableau 5. Les 11 groupements non-GC étaient tous négatifs pour l'amplification par le système de tSDA de GC3, alors que les témoins de groupements surchargés étaient positifs. Tableau 5 Evaluation de la réactivité croisée d'espèces non-GC (en 11 groupements) avec le système de tSDA de GC3 Groupement1,2 Espèces non-GC Groupement 1: Neisseria subflava 19243, Neisseria subflava 14799, Branhamella catarrhalis 25238 Groupement 2: Neisseria lactamica 23970, Neisseria lactamica 23972, Neisseria meningitidis 13077, Neisseria meningitidis 13090 Groupement 3: Staph. aureus 12598, Strep. feacalis 29212, Strep. grpA 16915, Strep. grpB 12386 Groupement 4: Salmonella typhimurium 13311, Salmonella minnesota 9700, E. coli 11775, Klebsiella pneumoniae 13883 Groupement 5: Acinetobacter lwoffi 19901, Haemophilas influenza 41433, Moraxella lacunata 17967, Proteus mirabilis 29906 Groupement 6: Candida albicans 44808, Gardnerella vaginalis 14018, Mycoplasma orale 23714, Tricomonas vaginalis 30001 Groupement 7: HSV-1, HSV-2, Peptostreptococcus productus 27340 Groupement 8: Neisseria cinerea 14685, Neisseria elongata 25295, Neisseria flavescens 13120, Neisseria sicca 29193 Groupement 9: Brahm. catarrhalis 25240, Kingella kingae 23330, Neisseria mucosa 19696, Neisseria subflava 14799 Groupement 10: Neisseria meningitidis 13102, Neisseria meningitidis 13113, Neisseria meningitidis 14632, Neisseria meningitidis 35559 Groupement 11: Neisseria lactamica 23971, Neisseria lactamica 44418, Neisseria lactamica 49142, Neisseria sicca 9913 1Chaque groupement renferme 107 génomes de chaque espèce. 2Chaque groupement témoin est un échantillon en double exemplaire contenant 104 génomes d'ADN de GC. EXEMPLE 13 Résumé du fragment GC3 et des systèmes d'amplification de GC3 1. Le fragment GC3 fait 414 pb de long. 2. Les 7 souches de GC séquencées partagent >99,5% d'homologie dans la moitié côté 5' du fragment GC3 avant le codon d'arrêt, et environ 90% d'homologie dans la moitié côté 3'. 3. Aucun site de restriction Bso Bt n'a été trouvé dans le fragment GC3. 4. Aucune séquence d'ADN similaire n'a été trouvée parmi plus de 600 entrées de séquence d'espèces Neisseria dans GenBank. 5. Les tests de spécificité par PCR de 12 souches de GC étaient positifs à 100%. 6. Les tests de réactivité croisée par PCR de 19 espèces non-GC étaient négatifs à 100%. 7. La sensibilité du système de tSDA de GC3 était de génomes. 8. Les tests de réactivité croisée par tSDA de 42 souches non-GC étaient négatifs à 100%. Bien que l'invention qui précède ait été décrite avec certains détails à titre illustratif et à titre d'exemple pour des raisons de clarté et de compréhension, il sera évident que certaines variations et modifications peuvent être effectuées dans le cadre des revendications annexées. LISTE DE SEQUENCES (1) INFORMATIONS GENERALES: (i) DEPOSANT: You, Qimin (ii) TITRE DE L'INVENTION: Fragment d'ADN spécifique de Neisseria gonorrhoeae GC3. (iii) NOMBRE DE SEQUENCES: 33 (iv) CORRESPONDANCE (A) NOM: Becton Dickinson and Company (B) RUE: 1 Becton Drive (C) VILLE: Franklin Lakes (D) ETAT: New Jersey (E) PAYS: USA (F) CODE POSTAL: 07417-6800 (iv) FORME LISIBLE PAR ORDINATEUR: (A) TYPE DE SUPPORT: Disquette (B) ORDINATEUR: IBM PC compatible (C) SYSTEME D'EXPLOITATION: PC-DOS/MS-DOS (D) LOGICIEL: PatentIn Release #1.0, Version #1.30 (vi) DEMANDE ACTUELLE: (A) NUMERO DE LA DEMANDE: (B) DATE DE DEPÈT: (C) CLASSIFICATION: (viii) MANDATAIRE: (A) NOM: Highet, David W. (B) REFERENCE / NUMERO DE DOSSIER: P-4088 (ix) INFORMATIONS TELEPHONIQUES: (A) TELEPHONE: 201-847-6800 (B) TELECOPIE: 201-848-9228 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 1: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 19 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 1: CGGTTGCCTC CATGCAGAT 19 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 2: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 414 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique (génomique) (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: GC souche ATCC 19424 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 2: CGGCATACTG TACCATAGCG TTCGCCTGGT CCGCCAAACG GGAAATTGGC GGCATAAGCA 60 GGGAACTGCT CCTGCAAACC TTTGACGACA TTTTGATCTT CATAAAACAA AATGGTTGCC 120 GCGCCCACCT TAAACAGCTT CAATTTTTGC GCGGTCGGTT CAAAACTGTC GGCAGGCACG 180 ACGGCACGCA GCGCGTCTTC GACAAATTGC CACACCTTAT ATATTGCGCC CCTTCTTAGG 240 GACGCAATAT ATAAGGGTAA TCCCATGCGT AACGCCGTAG GATTGGACAT ATCCAAGTTG 300 ACTTTTGACG CAACGGCCAT TGTCGGCAAT GCCGAATATT CGGCAAAGTT TGACAACGAT 360 TCAAAAGGTT TAGATCAGTT TTCGGACCGG TTGAAAAGCT TGGGATGTCA GAAT 414 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 3: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 19 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 3: CATACTGTAC CATAGCGTT 19 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 4: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 19 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 4: ATTCTGACAT CCCAAGCTT 19 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 5: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 414 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADN (génomique) (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: Séquence consensus GC3 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 5: CGGCATACTG TACCATAGCG TTCGCCTGGT CCGCCAAACG GGAAATTGGC GGCATAAGCA 60 GGGAACTGCT CCTGCAAACC TTTGACGACA TTTTGATCTT CATAAAACAA AATGGTTGCC 120 GCGCCCRCCT TAAACAGCTT CAATTTTTGC GCGGTCGGTT CAAAACTGTC GGCAGGCACG 180 ACGGCACGCA GCGCGTCTTC GACAAATTGC CACACCTTAT ATATTGCGCC CCTTCTTAGG 240 GACGCAATAT ATAAGGGTAA TCCCATGCGT AACRCCGTAG GATTGGAYAT ATCSAARYTG 300 ACHTTTRACG CAWCSGCCAT KGTCGGCAAW RCSGARYATT CGGCAAAGTT TGACAACGAT 360 TCAAAAGGTT TAGATCAGTT TTCGGACCGG TTGAAAAGCT TGGGATGTCA GAAT 414 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 6: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 414 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION:linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADN (génomique) (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: GC souche ATCC 35541 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 6: CGGCATACTG TACCATAGCG TTCGCCTGGT CCGCCAAACG GGAAATTGGC GGCATAAGCA 60 GGGAACTGCT CCTGCAAACC TTTGACGACA TTTTGATCTT CATAAAACAA AATGGTTGCC 120 GCGCCCGCCT TAAACAGCTT CAATTTTTGC GCGGTCGGTT CAAAACTGTC GGCAGGCACG 180 ACGGCACGCA GCGCGTCTTC GACAAATTGC CACACCTTAT ATATTGCGCC CCTTCTTAGG 240 GACGCAATAT ATAAGGGTAA TCCCATGCGT AACACCGTAG GATTGGACAT ATCCAAGCTG 300 ACATTTGACG CAACGGCCAT TGTCGGCAAT GCCGAATATT CGGCAAAGTT TGACAACGAT 360 TCAAAAGGTT TAGATCAGTT TTCGGACCGG TTGAAAAGCT TGGGATGTCA GAAT 414 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 7: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 414 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADN génomique (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: GC souche ATCC 43069 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 7: CGGCATACTG TACCATAGCG TTCGCCTGGT CCGCCAAACG GGAAATTGGC GGCATAAGCA 60 GGGAACTGCT CCTGCAAACC TTTGACGACA TTTTGATCTT CATAAAACAA AATGGTTGCC 120 GCGCCCGCCT TAAACAGCTT CAATTTTTGC GCGGTCGGTT CAAAACTGTC GGCAGGCACG 180 ACGGCACGCA GCGCGTCTTC GACAAATTGC CACACCTTAT ATATTGCGCC CCTTCTTAGG 240 GACGCAATAT ATAAGGGTAA TCCCATGCGT AACACCGTAG GATTGGACAT ATCCAAGCTG 300 ACATTTGACG CATCCGCCAT GGTCGGCAAA ACGGAGCATT CGGCAAAGTT TGACAACGAT 360 TCAAAAGGTT TAGATCAGTT TTCGGACCGG TTGAAAAGCT TGGGATGTCA GAAT 414 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 8: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 414 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADN génomique (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: GC souche ATCC 43070 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 8: CGGCATACTG TACCATAGCG TTCGCCTGGT CCGCCAAACG GGAAATTGGC GGCATAAGCA 60 GGGAACTGCT CCTGCAAACC TTTGACGACA TTTTGATCTT CATAAAACAA AATGGTTGCC 120 GCGCCCGCCT TAAACAGCTT CAATTTTTGC GCGGTCGGTT CAAAACTGTC GGCAGGCACG 180 ACGGCACGCA GCGCGTCTTC GACAAATTGC CACACCTTAT ATATTGCGCC CCTTCTTAGG 240 GACGCAATAT ATAAGGGTAA TCCCATGCGT AACACCGTAG GATTGGACAT ATCCAAGCTG 300 ACATTTGACG CATCCGCCAT GGTCGGCAAA ACGGAGCATT CGGCAAAGTT TGACAACGAT 360 TCAAAAGGTT TAGATCAGTT TTCGGACCGG TTGAAAAGCT TGGGATGTCA GAAT 414 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 9: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 414 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADN génomique (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: GC souche BDMS2900 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 9: CGGCATACTG TACCATAGCG TTCGCCTGGT CCGCCAAACG GGAAATTGGC GGCATAAGCA 60 GGGAACTGCT CCTGCAAACC TTTGACGACA TTTTGATCTT CATAAAACAA AATGGTTGCC 120 GCGCCCGCCT TAAACAGCTT CAATTTTTGC GCGGTCGGTT CAAAACTGTC GGCAGGCACG 180 ACGGCACGCA GCGCGTCTTC GACAAATTGC CACACCTTAT ATATTGCGCC CCTTCTTAGG 240 GACGCAATAT ATAAGGGTAA TCCCATGCGT AACGCCGTAG GATTGGATAT ATCGAAACTG 300 ACCTTTAACG CATCCGCCAT TGTCGGCAAT GCCGAATATT CGGCAAAGTT TGACAACGAT 360 TCAAAAGGTT TAGATCAGTT TTCGGACCGG TTGAAAAGCT TGGGATGTCA GAAT 414 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 10: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 414 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADN génomique (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: GC souche CDC 111 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 10: CGGCATACTG TACCATAGCG TTCGCCTGGT CCGCCAAACG GGAAATTGGC GGCATAAGCA 60 GGGAACTGCT CCTGCAAACC TTTGACGACA TTTTGATCTT CATAAAACAA AATGGTTGCC 120 GCGCCCGCCT TAAACAGCTT CAATTTTTGC GCGGTCGGTT CAAAACTGTC GGCAGGCACG 180 ACGGCACGCA GCGCGTCTTC GACAAATTGC CACACCTTAT ATATTGCGCC CCTTCTTAGG 240 GACGCAATAT ATAAGGGTAA TCCCATGCGT AACACCGTAG GATTGGACAT ATCCAAGCTG 300 ACATTTGACG CATCCGCCAT GGTCGGCAAA ACGGAGCATT CGGCAAAGTT TGACAACGAT 360 TCAAAAGGTT TAGATCAGTT TTCGGACCGG TTGAAAAGCT TGGGATGTCA GAAT 414 * (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 11: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 15 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 11: GCTCCTGCAA ACCTT 15 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 12: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 13 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 12: CGGCAGGCAC GAC 13 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 13: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 14 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 13: GCCATTGTCG GCAA 14 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 14: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 14: ATTCGGCAAA GTTTGA 16 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 15: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 14 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 15: CGCGGCAACC ATTT 14 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 16: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 17 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 16: GCAATATATA AGGTGTG 17 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 17: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 17: CTTATATATT GCGTCC 16 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 18: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 14 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 18: TTCAACCGGT CCGA 14 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 19: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 14 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 19: CTGACATCCC AAGC 14 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 20: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 37 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 20: CGATTCCGCT CCAGACTTCT CGGGCTTCTT AGGGACG 37 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 21: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 38 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 21: CGATTCCGCT CCAGACTTCT CGGGCTTCTT AGGGACGC 38 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 22: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 39 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 22: CGATTCCGCT CCAGACTTCT CGGGCTTCTT AGGGACGCA 39 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 23: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 39 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 23: ACCGCATCGA ATGCATGTCT CGGGGATATG TCCAATCCT 39 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 24: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 40 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 24: ACCGCATCGA ATGCATGTCT CGGGGATATG TCCAATCCTA 40 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 25: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 41 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 25: ACCGCATCGA ATGCATGTCT CGGGGATATG TCCAATCCTA C 41 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 26: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 40 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 26: ACCGCATCGA ATGCATGTCT CGGGATATGT CCAATCCTAC 40 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 27: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 27: AATTGCCACA CCTTAT 16 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 28: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 28: GATGCGTCAA ATGTCA 16 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 29: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 17 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 29: GGATGCGTCA AATGTCA 17 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 30: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 30: CGCAATATAT AAGGGT 16 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 31: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 31: ACCCTTATAT ATTGCG 16 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 32: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 15 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 32: AATCCCATGC GTAAC 15 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 33: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 15 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: acide nucléique autre (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 33: GTTACGCATG GGATT 15 REVENDICATIONS 1. Procédé pour la détection, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comprenant les étapes de: (a) hybridation d'une sonde oligonucléotidique aux acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae, la sonde consistant en au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae; et puis (b) détection de l'hybridation entre la sonde oligonucléotidique et les acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae est choisie dans le groupe consistant en SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la sonde oligonucléotidique est choisie dans le groupe consistant en SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:l9, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, et SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33. 4. Procédé pour la détection, spécifique d'espèce, d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comprenant les étapes de: (a) hybridation à des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae d'au moins une amorce d'amplification comprenant une séquence de liaison à la cible, la séquence de liaison à la cible consistant en au moins 10 nucléotides consécutifs d'une séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae; et (b) amplification des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae avec au moins unedite amorce d'amplification; et puis (c) détection des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae amplifiés. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae est choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10. 6. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la séquence de liaison à la cible d'au moins unedite amorce d'amplification est choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, et SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33. 7. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la sonde de détection est choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33. 8. ADN isolé consistant en une séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae. 9. ADN isolé selon la revendication 8, caractérisé en ce que la séquence GC3 de Neisseria gonorrhoeae est choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, et SEQ ID NO:10. 10. Oligonucléotide comprenant une séquence de liaison à la cible consistant en au moins 10 nucléotides consécutifs de l'ADN isolé de la revendication 8. 11. Oligonucléotide selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'il est choisi dans le groupe constitué de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, et SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33. 12. Groupe d'amorces pour l'amplification spécifique d'espèce d'acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae comprenant une première amorce d'amplification comprenant une séquence de liaison à la cible consistant en au moins 10 nucléotides consécutifs d'un ADN isolé selon la revendication 8. 13. Groupe d'amorces selon la revendication 12, dans lequel ladite première amorce d'amplification est choisie dans le groupe constitué de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:20, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:21, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:22, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:23, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:24, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:25, la séquence de liaison à la cible SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, et SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:32, et SEQ ID NO:33.