Brevet FR2781501A1 — publié le 20000128

I() l) Conditionnement et procédé de conditionnement de cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen La présente invention concerne un procédé de conditionnement de cellules vivantes de l'algue Haslea2) ostrearia Simonsen en vue de leur conservation pendant une période de temps prolongée, pouvant aller jusqu'à plusieurs mois, ainsi qu'un conditionnement desdites cellules obtenu en particulier par la mise en oeuvre du procédé. Haslea ostrearia Simonsen est une microalgue tychopélagique qui tapisse, au cours de la phase benthique, le fond des claires ostréicoles grâce à la synthèse d'un tapis muqueux de nature polysaccharidique. Lors de cette immobilisation naturelle, les cellules algales ont synthétisé un pigment30) bleu-vert (marennine) impliqué, entre autre, dans le verdissement des huîtres. Actuellement, la production en masse, en vue de son exploitation industrielle pour le verdissement des huîtres, est bien maîtrisée et est notamment décrite dans le brevet européen N 0.429.369.33 Actuellement, cette production s'effectue à l'intérieur de bassins de plusieurs m3 dans des conditions d'incubation contrôlées. Les cultures de cellules libres d'Haslea 2 ostrearia Simonsen ainsi produites sont par la suite directement transférées par siphonnage des bassins dans des claires ostréicoles o l'algue engendre la production du pigment en quantité suffisante pour provoquer un5 verdissement des huîtres. Toutefois, la production en masse des algues, telle qu'elle est conçue actuellement (culture de cellules libres) ne permet pas le stockage de ces cellules dont la viabilité est particulièrement courte. Il en résulte l'obligation de transférer très rapidement10 lesdites cellules des bassins de production de ces cellules vers les claires ostréicoles. Du fait de l'encombrement et de la complexité de l'installation nécessaire à la production en masse de ces15 algues, les ostréiculteurs ne sont pas en mesure aujourd'hui de disposer de telles installations. Ils sont donc dans l'obligation de fournir leurs huîtres à un industriel producteur de cette algue en vue du verdissement intensif de ces dernières. Toutefois, une telle20 organisation présente un grand nombre d'inconvénients. En particulier, la nécessité de transporter les huîtres implique une augmentation des coûts de manipulation et de transport et des risques de contamination accrus. Par ailleurs, le verdissement est dans ce cas directement2 dépendant de la production des cellules d'Haslea ostrearia Simonsen et ne s'effectue pas forcément dans les meilleures conditions de verdissement qui sont fonctions notamment de l'irradiance et de la qualité physico-chimique des eaux de claires. Pour toutes ces raisons, l'utilisation de l'algue30 Haslea ostrearia Simonsen, en particulier pour le verdissement des claires ostréicoles, est aujourd'hui limitée. Le but de la présente invention est donc de supprimer les inconvénients précités en proposant un conditionnement des cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen autorisant le transport d'une quantité importante de cellules vivantes dans des conditions d'encombrement réduit et leur conservation pendant une période de temps prolongée sans perte de viabilité de sorte que l'utilisation de ces cellules peut être parfaitement maitrisée par l'opérateur. Un autre but de la présente invention est de proposer un conditionnement qui permet une utilisation immédiate des cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen sans période préparatoire pour un ensemencement. Un autre but de la présente invention est de proposer un conditionnement de cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen qui permet la réalisation d'un inoculum de faible encombrement et dont la quantité de biomasse est parfaitement connue.15 A cet effet, l'invention a pour objet un procédé de conditionnement de cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen pour leur conservation pendant une période de temps prolongée pouvant aller jusqu'à plusieurs mois sans20) perte significative de viabilité, caractérisé en ce qu'on prépare une solution à base d'au moins un polymère, de préférence un polysaccharide, polymérisable, le pH et la salinité de la solution étant respectivement compris dans la plage [7,5 - 8] et [27 - 35], de préférence respectivement voisins de 7, 8 et 28, en ce qu'on mélange la dite solution avec des cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen, en ce que, après fractionnement éventuel du mélange, on polymérise ledit mélange au moyen d'un agent de polymérisation approprié pour former des 3(0 particules solides à base de polymère(s) de préférence polysaccharidique(s) à l'intérieur desquelles sont incluses de manière libérable lesdites cellules vivantes, en ce qu'on stocke lesdites particules dans des conditions aptes à la survie desdites cellules, une libération éventuelle des cellules des particules de polymère(s) pouvant être provoquée par voie naturelle ou artificielle en vue d'une utilisation des cellules à des fins diverses telles que 4 l'ensemencement de claires ostréicoles, la production de métabolites excrétés ou non, tels que les pigments ou autres. Grâce à ce procédé de conditionnement de cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen, il est possible de manière aisée de transporter l'algue, de la stocker pendant une période pouvant aller jusqu'à plusieurs mois et de libérer à tout moment les cellules emprisonnées dans les particules I) de polymère(s). L'invention concerne encore un conditionnement de cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen pour une conservation pendant une durée prolongée dans le temps, pouvant15 atteindre plusieurs mois, desdites cellules sans perte significative de viabilité de ces dernières, ledit conditionnement, obtenu en particulier par la mise en oeuvre du procédé précité, étant caractérisé en ce qu'il est constitué de particules solides d'au moins un polymère,20 de préférence polysaccharidique, à l'intérieur desquelles sont incluses, de manière libérable, des cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen, ce polymère présentant, à l'état dissous dans une solution tampon de pH 7,8 et de salinité voisine de 28, un pH compris dans la plage [7,5 - 8], de préférence voisin de 7,8, et une salinité comprise dans la plage [27 - 35], de préférence voisine de 28. Un tel conditionnement est aisé à fabriquer et parfaitement standardisable. Par ailleurs, les caractéristiques de ce conditionnement permettent une utilisation immédiate des cellules après leur libération des particules sans phase, par exemple de préculture, en vue de leur application finale.35 L'invention sera bien comprise à la lecture de la description suivante d'exemples de réalisation, en référence aux dessins annexés dans lesquels: le tableau 1 représente l'aptitude à la culture de cellules précédemment immobilisées à 5 x 105 par cm3 de gel de polymère et 10 cellules pour cm3 de gel de polymère (valeurs fournies entre parenthèses) et stockées à 4 C pendant diverses périodes dans un milieu ES 1/3 et ]0 le tableau 2 représente l'aptitude à la culture de cellules précédemment immobilisées à 5 x 105 par cm3 de gel de polymère et 107 cellules par cm3 de gel de polymère (valeurs fournies entre parenthèses) et stockées à 4'C pendant diverses périodes dans un milieu enrichi en azote, phospore et silice (N, P, si). Pour permettre la réalisation d'un conditionnement du type de celui objet de l'invention, il convient de disposer d'un2() matériel algal. Il convient de rappeler qu'Haslea ostrearia Simonsen est une diatomée de la classe des Bacillariophycées et de l'ordre des Pennées. La souche d'Haslea ostrearia Simonsen utilisée doit préférentiellement être axénique. Par ailleurs, les25 cellules utilisées, devant être introduites dans le conditionnement, présentent une longueur au moins égale à Mm. En effet, on constate qu'en dessous de cette taille critique, la croissance algale est perturbée et la proportion de cellules déformées devient importante.30 Le milieu de préculture utilisé est le milieu ES de Provasoli (Provasoli, 1968) modifié et dénommé ES 1/3. La composition de ce milieu est la suivante: Solution d'enrichissement (cf. ci-dessous) 7 ml Solution de métasilicate (cf. ci-dessous) 1 ml Solution de vitamines (cf. ci-dessous) 2 ml NaHCO3 80 mg 6 Eau de mer filtrée (salinité ajustée à 1000 ml 28 g/l avec de l'eau distillée) Ajustement du pH à 7,8. Stérilisation à 121 C pendant 20 minutes. Solution d'enrichissement: NaNO3 350 mg Glycérophosphate de sodium 50 mg1( (C3H706PNa2. 6H20) Tris(hydroxyméthyl)aminométhane 500 mg (tampon Tris) Solution Fe-EDTA (cf. ci-dessous) 2,5 ml Solution de métal à l'état de trace15 (cf. ci- dessous) 25 ml Eau distillée 100 ml Solution Fe-EDTA: Fe(NH4)2(SO4)2. 6H20 3,51 g 2) Na2EDTA 3,50 g Eau distillée 500 ml Solution de métal à l'état de trace: H 3BO 570 mg FeCl 3. 6H20 24,5 mg MnSO 4 H20 62, 15 mg ZnSO4. 7H20 11 mg CoSO4. 7H2O COSO4. 7H2 2,4 mg Na2EDTA 500 mg 3() Eau distillée 500 ml Solution Stock de métasilicate: Na2 Sio 35H 2 10,607 g Eau distillée 500 ml Solution de Vitamines Solution de Vitamines: 7 Thiamine 500 mg Solution de biotine 1 ml (20 mg/100 ml eau) Solution de vitamine B12 lml (20 mg/100 ml eau) Eau distillée 500 ml Avant utilisation, ce milieu est autoclavé (121 C, 20 minutes). Pour la préparation des cellules vivantes en vue10) de leur introduction dans le conditionnement, des précultures successives dans des volumes croissants sont réalisées. Le nombre de précultures dépend de la biomasse souhaitée. Un volume de préculture n sert à ensemencer 20 volumes de préculture n+1. Ainsi, à titre d'exemple, le15 volume de la première préculture est habituellement de 150 3 cm. Chaque préculture est mise à incuber environ 6 1 jours à 15 C en présence d'une intensité lumineuse de 3.1016 quanta cm-2. s-1 avec un cycle jour/nuit de 14 h/10 h. On procède ensuite à la concentration de l'inoculum, si 2) possible par simple élimination du surnageant, en tirant profit du caractère benthique de l'algue et éventuellement en complément par centrifugation (4000 g, 6 mm, 15 C). Les algues non décantées, issues du surnageant, peuvent être récupérées par centrifugation à 4 000 g pendant 6 minutes25 à 15 C. Des suspensions cellulaires dont les concentrations varient entre 107 et 108 cellules cm 3 (7,3 - 73 mg de poids sec cm 3) peuvent ainsi être obtenues. Il peut alors être procédé à leur conditionnement. 3) Pour ce faire, on prépare une solution à base d'au moins un polymère, de préférence polysaccharidique, polymérisable, le pH et la salinité de la solution étant respectivement compris dans la plage [7, 5 - 8] et [27 35] de préférence respectivement voisins de 7, 8 et 28. Il est à noter que la35 salinité peut être exprimée sans unité ou en g dm 3. De préférence, on choisit comme polymère polymérisable de la solution au moins un polysaccharide purifié, par exemple 8 polymérisable par voie chimique, de la famille des alginates ou des carraghénanes. Pour la préparation de la solution à base d'au moins un polymère, de préférence polysaccharidique, polymérisable, on fait dissoudre le polymère, tel qu'un alginate de sodium, dans de l'eau distillée à une concentration comprise dans la plage [0,5 - 3 %] poids/poids, on ajoute dans la solution au moins un sel, tel que du chlorure de10 sodium, et au moins une base, telle que de la soude jusqu'à ajustements respectifs du pH dans la plage [7,5 - 8], de préférence voisin de 7,8, et de la salinité dans la plage [27 - 35], de préférence voisine de 28. Ainsi, à titre d'exemple, pour environ 1 dm3 d'une solution d'alginate de sodium, 15 g d'alginate de sodium (Prolabo), stérilisés aux rayonnements ultraviolets pendant une nuit, sont mélangés pendant 1 h 30 avec 0,65 dm3 d'eau stérile. On ajoute ensuite 0,31 dm3 d'une solution de NaCl à 9 %20) (poids/poids) puis le tout est ajusté à un pH 7,8 avec de la soude à 0,1 M. La solution d'alginate de sodium, d'une salinité proche de 28, est ensuite mélangée à un volume V du culot de centrifugation afin d'obtenir la concentration cellulaire C désirée au sein du conditionnement.25 Une fois ce mélange polysaccharide/cellules vivantes réalisé, avec une quantité de cellules vivantes parfaitement connue à l'intérieur dudit mélange, on fractionne éventuellement ledit mélange en fonction des30 dimensions finales du conditionnement. Le fractionnement de ce mélange polysaccharide/cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen peut s'effectuer par pulvérisation ou extrusion dudit mélange. Bien évidemment, d'autres techniques de fractionnement peuvent encore être utilisées.35 Ce fractionnement permet l'obtention de gouttelettes de mélange qui sont ensuite polymérisées. Cette polymérisation 9 s'effectue au moyen d'un agent de polymérisation approprié pour former des particules solides à base d'au moins un polymère, de préférence polysaccharidique, à l'intérieur desquelles sont incluses de manière libérable lesdites5 cellules vivantes. On utilise, comme agent de polymérisation, une solution dont la salinité et le pH sont respectivement compris dans les plages [7,5 - 8] et [27 - ], de préférence respectivement voisins de 7, 8 et 28. L'étape de polymérisation est effectuée par voie chimique !) au moyen d'une solution de polymérisation, le temps de contact des cellules avec ladite solution étant au plus égal à 30-45 minutes pour ne pas porter atteinte à la viabilité des cellules. Ainsi, à titre d'exemple, afin d'assurer la polymérisation de la solution d'alginate15 décrite ci- dessus contenant les micro-algues, celle-ci est mise à percoler dans un récipient contenant du chlorure de calcium à 0,07 M dont la salinité et le pH sont respectivement ajustés à 28 et 7,8. La percolation peut s'effectuer grâce à une pompe péristaltique équipée d'une2() aiguille calibrée qui fait tomber goutte à goutte le mélange dans une solution de CaCl2. Les particules en forme de billes ainsi obtenues présentent un diamètre de l'ordre de 3 mm. Le temps de contact entre la solution de chlorure de calcium et les particules est au plus de 30 minutes.25 Pour vérifier l'influence de la concentration en cellules sur leur viabilité, deux concentrations ont été testées, à savoir 5.105 ou 107 cellules. cm3 de gel de polymère -3 (0,4-7,3 mg poids sec cm 3). Une fois les particules solides de polymère, à l'intérieur desquelles sont incluses de manière libérable lesdites cellules, ainsi obtenues, on stocke lesdites particules dans des conditions aptes à la survie desdites cellules. Deux modes de stockage peuvent intervenir. En effet, il est possible de stocker les particules incluant les cellules vivantes d'Haslea ostrearia Simonsen 1() à sec dans des conditions de température, d'humidité, de pH et d'éclairage aptes à la survie desdites cellules. Il est également possible de stocker lesdites particules dans une solution, apte à la survie des cellules, dont le pH et la salinité sont respectivement compris dans les plages [7,5 - 8] et [27 - 35], de préférence respectivement voisins de 7,8 et 28. Les algues peuvent ainsi être 15 -2 -1 stockées à 4'C en lumière faible (1,8.1015 quanta.cm-2.s-) I( avec un cycle jour/nuit de 14 h/10 h dans le milieu de culture ES 1/3 décrit ci-dessus. Une libération ou un relargage éventuels des cellules des particules peuvent être provoqués par voie artificielle ou15 naturelle en vue d'une utilisation des cellules à des fins différentes, telles que l'ensemencement de claires ostréicoles, la production de métabolites, excrétés ou non (exemple: pigments, arômes...). Pour la libération dite artificielle des cellules des particules de polymère(s), on détruit, généralement par dissolution, les particules de polymère(s) dans une solution de destruction de polymère(s), telles qu'une solution d'EDTA ou de citrate de sodium.25 Pour un relargage ou une libération naturelle desdites cellules en dehors des particules de polymère(s), on cultive, après stockage, lesdites particules dans des conditions de température, d'intensité lumineuse et30 d'environnement nutritif autorisant une croissance des cellules d'Haslea ostrearia Simonsen, ladite croissance provoquant une destruction mécanique des particules incluant lesdites cellules d'algues ou une simple sortie des algues hors des particules liée à la multiplication35 cellulaire sans destruction desdites particules. Les tableaux 1 et 2 illustrent le cas d'une libération lJ artificielle desdites cellules. En effet, après diverses périodes de stockage à 4 C (les périodes étant exprimées en jours) et à une faible intensité lumineuse, les billes d'alginate de calcium ont été dissoutes dans de l'EDTA ou5 dans du citrate de sodium pour obtenir une suspension et l'aptitude à la culture des cellules a été estimée. Ainsi, à titre d'exemple et de manière plus précise, 25 cm3 de citrate de sodium à 10 mM (pH 7,8, salinité à 28) sont ajoutés à 1 cm3 de gel sous agitation. Afin de maintenir la10) viabilité des cellules, le temps de dissolution des billes ne doit pas excéder 45 minutes. On note, à travers les résultats des tableaux, que quelles que soient les conditions de culture et indépendamment du milieu de remise en culture, l'aptitude à la culture des cellules a été15 maintenue après 12 jours de stockage et au moins deux mois avec le milieu ES 1/3 décrit ci-dessus. Aucun changement important du umax (vitesse de croissance cellulaire maximale) et de la biomasse cellulaire maximale n'a été constaté en comparaison d'une culture de cellules d'Haslea20() ostrearia non immobilisées au préalable. Les résultats moins performants en présence de milieu de culture NPSi (tableau 2) sont dus à l'autoclavage de ce milieu. La composition du milieu de culture NPSi est la suivante: NaNO3, 87,9 pmol.dm 3 K2HPO4, 7,14 pmol.dm3 Na2SiO3, 100 Mmol.dm-3 Les résultats nous montrent clairement que la voie chimique permet une libération immédiate et totale des cellules mais le contact entre cellules et le milieu de dissolution ne doit pas excéder 45 minutes car, après, la viabilité cellulaire chute. Par ailleurs, il n'y a pas de différence notable entre l'utilisation de l'EDTA et du citrate de35 sodium comme solution de "dépolymérisation" du gel. La deuxième voie de libération, à savoir la voie naturelle de libération dans laquelle la multiplication active des cellules permet une rupture mécanique de la matrice de gel 12 ou une simple sortie de celles-ci favorisée par la multiplication cellulaire s'avère donc prometteuse car elle s'affranchit des problèmes de temps de contact. Cette seconde voie peut être parfaitement maîtrisée en jouant sur5 des paramètres tels que la composition du milieu de culture, les conditions de culture (température, éclairement), la concentration en polysaccharide des particules, la concentration cellulaire, le choix de l'ion impliqué dans la polymérisation du polymère...I() Les résultats démontrent que l'immobilisation de cellules d'Haslea ostrearia Simonsen dans des particules d'alginate maintient leur viabilité cellulaire et leur potentiel de "cultivabilité". Des concentrations cellulaires élevées (qui peuvent être 100 fois supérieures à ce que l'on obtient en culture de cellules libres) peuvent être confinées dans les particules solides. Le stockage des algues est réalisable pendant au moins 15 jours sans hypothéquer leur viabilité et leur "cultivabilité". Ce2() résultat permet d'envisager la production en masse de microalgues immobilisées, facilement stockables chez leurs utilisateurs. Ces inocula peuvent être immédiatement remis en culture sans phase de latence pour l'application à laquelle ils sont destinés comme le montrent les tableaux.25 Le conditionnement décrit ci-dessus se caractérise par sa simplicité. Ce conditionnement peut être simplement constitué de particules solides polysaccharidiques et de cellules vivantes incluses dans lesdites particules. Bien3() évidemment, dans le cas d'un stockage en milieu humide des particules, il est constitué en outre d'un milieu de stockage desdites particules, ledit milieu se présentant sous forme d'une solution incluant des constituants, en particulier des éléments nutritifs, aptes à la survie des35 cellules et présentant une salinité comprise dans la plage [27 - 35] et un pH compris dans la plage [7,5 - 8]. 13 Les essais entrepris ont clairement démontré que d'une part les cellules vivantes pouvaient être immobilisées pendant une longue période dans des particules de polymère sans que cela nuise à leur viabilité et à leur aptitude à la culture5 et que d'autre part, ces cellules pouvaient être aisément libérées des particules et être immédiatement remises en culture sans période de latence. Ces avantages permettent d'envisager l'utilisation à I) l'échelle industrielle d'un tel procédé de conditionnement et la fabrication de manière standard et automatisée de tels conditionnements. 14 REVEND I CATIONS 1. Procédé de conditionnement de cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen pour leur conservation pendant une période de temps prolongée pouvant aller jusqu'à plusieurs mois sans perte significative de viabilité, caractérisé en ce qu'on prépare une solution à base d'au moins un polymère, tel qu'un polysaccharide, polymérisable,1) le pH et la salinité de la solution étant respectivement compris dans les plages [7,5 - 8] et [27 - 35], de préférence respectivement voisins de 7,8 et 28, en ce qu'on mélange ladite solution avec des cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen et en ce que, apresl) fractionnement éventuel du mélange, on polymérise ledit mélange au moyen d'un agent de polymérisation approprié pour former des particules solides à base de polymère(s) de préférence polysaccharidique(s) à l'intérieur desquelles sont incluses de manière libérable lesdites cellules2() vivantes, en ce qu'on stocke lesdites particules dans des conditions aptes à la survie desdites cellules, une libération éventuelle des cellules des particules de polymère(s) pouvant être provoquée par voie naturelle ou artificielle en vue d'une utilisation des cellules à des25 fins diverses, telles que l'ensemencement de claires ostréicoles, la production de métabolites excrétés ou non, tels que les pigments ou autres. 2. Procédé selon la revendication 1, ) caractérisé en ce qu'on choisit comme polymère polymérisable de la solution au moins un polysaccharide purifié polymérisable de la famille des alginates ou des carraghénanes. 3. Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'on introduit dans la solution à base d'au moins un polymère des cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen présentant une longueur au moins égale à 60 Mm et issues d'une souche axénique. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'on fractionne le mélange polymère/cellules vivantes d'algues Haslea ostrearia Simonsen par pulvérisation ou extrusion dudit mélange. 5. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, 1) caractérisé en ce que, pour la préparation de la solution à base d'au moins un polymère, de préférence polysaccharidique, polymérisable, on fait dissoudre le polymère, tel qu'un alginate de sodium, dans de l'eau distillée à une concentration comprise dans la plage [0,5 - 3 %] poids/poids, en ce qu'on ajoute dans la solution au moins un sel, tel que du chlorure de sodium et au moins une base telle que de la soude jusqu'à ajustements respectifs du pH dans la plage [7,5 - 8], de préférence voisin de 7,8, et de la salinité dans la plage [27 - 35], de préférence 2) voisine de 28. 6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'on effectue l'étape de polymérisation par voie chimique au moyen d'une solution de25 polymérisation, le temps de contact de ladite solution avec les cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen étant au plus égal à 30-45 minutes. 7. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, ) caractérisé en ce qu'on utilise, comme agent de polymérisation, une solution telle qu'une solution de chlorure de calcium dont le pH et la salinité sont respectivement compris dans la plage [27 - 35] et [7,5 - 8], de préférence respectivement voisins de 28 et 7,8. 8. Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, 16 caractérisé en ce qu'on stocke lesdites particules incluant les cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen à sec dans des conditions de température, d'humidité, de pH et d'éclairage aptes à la survie desdites cellules. 9. Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu'on stocke lesdites particules dans une solution, apte à la survie des cellules, dont le pH et la salinité sont respectivement compris dans les plages [7,5 - 8] et [27 - 35], de préférence respectivement voisins de 7,8 et 28. 10. Procédé selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que, pour la libération dite artificielle des cellules des particules de polymère(s), on détruit, généralement par dissolution, les particules de polymère(s) dans une solution de destruction de polymère(s), telle qu'une solution d'EDTA ou de citrate de sodium. 11. Procédé selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que, pour une libération naturelle desdites cellules en dehors des particules de polymère(s), on cultive, après stockage, lesdites particules dans des conditions de température, d'intensité lumineuse et25 d'environnement nutritif autorisant une croissance des cellules d'Haslea ostrearia Simonsen, ladite croissance provoquant une destruction mécanique des particules incluant lesdites cellules d'algues ou une libération desdites cellules hors des particules, conséquence de la3() multiplication cellulaire. 12. Conditionnement de cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen pour une conservation pendant une durée prolongée dans le temps pouvant atteindre plusieurs mois35 desdites cellules sans perte significative de viabilité de ces dernières, ledit conditionnement, obtenu en particulier par la mise en oeuvre du procédé selon l'une des 17 revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'il est constitué de particules solides d'au moins un polymère, de préférence polysaccharidique, à l'intérieur desquelles sont incluses, de manière libérable,5 des cellules vivantes de l'algue Haslea ostrearia Simonsen, ce polymère présentant, à l'état dissous dans une solution tampon de pH 7,8 et de salinité voisine de 28, un pH compris dans la plage [7,5 - 8], de préférence voisin de 7,8, et une salinité comprise dans la plage [27 - 35], de 1) préférence voisine de 28. 13. Conditionnement selon la revendication 12, caractérisé en ce que les cellules de l'algue Haslea ostrearia Simonsen incluses dans les particules de15 polymère(s) présentent une longueur au moins égale à 60 Mm. 14. Conditionnement selon l'une des revendications 12 et 13, caractérisé en ce qu'il est constitué en outre d'un milieu de stockage desdites particules, le milieu se présentant sous forme d'une solution incluant des constituants, en particulier des éléments nutritifs, aptes à assurer la survie des cellules et présentant une salinité comprise dans la plage [27 - 35], de préférence voisine de 28 et un pH compris dans la plage [7,5 - 8], de préférence voisin de 7,8. 15. Conditionnement selon l'une des revendications 12 à 14, caractérisé en ce que le polymère est au moins un polysaccharide polymérisable par voie chimique qui appartient de préférence à la famille des alginates ou des carraghénanes.