Brevet FR2781221A1 — publié le 20000121

La présente invention concerne de nouveaux composés qui sont des inhibiteurs de la fixation du fibrinogène sur les récepteurs plaquettaires Gp IIb/IIIa, et qui sont utilisables en thérapeutique comme antithrombotiques. Au cours des processus pathologiques qui conduisent à la constitution du thrombus (caillot) puis de son extension, l'agrégation plaquettaire représente une étape-clé parce qu'elle est à l'origine de la gravité du phénomène. En effet, dès l'initiation du thrombus, en particulier dans la circulation sanguine artérielle, la mise en jeu de plusieurs réactions biochimiques interdépendantes induit l'agrégation d'un nombre de plus en plus grand de plaquettes par l'intermédiaire de la transformation du fibrinogène soluble en filaments de fibrine insolubles qui augmentent la taille de l'amas de plaquettes, d'abord au siège même de la lésion vasculaire artérielle, puis de plus en plus dans la lumière du vaisseau. Dans ce mécanisme d'agrégation plaquettaire, l'activation des récepteurs Gp IIb/IIIa est à l'origine de l'amplification de l'agrégation plaquettaire Le fibrinogène, qui peut se lier par ses deux dimères à ces récepteurs, amplifie la liaison des plaquettes entre elles et induit ainsi la constitution d'une masse plaquettaire formant un thrombus au site de rupture de la plaque d'athérome Ce mécanisme d'agrégation plaquettaire est particulièrement actif dans toutes les thromboses artérielles qu'elles apparaissent au cours de pratiques de cardiologie interventionnelle (angioplastie percutanée transluminale; pose de "stents"), de chirurgie cardiaque (pontage aortocoronarien ; chirurgie valvulaire), au cours de maladies cardiaques aigues (infarctus du myocarde, angor instable, syndromes coronariens aigus,..) ou au cours de certaines ischémies cérébrales, ou enfin au cours des ischémies myocardiques qui peuvent venir compliquer les suites d'un traitement anti-thrombotique. Réduire ou empêcher l'activation des plaquettes au contact d'une plaque athérosclérotique rompue représente donc une approche thérapeutique originale et efficace du traitement des thromboses, en particulier des thromboses artérielles et donc un moyen de prévention efficace des syndromes coronariens aigus, dont l'angor instable et l'infarctus du myocarde. La présente invention vise à fournir de nouveaux inhibiteurs compétitifs de la fixation du fibrinogène sur les récepteurs Gpllb/llla utilisables comme médicaments antithrombotiques. La présente invention vise en outre à fournir des composés qui puissent être administrés par voie orale, qui permettent l'obtention d'une durée d'action prolongée et qui évitent les risques de saignement. La présente invention a pour objet des composés de formule générale (I) dans laquelle: Ri est choisi parmi l'hydrogène, un groupe alkyle en C1-C4 et un groupe phényl(alkyle en C1-C4) ; R2 est choisi parmi l'hydrogène, le groupe hydroxyle et un groupe protecteur du groupe amidino ; R3 est choisi parmi les groupes de formule : -NH-CO-R4, R4 étant choisi parmi les groupes alkoxy en C1-C4. cycloalkoxy en C3-C7, benzyloxy, méthoxyphényle, diméthoxyphényle, benzodioxolyle et benzodioxannyle, et les groupes de formule : -NH-S02-Rs, R5 étant choisi parmi : - les groupes alkyle en C1-C5 éventuellement substitués par un ou plusieurs groupes choisis parmi les halogènes, les groupes hydroxy et le groupe trifluorométhyle ; - les groupes cycloalkyle mono ou bicycliques en C3-C12 ; - les groupes aryle mono, bi ou tricycliques en C6-C14 ; - les groupes hétéroaryle choisis parmi les groupes pyridyle, thiényle, quinolyle, benzodioxannyle, benzodioxolyle et isoxazolyle ; - les groupes phénylalkyle (C1-C4) et naphtylalkyle (C1-C4) ; - les groupes de formule : avec n = 1, 2 ou 3 , les groupes aryle ou hétéroaryle de R5 étant éventuellement substitués par un ou plusieurs groupes choisis indépendamment parmi les halogènes, les groupes alkyle en C1-C4, tnfluorométhyle, alkyl (Ci-C4)thio, alkyl(CI-C4)oxy, alkyl(Ci-C4)SUIfonyle, nitro, di(alkyICi-C4)ammo, les groupes-COOR, -CH2-COOR, ou -0-CH2COOR, R étant un groupe alkyle en Ci-C4, et le groupe oxo est en position 2 ou 3 sur la pipérazine ; et leurs sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. Comme groupes protecteurs du groupe amidino, on peut citer les groupes éthoxycarbonyle, benzyloxycarbonyle et pnitrobenzyloxycarbonyle. Comme exemple de groupe aryle on peut citer les groupes phényle, a-naphtyle, ss-naphtyle, fluorényle. Les groupes alkyle en C1-C5 peuvent être linéaires ou ramifiés. Comme exemples on peut citer les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tertiobutyle, pentyle. Les groupes alcoxy en C1-C4 peuvent de même être linéaires ou ramifiés. Comme exemples on peut citer les groupes méthoxy, éthoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobutoxy. Les halogènes peuvent être choisis parmi le fluor, le chlore, le brome et l'iode. Les "sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables" désignent les sels qui donnent les propriétés biologiques des bases libres, sans avoir d'effet indésirable. Ces sels peuvent être notamment ceux formés avec des acides minéraux, tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique ; des sels métalliques acides, tels que l'orthophosphate disodique et le sulfate monopotassique, et des acides organiques. Les composés de formule# peuvent être préparés par . a) réaction d'un acide de formule dans laquelle Z est un groupe précurseur d'un groupe avec une amine de formule pour obtenir un composé de formule et b) conversion du groupe Z en groupe La réaction des acides de formule Il avec les amines de formule III peut être effectuée dans un solvant polaire tel que DMF, THF ou acétate d'éthyle, en présence d'un agent de couplage (DCC/HOBT, BOP, chloroformiate d'isobutyle) à une température de 15 à 50 C. Dans le cas où Z est un groupe N=C-, le groupe Z peut être converti en amidoxime par addition d'hydroxylamine sur le groupe nitrile en présence d'une base appropriée (K2CO3, Et3N, C2H50Na) dans un solvant alcoolique. L'hydrogénolyse en présence de palladium sur charbon dans un mélange d'anhydride acétique et d'acide acétique des composés obtenus conduit aux composés de formule # dans lesquels R2 est l'hydrogène. Les composés de formule Il à groupe 2-pipérazinone, dans le cas où Z est un groupe nitrile peuvent être obtenus selon le schéma suivant : Schéma 1 Le 4-fluorobenzonitnle est mis en réaction avec un excès d'éthylènediamine dans un solvant aprotique pour donner le 4-(2- aminoéthyl)benzonitrile qui est ensuite mono alkylé par le bromoacétate d'éthyle dans un solvant polaire comme l'éthanol ou l'acétonitrile en présence d'une base inorganique ou d'une amine tertiaire. Une acylation avec du chlorure de chloroacétyle suivi d'une cyclisation et d'une hydrolyse conduisent à l'acide (1). Les composés de formule Il à groupe 3-pipérazinone dans le cas où Z est un groupe nitrile peuvent être obtenus selon le schéma suivant : Schéma 2 Le 4-(2-aminoéthyl)benzonitrile est dialkylé par le bromoacétate d'éthyle; la cyclisation s'opère en présence d'une amine tertiaire, d'une base inorganique ou de leur mélange ; après hydrolyse on obtient l'acide (2) Les sels d'addition s'obtiennent de façon classique par réaction du composé de formule 1 avec un acide pharmaceutiquement acceptable dans un solvant approprié Inversement, les bases peuvent être obtenues à partir des sels d'addition par traitement par une base forte. Les exemples suivants illustrent la préparation des composés de formule I. A - Préparation des composés de formule Il. 1. Synthèse de l'acide 2-[4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino]acétique (1) a) 4-(2-Aminoéthylamino)benzonitrile Une suspension du 4-fluorobenzonitrile (167 g, 1,38 M), de l'éthylènediamine (330 g, 5,5 M) et du carbonate de potassium (300 g, 2,17 M) dans 2 1 de toluène est chauffée à reflux pendant 6 heures. Après refroidissement à température ambiante, on filtre et rince avec du toluène, le filtrat est évaporé pour donner une huile jaune qui est cristallisée dans du toluène On filtre et rince avec du toluène, sèche sous vide à 50 C et obtient 200 g d'un solide légèrement jaune. Rendement =90% Fus. = 85 C 1 H-RMN (400MHz, CDCI3): #1,2 (bs, 2H), 2,9 (t, 2H), 3,12 (q, 2H), 4,7 (bs,1H), 6,5 (d, 2H), 7,3 (d, 2H). b) 2-{2-(Chloroacétyl)-2-(4-cyanoanilino)éthylamino}acétate d'éthyle A une suspension du 4-(2-aminoéthylamino)benzonitrile (80,5 g, 0,5M), et de dusopropyléthylamine (65 g, 0,5 M) dans 800 ml d'acétonitrile, est ajouté du bromoacétate d'éthyle (84 g, 0,5 M). L'agitation est maintenue pendant 18 heures à température ambiante. On évapore la plupart de l'acétonitrile, le résidu est repris dans du dichlorométhane On lave avec de l'eau, sèche sur du sulfate de sodium; le produit brut est passé sur une colonne de silice courte [éluant. dichlorométhane puis dichlorométhane/méthanol, 20/1)] pour donner une huile. Le produit obtenu ci-dessus est solubilisé dans 1 L de tétrahydrofuranne on ajoute la diisopropyléthylamine (51 g, 0,4 M), ensuite le chlorure de chloroacétyle (45 g, 0,4 M) est additionné lentement à #5 C. Après 18 heures d'agitation à température ambiante, on ajoute 1 L d'acétate d'éthyle et lave avec de l'eau 3 fois, sèche sur du sulfate de sodium, évapore, on obtient un solide qui est agité avec un mélange dichlorométhane-éther (1/3). On filtre la suspension et rince avec dichlorométhane-éther (1/3), sèche sous vide pour obtenir 100 g d'un solide beige cristallin. Rendement = 62% 1 H-RMN (400MHz, CDC13): 8 1,2 (q, 6H), 3,3 (m, 4H), 3,65 (m, 4H), 3,8 (s, 2H), 3,9 (d, 4H), 4,1 (s, 4H), 4,15 (q, 4H), 4,9 (t, 1 H), 5,3 (t, 1 H), 6,5 (dd, 4H), 7,3 (dd, 4H). c) 2-[4-(4-Cyanophényl)-2-oxopipérazino]acétate d'éthyle Une suspension du 2-2-(chloroacétyl)-2-(4- cyanoanilino)éthylamino}acétate d'éthyle (152 g, 0,47M), de la diisopropyléthylamine (73 g, 0,57 M) et de l'iodure de sodium (85 g, 0,57M) dans 1200 ml d'acétonitrile est chauffée à reflux pendant 2 heures. On évapore le solvant et le residu est repris dans du dichlorométhane et lavé à l'eau, séché sur du sulfate de sodium, évaporé pour donner une huile brune qui est cristallisée dans un mélange cyclohéxane-acétate d'éthyle pour donner 125 g d'un solide cristallin brunâtre. Rendement = 93% P. f = 108 C. 1H-RMN (400MHz, CDCI3): # 1,3 (t, 3H), 3,65 (m, 4H), 4,05 (s, 2H), 4,2 (m, 4H), 6,8 (d, 2H), 7,5 (d, 2H). d) Acide 2-[4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino]acétique Le 2-[4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino]acétate d'éthyle(20,7 g, 72 mmole) est solubilisé dans 80 ml de méthanol 80 ml de tétrahydrofuranne et 100 ml d'eau, ensuite le lithium hydroxyde monohydrate (4 g, 98 mmole) est ajouté. L'agitation est maintenue pendant 20 minutes puis on élimine le solvant organique sous vide. On rajoute -100 ml d'eau à la suspension obtenue et acidifie. On filtre et rince à l'eau, sèche sous vide à 50 C pour obtenir 18,5 g d'une poudre beige. Rendement = 100% P.f. = 215 C (d). 1 H-RMN (200MHz, DMSO-d6): # 3,5 (t, 2H), 3,65 (t, 2H), 4,0 (s, 2H), 4,1 (s, 2H), 7,0 (d, 2H), 7,6 (d, 2H). 2. Synthèse de l'acide 2-[4-(4-cyanophényl)-3-oxopipérazino]acétique (2) a) 2-[2-(4-Cyanoanilino)éthyl(2-éthoxy-2-oxoéthyl)amino]acétate d'éthyle Une suspension du 4-(2-aminoéthylamino)benzonitrile (1 a)(32 g, 0,2M), du carbonate de potassium (55g, 0,4 M) et du bromoacétate d'éthyle(67g, 0,4 M) dans 400 ml d'acétonitrile est chauffée à reflux pendant 18 heures. On filtre et le produit brut est passé sur une colonne courte de silice (éluant: dichlorométhane) pour donner 58 g d'une huile brune. Rendement = 87% 1H-RMN (200MHz, CDC13): 8 1,3 (t, 3H), 3,05 (t, 2H), 3,4 (s, 2H), 3,55 (s, 2H), 3,8 (t, 2H), 4,2 (q, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,6 (d, 2H). MS-CI m/z: 287 (M+1)+ b) Acide 2-[4-(4-cyanophényl)-3-oxopipérazino]acétique Une suspension du 2-[2-(4-cyanoanilino)éthyl(2-éthoxy-2- oxoéthyl)amino]acétate d'éthyle (58 g, 0,174 M), de la diisopropyléthylamine (4g, 0,03 M) et du carbonate de potassium (24 g, 0,174 M) dans 400 ml d'acétonitrile est chauffée à reflux pendant 2 jours. On filtre et rince avec du dichlorométhane Le filtrat est évaporé pour donner un solide brun qui est solubilisé dans150 ml de méthanol et 50 ml d'eau, ensuite le lithium hydroxyde monohydrate (8,4 g, 0,2 M) est ajouté. Après 30 minutes d'agitation à température ambiante, la moitié de méthanol est éliminée sous vide pour donner une suspension. On rajoute -100 ml d'eau et acidifie à 5 C. On filtre et rince à l'eau, sèche sous vide à 50 C pour obtenir 27,2 g d'une poudre beige. Rendement =55% P f. = 120 C. 1 H-RMN (200MHz, DMSO-d6): # 2,95 (t, 2H), 3,3 (s, 2H), 3,4 (s, 2H), 3,7 (t, 2H), 7,65 (d, 2H), 7,85 (d, 2H). B - Préparation des composés intermédiaires de formule IV Synthèse du (2S)-3-{2-[( 4-( 4-cyanophényl )-2-oxopipérazino )acétyl]- amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (3) A une suspension de l'acide 2-[4-(4-cyanophényl)-2oxopipérazino]acétique (exemple 1d) (2,02 g, 7,8 mmole), de la Nméthylmorpholine (1,6 g, 15,8 mmole) dans 50 ml de tetrahydrofuranne, est ajouté le chloroformiate d'isobutyle (1,1 g, 8 mmole) à #5 C Après 20 minutes à 5 C, le chlorhydrate du (2S)-3-amino-2- (phénylsulfonylamino)propanoate d'éthyle (2,39 g, 7,8 mmole) est ajouté L'agitation est maintenue pendant 18 hr pour donner une suspension épaisse. On ajoute 100 ml d'acétate d'éthyle et filtre, rince à l'eau, à l'acétate d'éthyle et à l'éther, sèche pour obtenir 2,8 g d'un solide blanc. Rendement = 70 % 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,0 (t, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,4 (m, 3H), 3,45 (t, 2H), 3,8 (q, 2H), 3,95 (m, 5H), 7,0 (d, 2H), 7,55 (m, 5H), 7,75 (d, 2H), 8,15 (t, 1 H), 8,4 (bd, 1 H). La méthode décrite ci-dessus a été utilisée pour la synthèse des composés suivants : (2S)-3-{2-[4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-[(3- pyridylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (4) Produit de départ: dichlorhydrate du (2S)-3-amino-2-[(3-pyridylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle Rendement = 74% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,0 (t, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,45 (m, 3H), 3,7 (t, 2H), 3,8 (q, 2H), 4,0 (m, 5H), 7,0 (d, 2H), 7,6 (m, 3H), 8,1 (dd, 1H), 8,15 (t, 1 H), 8,70 (bs, 1 H), 8,8 (d, 1 H), 8,9 (d, 1 H) {2S)-3-{2-[4-{4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-[(8- quinolinylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (5) Produit de départ: dichlorhydrate du (2S)-3-amino-2-[(8- quinolinylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle Rendement = 70% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 0,8( t, 3H), 3,4 (m, 4H), 3,65 (m, 4H), 4,0 (m, 4H), 4,5 (bs, 1 H), 7,0 (d, 2H), 7,6 (d, 2H), 7,75 (m, 2H), 7,85 (bs, 1 H), 8,15 (t, 1 H), 8,3 (dd, 2H), 8,6 (d, 1 H), 9,05 (dd, 1 H). (2S)-3-2-[4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2 [(benzylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (6) Produit de départ : du (2S)-3-amino-2-[(benzylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle Rendement = 68% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 8 1,2 (t, 3H), 3,4 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,95 (s, 2H), 4,05 (s, 2H), 4,08 (m, 1 H), 4,1 (q, 2H), 4,35 (t, 2H), 6,95 (d, 2H), 7,35 (m, 5H), 7,6 (d, 2H), 7,7 (d, 1 H), 8,1 (t, 1 H). (2S)-3-{2-[4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2- [(phénéthylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (7) Produit de départ: chlorhydrate du (2S)-3-amino-2- [(phénéthylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle Rendement = 63% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,2 (t, 3H), 3,4 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,95 (s, 2H), 4,05 (s, 2H), 4,08 (m, 1H), 4,1 (q, 2H), 4,35 (t, 2H), 6,95 (d, 2H), 7,35 (m, 5H), 7,6 (d, 2H), 7,7 (d, 1 H), 8,1 (t, 1 H), (2S)-3-{2-[(4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-{[(4- méthoxyphényl)sulfonyl]amino}propanoate d'éthyle (8) Produit de départ : du (2S)-3-amino-2-{[(4- méthoxyphényl)sulfonyl]amino} propanoate d'éthyle Rendement = 70% 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 8 1,05 (t, 3H), 3,15 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,45 (m, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,8-3,95 (m, 9H), 6,9 (d, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 8,1 (t, 1 H), 8,15 (bs, 1 H). (2S)-3-{2-[(4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-{[(4- méthylphényl)sulfonyl]amino}propanoate d'éthyle (9) Produit de départ: chlorhydrate du (2S)-3-amino-2-[(4toluènesulfonyl)amino]propanoate d'éthyle Rendement = 55% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6) 8 1,0 (t, 3H), 3,15 (m, 1 H), 3,4 (m, 1 H), 3,45 (m, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,8 (q, 2H), 3,95 (m, 5H), 6,95 (d, 2H), 7,6 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 8,15 (t 1 H), 8,5 (bs, 1 H). (2S)-3-{2-[(4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-{[(4- chlorophényl)sulfonyl]amino}propanoate d'éthyle (10) Produit de départ: chlorhydrate du (2S)-3-amino-2-{[(4- chlorophényl)sulfonyl]amino} propanoate d'éthyle Rendement = 56% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 8 1,0 (t, 3H), 3,15 (m, 1 H), 3,4 (m, 1 H), 3,45 (m, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,8 (q, 2H), 3,95 (m, 5H), 6,95 (d, 2H), 7,6 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 8,15 (t 1 H), 8,5 (bs, 1 H). (2S)-3-2-[(4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-[(2- naphthylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (11) Produit de départ : du (2S)-3-amino-2-[(2- naphthylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle Rendement = 54% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 0,8 (t, 3H), 3,15 (m, 1 H), 3,35 (m, 3H), 3,6 (m, 4H), 3,95 (m, 5H), 6,95 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 7,7 (m, 2H), 7,8 (d, 1 H), 8,05 (d, 1 H), 8,15 (m, 3H), 8,45 (s, 1 H), 8,55 (d, 1 H). (2S)-3-2-[(4-(4-cyanophényl)-3-oxopipérazino)acétyl]amino}-2- [(phénylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (12) A une suspension de l'acide 2-[4-(4-cyanophényl)-3- oxopipérazino]acétique (2) (2,59g, 10 mmole) et de N-méthylmorpholine (2,2 g, 21,8 mmole) dans 50 ml de tetrahydrofuranne, est ajouté le chloroformiate d'isobutyle (1,47 g, 10,8 mmole) à #5 C, puis le mélange est agité à température ambiante pendant 20 minutes, le chlorhydrate du 2-(S)- 3-amino-2-(phénylsulfonylamino) propanoate d'éthyle (10,2 mmole) est alors ajouté. L'agitation est maintenue pendant 18 heures On ajoute 100 ml d'acétate d'éthyle et de l'eau, la phase organique est décantée, lavée à l'eau, séchée sur sulfate de sodium Le produit brut est purifié par flash chromatographie (dichlorométhane/méthanol, 15/1) pour donner 2,5 g d'un solide blanc. Rendement = 47,6 % 1 H-RMN (400MHz, CDC13): # 1,0 (t, 3H), 2,85 (m,1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,1 (s, 2H), 3,3 (m, 1 H), 3,35 (s, 2H), 3,7 (m, 3H), 3,85 (q, 2H), 3,9 (bs, 1 H), 5,7 (bs, 1 H), 7,35 (m, 4H), 7,4 (m, 1 H), 7,55 (d, 2H), 7,7 (d, 2H). Acide (2S)-3-2-[(4-(4-cyanophényl)-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2- [(phénylsulfonyl)amino]propanoique (13) A une suspension de l'acide 2-[4-(4-cyanophényl)-2oxopipérazino]acétique (1) (5,18 g, 20 mmole), de la N-méthylmorpholine (2,5 g, 25 mmole) dans 100 ml de tetrahydrofuranne, est ajouté le chloroformiate d'isobutyle (2,9 g, 21,2 mmole) à 5 C, après 20 minutes d'agitation, un mélange de l'acide (2S)-3-amino-2-(phénylsulfonylamino) propanoique (5 g, 20,5 mmole) et de diisopropyléthylamine (2,8 g, 21,7 mmole) dans 30 ml d'eau et 50 ml de THF est ajouté. L'agitation est maintenue pendant 2 heures. On évapore le solvant organique et rajoute de l'eau, puis acidifie pour obtenir une suspension. On extrait avec de l'acétate d'éthyle, les extraits sont lavés à l'eau, séchés sur sulfate de sodium. Après flash chromatographie (dichlorométhane/méthanol/AcOH, 10/1/0,5),.on obtient 4,6 g de produit Rendement = 47,4 % 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6). # 3,2 (m, 1 H), 3,35 (m, 1 H), 3,45 (t, 2H), 3,65 (t, 2H), 3,95 (m, 4H), 7,0 (d, 2H), 7,2 (dt, 2H), 7,6 (m, 4H), 7,8 (d, 2H), 8,15 (t, 1 H), 8,2 (d, 1 H). Le composé suivant 14 est synthétisé de la même manière: Acide (2S )-3-{2-[( 4-( 4-cyanophényl )-2-oxopipérazino )acétyl]amino }-2- [(4-toluènesulfonyl)amino]propanoique (14) Produit de départ : l'acide(2S)-3-amino-2-[(4-toluènesulfonyl)amino)] propanoique Rendement = 55% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): EXEMPLE 1 : Synthèse du (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino )méthyl]phényl}-2oxopipérazino )acétyl]amino }-2-[(phénylsulfonyl )amino ]propanoate d'éthyle(CRL 42800) Une suspension contenant du (2S)-3-{2-[(4-(4-cyanophényl)-2- oxopipérazino)acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (composé 3) (2,3 g, 4,48 mmole), de la triéthylamine (1 g, 9,9 mmole) et de l'hydroxylamine chlorhydrate (0,68 g, 9,78 mmole) dans 100 ml d'éthanol est chauffé à reflux pendant 20 heures. On filtre le précipité, rince avec de l'éthanol, sèche sous vide pour obtenir 1,9 g d'un solide blanc Rendement = 77,6% 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 8 1,0(t, 3H), 3,1 (m, 1H), 3,35 (m, 3H), 3,5 (bs, 2H), 3,75 (q, 2H), 3,8-4,0 (m, 5H), 5,65 (s, 2H), 6,85 (d, 2H), 7,55 (m, 5H), 7,75 (d, 2H), 8,1 (t, 1 H), 8,35 (bd, 1 H), 9,35 (bs, 1 H). La méthode décrite dans l'exemple 1 a été utilisée pour la synthèse des composés suivants EXEMPLE 2 : (2S)-3-{2-[( 4-( 4-amino(hydroxyimino )méthyl]phényl}-2-oxopi pérazi no)- acétyl]amino}-2-[(3-pyridylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42814) Produit de départ : 4 Rendement = 75% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 8 1,0 (t, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,4 (m, 3H), 3,5 (m, 2H), 3,8 (q, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,95 (q, 2H), 4,05 (dd, 1 H), 5,65 (s, 2H), 6,9 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 7,6 (dd, 1 H), 8,1 (dd, 2H), 8,7 (bs, 1 H), 8,85 (d, 1 H), 8,9 (d, 1 H), 9,35 (bs, 1 H) EXEMPLE 3 : (2S)-3-{2-[( 4-( 4-amino(hydroxyimino )méthyl]phényl}-2-oxopi pérazino)- acétyl]amino}-2-[(8-quinolinylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42813) Produit de départ : 5 Rendement = 73% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 8 0,85 (t, 3H), 3,35 (m, 4H), 3,55 (m, 4H), 3,85 (s, 2H), 3,95 (dd, 2H), 4,5 (dd, 1 H), 5,7 (s, 2H), 6,9 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 7,75 (m, 2H), 7,9 (bd, 1 H), 8,15 (t, 1 H), 8,3 (m, 2H), 8,55 (d, 1 H), 9,05 (d, 1 H), 9,4 (s, 1 H). EXEMPLE 4 : (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2-oxopipérazino)- acétyl]amino}-2-[(benzylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42830) Produit de départ : 6 Rendement = 64% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,2 (t, 3H), 3,3-3,55 (m, 7H), 3,85 (s, 2H), 4,0 (s, 2H), 4,1 (q, 2H), 4,4 (s, 2H), 5,65 (s, 2H), 6,9 (d, 2H), 7,35 (m, 5H), 7,55 (d, 2H), 7,75 (d, 1 H), 8,05 (t, 1 H), 9,4 (s, 1 H) EXEMPLE 5 : (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2-oxopipérazino)- acétyl]amino}-2-[(phénéthylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42832) Produit de départ : 7 Rendement = 82% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 8 1,25 (t, 3H), 3,0 (m, 2H), 3,25-3,6 (m, 9H), 3,85 (s, 2H), 4,05 (q, 2H), 4,2 (m, 2H), 5,7 (s, 2H), 6,9 (d, 2H), 7,3 (m, 5H), 7,6 (d, 2H), 7,9 (d, 1 H), 8,15 (t, 1 H), 9,4 (s, 1 H). EXEMPLE 6 : (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-{[(4-méthoxyphényl)sulfonyl]amino}propanoate d'éthyle (CRL 42834) Produit de départ : 8 Rendement = 87% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,05 (t, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,4 (m, 3H), 3,55 (m, 2H), 3,8-4,5 (m, 10H), 5,65 (s, 2H), 6,95 (d, 2H), 7,1 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 7,7 (d, 2H), 8,1 (t, 1 H), 8,2 (d, 1 H), 9,4 (s, 1 H). EXEMPLE 7 : (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2oxopipérazino)acétyl]amino}-2-{[4-toluènesulfonyl]amino}propanoate d'éthyle (CRL 42874) Produit de départ- composé 9 Rendement = 83% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6) # 1,0 (t, 3H), 2,35 (s, 3H), 3,1 (m, 1 H), 3,3 (m, 4H), 3,4 (m, 2H), 3,7 (m, 3H), 3,9 (m, 3H), 5,6 (s, 2H), 6,85 (d, 2H), 7,4 (d, 2H), 7,5 (d, 2H), 7,6 (d, 2H), 8,05 (t, 1 H), 8,25 (bd, 1 H), 9,4 (s, 1 H) EXEMPLE 8 : (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2-oxopipérazino) acétyl]amino}-2-{[(4-chlorophényl)sulfonyl]amino}propanoate d'éthyle (CRL 42876) Produit de départ : composé10 Rendement = 67% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,05 (t, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,35 (m, 4H), 3,5 (m, 2H), 3,9 (m, 6H), 5,7 (s, 2H), 6,9 (d, 2H), 7,6 (d, 2H), 7,7 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 8,15 (t, 1 H), 8,55 (bs, 1 H), 9,35 (bs, 1 H). EXEMPLE 9 : (2S)-3-2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2-oxopipérazino) acétyl]ami no }-2-[(2-naphthylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42878) Produit de départ : composé11 Rendement = 73% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 0,85 (t, 3H), 2,85 (m, 1 H), 3,35 (m, 4H), 3,5 (t, 2H), 3,6 (m, 2H), 3,9 (m, 4H), 5,65 (s, 2H), 6,85 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 7,65 (m, 2H), 7,7 d, 1 H), 8,05 (d, 1 H), 8,1 (dd, 3H), 8,35 (s, 1 H), 8,5 (bd 1 H), 9,35 (s, 1 H). EXEMPLE 10 : (2S)-3-{2-[( 4-( 4-amino(hydroxyimino )méthyl]phényl}-3-oxopi pérazino) acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (CRL 42836) Produit de départ : 12 Rendement = 73% 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,0 (t, 3H), 2,8 (t, 2H), 3,0 (dd, 2H), 3,2 (m, 2H), 3,4 (s, 2H), 3,45 (m, 1 H), 3,7 (bt, 2H), 3,75 (q, 2H), 5,8 (s, 2H), 7,3 (d, 2H), 7,55 (m, 3H), 7,7 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 8,05 (t, 1 H), 8,4 (bd, 1 H), 9,65 (s, 1 H). EXEMPLE 11 : Synthèse de l'acide (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]- phényl}-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino]- propanoique Une suspension de l'acide (2S)-3-{2-[(4-(4-cyanophényl)-2oxopipérazino) acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino] propanoique (composé 13) (4,43 g, 9,13 mmole), de la triéthylamine (2,3 g, 22,7 mmole) et de l'hydroxylamine chlorhydrate (1,58 g, 22,7 mmole) dans 150 ml d'éthanol est chauffé à reflux pendant 16 heures. On filtre le précipité, rince avec de l'éthanol, sèche sous vide pour obtenir 4,05 g d'un solide beige. Rendement = 85,6% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 3,15 (m, 1 H), 3,35-4,05 (m, 10H), 5,8 (s, 2H), 6,9 (d, 2H), 7,6 (m, 4H), 7,8 (d, 2H), 8,1 (m, 2H), 9,5 (bs, 1H). Le produit décrit ci-après est synthétisé de la même manière: EXEMPLE 12 : Acide (2S)-3-2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2oxopipérazino) acétyl]amino }-2-{[ 4-toluènesulfonyl]ami no }propanoique Produit de départ : 14 Rendement = 55% 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 2,35 (s, 3H), 3,15 (m, 3H), 3,45-3,9 (m, 8H), 5,85 (s, 2H), 6,95 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 7,5 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 8,0 (bs, 1 H), 8,05 (t, 1 H), 9,5 (bs, 1 H). EXEMPLE 13 : Synthèse de l'acétate du (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(imino)méthyl]phényl)-2- oxopipérazino)acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (CRL42817) Le (2S)-3-f 2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazino) acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (exemple 1) (1,5g, 2,75 mmole) est solubilisé dans 50 ml d'acide acétique on ajoute 600 mg d'anhydride acétique (5,6 mmole) et 0,76g de palladium sur charbon à. 10% L'hydrogénolyse s'effectue à température ambiante sous 50 psi pendant 3 hr. On filtre le catalyseur et évapore à sec pour obtenir un solide qui est dissout dans 150 ml d'eau et traité par du charbon. La solution est filtrée, le filtrat est lyophilisé pour donner 1,3 g d'un solide blanc. Rendement = 80% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 1,0 (t, 3H), 1,85 (bs, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,35 (m, 1 H), 3,45 (bs, 2H), 3,75 (bs, 2H), 3,85 (q, 2H), 3,95 (t, 3H), 4,05 (s, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,6 (t, 2H), 7,65 (q, 1 H), 7,8 (d, 4H), 8,3 (t, 1 H) La méthode décrite dans l'exemple 13 a été utilisée pour la synthèse des composés suivants : EXEMPLE 14 : Diacétate du (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazino) acétyl]amino}-2-[(3-pyridylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42815) Produit de départ: exemple 2 Rendement = 74% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-dg). ô 0,95 (t, 3H), 1,75 (bs, 6H), 3,2 (m,1 H), 3,4 (m, 1 H), 3,45 (m, 3H), 3,62 (bs, 2H), 3,8 (q, 2H), 4,0 (m, 4H), 7,0 (d, 2H), 7,6 (dd, 1 H), 7,7 (d, 2H), 8,1(d, 1 H), 8,25 (t, 1 H), 8,8 (d, 1 H), 8,9 (d, 1 H). MS (electrospray) m/z: 532(M+1 )+ EXEMPLE 15 : Acétate du (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazino) acétyl]amino}-2-[(1,2,3,4-tetrahydro-8quinolinylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42812) Produit de départ: exemple 3 Rendement = 77% 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6). # 1,05( t, 3H), 1,8 (m, 5H), 2,7 (t, 2H), 3,2 (m, 1 H), 3,4 (m, 3H), 3,45 (bs, 2H), 3,65 (bs, 2H), 3,8 (m, 3H), 3,95 (m, 4H), 5,95 (s, 1 H), 6,45 (t, 1 H), 7,0 (m, 3H), 7,3 (d, 1 H), 7,7 (d, 2H), 8,3 (t, 1 H). EXEMPLE 16 : Acétate du (2S)-3-{2-((4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazino) acétyl]amino}-2-[(benzylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle acétate (CRL 42829) Produit de départ: exemple 4 Rendement = 83% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-de): # 1,2 (t, 3H), 1,8 (s, 3H), 3,35 (m, 2H), 3,45 (bs, 2H), 3,65 (bs, 2H), 4,1 (m, 7H), 4,4 (m, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,35 (m, 5H), 7,75 (d, 2H), 8,3 (bs, 1 H), 8,7 (bs, 1 H), 10,9 (bs, 1 H) EXEMPLE 17: Acétate du (2S)-3-{2-((4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazino) acétyl]amino}-2-[(phénéthylsulfonyl)amino] propanoate d'éthyle (CRL 42831) Produit de départ. exemple 5 Rendement = 85% 1H-RMN (400MHz, DMSO-dg) # 1,2 (t, 3H), 1,85 (bs, 3H), 3,0 (m, 2H), 3,3 (m, 3H), 3,45 (m, 3H), 3,7 (bs, 2H), 4,05 (m, 7H), 7,05 (d, 2H), 7,25 (m, 1 H), 7,3 (m, 4H), 7,8 (d, 2H), 8,45 (bs,1 H), 8,7 (bs, 1 H), 10,9 (bs, 1 H). EXEMPLE 18 : Acétate du (2S)-3-{2-((4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-2oxopipérazino) acétyl]amino}-2-{((4-méthoxyphényl)sulfonyl]amino}- propanoate d'éthyle (CRL 42833) Produit de départ: exemple 6 Rendement = 82% 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6)' # 1,0 (t, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,2 (m, 1H), 3,35 (m, 1 H), 3,4 (m, 3H), 3,7 (m, 2H), 3,8-4,0 (m, 9H), 7,05 (dd, 2H), 7,7 (dd, 4H), 8,3 (bs, 1 H). MS (electrospray) m/z : 561 (M+1 )+. EXEMPLE 19 : Acétate du (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazino) acétyl]amino }-2-{[4-toluènesulfonyl]amino }propanoate d'éthyle (CRL 42875) Produit de départ: exemple 7 Rendement = 63% 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6). # 1,0 (t, 3H), 1,75 (bs, 3H), 2,4 (s, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,35 (m, 1 H), 3,4 (bs, 3H), 3,7 (bs, 2H), 3,85 (dd, 2H), 3,9 (q, 2H), 4,0 (s, 2H), 6,95 (d, 2H), 7,4 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 7,8 (d, 2H), 8,35 (bs, 1 H). EXEMPLE 20 : Acétate du (2S)-3-{2-[(4-( 4-amino(imino )méthyl]phényl}-2oxopipérazino) acétyl]amino }-2-{[( 4-chlorophényl )sulfonyl]amino}- propanoate d'éthyle (CRL 42877) Produit de départ: exemple 8 Rendement = 81 % 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6)' # 1,0 (t, 3H), 1,8 (bs, 3H), 3,15 (m, 1 H), 3,3 (m, 1 H), 3,4 (bs, 2H), 3,65 (bs, 2H), 3,8 (m, 2H), 4,0 (m, 5H), 7,05 (d, 2H), 7,7 (d, 2H), 7,8 (dd, 2H), 8,3 (m, 1 H), 8,8 (bs, 1 H), 9,8 (bs, 1 H) EXEMPLE 21 : Acétate du (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(imino )méthyl]phényl}-2- oxopipérazino) acétyl]amino}-2-[(2-naphthylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (CRL 42879) Produit de départ: exemple 9 Rendement = 82% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 0,85 (t, 3H), 1,8 (bs, 3H), 3,2 (m, 1 H), 3,35 (m, 3H), 3,65 (m, 4H), 3,9 (m, 5H), 7,0 (d, 2H), 7,7 (m, 5H), 8,0 (d, 1H), 8,15 (dd, 2H), 8,3 (t, 1 H), 8,4 (bs, 1 H), 8,7 (bs, 1 H). EXEMPLE 22 : Acétate du (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-3- oxopipérazino)acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)amino]propanoate d'éthyle (CRL 42835) Produit de départ: exemple 10 Rendement = 93% 1H-RMN (400MHz, DMSO-de): # 1,0 (t, 3H), 1,75 (bs, 3H), 2,75 (bs, 2H), 2,9 (dd, 2H), 3,2 (m, 1 H), 3,35 (s, 2H), 3,45 (m, 1 H), 3,7 (m, 4H), 3,9 (t, 1 H), 7,55 (m, 5H), 7,75 (d, 2H), 7,85 (d, 2H), 8,2 (t, 1 H), 9,2 (bs, 1 H). EXEMPLE 23 : Synthèse du chlorhydrate de l'acide (2S)-3-{2-[(4-(4- amino(imino)méthyl]phényl}-2-oxopipérazino)acétyl]amino}-2- [(phénylsulfonyl)amino]propanoique (CRL42872) L'acide (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(hydroxyimino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazmo)acétyl]amino}-2-[(phénylsulfonyl)ammo]propanoique (exemple 11) (3,1g, 6 mmole) est solubilisé dans 150 ml d'acide acétique, on ajoute 1,6 g d'anhydride acétique (15,7 mmole) et 1,5 g de palladium sur charbon à 10%. L'hydrogénolyse s'effectue à température ambiante sous 50 psi pendant 4 hr. On filtre, évapore à sec et ajoute 200 ml d'eau et 10 ml HCI à 4N. Le mélange est traité avec du charbon, puis lyophilisé pour donner 1 g d'un solide légèrement jaune. Rendement = 31 % 1 H-RMN (400MHz, DMSO-dg). 8 3,2 (dd, 1 H), 3,4 (dd, 1 H), 3,45 (bs, 2H), 3,7 (bs, 2H), 3,95 (m, 5H), 7,05 (d, 2H), 7,65 (m, 3H), 7,85 (dd, 4H), 8,3 (m, 2H), 8,95 (bs, 2H), 9,2 (bs, 2H). Le produit suivant est synthétisé de la même manière: EXEMPLE 24 : Chlorohydrate de l'acide (2S)-3-{2-[(4-(4-amino(imino)méthyl]phényl}-2- oxopipérazino)acétyl]amino}-2-{[4-toluènesulfonyl]amino}propanoique (CRL42873) Produit de départ: exemple 12 Rendement = 46% 1 H-RMN (400MHz, DMSO-d6): # 2,2 (s, 3H), 3,05 (bs, 1 H), 3,2 (m, 1 H), 3,3 (m, 1 H), 3,35 (bs, 2H), 3,7 (bs, 2H), 3,9 (m, 4H), 7,05 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 7,7 (d, 2H), 7,85 (d, 2H), 8,2 (d, 1 H), 8,3 (bs, 1 H), 9,0 (bs, 2H), 9,2 (bs, 2H). L'étude de l'activité inhibitrice de l'agrégation plaquettaire des composés de formule I a été réalisée in vitro, c'est-à-dire par contact direct de solution de concentrations variables des composés avec des plaquettes fraîchement séparées d'un échantillon de sang total, prélevé dans des conditions standardisées, chez des animaux de laboratoire (cobaye) et chez des sujets humains en bonne santé n'ayant pas reçu de substances ou de médicaments pouvant interférer avec la coagulation du sang. L'activité antiagrégante plaquettaire a été également étudiée ex vivo/vitro, c'est-à-dire après administration des substances revendiquées au cobaye pour mesurer l'intensité et la durée de l'action anti-agrégante induite par la fraction absorbée et circulant dans le sang du produit étudié. 1. Etudes pharmacologiques in vitro 1.1. Etudes sur plaquettes de cobaye Du sang est prélevé par ponction intracardiaque sur des cobayes Dunkin-Hartley de sexe mâle (poids 330 g environ), à raison de 4,5 ml pour 0,5 ml de citrate trisodique (concentration de la solution aqueuse : 1,55 %) afin de prévenir toute trace de coagulation. Le plasma riche en plaquettes (PRP) est obtenu par centnfugation des tubes de sang total 15 minutes à 150 g. Les PRP sont rassemblés en "pools". Une numération des plaquettes contenues dans ces pools est pratiquée à l'aide d'un automate d'hématologie de type Coulter ZM : si nécessaire, une dilution est réalisée afin que la concentration du plasma en plaquettes soit comprise entre 200 000 et 400 000 plaquettes/mm3. Simultanément, d'autres échantillons de ces pools servent à préparer du plasma pauvre en plaquettes (PPP) par centnfugation à 1 500 g pendant 15 minutes. L'étude cinétique de l'agrégation plaquettaire est réalisée par addition d'une solution de collagène ( 1 g/ml) à un volume de PRP, à l'aide d'un agrégomètre de type Chrono-log Corporation (490- Di ou 560 VS) qui utilise une détection optique de l'apparition du thrombus. La détermination de la concentration inhibitrice 50 % (Cl5o) est réalisée en additionnant à des échantillons des pools de PRP, un volume déterminé de solvant (référence contrôle) et des concentrations croissantes des composés : 1,5 x10-8 M, 7 #10-6 M, 1,5 #10-7 M, 3 #10-7 M, 7 x 10-7 M, 1,5 x 10-6 M et 7 x 10-5 M. Les mesures de l'inhibition de l'agrégation sont faites après 3 minutes de contact à 37 C sous agitation. 1 2 Etude sur plaquettes humaines Chez un groupe d'une dizaine de sujets humains masculins, d'âge homogène et en bonne santé, du sang veineux est prélevé par ponction dans une veine du pli du coude pour être recueilli dans un tube de verre contenant une solution aqueuse de citrate de sodium 0,129 M (1 volume de solution citratée pour 9 volumes de sang). Chaque tube est ensuite centrifugé une première fois à 20 C et 100 g pendant 15 minutes pour obtenir le plasma riche en plaquettes (PRP) ; après prélèvement de ce PRP, le tube est à nouveau centrifugé à 2 000 g pendant 15 minutes pour prélever cette fois le plasma pauvre en plaquettes (PPP). Pour chaque échantillon identifié de PRP, une numération plaquettaire est réalisée à l'aide du compteur Coulter ZM. Chaque échantillon est alors utilisé pour étudier la variation de l'inhibition de l'agrégation plaquettaire déclenchée par l'addition d'une solution glucosée de collagène Chromo-par-Reagent de Coultronics (utilisé à la concentration de 5 g/ml) en fonction de l'addition de concentrations croissantes de chaque composé dans une gamme couvrant l'intervalle 10-8 M#10-5 M (exemple de concentrations : 10-8 M, 5 x 10-7 M, 3 #10-7 M, 10-'M, 8 #10-6 M, 4 #10-6M, 4 x 10-6 M, 2 x10-sM, 10-6M, 5 x 10-5M, 10-5M). Au préalable, pour chaque composé, une solution aqueuse à 10-3M est préparée. Dans chaque série de mesure, est introduit un essai contrôle destiné à vérifier l'effet éventuel des solvants (valeur référence) sur l'agrégation plaquettaire qui est mesurée après 3 minutes de contact à 37 C sous agitation. A partir des pourcentages d'inhibition de l'agrégation plaquettaire mesurés pour chaque concentration de chaque composé, est calculée la concentration inhibitrice 50 % (Cl5o). 2. Etude pharmacologique ex vivolvitro chez le cobaye L'évaluation de l'activité anti-agrégante plaquettaire des composés est réalisée chez les mêmes cobayes que ceux évoqués cidessus (souche Dunkin-Hartley). L'administration de chaque produit dans une gamme de doses qui va de 150 à 10 mg/kg et de chaque véhicule (5 ml/kg) est faite par voie gastrique (ig) 1 h ou 2h ou 4h ou 6h ou 8h ou 12h avant le prélèvement de sang chez les cobayes mis à jeun la veille. L'allocation des traitements aux animaux est aléatoire. Le sang est prélevé puis traité dans les mêmes conditions que celles décrites ci-dessus pour les études in vitro. Les résultats de l'inhibition de l'agrégation plaquettaire obtenus pour chaque concentration essayée, permettent de calculer la concentration Cl50 de chaque produit essayé et la cinétique de l'effet inhibiteur, leur durée d'action. Les résultats sont rassemblés dans le tableau suivant : CI50(M) in vitro % d'inhibition v.g. cobaye ex vivo Exemples Composé Cobaye Homme d = 150 mg/kg d = 10 mg/kg CRL 1 h 2 h 1 h 2 h 1 42800- - -79-76 - - 13 42817 1,1 # 10-7 1,0 # 10-5 -71-59 -37-39 14 42815 9,1 # 10-7 3,2 # 10-5 -51- - - 15 42812 2,5 # 10-7 8,2 # 10-6 -59- - 20 42877 3,2 # 10-7 9,3 # 10-6 - - -21- 22 42835 1,8 x 106 5,3 x 10-6 -59-46 - 23 42872 9,4 x 10-8 1,2 # 10-7 - - -68-64 24 42873 3,1 # 10-7 3,4 # 10-7 -49- -49 - : donnée non disponible. Les composés de formule # peuvent être utilisés, notamment dans les domaines suivants : i) Prévention aiguë du risque thrombotique artériel au cours de la chirurgie cardiaque (pontage coronarien) ou de la cardiologie interventionnelle (angioplastie percutanée transluminale, endartectomie, pose de "stent") : - dans ces situations, les composés sont ajoutés au traitement préventif reconnu du risque thrombotique artériel ; administration orale d'acide acétylsalicylique démarrant avant l'intervention (150 à 500 mg/j per os) puis se poursuivant ensuite ; intraveineuse d'héparine non fractionnée démarrée pendant l'intervention puis se poursuivant pendant 48 à 96 heures. L'administration du composé de formule # peut alors se faire soit par voie orale (0,5 à 1,5 mg/kg) en même temps que l'administration d'aspirine, soit par perfusion intraveineuse (0,25 à 1 mg/kg/24 h) associée ou non à un bolus. Après la 48ème heure, si le traitement a été administré par voie intraveineuse, il sera relayé par l'administration orale (0,25 à 10 mg/kg en deux prises espacées de 12 heures) afin de faciliter les soins en hospitalisation puis en traitement ambulatoire. ii) Prophylaxie secondaire du risque thrombotique artériel chez les patients pouvant présenter des épisodes d'angor instable ou un infarctus du myocarde . dans ces situations, la biodisponibilité importante des composés revendiqués, c'est-à-dire la possibilité d'obtenir rapidement des concentrations circulantes efficaces car capables d'inhiber la fixation du fibrinogène sur les plaquettes permet d'utiliser les médicaments revendiqués par la voie orale pendant la période où les patients présentent ce risque de thrombose artérielle. Dans ces situations, ces composés pourront être administrés avantageusement à raison de 1 à 3 prises orales par jour, grâce à leur biodisponibilité élevée et leur longue durée d'action, la dose étant choisie dans la gamme 0,5-10 mg/kg. Les compositions pharmaceutiques qui comprennent l'un des principes actifs décrits dans la présente demande incorporent la substance active soit sous forme de base, soit sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, soit encore sous la forme d'une pro-drogue comprenant une fonction ester, fonction qui est ensuite libérée in vivo après administration orale. Ces compositions pharmaceutiques incorporent les adjuvants de fabrication, les véhicules qui sont connus de l'homme de l'art. Ceux-ci sont choisis parmi la panoplie des outils galéniques reconnus par les Pharmacopées. Comme exemples, peuvent être mentionnés pour la préparation des formes galéniques destinées à la voie orale : amidon, stéarate de magnésium, talc, gélatine, agar, pectine, lactose, polyéthylèneglycols, etc ... Les formes galéniques utilisables seront choisies parmi les propositions suivantes : comprimés sécables ou non, gélules, lyocs, granulés, poudres. Selon les caractéristiques de la pathologie à traiter et la morphologie de chaque patient, la posologie orale quotidienne sera comprise entre 0,02 et 50 mg/kg/jour en 1 à 3 prises régulièrement espacées afin de maintenir un taux d'occupation efficace des récepteurs Gpllb/Illa plaquettaires. Pour la voie intraveineuse, les formes pharmaceutiques destinées à la phase aiguë du traitement sont conçues de manière à permettre une adaptation posologique individuelle sur la base de l'inhibition de l'agrégation plaquettaire la plus efficace en fonction de l'évolution immédiate des suites opératoires. Dans ce cadre, le lyophilisât, le soluté pour perfusion prêt à l'emploi, permettent de moduler individuellement la posologie dans l'intervalle de dose 0,01 mg/kg/jour -20 mg/kg/jour. REVENDICATIONS 1. Composés de formule générale (I) : dans laquelle: R1 est choisi parmi l'hydrogène, un groupe alkyle en C1-C4 et un groupe phényl(alkyle en 61-04) ; R2 est choisi parmi l'hydrogène, le groupe hydroxyle et un groupe protecteur du groupe amidino ; R3 est choisi parmi les groupes de formule -NH-CO-R4, R4 étant choisi parmi les groupes alkoxy en C1-C4, cycloalkoxy en C3-C7, benzyloxy, méthoxyphényle, diméthoxyphényle, benzodioxolyle et benzodioxannyle, et les groupes de formule : -NH-S02-R5, R5 étant choisi parmi : - les groupes alkyle en C1-C5 éventuellement substitués par un ou plusieurs groupes choisis parmi les halogènes, les groupes hydroxy et le groupe trifluorométhyle ; - les groupes cycloalkyle mono ou bicycliques en C3-C12 ; - les groupes aryle mono, bi ou tricycliques en C6-C14 ; - les groupes hétéroaryle choisis parmi les groupes pyridyle, thiényle, quinolyle, benzodioxannyle, benzodioxolyle et isoxazolyle ; - les groupes phénylalkyle (C1-C4) et naphtylalkyle (C1-C4) ; - les groupes de formule : avec n = 1, 2 ou 3 ; les groupes aryle ou hétéroaryle de R5 étant éventuellement substitués par un ou plusieurs groupes choisis indépendamment parmi les halogènes, les groupes alkyle en C1-C4, trifluorométhyle, alkyl (C1-C4)thio, alkyl(Ci-C4)oxy, alkyl(C1-C4)sulfonyle, nitro, di(alkylC1-C4)amino, les groupes-COOR, -CH2-COOR, ou -O-CH2COOR, R étant un groupe alkyle en Ci-C4, et le groupe oxo est en position 2 ou 3 sur la pipérazine ; et leurs sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 2. Procédé de préparation des composés de formule 1 selon la revendication 1 par : a) réaction d'un acide de formule dans laquelle Z est un groupe précurseur d'un groupe avec une amine de formule pour obtenir un composé de formule et b) conversion du groupe Z en groupe 3. Composition thérapeutique qui comprend à titre de principe actif un composé tel que défini à la revendication 1. 4. Utilisation d'un composé tel que défini à la revendication 1 pour la fabrication d'un médicament antithrombotique