Brevet FR2777281A1 — publié le 19991015

La présente invention concerne un nouveau procédé de préparation par voie chimique du Q-D-glucopyranosyl-( I )-D-glucopyranose de formule (I), communément appelé D-laminaribiose. Le D-laminaribiose est un disaccharide notamment utilisé dans le domaine agricole et en tant qu'antiseptique. Ce disaccharide est généralement obtenu par hydrolyse ou acétolyse de polysaccharides naturels d'origine végétale (voir Villa, Phaff, Notario, Carbohydr. Res., 1979, 74, 369, Kusama, Kusakabe, Zama, Murakami, Yasui, Agric. Biol. Chem., 1984, 48, 1433 ; Wang, Sakairi, Kuzuhara, Carbohydr. Res., 1991, 219, 133 , Moreau, Viladot, Samain, Planas, Driguez, Bioorg. Med. Chem., 1996, 4, 1849). Le D-laminaribiose peut également être préparé par voie chimique, notamment par des méthodes dérivées de la méthode de O-glycosylation de Koenigs-Knorr (voir Koenigs, Knorr, Ber. Dtsch. Chem. Ges., 1901, 34, 957) utilisant des halogénures de glycosyle comme donneurs de glycosyle. Une première méthode a ainsi été proposée par Freudenberg et von Oertzen en 1951 (voir Freudenberg, von Oertzen, Jiistus Liebigs Altn Chem., 1951, 574, 37), et une seconde méthode a été décrite par Bachli et Percival en 1952 (voir Bachli, Percival, J. Chem. Soc., 1952, 1243). Les inconvénients majeurs de ces deux méthodes résident dans une purification difficile à mettre en oeuvre et dans un rendement global inférieur à 10%. Une troisième méthode a été proposée par Takeo en 1979 (voir Takeo, Carbohydr. Res., 1979, 77, 245) mais elle nécessite plusieurs étapes de protection et déprotection sélective des hydroxyles de l'accepteur utilisé qui se présente sous forme glucopyranosique. On a également proposé de préparer le D-laminaribiose à panir d'orthoesters (voir Kochetkov, Bochtov, Sokolovskaya, Snyatkova, Carbohydr. Res., 1971, 16, 17). Cette méthode s'avère toutefois difficile à mettre en oeuvre et ne permet d'obtenir le laminaribiose qu'avec un rendement global voisin de 10 %. Dans ces conditions, la présente invention a pour but de fournir un nouveau procédé de préparation par voie chimique du D-laminaribiose présentant un nombre limité d'étapes, d'une mise en oeuvre aisée ET permettant d'obtenir le produit recherché sous forme pure avec un rendement global élevé. La solution conforme à la présente invention pour résoudre ce problème technique consiste en un procédé de préparation du D-laminaribiose comprenant une étape de couplage glycosidique entre un donneur et un accepteur de glycosyle, caractérisé en ce que: le donneur de glycosyle se présente sous forme pyranosique et répond à la formule (II) dans laquelle R, représente - un radical alkyle ou halogénoalkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, - un radical aryle non substitué ou substitué par un ou plusieurs groupements choisis parmi un atome d'halogène, un radical alcoxy ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un groupement nitro, X représente un groupe partant nucléoflige choisi parmi - un groupement de formule S(O)nR' dans laquelle R' représente un radical alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, un radical aryle non substitué ou substitué par un groupement alcoxy ayant de I à 6 atomes de carbone, un groupement nitro ou acétamide, et n est un nombre entier égal à 0 ou 1 , - un groupement trichloroacétimidate l'accepteur de glycosyle se présente sous forme furanosique et répond à la formule (III) dans laquelle: R2 et R3 forment ensemble un radical éthylidyle isopropylidyle, hexafluoroisopropylidyle, cyclopentylidyle, cyclohexylidyle, cycloheptylidyle, butylidyle, I-tertiobutyléthylidyle, benzylidyle, méthoxybenzylidyle, 1-phénylbbenzylidyle , R4 et Rs forment ensemble un radical éthylidyle, isopropylidyle, hexafluoroisopropylidyle, cyclopentylidyle, cyclohexylidyle, cycloheptylidyle, butylidyle, I-tertiobutyléthylidyle, benzylidyle, méthoxybenzylidyle, I-phénylbenzylidyle ou représentent indépendamment un radical benzyle, acétyle, benzoyle, chlorobenzoyle, méthoxybenzoyle ou nitrobenzoyle; ladite étape de couplage est réalisée en solution dans un solvant organique anhydre, à une température comprise entre -80 C et 400C, pendant une durée de 1 minute à 8 heures, en présence d'un promoteur approprié choisi parmi - une source d'ions halonium, associée ou non à un acide de Lewis ou un sel d'acide fort, dans le cas où X représente un groupement S(O)nR' tel que défini ci-dessus dans lequel n est égal à 0, - un acide de Lewis associé à une amine, dans le cas où X représente un groupement S(O)nR tel que défini ci-dessus dans lequel n est égal à 1 - un acide de Bronstedt ou un acide de Lewis, dans le cas où X représente un groupement trichloroacétimidate. le produit de réaction ainsi obtenu, neutralisé et purifié étant soumis à un traitement de déprotection pour conduire, après purification, au D laminaribiose. Il a été découvert, et ceci constitue le fondement de la présente invention, qu'il était possible de préparer par voie chimique, le D-laminaribiose, avec un nombre limité d'étapes permettant d'obtenir un rendement global relativement élevé, par un choix judicieux du donneur et de l'accepteur de glycosyle, ainsi que du promoteur utilisé lors de la réaction de couplage. Dans la description et les revendications, on entend - par radical alkyle ayant de I à 6 atomes de carbone, toute chaîne hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, comme par exemple un radical méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tertiobutyle, pentyle, isopentyle, hexyle, isohexyle, - par radical halogénoalkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, tout radical alkyle dont 1 à 7 atomes d'hydrogène ont été substitués par 1 à 7 atomes d'halogène, comme par exemple un radical chlorométhyle, un radical bromométhyle, un radical trifluorométhyle, un radical trifluoro-2,2,2-éthyle, un radical pentafluoroéthyle, un radical heptafluoropropyle, - par radical aryle, un cycle aromatique ayant 5 ou 6 atomes de carbone ou hétéroatomes, comme par exemple un radical phényle, pyridyle, thiényle, furannyle, pyrimidyle. Le donneur de glycosyle de formule (Il) précitée ainsi que l'accepteur de glycosyle de formule (III) précitée peuvent être obtenus de façon relativement aisée, en une ou deux étapes, à partir du D-glucose. Avantageusement, le donneur de glycosyle sera généralement choisi parmi les composés de formule (II) précitée dans laquelle R, représente un radical choisi dans le groupe constitué des radicaux méthyle, chlorométhyle, trifluorométhyle, tertiobutyle, phényle, chlorophényle, méthoxyphényle et nitrophényle, X représente un radical choisi dans le groupe constitué des radicaux thiométhyle, thioéthyle, thiopropyle, thiophényle, thionitrophényle, thiopyridyle. taçon générale le promoteur utilisé au cours de l'étape de couplage moisi parmi uccinnimide ou le N-iodosuccinimide, associé ou non à un acide de parmi le chlorure ferrique, le ditriflate de cuivre, le ditriflate d'étain, fluorure de bore, le tétrachlorure d'étain ou de zirconium, le triflate triflate de triméthyl- (ou de triéthyl-) silyle, ou à un sel d'acide fort flate de tétrabutylammonium, dans le cas où X représente un (O),R' tel que défini ci-dessus dans lequel n est égal à O, Lewis choisi parmi l'anhydride triflique, le chlorure ferrique, le uivre, le ditriflate d'étain, I'éthérate de trifluorure de bore, le étain ou de zirconium, le triflate de méthyle, le triflate de triméthyl yl-) silyle, associé à une amine comme en particulier la di ylpyridine, dans le cas ou X représente un groupement S(O)nR tel essus dans lequel n est égal à 1, 3ronstedt comme en particulier l'acide triflique ou l'acide paratoluène un acide de Lewis choisi parmi l'anhydride triflique, le chlorure riflate de cuivre, le ditriflate d'étain, 'éthérate de trifluorure de bore, .e d'étain ou de zirconium, le triflate de méthyle, le triflate de de triéthyl-) silyle, dans le cas où X représente un groupement idate. un mode de réalisation actuellement préféré du procédé selon le glycosyle répond à la formule (II) précitée dans laquelle nte un radical phényle , et te un radical S(O)nR dans lequel n est égal à O et R' représente un ethyle ou phényle, le glycosyle répond à la formule (III) précitée dans laquelle et R4, R5 forment ensemble un radical cyclohexylidyle ou ylidyle. ce mode de réalisation particulier, le promoteur utilisé lors de la couplage est constitué d'un mélange de N-iodosuccinimide et de n. de préférence dans des proportions comprises entre 1:0,5 et D'une façon générale, l'étape de couplage précitée est réalisée en solution dans le dichlorométhane ou le 1,2-dichloroéthane, de préférence en présence d'un tamis moléculaire, à une température comprise entre - 30"C et 300C, pendant une durée de 1 minute à 6 heures, de préférence à 10 C pendant 30 minutes. Les quantités respectives de donneur de glycosyle, d'accepteur de glycosyle et de promoteur pourront être facilement déterminées par l'homme de métier. D'une façon générale, la réaction de couplage peut etre mise en oeuvre en mettant en réaction -un équivalent d'accepteur de glycosyle -un à deux équivalents de donneur de glycosyle; -un à deux équivalents de promoteur, -dans 5 à 200 équivalents en poids, par rapport à l'accepteur, d'un solvant. Avantageusement, on utilisera un solvant organique comme le dichlorométhane ou le 1,2-dichloroéthane, en présence d'un tamis moléculaire (destiné à piéger l'acide susceptible de se former au cours de la réaction) comme par exemple un tamis moléculaire de 4 , utilisé en une quantité de 10 à 200 mg/ml de solvant. Le produit obtenu par la réaction de couplage précité est généralement neutralisé, puis purifié. La neutralisation peut être réalisée par addition d'une base organique, de préférence la triéthylamine, ou l'éthanolamine ou encore par addition d'une base inorganique de préférence l'hydrogénocarbonate ou le carbonate de sodium ou de potassium, suivi d'une filtration du sel obtenu. La purification peut être réalisée soit par chromatographie, par exemple sur colonne de gel de silice ou de charbon actif, soit par cristallisation fractionnée de préférence dans un solvant organique ou un mélange de solvants organiques comme l'éther-éthylique, l'acétate d'éthyle, le cyclohexane ou l'éthanol. Le produit de la réaction de couplage, neutralisé et purifié conduit, par un traitement de déprotection, suivi d'une purification, au D-laminaribiose. D'une façon générale, le traitement de déprotection précité comporte deux étapes, la première consistant en une déprotection partielle du produit de la réaction de couplage, par clivage des groupements acétals provenant de l'accepteur de glycosyle. Dans le cadre du procédé conforme à la présente invention, le traitement de déprotection comprend a) le clivage des groupements acétals provenant de l'accepteur du glycosyle par un traitement acide en milieu aqueux ou hydroorganique, ou en présence d'une résine acide, b) la purification du produit ainsi obtenu c) la transestérification ou l'hydrolyse du produit obtenu à l'étape b); d) la purification du produit ainsi obtenu. La réaction de clivage a) précitée sera réalisée de préférence en milieu hydro-organique acide, comme par exemple dans un mélange équivolumique d'acide trifluoroacétique et d'eau, à une température comprise entre 10 et 70"C pendant une durée de 8 heures à 3 jours et dans ce cas, le produit partiellement déprotégé obtenu sera purifié par cristallisation fractionnée de préférence dans le méthanol, ou par chromatographie. L'acide acétique, l'acide oxalique, l'acide formique peuvent également être utilisés en lieu et place de l'acide trifluoro-acétique. Dans le cadre du procédé conforme à la présente invention l'étape de transestérification c) précitée sera réalisée dans un solvant alcoolique tel que le méthanol ou l'éthanol en présence d'une quantité catalytique de sodium ou de méthylate ou d'éthylate de sodium ou de potassium, pendant une durée de 8 heures à 10 jours. Le produit de transestérification ainsi obtenu sera généralement purifié par un procédé comprenant dl) la neutralisation du produit obtenu à l'étape c) d2) I'élimination de l'ester benzoïque formé, soit par évaporation azéotropique avec l'eau, soit par extraction avec un solvant organique d3) la concentration sous pression réduite de la phase aqueuse résiduelle d4) éventuellement, la lyophilisation ou la cristallisation dans un mélange hydroalcoolique du D-laminaribiose ainsi obtenu. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention seront mieux compns à la lecture des exemples non-limitatifs suivants. Exemnle 1 : Exemnle de préparation d'un accepteur de glycosyle Dans cet exemple, I'accepteur de glycosyle, à savoir le 1,2:5,6-di-O- cyclohexylidène-&alpha;-D-glucofuranose (composé de formule III dans laquelle R2, R3 et R4, R5 représentent un radical cyclohexylidyle) a été préparé en une seule étape à partir du D-glucose. A 65 g de D-glucose (361 mmol, 1 éq) et 85 ml (820 mmol; 2,27 éq) de cyclohexanone dans 50 ml de 1,4-dioxane (587 mmol, 1,62 éq) sont additionnés goutte à goutte 20 ml (375 mmol, 1,03 éq) d'acide sulfurique concentré à température ambiante. L'addition terminée, au bout de 30 minutes, le produit précipite dans le milieu réactionnel. Le précipité est brisé, filtré et lavé à l'eau. Le produit brut est alors purifié par recristallisation dans le cyclohexane pour conduire à 104 grammes de 1,2 : 5,6-di-O-cyclohexylidène-&alpha;-D-glucofuranose. Rendement (%) : 85 Solide blanc. F( C) = 134-136 CCM : Rf @ 0,8 (dichlorométhane / méthanol (9/1; v/v)). RMN 13C (CECl3, 101 MH7) # (ppm) : 112,49, 110,32 (C quat.), 104,93 (Cl), 84,62 (C2), 81,23 (C4) , 75,39 (C3), 73,27 (C5) , 67,40 (C6) , 36,50, 36,48, 35,69, 34,65, 25,09, 24,94, 24,08, 23,95, 23,82, 23,63, (CH2). RMN 'H (CDCl3, 400 MHz) 5 (ppm) : 5,93, (d, 1H, Hi, JHI-H2 = 3,6 Hz), 4,50 (d, 1H, H2, JH2-H1 = 3,6 Hz), 4,34-4,30 (m, 2H, H3, H5), 4,14 (dd, 1H, H6, JH6H5 = 6,2 Hz, JH6-H6 = 8,6 Hz), 4,04 (dd, 1H, H4, JH4-H3 = 2,8 Hz, JH4-H5 = 7,6 Hz), 3,95 (dd, 1H, H6', JH6-H5 = 5,4 Hz, JH6-H6 = 8,6 Hz), 1,70-1,36 (m, 20H, CH2). Exemple 2 : Exemple de préparation d'un donneur de glycosyle : Dans cet exemple, le donneur de glycosyle (composé de formule II dans laquelle R1 est un phényle et X un groupe S(O)nR' dans lequel n = O et R représente un groupement éthyle) a été préparé en deux étapes. a) Préparation du 1,2,3,4,6-penta-O-benzoyl-D-flucopyranos 100 g de D-glucose (555 mmol, 1 éq) sont dissous dans 2 l de pyridine et le milieu réactionnel est chauffé à reflux pendant 1 heure puis additionné à chaud (60-70 C) de 387 ml (3330 mmol, 6 éq) de chlorure de benzoyle. Après addition, ie milieu est dilué à l'eau, le produit précipite est filtré et rincé à l'eau jusqu'à neutralité. Après séchage, il est purifié par recristallisation dans l'acétate d'éthyle. Rendement (%) : 100 Solide blanc. F( C) = 164-166 (anomère P) , 188-191 (anomère a). CCM : R, 0,3 (éther de pétrole/acétate d'éthyle (8/2 , v/v)). RMN 13C (CDC13, 101 MHz) 8 (ppm) : anomère ss : 166,17, 165,74, 165,19, 165,16, 164,66 (C=O), 92,74 (C1), 73,21, 72,85 (C3, C5) ; 70,87 (C2) ; 69,08 (C4), 62,71 (C6), anomère &alpha;: 166,15, 165,96, 165,42, 165,18, 164,47 (C=O) ; 90,08 (C1) , 70,54, 70,51, 50,45 (C2, C3, C5) , 68,83 (C4) , 62,49 (C6). RMN , H (CDCl3, 400 MH7) # (ppm) : 8,20-7,16 (m, 25H, H arom.), anomère ss : 6,30 (d, 1H, H1, JH1-H2 = 8,0 Hz) , 6,05 (t, 1H, H3, JH3-H2 = JH3-H4 = 9,5 Hz) , 5,87 (dd, 1H, H2, JH2-H1 = 8,0 Hz, JH2-H3 = 9,5 Hz) ; 5,84 (t, 1H, H4, JH4 H3 = JH4-H5 = 9,6 Hz) , 4,66 (dd, 1H, H6, JH6-H5 = 2,9 Hz, JH6-H6 = 12,3 Hz) , 4,52 (dd, 1H, H6', JH6'-H5 = 4,7 Hz, JH6'-H6 = 12,3 Hz) ; 4,41 (ddd, 1H, H5, JH5-H4 = 9,7 Hz, JH5-H6 = 3,0 Hz, JH5-H6' = 4,6 Hz) , anomére &alpha; . 6,85 (d, 1H, H1, JH1-H2 = 3,8 Hz) , 6,33 (t, 1H, H3, JH3-H2 = JH3-H4 = 10,0 Hz) , 5,88 (t, 1H, H4, JH4-H3 = JH4-H5 = 9,8 Hz), 5,69 (dd, 1H, H2, JH2-H1 = 3,8 Hz, JH2-H3 = 10,3 Hz), 4,65-4,60 (m, 2H, H5, H6), 4,48 (dd, 1H, H6', JH6'-H5 = 5,0 Hz, JH6'-H6 = 13,0 Hz). b) Préparation du 2,3,4,6-tétra-0-benzoyl-1-thio-D-glucopyranoside d'éthyle 100 g de glucose perbenzoylé (143 mmol; 1 éq) sont dissous dans 21 de dichlorométhane et le milieu réactionnel est porté au reflux puis additionné de 12,7 ml d'éthanethiol (171 mmol; 1,2 éq) et de 54,2 ml (429 mmol ; 3 éq) d'éthérate de trifluorure de bore. Après 2 heures de réaction au total, le milieu est dilué avec du dichlorométhane, lavé avec une solution d'hydrogénocarbonate de sodium à 5% puis à l'eau jusqu'à pH neutre. Le produit est recristallisé dans l'acétate d'éthyle et on recueille ainsi 73 grammes de produit. Rendement (%) : 80 Solide blanc. F ( C) = 133-134 (anomére a) CCM : Rf = 0,4 (anomère ss), 0,5 (anomère a) (éther de pétrole/acétate d'éthyle (8/2 , v/v)). RMN '3C (CDC13, 101 MHz) 5 (ppm) : 166,23, 166,18, 165,87, 165,71, 165,50, 165,38, 165,27 (C=O), anomère &alpha; : 82,10 (Cl), 71,74 (C2), 70,99 (C3), 69,62 (C4); 68,21 (C5), 63,14 (C6), 24,34 (CH2), 14,71 (CH3) , nombre Q : 84,02 (C1), 76,37 (C5), 74,19 (C3), 70,68 (C2), 69,71 (C4), 63,42 (C6), 24,47 (CH2), 15,01 (CH3). RMN 'H (CDC13, 400 MHz) 5 (ppm): 8,06-7,26 (2m, 40H, H arom.), nombre a : 6,08 (t, 1H, H3, JH3-H2 = JH3-H4 = 9,9 Hz), 5,95 (d, 1H, Hi, JHI-H2 = 5,8 Hz); 5,68 (t, 1H, H4, JH4-H3 = JH4-H5 = 9,9 Hz) , 5,51 (dd, 1H, H2, JH2-HI = 5,8 Hz, J112.,u = 10,2 Hz) 4,88 (ddd, 1H, H5, JH5-H4 = 10,2 Hz, JH5-H6 = 2,8 Hz, J1154,6 = 5,4 Hz) , 4,60 (dd, 1H, H6, JH6-H5 = 2,8 Hz, JH6-H6 = 12,2 Hz) , 4,52 (dd, 1H, H6', JH6'-H5 = 5,4 Hz, JH6'-H6 = 12,2 Hz), 2,62 (qd, 2H, CH2, J = 7,4 Hz, J = 9,6 Hz) , 1,25 (t, 3H, CH3, J = 7,4 Hz), nombre ss : 5,93 (t, 1H, H3, JH3-H2 = JH3-H4 = 9,7 Hz) , 5,68 (t, 1H, H4, JH4-H3 = JH4-H5 = 9,8 Hz) , 5,57 (t, 1H, H2, JH2-H1 = JH2-H3 = 9,7 Hz) , 4,87 (d, 1H, Hi, JH1-H2 = 10 Hz) , 4,64 (dd, 1H, H6, JH6-H5 = 3,1 Hz, JH2-H6' = 12,1 Hz), 4,50 (dd, 1H, H6', JH6'-H5 = 5,5 Hz, JH6'-H6 = 12,1 Hz) , 4,18 (ddd 1H, H5, JH5-H4 = 10,0 Hz, JH5-H6 = 3,0 Hz, JH5-H6' = 5,5 Hz), 2,77 (qd, 2H, CH2, J = 7,4 Hz, J = 9,6 Hz) , 1,26 (t, 3H, CCCCH3, J = 7,4 Hz). Exemple 3: Exemple d'une réaction de couplage selon l'invention On a réalisé une réaction de couplage entre le donneur de l'exemple 2 et l'accepteur de l'exemple 1 pour obtenir le composé nouveau suivant 2,3,4,6-tétra-O-benzoyl-ss-D-glucopyranosyl-(1# 3)-1,2:5,6-di-O cyclohexylidene-a -D-glucofuranose 64 g (100 mmol, 1,06 éq) de 2,3,4,6-tétra-O benzoyl-l-thio-Dglucopyranoside d'éthyle, 32 g (94 mmol , 1 éq) de 1,2:5,6-di-O-cyclohexylidènea-D-glucofuranose, 22,5 g (100 mmol , 1,06 éq) de N-iodosuccinimide et 400 g de tamis moléculaire 4A sont introduits dans un ballon à l'abri de la lumière puis dissous dans 400 ml de dichlorométhane anhydre à une température de 10 C, et 3,92 grammes (9,4 mmol , 0,1 éq) de ditriflate d'étain sont alors ajoutés. Après I heure de réaction, le milieu est neutralisé par de la triéthylamine, filtré, concentré et la purification sur colonne de gel de silice (flash, éluant : toluéne/acétate d'éthyle (95/5 puis 9/1: v/v)) permet de recueillir 60,5 grammes de produit. Rendement (%) : 70 Solide blanc. CCM Rf = 0,4 (toluène/acétate d'éthyle (9/1 , v/v)). RMN 13C (CDCl3, 101 MHz) # (ppm) : 166,19, 165,86, 165,20, 164,83 (C O), 112,71, 109,32 (C quat.), 104,66 (Cla), 100,08 (Clb), 82,83 (C2a); 81,68 (C3a), 80,66 (C4a), 72,79 (C3b), 72,63 (C5b), 72,46 (C5a); 71,99 (C2b), 69,57 (C4b), 66,26 (C6a) , 63,12 (C6b) , 36,43, 36,33, 35,49, 34,61, 25,23, 24,84, 24,17, 23,89, 23,86, 23,54 (CH2). RMN 'H (CDCl3, 400 MHz) 5 (ppm) : 8,03-7,26 (2m, 20H, H arom.), 5,90 (t, 1H, H3b, JH3b-H2b = JH3b-H4b = 9,6 Hz) , 5,71 (t, 1H, H4b, JH4b-H3b = JH4b-H5b = 9,6 Hz), 5,52 (dd, 1H, H2b, JH2b-H1b = 8,2 Hz, JH2b-H3b = 9,4 Hz); 5,45 (d, 1H, H1a, JH1a-H2a = 3,6 Hz), 4,99 (d, 1H, Hlb, JH1b-H2b = 7,8 Hz), 4,64 (dd, 1H, H6b, JH6b-H5b = 2,4 Hz, JH6b-H6'b = 12,2 Hz), 4,49 (dd, 1H, H6'b, JH6'b-H5b = 5,0 Hz, JH6'b- H6b = 12,2 Hz), 4,38 (q, 1H, HSa, HH5a-H4a = JH5a-H6a = JH5a-H6'a = 6,1 Hz); 4,35 (d, 1H, H3a, JH3a-H4a = 3,0 Hz), 4,32 (d, 1H, H2a, JH2a-H1a = 3,6 Hz) ; 4,18 (dd, 1H, H4a, JH4a-H3a = 2,9 Hz, JH4a-H5a = 6,3 Hz); 4,11 (ddd, 1H, H5b, JH5b-H4b = Hz, JH5b- H6b = Hz, JH5b-H6'b = Hz) ; 4,03 (dd, 1H, H6a, JH6a-H5a = 6,8 Hz, JH6a-H6'a = 8,3 Hz); 3,94 (dd, 1H, H6'a, JH6'a-H5a = 5,6 Hz, JH6'a-H6a = 8,3 Hz); 1,62-1,30 (m, 20H, CH2). Exemple 4 : Autre exemnle d'une réaction de couplage selon l'invention Dans cet exemple, on a préparé par une réaction de couplage le 2,3,4,6-tétra-O-benzoyl-ss-D glucopyrannosyl-(1#3)- 1,2:5,6-di-O-isopropylidène &alpha;-D-glucofuranose Dans cet exemple, le composé accepteur de glycosyle est le diacétone Dglucose qui peut être facilement obtenu à partir du D-glucose et de l'acétone. 64 g (100 mmol, 1,06 éq) de 2,3,4,6-tétra-O-benzoyl- 1 -thio-D- glucopyranoside d'éthyle préparé à l'exemple 2, 24,5 g (94 mmol , 1 éq) de diacétone-D-glucose, 22,5 g (100 mmol, 1,06 éq) de N-iodosuccinimide et 400 g de tamis moléculaire 4A sont introduits dans un ballon à l'abri de la lumière puis dissous dans 400 ml de dichlorométhane anhydre. Le milieu réactionnel est refroidi à 0 C et additionné de 3,92 g (9,4 mmol , 0,1 éq) de ditriflate d'étain. Aprés 20 minutes de réaction, le milieu est neutralisé par de la triéthylamine, filtré, concentré et la purification sur colonne de gel de silice (flash, éludant dichlorométhane/acétate d'éthyle (95/5: v/v)) permet de recueillir 28 grammes de produit. Rendement (%): 35 Solide blanc. F ( C) = 90-94 CCM : Rf = 0,5 (toluène/acétate d'éthyle (8/2, v/v)). RMN 13C (CDCl3, 101 MHz) # (ppm) : 166,16, 165,85, 165,19, 164,81 (C =0); 112,00, 108,72 (C quat.), 104,99 (Cla); 99,99 (Clb), 82,78 (C2a); 81,48 (C3a), 80,47 (C4a), 73,05 (C5a), 72,72 (C3b), 72,65 (C5b) ; 71,85 (C2b), 69,54 (C4b), 66,25 (C6a), 62,98 (C6b), 26,73, 26,67, 26,03, 25,15 (CH3). RMN 'H (CDCl3, 400 MHz) 6 (ppm) : 8,03-7,26 (2m, 20H, H arom.); 5,90 (t, 1H, H3b, JH3b-H2b = JH3b-H4b = 9,7 Hz), 5,71 (t, 1H, H4b, JH4b-H3b = JH4b-H5b = 9,7 Hz), 5,50 (dd, 1H, H2b, JH2b-H1b = 7,8 Hz, JH2bH3b = 9,7 Hz), 5,48 (d, 1H, H1a, JH1a-H2a = 3,7 Hz) , 4,98 (d, 1H, Hlb, JH1bb-H2b = 7,8 Hz), 4,66 (dd, 1H, H6b, JH6b-H5b = 3,2 Hz, JH6b-H6'b = 12,2 Hz) , 4,50 (dd, 1H, H6'b, JH6'b-H5b = 5,1 Hz, JH6'b- H6b = 12,2 Hz) , 4,38 (m, 1H, H5a) , 4,34 (d, 1H, H2a, JH2a-H1a = 3,7 Hz); 4,33 (d, 1H, H3a, JH3a-H4a = 3,2 Hz) , 4,23 (dd, 1H, H4a, JH4a-H3a = 3,2 H7, JH4a-H5a = 5,5 Hz), 4,16 (ddd, 1H, H5b, JH5b-H4b = 9,7 Hz, JH5b-H6b = 3,2 Hz, JH5b-H6'b = 5,1 Hz), 4,04 (dd, 1H, H6a, JH6a-H5a = 6,5 Hz, JH6a-H6'a = 8,6 Hz) , 3,97 (dd, 1H, H6'a, JH6'a- H5a = = 5,7 Hz, JH6'a-H6a = 8,6 Hz) , 1,42, 1,37, 1,25, 1,12 (4s, 12H, CH3). ExemDle 5 : Cet exemple illustre la réaction de déDrotection conduisant au D-laminaribiose réalisée en deux étaDes selon l'invention tar-O-benzoyl-ss-D-glucopyranosyl- -(1#3)-D-glucopyranose de 2,3,4,6-tétra-O-benzoy-ss-D-glucopyranosyl-(1#3)-D- préparé à l'exemple 3 sont dissous dans 600 ml d'un mélange d'acide trifluoroacétique et d'eau auquel a été ajouté 60 ml de le pour obtenir une bonne dissolution du produit dans le milieu rés I jour de réaction à 40 C, le produit est précipité par dilution du nel avec de l'eau, filtré, rincé à l'eau jusqu'à neutralité, séché et stallisation dans le méthanol. On obtient ainsi 54 g du produit ment (%): 80 blanc. Rf = 0,6 (dichlorométhane/méthanol (9/1; v/v)). '3C (pyr. d5, 101 MHz) 5 (ppm) : 166,28, 166,25, 166,08, 166,03, 165,67 (C=O), anomére : 102,05 (Clb), 98,52 (Cla), 86,49 re a. 101,88 (Clb), 93,78 (Cla), 84,51 (C3a), 77,78, 75,97, 73,19, 73,15, 73,09, 72,26, 72,23, 70,50, 70,46, 69,71, 69,64; 6b) ; 62,57, 62,48 (C6a). b) Obtention du D-laminaribiose 2,7 mmol, 1 éq) de 2,3,4,6-tetra-O-benzoyl-ss-D-glucopyranosyl- pyranose sont traités par 1 I d'une solution de méthylate de sodium um) préalablement préparée en dissolvant 6 g de sodium dans 40 1 de méthanol anhydre. Après 4 jours de réaction à 35 C, le milieu est dilué avec de l'eau puis neutralisé avec de la résine acide IR 120, filtré et concentré. Après lyophilisation, 18 g de D-laminaribiose sont recueillis. Le produit peut etre cristallisé dans un mélange méthanol-eau ou éthanol-eau. Rendement (%) :100 Solide blanc. F ( C) = 199-204 (éthanol-eau, Bächli, Percival, J. Chem. Soc., 1952, 1243 196-206 , Takeo, Carbohydr. Res., 1979, 77, 245 : 202-204). F ( C) = 124-130 (laminaribiose lyophilisé). [a]D20 = + 19,30 (20 min) + 18,70 (24 h; c = 1,0; eau) (Takeo, Carbohydr. Res., 1979, 77, 245 : [&alpha;]D20 = + 15,50 (10 min) O+ 18,60 (24 h; c = 2,3 , eau)). CCM : Rf = 0,1 (acétate d'éthyle/isopropanol/méthanoVeau (10/6/1/1; v/v). RMN 13C (DMSO d6, 101 MHz) 5 (ppm): anomére ss : 104,16 (Clb); 96,33 (Cla), 88,43 (C3a), nombre a: 104,04 (C1b) ; 91,78 (Cla), 85,19 (C3a); 76,93, 76,87, 76,24, 76,10, 76,07, 73,87, 73,84, 73,50, 71,90, 70,90, 70,18, 70,13, 68,66, 68,57, 61,10, 60,92. Exemple 6: Caractérisation du D-laminaribiose Afin de caractériser le produit obtenu, le laminaribiose synthétisé a été acétylé en présence d'anhydride acétique (12 éq) dans la pyridine puis r [&alpha;]D20 = - 270 (c = 1,0 , chloroforme) (Takeo, Carbohydr. Res., 1979, 77, 245: [&alpha;]D20 =- 27,6 (c = 1,2 , chloroforme)). CCM : Rf= 0,3 (toluène/acétate d'éthyle (1/1 , v/v)). RMN '3C (CDCI3, 101 MHz) 5 (ppm) : 170,79, 170,57, 170,45, 169,38, 169,37, 169,29, 169,20, 168,92 (C=O), 101,02 (Clb), 91,80 (C la); 78,92 (C3a), 72,98, 72,87 (C5a, C3b ou vice versa); 71,15 (C2b), 67,99 (C4b); 67,56 (C4a) , 61,73, 61,71 (C6a, C6b ou vice versa), 20,91, 20,88, 20,84, 20,74, 20,64, 20,62, 20,52, 20,39 (CH3). RMN 'H (CDCI3, 400 MHz) 5 (ppm) : 5,61 (d, 1H, Hla, JH1a-H2a = 8,4 Hz); 5,13 (t, 1H, H3b, JH3b-H2b = JH3b-H4b = 9,4 Hz); 5,12 (dd, 1H, H2a, JH2a-H1a = 8,4 Hz, JH2a-H3a = 9,5 Hz), 5,06 (t, 1H, H4b, JH4b-H3b = JH4b-H5b = 9,6 Hz), 5,01 (t, 1H, H4a, JH4a-H3a = JH4a-H5a = 9,6 Hz) , 4,90 (dd, 1H, H2b, JH2b-H1b = 8,1 Hz, JH2b-H3b = 9,3 Hz); 4,59 (d, 1H, Hlb, JH1b-H2b = 8,1 Hz); 4,37 (dd, 1H, H6a, JH6a-H5a = 4,3 Hz, JH6a-H6'a = 12,4 Hz), 4,21 (dd, 1H, H6b, JH6b-H5b = 4,6 Hz, JH6b-H6'b = 12,4 Hz), 4,13 (dd, 1H, H6'b, JH6'b-H5b = 2,2 Hz, JH6'b-H6b = 12,4 Hz); 4,05 (dd, 1H, H6'a, JH6'a-H5a = 2,2 Hz, JH6'a-H6a = 12,4 Hz); 3,93 (t, 1H, H3a, JH3a-H2a = JH3a-H4a = 9,4 Hz) 3,78 (ddd, 1H, H5a, JH5a-H4a = 10,1 Hz, JH5a-H6a = 2,2 Hz, JH5a-H6'a = 4,6 Hz); 3,68 (ddd, 1H, H5b, JH5b-H4b = 9,9 Hz, JH5b-H6b = 4,3 Hz, JH5b-H6'b = 2,3 Hz); 2,12, 2,09, 2,08, 2,03, 2,00, 1,98 (6s, 24H, CH3). REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation du D-laminaribiose comprenant une étape de couplage glycosidique entre un donneur et un accepteur de glycosyle, caractérisé en ce que: le donneur de glycosyle se présente sous forme pyranosique et répond à la formule (Il) dans laquelle R, représente: - un radical alkyle ou halogénoalkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, - un radical aryle non substitué ou substitué par un ou plusieurs groupements choisis parmi un atome d'halogène, un radical alcoxy ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un groupement nitro X représente un groupe partant nucléofuge choisi parmi - un groupement de formule S(O)nR' dans laquelle R représente un radical alkyle ayant de I à 6 atomes de carbone, un radical aryle non substitué ou substitué par un groupement alcoxy ayant de I à 6 atomes de carbone, un groupement nitro ou acétamide, et n est un nombre entier égal à O ou 1 - un groupement trichloroacétimidate I'accepteur de glycosyle se présente sous forme fbranosique et répond à la formule (111) dans laquelle R2 et R, forment ensemble un radical éthylidyle isopropylidyle, hexafluoroisopropylidyle, cyclopentylidyle, cyclohexylidyle, cycloheptylidyle, butylidyle, I-tertiobutyléthylidyle, benzylidyle, méthoxybenzylidyle, 1-phénylbenzylidyle; R4 et Rs forment ensemble un radical éthylidyle isopropylidyle, hexafluoroisopropylidyle, cyclopentylidyle, cyclohexylidyle, cycloheptylidyle, butylidyle, I-tertiobutyléthylidyle, benzylidyle, méthoxybenzylidyle, I-phénylbenzylidyle ou représentent indépendamment un radical benzyle, acétyle, benzoyle, chlorobenzoyle, méthoxybenzoyle ou nitrobenzoyle; ladite étape de couplage est réalisée en solution dans un solvant organique anhydre, à une température comprise entre -80 C et 40 C, pendant une durée de 1 minute à 8 heures, en présence d'un promoteur approprié choisi parmi - une source d'ions halonium, associée ou non à un acide de Lewis ou un sel d'acide fort, dans le cas où X représente un groupement S(O)nR tel que défini ci-dessus dans lequel n est égal à 0, - un acide de Lewis associé à une amine, dans le cas ou X représente un groupement S(O)nR tel que défini ci-dessus dans lequel n est égal à 1, - un acide de Bronstedt ou un acide de Lewis, dans le cas où X représente un groupement trichloroacétimidate. le produit de réaction ainsi obtenu, neutralisé et purifié étant soumis à un traitement de déprotection pour conduire, après purification, au laminaribiose. 2. Procedé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le donneur de glycosyle répond à la formule (II) précitée dans laquelle R, représente un radical choisi dans le groupe constitué des radicaux méthyle, chlorométhyle, trifluorométhyle, tertiobutyle, phényle, chlorophényle, méthoxyphényle et nitrophényle X représente un radical choisi dans le groupe constitué des radicaux thiométhyle, thioéthyle, thiopropyle, thiophényle, thionitrophényle, thiopyridyle. 3. Procédé selon la revendication I ou 2, caractérisé en ce que le promoteur précité est choisi parmi - le N-bromosuccinimide ou le N-iodosuccinimide, associé ou non à un acide de Lewis choisi parmi le chlorure ferrique, le ditriflate de cuivre, le ditriflate d'étain, I'éthérate de trifluorure de bore, le tétrachlorure d'étain ou de zirconium, le triflate de méthyle, le triflate de triméthyl- (ou de triéthyl-) silyle, ou à un sel d'acide fort tel que le triflate de tétrabutylammonium, dans le cas où X représente un groupement S(O)nR' tel que défini ci-dessus dans lequel n est égal à O, - un acide de Lewis choisi parmi l'anhydride triflique, le chlorure ferrique, le ditriflate de cuivre, le ditriflate d'étain, I'éthérate de trifluorure de bore, le tétrachlorure d'étain ou de zirconium, le triflate de méthyle, le triflate de triméthyl (ou de triéthyl-) silyle, associé à une amine comme en particulier la ditertiobutylméthylpyridine, dans le cas où X représente un groupement S(O)nR' tel que défini ci-dessus dans lequel n est égal à 1, - un acide de Bronstedt comme en particulier l'acide triflique ou l'acide paratoluène sulfonique ou un acide de Lewis choisi parmi l'anhydride trîflique, le chlorure ferrique, le ditriflate de cuivre, le ditriflate d'étain, I'éthérate de trifluorure de bore, le tétrachlorure d'étain ou de zirconium, le triflate de méthyle, le triflate de triméthyl- (ou de triéthyl-) silyle, dans le cas où X représente un groupement trichloroacétimidate. 4. Procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé en ce que le donneur de glycosyle répond à la formule (Il) précitée dans laquelle R1 représente un radical phényle , et X représente un radical S(O)nR' dans lequel n est égal à O et R' représente un radical éthyle ou phényle I'accepteur de glycosyle répond à la formule (III) précitée dans laquelle R2, R3 et R4, Rs forment ensemble un radical cyclohexylidyle ou isopropylidyle. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le promoteur précité est un mélange de N-iodosuccinimide et de ditriflate d'étain de préférence dans des proportions comprises entre 1:0,5 et 1:0,005. 6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le traitement de déprotection précité comprend a) le clivage des groupements acétals provenant de l'accepteur du glycosyle par un traitement acide en milieu aqueux ou hydroorganique, ou en présence d'une résine acide, b) la purification du produit ainsi obtenu c) la transestérification ou l'hydrolyse du produit obtenu à l'étape b); d) la purification du produit ainsi obtenu. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que l'étape a) précitée est réalisée par la mise en réaction du produit de couplage neutralisé et purifié dans un mélange, de préférence équivolumique, d'acide trifluoroacétique et d'eau à une température comprise entre 10 et 70 "C pendant une durée de 8 heures à 3 jours et en ce que l'étape de purification b) précitée est réalisée par cristallisation fractionnée, de préférence dans le méthanol. 8. Procédé selon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce que l'étape de transestérification précitée est réalisée dans un solvant alcoolique tel que le méthanol ou l'éthanol, en présence d'une quantité catalytique de sodium ou de méthylate ou d'éthylate de sodium ou de potassium pendant une durée de 8 heures à 10 jours et en ce que l'étape de purification d) précitée comprend dl) la neutralisation du produit obtenu à l'étape c) d2) I'élimination de l'ester benzoïque formé, soit par évaporation azéotropique avec l'eau, soit par extraction avec un solvant organique d3) la concentration sous pression réduite de la phase aqueuse résiduelle d4) éventuellement, la lyophilisation ou la cristallisation dans un mélange hydroalcoolique du D-laminaribiose ainsi obtenu. 9. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'étape de couplage précitée est réalisée en solution dans le dichlorométhane ou le 1,2-dichloroéthane, de préférence en présence d'un tamis moléculaire, à une température comprise entre - 300C et 30"C, pendant une durée de I minute à 6 heures, de préférence à 10"C pendant 3.0 minutes. 10. Intermédiaires de synthèse du D-laminaribiose caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi les composés suivants 2,3,4,6-tétra-O-benzoyl-ss-D-glucopyranosyl-(1o3)- 1,2: 5,6-di-O- cyclohexylidène-a -D-glucofuranose 2,3,4,6-tétra-O-benzoyl-ss-D-glucopyranosyl-(1#3)-D-glucopyranose: