Brevet FR2777291A1 — publié le 19991015

La présente invention a pour objet une nouvelle métalloprotéase membranaire appelée NEP II et son utilisation, notamment pour le criblage d'inhibiteurs utiles en thérapie. Les métalloprotéases membranaires telles que le néprilysine (NEP I, EC 3.4.24.11) jouent un rôle important dans l'activation ou l'inactivation des messagers peptidiques neuronaux ou hormonaux. Leur inhibition sélective par des composés synthétiques a déjà conduit à des médicaments couramment utilisés en thérapeutique ou en cours de développement clinique, notamment dans les domaines gastroentérologique (Baumer et coll., Gut, 1992, 33 . 753758) et cardiovasculaire (Gros et coll., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88 4210-4214). L'isolement des ADNc de gènes de nouvelles métalloprotéases apparentées est de nature à permettre le développement de nouvelles classes d'inhibiteurs spécifiques à applications thérapeutiques prometteuses. C'est ainsi que le clonage et l'expression du gène de l'enzyme de conversion de l'endothéline (ECE) (Xu et coll., Cell, 1994, 78 : 473485) a permis la mise au point d'inhibiteurs potentiellement utiles dans certaines affections cardiovasculaires. Les travaux des inventeurs ayant conduit à la présente invention ont mis en évidence une nouvelle métalloprotéase membranaire appartenant à la famille ECEINEPIKell (Lee S. et coll., 1991, PNAS 88(14):6353-57), qu'ils ont appelée NEP II. La présente invention a donc pour objet un polypeptide isolé dont la séquence d'acides aminés est choisie parmi la séquence SEQ ID n"2, une séquence dérivée ou homologue de ladite séquence SEQ ID n"2, ou un fragment biologiquement actif de ladite séquence SEQ ID n"2, ledit polypeptide isolé étant désigné par NEP Il La séquence SEQ ID n" 2 est la séquence d'acides aminés de NEP II identifiée chez le rat. Par polypeptide "dérivé", on entend tout polypeptide résultant d'une modification de nature génétique etlou chimique de la séquence SEQ ID n" 2, c'est-à-dire par mutation, délétion, addition, substitution et/ou modification chimique d'au moins un acide aminé, ou toute isoforme ayant une séquence identique à la séquence SEQ ID n" 2 mais contenant au moins un acide aminé sous la forme D. Par polypeptide "homologue", on entend plus particulièrement tout polypeptide isolable chez d'autres espèces de mammifères que le rat, et notamment chez l'homme. Lesdits polypeptides homologues présentent préférentiellement une homologie de séquence supérieure à 80 %, de préférence encore supérieure à 85 %, avec la séquence SEQ ID n" 2 complète, l'homologie étant particulièrement élevée dans la partie centrale dudit polypeptide. Lesdits polypeptides dérivés, homologues ou les fragments polypeptidiques du polypeptide de séquence SEQ ID n" 2 sont biologiquement actifs, c'est-à-dire présentent des propriétés biologiques identiques ou similaires des propriétés biologiques du polypeptide NEP II de séquence SEQ ID n" 2, à savoir une activité métalloprotéasique. Les fragments polypeptidiques préférés comprennent la séquence du site actif responsable de la liaison de l'atome de zinc indispensable à la catalyse. Ce site actif a été identifié comme englobant les résidus HEX1X2H, X1 et X2 représentant des acides aminés variables. Il s'agit en particulier de la séquence HEITH (acides aminés 608 à 612 de la séquence SEQ ID n" 2) dans le polypeptide NEP II chez le rat. La présente invention a également pour objet une séquence nucléotidique isolée comprenant une séquence choisie parmi la séquence SEQ ID n 1, une séquence dérivée ou homologue de ladite séquence SEQ ID n 1, ou leurs séquences complémentaires. La séquence SEQ ID n" 1 est la séquence d'ADNc comprenant la phase codante pour NEP II identifiée chez le rat. Par séquence nucléotidique "dérivée", on entend toute séquence nucléotidique codant pour un polypeptide dérivé de NEP II tel que défini précédemment, c'est-à-dire une séquence résultant d'une modification de la séquence SEQ ID n" 1, notamment par mutation, délétion, addition ou substitution d'au moins un nucléotide. Sont en particulier comprises les séquences dérivées de la séquence SEQ ID n" 1 par dégénérescence du code génétique. Par séquence "homologue", on entend plus particulièrement toute séquence nucléotidique codant pour un polypeptide NEP II homologue du polypeptide NEP Il de séquence SEQ ID n" 2 chez d'autres espèces de mammifères que le rat, et notamment chez l'homme. Une telle séquence homologue présente préférentiellement une homologie supérieure à 70 %, de préférence encore supérieure à 75 %, avec la séquence SEQ ID n" 1,1'homologie étant particulièrement élevée dans la partie centrale de la séquence codant pour le polypeptide NEP II. Les séquences nucléotidiques selon l'invention peuvent être utilisées pour la production d'une protéine recombinante NEP II selon l'invention, selon des techniques de production de produits recombinants connues de l'homme du métier. Un système efficace de production d'une protéine recombinante nécessite de disposer d'un vecteur, par exemple d'origine plasmidique ou virale, et d'une cellule hôte compatible. L'hôte cellulaire peut être choisi parmi des systèmes procaryotes, comme les bactéries, ou eucaryotes, comme par exemple des levures, des cellules d'insectes, de mammifères, telles que les cellules CHO (cellules d'ovaires de hamster chinois) ou tout autre système avantageusement disponible. Le vecteur doit comporter un promoteur, des signaux d'initiation et de terminaison de la traduction, ainsi que les régions appropriées de régulation de la transcription. II doit pouvoir être intégré dans la cellule et peut éventuellement posséder des signaux particuliers spécifiant la sécrétion de la protéine traduite. Ces différents signaux de contrôle sont choisis en fonction de l'hôte cellulaire utilisé. A cet effet, les séquences nucléotidiques selon l'invention peuvent être insérées dans des vecteurs à réplication autonome au sein de l'hôte choisi, ou des vecteurs intégratifs de l'hôte choisi. De tels vecteurs seront préparés selon les méthodes couramment utilisées par l'homme du métier, et les clones en résultant peuvent être introduits dans un hôte approprié par des méthodes standard, telles que par exemple l'électroporation. Des exemples de vecteurs d'intérêt sont les plasmides pcDNA 3.1. PCR2.1 (Invitrogen), ou pMbac (Stratagene). L'invention vise les vecteurs de clonage et/ou d'expression contenant une séquence nucléotidique selon l'invention, et vise en outre les cellules hôtes transfectées par ces vecteurs. Ces cellules peuvent être obtenues par l'introduction dans des cellules hôtes d'une séquence nucléotidique insérée dans un vecteur tel que défini ci-dessus, puis la mise en culture desdites cellules dans des conditions permettant la réplication et/ou l'expression de la séquence nucléotidique transfectée. Ces cellules sont utilisables dans une méthode de production d'un polypeptide recombinant selon l'invention. La méthode de production d'un polypeptide de l'invention sous forme recombinante est elle-même comprise dans la présente invention, et se caractérise en ce que l'on cultive les cellules transfectées dans des conditions permettant l'expression d'un polypeptide recombinant selon l'invention, et que l'on récupère ledit polypeptide recombinant. Les procédés de purification utilisés sont connus de l'homme du métier. Le polypeptide recombinant peut être purifié à partir de lysats et extraits cellulaires, du surnageant du milieu de culture, par des méthodes utilisées séparément ou en combinaison, telles que le fractionnement, les méthodes de chromatographie, les techniques d'immunoaffinité à l'aide d'anticorps monoclonaux ou de sérum polyclonal, etc. La présente invention a également pour objet les sondes nucléotidiques, capables de s'hybrider fortement et spécifiquement avec une séquence d'acide nucléique, d'un ADN génomique ou d'un ARN messager, codant pour un polypeptide selon l'invention. Les conditions d'hybridation appropriées correspondent aux conditions de température et de force ionique usuellement utilisées par l'homme du métier (Sambrook et al., 1989), de préférence à des conditions de forte stringence, c'est-à-dire des conditions de température comprises entre (Tm moins 5 C) et (Tm moins 15 C) et de préférence encore, à des conditions de température comprises entre Tm et (Tm moins 10 C) (forte stringence), Tm étant la température théorique de fusion, définie comme étant la température à laquelle 50 % des brins appariés se séparent. Les sondes préférées sont notamment les sondes oligonucléotidiques choisies parmi les séquences : - SEQ ID n 3; - SEQ ID n 4 ; - SEQ ID n 5 ; - SEQ ID n 6 ; - SEQ ID n 7 ; - SEQ ID n 8 ; - SEQ ID n 9 ; - SEQ ID n 10 ; - SEQ ID n 11 ; - SEQ ID n 12 ; - SEQ ID n 13 ; - SEQ ID n 14 ; - SEQ ID n 15 ; - SEQ ID n 16 ; - SEQ ID n 17 ; - SEQ ID n 18 ; - SEQ ID n 19 . De telles sondes sont utiles pour des réactions de séquençage ou d'amplification spécifique selon la technique dite de PCR (réaction en chaîne par polymérase) ou toute autre variante de celle-ci. De telles sondes sont également utiles dans un procédé de détection de l'expression du polypeptide NEP II dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu par hybridation in situ, comprenant les étapes consistant à: - préparer 'ARN dudit échantillon ou desdites cellules ou dudit tissu; - mettre en contact ledit ARN obtenu avec au moins une sonde ayant une séquence nucléotidique capable de s'hybrider spécifiquement avec une séquence nucléotidique selon l'invention, ladite sonde pouvant être notamment une sonde oligonucléotidique de séquence SEQ ID n" 3 à SEQ ID n" 19; - détecter la présence d'ARNm hybridant avec ladite sonde indicatrice de l'expression du polypeptide NEP II. L'invention a également pour objet les anticorps mono- ou polyclonaux ou leurs fragments, anticorps chimériques ou immunoconjugués, caractérisés en ce qu'ils sont obtenus à partir d'un polypeptide selon l'invention administré à un animal, et sont capables de reconnaître spécifiquement un polypeptide selon l'invention. L'invention a en outre pour objet l'utilisation de ces anticorps pour la purification ou la détection d'un polypeptide NEP II dans un échantillon biologique. Les anticorps polyclonaux peuvent être obtenus à partir du sérum d'un animal immunisé contre la protéine NEP II, produite par exemple par recombinaison génétique suivant la méthode décrite ci-dessus, selon les modes opératoires usuels. Les anticorps monoclonaux peuvent être obtenus selon la méthode classique de culture d'hybridomes décrite par Kôhler et Milstein (Nature, 1975, vol. 256, pp 495-497). Les anticorps peuvent être des anticorps chimériques, des anticorps humanisés, des fragments Fab et F(ab')2. Ils peuvent également se présenter sous forme d'immunoconjugués ou d'anticorps marqués. Les anticorps selon l'invention sont particulièrement utiles pour détecter la présence de NEP II. La présente invention a donc pour objet un procédé de détection immunologique de NEP II dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu comprenant les étapes consistant à: - mettre en contact ledit échantillon cellulaire ou tissulaire, lesdites cellules ou ledit tissu avec un anticorps détectable selon l'invention - détecter la présence dudit anticorps, indicatrice de la présence du polypeptide NEP II. Par "anticorps détectable", on entend soit un anticorps marqué par un groupement détectable, tel qu'un groupement radioactif, enzymatique, fluorogène ou fluorescent, etc., soit un anticorps auquel se lie un autre anticorps lui-même marqué de manière détectable. Les anticorps selon l'invention peuvent ainsi permettre d'évaluer une surexpression du polypeptide Il, qui peut être indicatrice de cellules tumorales neuroendocriniennes notamment. L'invention a également pour objet un procédé d'identification de composés substrats du polypeptide NEP II tel que défini précédemment, dans lequel on met en contact lesdits composés, éventuellement marqués, avec le polypeptide NEP II, et on évalue la coupure desdits composés par NEP Il, indicatrice de l'activité métalloprotéasique de NEP II envers lesdits composés substrats. De tels substrats spécifiques de NEP II peuvent être en particulier utilisés dans un procédé de détection de l'activité métalloprotéasique de NEP II dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu comprenant les étapes consistant à: - mettre en contact ledit échantillon cellulaire ou tissulaire, lesdites cellules ou ledit tissu avec un composé substrat du polypeptide NEP Il obtenu selon l'invention, ledit composé substrat étant éventuellement marqué; - évaluer la coupure dudit composé substrat, indicatrice de l'activité métalloprotéasique de NEP II. Les cellules susceptibles d'être ainsi testées sont notamment les cellules transfectées par un polynucléotide codant pour le polypeptide NEP II tel que défini précédemment. Les extraits tissulaires susceptibles d'être testés sont en particulier les membranes de testicule, particulièrement riches en métalloprotéase NEP II. L'invention a par ailleurs pour objet un procédé de criblage de composés susceptibles d'inhiber l'activité métalloprotéasique du polypeptide NEP II selon l'invention, dans lequel on met en contact lesdits composés avec ledit polypeptide NEP Il et on évalue le taux d'inhibition de l'activité métalloprotéasique de NEP II. Les composés susceptibles d'inhiber l'activité métalloprotéasique de NEP II sont de préférence des peptides courts de 2 ou 3 acides aminés naturels ou modifiés. Les peptides synthétiques identifiés comme inhibiteurs de l'activité métalloprotéasique de NEP II par ce procédé de criblage peuvent être couplés à un groupe chélateur de zinc tels que les groupes thiol, phosphate ou acide hydroxamique, selon les techniques classiques connues de l'homme du métier. Le composé inhibiteur obtenu est un bon candidat en tant que principe actif d'un médicament, en association avec un véhicule pharamceutiquement acceptable. Ledit groupe chélateur peut éventuellement être protégé de manière transitoire, par exemple par un ester de thiol, pour améliorer la biodisponibilité dudit principe actif. Le polypeptide NEP II selon l'invention est particulièrement utile pour le criblage de composés inhibiteurs de l'activité métalloprotéasique de NEP II utiles pour la fabrication de médicament destiné à traiter les troubles impliquant les transmissions peptidergiques auxquelles participe NEP II. Parmi les troubles en cause, on peut citer notamment les maladies cardiovasculaires, neurodégénératives, les troubles de la croissance d'origine endocrinienne, les perturbations de l'axe hypothalamo-hypophysaire et les affections endocriniennes. Les composés substrats de NEP Il ou inhibiteurs de l'activité métalloprotéasique de NEP II obtenus selon les procédés décrits précédemment peuvent également être utiles pour détecter la protéine NEP II. La présente invention a donc également pour objet un procédé de détection de NEP II dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu comprenant les étapes consistant à: - mettre en contact ledit échantillon cellulaire ou tissulaire, lesdites cellules ou ledit tissu avec un composé substrat du polypeptide NEP II obtenu tel que défini précédemment ou avec un composé inhibiteur de l'activité métalloprotéasique de NEP II obtenu selon le procédé de criblage tel que défini précédemment, ledit composé substrat ou ledit composé inhibiteur étant marqué; - détecter la présence dudit composé substrat ou dudit composé inhibiteur, indicatrice de la présence du polypeptide NEP II Par "composé substrat marqué" ou "inhibiteur marqué", on entend un composé substrat ou un composé inhibiteur marqué de manière détectable, par exemple par un groupement radioactif, enzymatique, fluorogène ou fluorescent, etc. Les exemples suivants illustrent l'invention sans la limiter. Exemple 1: Clonaae de l'ADNc codant Dour NEP II Des oligonucléotides dégénérés ont été obtenus à partir de l'alignement des séquences peptidiques des enzymes ECE, NEP I et Kell et de la délimitation des zones de forte homologie. L'ARN total de différents tissus de rat (cerveau, intestin et testicules) a été soumis à une transcription inverse (RT) et amplifié par réaction en chaîne à la polymérase (PC R), à l'aide d'une paire d'oligonucléotides dégénérés sur la région N-terminale riche en résidus cystéine: Les séquences de ces oligonucléotides dégénérés sont les suivantes: DCYS2 CCC AAG (GTT)CG (A/G)G(AJG) CTG GTC DCYS3 T(A/T)(CTT) GC(AIC/TIG) GG(A/T) GG(A/C) TGG Ceci a permis d'amplifier un fragment de 420 paires de bases à partir de l'ARNt de testicule codant pour une phase ouverte de lecture qui présente une homologie de 76% avec la protéine NEP I. Cette séquence a été complétée par 3' et 5' RACE (rapid amplification of cDNA ends), à partir d'ARNt de cerveau de de testicules. Les séquences ont été confirmées par la vérification de cinq clones différents pour chaque tissu et chaque amplification. L'ADNc complet (SEQ ID n" 1) a alors été cloné dans les vecteurs PCR2.1 et pcDNA3.1 (Invitrogen). Exemple 2: Caractéristiques du polvoeptide NEP II Le nouveau gène isolé code pour une protéine de 774 acides aminés (SEQ ID n" 2) qui, outre de fortes homologies avec les enzymes NEP I, ECE et Kell (52%, 40% et 28% d'identité en acides aminés, respectivement) possède la séquence consensus du site actif HEXXH, une région transmembranaire (acides aminés 24 à 40 sur la séquence SEQ ID n" 2) suivie de quatre résidus cystéine caractéristiques de cette famille, et sept sites potentiels de glycosylation. Trois épissages alternatifs ont été identifiés par séquençage des RACE et par RT-PCR. Un de ces épissages alternatifs élimine un site potentiel de glycosylation et pourrait affecter le transit de la protéine à la surface de la cellule ou son activité. Chaque épissage correspond par ailleurs à un exon de la NEP I, ce qui suggère une structure de gène similaire. Ces données démontrent une appartenance de cette nouvelle enzyme à la famille des métalloprotéases ECEINEPIKell. Son homologie marquante avec NEP I a conduit à la nommer NEP II. Exemple 3: Exoression tissulaire de NEP II Des études de Northern-blot et de RT-PCR montrent que NEP II est codé par un transcrit de 2,8 Kb très fortement exprimé dans les testicules de rat et, modérément, dans le coeur, le foie, le système digestif et le cerveau. Des études de RT-PCR semi-quantitatives montrent un profil d'expression similaire dans ces tissus ainsi qu'une prédominance des formes longues. Toutes ces caractéristiques indiquent clairement que la protéine identifiée pour la première fois est une métalloprotéase membranaire (ectoprotéase) responsable du métabolisme de peptides messagers neuronaux et/ou hormonaux. Le polypeptide NEP II natif est exprimé de manière hétérogène dans le système nerveux, les glandes (hypophyse, testicule), I'appareil digestif (intestin grêle notamment), l'appareil cardiovasculaire (coeur notamment). Ces localisations indiquent sa participation dans la protéolyse d'hormones et de neurotransmetteurs peptidergiques ou de leurs précurseurs émanant de ou agissant sur ces divers organes. II devient dès lors intéressant dans un but thérapeutique d'affecter les transmissions peptidergiques correspondantes en inhibitant NEP II. LISTE DE SEQUENCES r1) INFORMATION GENERALE: (i) DEPOSANT: (A) NOM: Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (B) RUE: 101 rue de Tolbiac (C) VILLE: Paris (E) PAYS: France (F) CODE POSTAL: 75013 (ii) TITRE DE L'INVENTION: Nouvelle métalloprotéase NEPII (iii) NOMBRE DE SEQUENCES: 19 (iv) FORME LISIBLE PAR ORDINATEUR: (A) TYPE DE SUPPORT: Floppy disk (B) ORDINATEUR: IBM PC compatible (C) SYSTEME D'EXPLOITATION: PC-DOS/MS-DOS (D) LOGICIEL: PatentIn Release &num;1.0, Version &num;1.25 (OEB) '2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 1: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 2765 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: double (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: ADNc (vi) ORIGINE: (A) ORGANISME: Rattus rattus (ix) CARACTERISTIQUE ADDITIONELLE: (A) NOM/CLE: CDS (B) EMPLACEMENT: 107..2428 (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 1: GCAAAGCACT AGCTTCAGTG TGCTCAAGGC ATCCAAGCTC CAGCTGCCTC CCTCCTGGCC 60 CTGGCCCTGG GTGCTCAGCT GTGTGCCTTC CACCCAGAAC CGGCTG ATG GGG AAG 115 Met Gly Lys 1 TCG GAG AGC TCA GTG GGG ATG ATG GAG AGA GCG GAC AAC TGT GGG AGG 163 Ser Glu Ser Ser Val Gly Met Met Glu Arg Ala Asp Asn Cys Gly Arg 5 10 15 AGG CGC CTA GGC TTC GTG GAG TGT GGG CTG CTG GTA CTG CTG ACA CTG 211 Arg Arg Leu Gly Phe Val Glu Cys Gly Leu Leu Val Leu Leu Thr Leu 20 25 30 35 CTG TTG ATG GGA GCC ATA GTG ACT CTG GGT GTC TTC TAC AGC ATA GGG 259 Leu Leu Met Gly Ala Ile Val Thr Leu Gly Val Phe Tyr Ser Ile Gly 40 45 50 AAG CAG CTC CCC CTC TTA AAT AGC CTC CTG CAC CTC TCC CGG CAT GAG 307 Lys Gln Leu Pro Leu Leu Asn Ser Leu Leu His Val Ser Arg His Glu 55 60 65 AGG ACG GTT GTA AAA CGA GTC CTC AGA GAT TCA TCG CAG AAG AGT GAC 355 Arg Thr Val Val Lys Arg Val Leu Arg Asp Ser Ser Gln Lys Ser Asp 70 75 80 ATC TGT ACT ACC CCA AGC TGC GTG ATA GCA GCT GCC AGA ATC CTC CAG 403 Ile Cys Thr Thr Pro Ser Cys Val Ile Ala Ala Ala Arg Ile Leu Gln 85 90 95 AAC ATG GAC CAG TCA AAG AAA CCC GC GAC AAC TTC TAT CAG TAT GCT 451 Asn Met Asp Gln Ser Lys Lys Pro Cys Asp Asn Phe Tyr Gln Tyr Ala 100 105 110 115 TGC GGA GGC TGG CTA CGG CAC CAT GTG ATC CCC GAG ACC AAC TCC AGA 499 C7s Gly Gly Trp Leu Arg His His Val Ile Pro Glu Thr Asn Ser Arg 120 125 130 TAC AGC GTC TTT GAC ATC CTT CGG GAT GAG CTG GAG GTC ATC CTC AAA 547 Tyr Ser Val Phe Asp Ile Leu Arg Asp Glu Leu Glu Val Ile Leu Lys 135 140 145 GGG GTG CTG GAG GAT TCC TCT GTC CAG CAC CGC CCA GCT GTG GAG AAG 595 Gly Val Leu Glu Asp Ser Ser Val Gln His Arg Pro Ala Val Glu Lys 150 155 160 GCC AAC ACA CTG TAC CGC TCC TGC ATG AAC CAG AGT GTG ATA GAG AAG 643 Ala Lys Thr Leu Tyr Arg Ser Cys Met Asn Gln Ser Val Ile Glu Lys 165 170 175 AGA GAC TCT GAG CCC CTG CTG AAC GTC TTA GAT ATG ATA GGA GGT TGG 691 Arg Asp Ser Glu Pro Leu Leu Asn Val Leu Asp Met Ile Gly Gly Trp 180 185 190 195 CCT GTA GCC ATG GAC AAG TGG AAT GAG ACC ATG GGC CCC AAG TGG GAA 739 Pro Val Ala Met Asp Lys Trp Asn Glu Thr Met Gly Pro Lys Trp Glu 200 205 210 CTG GAG CGG CAG TTG GCT GTG TTG AAC TCG CAG TTC AAC AGG CGC GTC 787 Leu Glu Arg Gln Leu Ala Val Leu Asn Ser Gln Phe Asn Arg Arg Val 215 220 225 CTC ATC GAC CTC TTC ATC TGG AAT GAT GAC CAG AAC TCC AGC CGG CAC 835 Leu Ile Asp Leu Phe Ile Trp Asn Asp Asp Gln Asn Ser Ser Arg His 230 235 240 CTC ATC TAC ATA GAC CAG CCC ACC TTG GGC ATG CCC TCC CGG GAG TAC 883 Val Ile Tyr Ile Asp Gln Pro Thr Leu Gly Met Pro Ser Arg Glu Tyr 245 250 255 TAT TTC AAG GAA GAC AGC CAC CGG GTA CGG GAA GCC TAC CTG CAG TTC 931 Tyr Phe Lys Glu Asp Ser His Arg Val Arg Glu Ala Tyr Leu Gln Phe 260 265 270 275 ATG ACA TCA GTG GCC ACT ATG CTG AGG AGA GAC CTG AAC CTG CCC GGG 979 Met Thr Ser Val Ala Thr Met Leu Arg Arg Asp Leu Asn Leu Pro Gly 280 285 290 GAG ACC GAT TTG GTG CAG GAG GAA ATG GCA CAG GTG CTC CAT CTG GAG 1027 Glu Thr Asp Leu Val Gln Glu Glu Met Ala Gln Val Leu His Leu Glu 295 300 305 ACA CAT CTG GCC AAC GCC ACG GTC CCC CAG GAG AAA AGG CAT GAT GTC 1075 Thr His Leu Ala Asn Ala Thr Val Pro Gln Glu Lys Arg His Asp Val 310 315 320 ACC GCC CTG TAT CAC CGA ATG GGC CTG GAG GAG CTG CAG GAA AGG TTT 1123 Thr Ala Leu Tyr His Arg Met Gly Leu Glu Glu Leu Gln Glu Arg Phe 325 330 335 GGT CTC AAC GGG TTT AAC TGG ACT CTC TTC ATA CAA AAC GTG CTC TCT 1171 Gly Leu Lys Gly Phe Asn Trp Thr Leu Phe Ile Gln Asn Val Leu Ser 340 345 350 355 TCT GTG CAA GTT GAG CTG CTC CCG AAT GAG GAG GTG GTG GTC TAT GGC 1219 Ser Val Gln Val Glu Leu Leu Pro Asn Glu Glu Val Val Val Tyr Gly 360 365 370 ATC CCC TAC CTC GAG AAT CTT GAG GAG ATC ATT GAC CTC TTC CCA GCA 1267 Ile Pro Tyr Leu Glu Asn Leu Glu Glu Ile Ile Asp Val Phe Pro Ala 375 380 385 CAG ACC TTG CAA AAC TAC CTG GTG TGG CGC CTG GTG CTA GAT CGC ATC 1315 Gln Thr Leu Gln Asn Tyr Leu Val Trp Arg Leu Val Leu Asp Arg Ile 390 395 400 GGC AGC CTG AGC CAG AGA TTC AAA GAA GCG CGT GTG GAC TAC CGC AAG 1363 Gly Ser Leu Ser Gln Arg Phe Lys Glu Ala Arg Val Asp Tyr Arg Lys 405 410 415 GCG CTG TAC GGT ACA ACC ATG GAG GAA GTA CGC TGG CGG GAG TGT GTC 1411 Ala Leu Tyr Gly Thr Thr Met Glu Glu Val Arg Trp Arg Glu Cys Val 420 425 430 435 AGC TAT GTC AAC AGC AAC ATG GAG AGT GCC GTG GGC TCC CTC TAC ATC 1459 Ser Tyr Val Asn Ser Asn Met Glu Ser Ala Val Gly Ser Leu Tyr Ile 440 445 450 AAG CGG GCC TTC TCC AAG GAC AGC AAG AGC ATA GTC AGT GAG CTT ATC 1507 Lys Arg Ala Phe Ser Lys Asp Ser Lys Ser Ile Val Ser Glu Leu Ile 455 460 465 GAG AAG ATA CGG TCC GTG TTT GTG GAT AAC CTG GAC GAG TTG AAC TGG 1555 Glu Lys Ile Arg Ser Val Phe Val Asp Asn Leu Asp Glu Leu Asn Trp 470 475 480 ATG GAT GAG GAA TCC AAG AAA AAG GCC CAG GAA AAG GCC TTG AAT ATC 1603 Met Asp Glu Glu Ser Lys Lys Lys Ala Gln Glu Lys Ala Leu Asn Ile 485 490 495 CGG GAA CAG ATC GGC TAC CCT GAC TAC ATT TTG GAA GAC AAT AAC AGA 1651 Arg Glu Gln Ile Gly Tyr Pro Asp Tyr Ile Leu Glu Asp Asn Asn Arg 500 505 510 515 CAC CTG GAT GAG GAA TAC TCC AGT CTG ACT TTC TCA GAG GAC CTC TAT 1699 His Leu Asp Glu Glu Tyr Ser Ser Leu Thr Phe Ser Glu Asp Leu Tyr 520 525 530 TTT GAG AAC GGG CTT CAG AAC CTC AAG AAC AAT GCC CAA AGG AGC CTC 1747 Phe Glu Asn Gly Leu Gln Asn Leu Lys Asn Asn Ala Gln Arg Ser Leu 535 540 545 AAG AAA CTT CGG GAA AAG GTG GAC CAG AAT CTC TGG ATC ATT GGG GCT 1795 Lys Lys Leu Arg Glu Lys Val Asp Gln Asn Leu Trp Ile Ile Gly Ala 550 555 560 GCA GTG GTC AAT GCA TTC TAC TCC CCA AAC AGA AAC CTG ATC GTC TTT 1843 Ala Val Val Asn Ala Phe Tyr Ser Pro Asn Arg Asn Leu Ile Val Phe 565 570 575 CCA GCG GGG ATC CTC CAG CCA CCC TTC TTC AGC AAC GAC CAA CCA CAG 1891 Pro Ala Gly Ile Leu Gln Pro Pro Phe Phe Ser Lys Asp Gln Pro Gln 580 585 590 595 GCC TTG AAT TTC GGG GGC ATC GGG ATG GTG ATT GGA CAC GAG ATC ACA 1939 Ala Leu Asn Phe Gly Gly Ile Gly Met Val Ile Gly His Glu Ile Thr 600 605 610 CAC GGC TTT GAT GAT AAC GGT CGG AAC TTT GAC AAC AAT GGC AAC ATG 1987 His Gly Phe Asp Asp Asn Gly Arg Asn Phe Asp Lys Asn Gly Asn Met 615 620 625 CTG GAC TGG TGG AGC AAC TTC TCG GCC CGG CAC TTC CGA CAG CAG TCA 2035 Leu Asp Trp Trp Ser Asn Phe Ser Ala Arg His Phe Arg Gln Gln Ser 630 635 640 CAG TGT ATC ATT TAT CAG TAC AGC AAC TTC TCT TGG GAA CTA GCA GAC 2083 Gln Cys Met Ile Tyr Gln Tyr Ser Asn Phe Ser Trp Glu Leu Ala Asp 645 650 655 AAC CAG AAT GTG AAC GGA TTC AGC ACC CTC GGG GAG AAC ATC GCC GAC 2131 Asn Gln Asn Val Asn Gly Phe Ser Thr Leu Gly Glu Asn Ile Ala Asp 660 665 670 675 AAC GGC GGT GTG CGG CAG GCA TAC AAG GCT TAC CTA CAG TGG CTA GCT 2179 Asn Gly Gly Val Arg Gln Ala Tyr Lys Ala Tyr Leu Gln Trp Leu Ala 680 685 690 GAA GGC GGC AGA GAC CAG AGA CTG CCG GGA CTG AAC CTG ACC TAT GCT 2227 Glu Gly Gly Arg Asp Gln Arg Leu Pro Gly Leu Asn Leu Thr Tyr Ala 695 700 705 CAG CTT TTC TTC ATT AAC TAT GCC CAG GTG TGG TGT GGG TCC TAC AGG 2275 Gln Leu Phe Phe Ile Asn Tyr Ala Gln Val Trp Cys Gly Ser Tyr Arg 710 715 720 CCC GAG TTC GCC ATC CAG TCC ATC AAG ACA GAT GTC CAC AGT CCT CTT 2323 Pro Glu Phe Ala Ile Gln Ser Ile Lys Thr Asp Val His Ser Pro Leu 725 730 735 AAG TAC AGG GTG CTG GGC TCA CTA CAG AAC CTA CCA GGC TTC TCT GAG 2371 Lys Tyr Arg Val Leu Gly Ser Leu Gln Asn Leu Pro Gly Phe Ser Glu 740 745 750 755 CG TTC CAC TGC CCA CGA GGC AGC CCC ATG CAC CCT ATG AAT CGA TGT 2419 Ala Phe His Cys Pro (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 2: Met Gly Lys Ser Glu Ser Ser Val Gly Met Met Glu Arg Ala Asp Asn 1 5 10 15 Cys Gly Arg Arg Arg Leu Gly Phe Val Glu Cys Gly Leu Leu Val Leu 20 25 30 Leu Thr Leu Leu Leu Met Gly Ala Ile Val Thr Leu Gly Val Phe Tyr 35 40 45 Ser Ile Gly Lys Gln Leu Pro Leu Leu Asn Ser Leu Leu His Val Ser 50 55 60 Arg His Glu Arg Thr Val Val Lys Arg Val Leu Arg Asp Ser Ser Gln o5 70 75 80 Lys Ser Asp Ile Cys Thr Thr Pro Ser Cys Val Ile Ala Ala Ala Arg 85 90 95 Ile Leu Gln Asn Met Asp Gln Ser Lys Lys Pro Cys Asp Asn Phe Tyr 100 105 110 Gln Tyr Ala Cys Gly Gly Trp Leu Arg His His Val Ile Pro Glu Thr 115 120 125 Asn Ser Arg Tyr Ser Val Phe Asp Ile Leu Arg Asp Glu Leu Glu Val 130 135 140 Ile Leu Lys Gly Val Leu Glu Asp Ser Ser Val Gln His Arg Pro Ala 145 150 155 160 Val Glu Lys Ala Lys Thr Leu Tyr Arg Ser Cys Met Asn Gln Ser Val 165 170 175 Ile Glu Lys Arg Asp Ser Glu Pro Leu Leu Asn Val Leu Asp Met Ile 180 185 190 Gly Gly Trp Pro Val Ala Met Asp Lys Trp Asn Glu Thr Met Gly Pro 195 200 205 Lys Trp Glu Leu Glu Arg Gln Leu Ala Val Leu Asn Ser Gln Phe Asn 210 215 220 Arg Arg Val Leu Ile Asp Leu Phe Ile Trp Asn Asp Asp Gln Asn Ser 225 230 235 240 Ser Arg His Val Ile Tyr Ile Asp Gln Pro Thr Leu Gly Met Pro Ser 245 250 255 Arg Glu Tyr Tyr Phe Lys Glu Asp Ser His Arg Val Arg Glu Ala Tyr 260 265 270 Leu Gln Phe Met Thr Ser Val Ala Thr Met Leu Arg Arg Asp Leu Asn 275 280 285 Leu Pro Gly Glu Thr Asp Leu Val Gln Glu Glu Met Ala Gln Val Leu 290 295 300 His Leu Glu Thr His Leu Ala Asn Ala Thr Val Pro Gln Glu Lys Arg 305 310 315 320 His Asp Val Thr Ala Leu Tyr His Arg Met Gly Leu Glu Glu Leu Gln 325 330 335 Glu Arg Phe Gly Leu Lys Gly Phe Asn Trp Thr Leu Phe Ile Gln Asn 340 345 350 Val Leu Ser Ser Val Gln Val Glu Leu Leu Pro Asn Glu Glu Val Val 355 360 365 Val Tyr Gly Ile Pro Tyr Leu Glu Asn Leu Glu Glu Ile Ile Asp Val 370 375 380 Phe Pro Ala Gln Thr Leu Gln Asn Tyr Leu Val Trp Arg Leu Val Leu 385 390 395 400 Asp Arg Ile Gly Ser Leu Ser Gln Arg Phe Lys Glu Ala Arg Val Asp 405 410 415 Tyr Arg Lys Ala Leu Tyr Gly Thr Thr Met Glu Glu Val Arg Trp Arg 420 425 430 Glu Cys Val Ser Tyr Val Asn Ser Asn Met Glu Ser Ala Val Gly Ser 435 440 445 Leu Tyr Ile Lys Arg Ala Phe Ser Lys Asp Ser Lys Ser Ile Val Ser 450 455 460 Glu Leu Ile Glu Lys Ile Arg Ser Val Phe Val Asp Asn Leu Asp Glu 4O5 470 475 480 Leu Asn Trp Met Asp Glu Glu Ser Lys Lys Lys Ala Gln Glu Lys Ala 485 490 495 Leu Asn Ile Arg Glu Gln Ile Gly Tyr Pro Asp Tyr Ile Leu Glu Asp 500 505 510 Asn Asn Arg His Leu Asp Glu Glu Tyr Ser Ser Leu Thr Phe Ser Glu 515 520 525 Asp Leu Tyr Phe Glu Asn Gly Leu Gln Asn Leu Lys Asn Asn Ala Gln 530 535 540 Arg Ser Leu Lys Lys Leu Arg Glu Lys Val Asp Gln Asn Leu Trp Ile 545 550 555 560 Ile Gly Ala Ala Val Val Asn Ala Phe Tyr Ser Pro Asn Arg Asn Leu 565 570 575 Ile Val Phe Pro Ala Gly Ile Leu Gln Pro Pro Phe Phe Ser Lys Asp 580 585 590 Gln Pro Gln Ala Leu Asn Phe Gly Gly Ile Gly Met Val Ile Gly His 595 600 605 Glu Ile Thr His Gly Phe Asp Asp Asn Gly Arg Asn Phe Asp Lys Asn 610 615 620 Gly Asn Met Leu Asp Trp Trp Ser Asn Phe Ser Ala Arg His Phe Arg 625 630 635 640 Gln Gln Ser Gln Cys Met Ile Tyr Gln Tyr Ser Asn Phe Ser Trp Glu 645 650 655 Leu Ala Asp Asn Gln Asn Val Asn Gly Phe Ser Thr Leu Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Ala Asp Asn Gly Gly Val Arg Gln Ala Tyr Lys Ala Tyr Leu Gln 675 680 685 Trp Leu Ala Glu Gly Gly Arg Asp Gln Arg Leu Pro Gly Leu Asn Leu 690 695 700 Thr Tyr Ala Gln Leu Phe Phe Ile Asn Tyr Ala Gln Val Trp Cys Gly 705 710 715 720 Ser Tyr Arg Pro Glu Phe Ala Ile Gln Ser Ile Lys Thr Asp Val His 725 730 735 Ser Pro Leu Lys Tyr Arg Val Leu Gly Ser Leu Gln Asn Leu Pro Gly 740 745 750 Phe Ser Glu Ala Phe His Cys Pro Arg Gly Ser Pro Met His Pro Met 755 760 765 Asn Arg Cys Arg Ile Trp 770 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 3: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 20 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 3: TGGAGCGGCA GTTGGCTGTG 20 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 4: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 21 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 4 AGTTCCCACT TGGGGCCCAT G 21 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 5: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 20 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 5: GCTGGAGGAT TCCTCTGTCC 20 '2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 6: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 19 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 6: CGGGGATCAC ATGGTGCCG 19 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 7 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 21 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 7 CTACCCCAAG CTGCGTGATA G 21 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 8 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 21 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 8 CGGCACCATG TGATCCCCGA G 21 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 9 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 22 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 9 GCAAAGCACT AGCTTCAGTG TG 22 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 10: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 22 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 10: GGTCATCATT CCAGATGAAG AG 22 n INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 11: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 20 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 11 : CGATGAGGAC GCGCCTGTTG 20 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 12: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 20 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 12: TGCAGGAAAG GTTTGGTCTG 20 '2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 13: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 20 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 13: GAACGCCTCA GAGAAGCCTG 20 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 14: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 20 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 14: ATGACCAGAA CTCCAGCCGG (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 15: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 21 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 15: CATCATGCTT TTTCTCCTGG G 21 INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 16: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 21 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 16 CCCGAAGTTT CTTGAGGCTC C 21 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 17: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 19 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 17 GATCGGCTAC CCTGACTAC 19 2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 18 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 19 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 18 GTTCGCCATC CAGTCCATC 19 (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 19 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 20 paires de bases (B) TYPE: acide nucléique (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: sonde oligonucléotidique (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 19: CGAAGCCTAG GCGCCTCCTC 20 19 REVENDICATIONS 1. Polypeptide isolé dont la séquence d'acides aminés est choisie parmi la séquence SEQ ID n 2, une séquence dérivée ou homologue de ladite séquence SEQ ID n 2, ou un fragment biologiquement actif de ladite séquence SEQ ID n 2, ledit polypeptide isolé étant désigné par NEP II 2. Séquence nucléotidique isolée comprenant une séquence choisie parmi la séquence SEQ ID n 1, une séquence dérivée ou homologue de ladite séquence SEQ ID n 1, ou leurs séquences complémentaires. 3. Sonde oligonucléotidique hybridant spécifiquement avec la séquence nucléotidique selon la revendication 2, ladite sonde ayant une séquence d'acides aminés choisie parmi: - SEQ ID n 3 ; - SEQ ID n 4 ; - SEQ ID n 5 ; - SEQ ID n 6 ; - SEQ ID n 7 ; - SEQ ID n 8 ; - SEQ ID n 9 ; - SEQ ID n 10 ; - SEQ ID n 11; - SEQ ID n 12 ; - SEQ ID n 13 ; - SEQ ID n 14 ; - SEQ ID n 15 ; - SEQ ID n 16 ; - SEQ ID n 17 ; - SEQ ID n 18 ; - SEQ ID n 19 . 4. Vecteur de clonage et/ou d'expression contenant une séquence nucléotidique selon la revendication 2. 5. Cellule hôte transfectée par un vecteur selon la revendication 4. 6. Anticorps mono- ou polyclonaux ou leurs fragments, anticorps chimériques ou immunoconjugués, caractérisés en ce qu'ils sont obtenus à partir d'un polypeptide selon la revendication 1 administré à un animal, et sont capables de reconnaître spécifiquement un polypeptide selon la revendication 1. 7. Procédé de détection immunologique de NEP II dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu comprenant les étapes consistant à - mettre en contact ledit échantillon cellulaire ou tissulaire, lesdites cellules ou ledit tissu avec un anticorps détectable selon la revendication 6; - détecter la présence dudit anticorps, indicatrice de la présence du polypeptide NEP II. 8. Procédé de détection de l'expression du polypeptide NEP II dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu par hybridation in situ, comprenant les étapes consistant à: - préparer l'ARN dudit échantillon ou desdites cellules ou dudit tissu; - mettre en contact ledit ARN obtenu avec au moins une sonde ayant une séquence nucléotidique capable de s'hybrider spécifiquement avec une séquence nucléotidique selon la revendication 2, ladite sonde pouvant être notamment une sonde oligonucléotidique selon la revendication 3; - détecter la présence d'ARNm hybridant avec ladite sonde, indicatrice de l'expression du polypeptide NEP II. 9. Procédé d'identification de composés substrats du polypeptide NEP II selon la revendication 1, dans lequel on met en contact lesdits composés, éventuellement marqués, avec le polypeptide NEP II, et on évalue la coupure desdits composés par NEP II, indicatrice de l'activité métalloprotéasique de NEP II envers lesdits composés substrats. 10. Procédé de détection de l'activité métalloprotéasique de NEP II dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu comprenant les étapes consistant à: - mettre en contact ledit échantillon cellulaire ou tissulaire, lesdites cellules ou ledit tissu avec un composé substrat du polypeptide NEP II obtenu selon le procédé de la revendication 9, ledit composé substrat étant éventuellement marqué; - évaluer la coupure dudit composé substrat, indicatrice de l'activité métalloprotéasique de NEP II. 11. Procédé de criblage de composés susceptibles d'inhiber l'activité métalloprotéasique du polypeptide NEP Il selon la revendication 1, dans lequel on met en contact lesdits composés avec ledit polypeptide NEF Il et on évalue le taux d'inhibition de l'activité métalloprotéasique de NEP II. 12. Procédé de détection de NEF Il dans un échantillon cellulaire ou tissulaire ou dans des cellules ou un tissu comprenant les étapes consistant à - mettre en contact ledit échantillon cellulaire ou tissulaire, lesdites cellules ou ledit tissu avec un composé substrat du polypeptide NEF Il obtenu selon le procédé de la revendication 9 ou avec un composé inhibiteur de l'activité métalloprotéasique de NEF Il obtenu selon le procédé de criblage de la revendication 11, ledit composé substrat ou ledit composé inhibiteur étant marqué; - détecter la présence dudit composé substrat ou dudit composé inhibiteur, indicatrice de la présence du polypeptide NEP II. 13. Utilisation du polypeptide NEF Il selon la revendication 1 pour le criblage de composés inhibiteurs de l'activité métalloprotéasique de NEF Il utiles pour la fabrication de médicament destiné à traiter les troubles impliquant les transmissions peptidergiques auxquelles participe NEF Il. 14. Utilisation selon la revendication 13 dans laquelle lesdits troubles sont choisis parmi les maladies cardiovasculaires, neurodégénératives, les troubles de la croissance d'origine endocrinienne, les perturbations de l'axe hypothalamo-hypophysaire et les affection endocriniennes.