Brevet FR2763244A1 — publié le 19981120

1-2763244 La présente invention a pour objet une composition pharmaceutique destinée au traitement ou à la prévention d'un certain nombre d'infections dues à des agents pathogènes tels que les bactéries, qui comprend à titre d'agent immunogène, des polyosides dérivés d'un ou de plusieurs agents pathogènes. Les bactéries ainsi que les champignons tels que des levures incorporent des polyosides dans leur structure de surface. Ainsi la grande majorité des bactéries sont recouvertes d'un exsudat de nature polyosidique qui est fixé à la bactérie de manière plus ou moins forte mais qui n'est pas à proprement parler une enveloppe. Cet exsudat porte le nom de glycocalyx ou de capsule. D'autre part la membrane externe des bactéries gram- négatives est entre autre constituée de lipopolysaccharide (LPS). Enfin, des polyosides se retrouvent aussi dans la paroi des champignons. Ces polyosides sont en fait des antigènes de surface qui induisent une réponse immune chez un mammifère infecté. De tels polyosides sont constitués sur la base d'unités dans lesquelles les constituants et les liaisons sont définis et qui sont caractéristiques de l'espèce bactérienne ou fongique considérée. Ces unités répétitives contiennent les épitopes, c'est-à-dire les structures déterminantes de l'antigènicité. Les polyosides de microorganismes pathogènes sont réputés être de bons agents vaccinaux. Tels quels ils sont efficaces chez les adultes et les enfants de plus de deux ans. Par contre chez les nourrissons, certains sont peu ou pas immunogéniques et n'induisent pas de réponse immunitaire. Il est possible de surmonter ce problème, en couplant par liaison covalente les polyosides à une protéine dite porteuse telle que l'anatoxine diphthérique ou tétanique, de manière à obtenir un conjugué polyoside protéine porteuse. Une même composition vaccinale peut contenir plusieurs conjugués. En effet, la tendance veut que l'on rassemble plusieurs agents vaccinaux destinés à prévenir ou à traiter des infections induites par des agents pathogènes d'espèces différentes; ceci entre autre, afin de limiter le nombre d'administrations dans la vie d'un individu. De plus, au sein d'une même espèce, il peut exister plusieurs sérogroupes / sérotypes largement représentés au plan régional ou mondial, On rappelle qu'un sérogroupe / sérotype est caractérisé entre autres par la nature du polyoside de capsule et que des polyosides de sérotypes différents ne présentent pas de réaction immunologique croisée. Dans ce cas, il peut donc être nécessaire de réunir les polyosides provenant de différents sérotypes, afin de lutter avec efficacité contre une infection due à une seule et même espèce. -2- 2763244 Ainsi, cela est par exemple le cas lorsque l'on cherche à vacciner à l'encontre des infections à Streptococcus pneumoniae. Les infections à pneumocoques sont un réel problème de santé publique notamment dans la mesure o on les rencontre dans les formes sévères de pneumonies, de septicémies et de méningites. Dans les pays industrialisés, elles affectent chaque année 30 à 100 per 100,000 enfants de moins de trois ans. Le taux de mortalité dans les cas de bactéricémies et de méningites est de 15 à 30 % tandis que 5 % des enfants meurent de pneumonies. Une étude effectuée en Finlande de 1985 à 1989 montre que 90 % des infections invasives sont dues à 8 groupes de sérogroupes / sérotypes. Les sérogroupes / sérotypes 14, 16 et 19 sont responsables de 54 % des cas, le sérotype 14 étant prédominant chez les enfants de moins de deux ans. D'autres pneumocoques fréquemment isolés appartiennent aux sérogroupes 7, 18 et 23; d'autres encore, plus rares appartiennent aux sérogroupes / sérotypes 9 et 4. Une distribution similaire a été mise en évidence dans d'autres pays industrialisés, en particulier aux Etats-Unis. D'autre part, Sirept)lococc.us pnenumoniae est responsable d'un certain nombre d'otites, infections plus bénignes mais très courantes.On évalue à environ 75 % le nombre d'enfants ayant été atteints d'une otite avant l'âge de six ans et à 30 à 50 % le nombre d'otites dues au pneumocoque. Dans les pays développés, les otites à pneumocoque sont dues au sérogroupe 19 dans 25 % des cas; suivis par les sérogroupes / sérotypes 23 (13 %), 6 et 14 (12 %),9 et 18(4%) et 4 et 1(2%). Un vaccin pneumocoque contenant les polyosides de 23 sérotypes est déjà commercialisé. Ce vaccin permet de combattre de manière efficace les infections invasives chez les adultes et possède une action transitoire chez les enfants de plus de sept mois. Les polyosides de capsule du pneumocoque sont des antigènes Tindépendants i.e., ils peuvent induire des anticorps, de préférence du type lgM, sans l'aide des cellules T et ne sont pas capables de promouvoir une réponse rappel de type IgG. Lorsqu'ils sont couplés à une protéine porteuse, ces polyosides se révèlent alors capable d'induire une réponse T- dépendante, tout spécialement chez les nouveaux-nés et confèrent une protection à long terme. 3 2763244 Des études cliniques ont été effectuées en Finlande et en Israël, avec des vaccins pneumocoque à quatre valences contenant des conjugués 6B. 9V, I 8C et 23F dans lesquels le polyoside était couplé soit à de la DT ou à de la TT. Les doses étaient de 1, 3 ou 10 pg de polyoside par valence. Chacune de ces formulations a été administrée simultanément avec un vaccin anti Haemophilus (polyribitolphosphate couplé à de la TT; Act- Hib commercialisé par Pasteur Mérieux Connaught) et un vaccin anti diphtérie, tétanos, coqueluche (pour la Finlande, D.T.Coq commercialisé par KTL). De plus, ces trois administrations ont été mises en oeuvre accompagnées ou non par une administration simultanée d'un vaccin polio oral ou injectable. Elles ont été répétées deux fois à quelques semaines d'intervalle, puis une fois, un an après la primo-immunisation. Les résultats de ces études tels que rapportés dans le tableau ci-après ont permis de mettre en évidence un effet d'interférence négative de la charge en anatoxines diphthérique et tétanique sur l'induction des anticorps anti-HiB, après la dernière immunisation. Etude finlandaise Anticorps anti-HiB en pg/ml Placebo 11.0 Tetravalent pneumo TT: 1 gtg 10.1 3 ptg 7.18 atg4.11 DT: I}tg 11.5 3.tg 1_2.5 gg 7.18 Etude israëliennce Anticorps anti-HiB en pg/ml Placebo 6.62. Tetravalent pneumo TT: 3 lag 2.81 |DT: 3. tg 4.62 Un effet d'interférence similaire a été observé au cours d'une étude clinique en Islande dans laquelle les nourrissons avaient reçus du Pro HiB it (PRP couplé à de la DT Connaught) à la place de l'Act-HiB. D'une manière plus générale, on prévoit que quelque soit le vaccin à base de conjugués, il existe une charge maximale en DT et en TT ou en toute autre protéine porteuse au-delà de laquelle la réponse immune à l'encontre des polyosides est décroissante. Afin de surmonter le problème que constitue le phénomène d'interférence négative dans les vaccins multivalents composés de conjugués polyosidiques, la présente demande propose d'utiliser non pas une mais au moins deux protéines porteuses afin que la charge maximale en chacune des protéines porteuses ne soit pas atteinte. C'est pourquoi l'invention a pour objet une composition comprenant "n" conjugués C1 à Cn; chaque conjugué étant composé d'un polyoside SI à Sn respectivement et d'une protéine porteuse Pl à Pn respectivement; "n" étant un nombre égal ou supérieur à 2; composition dans laquelle les polyosides SI à Sn sont identiques ou différents et dans laquelle les protéines porteuses Pl à Pn sont sélectionnées de manière indépendante parmi un groupe constitué de "m" protéines porteuses AI à Am "m" étant un nombre égal ou supérieur à 2; à condition qu'au moins une des protéines porteuses Pl à Pn soit différente des autres. A titre illustratif, on envisage les compositions suivantes (i) Une composition contenant au moins trois conjugués C I. C2, C3... Cn; de formules S1-PI, S2-P2, S3-P3.....Sn-Pn. avec SI à Sn identiques entre eux et PI à Pn toutes différentes entre elles (ii) Une composition contenant au moins trois conjugués CI, C2, C3,... Cn; de formules S 1-PI, S2-P2, S3-P3..... Sn-Pn, avec: S1 à Sn tous différents entre eux, P1 et P2 identiques entre elles, P3 à Pn identiques entre elles et Pl et P2 différentes de P3 à Pn; et (iii) Une composition contenant au moins trois conjugués CI, C2, C3,... Cn; de formules Sl-PI, S2-P2, S3-P3..... Sn-Pn, avec: SI et S2 identiques entre eux, S3 à Sn identiques entre eux. SI et S2 différents de S3 à Sn, Pl et P3 identiques entre elles, P2 à Pn, à l'exclusion de P3, identiques entre elles et Pl et P3 différentes de P2 à Pn (-P3). Ainsi, aux fins de la présente invention, les conjugués CI à Cn nécessairement tous différents entre eux, peuvent l'être deux à deux soit par leur polyoside, soit par leur protéine porteuse ou par leur polyoside et leur protéine porteuse. Selon un mode particulier, les polyosides mis en oeuvre sont tous différents entre eux. 2763244 Le nombre "n" de conjugués présents dans une composition selon l'invention est égal ou supérieur à 2, et peut en particulier être égal ou supérieur à 4, 6, 8, 10, 11, 12, 15 ou 20. D'une manière générale ce nombre "n" peut être déterminé par l'homme de l'art en fonction d'un certains nombre de critères notamment liés à la nature même de la composition, aux objectifs que cette composition doit permettre d'atteindre et à la population auquelle cette composition est destinée. Par exemple, dans le cas d'une composition destinée à traiter ou à prévenir des infections à pneumocoque chez le nourrisson. on considère qu'une telle composition pour offrir une protection de bon niveau et à l'échelle mondiale, doit contenir au moins 8, de préférence au moins 10, de manière tout particulièrement préférée au moins 1I valences, pouvant être représentées par au moins 11 conjugués ou plus. Par "polyoside" on entend un polymère constitué d'une pluralité d'unités osidiques, notamment de plus de quatre unités, quelque soit la longueur de la chaîne osidique et par quelque soit le poids moléculaire moyen du polyoside. Ce termnie englobe en particulier celui d'oligoside. Ainsi que précédemment énoncé, une composition selon l'invention doit mettre en oeuvre au moins deux protéines porteuses. Ces protéines porteuses peuvent être choisies parmi toutes celles couramment en usage dans le domaine des vaccins. Il peut notamment s'agir de l'anatoxine diphthérique (DT), de l'anatoxine tétanique (TT), de la forme mutante non-toxique CRM197 de la toxine diphthérique et de la protéine de membrane externe de type I (OMPI) de NVeisseria mneningitidis ou de tout variant, analogue ou fragment de ces dernières ayant conservé la capacité de porteur. Les procédés permettant d'obtenir ces protéines sous forme purifiée sont bien connus de l'homme de l'art. Le terme "protéine" tel que utilisé dans la présente demande s'applique à toute chaîne d'acides aminés, quelque soit la longueur de la chaîne. En particulier ce terme englobe la notion de peptide. De manière générale, le groupe de protéines Al à Am dans lequel on sélectionne de manière indépendante les protéines porteuses PI à Pn, représente donc l'ensemble des protéines possédant un effet porteur. Pour ses besoins personnels, l'homme de l'art peut convenir que son choix se limitera à un nombre défini de protéines et en conséquence il peut définir le groupe à partir duquel il effectuera sa sélection sur la base d'un nombre "m" de composants égal ou supérieur à 2 et au plus égal à "n"; "nI" étant tel que défini ci-avant. En particulier, l'homme de l'art peut déterminer le nombre de protéines porteuses différentes qui est nécessaire en tenant compte de la charge maximale à ne pas dépasser -6- 2763244 pour chacune des protéines porteuses. On appelle "charge maximale" la quantité de protéine porteuse au-delà de laquelle on observe une réponse immune diminuée à l'encontre d'un ou des polyosides. En particulier en ce qui concerne l'anatoxine diphthérique et l'anatoxine tétanique, on estime que de manière avantageuse, la quantité de ces protéines présentes dans une dose d'une composition selon l'invention ne doit pas excéder 80 et 25 ag respectivement; une telle dose étant prévue pour administration chez un mammifère, de préférence un humain. De préférence, la charge en DT est inférieure ou égale à 60 pg. De préférence, la charge en TT est inférieure ou égale à 20 ou 10 pg. Ainsi, on peut convenir que pour une composition ne mettant en oeuvre que deux protéines porteuses différentes, la sélection de ces protéines s'effectuera à partir d'un groupe constitué des protéines AI et A2. De préférence, AI et A2 peuvent être l'anatoxine diphthérique (DT) et de l'anatoxine tétanique (TT) respectivement ou vice et versa. Selon un mode particulier, une composition mettant en oeuvre uniquement deux protéines porteuses différentes se caractérise par une répartition équilibrée du nombre de polyosides conjugués à la première protéine porteuse et du nombre de polyosides conjugués à la deuxième protéine porteuse. Par exemple, lorsque "n" est un nombre pair, "n"/2 protéines porteuses Pl à Pn sont AI et "n"/2 protéines porteuses Pl à Pn sont A2 ou lorsque "n" est un nombre impair, ("n"+l)/2 protéines porteuses Pl à Pn sont AI et ("n"- 1)/2 protéines porteuses Pl à Pn sont A2. Un polyoside utile aux fins de la présente invention peut notamment être un polyoside d"origine bactérienne ou fongique. Il peut notamment s'agir d'un polyoside de Streptococcus e.g., Srepiococcus pneurnoniae, Staphylococcus, Klebsiella. Salmonella e.g., Salmonella typhi, Escherichia, Shigella, Neisseria e.g., Neisseria meningitidis. Haemniophilus e.g., Haemophilus influenzae, Moraxella, Vibrio cholerae ou Mycobacteriumn tuberculosis. Au sein d'une composition selon l'invention, les polyosides peuvent provenir d'espèces différentes ou bien tous provenir de la même espèce e. g., de la même espèce bactérienne, éventuellement de sérogroupes / sérotypes différents. Afin d'illuster cette dernière possibilité on cite une composition selon l'invention destinée à vacciner contre les -7- 2763244 infections à pneumocoque, qui contient au moins 8 valences, de préférence 10 ou 11 valences choisies parmi les sérotypes 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V. 14, 18C, 19F et 23F. Ainsi, une composition constituant un vaccin pneumocoque comprend avantageusement 10 ou 1 1 valences e.g., représentées par 10 ou 1 I conjugués dans lesquels les polyosides sont tous différents entre eux et dérivent des sérotypes / sérogroupes choisis parmi les sérotypes 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F et 23F de S. pneurnoniae. Il peut notamment s'agir d'une composition qui comprend 10 ou 1 1 conjugués sélectionnés parmi - le polyoside de sérotype 1 couplé à la TT ou à la DT; - le polyoside de sérotype 3 couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 4 couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 5 couplé à la TT ou à la DT; le polyoside de sérotype 6B couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 7F couplé à la TT ou à la DT; 1 5 - le polyoside de sérotype 9V couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 14 couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 18C couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 19F couplé à la TT; et - le polyoside de sérotype 23F couplé à la TT. Sous un autre aspect, une composition constituant un vaccin pneumocoque peutit comprendre 10 ou 11 valences représentées par 12 à 22, notamment 12 à 15 conjugués, dans lesquels les polyosides dérivent des sérotypes choisis parmi les sérotypes 1. 3, 4, 5. 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F et 23F; composition dans laquelle des conjugués de même valence diffèrent entre eux par la protéine porteuse. Il peut notamment s'agir d'une composition qui comprend: - le polyoside de sérotype 1 couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 3 couplé à la DT; le polyoside de sérotype 4 couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 5 couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 6B couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 6B couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 7F couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 9V couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 9V couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 14 couplé à la DT; - 8 - 2763244 le polyoside de sérotype 18C couplé à la DT; le polyoside de sérotype 18C couplé à la TT; le polyoside de sérotype 19F couplé à la TT; le polyoside de sérotype 23F couplé à la TT; et - le polyoside de sérotype 23F couplé à la DT. Un tel polyoside peut être avantageusement extrait du microorganisme selon des procédés conventionnels et purifié de même. Ce polyoside peut être utilisé sous formnne brute après extraction / purification. Ou bien encore il peut être fragmenté afin d'obtenir un polyoside de poids moléculaire moyen inférieur à celui du polyoside extrait à l'origine. Un procédé de fragmentation particulièrement avantageux est décrit dans WO 93/7178, incorporé par référence. Un conjugué dans lequel un polyoside est couplé par liaison covalente à une protéine porteuse peut être obtenu selon des procédés conventionnels bien connus de l'homme de l'art. Il peut être fait usage de linker ou de spacer afin d'assurer la conjugaison. Selon le mode de conjugaison mis en oeuvre, le conjugué qui en résulte peut être un conjugué dans lequel le polyoside est lié à la protéine par une seule fonction chimique (type soleil ou néoglycoconjugué). ou par plusieurs fonctions (types rateau et pelote). Il est à la portée de l'homme de l'art déterminer le mode de conjugaison le plus approprié en fonction de la nature du polyoside et plus particulièrement des groupements chimiques portés par le polyoside qui peuvent être mis enjeu au cours de la réaction de conjugaison. Une composition selon l'invention peut être fabriquée de manière conventionnelle. En particulier, elle peutit être formulée avec un diluent ou unll support acceptable d'un point de vue pharmaceutique e.g., de l'eau ou une solution saline. En outre la composition peutit contenir des ingrédients usuels tel qu'un tampon; un agent conservateur ou stabilisant un adjuvant tel qu'un composé d'aluminium e.g., un hydroxide d'aluminium, un phosphate d'aluminium ou un hydroxy phosphate d'aluminium; et le cas échéant un excipient de lyophilisation. En général, ces produits peuvent être sélectionnés en fonction du mode et de la voie d'administration et selon les pratiques pharmaceutiques standard. Des porteurs ou des diluents appropriés ainsi que ce qui est indispensable à l'élaboration d'une composition pharmaceutique sont décrits dans Remington's Pharmaceutical Sciences, un livre de référence standard dans ce domaine. Une composition selon l'invention peut être administrée par n'importe quelle voie conventionnelle en usage dans le domaine des vaccins, en particulier par voie systémique i.e., parentérale e.g., par voie souscutanée, intramusculaire, intradermique ou intraveineuse ou par voie muqueuse e.g., par voie orale. L'administration peut avoir lieu en dose unique ou répétée une ou plusieurs fois e.g. 1, 2 ou 3 fois, après un certain délai d'intervalle. Le dosage approprié varie en fonction de divers paramètres, par exemple du nombre de valences contenues dans la composition, de la nature du ou des polyosides utilisés ou du mode d'administration. A titre indicatif on indique que de bons résultats peuvent être obtenus avec par valence, une dose de polyoside de 0.5 à 100 ptg, de préférence de I à 50 pg, de manière tout à fait préférée de I à 10 ptg. Une dose de la composition selon l'invention peut être avantageusement sous uni volume de 0.5 à 2 ml. Ci-après on présente à titre d'exemple, différents vaccins pneumocoque à valences multiples; les valences étant choisies parmi les sérotypes 1. 3. 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14. 18C, 19F et 23F. Les polyosides issus de ces sérotypes ont été firagmentés selon le procédé décrit dans WO 93/7178. Les polyosides couplés à la DT (sauf le polyoside de type 1). l'ont été selon le procédé de conjugaison décrit dans WO 93/7178. Brièvement, uni polyoside est soumis à une amination réductrice en présence de cyanoborohydrure de sodium afin de lier une molécule de diaminohexane à un groupe réducteur terminal. Puis le polyoside ainsi dérivé est activé par un groupe succinimide en utilisant du disuccinimidyl suberate (DSS). Le polyoside ainsi activé est mis à réagir directement avec la protéine porteuse. Le polyoside de sérotype 1 a été couplé à la DT ou à la TT selon le procédé de conjugaison décrit dans le brevet US n 5,204,098, incorporé par référence. Les autres polyosides couplés à la DT, l'ont été comme suit: Des groupes hydrazide sont incorporés sur le polyoside en faisant réagir le polyoside avec un excès d'acide adipique dihydrazide (ADH) en présence d'éthyl diméthyl amino propyl carbodiimide (EDAC) et de cyanoborohydrure de sodium (pour tous les types sauf le 3) ou simplement en présence de cyanoborohydrure de sodium (pour le type 3). Le polyoside ainsi dérivé est mis à réagir avec la protéine porteuse en présence d'EDAC. Les conditions expérimentales ont été contrôlées de manière à ce que l'on obtienne des conjugués dans lesquels la quantité de protéine soit comprise entre 1 et 4 fois, de préférence 2 fois, la valeur de la quantité de polyoside. Ainsi, pour une dose, 3 pg d'un polyoside particulier sont couplés à environ 6 pg de DT et I pg d'un polyoside particulier est couplé à environ 2 pg de TT. -10- 2763244 La DT et la TT utilisées ont été préparées par détoxification au formaldéhyde à partir des toxines extraites respectivement de Corynebacterium diphtheriae et de Clostridillum tetani. Les formulations contiennent un tampon phosphate (0.475 mg d'ion P042- par dose) et du chlorure de sodium (4.5 mg par dose) et peuvent être adjuvantées par de l'hydroxyde d'aluminium (alum) (300.ig d'ion Al2+ par dose) et contenir un conservateur tel que le phénoxy éthanol formol. Une dose est sous un volume de 0.5 ml. EXEMPLE 1: Formulation octavalente Protéine porteuse PolIoside Sérotype Quantité pour une dose DT 3 3 pg TT 4 I g DT 6B 10 pg TT 9V 1 pg DT 14 3 pg DT 18C 3pg TT 19F 1 gg TT 23F 1 Pg - 11 - EXEMPLE 2 Formulations F3. F4 et F3bis à 11 valences Polyoside Protéine Sérotype / Quantité pour Quantité pour Quantité pour porteuse Sérogroupe une dose de une dose de une dose de porteuse formulation F3 formulation F4 formulation F3 bis TT 1 1 DT -- 3 DT 3 3 3 TT 4 1 1 1 TT 5 1 1 DT 5 -3 DT 6B 10 10 3 TT 6B - 1 TT 7F 1 1 DT 7F - TT 9V 1 DT 9V -3 DT 14 3 3 3 DT 18C 3 3 n TT 18C - l_ _ TT 19F 1 1 1 TT 23F 1 I 1 DT 23F - 3 La charge approximative en protéine dans chacunes des trois formulations est comme suit F3 F4 F3 bis DT 45-50 pg environ 70 gtg environ 45 pg TT 8-12 pg environ 6 tg 10-15 pg -12 - 2763244 Revendications 1. Une composition comprenant "n" conjugués C1 à Cn; chaque conjugué étant composé d'un polyoside SI à Sn respectivement et d'une protéine porteuse P1 à Pn respectivement; "n" étant un nombre égal ou supérieur à 2; composition dans laquelle les polyosides SI à Sn sont identiques ou différents et dans laquelle les protéines porteuses Pl à Pn sont sélectionnées de manière indépendante parmi un groupe constitué de "m" protéines porteuses AI à Am: "m" étant un nombre égal ou supérieur à 2 à condition qu'au moins une des protéines porteuses Pl à Pn soit différente des autres. 2. Une composition selon la revendication 1, dans laquelle les conjugués CI à Cn sont tous différents entre eux soit par leur polyoside, soit par leur protéine porteuse ou par leur polyoside et leur protéine porteuse. 3. Une composition selon la revendication 2, dans laquelle les polyosides SI à Sn sont tous différents entre eux. 4. Une composition selon la revendication 1, 2 ou 3. dans laquelle "n" est un nombre égal ou supérieur à 6. 5. Une composition selon la revendication 4, dans laquelle "n" est un nombre égal ou supérieur à 10. 6. Une composition selon l'une des revendications I à 5. dans laquelle les protéines porteuses Pl à Pn sont sélectionnées de manière indépendante parmi un groupe constitué de deux protéines porteuses AI et A2. 7. Une composition selon la revendication 6, dans laquelle, lorsque "n" est un nombre pair, "n"/2 protéines porteuses Pl à Pn sont AI et "n"/2 protéines porteuses Pl à Pn sont A2 ou lorsque "n" est un nombre impair, ("n"+l)/2 protéines porteuses Pl à Pn sont AI1 et ("n"- 1)/2 protéines porteuses P l à Pn sont A2. -13 - 2763244 8. Une composition selon l'une des revendications 1 à 7, dans laquelle les polyosides S1 à Sn sont d'origine bactérienne. 9. Une composition selon la revendication 8, dans laquelle les polyosides SI à Sn sont tous dérivés de la même espèce bactérienne. 10. Une composition selon la revendication 9, dans laquelle les polyosides sont tous dérivés de l'espèce Streptococcus pneumoniae. 11. Une composition selon l'une des revendications 1 à 10, dans laquelle au moins une des protéines porteuses Pl à Pn est l'anatoxine diphthérique (DT) et au moins une des protéines porteuses Pl à Pn est l'anatoxine tétanique (TT). 12. Une composition selon la revendication 11, dans laquelle les protéines porteuses Pl à Pn sont sélectionnées parmi le groupe constitué par la DT et la TT. 13. Une composition selon la revendication I 1 ou 12, dans laquelle la quantité de DT est inférieure ou égale à 80 pg. 14. Une composition selon la revendication 11 12 ou 13. dans laquelle la quantité de TT est inférieure ou égale à 25 pg. 15. Une composition selon la revendication 10, qui comprend 10 ou 11 valences représentées par 10 ou 1 1 conjugués dans lesquels les polyosides sont tous différents entre eux et dérivent des sérotypes choisis parmi les sérotypes 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C. 19F et 23F de S. pneumoniae. 16. Une composition selon la revendication 15, qui comprend 10 ou 11 conjugués sélectionnés parmi - le polyoside de sérotype I couplé à la TT ou à la DT; - le polyoside de sérotype 3 couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 4 couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 5 couplé à la TT ou à la DT; - le polyoside de sérotype 6B couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 7F couplé à la TT ou à la DT; - le polyoside de sérotype 9V couplé à la TT; -14 - 2763244 - le polyoside de sérotype 14 couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 18C couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 19F couplé à la TT; et - le polyoside de sérotype 23F couplé à la TT. 17. Une composition selon la revendications 10, qui comprend 10 ou 11 valences représentées par 12 à 22, notamment 12 à 15 conjugués, dans lesquels les polyosides dérivent des sérotypes choisis parmi les sérotypes 1. 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F et 23F; composition dans laquelle des conjugués de même valence diffèrent entre eux par la protéine porteuse. 18. Une composition selon la revendication 17, qui comprend - le polyoside de sérotype I couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 3 couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 4 couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 5 couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 6B couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 6B couplé à la TT: - le polyoside de sérotype 7F couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 9V couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 9V couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 14 couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 18C couplé à la DT; - le polyoside de sérotype 18C couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 19F couplé à la TT; - le polyoside de sérotype 23F couplé à la TT; et - le polyoside de sérotype 23F couplé à la DT.