Brevet FR2767059A1 — publié le 19990212

La présente invention concerne l'utilisation d'extraits de Polygonatum pour stimuler la synthèse de l'élastine cutanée. Dans ce but, elle concerne notamment l'utilisation d'extraits de Polygonatum kingianum Coll. Et Hemsl, Polygonatum sibiricum Redoute, Polygonatum cyrtonema Hua, Polygonatum zanlanscianense, et plus particulièrement, l'utilisation d'extraits des rhizomes de Polygonatum connus sous le nom de Huang Jing (Liu Y.P. et al, Shoyakugaku Zasshi 47 (3), 1993, 249-266) Dans la suite de la présente description, ces différents extraits sont désignés sous le nom générique d'extraits de Polygonatum par simplification. Les rhizomes de Polygonatum et, notamment de Polygonatum sibiricum Redoute, de Polygonatum cyrtonema Hua ou de Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl. (Liliacées) sont utilisés en médecine traditionnelle chinoise sous le nom de Huang Jing (Matière Médicale Chinoise - B. Auteroche, M. Auteroche, M. Demont - Maloine 1992, p. 620). Les principales indications des rhizomes de Polygonatum sont pour le traitement des toux sèches dues à la déficience du poumon, pour tonifier les reins ou pour traitcr les déficiences de la rate ou de l'estomac. Par ailleurs, il est connu par l'article de Grégory C. Scphel ct al. dans J. Invest. Dersnatol. 1986, X, pages 279-285, que la production d'élastinc par les fibroblastes de donneurs âgés diminue. Il est également connu quc l'clasticitc cutanée diminue de façon significative avec l'age comme décrit par Takoma ct al. dans British Journal of Dermatology 1994, 131, pages 641 -648. Dans le cadre de l'invcntion, il a été mis cn cvidcncc, dc manière inattendue, que des extraits de Polygonatum permettaient de stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes du derme, en particulier Ics fibroblastos du dorme humain. Or, on rappellera que dans le derTnc, Ics fibres élastiques formcnt un réseau qui contribuc à l'clasticitc dc la peau ct par conscquent à sa tonicité et à sa fermeté. L'clastinc est le composant majeur dc ces fibrcs. Ellc cst initialcment synthétisée par les fibroblastes sous la forme d'un polypcptide soluble dc 70 kDa, la tropoélastine. La formation des microfibrilles sc rcalisc cnsuitc par des liaisons intramoléculaires appelées desmosincs entrc Ics résidu lysine dcs chaînes polypeptidiques. Ces liaisons confèrent à l'clastinc unc grandc insolubilité. Ainsi, la présente invention a pour but de résoudre le nouveau problème technique consistant en la fourniture d'une solution permettant d'améliorer l'élasticité cutanée en favorisant la synthèse d'elastine, selon une solution de conception simple, aisément utilisable à l'échelle industrielle tout en permettant un usage cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique. Ainsi, selon un premier aspect, la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Polygonatum comme agent cosmétique destiné à stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes du derme. Elle concerne également selon un deuxième aspect l'utilisation d'un extrait de Polygonatum pour la préparation d'une composition pharmaceutique, notamment dermatologique, destinée à stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes du derme. Dans ces deux types d'utilisation, la stimulation de la synthèse de l'élastine a pour résultat d'améliorer l'élasticité ct la tonicité cutanées ou de favoriser le raffermissement cutané. Dans ces deux types d'utilisation, on choisira avantageusement l'extrait parmi les extraits de rhizomes de Polygonatum kingianum, de P. sibiricum, de P. cyrtonema, de P. zanlanscianense et les autres extraits dc rhizomes de Polygonatum connus sous le nom chinois de Huan Jing. L'extrait de Polygonatum précité peut être utilisé aussi bien à titre curatif que préventif, pour corriger ou prévenir la perte d'élasticité, de tonicité ou de fermeté cutanée, due notamment au vieillissement ou à l'exposition aux rayons ultraviolets. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, L'extrait de Polygonatum est un extrait des rhizomes broycs. L'extrait est avantageusement obtenu par un procédé mettant en oeuvre une étape d'extraction de la matière végétale par un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. A titre d'exemple nullement limitatif, on réalise l'extraction au moyen d'un solvant choisi dans le groupe constitué par l'eau, les alcools comprenant de préférence de 1 à 4 atomes de carbone, et les solvants mixtes à basc dc mélanges quelconques des solvants précités. De préférence, on utilisera un alcool tcl que le méthanol, l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le propylèneglycol ou Ic butylcneglycol, ou un mélange de ces alcools ou encore un mélange hydro-alcoolique. On choisira avantageusement comme solvant pour réaliscr cctte extraction un solvant choisi dans le groupe constitué par le méthanol, l'éthanol, le 1,3-butylèneglycol et les mélanges de ces solvants entre eux ou avec l'eau. Dans ce cadre, les procédures d'extraction classiques bien connues de l'homme de l'art peuvent être utilisées. En particulier, l'extraction peut être réalisée sur la matière végétale broyée. Avantageusement, l'extraction est réalisée à partir des rhizomes. La matière végétale broyée est introduite dans le solvant d'extraction, de préférence constitué par le solvant ou le mélange dc solvants polaires précités. L'extraction peut être renouvelée plusieurs fois jusqu'à épuisement de la matière végétale, conformément aux procédés bien connus de l'homme de l'art. L'extraction peut être réalisée à la température ambiante, ou à chaud et notamment au reflux du solvant. La proportion en poids entre la matière végétale et le solvant peut varier dans de larges limites. Plus précisémcnt, clle peut être comprise entre 1: 5 et 1: 100, et, de préférence, entre 1 10 et 1: 20. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'extrait de Polygonatum précité est utilisé par voie topique à une concentration comprise entre 0,001 % et 10 % par rapport au poids total d'une composition le contenant dans un excipient, véhicule ou support approprié, de préférence cosmétiquement ou pharmaceutiquement, notamment dermatologiquement, acceptable. Une concentration préférée est comprise entre 0,01 et 2 % en poids par rapport au poids total de la composition le contenant. Selon un mode de réalisation avantageux dc l'invention, l'extrait dc Polygonatum selon l'invention est utilisé cn combinaison avec une quantité efficace d'un principe actif stimulant la synthèse des composants dc la matricc extracellulaire du derme, parmi Icsquels le collagène, en particulier le collagène I et le collagène III, et les glycosaminoglycanes, en particulier l'acide hyaluronique. On utilise, à titre d'exemple de principe actif stimulant la synthèse du collagène, en particulier du collagène I et du collagène III, le madecassosidc, un extrait de Centella asiatica, ou un extrait de ginscng, cn particulier un extrait contenant le ginsénoside Ro, ledit principe actif étant à une concentration comprise entre 0,01 % et 5 % en poids par rapport au poids total dc la composition finale. On utilise, à titre d'exemple de principe actif stimulant la synthèse des glycosaminoglycanes, un extrait végétal tcl qu'un extrait dc Filicium dccipicns, en particulier un extrait d'écorce de racine de cctte plantc, décrit dans la demande de brevet français 95 07708, ou un extrait d'Eryobotria japonica décrit dans la demande de brevet français 96. 00018, ou un facteur de croissance, cn particulier le PDGF (platelet derived growth factor), facteur de croissance dérivé des plaquettes sanguines. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l'extrait de Polygonatum précité est utilisé en combinaison avec une vitamine, en particulier la vitamine A, son ester palmitique, propionique ou acétique ou la vitamine E et ses dérivés, en particulier son phosphate, à une concentration comprise entre 0,0001 et 10 %, de préférence entre 0,0001 et 5 %, en poids par rapport au poids total de la composition. Selon un troisième aspect, la présente invention couvre aussi une méthode de traitement, cosmétique ou thérapeutique, de la peau, destinée à prévenir ou à corriger une perte d'élasticité, de tonicité ou de fermeté cutanée, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application sur les zones de la peau à traiter d'une quantité efficace d'un extrait de Polygonatum, à titre de principe actif, pour stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes, ledit principe actif étant incorporé dans un excipient cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable. Pour la mise en oeuvre d'un tel procédé, on choisira avantageusement un extrait de rhizome de Polygonatum kingianum, de P. sibiricum, de P. cyrtonema, de P. zanlanscianense, ou tout autre extrait de rhizome de Polygonatum connu sous le nom chinois de Huang Jing. Les variantes de réalisation de cette méthode résultent également clairement des variantes de réalisation de l'utilisation précitée. Il résulte de ce qui précède que les extraits de Polygonatum selon l'invention sont précieux pour la fabrication d'une composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, où l'on recherche une amélioration de l'élasticité cutanée. L'homme de l'art comprend ainsi l'intérêt majeur de l'invention qui favorise la synthèse d'élastine et sa facilité d'emploi grâce à une application topique sur la peau. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à la lumière de la description explicative qui va suivre faite en référence aux exemples donnés ci-après simplement à titre d'illustration et qui ne sauraient donc en aucune façon limiter la portée de l'invention. Dans les exemples, tous les pourcentages sont donnés en poids sauf indication contraire. Exemple 1 Préparation d'un extrait methanolique de rhizomes de Polveonatum kingianum: On traite à reflux pendant 30 minutes, 100 g de rhizomes séchés et broyés de Polygonatum kingianum avec 1 litre de méthanol. On laisse refroidir la phase méthanolique jusqu'à température ambiante, puis on filtre. Le résidu solide est extrait une nouvelle fois de la même façon avec un 1 litre de méthanol. On réunit les deux filtrats méthanoliques et on évapore le solvant sous vide au ballon rotatif jusqu'à l'obtention d'un résidu solide. On obtient ainsi l'extrait méthanolique de Polygonatum kingianum, ciaprès appelé El. Exemple2 Préparation d'un extrait hvdro-éthanol1que de rhizomes de Polygonatum sibiricum: On procède comme à l'exemple 1, si cc n'est que la matière végétale est du rhizome de Polygonatum sibiricum ct que le solvant est un mélange éthanoleau 75 : 25 en volume. De plus, l'extrait obtenu après évaporation du solvant au ballon rotatif est lyophilisé pour obtenir un produit sec pulvérulcnt. Exemple3 Exemple d'essal demontrant l'activité d'un extrait dc Polygonatum sur la stimulation de la synthèse de l'clastlnc par des fibroblastes cutanés humains Maténcl et méthodes Provenance des cellules On utilise dans cctte étude une souche dc fibroblastes humains normaux (FHN) provenant de peau chirurgicalc du visage d'unc femme de 47 ans ainsi qu'une souche de FHN provenant dc peau chirurgicale de la poitrinc d'une femme de 49 ans. Les cellules sont obtenues par la méthode des explants tcllc que décrite par Dumas M. et al. dans l'article ayant pour titre "in vitro biosynthcsis of type I and III collagens by human dermal fibroblasts from donors of incrcasing ages" dans Mcch. Ageing Dcv. D (1994), pages 179-187. Mise en oeuvre des cultures de cellules Ces fibroblastes cutanés humains normaux ainsi obtenus sont ensemencés dans les puits d'une boîte de culture multipuits, dans un milieu de culture E 199, dans lequel on a ajouté 2 millimoles par litre de L-glutamine et 25 micromoles par litre d'ascorbate de sodium. 24 heures après l'ensemencement, certains puits reçoivent dc l'extrait de Polygonatum à 1 ou 2,5 ou 10Fg/ml par l'intermédiaire d'une solution dans le DMSO de façon à ce que la concentration finale de DMSO soit de 0,1 %. On utilise à chaque fois six puits par produit et par concentration, ainsi que six puits ne recevant aucun produit à tester pour les cultures témoins. Ces cultures témoins ne reçoivent que du DMSO à la concentration finale de 0,1 % en poids. La culture est poursuivie pendant 48 h. Après 48h de culture comme indiqué ci-dessus, on dose sur les surnageants de la culture l'élastine sécrétée par une méthode ELISA dérivée de celle utilisée pour le dosage du collagène comme décrit par Dumas M. et al. dans la publication citée ci-dessus, à ceci près qu'un anticorps polyclonal anti-élastine humaine du commerce a été utilisé à la place de l'anticorps polyclonal anticollagène I et III humain. Ce dosage est naturellement réalisé aussi sur des cultures témoins, ne recevant pas de produit à tester. Une gamme étalon réalisée à partir d'clastine soluble du commerce permet de convertir en nanogramme d'élastine les valeurs dc densité optique (DO) obtenues à partir des surnageants dc culture. Dosage des protéines: Parallèlement au dosage de l'clastine, un dosage dc protéines cellulaires est effectué sur les cultures dc fibroblastes, après élimination du surnageant, afin de ramencr la quantité d'élastinc dosée à une quantité fixc dc protéines cellulaires. Le dosage est cffectué cn utilisant Ic kit BCA-1 (Bicinchoninic acid kit, commcrcialisé par Sigma, Francc) après dissolution du tapis cellulaire par de la soude 0,1 N. Expression des resultats et statistiques: Les résultats sont exprimés en nanogrammes d'élastinc sécrétée par microgramme de protéines cellulaires. L'activité A de stimulation, exprimée en pourcentage, est calculée selon la formule suivante: q-q0 A= x 100 qo dans laquelle : q représente la quantité d'élastine sécrétée par les FHN traités, q0 représente la quantité d'élastine secrétée par les FHN témoins. Les résultats obtenus sur les cultures traitées (n=6) et témoins (n=6) sont comparés à l'aide du test t de Student pour séries non appariées. Toutc valeur de p d'élastine des FHN témoins et ceux traités avec les produits de l'invention. Les tableaux 1 et 2 rapportent les résultats d'essai avec l'extrait de Polygonatum obtenu selon l'exemple 1 à différentes concentrations sur les cultures de fibroblastes des deux donneurs. TABLEAU 1 Activité d'un extrait de Polygonatum sur la synthèse de. l'castine (fibroblastes du visage d'une femme de 47 ans) Conditions Elastine sécrétée Activité A Tcst t dc Student expérimentales ng/ g prot/48 h # #* en % valeurs de Témoin (Asc 25 M + 11 + 1,61,6 0 DMSO 0,1 %) Extrait de l'exemple 1 à 1,ug/ml 12,5+1,3 14 0,063 Extrait de l'exemple 1 12,9 + 2,9 17 0,19 à 2,5 g/ml Extrait de l'exemple 1 13,9 + 2,16 26 0,02 à 10 g/ml TABLEAU 2 Activité d'un extrait de Polygonatum sur la synthèse de l'élastine (fibroblastes du visage d'une femme de 49 ans) Conditions Elastine sécrétée Activité A Test t de Student expérimentales n rot/48 h en * en valeurs de Témoin (Asc 25 M + 18,1 # 2,8 0 DMSO 0,1 9'o) Extrait de l'exemple 1 àîO mi 24,9 # 3,3 38 N 0,004 a = écart type ou déviation standard Conclusion Comme il ressort des tableaux 1 et 2, I'extrait de Polygonatum stimule fortement la synthèse d'élastine. Cette stimulation augmente avec la concentration du produit testé. Il est donc démontré que l'utilisation d'un extrait de Polygonatum permet de stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes de manière significative et particulièrement inattendue. Exemples d'applications Les compositions sont exprimées ci-dessous cn pourccntages en poids. Exemple4 Gel aux liposomes pour le som du visage extrait de Polygonatum selon l'exemple 1 . ...0,2 lécithine de soja . . . . .... 1 acide hyaluronique en solution aqueuse à 1% ... .....1 Carbopols 941 ... . . ...... . . ...1,25 eau + conservateur + triéthanolamine ..... ..... qsp 100. En application locale 2 fois par jour sur le bas du visage et le cou, ce produit de soin améliore et maintient la fermeté et la tonicité dc la peau du visage et en atténue les rides et ridules. Exemple 5 Emulslon raffermissante pour le visage: propylèneglycol........................................1 glycérylstéarate PEG 100 2 glycérylstéarate sodium lauryl sulfate 4 glycéryl stéarate 3 alcool cétylique 1 triglycéride caprilique/capric.....................3 octyl stéarate 2 huile de camélia 2 extrait méthanolique sec de Polygonatum selon l'exemple 1 0,4 palmitate de vitamine A 0,01 glycocéramides de blé 0,1 acide lactique & 0,5 Carbopols 940 0,5 eau + conservateur + parfums........................................qsp 100. Cette émulsion s'applique matin et soir et redonne l'élasticité au visage qui présente alors une bonne tonicitc et un aspect raffermi. Exemple6 Emulsion fluide pour le corps: huile végétale........................................ 2 triglycéride caprylictcapric........................................ 5 phosphate de vitamine E ........................................ 0,3 carbomer........................................ 0,5 gomme xanthane................................ 0,20 acide hyaluronique en solution à 1%...................................... 1 extrait de Polygonatum suivant exemple 1............................... 0,2 extrait d'Eriobotrya japonica..................... ........... 0,1 extrait de Centella asiatica........................ .... 0,1 extrait de thé vert........................................ 0,05 eau + conservateur + agent rafraîchissant + parfum qsp 100 En application le soir, par cures de 20 jours, avec massage pour permettre aux tissus de conserver leur élasticité. Exemple7 Lotlon tonique pour le visage Lotion A extrait hydroéthanolique sec de Polygonatum selon l'exemple 2 ...0,3 extrait d'Eriobotrya japonica . .... 1 ginsénoside Ro .. ....... . ..... 0,4 solution aqueuse à 1% d'acide hyaluronique .... 1 glycérol.... . 2 2 eau + conservateur qspl00. Cette lotion tonique peut être utilisée par les femmes après le démaquillage ou par les hommes après le rasage. L'invention couvre également tous les équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs diverses combinaisons. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'un extrait de Polygonatum comme agent cosmétique destiné à stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes du derme. 2. Utilisation d'un extrait de Polygonatum pour la préparation d'une composition pharmaceutique, notamment dermatologique, destinée à stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes du derme. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en cc que ledit extrait de Polygonatum est choisi par les extraits de rhizomes de Polygonatum kingianum, de P. sibiricum, de P. cyrtonema, dc P. zanlanscianense et les autres extraits de rhizomes de Polygonatum connus sous le nom chinois de Huang Jing. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ledit extrait est obtenu par un procédé mettant cn ocuvre au moins une étape d'extraction de la matière végétale par un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. 5. Utilisation selon la revendication 4, caractérisée en ce que ledit solvant polaire ou mélange de solvants polaires est choisi dans le groupe constitué par l'eau, les alcools comprenant dc préférence de 1 à 4 atomes de carbone, de préférence le méthanol, l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le propylèneglycol ou le butylèneglycol et les solvants mixtes à base de mélanges quclconqucs dc ces solvants. 6. Utilisation selon la revendication 4 ou 5, caractérisée cn cc que ledit solvant ou mélange de solvants polaires est choisi dans le groupe constitué par Ic méthanol, l'éthanol, le 1,3-butylèneglycol et les mélanges dc ces solvants entre eux ou avec l'eau. 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonatum est utilisé par voic topique à une concentration comprise entre 0,001 % ct 10 % en poids par rapport au poids total d'unc composition le contenant dans un excipient, véhicule ou support approprié, cn particulier cosmétiquement ou pharmaccutiqucmcnt, notamment dermatologiquemcnt, acceptable. 8. Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonatum précité est utilisé à une concentration comprise entre 0,01 ct 2 % en poids par rapport au poids total de laditc composition. 9. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonatum précité est utilisé cn combinaison avec une quantité efficace d'un principe actif stimulant la synthèse des composants dc la matrice extracellulaire du derme, en particulier le collagène, cn particulier le collagène I et le collagène III, et les glycosaminoglycanes, en particulier l'acide hyaluronique. 10. Utilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonatum précité est utilisé en combinaison avec un principe actif stimulant la synthèse du collagène, en particulier du collagène I et du collagène IIII, choisi parmi le groupe constitué par le madécassoside, un extrait de Centella asiatica, et un extrait de ginseng, en particulier contenant le ginsénosidc Ro, à une concentration en poids de 0,01 % à 5 %. 11. Utilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonatum précité est utilisé en combinaison avec un principe actif stimulant la synthèse des glycosaminoglycanes, choisi dans le groupe constitué par les extraits de Silicium décipiens, d'Eriobotrya japonica, et le PDGF (platelet derived growth factor). 12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait de Polygonatum précité est utilisé en combinaison avec des vitamines, en particulier la vitamine A, son ester palmitique, propionique, ou acétique, ou la vitamine E et ses dérivés, en particulier son phosphate, à une concentration en poids de 0,0001 à 10 %. 13. Méthode de traitement cosmétique destinée à prévenir ou à corriger une perte d'élasticité, de tonicité ou de fermeté cutanée, caractérisée en cc qu'cllc comprend l'application sur les zones de la peau à traitcr d'unc quantité efficace d'un extrait de Polygonatum utilisé à titre dc principe actif, pour stimuler la synthèse d'élastine par les fibroblastes du derme, ledit principe actif étant incorporé dans un excipient cosmétiquement acceptable. 14. Méthode selon la revendication 13, caractérisée cn cc que ledit extrait est un extrait de rhizome de Polygonatum kingianum, dc P. sibiricum, de P. cyrtoncma, de P. zanlanscianense, ou tout autre extrait dc rhizome de Polygonatum connu sous le nom chinois dc Huang Jing.