Brevet FR2761990A1 — publié le 19981016

Dérivés halogénés antimitotiques d'alcaloïdes de Vinca Les alcaloïdes dimêres du Catharanthus rose us et leurs dérivés, couramment appelés alcaloïdes de Vinca, sont largement utilisés en chimiothérapie anticancéreuse depuis une trentaine d'années. Ils sont représentés par quatre produits - deux composés naturels, la vinblastine et la vincristine, - deux produits d'hémisynthêse, la vindésine obtenue à partir de la vinblastine, et la vinorelbine, synthétisée à partir des alcaloïdes monomères précurseurs, catharanthine et vindoline. Vinblastine Vincristine Vindesine Vinorelbine Structure des alcaloïdes de Vinca utilisés en chimiothérapie Dans le cadre de nos travaux de recherche visant à obtenir de nouveaux dérivés de cette famille pouvant conduire à de nouvelles applications en chimiothérapie anticancéreuse, nous avons adopté une démarche originale consistant à utiliser la réactivité exceptionnelle des milieux superacides, susceptible d'induire de profondes modifications dans ces molécules hautement fonctionnalisées. Nous avons ainsi déjà préparé une série de composés difluorés en position 20', qui sont inaccessibles aujourd'hui par les méthodes classiques de synthèse (brevet FR 2 707 988 du 21.07.93, WO 95/03312), et dont les propriétés pharmacologiques sont particulièrement intéressantes. Formule générale des composés décrits dans le brevet FR 2 707 988 L'application de cette chimie inhabituelle à ce type de molécules complexes nous a permis de préparer une nouvelle famille de composés halogénés, également inaccessibles par la chimie classique. La présente invention, réalisée au Centre de Recherche Pierre Fabre, a pour objet de nouveaux dérivés d'alcaloïdes de Vinca, leur mode de préparation et leur application en thérapeutique. Les composés de l'invention possèdent la formule générale X, schématisée cidessous: Formule générale 1 dans laquelle n = 1 ou 2, R1 représente un atome d'hydrogène ou de fluor, R2 représente un atome de chlore. L'invention concerne également les sels des composés de formule générale 1 avec des acides minéraux ou organiques pharmaceutiquement acceptables. L'acide employé peut être, à titre d'exemple non limitatif, I'acide sulfurique ou l'acide tartrique. L'invention concerne aussi bien les isomères correspondant aux configurations R et S des carbones 4' et 20' des composés de formule générale 1, que leurs mélanges en toute proportion. Les dérivés de l'invention sont préparés par réaction d'un composé de formule générale 2 en milieu superacide, provenant du mélange d'un acide fort de Bronsted comme l'acide fluorhydrique, et d'un acide de Lewis fort comme le pentafluorure d'antimoine, en présence d'un réactif générateur d'espèces de type superélectrophile, suivant la dénomination proposée par G. Olah (Ang Chem. Int. Ed. Engl., 32, 767-88, 1993). Ce réactif peut être constitué d'un dérivé chloré comme le chlorure de méthylène, le chloroforme, le tétrachlorure de carbone, le 2,2-dichloropropane ou d'un mélange de ces dérivés en toutes proportions. La structure des composés de formule 2 est décrite ci-dessous Composés de formule générale 2 dans laquelle R3 représente un groupement hydroxyle et R4 un atome d'hydrogène, dans ce cas le composé 2 correspond à la vinblastine, ou bien: R3 et R4 formant une double liaison, dans ce cas le composé de formule 2 correspond à la 3',4'-anhydrovinblastine. Les réactions en milieu superacide s'effectuent dans des récipients resistant à l'acide fluorhydrique comme le Téflon() ou un acier de composition adaptée. Le dérivé de formule 2, dans laquelle R3 et R4 sont définis comme ci-dessus, est dissous dans l'acide fluorhydrique ou dans un dérivé chloré défini comme ci-dessus servant de solvant, et ajouté au mélange superacide, qui peut éventuellement déjà contenir une fraction de dérivé chloré. Cette addition est effectuée en maintenant la température du milieu à une valeur choisie, comprise entre -80 et -30 OC. A basse température et en présence de chlorure de méthylène ou de tétrachlorure de carbone, les composés de formule 1 dans laquelle n = 2, R1 = H et R2 = Cl sont isolés de façon majoritaire. Les composés de formule 1 dans laquelle n = 2, R1 = F et R2 = Cl sont isolés du même milieu réactionnel en proportion plus faible. Ceci est résumé dans le schéma ci-dessous 5 (Cy a '} ç 433~ m Composé de formule 2 Les dérivés de formule générale 1, dans lesquels n = 1, R1 et R2 étant définis comme ci-dessus, sont préparés par contraction du cycle C' (n = 2 o n = 1) des composés de formule générale 1 dans lesquels n = 2, suivant les méthodes décrites dans la littérature (Eur. J. Med. Chem., 18, 419-24, 1983), en particulier par action de la N-bromosuccinimide dans le chlorure de méthylène en présence d'un acide comme l'acide trifluoroacétique et à température inférieure à -10 C. Après neutralisation en milieu basique, la 9'bromoindolénine du dérivé de formule 1 dans laquelle n = 2, intermédiaire peu stable et non isolé, subit une hydrolyse de préférence dans un mélange [chlorure de méthylène : eau : tétrahydrofuranne], en présence ou non de tétrafluoroborate d'argent (AgBF4), à une température comprise entre - 10 C et le reflux du solvant. L'addition d'AgBF4, en quantité catalytique ou stoechiométrique par rapport au composé l ( n = 2), permet d'accélérer le cours de la réaction si celle-ci n'est pas terminée après l'étape de neutralisation. Le produit majoritaire de la réaction correspond au composé de formule 1 dans laquelle n = 1. Cette réaction est schématisée ci dessous AI BI N0 NesITFA ~ ruz chez NH1 "' OÉi'INHO4É Ct cy YE Ct CLI Ct Carpidefarnb1 coeT-foenie1(n=; PVI R,JZ s' N0 't NHJ Ct Ii NH:O 'IPO Ct ;cbnrI1se1(n=1) L'invention a également pour objet un nouveau procédé de synthèse de la 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine, ainsi que de la 20',20'-difluoro-3',4'dihydrovinorelbine ou vinflunine, composés revendiqués dans le brevet FR 2 707988 du 21.07.93 (WO 95/03312). En modifiant les conditions opératoires de la réaction en milieu superacide mettant en jeu les composés de formule 2 dans laquelle n = 2, R3 et R4 étant définis comme ci-dessus, on obtient préférentiellement la 4'-déoxy20',20'-difluorovinblastine. Ces modifications de conditions opératoires consistent essentiellement à augmenter la température (entre -45 et -35 "C), à allonger le temps de réaction, ou à employer un superélectrophile de réactivité différente. En effet, nous avons montré dans une étude cinétique de la réaction que les composés isolables de formule l dans laquelle n = 2, R1 = H et R2 = Cl, majoritaires dans le cas précédent (41%) disparaissent au profit du produit difluoré en position 20' dans ces nouvelles conditions. En optimisant les conditions opératoires, le rendement de cette réaction de difluoration est meilleur (50%) que celui obtenu par le procédé décrit dans le brevet cité ci-dessus, qui met notamment en jeu la N-bromosuccinimide (NBS) comme agent électrophile. En effet, le rendement indiqué pour la difluoration de la vinorelbine en présence de NBS n'est que de 25%. Les composés de formule générale 2 sont la vinblastine quand R3 = OH et R4 = H, et la 3',4'-anhydrovinblastine quand R3 et R4 forment ensemble une double liaison. Le dérivé de formule 2 est dissous dans le dérivé chloré, de préférence le chloroforme ou le 2,2-dichloropropane, ou un mélange contenant du chloroforme ou du 2,2-dichloropropane, et ajouté au milieu superacide, en maintenant la température de ce dernier entre -45 et -35 "C. Le dérivé difluoré, 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine, constitue alors le produit final majoritaire de la réaction. Le dosage par CLHP analytique indique une proportion de ce composé de l'ordre de 50%. Cette réaction est illustrée dans le schéma suivant: H FF II ?I=L R3'O et %=H cy cy ou 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine R3etR4=daSe bison D'autres agents générateurs d'ions superélectrophiles comme le tétrabromure de carbone CBr4, le dibromométhane CH2Br2 ou le tribromure de bore BBr3 conduisent également à la 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine de façon majoritaire. Cette méthode constitue donc un nouveau procédé de préparation de la 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine, avec un rendement supérieur à celui obtenu par la technique antérieure. La 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine obtenue suivant cette voie peut ensuite subir une contraction de son cycle C' (n = 2 I'addition d'AgBF4 permet d'accroître la vitesse de la réaction. Le composé majoritaire obtenu avec un rendement de l'ordre de 80% correspond à la 20',20'-difluoro-3',4'-dihydrovinorelbine ou vinflunine. Le schéma ci-dessous résume cette réaction: HFF H FF N Il N N3S/1FA hot" N NesITFA ycN' np- M1 Ct I 0 H,cO Ct Ct 4 2a,20 orwinblastine / gUrrandolériine de la / 44cog-2a,2a dRumerblastine H F F N Il ,4 Ct virflrnine (20', 20'-difluoro-3',4'-dihydrovinorelbine) L'enchaînement de ces deux étapes constituent donc un nouveau procédé de synthèse de la vinflunine, plus avantageux que le précédent en ce sens que: 1) la réaction de fluoration en milieu superacide est effectuée à partir de composés naturels comme la vinblastine ou la 3',4'-anhydrovinblastine, accessibles directement par extraction des feuilles de Catharanthus rose us, et non plus à partir de la vinorelbine, produit d'hémisynthèse plus onéreux, 2) le rendement de la réaction de difluoration par ce nouveau procédé est de l'ordre de 50% contre 25% avec le procédé précédent, 3) la purification par chromatographie des composés obtenus, notamment de la 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine est moins délicate que dans le cas précédent. Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toutefois en limiter la portée. Les caractéristiques spectroscopiques confirment la structure des composés obtenus selon l'invention. Exemple 1: 20'-chloro-4'-déoxyvinblastine 1. (n=2,R1=H,R2=Cl) Dans un récipient en Téflon de 250 ml, on prépare une solution de pentafluorure d'antimoine (60 g; 0,28 mole) dans 80 ml (4 moles) d'acide fluorhydrique anhydre que l'on refroidit à -60 "C. Sous agitation magnétique, on y ajoute successivement 1,63 mil (17 mmoles) de tétrachlorure de carbone, puis goutte-à-goutte une solution de 13,75 g (17 mmoles) de 3',4'anhydrovinblastine 2 (n = 2, R3 et R4 formant une double liaison) dans 25 ml de chlorure de méthylène, en évitant que la température ne dépasse -40 OC. Après 30 minutes, le milieu réactionnel est versé avec grande précaution dans 1,5 litre d'une suspension aqueuse 3 M de Na2CO3 contenant 200 ml de chlorure de méthylène. Après décantation, la phase aqueuse est extraite par 100 ml de chlorure de méthylène. Les phases organiques sont regroupées, lavées par une solution saturée de NaCI, séchées sur MgSO4 et évaporées. L'analyse par CLHP analytique du résidu récupéré montre la présence de deux pics voisins intégrant au total pour 41% (21 et 20%) notés produit de l'Exemple la et produit de l'Exemple lb dans les tableaux décrivant les spectres de RMN, correspondant aux deux diastéréoisomères en 20' de la 20'chloro-4'-déoxyvinblastine. La purification est effectuée par chromatographie sur colonne de silice, puis par CLHP préparative en phase inverse. Les deux diastéréoisomères de la 20'-chloro-4'-déoxyvinblastine séparés sont salifiés sous forme de ditartrate par addition de deux équivalents (mole) d'acide tartrique dans l'eau, et lyophilisés. C46 H57 Cl N4 O8 , 2(C4 H6 06): 1129,62 Point de fusion : > 260 "C IR(KBr): 3448.17 1736.05 1615.36 1459.86 1372.51 1231.89 1121.18 1067.54 cm-l. Spectre de masse (1)/CI NH3): MH + = 829.4 Exemple 2: 20'.chloeo-4'-déoxyvinblastine 1. (n = 2, R1 = H, R2 = Cl) Ce composé est obtenu en suivant le mode opératoire décrit à l'Exemple 1, en remplaçant la 3',4'-anhydrovinblastine 2 (n = 2, R3 et R4 formant une double liaison) par la vinblastine 2 (n = 2, R3 = OH, R4 = H). Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques des produits isolés sont identiques à celles des composés obtenus à l'Exemple 1. Exemple 3: 20'-chloro-4'-déoxy-4'-fluorovinblastine 1. (n = 2, R1 = F, R2 = C1) Ce composé est isolé du mélange réactionnel obtenu à l'Exemple 1 ou à l'Exemple 2, à partir d'autres fractions moins polaires provenant de la chromatographie sur colonne de silice. La purification finale est effectuée par CLHP préparative en phase inverse. La 20'-chloro-4'-déoxy-4'-fluorovinblastine est salifiée sous forme de ditartrate par addition de deux équivalents (mole) d'acide tartrique dans l'eau, et lyophilisée. C46 H56 Cl F N4 O8 , 2(C4 H6 06): 1147,61 Point de fusion : > 260 "C IR(KBr): 3470.13 2951.45 1735.92 1616.62 1458.44 1371.64 1228.52 1040.10 743.07 cm-l. Spectre de masse (D/CI NH3) MH + = 847.4 Exemple 4: 20'-chloro-3',4'-dihydrovinorelbine 1. (n = 1, R1 = H, R2 = Cl) On dissout 900 mg (1,08 mmoles) de 20'-chloro-4'-déoxyvinblastine 1 (n = 2, R1 = H, R2 = Cl), isolée suivant l'Exemple 1, dans 5 ml de chlorure de méthylène, additionné de 95 1ll (1,2 mmoles) d'acide trifluoroacétique, refroidi à -45 OC. On place le montage à l'abri de la lumière, et on ajoute en solution dans 2 ml de CH2C12 et 95 cul1(1,2 mmoles) de TFA 193 mg (1,08 mmoles) de N-bromosuccinimide, et on laisse agiter pendant 30 minutes. Le mélange est alors neutralisé par addition de 5 ml d'une solution saturée de NaHCO3, puis aussitôt d'une solution de 211 mg (1,08 mmoles) de tétrafluoroborate d'argent dans un mélange de 5 ml de tétrahydrofuranne et 2 ml d'eau. On laisse revenir à température ambiante sous agitation magnétique pendant environ deux heures. Après filtration, la phase organique est séparée, lavée par deux fois 10 ml d'eau, puis 10 ml d'une solution de NaCI saturé. Après séchage sur MgSO4, la solution est évaporée et le résidu, est purifié par chromatographie sur colonne de silice, puis par CLHP préparative en phase inverse. C45 H55 Cl N4 O8 : 815,41 JR(KBr): 3446 2950 1740.89 1459.16 1246.59 1200.65 1042 cm-l. Spectre de masse (D/CI NH3) MH + = 815.4 Exemple 5: 20'-chloro-3',4'-dihydro-4'-fluorovinorelbine 1. (n 1,R1=F,R2=Cl) Ce composé est obtenu en suivant le mode opératoire décrit à l'Exemple 4, en remplaçant la 20'-chloro-4'-déoxyvinblastine par la 20'chloro-4'-déoxy-4'-fluorovinblastine 1 (n = 2, R1 = F, R2 = Cl). La 20'-chloro3',4'-dihydro-4'-fluorovinorelbine est purifiée par chromatographie dans des conditions identiques. C45 H54 Cl F N4 O8 : 833,40 IR (KBr): 3446.83 2950.98 1742.73 1617.73 1457.36 1234.38 1042.23 996.50 742.15 cm-l. Spectre de masse (1)/CI NH3): MH + = 833.5 Les déplacements chimiques des protons caractéristiques des structures nouvelles préparées ci-dessus sont rassemblés dans le tableau suivant: Atome Produit de l'Exemple d'hydrogène la et lb 3 4 5 H4' 1,95 (m, 1H) 1,90 (m, 1H) - H7' 3,1-3,3 (m, 2H) 3,1 (m, 1H) 4,32 (d, 1H) 4,38 (d, 1H) 3,3 (m, 1H) 4,46 (d, 1H) 5,07 (d, 1H) H8' 3,1-3,25 (m,2H) 3,05 (m, 1H) - 3,45 (m,lH) H20' 3,68 (m, 1H) 3,80 (m, 1H) 3,80 (m, 1H) 3,93 (m, 1H) H21' 1,50 (d, 3H) 1,44 (d, 3H) 1,50 (d, 3H) 1,57 (d, 3H) La description des spectres de RMN 13C des produits nouveaux obtenus suivant les exemples ci-dessus est détaillée dans le tableau suivant: Numérotation des alcaloïdes de Vinca (suivant les recommandations I.U.P.A.C.) Exemple la Carbone n 1 N N N N N 2 83 348 83.348 82 72 83 5 83.36 3 79.71 79.71 79.01 80.07 79.74 4 76 496 76 466 75 78 76 78 76 46 5 42 69 42.69 42.04 42.95 42 66 6 130 04 130 01 129 41 130 311 130 08 7 124 583 124 583 123 89 124 94 124 54 8 50 27 50 209 49 64 50 75 50 49 9 N N N N N 10 50 27 50 209 49 64 50 55 50 38 11 44 6 4463 44 03 44 8 44 48 12 53.332 53.332 52 63 53 55 53.23 13 122.673 - 122.733 122.07 123 122.64 14 123 431 123 461 122 87 123 37 123 17 15 121 066 121036 120 48 120 2 120 84 16 158 086 158 056 157 52 158 3 158 12 17 94 142 94 142 93 63 94 19 94 01 18 152 75 152 719 152 07 153 01 152 65 19 65 369 65 399 64 83 65 64 65 45 20 30 835 30 835 30 17 31 30 71 21 8 368 8 399 7 72 8 42 8 1 22 38 415 38 385 37 76 38.65 38 45 23 171 669 171 669 171 06 171.95 171 69 24 52 271 52 271 51.57 52.51 52 23 25 55 849 55 849 55.29 56 04 55 49 26 170 941 170 941 170 13 171.22 170 88 27 21 193 21 193 20 45 21 45 21 15 1' 33 594 33 594 33 32 24 33 59 2' 30 016 30 077 28 56 2967 1971 3' 34 867 35 929 35 4 34 85 35 4 4' 38 779 39 355 92 52 31 95 92 5' 56 819 57 243 58 43 55 56 7 6' N N N N N 7' 56 819 56 788 55 4 47 38 46 98 sent sent 9' 117 064 117 185 116 07 110 76 111 68 10' 129.252 129.282 128.72 129.09 128.7 11' 118 337 118 398 1177 118 77 118 23 12' 178 883 118 913 118 120 1 119 56 13' 122 339 122 37 121 63 123 04 122 46 14' 110 575 110 545 109 9 110 76 110 52 -13S.0 133.073 134745 y3-4-,9g- 134.69 16' N N N N N 17' 130 617 130 495 130 49 133 3 133 43 18' 55 454 55 424 54 95 55 04 55 77 19' 47 42 47 45 46 11 48 6 47 04 20' 62.155 62.4281 60.71 62.7 61.24 21 ' 22 406 22 649 18 5 23 05 18 64 22' 174 883 174 883 174 17 175 175 23' 52 45 52 453 51 7 52 96 52.62 Caractéristiques de RMN 13C des comDosés préparés Exemple 6: 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine. Dans un réacteur en acier Asteloy de 6 litres, on prépare une solution de pentafluorure d'antimoine (750 g; 3,45 moles) dans 500 ml (25 moles) d'acide fluorhydrique anhydre que l'on refroidit à -45 "C. On y ajoute une solution de 107 g (0,12 mole) de dichlorhydrate de 3',4'-anhydrovinblastine dissous dans 250 ml de chloroforme en 30 minutes, en maintenant la température à -35 OC. On laisse sous agitation 30 minutes supplémentaires à cette température. On introduit ensuite 200 ml d'acétone en 30 minutes à -30 OC, puis 150 ml d'eau en 15 minutes à -25 "C. En laissant remonter la température à 20 OC, on ajoute 900 ml de chlorure de méthylène puis 650 ml d'eau. Après décantation, la phase aqueuse est extraite par 100 ml de chlorure de méthylène. Les phases organiques sont regroupées, et neutralisées à température inférieure à 20 "C par 600 ml de KOH à 10 %. Après décantation, la phase organique est agitée pendant une nuit en présence de 800 ml d'ammoniaque à 10% avant d'être lavée deux fois par 400 ml d'eau, séchée sur MgSO4 puis évaporée. La purification est effectuée par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange toluène : acétone (65 : 35). Le résidu obtenu après évaporation est dissous dans 80 ml de chlorure de méthylène et précipité par addition de 350 ml d'éther isopropylique. Après filtration, on récupère 41 g (40%) de 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine. Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques du composé isolé sont identiques à celles du produit obtenu suivant le procédé décrit dans le brevet FR 2 707 988 du 21.07.93 (WO 95/03312). Exemple 7: 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine. Dans un récipient en Téflon de 125 ml, on prépare une solution de pentafluorure d'antimoine (8,6 g; 40 mmoles) dans 7,2 ml (360 mmoles) d'acide fluorhydrique anhydre que l'on refroidit à -45 OC. Sous agitation magnétique, on y ajoute successivement 0,94 ml (9 mmoles) de 2,2dichloropropane, puis goutte-à-goutte une solution de 0,71 g (0,9 mmoles) de 3',4'-anhydrovinblastine 2 (n = 2, R3 et R4 formant une double liaison) dans 3,6 ml d'acide fluorhydrique, en évitant que la température ne dépasse -35 "C. Après 25 minutes, le milieu réactionnel est versé avec grande précaution dans 300 ml d'une solution aqueuse 3 M de Na2CO3. Après décantation, la phase aqueuse est extraite par 50 ml de chlorure de méthylène. Les phases organiques sont regroupées, lavées par une solution saturée de NaCI, séchées sur MgSO4 et évaporées. Le résidu contient 46% de 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine, identique au produit obtenu suivant le procédé décrit dans le brevet FR 2 707 988 du 21.07.93 (WO 95/03312). Exemple 8: 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine Ce composé est obtenu en suivant le mode opératoire décrit à l'Exemple 7, en remplaçant le 2,2-dichloropropane par le tétrabromure de carbone CBr4 lors du traitement en milieu superacide. Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques du composé isolé sont identiques à celles du produit obtenu suivant le procédé décrit dans le brevet FR 2 707 988 du 21.07.93 (WO 95/03312). Exemple 9: 4'-déoxy-20',20'-di fluorovinblastine Ce composé est obtenu en suivant le mode opératoire décrit à l'Exemple 7, en remplaçant le 2,2-dichloropropane par le tribromure de bore BBr3 lors du traitement en milieu superacide. Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques du composé isolé sont identiques à celles du produit obtenu suivant le procédé décrit dans le brevet FR 2 707 988 du 21.07.93 (WO 95/03312). Exemple 10: 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine Ce composé est obtenu en suivant le mode opératoire décrit à l'Exemple 7, en remplaçant le 2,2-dichloropropane par le dibromométhane CH2Br2 lors du traitement en milieu superacide. Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques du composé isolé sont identiques à celles du produit obtenu suivant le procédé décrit dans le brevet FR 2 707 988 du 21.07.93 (WO 95/03312). Exemple 11: 20',20'-difluoro-3 ',4'-dihydrovinorelbine (vinflunine). On dissout 90 g (0,108 mole) de 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine dans 800 ml de chlorure de méthylène qu'on refroidit à -45 "C, et auxquels on ajoute 10,4 ml (0,135 mole) d'acide trifluoroacétique. On place le montage à l'abri de la lumière, et on y verse durant environ 30 minutes une solution composée de 19,3 g (0,108 mole) de N-bromosuccinimide dans un mélange de 200 ml de chlorure de méthylène et 10,4 ml (0,135 mole) d'acide trifluoroacétique, en veillant à ce que la température du milieu ne remonte pas au-dessus de -45 La vinflunine, en solution dans le toluène, est extraite par une solution aqueuse contenant exactement deux équivalents (mole) d'acide tartrique. La phase aqueuse est ensuite lyophilisée pour obtenir le ditartrate de vinflunine. Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques du composé isolé sont identiques à celles du produit obtenu suivant le procédé décrit dans le brevet FR 2 707 988 du 21.07.93 (WO 95/03312). Comme les alcaloïdes antitumoraux du Catharanthus rose us, les composés préparés suivant l'invention sont des "poisons du fuseau mitotique". Cette propriété a été confirmée par la mesure de l'inhibition de la polymérisation de la tubuline en microtubules en présence des composés de l'invention, en suivant la méthode décrite par R. C. Weisenberg (Science 177, 1196-7, 1972). Les résultats sont exprimés en IC50, qui correspond à la concentration de composé qui provoque 50 % d'inhibition de la polymérisation. Ce phénomène est aisément suivi et quantifié par l'intermédiaire des variations de la densité optique. A titre d'exemple, le tableau ci-dessous montre les résultats obtenus avec deux dérivés préparés suivant l'invention: Produit IC50 (M) Exemple 1 1.99 Exemple 3 1.54 Vinorelbine 1.70 Compte-tenu de cette propriété pharmacologique caractéristique des alcaloïdes de Vinca, les composés de la présente invention peuvent être utilisés en chimiothérapie anticancéreuse. Les préparations pharmaceutiques contenant ces principes actifs peuvent être mises en forme pour l'administration par voie orale, intraveineuse ou sous-cutanée, de manière classique, bien connue de l'homme du métier. REVENDICATIONS 1)Nouveaux dérivés antimitotiques des alcaloïdes de Vinca correspondant à la formule générale suivante dans laquelle n = 1 ou 2, R1 représente un atome d'hydrogène ou de fluor, R2 représente un atome de chlore, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organiques thérapeutiquement acceptables, et les mélanges des diastéréoisomères correspondant aux configurations des carbones 4' et 20' des composés et leurs mélanges en toute proportion. 2) Composés de formule générale 1 selon la revendication 1, caractérisés par le fait qu'ils sont choisis parmi 20'-chloro-4'-deoxy-4'-fluorovinblastine, 20'-chloro-4'-deoxyvinblastine: 20'-chloro-3 ',4'-dihydrovinorelbine: 20'-chloro-3 ',4'-dihydro-4'-fluorovinorelbine: 3) Procédé de préparation des composés selon les revendications I et 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule générale 2 en milieu superacide, provenant de l'association d'un acide de Bronsted comme l'acide fluorhydrique HF et d'un acide de Lewis comme le pentafluorure d'antimoine SbFs, en présence d'un dérivé chloré générateur d'ions superélectrophiles selon le schéma: N Il F' f'9fs"D k )l11Ç1 > CÉd1oeé:pÉii11Ç1,Ç0 'IPo . HP o Composé de formule 2 4) Procédé de préparation de composés selon la revendication 3, caractérisé en ce que la réaction d'un composé de formule générale 2 en milieu superacide s'effectue à une température comprise entre -80 et -30 C. 5) Procédé de préparation de composés selon la revendication 3, caractérisé en ce que le dérivé chloré générateur d'ions superélectrophiles est choisi parmi: - le chlorure de méthylène, - le chloroforme, - le tétrachiorure de carbone, - le 2,2-dichloropropane, ou un mélange de ces dérivés en toutes proportions. 6) Procédé de préparation de composés selon les revendications 3 et 5, caractérisé en ce que le dérivé chloré générateur d'ions superélectrophiles utilisé pour obtenir les composés de formule générale 1 dans laquelle n = 2 est de préférence le chlorure de méthylène, le tétrachlorure de carbone, ou un mélange de ces dérivés en toutes proportions. 7) Procédé de préparation de composés selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule générale 1 dans laquelle n = 2, R1 et R2 étant défini comme ci-dessus, avec agent halogènant comme la Nbromosuccinimide, dans un solvant chloré comme le chlorure de méthylène et en présence d'un acide comme l'acide trifluoroacétique à une température inférieure à -10 C, conduisant à la 9'-bromoindolénine correspondante, intermédiaire non isolé. 8) Procédé de préparation de composés selon la revendication 1 et 7, caractérisé en ce que l'on neutralise le mélange réactionnel contenant la 9'bromoindolénine du composé de formule générale 1 dans laquelle n = 2 par un milieu basique, suivi d'une hydrolyse de préférence par un mélange [chlorure de méthylène eau tétrahydrofuranne], en présence ou non de tétrafluoroborate d'argent à une température comprise entre -10 "C et le reflux du solvant, pour obtenir le composé de formule générale 1 dans laquelle n = 1, selon le schéma suivant: 91N Fas,- N liPo 'Ct HP' Ct Carpoderomrrlel(n=9 rulei(nt2) CLI w R, Rz ';Â',"'1HPNIHffiq"OÉoCt Ct Ccnposédelon be 1 (n= 1) 9) Procédé de préparation de la 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule générale 2 en milieu superacide, provenant de l'association d'un acide de Bronsted comme l'acide fluorhydrique HF et d'un acide de Lewis comme le pentafluorure d'antimoine SbFs, en présence d'un dérivé chloré générateur d'ions superélectrophiles selon le schéma: I' H FF N N f/Sb'5 ;z1 N f19ctké P p O ;Ij H1"'9d' dé(noe9. i;i o4Nitoffas HÀoOt fiO O HF 0 R3=OH et %=H o HPo . ou 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine R3 et R4 = double liaison 10) Procédé de préparation du composé selon la revendication 9, caractérisé en ce que la température du milieu réactionnel superacide est comprise entre -45 et-35 C. 11) Procédé de préparation du composé selon la revendication 9, caractérisé en ce que le dérivé chloré générateur d'ions superélectrophiles est constitué de chloroforme ou de 2,2-dichloropropane, ou d'un mélange de dérivés chlorés contenant du chloroforme ou du 2,2-dichloropropane. 12) Procédé de préparation du composé selon la revendication 9, caractérisé en ce que le dérivé générateur d'ions superélectrophiles est constitué de tétrabromure de carbone CBr4, de dibromométhane CH2Br2 ou de tribromure de bore BBr3. 13) Procédé de préparation de la 20',20'-difluoro-3',4'-dihydrovinorelbine ou vinflunine, caractérisé en ce que l'on fait réagir la 4'-déoxy-20',20'difluorovinblastine avec agent halogénant comme la N-bromosuccinimide, dans un solvant chloré comme le chlorure de méthylène et en présence d'un acide comme l'acide trifluoroacétique à une température inférieure à -10 C, conduisant à la 9'-bromoindolénine de la 4'-déoxy-20',20'-difluorovinblastine correspondante, intermédiaire non isolé. 14) Procédé de préparation de la 20',20'-difluoro-3',4'-dihydrovinorelbine ou vinflunine selon la revendication 13, caractérisé en ce que l'on neutralise le mélange réactionnel contenant la 9'-bromoindolénine de la 4'-déoxy-20',20'difluorovinblastine par un milieu basique, suivi d'une hydrolyse de préférence par un mélange [chlorure de méthylène : eau : tétrahydrofuranne], en présence ou non de tétrafluoroborate d'argent à une température comprise entre -10 C et le reflux du solvant, selon le schéma suivant H FF HFF N Il orN' 4 OP2 Nes)TFA N H 's I N H HP o Ct Ct de 'a 4 Iip H FF N Il o1,11/iHsI4 N H: HP o50. Ct vinflurine(20',20'-difluoro-3',4'-dihydrovinorelbine) 15) A titre de médicaments nouveaux utiles, par exemple en thérapeutique humaine dans le traitement de la pathologie cancéreuse, les composés définis selon l'une des revendications I et 2. 16) Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient à titre de principe actif au moins un composé selon l'une des revendications 1 et 2, associé à un véhicule pharmaceutique acceptable.