Brevet FR2771008A1 — publié le 19990521

La présente invention concerne une nouvelle application thérapeutique des kétolides. L'invention a pour objet l'utilisation des kétolides et de leurs sels pharmaceutiquement acceptables pour la préparation de compositions pharmaceutiques destinées à prévenir les complications thrombotiques artérielles liées à l'athérosclérose. On appelle kétolide les dérivés de l'érythromycine dépourvues du cladinose en position 3. Ces produits présentent des propriétés antibiotiques (Antimicrobial Agents and Chemotherapy 1997, Vol. 41, p. 2149 à 2158, ou 1997 vol. 41, p. 454 à 459 ou Lettre de l'infectiologue 1997, vol. 12, p..46 à 54. Les kétolides sont également décrits par exemple dans les brevets européens 0487411, 596802, 606024, 614905, 680967 et la demande de brevet français 2742757. Parmi les kétolides préférés de l'invention, on peut citer les composés de formule (I) dans laquelle R représente un radical (CH2)m n(X)YAr dans lequel m représente le nomnre 0 ou 1, n représente le nombre 0 ou 1, X représente un radical (NH)a, CH2 ou S02 avec a représentant le nombre 0 ou 1, Y représente un radical (CH2)b-(CH=CH)C-(CH2)d avec c = 0 ou 1, b + c + d 5 8, Z représente un atome d'hydrogène ou d'halogène, Ar représente un radical aryle ou hétéroaryle éventuellement substitué. Le radical aryle peut être un radical phényle ou naphtyle. Le radical hétérocyclique substitué ou non peut être le radical thiényle, furyle, pyrolyle, thiazolyle, oxazolyle, imidazolyle, par exemple le radical 4- 4-(3-pyridinyl) 1Himidazolyle, thiadiazolyle, pyrazolyle ou isopyrazolyle, un radical pyridyle, pyrimidyle, pyridazinyle ou pyrazinyle, ou encore un radical indolyle benzofurannyle, benzothiazyle ou quinoléinyle. Ces radicaux aryles peuvent comporter un ou plusieurs groupements choisis dans le groupe constitué par les radicaux hydroxyle, les atomes d'halogène, les radicaux NO2, les radicaux C--N, les radicaux alkyle, alkényle ou alkynyle, 0-alkyle, 0-alkényle ou 0-alkynyle, S-alkyle, S-alkényle ou S-alkynyle et N-alkyle, N-alkényle ou N-alkynyle, renfermant jusqu'à 12 atomes de carbone éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes d'halogène, le radical Ra et Rb identiques ou différents, représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle renfermant jusqu'à 12 atomes de carbone, le radical R3 représentant un radical alkyle renfermant jusqu'à 12 atomes de carbone, ou un radical aryle ou hétéroaryle éventuellement substitué, les radicaux aryle, 0-aryle ou S-aryle carboxyliques ou aryle, O-aryle ou S-aryle hétérocycliques à 5 ou 6 chaînons comportant un ou plusieurs hétéro atomes, éventuellement substitués par un ou plusieurs des substituants mentionnés ci-dessous. Comme hétérocycle préféré, on peut citer entre autres et les radicaux hétérocycliques envisagés dans les demandes de brevets européens 487411, 596802, 676409 et 680987. Ces radicaux hétérocycliques préférés peuvent être substitués par un ou plusieurs groupements fonctionnels. Hal représente de préférence un atome de fluor, de chlore ou de brome. Parmi les sels d'addition avec les acides, on peut citer les sels formés avec les acides acétique, propionique, trifluoroacétique, malique, tartrique, méthanesulfonique, benzènesulfonique, p-toluènesulfonique, et spécialement les acides stéarique, éthylsuccinique ou laurylsulfonique. Le radical aryle est de préférence un radical arylhétérocyclique. Parmi les kétolides préférés, on peut citer les composés dans lesquels Ar représente un radical Parmi les composés préférés de l'invention, on peut citer le composé de formule (I) dont le nom suit : la 11,12didéoxy-3-de [(2,6-didéoxy-3-C(méthyl-3-O-méthyl-a-L-ribo- hexopyranosyl) oxy] 6-O-méthyl-3-oxo 12,11 ( [oxtcarboxnyl [ C[2-[4- (3-pyridinyl) lH-imidazol-l-yl] éthoxy] méthyl] imino]] érythromycine (composé P) ou encore la 11,12-didéoxy 3-de((2,6-didéoxy-3-C-méthyl-3-O-méthyl--L-ribohexopyrano- syl) oxy) 6-O-méthyl-3-oxo 12,11-(oxycarbonyl ((4-(3-(3pyridinyl) lH-1,2,4-triazol-1-yl) butyl) imino) érythromycine (composé P') décrit dans le brevet EP 680967 à l'exemple 35. Parmi les kétolides particulièrement intéressants, on peut citer les produits des brevets européens 676409 et 680967. Les kétolides présentent une activité antiagrégante plaquettaire et antithrombotique comme le montrent les résultats obtenus dans la partie expérimentale exposée ciaprès. L'invention a donc pour objet les compositions pharmaceutiques destinées à la prévention des complications artérielles comme les accidents vasculaires cérébraux, l'infarctus du myocarde et l'angor instable consécutifs à l'athérosclérose. L'agent infectieux Clamydia pneumoniae parait jouer un rôle dans le développement de l'athérosclérose chez l'homme. Les kétolides sont actifs contre Clamydia pneumoniae. De ce fait, les propriétés antiinfectieuses contre Clamydia pneumoniae jointe à leur activité antiagrégante plaquettaire permettent leur utilisation pour s'opposer au développement de l'athérosclérose et des complications thrombotiques. L'invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant un kétolide défini précédemment destinées à prévenir les complications thrombotiques artérielles liées à l'athérosclérose. Ces compositions peuvent être administrées par voie bucale, rectale, parentérale ou par voie locale en application topique sur la peau et les muqueuses mais la voie d'administration est la voie buccale. Elles peuvent être solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine, comme par exemple les comprimés simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables, les pommades, les crèmes, les gels; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, telles que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants et les conservateurs. Ces compositions peuvent également se présenter sous forme d'une poudre destinées à être dissoute extemporanément dans un véhicule approprié par exemple de l'eau stérile apyrogène. La dose administrée est variable selon l'infection traitée, le sujet en cause, la voie d'administration et le produit considéré. Elle peut être par exemple comprise entre 50 et 600 mg par jour par voie orale chez l'adulte pour le produit P ou P'. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. EXEMPLE 1 : 11,12-didéoxy-3-deE(2,6-didéoxy-3-C-méthyl-3-O- méthyl-alpha-L-ribo-hexopyranosyl) oxy -6-O-méthyl-3 -oxo- 12,11-[oxycarbonyl[[[2-[4-(3-pyridinyl) lH-imidazol-1-yl] éthoxy3 méthyl] imino]] érythromycine (composé P) Stade A : 2'-acétate de 2,3-didéhydro-11,12-didéoxy-3-O de[ (2,6-didéoxy-3-C-méthyl-3-O-méthyl-alpha-L-ribo-hexopyra- nosyl) -6-O-méthyl-11,12- (iminocarbonyloxy) -3-O- [[(2-trimé- thylsilyl) éthoxy] méthyl]-érythromycine On agite pendant 10 minutes une solution renfermant 6 ml de DMF, 0,654 g de 2'-acétate de 11,12-didéoxy-3-de[(2,6- didéoxy-3-C-méthyl-alpha-L-ribo-hexopyranosyl) oxy]-6-Ométhyl-3-oxo-11,12-(iminocarbonyloxy)-érythromycine et 0,057 g d'hydrure de sodium à 50 W dans l'huile. On porte le mélange réactionnel à 400C. On refroidit à -500C et introduit goutte à goutte 0,177 pl de ClSEM en solution. On dilue dans 5 ml de DMF. On agite à OOC pendant 30 minutes (pH 9), verse sur de la glace, extrait à l'acétate d'éthyle, lave à l'eau, sèche, filtre et concentre. On obtient 0,785 g de produit que l'on dissout dans l'éther isopropylique. On amorce la cristallisation, essore, lave et sèche à 700C. On obtient le produit recherché fondant à 1000C. RMN CDCl3 ppm Structure possible 0,07 (s) : Si(Me)3 ; 0,87 (t) : CH3-CH2 ; - 1,03 : CH2-Si 1,10 (d) - 1,12 (d) - 1,14 (d) - 1,24 (d) les CH3 ; 1,24 (s) - 1,43 (s) : 6 et 12 CH3 ; 1,95 (s) : 2-Me ; 2,08 (s) : OAc 2,27 (s) : N(Me)2 ; 2,47 (m) : H8 ; 2,68 (m) : H'3 ; 2,82 (s) : 6-OMe ; 3,04 (q) : H10 ; 3,31 (dq) : H4 ; 3,48 (m) H'5 ; 3,73 (d,J = 2,5) : H5 ; 3,80-3,92 : OCH2 ; 3,89 (s) H11 ; 4,69 (d) : H1 ; 4,78 (dd) : H2 ; 4,99 (d) - 5,04 (d) OCH2O ; 5,29 (dd) : H13. Stade B : 2'-acétate de 2,3-didéhydro-11,12-didéoxy-3-O- de(2,6-didéoxy-3-C-méthyl-3-O-méthyl-alpha-L-ribo-hexopyranosyl)-6-O-méthyl-12,11-[oxycarbonyl[[(2-bromoéthOxy) méthyl] imino]] -3-0-[[2- (triméthylsilyl) éthoxy] méthyl]-érythro- mycine Dans 2 ml de THF, on agite 0,278 g d'hydrure de sodium à 50 % dans l'huile. On refroidit à OOC et ajoute 510 mg de stade A, en solution dans 8 ml de THF. On ramène à la température ambiante et introduit 100 pl de ClCH2OCH2CH2Br en solution dans 4 ml de THF. On ramène à OOC, verse sur glace, extrait à l'acétate d'éthyle, lave à l'eau salée, sèche, filtre et concentre. On obtient 0,709 g du produit recherché. Stade C : 2'-acétate de 2,3-didéhydro-11,12-didéoxy-3-O- de(2,6-didéoxy-3-C-méthyl-3-O-méthyl-alpha-L-ribo-hexopyra nosyl) -6-O-méthyl-12,11- [oxycarbony[ [[2- [4- (3-pyridinyl) -1H- imidazol-1-yl] éthoxy] méthyl] imino]]-3-0-[[2-(triméthyl- silyl) éthoxy] méthyl] -érythromycine On introduit une solution de 3 ml de DMF et 0,377 g de 4-(3-pyridinyl)-1H-imidazole dans une solution renfermant 2 ml de DMF et 0,162 g d'hydrure de sodium à 50 W dans l'huile. On agite pendant un quart d'heure et introduit 0,709 g du produit du stade A de l'exemple 2 en solution dans 8 ml de DMF. On agite 3 heures à la température ambiante et 15 minutes à 600C. On verse sur la glace, extrait à l'acétate d'éthyle, lave à l'eau salée puis à l'eau, sèche, filtre et concentre. On obtient 0,644 g de produit. Stade D : 11,12-didéoxy-3-de[(2,6-didéoxy-3-C-méthyl-3-O- méthyl-alpha-L-ribo-hexopyranosyl) oxy]-6-O-méthyl-3-oxo12,11-[oxyCarbonyl[[[2-[4-(3-pyridinyl)-lH-imidazol-1-yl] éthoxy] méthyl] imino]] -érythromycine On agite pendant 48 heures à la température ambiante une solution renfermant 0,644 g du produit du stade B et 8 ml de méthanol, puis on dilue 0,565 g de produit obtenu dans 5 ml d'acétate d'éthyle. On refroidit à OOC et introduit 2,5 ml d'une solution 2,1N d'acide chlorhydrique dans le méthanol et ramène à la température ambiante. On maintient l'agitation à la température ambiante pendant 1 heure. On évapore les solvants, dilue à l'eau, verse sur une solution aqueuse saturée de carbonate de sodium, extrait à l'acétate éthyle, lave à l'eau, sèche, filtre et concentre. On obtient 0,508 g d'une huile que l'on chromatographie sur silice CH2Cl2/MeOH (93-7) puis CH2Cl2/MeOH/NH4OH (93-7-0,5). On concentre les fractions homogènes en CCM, reprend à l'acétate d'éthyle, lave à l'ammoniaque, dilue, extrait à l'acétate d'éthyle, à l'eau, sèche, filtre et concentre. On obtient 66 mg de produit recherché. RMN CDC13 ppm 0,85 (t) : CH3-CH2 ; 1,00 (d) - 1,15 (d) - 1,25 (d) 1,31 (d) - 1,40 (d) : les CH3-CH ; 1,34 et 1,51 : 6 et 12 Me 2,26 (s) : N(Me)2 ; 2,44 (m) : H' 4 ; 2,60 (m) : H8 ; 2,68 (s) : 6-OMe ; 3,03 (m) : H4 et H10 ; 3,18 (dd) : H'2 ; 3,55 (m) : H'5 ; 3,76 (s) - 3,92 (m) - 4,38 (m) : OCH2CH2N ; 3,87 (s) : H11 ; 3,83 (q) : H2 ; 4,24 (d) : H5 ; 4,31 (d) : H' 4,96 (dd) : H13 ; 4,99 (d) - 5,37 (d) : NCH2O . 7,36 (d) 7,54 (d) : H imidazole ; 7,30 (ddd) : H5 ; 8,08 (dt) : H4 8,45 (dd) : H6 - 8,95 (ddd) : pyridine. ETUDE PHARMACOLOGIOUE AGREGATION PLAQUETTAIRE IN VITRO. Principe L'agrégation plaquettaire est mesurée selon la méthode turbidimétrique inspirée de Born [1] en détectant la transmission optique à travers un plasma riche en plaquettes (PRP) auquel un agent agrégant a été ajouté. Lorsque les plaquettes agrègent, le plasma s'éclaircit et la transmission optique augmente. Préparation du plasma riche en plaquettes Le sang est prélevé (3 tubes par lapin) par ponction cardiaque chez un lapin, dans des tubes contenant du citrate de sodium. Pour obtenir le plasma riche en plaquettes (PRP), les tubes sont centrifugés à 160 g pendant 10 minutes. Les surnageants sont recueillis (PRP) et le culot est remis à centrifuger à 2000 g pendant 15 minutes pour obtenir le plasma pauvre en plaquettes (PPP). Par dilution avec le PPP, le PRP est ajusté à une concentration de 300 000 plaquettes par mm3 S 10%. Le comptage est effectué à l'aide du compteur Coulter ZM. Asrésation Des tubes contenant 320 111 de PRP sont mis à incuber à +370C pendant 30 minutes dans les puits de préincubation. L'agrégomètre est étalonné avec le PPP pour une transmission optique de 100% correspondant à une agrégation complète et avec le PRP issu du même lapin pour une transmission optique de 0% correspondant à l'absence d'agrégation. Le produit à étudier P est ajouté sous un volume de 40 pl. Après 2 minutes d'incubation, l'agent agrégant (ADP 10 yM, Arachidonate de sodium 0,2mM ou collagène 20 %g/ml) est ajouté sous un volume de 40 yl. L'agrégation commence immédiatement et peut être visualisée sur l'imprimante. Sur le tracé obtenu, la hauteur de la courbe d'agrégation est mesurée en cm à partir de la ligne de base avant addition de l'agent agrégant puis traduite en volts (=1/DO) en utilisant la formule 10 mV = 2,5 cm. [1] - Born G.V.R., Agregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal, Nature, 1962, 194, 927. Les résultats obtenus sont les suivants Effet du produit P sur l'agréaation plaquettaire in vitro Comparaison avec l'aspirine. % d'inbition de l'agrégation induite par l'acide arachidonique + Concentrations Produit P * Aspirine ** 10-7M 7 106M 42 8 10-5M 73 13 5x10-5M - 85 10-4M 90 100 + Les plaquettes de lapin sont mises en présence du produit à différentes concentrations puis l'acide arachidonique est ajouté à la concentration de 0,2 mM. * n = 2 lapins ** n = 4 lapins sauf pour la concentration 5x105M où n = 2. Le produit P' présente lui aussi une bonne activité sur ce test d'agrégation plaquettaire in vitro. REVENDICATIONS 1.- Utilisation des kétolides et de leurs sels pharmaceutiquement acceptables pour la préparation de compositions pharmaceutiques destinées à prévenir les complications thrombotiques artérielles liées à l'athérosclérose. 2.- Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le kétolide répond à la formule (I) dans laquelle R représente un radical (CH2)mOn(X)YAr dans lequel m représente le nombre 0 ou 1, n représente le nombre 0 ou 1, X représente un radical (NH)a, CH2 ou S02 avec a représentant le nombre 0 ou 1, Y représente un radical (CH2)b-(CH=CH)C-(CH2)d avec c = 0 ou 1, b + c + d 5 8, Z représente un atome d'hydrogène ou d'halogène, Ar représente un radical aryle ou hétéroaryle éventuellement substitué. 3.- Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que le kétolide est la 11,12-didéoxy-3-de [(2,6didéoxy-3-C(méthyl-3-O-méthyl-a-L-ribo-hexopyranosyl) oxy] 6 O-méthyl-3-oxo 12,11([oxtcarboxnyl [[[2-[4-(3-pyridinyl) 1Himidazol-l-yl] éthoxy] méthyl] imino]] érythromycine. 4.- Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le kétolide est la 11,12-didéoxy-3 de( (2,6-didéoxy-3-C-méthyl-3-O-méthyl-a-L-ribohexopyranosyl) oxy) 6-O-méthyl-3-oxo 12,11-(oxycarbonyl ((4-(3-(3-pyridinyl) lH-1,2,4-triazol-1-yl) butyl) imino) érythromycine. 5.- Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que kétolide est administré par voie orale à une dose comprise entre 50 et 600 mg par jour. 6.- Les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un kétolide défini à l'une quelconque des revendications 1 à 4, destinées à prévenir les complications thrombotiques artérielles liées à l'athérosclérose.