Brevet FR2757862A1 — publié le 19980703

La présente invention concerne l'immunologie et son incidence directe en endocrinologie, aussi bien chez 1' homme que chez l'animal. Plus particulièrement, cette incidence concerne le système reproducteur. C'est en effet par le biais de pathologies telles que avortements spontanés à répétition, syndrome des anticorps antiphospholipides, prééclampsie, que des mécanismes dysimmunitaires ont été observés en gynécologieobstétrique. Le développement des techniques de fécondation in vitro (FIV) a largement contribué à améliorer la compréhension des mécanismes de la fécondation humaine. Cette technique se heurte cependant parfois à des échecs inattendus. Le rôle de réactions immunitaires défavorables générées par la technique elle-même a été envisagé, en raison des traumatismes importants infligés à l'ovaire au cours de la stimulation hormonale et des ponctions folliculaires susceptibles de libérer des quantités importantes de matériel potentiellement antigénique dans la cavité péritonéale. Des travaux antérieurs ont mis en évidence des éléments antigéniques au niveau des thèques, constituants de l'ovaire, et la présence d'anticorps sériques dirigés contre les cellules des thèques ovariennes ou contre le corps jaune, a été rapportée dans différents contextes pathologiques (insuffisance surrénalienne, insuffisance ovarienne plus ou moins associée à une polyendocrinopathie) (6). En outre, SHIVERS et al. (1) ont montré que des anticorps fabriqués contre des antigènes ovariens, dits anticorps anti-ovaire (AOA) inhibaient la fécondation in vitro chez le hamster. Au cours de travaux précédents, les auteurs de la présente invention ont mis en évidence l'existence d'une corrélation entre le taux d'anticorps anti-ovaire observé et les échecs des tentatives de FIV (2). Les auteurs se sont alors intéressés aux antigènes potentiellement impliqués dans la génération de ces réponses auto-immunes, et ont d'abord isolé et caractérisé un peptide immunodominant réagissant avec les anticorps anti-ovaire, puis démontré l'intérêt de ce peptide dans la détection des AOA. L'importance de cette détection a été mise en évidence, dans différents pathologies entraînant des stérilités, par les auteurs de la présente invention. En examinant les taux d'AOA en pré- et postponction folliculaire, ceux-ci ont observé, chez des femmes en première tentative de FIV, un taux d'AOA supérieur au taux de femmes témoins, alors que pour ces femmes un protocole FIV avait été préconisé dans différents cas de stérilité, à savoir des stérilités d'origine tubaire, d'origine idiopathique, résultant d'une endométriose ou liées à des troubles sévères de 1 'ovulation. La détection des anticorps anti-ovaire dans une pathologie de stérilité, après une ou plusieurs tentatives vaines de FIV, peut devenir déterminante dans la conduite à tenir concernant ces échecs. Les auteurs ont en effet démontré l'efficacité d'une corticothérapie sur l'issue favorable d'une tentative de FIV (3). L'étude de l'auto-immunité ovarienne est aujourd'hui essentiellement approchée à l'aide de substrats tissulaires animaux et sur des extraits ovariens animaux (4). L'extrait ovarien utilisé par MONCAYO et al. était d'origine animale, bovine. I1 n'a pas été démontré que les antigènes reconnus étaient effectivement les mêmes dans l'espèce humaine et chez les bovins. Selon la présente invention, on apporte un peptide antigénique susceptible de remplacer les extraits ovariens, ainsi que l'hormone de stimulation folliculaire (FSH ou gonadotrophine A) qui reste un produit difficile à purifier, et seulement disponible sur le marché sous des formes recombinantes. Les études immunochimiques effectuées par les auteurs ont permis de détecter un oligopeptide immunodominant, appartenant à la chaîne beta de la FSH. Ainsi le premier objet de l'invention est un oligopeptide consistant en la séquence peptidique de référence Thr Gln Cys His Cys Gly Lys Cys (SEQ ID NO: 5), ou toute séquence peptidique, variante fonctionnelle de ladite séquence de référence. Une variante fonctionnelle de ladite séquence de référence est avantageusement obtenue en modifiant le reste hydrocarboné d'au moins l'un des acides aminés de la dite séquence de référence, tout en conservant une antigénicité identique ou similaire à celle de ladite séquence de référence, ou bien en modifiant le reste hydrocarboné d'au moins l'un des acides aminés de ladite séquence de référence, tout en conservant substantiellement le caractère hydrophile/hydrophobe dudit reste hydrocarboné. Un oligopeptide de l'invention peut ainsi consister en une séquence peptidique répondant à la formule Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8, formule dans laquelle Xaal représente la thréonine, Xaa2 représente la glutamine, Xaa3 représente la cystéine, Xaa4 représente l'histidine, Xaa5 représente la cystéine, Xaa6 représente la glycine, Xaa7 représente la lysine, et Xaa8 représente la cystéine, ladite séquence étant identifiée par SEQ ID NO: 5, ou une séquence peptidique, variante fonctionnelle de SEQ ID NO: 5. De préférence, ladite séquence variante fonctionnelle répond à la formule Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8, formule dans laquelle Xaal représente la thréonine ou l'unité NH2-CH(R1)COOH où R1 est un radical hydrocarboné oxygéné conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5, Xaa2 représente la glutamine ou l'unité NH2-CH(R2)COOH où R2 est un radical hydrocarboné oxygéné et/ou aminé conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5, Xaa3 représente la cystéine ou l'unité NH2-CH(R3)COOH où R3 est un radical hydrocarboné soufré conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5, Xaa4 représente l'histidine ou l'unité NH2-CH(R4)COOH où R4 est un radical hydrocarboné aminé conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5, Xaa5 représente la cystéine ou l'unité NH2-CH(R5)COOH où R5 est un radical hydrocarboné soufré conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5, Xaa6 représente la glycine ou l'unité NH2-CH(R6)COOH où R6 est un radical hydrocarboné conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5, Xaa7 représente la lysine ou l'unité NH2-CH(R7)COOH où R7 est un radical hydrocarboné aminé conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5, Xaa8 représente la cystéine ou l'unité NH2-CH(R8)COOH où R8 est un radical hydrocarboné soufré conférant à ladite séquence variante une antigénicité identique ou similaire à celle de SEQ ID NO: 5. De manière avantageuse, les radicaux R1 et/ou R2 et/ou R3 et/ou R4 et/ou R5 et/ou R6 et/ou R7 et/ou R8 constitutifs desdites unités sont respectivement choisis parmi des radicaux conférant auxdites unités une hydrophilicité/hydrophobicité identique ou similaire à celle des acides aminés respectivement correspondants. Il ressort des connaissances générales de l'homme du métier de l'immunologie et de la synthèse peptidique, que le caractère hydrophile/hydrophobe des unités constitutives des protéines/peptides revêt de l'importance dans le pouvoir antigénique de ces derniers. Par ailleurs, de nombreux ouvrages de biochimie générale (5), ont classé les 20 acides aminés en fonction de leur caractère plus ou moins hydrophobe/hydrophile. On considère selon la présente invention, que le choix des radicaux R1 à R8 dans la formule ci-dessus peut être effectué par l'homme du métier précité à l'appui des ouvrages mentionnés, et qu'il dispose en outre de protocoles expérimentaux pour déterminer le caractère hydrophile/hydrophobe de l'unité constitutive qu'il aura retenue. Bien entendu, d'autres paramètres physicochimiques des acides aminés peuvent être utilisés pour déterminer des séquences variantes, comme à titre d'exemple la constante pKa. Avantageusement l'oligopeptide de l'invention a la séquence peptidique identifiée par SEQ ID NO: 5. Un second objet de la présente invention est un composé antigénique susceptible d'être reconnu par les anticorps anti-ovaire, ou un composé immunogène susceptible d'induire la production d'anticorps antiovaire, ledit composé répondant au moins à l'une quelconque des définitions suivantes - un composé ayant une séquence peptidique comprenant la séquence de l'oligopeptide décrit ci-dessus, et de préférence comprenant la séquence SEQ ID NO: 5 ; en particulier, un tel composé a une séquence peptidique qui comprend ou qui consiste en une séquence choisie dans le groupe consistant en SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 et SEQ ID NO: 4, telles qu'identifiées en fin de description ; de préférence, il consiste en la séquence SEQ ID NO: 1 - un composé consistant en la FSH ou un variant fonctionnel de la FSH - un composé consistant en la chaîne ss de la FSH - un composé dont l'antigénicité ou l'immunogénicité est représentative de l'antigénicité ou l'immunogénicité des antigènes ovariens bruts, la structure primaire dudit composé comprenant une séquence peptidique correspondant à la séquence des acides aminés 78-93 de la chaîne ss de la FSH du genre humain ou de toute espèce animale, ladite séquence étant immunodominante et étant reconnue par les anticorps anti-ovaire dudit genre humain ou de ladite espèce. Un autre objet de l'invention est une composition antigénique ou immunogène vis-à-vis des anticorps antiovaire, comprenant un composé antigénique ou immunogène tel que défini précédemment. Une application d'un oligopeptide ou d'un composé de l'invention, réside dans la détection et/ou quantification d'anticorps anti-ovaire. Ainsi un troisième objet de l'invention est un procédé de détection et/ou quantification d'anticorps anti-ovaire dans un échantillon biologique, comprenant l'étape consistant à mettre en contact ledit échantillon biologique avec au moins un peptide ou un composé de l'invention, et à observer la formation d'un complexe antigène-anticorps entre ledit peptide ou composé et un anticorps anti-ovaire. La formation du complexe précité peut être détectée par différents formats de bio-essais classiques, connus de l'homme du métier, tels que les techniques immunocytochimiques, immunoenzymatiques (ELISA), techniques par compétition et "sandwich". Conformément à ce procédé, l'échantillon biologique est avantageusement choisi parmi le sérum sanguin, le liquide folliculaire, le liquide péritonéal, la glaire cervicale et la salive. L'étape d'observation de la formation d'un complexe antigène-anticorps est préférentiellement effectuée selon la technique immunoenzymatique dite ELISA qui a permis d'obtenir des résultats parfaitement corrélés à ceux obtenus par la technique de référence pour l'homme du métier, à savoir l'immunofluorescence indirecte. Enfin les derniers objets de l'invention sont d'une part, un réactif de détection et/ou quantification d'anticorps anti-ovaire comprenant au moins un peptide ou un composé de l'invention, et d'autre part, un kit de détection et/ou quantification d'anticorps anti-ovaire comprenant au moins ledit réactif. Avant de présenter les intérêts de l'invention et de la décrire plus en détail, certains termes utilisés dans le présent texte sont ci-après définis. Une séquence peptidique, variante fonctionnelle de la séquence peptidique de référence (SEQ ID NO: 5) est une séquence d'acides aminés, dite modifiée, différant de la séquence (SEQ ID NO: 5) par des modifications qui confèrent à ladite séquence variante fonctionnelle, une antigénicité identique ou similaire à celle de la séquence de référence. Les modifications de ladite séquence peuvent concerner sa taille, ainsi que chacun des acides aminés qui la constituent. De telles modifications sont notamment choisies parmi les substitutions, les délétions et les additions d'acides aminés dans la séquence du premier oligopeptide, mais aussi parmi le remplacement d'un acide aminé de la série L par un acide aminé de la série D, une modification des chaînes latérales des acides aminés, une modification des liaisons peptidiques telles que des liaisons carba, rétro, inverso, rétro-inverso, réduites ou méthylène-oxy, à la condition que ces modifications n'entraînent aucune altération significative des propriétés antigéniques de ladite séquence vis-à-vis des anticorps anti-ovaire. A titre d'exemple de substitution, et comme mentionné précédemment, on peut remplacer un acide aminé de SEQ ID NO: 5 par un autre acide aminé de même hydrophilicité/hydrophobicité ou d'hydrophilicité/hydro phobicité comparable. L'homme du métier compétent, qui utilise en routine les techniques à sa disposition, notamment les techniques de synthèse peptidique automatisée et les techniques de détermination de l'antigénicité d'un peptide telles que les tests ELISA, est à même, dans une première étape, de synthétiser une séquence modifiée telle que définie ci-dessus, et, dans une seconde étape, de tester l'antigénicité du peptide obtenu. Si ce dernier présente une antigénicité au moins substantiellement équivalente à celle de ladite séquence de référence, il répond à la définition de séquence variante fonctionnelle de ladite séquence de référence. L'homme du métier peut en particulier se reporter aux Exemples 2 et 3 ci-après, qui décrivent un protocole à suivre pour comparer l'antigénicité de deux peptides. Un composé de l'invention comprend une séquence d'un nombre variable d'acides aminés, comprenant au moins la séquence d'un oligopeptide de l'invention. Il peut notamment consister en une protéine, une glycoprotéine, une protéine de fusion, un peptide de fusion. Il peut en outre être fixé sur un support solide. Un oligopeptide ou un polypeptide de l'invention, peut être obtenu par toute voie d'obtention et notamment synthèse chimique ou recombinaison génétique. Les objets de l'invention présentent également un intérêt, en dehors de la recherche d'hypothèses physiopathogéniques à certaines situations cliniques, telles qu'énoncées précédemment. En effet, la mise à disposition d'un test fiable d'appréciation des anticorps anti-FSH peut avoir d'autres applications diagnostiques et des applications thérapeutiques. L'axe gonadique est l'axe le plus fragile des axes endocriniens. Dans diverses polyendocrinopathies, l'atteinte de la fonction gonadique peut être le premier signe de la maladie. Devant des irrégularités des cycles menstruels, une exploration des anticorps anti-FSH peut être le premier signe d'une ovarite auto-immune débutante. Deux autres groupes de pathologie sont directement concernés par ce type d'exploration. Il s'agit du groupe des ménopauses précoces et du groupe des dystrophies ovariennes. Ces groupes sont très hétérogènes dans leurs mécanismes et la détection et/ou quantification d'anticorps anti-SEQ ID NO: 1 permet d'identifier des sous-groupes plus homogènes avec des implications thérapeutiques possibles. Dans le domaine de la stérilité, les patientes atteintes de stérilité dite "idiopathique" peuvent bénéficier de ce type d'analyse, au même titre que la recherche d'autres auto-anticorps. L'endométriose, maladie aux mécanismes encore inconnus de nos jours, survient manifestement chez des patientes au terrain particulier. De nombreux autoanticorps ont été objectivés chez des patientes atteintes de cette maladie. Le mécanisme de la stérilité n'est pas toujours évident chez ces patientes. La recherche des anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1 y est d'un grand intérêt tant sur le plan physiopathologique que sur le plan thérapeutique. En effet, la recherche de tels auto-anticorps peut également avoir des implications thérapeutiques directes. Les caractéristiques et avantages des objets de la présente invention ressortiront des Exemples 1 à 4 ciaprès, à l'appui des figures 1 à 4, selon lesquelles - la figure 1 représente l'augmentation des taux d'anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1, - la figure 2 représente l'augmentation des taux d'anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1, après la première tentative de FIV et l'augmentation des IgM SEQ ID NO: 1, après les tentatives de FIV ultérieurs, - la figure 3 représente l'évolution comparée des anticorps anti-ovaire et anti-peptide SEQ ID NO: 1, avant et après ponction dans une population de femmes atteintes de stérilité tubaire, et - la figure 4 met en évidence les taux supérieurs d'anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1, en l'absence de grossesse biologique mesurée sur l'augmentation des taux d'HCG (colonnes pleines). EXEMPLE 1 : Technique immunoenzymatique de dosage des anticorps anti-ovaire a) Réactifs - Antigène Ovaire Corps jaune FSH (Métrodineo, Serono, Levallois-Perret, France) Peptides SEQ ID NOs: 1 à 5 - Tampon carbonate-bicarbonate 0,1 M, pH 9.6 - Tampon Phosphate Saline (PBS) 0,001 M, pH 7.4 (PBS) - Tween 20 (Sigma, St Louis, MO, USA) - Lait écrémé en poudre Gloria - Albumine de sérum bovin (BSA) (Sigma) - Anti-immunoglobulines humaines (IgG, IgA, IgM) conjuguées à la peroxydase (Miles, Napperville, MA, USA) - Tampon phosphate-acide citrique 0,1 M, pH 5,5 - Eau oxygénée à 30 volumes (Gifrer Barbezat, Décines, France) - Ortho Phénylène Diamine (OPD) (Sigma) - Acide sulfurique 2 N (Prolabo, Paris, France) b) Matériel - Plaques Maxisorp (Nunc, Roskilde, Danemark) - Balance de précision (Sartorius, Osi, Paris, France) - Spectrophotomètre Multiskan II équipé d'un filtre de 492 nm (Flow laboratories, Helsinki, Finlande) - Logiciel Titersoft (Flow Laboratories) c) Méthode La concentration de molécules à adsorber a été déterminée par des essais en échiquier pour chaque antigène. Elle est d'environ 1 ssg par puits. La fixation des antigènes sur la phase solide se réalise en une nuit à + 40C à raison de 100 ssl par puits de la solution d'antigène en tampon carbonate-bicarbonate. La plaque est vidée. Les sites de la phase solide encore non occupés sont saturés lors d'une incubation d'une heure à 370C avec 200 iiî par puits de 5 % de lait en poudre reconstitué dans du PBS. Les échantillons à tester sont dilués dans le PBS additionné de 0,5 % de BSA et 0,2 % de Tween 20 : dilution au 1/50 pour la recherche d'anticorps anti-ovaires et anti-corps jaune. La plaque est vidée et lavée 3 fois en PBS. Les échantillons sont distribués à raison de 100 tl par puits. La plaque est incubée 45 minutes à 370C. Les anti-isotypes sont dilués dans la même solution que celle qui a servi pour la dilution des échantillons - 1/10 000 pour les anti-IgG - 1/5 000 pour les anti-IgA - 1/5 000 pour les anti-IgM. La plaque est à nouveau vidée et lavée 3 fois en PBS. Puis les anti-isotypes sont distribués à raison de 100 iil par puits. La plaque est incubée 45 minutes à 370C. La solution de révélation est préparée extemporanément, comme suit pour une plaque - 12 ml de tampon de phosphate-acide citrique - 6 mg d'OPD - 12 ml d'H202. Après 3 nouveaux lavages de la plaque, 100 41 de solution de révélation sont distribués dans chaque puits. Après apparition d'une coloration jaune plus ou moins intense, la réaction est arrêtée avec 50 1 41 d'H2S04. La plaque est lue au spectrophotomètre, à 492 nm à l'aide du lecteur Multiskan II. Les résultats sont d'abord exprimés en densité optique (D.O.) puis calculés en ratios par rapport à un échantillon de témoins à la limite de la positivité. Tout ratio supérieur à 1 est considéré comme positif. EXEMPLE 2 : Sélection de peptides antigéniques Les inventeurs ont d'abord découvert que la FSH, puis les peptides comportant la séquence des acides aminés 78-93 de la chaîne ss de la FSH sont reconnus à la fois par des sérums contenant des anticorps anti-ovaires et par 2 anticorps monoclonaux anti ss-FSH (propriété bioMérieux, 22A3G7; 5H3E8) qui ont la caractéristique d'être immunoréactifs avec la métrodine et des extraits ovariens tandis qu'un anticorps monoclonal anti ss-FSH (propriété bioMérieux, 7G5A1) ne reconnaissant que la métrodine ne réagit pas avec cette séquence. Etant donné que la séquence des acides aminés 78-93 de la chaîne ss de la FSH contient 3 cystéines, on a synthétisé 4 peptides de 16 acides aminés correspondant aux différentes possibilités de pont disulfure. Ces quatre peptides sont identifiés par les références respectivement SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, et décrits en fin de description. Ces quatre peptides obtenus sous forme lyophilisée, ont été, après reconstitution et dialyse, utilisés comme antigènes dans une série de tests ELISA vis à vis de 30 sérums de patientes. Par ailleurs, ces mêmes sérums ont été testés contre les antigènes ovariens bruts. La technique immuno-enzymatique utilisée est celle décrite à l'Exemple 1. Les résultats de la corrélation obtenue entre la réactivité des sérums vis-à-vis de l'antigène ovarien et celle des mêmes sérums vis-à-vis de chacun des peptides testés, et exprimés par une valeur de r, sont rapportés dans le tableau I suivant: Tableau I SEQ ID N01 8EQ ID N02 8EQ ID N03 SEQ ID N04 IgG AOA 0,74 0,44 0,79 0,59 IgA AOA 0,46 0,28 0,49 0,49 IgM AOA 0,81 0,75 0,71 0,69 On constate que les meilleurs coefficients de corrélation sont obtenus pour les IgM d'une part (ce qui avait déjà été noté avec la FSH commerciale) et pour le peptide SEQ ID NO: 1 d'autre part. EXEMPLE 3 : Antigénicité du peptide SEQ ID NO: 1 Deux centre quatre-vingt quinze sérums ont été testés en double, à l'aide de la méthode immunoenzymatique décrite ci-dessus, avec, d'une part, l'extrait ovarien total et, d'autre part, le peptide SEQ ID NO: 1. Pour chaque antigène, les trois isotypes d'immunoglobulines IgG, IgA et IgM ont été étudiés. a) Population étudiée Les patientes incluses dans l'étude étaient toutes en protocole de FIV. Leur moyenne d'âge était de 32,7+4,2 ans. La durée moyenne de la stérilité était de 4,8+2,8 ans. L'étiologie de la stérilité ayant conduit le couple en FIV, était dans 24,9% des cas d'origine tubaire, dans 18,2% des cas d'origine masculine, dans 8,6% d'origine idiopathique, dans 3,8% des cas due à une dystrophie ovarienne (PCO), dans 2,8% des cas due à une endométriose. Dans 41,7% au moins deux des étiologies précédentes étaient regroupées, formant les étiologies mixtes. Dans 209 cas, le sérum a été prélevé au huitième jour de la stimulation et dans 84 cas, le sérum a été collecté 15 jours après la ponction. b) Résultats Les résultats de la corrélation obtenue entre la réactivité des sérums vis-à-vis de l'antigène ovarien brut et celle des mêmes sérums vis-à-vis du peptide SEQ ID NO: 1 testé, et exprimés par une valeur de r, sont rapportés dans le tableau II suivant: Tableau II Iga SEQ ID N01 IgA SEQ ID N01 IgM SEQ ID N04 IgG AOA 0,18 0,12 NS IgA AOA 0,12 0,11 0,01 Igx AOA 0,10 0,06 0,27 On observe une corrélation entre IgG AOA et IgG SEQ ID NO: 1 (r = 0,18, p = 0,002) ainsi qu'entre IgM AOA et IgM SEQ ID NO: 1 (r = 0,27, p SEQ ID NO: 1 (r = 0,10, p = 0,06). EXEMPLE 4 : Applications des peptides de l'invention - Quels que soient le nombre de tentatives de FIV pratiquées et l'étiologie de la stérilité confondues, une élévation des anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1, après la ponction, a été observée, avec une différence statistiquement significative pour les IgM SEQ ID NO: 1 (p = 0,005)(cf Figure 1). - Selon le nombre de tentatives de FIV pratiquées, avant et après ponction, et conformément à la Figure 2, on observe * chez les patientes en première tentative de FIV, une augmentation des anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1, après la ponction folliculaire, quel que soit l'isotype considéré, * chez les patientes multiponctionnées, une diminution des IgG et des IgA SEQ ID NO: 1 en post-ponction et une élévation des IgM SEQ ID NO: 1 très nette et statistiquement significative (p = 0,01). - Selon l'étiologie de la stérilité et avant et après ponction Pour l'étiologie d'origine tubaire retenue car elle sert de référence en matière de FIV (IgA p = 0,04 et IgM p = 0,027), on observe une élévation incontestable des AOA d'isotypes A et M, après la ponction, mais une élévation des anti-peptide SEQ ID NO: 1, plus nette et statistiquement significative pour ces mêmes isotypes (cf figure 3). - Selon le nombre d'ovocytes et d'embryons obtenus La présence d'anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1 apparaît délétère pour l'obtention d'ovocytes et d'embryons. On a tenté de définir un seuil limite selon l'isotype considéré en pré-ponction. Sur 151 dosages (un certain nombre de tentatives n'ont pas été jusqu'à la ponction folliculaire), on a pu déterminé ce seuil pour les IgA SEQ ID NO: 1 à 0,75, pour les ovocytes (9.4 vs 11.8 ovocytes), et à 0,60, pour les embryons (3.1 vs 4.9 embryons). Il faut remarquer que ce seuil est plus bas que celui défini pour les IgA AOA (1,7 pour les ovocytes et les embryons). - Selon l'issue de la tentative On a comparé les taux moyens d'anticorps antipeptide SEQ ID NO: 1 selon que le dosage de l'HCG (gonadotrophine chorionique) plasmatique était positif (grossesse biologique) ou négatif (absence de nidation). Conformément à la Figure 4, on a retrouvé des taux d'anticorps en moyenne plus bas lorsque l'HCG était positif. Ces résultats démontrent que le peptide SEQ ID NO: 1 permet de détecter de façon sensible et spécifique des anticorps présentant des variations parallèles à celles des anticorps dirigés contre l'extrait ovarien total. En outre la ponction folliculaire stimule l'apparition d'anticorps anti-peptide SEQ ID NO: 1, et les patientes présentant de tels anticorps dans leur sérum ont moins de chances d'obtenir une grossesse après FIV. LISTE DE SEQUENCES (1) INFORMATIONS GENERALES: (i) DEPOSANT: (A) NOM: BIO MERIEUX (B) RUE: CHEMIN DE L'ORME (C) VILLE: MARCY L'ETOILE (E) PAYS: FRANCE (F) CODE POSTAL: 69280 (ii) TITRE DE L' INVENTION: Détection des anti-corps anti-ovaire (iii) NOMBRE DE SEQUENCES: 5 (iv) FORME DECHIFFRABLE PAR ORDINATEUR: (A) TYPE DE SUPPORT: (B) ORDINATEUR: IBM PC compatible (C) SYSTEME D' EXPLOITATION: PC-DOS/ (D) LOGICIEL: PatentIn Release &num;1.0, Version #1.30 (OEB) (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 1: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 1: Val Ala Thr Gln Cys His Cys Gly Lys Cys Asp Ser Asp Ser Thr Asp 1 5 10 15 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 2: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (ix) CARACTERISTIQUE: liaison disulfure entre la cystéine en position 5 et la cystéine en position 7. (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 2: Val Ala Thr Gln Cys His Cys Gly Lys Cys Asp Ser Asp Ser Thr Asp 1 5 10 15 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 3: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (ix) CARACTERISTIQUE: liaison disulfure entre la cystéine en position 5 et la cystéine en position 10. (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 3: Val Ala Thr Gln Cys His Cys Gly Lys Cys Asp Ser Asp Ser Thr Asp 1 5 10 15 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 4: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 16 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (ix) CARACTERISTIQUE: liaison disulfure entre la cystéine en position 7 et la cystéine en position 10. (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 4: Val Ala Thr Gln Cys His Cys Gly Lys Cys Asp Ser Asp Ser Thr Asp 1 5 10 15 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 5: (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE: (A) LONGUEUR: 8 acides aminés (B) TYPE: acide aminé (C) NOMBRE DE BRINS: simple (D) CONFIGURATION: linaire (ii) TYPE DE MOLECULE: peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 5: Thr Gln Cys His Cys Gly Lys Cys 1 5 8 BIBLIOGRAPHIE (1) C.A. SHIVERS and B.S. DUNBAR, (1977) Autoantibodies to zona pellucida: a possible cause of infertility in women. Science, 197: 1087-1190 (2) P. BARBARINO-MONNIER et al., Fertility and Sterility, vol. 56, NO 5 (1991) 928-932 (3) P. BARBARINO-MONNIER et al., Human Reproduction, vol. 10, NO 8 (1995) 2006-2007 (4) H.E. MONCAYO-NAVEDA, R. MONCAYO, R. BENZ, A. WOLF, and Ch. LAURITZEN (1989) Organ specific antibodies against ovary in patients with systemic lupus erythematosus. Am. J. Obstet. Gynecol., 160: 1227-1229 (5) A.L. LEHNINGER, Traduction de la seconde édition de Biochemistry, the molecular basis of cell structure and function, Chapitre 4 : Les Protéines : Les aminoacides constitutifs, p 69 à 74 (1979) (6) R. MONCAYO et H.E. MONCAYO, Journal of Internal Medicine (1993), 234:371-378. REVENDICATIONS 1. Oligopeptide consistant en la séquence peptidique de référence Thr Gln Cys His Cys Gly Lys Cys (SEQ ID NO: 5), ou toute séquence peptidique, variante fonctionnelle de ladite séquence de référence. 2. Oligopeptide dont la séquence peptidique est une variante fonctionnelle de ladite séquence de référence selon la revendication 1, obtenue en modifiant le reste hydrocarboné d'au moins l'un des acides aminés de la dite séquence de référence, tout en conservant une antigénicité identique ou similaire à celle de ladite séquence de référence. 3. Oligopeptide dont la séquence peptidique est une variante fonctionnelle de ladite séquence de référence selon la revendication 1, obtenue en modifiant le reste hydrocarboné d'au moins l'un des acides aminés de ladite séquence de référence, tout en conservant substantiellement le caractère hydrophile/hydrophobe dudit reste hydrocarboné. 4. Oligopeptide selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il a la séquence peptidique identifiée par SEQ ID NO: 5. 5. Composé antigénique susceptible d'être reconnu par les anticorps anti-ovaire, ayant une séquence peptidique comprenant la séquence de l'oligopeptide selon la revendication 1. 6. Composé selon la revendication 5, caractérisé en ce que sa séquence peptidique comprend la séquence SEQ ID NO: 5. 7. Composé immunogène susceptible d'induire la production d'anticorps anti-ovaire, ayant une séquence peptidique comprenant la séquence de l'oligopeptide selon la revendication 1. 8. Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que sa séquence peptidique comprend la séquence SEQ ID NO: 5. 9. Composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 8, caractérisé en ce qu'il possède une séquence peptidique qui comprend ou qui consiste en une séquence choisie dans le groupe consistant en SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 et SEQ ID NO: 4. 10. Composé selon la revendication 9, caractérisé en ce que sa séquence peptidique consiste en SEQ ID NO: 1. 11. Composé antigénique ou immunogène vis-à-vis des anticorps anti-ovaire, caractérisé en ce qu'il consiste en la FSH ou un variant fonctionnel de la FSH. 12. Composé antigénique ou immunogène vis-à-vis des anticorps anti-ovaire, caractérisé en ce qu'il consiste en la chaîne ss de la FSH. 13. Composé antigénique ou immunogène vis-à-vis des anticorps anti-ovaire, dont l'antigénicité ou l'immunogénicité est représentative de l'antigénicité ou l'immunogénicité des antigènes ovariens bruts, caractérisé en ce que la structure primaire dudit composé comprend une séquence peptidique correspondant à la séquence des acides aminés 82-97 de la chaîne ss de la FSH du genre humain ou de toute espèce animale, ladite séquence étant immunodominante et étant reconnue par les anticorps antiovaire dudit genre humain ou de ladite espèce. 14. Composition antigénique ou immunogène vis-àvis des anticorps anti-ovaire, comprenant un composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 13. 15. Procédé de détection et/ou quantification d'anticorps anti-ovaire dans un échantillon biologique, comprenant l'étape consistant à mettre en contact ledit échantillon biologique avec au moins un oligopeptide selon l'une quelconque des revendications 1 ou 4, ou un composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 13, et à observer la formation d'un complexe antigène-anticorps entre ledit oligopeptide ou composé et un anticorps antiovaire. 16. Procédé selon la revendication 15, caractérisé en ce que l'échantillon biologique est choisi parmi le sérum sanguin, le liquide folliculaire, le liquide péritonéal, la glaire cervicale et la salive. 17. Procédé selon la revendication 15, caractérisé en ce qu'on observe la formation d'un complexe antigèneanticorps selon une technique immuno-enzymatique. 18. Utilisation d'un oligopeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, ou d'un composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 13, pour détecter et/ou quantifier, dans un échantillon biologique, des anticorps anti-ovaire. 19. Utilisation selon la revendication 18, caractérisée en ce que ledit composé consiste en la FSH. 20. Réactif de détection et/ou quantification d'anticorps anti-ovaire comprenant au moins un oligopeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, ou un composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 13. 21. Kit de détection et/ou quantification d'anticorps anti-ovaire comprenant au moins un réactif selon la revendication 20.