Brevet FR2747922A1 — publié le 19971031

La présente invention concerne l'utilisation d'extraits naturels d'algues pour élaborer un produit destiné à prévenir et à soigner des maladies de la peau. telles que des éruptions cutanées ou des manifestations allergiques à des compositions cosmétiques. L'invention concerne egalement des extraits naturels d'algues destinés à prévenir et à soigner des maladies de la peau. Les travaux de Susuma Tonegawa, Prix Nobel de médecine en 1987, ont mis en évidence la fonction immunologique de certaines cellules de l'épiderme, les cellules de Langerhans, vis-à-vis des agressions localisées dans la couche épidermique de la peau. Les cellules de Langerhans, qui appartiennent à une famille de cellules dites dendritiques lymphoïdes, sont essentiellement situées dans les couches moyennes de l'épiderme. Malgré leur faible densité. elles ont un rôle d'information et de surveillance sur l'ensemble de l'épiderme, grâce à leur nature dendritique et à leur capacité migratoire, notamment. Les cellules de Langerhans sont capables à la fois de phagocyter les corps étrangers ou les allergènes ayant pénétré dans l'épiderme et de transmettre des antigènes à des cellules immuno-compétentes particulières, les cellules dites cellules T. L'activation et la protection des cellules de Langerhans permet donc de stimuler le processus de défense intrinsèque de l'epiderme. Or, on sait que ces cellules sont directement exposées aux rayonnements ultraviolets résultant d'une exposition au soleil Des études récentes ont montré que ces rayonnements provoquent à plus ou moins grande échelle, d'une part, une diminution des marqueurs de membrane et donc une altération de la capacité de présentation d'antigènes aux cellules immuno-compétentes et, d'autre part une disparition des dendrites caractérisant les cellules de Langerhans. En cas d'exposition prolongée au soleil. les rayonnements ultraviolets inhibent les cellules de Langerhans et ces dernières voient leur nombre diminuer. On a cherché à élaborer des produits susceptibles de protéger et d'activer les cellules de Langerhans en prex ision des rayonnements ultraviolets qui agissent fréquemment sur l'épiderme On connait ainsi des produits qui sont elabores à partir d'extraits de membranes de levures. constitues de polysaccharides d'origine végétale Le produit obtenu. qui appartient à la tamille des ss- I, 3 lucanes est reconnu par les récepteurs membranaires des cellules de Lanterhans. et permet auxdites cellules de maintenir dans une certaine mesure leur activite macrophage et de proteger les cellules immunocompétentes de l'epiderme Un inconvénient majeur des produits précités réside dans le coût relativement élevé de la mise en oeuvre de leur procédé d'élaboration. Le but de la présente invention est de proposer une utilisation d'extraits naturels d'algues pour l'élaboration d'un produit destiné à prévenir et à soigner des maladies de la peau. ainsi que des extraits naturels d'algues destinés à prévenir et à soigner lesdites maladies, qui soient tels que ledit produit soit obtenu par un procédé relativement simple à mettre en oeuvre, donc d'un coût modéré. A cet effet, I'utilisation selon l'invention d'extraits naturels d'algues pour l'élaboration dudit produit est caractérisée en ce qu'elle consiste à utiliser des extraits concentrés d'algues du type chlorella Selon une autre caractéristique de l'invention, ladite utilisation d'extraits naturels d'algues est caractérisée en ce que lesdits extraits sont prévus pour protéger des rayonnements ultraviolets les cellules de Langerhans de l'épiderme, et pour stimuler le developpement desdites cellules suite auxdits rayonnements Selon une autre caractéristique de l'invention, lesdits extraits naturels d'algues destinés à prevenir et à soigner des maladies de la peau sont tels que lesdites algues sont du type chh 'L'llc1. Les caractéristiques de l'invention mentionnées ci-dessus, ainsi que d'autres, apparaitront plus clairement à la lecture de la description suivante d'un exemple de réalisation, ladite description étant faite en relation avec le dessin joint, dans lequel la Fig unique est un schéma illustrant le procédé de préparation d'un extrait de chlorella selon l'invention Le produit selon l'invention est élaboré à partir d'extraits naturels d'algues microscopiques du type chlorella qui sont préparés conformement au procédé illustré à la Fig. unique. Ce procède consiste essentiellement à etfectuer un broyage alcalin des algues, à acidifier le jus d'extraction obtenu, à éliminer les débris cellulaires par microfiltration tangentielle sur un filtre dont le seuil de retention est de 0,22 m. et a concentrer les eléments organiques restants, jusqu'à obtention d'un extrait comprenant 5 % de matières actives, qui constitue le produit selon l'invention On a enumere ci-apres les caractéristiques organoleptiques, physicochimiques et bacteriologiques du produit obtenu - Caractéristiques organoleptiques: Aspect: liquide translucide. Couleur: brun-vert clair. Odeur: caractéristique. - Caractéristiques physico-chimiques: pH (20 C) 6-7,5 Indice de réfraction 1,30-1,40. Densité (20 C) > ou Matières sèches (2g /1050 C / 2h) 3-6 %. Teneur en proteines 1-2,5 %. Conductivité 5-15 mS. Cendres 0,75 à 1,25 %. Teneur en glucides 1,75 à 2,25 %. - Caractéristiques bactériologiques: Germes aérobies mésophiles ' 100 germesig. Levures et moisissures Coliformes fécaux absence dans 0,10 ml. Coliformes totaux absence dans 0,10 ml. Pseudomonds derugmosa absence dans 0,02 ml. Staphylococcus aureus absence dans 0,02 ml. Candida albicans absence dans 0,02 ml. II est à noter que la teneur élevée du produit en glucides contribue à son activité immuno-modulatrice On a représenté ci-dessous la repartition des acides aminés totaux dans le produit selon l'invention % Pourcentage des acides amines totaux On observe une proportion importante d'alanine, de glycine et de proline dans le produit, qui sont les principaux acides amines de l'unite fondamentale du collagene On observe egalement une quantite importante de lysine, qui constitue avec la proline des precurscurs de la biosvnthese du collagene On a represente ci-dessous la repartition en poids moleculaire (exprune en Dalton) des peptides dans le produit selon l'invention lll';ll!1I(). I)I 1()ll) 1()I L( | I t1tlÇ. (l)al!ii La répartition des peptides montre que 96 % d'entre eux ont un poids moléculaire inférieur à 10 000 Dalton. Il en découle un bon potentiel d'assimilation du produit par la peau Afín de mettre en évidence les effets d'un tel produit sur l'épiderme, on a procédé à une experience consistant. apres une irradiation aux rayons ultraviolets de classe A (U V A.) à visualiser et à compter les cellules de Langerhans présentes dans l'épiderme, à l'aide d'un microscope à fluorescence. Des échantillons d'explants de peau d'un sujet sain, obtenus suite à une intervention de chirurgie plastique, sont placés en survie dans un milieu de culture approprié. Trois séries d'explants sont préparées: - la première série, ou série témoin, est telle que chaque explant la constituant ne reçoit pas le produit selon l'invention et n'est pas soumis à une irradiation U V A. - la deuxième série est telle que chaque explant la constituant ne reçoit pas le produit selon l'invention mais est soumis à une irradiation U V. A. - la troisième série est telle que chaque explant la constituant reçoit le produit selon l'invention et est soumis à une irradiation U. V. A. Les explants de la troisième série sont préparés de la manière suivante. On leur applique le produit selon l'invention deux fois par jour et ce durant quatre jours. Le cinquième jour on applique une dernière fois le produit sur lesdits explants. lesquels sont ensuite soumis à une irradiation U V A de 7 J/cm2. en mème temps que les explants de la deuxième série. Les trois séries d'explants sont ensuite congelées par immersion dans de l'isopentane qui est refroidi à -55 C dans de l'azote liquide. On effectue par la suite une dizaine de coupes frontales de 6 m à l'interieur d'un cryostat à une température de -16 C, ce qui a pour effet de stopper l'activité immunitaire des cellules de Langerhans On procède ensuite à l'incubation d'un anticorps primaire et d'un anticorps secondaire dans chaque explant lesquels anticorps permettent de révéler par ia technique d'immunoflluorescence. l'activité des cellules de Langerhans. En effet, les cellules de Langerhans ne sont actives que si elles jouent leur rôle antigénique en bloquant les anticorps. ladite action antigénique étant observable au microscope à fluorescence L'anticorps primaire est prévu pour reconnaître les cellules de Langerhans et l'anticorps secondaire, couplé à des molécules fluorescentes de tétraméthylrhodamine-isothiocyanate (TRITC), est prévu pour colorer lesdites cellules. On observe les échantillons coupés et incubés au microscope à fluorescence, afin de pouvoir visualiser et dénombrer les cellules de Langerhans caractérisant chaque échantillon. De 9 à 11 échantillons ont été photographiés et étudiés pour chaque série d'explants, de maniére à pouvoir évaluer le nombre moyen de cellules de Langerhans par unité de longueur d'épiderme pour l'ensemble des échantillons observés. On a également fait figurer pour chaque série étudiée l'erreur standard moyenne (SEM), laquelle est obtenue en divisant l'écart-type mesuré par la racine carrée du nombre d'échantillons. Les trois tableaux 1, Il et 111 ci-dessous. qui se rapportent respectivement aux trois séries d'explants, rendent compte de ces mesures. Tableau I - Première série d'échantillons Echantillon Epiderme en cm Nbre de cellules Nbre de cellules de langerhans /cm 18 3 0,167 2 ~ 14 5 0,357 3 14 4 0,286 4 | 17 4 0,235 5 15 4 0,267 6 14 6 0,429 7 16 5 0,313 8 15 8 0,533 9 11 3 0,273 10 15 4 0.267 Moyenne 15 1 0,313 SEM 0.6 0,5 0,025 Tableau II- Deuxième série d'échantillons: Echantillon Epiderme en cm Nbre de cellules Nbre de cellules de Langerhans / cm 16 4 0,250 2 13 1 0.077 3 22 4 0,182 4 14 4 0.286 5 15 4 0.267 6 15 J 0.200 7 12 3 0,250 8 16 3 0,188 9 17 7 0,412 10 15 2 0,133 11 16 4 0,250 Moyenne 16 4 4 0,227 SEM 0,7 0,4 0,03 Variation par rapport à la première série - 27 % Tableau III - Troisième série d'échantillons: Echantillon Epiderme en cm Nbre de cellules Nbre de cellules de Langerhans 'cm 1 16 4 0,250 2 15 5 0,333 3 12 4 0,333 4 13 5 0,385 5 17 7 0,412 6 10 4 0.400 7 16 7 0,438 8 13 5 | 0.384 9 14 | 3 0,214 Moyenne 14 5 0,350 SEM | 0,7 0,4 0.024 Variation par rapport à la deuxième série + 54 % Variation par rapport à la première série + 12 % En comparant les résultats respectivement obtenus pour les deux premieres séries. on observe que le nombre de cellules de Langerhans diminue de 27 O.o suite a une irradiation aux V V A En comparant les résultats obtenus pour la troisième série à ceux respectivement obtenus pour les deux premières séries, on observe que les explants traités avec le produit selon l'invention puis irradiés aux U. V. A. comportent 54 % de cellules de Langerhans en plus par rapport aux explants de la deuxième série, irradiés et non traités. On notera également que de tels explants traités et irradiés comportent 12 % de cellules de Langerhans en plus par rapport aux explants de la première série témoin, qui ne sont ni traités ni irradies Le produit selon l'invention a donc une action protectrice et surtout stimulante des cellules de Langerhans contenues dans l'épiderme, suite à l'irradiation de ce dernier aux rayons ultraviolets Par conséquent, I'activité macrophage desdites cellules est augmentée et la protection de l'épiderme vis-à-vis des agressions extérieures est améliorée. On notera que l'exposition de l'épiderme aux rayonnements ultraviolets constitue un simple test permettant de valider l'activité immuno-modulatrice du produit selon l'invention. On pourrait egalement utiliser à cet effet un test de dosage d'interleukines l-a, par exemple REVENDICATIONS 1) Utilisation d'extraits naturels d'algues pour l'élaboration d'un produit destiné à prévenir et à soigner des maladies de la peau, caractérisée en ce qu'elle consiste à utiliser des extraits concentrés d'algues du type chlorella. 2) Utilisation d'extraits naturels d'algues selon la revendication 1, caractérisée en ce que lesdits extraits sont prévus pour protéger des rayonnements ultraviolets les cellules de Langerhans de l'épiderme, et pour stimuler le développement desdites cellules suite auxdits rayonnements. 3) Extraits naturels d'algues destinés à prévenir et à soigner des maladies de la peau, caractérisés en ce que lesdites algues sont du type chlorelle.