Brevet FR2754713A1 — publié le 19980424

L'invention se rapporte à de nouvelles compositions dermocosmétiques et pharmaceutiques utiles pour améliorer et traiter l'état des peaux hyperréactives et plus généralement des réactions de types allergiques et/ou des phénomènes d'intolérance, qu'ils soient provoqués par des facteurs extrinsèques ou intrinsèques à l'individu. En effet, de plus en plus d'enfants et d'adultes présentent une peau qualifiée de "sensible". Lors d'une étude récente en France, 70% des femmes interrogées ont déclaré avoir la peau du visage sensible. La notion de peaux sensibles recouvre un ensemble de manifestations comprenant les peaux réactives et les peaux intolérantes. On peut également y rattacher les peaux atopiques. Ces peaux sont parfois improprement appelées "allergiques" par les sujets ; cependant si une composante allergique peut parfois être évoquée dans les symptômes d'une peau sensible, elle ne peut s'y limiter. Les facteurs déclenchants peuvent être les agressions de l'environnement comme, le vent, la pollution, les variations de température, des eaux trop calcaires ou des produits d'hygiène, cosmétiques ou de soins mal adaptés ; ces phénomènes peuvent aussi être associés à des stress ou des émotions ressentis par le sujet, certains régimes alimentaires ou la prise de médicaments. I1 existe en outre des facteurs prédisposants individuels (notamment neurologiques ou hormonaux) ou familiaux qui amplifient ces réactions. De manière générale, le sujet ressent un inconfort cutané qui peut se manifester par des signes subjectifs et/ou objectifs. La peau tiraille, démange ou picote facilement, il peut y avoir des sensations de chaleur, piqûre, brûlure. La peau peut rougir ou desquamer. On constate de façon irrégulière une xérose, une dermite séborrhéique, des télangiectasies, des vésicules ou même un oedème. Dans les cas plus sérieux, on peut observer des affections dermatologiques de type immunoallergiques telles que l'atopie, l'eczéma ou les neurodermites. Cet état peut se manifester au niveau de la peau, des muqueuses, ou du cuir chevelu. Dans ce dernier cas, il pourra être associé à un état pelliculaire et/ou une alopécie. Jusqu'à présent on a essayé d'éviter l'apparition de ces réactions en limitant la présence, dans les formulations dermo-cosmétologiques, de composants connus comme allergisants. Cependant il serait souhaitable de pouvoir disposer de compositions réellement actives, capables de prévenir ou de soulager ces symptômes, en diminuant la réactivité de la peau et en améliorant sa résistance aux facteurs déclenchants. De manière inattendue, la Demanderesse a maintenant trouvé que ces buts pouvaient être atteints par l'utilisation d'une composition contenant une association synergique réalisant un complexe hypoallergénique actif. Un tel complexe améliorera en outre la réceptivité de la peau à d'autres principes actifs. C'est pourquoi la présente invention a pour objet une composition dermo-cosmétique, caractérisée en ce qu'elle contient une association synergique immunomodulatrice d'au moins deux composants, chacun de ces composants présentant au moins l'une des activités suivantes a) anti-radicalaire b) anti-inflammatoire c) anti-allergique, lesdits composants étant choisis de telle sorte qu'au moins deux activités a), b) ou c) sont présentes dans la composition. Plus particulièrement l'invention a pour objet l'utilisation d'au moins deux composés choisis parmi les composants ayant une activité a) anti-radicalaire, b) anti-inflammatoire et c) anti-allergique, pour la préparation d'une composition immunomodulatrice présentant au moins deux des activités a), b) et c), destinée au traitement des peaux sensibles et/ou allergiques ; selon l'un de ses aspects les activités a), b) et c) sont exercées dans la composition. En effet, la Demanderesse a pu montrer que l'association de principes actifs ayant des activités complémentaires anti-allergique, antiradicalaire et/ou anti-inflammatoire permettait de combattre efficacement les phénomènes associés à l'apparition des symptômes de peaux sensibles et/ou intolérantes ou des affections immunoallergiques, de préférence par l'intermédiaire d'une synergie des activités des composants. Les composants entrant dans les formulations selon l'invention peuvent être des molécules purifiées ou non, des produits de synthèse ou d'extraction, des mélanges de principes actifs ou des extraits ayant subi une ou plusieurs étapes de fractionnement à partir d'une matière première d'origine végétale ou animale. De préférence, si deux composants présents dans la formulation montrent une activité de même type, elle s'exercera par la mise en oeuvre d'un mécanisme différent. En ce qui concerne l'activité anti-inflammatoire, elle pourra notamment être assurée par des inhibiteurs de prostaglandines (voie cyclooxygénase), les inhibiteurs de la production de cytokines et les inhibiteurs de la production de leucotriènes (LTB par exemple, voie lipooxygénase). De manière avantageuse, le ou les composants à activité antiinflammatoire présentent une activité d'inhibition de la production de l'Ikl, lL-2, IL-4, IL-6, Ikl2 et/ou du TNF a (Tumor Necrosis Factor). La fonction anti-inflammatoire peut également avoir pour conséquence la diminution de la production de dérivés réactifs nitrés par les cellules, limitant la génération de radicaux libres. Toutefois, par activité anti-radicalaire on entend des composants qui sont de préférence choisis parmi les capteurs de radicaux libres, les antilipopéroxydants et les stimulants de la production endogène des enzymes dégradant les radicaux libres. Les radicaux libres, par définition, sont des espèces chimiques, neutres ou chargées, qui possèdent un électron non apparié. Cet "electron célibataire" leur confère des propriétés chimiques particulières et une courte durée de vie. Ce sont des intermédiaires réactionnels qui vont se stabiliser par fusion ou transfert, et peuvent être à l'origine d'une réaction en chaîne. Parmi les radicaux libres on peut citer l'anion superoxyde 0' le radical hydroxyl OH-, NO, ou les péroxydes. Des enzymes actives dans les systèmes de défense endogène contre les radicaux libres sont par exemple la SOD (ou superoxyde-dismutase), la catalase ou la glutathion péroxydase, dont on cherchera à stimuler la production ou qui pourront être apportés de façon exogène. Les composants assurant la fonction anti-allergique dans la composition selon l'invention sont de préférence choisis parmi les inhibiteurs de la prolifération lymphocytaire, les inhibiteurs de l'internalisation des molécules du complexe majeur d'histocompatibilité (HLA-DR par exemple), les inhibiteurs de la production de cytokines. Avantageusement, ils sont capables de diminuer la production des médiateurs de l'inflammation qui survient pendant les phénomènes d'allergie. Comme indiqué plus haut, la composition présentera au moins deux des activités anti-radicalaire, anti-inflammatoire et anti-allergique. En outre, les composants du complexe hypoallergénique actif seront choisis de façon à ce qu'une synergie s'exerce par l'intermédiaire de mécanismes différents à la base d'une même activité. De préférence, chaque composant contribuera par l'intermédiaire de plusieurs paramètres, à l'activité globale de la composition selon l'invention. De manière avantageuse la composition selon l'invention possède une activité marquée d'inhibition de la synthèse et/ou l'expression des neuromédiateurs, en particulier sur les cellules cutanées, résultant d'une synergie des activités de ses différents composants. Les neuromédiateurs pourront être choisis dans le groupe comprenant les neurokinines A(NKA) et B(NKB), le "vasoactive intestinal polypeptide" (VIP) le "calcitonin gene related peptide" (CGRP), le neuropeptide Y (NPY), la neurotensine (NT), la somatostatine (SOM), le gastrin releasing peptide (GRP), le nerve growth factor (NGF), le "PGP 9.5" (Protein Gene Product 9.5) et la bombésine. Des composants permettant la préparation de compositions dermocosmétiques selon l'invention peuvent avantageusement être choisis dans le groupe suivant : ginkgo biloba et ses extraits, iramine, D-panthénol, - sitostérol, modulène, a-tocophérol et ses dérivés, p glucane et ses dérivés, acide eicosapentanoïque, acide 18 ss-glycyrrhétinique, acide glycyrrhétinique monoglucuronide, stéaryl glycyrrhétinate, extrait de Scutellaria, lactoferrine, thé vert, vitamine C, glutathion, facteur thymique épidermique et lipacide. Selon l'un des aspects de l'invention, la composition contient au moins un composant, de préférence au moins deux composants choisis dans le groupe ci-dessus. Parmi les dérivés d'a tocophérol utilisables, on peut citer plus particulièrement le phosphate d' Q tocophérol. Parmi les dérivés du p glucane on peut citer le carboxyméthyl ss glucane et la driéline ' . La driéline est un poly ,8-1-3 glucopyranose de formule n=1000 avec n = 1000. La molécule peut se présenter sous forme d'une solution à 0,1% dans de l'eau et du sorbitol, ou sous forme de poudre. Dans un des modes de réalisation préférés de l'invention, la composition contient une association synergique d'un extrait de Ginkgo biloba et d'un composé p glucane. En effet, la Demanderesse a trouvé que l'association de ces deux composants permettait d'obtenir de façon optimale, l'ensemble des caractéristiques fonctionnelles assurant l'activité des compositions selon l'invention. Le glucane est constitué d'un enchaînement de glucose en p 1- > 3, qui peut notamment être extrait de la paroi des cellules de levures. On peut lui faire subir des modifications chimiques afin d'améliorer notamment sa solubilité. Avantageusement, le ss glucane est substitué par des groupes carboxyméthyl; il peut se trouver sous forme de sel, notamment de sodium. De bons résultats sont obtenus avec un dérivé dont le degré de substitution par les groupements carboxyméthyl est compris dans l'intervalle de 0,65 à 0,85, et présente un pH de 5,5 à 8,5. Le Ginkgo biloba est un arbre dioïque d'Extrême Orient, dont les feuilles sont utilisées pour certaines propriétés médicinales. Elles contiennent des constituants comme les hydrocarbures et les alcools aliphatiques, des polyphénols, tels que lutéoline, quercétol, ou biflavones dérivés de l'amentaflavone, et des constituants plus spécifiques : acide ginkgolique, et dérivés anacardiques, terpènes dérivés du limonène, terpènes à groupement tertiobutyle. Les extraits de Ginkgo ont été proposés pour améliorer les symptômes du déficit intellectuel chez le sujet âgé, de la claudication intermittente des artériopathies chroniques oblitérantes et de la maladie de Raynaud, ou en cas de déficit rétinien. En cosmétologie ils ont été utilisés pour leur action protectrice visà-vis des radicaux libres. De manière inattendue, la Demanderesse a trouvé que des extraits de Ginkgo ont une excellente activité anti-inflammatoire et anti-allergique, qui peut être mise en évidence sur les cellules cutanées comme les kératinocytes et les macrophages. En outre, la Demanderesse a montré que cette activité se trouve potentialisée en présence de ss glucane. Des extraits particulièrement adaptés à la mise en oeuvre de l'invention sont obtenus à partir de feuilles de Ginkgo biloba ayant subi une étape au cours de laquelle la concentration en terpène a été amenée à une valeur inférieure à environ 7%, de préférence inférieure à environ 3% (p/p d'extrait sec). Dans un des modes de réalisation, cette concentration en terpènes est inférieure à environ 1% p/p. La concentration en flavone-hétérosides dans- l'extrait sec est avantageusement supérieure à 24%, de préférence supérieure à environ 28% p/p. La mise en évidence des propriétés anti-inflammatoires et antiallergiques peut notamment être effectuée sur des modèles in vitro, pour lesquels une corrélation existe avec des modèles animaux et des études cliniques déjà réalisées sur l'homme. On peut notamment travailler sur des kératinocytes et des cellules macrophagiques car ce sont des cellules essentielles au développement d'une réaction inflammatoire locale. De plus, les macrophages sont des cellules particulièrement intéressantes car du fait que ce sont des cellules résidantes au niveau de la peau, elles régulent non seulement les réactions inflammatoires locales mais elles régulent également les réponses immunitaires par leur capacité à présenter l'antigène et à produire un grand nombre de cytokines qui régulent l'immunité locale. Ces macrophages sont également impliqués dans les communications avec le système circulatoire pouvant, le cas échéant, mobiliser différents types cellulaires (monocytes, neutrophiles, éosinophiles et lymphocytes T) augmentant ainsi le pouvoir de défense non-spécifique et spécifique du tissu considéré. Les activités des produits testés sont donc recherchées sur des cultures de kératinocytes et de macrophages humains stimulés ou non par l'interféron- y + lipopolysaccharide (inflammation non spécifique) ou par 1'IL-4 (inflammation allergique). Ce type de stimulation met les cellules dans le cadre d'une réponse pro-oxydante (génération de radicaux libres anion supero,xyde, NO, qui peut être évaluée par la mesure de la production de dérivés nitrogénés) et immuno-inflammatoire (production de cytokines comme le Typa). Pour évaluer l'inflammation allergique, les cellules sont activées par 1'IL4, qui induit le récepteur CD23 puis par des complexes immuns à IgE. Dans tous les cas, les surnageants cellulaires sont analysés après l'activation. Une étude de viabilité est en outre effectuée sur les cellules. L'activité des composants est également confirmée sur des cultures mixtes lympho-épidermiques (CMLE). En effet au niveau de la peau, les cellules de Langherans jouent un rôle essentiel en présence de l'antigène et les kératinocytes génèrent des facteurs intervenant dans la réponse immune, constituant ainsi un système immunitaire cutané. Des CMLE permettent de déterminer les propriétés immunomodulatrices de substances par la mesure de la prolifération lymphocytaire induite par les cellules épidermiques allogéniques, présentatrices d'antigène avec ou sans traitement par la substance. Les résultats obtenus avec le Ginkgo et le ss glucane sont résumés dans le tableau ci-dessous: Activité Médiateur ou Ginkgo p glucane paramètre biloba .LTB4 inhibition pas d'effet Anti- . PGE2 pas d'effet inhibition inflammatoire . IL-la pas d'effet inhibition . TNFa pas d'effet inhibition péroxydation inhibition pas d'effet des lipides Anti-radicaux . NO inhibition inhibition libres . catalase pas d'effet stimulation glutathion stimulation stimulation peroxydase anti- . CMLE inhibition pas d'effet allergique Des compositions selon l'invention contiennent notamment de 0,001% à 10% p/p d'un extrait de Ginkgo, de manière préférée de 0,05 à 2%; selon l'un des modes de mise en oeuvre, la concentration en extrait de Ginkgo sera d'environ 0,1 à 0,5%, mais elle sera adaptée par l'homme du métier. Des concentrations en ss gucane, notamment carboxyméthylé, convenant à la mise en oeuvre de l'invention sont comprises dans l'intervalle de 0,001% à 10% p/p total de la composition. D'autres compositions particulièrement adaptées à l'invention comprennent l'association de lactoferrine et de driéline, de panthénol et d'extrait de thé vert, ou de panthénol et de p sitostérol. Une association d' a tocophérol (ou l'un de ses sels) et d'un extrait de ginkgo peut également être utilisée selon l'invention. De telles associations réalisent un complexe hypoallergénique actif qui abaisse le seuil de réactivité de la peau et du cuir chevelu et diminue l'amplitude des éventuelles réactions d'intolérance ou immunoallergiques. L'extrait de thé vert est obtenu à partir de feuilles sèches de Camellia oleifera et contient notamment de la théophylline, de la caféine et de la théobromine. L'invention a également pour objet un procédé de préparation d'un complexe hypoallergénique actif, caractérisé en ce qu'on sélectionne des substances appartenant à au moins l'un des groupes : principe actif antiradicaux libres, anti-inflammatoires et immunomodulateurs, et en ce qu'on associe ensuite deux substances ayant des activités complémentaires de façon à potentialiser les fonctions anti-radicalaires, antiinflammatoires et anti-allergiques de l'association. De préférence, l'association des substances constituant le complexe hypo-allergénique actif diminue la synthèse ou l'expression des neuromédiateurs tels que le VIP, le PGP 9.5, ou la CGRP, qui sont corrélés avec les peaux dites "sensibles" ou irritables. L'invention a également pour objet une méthode de traitement cosmétique des peaux sensibles comprenant l'application sur la peau du corps ou du visage, une ou plusieurs fois par jour, de compositions et/ou de complexes hypoallergéniques actifs tels que définis précédemment. En particulier, l'invention concerne une méthode de traitement de l'alopécie consistant à appliquer sur le cuir chevelu une association de composants anti-radicalaire, anti-inflammatoire et/ou anti-allergique, avec une périodicité hebdomadaire, bi-hebdomadaire, journalière ou bijournalière. Les associations pourront être au sein de différentes formulations telles que shampooing ou lotions, pouvant être appliquées de manière simultanée, séparée ou séquencée, éventuellement avec d'autres principes actifs sur l'alopécie, les états pelliculaires et/ou séborrhéiques. Un autre des objets de l'invention est l'utilisation d'un complexe hypoallergénique tel que défini précédemment, pour la préparation d'un médicament immunomodulateur, en particulier destiné au traitement d'une affection choisie parmi l'atopie, le psoriasis, les érythèmes polymorphes, xérodermites, lupus érythémateux, pemphigus, dermatites, rosace, acné, eczémas et neurodermites. Avantageusement, les associations hypoallergéniques selon l'invention seront formulées au sein de compositions contenant également des agents hydratants et/ou améliorant la pénétration cutanée, qui favoriseront l'activité du complexe selon l'invention. On peut citer à titre d'exemples, l'urée, le propylène glycol ou l'acide oléique, l'homme du métier étant capable d'utiliser d'autres promoteurs de pénétration, adaptés au type de formulation. Les compositions selon l'invention contiendront en outre des excipients pharmaceutiquement et/ou cosmétologiquement acceptables, adaptés à leur formulation notamment sous forme de solutions, lotions, crèmes, shampooings, émulsions etc, connus de l'homme du métier. On peut citer, de manière non limitative les pigments, colorants, conservateurs, agents de texture, épaississants, émulsionnants, parfums. Elles peuvent également contenir des filtres ou écrans solaires, ou un autre principe actif. Enfin, les complexes hypoallergéniques contenant les associations selon l'invention peuvent être introduits dans des compositions contenant au moins un principe actif par voie topique, en particulier lorsque ce principe actif est susceptible de provoquer une réaction cutanée. Parmi de tels principes actifs on peut citer plus particulièrement les rétinoïdes et les actifs dépigmentants. Par rétinoïdes on entend notamment l'acide rétinoïque ou trétinoïne, le rétinol, les rétinaldéhydes, leurs sels et leurs esters. Des sels typiques sont les sels de métal alcalin, d'ammonium et d'amonium en C2 C30. Les sels de sodium, de potassium, de triéthanolammonium et d'ammonium sont particulièrement préférés. Les combinaisons de tous les composés précédents peuvent être présentes dans les compositions. En outre, les termes "rétinol" et "acide rétinoïque" doivent s'entendre comme incluant les isomères hydrogénés et non hydrogénés tels que le 9-cisrétinol, le didéhydrorétinol, l'acide 13-cis-rétinoïque, l'acide 13-trans rétinoïque et l'acide didéhydrorétinoïque. Les agents dépigmentants comprennent par exemple l'acide kojique, l'hydroquinone, la vitamine C, la vitamine C phosphate magnésium, les caroténoïdes, l'arbutine, etc. Les exemples qui suivent sont destinés à illustrer l'invention. Dans ces exemples on se référera aux figures suivantes Figure 1 : Effet dose du carboxyméthyl Bglucane sur les fonctions inflammatoires des kératinocytes. Figure 2 : Synergie entre un extrait de Ginkgo Biloba (H37) et le carboxyméthyl Bglucane (K18) dans leurs fonctions anti inflammatoires sur kératinocytes. Exemple 1 1. Matériels et Méthodes Produits Les produits suivants ont été utilisés au cours de cette étude : LPS de Escherichia coli (Sigma) utilisé à 1 crg/ml. L'IFN-y et l'IL-4 proviennent de chez Immugenex (Los Angeles CA) et sont utilisés respectivement à 1000 U/ml et 10 ng/ml, les IgE monoclonaux proviennent de chez Stallergène (Fresnes, France) et les anti-IgE sont de chez Nordic (Tilburg, Hollande). Culture de kératinocytes Les primo-cultures de kératinocytes sont obtenues à partir de prépuces néonataux et sont maintenues en prolifération ex vivo dans un milieu ne contenant pas de sérum de veau. Les cultures confluentes de kératinocytes sont trypsinisées et transférées dans des plaques 24 puits dans du milieu frais à la densité cellulaire de 105 cellules/ml/puits. Le cas échéant, dans le cas de la stimulation par IL-4, la présence du récepteur à l'IgE (CD23) à la surface des cellules est vérifiée par immuno-marquage. Culture de macrophages Les cellules macrophagiques sont obtenues à partir du sang périphérique de donneurs normaux (non allergique). Les cellules mononucléées sont isolées sur gradient de ficoll et l'anneau de cellules lymphoïdes est récupéré, lavé trois fois, puis les cellules sont mises en culture de manière à faire adhérer les cellules macrophagiques. Ces cellules sont récupérées après 1 heure d'adhérence et sont mises en culture (106 cellules/ml/puits). Le cas échéant, dans le cas de la stimulation par IL-4, la présence du récepteur à l'IgE (CD23) à la surface des cellules est vérifiée par immuno-marquage. Activation cellulaire Les cellules sont activées par la combinaison d'IFN-y et de LPS pendant 3 à 4 jours et les surnageants de ces cultures sont ensuite récupérés afin de doser les dérivés nitrogénés et le TNF-a. De même lors d'une stimulation par IgE les cellules sont d'abord activées par l'IL-4 de manière à induire le CD23 puis sont ensuite mises en cultures et stimulées par les complexes immuns à IgE pendant 3 à 5 jours avant de récupérer les différents surnageants. Dans tous les cas une viabilité cellulaire est réalisée à l'issue de ces cultures. Dans le cas particulier des macrophages une étude de viabilité à long terme (7 à 12 jours) a été réalisée de manière à déterminer les effets protecteurs de ces produits. Le dosage des dérivés nitrogénés est réalisé à l'aide du Griess et le taux de TNF est mesuré en utilisant des kits de dosage de chez Medgénix (Fleurus, Belgique). 2. Résultats 2.1. Effet d'un extrait de Ginkgo Biloba sur les kératinocytes et les macrophages stimulés par l'IFNn + LPS Des feuilles sèches de Ginkgo Biloba ont été soumises à une extraction en continu par un mélange acétone-eau sous vide, puis plusieurs étapes d'élimination de solvant ainsi que de la chlorophylle, lipides, cires, lectines et de certaines substances conduisent à un extrait désigné dans ce qui suit par H37. Il se présente sous forme d'une poudre fine, répondant aux spécifications suivantes - solvants résiduels . éthanol . acétone . butanol . acétate d'éthyle Il est soluble à 6% (p/p) dans PEG 400 et à 4% (p/v) dans l'éthanol 90 . Dans cette étude le produit H37 (10 mg/ml) est ajouté 30 min avant la stimulation par IFN-y + LPS. Ce produit n'a montré aucune activité cytotoxique. Tableau 1A : Production de dérivés nitrés (NO2 - zM) après stimulation par IFN-&gamma; + LPS +/- 10 mg/ml H37 Cellules Expt-l Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 11 (5)* 15 (5) 5 (3) 2 (9) +1137 7(4) 8 (4) 2 (2) 2 (2) Kératinocytes 12 (15) 17 (3) 23 (12) 13 (5) +H37 7(6) 7 (3) 8(11) 6 (4) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par IFN-&gamma; + LPS Tableau 1B : Production de TNF (pg/ml) après stimulation par IFN-y + LPS +/- 10 mg/ml H37, Cellules Expt-1 Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 755 (ND)* 1250 (155) 998 (55) 1510(ND) +H37 605(ND) 1120(75) 895 (50) 1315 (nu) Kératinocytes 187 (ND) 173 (ND) 208 (ND) 135 (ND) +H37 168 (ND)) 165 (ND) 112 (ND) 105 (ND) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par IFN-y+ LPS, ND = non détectable. Au travers de ces expériences il apparaît que les macrophages stimulés par IFN-y+ LPS ne produisent pas de manière significative de dérivés nitrés alors que les kératinocytes en produisent de manière reproductible. En effet il a été récemment démontré que lors d'une telle stimulation les macrophages produisent une NO synthase tronquée qui pourrait avoir une diminution importante de son activité ce qui n'est apparemment pas le cas pour les kératinocytes. Chez les kératinocytes, H37 inhibe la production de NO après stimulation. Le produit H37 présente une légère activité "anti-inflammatoire . D'ailleurs en évaluant l'effet dose du H37 sur cette production par les kératinocytes, on montre que l'effet maximum est observé à 10 mg/ml. En outre, le H37 protège les cellules macrophagiques de la mort cellulaire induite par les produits radicalaires. Le fait que les macrophages stimulés ne produisent pas de quantités significatives de dérivés nitrés n'exclue pas le fait que ces cellules ne subissent pas un choc oxydatif pouvant conduire à la mort cellulaire. Ceci est objectivé par les comparaisons des effets sur la viabilité cellulaire à long terme à 10 jours ou avec les cultures à court terme (2 jours). Il apparait que le H37 à 10 mg/ml protège les cellules macrophagiques de la mort cellulaire induite la plupart du temps par les produits radicalaires. Tableau 2 : Effet de H37 sur la viabilité des macrophages Macrophages % de cellules % de cellules + IFN/LPS viables à J2 viables à J10 Milieu 85+2 55+7 +1137 88+3 3 80+2 2.2. Effet du produit H37 sur les macrophages et les kératinocytes stimulés par 1'IL-4. Les cellules sont stimulées pendant 48 h en présence d'IL-4 (10 ng/ml) de manière à induire le récepteur de basse affinité pour les IgE (CD23) à leur surface. Au terme de cette période de culture 30 à 80 % des kératinocytes et des macrophages expriment le CD23. Les variations individuelles ne sont en aucun cas l'image d'une situation allergique différente entre ces individus. Quoiqu'il en soit dans cette phase d'induction le produit testé ne modifie pas cette induction du CD23 > en effet moins de 5% de diminution ne peut être observé (n=8). Tableau 3 : induction de l'expression du CD23 par les différentes cellules stimulées par IL-4 en présence ou non de 10 mg/ml H37 Cellules Milieu + lL-4 Macrophages do 45 +/- 4 +1137 Kératinocytes ND 55 +/- 7 + H37 ND 51 +/- 4 * Les cellules sont stimulées pendant 48 h en présence ou non de 10 ng/ml d'IL-4 et en présence ou en l'absence des différents produits, ND = non détectable. Après engagement du CD23 par des complexes immuns à IgE on induit la production d'une grand nombre de médiateurs et cytokines (TNF notamment) et de produits issus du métabolisme oxydatif comme les dérivés nitrogénés. Cette stimulation redéfinit in vitro une réaction inflammatoire de type allergique. Dans ce cas de figure les résultats observés sont en tout point comparables à ceux obtenus avec l'IFN-y et le LPS ce qui tend à démontrer que le H37 présente certaines activités anti-inflammatoires (nonspécifique et allergique) probablement par sa capacité à réguler les capacités oxydantes des cellules "inflammées". Les résultats obtenus sont résumés dans les deux tableaux suivants: Tableau 4A : Production de dérivés nitrés (NO2 - M) après stimulation par 1'IL-4 +/- 10 mg/ml H37 Cellules Expt- 1 Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 25 (5)* 30 (2) 55 (11) 15 (2) +H37 15 (2) 17 (75) 21(50) 6 (2) Kératinocytes 17 (13) 13 (3) 23 (12) 13 (5) +1137 12(11) 8 (2) 10(10) 8(6) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par les complexes immuns à IgE. Le produit H37 présente une bonne capacité à inhiber la production de dérivés nitrés par les macrophages et les kératinocytes stimulés par l'IL-4 Tableau 4B : Production de TNF (pg/ml) après stimulation par 1'IL-4 +/- 10 mg/ml H37 Cellules Expt-l Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 975 (105)* 275 (35) 455 (40) 310 (89) +1137 850(105) 215 (25) 365(35) 275 (87) Kératinocytes 185 (ND) 158 (ND) 315 (35) 308 (ND) +1137 155 (ND) 120 (ND) 245 (30) 276 (ND) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par les complexes immuns à IgE, ND = non détectable. Le produit 1137 induit une légère diminution de la production de TNFa par les macrophages et les kératinocytes stimulés par l'IL-4. De même que lors de la stimulation non-spécifique il apparaît que le H37 augmente la viabilité à long terme des macrophages et des kératinocytes stimulés par les complexes immuns à IgE ce qui, de nouveau, suggère très fortement que le produit H37 exerce son activité antiinflammatoire légère par une activité anti-oxydante sur les cellules cibles. Il apparaît donc que le produit H37 présente une activité antiinflammatoire (allergique ou non). Cette caractéristique est très importante car la gravité des réponses inflammatoires qu'elles soient d'origine allergique ou non résultent d'un déséquilibre du métabolisme oxydatif de ces cellules. C'est notamment ce déséquilibre qui est à l'origine, en partie du moins, de la régulation des phénomènes immunologiques associés à ces réactions : c'est le cas des réactions allergènes spécifiques et de la production de cytokines. 2.3. Effet des produits, K17, K18 sur les kératinocytes et les macrophages stimulés par l'IFNn + LPS On désigne par K17 la driéline. La driéline est un poly p-1-3 glucopyranose, purifié à partir de membranes de levure Saccharomyces cerevisiae ; elle est en solution dans un mélange eau/sorbitol. On désigne par K18 le carboxyméthyl p glucane (vendu sous la marque CM Glucan par la société ARNAUD). Dans cette étude les produits (10 mg/ml ou 1/100 v/v) sont ajoutés 30 min avant la stimulation par IFNn + LPS. Dans aucun des cas ces produits n'ont montré une activité cytotoxique. Tableau 5A : Production de dérivés nitrés (NO2- en FM) après stimulation par IFN-y + LPS +/- 10 mg/ml des produits, K17 et K18 Cellules Expt-1 Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 13 (2)* 8 (5) 9 (6) 3 (2) + K17 5 (2) 2 (1) 7 (1,5) 2 (2) + K18 6 (1) 4(1) 5 (1) 1 (2) Kératinocytes 25 (2)* 28 (5) 19 (6) 13 (2) + K17 15 (2) 16 (1) ils (1) 8 (2) + K18 13 (1) 14(1) 11 (1) 7 (1) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par IFN-y + LPS. Les produits K 17 et K18 présentent une bonne capacité à inhiber la production de dérivés nitrés par les macrophages et les kératinocytes stimulés par IFN-y et LPS. Tableau SB : Production de TNF (pg/ml) après stimulation par IFN-y + LPS +/- ou 10 mg/ml des produits K17 et K18 Cellules Expt-1 Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 612 (ND)* 920 (155) 903 (55) 700 (ND) +K17 605(nid) 902 (95) 970(45) 695 (nu) + K18 121 (ND) 320 (125) 512 (20) 333 (ND) Kératinocytes 205 (ND) 138 (ND) 145 (ND) 108 (ND) + K17 125 (ND) 98 (95) 100 (ND) 70 (ND) + K18 130 (ND) 95 (ND) 85 (ND) 82 (ND) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par IFN-y + LPS, ND = non détectable. La production de TNF- par les macrophages et les kératinocytes stimulés par IFN-y + LPS est également altérée en présence des différents produits et de manière comparable à ce qui est observé pour les dérivés nitrés. Les produits K17 et K18 inhibent efficacement la production de TNF. 2.4. Effet des produits K17, K18 sur les macrophages et les kératinocytes stimulés par l'IL-4. Les cellules sont stimulées pendant 48 h en présence d'IL-4 (10 mg/ml) de manière à induire le récepteur de basse affinité pour les IgE (CD23) à leur surface. Au terme de cette période de culture, 30 à 80% des kératinocytes et des macrophages expriment le CD23, les variations individuelles ne sont en aucun cas l'image d'une situation allergique différente entre ces individus. Quoiqu'il en soit, dans cette phase d'induction, aucun des produits testé ne modifie cette induction du CD23 en effet moins de 5% de diminution ne peut être observé (n=8). Après engagement du CD23 par des complexes immuns à IgE on induit la production d'un grand nombre de médiateurs et cytokines (TNF notamment) et de produits issus du métabolisme oxydatif comme les dérivés nitrogénés. Cette stimulation redéfinit in vitro une réaction inflammatoire de type allergique. Tableau 6A : Production de dérivés nitrés (NO2-- en sM) après stimulation par les complexes immuns à IgE (1'IL 4) +/- 10 mg/ml des produits K17 et K18 Cellules EXtpt- 1 Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 15 (5)* 18 (3) 25 (11) 27 (3) + K17 16 (3) 17 (6) 19 (7) 30 (6) + K18 7 (2) 6 (4) 10 (2) 7 (2) Kératinocytes 19 (5)* 22 (1) 13 (1) 7 (1) + K17 16 (3) 20 (3) 14 (2) 7 (6) + K18 4 (2) 7 (4) 9(2) 3 (2) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par les complexes immuns à IgE. Le produit K18 présente une activité inhibitrice sur la génération de dérivés nitrés par les kératinocytes et les macrophages stimulés par 1'IL-4. Tableau 6B : Production de TNF (pg/ml) après stimulation par 1'IL-4 +/- K17 et K18 Cellules Expt-1 Expt-2 Expt-3 Expt-4 Macrophages 908 (78)* 135 (40) 508(45) 712 (58) + K17 917(45) 102 (41) 510 (41) 700 (32) + K18 524(59) 98 (35) 420 (32) 333 (25) Kératinocytes 198(31)* 105(10) 128 (10) 132 (15) + K17 185 (35) 111 (31) 120 (32) 132 (40) + K18 95 (23) 60 (35) 25 (12) 35 (12) * Les valeurs entre parenthèses sont celles de cellules non-stimulées par les complexes immuns à IgE, ND = non détectable. Le produit K18 présente une activité inhibitrice sur la génération de TNF par les macrophages et les kératinocytes stimulés par l > lL-4. Il apparaît donc que K18 possède une activité anti-inflammatoire non-spécifique et de type allergique alors que le produit K1 7 n'a qu'une activité anti-inflammatoire non spécifique. En conséquence les effets du produit K1 8 ont été évalués en fonction de la dose. Les résultats sont illustrés sur la Figure 1. K18 inhibe donc de manière dépendante de la dose la génération de dérivés nitrés et également de TNF. Les résultats ainsi obtenus démontrent que le Ksi 8 présente une activité anti-inflammatoire en général intéressante et que cette activité est a rapprocher de celle du H37. Exemple 2 :Mise en évidence d'une synergie d'activité entre le CM B glucane (K18) et l'extrait de Ginkgo (H37) Les activités antiinflammatoires, respectivement de K18 et H37 et de leur association sont déterminées. On effectue les essais dans un modèle kératinocytaire, comme indiqué dans l'exemple 1 ( Matériels et méthodes) après stimulation d'une part par une combinaison lFNy + LPS, d'autre part par l'IL-4 et les complexes immuns à IgE. Comme montré sur la figure 2 les produits K18 et H37 agissent en synergie dans leurs fonctions anti-inflammatoires. I1 est nécessaire de rappeler que cette activité anti-inflammatoire recouvre l'activité anti-inflammatoire non-spécifique et allergique. Exemple 3 Analyse de la prévention des altérations cutanées obtenues par irradiation UV A et UV B au niveau de peaux humaines Les cultures d'organe sont réalisées selon le protocole suivant : 10 fragments de peau de donneurs différents (provenance : chirurgie plastique) sont placés dans des inserts eux-mêmes positionnés sur des puits de culture. Du milieu de culture (antibiotiques, SVF) est ajouté dans le fond des puits, un passage s'effectuant par diffusion lente entre les deux compartiments par l'intermédiaire d'une membrane poreuse (0,45 clam). Avant chaque irradiation, chaque crème cosmétique (2 mg/cm 2) est déposée directement sur la peau pendant 2 heures (des peaux témoins sans traitement seront analysées en parallèle). Les 3 crèmes et l'excipient sont renouvelés trois fois par semaine au niveau des peaux: - crème 1: CM-glucan 0,5% - crème 2 : Ginkgo Biloba 0,05% - crème 3 : CM-glucane + extrait de Ginkgo Biloba (H37) - crème 4: excipient (Placebo carbopol) Après avoir retiré le surplus de crème, la peau est ensuite irradiée par 12 J/cm2 en UV A et 6 J/cm2 en UV B (lampe Vilber Lourmat T40M), équivalent à 20 DEM, doses déterminées par une étude préliminaire permettant d'obtenir rapidement des lésions au niveau épidermique et dermique avec notamment des altérations du collagène et des fibres élastiques. Ces doses sont par ailleurs équivalentes aux doses utilisées pour les photopatch tests et aux doses utilisées dans des modèles murins hairlessn pour générer des "sunburn cells". Les irradiations sont réalisées un jour sur deux. Trois séances d'exposition sont effectuées puis les fragments de peaux sont recueillis pour les analyses suivantes. La production de dérivés de l'oxygène tel que l'oxyde nitrique (NO) témoigne de l'agression par des irradiations UV. La protection éventuelle apportée par les crèmes sera quantifiée en évaluant la diminution de la quantité des nitrites et l'augmentation de la SOD. 1) Dosage de l'oxvde nitrique et des nitrites L'oxyde nitrique, NO, est un important médiateur physiologique, non seulement en tant que vasodilatateur et neurotransmetteur, mais également comme agent pro-inflammatoire. Sa synthèse est médiée par une enzyme, la NO synthase, qui est exprimée par de nombreux types cellulaires et notamment les kératinocytes lorsqu'ils sont activés. NO, obtenue par oxydation de la L-arginine par la NO synthase, est un produit instable rapidement dégradé en nitrites (NO 2-) et nitrates (NO3-). C'est le dosage spectrophotométrique des nitrites dans le surnageant de culture en présence du réactif de Griess qui est révélateur de l'activité NO synthasique. Les résultats sont reportés dans le tableau sous-jacent. Dosage des nitrites (nmoles/ml) % de protection Peau traitée par crème 1 21,6+ 7,3 14,7% + 8,2 Peau traitée par crème 2 21,4+3,6 13,5% + 5,8 Peau traitée par crème 3 16,4 + 2,9* 33,8% + 2,3* Peau traitée par crème 4 24,9 + 5,3 * résultat statistiquement significatif (p Le pourcentage de protection a été calculé de la manière suivante (A-B / A) x 100 où A est le résultat avec la crème n" 4 et B le résultat avec la crème 1, 2 ou 3. Les peaux traitées par les crèmes 1 et 2 présentent une légère diminution (non significative) de la production de nitrites. La diminution la plus importante est obtenue avec les peaux traitées par la crème 3, différence statistiquement significative versus l'excipient. Le calcul du pourcentage de protection confirme ces résultats, la crème 3 ayant notamment une protection de 34%. 2) Dosage de la SOD Une agression par irradiation U.V. se traduit par une diminution du taux de SOD. L'activité de la superoxyde dismutase est déterminée par la technique de Mc. Cord et Fridovich. Brièvement, des anions superoxydes sont générés par l'action de la xanthine oxydase sur la xanthine. La SOD présente dans les échantillons peut alors inhiber la réduction de la cytochrome C par ces anions superoxydes. L'activité de la SOD est rapportée à la quantité de cytochrome C réduit restante dans le milieu réactionnel. Les résultats sont exprimés par des pourcentages d'inhibition par rapport à l'excipient (crème n 4) : la SOD hydrolyse une partie des radicaux libres générés par l'agression U.V. et le système xanthine/xanthine oxydase. Ainsi, la diminution de la densité optique (proportionnelle à la quantité de radicaux libres) permettra de quantifier directement le taux de SOD). Dosage de la SOD % de protection peau traitée par crème 1 11,1%1-3,4 peau traitée par crème 2 7,04 % + 2,9 peau traitée par crème 3 15,1 %+ 3,3* * résultat statistiquement significatif (p Par rapport à l'excipient, les peaux traitées par les crèmes 1 et 2 montrent une légère protection (non significative) contre la diminution de l'activité SOD induite par les UV. Cette protection est plus importante avec les peaux traitées par la crème 3, différence statistiquement significative versus l'excipient. Conclusion Le dosage des nitrites a mis en évidence, pour les peaux traitées par la crème n" 3, une diminution significative, versus l'excipient, de leur quantité. Ces résultats permettent d'envisager l'activité protectrice de la crème n" 3 vis-à-vis des altérations dermiques générées par les éléments inflammatoires. Les peaux traitées par les crèmes 1 et 2 n'ont qu'une tendance à la protection. Il existe donc une synergie entre les composants de la crème n" 3. Le dosage de la SOD semble confirmer cette analyse avec une protection des peaux traitées par la crème n" 3 vis-à-vis des altérations radicalaires générées par les U.V. Les peaux traitées par les crèmes 1 et 2 n'ont qu'une tendance à la protection, plus marquée pour la crème n" 1. Exemple 4: Compositions contenant des associations selon l'invention A) Formulation avec des dépigmentants % - Eau 70 > 965 - Octylméthoxycinnamate 6,000 - Glycéryl stéarate/PEG-100 stéarate 5,000 - Glycérine 5,000 - Benzoate d'alkyle C12-C15 4,000 - Petrolatum 1,500 - Cétyl palmitate 1,000 - Alcool céthylique 1,000 - Alcool stéarylique 0,500 - Sulfite de sodium 0,025 - Disulfite de sodium 0,025 - Hydroquinone 2,000 - Acide citrique 0,15 - Carbomer 0,300 - Acétate de tocophérol 0,100 - Phénoxyéthanol 0,730 - Méthylparaben 0,200 - Propylparaben Q070 - Hydroxyde de sodium 0,135 - EDTA disodium 0,200 - Beta glucane 1,0 - Extrait de Ginkgo biloba 0,1 B) Formulation avec du rétinol % - Eau 56,42 - Cétéaryl octanoate 9,00 - Octyl méthoxycinnamate 8,00 - Lactose 5,00 - Glycérine 5,00 - Huile de cacahuète hydrogénée 5,00 - Glycéryl polyméthacrylate 3,45 - Butyl méthoxydibenzoylméthane 1,50 - Isopropyl myristate 1,00 - Lécithine hydrogénée 1,00 - Beta glucane 1,00 - Hydroxyde d d'ammonium 0,75 - Phénoxyéthanol 0,73 - Acrylates/copolymère d'acrylate C10-C30 aikyle 0,50 - Poloxamer 407 0,50 - Acétate de tocophéryl 0,50 - Méthylparaben 0,20 - Extrait de Ginkgo biloba 0,10 - Carbomer 0,10 - BHT Q10 - Propylparaben 0,07 - Propylène glycol 0,05 - Rétinol 0,03 100,00 C) Formulation avec du rétinol % - Eau 69,689 - Octyl hydroxy stearate 6,2942 - Glycérine 4,0000 - Cétéareth-20/alcool stéarylique 3,0000 - Cétéareth-20/alcool cétéarylique 3,0000 - Distéarate de glycérol 2,8000 - Diméthicone 2,5000 - Lactate d'alkyle en C12-C15 1,5000 - Stéareth-10 1,4000 - Cholestérol 1,0000 - Lanoline alcool acétylé/cétyl acétate 1,0000 - Polysorbate 80 0,7000 - Citrate de sodium 0,5160 - Isoparaffine C13-C14/laureth-7 0,5000 - Alcool stéarylique 0,5000 - Polysorbate 20/rétinol 0,1058 - BHT 0,1000 - Méthyl paraben 0,2000 - Parfum 0,0500 - Propyl paraben 0,0300 - Acide citrique 0,0150 - Extrait de Ginkgo biloba 0,1 - Panthénol 1,0 100, D) Formulation avec de la trétinoine - Trétinoïne 0 > 05 g - Beta glucan 0,50 g - Extrait de Ginkgo biloba 0,10 g - Paraffine liquide légère 25,00 g - Solution de sorbitol à 70 pour cent non cristallisable 5,00 g - Hydroxystéarate d'hydroxyoctacosanyl 5,00 g - Copolymère de méthoxy macrogol 22/dodécyl glycol 5,00 g - Copolymère de macrogol 45/dodécyl glycol 3,00 g - Stéaroxytriméthylsilane et alcool stéarylique 1,00 g - Diméticone 1,00 g - Parfum 0,25 g - Parahydroxybenzoate de méthyle 0,20 g - Edétate de sodium 0,10 g - Quaternium 15 0,10 g - Butylhydroxytoluène 0,10 g - Acide citrique monohydraté 0,10 g - Eau purifiée 53,495 g REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins deux composés choisis parmi les composants ayant une activité a) anti-radicalaire, b) anti-inflammatoire et c) anti-allergique, pour la préparation d'une composition immunomodulatrice présentant au moins deux des activités a), b) et c), destinée au traitement des peaux sensibles et/ou allergiques. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que les activités a), b) et c) sont exercées dans la composition. 3. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que le ou les composants présentant une activité anti-radicalaire sont choisis parmi les capteurs de radicaux libres, les anti-lipopéroxydants et les stimulants de la production endogène des enzymes dégradant les radicaux libres. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que les composants présentant une activité anti-inflammatoire sont choisis parmi les inhibiteurs de prostaglandines, les inhibiteurs de la production de cytokines et les inhibiteurs de la production de leucotriènes. 5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que les composants anti-allergiques sont choisis parmi les inhibiteurs de la prolifération lymphocytaire, les inhibiteurs de l'internaiisation des récepteurs HLA et les inhibiteurs de la production de cytokines. 6. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que la composition inhibe la synthèse ou l'expression de neuromédiateurs par les cellules cutanées. 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'au moins un composant est choisi dans le groupe suivant : ginkgo biloba et ses extraits iramine, D-panthénol, B-sitostérol, modulène, a- tocophérol et ses dérivés, phosphate d' -tocophérol, ss glucane et ses dérivés, acide eicosapentanoïque, acide 18 ss glycyrrhétinique, acide glycyrrhétinique monoglucuronide, stéaryl glycyrrhétinate, extrait de Scutellaria, lactoferrine, extrait de thé vert, vitamine C, glutathion, facteur thymique épidermique et lipacide. 8. Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'au moins deux composants sont choisis dans le groupe suivant: ginkgo biloba et ses extraits, iramine, panthénol, ss-sitostérol, modulène, a-tocophérol et ses dérivés, phosphate d'a-tocophérol, ,8 glucane et ses dérivés, acide eicosapentanoïque, acide 18 ,8 glycyrrhétinique, acide glycyrrhétinique monoglucuronide, stéaryl glycyrrhétinate, extrait de Scutellaria, lactoferrine, extrait de thé vert, vitamine C, glutathion facteur thymique épidermique et lipacide. 9. Utilisation d'au moins deux composés selon l'une des revendications 1 à 8 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement d'une affection choisie parmi l'atopie, le psoriasis, les érythèmes polymorphes, les xérodermites, le lupus érythémateux disséminé, le pemphigus, les dermatites, la rosacea, les neurodermites et l'alopécie. 10.Utilisation selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que la composition contient au moins l'une des associations suivantes : a tocophérol / extrait de Ginkgo biloba, carboxyméthyl '3glucane / extrait de Gingko biloba ss sitostérol / D-panthénol, driéline / lactoferrine et panthénol / extrait de thé vert. 11. Méthode de traitement cosmétique des peaux sensibles caractérisée en ce qu'on applique sur la région concernée une composition dermocosmétique qui contient une association synergique d'au moins deux composants choisis parmi a) les anti-radicalaires, b) les anti-inflammatoires, c) les anti-allergiques, lesdits composants étant choisis de telle sorte que la composition finale présente au moins deux des activités a) b) et/ou c) 12. Procédé de préparation d'une composition à activité hypoallergénique, immunomodulatrice et/ou destinée au traitement des peaux sensibles, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes au cours desquelles a) on sélectionne des composants présentant au moins une activité anti inflammatoire, anti-radicalaire et/ou anti-allergique, puis on associe au moins deux composants présentant au moins deux activités différentes, et on détermine si au moins l'une des activités est potentialisée par l'association de ces deux composants, b) on sélectionne les associations présentant au moins deux des activités choisies parmi les activités anti-inflammatoire, anti-radicalaire et anti allergique, et dans lesquelles au moins une des activités est potentialisée, c) on mélange au moins une des associations sélectionnées avec des excipients dermatologiquement ou cosmétologiquement acceptables pour obtenir la composition. 13. Composition susceptible d'être obtenue par le procédé selon la revendication 12, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un, de préférence au moins deux composants choisis dans le groupe constitué par ginkgo biloba et ses extraits, iramine, D-panthénol, modulène, atocophérol et ses dérivés, Bglucane et ses dérivés, acide eicosapentanoïque, acide 18 ,8 glycyrrhétinique, acide glycyrrhétinique monoglucuronide, stéaryl glycyrrhétinate, extrait de Scutellaria, lactoferrine, extrait de thé vert, vitamine C, glutathion, facteur thymique épidermique et lipacide. 14. Composition selon la revendication 13, caractérisée en ce qu'elle contient une association synergique d'un extrait de ginkgo biloba et de ss glucane ou de l'un de ses dérivés. 15. Composition selon l'une des revendications 13 ou 14, caractérisée en ce que le B glucane est substitué par des groupements carboxyméthyl. 16. Composition selon l'une des revendications 13 à 15, caractérisée en ce que la concentration en terpène dans l'extrait de ginkgo biloba est inférieure à 1% p/p de matière sèche. 17. Composition selon l'une des revendications 13 à 16, caractérisée en ce que la concentration en ginkgo biloba est comprise entre 0,001% et 10% p/p. 18. Composition selon l'une des revendications 13 à 17, caractérisée en ce que la concentration en '3glucane est comprise entre 0,001% et 10% p/p. 19. Composition selon la revendication 13, caractérisée en ce qu'elle contient une association choisie parmi driéline + lactoferrine, et panthénol + extrait de thé vert, D;panthénol + p sitostérol. 20. Composition selon l'une des revendications 13 à 19, caractérisée en ce qu'elle contient en outre au moins un autre principe actif par voie topique cutanée. 21. Composition selon la revendication 20, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un principe actif choisi dans le groupe des rétinoïdes et des agents dépigmentants.