Brevet FR2756462A1 — publié le 19980605

La présente invention concerne un larvicide biologique, écologique, biodégradable, spécifique pouvant être couplé, dans certains cas, à des hormones réputées larvicides Les larvicides et insecticides connus jusqu'à nos jours sont, en général, des organophosphorés, carbonates et autres composantes chimiques incompatibles avec la préservation de l'environnement. Ils sont peu maniables du fait de leur pouvoir toxique sur les vertébrés et les invertébrés et surtout dangereux pour le personnel d'assainissement. II y a également accumulation dans la chaîne alimentaire et apparition de résistance assez rapide aux nouvelles familles récemment créées de composantes chimiques entraînant dans la nature des pouvoirs mutagènes et tératogènes. De plus, I'augmentation permanente du coût des insecticides et l'effondrement des matières premières diminuent considérablement les possibilités de lutte des pays en voie de développement, et tout spécialement des pays africains. Cette situation amène à privilégier la lutte antilarvaire utilisant parfois des méthodes physiques abandonnées comme l'épandage de gas-oil et les programmes intégrés d'assainissement visant à rendre l'eau mobile. Le produit larvicide selon l'invention est un produit à base d'une variété de bactérie le Bacillus Sphaericus isolé au TCHAD en 1992, reconnu et recommandé par l'OMS pour sa parfaite innocuité tant sur les vertébrés que sur les invertébrés non ciblés, et rendu selon notre méthodologie spécifique pour les larves d'anophèles de Culex et d'Aedès.. Plusieurs méthodes ont été adaptées à la production de Bacillus bphaericus réputé larvicide biologique et biodégradable. La façon industrielle avec de grands fermenteurs qui permettent de produire toujours la même variété de Bacillus met le coût de production hors de portée des pays en voie de développement. La façon artisanale sous la forme de petites unités de fermenteurs préconisée par l'OMS nécessite une maintenance très difficile, entraînant à chaque manipulation des souillures venant très vite à bout de l'effort effectué. La méthode selon l'invention consiste à faire ingérer à plusieurs reprises la souche de Bacillus fiphaericus par des larves d'anophèles de Culex et d'Aedés du pays; en sachant que les larves ne sont pas forcément les mêmes d'un pays à l'autre. La bactérie est alors réisolée sur des milieux de culture et d'enrichissement en grandes boites en matière plastique stériles à fin de sporulation. Le larvicide acquiert une virulence spécifique aux larves du pays (publication par l'auteur dans Médecine Tropicale de mars 1993). La sporulation de la bactérie est obtenue par vieillissement spontané des souches sur un milieu de culture durant de cinq à quinze jours environ. II est composé de: - 1 - Peptone 4,8 g/l - 2 - Extrait de viande 1,8 g/I - 3 - Lactose 5,2 g/I - 4 - Pourpre de bromocrésol 0,027 g/l Ceci en grammes par litre d'eau distillée stérile. Après contrôle de la sporulation au microscope, on ramasse les colonies à l'aide d'écouvillons dans un tube contenant de l'eau distillée en sachant qu'une boîte de Pétri de 9 cm permet de recueillir une sporulation de 10 à 10 de spores bactériennes prêtes à être diluées dans 2 à 3 litres d'eau distillée stérile. Un choc thermique à 80" pendant 10 minutes permet d'éliminer une contamination bactérienne et de ne conserver que les formes sporulées. Le larvicide selon l'invention étant dans un premier temps prêt à l'emploi. Dans un deuxième temps, il peut être dilué extemporanément avec une hormone juvénoïde régulatrice de croissance (par exemple le PYRIPROXYFEN ou du METHOPREN). Dans un troisième temps, on imbibe la sporulation d'une hormone régulatrice de croissance: elle sera véhiculée par la sporulation de la bactérie lors d'épandages ciblant ainsi uniquement les larves d'anophèles de Culex et d'Aedés sans toucher la faune ni la flore environnantes. Le larvicide contenant deux toxines différentes libérées dans l'estomac des larves devient ainsi spécifique. Si l'on ajoute une hormone inhibant la croissance, nous obtenons un larvicide des plus performants et rémanents. Le larvicide, objet de l'invention peut être utilisé par des populations sans connaissances techniques du fait de sa non-toxicité : il est simple et peu coûteux et devrait être utilisé dans l'avenir pour la lutte contre le paludisme responsable de trois millions de décès par an dont un miilion d'enfants et sévissant dans plus de cent pays. II peut être utilisé contre les arboviroses (dengue) et la filariose. REVENDICATIONS 1) Procédé d'activation d'un larvicide biologique : caractérisé en ce que l'on fait ingérer à plusieurs reprises la souche de bacillus sphaericus par des larves d'anophèles, de culex et d'aèdes.Celle-ci est isolée ultérieurement sur un milieu de culture. 2) Méthode d'obtention de spores de la souche activée selon le procédé de la revendication caractérisée en ce que l'on fait vieillir spontanément la souche sur un milieu de culture, les spores obtenues seront contrôlées puis soumises à un choc thermique à 80"C pendant 10 minutes. 3) Méthode de couplage de la souche ou des spores caractérisée en ce qu'on les associe respectivement à une hormone juvenoide régulatrice de croissance, notamment le Pyridoxyfen ou le Méthopren.