Brevet FR2756738A1 — publié le 19980612

Nouvelle aoohcatlon thérapeutlque d'un dérlvé de la thinvlcvclohexvlamme La présente invention concerne l'utilisation d'une thiénylcyclohexylamine, seule ou en association avec d'autres substances à activité pharmaceutique, pour la préparation d'un médicament destiné à limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. L'invention concerne également un produit comprenant une thiénylcyclohexylamine et au moins une substance anticholinergique, anticonvulsivante ou Ttactivatrice des cholinestérases, et une composition pharmaceutique le contenant. Ce produit est particulièrement intéressant également pour son activité à limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. La famille des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques comprend les produits tels que les organophosphorés que l'on peut trouver, par exemple, dans les insecticides ou pesticides à usage ménager ou industriel, mais également dans les gaz de combat, comme le soman, le savin, le tabun ou le VX. Parmi les thérapies existantes telles que la polymédication pour lutter contre l'intoxication de tels composés, aucune ne prévirent totalement l'apparition de séquelles neuropathologiques. L'invention a pour objet l'utilisation de la thiénylcyclohexylamine répondant à la formule 2-méthyl-l-(l-pipéridinyl)-l-(2-thiényl) cyclohexane, pour la préparation d'un médicament destiné à limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques chez le primate et notamment chez l'homme. Elle peut être utilisée seule ou en association avec d'autres substances à activité pharmaceutique susceptible de limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. La thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, est décrite dans le brevet EP 396734. Compte tenu de l'existence de 2 carbones asymétriques, cette thiénylcyclohexylamine peut être sous forme racémique, de diastéréoisomères ou d'énantiomères substantiellement purs. La préparation des diastéréoisomères de la l-thiénylcyclohexylamine consiste à faire réagir le 2-bromothiénylmagnésien sur la 2-méthylcyclo hexanone, à traiter le 2-méthyl- 1-(2-thiényl) cyclohexanol ainsi obtenu par NaN3 pour obtenir l'azide correspondante, à réduire cette azide en amine et enfin à traiter avec du l,5-halogénopentane. Les diastéréoisomères cis et trans sont séparés par chromatographie préparative sur gel de silice, en utilisant un mélange hexane/ éther (95/5 en volume): la première fraction, correspondant au composé trans, cristallise à 40-410 C ; la deuxième fraction, correspondant au composé cis, cristallise à 80-810 C. Les énantiomères peuvent être obtenus en utilisant des acides optiquement actifs tels que l'acide di-O,O'4-toluoyltartrique. L'invention a particulièrement pour objet l'utilisation de la thiénylcyclohexylamine telle définie ci-dessus, avec au moins une substance choisie parmi les substances anticholinergiques, anticonvulsivantes et réactivatrices des cholinestases. L'invention a particulièrement pour objet l'utilisation de la thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, avec au moins une substance anticholinergique, au moins une substance anticonvulsivante et au moins une substance réactivatrice des cholinestérases. Les termes pharmacologiques utiles ont la signification classique connue de l'homme de l'art. Ainsi, parmi les substances anticholinergique, on peut citer les substances suivantes: atropine, scopolamine, N-oxyde d'atropine, dihexyvérine et méthylsulfate de tiemonium. Parmi les substances anticonvulsivantes, on peut citer par exemple les substances suivantes : phénobarbital, primidone, carbamazépine, éthosuximide, phényto-ine, valproate de sodium, progabide, gabapentine, vigabatrine, loprazolam, les benzodiazépines telles que clonazepam, clobazam, diazepam et prodiazepam. Parmi les substances réactivatrices des cholinestérases, on peut citer la pralidoxime, l'obidoxime, le H16. L'invention a également pour objet une utilisation de la thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, caractérisée en ce que la thiénylcyclohexylamine est associée à un inhibiteur réversible de la cholinestérase destiné à être administré avant exposition aux produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. Parmi les inhibiteurs réversibles de la cholinestase, on peut citer la pyridostigmine, la physostigmine. L'invention a également pour objet, à titre de médicament, un produit contenant la thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, associée avec au moins une substance à activiez pharmaceutique susceptible de limiter ou d'inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques, ainsi que des compositions pharmaceutiques le contenant. L'invention a plus particulièrement pour objet, à titre de médicament, un produit contenant la thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, sous forme racémique, de diastéréoisomères ou d'énantiomères substantiellement purs, associée avec au moins une substance choisie parmi les substances anticholinergiques, anticonvulsivantes et réactivatrices des cholinestérases. De préférence, le produit tel que défini ci-dessus, comprend la thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, associée avec au moins une substance anticholinergique, une substance anticonvulsivante et une substance réacdvatrice des cholinestases. L'invention concerne également un produit comprenant la thiénylcyclohexylamine et au moins une substance choisie parmi les substances anticholinergiques, anticonvulsivantes et réactivatrices des cholinestérases en tant que produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étale dans le temps, pour limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. L'invention a également pour objet un produit tel que défini ci-dessus caractérisé en ce qu'il comprend de plus un inhibiteur de la cholinestérase destiné à être administré avant l'exposition aux produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. La thiénylcyclohexylamine telle que définie ci-dessus, peut être administrée à une dose comprise entre 0,001 et 10 mg/kg, de préférence entre 0,01 et 0,1 mg/kg. Les substances qui lui sont éventuellement associées telles que les subtances anticholinergiques, anticonvulsivantes ou réactivatrices des cholinestérases, connues en pharmacologie, sont administrées aux doses habituellement conseillées dans leurs domaines pharmacologiques respectifs. La thiénylcyclohexylamine telle définie ci-dessus ainsi que les substances à activité pharmaceutique qui lui sont éventuellement associées, peuvent être administrées par les voies classiques d'administration telle que orale, intramusculaire, intrapéritonéale, sous-cutanée ou intraveineuse. Elles peuvent être administrées simultanément ou séparément, par des voies d'administration identiques ou différentes. De préférence, la thiénylcyclohexylamine est administrée par voie intraveineuse et les substances à activité pharmaceutique qui lui sont éventuellement associées telles que les susbtances anticholinergiques, anticonvulsivantes et réactivatrices des cholinestérases, sont administrées par voie intramusculaire. Dans le cas où la thiénylcyclohexylamine est associée à au moins une des substances à activité pharmaceutique telles que définies cidessus, l'administration de la thiénylcyclohexylamine peut être différée par rapport à l'administration de ces autres susbtances. Les exemples suivants sont présentés pour illustrer les procédures ci-dessus et ne doivent en aucun cas être considérés comme une limite à la portée de l'invention. PARTIE EXPÉRIMENTALE: Etude pharmacologique Protocole d'étude: Neuf singes Cynomolgus ont été traités 1 heure avant intoxication par la pyridostigmine (0,2 mg/kg; i.m.). Cette dose de pyridostigmine inhibe 30 % des cholinestérases plasmatiques, ce qui correspond aux normes de protection retenues dans les pays de l'OTAN. Les animaux sont ensuite intoxiqués par 5 DL50 de soman, composé organophosphoré (30 Rglkg; i.m.) puis traités 1 minute après intoxication par le "cocktail thérapeutique": sulfate d'atropine (0,5 mglkg; i.m.) + valium (0,2 mglkg; i.m.) + pralidoxime (30 mg/kg ; i.m.). Ce mélange de 3 drogues correspond à la thérapeutique d'urgence mise en place au niveau des personnels sous forme d'une seringue autoinjectable. Dix minutes après intoxication, les animaux reçoivent la cis-thiénylcyclohexylamine par voie i.v. (0,01; 0,03 et 0,1 mg/kg, 3 animaux par dose). Les animaux (non contraints) sont ensuite observés, les signes de toxicité aiguë et de rEcupération sont notés durant 17 périodes d'observation allant de 2 minutes post intoxication jusqu'à 3 semaines. Trois semaines après intoxication, les animaux sont sacrifiés, le cerveau est prélevé puis après immersion 1 mois dans le formol, on pratique des coupes histologiques (10 Rm) colorées au Luxol Fast Blue HE afin de rechercher d'éventuelles séquelles neuropathologiques. Nous avons réalisé des exprimentations semblables chez des animaux témoins ne recevant pas de cis-thiénylcyclohexylamine. Ainsi, nous avons pu voir l'influence de ce composé sur les signes cliniques des animaux intoxiqués et sur les séquelles neuropathologiques. Résultats : Animaux témoins (n = 4): Chez ces animaux, nous notons des signes sévères d'intoxication (fasciculations musculaires, tremblements, mâchonnements) qui apparaissent en 1 à 2 minutes après administration du soman, les animaux ont ensuite des convulsions tonico-cloniques associées à un opisthotonos. Tous les animaux tombent ensuite rapidement dans le coma en 5 minutes environ. Le coma des animaux dure de 20 à 40 minutes. Après cette phase de coma, les animaux récupèrent lentement durant les 6 heures qui suivent l'intoxication, les tremblements cessent progressivement. Un jour après intoxication, tous les animaux sont capables de marcher, d'agripper et de grimper mais ils ne récupèrent une activité normale que 4 jours après l'intoxication. Trois semaines après intoxication, I'examen histopathologique des tissus cérébraux montre une dépopulation neuronale marquée dans la deuxième couche du cortex frontopariéral chez tous les primates. Animaux traités par la thiénylcyclohexylamine (n = 3 par dose): L'administration i.v. de cis-thiénylcyclohexylamine est pratiquée, comme nous l'avons indiqué dans le protocole d'étude, durant la phase de coma des animaux. L'observation de l'état clinique est résumée dans le tableau suivant: Dose de la Signes de Prevention Arrêt rapide Ataxie Délai de cis-thiényl- toxicité du troubles des récupération cyclobexyl aiguë respiratoires tremblements (témoins: amine identiques 4 jours) (s8/k8) aux témoins Q1 x x x x 4jours 0.03 x x x 4jours 0,01 X 24 heures, pas de rebond à 48 heures Trois semaines après l'intoxication, I'examen histologique des tissus cérébraux des animaux traités par thiénylcyclohexylamine montre une densité neuronale normale dans la couche II du cortex frontopariétal, quelle que soit la dose de cis-thiénylcyclohexylamine utilisée. Les comptages effectués dans cette région cérébrale indiquent une différence significative entre la densité neuronale observée chez les animaux témoins et celle des animaux traités par thiénylcyclohexylamine. ll y a donc un effet neuroprotecteur de la thiénylcyclohexylamine qui apparaît dès la dose la plus faible. Conclusion : Dans nos conditions expérimentales, le traitement d'urgence a été administré 1 minute après intoxication. Dans ces conditions, l'état de mal déclenché par le soman ne dure que 3 à 5 minutes. Pourtant, des séquelles neuropathologiques subsistent 3 semaines après intoxication. L'administration de cis-thiénylcyclohexylamine en plus de la polymédication d'urgence permet, à la dose de 0,01 mg/kg i.v., d'améliorer sensiblement la récupération des animaux intoxiqués 48 heures après administration du soman et de prévenir la raréfaction neuronale observée dans le cortex frontopariétal des animaux témoins. Formulation: Préparation pour une solution injectable de la cis-thiénylcyclohexylamine - lyophilisat de la cis-thiénylcyclohexylamine 0,5 mg - mannitol 25 mg - chlorure de sodium 85,5 mg - eau pour préparations injectables: qsp 10,0 ml Les substances qui sont éventuellement associées à la thiénylcyclohexylamine, sont utilisées sous leurs formees habituelles dans leurs domaines pharmacologiques respectifs. REVENDICATIONS 1. Utilisation de la thiénylcyclohexylamine répondant à la formule 2-méthyl- 1-( l-pipéridinyl)- 1-(2-thiényl) cyclohexane, sous forme racémique, de diastéréoisomères ou d'énantiomères substantiellement purs, seule ou en association avec d'autres substances à activité pharmaceutique, pour la préparation d'un médicament destiné à limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que la thiénylcyclohexylamine est associée avec une ou plusieurs autres substances à activité pharmaceutique susceptible de limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. 3. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que la thiénylcyclohexylamine est associée avec au moins une substance choisie parmi les substances anticholinergiques, anticonvulsivantes et réactivatrices des cholinestérases. 4. Utilisation selon l'une des revendications 2 à 3, caractérisée en ce que la thiénylcyclohexylamine est associée avec au moins une substance anticholinergique, au moins une substance anticonvulsivante et au moins une substance réactivatrice des cholinestérases. S. Utilisation selon l'une des revendications 3 à 4, caractérisée en ce que la substance anticholinergique est choisie parmi l'atropine, la scopolamine, le N-oxyde d'atropine, la dihexyvérine et le méthylsulfate de tiémonium . 6. Utilisation selon l'une des revendications 3 à 4, caractérisée en ce que la substance anticonvulsivante est choisie parmi les substances suivantes : phénobarbital, primidone, les benzodiazépines, carbamazépine, éthosuximide, phénytoïne, valproate de sodium, progabide, gabapentine, vigabatrine et loprazolam. 7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que la substance anticonvulsivante est une benzodiazépine choisie parmi clonazepam, clobazam, diazepam et prodiazepam. 8. Utilisation selon l'une des revendications 3 à 4, caractérisée en ce que la substance réactivatrice des cholinestérases est choisie parmi les substances suivantes : la pralidoxime, l'obidoxime et le HI6. 9. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que la thiénylcyclohexylamine est associée à un inhibiteur réversible de la cholinestérase destiné à être administré avant exposition aux produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. 10. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que l'inhibiteur réversible de la cholinestérase est choisi parmi la pyridostigmine, la physostigmine. 11. A titre de médicament, un produit contenant la thiénylcyclohexylamine répondant à la formule 2-méthyl-1-(1-pipéridinyl)-1-(2-thiényl) cyclohexane, sous forme racémique, de diastéréoisomères ou d'énantiomères substantiellement purs, associée avec au moins une substance à activité pharmaceutique susceptible de limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. 12. A titre de médicament, un produit tel que défini à la revendication 11, caractérisé en ce que la thiénylcyclohexylamine est associée avec au moins une substance choisie parmi les substances anticholinergiques, anticonvulsivantes et réactivatrices des cholinestérases. 13. A titre de médicament, un produit tel que défini à l'une des revendications 11 à 12, caractérisé en ce que la thiénylcyclohexylamine est associée avec au moins une substance anticholinergique, au moins une substance anticonvulsivante et au moins une substance réactivatrice des cholinestérases. 14. A titre de médicament, un produit tel que défini à l'une des revendications 12 à 13, caractérisé en ce que la substance anticholinergique est choisie parmi l'atropine, la scopolamine, L'atropine N-oxyde, la dihexyvérine et le tiémonium méthylsulfate. 15. A titre de médicament, un produit tel que défini à l'une des revendications 12 à 13, caractérisée en ce que la substance anticonvulsivante est choisie parmi les substances suivantes : phénobarbital, primidone, carbamazépine, éthosuximide, phénytoine, valproate de sodium, progabide, gabapentine, vigabatrine, loprazolam et les benzodiazépines telles clonozepam, clobazam, diazepam et prodiazepam. 16. A titre de médicament, un produit tel que défini à l'une des revendications 12 à 13, caractérisé en ce que la substance Ttactivatrice des cholinestérases est choisie parmi la pralidoxime, l'obidoxime, le HI6. 17. Compositions pharmaceutiques contenant, à titre de principe actif, l'un au moins des médicaments tels que définis à l'une des revendications 11 à 16. 18. Produit comprenant la thiénylcyclohexylamine et au moins une substance choisie parmi les substances anticholinergiques, anticonvulsivantes et réactivatrices des cholinestérases en tant que produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps pour limiter ou inhiber les effets dus à des produits neurotoxiques ou neurotoxiniques. 19. Produit selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'il comprend de plus un inhibiteur de la cholinestérase destiné à être administré avant l'exposition au produit neurotoxique ou neurotoxinique. 20. Produit selon la revendication 19, caractérisée en ce que l'inhibiteur réversible de la cholinestérase est choisi parmi la pyridostigmine, la physostigmine.