Brevet FR2756740A1 — publié le 19980612

MEDICAMENT CONTENANT UN ADRENOCORTICOSTEROÏDE, DESTINE AU TRAITEMENT'DE L'HIRCISME La présente invention concerne un médicament destiné au traitement de l'hircisme, utilisant un agent adrénocorticostéroïdien, et elle a plus particulièrement trait à un médicament destiné au traitement de l'hircisme utilisant cet agent adrénocorticostéroïdien en association avec un extrait de fermentation lactique. Jusqu'à présent, de nombreuses dispositions contre l'hircisme ou de nombreux traitements de l'hircisme ont été tentés, par exemple l'élimination de l'odeur par des déodorants, l'inhibition d'un environnement favorable à la multiplication bactérienne par des agents antisudoraux, etc., et l'inhibition de l'activité bactérienne et la désinfection par des agents antibactériens tels que des antibiotiques ou des désinfectants. Un tissu épithélial sécrétant un stéroïde, tel qu'une glande apocrine, etc., métabolise et sécrète divers composés stéroïdiens tels que le cholestérol, une hormone sexuelle, etc. Parmi les composés stéroïdiens, un composé de ce type est métabolisé par la flore bactérienne qui s'est enracinée et multipliée sur l'épithélium axillaire en produisant ainsi un composé stéroïdien odorifère, à savoir la 5a-androst-16-ene-3-oneg5a-A), qui est responsable de l'hircisme. Toutefois, le composé lui-même n'a pas été détecté dans une sécrétion provenant du tissu sécréteur concernant l'hircisme. Une théorie générale suggère qu'un composé stéroïdien en C19 métabolisé et produit dans le tissu sécréteur peut être métabolisé de nouveau par les bactéries enracinées dans l'aisselle en produisant le composé indiqué ci-dessus. Parmi les bactéries enracinées sur des épithéliums, de nombreuses bactéries propioniques ou bactéries corynéformes et une partie des staphylocoques comprennent des espèces jouant un rôle dans le métabolisme des stéroïdes. Des dispositions classiques contre l'hircisme ont été prises principalement par inhibition de la production d'un stéroïde odorifère par l'application axillaire d'antibiotiques, etc., pour éliminer les bactéries enracinées sur l'épithélium axillaire. Toutefois, les effets ne sont que temporaires. Dans l'état de la technique, l'hircisme n'a été supprimé que par un traitement chirurgical. La demanderesse a effectué des recherches en vue de trouver un médicament curatif qui puisse rapidement supprimer l'hircisme sans aucun traitement chirurgical, et elle est parvenue au résultat qu'il est efficace d'associer un adrénocorticostéroïde et un agent antibactérien comme agent complémentaire, comme elle l'a déjà proposé (demande de brevet japonais mise à l'inspection Publique sous le n" 3-66608). Aucun adrénocorticostéroïde n'a été utilisé de façon classique pour le traitement de l'hircisme. En conséquence, leurs actions pharmaceutiques concrètes contre l'hircisme n'ont nullement été révélées jusqu'à présent, mais on suppose qu'elles sont dues à la sensibilité d'une bactérie propionique en un adrénocorticostéroide, et en particulier à l'inhibition de la sécrétion, par le tissu épithélial axillaire, d'une substance responsable de la formation du stéroide odorifère, inhibition causée par l'action exercée sur un tissu pour l'empêcher de synthétiser et de sécréter des stéroïdes, qui constitue l'une des actions physiologiques qu'exerce un adrénocorticostéroïde. Les effets thérapeutiques du médicament adrénocorticostéroïdien contre l'hircisme sont extrêmement remarquables et rapides, et des essais cliniques initiaux ont révélé, bien que sous la dépendance de symptômes, que l'application répétée d'une dose efficace ne dépassant pas environ 2 mg guérissait très efficacement de l'hircisme. Toutefois, un médicament stéroïdien est en soi un médicament qui pourrait induire des effets secondaires par suite d'un usage chronique. Par conséquent, il est préférable de l'utiliser à une forte concentration pendant une courte période. Toutefois, la dose a été limitée puisque des effets secondaires tels que de l'eczéma, une érosion ainsi qu'une altération lichéniforme pourraient apparaître si la fréquence d'administration était augmentée conformément à une constitution et un symptôme, etc., et cela pourrait aussi être accompagné d'une infection. La demanderesse a accompli divers essais en tenant compte du fait qu'un produit métabolique d'une bactérie lactique obtenue par fermentation lactique exerçait un effet d'astriction ou de réparation sur la peau, mais exerçait aussi une action bactériostatique ou bactéricide contre des bactéries, et elle a mis en évidence que l'utilisation d'un adrénocorticostéroïde produisant un effet thérapeutique spécial contre l'hircisme en association avec un extrait particulier produit par fermentation lactique, inhibait notablement les effets secondaires induits par cet adrénocorticostéroïde. La présente invention propose un médicament destiné au traitement de l'hircisme, caractérisé en ce qu'il contient une quantité efficace d'un adrénocorticostéroïde et 1 à 10 pour-cent en poids d'un extrait d'un produit de fermentation lactique, sur la base de l'excipient (1 g). Meilleur Mode de Mise en Oeuvre de l'invention Bien qu'un adrénocorticostéroïde à une concentration d'environ 100 mg/kg par rapport à l'excipient produise déjà un effet important sur une bactérie propionique, qui constitue une cause d'hircisme, il est préférable d'utiliser cette substance à une concentration d'au moins 300 mg/kg comme remède pratique contre l'hircisme. D'autre part, l'administration de cette substance même à une concentration ne s'abaissant pas en dessous de 30 mg/g n'augmente pas davantage l'effet. Les adrénocorticostéroïdes utilisés dans la présente invention comprennent de nombreux adrénocorticostéroïdes bien connus montrant un effet similaire, tels que la prednisolone, la cortisone, le cortisol, l'hydrocortisone, la prednisone, la méthylprednisone, la méthylprednisolone, la triamcinolone, la dexaméthasone, la paraméthasone, la bétaméthasone et la béclométhasone. Par ailleurs, les effets secondaires induits par de tels adrénocorticostéroïdes sont remarquablement inhibés par l'extrait d'un produit de fermentation lactique en question. Les raisons n en sont pas entièrement élucidées, mais on suppose que l'extrait de ce produit peut non seulement empêcher l'apparition de ce trouble cutané induit comme un effet secondaire d'un médicament adrénocorticostéroïdien, mais aussi guérir la lésion et ramener la peau à son état normal en inhibant l'induction d'une maladie infectieuse. L'extrait de produit dont il est question est utilisé à une concentration comprise dans une plage de 1 à 10 pour-cent en poids par rapport à l'excipient. On observe déjà l'effet attendu avec une concentration de 1 pour-cent en poids. Cet effet croît avec la concentration, mais une sensibilisation stimulée de la peau perturbe la thérapie pratique si la concentration dépasse 10 pour-cent en poids. Il est préférable d'utiliser un mélange d'un extrait obtenu à partir d'un produit de fermentation lactique, notamment une solution purifiée d'acide lactique obtenue par stérilisation à la chaleur et filtration à l'aide d'un filtre à membrane, etc., d'un liquide de fermentation lactique, et un extrait dérivé du cytoplasme de cellules bactériennes obtenu par homogénéisation des cellules bactériennes lactiques sous forme d'une masse agglomérée en vue d'obtenir l'extrait du produit de fermentation lactique de la présente invention. Cet extrait tiré d'un produit de fermentation lactique contient, en plus d'un produit métabolique (acide lactique) libéré des cellules bactériennes, divers amino acides, des protéines, des acides nucléiques, des lipides, des glycoprotéines et des polysaccharides, etc., dérivés des constituants des cellules bactériennes, ces substances étant appelées conjointement extraits du produit de fermentation lactique. La bactérie lactique utilisée dans la présente invention a pour caractéristique d'être une souche obtenue sélectivement par culture simultanée de différentes espèces multiples de bactéries lactiques dans une étape de croissance en compétition mutuelle. Il existe de nombreuses espèces de bactéries lactiques pouvant être utilisées dans la présente invention, les méthodes de culture variant avec les espèces. Dans les groupes (I) à (IV), dont chacun contient au moins une souche de bacille lactique et au moins une souche de microcoque lactique, avec différentes bactéries entre les divers groupes, par exemple I (B.bulgaricus A, B. acidophilus 1, M. lactisacidi), II (B. bulgaricus B, B. acidophilus, M. lactisacidi), III (Kornchenbacillus A, B. acidophilus, M. lactisacidi) et IV (Kornchenbacillus B, B. acidophilus, W. lactisacidi), des résultats avantageux sont obtenus par une culture primaire d'une multiplicité de souches de bactéries lactiques séparément dans chaque groupe dans des conditions données, puis en recueillant la culture obtenue de groupes respectifs ensemble et une autre culture secondaire simultanée. De préférence, dans ce cas, le produit métabolique présent dans la culture primaire est séparé par filtration, etc., et des cellules bactériennes seulement sont cultivées dans la culture secondaire. Le traitement des bactéries lactiques obtenues par cette culture secondaire par stérilisation à la chaleur et par d'autres moyens et filtration du produit métabolique, libéré par les cellules bactériennes au cours de la culture, au moyen d'un filtre à membrane, par exemple sous-vide, donne comme filtrat un liquide acide transparent (pH 3-4) (acide lactique) L'extrait du produit de fermentation lactique est obtenu par l'addition des composants des substances constitutives provenant des cellules bactériennes, obtenus par pulvérisation des cellules bactériennes et extraction de ces dernières, sous forme de gâteau sur le filtre. Exemples de réalisation L'invention est décrite ci-après à l'aide d'exemples de réalisation. Exemple de réalisation 1 On a ajouté 87 kg d'eau purifiée à 10 kg de lait écrémé en poudre et 3 kg de glucose et on a stérilisé le mélange à la chaleur à 100"C pendant 60 minutes, puis on l'a refroidi à 37"C pour préparer un milieu. Ensuite, une bactérie lactique préparée par ailleurs (streptococcus thermophilus) a été inoculée et cultivée à 37"C pendant 48 heures. Le bouillon de culture a été chauffé à 60"C en vue de sa stérilisation, puis il a été filtré sur Celite et il a encore été soumis à une stérilisation par filtration au moyen d'un filtre à membrane, et on a obtenu une solution fermentée d'acide lactique sous forme d'un liquide limpide à un pH d'environ 3-4. En outre, la bactérie lactique sous forme de gâteau retenu sur le filtre a été congelée et broyée afin d'obtenir un extrait dérivé du cytoplasme, etc., des cellules bactériennes, et l'extrait a été mélangé avec la solution d'acide lactique en question pour former un extrait de produit de fermentation lactique A. Exemple de réalisation 2 Les groupes (I)-(IV) de bactéries lactiques, avec différentes souches d'un groupe à l'autre, répartis en groupes I (B. bulgaricus A, B. acidophilus, M. lactisacidi), II (B. bulgaricus B, B. acidophilus, M. lactisacidi), III (Kornchenbacillus A, B. acidophilus, M. lactisacidi) et IV (Kornchenbacillus B, B. acidophilus, W. lactisacidi), ont été cultivés chacun à une température moyenne d'environ 37"C pendant 120 heures, dans un milieu de culture de composition suivante: Peptone trypticase 10,000 g Extrait de levure 5,000 g Phosphate de potassium 6,000 g Citrate d'ammonium 2000 g Glucose 20,000 g Monooléate de sorbitanne 1,000 g Acétate de sodium hydraté 25,000 g Sulfate de magnésium 0,575 g Sulfate de manganèse 0,120 g Sulfate ferreux 0,034 g Gélose 15,000 g pH 5,5 La culture obtenue a été traitée de la même manière que dans l'exemple de réalisation 1, ce qui a donné un extrait de produit de fermentation lactique B. Exemple de réalisation 3 (Test de sensibilité de propionibactérium acnès à un médicament adrénocorticostéroïdien) Une bactérie d'essai repiquée a été inoculée dans un milieu de culture et elle a été cultivée à 350C pendant 48 heures dans des conditions aérobies. Ensuite, le liquide de culture a été dilué avec le milieu de croissance de manière que la densité de bactéries soit d'environ 106/me, et une anse de platine de la cellule bactérienne 1 a été transférée dans un bouillon GAM (Nissui Seiyaku Co., Ltd.) et les bactéries ont été cultivées à 35"C pendant 24 heures dans des conditions anaérobies en vue de la préparation d'une solution bactérienne destinée à l'inoculation. Cette solution bactérienne a été répartie entre différentes boîtes de Petri contenant comme milieu de la gélose GAM (Nissui Seiyaku Co., Ltd), à raison de 15 mt dans chaque boîte, de manière que la densité bactérienne soit d'environ 106/me et la solution a été fixée. Ensuite, un échantillon d'essai contenant de la prednisolone comme adrénocorticostéroïde à une concentration de 28 mg dans 1 g de crème de base a encore été dilué par étapes successives à des degrés de 1-28 000 fois avec la crème. Des disques de sensibilité (papier filtre) de 10 mm de diamètre auxquels les échantillons d'essai dilués avaient été appliqués ont été disposés chacun sur les milieux. Un halo (cercle d'inhibition de croissance) a été observé lorsque la culture était terminée après un temps donné. Les résultats sont représentés sur le tableau suivant. Comme le montre à l'évidence ce tableau, la formation du halo (4 mm) a déjà été observée à partir de la dilution d'un facteur d'environ 280 (1000 mg/kg). La largeur du halo W est indiquée par l'expression: W=T-D/2 dans laquelle T désigne la largeur de la bande d'inhibition contenant l'échantillon d'essai et D est la largeur de l'échantillon d'essai. Formation d'un halo (bande d'inhibition de croissance) vis-à-vis de la bactérie d'essai Bactérie Concentration . . Concentration d'essai bactérienne de Dllution effective en Résultats (ma-1) ingrédient (mg/kg) I 28000 +(18mu) 7 4000 +(14mm) 28 1000 +(llmm) Propionibactérium 4,8 x 106 280 100 +(4mm) acnés 2800 10 28000 I Exemple de réalisation 4 Comme le montrent à l'évidence les résultats de cet essai de sensibilité, les bactéries propioniques avaient déjà une sensibilité importante vis-à-vis de l'adrénocorticostéroïde pour une concentration de 100 mg/kg, et cette sensibilité est remarquablement accrue pour la concentration dépassant 1000 mg/kg. On a conduit un essai thérapeutique dans lequel on a appliqué à un patient atteint d'hircisme un médicament d'essai consistant en une association de la substance active stéroïdienne à une concentration de 300 mg/kg et de l'extrait du produit de fermentation lactique A à une concentration de 3 pour-cent en poids. Dans cet essai, le médicament destiné au traitement de l'hircisme contenant 0,3 mg (300 mg/kg) de prednisolone comme adrénocorticostéroïde et 30 mg de l'extrait du produit A (3 pour-cent en poids) dont 1 g de crème pour pommade a été appliqué aux aisselles de 350 patients une fois par jour selon une méthode générale. Des améliorations ont été observées chez tous les patients mais, en fonction des symptômes, il y a eu certains cas où l'hircisme une fois réduit ou éliminé, est réapparu au bout d'une semaine environ. Cette concentration de prednisolone pour cette application a été efficace à un certain degré, soit qu'elle était suffisante, soit qu'elle ne dépendait pas des symptômes. Exemple de réalisation 5 Un traitement par application similaire a été effectué sur 150 patients atteints d'hircisme au moyen d'une crème préparée par mélange de 28 mg (concentration de 28 000 mg/kg) de prednisolone et de 30 mg de l'extrait du produit B dans 1 g d'excipient. Aucune rechute n'est apparue chez aucun des patients indiqués ci-dessus pendant une longue période. Aucun effet secondaire considéré comme induit par la prednisolone n a été observé. Dans cet essai, l'administration répétée d'un adrénocorticostéroide général à 10 patients comme traitement d'une atopie, etc., avait déjà entraîné avant le traitement contre l'hircisme l'apparition d'eczéma, d'anthème et d'érosion, etc., sur la peau dans la région axillaire, comme effet secondaire induit par le médicament. La crème a été appliquée à ces patients pendant cet essai 2 à 4 fois par jour en fonction des symptômes. En conséquence, ces dermatoses dues à l'effet secondaire induit par la substance active ont été remarquablement réduites chez 8 patients, et ont entièrement disparu chez 2 patients, et aucun hircisme ni aucune dermatose n'est encore réapparu. Chez deux autres patients, aucun effet n'a été observé et l'application a été interrompue. Aptitude à la mise en oeuvre industrielle Conformément à la présente invention, des effets thérapeutiques remarquables sur l'hircisme considéré de façon classique comme difficile à guérir, sont constatés pour une médication administrée en une courte période. On observe peu d'effets secondaires dus au médicament adrénocorticostéroïdien. Par conséquent, le médicament de la présente invention peut être utilisé efficacement comme médicament destiné au traitement de 1 'hircisme. REVENDICATIONS 1. Médicament destiné au traitement de l'hircisme, caractérisé en ce qu'il contient une quantité efficace d'adrénocorticostéroïde et 1 à 10 pour-cent en poids d'un extrait d'un produit de fermentation lactique, pour 1 g de l'excipient. 2. Médicament destiné au traitement de l'hircisme suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il contient l'adrénocorticostéroide en une quantité comprise dans la plage de 0,3 à 30 mg. 3. Médicament destiné au traitement de l'hircisme suivant la revendication 1, caractérisé en ce que l'extrait d'un produit de fermentation lactique est un mélange d'un produit métabolique généré par des cellules bactériennes au cours de la culture d'une bactérie lactique, et de composants dérivés du cytoplasme de cellules bactériennes, obtenus par broyage et extraction des cellules bactériennes isolées par filtration à chaud de la culture. 4. Médicament destiné au traitement de l'hircisme suivant la revendication 3, caractérisé en ce qu'on obtient la bactérie lactique en question en effectuant une culture primaire d'une multiplicité de bactéries lactiques de souches différentes, la culture étant séparée dans chaque groupe dans des conditions données, et en recueillant ensemble les bactéries lactiques des groupes respectifs et en effectuant en outre une culture secondaire simultanée.