Brevet FR2756929A1 — publié le 19980612

La présente invention est relative à un procédé de surveillance spécifique de l'observance d'un traitement comportant un inhibiteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine (tEC). La présente invention est également relative à l'utilisation du tétrapeptide N-acétyl Ser-Asp-Lys-Pro (acétyl-SDKP ou Ac-SDKP), en tant que marqueur spécifique et fiable à 100% de l'évaluation de l'observance d'un traitement comportant unIEC. Le tétrapeptide hémorégulateur acétyl-SDKP, mis en évidence à l'origine, dans la moelle osseuse de veau foetal, a été purifié et séquencé et appartient à la famille des facteurs inhibiteurs de l'hématopoïèse, qui inclut notamment le TGFss, la PEED-CK, le TNFa. Un certain nombre d'Auteurs ont montré que l'acétyl-SDKP est un substrat préférentiel du domaine N-terminal de l'enzyme de conversion de l'angiotensine I (ECA) (Rousseau et al., 1995, J. Biol. Chem. 270, 3656-3661); en effet, le métabolisme de l'acétyl-SDKP est sous le contrôle de l'ECA, qui hydrolyse la liaison Asp-Lys, permettant le relargage du dipeptide Lys-Pro C-terminal, aussi bien in vitro qu'in vivo (Rieger KJ et al., 1993, Biochem. J., 296,1-6; Azizi M et al, 1996, J. Clin. Invest., 97, 839-844); cette hydrolyse est bloquée par les inhibiteurs de l'enzyme de conversion de l'angiotensine (IEC) in vitro (Rousseau A. et al, précité) et in vivo (Azizi M. et al.). Des expériences de mutagenèse dirigée sur les deux sites actifs de l'ECA ont confirmé que l'acétyl-SDKP était principalement clivé par le site N-terminal de l'ECA; en outre, il a été montré que les constantes catalytiques de cette hydrolyse permettaient à l'Ac-SDKP d'être un substrat naturel de l'ECA in vivo (Rousseau et al. 1995, précité). Ce fait a été confirmé lors d'un essai croisé contre placebo chez le volontaire sain, testant l'effet de l'inhibition de l'ECA par le captopril sur la dégradation de l'acétyl-SDKP endogène. Quatre heures après l'administration d'une dose orale unique de 50 mg de captopril, le taux plasmatique de l'acétyl-SDKP, s'élève 5,5 fois par rapport à son taux basal, alors qu'il est stable sous traitement placebo. Le taux plasmatique de l'acétyl-SDKP reste élevé pendant une période de 8 heures. Cette étude confirme que l'acétyl-SDKP est un substrat physiologique de l'ECA chez l'homme et qu'il est le premier substrat de son domaine N-terminal in vivo (Azizi M. et al., 1996, précité). La surveillance de l'observance d'un traitement antihypertenseur au long cours par les inhibiteurs de l'ECA (IEC) est difficile dans la mesure où dans une maladie chronique telle que l'hypertension artérielle qui est, de plus, totalement asymptomatique, la non-observance inavouée au traitement est l'un des grands problèmes rencontré et pourrait être chiffrée aux alentours de 25 % de patients prenant un tel traitement antihypertenseur au long cours. Or, la détermination de l'activité de l'ECA tant in vitro, par la méthode de Cushman, méthode spectrophotométrique utilisant un substrat synthétique, l'hippuryl-histidine-leucine (Cushman et al., Biochem. Pharmacol., 1971, 20, 16371648) qu'in vivo, par mesure du rapport plasmatique Ang 11/ Ang I ne permettent pas de discriminer tous les patients prenant effectivement un IEC; en particulier la méthode in vitro de Cushman présente l'inconvénient d'entraîner une sous-estimation de l'inhibition due aux lEC et la méthode in vivo à base du rapport plasmatique Ang Ilang I, requiert la mise en oeuvre de radioimmunoessais fastidieux; en outre, le taux d'Ang II dans le plasma qui, théoriquement, diminue sous traitement par IEC, revient à sa valeur de base lors de traitements au long cours, du fait de la stimulation de la libération de rénine par l'IEC et de la génération d'Ang II par d'autres systèmes enzymatiques (chymase, CAGE). C'est la raison pour laquelle, les Inventeurs se sont donné pour but de mettre au point un test de surveillance de l'observance d'un traitement anti-hypertenseur par IEC, qui réponde mieux aux besoins de la pratique que les techniques antérieurement utilisées. De manière surprenante, les Inventeurs ont trouvé que le dosage de l'Ac-SDKP plasmatique et/ou urinaire permet effectivement de vérifier l'observance d'un traitement aux EC, de manière fiable et spécifique à 100 %, en discriminant effectivement l'ensemble des patients hypertendus traités par un EC, alors que les marqueurs classiques d'inhibition de l'ECA précités, à savoir le test de Cushman, le taux d'angiotensine il et le rapport plasmatique angiotensine II/ angiotensine I, ne permettent pas de les identifier tous correctement et ne peuvent donc pas constituer un test de surveillance fiable et spécifique de l'observance d'un tel traitement. De plus, les Inventeurs ont trouvé que le facteur multiplicatif du taux d'Ac-SDKP est de 100 dans les urines alors qu'il n'est que de 5, dans le plasma, dans les premières heures après l'administration de l'IEC. Cette amplification du facteur multiplicatif augmente encore la sensibilité du dosage de l'Ac-SDKP dans les urines. Au sens de la présente invention, les facteurs multiplicatifs précités doivent s'entendre comme des valeurs moyennes (moyenne géométrique). La présente invention a pour objet un procédé de surveillance d'un traitement comportant un inhibiteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine (IEC), quelle qu'en soit l'indication thérapeutique, caractérisé en ce qu'il comprend - le dosage du N-acétyl-Ser-Asp-Lys-Pro (Ac-SDKP) dans au moins un échantillon de fluide biologique, sélectionné au moins parmi le plasma et l'urine, d'un individu à surveiller et - la quantification de l'observance, considérée comme positive, si la concentration plasmatique en Ac-SDKP est supérieure à 1,50 pmol/ml, et/ou la concentration urinaire en Ac-SDKP est supérieure à 30 pmoUml. Le procédé selon l'invention englobe à la fois les procédés de surveillance comprenant soit uniquement un dosage d'Ac-SDKP plasmatique, soit uniquement un dosage d'Ac-SDKP urinaire, soit les deux dosages. De manière surprenante, dans ces trois cas, la méthode de surveillance selon l'invention permet effectivement de discriminer avec une sensibilité de 100 % et une spécificité de 100 % les patients prenant un traitement comportant la prise d'un IEC, de ceux qui n'en prennent pas ou plus. Au sens de la présente invention, on entend par traitement comportant la prise d'un EC, aussi bien les traitements à des doses subthérapeutiques, en association avec un autre traitement, que les traitements à des doses thérapeutiques, notamment dans les traitements au long cours tels que l'hypertension ou l'insuffisance cardiaque. En effet, la simplicité et la fiabilité de la détection de l'inhibition de l'ECA par le dosage de l'Ac-SDKP dans les urines permettent d'envisager l'administration de ces inhibiteurs à une très faible dose, susceptible d'élever le taux d'Ac-SDKP dans les urines, au delà de 30 nmovl (30 pmol/ml), avant même que le système rénine-angiotensine-aldostérone ne soit modifié. il existe, en effet, une très grande différence dans l'amplitude des réponses à l'inhibition de l'ECA, mesurée sur le système de l'Ac-SDKP plasmatique et surtout urinaire, par comparaison à ses effets sur le système rénine-angiotensinealdostérone. Ainsi, lors de l'administration orale de captopril à la dose de 50 mg deux fois par jour, le taux plasmatique de rénine active (marqueur indirect de l'inhibition) est multiplié par 2, alors que le taux urinaire de l'Ac-SDKP est multiplié par un facteur allant de 50 à 100. De manière surprenante, il est possible d'utiliser une dose minimale efficace d'inhibiteur de l'enzyme de conversion, n'entraînant ni modification des paramètres du système rénine-angiotensine-aldostérone, ni des paramètres hémodynamiques, mais entraînant une augmentation du taux d'Ac-SDKP. Cette dose minimale efficace d'IEC, qui n'a pas d'effet de blocage du système rénine-angiotensine-aldostérone, peut être couplée à d'autres médicaments (quels qu'ils soient, et en particulier dans le domaine des pathologies chroniques, en général) ; dans ce cas, l'Ac-SDKP urinaire peut être utilisé comme molécule traçante de l'observance des patients et ce, quel que soit le médicament utilisé, chaque comprimé étant associé à une faible dose d'EC qui, absorbé en même temps que le traitement actif, augmente l'Ac-SDKP urinaire, sans avoir le moindre effet biologique sur les autres systèmes. L'Ac-SDKP peut être dosé par n'importe quelle méthode de dosage et notamment par la méthode décrite dans Pradelles P. et al. (Biochem. Biophys. Res. Comm., 1990, 170, 986-993). La présente invention a également pour objet l'utilisation de l'Ac SDKP présent dans au moins un échantillon biologique comme marqueur spécifique de l'observance d'un traitement comportant un EC. Selon un mode de réalisation avantageux de cette utilisation, ledit échantillon biologique est notamment un fluide biologique, tel que le plasma ou les urines ou un tissu. Selon un autre mode de réalisation avantageux de cette utilisation, ledit Ac-SDKP est dosé (qualitativement ou quantitativement) dans ledit échantillon biologique. La présente invention a, en outre pour objet l'utilisation du dosage de l'Ac-SDKP dans au moins un échantillon biologique, comme marqueur spécifique de l'évaluation de l'observance d'un traitement comportant un EC. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la présente invention ainsi qu'aux figures annexées, dans lesquelles - la figure 1 illustre la répartition de la variable normale standardisée z = (x-m)/s obtenue pour l'Ac-SDKP plasmatique, l'activité de l'enzyme de conversion de l'angiotensine (AEC) in vitre (utilisant Hip-His-Leu comme substrat) et le rapport angiotensine II/angiotensine I chez des patients hypertendus, soit traités (IEC+, n = 27), soit non traités (IEC-, n = 23) avec un EC et chez des sujets normotendus (NT). Après transformation logarithmique de chacune de ces 3 variables hormonales pour obtenir une distribution normale, chaque variable est transformée en une variable normale standardisée z = (x-m)/s dans laquelle x est la valeur de la variable transformée en log, m sa moyenne et s sa déviation standard pour tout le groupe de sujets. Ainsi, toutes les variables ont la même distribution avec une moyenne égale à 0 et une déviation standard égale à 1, ce qui permet une comparaison directe sur la même échelle; - la figure 2 représente le taux plasmatique d'Ac-SDKP (nM), en fonction du temps (heures), après une prise orale unique de 50 mg de captopril; - la figure 3 représente le taux urinaire d'Ac-SDKP (nM/12 h), avant une prise orale unique de 50 mg de captopril (recueil 1 de 12 h) puis après prise de captopril (recueils 2 et 3, respectivement de 12 h); - la figure 4 représente les taux plasmatique d'ECA (mU/ml), de rénine active (pg/ml), d'Ac-SDKP (nM) et les rapports urinaires Ac-SDKP/créatinine (Cr) (nmoVmmol), en fonction du temps (jours), pendant une prise répétée de 7 jours de captopril (50 mg, 2 fois par jour, par voie orale). Exemple 1: Quantification de l'observance par la mesure plasmatique comparée de l'Ac-SDKP, par différentes méthodes, chez des patients hypertendus. - Patients et méthodes * Patients 27 patients hypertendus, traités par un IEC, depuis plus d'un mois (groupe IEC+) ont été comparés à un groupe de 23 patients hypertendus appariés en fonction de l'âge et du sexe et non-traités par IEC depuis au moins un mois (groupe EC-) et à un groupe de 17 sujets normotendus également appariés en fonction de l'âge et du sexe. * Méthodes de laboratoire Les échantillons sanguins sont prélevés après repos du patient en position assise, pendant au moins 5 minutes et après 2 à 48 heures après la prise de d'IEC. La préparation des échantillons prélevés, en fonction des dosages est celle décrite dans Azizi M. et al., précité. Le blocage du système rénine-angiotensine est exploré par le dosage de l'activité de l'ECA in vitro par la méthode de Cushman précitée et les dosages radioimmunologiques de l'Ang I et de l'Ang H et immunoradiométrique de la rénine active, conformément aux méthodes décrites dans Azizi M. et al. précité). Le taux plasmatique de l'Ac-SDKP est mesuré par immunoessai de type compétitif (Pradelles P et al., Biochem. Biophys. Res. Comm., 1990, 170, 986-993). * Méthodes statistiques Les deux groupes d'hypertendus sont comparés à l'aide du test de t de Student non apparié. La normalité est vérifiée pour chaque variable et la transformation en logarithme naturel est appliquée lorsque les distributions divergent de la normalité. La relation entre deux variables continues est étudiée avec le test de corrélation de Spearman. Les calculs ont été effectués à l'aide du logiciel STATVIEW 4.0 (Abacus concepts Inc., Berkeley, CA 94704). Dans la plupart des cas, les données ci-après sont exprimées sous la forme de moyennes géométriques, sauf précision contraire. Une valeur de probabilité inférieure à 0,05 est considérée comme significative. - Résultats La durée moyenne du traitement par IEC est de 4 ans (1, 5 mois-16 ans). Les types et les doses d'IEC administrés aux patients au moment du prélèvement sanguin sont illustrés au Tableau I. Tableau I: Types et doses d'IEC au moment du prélèvement sanguin DCI Groupe SH Prodrogue Posologie Patients* Moment du (N) prélèvement sanguin* * (h) Lisinopril non non 20 mg x 2. 1 20 Perindopril non oui 4 mg 1 24 4m x2 1 13 Quinapril non oui 20 mg 1 24 4m x2 1 12 Captopril oui non 50 mg x 2 3 12 Benazepril non oui 10 mg 2 24, 48 îOm x2 2 2, 12 Trandolapril non oui 0,5 mg x 2 1 12 2 mg 5 3,15,20,24,24 Enalapril non oui 10 mg 2 24,24 20 mg 6 3, 4, 5, 12, 24, 24 20mgx2 1 5 * traités avec un IEC ** après prise du médicament Les deux groupes de patients sont comparables en terme d'âge, de sexe, de pression artérielle. La clairance de la créatinine (Ccr), estimée par la formule de Cockcroft et Gault est significativement plus faible dans le groupe IEC+ que dans le groupe EC-: lEC+ : 70i23 ml/min/1,73 m2 vs IEC-: 90i35 mVmin/1,73 m2, P * Effets du traitement par IEC sur le taux plasmatique d'Ac-SDKP (Tableau II et figure 1) Les résultats des paramètres hormonaux sont résumés dans le Tableau II suivant. Tableau Il : Taux plasmatiques d'Ac-SDKP et d'autres paramètres du système rénine-angiotensine-aldostérone chez des patients. soit traités (groupe IEC+) soit non traités (groupe lEC-) par un lEC. Taux plasmatique Groupe IEC+ Grou e lEC- Rapport(2) p(3) Ac-SDKP (pmol/ml) 3,78(14,5) 0,75(0,36-1,22) 5,0(3,8-6,6) Activité ECA (mU/m 12G3-47) 32(19-65) 2,7(1,9-3,8 Rapport AngII/Ang I 0,17 01-1,00) - 0,74(0,28-2,00) 5,0(2,6-9,3) Ang II (pg/ml) 1,1(0,4-5,6) 1,4(0,5-4,3) 1,1(0,8-1,5) 0,68 Rénine active mi 324-969 131-161 2,4(1,1-5,1) 0,02 Ang I (pg/ml) 6,4(0,5-134) 1,8(0,5-13) 2,9 1,5-5,5 0,002 Aldostérone (pg/ml) 151(30-408) 133(43-406) 1,2(0,9-1,7) 0,25 (t) données exprimées en moyenne géométrique (fourchettes) (2) moyenne géométrique (intervalle de confiance 95 %) du rapport des variables entre les deux groupes; ce rapport exprime une différence relative (soit une augmentation, soit une diminution, selon le paramètre) (3) par le test t de Student non-apparié déterminé par la méthode de Cushman. Les résultats illustrés au Tableau H montrent qu'il n'y a aucun chevauchement des valeurs entre les deux groupes en ce qui concerne l'Ac-SDKP plasmatique, ce qui n'est le cas pour aucun des autres paramètres hormonaux mesurés. Seule la mesure de l'Ac-SDKP dans le plasma discrimine tous les patients traités par un IEC, alors que les marqueurs classiques d'inhibition de l'ECA, le rapport Ang II/Ang I et l'ECA, n'identifient pas 5 et 9 patients respectivement. Les taux plasmatiques d'Ac-SDKP sont similaires dans le groupe d'hypertendus IEC- et dans le groupe de sujets normotendus : moyenne géométrique [fourchette] : 0,75 [0,36-1,22] vs 0,63[0,48-0,85] pmol/ml, respectivement, NS, fig. 1. Les taux plasmatiques d'Ac-SDKP sont significativement corrélés avec la clairance à la créatinine dans le groupe IEC+ (Rho=0,41, n=27, p=0,03) mais pas dans le groupe IEC- (Rho=0,20, n=23, NS). De ce fait, une analyse supplémentaire en excluant les patients présentant une dysfonction rénale mineure (clairance de la créatinine IEC+: 3,31 [1,48-7,13] pmol/ml vs IEC- 0,80 [0,37-1,22] pmol/ml, P Chez des patients sans insuffisance rénale, les taux plasmatiques mesurés 20 à 24 heures après la prise d'IEC ne diffèrent pas de manière significative, de ceux mesurés 2 à 15 heures après la prise : moyenne géométrique [fourchette] : 2,93 [1,48-7,13] vs 3,70 [2,41-5,44] pmol/ml, respectivement, NS. L'Ac-SDKP s'accumule constamment dans le plasma lors d'un traitement au long cours par IEC. Quel que soit l'intervalle de temps entre le prélèvement sanguin et la dernière prise d'IEC, la moyenne géométrique des taux plasmatiques d'Ac-SDKP sont 5 fois (intervalle de confiance de 95 %: 3,8 - 6,6) supérieurs dans le groupe IEC+ que dans le groupe IEC-, sans aucun chevauchement entre les groupes (Tableau II et figure 1). * Effets du traitement par IEC sur l'activité ECA, la rénine active plasmatique, les taux plasmatiques d'Angiotensine I, d'Angiotensine Il et d'aldostérone (Tableau II et figure 1) Les valeurs moyennes de l'activité ECA plasmatique in vitro, selon la méthode de Cushman précitée et le rapport Ang II/Ang I sont significativement plus faibles, alors que la rénine active plasmatique moyenne et les taux d'Ang I sont significativement plus élevés dans le groupe IEC+ que dans le groupe IEC- (Tableau II). Chez 9 patients (6 dans le groupe IEC-), les concentrations plasmatiques d'Ang I et d'Ang II sont faibles, expliquées par une forme d'hypertension à taux de rénine faible (aldostéronisme primaire: n=4 ou prescription de ss-bloquants, n=2), ce qui rend le calcul de leur rapport, imprécis. Un chevauchement important des valeurs est observé pour l'activité ECA plasmatique, la rénine active, I'aldostérone, 1'Ang I, 1'Ang II et le rapport Ang II/Ang I entre le groupe IEC+ et le groupe IEC- (Tableau II et figure 1). De manière surprenante, le dosage de l'acétyl-SDKP dans le plasma permet de discriminer avec une sensibilité de 100 % et une spécificité de 100 % les patients prenant un traitement au long cours comportant un IEC, de ceux qui n'en prennent pas. La plupart des paramètres quantifiant habituellement le degré d'inhibition de l'IEC sont pris en défaut, puisqu'il existe un chevauchement important des valeurs de ces différents paramètres entre les deux groupes. Exemple 2 : Evolution de l'Ac-SDKP dans le plasma et dans les urines après administration d'une dose unique de captopril 50 mg per os. 32 sujets sains ont reçu 50 mg de captopril per os et ont eu des prélèvements plasmatiques répétés 0, 1, 2, 4, 6, 10 et 24 heures après la prise et 3 recueils urinaires fractionnés de 12 heures, le premier, précédent la prise de captopril, le deuxième et le troisième suivant la prise de captopril. Les résultats de cette investigation sont rapportés sur les figures 2 et 3. Cette étude confirme l'élévation du taux plasmatique d'Ac-SDKP après administration d'une dose unique de captopril. Son taux plasmatique est multiplié par un facteur 5 à 6 et reste élevé à 2 fois la valeur de base jusqu'à la 24ème heure après la prise. Dans les urines, alors que les taux avant administration d'IEC sont très faibles, à 2,4 nmoV12 h, ils sont multipliés par un facteur 100 immédiatement après la prise de captopril passant à 236 nmoV12h dans le premier recueil urinaire et s'abaissant dans le deuxième recueil urinaire à 121 nmoV12h. Exemple 3 : Evolution de l'Ac-SDKP dans le plasma et dans les urines après administration de captopril pendant 7 jours, à raison de 50 mg matin et soir. 8 volontaires sains ont reçu pendant 7 jours du captopril à la dose de 50 mg matin et soir et ont eu des prélèvements sanguins répétés pour une mesure de l'activité de l'enzyme de conversion mesurée (technique de Cushman), de la rénine active et de l'Ac-SDKP et des prélèvements urinaires répétés pour une mesure de l'Ac SDKP. Les résultats sont rapportés en figure 4. Douze heures après la prise de captopril, il est difficile de mettre ne évidence une inhibition claire de l'enzyme de conversion mesurée dans le plasma par la technique de Cushman. A partir du 7ème jour (date de la dernière prise d'IEC), alors que l'inhibiteur est en voie d'élimination, il existe une induction de l'enzyme de conversion qui s'élève progressivement passant de 35 à 45 mU/ml. Conséquence de cette inhibition de l'enzyme de conversion et de la baisse du taux circulant d'angiotensine II, on observe une élévation progressive de la rénine active dans le plasma (liée à l'interruption du feed-back négatif de l'angiotensine II sur la sécrétion et la libération de rénine), qui atteint son pic vers le 6ème jour. A I'arrêt de l'administration du captopril, on assiste à une décroissance du taux plasmatique de rénine active sur 4 jours retournant quasiment à sa valeur initiale au 1 la" jour. L'acétyl-SDKP dans le plasma quant à lui, s'élève très rapidement à un plateau dès la 24e" heure et reste à ce niveau pendant les 7 jours d'administration du captopril. Après l'arrêt de l'administration du captopril, on assiste à une décroissance progressive du taux plasmatique d'Ac-SDKP, qui s'effectue de manière exponentielle, pour atteindre 4 jours après l'arrêt du captopril, une valeur restant plus élevée que la valeur initiale. Dans les urines, où le taux d'acétyl-SDKP est rapporté à la créatininurie, I'évolution de ce paramètre est comparable à son évolution plasmatique, avec une montée rapide, un maintien à un plateau et une décroissance exponentielle avec des taux restant encore élevés 4 jours après l'interruption du traitement. Cette expérience montre qu'il existe une accumulation de l'acétyl SDKP dans le plasma après administration répétée de captopril 50 mg deux fois par jour chez des volontaires sains. La cinétique d'inhibition enzymatique appréciée par l'évolution d'acétyl-SDKP dans le plasma est plus rapide que celle appréciée par la l'élévation de la rénine active plasmatique et permet dans tous les cas de détecter une inhibition de l'ECA qui n'est pas détectable par la mesure de l'activité de l'enzyme de conversion, réalisée de façon conventionnelle avec un substrat synthétique tel que Hip His-Leu. L'augmentation du taux urinaire d'acétyl-SDKP est extrême, puisque ces taux urinaires sont multipliés d'un facteur allant de 50 à 100. L'acétyl-SDKP mesuré dans les urines est ainsi un marqueur encore plus fiable de l'inhibition de l'ECA. Ce dosage urinaire seul est donc un bon marqueur et présente l'intérêt de ne pas nécessiter de prélèvement sanguin et pourrait donc être réalisé, même au lit du malade ou en consultation, grâce à l'utilisation de bandelettes réactives. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, I'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite ; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. REVENDICATIONS 1") Procédé de surveillance d'un traitement comportant un inhibiteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine (IEC), caractérisé en ce qu'il comprend: - le dosage du N-acétyl-Ser-Asp-Lys-Pro (Ac-SDKP) dans au moins un échantillon de fluide biologique, sélectionné au moins parmi le plasma et l'urine, d'un individu à surveiller et - la quantification de l'observance, considérée comme positive, si la concentration plasmatique en Ac-SDKP est supérieure à 1,50 pmoMml, et/ou la concentration urinaire en Ac-SDKP est supérieure à 30 pmol/ml. 2") Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit traitement à l'IEC est un traitement à des doses subthérapeutiques, en association avec un autre traitement. 3 ) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit traitement à l'IEC est un traitement à des doses thérapeutiques. 4 ) Utilisation de l'Ac-SDKP présent dans au moins un échantillon biologique comme marqueur spécifique de l'observance d'un traitement comportant un IEC. 5 ) Utilisation selon la revendication 4, caractérisée en ce que ledit échantillon biologique est notamment un fluide biologique ou un tissu. 6 ) Utilisation selon la revendication 4 ou la revendication 5, caractérisée en ce que ledit Ac-SDKP est dosé dans ledit échantillon biologique. 7 ) Utilisation du dosage de l'Ac-SDKP dans au moins un échantillon biologique comme marqueur spécifique de l'évaluation de l'observance d'un traitement comportant un IEC.