Brevet FR2757399A1 — publié le 19980626

i La présente invention concerne l'application de composés stéroides substitués en position 11 pour la fabrication de médicaments destinés au traitement hormonal substitutif de la ménopause ne présentant que peu ou pas d'activité estrogène 5 au niveau utérin. L'ostéoporose est une pathologie qui se caractérise par une réduction quantitative et qualitative du tissu osseux, suffisante pour entraîner des fractures vertébrales ou périphériques, ce de façon spontanée ou à l'occasion de10 traumatismes minimes. Bien que cette affection soit d'origine multifactorielle, c'est la ménopause qui, chez la femme, constitue le facteur prépondérant de la perte osseuse ou ostéopénie. Cette ostéopénie se manifeste par une raréfaction et une modification de l'architecture de l'os spongieux qui a pour conséquence d'accentuer la fragilité squelettique et le risque fracturaire. La perte osseuse s'accentue fortement après la ménopause en raison de la suppression de la fonction ovarienne et atteint 3 à 5 % par an pour se ralentir après20 65 ans. Dans un but thérapeutique, la carence hormonale post ménopausique peut être compensée par une hormonothérapie substitutive o l'estrogène joue un rôle majeur en préservant le capital osseux. Mais l'estrogénothérapie au long cours25 s'accompagne parfois d'effet indésirable sur l'appareil génital (hyperplasie endométriale, tumeur mammaire...), ce qui constitue un inconvénient majeur et limite son applica- tion. Il convient donc de trouver d'autres composés que l'oes- tradiol ayant une activité estrogène dissociée, à savoir une activité estrogène au niveau osseux, tout en n'ayant pas ou peu d'activité d'hyperplasie endométriale, ni d'activité de prolifération de tumeur mammaire. L'invention a donc pour objet l'application de composés de formule générale (I): N R No 1F (C)n HO dans laquelle: n est un entier égal à 2 ou 3, soit R1 et R2 identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, soit R1 et R2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel20 ils sont liés un hétérocycle mono ou polycyclique saturé ou insaturé, aromatique ou non aromatique, de 5 à 15 chaînons renfermant éventuellement de 1 à 3 hétéroatomes additionnels choisis parmi l'oxygène, le soufre et l'azote, non substitué ou substitué,25 soit X représente un radical hydroxyle éventuellement estéri- fié et Y représente un atome d'hydrogène, un radical alkényle ou alkynyle renfermant de 2 à 4 atomes de carbone, et soit X et Y forment ensemble avec l'atome de carbone qui les portent l'un des cycles suivants:30 O soit X et Y forment ensemble un groupement oxo, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement hormonal substitutif de la ménopause, ou de la périménopause, ne présentant que peu ou pas d'activité estro- gène au niveau utérin. Par radical alkyle renfermant de 1 & 4 atomes de car- bone, on entend les radicaux méthyle, éthyle, propyle, iso- propyle, n-butyle, isobutyle, tert-butyle. 5 Lorsque R1 et R2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle, il s'agit notamment des hétérocycles mono ou bicycliques renfermant éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi l'oxygène et l'azote, comme des hétérocycles choisis parmi pyrrolyle, imidazolyle, indo-10 lyle, pyridyle, pyrazinyle, pyrimidinyle, pyridazinyle, thiazolyle, oxazolyle, furazonyle, pyrazolinyle, thiazoli- nyle, et tout particulièrement les hétérocycles saturés suivants: eN) , N N O, -N NH et N Lorsque cet hétérocycle est substitué, il l'est notamment par un groupement alkyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone au niveau de l'atome d'azote. Par radical alkényle ou alkynyle renfermant de 2 à 4 atomes de carbone on entend de préférence les radicaux sui- vants: -C=CH, -C-C-Me, -C-C-CH2CH3, - CH=CH2, -CH=CH-Me, -CH=CH-CH2CH3. Le trait ondulé signifie que le radical alkényle pré- sente une configuration (E) ou (Z). Lorsque X est un radical hydroxyle éventuellement esté- rifié, on entend les groupements OCO-alcl dans lesquels alcl est un radical alkyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone et de préférence les groupements -OCOMe ou OCOEt.35 Par sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, on entend les sels d'addition formés avec des acides minéraux ou organiques sur l'amine. I1 peut alors s'agir des acides chlorhydrique, bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, propionique, benzoïque, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citri- que, oxalique, glyoxylique, aspartique, alcane sulfonique tels que les acides méthane ou éthane sulfonique, arylsulfo-5 niques, tels que les acides benzène ou paratoluène sulfonique et arylcarboxyliques. Parmi les symptômes et les conséquences de la ménopause, on entend plus précisément les bouffées de chaleur, les sueurs, l'atrophie et la sécheresse vaginale, les symptômes10 urinaires et à long terme la diminution de la masse osseuse et l'augmentation du risque de fracture, ainsi que la perte de la protection cardio-vasculaire offerte par les estro- gènes. L'invention a donc plus particulièrement pour objet l'application de composés de formule (I) tels que définis précédemment pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement de l'ostéoporose, ne présentant que peu ou pas d'activité estrogène au niveau utérin. L'invention a plus particulièrement pour objet l'appli- cation telle que définie plus haut des composés de formule (I) dans laquelle n est égal a 2. L'invention a plus particulièrement pour objet l'appli- cation telle que définie plus haut des composés de formule (I) dans laquelle: n est égal à 2, soit R1 et R2 identiques ou différents représentent un radical alkyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, soit R1 et R2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un groupement pipéridino ou pyrrolidino et30 soit X représente un radical hydroxyle et Y représente un atome d'hydrogène, un radical -C-CH, -C-C- Me, -CH=CH-Me (E) ou -CH=CH-Me (Z) soit X et Y forment ensemble avec l'atome de carbone qui les portent l'un des cycles tels que définis précédemment, ainsi35 que de leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutique- ment acceptables. L'invention a tout particulièrement pour objet l'application telle que définie plus haut des composés de formule (I) dont les noms suivent: - 111-[4-[2-(diméthylamino)éthoxy]phényl]-19-nor-17a-pregna- 1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17a-diol, - 11-[4-[2-(1-pyrrolidinyl)éthoxy]phényl]-estra-1,3,5(10)- triène-3,17a-diol, - 11-[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-estra-1,3, 5(10)- triène-3,173-diol, - (17R) 11/-[4-[2-(diméthylamino)éthoxy]phényl]-spiro(estra- 1,3,5(10)-triène-17,2'(5'H)-furan)-3-ol, - (17R) 4',5'-dihydro-11-[4-[2(diméthylamino)éthoxy]phé- nyl]-spiro(estra-1,3,5(10)-triène-17, 2'(3'H)-furan)-3-ol, - 11-[4-[2-(diéthylamino)éthoxy]phényl]-19-nor-17a-pregna- 1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17a-diol, - 1la-[4-[2-(diéthylamino)éthoxy]phényl]-estra-1,3,5(10)- triène-3,17a-diol, - 11a-[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-19-nor-17a-prégna- 1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17a-diol, - gamma-lactone de l'acide (17a)-113[4-[2-(diéthylamino) éthoxy]phényl]-3,17a-dihydroxy-19-norpregna-1,3,5(10)-triène- 21-carboxylique, - gamma-lactone de l'acide (17a)-3,17a-dihydroxy-111-[4-[2- (1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-19-norpregna-1,3,5(10)-triène- 21-carboxylique, - 11-[4-[2-(diéthylamino)éthoxy]phényl]-3-hydroxy-estra- 1,3,5(10)-trièn-17-one, - 3-hydroxy-113-[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-estra- 1,3,5(10)-trièn-17-one. Les composés de formule (I) sont des composés connus. Ils sont spécifiquement décrits ou sont inclus dans des formules générales des brevets suivants: EP-B-0097572, FR-B-2640977, EP-B-0305242, FR-B-2596395, EP-B-0308345. Dans ces brevets, il est enseigné que les composés ren- trant dans des formules générales très larges peuvent avoir une activité antiglucocorticoide, antiprogestomimétique, progestomimétique, androgène, antiandrogène, estrogène ou antiestrogène. La demanderesse a mis en lumière de nouvelles propriétés concernant une sélection très restreinte de ces composés ayant comme point commun, en position 11, un groupement aminoalkyloxy éventuellement substitué et le cycle A aroma- tique substitué par un groupement OH en position 3.5 Il n'est en effet en aucun cas enseigné dans ces brevets que les produits de formule (I) selon l'invention possèdent une activité estrogénique dissociée. Par activité estrogénique dissociée, on entend une activité estrogénique au niveau osseux tout en ne manifestant qu'une activité minimale au niveau utérin, n'entraînant ainsi pas de prolifération endométriale (activité bien inférieure à celle de l'oestradiol). Par ailleurs, les composés selon l'invention présentent les avantages suivants: - Ils présentent une activité antiestrogène au niveau du sein. A l'opposé de l'oestradiol ils ne stimulent pas la croissance de cellules tumorales mammaires humaines et même peuvent inhiber leur croissance. Les composés selon l'inven- tion sont donc particulièrement avantageux pour le traitement20 de la ménopause chez les femmes à risque de cancer mammaire (antécédents familiaux) qui sont donc exclues d'un traitement substitutif par l'oestradiol, - Ils entraînent un abaissement du taux de cholestérol séri- que à un niveau équivalent à celui induit par l'oestradiol. Ils renforcent ainsi la protection cardio-vasculaire. Enfin, les composés selon l'invention ne présentant pas d'activité estrogène au niveau utérin, ne nécessitent pas d'être administrés en association avec un composé progestomimétique.30 L'invention s'étend aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins l'un des médicaments tels que définis ci-dessus. Les composés de formule (I) sont utilisés par voie digestive, parentérale ou locale, par exemple par voie percutanée. Ils peuvent être prescrits sous forme de compri- més simples ou dragéifiés, de gélules, de granulés, de suppositoires, d'ovules, de préparation injectable, de pomma- des, de crèmes, de gels, de microsphères, d'implants, d'anneaux intravaginal, de patchs, de sprays, lesquels sont préparés selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés & des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants,10 les conservateurs. La posologie utile varie en fonction de l'affection à traiter et de la voie d'administration; elle peut varier par exemple de 0,5 à 100 mg par jour chez l'adulte par voie orale.15 Certains composés de formule (I) sont des composés connus uniquement à titre de composés intermédiaires. L'invention a donc pour objet à titre de médicaments, les composés de formule (I) dans laquelle R1 et R2 identiques ou différents représentent un radical alkyle renfermant de 120 à 4 atomes de carbone et X et Y forment ensemble un groupe- ment oxo, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. L'invention a donc également pour objet les compositions pharmaceutiques les renfermant. Tests pharmacologiques Molécules étudiées E2: Oestradiol A ll: 11-[4[2-(1-pyrrolidinyl)éthoxy]phényl]-estra-1,3,5(10)- triène-3,17a-diol, 30 B: 11e-[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-estra-l,3,5(10)- triène3,170-diol, C: 11/-[4-[2-(diéthylamino)éthoxy]phényl]-estra-l,3,5(10)- triène-3, 173-diol, D: 11a-[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-19-nor-17a-35 pregna-l,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17/-diol, E: 3-hydroxy-11-[4-[2-(1pipéridinyl)éthoxy]phényl]-estra- 1,3,5(10)-trièn-17-one. Effet sur la prolifération de cellules mammaires L'activité proliférative des molécules est étudiée comparativement à celle de l'oestradiol sur les cellules mammaires humaines MCF-7 en culture. Pour mettre en évidence un effet agoniste de l'oestra- diol et/ou des molécules testées, le milieu de culture d'entretien des cellules (riche en facteurs de croissance et en stéroïdes) est remplacé par un milieu appauvri, entre autres dépourvu de stéroïdes (DMEM supplémenté par 5 % de sérum déstéroidé et sans rouge de phénol). Les cellules10 subissent ce sevrage deux jours avant le début de l'essai. Après 7 jours de culture en présence des produits & étudier, la prolifération cellulaire est évaluée par dosage du DNA. Dans chaque essai, l'effet de l'oestradiol à 10-10M (croissance cellulaire en présence d'oestradiol moins croissance cellulaire en présence du solvant) détermine le % de l'activité agoniste. L'activité des molécules est évaluée en comparaison à ce témoin interne. Les molécules induisant une croissance cellulaire identique à celle observée avec le solvant seul sont classées "inactives",20 celles induisant une croissance cellulaire inférieure à celle observée avec le solvant sont classées "inhibiteur". I I E2 L A B l D Activité Agoniste inactif inactif inhibiteur Etude de l'impact osseux d'un produit chez la rate femelle ovariectomisée à l'âge de 3 mois. Les composés A, B, C, D, E sont testés afin de déter- miner leur effet sur la masse osseuse et sur l'activité de formation et de résorption dans le modèle de la rate ovariec-30 tomisée à l'âge de 3 mois. Les animaux sont traités en préventif. Animaux: Espèce rat Souche Sprague- Dawley35 Sexe femelle Poids 250 g à 280 g Nbre d'animaux/groupe 8 Produits: 1 - Produit à tester: Produits A, B, C, D, E * véhicule(s): huile de maïs, méthylcellulose 0,5 % * dose(s): une dose par produit testé (0,3 mg/kg/j) * nombre d'administrations: une fois/jour; 5 jours/semaine pendant 4 semaines * voie d'administration: voie orale pour les produits * volumes: 5 ml/kg (p.o.) * délai entre la dernière injection et le sacrifice: 24 heures * nombre d'administrations: 20. 2 - Produit de référence: le 17f oestradiol est administré par voie sous cutanée à la dose 0,1 mg/kg/j en solution dans un mélange d'huile de germe de maïs-alcool benzylique (99:1,15 v/v) sous un volume de 0,2 ml/kg. Protocole expérimental Animaux L'étude est réalisée chez des rats femelles ovariecto- misées à l'âge de 3 mois. Les animaux sont maintenus dans une pièce climatisée (température 200C 2 C) et groupés par 4 dans des boîtes. Les animaux reçoivent, ad libitum, de l'eau déminéralisée et des aliments comprimés (bouchons: AO4CR- 10 UAR). Chirurgie Des rats femelles âgées de 3 mois pesant environ 250 g sont ovariectomisées sous anesthésie à l'Imalgène 1000, à la dose de 100 mg/kg par voie intrapéritonéale (i.p.) et sous un volume de 1 ml/kg. Ils reçoivent également du Nembutal (3 mg/kg i.p. sous un volume de 0,3 ml/kg). Après incision latérale, les plans cutanés et muscu- laires sont sectionnés. L'exérèse de chaque ovaire se fait après ligature de l'oviducte. Les rats témoins "SHAM" sont anesthésiés dans les mêmes conditions. Après incision des plans cutanés et musculaires, chaque ovaire est exposé puis replacé in situ. Traitement Les effets des produits sont déterminés en traitement préventif. Ils sont administrés immédiatement après l'ova- riectomie. Les animaux répartis en groupes de 8. Groupe 1: rats témoins "SHAM" recevant le ou les véhicules Groupe 2: rats témoins "OVX" recevant le ou les véhicules Groupes X: rats "OVX" recevant respectivement les doses5 définies du ou des produits & tester. Prélèvements sanguins Au terme des 4 semaines (durée de l'étude) les animaux sont décapités par guillotine. Les sérums recueillis après centrifugation sont conserves à -20 C.10 Un bilan lipidique sera établi à partir des dosages sériques du cholestérol total, des triglycérides et des phospholipides sur une aliquote de sérum de 500 M1. La baisse du taux de cholestérol sérique est exprimée en % par rapport au taux présenté par les animaux ovariectomisés ne recevant15 que le solvant. Prélèvements d'organes Après sacrifice des animaux, les organes suivants sont prélevés: - tractus génital Les utérus sont prélevés. Ces derniers sont pesés. L'augmentation du poids est exprimée, en % du poids de l'utérus des animaux ovariectomisés ne recevant que le solvant. - au niveau osseux: La masse osseuse (BMD ou Bone mineral density = densité minérale osseuse) est mesurée par absorptiométrie biphoto- nique à rayons X en double énergie (DEXA). Les mesures sont réalisées sur les os excisés et débarrassés de tous les tissus mous. La BMD (Bone mineral density) est mesurée sur30 l'os entier ainsi que sur la partie métaphysaire au niveau de l'extrémité proximale pour le tibia gauche. Cette zone est définie comme étant la région la plus riche en os trabéculaire; et par conséquent, est la plus sensible aux varia- tions de volume osseux et de densité minérale osseuse.35 Les résultats sont exprimés en % selon la formule: BMD produit testé - BMD OVX x 100 BMD SHAM - BMD OVX Dose OS TIBIA UTERUS Cholestérol mg/kg densité % Poids % % E2 0,1 sc 105 359 -35 A 0,3 po 68 70 -53 B 0,3 po 60 68 - 50 C 0,3 po 63 75 -55 D 0,3 po 66 88 -50 E 0,3 po 77 59 -52 OVX 0 SHAM 100 Nota: pour l'oestradiol: moyenne de 4 essais, pour le com- posé B, moyenne de 3 essais. Conclusions Les composés selon l'invention offre une protection osseuse efficace (>60 %), tout en montrant une activité utérotrophique minimale en comparaison de celle provoquée par l'oestradiol. De plus, on observe une baisse significative du20 taux de cholestérol total. REVENDICATIONS 1) Application de composés de formule générale (I): No (R2 (c-n | (I) ^^^^X HO dans laquelle: n est un entier égal à 2 ou 3, soit R1 et R2 identique ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle renfermant de 1 à 4 atomes20 de carbone, soit R1 et R2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle mono ou polycyclique, saturé ou insaturé, aromatique ou non aromatique, de 5 à 15 chaînons renfermant éventuellement de 1 à 3 hétéroatomes additionnels25 choisis parmi l'oxygène, le soufre et l'azote, non substitué ou substitué, soit X représente un radical hydroxyle éventuellement estéri- fié et Y représente un atome d'hydrogène, un radical alkényle ou alkynyle renfermant de 2 à 4 atomes de carbone,30 soit X et Y forment ensemble avec l'atome de carbone qui les portent l'un des cycles suivants: soit X et Y forment ensemble un groupement oxo, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement hormonal substitutif de la ménopause, ou de la périménopause, ne présentant que peu ou pas d'activité estro- gène au niveau utérin. 2) Application selon la revendication 1, caractérisée en ce que le médicament est destiné à la prévention ou au traite- ment de l'ostéoporose. 3) Application selon la revendication 1 ou 2, des composés de formule (I) telle que définie à la revendication 1 dans la- quelle n est égal à 2.10 4) Application selon la revendication 1 ou 2, des composés de formule (I) telle que définie à la revendication 1 ou 2 dans laquelle: n est égal à 2, soit R1 et R2 identique ou différents représentent un radical15 alkyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, soit R1 et R2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un groupement pipéridino ou une pyrrolidino, soit X représente un radical hydroxyle et Y représente un atome d'hydrogène, un radical -C-CH,-C-C-Me, -CH=CH-Me (E) ou20 -CH=CH-Me (Z), soit X et Y forment ensemble avec l'atome de carbone qui les portent l'un des cycles tels que définis à la revendication 1, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. 5) Application selon la revendication 1 ou 2, des composés de formule (I) telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 3 dont les noms suivent: - 11a-[4-[2(diméthylamino)éthoxy]phényl]-19-nor-17a-pregna- 1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17a-diol, - 11a-[4-[2-(1pyrrolidinyl)éthoxy]phényl]-estra-l,3,5(10)- triène-3,17a-diol, - 113[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-estra-l,3,5(10)- triène-3,170-diol, - (17R) 11-[4-[2-(diméthylamino)éthoxy]phényl]-spiro(estra- 1,3,5(10)-triène-17,2'(5'H)-furan)-3-ol, - (17R) 4',5'-dihydro-11l-[4-[2(diméthylamino)éthoxy]phé- nyl]-spiro(estra-l,3,5(10)-triène-17, 2'(3'H)-furan)-3-ol, - 11-[4-[2-(diéthylamino)éthoxy]phényl]-19-nor-17a-pregna- 1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17f-diol, - 113-[4-[2(diéthylamino)éthoxy]phényl]-estra-1,3,5(10)- triène-3,17a-diol, - 113-[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-19-nor-17a-prégna- 1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17a-diol, - gamma-lactone de l'acide (17a)-11a[4-[2-(diéthylamino) éthoxy]phényl]-3,17a-dihydroxy-19-norpregna-l,3,5(10)-triène- 21-carboxylique, - gamma-lactone de l'acide (17a)-3,171-dihydroxy-11j-[4-[2- (1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-19-norpregna-1,3,5(10)-triène- 21-carboxylique, - 11e-[4-[2-(diéthylamino)éthoxy]phényl]-3-hydroxy-estra- 1,3,5(10)-trièn-17-one, - 3-hydroxy-ll-[4-[2-(1-pipéridinyl)éthoxy]phényl]-estra- 1,3,5(10)-trièn-17-one. 6) Application des composés de formule (I) telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 5 pour la prépara- tion d'un médicament destiné au traitement des femmes & risque de cancer mammaire.20 7) Compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins l'un des médicaments tels que définis à l'une quelconque des revendications 1 à 5, destinées au traitement tel que défini à la revendication 1, 2 ou 6. 8) A titre de médicaments, les composés de formule (I) telle que définie à la revendication 1 dans laquelle R1 et R2 iden- tiques ou différents représentent un radical alkyle renfer- mant de 1 à 4 atomes de carbone et X et Y forment ensemble un groupement oxo, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.30 9) Compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins l'un des médicaments tels que définis à la revendication 8.