Brevet FR2757875A1 — publié le 19980703

PROCEDES D'UTILISATION DU GENE NIMi POUR CONFERER AUX VEGETAUX UNE RESISTANCE AUX MALADIES La présente invention concerne d'une manière générale la résistance des végétaux à un large spectre de maladies, notamment le phénomène de résistance systémique acquise (en anglais : systemic acquired resistance, SAR). Plus particulièrement, la présente invention concerne l'expression recombinante des formes sauvages et modifiées du gène NIAI, qui est mis en jeu dans la cascade de transduction des signaux conduisant à la SAR pour créer des plantes transgéniques présentant une résistance à un large spectre de maladies. La présente invention concerne aussi l'expression de haut niveau du gène NIMi cloné dans des plantes transgéniques présentant une résistance à un large spectre de maladies. Les plantes et végétaux sont en permanence agressés par une large gamme d'organismes pathogènes, parmi lesquels les virus, les bactéries, les champignons et les nématodes. Les plantes de culture sont particulièrement vulnérables, car elles croissent généralement sous forme de monocultures génétiquement uniformes ; si une maladie apparaît, les pertes peuvent être sévères. Cependant, la plupart des végétaux possèdent leurs propres mécanismes innés de défense contre les organismes pathogènes. Une variante naturelle, assurant la résistance aux ennemis des végétaux, a été identifiée par les sélectionneurs et a été introduite dans de nombreuses plantes de culture. Ces gènes naturels de résistance aux maladies assurent souvent un niveau élevé de résistance aux micro-organismes pathogènes, ou d'immunité contre ces derniers. La résistance systémique acquise (SAR) est une composante des végétaux à systèmes complexes, utilisée pour les défendre contre les micro-organismes pathogènes (Hunt et Ryals, Crit. Rev. in Plant. Sci. 15, 583-606 (1996), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité Ryals et al., Plant Cell 8, 1809-1819 (1996), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité. Voir aussi le brevet US N" 5 614 395, incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). La SAR est un aspect particulièrement important des réponses plante-microorganisme pathogène, car il s'agit d'une résistance systémique, pouvant être provoquée par un micro-organisme pathogène, contre un large spectre d'agents infectieux, parmi lesquels les virus, les bactéries et les champignons pathogènes. Quand la voie de transduction du signal SAR est bloquée, les plantes deviennent plus sensibles aux microorganismes pathogènes qui créent normalement une maladie, et de même deviennent sensibles à certains agents infectieux qui normalement ne devraient pas provoquer de maladie (Gaffney et al., Science 261, 754-756 (1993), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Delaney et al., Science 266, 1247-1250 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Delaney et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 92, 6602-6606 (1995), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Delaney, Plant. Phys. 113, 5-12 (1997), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Bi et al., Plant. J. 8, 235245 (1995), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Mauch-Mani et Slusarenko, Plant Cell 8, 203212 (1996), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Ces observations indiquent que la voie de transduction du signal SAR présente un caractère critique pour maintenir la santé des végétaux. En théorie, la réponse SAR peut être subdivisée en deux phases. Dans la phase d'initiation, on reconnaît une infection par un organisme pathogène, et un signal est libéré, qui traverse le phloème pour arriver aux tissus distants. Ce signal systémique est perçu par les cellules cibles, qui réagissent par l'expression des gènes de la SAR et de la résistance aux maladies. La phase de maintien de la SAR désigne le laps de temps, compris entre quelques semaines et la totalité de la vie du végétal, pendant lequel la plante se trouve dans un état quasipermanent, avec maintien de la résistance aux maladies (Ryals et al., 1996). L'accumulation de l'acide salicylique (SA) semble être nécessaire pour la transduction du signal SAR. Les plantes qui ne peuvent accumuler le SA en raison d'un traitement par les inhibiteurs spécifiques, d'une répression épigénétique de la phénylalanine-ammoniac-lyase, ou d'une expression transgénique de la salicylate-hydroxy- lase, qui dégrade spécifiquement le SA, ne peuvent non plus induire une expression du gène de la SAR ou une résistance aux maladies (Gaffney et al., 1993 ; Delaney et al., 1994 ; Mauch-Mani et Slusarenko 1996 ; Maher et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 91, 7802-7806 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité Pallas et al., Plant J. 10, 281-293 (1996), incorporé ici à titre de référence). Bien qu'il ait été proposé que le SA puisse servir de signal systémique, ce point fait actuellement l'objet de controverses, et, à ce jour, tout ce que l'on sait de certain, c'est que, si le SA ne s'accumule pas, alors la transduction du signal SAR est bloquée (Pallas et al., 1996 ; Shulaev et al., 1995, Plant Cell 7, 1691-1701 (1995), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Vernooij et al., Plant Cell 6, 959-965 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Récemment, on s'est aperçu qu'Arabidopsis représente un système modèle permettant d'étudier la SAR (Uknes et al., Plant Cell 4, 645-656 (1992), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Uknes et al., Mol. Plant Microbe Interact 6, 692-698 (1993), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Cameron et al., Plant J 5, 715-725 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Mauch-Mani et Slusarenko, Mol. Plant Microbe Interact. 7, 378-383 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Dempsey et Klessig, Bulletin de L'Institut Paster 93, 167-186 (1995), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). I1 a été montré que la SAR peut être activée dans Arabidopsis tant par les micro-organismes pathogènes que par des agents chimiques tels que le SA, l'acide 2,6-dichloroisonicotinique (INA) et l'ester S-méthylique de l'acide benzo(1,2,3) thiadiazole-7-carbothioïque (BTH) (Uknes et al., 1992 ; Vernooij et al., Mol. Plant-Microbe interact. 8, 228-234 (1995), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Lawton et al., Plant J. 10, 71-82 (1996), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité à titre de référence dans sa totalité). Après traitement par 1'INA ou le BTH, ou après une infection par un micro-organisme pathogène, au moins trois gènes de protéine apparentés à une pathogénèse (pathogenesis-related, PR), à savoir PR-1, PR-2 et PR-5, sont induits d'une manière coordonnée, simultanément à l'apparition de la résistance (Uknes et al., 1992, 1993). Dans le tabac, qui est l'espèce la mieux caractérisée, un traitement par un micro-organisme pathogène ou un composé d'immunisation provoque l'expression d'au moins 9 ensembles de gènes (Ward et al., Plant Cell3, 1085-1094 (1991), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Des plantes transgéniques résistant aux maladies ont été créées en transformant des végétaux à l'aide de différents gènes de la SAR (brevet US NO 5 614 395). Un certain nombre de mutants d'Arabidopsis ont été isolés, qui possèdent une transduction modifiée du signal SAR (Delaney, 1997). Les premiers de ces mutants sont ce que l'on appelle les mutants lsd (en anglais lesions simulating dispose, maladie simulant les lésions) , et acd2 (en anglais : accelerated cell death, mort accélérée des cellules) (Dietrich et al., Cell77, 551-563 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Greenberg et al., Cell77, 551-563 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité) . Tous ces mutants présentent un certain degré de formation spontanée de lésions nécrotiques sur leurs feuilles, des niveaux élevés de SA, une accumulation d'ARNm pour les gènes de la SAR, et une résistance significativement renforcée aux maladies. Au moins 7 mutants lsd différents ont été isolés et caractérisés (Dietrich et al., 1994 ; Weymann et al., Plant Cell 7, 2013-2022 (1995), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité) . Une autre classe intéressante de mutants est représentée par les mutants cin: (en anglais : constitutive immunité, immunité constitutive) (Lawton et al., 1993 "The molecular biology of systemic aquired resistance", dans Mechanisms of Defense Responses in Plants, B. Fritig et M. Legrand, eds (Dordrecht, Pays-Bas, éditions académiques Kluwer), pages 422-432 (1993), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Voir aussi la demande internationale PCT WO 94/16077, ces deux références étant incorporées ici dans leur totalité. Tout comme les mutants lsd et acd2, les mutants cim présentent une accumulation élevée de SA et un niveau élevé d'expression et de résistance du gène de la SAR, mais, au contraire du lsd ou de l'acd2, ils ne présentent pas de lésions détectables sur leurs feuilles. Le cprl (en anglais : constitutive expresser of PR genes, exprimeur constitutif de gènes PR), peut être un type de mutant cim ; cependant, comme la présence de lésions microscopiques sur les feuilles du cprl n'est pas exclue, le cprl peut être un type de mutant lsd (Bowling et al., Plant Cell6, 1845-1857 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Des mutants ont de même été isolés, qui sont bloqués au niveau de la signalisation de la SAR. Le ndrl (en anglais : non-race-specific disease resistance, résistance aux maladies non spécifique de race) est un mutant qui permet la croissance tant de Pseudomonas syringae, contenant différents gènes d'avirulence, que d'isolats normalement avirulents de Peronospora parasitica (Century et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 92, 6597-6601 (1995), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Manifestement, ce mutant présente un blocage précoce au niveau de la signalisation de la SAR. Le nprl (en anglais : nonexpresser of PR genes, non-exprimeur de gènes PR) est un mutant qui ne peut provoquer l'expression de la voie de signalisation de la SAR après traitement par l'INA (Cao et al., Plant Cell 6, 1583-1592 (1994), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Des mutants eds (en anglais : enhanced disease susceptibility, sensibilité renforcée aux maladies) ont été isolés sur la base de leur aptitude à soutenir une infection bactérienne après inoculation d'une faible concentration bactérienne (Glazebrook et al., Genetics 143, 973-982 (1996), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Parker et al., Plant Cell 8, 2033-2046 (1996), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Certains mutants eds sont d'un point de vue phénotypique très analogues au nprl, et, récemment, eds5 et eds53 se sont révélés être alléliques vis-à-vis du nprl (Glazebrook et al., 1996). Le niml (en anglais : noninducible immunité, immunité non-indutible) est un mutant qui soutient la croissance de P. parasitica (c'est-à-dire l'agent qui est à l'origine du mildiou) après traitement par 1'INA (Delaney et al., 1995 ; demande internationale PCT WO 94/16077). Bien que le niml puisse accumuler le SA après infection par un micro-organisme pathogène, il ne peut provoquer l'expression du gène du la SAR ou une résistance aux maladies, ce qui donne à penser que la mutation bloque la voie en aval du SA. Le niml présente aussi une aptitude réduite à répondre à l'INA ou au BTH, ce qui donne à penser que le blocage existe en aval de l'action de ces agents chimiques (Delaney et al., 1995 Lawton et al., 1996). Récemment, deux gènes alléliques d'Arabidopsis ont été isolés et caractérisés, dont les mutants sont responsables des phénotypes respectivement nimi et nprl (Ryals et al., Plant Cell 9, 425-439 (1997), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité ; Cao et al., Cell 88, 57-63 (1997), incorporé ici à titre de référence dans sa totalité). Le gène produit NIMi de type sauvage est mis en jeu dans la cascade de transduction du signal conduisant tant à la SAR qu'à la résistance aux maladies gène-pour-gène dans Arabidopsis (Ryals et al., 1997). Ryals et al. (1997) décrivent aussi l'isolement de 5 allèles additionnels du niml, qui présentent une gamme de phénotypes qui vont d'une faible dégradation de l'expression du gène PR-1 induite par voie chimique et de la résistance fongique, à des mutants fortement bloqués. La transformation du gène NPR1 de type sauvage en des mutants nprl non seulement complète les mutations, rétablit la sensibilité de l'induction de la SAR pour ce qui est de l'expression du gène PR et de la résistance aux maladies, mais encore rend les plantes transgéniques plus résistantes à une infection par P. syringae en l'absence d'induction de la SAR (Cao et al., 1997). Voies de transduction du signal NF-KB/IKB Les voies de signalisation NF-KB/IKB ont été impliquées dans les réponses en résistance aux maladies, dans toute une gamme d'organismes allant de Drosophila aux mammifères. Chez les mammifères, la transduction du signal NF-KB/IKB peut être provoquée par un certain nombre de stimuli différents, qui comprennent une exposition des cellules à un lipopolysaccharide, au facteur de nécrose tumorale, à l'interleukine 1 (IL-1) ou à une infection virale (Baeuerle et Baltimore, Cell 87, 13-20 (1996) ; Baldwin, Annu. Rev. Immunol. 14, 649-681 (1996)). La voie activée conduit à la synthèse d'un certain nombre de facteurs mis en jeu dans l'inflammation et les réponses immunes, notamment 1'IL-2, 1'IL-6, 1'IL-8 et le facteur de stimulation des colonies de granulocytes/ macrophages (deMartin et al. Gene 152, 253-255 (1995)). Dans le cadre d'études portant sur la souris transgénique, l'élimination de la transduction du signal NF-KB/IKB conduit à une réponse immune défectueuse, qui comprend une sensibilité accrue aux micro-organismes pathogènes bactériens et viraux (Beg et Baltimore, Science 274, 782784 (1996) ; Van Antwerp et al., Science 274, 787-789 (1996) ; Wang et al., Science 274, 784-787 (1996) Baeuerle et Baltimore (1996)). Dans Arabidopsis, la SAR est fonctionnellement analogue à une inflammation, en ce sens que les processus normaux de résistance sont renforcés après activation de la SAR, conduisant à une résistance accrue aux maladies (Bi et al., 1995 ; Cao et al., 1994 ; Delaney et al., 1995 ; Delaney et al. 1994 Gaffney et al., 1993 ; Mauch-Mani et Slusarenko 1996 Delaney, 1997). En outre, une inactivation de la voie conduit à une sensibilité accrue à des micro-organismes pathogènes bactériens, viraux et fongiques. I1 est intéressant d'observer que le SA a été dit bloquer l'activation du NF-KB dans les cellules de mammifères (Kopp et Ghosh, Science 265, 956-959 (1994)), tandis que le SA active la transduction du signal dans Arabidopsis. L'infection bactérienne de Drosophila active une cascade de transductions de signaux, qui conduit à la synthèse d'un certain nombre de protéines antifongiques telles que la cercropine B, la défensine, la diptéricine et la drosomycine (lp et al., Cell 75, 753-763 (1993) ; Lemaitre et al., Cell 86, 973-983 (1996)). Cette induction dépend du produit génique de dorsal et de dif, deux homologues du NF-KB, et est réprimée par cactus, un homologue de 1'IKB, chez la mouche. Les mutants qui présentent une synthèse réduite des protéines antifongiques et antibactériennes présentent une résistance considérablement réduite à l'infection. Malgré de nombreuses recherches, et malgré l'utilisation de mesures élaborées et intensives de protection des cultures, notamment la transformation génétique des végétaux, les pertes dues aux maladies continuent à représenter des milliards de dollars chaque année. En conséquence, il existe un besoin continu portant sur la mise au point de nouvelles mesures de protection des cultures, se fondant sur une compréhension toujours plus grande de la base génétique de la résistance des végétaux aux maladies. Les définitions ci-après vont faciliter la compréhension de la présente invention. Cellule végétale Il s'agit de l'unité structurale et physiologique des végétaux, comprenant un protoplaste et la paroi cellulaire. L'expression "cellule végétale" désigne toute cellule, qui fait partie d'un végétal ou en dérive. On peut citer à titre d'exemples de cellules les cellules différenciées qui font partie d'une plante vivante ; les cellules différenciées en culture ; les cellules non différenciées en culture ; les cellules des tissus non différenciés tels que le callus ou les tumeurs ; les cellules différenciées des semences, des embryons, des propagules et du pollen. Tissu végétal Il s'agit d'un groupe cellules végétales organisées en une unité structurale et fonctionnelle. Les tissus végétaux comprennent tous les tissus des végétaux, en cours de plantation ou en culture. L'expression comprend, mais sans limitation, les plantes entières, les organes des végétaux, les semences des végétaux, les cultures de tissus et tous groupes de cellules végétales organisées en unités structurales et/ou fonctionnelles. L'utilisation de cette expression, conjointement avec un type spécifique quelconque de tissu végétal, ou en l'absence d'un type spécifique quelconque de tissu végétal ressortant de la liste ci-dessus, ou par ailleurs englobé dans cette définition, ne veut exclure aucun autre type de tissu végétal. Protoplaste Il s'agit d'une cellule végétale sans paroi cellulaire. Plante descendante Il s'agit d'une plante d'une génération future, obtenue par voie sexuée ou asexuée, qui comprend, mais sans limitation, la progéniture. Plante transgénique Il s'agit d'une plante dans le génome de laquelle est incorporé d'une manière stable un ADN recombinant. ADN recombinant Toute molécule formée par réunion de segments d'ADN provenant de différentes sources, et produite par utilisation de la technologie de recombinaison de l'ADN. Technologie de recombinaison de l'ADN (ou technologie de l'ADN recombinant) : Il s'agit de la technologie qui produit l'ADN recombinant in vitro et transfère l'ADN recombinant dans des cellules où il peut être exprimé ou multiplié (voir Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Ed. Juo, CRC Press, Boca Raton (1996)), par exemple le transfert de l'ADN dans un ou plusieurs protoplastes ou cellules sous différentes formes, et notamment par exemple (1) l'ADN nu sous des formes circulaires, linéaires ou supertorsadées, (2) l'ADN contenu dans les nucléosomes ou les chromosomes ou les noyaux ou leurs parties, (3) l'ADN complexé ou associé à d'autres molécules, (4) l'ADN enfermé dans les liposomes, les sphéroplastes, les cellules ou les protoplastes, ou (5) l'ADN transféré à partir d'organismes autres que l'organisme hôte (par exemple Agrobacterium tumefaciens). Ces procédés, ainsi que d'autres procédés pour introduire l'ADN recombinant dans des cellules, sont connus dans la technique et peuvent être utilisés pour produire les cellules transgéniques ou les plantes transgéniques de la présente invention. La technologie de l'ADN recombinant comprend aussi les procédés de recombinaison homologues décrits dans Treco et al., WO 94/12650, et Treco et al., WO 95/31560, qui peuvent appliquer à une activité croissante de peroxydase dans une monocotylédone. Il devrait en résulter une augmentation du nombre de copies des séquences codant la peroxydase à l'intérieur de la plante. L'insertion initiale de l'ADN recombinant dans le génome de la plante RO n'est pas définie comme étant réalisée par les méthodes traditionnelles de sélection végétale, mais plutôt par des méthodes techniques décrites dans l'invention. Après l'insertion initiale, les descendants transgéniques peuvent se multiplier par utilisation des techniques de sélection essentiellement traditionnelles. Gène chimère Il s'agit d'une molécule d'ADN contenant au moins deux parties hétérologues, par exemple des parties qui dérivent de séquences d'ADN préexistantes qui ne sont pas associées dans leurs états préexistants, ces séquences ayant été de préférence générées par utilisation de la technologie de l'ADN recombinant. Cassette d'expression Il s'agit d'une molécule d'ADN comprenant un promoteur et un terminateur entre lesquels peut être insérée une séquence codante. Séquence codante Il s'agit d'une molécule d'ADN qui, quand elle est transcrite et traduite, conduit à la formation d'un polypeptide ou d'une protéine. Gène: Région chromosomique discrète, comprenant une séquence d'ADN régulatrice responsable de la régulation de l'expression, c'est-à-dire de la transcription et de la transduction, et une séquence codante qui est transcrite et traduite pour donner un polypeptide ou une protéine distincts. La présente invention décrit l'identification, l'isolement et la caractérisation du gène NIAI, qui code une protéine mise en jeu dans la cascade de transduction du signal sensible aux inducteurs biologiques et chimiques, qui conduit à la résistance systémique acquise dans les végétaux. En conséquence, la présente invention décrit une molécule d'ADN isolée (gène NIT1), qui code une protéine NIM1 mise en jeu dans la cascade de transduction du signal conduisant à la résistance systémique acquise dans les végétaux. Dans le cadre de la présente invention, on décrit une molécule d'ADN qui code la protéine NIM1 qui s'hybride dans les conditions suivantes pour donner le BAC-04, dépôt ATCC NO 97543 : hybridation dans BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Dans une forme de réalisation particulièrement préférée, le gène NIM1 se trouve à l'intérieur du cosmide D7, dépôt ATCC NO 97736. Le gène NIMi décrit dans l'invention peut être isolé d'une dicotylédone telle qu'Arabidopsis, le tabac, le concombre ou la tomate. Ou bien encore, le gène NIM1 peut être isolé d'une monocotylédone telle que le maïs, le blé ou 1 'orge. On décrit en outre une protéine NIM1 codée, comprenant la séquences d'acides aminés SEQ ID NO:3. L'invention décrit en outre la séquence codant le gène NIM1, qui s 'hybride dans les conditions suivantes à la séquence codante SEQ ID NO:2 Hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Dans une forme de réalisation, particulièrement préférée, la séquence codant le gène NIMi comprend la séquence codante SEQ ID NO:2. La présente invention décrit aussi un gène chimère comprenant un promoteur actif dans les végétaux lié par liaison opérationnelle à une séquence codante du gène NIM1, un vecteur recombinant comprenant un tel gène chimère, où le vecteur est capable de subir une transformation stable dans un hôte, ainsi qu'un hôte transformé dans des conditions stables à l'aide d'un tel vecteur. De préférence, l'hôte est un végétal tel que l'une des cultures suivantes, importantes d'un point de vue agronomique ; riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. Dans une forme de réalisation particulièrement préférée, la protéine NIM1 est exprimée dans un végétal transformé, en des niveaux plus importants que dans une plante de type sauvage. La présente invention concerne aussi un procédé pour conférer un phénotype CIM à un végétal, par transformation du végétal à l'aide d'un vecteur recombinant comprenant un gène chimère qui par lui-même comprend un promoteur actif dans les végétaux et lié par liaison opérationnelle à une séquence codant le gène NIM1, où la protéine NIM1 codée est exprimée dans le végétal transformé en des quantités plus grandes que dans un végétal de type sauvage. De plus, la présente invention concerne un procédé pour activer la résistance systémique acquise dans un végétal, par transformation du végétal à l'aide d'un vecteur recombinant comprenant un gène chimère, qui par luimême comprend un promoteur actif dans les végétaux, lié par liaison opérationnelle à une séquence codant le gène NIAI, où la protéine NIM1 codée est exprimée dans le végétal transformée en des quantités plus grandes que dans un végétal de type sauvage. En outre, la présente invention concerne un procédé pour conférer une résistance à un large spectre de maladies à un végétal, par transformation du végétal à l'aide d'un vecteur recombinant comprenant un gène chimère qui par lui-même comprend un promoteur actif dans les végétaux, lié par liaison opérationnelle à une séquence codant le gène NIAI, où la protéine NIM1 codée est exprimée dans le végétal transformé en des quantités plus grandes que dans un végétal de type sauvage. Un autre aspect de la présente invention exploite la prise en compte de ce que la voie de la SAR dans les végétaux présente des parallèles fonctionnels avec le schéma de régulation du NF-KB/IKB chez les mammifères et les mouches, ainsi que la découverte selon laquelle le gène NIMi produit est un homologue structural de la sous classe a du facteur IKB de transduction du signal chez un mammifère. Des mutations de 1'IKB ont été décrites, qui jouent le rôle de super-répresseurs ou de dominant-négatifs du schéma de régulation du NF-KB/IaB. La présente invention englobe des formes modifiées du gène NIM1 de type sauvage (SEQ NO:2), qui jouent le rôle de régulateurs dominant-négatifs de la voie de transduction du signal SAR. Ces formes modifiées du NIM1 confèrent le phénotype opposé aux végétaux transformés avec son aide, en tant que mutant niml ; les végétaux, par exemple ceux qui sont transformés par des formes modifiées de NIAI, présentent une expression du gène constitutif de la SAR et un phénotype CIM. La présente invention porte aussi sur des molécules d'ADN qui s'hybrident à une molécule d'ADN selon la présente invention telle que définie ci-dessus, mais de préférence à une sonde oligonucléotidique pouvant être obtenue à partir de cette molécule d'ADN, comprenant une portion contiguë de la séquence codante pour lesdites formes modifiées du NiMi et ayant une longueur d'au moins 10 nucléotides, dans des conditions modérément stringentes. Les facteurs qui affectent la stabilité des hybrides déterminent la stringence de l'hybridation. L'un de ses facteurs est la température de fusion T,,,,, qui peut être facilement calculée par la formule donnée dans DNA PROBES, George H. Keller et Mark M. Manak, Macmillan Publishers Ltd, 1993, Section one : Molecular Hybridization Technology, page 8 et suivantes. La température préférée d'hybridation est de l'ordre d'environ 25"C inférieure à la température de fusion calculée Tm, et elle est de préférence comprise entre environ 12 et 150C en dessous de la température calculée de fusion T,,,,, et, dans le cas des oligonucléotides, elle est comprise dans l'intervalle d'environ 5 à 100C en dessous de la température de fusion T,. Dans une forme de réalisation de la présente invention, le gène NIM1 est modifié, de façon que le produit codé comporte des alanines au lieu de sérines dans les positions d'acides aminés correspondant aux positions 5559 de la séquence d'acides aminés du NIM1 de type sauvage d'Arabidopsis (SEQ ID NO:3). Un exemple d'une forme de réalisation préférée de cette forme modifiée du gène NIM1, qui conduit à des changements de ces résidus sérine en résidus alanine, est présenté dans la séquence SEQ ID NO:22. Une forme exemplaire, dominant-négative, de la protéine NIM1, avec des alanines au lieu de sérines sur les positions d'acides aminés exemple d'une forme de réalisation préférée de cette forme modifiée du gène NIM1, qui code un produit génique ayant une délétion N-terminale, est présenté dans la séquence SEQ ID NO:24. Une forme exemplaire dominantnégative de la protéine NIM1 comportant une délétion Nterminale est présentée dans la séquence SEQ ID NO:25. La présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIAI, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans des conditions modérément stringentes à la séquence codante SEQ ID NO:24 ; on préfère en particulier les conditions suivantes : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 55"C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Dans ces formes de réalisation, des allèles du NIM1 qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:24 dans les conditions ci-dessus sont modifiés de telle sorte que le produit codé possède une délétion N-terminale qui élimine les résidus de lysine susceptibles de servir en tant que sites potentiels d'ubiquitinisation, en plus des sérines sur les positions d'acides aminés correspondant aux positions 55 et 59 du produit génique de type sauvage. Dans encore une autre forme de réalisation de la présente invention, le gène NIM1 est modifié de façon que le produit codé ait une troncation C-terminale, dont on pense qu'elle va conduire à une stabilité intrinsèque améliorée, par blocage de la phosphorylation constitutive des résidus de sérine et de thréonine sur le site Cterminal du produit génique de type sauvage. Un exemple d'une forme de réalisation préférée de cette forme modifiée du gène NIAI, qui code un produit génique ayant une délétion C-terminale, est présenté dans la séquence SEQ ID NO:26. Une forme exemplaire dominant-négative de la protéine NIM1 comportant une délétion C-terminale est présentée dans la séquence SEQ ID NO:27. La présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIM1, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans des conditions modérément stringentes à la séquence codante SEQ ID NO:26 ; on préfère en particulier les conditions suivantes : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 rnM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C. Dans ces formes de réalisation, les allèles du NIM1 qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:26 dans les conditions ci-dessus sont modifiés de telle sorte que le produit codé possède une délétion C-terminale qui élimine les résidus de sérine et de thréoline. Dans encore une autre forme de réalisation de la présente invention, le gène NIM1 est modifié de sorte que le produit codé possède tant une délétion N-terminale et une troncation C-terminal, en conduisant aux avantages des deux formes de réalisation décrites ci-dessus de 1 'invention. Une forme de réalisation préférée de l'invention représente une forme modifiée de la protéine NIM1, qui possède une troncation N-terminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 1-125 de la séquence SEQ ID NO:2 et une troncation Cterminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 522-593 de la séquence SEQ ID NO:3. La séquence SEQ ID NO:28 présente un exemple d'une forme de réalisation préférée de cette forme modifiée du gène NIM1, qui code un produit génique comportant tant une délétion N-terminale qu'une délétion C-terminale. La séquence SEQ ID NO:29 présente une forme exemplaire dominant-négative de la protéine NIM1 comportant une délétion C-terminale. La présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIM1, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans des conditions modérément stringentes à la séquence codante SEQ ID NO:28 ; on préfère en particuler les conditions suivantes : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Dans ces formes de réalisation, des allèles du NIM1 qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:28 dans les conditions ci-dessus sont modifiées de façon que le produit codé possède tant une délétion Nterminale, qui élimine les résidus de lysine susceptibles de servir de sites potentiels d'ubiquitinisation en plus des sérines sur les positions d'acides aminés correspondant aux positiosn 55 et 59 du produit génique de type sauvage, qu'une délétion C-terminale, qui élimine les résidus de sérine et de thréonine. Dans encore une autre forme de réalisation de la présente invention, le gène NiMi est modifié de sorte que le produit codé soit essentiellement constitué uniquement de domaines ankyrine du produit génique du type sauvage. On préfère une molécule d'ADN isolée, dans laquelle ladite forme modifiée de la protéine NIM1 est constituée essentiellement de motifs ankyrine correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 103-362 de la séquence SEQ ID NO:3. Un exemple d'une forme de réalisation préférée de cette forme modifiée du gène NDM1, qui code les domaines ankyrine, est présenté dans la séquence SEQ ID NO:30. La séquence SEQ ID NO:31 présente une forme exemplaire, dominant-négative, de la protéine NIM1, constituée essentiellement et uniquement des domaines ankyrine. La présente invention porte aussi sur des formes modifiées d'allèles du MIMI, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans des conditions modérément stringentes à la séquence codante SEQ ID NO:30 ; on préfère en particulier les conditions suivantes : hybridation dans du BSA à 1 8 ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Dans ces formes de réalisation, les allèles du NIM1 qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:30 dans les conditions ci-dessus sont modifiées de façon que le produit codé consiste essentiellement en domaines ankyrine du produit génique de type sauvage. Ainsi, la présente invention concerne des molécules d'ADN codant des formes modifiées du gène NIM1, telles celles qui sont décrites ci-dessus, et toutes les molécules d'ADN qui s'y hybrident par utilisation de conditions modérément stringentes. La présente invention concerne aussi un gène chimère comprenant un promoteur actif dans les végétaux, lié par liaison opérationnelle à l'une des formes modifiées décrites ci-dessus du gène NIM1, un vecteur recombinant comprenant ce gène chimère, où le vecteur peut être transformé dans des conditions stables dans une cellule hôte, ainsi qu'une cellule hôte transformée dans des conditions stables par un tel vecteur. De préférence, l'hôte est un végétal tel que l'une des cultures suivantes, importantes d'un point de vue agronomique ; riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. La présente invention concerne aussi un procédé pour conférer un phénotype CIM à un végétal, par transformation du végétal avec un vecteur recombinant comprenant un gène chimère qui lui-même comprend un promoteur actif dans les végétaux et lié par liaison opérationnelle à l'une des formes modifiées décrites ci-dessus du gène NIMl, où la forme codée, dominant-négative, de la protéine NIM1 est exprimée dans le végétal transformé et confère un phénotype CIM au végétal. En outre, la présente invention concerne un procédé pour activer la résistance systémique acquise dans un végétal, par transformation du végétal avec un vecteur recombinant comprenant un gène chimère, qui lui-même comprend un promoteur actif dans les végétaux et lié par liaison opérationnelle à l'une des formes modifiées décrites ci-dessus du gène NIMl, où la forme codée, dominant-négative, de la protéine NIM1 est exprimée dans le végétal transformé et active la résistance systémique acquise dans le végétal. En outre, la présente invention concerne un procédé pour conférer une résistance à un large spectre de maladies à un végétal, par transformation du végétal avec un vecteur recombinant comprenant un gène chimère qui luimême comprend un promoteur actif dans les végétaux et lié par liaison opérationnelle à l'une des formes modifiées décrites ci-dessus du gène NIMl, où la forme codée, dominant-négative, de la protéine NIM1 est exprimée dans le végétal transformé et confère au végétal une résistance à un large spectre de maladies. Dans encore un autre aspect, la présente invention concerne un procédé de criblage d'un gène NIMl mis en jeu dans la cascade de transduction de signaux conduisant à la résistance systémique acquise dans un végétal, qui consiste à sonder une génothèque ou une banque d'ADNc provenant dudit végétal avec une séquence codant le NIMl qui s'hybride dans l'ensemble de conditions suivantes à la séquence codante SEQ ID NO:2 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 55"C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550 C. L'invention concerne aussi les objets suivants Une molécule d'ADN isolée selon l'invention, dans laquelle ladite forme modifiée de la protéine NIM1 possède des alanines au lieu de sérines sur les positions d'acides aminés correspondant aux positiosn 55 et 59 de la séquence SEQ ID NO:3, où ladite molécule d'ADN s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence nucléotidique SEQ ID NO:22 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550 C. Une molécule d'ADN isolée selon l'invention, dans laquelle ladite forme modifiée de la protéine NIM1 possède une troncation N-terminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 1-125 de la séquence SEQ ID NO:3, où ladite molécule d'ADN s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence nucléotidique SEQ ID NO:24 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C. Une molécule d'ADN isolée selon l'invention, dans laquelle ladite forme modifiée de la protéine NIM1 possède une troncation C-terminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 522-593 de la séquence SEQ ID NO:3, où ladite molécule d'ADN s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence nucléotidique SEQ ID NO:26 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Une molécule d'ADN isolée selon l'invention, dans laquelle ladite forme modifiée de la protéine NIM1 comprend la séquence d'acides aminés SEQ ID NO:28, où ladite molécule d'ADN s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence nucléotidique SEQ ID NO:28 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 55"C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C. Une molécule d'ADN isolée selon l'invention, dans laquelle ladite forme modifiée de la protéine NIM1 est constituée essentiellement de motifs ankyrine correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 103362 de la séquence SEQ ID NO:3, où ladite molécule d'ADN s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence nucléotidique SEQ ID NO:30 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Une forme modifiée du gène NIMl selon l'invention, qui a été synthétisée par mutagénisation. Utilisation d'une molécule d'ADN isolée selon l'invention, pour activer la résistance systémique acquise dans une cellule végétale, un végétal et leurs descendants. Utilisation d'une molécule d'ADN isolée selon l'invention pour conférer une résistance à un large spectre de maladies à une cellule végétale, un végétal et leurs descendants. Utilisation d'une molécule d'ADN isolée selon l'invention, pour conférer un phénotype CIM à une cellule végétale, un végétal et leurs descendants. Utilisation de plantes résistantes et de leurs descendants selon l'invention, pour incorporer le caractère de résistance à la maladie à des lignées végétales par sélection. Utilisation de variants du gène NiMi pour conférer une résistance aux maladies et activer l'expression du gène de la SAR dans les végétaux transformés à l'aide de ce gène. Un procédé pour produire une forme modifiée d'un gène NiMi. Un procédé pour produire des descendants transgéniques d'un végétal parent transgénique comprenant une molécule d'ADN isolée codant une forme modifiée d'une protéine NIM1 selon l'invention, qui consiste à transformer ledit végétal parent à l'aide d'une molécule d'un vecteur recombinant selon l'invention, et à transférer le caractère aux descendants dudit végétal parent transgénique, en mettant en jeu des techniques connues de sélection végétale. Un procédé de production d'une molécule d'ADN comprenant une portion d'ADN contenant une portion d'ADN codant une forme modifiée d'une protéine NIM1, qui consiste a) à préparer une sonde nucléotidique capable de s'hybrider d'une manière spécifique à une forme modifiée d'un gène NIjMl ou à un ARNm, où ladite sonde comprend une portion contiguë de la séquence codante pour une forme modifiée d'un NIjMl ayant une longueur d'au moins 10 nucléotides. b) à procéder à un sondage pour d'autres formes modifiées d'une séquence codante du NIjMl dans des popula tions de fragments d'ADN génomiques clonés ou de fragments d'ADNc provenant d'un organisme choisi, par l'utilisation de la sonde nucléotidique préparée dans l'étape a) ; et c) à isoler et multiplier une molécule d'ADN comprenant une portion d'ADN contenant une portion d'ADN codant une forme modifiée d'une protéine NIM1. Un procédé pour isoler une molécule d'ADN comprenant une portion d'ADN contenant une forme modifiée d'une séquence NLMl, qui consiste a) à préparer une sonde nucléotidique capable de s'hybrider d'une manière spécifique à une forme modifiée d'un gène NIMl ou à un ARNm, où ladite sonde comprend une portion contiguë de la séquence codante pour une forme modifiée d'un NiMi ayant une longueur d'au moins 10 nucléotides. b) à procéder à un sondage pour d'autres formes modifiées d'une séquence codante du NIMl dans des populations de fragments d'ADN génomiques clonés ou de fragments d'ADNc provenant d'un organisme choisi, par l'utilisation de la sonde nucléotidique préparée dans l'étape a) ; et c) à isoler une molécule d'ADN comprenant une portion d'ADN contenant une forme modifiée d'un gène NIMl. Un procédé de production de plantes transgéniques qui expriment des niveaux du gène NIMl supérieurs à ceux du type sauvage, ou encore leurs variants fonctionnels et mutants. Un procédé de production de plantes transgéniques qui expriment des niveaux du gène NiMi supérieurs à ceux du type sauvage, ou leurs variants fonctionnels et mutants, où l'expression du gène NIMl s'effectue à un niveau qui est au moins deux fois supérieur au niveau d'expression du gène NiMi dans les végétaux de type sauvage. Un procédé de production de plantes transgéniques qui expriment des niveaux du gène NIMl supérieurs à ceux du type sauvage, ou leurs variants fonctionnels et mutants, où l'expression du gène NIMl s'effectue à un niveau qui est au moins dix fois supérieur au niveau d'expression du gène NIM1 dans les végétaux de type sauvage. Le phénotype du mutant nim La présente invention concerne des végétaux mutants, ainsi que des gènes qui en sont isolés, qui présentent un défaut au niveau de leur réponse normale à une infection par des micro-organismes pathogènes, en ce sens qu'ils n'expriment pas les gènes associés à la SAR. Ces mutants sont appelés des mutants nim (en anglais : non-inducible immunity, immunité non-inductible), et présentent une "sensibilité universelle aux maladies" (en anglais : universal dispose susceptible, UDS), car ils sont sensibles à de nombreuses souches et de nombreux pathotypes de micro-organismes pathogènes du végétal hôte, ainsi qu'aux micro-organismes pathogènes qui n'affectent normalement pas le végétal hôte, mais qui affectent normalement d'autres hôtes. Ces mutants peuvent être sélectionnés par traitement de semences ou d'un autre matériel biologique avec des agents mutagènes, puis sélection de végétaux descendants pour ce qui est du phénotype UDS par traitement des descendants avec des inducteurs chimiques connus (par exemple l'INA) de la SAR, puis infection des végétaux à l'aide d'un micro-organisme pathogène connu. Les mutants non-inductibles développent des symptômes pathologiques graves dans ces circonstances, tandis que les végétaux de type sauvage prennent une résistance systémique acquise grâce au composé chimique. Les mutants nim peuvent être également sélectionnés à partir de populations mutantes produites par mutagenèse chimique et par irradiation, ainsi que dans des populations produites par insertion d'ADN-T et mutagenèse induite par un transposon. Les techniques de production de lignées végétales mutantes sont bien connues. Les mutants nim représentent des indicateurs utiles de l'évaluation de la pression de la maladie dans les essais de pathogénèse sur champ, où le phénotype de la résistance naturelle des végétaux que l'on appelle du type sauvage (c'est-à-dire non mutants) peut varier, de sorte que l'on n'obtient pas une norme fiable de sensibilité. De plus, les végétaux nim présentent une utilité additionnelle pour l'essai de candidats de transgènes de la résistance aux maladies. Si l'on utilise en tant que receveur des transgènes une lignée mère nim, la contribution du transgène à la résistance à la maladie peut être directement évaluée par rapport à un niveau de base de la sensibilité. De plus, les végétaux peuvent être utilisés en tant qu'outil pour comprendre les interactions plantemicroorganisme pathogènes. Les végétaux hôtes nim n'établissent pas de réponse systémique à une attaque par un micro-organisme pathogène, et le développement permanent du micro-organisme pathogène représente un système idéal dans lequel on peut étudier son interaction biologique avec l'hôte. Comme les végétaux hôtes nim peuvent aussi être sensibles aux micro-organismes pathogènes à l'extérieur de la gamme des hôtes dans laquelle ils entrent normalement, ces végétaux ont aussi une grande utilité dans l'étude moléculaire, génétique et biologique des interactions hâte-microorganisme pathogènes. De plus, le phénotype UDS des végétaux nim les rendent même utiles pour la sélection des fongicides. Les mutants nim sélectionnés dans un hôte particulier ont une utilité considérable dans la sélection des fongicides, si l'on utilise cet hôte et les micro-organismes pathogènes de l'hôte. L'avantage réside dans le phénotype UDS du mutant, qui supprime les problè mes rencontrés par les hôtes présentant différentes sensibilités à différents micro-organismes pathogènes et pathotypes, ou même résistants à certains micro-organismes pathogènes ou pathotypes. Les mutants nim peuvent en outre être utilisés pour sélectionner des fongicides contre une gamme de microorganismes pathogènes et de pathotypes, par utilisation d'un hôte hétérologue, c'est-à-dire un hôte qui normalement ne peut se trouver dans la gamme des espèces hôtes d'un micro-organisme pathogène particulier. Ainsi, la sensibilité des mutants nim d'Arabidopsis vis-à-vis des micro-organismes pathogènes d'autres espèces (par exemple des espèces de plantes de culture) facilite les opérations efficaces de sélection des fongicides, pour ce qui est de composés contre d'importants micro-organismes pathogènes des plantes de culture. Le mutant niml d'Arabidopsis thaliana Un mutant d'Arabidopsis thaliana, appelé niml (en anglais : noninducible immunity, immunité non-inductible), qui soutient la prolifération de P. parasitica (qui est l'agent à l'origine du mildiou) après traitement par l'INA est décrit dans Delaney et al. Bien que le niml puisse accumuler le SA après une infection par des microorganismes pathogènes, ni l'expression du gène de la SAR, ni la résistance aux maladies, ne peut être induite, ce qui donne à penser que la mutation bloque la voie en aval du SA. Le niml voit aussi diminuer son aptitude à répondre à 1'INA ou au BTH, ce qui donne à penser que le blocage existe en aval de l'action de ces agents chimiques (Delaney et al., 1995 ; Lawton et al., 1996). Le premier mutant niml d'Arabidopsis (ci-après appelé niml-l) a été isolé de 80 000 plantes d'une population d'Issilewskija, écotype Arabidopsis, marqué à l'ADN-T (Ws-0), par pulvérisation, sur des plants de deux semaines, d'INA 0,33 mM, suivie d'une inoculation par P. parasitica (Delaney et al., 1995). Les plants qui soutiennent la prolifération fongique après traitement par l'INA sont sélectionnés en tant que mutants putatifs. Cinq mutants additionnels (appelés dans l'invention nim1-2, niml-3, n7ml-4, niml-5 et niml-6) sont isolés de 280 000 plants M2, à partir d'une population de Ws-0 mutagénisée par le méthanesulfonate d'éthyle (EMS). Pour déterminer si les mutants sont dominants ou récessifs, on utilise des plants Ws-0 en tant que donneurs de pollen, pour croisement avec chacun de ces mutants. Les plants F1 sont ensuite notés pour ce qui est de leur aptitude à soutenir la prolifération fongique après traitement par 1'INA. comme on le voit sur le Tableau 3 des exemples, tous les plants F1 niml-l, nim1-2, niml-3, nimi-4 et niml-6 sont du type sauvage d'un point de vue phénotypique, ce qui indique une mutation récessive dans chaque lignée. niml-5 présente le phénotype nim dans les 35 plants F1, ce qui indique que ce mutant particulier est dominant. Pour vérification, le croisement réciproque est réalisé par utilisation de niml-5 en tant que donneur de pollen pour fertiliser les plants Ws-0. Dans ce cas, les 18 plants F1 sont nim du point de vue phénotypique, ce qui confirme la dominance de la mutation nim1-5. Pour déterminer si les mutations allant de niml-2 à niml-6 sont alléliques vis-à-vis de la mutation niml-l précédemment caractérisée, on utilise le pollen de niml-l pour fertiliser les mutations nim1-2 à nimi-6. Comme niml-l porte la résistance à la kanamycine, les descendants F1 sont identifiés par leur résistance aux antibiotiques. Dans tous les cas, les plants F1 résistant à la kanamycine sont nim, ce qui indique qu'ils sont tous alléliques vis-à-vis du mutant niml-l. Comme le mutant nîmi-5 est dominant et manifestement homozygote pour la mutation, il est nécessaire d'analyser la complémentation de niml-l dans la génération F2. Si niml-l et niml-5 étaient alléliques, alors on devrait s'attendre à ce que tous les plants F2 possèdent un phénotype nim. Si ce n'est pas le cas, alors 13 des 16 plants F2 devraient vraisemblablement avoir un phénotype nim. Sur 94 plants, 88 soutiennent manifestement la prolifération fongique après traitement par 1'INA. Six plants présentent un phénotype associé de taches noires sur les feuilles, qui rappelle un phénotype de mimétisme de lésions, et soutiennent une faible prolifération fongique après traitement par lINA. Comme niml-5 porte une mutation ponctuelle dans le gène NIMl (voir ci-dessus), on considère qu'il s'agit d'un allèle niml. Pour déterminer la force relative des différents allèles niml, on soumet chaque mutant à une analyse de la prolifération de P. parasitica dans les conditions normales de prolifération et après traitement préalable avec du SA, de l'INA ou du BTH. Comme on le voit sur le Tableau 1, en cours de prolifération normale, les mutants niml-l, niml-2, niml-3, nimi-4 et niml-6 soutiennent tous approximativement la même vitesse de prolifération fongique, qui est quelque peu plus grande que celle du témoin Ws-O. L'exception est représentée par les plants niml-5 dans lesquels la prolifération fongique est retardée de plusieurs jours par rapport aux autres mutants niml et aux témoins Ws-0, mais finalement tous les plants niml-5 succombent au champignon pathogène. Après traitement par le SA, les mutants peuvent être regroupés en trois classes : niml-4 et niml-6 présentent une prolifération fongique relativement rapide ; les plants niml-l, niml-2, niml-3 présentent une vitesse relativement plus faible de prolifération fongique ; et la prolifération fongique des plants niml-5 est encore plus lente que dans les témoins Ws-0 non traités. Après traitement par 1'INA ou le BTH, les mutants semblent aussi entrer dans trois classes, où niml-4 est le plus gravement compromis pour ce qui est de son aptitude à restreindre la prolifération fongique après le traitement chimique ; niml-l, niml-2, niml-3 et niml-4 sont tous modérément compromis ; et niml-5 n'est que légèrement compromis. Dans ces expériences, le Ws-0 ne soutient pas la prolifération fongique après traitement par l'INA ou le BTH. Ainsi, pour ce qui concerne l'inhibition de la prolifération fongique après traitement chimique, les mutants entrent dans trois classes, nimi-4 étant le plus fortement compromis, niml-l, niml-2, nimi-3 et niml-6 présentant une inhibition intermédiaire du champignon pathogène, niml-5 n'ayant qu'une résistance légèrement dégradée aux champignons. L'accumulation de 1'ARNm du PR-l est elle aussi utilisée en tant que critère pour caractériser les différents allèles niml. il pourrait y avoir des allèles niml particulièrement forts. Il est intéressant d'observer que l'accumulation de l'ARNm du PR-l est élevée dans le mutant niml-5, mais n'est que modérément induite après traitement chimique ou après infection par P. parasitica. Sur la base de l'accumulation de l'ARNm du PR-1 et de l'infection fongique, les mutants entrent dans 3 catégories : les allèles fortement compromis (niml-4 et niml-6) ; les allèles modérément compromis (niml-l, niml-2 et niml-3) et un allèle faiblement compromis (niml-5). Cartographie de la structure fine de la mutation niml Pour déterminer une position cartographique grossière du NIMl, on identifie 74 plants du phénotype nim F2 provenant d'un croisement entre niml-l (Ws-O) et Landsberg erecta (Ler) pour ce qui est de leur sensibilité à P. parasitica et de l'absence d'accumulation de l'ARNm du PR-1 après traitement par l'INA. Après avoir essayé un certain nombre de marqueurs du polymorphisme de taille des séquences simples (en anglais : simple sequence length polymorphism, SSLP) (Bell et Ecker, 1994), on a trouvé que niml se trouve à environ 8,2 centimorgans (cM) de nga 128 et à 8,2 cM de nga 111, sur le bras inférieur du chromosome 1. Au cours d'une analyse ultérieure, il s'est avéré que niml-l se trouve entre nga 111 et environ 4 cM du marqueur SSLP ATHGENEA. Pour la cartographie de la structure fine, on identifie 1138 plants nim provenant d'une population F2, obtenue par croisement entre niml-l et Ler DP23, sur la base tant de leur inaptitude à accumuler l'ARNm du PR-l que de leur aptitude à soutenir la prolifération fongique après traitement par l'INA. L'ADN est extrait de ces végétaux, et on note leur caractère zygotique tant au niveau d'ATHGENEA que de nga 111. Comme on le voit sur les Figures 5A-5D, 93 chromosomes recombinants sont identifiés entre ATHGENEA et niml, ce qui donne une distance généti que d'environ 4,1 cM (93 sur 2276), et 239 chromosomes recombinants sont identifiés entre nga 111 et niml, ce qui indique une distance génétique d'environ 10,5 cM (239 sur 2276). On soumet à une analyse plus poussée des recombinants informatifs dans l'intervalle allant d'ATHGENEA à nga 111, en utilisant une analyse par polymorphisme de taille des fragments amplifiés (amplified fragment length polymorphism, AFLP) (Vos et al., 1995). Au départ, on identifie 10 marqueurs de l'AFLP entre ATHGENEA et nga 111, et on les utilise pour synthétiser une carte à faible résolution de la région (Figure 5A). Les marqueurs de l'AFLP W84.2 (situé à 1 cM de niml) et W85.1 (situé à 0,6 cM de niml) sont utilisés pour isoler des clones du chromosome artificiel de levure (en anglais : yeast artificial chromosome, YAC) à partir de la banque du CIC (qui est le Centre d'Etude du Polymorphisme Humain, INRA et CNRS) (Creusot et al., 1995). Deux clones du YAC, CIC12H07 et CIC12F04, sont identifiés avec W84.2, et deux clones de YAC, CIC7E03 et CIC10G07 (données non représentées) sont identifiés avec le marqueur W85.1. Cependant, on constate qu'il y a une brèche entre les deux ensembles de clones de YAC latéraux. A partir de ce point, des clones du chromosome artificiel bactérien (BAC) et des clones P1 qui chevauchent le CIC 12H07 et le CIC 12F04 sont isolés et cartographiés, puis on procède à trois étapes de marche séquentielle en étendant le BAC/P1 contigu vers le NM1 (Liu et al., 1995 ; Chio et al., 1995). A différents instants pendant la marche, de nouveaux polymorphismes AFLP sont développés, qui sont spécifiques des clones du BAC ou P1 et ils sont utilisés pour déterminer s'il y a eu croisement du gène NIMl. On constate que NIMl a été croisé quand des clones du BAC et P1 sont isolés, qui donnent naissance aux deux marqueurs du polymorphisme AFLP L84.6a et L84.8. Le marqueur de l'AFLP L84.6a, que l'on trouve sur les clones P1, à savoir P1-18, P1-17 et P1-21, identifie trois recombinants, et le marqueur L84.8 que l'on trouve sur les clones P1 que sont les clones P1-20, P1-22, P1-23 et P1-24, et les clones BAC que sont BAC-04, BAC-05 et BAC-06 identifient un recombinant. Comme ces clones se chevauchent pour former une large structure contiguë (2 100 kb) et comprennent les marqueurs de l'AFLP qui sont latéraux par rapport à niai, le gène est situé sur la structure contiguë. Les clones BAC et P1 qui comprennent la structure contiguë sont utilisés pour produire 8 marqueurs additionnels de l'AFLP, ce qui montre que niml est situé entre les marqueurs L84.Y1 et L84.8, en représentant une brèche d'environ 0,09 cM. On synthétise une banque de cosmides dans le vecteur cosmidique à ADN-T compatible avec Agrobacterium, pCLD04541, par utilisation de l'ADN provenant du BAC-06, du BAC-04 et du P1-18. Une structure contiguë de cosmide est mise par utilisation de marqueurs de l'AFLP qui dérivent de ces clones. Une cartographie physique montre que la distance physique entre le L84.Y1 et le L84.8 est supérieure à 98 kb, ce qui donne un rapport de la distance génétique à la distance physique d'environ 1 mégabase par cM. Pour faciliter l'identification ultérieure du gène NIMl, on détermine la séquence de l'ADN du BAC04. Isolement du gène NIMl Pour identifier les cosmides qui contiennent le gène NIMl, on transforme les 12 cosmides du Tableau 4 des exemples en niml-l, et on évalue l'aptitude des transformants à compléter le phénotype du mutant. Les cosmides D5, El et D7 se révèlent tous compléter le niml-l, ce que l'on détermine par l'aptitude des transformants à accumuler l'ARNm du PR-l après traitement par 1'INA. Les extrémités de ces cosmides sont séquencées, et se révèlent être situées sur la séquence d'ADN du BAC-04. Il y a 9918 paires de bases dans la région de 1'ADN partagées par le D7 et le D5, qui contiennent le gène NIM1. Comme on le voit sur la Figure 5D, quatre régions géniques putatives sont identifiées dans cette séquence de 10 kb. La région 1 pourrait potentiellement coder une protéine de 19 105 D, la région 3 pourrait coder une protéine de 44 554 D, et la région 4 pourrait coder une région de 52 797 D. La région 2 possède quatre cadres ouverts de lecture ayant différentes tailles, situés près les uns des autres, ce qui donne à penser que l'on a un gène avec trois introns. Une analyse utilisant le programme NetPlantGene (Hebsgaard et al., 1996) indique une grande probabilité que les cadres ouverts de lecture puissent être épissés les uns aux autres pour former un grand cadre ouvert de lecture codant une protéine de 66 039 D. Pour déterminer la région du gène qui contient le gène NIMl, des transferts sur gel (gel blots), contenant un ARN isolé d'un tissu foliaire du Ws-O, et les différents mutants niml, après traitement par de l'eau ou un agent chimique, sont sondés avec un ADN qui dérive de chacune des quatre régions du gène. Dans ces expériences, on veille à marquer les sondes à une grande activité spécifique, et les autoradiogrammes sont exposés pendant plus d'une semaine. Dans le cadre de notre expérience passée, ces conditions devraient identifier l'ARN à des concentrations d'environ une copie par cellule. La seule région du gène qui produise un ARN décelable est la région 2 du gène. Comme on le voit sur la Figure 7, 1'ARNm identifié par la sonde de la région 2 du gène est induit par le traitement au BTH de plants de type sauvage, mais non dans l'un quelconque des mutants. De plus, l'accumulation de l'ARN est élevée dans tous les végétaux après infection par P. parasitica, ce qui indique que ce gène particulier est induit après infection par un microorganisme pathogène. Pour établir avec plus de détail la région du gène qui code le NIMl, on détermine la séquence de l'ADN provenant de chacune des quatre régions du gène, pour chacun des allèles niml, et on compare à la région correspondante du gène provenant de Ws-0. Aucune mutation n'est détectée entre le Ws-0 et les allèles mutants dans l'une ou l'autre des régions 3 ou 4 du gène, et seul un changement unique est observé dans la région 1 du gène du mutant niml-6. Cependant, on trouve une mutation constituée d'une paire de base unique dans chacun des allèles, par rapport au Ws-0 pour la région 2. La séquence d'ADN de la région du gène 2 est présentée sur la Figure 6. Comme on le voit sur le Tableau 5 et sur la Figure 6, une adénosine unique est, dans niml-l, insérée sur la position 3579, ce qui provoque un décalage du cadre de lecture avec comme conséquence une modification de sept acides aminés et la délétion de 349 acides aminés. Dans niml-2, il y a une transition cytidine-thymidine sur la position 3763, qui remplace une histidine par une tyrosine. Dans niml-3, une adénosine unique est supprimée sur la position 3301, ce qui provoque un décalage du cadre de lecture, qui modifie 10 acides aminés et supprime 412 acides aminés de la protéine prévue. Il est intéressant d'observer que tant nimi-4 que niml-5 possèdent une transition guanosine-adénosine sur la position 4160, en remplaçant une arginine par une lysine, et, dans niml-6, on a une transition cytosine-thymidine qui conduit à un codon d'arrêt, qui provoque la délétion de 255 acides aminés à partir de la protéine prévue. Bien que la mutation dans nimi-4 et niml-5 modifie le site d'épissage du donneur consensus de l'ARNm, une analyse par amplification en chaîne par polymérase RT-PCR indique que cette mutation ne conduit pas une modification de l'épissage de 1 'ARNm (données non représentées). Homologues du NDMl La séquence d'ADN de la région 2 du gène est utilisée dans une recherche Blast (Altschul et al., 1990), et identifie un appariement entre le marqueur de séquence exprimée d'Arabidopsis (EST) T22612 et des appariements significatifs avec les marqueurs EST du riz S2556, S2861, S3060 et S3481 (voir Figure 8). On utilise une sonde à ADN recouvrant les paires de bases 2081 à 3266 pour cribler une banque d'ADNc d'Arabidopsis, et on isole 14 clones qui correspondent à la région 2 du gène. A partir de la séquence d'ADNc, nous pouvons confirmer la mise en place des frontières exon/intron que l'on voit sur la Figure 6. Une rapide amplification des extrémités de l'ADNc (RACE) par une amplification en chaîne par polymérase est réalisée par utilisation d'un ARN provenant de plants Ws-0 traités par l'INA, et on détermine le site vraisemblable de départ de la transcription, qui se révèle être le A sur la position 2588 de la Figure 6. En utilisant l'ADNc du NIMl en tant que sonde, des homologues du NiMi d'Arabidopsis peuvent être identifiés et isolés par criblage de génothèques ou de banques d'ADNc provenant de différents végétaux, parmi lesquels, mais sans limitation, les plantes de culture suivantes riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. Parmi les techniques classiques permettant d'effectuer cette opération, on peut citer le criblage par hybridation de banques d'ADN sur plaque (plages ou colonies ; voir par exemple Sambrook et al., Molecular Cloning, eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press. (1989)), et l'amplification en chaîne par polymérase (PAR) par utilisation d'amorces oligonucléotidiques (voir par exemple Innis et al., PCR Protocols, a Guide to Methods and Applications, eds., Academic Press (1990)). Les homologues identifiés subissent une opération de génie génétique dans les vecteurs d'expression mentionnés ci-dessous, et sont transformés dans les cultures cidessus. Les transformants font l'objet d'une évaluation de l'amélioration de leur résistance aux maladies, par utilisation de micro-organismes pathogènes appropriés de la plante de culture soumise à l'essai. Par exemple, les homologues du NIMl dans les génomes du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs, du blé et de l'orge, ont été détectés par analyse par transfert d'ADN. L'ADN génomique est isolé du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs, du blé et de l'orge, soumis à une digestion par les enzymes de restriction BamHI, Hindîli, XbaI ou SalI, soumis à une séparation par électrophorèse sur des gels d'agarose à 0,8 % et transféré sur une membrane de Nylon par transfert capillaire. Après réticulation aux W pour fixer 1'ADN, la membrane est hybridée dans des conditions peu stringentes [(BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM) à 55"C pendant 18 à 24 heures] avec un ADNc du NIM1 d'Arabidopsis thaliana radiomarqué au 32p. Après hybridation, les transferts sont lavés dans des conditions peu stringentes [6XSSC pendant 15 minutes (X3)3XSSC pendant 15 minutes, (X1) à 55"C ; 1XSSC correspondant à NaCl 0,15 M, citrate de Na 15 mM, pH 7,0)], et on expose à un film radiographique pour visualiser les bandes qui correspondent au NIMl. En outre, on peut aussi utiliser pour isoler les homologues des marqueurs de séquence exprimée (EST) identifiés par analogie avec le gène NIMl, tels que les marqueurs EST du riz décrits ci-dessus. Les marqueurs EST peuvent être particulièrement utiles pour isoler les homologues du NIMl à partir d'autres monocotylédones. On peut aussi obtenir les homologues par une amplification en chaîne par polymérase PAR. Dans cette méthode, on procède à des comparaisons entre des homologues connus (par exemple le riz et Arabidopsis) . On utilise alors pour fabriquer des amorces pour amplification PCR des régions présentant une grande similitude ou identité entre les acides aminés et 1'ADN. Une fois qu'une région appropriée est identifiée, on prépare des amorces pour cette région, avec différentes substitutions sur la troisième position du codon. La réaction PCR est réalisée à partir d'ADNc ou d'ADN génomique dans différentes conditions standard. Quand une bande apparaît, on la clone, et/ou on la séquence pour déterminer s'il s'agit d'un homologue du NDMl. Un niveau élevé d'expression du NIMl confère aux végétaux une résistance aux maladies La présente invention concerne aussi la production de plantes transgéniques qui expriment des niveaux du gène NIMl supérieurs à ceux du type sauvage, ou encore leurs variants fonctionnels et mutants, de sorte qu'ils présentent une résistance à un large spectre de maladie. Dans une forme de réalisation préférée de l'invention, l'expression du gène NIMl correspond à un niveau qui est au moins deux fois supérieur au niveau d'expression du gène NIMl des végétaux de type sauvage, et qui de préférence est 10 fois supérieur au niveau d'expression du type sauvage. Le niveau élevé d'expression du gène NIMl simule les effets des composés inducteurs, en ce sens qu'il donne naissance à des végétaux présentant un phénotype d'immunité constitutive (CIM). Plusieurs procédés sont décrits pour produire des végétaux qui surexpriment le gène NIMl et donc possèdent un phénotype CIM. Un premier procédé consiste à sélec tionner des plantes transformées qui ont un niveau élevé d'expression du NSMl, et donc un phénotype CIM en raison de l'effet du site d'insertion. Le Tableau 6 présente les résultats de l'essai de différents transformants pour ce qui est de leur résistance à une infection fongique. Comme il ressort du tableau, un certain nombre de transformants présentent une prolifération fongique inférieure à la normale, et plusieurs d'entre eux ne présentent pas du tout de prolifération fongique visible. On prépare l'ARN à partir d'échantillons prélevés, et on l'analyse comme décrit dans Delaney et al., 1995. Les transferts sont hybridés sur la sonde génique PR-1 d'Arabidopsis par (Uknes et al., 1992). Trois lignées présentent une induction précoce de l'expression du gène du PR-1, en ce sens que l'ARNm du PR-1 est manifeste 24 ou 48 heures après le traitement fongique. Ces trois lignées présentent ellesaussi une résistance à l'infection fongique. De plus, des procédés sont décrits, qui permettent de synthétiser des vecteurs de transformation de végétaux, comprenant un promoteur constitutif à activité végétale, par exemple le promoteur 35S du CaMV, lié par liaison opérationnelle à une région codante qui code une protéine NIM1 active. Des niveaux élevés de la protéine NIM1 active produisent le même effet de résistance aux maladies que l'induction chimique avec des produits chimiques inducteurs tels que le BTH, l'INA et le SA. Le gène NlMl est un homologue de 1'IKBa Le gène NIMl est un constituant clé de la voie de la résistance systémique acquise (SAR) des végétaux (Ryals et al., 1996). Le gène NMI est associé à l'activation de la SAR par inducteurs chimiques et biologiques, et, conjointement à ces inducteurs, est nécessaire pour la SAR et l'expression du gène de la SAR. L'emplacement du gène NIMl est déterminé par une analyse de biologie moléculaire du génome de végétaux mutants dont on sait qu'ils portent le gène NIMl mutant, ce qui confère aux plants hôtes une sensibilité extrême à une large gamme de microorganismes pathogènes et les rend inaptes à répondre aux micro-organismes pathogènes et aux inducteurs chimiques de la SAR. Le gène NIMl de type sauvage d'Arabidopsis a été cartographié et séquencé (SEQ ID NO:2). Le gène NIMl de type sauvage produit (SEQ ID NO:3) est mis en jeu dans la cascade de transduction de signaux conduisant tant qu'à la SAR qu'à la résistance aux maladies gène-pourgène dans Arabidopsis (Ryals et al., 1997). Une surexpression recombinante de la forme sauvage du NIMl donne naissance à des végétaux ayant un phénotype d'immunité constitutive (CIM), et donc confère une résistance aux maladies aux végétaux transgéniques. Des quantités accrues de la protéine NIM1 active produisent le même effet de résistance aux maladies que l'induction chimique avec des produits chimiques inducteurs tels que le BTH, l'INA et le SA. La séquence du gène NIMl (SEQ ID NO:2) est utilisée dans les recherches BLAST, et les appariements sont identifiés sur la base d'une homologie d'un domaine relativement bien conservé dans la séquence du gène NIMl, par rapport aux domaines ankyrine que l'on trouve dans un certain nombre de protéines telles que les spectrines, les ankyrines, le NF-KB et IKB (Michaely et Bennett, Trends Cell Biol. 2, 127-129 (1992)). Cependant, au-delà du motif ankyrine, une analyse classique par ordinateur ne détecte pas d'autres fortes homologies, notamment une homologie vis-à-vis de l'IKBa. Malgré les résultats négatifs des programmes informatiques, on procède à des contrôles visuels par paires entre la protéine NIM1 (SEQ ID NO:3) et 70 protéines connues contenant de l'ankyrine, et on observe une similitude marquée avec les éléments de la classe IKBa des régulateurs de transcription (Baeuerle et Baltimore 1996 ; Balwin 1996). Comme on le voit sur la Figure 9, la protéine NIM1 (SEQ ID NO:3) partage une homologie significative avec les protéines IKBa de la souris, du rat et du porc (respectivement SEQ ID NO:18, 19 et 20). La NIM1 contient de nombreux domaines structuraux importants de l'IKBa sur toute la longueur de la protéine, y compris des domaines ankyrine (indiqués par le soulignement en tirets de la Figure 9), 2 sérines aminoterminales (acides aminés 55 et 59 de la NIM1), une paire de lysines (acides aminés 99 et 100 de la NIM1) et un site C-terminal acide. Globalement, la NIM1 et l'IKBa partagent une identité au niveau de 30 % des résidus, et des remplacements conservateurs au niveau de 50 % des résidus. Ainsi, il y a homologie entre l'IKB et la NIM1 sur l'ensemble des protéines, avec une similitude globale de 80 %. L'une des voies de fonctionnement de la protéine IKBa dans la transduction des signaux consiste à la fixer au facteur de transcription cytosolique NF-KB et à l'empêcher de pénétrer dans le noyau et de modifier la transcription des gènes cibles (Baeuerle et Baltimore, 1996 ; Baldwin, 1996). Les gènes cibles du NF-KB régulent (activent ou inhibent) plusieurs processus cellulaires, notamment les réponses antivirale, antimicrobienne et de mort cellulaire (Baeuerle et Baltimore, 1996). Quand la voie de transduction des signaux est activée, 1'IKBa est phosphorylé au niveau de deux résidus de sérine (acides aminés 32 et 36 de l'IKBa de la souris). Cela programme l'ubiquîtinisation au niveau d'une lysine double (acides aminés 21 et 22) de l'IKBa de la souris). Après ubiquitinisation, le complexe NF-KB/IKB est envoyé dans le protéosome, où l'IKBa se dégrade, et le NF-KB est libéré vers le noyau. Les résidus de sérine phosphorylés, importants dans la fonction de la protéine I'cBa, sont conservés dans le NIM1, à l'intérieur d'un grand bloc contigu de séquences conservées, entre les acides aminés 35 et 84 (Figure 9). Par contraste à l'IKBa, où la lysine double est située à environ 15 acides aminés dans la direction du site Nterminal de la protéine, on a dans la NIM1 une lysine double située à environ 40 acides aminés vers ltextrémité C-terminale. De plus, il existe un degré élevé d'homologie entre la NIM1 et l'IicBa dans la région carboxyterminale à haute teneur en sérine/thréonine, ce qui s'est avéré être important au niveau du taux de renouvellement basal (Sun et al., Mol. Cell. Biol. 16, 1058-1065 (1996)). Selon la présente invention, et sur la base de l'analyse de l'homologie structurale et de la présence d'éléments dont on sait qu'ils sont importants pour la fonction de l'IicBa, on s'attend à ce que la NIM1 fonctionne comme l'IKBa, puisqu'elle a des effets analogues sur la régulation des gènes végétaux. Les végétaux contenant le gène NIMl de type sauvage, après traitement avec des produits chimiques inducteurs, doivent comporter une quantité plus importante du produit génique NIMl (homologue de 1'IKB), ou une phosphorylation moins importante du produit génique NiMi (homologue de 1'IKB). Selon ce modèle, le résultat est que l'homologue NF-KB du végétal est maintenu à l'extérieur du noyau, et les réponses en expression du gène de la SAR et en résistance peuvent se produire. Dans les plants mutants niml, un gène NIMl non fonctionnel produit est présent. En conséquence, selon ce modèle, l'homologue du NF-KB est libre d'aller jusqu'au noyau et de réprimer la résistance et l'expression du gène de la SAR. D'une manière compatible avec cette idée, des cellules animales traitées par l'acide salicylique présentent une stabilité/abondance accrue de l'IKBet une réduction du NF-KB actif dans le noyau (Kopp et Ghosh, 1994). On connaît des mutations de 1'IKB qui agissent comme super répresseurs ou dominant-négatifs (Britta-Mareen Traenckner et al., EMBO 14:2876-2883 (1995) ; Brown et al., Science 267:1485-1488 (1996) ; Brockman et al., Molecular and Cellular Biology 15:2809-2818 (1995) ; Wang et al., Science 274:784-787 (1996)). Ces formes mutantes de l'IKB se fixent au NF-KB mais ne sont pas phosphorylées ou ubiquitinisées, de sorte qu'elles ne sont pas dégradées. Le NF-KB reste fixé à l'IKB et ne peut se déplacer pour pénétrer dans le noyau. Formes modifiées du gène NIMl Compte tenu de ce qui précède, la présente invention concerne des formes modifiées du NIMl, qui jouent le rôle de régulateurs dominant-négatifs de la voie de transduction du signal SAR. Les plantes transformées par ces formes dominant-négatifs du NIMl possèdent le phénotype opposé en tant que plantes mutantes niml, en ce sens que les végétaux transformés par des formes modifiées du NIMl présentent une expression constitutive du gène de la SAR, et donc un phénotype CIM. En raison de la position que le gène NIMl conserve dans la voie de transduction du signal de la SAR, on s'attend à ce qu'un certain nombre de modifications du gène, au-delà de celles qui sont spécifiquement décrites dans l'invention, apparaissent dans l'expression constitutive des gènes de la SAR, et donc un phénotype CIM. On a besoin d'une phosphorylation des résidus de sérine dans l'IKBa humain pour une dégradation de l'IKBa activée par un stimulus, ce qui active le NF-KB. La mutagenèse des résidus de sérine (S32 et S36) dans l'IKBa humain en résidus d'alanine inhibe la phosphorylation induite par un stimulus, ce qui bloque la dégradation médiée par le protéosome IKBa (Traenckner et al. 1995 Brown et al. 1996 ; Brockman et al. 1995 ; Wang et al. 1996). Cette forme modifiée de l'IKBa peut jouer le rôle d'une forme dominant-négative, en conservant le NF-KB dans le cytoplasme, et en bloquant de ce fait les événements de signalisation en aval. Sur la base d'une comparaison des séquences d'acides aminés entre le NIM1 et l'IaB que l'on voit sur la Figure 9, les sérines 55 (S55) et 59 (S59) du NIM1 (SEQ ID NO:3) sont homologues du S32 et du S36 dans 1'IKBa humain. Pour synthétiser des formes dominant-négatives du NIM1, les sérines sur les positions d'acides aminés 55 et 59 sont mutagénisées en résidus d'alanine. Ainsi, dans une forme de réalisation préférée de la présente invention, le gène NIMl est modifié de façon que le produit codé possède des alanines au lieu de sérines sur les positions d'acides aminés correspondant aux positions 55 et 59 de la séquence d'acides aminés du NIM1 d'Arabidopsis. La présente invention concerne aussi des plantes transgéniques résistant aux maladies, transformées par une telle forme modifiée du gène NIMl, ainsi que des procédés pour utiliser cette forme modifiée du gène NIMl dans le but de conférer à des végétaux transformés à l'aide de ce dernier une résistance aux maladies, en y activant l'expression du gène de la SAR. La délétion des acides aminés 1 à 36 (Brockman et al., 1995 ; Sun et al., 1996) ou 1-72 (Sun comparaison à la séquence d'acides aminés native NIM1 d'Arabidopsis. La présente invention concerne aussi des plantes transgéniques résistant aux maladies, transformées par une telle forme modifiée du gène NIAI, ainsi que des procédés pour utiliser cette forme modifiée du gène NIMl, pour conférer une résistance aux maladies et activer l'expression du gène de la SAR dans les plantes transformées à l'aide de ce dernier. La délétion des acides aminés 261-317 de l'IaBa humain peut conduire à une stabilité intrinsèque renforcée par blocage de la phosphorylation constitutive des résidus de sérine et de thréonine dans le site C-terminal. Cette forme modifiée de 1'IKBa devrait fonctionner comme une forme dominant-négative. Une région riche en sérine et en thréonine est présente au niveau des acides aminés 522-593 sur le site C-terminal du NIM1. Ainsi, dans une forme de réalisation préférée de la présente invention, le gène NIMl est modifié de façon que le produit codé manque approximativement de sa portion Cterminale, qui comprend les acides aminés 522-593, par comparaison avec la séquence d'acides aminés NIM1 native d'Arabidopsis. La présente invention concerne aussi des plantes transgéniques résistant aux maladies, transformées par une telle forme modifiée du gène NIMl, ainsi que des procédés pour utiliser cette forme modifiée du gène NIMl pour conférer une résistance aux maladies et activer l'expression du gène de la SAR dans les plantes transformées avec ce dernier. Dans une autre forme de réalisation de la présente invention, des formes modifiées du produit génique NIMl sont produites en conséquence de délétions ou de chimères du segment C-terminal et du segment N-terminal. Dans encore une autre forme de réalisation de la présente invention, il est mis à disposition des produits de synthèse comprenant les domaines ankyrine provenant du gène NIM1. La présente invention porte aussi sur des plantes transgéniques résistant aux maladies, transformées avec de tels produits de synthèse ou d'ankyrine NIMl, ainsi que des procédés pour utiliser ces variants du gène NIMl pour conférer une résistance aux maladies et activer l'expression du gène de la SAR dans des végétaux transformés avec ce dernier. La présente invention concerne des molécules d'ADN codant des formes modifiées du gène NIMl, telles celles qui sont décrites ci-dessus, des vecteurs d'expression contenant ces molécules d'ADN, et des végétaux et cellules végétales transformés avec elles. L'invention concerne aussi des procédés pour activer la SAR dans les végétaux, et pour conférer aux végétaux un phénotype CIM et une résistance à un large spectre de maladies, en transformant les plantes à l'aide de molécules d'ADN codant des formes modifiées du produit génique NIMl. La présente invention concerne en outre des végétaux transformés par une forme modifiée du gène NiMi. Résistance aux maladies La surexpression du gène NIMl de type sauvage dans les végétaux et l'expression de formes modifiées du gène NiMi dans les végétaux conduisent à une immunité vis-àvis d'un large ensemble de micro-organismes phytopathogènes qui comprennent, mais sans limitation, les virus ou viroïdes, le virus de la mosaïque du tabac ou du concombre, le virus des taches annulaires ou de la nécrose, le virus de la nécrose foliaire des géraniacées, le virus des bigarrures du trèfle violet, le virus du rabougrissement buissonneux de la tomate, et les virus analogues les champignons pathogènes, par exemple Phytophthora parasitica et Peronospora tabacina ; les bactéries, Pseudomonas syringae et Pseudomonas tabaci, les insectes tels que les aphidiens, par exemple Myzus persicae, et les lépidoptères, Heliothus spp. ; et les nématodes, par exemple Meloidogyne incognita. Les vecteurs et procédés de Invention peuvent être utilisés contre un certain nombre d'organismes pathogènes, qui comprennent mais sans limitation les mildious tels que Sclerophthora macrospora, Sclerophthora rayissiae, Sclerospora graminicola, Peronosclerospora sorghi, Peronosclerospora philippinensis, Peronosclerospora sacchari et Peronosclerospora maydis ; les rouilles telles que Puccinia sorphi, Puccinia polysora et Physopella zeae ; d'autres champignons pathogènes tels que Cercospora zeae-maydis, Colletotrichum graminicola, Fusarium monoliforme, Gibberella zeae, Exserohilum turcicum, Kabatiellu zeae, Erysiphe graminis, Septoria et Bipolaris maydis ; et les bactéries, telles que Erwinia stewartii. Les procédés de la présente invention peuvent être utilisés pour conférer une résistance aux maladies à une large gamme de végétaux, notamment les gymnospermes, les monocotylédones et les dicotylédones. Bien que la résistance aux maladies puisse être conférée à tout végétal entrant dans ces grandes catégories, elle est particulièrement utile dans les plantes de culture importantes d'un point de vue agronomique, telles que les plantes suivantes : riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. Les cellules transformées peuvent être régénérées dans des plantes entières, de sorte que le gène confère une résistance aux maladies aux plantes transgéniques intactes. Le système d'expression peut être modifié de façon que le gène de résistance à la maladie puisse être exprimé d'une manière continue ou constitutive. Technologie de l'ADN recombinant La molécule d'ADN ou le fragment de gène NIMl qui confère une résistance aux maladies à des végétaux en permettant l'induction de l'expression du gène de la SAR, ou encore la forme modifiée du gène NIMl conférant une résistance aux maladies aux végétaux en renforçant l'expression du gène de la SAR, peut être incorporée dans des cellules végétales ou bactériennes par utilisation de la technologie classique de l'ADN recombinant. D'une manière générale, cette technique consiste à insérer la molécule d'ADN, comprise dans la séquence SEQ ID NO:1, ou un variant fonctionnel de cette dernière, ou une molécule codant l'une des formes modifiées du NIMl décrites cidessus, dans un système d'expression dont la molécule d'ADN est hétérologue (c'est-à-dire n'est normalement pas présente). La molécule d'ADN hétérologue est insérée dans le système ou le vecteur d'expression selon une orientation correcte et selon un cadre de lecture correct. Le vecteur contient les éléments nécessaires à la transcription et à la traduction des séquences insérées, codant la protéine. On peut utiliser une large gamme de systèmes de vecteurs connus dans la technique, tels que les plasmides, les virus bactériophages et d'autres virus modifiés. Parmi les vecteurs appropriés, on peut citer, mais sans limitation, les vecteurs viraux tels que les systèmes vecteurs X, kgtll, hgtl0 et Charon 4 ; les vecteurs plasmidiques tels que pBI121, pBR322, pACYC177, pACYC184, la série pAR, pKK223-3, pUC8, pUC9, pUC18, pUC19, pLG339, pRK290, pKC37, pKC101, pCDNAII ; et d'autres systèmes analogues. La séquence codante du NIMl et les séquences codantes modifiées du NIMl décrites dans l'invention peuvent etre clonées dans le vecteur par utilisation de techniques classiques de clonage, telles que décrites par Maniatis et al., Molecular Cloning : A Laboratory Manual, Cold Spring Laboratory, Cold Spring Harbor, New York (1982). Pour obtenir une expression efficace du gène ou du fragment génique de la présente invention, un promoteur qui va conduire à un niveau d'expression suffisant ou à une expression constitutive suffisante doit être présent dans le vecteur d'expression. L'ARN-polymérase se fixe normalement au promoteur et déclenche la transcription d'un gène. Les promoteurs varient au niveau de leur force, c'est-à-dire de leur aptitude à promouvoir la transcription. Selon le système de cellule hôte utilisé, on peut utiliser l'un quelconque d'un certain nombre de promoteurs appropriés. Les composants de la cassette d'expression peuvent être modifiés pour augmenter l'expression. Par exemple, on peut utiliser des séquences tronquées, des substitutions nucléotidiques ou d'autres modifications. Les cellules végétales transformées à l'aide de ces systèmes d'expression modifiés présentent donc une surexpression ou une expression constitutive des gènes nécessaires à l'activation de la SAR. A. Synthèse des vecteurs de transformation de végétaux On dispose de nombreux vecteurs de transformation pour la transformation des végétaux, et les gènes de la présente invention peuvent être utilisés conjointement à un ou plusieurs quelconques de ces vecteurs. La sélection du vecteur va dépendre de la technique de transformation préférée et de l'espèce cible de la transformation. Pour certaines espèces cibles, on pourra préférer différents marqueurs de sélection antibiotiques ou herbicides. Les marqueurs de sélection utilisés en routine lors d'une transformation comprennent le gène nptil, qui confère une résistance à la kanamycine et aux antibiotiques apparentés (Messing & Vierra, Gene 19:259-268 (1982) ; Bevan et al., Nature 304:184-187 (1983)), le gène bar, qui confère une résistance à l'herbicide phosphinothricine (White et al., Nucl. Acid. Res. 18:1062 (1990), Spencer et al., Theor. Appl. Genet 79:625-631 (1990)), le gène hph, qui confère une résistance à l'antibiotique hygromycine (Blochinger & Diggelmann, Mol. Cell. Biol. 4:2929-2931), et le gène dhfr, qui confère une résistance au méthotréxate (Bourouis et al., EMBO J. 2(7):1099-1104 (1983)) ; et le gène EPSPS, qui confère une résistance au glyphosate (brevets US N" 4 940 935 et 5 188 642). 1. Vecteurs convenant à la transformation d'Agrobactérium De nombreux vecteurs existent, qui permettent une transformation par utilisation d 'Agrobacterium tumefaciens. Ils portent habituellement une séquence limite d'ADN-T et comprennent des vecteurs tels que le pBIN19 (Bevan, Nucl. Acid. Res. (1984)) et pXYZ. On va décrite ci-après la synthèse de deux vecteurs représentatifs. a. pCBI200 et pCIB2001 Les vecteurs binaires pCIB200 et pCIB2001 sont utilisés pour synthétiser des vecteurs recombinants destinés à être utilisés avec Agrobacterium, et ils sont synthétisés de la manière suivante. On crée pTJS75kan par digestion de pTJS75 par NarI (Schmidhauser & Helinski, J. Bacteriol. 164:446-455 (1985), ce qui permet l'excision du gène de résistance à la tétracycline, puis on procède à une insertion d'un fragment AccI provenant de pUC4K portant un NPTII (Messing & Vierra, Gene 19:259-268 (1982) ; Bevan et al., Nature 304:184-187 (1983) McBride et al., Plant Molecular Biology 14:266-276 (1990)). Des lieurs XhoI sont ligaturés au fragment EcoRV du pCIB7, qui contient le bord gauche et le bord droit de l'ADN-T, un gène chimère nos/nptII sélectionnable vis-àvis d'un végétal, et le lieur multisite pUC (Rothstein et al., Gene 53:153-161 (1987)) et le fragment digéré par XhoI est cloné dans pTJS75kan digéré par SalI pour créer le pCIB200 (voir aussi le brevet EP 0 332 104, Exemple 19). Le pCIB200 contient les sites de restriction polysites uniques suivants : EcoRi, SstI, Kpni, BglII, XbaI et SalI. Le pCIB2001 est un dérivé du pCIB200, crée par insertion de sites de restriction additionnels dans le lieur multisite. Les sites de restriction unique du lieur multisite du pCIB2001 sont EcoRi, SstI, KpnI, BglII, XbaI, SalI, MluI, BclI, AvrII, ApaI, HpaI et StuI. Le pCIB2001, outre le fait qu'il contient ces sites de restriction uniques, possède aussi des bords gauche et droite d'ADN-T, assurant la sélection vis-à-vis de la kanamycine végétale et bactérienne, pour transformation médiée par Agrobacterium, la fonction trfA dérivée du RK2 pour une mobilisation entre E. coli et d'autres hôtes, et les fonctions OriT et OriV, qui proviennent elles aussi du RK2. Le lieur multisite pCIB2001 convient au clonage de cassettes d'expression de végétaux contenant leurs propres signaux régulateurs. b. Le pCIB10, et ses dérivés de sélection de l'hygromycine Le vecteur binaire pCIB10 contient un gène codant la résistance à la kanamycine pour sélection dans les végétaux, et les séquences bordantes gauche et droite d'ADN T, et comprend les séquences provenant du plasmide pRK252, qui correspond à une large gamme d'hôtes, qui en permet la réplication tant dans E. coli que dans Agrobacterium. Sa synthèse est décrite par Rothstein et al. (Gene 53:153-161 (1987)). Différents dérivés du pCIB10 sont synthétisés, qui comprennent le gène de l'hygromycine-B-phosphotransférase, décrit par Gritz et al. (Gene 25:179-188 (1983)). Ces dérivés permettent une sélection de cellules de plantes transgéniques, portant sur l'hygromycine seule (pCIB743) ou sur l'hygromycine et la kanamycine (pCIB715, pCIB717). 2. Vecteurs convenant à une transformation autre qu'avec Agrobacterium Une transformation n'utilisant pas Agrobacterium tumefaciens évite d'utiliser des séquences d'ADN-T dans le vecteur de transformation choisi, de sorte que des vecteurs ne comportant pas ces séquences peuvent être utilisés, en plus des vecteurs tels ceux qui sont décrits ci-dessus et qui contiennent des séquences d'ADN-T. Les techniques de transformation qui ne se fondent pas sur Agrobacterium comprennent une transformation par bombardement de particules, l'absorption de protoplastes (par exemple PEG et électroporation), et la micro-injection. Le choix du vecteur dépend grandement du choix préféré de l'espèce soumise à transformation. a. pCIB3064 Le pCIB3064 est un vecteur dérivé du pUC, pouvant être utilisé dans les techniques de transfert direct de gènes en combinaison avec une sélection par l'herbicide basta (ou phosphinothricine). Le plasmide pCIB246 comprend le promoteur 35S du CaMV, en fusion opérationnelle avec le gène GUS de E. coli et le terminateur de transcription 35S du CaMV, et est décrit dans la demande PCT publiée sous le numéro WO 93/07278. Le promoteur 35S de ce vecteur contient deux séquences ATG, dans la direction 5' à partir du site de départ. Ces sites sont mutés par utilisation de techniques classiques d'amplification PCR, de façon à éliminer les ATG et produire les sites de restriction SspI et PvuII. Les nouveaux sites de restriction sont situés à 96 et 37 pb du site SalI unique, et à 101 et à 42 pb du site effectif de départ. Le dérivé obtenu du pCIB246 est appelé pCIB3025. Le gène GUS est ensuite excisé du pCIB3025 par digestion par SalI et SacI, les sites terminaux reçoivent des extrémités franches et sont religaturées pour produire le plasmide pCIB3060. Le plasmide pJIT82 est obtenu auprès de John Innes Center, Norwich, et le fragment SmaI de 400 pb contenant le gène bar provenant de Streptomyces viridochromogenes est excisé et inséré dans le site HpaI du pCIB3060 (Thomson et al., EMBO J 6:2519-2523 (1987)). Ce pCIB3064 ainsi produit comprend le gène bar sous le contrôle du promoteur 35S du CaMV et le promoteur de sélection vis-à-vis des herbicides, un gène de résistance à l'ampicilline (pour sélection dans E. coli) et un lieur multisite, comportant les sites uniques SphI, Psti, HindIII et PainHi. Ce vecteur permet le clonage de cassettes d'expression de végétaux contenant leurs propres signaux régulateurs. b. pSOG19 et pSOG35 Le pSOG35 est un vecteur de transformation qui utilise la dihydrofolate-réductase (DFR) du gène de E. coli en tant que marqueur sélectionnable conférant une résistance au méthotrexate. On utilise une amplification PCR pour amplifier le promoteur 35S (-800 pb), l'intron 6 provenant du gène Acide du maïs (-550 pb), et 18 pb de la séquence de tête non traduite GUS provenant du pSOG10. Un fragment de 250 pb, qui code le gène de type Il de la dihydrofolate-réductase de E. coli est lui aussi amplifié par amplification PCR, et ces deux fragments PCR sont assemblés à un fragment SacI-PstI provenant du pB1221 (Clontech), qui comprend le squelette du vecteur pUC19 et le terminateur de la nopaline-synthase. L'assemblage de ces fragments produit le pSOG19, qui contient le promoteur 35S en fusion avec la séquence de l'intron 6, la séquence de tête GUS, le gène du DHFR et le terminateur de la nopaline-synthase. Le replacement de la séquence de tête GUS dans le pSOG19 par la séquence de tête provenant du virus de la marbrure chlorotique du maïs (MCMV) produit le vecteur pSOG35. Le pSOG19 et le pSOG35 portent le gène du pUC de résistance à l'ampicilline et possèdent les sites HindIII, SphI, PstI et EcoRi, qui permettent le clonage de substances étrangères. B. Exigences portant sur la synthèse de cassettes d'expression végétale Les séquences géniques que l'on veut exprimer dans les plantes transgéniques sont d'abord assemblées en cassettes d'expression, en arrière d'un promoteur approprié de niveau élevé d'expression, et en amont d'un terminateur approprié de transcription. Ces cassettes d'expression peuvent ensuite être facilement transférées dans les vecteurs de transformation végétale décrits cidessus. 1. Sélection du promoteur La sélection du promoteur utilisé dans les cassettes d'expression va déterminer la séquence d'expression spatiale et temporelle du transgène dans la plante transgénique. Des promoteurs sélectionnés vont exprimer des transgènes dans des cellules végétales spécifiques (telles que les cellules épidermiques des feuilles, les cellules du mésophylle, les cellules du cortex radiculaire) ou dans des tissus ou organes spécifiques (par exemple racines, feuilles ou fleurs), et la sélection va traduire la localisation souhaitée de l'accumulation du produit génique NIMl ou du produit génique NIMl modifié. Ou bien encore, le promoteur sélectionné peut entraîner l'expression du gène sous un promoteur photo-induit, ou un autre promoteur à régulation provisoire. a. Expression constitutive, le promoteur 35S du CaMV La synthèse du plasmide pCGN1761 est décrite dans la demande de brevet publiée EP 0 392 225 (Exemple 23), qui est incorporée ici à titre de référence. Le pCGN1761 contient le promoteur 35S "double" et le terminateur de transcription tml, avec un site EcoRI unique entre le promoteur et le terminateur, et possède un squelette de type pUC. On synthétise un dérivé du pCGN1761, qui possède un lieur multisite modifié, lequel comprend les sites NotI et XhoI en plus du site EcoRI existant. Ce dérivé est appelé pCGN1761ENX. Le pCGN1761ENX peut être utilisé pour cloner des séquences d'ADNc ou des séquences géniques (y compris des séquences ORF microbiennes) à l'intérieur de son lieur multisite, pour permettre leur expression sous le contrôle du promoteur 35S dans les plantes transgéniques. La totalité de la cassette promoteur 35S-séquence génique-terminateur tml d'un tel produit de synthèse peut être excisée par les sites HindIII, SphI, SalI et XbaI, situés dans la direction 5' par rapport au promoteur, et les sites XbaI, BamHI et BglI situés dans la direction 3' par rapport au terminateur, pour permettre le transfert vers des vecteurs de transformation tels ceux qui sont décrits ci-dessus. En outre, le fragment promoteur 35S double peut être éliminé par excision en position 5' à l'aide de HindIII, SphI, SalI, XbalI ou Psti, et par une excision en 3' avec l'un quelconque des sites de restriction du lieur multisite (EcoRi, NotI ou XhoI) pour remplacement par un autre promoteur. b. Modification du pCGN1761ENX par optimisation du site d'initiation de la traduction Pour l'un quelconque des produits de synthèse décrits dans l'invention, on peut apporter des modifications autour des sites de clonage en introduisant des séquences qui peuvent renforcer la traduction. Cette façon de faire est particulièrement intéressante quand on souhaite une surexpression. Le pCGN1761ENX est clivé avec SphI, traité par l'ADN-polymérase de T4 et religaturé, puis on détruit le site SphI situé dans la direction 5' par rapport au promoteur 35S double. On obtient ainsi le vecteur pCGN1761ENX/Sph-. Le pCGN1761ENX/Sph- est clivé avec EcoRi, et ligaturé sur un adaptateur moléculaire annelé de la séquence 5 ' -AATTCTAAAGCATGCCGATCGG-3 '/5 AATTCCGATCGGCATGCTTTA-3' (SEQ ID NO:12 et 13). On obtient ainsi le vecteur pCGNSENX, qui comporte la séquence d'initiation de traduction végétale quasi-optimisée TAAA C, adjacente à l'ATG, qui lui-même fait partie d'un site SphaI, lequel convient au clonage de gènes hétérologues au niveau de leur méthionine de départ. En aval du site SphI, on conserve les sites EcoRi, NotI et Chou. On synthétise un autre vecteur, qui utilise un site NcoI au niveau de l'ATG de départ. Ce vecteur, appelé pCGN1761NENX, est obtenu par insertion d'un adaptateur moléculaire annelé de la séquence 5' AATTCCGATCGCCATGGTTTA-3' (SEQ ID NO:14 et 15) au niveau du site EcoRI du pCGN1761ENX. Ainsi, ce vecteur comprend la totalité de la séquence quasi-optimisée TAAACC adjacente à l'ATG de départ qui se trouve à l'intérieur du site NcoI. Les sites en aval sont EcoRi, NotI et XhoI. Avant cette manipulation, les deux sites NcoI du vecteur pCGN1761ENX (sur les positions amont du promoteur 35S en position 5') sont cependant détruits par utilisation de techniques analogues à celles qui sont décrites ci-dessus pour SphI, ou encore par utilisation d'une amplification PCR "intérieur-extérieur". Innes et al., PRC Protocols A guide to methods and applications, Academic Press, New York, (1990). Cette manipulation peut faire l'objet d'une évaluation des éventuels effets gênants possibles sur l'expression, par insertion d'un ADNc végétal quelconque ou d'une séquence génique reporter dans le site de clonage après une analyse de routine par expression dans les végétaux. c. Expression sous un promoteur pouvant subir une régulation chimique/par un micro-organisme pathogène Le promoteur 35S double du pCGN1761ENX peut être remplacé par un autre promoteur quelconque, qui conduise à des niveaux d'expression suffisamment élevés. A titre d'exemple, un promoteur PR-1 chimiquement régulé, qui est décrit dans le brevet US N" 5 614 395, lequel est incorporé ici à titre de référence dans sa totalité, peut rem placer le promoteur 35S double. Le promoteur de choix est de préférence excisé à partir de sa source par des enzymes de restriction, mais il peut aussi être amplifié par amplification PCR à l'aide d'amorces qui portent les sites de restriction terminaux appropriés. S'il fallait effectuer une amplification PCR, il faudrait reséquencer le promoteur pour contrôler les erreurs d'amplification après le clonage du promoteur amplifié dans le vecteur cible. Le promoteur PR-la du tabac, pouvant être régulé par voie chimique ou par un micro-organisme pathogène, est séparé par clivage du plasmide pCIB1004 (voir le brevet EP 0 332 104, Exemple 21, pour la synthèse, ce document étant incorporé ici à titre de référence), et on le transfère dans le plasmide pCGN1761ENX (Uknes et al., 1992). Le pCIB1004 est clivé à l'aide de Nicol, et le dépassement de l'extrémité 3' que l'on obtient du fragment linéarisé est rendu franc par traitement avec l'ADNpolymérase de T4. Ce fragment est ensuite clivé à l'aide de HindIII, et le fragment obtenu, contenant le promoteur PR-la, est purifié sur gel et cloné dans le pCGN1761ENX, dont on a enlevé le promoteur 35S double. Cette opération est réalisée par clivage avec XhoI, et réalisation d'une extrémité franche avec la polymérase de T4, puis on clive à l'aide de HindIII et on isole le fragment plus grand contenant le terminateur du vecteur, dans lequel est cloné le fragment du promoteur pCIB1004. On obtient un dérivé pCGN1761ENX, avec le promoteur PR-la et le terminateur tml, et un lieur polysite intermédiaire comportant des sites uniques EcoRI et NotI. Des gènes NIMl sélectionnés peuvent être insérés dans ce vecteur, et les produits de fusion (c'est-à-dire promoteur-gène-terminateur) peuvent être ensuite transférés à un vecteur de transformation sélectionné quelconque, notamment ceux qui sont décrits dans la présente demande. On peut utiliser différents régulateurs chimiques pour induire l'expression de la séquence codante du NIMl dans les végétaux transformés selon la présente invention. Dans le cadre de l'invention, les "régulateurs chimiques" comprennent les composés chimiques dont on sait qu'il s'agit d'inducteur du promoteur PR-1 dans les végétaux, ou leurs dérivés étroitement apparentés. Un groupe préféré de régulateurs du promoteur PR-1 se fonde sur la structure benzo-1,2,3-thiadiazole (BTH), et comprend mais sans limitation les types de composés suivants : acide benzo-1,2,3-thiadiazolecarboxylique, acide benzo-1,2,3thiadiazolethiocarboxylique, cyanobenzo-l,2,3- thiadiazole, benzo-1,2,3-thiadiazolecarboxamide, hydrazide de l'acide benzo-1,2,3-thiadiazolecarboxylique, acide benzo-1,2,3-thiadiazole-7-carboxylique, acide benzo-1 , 2, 3-thiadiazole-7-thiocarboxylique, 7-cyanobenzo1,2,3-thiadiazole, benzo-1,2,3-thiadiazolecarboxylate, où le groupe alkyle contient de 1 à 6 atomes de carbone, benzo-1,2,3-thiadiazole-7-carboxylate de méthyle, benzo1,2,3-thiadiazole-7-carboxylate de n-propyle, benzo1,2,3-thiadiazole-7-carboxylate de benzyle, sec-butylhydrazide de l'acide benzo-1,2,3-thiadiazole-7carboxylique, et leurs dérivés appropriés. D'autres inducteurs chimiques peuvent comprendre par exemple l'acide benzoïque, l'acide salicylique (SA), le poly (acide acrylique) et leurs dérivés substitués ; les substituants appropriés comprennent les groupes alkyle inférieur, alcoxy inférieur, alkylthio inférieur et halogéno. Encore un autre groupe de régulateurs, pour les séquences d'ADN pouvant être induites chimiquement de la présente invention, se fonde sur la structure acide pyridinecarboxylique, par exemple la structure acide isonicotinique, et de préférence la structure acide halogénoisonicotinique. On préfère les acides dichloroisonicotinique et leurs dérivés, par exemple leurs esters alkyliques inférieurs. Les membres appropriés de cette classe de composés régulateurs sont par exemple l'acide 2,6-dichloroisonicotinique (INA) et ses esters alkyliques inférieurs, notamment son ester méthylique. d. Expression constitutive, le promoteur actine On sait que plusieurs isoformes de l'actine sont exprimées dans la plupart des types de cellule, de sorte que le promoteur actine représente un choix approprié pour un promoteur constitutif. En particulier, le promoteur provenant du gène Acti du riz a été cloné et caractérisé (McElroy et al., Plant Cell 2:163-171 (1990)). Un fragment de 1,3 kb du promoteur s'est révélé contenir tous les éléments régulateurs requis pour l'expression des protoplastes du riz. En outre, de nombreux vecteurs d'expression se fondant sur le promoteur ActI ont été synthétisés spécifiquement pour utilisation dans les monocotylédones (McElroy et al, Mon. Gen. Genet. 231:150160 (1991)). Ils comprennent l'intron 1 de 1'acte, la séquence 5'-latérale de 1'AdhI et l'intron 1 de 1'Acide (provenant du gène de l'alcool-déshydrogénase du maïs), et la séquence provenant du promoteur 35S du CaMV. Les vecteurs présentant l'expression la plus grande sont les fusions du 35S et de l'intron de 1'acte, ou encore la séquence 5'-latérale de 1'ActI et l'intron de 1'acte. Une optimisation des séquences autour de l'ATG d'initiation (du gène reporteur GUS) renforce aussi l'expression. Les cassettes d'expression du promoteur décrites par McElroy et al. (Mol. Gen. Genet. 231:150-160 (1991)) peuvent être facilement modifiées pour permettre l'expression des gènes de la cellulase et conviennent en particulier à une utilisation dans des hôtes monocotylédones. Par exemple, des fragments contenant le promoteur sont enlevés des produits de synthèse de McElroy et sont utilisés pour remplacer le promoteur 35S double du pCGN1761ENX, qui est ensuite disponible pour l'insertion des séquences géniques spécifiques. Les gènes de fusion ainsi synthétisés peuvent être ensuite transférés sur des vecteurs de transformation appropriés. Dans un article distinct, le promoteur ActI du riz, avec son premier intron, s'est lui aussi révélé diriger une expression élevée dans des cellules d'orge en culture (Chibbar et al. Plant Cell Rep. 12:506-509 (1993)). e. Expression constitutive, le promoteur ubiquitine L'ubiquitine est un autre produit génique dont on sait qu'il s'accumule dans de nombreux types cellulaires, et son promoteur a été cloné à partir de plusieurs espè-ces pour utilisation dans des plantes transgéniques (par exemple le tournesol - Binet et al., Plant Science 79:8794 (1991) et le maïs - Christensen et al. Plant Molec. *Biol. 12:619-632 (1989)). Le promoteur de l'ubiquitine du maïs a été développé dans des systèmes monocotylédones transgéniques, et sa séquence et ses vecteurs, synthétisés pour transformation de monocotylédones, sont décrits dans le brevet EP 0 342 926 (au nom de Lubrizol), qui est incorporé ici à titre de référence. Taylor et al. (Plant Cell Rep. 12:491-495 (1993)) décri-vent un vecteur (pAHC25) qui comprend le promoteur de l'ubiquitine du maïs et un premier intron, ainsi que sa grande activité dans les suspensions de cellules de nom-breuses monocotylédones après introduction par bombarde-ment de microprojectiles. Le promoteur ubiquitine con-vient à l'expression des gènes de la cellulase dans les plantes transgéniques, notamment les monocotylédones. Les vecteurs appropriés sont des dérivés du pAHC25 ou l'un quelconque des vecteurs de transformation décrits dans la présente demande, modifiés par l'introduction de séquences appropriées promoteurs et/ou introns de l'ubiquitine. f. Expression spécifique des racines Un autre modèle d'expression du gène NIM1 de la présente invention est l'expression radiculaire. Un promoteur radiculaire approprié est décrit par de Framond (FEBS 290 : 103-106 (1991)), et aussi dans le brevet publié EP 0 452 269 (au nom de Ciba-Geigy), qui est incorporé ici à titre de référence. Ce promoteur est transféré sur un vecteur approprié tel que le pCGN1761ENX pour insertion d'un gène de la cellulase, puis transfert de la totalité de la cassette promoteur-gène-terminateur sur un vecteur de transformation présentant un intérêt. g. Promoteurs inductibles par une lésion Des promoteurs inductibles par une lésion peuvent aussi convenir à l'expression des gènes NIMl selon l'invention. De nombreux promoteurs de ce type ont été décrits (par exemple Xu et al., Plant Molec. Biol. 22 573-588 (1993), Logemann et al., Plant Cell 1 : 151-158 s(1989), Rohrmeier & Lehle, Plant Molec. Biol. 22 : 783792 (1993), Firek & al., Plant Molec. Biol. 22 : 129-142 (1993), Warner & al., Plant J. 3 : 191-201 (1993)), et tous conviennent à une utilisation dans le cadre de la présente invention. Logemann & al. décrivent les séquences 5'-amont du gène wunI de la dicotylédone pomme de terre. Xu et al. montrent qu'un promoteur inductible par une lésion, provenant de la dicotylédone pomme de terre (pin2) est actif dans la monocotylédone riz. En outre, Rohrmeier & Lehle décrivent le clonage de l'ADNc du WipI du maïs, qui subit une induction par une lésion, et qui peut être utilisé pour isoler le promoteur apparenté par utilisation de techniques classiques. De même, Firek et al., et Warner et al., ont décrit un gène induit par une lésion, provenant de la monocotylédone Asparagus officinalis, et qui est exprimé au niveau des sites locaux de lésion et d'invasion par un micro-organisme pathogène. Par utilisation des techniques de clonage de départ bien connues, ces promoteurs peuvent être transférés dans des vecteurs appropriés, fusionnés au gène NIMl de l'invention, et utilisés pour exprimer ces gènes sur les sites de lésion des végétaux. h. Expression médullo-préféréntielle La demande de brevet WO 93/07278 (au nom de Ciba Geigy), qui est incorporée ici à titre de référence, décrit l'isolement du gène trpA du maïs, qui présente une expression préférentielle dans les cellules médullaires. Cette référence présente la séquence du gène et le promoteur allant jusqu'à -1726 pb à partir du début de la transcription. Par utilisation de techniques classiques de biologie moléculaire, ce promoteur, ou des parties de ce promoteur, peut être transféré sur un vecteur tel que le pCGN1761, où il peut remplacer le promoteur 35S et être utilisé pour entraîner l'expression d'un gène étranger d'une manière médullo-préférentielle. En fait, les fragments contenant le promoteur médullo-préférentielle, ou des parties de ce dernier, peuvent être transférés sur un vecteur quelconque et modifiés pour être utilisés dans les plantes transgéniques. i. Expression spécifique de feuille Un gène du maïs codant la phosphoénol-carboxylate (PEPC) a été décrit par Hudspeth & Grula (Plant Molec Biol 12 : 579-589 (1989)). Par utilisation de techniques classiques de biologie moléculaire, le promoteur de ce gène peut être utilisé pour entraîner l'expression d'un gène quelconque d'une manière spécifique de feuille dans des plantes transgéniques. j. Expression avec ciblage du chloroplaste Chen & Jagendorf (J. Biol. Chem. 268 : 2323-2367 (1993)) ont décrit l'utilisation réussie d'un peptide de transit de chloroplaste pour importation d'un transgène hétérologue. Ce peptide tel qu'utilisé est le peptide de transit provenant du gène rbcS du Nicotiana plumbaginifolia (Poulsen & al., Mol. Gen. Genet. 205 : 193-200 (1986)). En utilisant les enzymes de restriction DraI et SphI au prorata de Tsp509I et de SphI, la séquence d'ADN codant ce peptide de transit peut être excisé du plasmide prbcS-8B et manipulé pour utilisation avec l'un quelconque des produits de synthèse décrits ci-dessus. Le fragment DraI-SphI s'étend depuis -58, par rapport à l'ATG du rbsS d'initiation, jusqu'à et y compris le premier acide aminé (et aussi une méthionine) du peptide mature immédiatement après le site de clivage d'importation, tandis que le fragment Tsp509I-SphI s'étend depuis la position 8 par rapport à l'ATG du rbcS d'initiation jusqu'à et y compris le premier acide du peptide mature. Ainsi, ces fragments peuvent être convenablement insérés dans le lieur multisite d'une cassette d'expression quelconque choisie qui produit une fusion de transcription avec la séquence de tête non traduite du promoteur choisi (par exemple 35S, PR-1A, actine, ubiquitine, etc.), tout en permettant l'insertion d'un gène NIMl en fusion correcte en aval du peptide de transit. Des produits de synthèse de ce type sont habituels dans la technique. Par exemple, alors que l'extrémité du DraI est déjà franche, le site 5' Tsp509I peut être rendu franc par traitement par la polymérase de T4, ou encore il peut être ligaturé sur un lieur ou une séquence d'adaptation pour faciliter sa fusion au promoteur choisi. Le site 3' SphI peut être maintenu en l'état, ou encore il peut être ligaturé à la séquence adaptateur ou lieur pour faciliter son insertion dans le vecteur choisi de façon à mettre à disposition des sites de restriction appropriés pour l'insertion ultérieure d'un gène NIMl sélectionné. Idéalement, 1'ATG du site SphI est maintenu et comprend le premier ATG du gène NIMl sélectionné. Chen & Jagendorf mettent à disposition des séquences consensus pour le clivage idéal permettant l'importation des chloroplastes, et, dans chaque cas, on préfère une méthionine sur la première position de la protéine mature. Sur les positions ultérieures, il y a une variation plus grande, et l'acide aminé peut ne pas présenté un caractère aussi critique. Dans tous les cas, les produits de synthèse par fusion peuvent faire l'objet d'une évaluation de leur efficacité de l'importation in vitro par utilisation des méthodes décrites par Bartlett & al. (dans : Edelmann et al. (Eds), Methods in Chloroplast Molecular Biology, Elsevier, pages 1081-1091 (1982)), et Wasmann et al. (Mol. Gen. Genet. 205 : 446-453 (1986)). Habituellement, l'approche la meilleure pourra consister à produire des fusions en utilisant le gène NIM1 sélectionné ou une forme modifiée du gène NIM1 sans aucune modification au niveau du site amino-terminal, et seulement pour incorporer des modifications quand il est manifeste que ces fusions ne correspondent pas à une importation de chloroplaste avec un rendement élevé, auquel cas des modifications peuvent être apportées selon la littérature établie (Chen & Jagendorf ; Wasmann et al. ; Ko & Ko, J. Biol. Chem. 267 : 13910-13916 (1992)). On synthétise un vecteur préféré en transférant le fragment codant le peptide de transit DraI-SphI provenant du prbcS-8B dans le vecteur de clonage pCGN1761ENX/Sph-. Ce plasmide est clivé avec EcoRi, et les extrémités sont rendues franches par traitement avec de i 'ADN-polymérase de T4. Le plasmide prbcS-8B est clivé avec SphI et ligaturé à un adaptateur moléculaire annelé de la séquence 5'-CCAGCTGGAATTCCG-3'/5'-CGGAATTCCAGCTGGCATG-3' (SEQ ID NO:16 et 17). Le produit obtenu est soumis à une phosphorylation 5'-terminale par traitement avec la kinase de T4. Un clivage ultérieur avec DraI libère le fragment codant le peptide de transit, lequel fragment est ligaturé dans les sites ex-EcoRI à extrémités franches du vecteur modifié décrit ci-dessus. Les clones orientés vers l'extrémité 5' du produit d'insertion adjacent de l'extrémité 3' du promoteur 35S sont identifiés par séquençage. Ces clones portent une fusion d'ADN de la séquence de tête 35S et de la séquence promoteur rbcS-8A peptide de transit allant de la position -58 par rapport à 1'ATG du rbcS à 1'ATG de la protéine mature, et comprenant dans cette région un site SphI unique, et un site nouvellement crée EcoRi, ainsi que les sites existants NotI et XhoI du pCGN1761ENX. Ce nouveau vecteur est appelé pCGN1761/CT. Des séquences d'ADN sont transférées au pCGN1761/CT du cadre de lecture par amplification PCR et incorporation d'un site SphI, NSphI ou N1AIII au niveau de l'ATG amplifié qui, après clivage par l'enzyme de restriction appropriée, est ligaturé dans le pCGN1761/ CT clivé par Spahi. Pour faciliter la synthèse, il peut se révéler nécessaire de modifier le deuxième acide aminé du produit du gène cloné ; cependant, dans la plupart des cas, l'utilisation de l'amplification PCR, couplée à une mutagenèse standard dirigée vers un site, va permettre la synthèse d'une séquence voulue quelconque autour du site de clivage et de la première méthionine de la protéine mature. Un autre vecteur préféré est synthétisé par remplacement du promoteur 35S double du pCGN1761ENX par le fragment BamHI-SphI du prbcS-8A qui contient le promoteur rbcS-8A, photorégulé, complet, allant de la position 1038 par rapport au site de départ de transcription à la première méthionine de la protéine mature. Le pCGN1761 modifié, comportant le SphI détruit, est clivé avec PstI et EcoRi, et traité avec de l'ADN-polymérase de T4 pour rendre franches les extrémités. Le prbcS-8A est clivé avec l'enzyme SphI et ligaturé à l'adaptateur moléculaire annelé de la séquence décrite ci-dessus. Le produit obtenu est soumis à une phosphorylation 5-terminale par le traitement par la kinase de T4. Un clivage ultérieur avec BamHI libère le fragment contenant le promoteurpeptide de transit, fragment qui est traité avec de l'ADN-polymère de T4 pour rendre franches les extrémités BamHI. Le fragment promoteur-peptide de transit ainsi produit est cloné dans le vecteur pCGN1761ENX ainsi préparé, en produisant un produit de synthèse comprenant le promoteur rbcS-8A et le peptide de transît, avec un site SphI situé au niveau du site de clivage pour insertion de gènes hétérologues. En outre, en aval du site SphI, on a des sites de clonage EcoRI (recréé), NotI et XhoI. Ce produit de synthèse est appelé pCGN176lrbcS/CT. Des manipulations analogues peuvent être effectuées pour utiliser d'autres séquences GS2 codant le peptide de transit du chloroplaste et provenant d'autres sources (monocotylédones et dicotylédones), et d'autres gènes. En outre, on peut utiliser des modes opératoires analogues pour cibler d'autres compartiments sous-cellulaires tels que les mitochondries. 2. Terminateurs de transcription On dispose d'un grand nombre de terminateurs de transcription pour utilisation dans des cassettes d'expression. Ils sont responsables de la terminaison de la transcription au-delà du transgène et de sa polyadénylation correcte. Les terminateurs de transcription appropriés sont ceux dont on sait qu'ils fonctionnent dans les plantes, et comprennent le terminateur 35S du CaMV, le terminateur tml, le terminateur de la nopaline-synthase et le terminateur E9 du rbcS du pois. On peut les utiliser dans les monocotylédones et dans les dicotylédones. 3. Séquences pour amplifier ou réguler l'expression De nombreuses séquences se sont révélées renforcer l'expression génique à partir de l'unité de transcription, et ces séquences peuvent être utilisées conjointement aux gènes de la présente invention pour augmenter leur expression dans les plantes transgéniques. De nombreuses séquences introns se sont révélées renforcer l'expression, en particulier dans les cellules de monocotylédone. Par exemple, les introns du gène Adhi du maïs se sont révélés renforcer d'une manière signifi cative l'expression du gène de type sauvage en présence de son promoteur apparenté, après introduction dans ces cellules de maïs. L'intron 1 s'est révélé particulièrement efficace, et a renforcé l'expression dans les produits de synthèse par fusion avec le gène de la chloramphénicol-acétyltransférase (Callis et al., Genes Develop. 1 : 1183-1200 (1987)). Dans le même système expérimental, l'intron du gène bronzel du maïs a un effet analogue sur le renforcement de l'expression. Les séquences d'introns sont incorporées d'une manière systématique dans les vecteurs de transformation des végétaux, habituellement avec la séquence de tête non traduite. On connaît un certain nombre de séquences de tête non traduites qui dérivent de virus, et qui améliorent l'expression, et elles sont particulièrement efficaces dans les cellules de dicotylédone. Plus précisément, les séquences de tête du virus de la mosaïque du tabac (TMV, la "séquence W"), le virus de la marbrure du mais (MCMV), et le virus de la mosaïque de la luzerne (AMV) se sont révélés efficaces pour ce qui est de renforcer l'expression (par exemple Gallie et al., Nucl. Acids. Res. 15 8693-8711 (1987) ; Skuzeski et al., Plant. Molec . Biol. 15 : 65-79 (1990)). 4. Ciblage du produit génique à l'intérieur de la cellule On sait qu'il existe différents mécanismes pour cibler les produits géniques dans les végétaux, et les séquences qui commandent le fonctionnement de ces mécanismes ont été caractérisées dans un certain détail. Par exemple, le ciblage des produits géniques au chloroplaste est commandé par une séquence signal que l'on trouve à l'extrémité amino-terminale de différentes protéines, et qui est clivée pendant l'importation du chloroplaste pour donner la protéine mature (par exemple Comai et al., J. Biol. Chem. 263 : 15 104-150 109 (1988)). Ces séquences signal peuvent etre fusionnées à des produits géniques hétérologues pour assurer l'importation des produits hétérologues dans le chloroplaste (van den Broeck et al., Nature 313 : 358-363 (1985)). L'ADN codant pour les séquences signal appropriées peut être isolé de l'extrémité 5' des ADNc codant la protéine RUBISCO, la protéine CAB, l'enzyme EPSP-synthase, la protéine GS2 et de nombreuses autres protéines dont on sait qu'elles sont localisées au chloroplaste. D'autres produits géniques sont localisés dans d'autres organites, notamment la mitochondrie et le peroxisome (par exemple Unger et al., Plant. Molec. Biol. 13 411-418 (1989)). Les ADNc codant ces produits peuvent aussi être manipulés pour assurer le ciblage de produits géniques hétérologues à ces organites. On peut citer à titre d'exemples de ces séquences les ATPases à codage nucléaire et les isoformes spécifiques de l'aspartateamino-transférase pour les mitochondries. Le ciblage des corps protéiques cellulaires a été décrit par Rogers et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82 : 6512-6516 (1985)). En outre, des séquences ont été caractérisées, qui provoquent le ciblage des produits géniques à d'autres compartiments cellulaires. Les séquences amino-terminales sont responsables du ciblage à 1'ER, à l'apoplaste et à la sécrétion extra-cellulaire provenant de cellules d'aleurones (Koehler & Ho, Plant Cell 2 : 769-783 (1990)). En outre, les séquences amino-terminales, conjointement aux séquences carboxy-terminales, sont responsables du ciblage vacuolaire des produits géniques (Shinshi et al., Plant. Molec. Biol. 14 : 357-368 (1990)) Par fusion des séquences de ciblage appropriées décrites ci-dessus aux séquences transgéniques présentant un intérêt, il est possible de diriger le produit transgénique vers un organite ou un compartiment cellulaire quelconque. Par exemple pour le ciblage du chloroplaste, la séquence signal du chloroplaste provenant du gène de RUBISCO, du gène de CAB, du gène de l'EPSP-synthase ou du gène du GS2, est fusionnée dans le cadre à l'ATG aminoterminale du transgène. La séquence signal sélectionnée doit comprendre le site de clivage connu, et le produit de synthèse par fusion doit prendre en compte tous les acides aminés après le site de clivage nécessaire au clivage. Dans certains cas, cette exigence peut être satisfaite par addition d'un petit nombre d'acides aminés entre le site de clivage et l'ATG du transgène, ou encore par remplacement de certains acides aminés par la séquence transgénique. Les fusions synthétisées pour l'importation de chloroplastes peuvent faire l'objet d'une évaluation de l'efficacité de l'absorption du chloroplaste par traduction in vitro de produits de synthèse transcrits in vitro, puis absorption in vitro du chloroplaste par utilisation des techniques décrites par Bartlett et al. dans : Edelmann et al. (Eds.), Methods in Chloroplast Molecular Biology, Elsevier, pages 1081-1091 (1982) et Wasmann et al. Mol. Gen. Genet. 205 : 446-453 (1986). Ces techniques de synthèse sont bien connues et s'appliquent tant aux mitochondries qu'aux peroxisomes. Les mécanismes décrits ci-dessus de ciblage cellulaire peuvent être utilisés non seulement conjointement à leurs promoteurs apparentés, mais aussi conjointement aux promoteurs hétérologues, de façon à réaliser un objectif spécifique de ciblage cellulaire dans le cadre de la régulation de la transcription d'un promoteur, qui présente un modèle d'expression différent de celui du promoteur dont dérive le signal de ciblage. C. Transformation Une fois que la séquence codante du NIMl a été clonée dans un système d'expression, on la transforme dans une cellule végétale. Les tissus végétaux convenant à la transformation comprennent les tissus foliaires, les tis sus radiculaires, les méristèmes et les protoplastes. Le système de la présente invention peut être utilisé dans un végétal quelconque susceptible d'être transformé et régénéré. Ces procédés de transformation et de régénération sont bien connus dans la technique. Les méthodes permettant de synthétiser les cassettes d'expression végétale et d'introduire un ADN étranger dans les végétaux sont généralement décrites dans la technique. D'une manière générale, pour introduire un ADN étranger dans des plantes, on utilise pour libérer l'ADN étranger des vecteurs plasmidiques de Ti. On a aussi utilisé pour cette libération l'absorption directe de l'ADN, les liposomes, l'électroporation, la microinjection et les microprojectiles. Ces procédés sont déjà publiés, et on pourra se référer par exemple à : Bilang et al. (1991) Gene 100:247-250 ; Scheid et al. (1991) Mol. Gen. Genet. 228:104-112 ; Guerche et al., (1987) Plant Science 52:111-116 ; Neuhause et al., (1987) Theor. Appl. Genet. 75:30-36 ; Klein et al., (1987) Nature 327-70-73 ; Howell et al., (1980) Science 208:1265 ; Horsch et al. (1985) Science 227:1229-1231 ; DeBlock et al. (1989) Plant Physioiogy 91:694-701 ; Methods for Plant Molecular Biology (Weisbach and Weissbach, eds.) Academic Press, Inc. (1988) ; and Methods in Plant Molecular Biology (Schuler and Zielinski, eds.) Academic Press, Inc. (1989). On pourra aussi se reporter au brevet US NO 5 625 136, qui est incorporé ici à titre de référence dans sa totalité. I1 est bien entendu que le procédé de transformation va dépendre de la cellule végétale à transformer. Transformation du tabac, de la tomate, de la pomme de terre et d 'Arabidopsis thaliana par utilisation d'un système vecteur binaire Ti. Plant Physiol. 81:301-305, 1986 ; Fry J., Barnason A. et Horsch R.B., Transformation de Brassica napus avec des vecteurs à base d'Agrobacterium tumefaciens. P1. Cell Rep. 6:321-325, 1987 ; Block M.d. Transformation de disques foliaires de la pomme de terre, indépendante du génotype (Solanum tuberosum) par utilisation d'Agrobacterium tumefaciens. Theor. appl. genet. 76:767-774, 1988 ; Deblock M., Brouwer D.D. et Tenning P. Transformation de Brassica napus et de Brassica oleracea par utilisation d 'Agrobacterium tumefacens, et expression des gènes bar et neo dans les plantes transgéniques. Plant Physiol. 91:694-701, 1989 Baribault T.J., Skene K.G.M., Cain P.A. et Scott N.S. Raisins transgéniques : régénération des pousses exprimant la -glucuronidase. Pl. Cell Rep. 41:1045-1049, 1990 ; Hinchee, M.A.W., Newell C.A., ConnorWard D.V., Armstrong T.A., Deaton W.R., Sato S.S. et Rozman R.J. Transformation et régénération de plantes de culture non solanacées. Stadler. Genet. Symp. 203201.203212, 1990 Barfield D.G. et Pua E.C., Transfert de gènes dans des plantes de Brassica juncea par utilisation d'une transformation médiée par Agrobacterium tumefaciens. Pi. Cell Rep. 10:308-314, 1991 ; Cousins Y.L., Lyon B.R. et Llewellyn D.J., transformation d'une variété de coto australien ; perpective d'amélioration du coton par génie génétique. Aust. J. Plant. Physiol. 18:481-494. 1991 Chee P.P. et Slightom J.L. Transformation de tissus de concombre par identification par bombardement à l'aide de microprojectiles de plants contenant des gènes transférés fonctionnels et non fonctionnels. GENE 118:255-260, 1992 ; Christou P., Ford T.L. et Kofron M. Le développement d'une méthode de transfert du gène pour le riz, indépendante de la variété. Trends. Biotechnol. 10:239246, 1992 ; D'Halluin K., Bossut M., Bonne E., Mazur B., Leemans J. et Botterman J., Transformation de la betterave à sucre (Beta vulgaris L.) et évaluation de la résistance aux herbicides des plantes transgéniques. Bio/Technol. 10:309-314. 1992 ; Dhir S.K., Dhir S., Savka M.A., Belanger F., Kriz A.L., Farrand S.K. et Whidholm J.M. Régénération de plants de soja transgénique (Glycine Max) à partir de protoplastes électroporés. Plant. Physiol. 99:81-88, 1992 ; Ha S.B., Wu F.S. et Thorne T.K., Plants transgéniques de fétuque élevée de type gazon (Festuca arundinacea Schreb.) régénérées à partir de protoplastes. Pi. Cell Rep. 11:601-604 (1992) ; Blechl A.E., Transformation génétique : le nouvel outil d'amélioration du blé, 78ème réunion annuelle, Keynote Address, Cereal Food World 38:846-847, 1993 ; Casas A.M., Kononowicz A.K., Zehr U.B., Tomes D.T., Axtell J.D., Butler L.G., Bressan R.A. et Hasegawa P.M., Plants transgéniques de sorghum par bombardement par des microprojectiles. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 90:11212-11216, Christou P., Philosophie et pratique du transfert de gènes indépendant de la variété dans des cultures récalcitrantes. In Vitro Cell Dev Biol-Plant 29P :119-124, 1993 ; Damiani F., Nenz E., Paolocci F. et Arcioni S. Introduction d'une résistance à l'hygromycine dans Lotus spp. par transformation par Agrobacterium rhizogenes. Transgenic Res 2:330-335, 1993 ; Davies D.R., Hamilton J. et Mullineaux P., Transformation du pois, Pi. Cell Rep. 12:180-183, 1993 ; Dong J.Z. et Mchughen A., Tlants transgéniques de lin obtenus par transformation médiée par Agrobacterium, fréquence des régénérants chimères et héritage des plantes transgéniques. Plant Sci 91:139-148, 1993 ; Fitch M.M.M., Manshardt R.M., Gonsalves D., et Slightom J.L., Plants transgéniques de papaye, obtenus par transformation médiée par Agrobacterium d'embryons somatiques. Pi. Cell Rep. 12:245-249, 1993 ; Franklin C.I. et Trieu T.N., Transformation du Caucasien Bluestem utilisé comme herbe à fourrage par un transfert d'ADN médié par un bombardement biolistique. Plant Physiol 102:167, 1993 ; Golovkin, M.V., Abraham, M., Morocz, S. Bottka S., Feher A., et Dudits D., Production de plants transgéniques de maïs par absorption directe d'ADN par des protoplastes embryogè nes. Plant Sci 90:41-52, 1993 ; Guo, G.Q., Xu Z.H., Wei Z.M. et Chen H.M., Plantes transgéniques obtenues à partir de protoplastes de blé transformées par transfert direct de gènes médié par le peg. Chin Sci Bull 38:20722078, 1993 ; Asano Y. et Ugaki M. Plantes transgéniques d'Agrostis alba obtenues par transfert direct de gènes, médié par électroporation, dans des protoplastes. Pi. Cell Rep. 13, 1994 ; Ayres N.M. et Park W.D., Transformation génétique du riz, Crit. Rev. Plant. Sci 13:213-239, 1994 ; Barcelo P. Hagel C., Becker D., Martin A. et Lorz H., Plants transgéniques de céréales (Tritordeum) obtenus avec un rendement élevé par bombardement par des microprojectiles d'un tissu d'influrescence. PLANT J, 5:583592, 1994 ; Becker D., Brettschneider R. et Lorz H; Blé transgénique fertile obtenu par bombardement par des microprojectiles d'un tissu scutellaire. Plant J 5:299307, 1994 ; Biswas G.C.G., Iglesias V.A. Datta S.K. et Potrykys I., Plants transgéniques de riz de rizière aquatiq médié par Agrobacterium tumefaciens. Pi. Cell Rep. 13:582-586, 1994 ; Hartman C.L., Lee L., Day P.R. et Tumer N.E., Herbe à gazon résistant aux herbicides (Agrostis Palustris Huds) par transformation biolistique. Bid-Technology (12:919-923), 1994 ; Howe G.T., Goldfarb B. et Strauss S.H., Transformation, médiée par Agrobacterium, de cultures en suspension de peupliers hybrides, et régénération des plants transformés. Plant Cell Tissue & Orgarn Culture 36:59-71, 1994 ; Konwar B.K., Transformation génétique, médiée par Agrobacterium tumefaciens, de la betterave à sucre (Beta vulgaris L) J Plantbiochem Biotechnol 3:37-41, 1994 ; Ritala, A. Aspegren K., Kurten U., Salmenkalliomerttila M., Mannomen L., Hannus R., Kauppinen V, Teeri T.H. et Enari T.M. Orge transgénique fertile obtenue par bombardement particulaire d'embryons immatures. Plant Mol Biol 24:317-325, 1994 ; Scorza R., Cordts J.M., Ramming D.W. et Emershad R.L., Transformation d'embryons somatiques de raisin (Vitis vinifera L), et régénération des plantes transgéniques. J. Cell Biochem :102, 1994 ; Shimamoto K., Expression génique dans des monocotylédones transgéniques. Curr. Spin. Biotechnol. 5:158-162, 1994 ; Spangenberg G., Wang Z.Y., Nagel J. et Potrykus I., Transfert de gène et régénérations de plantes transgéniques dans les herbes à fourrage. J. Cell Biochem :102, 1994 ; Wan Y.C. et Lemaux P.G., Production d'un grand nombre de plants d'orge fertiles ayant subi une transformation indépendante. Plant Physiol 104:3748, 1994 ; Weeks J.T., Anderson O.D. et Blechl A.E., Transformation stable du blé (Triticum aestivum L) par bombardement par des microprojectiles. J. Cell. Biochem :104, 1994 ; Ye, X.J., Brown S.K., Scorza R., Cordts J. et Sanford J.C., Transformation génétique de tissu de pois par bombardement particulaire. J. Amer. Soc. Hort. Sci. 119:367-373, 1994 ; Spangenberg G., Wang Z.Y., Nagel J. et Potrykus I., Culture de protoplastes et production de plantes transgéniques dans la fétuque rouge (Festuca rubra L). Plant Science 1994, 97:83-94, 1995. Voir aussi le brevet US N" 5 639 949, incorporé ici à titre de référence dans sa totalité. Les bactéries du genre Agrobacterium peuvent être utilisées pour transformer les cellules végétales. Les espèces appropriées de cette bactérie comprennent Agrobacterium tumefaciens et Agrobacterium rhizogens. Agrobacterium tumefaciens (c'est-à-dire les souches BAC404 ou EHA1OS) est particulièrement utile en raison de son aptitude bien connue à transformer les végétaux. 1. Transformation de dicotylédones Les techniques de transformation des dicotylédones sont bien connues et comprennent les techniques faisant appel à Agrobacterium, et les techniques qui n'exigent pas Agrobacterium. Les techniques ne faisant pas appel à Agrobacterium mettent en jeu l'absorption d'un matériel génétique exogène directement par les protoplastes ou les cellules. Cette opération peut être réalisée par une absorption, médiée par le PEG ou une électroporation, par une libération médiée par un bombardement particulaire, ou par une microinjection. Des exemples de ces techniques sont décrits dans Paskowski et al., EMBO J 3:2717-2722 (1984), Potrykus et al., Mol. Gen. Genet. 199:169-177 (1985), Reich et al., Biotechnology 4:1001-1004 (1986), et Klein et al., Nature 327:70-73 (1987). Dans chaque cas, les cellules transformées sont régénérées en plantes totales par utilisation de procédés classiques bien connus dans la technique. La transformation faisant appel à Agrobacterium est une technique préférée de transformation du dicotylédone, en raison de son rendement élevé de transformation et de sa grande utilité avec de nombreuses espèces différentes, qui peuvent être la luzerne et le peuplier. On peut citer en outre EP 0 317 511 (le coton), EP 0 249 432 (tomate, au nom de Calgene), WO 87/07299 (Brassica, au nom de Calgene), et le brevet US NO 4 795 855 (peuplier). La transformation par Agrobacterium met habituellement en jeu le transfert du vecteur binaire portant 1 'ADN étranger étudié (par exemple pCIB200 ou pCIB2001) vers une souche appropriée d'Agrobacterium, qui peut dépendre du complément des gènes vir portés par la souche d'Agrobacterium hâte, dans un plasmide Ti co-résidant, ou par voie chromosomique (par exemple la souche CIB542 pour le pCIB200 et le pCIB2001 (Uknes et al., Plant Cell 5:159-169 (1993)). Le transfert du vecteur binaire recombinant à Agrobacterium est réalisé par une procédure d'appariement triparental par utilisation d'un E. coli portant le vecteur binaire, recombinant, une souche de E. coli helper (assistante) qui porte un plasmide, par exemple pRK2013, et qui peut mobiliser le vecteur binaire recombinant à la souche cible d'Agrobacterium. Ou bien encore, le vecteur binaire recombinant peut être transféré à Agrobacterium par transformation d'ADN (Höfgen & Willmitzer, Nucl. Acids. Res. 16 :9877 (1988)). La transformation des espèces végétales cibles par Agrobacterium recombinant met en jeu habituellement la culture simultanée d'Agrobacterium avec des explants provenant du végétal, et suit les modes opératoires bien connus dans la technique. Le tissu transformé est régénéré sur un milieu sélectionnable portant le marqueur de résistance aux antibiotiques ou aux herbicides, qui est présent entre les bords de 1'ADN T du plasmide binaire. Une autre approche à la transformation des cellules végétales à l'aide d'un gène met en jeu la propulsion de particules inertes ou biologiquement actives sur les tissus ou cellules végétales. Cette technique est décrite dans les brevets US NO 4 945 050, 5 036 006 et 5 100 792, tous au nom de Sanford et al. D'une manière générale, cette technique met en jeu la propulsion de particules inertes ou biologiquement actives vers les cellules, dans des conditions permettant la pénétration de la surface extérieure de la cellule, et conduisant à l'incorporation des particules dans le volume intérieur des cellules. Quand on utilise des particules inertes, le vecteur peut être introduit dans la cellule par enrobage des particules avec le vecteur contenant le gène voulu. Ou bien encore, la cellule cible peut être entourée du vecteur, de sorte que le vecteur est transporté dans la cellule à la suite de la particule. On peut aussi propulser dans le tissu des cellules végétales des particules biologiquement actives (par exemple des cellules de levure séchées, des bactéries séchées ou un bactériophage, dont chacun contient 1'ADN que l'on introduire). 2. Transformation de monocotylédones La transformation de la plupart des espèces de monocotylédones est maintenue devenue une technique de routine. Les techniques préférées comprennent le transfert direct du gène dans les protoplastes par utilisation de techniques par PEG ou électroporation, et le bombardement de particules dans le tissu du callus. Les transformations peuvent être réalisées avec une espèce d'ADN unique ou avec plusieurs espèces d'ADN (c'est-à-dire une cotransformation) , et ces deux techniques peuvent être utilisées dans la présente invention. La cotransformation peut présenter l'avantage d'éviter une synthèse complète du vecteur et de produire des plantes transgéniques comportant des sites non liés pour le gène recherché et le marqueur sélectionnable, ce qui permet d'éliminer le marqueur sélectionnable au cours des générations ultérieures, si cela se révélait souhaitable. Cependant, un inconvénient qu'il y a à utiliser une cotransformation réside dans la fréquence, inférieure à 100 %, avec laquelle des espèces d'ADN distinctes s'intègrent dans le génome (Schocher et al., Biotechnology 4 : 1093-1096 (1986)). Les demandes de brevet EP 0 292 435 ([1280/1281] au nom de Ciba-Geigy), EP 0 392 225 (au nom de Ciba-Geigy) et WO 93/07278 (au nom de Ciba-Geigy) décrivent des techniques pour préparer le callus et des protoplastes à partir d'une lignée consanguine élite de maïs, la transformation de protoplastes par utilisation de PEG ou d'une électroporation, et la régénération de plants de maïs à partir des protoplastes transformés. Gordon-Kamm et al. (Plant Cell 2 : 603-618 (1990)) et Fromm et al. (Biotechnology 8 : 833-839 (1990)) ont publié des techniques permettant de transformer la lignée de maïs dérivée de l'A188 par utilisation d'un bombardement de particules. En outre, la demande WO 93/07278 (au nom de Ciba-Geigy) et Koziel et al. (Biotechnology 11 : 194-200 (1993)) décrivent des techniques pour la transformation de lignées consanguines élites de maïs par bombardement de particules. Cette technique utilise des embryons de maïs immatures ayant une longueur de 1,5 à 2,5 mm, excisés à partir d'un épi de maïs 14 à 15 jours après la pollinisation, et un dispositif de biolistique PDS-1000He pour le bombardement. La transformation du riz peut aussi être réalisée par des techniques de transfert direct de gènes, utilisant des protoplastes ou un bombardement particulaire. La transformation utilisant les protoplastes est décrite pour les types Japonica et les types Indica (Zhang et al., P1. Cell Rep. 7 : 379-384 (1988) ; Shimamoto et al., Nature 338 : 274-277 (1989) ; Datta et al., Biotechnology 8 736-740 (1990)). Les deux types peuvent être aussi transformés en routine par utilisation d'un bombardement particulaire (Christou et al., Biotechnology 9 : 957-962 (1991)) La demande de brevet EP 0 332 581 (au nom de Ciba Geigy) décrit des techniques pour la production, la transformation et la régénération de protoplastes de Pooideae. Ces techniques permettent la transformation de Dactylis et du blé. En outre, la transformation du blé est décrite par Vasil et al. (Biotechnology 10 : 667-674 (1992)) par utilisation d'un bombardement particulaire dans des cellules d'un callus régénérable à long terme du type C, et aussi par Vasil et al. (Biotechnology 11 1553-1558 (1993)) et Weeks et al. (Plant Physiol. 102 1077-1084 (1993)) par bombardement particulaire d'embryons immatures et d'un callus dérivé d'un embryon immature. Une technique préférée pour transformer le blé met cependant en jeu la transformation du blé par bombardement particulaire d'embryons immatures, et comprend une étape à haute teneur en saccharose ou une étape à haute teneur en maltose avant la libération du gène. Avant le bombardement, un nombre quelconque d'embryons (ayant une longueur de 0,75 à 1 mm) sont plaqués sur un milieu MS contenant 3 % de saccharose (Murashiga & Skoog, Physiologia Plantarum 15 : 473-497 (1962)) et 3 mg/l de 2,4-D pour induction d'embryons somatiques, et on laisse l'opération se dérouler à l'obscurité. Le jour choisi pour le bombardement, les embryons sont retirés du milieu d'induction et placés sur le milieu osmotique (c'est-à-dire un milieu d'induction auquel on a ajouté du saccharose et du maltose à la concentration voulue, habituellement 15 %). On laisse les embryons subir une plasmolyse pendant 2 à 3 heures, puis on les bombarde. Habituellement, on utilise 20 embryons par plaque cible, ce chiffre ne présentant aucun caractère critique. Un plasmide approprié portant le gène (tel que pCIB3064 ou pCG35) est mis à précipiter sur des particules d'or, de grosseur micrométrique, par utilisation de techniques classiques. Chaque plaque d'embryons reçoit un tir, effectué par un dispositif à hélium DuPont BiolisticsX, la pression de rafale étant d'environ 7 MPa (environ 1000 psi), auquel cas on utilise un tamis ayant une ouverture de maille de 177 um (80 mesh). Après le bombardement, les embryons sont placés de nouveau à l'obscurité, pour récupération pendant environ 24 heures (toujours sur le milieu osmotique). Au bout de 24 heures, on retire les embryons du milieu osmotique et on les place de nouveau sur le milieu d'induction, où on les abandonne pendant un mois avant régénération. Environ un mois plus tard, des explants d'embryons présentant un callus embryogène en développement sont transférés sur le milieu de régénération (MS + 1 mg/l de NAA, 5 mg/l de GA), qui contient en outre l'agent de sélection approprié (10 mg/l de basta dans le cas du pCIB3064 et 2 mg/l de méthotrexate dans le cas du pSOG35). Au bout d'environ 1 mois, les pousses développées sont transférées dans des récipients stériles plus grands, connus sous le nom de "GA7", qui contiennent du MS ayant une force deux fois inférieure à la force maximale, 2 % de saccharose, et la même concentration de l'agent de sélection. La demande de brevet 08/147 161 décrit des procédés permettant de transformer le blé et est donc incorporée ici à titre de référence. Plus récemment, la transformation de monocotylédones a été décrite, qui utilise Agrobacterium. Voir la demande Wo 94/00977 et le brevet US N" 5 591 616, ces deux documents étant incorporés ici à titre de référence. Sélection Le fragment génique isolé de la présente invention, ou encore les formes altérées du gène NIMl, peuvent être utilisées pour conférer une résistance aux maladies à une large gamme de cellules végétales, comprenant celles des gymnospermes, des monocotylédones et des dicotylédones. Bien que le gène puisse être inséré dans une cellule végétale quelconque entrant dans les larges catégories ci-dessus, on peut l'utiliser en particulier dans les cellules des plantes de culture, notamment les plantes suivantes : riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. Le niveau élevé d'expression du gène NIMl et de ses mutants, nécessaire à l'expression constitutive des gènes de la SAR, en combinaison avec d'autres caractéristiques importantes pour la production et la qualité, peut être incorporé dans les lignées végétales par sélection. Ainsi, une autre forme de réalisation de la présente invention concerne un procédé de production de descendants transgéniques d'un végétal parent transgénique comprenant une molécule d'ADN isolée codant une forme modifiée d'une protéine NIM1 selon l'invention, qui consiste à transformer ledit végétal parent avec une molécule de vecteur recombinant selon l'invention, et à transférer la caractéristique aux descendants dudit végétal parent transgénique, en utilisant des techniques connues de sélection végétale. Les techniques et méthodes de sélection sont connues, et on pourra se référer par exemple à Welsh J.R., Fundamentals of Plant Genetics and Breeding, John Wiley & Sons, NY (1981) ; Crop Breeding, Wood D.R. (Ed.) American Society of Agronomy Madison, Wisconsin (1983) ; Mayo O., The Theory of Plant Breeding, Second Edition, Clarendon Press, Oxford (1987) ; Singh D.P., Breeding for Resistance to Disease and Insect Pests, Springer-Verlag, NY (1986) ; and Wricke and Weber, Quantitative Genetics and Selection Plant Breeding, Walter de Gruyter and Co., Berlin (1986). Propagation de propriétés génétiques, introduites dans des graines transgéniques et des plantes transgéni ques, et maintien dans les plantes descendantes Les propriétés génétiques introduites par génie génétique dans des graines et plantes transgéniques, décrites ci-dessus, sont transmises par reproduction sexuées ou croissance végétative, et peuvent donc se maintenir et se propager chez les descendants. D'une manière générale, ce maintien et cette propagation utilisent des méthodes agricoles connues, développées pour s'adapter aux besoins particuliers tels que le travail du sol, l'ensemencement ou la récolte. On peut aussi appliquer des procédés spécialisés, tels que l'hydroponique ou les technologies en serre. Comme la plante en cours de croissance est vulnérable à une attaque et à des lésions provoquées par les insectes ou les infections, ainsi qu'à la concurrence par les mauvaises herbes, des mesures sont prises pour maîtriser les mauvaises herbes, les maladies des végétaux, les insectes, les nématodes et d'autres conditions indésirables, dans le but d'améliorer le rendement. Elles comprennent les mesures mécaniques telles que le travail du sol ou l'élimination des mauvaises herbes et des plantes infectées, ainsi que l'application de produits phytosanitaires tels que les herbicides, les fongicides, les gaméticides, les nématicides, les régulateurs de croissance, les agents de mûrissement et les insecticides. L'utilisation des propriétés génétiques avantageuses des plantes et graines transgéniques selon l'invention peut en outre être mise en oeuvre dans la sélection végétale, dont l'objectif est la mise au point de plantes ayant des propriétés améliorées, telles que la tolérance vis-à-vis des ravageurs, des herbicides ou des contraintes, une meilleure valeur nutritionnelle, un rendement accru, ou une structure améliorée, conduisant à des pertes plus faibles dues à la verse ou à la rupture. Les différentes étapes de la sélection sont caractérisées par une intervention humaine parfaitement définie, comme la sélection des lignées à croiser, l'orientation de la pollination des lignées parentales, ou la sélection de descendants appropriés. Selon les propriétés souhaitées, on utilisera différentes techniques de sélection. Les techniques appropriées sont bien connues et comprennent mais sans limitation l'hybridation, l'inbreeding, le recroisement, la sélection multilignée, le mélange des variétés, l'hybridation interspécifique, les techniques aneuploïdes, etc. Les techniques d'hybridation comprennent aussi la stérilisation des plantes pour donner des plantes stériles mâles ou femelles par des moyens mécaniques, chimiques ou biochimiques. La pollination croisée d'une plante stérile mâle avec le pollen d'une lignée différente garantit que le génome de la plante, stérile mâle mais stérile femelle, va présenter uniformément les propriétés des deux lignées parentales. Ainsi, les semences et plantes transgéniques selon la présente invention peuvent être utilisées pour la sélection de lignées végétales améliorées, qui par exemple vont augmenter le rendement des procédés classiques tels qu'un traitement par un herbicide ou un pesticide, ou encore vont permettre d'omettre ces techniques, du fait de leurs propriétés génétiques modifiées. Ou bien encore, on pourra obtenir de nouvelles cultures, présentant une tolérance améliorée aux contraintes, et qui, en raison de leur "équipement" génétique optimisé, donneront un produit récolté de qualité meilleure que les produits qui n'ont pas été à même de supporter les conditions indésirables comparables de développement. Dans la production des semences, la qualité de la germination et l'uniformité des semences représentent des caractéristiques essentielles des produits, tandis que la qualité de germination et l'uniformité des semences récoltées et commercialisées par l'exploitant agricole ne présente pas d'importance. Comme il est difficile de maintenir une plante exempte des semences d'autres plantes et mauvaises herbes, et pour maîtriser les maladies transmises par les semences et produire des semences présentant une bonne germination, des pratiques de production de semences très étendues et parfaitement définies ont été mises au point par les producteurs de semences, qui ont acquis l'expérience nécessaire dans le domaine de la croissance, du conditionnement et de la commercialisation des semences pures. Ainsi, il est de pratique courante pour les agriculteurs d'acheter des semences certifiées, satisfaisant à des normes de qualité spécifiques, au lieu d'utiliser des semences récoltées dans leurs propres cultures. Le matériel de propagation qu'il faut utiliser en tant que semence est habituellement traité avec un enrobage protecteur comprenant des herbicides, des insecticides, des fongicides, des bactéricides, des nématicides, des molluscicides ou leurs mélanges. Les enrobages protecteurs habituellement utilisés comprennent des composés tels que le captan, la carboxine, le thirame (TMTD&commat;), le méthalaxyl (Apron&commat;), et le pirimiphos-méthyl (Actellic&commat;). Si cela se révèle souhaitable, ces composés sont formulés avec d'autres supports, tensioactifs ou adjuvants favorisant l'application, couramment utlisés dans la technique de la formulation pour assurer une protection contre les dommages provoqués par les ravageurs bactériens, fongiques ou animaux. Les enrobages protecteurs peuvent être appliqués par imprégnation, sur le matériel de propagation, d'une formulation liquide, ou par enrobage à l'aide d'une formulation combinée humide ou sèche. On peut aussi faire appel à d'autres techniques d'application, par exemple le traitement direct des bourgeons ou du fruit. Un autre aspect de la présente invention consiste à mettre à disposition de nouvelles méthodes agricoles, telles que les méthodes présentées à titre d'exemples cidessus, qui sont caractérisées par l'utilisation de plantes transgéniques, de matériel végétal transgénique ou de semences transgéniques selon la présente invention. Les semences peuvent être mises à disposition dans un sac, un récipient ou un contenant, constitué d'un matériau d'emballage approprié, le sac ou le contenant pouvant être fermés pour y enfermer les semences. Le sac, le contenant ou le récipient peuvent être conçus pour une conservation à court terme ou à long terme, ou les deux, des semences. On peut citer à titre d'exemples de matériaux d'emballage appropriés le papier, tel que le papier kraft, les plastiques rigides ou pliables, ou d'autres matériaux polymères, le verre ou les métaux. Il est souhaitable que le sac, le contenant ou le récipient soit constitué de plusieurs couches de matériaux d'emballage, d'un type identique ou de types différents. Dans une forme de réalisation, le sac, le contenant ou le récipient est prévu de façon à exclure ou limiter que l'eau ou l'humidité n'entre en contact avec les semences. Dans un exemple, le sac, le récipient ou le contenant est hermétiquement fermé, par exemple thermoscellé, pour empêcher la pénétration de l'eau ou de l'humidité. Dans une autre forme de réalisation, des matériaux absorbant l'eau sont disposés entre des couches du matériau d'emballage, ou contigus à ces couches. Dans encore une autre forme de réalisation, le sac, le contenant ou le récipient, ou encore le matériau d'emballage dont ils sont constitués, sont traités pour limiter, supprimer ou prévenir les maladies, les contaminations ou d'autres effets indésirables du stockage ou du transport des semences. Un exemple d'un tel traitement est représenté par la stérilisation, par exemple par un moyen chimique ou par exposition à un rayonnement. La présente invention englobe un sac du commerce comprenant des semences d'une plante transgénique comprenant au moins une forme modifiée d'une protéine NIM1, ou encore une protéine NIM1 qui est exprimée dans ladite plante transformée à des niveaux plus élevés que dans une plante de type sauvage, en même temps qu'un support approprié, avec des instructions portées sur l'étiquette concernant leur utilisation, de façon à conférer aux végétaux une résistance à un large spectre de maladies. Résistance aux maladies L'évaluation de la résistance aux maladies est réalisée par des méthodes connues dans la technique. Par exemple, il convient de se référer à Uknes et al. (1993), Molecular Plant Microbe Interaction 6 : 680-685 ; Gorlach et al. (1996) Plant Cell 8 : 629-643 ; Alexander et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 : 7327-7331. A. Essai de résistance à Phytophthora parasitaca (jambe noire) Les essais de résistance à Phytophthora parasitica, le micro-organisme qui est à l'origine de la jambe noire, sont réalisés sur des plants de 6 semaines, cultivés comme décrit dans Alexander et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 : 7327-7331. Les plants sont arrosés, jusqu'à égouttage, puis on les ensemence en appliquant 10 ml d'une suspension de sporanges (300 sporanges par ml) sur le sol. Les plants inoculés sont conservés dans une serre maintenue à une température de 23 à 25"C pendant le jour et de 20 à 220C pendant la nuit. Les essais utilisent en tant que barème de flétrissement les notes suivantes : 0 = aucun symptôme ; 1 = aucun symptôme ; 1 = quelques signes de flétrissement, avec turgescence réduite ; 2 = symptômes nets de flétrissement, mais ni putréfaction, ni rabougrissement ; 3 = symptômes nets de flétrissement avec rabougrissement, mais aucun signe de pourriture de la tige ; 4 = fort flétrissement, avec une pourriture visible de la tige et quelques dommages au système radi culaire ; 5 = comme 4, mais les plants sont proches de la mort ou sont morts, avec une forte réduction du système radiculaire. Tous les essais sont notés à l'aveugle, sur des plants disposés selon un modèle aléatoire. B. Essai de résistance à Pseudomonas syringae On injecte la souche N" 551 de Pseudomonas syringae pv. tabaci dans les deux feuilles inférieures de plusieurs plants de 6 à 7 semaines à une concentration de 106 ou 3.106/ml dans du H20. A chaque instant, on évalue six plants individuels. Les plants infectés par Pseudomonas tabaci sont notés sur une échelle de gravité de la maladie à 5 points, à savoir : 5 = 100 % de mortalité des tissus, 0 = aucun symptôme. On procède à un test t (LSD) sur les évaluations effectuées chaque jour, et les regroupements sont indiqués après la note moyenne. Les valeurs qui suivent la même lettre le jour de l'évaluation ne présentent pas une différence statistiquement significative. C. Essai de résistance à Cercospora nicotianae On pulvérise jusqu'à ruissellement imminent sur la surface des feuilles une suspension de spores de Cercospora nicotianae (ATCC NO 18366) (100 000 à 150 000 spores par ml). Les plants sont maintenus dans une atmosphère à 100 % d'humidité pendant 5 jours. Puis les plants reçoivent un brouillard d'eau 5 à 10 fois par jour. A chaque instant, on évalue 6 plants individuels. Cercospora nicotianae est noté en pourcentage d'aire foliaire présentant les symptômes de base de la maladie. On procède à un test t (LSD) sur les évaluations effectuées chaque jour, et les regroupements sont indiqués après la note moyenne. Les valeurs qui suivent la même lettre le jour de l'évaluation ne présentent pas une différence statistiquement significative. D. Essai de résistance à Peronospora parasitica On procède à des essais portant sur la résistance à Peronospora parasitica sur des plants, comme décrit dans Uknes et al. (1993). Les plants reçoivent une inoculation par un isolat compatible de P. parasitica par pulvérisation d'une suspension de conidies (environ 5.104 spores par ml). Les plants inoculés sont incubés dans des conditions humides à 17"C dans une chambre de croissance avec un cycle de 14 heures de jour et 10 heures de nuit. On étudie la présence de conidiophores en examinant les plants 3 à 14 et de préférence 7 à 12 jours après l'inoculation. En outre, plusieurs plants de chaque traitement sont sélectionnés au hasard et colorés avec du bleu de lactophénol-trypan (Keogh et al., Trans. Br. Mycol. Soc. 74 : 329-333 (1980)) pour permettre un examen au microscope. L'invention sera mieux comprise en regard des exemples ci-après et des dessins annexés, sur lesquels La Figure 1 présente l'effet d'inducteurs chimiques sur l'induction de l'expression du gène de la SAR dans des plantes de type sauvage et niml. L'induction chimique de gènes de la SAR est diminuée dans les plantes niml. On applique de l'eau, du SA, de 1'INA ou du BTH aux plantes de type sauvage (WT) et niml. Au bout de 3 jours, on prépare un ARN à partir de ces plantes, et on en détermine l'expression du PR-1, du PR-2 et du PR-5. La Figure 2 présente l'expression du gène du PR-1 dans des plantes WS-O et niml infectées par un microorganisme pathogène. L'induction du micro-organisme pathogène du PR-1 diminue dans les plantes niml. Des plantes de type sauvage (WT) et niml reçoivent par pulvérisation une inoculation par la race Emwa de P. parasitica. Des échantillons sont recueillis 1 dans des mutants nimi et des plantes de type sauvage après infection par un micro-organisme pathogène ou traitement chimique. Les plantes contenant les allèles niml à savoir niml-l, -2, -3, -4, -5 et -6, et les plantes Ws-O (Ws) sont traitées avec de l'eau (C), du SA, de 1'INA ou du BTH 3 jours avant isolement de 1'ARN. L'échantillon Emwa est constitué d'un ARN isolé des plantes 14 jours après l'inoculation par l'isolat Emwa de P. parasitica. Les transferts sont hybridés par utilisation en tant que sonde d'un ADNc du PR-1 d'Arabidopsis (Uknes et al., 1992). La Figure 4 représente les niveaux d'accumulation du SA dans des plantes Ws-O et niml infectées par P. syringae. Les plantes niml accumulent le SNA après exposition au micro-organisme pathogène. Des feuilles de plantes de type sauvage et niml sont infiltrées par du Pst DC3000 (avrRpt2) ou un milieu support (MgCl2 10 mM) seul. Au bout de 2 jours, des échantillons sont prélevés des plantes non traitées, des plantes traitées par du MgCl2 et des plantes traitées par le DC3000 (avrRpt2). Les échantillons traités par des bactéries sont séparés en feuilles primaires (infiltrées) et feuilles secondaires (non infiltrées). On quantifie par CLHP le SA libre et le SA total après hydrolyse par la ss-glucosidase. Les barres d'erreur indiquent l'écart-type de trois échantillons en répliques. Les Figures 5A-D présentent une carte globale des niveaux d'augmentation de la résolution de la région chromosomique centrée sur NIMl, avec les recombinants indiqués, qui comprennent les BAC, les YAC et les cosmides, dans la région NIMl. (A) Position sur la carte du NM1 sur le chromosome 1. Le nombre total de gamètes notés est de 2276. (B) Chromosome artificiel de levure (zébré), chromo some artificiel bactérien (BAC), et clones P1 utilisés pour cloner le NIMl. (C) Clones cosmidiques qui recouvrent le site NIMl Les trois cosmides qui complètent le niml-l sont tracés en gras. (D) Les quatre régions géniques putatives du frag ment le plus petit de l'ADN génomique complémen taire. Les quatre cadres ouverts de lecture qui comprennent le gène NiMi sont indiqués par des barres ouvertes. Les flèches indiquent la direc tion de la transcription. La numérotation est rapportée à la première base de l'ADN génomique d'Arabidopsis présent dans le cosmide D7. La Figure 6 présente la séquence d'acides nucléiques du gène NIMl et la séquence d'acides aminés du produit génique NIMl, y compris les changements au niveau des différents allèles. Cette séquence d'acides aminés, qui se trouve sur le brin opposé sous forme de la séquence de 9,9 kb présentée dans la séquence SEQ ID NO:1, et aussi présentée dans la séquence SEQ ID NO:2, et la séquence d'acides aminés du produit génique NiMi est aussi présentée dans la séquence SEQ ID NO:3. La Figure 7 présente l'accumulation du NIMl provoquée par l'INA, le BTH, le SA et le traitement par des micro-organismes pathogènes de plantes de type sauvage et d'allèles mutants de niml. Les transferts sur gel d'ARN de la Figure 3 sont sondés pour permettre l'expression de l'ARN par utilisation d'une sonde qui dérive des positions 2081 à 3266 de la séquence présentée sur la Figure 6. La Figure 8 est une comparaison des séquences d'acides aminés des régions de marqueurs de séquence exprimée des produits protéine NIM1 et protéine d'ADNc de quatre séquences géniques du riz (SEQ ID NO:4-11 ) ; les numéros correspondent aux positions d'acides aminés de la séquence SEQ ID NO:3. La Figure 9 est un alignement de séquences correspondant à la séquence de la protéine NIM1 avec l'IKBa de la souris, du rat et du porc. Les barres verticales (I) au-dessus des séquences indiquent l'identité d'acides aminés entre le NIM1 et les séquences de l'IKBa (la note de matrice est égale à 1,5) ; les doubles points (:) audes sus des séquences indiquent une note de similitude supérieure à 0,5 ; les points simples (.) au-dessus des séquences indiquent une note de similitude inférieure à 0,5 mais supérieure à 0,0 ; et une note inférieure à 0,0 indique l'absence de similitude, avec aucun indice audessus des séquences (voir les exemples). L'emplacement des domaines ankyrine de l'baba des mammifères est identifié selon de Martin et al., Gene 152, 253-255 (1995). Les points à l'intérieur d'une séquence indiquent des brèches entre les protéines NIM1 et I'cBa. Les 5 répétitions d'ankyrine de l'IKBa sont idniquées par les lignes en tirets en dessous des séquences. Les acides aminés sont numérotés par rapport à la proténe NIM1, avec des brèches introduites chaque fois que nécessaire. Les signes plus (+) sont placés au-dessus des séquences tous les 10 acidse amiéns. Dépôts Les molécules des vecteurs suivants ont été déposées auprès de l'American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive Rockville, MD 20852, Etats-Unis, aux dates indiquées : le plasmide BAC-04 a été déposé auprès de 1'ATCC le 8 mai 1996 sous le numéro ATCC 97543. Le plasmide P1-18 a été déposé auprès de l'ATCC le 13 juin 1996 sous le numéro ATCC 97606. Le cosmide D7 a été déposé auprès de 1'ATCC le 25 septembre 1996 sous le numéro ATCC 97736. Brève description des séquences présentées dans la liste ci-après SEQ ID NO:1 : Séquence génomique à 9919 pb de la région 2 du gène NIMl de la Figure 5D. SEQ ID NO:2 : Séquence génomique à 5655 pb de la Figure 6 (brin opposé à celui de SEQ ID NO:1) comprenant la région codante du gène NIM1 d'Arabidopsis thaliana de type sauvage. SEQ ID NO:3 : Séquence AA de la protéine NIM1 de type sauvage codée par le cds de SEQ ID NO:2. SEQ ID NO:4 : Séquence d'acides aminés 33-155 du riz 1 de la Figure 8. SEQ ID NO:5 : Séquence d'acides aminés 215-328 du riz 1 de la Figure 8. SEQ ID NO:6 : Séquence d'acides aminés 33-155 du riz 2 de la Figure 8. SEQ ID NO:7 : Séquence d'acides aminés 208-288 du riz 2 de la Figure 8. SEQ ID NO:8 : Séquence d'acides aminés 33-155 du riz 3 de la Figure 8. SEQ ID NO:9 : Séquence d'acides aminés 208-288 du riz 3 de la Figure 8. SEQ ID NO:10 : Séquence d'acides aminés 33-155 du riz 4 de la Figure 8. SEQ ID NO:11 : Séquence d'acides aminés 215-271 du riz 4 de la Figure 8. SEQ ID NO:12 : Oligonucléotide SEQ ID NO:13 : Oligonucléotide SEQ ID NO:14 : Oligonucléotide SEQ ID NO:15 : Oligonucléotide SEQ ID NO:16 : Oligonucléotide SEQ ID NO:17 : Oligonucléotide SEQ ID NO:18 : est la séquence d'acides aminés de llIKBa de la souris de la Figure 8. SEQ ID NO:19 : est la séquence d'acides aminés de 1'IKBa du rat de la Figure 8. SEQ ID NO:20 : est la séquence d'acides aminés de l'IkB&alpha; du porc de la Figure 8. SEQ ID NO:21 : est la séquence d'ADNc du gène NIM1 d'Arabidopsis thaliana. - Les séquences SEQ ID NO:22 et 23 sont respectivement la séquence codant l'ADN et la séquence d'acides aminés codée, d'une forme dominant-négative de la protéine NIM1 ayant des résidus d'alanine au lieu de résidus de sérine sur les positions d'acides aminés 55 et 59. - Les séquences SEQ ID NO:24 et 25 représentent respectivement la séquence codant 1 'ADN et la séquence d'acides aminés codée, d'une forme dominant-négative de la protéine NIM1 ayant une délétion N-terminale. - Les séquences SEQ ID NO:26 et 27 représentent respectivement la séquence codant l'ADN et la séquence d'acides aminés codée, d'une forme dominant-négative de la protéine NIM1 ayant une délétion C-terminale. - Les séquences SEQ ID NO:28 et 29 représentent respectivement la séquence codant l'ADN et la séquence d'acides aminés codée, d'une forme modifiée du gène NIMl comportant des délétions d'acides aminés, tant N-terminales que C-terminales. - Les séquences SEQ ID NO:30 et 31 représentent respectivement la séquence codant 1'ADN et la séquence d'acides aminés codée, du domaine ankyrine de NIMl. - Les séquences SEQ ID NO:32 à 39 sont des amorces oligonucléotidiques. Définitions Acd : Plante mutante à mort accélérée des cellules AFLP : Polymorphisme de taille des fragments ampli fiés avrRpt2 : Gène d'avirulence Rpt2, isolé de Pseudomonas syringae BAC : Chromosome artificiel bactérien BTH : Ester S-méthylique de l'acide benzo(1,2,3) thiadiazole-7-carbothioïque CIM : Phénotype de l'immunité constitutive (la SAR subit une activation constitutive) cim : Plante mutante à immunité constitutive cM : Centimorgans cprl : Exprimeur constitutif d'une plante mutante à gènes PR Col-O : Arabidopsis, écotype Columbia EC : Combinaison enzymatique Emwa : Isolat de Peronospora parasitica, compatible dans l'écotype Ws-O d'Arabidopsis EMS : Méthanesulfonate d'éthyle INA : Acide 2,6-dichloroisonicotinique Ler : Arabidopsis écotype Landsberg erecta lds : Plante mutante à maladie simulant les lésions nahG : Salicylate-hydroxylase de Pseudomonas putida qui convertit l'acide salicylique en catéchol. NahG : Lignée d'Arabidopsis transformée avec le gène nahG ndr : Plante mutante résistant aux maladies non spé cifiques de race nim : Plante mutante à immunité non inductible NIM1 : Le gène de type sauvage mis en jeu dans la cascade de transduction du signal de la SAR NIM1 : Protéine codée par le gène NIM1 de type sau vage niml : Allèle mutant de NIM1, qui confère à la plante une sensibilité aux maladies ; désigne aussi des plants mutants Arabidopsis thaliana comportant l'allèle mutant niml du NIM1 Noco : Isolat de Peronospora parasitica compatible dans l'écotype Col-O d'Arabidopsis ORF : Cadre ouvert de lecture PC : Combinaison primaire PR : Apparentée à une pathogénèse SA : Acide salicylique SAR : Résistance systémique acquise SSLP : Polymorphisme de taille des séquences simples UDS : Phénotype de sensibilité universelle aux mala dies Wela : Isolat de Peronospora parasitica compatible dans l'écotype Weiningen d'Arabidopsis Ws-O : Arabidopsis écotype Issilewskija WT : Type sauvage YAC : Chromosome artificiel de levure L'invention est illustrée plus en détail à l'aide des modes opératoires détaillés, préparations et exemples ci-après. L'ADN recombinant standard et les techniques de clonage moléculaire utilisées dans l'invention sont bien connus dans la technique et sont décrites par Sambrook et al., Molecular Cloning, eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1989) et par T.J. Silhavy, M.L. Berman et L.W. Enquist, Experiments with Gene Fusions, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Sprind Harbor, NY (1984) et par Ausubel F.M. et al., Current Protocols in Molecular Biology, publié par Greene Publishing Assoc. Et Wiley-Interscience (1987). A. Caractérisation des mutants niml Exemple 1 : Lignées végétales et souches fongiques On obtient des semences d'Arabidopsis thaliana écotype Isilewskija (Ws-O ; numéro de stock CS 2360) et de la quatrième génération (T4), provenant de lignées transformées par l'ADN-T, auprès de l1Ohio State University Arabidopsis Biological Resource Center (Columbus, OH). C'est auprès de Lehle Seeds (Round Rock, TX) que l'on se procure des semences de la deuxième génération (M2), provenant de plants Ws-O mutagénisés par le méthanesulfonate d'éthyle (EMS). La souche d'essai 3000 de Pseudomonas syringae pv. tomato (Pst) contenant le gène avrRpt2 cloné [DC3000 (avrRpt2)1 est obtenu auprès de B. Staskawicz, University of California, Berkeley. Les variétés pathogènes de P. parasitica et leurs sources sont les suivantes : Emwa provient de E. Holub et I.R. Crute, Horticultural Research Station, East Malling, Kent ; Wela provient d'A. Slusarenko et de B. Mauch-Mani, Institut für Pflanzenbiologie, Zurich, Suisse ; et Noco provient de J. Parker, Sainsbury Laboratory, Norwich, Angleterre. Les cultures fongiques sont maintenues par culture hebdomadaire sur Arabidopsis écotype Ws-O, Weiningen, et Col-O, pour les variétés pathogènes de P. parasitica respectivement Emwa, Wela et Noco. Exemple 2 : Sélection des mutants On cultive des semences M2 ou T, sur sol pendant deux semaines, avec 14 heures de lumière par jour, on les nébulise avec de 1'INA 0,33 mM (0,25 mg/ml, obtenus à partir d'INA à 25 % dans une poudre mouillable ; Ciba, Bâle, Suisse), et on les inocule 4 jours plus tard en pulvérisant une suspension de conidies de P. parasitica contenant 5-10 .104 conidiospores par ml d'eau. Ce champi- gnon pathogène est normalement virulent sur l'écotype Ws O d'Arabidopsis, à moins qu'une résistance ait été au préalable induite dans ces végétaux à l'aide d'acide isonicotinique (INA) ou un composé analogue. Les plantes sont maintenues dans des conditions humides à 180C pendant une semaine, puis on note leur sporulation fongique. Les plantes qui supportent la prolifération des champignons après traitement par 1'INA sont sélectionnées comme étant des mutants putatifs. Après incubation dans une atmosphère à grande humidité, les plantes présentant des symptômes visibles de maladie sont identifiées, habituellement 7 jours après l'infection. Ces plantes ne présentent aucune résistance au champignon, malgré l'application du produit chimique inducteur de résistance, et représente ainsi des plantes mutantes nim (à immunité non inductible) potentielles. Sur 360 000 plants, on identifie 75 mutants nim potentiels. Ces plants mutants potentiels sont isolés de la parcelle, placés dans une atmosphère à faible humidité, et on les laisse germer. Les plants qui dérivent de cette semence sont sélectionnés d'une manière identique en fonction de leur sensibilité au champignon Emwa, une fois de plus après traitement préalable à l'INA. Les plants descendants qui présentent des symptômes d'infection sont définis comme étant des mutants nim. Six lignées nim sont ainsi identifiées. Une lignée (niml-l) est isolée de la population d'ADN-T, et cinq (niml-2, niml-3, nimi-4, niml-5 et niml-6) de la population EMS. Exemple 3 : Résistance aux maladies des plantes niml L'acide salicylique (SA) et l'ester S-méthylique de l'acide benzo(l,2,3)thiadiazole-7-carbothioïque (BTH) sont des produits chimiques qui, tout comme 1'INA, induisent une résistance à un large spectre de maladies (SAR) dans les plantes de type sauvage. Les plants mutants sont traités par le SA, 1'INA et le BTH, puis on évalue leur résistance à Peronospora parasitica. L'isolat de P. parasitica "Emwa" est un isolat de P.p qui est compatible dans l'écotype Ws. Les isolats compatibles sont ceux qui sont capables de créer une maladie dans un hôte particulier. L'isolat de P. parasitica "Noco" est incompatible sur Ws mais compatible sur l'écotype Columbia. Les microorganismes pathogènes incompatibles sont reconnus par l'hâte potentiel, en déclenchant une réponse de l'hâte qui empêche le développement de la maladie. Des semences de type sauvage, et des semences pour chacun des allèles niml (niml-l, -2, -3, -4, -5, -6) sont semées sur des milieux de croissance MetroMix 300, recouvertes d'un dôme plastique transparent et placées à 40C à l'obscurité pendant 3 jours. Après 3 jours du traitement à 4"C, les plantes sont envoyées dans un phytotron pendant 2 semaines. Environ deux semaines après la planta tion, les plants de semis germés ont produit quatre feuilles vraies. Les plants sont ensuite traités avec du H2O, du SA 5 mM, du BTH 300 WM ou de l'INA 300 AM. Les produits chimiques sont appliqués sous forme d'un brouillard fin pour recouvrir complètement les plants de semis à l'aide d'un "Chromister". Les plants témoins arrosés, sont renvoyés au phytotron de croissance, tandis que les plants traités par voie chimique sont maintenus dans un phytotron distinct mais identique. Trois jours après l'application du produit chimique, les plants arrosés par de l'eau et chimiquement traités sont inoculés par l'isolat "Emwa" compatible. On procède à une inoculation par "Noco" uniquement sur les plants traités par l'eau. Après inoculation, les plants sont recouverts d'un dôme plastique transparent pour maintenir l'humidité élevée requise pour la réussite de l'infection par P. parasitica, et on les place dans une chambre de culture à 19"C pendant le jour et 17"C pendant la nuit, avec des cycles de 8 heures de lumière et 16 heures d'obscurité. Pour déterminer la force relative des différents allèles niml, chaque mutant fait l'objet d'une analyse au microscopie à différents instants suivant l'inoculation pour déterminer la croissance de P. parasitica dans les conditions normales de croissance et après un traitement préalable avec le SA, l'INA ou le BTH. Après grossissement, on peut observer une sporulation du champignon, au stade très précoce du développement de la maladie. Le pourcentage de plants par pot présentant une sporulation, 5, 6, 7, 11 et 14 jours après l'inoculation, fait l'objet d'une détermination, et on enregistre aussi la densité de la sporulation. Le Tableau 1 indique, pour chacune des lignées de plants mutants niml, le pourcentage de plants qui présentent quelques conidies en surface sur au moins une feuille après infection par la race Emwa de P. parasi tica. P. parasitica est inoculé sur les plants 3 jours après le traitement par l'eau ou les produits chimiques. Le tableau indique le nombre de jours après l'infection au bout duquel on évalue la résistance à la maladie. Tableau 1 Pourcentage d'infection - Emwa/témoin Mutant Jour O Jour 5 Jour 6 Jour 7 Jour 11 Ws WT 0 10 25 100 90 nim1-1 0 75 95 100 100 nim1-2 0 30 85 100 100 nim1-3 0 30 90 100 100 nim1-4 4 80 100 100 100 nim1-5 0 0 5 100 100 nim1-6 0 5 70 80 100 Pourcentage d'infection - Emwa/SA Mutant @ Jour 0 Jour 5 | Jour 6 Jour 7 Jour 11 Ws WT 0 S 30 70 100 nim1-1 0 5 95 100 100 nim1-2 0 5 95 100 100 nim1-3 0 10 90 100 100 nim1-4 0 75 100 100 100 nim1-5 0 0 20 75 100 nim1-6 0 80 100 100 100 Pourcentage d'infection - Emwa/INA Mutant Jour 0 Jour 5 Jour 6 Jour 7 Jour 11 WsWT O 0 0 0 0 nim1-1 0 5 80 100 100 niai-2 0 15 95 100 100 nim1-3 0 10 60 100 100 nimi-4 0 80 100 100 100 nim1-5 0 0 0 5 5 nimi-6 0 1 50 90 100 Pourcentage d'infection - Emwa/BTH Mutant Jour 0 Jour 5 Jour 6 Jour 7 Jour 11 Ws WT 0 0 0 0 0 nim1-1 0 1 5 30 100 nim1-2 0 O 25 90 100 nim1-3 0 X 15 70 10 100 100 niml-4 0 80 100 100 100 nim1-5 O 0 i 1 10 ni=i-6 0 i 90 100 100 Comme on le voit sur le Tableau 1, en cours de croissance normale, nim1-1, nim1-2, nim1-3, nim1-4 et niml-6 présentent tous approximativement la même vitesse de prolifération du champignon, qui est quelque peu plus grande que celle du témoin Ws-0. L'exception concerne les plants nim1-5, où la prolifération du champignon est retardée de plusieurs jours par rapport aux autres mutants nim1 et au témoin Ws-0, mais finalement tous les plants niml-5 succombent au champignon. Après traitement par le SA, les mutants peuvent être regroupés en trois catégories : nimi-4 et nim1-6 présentent une prolifération fongique relativement rapide ; les plants niml-l, nim1-2 et nim1-3 présentent une vitesse de prolifération fongique quelque plus faible ; et la prolifération du champignon dans les plants nimi-5 est encore plus lente que dans les témoins Ws-0 non traités. Après traitement par l'INA ou le BTH, les mutants entrent une fois de plus dans trois classes, où nimi-4 est le plus gravement compromis pour ce qui est de son aptitude à limiter la prolifération fongique après traitement chimique ; niml-l, niml-2, nim1-3 et nim1-6 sont tous modérément compromis ; et nim1-5 n'est que légèrement compromis. Dans ces expériences, Ws-0 ne favorise pas la prolifération fongique après traitement par l'INA ou le BTH. Ainsi, pour ce qui est de l'inhibition de la prolifération du champignon après traitement chimique, les mutants entrent dans trois classes, nimi-4 étant le plus gravement compromis, niml-l, niml-2, niml-3 et niml-4 présentant une inhibition intermédiaire du champignon, et niml5 ne présentant qu'une légère dégradation de la résistance aux champignons. Le Tableau 2 présente une évaluation de la résistance aux maladies, exprimée par une notation de l'infection des différents allèles niai, ainsi que de plants NahG 7 et 11 jours après inoculation par Peronospora parasitica. WsWT indique la lignée parentale de type sauvage de Ws, dans laquelle on trouve les allèles niml. Les différents allèles niml sont indiqués sur le tableau, ainsi que le plant NahG. Une description du plant NahG a déjà été publiée (Delaney et al., Science 266, pages 1247-1250 (1994)). Arabidopsis NahG est de même décrit dans la demande de brevet des Etats-Unis déposée sous le numéro de série 08/454 876 et incorporé ici à titre de référence. NahG est un gène provenant de Pseudomonas putida codant une salicylate-hydroxylase qui convertit l'acide salicylique en catéchol, ce qui élimine l'accumulation de l'acide salicylique, un constituant nécessaire de transduction du signal pour la SAR dans les végétaux. Ainsi, les plants d'Arabidopsis NahG ne présentent pas une SAR normale, et présentent une sensibilité généralement beaucoup plus grande aux micro-organismes pathogènes. Cependant, les plants NahG répondent encore aux inducteurs chimiques INA et BTH. Les plants NahG représentent donc un type de témoin universel de sensibilité. Tableau 2 Gravité de l'infection - Emwa/eau Mutant Jour 7 Jour il Ws WT 3 3 nim1-1 4 4,5 nim1-2 3 4 nim1-3 4 4 nim1-4 5 5 nim1-5 1 3,5 nim1-6 3 4,5 NahG Gravité de l'infection - Emwa/SA Mutant Jour 7 Jour 11 Ws WT 3 4 nim1-1 3 4,5 nim1-2 3 4 nim1-3 3 4 nim1-4 4 5 nim1-5 3 3 nim1-6 4 4,5 NahG 4 5 Gravité de l'infection - Emwa/INA Mutant Jour 7 Jour 11 Wn WT O O nim1-1 2,5 4 nim1-2 4 4 nim1-3 3 3,5 nim1-4 4 5 nim1-5 1 2 3 4,5 NahG 3 3 Gravité de l'infection - Emwa/BTH Mutant Jour 7 Jour 11 Ws WT O O nirni-1 2,5 4 niai-2 3,5 4 ni=i-3 3 3,5 nim1-4 4 5 nim1-5 1,5 2 nîmi-6 3 4 NahG o O On peut voir sur le Tableau 2 que les allèles niml-4 et niml-6 sont soit ceux qui présentent l'infection la plus sévère par Peronospora parasitica ; on peut l'observer le plus aisément dans les premières phases. En outre, l'allèle niml-5 est celui qui présente la réponse la plus grande tant à l'INA qu'au BTH, de sorte qu'il est réputé être l'allèle niml le plus faible. Les plants NahG présentent une très bonne réponse tant à l'INA qu'au BTH, et ont un aspect très analogue à l'allèle niml. Cependant, à des instants plus tardifs, par exemple au jour 11 du tableau, la résistance à la maladie, induite dans les plants NahG, commence à diminuer, et il y a une grande différence entre 1'INA et le BTH, en ce sens que la résistance induite par 1'INA disparaît beaucoup plus rapidement et beaucoup plus fortement que la résistance induite dans les plants NahG par le BTH. On voit aussi dans ces expériences que 1'INA et le BTH conduisent à une très bonne résistance du Ws à Emwa, et que les allèles niml-l, niml-2 et les autres allèles niml-l ne présentent pour ainsi dire aucune réponse au SA ou à 1'INA pour ce qui est de la résistance aux maladies. L'absence de réponse des plants niml aux produits chimiques inducteurs de SAR que sont le SA, 1'INA et le BTH, implique que la mutation se fait en aval du ou des points d'entrée de ces produits chimiques dans la cascade de transduction du signal conduisant à la résistance systémique acquise. Exemple 4 : analyse de Northern de l'expression du gène de la SAR Comme le SA, 1'INA et le BTH ne provoquent pas la SAR, ou encore l'expression du gène de la SAR dans l'un quelconque des plants niml, il est intéressant d'étudier si l'infection par un micro-organisme pathogène pourrait induire l'expression du gène de la SAR dans ces végétaux, comme dans les plants de type sauvage. Ainsi, on utilise aussi l'accumulation de 1'ARNm du gène de la SAR en tant que critère pour caractériser les différents allèles niai. Les Figures 1 à 3 présentent différents transferts sur gel d'ARN qui indiquent que le SA, 1'INA et le BTH ne provoquent ni SAR, ni expression du gène de la SAR dans les plants niml. Sur la Figure 1, des transferts répliques sont hybridés aux sondes géniques d'Arabidopsis PR1, PR-2 et PR-5, comme décrit dans Uknes et al. (1992). Par contraste avec les plants de type sauvage, les produits chimiques n'induisent aucune accumulation d'ARN à partir de l'un quelconque des trois gènes de la SAR dans les plants niml-l. Comme on le voit sur la Figure 2, l'infection par un micro-organisme pathogène (Emwa) de plant Ws-O de type sauvage provoque l'expression du gène PR-1 dans les quatre jours suivant l'infection. Dans les plants niml-l, l'expression du gène PR-1 n'est pas induite avant 6 jours avant l'infection, et le niveau est réduit par rapport à celui du type sauvage à la même date. Ainsi, après infection par un micro-organisme pathogène, l'expression du gène PR-1 dans les plants niml-l est retardé, et est réduite par rapport au type sauvage. L'empreinte de l'ARN sur gel (gel blot) de la Figure 3 montre que l'ARNm du PR-l s'accumule en des quantités élevées après traitement des plants de type sauvage avec le SA, l'INA ou le BTH, ou après infection par P. parasi tica. Dans les plants niml-l, nimi-2 et niml-3, 1 'accumu- lation de l'ARNm du PR-1 subit une forte réduction par rapport au type sauvage après traitement chimique. L'ARNm du PR-1 subit aussi une réduction après infection par P. parasitica, mais il y a encore une certaine accumulation dans ces mutants. Dans les plants niml-4 et nimi-6, l'accumulation de l'ARNrn du PR-l subit une réduction plus importante que dans les autres allèles après traitement chimique (ce qui se manifeste par des expositions plus longues) et la quantité d'ARNm du PR-1 qui s'accumule après infection par P. parasitica est significativement plus faible, ce qui étaye l'idée selon laquelle il s'agit d'allèles niml particulièrement forts. L'accumulation de l'ARNm du PR-1 est élevée dans le mutant niml-5, mais n'est que légèrement induite après traitement chimique ou infection par P. parasitica. Sur la base de l'accumulation de l'ARNm du PR-1 et d'une infection fongique, les mutants se révèlent entrer dans trois classes : les allèles fortement compromis (niml-4 et niml-6), les allèles moyennement compromis (niml-l, niml-2, niml-3) ; et un allèle légèrement compromis (niml-5). Exemple 5 : Détermination de l'accumulation du SA dans les plants niml L'accumulation de plants de type sauvage par des micro-organismes pathogènes provoquant une réaction nécrotique conduit à l'accumulation de SA dans les tissus infectés. Le SA endogène est nécessaire pour la transduction du signal dans la voie de la SAR, car une rupture de la SA endogène conduit à une diminution de la résistance aux maladies. Cela définit l'accumulation du SA en tant que marqueur dans la voie de la SAR (Gaffney et al., 1993, Science 261, 754-756). Le phénotype des plants niml indique une rupture d'un composant de la voie de la SAR en aval du SA et en amont de l'induction du gène de la SAR. On soumet des plants niml à des essais pour déterminer leur aptitude à accumuler le SA après infection par un micro-organisme pathogène. On injecte dans des feuilles de plant niml de quatre semaines la souche d'essai 30 de Pseudomonas syringae de la tomate, portant le gène avrRpt2. Les feuilles sont récoltées deux jours plus tard pour permettre une analyse du SA comme décrit par Delaney et al., 1995, PNAS 92,6602-6606. Cette analyse montre que les plants nimi accumulent des quantités élevées de SA dans les feuilles infectées, comme on le voit sur la Figure 4. Les feuilles non infectées accumulent aussi le SA, mais pas dans les mêmes quantités que les feuilles infectées, ce qui est analogue à ce que l'on observe avec Arabidopsis de type sauvage. Ce résultat indique que la mutation nim se trouve sur la carte en aval du marqueur de SA dans la voie de transduction du signal. En outre, 1'INA et le BTH (inactifs dans les plants niml) se révèlent stimuler un composant de la voie de la SAR en aval du SA (Venooij et al. (1995) ; Friedrich et al. (1996) et Lawton et al. (1996)). En outre, comme on l'a dit cidessus, le SA appliqué par voie exogène ne protège pas les plants niml d'une infection par Emwa. Exemple 6 : Analyse génétique Pour déterminer la dominance des différents mutants qui présentent le phénotype niml, un pollen provenant de plants de type sauvage est transféré sur les stigmates de nimi-i, -2, -3, -4, -5, -6. Si la mutation est dominante, alors le phénotype niml va être observé dans les plants F1 résultants. Si la mutation est récessive, alors les plants F1 obtenus vont présenter un phénotype de type sauvage. Les données présentées sur le Tableau 3 montrent que, quand niml-l, -2, -3, -4 et -6 sont croisés avec le type sauvage, les plants F1 obtenus présentent le phénotype de type sauvage. Ainsi, ces mutations sont récessi ves. Par contraste, les descendants mutants F1 niml-5 X de type sauvage présentent tous le phénotype niml, ce qui indique qu'il s'agit d'une mutation dominante. Après traitement par l'INA, aucune sporulation de P. parasitica n'est observée sur les plants de type sauvage, tandis que les plants F1 favorisent la prolifération et une certaine sporulation de P. parasitica. Cependant, le phénotype niml de ces plants F1 est moins grave que celui qui est observé quand niml-l est homozygote. Pour déterminer l'allélisme, du pollen provenant des plants mutants niml-l résistant à la kanamycine est transféré sur les stigmates de niml-2, -3, -4, -5, f6. Les semences provenant du croisement sont plaquées sur des plaques Murashige-Skoog B5 contenant de la kanamycine à raison de 25 ug/ml, pour vérifier l'origine hybride de la semence. Les plants F1 résistant à la kanamycine sont transférés sur un sol, et on détermine leur phénotype niml. Comme les descendants F1 du croisement du mutant niml-5 avec le type sauvage Ws présentent un phénotype niml, on procède aussi à une analyse du descendant F2 niml-5 X niml-l. Comme il ressort du Tableau 3, tous les plants F1 obtenus présentent le phénotype niml. Ainsi, la mutation dans niml-2, -3, -4, -5, -6 n'est pas complétée par niml1 ; ces plants entrent tous dans le même groupe de complémentation et sont donc alléliques. Les descendants F2 du croisement niml-5 X niml-l présentent aussi le phénotype niml, ce qui confirme que niml-5 est un allèle niml. Tableau 3 Ségrégation génétique des mutants nim Mutant Génération Femelle Mâle Phénotype Type sauvagea) Nim1b) n nim1-1 F1 Type sauvagec) nim1-1 24 0 F2 98 32 nim1-2 F1 nim1-2 Type sauvage 3 0 nim1-3 F1 nim1-3 Type sauvage 3 0 nim1-4 F1 nim1-4 Type sauvage 3 0 nim1-5 F1 nim1-5 Type sauvage 0 35 F1 Type sauvage nim1-5 0 18 nim1-6 F1 nim1-6 Type sauvage 3 0 nim1-2 F1 nim1-2 nim1-1 0 15 nim1-3 F1 nim1-3 nim1-1 0 10 nim1-4 F1 nim1-4 nim1-1 0 15 nim1-5 F1 nim1-5 nim1-1 0 14 F2 9 85 nim1-6 F1 nim1-6 nim1-1 0 12 a) Nombre de plants ayant une accumulation élevée d'ARNm du PR-1, avec absence de P. parasitica après traitement par l'INA. b) Nombre de plants n'ayant pas d'accumulation de l'ARNm du PR-1, avec présence de P. parasitica après traitement par l'INA. c) Le type sauvage désigne la souche Ws-O de type sauvage. B. Cartographie de la mutation niml La cartographie de la mutation niml est décrite très en détail dans la demande de brevet des Etats-Unis déposée par la demanderesse sous le numéro 08/773 559 le 27 décembre 1996, cette demande étant incorporée ici par référence dans sa totalité. Exemple 7 : Identification de marqueurs du site NOM et cartographie génétique du site NIMl Pour déterminer une position brute du NIMl sur la carte, on identifie la sensibilité à P. parasitica et l'absence d'accumulation de l'ARNm du PR-1 après traitement par l'INA, sur 74 plants NiMi F2 provenant d'un croisement entre niml-l (Ws-O) et Landsberg erecta (Ler). Par utilisation de marqueurs du polymorphisme de taille des séquences simples (SSLP) (Bell et Ecker 1994), on constate que niml-l se trouve à environ 8,2 centimorgans (cM) de nga 128 et à 8,2 cM de nga 111 sur le bras inférieur du chromosome 1. De plus, il s'avère que niml-l se trouve entre nga 111 et environ 4 cM à partir du marqueur de SSLP ATHGENEA. (Figure 5A). Pour une cartographie de la structure fine, on identifie 1138 plants nim provenant d'une population F2 qui dérive d'un croisement entre niml-l et LerDP23, sur la base de leur aptitude à accumuler l'ARNm du PR-1 et de leur aptitude à favoriser la prolifération fongique après traitement par l'INA. L'ADN est extrait de ces végétaux, et on note sa zygosité au niveau d'ATNGENEA et de nga 111. Comme on le voit sur la Figure 5A, 93 chromosomes recombinants sont identifiés entre ATHGENEA et niml-l, ce qui donne une distance génétique d'environ 4,1 cM (93 sur 2276), et 239 chromosomes recombinants sont identifiés entre nga 111 et niml-l, ce qui donne une distance génétique d'environ 10,5 cM (239 sur 2276). On soumet à une analyse plus poussée des recombinants informatifs dans l'intervalle allant de ATHGENEA à nga 111, en utilisant une analyse du polymorphisme de taille des fragments amplifiés (AFLP) (Vos et al., 1995). Des marqueurs de l'AFLP entre ATHGENEA et nga 111 sont identifiés et sont utilisés pour construire une carte à faible résolution de la région (Figures 5A et 5B). On utilise des marqueurs de 1'AFLP W84.2 (à 1 cM de niml-l) et W85.1 (à 0,6 cM de niml-l) pour isoler des clones du chromosome artificiel de levure (YAC) à partir de la banque CIC (Centre d'Etude du Polymorphisme humain, INRA et CNRS) (Creusot et al., 1995). Deux clones du YAC, le CIC 12H07 et le CIC12F04, sont identifiés avec le W84.2, et deux clones du YAC, le CIC7E03 et le CIC1OG07, sont identifiés avec le marqueur W85.1 (Figure 5B). Pour franchir l'intervalle entre les deux ensembles de clones latéraux du YAC, on isole et on cartographie des clones du chromosome artificiel bactérien (BAC) et des clones P1 qui chevauchent le CIC12H07 et le CIC12F04, et on procède à des étapes successives de marche, en étendant la zone contiguë à BAC/P1 vers NIM1 (Figure 5C, Liu et al., 1995 ; Chio et al., 1995). De nouveaux polymorphismes AFLP sont mis au point pendant la marche, qui sont spécifiques des clones BAC ou P1, et on les utilise pour déterminer si le gène nim1 a été croisé. Le nimi a été croisé quand les clones BAC et P1 ont été isolés, en donnant naissance aux deux marqueurs de l'AFLP L84.6a et L84.8. Le marqueur de l'AFLP L84.6a que l'on trouve sur le clone P1, à savoir P1-18, P1-17 et P1-26, identifie trois recombinants, et le marqueur L84.8, que l'on trouve sur les clones P1, à savoir P1-20, P1-22, P1-23 et P1-24, et les clones BAC, à savoir BAC-04, BAC-05 et BAC-06, identifient un recombinant. Comme ces clones se chevauchent pour former une large zone contiguë (supérieure à 100 kb) et comprennent des marqueurs de l'AFLP en position latérale par rapport au nml, il s'avère que le gène est situé sur la zone contiguë. Les clones BAC et P1 qui comprennent la zone contiguë sont utilisés pour produire des marqueurs additionnels de 1'AFLP, ce qui montre que nim1 est situé entre L84.Y1 et L84.8, en représentant un intervalle d'environ 0,09 cM. C. Isolement du gène NIM1 Exemple 8 : Synthèse d'une zone contiguë cosmidique On synthétise une banque cosmidique de la région NIMl dans le vecteur cosmidique d'ADN-T compatible avec Agrobacterium pCLD04541 par utilisation d'un ADN purifié par CsCl provenant de BAC-06, BAC-04 et P1-18. Les ADN des trois clones sont mélangés en des quantités équimolaires et sont soumis à une digestion partielle avec l'enzyme de restriction Sau3A. Les fragments de 20-25 kb sont isolés par utilisation d'un gradient de saccharose, combinés et remplis avec du dATP et du dGTP. Le plasmide pCLD04541 est utilisé en tant que vecteur cosmidique d'ADN-T. Ce plasmide contient un réplicon à base de pRK290, correspondant à une large gamme d'hôtes, un gène de résistance à la tétracycline pour la sélection bactérienne, et le gène nptII pour la sélection végétale. Le vecteur est clivé avec XhoI et rempli avec dCTP et dTTP. Les fragments préparés sont ensuite ligaturés dans le vecteur. Le mélange de ligature est empaqueté et soumis à une transduction dans la souche de E. coli XL1-blue MR (Statagene). Les transformants obtenus sont criblés par hybridation avec les clones BAC04, BAC06 et P1-18, et les clones positifs sont isolés. L'ADN cosmidique est isolé de ces clones, et l'ADN de matrice est préparé par utilisation des combinaisons d'enzymes EcoRI/MseI et HindIII/ MseI. Les empreintes obtenues du polymorphisme AFLP sont analysées pour déterminer l'ordre des clones cosmidiques. Un ensemble de 15 cosmides à semi-chevauchement sont sélectionnés, qui recouvrent la région nim (Figure 5D). Les ADN cosmidiques sont eux aussi restreints par EcoRI, PstI, BssHII et SgrAI. Il est ainsi possible d'estimer la taille des inserts cosmidiques, et de vérifier les chevauchements entre les différents cosmides, tels que déterminés par les empruntes AFLP. Une cartographie physique montre que la distance physique entre L84.Y1 et L84.8 est supérieure à 90 kb, ce qui donne un rapport entre la distance génétique et la distance physique d'environ 1 mégabase par cM. Pour faciliter l'identification du gène NIMl, on détermine la séquence d'ADN du BAC04. Exemple 9 : Identification d'un clone contenant le gène NIMi Des cosmides produits à partir de clones qui recouvrent la région NDMl sont déplacés dans Agrobacterium tumefaciens AGL-1 par transfert par conjugaison, dans le cadre d'un appariement triparental avec la souche assistante HB101 (pRK2013). Ces cosmides sont ensuite utilisés pour transformer une lignée d'Arabidopsis niml-l sensible à la kanamycine, par utilisation d'une infiltration sous vide (Bechtold et al., 1993 ; Mindrinos et al., 1994). Les semences provenant des plants infiltrés sont récoltées, et on les laisse germer sur des plaques de gélose GM contenant 50 mg/ml de kanamycine servant d'agent de sélection. Seules les plantules transformées avec l'ADN cosmidique peuvent détoxifier l'agent de sélection et survivre. Les plants de semis qui survivent à la sélection sont transférés sur un sol approximativement deux semaines après le plaquage, et on les soumet à un essai pour déterminer le phénotype niml, comme décrit ci-après. Les plants transformés qui ne possèdent plus le phénotype niml identifient le ou les cosmides contenant un gène NIMl fonctionnel. Exemple 10 : Complémentation du phénotype niml Les plants transférés sur le sol sont cultivés dans un phytotron pendant environ une semaine après le transfert. On applique de 1'INA 300 WM sous forme d'un brouillard fin pour recouvrir complètement les plants à l'aide d'un chromister. Au bout de deux jours, les feuilles sont récoltées pour permettre l'extraction de i'ARN et l'analyse de l'expression du PR-1. Les plants sont ensuite soumis à une pulvérisation par Peronospora parasitica (isolat Emwa), et on les cultive en présence d'une forte humidité dans une chambre de culture, à 19"C pendant la journée et 17"C pendant la nuit, avec des cycles de 8 heures de lumière et 16 heures d'obscurité. 8 à 10 jours après l'infection fongique, on évalue les plants et on leur donne une note positive ou négative vis-à-vis de la prolifération fongique. Les plants Ws et niml sont traités de la même manière, pour servir de témoin pour chaque expérience. L'ARN total est extrait du tissu recueilli par utilisation d'un tampon d'extraction LiCl/phénol (Verwoerd et al., 1989). Les échantillons d'ARN sont placés sur un gel de formaldéhyde-agarose, et transférés sur des membranes GeneScreen Plus (DuPont). Les empreintes des transferts sont hybridées à l'aide d'une sonde à ADNc de PR-1 marquée au 32P. Les transferts obtenus sont exposés à un film pour déterminer les transformants qui sont aptes à induire l'expression du PR-1 après traitement par l1INA. Les résultats sont récapitulés dans le Tableau 4, qui présente la complémentation du phénotype niml par les clones cosmidiques D5, El et D7. Tableau 4 Nom du clone Nombre de Nombre de Plants à PR-1 induits par transformants l'INA/nb total de plants testés (%) A8 3 0/3 (O 4) All 8 4/18 (22 %) C2 10 1/10 (10 %) C7 33 1/32 (3 8) D2 81 4/49 (8 %) DS 6 5/6 (83 %) El 10 10/10 (100 %) D7 129 36/36 (100 %) E8 9 0/9 (0 %) F12 6 0/6 (O 4) E6 1 0/1 (O %) E7 34 0/4 (O 4) Témoin Ws NA 28/28 (100 %) (type sauvage) Témoin phéno- NA 0/34 (O %) type nim1-1 NA : Ne s'applique pas Exemple 11 : séquençage de la région du gène NIM1 On utilise l'ADN du BAC04 (25 pg, que l'on se procure auprès de KeyGene) en tant que source d'ADN utilisée pour l'analyse des séquences, car ce BAC est le clone qui recouvre complètement la région qui complémente les mutants niml. L'ADN du BAC04 est soumis à un cisaillement aléatoire dans un nébulisateur pour produire des fragments ayant une taille moyenne d'environ 2 kb. Les extrémités des fragments cisaillés sont réparées, et les fragments sont purifiés. L'ADN préparé est ligaturé avec le pRBKanF4 digéré par EcoRV (un dérivé du pBRKanF1) (Bhat 1993)). Les colonies obtenues, résistant à la kanamycine, sont sélectionnées en fonction de l'isolement des plasmides par utilisation du système Wizard Plus 9600 Miniprep System (Promega). Les plasmides sont séquencés par utilisation de la technique des terminateurs de colorants (Applied Biosystems, Foster City, CA) avec des amorces conçues pour séquencer les deux brins des plasmides (M1321 vers l'avant et T7 vers l'arrière, Applied BioSystems). Les données sont recueillies sur des séquenceurs d'ADN ABI377. Les séquences sont éditées et assemblées dans des zones contiguës par utilisation du Sequencher 3.0 (GeneCodes Corp., Ann Arbor, MI), les programmes d'assemblage de génomes Staden, phred, phrap et crossmatch (Phil Green, Washington University, Saint Louis, MO) et consed (David Gordon, Washington University, Saint Louis, MO). L'ADN provenant des cosmides, qui se révèle complémenter la mutation nimi-i, est séquencé par utilisation d'amorces mises au point par le logiciel d'analyse d'amorces Oligo 5.0 (National Biosciences Inc., Plymouth, MN). Le séquençage de l'ADN provenant des allèles Ws-0 et nXml, ainsi que celui des ADNc, est réalisé essentiellement comme décrit ci-dessus. * Une région d'environ 9,9 kb, définie par le chevauchement des cosmides El et D7, est identifiée par analyse de complémentation comme contenant la région niml. Les amorces qui se trouvent en position latérale par rapport au site d'insertion du vecteur et qui sont spécifiques du squelette cosmidique sont mises au point par utilisation du logiciel d'analyse d'amorces Oligo 5.0 (National Biosciences Inc.). L'ADN est isolé des cosmides D7 et El par utilisation d'une variante de la méthode à l'acétate d'ammonium (Traynor P.L., 1990, BioTechniques 9(6):676). Cet ADN est séquencé directement par utilisation de la chimie des terminateurs de colorant ci-dessus. La séquence obtenue permet de déterminer les points finals de la région de complémentation. La région définie par le chevauchement des cosmides El et D7 est présentée sous le nom de séquence SEQ ID NO:1. Une version tronquée du fragment BamHI-EcoRV est elle aussi synthétisée, et donne un produit de synthèse qui ne contient pas la région 3 du gène (Figure 5D). L'approche suivante est nécessaire, en raison de la présence de sites HindIII dans la région Bam-Spe de 1'ADN. Le produit de synthèse BamHI-EcoRV est entièrement digéré par SpeI, puis est subdivisé en deux réactions distinctes par double digestion. Une aliquote est digérée par BamHI, et l'autre par HindIII. On isole de gels d'agarose (trousse d'extraction QIAquick Gel) un fragment BamHI-SpeI de 2816 pb et un fragment Hindîli-Spel de 1588 pb, et on les ligature au pSGCG0i digéré par BamHI- Hindîli. Le DHSa est transformé avec le mélange de ligature. Les colonies obtenues sont criblées pour déterminer l'insertion correcte par digestion avec HindIII après préparation de l'ADN par utilisation du Wizard Magic MiniPreps (Promega). Un clone contenant le produit de synthèse correct est soumis à une électroporation dans la souche d'Agrobacterium GV3101 pour transformation de plants d'Arabidopsis. Exemple 12 : Analyse de séquence et sous-clonage de la région NiMi La région de 9,9 kb contenant le gène NiMi fait l'objet d'une analyse pour déterminer la présence de cadres ouverts de lecture dans les six cadres, par utilisation du Sequencher 3.0 et du progiciel GCG. Quatre régions contenant de grands cadres ouverts de lecture sont identifiés comme étant des gènes possibles (régions 1-4 des gènes sur la Figure 5D). Ces quatre régions sont soumises à une amplification PCR à partir de l'ADN du parent de type sauvage, et des sites variants alléliques niml différents, niml-l, -2, -3, -4, -5 et -6. Les amorces utilisées pour ces amplifications sont sélectionnées par utilisation de l'Oligo 5.0 (National Biosciences Inc.) et sont synthétisées par Integrated DNA Technolo gies Inc. Les produits de amplification PCR sont séparés sur des gels d'agarose à 1,0 % qui sont purifiés par la trousse d'extraction sur gel QIAquick Gel Extraction. Les produits génomiques purifiés de l'amplification PCR sont directement séquencés par utilisation des amorces utilisées pour amplification initiale, et avec des amorces additionnelles destinées à assurer un séquençage en travers de toutes régions non recouvertes par les amorces initiales. La couverture moyenne de ces régions géniques est d'environ 3,5 lectures/base. Les séquences sont éditées et sont assemblées par utilisation du Sequencher 3.0. Les changements de base spécifiques des différents allèles niml sont identifiés uniquement dans la région appelée Région 2 du gène, comme on le voit ci-dessous sur le Tableau 5, qui présente les variations de séquence parmi les six allèles niml. Tableau 5 Région du gêne Allèle/écotype 1 (bases 590-1090) 2 (NIM1) (bases 13804100) 3 (bases 4 (bases 8140 5870-6840) 9210) nim1-1 Pas de changement t inséré en 2981: changement Pas de Pas de de 7AA et terminaison changement changement prématurée de la protéine nim1-2 Pas de changement Remplacement de g par a en Pas de Pas de 2799 : His en Tyr changement changement nim1-3 Pas de changement Délétion de t en 3261 ; Pas de Pas de changement de 10AA et changement changement terminaison prématurée de la protéine nim1-4 Pas de changement c en t à 2402 : Arg en lys Pas de Pas de changement changement nim1-5 Pas de changement c en t à 2402 : Arg en lys Pas de Pas de changement changement nim1-6 g en a à 734 : Asp g en a à 2670: Gln en Stop Pas de Pas de en lys ~ changement changement Ws Pas de changement a en g à 1607 : lle en Leu t en a à 5746 t en g à 8705 (comparaison de d à Columbia) a en c à niml-6 appartiennent à la souche Ws. Columbia-0 représente le type sauvage. Il est manifeste que le gène NIMl se trouve à l'intérieur de la Région 2 du gène, car il y a des changements d'acides aminés ou des modifications de séquence à l'intérieur du cadre ouvert de lecture de la Région 2 du gène dans les six allèles niml. Simultanément, au moins l'un des allèles niml ne montre aucun changement des cadres ouverts de lecture dans les régions 1, 3 et 4 du gène. En conséquence, la seule région du gène à l'intérieur de la région de 9,9 kb susceptible de contenir le gène NiMi est la région 2 du gène. La section Ws du Tableau 5 indique les changements de l'écotype Ws d'Arabidopsis par rapport à l'écotype Colombia d'Arabidopsis. Les séquences qui y sont présentées concerne l'écotype Colombia d'Arabidopsis, qui contient le gène de type sauvage dans les expériences décrites dans l'invention. Les changements sont mentionnés sous forme de changements d'acides aminés dans la région 2 du gène (la région NIAI) et sont indiqués sous forme de changement des paires de base dans les autres régions. La région cosmidique contenant le gène niml est représentée par un fragment de restriction BamHI-EcoRV ayant une taille d'environ 5,3 kb. L'ADN cosmidique de D7 et l'ADN plasmidique de pBlueScriptII (pBSII) sont digérés avec BamHI et avec EcoRV (NEB). Le fragment de 5,3 kb provenant de D7 est isolé de gels d'agarose et est purifié par utilisation de la trousse d'extraction sur gel QIAquick (NO 28796, Qiagen). Le fragment est ligaturé jusqu'au lendemain sur le pBSII digéré par Bam-EcoRV, et le mélange de ligature est transformé dans la souche de ecoAquick (NO 28796, Qiagen). Le fragment est ligaturé jusqu'au lendemain sur le pBSII digéré par Bam-EcoRV, et le mélange de ligature est transformé dans la souche de E. coli DH5a. Les colonies contenant l'insert sont sélec tionnées, l'ADN est isolé, et la confirmation est réalisée par digestion par HindIII. Le fragment Bam-EcoRV est ensuite introduit par génie génétique dans un vecteur binaire (pSGCG0l) pour transformation dans Arabidopsis. Exemple 13 : Analyse par transfert de Northern des quatre régions du gène On effectue des transferts de Northern identiques à partir d'échantillons d'ARN isolés de Ws traités par de l'eau, du SA, de BTH et de l'INA, et de lignées niml, comme décrit antérieurement dans Delaney et al. (1995). Ces transferts sont hybridés avec des produits amplification PCR obtenus à partir des quatre régions du gène identifiées dans de la région du gène NIMl de 9,9 kb (SEQ ID NO:1). Seule la région du gène contenant le gène NiMi (région 2 du gène) possède une hybridation décelable avec les échantillons d'ARN, ce qui indique que seule la région NIMl contient un gène de transcription détectable (Figure 5D et Tableau 5). Exemple 14 : Complémentation avec la région 2 du gène Les expériences additionnelles de complémentation ont montré aussi que la région 2 du gène (Figure 5D) contient le gène NIMi fonctionnel. Un fragment d'ADN génomique BamHI/HindIII contenant la région 2 du gène est isolé du cosmide D7 et est cloné dans le vecteur binaire pSGCG0i contenant le gène de résistance à la kanamycine. Le plasmide obtenu est transformé dans la souche d'Agrobacterium GV3101, et les colonies positives sont sélectionnées sur kanamycine. On utilise une amplification PCR pour vérifier que la colonie sélectionnée contient le plasmide. Des plants niml-l sensibles à la kanamycine subissent une infiltration par cette bactérie, comme on l'a déjà décrit. La semence obtenue est récoltée sur une gélose GM contenant 50 wug/ml de kanamycine. Les plants survivants à la sélection sont transférés sur un sol et soumis à un essai de complémentation. Les plants trans formés et les plants Ws et niml témoin reçoivent une pulvérisation d'INA 300 WM. Deux jours plus tard, les feuilles sont récoltées pour extraction de l'ARN et analyse de l'expression du PR-1. Les plants sont ensuite pulvérisés par Peronospora parasitica (isolat Emwa), et on les cultive comme on l'a dit ci-dessus. Dix jours après l'infection fongique, on évalue les plants et on leur donne une note positive ou négative vis-à-vis de la prolifération fongique. Les 15 plants transformés, ainsi que les témoins Ws, sont négatifs vis-à-vis de la prolifération fongique après traitement par 1 'INA, tandis que les témoins niml sont positifs vis-à-vis de la prolifération fongique. L'ARN est extrait et analysé comme décrit cidessus pour ces transformants et témoins. Les témoins Ws et les 15 transformants présentent une induction du gène du PR-1 après traitement par l'INA, tandis que les témoins niml ne présentent pas d'induction du PR-1 par 1 'INA. Exemple 15 : Isolement d'un ADNc de NIMl On dépose sur plaque une banque d'ADNc d'Arabidopsis, réalisée dans un vecteur d'expression IYES (Elledge et al., 1991, PNAS 88, 1731-1735), et on procède à des transferts de plage. Les filtres sont hybridés avec un produit amplification PCR marqué au 32p, obtenu à partir de la région 2 du gène (Figure 5D). 14 positifs sont identifiés à partir d'un criblage d'environ 150 000 plages. Chaque plage est purifiée, et 1'ADN plasmidique est récupéré. Les inserts d'ADNc sont extraits du vecteur par digestion par EcoRI, purifiés sur gel d'agarose et séquencés. La séquence obtenue à partir de l'ADNc le plus long est indiquée sur la séquence SEQ ID NO:2 et sur la Figure 6. Pour confirmer que l'extrémité 5' de l'ADNc a été obtenue, on utilise une trousse Gibco BRL 5' RACE en suivant les instructions du fabriquant. Les produits RACE obtenus (par amplification rapide des extrémités de l'ADNc) sont séquencés et se révèlent comporter les bases additionnelles indiquées sur la Figure 6. La région transcrite présente dans les deux clones d'ADNc et détectée par l'amplification RACE est indiquée en majuscules sur la Figure 6. Les changements dans les allèles sont présentés au-dessus du brin d'ADN. Les majuscules indiquent la présence de la séquence dans un clone d'ADNc, ou sa détection après amplification RACE PCR. Les mêmes échantillons d'ARN que ceux qui sont produits dans les études d'induction (Figure 3) sont sondés avec le gène NIMl par utilisation, en tant que sonde, d'un clone d'ADNc complet. Sur la Figure 7, on peut voir que 1'INA induit le gène NIMl dans l'allèle Ws de type sauvage. Cependant, l'allèle mutant niml-l présente un niveau de base de l'expression inférieur à celui du gène NIMl, et ne peut être induit par l'INA. Ce résultat est analogue à ce que l'on observe dans l'allèle niml-3 et l'allèle nimi-6. L'allèle niml-2 présente des niveaux approximativement normaux dans l'échantillon non traité et présente une induction analogue à celle de l'échantillon de type sauvage, tout comme l'allèle nimi-4. L'allèle niml-5 semble présenter un niveau d'expression de base plus élevé que celui du gène NIMi, et une expression beaucoup plus forte après induction par des inducteurs chimiques. D. Homologues du NIMl Exemple 16 : Recherche BLAST avec la séquence NIM1 On synthétise un alignement de séquences multiples par utilisation du Clustal V (Higgins, Desmond G, et Paul M. Sharp (1989), Fast and sensitive multiple sequence alignements on a microcomputer, CABIOS 5:151-153) en tant qu'élément du progiciel pour Macintosh (1994) Lasergene Biocomputing Software de DNA* (1228 South Park Street, Madison Wisconsin, 53715). Certaines régions de la protéine NIMl sont homologues, pour ce qui est de leur séquence d'acides aminés, de 4 protéines d'ADNc différentes du riz. Les homologies sont identifiées par utilisation des séquences NSMl dans une recherche BLAST de Gen Bank. Des comparaisons des régions d'homologie du NIMI et des produits d'ADNc du riz sont présentées sur la Figure 8 (voir aussi les séquences SEQ ID NO:3 et SEQ ID NO:4 à 11). Les fragments de protéine NIMl présentent des séquences d'acides aminés ayant un taux d'identification de 36 à 48 % avec les 4 produits de riz. Exemple 17 : Isolement de gènes homologues à partir d'autres plantes En utilisant en tant que sonde l'ADNc du NIAI, des homologues du NiMi d'Arabidopsis sont identifiés par criblage de génothèques ou de banques d'ADNc provenant de différentes cultures, telles par exemple, mais sans limitation, celles qui sont mentionnées ci-dessous dans 1 'Exemple 22. Parmi les techniques classiques permettant d'y arriver, on peut citer le criblage par hybridation de banques d'ADN sur plaque (plages ou colonies ; voir par exemple Sambrook et al., Molecular Cloning, eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989)), et amplification par PCR par utilisation d'amorces oligonucléotidiques (voir par exemple Innis et al., PCR Protocols, a Guide to Methods and Applications, eds., Academic Press (1990)). Les homologues identifiés sont traités par génie génétique dans les vecteurs d'expression selon l'invention, et transformés dans les cultures ci-dessus. Les transformants font l'objet d'une évaluation de leur résistance améliorée aux maladies par utilisation de micro-organismes pathogènes appropriés de la plante de culture faisant l'objet de l'essai. Les homologues du NIMl dans les génomes du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs et de l'orge sont détectés par analyse par transfert d'ADN. L'ADN génomique est isolé du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs, du blé et de l'orge, soumis à une digestion par les enzymes de restriction BamHI, HindIII, XbaI ou SalI, soumis à séparation électrophorétique sur des gels d'agarose à 0,8 % et transféré sur une membrane en nylon par transfert capillaire. Après réticulation aux UV pour fixer l'ADN, la membrane est hybridée dans des conditions peu stringentes [BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM) à 55"C pendant 18 à 24 heures] à l'aide de l'ADNc du NIM1 d'Arabidopsis thaliana radiomarqué au 32P. Après hybridation, les transferts sont lavés dans des conditions peu stringentes [6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C ; lXSSC représente NaCl 0,15 M, citrate de Na 15 mM (pH 7,0)], et on les expose à un film radiographique pour visualiser les bandes qui correspondent à NIMl. En outre, des marqueurs de séquence exprimée (EST), identifiés par analogie avec le gène NIMl, notamment les EST du riz décrits dans l'Exemple 16, peuvent eux aussi être utilisés pour isoler des homologues. Les EST du riz peuvent être utilisés en particulier pour isoler les homologues du NiMi d'avec d'autres monocotylédones. Les homologues peuvent être obtenus par amplification PCR. Dans ce procédé, on procède à des comparaisons entre des homologues connus (par exemple le riz et Arabidopsis) . Puis on utilise pour fabriquer des amorces pour amplification PCR les régions ayant une grande similitude ou identité avec les acides aminés et l'ADN. Les régions riches en M et en W sont au mieux suivies par des régions riches en F, Y, C, H, Q, K et E, car ces acides aminés sont codés par un nombre limité de codons. Une fois qu'une région appropriée a été identifiée, on prépare des amorces pour cette région, avec une diversité de substitutions sur la position du troisième codon. Cette diversité de substitution sur la troisième position peut être limitée en fonction de l'espèce ciblée. Par exemple, comme le maïs est riche en GC, on met au point des amorces qui utilisent si possible un G ou un C sur la troisième position. La réaction d'amplification PCR est réalisée à partir d'ADNc ou d'ADN génomique dans de nombreuses conditions standard. Quand une bande est apparente, on la clone et/ou on la séquence pour déterminer s'il s'agit d'un homologue du NIAI. E. Un niveau élevé d'expression du NIMi confère aux végétaux une résistance aux maladies Un niveau élevé d'expression du gène NIMl dans les plantes transgéniques, destiné à conférer un phénotype CIX, est de même décrit dans la demande de brevet US déposée par la demanderesse sous le numéro de série 08/773 554 le 27 décembre 1996, ce document étant incorporé ici à titre de référence dans sa totalité. Exemple 18 : Niveau élevé d'expression du NIMl en raison de l'effet du site d'insertion Pour déterminer si l'un quelconque des transformants décrits ci-dessus dans l'Exemple 10 et le Tableau 4 possède un niveau d'expression du NiMi en raison de l'effet du site d'insertion, on soumet à une autofécondation des transformants primaires contenant les cosmides D7, D5 ou El (contenant le gène NOM), et on recueille la semence T2. Les semences d'une lignée El, de quatre lignées D5 et de 95 lignées D7 sont semées sur le sol, et on les cultive comme décrit ci-dessus. Quand les plants T2 sont arrivés au moins à quatre feuilles vraies, on récolte séparément pour chaque plante une feuille unique. On extrait l'ARN de ce tissu, et on l'analyse pour ce qui est de l'expression du PR-1 et du NIMl. Les plantes sont ensuite ensemencées par P. parasitica (Emwa), on détermine la prolifération fongique au bout de 3 à 14 jours, de préférence 7 à 12 jours après l'infection. Les plantes présentant une expression du NIM1 et du PR-1 plus grande que la normale, avec une résistance fongique, montrent qu'un niveau élevé d'expression du NIMi confère un phénotype CIM. Le Tableau 6 présente les résultats des essais de différents transformants, portant sur la résistance à l'infection fongique. Comme il ressort du tableau, un certain nombre de transformants présentent une prolifération fongique inférieure à la normale, et plusieurs d'entre eux ne présentent aucune prolifération fongique visible. L'ARN est préparé à partir d'échantillons collectés, et on l'analyse comme décrit ci-dessus (Delaney et al., 1995). Les transferts sont hybridés sur le PR-1 de la sonde génique d'Arabidopsis (Uknes et al., 1992). Les lignées D7-74, D5-6 et El-l présentent une induction précoce de l'expression du gène du PR-1, tandis que l'ARNm du PR-1 est manifeste 24 ou 48 heures après traitement contre les champignons. Ces trois lignées mettent aussi en évidence une résistance à l'infection fongique. Tableau 6 Lignée Prolifération Lignée Prolifération Lignée Prolifération de P. de P. de P parasitica parasitica parasitica D7-2 Négative 52 + 90 + 3 + 53 + 91 + 9 + 54 +/- 92 + 11 + 56 + 93 + 12 + 57 + 94 + 13 + 58 + 95 + 14 59 96 + 17 + 60 + 97 + 18 + 61 + 98 +/ 19 + 62 + 100 +/ 20 + 63 + 101 21 + 64 + 102 | +/ 22 + 66 + 103 + 23 + 67 + 104 + 24 + 68 + 106 + 25 + 69 + 107 + 28 + 70 + 108 + 29 ~ + 71 + 114 + 31 + 72 + 115 + 32 | + 73 + 118 + 33 + 74 Négative 119 + 34 ~ + 75 + 122 + 35 ~ + 77 + 123 + 36 + 78 + 124 + 38 + 79 + 125 + 39 + 80 +/- 126 + 42 + 81 + 128 + 43 + 82 + 129 + 46 + 83 + 130 + 47 + 84 + | D5-1 + 48 + 85 + 2 + 49 + 86 + 4 + 50 + 87 + 6 51 + 89 + E1-1 Négative Les plants sont traités par l'isolat Emwa de P. parasitica et notés 10 jours plus tard. + : Prolifération fongique normale +/- : Prolifération fongique inférieure à la normale - : Aucune prolifération fongique visible. Exemple 19 : Expression du NIMi provoquée par le 35S Des plantes qui expriment d'une manière constitutive le gène NIMl sont de même produites par transformation de plants de type sauvage Ws ou Col, à l'aide du fragment génomique d'Arabidopsis BamHI-HindIII (Figure 6) cloné dans pSGCG0i transformé dans la souche d'Agrobacterium GV3101 (pMP90, Koncz et Schell 1986, Mol. Gen. Genet. 204 : 383-396). Dans un autre produit de synthèse, l'ADNc du NIMl complet est cloné dans le site EcoRI de pCGN1761 ENX (Comai et al., 1990, Plant Mol. Biol. 15, 373-381). On obtient à partir du plasmide ainsi obtenu un fragment XbaI contenant un promoteur 35S du CaMV renforcé, l'ADNc de NIMl dans l'orientation correcte permettant la transcription, et un 3'-terminateur de tml. Ce fragment est cloné dans le vecteur binaire pCIB200 et transformé dans GV3101. Des plants Ws ou Col sont soumis comme décrit cidessus à une infiltration par chacune de ces souches transformées. La semence obtenue est récoltée et placée sur une plaque de gélose GM contenant 50 mg/ml de kanamycine. Les plantules survivantes sont transférées sur le sol et soumises à des essais. Exemple 20 : Expression du NIMl provoquée par le 35S autre forme de réalisation Un fragment génomique d'Arabidopsis BamHI/HindIII (Figure 6, bases 1249-5655) contenant le promoteur de NIMl, le gène et la séquence aval clonée dans pSGCG01, est soumis à une digestion par l'endonucléase de restriction PstI, et les extrémités sont rendues franches avec la polymérase de T4. Le fragment est en outre soumis à une digestion par l'endonucléase de restriction SpeI, pour donner un fragment de 2262 pb. L'ADNc du NIMl cloné dans le site EcoRI de pCGN1761ENX (voir ci-dessus) est digéré par l'endonucléase de restriction NotI, et les extrémités sont rendues franches par la polymérase de T4. Le fragment est en outre soumis à une digestion par l'endonucléase de restriction SpeI. Le fragment de NIMl génomique de 2262 pb obtenu ci-dessus est ligaturé avec le vecteur pCGN1761ENX contenant 91 pb de l'ADNc du NIMl. La cassette de transformation comprend le promoteur du 35S, et le terminateur du tml est libéré du pCGN1761ENX par digestion partielle par l'enzyme de restriction XbaI, et ligaturé dans le site XbaI du pCIB200 déphosphorylé. Le plasmide résultant est transformé dans GV3101, et les plants Ws ou Col sont soumis à une infiltration comme décrit ci-dessus. Les semences sont placées sur une plaque, et les plantules survivantes sont sélectionnées comme décrit ci-dessus. Exemple 21 : Evaluation du phénotype CIM dans le niveau élevé d'expression de transformants du NIMl On récolte une feuille de chaque transformant primaire, on isole l'ARN (Verwoerd et al., 1989, Nuc Acid Res, 2362), et on en détermine l'expression constitutive du PR-1 et l'expression du NIMl par analyse par transfert d'ARN (Uknes et al., 1992). Chaque transformant fait llobjet d'une évaluation d'une réponse de résistance renforcée aux maladies, qui est le signe d'une analyse de l'expression constitutive de la SAR (Uknes et al., 1992). On prépare des suspensions de conidies de 5-10.104 spores par ml provenant de deux isolats de P. parasitica compatibles, Emwa et Noco (c'est-à-dire que ces souches fongiques créent une maladie sur les plants respectivement Ws-O et Col-O de type sauvage), et les transformants reçoivent une pulvérisation de l'isolat approprié, en fonction de l'écotype du transformant. Les plants inocu lés sont incubés en présence d'une humidité élevée pendant 7 jours. On évalue le taux de maladie des plantes le jour 7, et on récolte une feuille unique pour analyse par transfert d'ARN en utilisant une sonde qui représente un moyen permettant de mesurer l'infection fongique. Les transformants qui présentent un phénotype CIM sont menés jusqu'à la génération F1, et les plantes homozygotes sont identifiées. Les transformants sont soumis à une bactérie d'essais de résistance aux maladies. On procède à une infection fongique par Noco et Emwa, et on colore les feuilles avec du bleu de lactophénol pour identifier la présence d'hyphes fongiques, comme décrit dans Dietrich et al. (1994). Les transformants sont infectés par la bactérie pathogène Pseudomonas syringae DC3000 pour évaluer le spectre de résistance, qui est manifeste comme décrit dans Uknes et al. (1993). Les plants non infectés font l'objet d'une évaluation du SA libre et du SA conjugué au glucose, et les feuilles sont colorées au bleu de lactophénol pour évaluer la présence de lésions microscopiques. Les plants résistants sont soumis à un croisement sexué avec des mutants SAR tels que NahG et ndrl, pour établir la relation épistatique du phénotype de résistance à celui d'autres mutants, et pour évaluer comment ces mutants dominant-négatifs du NIMl peuvent influencer la boucle de rétroaction dépendant du SA. Exemple 22 : Niveau élevé d'expression du NIMl dans les plantes de culture Les produits de synthèse conférant un phénotype CIM aux plants Col-O et Ws-0, et d'autres végétaux, sont transformés dans des plantes de culture pour évaluation. Bien que le gène NIMl puisse être inséré dans toute cellule végétale entrant dans ces larges catégories, il est particulièrement utile dans les cellules végétales des plantes de culture, telles que les cultures suivantes riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. Les transformants font l'objet d'une évaluation de leur résistance améliorée aux maladies. Dans une forme de réalisation préférée de l'invention, l'expression du gène NIM1 correspond à un niveau qui est au moins deux fois supérieur au niveau d'expression du gène NLMl des plants de type sauvage, et qui de préférence est 10 fois supérieur au niveau d'expression du type sauvage. F. Autres utilisations générales des plantes comportant le phénotype nim Exemple 23 : Utilisation de mutants nim dans l'évaluation des maladies On provoque des mutants nim avec différents microorganismes pathogènes, et ces mutants se révèlent développer des lésions plus grandes, plus vite que les plants de type sauvage. Ce phénotype est appelé UDS (c'est-àdire sensibilité universelle aux maladies) et est le résultat de mutants qui ne peuvent exprimer les gènes de la SAR, pour assurer la défense des végétaux contre les micro-organismes pathogènes. Le phénotype UDS des mutants nim les rend utiles en tant que plantes témoins pour l'évaluation des symptômes des maladies dans les lignées expérimentales dans le cadre des essais de pathogénèse sur champ, où le phénotype de résistance naturelle de ce que l'on appelle les lignées de type sauvage peut varier (c'est-à-dire différents micro-organismes pathogènes, avec différents pathotypes du même micro-organisme patho gène). Ainsi, sur champ, où l'infection naturelle par les micro-organismes pathogènes se fonde sur une évaluation de la résistance de lignées expérimentales, l'incorporation, dans l'expérience, de lignées mutantes nim de la plante de culture appropriée devrait permettre une évaluation du niveau vrai et du spectre de pression des micro-organismes pathogènes, sans les variations inhérentes à l'utilisation de lignées non expérimentales. Exemple 24 : Evaluation de l'utilité des transgènes à des fins de résistance aux maladies On utilise des mutants nim en tant que plantes hôtes pour transformer des transgènes et faciliter leur évaluation dans le cadre d'une utilisation dans la résistance aux maladies. Par exemple, une lignée mutante nim d'Arabidopsis, caractérisée par son phénotype UDS, est utilisée pour des transformations ultérieures avec des gènes candidats de résistance à la maladie, ce qui permet une évaluation de la contribution d'un gène individuel à la résistance contre le niveau de base des plants mutants nim UDS. Exemple 25 : Les mutants nim, un outil permettant de comprendre les interactions plante-microorganisme pathogène Les mutants nim peuvent être utilisés pour comprendre les interactions plantes-microorganismes pathogènes, et en particulier pour comprendre les processus utilisés par le micro-organisme pathogène pour envahir les cellules végétales. La raison en est que les mutants nim ne montent pas une réponse à une attaque par les microorganismes pathogènes, et le développement non restreint du micro-organisme pathogène est un scénario idéal permettant d'étudier son interaction biologique avec l'hôte. Présente une importance encore plus grande l'observation selon laquelle un mutant nim hôte peut être sensible aux micro-organismes pathogènes qui normalement ne sont pas associés à cet hôte particulier, mais plutôt sont associés à un autre différent. Par exemple, un mutant nim d'Arabidopsis, tel que niml-l, -2, -3, -4, -5 ou -6, est provoqué par un certain nombre de micro-organismes pathogènes qui normalement n'affectent que le tabac, et se révèle être sensible. Ainsi, la mutation nim provoquant le phénotype UDS conduit à une modification de la sensibilité à une certaine gamme de micro-organismes pathogènes, ce qui présente une grande utilité dans l'analyse moléculaire, génétique et biochimique de 1 'interaction hôte-pathogène. Exemple 26 : Mutants nim pour utilisation dans la sélection des fongicides Les mutants nim sont particulièrement utiles dans la sélection de nouveaux composés chim micro-organisme du mildiou), Rhizoctonia solani (le micro-organisme du piétin-verse), Pseudocercosporella herpotrichoides (le micro-organisme de la pseudocercosporellose), Puccinia spp. (le micro-organisme de la rouille), et Septoria nodorum. De même, les mutants nim du mais devraient présenter une grande sensibilité aux micro-organismes pathogènes du maïs, et devraient donc être utiles dans la sélection des fongicides présentant une activité contre les maladies du maïs. Les mutants nim sont en outre utiles pour sélectionner une large gamme de micro-organismes pathogènes et de pathotypes dans un hôte hétérologue, c'est-à-dire dans un hôte qui ne peut normalement entrer dans la gamme de l'espèce de l'hôte d'un micro-organisme pathogène particulier, et qui peut être particulièrement aisé à manipuler (tel qu'Arabidopsis). Grâce à son phénotype UDS, l'hôte hétérologue est sensible aux micro-organismes pathogènes d'autres espèces végétales, parmi lesquelles des espèces de plants de culture importantes du point de vue économique. Ainsi, à titre d'exemple, le même mutant nim d'Arabidopsis pourrait être infecté par un microorganisme pathogène du blé tel qu'Erisyphe graminis (le micro-organisme responsable du mildiou) ou un microorganisme pathogène du maïs, tel que Helminthosporium mardis, et on pourrait l'utiliser pour tester l'efficacité des fongicides candidats. Une telle approche conduit à des améliorations considérables du rendement par rapport aux techniques actuellement utilisées de sélection des espèces végétales individuelles et de différentes variétés d'espèces avec différents micro-organismes pathogènes et pathotypes susceptibles de présenter une virulence différente sur des variétés différentes de plante de culture. En outre, l'utilisation d'Arabidopsis présente des avantages, en raison de sa petite taille et de la possibilité, de ce fait, d'effectuer un plus grand nombre d'essais avec des ressources limitées en espace. Exemple 27 : Le NIM1 est un homologue de 1'IaB On procède à un alignement de séquences multiples entre les produits géniques protéiques du NIMl et de 1'IKB, ce qui permet de déterminer que le produit génique NIMi est un homologue de 1'IKBa (Figure 9). Les recherches d'homologie de séquence sont effectuées par utilisation du BLAST (Altschul et al., J. Mol. Biol. 215, 403410 (1990)). L'alignement de séquences multiples est réalisé par utilisation du Clustal V (Higgins et al., CABIOS 5, 151-153 (1989)), qui fait partie du logiciel Lasergene Biocomputing Software de DNASTAR (Madison, WI). Les séquences utilisées dans l'alignement sont NIM1 (SEQ ID NO:3), l'I Z21968 ; de Martin et al., EMBO J. 12, 2773-2779 (1993) numéro d'enregistrement GenBank 517193, de Martin et al., Gene 152, 253-255 (1995)). Les paramètres utilisés dans l'analyse Clustal sont une pénalité de brèche de 10, et une pénalité de longueur de brèche de 10. Les distances de divergence d'évolution sont calculées à l'aide de la table des poids PAM250 (Dayhoff et al., "A model of evolutionary change in proteins. Matrices for detecting distant relationships", dans Atlas of Protein Sequence and Structure, volume 5, Suppl. 3, M.O. Dayhoff, ed (National Biomedical Research Foundation, Washington D.C.), pages 345-358 (1978)). La similitude des résidus est calculée par utilisation d'une table modifiée de Dayhoff (Schwartz et Dayhoff "A model of evolutionary change in proteins", dans Atlas of Protein Sequence and Structure, M.O. Dayhoff, ed (National Biomedical Research Foundation, Washington, D.C.), pages 353-358 (1979) ; Gribskov et Burgess, Nucleic Acids Res. 14, 6745-6763 (1986)). Les recherches d'homologie indiquent qu'une similitude du NIM1 aux domaines ankyrine de différentes protéines, notamment l'ankyrine, le NF-KB et 1'IKB. La meilleure homologie globale est une homologie à 1'IKB et aux molécules apparentée (Figure 9). Le NIM1 contient 2 sérines sur les positions d'acides aminés 55 et 59, la sérine en position 59 se trouve dans un contexte (D/ExxxxxS) et sur une position (N-terminale) compatible avec un rôle dans une dégradation inductible, dépendant de la phosphorylation et médiée par l'ubiquitine. Tous les IKB possèdent ces sérines N-terminales, et ils sont nécessaires à l'inactivation de 1'IKB et à la libération ultérieure du NF-KB. Le NIM1 possède des domaines ankyrine (acides aminés 262-290 et 323-371. On pense que les domaines ankyrine sont mis en jeu dans les interactions protéineprotéine et représentent une caractéristique ubiquitaire des molécules d'IKB et de NF-KB. Les sites C-terminaux des IKB peuvent être dissemblables. Le NIM1 présente une certaine homologie avec la région riche en QL (acides aminés 491-499), que l'on trouve sur les sites C-terminaux de certains IKB. Exemple 28 : Production de formes modifiées de NIMl Changements des résidus de sérine 55 et 59 en résidus d'alanine La phosphorylation des résidus de sérine dans l'IkB&alpha; humain est nécessaire pour une dégradation, activée par un stimulus, de 1'Ia3a, ce qui active le NF-KB. La mutagenèse des résidus de sérine (S32-S36) dans llIKBa humain en résidus d'alanine inhibe la phosphorylation induite par le stimulus, ce qui bloque la dégradation médiée par le protéosome de l'IaBa (E. Britta-Mareen Traenckner et al., EMBO J. 14 : 2876-2883 (1995) ; Brown et al., Science 267 : 1485-1488 (1996) ; Brockman et al., Molecular and Cellular Biology 15 : 2809-2818 (1995) ; Wang et al., Science 274 : 784-787 (1996)). Cette forme modifiée de l'IKBa joue le rôle d'une forme dominant-négative en conservant le NF-KB dans le cytoplasme, ce qui bloque les événements de signalisation aval. Sur la base de comparaisons de séquence entre le NIM1 et l'IKB, les sérines 55 (S55) et 59 (S59) du NIMi sont homologues du S32 et du S36 dans l'isba humain. Pour synthétiser des formes dominant-négatives du NIM1, les sérines sur les positions d'acides aminés 55 et 59 sont mutagénisées en résidus d'alanine. Cette opération peut être réalisée par un procédé quelconque connu de 1 'homme de métier, par exemple par utilisation de la trousse de mutagenèse directive de site QuikChange Site Directed Mutagenesis Kit (N" 200 518 : Stratagene). En utilisant un ADNc du NIM1 complet (SEQ ID NO:21) comprenant 42 pb de la séquence 5'-non traduite (UTR) et 187 pb de la séquence 3'-UTR, le produit de synthèse mutagénisé peut être réalisé selon les instructions du fabricant, à l'aide des amorces suivantes (SEQ ID NO:21, positions 192-226) : 5'-CAA CAG CTT CGA AGC CGT TGA CGC GCC GGA TG-3' (SEQ ID NO:32) et 5'-CAT CCG GCG CGT CAA AGA CGC CTT CGA AGC TCT TG-3' (SEQ ID NO:33), où les bases soulignées désignent les mutations. La stratégie est la suivante : l'ADNc du NiMi cloné dans le vecteur pSE936 (Elledge et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 88:1731-1735 (1991)) est dénaturé, et les amorces contenant les bases modifiées sont annelées. L'ADN-polymérase (Pfu) allonge les amorces par un déplacement non brin, ce qui conduit à des brins circulaires coupés. L'ADN est soumis à une digestion par l'endonucléase de restriction DpnI, qui ne coupe que les sites méthylés (ADN de matrice non mutagénisé) . L'ADNds circulaire restant est transformé dans la souche XLl-Blue de E. coli. Les plasmides provenant des colonies obtenues est extrait et séquencé pour vérifier la présence des bases mutées et pour con firmer qu'aucune autre mutation n'a eu lieu. L'ADNc du NIM1 mutagénisé est digéré par l'endonucléase de restriction EcoRI et cloné dans pCGN1761 au titre de la régulation de transcription du promoteur du 35S double du virus de la mosaïque du chou-fleur. La cassette de transformation comprenant le promoteur 35S, l'ADNc du NIM1 et le terminateur tml, est dégagée du pCGN1761 par digestion partielle par l'enzyme de restriction XbaI et ligaturé dans le site XbaI du pCIB200 déphosphorylé. Les séquences SEQ ID NO:22 et 23 présentent respectivement la séquence codante de l'ADN et la séquence d'acides aminés codée, de cette forme modifiée du gène Niai. La présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIAI, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence codante SEQ ID NO:22 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C. Dans ces formes de réalisation, les allèles du NIMi qui s'hybrident à la séquence N" 22 dans ces conditions sont modifiées de sorte que le produit codé possède des alanines au lieu de sérines sur les positions d'acides aminés qui correspondent aux positions 55 et 59 de la séquence SEQ ID NO:22. Exemple 29 : Production de formes modifiées du NIMl Délétion N-terminale La délétion des acides aminés 1-36 (Brockman et al., Sun et al.) ou 1-72 (Sun et al.) de l'IKBa humain, qui comprend K21, K22, S32 et S36, conduit à un phénotype IKBa dominant-négatif dans des cultures de cellules humaines transfectées. Une délétion N-terminale, approximativement des 125 premiers acides aminés du produit codé de l'ADNc du NIMl, élimine 8 résidus de lysine, qui peuvent servir de site potentiel d'ubiquitinisation, et élimine aussi les sites putatifs de phosphorylation en S55 et S59 (voir l'Exemple 2). Ce produit génique modifié peut être obtenu par un moyen quelconque connu de l'homme de métier. Par exemple, en utilisant le procédé de Ho et al. Gene 77 : 51-59 (1989), une forme de NIMl peut être produite, dans laquelle l'ADN codant approximativement les 125 premiers acides est supprimé. Les amorces suivantes produisent un produit d'amplification PCR de 1612 pb (SEQ ID NO:21 : 418 à 2011) : 5'-gg aat tca-ATG GAT TCG GTT GTG ACT GTT TTG-3' (SEQ ID NO:34) et 5'-gga att cTA CAA ATC TGT ATA CCA TTG G-3' (SEQ ID NO:35), où le codon d'initiation de synthèse est souligné (ATG), la séquence de liaison correspondant à EcoRI étant minuscules. L'amplification des fragments utilise un mélange réactionnel comprenant de 0,1 à 100 ng de l'ADN de matrice, du Tris 10 mM à pH 8,5/KCl/50 mM/MgCl2 2 mM/gélatine à 0,001 %/0,25 mM de chaque dNTP/0,2 mM de chaque amorce et 1 unité d'ADN-polymérase de rTth, avec un volume final de 50 ml, ainsi qu'une machine d'amplification PCR Perkin Elmer Cetus 9600. Les conditions d'amplification PCR sont les suivantes : 94"C 3 minutes : 35X (940C 30 secondes 52"C 1 minute : 720C 2 minutes) : 720C 10 minutes. Le produit de l'amplification PCR est directement cloné dans le vecteur pCR2.1 (Invitrogen). L'insert produit par amplification PCR dans le vecteur PCR est libéré par digestion par l'endonucléase de restriction EcoRI et ligaturé dans le site EcoRI du pCGN1761 déphosphorylé, au titre de la régulation de transcription du promoteur 35S double. Le produit de synthèse est séquencé pour vérifier la présence de 1'ATG de départ de synthèse et pour confirmer qu'aucune autre mutation n'a lieu pendant la PCR. La cassette de transformation comprenant le promoteur 35S, l'ADNc du NIM1 modifié et le terminateur tml, est dégagée du pCGN1761ENX par digestion partielle par l'enzyme de restriction XbaI et ligaturée dans le site XbaI du pCIB200. Les séquences SEQ ID NO:24 et 25 présentent respectivement la séquence codant 1 'ADN et la séquence des acides aminés codés, d'une forme modifiée du gène NIMl ayant une délétion d'acides aminés N-terminale. La présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIM1, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence codante SEQ ID NO:24 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C. Dans ces formes de réalisation, les allèles du NiMi qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:24 dans ces conditions sont modifiées de façon que le produit codé possède une délétion N-terminale qui supprime les résidus de lysine pouvant servir de sites potentiels d'ubiquitinisation en plus des sérines sur les positions d'acides aminés correspondant aux positions 55 et 59 du produit génique de type sauvage. Exemple 30 : Production de formes modifiées du NIMl Délétion C-terminale On pense que la délétion des acides aminés 261-317 de 1'IKBa humain conduit à un renforcement de la stabilité intrinsèque par blocage de la phosphorylation constitutive des résidus de sérine et de thréonine sur le site C-terminal. Une région riche en sérine et en thréonine est présente sur les acides aminés 522-593 du site C-terminal du NIM1. La région codant le site C-terminal du gène NIMl peut être modifiée par délétion des séquences nucléotidiques qui codent les acides aminés 522-593. Par utilisation de la méthode de Ho et al. (1989), la région codant le site C-terminal et le site 3'UTR de l'ADNc du NIMi (SEQ ID NO:21 : 1606-2011) est supprimée par amplification PCR, en donnant un fragment de 1623 pb par utilisation des amorces suivantes : 5'cggaattcGATCTCTTTAATTTGTGAATTT C-3' (SEQ ID NO:36) et 5'ggaattcTCAACAGTT CATAATCTGGTCG-3' (SEQ ID NO:37), où un codon d'arrêt synthétique est souligné (TGA) sur le brin complémentaire), et les séquences de liaisons de EcoRI sont en minuscules. Les constituants de la réaction d'amplification PCR sont telles que décrites ci-dessus, et les paramètres de cyclage sont les suivants : 94"C 3 minutes : 30X (94"C 30 secondes : 52"C 1 minute : 720C 2 minutes) ; 720C 10 minutes]. Le produit de l'amplification PCR est cloné directement dans le vecteur PCR:1 (Invitrogen). L'insert produit par PCR du vecteur PCR est libéré par digestion par l'endonucléase de restriction EcoRI et ligaturé dans le site EcoRI du pCGN1761 déphosphorylé, qui contient le promoteur 35S double. Le produit de synthèse est séquencé pour vérifier la présence du codon d'arrêt synthétique dans le cadre, et pour confirmer qu'aucune autre mutation n'a eu lieu pendant la PCR. La cassette de transformation, qui comprend le promoteur, l'ADNc du NIMl modifié et le terminateur du tml, est libérée du pCGN1761 par digestion par l'enzyme de restriction partielle XbaI et ligaturée dans le site XbaI du pCIB200 déphosphorylé. Les séquences SEQ ID NO:26 et 27 présentent respectivement la séquence codante de l'ADN et la séquence d'acides aminés codés, d'une forme modifiée du gène NIMl ayant une délétion d'acides aminés Cterminale. la présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIAI, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence codante SEQ ID NO:26 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 55"C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 550C. Dans ces formes de réalisation, les allèles du NIM1 qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:26 dans les conditions ci-dessus sont modifiées de sorte que le produit codé ait une délétion C-terminale qui élimine les résidus de sérine et de thréonine. Exemple 31 : Production de formes modifiées de NIM1 Chimère de délétion N-terminale/C-terminale On produit une forme du NIM1 à délétion N-terminale et C-terminale en utilisant un site de restriction KpnI unique sur la position 819 (SEQ ID NO:21). La forme de délétion N-terminale (Exemple 3) subit une digestion par les endonucléases de restriction EcoRI/KpnI, et le fragment de 415 pb correspondant au site N-terminal modifié est récupéré par électrophorèse sur gel. De même, la forme de délétion C-terminale (Exemple 4) est soumise à une digestion par les endonucléases de restriction EcoRI/ KpnI, et le fragment de 790 pb correspondant au site Cterminal modifié est récupéré par électrophorèse sur gel. Les fragments sont ligaturés à 150C, digérés avec EcoRI pour éliminer les concatémères EcoRi, et on les clone dans le site EcoRI du pCGN1761 déphosphorylé. La forme de délétion N/C-terminale du NIM1 entre dans le cadre de la régulation de transcription du promoteur 35S double. De même, on produit une forme chimère du MIMI, qui est constituée des sites de phosphorylation putatifs mutagénisés S55/S59 (Exemple 2) fusionnés à la délétion C-terminale (Exemple 4). Le produit de synthèse est produit commue décrit ci-dessus. Les produits de synthèse sont séquencés pour vérifier la fidélité du codon d'initiation et du codon d'arrêt et pour confirmer qu'aucune mutation n'a eu lieu pendant le clonage. Les différentes cassettes de transformation, comprenant le promoteur 35S, la chimère NIMl et le terminateur tml, sont libérées du pCGN1761 par digestion partielle par l'enzyme de restriction XbaI et ligaturées dans le site XbaI du pCIB200 déphosphorylé. Les séquences SEQ ID NO:28 et 29 présentent respectivement la séquence codante de 1'ADN et la séquence d'acides aminés codés, d'une forme modifiée du gène NIMi comportant des délétions d'acides aminés tant N-terminales que C-terminales. La présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIMl, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence codante SEQ ID NO:28 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C. Dans ces formes de réalisation, les allèles du NIMl qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:28 dans les conditions ci-dessus sont modifiés de façon que le produit codé possède tant une délétion N-terminale, qui élimine les résidus de lysine pouvant servir de sites potentiels d'ubiquitinisation en plus des sérines sur les positions d'acides aminés correspondant aux positions 55 et 59 du produit génique de type sauvage, qu'une délétion C-terminale, qui élimine les résidus de sérine et de thréonine. Exemple 32 : Production de formes modifiées du NIM1 Domaines ankyrine Le NiMi présente une homologie avec les motifs ankyrine approximativement au niveau des acides aminés 103262. Par utilisation de la méthode de Ho et al. (1989), la séquence d'ADN codant les domaines ankyrine putatifs (SEQ ID NO:2 : 3093-3951) est amplifiée par PCR (conditions : 94"C, 3 minutes : 35X (940C 30 secondes : 62"C 30 secondes : 72"C 2 minutes) : 720C 10 minutes) à partir de l'ADNc du NiMi (SEQ ID NO:21 : 349-1128) par utilisation des amorces suivantes : 5'ggaattcaA GACTCCAACAACACCGCCGC-3' (SEQ ID NO:38) et 5' ggaattcTCAACCTTCCAAAGTTGCTTCTGATG-3' (SEQ ID NO:39). Le produit obtenu est digéré par l'endonucléase de restriction EcoRi, puis épissé dans le site EcoRI du pCGN1761 déphosphorylé dans les conditions de la régulation de transcription du promoteur 35S double. Le produit de synthèse est séquencé pour vérifier la présence du codon d'initiation synthétique (ATG), d'un codon d'arrêt dans le cadre (TGA), et pour confirmer qu'aucune autre mutation n'a eu lieu pendant amplification PCR. La cassette de transformation, qui comprend le promoteur 35S, les domaines ankyrine et le terminateur tml est libérée du pCGN1761 par digestion partielle par l'enzyme de restriction XbaI et ligaturée dans le site XbaI du pCIB200 déphosphorylé. Les séquences SEQ ID NO:30 et 31 présentent respectivement la séquence codante de l'ADN et la séquence d'acides aminés codée du domaine ankyrine du NIAI. La présente invention concerne aussi des formes modifiées d'allèles du NIMl, où la séquence codante d'un tel allèle s'hybride dans les conditions suivantes à la séquence codante SEQ ID NO:30 : hybridation dans du BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 550C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C. Dans ces formes de réalisation, les allèles du NiMi qui s'hybrident à la séquence SEQ ID NO:30 dans les conditions ci-dessus sont modifiées de sorte que le produit codé soit essentiellement constitué des domaines ankyrine du produit génique de type sauvage. Exemple 33 : Synthèse de gènes chimères Pour augmenter la probabilité d'une expression spatiale et temporelle appropriée de formes modifiées du NIMl, on utilise le fragment HindIII/BamHI de 4407 pb (SEQ ID NO:2, bases 1249-5655), et/ou un fragment EcoRV/ BamHI de 5655 pb (SEQ ID NO:2 : bases 1-5655) contenant le promoteur et le gène NIMl, pour créer les formes modifiées du NIMl dans les Exemples 28 à 32 ci-dessus. Bien que les étapes de synthèse puissent différer, les concepts sont comparables aux exemples décrits ci-dessus dans l'invention. Une forte surexpression des formes modifiées peut être potentiellement létale. Ainsi, les formes modifiées du gène NIMl décrites dans les Exemples 28 à 32 peuvent être placées dans le cadre de la régulation de promoteurs autres que le promoteur NIMl endogène, y compris mais sans limitation le promoteur nos ou la petite sous-unité du promoteur Rubisco. De même, les formes NIMl modifiées peuvent être exprimées au titre de la régulation du promoteur de réponse aux micro-organismes pathogènes PR-1 (brevet US N" 5 614 395). Cette expression permet une forte expression des formes modifiées NIMl, uniquement en présence d'une attaque par des micro-organismes pathogènes, ou dans d'autres conditions d'activation de la SAR. En outre, la résistance aux maladies peut être manifeste dans les transformants qui expriment des formes modifiées du NIMl dans le cadre d'une régulation du promoteur PR-1 après traitement par des concentrations d'activateurs de la SAR (à savoir BTH ou INA) qui normalement n'activent pas la SAR, en activant ainsi une boucle de rétroaction (Weymann et al. (1995) Plant Cell 7 : 2013-2022). Exemple 34 : Transformation de formes modifiées du NIMl dans Arabidopsis thaliana Les produits de synthèse obtenus dans les Exemples 28 à 33 sont envoyés dans Arabidopsis thaliana par électroporation dans la souche GV3101. Ces produits de synthèse sont utilisés pour transformer les écotypes Col-O et Ws-O d'Arabidopsis par infiltration sous vide (Mindrinos et al., Cell 78, 1089-1099 (1994)) ou par des techniques classiques de transformation des racines. Les semences provenant de ces plants sont récoltées, et on les laisse germer sur des plaques de gélose avec de la kanamycine (ou un autre antibiotique approprié) en tant qu'agent de sélection. D'autres plantules, qui sont transformées avec de 1'ADN cosmidique, peuvent détoxifier l'agent de sélection et survivre. Les plantes de semis qui survivent à la sélection sont transférées au sol et font l'objet d'un essai du phénotype CIM (immunité constitutive). Les plants font l'objet d'une évaluation des différences phénotypiques observables par rapport aux plants de type sauvage. Exemple 35 : évaluation du phénotype CIM dans des plantes transformées par des formes modifiées du NIM1 On récolte une feuille de chaque transformant primaire, on isole l'ARN (Verwoerd et al., 1989, Nuc Acid Res, 2362), et on la soumet à un essai pour déterminer l'expression PR-1 constitutive par une analyse par transfert d'ARN (Uknes et al., 1992). Chaque transformant fait l'objet d'une évaluation de sa réponse en résistance amé- liorée aux maladies, indicatives d'une analyse de l'expression constitutive de la SAR (Uknes et al., 1992). On prépare des suspensions de conidies à 5-10.104 spores/ ml, provenant de 2 isolats compatibles de P. parasitica, Emwa et Noco (c'est-à-dire que ces souches fongiques provoquent une maladie sur les plants de type sauvage, respectivement Ws-0 et Col-O), et les transformants reçoivent une pulvérisation de l'isolat approprié, en fonction de l'écotype du transformant. Les plants inoculés sont incubés en présence d'une forte humidité pendant 7 jours. Les plants font l'objet d'une notation de la maladie le 7ème jour, et une feuille unique est récoltée pour analyse par transfert d'ARN, qui utilise une sonde qui fournit un moyen permettant de mesurer l'infection fongique. Les transformants qui présentent un phénotype CIM sont menés à la génération T1, et les plants homozygotes sont identifiés. Les transformants sont soumis à une bactérie d'essai de résistance aux maladies, tels que décrits ci-dessous. L'infection fongique par Noco et Emwa est répétée, et les feuilles sont colorées au bleu de lactophénol pour identifier la présence d'hyphes fongiques, comme décrit dans Dietrich et al. (1994). Les transformants sont infectés par la bactérie pathogène Pseudomonas syringae DC 3000 pour évaluer le spectre de résistance, qui est mis en évidence comme décrit dans Uknes et al. (1993). Les plants non infectés font l'objet d'une évaluation du SA libre et du SA conjugué au glucose, et les feuilles sont colorées au bleu de lactophénol pour évaluer la présence des lésions microscopiques. Les plants résistant subissent un croisement sexué avec des mutants SAR tels que NahG (brevet US N" 5 614 395) et indri, pour établir la relation épistatique du phénotype de la résistance avec d'autres mutants, et évaluer comment ces mutants dominant-négatifs du NIMl peuvent influer sur la boucle de rétroaction dépendant du SA. Exemple 36 : Isolement d'homologues du NIMl En utilisant en tant que sonde l'ADNc du NIMl (SEQ ID NO:21), des homologues du NIMl d'Arabidopsis sont identifiés par criblage de génothèques ou de banques d'ADNc provenant de différentes cultures, par exemple, mais sans limitation, celles qui sont mentionnées par ailleurs dans l'Exemple 11. Parmi les techniques classiques permettant d'y arriver, on peut citer le criblage par hybridation de banques d'ADN sur plaque (plages ou colonies ; voir par exemple Sambrook et al., Molecular Cloning, eds, Cold Spring Harbor Laboratory Press. (1989)), et l'amplification par PCR en utilisant des amorces oligonucléotidiques (voir par exemple Innis et al., PCR Protocols, a Guide to Methods and Application, eds, Academic Press (1990)). Les homologues identifiés sont envoyés par génie génétique dans les vecteurs d'expression de la présente invention et transformés dans les cultures ci-dessus. Les transformants font l'objet d'une évaluation de leur résistance améliorée aux maladies, par utilisation de micro-organismes pathogènes de la plante de culture faisant l'objet des essais. Les homologues du NIMl dans les génomes du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs et de l'orge sont détectés par analyse par transfert d'ADN. L'ADN génomique est isolé du concombre, de la tomate, du tabac, du maïs, du blé et de l'orge, soumis à une digestion par les enzymes de restriction BamHI, Hindîli, XbaI ou SalI, soumis à séparation électrophorétique sur des gels d'agarose à 0,8 % et transféré sur une membrane en nylon par transfert capillaire. Après réticulation aux UV pour fixer l'ADN, la membrane est hybridée dans des conditions peu stringentes [BSA à 1 % ; NaPO4 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM) à 55"C pendant 18 à 24 heures] à l'aide de l'ADNc du NIM1 d'Arabidopsis thaliana radiomarqué au 32p. Après hybridation, les transferts sont lavés dans des conditions peu stringentes [6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X1) à 55"C ; 1XSSC représente NaCl 0,15 M, citrate de Na 15 mM (pH 7,0)], et on les expose à un film radiographique pour visualiser les bandes qui correspondent à NIMl. En outre, des marqueurs de séquence exprimée (EST), identifiés par analogie avec le gène NIMl, peuvent être utilisés pour isoler des homologues. Par exemple, plusieurs marqueurs de séquences exprimées (EST) du riz ont été identifiées, qui présentent une similitude avec le gène NIMl. Un alignement de séquences multiples est synthétisé par utilisation du Clustal 5 (Higgins, Desmond G. et Paul M. Sharp (1989), Fast and sensitive multiple sequence alignments on a microcomputer, CABIOS 5 : 151153) en tant qu'élément du progiciel Lasergene Biocompu ting Software de DNA* (1228 South Park Street, Madison Wisconsin, 53715) pour Macintosh (1994). Certaines régions de la protéine NIMl sont homologues, pour la séquence d'acides aminés, à 4 produits protéiques d'ADNc différents, dans le riz. Les homologies sont identifiées par utilisation des séquences NIMl dans le cadre d'une recherche BLAST de GenBank. Des comparaisons des régions d'homologie dans NNMl et dans les produits d'ANDc du riz sont présentées sur la Figure 8 (voir aussi les séquences SEQ ID NO:3 et SEQ ID NO:4 à 11). Les fragments de protéine NIM1 présentent de 36 à 48 % de séquences identiques d'acides aminés avec les quatre produits du riz. Ces EST du riz peuvent être spécialement utiles pour isoler des homologues du NIMl d'avec d'autres monocotylédones. Les homologues peuvent être obtenus par amplification PCR. Dans ce procédé, on procède à des comparaisons entre des homologues connus (par exemple le riz et Arabidopsis). Puis on utilise pour fabriquer des amorces pour amplification PCR les régions ayant une grande similitude ou identité avec les acides aminés et 1'ADN. Les régions riches en les résidus d'acides aminés M et en W sont au mieux suivies par des régions riches en les résidus d'acides aminés F, Y, C, H, Q, K et E, car ces acides aminés sont codés par un nombre limité de codons. Une fois qu'une région appropriée a été identifiée, on prépare des amorces pour cette région, avec une diversité de substitutions sur la position du troisième codon. Cette diversité de substitutions sur la troisième position peut être limitée en fonction de l'espèce ciblée. Par exemple, comme le maïs est riche en GC, on met au point des amorces qui utilisent si possible un G ou un C sur la troisiéme position. La réaction d'amplification PCR est réalisée à partir d'ADNc ou d'ADN génomique dans de nombreuses conditions standard. Quand une bande est apparente, on la clone et/ou on la séquence pour déterminer s'il s'agit d'un homologue du NIMl. Exemple 37 : Expression de formes modifiées du NIMl dans les plantes de culture Les produits de synthèse qui confèrent un phénotype CIM aux plants Col-O et Ws-0 sont transformés dans des plantes de culture pour évaluation. Ou bien encore, des gènes NIMl natifs modifiés, isolés de plantes de culture dans l'Exemple ci-dessus, sont ramenés à leurs plantes d'origine. Bien que le gène NIM1 puisse être inséré dans toutes cellules végétales entrant dans ces grandes catégories, il est particulièrement utile dans les cellules végétales des plantes de culture, notamment les suivantes : riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, chou-fleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. Les transformants font l'objet d'une évaluation de l'amélioration de leur résistance aux maladies. Dans une forme de réalisation préférée de l'invention, l'expression de la forme modifiée du gène NIMi s'effectue à un niveau qui est au moins deux fois supérieur au niveau d'expression du gène NIMl natif dans les plants sauvage, et est de préférence 10 fois supérieur au niveau d'expression du type sauvage. Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation ci-dessus décrits et représentés, à partir desquels on pourra prévoir d'autres modes et d'autres formes de réalisation, sans pour autant sortir du cadre de l'invention. BIBLIOGRAPHIE La teneur de chacune des références ci-après est expressément incorporée ici à titre de référence dans la présente description Altschul, S.F., Gish, W., Myers, E.W. & Lipman, D.J. (1990). Basics local alignment search tool. J. Mol. Biol. 215, 403-410. Ausubel, F.M., Brent, R. Kingston, R.E., Moore, D.D. Seidman, J.G. Smith, J.A. et Struhl K. eds (1987). Current Protocols in Molecular Biology. (New York : J. Wiley & Sons). Bechtold N. Ellis, J. & Pelletier, G. (1993). In planta Agrobacterium mediated gene transfer by infiltration of adult Arabidopsis thaliana plants. Comptes Rendus de l'Académie des Sciences de Paris, Série Sciences De La Vie 316, 494-499. Bell C. & Ecker, J. (1994). Assignment of 30 microsatellite loci to the linkage map of Arabidopsis. Genomics 19, 137-144. Bhat K. (1993). Generation of a plasmid vector for deletion cloning by rapid multiple site-directed mutagenesis. Gene 134, 83-87. Bi, Y.M. Kenton, P. Mur, L. Darby R. & Draper, J. (1995). Hydrogen peroxide does not function downstream of salicylic acid in the induction of PR protein expression. Plant J. 8, 235-245. Bowling, S.A. Guo A., Cao, H. Gordon, A.S. Klessig, D.F. & Dong, X.I. (1994). A mutation in Arabidopsis that leads to constitutive expression of systemic acquired resistance. Plant Cell 6, 1845-1857. Cameron R.K., Dixon R.A. & Lamb C.J. (1994). Biologically induced systemic acquired resistance in Arabidopsis thaliana. Plant J. 5, 715-725. Century K.S., Holub E.B. & Staskawicz, B.J. (1995). INDRI, a locus of Arabidopsis thaliana that is required for disease resistance to both a bacterial and a fungal pathogen. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92, 6597-6601. Chio S., Creelman R.J., M. & Wing R. (1995). Construction and characterization of a bacterial artificial chromosome library of Arabidopsis thaliana. Plant Mol. Biol. 13, 124-128. Creusot F., Fouilloux E. Dron, M. Lafleuriel J., Picard, G. Billaut A., Le Paslier D., Cohen D., Chaboute, M.-E., Durr, A., Fleck., J. Gigot, C. Camilleri, C. Bellini, C., Caboche, M. & Bouchez D. (1995). The CICI library : a large insert YAC library for genome mapping in Arabidopsis thaliana. Plant J. 8, 763-770. Delaney, T.P. (1997), Genetic dissection of acquired resistance to disease. Plant Physiology. 113, 5-12. Delaney, T.P., Uknes S., Vernooij, B. Friedrich L., Weymann, K. Negrotto D., Gaffney, T., Gutrella, M., Kessmann, H. Ward, E. & Ryals, J. (1994). A central role of salicylic acid in plant disease resistance. Science 266, 1247-1250. Delaney, T.P., Friedrich L. & Ryals, J.A. (1995). Arabidopsis signal transduction mutant defective in chemicyally and biologically induced disease resistance. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 92, 6602-6606. Dempsey D.A. & Klessig D.F. (1995). Signals in plant disease resistance. Bulletin de l'institut Pasteur 93, 167-186. Dietrich R.A., Delaney T.P., Uknes, S.J. Ward. E.R., Ryals, J.A. & Dangl, J. L. (1994). Arabidopsis mutants simulating disease resistance response. Cell 77, 565-577. Friedrich, L., Lawton K., Ruess, W., Masner, P., Specker, N., Gut Rella, M. Meier, B., Dincher, S., Staub, T., Uknes, S., Metraux, J.-P., Kessmann, H., & Ryals, J. (1996). A benzothiadazole derivative induces systemic acquired resistance in tobacco. The Plant Journal 10(1), 61-70. Elledge, S., Mulligan, J., Ramer, S., Spottswood, M., & Davis, R. (1991). I Yes : A multiunctional cDNA expression vector for the isolation of genes by complementation of yeast and Escherichia. coli mutations. Proc. Natl. Acad. Sci. 88, 1731-1735. Gaffney, T., Friedrich., L., Vernooij, B., Negrotto, D., Nye, G., Uknes, S., Ward, E., Kessmann, H., & Ryals, J. (1993). Requirement of salicylic acid for the induction of systemic acquired resistance. Science 261, 754756. Greenberg, J.T., Guo, A.L., Klessig, D.F., & Ausubel, F.M. (1994). Programmed cell death in plants-a pathogen-triggered response activated coordinately with multiple defense functions. Cell 77, 551-563. Hebsgaard, S., Korning, P., Tolstrup, J., Engelbrecht, J. Rouze, P., & Brunak, S. (1996). Spice site prediction in Arabidopsis thaliana pre-mRNA by combining local and global sequence information. Nucleic Acids Res. 24, 3439-3452. Higgins, D.G. & Sharp, P.M. (1989). Fast and sensitive multiple sequence alignments on a microcomputer. CABRIOS 5, 151-153. Hunt, M., & Ryals, J. (1996). Systemic acquired resistance signal transduction Crit. Rev. in Plant Sci. 15, 583-606. Lawton, K., Uknes, S., Friedrich, L., Gaffney, T., Alexander, D., Goodman, R., Métraux, J.-P., Kessmann, H., Ahl-Goy, P., Gut Rella, M., Ward E. and Ryals, J. (1993). The molecular biology of systemic acquired resistance. In Mechanisms of Defence Responses in Plants B. Fritig and M. Legrand, eds (Dordrecht, The Netherlands : Kluwer Academic Publishers), pp. 422-432. Lawton, K. A. Friedrich, L., Hunt, M. Weymann, K., Delaney, T., Kessmann, H., Staub, T. and Ryals, J. (1996). Benzothiadiazole induces disease resistance in Arabidopsis by activation of the systemic acquired resistance signal transduction pathway. Plant J. 10, 7182. Liu, Y.-G., Mitsukawa, N., Vazquez-tello, A. and Whittier, R. (1995). Generation of a high-quality P1 library of Arabidopsis suitable for chromosome walking. Plant J. 7, 351-358. Maher, E. A., Bate, N. J., Ni, W.T., Elkind, Y., Dixon, R.A., and Lamb, C.J. (1994). Increased disease susceptibility of transgenic tobacco plants with suppressed levels of preformed phenylpropanoid products. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91, 7802-7806. Mauch-Mani, B., & Slusarenko, A.J. (1994). Systemic acquired resistance in Arabidopsis thaliana induced by a predisposing infection with a pathogenic isolate of fusarium oxysporum. Molecular Plant-Microbe Interactions 7, 378-383. Mauch-Mani, B., & Slusarenko, A.J. (1996). Production of salicylic acid precursors is a major function of phenylalanine ammonia-lyase in the resistance of Arabidopsis to Peronospora parasitica. Plant Cell 8, 203-212. Mindrinos, M., Katagiri, F., Yu, G. L., & Ausubel, F. (1994). The Arabidopsis thaliana resistance gene rps2 encodes a protein containing a nucleotide-binding site and leucine-rich repeats. Cell 78, 1089-1099. Pallas, J., Paiva, N., Lamb, C., & Dixon, R. (1996). Tobacco plants epigenetically suppressed in phenylalanine ammonia-lyase expression do not develop systemic acquired resistance in response to infection by tobacco mosaic virus. Plant J. 10, 281-293. Ryals, J.A., Neuenschwander, U.H., Willits, M.G., Molina, A. Steiner, H.-Y., & Hunt, M.D. (1996). Systemic acquired resistance. Plant Cell 8, 1809-1819. Sambrook, J., Fritsch, E.F., & Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning : A laboratory Manual. (Cold Spring Harbor, NY : Cold Spring Harbor Laboratory Press). Shulaev, V., Léon, J., & Raskin, I. (1995). Is salicylic acid a translocated signal of systemic acquired resistance in tobacco. Plant Cell 7, 1691-1701. Uknes, S., Mauch-Mani, B., Moyer, M. Potter, S., Williams, S., Dincher, S., Chandler, D., Slusarenko, A., Ward, E., & Ryals, J. (1992). Acquired resistance in Arabidopsis. Plant Cell 4, 645-656. Uknes, S., Winter, A.M., Delaney, T., Vernooij, B., Morse, A., Friedrich, L., Nye, G., Potter, S., Ward, E;, & Ryals, J. (1993). Biological induction of systemic acquired resistance in Arabidopsis. Mol. Plant-Microbe Interact. 6, 692-698. Vernooij, B., Friedrich, L., Goy, P.A., Staub, T., Kessmann, H. & Ryals, J. (1995). 2,6-dichloroisonicotinic acid-induced resistance to pathogens without the accumulation of salicylic acid. Molecular Plant-Microbe Interactions 8, 228-234. Vernooij, B., Friedrich, L., Morse, A., Reist, R., Kolditz-Jawhar, R., Ward, E., Uknes, S. Kessmann, H. & Ryals, J. (1994). Salicylic acid is not the translocated signal responsible for inducing systemic acquired resistance but is required in signal reduction. Plant Cell 6, 959-965. Vernooij, B., Dekker, M. & Hoekema, A. (1989). A small-scale procedure for the rapid isolation of plant RNAs. Nucleic Acids Res. 17, 2362. Vos, P., Hogers, R., Bleeker, M., Reijans, M., van de Lee, T., Hornes, M., Frijters, A., Pot, J., Pelema, J., Kuiper, M., & Zabeau, M. (1995). AFLP : a new technique for DNA fingerprinting. Nucleic Acids Res. 23, 4407-4414. Ward, E.R., Uknes, S.J., Williams, S.C., Dincher, S.S., Wiederhold, D.L., Alexander, D.C., Ahl-Goy, P., Metraux, J.P. & Ryals, J.A. (1991). Coordinate Gene Activity in Response to Agents That Induce Systemic Acquired Resistance. Plant Cell 3, 1085-1094. Weymann, K., Hunt, M., Uknes, S., Neuenschwander, U., Lawton, K., Steiner, H.-Y., & Ryals, J. (1995). Suppression and restoration of lesion formation in Arabidopsis lsd mutants. Plant Celî 7, 2013-2022. LISTE DES SEQUENCES (1) INFORMATIONS GENERALES : (i) DEMANDEUR: (A) NOM : Novartis AG (B) RUE : Schwarzwaldallee 215 (C) VILLE : Balle (D) PAYS : Suisse (F) CODE POSTAL : 4002 (G) TELEPHONE : +41 61 69 11 11 (H) TELEFAX : +41 61 696 79 76 (I) TELEX : 962 991 (v) FORME POUVANT ETRE LUE PAR L'ORDINATEUR : (A) TYPE DE SUPPORT : disquette (B) ORDINATEUR : IBM PC compatible (C) SYSTEME D'EXPLOITATION : PC-DOS/MS-DOS (D) LOGICIEL : Patentîn Release N 1.0, version N 1.30 (ii) TITRE DE L'INVENTION : PROCEDES D'UTILISATION DU GENE NIM1 POUR CONFERER AUX VEGETAUX UNE RESISTANCE AUX MALADIES (iii) NOMBRE DE SEQUENCES : 39 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:1 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 9919 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADN (génomique) (iii) HYPOTHETIQUE : NON (iv) ANTI-SENS : NON (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:1 TGATCATGAA TTGCGTGTAG GGTTGTGTTT TAAAGATAGG GATGAGCTGA AGAAGGCGGT 60 GGACTGGTGT TCCATTAGAG GGCAGCAAAA GTGTGTAGTA CAAGAGATTG AGAAGGACGA 120 GTATACGTTT AAATGCATCA GATGGAAATG CAATTGGTCG CGTCGGGCAG ATTGAATAGA 180 AGAACATGGA CTTGTTAAGA TAACTAAGTG TAGTTGGTCC ACATACTTGT TGTTCTATTA 240 AGCCGGAAAA CTTCAACTTG TAATTTGCAG CAGAAGAGAT TGAGTGTCTG ATCAGGGTAC 300 AACCCACTCT AACAGCAGAG TTGAAAAGTT TGGTGACATG CTTAAAACTT CAAAGCTGCG 360 GGCAGCAGAA CAGGAAGTAA TCAAAGATCA GAGTTTCAGA GTATTGCCTA AACTAATTGG 420 CTGCATTTCA CTCATCTAAT GGGCTACTTG TGGACTGCAA TATGAGCTTT TCCCTAATCC 480 TGAATTTGCA TCCTTCGGTG GCGCGTTTTG GGCGTTTCCA CAGTCCATTG AAGGGTTTCA 540 ACACTGTAGA CCTCTGATCA TAGTGGATTC AAAAGACTTG AACGGCAAGT ACCCTATGAA 600 ATTGATGATT TCCTCAGGAC TCGACGCTGA TGATTGCTTT TTCCCGCTTG CCTTTCCGCT 660 TACCAAAGAA GTGTCCACTG ATAGTTGGCG TTGGTTTCTC ACTAATATCA GAGAGAAGGT 720 AACACAAAGG AAAGACGTTT GCCTCGTCTC CAGTCCTCAC CCGGACATAG TTGCTGTTAT 780 TAACGAACCC GGATCACTGT GGCAAGAACC TTGGGTCTAT CACAGGTTCT GTCTGGATTG 840 TTTTTGCTTA CAATTCCATG ATATTTTTGG AGACTACAAC CTGGTGAGCC TTGTGAAGCA 900 GGCTGGATCC ACAAGTCAGA AGGAAGAATT TGATTCCTAC ATAAAGGACA TCAAAAAGAA 960 GGACTCAGAA GCTCGGAAAT GGTTAGCCCA ATTCCCTCAA AATCAGTGGG CTCTGGCTCA 1020 TGACCAGTGG TCGGAGATAT GGAGTCATGA CGATAGAAAC AGAAGATTTG AGGGCAATTT 1080 GTGAAAGCTT TCAGTCTCTT GGTCTATCAG TGACAGCGAA CGCACCTGCA CATGTGGGAA 1140 GTTTCAATCG AAGAAGTTTC CATGTATGCA CCCAGAAATG GTGCAAAGGA TTGTTAACTT 1200 GTGTCATTCA CAAATGTTGG ATGCAATGGA GCTGACTAGG AGAATGCACC TTACACGCCC 1260 ACTCAGTCTT CTCTTATCTC TAGACCTGAA ACTAACTTCC TGTGTAATTC GAGTTACAAA 1320 AGGTTAAAGG AAGAATTAGG AAGATACATA TAACATGAAT GTTGCCAGAA GTTCAGGGAA 1380 CTTGAATATT CTTTTGGTTC TTGGTGGAAA ATATCCAACA GATGAACAAT TTGACATTAT 1440 TTCACACTTT GATTCTAGCA ACTCTGTAAC ACCATCATGG GTTATTGTTG ATGTACATAA 1500 ATATATATTA CAAATCTGTA TACCATTGGT TCAAATTGTT ACAACATTTG TTTGAAGCAC 1560 ACCTGCAGCA ATAATACACA GGATGCAAAA CGAAGAGCGA AACTATATGA CGCCAACGAT 1620 AGACATAAAC AGTTACAGTC ATCATGAAAA CAGAATTATA TGGTACAGCA AAAATTACAC 1680 TAAGAGGCAA GAGTCTCACC GACGACGATG AGAGAGTTTA CGGTTAGACC TCTTTCCACC 1740 GGTTGATTTC GATGTGGAAG AAGTCGAATC TGTCAGGGAC GAATTTCCTA ATTCCAAATT 1800 GTCCTCACTA AAGGCCTTCT TTAGTGTCTC TTGTATTTCC ATGTACCTTT GCTTCTTTTG 1860 TAGTCGTTTC TCAGCAGTGT CGTCTTCTCC GCAAGCCAGT TGAGTCAAGT CCTCACAGTT 1920 CATAATCTGG TCGAGCACTG CCGAACAGCG CGGGAAGAAT CGTTTCCCGA GTTCCACTGA 1980 TGATAAAAAA AACAAGGTCA GACAGCAAGT AACAAAACCA TGTTTAAAGA TCATTTAGTT 2040 TTGTTTTTTG TGATAAGGAG TCCGATGAAG TGGGTGAGAA TCCATACCGG TTTTAGAAAG 2100 CGCTTTTAGT CTACTTTGAT GCTCTTCTAG GATTCTGAAA GGTGCTATCT TTACACCCGG 2160 TGATGTTCTC TTCGTACCAG TGAGACGGTC AGGCTCCAGG CTAGTCACTA TGAACTCACA 2220 TGTTCCCTTC ATTTCGGCGA TCTCCATTGC AGCTTGTGCT TCCGTTGGAA AAAGACGTTG 2280 AGCAAGTGCA ACTAAACAGT GGACGACACA AAGAATAGTT ATCATTAGTT CACTCAGTTT 2340 CCTAATAGAG AGGACATAAA TTTAATTCAA ACATATAAGA AATAAGACTT GATAGATACC 2400 TCTATTTTCA AGATCGAGCA GCGTCATCTT CAATTCATCG GCCGCCACTG CAAAAGAGGG 2460 AGGAACATCT CTAGGAATTT GTTCTCGTTT GTCTTCTTGC TCTAGTATTT CTACACATAG 2520 TCGGCCTTTG AGAGAATGCT TGCATTGCTC CGGGATATTA TTACATTCAA CCGCCATAGT 2580 GGCTTGTTTT GCGATCATGA GTGCGGTTCT ACCTTCCAAA GTTGCTTCTG ATGCACTTGC 2640 ACCTTTTTCC AATAGAGATA GTATCAATTG TGGCTCCTTC CGCATCGCAC CAACATGAAG 2700 CACCGTATAT CCCCTCGGAT TCCTATGGTT GACATCGGCA AGATCAAGTT TTAAAAGATC 2760 TGTTGCGGTC TTCACATTGC AATATGCAAC AGCGAAATGA AGAGCACACG CATCATCTAG 2820 ATTGGTGTGA TCCTCTTTCA AAAGCAACTT GACTAACTCA ATATCATCCG AGTCAAGTGC 2880 CTTATGTACA TTCGAGACAT GTTTCTTTAC TTTAGGTACC TCCAAACCAA GCTCTTTACG 2940 TCTATCAATT ATCTCTTTAA CAAGCTCTTC CGGCAATGAC TTTTCAAGAC TAACCATATC 3000 TACATTAGAC TTGACAATAA TCTCTTTACA TCTATCCAAT AGCTTCATAC AAGCTTTACC 3060 ACATATATTA GCAAGCTTGA GTATAACCAA TGTGTCCTCT ATAACAACTT TGTCTACAAC 3120 GTCCAATAAG TGCCTCTGAA ATACAAATAC AAGTACTCAA GTAAGAACAT ATTCATGAAT 3180 GTGTAACCAT AGCTTAATGC AGATGGTGTT TTACCTGATA GAGAGTAATT AATTCAGGGA 3240 TCTTGAAGAT GAAAGCCAAA TAGAGAACCT CCAACATGAA ATCCACCGCC GGCCGGCAAG 3300 CCACGTGGCA GCAATTCTCG TCTGCGCATT CAGAAACTCC TTTAGGCGGC GGTCTCACTC 3360 TGCTGCTGTA AACATAAGCC AAAACAGTCA CAACCGAATC GAAACCGACT TCGTAATCCT 3420 TGGCAATCTC CTTAAGCTCG AGCTTCACGG CGGCGGTGTT GTTGGAGTCT TTCTCCTTCT 3480 TAGCGGCGGC TAAAGCGCTC TTGAAGAAAG AGCTTCTCGC TGACAAAACG CACCGGTGGA 3540 AAGAAACTTC CCGGCCGTCG GAGAGAACAA GCTTAGCGTC GCTGTAGAAA TCATCCGGCG 3600 AGTCAAAGAC GGATTCGAAG CTGTTGGAGA GCAATTGCAG AGCAGATACA TCAGGTCCGG 3660 TGAGTACTTG TTCGGCGGCC AGATAAACAA TAGAGGAGTC GGTGTTATCG GTAGCGACGA 3720 AACTAGTGCT GCTGATTTCA TAAGAATCGG CGAATCCATC AATGGTGGTG TCCATCAACA 3780 GGTTCCGATG AATTGAAATT CACAAATTAA AGAGATCTCT GCTAATCAAC GAAGAGACCT 3840 TATCAACTGG ATTTGGTTAA AGATCGAAGA TAACCATTGA CGAGCAGAGC CAAGTCAAGT 3900 CAACGAGAGT GGTGGTGAGA TATGAAGAAG CATCCTCGTC CCACGGTTTA CATTTCACCA 3960 AAACCGGTAA ATTTCCAGGA AAGGAATCTT TGTCAGAGAT CTTTTTTAAA AAGATATAAC 4020 AGGAAGCTAA ACCGGTTCGG GTTATAAATG TTAGTATTTA TACCGGAGAC ATTTTGTGTT 4080 GCTAATTTTT GTATATGAGA AGTTCAATCC GGTTCGGTAA GCCCCTGAAC CAAACTAGAT 4140 TTGGAGATGA TATAAATATA TAAAATTTAT TTTTCATCCG GTTCGTTATT TTCATATAAA 4200 TATATAAATA TTATTTTTTA AATTTAAGAA TTAGATTTAC ATGTGAAAGT TACATTTCTG 4260 TTTATTTTCT TTGAAGTAAA ATGATAAAGG GAACGTATAT TAAGTTTCAT GCTTTATTCA 4320 CATAAGTTTT GTAATGTATA TTATATTTTT CGTTTATTGA AAAAGTAATT TTCAGTGTTC 4380 AGCATGTTTA CACTATAATT AAATCAAGTC GAATATTTCC TGGAACTATT CTCCTTGTTC 4440 TATAGCAAAT GAAAACGCTC TTCACAACAA AATCATTATA GATATAGGAA TAAATTACAT 4500 TAAAAACATG AAAGTCATAA TGAATATATT TTTTTAATTA GGATTTGATT TAAAAACAAT 4560 TATTGTATAC ATATAAAAGA CTTCTTTAGT TATTTGCCTT CAACTTCTCG TTCTGAATCA 4620 TGCGATAAAT CAGCTTTTTC AATAACTACG ACGTAAAAGC AAATTCATAA CACGTCTAAA 4680 CAAATTTGGC TCATCCTTCA CTTGATTGGT GTTTTCCGGA CTCGATGTTG CTGGAAACTG 4740 AGAAGAAGAA GGAATCTGCA TAATCACCTC TTGGTTCCTC ACCGGTAGAC TCATTTTGTT 4800 GGATCGAAAA CGATCGAGAT CAGAAAATGA AAAGATAGGT TAAAGATGCC TATGAATACA 4860 ACAACGTAAG ATTATGTTGA ATAAACAGAG TACTTTATAT AGGAGTTATA ATAAGGTAAA 4920 TAAATTATTG CTTTCCGCGT TTTTTACTTT TGTATTTCTT AAATGATAAG TTAAATTAGG 4980 ATAAGATTTG TATGATTTTA AGTAAATTTA CAATAACTCT CTATAACTCA ATAGCATCAC 5040 ATATTTAATT AATTTTACTA ATTATCTTTT GAACAATTTT ATGAAATAGT TTTCTTTTAA 5100 TTAATTTTTT AAAATGATAT ATTATAAAAT TTAATTGAAT CAATCTGATA TAATTTTTTT 5160 ATCTTCTACC ATCTATTATA GTTGATAAAT ATTGTGATAA ACTTTAGATA AACACCCAAT 5220 TGCCAAATAT TTAATAAATT TTGTGTACCA TGCGTTTTTT TTGGAGAATA TATATACGTG 5280 GACAGCATAC CGTACATATA TTGTATAAAA GCTTATAAAA CATAGATACG GGTTATATTG 5340 GTAAGCTATA AATATATGTA AACAATAGTA AGATATTACG TGTTGTGTCT AAATATGTGT 5400 TGCTTTAGAT ATTATGTATA TCTAATATAT TAAAATATCT TTTATTAACT AATATATTAT 5460 TTAAGAGAGA AAATTGGGAC ACTATTTTCT ATACAGTAAC TGTTTTCAAC TATAAACAGG 5520 AACCCTTGAT ATAATAAAAT AACTAGCCAA AAAATCAGAT TAAATATTCA TAAAACAATG 5580 TTTGGTATTA TTACATAAAC CTAAGAAACA AAATTCAATA TTCCTTTTTA CCTTATAAAA 5640 AACAATTAAA CATCACTAGA TATATTTATG CCCCACAATG AGCGAGCCAA TTGAGACTTG 5700 AGACTTGAGA TCCTTGTCAA CTACGTTTGC ATTTGTCGGC CCATTTTTTT TATTTTTTTT 5760 TTAAAGTGTC GGCCCGTTGT TTCTTCCGTT CAGATCAACC CTCTCGTAAT CAGAACAAAA 5820 CGGAAAACAA ACGAAAGAAC AATCAGATCC CTCTTTTTTT GCATAAACTA AATTCAACTT 5880 CTCTGCGTTT ATGTTGTAGA GGCAACCACG ATCACTACTA CGAAACAATA CAACGTCGTT 5940 GCTTGGAGTC CACGTAATCA AATCTACTCC AATGCTTTTA ATATCTTTCA CTTTAACCCA 6000 CGACTTTTCA AAACTGCTCT TTAAAACCCA TAACTCGTGA ACATCTTCTT GATCTTTGTT 6060 TGTCCACTGA CGAATAGCAC CTAGCTTCCC TTCGTATCTG ACTAATCCTG AGAAAACATC 6120 AGAGTTCGGA GTATGGAAGA AGGACCAAGT TTCGGTTTTG AGACAAAACC GGATCACATT 6180 GTTGTTCCGT GATATCCAAT GCAAGAACCC CGAAACTTGT ATCGGGTTGG AAAAAATTAA 6240 TCTGTCTGTT TTTGGTAGAC GCAAATTTTC TAATCTCTTC CAGGTAAACG AATCAGAATC 6300 GAAAACTTCG CACATAAAAG TTCTGTGATT CAAATGGTAG ATACCCCGAG ACATACACAT 6360 ACGCCGAGAC TGCGAAAGCC TTTGTATTTT ATACCGGAAA GGGTTCAATC CGATTACCGC 6420 TAAACCCAAT GACATATCCC AACCCTTCAC TTCTGGCTTT GGTATGACCT GATACTGTTT 6480 AGTGGTTGGT TTGAAGACTA TGTATCCACG TGATGGTTTT GTATACTTAA CACAAAGCAA 6540 TATCCCATGA CTTGCATCAC AAGCTTCGAT CTTTATCATT CCGGGTGGCA GAAAGTCGAT 6600 GGAGACTCCA TTGTTTTGTA AATCACTCCT CTCATGGACA AAACTGGTTC GAAGTTCGTG 6660 TCCTTTTACT ATGTAGTGTT GTATGAAGTA TCCCGAAATA CGATTGGTTC TAAGGAGATT 6720 AAGATTGACA AACCATGACT CGTAGCTTCT CTTGTTGCAC TCTTTATTCA GGAGCCTGAA 6780 TTTTCCGATT TTTGACGCCG GAAGATAAGA AAGAAATTCT TGGATCATGT CTTGATTTAT 6840 CACCGGAGAA CTCATGATCC TGTCGGGAAT AAAGAGATGA GCACGATCAC TGAATGAGAA 6900 ATGAAAAAAT CAGGATCGGT AGAGAACAAC TTATGATGAA TAAAGTGTTT ATATATCCTT 6960 TCTTTGTTTA AGGAAAGTAT CAAAATTTGC CTTTTTCTTC GCTAGTCCTA AAACAAACAA 7020 ATTAACCAAA AGATAAAATC TTTCATGATT AATGTTACTT GTGATACCTT AAGCCAAAAC 7080 TTTATCTTTA GACTTTTAAC CAAATCTACA GTAATTTAAT TGCTAGACTT AGGAAACAAC 7140 TTTTTTTTTT ACCCAACAAT CTTTGGATTT TAATTGTTTT TTTTTCTACT AATAGATTAA 7200 CAACTCATTA TATAATAATO TTTCTATCAT AATTGACAAT TCTTTCTTTT TAATAAACAT 7260 CCAGCTTGTA TAATAATCCA CAAGTCAATT TCACCATTTT GGCCAATTTA TTTTCTTATA 7320 AAAATTAGCA CAAAAAAGAT TATCATTGTT TAGCAGATTT AATTTCTAAT TAACTTACGT 7380 AATTTCCATT TTCCATAGAT TTATCTTTCT TTTTATTTCC TTAGTTATCT TAGTACTTTC 7440 TTAGTTTCCT TAGTAATTTT AAATTTTAAG ATAATATATT GAAATTAAAA GAAGAAAAAA 7500 AACTCTAGTT ATACTTTTGT TAAATGTTTC ATCACACTAA CTAATAATTT TTTTTAGTTA 7560 AATTACAATA TATAAACACT GAAGAAAGTT TTTGGCCCAC ACTTTTTTCO GATCAATTAG 7620 TACTATAGTT AGGGGAAGAT TCTGATTTAA AGGATACCAA AAATGACTAG TTAGGACATG 7680 AATGAAAACT TATAATCTCA ATAACATACA TACGTGTTAC TGAACAATAG TAACATCTTA 7740 CGTGTTTTGT CCATATATTT GTTGCTTATA AATATATTCA TATAACAATG TTTGCATTAA 7800 GCTTTTAAGA AGCACAAAAC CATATAACAA AATTAAATAT TCCTATCCCT ACCAAAAAAA 7860 AAAATTAAAT ATTCCTACAG CCT ACCGTCTGTT CTCGGTAGAC GCAAATTTTT TAATCTCTTC CACATAAACG AATCGGAATC 8460 AAAAACTTCG CACGCAAAAG TTCTGAGATT CCGAGTCATA CCAGGCGATT TCGAAAGCCT 8520 AAATATTTTA TACCGGAAAG GCTGCAATCC GGTTACCGTT AGACCTAATG ACTTATCACA 8580 ACTCCTCACT TTTGGGTTTG GTATGATCTG ATACTGTTTT GTTGTTGGTT TGCAGACTAT 8640 GTATTCCGGT ATTGGTCTTG TATCATTATA ACAAAGCAAT ATCCCATGAC GTGCATCACA 8700 AGCTTTGATC TTTACCTCTC CTTGTGGCAG AAAATCGATG GAGACTCCTT TGTTATCCAA 8760 ATCTCTCCTC TCATGGAAAA AACTGGTATC AAGTTTGTAT CCTCTTTCGT AGCGTTCTAG 8820 GAAGTATCCA GAGATATTGT TGGTTCGATG GAGATTTAGG TTGACAAACC AAGACTCGTA 8880 GCTTCTCTTG TTGCACTCTT TATTGATGAG CCTCAATTTT CCGATTTCGG ACCCCCGAAG 8940 ATAAGAAAGA ACCTCTTGGA TCGTGTCCTG ATTTATCACC GGAGAACTCA TGATCTTATT 9000 GGAAAAAAGA AAGAAAGAGA TGAGCACGAT CAGTGAATGA GATATATAGA AATCAGGATT 9060 GGTAGAGAAC CGACGATGAT GAATATACAA GTGTTTATAA GTATCACAAA TTGCCTTTTT 9120 CTTCGCTAGT CCCAAAACAA GCAAATTAAC CAAAGATAAA ATCTTCATTA ATGTTTTCCT 9180 TTTTCTTCGC CAGTCCCAGA TAAAAATATA TATAAAATAT TTCATTAGGT TACTTGTAGT 9240 ACCTTGAGCC CAAAGTTTCT CTTTTGACTT TTAACCAAAT TAACAGTAAT TTAATAGCTA 9300 GACTTAGAAA ACAACATTTT GTATATATAT TCTTTGACAT CAAAATTCAA CAATCTTTGG 9360 GTTTCTATAG TGTTTTTTTT CTTATTCTAA TAGATTACCA CTCATTATAT CATATACAAA 9420 GTGTTTCCTT TTCAATCAAC ATCCATTTTC TTTAAAAATT AGCAAGTTTG TTCTTATATC 9480 ATCATTCAGC AGATTTCTTA ATTAAACTTA GTGATTTCCA TTTTGCACCT ATATGTTTCT 9540 CTTTCTTAGT TTAGTACTTT AAATTTTCAT ATATATAATT TATTAAAATT AAAAGTAAAA 9600 ACTCCAGTTT AACTTATGTT AAATGTTTCA TCACACTAAA AGAGCATTAA GTAATAAATA 9660 TTTTAGCTTT ATGAAAAAAA ATATCAAATC ACTGAAGACA TTTGTTGGCC TATACTCTAT 9720 TTTTTATTTG GCCAATTAGT AATAGACTAA TAGTAACTCA TATGATATCT CTCTAATTCT 9780 GGCGAAACGA ATATTCTGAT TCTAAAGATA GTAAAAATGA ATTTTGATGA AGGGAATACT 9640 ATTTCACACA CCTAGAAAGA GTAAGGTAGA AACCTTTTTT TTTTTGGTCA GATTCTTGTA 9900 TCAAGAAGTT CTCATCGAT 9919 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:2 : (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 5655 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADN (génomique) (iii) HYPOTHETIQUE : NON (iv) ANTI-SENS : NON (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : exon (B) LOCALISATION : 2787..3347 (D) AUTRES INFORMATIONS : /produit 3 "1er exon du NIM1" (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : exon (B) LOCALISATION : 3427..4162 (D) AUTRES INFORMATIONS : /produit = "2@@e exon du NIM1" (ix) PARTICULARITE (A) NOMICLE : exon (B) LOCALISATION : 4271.. 4474 (D) AUTRES INFORMATIONS : /produit = "3@me exon du NIM1" (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : exon (@) LOCALISATION : 4566.. 4666 (D) AUTRES INFORMATIONS : /produit = "4 exon du NIM1" (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : CDS (B) LOCALISATION : join (2787..3347, 3427.. 4162, 4271.. 4474, 4566.. 4866) (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:2 TGTGATGCAA GTCATGGGAT ATTGCTTTGT GTTAAGTATA CAAAACCATC ACGTGGATAC 60 ATAGTCTTCA AACCAACCAC TAAACAGTAT CAGGTCATAC CAAAGCCAGA AGTGAAGGGT 120 TGGGATATGT CATTGGGTTT AGCGGTAATC GGATTGAACC CTTTCCGGTA TAAAATACAA 180 AGGCTTTCGC AGTCTCGGCG TATGTGTATG TCTCGGGGTA TCTACCATTT GAATCACAGA 240 ACTTTTATGT GCGAAGTTTT CGATTCTGAT TCGTTTACCT GGAAGAGATT AGAAAATTTG 300 CGTCTACCAA AAACAGACAG ATTAATTTTT TCCAACCCGA TACAAGTTTC GGGGTTCTTG 360 CATTGGATAT CACGGAACAA CAATGTGATC CGGTTTTGTC TCAAAACCGA AACTTGGTCC 420 TTCTTCCATA CTCCGAACTC TGATGTTTTC TCAGGATTAG TCAGATACGA AGGGAAGCTA 480 GGTGCTATTC GTCAGTGGAC AAACAAAGAT CAAGAAGATG TTCACGAGTT ATGGGTTTTA 540 AAGAGCAGTT TTGAAAAGTC GTGGGTTAAA GTGAAAGATA TTAAAAGCAT TGGAGTAGAT 600 TTGATTACGT GGACTCCAAG CAACGACGTT GTATTGTTTC GTAGTAGTGA TCGTGGTTGC 660 CTCTACAACA TAAACGCAGA GAAGTTGAAT TTAGTTTATG CAAAAAAAGA GGGATCTGAT 720 TGTTCTTTCG TTTGTTTTCC GTTTTGTTCT GATTACGAGA GGGTTGATCT GAACGGAAGA 780 AGCAACGGGC CGACACTTTA AAAAAAAAAT AAAAAAAATG GGCCGACAAA TGCAAACGTA 840 GTTGACAAGG ATCTCAAGTC TCAAGTCTCA ATTGGCTCGC TCATTGTGGG GCATAAATAT 900 ATCTAGTGAT GTTTAATTGT TTTTTATAAG GTAAAAAGGA ATATTGAATT TTGTTTCTTA 960 GGTTTATGTA ATAATACCAA ACATTGTTTT ATGAATATTT AATCTGATTT TTTGGCTAGT 1020 TATTTTATTA TATCAAGGGT TCCTGTTTAT AGTTGAAAAC AGTTACTGTA TAGAAAATAG 1080 TGTCCCAATT TTCTCTCTTA AATAATATAT TAGTTAATAA AAGATATTTT AATATATTAG 1140 ATATACATAA TATCTAAAGC AACACATATT TAGACACAAC ACGTAATATC TTACTATTGT 1200 TTACATATAT TTATAGCTTA CCAATATAAC CCGTATCTAT GTTTTATAAG CTTTTATACA 1260 ATATATGTAC GGTATGCTGT CCACGTATAT ATATTCTCCA AAAAAAACGC ATGGTACACA 1320 AAATTTATTA AATATTTGGC AATTGGGTGT TTATCTAAAG TTTATCACAA TATTTATCAA 1380 CTATAATAGA TGGTAGAAGA TAAAAAAATT ATATCAGATT GATTCAATTA AATTTTATAA 1440 TATATCATTT TAAAAAATTA ATTAAAAGAA AACTATTTCA TAAAATTGTT CAAAAOATAA 1500 TTAGTAAAAT TAATTAAATA TGTGATGCTA TTGAGTTATA GAGAGTTATT GTAAATTTAC 1560 TTAAAATCAT ACAAATCTTA TCCTAATTTA ACTTATCATT TAAGAAATAC AAAAGTAAAA 1620 AACGCGGAAA GCAATAATTT ATTTACCTTA TTATAACTCC TATATAAAOT ACTCTGTTTA 1680 TTCAACATAA TCTTACGTTG TTGTATTCAT AGGCATCTTT AACCTATCTT TTCATTTTCT 1740 GATCTCGATC GTTTTCGATC CAACAAAATG AGTCTACCGO TGAGGAACCA AGAGGTGATT 1800 ATGCAGATTC CTTCTTCTTC TCAGTTTCCA GCAACATCGA GTCCGGAAAA CACCAATCAA 1860 GTGAAGGATG AGCCAAATTT GTTTAGACGT GTTATGAATT TGCTTTTAGG TCGTAGTTAT 1920 TGAAAAAGCT GATTTATCGC ATGATTCAGA ACGAGAAGTT GAAGGCAAAT AACTAAAGAA 1980 GTCTTTTATA TGTATACAAT AATTGTTTTT AAATCAAATC CTAATTAAAA AAATATATTC 2040 ATTATGACTT TCATGTTTTT AATGTAATTT ATTCCTATAT CTATAATGAT TTTGTTGTGA 2100 AGAGCGTTTT CATTTGCTAT AGAACAAGGA GAATAGTTCC AGGAAATATT CGACTTGATT 2160 TAATTATAGT GTAAACATGC TGAACACTGA AAATTACTTT TTCAATAAAC GAAAAATATA 2220 ATATACATTA CAAAACTTAT GTGAATAAAG CATGAAACTT AATATACGTT CCCTTTATCA 2280 TTTTACTTCA AAGAAAATAA ACAGAAATGT AACTTTCACA TGTAAATCTA ATTCTTAAAT 2340 TTAAAAAATA ATATTTATAT ATTTATATGA AAATAACGAA CCGGATGAAA AATAAATTTT 2400 ATATATTTAT ATCATCTCCA AATCTAGTTT GGTTCAGGGG CTTACCGAAC CGGATTGAAC 2460 TTCTCATATA CAAAAATTAG CAACACAAAA TGTCTCCGGT ATAAATACTA ACATTTATAA 2520 CCCGAACCGG TTTAGCTTCC TGTTATATCT TTTTAAAAAA GATCTCTGAC AAAGATTCCT 2580 TTCCTGGAAA TTTACCGGTT TTGGTGAAAT GTAAACCGTG GGACGAGGAT GCTTCTTCAT 2640 ATCTCACCAC CACTCTCGTT CACTTGACTT GGCTCTGCTC GTCAATGGTT ATCTTCGATC 2700 TTTAACCAAA TCCAGTTGAT AAGGTCTCTT CGTTGATTAG CAGAGATCTC TTTAATTTGT 2760 CAATTTCAAT TCATCGGAAC CTGTTG ATG GAC ACC ACC ATT GAT GGA TTC GCC 2813 Met Asp Thr Thr Ile Asp Gly Phe Ala 1 5 GAT TCT TAT GAA ATC AGC AGC ACT AGT TTC GTC GCT ACC GAT AAC ACC 2861 Asp Ser Tyr Glu Ile Ser Ser Thr Ser Phe Val Ala Thr Asp Asn Thr 10 15 20 25 GAC TCC TCT ATT GTT TAT CTG GCC GCC GAA CAA GTA CTC ACC GGA CCT 2909 Asp Ser Ser Ile Val Tyr Leu Ala Ala Glu Gln Val Leu Thr Gly Pro 30 35 40 GAT GTA TCT GCT CTG CAA TTC CTC TCC AAC AGC TTC GAA TCC GTC TTT 2957 Asp Val Ser Ala Leu Gln Leu Leu Ser Asn Ser Phe Glu Ser Val Phe 45 50 55 GAC TCG CCG GAT GAT TTC TAC AGC GAC GCT AAG CTT CTT CTC TCC GAC 3005 Asp Ser Pro Asp Asp Phe Tyr Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ser Asp 60 65 70 GGC CGG GAA GTT TCT TTC CAC CGG TGC GTT TTG TCA GCG AGA AGC TCT 3053 Gly Arg Glu Val Ser Phe His Arg Cys Val Leu Ser Ala Arg Ser Ser 75 80 85 TTC TTC AAC AGC GCT TTA GCC GCC GCT AAC AAC GAG AAA GAC TCC AAC 3101 Phe Phe Lys Ser Ala Leu Ala Ala Ala Lys Lys Glu Lys Asp Ser Asn 90 95 100 105 AAC ACC GCC GCC GTG AAG CTC GAG CTT AAC GAG ATT GCC AAC GAT TAC 3149 Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu Glu Leu Lys Glu Ile Ala Lys Asp Tyr 110 115 120 GAA GTC GGT TTC GAT TCC GTT GTG ACT GTT TTG GCT TAT GTT TAC AGC 3197 Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser 125 130 135 AGC AGA GTG AGA CCG CCG CCT AAA GGA GTT TCT GAA TGC GCA GAC GAG 3245 Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser Glu Cys Ala Asp Glu 140 145 150 AAT TGC TGC CAC GTG GCT TGC CGC CCG GCG GTG GAT TTC ATG TTG GAG 3293 Asn Cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Glu 155 160 165 GTT CTC TAT TTG GCT TTC ATC TTC AAC ATC CCT GAA TTA ATT ACT CTC 3341 Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro Glu Leu Ile Thr Leu 170 175 180 185 TAT CAG GTAAAACACC ATCTGCATTA AGCTATGGTT ACACATTCAT GAATATGTTC 3397 Tyr Gln TTACTTGAGT ACTTGTATTT GTATTTCAG AGG CAC TTA TTC GAC GTT GTA GAC 3450 Arg His Leu Leu Asp Val Val Asp 190 195 AAA GTT GTT ATA GAG GAC ACA TTG GTT ATA CTC AAC CTT GCT AAT ATA 3498 Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile 200 205 210 TGT GGT AAA GCT TCT ATG AAC CTA TTG GAT AGA TGT AAA GAG ATT ATT 3546 Cys Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile 215 220 225 GTC AAC TCT AAT GTA GAT ATG GTT AGT CTT GAA AAC TCA TTG CCG GAA 3594 Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu 230 235 240 GAG CTT GTT AAA GAG ATA ATT GAT AGA CGT AAA GAG CTT GGT TTG GAG 3642 Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu 245 250 255 GTA CCT AAA GTA AAG AAA CAT GTC TCG AAT GTA CAT AAG GCA CTT GAC 3690 Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys Ala Leu Asp 260 265 270 275 TCG GAT GAT ATT GAG TTA GTC AAG TTG CTT TTG AAA GAG GAT CAC ACC 3738 Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu Asp His Thr 280 285 290 AAT CTA GAT GAT GCC TCT GCT CTT CAT TTC GCT GTT GCA TAT TGC AAT 3786 Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn 295 300 305 GTG AAC ACC GCA ACA GAT CTT TTA AAA CTT GAT CTT CCC GAT GTC AAC 3834 Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn 310 315 320 CAT AGG AAT CCG AGG GGA TAT ACG GTG CTT CAT GTT GCT CCC ATG CGG 3882 His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg 325 330 335 AAG GAG CCA CAA TTG ATA CTA TCT CTA TTG GAA AAA GGT GCA AGT GCA 3930 Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala 340 345 350 355 TCA GAA GCA ACT TTG GAA GGT AGA ACC GCA CTC ATG ATC GCA AAA CAA 3978 Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln 360 365 370 GCC ACT ATG CCC GTT GAA TGT AAT AAT ATC CCG GAG CAA TGC AAG CAT 4026 Ala Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn Ile Pro Glu Gln Cys Lys His 375 380 385 TCT CTC AAA GGC CCA CTA TGT GTA GAA ATA CTA GAG CAA GAA GAC AAA 4074 Ser Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys 390 395 400 CCA GAA CAA ATT CCT AGA GAT GTT CCT CCC TCT TTT GCA GTG GCG GCC 4122 Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala 405 410 415 GAT GAA TTG AAC ATG ACG CTC CTC GAT CTT GAA AAT AGA G 4162 Asp Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp Leu Glu Asn Arg 420 425 430 GTATCTATCA AGTCTTATTT CTTATATGTT TGAATTAAAT TTATGTCCTC TCTATTAGGA 4222 AACTGAGTGA ACTAATGATA ACTATTCTTT GTGTCGTCCA CTGTTTAG TT GCA CTT 4278 Val Ala Leu 435 GCT CAA CGT CTT TTT CCA ACG GAA GCA CAA GCT GCA ATG GAG ATC GCC 4326 Ala Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala Gln Ala Ala Met Glu Ile Ala 440 445 450 GAA ATG AAC GGA ACA TGT GAG TTC ATA GTG ACT AGC CTC GAG CCT GAC 4374 Glu Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile Val Thr Ser Leu Glu Pro Asp 455 460 465 CGT CTC ACT GGT ACG AAC AGA ACA TCA CCG GGT GTA AAG ATA GCA CCT 4422 Arg Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser Pro Gly Val Lys Ile Ala Pro 470 475 480 TTC AGA ATC CTA GAA GAG CAT CAA AGT AGA CTA AAA GCG CTT TCT AAA 4470 Phe Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser Arg Leu Lys Ala Leu Ser Lys 485 490 495 ACC G GTATGGATTC TCACCCACTT CATCGGACTC CTTATCACAA AAAACAAAAC 4524 Thr 500 TAAATGATCT TTAAACATGG TTTTGTTACT TGCTGTCTGA CCTTGTTTTT TTTATCATCA 4584 G TG GAA CTC GGG AAA CGA TTC TTC CCG CCC TGT TCG GCA GTG CTC 4629 Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser Ala Val Leu 505 510 515 GAC CAG ATT ATG AAC TCT GAG GAC TTC ACT CAA CTC GCT TGC GGA GAA 4677 Asp Gln Ile Met Asn Cys Glu Asp Leu Thr Gln Leu Ala Cys Gly Glu 520 525 530 GAC GAC ACT GCT GAG AAA CGA CTA CAA AAC AAC CAA AGG TAC ATG GAA 4725 Asp Asp Thr Ala Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg Tyr Met Glu 535 540 545 ATA CAA GAG ACA CTA AAG AAG GCC TTT AGT GAG GAC AAT TTG GAA TTA 4773 Ile Gln Glu Thr Leu Lys Lys Ala Phe Ser Glu Asp Asn Leu Glu Leu 550 555 560 GGA AAT TCC TCC CTG ACA GAT TCG ACT TCT TCC ACA TCG AAA TCA ACC 4821 Gly Asn Ser Ser Leu Thr Asp Ser Thr Ser Ser Thr Ser Lys Ser Thr 565 570 575 GGT CGA AAG AGG TCT AAC CGT AAA CTC TCT CAT CGT CGT CGC TCA 4866 Gly Gly Lys Arg Ser Asn Arg Lys Leu Ser His Arg Arg Arg 580 585 590 GACTCTTGCC TCTTAGTGTA ATTTTTGCTG TACCATATAA TTCTGTTTTC ATGATGACTG 4926 TAACTGTTTA TGTCTATCGT TGGCGTCATA TAGTTTCGCT CTTCGTTTTG CATCCTGTGT 4986 ATTATTGCTG CAGGTGTGCT TCAAACAAAT GTTGTAACAA TTTGAACCAA TGGTATACAG 5046 ATTTGTAATA TATATTTATG TACATCAACA ATAACCCATG ATGGTGTTAC AGACTTGCTA 5106 GAATCAAAGT GTGAAATAAT GTCAAATTGT TCATCTGTTG GATATTTTCC ACCAAGAACC 5166 AAAAGAATAT TCAAGTTCCC TGAACTTCTG GCAACATTCA TGTTATATGT ATCTTCCTAA 5226 TTCTTCCTTT AACCTTTTGT AACTCGAATT ACACAGCAAG TTAGTTTCAG GTCTAGAGAT 5286 AAGAGAACAC TGAGTGGGCG TGTAAGGTGC ATTCTCCTAG TCAGCTCCAT TGCATCCAAC 5346 ATTTGTGAAT GACACAAGTT AACAATCCTT TGCACCATTT CTGGGTGCAT ACATGGAAAC 5406 TTCTTCGATT GAAACTTCCC ACATGTGCAG GTGCGTTCGC TGTCACTGAT AGACCAAGAG 5466 ACTGAAAGCT TTCACAAATT GCCCTCAAAT CTTCTGTTTC TATCGTCATG ACTCCATATC 5526 TCCGACCACT GGTCATGAGC CAGAGCCCAC TGATTTTGAG GGAATTGGGC TAACCATTTC 5586 CGAGCTTCTG AGTCCTTCTT TTTGATGTCC TTTATGTAGG AATCAAATTC TTCCTTCTGA 5646 CTTCTGGAT 5655 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:3 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 594 acides amin s (B) TYPE : acide amin (D) TOPOLOGIE : lin aire (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:3 Met Asp Thr Thr Ile Asp Gly Phe Ala Asp Ser Tyr Glu Ile Ser Ser 1 5 10 15 Thr Ser Phe Val Ala Thr Asp Asn Thr Asp Ser Ser Ile Val Tyr Leu 20 25 30 Ala Ala Glu Gln Val Leu Thr Gly Pro Asp Val Ser Ala Leu Cln Leu 35 40 45 Leu Ser Asn Ser Phe Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Asp Asp Phe Tyr 50 55 60 Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ser Asp Gly Arg Glu Val Ser Phe His 65 70 75 80 Arg Cys Val Leu Ser Ala Arg Ser Ser Phe Phe Lys Ser Ala Leu Ala 85 90 95 Ala Ala Lys Lys Glu Lys Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu 100 105 110 Glu Leu Lys Glu Ile Ala Lys Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val 115 120 125 Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro 130 135 140 Lys Gly Val Ser Glu Gys Ala Asp Glu Asn Cys Cys His Val Ala Cys 145 150 155 160 Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile 165 170 175 Phe Lys Ile Pro Glu Leu le Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp 180 185 190 Val Val Asp Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu 195 200 205 Ala Asn Ile Cys Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys 210 215 220 Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser 225 230 235 240 Leu Pro Glu Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu 245 250 255 Gly Leu Glu Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys 260 265 270 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu 275 280 285 Asp His Thr Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala 290 295 300 Tyr Cys Asn Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala 305 310 315 320 Asp Val Asn His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala 325 330 335 Ala Met Arg Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly 340 345 350 Ala Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr Ala Leu Met Ile 355 360 365 Ala Lys Gln Ala Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn Ile Pro Glu Gln 370 375 380 Cys Lys His Ser Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu Ile Leu Glu Cln 385 390 395 400 Glu Asp Lys Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro Pro Ser Phe Ala 405 410 415 Val Ala Ala Asp Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp Leu Glu Asn Arg 420 425 430 Val Ala Leu Ala Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala Gln Ala Ala Met 435 440 445 Glu Ile Ala Glu Met Lys Gly Thr cys Glu Phe Ile Val Thr Ser Leu 450 455 460 Glu Pro Asp Arg Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser Pro Gly Val Lys 465 470 475 480 Ile Ala Pro Phe Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser Arg Leu Lys Ala 485 490 495 Leu Ser Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser 500 505 510 Ala Val Leu Asp Gln Ile Met Asn Cys Glu Asp Leu Thr Gln Leu Ala 515 520 525 Cys Gly Glu Asp Asp Thr Ala Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg 530 535 540 Tyr Met Glu Ile Gln Glu Thr Leu Lys Lys Ala Phe Ser Glu Asp Asn 545 550 555 560 Leu Glu Leu Gly Asn Ser Ser Leu Thr Asp Ser Thr Ser Ser Thr Ser 565 570 575 Lys Ser Thr Gly Gly Lys Arg Ser Asn Arg Lys Leu Ser His Arg Arg 580 585 590 Arg (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:4 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 41 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:4 Ile Arg Arg Met Arg Arg Ala Leu Asp Ala Ala Asp Ile Glu Leu Val 1 5 10 15 Lys Leu Met Val Met Gly Glu Gly Leu Asp Leu Asp Asp Ala Leu Ala 20 25 30 Val His Tyr Ala Val Cln His Cys Asn 35 40 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:5 : (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 38 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:5 Pro Thr Gly Lys Thr Ala Leu His Leu Ala Ala Glu Met Val Ser Pro 1 5 10 15 Asp Met Val Ser Val Leu Leu Asp His His Ala Asp Xaa Asn Phe Arg 20 25 30 Thr Xaa Asp Gly Val Thr 35 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:6 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 41 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s 'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:6 Ile Arg Arg Met Arg Arg Ala Leu Asp Ala Ala Asp Ile Clu Leu Val 1 5 10 15 Lys Leu Met Val Met Gly Glu Gly Leu Asp Leu Asp Asp Ala Leu Ala 20 25 30 Val His Tyr Ala Val Gln His Cys Asn 35 40 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:7 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 27 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:7 Arg Arg Pro Asp Ser Lys Thr Ala Leu His Leu Ala Ala Glu Met Val 1 5 10 15 Ser Pro Asp Met Val Ser Val Leu Leu Asp Gln 20 25 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:8 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 41 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:8 Ile Arg Arg Met Arg Arg Ala Leu Asp Ala Ala Asp Ile Glu Leu Val 1 5 10 15 Lys Leu Met Val Met Gly Glu Gly Leu Asp Leu Asp Asp Ala Leu Ala 20 25 30 Val His Tyr Ala Val Gln His Cys Asn 35 40 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:9 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 27 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:9 Arg Arg Pro Asp Ser Lys Thr Ala Leu His Leu Ala Ala Glu Met Val 15 10 15 Ser Pro Asp Met Val Ser Val Leu Leu Asp Gln 20 25 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:10 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 41 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:10 Ile Arg Arg Met Arg Arg Ala Leu Asp Ala Ala Asp Ile Glu Leu Val 1 5 10 15 Lys Leu Met Val Met C y Glu Gly Leu Asp Leu Asp Asp Ala Leu Ala 20 25 30 Val His Tyr Ala Val Gln His Cys Asn 35 40 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:l1 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 19 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : peptide (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:ll : Pro Thr Gly Lys Thr Ala Leu His Leu Ala Ala Glu Met Val Ser Pro 1 5 10 15 Asp Met Val (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:12 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 22 paires de bases (B) TYPE : acide nucl ique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : lin aire (ii) TYPE DE MOLECULE : autres acides nucl iques (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucl otide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:12 AATTCTAAAG CATGCCGATC GG 22 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:13 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 21 paires de bases (B) TYPE : acide nucl ique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : lin aire (ii) TYPE DE MOLECULE : autres acides nucl iques (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucl otide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:13 AATTCCGATC GGCATGCTTT A 21 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:14 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 22 paires de bases (B) TYPE : acide nucl ique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : lin aire (ii) TYPE DE MOLECULE : autres acides nucl iques (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucl otidew' (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:14 AATTCTAAAC CATGGCGATC GC 22 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:15 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 21 paires de bases (B) TYPE : acide nucl ique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : lin aire (ii) TYPE DE MOLECULE : autres acides nucl iques (A) DESCRIPTION : /desc '1o igonucl otide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:15 AATTCCGATC GCCATGGTTT A 21 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:16 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 15 paires de bases (B) TYPE : acide nucl ique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : lin aire (ii) TYPE DE MOLECULE : autres acides nucl iques (A) DESCRIPTION : /desc - "oligonucl otide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:16: CCAGCTGGAA TTCCG 15 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:17 : (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 19 paires de bases (B) TYPE : acide nucl ique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : lin aire (ii) TYPE DE MOLECULE : autres acides nucl iques (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucl otide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:17 CGGAATTCCA GCTGGCATG 19 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:18 : (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 314 acides amin s (B) TYPE : acide amin (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : prot ine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:18 Met Phe Gln Pro Ala Gly His Gly Gln Asp Trp Ala Met Glu Gly Pro 1 5 10 15 Arg Asp Gly Leu Lys Lys Glu Arg Leu Val Asp Asp Arg His Asp Ser 20 25 30 Gly Leu Asp Ser Met Lys Asp Glu Glu Tyr Glu Gln Met Val Lys Glu 35 40 45 Leu Arg Glu Ile Arg Leu Gln Pro Gln Glu Ala Pro Leu Ala Ala Glu 50 55 60 Pro Trp Lys Gln Gln Leu Thr Glu Asp Gly Asp Ser Phe Leu His Leu 65 70 75 80 Ala Ile Ile His Glu Glu Lys Pro Leu Thr Met Glu Val Ile Gly Gln 85 90 95 Val Lys Gly Asp Leu Ala Phe Leu Asn Phe Gln Asn Asn Leu Gln Gln 100 105 110 Thr Pro Leu His Leu Ala Val Ile Thr Asn Gln Pro Gly Ile Ala Glu 115 120 125 Ala Leu Leu Lys Ala Gly Cys Asp Pro Glu Leu Arg Asp Phe Arg Gly 130 135 140 Asn Thr Pro Leu His Leu Ala Cys Glu Gln Gly Cys Leu Ala Ser Val 145 150 155 160 Ala Val Leu Thr Gln Thr Cys Thr Pro Gln His Leu His Ser Val Leu 165 170 175 Gln Ala Thr Asn Tyr Asn Gly His Thr Cys Leu His Leu Ala Ser Thr 180 185 190 His Gly Tyr Leu Ala Ile Val Glu His Leu Val Thr Leu Gly Ala Asp 195 200 205 Val Asn Ala Gln Glu Pro Cys Asn Gly Arg Thr Ala Leu His Leu Ala 210 215 220 Val Asp Leu Gln Asn Pro Asp Leu Val Ser Leu Leu Leu Lys Cys Gly 225 230 235 240 Ala Asp Val Asn Arg Val Thr Tyr Gln Gly Tyr Ser Pro Tyr Gln Leu 245 250 255 Thr Trp Gly Arg Pro Ser Thr Arg Ile Gln Gln Gin Leu Cly Gln Leu 260 265 270 Thr Leu Glu Asn Leu Gin Met Leu Pro Glu Ser Glu Asp Glu Glu Ser 275 280 285 Tyr Asp Thr Glu Ser Glu Phe Thr Glu Asp Glu Leu Pro Tyr Asp Asp 290 295 300 Cys Val Phe Gly Gly Gln Arg Leu Thr Leu 305 310 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:19 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 314 acides aminés (B) TYPE : acide aminé (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:19 Met Phe Leu Arg Glu Ile Arg Leu Gln Pro Gln Glu Ala Pro Leu Ala Ala Glu 50 55 60 Pro Trp Lys Gln Gln Leu Thr Glu Asp Gly Asp Ser Phe Leu His Leu 65 70 75 80 Ala Ile Ile His Glu Glu Lys Thr Leu Thr Met Glu Val Ile Gly Gln 85 90 95 Val Lys Gly Asp Leu Ala Phe Leu Asn Phe Gln Asn Asn Leu Gln Gln 100 105 110 Thr Pro Leu His Leu Ala Val Ile Thr Asn Gln Pro Gly Ile Ala Glu 115 120 125 Ala Leu Leu Lys Ala Gly Cys Asp Pro Glu Leu Arg Asp Phe Arg Gly 130 135 140 Asn Thr Pro Leu His Leu Ala cys Glu Gln Gly Cys Leu Ala Ser Val 145 150 155 160 Ala Val Leu Thr Gln Thr Cys Thr Pro Gln His Leu His Ser Val Leu 165 170 175 Gln Ala Thr Asn Tyr Asn Gly His Thr Cys Leu His Leu Ala Ser Ile 180 185 190 His Gly Tyr Leu Gly Ile Val Glu His Leu Val Thr Leu Gly Ala Asp 195 200 205 Val Asn Ala Gln Glu Pro Cys Asn Gly Arg Thr Ala Leu His Leu Ala 210 215 220 Val Asp Leu Gln Asn Pro Asp Leu Val Ser Leu Leu Leu Lys Cys Gly 225 230 235 240 Ala Asp Val Asn Arg Val Thr Tyr Gln Gly Tyr Ser Pro Tyr Gln Leu 245 250 255 Thr Trp Gly Arg Pro Ser Thr Arg Ile Gln Gln Gln Leu Gly Gln Leu 260 265 270 Thr Leu Glu Asn Leu Gln Thr Leu Pro Glu Ser Glu Asp Glu Glu Ser 275 280 285 Tyr Asp Thr Glu Ser Glu Phe Thr Glu Asp Glu Leu Pro Tyr Asp Asp 290 295 300 Cys Val Phe Gly Gly Gln Arg Leu Thr Leu 305 310 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:20 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 314 acides aminés (B) TYPE : acide aminé (C) NATURE DES BRINS : ne s'applique pas (D) TOPOLOGIE : ne s'applique pas (ii) TYPE DE MOLECULE : protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:20 Met Phe Gln Pro Ala Glu Pro Gly Gln Glu Trp Ala Met Glu Gly Pro 1 5 10 15 Arg Asp Ala Leu Lys Lys Glu Arg Leu Leu Asp Asp Arg His Asp Ser 20 25 30 Gly Leu Asp Ser Met Lys Asp Glu Glu Tyr Glu Gln Met Val Lys Glu 35 40 45 Leu Arg Glu Ile Arg Leu Glu Pro Gln Glu Ala Pro Arg Gly Ala Glu 50 55 60 Pro Trp Lys Gln Gln Leu Thr Glu Asp Gly Asp Ser Phe Leu His Leu 65 70 75 80 Ala Ile Ile His Glu Glu Lys Ala Leu Thr Met Glu Val Val Arg Gln 85 90 95 Val Lys Gly Asp Leu Ala Phe Leu Asn Phe Gln Asn Asn Leu Gln Gln 100 105 110 Thr Pro Leu His Leu Ala Val Ile Thr Asn Gln Pro Glu Ile Ala Glu 115 120 125 Ala Leu Leu Glu Ala Gly Cys Asp Pro Glu Leu Arg Asp Phe Arg Gly 130 135 140 Asn Thr Pro Leu His Leu Ala Cys Glu Gln Gly Cys Leu Ala Ser Val 145 150 155 160 Gly Val Leu Thr Gln Pro Arg Gly Thr Gln His Leu His Ser Ile Leu 165 170 175 Gln Ala Thr Asn Tyr Asn Gly His Thr Cys Leu His Leu Ala Ser Ile 180 185 190 Mis Gly Tyr Leu Gly Ile Val Glu Leu Leu Val Ser Leu Gly Ala Asp 195 200 205 Val Asn Ala Gln Glu Pro Cys Asn Gly Arg Thr Ala Leu His Leu Ala 210 215 220 Val Asp Leu Gln Asn Pro Asp Leu Val Ser Leu Leu Leu Lys Cys Gly 225 230 235 240 Ala Asp Val Asn Arg Val Thr Tyr Gln Gly Tyr Ser Pro Tyr Gln Leu 245 250 255 Thr Trp Gly Arg Pro Ser Thr Arg Ile Gln Gln Gln Leu Gly Gln Leu 260 265 270 Thr Leu Glu Asn Leu Gln Met Leu Pro Glu Ser Glu Asp Glu Glu Ser 275 280 285 Tyr Asp Thr Glu Ser Glu Phe Thr Glu Asp Clu Leu Pro Tyr Asp Asp 290 295 300 Cys Val Leu Gly Gly Gln Arg Leu Thr Leu 305 310 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:21 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 2011 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADNc (vi) SOURCE ORIGINALE (A) ORGANISME : Arabidopsis thaliana (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : misc~feature (B) LOCALISATION : 1..2011 (D) AUTRES INFORMATIONS : /note = "séquence de 1'ADNc du NIM1" (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : CDS (B) LOCALISATION : 43..1824 (D) AUTRES INFORMATIONS : * /produit = "protéine du NIM1" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:21 GATCTCTTTA ATTTGTGAAT TTCAATTCAT CGGAACCTGT TG ATG GAC ACC ACC 54 Met Asp Thr Thr ATT GAT GGA TTC GCC GAT TCT TAT GAA ATC AGC AGC ACT AGT TTC GTC 102 Ile Asp Gly Phe Ala Asp Ser Tyr Glu Ile Ser Ser Thr Ser Phe Val 5 10 15 20 GCT ACC GAT AAC ACC GAC TCC TCT ATT GTT TAT CTC GCC GCC GAA CAA 150 Ala Thr Asp Asn Thr Asp Ser Ser Ile Val Tyr Leu Ala Ala Glu Gln 25 30 35 GTA CTC ACC GGA CCT GAT GTA TCT GCT CTG CAA TTG CTC TCC AAC AGC 198 Val Leu Thr Gly Pro Asp Val Ser Ala Leu Gln Leu Leu Ser Asn Ser 40 45 50 TTC GAA TCC GTC TTT GAC TCG CCG GAT GAT TTC TAC AGC GAC GCT AAC 246 Phe Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Asp Asp Phe Tyr Ser Asp Ala Lys 55 60 65 CTT GTT CTC TCC GAC GGC CGG GAA GTT TCT TTC CAC CGG TGC GTT TTG 294 Leu Val Leu Ser Asp Gly Arg Glu Val Ser Phe His Arg Cys Val Leu 70 75 80 TCA GCG AGA AGC TCT TTC TTC AAG AGC GCT TTA GCC GCC GCT AAC AAC 342 Ser Ala Arg Ser Ser Phe Phe Lys Ser Ala Leu Ala Ala Ala Lys Lys 85 90 95 100 GAG AAA GAC TCC AAC AAC ACC GCC GCC GTG AAC CTC GAG CTT AAC GAG 390 Glu Lys Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu Glu Leu Lys Glu 105 110 115 ATT GCC AAG GAT TAC GAA GTC GGT TTC GAT TCC CTT GTG ACT GTT TTC 438 Ile Ala Lys Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val Thr Val Leu 120 125 130 GCT TAT GTT TAC AGC AGC AGA GTG AGA CCG CCG CCT AAA GCA GTT TCT 486 Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser 135 140 145 GAA TGC GCA GAC GAG AAT TGC TGC CAC GTG GCT TGC CGG CCG CCC GTG 534 Glu Cys Ala Asp Glu Asn Cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val 150 155 160 GAT TTC ATG TTG GAG GTT CTC TAT TTC GCT TTC ATC TTC AAG ATC CCT 582 Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro 165 170 175 180 GAA TTA ATT ACT CTC TAT CAG AGG CAC TTA TTG GAC GTT GTA GAC AAA 630 Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys 185 190 195 GTT GTT ATA GAG GAC ACA TTG GTT ATA CTC AAC CTT GCT AAT ATA TGT 678 Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile Cys 200 205 210 GGT AAA GCT TGT ATG AAC CTA TTG GAT AGA TGT AAA GAG ATT ATT GTC 726 Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val 215 220 225 AAG TCT AAT GTA GAT ATC GTT AGT CTT GAA AAG TCA TTG CCG GAA GAG 774 Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu 230 235 240 CTT GTT AAA GAG ATA ATT GAT AGA CGT AAA GAG CTT CGT TTG GAG GTA 822 Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val 245 250 255 260 CCT AAA GTA AAG AAA CAT GTC TCG AAT GTA CAT AAG GCA CTT GAC TCC 870 Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser 265 270 275 GAT GAT ATT GAG TTA GTC AAG TTG CTT TTC AAA GAG GAT CAC ACC AAT 918 Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn 280 285 290 CTA GAT GAT CCC TGT GCT CTT CAT TTC GCT GTT GCA TAT TGC AAT GTG 966 Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn Val 295 300 305 AAC ACC GCA ACA GAT CTT TTA AAA CTT GAT CTT GCC GAT GTC AAC CAT 1014 Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His 310 315 320 AGG AAT CCG AGG GGA TAT ACG GTG CTT CAT GTT GCT GCG ATG CGG AAG 1062 Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys 325 330 335 340 GAG CCA CAA TTG ATA CTA TCT CTA TTG GAA AAA GGT GCA AGT GCA TCA 1110 Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser 345 350 355 GAA GCA ACT TTG GAA GGT AGA ACC GCA CTC ATG ATC GCA AAA CAA GCC 1158 Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln Ala 360 365 370 ACT ATG CCC GTT GAA TGT AAT AAT ATC CCG GAG CAA TGC AAG CAT TCT 1206 Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn Ile Pro Glu Gln Cys Lys His Ser 375 380 385 CTC AAA GGC CGA CTA TGT GTA GAA ATA CTA GAG CAA GAA GAC AAA CGA 1254 Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys Arg 390 395 400 GAA CAA ATT CCT AGA GAT GTT CCT CCC TCT TTT GCA GTC GCG GCC GAT 1302 Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala Asp 405 410 415 420 GAA TTG AAC ATG ACG CTC CTC GAT CTT GAA AAT AGA GTT GCA CTT GCT 1350 Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp Leu Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala 425 430 435 CAA CGT CTT TTT CCA ACG GAA GCA CAA GCT GCA ATG GAG ATC GCC GAA 1398 Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala Gln Ala Ala Met Glu Ile Ala Glu 440 445 450 ATG AAC GGA ACA TGT GAG TTC ATA GTG ACT AGC CTC GAG CCT GAC CGT 1446 Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile Val Thr Ser Leu Glu Pro Asp Arg 455 460 465 CTC ACT GGT ACG AAG AGA ACA TCA CCG GGT GTA AAC ATA GCA CCT TTC 1494 Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser Pro Gly Val Lys Ile Ala Pro Phe 470 475 480 AGA ATC CTA GAA GAG CAT CAA ACT AGA CTA AAA GCC CTT TCT AAA ACC 1542 Arg le Leu Glu Glu His Gln Ser Arg Leu Lys Ala Leu Ser Lys Thr 485 490 495 500 GTC GAA CTC GGG AAA CGA TTC TTC CCG CGC TGT TCG GCA GTG CTC GAC 1590 Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser Ala Val Leu Asp 505 510 515 CAG ATT ATG AAC TGT GAG GAC TTG ACT CAA CTG GCT TGC GGA GAA GAC 1638 Gln Ile Met Asn Cys Glu Asp Leu Thr Gln Leu Ala Cys Gly Glu Asp 520 525 530 GAC ACT GCT GAG AAA CGA CTA CAA AAC AAG CAA AGG TAC ATG GAA ATA 1686 Asp Thr Ala Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg Tyr Met Glu Ile 535 540 545 CAA GAG ACA CTA AAG AAG GCC TTT AGT GAG GAC AAT TTG GAA TTA GGA 1734 Gln Glu Thr Leu Lys Lys Ala Phe Ser Glu Asp Asn Leu Glu Leu Gly 550 555 560 AAT TTG TCC CTG ACA GAT TCC ACT TCT TCC ACA TCG AAA TCA ACC GGT 1782 Asn Leu Ser Leu Thr Asp Ser Thr Ser Ser Thr Ser Lys Ser Thr Gly 565 570 575 580 GGA AAC AGG TCT AAC CGT AAA CTC TCT CAT CGT CGT CGG TGA 1824 Gly Lys Arg Ser Asn Arg Lys Leu Ser His Arg Arg Arg * 585 590 GACTCTTGCC TCTTAGTGTA ATTTTTGCTG TACCATATAA TTCTGTTTTC ATGATGACTG 1884 TAACTGTTTA TGTCTATCGT TGGCGTCATA TAGTTTCGCT CTTCGTTTTG CATCCTGTGT 1944 ATTATTGCTG CAGGTGTGCT TCAAACAAAT GTTGTAACAA TTTGAACCAA TGGTATACAG 2004 ATTTGTA 2011 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:22 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 2011 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADNc (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : CDS (B) LOCALISATION : 43..1824 (D) AUTRES INFORMATIONS : produit = "forme modifiée du NIM1" /note = "Les résidus de sérine sur les positions d'acides aminés 55 et 59 du produit génique NIM1 de type sauvage ont été modifiés en résidus d'alanine". (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : misc feature (B) LOCALISATION : 205..217 (D) AUTRES INFORMATIONS : /note = "Les nucléotides 205 et 217 passent de T à G par comparaison à la séquence de type sauvage" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:22 CATCTCTTTA ATTTGTGAAT TTCAATTCAT CGGAACCTGT TO ATG GAC ACC ACC 54 Met Asp Thr Thr ATT GAT GGA TTC GCC GAT TCT TAT GAA ATC AGC AGC ACT AGT TTC GTC 102 Ile Asp Gly Phe Ala Asp Ser Tyr Glu Ile Ser Ser Thr Ser Phe Val 5 10 15 20 GCT ACC GAT AAC ACC GAC TCC TCT ATT GTT TAT CTG GCC GCC GAA CAA 150 Ala Thr Asp Asn Thr Asp Ser Ser Ile Val Tyr Leu Ala Ala Glu Gln 25 30 35 GTA CTC ACC GGA CCT GAT GTA TCT GCT CTG CAA TTG CTC TCC AAC AGC 198 Val Leu Thr Gly Pro Asp Val Ser Ala Leu Gln Leu Leu Ser Asn Ser 40 45 50 TTC GAA GCC GTC TTT GAC CCC CCG GAT GAT TTC TAC AGC GAC GCT AAG 246 Phe Glu Ala Val Phe Asp Ala Pro Asp Asp Phe Tyr Ser Asp Ala Lys 55 60 65 CTT GTT CTC TCC GAC GGC CGG GAA GTT TCT TTC CAC CGG TGC GTT TTG 294 Leu Val Leu Ser Asp Gly Arg Glu Val Ser Phe His Arg Cys Val Leu 70 75 80 TCA CCC AGA AGC TCT TTC TTC AAC AGC GCT TTA GCC GCC GCT AAC AAC 342 Ser Ala Arg Ser Ser Phe Phe Lys Ser Ala Leu Ala Ala Ala Lys Lys 85 90 95 100 GAG AAA GAC TCC AAC AAC ACC GCC GCC GTG AAC CTC GAG CTT AAG GAG 390 Glu Lys Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu Glu Leu Lys Glu 105 110 115 ATT CCC AAC GAT TAC GAA GTC GGT TTC GAT TCC GTT GTG ACT GTT TTG 438 Ile Ala Lys Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val Thr Val Leu 120 125 130 GCT TAT GTT TAC AGC AGC AGA GTG AGA CCG CCG CCT AAA GGA GTT TCT 486 Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser 135 140 145 GAA TGC GCA GAC GAG AAT TGC TGC CAC GTG GCT TGC CGG CCC CCC GTG 534 Clu Cys Ala Asp Glu Asn Cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val 150 155 160 GAT TTC ATG TTG GAG GTT CTC TAT TTG GCT TTC ATC TTC AAG ATC CCT 582 Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro 165 170 175 180 GAA TTA ATT ACT CTC TAT CAG AGG CAC TTA TTG GAC CTT GTA GAC AAA 630 Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys 185 190 195 GTT GTT ATA GAG GAC ACA TTG GTT ATA CTC AAG CTT GCT AAT ATA TCT 678 Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile cys 200 205 210 GGT AAA GCT TCT ATG AAC CTA TTG GAT AGA TGT AAA GAG ATT ATT GTC 726 Gly Lys Ala cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val 215 220 225 AAG TCT AAT GTA GAT ATG GTT AGT CTT GAA AAG TCA TTC CCC GAA GAG 774 Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu 230 235 240 CTT GTT AAA GAG ATA ATT GAT AGA CGT AAA GAG CTT GGT TTG GAG GTA 822 Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val 245 250 255 260 CCT AAA GTA AAG AAA CAT GTC TCC AAT GTA CAT AAG GCA CTT GAC TCG 870 Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser 265 270 275 GAT GAT ATT GAG TTA CTC AAC TTG CTT TTG AAA GAG GAT CAC ACC AAT 918 Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn 280 285 290 CTA GAT GAT CCC TGT GCT CTT CAT TTC GCT GTT GCA TAT TGC AAT GTG 966 Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn Val 295 300 305 AAG ACC GCA ACA GAT CTT TTA AAA CTT GAT CTT GCC GAT GTC AAC CAT 1014 Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His 310 315 320 AGG AAT CCG AGG GGA TAT ACC GTG CTT CAT GTT GCT GCG ATG CGC AAG 1062 Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys 325 330 335 340 GAG CCA CAA TTC ATA CTA TCT CTA TTG GAA AAA GGT GCA AGT GCA TCA 1110 Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser 345 350 355 GAA GCA ACT TTG GAA GGT AGA ACC GCA CTC ATG ATC GCA AAA CAA GCC 1158 Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln Ala 360 365 370 ACT ATG CCC GTT GAA TGT AAT AAT ATC CCG GAG CAA TGC AAG CAT TCT 1206 Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn Ile Pro Glu Gln Cys Lys His Ser 375 380 385 CTC AAA GGC CGA CTA TGT GTA GAA ATA CTA GAG CAA GAA GAC AAA CGA 1254 Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys Arg 390 395 400 GAA CAA ATT CCT AGA GAT GTT CCT CCC TCT TTT GCA GTC GCG GCC GAT 1302 Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala Asp 405 410 415 420 GAA TTG AAG ATG ACG CTG CTC GAT CTT GAA AAT AGA GTT GCA CTT GCT 1350 Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp Leu Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala 425 430 435 CAA CGT CTT TTT CCA ACG GAA GCA CAA GCT GCA ATG GAG ATC GCC GAA 1398 Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala Gln Ala Ala Met Glu Ile Ala Glu 440 445 450 ATG AAC GGA ACA TGT GAG TTC ATA GTG ACT AGC CTC GAG CCT GAC CGT 1446 Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile Val Thr Ser Leu Glu Pro Asp Arg 455 460 465 CTC ACT GGT ACG AAG AGA ACA TCA CCC GGT GTA AAC ATA GCA CCT TTC 1494 Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser Pro Gly Val Lys Ile Ala Pro Phe 470 475 480 AGA ATC CTA GAA GAG CAT CAA AGT AGA CTA AAA GCG CTT TCT AAA ACC 1542 Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser Arg Leu Lys Ala Leu Ser Lys Thr 485 490 495 500 GTG GAA CTC GGG AAA CGA TTC TTC CCG CCC TGT TCG GCA GTG CTC GAC 1590 Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser Ala Val Leu Asp 505 510 515 CAG ATT ATG AAC TGT GAG GAC TTG ACT CAA CTC GCT TGC GGA GAA GAC 1638 Gln Ile Met Asn Cys Glu Asp Leu Thr Gln Leu Ala Cys Gly Glu Asp 520 525 530 GAC ACT GCT GAG AAA CGA CTA CAA AAG AAG CAA AGG TAC ATG GAA ATA 1686 Asp Thr Ala Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg Tyr Met Glu Ile 535 540 545 CAA GAG ACA CTA AAG AAG GCC TTT AGT GAG GAC AAT TTG GAA TTA GCA 1734 Gln Glu Thr Leu Lys Lys Ala Phe Ser Glu Asp Asn Leu Glu Leu Gly 550 555 560 AAT TTG TCC CTG ACA GAT TCC ACT TCT TCC ACA TCG AAA TCA ACC GGT 1782 Asn Leu Ser Leu Thr Asp Ser Thr Ser Ser Thr Ser Lys Ser Thr Gly 565 570 575 580 GGA AAC AGG TCT AAC CGT AAA CTC TCT CAT CGT CGT CGG TGA 1824 Gly Lys Arg Ser Asn Arg Lys Leu Ser His Arg Arg Arg 585 590 GACTCTTGCC TCTTAGTGTA ATTTTTGCTG TACCATATAA TTCTGTTTTC ATGATGACTG 1884 TAACTGTTTA TGTCTATCGT TGGCGTCATA TAGTTTCGCT CTTCGTTTTG CATCCTGTGT 1944 ATTATTGCTG CAGGTGTGCT TCAAACAAAT GTTGTAACAA TTTGAACCAA TGGTATACAG 2004 ATTTGTA 2011 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:23 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 594 acides aminés (B) TYPE : acide aminé (D) TOPOLOGIE : linéaire (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:23 Met Asp Thr Thr Ile Asp Cîy Phe Ala Asp Ser Tyr Glu Ile Ser Ser 1 5 10 15 Thr Ser Phe Val Ala Thr Asp Asn Thr Asp Ser Ser Ile Val Tyr Leu 20 25 30 Ala Ala Glu Gln Val Leu Thr Gly Pro Asp Val Ser Ala Leu Cln Leu 35 40 45 Leu Ser Asn Ser Phe Glu Ala Val Phe Asp Ala Pro Asp Asp Phe Tyr 50 55 60 Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ser Asp Gly Arg Glu Val Ser Phe His 65 70 75 80 Arg Cys Val Leu Ser Ala Arg Ser Ser Phe Phe Lys Ser Ala Leu Ala 85 90 95 Ala Ala Lys Lys Glu Lys Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu 100 105 110 Glu Leu Lys Glu Ile Ala Lys Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val 115 120 125 Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro 130 135 140 Lys Gly Val Ser Glu Cys Ala Asp Glu Asn Cys cys His Val Ala Cys 145 150 155 160 Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Clu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile 165 170 175 Phe Lys Ile Pro Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp 180 185 190 Val Val Asp Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu 195 200 205 Ala Asn île Cys Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys 210 215 220 Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser 225 230 235 240 Leu Pro Glu Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu 245 250 255 Gly Leu Glu Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys 260 265 270 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu 275 280 285 Asp His Thr Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala 290 295 300 Tyr Cys Asn Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala 305 310 315 320 Asp Val Asn His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala 325 330 335 Ala Met Arg Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly 340 345 350 % Ala Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr Ala Leu Met Ile 355 360 365 Ala Lys Gln Ala Thr Met Ala Val Glu cys Asn Asn Ile Pro Glu Gln 370 375 380 cys Lys His Ser Leu Lys Gly Arg Leu cys Val Glu Ile Leu Glu Gln 385 390 395 400 Glu Asp Lys Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro Pro Ser Phe Ala 405 410 415 Val Ala Ala Asp Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp Leu Glu Asn Arg 420 425 430 Val Ala Leu Ala Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala Gln Ala Ala Met 435 440 445 Glu Ile Ala Glu Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile Val Thr Ser Leu 450 455 460 Glu Pro Asp Arg Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser Pro Gly Val Lys 465 470 475 480 Ile Ala Pro Phe Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser Arg Leu Lys Ala 485 490 495 Leu Ser Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser 500 505 510 Ala Val Leu Asp Gln Ile Met Asn Cys Glu Asp Leu Thr Gln Leu Ala 515 520 525 cys Gly Glu Asp Asp Thr Ala Glu Lys Arg Leu Gln Lys Lys Gln Arg 530 535 540 Tyr Met Glu Ile Gln Glu Thr Leu Lys Lys Ala Phe Ser Glu Asp Asn 545 550 555 560 Leu Glu Leu Gly Asn Leu Ser Leu Thr Asp Ser Thr Ser Ser Thr Ser 565 570 575 Lys Ser Thr Gly Gly Lys Arg Ser Asn Arg Lys Leu Ser His Arg Arg 580 585 590 Arg * (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:24 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 1597 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADNc (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : CDS (B) LOCALISATION : 1..1410 (D) AUTRES INFORMATIONS : /produit = "Forme modifiée du NIM1" /note = "Délétion N-terminale par comparaison à la séquence du NIM1 du type sauvage" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:24 ATG GAT TCC GTT GTG ACT GTT TTG GCT TAT GTT TAC AGC AGC AGA GTG 48 Met Asp Ser Val Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val 1 5 10 15 AGA CCG CCG CCT AAA GGA GTT TCT GAA TGC GCA GAC GAG AAT TGC TGC 96 Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser Glu Cys Ala Asp Glu Asn Cys Cys 20 25 30 CAC GTG GCT TGC CGG CCG CCC GTG GAT TTC ATG TTG GAG GTT CTC TAT 144 His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr 35 40 45 TTG GCT TTC ATC TTC AAG ATC CCT GAA TTA ATT ACT CTC TAT CAG AGG 192 Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg 50 55 60 CAC TTA TTG GAC GTT GTA GAC AAA GTT GTT ATA GAG GAC ACA TTG GTT 240 His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val 65 70 75 80 ATA CTC AAG CTT GCT AAT ATA TGT GGT AAA GCT TGT ATG AAC CTA TTG 288 Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile Cys Gly Lys Ala cys Met Lys Leu Leu 85 90 95 GAT AGA TGT AAA GAG ATT ATT CTC AAC TCT AAT GTA GAT ATG GTT AGT 336 Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser 100 105 110 CTT GAA AAC TCA TTG CCG GAA GAG CTT GTT AAA GAG ATA ATT GAT AGA 384 Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg 115 120 125 CGT AAA GAG CTT GGT TTG GAG GTA CCT AAA GTA AAC AAA CAT GTC TCG 432 Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser 130 135 140 AAT GTA CAT AAC GCA CTT GAC TCG GAT GAT ATT GAG TTA GTC AAC TTG 480 Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu 145 150 155 160 CTT TTG AAA GAG GAT CAC ACC AAT CTA GAT GAT CCC TGT GCT CTT CAT 528 Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His 165 170 175 TTC GCT GTT GCA TAT TGC AAT GTC AAG ACC GCA ACA GAT CTT TTA AAA 576 Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys 180 185 190 CTT GAT CTT GCC GAT CTC AAC CAT AGG AAT CCG AGG GGA TAT ACG GTG 624 Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val 195 200 205 CTT CAT GTT GCT CCC ATG CGG AAC GAG CCA CAA TTG ATA CTA TCT CTA 672 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu 210 215 220 TTG GAA AAA CGT GCA AGT GCA TCA GAA GCA ACT TTC GAA GCT AGA ACC 720 Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr 225 230 235 240 GCA CTC ATG ATC GCA AAA CAA GCC ACT ATG CCC GTT GAA TGT AAT AAT 768 Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln Ala Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn 245 250 255 ATC CCG GAG CAA TGC AAC CAT TCT CTC AAA CCC CGA CTA TGT GTA GAA 816 Ile Pro Glu Gln Cys Lys His Ser Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu 260 265 270 ATA CTA GAG CAA GAA GAC AAA CGA GAA CAA ATT CCT AGA GAT GTT CCT 864 Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro 275 280 285 CCC TCT TTT GCA GTG GCG GCC GAT GAA TTC AAC ATG ACG CTG CTC GAT 912 Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala Asp Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp 290 295 300 CTT GAA AAT AGA GTT GCA CTT CCT CAA CGT CTT TTT CCA ACG GAA GCA 960 Leu Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala 305 310 315 320 CAA GCT GCA ATG GAG ATC GCC GAA ATG AAC GGA ACA TGT GAG TTC ATA 1008 Gin Ala Ala Met Glu Ile Ala Glu Met Lys Gly Thr cys Glu Phe Ile 325 330 335 GTG ACT AGC CTC GAG CCT GAC CGT CTC ACT GGT ACG AAG AGA ACA TCA 1056 Val Thr Ser Leu Glu Pro Asp Arg Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser 340 345 350 CCG GGT GTA AAC ATA GCA CCT TTC AGA ATC CTA GAA GAG CAT CAA AGT 1104 Pro Gly Val Lys Ile Ala Pro Phe Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser 355 360 365 AGA CTA AAA GCG CTT TCT AAA ACC GTG GAA CTC GGG AAA CGA TTC TTC 1152 Arg Leu Lys Ala Leu Ser Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe 370 375 380 CCG CCC TGT TCC GCA GTG CTC GAC CAG ATT ATG AAC TGT GAG GAC TTG 1200 Pro Arg Cys Ser Ala Val Leu Asp Gln Ile Met Asn Cys Glu Asp Leu 385 390 395 400 ACT CAA CTG GCT TGC GGA GAA GAC GAC ACT GCT GAG AAA CGA CTA CAA 1248 Thr Gln Leu Ala Cys Gly Glu Asp Asp Thr Ala Glu Lys Arg Leu Gln 405 410 415 AAC AAC CAA AGG TAC ATC GAA ATA CAA GAG ACA CTA AAG AAG CCC TTT 1296 Lys Lys Gln Arg Tyr Met Glu Ile Gln Glu Thr Leu Lys Lys Ala Phe 420 425 430 AGT GAG GAC AAT TTG GAA TTA GGA AAT TTG TCC CTC ACA GAT TCG ACT 1344 Ser Glu Asp Asn Leu Glu Leu Gly Asn Leu Ser Leu Thr Asp Ser Thr 435 440 445 TCT TCC ACA TCC AAA TCA ACC GGT GGA AAG AGG TCT AAC CGT AAA CTC 1392 Ser Ser Thr Ser Lys Ser Thr Gly Gly Lys Arg Ser Asn Arg Lys Leu 450 455 460 TCT CAT CGT CGT CGC TCA GACTCTTGCC TCTTAGTGTA ATTTTTGCTG 1440 Ser His Arg Arg Arg * 465 470 TACCATATAA TTCTGTTTTC ATGATGACTG TAACTGTTTA TGTCTATCGT TGGCGTCATA 1500 TAGTTTCGCT CTTCGTTTTG CATCCTGTGT ATTATTGCTG CAGGTGTGCT TCAAACAAAT 1560 GTTGTAACAA TTTGAACCAA TGGTATACAG ATTTCTA 1597 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:25 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 470 acides aminés (B) TYPE : acide aminé (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:25 Met Asp Ser Val Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val 1 5 10 15 Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser Glu cys Ala Asp Glu Asn cys cys 20 25 30 His Val Ala cys Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr 35 40 45 Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg 50 55 60 His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val 65 70 75 80 Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile cys Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu 85 90 95 Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser 100 105 110 Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg 115 120 125 Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser 130 135 140 Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu 145 150 155 160 Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His 165 170 175 Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys 180 185 190 Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val 195 200 205 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu 210 215 220 Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr 225 230 235 240 Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln Ala Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn 245 250 255 Ile Pro Glu Gln cys Lys His Ser Leu Lys Gly Arg Leu cys Val Glu 260 265 270 Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro 275 280 285 Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala Thr Gln Leu u Ala cys Gly Glu Asp Asp Thr Ala Glu Lys Arg Leu Gin 405 410 415 Lys Lys Gln Arg Tyr Met Glu Ile Gln Glu Thr Leu Lys Lys Ala Phe 420 425 430 Ser Glu Asp Asn Leu Glu Leu Gly Asn Leu Ser Leu Thr Asp Ser Thr 435 440 445 Ser Ser Thr Ser Lys Ser Thr Gly Gly Lys Arg Ser Asn Arg Lys Leu 450 455 460 Ser His Arg Arg Arg 465 470 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:26 : (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 1608 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADNc (ix) PARTICULARITE: (A) NOM/CLE : CDS (B) LOCALISATION : 43..1608 (D) AUTRES INFORMATIONS : /produit = = "forme modifiée du u NIM1" /note = = "Délétion C-terminale par rapport au u NIM1 de type sauvage" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:26 GATCTCTTTA ATTTGTGAAT TTCAATTCAT CGGAACCTGT TG ATC GAC ACC ACC 54 Met Asp Thr Thr 1 ATT GAT GGA TTC GCC GAT TCT TAT GAA ATC AGC AGC ACT AGT TTC GTC 102 Ile Asp Gly Phe Ala Asp Ser Tyr Glu Ile Ser Ser Thr Ser Phe Val 5 10 15 20 GCT ACC GAT AAC ACC GAC TCC TCT ATT GTT TAT CTC GCC GCC GAA CAA 150 Ala Thr Asp Asn Thr Asp Ser Ser Ile Val Tyr Leu Ala Ala Glu Gln 25 30 35 GTA CTC ACC GGA CCT GAT GTA TCT GCT CTG CAA TTG CTC TCC AAC AGC 198 Val Leu Thr Gly Pro Asp Val Ser Ala Leu Gln Leu Leu Ser Asn Ser 40 45 50 TTC GAA TCC GTC TTT GAC TCG CCG GAT GAT TTC TAC AGC GAC GCT AAC 246 Phe Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Asp Asp Phe Tyr Ser Asp Ala Lys 55 60 65 CTT GTT CTC TCC GAC GGC CGC GAA GTT TCT TTC CAC CGC TGC GTT TTC 294 Leu Val Leu Ser Asp Gly Arg Glu Val Ser Phe His Arg Cys Val Leu 70 75 80 TCA CCC AGA AGC TCT TTC TTC AAG AGC GCT TTA GCC GCC GCT AAG AAC 342 Ser Ala Arg Ser Ser Phe Phe Lys Ser Ala Leu Ala Ala Ala Lys Lys 85 90 95 100 GAG AAA GAC TCC AAC AAC ACC GCC CCC GTG AAG CTC GAG CTT AAC GAG 390 Glu Lys Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu Glu Leu Lys Glu 105 110 115 ATT GCC AAC CAT TAC GAA GTC GGT TTC GAT TCG GTT GTG ACT GTT TTC 438 Ile Ala Lys Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val Thr Val Leu 120 125 130 GCT TAT GTT TAC AGC AGC AGA CTG AGA CCG CCG CCT AAA GCA GTT TCT 486 Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser 135 140 145 GAA TGC GCA GAC GAG AAT TGC TGC CAC GTG GCT TGC CGC CCG CCC GTG 534 Glu Cys Ala Asp Glu Asn Cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val 150 155 160 GAT TTC ATG TTG GAG GTT CTC TAT TTG GCT TTC ATC TTC AAG ATC CCT 582 Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro 165 170 175 180 GAA TTA ATT ACT CTC TAT CAG AGG CAC TTA TTC GAC GTT GTA GAC AAA 630 Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys 185 190 195 GTT GTT ATA GAG GAC ACA TTC GTT ATA CTC AAG CTT GCT AAT ATA TGT 678 Val Val Ile Clu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile Cys 200 205 210 GGT AAA GCT TGT ATG AAC CTA TTG GAT AGA TGT AAA GAG ATT ATT GTC 726 Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val 215 220 225 AAC TCT AAT GTA GAT ATG GTT AGT CTT GAA AAG TCA TTG CCG GAA GAG 774 Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu 230 235 240 CTT GTT AAA GAG ATA ATT GAT AGA CGT AAA GAG CTT GGT TTG GAG GTA 822 Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val 245 250 255 260 CCT AAA GTA AAG AAA CAT GTC TCC AAT GTA CAT AAC GCA CTT GAC TCC 870 Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser 265 270 275 GAT GAT ATT GAG TTA GTC AAC TTG CTT TTG AAA GAG GAT CAC ACC AAT 918 Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn 280 285 290 CTA GAT GAT GCG TGT GCT CTT CAT TTC GCT GTT GCA TAT TGC AAT GTG 966 Leu Asp Asp Ala cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr cys Asn Val 295 300 305 AAC ACC GCA ACA GAT CTT TTA AAA CTT GAT CTT GCC GAT GTC AAC CAT 1014 Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His 310 315 320 AGG AAT CCG AGG GGA TAT ACG GTG CTT CAT GTT GCT CCC ATG CGG AAC 1062 Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys 325 330 335 340 GAG CCA CAA TTG ATA CTA TCT CTA TTG GAA AAA GGT GCA AGT GCA TCA 1110 Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser 345 350 355 GAA GCA ACT TTG GAA GGT AGA ACC GCA CTC ATG ATC GCA AAA CAA GCC 1158 Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln Ala 360 365 370 ACT ATG CCC GTT GAA TGT AAT AAT ATC CCG GAG CAA TGC AAC CAT TCT 1206 Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn Ile Pro Glu Gln Cys Lys His Ser 375 380 385 CTC AAA GGC CGA CTA TGT GTA GAA ATA CTA GAG CAA GAA GAC AAA CGA 1254 Leu Lys C1y Arg Leu Cys Val Glu Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys Arg 390 395 400 GAA CAA ATT CCT AGA GAT GTT CCT CCC TCT TTT GCA GTG CCC GCC GAT 1302 Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala Asp 405 410 415 420 GAA TTG AAG ATG ACG CTG CTC GAT CTT GAA AAT AGA GTT GCA CTT GCT 1350 Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp Leu Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala 425 430 435 CAA CCT CTT TTT CCA ACG GAA GCA CAA GCT GCA ATC GAG ATC GCC CAA 1398 Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala Gln Ala Ala Met Glu Ile Ala Glu 440 445 450 ATC AAC GGA ACA TGT GAG TTC ATA GTG ACT AGC CTC GAG CCT GAC CGT 1446 Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile Val Thr Ser Leu Glu Pro Asp Arg 455 460 465 CTC ACT GGT ACG AAC AGA ACA TCA CCG GGT GTA AAC ATA CCA CCT TTC 1494 Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser Pro Gly Val Lys Ile Ala Pro Phe 470 475 480 AGA ATC CTA GAA GAG CAT CAA AGT AGA CTA AAA CCC CTT TCT AAA ACC 1542 Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser Arg Leu Lys Ala Leu Ser Lys Thr 485 490 495 500 GTG GAA CTC GGG AAA CCA TTC TTC CCG CGC TGT TCC GCA GTG CTC GAC 1590 Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser Ala Val Leu Asp 505 510 515 CAG ATT ATG AAC TGT TCA 1608 Gln Ile Met Asn Cys * 520 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:27 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 522 acides aminés (B) TYPE : acide nucléique (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:27 Met Asp Thr Thr Ile Asp Gly Phe Ala Asp Ser Tyr Glu Ile Ser Ser 1 5 10 15 Thr Ser Phe Val Ala Thr Asp Asn Thr Asp Ser Ser Ile Val Tyr Leu 20 25 30 Ala Ala Glu Gln Val Leu Thr Gly Pro Asp Val Ser Ala Leu Gln Leu 35 40 45 Leu Ser Asn Ser Phe Glu Ser Val Phe Asp Ser Pro Asp Asp Phe Tyr 50 55 60 Ser Asp Ala Lys Leu Val Leu Ser Asp Gly Arg Glu Val Ser Phe His 65 70 75 80 Arg Cys Val Leu Ser Ala Arg Ser Ser Phe Phe Lys Ser Ala Leu Ala 85 90 95 Ala Ala Lys Lys Glu Lys Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu 100 105 110 Glu Leu Lys Glu Ile Ala Lys Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val 115 120 125 Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro 130 135 140 Lys Gly Val Ser Glu Cys Ala Asp Glu Asn Cys cys His Val Ala Cys 145 150 155 160 Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile 165 170 175 Phe Lys île Pro Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp 180 185 190 Val Val Asp Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu 195 200 205 Ala Asn Ile Cys Gly Lys Ala cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys 210 215 220 Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser 225 230 235 240 Leu Pro Glu Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu 245 250 255 Cly Leu Glu Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys 260 265 270 Ala Leu Asp Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu 275 280 285 Asp His Thr Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala 290 295 300 Tyr Cys Asn Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala 305 310 315 320 Asp Val Asn His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala 325 330 335 Ala Met Arg Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly 340 345 350 Ala Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr Ala Leu Met Ile 355 360 365 Ala Lys Gln Ala Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn Ile Pro Glu Gln 370 375 380 Cys Lys His Ser Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu Ile Leu Glu Gln 385 390 395 400 Glu Asp Lys Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro Pro Ser Phe Ala 405 410 415 Val Ala Ala Asp Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp Leu Glu Asn Arg 420 425 430 Val Ala Leu Ala Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala Gln Ala Ala Met 435 440 445 Clu Ile Ala Glu Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile Val Thr Ser Leu 450 455 460 Glu Pro Asp Arg Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser Pro Gly Val Lys 465 470 475 480 Ile Ala Pro Phe Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser Arg Leu Lys Ala 485 490 495 Leu Ser Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe Pro Arg Cys Ser 500 505 510 Ala Val Leu Asp Gln Ile Met Asn Cys * 515 520 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:28 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 1194 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADNc (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : CDS (B) LOCALISATION : 1..1194 (D) AUTRES INFORMATIONS : /produit = "forme modifiée du NIM1" /note = "Chimère N-terminale/C-terminale" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:28 ATG GAT TCC GTT GTG ACT GTT TTG GCT TAT GTT TAC AGC AGC AGA GTG 48 Met Asp Ser Val Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val 1 5 10 15 AGA CCC CCG CCT AAA GGA GTT TCT GAA TGC GCA GAC GAG AAT TGC TGC 96 Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser Glu Cys Ala Asp Glu Asn Cys Cys 20 25 30 CAC CTC GCT TGC CGG CCG CCC GTG GAT TTC ATG TTG GAG GTT CTC TAT 144 His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr 35 40 45 TTG GCT TTC ATC TTC AAG ATC CCT GAA TTA ATT ACT CTC TAT CAG AGG 192 Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg 50 55 60 CAC TTA TTG GAC GTT GTA GAC AAA GTT GTT ATA GAG GAC ACA TTG GTT 240 His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val 65 70 75 80 ATA CTC AAC CTT GCT AAT ATA TGT GGT AAA GCT TGT ATG AAC CTA TTG 288 Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile Cys Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu 85 90 95 GAT AGA TGT AAA GAG ATT ATT GTC AAC TCT AAT GTA GAT ATG GTT AGT 336 Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser 100 105 110 CTT GAA AAC TCA TTG CCG GAA GAG CTT GTT AAA GAG ATA ATT GAT AGA 384 Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg 115 120 125 CGT AAA GAG CTT GGT TTG GAG GTA CCT AAA GTA AAG AAA CAT GTC TCG 432 Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser 130 135 140 AAT GTA CAT AAC GCA CTT GAC TCC GAT GAT ATT GAG TTA GTC AAC TTG 480 Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu 145 150 155 160 CTT TTG AAA GAG GAT CAC ACC AAT CTA GAT GAT CCC TGT GCT CTT CAT 528 Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His 165 170 175 TTC GCT GTT GCA TAT TOC AAT GTG AAG ACC GCA ACA GAT CTT TTA AAA 576 Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys 180 185 190 CTT GAT CTT GCC GAT GTC AAC CAT AGG AAT CCG AGG GCA TAT ACG GTG 624 Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val 195 200 205 CTT CAT GTT GCT CCC ATG CGC AAG GAG CCA CAA TTG ATA CTA TCT CTA 672 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu 210 215 220 TTG GAA AAA GGT GCA AGT GCA TCA GAA GCA ACT TTG GAA GGT AGA ACC 720 Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr 225 230 235 240 GCA CTC ATG ATC GCA AAA CAA GCC ACT ATG CCC GTT GAA TGT AAT AAT 768 Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln Ala Thr Met Ala Val Glu cys Asn Asn 245 250 255 ATC CCG GAG CAA TGC AAC CAT TCT CTC AAA GGC CGA CTA TGT GTA GAA 816 Ile Pro Glu Gln Cys Lys His Ser Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu 260 265 270 ATA CTA GAG CAA GAA GAC AAA CGA GAA CAA ATT CCT AGA GAT GTT CCT 864 Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro 275 280 285 CCC TCT TTT GCA GTG CCC GCC GAT GAA TTG AAC ATG ACG CTC CTC GAT 912 Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala Asp Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp 290 295 300 CTT GAA AAT AGA GTT GCA CTT GCT CAA CGT CTT TTT CCA ACG GAA GCA 960 Leu Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala 305 310 315 320 CAA GCT GCA ATG GAG ATC CCC GAA ATG AAG GGA ACA TGT GAG TTC ATA 1008 Gln Ala Ala Met Glu Ile Ala Glu Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile 325 330 335 GTG ACT AGC CTC GAG CCT GAC CGT CTC ACT GGT ACG AAC AGA ACA TCA 1056 Val Thr Ser Leu Glu Pro Asp Arg Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser 340 345 350 CCG GGT GTA AAC ATA GCA CCT TTC AGA ATC CTA GAA GAG CAT CAA AGT 1104 Pro Gly Val Lys Ile Ala Pro Phe Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser 355 360 365 AGA CTA AAA GCG CTT TCT AAA ACC GTG GAA CTC GGG AAA CGA TTC TTC .1152 Arg Leu Lys Ala Leu Ser Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe 370 375 380 CCG CCC TGT TCC GCA GTG CTC GAC CAG ATT ATG AAC TGT TGA 1194 Pro Arg Cys Ser Ala Val Leu Asp Gln Ile Met Asn Cys * 385 390 395 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:29 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 398 acides aminés (B) TYPE : acide aminé (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:29 Met Asp Ser Val Val Thr Val Leu Ala Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val 1 5 10 15 Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser Glu cys Ala Asp Glu Asn Cys Cys 20 25 30 His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Asp Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr 35 40 45 Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro Glu Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg 50 55 60 His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys Val Val Ile Glu Asp Thr Leu Val 65 70 75 80 Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile Cys Gly Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu 85 90 95 Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val Lys Ser Asn Val Asp Met Val Ser 100 105 110 Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu Leu Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg 115 120 125 Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val Pro Lys Val Lys Lys His Val Ser 130 135 140 Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser Asp Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu 145 150 155 160 Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn Leu Asp Asp Ala Cys Ala Leu His 165 170 175 Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn Val Lys Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys 180 185 190 Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His Arg Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val 195 200 205 Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu 210 215 220 Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser Glu Ala Thr Leu Glu Gly Arg Thr 225 230 235 240 Ala Leu Met Ile Ala Lys Gln Ala Thr Met Ala Val Glu Cys Asn Asn 245 250 255 île Pro Glu Gln Cys Lys His Ser Leu Lys Gly Arg Leu Cys Val Glu 260 265 270 Ile Leu Glu Gln Glu Asp Lys Arg Glu Gln Ile Pro Arg Asp Val Pro 275 280 285 Pro Ser Phe Ala Val Ala Ala Asp Glu Leu Lys Met Thr Leu Leu Asp 290 295 300 Leu Glu Asn Arg Val Ala Leu Ala Gln Arg Leu Phe Pro Thr Glu Ala 305 310 315 320 Gln Ala Ala Met Glu Ile Ala Glu Met Lys Gly Thr Cys Glu Phe Ile 325 330 335 Val Thr Ser Leu Glu Pro Asp Arg Leu Thr Gly Thr Lys Arg Thr Ser 340 345 350 Pro Gly Val Lys Ile Ala Pro Phe Arg Ile Leu Glu Glu His Gln Ser 355 360 365 Arg Leu Lys Ala Leu Ser Lys Thr Val Glu Leu Gly Lys Arg Phe Phe 370 375 380 Pro Arg cys Ser Ala Val Leu Asp Gln Ile Met Asn Cys * 385 390 395 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:30 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 786 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : ADNc (ix) PARTICULARITE (A) NOM/CLE : CDS (B) LOCALISATION : 1..786 (D) AUTRES INFORMATIONS : produit = "forme modifiée du NIM1" /note = "Domaines ankyrine du NIM1". (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:30 ATG GAC TCC AAC AAC ACC GCC GCC CTC AAC CTC GAG CTT AAG GAG ATT 48 Met Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu Glu Leu Lys Glu Ile 1 5 10 15 GCC AAG GAT TAC GAA GTC GGT TTC GAT TCC GTT GTG ACT GTT TTG GCT 96 Ala Lys Asp Tyr Glu Val Gly Phe Asp Ser Val Val Thr Val Leu Ala 20 25 30 TAT GTT TAC AGC AGC AGA GTG AGA CCG CCG CCT AAA GGA GTT TCT GAA 144 Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser Glu 35 40 45 TOC GCA GAC GAG AAT TGC TGC CAC GTG GCT TGC CGG CCG CCC GTG GAT 192 Cys Ala Asp Glu Asn Cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Asp 50 55 60 TTC ATG TTG GAG GTT CTC TAT TTG GCT TTC ATC TTC AAC ATC CCT GAA 240 Phe Met Leu Glu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro Glu 65 70 75 80 TTA ATT ACT CTC TAT CAG AGG CAC TTA TTG GAC GTT GTA GAC AAA GTT 288 Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys Val 85 90 95 GTT ATA GAG GAC ACA TTG GTT ATA CTC AAC CTT GCT AAT ATA TGT GGT 336 Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile Cys Gly 100 105 110 AAA GCT TGT ATG AAC CTA TTG GAT AGA TGT AAA GAG ATT ATT GTC AAG 384 Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val Lys 115 120 125 TCT AAT GTA GAT ATG GTT AGT CTT GAA AAC TCA TTC CCG GAA GAG CTT 432 Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu Leu 130 135 140 GTT AAA GAG ATA ATT GAT AGA CGT AAA GAG CTT GGT TTG GAG GTA CCT 480 Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val Pro 145 150 155 160 AAA GTA AAG AAA CAT GTC TCG AAT GTA CAT AAG GCA CTT GAC TCG GAT 528 Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser Asp 165 170 175 GAT ATT GAG TTA GTC AAG TTG CTT TTG AAA GAG GAT CAC ACC AAT CTA 576 Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Clu Asp His Thr Asn Leu 180 185 190 CAT GAT GCG TGT GCT CTT CAT TTC GCT GTT GCA TAT TGC AAT GTG AAG 624 Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr Cys Asn Val Lys 195 200 205 ACC GCA ACA GAT CTT TTA AAA CTT GAT CTT CCC GAT GTC AAC CAT AGG 672 Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His Arg 210 215 220 AAT CCG AGG GGA TAT ACG GTG CTT CAT GTT GCT CCC ATG CGG AAC GAG 720 Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu 225 230 235 240 CCA CAA TTG ATA CTA TCT CTA TTC GAA AAA GGT GCA AGT GCA TCA GAA 768 Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser Glu 245 250 255 GCA ACT TTG GAA GGT TGA 786 Ala Thr Leu Glu Gly * 260 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:31 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 262 acides aminés (B) TYPE : acide aminé (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:31 Met Asp Ser Asn Asn Thr Ala Ala Val Lys Leu Glu Leu Lys Glu Ile 1 5 10 15 Ala Lys Asp Tyr Glu Val Cly Phe Asp Ser Val Val Thr Val Leu Ala 20 25 30 Tyr Val Tyr Ser Ser Arg Val Arg Pro Pro Pro Lys Gly Val Ser Glu 35 40 45 Cys Ala Asp Glu Asn cys Cys His Val Ala Cys Arg Pro Ala Val Asp 50 55 60 Phe Met Leu Clu Val Leu Tyr Leu Ala Phe Ile Phe Lys Ile Pro Glu 65 70 75 80 Leu Ile Thr Leu Tyr Gln Arg His Leu Leu Asp Val Val Asp Lys Val 85 90 95 Val Ile Glu Asp Thr Leu Val Ile Leu Lys Leu Ala Asn Ile Cys Gly 100 105 110 Lys Ala Cys Met Lys Leu Leu Asp Arg Cys Lys Glu Ile Ile Val Lys 115 120 125 Ser Asn Val Asp Met Val Ser Leu Glu Lys Ser Leu Pro Glu Glu Leu 130 135 140 Val Lys Glu Ile Ile Asp Arg Arg Lys Glu Leu Gly Leu Glu Val Pro 145 150 155 160 Lys Val Lys Lys His Val Ser Asn Val His Lys Ala Leu Asp Ser Asp 165 170 175 Asp Ile Glu Leu Val Lys Leu Leu Leu Lys Glu Asp His Thr Asn Leu 180 185 190 Asp Asp Ala Cys Ala Leu His Phe Ala Val Ala Tyr cys Asn Val Lys 195 200 205 Thr Ala Thr Asp Leu Leu Lys Leu Asp Leu Ala Asp Val Asn His Arg 210 215 220 Asn Pro Arg Gly Tyr Thr Val Leu His Val Ala Ala Met Arg Lys Glu 225 230 235 240 Pro Gln Leu Ile Leu Ser Leu Leu Glu Lys Gly Ala Ser Ala Ser Glu 245 250 255 Ala Thr Leu Clu Gly * 260 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:32 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 35 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:32 CAACAGCTTC GAAGCCGTCT TTGACGCGCC GGATG 35 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:33 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 35 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotidet (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:33 CATCCGGCGC GTCAAAGACG GCTTCGAAGC TGTTG 35 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:34 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 32 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:34 GGAATTCAAT GGATTCGGTT GTGACTGTTT TO 32 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:35 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 28 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:35 GGAATTCTAC AAATCTGTAT ACCATTGG 28 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:36 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 31 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:36 CGGAATTCGA TCTCTTTAAT TTGTGAATTT C 31 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:37 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 29 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:37 : GGAATTCTCA ACAGTTCATA ATCTGGTCG 29 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:38 : (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 31 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:38 GGAATTCAAT GGACTCCAAC AACACCGCCG C 31 (2) INFORMATIONS POUR LA SEQUENCE SEQ ID NO:39 (i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE (A) LONGUEUR : 33 paires de bases (B) TYPE : acide nucléique (C) NATURE DES BRINS : simple brin (D) TOPOLOGIE : linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE : autre acide nucléique (A) DESCRIPTION : /desc = "oligonucléotide" (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE SEQ ID NO:39 GGAATTCTCA ACCTTCCAAA GTTGCTTCTG ATG 33 REVENDICATIONS 1. Molécule d'ADN, caractérisée en ce qu'elle code une forme modifiée d'une protéine NIAI. 2. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle joue le rôle d'un régulateur dominant-négatif de la voie de transduction du signal de la SAR. 3. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM i possède des alanines au lieu de sérines sur les positions d'acides aminés correspondant aux positions 55 et 59 de la séquence SEQ ID NO:3. 4. Molécule d'ADN selon la revendication 3, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIMI comprend la séquence d'acides aminés présentée dans la séquence SEQ ID NO:23. 5. Molécule d'ADN selon la revendication 4, caractérisée en ce que ladite molécule d'ADN comprend la séquence nucléotidique présentée dans la séquence SEQ ID NO:22 et la totalité de l'ADN. 6. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que la forme modifiée de la protéine NIMI est une version tronquée du produit génique NIMI. 7. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIMI possède une troncation N-terminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 1-125 de la séquence SEQ ID NO:3. 8. Molécule d'ADN selon la revendication 7, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIMI comprend la séquence d'acides aminés présentée dans la séquence SEQ ID NO:25. 9. Molécule d'ADN selon la revendication 8, caractérisée en ce que ladite molécule d'ADN comprend la séquence nucléotidique présentée dans la séquence SEQ ID NO:24. 10. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM 1 possède une troncation C-terminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 522-593 de la séquence SEQ ID NO:3. Il. Molécule d'ADN selon la revendication 10, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIMI comprend la séquence d'acides aminés présentée dans la séquence SEQ ID NO:27. 12. Molécule d'ADN selon la revendication 11, caractérisée en ce que ladite molécule d'ADN comprend la séquence nucléotidique présentée dans la séquence SEQ ID NO:26. 13. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM I possède une troncation N-tefminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 1 à 125 de la séquence SEQ ID NO:2 et une troncation C-terminale d'acides aminés correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 522-593 de la séquence SEQ ID NO:3. 14. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIMI comprend la séquence d'acides aminés présentée dans la séquence SEQ ID NO:29. 15. Molécule d'ADN selon la revendication 14, caractérisée en ce que ladite molécule d'ADN comprend la séquence nucléotidique présentée dans la séquence SEQ ID NO:28. 16. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM 1 est essentiellement constituée de motifs ankyrine correspondant approximativement aux positions d'acides aminés 103-362 de la séquence SEQ ID NO:3. 17. Molécule d'ADN selon la revendication 16, caractérisée en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM i comprend la séquence d'acides aminés présentée dans la séquence SEQ ID NO:31. 18. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite molécule d'ADN comprend la séquence nucléotidique présentée dans la séquence SEQ ID NO:30. 19. Molécule d'ADN selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite molécule d'ADN s'hybride dans les conditions suivantes à une séquence nucléotidique choisie parmi l'ensemble comprenant les séquences SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:28 et SEQ ID NO:30: hybridation dans du BSA à 1 % NaP04 520 mM, pH 7,2 ; laurylsulfate de sodium à 7 % ; EDTA 1 mM ; chlorure de sodium 250 mM à 55"C pendant 18 à 24 heures, et lavage dans 6XSSC pendant 15 minutes (X3), 3XSSC pendant 15 minutes (X 1) à 55 Oc. 20. Gène chimère, caractérisé en ce qu'il comprend un promoteur ayant une activité dans les végétaux, lié par liaison opérationnelle à la molécule d'ADN selon l'une quelconque des revendications 1 à 19. 21. Vecteur recombinant comprenant le gène chimère de la revendication 20, caractérisé en ce que ledit vecteur peut être transformé d'une manière stable dans une cellule hôte. 22. Procédé d'activation de la SAR dans un végétal, qui consiste à transformer le végétal avec une molécule d'ADN, caractérisée en ce qu'elle code une forme modifiée d'une protéine NIM I, caractérisé en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM 1 est exprimée dans ledit végétal transformé et active la SAR dans ledit végétal. 23. Procédé pour conférer une résistance à un large spectre de maladies à un végétal, qui consiste à transformer le végétal avec le vecteur recombinant de la revendication 21, caractérisé en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM 1 est exprimée dans ledit végétal transformé et confere audit végétal une résistance à un large spectre de maladies. 24. Procédé pour conférer à un végétal un phénotype CIM, qui consiste à transformer le végétal avec le vecteur recombinant de la revendication 21, caractérisé en ce que ladite forme modifiée de la protéine NIM i est exprimée dans ledit végétal transformé et confère à ce végétal un phénotype CIM. 25. Cellule hôte, caractérisée en ce qu'elle est transformée d'une manière stable avec le vecteur de la revendication 21. 26. Cellule hôte selon la revendication 25, caractérisée en ce qu'il s'agit d'une cellule végétale. 27. Végétal, cellules végétales et leurs descendants, comprenant le gène chimère selon la revendication 20, caractérisés en ce qu'il présente un large spectre de résistance aux maladies. 28. Végétal, cellules végétales et leurs descendants, caractérisés en ce qu'une protéine NIM1 mise en jeu dans la cascade de transduction du signal conduisant à la résistance systémique acquise dans les végétaux est exprimée dans ledit végétal transformé, à des niveaux plus élevés que dans une plante de type sauvage. 29. Végétal, cellules végétales et leurs descendants selon les revendications 27 ou 28, caractérisés en ce que ledit végétal est choisi parmi l'ensemble comprenant les gymnospermes, les monocotylédones et les dicotylédones. 30. Végétal, cellules végétales et leurs descendants selon les revendications 27 ou 28, caractérisés en ce que ledit végétal est une plante de culture. 31. Végétal, cellules végétales et leurs descendants selon les revendications 27 ou 28, caractérisés en ce que ledit végétal est choisi parmi l'ensemble comprenant les plantes suivantes : riz, blé, orge, seigle, maïs, pomme de terre, carotte, patate douce, betterave à sucre, haricot, pois, chicorée, laitue, chou, choufleur, broccoli, navet, radis, épinard, asperge, oignon, ail, aubergine, poivre, céleri, carotte, courge, potiron, courgette, concombre, pomme, poire, coing, melon, prune, cerise, pêche, nectarine, abricot, fraise, raisin, framboise, mûre, ananas, avocat, papaye, mangue, banane, soja, tabac, tomate, sorgho et canne à sucre. 32. Procédé pour conférer un phénotype CIM à une cellule végétale, un végétal et leurs descendants, qui consiste à transformer le végétal avec le vecteur recombinant comprenant le gène chimère comprenant un promoteur ayant une activité dans les végétaux, lié par liaison opérationnelle à la molécule d'ADN qui code une protéine NIMI mise en jeu dans la cascade de transduction du signal conduisant à la résistance systémique acquise chez les végétaux, caractérisé en ce que ledit vecteur peut subir une transformations stable dans un hôte, où ladite protéine NIMI est exprimée dans ledit végétal transformé à des niveaux plus élevés que dans un végétal de type sauvage. 33. Procédé pour activer la résistance systémique acquise dans une cellule végétale, un végétal et leurs descendants, qui consiste à transformer le végétal avec le vecteur recombinant comprenant le gène chimère comprenant un promoteur ayant une activité dans les végétaux, lié par liaison opérationnelle à la molécule d'ADN qui code une protéine NIM1 mise en jeu dans la cascade de transduction du signal conduisant à la résistance systémique acquise chez les végétaux, caractérisé en ce que ledit vecteur peut subir une transformations stable dans un hôte, où ladite protéine NIMI est exprimée dans ledit végétal transformé à des niveaux plus élevés que dans un végétal de type sauvage. 34. Procédé pour conférer une résistance à un large spectre de maladies à une cellule végétale, un végétal et leurs descendants, qui consiste à transformer le végétal avec le vecteur recombinant comprenant le gène chimère comprenant un promoteur ayant une activité dans les végétaux, lié par liaison opérationnelle à la molécule d'ADN qui code une protéine NIMI mise en jeu dans la cascade de transduction du signal conduisant à la résistance systémique acquise chez les végétaux, caractérisé en ce que ledit vecteur peut subir une transformations stable dans un hôte, où ladite protéine NIMi est exprimée dans ledit végétal transformé à des niveaux plus élevés que dans un végétal de type sauvage. 35. Utilisation d'une plante transgénique ou de ses descendants, caractérisée en ce qu'ils comprennent un gène chimère selon la revendication 20 dans le cadre d'une technique agricole. 36. Sac du commerce, caractérisé en ce qu'il comprend des semences d'une plante transgénique comprenant au moins une forme modifiée de la protéine NIM 1 ou d'une protéine NIM 1 qui est exprimée dans ladite plante transformée, à des niveaux plus élevés que dans une plante de type sauvage, en même temps qu'un support approprié en une quantité suffisante pour jouer le rôle d'un régulateur dominant-négatif de la voie de transduction du signal SAR, en même temps que des instructions sur étiquette correspondant à leur utilisation, pour conférer aux plantes une résistance à un large spectre de maladies.