Brevet FR2746797A1 — publié le 19971003

La présente invention concerne de nouveaux dérivés du 10acétyldocétaxel. Parmi les composés à action anti-cancéreuse, un certain nombre d'entre eux sont apparentés aux dérivés du 10-acétyldocétaxel. Parmi les composés de ce type actuellement commercialisés, il faut citer le Docétaxel et le Paclitaxel. La présente invention concerne de nouveaux dérivés apparentés à cette famille, ainsi que les procédés pour leur préparation et leur application à titre de composés pharmaceutiques utilisables notamment dans le traitement des cancers. Plus particulièrement, la présente invention concerne des composés de formule dans laquelle R1 est H ou NH2 ou [N-alkyl] ou [N,N-dialkylamino], R2 est OH ou un halogène ou un radical OH protégé, R3 est H ou OH ou un radical OH protégé, R4 et Rs sont le radical carbonyl, le radical OH, OH estérifié par un acide alcanoïque ou pris ensemble représentent un radical acétonide en C1 à C3 ainsi que leurs sels et esters correspondants. De façon encore préférée, la présente invention concerne les composés dans lesquels R2 est le radical OH, R3 est H ou OH, R4 est choisi parmi OH et AcO, et R5 est OH ou carbonyl. Plus particulièrement, la présente invention concerne le composé de formule Parmi les sels des composés selon la présente invention, il faut citer plus particulièrement les chlorhydrates. Les radicaux alkyls ou correspondant aux radicaux alcanoïques sont de préférence en C1 à C3. Les protections des radicaux OH peuvent être notamment les radicaux triaikylsilyl tels que le radical TES, ou TB, ou DOMS, ou le radical TrOC. Les composés selon la présente invention sont utiles à titre de médicaments, et l'invention concerne également des compositions pharmaceutiques comportant à titre de principe actif au moins un composé tel que décrit précédemment. Le schéma ci-après décrit la synthèse de certains des composés selon la présente invention, notamment les composés 5, 7, 8 et 9. Les autres composés peuvent être préparés par des procédés analogues. En particulier, les composés selon la présente invention peuvent être préparés notamment par réaction d'un lactame de formule 4 éventuellement convenablement substitué et protégé sur le composé de formule 6, lui-même convenablement substitué et protégé afin d'obtenir un composé de formule 5 protégé. Le composé ainsi protégé peut être déprotégé sélectivement afin de conduire à l'un des composés selon la présente invention. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaitront à la lecture des exemples ci-après. EXEMPLES Préparation du 3 '-déphényl-3 '-[imidazol4( 5 )-yl]- 1 0-acétyldocétaxel Préparation du lactame 1 Le Lactame 1 est obtenu par réaction de la triméthylsilylaldimine de 2 avec l'énolate de l'auxiliaire chiral 3, tous deux préparés juste avant l'emploi. Présaration de la triméthvlsilvlaldimine de 2 selon les références I 2 Dans un bicol sous argon à 0 C, on place successivement 0,18 ml d'hexaméthyldisilazane et 0,6 ml de n-butyllithium (1,5M dans l'hexane). Après 5 min. d'agitation à 0 C, puis 35 min. à température ambiante, la solution est refroidie à - 70"C. On y ajoute une solution de 388,4 mg (1,14 mmol) de 1-trityl-4-carbaldéhyde imidazole 2 dans 2 ml de tétrahydrofurane. L'agitation se poursuit à - 70oC pendant 15 min., puis 1 h à 0 C (milieu réactionnel A). Présaration de l'énolate chiral de 3 selon la référence 2 Dans un bicol sous argon à 0 C, on place 0,8 ml de tétrahydrofurane fraichement distillé, 0,5 ml de n-butyllithium (l,52Nt dans l'hexane), puis 0,1 ml de diisopropylamine. La solution de diisopropylamidure de lithium ainsi formée est agitée pendant 30 min. à 0'C, puis refroidie à - 70"C. On y ajoute une solution de 242 mg de ( lR,2S)-2-phényl-1-cyclohexylterbutyl- diméthylsilyloxyacétate 3 (préparé selon 2) dans 1 ml de tétrahydrofurane; l'agitation se poursuit pendant 75 min. (milieu réactionnel B). Obtention du ss-lactame: A + B --- > 1 Le milieu réactionnel A est ajouté au milieu réactionnel B à - 70"C. Après 1 h d'agitation à la même température, on laisse revenir à la température ambiante en 1 h. Le milieu réactionnel est hydrolysé par 4 ml d'une solution aqueuse saturée en Nazi. La phase organique est décantée et séparée. La phase aqueuse est extraite par 3 x 5 ml de chlorure de méthylène. Les phases organiques sont réunies, séchées sur sulfate de magnésium, filtrées et concentrées à sec. Le résidu est chromatographié sur couche épaisse de silice avec l'éludant heptane / acétate d'éthyle [1:1] : on isole 250,4 mg de dérivé 1 (rendement 71 %). (3 R,4S)-2-oxo-3-terbutyldiméthylsilyloxy-4- [1 -tritylimidazol-4-ylj azétidine - amorphe, - pouvoir rotatoire [a]D - 5,8 (c = 1,4; chloroforme), - spectre de masse (impact électronique, T = 190 C, m/z) 509 (NI)+, - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz, chloroforme deutéré, ô):7,36 (s, 1H), 7,31 (m, 9H), 7,11 (m, 6H), 6,90 (s, 1H), 6,15 (s, 1H), 5,94 (m, 1H), 4,84 (d, J = 5 Hz, 1H), 0,77 (s, 9H), 0,11 (s, 3H), 0,01 (s, 3H), - sont également disponibles les spectres infra-rouge, ultra-violet et de résonance magnétique nucléaire du carbone. Prénaration du lactame protégé: 1--- > 4 La protection du lactame est faite par un groupement terbutoxycarbonyle. Une solution de 142,5 mg de 1 dans 1 ml de chlorure de méthylène est refroidie sous argon à 0tC. On y ajoute quelques cristaux de 4diméthylaminopyridine, 0,12 ml de triéthylamine et une solution de 180,3 mg de dicarbonate de diterbutyle dans 2 ml de chlorure de méthylène. Après 24 h d'agitation à température ambiante, on ajoute 3 ml d'eau. La phase organique est décantée et séparée. La phase aqueuse est extraite par 3 x 5 ml de chlorure de méthylène. Les phases organiques sont réunies, lavées avec 3 x 5 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium ; elles sont séchées sur sulfate de magnésium, filtrées, puis concentrées à sec. Le résidu est purifié par chromatographie sur couche épaisse de silice avec l'éluant heptane / acétate d'éthyle [1:1]: on obtient 160,2 mg de composé 4 avec un rendement de 93 %. (3 R,4S)- 1 -terbutoxycarbonyl-2 -oxo-3-terbutyldiméthylsilyloxy-4 [1-tritylimidazol-4-yl] azétidine 4 - amorphe, - pouvoir rotatoire [u]D + 8,8 (c = 3,07 ; chloroforme), - spectre de masse (impact électronique, T = 170 C, m/z) 509 (M+H-tBuOCO)+ - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz, chloroforme deutéré, ): 7,40 (s, 1H), 7,30 (m, 9H), 7,12 (m, 6H), 6,98 (s, 1H), 5,15 (d, J = 6 Hz, 1H), 1,41 (s,9H), 0,76 (s, 9H), 0,11 (s, 3H), 0,03 (s, 3H), - sont également disponibles les spectres infra-rouge, ultra-violet et de résonance magnétique nucléaire du carbone. Préparation du 2'-O-terbutyldiméthylsilyl-3'-déphényl-3'- [1 -tritylimidazol-4-yl]-7-O-triéthylsilyl- 1 0-O-acétyldocétaxel 5 Le couplage du lactame 4 et de la 7-O-triéthylsilylbaccatine III 6 conduit au dérivé 5. La préparation de 6 ne sera pas décrite. La 10-désacétylbaccatine III a été extraite des feuilles d'if (Taxxs baccata) récoltées par nos soins dans le parc du CNRS à Gif. Sa transformation en dérivé 6 a été faite en suivant les modes opératoires des références 3 et 4. PréDaration de 5 A une solution de 16,8 mg (0,024 mmol) de dérivé 6 dans 1 ml de tétrahydrofurane à OC, on ajoute 113,7 mg d'hydrure de sodium, puis une solution de 26,3 mg du lactame 4 dans 0,5 ml de tétrahydrofurane. Le milieu réactionnel est chauffé à 35"C pendant 2 h 30, puis refroidi à 0 C avant d'être hydrolysé par addition de 2 ml d'eau. Le résidu obtenu est chromatographié sur couche épaisse de silice avec l'éluant heptane / acétate d'éthyle [1:1] : on obtient 21,9 mg de composé 5 avec un rendement de 70 %. - amorphe, - pouvoir rotatoire [Q]D - 38,9 (c = 1,79 ; chloroforme), - spectre de masse (bombardement atomique rapide, alcool métanitro benzylique, chlorure de lithium) 1316 (Nt+U)+ - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz, chloroforme deutéré, 8) : 8,11 (d, J = 7 Hz, 2H), 7,60 (t, J = 7 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7 Hz, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,32 (m, 9H), 7,13 (m, 6H), 6,66 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 6,16 (t, J = 9 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 7 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 10 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,47 (dd, J = 10 et 7 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 8 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 7 Hz, 1H), 2,55 (m et s, 4H), 2,25 (m, 1H), 2,14 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,88 (m, 1H), 1,67 (s, 3H), 1,32 (s, 9H), 1,25 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 0,92 (m, 9H), 0,84 (s, 9H), 0,57 (s, 6H), 0,06 (s, 3H), - 0,88 (s, 3H), - sont également disponibles les spectres infra-rouge et de résonance magnétique nucléaire du carbone. Déprotection de 5 La déprotection du composé 5 se fera selon deux voies détritylation puis désilylation, ou désilylation puis détritylation. Première voie: 5 --- > 7--- > 8 A une solution de 15,1 mg de 5 dans 1 ml d'éthanol absolu, on ajoute une solution d'acide chlorhydrique à 1 %, goutte à goutte jusqu'à obtention d'un précipité blanc. Après 18 h d'agitation à 25"C, le milieu réactionnel est évaporé à sec. Le résidu est chromatographié sur couche épaisse de silice avec l'éluant chlorure de méthylène / méthanol [9:1] saturé en ammoniac on obtient ainsi 1 1 mg de dérivé 7 avec un rendement quantitatif. - amorphe, - pouvoir rotatoire [a]D - 32,4 (c = 0,21; chloroforme), - spectre de masse (bombardement atomique rapide, alcool métanitro benzylique, chlorure de lithium) 960 (M+U)+, - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz, chloroforme deutéré, 5): 8,11 (d, J = 7 Hz, 2H), 7,61 (s, 1H), 7,58 (t, J = 7 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7 Hz, 2H), 6,90 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 6,26 (t, J = 9 Hz, 1H), 5,66 (d, J = 7 Hz, 1H), 5,29 (s, 2H), 4,96 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,90 (s ép, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,29 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 8 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 7 Hz, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,34 (m, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,13(m, 1H), 1,87 (s + m, AH), 1,67 (s, 3H), 1,37 (s, 9H), 1,29 (s, 3H), 1,14 (s, 3H), 0,81 (s, 9H), 0,13(s, 3H), - 0,89(s, 3H), - est également disponible le spectre infra-rouge. A une solution de 5,2 mg (0,0054 mmol) de 7 dans 0,5 ml de pyridine à 0 C, est ajouté 0,05 ml de complexe acide fluorhydrique / pyridine. Après 18 h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est dilué avec 5 ml d'éther, puis lavé avec une solution chlorhydrique à 0,5 %. Après évaporation à sec du solvant, le résidu est chromatographié sur couche épaisse de silice avec l'éluant chlorure de méthylène / méthanol [9:1] : on obtient 2,4 mg de dérivé 8 avec un rendement de 52 %. - amorphe, - pouvoir rotatoire [a]D - 45,7" (c = 0,28 ; chloroforme), - spectre de masse (bombardement atomique rapide, alcool métanitro benzylique, chlorure de lithium) 846 (M+Li)+, - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz, méthanol deutéré, ô) : 8,13 (d, J = 7 Hz, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,63 (t, J = 7 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7 Hz, 2H), 7,05 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 6,16 (t, J = 9 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 7 Hz, 1H), 5,23 (s, 1H), 5,0 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,68 (s, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,16 (m, 2H), 3,86 (d, J = 7 Hz, 1H), 2,53 (s, 1H), 2,36 (m + s, 5H), 2,17 (s, 3H), 1,97 (s, 3H), 1,67 (s, 3H), 1,42 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,16(s, 3H). Première voie: 5 --- > 9--- > 8 A une solution de 3,9 mg (0,0029 mmol) de 5 dans 0,5 ml de pyridine à 0 C, est ajouté 0,0 15 ml de complexe acide fluorhydrique / pyridine. Après 18 h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est dilué avec 5 ml d'éther, puis lavé avec une solution chlorhvdrique à 0,5 %. Après évaporation à sec du solvant, le résidu est chromatographié sur couche épaisse de silice avec l'éluant chlorure de méthylène / méthanol [9/1] : on obtient 2,3 mg de dérivé 9 avec un rendement de 99 %. - amorphe, - pouvoir rotatoire [a]D - 55,6 (c = 0,23; chloroforme), - spectre de masse (bombardement atomique rapide, alcool métanitro benzylique, chlorure de lithium) 1088 (Nl+Li)+, - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz, chloroforme deutéré, ô) : 8,07 (d, J = 7 Hz, 2H), 7,61 (t, J = 7 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7 Hz, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,35 (m, 9H), 7,11 (m, 6H), 6,82 (s, 1H), 6,29 (s, 1H), 6,17 (t,J=9Hz, 1H), 5,67 (d,J=7Hz, 1H), 5,56 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,16 (d,J=9Hz, 1H), 4,96 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,71 (s ép, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,29 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,15 (d, J = 8 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 7 Hz, 1H), 2,55 (s, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,24 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,67 (s, 3H), 1,34 (s, 9H), 1,25 (s, 3H), 1,15 (s, 3H), - est également disponible le spectre infra-rouge. A une solution de 2,6 mg (0,0024 mmol) de 9 dans 0,5 ml d'éthanol absolu, on ajoute une solution d'acide chlorhydrique à 1 %, goutte à goutte jusqu'à obtention d'un précipité blanc. Après 18 h d'agitation à 25"C, le milieu réactionnel est évaporé à sec. Le résidu est chromatographié sur couche épaisse de silice avec l'éluant chlorure de méthylène / méthanol [9:1] saturé en ammoniac : on obtient ainsi 1,1 mg de dérivé 8 avec un rendement de 52 %. Les données spectrales sont identiques à celles décrites plus haut. EXEMPLE D'ACTIVITE CYTOSTATIQUE Les composés 8 et 9 selon la présente invention ont été testés en comparaison avec le composé de référence dénommé Docétaxel. Pour se faire, les produits sont utilisés dans le DMSO et les cellules de références testées sont des cellules KB. On mesure l'activité cytostatique en pourcentage en fonction de doses administrées puis on mesure selon une échelle connue une DL50. Les résultats sont donnés ci-après t TAXOTERE 10-11 10-10 5.10-10 10-9 5.10-9 M 0 24 % 36 % 85 % 96,5 % *DL 50 = 6,5.10-10 M 8 5 10-10 5,10-10 10-9 5.10-9 7,5.10-9 10-8 M 0 44,5% 63% 87% 93% *DL 50 = 1,75.10-9 M 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 M 7 99% 69% 20% 20% 19% 9 96,5 % 92% 68% 16% 0 8 98% 98% 98% 92% 91 % Ces tableaux démontrent que le composé 8 présente une activité cytostatique voisine de celle du Docétaxel. Il convient en effet de remarquer qu'un facteur 4 dans ce domaine ne saurait être totalement caractéristique et que les deux produits peuvent être considérés comme ayant des activités voisines. Références 1) Ojima I, Habus I, Zhao M, Zucco M, Park YH, Sun CM, Brigaud T, Tetrahedron (1992) 48, 6985-7012; 2) Ojima I, U. S. US-5,294,737, 15 March 1994, Appl. 842,444, 27 Feb. 1992; Chem. Abst. (1994)121, 281221b; 3) Denis J-D, Greene AE, Guénard D, Guéritte-Voegelein F, Eur. Pat. Appl. EP-0 336 840, 11 Oct. 1989 ; FR-Appl. 88 04 512, 6 Apr. 1988; Chem. Abst. (1990)112, 158670j; 4) Denis J-N, Greene AE, Guénard D, Guéritte-Voegelein F, Mangatal L Potier P,J. Am. Chem. Soc. (1988)110,5917-5919. REVENDICATIONS 1/ Composé de formule dans laquelle R1 est H ou NH2 ou [N-alkyl] ou [N,N-dialkylamino], R2 est OH ou un halogène ou un radical OH protégé, R3 est H ou OH ou un radical OH protégé, R4 et R5 sont le radical carbonyl, le radical OH, OH estérifié par un acide alcanoïque ou pris ensemble représentent un radical acétonide en C1 à C3 ainsi que leurs sels et esters correspondants. 2/ Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que R2 est le radical OH, R3 est H ou OH, R4 est choisi parmi OH et AcO et R5 est OH ou carbonyl. 3/ Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un composé de formule 4/ A titre de médicament, un composé selon l'une des revendications précédentes. 5/ Composition pharmaceutique comportant à titre de principe actif au moins un médicament selon la revendication 4. 6/ Procédé de préparation d'un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on déprotège un composé protégé sur l'azote en position 4 de l'imidazole, et/ou de l'hydroxy en position 7, et/ou de l'hydroxy de la chaîne latérale. 7/ Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que le composé protégé est obtenu par réaction d'un lactame de formule dans laquelle R1 est défini dans la revendication 1, et d'un dérivé de baccatine de formule dans laquelle R3, R4 et R5 sont définis dans les revendications 1 ou 2.