Brevet FR2740937A1 — publié le 19970516

Procédé pour semer des tissus méristématiques La présente invention a pour objet un procédé pour semer des tissus méristématiques dans le sol ou un support de culture. I1 est connu de semer des semences ou graines d'espèces végétales, et notamment de cultures agricoles ou horticoles à l'aide de semoirs automatiques. Il est par ailleurs connu d'effectuer des semis avec des tissus méristématiques, essentiellement des embryons somatiques. Ces semis sont manuels lorsque les embryons somatiques sont nus. L'utilisation de ces embryons somatiques nus dans des semoirs automatiques a bien été envisagé (cf Plant Cell, vol 39: p. 137-145, 1994) mais pour aussitôt estimer que le risque de dommage physique et de dessiccation est trop grand et que pour utiliser ces semoirs il faut avoir recours à des embryons encapsulés ou enrobés, par exemple dans un gel d'alginate, qui apportent à l'embryon une protection et une meilleure aptitude à être manipulés. Cette publication qui recommande une solution technique complexe tend à dissuader l'homme de métier de recourir à une technique plus simple. 11 a maintenant été trouvé que d'une manière surprenante, et contrairement à ce que suggère l'art antérieur, il est possible de procéder à des semis avec notamment des embryons somatiques nus. La présente invention a donc pour objet un procédé pour semer des tissus méristématiques, caractérisé en ce qu'on alimente un semoir avec des tissus méristématiques nus. De préférence, avant le passage dans le semoir, les tissus méristématiques passent dans au moins l'un des dispositifs de tri et de nettoyage et éventuellement de pelliculage. Par "tissu méristématique", on entend, au sens de la présente invention, tout tissu végétal, ou ensemble de cellules végétales, capable, lorsqu'il est mis dans des conditions convenables, de se développer jusqu'à former une plante entière ou partie de plante entière. Sous cette expression on inclut toute sorte de tissus végétaux, notamment: le tissu somatique à l'exception de la graine naturelle, l'embryon somatique, le tissu zygotique immature, le germe, le bourgeon adventice, les pousses, le primordium de tige (connu en anglais sous le nom de shoot primordium), les analogues de protocorm (connus en anglais sous le nom de protocorn like body), le tissu connu en anglais sous le nom de green spot, les cellules germinales (connues en anglais sous le nom de germ line). De manière préférée, on utilise des embryons somatiques. Par "tissu méristématique nu", on entend, au sens de la présente invention tout tissu méristématique tel que défini ci-dessus, soit tel quel soit ayant subi un traitement de surface par un agent classique, par exemple phytosanitaire, ou sous forme d'un pelliculage. Les végétaux dont sont issus des tissus méristématiques selon l'invention sont de nature, de forme et de taille les plus diverses, et incluent les espèces vivrières annuelles ou perennes, telles que le riz, le blé, l'orge, le maïs, le colza, le soja; les cultures légumières telles que le céleri, le persil, les salades, la chicorée, le chou, le chou-fleur, la carotte, I'aubergine, le piment, la tomate, l'oignon, l'ail, le gingembre, les fraises, les melons, les pastèques, le concombre, l'asperge; les cultures vivrières et/ou industrielles telles que la pomme de terre,, la canne à sucre, les betteraves sucrières ou fourragères, le tabac; les espèces de plantes médicinales telles que la belladone, le ginseng ou l'if; les cultures ornementales telles que les chrysanthèmes, les glaïeuls, les lys, les orchidées, les amaryllis, les géranium, les begonia, les violettes du Cap, les poinsettias; des arbres ou espèces arborescentes ou arbustes à feuillage persistant telles que les résineux ou à feuillage caduc tels que les érables, les palmiers, des cultures tropicales telles que le caféier, le cacaoyer, ou à feuillage caduc tels que les arbres fruitiers, la vigne. De manière préférée on utilise des "tissus méristématiques nus" de carotte ou de caféier. Le tissu méristématique est de préférence au moins partiellement déhydraté. De manière préférée, pour éviter, ou en tout cas limiter de manière importante, les phénomènes d'agglomération et donc de bouchage du semoir, les tissus méristématiques nus ont une humidité relative au plus égale à 85%. Par "semoir" on entend tout dispositif de distribution unitaires de graines sur des supports de germination, naturels ou artificiels. Un tel dispositf comprend généralement une trémie d'alimentation, un dispositif de transport, soit mécanique, par exemple par vibration, soit par aspiration, par exemple pneumatique, puis éventuellement des éléments de distribution précise tels que goulotte ou surface d'accompagnement et de guidage du tissu méristématique (cf par exemple PMM reveue horticole; septembre 1995; n" 362; p. 19-25. Le procédé selon l'invention permet de manière surprenante que les tissus méristématiques nus arrivent sur le sol sans dommage, que leur taux de germination dans le milieu de culture naturel ou artificiel est excellent, généralement au moins égal à 85% et pouvant atteindre 100% et que le taux de conversion des tissus méristématiques nus en plantes est équivalent à celui des tissus méristématiques correspondantes semés manuellement. Le procédé selon l'invention est effectué en alimentant la trémie d'un semoir avec une quantité prédéterminée de tissus méristématiques nus puis passage au dessus de la surface à semis, qui peut être, soit celle d'un champ, soit celle d'un milieu de culture artificel , en plaque ou en bouchons à bas de matériau de substrat de culture tel que, par exemple, tourbe, laine de roche ou encore celui décrit dans la demande FR 2 716 892. L' exemple suivant illustre, sans en limiter la portée, le procédé selon l'invention. EXEMPLE N" 1: SEMIS MECANIQUE D'EMBRYONS AVEC UN SEMOIR PNEUMATIQUE Obtention d'embryons somatiques de carotte. Les embryons somatiques sont obtenus selon la méthode décrite dans Cryo-Lett. 12: 319-328, 1991 et déshydratés selon la méthode décrite dans C.R. Acad. Sci. Paris, Sér. 111, 314, 423, 1992. Les embryons ainsi obtenus ont une teneur en eau inférieure à 0,35 grammes d'eau par gramme de masse sèche, I'eau résiduelle représentant moins de 3% de l'eau libre présente dans les embryons avant dessiccation. Leur taux d'humidité relative est de 45%. Obtention d'embryons somatiques de caféier. Les embryons somatiques sont obtenus selon la méthode décrite dans Café, Cacao, Thé, 35, 233-244, 1991 et déshydratés selon la méthode décrite dans C.R. Acad. Sci. Paris, Sér. 111, 314, 423, 1992. Leur taux d'humidité relative est de 45% Réalisation du semis: Le semoir utilisé est de type Granette (marque Visser). Le semoir est réglé pour semer sur plaques de germination de 40 x 60 cm contenant 240 alvéoles. 11 est équipé d'une trémie en aluminium compartimentée et d'une rampe de buses d'aspiration de 0,25 mm de diamètre. La pression de vibration des trémies est réglée à 6 bars et la dépression pour aspiration de 0,1 à 0,3 bars. Les embryons somatiques nus sont placés dans la trémie du semoir. Elles y sont vibrées puis aspirées avant d'être déposées par dépression sur les alvéoles. Environ 1000 embryons de carotte et 200 embryons de caféier ont été utilisés dans l'expérience. Les étapes ultérieures au semis (conversion) sont conduites en conditions stériles. Résultats. 1) Le taux de remplissage des alvéoles est le nombre d'alvéoles dans lequel est semé au moins un embryon rapporté au nombre total d'alvéoles couvertes par le semoir. Dans ce cas, le taux de remplissage des alvéoles est de 75% en moyenne sur l'ensemble des plaques. Le taux d'embryons doubles par alvéole est le nombre d'alvéoles dans lequel est semé au moins deux embryons rapporté au nombre total d'alvéoles couvertes par le semoir. Dans ce cas, le taux d'alvéole contenant deux embryons est de 5% . 2) Le taux de germination est le nombre d'embryons présentant un apex chlorophyllien et une racine rapporté au nombre total d'embryons semés. Les taux de germination des embryons de carotte sont donnés par le tableau suivant: Nombre d'embryons Nombre de plantes Taux de semés germes ermination(%) Embryons mis en germination en boîte 100 98 98 de Petri sans passage au semoir Embryons mis en germination en boîte 100 99 99 de Petri après passage au semoir 3) Les jeunes plantes âgées d'une semaine sont reprises et transférées, en conditions stériles, en boîte Magenta où elles se développent, donnant des plantes feuillées. Le taux de conversion est le nombre de jeunes plantes présentant la première paire de feuilles vraies rapporté au nombre total de plantes repiquées. Ce taux est évalué 20 jours après semis. Les résultats sont consignés dans le tableau suivant: Nombre de plantes Nombre de plantes L Taux de conversion repiquées présentant des (%) feuilles vraies Embryons mis en germination en boîte 50 32 64 de Petri sans passage au semoir Embryons mis en germination en boîte 50 33 66 de Petri après passage au semoir Ces résultats montrent clairement que le procédé selon l'invention permet, de manière surprenante le semis des tissus méristématiques nus dans d'excellentes conditions. Le semoir n'affecte ni le taux de germination, ni le taux de conversion en plante des embryons somatiques qui ont été semés. REVENDICATIONS 1. Procédé pour semer des tissus méristématiques, caractérisé en ce qu'on alimente un semoir avec des tissus méristématiques nus. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les tissus méristématiques sont des embryons somatiques. 3. Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que les tissus méristématiques ont une humidité relative au plus égale à 85%. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que les tissus méristématiques sont issus de la carotte. 5. Procédé selon l'une des revendications l à 3, caractérisé en ce que les tissus méristématiques sont issus du caféier. 6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le semoir est tel que le tissu méristématique à semer passe successivement dans une trémie, puis éventuellement dans des éléments de distribution tels que goulotte ou surface d'accompagnement et de guidage du tissu méristématique nu. 7. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le semoir est du type trémie à vibration. 8. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le semoir est du type trémie à aspiration pneumatique. 9. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le semoir comprend des goulottes pour une distribution précise des tissus méristématiques sur le sol. 10. Procédé selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que avant le passage dans le semoir, les tissus méristématiques passent dans au moins l'un des dispositifs de tri et de nettoyage et éventuellement de pelliculage.