Brevet FR2739778A1 — publié le 19970418

La présente invention est relative à une préparation pharmaceutique destinée à controler les maladies parasitaires dues à la douve ( fasciola hepatica / fasciola magna ) chez les animaux à sang chaud à l'exclusion de l'homme, en particulier une formulation utilisant du sel de sodium de closantel comme principe actif principal et associé ou non à un autre agent anthelmintique formulé dans un solvant ou un mélange de solvants choisis pour permettre une administration topique et un passage transcutané Différents symptômes cliniques sont associés à une infection par la douve, dépendant du stade d'avancement de l'infestation et du nombre de parasites.L'infestation aigue par la douve apparait au moment de l'invasion du foie par les métacercaires, dans les cas les plus graves les dégats apportés aux tissus hépatiques et les réactions inflammmatoires sont telles qu'une issue fatale s'ensuit. Les affections chroniques se développent lentement occasionnant cholangitis, obstruction biliaire, destruction des tissus hépatiques, fibroses et anémie. Cette infection limite bien évidemment la croissance de l'animal et sa capacité d'assimilation alimentaire réduisant de ce fait la production de viande chez le bovin et la production de lait chez la vache laitière. La présente invention concerne donc une préparation de closantel sel de sodium dissout dans un solvant ou mélange de solvants choisis pour une administration topique à l'animal. Cette préparation peut en outre, comporter un autre agent thérapeutique antiparasitaire déstiné à élargir le spectre antiparasitaire. Le closantel ou ( N-[5-chloro-4-[ Preventive Veterinary medicine, 2 (1984) 317-327 ). Rothwell J.T dans Int. J. Parasitol (1993) 16 (3) 254-60 met en évidence une efficacité comparable chez la chèvre et le mouton mais Hennessy D.R. dans J. Vet. Pharmacol. Ther. (1993) 16 (3) 254-60 note une pharmacocinétique différente entre les espèces à 7,5 mg/kg Cette différence entre espèces peut remettre en cause le choix des voies d'administration . De plus, dans de nombreuses régions, la dispersion du bétail dans les élevages extensifs, fait préférer le mode d'administration topique aux autres modes d'administration. Beaucoup plus adaptée à des élévages non restreints, cette voie d'administration est préférée également par sa facilité d'emploi par rapport aux autres formes orales ou plus encore parentérales avec leurs astreintes de stérilité. Outre la facilité d'emploi, l'éleveur administrant un traitement par voie topique apprécie le gain de temps obtenu, l'absence d'irritation douleur ou nervosité chez l'animal ainsi que le gain de main d'oeuvre en résultant. Pour une administration efficace, la formulation topique doit être dissoute ou dispersée dans un solvant adapté au principe actif, favorable au passage transcutané et bien toléré par l'animal. Le principe actif ainsi formulé doit être bien assimilé après son passage à travers la peau de l'animal. La demanderesse a trouvé de façon inattendue que le closantel sel de sodium pouvait être absorbé à travers la peau de l'animal quand il est formulé dans un solvant nonaqueux de type Pour on. La demanderesse a ainsi découvert qu'il était possible d'obtenir d'excellents résultats dans le contrôle de la douve du foie chez les animaux à sang chaud en administrant le dérivé sodé du closantel dans une formulation non aqueuse. Un objet de la présente invention est donc de réaliser une préparation pharmaceutique ayant une activité douvicide sur une base non aqueuse et capable d'être administrée par voie topique. Un autre intêret de la présente invention est de réaliser une formulation parfaitement stable notamment dans les conditions climatiques difficiles des grands élevages extensifs. Le N- [ 5- chloro -4- [ (4-chlorophenyl) cyanomethyl ] 2-methylphenyl]-2- hydroxy-3,5-diodo benzamide a été utilisé comme douvicide chez l'animal , en particulier chez le bovin par voie parentérale à la dose de 2,5 mg à 5 mg par kilo de poids d'animal. Il n'a jamais été tenté d'utiliser le sel de sodium du closantel pour obtenir une absorption transcutanée du principe actif. Le dérivé sodé du closantel bien que très peu soluble dans l'eau offre une assez bonne solubilité dans les solvants de type hydroxyethers ou polyols comme le diethylène glycol ou monobutylethyleneglycol. Ces solvants permettent au sel de sodium du principe actif un passage actif à travers l'épiderme et les couches profondes aboutissant ainsi à un taux plasmatique équivalent à une administration IM ou SC ou Per Os. Les formulations topiques selon la présente invention sont réalisées dans des glycols comme le propylèneglycol le diethylène glycol le butyldiglycol ou leur mono ou poly ethers comme le methoxyethanol le butoxyethoxyethanol, le monobutylether du propylèneglycol ou de l'ethylèneglycol. Le sel de sodium du closantel est dispersé dans le solvant sous vive agitation dans le solvant choisi à une température convenable pour faciliter la dissolution mais pas trop élevée afin d'éviter la décompositon thermique du ou des principes actifs. Cette température est comprise entre Oc et 100 OC de préférence entre 400 et 80 OC. Cette dissolution peut être accélérée par addition d'un adjuvant de dissolution choisi parmi les solvants dipolaires comme le Dimethylsulfoxyde, le dimethylacétamide ou le dimethylisosorbide.Après retour à température ordinaire, la solution peut être additionnée d'autres principes actifs antiparasitaires déstinés à combattre d'autres parasites. Les compositions selon la présente invention peuvent éventuellement contenir des produits susceptibles d'exalter le passage du/des principes actifs vers les couches profondes de la peau. On peut citer parmi ces produits : des alcools gras, plus particuliérement le n-dodecanol, des amides entre autres le Dimethylacetamide le n-butyl-n-dodecylamide, le dimethylformamide, des esters d'acide gras choisis de préférences parmi l'isopropylmyristate, le laurate de methyle, le monolaurate de glycérol ou de propylèneglycol, des dérivés monocycliques fonctionnels tels que cycloalcanone, N-methylpyrrolidone, les 1alkylazacycloheptane-2-one, des huiles essentielles ou dérivés dont le menthol, la 1-carvone, l'eucalyptol, l'eugénol, des dérivés sulfoxydes comme le Dimethylsulfoxyde, le decylmethylsulfoxide, des tensioactifs, et plus précisement des tensioactifs non ioniques, dont les esters de sorbitan comme le monolaurate les esters polyoxyéthyléniques de sorbitan, en particulier le monooléate de POE (20); ces auxiliaires de passage sont employés en proportion généralement inférieure à 20 % plus généralement entre 5 et 10 %. On peut additionner également des tensioactifs compatibles comme le Tween 80 pour donner à la préparation une viscosité souhaitable dans l'application cutanée, leur concentration est inférieure à 10 % plus généralement voisine de 1 à 2 %. La préparation peut également mettre en oeuvre des agents filmogènes comme des polymères ou copolymères acryliques. Des colorants sont également ajoutés pour permettre de tracer l'application sur l'animal, ces colorants sont choisis parmi des produits non toxiques comme le bleu patenté, la Rhodamine ou encore le violet de Gentiane ,à des concentrations de quelques milligrammes par litre. Des agents stabilisants peuvent éventuellement être ajoutés ce sont par exemple des dérivés phénoliques, s'il sont utilisés leur concentration dans la préparation ne dépasse pas 1 e et plus géneralement sera comprise entre 0.05 et 0.1 Selon l'invention, la préparation est appliquée de façon topique à l'animal en la versant sur le dos de l'animal, le long de la colonne vertébrale par exemple ou appliquée sur un zone moins étendue pour des préparations plus concentrées. On peut utiliser aussi bien des moyens comme des brosses ou rouleaux applicateurs que des récipients doseurs verseurs ou des seringues doseuses équipées d'un embout adéquat. Les exemples ci-dessous décrivent le principe de l'invention sans en limiter toutefois la portée. - Exemple 1 On disperse sous vive agitation 30 grammes de tlosantel sel de sodium dans le mélange suivant propylène glycol monobutyl ether 12 volumes éthylène glycolmonobutyl ether 9 volumes polyéthylêneglycol 400 1 volume diéthylène glycol 60 volumes en maintenant la température du milieu proche de 50 "C. Après environ 15 minutes la solution est totale, on laisse refroidir et ajoute tween 80 1 volume Rhodamine B 0,1 mg diéthylèneglycol q.s.p. 100 volumes - Exemple 2 On disperse sous vive agitation comme ci-dessus 20 grammes de Closantel sel de Sodium dans une quantité suffisante de propylène glycol soit environ 80 volumes pour atteindre un concentration de 20 % ( gr % ml de solution ). - Exemple 3 En opérant comme précédemment, en dissolvant 20 grammes de Closantel sodium dans 70 volumes de propylène glycol, on obtient une solution concentrée de closantel sodium à laquelle on ajoute après refroidissement une solution de 0.5 gramme d'Ivermectine dans 10 parties de propylène glycol - Exemple 4 On disperse sous vive agitation 30 grammes de Closantel sodium dans 10 ml de DMSO 60 millilitres de monobutylether du propylglycol et porte à 80"C 5 minutes puis à 500C pendant 30 minutes. On refroidit la solution obtenue et ajoute 1 mL de Tween 80 et l'équivalent de 1 milligramme de Bleu Patenté en solution dans le propylèneglycol pour compléter la préparation à 100 mL. - Exemple 5 On opère dans les conditions de l'exemple précédent en utilisant 30 grammes de Closantel sodium 10 mL de Dimethylacetamide, 5 mL de N-methylpyrrolidone et 65 mL d'éthylèneglycol. Après dissolution complète, on ajoute 1 g de polysaccharide semi-synthétique ( ique Klucel-HF-Aqualon )et 0.5 g de Tween 80 puis complète éventuellement à 100 mL. - Exemple 6 La formulation selon l'exemple 1 est appliquée sur le dos de bovins à raison de 10 mg, 20 mg, 30 et 40 mg / kg de poids vif. On a constitué des groupes de six bovins d'environ 300 kg .Un quatrième groupe est traité par voie sous-cutanée à raison de 2,5 mg / kg tandis qu'un cinquième groupe est traitée par voie orale à raison de 10 mg/kg et servent de témoins positifs . Des prélèvements sanguins sont effectués sur tous les animaux aux instants suivants ( en jours ) ; TO, T1, T3, T7, T10, T12, T14, T16, T18, T21, T28. Les prélèvements sont centrifugés et la concentration plasmatique du Closantel est déterminée par les méthodes H.P.L.C. connues. Les résultats sont rassemblés dans le tableau suivant. On note qu'une administration topique selon la formule ci-dessus à 20 mg/kg présente une concentration plasmatique comparable à une formulation sous-cutanée à 5 mg/kg. De même, la formule topique à 40 mg/kg présente une efficacité comparable à une administration de 10 mg/kg par voie orale. (Voir annèxe 1/1). Jour Adminis. Adminis. Adminis. Adminis. Adminis. Adminis. Topique Topique Topique Topique Inj Oral 10 mg/kg 20 mg/kg 30 mg/kg 40 mg/kg 2,5 mg/kc 10 mg/kg 1 7 7.56 22.35 3 2.24 3.97 5.65 7.24 17.35 45.27 7 3.07 10.85 19.63 25.94 15.04 40.35 10 8.37 17.26 32.9 52.97 14.09 i 32.65 12 7.13 14.57 29.77 47.77 12.85 29.81 14 5.7 12.15 27.13 39.72 11.35 26.64 16 5.44 11.82 28.21 39.46 10.51 24.33 18 5.36 10.87 26.65 35.04 i 8.91 22.68 21 5.11 9.48 23.42 32.34 7.73 16.86 28 4.59 7.98 21.64 29.85 5.32 12.95 - Exemple 7 On pratique une infestation expérimentale par des larves ( 200 au minimum ) au stade métacercaire de douve sur des bovins de 300 kg. Après un délai de 14 semaines,corrspondant au stade de développementet migration des formes immatures jusqu'à leur organe cible final le foie. On pratique l'administration de la préparation selon l'exemple 1 à raison de 30 mg/kg de bovin vif. Ceci s'obtient en versant 30 ml de la préparation sur le dos de l'animal le long de la colonne vertébrale. Après un délai de deux semaines les animaux sont abattus le foie prélevé et les parasites sont comptés. Sur 6 animaux traités , l'efficacité est de 97,42. Efficacité du Closantel Sodium Formulation Topique administrée à 1 mL/10 kg (30 mg/kg) sur Fasciola hepatica ID No Poids (kg) Dose (mL) Nbre de Moyenne douves 183 331 0 97 203 324 0 131 non traité 379 244 O 74 270 289 145 145 115 215 - 311 31.1 6 268 310 31 3 Groupe 281 299 29.9 o traité 287 316 31.6 2 385 221 22.1 O 359 295 29.5 7 3 Il ressort des exemples précédents que la concentration de Closantel sodium à employer dans cette formulation doit être comprise entre 1 et 60 % et plus particulièrement entre 5 et 40 %. Dans l'éventualité de l'addition d'un deuxième principe actif antiparasitaire, la concentration de celui-ci doit être comprise entre 0,01 % et 10 %, de préférence entre 0,1 et 2 %. Ce deuxième principe actif antiparasitaire est choisi parmi la famille des avermectines comprenant entre autres l'Abamectine et l'Ivermectine. Revendications 1 - Formulation topique comprenant comme substance active le closantel sodium associé ou non avec un autre antiparasitaire en solution dans un milieu solvant non aqueux favorisant le passage transcutané du/des principes actifs pour combattre la douve du foie chez l'animal. 2- Formulation selon la revendication 1 ou le closantel sodium est employé à la concentration comprise entre 1 et 60 % plus particulièrement entre 5 et 40 % 3- Formulation selon 1 et 2 dans laquelle un deuxième principe actif est compris entre 0.01 % et 10 % plus particulièrement entre 0.01 et 2% 4- Composition selon 1 à 3 où le solvant est un polyalcool un glycol ou un polyglycol ou un de leurs ethers ou un mélange de plusieurs d'entre eux. 5- Composition selon 1 à 4 selon laquelle on utilise un cosolvant choisi parmi le DMSO, le DMF, le DMAC, la NmethylPyrrolidone dans des proportions inférieurs à 20 % plus généralement entre 5 et 10 %. 6- Composition selon la revendication précédente dans laquelle est ajoutée une avermectine à une concentration comprise entre 0,1 et 1 % et où le cosolvant est le dimethylformamide. 7- Procédé pour la mise en solution selon les revendications 1 à 4 où l'on disperse le closantel sodium dans le/les solvants à température comprise entre 0 et 1000C plus particulièrement entre 40 et 80 OC.