Brevet FR2738064A1 — publié le 19970228

La présente invention concerne un dispositif pour mesurer ou détecter optiquement au moins une caractéristique ou une variation d'au moins une caractéristique d'une substance, telles que son absorbance par exemple, et une méthode pour sa mise en oeuvre, comportant notamment un moyen d'autocalibration du dispositif permettant de pallier à d'éventuelles dérives. Dans la demande de brevet FR 93/01.513, est décrit un dispositif pour mesurer des caractéristiques optiques d'une substance réagissante contenue dans une cellule transparente, telles que son absorbance vraie. ll comporte une source lumineuse, une première branche optique et une deuxième branche optique permettant sélectivement le passage de la lumière au travers de la cellule et à l'extérieur de celle-ci, un système optique pour former des rayons ayant traversé la première branche ou la deuxième branche optique et un filtre optique sélectif parmi un ensemble de trois filtres sélectifs centrés le premier sur une première longueur d'onde correspondant au point isobestique de la substance réagissante, le deuxième, sur une longueur d'onde située dans une partie du spectre de la lumière où la substance est la plus sensible et le troisième, dans une autre partie du spectre où la substance est la moins sensible, des moyens de mesure de l'intensité de la lumière ayant traversé le système optique, et permettant de déterminer des caractéristiques de la substance en combinant des valeurs d'intensité de la lumière ayant traversé la cellule contenant la substance et une cellule de référence. La méthode employée fournit des résultats précis et fiables mais néanmoins ne permet pas de pallier à toutes les dérives dues notamment au vieillissement des différents composants et des différences de chemin optique. De façon à améliorer la précision des mesures, le dispositif et la méthode de la présente invention permettent à tout moment d'effectuer une auto calibration du dispositif. On élimine ainsi tous les effets de dérive dus notamment au vieillissement, à la dégradation des différents composants du dispositif et aux différences de trajet optique. Le dispositif selon l'invention a pour objet de mesurer ou détecter optiquement au moins une caractéristique d'une substance réagissante contenue dans une cellule transparente (ou ses modifications), telles que son absorbance vraie. Il comporte au moins une source lumineuse, reliée par au moins une branche optique à un moyen permettant sélectivement le passage de la lumière incidente au travers de la cellule et à l'extérieur de celle, au moins un filtre de référence, un système optique pour former des rayons ayant traversé le moyen sélectif et un filtre optique sélectif choisi parmi un ensemble de trois filtres sélectifs centrés, le premier sur une première longueur d'onde correspondant au point isobestique de la substance réagissante, le deuxième sur une longueur d'onde dans une partie du spectre de la lumière où la substance est la plus sensible et le troisième, dans une autre partie du spectre où la substance est la moins sensible, des moyens de mesure de l'intensité de la lumière ayant traversé le système optique, un ensemble de pilotage, des moyens de sélection contrôlés par ledit ensemble de pilotage et un bloc d'alimentation électrique. Le dispositif est caractérisé en ce que le moyen de sélection du passage de la lumière est adapté pour laisser passer la lumière incidente au travers de ladite cellule et/ou au travers d'au moins un des filtres de référence et/ou directement à l'extérieur de ladite cellule et d'au moins un desdits filtres L'ensemble de pilotage comporte, par exemple, un processeur de commande, une unité d'acquisition des signaux de mesure d'intensité lumineuse et un ensemble d'interface pour contrôler le moyen de sélection. Selon un mode de réalisation, le système optique comporte des moyens de dérivation pour diriger vers les trois filtres les rayons lumineux ayant traversé le moyen de sélection de passage de la lumière, les moyens de mesure comportent trois détecteurs pour mesurer la lumière ayant traversé les trois filtres, et les moyens de commutation électrique comportent des éléments pour connecter par intermittence lesdits détecteurs avec ledit ensemble de pilotage et un commutateur pour connecter la source lumineuse, par exemple une lampe, au bloc d'alimentation électrique par intermittence. Le moyen de sélection du passage de la lumière comporte, par exemple, plusieurs éléments reliés séparément audit ensemble de pilotage. n peut aussi comprendre un support commun au filtre de référence et à la cellule transparente, ledit support commun étant mobile en rotation et/ou en translation et le support étant relié audit ensemble de pilotage. Suivant un mode de réalisation, le dispositif comporte une première branche optique et une deuxième branche optique permettant respectivement le passage de la lumière incidente au travers de la cellule transparente et au travers d'au moins un desdits filtres de référence. Pour améliorer la précision des mesures, le dispositif peut comporter des moyens de mesure de la température ambiante et/ou celle de la substance réagissante, pouvant être connectés à l'ensemble de pilotage par les moyens de commutation électrique et des moyens de mesure de la tension électrique d'alimentation de chaque lampe pouvant être connectés à l'ensemble de pilotage par les moyens de commutation électrique. La première branche et la deuxième branche comportent, par exemple, chacune au moins un filtre optique. La méthode selon l'invention est caractérisée suivant un mode de réalisation, en ce qu'elle comporte la réalisation automatique de cycles de mesure sous le contrôle d'un ensemble de pilotage, chacun d'eux comportant: a) une étape de mesure où l'on dirige la lumière ayant traversé la cellule transparente successivement au travers trois filtres sélectifs (F1, F2, F3), et on acquiert les valeurs détectées des intensités lumineuses issues des trois filtres; b) une étape de mesure où l'on dirige la lumière ayant traversé au moins un premier milieu de référence successivement au travers des trois filtres et on acquiert également les valeurs détectées des intensités lumineuses issues des trois filtres; c) une étape de mesure où l'on dirige la lumière ayant traversé au moins un second milieu de référence successivement au travers des trois filtres et on acquiert également les valeurs détectées des intensités lumineuses issues des trois filtres, et d) on détermine à partir des valeurs mesurées aux étapes b) et c) pour chacun des filtres une valeur de coefficient de correction Kcj relative à chacun des filtres et on détermine à partir des valeurs d'intensité mesurées pour les étapes a) et b) ou a) et c) et du coefficient de correction associé à un filtre des caractéristiques de la substance réagissante. Les milieux de référence sont par exemple des filtres de référence ayant des valeurs de transmitance connues, ou encore un filtre neutre ne modifiant pas la lumière incidente. On peut, par exemple, utiliser trois filtres sélectifs centrés de la manière suivante, le premier sur une première longueur d'onde correspondant au point isobestique de la substance réagissante, le deuxième sur une longueur d'onde dans une partie du spectre de la lumière où la substance est la plus sensible et le troisième, dans une autre partie du spectre où la substance est la moins sensible. On peut au cours de l'étape b) ou de l'étape c) faire passer la lumière incidente à travers l'air. Selon une autre façon de procéder, on dirige respectivement au cours des étapes b) et c) la lumière incidente à travers un premier filtre et à travers un second filtre de référence, les filtres de référence utilisés aux étapes b) et c) ayant une valeur de transmitance associée Tel, Te2, la différence Tel-Te2 est choisie sensiblement égale à la valeur maximum de la transmitance de la substance contenue dans la cellule. D'autres caractéristiques et avantages du dispositif selon l'invention et de la méthode de mise en oeuvre, apparaîtront mieux à la lecture de la description ci-après de deux modes de réalisation décrits seulement à titre d'exemples en se référant aux dessins annexés où - la figure 1 montre schématiquement un premier mode de réalisation du dispositif comportant un parcours optique unique et un moyen mobile de sélection du passage de la lumière incidente, - la figure 2 montre schématiquement un deuxième mode de réalisation comportant deux parcours optiques pour le passage de la lumière incidente, - les figures 3A et 3B schématisent des variantes de réalisation des moyens de sélection selon le schéma de la figure 1, - les figures 4 et 5 détaillent un exemple d'organigramme et une étape d'acquisition des mesures de mise en oeuvre du mode de réalisation de la figure 1. On rappelle tout d'abord que le pH d'une solution se calcule par la relation: pH = pKi + log x/(l-x) (1), où pKi est une constante et x est la fraction basique de la substance. Ce paramètre x est reliée à l'absorbance A de la substance par la relation x = A/(c.l. ) (2) où c représente la concentration, 1, la longueur du trajet optique traversé par les rayons et e, le coefficient d'extinction de la cellule.L'absorbance s'exprime en fonction de l'intensité inadente Ii appliquée à la cellule et de l'intensité le qui en émerge, par la relation: A=log(Ii/Ie) (3) Les valeurs de l'absorbance A sont soumises à des fluctuations importantes si l'on procède uniquement à la mesure de Ie du fait de l'instabilité de la lampe. On sait en effet que les caractéristiques d'une telle source varient au cours du temps. La température de couleur par exemple est susceptible de varier en raison de causes diverses tenant à la lampe elle-même: vaporisation progressive du filament, vieillissement de l'enveloppe etc., et à l'instabilité de l'alimentation électrique. I1 en résulte une modification notable de la forme du spectre de fréquence de la source.On observe par exemple que la température de couleur de la source peut diminuer au cours du temps de plus de 10%, ce qui se traduit par des variations importantes des rapports entre les intensités lumineuses appliquées aux différents filtres avec pour conséquence des fausses mesures. Des dérives peuvent aussi provenir des différences de parcours optique entre la source de lumière et le système de mesure. La valeur de la transmitance se déduit simplement de la valeur de l'absorbanoe A selon la relation T = I-A. De par sa conception et son mode de mise en oeuvre, le dispositif selon l'invention permet justement de faire abstraction des effets dus au vieillissement ou à la dégradation des composants entrant dans le dispositif et/ou éventuellement des incertitudes dues aux trajets optiques pouvant être différents, en réalisant une auto-calibration du dispositif en permanence et pour chaque longueur d'onde. Suivant un premier mode de réalisation décrit à la figure 1, le dispositif comporte une source lumineuse I telle qu'une lampe halogène à filament de tungstène. La lumière issue de la source 1 est dirigée vers un ensemble ou moyen mobile 2 permettant sélectivement le passage de la lumière incidente, comportant un support 3 muni d'une cellule transparente 4, contenant une substance réactive dont on veut mesurer les variations de couleur, reliée au support par un actionneur 5 et d'un moyen de référence tel un filtre 6 relié luimême au support par un actionneur 5'. Le moyen 2 est mobile en rotation et/ou en translation selon sa structure, de façon à positionner la cellule et le filtre de référence par rapport au faisceau de la lumière incidente.La cellule transparente 4 et le filtre de référence 6 sont agencées sur le support 3 de manière à laisser passer la lumière incidente à l'extérieur de ces deux éléments. Différentes variantes de réalisation du moyen mobile sont décrites aux figures 3A et 3B. Le faisceau de lumière issu de la cellule 4, du filtre de référence 6 et/ou ayant passé à l'extérieur de ces deux éléments, est subdivisé par un séparateur optique 8 en trois faisceaux qui sont dirigés par trois fibres optiques 13, 14, 15 respectivement vers trois filtres colorés F1, F2, F3. Ces trois filtres laissent passer respectivement les longueurs d'onde L1 = 494 nm, L2 = 600 nm et L3 = 730 nm par exemple. La première L1 correspond au point dit isobestique de la substance colorante où l'absorbance de la fraction basique de la substance est égale à celle de sa fraction acide et donc indépendante de la valeur du pH. La deuxième L2 est celle pour laquelle la substance colorée réagit le plus aux variations du paramètre à mesurer.La troisième L3 correspond à une longueur d'onde pour laquelle l'absorbance de la substance colorée ne subit aucune variation. Chacun des trois filtres F1, F2, F3 est doublé par exemple d'un filtre neutre dont la transmitance est choisie de façon à équilibrer les intensités lumineuses passant dans les trois branches 13, 14, 15. La lumière ayant traversé respectivement les trois filtres colorés FI, F2, F3 , est appliquée à trois détecteurs photoélectriques DI, D2, D3. Les signaux qu'ils délivrent sont appliqués à trois entrées d'un multiplexeur M. La gestion du dispositif est assurée par un ensemble de pilotage 9 comportant un processeur de commande 10, une unité d'acquisition 11 connecté à la sortie du multiplexeur M et un ensemble d'interface 12 pour la commande des différents composants du dispositif et du multiplexeur M. Le dispositif comporte encore un bloc d'alimentation électrique 13 tel qu'un accumulateur électrique dans le cas d'un fonctionnement autonome du dispositif, ce bloc étant connecté à la lampe 1 par l'intermédiaire d'un interrupteur I1 également commandé par l'ensemble d'interface 12.De préférence, le dispositif comporte aussi une sonde thermique 14 disposée au voisinage des éléments du dispositif pour mesurer la température ambiante, et/ou celle de la substance réactive, cette sonde étant reliée à une entrée du multiplexeur M, ainsi qu'un voltmètre pour mesurer la tension délivrée par le bloc d'alimentation 13. L'ensemble d'interface 12 est relié, par exemple individuellement à la cellule transparente et au filtre de référence, qui dans 1 'exemple de réalisation de la figure 1 sont des éléments séparées, de manière à contrôler en agissant, par exemple, sur les actionneurs 5 et 5', leur positionnement par rapport au faisceau de lumière incidente. Selon d'autres modes de réalisation, l'ensemble 12 commande le support mobile pour positionner les éléments par rapport au faisceau de lumière. La cellule transparente étant mobile directement ou indirectement, sa liaison avec une éventuelle source extérieure s'effectue à l'aide de conduites souples. La méthode de mesure que l'on applique permet de faire abstraction de la dégradation des composants en déterminant un coefficient de correction pour chaque longueur d'onde des filtres, de préférence en permanence. Comme l'indique l'organigramme des Figs 4 et 5, chaque cycle de mesure comporte tout d'abord une série de 8, 12 ou 16 mesures dites d"'offset", où l'on mesure en séquence les signaux de bruit affectant les détecteurs D1, D2, D3 par une commande séquentielle du multiplexeur M, ces signaux étant acquis et numérisés par l'ensemble d'acquisition 11. Les signaux de bruit ayant été mesurés, on allume ensuite la lampe en ouvrant l'interrupteur I1, puis on positionne la cellule et le filtre de référence de façon à laisser passer directement la lumière incidente vers les filtres F1, F2, F3, et on procède à une première séquence de mesures de la lumière ayant traversé directement et successivement filtrée à travers les filtres F1, F2, F3.Puis on positionne la cellule transparente de façon à ce que la lumière incidente passe à travers et on procède selon une séquence analogue à une seconde série de mesures de la lumière ayant traversé la cellule transparente et successivement filtrés à travers les filtres F1, F2, F3. Puis en agissant par exemple sur les actionneurs 5 et 5' on repositionne la cellule transparente vers sa position initiale et on place le filtre de référence pour laisser passer la lumière incidente à travers et on procède à une troisième séquence de mesures de la lumière ayant traversé le filtre de référence et successivement filtrés à travers les filtres F1, F2, F3 selon une séquence analogue. A la fin de ce cycle de mesures, on se trouve en possession pour chaque valeur de longueur d'onde associée à un des filtres F1, F2 ou F3 et indicée dans la suite de la description par j, d'une mesure de la lumière incidente Mij, d'une valeur de la lumière Msj ayant traversé la cellule transparente contenant la substance susceptible de varier et de la valeur de la lumière ayant traversé le filtre de référence Mrj Pour chaque longueur d'onde propre à un filtre, on détermine la valeur de la transmitance du filtre de référence selon la formule Trj = (Kr*Mrj)/Mij où Kr est le coefficient de couplage du filtre de référence. Connaissant la valeur de la transmitance initiale pour le filtre de référence, Te, on obtient le coefficient de correction associée à une valeur de longueur d'onde référencée par l'indice j Kcj = (Te/Trj) Et, à partir de ce coefficient de transmitance, on détermine la valeur de la transmitance de la substance contenue dans la cellule transparente pour une valeur de longueur d'onde Tsj = Kcj *[(Ksj*Msj)/Mij] où Ksj est le coefficient de couplage de la cellule. La valeur de l'absorbance de la substance contenue dans la cellule transparente est ensuite directement déduite pour chaque longueur d'onde de l'expression suivante Asj =1- Tsj On calcule ainsi les absorbances Asl, As2 et As3 correspondant aux trois longueurs d'onde des filtres colorés Fl à F3. Par application de la relation (2), on peut montrer que l'on obtient la valeur de la fraction basique x de la substance étudiée, par la relation suivante x = k. (As2 - As3)/ (Asl - As3) où k est une constante, et que, du fait de la méthode comparative employée, on fait totalement abstraction de toute dégradation de tous les composants du dispositif pour chaque longueur d'onde. Le processeur 10 peut en déduire par exemple le pH de la substance analysée. Pour compléter les mesures précédentes, on procède de préférence à une acquisition de la température mesurée par le voltmètre 14 ainsi que de la tension électrique appliquée à la lampe 1 mesurée par l'élément 15, et on tient compte de ces valeurs afin de minimiser les erreurs. On constate en effet que les erreurs de mesure quand la température passe de 20"C à 60"C sont de l'ordre de 4%. Pour compenser ces variations, le processeur 12 est adapté à appliquer aux mesures une correction en fonction de la variation de température, telle qu'une correction linéaire par exemple. Si l'on veut encore mieux minimiser les erreurs de mesure, on peut aussi tenir compte des variations de la tension électrique (dues dans le cas d'une alimentation autonome, à la décharge de l'accumulateur), qui ont pour effet de faire varier l'intensité lumineuse de la lampe 1. En tenant compte de ces variations de la température et de la tension électrique, on peut obtenir des mesures précises à 1 O/oo près. La figure 2 décrit un autre mode de réalisation comprenant deux chemins optiques à la place du chemin unique optique de la figure 1 et de deux filtres de référence. La lumière issue de la source 1 est subdivisée par un séparateur optique 21 en deux pinceaux lumineux qui sont dirigés au moyen de fibres optiques 11, 12 par exemple, le premier, vers une branche optique principale comportant un commutateur 22 et une cellule 23 contenant la substance réactive dont on veut mesurer les variations de couleur, le deuxième, vers une branche optique dérivée pour former un faisceau passant à l'extérieur de la cellule 23 et à travers un ensemble 24 comprenant deux filtres de référence 25 et 26, ayant respectivement des valeurs de transmitances initiales Tel et Te2.L'obturateur 22 et le dispositif 24 de sélection de passage de la lumière sont reliés à l'ensemble d'interface 12, qui commande leur ouverture ou le positionnement par rapport au faisceau de la lumière incidente de façon à laisser passer le faisceau de manière sélective selon une séquence sensiblement identique à celle décrite en relation avec la figure 1 à travers respectivement les deux filtres de référence et la cellule transparente. Les filtres de référence 25 et 26 possèdent des valeurs de transmitance choisies de façon que la différence Tel-Te2 soit sensiblement du même ordre de grandeur que la transmitance maximum possible de la substance à mesurer contenue dans la cellule. Ceci permet avantageusement de calibrer cette mesure, indépendamment de la quantité de lumière ayant traversé le milieu. Les deux branches optiques sont connectées à un noeud optique 7 qui permet la transmission du faisceau de lumière provenant sélectivement de l'une ou l'autre branche, vers un séparateur optique 8. Ce dernier subdivise le faisceau en trois faisceaux dirigés vers les trois filtres comme il est décrit à la figure 1. La méthode de mesures s'effectue selon une séquence analogue à celle décrite en relation avec la figure 1, la lumière étant envoyée respectivement à travers chacun des filtres de référence et à travers la cellule transparente. n est bien entendu que l'un des filtres de référence peut être un filtre neutre, n'introduisant pas de modification au niveau de la lumière incidente. La figure 3A décrit un exemple de réalisation pour le moyen de sélection de passage de la lumière mobile en translation. ll comporte, disposé sur un support commun 30, la cellule transparente 4, un filtre de référence 6 et par exemple une fente 31 laissant passer la lumière directement. I1 est bien entendu que la fente peut être remplacée par un second filtre de référence comme mentionné à la figure 2. Le support 30 est rendu mobile en translation, par exemple à l'aide de moyens connus, tel qu'un moteur pas à pas ou tout autre moyen disponible et connu de l'homme de métier permettant son déplacement, et de préférence simultanément, une indexation des éléments présents sur le support afin de les positionner de manière précise par rapport au faisceau de lumière incidente pour réaliser les étapes de la méthode. Sur la figure 3B, on a représenté un moyen 2 monté par exemple sur un axe de rotation 32. De manière identique, l'axe de rotation 32 est relié à un dispositif de commande, tel un moteur (non représenté sur la figure) relié à l'ensemble 12, par exemple, qui le pilote de façon à positionner la cellule et, le ou les filtres de référence, selon les séquences mises en jeu au cours de la méthode. I1 est bien entendu que les formes des fentes, filtres et supports peuvent être quelconques et sont choisis en fonction de l'encombrement. REVENDICATIONS 1) Dispositif pour mesurer ou détecter optiquement au moins une caractéristique ou une variation d'au moins une caractéristique d'une substance réagissante contenue dans une cellule transparente (4), comportant au moins une source lumineuse (1), reliée par au moins une branche optique à au moins un moyen (2) permettant sélectivement le passage de la lumière incidente au travers de la cellule et à l'extérieur de celle, au moins un filtre de référence (6), un système optique pour former des rayons ayant traversé ledit moyen sélectif et un filtre optique sélectif parmi un ensemble de trois filtres sélectifs (F1, F2, F3) centrés, le premier sur une première longueur d'onde correspondant au point isobestique de la substance réagissante, le deuxième sur une longueur d'onde dans une partie du spectre de la lumière où la substance est la plus sensible et le troisième, dans une autre partie du spectre où la substance est la moins sensible, des moyens de mesure (Dl-D3) de l'intensité de la lumière ayant traversé le système optique, un ensemble de pilotage (9), des moyens de sélection contrôlés par ledit ensemble de pilotage et un bloc d'alimentation électrique (13), caractérisé en ce que ledit moyen (2) de sélection du passage de la lumière est adapté pour laisser passer la lumière incidente au travers de ladite cellule et/ou au travers d'au moins un desdits filtres de référence et/ou à l'extérieur de ladite cellule et d'au moins un desdits filtres de référence. 2) Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'ensemble de pilotage (9) comporte un processeur de commande (10), une unité d'acquisition (11) des signaux de mesure d'intensité lumineuse et un ensemble d'interface (12) pour contrôler lesdits moyens de sélection. 3) Dispositif selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que ledit système optique comporte des moyens de dérivation (7, 8) pour diriger vers les trois filtres les rayons lumineux ayant traversé la première ou la deuxième branche, les moyens de mesure comportent trois détecteurs (D1, D2, D3) pour mesurer la lumière ayant traversé les trois filtres, et les moyens de commutation électrique comportent des éléments (M) pour connecter par intermittence lesdits détecteurs avec ledit ensemble de pilotage et un commutateur (I1) pour connecter la source lumineuse au bloc d'alimentation électrique par intermittence. 4) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que ledit moyen de sélection du passage de la lumière est composé de plusieurs éléments (4, 6) reliés séparément audit ensemble de pilotage (9). 5) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que ledit moyen (2) de sélection du passage de la lumière comporte un support commun au filtre de référence et à la cellule transparente, ledit support commun étant mobile en rotation et/ou en translation et en ce que ledit support est relié audit ensemble de pilotage (9). 6) Dispositif selon l'une des revendications 1 à 3 caractérisé en ce qu'il comporte une première branche optique et une deuxième branche optique permettant respectivement le passage de la lumière incidente au travers de la cellule transparente (23) et au travers d'au moins un desdits filtres de référence (25,26). 7) Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comporte des moyens (14) de mesure de la température ambiante et/ou celle de la substance réagissante, pouvant être connectés à l'ensemble de pilotage par les moyens de commutation électrique. 8) Dispositif selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comporte des moyens (15) de mesure de la tension électrique d'alimentation de chaque lampe pouvant être connectés à l'ensemble de pilotage par les moyens (I1-I4) de commutation électrique. 9) Méthode pour mesurer optiquement les modifications d'une substance réagissante contenue dans une cellule transparente, caractérisée en ce qu'elle comporte la réalisation automatique de cycles de mesure sous le contrôle d'un ensemble de pilotage, comportant chacun: a) une étape de mesure où l'on dirige la lumière ayant traversé la cellule transparente successivement au travers de trois filtres sélectifs (Fl, F2, F3) et on acquiert les valeurs Msj détectées des intensités lumineuses issues des trois filtres, b) une étape de mesure où l'on dirige la lumière ayant traversé un premier milieu de référence successivement au travers des trois filtres et on acquiert également les valeurs Mrj détectées des intensités lumineuses issues des trois filtres, c) une étape de mesure où l'on dirige la lumière ayant traversé un second milieu de référence au travers des trois filtres et on acquiert également les valeurs Mij détectées des intensités lumineuses issues des trois filtres, et d) on détermine à partir des valeurs mesurées aux étapes b) et c) pour chacun des filtres une valeur de coefficient de correction Kcj relative à chacun des filtres et on détermine à partir des valeurs d'intensité mesurées pour les étapes a) et b) ou a) et c) et du coefficient de correction associé à un filtre des caractéristiques de la substance réagissante. 10) Méthode selon la revendication 9 caractérisée en ce qu'au cours de l'étape b) ou de l'étape c), on dirige directement la lumière incidente à travers l'air. 11) Méthode selon la revendication 9 caractérisé en ce qu'au cours de l'étape b) et de l'étape c) on dirige respectivement la lumière incidente à travers un premier filtre et un second filtre de référence, chacun des filtres ayant une valeur de transmitance associée Tel, Te2 et en ce que la différence Tel-Te2 est sensiblement égale à la valeur maximum de la transmitance de la substance contenue dans la cellule.