Brevet FR2740039A1 — publié le 19970425

UTILISATION D 'UNE SUBSTANCE INHIBANT LA PRO TEINTE D'ADHéSION D'UN MICROORGANISME, COMPOSITION NOTAMMENT COSMETIQUE OU THERAPEUTIQUE CONTENANT CETTE SUBSTANCE Domaine de l 'invention La présente invention a trait à l'utilisation d'une substance inhibant la protéine d'adhésion d'un microorganisme afin d'empêcher ou de limiter substantiellement la fixation dudit microorganisme sur des cellules humaines, animales ou végétales. Elle concerne également une composition comprenant ladite substance inhibitrice pour un usage notamment cosmétique, thérapeutique ou phytosanitaire. On sait que les mono- et polyaldéhydes ont des propriétés antibactériennes. On sait également qu'aux doses antibactériennes ces aldéhydes ne sont pas tolérés par l'organisme. Ceci explique en particulier que lesdits mono- et polyaldéhydes sont plutôt utilisés à des doses plus faibles en tant que conservateurs de compositions cosmétiques et pharmaceutiques. Voir à cet effet. la demande PCT publiée WO 94/04167 et l'article de N. MELTZER et al., Cosmetics and Toileteries, 1977; 92 pages 95-98. On sait par ailleurs de l'article de G.W. COLE et al., Arch. Dermatol., 1986; 122, pages 166-169, que les souches de Staphylococcus aureus se fixent, par l'intermédiaire de leur protéine d'adhésion qui est principalement constituée de protéine A, sur les cornéocytes et sont un des facteurs étiopathogénique de la dermatose atopique ou des complications de cette maladie. Selon l'article de S.J. MILLER et al., Arch. Dermatol., 1988; 124, pages 209-215, il a été recommandé de faire appel à un acide gras libre, de préférence extrait et isolé des lipides du stratum corneum [où ledit acide est sous forme liée (triglycéride en particulier)] pour protéger les cornéocytes de l'action des souches de Staphylococcus aureus. Or il se trouve que l'utilisation d'un acide gras est insuffisante pour empêcher substantiellement la fixation desdites souches de Staphylococcus aureus. But de l'invention Il existe donc un besoin à satisfaire en ce qui concerne la protection des cellules vivantes de l'organisme vis-à-vis des microorganismes capables de se fixer auxdites cellules. En effet, d'un côté les mono- et polyaldéhydes ne sont pas bien tolérés en tant qu'agents antibiotiques dès lors qu'ils provoquent notamment en cosmétique des irritations ; d'un autre côté les acides gras libres ne sont pas suffisamment efficaces quand on veut les utiliser en tant qu'agents antibiotiques. Selon l'invention on se propose de fournir une nouvelle solution technique pour résoudre avantageusement le problème de 1 attaque des cellules humaines, animales ou végétales par les microorganismes. Objet de l'invention La nouvelle solution technique selon l'invention consiste à empêcher ou limiter substantiellement la fixation des microorganismes néfastes sur lesdites cellules, c'est-à-dire en inhibant la protéine d'adhésion de ces microorganismes de façon qu'ils ne se fixent pas sur le ou les récepteurs spécifiques de ladite protéine d'adhésion présente sur la surface externe desdites cellules. Selon un aspect de l'invention, on préconise l'utilisation d'une substance inhibant la fixation d'un microorganisme ayant une protéine d'adhésion sur une cellule humaine, animale ou végétale pourvue d'au moins un récepteur de ladite protéine d' adhésion, pour la préparation d'une composition destinée à un usage cosmétique, thérapeutique ou phytosanitaire vis-à-vis des désordres induits par ledit microorganisme. Selon un autre aspect de l'invention, on préconise une composition l'on fait appel à une substance inhibant la fixation d'une bactérie ayant une protéine d'adhésion sur une cellule pourvue d'au moins un récepteur de ladite protéine d'adhésion, pour la préparation d'une composition destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique vis-à-vis des altérations cutanées ou des inflammations induites par ladite bactérie. La solution technique de l'invention, quand elle est utilisée en cosmétique ou dermatopharmacie, offre l'avantage d'empêcher ou limiter substantiellement l'adhésion des microorganismes ayant une protéine d'adhésion sur les cellules kératinocytaires sans affecter de façon défavorable les parasites saprophytes bénéfiques pour la peau. Descnption détaillée de l'invention Par substance inhibant la fixation d'un microorganisme sur une cellule humaine, animale ou végétale, on entend un composé qui (a) dénature ou inactive la protéine d'adhésion (également dénommée "molécule d'adhésion") ou qui (b) se fixe sur le ou les récepteurs spécifiques de ladite protéine d'adhésion présents sur la paroi de ladite cellule en empêchant selon un mécanisme dit de compétition la fixation de ladite protéine d'adhésion. Le processus microbiochimique n'est pas encore clairement explicité. On présume, mais il s'agit lâ d'une théorie qui ne lie pas la demanderesse, que le mécanisme comprend: (A) I'inactivation de la protéine d'adhésion, qui est en général, un produit protéinique comprenant ou constitué par la protéine A, ou la dénaturation de ladite protéine d'adhésion, ce qui conduit à l'absence ou à la limitation substantielle de fixation de celle-ci sur son ou ses récepteurs cellulaires spécifiques (B) la fixation de la substance inhibitrice sur le ou les récepteurs, ce qui empêche ou limite substantiellement, par compétition, la fixation de la protéine d'adhésion sur son ou ses récepteurs cellulaires ; ou, (C) un mécanisme résultant de l'ensemble (A) + (B). Le résultat global que l'on observe est une absence ou une diminution considérable de la fixation de la protéine d'adhésion sur son ou ses récepteurs cellulaires. Selon l'utilisation préconisée par l'invention, on fait appel à une substance inhibant la fixation d'une bactérie ayant une protéine d'adhésion sur une cellule pourvue d ' au moins un récepteur de ladite protéine d'adhésion, pour la préparation d'une composition destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique vis-à-vis des altérations cutanées ou des inflammations induites par ladite bactérie. En variante, on fait appel à une substance inhibant la protéine A pour empêcher substantiellement la fixation d'une bactérie ayant une protéine d'adhésion contenant ladite protéine A sur une cellule pourvue d'au moins un récepteur de ladite protéine A, pour la préparation d'une composition destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique vis-à-vis des troubles ou des inflammations induits par ladite bactérie. Par altérations cutanées on entend ici des problèmes de dessèchement au niveau de la peau, qui sont dommageables pour le patient, en cosmétique ou en dermatologie. La substance inhibant la protéine d'adhésion d'un microorganisme, qui est l'ingrédient actif selon l'invention, est choisie parmi l'ensemble constitué par les aldéhydes et les composés bifonctionnels, de préférence le glutaraldéhyde. Les aldéhydes qui conviennent sont des composés du type mono- et polyaldéhyde, notamment le formaldhéhyde, le paraformaldhéhyde, le glyoxal (ou éthanedial), le 1,3-propanedial, le 1,4-butanedial, le glutaraldéhyde (déjà cité) et le 1 ,6-hexanedial. Parmi les composés bifonctionnels autres que ceux sus-visés du type polyaldéhyde, on peut mentionner notamment les produits déjà connus en biochimie pour la fixation par covalence de réactifs biochimiques sur un support, en particulier les composés comprenant notamment une fonction aldéhyde CHO et une fonction acide COO-, une fonction aldéhyde CHO et une fonction amine, une fonction acide et une fonction alcool ou encore une fonction cétone CO et une fonction acide. A titre d'exemple on peut citer l'acide formylformique, l'acide pyruvique, le pyruvaldéhyde et l'acide lévulinique. La solution technique selon l'invention convient pour inhiber la fixation de microorganismes, tels que les bactéries, les moisissures et les virus, qui comportent une protéine d'adhésion. L'invention est particulièrement intéressante pour inhiber la fixation d'une bactérie, choisie parmi l'ensemble constitué par les souches de Staphylococcus et notamment de Staphylococcus aureus, sur les cellules kératinocytaires, pour la préparation d'une composition topique destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique. Selon l'utilisation préférée de l'invention, on fait appel à une substance choisie parmi l'ensemble constitué par les aldéhydes et les composés bifonctionnels, de préférence le glutaraldéhyde, pour inhiber la fixation de souches de Staphylococcus aureus sur les kératinocytes et cornéocytes, pour la préparation d'une composition topique destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique, notamment vis-à-vis de la dermatose atopique. On sait que la peau de 1' atopique est caractérisée par un dessèchement important, un état inflammatoire et une surinfection bactérienne. Le dessèchement est consécutif à l'altération de la barrière épidermique avec une augmentation de la perte en eau (I'homme du métier parle de "perte insensible en eau", ou PIE). Cette altération est due à une modification quantitative et qualitative des lipides cutanés et en particulier à une carence en acides gras essentiels (notamment en acide y-linoléique) du fait d'un déficit enzymatique en A-6-désaturase. Chez I' atopique, les souches de Staphylococcus aureus interviennent comme des superantigènes, et la molécule d'adhésion, dans le cas d'espèce la protéine A, assure leur fixation sur les récepteurs des cellules immunitaires, d'une part, et les récepteurs des cellules kératinocytaires, d'autre part. L'adhésion des Staphylococcus aureus, l'augmentation du nombre de cellules immunitaires (cellules de Langerhans et lymphocytes T) et celle du nombre de récepteurs IgE favorisent effectivement les irritations et surtout l'inflammation. Dans la composition selon l'invention, I'ingrédient actif inhibe la protéine d'adhésion de microorganismes particuliers à savoir les bactéries. Ladite composition est plus particulièrement destinée à une utilisation topique vis-à-vis des désordres induits par les souches de Staphylococcus. De façon préférée ladite composition sera utilisée par voie topique et destinée à une utilisation vis-à-vis des désordres de la peau induits par les souches de Staphylococcus aureus, notamment la dermatose atopique. Quand on utilise cette composition en tant que produit antistaphylocoque en thérapeutique et/ou cosmétique, elle contiendra ladite substance inhibant la fixation des souches de Staphylococcus sur les cellules kératinocytaires. Les cellules kératinocytaires comprennent les cornéocytes et les kératinocytes, ceux-ci générant ceux-là au fur et à mesure qu' ils progressent dans la peau vers le stratum corneum. La composition préférée est celle destinée à un usage topique en thérapeutique et/ou cosmétique pour inhiber la fixation des souches de Staphylococcus aureus sur lesdites cellules kératinocytaires et plus spécialement les cornéocytes. De façon pratique l'ingrédient actif, c'est-à-dire la substance inhibant la fixation des microorganismes pourvus d'une protéine d'adhésion, sera utilisé selon l'invention à une dose inférieure à la dose thérapeutique ou de conservation connue pour les mono- et polyaldéhydes qui ont déjà été décrits dans l'art antérieur, comme cela est le cas notamment du glutaraldéhyde. Ainsi, on utilisera une composition renfermant une quantité inférieure à 0,1 % p/p dudit ingrédient actif par rapport au poids total de ladite composition et de préférence une quantité inférieure à 0,05 % p/p. Par ailleurs, on a observé une synergie lorsque la composition selon I ' invention contient ladite substance inhibant la fixation des microorganismes en association avec un acide gras essentiel, notamment l'acide y-linoléique. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention seront mieux compris à la lecture qui va suivre d'exemples de préparations et de résultats d'essais comparatifs. Bien entendu, I'ensemble de ces éléments est nullement limitatif mais est donné à titre d'illustration. Exemple I Formulation A Glutaraldéhyde 0,045 % Huile de pépins de raisin 20 % Epaline 100 0,5 % Perhydrosqualène 5% Glycérol 2% Autre excipient QSP 100 % p/p Exemple 2 Formulation B Glutaraldéhyde 0,02 % Huile de pépins de raisin 20 % EpalineX 100 0,5 % Perhydrosqualène 5% Glycérol 2% Acide y-linoléique 0,02 % Autre excipient QSP 100 % p/p Exemple 3 Essais comparatifs Des essais comparatifs ont été entrepris sur peaux synthétiques humaines et peaux de souris mâle "nude" préalablement stérilisées et dépourvues de staphylocoques avec des compositions analogues à celles des exemples ci-dessus mais ne contenant que (a) 0,045 % p/p de glutaraldéhyde, (b) 0,02 % p/p de glutaraldéhyde et 0,02 % p/p d'acide ylinoléique, ou (c) 0,05 % p/p d'acide y-linoléique dans du sérum physiologique tamponné à pH 6, le lot contrôle ne contenant que ledit sérum physiologique. Les peaux contenant une quantité normale de cornéocytes ont été mises en contact avec les solutions précitées. On a ensuite incubé à 37"C pendant une heure en incorporant dans le milieu résultant une souche de référence de Staphylococcus aureus. Après avoir mesuré au microscope le nombre de staphylocoques dorés fixés sur les cornéocytes, on a constaté que les compositions (a) et (b) limitaient substantiellement la fixation des staphylocoques dorés que la composition (b) ne diminuait pratiquement pas la fixation des staphylocoques dorés par rapport au lot contrôle. Les résultats sont schématiquement consignés dans le tableau I qui suit. TABLEAU I Composition Lnhibition de la fixation (a) (b) (c) (d) 0 Les essais cliniques entrepris avec les formulations des exemples (a) et (b) ont donné de bons résultats sur la peau desséchée, d'une part, et la peau de patients souffrant de dermatose atopique, d'autre part. Les microorganismes non fixés sur les cornéocytes, dans le cas d'espèce les souches de Staphylococcus aureus, sont éliminés par lavage ou rinçage. En pratique, pour éliminer la composition selon l'invention il suffit de laver la peau normalement selon les habitudes d'hygiène normales, en ce qui concerne l'aspect cosmétique et dermatopharmaceutique. Quand il s'agit de plantes, il suffit de rincer à l'eau ou de nébuliser de l'eau sur la surface extérieure de la partie de la plante qui a été traitée. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'une substance inhibant la fixation d'un microorganisme ayant une protéine d'adhésion sur une cellule humaine, animale ou végétale pourvue d'au moins un récepteur de ladite protéine d'adhésion, pour la préparation d'une composition destinée à un usage cosmétique, thérapeutique ou phytosanitaire vis-à-vis des désordres induits par ledit microorganisme. 2. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée par le fait que l'on fait appel à une substance inhibant la fixation d'une bactérie ayant une protéine d'adhésion sur une cellule pourvue d'au moins un récepteur de ladite protéine d'adhésion, pour la préparation d'une composition destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique vis-à-vis des altérations cutanées ou des inflammations induites par ladite bactérie. 3. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée par le fait que l'on fait appel à une substance inhibant la protéine A pour empêcher substantiellement la fixation d'une bactérie ayant une protéine d'adhésion contenant ladite protéine A sur une cellule pourvue d'au moins un récepteur de ladite protéine A, pour la préparation d'une composition destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique vis-à-vis des altérations cutanées ou des inflammations induites par ladite bactérie. 4. Utilisation suivant l'une quelconque des revendications 1 à 3 pour inhiber la fixation d'une bactérie choisie parmi l'ensemble constitué par les souches de Staphylococcus sur les cellules kératinocytaires, pour la préparation d'une composition topique destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique. 5. Utilisation suivant la revendication 4, caractérisée par le fait que l'on fait appel à une substance choisie parmi l'ensemble constitué par les aldéhydes et les composés bifonctionnels, de préférence le glutaraldéhyde, pour inhiber les fixation de souches de Staphylococcus aureus sur les kératinocytes et cornéocytes, pour la préparation d'une composition topique destinée à un usage cosmétique ou thérapeutique, notamment visà-vis de la dermatose atopique. 6. Composition cosmétique, thérapeutique ou phytosanitaire caractérisée en ce qu'elle contient, en association avec un excipient physiologiquement acceptable, une quantité efficace d'un ingrédient actif choisi parmi l'ensemble constitué par les substances inhibant la fixation d'un microorganisme ayant une protéine d'adhésion sur une cellule humaine, animale ou végétale pourvue d'au moins un récepteur de ladite protéine d'adhésion. 7. Composition cosmétique ou thérapeutique suivant la revendication 6, caractérisée en ce que ledit ingrédient actif inhibe la protéine d'adhésion de souches de bactéries. 8. Composition suivant la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle est destinée à une utilisation topique vis-à-vis des désordres induits par les souches de Staphylococcus aureus. 9. Composition topique suivant la revendication 8, caractérisée en ce qu'elle est destinée à une utilisation vis-à-vis de la dermatose atopique. 10. Composition suivant l'une quelconque des revendications 6 à 9, caractérisée en ce que ledit ingrédient actif est choisi parmi l'ensemble constitué par les aldéhydes et les composés bifonctionnels, de préférence le glutaraldéhyde. 11. Composition suivant l'une quelconque des revendications 8 à 10, caractérisée en ce que elle contient en outre un acide gras essentiel notamment l'acide y-linoléique.