Brevet FR2735694A1 — publié le 19961227

La présente invention a pour objet le cladinose & titre de médicament et les compositions pharmaceutiques le renfermant. L'invention a pour objet à titre de médicaments, le cladinose sous toutes ses formes stéréoisomères possibles ainsi que leur mélange, libre ou greffé sur un support. Le cladinose est un produit connu qui a fait l'objet de différentes publications par E.H. Flynn et Coll. dans J. Am. Chem. Soc., 76, 3121-31 (1954), par P.F. Wiley et Coll. dans J. Am. Chem. Soc., 77, 3422-3 (1955) notamment. La synthèse du cladinose et du L-cladinose en particulier est décrite par Howarth GB et Coll. dans Can. J. Chem. (1967), 45 (19) 2253-6. A ce jour, aucune propriété pharmacologique du cladinose n'a été décrite, aucune application thérapeutique n'a été envisagée. On vient de découvrir que le cladinose et notamment le L-cladinose présentait d'intéressantes propriétés pharmacologiques et notamment une intéressante activité antiinflammatoire qui justifie son utilisation en thérapeutique humaine ou animale. Les propriétés anti-inflammatoires du cladinose et notamment du L-cladinose ont été déduites d'études in-vitro comparant des macrolides comportant du cladinose et des macrolides ne comportant pas de cladinose. Des études pharmacologiques réalisées ensuite ont mis en évidence les propriétés anti-inflammatoires du cladinose et notamment du L-cladinose. Les macrolides à 14 chainons dérivés de l'érythromycine A possèdent des propriétés anti-inflammatoires. L'érythromycine A par exemple a été étudiée sur divers modèles expérimentaux d'inflammation par Tarayre J.P. et Coll. 1987 Int. J. Tissue React. 9 : 77-85 par exemple. Mikasa et Coll. 1992 J. Antimicrob Chemother. 30, 339347) ont mis en évidence l'activité anti-inflammatoire de l'érythromycine dans le cas de péritonite aseptique ches la souris. Tamaoki J. et Coll. (1994 Antimicrob Agents Chemother. 38, 1641-1644), ont mis en évidence l'activité anti-inflamma toire chez le rat, dans le cas d'inflammation trachéale induite par le LPS (ou lipopolysaccharide). L'activité anti-inflammatoire des macrolides a également été décrite en thérapeutique : chez l'homme, l'érythromycine s'est montrée utile pour le traitement de panbronchiolites diffuses (cf Nagai et Coll, 1991, Respiration 58, 145-149) ou pour le traitement de l'asthme bronchique (cf Miyatake et Coll. 1991, Chest. 99 : 670-673). Les propriétés anti-inflammatoires de la roxithromycine ont été décrites par C. Agen et Coll. dans Agents Actions 1993, 38 : 85-90 sur des tests classiques d'activité antiinflammatoire comme le test de l'oedème plantaire aigu à la carraghénine chez le rat, ou le test de l'oedème plantaire aigu à la poly-L-arginine ou l'oedème aigu induit par l'huile de croton. I1 a été décrit que les macrolides et notamment la roxithromycine, la dirithromycine, l'érythromycylanine et l'érythromycine A inhibent in vitro la production d'oxydants par les phagocytes à une étape se situant en amont de la reconstitution de l'enzyme clef des phagocytes, la NADPH oxydase. Ces propriétés d'inhibition de la production d'oxydants par les phagocytes ont été décrites par exemple par MT Labro et Coll. dans Journal of Antimicrobial Chemotherapy 1993 31, Suppl. C. 51-64 ou Journal of Antimicrobial Chemotherapy 1989, 24, 561-572, ou 1992, 30 509-523. On a observé également que les macrolides induisaient la dégranulation de polynucléaires neutrophiles humains (PN) in vitro de manière indépendante de leur accumulation cellulaire (cf à ce sujet les articles de Abdelghaffar H. et Coll. Antimicrob. Agents Chemother 1994, 38 : 1548-1554, Labro M.T. et Coll. Program and Abstr. of the 33d Intersci. Conf. Antimicrob. Agent Chemother 1993, abstr. 309). Les structures chimiques de macrolides induisant à la fois la dégranulation et inhibant la production d'oxydants (azithromycine, clarithromycine, diithromycine, érythromycylamine, roxithromycine) ont un point commun : la présence d'un cladinose en 3. Des études portant sur des macrolides connus qui ne comportent pas de cladinose comme la roxithromycine descladinosylée ou la clarithromycine descladinosylée ont clairement montré que ces molécules se comportaient différemment des molécules comportant un cladinose, comme le montrent les résultats de tests exposés ci-après dans la partie expérimentale. L'invention a donc pour objet le cladinose et notamment le L-cladinose à titre de médicament. Le cladinose pouvant être libre ou fixé à un support chimique approprié. Le cladinose et notamment le L-cladinose présentent d'intéressantes propriétés anti-inflammatoires qui permettent leur utilisation notamment dans le traitement des algies musculaires, articulaires ou nerveuses, de l'asthme, des affections rhumatismales, des douleurs dentaires et des inflammations de la peau. La posologie utile s'échelonne entre 10 et 300 mg par jour chez l'adulte en fonction de la voie d'administration et de l'affection traitée. L'invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un des médicaments définis ci-dessus. Ces compositions peuvent être administrées par voie, buccale, rectale, parentérale ou par voie locale en application topique sur la peau et les muqueuses. Elles peuvent être solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine, comme par exemple, les comprimés simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables, les pommades, les crèmes, les gels ; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs. Ces compositions peuvent également se présenter sous forme d'une poudre destinée à être dissoute extemporanément dans un véhicule approprié, par exemple de l'eau stérile apyrogène. ICpermle r Le L-cladinose a été préparé en suivant par exemple le mode opératoire décrit par Howarth GB et Coll. dans Can. J. Chem. (1967) 45 (19) 2253-6. I - Exemple de comprimés On a préparé des comprimés renfermant L-cladinose 150 mg Excipient qsp 1 g détail de l'excipient : amidon, talc, stéarate de magnésium. II - Etude de la production d'O2- par les polynucléaires neutrophiles humains stimulés (PMA) en présence de macrolides (100 mg/l). Le protocole du test utilisé est décrit par MT Labro et Coll. dans Journal of Anti-microbiol Chemotherapy (1989) 24, 561-572. Description du test Le métabolisme oxydatif des polynucléaires neutrophiles est étudié par la technique de réduction du cytochrome C, inhibable par la superoxyde dismutase (SOD), décrite par Cohen H.J. et Chovaniec M.E. J. Clin. Invest. 1978, 61 1081-1087. Cette technique spectrophotométrique permet de suivre en cinétique la réduction du cytochrome C par 1'O2- produit par les polynucléaires neutrophiles stimulés par du PMA (100 mg/ml - phorbol myristate acétate) ou un autre stimulant. Les résultats sont exprimés en nmoles d'O2 produit par 106PN/min. Dans les tests portant sur les substances analysées (macrolides avec et sans cladinose), les PN sont préalablement incubés dans un milieu contrôle (tampon de dilution) ou en présence de macrolides, pendant 5, 30 ou 60 minutes. Les résultats obtenus sont les suivants Tableau 1 Production d'O2 par les PN stimulés (PMA) en présence de macrolides (100 mg/l) Temps d'incubation 30 minutes 60 minutes Contrôle : Vi nmole/106PN/min = 100 > 4 + 1.7 (4 exp.) 4 + 1.4 moyenne + SEM % de la réponse contrôle en présence de macrolides Roxithromycine 0.6 + 0.6 (4 exp.) 0 + 0.0 Roxithromycine 84 + 14.7 (4)* 76 + 3.9 (4)* sans cladinose Clarithromycine 49 + 18.2 (3 exp.) 24 + 8.8 (4) Clarithromycine 92 + 10.0 (3 exp.)* 69 + 4.2 (4) III - Etude de la dégranulation induite par les macrolides L'étude a été faite selon le protocole du test décrit par H. Abdelgheffar et Coll. dans Anti-microbiol. Agents and Chemotherapy 1994, 38, 7 : 1548-1554. Le protocole est le suivant : Dégranulation Les PN incubés (5 à 180 min.) dans un milieu contrôle (tampon de dilution) ou en présence de macrolides, sont centrifugés. Les activités enzymatiques sont mesurées dans le culot cellulaire et le surnageant et la dégranulation enduite est exprimée par le % d'activité enzymatique dans le surnageant sur la somme (culot + surnageant). Les dosages enzymatiques sont effectués d'après les techniques classiques décrites par Talalay et Coll. 1946, J. Biol. Chem. 166, 756-772 pour la ss-glucuronidase et par Litwack G. 1955 Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 89 : 401-403 pour le lysozyme. Les résultats sont les suivants Tableau 2 Dégranulation induite par les macrolides Temps d'incubation 60 minutes 180 minutes Enzyme : ss-glucuronidase Contrôle : 12 + 1.6 (4 exp.) 16 + 2.3 (4 exp.) dégranulation spontanée moyenne + SEN Roxithromycine 43 + 3.7 (4 exp.)* 56 + 2.3 (4)* Roxithromycine 15 + 3.1 (4)** 24 + 2.4 (4) descladinose Clarithromycine 45 + 3.0 (3)* 60 + 6.1 (2) Clarithromycine 18 + 2.1 (3)** 26 + 9.6 (2) descladinose Lysozyme Contrôle : 15 + 2.0 (4) 19 + 2.7 (4) Roxithromycine 39 + 1.4 (4)* 47 + 4.6 (4)* Roxithromycine 16 + 2.3 (4)** 24 + 3.1 (4)** descladinose Clarithromycine 40 i 2.7 (3)* 55 + 1.4 (2) Clarithromycine 21 + 4.9 (3)** 26 i 4.6 (2) descladinose * p De ces deux tableaux de résultats, on peut déduire que le L-cladinose est responsable en totalité ou en partie des propriétés anti-inflammatoires des macrolides. Ces propriétés anti-inflammatoires ont ensuite été mises en évidence sur des tests classiques d'activité anti-inflammatoires décrits dans la littérature comme le test de l'oedème plantaire aigu à la carraghénine chez le rat, le test de l'oedème plantaire aigu à la poly-L-arginine ou encore le test de l'oedème aigu induit par l'huile de croton. (Les protocoles utilisés figurent notamment dans l'article de C. Agen et Coll. Agents Actions 38, 1993, p. 85-90). Les résultats obtenus sur ces tests confirment l'activité anti-inflammatoire du L-cladinose. REVENDICATIONS 1) A titre de médicament, le cladinose sous toutes ses formes stéréoisomères possibles ainsi que leur mélange, libre ou greffé sur un support. 2) A titre de médicament le L-cladinose. 3) A titre de médicament anti-inflammatoire le cladinose et notamment le L-cladinose. 4) Les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un médicament selon l'une quelconque des revendications 1 à 3.