Brevet FR2730133A1 — publié le 19960809

La présente invention concerne un procédé pour améliorer l'activité de reproduction des verrrats par alimentation des verrats reproducteurs avec un aliment qui contient des saccharides constitués principalement par des oligo- saccarides. La présente invention a pour but de permettre une conception stable et la production de spermatozoïdes pendant toute l'année, en empêchant en particulier une réduction de la capacité de fertilisation pendant la saison chaude. La demande de viande a augmenté parallèlement à la récente tendance des japonais à prendre les habitudes alimentaires occidentales. De ce fait, les producteurs de viande doivent développer des procédés d'alimentation efficaces. D'autre part, l'industrie japonaise de production de bétail doit améliorer encore sa productivité pour pouvoir être compétitive sur le marché mondial. Les procédés pour améliorer la productivité des élevages de porcs consistent par exemple à augmenter la taille des portées, le taux de production des porcelets et la fréquence des mises bas. Bien que la taille des portées et le taux de production des porcelets aient été améliorés par les progrès apparus dans l'élevage du bétail et par les améliorations des installations d'alimentation et des conditions sanitaires, ces effets sont encore insuffisants. Par ailleurs l'amélioration du taux de conception ou de la prévention des maladies constitue un autre facteur important pour l'amélioration de la produc- tivité. Pour élever des porcs, il est nécessaire de répéter efficacement le cycle d'oestrus, d'accouplement, de conception et de mise bas. Cependant, des maladies sont apparues de manière croissante dans les élevages ces dernières années, par exemple du fait de la difficulté d'observer suffisamment chaque porc pour adapter son alimentation étant donné la taille croissante des élevages de porcs, ce qui a entraîné des pertes économiques sensibles. Dans le cas des porcs, la réduction de leurs activités reproductrices pendant la saison chaude constitue un problème qui doit être résolu. Concernant les verrats, ces causes comprennent la survenue de maladies telles que l'orchite, un manque ou une baisse de la tendance à la copulation, la détérioration de l'état de la semence pendant la saison chaude. En particulier, il est difficile de vérifier la détérioration de l'état de la semence dans le cas d'un accouplement naturel de sorte que l'on est pratiquement désarmé en cas de survenue d'une maladie chez les verrats. De plus, comme l'état de la semence est instable pendant la saison chaude, les possibilités de conservation de la semence sont réduites de moitié ce qui pose un autre problème du point de vue de l'insémination artificielle. En conséquence, pour améliorer l'activité de reproduction ou la prévention des maladies, différents moyens ont été testés tels que l'administration d'antibiotiques et d'hormones. Cependant, de tels moyens ne sont pas toujours suffisants car il apparaît des problèmes supplémentaires en termes d'effets secon- daires ou de sécurité de l'aliment. De ce fait, beaucoup d'efforts ont été faits concernant le développement d'un moyen permettant d'améliorer efficacement l'activité de reproduction à moindre coût et avec une moindre main d'oeuvre, en particulier d'un moyen permettant une conception stable et la production de sper- matozoïdes pendant toute l'année en empêchant une réduction de la capacité de fertilisation des verrats pendant la saison chaude. Les présents inventeurs ont fait des recherches étendues pour résoudre les problèmes ci-dessus et ont constaté qu'un aliment qui contient des saccharides constitués principalement par des oligosaccharides a d'excellents effets. Ainsi, la présente invention concerne un procédé pour améliorer la capacité de fertilisation des spermatozoïdes au moyen d'un aliment pour verrats reproducteurs qui contient des saccharides constitués principalement par des oligosaccharides. En particulier, la présente invention a pour but de permettre une conception stable et la production de spermatozoïdes pendant toute l'année en empêchant la réduction de la capacité de fertilisation des verrats pendant la saison chaude. D'autres objets et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée ci-dessous. Les fructo-oligosaccharides, les galacto-oligosaccharides, les inulo- oligosaccharides, les oligosaccharides de soja, le lactulose, les isomalto- oligosaccharides, le lactosaccharose et les xylo-oligosaccharides sont des exemples d'oligosaccharides qui peuvent être utilisés dans la présente invention. On préfère en particuler les oligosaccharides contenant comme constituant une multiplicité de molécules de fructose liées, tels que les fructo-oligosaccharides ou les inulo-oligosaccharides. Une composition saccharidique obtenue par traitement du saccharose avec une fructose transférase (voir la demande de brevet japonais publiée avant examen JP-A-56-154 967) qui est un mélange de fructo- oligosaccharides dans lesquels une à quatre molécules de fructose sont liées au saccharose et de saccharose, de glucose et de fructose constitue un exemple de saccharides contenant des fructo- oligosaccharides comme constituant principal qui peuvent être utilisés dans la présente invention. Cette composition saccharidique peut être fabriquée par exemple par le procédé suivant. Du milieu BS contenant 5,0% de saccharose, 1,0% de peptone, 0,7% de bouillon et 0,3% de chlorure de sodium a été placé dans deux tubes à essai (10 ml chacun) et stérilisé à 120 C pendant 30 min. Un échantillon d'Aspergillus niger (Williams & Wilkins Corporation, 1965, article 293) a été utilisé pour inoculer chaque tube à essai qui a ensuite été incubé à 28C pendant 24 h. La culture ainsi obtenue a ensuite été utilisée pour inoculer deux flacons coniques contenant chacun 200 ml de milieu BS préalablement stérilisé à 120 C pendant 30 min (10 ml de culture dans chaque flacon) qui ont ensuite été soumis à une culture agitée à 28-C pendant 24 h pour donner une culture mère. Vingt libres de milieu BS ont été introduits dans un fermenteur de 301, stérilisés à 120'C pendant 30 min et refroidis. La culture mère préparée ci-dessus (400 ml au total) a été utilisée pour inoculer ce milieu qui a ensuite été cultivé à 28C pendant 72 h sous aération et agitation (300 tr/min). A la fin de la culture, les cellules microbiennes ont été retirées par filtration et 201 de filtrat ont été concentrés et purifiés par ultrafiltration pour donner 2 1 d'une solution d'enzyme (activité enzymatique: 240 unités/ml). Séparément, 10 kg de saccharose ont été dissous dans 6,7 1 d'eau et le pH de la solution résultante a été ajusté à 5,0. La solution d'enzyme préparée ci- dessus a été ajoutée à cette solution en une quantité de 48 unités/g de saccharose et le mélange a été maintenu à 50C pendant 48 h pour achever la transformation. A la fin de la réaction, le mélange a été chauffé à 100'C pendant 15 min pour désactiver l'enzyme et a été décoloré par addition de charbon actif (0,5% par rapport aux solides). Après retrait du charbon actif, le filtrat a été traité avec des résines échangeuses d'ions (Amberlite IR120B et Amberlite IRA411) puis concentré pour donner 12 kg d'une composition de sucres consistant en 33% de glucose (G), 2% de fructose (F), 10% de saccharose (GF), 25% de 1- kestose (GF2), 25% de nistose (GF3) et 5% de frucosylnistose (GF4). Selon la présente invention, un aliment pour verrats reproducteurs qui contient des saccharides comportant des fructo-oligosaccharides comme constituant principal (appelés dans la suite FO) est obtenu par addition des FO mentionnés ci-dessus à un aliment ordinaire pour verrats reproducteurs. La quantité de FO qui doit être ajoutée n'est pas limitée d'une manière particulière mais les buts de la présente invention peuvent être atteints pleinement lorsque les FO sont ajoutés en une quantité de 0,1 à 2 parties en masse, de préférence de 0,1 à 0,6 partie en masse, pour 100 parties en masse d'aliment. Le cas échéant, d'autres additifs alimentaires tels que des vitamines, des huiles et des graisses peuvent être ajoutés également. Dans la mise en oeuvre du procédé selon la présente invention, il est souhaitable d'alimenter les verrats de manière continue pendant toute l'année avec l'aliment selon l'invention, avec une quantité approximative de FO par animal de 2,7 à 50 g/jour, de préférence de 2,7 à 16,2 g/jour. Bien entendu, il est possible de modifier cette quantité, notamment en fonction de l'état physique des verrats et de la saison. En particulier, pour empêcher une réduction de la capacité de fertilisation des verrats pendant la saison chaude, il est nécessaire de réaliser une alimentation continue qui s'étend au moins du mois de mars au mois d'août. Comme le montrent les exemples suivants, le procédé selon la présente invention permet d'améliorer le taux de fertilisation in vitro, la normalité et la concentration des spermatozoïdes dans le groupe alimenté avec des FO et en particulier d'empêcher une réduction de la capacité de fertilisation des verrats pendant la saison chaude. Ces résultats montrent que l'on peut obtenir une capacité de fertilisation stable pendant toute l'année dans le cas de l'insémination artificielle. Comme la semence recueillie est utilisée en insémination artificielle après avoir été diluée 30 à 40 fois, le taux de dilution a dans bien des cas une grande influence sur le taux de conception de sorte que les saisons et l'état des spermatozoïdes ont une grande influence. Cependant, la grande capacité de fertilisation des spermatozoïdes qui peut être obtenue grâce à la présente invention autorise des taux de dilution plus élevés et permet donc d'inséminer un plus grand nombre de truies. La présente invention va maintenant être illustrée de manière plus précise à l'aide des exemples non limitatifs suivants. Exemple 1 Des verrats ont été alimentés en continu avec un aliment contenant des FO pour examiner son effet sur la semence. (1) Description du test: Six verrats ont été répartis en un groupe témoin et en un groupe à tester, chaque groupe contenant 3 animaux. Un aliment du commerce pour verrats reproducteurs a été utilisé dans les deux groupes en la même quantité. Dans le groupe à tester, l'aliment du commerce a été mélangé avec l'additif Meiji Feed Oligo SI (fabriqué par Meiji Seika Kaisha, Ltd. ; teneur en FO environ 27%) en une quantité de 10 g/jour par animal et a été utilisé comme aliment selon la présente invention. Le test a été réalisé sur une période qui s'étendait du mois de mars au mois de décembre compte tenu des effets de l'alimentation sur la capacité de fertilisation pendant la saison chaude. (2) Paramètres testés: Le taux de fertilisation in vitro, la normalité et la concentration des spermatozoïdes ont été msurés selon le procédé habituel décrit par Yoshida M. et al., dans "Confocal and fluorescence microscopic study using lectins of the distribution of cortical granules during maturation and fertilization of pig oocytes", Mol. Reprod. Dev., vol. 36, pages 462-468 (1993) et par Yoshida M. et al. , dans "Birth of piglets derived from in vitro fertilization of pig oocytes matured in vitro", Ieinology. vol. 39, pages 1303-1311 (1993). Ces mesures ont été faites en juillet, août, septembre et octobre lorsque les effets de la saison chaude étaient susceptibles de se faire sentir. (3) Résultats: Les résultats sont présentés dans le tableau 1 ci-dessous. Comme le montre ce tableau, par rapport au groupe témoin, l'alimentation continue du groupe à tester avec l'aliment de la présente invention est efficace pour améliorer le taux de fertilisation in vitro, la normalité et la concentration des spermatozoïdes et pour empêcher une réduction de la capacité de fertilisation chez les verrats pendant la saison chaude. Tableau 1 Paramètres Groupes Juillet Août Septembre Octobre Taux de fertilisation in vitro (%) Témoin 59,3 + 28,0 76,7 14,5 47,3 + 6,4 26,7 j 12,6 Testé 75,8 + 6,9 68,6 20,9 61,6 18,1 65,2 + 21,8 Taux de normalité des spermaTémoin 83, 8 + 2,7 87,5 + 0,9 82,2 + 6,6 81,6 + 4,9 o, tozoïdes (%) Testé 85,1 + 4,3 81,8 2,8 87,3 + 3,7 87,1 i 4,2 Concentration des spermatozoïdes Témoin 4,2 + 1,8 4,5 + 0,8 6,8 + 2,8 4,2 + 0,9 (x 100 millions/ml) Testé 5,3 0,2 5,2 + 1,0 5,6 + 1,1 6,2 + 1,9 Remarque: les donnés sont des moyennes écart-type Ainsi, selon la présente invention, l'activité de reproduction des verrats peut être améliorée et la réduction de leur capacité de fertilisation peut être évitée, en particulier pendant la saison chaude, grâce à l'utilisation d'un aliment pour verrats reproducteurs qui contient des saccharides constitués principalement par des oligosaccharides. Ceci permet aisément et à faible coût d'obtenir une conception stable et la production de spermatozoïdes pendant toute l'année. REVENDICATIONS 1. Procédé pour améliorer l'activité de reproduction des verrats, caractérisé en ce qu'il comprend l'alimentation de verrats reproducteurs avec un aliment qui contient des saccharides constitués principalement par des oligo- saccharides. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdits oligosaccharides sont des fructo-oligosaccharides. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdits verrats sont nourris avec l'aliment en continu pendant toute l'année. 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdits verrats sont nourris avec l'aliment en continu depuis le mois de mars jusqu'au mois d'août. 5. Utilisation de saccharides constitués principalement par des oligosaccharides pour la préparation d'un aliment destiné à améliorer l'activité de reproduction des verrats. 6. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que lesdits oligosaccharides sont des fructo-oligosaccharides.