Brevet FR2728465A1 — publié le 19960628

La présente invention concerne essentiellement une composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, contenant un extrait de Smelophyllum capense. Plus précisément, la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Smelophyllum capense, pour la préparation d'une composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, stimulant notamment la synthèse du collagène, et destinée en particulier à améliorer la cicatrisation cutanée, à lutter contre les effets du vieillissement cutané, à obtenir un raffermissement cutané ou à traiter les diverses pathologies accompagnées dune déficience en collagène, ainsi que des compositions cosmétiques ou pharmaceutiques en comportant application. La plante Smelophyllum capense appartient à la famille des Sapindacées qui regroupe environ 1.700 espèces végétales. Les plantes de cette famille contiennent des saponines utilisées depuis longtemps comme détergent et poison de pêche. La plante Smelophyllum capense est un arbre de hauteur relativement modeste, mesurant de 3 à 4 m, que l'on trouve à l'état endémique en particulier dans les forêts de la partie méridionale de l'Afrique du Sud (voir R.B. Drumont, "rides of Southern Africa, C. Struik Publisher, Capetown, 1984, page 531). n a maintenant été découvert une activité surprenante des extraits de Smelophyllum capense sur la synthèse de collagène, en particulier de collagène de type I, ci-après dénommé en abréviation "collagène I", ce qui les rend particulièrement utiles pour lutter contre les effets du vieillissement cutané, ainsi que pour obtenir un raffermissement cutané, ou pour améliorer la cicatrisation. La présente invention a donc pour but principal de résoudre le nouveau problème technique consistant en la fourniture d'une nouvelle formulation dune composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, presentant une bonne efficacité sur la prévention ou le traitement des effets du vieillissement cutané, ainsi que sur le raffermissement cutané, ou pour améliorer la cicatrisation. La présente invention a encore pour but principal de résoudre ce nouveau problème technique d'une manière particulièrement simple, satisfaisante et utilisable à l'échelle industrielle, notamment dans l'industrie cosmétique ou pharmaceutique. Ainsi, selon un premier aspect, la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Smelophyllum capense, pour la préparation d'unc composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, stimulant notamment la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène I, et destinée notamment à améliorer la cicatrisation cutanée, à améliorer les propriétés biomécaniques et l'aspect de surface de la peau, à obtenir un raffermissement cutané, à lutter contre les effets du vieillissement cutané ou à traiter les diverses pathologies accompagnées d'une déficience en collagène. Suivant une variante de réalisation avantageuse, l'extrait de Smelophyllum capense est utilisé pour la préparation d'une composition, à effet anti-vieillissement cutané, en particulier anti-rides, destinée à prévenir l'apparition des rides ou en atténuer la profondeur. Selon une variante de réalisation particulière, l'extrait dc Smelophyllum capcnse précité est obtenu par extraction par un solvant polairc, tel qu'un alcool inférieur, choisi avantageusement parmi le méthanol ou un mélange hydro-éthanoliquc, de préférence à partir de l'écorce de la plante, dc préference' encore à partir de l'écorce de racine de cette plante. En particulier, l'extrait de Smelophyllum capense peut etre obtenu selon le procédé décrit ci-après à titre indicatif, mais nullement limitatif. On effectue une première extraction de l'écorce, de préférence de l'écorce de racine, de la plante, par un solvant polaire, avantageusement choisi parmi le groupe constitué par: l'eau, les alcools comportant de préférence de 1 à 4 atomes de carbone, les solvants chlorés comportant de préférence 1 à 2 atomes de carbone, les esters organiques comportant de preférence de 3 à 6 atomes de carbone ; ou d'un solvant mixte à base d'un mélange quelconque des solvants précités. Encore de préférence, le solvant de première extraction est choisi parmi le groupe consistant de l'eau, le méthanol, l'éthanol, un mélange méthanol eau ou un mélange éthanol-eau, le chloroforme, le dichlorométhane. Encore de préférence, il s'agit de l'eau, du méthanol, de l'éthanol ou de leurs mélanges. Le rapport de l'écorce à l'agent d'extraction n'est pas cntiquc et généralement sera compris entre 1: 5 et 1 : 20 parties en poids. L'extraction s'effectue généralement à des températures comprises entre la température ambiante et le point d'ébullition du solvant utilisé pour l'extraction. De préférence, cette première extraction est effectuée au reflux sous pression atmosphérique pendant une durée de 2 à 4 h. En outre, elle est avantageusement précédée d'une macération à froid pendant 2 à 4h dans le solvant d'extraction. En fin d'extraction, la phase du solvant contenant l'extrait est filtrée puis concentrée et/ou évaporée à sec sous pression réduite. On obtient ainsi un premier extrait brut de Smelophyllum capense selon l'invention. Cet extrait brut peut être purifié selon divers procédés bien connus à l'homme de l'art. Selon un second aspect, la présente invention conceme aussi une composition cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, une quantité cosmétiquement efficace d'un extrait de Smelophyllum capense de préférence dispersé dans un excipient cosmétiquement acceptable. Selon une variante de réalisation particulière, cette composition cosmétique stimule la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène L et est destinée notamment à lutter contre les effets du vieillissement cutané, ou à obtenir un raffermissement cutané. Une telle composition, par exemple, peut avantageusement être utilisée comme composition pour prévenir l'apparition des rides ou en atténuer la profondeur. Selon un troisième aspect, l'invention concerne encore une composition pharmaceutique, notamment dermatologique, stimulant la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène I, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, une quantité pharmaceutiquement efficace d'un extrait de Smelophyllum capense dispersé dans un excipient pharmaceutiquement acceptable. Selon un mode de réalisation particulier, ladite composition est destinée à améliorer la cicatrisation cutanée ou à traiter les diverses pathologies accompagnées d'une déficience en collagène. Selon un quatrième aspect, l'invention couvre encore un procédé de traitement cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, caractérisé en ce qu'il comprend l'application d'une quantité cosmétiquement ou pharmaccutiquement efficace pour un traitement cosmétique ou pharmaceutique d'un extrait de Smelophyllum capense, en particulier dispersé dans un excipient cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable. Les applications cosmétiques ou pharmaceutiques particulièrement avantageuses actuellement résultent de la description précédente ainsi que de la description suivante en relation avec les exemples, et des revendications. ll en est de même en ce qui concerne la cocen- tration en extrait. Dans l'un ou l'autre des aspects précédents, on utilisera de préférence l'extrait de Smelophyllum capense à une concentration comprise entre 0,0001 % et 1% en poids par rapport au poids total de la composition finale. De préférence, cette concentration est comprise entre 0,0196 et 0,25 96 en poids par rapport au poids total de la composition finale. Egalement dans l'un quelconque des aspects précédents, la composition selon l'invention contient de préférence en outre une substance active choisie parmi le groupe constitué par l'acide ascorbique, I'acide madécassique, l'acide asiatique, le madécassoside, I'asiaticoside, l'alpha-1-protéinase inhibitcur, les inhibiteurs de collagénase, tels que l'acide rétinoique, les inhibiteurs d'élastase, la lysine, la proline, le 2-oxoglutarate, et le ginsénoside Rg. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à l'homme de l'art à partir de la description suivante faite en référence à plusieurs modes de réalisation actuellement préférés de l'invention, ainsi qu'aux exemples qui suivent. Dans les exemples, tous les pourcentages sont donnés en poids, sauf indication contraire. Exemple 1 Préparation d'un extrait méthanolique d'ecorce de racine de Smelophyllum capense On prépare de la poudre d'écorce de racine de Smelophyllum capse par broyage d'écorces séchées de racine de cette plante provenant de l'aurique du Sud. On fait ensuite macérer 200g de cette poudre pendant 2h dans 21 dc méthanol. On porte le tout à reflux pendant 3 h, puis on laisse refroidir et on filtre sur verre fritté. Le filtrat est évaporé à sec. Le résidu, pesant 44,6 g, est repris par 350 ml de méthanol. On effectue une précipitation par ajout dans cette solution de 1,751 d'éther éthylique, puis on filtre.Le précipité est ensuite séché sur un agent déshydratant solide tel que P2O5. Une quantité d'environ 27 g de ce précipité est ensuite dialysée pendant 4 jours contre 270ml d'eau déminéralisée, puis on lyophilise. On obtient ainsi 13,6 g d'extrait selon l'invention dit extrait I1. Exemple2 Mise en évidence de l'activité d'un extrait méthanolique d'écorce de racine de Smelophyllum capense préparé selon l'exemple 1. extrait 11. sur la synthèse de collagène par des fibroblastes humains en culture Culture de fibroblastes Des cultures de fibroblastes de derme adulte sain sont réalisées en utilisant la méthode par explants à l'aide d'un prélèvement de peau faciale obtenu sur une femme âgée de 60 ans au cours d'un lifting. Les fibroblastes sont cultivés jusqu'à confluence dans un milieu E 199 (Gibco) supplémenté avec 2 mM de L-glutamine (Gibco) et 10 % en v/v de sérum de veau foetal (Gibco) à 3rc dans une atmosphère à 5 % de CO2 humidifiée. Pour évaluer la teneur en collagène, les cultures primaires en confluence sont recollées avec une solution à 0,1 % de trypsine et 0,02 % d'EDTA dans une solution saline tamponnée de phosphate (PBS) à pH 7,2 et les cellules sont ensemencées sur des plaques de miccoculture à 96 puits (Falcon) à une densité de confluence de 104 fibroblastes par puits dans un milieu de culture. 24 h après l'ensemencement, le milieu est enlevé et remplace par un milieu dépourvu de sérum contenant le produit à tester avec 25 ssM d'acide Lascorbique sous forme de sel de sodium pendant une période supplémentaire de 48 h. Le produit testé (extrait I1) a été dissous dans le DMSO avant l'incorporation dans le milieu de culture dans le puits (concentration finale en DMSO 0,1 % en v/v). Viabilité des cellules A la fin de la période d'incubation, le milieu est enlevé et un test de viabilité de cellules MII a été réalisé conformément à la publication de Denizot F. et al. J. Immunol. Methods, (1986) 89 271-277. les cellules sont incubées avec 100 jus d'une solution en sel tétrazolium à 0,5 mg/ml (bromure de > [4,5- diméthylthiazol-2-yl]-2,5-diphényltétrazolium ou MIT) dans le milieu E 199 sans rouge de phénol (Gibco) pendant 3h à 37 C. Ensuite, 100fiv d'isopropanol sont ajoutés à chaque puits pour solubiliser le dérivé bleu de Formazan sombre formé par les cellules vivantes. On mesure le taux d'absorbance à 540 nm. Mesure du collagène La quantité de collagène de type I sécrété par les cellules dans le milieu dépourvu de sérum après 48 h d'incubation avec le mélange ou le composant individuel, est déterminée par un test ELISA comme précédemment décrit dans la publication de Dumas M. et al., Mech. Ageing Dev. (1994) 73. 179-187, et celle de Grimaud J.P. et al., dans : Methods of Enzymatic Analysis (Bermeyer, H.U., ed.), VCH Publishers, Weinheim, (1986), 186-201. Les milieux d'incubation dépourvus de sérum et les cellules restantes homogénéisées par sonication dans de la glace sont recueillis et transférés dans des puits d'une immunoplaque en plastique (NUNC) pour une incubation de 24 h à +4 C pour permettre l'adhérence du collagène sécrété. Des inhibiteurs de protéase (éthylmaléimide, fluorure de phénylméthylsulfonyle, éthylènediaminetétraacétate, chacun en concentration finale de 1 mM) sont ajoutés pendant cette période. Les plaques sont ensuite réinsérées avec le PBS. Une étape de lavage similaire est réalisée après chaque traitement de plaque. Après 24 h d'incubation à 4'C avec de la sérum albumine pour éviter une liaison non spédfique, des anticorps de lapin anti-collagène de type I humain (Institut Pasteur, Lyon, France) sont ajoutés pendant 1,5 h à 22 C et les anticorps liés sont mis à réagir avec de l'IgG de chèvre anti-lapin conjugué à de la phosphatase alcaline (Interchim, Montluçon, France). L'absorbance du paranitrophénol formé à partir de para-nitrophénylphosphate (Sigma) par la phosphatase alcaline est mesuré à 405 nm. Les densités optiques sont converties en nanogamme de collagène en utilisant une courte étalon établie avec du collagène de type I humain purifié (Institut Jacques Boy, France). Statistiques Les taux de collagène (moyenne + SD, déviation standard, n = 6) sont comparés à ceux déterminés sur des cellules non traitées (milieu + L-ascorbate + DMSO) par le test t de Student's avec p Résultats On calcule le pourcentage de stimulation A de la synthèse de collagène I en comparant les quantités de collagène I sécrétées dans les cultures témoins (ne recevant aucun produit à tester) CO et dans les cultures traitées Ct, à partir de la formule suivante: L'ensemble des résultats figure au tableau I cidessous. TABLEAU I % de viabilités Collagène I sécrété par % de stimu- Signifi Cultures témoin les fibroblastes lation A captivité (ng/10000 cellules/48 h) Culture témoin sans 100 584 0 produit Produit de 102 884 + 51 S* I'invention I1 (NS)* àî mi Produit de 92 1164 +99 S* l'invention I1 (NS)* a 2,5 g/ml *S = significatif NS = non significatif L'examen du tableau I montre d'abord que le taux de viabilité des cellules dans les cultures traitées n'a pas varié de manière significative par rapport à celui des cultures témoins. L'extrait I1 ne présente donc pas de cytotoxicité. Dans ce tableau, on a exprimé les quantités de collagène I sécrétées par les fibroblastes en ng/10000 cellules/48 h. On observera, à partir du tableau I, que l'extrait méthanolique de Smelophyllum capense a produit une activité significative de stimulation de la synthèse de collagène I par les fibroblastes. Or, il est connu notamment par la publication de Dumas M. et al., dans: Mech. Ageing Dev. (1994) n > 187, que la quantité de collagène I diminue au cours du vieillissement cutané. Ainsi, I'extrait de Smelophyllum capense peut être utilisé pour des produits destinés à combattre le vieillissement cutané ou nécessitant une augmentation de synthèse locale de collagène comme cela est le cas lors d'un traitement des rides ou pour contribuer à l'amélioration de la cicatrisation cutanée. Ainsi, les extraits de Smelophyllum capense peuvent avantageusement être utilisés, grâce à leur propriété de stimulation de la synthèse du collagène, comme agent actif, dans des compositions cosmétiques ou pharmaceutiques, notamment dermatologiques, telles que définies précédemment. Diverses formulations de compositions cosmétiques sont données ciaprès: Exemple 3 Gel de massage raffermissant cutané - Extrait d'écorce de racine de Smelophyllum capense I1 de l'exemple 1 ....0,1 g - Ethanol.... .. .. . . ....25 g - Glycérine ....... 2 g - Propylèneglycol ...... 2 g - Carbopol 940#.... ........1,25 g - Excipient aqueux avec conservateur éventuellement parfumé ....q.s.p. 100,00 g Une partie de l'excipient aqueux est utilisée avec le Carbopol pour préparer séparément un gel, l'autre partie de l'excipient aqueux est utilisée pour être mélangée avec les autres composants et le gel est ajouté dans la solution obtenue afin d'obtenir une composition gélifiée formant le gel de massage. Cette composition de gel de massage peut être utilisée trois fois par semaine pendant deux mois au niveau du buste. Exemple 4 Lotion de soins du corps pour le raffermissement cutané - Extrait d'écorce de racine de Smelophyllum capense I1 de l'exemple 1 0,5 g - Agent solubilisant (Cremophor RH40e) . . 2 g - Acide hyaluronique.... 1 1 g - Excipient aqueux contenant un conservateur éventuellement parfumé . q.s.p. 100,00 g L'extrait est tout d'abord solubilisé dans l'agent solubilisant, puis est ajouté dans l'excipient aqueux auquel on ajoute l'acide hyaluronique. La lotion obtenue peut être utilisée par cure de trois semaines sur les zones sensibles au relâchement, telles que le ventre, les cuisses. Exemple 5 Emulsion antiride - Extrait d'écorce de racine de Smelophyllum capense I1 de l'exemple 1 0,10 g - Excipient émulsionné parfumé..... . .... q.p. 100,00 g Exemple 6 Composition cicatrisante - Extrait d'écorce de racine de Smelophyllum capense I1 selon l'exemple 1 0,5 g - Excipient émulsionné, type eau dans l'huile..... ......q.s.p. 100,00 g Exemple 7 Crème raffermissante et embellissante - Extrait d'écorce de racine de Smelophyllum capense I1 de l'exemple 1 ....0,05 g - Asiaticoside . . . 0,1 g - Phosphate d'ascorbyle (sel de magnésium) .......0,05 g - Glycocéramides végétaux .. ....... 0,05 g - Palmitate de vitamine A ........ 0,01 g - Conservateurs .... .. .. ....... 0,05 g - Excipients émulsionnés...... ...... q.s.p. 100,00 g Cette crème, appliquée deux fois par jour, restaure les qualités dc fermeté, d'élasticité ainsi que les propriétés de barrière cutanée et l'éclat d'une peau jeune. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'un extrait de Smelophyllum capense pour la préparation d'une composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, stimulant la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène I, et destinée en particulier à améliorer la cicatrisation cutanée, à améliorer les propriétés biomécaniques et l'aspect de surface de la peau, à obtenir un raffermissement cutané, à lutter contre les effets du vieillissement cutané, ou à traiter les diverses pathologies accompagnées d'une déficience en collagène. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que la composition précitée est une composition à effet anti-vieillissement cutané, en particulier anti-rides, destinée à prévenir l'apparition des rides ou en atténuer la profondeur. 3. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en cc que l'extrait précité est un extrait d'écorce, en particulier un extrait d'écorce de racine de Smelophyllum capense. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caactéreee en ce que l'extrait de Smelophyllum capense précité est obtenu par extraction par un solvant polaire, tel qu'un alcool inférieur choisi avantageusement parmi le méthanol ou un mélange hydro-éthanolique, de préférence à partir de l'écorce de la plante, de préférence encore à partir de l'écorce de racine de cette plante. 5. Composition cosmétique, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, une quantité cosmétiquement efficace d'un extrait de Smelophyllum capense dispersée dans un excipient cosmétiquement acceptable. 6. Composition pharmaceutique, notamment dermatologique, stimulant la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène I, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre d'ingrédient actif, une quantité pharmaceutiquement efficace d'un extrait de Smelophyllum capense dispersée dans un excipient pharmaceutiquement acceptable. 7. Composition selon l'une des revendications 5 ou 6, cautérisée en ce que la concentration en extrait de Smelophyllum capense est comprise entre 0,0001 % et 1 % en poids, de préférence entre 0,01 % et 0,25 % en poids, par rapport au poids total de ladite composition. 8. Composition selon l'une des revendications 5 à 7, caractérisée en ce que l'extrait précité est obtenu à partir de l'écorce de la plante, en particulier de l'écorce de racine de la plante. 9. Composition selon l'une des revendications 5 à 8, caractérisée en ce que l'extrait de Smelophyllum capense précité est obtenu par extraction par un solvant polaire, tel qu'un alcool inférieur, avantageusement choisi parmi le méthanol ou un mélange hydro-éthanolique. 10. Composition selon l'une des revendications 5 à 9, caractensée en ce qu'elle contient en outre une substance active choisie parmi le groupe constitué par l'acide ascorbique, I'acide madécassique, I'acide asiatique, le madcsosde, I'asiaticoside, l'alpha-1-protéinase inhibiteur, les inhibiteurs de collagénase, tels que l'acide rétinoique, les inhibiteurs d'élastase, la lysine, la proline, le 2oxoglutarate, et le ginsénoside Rg. 11. Procédé de traitement cosmétique, caractérisé en ce qu'il comprend l'application topique sur une zone exteme du corps humain d'une quantité cosmétiquement efficace d'un extrait de Smelophyllum capense, en particulier dispersée dans un excipient cosmétiquement acceptable. 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que l'extrait de Smelophyllum capense est présent dans une composition comprenant une concentration en extrait de Smelophyllum capense comprise entre 0,0001 % et 1 %, de préférence entre 0,01 % et 0,25 %, en poids par rapport au poids total de ladite composition. 13. Procédé selon la revendication 11 ou 12, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un traitement cosmétique pour stimuler la synthèse du collagène, en particulier celle du collagène I, pour améliorer la cicatrisation cutanée, pour lutter contre les effets du vieillissement cutané, pour prévenir l'apparition des rides ou en atténuer la profondeur, ou pour obtenir un raffermissement cutané.