Brevet FR2724112A1 — publié le 19960308

L'utilisation du facteur intrinsèque, molécule connue depuis les années 1940, comme permettant l'absorption de la vitamine B12, ou cyanocobalamine, par voie orale; l'utilisation de l'insuline extraite de pancréas animaux ou obtenue par voie synthétique,ou biogénétique est aussi, bien connue dans les traitements du diabète par voie injectable. Cette dernière n'étant pas administrable par voie orale, puisque détruite par la digestion.La forme rectale n'est pas satisfaisante car la drogue n'a pas d effets sufisamment réguliers ce qui peut entrainer des risques d'hypoglycémie. La présente invention a pour but de proposer un nouvel actif obtenu par une préparation associant l'insuline avec le facteur intrinsèque, ce complexe offrant de nouvelles utilisations dans le champ thérapeutique de l'insuline. Celle-ci, en étant liée intimement avec du facteur intrinsèque lui confère les mêmes propriétés par voie orale et rectale que par voie injectable. L'invention apportant ainsi des modes d'administrations moins lourds pour les malades, et moins chers quant à la mise en oeuvre de 1' insuline qui doit en outre être purifiée pour permettre un produit injectable. Ces formes originales d'administration incorporent toutes le complexe ou le nouvel actif préparé selon l'invention à l'aide du facteur intrinsèque et de l'insuline. La préparation nouvelle du complexe consiste à disposer des deux substances en solution judicieusement tamponnée ,qui a pour effet de lier les deux de telle façon qu'ultérieurement le facteur intrinsèque protège, transporte et libère l'insuline dans l'organisme où elle sera utilisée Ainsi dans l'invention le facteur intrinsèque est préparé à partir de la muqueuse jaune d'antres pyloriques de porc, celleci est préférée à l'intestin grêle de bovin pour sa teneur plus élevée en facteur intrinsèque et surtout pour une plus grande facilité d'extraction ( graisses génantes dans l'intestin de bovin). Selon une particularité avantageuse de l'invention, la méthode de préparation consiste en l'extraction en présence d'un complexe élastasique d'origine pancréatique porcine ( titrant environ 20 Unités Sacchar par mg ), à raison de 1 à 10 g pour 100Kg de muqueuses, et plus précisément 3 g pour 100 kg. Le facteur intrinsèque ainsi obtenu est ensuite complexé selon l'invention, avec l'insuline dans les conditions suivantes et qui sont celle du laboratoire, extrapolables à l'echelle industrielle: le facteur intrinsèque est mis en milieu tampon phosphate à 0,02 Mole (disodique monopotassique )à raison de 10 grammes de solution de facteur pour un litre du tampon. Cette solution obtenue elle est ensuite mélangée à l'insuline dans les proportions comprises entre 40 et 300 Unités Insuline Actrapid , le bon rendement se situe avec 50 unités, à pH compris entre 3 et 6. La solution est agitée à une température de 37 OC durant plusieurs heures, mais avantageusement jusqu'à 24 heures. Le produit obtenu est ensuite selon l'invention dialysé , à une température de 4 OC., puis le dialysat est ensuite déshydraté préférentiellement par lyophilisation , technique choisie pour s'assurer de ne pas avoir d'altération du complexe sur le plan thermique. Une variante en tour d'atomisation mais avec de l'air chaud n'excédant pas 200 OC permet l'obtention du produit dans de meilleures conditions industrielles et économiques. Selon l'invention cette préparation préalable à toute mise en oeuvre galénique s'effectue avec les alternatives ouvertes par le fait que l'administration finale est orale. Ainsi de façon avantageuse l'insuline peut être utilisée pure ( dans sa qualité de pureté injectable )de toutes origines, ainsi que décrit précédemment , sous sa forme cristallisée mais aussi sous forme intermédiaires d'extractions de l'insuline en respectant les proportions de sa complexation avec le facteur intrinsèque. Les poudres ainsi obtenues offrent différentes possibilités de formulations galéniques très variées,liquides, solides, pâteuses. Les mises en oeuvre de formules selon l'invention et qui ont montrées sur animaux , souris et chiens, des résultats très significatifs mesurés en chute de glycémie La matière active obtenue selon l'invention a donc fait l'objet de différentes préparation galéniques nouvelles du fait de sa présence.Ces préparations avec les exemples suivants ont permis de montrer les effets et l'activité inattendue du complexe: Exemple 1: 50 mg de facteur intrinsèque, avec 5 mg d'équivalent insuline obtenu dans un extrait de pancréas de boeuf ont étés préparés comme complexe , complétée d'excipients utiles à la mise en gélules, gastro-resistantes bien connue des techniques de l'art pharmaceutiques, administrées à des souris suivant le protocole suivant: La méthode proposée implique dans un premier temps 1' utilisation de l'anse duodénale ligaturée de souris, ceci afin d'éviter que la substance administrée ne passe par l'estomac et ne subisse l'action du suc gastrique.L'insuline seule, ( témoin ) injectée dans l'anse duodénale ligaturée ne provoque pas de chute de la glycémie chez les animaux traités. L'insuline complexée avec le facteur, injectée dans l'anse duodénale ligaturée provoque une chute de la glycémie chez les animaux traités allant jusqu'à la mort.Ainsi la préparation selon l'invention permet la vectorisation de l'insuline. Exemple 2 La même composition , avec 3 mg d'insuline pure , choisis dans une qualité injectable, complexés avec du facteur intrinsèque ont été comprimés avec des excipients choisis pour conférer aux comprimés fabriqués, un effet de libération progressif ou prolongé avec PRECIROL et COMPRITOL . Ces derniers, d'un poids de 600 mg, sont administrés à une population de 10 chiens. ExemDle 3: Formulation selon l'invention de suppositoires retards Ces mises au point ont été réalisées en laboratoire pour s'assurer de la bonne faisabilité en formulation galénique des matières mises en oeuvre et de leur stabilité.Tous les exemples illustrent à la fois la facilité de formulation sans en limiter les variantes. Revendications l-Composition , caractérisée par le fait qu'elle contient de l'insuline en combinaison avec du facteur intrinsèque, en vue de nouvelles adnînistrations. 2-Procédé pour la préparation de la combinaison, selon la revendication l-,caractérisée en ce que le facteur intrinsèque est préparé à partir d'antres pyloriques de porc, en présence de complexe élastasique dans des proportions comprises entre 0,001% et 0,01% ; le facteur intrinsèque ainsi obtenu , est ensuite complexé: la solution de facteur intrinsèque est mise en milieu tampon phosphate à O, 02 Mole (dissodique monopotassique) à raison de 10 gra-enes de solution de facteur pour un litre du tampon. Cette solution , est mélangée à 1 'insuline dans les proportions comprises entre 40 et 300 Unités Insuline Actrapid , de préférence de 50 unités, à ph compris entre 3 et 6 ; La solution est agitée à une température de 37 "C plusieurs heures, jusqu'à 24 heures Le produit obtenue est ensuite dialysé, à une température de voisine de 4 "C. Le dialysat est alors déshydraté 3- Composition selon la revendications 1, caractérisée par le fait que l'insuline, quelle que soit son origine, utilisée pour réaliser le complexe peut être, soit de l'insuline dans sa qualité de pureté injectable, soit de 1' insuline non purifiée et non concentrée en respectant les proportions de la complexation avec le facteur intrinsèque. 4- Utilisation de la composition selon l'une des revendications 1 ou 3 dans la réalisation de produits destinés à une administration orale ou rectale et correspondant aus mêmes utilisations que l'insuline par voie injectable.