Brevet FR2725990A1 — publié le 19960426

Parmi la classe des épipodophylloïdes, certains composés comme l'étoposide ou le téniposide, dérivés de l'épipodophyllotoxine, composés hémisynthétiques, issus de lignane naturel, sont utilisés dans la préparation de médicaments pour traiter de nombreuses formes de cancer. Ils sont considérés, actuellement comme des produits majeurs de l'arsenal thérapeutique. Parmi les différents cancers traités par ce type de composés on peut citer le cancer du poumon à petites cellules, les tumeurs embryonnaires, neuroblastomes, cancer du rein, lymphomes, maladie de Hodgkin, leucémies aigries, et même cancer du sein. L'étoposide est avantageusement utilisé en association avec d'autres produits anticancéreux et en particulier les dérivés du Platine comme le Cis Platine. L'inconvénient important de ce dérivé, et de même pour son dérivé apparenté le téniposide, est son manque d'hydrosolubilité. Il n'existe pas de formes commercialisées hydrosolubles pour des administrations intraveineuses. Au contraire la mise en solution est faite actuellement dans des solvants partiellement non aqueux, nécessite une administration en perfusion lente et provoque certains effets indésirables voire même toxiques. n existe ainsi un besoin de formes hydrosolubles pour des produits dérivés de cette classe de composés, afin d'améliorer l'administration chez la malade, ainsi que sa biodisponibilité. La présente invention concerne donc des dérivés de l'étoposide hydrosolubles grâce à la présence de groupements fonctionnels phosphates ou carboxylates dont les sels d'addition organiques ou minéraux forment des entités solubles dans l'eau. Cette formulation aqueuse présente l'avantage d'être moins toxique et plus facilement administrable que les formes commercialisées actuellement. La préparation de dérivés de l'étoposide a suscité de nombreux travaux et de nombreux brevets, et en particulier des dérivés diesters 2", 3" et triesters 2", 3", 4' d'étoposide ont été revendiqués dans le brevet FR 2699535-A1. Certains de ces dérivés ont montré une activité égale ou supérieure à l'étoposide et une moindre toxicité. Une amélioration supplémentaire est apportée maintenant grâce à une solubilité aqueuse qui leur confère une facilité d'administration et laisse présager une biodisponibilité accrue par un meilleur passage dans les différentes membranes biologiques. La littérature mentionne des brevets relatifs à des composés apparentés à l'étoposide cherchant à améliorer l'hydrosolubilité, notamment (US 4904768, EP 0369369-A2, EP 196618A1, EP 320988, EP 415453A2). L'avantage de moduler la solubilité aqueuse des composés par des groupements phosphates a été utilisé dans quelques cas favorablement soit dans le domaine des anticancéreux WO 8707609, soit dans le domaine des analgésiques (BE 893,563) malgré tout rien ne laisse prévoir que le composé ainsi obtenu puisse conserver totalement une activité biologique intéressante en lui-même ainsi que celle du dérivé dont il est issu. I1 a été trouvé que les dérivés phosphates et carboxylates possèdent une hydrosolubilité permettant l'administration par voie injectable, et de plus manifestent une activité anticancéreuse améliorée par rapport à l'étoposide. La présente invention concerne donc un composé de formule générale I dans laquelle R' représente soit un atome d'hydrogène, soit un groupement phosphate monoester, soit un groupement carbamate de type -CO-N (R1R2) où N (R1R2) représente des groupements aminodiacétiques et une amine polycyclique comme la 3-amino-quinuclidine, soit un groupement acyle de type phosphonoacétic H203P-CH2-CO, soit un radical R, R représente un groupe acyle de formule A-Z-CH2-CO où Z représente un atome d'oxygène, de soufre, un groupement SO2, un alIlylène linéaire ou ramifié en C14, dans ce cas A représente un noyau phényl substitué ou non, à la condition que:: - dans le cas où R'=R, c'est à dire les dérivés triacylés, A représente un noyau aromatique possédant une fonction salifiable, - dans le cas où R'wR, A représente un reste benzyl, naphtyl, hétéroaryl, phényl substitué ou non, dans ce cas le phényl pouvant être substitué une ou plusieurs fois quelle que soit sa position sur le noyau aromatique par des groupes tels que halogènes, F, C1, Br, alcoxy linéaire ou cycliques en C1-6, aikyl C1-C6, méthylène dioxy, OCF3, CF3, N02, CN, OCH2 Aryl, OH, OPO3H2, CH2 PO3H2, PO3H2, OCH2CO2H, COOH, CH2COOH, COCH3, CHO, A-Z peut également représenter un groupement OCH2CO2H, S02CH2COOH, PO3H2, ainsi que leur sel avec des acides ou des bases, minérales ou organiques, thérapeutiquement acceptables et hydrosolubles. De manière avantageuse les composés de formule générale I seront choisis avec R' représentant un groupe phosphate monoester (PO3H2), carbamate CONRlR2 et NRIR2 représentant un groupement aminodiacétique ou une amine3 quinuclidine, R' représentant également un groupe phosphonoacétique et leurs sels. De préférence, R est choisi parmi les radicaux phénoxyacétyl, 3,4-méthylènedioxyphénoxyacétyl, 4-méthoxyphénoxyacétyl, 4-hydroxyphénoxyacétyl, 4-phosphonooxyphénoxyacétyl, 4carboxyméthylphénoxy acétyl, 4-carboxyméthoxyphénoxyacétyl, 4carboxyphénoxyacétyl, 4-trifluoro méthylphénoxyacétyl, 4trifluorométhoxyphénoxyacétyl, 4-chlorophénoxyacétyl, 4nitrophénoxyacétyl, 4-fluorophénoxyacétyl, cyclohexy loxyacétyl, phénylsulfonylacétyl, pentafluorophénoxyacétyl, 2 et 4 formylphénoxyacétyl, 4-cyanophénoxyacétyl . La présente invention concerne également les procédés de préparation d'un composé de formule I, représentés sur le schéma 1 (voie A), pour lequel on fait réagir un intermédiaire glycosylé de formule générale II. avec un intermédiaire de formule générale III pour fournir un intermédiaire IV R ayant les significations précédentes. R4 est un groupe protecteur par exemple le benzyloxycarbonyl ou un reste carbamate. Ce procédé de préparation est décrit dans le brevet antérieur FR 2699535 à l'exemple 17. Pour fournir un composé de formule IV dans lequel R4 est un groupement protecteur et R défini précédemment. Ce dérivé IV est déprotégé sur sa position 4' (R4), soit par hydrogénolyse, soit par hydrolyse faiblement basique pour fournir le dérivé I (R'=H). Il est également possible de préparer les composés de formule I où R' =R par cette méthode, en utilisant l'intermédiaire de formule III dans lequel R4 représente un groupe acyl R, cette méthode est décrite également dans le brevet antérieur FR 2699535 à l'exemple 1. Selon les compatibilités des substituants R du glucosyl, il est possible également de synthétiser les composés de formule I à partir de l'étoposide lui-même (voie B). Dans une première étape l'étoposide peut être protégé en position 4' (R4)par un groupement R4=benzyloxycarbonyl, ou par un groupement quinuclidine carbamate (R4 = CONH3-quinuclidinyl) obtenu par réaction successive du phosgène suivi de l'amino-3-Quinuclidine sur l'étoposide, pour fournir l'intermédiaire V. D'une façon générale les intermédiaires V sont acylés par des chlorures d'acide dérivés des groupes R définis précédemment, (formés par action du chlorure d'oxalyl) en présence de pyridine, dans le chlorure de méthylène à basse température, sous réserve que les autres fonctions du groupe R soient inertes dans ces conditions, sinon, les substituants phénoliques, carboxyliques ou phosphoniques sont protégés sous forme d'éthers ou d'esters benzyliques respectivement, ce qui permet le déblocage, au stade suivant de la synthèse, par hydrogénolyse (V donnant I R'=H). Les dérivés pour lesquels R' =R sont préparés à partir de l'étoposide par triacylation sur les positions 2", 3" et 4' (voie C). Dans le cas des dérivés fonctionnels R sensibles aux conditions d'hydrogénolyse comme par exemple mais non exclusivement, la présence de C1 ou de NQ, le groupement protecteur choisi sur la position 4' peut être un dérivé carbamate de type CONH-3-quinuclidinyl ou d'un carbonate ou d'un ester de faible poids moléculaire, comme les chloroacétates qui peuvent se cliver ultérieurement entre autres dans des conditions faiblement basiques comme une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à basse température sans influencer la stéréochimie de la lactone trans. L'étape ultime I (R'=H) donnant I (R'wH) consiste en une phosphorylation pour former un phosphate monoester du ou des phénols avec POIL3 en présence de pyridine suivi d'une hydrolyse lente en milieu aqueux acide. L'obtention des dérivés possédant en position 4' un reste carbamate diacétique de type R' = CON (CH2 CO2H)2 se préparent par action du phosgène sur le composé de formule I (R' = H) pour former l'intermédiaire chlorocarbonate non isolé (R'=COCI) puis en le faisant réagir avec le diester benzylique de l'acide aminodiacétique suivi d'une hydrogénolyse pour libérer ensuite les fonctions acides sous forme libre. Les dérivés phosphonoacétiques en position 4' s'obtiennent en faisant réagir le phénol libre en cette position avec le chlorure d'acide de l'acide diéthylphosphonoacétique (Synthesis 1978, 131) ou l'acide dibenzyl phosphonoacétique (Tet. Let. 1974, N"9, 711), puis en hydrolysant les fonctions esters phosphoniques par le bromure de triméthyl silyle, en présence de pyridine dans l'acétonitrile, dans le cas des esters éthyliques, ou par hydrogénolyse, dans le cas des esters benzyliques.Les dérivés de formule I où R' =R, c'est-à-dire possédant la même substitution acyle sur les positions 2", 3" et 4' s'obtiennent, par la voie C, par triacylation de l'étoposide lui-même avec des groupements acyles AXCH2CO ayant une fonction carboxylique sur le groupement A défini précédemment, protégée par exemple sous forme d'ester benzylique, que l'on déprotège par hydrogénolyse ultérieurement. Les dérivés carboxyliques, ou les dérivés phosphates ou phosphonates ainsi obtenus sont salifiés dans l'eau en présence éventuellement d'un cosolvant organique, par addition de bases organiques ou minérales en proportion stoechiométrique par rapport aux acidités en présence, et par exemple avec le N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la lysine, etc. Les sels amorphes ou cristallisés sont obtenus par simple lyophylisation. Schéma 1 Voie A Voie B Voie C II lil Etoposide Etoposi È Sa0 t0 o Me MedOne "V À 1) Diacylation Déprote / 2) Déprotection I 2) I(R'=H) / Tnacylation I (R&commat;=H) Mesure de l'kvdrosolublllte La solubilité dans l'eau des sels des dérivés phosphates ou carboxylates par addition d'amines organiques physiologiquement acceptables comme par exemple la N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la lysine, ou les sels avec des cations minéraux comme le sodium, obtenus sous forme lyophilisée ou par addition extemporannée d'une base sur le composé acide libre, a fourni les résultats suivants à titre d'exemple. Tableau in Composés Sel Solubilité % (poids/volume) exprimé en g pour 100ml d'eau Exemple 1 N-méthylglucamine 0,5 Exemple 3 N-méthylglucamine 5 Exemple 4 N-méthylglucamine 10 Exemple 6 N-méthylglucamine 10 Exemple 6 triéthanolamine 20 Exemple 6 lysine 20 Exemple 6 Sodium 1 Exemple 7 N-méthylglucamine 10 Exemple 1 1 N-méthylglucamine 10 Exemple 21 N-méthylglucamine 10 Exemple 26 N-méthylglucamine 10 Exemple 27 N-méthylglucamine 0,5 Les dérivés ainsi préparés sont stables dans les conditions usuelles de pH neutre et acide et de température. Les dérivés phosphates sur la position 4' ont une stabilité chimique pour pouvoir se prêter aux différentes formulations pharmaceutiques. EXPERIMENTATION BIOLOGIQUE Les molécules ont été testées in vitro en expérimentation biologique et ont montré leur intérêt en tant qu'agents anticancéreux dans les tests suivants. La mesure de l'inhibition de l'activité de la topoisomérase II est faite selon le protocole décrit dans la littérature : "Nuclear topoisomérase II levels correlate with the sensitivity of mammalien cells to intercalating Agents and Epipodophyllotoxins". I.D. HICKSON et coll., J. Biol. Chem. (1988), 263, 17724-1772. Cette mesure a fourni les résultats suivants. Tableau I Composés Test d'inhibition de l'activité de la topoisomérase n (ED50 M) Etoposide 5.6. 10-5 Etopofos > 104 Exemple 1 5.6 10-6 Exemple 3 3.2. 10-7 Exemple 4 1.8. 10-6 Exemple 6 3.2. 10-7 Exemple 7 5.6 . 10-5 Exemple 11 5.6 10-6 Exemple 21 5.6 . 10-6 Exemple 26 5.6 . 10-6 Exemple 27 7.6 . 10-7 La comparaison de l'étoposide avec son analogue soluble 4'-phosphate étopofos (US-4904768) montre une perte d'activité in vitro. Ici les composés de l'invention se trouvent aussi, sinon plus, actifs que l'étoposide. Les groupements R et R' définis précédemment confèrent aux composés de I'invention une augmentation d'un facteur 10 à 100 de l'inhlbition de l'activité enzymatique in vitro par rapport à l'étoposide. On peut apprécier, au vu de ces résultats, I'intérêt de composés ayant une activité anticancéreuse égale ou supérieure à celle de l'étoposide, et une moindre toxicité, sur différentes formes de cancers comme en particulier le cancer du poumon à petites cellules, les tumeurs embryonnaires, les neuroblastomes, le cancer du rein, les tumeurs pédiatriques, les lymphomes hodgkimiens et non hodgkimiens, les leucémies aigües, les choriocarcinomes placentaires, les adénocarcinomes mammaires. Ces dérivés peuvent être utilisés également dans les pathologies induites par le papilloma virus humain ainsi que l'arthrite rhumatoïde associée ou non à des pathologies cancéreuses. De plus ces dérivés peuvent être utilisés pour augmenter l'efficacité thérapeutique des composés inhibiteurs de topoisomérase II et en particulier le traitement des tumeurs normalement réfractaires à la thérapeutique usuelle, c'est à dire les cancers colorectaux et les mélanomes. De plus on peut apprécier l'intérêt de ces produits présentant, d'une part une importante hydrosolubilité qui permet une administration par voie intraveineuse et orale aisée, et d'autre part une meilleure biodisponibilité que celle de l'étoposide. La présente invention concerne également les compositions pharmaceutiques comprenant au moins un composé de formule générale I selon 1' invention et un excipient appropne. Les compositions pharmaceutiques peuvent être présentées de façon adaptée pour l'administration par voie injectable ou par voie orale sous forme de capsule, de gélules, de comprimés à la posologie de 2 à 200mg/m2 par voie injectable et de 5 à 400mg/m2 par 24h pour la voie orale. A titre d'exemple et de façon non limitative les exemples suivants décrivent la préparation des composés de l'invention : Exemple 1 - formule I R'= phosph 4'-déméthyl-4-O-(2,3-bis-phénoxyacétyl-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)épipodophyllotoxine-4'-désoxy-4'-posphate. A une solution de 4'-déméthyl4-0-(2,3-bis-phénoxyacétyl-4,6-ethylidène-ss- D-glucosyl)-épipodophyllotoxine (lg, 1,16mmole) dans 50ml de THF à 10 C sont ajoutés 0,22ml (2,33mmoles) de POC13 puis 0,5ml (3,5mmoles) de triéthylamine. L'agitation est maintenue 30mn à cette température. L'hydrolyse est effectuée ensuite par addition dans le milieu de 20ml d'acide chlorhydrique N puis agité une nuit à température ambiante. Le milieu réactionnel est extrait avec l'acétate d'éthyle pour obtenir le dérivé phosphate cristallisant dans l'éther isopropylique avec un rendement quantitatif. Les caractéristiques sont les suivantes F C # 175 C Anal. C45H45O20P; 1,5H2O; PM = 963,831 C H Calc. % 56.07 5.02 Tr. % 56.18 4.73 Spectre de Masse (FAB) m/e 959 (M+ +Na) 1H 200MHz RMN CDCl3 6 1,30 (3H, d, J = 4,4Hz, H8"); 2,9 (1H, m, H3); 3,1 (1H, m, H2); 5,0 (1H, dd, J = 8,8Hz, H2"); 5,3 (1H, dd, J # 9,2Hz, H3"); 5,5 (1H, s, OCHAO); 5,7 (1H, s, OCHBO); 6,25 (2H, s, H2'H6'); 6,44 (1H, s, Hs). IR v (KBr) 2941, 1774, 1599, 1487. Sel de N-méthyl glucamine Le dérivé phosphate précédent est mis en suspension dans l'eau et on ajoute 2 équivalents de N-méthyl glucamine en solution 0,1M dans l'eau. La solution est agitée sous ultrasons et diluée à 200ml. Aprés filtration la solution est glacée puis lyophilisée pendant 12h. Le résidu est alors repris dans l'acétone et cristallisé, filtré séché pour fournir 350mg d'un solide blanc F = 135 C. Anal. C59H79N2O30P, H20 PM = 1345, 256 C H N Calc. 52,68 6,06 2.08 Tr. 52,69 5,86 1.68 IR v (KBr) 3426, 1772, 1599, 1487. RMN 1H 200MHz CDCl3 6 1,22 (3H, d, J = 4,8Hz, H8"); 2,3 (6H, s, N CH3), 2,6-3,0 (2H, m, H2-H3); 5,36 (1H, dd, J = 7,8Hz, H3"); 5,74 (1H, s, OCHAO); 5,97 (1H, s, OCHBO); 6,15 (2H, s, H2'-H6'); 6,5 (1H, s, Hg); 7,10 (1H, s, Hg); 6,65 (2H, d, J = 8Hz, Ar Ortho); 6,8 à 6,96 (2H, d, J = 8Hz Ar ortho et 2H, t, J = 7Hz, Ar para); 7,24 (4H, m, Ar meta). Sel de Sodium Le dérivé phosphate précédent est agité en solution dans l'acétone avec une résine échangeuse d'ion (Dowex 50 x 8 - 100) préparée par élution avec la soude N. Le milieu est allongé avec de l'eau, filtré et concentré. Le résidu aqueux est lyophillisé pour fournir le di-sel de sodium F # 190 C Anal C45H43Na2O20P3.3H2O PM = 1040,208 C H Calc. 51.96 4.81 Tr. 51.56 4.51 Par la même méthode que celle de l'exemple 1 mais en utilisant les composés intermédiaires de formule I (R' = H) correspondants les nouveaux dérivés suivants ont été préparés Exemple2 - formule I R'=phosph 4'-déméthyl+0-(2,Sbis-cyclohexyloxyacétyl 4,Séthylidène-ss-D- glucosyl)-épipodophyllotoxine4 '-désoxy4 '-phosphate. Rdt = 90% F - 1600CAna1. C45H45O20P, H20 PM = 966,920 C H Calc. 55,89 6,15 Tr. 55,70 6,11 Sel de N-méthylglucamine 4'-déméthyl-4-O-(2,3-bis-cyclohexyloxyacétyl-4,6-éthylidène-ss-D glucosyl)-épipodophyllotoxine4'-désoxy4'-phosphate, di-sel de Nméthylglucamine. Rdt = 50% F - 112 C Anal. C59Hg, N2030P, 4H20 PM = 1411,420 C H N Calc. 50,21 7,07 1.99 Tr. 50,16 6,60 2,30 Exemple 3 - formule I R'=phosph 4'-déméthyl-4-O-(2,3-bis-(4-trifluorométhoxyphenoxyacétyl)-4,6éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine-4'-désoxy-4'-phosphate, disel de N-méthyl glucamine. Rdt = 68% F - 132 C Anal. C61H77N2032F6P, 2,6H20 PM = 1541,840 C H N Calc. 47,52 5,37 1,82 Tr. 47,15 5,51 2,11 Exemple 4 - formule I R'=phosph 4'-déméthyl-4-O-(2,3-bis-(4-fluorophénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D glucosyi)-épipodophyllotoxine-4 '-désoxy-4 '-phosphate di-sel de N-méthyl glucamine. Rdt = 60% F - 1300C Anal. C59H77N2O3F2P, 2,7 H20 PM = 1363,240 C H N Calc. 50,17 5,88 1,98 Tr. 49,74 5,67 1,92 Exemple - formule I R'=phosph 4'-déméthyl-4-O-(2,3-bis-(3,4-méthylènedioxyphenoxyacétyl)-4,6éthylidène-ss-D-glucoxyl)-épipodophyllotoxine-4'-désoxy-4'-phosphate disel de N-méthylglucamine. Rdt = 50% F # 120 C Anal. C61H79N2O34P, H2O PM = 1433,274 C H N Calc. 51,08 5,70 1,95 Tr. 50,68 5,58 1,94 Exemple6 - formule I 4 -(4-phosphonooxyphénoxyacétyl) 4' -déméthyl4O-(2 ,3-bis- (4 phosphonooxyphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)épipodophyllotoxine. Le dérivé phénolique de formule I correspondant à R=R' = 4-hydroxyphénoxyacétyl est décrit dans le brevet FR 2699535-A1 à l'exemple 16 préparé par la voie A. îg de ce dérivé (9,6mmoles) est placé dans 50ml de THF à -10 C sous atmosphère d'azote et on ajoute 1,2ml (8,7mmoles) de triéthylamine puis goutte à goutte 0,53ml (5,8mmoles) de POCl3, I'agitation est maintenue 30mn. Aprés filtration du chlorhydrate de triéthylamine formé, le THF est évaporé. Le résidu est repris dans HCl 1N et agité à température ambiante pendant 30mn. Le précipité blanc est filtré, lavé à l'eau et séché sous vide à 60 C pendant une nuit. On obtient 800mg de dérivé sous forme de phosphate libre. Rdt = 80%. F - 1600C Anal. C53H53031P3 PM = 1278,898 Spectre de masse (FAB) rn/e:1277 (M±1) IR (KBr) v (cm-1) 3404, 1768, 1603, 1500, 1485, 1203, 1086. RMN 1H 200Mz (DMSO) 6 1,23 (3H, d, J = 4,26Hz H8"); 3,03 (2H, m, H2-H3); 5,37 (2H, m, H2"-H3"); 5,77 (1H, s, O-CHA o); 5,97 (1H, s, O CHB-O); 6,3 (2H, s, H2'-H6'). La préparation du sel de glucamine se fait de façon similaire à l'exemple 1 mais avec addition de 3 équivalents de N-méthylglucamine. Le composé s'obtient directement aprés lyophilisation, avec un rendement de 88% donnant les analyses suivantes F - 155 C Anal. C74 H104N3 46P3 PM = 1864,54 C H N Calc. 47,67 5,62 2,25 Tr. 47,26 5,62 2,38 IR (KBr) v (cm-1) : 3458, 1768, 1604, 1500, 1485, 1199, 1084. Exemple @ - formule I 4'-déméthyl-4-O-(2,3-bis-(4-phosphonooxyphénoxyacéthyl)-4,6-éthylidène ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine-4'-désoxy-4'-phosphate. Par la même suite de réactions que pour l'exemple 6 mais en utilisant le dérivé de formule I (R=4-hydroxyphénoxyacétyl et R' =H). Décrit dans le brevet FR 2699535A1 à l'exemple 20, on obtient le composé avec un rendement de F - 1300C Anal. C66H98 N3043P3, 6H2O PM = 1822, 503 C H N Calc. 43,49 6,08 2,31 Tr. 43,30 5,88 2,77 IR (KBr) v (cm-1) : 3429, 1763, 1508, 1199, 1084. Exemple 8 - formule I 4'-(4-phosphonométhylphénoxyacétyl)-4'-déméthyl-4-O-(2,3-bis-(4 phosphonométhylphénoxyacétyl)4,6 ethylidènvss-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. ler stade : 4-benzyloxyphénylméthyldiéthylphosphonat îg (4,3 10-3moles) de chlorure de 4-benzyloxybenzyle sont portés 6h au reflux avec 0,9ml (5,15.10-3moles) de triéthylphosphite. Le milieu réactionnel est filtré sur 150g de Si02, éluée par un mélange d'heptane- acétate d'éthyle (20-80) pour fournir aprés évaporation 1,4g du dérivé phosphonate (Rdt = 100%). 2e stade : 4-hydroxyphénylméthyldiéthylphosphonate Dans un autoclave, 1,1g (3,3.10-3moles) du dérivé benzyloxy du ler stade sont hydrogénés sous une pression d'hydrogène de 7 bars en présence de 200mg de charbon palladié à 10% dans 15ml d'un mélange d'acétate d'éthyle - éthanol (90-10) à une température de 80 C pendant 12h sous agitation. Après filtration du catalyseur, le filtrat est évaporé sous pression réduite pour obtenir 800mg (Rdt 100%) du dérivé phénolique. 3e stade : Acide diéthyl phosphonométhylphénoxyacétique A une solution THF (250ml) de 2,7g (1 îmmoles) du dérivé phénolique précédent sont ajoutés 1,3g (26mmoles) de NaH (50% dispersion) à température ambiante, puis 1,8g (13mmoles) d'acide bromoacétique sont introduits et le milieu réactionnel est porté 8h au reflux. Le milieu réactionnel est versé sur 11 d'eau glacé et extrait par l'éther éthylique. Les phases aqueuses sont acidifiées à pH 1.2 et extraites par l'acétate d'éthyle, séchées, évaporées pour fournir 3,1g (Rdt 94%) du dérivé acétique. 1H 200MHz RMN (CDCl3) 6 8.09 (massif 1H, échangeable) 7.16-7.26 (dd, 2H, J = 8Hz, 2Hz, H aromatiques), 6,85 (2H, d, J = 8Hz, H aromatiques), 4,6 (2H, s, OCH2CO2H), 4.0 (4H, m, ester phosphonate OCH2), 3.12 (2H, d, J = 21.7Hz, CH2P), 1.23 (6H, t, J = 7Hz, ester phosphonate OCH2CH3). 4e stade : condensation de l'acide obtenu au 3e stade sur l'étoposide A 3g (10,2mmoles) d'acide précédemment obtenu au 3e stade en solution dans du chlorure de méthylène (15ml) et 0,2ml de DMF à 0 C sous azote, sont ajoutés goutte à goutte 1,4g (11,2mmoles) de chlorure d'oxalyle, après un important dégagement de COQ on laisse revenir le milieu réactionnel à température ordinaire. On refroidit de nouveau à O"C pour introduire une solution contenant 1g (1,7mmole) d'étoposide, 2g (25,5mmoles) de pyridine dans du chlorure de méthylène (45ml) goutte à goutte. En fin d'addition le milieu est agité encore pendant 4h avec retour à température ordinaire. Aprés évaporation sous pression réduite le milieu réactionnel est repris par du toluène et évaporé, le résidu est agité avec de l'acétate d'éthyle et de l'acide chlorhydrique N. Aprés extraction, la phase organique est lavée par une solution glacée de bicarbonate de sodium puis par une solution saturée de NaCl, décantée, séchée, évaporée, elle fournit une mousse brune qui est chromatographiée sur SiO2 (éluant CH2Cl2 - MeOH-98-2) et donne aprés évaporation un résidu solide de 220mg (Rdt 10%), Masse (FAB) m/e 1441 (M+). 1H RMN 200MHz fournit les pics caractéristiques de ces molécules (CDCl3) 6 7.20 (6H, m, H arom-phosphonate), 6.65-6.93 (6H, d, J = 8.4Hz, H arom. phénoxy) 6.75 (1H, s, H5), 6.47 (1H, s, H8), 6.24 (2H, s, H2 et H6'), 5.87 (1H, s, OCHAO), 5.61 (1H, s, OCHBO), 5.35 (1H, t, H3"), 5.05 (1H, t, H2n), 3.0 (6H, d, J = 21Hz, CH2 Phosphonate). 5e stade : Hydrolyse des esters phosphoniques 220mg (0,16mmoles) du dérivé triester phosphonique obtenu au 4e stade sont placés dans CH3CN (50ml) à 0 C sous azote, on additionne 0,26ml de pyridine (3,2mmoles) puis goutte à goutte 0,49g (3,2mmoles) de bromure de triméthylsilyle. L'agitation est maintenue 24h avec retour à température ambiante. On évapore à sec, reprend le milieu par HCl N et le produit précipite, on filtre le précipité blanc, rince à l'eau jusqu'à neutralité. Le précipité est solubilisé dans du méthanol, filtré, évaporé. Le résidu est repris dans l'eau, cristallisé, pour fournir 120mg du dérivé phosphonique (Rdt 57%). F = 190"C Anal C56 Hgg 028 P3, 5H20 PM = 1301, 41 C H Calc % 51.68 5.34 Tr % 51.91 4.90 IR v (KBr) 3431, 2922, 1774, 1608, 1512, 1485 1H 200MHz RMN (CD30D) ô 7.15-7.23 (6H, m, H arom. méthyl phosphonique), 7.04 (1H, s, H5), 6.9 (2H, d, H arom phénoxy), 6.8 (2H, d, H arom phénoxy), 6.67 (2H, d, H arom. phénoxy), 6.50 (1H, s, Hg), 6.35 (2H, s, H2', H6'), 5.85 (1H, s, OCHAO), 5.58 (1H, s, OCHBO), 3.05 (2H, d, CH2P), 2.9 (1H, dd, H3), 1.3 (3H, d, H8"). Par la même réaction que pour l'exemple 8 4e stade ou l'exemple 25, on prépare (voie C) par triacylation sur l'étoposide les composés suivants à partir des acides A-Z-CH2-CO2H correspondants: Exemple9 - formule I R' = 4'-(phosphonoacétyl)-4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-phénoxyacéthyl-4,6éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. A une solution de 400mg (2mmoles) d'acide diéthyl phosphonoacétique dans 5ml de CH2Cl2 et 3 gouttes de DMF sous azote à 0 C, sont ajoutés 266mg (2,1mmoles) de chlorure d'oxalyle. L'agitation est maintenue 15mn à 0 C, puis une solution de 500mg (0,583mmoles) de 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis- phénoxyacétyl-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine dans 5ml de CH2C12 et 184mg (188y1, 23mmoles) de pyridine sont introduits au milieu réactionnel à 0 C. Le contact est maintenu 2,5h, puis le milieu réactionnel est versé sur HCl N. La phase organique est décantée, lavée avec une solution de NaCl, séchée, évaporée.Le résidu est cristallisé dans l'éther éthylique pour fournir un précipité blanc (450mg, Rdt 75 %). 320mg (0,3 lmmole) de ce dérivé sont placés sous agitation dans 10ml d'acétonitrile en présence de 470mg (0,4ml, 0,31mmoles) de bromure de triméthyl silyle et 240mg (0,25ml, 0,31mmole) de pyridine, à température ambiante pendant 6h. Aprés évaporation le résidu est repris dans HCl N pour fournir un solide blanc qui est filtré, lavé à l'eau, séché. On obtient 180mg (Rdt 57%) du dérivé phosphonique F # 140 C Anal C47 H47 021 P, 2H20 (PM = 1014, 996) C H Calc % 55.61 5.06 Tr % 55.87 4.80 IR v (KBr) 3431, 1774, 1601, 1487 1H 200MHz RMN (CDCl3) # 7.16-7.27 (4H, m, H m. Arom.), 6.68-6.95 (7H, m, H o.p. Arom, H5), 6.44 (1H, s, H8), 6.24 (2H, s, H2'-H6'), 5.82 (1H, s, OCHAO), 5.56 (1H, s, OCHBO), 5.32 (1H, dd, H3"), 5.02 (1H, t, H2"), 3.2 (m, 3H, CH2P, H2), 1.32 (d, 3H, J # 4.4Hz, H8"). Exemple 10 - formule I 4'-(phosphonoacétyl)-4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(4trifluorométhoxyphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)épipodophyllotoxine. Sel de N-méthyl glucamine. Ce dérivé est obtenu par la même méthode que pour l'exemple 9 mais en partant du dérivé de formule I pour lequel R=4trifluorométhoxyphénoxyacétyl et R' =H. Préparation du sel de N-méthyl glucamine : on introduit 810mg (0,7mMole) du dérivé phosphonique dans l'éthanol (15ml) et 0,5m. d'acétone puis 14,1ml d'une solution 0,1N de N-méthyl glucamine (1,41mMole) dans l'éthanol sont introduits goutte à goutte sous agitation. L'agitation est maintenue 1h. Le milieu réactionnel est évaporé et le résidu repris dans l'eau puis filtré (filtre de 0.45 ). La solution aqueuse est lyophylisée, et le résidu est repris dans l'isopropanol, cristallisé, filtré, séché pour fournir 740mg (Rdt 65%) de sel de N-méthyl glucamine. F = 1200C Anal C63 H79 N2 F6 033 P, 3,5H20 PM = 1600,47 C H N Calc % 47.28 5.42 1.75 Tr % 46.95 5.47 2.07 IR v (KBr) 3426, 1774, 1601, 1500, 1487 Exemple 11 - formule I 4'-(dicarboxyméthylaminocarbonyl)-4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(p hydroxyphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène- B-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. ler stade : préparation du diesterbenzylique de l'acide aminodiacétique A une solution de 10g (49,6mMoles) de chlorhydrate de l'ester benzylique de la glycine dans 200ml de CH3CN sont ajoutés 13,7g (99mMoles) de K2CO3, et 8ml (49,6mMoles) de bromoacétate de benzyle goutte à goutte. Le milieu est agité à température ambiante pendant 2 jours. 200ml d'eau sont ajoutés et le milieu est acidifié à pH 2-3 par HCl concentré, puis extrait par l'acétate d'éthyle, pour obtenir 12g (Rdt 80%) du diester utilisé dans l'étape suivante. 2e stade : préparation du carbamate Une solution de phosgène (0,79ml, 1,5mMole) dans le toluène à 1.93M est introduite dans 50ml d'acétonitrile puis refroidie à -10 C sous atmosphère d'azote. On introduit goutte à goutte 820mg (0,76m Mole) de 4'-démetéhyl 44)(2 benzyloxyphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine dans 13ml d'acétonitrile et 0,24g de diisopropyléthylamine. Le milieu réactionnel est agité 2h à -10 C, puis on y introduit 0,24g du diester benzylique de l'acide aminodiacétique, obtenu au ler stade, dans 6ml d'acétonitrile à -5 C. L'agitation est maintenue 6h. Le milieu réactionnel est ensuite évaporé puis filtré sur SiO2 et élué avec un gradient de solvant : éther de pétrole - acétate d'éthyle 70.30 puis 60.40 et enfin 50.50 pour obtenir 700mg (Rdt 65%) du dérivé diester benzylique. 3e stade : Hydro-énolyse des fonctions benzyliques 700mg du dérivé obtenu au 2e stade sont placés en solution dans un mélange de 13ml d'acétate d'éthyle et 3ml d'éthanol, dans un autoclave sous atmosphère d'hydrogène en présence de 70mg de charbon palladié à 10%. L'agitation est maintenue pendant 24h puis le milieu réactionnel est filtré, évaporé. Le résidu est cristallisé dans l'éther isopropylique pour obtenir 480mg (Rdt 92%) du dérivé diacide. F LI 1500C Anal C50 H49 NO24 PM = 1047.94 C H N Calc % 57.31 4.71 1.34 Tr % 57.07 4.96 1.13 IR v (KBr) 3433, 1768, 1603, 1512, 1485, 1460, 1236, 1199 1H 200MHz RMN (DMSO) 6 9.03 et 8.98 (2H, 2s, CO2H, échangeables), 6.45-6.67 (10H, m, Hg, H8, ArH), 6.21 (2H, s, H2', H6'), 6.0 (1H, s, OCHAO), 5.79 (1H, s, OCHBO), 5.32 (2H, m, H2" et H3"), 3.39 (s, N CH2-CO2H), 1.20 (3H, d, H8"). Par la même méthode que l'exemple 11 - 2e stade, mais en utilisant les composés intermédiaires de formule I (R' = H) correspondants, les nouveaux dérivés suivants ont été préparés. Exemple - formule I R' = CON (C2HCOOH2) 4'-(dicarboxyméthylaminocarbonyl)-4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis cyclohexyloxy acéthyl-4,6-ethylidène-ss-D-glucosyl)-épipodopyllotoxine. Rdt = 98% F = 1700C Anal C50 H61 N 22 PM = 1028,037 Exemple 13 - formule I R'= CON (C2HCOOH2) 4'-(dicarboxyméthylaminocarbonyl)-4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis (ptrifluorométhoxy phénoxy acétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)épipodopyllotoxine. Rdt = 87% F - 1500C Anal C52 H47 NO24 F6 PM = 1183,94 C H N Calc % 52.75 4.00 1.20 Tr % 52.64 4.10 1.30 Exemple 14 - formule I R' = CON(C2HCOOH2) 4'-(dicarboxyméthylaminocarbonyl)4'-déméthyl4-0-(2,3-bis phénoxyacétyl-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. Rdt = 25% F - 1700C Anal C50 H49 N 22 H20 PM = 1033,955 C H N Calc % 58.08 4.97 1.35 Tr % 58.43 5.05 1.28 ExemSe 15 - formule I 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(4-carboxyméthoxyphénoxyacétyl)-4,6éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodohyllotoxine, sel de N-méthylglucamine. ler stade : 4hydroxyphénoxyacétate de benzyle A une suspension de 10g (59mMoles) d'acide p-hydroxyphénoxyacétique dans 100ml de CH2C12 à 0 C sous atmosphère d'azote sont ajoutés 0,2ml de DMF puis goutte à goutte 9g de chlorure d'oxalyle (7 imMoles). L'agitation est maintenue 12h à température ordinaire, puis 7,7g (7 imMoles) d'alcool benzylique sont introduits et l'agitation est gardée 8h à température ambiante. On jette le milieu réactionnel sur une solution ammoniacale glacée et on extrait par du chlorure de méthylène. La phase organique est lavée avec HCl N, décantée, séchée, évaporée.Le résidu est filtré sur 150g de SiO2 et éluée par un mélange heptane - acétate d'éthyle (75-25) pour fournir 3,8g (Rdt 25%) d'un solide blanc. 1H 200MHz RMN (CDCl3) 6 7.36 (5H, s, Ar), 6.75 (4H, d, ArOH), 5.24 (2H, s, CH2 Ar), 4.61 (2H, s, OCH2CO). 2e stade : acide 4-benzyloxycarbonylméthoxyphénoxyacétiqu 3,8g du phénol obtenu au ler stade sont portés au reflux du THF (200ml) en présence de 1,3g de NaH (dispersion à 60%) et 2g d'acide bromoacétique pendant 48h. On verse ensuite le milieu réactionnel sur de la glace et on extrait à l'éther isopropylique puis à l'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est acidifiée et extraite par du CH2C12 pour 2.8g (Rdt 60%) d'un solide crème. 1H 200MHz RMN (CDCl3) 6 7.35 (5H, s, Ar), 6.78 (4H, s, ArO), 5.15 (2H, s, CH2 Ar), 4.55 (2H, s, OCH2 ester), 4.45 (2H, s, OCH2 acide) 3e stade : complage de l'acide du 2e stade avec le 4'-benzyloxy carbonyl étoposide A 1,75g (5,SmMoles) de l'acide du 2e stade en solution dans 40ml de CH2C12 avec 0,2ml de DMF, on additionne à 0 C sous atmosphère d'azote goutte à goutte 770mg (6,1mMoles) de chlorure d'oxalyle. L'agitation est maintenue 2h à température ambiante. On ajoute alors, après retour à 0 C, une solution de lg (1,38mMole) de 4'-benzyloxycarbonyl étoposide et de l,lg (1,38mMoles) de pyridine dans 10ml de CH2Cl2.Aprés 3h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est concentré, repris par l'acétate d'éthyle et lavé à l'eau, puis par une solution glacée de bicarbonate de sodium, après un nouveau lavage par du HCl N, puis par une solution saturée de NaCl, la phase organique est décantée, séchée, évaporée pour fournir 800mg (Rdt 66%) qui sont directement hydrogénolysés au stade suivant (CCM SiO2 heptane-AcOEt 2S80 Rf=0.9) 4e stade : Hydrogénolyse 800mg (0,6mMole) de dérivé obtenu au 3e stade sont placés sous atmosphère d'hydrogène à pression atmosphérique dans 15ml d'acétate d'éthyle et Sml d'éthanol en présence de 100mg de charbon palladié, sous agitation importante pendant une heure. Le catalyseur est filtré et le filtrat évaporé.Le résidu est repris dans l'acétone et filtré à nouveau et évaporé pour fournir quantitativement (650mg) le dérivé débenzylé. Ce dérivé est transformé en sel de N-méthyl glucamine par addition de 2 équivalents d'une solution 0, 1M de N-méthyl glucamine dans le mélange EtOH, H2O-Acétone. Aprés 1h d'agitation, la solution est évaporée, reprise par H20, filtrée sur filtre 0.45y et lyophylisée on obtient alors 700mg du dérivé carboxylique. F # 130 C Anal C63 H82 N2 O33. 6H2 O PM = 1503,422 C H N Calc % 50.33 6.30 1.86 Tr % 49.89 5.93 2.19 IR v (KBr) 3427, 1772, 1618, 1508, 1425, 1205, 1087 1H 200MHz RMN (DMSO) 6 7.04 (1H, s, H5), 6.59-6.70 (8H, m, OArO), 6.47 (1H, s, H8), 6.13 (2H, s, H2' et H6'), 5.96 (1H, s, OCHAO), 5.73 (1H, s, OCHBO), 5.33 (2H, m, H2" et H3"), 2.46 (6H, s, NCH3), 1.20 (3H, d, J=4Hz, H8"). Par la même suite de réactions de l'exemple 15, mais en utilisant les réactifs appropriés les dérivés de formule générale I (R' H) sont obtenus Exemple 16 - formule I 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis (4-carboxyphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D glucosyl)-épipodophyIlotoxine En utilisant l'acide 4-benzyloxycarbonylphénoxyacétique, on obtient selon le procédé de l'exemple 15 le dérivé carboxylique avec un rendement de 45%. F # 170 C Anal C47 H44 O21, 1,3H20 PM = 968,469 C H Calc % 58.28 4.81 Tr % 58.19 4.85 Sel de N-méthylglucamine F = 138 C Anal C61 H78 N2 031, 5H20 PM = 1425,355 C H N Calc % 51.40 6.22 1.97 Tr% 51.275.85 2.19 Exemple 17 - formule I 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(4-carboxyméthylphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène ss-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. En utilisant l'acide 4-benzyloxycarbonylméthylphénoxyacétique, on obtient selon l'exemple 15, le dérivé acétique (Rdt 66%). F#150 C Anal C49 H48 21. 2H2 PM = 1008, 932 C H Calc % 58.33 5.19 Tr % 57.74 4.85 Spectrographie de Masse (FAB) m/e 972 (M+) Par la méthode de l'exemple 15 3e stade uniquement, les dérivés suivants sont préparés: Exemple 18 - formule I 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(phénylsulfonylacétyl)-ss-D-glucosyl)épipodophyllotoxine. Rdt = 92% F=248 C Anal. C45 H44 19 S2 PM = 976,790 C H Calc. % 56.72 4.65 Tr. % 56.40 4.66 Exemple - formule I 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(pentafluorophénoxyacétyl)-ss-D-glucosyl)épipodophyllotoxine. Rdt = 75% Anal. C45 H34 017 F10 PM = 1036,75 C H Calc. % 52.13 3.30 Tr. % 51.88 3.25 Exemple 20 - formule I 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(4-trifluorométhylphénoxyacétyl)-ss-D-glucosyl)épipodophyllotoxine. Rdt = 53% Anal. C47 H42 017 F6 PM = 992,820 C H Calc. % 56.86 4.26 Tr. % 56.78 4.22 Exemple 21 - formule I R' =phospha 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4-0-(2,3-bis-(phénylsulfonylacétyl)4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. Di-sel de N-méthylglucamine En utilisant la méthode de l'exemple 1, mais avec le composé de l'exemple 18, le dérivé phosphate sous forme de sel de N-méthylglucamine est obtenu. Rdt = 60% Anal. C59 H79 N2 032 PS2; 3,8H20 F # 148 C PM = 1492,85 C H N Calc. % 49.79 5.59 1.97 Tr. % 47.47 5.85 1.88 Exemple 22 - formule I R'=phospha 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4-0-(2,3-bis-(2,3,4,5,6 pentafluorophénoxyacébl)4,Séthylidène-ss-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. Di-sel de N-méthylgluca mine. En utilisant la méthode de l'exemple 1 mais avec le composé de l'exemple 19, le dérivé phosphate sous forme de sel de N-méthylglucamine est obtenu. Rdt = 78% F- 140 C Anal. C59 H69 F10 N2 030 P; 3,5H20 PM = 1507,147 C H N Calc. % 45.11 4.88 1.78 Tr. % 45.34 4.67 1.82 Exemple 23 - formule I R' = phosph 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4-0-(2,3-bis-(4trifluorométhylphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)épipodophyllotoxine. Di-sel de N-méthylgluca mine. En utilisant la méthode de l'exemple 1 mais avec le composé obtenu à l'exemple 20, le dérivé phosphate sous forme de N-méthylglucamine est obtenu. Rdt = 33% F = 1200C Anal. C61 H77 N2 O30 F6 P; 4,15 H20 PM = 1538,170 C H N Calc. % 47.63 5.59 1.82 Tr. % 47.16 5.12 1.84 Exemple 24 - formule I Voie C 4'-déméthyl4'-(4~carboxyphénoxyacétyl)40-(2,3-bis-(4 carboxyphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine - sel de glucamine. 1er stade : Condensation de l'acide 4-benzyloxycarbonylphénoxy acétique avec l'étoposide A une solution de 4,9g (17mMoles) d'acide 4benzyloxycarbonylphénoxyacétique dans 100ml de CH2C12 et 0,2ml de DMF sont ajoutés à 0 C sous azote, goutte à goutte 2,4g (18,7mMoles) de chlorure d'oxalyle, après 2h d'agitation à température ambiante, on introduit à cette solution 2g (3,4mMoles) d'étoposide en solution dans 15ml de CH2C12 et 3,2g (4 ImMoles) de pyridine goutte à goutte à 0 C. Après retour à température ambiante en 3 heures, le milieu réactionnel est versé sur HCl N puis extrait par CH2Cl2 et lavé par une solution de NaHCO3, et NaCl saturé successivement pour obtenir aprés évaporation un produit brut qui est chromatographié sur SiO2 par élution dans un mélange heptane-AcOEt (6040). On obtient 1,8g (Rdt 38%) de dérivé trisubstitué qui est utilisé directement dans l'étape suivante. 2e stade : Hydrogénolyse 1,5g (1.07mMole) du triester benzylique précédent est hydrogénolysé en présence d'hydrogène à pression atmosphérique dans un mélange EtOH (15ml) AcOEt (60ml) avec 300mg de charbon palladié à 10% sous bonne agitation pendant 8h à température ambiante. Le catalyseur est filtré, le filtrat évaporé est chromatographié sur SiO2 et élué dans un mélange CH2C12-MeOH (96.4) pour obtenir un solide blanc (600mg Rdt 50%). Le sel de glucamine effectué directement, est obtenu en plaçant 3 équivalents d'une solution aqueuse 0,1M de N-méthyl glucamine dans un mélange EtOH-H20 (80-20), cette solution est ajoutée à la solution du triacide dans l'acétone. Un précipité gommeux est obtenu, le milieu est évaporé puis repris par H20 et filtré à travers un filtre de 0.45 . Le filtrat est alors lyophilisé pour obtenir le sel de glucamine.Rdt = 50% F- 1350C Anal C77 H101 N3 04, 7H20 PM = 1836,103 C H N Calc % 50.37 6.32 2.29 Tr % 49.99 5.77 2.43 IR v (KBr) 3404, 1772, 1604, 1545, 1385, 1086. 1H 200MHz RMN (DMSO), 7.77-7.85 (6H, m, Ar), 7.1 (1H, s, H5), 6.89, 6.79, 6.64 (6H, d, J=8,7Hz, ArO), 7.08 (1H, s, H5), 6.46 (1H, s, H8), 6.26 (2H, s, H2' et H6'), 6.13 (1H, s, OCHAO), 5.95 (1H, s, OCHBO), 2.42 (9H, s, N-CH3), 1.20 (3H, d, J=4,9Hz, H8"). Fxemple 25 - formule I 4'4éméthyl-4'-carboxyméthylphénoxyacétyl40-(2,3-bis-(4- carboxyméthylphénoxy acétyl)4, 6éthylidène-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. Ce dérivé est obtenu par la même méthode que pour l'exemple 24, mais en utilisant l'acide benzyloxycarbonylméthylphénoxyacétique. Rdt = 20% F - 1500C Anal C59 H56 25, 1.4H20 PM = 1190,703 C H Calc % 59.63 4.81 Tr % 59.19 4.84 Exemple 26 - formule I 4'-déméthyW' carboxyméthoxyphénoxyacétyl-4s(2,3-bis-(4 carboxyméthoxy phénoxyacétyl)-4,6-ethylidène-ss-D-glucosyl) épipodophyllotoxine - Sel de N-méthyl glucamine. Ce dérivé est obtenu par la même méthode que pour l'exemple 24, mais en utilisant l'acide benzyloxycarbonylméthoxyphénoxyacétique. Rdt = 84% F-1100C Anal C80 H107 N3 043,6.3 H20 PM = 1912,036 C H N Calc % 50.25 6.30 2.20 Tr % 50.13 6.17 2.56 Exemple 27 - formule I 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4-0-(2,3-bis-(4-chlorophénoxyacétyl)4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. Préparation des intermédiaires (voie B) 4'-déméthyl-4'-(3-quinuclidinylaminocarbonyl)-4-0-(2,3-bis-(4chlorophénoxy acétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. ler stade : 4 '- (3-quinuclidinylaminocarbonyl) étoposide formule V R4 = COHN 3-quinuclidinyl A une solution 1,93M de phosgène dans l'acétonitrile (8,8ml, 16,9mMoles) refroidie à 0 C sous azote, est ajoutée goutte à goutte une solution d'étoposide (5g, 8.49mMoles) dans 200ml de CH3CN et 2,74g (21.2mMoles) de N, N-diisopropyléthylanine en 10nrn, puis introduire 1,07g (8,49mMoles) de 3-aminoquinuclidine en solution dans 20ml de CH3CN. Le milieu est agité 24h. Aprés évaporation, le résidu est chromatographié sur SiO2 avec un mélange de solvants : CHCl3-MeOH NH40H (93-7-0.7) puis (90-10-1). On obtient 1,67g (Rdt 26%) de produit carbamate, V homogène en CCM qui est mis aussitôt en réaction dans le 2e stade. 2e stade: Condensation avec 1 'acide p-chlorophenoxyacétique A une solution de 1,68g (8,98mMoles) d'acide p-chlorophénoxyacétique dans du chloroforme (40ml) et 0,5ml de DMF à 0 C sous atmosphère d'azote, sont introduits 1,25g (9.88mMoles) de chlorure d'oxalyle goutte à goutte. L'agitation est maintenue lh. Cette solution est ensuite ajoutée goutte à goutte à la solution du dérivé de l'étoposide obtenu au ler stade (1,66g, 2.24mMoles) dans 60ml de chloroforme et 1,77g de pyridine à 0 C. Cette nouvelle solution est agitée 5h avec retour à la température ambiante.Le milieu réactionnel est ensuite versé sur HCl N (lOOml) décanté, puis lavé par une solution saturée de NaCl, séchée, évaporée pour fournir une huile qui est chromatographiée sur silice. L'élution par un mélange de CHCl3, MeOH, NH40H (95, 5, 0.5) fournit 1,97g (Rdt 80%) du dérivé du titre de l'exemple 26. On en forme le chlorhydrate (par addition d'une solution d'éther saturé de gaz chlorhydrique à la solution de la base dans l'acétone. Aprés agitation pendant 10rnn, le précipité obtenu est filtré lentement, lavé à l'éther et séché (Rdt 50%). F # 1800C Anal C53 H54 Cl2 N2 018, HCl, 2H20 PM = 1150,422 C H N Calc % 55.33 5.08 2.43 Tr % 55.74 4.96 2.61 Spectre de masse (FAB) m/e 1077 (M+) 3e stade : hydrolyse A une solution dans 70ml d'acétone de 1,08g du dérivé du 2e stade, on introduit 30ml d'une solution saturée de NaHCO3. Le milieu est agité pendant 2 jours, on évapore l'acétone et acidifie le milieu avec HCl concentré jusqu'à pH 2, puis on extrait par du chlorure de methylène. Une chromatographie sur SiO2 (élution CH2Cl2-MeOH 97-3) fournit le dérivé du titre de l'exemple 27. Une nouvelle chromatographie sur SiO2 (élution éther de pétrole - AcOEt 1-1) fournit aprés évaporation un résidu qui cristallise dans l'éther isopropylique (200mg Rdt=21%). F-125"C AnalC45H42C12017 PM = 925,730 C H Calc % 58.38 4.57 Tr % 58.63 4.69 Spectre de masse (FAB) m/e 924 (M±1) IR v (KBr) 3458, 1774, 1618, 1491. 1H 200MHz RMN (CDCl3) 6 7.15-7.22 (4H, m, Ar), 6.75 (1H, s, H5), 6.77 (2H, d, J=8.8Hz, ArO), 6.64 (2H, d, J=8.8Hz, ArO), 6.51 (1H, s, Hg), 6.22 (2H, s, H2 et H6'), 5.91 (1H, s, OCHAO), 5.71 (1H, s, OCHBO), 5.33 (1H, t, J=9Hz, H3"), 5.02 (1H, t, J=7.8Hz, H2"), 4.91 (1H, d, J=7.8Hz, H1"), 4.83 (1H, d, J=3.2Hz, H4), 4.69 (1H, q, H7"), 3.1 (1H,dd, H2), 2.9 (1H, m, H3), 1.34(3H, d, J=5Hz, H8"). Préparation du phosphate: Ce dérivé est obtenu selon le mode opératoire de l'exemple 1 mais en utilisant le dérivé obtenu au 3e stade. Sel de N-méthylglucamine: Rdt = 70% F-1400C Anal C59 H77 C12 N2 030 P, 6H20 PM = 1461,49 C H N Calc % 48.49 5.8 1.90 Tr % 48.78 5.55 1.88 Exemple 28 - formule I 4'-déméthyl-4'-carboxyméthoxyacétyl-4-0-(2,3-biscarboxyméthoxyacétyl-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. Ce dérivé est préparé selon la méthode de l'exemple 24, ler et 2e stade dans lequel on utilise l'acide benzyloxycarbonylméthoxy acétique au lieu de l'acide 4-benzyloxycarbonylphénoxyacétique, pour conduire avec des rendements successifs de 77% et de 75 %. F = 138 C Anal C41 H44 Q5, H20 PM=954,805 C H Calc % 51.57 4.85 Tr % 51.22 4.72 Spectre de masse (FAB) m/e 959 (M+ +Na) Exemple D - formule I 4'-déméthyW'-carboxyméthylsulfonylacétyl40-(2,3-bis- carboxyméthylsulfonyl acétyl-4, 6éthylidène-B -D-glucosyl) épipodophyllotoxine. Ce dérivé est préparé comme le précédent selon la méthode de l'exemple 24, ler et 2e stade en utilisant l'acide benzyloxycarbonylméthylsulfonylacétique avec des rendements successifs de 55 % et 90%. F#165 C Anal C41 H44 028 S3, H20 PM = 1098,98 C H Calc % 44.81 4.22 Tr % 44.94 4.34 Spectre de masse (FAB) m/e 1103 (M+ +Na) Exemple - formule I R HOC2#CH2CO, R = 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-carboxyméthyoxyacétyl-4,6-éthylidène-ss-Dglucosyl) épipodophyllotoxine. Ce dérivé est obtenu par la méthode décrite pour l'exemple 15, 3e et 4e stade, mais en utilisant l'acide benzyloxycarbonylméthoxyacétique au lieu de benzyloxycarbonylméthoxyphénoxyacétique. Les rendements successifs sont 42% et 71%. F#192 C Anal C37 H40 21, 0.2 H20 PM = 824.32 C H Calc % 54.59 5.20 Tr % 54.81 5.23 Exemple 31 formule I R = R' 4' -déméthyl4' -Phosphonoacétyl4s(2,3-bis-phosphonoacétyl4,$ éthylidène-B-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. Ce dérivé est obtenu de façon identique à la méthode de l'exemple 24, ler et 2e stades, mais en utilisant l'acide dibenzylphosphonoacétique (Tet. Let. 1974, N 9, 711). Les modifications par rapport à l'exemple 24 sont les suivants : le premier stade se conduit à 0 C avec retour à température ambiante pendant 18h; I'hydrogénolyse au second stade se fait dans le solvant: THF 25ml et EtOH 50ml et la réaction est conduite à 0 C pendant 4h. Les rendements sont successivement 34% et 83 %. F- 1840C Anal C35 H41 025 P3, 4H20 PM = 1026, 58 C H H20 Calc % 40.94 4.81 7.02 Tr % 40.95 4.38 7.54 Sprectre de masse (FAB) m/e 955 (M+ + 1) Exemple 37 - formule I R H2O3PCH2CO. R = 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-phosphonoacétyl-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. Ce dérivé est obtenu de façon identique à la méthode de l'exemple 15, 3e et 4e stades, mais en utilisant l'acide dibenzylphosphonoacétique, déjà utilisé pour l'exemple 31. Le stade d'hydrogénolyse se fait en utilisant un mélange de solvant : THF EtOH (30-70) à 0 C pendant 4h. On obtient alors le dérivé avec un rendement global de 45 % . F- 1680C Anal C33 H38 21 P2 PM = 832,606 Spectre de masse (FAB) m/e 833 (M+ + 1). REVENDICATIONS 1. Composé de formule générale I dans laquelle R' représente soit un atome d'hydrogène, soit un groupement phosphate monoester, soit un groupement carbamate de type -CO-N (R1R2) où N (R1R2) représente des groupements aminodiacétiques et une amine polycyclique comme la 3-amino-quinuclidine, soit un groupement acyle de type phosphonoacétic H203P-CH2-CO, soit un radical R, R représente un groupe acyle de formule A-Z-CH2-CO où Z représente un atome d'oxygène, de soufre, un groupement S02, un aikylène linéaire ou ramifié en C14, dans ce cas A représente un noyau phényl substitué ou non, à la condition que:: - dans le cas où R'=R, c'est à dire les dérivés triacylés, A représente un noyau aromatique possédant une fonction salifiable, - dans le cas où R'wR, A représente un reste benzyl, naphtyl, hétéroaryl, phényl substitué ou non, dans ce cas le phényl pouvant être substitué une ou plusieurs fois quelle que soit sa position sur le noyau aromatique par des groupes tels que halogènes, F, Cl, Br, alcoxy linéaire ou cycliques en C1, aikyl C1-C6, méthylène dioxy, OCF3, CF3, N02, CN, OCH2 Aryl, OH, OPO3H2, CH2 P03H2, PO3H2, OCH2CO2H, COOH, CH2COOH, COCH3, CHO, A-Z peut également représenter un groupement OCH2CO2H, S02CH2COOH, P03H2, ainsi que leur sel avec des acides ou des bases, minérales ou organiques, thérapeutiquement acceptables et hydrosolubles. 2. Composé selon la revendication 1 caractérisé en ce que R' représente un groupement phosphate monoester (P03H2), carbamate CONR1R2 et NR1R2 représente un groupement aminodiacétique ou une amino-3 quinuclidine, R' représente également un groupe phosphonoacétique et leurs sels. 3. Composé selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce que R est choisi parmi les radicaux: phénoxyacétyl, 3,4-méthylènedioxyphénoxyacétyl, 4-méthoxyphénoxyacétyl, 4-hydroxyphénoxyacétyl, 4-phosphonooxyphénoxyacétyl, 4carboxyméthylphénoxy acétyl, 4-carboxyméthoxyphénoxyacétyl, 4carboxyphénoxyacétyl, 4-trifluoro méthylphénoxyacétyl, 4trifluorométhoxyphénoxyacétyl, 4-chlorophénoxyacétyl, 4nitrophénoxyacétyl, 4-fluorophénoxyacétyl, cyclohexyloxyacétyl, phénylsulfonylacétyl, pentafluorophénoxyacétyl, 2 et 4 formylphénoxyacétyl, 4-cyanophénoxyacétyl. 4. Composé selon l'une des revendications 1 à 3 caractérisé en ce qu'il est choisi parmi les sels organiques ou minéraux de 4'-démétyl-4'-deoxy-4'-phosphate-4-0-(2,3-bis phénoxyacetyl-4,6 éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl4'-di(carboxyméthyl)aminocarbonyl4-0-(2,3-bis phénoxyacétyl-4,6-éthylidène-ss-D-glucosy)-épipodopyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-phosphonoacétyl-4-0-(2,3-bis phénoxyacétyl-4,6 éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl4'-désoxy-4'-phosphate4-0-(2,3-bis-(4- trifluoromethylphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-di(carboxymethyl)aminocarbonyl-4-0-(2,3-bis-(4 trifluorométhoxyphénoxyacétyl)4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl4'-désoxy4'-phosphate4-0-(2,3-bis-(4- trifluoromethoxyphénoxyacétyl)4 , 6-éthylidène- I3-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-phosphonoacéthyl-4-0-(2,3-bis-(4 trifluorométhoxyphénoxyacétyl)4 ,6-éthyl idène-P- D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. 4'-déméthyl4'-(4-phosphonooxyphénoxyacétyl)4-0-(2,3-bis-(4- phosphonooxyphénoxyacétyl)4 ,6-éthylidène-ss -D-glucosyl) épipodophyllotoxine. 4'-déméthyl-4' -désoxy-4 '-phosphate-4-0-(2,3-bis-(4- phosphonooxyphénoxyacétyl)-4 ,6-éthylidène-B-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. 4'-déméthyl4'-di(carboxymethyl)arninocarbonyl-4-0-(2,3-bis- cyclohexyloxacétyl-4,6-ethylidène-ss-D-glucosyl)-épipodopyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4-0-(2,3-bis cyclohexloxyacéthyl) 4,Séthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine . 4' aéméthyl-4' -(3-quinuclidinyl aminocarbonyl) 4-0-(2 , 3-bis-(3 , 4- méthylènedioxyphénoxyacétyl)4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. 4'-déméthyl4'-désoxy4'-phosphate4-0-(2,3-bis-(3,4- méthylènedioxyphénoxyacétyl)4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4-0-(2,3-bis-(2,3,4,5,6 pentafluorophénoxyacétyl)-4,6-éthylidène, ss-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. 4'-déméthyl4'-désoxy4'-phosphate4-0-(2,3-bis-(4- fluorophénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodoyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-(3-quinuclidinylaminocarbonyl)-4-0-(2,3-bis-(4 chlorophénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodoyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4,0-(2,3-bis-(4 chlorophénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-Dglucosyl)-épipodopylloroxine. - 4'-déméthyl-4'-désoxy-4'-phosphate-4,0-(2,3-bis-phénylsulfonylacétyl) 4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine. 4'-déméthyl4'-(4-carboxyphénoxyacétyl)4-0-(2,3-bis-(4 carboxyphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl) épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-(4-carboxyméthylphénoxyacétyl)-4-0-(2,3-bis-(4 carboxyméthylphénoxyacétyl)-4, 6-éthylidène- P-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl-4'-(4-carboxyaméthyoxyphénoxyacétyl)-4-0-(2,3-bis-(4 carboxyméthoxyphénoxyacétyl)4 , 6-éthylidêne- '3-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. - 4'-déméthyl44(2,3-bis-(4-carboxymethoxyphénoxyacétyl)4,6- éthylidène--D-glucosyl)pipodophyllotonne. - 4'-déméthyl-4-0-(2,3-bis-(4-carboxyméthylphénoxyacétyl)-4,6-éthylidène B-D-glucosyl)-épipodophyllotoxine . - 4'-déméthyl-4'-(3-quinuclidinylaminocarbonyl)-4-0-(2,3-bis-(4 nitrophénoxyacéthyl)-4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)-épipodphyliotoxine. - 4'-déméthyl4'-désoxy4'-phosphate4-0-(2,3-bis-(4- méthoxyphénoxyacétyl)4,6-éthylidène-ss-D-glucosyl)- épipodophyllotoxine. 5. Composés selon la revendication 4, caractérisés en ce que les agents salifiant les fonctions acides sont plus particulièrement choisis parmi les amines telles que N-méthylglucamine, lysine, triéthanolamine, ou les cations comme le sodium ou le potassium et en ce que les agents salifiant les fonctions basiques sont plus particulièrement choisis parmi les acides minéraux ou organiques tels que acide chlorhydrique, acide sulfurique, acide méthane sulfonique, acide éthanol sulfonique, acide maléique, acide tartrique. 6. Procédé de préparation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que l'on fait réagir un intermédiaire glycosylé de formule générale 11. avec un intermédiaire III pour lesquels R et R4 sont définis précédemment, que l'on déprotège pour obtenir les composés de formule I R'=H, et que l'on fait réagir avec les réactifs appropriés pour obtenir les composés de formule I R'gH. 7. Procédé de préparation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que l'on fait réagir l'étoposide protégé en position 4' par un groupe benzyloxycarbonyl ou quinuclidinecarbamate de formule V avec un réactif acylant de type A-X-CH2CO pour conduire aprés hydrogénolyse ou hydrolyse au composé de formule I R' =H. 8. Procédé de préparation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que l'on fait réagir l'étoposide par triacylation pour obtenir les composés de formule I où R' =R=A-X-CH2CO, A possédant une fonction salifiable. 9. Procédé de préparation du sel d'un composé selon les revendications 1 à 5 caractérisé en ce que l'on traite le composé acide par une quantité stoechiométrique de base, ou par résine échangeuse d'ions et que l'on lyophilise ou cristallise. 10. Procédé de préparation du sel d'un composé selon les revendications 1 à 5 caractérisé en ce que l'on traite le composé basique par une quantité stoechiométrique de l'agent acide et que l'on lyophilise ou cristallise. 11. A titre de médicament, le composé selon l'une des revendications 1 à 5. 12. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé de formule I selon l'une des revendications 1 à 5 et un excipient approprié. 13. Utilisation d'un composé de formule I selon l'une des revendications 1 à 5, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement anticancéreux, en particulier le cancer du poumon à petites cellules, les tumeurs embryonnaires, les neuroblastomes, le cancer du rein, les tumeurs pédiatriques, les lymphomes hodgkimiens et non hodgkimiens, les leucémies aigües, les choriocarcinomes placentaires, les adenocarcinomes mammaires ainsi que pour augmenter l'efficacité thérapeutique des composés inhibiteurs de topoisomérase ll pour le traitement des tumeurs réfractaires aux thérapeutiques usuelles : les cancers colorectaux et les mélanomes. 14. Utilisation d'un composé de formule I selon l'une des revendications 1 à 5 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de l'arthrite rhumatoïde, et des affections provoquées par le papilloma virus humain.