Brevet FR2726470A1 — publié le 19960510

La présente invention concerne des formulations non- parentérales améliorées pour administration d'interféron. Les interférons sont des protéines naturelles spécifiques d'une espèce, produites par différentes cellules sous induction par des virus, des ARN double brin, d'autres polynucléotides, des antigènes et des mitogènes. Les interférons présentent de multiples activités biologiques telles que des fonctions antivirales, antiprolifératives, immunomodulatrices et anticellulaires. Au moins trois types distincts d'interférons humains ont été identifiés et caractérisés en termes d'activités anti-virale, anti-croissance et d'activation de cellules tueuses naturelles. Ils sont produits par les leucocytes, les lymphocytes et les fibroblastes et sont classés en interférons a, y et È, respectivement. Un grand nombre de variantes des trois types d'interférons humains sont également connues. Ces interférons "natifs" peuvent être produits en culture cellulaire, isolés et purifiés par des méthodes classiques, par exemple comme décrit dans le brevet US No. 4. 503.035. Des protéines ou des polypeptides présentant une activité biologique comparable à l'interféron natif peuvent également être produites par génie génétique, récupérées et purifiées par une technologie classique, par exemple comme décrit dans les brevets US Nos. 4.816.566 et 4.810.645. Selon la présente invention, le terme "interféron" englobe l'interféron natif, les protéines et les polypeptides présentant une activité biologique comparable à l'interféron natif, ainsi que les interférons conjugués à un polymère (interféron pégylé). Sont surtout préférés aux fins de la présente invention l'interféron a, et plus particulièrement l'interféron a-2a. L'interféron est normalement faiblement absorbé par l'intermédiaire du tissu muqueux dans la circulation sanguine et il est par conséquent d'une valeur limitée ou sans valeur pratique lorsqu'il est administré via une voie quelconque autre que parentérale. La biodisponibilité de l'interféron dans les présents systèmes pour administration non- parentérale, en particulier par voie orale, est généralement de ou proche de 0 %. L'administration de ce produit pharmaceutique difficilement absorbable est généralement effectuée par des injections intraveineuses ou intramusculaires. Les compositions selon la présente invention augmentent l'importance de l'absorption de l'interféron à travers le tissu muqueux tel que les membranes gastro- intestinales et rectales, et dans la circulation sanguine et ainsi favorisent la biodisponibilité de l'interféron qui sinon n'est généralement pas absorbé à travers le tissu muqueux, ce qui augmente l'efficacité thérapeutique de l'interféron. C'est la combinaison originale du système d'augmentation de l'absorption qui conduit à des résultats supérieurs. La présente invention concerne une composition pharmaceutique comprenant: a) une quantité thérapeutiquement efficace d'interféron; b) une quantité favorisant l'absorption d'un système d'augmentation de l'absorption, comprenant: (1) d'environ 1 % à environ 20 % en poids du système d'augmentation de l'absorption d'un composé de formule: CH3(CH2)1 0CH2(OCH2CH2)nOH o n a une valeur moyenne de 12; (2) d'environ 1 % à environ 20 % en poids du système d'augmentation de l'absorption d'un sel pharmaceutiquement acceptable d'au moins l'un des acides caprylique ou caprique, et c) d'environ 0 % à environ 90 % en poids d'un composé de formule o0 i CHrO-C-(CH2) n-CH3 1o CH-O-C-(CH2) n-CH3 Iii CH2-O-C-(CH2) n-CH3 o n est 6 ou 8. Le premier composant du système d'augmentation (composant (b) (1)), est le produit d'une réaction d'éthérification entre l'alcanol laurylique et le polyéthylène glycol. Le Laureth-12 qui est désigné, selon une désignation CFTA, par éther laurylique de PEG (12) est disponible commercialement et également connu sous la dénomination MACOL LA-12, produite par Mazer Chemicals Company, Gurnee, Illinois, USA; Alkasurf LAN-12, produite par Alkaril; Carsonon L-12, produite par Lonza; et Ethosperse LA-12, produite par Glyco. Le polyéthylène glycol dans le Laureth-12 est, en pratique, un moyen pour atteindre une matière de masse moléculaire élevée, ayant de préférence une masse moléculaire moyenne en nombre de 600. Le second composant du système d'augmentation (composant (b)(2)) est un ou plusieurs des sels de l'acide caprylique, (CH3(CH2)6COOH) et de l'acide caprique (CH3(CH2) 8COOH). Conformément à la présente invention, les sels pharmaceutiquement acceptables de l'un ou l'autre des acides caprique et caprylique ou des deux, ou leurs mélanges peuvent être utilisés et rentrent dans le cadre de l'invention. Les sels peuvent être préparés d'une manière classique et au moyen de techniques connues, par réaction de l'acide avec une base ayant un cation non- toxique, pharmacologiquement et pharmaceutiquement acceptable. En général, une base quelconque formant un sel avec l'acide carboxylique et dont les propriétés pharmacologiques ne provoquent pas d'effet physiologique défavorable lorsqu'elle est ingérée par ou administrée d'une autre manière à un animal à sang chaud convient. De telles bases comprennent ainsi, par exemple, les hydroxydes ou carbonates de métaux alcalins et de métaux alcalino-terreux, comme par exemple l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, l'hydroxyde de calcium, le carbonate de potassium, et analogues. On préfère particulièrement pour l'invention les sels de sodium, principalement en raison de leur accessibilité aisée, et les sels de potassium. Le caprylate de sodium est celui qui est le plus préferé. Il est également avantageux que la formulation selon l'invention comprenne un triglycéride en C8-C1o de formu- le o CH2-0-C-(CH2) n-CH3 19i l II CH-O-C-(CH2) n-CH3 o Il CH2-O-C-(CH2) n-CH3 o nest 6 ou 8. Ce triglycéride est produit par H ls America sous la dénomination commerciale Miglyol -12 et par Stephan Company sous la dénomination Neobee M5. La composition pharmaceutique selon la présente invention peut être administrée virtuellement sous n'importe quelle forme de dosage appropriée pour une administration non-parentérale, de préférence par voie orale ou rectale. Par exemple, les compositions pharmaceutiques peuvent être fournies par voie orale via un dispositif de délivrance de médicament imbibant un fluide. Des systèmes de délivrance orale appropriés pour la présente invention comprennent ceux décrits dans les brevets US Nos. 5.198.229 et 5.223.265. Les compositions pharmaceutiques peuvent également être délivrées par voie rectale sous la forme de "microlavements"' par utilisation de dispositifs rectaux tels qu'une seringue ou d'autres dispositifs connus de l'homme du métier. Des exemples de microlavements sont décrits dans Martindale, The Extra Pharmacopoeia, 30ème édition (The Pharmaceutical Press, Londres, 1993) (voir descriptions de diverses compositions pour les produits Microlax, Microlet et Relaxit aux pages 1696, 1697 et 1797 respectivement). Les compositions pharmaceutiques peuvent également être délivrées par voie rectale sous la forme d'un suppositoire, qui peut être préparé selon des modes opératoires classiques. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être une émulsion, ou peuvent être miscibles dans l'eau ou une solution aqueuse. Dans le cas d'une émulsion, la composition pharmaceutique comprend un agent émulsifiant. Des agents émulsifiants appropriés sont notamment un quelconque agent émulsifiant classique aidant à la formation de l'émulsion et qui étend l'intervalle de température, de concentra- tion, etc., sur lequel l'émulsion demeure dispersée, et en général augmente la stabilité de l'émulsion. Un exemple d'agent émulsifiant préféré est le monoglycéride d'acide stéarique produit par Henkel Corporation sous la dénomination de Monumul 90-25. Dans le cas d'une composition qui est miscible à l'eau, la composition pharmaceutique peut également comprendre au moins un support hydrophile capable de dissoudre les substances hydrosolubles. Des exemples sont le PEG 400 et la glycérine. En plus des composants de base susdits, les compositions pharmaceutiques peuvent également comprendre des inhibiteurs de protéase. Les protéases sont des enzymes qui catalysent la coupure des liaisons peptidiques internes dans une protéine. Un exemple d'inhibiteur de protéase est l'aprotinine. Les compositions pharmaceutiques peuvent également comprendre des agents chélatants. Un exemple d'agent chélatant est l'acide éthylènediamine tétraacétique (EDTA) et ses sels. En outre, les compositions pharmaceutiques peuvent également comprendre de l'albumine sérique humaine, une préparation stérile d'albumine sérique obtenue par fractionnement du sang de donneurs humains sains, pas moins de 96 % de son volume total étant la protéine albumine. Lorsqu'elle est délivrée sous la forme d'un suppositoire, la composition pharmaceutique peut compren- dre une base de suppositoire appropriée. Des bases de suppositoire appropriées sont notamment une quelconque base de suppositoire classique telle que celles indiquées dans Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ème édition, éd. A. Gennaro, Mack Publishing Co., Easton, PA 1990. Des exemples de bases pour suppositoire appropriées comprennent, mais sans y être limitées, les suivantes: beurre de cacao; glycérides d'acides gras tels qu'ne huile végétale, y compris noix de coco et noyau de palme modifié par estérification, hydrogénation et fractionnement; gélatine glycérinée; polyéthylène glycol; agent de surface non-ionique tel que l'ester d'acide gras de polyoxyéthylène sorbitan; et le polyoxyéthylène stéarate. On préfère tout particulièrement les mélanges de mono-, di- et triglycérides d'acides gras saturés naturels en C12-C18 ayant un nombre pair d'atomes de carbone. On préfère tout particulièrement les bases de Hûls America ayant pour dénomination commerciale Witespol . Les proportions relatives des composants de la composition selon l'invention peuvent être ajustées pour que l'on atteigne l'absorption optimale sur l'interféron sélectionné, le mode d'administration de la formulation selon l'invention et l'aptitude des patients à la tolérance de l'irritation. Pour l'interféron a-2a, la compositon en poids peut s'établir comme suit: a) environ 1 x 106 UI/ml à environ 2 x 108 UI/ml d'interféron, de préférence environ 2 x 107 UI/ml à environ 1 x 108 UI/ml, et plus avantageusement encore environ 5 x 107 UI/ml; b) (1) environ 1 % à environ 20 % de Laureth-12, de préférence environ 3 % à environ 15 %, et plus avantageusement encore environ 6 % à environ 12 %; (2) environ 1 % à environ 20 % du sel de l'acide caprylique/caprique, de préférence environ 3 % à environ %, et plus avantageusement encore environ 5 % à environ 10 %. La composition pharmaceutique peut également comprendre d'environ 0 % à environ 90 % de Miglyol-812, de préférence 20 % à environ 60 %; et plus avantageusement environ 50 %. Dans une forme de mise en oeuvre préférée, le sel d'acide caprylique/caprique est le caprylate de sodium, qui est présent dans la formulation susdite dans le pourcentage en poids indiqué plus haut. Les compositions selon l'invention sont sous des formes de dosage liquides en émulsion ou en solution. La formulation peut être mise dans un système de délivrance orale ou rectale tels que ceux décrits plus haut par des méthodes classiques. De préférence, la composition pharmaceutique selon la présente invention est sous la forme d'une "dose unitaire". L'expression "dose unitaire" est utilisée ici dans le sens classique pour désigner une application ou administration unique du médicament au sujet à traiter en une quantité telle qu'indiquée plus loin. Il convient de noter que la quantité peut être administrée en une dose unitaire ou capsule, ou en variante en des multiples de deux ou plus de ces doses unitaires, le total de celles-ci correspondant à la quantité prescrite de médicament pour une période de temps donnée. Exemples Afin d'évaluer l'absorption de l'interféron par la membrane gastrointestinale et rectale, des tests in vivo ont été effectués sur les formulations selon l'invention, ainsi que sur une formulation comparative. Le mode opératoire et les résultats sont décrits dans la suite. Exemple 1 In vivo - rats - coliaue Préparation de la formulation 1 Pour préparer une formulation 1 non inventive, on a ajouté à de l'eau contenant de l'albumine sérique humaine une solution aqueuse d'interféron a-2a ayant une concentration d'environ 14,2 x 108 UI/ml, tamponnée à environ pH 5 (solution d'apport d'interféron). Pour préparer des formulations 2 et 3 selon l'invention, on a ajouté une solution de caprylate de sodium dans l'eau (phase aqueuse) à un mélange de Laureth- 12 en option avec du Monomul 90-25 et du Miglyol 812 (phase huileuse) à 60-65 C avec agitation, suivie d'une mise en vortex. Dans un second tube a été préparé un mélange contenant une solution d'apport d'interféron, de l'albumine sérque humaine, de l'aprotinine et de l'EDTA. On a ajouté au mélange du second tube l'émulsion de la phase huileuse et la phase aqueuse à environ 35-40 C et le mélange résultant a été mis en tourbillonnement vortex. Les formulations sont représentées dans le tableau 1 ci-dessous: Tableau 1 Formulation 1 Formulation 2 Formulation 3 Constituants non-inventiv selon l'inv. selon l'inv. Solution d'interféron* 0,357 ml 0,357 ml 0,357 ml Eau 4,6 ml 1,9 ml 1,0 ml Miglyol 812 - -- 1,4 g 2,3 g Laureth-12 --- 0,6 g 0,6 g Caprylate de sodium --- 0, 5 g 0,5 g Albumine sérique humaine** 0,04 ml 0,04 ml 0,04 ml EDTA --- 1,75 mg 1,75 mg Aprotinine*** --- 0,2 ml 0,2 ml la solution d'interféron était à 14,2 x 108 UI/ml d'interféron a-2a ** solution à 25 % en poids/volume d'albumine sérique humaine *** d'une solution de réserve à 50.000 KUI/ml Bien que de l'interféron cc-2a ait été utilisé dans les compositions susdites, il est clair que d'autres interférons peuvent être substitués en des quantités appropriées compte tenu des connaissances de l'homme du métier, dans ces compositions et d'autres qui seront décrites ici. Administration de la formulation 1 témoin et des formulations 1 et 2 selon l'invention Des rats femelles adultes Sprague-Dawley pesant chacun environ 300-400 grammes ont été mis à la diète et anesthésiés avec de la cétamine-HCl et de la xylazine à une dose de 80 mg/kg et 10 mg/kg respectivement. Avec chaque rat, une incision d'environ 3 cm a été pratiquée verticalement dans le plan médian abdominal pour exposer la paroi du côlon. La formulation témoin 1 et les formulations 2 et 3 selon l'invention ont été administrées à une dose de 20 MU par injection avec une seringue dans la paroi du côlon ascendant à une distance de 1 à 2 cm du caecum. Administration de la formulation 1 par voie sous- cutanée Aux fins de déterminer la biodisponibilité relative, on a administré une dose de 3-20 mU de formulation 1 par voie sous-cutanée (s. c.) par injection avec une seringue sous forme d'un bolus dans une poche créée par plissement la peau dans la zone dorsale du cou de rats anesthésiés. La Fig. 1 montre les données pour la zone sous la courbe de la formulation 1 administrée s.c. en fonction de la dose. Détermination de concentration d'interféron dans le plasma La concentration d'interféron dans le plasma a été déterminée à différents intervalles de temps après administration d'interféron via la formulation 1 et les formulations 2 et 3 selon l'invention. 0,6 ml de prises d'essai de sang ont été recueillis au moyen de la technique du plexus orbital avant l'administration de l'interféron, et 0,25, 0,50, 1, 2, 4 et 5 heures après l'administration, puis on a centrifugé pour séparer le sérum, après quoi le plasma a été séparé et congelé jusqu'à analyse. Après que chaque prise d'essai de sang avait été faite, sauf avant l'administration de l'interféron et 15 minutes après l'administration, 0, 5 ml de solution saline normale (0,9 %) ont été injectés par voie intrapéritonéale. Analyse d'échantillons de Dlasma Les taux d'interféron dans le plasma ont été évalués au moyen d'un kit d'analyse immuno- enzymatique (EIA) de Roche Diagnostic Systems, Bâle, Suisse. Le mode opératoire de l'analyse était le suivant: Etalon de réserve: Un ml d'eau distillée a été ajouté dans un flacon contenant 2500 UI d'interféron cL-2a lyophilisé. Le flacon a été secoué doucement par retournement un certain nombre de fois. Etalons Dour courbe d'étalonnaae: Les tubes d'EIA ont été marqués comme étant de 200 UI, 100 UI, 50 UI, 25 UI et 12,5 UI par ml. On a ajouté dans le premier tube (marqué UI/ml) 920 ml et dans le reste des tubes 500 ml d'albumine sérique humaine (HSA). 80 ml de l'étalon de réserve ont été ajoutés au premier tube et mélangés doucement. On a transféré de ce tube 500 ml de solution dans le second tube (marqué 100 UI/ml) et on a mélangé doucement. Cette technique de dilutions successives a été répétée pour chacun des tubes restants et on a ainsi obtenu des concentrations de 200 UI, 100 UI, 50 UI, 25 UI et 12,5 UI/ml. Montaae d'essai cour étalons et prises d'essai: 100 microlitres d'étalons et de prises d'essai en double ont été transférés dans les tubes d'EIA désignés. Dans les tubes de 0 UI/ml on a ajouté 100 ml de tampon HSA. Aux tubes d'EIA contenant les étalons dans du tampon HSA ont été ajoutés 100 ml de sérum exempt d'interféron, tandis qu'aux tubes d'EIA contenant des prises d'essai dans du sérum ont été ajoutés 100 ml de tampon HSA. A tous ces tubes ont été ajoutés et mélangés doucement 500 ml de solution de peroxydase anti-interféron provenant du kit d'essai de l'interféron. Une bille (revêtue d'anticorps anti-interféron monoclonal) a été répartie dans chaque tube. Toutes les rangées de tubes ont été couvertes d'une feuille d'aluminium et ont été entreposées pendant 18 à 24 heures dans l'obscurité à température ambiante pour incubation. Après la période d'incubation, les billes dans les tubes d'EIA ont été lavées avec de l'eau au moyen d'un laveur COBAS Washer. Après lavage, 250 ml de substrat de développement de couleurs ont été ajoutés et on a laissé incuber pendant 30 minutes. Immédiatement après les 30 minutes, on a ajouté 1 ML d'agent d'interruption à chaque tube, on a mélangé et on a mesuré à 492 nm la densité optique de la couleur développée en utilisant un photomètre d'EIA COBAS. A partir de la densité optique, on a calculé la quantité d'interféron dans la prise d'essai, au moyen de la pente de la courbe étalon. Evaluation et analyse des données Le taux de plasma en fonction du temps a été enregistré pour la formulation 1 et les formulations 2 et 3 selon l'invention, comme l'indiquent les Figs. 2 et 3. Au moyen d'un système informatique on a déterminé l'aire située sous la courbe ("AUC") pour la formulation 1 et les formulations 2 et 3 selon l'invention. La figure 1 illustre les données obtenues après l'administration s.c. de différentes doses utilisant la formulation 1. La biodisponibilité a ensuite été calculée comme suit: % de biodisponibilité relative = AUC 0-5 h (formulations 1/2/3) x 100 AUC 0-5 h (formulation 1 (s.c.)) Les résultats sont indiqués dans le tableau 2. Tableau 2 Biodisoonibillité relative (% moyen) Composition 0 formulation témoin 1 18,3 formulation 2 selon l'invention 22,6 formulation 3 selon l'invention Les données indiquent que les formulations 2 et 3 selon l'invention, lorsqu'elles étaient administrées par voie non-parentérale, étaient supérieures à la formulation non-inventive 1, lorsque celle-ci était asministrée par voie non-parentérale, en termes de biodisponibilité relative. ExemDle 2 Rats in vivo - émulsion - Dar voie rectale Préparation des formulations La formulation non-inventive 1 a été préparée comme dans l'exemple 1. Pour préparer les formulations 4 et 5 selon l'invention, on a ajouté une solution de caprylate de sodium dans l'eau (solution aqueuse) à un mélange de Laureth-12, avec du Monomul 90-25, dans du Miglyol 812 (phase huileuse) à 60-65 C avec secouage, suivi d'une agitation avec vortex. Dans un second tube a été préparé un mélange contenant une solution d'apport d'interféron, de l'albumine sérique humaine, une solution d'aprotinine et de l'EDTA. Au mélange du second tube a été ajoutée l'émulsion de la phase huileuse et la phase aqueuse à environ 35- 40 C et le mélange résultant a été soumis à un vortex. La formulation non-inventive 1 et les formulations 4 et 5 selon l'invention sont représentées dans le tableau 3 ci-dessous: Tableau3 Formulation 1 Formulation 4 Formulation 5 Constituants non-inventive selon l'inv. selon l'inv. Solution d'interféron* 0,357 ml 0,357 ml 0,357 ml Eau 4,6 ml 1,75 ml 1,75 ml Miglyol 812 ---2,5 g 2,5 g Laureth-12 --- 0,3 g 0,2 g Monomul 90-25 --- 0,15 g 0,2 g Caprylate de sodium --- 0,25 g 0,2 g Albumine sérique humaine** 0,04 ml 0,04 ml 0,04 ml EDTA --- 1,75 mg 1,75 mg Aprotinine*** --- 0,2 ml 0,2 ml * la solution d'interféron était à 14,2 x 108 UI/ml d'interféron a-2a ** solution à 25 % en poids/volume d'albumine sérique humaine d'une solution de réserve à 50.000 KUI/ml Administration de formulation 1 par voie s.c. Comme décrit dans l'exemple 1. Administration de formulation 1 témoin non-inventive et des formulations 4 et 5 selon l'invention Des rats femelles adultes Sprague-Dawley pesant chacun environ 300-400 grammes ont été mis à la diète pendant 24 heures et anesthésiés avec de la cétamine-HCl et de la xylazine à une dose de 80 mg/kg et 10 mg/kg respectivement. L'interféron a été administré à une dose de 3 MU par injection de la formulation témoin 1 non- inventive et des formulations 4 et 5 selon l'invention avec un dispositif rectal extemporané à 2-3 cm dans le rectum. Détermination de concentration d'interféron dans le plasma La concentration de l'interféron dans le plasma, y compris les modes opératoires d'essai, ont été déterminés comme indiqué dans l'exemple 1. Evaluation et analyse des données La Fig. 4 représente un tracé de la teneur dans le plasma en fonction du temps pour la formulation témoin 1 non-inventive et pour les formulations 4 et 5 selon l'invention. La biodisponibilité relative a été calculée comme indiqué dans l'exemple 1. Les résultats sont indiqués dans le tableau 4. Tableau 4 Biodisponibillité relative (% moyen) Composition 0 non-inventive formulation témoin 1 19,5 formulation 4 selon l'invention 21 formulation 5 selon l'invention Les données indiquent que les formulations 4 et 5 selon l'invention, lorsqu'elles étaient administrées par voie non-parentérale, étaient supérieures à la formulation témoin 1 lorsque celle-ci était administrée par voie non- parentérale en termes de biodisponibilité relative. Exemple 3 In vivo - lapin - émulsion - par voie rectale La formulation noninventive a été préparée comme dans l'exemple 1. La formulation 4 selon l'invention a été préparée comme dans l'exemple 2. La formulation 1 non-inventive et la formulation 4 selon l'invention sont représentées dans le tableau 5 ci- dessous: Tableau 5 Constituants Formulation 1 Formulation 4 Solution d'interféron* 0,357 ml 0,357 ml Eau 4,6 ml 1,75 ml Miglyol 812 --- 2,5 g Laureth-12 --- 0,3 g Monomul 90-25 --- 0,15 g Caprylate de sodium --- 0,25 g Albumine sérique humaine** 0,04 ml 0,04 ml EDTA -- - 1,75 mg Aprotinine*** --- 0,2 ml * la solution d'interféron était à 14,2 x 108 UI/ml d'interféron c-2a ** solution à 25 % en poids/volume d'albumine sérique humaine d'une solution de réserve à 50.000 KUI/ml Administration de formulation 1 témoin non-inventive et de la formulation 4 selon l'invention Des lapins blancs de Nouvelle-Zélande ont été mis à la diète pendant 24 heures et anesthésiés avec de la cétamine-HCl et de la xylazine à une dose de 35 mg/kg et 10 mg/kg respectivement. Pour la formulation 4 selon l'invention l'interféron a été administré à une dose de 20 MU au moyen d'un dispositif rectal extemporané à 2-3 cm dans le rectum. Administration de la formulation 1 par voie s.c. Comme décrit dans l'exemple 1, sauf que la dose d'interféron était de 10 mU. Détermination de concentration d'interféron dans le Dlasma Des échantillons de sang ont été prélevés à partir de l'artère centrale auriculaire à des intervalles de temps prédéterminés. La concentration d'interféron dans le plasma, y compris les modes opératoires d'essai, ont été déterminés comme dans l'exemple 1. Evaluation et analyse des données La Fig. 5 représente un tracé de la teneur dans le plasma en fonction du temps pour la formulation 1 non- inventive telle qu'administrée par voie sous-cutanée dans la figure 5. La Fig. 6 montre la teneur dans le plasma en fonction du temps pour la formulation 4 selon l'invention telle qu'administrée par voie rectale. Avec l'aide d'un système informatisé, l'aire située sous la courbe ("AUC") a été déterminée pour la formulation 1 administrée par voie sous-cutanée ("s.c.") et pour la formulation 4 administrée par voie non-parentérale. La biodisponibilité relative de la formulation 1 témoin non-inventive et de la formulation 4 selon l'invention a ensuite été calculée comme suit: % de biodisponibilité relative = AUC 0-5 h (formulations 1/4) x 100 AUC 0-5 h (formulation 1 (s.c.)) Les résultats sont indiqués dans le tableau 6 ci- dessous. Tableau 6 Biodisponibillité relative (% moven) ComDosition 0 non-inventive formulation 1 témoin 10 formulation 4 selon l'invention Les données indiquent que la formulation 4 selon l'invention, lorsqu'elle était administrée par voie non- parentérale, était supérieure à la formulation témoin 1 non-inventive, lorsque celle-ci était administrée par voie non-parentérale, en termes de biodisponibilité relative. Exemple 4 Rats in vivo - non acueux - colique Préparation de formulations La formulation 1 non-inventive a été préparée comme dans l'exemple 1. Pour préparer la formulation 6 selon l'invention, on a ajouté du Laureth 12 à du Miglyol 812 et chauffé entre 35 C et 40 C. Du caprylate de sodium a été dissous par chauffage dans in mélange d'acide caprylique et de labrasol, un glycéride en C8-C10 polyglycosylé saturé. De l'aprotinine et une solution d'interféron ont été ajoutées à la solution susdite à température ambiante, suivies de l'addition d'une solution de Miglyol 812 et de Laureth 12 avec agitation. Pour préparer la formulation 7 selon l'invention on a dissous du caprylate de sodium dans un mélange d'acide caprylique et de Miglyol 812 à une température de 50- 60 C. Dans un second flacon l'agent émulsifiant lécithine et le Laureth 12 ont été fondus et mélangés, puis on a ajouté les solutions d'interféron et d'aprotinine à environ 30 C. Le mélange de caprylate de sodium, d'acide caprylique et de Miglyol 812 a été ajouté dans le second flacon avec agitation. La formulation 1 non-inventive et les formulations 6 et 7 selonl'invention sont représentées dans le tableau 7 ci-dessous: Tableau 7 Formulation 1 Formulation 6 Formulation 7 non-inventive selon l'inv. selon l'inv. Solution d'interféron* 0,357 ml 0,357 ml 0,178 ml Eau 4,6 ml Acide caprylique --- 1,0 g 1,1 g Miglyol 812 --- 1,9 g 2,3 g Laureth- 12 0,6 g 0,6 g Caprylate de sodium --- 0,5 g 0,5 g Labrasol --- 0,5 g Albumine sérique humaine** 0,04 ml --- 0,04 ml Lécithine --- --- 0,25 g Aprotinine*** --- 0,1 ml 0,1 ml * la solution d'interféron était à 14,2 x 108 UI/ml d'interféron a-2a ** solution à 25 % en poids/volume d'albumine sérique humaine *** d'une solution de réserve à 50.000 KUI/ml Administration de formulation 1 car voie s.c. Comme décrit dans l'exemple 1. Administration de la formulation 1 témoin non-inventive et des formulations 6 et 7 selon l'invention Comme décrit dans l'exemple 1. Détermination de concentration d'interféron dans le plasma La concentration d'interféron dans le plasma, y compris les modes opératoires d'essai, a été déterminée comme dans l'exemple 1. Evaluation et analyse des données La Fig. 7 représente un tracé de la teneur dans le plasma en fonction du temps pour la formulation 6 selon l'invention. La Fig. 8 représente un tracé de la teneur dans le plasma en fonction du temps pour la formulation 7 selon l'invention. La biodisponibilité relative été calculée comme dans l'exemple 1. Les résultats sont indiqués dans le tableau 8. Tableau 8 BiodisDonibillité relative (% moven) Composition 0 non-inventive formulation 1 témoin 9,2 formulation 6 selon l'invention 4,9 formulation 7 selon l'invention Les données indiquent que les formulations 6 et 7 selon l'invention, lorsqu'elles étaient administrées par voie non-parentérale, étaient supérieures à la formulation 1, lorsque celle-ci était administrée par voie non- parentérale, en termes de biodisponibilité relative. ExemDle 5 Rats in vivo - aaueux - colique Préoaration de formulations La formulation 1 non-inventive a été préparée comme dans l'exemple 1. Pour préparer la formulation 8 selon l'invention, on a chauffé du PEG 400, de la glycérine, du Laureth 12 et du caprylate de sodium jusqu'à ce que la caprylate de sodium fût complètement dissous (60-70 C). Une solution d'interféron, une solution d'albumine sérique humaine et une solution d'aprotinine ont été ajoutées après refroidissement de la solution susdite à température ambiante. La solution résultante a ensuite été mise à tourbillonner en vortex. Pour préparer la formulation 9 selon l'invention, du Laureth 12 et du caprylate de sodium ont été dissous dans de l'eau par chauffage à 40 C. Après refroidissement du mélange susdit à température ambiante, une solution d'interféron, une solution d'aprotinine, une solution d'albumine sérique humaine et de i'EDTA lui ont été ajoutés et mélangés avec ce mélange. La formulation 1 témoin non-inventive et les formulations 8 et 9 selon l'invention sont représentées dans le tableau 9 ci-dessous: Tableau 9 Formulation 1 Formulation 8 Formulation 9 Constituants non-inventive selon l'inv. selon l'inv. Solution d'interféron* 0,357 ml 0,357 ml 0,357 ml Eau 4,6 ml --- 3,303 ml Laureth-12 --- 0,60 g 0,60 g Caprylate de sodium --- 0,50 g 0,50 g Acide caprylique --- 1,0 g --- PEG 400 --- 2,5 g --- Glycérine --- 0,9 g --- Albumine sérique humaine** 0,04 ml 0,04 ml 0,04 ml EDTA --- 1,75 mg 2,33 mg Aprotinine*** --- 0,1 ml 0,1 ml * la solution d'interféron était à 14,2 x 108 UI/ml d'interféron a-2a À* solution à 25 % en poids/volume d'albumine sérique humaine d'une solution de réserve à 50.000 KUI/ml Administration de formulation 1 par voie s.c. Comme décrit dans l'exemple 1. Administration de la formulation 1 témoin et des formula- tions 8 et 9 Comme décrit dans l'exemple 1. Détermination de concentration d'interféron dans le olasma La concentration d'interféron dans le plasma, y compris les modes opératoires d'essai, a été déterminée comme dans l'exemple 1. Evaluation et analyse des données La Fig. 9 représente un tracé de la teneur dans le plasma en fonction du temps pour la formulation 8 selon l'invention. La Fig. 10 représente un tracé de la teneur dans le plasma en fonction du temps pour la formulation 9 selon l'invention. La biodisponibilité relative été calculée comme dans l'exemple 1. Les résultats sont indiqués dans le tableau 10. Tableau 10 Biodisoonibillité relative (% moven) Composition 0 non-inventive formulation 1 témoin 4,1 formulation 8 selon l'invention 6,1 formulation 9 selon l'invention Les données indiquent que les formulations 8 et 9 selon l'invention, lorsqu'elles étaient administrées par voie non-parentérale, étaient supérieures à la formulation 1 témoin, lorsque celle-ci était administrée par voie non- parentérale, en termes de biodisponibilité relative. Exemole 6 A titre d'illustration, une formulation de suppositoire appropriée selon la présente invention est détaillée ci-dessous. Bien que l'interféron c-2a, qui est l'interféron préféré selon la présente invention, soit utilisé pour illustrer ces formulations, il doit être entendu que d'autres interférons peuvent lui être substitués en des quantités appropriées. Forme de dosage en suppositoire Solution brute d'interféron 0,02 ml Witepsol H15 1000 mg Laureth 12 90 mg Caprylate de sodium 60 mg Miglyol 812 280 mg La forme de dosage susdite peut être préparée comme suit: Chauffer la base à environ 40-45 C. Ajouter le Laureth 12, le caprylate de sodium et le Miglyol 812 et mélanger pour obtenir un mélange uniforme. Refroidir le mélange à 35 C. Ajouter la solution d'interféron et mélanger intimement. Verser le mélange dans des moules pour suppositoires et refroidir pour faire durcir en suppositoires. L'efficacité des compositions procurées par la présente invention est en outre démontrée par les figures 1-10. Fig. 1 montre un tracé de l'aire située sous la courbe en fonction de la dose pour une administration sous-cutanée chez le rat de la formulation 1. Fig. 2 illustre un tracé des teneurs en interféron dans le plasma de rat en fonction du temps pour une administration colique de la formulation témoin et de la formulation 2 selon l'invention. Fig. 3 représente un tracé des teneurs en interféron dans le plasma de rat en fonction du temps pour une administration colique de la formulation 3 selon l'invention. Fig. 4 représente un tracé des teneurs en interféron dans le plasma de rat en fonction du temps pour une administration rectale de la formulation témoin et des formulations 4 et 5 selon l'invention. Fig. 5 montre un tracé des teneurs en interféron dans la plasma du lapin en fonction du temps pour une administration sous-cutanée de la formulation 1. Fig. 6 montre un tracé des teneurs en interféron dans le plasma du lapin en fonction du temps pour une administration rectale de la formulation 4 selon l'invention. Fig. 7 montre un tracé des teneurs en interféron dans le plasma du rat en fonction du temps pour une administration colique de la formulation 6 selon l'invention. Fig. 8 montre un tracé des teneurs en interféron dans le plasma du lapin en fonction du temps pour une administration rectale de la formulation 7 selon l'invention. Fig. 9 montre un tracé des teneurs en interféron dans le plasma du lapin en fonction du temps pour une administration rectale de la formulation 8 selon l'invention. Fig. 10 montre un tracé des teneurs en interféron dans le plasma du lapin en fonction du temps pour une administration rectale de la formulation 9 selon l'invention. wnipos ap d eT/T D úHD (ZHD)-D-O-HD 0" O" il J HD-U (ZHD)-D-O-ZHD II aainwuo; ap asoduoD un,p sp7cd,ua % 06 uo.TAua e % 0 uoITAua,P (D ia 'anbiDdpo no anbTlAadeDo sapoD Cl sap un,I suToui -,ep alqdeodaDDoe nuaanbTnaDeoPw2qd las un,p spiod ua % [ Uo-TAUa ? % 1 uo1TAuap (z) z ap auuaeou -naepA aun P u no HOU(gHOEHOO)EHOO L (EHO)CHO :alnwioj ap asodwoo un,p spTod ua %:E uo.ITAU e % T uoIAua,p (T) ::_ ouadWoD 'uoTIdiosqp,t ap uoi PquaDw6n,p awe:sAs un,p uc:2dosqi,I:ues. :oDe9uenb aun (q 2a S uopan:,o a_:a auaunbnnapTuPnb aun (P :'luy_.C:ooo arnbTnaioy.u:yd uOTTsodmio D '1 SNOILYJNDIGNSA2 5. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 1-4, dans laquelle l'interféron est de l'interféron a-2a. 6. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 1-5, comprenant: a) d'environ 1 x 106 UI/ml à environ 2 x 108 UI/ml d'interféron c-2a; b) une quantité favorisant l'absorption d'un système d'augmentation de l'absorption, comprenant: (1) d'environ 1 % à environ 20 % en poids d'éther laurylique de polyéthylène glycol-12; (2) d'environ 1 % à environ 20 % en poids de caprylate de sodium; et c) d'environ 0 % à environ 90 % en poids d'un composé de formule O O II CHO-0-C-(CH2) n-CH3 o 1 il CH-O-C-(CH2) n-CH3 1 O I CH,-0-C-(CH2) nCH3 o n est 6 ou 8. 7. Composition pharmaceutique selon la revendication 6, comprenant d'environ 6 % à environ 12 % en poids d'éther laurylique de polyéthylène glycol-12. 8. Composition pharmaceutique selon la revendication 6, comprenant d'environ 3 % à environ 10 % en poids de caprylate de sodium. 9. Composition pharmaceutique selon la revendication 6, comprenant environ 50 % en poids d'un composé de formule O Il CH2-O-C-(CH2) n-CH3 I II CH-O-C-(CH2) n-CH3 o l i o n est 6 ou 8. CH2-O-C-(CH2)n-CH3