Brevet FR2731906A1 — publié le 19960927

La présente invention concerne une composition cosmétique ou pharmaceutique contenant à titre de principe actif un extrait de feuille de Mangifera sp. qui peut être utilisée notamment pour protéger la peau contre les rayons ultra-violets, lutter contre le vieillissement cutané et améliorer la qualité structurelle de la peau. Le Mangifera, et en particulier Mangifera indica, appartient à la famille des Anacardiacées. Le genre Mangifera est caractérisé par des caractères communs suivants : arbres à feuilles alternes, pétiolées, entières, coriaces aux inflorescences terminales en panicules. Les fruits sont des drupes. Ce genre comprend soixante deux espèces arborescentes dont 16 espèces donnent des fruits. L'espèce Mangifera indica L. en particulier est un arbre érigé à port plus ou moins étalé de 9 à 30 m de haut, toujours vert. Cette espèce comporte actuellement environ 1 000 variétés. Les espèces de Mangifera produisant des fruits sont très répandues. On trouve le Mangifera indica en particulier en Asie, Amérique Centrale et du Sud et en Afrique Tropicale. Traditionnellement, le fruit du Mangifera est consommé par les populations locales qui utilisent également d'autres parties de l'arbre pour divers usages : Le Mangifera indica en particulier est utilisé couramment pour soigner les populations : des infusions de l'écorce pour soigner la leucorrhée, les hémorragies et la dysenterie. Les feuilles sont employées en décoction pour la perte de voix, pour le diabète. Les cendres des feuilles sont également appliquées sur les brûlures. Les inventeurs auteurs de la présente invention ont à présent decouvert que l'extrait des feuilles de Mangifera sp. possède des activités anti-W, anti-radicalaire, anti-collagenase, anti-élastase et anti-hyaluronidase, qui le rend particulièrement utile dans des compositions cosmétiques ou pharmaceutiques destinées à la protection de l'épiderme contre les rayons ultra-violets, pour lutter contre le vieillissement cutané biologique et/ou actinique et pour améliorer la qualité structurelle de la peau. L'extrait de Mangifera selon l'invention est obtenu à partir de toutes les espèces de Mangifera, et en particulier Mangifera indica L. Les principaux constituants, actuellement identifiés dans l'extrait de feuilles de Mangifera sp. de l'invention sont un C-glucosyltétrahydroxanthane des flavonoïdes . des tannins (Il est exempt de substances alcaloïdes). Les extraits de Mangifera de l'invention peuvent être obtenus en soumettant les feuilles de Mangifera sp. fraîches ou sèches, à une extraction par un solvant polaire, notamment par un solvant tel que l'eau, un alcanol (par exemple l'éthanol, le méthanol), le propylène glycol, le butylène glycol ou un mélange de ces solvants. On peut par exemple utiliser un mélange alcanol/eau ou bien un mélange propylène glycol/eau. Le poids de solvant utilisé est de préférence égal à 2 à 20 fois le poids des feuilles rapporté au poids sec. On effectue avantageusement l'extraction, sous agitation, à une température située entre 10 C et la température d'ébullition du solvant. La durée de l'ex- traction est de préférence de 1 à 5 heures. On concentre éventuellement les solutions extractives, on sèche éventuellement les concentrats obtenus par les moyens connus de l'homme du métier (étuve à vide, micro-ondes...). L'extrait peut être utilisé sous forme d'extrait liquide plus ou moins concentré ou sous forme sèche. On décrira ci-après les propriétés des extraits de Mangifera de l'invention ou se référant aux figures annexées sur lesquelles - la figure 1 représente le spectre d'absorption de la lumière W en fonction de la longueur d'onde d'un extrait de Mangifera selon l'invention ; - la figure 2 représente la photostabilité en fonction du temps d'un extrait de Mangifera, comparé à deux filtres solaires de synthèse commercialisés (extrait de Mangiféra, Univul, ,p,, Mangiféra,-CAUnivulntrbenzophénone 3); - la figure 3 représente les courbes d'activité antiradicalaire d'un extrait de Mangifera selon l'invention (0,25 % ext. sec) et d'un témoin non inhibiteur en fonction du temps;; - la figure 4 représente la courbe d'activité anti-élastase d'un extrait de Mangifera selon l'invention (0,25 %, dil. 1/4) déterminée par cinétique enzymatique au spectrophotomètre (mesure du rapport de l'absorbance sur le temps) - la figure 5 représente la courbe d'activité anti-collagénase d'un extrait de Mangiféra selon l'invention (0,25 %) déterminée par la mesure de la densité optique à 320 nm. - la figure 6 représente l'activité antihyaluronidase d'un extrait de Mangifera selon l'invention (0,25 %). Exemple d'extrait de Mangifera L'extrait étudié a été obtenu de la manière suivante 5% (p/p) de feuilles sèches de Mangifera indica, grossièrement broyées, sont mis en contact sous agitation et à 50"C avec un mélange éthanol/eau (30/70). L'extraction se déroule pendant lh30. La plante est écartée par filtration sur une toile (55 ut). Puis l'extrait est filtré sur un filtre de cellulose (5 um). Effet photoprotecteur L'extrait de Mangifera décrit ci-dessus présente un spectre d'absorption dans le domaine des W très intéressant pour une application de protection contre l'érythème solaire, avec un maximum aux alentours de 320 nm, correspondant aux UVB et un autre aux environs de 360 nm, correspondant à la zone des WA, comme représenté à la figure 1. Par ailleurs, l'absence de phototoxicité a été vérifiée. Compte tenu de son innocuité, la résistance de l'extrait à l'irradiation (sa photostabilité) a été testée par rapport à celles des filtres synthétiques déjà commercialisés, (comme par exemple la benzophénone 3, GAF, USA ou l'WINUL T150, BASF, Allemagne) dans des solvants compatibles à leurs solubilités respectives. Un filtre solaire est une molécule qui, par définition absorbe les radiations ultra violettes fortement énergétiques. Ainsi excitée, elle est susceptible de perdre son énergie, soit en émettant un rayonnement de longueur d'onde supérieur, soit en subissant des transformations intramoléculaires. Ces réarrangements modifient ses propriétés physico-chimiques et en particulier sa faculté d'absorber la lumière dans la zone du spectre considéré. L'extrait a donc été soumis à un rayonnement continu dont le spectre est comparable à celui de la lumière solaire et de niveau énergétique contrôlable, émis par une lampe au xénon. L'évolution du spectre d'absorption a été suivie au cours du temps et le temps de demi-vie mesuré (durée d'irradiation nécessaire pour une perte d'absorption de 50% à une longueur d'onde fixée). Comme représenté à la figure 2, l'extrait de Mangifera, comparé à la benzophénone 3, et à l'WINUL T150 dans les mêmes conditions, s'est révélé au moins aussi résistant à l'irradiation, avec un temps de demivie nettement supérieur à ces deux filtres synthétiques. Enfin, l'extrait de Mangifera préparé comme décrit dans le procédé de l'invention a été testé dans une composition cosmétique afin d'évaluer l'indice de protection SPF, selon la méthode SOLATEX, méthode d'évaluation du facteur de protection solaire in vitro commercialisée par IN VITRO INTERNATIONAL (Irvine, Californie, USA). Une base cosmétique contenant 5% en poids de l'extrait ci-dessus a été comparée à la même base contenant 5% en poids de propylène glycol pur. Après application du protocole SOLATEX, les résultats suivants ont été obtenus base seule r SPF = 8 base + extrait de l'invention r SPF = 14 L'extrait de l'invention s' avère donc efficace pour protéger la peau contre l'irradiation ultra violette; l'extrait peut être utilisé seul, ou en association avec des filtres chimiques synthétiques ou des écrans minéraux, dont il vient renforcer l'efficacité. L'intérêt de l'extrait obtenu selon l'invention pour la protection de la peau au niveau moléculaire est également illustré par les exemples suivants Activité anti radicalaire déterminée in vitro (V. Ponti, M.U. Dianzani, K. Cheeseman and T.F. Slater, Chem. Biol. interaction, 23, 281-291, 1978). Selon la technique utilisée, des radicaux superoxydes sont générés par la réaction de la NADH (Nicotinamide Adénine Dinucléotide Hydrate) sur le PMS (Phénazine Méthosulfate). Les radicaux superoxydes réduisent le NBT (Nitrobleu Tetrazolium) en diformazan de couleur bleu-violet. L'apparition NBT réduit est ainsi suivie dans le temps, au spectrophotomètre. Les résultats sont représentés sur la figure 3. On exprime l'activité anti-radicalaire des extraits en équivalent rutine pour une inhibition de 50% (1/2 inh.rutine = 35 ut). Un extrait de Mangifera (extrait sec 1t) présente une activité 15 à 30 fois plus importante que le témoin rutine (1 mg/ml) en fonction de la polarité du solvant d'extraction utilisé. Les données obtenues montrent que l'effica- cité des extraits considérés dans la protection parrapport aux radicaux superoxydes est tout à fait significative. Les radicaux libres étant connus pour leur part active non négligeable dans le processus de vieillissement, l'extrait selon 1 invention a donc potentiellement une activité intéressante dans la protection de la peau contre le vieillissement dû à l'altération des structures moléculaires de l'épiderme. D'autre part, les inventeurs de la présente invention se sont aperçus que les extraits avaient une activité protectrice par rapport aux protéines de structure : élastine et collagène. Activité anti-élastase déterminée in vitro (J. Bieth, B. Spices et Camille G. Wermecth, Biochemical medecine 11, 350-357, 1974) Modifié. Une élastase pancréatique est mise à agir sur un substrat suffisamment hydrophilique, spécifique de l'enzyme MeO Suc - Ala - Ala - Pro - Val - pNa et ayant la caractéristique de libérer un chromogène, le p-nitroanilide. Il est ainsi possible de suivre la cinétique enzymatique au spectrophotomètre et définir une vitesse initiale ou pente pour les différentes concentrations testées. La courbe des pentes obtenue en fonction des quantités d'extrait de Mangifera obtenu selon l'invention, permet ainsi de définir la concentration correspondant à 50 % d'inhibition (CI50). Cette courbe est reportée sur la figure 4. L'extrait de Mangifera selon l'invention présente une CISO très significative, de l'ordre de 5.10-2 - 1 mg/ml et pouvant aller au-delà de cet écart en fonction de l'espèce considérée. Activité anti-collagénase déterminée in vitro( Erich Wünsch and Hans Georg Heidrich Hoppe-Seyler's - Zeit Physiol. - Chem. 333, 149-151, 1963). Une collagénase est mise à agir sur un substrat hydrophile (p. phenylazo - benzylcarbonyl - L propyl - L leucyl - glycyl - L Propyl - D arginine). Le produit résultant de la coupure entre Leu et Gly est lipophyle et absorbe la lumière W à 320 nm. L'effet inhibiteur de Mangifera est mesuré en ajoutant l'extrait obtenu selon l'invention au milieu réactionnel. La figure 5 représente la courbe des valeurs obtenues à 320 nm en fonction des différents volumes d'extrait de Mangifera ajoutés au milieu. La concentration permettant 50 % d'inhibition (CI50) peut être ainsi déterminée. L'extrait de Mangifera obtenu selon l'invention présente une CISO de l'ordre de 5. 10-2 - 1 mg/ml et pouvant aller au-delà de cet écart en fonction de l'espèce considérée. Activité anti-hyaluronidase déterminée in vitro (José L. Reissig, Jack L. Strominger and Luis F. Leloir, J. Biol. Chem. 217,960-966, 1953). La N-acétyl glucosamine libérée au bout de 45 minutes lors de la réaction de la hyaluronidase sur l'acide hyaluronique est mesurée par spectrophotométrie. Le procédé utilisé est un procédé de réduction des sucres anhydres, qui en milieu acide sont transformés en dérivés furanne. Ces derniers réagissent avec le para-diméthyl- aminobenzaldéhyde pour former un complexe coloré. L'activité est exprimée en ug de N-acétylglucosamine formé par minute. L'activité anti hyaluronidase est exprimée en quantité d'extrait pour obtenir 50% d'inhibition. Les résultats sont reportés sur la figure 6. La CI50 de l'extrait de Mangifera (extrait sec 1%) est de 200 à 250 ul. En comparaison avec l'héparine, inhibiteur reconnu de la hyaluronidase (Sigma 10 USP/ml) dont CI50 = 380 ul. Ces données permettent de conclure que les extraits de Mangifera possèdent un effet protecteur vis à vis des agressions moléculaires au niveau de la peau tout à fait considérable et par conséquent, l'utilisation de ceux-ci en cosmétique présente un intérêt évident, en particulier pour la protection de la peau et des cheveux contre les rayons ultra-violets, pour lutter contre le vieillissement cutané dû à l'âge et de manière générale pour améliorer l'apparence et la qualité de la structure de l'épiderme. Les extraits obtenus selon l'invention sont donc utilisables en cosmétique de soins et/ou de décoration et en pharmacie. Pour la protection contre les UVA et UVB, de par leur rôle filtrant et anti radicalaire, protégeant de l'effet nocif des radicaux produits sous l'effet des WA; pour les peaux fragilisées par le temps (âge) : diminution de l'hydratation et de la tonicité des tissus, de par leurs propriétés anti-hyaluronidase limitant la dégradation de l'acide hyaluronique (protéoglycane ayant un pouvoir hydratant très puissant) ; ainsi que par leurs propriétés anti-collagénase et antiélastase limitant la dégradation du collagène et de l'êlastine, l'état de ces molécules étant notamment responsable de la qualité structurelle de la peau. Les extraits de feuilles de Mangifera sp. selon l'invention peuvent être utilisés tels quels, vectorisés, microencapsulés, en association avec un mélange d'excipients tels que : huiles végétales, minérales ; cires végétales ou minérales ; silicones alcools et acides gras ; agents tensio actifs ; dérivés de protéines, gélifiants inorganiques ou organiques lanoline et ses dérivés ; filtres UV organiques ou inorganiques, eau ; ou en association avec d'autres extraits végétaux. Les compositions se présentent sous forme d'émulsion simple H/E ou E/H, émulsions multiples ou micro émulsions ; gels aqueux, hydroalcooliques ; huiles, lotions aqueuses ou hydroalcooliques ; stick ; shampooing ou après shampooing. Les compositions selon l'invention comprennent de 0,01 % à 20 % en poids d'extrait de feuilles de Mangifera sp., exprimé en poids d'extrait sec par rapport au poids total de la composition, la proportion d'extrait pouvant aller jusqu'à 50 t dans le cas d'un extrait liquide. REVENDICATIONS 1. Composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant un extrait de feuilles de Mangifera sp. en tant que principe actif. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend de 0,01% à 20% en poids d'extrait de feuilles de Mangifera sp., exprimé en poids d'extrait sec par rapport au poids total de la composition. 3. Composition selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que l'extrait de feuilles de Mangifera sp. est obtenu en soumettant les feuilles de Mangifera sp. fraîches ou sèches à une extraction pour un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. 4. Utilisation d'un extrait de feuilles de Mangifera sp. pour la protection de la peau ou des cheveux contre les rayons ultraviolets. 5. Utilisation d'un extrait de feuilles de Mangifera sp. pour lutter contre le vieillissement cutané. 6. Utilisation d'un extrait de feuilles de Mangifera sp. pour améliorer la qualité structurelle de la peau. 7. Procédé de traitement cosmétique consistant à appliquer sur la peau ou les cheveux une composition telle que définie dans les revendications 1 à 3.