Brevet FR2733995A1 — publié le 19961115

INHIBITEURS DE L'INACTIVATION DE NEUROPEPTIDES ENDOGENES NOTAMMENT LA CHOLECYSTOKININE, LEURS PROCEDES DE PREPARATION, LEUR UTILISATION COMME MEDICAMENTS ET PROCEDE DE CRIBLAGE DE MEDICAMENTS La présente invention se situe dans le domaine de la prévention de l'inactivation de neuropeptides endogènes tels que la cholécystokinine (CCK). Aussi, l'invention concerne plus précisément un procédé de préparation à l'état pur d'enzymes intervenant dans ce type d'inactivation. Elle a aussi pour objet les séquences nucléotidiques codant pour lesdites enzymes Elle a encore pour objet les enzymes ainsi obtenues. L'invention a également pour objet un procédé de criblage de médicaments mettant en oeuvre lesdites enzymes. En outre, la présente invention a pour objet des composés chimiques de formule définie ainsi que leurs procédés de préparation et leur utilisation en tant qu'inhibiteurs des enzymes précitées, intervenant dans l'inactivation physiologique de neuropeptides endogènes comme en particulier la cholécystokinine (CCK). L'invention a aussi pour objet des compositions physiologiquement acceptables comprenant lesdits composés. Elle a également pour objet l'utilisation desdits composés dans la préparation de médicaments destinés à l'homme ou à l'animal. On connaît le rôle physiologique important des neuropeptides endogènes et en particulier celui de la cholécystokinine (CCK). Cette dernière est à la fois une hormone digestive et un neurotransmetteur des systèmes nerveux central et périphérique. Dans ce dernier cas, elle se présente principalement sous forme d'un octapeptide sulfaté (CCK-8-S) répondant à la formule Asp-Tyr(SO3H)-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2. La CCK exerce des actions variées sur la motricité et les sécrétions digestives (contraction de la vésicule biliaire, inhibition de la sécrétion gastrique, etc.) ainsi que sur le système nerveux central (analgésie, action sur l'humeur et la cognition) et endocrinien (sécrétions hypophysaires). En filtre, la CCK et certains dérivés possedent une puissante activité anorexigène par facilitation de la satiété en stimulant des récepteurs périphériques et, éventuellement centraux (J.J. Vanderhaegen and J.M. Crawley, Ann. N.Y. Acad. Sci., 1985, 448 : la697). Bien que l'on aurait pu attendre des effets intéressants de la stimulation pharmacologique des récepteurs CCK, aucun agent stimulant ces récepteurs n'est disponible actuellement en tl-lérapeutique principalement pour des raisons de mauvaise biodisponibilité de la CCK et de ses dérives. En outre, il a même été montré qu'une stimulation directe des récepteurs CCK était susceptible d'entraîner des effets anxiogènes indésirables. D'autres études se sont orientées vers l'identification de l'enzyme ou des enzymes responsable(s) de l'inactivation physiologique de ces neuropeptides endogènes et en particulier de la CCK mais n'ont pas conduit jusqu'à présent à une caractérisation suffisamment précise pour permettre la mise au point d'inhibiteurs. C'est ainsi qu'il a été suggéré l'implication de différentes enzymes supposées attaquer certaines liaisons peptidiques de la molécule CCK-8, comme notamment celle d'une aminopeptidase acide, distincte de l'aminopeptidase A (Deschodt-Lanckman et al., Peptides, 1983, 4 : 71), de l'enképhalinase et d'une aminopeptidase (Matsas et al., FEBS Lett., 1984, 175 : 124 Deschodt-Lanckman et al., Regul. Peptides, 1981, 2 : 15), celle de thiolpeptidases (Mc Dermott et al., Neurochem. Int., 1983, 5 : 641 1 Durieux et al., Neuropeptides, 1986, 7 :1) ainsi que celle d'une métalloendopeptidase (Steardo et al., J. Neurochem., 1985, 45 784). Plus récemment, Rose et al. (Proc. Natl. Acad., Sci. USA, 1988, 85 :8326 ; Neurosci., 1989, 29 : 583) ont suggéré l'intervention d'une sérine-peptidase. Ils ont en outre constaté que des réactifs généraux des groupes sérine des protéines tels que le diisopropylfluorophosphorate (DFP) ou des chlorométhyl-cétones ou acides boroniques inhibiteurs d'élastases (une famille de sérine-peptidases) étaient capables d'empêcher la dégradation enzymatique de la CCK-8 endogène libérée par dépolarisation de coupes de cerveaux. Toutefois, ces expériences n'ont pas permis d'identifier et de purifier l'enzyme responsable et les composés utilisés dans ces expériences in vitro ne sauraient être considérées comme des médicaments, en particulier, en raison de leur toxicité, leur absence de spécificité et/ou leur mauvaise biodisponibilité. On constate donc qu'il subsiste dans l'état de la technique le besoin d'identifier précisément l'enzyme ou les enzymes responsable(s) de l'inactivation de neuropeptides endogènes et en particulier de la cholécystokinine (CCK) ainsi que le besoin de composés chimiques non toxiques, biodisponibles, spécifiques et pouvant être utilisés en tant que médicaments pour la prévention de l'inactivation de ces neuropept ides endogènes. L'invention a maintenant permis d'atteindre ces objectifs en fournissant en particulier un procédé de criblage de médicaments mettant en oeuvre l'enzyme responsable isolée, permettant ainsi, selon que ladite enzyme est inhibée ou non, de distinguer des molécules susceptibles de constituer des médicaments efficaces dans le traitement des troubles ou affections où les neuropeptides endogènes, et en particulier la cholécystokinine, sont impliqués. La présente invention fournit également des composés chimiques de formule définie ci-après, pouvant être utilisés dans la prévention de l'inactivation des neuropeptides endogènes et satisfait donc l'autre besoin essentiel subsistant dans l'état de la technique. Ainsi, la présente invention a tout d'abord pour objet un procédé de préparation d'une tripptidylpeptidase membranaire à l'état pur, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes i) préparation de membranes de cerveau (cortex cérébral), par exemple de rat ii) purification par chromatographie(s) liquide(s) haute performance (CLHP) iii) vérification du produit obtenu, par réaction enzymatique utilisant un substrat CCK, par exemple les peptides CCK-8 (non sulfaté) de formule Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2 ou CCK-5 de formule Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2 L'invention a encore pour objet l'enzyme purifiée ainsi obtenue. L'étude de la spécificité de cette enzyme purifiée sur une série de substrats-modèles a montré que celle-ci se comporte comme une aminotripeptidylpeptidase. Les inventeurs ont effectué des travaux de séquençage et ont découvert, de manière surprenante, qu un fragment de la protéine purifiée présente une forte similitude avec une protéase connue sous le nom de tripeptidylpeptidase II précédemment isolée à partir d'érythrocytes humains ou de foie de rat (Balow R.M. et al., J. Biol. Chem., 1986, 261 : 24092417). Cependant, la fonction de cette dernière était restée totalement inconnue et son rôle dans l'inactivation de neuropeptides, tels que la CCK, non soupçonné d'autant plus qu'elle n'était connue que comme enzyme cytoplasmique. En utilisant des méthodes traditionnelles de clonage moléculaire, les inventeurs ont identifié deux clones distincts dans une librairie d'ADN complémentaire de cerveau de rat à l'aide de deux sondes A et B respectivement de 350 et 380 bases. Elles ont été obtenues par une réaction en chaîne de polymérase (PCR) pratiquée à l'aide des amorces suivantes SEQ ID N"3 (Sonde A, amorce sens) GACTGAGGAGCCCTTCCCTTTTCA SEQ ID N"4 (Sonde A, amorce antisens) GCCTTAGGATAGAAGTCATAGCCA SEQ ID N 5 (Sonde B, amorce sens) CCCTTTGTAGGAAAGGTTGTGCC SEQ ID N"6 (Sonde B, amorce antisens) GAATACGCAATAATCGGGAGGATAC Leur séquençage a indiqué que le premier clone est l'homologue rongeur de la tripeptidylpeptidase II (TPP II) humaine. Par contre, dans le second, la séquence diffère dans la partie 5' (à partir du nucléotide 293) laquelle n'était pas connue à ce jour. L'invention a donc également pour objet la séquence nucléotidique (SEQ ID N"1 et SEQ ID N"2) codant pour la nouvelle protéine isolée. La séquence comporte un segment hydrophobe d'une vingtaine d'acides aminés indiquant l'existence d'un segment transmembranaire. Ainsi, cette nouvelle protéine, quoique dérivant vraisemblablement du même gène que la précédente par un processus d'épissage alternatif, se présente comme une ectopeptidase à sérine. Aussi, la présente invention a pour objet un procédé de criblage de médicaments par mesure de l'activité de l'enzyme tripeptidylpeptidase II membranaire ou homologue, par utilisation d'un substrat modèle de cette enzyme. Par enzyme homologue, on entend aussi bien des tripeptidylpeptidases qui seraient modifiées génétiquement que des tripeptidylpeptidases non membranaires, notamment solubles, comme celle précitée, isolée par Barlow R.M. et al.. Les inventeurs ont pu mettre au point des inhibiteurs de la dégradation de neuropeptides endogènes, en particulier de CCK, en mesurant l'activité de ladite enzyme à l'état purifié mais aussi plus simplement à l'état natif sur des préparations de membranes à partir de tissus en utilisant un substrat modèle de la TPP II. Aussi, la présente invention a encore pour objet des composés chimiques répondant à la formule générale (I) suivante dans laquelle - R1 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C2 - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m - R3 représente un radical bivalent constitué d'une chaîne alkyle -(CH2)p- où p représente un entier variant de 1 à 4 (extrémités incluses), -CH2-CH(cis.F)-,-CH2S-, -CH2-CH(CH2Ph)-, -(CH2)2-CH(CONH2)-, d'un motif où R6 représente H, F, CH3 ou OCH2Ph, - R4 représente un hydrogène, un groupe n.C6H13, CH20H, CH2-NHn .C4H9, amide CO-NH-R5 où R5 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié, -(CH2)3-SCH3, -CH2Ph, -CH2C6H11, ou carbonyle CO-R7 où R7 représente un groupe n.C5H11 ou NC5H10. Dans toute la description, "Ph" désigne le radical phényle éventuellement substitué. Les composés de formule (I) présentent plusieurs centres d'assymétrie et l'invention couvre donc les mélanges racémiques aussi bien que les différents stéréoisomères ainsi que leurs mélanges selon des proportions quelconques. Selon une première variante préférée, l'invention a pour objet des composés de formule (I) telle que définie ci-avant dans laquelle n et m sont indifféremment égaux à O ou 1 à la condition toutefois que n soit différent de m. Selon un premier aspect, l'invention concerne plus particulièrement un premier groupe de ces composés dans lesquels R3 représente le radical bivalent -(CH2)2-, ce qui correspond à p = 2 (squelette proline). Des composés de ce type sont notamment les composés donnés en exemples ci-après, références sous les codes internes UCL 1330-J, UCL 1371-H, UCL 1381-J, UCL 1382-J, UCL 1391-J, UCL 1393-F, UCL 1394-F, UCL 1327-J, UCL 1331-J, UCL 1353-H, UCL 1387-J, UCL 1416-H (préparés selon la voie 1) ; UCL 1324-J (voie 2) ; UCL 1372-F3 (voie 5) ; UCL 1389-J (voie 6) ; UCL 1419-H (voie 7) ; UCL 1420-H (voie 8) ; UCL 1424-A (voie 9). Parmi ce premier groupe de composés, ceux dans lesquels R1 représente CH2CH3, (CH2)2CH3, (CH2)3CH31 CH(CH3)2, CH2CH(CH3)2 et CH(CH3)CH2CH3, R2 représente un hydrogène, R4 représente le groupe amide CO-NH-R5 et R5 représente un hydrogène sont connus. Selon un autre aspect, l'invention concerne plus particulièrement un second groupe de ces composés dans lesquels R3 représente le motif cis.fluoroéthylène -CH2-CH(cis.F) (squelette proline substituée) comme par exemple le composé référencé sous le code interne UCL 1395-F (voie 3) décrit ci après. Selon un autre aspect, l'invention concerne un troisième groupe de ces composés dans lesquels R3 représente le motif benzyléthylène -CH2-CH(CH2Ph)- (squelette proline substituée) comme par exemple le composé UCL 1433-H (voie 4) décrit ciapres. Selon encore un autre aspect de l'invention, celle-ci a pour objet un quatrième groupe des composés de cette première variante dans lesquels R3 représente le motif -SCH2- (squelette thiaproline) comme par exemple le composé UCL 1374-F (voie 1) décrit ci-après. Selon encore un autre aspect de cette première variante, l'invention concerne un cinquième groupe de ces composés dans lesquels R3 représente le moitié que le t t e té t raliydro i soqu i no 1 i ne dont les composés UCL 1421-H et UCL 1485-H (voie 3) sont des exemples décrits ci-après. Selon d'autres aspects de cette première variante, l'invention concerne plus particulièrement des composés dans lesquels R3 représente le radical bivalent -(CH2)4correspondant à p = 4 (squelette perhydroazépine) tels que le composé UCL 1482-H (voie 11), le radical -(CH2)3 correspondant à p = 3 (squeltte pipécol ine) tels que le composé UCL 1398-F (voie 4), le radical -CH2- correspondant à p = 1 (squelette azétidine) tels que le composé UCL 1373-F (voie 1). Selon une deuxième variante particulièrement préférés, l'invention a pour objet des composés de formule (I) où n = 0 et m = 1 et où R3 représente le motif (squelette indoline) dont des exemples sont les composés UCL 1397-H, UCL 1413-H, UCL 1414-H, UCL 1415-H, UCL 1423-H (voie 3) ; UCL 1446-A2 (voie 105 ; UCL 1486-H, UCL 1534-H, UCL 1535-A, UCL 1546-H (voie 12) décrits ci-après. Selon un autre aspect de cette seconde variante, l'invention concerne des composés dans lesquels R3 représente le motif (squelette perhydroindoline) tels que le composé UCL 144?-H (voie 3) donné en exemple ci-après. Enfin, selon une troisième variante, l'invention a pour objet les composés de formu i e (I) dans laquelle n = 1 et m = O et où R3 représente le motif (squelette isoindoline) @els que le composé UCL 1466-H (voie 4) décrit ci-après. Selon un autre aspect de cette troisième variante, l'invention concerne les composés dans lesquels R3 représente le radical - (CH2)2-CH(CO-NH2)- (squelette nipécotique) tels que par exemple le composé UCL 1378-H (voie 3) donné ci-après. Parmi ces composés, le radical R4 représente de préférence le groupe amide CO-NH-R5. Les composés dans lesquels R4 représente le groupe carbonyle CO-R7 sont également préférés. Selon d'autres variantes, le radical R4 peut représenter un hydrogène ou encore l'un des groupes CH20H, CH2-NH(n.C4H9). Les composés de formules (I) dans lesquels R2 représente un hydrogène sont également particulièrement préférés. Dans d'autres cas, R1 et R2 représentent chacun un groupe méthyle ou R1 représente un hydrogène et R2 représente un groupe éthyle. L'effet inhibiteur de ces composés a été évalué par mesure de l'activité TPP II membranaire et exprimé par leur constante de dissociation apparente Ki comme décrit ci-après. Les composés préférés selon 1 invention sont les composés suivants - 2(S)-aminobutyryl-L-prolinamide (UCL 1338-J) - L-valyl-L-proline n.hexylamide (UCL 1330-J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline 3-(méthylthio)propylamide (UCL 1382-J) - 1-(2 J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline n.butylamide (UCL 1371 H) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline [2(S)-méthyl]butylamide (UCL 1381-J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline n.propylamide (UCL 1393 F) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline iso.butylamide (UCL 1394-F) - L-valyl-L-proline n.butylamide (UCL 1324-J) - L-alanyl-L-prolyl-L-borovaline pinanediol ester (UCL 1372-F3) - borohydrate de L-alanyl-L-prolyl-difluoro-L-borovaline (UCL 1389-J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-(4(S)-fluoro)-L-proline n.butylamide (UCL 1395-F) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-(4(S)-benzyl)-L-proline n.butylamide (UCL 1433-H) - acide 2-(2(S)-aminobutyryl)-1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-iso- quinolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1421-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1397-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.propylamide (UCL 1413-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique méthylamide (UCL 1414-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique éthylamide (UCL 1415-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-méthoxy)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1486-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(6-méthoxy)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1546-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(RlS)-(5-fluoro)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1534-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-benzyloxy)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1535-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-t(3aS,7aS)-perhydro]- indolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1442-H) - acide 2-(2(S)-aminobutyryl)-1(R/S)-isoindoline carboxylique n.butylamide (UCL 1466-H) ainsi que leurs sels ou hydrates correspondants. Ces composés constituent des inhibiteurs préférés selon l'invention et présentent une constante Ki vis-à-vis de l'enzyme tripeptidylpeptidase selon l'invention, inférieure ou égale à 1 pM. Les composés suivants sont également préférés - 1-(2(S)-aminobutyryl)-2-hexyl-pyrrolidinamide (UCL 1419 H) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-2-((1-oxo)hexyljpyrrolidinamide (UCL 1420-H) - 1- - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-perhydroazéplne carboxylique n.butylamide (UCL 1482-H) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinylméthyl-N-butylamine (UCL 1446-A2) ainsi que leurs sels ou hydrates correspondants. D'autres composés tout particulièrement préférés sont les composés de formule (I) présentant un squelette indoline à savoir les composés suivants: - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1397-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.propylamide (UCL 1413-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique éthylamide (UCL 1415-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-méthoxy)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1486-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-fluoro)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1534-H) ainsi que leurs sels ou hydrates correspondants. Ces composés sont des inhibiteurs particulièrement préférés présentant une constante Ki n'excèdant pas 0,02 pM. La présente invention a également pour objet les procédés de préparation des composés de formule générale (I) décrits ciavant. Aussi, l'invention se rapporte plus particulièrement à un procédé (voie 1) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente -(CH2)2-, -CH2S-, -CH2- ; et - R4 représente CO-NH-R5, CO-R7 où R5 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié, -(CH2)3-S-CH3, -CH2Ph et R7 représente NC5H10, CH2C6H11 caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation d'un composé de formule (III) dans laquelle R1 et R2 ont les significations données cidessus et X représente un groupe protecteur, à partir d'un composé de formule (II) estérifié sur sa fonction acide par un groupement Y et dans laquelle X, R1 et R2 ont les significations données précédemment, par réaction avec la L-proline ii) l'amidation de la fonction acide du composé (III) avec l'amine appropriée R5NH2 ou R7H où Rs et R7 ont les significations données ci-dessus, pour former le dérivé (IV) protégé sur sa fonction amine primaire par le groupe X iii) l'élimination du groupe X du dérivé (IV), pour obtenir le composé (I) désiré. Le groupe Y représente de préférence le motif L'étape i) est effectuée en présence de triéthylamine et d'eau. Par ailleurs, à l'étape ii), on forme l'anhydride mixte de l'acide (III) et du chloroformiate d'isobutyle, que l'on fait réagir ensuite in situ avec l'amine R5NH2. Dans les composés préparés selon cette voie 1, R représente de préférence un groupe ethyle ou isopropyle. L'invention se rapporte également à un procédé (voie 2) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène ou un groupe méthyle - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où R5 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation d'un composé de formule (IV) dans laquelle R1, R2 et Rs ont les significations données ci-dessus et X représente un groupe protecteur, à partir d'un composé de formule (II) estérifié sur sa fonction acide à l'aide d'un groupe Y et dans laquelle R1, R2 et X ont les significations données précédemment, par réaction avec une prolineamide de formule (V) dans laquelle R5 a la signification donnée ci-dessus ii) l'élimination du groupe protecteur X du composé (IV), pour obtenir le composé (I) désiré. La prolineamide (V) peut être préparée par réaction de la L-proline protégée sur sa fonction amine par un groupe protecteur X et estérifiée sur sa fonction acide à l'aide d'un groupe Y, avec l'amine R5NH2 appropriée. Le groupe Y représente de préférence le motif Pour former le composé (IV), on fait réagir la prolineamide ainsi obtenue avec le composé (II), en présence d'eau et de triéthylamine dans un solvant tel que le tétrahydrofuranne ou le dioxanne. Dans les composés préparés selon cette voie 2, Ri représente de préférence un groupe éthyle ou isopropyle et R5 représente de préférence un hydrogène ou un groupe n.butyle. L'invention se rapporte également à un procédé (voie 3) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié ; - R2 représente un hydrogène - n = 0 et m = 1 et R3 représente un groupe -CH2-CH(cis.F) - R4 représente un groupe -CH20H, CO-NH-R5 où Rs représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la préparation d'un composé de formule (X) dans laquelle R1, R2, R3 et R4 ont les significations données ci-dessus et X représente un groupe protecteur, par réaction d'un composé de formule (VIII) avec un composé de formule (IX) dans lesquelles R1, R2, R4 et X ont les significations données précédemment ii) l'élimination du groupement X du composé (X), pour former le composé (I) désiré. Selon cette voie 3, on prépare le composé (VIII) par amidation de la fonction acide d'un composé (VI) protégé sur sa fonction amine par un groupe protecteur X et dans laquelle R3 a la signification donnée précédemment, avec l'amine R5NH2 appropriée, pour former le dérivé (VII) dans laquelle R3, R4 et X ont les significations données ci-dessus, puis par élimination du groupe protecteur X. Pour cela, on forme avantageusement l'anhydride mixte de l'acide (VI) et de chloroformiate d'isobutyle en présence de N-éthylmorpholine dans du tétrahydrofuranne, que l'on fait ensuite réagir in situ avec l'amine R5NH2 appropriée. Ces conditions peuvent aussi constituer celles de l'étape i) sauf que l'on fait réagir le composé (VII) à la place de l'amine R5NH2. Dans les composés préparés selon cette voie 3, R1 représente de préférence un groupe éthyle et R5 représente de préférence un hydrogène ou un groupe méthyle, éthyle, n.propyle ou n.butyle. L'invention se rapporte aussi à un procédé (voie 4) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée cidessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 1 et m = 0 et R3 représente un groupe -CH(CH2Ph) CH2-, -(CH2)3- ou - R4 représente un groupe amide CO-NH-R5 où R5 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) l'obtention d'un composé (XII) protégé sur sa fonction amine primaire par un groupe protecteur X et dans laquelle R1, R2 et R3 ont les significations données ci-dessus, par réaction du composé de formule (IX) avec le composé de formule (XI) dans lesquelles R1, R2 et R3 ont les significations données précédemment et X représente un groupe protecteur ii) l'hydrolyse de la fonction ester du composé (XII) ainsi obtenu pour former le composé de formule (XIII) dans laquelle R1, R2, R3 et X ont les significations données précédemment iii) l'amidation de la fonction acide du composé (XIII) à l'aide de l'amine R5NH2 appropriée pour former le dérivé de formule (XIV) dans laquelle R1, R2, R3, R5 et X ont les significations données ci-dessus iv) l'élimination du groupe protecteur X du composé (XIV) pour former le composé (I) désiré. L'étape ii) d'hydrolyse est avantageusement effectuée en présence de soude dans du méthanol. A l'étape iii), on forme l'anhydride mixte de l'acide (XIII) et du chloroformiate d'isobutyle, que l'on fait ensuite réagir in situ avec l'amine RsNH2 appropriée. Dans les composés préparés selon cette voie 4, R1 représente de préférence un groupe éthyle et R5 représente de préférence un hydrogène ou un groupe n.butyle. L'invention se rapporte encore à un procédé (voie 5) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée cidessus, dans laquelle - R1 représente un groupe méthyle - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente le groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe amide CO-NH-R5 où Rs représente le motif caractérisé en ce qu'il comprend i) l'amidation de la fonction acide du composé de formule (XIX) protégé sur sa fonction amine primaire par un groupe protecteur X et dans laquelle R1 et R2 ont les significations données ci-dessus, à l'aide de l'amine (XVIII) pour former le dérivé (XX) dans laquelle R1, R2, R5 et X ont les significations données précédemment ii) l'élimination du groupe protecteur X du composé (XX) pour obtenir le composé (I) désiré. L'étape i) est avantageusement réalisée à l'aide de chloroformiate d'isobutyle pour former l'anhydride mixte de l'acide XIX, en présence de N-éthylmorpholine dans du tétrahydrofuranne. L'étape ii) peut, quant à elle, être effectuée à l'aide d'acide trifluoroacétique dans du chlorure de méthylène. L'amine (XVIII) est préparée i) par réaction de l'acide isopropylboronique avec le (+)-pinanediol dans l'éther, pour obtenir le dérivé (XV) ii) par réaction du composé (XV) avec du butyllithium et du chlorure de méthylène puis du chlorure de zinc ZnCl2 dans du tétrahydrofuranne, à basse température, pour former le dérivé (XVI) iii) substitution du chlore du composé (XVI) à l'aide de butyllithium et d'hexaméthyldisilazanne dans du tétrahydrofuranne à basse température, pour former le composé (XVII) iv) libération de la fonction amine du composé (XVII) pour obtenir le composé (XVIII) désiré. L'acide isopropylboronique est obtenu par addition de triéthylborate au chlorure d'isopropylmagnésium dans l'éther à basse température. L'étape iv) précitée est avantageusement réalisée par l'acide trifluoroacétique dans du pentane. L'invention se rapporte également à un procédé (voie 6) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe méthyle - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe amide CO-NH-R5 où R5 représente (CH3)2-CH-BF2 caractérisé en ce qu'il comprend i) l'élimination du motif pinane du composé de formule (I) dans laquelle R1, R2, n, m R3 et R4 ont les significations données ci-dessus et Rs représente par action du trichlorure de bore dans du chlorure de méthylène suivie d'une hydrolyse, pour obtenir le dérivé (XXI) ii) le fait de faire réagir le composé (XXI) avec l'acide fluorhydrique pour former le composé (I) désiré. L'invention se rapporte encore à un procédé (voie 7) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée cidessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente le groupe n.C6H13 caractérisé en ce qu'il comprend 1) la réaction d'un composé (XXV) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1 et R2 ont les significations données cidessus et X représente un groupe protecteur, pour former le dérivé de formule (XXVI) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations données précédemment ii) l'hydrogénation de la double liaison du composé (XXVI) ainsi obtenu pour former le composé de formule (XXVII) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées ; iii) l'élimination du groupe protecteur X du composé (XXVII) pour obtenir le composé (I) désiré. Le composé (XXV) est préparé à partir de Lprolinal (XXIII) protégé sur sa fonction amine hétérocyclique par un groupe protecteur X, par réaction avec le bromure de triphénylpentylphosphonium en présence de butyllithium dans du toluène, pour former le dérivé (XXIV) puis par élimination du groupement protecteur X du composé (XXIV) ainsi obtenu, par exemple à l'aide d'acide trifluoroacétique. Le L-prolinal (XXIII) peut être préparé par réaction du méthylester de la L-proline (XXII), protégé sur sa fonction amino par un groupe protecteur X, avec de l'hydrure de diisobutylaluminium dans du toluène à basse température. L'ester méthylique de la L-proline (XXII) peut, quant à lui, être obtenu par action du chlorure de thionyle sur la Lproline dans le méthanol. A l'étape i) précitée, la réaction de l'acide 2(S)-aminobutyrique protégé (IX) se fait par exemple à l'aide de chloroformiate d'isobutyle pour former son anhydride mixte in situ, en présence de N-éthylmorpholine dans du tétrahydrofuranne. L'hydrogénation de l'étape ii) peut être réalisée dans du méthanol en présence de Pd/C. La déprotection de l'étape iii) peut être obtenue par action de l'acide trifluoroacétique puis de la soude puis de l'acide oxalique. Dans les composés préparés selon cette voie 7, R représente de préférence un groupe éthyle. L'invention se rapporte encore à un procédé (voie 8) pour la préparation d'un composé de formule (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe carbonyle CO-R7 où R7 représente le groupe n.C5H11 caractérisé en ce qu'il comprend i) l'obtention d'un composé de formule (XXX) dans laquelle R1 et R2 ont les significations données cidessus et X est un groupe protecteur, par réaction du composé (XXIX) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations données précédemment ii) l'élimination du groupement protecteur X du composé (XXX) obtenu, pour former le composé (I) désiré. A l'étape i), on forme l'anhydride mixte de l'acide 2(S)-aminobutyrique protégé (IX) et du chloroformiate d'isobutyle, puis on le fait réagir in situ avec le composé XXIX). Le composé (XXIX) peut être obtenu par hydrogénation de l'hexagone (XXVIII) correspondante de la L-proline, obtenue par action du pentyllithium dans l'ether, sur la L-proline protégée sur sa fonction amine par un groupement X. L'hydrogénation est avantageusement effectuée en présence de Pd/C dans du méthanol. L'invention se rapporte aussi à un procédé (voie 9) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée cidessus, dans laquelle - R1 et R2 représentent chacun un groupe méthyle - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe amide CO-NH-R5 où Rs représente un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la réaction de la L-prolineamide appropriée de formule (V) avec l'acide de formule (IX) dans lesquelles R1, R2 et R5 ont les significations données ci-dessus et X est un groupe protecteur, pour former le dérivé de formule (IV) dans laquelle R1, R2, R5 et X ont les significations précitées ii) l'élimination du groupement protecteur X du composé (IV) pour obtenir le composé (I) recherché. L'étape i) est avantageusement effectuée en présence de dicyclohexylcarbodiimide dans du chlorure de méthylène. La L-prolineamide (V) peut être obtenue par formation de l'anhydride mixte de la L-proline protégée sur sa fonction amine hétérocyclique et du chloroformiate d'isobutyle, en présence de N-éthylmorpholine dans du tétrahydrofuranne, que l'on fait ensuite réagir avec l'amine R5NH2 appropriée, ce qui conduit au composé (V) recherché après déprotection, par exemple par l'acide trifluoroacétique. Dans les composés préparés selon cette voie 9, R5 représente de préférence un groupe n.butyle. L'invention se rapporte également à un procédé (voie 10) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un hydrogène - R2 est différent de l'hydrogène - n = 0 et m = 1 et R3 représente un motif - R4 représente le groupe CH2-NH(n.C4H9) caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation d'un composé de formule (XXXII) à partir de l'amide de formule (XXXI) correspondant dans lesquelles X représente un groupe protecteur ii) la protection de la fonction amine secondaire du composé (XXXII) ainsi formé par un groupement X', pour obtenir le composé (XXXIII) iii) la déprotection sélective de l'amine hétérocyclique par élimination du groupement X du composé (XXXIII), pour former le composé (XXXIV) iv) la réaction du composé (XXXIV) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées, pour former un composé de formule (XXXV) dans laquelle R1, R2 X et X' ont les significations indiquées précédemment v) l'élimination des groupements protecteurs X et X' du composé (XXXV) pour former le composé (I) recherché. L'étape i) est effectuée à l'aide de diborane dans du tétrahydrofuranne, à basse température. L'étape iv) est avantageusement effectuée à l'aide de dicyclohexylcarbodiimide et d'hydroxybenzotiazole dans un mélange diméthylformamide/chlorure de méthylène. Dans les composés préparés selon cette voie 10, R2 représente de préférence un groupe éthyle. L'invention se rapporte, par ailleurs, à un procédé (voie 11) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)4- ; et - R4 représente un groupe amide CO-NH-R5 où Rs représente un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation du composé de formule (XXXVI) à partir du composé de formule (IX) dans lesquelles R1 et R2 ont les significations données ci-dessus et X est un groupe protecteur, à l'aide de 3-hydroxy 1,2,3-benzotriazine-4(3H)-one en présence de diclyclohexylcarbodiimide (DCC) dans du tétrahydrofuranne ii) la réaction du composé (XXXVI) avec l'acide 2-(R/S)-perhydroazépinique, pour former le dérivé (XXXVII) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées iii) l'amidation de la fonction acide du composé (XXXVII) ainsi obtenu, à l'aide de l'amine R5NH2 appropriée, pour former le dérivé de formule (XXXVIII) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées iv) l'élimination du groupement protecteur X du composé (XXXVIII) pour obtenir le composé (I) désiré. L'étape ii) est avantageusement réalisée en présence de triéthylamine dans du diméthylformamide. A l'étape iii), on forme l'anhydride mixte de l'acide (XXXVII) et du chloroformiate d'isobutyle, que l'on fait ensuite réagir avec l'amine R5NH2 appropriée. Dans les composés préparés selon cette voie 11, R1 représente de préférence un groupe éthyle et R5 représente de préférence un groupe n.butyle. Enfin, l'invention se rapporte à un procédé (voie 12) pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée cidessus, dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = O et m = 1 et R3 représente le motif où R6 représente un groupe OCH3, OCH2Ph, F ; et - R4 représente un groupe amide CO-NH-R5 où R5 représente un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation de l'amide de formule (XXXXIV) à partir de l'ester de formule (XXXXIII) dans lesquelles R6 a la signification donnée ci-dessus, par réaction avec l'amine R5NH2 appropriée ii) la réaction du composé (XXXXIV) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1 et R2 ont les significations précitées et X représente un groupement protecteur, pour former le composé de formule (XXXXV) dans laquelle R1, R2, Rg, R6 et X ont les significations données précédemment iii) l'élimination du groupement X pour former le composé (I) désiré. L'étape ii) s'effectue avantageusement en présence du chlorure de l'acide bis(2-oxo 3-oxazolodinyl)phosphinique et de triéthylamine dans du chlorure de méthylène. Quant à l'ester méthylique (XXXXIII), il peut être obtenu i) par action du nitrite de sodium en présence d'acide chlorhydrique, sur le composé de formule (XXXIX) pour former le composé de formule (XXXX) dans lesquelles R6 a la signification indiquée précédemment ii) par addition de 2-méthylacétoacétate d'éthyle au composé (XXXX) ainsi obtenu, en présence de nitrite de sodium dans l'éthanol, pour former le composé de formule (XXXXI) dans laquelle R6 a la signification précitée iii) par cyclisation en milieu acide, pour former l'ester éthylique (XXXXII) iv) par échange à partir de l'ester éthylique (XXXXII) ainsi obtenu, en présence de magnésium dans l'éthanol. L'ester éthylique subit un échange d'ester et une réduction en présence de magnésium et de méthanol pour conduire à l'ester méthylique (XXXXIII). Dans les composés préparés selon cette voie 12, Rî représente de préférence un groupe éthyle et R5 représente de préférence un groupe n.butyle. Dans tous les procédés décrits ci-desssus, la formation des anhydrides d'acides peut être effectuée par les méthodes classiques, avantageusement à l'aide de chloroformiate d'isobutyle en présence de N-éthylmorpholine dans du tétrahydrofuranne. Par ailleurs, selon l'invention, X ou X' représente un groupe protecteur classique capable de protéger la fonction désirée dans une molécule donnée sans altérer les autres fonctions de celle-ci, tel que notamment les groupes benzyle, benzyloxycarbonyle ou tert-butoxycarbonyle. Ces groupes sont introduits par les méthodes classiques bien connues de l'homme du métier. Il en est de même pour les étapes de déprotection qui sont également réalisées par des méthodes connues en soi comme en particulier l'hydrolyse acide ou encore l'hydrogénation catalytique notamment en présence de Pd/C. Quant au groupement Y, il s'agit d'un radical capable d'estérifier une fonction acide sans modifier les autres fonctions de la molécule, et constituant un bon groupe partant afin de pouvoir être facilement éliminé lors d'une étape subséquente. Il s'agit de préférence de l'ester succinimidique. Les travaux de la demanderesse ont montré que les composés de formule (I) présentaient de nombreuses propriétés thérapeutiques et en particulier dans le domaine du traitement de troubles ou affections dans lesquels l'inactivation des neuropeptides endogènes est impliquée comme en particulier les troubles ou affections liés à l'inactivation de la CCK. Aussi, la présente invention a également pour objet l'utilisation d'un composé de formule (I) en tant que médicament pour traiter, chez l'homme ou chez l'animal, en particulier les troubles de la prise alimentaire, de l'humeur, cognitifs ou moteurs, notamment 1 'anoréxie, la schizophrénie, la maladie de Parkinson et la dépression ainsi que les troubles du transit gastro-intestinal tel que le syndrome du côlon irritable. La présente invention a également pour objet l'utilisation d'un composé de formule (I) dans la préparation d'un médicament destiné au traitement, chez l'homme ou l'animal, des affections ou troubles provoqués par la dégradation physiologique de neuropeptides endogènes en partculier celle de la CCK. La présente invention a en particulier pour objet l'utilisation de composés de formule (I) dans la préparation d'un médicament destiné au traitement des troubles ou affections tels que précités. Des composés de formule (I) utiles en tant que médicaments peuvent être administrés dans un support physiologiquement acceptable. Aussi la présente invention a également pour objet des compositions pharmaceutiques comprenant une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé de formule (I) en combinaison avec un support physiologiquement acceptable. La présente invention a encore pour objet l'utilisation des composés de formule (I) en tant qu'inhibiteurs de l'inactivation de neuropeptides endogènes et en particulier de celle de la CCK. Les inventeurs ont constaté que, d'une manière générale, parmi les composés de fomrules (I), ceux présentant une chiralité L,L (c'est-à-dire S,S selon la nomenclature Ingold Kahn-Prelog) sont les plus actifs. Dans les exemples donnés ciaprès, la configuration des autres carbones optiquement actifs est également indiquée pour les composés de formules (I) présentant plus de deux centres d'asymétrie. Dans toutes les utilisations précitées, on préfère choisir les composés selon l'invention présentant une constante Ki inférieure ou égale à 1 uM tels que ceux exemplifiés et d'une manière tout-à-fait préférentielle, les composés de formule (I) présentant un squelette indoline. Selon l'invention, toutes les utilisations précitées comprennent également celle des composés de formules (I) déjà connus, comme indiqués précédemment, c'est-à-dire les composés de formule (I) dans laquelle R1 représente un groupe CH2CH3, (CH2)2CH3, (CH2)3CH3, CH(CH3)2, CH2CH(CH3)2 ou CH(CH3)CH2CH3, R2 représente un hydrogène, R3 représente le radical bivalent -(CH2)2- > R4 représente un groupe amide CO-NH-R5 et Rs représente l'hydrogène. D'autres avantages et caractéristiques de la présente invention apparaîtront à la lecture des résultats expérimentaux qui suivent, en particulier d'une méthode d'isolement et de caractérisation de la tripeptidylpeptidase selon l'invention ainsi que des exemples de préparation donnés à titre illustratif et non limitatif. ISOLEMENT ET CARACTERISATION DE L'ENZYME INACTIVANT LA CCK Les inventeurs ont utilisé des membranes de cerveau (cortex cérébral) de rat comme matériel d'origine et des peptides CCK-8 non sulfaté (Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe NH2) et CCK-5 (Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2) comme substrats, les produits caractéristiques de la réaction (CCK-5 et Gly-Trp-Met) étant mesurés fluorimétriquement après isolement par chromatographie liquide haute performance (CLHP) selon Camus et al., (Neurosci., 1989, 29 : 595). Les étapes successives de purification CLHP mises en jeu sont décrites dans le tableau I suivant qui indique aussi les facteurs de purification obtenus en utilisant CCK-8 comme substrat. TABLEAU I Temps de rétention Etapes ou molarité de Facteur de [éluant] 'éluant au pic purification d'activité Membranes i Solubilisation de membranes 0.4 (détergent: 1 %) Echange d'ions (DEAE 5PW) 300 mM 15 [NaCI 0-300 mM] Hydroxyapatite (Bio-Gel HPHT) 220 mM 45 [phosphate 0-300 mM] Filtration sur gel (Protein Pak 300su) 45 min 3.500 [phosphate 50 mM] Colonne hydrophobe (Phenyl-5 PVV) 0 8.571 [(NH4)2 S04 lM-0] Dès le deuxième stade de purification, le profil de chromatographie ne comporte qu'un seul pic d'activité enzymatique auquel est superposé le pic obtenu en mesurant l'hydrolyse de CCK-5, indiquant par là qu'une enzyme unique est responsable des deux coupures de la molécule CCK-8. Après la dernière étape de purification, une électrophorèse sur gel de sodium dodécylsulfate (SDS) indique une bande unique marquée irréversiblement par DFP-3H à une masse apparente de 135 kDa. L'étude de la spécificité de l'enzyme purifiée sur une série de substrats-modèles a montré que celle-ci se comporte comme une aminotripeptidylpeptidase capable, notamment, d'hydrolyser les fragments Ala-Ala-Phe-p.nitroanilide ou Ala Ala-Phe-amidométhylcoumarine (A-AP-Amc) en libérant nitroaniline ou aminométhylcoumarine. EXEMPLES DE PREPARATION DE COMPOSES DE FORMULE (I) Pour les données spectrales indiquées dans tous les exemples ci-dessous, les abréviations suivantes ont pour signification : s = singulet, m = multiplet, d = doublet, dd = doublet de doublets, t = triplet, dt = doublet de triplets, q = quadruplet, tq = triplet de quadruplets et tt = triplet de triplets. Exemple 1 : Préparation de la L-valyl-L-proline n.hexylamide (UCL 1330-J) ; voie 1 R1 = CH(CH3)2 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; Rs = (CH2)5CH3 a/ Préparation de la N-benzyloxycarbonyl-L-valine On dissout 10 g de L-valine (85 mmoles) dans KOH 4 M (40 ml) et on refroidit le mélange dans la glace. On y ajoute 21,9 g de chlorure de benzyloxycarbonyle (128 mmoles) en 5 minutes et il se forme un solide blanc. On agite le mélange à 0 C pendant une heure puis on laisse la température remonter et on agite encore une heure à température ambiante. On dilue alors le mélange réactionnel avec KOH 4 M (200 ml) et on l'extrait à l'éther (2 x 100 ml).On porte alors la phase aqueuse à pH acide RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,42-7,52 (1H, d, NH) 7,24-7,36 (5H, m, Ph) 5,00 (2H, s, Ph-CH2) 3,78-3,88 (1H, m, a-CH acide) ; 1,98-2,08 (1H, m, P-CH acide) ; 0,80-0,88 (6H, m, 2 x CH3). b/ Préparation de l'ester succinimidique de la N-benzyloxycarbonyl-L-valine On dissout dans du diméthoxyéthane (100 ml) 15,63 g (62 mmoles) du produit obtenu au a/ et 7,16 g de N-hydroxysuccinimide (62 mmoles) et on refroidit le mélange dans de la glace. On ajoute 12,8 g de dicyclohexylcarbodiimide (62 mmoles) en agitant et le mélange est réfrigéré pendant une nuit. On élimine par filtration le solide blanc qui se forme et on concentre le filtrat pour obtenir 24,28 g d'un solide blanc par cristallisation dans l'isopropanol. On obtient 13,20 g du produit désiré.PF = 105-6 C (litterature : 116-7 C) RMN-1H : 7,35 (5H, s, ArCH) ; 5,27-5,41 (1H, d, NH) ; 5,11 (2H, s, PhCH2) ; 4,58-4,71 (1H, m, "-CH valine) ; 2,80 (4H, s, 2 x CH2) ; 2,19-2,41 (1H, m, F-CH valine) ; 0,99-1,07 (6H, m, 2 x CH3). c/ Préparation de la N-benzyloxycarbonyl-L-valyl-L-proline On dissout dans l'eau (100 ml) 3,4 g de L-proline (29,9 mmoles) et on ajoute 4,5 g de triéthylamine (44,8 mmoles). On dissout dans du tétrahydrofuranne (100 ml) 10 g (29,9 mmoles) du produit obtenu au b/ que l'on refroidit avec de la glace. On ajoute la solution de proline en 40 minutes et on agite le mélange pendant une heure à 0 C puis à température ambiante pendant une nuit. On réduit environ de moitié le volume de solvant, on acidifie (pH Une analyse CCM (acétate d'éthyle/acide acétique 18) a montré la présence de 4 composants. On redissout le produit obtenu dans l'acétate d'éthyle et on extrait avec KOH 4M (3 x 200 ml). On acidifie les phases aqueuses (pH Une CLHP (colonne : Lichrosorb rp select B, éluant CH3OH/H20 7/3 + acide trifluoroacétique 0,1 %) a indiqué une pureté > 90 %. RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,25-7,30 (5H, m, Ph) 5,90-5,95 (1H, d, NH) 5,04-5,10 (2H, m, PhCH2) ; 4,50-4,57 (1H, m, -CH valine) ; 4,26-4,34 (1H, m, -CH proline) ; 3,633,79 (2H, m, CH2 proline) ; 1,95-2,14 (4H, m, 2 x CH2proline) 0,87-1,00 (6H, m, 2 x CH3). Spectre de masse (EI) : 349 (M+ + 1). d/ Préparation de la N-benzyloxycarbonyl-L-valyl-L-proline hexylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne (50 ml, sec, distillé) 2 g (5,7 mmoles) du produit obtenu au c/ et on refroidit dans un bain glace/sel. On ajoute 660 mg de N-éthylmorpholine (5,7 mmoles) et 780 mg de chloroformiate d'isobutyle (5,7 mmoles) et on maintient le mélange refroidi pendant 30 minutes. On ajoute 580 mg de n.hexylamine (5,7 mmoles), on laisse la température du mélange remonter à la température ambiante et on laisse le mélange ainsi pendant une nuit. On dissout le mélange dans l'eau (50 ml) et on l'extrait à l'acétate d'éthyle (2 x 50 ml). On combine et on sèche (Na2S04) les phases organiques et on évapore le solvant. On obtient 2,95 g d'une huile brune.Par cristallisation dans un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole, on obtient 370 mg d'une poudre blanche. On concentre les filtrats. Par chromatographie en utilisant de l'acétate d'éthyle comme éluant, on obtient 1,80 g (73,2 %) du produit désiré. Une CLHP (colonne : Kromasil C-18 ; éluant : CH3OH/H2O 7/3 + acide trifluoroacétique 0,1 %) a indiqué une pureté > 90 %. RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) 7,33 (5H, s, Ph) ; 5,455,50 (1H, d, NH) ; 5,07-5,08 (2H, d, PhCH2) ; 4,52-4,57 (1H, m, -CH valine) ; 4,28-4,36 (1H, m, -CH proline) ; 3,56-3,72 (2H, m, CH2 proline) ; 3,11-3,21(2H, m, a-CH2 amide) ; 1,69-2,39 (5H, m, P-CH valine, 2 x CH2 proline) ; 15-1,45 (8H, m, 4 x CH2) ; 0,81-0,98 (9H, m, 3 x CH3). e/ Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On dissout dans du méthanol 100 ml) 900 mg (208 mmoles) du produit obtenu au d/ et on ajoute 300 mg de palladium sur charbon. On hydrogène le mélange pendant 3 heures puis on élimine par filtration le catalyseur. Après élimination du solvant, on obtient 602 mg (94,5 %) d'une huile pâle. Une analyse par CCM a montré qu'il ne restait pas de produit de départ. On ajoute 182 mg d'acide oxalique (202 mmoles) dans 5 ml d'éthanol et on dissout l'huile. Après addition d'éther (50 ml), on obtient une solution trouble qui est réfrigérée. On obtient 660 mg (84 %) du produit désiré sous forme de sel d'oxalate. P.F. = 146-7"C Analyse élémentaire : C16H31N302.C2H2O4 Trouvé : C = 55,99 % ; H = 8,75 % ; N = 10,63 % ; Théorique : C = 55,80% ; H = 8,58 % ; N = 10,84 % RMN-1H (200 MHz, DMSO, ppm) : 7,85-7,91 (1H, t, NH) 4,25-4,32 (1H, q, -H proline) ; 3,93-3,96 (1H, d, aH valine) 3,43-3,72 (2H, m, CH2 proline) ; 2,95-3,07 (2H, m, aCH2amide) 1,66-2,15 (5H, m, P-CH valine, 2 x CH2 proline) ; 1,25-1,39 (8H, m, 4 x CH2) ; 0,8-1,2 (6H, m, 3 x CH3). IR (cm-l) : 3400, 3333 (N-H), 2700-3200 (OH), 1683, 1639 (C=O), 1195 (CONH). CLHP (colonne : Kromasil C-18 ; éluant : CH3OH/H20 1/1 + acide trifluoroacétique 0,1 %) : 100 % Spectre de masse (FAB) : 298 (M+ + 1). Exemple 2 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)-Lproline 3-(méthylthio)propylamide (UCL 1382-J) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- R4 = CO-NH-R5 ; R5 = (CH2)3SCH3 a/ Préparation de l'acide N-(tert.butoxycarbonyl)2(S)-aminobutyrique On dissout dans un mélange de dioxanne (155 ml), d'eau (78 mi) et de NaOH 1N (78 mi), 8 g d'acide 2(S)-aminobutyrique (77,6 mmoles). On refroidit la solution dans un bain glace/sel et on ajoute 18,62 g de dicarbonate de di-tert.butyle (85,4 mmoles). On laisse la solution se réchauffer jusqu'à la température ambiante et on agite pendant une heure.On concentre alors le mélange sous vide jusqu'à un volume d'environ 90 ml puis on l'acidifie avec une solution de KHSO4. On extrait la solution résultante au chlorure de méthylène (2 x 200 ml), on sèche les extraits réunis et on les fait évaporer, ce qui conduit à une huile. Par sèchage prolongé sous vide, on obtient 14,20 g d'un solide cireux blanc (91 %). P.F. = 65-66C bJ Préparation de l'ester succinimidique de l'acide N-(tert.butoxycarbonyl )-2(S)-aminobutyrique On dissout dans du tétrahydrofuranne sec, sous azote à 0 C, 14,2 g d'acide (70 mmoles) obtenu au a/. On ajoute 14,4 g de dicyclohexylcarbodiimide (70 mmoles) et 8,1 g de N-hydroxysuccinimide (70 mmoles), et on agite le mélange pendant une nuit.On élimine par filtration le précipité formé, on le rince une fois avec de l'acétate d'éthyle et on élimine le solvant sous vide, ce qui conduit à 18,00 g d'une huile (85 %). Le produit est utilisé dans les étapes subséquentes sans purification supplémentaire. RMN-1H (CDC13, ppm) : 4,6 (1H, m, aH) ; 2,6 (4H, s, CH2CH2succinimide) ; 1,5-1,7 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 1,2 (9H, s, (CH3)3) ; 0,9 (3H, t, CH3aminobutyryle). c/ Préparation de la 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)2(S)-aminobutyryl)-L-proline On dissout dans du tétrahydrofuranne (150 ml), 6,933 g d'ester (23,1 mmoles) obtenu au b/ et on refroidit le mélange à 0 C. On ajoute une solution de 3,99 g de L-proline (34,7 mmoles) et 3,51 g de triéthylamine (34,7 mmoles) dans l'eau (50 mi). On maintient l'agitation pendant 48 heures à température ambiante. On élimine sous vide le tétrahydrofuranne et on le remplace par de l'eau puis on porte le pH à 2 environ avec du KHSO4 dilué. On extrait la solution acide au chlorure de méthylène, on sèche les extraits et on les fait évaporer, ce qui conduit à une huile (rendement 64 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 4,3 (1H, m, "'H) ; 4,2 (1H, m, "'H) 3,6-3,8 (2H, m, CH2Nproline) ; 1,9-2,1 (4H, CH2CH2CH2Nproline) ; 1,6-1,8 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 1,5 (9H, s, (CH3)3) ; 0,9 (3H, t, CH3aminobutyryle). d/ Préparation de la 1-(N-(tert.butoxyearbonyl)- 2(S)-aminobutyryl)-L-proline 3-(méthylthio)propylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne (100 ml), sous azote, 2,47 g (8,23 mmoles) du produit obtenu au c/, en refroidissant dans un bain glace/sel. On ajoute 0,948 g de N-éthylmorpholine (8,23 mmoles) puis 1,125 g de chloroformiate d'isobutyle (8,23 mmoles). Après 30 minutes, on ajoute 0,864 g de 3-(méthylthio)propylamine (8,23 mmoles). On maintient l'agitation pendant une nuit. On verse la suspension dans du chlorure de méthylène (250 ml), on lave avec de l'acide citrique 10 % (3 x 100 ml) puis avec NaHCO3 5 % (3 x 100 ml), on sèche et on fait évaporer, ce qui conduit à une huile (rendement 60 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 4,4 (1H, m, aH) ; 4,3 (1H, m, &alpha;H) s 3,5-3,8 (2H, m, CH2Nproline) ; 3,2 (2H, m, CH2N) ; 2,2 (2H, m, CH2CH2Nproline) ; 2,0 (3H, s, CH3S) ; 1,6-1,8 (8H, m, CH2CH2CH2Nproline, CH2CH2SCH3, CHaminobutyryle) ; 1,5 (9H, s, (CH3)3) ; 0,9 (3H, t, CH3aminobutyryle). e/ Préparation du composé en titre sous forme de sel d'oxalate On dissout dans de l'acide trifluoroacétique refroidi (100 ml), 5 g (12,9 mmoles) du produit obtenu au d/, en refroidissant dans un bain glace/sel et on agite le mélange pendant 30 minutes. On élimine sous vide l'acide, ce qui conduit à une huile claire. On traite cette huile par NaHCO3 5 % et on l'extrait au chlorure de méthylène. On sèche la phase organique et on la fait évaporer, ce qui conduit à la base libre (huile claire). On dissout l'huile obtenue dans une petite quantité d'éthanol et on ajoute de l'acide oxalique (1,1 équivalent). Après addition d'éther, on obtient des cristaux blancs du produit désiré sous forme de sel d'oxalate (rendement 25 %). Ce produit est suffisamment pur sans qu'une recristallisation soit nécessaire. P.F. = 120-121 C RMN-1H (CD30D, ppm) : 4,5 (1H, m, &alpha;H) ; 4,3 (1H, m, aH) 3,6 (2H, m, CH2Nproline) ; 2,5 (2H, m, CH2Namide) ; 2,1 (3H, s, SCH3) 1 1,75-2,0 (10H, m, SCH2CH2CH2CH2CH2Nproline, CH2 aminobutyryle) ; 1,0 (3H, t, CH3aminobutyryle). CLHP (colonne : Lichrosorb r.p. select B : éluant CH30H/H20 30/70) : 99,99 % (Tr = 8,66 minutes). Analyse élémentaire : C13H25N3O2S.C2H2O4.0,5H2O Trouvé : C = 47,17 9w ; H = 7,05 % ; N = 10,67 % Calculé : C = 46,62 % ; H = 7,30 % ; N = 10,87 % Exemple 3 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl) L-proline n.pentylamide (UCL 1391-J) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)- ;R4 = CO-NH-R5 ; Rs = (CH2)4CH3 a/ Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique On dissout dans une solution aqueuse de KOH 4M (100 ml), 10 g d'acide 2(S)-aminobutyrique (97 mmoles) et on refroidit à 0 C. On ajoute 24,7 g de chloroformiate de benzyle (145 mmoles) et on agite le mélange en laissant la température du mélange remonter jusqu'à la température ambiante pendant 2 heures 30 minutes. On dilue alors le mélange avec de l'eau (100 ml) et on l'extrait à l'ether (2 x 200 ml). On acidifie la phase aqueuse jusqu'à un pH RMN-1H (ppm) : 7,32 (5H, s, ArCH) ; 5,22-5,28 (1H, d, NH) ; 5,10 (2H, s, Ph-CH2) ; 4,02-4,44 (1H, m, a-CH) ; 1,582,02 (2H, m, CH2) ; 0,9-1,2 (3H, t, CH3). b/ Préparation de l'ester succinimidique de l'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)aminobutyrique On dissout dans du diméthoxyéthane (160 ml), 20 g d'acide (84 mmoles) obtenu au a/ et 9,7 g de N-hydroxysuccinimide (20 mmoles) et on refroidit la solution dans de la glace. On ajoute par portions 17,3 g de dicyclohexyl-carbodiimide (84 mmoles) en refroidissant et il se forme rapidemment un précipité blanc. On refrigère le mélange pendant une nuit, on le filtre et on élimine le solvant. On obtient 30,69 q d'une huile visqueuse. Par cristallisation dans de l'isopropanol, on obtient 5,74 g d'un solide blanc. RMN-1H (ppm) : 7,31 (5H, s, ArCH) ; 5,3-5,6 (1H, d, NH) 5,1 (2H, s, Ph-CH2) ; 4,8-4,9 (1H, m, a-CH) ; 2,9 (4H, s, 2 x CH2ester) ; 1,80-2,05 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 0,95-1,25 (3H, m, CH3aminobutyryle). c/ Préparation de la 1-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-amino butyryl )-L-prol ine On dissout dans du tétrahydrofuranne (50 ml), 5 g d'ester (14,95 mmoles) obtenu au b/ et on refroidit dans de la glace. On y ajoute alors 1,75 g de L-proline (14,95 mmoles), 2,25 g de triéthylamine (22,4 mmoles) et de l'eau (50 ml). On agite le mélange et on le refroidit pendant un heure puis on le porte à la température ambiante pendant une nuit. On reduit la teneur en solvant à environ la moitié de son volume, on acidifie et on extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 100 ml). On sèche les fractions d'acétate d'éthyle combinées (Na2S04) et on élimine le solvant. On obtient 5,73 g d'une huile épaisse. RMN-1H (ppm) : 7,38 (5H, s, ArCH) ; 5,9-6,0 (1H, d, NH) 5,08 (2H, s, Ph-CH2) ; 4,42-4,54 (2H, m, 2 x a-CH) ; 3,52-3,85 (2H, m, CH2proline) ; 1,52-2,30 (6H, m, 2 x CH2proline, CH2aminobutyryle) ; 0,85-1,0 (3H, m, CH3). d/ Préparation de la 1-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-amino butyryl )-L-prol ine n.pentylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne, sec, distillé (50 ml), 2 g (5,98 mmoles) du produit obtenu au c/, et on refroidit dans un bain glace/sel. On y ajoute 0,813 g de chloroformiate d'iso.butyle (5,98 mmoles) et 0,687 g de N-éthylmorpholine (5,98 mmoles) en agitant et la solution devient trouble. On poursuit l'agitation et le refroidissement pendant 30 minutes puis on ajoute 0,52 g de n.pentylamine (5,98 mmoles). On agite le mélange à la température ambiante pendant une nuit puis on le dilue avec de l'eau (50 ml) et on l'extrait à l'acétate d'éthyle (2 x 50 ml). On sèche les extraits organiques réunis (Na2504) et on élimine le solvant. On obtient 2,54 g d'une huile.Des analyses CLHP et CCM ont montré qu'il restait de l'acide de départ. On redissout donc l'huile obtenue dans de l'acétate d'éthyle (100 ml), on la lave avec KOH 4M (50 ml) et de l'eau puis on la sèche (Na2504) et on élimine le solvant. On obtient 2,03 g du produit désiré (rendement 84 %). RMN-1H (ppm) : 7,33 (5H, s, ArCH) ; 5,07-5,08 (2H, m, CH2Ph) ; 3,96-4,07 (2H, m, a-CH) ; 3,48-3,9 (2H, m, CH2 proline) ; 1,1-2,5 (12H, m, 6 x CH2) ; 0,75-1,0 (6H, m, 2 x CH3). e/ Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On dissout dans du méthanol (100 ml), 1 g (2,48 mmoles) du produit obtenu au d/ et on ajoute 200 mg de Pd/C (10 %). On hydrogène ce mélange sous pression pendant 3 heures dans un appareil de Parr. On élimine le catalyseur par filtration puis on élimine le solvant et on ajoute 223 mg d'acide oxalique (2,48 mmoles). Par cristallisation dans un mélange éthanolléther, on obtient 290 mg de produit désiré (rendement 32,5 %). P.F. = 140-141 C CLHP (éluant : CH30H 30 %/ H2O/TFA 0,1 %) : 99,3 % Analyse élémentaire: C14H27N302.0,9C2H204.0,2C2H50H.O,5H20 Trouvé : C = 52,63 % ; H = 8,44 % ; N N = 11,24 % Calculé : C = 52,78 % ; H = 8,48 % N = 11,40 % Spectre de masse ( FAB) : 270 (M+ + 1) RMN-1H (DMSO-d6, ppm) : 7,64-7,69 (1H, m, NH) ; 4,24-4,30 (1H, m, a-CH) ; 4,03-4,09 (1H, m, a-CH) ; 3,30-3,74 (2H, m, CH2proline) ; 2,90-3,10 (-NH-CH2-) ; 1,52-2,10 (6H, m, 2 x CH2proline, CH2 chaîne butyle) ; 0,72-1,44 (12H, m, 2 x CH3, 3 x CH2 chaîne pentyle). Exemple 4 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl) L-proline n.butylamide (UCL 1371-H) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = (CH2)3CH3 a/ Préparation de la 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)- 2(S)-aminobutyryl)-L-proline n.butylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne sec (15 ml) 2,42 g de 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)-2(S)-aminobutyryl)-L-prollne (8,05 mmoles) préparé comme à l'exemple 2 c/. On refroidit la solution dans un bain glace/sel puis on ajoute 0,927 g de N-éthylmorpholine (8,05 mmoles) et 1,10 g de chloroformiate d'isobutyle (8,05 mmoles). La solution est agitée pendant 45 minutes et on ajoute 0,59 g (8,05 mmoles) de n.butylamine. Après avoir agité pendant une nuit, on ajoute du chlorure de méthylène (200 mi) et on lave le mélange avec de l'acide citrique 10 % (2 x 100 ml) puis avec NaHCO3 5 % (2 x 100 ml). On sèche la phase organique (Na2SO4) et on évapore sous vide. On obtient un sirop. On réalise la déprotection sans caractérisation. b/ Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On traite par de l'acide trifluoroacétique (TFA) froid (28 ml) le produit obtenu au al en agitant dans un bain glace/sel pendant 30 minutes. On élimine le TFA sous vide. On traite l'huile résultante par NaHCO3 5 % froid jusqu'à ce que le pH soit d'environ 10 puis on extrait au chlorure de méthylène. On sèche la phase organique (Na2SO4) et on évapore. On reprend l'huile dans un faible volume d'éthanol et on traite par l'acide oxalique. Après addition d'ether, on obtient des cristaux blancs du produit désiré sous forme de sel d'oxalate. Ce composé est suffisammment pur sans recristallisation (50 %). P.F. = 165-167"C RMN-1H (CD30D, ppm) : 4,4 (1H, m, a-H) ; 4,2 (1H, m, aH) 3,4-3,7 (2H, m, CH2N proline) ; 3,0-3,2 (2H, m, CH2NC4Hg) 1,6-2,2 (4H, m, NCH2CH2CH2 proline) ; 1,2-1,5 (4H, m, CH2 aminobutyryle, NCH2CH2C4H9) ; 1,1 (3H, t, CH3 aminobutyryle) 0,9 (3H, t, CH3 de n.butyle). CLHP (colonne : Lichrosorb r.p. select B, éluant CH3OH/H2O 55/45 + TFA 0,1 *) : 99,99 % (Tr : 4,82 minutes). Analyse élémentaire : Cl3H25N302.C2H204.1,3H20 Trouvé : C = 49,15 * ; H = 7,62 * ; N = 11,06 % Théorique : C = 48,85 % ; H = 8,09 % ; N = 11,39 % Exemple 5 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl) L-proline E2(S)-méthyljbutylamide (UCL 1381-J) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ;R3 = -(CH2)2- R4 = CO-NH-R5 ; R5 - (S)CH2CH(CH3)CH2CH3 al Préparation de la 1-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-amino- butyryl)-L-proline On traite par une solution de 4,138 g d'ester succinimidique de l'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique (12,4 mmoles) préparé comme à l'exemple 3 b/, dans du diméthoxyéthane (25 ml), une solution de 2,1395 g de L-proline (18,6 mmoles) et de 1,56 g de NaHCO3 (18,6 mmoles) dans l'eau (20 ml). Après 5 heures, on ajoute 12,4 ml d'eau, on acidifie le mélange résultant jusqu'à pH = 2 avec HCl concentré et on l'extrait à l'acétate d'éthyle. On sèche les extraits et on les fait évaporer ce qui conduit à un sirop (rendement 48 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,2 (5H, m, H-Aryle) ; 5,2 (1H, m, &alpha;H) ; 5,0 (3H, m, CH2benzyloxycarbonyle, aH) ; 4,0-4,1 (2H, m, CH2N) ; 1,8-2,0 (4H, m, CH2CH2CH2N) ; 1,1-1,2 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 0,9 (3H, t) ; 3,8 (2H, m, CH2Aryle) ; 3,5 (2H, m, CH2cycle) ; 3,2 (2H, m) ; 2,0 (2H, m) ; 0,9 (3H, t, CH3aminobutyryle). b/ Préparation de la 1-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyryl)-L-proline [2(S)-méthyljbutylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne (100 ml), 3,8 g (11,4 mmoles) du produit obtenu au a/, et on refroidit le mélange sous azote dans un bain glace/sel. On ajoute 1,31 g de N-éthyl-morpholine (11,4 mmoles) puis 1,487 g de chloroformiate d'isobutyle (11,4 mmoles). Après 30 minutes, on ajoute 0,99 g de 2(S)-méthylbutylamide (11,4 mmoles) et on poursuit l'agitation pendant une nuit. On verse la suspension dans du chlorure de méthylène (250 ml), on lavè avec de l'acide citrique 10 % (3 x 100 ml) puis avec NaHCO3 5 9s (3 x 100 ml), on sèche et on fait évaporer. On obtient une huile (rendement 50 %). RMN-1H (CDC13, ppm) : 7,2 (5H, m, H-Aryle) 5,0 (2H, d, CH2benzyloxycarbonyle) ; 4,3-4,5 (2H, m, 2H) ; 3,2-3,6 (2H, m, CH2N) 2 2,9-3,1 (2H, m, CH2Nproiine) 1 1,0-2,1 (18H, m, CH2CH2CH2N, CH3CH2aminobutyryle, NCH2CH(CH3)CH2CH3). c/ Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On dissout dans du méthanol 1,96 g du produit obtenu au b/ et on ajoute 0,24 g de palladium sur charbon (10 %, humide). On hydrogène cette suspension dans un appareil de Parr sous 40 Psi pendant 4 heures. On élmimine le catalyseur par filtration et on élimine le solvant sous vide. On dissout l'huile résultante dans un peu d'éthanol et on ajoute de l'acide oxalique (1,1 équivalent). Après addition d'éther, on obtient le produit désiré sous forme de sel d'oxalate (rendement 45 %). P.F. = 135-136"C RMN-1H (CD30D, ppm) : 4,4 (1H, m, aH) ; 4,25 (1H, m, aH) 3,65 (2H, m, CH2Nproline) ; 3,0 (2H, m, CH2Namide) ; 2,0 (5H, m, CH2CH2Nproline, CH3CH2CH(CH3)CH2N) , 1,5 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 1,1 (3H, t, CH3aminobutyryle) ; 0,9 (6H, m, CH3CH2CH(CH3)CH2N). CLHP (colonne Lichrosorb r.p. select B ; éluant CH3OH/H20 15/85 + TFA 0,1 %) : 99,99 % (Tr = 4,63 minutes). Analyse élémentaire : Cî4H27N302.C2H204.5H20 Trouvé : C = 52,04 % ; H = 7,82 * ; N = 11,27 % Calculé : C = 52,16 % ; H = 8,21 % ; N = 11,41 % Exemple 6 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)-Lproline n.propylamide (UCL 1393-F) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = (CH2)2CH3 a/ Préparation de la 1-(N-(tert.butoxyzarbonyl)- 2(S)-aminobutyryl)-L-proline n.propylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne (40 ml), 2 q de 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)-2(S)aminobutyryl)-L-proline (6,6 mmoles) préparée comme à l'exemple 2 c/.On ajoute alors à cette solution, à -10 C et sous azote, 0,86 ml de chloroformiate d'iso.hutyle (6,6 mmoles) et 0,85 ml de N éthylmorpholine (6,6 mmoles). Après agitation à -10 C pendant 20 minutes, on ajoute 2,75 ml de n.propylamine (33,0 mmoles). On laisse agiter le mélange à 0 C pendant une heure puis à température ambiante pendant une nuit. On fait évaporer le solvant sous vide et on obtient une matière semi-solide blanche. On la dissout dans de l'acétate d'éthyle (150 ml), on la lave avec de l'acide citrique 5 % (30 ml), une solution saturée de bicarbonate de sodium (30 ml) et de la brine (20 mi). On filtre après sèchage Na2SO4) et on fait évaporer le solvant. On obtient une huile que l'on purifie par chromatographie liquide sur colonne (éluant : acétate d'éthyle) et on obtient 2,06 g d'un solide blanc (rendement 90 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 6,86 (1H, 6 large, NH) ; 5,22 (1H, d, NH) ; 4,56 (1H, dd, &alpha;-CHaminobutyryle) ; 4,37 (1H, m, &alpha;-CH proline) ; 3,54 (2H, m, N-CH2proline) ; 3,13 (2H, m, N-CH2 propyl) ; 2,39-1,31 (8H, m, 4 x CH2) ; 1,24 (9H, s, (CH3)3-) 0,91 (3H, t, CH3propyle) ; 0,86 (3H, t, CH3 aminobutyryle). Spectre de masse (FAB) : 342 (MH+) bl Préparation du composé en titre sous forme de trifluoroacétate On dissout dans du dichlorométhane (5 ml), 2,0 g (5,9 mmoles) du produit obtenu au a/ et on ajoute de l'acide trifluoroacétique (5 ml) à cette solution refroidie. On agite le mélange réactionnel pendant 2 heures dans un bain de glace. On fait évaporer l'acide et on obtient par précipitation avec de l'éther éthylique et sèchage pendant une nuit à 30 C sous 0,1 mmHg, 1,34 g de produit désiré (rendement 59 %). P.F. = 46-51 C (capillaire ouvert) CLHP : 99,8 % RMN-1H (D20/TSP, ppm) : 4,41 (1H, t, a-CHaminobutyryle) 4,33 (1H, t, -CHproline) 3,71 (2H, m, N-CH2proline) ; 3,17 (2H, dt, N-CH2amide) 2 2,21 (2H,, dt, CH2proline) ; 1,86-2,03 (4H, m, 2 x CH2) ; 1,54 (2H, tq, CH2amide) ; 1,04 (3H, t, CH3 aminobutyryle) ; 0,89 (3H, t, CH3 amide). Spectre de masse (FAB) : 242 (MH+) Analyse élémentaire : C12H23N302.1,3CF3COOH Trouvé : C = 44,75 % ; H = 6,13 % ; N = 10,59 % Calculé : C = 45,01 % ; H = 6,29 % ; N = 10,79 % Exemple 7 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)-Lproline iso.butylamide (UCL 1394-F) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 = = CH2CH(CH3)2 a/ Préparation de la 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)- 2(S)-aminobutyryl)-L-proline iso.butylamide On procède comme à l'exemple 6 a/ en utilisant de l'iso.butylamine au lieu de la n.propylamine. On obtient 2,21 g d'une huile (rendement 94 % ). RMN-1H (CDC13, ppm) : 6,93 (1H, s large, NH) ; 5,24 (1H, s large, NH) ; 4,56 (1H, dd, =-CHaminobutyryle) ; 4,36 (1H, tt, a-CHproline) ; 3,53 (2H, m, N-CH2proline) ; 3,00 (2H, m, NCH2); 2,39-1,58 (7H, m, CH et CH2) ; 1,37 (9H, s, (CH3)3-) 0,94 (3H, t, CH3) ; 0,84 (6H, d, 2 x CH3). Spectre de masse (FAB) : 356 (MH+) b/ Préparation du composé en titre sous forme de tri fluoroacétate On procède comme à l'exemple 6 b/ à partir du produit préparé au a/ et on obtient 0,62 g de produit désiré (rendement 29 %) par précipitation avec de l'éther éthylique et sèchage à température ambiante sous vide (0,1 mmHg) pendant une nuit. P.F. = 58-61 C (capillaire ouvert) CLHP = 100 % RMN-1H (D2O/TSP, ppm) : 4,43 (1H, t, a-CHaminobutyryle) 4,33 (1H, t, ',-CHproline) ; 3,70 (2H, m, N-CH2proline) ; 3,04 (2H, dd, N-CH2amide) ; 2,23 (2H, m, CH2proiine) ; 1,96(4H, m, CH2) ; 1,78 (1H, m, CH) ; 1,04 (3H, t, CH3aminobutyryle) ; 0,89 (6H, d, 2 x CH3). Spectre de masse (FAB) : 256 (MH+) IR (pastille KBr, cm-1) : 3298 et 3089 (N-H), 2962 (C-H), 1662 (C=O). Analyse élémentaire : C13H25N3O2.1,2CF3COOH Trouvé : C = 47,15 % ; H = 6,75 % ; N = 10,72 % Calculé : C = 47,16 % ; H = 6,73 % ; N = 10,71 Exemple 8 : Préparation de la L-valyl-L-proline pipéridineamide (UCL 1327-J) ; voie 1 R1 = CH(CH3)2 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-R7 ; R7 = On procède comme à l'exemple 1. P.F. = 56-58 C RMN-1H (400 MHz, CD30D, ppm) : 3,89 (1H, s large, a-CH) 3,39 (1H, s large, a-CH) ; 3,35 (4H, m, N-(CH2)2-) ; 3,24 (2H, t, N-CH2) ; 2,09 (2H, s large, CH2 proline) ; 1,82 (2H, s large, CH2proline) ; 1,61 (1H, m, CH(CH3)2) ; 1,47 (2H, tt, -CH2-) ; 1,36 (2H, t large, -CH2-) ; 0,95 (3H, d, CH3) ; 0,86 (3H, d, CH3). IR (pâte de nujol, cm-1) : 3445 et 3419 (N-H amine), 1744 (C=O acide ), 1648 (C=O amide tertiaire). Analyse élémentaire : C13H23N302. 2,1(COOH) 2.0,3H20 Trouvé : C = 48,55 % ; H = 7,00 % ; N = 8,71 % Calculé : C = 48,46 % ; H = 6,74 % ; N = 8,83 % Exemple 9 : Préparation de la L-valyl-L-proline n.butylamide (UCL 1324-J) ; voie 2 R1 = CH(CH3)2 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = (CH2)3CH3 a/ Préparation de la N-(tert.butoxycarbonyi )-L-proline n.butylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne (50 ml), 5,0 g d'ester succinimidique de la N-(tert.butoxycarbonyl)-L-proline (0,016 mmole) commercialisé par NOVABIOCHEM. On y ajoute alors à 0 C, en 10 minutes, 1,533 ml de n.butylamine (0,015 mmole) et on agite le mélange pendant une heure.On élimine le solvant et on purifie la matière brute résultante par chromatographie sur silice en utilisant comme éluant de l'acétate d'éthyle. On obtient 4,3 g d'une huile (rendement 100 %). RMN-1H (200MHz, CDCl3, ppm) : 6,3 (1H, s large, NH) ; 4,25 (1H, m, méthine) 3 3,6-3,1 (4H, m, méthylène) ; 2,9 (2H, m, méthylène ; 1,95 (9H, s, méthyle) ; 1,6-1,2 (6H, m, méthylène). b/ Préparation de la L-proline n.butylamide, tri fluoroacétate On agite à température ambiante pendant une heure, 4,32 g du produit obtenu au al (0,014 mmole) et 15 ml d'acide trifluoroacétique. On fait évaporer sous vide l'acide en excès et on fait sècher sous vide pendant 3 heures. On obtient 4,5 g de produit désiré (rendement 100 %). RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 9,3 (1H, s large, NH) 7,65 (1H, s large, NH) ; 4,7 (1H, m, méthine) ; 3,5 (2H, m, méthylène) ; 3,25 (2H, m, méthylène) ; 2,1 (4H, m, méthylène) 1,5 (2H, m, méthylène) ; 1,3 (2H, m, méthylène) ; 0,9 (3H, t, méthyle). c/ Préparation de la N-(tert.butoxycarbonyl)-L-valyl L-proline n.butylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne (30ml), 3,707 g d'ester succinimidique de la N-(tert.butoxycarbonyl)-L-vallne (0,0117 mole) commercialisé par NOVABIOCHEM. On y ajoute une solution de 3,35 g du produit obtenu au b/ (0,0117 mole) dans 20 ml de tétrahydrofuranne en agitant à 25"C. On ajoute ensuite 3,0 ml de triéthylamine pour neutraliser le sel de trifluoroacétate et on agite le mélange pendant 20 heures. On fait évaporer le solvant et on purifie la matière brute résultante par chromatographie sur silice en utilisant comme éluant un mélange d'éther de pétrole et d'acétate d'éthyle 1/1. On obtient 1,8 g de produit désiré (rendement 41 %) sous forme d'une huile incolore. RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 6,9 (1H, s large, NH) ; 5,2 (1H, d, NH) ; 4,5 (1H, dd, méthine) ; 4,25 (1H, dd, méthine) 3,6 (2H, m, méthylène) ; 3,2 (2H, q, méthylène) ; 1,1 (5H, m, méthine et méthylène) ; 1,4 (9H, s, CH3tert.butyle) ; 1,3 (4H, m, méthylène) ; 0,9 (6H, dd, méthyle) ; 0,8 (3H, t, méthyle). d/ Préparation de la L-valyl-L-proline n.butylamide, trifluoroacétate On agite à 25"C pendant 45 minutes, 1,5 g du produit obtenu au c/ (4,8 mmoles) et 6 ml d'acide trifluoroacétique. On fait évaporer l'excès d'acide et on purifie la matière brute résultante par chromatographie sur silice en utilisant comme éluant un mélange éther/acétate d'éthyle/acide acétique (1/1/0,1) puis acétate d'éthyle/méthanol/acide acétique (1/1/0,1). On réalise une purification supplémentaire par CLHP préparative dans les conditions suivantes : colonne Lichrosorb r.p. select B ; éluant : eauîméthanol 60/40 + acide trifluoroacétique 0,1 %. On obtient le produit sous la forme d'une huile. e/ Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On dissout dans Na2CO3 en solution aqueuse à 20 % (5 ml), 1,7 g du produit obtenu au d/ (4,4 mmoles), on agite pendant 10 minutes et on extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 15 ml). On sèche les extraits organiques (Na2SO4) et on concentre de façon à obtenir une huile (0,734 g). On dissout 1 g d'acide oxalique dans 3 ml d'éthanol et on ajoute cette solution à l'huile précédemment obtenue, on chauffe dans un bain d'eau pendant 10 minutes puis on refroidit. Par addition d'éther éthylique, on obtient un précipité blanc que l'on filtre et qu'on lave avec de l'éther éthylique. On le recristallise dans un mélange méthanol/acétate d'éthyle/éther (1/1/3), ce qui conduit à 0,680 g de cristaux blancs (rendement 42 %). P.F. = 165-166 C CCM (acétate d'éthyle/méthanol/acide acétique 6/2/2) Rf = 0,25 IR (KBr, cm-1) : 3432 (NH), 3072 (+NH3), 2958 (C-H), 1718 (C=O), 1641 (C=O), 1554 (N-H). RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6, ppm) : 7,9 (1H, t, NH) ; 7,3 (2H, s large, NH2) ; 4,25 (1H, t, méthine) @ 3,95 (1H, d, méthine) ; 3,65 (1H, m, CH2 proline) ; 3,45 (1H, m, CH2 proline) ; 3,0 (2H, m, méthylène) ; 2,2-1,5 (5H, m, méthine et méthylène) ; 1,3 (4H, m, méthylène) ; 0,9 (6H, dd, méthyle) 0,8 (3H, t, méthyle). Spectre de masse : 269 (M+) (2 %). Analyse élémentaire : C16H29N306.0,2(COOH)2 Trouvé : C = 52,12 % ; H H = 8,01 % ; N = 11,07 % Calculé : C = 52,19 % ; H = 7,85 % ; N = 11,13 % Exemple 10 : Préparation de la L-alanyl-L-prolyl L-borovaline pinanediol ester (UCL 1372-F3) ; voie 5 R1 = CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ;R4 = CO-NH-R5 R5 = a/ Préparation de l'acide isopropylboronique On ajoute simultanément, sous atmosphère d'azote et agitation vigoureusement, une solution de 149 g de triéthylborate (1 mole) dans 300 cm3 d'éther et une solution 2M de 103 g de chlorure d'isopropylmagnésium (1 mole) dans 500 cm3 d'éther, dans de l'éther éthylique (500 cm3) agitée sous azote à -78 C, en maintenant la température en dessous de -70 *C pendant 2 heures. On laisse la température du mélange réactionnel remonter à la température ambiante et on poursuit l'agitation encore pendant 24 heures.On acidifie alors le mélange avec de l'acide sulfurique dilué à 40 % froid (250 cm3) et on agite en maintenant la température en dessous de 15 C. On agite pendant une période supplémentaire de 16 heures et on dilue encore avec de l'eau (250 cm3) pour éliminer l'émulsion. On sépare la phase éthérée et on extrait la phase aqueuse à l'éther (3 x 200 cm3). On réunit les phases éthérées et on les sèche (sulfate de magnésium) puis on les concentre. On cristallise le solide résultant dans l'eau. On obtient 75 g (humide) de produit désiré qu'il est nécessaire de conserver humide ou dans l'éther afin d'éviter une autooxydation. RMN-1H (DMSO-d6), ppm) : 3,4 (2H, s large, OH) ; 0,8 (7H, s, méthine et méthyle). [L'acide isopropylboronique a été décrit par R.M. Washburn et al., Org. Syn., 1963, Coll. Vol. IV : 68-72]. b/ Préparation de l'hexahydro-2(1-méthyléthyl)-3a,5,5 triméthyl-(3a5-(3aa,4a,6a,7aa)]-4,6-méthano-1,3,2-benzodioxabor ole (ou acide isopropylboronique pinanediol ester) : composé XV. On agite pendant 48 heures 30 g d'acide (0,34 mole) préparé au a/ et 40 g de (+)-pinanediol (0,23 mole) dans 150 cm3 d'éther. On dilue le mélange réactionnel avec 150 cm3 d'éther et 100 cm3 d'eau puis on sépare la phase éthérée. On extrait la phase aqueuse à l'éther (3 x 50 cm3), on combine les phases organiques, on les sèche (sulfate de magnésium) et on les concentre. On purifie l'huile résultante par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange éther de pétrole/acétate d'éthyle (9/1). On purifie encore l'huile obtenue par distillation sous vide et on recueille 28 g de produit désiré avec un point d'ébullition de 64-68eC sous 0,3 Torr (rendement 45 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 4,25 (1H, dd, méthine) ; 2,4-1,7 (6H, m, méthylène et méthine) ; 1,35 (3H, s, méthyle) ; 1,25 (3H, s, méthyle) ; 1,0 (7H, s, méthyle et méthine) ; 0,8 (3H, s, méthyle). [Ce composé a été décrit par C.A. Kettner et al., J. Biol. Chem., 1984, 259, 151061. c/ Préparation du 2-( 1-chloro-2-méthyipropyl )-hexahydro- 3a,5,5-triméthyl-[3a5-[2(1S),3aa,4a,6a,7aa]-4,6-méthano-1,3,2-b enzodioxaboroie : composé XVI. On agite à -105 C sous atmosphère d'azote, 200 cm3 de tétrahydrofuranne et 10,6 g de dichlorométhane (0,124 mole). On introduit à l'aide d'une seringue, à -105 C en 40 minutes, 46 cm3 de butyllithium 1,6M dans l'hexane (0,084 mole). On agite ce mélange pendant 15 minutes puis on introduit lentement, à l'aide d'une seringue, un mélange de 15 g de composé XV (0,0675 mole) obtenu au b/ dans 60 cm3 de tétrahydrofuranne, en maintenant la température à -105"C. On agite le mélange réactionnel pendant 30 minutes puis on introduit à -1050C en 20 minute, à l'aide d'une seringue, 40,5 cm3 de chlorure de zinc 1M dans l'éther éthylique (0,0405 mole). On laisse la température remonter à la température ambiante et on agite encore pendant 16 heures. On élimine le solvant sous pression réduite et on reprend l'huile résultante dans 500 cm3 d'éther. On lave l'extrait éthéré avec une solution aqueuse saturée de chlorure d'ammonium (100 cm3) et on sépare la phase aqueuse. On l'extrait à l'éther (2 x 100 cm3), on sèche (sulfate de magnésium) les solutions éthérées réunies et on les concentre. On distille sous vide l'huile résultante et on obtient 26,9 g de composé XVI désiré dans la fraction principale (rendement 88 %) avec un point d'ébullition de 74-108"C sous 0,2 Torr. RMN-1H (CDCl3, ppm) 4,35 (1H, d, O-CH-ester pinanediol) ; 3,32 (1H, d, CHCl) ; 2,45-1,9 (7H, m, méthylène méthine ester de pinanediol) ; 1,35 (3H, s, méthyle) ; 1,25 (3H, s, méthyle) ; 1,0 (6H, dd, CH3isopropyle) 0,8 (3H, s, méthyle). d/ Préparation de l'hexahydro-3a,5,5-triméthyl-a-(1- méthyléthyl)-N,N-bis(triméthylsilyl)-[3a5-[2(îR),3aa,4a,6a,7aaJ -4,6-méthano-1,3,2-benzodioxaborole-2-méthaneamine : composé XVII On agite à -72 c sous atmosphère d'azote, 24,3 cm3 d'hexaméthyldisiiazanne (0,115 mole) et 120 cm3 de tétrahydrofuranne. On y ajoute progressivement 61 cm3 de n.butyllithium 1,6M dans i'hexane (0,0974 mole) entre -72 C et -70 C en 40 minutes. On laisse la température remonter à 0 C pendant 3 heures et on refroidit à nouveau le mélange réactionnel à -72 C. On y introduit lentement en 30 minutes à -72 C, un mélange de 24 g du composé XVI (0,0886 mole) obtenu au c/, dans 100 cm3 de tétrahydrofuranne.On porte alors la température à 20 C et on agite pendant 20 heures puis on concentre. On traite l'huile résultante à l'éther (250 cm3) et à l'eau (100 cm3). On sépare la phase organique et on extrait la phase aqueuse à l'éther éthylique (2 x 100 cm3) puis on réunit les solutions éthérées, on les sèche (sulfate de sodium) et on les concentre. On distille sous vide l'huile résultante (en éliminant la tête) et on obtient 32 g de composé XVII (rendement 91 %) avec un point d'ébullition de 120-155eC sous 0,2 Torr. RMN-1H (CDCl3, ppm) : 4,25 (1H, d, O-CH ester de pinanediol) ; 2,4-1,7 (7H, m, méthylène et méthine) ; 1,35 (3H, s, méthyle) ; 1,25 (3H, s, méthyle) ; 1,15 (1H, d, méthine) 0,9 (6H, dd, CH3isopropyle) ; 0,8 (3H, s, méthyle). e/ Préparation de l'hexahydro-3a,5,5-triméthyl-a-(1- méthyiéthyl)-[3a5-[2(îR),3aa,4a,6a,7aaJ-4,6-méthano-1,3,2-benzo dioxaborole-2-méthaneamine, trifluoroacétate (ou trifluoroacétate de borovaline pinanediol ester) composé XVIII On agite à 0 C sous atmosphère d'azote, 1 g (0,0258 mole) du produit obtenu au d/ dans 10 cm3 de pentane. On y introduit lentement 0,584 cm3 d'acide trifluoroacétique (0,0758 mole) et on agite ce mélange pendant une heure à 0 C. Après concentration sous pression réduite puis aspiration sous un vide poussé pendant 48 heures, on obtient le composé XVIII avec un rendement quantitatif, sous la forme d'un solide blanc. RMN-1H (DMSO-d6, ppm) : 7,7 (2H, s large, NH2) ; 4,3 (1H, d, O-CH) ; 2,8 (1H, m, a-CH) ; 2,4-1,8 (7H, m, méthine et méthyle) ; 1,35 (3H, s, méthyle) ; 1,25 (3H, s, méthyle) ; 1,0 (6H, dd, méthyle) ; 0,8 (3H, s, méthyle). [a1D23 + 25" (c 1,0, CHCl3) f/ Préparation de la N-(tert.butoxycarbonyl)-L-alanyl- L-proline : composé XIX On dissout dans 30 cm3 de NaOH aqueux 0,5M et 30 cm3 de dioxanne, 3 g de L-alanyl-L-proline sous forme d'hydrate (0,0147 mole) et on refroidit le mélange à 0 C sous agitation. On y introduit à 0 C à l'aide d'une seringue, 3,53 g de dicarbonate de di-tert.butyle (0,0162 mole). On agite le mélange réactionnel à 0 C pendant 30 minutes puis à 200C pendant une heure. On ajoute 30 cm3 d'acétate d'éthyle et on refroidit le ménage à 0 C. On le traite alors avec KHSO4 aqueux dilué jusqu'à atteindre pH = 2 et il se forme un précipité. On le filtre, on le lave à l'éther et on le sèche sous vide. On obtient 3,17 g de produit désiré. RMN (DMSO-d6, ppm) : 6,9 (1H, d, NH) ; 4,2 (2H, m, ,,-CH alanine et proline) ; 3,5 (2H, m, méthylène) ; 2,1 (1H, m, CH2proline) ; 1,9 (3H, m, CH2proline) ; 1,3 (9H, s, méthyle) 1,1 (3H, d, méthyle). [Ce composé a été décrit notamment par E. Wuensch et al., Int. J. Pept. Protein Res., 1988, 32, 3683. g/ Préparation de la N-(tert.butoxycarbonyl)-L-alanyl L-prolyl-L-borovaline pinanediol ester : composé XX On dissout dans 30 cm3 de tétrahydrofuranne agité sous azote, 3,17 g du composé obtenu au f/ et on refroidit à -20 C. On y introduit à -20 C, 2,27 g de N-éthylmorpholine (0,0190 mole) puis 1,59 g de chioroformiate d'isobutyle (0,0116 mole) et il se forme un précipité. On agite le mélange réactionnel à -20 C pendant 30 minutes puis on introduit un mélange de 4,05 g de composé XVIII sous forme de trifluoroacétate (0,0110 mole) tel qu'obtenu au e/ dans 20 cm3 de tétrahydrofuranne. On agite le mélange à -20"C pendant 30 minutes puis on le laisse réchauffer à 20"C et on l'y maintient pendant 30 minutes. On ajoute alors 30 cm3 d'eau et on extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 50 cm3). On sèche les phases organiques réunies et on les concentre. On purifie l'huile résultante par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange chloroforme/méthanol (9/1).Par sèchage sous vide de l'huile résultante, on obtient 3,32 g de composé désiré (rendement 57 %) sous forme d'un solide blanc. RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,0 (1H, d, NH) ; 5,4 (1H, d, NH) 4,65 (1H, d, a-CH) ; 4,45 (1H, t, a-CH) ; 4,30 (1H, d, O-CH) 3,5 (2H, m, méthine) ; 3,1 (1H, t, a-CHborovaline) ; 2,5-1,5 (11H, m, méthine et méthylène proline et pinane) ; 1,4 (9H, s, méthyle et tert.butyle) ; 1,35 (3H, s, méthyle) ; 1,3 (3H, dd, méthyle alanine) ; 0,9 (6H, dd, méthyle) ; 0,75 (3H, s, méthyle). h/ Préparation du composé en titre sous forme de trifluoroacétate On dissout dans 2 cm3 de dichlorométhane, 0,5 g du composé obtenu au g/ (0,000962 mole) et on refroidit le mélange à oec sous azote. On y introduit, à 0 C sous azote, 3,7 g d'acide trifluoroacétique (0,0324 mole) et on agite le mélange pendant 30 minutes. On élimine l'acide en excès sous pression réduite puis sous vide. On purifie l'huile résultante par CLHP préparative sur une colonne Kromasil équipée d'un détecteur à 215 nm en éluant avec une mélange CF3COOH aqueux 0,1 %/CF3COOH méthanolique 0,1 % 3/7 et on obtient un solide incolor qui présente un temps de rétention de 9,7 minutes. P.F. = 124-125"C IR (KBr, cm-1) : 3475 (NH2), 1671 (C=O amide), 1614 (C=O amide). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,9 (1H, s, NH) ; 4,5 (s large, NH2 et a-CH alanine) ; 4,2 (1H, d, B-O-H) ; 3,95 (1H, m, a-CH proline) ; 3,45 (2H, m, CH2 proline) ; 2,4-1,6 (11H, m, méthylène et méthine) ; 1,4 (3H, d, CH3 alanine) ; 1,3 (3H, s, méthyle) ; 1,2 (4H, s, méthyle et méthine) ; 0,8 (6H, dd, méthyle) ; 0,7 (3H, s, méthyle). Analyse élémentaire : C22H38BN304.2CF3COOH Trouvé : C = 47,8 % ; H = 6,50 % ; N = 6,31 % Calculé : C = 48,2 % ; H = 6,23 % ; N = 6,49 % Exemple 11 : Préparation du borohydrate de L-alanyl L-prolyl-difluoro-L-borovaline (UCL 1389-J) ; voie 6 R1 = CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = On refroidit à -50 c, une solution de 0,20 g de BCl3 1M dans CH2Cl2 (0,000384 mole). On y ajoute à l'aide d'une seringue sous atmosphère d'azote et agitation, une solution de 0,20 g du composé obtenu à l'exemple 11 (0,000384 mole) dans 1 cm3 de CH2Cl2. On agite ainsi ce mélange réactionnel pendant 15 minutes puis on poursuit l'agitation à 0 C pendant une heure. On y ajoute 1 cm3 d'eau puis 5 cm3 d'acétate d'éthyle. On sépare la phase aqueuse et on évapore à sec à 20 C. On dissout le solide blanc résultant dans 2 cm3 d'eau et 1 cm3 d'acétone et on traite par de l'acide fluorhydrique aqueux 0,5M (5 cm3) pendant 15 minutes. On élimine le solvant à 20"C sous vide poussé. On agite le solide résiduel dans du méthanol et on élimine par filtration le résidu insoluble puis on fait évaporer le filtrat. On obtient un solide blanc que l'on cristallise dans un mélange acétone/eau/éther. On obtient 0,55 g de composé désiré sous forme de borohydrate. P.F. = 207-208"C IR (KBr, cm-l) : 3439 (NH), 3190 (NH3), 1652 (C=O amide), 1629 (C=O amide), 727 (B-F). RMN-1H (D20, ppm) : 4,8 (1H, m, a-CH proline) ; 4,5 (1H, m, a-CH alanine) ; 3,8 (2H, m, CH2 proline) ; 2,31 (1H, m, csCH valine) ; 2,0 (4H, m, CH2 proline) ; 1,7 (1H, m, CH valine) 1,55 (3H, d, CH3 alanine) ; 0,88 (6H, dd, méthyle). Analyse élémentaire : Cî2H22BF2N302.0,95 H3B03 Trouvé : C = 41,51 % ; H = 6,86 ; N = 11,72 % Calculé : C = 41,43 % ; H = 7,20 % ; N = 12,08 % Exemple 12 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)-2hexyl pyrrolidineamide (UCL 1419-H) ; voie 7 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = n.C6H13 a/ Préparation de l'ester méthylique de la N-( tert.butoxycarbonyl)-L-proline : : composé XXII On dissout dans du méthanol (100 ml), 12,5 g de proline (0,108 mole) et on refroidit à 5"C. On ajoute lentement 8,75 ml de chlorure de thionyle (0,12 mole) et on porte au reflux le mélange pendant 16 heures. Après élimination du solvant, on obtient 20,6 g d'une huile jaune.On dissout ensuite cette huile dans 200 ml de diméthylformamide et on ajoute 21,4 g de triéthylamine (0,2 mole). Il se forme un précipité. On agite le mélange pendant 30 minutes puis on le filtre et on ajoute par portions au filtrat, 21,8 g de dicarbonate de di-tert.butyle (0,108 mole). On dégaze lentement le mélange puis on le laisse une nuit. Après élimination du solvant, on obtient un solide huileux. Par chromatographie sur gel de silice en éluant avec de l'acétate d'éthyle, on obtient 17,25 g d'ester désiré (rendement 96,9 %). Spectre de masse : m/e = 229 (M+) RMN-1H (ppm) : 4,0-4,18 (1H, m, NCHCO) ; 3,65 (3H, s, CH30) ; 3,28-3,55 (2H, m, CH2 cycle) ; 1,77-2,16 (4H, m, 2 x CH2 cycle) ; 1,24-1,39 (9H, m, tert.C4HgO). b/ Préparation du N-(tert.butoxycarbonyl)-L-prolinal composé XXIII On dissout, sous argon, dans du toluène, sec, distillé (300ml), 15 g (0,065 mole) de l'ester préparé au a/ et on refroidit à -78 C. On ajoute en 45 minutes, 159 ml d'une solution M d'hydrure de diisobutylaluminium dans l'hexane (0,159 mole). Après 30 minutes à -60"C, on ajoute du méthanol (10 ml) et on verse le mélange réactionnel dans une solution M de tartrate de sodium potassium (250ml) puis on agite à la température ambiante pendant 2 heures et on laisse reposer une nuit. On sépare les phases et on extrait la phase aqueuse à l'éther (2 x 200 ml). On sèche (Na2SO4) les phases organiques réunies et on élimine le solvant. On obtient 14,71 g d'une huile noire. Spectre de masse : m/e = 199 (M+) RMN-1H (ppm) : 9,4-9,56 (1H, m, CHO) ; 3,76-4,20 (1H, m, NCHCO) ; 3,22-3,66 (2H, m, CH2 cycle) ; 1,58-2,16 (4H, m, 2 x CH2 cycle) ; 1,30-1,52 (9H, m, tert.C4HgO). c/ Préparation de la N-(trt.butoxycarbonyl)-2-(l-hexènyl) pyrrolidine : composé XXIV On met en suspension, sous argon, 21,89 g (0,053 mole) de bromure de pentyltriphénylphosphonium (préparé selon la méthode de Jaenicke et al., Liebigs Annalen der Chemie, 1973 : 1259) dans 260 ml de tétrahydrofuranne (sec, distillé), et on refroidit à -78 C. On ajoute 40 ml d'une solution de butyllithium 1,6M et le mélange devient orange foncé. On ajoute alors, en 5 minutes, 13 g (0,057 mole) du composé préparé au bl en solution dans 30 ml de tétrahydrofuranne (sec, distillé). On laisse le mélange se réchauffer à la température ambiante et on le laisse une nuit à cette température.On ajoute ensuite 250 ml de brine et il se forme un précipité blanc. On sépare les phases et on extrait la phase aqueuse à l'éther de pétrole (2 x 250 ml). On sèche (Na2S04) les phases organiques réunies et on élimine le solvant. Par une nouvelle addition d'éther de pétrole, un solide précipite que l'on élimine par filtration puis on concentre le filtrait. On obtient 3,5 g d'une huile claire par chromatographie sur colonne sur gel de silice en éluant avec un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole 1/9. On procède à une chromatographie supplémentaire en utilisant comme éluant un mélange acétate d'éthyle/pétrole (1:19) et on obtient 2,63 g de produit désir. Spectre de masse : m/e = 253 (M+) RMN-1H (400 MHz, ppm) : 5,29-5,31 (2H, m large, -CH=CH-) 4,47 (1H, s large, N-CH-CH=CH-) ; 3,36-3,39 (2H, m large, CH2 cycle) ; 1,56-2,11 (6H, m, 2 x CH2 cycle, CH2 allylique) 1,27-1,46 (14H, m, tert.C4HgO, 2 x CH2 chaîne) ; 0,86-0,90 (3H, m, CH3). d/ Préparation de la 2-(1-hexènyl)pyrrolidine composé XXV On refroidit, dans un bain glace/sel, 20 ml d'acide trifluoroacétique et on ajoute 2,3 g (9,09 mmoles) du composé préparé au c/. On poursuit l'agitation et le refroidissement pendant une heure puis on élimine l'acide et on partage le résidu entre 100 ml d'une solution de soude M et 100 ml d'éther. On sépare les phases et on extrait la phase aqueuse à l'éther (2 x 100 ml). On combine et on sèche (Na2SO4) les fractions obtenues et on élimine le solvant. On obtient 1,29 g de produit désiré (rendement 92,8 96). Spectre de masse : m/e = 154 (M+ + 1) RMN-1H (400 MHz, ppm) : 5,37-5,55 (2H, m, -CH=CH-) ; 3,733,79 (1H, m, N-CH-CH=CH-) ; 2,81-2,89 (1H, m, -CH(H)-N cycle) 2,61-2,67 (1H, m, -CH(H)-N cycle) 1,95-2,12 (3H, m, CH2 allylique, CH(H) cycle) ; 1,66-1,73 (1H, m, CH(H) cycle) 1,37-1,56 (2H, m, CH2 cycle) ; 1,20-1,34 (4H, m, 2 x CH2) 0,84-0,92 (3H, m, CH3). el Préparation de la 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)2(S)-aminobutyryl)-2-(1-hexenyl)pyrrolidineamide : composé XXVI On dissout dans du tétrahydrofuranne (sec, distillé), 795 mg (3,92 mmoles) d'acide N-(tert.butoxycarbonyl)- 2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 2 a/, et on refroidit à 0 C. On ajoute 450 mg (3,92 mmoles) de N-éthylmorpholine et 3,92 mmoles de chloroformiate d'isobutyle et on agite le mélange refroidit pendant une heure et demi. On ajoute alors 600 mg (3,92 mmoles) du composé préparé au d/ et on laisse le mélange à la température ambiante pendant une nuit. On élimine le solvant et on dissout le résidu dans 100 ml d'eau puis on extrait à l'acétate d'éthyle. On combine et on sèche (Na2S04) les extraits et on élimine le solvant.On obtient 1,62 q d'une huile noire que l'on purifie par chromatographie sur colonne sur gel de silice en éluant avec un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole 3/10. On obtient 510 mg de produit désiré (rendement 38,5 %). Spectre de masse : m/e = 339 (M+ + 1) RMN-1H (ppm) : 5,04-5,54 (2H, m, CH vinylique) ; 4,26-4,42 (1H, m, N-CH-CH=CH-) ; 3,32-3,74 (2H, m, CH2-N cycle) ; 1,12- 1,26 (21H, m, tert.C4HgO, 6 x CH2) ; 0,74-0,98 (6H, m, 2 x CH3). f/ Préparation de la 1-(N-(tert.butoxycarbonyl) 2(S)-aminobutyryl)-2-hexylpyrrolidineamide : composé XXVII On dissout dans 100 ml de méthanol, 400 mg (1,18 mmole) du composé obtenu au e/ et on ajoute 200 mg de palladium sur charbon à 10 % On hydrogène le mélange pendant 2 heures. Une chromatographie a montré qu'il ne restait plus de produit de départ et qu'un seul produit était forme. On élimine par filtration le catalyseur puis on élimine le solvant. On obtient 310 mg d'une huile (rendement 77,1 %). Spectre de masse : m/e = 341 (M+ +1). gI Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On refroidit à 0 C, 10 ml d'acide trifluoroacétique et on ajoute 300 mg (0,882 mmole) du composé obtenu au f/. On maintient le mélange à 00C pendant une heure. On élimine l'acide et on dissout le résidu dans 100 ml d'une solution de KOH 0,SMpuis on l'extrait à l'acétate d'éthyle (2 x 100 ml). On réunit et on sèche (Na2SO4) les extraits puis on élimine le solvant. On obtient 220 mg d'un solide que l'on dissout dans de l'éthanol et que l'on traite par 82 mg (0,916 mmole) d'acide oxalique et de l'éther. Par refroidissement, on obtient un gel inconsistant qui conduit à 77 mg d' un solide par pompage (redement 26,9 %). CLHP (Colonne : Kromasil C-18 éluant méthanol/eau/acide trifluoroacétique 40/40/0,1) : pureté = 99,4 % Analyse élémentaire :C14H28N20.0,7(COOH)2.O,7H20.0,2C2HSOH Trouvé : C = 58,84 % ; H = 10,13 % ; N = 8,43 % Calculé : C = 58,81 % ; H = 9,99 % ;N = 8,47 % RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6, ppm) : 3,90-4,05 (2H, m, CH2pyrrolidine) ; 3,55-3,85 (1H, m, NCHCO) ; 3,3-3,45 (1H, m, NCH pyrrolidine) ; 1,35-1,9 (7H, m, 2 x CH2pyrrolidine, CH2butyryle, N-CH-CH(H)-CsH1l) ; 1,1-1,35 (9H, m, 4 x CH2, N CH-CH(H)-CsH1l) ; 0,8-0,95 (6H, m, 2 x CH3). Exemple 13 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl) 2-[(1-oxo)hexyl)pyrrolidineamide (UCL 1420-H) ; voie 8 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-R7 ; R7 = n.CsH1l al Préparation de la N-benzyl-L-proline On met en suspension dans de l'éthanol (200 ml), 11,5 g (99,8 mmoles) de L-proline et on traite par 13,8 g (99,8 mmoles) de carbonate de potassium, de l'iodure de potassium (en quantité catalytique) et 13,9 g (99,8 mmoles) de chlorure de benzoyle. On porte le mélange au reflux et on le maintient ainsi pendant 3 heures. On l'agite ensuite à la température ambiante pendant une nuit. On élimine par filtration le solide formé et on concentre le filtrat.On dissout le résidu dans de l'eau (200 ml) et on ajuste le pH à 7 avec de l'acide chlorhydriqu. Après élimination de l'eau, on triture le résidu dans de l'acétone chaud. Le solide obtenu (rendement 65 %) est suffisamment pur pour étire utilisé dans l'étape suivante. P.F. = 1500C (décomposé). b/ Préparation de la 1-[2-(N-benzyl)pyrrolidinyli- 1-hexanone : composé XXVIII On met en suspension dans de l'éther sec (400 ml), sous atmosphère d'azote, 20 g (97 mmoles) de N-(benzyl)-L-proline obtenue au a/ et on refroidit dans de la glace. On ajoute en 10 minutes, 120 ml de pentyllithium 1,66M fraîchement préparé puis on réchauffe le mélange à la température ambiante et on l'agite pendant une nuit. On le réfroidit ensuite dans de la glace et on ajoute de l'acide sulfurique concentré. On rend le mélange basique avec du bicarbonate de sodium puis on l'extrait au chlorure de méthylène. Après séchage (Na2S04) des extraits et élimination du solvant, on obtient une huile. RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,2 (5H, m, Ph) ; 3,8 (1H, d, PhCH(H)) ; 3,3 (1H, d, PhCH(H)) ; 3,0 (2H, m, NCH2 cycle) 2,1-2,5 (4H, m, NCH2CH2CH2 cycle) ; 2,0 (1H, m, NCHCO) ; 1,01,9 (8H, m, 4 x CH2 chaîne) ; 0,9 (3H, m, CH3 ). Spectre de masse : m/e = 260 (M+ + 1). c/ Préparation de la 1-(2-pyrrolidinyl)-1-hexanone composé XXIX On dissout dans du méthanol (50 ml), 0,342 g (1,32 mmole) du composé obtenu au b/ et on ajoute du palladium sur charbon (10 %). On hydrogène ce mélange sous 40 psi pendant 5 heures. On élimine par filtration le catalyseur et on fait évaporer le solvant, ce qui conduit au produit désiré. RMN-1H (CDCl3, ppm) 3,2-3,5 (2H, m, NCH2) ; 1,0-2,1 (12H, m, 6 x CH2) ; 0,8 (3H, m, CH3). Spectre de masse : m/e = 170 (M+ + 1). d/ Préparation de la 1-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-amino- .butyryl)-2-L( 1-oxo)hexyl)pyrrolidineamide : composé XXX On dissout dans du tétrahydrofuranne sec (20 ml), sous azote, 0,313 g (1,3 mmole) d'acide N-benzyloxycarbonyl 2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 3 a/ et on refroidit dans de la glace. On ajoute 0,15 g (1,3 mmole) de N-éthylmorpholine et 0,18 g (1,3 mmole) de chloroformiate d'isobutyle. Après 30 minutes d'agitation, on ajoute le composé obtenu au c/ et on agite encore le mélange réactionnel pendant une nuit. On le dilue ensuite avec du chlorure de méthylène, on le lave avec une solution d'acide citrique (5 %, 3 x 100 ml), puis on sèche et on élimine le solvant, ce qui conduit à une huile (rendement 80 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,25 (5H, m, Ph) ; 5,20 (1H, m, NCHCO) ; 5,10 (2H, s, PhCH2) 4,30 (1H, m, NCHCO) ; 4,0 (2H, m, NCH2 cycle) ; 0,9-2,1 (20H, m, 7 x CH2, 2 x CH3). Spectre de masse : m/e = 389 (M+ + 1). e/ Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On dissout dans du méthanol 0,3 g (0,77 mmole) du composé obtenu au d/ et on ajoute 0,03 g de palladium sur charbon (10 %, humidité 50 %). On hydrogène le mélange sous 40 psi pendant 4 heures puis on élimine par filtration le catalyseur et on élimine le solvant. On obtient une huile que l'on traite par l'acide oxalique dans de l'éthanol, puis par de l'éther. On obtient le produit désiré sous la forme d'un solide blanc (rendement 80 %).P.F. = 129-130 C Analyse élémentaire : C14H26N2O2.(COOH)2.2,75H2O Trouvé : C = 48,61 % ; H = 8,20 % ; N = 6,82 % Calculé : C = 48,78 % ; H = 8,57 % ; N = 7,11 % RMN-1H (CD30D, ppm) : 4,0 (2H, m, NCH2) ; 3,75 (1H, m, NCHCO) ; 3,25 (1H, m, NCHCO) ; 1,95 (6H, m, COCH2, NCH2CH2CH2); 1,3 (2H, m, CH2butyryle) ; 0,9-1,2 (14H, m, CH3(CH2)3, CH3butyryle). Spectre de masse : m/e = 255 (M+ + 1). Exemple 14 : Préparation de la 1-(2-amino-2-méthyl- propionyl)-L-proline n.butylamide (UCL 1424-A) ; voie 9 R1 = CH3 ; R2 = CH3 ; n = O ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4Hg a/ Préparation de l'acide N-(tert.butoxycarbonyl)-2-amino- 2-méthylpropionique : composé IX On dissout dans du dioxanne aqueux à 50 % (100 ml) contenant de la triéthylamine (15 ml), 4,2 g (0,041 mole) d'acide 2-amino-2-méthylpropionique. On refroidit le mélange dans la glace et on le traite par 6,4 g (0,026 mole) de 2-(tert.butoxycarbonyl)-2-phénylacétonitrile. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 60 heures puis on élimine le solvant.On traite le résidu par de l'eau (60 ml) et de l'acétate d'éthyle (40 ml) et on rend le milieu basique à l'aide d'une solution d'hydroxide de sodium 4M. On sépare les phases et on lave la phase aqueuse à l'acétate d'éthyle (75 ml). On l'acidifie alors avec une solution d'acide citrique à 5 % puis on l'extrait à l'acétate d'éthyle (200 ml). On sèche (Na2SO4) l'extrait et on élimine le solvant. On obtient 3,9 g de produit désiré (rendement 74 %). P.F. = 117-119 C RMN-1H (CDC13, ppm) : 1,51 (6H, s, 2 x CH3) ; 1,42 (9H, s, tert.C4HgO). Spectre de masse (FAB) : m/e = 204 (M+ + 1). bl Préparation de la N-(tert.butoxycarbonyl)-L-proline n.butylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne sec (30 ml), 5 g (0,023 mole) de N-(tert.butoxycarbonyl)-L-proline. On refroidit à -10 C et on ajoute 3 ml (0,023 mole) de chloroformiate d'isobutyle et 2,9 ml (0,023 mole) de N-éthylmorpholine. On agite le mélange à -10 C pendant 20 minutes puis on ajoute 5 ml (0,051 mole) de n.butylamine. On agite pendant une heure à 00C puis pendant 18 heures à la température ambiante.On élimine le solvant et on dissout le résidu obtenu dans de l'acétate d'éthyle (200 ml). On lave la solution avec de l'eau (100 ml), de l'acide citrique 5 % (40 ml), une solution de bicarbonate de potassium à 10 % (40 mi) et de la brine (30 mi). On sèche (Na2SO4) et on élimine le solvant, ce qui conduit à une huile. Après cristallisation dans l'hexane, on obtient 3,53 g de produit désiré (rendement 56 %). P.F. = 65-66 C RMN-1H (CDCl3, ppm) : 4,23 (1H, s large, NCHCO) ; 3,40 (1H, s large, NH) ; 3,22 (4H, s large, 2 x NCH2) ; 1,65 et 1,85 (4H, m, NCH2CH2CH2proline) ; 1,42 (9H, s, tert.butoxy carbonyle); 1,33 (4H, m, NHCH2CH2CH2 butyle) ; 0,89 (3H, t, CH3). Spectre de masse (EI) : m/e = 270 (M+). c/ Préparation de la L-proline n.butylamide : composé V On dissout dans du dichlorométhane (10 ml), 1 g (3,7 mmoles) du composé préparé au b/. On refroidit dans la glace en agitant et on ajoute de l'acide trifluoroacétique (5 ml). On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 3 heures puis on élimine le solvant et on dissout l'huile résiduelle dans une solution de carbonate de potassium à 10 % (20 ml). On extrait à l'acétate d'éthyle (3 x 25 ml) et on sèche (Na2SO4) les phases organiques réunies. Après élimination du solvant, on obtient 0,62 g d'une huile (rendement 100 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) 7,93 (1H, s, NH) ; 4,45 (1H, m, NCHCO) ; 3,23-3,25 (4H, m, 2 x NCH2) ; 1,96 et 2,36 (4H, m, NCH2CH2CH2proline) ; 1,33 et 1,47 (4H, m, NHCH2CH2CH2butyle) 0,89 (3H, t, CH3). Spectre de masse (EI) : m/e = 170 (M+). d/ Préparation de la 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)-2-amino2-méthylpropionyl)-L-proline n.butylamide : composé IV On dissout dans du dichlorométhane (15 ml), 0,6 g (3,5 mmoles) de L-proline n.butylamide préparé au c/. On refroidit à 0 C et on traite avec 0,7 g (3,5 mmoles) d'acide obtenu au a/ et 0,7 g (3,5 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant une nuit puis on filtre et on élimine le solvant. On dissout le résidu obtenu dans du dichlorométhane (50 ml) et on le lave avec une solution d'acide citrique à 5 % (30 ml), de l'eau (30 ml) et une solution de bicarbonate de potassium à 10 % (30 ml). On réalise alors un décoloration sur charbon puis on sèche (Na2SO4) et on élimine le solvant. On obtient 0,28 g (rendement 22 %) d'un solide blanc. P.F. = 198-203"C RMN-1H (CDCl3, ppm) : 4,64 (1H, m, NCHCO) ; 3,61 (2H, m, NCH2butyle) ; 3,20 (2H, m, NCH2proline) ; 2,05 (2H, m, CH2 proline) ; 1,86 (2H, m, CH2 proline) ; 1,64 (3H, s, CH3isobutyle) ; 1,52 (3H, s, CH3isobutyle) ; 1,42 (9H, s, tert.CHO) ; 1,37 (4H, NCH2CH2CH2 butyle) ; 0,86 (3H, t, CH3 butyle). Spectre de masse (EI) : m/e = 356 (M+ + 1). e/ Préparation du composé en titre sous la forme de chlorhydrate On ajoute de l'acide chlorhydrique dans de l'acide acétique glacial (M, 5 ml) à 24 mg (0,06 mmole) du composé préparé au d/. On agite le mélange pendant 2 heures puis on fait évaporer à sec. On obtient 17 mg (rendement 89 %) de produit désiré. P.F. = 155-156"C RMN-1H (DMSO-d6, ppm) : 4,31 (1H, q, NCHCO) ; 3,63 (2H, t, NCH2 proline) ; 3,00 (2H, m, NCH2 butyle) ; 1,78 et 1,98 (4H, m, NCH2CH2CH2 proline) ; 1,51 (6H, s, C(CH3)2) ; 1,25 et 1,35 (4H, m, NCH2CH2CH2 butyle) ; 0,85 (3H, t, CH3). Spectre de masse (EI) : m/e = 255 (M+). Analyse élémentaire : C13H25N302.0,8HC1.0,9H20.0,2(C2Hg)20 Trouvé : C = 52,40 % ; H = 9,42 * ; N = 13,41 % Calculé : C = 52,53 % ; H = 9,45 % ; N = 13,32 % Exemple 15 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)- (4(S)-fluoro)-L-proline n.butylamide (UCL 1395-F) ; voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -CH2-CH(cis.F)- ;R4 = CO-NH-R5 R5 = n.C4Hg a/ Préparation de l'ester méthylique de la N-benzyloxycarbonyl-4(S)-fluoro-L-proline On dissout, sous azote, dans du dichlorométhane (90 ml), 4,83 g (17,29 mmoles) d'ester méthylique de la N-benzyloxy carbonyl-4(R)-hydroxy-L-proline (commercialisé par ALDRICH, SIGMA) et on refroidit à -70 C puis on traite ce mélange goutte à goutte avec 3 ml (22,71 mmoles) de trifluorure de diéthylaminosulfure (DAST). On réchauffe en une heure le mélange résultant et on l'agite pendant 18 heures. On verse alors le mélange réactionnel dans un mélange eau-glace contenant du NaHCO3, on l'extrait au dichlorométhane, on sèche (MgSO4) l'extrait et on le concentre sous pression réduite.On purifie l'huile jaune obtenue par chromatographie sur silice en éluant avec un mélange éther de pétrole/acétate d'éthyle 40/60 puis 50/50. Après évaporation sous vide, on obtient 3,44 g d'une huile (rendement 70,5 %) ; Rf = 0,5 (éther de pétrole/acétate d'éthyle 50/50) RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,40-7,27 (5H, m, ArH) ; 5,22 (1H, dt, -CHF-, HF = 52,4 Hz, J = 3,7 Hz) ; 5,14-5,06 (2H, m, CH2benzyle) ; 4,58 (dd, H, J = 30,1 Hz, J = 9,5 Hz) ; 3,963,62 (2H, m, -CH2N-) ; 3,64, 3,75 (3H, OCH3) ; 2,59-2,47 (1H, m, -CH2) ; 2,47-2,24 (1H, m, -CH2-). Spectre de masse (El) : m/e {% intensité) = 281 (M+, 1,36) ; 261 (M±HF, 0 01) ; 91 (Ph-CH2+, 100). b/ Préparation de la N-benzyloxycarbonyl-4(S)-fluoro L-proline On dissout dans du méthanol (30 ml), 3,29 g (11,70 mmoles) du composé préparé au a/ et on ajoute goutte à goutte, à -50C, 7 ml (14 mmoles) de soude 2M. On laisse alors le mélange à la température ambiante pendant 17 heures. Après addition d'eau (100 ml), on élimine sous vide le méthanol et on lave la solution aqueuse 2 fois avec du dichlorométhane. On acidifie alors cette solution à pH = 3 avec de l'acide citrique (20 %) puis on extrait avec du dichlorométhane (3 x 50 cm3). On sèche (MgSO4) les extraits, on filtre et on élimine le solvant sous vide (en ajoutant de l'éther à la fin). On obtient ainsi 2,91 g d'un solide blanc (rendement 93 %). P.F. = 123-124 C RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) 7,38-7,26 (5H, m, ArH) 5,32-5,15 (3H, m, -CHF- RF = 52,16 Hz, CH2 benzyle) ; 4,61 (1H, dd, &alpha;H J = 27,6 Hz, J = 9,6 Hz) ; 3,98-3,60 (2H, m, CH2N); 2,78-2,54 (1H, m, -CH2-) ; 2,52-2,24 (1H, m, -CH2-). CCM (acétate d'éthyle) : Rf = 0,04 Spectre de masse (EI) : m/e (% intensité) = 267 (M+, 1,82) ; 247 (M±HF, 0,02) ; 91 (PhCH2+, 100). c/ Préparation de la N-benzyloxycarbonyl-4(S)fluoro-L-proline n.butylamide On dissout, sous argon, dans du tétrahydrofuranne sec (40 ml), 1,40 g (5,24 mmoles) du composé obtenu au b/ et on ajoute 0,66 ml (5,24 mmoles) de 4-éthylmorpholine à 0 C puis 0,685 ml (5,24 mmoles) de chloroformiate d'isobutyle à -5 C. Un précipité blanc de chlorhydrate de 4-éthylmorpholine se forme. Après agitation pendant 20 minutes à -5 C, on ajoute 0,54 ml (5,46 mmoles) de n.butylamine et on agite le mélange réactionnel 40 minutes à 0 C puis une heure à la température ambiante. On élimine par filtration le solide, on lave avec du tétrahydrofuranne sec puis on fait évaporer sous vide la solution résultante. On traite alors le résidu incolor par 50 ml d'une solution d'acide citrique à 5 % et 120 ml d'acétate d'éthyle. Après avoir secouer rigoureusement, on sépare les phases, on lave la phase organique avec 50 ml de KHCO3 10 % puis avec 50 ml de brine.Après séchage (MgSO4) et élimination sous vide du solvant, on obtient 1,89 g d'un solide blanc qu'on lave à l'éther de pétrole et qu'on sèche sous vide sur P205. On obtient 1,50 g de produit désiré sous la forme d'un solide blanc. P.F. = 79-80"C CCM (acétate d'éthyle/éther de pétrole 50/50) : 0,5 RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 7,34 (5H, s large, ArH) 6,50-6,00 (1H, d large, -NH-) ; 5,21 (1H, dt, -CHF- HF = 51,9 Hz, J = 3,4 Hz) ; 5,20-5,00 (2H, m, CH2benzyle) ; 4,48 (1H, d, aH J = 1,4 Hz) ; 4,02-3,38 (2H, m, -CH2N proline) ; 3,32-3,02 (2H, m, -CH2-NH- NHbutyle) ; 2,90-2,52 (1H, m, -CH2- proline) 2,48-2,08 (1H, m, -CH2- proline) 1,54-1,16 (4H, m, -CH2 NHbutyle) ; 0,87 (3H, s large, CH3 NH butyle). d/ Préparation de la 4(S)-fluoro-L-proline n.butyiamide On dissout dans 40 ml de méthanol, 1,48 g (4,59 mmoles) du composé obtenu au c/ et on ajoute 0,56 g de Palladium sur charbon activé humide (t0 %). On hydrogène le mélange réactionnel sous 60 psi pendant 3 heures puis on filtre la solution et on la concentre sous vide. On obtient une huile qui cristallise après sèchage sous vide sur P205 pendant 18 heures, ce qui conduit à 0,76 g de produit désiré (rendement 88,5 %). P.F. = 30 C RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 7,53 (s large, 1H, -NH-) 5,16 (1H, dt, -CHF- J1 = 53,1 Hz, J2 = 3,7 HZ) ; 3,82 (1H, dd, &alpha;H, J1 = 10,3 Hz, J2 = 3,3 Hz) ; 3,40-3,10 (4H, m, -CH2-N- et -CO-N-CH2-) ; 2,48-2,20 (2H, m, -CH2- proline) ; 2,12 (1H, s large, -NH-) ; 1,42-1,52 (2H, m, -CH2- NHbutyle) ; 1,37-1,28 (2H, m, -CH2- NHbutyle) ; 0,91 (3H, t, J = 7,34 Hz, -CH3). e/ Préparation de la l-(N-(tert.butoxycarbonyl)- 2(S)-aminobutyryl)-(4(S)-fluoro)-L-proline n.butylamide On procède comme à l'étape c/ à partir de 0,81 g (3,98 mmoles) d'acide N-(tert.butoxycarbonyl)-2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 2 a/ et en utilisant le composé obtenu au d/ au lieu de la n.butylamine. Le produit brut obtenu présente deux tâches en CCM avec des Rf similaires. On sépare ces deux produits par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un gradient du mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole de 20/80 à 60/40. On obtient 0,74 g d'amide pur (second produit) qui cristallise après sèchage sur P205 sous vide pendant 5 jours (rendement 51 %). P.F. = 67-68 C (isomère trans : T et isomère cis : C) RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 7,52 (0,37 H, s large,-NH C) ; 6,55 (0,63H, s large, -NH- T) ; 5,31 (0,37H, dt, -CHF- T J1 = 52,3 Hz, J2 = 4,0 Hz) ; 5,23 (0,63H, dt, -CHF- C J1 = 50,1 Hz, J2 = 3,2 Hz) ; 5,19 (0,63H, d large, -NH- T J = 8,3 Hz) 5,19 (0,37H, d large, -NH- C J = 6,7 Hz) ; 4,76 (0,63H, d, aH T J = 9,5 Hz) ; 4,43 (0,37H, d, xH C, J = 9,2 Hz) ; 4,33 (0,63H, q, "'H T J1 = 8,5 Hz, J2 = 6,7 Hz) ; 4,09-3,76 (2,37H, m, -CH2 N-proline et H C) ; 3,46-2,85 (3H, m, -CO-N-CH2 et -CHaminobutyryle) ; 2,34-2,07 (1H, m, -CH2 aminobutyryle) 1,89-1,20 (15H, m, tert.C4Hg et -CH2- proline et NHbutyle) 1,00 (1,89H, t, CH3aminobutyryle T J = 7,3 Hz) ; 1,00 (1, 11H, t, CH3aminobutyryle C J = 7,5 Hz) ; 0,89 (3H, t, CH3 NHbutyle, J = 7,3 Hz). Spectre de masse (FAB) : trouvé : MH+ = 374 (11,7) ; 58 (100,0) ; calculé : M = 373 f/ Préparation du composé en titre sous forme de tri fluoroacétate On refroidit à 0 C une solution de CF3COOH/CH2C12 50/50 et on y ajoute 0,20 g (0,547 mmole) du composé préparé au e/. On agite à la température ambiante pendant une heure et 15 minutes puis on élimine l'acide et le solvant sous vide, ce qui conduit à une huile jaune. On ajoute ensuite 2 x 6 ml de CH2Cl2 et on fait évaporer sous vide pour éliminer l'acide en excès. On lave le produit brut résultant avec 3 x 20 ml de diéthyléther anhydre et on obtient un solide blanc qur l'on sèche pendant 48 heures à la température ambiante sous 0,25 mmHg. On obtient finalement 0,20 g de produit désiré (rendement 90 %). P.F. = 60-63"C (T isomère trans et C : isomère cis) RMN-1H (400 MHz, CD30D, ppm) : 5,34 (0,73H, dm, -CHF- T) 5,27 (0,27H, dm, -CHF- C) ; 4,65 (1H, dd, 'x-Haminobutyryle) 4,13 (0,73H, dd, a-Hproline T) ; 4,05-3,63 (2H, m, CH2-Nproline et 0,27H, -Hproline C) ; 3,28-3,08 (2H, m, -N-CH2- -NHbutyle); 2,68-2,25 (2H, m, -CH2aminobutyryle) ; 2,10-1,75 (2H, m, -CH2proline) ; 1,54-1,42 (2H, m, -CH2-CH2-CH3) ; 1,40-1,29 (2H, m, -CH2-CH2-CH3) ; 1,11 (2,19H, t, CH3aminobutyryle T) ; 1,01 (0,81H, t, CH3aminobutyryle C) ; 0,94 (0,81H, t, CH3 NHbutyle C) ; 0,92 (2,19H, t, CH3 NHbutyle T). CLHP (détecteur : 215 nm ; colonne : Kromasil C18 250 mm x 4,6 mm, 5 pm ; débit : 1,0 ml/mn ; éluant : A = H20 + 0,1 % TFA et B = CH30H + 0,1 % TFA, A/B = 70/30 ; phase mobile) : pic majoritaire = 99,9 % ; temps de rétention = 10,29 minutes. Spectre de masse (FAB) : MH+ trouvé = 274 (100 %) calculé = 273 IR (pastille de KBr, cm-1) : 3438 (m, amide) ; 3073 (m, NH3+) ; 1668 (s, C=O). Microanalyse : C13H2402N3F.1,1CF3COOH Trouvé : C = 45,90 % ; H = 6,30 % ; N = 10,48 9s Calculé : C = 45,78 % ; H = 6,34 % ; N = 10,54 % Exemple 16 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)- (4(S)-benzyl)-L-proline n.butylamide (UCL 1433-H) ; voie 4 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -CH2-CH(CH2Ph)- ; R4 = CO-NH-R5 R5 = n.CqHg a/ Préparation de l'ester méthylique de la N-benzyloxycarbonyl-4-céto-L-prol ine On dissout dans 300 ml d'acétone (qualité réactif), 5,0 g (17,90 mmoles) d'ester méthylique de la N-benzyloxycarbonyl4-hydroxy-L-proline (commercialisée par ALDRICH, SIGMA).On agite cette solution magnétiquement et on ajoute 15 ml d'acide chromique dans l'acide sulfurique approximativement 8N sur une période d'environ 3 minutes. On continue l'agitation pendant une heure puis on détruit l'excès d'oxydant par addition de 5 ml d'isopropanol en 20 minutes. On élimine le solvant puis on dissout le résidu dans de l'éther et on filtre sur fluorisil afin d'éliminer les sels de chrome. On purifie le produit brut obtenu après évaporation par chromatographie éclaire sur silice en éluant avec un gradient de mélange acétate d'éthyleîéther de pétrole (P.Eb. Rf = 0,85 (acétate d'éthyle) RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) 7,30 (5H, s large, ArH) 5,20-5,00 (2H, m, CH2benzyle) ; 4,85 (1H, t, -H) ; 3,95 (2H, s large, -CH2-Nproiine) ; 3,70-3,60 (3H, d, -OCH3) ; 3,05-2,80 (1H, m, -CH2proline) ; 3,65-3,50 (1H, m, CH2proline). Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) = 300 ((M + Na)+, 100,0) ; 278 (MH+, 13,0) ; 154 (43,5) ; 136 (12) ; 107 (12,5) ; 91 (100). b/ Préparation de l'ester méthylique de la N-benzyloxy carbonyl-4-benzylidène-L-proline On met en suspension dans 30 ml de tétrahydrofuranne sec, 3,68 g (9,46 mmoles) de chlorure de benzyltriphénylphosphonium et on ajoute ce mélange à une solution de 0,22 g (9,65 mmoles) d'hyrure de sodium (95 %) dans 20 ml de tétrahydrofuranne sec, sous azote. On ajoute ensuite 25 ml de DMSO sec et on chauffe le mélange à 70 c jusqu'à ce qu'il devienne homogène (4 heures). Après refroidissement de la solution à 50 C, on ajoute en 5 minutes, un mélange de 2,00 g (7,90 mmoles) de l'ester obtenu au al dans 10 ml de tétrahydrofuranne sec.On chauffe alors le mélange réactionnel à 70 C pendant 16 heures puis on le verse dans 200 ml d'eau/glace contenant 1,4 g de KHCO3. On ajoute ensuite 150 ml de dichlorométhane puis on sépare la phase organique et on extrait la phase aqueuse une fois avec 100 ml de dichlorométhane. Après sèchage (MgSO4) des phases organiques et évaporation sous vide, on purifie le produit brut obtenu par chromatographie éclaire sur silice en éluant avec un mélange acétate d'éthyleîéther de pétrole 15/85 puis 35/65. Après sèchage sous vide sur P205 pendant une nuit, on obtient 2,19 g d'une huile incolore (rendement 79 %). Rf = 0,90 (acétate d'éthyle) RMN-1H (400 MHz, CDC13, ppm) : 7,50-7,05 (10H, m, ArH) 6,53-6,13 (1H, m, H vinylique) ; 5,30-5,00 (2H, m, H benzyle) 4,73-4,30 (3H, m, cs-H et N-CH2proline) ; 3,80-3,50 (3H, dd, OCH3) 3 3,33-3,10 (1H, m, -CH2proiine) ; 3,05-2,67 (1H, m, -CH2proline) CLHP (colonne : gel de silice Kromasil 250 x 4,6 mm, Sum débit 1 ml/mn ; détecteur 254 nm ; éluant dichlorométhane) deux isomères (cis et trans) en proportion 44/56 ; temps de rétention : 9,28 minutes (44 %) et 10,42 minutes (56 *) pureté totale des deux isomères : 98,3 %. Spectre de masse (FAB, (matrice MNOBA + NaI) : m/e (% intensité) = 300 (MH+ + Na, 97) ; 278 (MH+, 13) ; 154 (44) ; 91 (C7H7+, 100). c/ Préparation de l'ester méthylique de la 4(S)-benzyl L-proline On ajoute 0,95 g de palladium sur charbon activé (humide à 10 %) à une solution de 2,10 g (5,97 mmoles) de l'ester obtenu au b/ dans 250 ml de méthanol et on hydrogène ce mélange réactionnel pendant 2 heures et 30 minutes sous 60 psi. Après filtration de la solution, concentration sous vide et sèchage sur P205 pendant une nuit, on obtient 0,889 g de produit désiré (rendement 67 %). Le spectre RMN montre la présence de deux diastéréoisomères dans un rapport ci/trans 90/10. (T = isomère trans et C = isomère cis) RMN-1H (400 MHz, ppm) : 7,32-7,12 (5H, m, ArH) ; 3,82 (1H, t, a-H, J = 8,0 Hz) ; 3,74 (3H, s, OCH3) 3,08-3,02 (1H, m, -CH2-Nproline) ; 2,80-2,73 (1H, m, -CH2N proline) ; 2,72-2,58 (2H, m, Hbenzyle) ; 1,60-1,70 (0,1H, m, PhCH2CH T) ; 1,50-1,59 (0,9H, m, PhCH2CH C). d/ Préparation de l'ester méthylique de la 1-(N-benzyloxycarhonyl-2(S)-aminobutyryl)-(4(S)-benzyl)-L-proline On ajoute à 0 C 0,66 g (4,01 mmoles) de 3-hydroxy1,2,3-benzotriazine-4(3H)-one et 0,83 g (4,01 mmoles) de dicyiohexyicarbodiimide (DCC) à une solution de 0,815 g (3,43 mmoles) d'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 3 a/ dans un mélange de 5 ml de diméthylformamide et 5 ml de chlorure de méthylène. Après une heure et 15 minutes, on ajoute un mélange de 0,88 g (4,01 mmoles) de l'ester obtenu au c/ dans 5 ml de CH2Cl2. On agite à 0 C pendant 15 minutes puis deux jours à la température ambiante. Après élimination sous vide du solvant, on reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle.On élimine par filtration la dicyclohexylurée, on lave le filtrat successivement avec NaRCO3 4 %, de l'acide citrique 10 % puis on fait évaporer sous vide. On purifie le produit brut ainsi obtenu par chromatographie éclaire sur silice en éluant avec un gradient du mélange acétate d'éthylel éther de pétrole 15/85 à 35/65. Après évaporation, on obtient 1,30 g d'une pâte jaune (rendement 74 %). RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,50-6,95 (10H, m, ArH) 5,60 (1H, d, -NH-) ; 5,05 (2H, m, PhCH2O) ; 4,50-4,35 (2H, m, a-H) ; 3,95-3,60 (4H, m, OCH3 et -CH2-Nproline) 3,35-3,20 (1H, m, -CH2-Nproline) ; 2,80-2,10 (4H, m, PhCH2C et -CH2proline) ; 1,95-1,50 (3H, m, -CH2aminobutyryle et H proline) ; 0,95 (3H, t, CH3aminobutyryle). Rf = 0,61 (acétate d'éthyle) el Préparation de la 1-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-amino butyryl)-(4(S)-benzyl)-L-proline On saponifie 1,30 g (2,96 mmoles) de l'ester obtenu au d/ avec 1,75 ml (3,50 mmoles) de NaOH 2M dans 30 ml de méthanol pendant 20 heures à la température ambiante. Après évaporation sous vide, reprise dans 100 ml d'eau distillée, lavage deux fois à l'éther puis acidification à pH = 1 avec HCl aqueux 5N, on extrait trois fois avec 150 ml d'éther éthylique, on sèche (MgSO4) les phases organiques, on filtre et on fait évaporer sous vide. On obtient 1,05 g de produit désiré sous la forme d'un solide blanc (rendement 83,5 %). P.F. = 56-57"C RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,5-7,0 (10H, m, ArH) ; 5,7 (1H, d, -NH-) ; 5,05 (2H, s large, PhCH2O) ; 4,50-4,25 (2H, m, a-H) ; 4,00-3,80 (1H, m, -N-CH2proline) ; 3,30-3,10 (1H, m, -N-CH2proline) ; 2,80-2,10 (4H, m, PhCH2C et -CH2proline) 1,90-1,40 (3H, m, -CH2aminobutyryle et Hproline) ; 0,90 (3H, t, CH3aminobutyryle). f/ Préparation de la 1-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyryl)-(4(S)-benzyl)-L-proline n.butylamide On procède de la manière indiquée à l'exemple 15 c/ à partir du composé obtenu précédemment au c/. On purifie le produit brut résultant par chromatographie éclaire sur silice en éluant avec un gradient de mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole 15/85 à 50/50. On obtient deux échantillons du produit désiré. g/ Préparation du composé en titre sous forme d'hydrate d'oxalate On hydrogène sous 60 psi pendant 2 heures et 30 minutes une solution de 0,75 g du composé obtenu précédemment au f/ dans du méthanol, à l'aide de 0,30 g de palladium 10 % sur charbon (humide). Après élimination du catalyseur par filtration et du solvant sous vide, on purifie le produit brut obtenu par chromatographie éclaire en utilisant comme premier éluant un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole 50/50 puis un mélange acétate d'éthyle/méthanol 50/50. Après évaporation du solvant, on reprend l'huile résultante dans de l'isopropanol et on filtre pour éliminer la silice. On obtient 350 mg (1,01 mmole) de base libre. On y ajoute 0,12 g (1,32 mmole) d'acide oxalique dans de l'éthanol et on ajoute de l'éther. Après cristallisation, on obtient 0,18 g de produit désiré (rendement 25 %). L'analyse CLHP indique deux isomères qui sont considérés comme les diastéréoisomères cis- et trans- (4-benzy) l-L-proline dans un rapport cis/trans 90/10. P.F. = 89-93"C (capillaire ouvert) RMN-1H (400 MHz, CD3OD, ppm) : 7,32-7,15 (5H, m, ArH) 4,48-4,28 (1H, m, a-H) ; 4,22-4,10 (1H, m, a-H) ; 3,87-3,68 (lH, m, -CH2-Nproiine) ; 3,42-3,06 (3H, m, -CH2Nproline et -CH2-N NH2butyle) ; 2,84-2,44 (3H, m, -CH2Ph et CH2proline) J 2,36-2,10 (1H, m, -CH2proline) ; 2,02-1,76 (2H, m, -CH2aminobutyryle) ; 1,67-1,26 (5H, m, -CH2CH2 NH2butyle et Hproline) ; 1,12-0,86 (6H, m, -CH3aminobutyryle et -CH3 NH2butyle). CLHP (colonne : Kromasil C18 250 mm x 4,6 mm, 5 Pm ; détecteur U.V. : 215 nm ; débit : 1 ml/mn ; Phase mobile A = CH3CN et B = H20 + 0,1 % TEA, A/B = 30/70) : pic majoritaire = 88,92 %, temps de rétention 12,63 minutes (isomère cis) 10,08 %, temps de rétention 14,93 minutes (isomère trans) ; pic minoritaire = 0,99 %, temps de rétention 3,3 minutes. Microanalyse : C20H31N2o2.1,O5(COOH)2.O,9H20 Trouvé : C = 58,19 % ; H H = 7,24 % ; N = 8,95 8 Calculé : C = 58,18 % ; H = 7,71 % ; N = 9,21 % Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) = 368 (M+ + Na, 14) ; 346 (M+, 100) ; 261 (68) ; 160 "(47) ; 91 (C7H7+, 7). Exemple 17 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl) L-thiaprolineamide (UCL 1374-F) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -CH2S- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = H On procède comme dans les exemples de préparation selon la voie 1 donnés précédemment. On obtient le composé désiré sous forme de trifluoroacétate. P.F. = 97-105 C RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6, ppm) : 4,50-5,0 (2H, dd, NCH2S) ; 4,71 (1H, t, a-CHaminobutyryle) ; 4,36 (1H, m, NCHCO cycle); 3,0 (2H, dd, S-CH2-CH) ; 1,77 (2H, m, CH3CH2-) ; 0,92 (3H, m, CH3-). IR (KBr, cm-1) : 3399 (m, -NH2) ; 2977 (m, -CH) ; 1672 (s, C=O) ; 1640 (s, C=O). Microanalyse : C8H15N3O2S.1,0CF3COOH.0,2H2O Trouvé : C = 35,84 % ; H = 5,07 % ; N = 12,04 % Calculé : C = 35,63 % ; H = 5,07 % ; N = 11,98 % Exemple 18 : Préparation de l'acide 2-(2(S)-aminobutyryl)1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-isoquinolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1421-H) ; voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.c4Hg al Préparation de l'acide 1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-iso quinol inecarboxyl ique On dissout dans 50 ml d'acide chlorhydrique concentré, 5,0 g (30,27 mmoles) de L-phénylalanine et on ajoute 4,0 g de parafomrmaldéhyde et 1 ml d'acide sulfurique concentré.On porte au reflux cette solution pendant deux jours. Après refroidissement et filtration, on dissout le solide résultant dans un mélange chaud eau/éthanol : 1/1 (v/v) et on ajoute NH4OH aqueux (30 %) jusqu'à ce qu'un pH 7,0 soit atteint. On récupère par filtration les cristaux qui ont précipité après refroidissement de la solution, on les lave à l'éthanol et on les sèche. On obtient ainsi 2,68 g de produit désiré (rendement 50 %). P.F. = 315 C (litt.)23 Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) = 178 (MH+, 23) ; 154 (100). b/ Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl 1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-isoquinolinecarboxylique On refroidit dans un bain glace-eau, une solution de 2,50 g (14,11 mmoles) de l'acide préparé au a/ dans NaOH 2N (8 ml) et on agite vigoureusement avec un agitateur magnétique. On ajoute alternativement, en 10 portions environ, 2,21 ml (15,52 mmoles) de chloroformiate de benzyle et 8 ml de NaOH 2N. On maintient la température du mélange réactionnel entre 0 et 5 C en controllant la vitesse d'addition des réactifs. On ajoute 9 ml de NaOH 2N et on maintient le mélange à la température ambiante pendant 30 minutes. On lave la solution alcaline à l'éther (4 x 50 ml), puis on acidifie par addition de HCl 5N (pH P.F. = 52-55"C RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,55-7,00 (9H, m, Ar-H) 5,10 (2H, d, H benylique) ; 5,00-4,50 (3H, m, ""-H et -CH2- Ntétra-hydroisoquinoline) ; 3,20-3,00 (2H, m, -CH2tétrahydroisoquinoline). Spectre dee masse (FAB) : m/e (% intensité) = 334 ((M + Na)+, 0,1) ; 312 (MH+, 3,5) ; 91 (C7H7+, 100). cI Préparation de l'acide N-benzyloxycarhonyl- 1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-isoquinolinecarboxylique n.butylamide On procède comme à l'exemple 15 c/ à partir de l'acide obtenu au b/. On agite le mélange réactionnel à 0 C pendant 40 minutes puis à la température ambiante pendant une nuit. On ajoute ensuite 100 ml de chlorure de méthylène et on lave la solution avec 3 x 50 ml d'acide citrique 10 %. On sépare les phases après avoir secouer énergiquement puis on lave la phase organique avec 2 x 50 ml de NaHCO3 5 %. Après sèchaqe sur MgSO4, on purifie le produit brut obtenu par chromatographie éclaire en éluant avec un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole 70/30 (v/v).Après évaporoation sous vide, on fait sècher sur P205 pendant une nuit le produit résultant. On obtient ainsi 2,36 g d'amide pur sous la forme d'une huile (rendement 57 %). RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) 7,45-7,05 (9H, m, Ar-H) 5,80 (1H, d, -NH-) ; 5,25-5,06 (2H, m, -CH2-Ph) ; 4,90-4,40 (3H, m, -H et -NH-CH2tétrahydroisoquinoline) ; 3,42-2,78 (4H, m, -NH-CH2 NH2butyle et -CH2tétrahydroisoquinoline) ; 3,60-3,40 (2H, m, -CH2tétrahydroisoquinoiine) ; 1,18-0,66 (7H, m, -CH2CH2CH3 NHbutyle). Rf (acétate d'éthyle) = 0,60 Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) = 367 (MH+, 13,9) ; 91 (C6H5+, 100). d/ Préparation de l'acide 1,2,3,4-tétrahydro-3(S)isoquinolinecarboxylique n.butylamide On procède à une hydrogénation du composé obtenu au c/, dans les conditions de l'exemple 15 d/. On obtient 1,30 g de produit désiré (rendement 89 %). P.F. = 58-60"C RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 7,26-7,02 (5H, m, Ar-H et -NHamide) ; 4,08-3,98 (2H, m, &alpha;-H et -CH2Ntétrahydroisoquinoline) I 3,51-3,58 (1H, m, -CH2-NHtétrahydroisoquinoline) ; 3,32-3,20 (3H, m, -CH2amide et 1H -CH2tétrahydroisoquinoline) ; 2,76-2,88 (1H, m, -CH2tétrahydroisoquinoline) ; 1,81 (1H, s large, -NHtétrahydroisoquinoline) ; 1,55-1,46 (2H, m, -NH-CH2-CH2-CH2-CH3) ; 1,401,29 (2H, m, -NH-CH2-CH2-CH2-CH3) ; 0,93 (3H, t, CH3amide J = 7,3 Hz). e/ Préparation de l'acide 2-(N-benzyloxycarbonyl- 2(S)-aminobutyryl)-1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-isoquinoline carboxylique n.butylamide On procède comme à l'étape c/, à partir d'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 3 a/ et à partir du composé obtenu au dl. On laisse reposer le mélange réactionnel pendant un nuit à la température ambiante, puis on ajoute 40 ml de chlorure de méthylène et on lave cette solution avec 3 x 50 ml d'acide citrique 10 %. Après avoir secouer énergiquement, on sépare les phases et on lave la phase organique avec 2 x 50 ml de NaHCO3 5 %.Après sèchaqe sur MgSO4 et évaporation sous vide, on purifie le produit brut résultant par chromatographie éclaire sur silice en éluant avec un mélange acétate d'éthyleîéther 15/85 puis 35/65. On obtient 0,63 g de produit désiré (rendement 49,5 %) sous la forme d'une huile que l'on fait sècher sous vide sur P2O5 pendant une nuit. Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) = 474 ((M + Na)+, 0,1) ; 452 (M+, 2,5) ; 91 (C7H7+, 100). RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 7,42-7,08 (9H, m, Ar-H) 6,03 (1H, s large, -NHamide) ; 5,68 et 5,39 (1H, d, -NHamide) 5,20-4,88 (3H, m, Hbenzyle et c-H) ; 4,86-4,38 (3H, m, -CH2Ntétrahydroisoquinoline et "-H) ; 3,68-2,90 (4H, m, -CH2N NH2butyle et -CH2tétrahydroisoquinoline) ; 2,00-1,60 (2H, m, -CHaminobutyryie) ; 1,44-1,16 (2H, m, -CH2-CH2-CH2-CH3) 1,16-0,96 (2H, m, -CH2-CH2-CH2-CH3) ; 0,86 et 0,78 (3H, t, CH3aminobutyryle). f/ Préparation du composé en titre sous la forme d'oxalate On procède à une hydrogénation du composé obtenu au e/, dans les conditions de l'étape dl. On ajoute ensuite à la solution filtrée, 0,16 g (1,78 mmole) d'acide oxalique et on concentre cette solution sous vide. On ajoute alors de l'éthanol puis de l'éther (rapport 1/50), ce qui conduit à un produit cristallisé. Après filtration et lavage au diéthyléther, on fait sècher le solide sur P205 sous vide à 30 C pendant 24 heures et on obtient 0,35 g de composé désiré (rendement 60,5 %). P.F. = 105-110 C (capillaire ouvert) RMN-1H (400 MHz, CD30D, ppm) : 7,34-7,15 (4H, m, Ar-H) 4,86-4,54 (4H, m, 2 a-H et -CH2Ntétrahydroisoquinoline) ; 3,43- 2,88 (4H, m, -CH2tétrahydroisoquinoline et -NH-CH2 NHbutyle) 2,14-1,80 (2H, m, -CHaminobutyryle) ; 1,48-1,18 (4H, m, -CH2 CH2 -NHbutyle) ; 1,0-1,2 (3H, t, CH3aminobutyryle) ; 0,7-0,95 (3H, t, CH3 -NHbutyle). Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) = 318 (MH+, 96,1) ; 245 (30,9) ; 233 (40,3) ; 149 (100,0) ; 132 (65,4) ; 71 (38,8) ; 58 (53,7) ; 57 (73,0). Pureté CLHP (Kromasil C-18 eau/méthanollacide trifluoroacétique 50:50:0,1) : 98,6 %. IR (pastille KBr, cm-1) : 3072 (m, NH) ; 2956 (s, CH) 1652 (s, C=O). Microanalyse : C18H27N3O2.1,05(COOH)2.0,5H2O Trouvé : C = 57,63 % ; H = 7,08 % ; N = 9,53 % Calculé : C = 57,35 % ; H = 7,21 % ; N = 9,98 % Exemple 19 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl)2(R/S)-perhydroazépinecarboxylique n butylamide (UCL 1482-H) voie 11 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)4- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4Hg a/ Préparation de l'ester 3,4-dihydro-4-oxo-1,2,3-benzotriazine de l'acide N-benzyloxycarbonyl-2-(S)-aminobutyrique composé XXXVI On dissout dans du tétrahydrofuranne, à 0 C, 2 g (8,43 mmoles) d'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 3 a/. On ajoute 1,741 g (8,43 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide puis 1,378 g (8,43 mmoles) de 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazine-4(3H)-one.On agite le mélange à la température ambiante pendant 3 heures puis on élimine le solvant. Par cristallisation dans un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole 1/1, on obtient 2,334 g de produit désiré (rendement 72 %) sous la forme de cristaux jaune pâle. RMN-1H (200 MHz, CDC13, ppm) # 8,3 (1H, d. ArCH) ; 8,2 (1H, d, ArCH) ; 8,0 (1H, dt, ArCH) ; 7,8 (1H, dt, ArCH) ; 7,3 (5H, m, ArCH) ; 5,3 (1H, d large, NH) ; 5,1 (2H, s, PhCH2) 4,8 (1H, q, NCHCO) ; 2,1 (2H, m, CH2) ; 1,1 (3H, t, CH3). b/ Préparation de l'acide 2(R/S)-azépinecarboxylique On dissout dans HCl 6M, dans une bombe, 1 g (4,4 mmoles) de (7S,îOR)-10-(tert.butyl)-9-méthyl-1,9-diazobicycio(5,3,OJ- décan-8-one préparée selon la méthode de Seebach et al. (Annalen der Chemie, 1215-1232 (1989)) et on chauffe à 1800C pendant 3 heures. On refroidit ensuite le mélange et on l'extrait au chlorure de méthylène puis on concentre la phase aqueuse. Par CLHP préparative, (Kromasil C-18, éluant eau/méthanol/acide trifluoroacétique 80:20:0,1), on obtient 0,4 g de produit désiré (rendement 34 %). RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6, ppm) : 9,0 (1H, OH) ; 4,0 (1H, dd, NCHCO) ; 3,1 (2H, m, CH2) ; 2,1 (1H, m, CH(H)) ; 1,6 (7H, m, CH(H), 3 x CH2). Spectre de masse : m/e = 144 (M+ + 1). c/ Préparation de l'acide 1-(N-benzyloxycarbonyl 2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-perhydroazépinecarboxylique : composé XXXVI I On refroidit à 0 C 0,630 g (1,64 mmole) de l'ester préparé au a/ dans 3 ml de diméthylformamide. On y ajoute 0,308 g (1,198 mmole) de l'acide obtenu au bl dans du diméthylformamide (2 ml) contenant 0,2 ml). On agite ce mélange à la température ambiante pendant 5 jours puis on fait évaporer le solvant et on chromatographie le produit obtenu sur gel de silice en éluant avec un mélange éther de pétrole/acétate d'éthyle/acide acétique 5:4:1. On obtient 0,433 g de produit désiré (rendement 100 %). RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,25 (5H, m, Ph) ; 6,0 (1H, d, NH) ; 5,0 (2H, q, PhCH2) ; 4,8 (1H, m, NCHCO) ; 4,5 (1H, m, NCHCO) ; 3,6 (1H, m, NCH(H)) ; 3,1 (1H, m, NCH(H)) ; 2,3 (1H, m, CH3CH(H)) ; 1,6 (7H, m, CH3CH(H), 3 x CH2) ; 1,2 (2H, m, CH2) ; 0,8 (3H, m, CH3). dl Préparation de l'acide 1-(N-benzyloxycarbonyl2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-perhydroazépinecarboxylique n.butylami de : composé XXXVII I On dissout dans du tétrahydrofuranne sec (10 ml), 0,43 g (1,19 mmole) d'acide obtenu au c/ et on refroidit à -10eC sous azote. On ajoute 0,246 ml (2,08 mmoles) de N-éthylmorpholine et 0,26 ml (2,08 mmoles) de chloroformiate d'isobutyle et on agite le mélange pendant 30 minutes. On ajoute ensuite 0,2 ml (2,08 mmoles) de n.butylamine et on poursuit l'agitation pendant 3 heures. On élimine le solvant et on purifie le produit résultant sur colonne chromatographique sur gel de silice en éluant avec un mélange éther de pétrole/ diéthyléther 7:3 puis 2:3.On obtient le produit désiré avec un rendement de 52 %. RMN-1H (200 MHz, CDC13, ppm) : 7,3 (5H, m, Ph) ; 6,4 (1H, d large, NH) ; 5,3 (1H, d large, NH) ; 5,0 (2H, t, PhCH2) ; 4,7 (1H, m, NCHCO) ; 4,5 (1H, m, NCHCO) ; 3,1 (4H, m, 2 x NCH2) 0,8-1,8 (20H, m, 7 x CH2, 2 x CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e 418 (M+ + 1). e/ Préparation du composé en titre sous forme d'oxalate On dissout dans du méthanol (15 ml) contenant 0,1 g de palladium sur charbon à 10 %, 0,25 g (0,42 mmole) de l'acide préparé au d/ et on hydrogène sous 30 psi pendant 2,5 heures. Après élimination du catalyseur et concentration de la solution, on obtient une huile que l'on reprend dans de l'méthanol et que l'on traite avec 0,15 g d'acide oxalique. Par addition d'éther, on fait précipiter le produit désiré. On obtient 0,1 g (rendement 43 8). RMN-1H (200 MHz, CD30D, ppm) : 8,0 (1H, d large, NH) ; 4,7 (1H, dd, NCHCO) ; 4,4 (1H, m, NCHCO) ; 3,8 (1H, m, NCH(H)) 3,5 (1H, m, NCH(H)) ; 3,2 (2H, m, NCH2) ; 2,2 (2H, m, CH2) 1,8 (6H, m, 3 x CH2) ; 1,4 (6H, m, 3 x CH2) ; 0,9 (6H, dt, 2 x CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e = 289 (M+ + 1). Pureté (Kromasil C-18 ; éluant : méthanol/eau/acide trifluoroacétique 40:60:0,1) : 99,3 % (rapport diastéréomérique : 3:2). Exemple 20 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl) 2(R/S)-pipécolineamide (UCL 1398-F) ; voie 4 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)3- ; R4 = CO-NH-R5 ; Rs = H On procède comme pour les autres composés préparés selon la voie 4. P.F = 46-50 C RMN-1H (400 MHz, CD30D, ppm) : 5,19 (1H, d, Hpipécoline); 4,58 (1H, q, Haminobutyryle) ; 3,82-3,72 (1H, m, N-CH2 pipécoline) ; 3,52-3,42 (1H, m, N-CH2pipécoline) ; 2,82-2,26 (1H, m, -CH2pipécoline) ; 2,24-2,15 (1H, m, CH2pipécoline) 2,20-1,25 (8H, m, CH2pipécoline et aminobutyryle, NH2amide) 1,04 (3H, t, CH3). Microanalyse ; C10H19N3O2.1,1CF3COOH.0,5H2O Trouvé : C = 42,21 % ; H = 5,9 % ; N = 11,72 % Calculé : C = 42,14 % ; H = 6,12 % ; N = 12,08 % Exemple 21 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)2(R/S)-azétidinecarboxamide (UCL 1373-F) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -CH2- ; R4 = -CO-NH-R5 ; R5 = H On procède comme pour les autres composés préparés selon la voie 1. P.V. = 60-64 C RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6, ppm) : 7,05 (2H, s large, NH2) 4,47 (1H, dd, cHaminobutyryle) ; 4,07 (1H, m, aCHcycle) ; 3,73 (2H, t, N-CH2) ; 2,00 (2H, m, CH3CH2) ; 1,59 (2H, m, NCH2CH2) 0,79 (3H, m, CH3). Spectre IR (pastille KBr, cm-l) : 3364 (m, NH) ; 1674 (s, 2 x C=O) ; 1510-1439 (m, NH3+). Microanalyse : C8H15N3O2.1,1CF3COOH.0,5H2O Trouvé : C = 38,18 % ; H = 5,62 % ; N = 13,08 % Calculé : C = 38,33 % ; H = 5,39 % ; N = 13,15 % Exemple 22 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl)- 2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1397-H) ; voie 3 R1 = CH2CH3 ; R R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = (R6 = H) R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4Hg a/ Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl 2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide On dissout dans du tétrahydrofuranne (150 ml), sous azote, 7,699 g (25,9 mmoles) d'acide N-benzyloxycarbonyl2(S)-indolinecarboxylique préparé comme à l'exemple 24 a/. On ajoute à 0 C 2,986 g (25,9 mmoles) de N-éthylmorpholine puis 3,54 g (25,9 mmoles) de chloroformiate d'isobutyle.Après 45 minutes, on ajoute 1,903 g (25,9 mmoles) de n.butylamine et on agite la suspension pendant une nuit. On ajoute du chlorure de méthylène (300 ml) et on lave la phase organique avec de l'acide citrique 10 % (3 x 100 ml) puis NaHCO3 (3 x 100 ml). Après sèchage et évaporation, on obtient un solide blanc que l'on recristallise dans du méthanol (rendement 80 %). P.F. 164-1650C RMN-1H (CDCl3, ppm) : 6,9-7,8 (9H, m, Ar-H) ; 5,2 (2H, m, CH2benzyloxycarbonyle) ; 4,9 (1H, m, &alpha;H) ; 2,9-3,8 (4H, m, CH2cycle CH2N) ; 1,0-1,5 (4H, m, CH2CH2CH2N) ; 0,8-1,0 (3H, m, CH3). b/ Préparation de l'acide 2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide On dissout dans du méthanol le composé préparé au a/ et on ajoute du palladium sur charbon (10 %, humide, 10 % en poids). On hydrogène le mélange pendant 4 heures sous 40 psi dans un appareil de Parr. Après élimination du catalyseur et évaporation du méthanol, on obtient des cristaux suffisamment purs sans recristallisation (rendement 80 %). P.F. = 110-1110C RMN-1H (CDC13, ppm) : 6,8-7,1 (4H, m, Ar-H) ; 4,3 (1H, m, H) ; 2,9-3,5 (4H, m, CH2cycle CH2N) ; 1,0-1,9 (4H, m, CH2CH2CHzN) ; 0,9 (3H, t, CH3). c/ Préparation de l'acide 1-(N-benzyloxyzarbonyl- 2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide On procède comme à l'exemple 20 a/ en utilisant 0,646 g (2,73 mmoles) d'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 3 a/ et 0,595 g (2,73 mmoles) de l'amide préparé à l'étape b/. On obtient une huile que l'on recristallise dans CC14 (rendement 65 %). P.F. = 178-179 C RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,0-7,2 (9H, m, Ar-H) ; 4,9-5,3 (4H, m, 2 x &alpha;H CH2benzyloxycarbonyle) ; 3,5 (2H, m, CH2cycle) ; 3,1 (2H, m, CH2N) ; 1,0-2,0 (9H, m, CH2CH2CH2N CH2aminobutyryle CH3 aminobutyryle) ; 0,9 (3H, m, CH3butyle). d/ Préparation du composé en titre sous la forme d'hydrate d'oxalate On hydrogène le composé obtenu au c/ comme à l'exemple 5 c/ pour la N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyryl-L-proline [2(S)-méthyl] n.butylamide et on isole le composé en titre sous la forme de sel d'oxalate. Il est suffisamment pur sans recristallisation (rendement 80 %). P.F. = 142 C RMN-1H (CD30D, ppm) : 8,25 (1H, m, NH) ; 7,25 (4H, m, Ar H) ; 5,1 (2H, m, 2 x H (caché par le colvant)) ; 3,8 (2H, m, CH2Ar) ; 3,5 (2H, m, CH2cycle) ; 3,2 (2H, m, CH2N) ; 2,0 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 0,9-1,8 (10H, m, CH3aminobutyryle CH3CH2CH2CH2N). Pureté CLHP (Lichrosorb r. p. select b méthanol /eau 40/60 + 0,1 % CF3COOH) : 99,81 % ; temps de rétention = 25,00 minutes. Analyse : C17H25N302.C2H204.0,75 H20 Trouve : C = 56,25 ; H = 6,99 % ; N = 9,84 % Calculé : C = 56,08 z H = 7,06 % N = 10,33 % Exemple 23 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl)2(S)-indolinecarboxylique n propylamide (UCL 1413-H) ; voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = (R6 = H) ; R4 = CO-NH-R5 ; Rs = n.C3H7 a/ Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl 2(S)-indolinecarboxylique n.propylamide On procède comme à l'exemple 22 a/ à partir de l'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-indolinecarboxylique préparé comme à l'exemple 24 a/ et de n.propylamine. On obtient un solide blanc que l'on recristallise dans du CC14 (rendement 70 %). P.F. = 185-186"C RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,0-7,25 (9H, m, Ar-CH) ; 5,20 (2H, s, Ph-CH2) ; 4,90 (1H, m, NCHCO) ; 3,90 (2H, m, CH2indoline) 3,0-3,5 (NCH2propyle) ; 0,9-1,8 (5H, m, CH3CH2). b/ Préparation de l'acide 2(S)-indolinecarboxylique n.propylamide On effectue une hydrogénation du composé obtenu à l'étape a/ dans les conditions de son analogue n.butylamide de l'exemple 22 b/. Après évaporation du méthanol, on obtient un solide blanc qui est suffisamment pur sans recristallisation (rendement 90 %). RMN-1H (CDC13, ppm) 6,85-7,2 (4H, ArCH) ; 4,3 (1H, m, NCHCO) ; 2,9-3,8 (4H, m, NCH2, CH2indoline) ; 1,5 (2H, m, NCH2CH2) ; 0,9 (3H, t, CH3). c/ Préparation de l'acide 1-(N-benzyloxycarbonyl- 2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.propylamide On dissout, sous azote, dans du tétrahydrofuranne (50 ml) 0,439 g (1,85 mmole) d'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-amino- butyrique préparé comme à l'exemple 3 a/ et on refroidit dans un bain glace/eau. On ajoute 0,213 g (1,85'mmole) de N-éthylmorpholine puis 0,253 g (1,85 mmole) de chloroformiate d'isobutyle. Après 45 minutes, on ajoute 0,378 g (1,85 mmole) du composé obtenu à l'étape b/ et on maintient l'agitation pendant 12 heures.On verse la suspension dans du CH2Cl2 (100 ml), on lave avec de l'acide citrique 10 % (3 x 100 ml) puis avec NaRCO3 5 % (3 x 100 ml). Après sèchage et évaporation, on obtient un solide blanc qui cristallise dans CCl4 (rendement 89 %). P.F. = 176-177 C RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,0-7,25 (9H, m, H-Ar) ; 5,0 (2H, s, CH2benzyloxycarbonyle) ; 4,8 (1H, m, zH) ; 4,1 (1H, &alpha;H) ; 3,3 (2H, m, CH2cycle) ; 3,0 (2H, m, CH2N) ; 1,0-2,0 (4H, m, CH3CH2CH2N CH2aminobutyryle) ; 0,70-1,00 (CH3aminobutyryle CH3propyle). dl Préparation du composé en titre sous forme d'hydrate d'oxalate On procède à une hydrogénation du composé issu de l'étape c/ dans les conditions de l'exemple 5 c/ pour la N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyryl-L-proline [2(S)-méthyl)] n.butylamide. On obtient le produit désiré sous la forme de son sel d'oxalate qui est suffisamment pur sans recristallisation (rendement 90 %). P.F. = 130-131C RMN-1H (CD30D, ppm) : 7,70 (1H, m, NH) ; 6,55-6,90 (4H, m, H-Ar) ; 4,20-4,60 (2H, m, 2 x zH) ; 2,90-3,40 (2H, m, CH2 cycle) ; 2,50-2,80 (CH2N) ; 1,40-1,80 (2H, m, CH2CH3propyle) 1,00 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 0,40-0,70 (6H, m, CH3aminobutyryle CH3propyle). Pureté CLHP (Lichrosorb r.p.select b ; CH3OH/H2O + CF3COOH 0,1 %) : 99,03 % ; temps de rétention = 12,80 minutes. Microanalyse : C16H23N302.(COOH)2.1,25H20 Trouvé : C = 53,79 z ; H = 6,90 * ; N = 10,45 % Calculé : C = 53,84 % ; H = 6,68 % ; N = 10,62 % Exemple 24 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl) 2(S)-indoiinecarboxylique méthylamide (UCL 1414-H) ; voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = (R6 = H) ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = CH3 a/ Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl2(S)-indolinecarboxylique On refroidit dans un bain glace-eau une solution de 20 g (122,56 mmoles) d'acide 2(S)-indoline carboxylique dans NaOH 2N (62 ml) et on agite avec un agitateur magnétique puissant.On y ajoute alternativement 20,0 ml (140,09 mmoles) de chloroformai te de benzyle et 68 ml de NaOH 2N en environ 10 portions en 60 minutes. On maintient la température du mélange réactionnel entre 0 et 5 C en controllant la vitesse d'addition des réactifs. On ajoute ensuite 50 ml de NaOH et on maintient le mélange à la température ambiante pendant 30 minutes. On lave la solution alcaline à l'éther (4 x 150 ml) puis on l'acidifie par addition de HCl SN (80 ml, pH P.F. = 117-118 C RMN-1H (400 MHz, CDC13, ppm) : 8,30-6,90 (10H, m, ArH et COOH) ; 5,45-5,14 (2H, m, CH2-Ph) ; 5,08-4,92 (1H, m, u-H) 3,65-3,46 (1H, m, CH2indoline) ; 3,30-3,15 (1H, m, CH2indoline). Spectre de masse (FAB) m/e (t intensité) = 342 ((M-H + 2Na)+, 0,2) ; 320 ((M + Na)+, 4,3) ; 298 (MH+, 5,7) ; 297 (M+, 9,3) ; 91 (C7H7+, 100). b/ Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl2(S)-indolinecarboxylique méthylamide On dissout dans 90 ml de tétrahydrofuranne sec, 4,00 g (13,45 mmoles) d'acide obtenu au a/ et on ajoute 1,71 ml (13,45 mmoles) de 4-éthylmorpholine à 0 C. On refroidit cette solution à -5 C et on ajoute, goutte à goutte, 0,62 ml (4,78 mmoles) de chioroformiate d'isobutyle. Après 30 minutes à -5 C, on sature la solution avec de la méthylamine (gaz). On laisse le mélange une nuit à la température ambiante puis on ajoute 150 ml de dichlorométhane et on lave cette solution avec 3 x 150 ml d'acide citrique 10 %. Après avoir secouer énergiquement, on sépare les phases, on lave la phase organique avec 2 x 150 ml de NaHCO3 5 %.Après sèchage sur MgSO4, on purifie le produit brut par lavage avec CCl4 chaud. On obtient 2,94 g d'un solide blanc correspondant à l'amide pur (rendement 70,5 %). P.F. = 210-211"C RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 7,75 (1H, s large, COOH) 7,45-6,95 (9H, m, Ar-H) ; 5,90 (1H, s large, NH) ; 5,37-5,10 (2H, m, CH2-Ph) ; 4,93 (1H, dd, ci-H) 3 3,62-3,16 (2H, m, CH2indoline) ; 2,71 (3H, s, CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) : 311 (MH+, 11,3) ; 310 (M+, 11,4) ; 91 (C7H7+, 100). c/ Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl2(S)-indolinecarboxylique méthylamide On hydrogène sous 60 psi pendant 3 heures, une solution de 2,91 g (9,38 mmoles) du composé obtenu à l'étape b/ dans 120 ml de méthanol en présence 1,20 g de palladium 10 % sur charbon activé (humide). Après filtration et concentration sous vide, l'huile résultante cristallise après sèchage une nuit sur P205. On obtient 1,50 g (rendement 91 %). P.F. = 125-130"C RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,22-7,03 (3H, m, NHamide et 2 ArH) ; 6,82 (1H, t, J = 7,4 Hz, ArH) ; 6,73 (1H, d, J = 7,8 Hz, ArH) ; 4,42 (1H, t, > -H J = 9,4 Hz) ; 4,14 (1H, s large, NH) ; 3,65 -3,55 (1H, m, CH2) ; 3,14-3,02 (1H, m, CH2) 2,84 (3H, d, J = 15,0 Hz, CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e = 177 (MH+, 42,4) ; 176 (M+, 33,2) ; 118 (100,0). d/ Préparation de l'acide 1-(N-benzyloxycarbonyl- 2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique méthylamide On dissout, sous argon, dans 40 ml de tétrahydrofuranne sec, 1,73 g (8,51 mmoles) d'acide N-(tert.butoxycarbonyl)- 2(S)-amino-butyrique préparé selon l'exemple 2 al et on ajoute 1,07 ml (8,51 mmoles) de 4-éthylmorpholine à 0 C puis 1,11 ml (8,51 mmoles) de chloroformiate d'isobutyle à -5 C. Un précipité blanc se forme. Après 30 minutes d'agitation à -5 C, on ajoute 1,50 g (8,51 mmoles) du composé obtenu à l'étape c/. On agite alors le mélange à 0 C pendant 40 minutes puis une nuit à la température ambiante. On ajoute ensuite à cette solution, 100 ml de dichlorométhane puis on la lave avec 3 x 50 ml d'acide citrique 10 %. Après avoir secouer énergiquement, on sépare les phases, on lave la phase organique avec 2 x 50 ml de NaHCO3 5 %. Après sèchage sur MgSO4, on élimine le solvant sous vide et on purifie le produit brut obtenu (3,00 g) par recristallisation dans CCl4 (rendement 64 %). P.F. = 196-197"C RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 8,12 (1H, d, NH) ; 7,456,95 (9H, m, ArH) ; 5,30 (1H, d, NH) ; 5,25-5,0 (2H, m, CH2Ph) ; 4,82 (1H, t, -H) ; 4,14 (1H, m, "-H) ; 3,60-3,45 (2H, m, CH2indoline) ; 2,80 (3H, d, CH3méthylamide) ; 2,0-1,55 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 1,03 (1H, t, CH3aminobutyryle). Spectre de masse (FAB) : m/e (E intensité) = 396 (MH+, 9,9 ) ; 91 (C6Hs+, 100). e/ Préparation du composé en titre sous forme d'hydrate d'oxalate On dissout 2,15 g (5,44 mmoles) du composé obtenu à l'étape d/ dans 200 ml de méthanol et on ajoute 0,85 g de palladium 10 % sur charbon activé (humide). On hydrogène le mélange réactionnel sous 60 psi pendant 3 heures. On filtre la solution et on ajoute 1,3 équivalent (0,64 g) d'acide oxalique (7,07 mmoles) puis on concentre la solution sous vide. On ajoute de l'éthanol puis de l'éther (rapport 1:50) et on obtient un produit cristallisé. Après filtration et lavage au diéthyléther, on sèche le solide sous vide pendant 24 heures sur P2Os à 35*C. On obtient 0,98 q de produit désiré (rendement 49 *). P.F. = 138-139 C RMN-1H (400 MHz, CD30D, ppm) : 8,20 et 8,02 (1H, d, ArH) 7,36-7,05 (3H, m, ArH) ; 5,18-5,02 et 4,70-4,62 (1H, m, aHindoline) ; 5,01-4,94 et 4,28-4,22 (1H, m, &alpha;Haminobutyryle) 3,92-3,00 (2H, m, CH2indoline) 2,78 et 2,73 et 2,33 (3H, s, CH3amide) ; 2,26-2,12 et 2,12-2,86 (2H, m, CH2aminobutyryle) 1,16 et 1,07 et 1,04 (3H, t, CH3aminobutyryle). Spectre de masse (FAB) : m/e (% intensité) ; 262 (MH+, 43,0) ; 154 (100) ; 137 (65,1) ; 136 (81,6). Pureté CLHP (Kromasil C-18 ; eau/méthanol/acide trifluoroacétique 70:30:0,1) : 99,99 %. Spectre IR (disque KBr, cm-1) : 3440 (vague, NH) ; 3289 (m, NH) ; 2969 (m, CH) ; 2935 (m, CH) ; 1668 (s, C=O). Microanalyse : C14H19N302. (COOH)2.H20 Trouvé : C = 51,55 % ; H = 6,05 % ; N = 11,28 % Calculé : C = 52,03 % ; H = 6,28 % ; N = 11,38 % Exemple 25 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl) 2(S)-indolinecarboxylique éthylamide (UCL 1415-H) ; voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = (R6 = H) ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = CH2CH3 al Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl 2(S)-indolinecarboxylique éthylamide On procède comme à l'exemple 24 bi en utilisant de l'éthylamine (gas). On purifie le produit brut obtenu par recristallisation dans CCl4. Par filtration, on obtient 4,05 g d'amide pur sous la forme d'un solide blanc (rendement 74 %). P.F. = 201,0-201,5 C Rf = 0,58 (acétate d'éthyle) RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 7,70 (1H, s large,COOH) 7,45-6,98 (9H, m, ArH) ; 5,90 (1H, s large, NH) ; 5,35-5,18 (2H, m, CH2benzyle) ; 4,90 (1H, dd, &alpha;-H) ; 3,64-3,04 (4H, m, CH2indolinyle et NH-CH2) ; 0,99 (3H, s large,CH3). b/ Préparation de l'acide 2(S)-indolinecarboxylique éthylamide On procède comme à l'exemple 24 c/ à partir du composé obtenu à l'étape a/. L'huile résultante cristallise après sèchage sur P205 pendant une nuit. On obtient 2,25 g de produit désiré (rendement 95 %). P.F. = 92-95 c Rf = 0,28 (acétate d'éthyle) RMN-1H (400 MHz, ppm) 7,22-7,00 (3H, m, NHamide et ArH) ; 6,82 (1H, t, ArH) ; 6,73 (1H, d, ArH) ; 4,42 (1H, t, cx-H) ; 4,14 (1H, s large, NH) ; 3,65-3,50 (1H, m, CH2indoline) ; 3,45-3,20 (2H, m, CH2CH3) ; 3,14-3,02 (1H, m, CH2indoline) ; 1,15 (3H, t, CH3). c/ Préparation de l'acide 1-(N-benzyloxycarbonyl- 2(S)-aminobutyryl)-2 (S)-indolinecarboxylique éthylamide On procède comme à l'exemple 24 d/ en utilisant de l'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique préparé comme à l'exemple 3 a/ et le composé issu de l'étape b/. On obtient 2,23 g d'amide pur sous la forme d'un solide blanc (rendement 50,5 96). P.F. = 184,5-185 C RMN-1H (400 MHz, CDCl3, ppm) : 8,15 (1H, d, Haromatique J = 7,9 Hz) ; 7,44-7,08 (8H, m, ArH) ; 7,04 (s large, NHamide) ; 5,37 (1H, d, NHamide) ; 5,0-5,2 (2H, m, PhCH2) 4,84 (1H, m, &alpha;-H) ; 4,18 (1H, m, "'-H) ; 3,62-3,48 (2H, m, CH2indoline) 3 3,34-3,14 (2H, m, CH2éthylamide) 2 2,10-1,60 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 1,20-0,98 (3H, m, CH3). d/ Préparation du composé en titre On procède comme à l'exemple 24 c/ pour le composé issu de l'étape c/. Après sèchage du solide sur P205 pendant 24 heures à 35 C, on obtient 1,51 g de produit désiré (rendement 72 %). P.F. = 115-120 C RMN-1H (400 MHz, D2O, ppm) : 7,06-8,08 (4H, m, ArCH) 5,12 (1H, m, crH) ; 3,91 (1H, m, &alpha;H) ; 3,78-3,50 (1H, m, CH2Nindoline) ; 3,25-2,96 (3H, m, CH2Nindoline et NH-CH2) 2,25-1,90 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 1,28-0,98 (m, CH3aminobutyryle et CH3éthylamide). Spectre de masse (FAB) . m/e (% intensité) : 276 (MH+, 49,9) ; 191 (80,8) ; 118 (100) ; 89 (16,0) 77 (37,2) ; 58 (74,1) ; 51 (21,3) ; 50 (22,7) ; 46 (19,9) ; 39 (28,2) ; 31 (29,5). Pureté CLHP (Kromasil C-18 ; eau/méthanol/acide trifluoroacétique 65:35:0,1) : 99,99 %. Spectre IR (Disque KBr, cm-1) : 3395 (m, amide) ; 3057 (m, NH3+) ; 1718 et 1669 (s, C=O). Microanalyse ; C15H21N3O2.(COOH)2.H2O Trouvé : C = 53,09 % ; H = 6,54 % ; N = 10,84 % Calculé : C = 53,26 z ; H = 6,57 % ; N = 10,96 % Exemple 26 : Préparation du 1-12(S)-aminobutyryl)- 2(S)-(hydroxyméthyl)indoline (UCL 1423-H) ; voie 3 . R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = (R6 = H) ; R4 = CH2OH On procède comme pour les exemples précédents selon la voie 3. On obtient le composé en titre sous forme de sel d'oxalate. P.F. = 93-98 C IR (disque KEr, cm-1) ) : 3400 (NH3+) ; 3160 (OH) ; 2975 (CH) ; 1652 (C=O) ; 1595 (C=C); RMN-1H (400 MHz, CD30D, ppm) : 8,06 (1H, d, Haromatique) 7,29 (1H, d, H aromatique) ; 7,22 (1H, t, H aromatique) ; 7,09 (1H, t, H aromatique) ; 7,00 (4H, s, OH et NH3+) ; 4,57 (1H, q, &alpha;H) ; 4,41 (1H, t, aH) ; 2,44 (3H, m, CH2 indoline et 1H de CH2O) ; 2,60 (1H, d, 1H de CH2O) ; 1,97-1,75 (2H, m, CH2aminobutyryle) ; 0,97 (3H, t, CH3 aminobutyryle). Microanalyse : C13H18N202.C2H204.0,4H20 Trouvé : C = 54,60 % ; H = 6,18 % ; N = 8,08 % Calculé : C = 54,34 % ; H = 6,32 % ; N = 8,45 % Exemple 27 : Préparation du 1-(2(S)-aminobutyryl)2(S)-indolinylméthyl-N-butylamine (UCL 1446-A2); voie 10 R1 = H ; R2 = CH2CH3 ; n = 0 et m = 1 ; R3 = (R6 = H) ; R4 = CH2-NH-RS ; R5 = n.C4Hg a/ Préparation du N-CN-benzyloxycarbonyl-2(S)-indolinyl- méthyl] butylamine : composé XXXII On ajoute à une solution (1M) de diborane dans le tétrahydrofuranne à -78 C sous azote, du N-benzyloxycarbonyl2(S)-indolinyl butylamide (1,9 g, 5,6 mmole), préparé comme à l'exemple 22 a/, dans du trétrahydrofuranne anhydre (25 ml).Le mélange est chauffé et mis au reflux pendant 2 heures 30 minutes puis refroidi et on additionne du méthanol (11 ml) avec précautions. Le mélange est agité pendant une nuit et le solvant éliminé. Le résidu est dissout dans du méthanol (30 ml) puis évaporé. Par chromatographie sur colonne sur gel de silice en éluant avec un mélange méthanol/chloroforme (5:95), on obtient 0,28 g de produit désiré (rendement 16 96). P.F. = 36-38 C RMN-1H : (CDCl3, ppm) : 7,48 (5H, m, PhCH) ; 6,96-7,13 (4H, dd, ArCH indoline) ; 5,25 (2H, s, PhCH2) ; 4,54 (1H, s large, NCH indoline) ; 2,53-3,29 (4H, m, 2 x NCH2) ; 1,30 (6H, m, 3 x CH2) ; 0,85 (3H, t, CH3). Spectre de masse (EI) : m/e = 338 (M+) Microanalyse : C21H26N202 Trouvé : C = 74,44 % ; H = 7,90 % Calculé : C = 74,53 % ; H = 7,74 % ; N = 8,28 % b/ Préparation du N-[N-benzyloxycarbonyl-2(S)-indolinyl- méthyl]-N-(tert.butoxycarbonyl)butylamine : composé XXXIII Le composé provenant de l'étape a/ (0,24 g, 0,7 mmole) est dissout dans du dioxane aqueux (18 ml). On ajoute 0,07 ml (0,7 mmole) de triéthylamine et 0,35 g (1,4 mmole) de 2 (tert.butoxycarbonyloxyimino)-2-phénylacétonitrile. Le mélange est agité à température ambiante pendant 18 heures et le solvant éliminé. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant chloroforme/acétate d'éthyle 95:5). On obtient 0,28 q sous forme d'huile (rendement 90 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,37 (5H, m, Ph) ; 7,07 (4H, m, ArCH indoline) ; 5,25 (2H, s large, PhCH2) ; 4,67 (1H, m, NCH) 3,14 (6H, m, 2 x NCH2, ArCH2 indoline) ; 1,34 (9H, s, tert.butoxycarbonyle) ; 1,15 (4H, m, CH3CH2CH2) ; 0,81 (3H, t, CH3). Spectre de masse (EI) : 438 (M+). c/ Préparation du 2(S)-tN-butyl-N-(tert.butoxycarbonyl) aminométhyl] indoline : composé XXXIV. Le composé obtenu à l'étape précédente (0,28 g, 1 mmole) est hydrogéné en milieu méthanol aqueux (10 ml) contenant du palladium sur charbon actif à 10 % (0,11 g) pendant 3 heures 30 minutes. Après élimination du catalyseur et concentration de la solution, on obtient 0,19 g (rendement 100 %) du produit. RMN-1H (CDC13, ppm) : 6,73-7,04 (4H, m, ArCH) ; 4,14 (1H, s large, NH) ; 4,02 (1H, m, NHCH) ; 3,25 (2H, m, NCH2) ; 2,93 (2H, d, NCH2) ; 1,18-1,68 (6H, m, 3 x CH2) ; 1,38 (9H, s, tert.butoxycarbonyl) ; 0,88 (3H, t, CH3). Spectre de masse (EI) : m/e = 304 (M+). d/ Préparation du 2-[N-(tert.butoxycarbonyl)-N-butylamino- méthyl)-N-EN-(tert.bütoxycarbonyl)-2(S)-aminobutyryl] indoline : composé XXXV Au composé obtenu par l'exemple 2a/ (0,6 g, 2,95 mmoles), dissous dans du diméthylformamide (20 ml) et du dichlorométhane (20 ml), refroidi à -5 C, on ajoute 0,12 g (0,58 mmole) de dicyclohexylcarbodiimide et l'on agite le mélange 5 minutes, puis l'on ajoute 91 mg (0,56 mmole) de 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazine-4(3H)-one. Le mélange est agité à 0 C pendant une heure puis on ajoute 170 mg (0,56 mmole) du composé obtenu par l'étape c/. Le mélange est agité à température ambiante pendant la nuit, le solvant éliminé et le résidu purifié sur une colonne chromatographîque sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle/pétrole 4:1).On obtient 90 mg de produit (rendement 33 96). RMN-1H (CDC13, ppm) : 8,16 (1H, s large, ArCH) ; 7,12 (3H, m, ArCH) ; 4,56 (1H, m, NCHCO) ; 4,25 (1H, m, NCHCH2N) ; 3,143,40 (4H, m, 2 x NCH2) ; 1,12-1,81 (8H, m, 4 x CH2) ; 1,34 (18H, s, 2 x tert.butoxycarbonyle) ; 0,8-1,0 (6H, m, 2 x CH3). Spectre de masse (EI) : m/e = 489 (M+). e/ Préparation du composé en titre sous forme de dichlorhydrate Le composé obtenu à l'étape précédente (90 mg, 0,184 mmole) est traité par un mélange à froid HCl concentré (1 ml) et d'acide acétique glacial (9 ml). La solution est agitée 1 heure 30 minutes et les solvants éliminés pour obtenir le produit. P.F. = 113-8 C. Pureté CLHP (Kromasil C-18 ; eau/méthanol/acide trifluoroacétique 70:30:0,1) . 100 %. RMN-1H (CD30D, ppm) 8,01 (1H, m, ArCH) 7,0-7,28 (3H, m, ArCH) ; 4,31 (1H, m, NCHCO) ; 3,91 (1H, t, NCHCH2N) ; 2,953,08 (4H, m, 2 x CH2) ; 1,88 (2H, m, CH2) ; 1,64 (2H, m, CH2) 1,32 (2H, dd, CH2) ; 1,08 (2H, m, CH2) ; 0,92 (3H, t, CH3) 0,86 (3H, t, CH3). Spectre de masse (FAB) : 290 (M+ + 1) Microanalyse : C17H29N3OCl2.1,8H2O : Trouvé : C = 51,83 % ; H H = 8,21 % ; N = 10,34 %; Calculé : C = 51,72 % ; H = 8,32 % ; N = 10,64 %. Exemple 28 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl)2(R/S)-(5-méthoxy)indolinecarboxylique n-butylamide (UCL 1486 H); voie 12 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = R6 = OCH3 ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n. C4 H9 a/ Préparation de l'ester éthylique de l'acide 5-méthoxy2-indolecarboxylique : composé XXXXII On traite de la p-Anisidine (61,5 g, 499 mmoles) dans 500 ml d'HCl 15 % contenant 500 g de glace par adjonction goutte à goutte pendant 5 minutes d'une solution de nitrite de sodium (37,5 g, 543 mmoles) dans l'eau (100 ml). On ajoute 3 g de charbon activé et on agite le mélange 10 minutes.Après filtration, le filtrat est rapidement ajouté à du 2méthylacétoacétate d'éthyle (80 g, 554 mmoles) et de l'acétate de sodium anhydre (410 g, 4,998 moles), dans de l'éthanol (500 ml) contenant 500 g de glace. Le mélange est agité 2 heures puis extrait au toluène (3 x 500 ml). Les extraits sont séchés (Na2SO4) et le solvant éliminé pour obtenir du 1-(p méthoxyphénylazo)-1-méthyl acétoacétate d'éthyle brut sous forme d'une huile. Cette huile est ajoutée à une solution froide de HCl dans l'méthanol (38-40 % en poids). Le mélange est porté et maintenu au reflux pendant 40 minutes. Le mélange est agité 2 heures à température ambiante, additionné d'eau (150 ml) puis réfrigéré.Le produit se sépare sous forme de cristaux orange qui sont reccueillis et lavés à méthanol froid puis à l'eau. On obtient 79,5 g (rendement 72,6 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 9,03 (1H, s large, NH) ; 7,31 (1H, dd, ArCH) ; 7,14 (1H, t, ArCH) ; 7,07 (1H, d, ArCH) ; 6,99 (1H, dd, ArCH) ; 4,40 (2H, q, CH2) ; 3,84 (3H, s, CH30) ; 1,43 (3H, t, CH3CH2). b/ Préparation de l'acide 5-méthoxy-2(R/S)-indoline carboxylique n.butylamide : composé XXXXIV. Le produit de l'étape a/ (10 g, 53 mmoles) est dissout dans du méthanol (100 ml) et traité par du magnésium (3,6 g, 150 mmoles). La température de réaction est maintenue à 15-20"C par refroidissement externe et le mélange agité pendant la nuit. Puis il est dilué par 300 ml d'eau et extrait par du chlorure de méthylène (4 x 100 ml). Les extraits sont séchés (Na2SO4) et le solvant éliminé pour donner l'ester méthylique de l'acide 5-méthoxy-2(R/S)-indolinecarboxylique (composé XXXXIII). Celui-ci est dissout dans la butylamine (40 ml) et amené au reflux sous azote pendant 3 heures. L'amine en excès est éliminée et le résidu cristallisé à partir d'éther pour donner le composé XXXXIV (9,00 g, rendement 82 %). P.F. 119-121"C. RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,2 (1H, s, NHCO) ; 6,6-6,7 (3H, m, ArCH) ; 4,37 (1H, t, NHCHCO) ; 3,90 (1H, s, NH indoline) ; 3,73 (3H, s, OCH3) ; 3,54 (1H, dd, ArC(H)H) ; 3,27 (2H, m, NHCH2) 3,05 (1H, dd, Ar-C(H)H) ; 1,2-1,5 (4H, m, CH3(CH2)2), 0,89 (3H, t, CH3(CH2)2)- c/ Préparation de l'acide l-(N-benzyloxycarbonyl)- 2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-méthoxy)indolinecarboxylique n.butylamide : composé XXXXV 2,37 g (10 mmoles) d'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique, obtenu selon l'exemple 3a/, et le composé obtenu par l'étape b/ (2,48 g, 10 mmoles) sont dissous dans du chlorure de méthylène anhydre et refroidit à 0 C. Le mélange est traité par de la triéthylamine (2,03 g, 20 mmoles) puis par le chlorure bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)phosphinique (2,8 g, 10 mmoles). Le mélange réactionnel est agité pendant la nuit à température ambiante. Il est lavé par une solution d'acide citrique à 10 96 (3 x 100 ml) puis une solution de bicarbonate de sodium à 5 % (3 x 100 ml), sèché (Na 2SO 4) et le solvant est éliminé. Le produit est purifié par chromatographie sur gel de silice, éluant acétate d'éthyle/pétrole 1:2. On obtient 3,4 g (rendement 72,6 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 8,0 (0,5H, m, NH) ; 7,2-7,3 (5H, m, Ph) ; 6,6-7,1 (3,5H, m, NH et ArCH indoline) ; 4,7-5,7 (4H, m, PhCH2, NH, NCHCO de l'acide butyrique); 4,0-4,3 (1H, m, NCHCO indoline) ; 3,78 (3H, s, OCH3) ; 3,45 (1H, m, ArCH(H) indoline) ; 3,0-3,2 (3H, m, NHCH2, ArCH(H) indoline) ; 0,7-2,0 (12H, 3 x CH2, 2 x CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e = 468 (M+ + 1). d/ Préparation du composé en titre sous la forme de sel d'oxalate Le composé de l'étape c/ (2,8 g, 6 mmoles) est dissous dans 100 ml de méthanol contenant du palladium sur charbon (10 %, 0,8 g, 50 % d'humidité) et le mélange est hydrogéné à 40 psi pendant 2,5 heures. Le catalyseur est éliminé par filtration et le solvant éliminé. Le résidu est traité par l'acide oxalique (0,85 g, 9,4 mmoles) dans de l'éthanol (10 ml) puis de l'éther (500 mi) le produit précipite. On obtient 1,86 g (rendement 72 %). Microanalyse : C18H27N303.(COOH)2.0,25H20 Trouvé : C = 56,i4 % ; H = 6,98 % ; N = 9,57 % Calculé : C = 56,13 % ; H = 6,95 % ; N = 9,82 % Spectre de masse (FAB) : m/e = 333 (M+) RMN-1H (DMSO-d6, ppm) : 8,3-9,1 (ArCH masqué) ; 7,97 (1H, dd, CONH) ; 6,7-7,0 (2H, m, ArCH) ; 4,9-5,3 (1H, m, NCHCO indoline) ; 3,2-3,9 (5H, m, CH30, NCHCO butyle, ArCH(H)) ; 2,73,2 (3H, m, CONHCH2, ArCH(H)) ; 1,0-2,0 (6H, m, CH3CH2, CH3(CH2)2) ; 0,7-1,0 (2 x CH3CH2). Pureté CLHP (Kromasil C-18 J Méthanol/eau/acide trifluoroacétique 50:50:0,1) : 99,92 %. (Rapport diastéréoisomérique 39,37 : 60,55) e/ Séparation optique de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl) 2(R/S)-(5-méthoxy)indoiinecarboxyiique n-butylamide (UCL 1486 H) L'acide l-(N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyryl 2(R/S)-(5-méthoxy)indolinecarboxylique n.butylamide (composé XXXXV) est séparé en ses diastéréoisomères par chromatographie sur colonne sur gel de silice en utilisant comme éluant un mélange chlorure de méthylène/diéthyléther (10:1). L'isomère (S,S) est élué en premier. Il est recueilli et recristallisé dans du méthanol puis le groupe protecteur benzyloxycarbonyle est éliminé par hydrogénation en présence de palladium sur charbon dans le méthanol pendant 2 heures et 30 minutes sous une pression d'hydrogène de 60 psi, comme décrit ci-dessus. Le catalyseur est éliminé par filtration et le résidu est traité avec de l'acide oxalique dans le méthanol puis l'éther pour conduire au sel d'oxalate (UCL 1704-H). P.F. = 185-190"C Microanalyse : C18H27N3O3.1,4C2H2O4.0,5H2O : Trouvé : C = 53,3 % ; H = 6,81 % ; N = 9,05 % Calculé : C = 53,3 % ; H = 6,63 % ; N = 8,97 % L'isomère (S,R) est élué en second. I1 est traité d'une manière similaire à l'isomère (S,S) pour obtenir le sel d'oxalate (UCL 1705-H). P.F. = 95-105"C Microanalyse : C18H27N303. 1, 35C2H204 Trouvé : C = 54,4 % ; H = 6,55 % ; N = 9,45 % Calculé : C = 54,1 % ; H = 6,58 % ; N = 9,24 % Exemple 29 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl) 2(R/S)-(6-méthoxy)indolinecarboxylique n-butylamide (UCL 1546 H); voie 12 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = R6 = OCH3 ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4Hg On procède comme à l'exemple 28. On obtient le composé en titre sous forme de sel d'oxalate avec un rendement de 70 %. Microanalyse : C18H27N303.(COOH)2.H20 Trouvé : C = 54,54 96 ; H H = 7,08 % ; N = 9,52 % Calculé : C = 54,41 % ; H = 7,08 96 ; N = 9,52 % ; RMN-1H (DMSO-d6, ppm) : 8,5 (1H, b, NH) ; 7,3-8,2 (6H, m, NH3+,ArCH, H2O) ; 7,0-7,2 (lH, m, ArCH) ; 6,5-6,7 (1H, m, ArCH) ; 5,05 (1H, dd, NCHCOindoline) ; 3,2-4,1 (5H, m, CH3O, ArCR(H), NCHCO butyryle) ; 2,7-3,2 (3H, m, NCH2, ArCH(H)) 1,5-2,0 (2H, m, CH2) ; 1,0-1,5 (4H, m, 2 x CH2) ; 0,7-1,0 (6H, m, 2 x CH3). Pureté CLHP (Kromasil C-18 ; méthanol/eau/acide trifluoroacétique 50:50:0,1) : 98,2 %. (Rapport diastéréoisomérique 39,4 : 58,8) Exemple 30 : Préparation de I'acide 1-(2(S)-aminobutyryl)2(R/S)-(5-fluoro)indolinecarboxylique n-butylamide (UCL 1534 H) ; voie 12 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = R6 = F ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4H9 a/ Préparation de l'ester éthylique de l'acide (5-fluoro)2-indole carboxylique : composé XXXXII On procède comme à l'exemple 28a/ pour préparer le 1-[p-fluorophénylazo)-1-méthyl acétoacétate d'éthyle à partir de p-fluoroaniiine et de 2-méthylacétoacétate d'éthyle (Rendement brut 62g). On le dissout dans 270 ml d'acide acétique contenant 15 ml d'acide sulfurique, puis le mélange est porté au reflux pendant 15 minutes.Après refroissement à la température ambiante, on ajoute 500 ml d'eau et on extrait le mélange à l'éther (500 ml) et au chlorure de méthylène (500 ml). Les extraits mélangés sont lavés à l'eau (1000 ml) et avec une solution de carbonate de potassium à 10% (300 ml), séchés et le solvant éliminé. Le produit est alors obtenu par cristallisation dans l'éthanol. On obtient 6,8 g, (Rendement 14 %). RMN-1H (CDC13, ppm) : 7,0-7,4 (4H, m, ArCH) ; 4,41 (2H, q, CH2) ; 1,40 (3H, t, CH3). b/ Préparation de l'acide 5-fluoro-2(R/S)-indoline carboxylique n.butylamide : composé XXXXIV. On procède comme à l'exemple 28 bI. Rendement 62 9s. P. F. : 93-50C. RMN-1H CDCl3, ppm) 7,12 (1H, b, NH) ; 6,6-6,9 (3H, m, ArCH) ; 4,42 (1H, t, NHCHCO) ; 4,03 (1H, b, NH) ; 3,56 (1H, dd, ArCH(H)) ; 3,27 (2H, m, CH2NH) ; 3,05 (1H, m, ArCH(H)) ; 1,2- 1,7 (CH3(CH2)2) ; 0,90 (3H, t, CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e = 237 (M+ + 1). c/ Préparation de l'acide 1-(N-(benzyloxycarbonyi)- 2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-fluoro)indolinecarboxylique n.butylamide : composé XXXXV On procède comme à l'exemple 28c/, puis on purifie le produit par une chromatographie sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle/pétrole 1:1). Rendement 54R. P.F. 192-3 C. RMN-1H (CDCl3, ppm) : 8,05 (1H, b, NH) ; 7,2-7,4 (5H, m, Ph) ; 6,8-7,1 (4H, m, NH, ArCH indoline) ; 4,7-5,4 (4H, m, PhCH2, 2 x NCHCO) ; 3,5 (2H, m, ArCH2 indoline) ; 3,2 (2H, m, CH2NHCO) ; 0,7-2,0 (12H, m, CH3CH2 et CH3(CH2)2). dl Préparation du composé en titre sous forme de sel d'oxalate On procède comme à l'exemple 28 d/. Rendement 68 %. Microanalyse : C17H24FN302.(COOH)2.0,75H20 Trouvé : C = 53,58 % ; H = 6,60 % ; N = 10,25 % Calculé : C = 53,70 % ; H = 6,52 % ; N = 9,89 % RMN-1H (DMSO-d6, ppm) : 8,60 (1H, b, NH) ; 7,8-8,1 (1H, m, ArCH) ; 7,2 -7,8 (4H, b, NH3+ et H2O) ; 6,8-7,2 (2H, m, ArCH) 5,0-5,2 (1H, m, NHCHCO indoline) ; 2,6-3,8 (5H, m, NCHCO butyryle, ArCH2, CH2NHCO) ; 1,5-2,0 (2H, m, CH2) ; 1,0-1,5 (4H, m, 2 x CH2) ; 0,6-1,0 (6H, m, 2 x CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e = 322 (M++1). Pureté CLHP (Kromasil C-18, méthanol/eau/acide trifluoroacétique 50:50:0,1) : 100 %. (Rapport diastéréomérique 36,1 : 63,9) el Séparation optique de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl)2(R/S)-(5-fluoro)indolinecarboxylique n-butylamide (UCL 1534-H) On sépare l'acide 1-(N-(benzyloxycarbonyl)-2(S)-amino- butyryl)-2(R/S)-(5-fluoro)indolinecarboxylique en ses diastéréoisomères par chromatographie sur colonne sur gel de silice en utilisant comme éluant un mélange éther de pétrole (P.E. = 60-80 C)/éthanoate d'éthyle (2:1). L'isomère (S,R) est élué en premier. Il est recristallisé dans un mélange pétrole/diéthyléther puis déprotégé par hydrogénation comme indiqué à l'exemple 28 el. On obtient l'isomère (S,R) sous forme de sel d'oxalate (UCL 1703-H). P.F. = 173-177 C Analyse : C17H24FN302.C2H204.H20 Trouvé : C = 52,9 % ; H = 6,37 % ; N = 9,52 % Calculé : C = 53,1 % ; H = 6,57 % ; N = 9,78 % L'isomère (S,S) est élué en second et traité d'une manière analogue au premier isomère pour sa purification et sa déprotection. On obtient l'isomère (S,S) également sous forme de sel d'oxalate (UCL 1702-H). P.F. = 105-110 C Microanalyse : C17H24FN302.C2H204.H20 Trouvé : C = 52,9 % ; H = 6,37 % ; N = 9,70 % Calculé : C = 53,1 % ; H = 6,57 % ; N = 9,78 % Exemple 31 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl)2(R/S)-(5-benzyloxy)indolinecarboxylique n-butylamide (UCL 1535-A); voie 12 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = R6 = OCH2Ph ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4Hg On procède comme à l'exemple 28. L'acide 1-(N-(tert.butoxycarbonyl)-2(S)-aminobutyryl)- 2(R/S)-(5-benzyloxy)indolinecarboxylique n-butylamide (3,56 g, 7 mmoles) est dissout dans l'acétate d'éthyle (20 ml) puis traité par HCl dans de l'acétate d'éthyle (3 M, 25 ml). Le mélange est agité à température ambiante pendant 1h et le solide formé est recueilli, lavé et séché. Le composé en titre est isolé sous forme de chlorhydrate. On obtient 0,9 g (Rendement 30,2 %). Microanalyse : C24H32N303C1 Trouvé : C = 63,28 % ; H = 6,92 % ; N = 9,20 % Calculé : C = 63,36 % ; H = 7,31 % ; N = 9,24 % RMN-1H (DMSO-d6, ppm) . 8,7 (0,9H, s large, NH d'un diastéréoisomère) ; 8,5 (s large, NH3+ et H20) ; 8,07 (0,1H, NH du second diastéréoisomère) ; 7,93 (1H, d, ArCH) ; 7,2-7,5 (5H, m, ArCH) ; 6,93 (1H, s, ArCH) ; 6,84 (1H, dd, ArCH) ; 5,35 (0,9H, dd, NCHCO indoline d'un diastéréoisomère) ; 4,9-5,2 (2,1H, PhCH2, NCHCO indoline du second diastéréoisomère) ; 4,7 (0,1H, m, NCHCO butyryle d'un diastéréoisomère) ; 3,92 (0,9H, m, NCHCO butyryle du second diastéréoisomère) ; 3,4-3,7 (1H, m, ArCH(H) indoline) ; 2,8-3,1 (3H, m, ArCH(H) indoline, NCH2) 1,5-2,0 (2H, m, CH2) ; 1,05-1,5 (4H, m, 2 x CH2) ; 0,7-1,0 (6H, m, 2 x CH3). Spectre de masse (FAB) : m/e = 410 (M++1). Pureté CLHP (Kromasil C-18, méthanol/eau/acide trifluoroacétique 70:30:0,1) : 98,93 *. (Rapport diastéréomèrique 85,83 : 13,1). Exemple 32 : Préparation de l'acide 1-(2(S)-aminobutyryl) 2(S)-t(3aS,7aS)-perhydro]indolinecarboxylique n-butylamide (UCL 1442-H); voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 et m = 1 ; R3 = R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4Hg a/ Préparation de l'acide 2(S)-[(3aS,7aS)perhydro]indoline carboxylique sous forme de sel de N-acétate. Une solution d'acide 2(S)-indolinecarboxylique (2,5 g, 15,32 mmoles) dans l'acide acétique contenant PtO2 (lg) est hydrogénée à 55 C pendant 2 heures à 60 psi. Le catalyseur est éliminé par filtration et le solvant éliminé sous vide pour donner un résidu brut qui est cristallisé à partir de diéthyl éther pour donner, après filtration et lavage à l'éther, un solide blanc. On obtient 1,28 g (Rendement 27,5 %). P.F. 247-248 C. RMN-1H (200 MHz, CD30D, ppm) 4,05-3,90 (1H, m, H junction) ; 3,70-3,55 (1H, m, &alpha;H) ; 2,45-2,20 (2H, m, CH2 COOH) ; 2,15-1,25 (12H, m, CHcyciohexyle, H junction et CH3 AcOH). b/ Préparation de l'acide N-(benzyloxycarbonyl)- 2(S)-t(3aS,7aS)perhydro]indolinecarboxylique. Une solution du composé obtenu par l'étape a/ (1,28 g, 5,58 mmoles) dans NaOH 2N (30 ml) est refroidie dans un bain eau-glace et agitée vigoureusement. Du chloroformiate de benzyle (0,95 ml, 6,65 mmoles) et de la soude 2N (30 ml) sont ajoutés (en environ 10 parties). La température du mélange réactionnel est maintenue entre 5 et 10 C en jouant sur la vitesse d'addition des réactifs. 40 ml de soude 2N sont ajoutés et le mélange est maintenu à température ambiante pendant 30 minutes. La solution alcaline est lavée avec de l'éther (4 x 50 ml) puis acidifiée à pH RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,14 (5H, s large, ArCH) 5,05 (2H, s large, H benzyle) ; 4,20-4,10 (1H, m, H junction) 4,00-3,75 (1H, m, AH); 2,20-1,00 (11H, m, CH2 cyclohexyle, H junction, CH2COOH). cl Préparation de l'acide N-benzyloxycarbonyl2(S)-[(3aS,7aS)perhydro]indolinecarboxylique n.butylamide On procède comme à l'exemple 15 étape c/ en utilisant le produit obtenu à l'exemple 32 étape b/. On dissout 1,40 q du produit issu de l'étape précédente (4,61 mmoles) dans 50 ml de tétrahydrofuranne anhydre et 0,58 ml de 4-éthylmorpholine (4,61 mmoles) sont ajoutés à une température de 0 C. Cette solution est refroidie à -5 C et 0,60 ml d'isobutylchloroformiate (4,61 mmoles) sont ajoutés goutte à goutte. Après 30 minutes à -5 C, 0,46 ml de butylamine (4,61 mmoles) sont ajoutés à la solution puis le mélange est laissé durant une nuit à température ambiante. On ajoute alors 70 ml de dichlororométhane et cette solution est lavée avec 3x50 ml d'acide citrique 10%. Après agitation vigoureuse, les phases sont séparées.La phase organique est lavée avec 2x50 ml de NaHCO, 5%. Après séchage sur MgSO, la solution est évaporée sous vide et on obtient 1,70 g d'amide brut (Rendement 98%) qui est utilisé sans autre purification. RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,30 (5H, s large, ArCH) 5,05 (2H, s large, H benzyle) ; 4,20 (1H, m, oeH) ; 4,00-3,80 (1H, m, H junction) ; 3,80-3,60 (1H, m, NH) ; 3,20-3,00 (2H, m, CH2-NH butylamide) ; 2,30-1,00 (15H, m, CH2 cyclohexyle, CH2 CH2-BuNH, H junction, CH2-COOH) ; 1,00-0,80 (6H, m, CH3 butylamide). d/ Préparation de l'acide 2-[(2S,3aS,7aS)perhydro]indoline carboxylique n. butylamide Le produit de l'étape cJ (1,70 g, 4,54 mmoles) en solution dans 200 ml de méthanol est hydrogéné à température ambiante pendant 2 heures 30 minutes à 60 psi en utilisant comme catalyseur 0,6 g de Pd/C (10%, humide). L'amide est isolé sous forme d'huile. RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,80 (1H, s large, NH) 3,90-3,80 (1H, m, crH) ; 3,50-3,00 (3H, m, -CH2-NH- BuNH-, H junction) ; 3,00-1,05 (15H, m, -CH2- cyclohexyle, H junction, -CH2- butylamide) ; 0,95 (3H, t, CH3 butylamide). e/ Préparation de l'acide 1-(N-benzyloxycarbonyl)-2(S)aminobutyryl)-2(S)-[(3aS,7aS) perhydro]indolinecarboxylique n.butylamide. On dissout de l'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)aminobutyrique obtenu comme à l'exemple 3 a/ (0,95 g, 4 mmoles) dans 45 ml de tétrahydrofuranne anhydre et on rajoute 0,51 ml de 4-éthylmorpholine (4,01 mmoles) à 0 C. Cette solution est refroidie à -5 C et traitée goutte à goutte par de l'isobutylchloroformiate (0,52 ml, 4,01 mmoles). Après 30 minutes à -5 C, on ajoute au mélange le composé de l'étape d/ (0,90 g, 4,01 mmoles) en solution dans 5 ml de tétrahydrofuranne anhydre et le mélange ainsi obtenu est laissé durant une nuit à température ambiante. On ajoute ensuite 50 ml de dichlorométhane, puis le mélange est lavé avec 3 x 50 ml d'une solution d'acide citrique 10 %. La phase organique est lavée avec 2 x 50 ml de NaHCOo 5%. Après séchage sur MgSO, la solution est évaporée sous-vide et on obtient un produit brut que l'on purifie par chromatographie éclair sur silice en éluant avec un mélange acétate d'éthyle/éther (15:85 puis 35:65). Ceci permet d'obtenir 0,66 g du produit désiré sous forme d'huile. On la sèche durant une nuit à pression réduite sur P@O@. RMN-1H (200 MHz, CDCl3, ppm) : 7,20 (5H, s large, ArCH) 6,90 (1H, s large, -NH-) ; 5,45 (1H, d, -NH-) ; 5,10-4,95 (2H, m, H benzyle) ; 4,50-4,30 (2H, m, H junction et aH) ; 4,10-4,00 (1H, m, c*H) ; 3,20-3,00 (2H, m, -CH2- butylamide) ; 2,65-1,00 (17H, m, -CH2- cyclohexyle, H junction, -CH2- aminobutyryle, -CH2- butylamide) ; 1,00-0,90 (6H, m, CH3 aminobutyryle et CH3 butylamide). Spectre de masse (FAB) m/e (% intensité) : 444 (MH+, 13,5) ; 225 (56) ; 124 (100) ; 91 (91). f/ Préparation du composé en titre Une solution du composé obtenu à l'étape e/ (0,66 g, 1,49 mmole) dans 100 ml de méthanol est hydrogénée pendant 3 heures en utilisant un catalyseur Pd/C (0,25 g, 10%, humide) à 60 Psi. Le catalyseur est éliminé par filtration et le solvant évaporé sous vide. On ajoute 0,18 g d'acide oxalique (1,98 mmole) à l'huile brute ainsi obtenue, dans de l'éthanol, puis on y ajoute de l'éther. Après cristallisation, filtration et séchage sous vide, on obtient 0,375 g (62,5%) du produit désiré. P. F. : 168-9 C (capillaire ouvert) RMN-1H (400 MHz, CD30D, ppm) : 4,30-4,25 (1H, m, aH) 4,05-3,85 et 3,40-3,35 (2H, m, aH et 7aH) ; 3,15-2,98 (2H, m, -CH2-NH- BuNH2) ; 2,33-2,15 (1H, m, 3aH) ; 2,05-1,50 (9H, m, -CH2- aminobutyryle, -CH2- perhydroindoline) ; 1,45-1,05 (7H, m, -CH2-CH2- BuNH2 et H proline) ; 0,95-0,75 (6H, m, -CH3 aminobutyryle et -CH3 BuNH2). CLHP (colonne : Kromasil C-18 (250 mm x 4,6) 5 pm détecteur : u.v. 215 nm ; débit : 1 ml/minute ; phase mobile A/B = 50/50 avec A = H20 + 0,1 % acide trifluoroacétique et B = CH30H + 0,1 % acide trifluoroacétique) : pic majoritaire 98,5 %, temps de rétention = 19,8 minutes ; pic minoritaire 1,4 %, temps de rétention = 18,9 minutes. Spectre de masse (FAB) . m/e (% intensité) = 332 (MH + Na)+, 1) ; 310 (MH+, 100) ; 225 (75) ; 124 (66) ; 59 (C7H7+, 43). IR (disque KBr, cm1) ) : 3342 (NH3+, vague) ; 3049 (NH, vague) ; 2937 (CH, s) ; 2857 (CH, s) ; 1745 (C=O, s) ; 1682 (s) ; 1652 (s). Microanalyse : C17H31N2O2.1,0C2H2O4.0,3H2O Trouvé : C = 56,34 * ; H = 8,37 % ; N = 10,33 % Calculé : C = 56,36 % ; H = 8,36 % ; N = 10,38 % Exemple 33 : Préparation de l'acide 2-(2(S)-aminobutyryl)l-(R/S)-isoindolinecarboxylique n-butylamide (UCL 1466-H); voie 4 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 1 et m = 0 ; R3 = R4 = CO-NH-R5 ; R5 = n.C4Hg al Préparation de l'acide o. (bromométhyl)phénylacétique. On dissout de l'acide o-tolylacétique (40 g, 266 mmoles), du N-bromosuccinimide (52,147 g, 293 mmoles) et du peroxyde de benzoyle (0,174 g, catalytique) dans 300 ml de CCl@. La suspension est portée au reflux et y est maintenue pendant 12 heures. Après refroidissement, les particules solides sont séparées par filtration et le CCl4 est évaporé sous vide, laissant apparaître un solide blanc. Celui-ci est suffisamment pur sans recristallisation (rendement 90 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,25 (4H, m, ArH) ; 4,3 (2H, s, CH2COOH) ; 3,7 (2H, s, CH2Br). b/ Préparation de l'ester méthylique de l'acide o.(bromométhyl)phénylbromoacétique. L'acide issu de l'étape a/ est dissout dans 44 ml de SOCLE et chauffé pendant 3 heures à 55 C. Le SOCL@ est éliminé sous vide et, l'huile brune qui en résulte est traitée par 26 ml de Br: en irradiant par une lampe UV de 450 W pendant 2 heures. Après addition, le brome est évacué par distillation sous vide et le résidu noir est versé dans 305 ml de méthanol. Le méthanol est ensuite éliminé et il reste une huile noire qui est distillée sous une pression de 0,1 mm Hg. Les fractions de distallation qui sortent entre 120 et 1300C sont récupérées (Rendement 60%). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,0-7,50 (4H, m, ArH) ; 5,7 (1H, s, CH) ; 4,3 (2H, d, CH2Br) ; 3,7 (3H, s, CH3). cl Préparation de l'ester méthylique de l'acide N-benzyl1(R/S)-isoindoline carboxylique sous forme de chlorhydrate. L'ester méthylique (46,4 g, 144 mmoles) issu de l'étape b/ est dissout dans du toluène anhydre (288 ml) sous azote. On ajoute 46,35 g de benzylamine (864 ml) en utilisant un mélange glace/sel. Le mélange est agité pendant 72 heures. Ensuite, l'hydrobromure d'amine est éliminé par filtration et le toluène évacué sous vide. On dissout dans l'éther l'huile jaune obtenue et on y fait buller du HCl pour obtenir le chlorhydrate (Rendement 50%). P.F. : 160-1610C RMN-1H (D20, ppm) : 7,00 (9H, m, ArH) ; 5,20 (1H, s, aH) 4,10 (2H, d, CH2 cycle) ; 4,00 (2H, d, CH2Bn) 3 3,10 10 (3H, s, CH3). d/ Préparation de l'ester méthylique de l'acide 1(R/S)isoindoline carboxylique sous forme de chlorhydrate Le produit de l'étape c/ (5 g, 16mmoles) est dissout dans 100 mi d'éthanol et on ajoute du Pd/C (10%, humide). La suspension est agitée sous 40 psi d'hydrogène à 500C et pendant 8 heures. Le catalyseur est extrait par filtration et l'éthanol concentré à un petit volume. L'addition d'éther permet de faire apparaître des cri taux blancs. Le degré de pureté du produit est suffisant et ne nécessite pas une recristallisation (Rendement 90 %). P. F. : 159-1610C RMN-1H (CD30D, ppm) : 7,25-7,30 (4H, m, ArH) ; 5,50 (1H, s, H) ; 4,50 (2H, d, CH2 cycle) ; 3,8 (3H, s, CH3). e/ Préparation de l'ester méthylique de l'acide 2-(N-(benzyioxycarbonyl )-2(S)-aminobutyryl)-1(R/S)-isoindoiine carboxylique. L'acide N-benzyloxycarbonyl-2(S)-aminobutyrique (composé de l'exemple 3 étape a/) (2,62 g, 11,04 mmoles) est dissout dans 100 ml de tétrahydrofuranne sous azote et refroidi sur un mélange glace/sel. On ajoute de la N-éthylmorpholine (1,27 g, 11,04 mmoles) puis du chloroformiate d'isobutyle (1,51 g, 11,04 mmoles). Après 30 minutes, on ajoute le composé issu de l'étape d/ (2,347 g, 11,04 mmoles). L'agitation est maintenue durant toute une nuit. Le mélange est alors versé dans 200 ml de CHzClz lavé avec 3x100 ml d'acide citrique (10%) puis avec 3x100 ml de NaHCO2 (58), séché et évaporé jusqu'à obtenir une huile claire (Rendement 50 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,25 (9H, m, ArH) ; 5,75 (1H, m, csH) ; 5,10 (2H, s, CH2 benzyloxycarbonyle) ; 4,60-5,00 (3H, m, ""H, CH2 cycle) ; 3,8 (3H, s, OCH3) ; 1,60-2,00 (2H, m, CH2 aminobutyryle) ; 1,0 (3H, m, CH3 aminobutyryle). f/ Préparation de l'acide 2-(N-benzyloxycarbonyl2(S)-aminobutyryl)-l(R/S)-isoindolinecarboxylique. Le composé de l'étape e/ (3,422 g, 8,6 mmoles) est dissout dans 69 ml de méthanol. On ajoute 8,6 ml de NaOH 2N et la solution est mise sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. On ajoute ensuite 172 ml d'eau et on évacue le méthanol sous vide. La solution est acidifiée avec du HCl concentré jusqu'à pH 2 et la suspension qui en résulte est extraite par CHrClz. Après séchage, le CHzClr est évacué. Il reste une huile (Rendement 90 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) : 7,00-7,30 (9H, m, ArH) ; 5,75 (2H, m, CH2 cycle) ; 4,8-5,2 (3H, m, zH, CH2 benzyloxycarbonyle) 4,60 (1H, m, &alpha;H) ; 1,90 (2H, m, CH2 aminobutyryle) ; 1,0 (3H, m, CH3 aminobutyuryle). g/ Préparation de l'acide 2-(N-benzyloxycarbonyl2(S)-aminobutyryl)-1(R/S)-isoindolinecarboxylique n-butylamide. Le composé de l'étape fl (2,70g, 7,07mmoles) est dissout dans 100 ml de tétrahydrofuranne sous azote et refroidi sur un mélange glace/sel. On ajoute ensuite de la N-éthylmorpholine (0,814 g, 7,07 mmoles), puis de l'isobutylchloroformiate (0,966 g, 7,07 mmoles). Après 30 minutes, on ajoute de la n-butylamine (0,517 g, 7,07 mmoles) et on maintient l'agitation durant toute une nuit. Le mélange est versé dans 200 ml de CHzClz, lavé avec 3x100 ml d'acide citrique (108) puis avec 3x100 ml de NaHCO: (5%), séché et évaporé jusqu'à obtention d'une huile claire (Rendement 80 %). RMN-1H (CDCl3, ppm) 7,25 (9H, m, ArH) ; 5,20-5,30 (2H, m, CH2 cycle) ; 4,80-5,10 (3H, m, zH, CH2 benzyloxycarbonyle) 4,00-4,25 (1H, m, aH) ; 3,0 (2H, m, CH2N) ; 1,00-1,90 (6H, m, CH2 aminobutyrle, CH3CH2CH2) ; 0,8-1,5 (6H, m, CH3 aminobutyryle, CH3 butyle). h/ Préparation du composé en titre sous la forme de sel d'oxalate Le composé de l'étape g/ est hydrogéné de la même manière qu'à l'exemple 5 étape c/, et le produit est isolé en tant que sel d'oxalate (Rendement 90 %). P. F. : 90-920C. RMN-1H (CD30D, ppm) : 7,00-7,25 (4H, m, ArH) ; 5,30 (1H, m, NCHCO) ; 4,8-5,0 (2H, m, CH2 isoindoline) ; 3,25 (1H, m, NCHCO) ; 2,90-3,00 (2H, m, CH2N) ; 1,50-2,00 (2H, m, CH2 aminobutyryle) ; 0,8-1,2 (10H, m, CH3CH2CH2 CH3 aminobutyryle). Microanalyse :C17H25N3O2.C2H2O4.1,25H2O Trouvé : C = 54,98 % ; H = 7,30 % ; N = 10,66 % Calculé : C = 54,86 % ; H = 7,15 % ; N = 10,10 % Exemple 34 : Préparation du 1-(2(S)-aminobutyryl) (R/S)-nipécotamide (UCL 1378-H); voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 1 et m = 0 R3 = -(CH2)2-CH(CONH2)- ; R4 = H On procède comme pour les exemples précédents selon la voie 3. P.F. = 149-150 C RMN-1H (200 MHz, CD30D, ppm) : 4,3-4,5 (2H, m, 2 x CH) 3,6-4,0 (2H, m, CHCH2N nipécotamide) ; 2,8-3,1 (2H, m, CH2CH2N nipécotamide) ; 1,4-2,1 (6H, m, CH2CH2CH nipécotamide, CH2 aminobutyryle) ; 1,00 (3H, m, CH3 aminobutyryle). IR (nujol, cm-1) : 1570 (N-H amide) ; 1650 (C=O amide). Exemple 35 : Préparation de la L-valyl-L-proline cyclohexylméthylamide (UCL 1331-J) ; voie 1 R1 = CH(CH3)2 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = CH2C6H11 On procède comme pour les autres exemples de composés à squelette proline préparés selon la voie 1 et on obtient le composé en titre sous forme de sel d'oxalate. P.F. = 157-158 C IR (nujol, cm-1) : 3369-3265 (N-H) ; 3600-2400 (OH) ; 2935 (nujol) ; 1745-1635 (C=O) ; 1459-1375 (nujol). RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6, ppm) : 7,85-7,9 (1H, t, NH) 4,28-4,35 (1H, q, oeH proline) ; 3,94-3,97 (1H, d, aH valine) 3,5-3,7 (2H, m, -CH2N- proline) ; 2,82-2,95 (2H, m, -NH-CH2 C6H1l) ; 1,51-2,50 (10H, m, -NCH2CH2CH2-proline, CH(CH3)2, -CH2CHCH2-cyclohexyle) ; 0,74-1,4 (12H, m, -CH2CH2CH2- cyclohexyle et 2 x CH3-). Microanalyse : C17H31N3O2.(COOH)2.O,2H2O : Trouvé : C = 56,87 % ; H = 8,42 % ; N = 9,98 % Calculé C = 56,61 % ; H = 8,35 % ; N = 10,42 % Exemple 36 : Préparation de la L-valyl-L-proline benzylamide (UCL 1353-H) ; voie 1 R1 = CH(CH3)2 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = -CH2Ph On procède comme pour les autres composés à squelette proline préparés selon la voie 1 et on obtient le composé en titre sous forme de sel d'oxalate. P.F. = 143-144 C IR (KBr, cm-1) . 3111 (C-H) ; 3073 (C-H) ; 2968 (C-H) 1695 (C=O) ; 1670 (C=O) ; 1639 (C=O) ; 1618-1556-1498 (C=C dans Ph). RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6, ppm) : 8,50-8,53 (1H, m, NH) 7,30-7,34 (5H, m, H aromatique) ; 4,24-4,39 (3H, m, Ph-CH2, aCH proline) ; 3,97-4,0 (1H, m, cCH valine) ; 3,45-3,99 (2H, m, -NCH2-proline) 1 1,76-2,17 (5H, m, -NCH2CH2CR2- proline, ssCH valine) ; 0,90-1,50 (6H, m, 2 x CH3). Microanalyse : C17H25N3O2.C2H2O4.0,2H20 Trouvé : C = 57,42 % ; H = 6,94 % ; N = 10,48 % Calculé : C = 57,48 % ; H = 6,96 % ; N = 10,58 * Exemple 37 : Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl)- L-proline (R)sec.butylamide (UCL 1387-J) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 R5 = -CH(CH3)CH2CH3 On procède comme pour les autres composés à squelette proline préparés selqn la voie 1 et on obtient le composé en titre sous forme de sel d'oxalate. P.F. = 165-166oC IR (disque KBr, cm-1) : 3650-3150 (OH) ; 3000-2900 (CH) 1710 (C=O) ; 1650 (C=O) ; 1200 (C-O-C). RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6, ppm) : 7,58-7,64 (1H, d, NH) 4,18-4,38 (1H, m, aCH) ; 4,0-4,12 (1H, m, &alpha;CH) ; 3,28-3,76 (3H, m, -NCH2-proline, -NH-CH- sec.butyle) ; 1,54-2,24 (6H, m, -NCH2CH2CH2-proline, CH2CH3 aminobutyryle) ; 1,27-1,50 (2H, m, CH2) ; 0,72-1,1 (9H, m, 3 x CH3). Microanalyse : C13H25N3O2.0,93C2H2O4.0,6H2O Trouvé : C = 51,22 % ; H = 7,96 96 ; N = 11,79 % Calculé : C = 51,01 % ; H = 8,08 % ; N N = 12,01 % Exemple 38 Préparation de la 1-(2(S)-aminobutyryl) L-proline (S)sec.butylamide (UCL 1416-H) ; voie 1 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = CH(CH3)CH2CH3 On procède comme à l'exemple précédent et on obtient le composé en titre sous forme de sel d'oxalate. P.F. = 153-154 C RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6, ppm) 7,61-7,65 (1H, d, NH) 4,22-4,28 (1H, m, CH) 3,97-4,03 (1H, m, &alpha;CH) ; 3,30-3,68 (3H, m, NCH2-proline, NH-CH-) ; 1,58-2,13 (6H, m, ssCH2aminobutyryle, NCH2CH2CH2-proline) ; 1,23-1,39 (2H, m, CH2) ; 0,71-1,02 (9H, m, 3 x CH3). Microanalyse : C13H25N3O2.0,9C2H2O4.0,2C2H6O Trouvé : C = 52,72 % ; H = 8,31 % ; N N = 12,28 96 Calculé : C = 52,83 % ; H = 8,17 96 ; N = 12,16 % Exemple 39 : Préparation de l'acide 2-(2(S)-aminobutyryl) 1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-isoquinolinecarboxylique méthylamide (UCL 1485-H) ; voie 3 R1 = CH2CH3 ; R2 = H ; n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m ; R3 = R4 = CO-NH-R5; = = CH3 On procède d'une manière analogue à l'exemple 18 et on obtient le composé en titre sous forme de sel d'oxalate. P.F. = 119-124 C RMN-1H (400 MHz, ppm) : 7,29-7,19 (4H, m, ArCH) ; 4,564,85 (masqué par H20, m, NCH2Ar, 2 x aCH) ; 3,06-3,22 (2H, m, ArCH2CH) ; 2,68 (3H, s, NHCH3) ; 1,96-2,06 (2H, m, CH3CH2) 1,11-1,14 (masqué, m, CH3CH2). Microanalyse : C15H21N302.1,0(COOH)2.0,5R20.0,75C2HsOH Trouvé : C = 54,48 % ; H = 6,80 % ; N = 10,05 % Calculé : C = 54,28 % ; H = 7,19 . N = 9,99 % MESURE DE L'ACTIVITE TRIPEPTIDYLPEPTIDASE MEMBRANAIRE Après avoir isolé et caractérisé la tripeptidylpeptidase membranaire précitée, les inventeurs ont mis au point une mesure de son activité décrite ci-après. Des membranes de cerveau de rat ont été obtenues par centrifugation (200 000 x g min) d'un homogénat préparé dans 10 volumes de tampon phosphate de potassium 50 mM, pH 7,4. Le culot de centrifugation soigneusement lavé est repris dans le tampon contenant 10 % de glycérol et 0,1 % de Brij 35 pour obtenir une concentration de 25 mg de protéines/ml. Après 25 minutes de préincubation, les incubations sont pratiquées pendant 15 minutes à 37"C dans le tampon sous un volume de 0,1 ml contenant 0,1 % de Brij 35, 100 mM de bestatine, 25 ug de membrane et 50 pM de substrat (A-AP-Amc). La libération d'Amc est évaluée par fluorométrie. MISE AU POINT D'INHIBITEURS L'effet des composés selon l'invention donnés en exemple ci-dessus a été évalué par mesure de l'activité tripeptidylpeptidase II membranaire. Le pouvoir inhibiteur de ces composés a été exprimé par leur constante de dissociation apparente (Ki), calculée à partir des valeurs de leur concentration inhibitrice 50 % et du KM du substrat (23 uM). Le tableau II suivant rapporte une série de valeurs caractéristiques des composés selon l'invention. TABLEAU II INHIBITION DE L'ACTIVITE AMINOTRIPEPTIDYLPEPTIDASE MEMBRANAIRE DE CERVEAU Code interne du composé n" exemple Ki vM UCL 1330-J 1 0,9 UCL 1382-J 2 0,3 UCL 1391-J 3 0,270 UCL 1371-H 4 0,10 UCL 1381-J 5 0,5 UCL 1393-F 6 0,080 UCL 1394-F 7 0,320 UCL 1327-J 8 57 UCL 1324-J 9 0,57 UCL 1372-F3 10 0,00030 UCL 1389-J 11 0,00030 UCL 1419-H 12 5,0 UCL 1420-H 13 12,0 UCL 1424-A 14 5,0 UCL 1395-F 15 0,320 UCL 1433-H 16 0,140 UCL 1374-F 17 40 UCL 1421-H 18 0,040 UCL 1482-H 19 6,0 UCL 1398-F 20 12,0 UCL 1373-F 21 20 UCL 1397-H 22 0,0052 UCL 1413-H 23 0,0060 UCL 1414-H 24 0,340 UCL 1415-H 25 0,012 UCL 1423-H 26 8,0 UCL 1446-A2 27 2,8 UCL 1486-H 28 0,008 UCL 1546-H 29 0,077 UCL 1534-H 30 0,012 UCL 1535-A 31 1,0 UCL 1442-H 32 0,560 UCL 1466-H 33 0,143 UCL 1378-H 34 40 UCL 1331-J 35 34 UCL 1353-H 36 3,3 UCL 1387-J 37 4,5 UCL 1416-H 38 20 UCL 1485-H 39 12 UCL 1338-J* connu 0,57 UCL 1702-H 30 0,003 UCL 1703-H 30 0,233 UCL 1704-H 28 0,006 UCL 1705-H 28 0,241 * 2(S)-aminobutyryl-L-prolinamide R1 = CH(CH3)2 ; R2 = H ; n = O ou 1 et m = O ou 1 avec n différent de m ; R3 = -(CH2)2- ; R4 = CO-NH-R5 ; R5 = H Des effets remarquables des composés selon l'invention ont été mis en évidence en particulier pour les composés présentant un squelette indoline. Il est notable que le composé référencé sous le code interne UCL 1397-H, par exemple, a un effet protecteur de CCK-8 endogène sur coupe de cortex cérébral de rat dépolarisé mis en évidence selon la méthode de Rose et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1988, 85 : 8326). A une concentration de 1 pM, il multiplie par 4 la récupération de CCK-8 libérée (mesurée par un radioimmunodosage). L'activité anorexigène (pro-satiété) de ce même composé est mise en évidence chez le rongeur : chez la souris, à la dose de 10 mg/kg ( par voie intraveineuse), ce composé diminue de 45 % la prise spontanée de nourriture solide (comprimé "UAR") mesurée sur une période de 30 à 90 minutes après libre accès à cette nourriture (période précédée par mise à jeun d'une nuit et administration de 0,2 ml d'un repas semi-liquide par voie orale). Cet essai est complété par une évaluation de l'activité inhibitrice de TPP II "ex vivo" consistant à administrer un composé selon l'invention à un rongeur et à mesurer l'activité catalytique résiduelle sur membranes de cerveau ou d'un organe périphérique. Par exemple, l'activité de TPP II hépatique mesurée chez la souris 90 minutes après administration de 10 mg/kg du composé référencé sous le code interne UCL 1372-F3 par voie orale est inhibée à environ 90-100 %. SEQ ID1 cgcccctcgtccgcgcgctgcctggcagtttacctcttccacgtccgtcctccagcttgc 60 gtcc ATG GCC ACC GCT GCG ACC GAG GAG CCT TTC CCT TTC CAT GGT 106 M A T A A T E E P F P F H G 14 CTT CTA CCA AAG AAA GAG ACT GGG GCC TCC TCC TTC CTG TGC CGC 151 L L P K K E T G A S S F L C R 29 TAC CCG GAG TAT GAC GGA CGC GGG GTG CTC ATC GCC GTC CTG GAC 196 Y P E Y D G R G V L I A V L D 44 ACA GGG GTT GAT CCC GGG GCC CCG GGC ATG CAG GTC ACG ACT GAT 241 T G V D P G A P G M Q V T T D 59 GGG AAA CCA AAA ATC ATT GAT ATC ATT GAT ACA ACA GGA AGT GGT 286 G K P K I I D I I D T T G S G 74 GAT GTG AAT ACT GCT ACA GAA GTA GAA CCA AAA GAT GGC GAA ATC 331 D V N T A T E V E P K D G E I 89 ACT GGT CTT TCT GGA AGA GTG CTT AAG ATT CCT GCA AAC TGG ACA 376 T G L S G R V L R I P A N W T 104 AAT CCT TCA GGA AAA TAT CAT ATT GGC ATT AAA AAT GGT TAT GAC 421 N P S G K Y H I G I K N G Y O 119 TTC TAT CCA AAG GCT CTC AAG GAA AGG ATA CAG AAA GAA CGG AAG 466 F Y P K A L K E R I Q K E R K 134 GAA AAA ATC TGG GAT CCA ATT CAC AGA GTT GCG CTT GCA GAA GCT 511 E K I W D P I H R V A L A E A 149 TGT AGA AAA CAA GAA GAA TTT GAT ATT GCC AAT AAT GGC TCT TCC 556 C R K Q E E F D I A N N G S S 164 CAA GCC AAT AAA CTA ATC AAG GAA GAG TTG CAG AGT CAA GTG GAA 601 Q A N K L I K E E L Q S Q V E 179 TTA CTT AAT TCT TTT GAG AAA AAG TAT AGT GAT CCA GGC CCT GTG 646 L L N S F E K K Y S D :: G P V 194 TAT GAC TGC TTG GTG TGG CAT GAT GGT GAG ACC TGG AGA GCC TGT 691 Y D C L V W H D G E T W R A C 209 GTT GAT TCG AAT GAA AAT GGG GAC TTG GGT AAA TCT ACT GTA TTG 736 V O S N E N G O t G K S T V t 224 AGA AAC TAC AAA GAG GCT CAA GAA TAT GGT TCT TTT GGC ACA GCT 781 R N Y K E A Q E Y G S F G T A 239 GAG ATG CTG AAT TAC TCT GTT AAT ATT TAT GAT GAT GGA AAC CTG 826 E M t N Y S V N I Y O D G N t 254 CTC TCC ATT GTG ACC AGT GGA GGA GCT CAT GGA ACC CAT GTA GCG 871 L S I V T S G G A H G T H V A 269 AGT ATA GCT GCT GGG CAT TTT CCA GAA GAG CCT GAA CGG AAT GGA 916 S I A A G H F P E E P E R N G 284 GTT GCT CCT GGT GCT CAA ATT CTA TCC ATT AAG ATT GGT GAT ACA 961 V A P G A Q I L S I K I G D T 299 AGG CTA AGC ACC ATG GAA ACA GGC ACA GGC CTC ATC AGA GCT ATG 1006 R L S T M E T G T G L I R A M 314 ATA GAA GTT ATA AAT CAT AAG TGT GAT CTT GTC AAC TAC AGT TAT 1051 I E V I N H K C D t V N Y S Y 329 GGA GAA GCA ACT CAT TGG CCA AAT TCT GGG AGA ATT TGT GAA GTA 1096 G E A T H W P N S G R I C E V 344 ATT AAT GAA GCA GTA TGG AAA CAT AAT ACA ATT TAT GTT TCA AGT 1141 I N E A V W K H N T I Y V S S 359 GCT GGA AAT AAT GGT CCA TGC CTT TCT ACA GTG GGT TGT CCA GGA 1186 A G N N G P C t S T V G C P G 374 GGA ACT ACT TCC AGC GTG ATA GGT GTT GGA GCT TAT GTT TCT CCT 1231 G T T S S V I G V G A Y V S P 389 GAT ATG ATG GTT GCA GAG TAT TCA CTG AGA GAG AAA CTA CCT GCA 1276 D M M V A E Y S t R E K L P A 404 AAT CAA TAT ACA TGG TCT TCT AGA GGC CCA AGT GCT GAT GGG GCC 1321 N Q Y T W S S R G P S A D G A 419 CTT GGT GTG AGC ATC AGT GCA CCA GGA GGT GCT ATT GCT TCT GTG 1366 t G V S I S A P G G A I A S V 434 CCT AAC TGG ACA TTG AGG GGG ACT CAG CTA ATG AAT GGG ACA TCA 1411 P N W T t R G T Q t M N G T S 449 ATG TCT TCC CCC AAT GCC TGT GGT GGC ATT GCC CTG GTA CTT TCA 1456 M S S P N A C G G I A t V L S 464 GGG CTG AAA GCA AAT AAT GTT GAC TAT ACT GTT CAC TCA GTC AGA 1501 G t K A N N V D Y T V H S V R 479 AGA GCT CTA GAA AAC ACT GCA ATA AAA GCT GAC AAT ATA GAA GTA 1546 R A t E N T A I K A D N I E V 494 TTT GCC CAA GGA CAT GGA ATT ATT CAG GTT GAC AAA GCT TAT GAC 1591 F A Q G H G I I Q V D K A Y D 509 TAC CTC ATT CAG AAT ACA TCA TTT GCT AAC AGA TTA GGT TTT ACA 1636 Y t I Q N T S F A N R t G F T 524 GTT ACA GTT GGA AAT AAC CGT GGC ATC TAC CTC CGA GAT CCT GTT 1681 V T V G N N R G I Y t R D P V 539 CAG GTG GCT GCT CCT TCA GAT CAT GGT GTT GGC ATT GAG CCT GTA 1726 Q V A A P S D H G V G I E P V 554 TTT CCA GAG AAC ACA GAA AAC TCT GAA AAA ATA TCC TTC CAG CTT 1771 F P E N T E N S E K I S F Q t 569 CAT TTA GCT TTA ACT TCA AAT TCA TCT TGG GTT CAA TGT CCC AGC 1816 H L A L T S N S S W V Q C P S 584 CAT TTG GAA CTC ATG AAT CAA TGT CGG CAC ATA AAC ATA CGT GTG 1861 H t E t M N Q C R H I N I R V 599 GAC CCC AGG GGC TTA AGA GAA GGG TTA CAT TAT ACA GAG GTA TGT 1906 D P R G L R E G L H Y T E V C 614 GGG TAT GAT ATA GCA TCC CCC AAT GCA GGT CCT TTA TTC AGA GTT 1951 G Y D I A S P N A G P t F R V 629 CCA ATC ACT GCA GTT ATA GCA GCA AAA GTA AAT GAA TCA TCA CAT 1996 P I T A V I A A K V N E S S H 644 TAT GAT CTA GCC TTT ACA GAT GTA CAT TTT AAA CCT GGT @AG A@@ 2041 Y D L A F T D V H F K P G Q I 659 CGA AGA CAT TTT GTT GAG GTT CCT GAG GGG GCA ACT TGG GCT GAA 2086 R R H F V E V P E G A T W A E 674 GTT ACC GTG TGT TCG TGT TCT TCT GAG GTA TCA GCA AAA TTT GTT 2131 V T V C S C S S E V S A K F V 689 CTT CAT GCA GTA CAG CTT GTG AAG CAG AGA GCA TAT CGA AGT CAT 2176 L H A V Q L V K Q R A Y R S H 704 GAA TTT TAT AAG TTT TGT TCC CTT CCA GAA AAA GGA ACA CTC ATT 2221 E F Y K F C S L P E K G T L I 719 GAA GCC TTT CCT GTT CTG GGT GGG AAA GCA ATT GAA TTT TGT ATT 2266 E A F P V L G G K A I E F C I 734 GCT CGT TGG TGG GCA AGT CTC AGT GAT GTC AAT ATT GAT TAT ACC 2311 A K W W A S L S D V N I D Y T 749 ATA TCA TTC CAT GGC ATA GTG TGT ACT GCA CCA CAG TTA AAC ATT 2356 I S F H G I V C T A P Q L N I 764 CAT GCA TCT GAA GGA ATC AAT CGT TTT GAT GTC CAG TCC TCT TTA 2401 H A S E G I N K F D V Q S S L 779 AAA TAT GAA GAT CTG GCT CCT TGC ATA ACT TTG AAG AGC TGG GTG 2446 K Y E D L A P C I T L K S W V 794 CAA ACA CTA CGC CCA GTA AAT GCA AAA ACC AGA CCT TTA GGA TCA 2491 Q T L R P V N A K T R P L G S 809 AGA GAT GTT TTG CCA AAT AAT CGC CAG CTT TAT GAG ATG GTC CTG 2536 R D V L P N N R Q L Y E M V L 824 ACA TAC AGC TTT CAT CAG CCC AAG AGC GGA GAA GTA ACA CCT AGT 2581 T Y S F H Q P K S G E V T P S 839 TGT CCA CTC CTT TGT GAA TTA TTA TAT GAG TCA GAA TTT GAC AGT 2626 C P L L C E L L Y E S E F D S 854 CAG TTG TGG ATT ATT TTT GAC CAG AAC AAA AGA CAG ATG GGC TCA 2671 Q L W I I F D Q N K R Q M G S 869 GGC GAT GCC TAT CCA CAT CAG TAT TCT TTG AAA TTG GAG AAA GGA 2716 G D A Y P H Q Y S L K L E K G 884 GAT TAT ACG ATT CGA TTA CAG ATT CGT CAT GAG CAA ATC AGT GAT 2761 D Y T I R L Q I K H E Q I S D 899 TTG GAT CGT CTC AAA GAT CTT CCG TTT ATT GTT TCG CAT AGG TTG 2806 L D K L K D t P F I V S H K L 914 TCT AAT ACC TTG AGC TTA GAT ATT CAT GAA AAT CAT AGC CTT GCA 2851 S N T t S t D I H E N H S t A 929 CTT CTA GGA AAG AAG AAA TCA AGC AGT TTG ACA TTA CCA CCC AAA 2896 t t G K K K S S S t T t P P K 944 TAT AAT CAG CCA TTC TTT GTT ACT TCC TTA CCT GAT GAT AAA ATA 2941 Y N Q P F F V T S t P D D K I 959 CCT AAG GGG GCA GGA CCC GGA TGC TAC CTT GCA GGC TCC TTG ACA 2986 P K G A G P G C Y t A G S t T 974 TTG TCA AAG ACT GAG CTT GGA AAG AAA GCT GAT GTG ATC (2733995 3031 L S K T E L G K K A D V I P V 989 CAT TAC TAT CTA ATA CCT CCA CCA ACA AAG ACT AAG AAT GGC AGC 3076 H Y Y L I P P P T K T K N G S 1004 AAA GAT AAA GAA AAG GAT TCA GAA AAA GAG AAA GAT TTG AAA GAA 3121 K D K E K D S E K E K D L K E 1019 GAG TTT ACT GAA GCT TTA CGA GAT CTT AAA ATT CAG TGG ATG ACC 3166 E F T E A L R D L K I Q W M T 1034 AAG CTG GAT TCT ACT GAC ATT TAC AAT GAA TTG AAA GAA ACA TAT 3211 K L D S T D I Y N E L K E T Y 1049 CCT GCT TAC CTT CCT TTG TAT GTT GCA CGT CTT CAT CAA TTA GAT 3256 P A Y L P L Y V A R L H Q L D 1064 GCT GAA AAG GAG CGG ATG AAA AGA CTT AAT GAA ATT GTT GAT GCT 3301 A E K E R M K R L N E I V D A 1079 GCC AAT GCT GTT ATT TCT CAC ATC GAT CAG ACC GCT CTC GCT GTT 3346 A N A V I S H I D Q T A L A V 1094 TAC ATT GCC ATG AAG ACT GAC CCC AGG CCT GAT GCA GCT ACT ATA 3391 Y I A M K T D P R P D A A T I 1109 AAA AAT GAT ATG GAC AAG CAG AAA TCT ACC CTG GTA GAT GCC CTC 3436 K N D M D K Q K S T L V D A L 1124 TGC AGG AAA GGA TGT GCT CTG GCA GAC CAC CTT CTT CAT GCA CAG 3481 C R K G C A L A D H L L H A Q 1139 CCC CAC GAT GGG GCA GCA GCT GGA GAT GCA GAA GCA AAA GAA GAG 3526 P H D G A A A G D A E A K E E 1154 GAA GGA GAA AGT ACC TTG GAA TCT CTA TCA GAA ACC TAT TGG GAA 3571 E G E S T L E S L S E T Y W E 1169 ACT ACA AAG TGG ACA GAT CTT TTT GAC ACT AAG GTT TTG ACA TTT 3616 T T K W T O t F D T K V t T F 1184 GCA TAC AAG CAT GCA TTA GTA AAT AAG ATG TAC GGG AGA GGC CTT 3661 A Y K H A t V N K M Y G R G t 1199 AAG TTT GCA ACC AAA CTC GTA GAA GAA AAA CCA ACA AAA GAA AAC 3706 K F A T K t V E E K P T K E N 1214 TGG AAA AAT TGT ATT CAA CTG ATG AAA TTA CTC GGA TGG ACC CAT 3751 W K N C I Q L M K L L G W T H 1229 TGT GCG TCT TTT ACT GAA AAC TGG CTC CCC ATC ATG TAT CCT CCT 3796 C A S F T E N W t P I M Y P P 1244 GAT TAT TGT GTA TTC TAA aatgggaaccaaaacgttaaatttcgaaagcagaa 3849 D Y C V F * 1250 aattttatagtgaacaaatatatgaacaaatgtgtggcatttctagtctaactaatgcat 3909 gtcttcatccactatcgaatactgatcattaaaactctatgtatttatcagagaactcaa 3969 tggtgtgtggcttcatacatgtaatgtagacagacctctgacatcatgctgctttcctgc 4029 tgcctcccacacttggctagggagggcagagcctgcctgccagccccaacctggtggat 4089 gcagctgctcactgcaggagaggttttcatctcttaattttaactgtaaaacgtcatcc 4149 agtttttattttataaatcaaaaaggttaaaacatgctaaatttttccaattat tagag 4209 gccttaaaaatgctacattgggtgtagctaaattatttatttgactaaaaattacgagaa 4269 cataatttccagacttctaaaaataaattcaattaatgggtatggtggggaggtataaat 4329 acatggcaactgggaaaagaaacgtgttaatgtaatcttcactccggagtcacaacaagc 4389 aagttgtttttacagcatcctcaagtacacagcatcagaataagttaaaatttcatgtgt 4449 tggtgccagacagttgaatctatctggttttgtaaagatatacacagtatgtttataaca 4509 ttgaaatcatgtaaaatacatgaataaatgtgcaaaacaacaggcacagcacaccatatg 4569 cactctgatacctgttttttataaataaaagtaaatattgaagctaaa 4617 SEQ @D @ ataatttgtttggtttcactgctgagtaccatgctatgatttctacactatctgcttatt 60 aaactgtttcttactgtttggaactgttatctaacagttatttcaaaaagcattaggcac 120 agttcctgtgcctgtgtgcagatgtttccaggatgtataccagaaatggaattgctgagt 180 cagggagattcaggtttactaggtcatgtgtaacagctttttcattgagctggccttgaa 240 ctcttctgatattcctgcctccacctcccagctgctgtgattatggatatattccaccat 300 gcctggccaactgttaacttcttttttttaattttattttttttttaaagattttatttt 360 attgtatgagtgcactgtagctgccttcagacacaccagaagagggcattggattccatt 420 acagatggttgtgagccaccatgtggttgctgggatttgaactcaggacctcaggaagag 480 cactcggtgctcttaaccactgagccatctctccagcccccaactgttaacttcttatac 540 tttgaattttcagacctgtttttaatttcttatgtaggaaatatcagtgtattgtagg 598 TTT GAT TTG CAT TTT TAT AGT GAA ATC AGT TAT TTT TCT AAC AGA 643 F O L H F Y S E I S Y F S N R 15 TTT AGG CTT TTG GGT CCT CTC ATA GTG CTA TTA AAG TTC TTT TAC 688 F R L L G P L I V L L K F F Y 30 TTT TTC ATT TTC TGT TTT TTT TTT TTT TTT AAT ACT ACT AAG TTG 733 F F I F C F F F F F N T T K L 45 TCA ATT GCT TTT TTT TTT TTT CCG GAG CTG GGG ATC GAA CCC AGG 778 S I A F F F F P E t G I E P R 60 GCC TTG CGC TTG CTA GGC AAG CGC TCT ACC GCT GAG CTA AAT CTC 823 A L R L L G K R S T A E L N L 75 CAA CCC CTG TCA ATT GCT TTT TCA CTG, ATT CCT GCA AAC TGG ACA Q P L S I A F S L I P A N W T AAT CCT TCA GGA AAA TAT CAT ATT GGC ATT AAA AAT GGT TAT GAC N P S G K Y H t G I K N G Y D TTC TAT CCA AAG GCT CTC AAG GAA AGG ATA CAG AAA GAA CGG AAG F Y P K A L K E R I Q K E R K GAA AAA ATC TGG GAT CCA ATT CAC AGA GTT GCG CTT GCA GAA GCT E K I W D P I H R V A L A E A TGT AGA AAA CAA GAA GAA TTT GAT ATT GCC AAT AAT GGC TCT TCC C R K Q E E F D I A N N G S S CAA GCC AAT AAA CTA ATC AAG GAA GAG TTG CAG AGT CAA GTG GAA Q A N K L I K E E L Q S Q V E TTA CTT AAT TCT TTT GAG AAA AAG TAT AGT GAT CCA GGC CCT GTG L L N S F E K K Y S D P G P V TAT GAC TGC TTG GTG TGG CAT GAT GGT GAG ACC TGG AGA GCC TGT Y D C L V W H D G E T W R A C GTT GAT TCG AAT GAA AAT GGG GAC TTG GGT AAA TCT ACT GTA TTG V D S N E N G D L G K S T V L AGA AAC TAC AAA GAG GCT CAA GAA TAT GGT TCT TTT CCC ACA GCT R N Y K E A Q E Y G S F G T A GAG ATG CTG AAT TAC TCT GTT AAT ATT TAT GAT GAT GGA AAC CTG E M L N Y S V N I Y D D G N L CTC TCC ATT GTG ACC AGT GGA GGA GCT CAT GGA ACC CAT GTA CCC L S I V T S G G A H G T H V A AGT ATA GCT GCT GCC CAT TTT CCA GAA GAG CCT GAA CCC AAT GGA S I A A G H F P E E P E R N G GTT GCT CCT GGT GCT CAA ATT CTA TCC ATT AAC ATT GGT GAT ACA V A P G A Q I L S I K I G D T AGG CTA AGC ACC ATG GAA ACA GGC ACA GGC CTC ATC AGA GCT ATG R L S T M E T G T G L I R A M ATA GAA GTT ATA AAT CAT AAG TGT GAT CTT GTC AAC TAC AGT @@@ I E V I N H K C D L V N Y S Y GGA GAA GCA ACT CAT TGG CCA AAT TCT GGG AGA ATT TGT GAA GTA G E A T H W P N S G R I C E V ATT AAT GAA GCA GTA TGG AAA CAT AAT ACA ATT TAT GTT TCA AGT I N E A V W K H N T I Y V S S GCT GGA AAT AAT GGT CCA TGC CTT TCT ACA GTG GGT TGT CCA GGA A G N N G P O t S T V G O P G GGA ACT ACT TCC AGC GTG ATA GGT GTT GGA GCT TAT GTT TCT CCT G T T S S V I G V G A Y V S P GAT ATG ATG GTT GCA GAG TAT TCA CTG AGA GAG AAA CTA CCT GCA D M M V A E Y S t R E K t P A AAT CAA TAT ACA TGG TCT TCT AGA GGC CCA AGT GCT GAT GGG GCC N Q Y T W S S R G P S A D G A CTT GGT GTG AGC ATC AGT GCA CCA GGA GGT GCT ATT GCT TCT GTG t G V S I S A P G G A I A S V CCT AAC TGG ACA TTG AGG GGG ACT CAG CTA ATG AAT GGG ACA TCA P N W T L R G T Q L M N G T S ATG TCT TCC CCC AAT GCC TGT GGT GGC ATT GCC CTG GTA CTT TCA M S S P N A C G G I A t V t S GGG CTG AAA GCA AAT AAT GTT GAC TAT ACT GTT CAC TCA GTC AGA G L K A N N V D Y T V H S V R AGA GCT CTA GAA AAC ACT GCA ATA AAA GCT GAC AAT ATA GAA GTA R A t E N T A I K A O N I E V TTT GCC CAA GGA CAT GGA ATT ATT CAG GTT GAC AAA GCT TAT GAC F A Q G H G I I Q V D K A Y D TAC CTC ATT CAG AAT ACA TCA TTT GCT AAC AGA TTA GGT TTT ACA Y L I Q N T S F A N R L G F T GTT ACA GTT GGA AAT AAC CGT GGC ATC TAC CTC CGA GAT CCT GTT V T V G N N R G I Y t R O P V CAG GTG GCT GCT CCT TCA GAT CAT GGT GTT GGC ATT GAG CCT GTA Q V A A P S D H G V G I E P V TTT CCA GAG AAC ACA GAA AAC TCT GAA AAA ATA TCC TTC CAG CTT F P E N T E N S E K I S F Q L CAT TTA GCT TTA ACT TCA AAT TCA TCT TGG GTT CAA TGT CCC AGC H L A L T S N S S W V Q C P S CAT TTG GAA CTC ATG AAT CAA TGT CGG CAC ATA AAC ATA CGT GTG H L E L M N Q C R H I N I R V GAC CCC AGG GGC TTA AGA GAA GGG TTA CAT TAT ACA GAG GTA TGT O P R G t R E G t H Y T E V C GGG TAT GAT ATA GCA TCC CCC AAT GCA GGT CCT TTA TTC AGA GTT G Y O I A S P N A G P t F R V CCA ATC ACT GCA GTT ATA GCA GCA AAA GTA AAT GAA TCA TCA CAT p I T A V I A A K V N E S S H TAT GAT CTA GCC TTT ACA GAT GTA CAT TTT AAA CCT GGT (2733995 Y D L A F T D V H F K P G Q I CGA AGA CAT TTT GTT GAG GTT CCT GAG GGG GCA ACT TGG GCT GAA R R H F V E V P E G A T W A E GTT ACC GTG TGT TCG TGT TCT TCT GAG GTA TCA GCA AAA TTT GTT V T V C S C S S E V S A K F V CTT CAT GCA GTA CAG CTT GTG AAG CAG AGA GCA TAT CGA AGT CAT L H A V Q L V K Q R A Y R S H GAA TTT TAT AAG TTT TGT TCC CTT CCA GAA AAA GGA ACA CTC ATT E F Y K F C S L P E K G T L I GAA GCC TTT CCT GTT CTG GGT GGG AAA GCA ATT GAA TTT TGT ATT E A F P v t G G K A I E F C I GCT CGT TGG TGG GCA AGT CTC AGT GAT GTC AAT ATT GAT TAT ACC A R W W A S t S D V N I D Y T ATA TCA TTC CAT GGC ATA GTG TGT ACT GCA CCA CAG TTA AAC ATT I S F H G I V C T A P Q L N I CAT GCA TCT GAA GGA ATC AAT CGT TTT GAT GTC CAG TCC TCT TTA H A S E G I N R F D V Q S S L AAA TAT GAA GAT CTG GCT CCT TGC ATA ACT TTG AAG AGC TGG GTG K Y E O t A P C I T t K S W V CAA ACA CTA CGC CCA GTA AAT GCA AAA ACC AGA CCT TTA GGA TCA Q T L R P V N A K T R P L G S AGA GAT GTT TTG CCA AAT AAT CGC CAG CTT TAT GAG ATG GTC CTG R D V L P N N R Q L Y E M V L ACA TAC AGC TTT CAT CAG CCC AAG AGC GGA GAA GTA ACA CCT AGT T Y S F H Q P K S G E V T P S TGT CCA CTC CTT TGT GAA TTA TTA TAT GAG TCA GAA TTT GAC AGT C P L L C E L L Y E S E F D S CAG TTG TGG ATT ATT TTT GAC CAG AAC AAA AGA CAG ATG GGC TCA Q L W I I F D Q N K R Q M G S GGC GAT GCC TAT CCA CAT CAG TAT TCT TTG AAA TTG GAG AAA GGA G D A Y P H Q Y S L K L E K G GAT TAT ACG ATT CGA TTA CAG ATT CGT CAT GAG CAA ATC AGT GAT D Y T I R L Q I R H E Q I S D TTG GAT CGT CTC AAA GAT CTT CCG TTT ATT GTT TCG CAT AGG TTG L D R L K D L P F I V S H R L TCT AAT ACC TTG AGC TTA GAT ATT CAT GAA AAT CAT AGC CTT GCA S N T L S L D I H E N H S L A CTT CTA GGA AAG AAG AAA TCA AGC AGT TTG ACA TTA CCA CCC AAA L L G K K K S S S L T L P P K TAT AAT CAG CCA TTC TTT GTT ACT TCC TTA CCT GAT GAT AAA ATA Y N Q P F F V T S L P D D K I CCT AAG GGG GCA GGA CCC GGA TGC TAC CTT GCA GGC TCC TTG ACA P K G A G P G C Y L A G S L T TTG TCA AAG ACT GAG CTT GGA AAG AAA GCT GAT GTG ATC L S K T E L G K K A D V I P V CAT TAC TAT CTA ATA CCT CCA CCA ACA AAG ACT AAG AAT GGC AGC H Y Y L I P P P T K T K N G S AAA GAT AAA GAA AAG GAT TCA GAA AAA GAG AAA GAT TTG AAA GAA K O K E K D S E K E K D L K E GAG TTT ACT GAA GCT TTA CGA 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séquence SEQ ID N"2 de la liste de séquence annexée. 4/ Procédé de criblage de médicaments destinés à traiter chez l'homme ou l'animal les troubles ou affections liés à l'inactivation de neuropeptides endogènes, caractérisé en ce qu'il consiste à mettre en contact une molécule candidate avec une tripeptidylpeptidase membranaire ou homologue et à mesurer l'activité de cette enzyme. 5/ Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la tripeptidylpeptidase est préparée conformément au procédé selon la revendication 1. 6/ Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que les troubles ou affections sont liés à l'inactivation de la cholécystokinine (CCK). 7/ Composé de formule générale (I) suivante dans laquelle - R1 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C2; - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m - R3 représente un radical bivalent constitué d'une chalne alkyle -(CH2)p- où p représente un entier variant de 1 à 4 (extrémités incluses), -CH2-CH(cis.F)-, -CH2S-,-CH2-CH(CH2Ph)-, -(CH2)2-CH(CONH2)-, d'un motif où R6 représente H, F, OCH3 ou OCH2Ph, - R4 représente un hydrogène, un groupe n.C6H13, CH2OH, CH2-NHn.C4H9, amide CO-NH-R5 où R5 représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié, -(CH2)3-SCH3, -CH2Ph, -CH2C6H11, ou carbonyle CO-R7 où R7 représente un groupe n.C5H11 ou NC5H10; sous réserve que lorsque R2 représente un hydrogène, R3 représente le radical bivalent -(CH2)2- et R4 représente le groupe amide CO-NH-R5, R5 étant un hydrogène, alors R1 est différent de CH2CH3, (CH2)2CH3 (CH2)3CH3 CH(CH3)2, CH2CH(CH3)2, CH(CH3)CH2CH3. 8/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente -(CH2)2-. 9/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente -CH2-CH(cis.F)-. 10/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente -CH2-CH(CH2Ph)-. 11/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente -SCH2-. 12/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente 13/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente -(CH2)4-. 14/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente -(CH2)3-. 15/. Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que R3 représente -CH2-. 16/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que n = 0 et m = 1. 17/ Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que R3 représente 18/ Composé selon la revendication 16, caractérisé en ce que R3 représente 19/ Composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que n = 1 et m = 0. 20/ Composé selon la revendication 19, caractérisé en ce que R3 représente 21/ Composé selon la revendication 19, caractérisé en ce que R3 représente -(CH2)2-CH(CONH2)-. 22/ Composé selon l'une quelconque des revendications 7 à 20, caractérisé en ce que R4 représente CONHR5. 23/ Composé selon la revendication 22, caractérisé en ce que Rs représente le groupe n.butyle 24/ Composé selon la revendication 21, caractérisé en ce que R4 représente un hydrogène. 25/ Copmposé selon la revendication 8, caractérisé en ce que R4 représente COR7. 26/ Composé selon la revendication 17, caractérisé en ce que R4 représente CH2OH. 27/ Composé selon la revendication 17, caractérisé en ce que R4 représente CH2-NH(n.C4H9). 28/ Composé selon l'une quelconque des revendications 7 à 21, caractérisé en ce que R2 représente un hydrogène. 29/ Composé selon la revendication 8, caractérisé en ce que R1 et R2 représentent chacun un groupe méthyle. 30/ Composé selon la revendication 17, caractérisé en ce que R1 représente un hydrogène et R2 représente un groupe éthyle. 31/ Composé selon l'une quelconque des revendications 7 à 30, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi le groupe comprenant - 2(S)-aminobutyryl-L-prolinamide (UCL 1338-J) - L-valyl-I,-proline n.hexylamide (UCL 1330-J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline 3-(méthylthio)propylamide (UCL 1382-J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline n.pentylamide (UCL 1391 J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline n.butyiamide (UCL 1371 H) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline [2(S)-méthyijbutyiamide (UCL 1381-J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline n.propylamide (UCL 1393 F) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-L-proline iso.butylamide (UCL 1394-F) - L-valyl-L-proline n.butylamide (UCL 1324-J) - L-alanyl-L-prolyl-L-borovaline pinanediol ester (UCL 1372-F3) - borohydrate de L-alanyl-L-prolyl-difluoro-L-borovaline (UCL 1389-J) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-(4(S)-fluoro)-L-proline n.butylamide (UCL 1395-F) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-(4(S)-benzyl)-L-proline n.butylamide (UCL 1433-H) - acide 2-(2(S)-aminobutyryl)-1,2,3,4-tétrahydro-3(S)-iso- quinolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1421-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1397-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2-(S)-indolinecarboxylique n.propylamide (UCL 1413-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique méthylamide (UCL 1414-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique éthylamide (UCL 1415-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(RlS)-(5-méthoxy)indoilne carboxylique n.butylamide (UCL 1486-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl,-2(R/S)-(6-méthoxy)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1546-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-fluoro)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1534-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(RIS)-(S-benzyloxy)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1535-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-[(3aS,7aS)-perhydro]- indolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1442-H) - acide 2-(2(S)-aminobutyryl)-1(R/S)-isoindoline carboxylique n.butylamide (UCL 1466-H) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-2-hexyl-pyrrolidineamide (UCL 1419-H) - 1-(2(S)-aminobutyryi)-2-[(1-oxo)hexyi]pyrroiidineamide (UCL 1420-H) - 1-(2-amino-2-méthylpropionyl)-L-proline n.butylamide (UCL 1424-A) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-perhydroazépine carboxylique n.butylamide (UCL 1482-H) - 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinylméthyl-N-butylamine (UCL 1446-A2) ainsi que leurs sels ou hydrates correspondants. 32/ Composé selon la revendication 17, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi le groupe comprenant - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.butylamide (UCL 1397-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique n.propylamide (UCL 1413-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(S)-indolinecarboxylique éthylamide (UCL 1415-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(R/S)-(5-méthoxy)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1486-H) - acide 1-(2(S)-aminobutyryl)-2(RlS)-(5-fluoro)indoline carboxylique n.butylamide (UCL 1534-H) ainsi que leurs sels ou hydrates correspondants. 33/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente -(CH2)2-, -CH2S-, -CH2- ; et - R4 représente CO-NH-R5, COR7 où Rs représente un hydrogène ou un groupe alkyle en Cl-C6 linéaire ou ramifié, -(CH2)3-S-CH3, -CH2Ph et R7 représente NC5H10, CH2C6H11 caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation d'un composé de formule (III) dans laquelle R1 et R2 ont les significations données cidessus et X représente un groupe protecteur, à partir d'un composé de formule (II) estérifié sur sa fonction acide par un groupement Y et dans laquelle X, R1 et R2 ont les significations données précédemment, par réaction avec la L-proline ii) l'amidation de la fonction acide du composé (III) avec l'amine appropriée R5NH2 ou R7H où Rs et R7 ont les significations données ci-dessus, pour former le dérivé (IV) protégé sur sa fonction amine primaire par le groupe X iii) l'élimination du groupe X du dérivé (IV), pour obtenir le composé (I) désiré. 34/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène ou un groupe méthyle - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où Rs représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation d'un composé de formule (IV) dans laquelle R1, R2 et R5 ont les significations données ci-dessus et X représente un groupe protecteur, à partir d'un composé de formule (II) estérifié sur sa fonction acide à l'aide d'un groupe Y et dans laquelle R1, R2 et X ont les significations données précédemment, par réaction avec une prolineamide de formule (V) dans laquelle Rs a la signification donnée ci-dessus ii) l'élimination du groupe protecteur X du composé (IV), pour obtenir le composé (I) désiré. 35/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 et m = 1 et R3 représente un groupe -CH2-CH(cis.F)-, - R4 représente un groupe -CH2OH, CO-NH-R5 où Rs représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la préparation d'un composé de formule (X) dans laquelle R1, R2, R3 et R4 ont les significations données ci-dessus et X représente un groupe protecteur, par réaction d'un composé de formule (VIII) avec un composé de formule (IX) dans lesquelles RI, R2, R4 et X ont les significations données précédemment ii) l'élimination du groupement X du composé (X), pour former le composé (I) désiré. 36/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 1 et m = 0 et R3 représente un groupe -CH(CH2Ph) CH2-, -(CH2)3- ou - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où Rs représente un hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) l'obtention d'un composé (XII) protégé sur sa fonction amine primaire par un groupe protecteur X et dans laquelle R1, R2 et R3 ont les significations données ci-dessus, par réaction du composé de formule (IX) avec le composé de formule (XI) dans lesquelles R1, R2 et R3 ont les significations données précédemment et X représente un groupe protecteur ii) l'hydrolyse de la fonction ester du composé (XII) ainsi obtenu pour former le composé de formule (XIII) dans laquelle R1, R2, R3 et X ont les significations données précédemment iii) l'amidation de la fonction acide du composé (XIII) à l'aide de l'amine R5NH2 appropriée pour former le dérivé de formule (XIV) dans laquelle R1, R2, R3, Rs et X ont les significations données ci-dessus iv) l'élimination du groupe protecteur X du composé (XIV) pour former le composé (I) désiré. 37/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un groupe méthyle - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente le groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où Rs représente le motif caractérisé en ce qu'il comprend i) l'amidation de la fonction acide du composé de formule (XIX) protégé sur sa fonction amine primaire par un groupe protecteur X et dans laquelle R1 et R2 ont les significations données ci-dessus, à l'aide de l'amine (XVIII) pour former le dérivé (XX) dans laquelle R1, R2, Rs et X ont les significations données précédemment ii) l'élimination du groupe protecteur X du composé (XX) pour obtenir le composé (I) désiré. 38/ Procédé selon la revendication 37, caractérisé en ce que l'on prépare l'amine (XVIII) i) par réaction de l'acide isopropylboronique avec le (+)-pinanediol dans l'ether, pour obtenir le dérivé (XV) ii) par réaction du composé (XV) avec du butyllithium et du chlorure de méthylène puis du chlorure de zinc ZnCl2 dans du tétrahydrofuranne, à basse température, pour former le dérivé (XVI) iii) substitution du chlore du composé (XVI) à l'aide de butyllithium et d'hexaméthyldisilazanne dans du tétrahydrofuranne à basse température, pour former le composé (XVII) iv) libération de la fonction amine du composé (XVII) pour obtenir le composé (XVIII) désiré. 39/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe méthyle - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où R5 représente (CH3)2-CH-BF2 caractérisé en ce qu'il comprend i) l'élimination du motif pinane du composé de formule (I) dans laquelle R1, R2, n, m R3 et R4 ont les significations données ci-dessus et R5 représente par action du tri chlorure de bore dans du chlorure de méthylène suivie d'une hydrolyse, pour obtenir le dérivé (XXI) ii) le fait de faire réagir le composé (XXI) avec l'acide fluorhydrique pour former le composé (I) désiré. 40/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = O ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente le groupe n.C6Hî3 caractérisé en ce qu'il comprend i) la réaction d'un composé (XXV) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1 et R2 ont les significations données cidessus et X représente un groupe protecteur, pour former le dérivé de formule (XXVI) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations données précédemment ii) l'hydrogénation de la double liaison du composé (XXVI) ainsi obtenu pour former le composé de formule (XXVII) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées iii) l'élimination du groupe protecteur X du composé (XXVII) pour obtenir le composé (I) désiré. 41/ Procédé selon la revendication 40, caractérisé en ce que l'on prépare le composé (XXV) i) par réaction de l'ester méthylique de la L-proline (XXII) protégée sur sa fonction amine par un groupe protecteur X, avec de l'hydrure de diisobutylaluminium dans du toluène à basse température, pour former le L-prolinal (XXIII) ii) par réaction du L-prolinai (XXIII) protégé sur sa fonction amine hétérocyclique par un groupe protecteur X, avec le bromure de triphénylpentylphosphonium en présence de butyllithium dans du toluène, pour former le dérivé (XXIV) iii) par élimination du groupement protecteur X du composé (XXIV) ainsi obtenu. 42/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe CO-R7 où R7 représente le groupe n.C5H11 caractérisé en ce qu'il comprend i) l'obtention d'un composé de formule (XXX) dans laquelle R1 et R2 ont les significations données cidessus et X est un groupe protecteur, par réaction du composé (XXIX) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations données précédemment ; ii) l'élimination du groupement protecteur X du composé (XXX) obtenu, pour former le composé (I) désiré. 43/ Procédé selon la revendication 42, caractérisé en ce que l'on prépare le composé (XXIX) par hydrogénation de l'hexanone (XXVIII) correspondante (XXVIII) de la L-proline, obtenue par action du pentyllithium dans l'ether, sur la L-proline protégée sur sa fonction amine par un groupement X. 44/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 et R2 représentent chacun un groupe méthyle - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)2- ; et - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où R5 représente un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la réaction de la L-prolineamide appropriée de avec l'acide de formule (IX) dans lesquelles R1, R2 et R5 ont les significations données ci-dessus et X est un groupe protecteur, pour former le dérivé de formule (IV) dans laquelle R1, R2, Rs et X ont les significations précitées ii) l'élimination du groupement protecteur X du composé (IV) pour obtenir le composé (I) recherché. 45/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un hydrogène - R2 est différent de l'hydrogène - n = 0 et m = 1 et R3 représente un motif - R4 représente le groupe CH2-NH(n.C4H9) caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation d'un composé de formule (XXXII) à partir de l'amide de formule (XXXI) correspondant dans lesquelles X représente un groupe protecteur ii) la protection de la fonction amine secondaire du composé (XXXII) ainsi formée par un groupement X', pour obtenir le composé (XXXIII) iii) la déprotection sélective de l'amine hétérocyclique par élimination du groupement X du composé (XXXIII), pour former le composé (XXXIV) iv) la réaction du commposé (XXXIV) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées, pour former un composé de formule (XXXV) dans laquelle R1, R2 X et X' ont les significations indiquées précédemment v) l'élimination des groupements protecteurs X et X' du composé (XXXV) pour former le composé (I) recherché. 46/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 ou 1 et m = 0 ou 1 avec n différent de m et R3 représente un groupe -(CH2)4- ; et - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où R5 représente un groupe alkyle en Cl-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation du composé de formule (XXXVI) à partir du composé de formule (IX) dans lesquelles R1 et R2 ont les significations données ci-dessus et X est un groupe protecteur, à l'aide de 3-hydroxy 1,2,3-benzotriazine-4(3H)-one en présence de diclyclohexylcarbodiimide (DCC) dans du tétrahydrofuranne ii) la réaction du composé (XXXVI) avec l'acide 2-(RSS)-perhydroazépinique, pour former le dérivé (XXXVII) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées iii) l'amidation de la fonction acide du composé (XXXVII) ainsi obtenu, à l'aide de l'amine R5NH2 appropriée, pour former le dérivé de formule (XXXVIII) dans laquelle R1, R2 et X ont les significations précitées iv) l'élimination du groupement protecteur X du composé (XXXVIII) pour obtenir le composé (I) désiré. 47/ Procédé pour la préparation d'un composé de formule générale (I) donnée ci-dessus, dans laquelle - R1 représente un groupe alkyle en C1-C4 linéaire ou ramifié - R2 représente un hydrogène - n = 0 et m = 1 et R3 représente le motif où R6 représente un groupe OCR3, OCH2Ph, F ; et - R4 représente un groupe CO-NH-R5 où R5 représente un groupe alkyle en Cl-C6 linéaire ou ramifié caractérisé en ce qu'il comprend i) la formation de l'amide de formule (XXXXIV) à partir de l'ester de formule (XXXXIII) dans lesquelles R6 a la signification donnée ci-dessus, par réaction avec i amine R5NH2 appropriée ii) la réaction du composé (XXXXIV) avec le composé de formule (IX) dans laquelle R1 et R2 ont les significations précitées et X représente un groupement protecteur, pour former le composé de formule (XXXXV) dans laquelle R1, R2, Rg, R6 et X ont les significations données précédemment iii) l'élimination du groupement X pour former le composé (I) désiré. 48/ Procédé selon la revendication 47, caractérisé en ce que l'on prépare l'ester méthylique (XXXXIII) i) par action du nitrite de sodium en présence d'acide chlorhydrique, sur le composé de formule (XXXIX) pour former le composé de formule (XXXX) dans lesquelles R6 a la signification indiquée précédemment ii) par addition de 2-méthylacétoacétate d'éthyle au composé (XXXX) ainsi obtenu, en présence de nitrite de sodium dans l'éthanol, pour former le composé de formule (XXXXI) aans laquelle K6 a la sîgnitication précitée iii) par cyclisation en milieu acide, pour former l'ester éthylique (XXXXII) iv) par échange à partir de l'ester éthylique (XXXXII) ainsi obtenu, en présence de magnésium dans du méthanol. 49/ Utilisation d'un composé de formule générale (I) selon l'une quelconque des revendications 7 à 32 en tant que médicament pour le traitement chez l'homme ou l'animal des troubles ou affections liés à l'inactivation de neuropeptides endogènes. 50/ Utilisation selon la revendication 49, caractérisée en ce que les troubles ou affections sont liés à l'inactivation de la cholécystokinine (CCK). 51/ Utilisation selon la revendication 50, caractérisée en ce que les troubles ou affections sont des troubles de la prise alimentaire, de l'humeur, cognitifs ou moteurs, notamment l'anorexie, la schizophrénie, la maladie de Parkinson et les dépressions ainsi que les troubles du transit gastro-intestinal tel que le syndrome du côlon irritable. 52/ Utilisation d'un composé de formule générale (I) selon l'une quelconque des revendications 7 à 32 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement chez l'homme ou l'animal des troubles ou affections liés à l'inactivation de neuropept ides endogènes. 53/ Utilisation selon la revendicaiton 52, caractérisée en ce que les troubles ou affections sont liés à l'inactivation de la cholécystokinine (CCK). 54/ Utilisation selon la revendication 53, caractérisée en ce que les troubles ou affections sont des troubles de la prise alimentaire, de l'humeur, cognitifs ou moteurs, notamment l'anorexie, la schizophrénie, la maladie de Parkinson et les dépressions ainsi que les troubles du transit gastro-intestinal tel que le syndrome du côlon irritable. 55/ Composition pharmaceutique comprenant une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé selon l'une quelconque des revendications 7 à 30 dans un excipient pharmaceutiquement acceptable. 56/ Composition pharmaceutique selon la revendication 55, caractérisée en ce qu elle comprend un composé selon la revendication 31. 57/ Composition pharmaceutique selon la revendication 55, caractérisée en ce qu elle comprend un composé selon la revendication 32. 58/ Utilisation selon la revendication 49, caractérisée en ce que l'on met en oeuvre un composé de formule (I) dans laquelle R1 représente un groupe CH2CH3, (CH2)2CH3, (CH2)3CH3, CH(CH3)2, CH2CH(CH3)2, CH(CH3)CH2CH3, R2 représente l'hydrogène, R3 représente le radical bivalent -(CH2)2- et R4 représente le groupe amide CO-NH-R5, R5 étant un hydrogène. 59/ Utilisation selon la revendication 52, caractérisée ne ce que l'on met en oeuvre un composé de formule (I) dans laquelle R1 représente un groupe CH2CH3, (CH2)2CH3, (CH2)3CH3, CH(CH3)2, CH2CH(CH3)2, CH(CH3)CH2CH3, R2 représente l'hydrogène, R3 représente le radical bivalent -(CH2)2- et R4 représente le groupe amide CO-NH-R5, Rg étant un hydrogène.