Brevet FR2727117A1 — publié le 19960524

Utilisation de conjugués de la polylysine pour la préparation de médicaments utile' dans le traitement des maladies neurodégénératives et des affections dégénératives à caractère autoimmun. La présente invention concerne le domaine médical. Plus particulièrement, l'invention concerne l'utilisation d'au moins un conjugué monofonctionnel et/ou polyfonctiamcl de la polylysine pour la préparation de compositions ou associations pharmaceutiques utiles dans le traitement de la dégénérescence neuronale, des neuropathies infectieuses, tmt et toxiques, des affections dégénératives à caractère autoimmun et des affections prolifératives. L'invention concerne également des conjugués monofonctionnels et polyfonctionnels de la polylysine. La majorité des affections humaines chroniques invalidantes, telles que la sclérose en plaques (SEP), les polyarthrites (PR), les neuropathies, etc., n'ont pas d'étiologie clairement définie. Par conséquent, les traitements actuellement pratiqués restent symptomatiqucs: utilisation de corticoldes, d'anti-inflammatoires divers, d'immunodépresseurs, etc.; ces médications présentent de nombreux effets secondaires non négligeables pour la santé des patients. De plus, leur efficacité est fugace. On ne note pas d'amélioration durable et surtout peu d'amélioration dans l'évolution de ces affections. Des données et travaux récents sur l'autoimmunité (Daverat et al. 1989 (1), Amara et al., 1994(2)) ont permis d'identifier des cibles antigéniques chimiquement définies par les anticorps cicculant dans les fluides biologiques des malades. L'élévation de ces immunoglobulines circulantes est liée à l'évolution de ces maladies. Les anticorps n'apparaissent plus comme des éléments aberrants mais sont le reflet de désordres antigéniques précis. A titre d'exemple, on a identifié des anticorps dirigés contre l'acide oléique conjugue, L'acide azélalque conjugué, un phospholipide et le cystéinyl-NO dans la SEP (Maneta Peyret et al., 1987 (3); Daverat et al., 1989(1); Brochet et al., 1991 (4); Boullerne et aL, 1994(5 . De même lors de l'infection par le virus du VIH, des anticorps dirigés contre les acides gras couplés par liaison amide ont été trouvés (Amara et al., 1994(2)). On a aussi dccrit un anticorps anti-choline glutaryl poly-Ilysine, mimant l'acétylcholine (Geffard et al., 1985 (11); Souan et al., 1986 (12)), des antisirums Rglutaraldéhyde-polylysine dans lesquels R est un composé indolealkylamine, dirigés contre les indolealkylamines (Geffard et al. 1985(13)) ainsi que des anticorps dirigés contre l'acide y-aminobutyrique (Geffard et al., 1985(14); Seguela et al., 1984(15)). Au cours des affections chroniques citées précédemment, des processus oxydatifs ont été trouvés et décrits (Buttke et al. 1994(6)). Cest ainsi que dans la SEP, des auteus ont montré une élévation directe des produits de lipopéroxydation (Hunter et al. 1985 Ç7), Korpela et al. 1989 (8 et une diminution notable des anti-oxydants. Les données récentes montrent qu'au cours de l'infection à MH, le stress oxydatif serait l'un des éléments déterminants dans la mort cellulaire, donc la perte cn lymphocytes 1m4+ (Roederer et al. 1993(9); Staal et al. 1992(10)). fi était donc indispensable de mettre à la disposition des malades des médicaments ayant le triple objectif suivant: - restituer les perturbations antigéniques spécifiquement identifiées lors d'une affection humaine chronique; - lutter contre les processus inflammatoires, oxydatils; - inhiber les agents étiologiques viraux et/ou bactériens pouvant être à l'origine des affections chroniques évolutives. La Demanderesse a résolu ce problème en utilisant des conjugués monofonctionnels et/ou polyfonctionnels de la poly-L-lysine à visée thérapeutique. Selon un premier aspect, la présente invention concerne donc l'utilisation d'au moins un conjugué monofonctionnel et/ou polyfonctionnel de la poly-L-lysine pour la préparation de compositions ou associations pharmaceutiques utiles dans le traitement dc la dégénérescence neuronale, des neuropathies infectieuses, traumatiques ou toxiques, des affections dégénératives à caractère autoimmun et des affections prolifératives. La poly-L-lysine (ci-après appelée polylysine) est un polypeptide ou homopolymère de la lysine dont la longueur de chaîne varie suivant la méthode de préparation. Elle répond à la formule: (cf Merck Index, 10ème édition, abrégé N 7444). Ce produit a un poids moléculaire moyen qui est généralement compris entre 2000 et 300 000, ce qui signifie que son degré de polymérisation (c'est à dire la valeur de l'indice n ci-dessus) est compris entre environ 15 ct environ 2345. Bien entendu, par polylysine on entend de la polylysine linéaire ou ramifiée. Avantageusement, on utilise selon la présente invention de la polylysinc linéaire pipant un poids moléculaire moyen compris entre 20 000 et 30 000. Par conjugués monofonctionnels et polyfonctionnels de la polylysine, on entend respectivement les produits de couplage de l'une quelconque des molécules définies ciaprès à la polylysine et les produits de couplage d'au moins deux molécules définies ciaprès à au moins une molécule de polylysine. Par exemple, un conjugué bifonctiormel peut être représenté par la formule: molécule 1 - polylysine molécule 2 Avantageusement, les conjugués polyfonctionnels utilisés dans le cadre de l'invention sont des conjugués bifonctionnels. Les molécules utilisées dans le cadre de l'invention, désignées sous le terme "d'haptène" dans les préparations ci-après, peuvent être choisies dans l'une des trois catégories suivantes: I, Les molécules à caractère "acide gras ou lipidique", qui comprennent:: - les acides gras mono- ou dicarboxyliques, ci-après communémént désignés par le terme (di)acide gras, à chaume linéaire ou ramifiée, saturés ou insaturés, comprenant généralement de 4 à 24 atomes de carbone; - les composés impliqués dans le mécanisme d'ancrage des protéines aux membranes cellulaires, ces composés intervenant notamment dans le cycle du mévalonate, en particulier les isoprénoides liés à une cystéine; - le cholestérol et ses dérivés, notamment les hormones hydrophobes. V Les molécules à caractère "anti-oxydant", qui comprennent: - la vitamine A, la vitamine C, la vitamine E ou l'un de leurs dérivés; - la cystéine et ses dérivés, de formule: R1S-R2-CH(NH2) COOH dans laquelle R1 représente H ou CH3 et R2 représente un C1-C3 aikylène. 3/ Les molécules à caractère "acide aminé ou neurotransmetteur", qui comprennent: - les indolealkylamines ; - les catécholamines; - les acides aminés de formule: R3-CH(NH2 COOH dans laquelle R3 représente l'hydrogène, un groupe imidazolyle, un groupe carboxyméthyle ou un groupe aminopropyle; - les acides amino(C1-Cs)alkylsulfoniques ou sulfiniques; - la carnitine ou la carnosine; - les diamines de formule:: 2HN-A-NH2 dans laquelle A représente un (Cl-C6)alkylène ou un groupe dCHim-NH-B (CH2)p- dans lequel m et p, indépendamment l'un de l'autre, sont des entiers allant de 1 à 5, et B représente rien ou un groupe -(CH-NH- , n étant un entier allant de 1 à 5 ; - l'acétylcholîne et - L'acide y-aminobutynque. On distinguera donc trois sortes de conjugués (qu'ils soient mooofonctionnels ou polyfonctionnels) : les conjugués "acide gras ou lipidiques"; les conjugués "antioxydain"; et les conjugués "acides aminés ou neurotransmetteurs". Selon une variante de l'invention, on utilise au moins 4 conjugués monofonctionnels et/ou polyfonctionnels de la polylysine pour la préparation de compositions ou associations pharmaceutiques pour le traitement des troubles mentionnés précédemment. n est possible de n'utiliser que des conjugués de la même sorte. Avantageusement, on utilise des conjugués de deux sortes différentes. De manière préférée, on utilise des conjugués dc chacune des trois sortes ci-dessus. Selon une autre variante de l'invention, il est possible d'utiliser également un ou deux anticorps monoclonaux anti-idiotypiques pour préparer les compositions ou associations pharmaceutiques mentionnées précédemment. Ces anticorps sont par exemple ceux décrits par Chagnaud et al. (18, 19, 20). Généralement, le (di)acide gras comprend de 4 à 24 atomes de carbone, comme par exemple l'acide butyrique, maléique, succinique, glutarique, adipique, pimélique, subéxique, sébasique, caproique, caprylique, caprique, laurique, myristique, palmitique, palmitoléiquc, stéarique, oléique, linoléique, y-linolénique, a-linolénique, arachidique, gadoléiquc, arachidonique, béthénique, érucique, clupadonique ou azélaique . De préférence, le (di)acide gras est choisi parmi l'acide myristique, L'acide palmitique, l'acide stéarique, L'acide oléique ou l'acide azélaique. Les isoprénoides liés à une cystéine comprennent généralement de 6 à 20 atomes de carbone. Avantageusement, on utilise dans le cadre de l'invention le farnésyl-cystéinc, le géranyl-géranyl-cystéine ou le mévalonate-cystéine. Comme hormone hydrophobe, on utilise avantageusement la progestérone ou le 2méthoxyoestradiol. Comme dérivé de la cystéine, on utilise avantageusement l'homocystéine ou la méthionine. Les indolealkyleamines et catécholamines utilisées dans le cadre de l'invention comprennent notamment le tryptophane, le 5-méthoxytryptophane, la sérotonine, la tryptamine, la 5-méthoxytryptamine, la mélatonine, la phénylalanine, la 3,4dihydroxyphénylalanine et la tyrosine. Comme acides aminés, on utilise de préférence l'histidine, la glycine, l'aspartate ou l'omithine. Les acides amino(C1-Cg)alkylsulfoniques ou sulfiniques utilisés selon l'invention incluent notamment la taurine, l'homotaurine et l'hypotaurine. Les diamines utilisées de manière préférentielle dans le cadre de l'invention sont la putrescine, la cadavérine, la spermine et la spermidîne. Avantageusement, dans les conjugués monofonctionnels de la polylysine, la molécule utilisée est un (di)acide gras tel que défini précédemment. Dans les conjugués polyfonctionnels de la polylysine, au moins une des molécules utilisées est avantageusement un (di)acide gras, tel que défini précédemment, étant entendu que plusieurs (di)acides gras différents peuvent être utilisées. De préférence, ledit (dloacidc gras est choisi parmi l'acide myristique, l'acide palmitique, L'acide stéarique, l'acide oléique ou l'acide azélaique. Selon un autre aspect, l'invention concerne également les compléments alimentaires et vitaminés comprenant, à titre de principe actif, au moins un conjugué monofonctionnel etlou polyfonctionnel de la polylysine définis ciaessus, notamment au moins un conjugué entre un (di)acide gras et la polylysine. Les méthodes de couplage entre lesdites molécules et la polylysine, pour l'obtention de ces conjugués sont les méthodes de couplage chimique classiques bien connues de l'homme du métier, entre un groupe fonctionnel de chaque molécule et un groupe fonctionnel de la polylysine. Ces couplages sont réalisés par l'intermédiaire d'un agent de couplage, choisi par exemple parmi le glutaraldéhyde, l'anhydride succinique ou glutarique, le carbodiimide, le chloroformiate d'éthyle,ou l'hexaméthylène diisocyanate. Des exemples de telles méthodes de couplage sont notamment celles décrites dans Geffard et al. (16). On peut également coupler les molécules à la polylysine par simple adsorption.Des exemples de méthodes de couplage appropriées sont décrites en détail dans les préparations ci-a- A titre illustratif, le couplage entre lesdites molécules et la polylysine peut etre effectué entre une fonction amine de la polylysine et une fonction carboxylique desditts molécules. Ainsi, dans le cas des acides gras, notamment l'acide myristique, I'acide palmitique, etc., ainsi que dans le cas des isoprénoides liés à une cystéine, notamment de la farntsyl- cystéine, la liaison avec la polylysine est effectuée entre une fonction amine de cette dernière et la fonction carboxylique des molécules susmentionnées. De même, dans le cas de la cystéine et ses dérivés, la liaison avec la polylysine se fait avantageusement entre une fonction amine de cette demière et la fonction acide de ces molécules. Alternativement, la cystéine et ses dérivés peuvent être préalablement activés par couplage avec l'anhydride succinique ou glutarique, la liaison se faisant alors entre une fonction amine de la polylysine et la fonction acide libre de la molécule succcnylée ou glutarylée. Ou bien encore, la cystéine et ses dérivés peuvent être liés à la polylysine par réaction avec le glutaraldéhyde, la réaction se faisant notamment comme décrit par GcfXard et al. (17). Dans le cas du cholestérol et de ses dérivés, le couplage avec la polylysine est avantageusement réalisé par l'intermédiaire du groupe hydroxyle du cholestérol. Avantageusement le cholestérol et ses dérivés sont adsorbés sur la polylysine. Dans le cas des hormones hydrophobes, le couplage avec la polylysine est avantageusement réalisé par i'hexaméthylène diisocyanate. Dans le cas de la vitamine A (acide rétinoique), la liaison entre cette molécule et la polylysine s'effectue entre la fonction amine de cette dernière et la fonction acide de la molécule. Dans le cas de la vitamine C (acide ascorbique), la liaison entre cette molécule et la polylysine s'effectue entre la fonction amine de cette dernière et la fonction oxo de la molécule. Dans le cas de la vitamine E (a-tocophérol), la liaison entre cette molécule et la polylysine s'effectue entre la fonction amine de cette dernière et la fonction acide libre du succinate acide de la molécule. Dans le cas des acides aminoalkylsulfoniques ou sulfiniques, notamment la taurine, I'homotaurine et l'hypotaurine, la liaison entre ces molécules et la polylysine s'effectue par activation préalable des molécules avec un anhydride d'acide (succinique ou glutarique), ou bien par couplage avec le glutaraldéhyde. Dans le cas des acides aminés, de certains composés indolealkylamines, notamment le tryptophane, et des catécholamines, on peut effectuer la liaison entre ces molécules et la polylysine soit directement, soit par couplage avec le caidiimide, le glutaraldéhyde, un anhydride d'acide ou un chlorure d'acide, par exemple le chloroformiate d'éthyle. Dans le cas des diamines, on peut effectuer la liaison entre ces molécules et la polylysine par couplage avec le glutaraldehyde ou un anhydride d'acide. La liaison entre la cannitine ou la carnosine d'une part, et la polylysine d'autre part, s'effectue par couplage avec le carbodiimide. Les conjugués selon l'invention sont utilisables notamment pour la préparation de compositions ou associations pharmaceutiques utiles dans le traitement de la dégénérescence neuronale, des neuropathies infectieuses, traumatiques et toxiques, des affections dégénératives à caractère autoimmun et des affections prolifératives et plus particulièrement dans les indications suivantes : troubles de la mémoire, démence vasculaire, troubles post-encéphalitiques, troubles post-apoplectiques, syndromes posttraumatiques dus à un traumatisme crânien, troubles dérivant d'anoxies cérébrales, maladie d'Alzheimer, démence sénile, démence subcorticale, tellc que la chorée de Huntington ct h maladie de Parkinson, démence provoquée par le SIDA, neuropathies dérivées de morbidité ou dommage des nerfs sympatiques ou sensoriels, maladies cérébrales, telles que l'oedème cérébral, dégénérescences spinocérébelleuses, neuropathies consécutives à une maladie de Lymc, sclérose latérale amyotrophique, sclérose en plaques, épilepsies, migraines, polyarthrites, diabète insulino-dépendant, lupus érythémateux disséminé, thyroïdite de Hashimoto, maladie de Horton, dermatomyosite et polymyosite, ainsi que spondylarthrite ankylosante, infection à VIH et cancers. Dans le cadre de la présente invention, on entend par association pharmaceutique plusieurs mélanges de conjugués de la polylysine, conditionnés de manière distincte, qui peuvent être administrés simultanément ou séparemment, par exemple de manière séquentielle. Ces mélanges se présentent dans des conditionnements distends, identiques ou différents, en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention contiennent, à titre dc principe actif, un mélange dc conjugués de la polylysine tels que définis précédemment, en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. L'administration des conjugués selon l'invention s'effectue préférablement par voic parentérale. La quantité de principe actif à administrer dans le traitement des troubles cidessus selon la méthode de la présente invention dépend bien évidemment de la nature ct de la gravité des affections à traiter ainsi que du poids du malade. Néanmoins, les doses unitaires préférées comprendront généralement de 0,1 à 2 ml, de préférence de 0,5 à 1 ml, comme par exemple 0,6 ; 0,8 et 1 ml, de solution de conjugués, à raison de 0,3 à 0,6 mg de conjugués/ml. Ces doses unitaires seront normalement administrées 1 à 4 fois par jour, mais on peut également envisager une administration plus espacée dans le temps, par exemple tous les 2 à 3 jouIs. Les conjugués selon l'invention peuvent se présenter sous forme de solutions aqueuses contenant les doses unitaires indiquées ci-dessus dans un véhicule aqueux, isotonique ou stérile qui contient éventuellement des agents de dispersion et/ou des mouillants pharmacologiquement compatibles. Ces solutions sont conditionnées de manière appropriée pour permettre une administration parentérale, par exemple une administration intraveineuse, intramusculaire ou sous-cutanée, ou l'introduction dans un dispositif dc perfusion intraveineuse, ou bien encore une administration par un système d'implant permettant la perfusion sous-cutanée. On peut également administrer les conjugués selon l'invention par voic oralc, intranasalc, rectale ou bien percutanéc. Dans ce cas, les formes unitaires d'administration sont préparées de manière conventionnelle selon les techniques classiques connues dc comme du métier, avec les excipients couramment utilisés dans ce domaine. A titre d'exemples de composition pharmaceutique selon l'invention, on peut mentionner (les abrévations utilisées sont explicitées ci-après) * une composition qui comprend les conjugués suivants: L-DOPA-G-PL atoco- PL, Ole-PL-Farcys, PO-PL-Ole, Myr-PL-Ole, Cys-AG-PL ou Cys-AS-PL, HomocysP AG-PL ou Homocys-AS-PL, Met-AG-PL ou Met-AS-PL, Met-G-PL, Cys-G-PL, Homocys-G-PL, Laur-PL-Ole, GABA-AG-PL, SMT-AG-PL His-PL, Cys-PL-Nac, Homocys-PL-Nac, Met-PL-Nac, utile notamment pour le traitement de la maladie de Parkinson. * une composition qui comprend les conjugués suivants: GABA-G-Pt > PO-PL Aze, Pal-PL-Farcys, Myr-PL-Farcys, W-AG-PL, Ole-PL-Pal, Myr-PL-Ole, atoco PL Aze-PL-Lin2, utile notamment pour le traitement des épilepsies.. * une composition qui comprend les conjugués suivants : HW-AG-PL, W-AG-PL MT-AG-PL atoco-PL, Cys-AG-PL, Met-AG-PL, Homocys-AG-PL, utile notamment pour le traitement des migraines essentielles. A titre d'exemples d'association pharmaceutique selon l'invention, on peut mentionner: * une association qui comprend dans deux conditionnements distinctes, d'une part les conjugués suivants (la) : Farcys-PL-Pal, Pal-PL-Myr, Farcys-PL-Myr, Lin2-PL-Olc, Met-PL-Nac, Cys-PL-Nac, Homocys-PL-Nac, Farcys-PL-Ole, Met-AG-PL, Pal-PL Ole, Myr-PL-Ole, Tau-AG-PL, VitC-PL, Tau-G-PL, Stea-PL-Farcys, ACh-AG-PL, a toco-PL, Aze-PL-Ole ; et d'autre part les conjugués suivants (lb): Farcys-PL-Pal, Farcys-PL-Myr, Pal-PL-Myr, Aze-PL-Ole, Pal-PL-Ole, Farcys-PL-Ole, PO-PL-Azc, Ole-PL-Myr, Stea-PL-Farcys, Ole-PL-Laur, utile notamment pour le traitement des neuropathies post-Lyme et de la spondylarthrite ankylosante. * une association qui comprend dans deux conditionnements distincts, d'une part les conjugués suivants (2a): Myr-PL-Pal, Pal-PL-Ole, Myr-PL-Ole, Tau-AS-PL ou Tau AG-PL, atoco-PL, VitC-PL, Homocys-PL-Nac, Cys-PL-Nac, Met-PL-Nac, Farcys PL-Myr, Farcys-PL-Pal, Farcys-PL-Ole, Farcys-PL-Stea, Met-AS-PL ou Met-AG-PL, Homocys-AS-PL ou Homocys-AG-PL, Cys-G-PL, Homocys-G-PL Met-G-PL CHOPEZ SMT-AG-PL W-AG-PL, ACh-AG-PL; et d'autre part les conjugués suivants (2b):Pal-PL-Ole, Tau-AS-PL ou Tau-AG-PL, atoco-PL, VitC-PL, Homocys-PL Nac, Cys-PL-Nac, Met-PL-Nac, Farcys-PL-Myr, Farcys-PL-Pal, Farcys-PL-Olc, Farcys-PL-Stea, Met-AS-PL ou Met-AG-PL, Homocys-AS-PL ou Homocys-AG-PL, Cys-AG-PL Cys-G-PL, Met-G-PL, Homocys-G-PL, Met-G-PL, CHO-PL, W-AG- PL, ACh-AG-PL, utile notamment pour le traitement da la sclérose latérale amyotrophique. * une association qui comprend dans trois conditionnements distincts: 3a) les conjugués suivants: Myr-PL-Pal, Pal-PL-Ole, Myr-PL-Ole, Tau-ASPL ou Tau-AG-PL, atoco-PL, VitC-PL, Homocys-PL-Nac, Cys-PL-Nac, Met-PL-Nac, Farcys-PL-Myr, Farcys-PL-Pal, Farcys-PL-Ole, Farcys-PL-Stea, Met-ASPL ou Met AG-PL, Homocys-AS-PL ou Homocys-AG-PL, Cys-G-PL, Homocys-G-PL, MetV PL, CHO-PL, SMr-AG-PL, W-AG-PL, ACh-AG-PL; 3b) les conjugués suivants : Cys-AG-PL, Met-AG-PL, Homocys-G-PL, Çys-PL- Nac, Homocys-PL-Nac, Met-PL-Nac, Tau-AG-PL, Tau-G-PL, Met-G-pL atoco-PL, atoco-PL-Ret; et 3c) les conjugués suivants :Farcys-PL-Ole, Aze-PL-Ole, Aze-PL-PO, Met-PL Nac, Cys-PL-Nac, Homocys-PL-Nac, atoco-PL, Lin2-PL-Ole, Ret-PL, Ole-PL-Laur, atoco-PL-Ret, Tau-G-PL, ACh-AG-PL, PRO-PL, GABA-G-PL, utile notamment pour le traitement de la chorée de Huntington. * une association qui comprend dans quatre conditionnements distincts: 4a) les conjugués suivants: Farcys-PL-Ole, PO-PL-Ole, Aze-PL-Ole, Azc-PL PO, Met-PL-Nac, Homocys-PL-Nac, atoco-PL, VitC-PL, Tau-AG-PL, Lin2-PLOle, CHO-PL, Ole-PL-Laur, 5-MT-AG-PL Tau-G-PL, ACh-AG-PL; 4b) les conjugués suivants: Farcys-PL-Pal, Farcys-PL-Myr, Pal-PL-Myr, Aze- PL-Ole, Pal-PL-Ole, Farcys-PL-Ole, PO-PL-Aze, Ole-PL-Myr, Stea-PL-Farcys, OIe- PL-Laur; 4c) les conjugués suivants : Farcys-PL-Ole, Aze-PL-Ole, Aze-PL-PO, Met-PL Nac, Cys-PL-Nac, Homocys-PL-Nac, atoco-PL, Lin2-PL-Ole, Ret-PL, Ole-PL-Laur, atoco-PL-Ret, Tau-G-PL, ACh-AG-PL, PROPL, GABA-G-PL; et 4d) les conjugués suivants :Farcys-PL-Ole, Aze-PL-Ole, Aze-PL-PO, atoca PL, VitC-PL, Tau-AG-PL, Lin2-PL-Ole, CHO-PL, Laur-PL-Ole, utile notamment pour le traitement de la sclérose en plaques. * une association qui comprend dans trois conditionnements distincts: Sa) les conjugués suivants : Farcys-PL-Pal, Pal-PL-Myr, Farcys-PL-Myr, Iin2 PL-Ole, Met-PL-Nac, Cys-PL-Nac, Homocys-PL-Nac, Farcys-PL-Ole, Met-AG-PL, Pal-PL-Ole, Myr-PL-Ole, Tau-AG-PL, VitC-PL, Tau-G-PL, Stea-PL-Farcys, ACh- AG-PL, atoco-PL, Aze-PL-Ole; sb) les conjugués suivants: Farcys-PL-Pal, Farcys-PL-Myr, Pal-PL-Myr, Azc- PL-Ole, Pal-PL-Ole, Farcys-PL-Ole, PO-PL-Aze, Ole-PL-Myr, Stea-PL-Farcys, OIe- PL-Laur; et Sc) les conjugués suivants : Farcys-PL-Pal, Pal-PL-Myr, Farcys-PL-Myr, Farcys-PL-Ole, Myr-PL-Ole, Stea-PL-Farcys, ACh-AG-P1, atoco-PL, utile notamment pour le traitement des polyarthrites. * une association qui comprend dans deux conditionnements distincts, d'une part les conjugués suivants (6a): Lin2-PL-Farcys, Stea-PL-Farcys, Myr-PL-Farcys, Pal-PL Farcis, Ole-PL-Farcys, Cys-AG-PL, Met-AG-PL, Homocys-AG-PL CHO-PL Homocys-PL-Nac, Cys-PL-Nac, atoco-PL-Ret, otoco-PL, VitC-PL Ole-PL-Laur, Met-G-PL, Met-PL-Nac, Homocys-PL-Nac, Cys-G-PL; et d'autre part les conjugués mentionnés au point 3c) cidessus, utile notamment pour le traitement dc l'infection à VIH. c une association qui comprend dans trois conditionnements distincts: 7a) les conjugués suivants: PRO-PL, Ret-PL, atoco-PL, atoco-PL-Ret, W-AG PL 5MT-AG-PL Hist-PL; 7b) les conjugués mentionnés au point lb) cidessus; et 7c) les conjugués suivants : L-DOPA-G-PL, L-DOPA-AG-PL, 5MT-AG-PL, HW-AG-PL, Tyr-AG-PL, utile notamment pour le traitement des cancers. Selon un autre aspect, I'invention concerne également les conjugués monofonctionnels et polyfonctionnels entre d'une part la polylysine et d'autre part une (plusieurs) molécule(s) choisie(s) parmi: - les (di)acides gras à chaîne linéaire ou ramifiée, saturés ou insaturés, comprenant généralement de 4 à 24 atomes de carbone; - les composés impliqués dans le mécanisme d'ancrage des protéines aux membranes cellulaires, ces composés intervenant notamment dans le cycle du mévalonate, en particulier les isoprénoides liés à une cystéine; - le cholestérol et ses drivés, notamment les hormones hydrophobes; - la vitamine A, la vitamine C, la vitamine E ou un de leurs dérivés; - la cystéine et ses dérivés, de formule: R1S-R2-CH(NH2 COOH dans laquelle R1 représente H ou CH3 et R2 représente un C1-C3 alkylène. - les indolealkylamines; - les catécholamines; - les acides aminés de formule: R3-CH(NHZ)-COOH dans laquelle R3 représente l'hydrogène, un groupe imidazolyle, un groupe carboxyméthyle ou un groupe aminopropyle; - les acides amino(C1-C5)alkylsulfoniques ou sulfiniques; - la carnitine ou la carnosine; - les diamines de formule: 2HN-A-NH2 dans laquelle A représente un (Cl-C6)alkylène ou un groupe -(CH2)m-NH-B-(CH2)p- dans lequel m et p, indépendamment l'un de l'autre, sont des entiers allant de 1 à 5, et B représente rien ou un groupe -(CH2)n-NH-, n étant un entier allant de 1 à 5; - I'acétylcholine et - L'acide y-aminobutyrique. à la condition que lorsque le conjugué est monofonctionnel, la molécule est choisie parmi: - une hormone hydrophobe; - la vitamine A, la vitamine C, la vitamine E ou un de leurs dérivés; - un acide aminé de formule: R3-CH(NHCOOH dans laquelle R3 représente l'hydrogène, un groupe imidazolyle, un groupe carboxyméthyle ou un groupe aminopropyle; - un acide amino(C1-Cs)alkylsulfonique ou sulfinique; - la carnitine ou la carnosine; et - une diamine de formule: 2HN-A-NH2 dans laquelle A représente un (C1-C6)alkylène ou un groupe -(CH2)m-NH-B-(CH2)p- dans lequel m et p, indépendamment l'un de l'autre, sont des entiers allant de 1 à 5, et B représente rien ou un groupe -(CH)-NH- , n étant un entier allant de 1 à 5; Les préparations et exemples qui suivent illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée. Les préparations illustrent la synthèse des conjugués, qui sont identifiés par l'agent de couplage utilise, et les exemples sont relatifs aux compositions et associations pharmaceutiques de l'invention. Dans ceux-ci, les abréviations suivantes ont été utilisées: 5Mr = 5-méthoxytryptamine; ACh = acétylcholine; AG = anhydride glutarique; AS = anhydride succinique; G = glutaraldehyde réduit:: atoco = a-tocophérol; Aze = acide azélaique; CHO = cholestérol; Cys=cystéine; DMF = diméthylformamide; DMSO = diméthylsulfoxyde; ECF = chloroformiate d'éthyle Farcys = farnésyl cystéine; GABA = acide y-aminobutyrique; His=histamine; Hist = histidine; Homocys = homocystéine; HW = 5-hydroxytryptophane; Laur = acide laurique; L-DOPA = L-3,4 dihydroxyphénylalanine; Lin2 = acide a-linoléique; MBS = métabisulfite de sodium MES = acide morpholinoéthanol sulfonique Met = méthionine; Myr = acide myristique; Pal = acide palmitique; Nac = N-acétylé; Ret = acide rétinoique; Ole = acide olélque; PO = acide palmitoléique; stea = acide stéarique; tau = taurine; TEA = tétraéthylamine; vitc = acide ascorbique; W = tryptophane; PRO = progestérone; 2MO = 2-méthoxyoestradiol; AI = anticorps monoclonal anti-idiotypique PL = polylysine. Préparations L Conjugués glutaraldéhyde : Cette préparation illustre notamment la préparation des conjugués de cystéine ou de ses dérivés avec la polylysine selon le schéma réactionnel ci-après: R'-NH2 + OHC-(CH2)3-CHO + H2N-PL réaction de condensation ï0M R' (CH2)3 CH=N (CH2)4 CIH polylysine NH formation de diimines puis réduction par NaBH4 CO R' -NH-(CH2)5 NH-(CH2)4- CH polylysine NH (R' = cystéinyl, homocystéinyl, méthionyl). 20 mg d'haptène sont repris dans 1 ml de tampon acétate 1,5 M (pH8) avec 1 fid dc traceur radioactif (3H tyrosine : ref. NET 127, Dupont de Nemours). Dans le cas dc conjugués catécholaminergiques, il faut rajouter quelques grains de MBS. Dans le cas du tryptophane, il faut solubiliser ce dernier dans 1 ml de DMSO (Prolabo) et 1 ml d'acétate dc sodium (Prolabo). Séparément, 40 mg de polylysine sont repris dans 2 ml de tampon acétate 1,5 M. A la solution d'haptène, on ajoute 1 ml d'une solution de glutaraldéhyde (Prolabo) à 5 %, et environ 10 secondes après, la polylysine. La réaction de couplage se tilt par une coloration jaune ; dès que celle-ci est atteinte, la réaction est stoppée par addition dc quelques gouttes d'une solution de NaBHq (Aldrich) (quelques grains dans de l'eau, dc manière à avoir une solution qui "bulle" > Dans le cas particulier de la taurine, il faut rajouter 1 ml dc glutaraldéhydc à 1 % seulement. Les conjugués sont purifiés par dialyse contre de veau, sauf pour les catécholamines, où il faut rajouter du MBS à la solution de dialyse. Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par: R-G-PL (R = haptène, G = résidu glutaraldéhyde réduit). IL Conjugués avec un bras succinvl ou nlutarvl Cest le cas par exemple de l'a-tocophérol (vitamine E), de la cystéine et ses dérivés, ou bien encore de la 5-méthoxytryptamine, de la taurine, de l'homotaurine: * Cys-AS ou AG-PL Co R'-CO-NH-(CH2)n CO-NH-(CH2)4 fH reste de polylysine NH R' = cystéinyl, homocystéinyl, méthionyl, avec n = 2 dans le cas de l'acide ou anhydride succinique, n = 3 dans le cas de l'acide ou anhydride glutarique. * atoco-AS-PL Éoei CH-(CH, ),-HN-CO NH :I(a'2 H2C 013 oe 21H3C 0013 3 H,\oei012oe227oe3 coo * SMT-AS ou AG-PL H3CO chez N3COo > CO1H(CH2 > C1 pclll7iine ÉÉp 2 2 n 4 iii l'H n =2 ou 3 * (homo)tau-AS ou AG-PL co HO3S-(CH2 t7NH-Co- (CH2 )7C0-NH- (CH2 )-CH polylysine n=2,3 40 mg d'haptène sont solubilisés dans 1 ml d'eau avec 1,al de traceur radioactif (3H tyrosine). Dans le cas de la 5-méthoxytryptamine, sa solubilisation n'est possible qu'en mettant 200 $ de DMSO.On ajoute 34 mg d'anhydride glutarique ou succinique (Sigma) ct aussitôt 340 l de NaOH 1M (Prolabo) de manière à être à pH 7. Les conjugués sont ensuite lyophilisés. L'accrochage de ces conjugués sur la polylysine se fait par le chloroformiate d'éthyle (Fluka) à 4 C. Les haptènes -glutaryl ou -succinyl sont repris dans 1,6 ml de DMF anhydre (Prolabo) et 20 pi de TEA anhydre (Merck) (pas de solubilisation complète). L'activation des COOH se fait par 400 pi d'ECF dilué au V16 dans du DMF anhydre pendant S minutes. Puis, on ajoute une solution de PL (80 mg dissouts dans 2 ml d'eau et 20 pi de TEA anhydre). La purification des conjugués est faite par dialyse contre de l'eau. Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par: R-AS ou AG-PL (R = haptène, AS = résidu succinyl, AG = résidu glutaryl). m. Contés carbodiimide 50 mg d'haptène et 50 mg de polylysine sont solubilisés dans 1 ml de tampon MES 0,2MpHS,4. On ajoute petit à petit, à cette solution, 200 mg de carbodiimide (Sigma) cn environ 10 minutes. n faut vérifier à chaque addition le pH, et l'ajuster à 5,4. La purification des conjugués est faite par dialyse contre de l'eau. Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par : R-PL (R = haptène lié par -CONH-). IV. Conjugués chloroformiate d'éthvle (molécules bvdrophiles) * VitC-PL: H OH HCOH CO 0-N-(CH2)7CH polylysine HO NH HO OH 40 mg d'haptène sont repris dans 1,6 ml de DMF anhydre et 20 pi de TEA anhydre. L'activation des COOH se fait par 400 pi dECF dilué au V16 dans du DMF anhydre pendant 5 minutes. Au bout de ce temps, on ajoute une solution de PL (80 mg dissouts dans 2 ml d'eau et 20 l de TEA anhydre). h Cystéine, homocystéine, méthionine: 40 mg d'haptène sont repris dans 2 ml de méthanol anhydre et 20 pi de TEA anhydre (solubilisation difficile). L'activation des COOH se fait avec 1 ml d'ECF dilué au V16 dans du DMF anhydre pendant 5 minutes. Au bout de 5 minutes, on ajoute une solution dc PL (80 mg dissout dans 2 ml d'eau et 20 $ de TEA anhydre). *carnitine: On s'assure de la bonne déshydratation de la carnitine en la lyophilisant. Le couplage doit se faire ensuite très rapidement, car la carnitine est très hydroscopique. Le protocole est le même que pour la vitamine C. La purification des conjugués est faite par dialyse contre dc l'eau. Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par: R-PL (R = haptène > V. Conjugués chloroformiate d'éthvle (acides gras, farnesvi cystéine acide rétinoïque et a-tocophérol) * Cas de la farnesyl cystéine: La farnésyl cystéine est le résultat de la condensation du farnésol: avec la cystéine: par liaison thioéther. Cette molécule est ensuite liée à la polylysine:: NH R -CO-NH-(CH2)4 4 CH polylysine CO (R' = résidu de farnésylcystéine) On utilise 20 mg d'haptène pour les acides gras (40 mg pour l'acide azélaique), 40 mg pour la farnésylcystéine, 40 mg pour l'acide rétinoique ou 60 mg pour l'&alpha;-tocophérol. Les haptènes sont solubilisés dans 1 ml de méthanol anhydre et 20 l de TEA anhydre avec 1 l de marqueur radioactif (acide palmitique 14C réf. C14 NECQ, Dupont de NemouIs). Ptiis on laisse le mélange sous atmosphère sèche pendant 30 minutes. On active ensuite ce mélange par 200 ,ul de chloroformiate d'éthyle dilués au 1116 dans du DMF anhydre, pendant 15 minutes à 4 C. Puis on rajoute la solution de PL (80 mg dans 4 ml de tampon phosphate 10-2M contenant CaQ2 10-3M et 40 fid de 1EA anhydre). La réaction terminée, le conjugué est purifié par dialyse. On transfère les solutions obtenues dans des tubes de dialyse Cube dialyse Visking, Prolabo), dont les porcs laissent passer les molécules non couplées (PM Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par: R-PL (R = haptène). VI. Acétylation des conjugués farnésykystéine ou thiols couplés par la carbodiimide Le pH des conjugués est ramené à 10 avec de la soude 1M. Puis on ajoute un mélange de 4 jcd d'anhydride acétique (Prolabo) et de 500 l de DMSO anhydre. L'addition de 40,d de NaOH 1M permet de neutraliser la réaction. Les conjugués sont ensuite dialysés contre de l'eau. Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par: R-PL-Nac (R = haptène, Nac = Nacétylé). VII. Conjugués cholestérol ou acide rétinoïque nar adsorption * Cas de l'acide rétinolque: H3C CH3 CH3 CH3 oe-- CO-NH-(CH, wlylyX W NH 40 mg d'haptène sont solubilisés avec 2 ml de méthanol anhydre et 2 ml de DMF anhydre avec 1,ul de traceur radioactif (cholesterol : réf. NET 725, Dupont de Nemours). Puis on ajoute goutte à goutte 80 mg de PL dissouts dans 2 ml de tampon acétate 1,5 M. On agite bien puis on purifie les conjugués par dialyse. La première solution de dialyse est constituée d'un mélange 1/3 méthanol, 1/3 DMF et 1/3 eau. Les deux solutions suivantes comprennent uniquement de l'eau. Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par: R-PL (R = haptène). VIIL Conjugués hexamétbvlêne diisocvanate S mg de 2-méthoxyoestradiol sont repris dans 1 ml de DMSO avec 1 fid donc radioactive (progestérone : réf. N381, Dupont de Nemours). On ajoute 10 mg de FL dissouts dans 1 ml de tampon phosphate 0,2 M pH10, et 50 fid d'hexaméthylène diisocyanate (Fluka). On ajuste le pH à 10 avec de la soudc 1N. Pour la progestérone, le protocole est le même, mais on part dc 40 mg dc progestérone, 80 mg de PL et 200 l d'hexaméthylène diisocyanate. La purification des conjugués se fait par dialyse, la 1ère solution est constituée dim mélange DMF/DMSO/eau, les deux suivantes d'eau. Les conjugués ainsi obtenus sont désignés par: R-PL (R = haptène). De manière générale, le petit matériel dans lequel se font les réactions de couplage ct les purifications des conjugués hydrophobes, est délipidé par rinçage au méthanol et séchage pour éviter toute contamination lipidique extérieure. De plus, dans la synthèse des conjugués ayant un haptène possédant une fonction thiol (cystéinc, homocystéine, méthionine, etc..), on ajoute après la dialyse quelques grains de l'haptène correspondant non couplé. Dans les exemples qui suivent, les conjugués de la polylysine ont été synthétisés suivant le mode opératoire décrit précédemment, en utilisant de la polylysmc commercialisée par le société Sigma sous la référence P 7890. A titre d'indication, les rapports de couplage des conjugués utilisés dans les exemples sont rapportés dans le Tableau suivant: : atoco-PL 23 Aze-PL-Lin2 10,10 Pro-PL 8 Farcys-PL-PO 30,30 Farcys-PL-Pal 8,8 Pal-PL-Myr 25,25 CHO-PL 33 Homocys-PL 4 Ole-PL-Pal 5,5 GABA-AG-PL 23 atoco PL-Ret 22,23 L-DOPA-AG-PL 18 Ret-PL 11 Homocys-AG-PL 22 Ole-PL-Laur 7,5 Homocys-G-PL 5 Tau-AG-PL 32 Cys-G-PL 5 Tau-G-PL 44 Met-G-PL 12 His-G-PL 5 Homocys-G-PL 4 Cys-AG-PL 10 Cys-PL-Nac 3 Tableau (suite) HW-AG-PL 41 Met-PL-Nac 7 W-AG-PL 32 2MO-PL 22 Cys-PL-Nac 2 PRO-PL 12 Homocys-PL-Nac 3 GABA-G-PL 10 L-DOPA-G-PL 4 Aze-PL-F s 10,10 Par rapport dc couplage, on entend le nombre de molécules d'haptène(s) coqugues par molécule de polylysine. Dans le cas des conjugués bifonctionnels, on indiquc, pour chaque haptène, le nombre respectif de molécules conjuguées. Exemple 1: Préparation d'une association pharmaceutique pour le traitement des troubles neurologiques consécutifs à une maladie de Lyme De nombreuses affections neurologiques sont la conséquence d'infections bactériennes et virales connues ou non. Borrelia burgdorflei, est l'agent étiologique dc la maladie de Lyme. n provoque dans un certain nombre de cas des neuropathies. On a préparé les solutions suivantes: Solution 1 Farcys-PL-Pal 1 Pal-PL-Myr 1 Farcys-PL-Myr 1 Lin2-PL-Olc 1 Met-PL-Nac 1 Cys-PL-Nac 1 Homocys-PL-Nac 1 Farcys-PL-Ole 1 Met-AG-PL 1 Pal-PL-Ole 1 Myr-PL-Ole 1 Tau-AG-PL 2 VitC-PL 2 Tau-G-PL 2 Stea-PL-Farcys 2 ACh-AG-PL 2 atoco-PL 2 Aze-PL-Ole 2 Solution 2 Farcys-PL-Pal 1 Farcys-PL-Myr 1 Pal-PL-Myr 1 Aze-PL-Olc 1 Pal-PL-Ole 1 Farcys-PL-Ole t PO-PL-Aze 1 Ole-PL-Myr 1 Stea-PL-Farcys 1 Ole-PL-Laur 1 Le chiffre à droite du conjugué monofonctionnel ou bifonctionnel de la polylysine indique la concentration en haptène(s) dudit conjugué dans la solution, étant entendu que la valeur 1 correspond à une concentration égale à 10-5 M. Ainsi, pour le conjugué bifonctionnel Farcys-PL-Pal, on a: [Faccys] = 10-5M [Pal] = 10-5M. De cette manière, on peut déterminer la concentration finale de chaque haptène dans les solution 1 et 2. Par exemple, la concentration finale en Farcys dans la solution 1 est de 5.10-5M. Procédé de préparation: On mélange les différentes solutions de conjugués monofonctionnels et bifonctionnels, préparées extemporanément dans du sérum physiologique, de manière à obtenir, après mélange au vortex et dilution dans les solutions finales respectives 1 et 2, les concentrations en haptènes indiquées précédemment. Puis, les solutions sont filtres séparément sur des filtres Sartorius stériles ayant des pores de 0,22 jum puis réparties dans des flacons stériles distincts ou préparées en solutions buvables distinctes (mélangc sirop, huile végétale pure 1ère pression). Les solutions i et 2 sont administrées alternativement par injection intramusculaire ou sous-cutanée lente, à raison de 1 ml de chaque solution 1 à 2 fois par jour, par exemple 2 fois la solution Z pour 1 fois la solution 1 chaque jour. On constate chez tous les malades (n = 4) traités selon le protocole décrit ci-dess, une régression de la neuropathie causée par la maladie de Lyme. EJcemple 2: Préparation d'une association pharmaceutique pour le traitement de la sclérose latérale amyotrophique La sclérose latérale amyotrophique (SLA), encore appelée maladie de Ctarcr, est une affection progressive qui fait partie de la triade des affections dégénératives du système nerveux âgé, les deux autres étant les maladies d'Alzheimer et de Parkinson, Toutes les trois sont caractérisées par une vulnérabilité sélective d'un groupe de neurones disparaissant pour des raisons non encore connues. En effet, les lésions ne sont causées ni par des problèmes vasculaires, ni par des réactions inflammatoires.Dans la SLA, les cellules atteintes sont les motoneurones de la corne antérieure de la moelle épinière et des noyaux moteurs crâniens: V, VII, IX, XI, XII ; et, les voies motrices (corticospinales et cortibulbaires) qui, dans leur ensemble peuvent être touchées, entraînant secondairement une amyotrophie. L'évolution se fait vers une aggravation progressive, avec installation d'un état grabataire, d'une insuffisance respiratoire par atteinte de la musculature intercostale et diaphragmatique menant rapidement au décès (24 à 26 mois en moyenne dans la majorité des cas). La SIA survient chez l'adulte, homme et femme, entre 40 et 60 ans (on constate 2000 nouveaux cas par an en France).L'incidence de la SLA est égale à celle de la sclérose en plaques (SEP) et est cinq fois supérieure à celle de la maladie de Huntington. L'étiologie de cette affection demeure encore inconnue. Le modèlc qui prévaut aujourd'hui est multifactoriel. Elle résulterait de l'addition combinée d'une susceptibilité génétique (5 à 10 % des cas de SLA familiales seraient rattachés à une transmission autosomale localisée sur le chromosome 21), d'un vieillissement accéléré et de facteurs neurotoxiques exogènes et/ou endogènes aboutissant à la destruction sélective des motoneurones. On a préparé les solutions suivantes: Solution 3 Myr-PL-Pal 1 Pal-PL-Olc 1 Myr-PL-Ole 1 Tau-AS-PL ou Tau-AG-PL 1 atoco-PL 3 VitC-PL 1 Homocys-PL-Nac 4 Cys-PL-Nac 4 Met-PL-Nac 4 Farcys-PL-Myr 1 Farcys-PL-Pal 1 Farcys-PL-Ole 1 Farcys-PL-Stea 1 Met-AS-PL ou Met-AG-PL 4 Homocys-AS-PL ou Homocys-AG-PL 4 Cys-G-PL 4 Homocys-G-PL 4 Met-G-PL 4 CHOPL 1 5Mr-AG-PL 1 W-AG-PL 2 ACh-AG-PL 4 Solution 4 Pal-PL-Ole 1 Tau-AS-PL ou Tau-AG-PL 1 atoco-PL 3 VitC-PL 1 Homocys-PL-Nac 4 Cys-PL-Nac 4 Met-PL-Nac 4 Farcys-PL-Myr 1 Farcys-PL-Pal 1 Farcys-PL-Olc 1 Farcys-PL-Stea 1 Met-AS-PL ou Met-AG-PL 4 Homocys-AS-PL ou Homocys-AG-PL 4 Cys-AG-PL 4 Cys-G-PL 4 Met-G-PL 4 Homocys-G-PL 4 Met-G-PL 4 CHOPL 1 W-AG-PL 2 ACh-AG-PL 4 AI= 0,1 mg/ml Procédé de préparation: comme pour l'exemple 1. Les solution 2 et 4 sont administrées par injection sous-cutanée lent, à raison dc 0,8 ml dc chaque solution 2 fois par jour, ou bien 0,8 ml de solution par jour en alternant les solutions ss et 4 un jour sur deux. On observe dans 80 % des cas (n = 30) une stabilisation de la symptomatologie; dans 40 à 50 % des cas, une amélioration de la symptomatologie est même constatée (régress des atteintes). Exemple 3: Préparation d'une composition pharnaceutique pour le traitement de la maladie de Parkinson Cest une affection dégénérative du système nerveux central dans laquelle les neurones dopaminergiques de la voie nigro striée sont sélectivement détruits. La maladie de PARKINSON est l'aboutissement d'un prooessus chronique actif débutant 20 à 30 ans avant l'expression de la maladie, dont l'origine selon les hytes récentes est d'ordre multifactoriel. Elle est le résultat de l'action combinée d une susceptibilité génétique, du vieillissement, et de facteurs neurotoxiques exogènes et endogènes aboutissant à la destruction des systèmes monoaminergiques ascendants. L'analyse post-mortem de sujets atteints de la forme idiopathique ou post encépbalitique, met en évidence les phénomènes essentiels suivants: (i) une dégénérescence du faisceau nigrostrié se traduit par l'effondrement des taux de dopamine (DA) et de ses métabolites dans le néostriatum et par une perte neuronale prédominante dans la pars compacta de la substance noire; (ii) une déficience en DA dans les neurones de l'aire tegmento-ventrale (ATV) qui sont à l'origine de la voie mésocorticolimbique et qui projettent sur le noyau accumbens. Une diminution moins importante du nombre de neurones DA et des corps de Leeey est observée dans la partie ventrale de l'ATV. La déplétion en DA doit atteindre un certain seuil critique (60 % à 80 to) avant que les symptômes parkinsoniens n'apparaissent. L'akinésie étant le symptôme principal relié au degré de déplétion en DA; (iii) la dispantion en neurones nigriques s'accompagne de la libération du pigment mélanique et surtout de l'apparition de corps de Lewy, leur présence est un indicateur habituel de cette atteinte neuronale spécifique. Au niveau évolutif et individuel, la maladie de Parkinson résulterait de l'intervention de ces différents facteurs, tôt dans la vie, chez des sujets possédant une susceptibilité génétique s'exprimant par exemple dans leur capacité anti-oxydative (glutathion réductase, phénotype d'hydroxylation...) conduisant à la réduction du pool neuronal nigrique. La perte neuronale physiologique liée à l'âge aboutirait ensuite à l'expression clinique de la maladie lorsque 80 % des neurones dopaminergiques nigriques manquent. On a préparé la solution suivante: Solution 5 L-DOPA-G-PL 5 atoco-PL 2 Ole-PL-Farcys 1 PO-PL-Ole 1 Myr-PL-Ole 1 Cys-AG-PL ou Cys-AS-PL 1 Homocys-AG-PL ou Homocys-AS-PL 1 Met-AG-PL ou Met-AS-PL 1 Met-G-PL 1 Cys-G-PL 1 Homocys-G-PL 1 Laur-PL-Ole 1 GABA-AG-PL 2 5MT-AG-PL 1 Hist-PL 1 Cys-PL-Nac 1 Homocys-PL-Nac 1 Met-PL-Nac 1 Préparation: comme pour l'exemple 1. La solution 5 est administrée par injection sous-cutanée, à raison de 0,4 à 0,8 ml de solution tous les 2 à 3 jours. On constate une amélioration de la rigidité, de l'akinésie et des tremblements dans 80 % des cas (n = 15), avec une diminution de la prise d'autres traitements. Exemple 4: Préparation d'une association pharmaceutique pour le traitement de la chorée de Huntington On a préparé les solutions suivantes: Solution 6 Myr-PL-Pal 1 Pal-PL-Ole 1 Myr-PLOle 1 Tau-AS-PL ou Tau-AG-PL 1 atoco-PL 3 VitC-PL 1 Homocys-PL-Nac 4 Cys-PL-Nac 4 Met-PL-Nac 4 Farcys-PL-Myr 1 Farcys-PL-Pal 1 Farcys-PL-Ole 1 Farcys-PL-Stea 1 Met-AS-PL ou Met-AG-PL 4 Homocys-AS-PL ou Homocys-AG-PL 4 Cys-G-PL 4 Homocys-G-PL 4 Met-G-PL 4 CHOPL 1 5MT-AG-PL 1 W-AG-PL 2 ACh-AG-PL 4 Solution 7 Cys-AG-PL 4 Met-AG-PL 4 Homocys-G-PL 4 Cys-PL-Nac 4 Homocys-PL-Nac 4 Met-PL-Nac 4 Tau-AG-PL 1 Tau-G-PL 1 Met-G-PL 4 atoco-PL 2 atoco-PL-Ret 2 sOlution8 Farcys-PL-Ole 2 Aze-PL-Ole 1 Aze-PL-PO 1 Met-PL-Nac 2 Cys-PL-Nac 2 Homocys-PL-Nac 2 atoco-PL 2 Lin2-PL-Ole 2 Ret-PL 1 Ole-PL-Laur 1 atoco-PL-Ret 1 Tau-G-PL 1 ACh-AG-PL 1 PRO-PL 1 GABA-G-PL 1 PKéaration: : comme pour l'exemple 1. Les solution a 2 et E sont administrées par injection sous-cutanée : - soit à raison de 0,6 ml de chaque solution tous les jours; - soit alternativement à raison de 0,6 ml d'une solution donnée tous les deux à trois jours (par exemple, on peut administrer la solution 6 le premier jour, la solution 2 le deuxième jour et la solution 8 le troisième jour, etc... ou bien encore on peut administrer la solution 6 le premier jour, la solution 7 le troisième jour et la solution 8 le cinquièmc jouir, etc...). Sur cinq patients en cours de traitement, on constate une nette amélioration au niveau de la récupération des foncions mnésiques et de la vivacité relationnelle. Exemple 5: Préparation d'une association pharmaceutique pour le traitement de la sclérose en plaques En France, plus de 50 000 personnes sont atteintes de sclérose en plaques (SEP), ct au moins 2000 nouveaux cas sont enregistrés chaque année. Cette affection débute chez le sujet jeune, habituellement entre 20 et 40 ans. Son incidence est 2 à 3 fois plus forte chez les femmes que chez les hommes. Les symptômes sont variables. Ils peuvent se présenter sous forme : de troubles visuels, d'une faiblesse musculaire, d'une perte de coordination des mouvements ou de contractures... ns reflètent tous une altération de la conduction nerveuse centrale. Ils peuvent disparaître ou s'atténuer pour réapparaître ensuite sous une forme plus grave.L'évolution habituelle de la maladie est cyclique, entraînant une invalidité progressive, mais les formes cliniques sont très polymorphes. Cest une maladie invalidantc dont le coût en suivi clinique, traitement symptomatique et prise en charge sont tres Cltvts. La SEP est une affection multifactorielle dans laquelle interviennent des facteurs liés à : I'environnement, une prédisposition génétique, et des désordres immunologiques. Le modèle qui prévaut se résume ainsi : un sujet prédisposé (grande fréquence des antigènes du système HLA : A3, B7, DR2DW2, DQB1 et DR4) rencontre un facteur exogène, vraisemblablement viral et/ou bactérien.Suit une longue phase de latence totalement silencieuse, au terme de laquelle se développent des réactions, pour une part autoimmunes, dirigées contre la myéline et la cellule productrice, l'oligodendrocyte. Ces désordres se traduisent par des lésions démyélinisantes du système nerveux central (SNC7). La multiplicité des facteurs intervenant dans la SEP, et leur complexité, constituent des obstacles à la compréhension de son étiologie. Cest pourquoi, malgré les nombreux travaux effectués, celle-ci demeure toujours inconnue. Les solutions suivantes ont été préparées: Solution 9 Farcys-PL-Ole 2 Po-PLOle 2 Aze-PL-Ole 2 Aze-PL-PO 2 Met-PL-Nac 2 Homocys-PL-Nac 2 atoco-PL 2 VitC-PL 1 Tau-AG-PL 2 1nn2-PL-Ole 2 CHO-PL 1 Ole-PL-Laur 1 SMT-AG-PL 1 Tau-G-PL 2 ACh-AG-PL 2 Solution 10 Farcys-PL-Pal 1 Farcys-PL-Myr 1 Pal-PL-Myr 1 Aze-PL-Ole 1 Pal-PL-Ole 1 Farcys-PL-Ole 1 PO-PL-Aze 1 Ole-PL-Myr 1 Stea-PL-Farcys 1 Ole-PL-Laur 1 Solution 11 Farcys-PL-Ole 2 Aze-PL-Ole 1 Aze-PL-PO 1 Met-PL-Nac 2 Cys-PL-Nac 2 Homocys-PL-Nac 2 atoco-PL 2 Lin2-PL-Ole 2 Ret-PL 1 Ole-PL-Laur 1 atoco-PL-Ret 1 Tau-G-PL 1 ACh-AG-PL 1 PRO-PL 1 GABA-G-PL 1 Solution 12 Farcys-PL-Ole 2 Aze-PL-Ole 1 Aze-PL-PO 1 atoco-PL 2 VitC-PL 1 Tau-AG-PL 2 Lin2-PL-Ole 2 CHO-PL 1 Laur-PL-Ole 1 AI = 0,1 mg/ml Préparation: : comme pour l'exemple 1. Selon la forme clinique de la sclérose en plaques (SEP), l'administration (par injection sous-cutanée) des solutions 2, 1Q 11. et 12 varie. a) Dans le cas d'une poussée ou aggravation de la SEP, on utilise alternativement au moins deux des solutions 9, 10 ou 11, à raison de 0,5 ml à 1 ml de ces solutions une à deux fois par jour, ou bien de 0,5 ml à 1 ml de ces solutions tous les 2-3 jours, ou une fois par semaine. Par exemple, du ler au 8ème jour de traitement, on administre alternativemcnt, une ou deux fois par jour, les solutions 2 et 10. Du 8ème au 10ème jour de traitement, on administre alternativement, une fois par jour, les solutions 2 et il. Du 10ème au 20ème jour de traitement, on administre alternativement, tous les deux jours, les solutions 2 et 11.Puis, après le 20ème jour de traitement, on utilise en alternance les solutions 2, 10 et li tous les 2-3 jours après le début du traitement. Sur tous les cas (n = 15) de SEP en poussée en aggravation traités selon le protocole cidessus depuis juin 1994, on a observé 100 % de régression de la symptomatologie. b) Dans le cas de la maladie chronique ou de la récupération des séquelles, on administre alternativement, à raison de 0,5 ml à 0,8 ml par jour les solutions 2,11 ct Il. Par exemple, on administre une solution par jour, le matin ou le soir. On notc dans 80 % des cas (n = 250) traités une régression significative dc la symptomatologie. Exemple 6: Préparation d'une composition pharmaceutique pour le traitement des épilepsies Les épilepsies essentielles peuvent revêtir différentes formes cliniques et atteintes électro enccphalographiques, allant des absences au grand mal épileptique. On a préparé la solution suivante: Solution 13 GABA-G-PL 4 PO-PL-Aze 2 Pal-PL-Farcys 1 Myr-PL-Farcys 1 W-AG-PL 1 Ole-PL-Pal 1 Myr-PL-Ole 1 atoco-PL 2 Aze-PL-Lin2 2 Préparation: comme pour l'exemple 1. La solution Il est administrée par injection sous-cutanée, à raison de 0,6 ml de solution 2 à 3 fois par semaine. Les deux malades traités ont diminué leurs médications classiques (Zarontua, DépamideX,....) ) sans inconvénient majeur. Exemple 7: Préparation d'une composition pharmaceutique pour le traitement des migraines essentielles Celles-ci n'ont pas de cause apparente. Elles se présentent avec ou sans ama Elles sont liées à un réflexe vasogénique impliquant la sérotonine et ses dérivés. On a préparé la solution suivante Solution 14: HW-AG-PL 3 W-AG-PL 3 SMT-AG-PL 3 atoco-PL 2 Cys-AG-PL 1 Met-AG-PL 1 Homocys-AG-PL 1 Préparation : comme pour l'exemple 1. La solution 14 est administrée par injection sous-cutanée, à raison de 0,8 ml de solution 2 à 3 fois par jour en cas de crise. En cas d'état migraineux permanent, on administre de préférence 0,8 ml de solution tous les 2 à 3 jours. Sur trois cas traités, on observe un arrêt de la crise ou une atténuation de l'état migraineux. Exemple 8: : Préparation d'une association pharmaceutique pour le traitement des polyarthrites. La polyarthrite rhumatoide (PR) est une affection à caractère autoimmun dont l'étiologie demeure inconnue. Les rhumatismes inflammatoires entraînent une atteinte importante des articulations avec déformations invalidantes et douleurs intenses. On ne connaît pas de traitement spécifique pour la PR. Les principaux médicaments utilisés : sels d'or, D-penicillamine, sulfasalazine, méthotréxate, antimalariques, antiinflammatoires non stéroidiens, immunodépresseurs, immunostimulants, agissent soit sur l'immunité, soit sur l'inflammation. Mais, ces médicaments présentent des limites et des inconvénients: - à court terme, ils ont une efficacité partielle et chez certains malades seulement; - à long terme, il n'existe aucune preuve de leur efficacité, sinon de nombreux effets secondaires (troubles gasointestinaux, immunodépression, etc...); - ils ne sont pas anodins, entraînant parfois des accidents graves. On a préparé les solutions suivantes: Solution 15 Farcys-PL-Pal 1 Pal-PL-Myr 1 Farcys-PL-Myr 1 Lin2-PL-Ole 1 Met-PL-Nac 1 Cys-PL-Nac 1 Homocys-PL-Nac 1 Farcys-PL-Ole 1 Met-AG-PL 1 Pal-PL-Ole 1 Myr-PL-Ole 1 Tau-AG-PL 2 VitC-PL 2 Tau-G-PL 2 Stea-PL-Farcys 2 ACh-AG-PL 2 atoco-PL 2 Aze-PL-Ole 2 Solution 16 Farcys-PL-Pal 1 Farcys-PL-Myr 1 Pal-PL-Myr 1 Aze-PL-Ole 1 Pal-PL-Ole 1 Farcys-PL-Ole 1 PO-PL-Aze 1 Ole-PL-Myr 1 Stea-PL-Farcys 1 Ole-PL-Laur 1 Solution 17 Farcys-PL-Pal 1 Pal-PL-Myr 1 Farcys-PL-Myr 1 Farcys-PL-Ole 1 Myr-PL-Ole 1 Stea-PL-Farcys 1 ACh-AG-PL 2 atoco-PL 2 AI = 0,1 mg/ml Préparation: comme pour l'exemple 1. Selon la forme clinique de la polyarthrite rhumatoïde, l'administration, par voie souscutanée, des solutions , 16 et il varie. a) en période de poussée ou d'aggravation, on utilise les solutions 15 et 16, à raison d'un mélange de 0,1 ml à 0,5 ml de chaque solution, une à deux fois parjour. b) cn phase chronique, on utilise alternativement: - soit les solutions 15 et 16 mélangées ensemble; - soit les solutions 16 et 17 mélangées ensemble à raison de 0,1 ml à 0,5 ml de chaque solution, tous les 2, 3 ou 4 jours ou toutes les semaines. On constate chez les sujets (n = 150) traités une évolution favorable de la polyarthrite rhumatoïde dans 80 % des cas, même pour des affections anciennes rebelles aux autres thérapeutiques. Références bibliographiques 1. Daverat et al., J. Neuroimmunol.: 22, 129-134 (1989) 2. Amara et al., AIDS : 8,711-713(1994) 3. Maneta-Peyret et al., Neuroscience Letters: 80, 235-239 (1987) 4. Brochet et al., Current Concepts in Multiple Sclerosis: 10, 97-102 (1991) 5. 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Lamotte Eds., Gordon and Breach Science Publishers) 20. Chagnaud et al., Anti-cancer drugs :5,361-366(1994) REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins un conjugué monofonctionnel et/ou polyfontionnel entre d'une part la polylysine et d'autre part une ou plusieurs molécules(s) choisie(s) parmi: a) - les (di)acides gras à chaîne linéaire ou ramifiéc, saturés ou insaturés, comprenant de 4 à 24 atomes de carbone; - les composés impliqués dans le mécanisme d'ancrage des protéines aux membranes cellulaires, ces composés intervenant notamment dans le cycle du mévalonatc, en particulier les isoprénoides liés à une cystéine; - le cholestérol et ses dérivés, notamment les hormones hydrophobes; b) - la vitamine A, la vitamine C, la vitamine E ou un de leurs dérivés;; - la cystéine et ses dérivés, de formule: R1S-R2-CH(NH2)-COOH dans laquelle R1 représente H ou CH3 et R2 représente un C1-C3 aikylène; c) - les indolealkylamines; - les catécholamines; - les acides aminés de formule: R3-CH(NH2)-COOH dans laquelle R3 représente l'hydrogène, un groupe imidazolyle, un groupe carboxyméthyle ou un groupe aminopropyle; - les acides amino(C1-Cs)alkylsulfoniques ou sulfiniques; - la carnitine ou la carnosine; - les diamines de formule:: 2HN-A-NH2 dans laquelle A représente un (Cl-C6)alkylène ou un groupe (CH2)m- NH-B CH2)p- dans lequel m et p, indépendamment l'un de l'autre, sont des entiers allant de 1 à 5, et B représente rien ou un groupe dCH2)n-NH~, n étant un entier allant de 1 à 5; - l'acétylcholine et - l'acide y-aminobutyrique. pour la préparation d'une composition ou association pharmaceutique utile dans Ic traitement de la dégénérescence neuronale et des neuropathies infectieuses, traumatiques et toxiques, des affections dégénératives à caractère autoimmun et des affections prolifératives. 2. Utilisation selon la revendication 1 pour la préparation d'une composition ou association pharmaceutique utile pour le traitement des troubles de la mémoire, démcacc vasculaire, troubles post-encéphalitiques, troubles post-apoplectiques, syndromes posttraumatiques dus à un traumatisme crânien, troubles dérivant d'anoxies cérébrales, maladie d'Alzheimer, démence sénile, démence subcorticale, telle que la chorée de Huntington et la maladie de Parkinson, démence provoquée par le SIDA, neuropathies dérivés de morbidité ou dommage des nervis sympatiques ou sensoriels, maladies cérébrales, telles que l'oedEe cérébral, dégénérescences spinocérébelleuses, neuropathies consécutives à une maladie de Lyme, sclérose latérale amyotrophique, sclérose en plaques, épilepsies, migraines, polyarthrites, diabète insulino-dépendant, lupus érythémateux disséminé, thyroidite de Hashimoto, maladie de Horton, dermatomyosite ou polymyosite, spondylarthrite ankylosante, infection à VIH ou cancers. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractéiisée en ce que ledit conjugué monofonctionnel est un conjugué entre la polylysine et un (di)acide gras. 4. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que ledit conjugué polyfonctionnel est un conjugué bifonctionnel et en ce que au moins une des molécules dudit conjugué bifonctionnel est un (di)acide gras. 5. Utilisation selon la revendication 3 ou la revendication 4, caractésée en ce que le (di)acide gras est choisi parmi l'acide myristique, l'acide palmitique, l'acide stéarique, l'acide oléique ou l'acide azélasque. 6. Conjugués monofonctionnels entre d'une part la polylysine et d'autre part une molécule choisie parmi: - une hormone hydrophobe; - la vitamine A, la vitamine C, la vitamine E ou un de leurs dérivés; - un acide aminé de formule: R3-CH(NH2 CH dans laquelle R3 représente l'hydrogène, un groupe imidazolyle, un groupe carboxyméthyle ou un groupe aminopropyle; - un acide amino(C1-C)alkylsulfonique ou sulfinique; - la carnitine ou la carnosine ; ou - une diamine de formule: 2HN-A-NH2 dans laquelle A représente un (C1-C6)alkylène ou un groupe -(CH2)m-NH-B- (CH2)p- dans lequel m et p, indépendamment l'un de l'autre, sont des entiers allant dc 1 à 5, et B représente rien ou un groupe -(CH2)n-NH-, n étant un entier allant de 1 à 5. 7. Conjugués polyfonctionnels entre d'une part au moins deux molécules choisics parmi: - les (di)acides gras à chaîne linéaire ou ramifiée, saturés ou insaturés, comprenant dc 4 à 24 atomes de carbone; - les composés impliqués dans le mécanisme d'ancrage des protéines aux membres cellulaires, ces composés intervenant notamment dans le cycle du mévaloeate, cn particulier les isoprénoides liés à une cystéine; - le cholestérol et ses dérivés, notamment les hormones hydrophobes; - la vitamine A, la vitamine C, la vitamine E ou un de leurs dérivés; - la cystéine et ses dérivés, de formule: R1S-R2-CH(NH2)-COOH dans laquelle R1 représente H ou CH3 et R2 représente un C1-C3 alkylène. - les indolealkylamines; - les catécholamines; - les acides aminés de formule: R3-CH(NH2)-COOH dans laquelle R3 représente l'hydrogène, un groupe imidazolyle, un groupe carboxyméthyle ou un groupe aminopropyle; - les acides amino(C1-Cs)alkylsulfoniques ou sulfiniques; - la carnitine ou la carnosine; - les diamines de formule: 2HN-A-NH2 dans laquelle A représente un (C1-C6)alkylène ou un groupe -(CH2)m-NH-B- (CH2)p- dans lequel m et p, indépendamment l'un de l'autre, sont des entiers allant dc 1 à 5, et B représente rien ou un groupe -(CH2)n-NH-, n étant un entier allant de 1 à 5; - l'acétylcholine et - l'acide y-aminobutyrique. et d'autre part au moins une molécule de polylysine. 8. Conjugués selon la revendication 7, qui sont des conjugués bifoncrionnels. 9. Compositions ou associations pharmaceutiques, qui comprennent au moins un conjugué tel que défini dans l'une quelconque des revendications 6 à 8.