Brevet FR2720229A1 — publié le 19951201

UTILISATION D'AU MOINS UN ACIDE GRAS EVENTUELLEMENT ASSOCIE A AU MOINS UN ESTER 'ACIDE GRAS, CONTRE LA PONTE DES LEPIDOPTERES TORTRICIDES. L'invention est relative à l'utilisation de substances dotées de propriétés anti-oviposition, pour lutter contre les insectes ravageurs. On sait que certaines substances constituent des signaux chimiques intra-spécifiques, qui sont déposés par certains insectes femelles sur et/ou au voisinage de leur oeufs après la ponte. Les emplacements ainsi marqués sont ensuite rejetés par les autres femelles de la même espèce comme sites de ponte. I1 a donc été proposé d'utiliser l'effet dissuasif de ces substances dans la lutte contre les insectes ravageurs. Les Inventeurs ont précédemment mis en évidence l'activité anti-oviposition sur la pyrale du maïs d'un extrait methanolique des oeufs de cette espèce (Ostrinia nubílalis), et ont identifié le constituant actif comme comprenant un mélange des esters méthyliques des acides palmitoléique, palmitique, linoléique, oléique et stéarique [Demande TCT O 92702138, au nom de l'INSTITUT NATIONAL DE LA RECHERCHE AGRONOMIQUE et du CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (Inventeur D. THIERY)]. Les lépidoptères tortricidés, également dénommés tordeuses, parmi lesquels on citera, en particulier, les tordeuses e la grappe, Lobesia botrana (Eudemis), Sparganothls pSiLeriana et Eupoecilia ambiguella (Cochylis), qui sont des ravageurs des vignobles, ainsi que Cydia pomonella (Carpocapse des pommes), Cydia molesta (Tordeuse orientale du pêcher) et Adoxophyes orana (Tordeuse de la pelure) sont des insectes ravageurs responsables d'importants dégâts dans les cultures, et entraînant des pertes économiques notables. En conséquence, de nombreuses recherches ont été faites pour lutter contre ces insectes. Les Inventeurs sont précédemment parvenus à sélectionner, à partir d'un extrait d'oeufs d'Eudémis de la vigne, un mélange de constituants dotés d'une activité anti-oviposition et à formuler une composition antioviposition, active non seulement sur cet insecte, mais également sur les autres espèces de tordeuses mentionnées ci-dessus [Demande PCT/WO 93/00812 aux noms de l'INSTITUT NATIONAL DE LA RECHERCHE .GRONOMIQUE et du CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (Inventeurs THIERY et GABEL.]. Les constituants actifs de cette composition sont les acides myristique, stéarique, et palmitique, et les esters méthyliques des acides palmitoléique, palmitique, linoléique, linolénique, oléique, et stéarique. En poursuivant leurs recherches, les Inventeurs sont maintenant parvenus à identifier encore plus précisément les substances pourvues de propriétés anti-oviposition, et à mettre au point des formulations anti-oviposition à la fois plus simples et plus efficaces. La présente Invention a pour objet l'utilisation d'au moins un acide gras choisi dans le groupe constitué par l'acide palmitique, l'acide palmitoléique, placide oléique, l'acide myristique, l'acide stéarique, l'acide linolénique et l'acide linoléique, à l'exception de l'utilisation du mélange des acides myristique, stearique, et palmitique, et des esters méthyliques des acides palmitoléique, palmitique, linoléique, linolénique, oléique, et stéarique, décrit dans la Demande PCT/WO 93/00812, comme produit antioviposition actif sur les lépidoptères tortricidés. Selon un mode de mise en oeuvre préféré de la présente Invention, on utilise au moins un acide gras choisi dans le groupe constitué par l'acide palmitique, l'acide palmitoléique et l'acide oléique. Selon un autre mode de mise en oeuvre préféré de la présente Invention, on utilise un mélange d'acide palmitique, d'acide palmitoléique, d'acide oléique, d'acide myristique, d'acide stéarique, d'acide linolénique et d'acide linoléique. On observe un effet significatif sur le comportement de ponte à partir d'une dose correspondant généralement à 2 équivalents oeufs (2 e.e.) d'un mélange d'acide gras/cm2, c'est-à-dire comprenant au moins l'un des acides gras précités, aux doses minimales suivantes 1,06 ng/cm2 d'acide myristique, 2,1 ng/cm2 d'acide palmitique, 3,6 ng/cm2 d'acide palmitoléique, 7 ng/cm2 d'acide oléique, 20 ng/cm2 d'acide stéarique, 22 ng/cm2 d'acide linoléique, 7 ng/cm2 d'acide linolénique. Chacun des acides gras étant actif séparément, il est possible de les associer entre eux dans n'importe quelles proportions. D'excellents résultats ont été cependant observés, sur le carpocapse des pommes, lorsque ces acides gras sont associés dans les proportions (en masse ou en volume) suivantes une partie d'acide palmitoléique pour 2 à 5 parties de chacun des acides myristique, oléique et linolénique, et pour 5 à 15 parties de chacun des acides palmitique, stéarique et linoléique. Les Inventeurs ont constaté que le traitement par des acides gras a pour effet de modifier le comportement de ponte des femelles en les détournant des sites traités. Ils ont en outre observé que l'activité anti-oviposition pouvait être encore améliorée si l'on associait à l'acide gras, ou au mélange d'acide gras, au moins un ester d'acide gras choisi dans le groupe des esters méthyliques ou éthyliques de l'acide palmitique, l'acide palmitoléique, l'acide linoléique, l'acide linolénique, l'acide oléique, l'acide stéarique. I1 apparaît que l'activité anti-oviposition des esters d'acides gras implique un mécanisme un peu différent de celle des acides gras ils semblent agir plutôt sur la réduction de la ponte que sur le choix du site de ponte. Les acides gras et leurs esters sont facilement disponibles dans le commerce, et peu coûteux. Ils peuvent donc être utilisés à grande échelle, dans le traitement des cultures. La présente Invention a également pour objet un procédé de protection des plantes contre les Lépidoptères tortricidés, lequel procédé est caractérisé en ce que l'on met en contact les plantes à traiter avec une composition comprenant, en tant que constituant essentiel, un acide gras ou un mélange d'acide gras, tels que définis ci-dessus. Avantageusement, ladite composition comprend également au moins un ester méthylique ou éthylique d'acide gras, tels que définis ci-dessus. La présente Invention sera mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de préparation et d'utilisation des compositions conformes à l'Invention. Il va de soi toutefois que ces exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'Invention dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMPLE 1 : PREPARATION DE COMPOSITIONS ANTI-CVIPOSITION CONFORMES A L'INVENTION Les différents constituants sont mélangés dans les proportions indiquées dans les tableaux I à VI ci-dessous. Lorsque les quantités de chacun des constituants sont exprimées en nanogrammes, le mélange obtenu correspond à un équivalent-oeuf (e.e.). Les mélanges sont dissous dans un mélange acétone/eau distillée 50/50 (v/v), pour préparer une solution mère qui est ensuite diluée selon les besoins. A titre d'exemple, on peut préparer une solution mère comprenant 3 g de constituant actif (acides gras) pour 60 ml dudit solvant. - Composition I TABLEAU I (en ng/e.e.) Myristate de méthyle 0,015 Palmitate de méthyle 0,06 Oléate de méthyle 0,024 Acide myristique 0,53 Acide palmitique 11,2 Acide palmitoléique 1,82 Acide oléique 3,68 Acide stéarique 10,0 Acide linoléique 11,7 Acide linolénique 3,69 - Composition II : TABLEAU II (en ng/e.e.) Palmitate de méthyle 0,06 Oléate de méthyle 0,024 Acide myristique 0,53 Acide palmitique 11,2 Acide palmitoléique 1,82 Acide oléique 3,68 Acide stéarique 10,0 Acide linoléique 11,7 Acide linolenique 3,69 - Composition III TABLEAU III (en ng/e.e.) Acide myristique 0,53 Acide palmitique 11,2 Acide palmitoléique 1,82 Acide oléique 3,68 Acide stéarique 10,0 Acide linoléique 11,7 Acide linolénique 3,69 - Composition IV : (exemple de comparaison) TABLEAU IV (en ng/e.e.) Acide myristique 0,258 Palmitate de méthyle 0,586 Acide palmitique 1,373 Linoléate de méthyle 0,225 Linolénate de méthyle 0,180 Oléate de méthyle 0,610 Stéarate de méthyle 0,290 Acide stéarique 0,180 Palmitoléate de méthyle 0,078 Cette conposition est décrite dans la Demande PCT/WO 9300812. - Composition V TABLEAU V (en ng/e.e.) Palmitate de méthyle 0,0117 Linoléate de méthyle 0,0044 Stéarate de méthyle 0,0058 - Composition VI TABLEAU VI (en ng/e.e.) Palmitate de méthyle 0,0117 Acide palmitique 0,0274 COMPARAISON DE L'EFFICACITE DE DIFFERENTES COMPOSITIONS SUR LE COMPORTEMENT DE PONTE DU CARPOCAPSE DU POMMIER EXEMPLE 2 : - ACTIVITE SUR SUPPORT ARTIFICIEL A.1. - Effet sur le choix du site de Ponte Les compositions I, II et III ont été testées. L'activité biologique a été évaluée en proposant aux femelles des sites artificiels de ponte (carton lisse) comportant des zones traitées et des zones non traitées. Il a été préalablement vérifié que le solvant ne modifiait pas le comportement de ponte. L'étude du comportement de ponte a été effectuée dans des cages en altuglas dans lesquelles a été déposé un substrat d'oviposition permettant la ponte, constitué par une feuille de papier bristol (10,7 x 13,6 cm). Sur chaque feuille de bristol ont été effectués 32 dépôts, de 5 41 chacun, de la composition à tester à la concentration voulue, ou du solvant seul ; les dépôts sont espacés de 2,1 cm et ont un diamètre de 1,1 cm. Les concentrations utilisées sont de O (solvant seul), 2 et 20 équivalents-oeufs par dépôt (uniquement 20 e.e. pour la composition III). Des supports témoins, n'ayant subi aucun traitement, ont également été utilisés. Les supports d'oviposition ont été placés dans les cages. 10 femelles fécondées âgées de 2 jours ont été laissées en présence des supports, pendant 1 nuit, à l'issue de laquelle le nombre et la disposition des oeufs déposés sur les zones traitées et sur les zones non traitées ont été notés. D'autre part, les oeufs pondus pendant l'expérimentation sont comptés. On détermine pour chaque composition l'indice d'évitement (IE), selon la formule IE (%) = (T - NT)/(T + NT) x 100, T = nombre moyen d'oeufs sur les zones traitées NT = nombre moyen d'oeufs sur les zones non traitées (T et NT sont rapportés à des surfaces équivalentes). Un indice de -100 indique un évitement total et un indice de 0 indique l'absence d'effet (pas d'évitement). La moyenne des indices obtenus pour chaque composition est comparée entre les différents types de traitement. Les résultats sont les suivants - Dans le cas du support témoin (bristol sans traitement), IE = +1% (Sd = 24%) (pas d'effet), ce qui indique que les dépôts d'oeufs sont régulièrement répartis sur toute la superficie du support de ponte une répartition similaire est observée dans le cas du support traité au solvant. - En ce qui concerne la composition I : à la dose de 2 équivalents oeufs par dépôt, IE = -358 (Sd = 17%), ce qui indique que les femelles déposent de préférence leurs oeufs sur des zones non traitées (bien qu ' une fraction des femelles testées ne semble pas sensible à cette dose) ; cet effet de déterrence apparaît comme étant dose-dépendant, car il est encore augmenté à la dose de 20 équivalents oeufs par dépôt, où IE = -758 (Sd = 258). Un résultat identique est obtenu avec la composition II. En ce qui concerne la composition III : à la dose de 20 e.e. par dépôt, IE = -66% (Sd = 8%). Le nombre d'oeufs pondus par les femelles pendant l'expérimentation a été déterminé, avec les compositions I, III, et IV aux doses de 20 e.e. par dépôt ; les résultats sont représentés dans le tableau VII ci-dessous: TABLEAU VII TEMOIN COMPOSITION COMPOSITION COMPOSITION III Iv N 21,73 15,60(**) 22,43(ns) 16,2(**) N = nombre moyen d'oeufs par femelle Différence par rapport au témoin ** = statistiquement significative ; ns = non significative Les résultats ci-dessus montrent que : les compositions I et IV utilisées à la dose de 20 équivalents-oeufs par dépôt réduisent la ponte (environ - 25%) ; en revanche la composition III (mélange de 7 acides gras) ne présente pas d'activité significative sur la réduction de la ponte. EXEMPLE 3 : ACTIVITE SUR PO8MRS 1) Une première série d'expérimentations a été effectuée avec les compositions IV, V, et VI. Les expérimentations ont été effectuées sur des femelles de Cydia pomonella fécondées. Des pommes non traitées dépourvues de tout résidu de pesticide ont été récoltées juste avant les expériences et les pommes portant des oeufs ou des traces de larves de C. pomonella ont été écartées. Les essais ont été effectués dans une cage (1 m x 0,4 m x 0,5 m) recouverte d'un tulle. 4 rangées de 4 pommes espacées de manière équidistantes sont suspendues au plafond de la cage. 8 pommes traitées et 8 pommes témoins sont rangées alternativement. Pour chaque expérimentation, 4 femelles (âgées de 2 ou 3 jours) sont lâchées dans la cage, et après une nuit, le nombre d'oeufs déposés sur chaque pomme est compté. A partir du nombre d'oeufs sur les pommes traitées (A) et sur les pommes témoins (B) l'index de déterrence a été calculé selon la formule suivante DI (%) = (A - B)/(A + B) x 100. Les différents traitements ont consisté en - un traitement de contrôle : 16 pommes témoin traitées dans du solvant seul (10% méthanol, 90% eau distillée additionnée de 1 ml/l de TRITON X100) - un choix à deux possibilités, entre les pommes trempées dans le solvant et les pommes trempées dans l'un des mélanges suivants a) La composition IV b) La composition V c) La composition VI. Les acides gras et leurs esters méthyliques ont été dilués dans le solvant mentionné ci-dessus ; la dilution a été calculée afin d'obtenir les dépôts de 0,03 g ou 0,3 g de chaque mélange par pomme, correspondant respectivement à 72 et 720 équivalent-oeufs par pomme, ou bien à 0,9 et 9 équivalent oeufs par cm2 de surface de pomme. Dans les essais de contrôle, 28 des 36 femelles fécondées ont pondu pendant la nuit sur les pommes non traitées. Pour les autres traitements, ce nombre varie de 20 (composition IV à la dose la plus élevée) à 27 (composition IV à la dose la moins élevée) ces différences ne sont pas significatives. Le nombre total des oeufs déposés pour chaque femelle ne différe pas significativement d'un traitement à l'autre. Il varie de 18,9 oeufs par femelle (composition IV à haute dose), à 25,4 oeufs par femelle (composition IV à faible dose), avec une valeur de 23,9 oeufs en moyenne pour les essais sur les pommes contrôle. Pour les essais de contrôle (toutes les pommes sont traitées avec le solvant seul), les oeufs sont distribués de façon homogène entre les 16 pommes. Le nombre moyen d'oeufs par pomme dans ces essais est de 4,6+4 avec 8,3% de pommes ne portant aucun oeuf. La composition IV provoque une déterrence significative à la dose de 72 équivalent oeufs par pomme (DI = - 31%). Cet effet est augmenté pour la dose de 720 équivalent oeufs par pomme, pour lequel 118 oeufs ont été déposés sur les pommes traitées et 261 sur les pommes non traitées (DI = -38%) est plus important que celui observé à la dose de 72 équivalent oeufs. Si l'on compare aux essais de contrôle, la composition IV à la plus faible dose réduit le nombre moyen d'oeufs (3,3+ 2,9), mais le pourcentage de pommes ne portant pas d'oeufs n'est pas significativement différent. La composition IV à la dose la plus forte réduit significativement à la fois le nombre d'oeufs par pomme (1,6+ 1,8) et le pourcentage de pommes qui ont été attaquées (37,5 & ne portent pas d'oeufs). Les pommes traitées avec la composition V (mélange d'acide palmitique et de palmitate de méthyle) à la dose de 72 équivalent oeufs par pomme ont été évitées de façon significative (361 oeufs sur les pommes non traitées, 188 sur les pommes traitées) ; l'index de déterrence (DI = -32%) n'est pas significativement différent de celui observé avec la composition IV à la dose de 72 équivalent oeufs par pomme. En revanche, la composition V à la dose de 720 équivalent oeufs par pomme provoque une déterrence élevée (487 oeufs sur les pommes non traitées, 134 oeufs sur les pommes traitées DI = -57%). Cette déterrence est plus élevée que celle observée pour n'importe lequel des autres traitements. D'autre part, dans le cas des essais avec la composition V, on observe une quantité d'oeufs par pomme significativement inférieure à celle des essais de contrôle 2,6+ 2,8 et 1,8+ 2 respectivement contre 4,6+ 4 dans les essais de contrôle. Le pourcentage de pommes qui ne portent aucun oeuf est également plus élevé que celui observé dans les essais de contrôle (18,1% et 26,4% respectivement, contre 8,3% dans le contrôle). La composition VI (mélange de palmitate de méthyle, linoléate de méthyle et stéarate de méthyle) provoque une légère déterrence non significative (328 oeufs sur les pommes non traitées, 253 sur les pommes traitées : DI = -13%). L'indice de déterrence ne diffère pas significativement de celui du traitement de contrôle. Cependant la composition VI à la dose la plus importante réduit significativement le nombre d'oeufs par pomme (3,5+ 4,4), si on compare au contrôle, et l'on observe également un nombre de pommes sans oeuf significativement plus important que dans les essais de contrôle. Le nombre d'oeufs par pomme observé avec la composition VI à la dose la plus importante est équivalent à celui observé avec la composition IV à la dose la plus faible. Dans les essais de contrôle, seulement 8% des pommes ne portent pas d'oeufs. Ceci est probablement dû à la densité élevée des femelles par cage (4 femelles pour 16 pommes). Les compositions IV et V à doses élevées augmentent la protection des pommes, avec respectivement 38% et 26% de pommes qui ne portent pas d'oeufs. En revanche, à la dose de 72 équivalent oeufs/pomme, une protection augmentée est observée seulement avec la composition V. La composition VI à la dose la plus élevée augmente également légèrement la protection (18% de pommes ne portant pas d'oeufs). Il est à noter que la composition V (mélange d'acide palmitique et de palmitate de méthyle) a pour effet un indice de déterrence similaire ou plus élevé que celui observé avec le composition IV aux mêmes doses. En revanche, la composition V utilisée à des concentrations similaires n'a que peu effet sur la sélection des sites d'oviposition. En conséquence, la présence de l'acide palmitique permet de rendre compte pour l'essentiel, de la déterrence observée dans ces expérimentations. 2) Une deuxième série d'expérimentations a été effectuée avec une composition comprenant les constituants de la composition III, dilués dans un mélange acétone/eau 50/50 de sorte à obtenir sur chaque pomme le dépôt des quantités (en Ag par pomme) indiquées dans le tableau VIII ci-dessous TABLEAU VIII Acide myristique 2,5 Acide palmitique 10 Acide palmitoléique 1,25 Acide oléique 5 Acide stéarique 10 Acide linoléique 10 Acide linolénique 6,25 Des pommes (variété Golden delicious) sont trempées dans la composition ci-dessus, ou dans le solvant seul. Deux types d'expérience ont été effectuées - une expérience dans laquelle chaque femelle est mise en présence de 10 pommes traitées et 10 pommes non traitées (situation de choix) - une expérience dans laquelle chaque femelle est mise en présence de 20 pommes traitées. Les pommes sont disposées de manière équidistante dans des enceintes comportementales, comme décrit ci-dessus, et les femelles sont enfermées dans ces enceintes pendant une nuit. Un indice d'évitement est calculé à partir du nombre d'oeufs déposés sur les pommes, comme décrit à l'exemple 2 ci-dessus. Les résultats sont présentés dans le Tableau IX ci-dessous qui indique le nombre d'oeufs pondus par femelle pendant une nuit, et la moyenne de l'indice d'évitement obtenu pour chacune des 20 femelles (choix entre pommes traitées et non-traitées). Les résultats montrent que les pommes traitées sont nettement évitées par les femelles, et confirment l'activité biologique du mélange de 7 acides gras. TABLEAU IX Oeufs sur Oeufs sur pommes non pommes Indice traitées traitées d'évitement Témoin 112 98 +7% Traitement 38 323 -79% Témoin = traitement au solvant seul (eau + acétone). EXEMPLE 4 : TRAITEMENT EN VERGER Un demi-pommier ou un arbre entier d'environ 2 m de hauteur ont été traités par pulvérisations à l'aide d'un atomiseur à moteur (pulvérisateur classique pour traitement en vergers), avec une composition comprenant les constituants de la composition III. Le tableau X ci-dessous indique les quantités de composition appliquées pour un demi-arbre (ces quantités sont doublées pour un arbre entier). TABLEAU X Quantité en Ag par demi arbre Acide myristique 2,5 Acide palmitique 10 Acide palmitoléique 1,25 Acide oléique 5 Acide stéarique 10 Acide linoléique 10 Acide linolénique 6,25 Dans le cas du traitement d'un demi-pommier, l'autre moitié de l'arbre ne subit aucun traitement. Chaque arbre est ensuite isolé sous une cage étanche aux insectes, de 2,5 m de haut sur 3 m de côté, et 20 femelles fécondées de carpocapse sont lâchées sous chaque cage. Un arbre non traité sert de contrôle dans les mêmes conditions. La récolte de la totalité des pommes portées par chaque arbre est effectuée environ 1 mois après le traitement, et les pommes attaquées sont comptées et le pourcentage d'attaque est déterminé. Les résultats sont présentés dans le tableau XI ci-dessous. TABLEAU XI Arbre Arbre 1/2 arbre 1/2 arbre non entiè- non traité traité rement traité traité Nb de pommes 556 591 130 233 Pommes attaquées 322 64 88 16 Taux d'attaque 58% 11% 68% 7% (%) Ces résultats montrent que le traitement diminue très nettement le taux d'attaque, aussi bien lorsque les femelles ont le choix entre une partie traitée et une partie non traitée, que si la totalité de l'arbre est traitée. REVENDICATIONS 1) Utilisation d'au moins un acide gras choisi dans le groupe constitué par l'acide palmitique, l'acide palmitoléique, l'acide oléique, l'acide myristique, l'acide stéarique, l'acide linolénique et l'acide linoléique, et leurs mélanges, à l'exception de l'utilisation du mélange des acides myristique, stéarique, et palmitique, avec les esters méthyliques des acides palmitoléique, palmitique, linoléique, linolénique, oléique, et stéarique, comme produit antioviposition actif sur les lépidoptères tortricidés. 2) Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit acide gras est choisi dans le groupe constitué par l'acide palmitique, l'acide palmitoléique, l'acide oléique, et leurs mélanges. 3) Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'on utilise un mélange d'acide palmitique, d'acide palmitoléique, d'acide oléique, d'acide myristique, d'acide stéarique, d'acide linolénique et d'acide linoléique. 4) Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que lesdits acides gras sont associés dans les proportions suivantes une partie d'acide palmitoléique pour 2 à 5 parties de chacun des acides myristique, oléique et linolénique, et pour 5 à 15 parties de chacun des acides palmitique, stéarique et linoléique. 5) Utilisation selon une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ledit acide gras ou mélange d'acide gras, sont associés à au moins un ester d'acide gras choisi dans le groupe des esters méthyliques ou éthyliques de l'acide palmitique, l'acide palmitoléique, l'acide linoléique, l'acide linolénique, l'acide oléique, l'acide stéarique. 6) Procédé de protection des plantes contre les Lépidoptères tortricidés, caractérisé en ce que l'on met en contact les plantes à traiter avec une composition comprenant, en tant que constituant essentiel, un acide gras, ou un mélange d'acide gras, tels que définis dans une quelconque des revendications 1 à 4. 7) Procédé selon la revendication 6 caractérisé en ce que l'acide gras, ou le mélange d'acide gras est associé à au moins un ester d'acide gras, tel que défini dans la revendication 5.