Brevet FR2718751A1 — publié le 19951020

La présente Invention est relative à des pré- parations à base de lactosérum fermenté, utilisables pour améliorer l'état de la peau. Des produits issus de la fermentation du lait, en particulier par des bactéries lactiques (produits du type yaourt), ou par des levures (produits du type kefir), sont connus depuis très longtemps et sont réputés avoir une action favorable sur la santé, qui est attri- buée à leur effet sur l'équilibre de la flore intes- tinale. Les Inventeurs ont maintenant mis au point un produit issu de la fermentation de lactosérum par un mélange de souches spécifiques de bactéries lactiques et de levures, et ont constaté que ce produit possédait une activité particulièrement bénéfique pour le tissu cutané. La présente Invention a pour objet un procédé d'obtention d'une préparation à base de lactosérum, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend une étape au cours de laquelle on procède à la fermentation de lactosérum par un mélange de microorganismes compre- nant au moins un lactobacille choisi dans le groupe constitué par Lactobacillus hilgardii, Lactobacillus casei, Lactobacillus cellobiosus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus kefir; au moins un streptocoque choisi dans le groupe constitué par: Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris, Streptococ- cus diacetylactis, au moins un Leuconostoc choisi dans le groupe constitué par: Leuconostoc mesenteroides, et Leuconostoc kefir; au moins une levure choisie dans le groupe constitué par: Saccharomyces delbrueckii, Saccha- romyces cerevisiae, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces bulgaricus, Saccharomyces unisporus, Torula holmii, Saccharomyces globosus, Saccharomyces carlbergensis, Kluyveromyces lactis, Candida tenuis, Candida kefir. Selon un mode de mise en oeuvre préféré du procédé conforme à l'Invention, ledit mélange de micro- organismes comprend au moins: Lactobacillus acidophilus, Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris, Streptococcus diacetylactis, Leuconostoc mesenteroides, Kluyveromyces lactis. Le procédé conforme à l'Invention peut être mis en oeuvre à partir de lactosérum frais, directement issu de la fabrication fromagère, ou d'un lactosérum reconstitué à partir de poudre de lactosérum. On peut ajouter au lactosérum des substrats facilitant la crois-10 sance du mélange de microorganismes, tels que par exemple, des extraits de levure, de mélasses, ou n'importe quelle autre substance connue en elle-même pour faciliter le démarrage de la fermentation par les souches considérées. On effectue l'ensemencement du lactosérum par un inoculat du mélange d'un microorganisme tel que défini ci-dessus. Avantageusement, cet inoculat a préalablement subi une préculture pendant une durée comprise entre 12 et 20 heures, par exemple 16 heures, dans un milieu convenant à la croissance de l'ensemble desdits micro- organismes, tel que par exemple, le milieu M17. On procède de préférence à la fermentation, sous agitation, à une température comprise entre 25 et 'C, pendant une durée comprise entre 18 et 30 heures, par exemple 24 heures. Selon un autre mode de mise en oeuvre préféré du procédé conforme à l'Invention, il comprend en outre une étape au cours de la laquelle l'on procède à la cen- trifugation du lactosérum fermenté, à une force centri- fuge comprise entre 4000 et 8000 g, de préférence 4500 g environ, et l'on recueille le surnageant. Selon une disposition préférée de ce mode de mise en oeuvre, le lactosérum est chauffé après la fer- mentation et préalablement à la centrifugation, à une température comprise entre 80 et 95'C pendant 15 à 30 mi- nutes, de préférence à 85'C pendant 30 minutes. Selon encore une autre disposition préférée de ce mode de mise en oeuvre, le procédé comprend en outre une étape au cours de laquelle on procède à l'ultrafiltration du surnageant de centrifugation sur une membrane, organique ou minérale, possédant un seuil de coupure de 100 000 daltons, et l'on recueille le filtrat obtenu. La présente Invention a également pour objet des préparations fermentées à base de lactosérum, suscep- tibles d'être obtenues par un procédé conforme à l'Invention, tel que défini ci-dessus. Ces préparations possèdent un effet particu- lièrement bénéfique sur l'état et l'aspect du tissu cutané, et peuvent donc en particulier constituer le principe actif de base de compositions cosmétiques buvables, qui font également partie de l'objet de la pré- sente Invention. Pour l'obtention de ces compositions cosmé- tiques buvables, les préparations fermentées conformes à l'Invention peuvent être diluées par addition d'eau, et/ou additionnées de substances diverses, en particulier d'autres principes actifs. Tout particulièrement, les Inventeurs ont constaté que lorsqu'une préparation fermentée conforme à l'Invention était combinée à au moins un principe actif choisi dans le groupe constitué par les vitamines A, E, C, B1, le sélénium, le 5-carotène et la superoxyde dis- mustase (SOD), les effets favorables sur la peau étaient très notablement augmentés. Des compositions conformes à l'Invention ont en particulier une action sur le taux de sébum, et sur l'hydratation et la fermeté de la peau, qui lui confère un aspect plus doux et plus lisse. Les vitamines sont ajoutées de préférence en une quantité calculée pour qu'une prise journalière d'une composition conforme à l'Invention assure entre 20 et 40% des apports nutritionnels quotidiens recommandés pour chacune des vitamines considérées. De préférence, le P- carotène est ajouté à un taux compris entre 10 et 30 mg pour 100 g de composition prête à l'emploi, le sélénium est ajouté à un taux com- pris entre 10 et 40 gg pour 100 g de composition prête à l'emploi, et la superoxyde dismutase est ajoutée à un taux compris entre 2000 et 10000 unités internationales pour 100 g de composition prête à l'emploi. Les principes actifs hydrosolubles peuvent être dissous directement dans le lactosérum. Les principes actifs liposolubles peuvent être ajoutés sous forme hydrodispersible; avantageusement il sont incorporés sous forme de microparticules telles que celles obtenues par exemple par le procédé décrit dans la Demande EP 501 094, déposée au nom de WORLD TRUST INVESTMENT S.A.. Les compositions conformes à l'Invention peu- vent être aromatisées par addition d'arômes alimentaires, et/ou sucrées, avant d'être conditionnées dans des conte- nants du volume souhaité. Les compositions conformes à l'Invention sont administrées de préférence à une dose correspondant à l'absorption d'une quantité comprise entre 30 et 100 ml par jour d'une composition contenant 40% en volume d'une préparation fermentée conforme à l'Invention. La présente Invention sera mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, qui se réfère à des exemples d'obtention de compléments alimen- taires conformes à l'Invention, et montrant leur activité sur la peau. Il va de soi toutefois que ces exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'Invention dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMLE 15 On utilise du lactosérum en poudre reconstitué avec de l'eau à raison de 60 grammes de lactosérum pour 1 litre d'eau.5 Le lactosérum est additionné de 1,5 pour cent d'extrait de levure afin de permettre une meilleure croissance des bactéries. Le lactosérum enrichi est stérilisé, refroidi à 28'C et ensemencé avec le mélange de bactéries et levures suivant: Lactobacillus hilgardii, Lactobacillus case!, Lactobacillus cellobiosus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus kefir, Streptocoque lactis, Streptocoque cremoris, Streptocoque diacetylactis, Leuconostoc mesenteroides, Leuconostoc kefir, Saccharomyces delbrueckii, Saccharomyces cerevisiae, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces bulgaricus, Saccharomyces unisporus, Torula holmil, Saccharomyces globosus Saccharomyces carlbergensis, Kluyveromyces lactis, Candida tenuis, Candida kefir. L'ensemencement est réalisé à l'aide de pré- cultures de 16 heures de chacune des souches de bactéries et de levures dans du milieu M 17 lactosé (milieu de marque DIFCO). Le lactosérum est maintenu à 28'C pendant 24 heures avec une agitation permanente à l'aide d'un mélan- geur équipé d'une pale large en rotation lente (70 tours par minute). 5 Pendant les 18 premières heures, le lactosérum est maintenu à un pH de 5,5 par adjonction de soude concentrée à l'aide d'une pompe doseuse. Pendant les 6 dernières heures, la régulation de pH est arrêtée. Après 24 heures de fermentation, le lactosérum multi-fermenté est porté à une température de 85'C et maintenu à cette température pendant 30 minutes. Les phospholipides du sérum qui ont précipité lors de l'étape précédente sont séparés par centrifuga- tion continue (à 4500 g). Le surnageant ainsi obtenu est ultra-filtré tangentiellement sur membrane organique spirale en PVDF (MILLIPORE), de seuil de coupure 100 000 D. L'appareil est réglé de telle façon que l'on ait une pression transmembranaire de 0,5 bar. L'ultra-filtrat obtenu est dilué avec de l'eau potable de façon à obtenir une solution contenant 40% de lactosérum clarifié et filtré. Cette solution est addi- tionnée de (pour 100 g): - 100 UI de vitamine A - 0,2 mg de vitamine B1 30 mg de vitamine C - 2 UI de vitamine E - 25 microgrammes de sélénium. Ces vitamines ainsi que le sélénium possèdent des effets bénéfiques pour la peau. Les vitamines C et E et le sélénium possèdent des propriétés anti-radicaux libres. Les vitamines A et B1 possèdent un effet béné- fique sur la régénération des membranes des cellules. Le lactosérum dilué et vitaminé est aromatisé et sucré pour des raisons organoleptiques: On ajoute au produit (pour 100 g): 2,50 g de saccharose 0,70 g de fructose 5. 0,25 g de glucose 0,40 g d'arôme naturel de vanille 0,05 g d'arôme naturel d'abricot. EXEMPLE 2: Au produit obtenu dans l'exemple 1, sont ajou- tés: mg de béta carotène qui possède des pro- priétés photo-protectrices. X]CEMLB 3: Au produit obtenu dans l'exemple 1, sont ajou- tés: 5000 UI de S.O.D. (super oxyde dismutase) qui possède des effets anti-radicaux libres ainsi que des propriétés régénératrices du tissu cutané. EXEMPLE 4: REFFETS SUR LE TISSU CUTANE D'UNE PREPARATION CONFORME A L'INVENTION ET D'UNE PREPARATION. Les essais ont été effectués en double aveugle contre placebo. Des compositions conformes à l'invention, obtenues comme décrit dans l'exemple 1, sont administrées oralement à un groupe de 10 sujets. En parallèle, un autre groupe de sujets a reçu des compositions (produit de référence) obtenues par fermentation du lactosérum avec le mélange de microorga- nismes suivant: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus caucasicus, Lactobacillus buchnieri, Lactobacillus cellobiosus, Lactobacillus kefir, Lactobacillus brevis, Streptococcus lactis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces delbrueckii, Saccharomyces exiguus, Saccharomyces unisporus, Saccharomyces uvarum, Saccharomyces carlbergensis, Candida tenuis, Candida kefir, Candida pseudotropicalis, Kluyveromyces fragilis. Un troisième groupe témoin a reçu un placebo constitué par de l'eau distillée, aromatisée et sucrée. Au bout de 14 jours d'expérimentation, les effets ont été évalués en déterminant l'indice de sébumé- trie (qui est proportionel au taux lipidique de la sur- face de l'épiderme). Les résultats sont indiqués dans le Tableau I ci-dessous. Ces résultats montrent que les compositions selon l'invention ont un effet très positif sur la pro- duction de sébum et sont particulièrement appropriées au soin des peaux sèches. Lni C) Ln) L TABLEAU I Placébo Produit de référence Produit selon l'inventon J-'-l -J-14 J-' J-14 J- 1 J-14 _____ 95 103 1 48 25 I 89 104 2.... 92 87 2 89 98 2 1 i16 142 3 47 27 3 108 61'_- 3 ' 83 136 4 45 64 4 47 77 4 107 132 97 73 5 92 113 5 50 61 6 66 137 6 84 85 6...... 83 78o 7 105 57 7 87 77 7 93 133 8 142 109 8. 94 136 8 84 105 9 80 147 91 65 64 g 164 121 79 72 10 94 140 10 37 106 84,8 87,6, 80i, 87,6 __ 90.6 111. 8 Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui vien- nent d'être décrits de façon plus explicite; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée de la présente inven- tion. REVENDICATIONS 1) Procédé d'obtention d'une préparation à base de lactosérum, lequel procédé est caractérisé en ce qu'il comprend une étape au cours de laquelle on procède 5 à la fermentation de lactosérum par un mélange de microorganismes comprenant au moins un lactobacille choisi dans le groupe constitué par Lactobacillus hilgardii, Lactobacillus casei, Lactobacillus cellobio- sus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus acidophilus,10 Lactobacillus kefir; au moins un streptocoque choisi dans le groupe constitué par: Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris, Streptococcus diacetylactis, au moins un Leuconostoc choisi dans le groupe constitué par : Leuconostoc mesenteroides, et Leuconostoc kefir; au moins une levure choisie dans le groupe constitué par: Saccharomyces delbrueckii, Saccharomyces cerevisiae, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces bulgaricus, Saccha- romyces unisporus, Torula holmii, Saccharomyces globosus, Saccharomyces carlbergensis, Kluyveromyces lactis, Candida tenuis, Candida kefir. 2') Procédé selon la revendication 1, caracté- risé en ce que ledit mélange de microorganismes comprend au moins: Lactobacillus acidophilus, Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris, Streptococcus diacetylac- tis, Leuconostoc mesenteroides, Kluyveromyces lactis. 3') Procédé selon l'une quelconque des reven- dications 1 ou 2, caractérisé en ce que la fermentation est effectuée à une température comprise entre 25 et 'C, pendant une durée comprise entre 18 et 30 heures, par exemple 24 heures. 4') Procédé selon l'une quelconque des reven- dications 1 à 3, caractérisé en ce qu'il comprend en outre une étape au cours de la laquelle l'on procède à la centrifugation du lactosérum fermenté, à une force cen- trifuge comprise entre 4000 et 8000 g. ') Procédé selon l'une quelconque des reven- dications 1 à 4, caractérisé en ce que le lactosérum est chauffé après la fermentation et préalablement à la cen- trifugation, à une température comprise entre 80 et 95'C, pendant 15 à 30 minutes. 6') Procédé selon l'une quelconque des reven- dications 1 à 5, caractérisé en ce qu'il comprend en outre une étape au cours de laquelle on procède à l'ultrafiltration du surnageant de centrifugation sur une membrane, organique ou minérale, possédant un seuil de coupure de 100 000 daltons, et l'on recueille le filtrat obtenu. 7) Préparation fermentée à base de lacto- sérum, caractérisée en ce qu'elle est susceptible d'être obtenue par un procédé selon une quelconque des revendi- cations 1 à 6. 8') Composition cosmétique buvable, caractéri- sée en ce qu'elle comprend une préparation fermentée selon la revendication 7. 9') Composition cosmétique selon la revendica- tion 8, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins un principe actif choisi dans le groupe constitué par les vitamines A, E, C, B1, le sélénium, le 5-carotène et la superoxyde dismustase (SOD). 10') Utilisation d'une préparation fermentée selon la revendication 7, ou d'une composition selon l'une quelconque des revendications 8 ou 9, pour amélio- rer l'aspect de la peau.