Brevet FR2710916A1 — publié le 19950414

La présente invention a pour objet des composés de nature peptidique possédant la propriété de modifier la transmission sérotoninergique ainsi que les applications diagnostiques et thérapeutiques de ces composés. Le système sérotoninergique cérébral est un système de neurotransmission cérébral et périphérique, qui met en oeuvre la sérotonine ou 5-hydroxytryptamine (5-HT) découverte dans les années 1949-50. Au niveau central, ce système est particulier, dans la mesure où il est extrêmement centralisé (tous les corps cellulaires sont localisés dans la région postérieure du cerveau, le raphé) et où il se projette dans pratiquement toutes les régions du cerveau. Il est caractérisé par un nombre extrêmement élevé de varicosités (ou équivalent de terminaisons neuronales) le long des axones ; cette disposition multiplie ses points d'interactions avec les autres systèmes neuronaux cérébraux. De plus, une très grande partie de ces varicosités ne présente pas de profil synaptique, c'està-dire que la 5-HT libérée par ces "terminaisons" va diffuser et atteindre les cibles (récepteurs) situées à une certaine distance ; ce mécanisme nécessite la mise en oeuvre de récepteurs particuliers possédant une affinité élevée pour l'amine. Cette disposition structurale est tout à fait favorable à une fonction de contrôle de l'ensemble des cellules neuronales du cerveau, et par là à un rôle essentiel dans le maintien de l'homéostasie du système nerveux central. Pour exercer ce contrôle, le système 5-HT met en oeuvre une grande variété de récepteurs spécifiques. Il s'agit en effet de plusieurs familles dont certaines sont bien caractérisées (5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4) et d'autres mises en évidence plus récemment sont encore peu connues (5-HT5, 5-HT6, 5-HT). Certaines d'entre elles sont représentées par de nombreux sous-types ; c'est le cas en particulier de la famille 5-HT1, caractérisée par une affinité nanomolaire de la 5-HT pour ces sites, et qui comporte les sous-types S-HT1A,,D.E,. Les récepteurs de type 5-HT1B et 5-HT iD sont localisés sur les terminaisons sérotoninergiques et nonsérotoninergiques, où ils modulent la libération du neurotransmetteur contenu dans ces terminaisons, en particulier ils peuvent réguler la libération de la 5-HT elle-même (autorécepteurs) et jouer alors un rôle déterminant dans l'activité de la neurotransmission sérotoninergique. D'un point de vue fondamental, le système sérotoninergique est impliqué dans de très nombreuses fonctions physiologiques et dans de nombreuses pathologies, et notamment dans le syndrome dépressif. La dépression est un désordre psychiatrique encore mal connu malgré les très nombreuses études qui lui ont été consacrées. Cependant, il est maintenant assez clair qu'une très grande partie sinon la totalité des dépressions implique le système sérotoninergique et notamment, il est généralement accepté qu'il existe une relation entre un déficit sérotoninergique et le suicide. En outre, les médicaments antidépresseurs interagissent pour un grand nombre d'entre eux avec le système sérotoninergique et les plus récents, qui sont les plus efficaces et qui possèdent le moins d'effets indésirables, sont le plus souvent de type "sérotoninergique". Ces substances aboutissent toutes, par des mécanismes divers, à faciliter la transmission sérotoninergique (inhibiteurs de monoamine oxydases, inhibiteurs de recapture, agonistes 5-HT,,). Mais d'une part, leur efficacité est limitée, et d'autre part, ils possèdent encore pour nombre d'entre eux des effets secondaires importants, et enfin, leur délai d'action est important ( > 2 semaines). Les résultats récents de la littérature et des inventeurs indiquent que les récepteurs 5-HT,,/,, pourraient jouer un rôle important dans le syndrome dépressif et dans le mécanisme d'action des antidépresseurs. Il a en effet été montré que non seulement ils modulent la libération d'acétylcholine, mais ils modulent aussi celle de la 5-HT elle-même, et par là même régulent de façon efficace la transmission sérotoninergique dont on sait l'importance dans le syndrome dépressif. De plus, ils sont la cible des antidépresseurs qui interagissent de façon vraisemblablement non compétitive ; autrement dit, les antidépresseurs reconnaîtraient un site distinct des récepteurs 5-HT1B/lD, mais étroitement interactif avec ces derniers. Les travaux des inventeurs ont permis la mise en évidence d'un composé endogène cérébral reconnaissant un site récepteur capable d'interagir avec le fonctionnement de certains récepteurs 5-HT, en particulier les récepteurs 5-HT,,/,, qui modulent la libération de la 5-HT elle-même. Le composé endogène cérébral comprend deux fractions peptidiques RET1 (Ala-Leu) et RET2 (Leu-Ser) qui sont toutes deux actives. Il est cependant vraisemblable que ces fractions correspondent à un seul peptide (Ala-Leu-Ser) qui aurait été clivé au cours du processus d'extraction, cela d'autant plus que ce tripeptide s'est avéré actif sur le fonctionnement des récepteur 5-HT1B/lD. Les peptides caractérisés possèdent la propriété de modifier la transmission sérotoninergique par leurs interactions avec les autorécepteurs (et aussi les hétérorécepteurs) et devraient jouer un rôle clef dans diverses pathologies psychiatriques où le système 5-HT est notoirement mis en jeu (stress, anxiété, dépression, obsessions compulsives, troubles de l'appétit, du sommeil, troubles du comportement, agressivité, etc...). L'invention a ainsi pour objet un composé de séquence peptidique X Leu Y dans laquelle X représente H ou Ala, Y représente OH ou Ser, sous réserve que X et Y ne représentent pas simultanément H et OH, respectivement ainsi que les composés correspondants dans lesquels le groupe de liaison peptidique -CO-NH- est remplacé par un groupe de liaison résistant à la dégradation enzymatique des protéases, ou dans lesquels le squelette peptidique comporte un ou plusieurs groupes intercalés rendant la liaison peptidique résistante à la dégradation enzymatique. Ainsi, le groupe de liaison peptidique (-CO NH-) est avantageusement remplacé par un groupe de liaison -CO-NR'-, -CR1R2-CR3R4-, -CO-CR1R2-, R1, R2, R3 et R4, identiques ou différents, représentant H ou un groupe alkyle en C1-C6, notamment un groupe méthyle, et R' représentant un groupe alkyle en C,-C6. Parmi les groupes pouvant être intercalés dans le squelette peptidique, on peut citer les groupes suivants -CR1R2-, -NRl- et -O-, R1 et R2 étant définis comme précédemment. Les composés selon l'invention comprennent ainsi les peptides de séquence suivante Ala - Leu, Leu - Ser, Ala - Leu - Ser ainsi que les composés analogues dans lesquels la liaison peptidique est remplacée par une liaison telle que définie ci-dessus, ou dont le squelette comprend un groupe intercalé tel que défini ci-dessus. Les composés les plus actifs sont ceux dont les aminoacides constitutifs sont sous la forme L, c'està-dire la forme naturelle pour les structures peptidiques définies ci-dessus. Les composés selon l'invention sont préparés par extraction à partir de cerveau lyophilisé comme décrit ci-après ou plus avantageusement par synthèse peptidique classique, par exemple par la méthode en phase solide de MERRIFIELD lorsqu'ils sont de nature exclusivement peptidique, ou encore par modification des groupes terminaux des aminoacides et condensation des résidus ainsi obtenus, les fonctions réactives autres que celles engagées dans la liaison entre les résidus successifs ayant été préalablement protégées à l'aide des groupes protecteurs bien connus de l'homme du métier. Selon un exemple de préparation d'un peptide selon l'invention, on fixe sur une résine, par l'intermédiaire de son groupe carboxylique, le résidu Ser dont la fonction amine est protégée par un groupe terbutyloxycarbonyle, puis, après avoir déprotégé la fonction amino en lavant la résine avec de l'acide trifluoroacétique dans du dichlorométhane, on couple dans le diméthylformamide le second résidu d'acide aminé dont la fonction amino est protégée comme précédemment, on fixe ainsi les uns après les autres les résidus aminoacides qui vont constituer la portion du peptide selon l'invention. Après déprotection, la fonction amino du résidu N-terminal peut être acétylée par action d'un excès d'anhydride acétique en présence de diisopropyléthylamine. La chaîne latérale de la sérine peut être protégée par exemple par un groupe benzyle. Après avoir éliminé le groupe protecteur,le peptide selon l'invention est libéré du support solide, par exemple avec de l'acide fluorhydrique. Le produit brut est lyophilisé et soumis à une chromatographie en phase liquide à moyenne pression, permettant d'obtenir un produit pratiquement pur ; celui-ci est alors caractérisé par chromatographie en phase liquide à haute pression ainsi que par l'analyse de sa composition en aminoacides et par spectrométrie de masse. L'invention a également pour objet une composition thérapeutique comprenant un composé tel que défini ci-dessus, capable de traverser la barrière hématoencéphalique. Pour traverser la barrière hématoencéphalique, le peptide est de préférence administré sous la forme d'une pro-drogue de type glycosyl-phospho-triester dans laquelle le peptide est lié par exemple par la sérine au groupe phosphate, comme décrit dans J. MED. CHEM. 92, Vol. 35, p. 30-39. La composition thérapeutique est utilisée avantageusement dans des pathologies dans lesquelles est impliqué le système sérotoninergique, notamment dans les pathologies liées à une déficience de la transmission sérotoninergique. Ainsi, la composition selon l'invention peut être utilisée en particulier dans le traitement de la dépression, mais également dans toutes les indications actuellement couvertes par les antidépresseurs, comme les troubles obsessionnels compulsifs, 1 'anxiété généralisée, la crise de panique, les troubles de l'appétit, du sommeil, l'impulsivité, les troubles sexuels, l'agressivité, et plus généralement celles des composés facilitant la transmission sérotoninergique. La composition selon l'invention se présente avantageusement sous forme injectable ou orale, ou sous toute autre forme pharmaceutique connue. La dose thérapeutique efficace est aisément déterminée par l'homme du métier en fonction de la nature et de la gravité de la pathologie à traiter, ainsi que du poids et de l'âge du patient. Les composés selon l'invention ne sont pas toxiques. Ils sont ajoutés à un véhicule pharmaceutiquement acceptable ou à un excipient bien connu de l'homme du métier. L'invention a également pour objet un procédé de diagnostic in vitro d'une affection liée au système sérotoninergique chez un patient, caractérisé en ce que l'on effectue un dosage dans un fluide biologique du patient d'un peptide de séquence X Leu Y dans laquelle X représente H ou Ala, Y représente OH ou Ser, sous réserve que X et Y ne représentent pas simultanément H et OH, respectivement Le dosage est effectué notamment par une méthode immunologique comprenant la mise en présence d'un prélèvement biologique avec un anticorps spécifiquement dirigé contre un peptide selon l'invention et la mise en évidence du complexe antigène-anticorps ainsi formé. Ces procédés peuvent être basés sur une méthode radioimmunologique de type RIA, RIPA ou IRMA, ou sur une méthode immunoenzymatique, par exemple de type ELISA. Le fluide biologique peut être le sang, l'urine ou le liquide céphalo-rachidien. Les anticorps peuvent être monoclonaux ou polyclonaux et constituent, ainsi que leurs fragments Fab, Fab', F(ab')2 et Fc, un autre objet de l'invention. Les anticorps sont obtenus par couplage d'un peptide selon l'invention sur un peptide ou une protéine porteurs immunogènes. L'invention a également pour objet un kit de diagnostic pour le dosage d'un peptide selon l'invention dans un fluide corporel d'un patient chez lequel on suspecte une pathologie liée à une déficience de la transmission sérotoninergique, notamment une dépression masquée, comprenant au moins un anticorps tel que défini ci-dessus et éventuellement les réactifs pour la mise en oeuvre du dosage. Les peptides de l'invention se sont révélés inactifs sur le site de recapture de la 5-HT. L'existence d'un facteur endogène cérébral non actif sur le site de recapture constitue un standard de référence en terme d'activité et permet ainsi d'envisager un procédé de sélection de substances antidépressives, consistant à discriminer entre l'effet de recapture et l'effet d'interaction sur le site 5-HTlB/lD. Ce procédé s'applique aux antidépresseurs connus et permet également la mise au point de médicaments nouveaux. En pratique, la discrimination entre l'effet de recapture et l'effet sur le site 5-HTl8XlD peut être effectuée en réalisant des essais de compétition entre d'une part l'activité de quantités croissantes d'antidépresseurs et la capture de la 5-HT dans les synaptosomes, la 5-HT étant radiomarquée et d'autre part en réalisant des essais de même type sur le récepteur 5-HTlB/lD en faisant varier la quantité d'antidépresseurs en présence d'un ligand radiomarqué spécifique de ces récepteurs, et en déterminant les Ki respectifs ou de façon plus générale les CI50. Le choix d'antidépresseurs ayant une activité sélective sur le site 5-HTlBXlD sera dicté par les substances présentant un Ki élevé ou une CIso faible dans l'essai de recapture et inversement un Ki faible ou une CI50 élevée dans l'essai de liaison sur le site 5-HTlB/lD. On peut également et plus aisément utiliser le peptide radiomarqué (iode-125 ou tritium) pour identifier et caractériser le site spécifique de reconnaissance du peptide, et ainsi directement étudier les capacités de diverses substances à déplacer (compétition) ce peptide en mesurant leur Ki et en comparant ce dernier aux valeurs de Ki obtenues pour ces mêmes substances pour inhiber la capture de la 5-HT (ou déplacer un inhibiteur de recapture (3H paroxetine par exemple). On décrira ci-après l'isolement et la caractérisation des peptides Ala-Leu et Leu-Ser selon l'invention, ainsi que les propriétés de liaison et les activités pharmacologiques sur les récepteurs 5-HT,,,,, des peptides Ala-Leu, Leu-Ser et Ala-Leu-Ser en se reportant aux figures annexées sur lesquelles - la fig. 1 représente l'effet du dipeptide Leu-Ser (dipeptide 2) sur la liaison 5-HT1 > dans l'hippocampe de rat; - la fig. 2 représente les interactions du dipeptide 2 et du tripeptide Ala-Leu-Ser (A3S) avec la liaison 5-HT1 nonA dans l'hippoeampe de rat; - la fig. 3 représente les interactions des dipeptides 1 (Ala-Leu) et 2 et du tripeptide A3S avec la liaison 5-HT1 > dans l'hippocampe de rat; - la fig. 4 représente la spécificité d'interaction du peptide 2 avec divers récepteurs. 1. Isolerent et Purification de peptides Ala Leu (dinentide 1) et Leu - Ser (dineptide 2) En utilisant comme critère de discrimination la capacité d'un facteur potentiel à interagir avec la reconnaissance de la 5-HT par le récepteur 5-HTlB/lD, comme décrit dans FR-2 657 784, un composé actif a été purifié à partir d'extraits de cerveaux de bovins et de chevaux. La méthodologie de purification a fait appel à des séparations par perméation sur gel, des phases normales ou inversées ou encore des échanges ioniques. a) Séparation des fractions actives correspondant aux dipeptides 1 et 2 Le matériel de départ était constitué par des cerveaux de bovins lyophilisés (poids sec = 65 g). Le lyophilisat était repris dans 20 ml d'acétate d'ammonium 50 mM pH 5. Après filtration à 0,22 pm, l'extrait était déposé au sommet d'une colonne de gel perméation (600 x 26 mm) (TSK HW 40S, domaine de fractionnement : 10 000 à 1000 daltons) préalablement équilibrée avec le même tampon. L'élution était réalisée à un débit de 2 ml.min-l et 60 fractions de 5 minutes étaient collectées. La fraction F1 était obtenue par regroupement et lyophilisation des fractions 12 à 24. La fraction F1 était resuspendue dans 10 ml d'acétate d'ammonium 50 mM pH 5 et injectée sur une colonne de phase inverse (C 18 ultrabase, SFCC, 250 x 10 mm) à raison de 1 ml par analyse. L'élution était réalisée à 4 ml.min~l en utilisant le gradient d'acétonitrile suivant - phase 1 : 3 min en acétate d'ammonium - phase 2 : 12 min de O à 12% d'acétonitrile - phase 3 : 5 min en 50% d'acétonitrile. Les fractions de T R = 9 min 30 (dipeptide 1) et 13 min 30 (dipeptide 2) étaient collectées. b) Purification du dipeptide 1 1. Gel perméation (G25) La fraction de T R = 9 min 30 était déposée au sommet d'une colonne de G25 (45 x 1,6 cm) préalablement équilibrée avec de l'acétate d'ammonium 10 mM pH 5. Le débit était de 0,3 mol. min et l'enregistrement du chromatogramme était réalisé à 230 nm. La fraction de Te = 320 minutes était récupérée. 2. Chromatoaraphie en phase inverse Le tampon utilisé était de l'acétate d'ammonium 50 mM pH 5. La colonne était une C18 ultrabase de 250 x 10 mm. L'élution était réalisée par un gradient d'acétonitrile tel que décrit en a) à un débit de 4 ml.min~1. L'enregistrement du chromatogramme était effectué à 230 nm et des fractions de 1 minute étaient collectées. L'activité était retrouvée dans une zone de gradient correspondant à des produits de rétention (TR) moyen est de 9 min 30. 3. Chromatographie sur colonne carbone La colonne utilisée était une colonne Hypercarb (Shandon) (100 x 3 mm). Les conditions chromatographiques étaient analogues aux précédentes excepté le débit fixé à 1 ml.min~1. L'activité inhibitrice était retrouvée sur une fraction faiblement retenue de TR = 1,98 minute. L'achèvement de la purification de cette fraction était réalisée par deux autres passages successifs sur la colonne Hypercarb en utilisant une élut ion isocratique en acétate d'ammonium (pic de T R = 1,60 min.). c) Purification du dipeptide 2 1. Gel perméation (G25) La fraction de T R = 13 min 30 était déposée au sommet d'une colonne de G25 (45 x 1,6 cm) préalable ment équilibrée avec de l'acétate d'ammonium 10 mM pH 5. Le débit était de 0,3 ml.min~1 et l'enregistrement du chromatogramme était réalisé à 230 nm. La fraction de Te = 290 minutes était récupérée. 2. ChromatoQraDhie en phase inverse Le tampon utilisé était de l'acétate d'ammonium 50 mM pH 5. La colonne était une C18 ultrabase de 250 x 10 mm. L'élution était réalisée par un gradient d'acétonitrile tel que décrit précédemment à un débit de 4 ml .min-l. L'enregistrement du chromatogramme était effectué à 230 nm et des fractions de 1 minute étaient collectées. Les fractions de TR comprises entre 14 et 21 minutes étaient récupérées. La re-chromatographie sur la même colonne de la zone active, en utilisant un gradient d'acétonitrile de pente plus faible, permettait d'obtenir une fraction étroite de TR = 17 minutes et contenant la totalité de l'activité inhibitrice. 3. Chromatoaraphie sur colonne carbone La colonne utilisée était une colonne Hypercarb (Shandon) (100 x 3 mm). Les conditions chromatographiques étaient analogues aux précédentes excepté le débit fixé à 1 ml.min-l. L'activité était localisée sur une fraction faiblement retenue sur cette colonne (TR = 0,84 minute). Sa re-chromatographie sur la même colonne en condition isocratique et à un débit de 0,5 ml.min1 permettait d'isoler trois pics d'adsorption. L'activité était retrouvée sur le pic le plus retenu par la colonne (TR = 1,76 minutes). 2. Caractérisation des PePtides La caractérisation des fractions obtenues a été réalisée essentiellement sur la base d'analyses par RMN qui a permis d'identifier dans RET1 les acides aminés Ala-Leu et dans la fraction RET2 les acides aminés Leu Ser. Ces résultats ont été confirmés par l'analyse d'acides aminés. 3. Interactions des peptides identifiés avec les récepteurs 5-HtlB/lD a) Interactions de liaison (fig. 1 à 3) La liaison de la (3H)5-HT ou de (125îicyano- pindolol sur les récepteurs de type 5-HTlBXlD est inhibée par les peptides suivants avec les CI50 correspondantes - Ala - Leu CI50 = 10-13 M - Leu- Ser CI50 = 10-1l M - Ala - Leu - Ser CI50 = 10.12 M A titre comparatif, le peptide Ala - Leu Leu - Ser s'est montré inactif dans le seul essai réalisé. Le peptide Ala - Leu est actif dans sa forme L (forme naturelle) et ne présente quasiment pas d'activité dans sa forme D. L'interaction de liaison n'est pas michaelienne, elle apparaît de type non-compétitif. b) SpéCifiCité de l'interaction Les fractions RET1 et RET2 isolées du cerveau de mammifères ont une grande spécificité d'interaction, puisque leur effet inhibiteur de liaison ne s'exerce que sur les sous-types 5-HT1 des récepteurs 5-HT et plus particulièrement sur le sous-type 5-HTlB/lD ; dans les conditions expérimentales utilisées, elles n'apparaissent pas affecter les récepteurs 5-HT2 et 5-HT3 ni les récepteurs a adrénergiques, ss adrénergiques, dopaminergiques, teurs a adrénergiques, ss adrénergiques, dopaminergiques, muscariniques, histaminergiques, récepteurs aux benzodiazéines et récepteurs aux opiacés (fig. 4). Ces peptides sont également dépourvus d'activité de déplacement du marqueur des sites de transport (3H paroxetine) et ne sont pas inhibiteurs de recapture de la 5-HT. c) Interactions sur la fonction cellulaire liée aux récepteurs 5-HTlB/lD L'activité du peptide Ala - Leu a été mesurée dans des essais préliminaires sur la fonction inhibitrice des récepteurs 5-HTlB/1D sur la libération évoquée d'acétylcholine. En accord avec les résultats des études de liaison indiquant une interaction avec les récepteurs 5 HT1B/1D, il a été montré que ce peptide antagonisait l'activité modulatrice des récepteurs 5-HTlB/lD à très faible concentration et potentialisait au contraire l'effet d'un agoniste 5-HT1 > à concentration plus élevée. Ces résultats suggèrent que le peptide étudié pourrait jouer le rôle d'un modulateur allostérique du récepteur 5-HT1B/1D. Ce peptide permet donc de réguler l'activité modulatrice sérotoninergique. 4. Cosparaison de l'activité du peptide et des antidépresseurs 4.1 Activité du peptide et des antidépresseurs sur la liaison 5-HT1B/1D Les inventeurs avaient précédemment montré que les antidépresseurs interagissaient (de façon complexe, vraisemblablement non-compétitive) avec les récepteurs 5-HT1. Cependant, le fait qu'à cette époque les divers sous-types 5-HT1 (5-HT1A, 5-HT1 > , 5-HT1C, 5-HTlDt 5-HT1E, 5-HT1F) n'avaient pas été identifiés et caractérisés, rendait l'interprétation des résultats difficile. Actuellement, l'observation de la seule population 5HTlBlD marquée par le [l2sI]CYN-Pindolol permet de mettre clairement en évidence l'interaction des antidépresseurs avec ce récepteur. L'étude pharmacologique montre que les antidépresseurs de type "sérotoninergiques" (paroxétine, fluoxétine) sont beaucoup plus actifs que les antidépresseurs "noradrénergiques" (nomifensine). Les peptides identifiés miment l'effet des antidépresseurs sur la liaison de (3H]5-HT ou de (125I1 CYN-Pindolol aux récepteurs 5-HT1B/1D. 4.2 Activité sur les effets cellulaires des récepteurs 5 5-HTlB/lD Les antidépresseurs (citalopram en particulier) antagonisent l'activité inhibitrice des récepteurs 5-HTlB/lD sur la libération des neurotransmetteurs. 4.3 Activité sur un modèle comportemental in vivo Le test de la nage forcée (Porsolt) est un test simple qui ne peut en aucun cas être assimilé à un modèle de "dépression". I1 a cependant le mérite de discriminer un bon nombre de substances antidépressives. I1 faut cependant remarquer que quelques antidépresseurs ne sont pas actifs dans ce test et certaines substances non antidépressives y sont actives. Dans des conditions expérimentales où l'on mesure l'activité d'antidépresseurs dans ce test, il a été montré que le peptide Ala - Leu injecté par voie ip à forte concentration, mais aussi i.c.v. (intra cérébroventriculaire) à faible concentration, réduit légèrement mais significativement le temps d'immobilité des souris les antidépresseurs de type noradrénergique (nomifensine) sont beaucoup plus efficaces que le peptide dans ce test, mais les antidépresseurs sérotoninergiques ont également une activité faible. La mesure de l'activité locomotrice horizontale a été réalisée dans un appareil d'activométrie. Le peptide a un effet stimulant. Au cours de ce test, une forte augmentation des défécations (signe lié à l'anxiété) a été notée chez des animaux qui ont reçu le peptide. Cependant, dans tous ces essais, il semble que l'état de "stress" initial des animaux joue un rôle dans l'amplitude des phénomènes observés. Diverses séries d'essais ont été réalisées sur les effets du dipeptide Ala - Leu sur l'appétit. Des administrations i.c.v. de 7 à 30 ug du peptide ont des effets très significatifs sur la prise de nourriture chez la souris, puisqu'elles entraînent sur 24 heures une diminution de près de la moitié de la consommation alimentaire des animaux, ainsi qu'une perte de poids également significative. Ces dernières observations sont bien en accord avec le fait que les antidépresseurs sérotoninergiques ont le plus souvent des effets importants sur la prise alimentaire, certains favorisant, d'autres réduisant le poids chez les patients traités, et que leur activité est mise à profit dans les cas de boulimie ou d'anorexie qui souvent accompagnent la dépression. REVENDICATIONS 1. Composés de séquence peptidique X Leu Y dans laquelle X représente H ou Ala, Y représente OH ou Ser, sous réserve que X et Y ne représentent pas simultanément H et OH, respectivement ainsi que les composés correspondants dans lesquels la liaison peptidique est remplacée par une liaison résistante à la dégradation enzymatique des protéases ou dans lesquels le squelette peptidique comporte un ou plusieurs groupes intercalés rendant la liaison peptidique résistante à la dégradation enzymatique. 2. Composés selon la revendication 1, dans lesquels le groupe de liaison peptidique -CO-NH- est remplacé par un groupe choisi parmi -CO- NR', -CR1R2CR3R4-, -CO-CR1R2-, ou dans lesquels le squelette peptidique présente un ou plusieurs groupes intercalés choisis parmi les groupes -CR1R2-, -NR1-, -O-, R1, R2, R3 et R4, identiques ou différents, représentant H ou un groupe alkyle en C1-C6 et R' représentant un groupe alkyle en C1-C6. 3. Composés selon la revendication 1, comprenant la séquence Ala - Leu ainsi que les composés correspondants dans lesquels la liaison peptidique est remplacée par une liaison résistante à la dégradation enzymatique des protéases, ou dans lesquels le squelette peptidique comporte un ou plusieurs groupes intercalés rendant la liaison peptidique résis tante à la dégradation enzymatique. 4. Composés selon la revendication 1, comprenant la séquence Leu - Ser ainsi que les composés correspondants dans lesquels la liaison peptidique est remplacée par une liaison résistante à la dégradation enzymatique des protéases, ou dans lesquels le squelette peptidique comporte un ou plusieurs groupes intercalés rendant la liaison peptidique résistante à la dégradation enzymatique. 5. Composés selon la revendication 1, comprenant la séquence Ala - Leu - Ser ainsi que les composés correspondants dans lesquels la liaison peptidique est remplacée par une liaison résistante à la dégradation enzymatique des protéases ou dans lesquels le squelette peptidique comporte un ou plusieurs groupes intercalés rendant la liaison peptidique résistante à la dégradation enzymatique. 6. Composés selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisés en ce qu'ils sont sous la forme L. 7. Composition thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6. 8. Procédé de diagnostic in vitro d'une affection liée au système sérotoninergique chez un patient, caractérisé en ce que l'on effectue un dosage dans un fluide biologique du patient d'un peptide de séquence X Leu Y dans laquelle X représente H ou Ala, Y représente OH ou Ser, sous réserve que X et Y ne représentent pas simultanément H et OH, respectivement. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que le dosage est effectué à l'aide d'un anticorps spécifique dudit peptide. 10. Anticorps polyclonal ou monoclonal dirige spécifiquement contre un peptide tel que défini dans la revendication 8, ainsi que les fragments dudit anticorps, notamment les fragments Fab, Fab', F(ab')2 ou Fc. 11. Kit de diagnostic pour la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 8 ou la revendication 9, caractérisé en ce qu'il comprend un anticorps ou un fragment d'anticorps tels que définis à la revendication 10. 12. Procédé de criblage de substances antidépressives occupant le même site conformationnel que les peptides définis à la revendication 1, caractérisé en ce que l'on réalise une discrimination par des essais d'inhibition entre d'une part leur liaison sur le site de recapture de la 5-HT et d'autre part entre leur liaison sur le site 5-HT1B/lD. 13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'on compare la constante d'inhibition Ki1 des substances à tester par des essais d'inhibition compétitive en présence d'un peptide selon la revendication 1 à la constante d'inhibition Ki2 de ces mêmes substances, pour inhiber la recapture de la 5-HT ou déplacer un inhibiteur de recapture. 14. Utilisation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 6 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement d'une pathologie liée à une déficience de la transmission serotoninergique.