Brevet FR2714474A1 — publié le 19950630

i La présente invention concerne le marquage d'une substance ou d'un article et peut être utilisée pour le marquage d'une substance ou d'un article dans le but d'identifier ladite substance ou ledit article. Selon un aspect de la présente invention, il est proposé un procédé destiné à être utilisé pour le marquage d'une substance ou d'un article, lequel proc&édéi comprend la fourniture à une substance ou un article d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pou un fragment d'une molécule d'enzyme. Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé un procédé qui peut être utilisé pour identifier une substance ou un article, lequel procédé comprend la fourniture à une substance ou un artidcl d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une mol6culc d'enzyme et l'accomplissement d'une étape de détection pour dterminer la pr6sence ou l'absence d'une moléculec d'enzyme, d'un fragment d'une molecule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. A titre d'exemple, la présente invention peut êtrc utilisée pour le marquage dissimulé d'une substance ou d'un article. Il importe de comprendre que, selon la présente invention, un marqueur peut êtrec une mol6culc d'enzyme, un fragment d'une molculc d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé un procèdé qui peut être utilise pour identifier une substance ou un article, lequel proc&édé comprend l'accomplissement d'une étape de détection pour d6terminer la présence ou l'absence d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une moléculc d'enzyme, d'un liant pour une mol&culc d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une moléculc d'enzyme. A titre d'exemple, il importe de comprendre qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, selon l'aspect de l'invention imm&édiatement précèdent, peut êctre choisie de manière à être un marqueur. Il est à noter qu'un anticorps dirigé contre une molécule d'enzyme est un liant pour une molécule d'enzyme et qu'un anticorps dirigé contre un fragment d'unc moléculc d'enzyme est un liant pour un fragment d'une molécule d'enzymc. De même, il est à noter quune molécule d'enzyme et un liant pour celle- ci peuvent être considérés comme étant des partenaires de liaison spécifiquc ct qu'un fragment d'unc molécule d'cnzymc et un liant pour cclui-ci peuvent êtrc considérés commec étant des partenaires de liaison spécifiquc. On dispose dc nombreuses molécules d'cnzyme ct de nombreux fragments de molécules d'enzymc. A titre d'exemplc, il cst possible d'utiliscr selon l'invention toutc molécule d'cnzymc appropriée, tout fragment approprié d'une molécule d'enzyme, tout liant approprié pour une molécule d'enzyme ou tout liant approprié pour un fragment d'une molécule d'enzyme. La phosphatase alcalinc ct la peroxydase de raifort sont des exemples de molécules d'enzyme qui peuvent êtrc utilisées selon la présentc invention. Les anticorps dirigés contrc la phosphatae alcaline et la peroxydasc de raifort sont des exemples de liant qui peuvent être utilisés selon la présente invention. Il est à noter quc les molécules d'enzymc et les fragments de molécules d'enzyme peuvent être plus stables (par exemple moins sensibles à des modifi- cations inaccptables) lorsqu'ils sont liées à leurs liants respectifs (anticorps). Ainsi, par exemplc, il peut être avantageux dans certaines circonstances de munir une substance ou un article d'unc molécule d'enzyme liée à un liant d'une molécule d'enzyme, ou d'un fragment d'une moléculc d'enzyme lié à un liant pour le fragment de moléculc d'cnzymc, étant donné quc les molécules d'cnzymc li6es ou les fragments liés dc molécules d'enzyme pcuvcnt êtrc plus stables quc Ies formes non liées (par exemplc vis-à-vis du traitement ct du stockage). La détection d'une moléculc d'enzyme liée à son liant ou d'un fragment d'unc molécule d'enzymc lié à son liant peut êtrc réaliscée par exemplc par voie enzymologique. Ainsi, par exemplc, dans la description dc cettc invention, le terme "moléculc d'enzymec peut désigner une moléculc d'enzymc tellc quellc ou peut désigner unc moléculc d'cnzymc liée à un liant spécifique (anticorps) pour la moléculc d'enzymc, et l'cxprcssion 'fragment d'unc moléculc d'enzyme' peut désigner un fragment d'unc molécule d'enzymc tel quel ou peut désigner un fragment d'une molécule d'cnzymc lié à un liant spécifique (anticorps) pour le fragment de molécule d'enzyme. Selon la présente invention, une substance o un article peut êtrc muni d'un marqueur, ledit marqueur étant une moléculc d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, de toute manière appropriée. Ainsi, par exemple, lorsqu'une substance est un fluide, tel qu'un liquide, un marqueur peut être introduit dans le fluide par une opération de mélange. A titre d'exemple, lorsque la substance est une pâte ou un solide (par exemple un produit chimique), un marqueur peut être introduit pendant la fabrication de la pâte ou du solide. Ainsi, par exemple, un marqueur qui comprend une moléculec d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une moléculc d'enzyme peut être incorporé dans une substance. Lorsqu'un article doit être muni d'un marqueur, le marqueur peut être apporté de toute manière appropriée (par exemple par application à l'article). Ainsi, par exemple, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut tre appliqué à un article de toute manière appropriée. A titre d'exemple, un marqueur peut être incorporé dans une composition destinée à être appliquée à un article. Une telle composition peut être par exemple une encre, un milieu à base d'encre ou une composition d'encre, ou bien une composition de pointure destinée à être appliquée à un article par des moyens appropriés. Ainsi, par exemple, un marqueur qui comprend une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être incorporé dans une encre, un milieu à base d'encre, une composition d'encre ou une composition de peinture susceptible d'être appliquée à un article. L'encre ou le milieu à base d'encre peut être par exemple une encre invisible, un milieu à base d'encre invisible ou une composition d'encre invisible. Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé une composition qui comprend une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. La composition peut être par exemple une composition d'encre qui comprend une molécule d'enzyme, un fragment dune molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. On notera que les constituants d'une composition doivent être choisis de manière qu'il n'y ait pas d'interférence inacceptable entre le marqueur et les autres constituants de la composition, susceptible de provoquer une détérioration inacceptable des propriétés de la composition. En outre, les constituants de la composition ne doivent provoquer aucune détérioration inacceptable des propriétés du marqueur. Par ailleurs, le marqueur doit etre tel qu'il puisse être détecté après avoir été appliqué à un article et après exposition de l'article aux conditions qu'il peut rencontrer (par exemple expédition et/ou stockage). Il est à noter que la présente invention peut être utilisée pour munir une substance ou un article d'un marqueur de manière que la nature du marqueur ne soit pas connue des personnes non autorisées. En outre, on peut faire en sorte que la quantité de marqueur appliquée soit ignorée des personnes non autorisées. Si on le souhaite, on peut faire en sorte que l'existence d'un marqueur soit ignorée des personnes non autorisées. Lorsqu'un article est marqué, on peut faire en sorte que la position du marqueur soit ignorée d'une personne non autorisée. Il importe de noter également qu'il suffit que la nature d'un marqueur soit connue seulement par des personnes essentielles car il n'est pas absolument nécessaire que les personnes impliquées dans l'application d'un marqueur sur une substance ou un article, dans les tests de contrôle de qualité ou dans les tests destinés à vérifier si un marqueur particulier est présent, connaissent la nature du marqueur (du fait qu'il n'est pas nécessaire que les réactifs utilisés dans les tests soient identifiés autrement que par des codes de référence par exemple). Selon la présente invention, une substance ou un article peut être muni d'un marqueur comprenant une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, en toute concentration appropriée. Une concentration appropriée peut tre telle, par exemple, que la quantité de marqueur présente rende difficile ou sensiblement impossible pour une personne non autorisée d'identifier le marqueur par des procédés "conventionnels" (par exemple par des procédés physicochimiques tels que la chromatographie) mais que la quantité de marqueur utilisée soit suffisante pour faciliter la détection par une personne autorisée à l'aide de réactifs de détection autorisés. A titre d'exemple, une composition pouvant être utilisée pour le marquage d'une substance ou d'un article peut contenir un marqueur en une concentration de 0,1 à 80 000 fgl. La présente invention peut être utilisée pour le marquage à des fins appropriées quelconques. Ainsi, par exemple, le marquage peut être accompli pour qu'une substance ou un artidcle puisse être identifié de manière à authentifier la substance ou l'article. Ainsi, par exemple, la présente invention peut être utilisée pour l'identification d'une substance ou d'un article dans le but de distinguer une substance authentique ou un article authentique d'une substance ou d'un article de contrefaçon. A titre d'exemple également, la présente invention peut être utilis&ée pour identifier une substance ou un article dans le but de surveiller le mouvement d'une substance ou d'un article (par exemple dans une chaîne ou un réseau). Ainsi, par exemple, le mouvement d'une substance ou d'un article peut être surveillé dans le but de surveiller le fonctionnement d'une chaîne de distribution ou d'un réseau de distribution ou, par exemple, le mouvement d'aune substance ou d'un article peut être surveille dans le but de détecter le détournement de produits (par exemple par un agent intermédiaire dans une chaîne commerciale ou dans un réseau commercial). La présente invention peut être utilisée par exemple pour le marquage de toute substance appropriée ou de tout article approprié, par exemple un solide, un liquide ou d'autres substances ou articles appropris. La présente invention peut être utilisée par exemple pour marquer une substance ou un article qui a ét rendu approprié pour le marquage. On comprendra qu'en munissant une substance choisie ou un article choisi d'un marqueur choisi ou de marqueurs choisis, il peut être possible par exemple de distinguer cette substance ou cet article d'autres substances ou d'autres articles au moyen d'un test permettant de détecter le ou les marqueurs choisis. Ainsi, par exemple, la présence d'un marqueur choisi ou de marqueurs choisis peut indiquer qu'une substance testée ou un article testé est la substance choisie ou l'article choisi tandis que l'absence d'un tel marqueur choisi ou de tels marqueurs choisis peut indiquer qu'une substance ou un article n'est pas la substance choisie ou l'article choisi. Les substances qui peuvent être marquées et les articles qui peuvent être marqués sont par exemple les parfums, les billets de banque, les oeuvres d'art, les documents de valeur réalisables, les articles de mode et de haute couture, les montres, les produits électriques, les livres, les passeports, les médicaments, tout produit de haute valeur (par exemple les produits de luxe), tout article à grand volume de vente, les articles de prestige de grande valeur, les formulations chimiques, les viandes et les produits à base de viande (par exemple les viandes et les aliments cachères), et les emballages pour différents produits. Il est à noter que la présente invention peut être utilisée pour le marquage d'une substance ou d'un article d'une manière destinée à empêcher les ventes et les falsifications frauduleuses, les copies non autorisées et les produits faux. Un tel marquage peut être utilisé par exemple pour permettre à un fabriquant authentique d'identifier de manière non équivoque une substance ou un article produit par lui et de distinguer une telle substance ou un tel article d'une substance ou d'un article non authentique. Ceci permet à un fabriquant authentique de chercher à empêcher les pertes de revenus qui peuvent être provoquées par la présence de substances ou d'artidcles non authentiques dans un marché donné. Par exemple, les fabriquants peuvent être capables de décrouvrir des substances et des articles qui, bien qu'ils ne soient pas fournis par eux, portent leurs noms de marque et/ou leurs emballages. Si on le souhaite, la présente invention peut être utilisée par exemple pour marquer une substance ou un article de manière à indiquer le numéro de lot et/ou la date limite d'utilisation. A titre dcexemple, un marqueur peut être appliqué à un article dans tout agencement approprié. Ainsi, par exemple, une composition (par exemple, une encre) contenant un marqueur comprenant une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être appliquée à un article sous forme d'un ensemble voulu de marques (par exemple des chiffres, des lettres, des formes ou des dessins). Le marquage des substances et des articles selon la présente invention peut être réalisé à titre d'exemple par: (a) mélange d'un marqueur avec une encre ou une composition de véhicule d'encre (par exemple à raison de 0,1-80 000 fg/l) et l'impression directement sur un article, ou (b) application d'une solution d'unm marqueur (par exemple dans l'eau ou dans une combinaison d'eau et de solvant organique) directement sur un article, (c) immersion d'une partie de la surface d'un article dans une solution d'un marqueur pour fixer (par exemple adsorber) le marqueur sur l'article, ou (d) mélange d'un marqueur avec une matière colorante ou une peinture destinée à être utilisée avec des articles ou des emballages, ou (c) addition d'un marqueur directement à des solutions ou formu- lations de produits chimiques (par exemple médicaments, peintures, aliments, etc.), ou (t) mélange d'un marqueur avec une substance adhésive qui peut ensuite être utilisée pour fixer des étiquettes ou du papier à des articles, ou (g) inscription (par exemple au cours de l'impression) d'un document de certification qui doit accompagner les produits, ou (h) application d'une composition de véhicule d'encre à un article et traitement (par exemple par séchage) de la composition de véhicule d'encre pour former une couche hydrophobe solidement fixée et application d'un marqueur (par exemple en solution ou en suspension) à la couche hydrophobe de manière que le marqueur soit associé à la couche (par exemple par adsorption) et traitement (par exemple par séchage) pour appliquer un marqueur sur l'article, ou (i) activation (par exemple par oxydation avec le periodate) d'un constituant d'une composition de véhicule d'encre pour former des sites réactifs auxquels un marqueur peut être lié de manière covalente, application de la composition de véhicule d'encre à un article et traitement de la composition d'encre (par exemple par séchage) pour former une couche solidement fixée, et introduction d'un marqueur sur la couche de manière à fixer le marqueur à la couche par liaison covalente, ou (j) application d'une composition de véhicule d'encre à un article et traitement (par exemple par séchage) de la composition de véhicule d'encre pour former une couche solidement fixée, activation (par exemple par oxydation avec le periodate) de la couche pour produire sur celle-ci des sites réactifs auxquels un marqueur peut être lié de manière covalente afin de réaliser la fixation du marqueur à la couche et introduction du marqueur sur la couche pour fixer le marqueur à la couche par liaison covalente. On notera qu'un marqueur tel que décrit ci-dessus aux points (a) à (j) peut comprendre une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. Selon la présente invention, une molécule d'enzyme, un fragment d'une moléculc d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être détecté de toute manière appropriée. A titre d'exemple, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être détecté in situ (par exemple tandis qu'il est encore fixé à un article). Ou bien encore, à titre d'exemple, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être extrait d'une substance ou d'un article et soumis à une détection. L'extraction peut être accomplie de toute manière appropriée. Par exemple, lorsqu'un tel marqueur doit être extrait d'un liquide, le liquide peut être évaporé pour laisser un résidu et le résidu peut être traité avec un milieu liquide approprié (par exemple une solution tampon) pour produire un échantillon liquide qui peut être soumis à une détection. A titre d'exemple encore, lorsqu'un marqueur doit être extrait d'une substance qui n'est pas un liquide, la substance peut être dissoute ou traitée d'une autre manière pour produire un liquide contenant le marqueur, lequel liquide peut ensuite être soumis à une détection ou traité de la manière décrite ci-dessus par évaporation et traitement avec un milieu liquide pour donner un échantillon liquide qui peut être soumis à une détection. A titre d'exemple encore, un marqueur peut être extrait d'un article (par exemple pour donner un liquide contenant le marqueur) et soumis à une détection de toute manière appropriée. A titre d'exemple, on peut rencontrer des circonstances dans lesquelles une extraction par solvant peut ne pas être applicable pour récupérer des substances enzymatiquement actives. Cependant, lorsqu'une extraction par solvant est applicable, le solvant peut être retiré après l'extraction et un tampon approprié peut être ajouté (par exemple un tampon d'immunoanalyse tel que PBS pH 7, 4). On comprendra qu'il est possible de choisir tout solvant ou tout système solvant dans la mesure o il convient pour la détection du marqueur. Ainsi, par exemple, un solvant ou un système solvant peut être choisi de manière que son utilisation n'entraîne pas des modifications inacceptables du marqueur. Lorsqu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme a été extrait, il peut tre immobilisé de toute manière appropriée pour permettre sa détection (par exemple par un test de liaison à des protéines spécifiques (par exemple un processus d'immunoanalyse) ou par tout autre processus de détection approprié (par exemple un procédé enzymologiquc). Ainsi, par exemple, un procédé chimique non spécifique peut étre utilisé pour immobiliser une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme sur un matériau support approprié (par exemple, sur du papier de nitrocellulose). Par exemple, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d"enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être extrait, placé dans un milieu liquide approprié (par exemple une solution tampon), et la molécule d'enzyme, le fragment de molécule d'enzyme, le liant pour une molécule d'enzyme ou le liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être immobilisé sur un support approprié au moyen dun procédé chimique non spécifique. Ou bien encore, à titre d'exemple, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être extrait, placé dans un milieu liquide approprié (par exemple une solution tampon) puis la molécule d'enzyme, le fragment d'une molécule d'enzyme, le liant pour une molécule d'enzyme ou le liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut tre immobilisé sur un matériau support approprié (par exemple, le polystyrène) par adsorption non spécifique. A titre d'exemple encore, une interaction spécifique (par exemple liaison spécifique) peut être utilisée pour immobilisr une molécule d'enzyme extraite, un fragment d'une molécule d'enzyme extrait, un liant pour une molécule d'enzyme extrait ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme extrait. Ainsi, par exemple, un partenaire de réaction spécifique (anticorps) pour une molécule d'enzyme ou un partenaire de réaction spécifique (anticorps) pour un fragment d'une molécule d'enzyme, peut être utilisé pour réaliser la fixation à un matériau support au moyen d'une interaction spécifique avec une molécule d'enzyme correspondante ou un fragment de molécule d'enzyme correspondant. Par exemple, un liant (anticorps) pour une molécule d'enzyme, ou un liant (anticorps) pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être utilisé pour provoquer l'immobilisation d'une molécule d'enzyme ou d'un fragment d'une molécule d'enzyme sur un matériau de support. Ou bien encore, à titre d'exemple, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme peut être utilisé pour réaliser la fixation à un matériau support d'un liant (qui est un anticorps dirigé contre une molécule d'enzyme), ou un fragment d'une molécule d'enzyme peut être utilisé pour réaliser la fixation à un matériau support d'un liant (qui est un anticorps dirigé contre un fragment d'une molécule d'enzyme). Par exemple, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme peut être utilisé pour provoquer l'immobilisation, sur un matériau support, d'un liant (anticorps) pour une molécule d'enzyme ou d'un liant (anticorps) pour un fragment d'une molécule d'enzyme. On comprendra quun liant pour une molécule d'enzyme, un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme puisse être utilisé pour provoquer l'immobilisation d'une molécule d'enzyme, d'un fragent d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment dune molécule d'enzyme, respectivement, de toute manière appropriée. Ainsi, par exemple, un liant pour une molécule d'enzyme, un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme peut être associé à un matériau support avant ou après l'interaction spécifique avec une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'mne molécule d'enzyme, respectivement. Un liant pour une molécule d'enzyme, un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme peut être associé directement à un matériau support (par exemple par liaison covalente) ou peut être associé indirectement avec un matériau support par l'intermédiaire d'autres espèces et d'autres liaisons (de nature spécifique ou non spécifique). Ainsi, par exemple, un partenaire de réaction qui est un liant peut être lié à un matériau support par un second liant (qui est un anticorps), lequel second liant est un liant pour le partenaire du réaction. Dans cette configuration, le second liant peut être fixé à un matériau support de toute manière appropriée et à tout moment approprié et peut être amené à subir une liaison spécifique avec le partenaire de réaction avant ou après que le partenaire de réaction a subi une interaction spécifique avec une molécule d'enzyme ou avec un fragment d'une molécule d'enzyme. Ou bien encore, à titre d'exemple, un liant pour une molécule d'enzyme, un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme peut être amené à être associé à un matériau support (avant ou après la réaction avec une moléculc d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme) au moyen d'un liant auxiliaire ou d'un système de ligand auxiliaire (par exemple au moyen d'un autre système ligand-liant). Lorsqu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme a été immobilisé sur un matériau support, il peut être détecté de toute manière appropriée comme cela est connu dans le domaine immunologique et dans le domaine non immunologique. Ainsi, par exemple, il est possible d'utiliser un liant approprié pour une molécule d'enzyme, un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme, lequel liant pour une molécule d'enzyme, liant pour un fragment dune molécule d'enzyme, molécule d'enzyme ou fragment de molécule d'enzyme peut être amené à être associé à un marqueur capable de produire un signal délectable. A titre d'exemple, tout marqueur approprié peut être utilisé selon la présente invention. Des exemples de marqueur comprennent les enzymes, les composés fluorescents, les composés chimiluminescents, les composés bioluminescents, les radio-isotopes et les colorants. Un signal produit par un marqueur peut être déterminé par tout procédé chimique ou biochimique approprié ou de toute manière appropriée. A titre d'exemple encore, un liquide ou échantillon de liquide contenant un marqueur peut être soumis à une détection par formation d'une mince couche liquide ou d'échantillon de liquide sur une surface solide appropriée et par séchage de cette couche pour former sur la surface solide une mince couche de produit qui doit être soumis à une détection. La surface solide peut être par exemple une lame de verre pour microscope, une baguette de verre ou une boîte de Petri. Lorque la surface solide estsous une forme appropriée (par exemple lame de microscope au baguette de verre), il est possible d'appliquer sur celle-ci une mince couche de liquide ou d'échantillon liquide par immersion de la surface solide dans le liquide ou l'échantillon liquide. Une mince couche de produit sur une surface solide appropriée qui peut être obtenue de la manière décrite précédemment peut être soumise à une détection de toute manière appropriée, par cxemplc par addition de réactifs d'identification ou par tout procédé approprié (par exemple par un procédé d'analyse ou par un procédé enzymologique). A titre d'exemple encore, un marqueur dans un liquide ou un échantillon liquide peut être détecté par addition au liquide ou à l'échantillon liquide de réactifs d'identification appropriés. La détection in situ d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être réalisée à l'aide de tout processus approprié, par exemple à l'aide des processus connus dans le domaine immunologique ou dans le domaine non immunologique de liaison à des protéines. On comprendra que dans un processus in situ un article puisse agir luimême comme matériau support dans un processus de détection. A titre d'exemple, la détection in situ d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être réalisée à l'aide d'un liant pour une molécule d'enzyme, d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, d'une molécule d'enzyme ou d'un fragment d'une molécule d'enzyme qui peut être associé à un marqueur approprié. Par exemple, le marqueur peut être détecté in situ. Une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une moléculc d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une moléculc d'enzyme peut être détecté par exemple par toute forme d'analyse appropriée. Dans une forme d'analyse, il est possible d'utiliser une configuration d'analyse sandwich non compétitive (par exemple après extraction d'une molécule d'enzyme ou d'un fragment de molécule d'enzyme). Ainsi, par exemple, un anticorps contre une molécule d'enzyme ou contre un fragment d'une molécule d'enzyme (lequel anticorps peut être fixé ou non à un matériau support) peut être utilisé pour fixer une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme à un matériau support, et un autre anticorps (qui peut être associé directement ou indirectement à un marqueur) dirigé contre la molécule d'enzyme ou contre le fragment de molécule d'enzyme peut être utilisé pour faciliter la détection de la molécule d'enzymc ou du fragment de molécule d'enzyme. Puis, si on le souhaite, l'anticorps peut être dénaturé et la molécule d'enzyme ou le fragment de molécule d'enzyme peut être recueilli pour être utilisé dans une autre analyse (par exemplc compétitive) qui peut être utilisée pour confirmer les résultats de l'analyse non compétitive. On comprendra que la possibilité de réaliser plus d'une analyse sur un échantillon donné puisse être avantageuse en permettant de confirmer les résultats de l'analyse et d'améliorer la fiabilité des résultats. On comprendra d'après ce qui précède que même si des molécules d'enzyme ou des fragments de molécules d'enzyme peuvent être dénaturés en étant introduits dans une substance ou un article, ils peuvent encore être détectables bien qu'ils puissent avoir perdu tout ou partie de leur activité enzymatique. Ainsi, par exemple, des molécules d'cnzyme dénaturées ou des fragments de molécules d'enzyme dénaturés peuvent être reconnus par un anticorps qui reconnaît aussi les molécules d'enzyme entières actives. Ceci est possible du fait que la spécificité structurale peut être indé- pendante de l'activité enzymatique. Ainsi, par exemple, il est possible de conduire une immunoanalyse compétitive dans laquelle un marqueur, comprenant une molécule d'enzyme ou un fragment de molécule d'enzyme, entre en compétition avec des molécules d'enzyme actives (qui peuvent être utilisées comme marqueur) pour la liaison à un anticorps (qui peut être placé sur un matériau support). Bien que l'on se soit référé dans ce qui précède à une immunoanalyse compétitive en ce qui concerne la détection d'une molécule d'enzyme ou d'un fragment d'une molécule d'enzyme, on comprendra qu'une molécule d'enzyme ou un fragment dune molécule d'enzyme puisse être détecté de toute manière appropriée, par exemple au moyen d'une immunoanalyse non compétitive. A titre d'exemple encore, un marqueur qui est une molécule d'enzyme (par exemple une molécule d'enzyme dénaturée) ou un fragment d'une molécule d'enzyme peut être détecté au moyen d'un anticorps ou d'un fragment d'anticorps (c'est-à-dire (Fab)2), qui a deux sites de liaison. Ainsi, par exemple, il peut se faire que l'un des sites de liaison se lie au marqueur (ledit marqueur étant une molécule d'enzyme (par exemple une molécule d'enzyme dénaturée) ou un fragment d'une molécule d'enzyme) et que l'autre site de liaison se lie à une molécule d'enzyme enzymatiquement active, ladite molécule d'enzyme enzymati- quement active étant du mêmc type que celle qui est utilisée pour former le marqueur. La molécule d'enzyme enzymatiquement active peut ensuite être utilisée pour détecter le marqueur. Ainsi, le marqueur peut être détecté in situ au moyen de l'anticorps ou du fragment d'anticorps qui comporte deux sites de liaison et de la molécule d'enzyme enzymatiquement active, ou bien le marqueur peut être détecté en étant extrait et associé à un matériau support avant que l'anticorps ou fragment d'anticorps ayant deux sites de liaison et la molécule d'enzyme enzymatiquement active soient utilisés. La molécule d'enzyme enzymatiquement active peut être détectée de toute manière appropriée (par exemple par des procédés enzymologiques tels que décrits ci-dessous). On comprendra qu'une chaîne molécule d'enzyme - anticorps - enzyme ou fragment de molécule d'enzyme - anticorps - enzyme qui peut être formée au moyen d'un anticorps ayant deux sites de liaison peut être utilisée par exemple pour augmenter la sensibilité de détection. En outre, il peut être possible par exemple d'utiliser une chaîne molécule d'enzyme - anticorps - ligand - anticorps - ligand ou une chaîne fragment de molécule d'enzyme - anticorps - ligand - anticorps - ligand. On comprendra aussi que si une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment dune molécule d'enzyme est utilisé comme marqueur, il est possible d'utiliser tout procédé de détection immunologique approprié pour détecter un tel marqueur, in situ ou après extraction. Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé une trousse de test pouvant être utilisée pour identifier une substance ou un article, laquelle tousse de test comprend un liant pour une molécule d'enzyme, un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme. Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé une composition pouvant être utilisée pour marquer une substance ou un article, laquelle composition comprend une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. A titre d'exemple, une composition selon l'aspect immédiatement précédent de la présente invention peut être une composition d'encre, une composition de véhicule d'encre ou une composition de peinture. Une composition de véhicule d'encre peut être une composition qui contient un mélange de substances rencontrées normalement dans les compositions d'encre, à l'exception d'un colorant. Une composition de véhicule d'encre peut avoir été additionnée d'un colorant pour obtenir une encre colorée. Selon la présente invention, il est proposé une combinaison comprenant un marqueur associé à un agent solubilisant, ledit marqueur étant une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. L'agent solubilisant peut être un tensioactif. Ainsi, dans un mode de réalisation de la présente invention, il est proposé une combinaison comprenant un marqueur associé à un tensioactif, ledit marqueur étant une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. Une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être associé à un tensioactif de toute manière appropriée. Par exemple, un site réactif ou des sites réactifs d'un tensioactif peuvent être conjugués à une moléculc d'enzyme, un fragment d'une moléculc d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, ou à toute combinaison appropriée de ceux-ci. On comprendra que la conjugaison puisse être réalisée par liaison covalente. Le polyéthylèneglycol est un exemple de tensioactif auquel une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être associé (par exemple conjugué). Une combinaison comprenant un marqueur selon la présente invention associé à un tensioactif peut être soluble dans les liquides aqueux et organiques. Ceux-ci peuvent être avantageux, par exemple lorsque l'on cherche à introduire un marqueur dans une encre qui comporte des constituants organiques (par exemple un solvant organique). On comprendra qu'une combinaison d'un marqueur associé à un tensioactif puisse être utilisée dans un marquage à l'aide de solvants à base d'eau. Selon la présente invention, il est proposé également une combinaison comprenant un marqueur associé à un milieu insolubilisant, ledit marqueur étant une molécule d'enzymc, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. Le milieu insolubilisant peut être par exemple un milieu qui est d'un type et d'une taille de particules tels qu'il ne se dissout pas dans les solvants organiques ou aqueux choisis, de sorte que le marqueur associé au milieu insolubi- lisant est rendu lui aussi sensiblement insoluble dans les solvants organiques ou aqueux choisis. Le milieu insolubilisant peut être par exemple constitué par des microparticules de taille micronique ou submicronique (par exemple particules de latex, microparticules de polystyrène, particules de nitrocellulose et particules de poudre de verre). Des microparticules de taille micronique et submicronique sont disponibles dans le commerce. A titre d'exemple, tout moyen approprié peut être utilisé pour associer un marqueur à un milieu insolubilisant. Ainsi, par exemple, il est possible d'utiliser tout procédé de fixation approprié, par exemple les procédés qui sont connus dans la technique pour fixer des subtances (par exemple des substances biochimiques) à des microparticules. L'adsorption et la liaison covalente sont des exemples de fixation. Ainsi, par exemple, une combinaison comprenant un marqueur associé à un milieu insolubilisant peut comprendre un marqueur fixé à un milieu insolubilisant comprenant des microparticules. A titre d'exemple, une combinaison d'un marqueur selon la présente invention et d'un milieu insolubilisant, laquelle combinaison peut être sensiblement insoluble dans les solvants organiques ou aqueux choisis, peut se révéler avantageuse dans certaines circonstances. Par exemple, une telle combinaison peut être sous forme dune suspension homogène dans des milieux organiques ou aqueux de viscosité élevée (par exemple solution d'hydroxypropylméthylcellulose à 0,8 %) et une telle suspension peut offrir des avantages par exemple en favorisant l'obtention de concentrations sensiblement uniformes de molécules d'enzyme, de fragments d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, utilisés comme marqueur. Compte tenu de ce qui précède, on comprendra que la présente invention peut permettre le marquage d'une substance ou d'un article au moyen d'un marqueur qui est biodétectable. Lorsque des molécules d'enzyme ou des fragments de molécules d'enzymc ne sont pas dénaturés dans une mesure inacceptable lorsqu'ils sont combinés à une substance ou un article, les molécules d'enzyme ou les fragments de molécules d'enzyme peuvent êtrec détectés (par exemple in situ ou après extraction) au moyen d'un processus approprié et d'un substrat approprié. On s'est référé dans cc qui précède à la détection immunologiquc d'un marqueur selon la présente invention. On comprendra également d'après cc qui précède que lorsqu'une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme a une activité enzymatique appropriée, il est possible d'utiliser tout procédé enzymologique approprié pour la détection en solution ou sur une surface solide. D'après ce qui précède on comprendra qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'um molécule d'enzyme peut être détecté par exemplc par tout procédé immunologique approprié et/ou par tout procédé enzymologique approprié. Ainsi, par exemple, une molécule d'enzyme qui a une activité enzymatique appropriée, ou un fragment d'une molécule d'cnzyme qui a une activité enzymatique appropriée, peut êtrec détecté (sur une surface solide ou en solution) par des procédés tels que les suivants, par exemple: (i) détection directe par application d'un substrat approprié dans un système tampon approprié (le substrat peut êtrc synthétique ou naturel. Les substrats synthétiques peuvent êtrc chromogènes (capables de donner des produits colorés solubles ou insolubles) ou fluorigènes (capables de donner des produits fluorescents solubles ou insolubles)); (ii) détection par application d'un substrat plus un mélange de substances chromogènes (l'action sur le substrat donne un produit (intermédiaire) qui agit sur la substance chromogène en la transformant en un produit coloré soluble ou insoluble); (iii) détection par des réactions enzymatiques couplées dans lesquelles une seconde enzyme (ou des enzymes) agit sur un produit provenant d'une première enzyme pour donner un produit final détectable (par exemple un produit coloré ou fluorescent soluble ou insoluble); (iv) détection par des procédés à cycles enzymatiques dans lesquels le produit d'une premie enzyme agit comme cofacteur pour un second système enzyme - substrat (le cofacteur peut être régénéré par un troisième système enzymatique, lequel cofacteur pénètre dans le second système enzymatique, etc. Les cycles enzymatiques constituent un procédé d'amplification biochimiquc qui peut permnnettre la détection de très faibles quantités d'une première enzyme). On comprendra que lorsqu'un anticorps bivalent forme un "pont" entre une enzyme immobilisée et une molécule d'enzyme homologue active, la molécule active peut être détectée par tout procédé approprié tel que ceux qui ont été décrits précédemment dans les paragraphes (i) à (iv). On comprendra que, par exemple, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être détecté (par exemple in situ ou après extraction) au moyen d'un procédé enzymologique à l'aide d'une molécule d'enzyme enzymatiquement active appropriée ou à l'aide d'un fragment de molécule d'enzyme enzymatiquement actif approprié. Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé une trousse de test pouvant être utilisée pour identifier une substancc ou un article, ladite trousse de test comprenant des réactifs choisis pour la détection enzymolo- gique d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. A titre d'exemple, les molécules d'enzyme en l'état, des fragments de molécules d'enzyme en l'état, un liant pour une moléculc d'enzyme en l'état ou un liant pour un fragment dmune molécule d'enzyme en l'état, peuvent être utilisés pour marquer une substance ou un article. Ou bien encore, des molécules d'enzyme, des fragments de molécules d'enzyme, un liant pour des molécules d'enzyme ou un liant pour des fragments de molécules d'enzyme peuvent être fixés à un matériau support. Si on le souhaite, plus d'un type de molécule d'enzyme, plus d'un type de fragment de molécule d'enzyme, plus d'un type de liant pour une molécule d'enzyme, plus d'un type de liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, ou tout autre combinaison appropriée de ceux-ci, peuvent être utilisés pour marquer une substance ou un articldc. A titre d'exemple, l'utilisation de plus d'un type de molécule d'enzyme, de plus d'un type de fragment de molécule d'enzyme, de plus d'un type de liant pour une molécule d'enzyme ou de plus d'un type de liant pour un fragment d'une molécule d'enzymc, ou de toute combinaison appropriée de ceux-ci, peut S augmenter la difficulté éprouvée par une personne non autorisée pour mettre en évidence leur présence et/ou leur identité ou pour les détecter. A titre d'exemple, si on le souhaite, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être utilisé en combinaison avec tout autre espèce identifiable appropriée. Ainsi, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être utilisé pour former un premier marqueur, et un autre marqueur ou d'autres marqueurs peuvent être fournis par toute autre espèce identifiable appropriée (par exemple une espèce chimique ou une espèce biochimique ou une entit6 qui donne des espèces identifiables). On comprendra qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, qui peut être détecté, peut être considéré par exemple comme une espèce identifiable. On comprendra que lorsqu'un fragment d'une molécule d'enzyme est une sous-unité d'une molécule d'enzyme, le fragment peut être détectable par des procédés immunologiques. Cependant, une telle sous-unité peut ne pas être détectable par des procédés enzymologiques. Pourtant, par exemple, le fragment peut etre rendu détectable par des moyens enzymologiqucs par addition à la sous- unité d'une autre sous-unité ou d'autres sous-unités de molécule d'enzyme, selon ce qui est approprié. Ainsi, l'addition d'une sous-unité ou de sous-unités de molécule d'enzyme peut faire partie d'un procédé de détection. On comprendra également qu'une molécule d'enzyme ou un fiagment d'une molécule d'enzyme qui a une activité enzymatique peut être considéré comme une espèce catalytique du fait qu'une telle molécule d'enzyme ou un tel fragment de molécule d'enzyme peut catalyser une réaction. A titre d'exemple, on peut noter que, facultativement, pour certaines applications, il peut être possible de faire en sorte qu'un marqueur soit fixé à un constituant d'une composition (par exemple un constituant d'une composition de véhicule d'encre). Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé une substance marquée ou un article marqué avec un marqueur qui est une molécule d'enzyme, un fragment d'une moléculc d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. On comprendra également qu'un marqueur peut être détecté qualita- tivemcnt ou quantitativement et qu'une détection quantitative (qui peut être considérée par exemple comme une mesure) peut être réalisée en combinaison avec une courbe d'étalonnage. La détection d'un marqueur peut être réalisée par toute technique appropriée telle que celles qui sont connues dans le domaine des analyses de liaison à des protéines (par exemplc analyse immunologiquc et analyse non immunologiquc) et dans le domaine de l'enzymologie (par exemple systèmes à base de substrat). A titre d'exemplc, on comprendra que des espèces identifiables utilisées séparément peuvent aussi être détectées in situ ou après extraction, selon ce qui est approprié. Le terme "anticorps" tel qu'il est utilisé ici englobe les anticorps complets et les fragments d'anticorps tels que Fab et (Fab)2 de sorte que le terme anticorps tel qu'il est utilisé ici englobe les anticorps complets et les fragments d'anticorps selon ce qui est approprié. On comprendra que les anticorps peuvent être préparés par tout procédéi approprié, par exemple par les proc6d/s connus pour la production d'anticorps polyclonaux ou monoclonaux. Ainsi, par exemple, un liant comprenant un anticorps dirigé contre une molécule d'enzyme ou un liant comprenant un anticorps dirigé contre un fragment d'une molécule d'enzyme peut être préparé par production d'anticorps dirigés respectivement contre une molécule d'enzyme ou contre un fragment d'une molêculc d'enzyme. On comprendra d'après ce qui précède que toute molécule d'enzyme appropriée ou tout fragment approprié de molécule d'enzyme peut être utilisé selon la présente invention. Lorsque cela est approprié, il est possible d'utiliser selon la présente invention une enzyme thermophile ou une enzyme qui est active dans des milieux organiques. Lorsqu'un matériau support est utilisé selon la présente invention, il est possible d'utiliser tout mat&ériau support tel que ceux qui sont connus dans la technique. Le polystyrène (qui peut être utilisé sous toute forme appropriée) et la nitrocellulose (qui peut être utilisée sous toute forme appropriée) sont des exemples de matériaux supports. La présente invention peut présenter l'avantage d'utiliser plus d'un procédé de détection (par exemple successivement) dans un processus de détection donné. Egalement, la présente invention peut présenter l'avantage d'une sensibilité de détection élevée grâce à l'utilisation dune combinaison d'une molécule d'enzyme ou d'un fragment de molécule d'enzyme et d'un partenaire de réaction pour celle-ci ou celui-ci, laquelle combinaison a une affinité élevée (à titre d'exemple, des quantités de l'ordre du picogramme peuvent être détectées). * D'après ce qui précède on comprendra qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une mol6cule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, ou tout autre combinaison de ceux-ci, peut être utilisé seul pour réaliser le marquage. Ccpendant, si on le souhaite, une molécule d'enzyme, un fragment d'mne molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme peut être utilisé avec d'autres espèces identifiables (par exemple des espèces identifiables séparées ou celles qui font partie dm'une entité ou d'entités). Ainsi, si on le souhaite, une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme selon la présente invention peut être utilisé avec une ou plusieurs espèces identifiables séparées ou avec une combinaison d'espèces identifiables séparées, par exemple un ligand (antigénique ou non antigénique), un liant (par exemple pour un ligand antigénique ou pour un ligant non antigénique), un ligand "masqué", un acide nucléique, ou une espèce capable de subir une interaction spécifique avec un acide nucléique ou avec une entité qui fournit une multiplicité d'espèces identifiables. On peut citer par exemple la demande en instance de numéro de référence de mandataire P/60090/HRF au sujet des entités qui fournissent une multiplicité d'espèces identifiables concernant le marquage, la demande en instance de numéro de référence de mandataire P/60540/HRF au sujet des ligands "masqués" en ce qui concerne le marquage, la demande en instance de numéro de référence de mandataire HRF/60541/HRF au sujet des ligands et des liants en ce qui concerne le marquage. La présente invention va maintenant être décrite de manière plus détaillée au moyen des exemples non limitatifs suivants: Exemple 1 L'enzyme phosphatase alcaline (EC3.13.1) a été introduite dans les puits d'une microplaque de titrage en différentes quantités et soumise à une détection enzymologiquc. Ainsi, différentes quantités de phosphatase alcaline (S.A. 2290 unités/mg) dans des échantillons de 100 d de solution aqueuse de tampon de revêtement (tétraboratc de sodium 50 mM pH 9,5 contenant 0,5 mM de MgCI2) ont été ajoutées aux puits d'une microplaque de titrage et laissées à la température ambiante pendant 4 h. Les puits ont ensuite été vidés et lavés (3 fois avec du bicarbonate de sodium 100 mM contenant 100 mM de NaCI à 0,05 % de Tween@ ). Par ailleurs, des échantillons ne contenant pas d'enzyme ont été introduits dans certains puits pour former des "témoins". Pour réaliser la détection, une solution de substrat synthétique de phosphatase alcaline a été utilisée. Dans cet exemple, la solution de substrat synthétique de phosphatase alcaline était une solution de sel disodiquc de p-nitro- phénylphosphate (pNPP) (6 mM) dans du tampon diéthanolamine à 10 % (pH 9, 8) contenant 0,5 mM de MgCI2. Ainsi, 100 d de la solution de substrat synthétique de phosphatase alcaline ont été ajoutés à chacun des puits de la microplaque de titrage lavée. On a observé le développement d'une couleur jaune en 3 à 4 minutes. La densité optique (DO) a été lue à 405 nm au bout de 15 minutes. Les résultats sont présentés dans le tableau 1. Tableau 1 Quantité de phosphatase alcaline Densité optique (DO) à 405 nm ajoutée par puits (ng) 3,00 3,00 12,5 2,56 6,25 1,91 3,12 1,65 1,56 1,12 0,78 0,61 0 0,12 De la phosphatase alcaline (EC3.13.1) dans une solution de tampon de revêtement (voir l'exemple 1) (125 mg/ml) a été appliquée (250/d) aux surfaces extemrnes inférieures de récipients en polystyrène à bouchon vissé et a été amenée à sécher à l'air à la température ambiante pendant 16 h. Les surfaces ont ensuite été lavées pour retirer les produits faiblement fixés puis séchées. Une solution de substrat synthétique de phosphatase alcaline a ensuite été appliquée et, en quelques minutes, une couleur bleue a commencé à apparaître et un précipité bleu intense s'est formé. La solution de substrat synthétique de phosphatase alcaline utilisée dans cet cxemplc était une solution à 0,5 mg/ml de sel disodiquc de 5-bromo-4-chloro-3-indolylphosphate (BCIP) dans du tampon diéthanolaminc à 10 % (pH 9,8) contenant 0,5 mM de MgCI2. Exemple 3 Dans cet exemple l'activité enzymatique de la phosphatase alcaline dénaturée a été étudiée. Ainsi, différentes quantités de phosphatase alcaline (EC3.1.3.1) ont été introduites dans les puits d'une microplaque de titrage de la même manière que dans l'exemple 1. Du méthanol (100 d) a ensuite ét ajouté à chacun des puits dans une moitié de la microplaque de titrage et une solution de tampon de revêtement (voir l'exemple 1) a été ajoutée aux puits dans la seconde moitié de la microplaque de titrage. Au bout de 1 heure, à la température ambiante, les puits ont été vidés et lavés trois fois. Puis, une solution de pNPP (voir exemplc 1) (100 sd) a été ajoutée à chacun des puits. On a observé le développement d'une couleur jaune dans les puits dans lesquels du tampon de revêtement avait été introduit initialement, tandis qu'aucune couleur n'a été observée dans les puits traités au méthanol. La densité optique a été mesurée à 450 nm au bout de 15 min et les résultats sont présentés dans le tableau 2. La colonne A indique les résultats concernant les puits traités au méthanol et la colonne B indique les résultats concernant les autres puits. Tableau 2 Quantité de phosphatase alcaline Densité optique (DO) à 405 nm ajoutée par puits (ng) A B 0,05 3,00 0,05 2,93 12,5 0,06 2,46 6,26 0,05 1,95 3,12 0,06 1,34 1,65 0,06 0,97 0,78 0,06 0,54 ExuMple 4 De la phosphatase alcaline (EC3.1.3.1) a été ajoutée aux puits d'une microplaque de titrage comme dans l'exemple 3. La moitié des puits ont été traités avec du méthanol et l'autre moitié ont été traités avec du tampon comme dans l'exemple 3. Pour étudier l'activité de liaison aux anticorps de la phosphatase alcaline dans les puits, on a utilisé un anticorps de lapin antiphosphatase alcaline dilué de manière appropriée dans du tampon de liaison (e tampon de liaison était du tampon Tris-HCI 50 mM (pH 7,4) contenant 0,1 M de NaCI, 0,2 % de gélatine, 0,001 % de thimérosal, 10 mg/ml de SAB (sérum albumine bovine) et 20 mg/l de rhodamine base B.). L'anticorps a été préparé selon des processus g6n6raux connus pour produire des anticorps qui ont été adaptés pour produire l'anticorps parlticulier requis. Le signal a été développé avec un conjugu6 anticorps de chèvre anti- lapin-peroxydase de raifort (HRR) (Sigma) et une solution de substrat de peroxydase (0,5 mg/ml de sel disodique de l'acide 2,2'-azino-bis(3-éthylbenzo- thiazoline-6-sulfonique (ABTS) dans du tampon ac6tate de sodium/acide citrique mM, pH 4,1 contenant 60id/100 ml de peroxyde dydrogène à 34 % v/v) selon des processus connus. Une couleur est apparue dans tous les puits. La densité optique a ét6 lue à 405 nm au bout de 30 min et les résultats sont présentés dans le tableau 3 dans lequel la colonne A indique les r6sultats concernant les puits trait6s au méthanol et la colonne B indique les résultats concernant les autres puits. Tableau 3 Quantit6 de phosphatase alcaline Densit6 optique (DO) à 405 nm ajoutée par puits (ng) A B 2,96 3,00 2,13 2,56 12,5 1,87 2,12 6,26 1,12 1,32 3,12 0,86 0,97 1,65 0,45 0,65 0,78 0,24 0,36 Une comparaison des r6sultats obtenus dans les exemples 3 et 4 r6vèle que, bien que la phosphatase alcaline dénaturé par le méthanol présente peu ou pas d'activit6 enzymatique (colonne A, tableau 2), la phosphatase alcaline dénaturée conserve une activité de liaison aux anticorps. Exemple 5 De la phosphatase alcaline (EC3.13.1) a été introduite dans les puits d'une microplaque de titrage comme dans l'exemple 1, traitée au méthanol (voir exemple 3) puis mise à réagir avec un anticorps de lapin antiphosphatase alcaline (voir exemple 4). Le sérum provenant d'un lapin non immunisé a été ajouté à une série de puits témoins contenant les mêmes quantités de phosphatase alcaline que les autres puits et traités au méthanol comme les autres puits. Après un lavage, un excès de phosphatase alcaline native (c'est-à-dire enzyme active non dénaturée) a été ajouté aux puits (dans Tris 50 mM (pH 7,8) contenant 10 mg/ml de SAB et 0,5 mM de MgC12) qui ont été laissés au repos pendant 30 min. A la suite d'un lavage pour retirer l'enzyme non liée, une solution de BCIP (voir exemple 2) a été ajoutée aux puits et on a noté que, dans les puits qui avaient été traités avec l'anticorps de lapin anti-phosphatase alcaline, il est apparu une couleur bleue (dont l'intensité était liée à la quantité de phosphatase alcaline introduite dans les puits) alors que les puits témoins ne présentaient aucun développement de couleur. Dans les puits traités avec l'anticorps de lapin anti-phosphatase alcaline, l'anticorps s'était lié à la phosphatase alcaline adsorbée et à l'enzyme active en fixant ainsi l'enzyme active à la microplaque de titrage de manière qu'elle puisse être détectée au moyen d'une solution de substrat. Excmhl 6 De la phosphatase alcaline (EC3.13.1) a été ajoutée à une composition de véhicule d'encre du commerce et mélangée pour produire un mélange homogène comprenant une composition de véhicule d'encre marquée contenant environ 50 /g/ml de phosphatase alcaline. La composition de véhicule d'encre à laquelle la phosphatase alcaline a été ajoutée était un liquide contenant un mélange de substances trouvées norma- lement dans les formulations d'encre à séchage rapide, à l'exception d'un colorant. Cinquante microlitres de composition de véhicule d'encre marquée ont été ajoutés aux puits d'une microplaque de titrage et amenés à sécher à 3TC dans un incubateur pendant 2 h. Certains puits de la microplaque de titrage ont été additionnés uniquement de composition de véhicule d'encre non marquée (en la même quantité que la composition de véhicule d'encre marquée contenue dans les autres puits) et traités de la même manière que les puits contenant la composition de véhicule d'encre marquée, pour donner des puits témoins. Un anticorps de lapin anti-phosphatase alcaline (100/A), dilué de manière approprié dans du tampon de liaison (voir l'exemple 4), a été ajouté à tous les puits. Au bout de 30 min de repos à la température ambiante, les puits ont été vidés et lavés trois fois. Un conjugué anticorps de chèvre antilapin - peroxydase de raifort (100 l) a été ajouté aux puits et, au bout de 1 h d'incubation, les puits ont été lavés (trois fois) et une solution de substrat de peroxydase (voir exemple 4) a été ajoutée. Au bout de 10 min de réaction, on a observé l'apparition d'une couleur dans les puits dans lecsquels la composition de v6hicule d'encre marquée avait été introduite initialement. Au bout de 30 min de réaction, les solutions réactionnclles résultantes ont 6té transférées dans une microplaque de titrage non utilisée et la densité optique (DO) a été mesurée à 405 nm. La DO était de 0,65 pour les puits dans lesquels la composition d'encre marquée avait été introduite initialement et de 0,16 pour les puits t6moins. Exemple 7 Une composition de véhicule d'encre du commerce a été appliquée à des boîtes de Petri en matière plastique et amenée à sécher à l'air pour former des couches fixées à la surface des boîtes de Petri. De la phosphatase alcaline (EC.13.1) (200 #l à 125 ngWml) dans un tampon de revêtement (voir exemple 1) a été appliqu6e aux couches d'encre sèche et amenée à sécher à l'air à hla température ambiante. Puis, les boîtes de Petri ont été placées dans un incubateur à 37C pendant 10 min. Une solution de pNPP (voir exemple 1) a été appliquée auxsurfaces des boîtes de Petri auxquelles la composition de véhicule d'encre et l'enzyme avaient 6té appliqu6es. Une couleur jaune a 6té observée immédiatement dans les boîtes. Cet exemple démontre que les couches de composition de véhicule d'encre sont capables d'adsorber des espèces enzymatiques actives et que les espèces enzymatiques restent actives après le séchage. REVENDICATONS 1. Procédé utilisablc pour le marquage d'unem substance ou d'un article, caractéris6 en ce qu'il comprend la fourniture à une substance ou un article d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. 2. Procédé utilisable pour identifier une substance ou un article, caractérisé en ce qu'il comprend la fourniture à une substance ou un article d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une mol6cule d'enzyme et l'accomplissement dm'une étape de détection pour établir la présence ou l'absence d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. 3. Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce qu'une substance ou un article est uni d'une molécule d'enzyme liée à un liant pour une molécule d'enzyme, ou en ce qu'une substance ou un article est muni d'un fragment dm'une molécule d'enzyme liée à un liant pour un fagment d'une moléculc d'enzyme. 4. Procédé utilisable pour identifier une substance ou un article, caractérisé en ce qu'il comprend l'accomplissement d'une étape de détection pour établir la présence ou l'absence d'une molécule d'enzyme, d'un fragment d'une molécule d'enzyme, d'un liant pour une molécule d'enzyme ou d'un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, caractéris en ce qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une moléculc d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme est détect6 par détection immunologique. 6. Procéd6 selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, caractérisé en ce qu'une molécule d'enzyme ou un fragment d'une moléculc d'enzyme est détecté par un procéd6 enzymologique. 7. Procédé selon la revendication 6, caractéris6 en ce qu'une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme est détect6 par application d'une substance, application d'un substrat et d'une substance chromogène, d6tection par des r6actions enzymatiques couplées ou détection par un proc6dé à cycles enzymatiques. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2, 3, 4, 6 et 7, caractérisé en ce que la détection d'une molécule d'enzyme ou d'un fragment d'une molécule d'enzyme comprend l'utilisation d'un anticorps ayant deux sites de liaison et l'utilisation d'une molécule d'enzyme enzymatiquement active. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 8, caractérisé en ce qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme est détecté in situ tout en étant toujours fixé à un article. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 8, caractérisé en ce qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme est extrait d'une substance ou d'un article avant d'être soumis à une détection. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 8 ou 10, caractérisé en ce qu'un liquide ou un échantillon de liquide contenant une entité et soumis à une détection par formation d'une couche mince de liquide ou de l'échantillon de liquide sur une surface solide appropriée et séchage de la couche mince pour former sur la surface solide une couche mince de produit destiné à être soumis à une détection. 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou 5 à 8 ou 10 ou 11, caractérisé en ce qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme est incorporé dans une substance. 13. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou 5 à 9 ou 11, caractérisé en ce qu'une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme est appliqué à un article. 14. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou 5 à 13, caractérisé en ce qu'une substance ou un article qui est marqué est un parfum, un billet de banque, une oeuvre d'art, un document de valeur réalisable, un article de mode ou de haute couture, une montre, un appareil électrique, un livre, un passeport, un médicament, un produit de grande valeur, un article à grand volume de vente, un article de prestige de grande valeur, une formulation chimique, de la viande, un produit à base de viande ou un emballage pour produits. 15. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou 5 à 14, caractérisé en ce que le marquage d'une substance ou d'un article est accompli par mélange d'un marqueur avec une encre ou une composition de véhicule d'encre et impression sur un article, application d'une solution de marqueur directement sur un article, immersion d'une partie d'une surface d'un article dans une solution d'un marqueur pour fixer le marqueur à l'article, mélange d'un marqueur avec une matière colorante ou une peinture destinée à être utilisée avec un article ou un emballage, addition d'un marqueur directement à des solutions ou formulations de produits chimiques, mélange d'un marqueur avec une substance adhésive qui peut ensuite être fixé à des étiquettes, des papiers ou des articles, inscription d'un document de certification qui doit accompagner des articles, ou application d'une composition de véhicule d'encre à un article pour former une couche et application d'un marqueur à la couche. 16. Composition utilisable pour le marquage d'une substance ou d'un article, caractérisée en ce qu'elle comprend une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. 17. Composition selon la revendication 16, caractérisée en ce qu'il s'agit d'une composition d'encre, d'une composition de véhicule d'encre ou d'une composition de peinture. 18. Combinaison caractérisée en ce qu'elle comprend un marqueur associé à un agent solubilisant, ledit marqueur étant une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. 19. Combinaison selon la revendication 18, caractérisée en ce que l'agent solubilisant est le polyéthylèneglycol. 20. Combinaison caractérisée en ce qu'elle comprend un marqueur associé à un milieu insolubilisant, ledit marqueur étant une molécule d'enzyme, un fragment d'une molécule d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzyme ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme. 21. Combinaison selon la revendication 20, caractérisée en ce que le milieu insolubilisant est constitué par des microparticules. 22. Trousse de test utilisable pour identifier une substance ou un article, caractérisée en ce qu'elle comprend des réactifs choisis pour la détection enzymologique d'une enzyme ou d'un fragment d'une enzyme. 23. Trousse de test utilisable pour identifier une substance ou un article, caractérisée en ce qu'elle comprend un liant pour une molécule d'enzyme, un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme, une molécule d'enzyme ou un fragment d'une molécule d'enzyme. 24. Substance marquée ou article marqué caractérisé en ce que la substance ou l'article est marqué avec un marqueur qui est une molécule d'enzyme, un fragment d'une moléculc d'enzyme, un liant pour une molécule d'enzymc ou un liant pour un fragment d'une molécule d'enzyme.