Brevet FR2701027A1 — publié le 19940805

PROCEDE DE SYNTHESE AMELIORE DU 9-(p-D-ARABINOFURANOSYL)ADENINE 5'-PHOSPHATE La présente invention a pour objet un procédé amélioré permettant la production de 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate. Le 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate est utile en tant qu'agent médicinal, notamment en tant qu'agent anti-viral actif contre l'herpès virus simplex, comme cela est décrit dans US-3.703.507. Ce dérivé est également connu en tant que Vira-MPX ou monophosphate de vidarabine. Malgré que des publications antérieures décrivent le 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine [Vidarabine, également connu sous le nom de Vira-A] en tant qu'agent antiviral [cf.Adams HG, et al, Journal 0f Infectious Diseases 1976; 133 (Suppl.):A151-A159, et Pharmacology & Therapeutics 1980;8:143-171 par Buchanan RA et Hess Fj, l'intérêt médical porté à la Vidarabine et à ses dérivés reste important; ainsi par exemple, dans une étude récente [Whitley R, et al dans New England Journal 0f Medicine 1991; 32(7):444-9] comparant la Vidarabine et l'Acyclovir ont montré que "au cours d'études réalisées en aveugle, de façon statistique et dans plusieurs centres, aucune différence nwest apparue dans les résultats obtenus, entre la Vidarabine et l'Acyclovir lors du traitement d'une infection néonatale d'un herpes virus simplex". US-3 703 507 décrit un procédé de préparation du 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate, par réaction de 9-(P-D-arabinofuranosyl)-adénine avec de l'oxychlorure phosphoreux dans de l'acide acétique glacial, en présence d'une base correspondant à une amine tertiaire. US-3 413 282 décrit un procédé de conversion de la nucloside en un nucléotide 5'-phosphate par réaction avec de l'oxychlorure phosphoreux ou du chlorure de diphosphoryl (tétrachloropyrophosphate) en présence d'un solvant à base de trialkyl phosphate. Le produit réactif est hydrolysé, neutralisé, et le nucléotide 5'-phosphate est isolé par des techniques d'absorption et d'élution nécessitant une résine échangeuse d'ions ou de carbone activé. Les procédés décrits dans SS7337637 et 3 413 282 comprennent des étapes de traitement et des manipulations longues indésirables ainsi que l'emploi de solvants d'élution et de milieux de séparation coûteux. US-4 123 609 décrit un procédé de séparation de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate. Le procédé comprend la réaction de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine avec un agent phosphorylant tel que de ltoxyhalogénure de phosphore, en particulier oxychlorure de phosphore, oxybromure de phosphore et chlorure de diphosphoryle en présence d'un solvant à base de trialkylphosphate. Puis, le mélange réactionnel est hydrolysé; le pH du mélange d'hydrolyse aqueux est ajusté à une valeur basique pour provoquer cette séparation en une phase liquide aqueuse et en une phase liquide nonaqueuse.Le solvant à base de trialkyl phosphate est éliminé du mélange aqueux, le pH du mélange aqueux résiduel étant maintenu à une valeur à laquelle l'ester produit est insoluble, de façon à ce qu'il précipite, sous la forme d'une phase solide, à partir du mélange aqueux; le produit est alors isolé. Bien que ce procédé conduise au 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate désiré, il est difficile à mettre en oeuvre à une grande échelle. Les rendements sont modestes, que ce soit à l'échelle industrielle ou à une grande échelle, en fait d'environ 55%, et le produit formé est un solide cireux et/ou gommeux qui est difficile à isoler et qui ne peut être facilement séparé du sel organique produit que par chromatographie par échange d'ions. La présente invention a pour objet un procédé amélioré, permettant de préparer du 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate. Le procédé selon la présente invention correspond à un procédé adaptable à grande échelle et plus spécifique, qui permet la production de 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate, et qui conduit à des rendements plus élevés que ceux qui sont obtenus avec les procédés précédents. Ainsi, selon un premier aspect de la présente invention celle-ci a pour objet un procédé amélioré de préparation de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate: qui comprend: - étape (a): séchage du monohydrate de 9-(ss-D-arabino- furanozyl)-adénine: étape (b): addition de triéthyl phosphate; - étape (c): refroidissement et addition d'une solution d'oxychlorure phosphoreux dans du dichlorométhane; étape (d): hydrolyse du mélange réactionnel de l'étape (c) avec de liteau; et étape (e): séparation des phases aqueuses et non-aqueu ses formées et addition de la phase aqueuse à une solu tion d'oxyde de propylène dans de l'éthanol pour conduire à du 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine 5' phosphate cristallin. Selon un second aspect, la présente invention a pour objet un procédé amélioré permettant la purification de 9-(P-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'phosphate préparé selon le procédé correspondant au premier aspect de la présente invention, qui comprend: - étape (a): mise en suspension de 9-(p-D-arabinofurano- syl)-adénine 5-phosphate dans de l'eau et ajustement du pH à environ 6, par addition d'une solution aqueuse d'hydroxyde d'ammonium à 28t; étape (b): filtration pour éliminer les matières parti culaires; - étape (c): ajustement du pH à environ 2,5 à l'aide d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 37*; et - étape (d): addition d'éthanol anhydre pour obtenir du 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate cristal lin. lln. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Le procédé selon la présente invention correspond à un procédé aisemment réalisable, économique, amélioré et nouveau, permettant de préparer du 9-(ss-D-arabinofuranosyl)- adénine 5'-phosphate. Le produit de départ correspondant au monohydrate de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine est séché sous vide jusqu une teneur en eau inférieure ou égale à 0,1% d'eau. Le nucléoside séché est mélangé avec du triéthylphosphate et le mélange est refroidi sous agitation à une température d'environ -10 C à environ -20 C. Tout en maintenant la température entre environ -25 C et environ 25"C, et de préférence entre -10 C et environ -20 C, une solution d'oxychlorure phosphoreux dans du dichlorométhane entre environ -10 C et environ 25"C est ajoutée. La quantité en kilogrammes d'oxychlorure phosphoreux utilisé est calculée par multiplication de la quantité en kilogrammes de 9-(P-D-arabinofuranosyl)- adénine par un facteur de 0,717 + 5%. La quantité en kilogrammes de dichlorométhane est calculée par multiplication de la quantité en kilogrammes de 9-(p-D-arabinofuranosyl)- adénine anhydre par un facteur de 2 à 3. L'agitation est poursuivie jusqu'à ce qu'un échantillon en cours de traitement indique que moins de 3% de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adé- nine n'ayant pas réagi sont présents. L'échantillon en cours de traitement est traité de la façon suivante: 1 ml d'échantillon est ajouté à 100 ml d'eau et mélangé de façon homogène pendant au moins 10 minutes. Un échantillon de 20 p1 de ce mélange est injecté dans une colonne de chromatographie liquide haute-pression (HPLC) Conditions et colonne HPLC - colonne: colonne Alltech nucléoside-nucléotide 7p, C18, 25 cm de haut. - conditions: 254 nm, 1,00 ml/min en utilisant le gra dient décrit ci-dessous. - gradient: de O à 8 minutes, maintien du solvant B à une quantité de 15%; de 8 à 15 minutes; augmentation de la quantité de solvant B de 15 à 22%; de 15 à 40 mi nutes, maintien de la quantité de solvant B à 22%; en 40 à 45 minutes, diminution de la quantité de solvant B de 22 à 15%. - solvant A: eau 60 mmol de NH4H2PO4, 5 mmol de phosphate de tetrabutyl-ammonium. - solvant B: méthanol, 5 mmol de phosphate de tétrabutyl ammonium. Le mélange est complètement phosphorylé et chargé dans une suspension agitée d'eau et de glace avec refroidissement supplémentaire pour maintenir la température du nouveau mélange entre environ 0 C et environ 25"C (une température d'environ 15 à environ 20"C est préférée). Après la fin du mélange, l'agitation est poursuivie pendant environ 0,5 heure à environ 1,5 heure, et la température du mélange est maintenue entre environ 20"C et environ 25"C. Du dichlorométhane supplémentaire est chargé sous agitation, l'agitation est stoppée et la couche de dichlorométhane est séparée.La température de la couche aqueuse est contrôlée entre environ 20 et environ 25"C. Une quantité d'oxyde de propylène en excès par rapport à l'acide chlorhydrique qui devrait théoriquement être produite par hydrolyse totale de l'oxyde phosphoreux utilisé dans la réaction de phosphorylation, est dissoute dans de méthanol sous agitation vigoureuse, et la température est ajustée entre environ 20"C et environ 25 OC. La couche aqueuse contenant le 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate est ajoutée à la solution d'oxyde de propylène, tout en maintenant la température entre environ 20 C et environ 25"C par refroidissement.Le produit désiré, correspondant au 9-(P-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate cristallise doucement à partir du mélange éthanol/eau, et peut être isolé par filtration ou centrifugation. Après séchage sous vide à environ 40 + 5"C pendant environ 24 à environ 48 heures, on obtient avec un rendement élevé un produit qui répond généralement à toutes les exigences. De plus, le 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate, obtenu à partir de ce procédé, peut être davantage purifié par mise en suspension du composé dans l'eau, sous agitation, entre environ 20 et environ 25"C. Le pH est ajusté à une valeur de 6,0 + 0,1 avec une solution aqueuse d'hydroxyde d'ammonium à 28%, la température de la réaction étant maintenue à une valeur inférieure à environ 25"C. L'agitation se poursuit jusqu'à ce qu'une réaction sensiblement totale soit obtenue. La solution est filtrée sur un filtre présentant des mailles de 0,45 p, de façon à éliminer toutes matières particulaires ou trouble.Le pH du mélange du produit filtré est ajusté à l'aide d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 37% sous agitation, à un pH de 2,5 + 0,1, la température étant maintenue à une valeur comprise entre environ 20 et environ 25"C. A cette solution sous agitation, on ajoute un volume d'éthanol anhydre égal au volume total d'eau qui a préalablement été ajoutée (eau de suspension + eau présente dans la solution aqueuse d'hydroxyde d'ammonium à 28% et d'eau présente dans la solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 37%) + 5%. L'agitation se poursuit alors que le 9- ( p-D-arabinofuranosyl ) -adénine 5'-phosphate cristallise et la température est maintenue entre environ 15"C et environ 25"C pendant une période d'environ 24 à environ 48 heures.Le produit est isolé par filtration ou centrifugation, puis il est lavé avec de méthanol anhydre. Le 9-(p-D-arabinofura- nosyl)-adénine 5'-phosphate est séché sous vide à environ 40 + 5"C jusqu'à ce qu'un test du solvant résiduaire montre une quantité d'éthanol inférieure ou égale à 1,0% et qu'un test de Karl Fischner indique une teneur en eau inférieure ou égale à 7,0* (H20). L'utilisation d'oxyde de propylène pour éliminer ltex- cès d'acide chlorhydrique est crucial au succès du procédé. L'utilisation de bases telles que celles qui sont utilisées dans les procédés de la littérature antérieure, par exemple hydroxyde de sodium, hydroxyde de potassium ou hydroxyde d'aluminium conduisent à un produit qui ne peut être facilement purifié du chlorure de sodium résultant, sans avoir recours à une chromatographie par échange d'ions. L'utilisation d'oxyde d'éthylène, d'oxyde de propylène et d'oxyde de butylène en tant qu'agents de fixation (scavengers) de l'acide chlorhydrique a été décrite (US-4 767 873 et 4 814 407 et dans CA-734 021). Toutefois, il a été décrit que ces matières à base d'oxydes d'hydroxyalkylate contenant des groupes OH, NH, et/ou NH2. Les catalyseurs basiques ont été utilisés pour accélérer la vitesse de réaction et pour obtenir des rendements élevés, mais ils ne sont pas nécessaires à la réalisation de la réaction (GB-1 082 673A et 1 504 432A; JA-89 013 484B; et DE-219 204 (publié)). Ainsi, il a été mis en évidence, de façon surprenante et inattendue, que l'oxyde de propylène pouvait être utilisé en tant qu'agent de fixation (scavenger) de l'acide chlorhydrique dans la préparation de composés comprenant des fonctionnalités polyhydroxyles et amines; c'est-à-dire du 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate, sans formation de sous-produits indésirables résultant de l'hydroxypropyla- tion par l'oxyde de propylène. EXEMPLE 1 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate 2,5 kg de monohydrate de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adé- nine sont séchés dans un séchoir à plateau sous vide à 90 i 5"C et sous une pression de 635 à 711,2 mm de mercure (Hg) (26 à 28 inches) jusqu'à ce que l'analyse selon la' mé- thode de Karl Fischer indique une teneur en eau inférieure ou égale à 0,1%. Le calcul suivant est réalisé pour calculer la quantité d'oxychlorure phosphoreux (POC13) requise, soit: 2,4 kg (poids net) de 9-(p-D-arabinofuranosyl)-adénine x 0,717 = 1,72 kg de POCl3. Le 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine est chargé dans un appareil distillé revêtu de verre de 88,20 1 (20 gallon); ensuite, 47 kg de triéthylphosphate sont chargés dans le même appareil à distiller, et une atmosphère inerte d'azote (N2) de 0,34 bar (5 psig) est appliquée à l'appareil à distiller scellé (pour exclure l'humidité atmosphérique tout en refroidissant le contenu de l'appareil à distiller). Le mélange est agité et refroidi à une température comprise entre -15 et -20 C. Le nombre de kilogrammess de POCl3 tel que calculé, soit 1,72 kg, est mélangé sous N2 avec 6,5 kg de dichlorométhane (CH2C12).La solution de POC13/CH2C12 qui peut être prérefroidie entre -15 C et -lOO0C, est refroidie à une température de -15 C à O"C et introduite par pompe dans l'appareil à distiller de 88,20 1 (20 gallons) sous atmosphère inerte selon un débit de 50 + 10 ml par minute, tout en maintenant la température du mélange réactionnel entre -15 et -20 C, par refroidissement. La dernière partie de la solution de POCl3/CH2C12 est rincée dans le réacteur avec 0,5 kg de dichlorométhane. L'agitation est poursuivie jusqu a ce qu'un échantillon en cours de traitement indique que moins de 3% de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine n'ayant pas réagis sont présents.L'échantillon en cours de traitement est traité de la façon suivante: 1 ml d'échantillon est ajouté à 100 ml d'eau et mélangé de façon homogène pendant au moins 10 minutes. Un échantillon de 20pl obtenu à base de ce mélange est injecté dans une colonne de chromatographie liquide hautepression (HPLC) Conditions et colonne HPLC - colonne: colonne Alltech nucléoside-nucléotide 7p, C18, 25 cm de haut. - conditions: 254 nm, 1,00 ml/min en utilisant le gra dient décrit. - gradient: de O à 8 minutes, maintien du solvant B à une quantité de 15%; de 8 à 15 minutes, augmentation de la quantité de solvant B de 15 à 22%; de 15 à 40 minu tes, maintien de la quantité de solvant B à 22g; de 40 à 45 minutes, diminution de la quantité de solvant B de 22 à 15%. - solvant A: eau 60 mmol de NH4H2PO4, 5 mmol de phosphate de tétrabutyl - ammonium. - solvant B: méthanol, 5 mmol de phosphate de tétrabutyl ammonium. Lorsque les tests réalisés en cours de fabrication montrent que moins de 3,0 de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adé- nine sont présents, le mélange est versé dans un mélange sous agitation constitué de 16 kg d'eau déminéralisée et de 16 kg de glace, avec refroidissement pour maintenir la température à une valeur de 15+2 C. On laisse le mélange se réchauffer à une température de 20 à 25"C, lorsque l'addition est terminée, et il est agité pendant 45 à 60 minutes. 53 kg de dichlorométhane sont alors ajoutés, et le mélange est agité vigoureusement pendant 30 minutes. L'agitateur est éteint, on laisse les couches se séparer pendant 30 minutes, et la couche de dichlorométhane est éliminée. Une autre addition de 13,8 kg de dichlorométhane est réalisée.Le mélange est agité vigoureusement pendant 30 minutes, on laisse les couches se séparer, et la couche de dichlorométhane est éliminée. La couche aqueuse est filtrée sur un filtre présentant des mailles de 0,45 p, de façon à éliminer toute matière particulaire, et le filtre est lavé avec deux litres d'eau déminéralisée qui sont ajoutés au filtrat.Dans un réacteur revêtu de verre de 220,5 1 (50 gallons), 2,3 kg d'oxyde de propylène et 103 kg d'éthanol 2B anhydre sont chargés, agités vigoureusement, et la température du mélange est maintenue à une valeur de 20 à 25"C. La solution aqueuse des produits provenant de l'appareil à distiller revêtu de verre de 88,20 1 (20 gallons) est pompée à travers un filtre comportant des mailles de 0,45 p dans la solution constituée d'oxyde de propylène/éthanol sous forte agitation, la température étant maintenue entre 20 et 25"C. Le temps nécessaire est approximativement de 50 minutes à cette échelle et avec cet équipement. L'agitation est poursuivie tandis que le produit cristallise sur une période de 24 h.Le 9-(ss-D- arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate est isolé par centrifugation puis lavé avec 20 kg d'éthanol 2B anhydre. Le solide cristallin est séché autant qu'il est possible par centrifugation, puis il est transféré dans des plateaux à revêtements multiples puis séché dans un sécheur à plateau sous vide à une température de 40"C i 5"C sous un vide de 660,4 à 711,2 mm de Hg (26 à 28 inches de Hg), jusqu a ce que l'analyse d'un échantillon par le test de Karl Fischer indique une teneur en eau inférieure à 7,0* et que l'analyse montre que le solvant résiduel à savoir l'éthanol est présent en une quantité inférieure à 1,0%.On obtient 2,95 kg de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'phosphate avec une bonne pureté, ce qui correspond à un rendement de 98% (essai contre la Vidarabine: 83,73% poids/poids; essai contre un étalon de référence de 9- ( p-D-arabinofuranosyl ) -adénine 5'phosphate = 85,24% poids/poids). Si une plus grande pureté est nécessaire, le 9-(ss-D- arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate, préparé parle procédé ci-dessus, peut être davantage purifié de la façon suivante: 2,5 kg de 9- ( p-D-arabinofuranosyl ) -adénine 5'-phosphate sont chargés dans un appareil à distiller revêtu de verre ayant u e capacité de 220,5 1 (50 gallons) maintenus sous atmosphère inerte puis on charge 30 kg d'eau déminéralisée. L'agitateur démarre, et la température du mélange est ajustée à une valeur comprise entre 20 et 25 C. Une solution d'hydroxyde d'ammonium à 25% est ajoutée, jusqu'à ce que le pH du mélange atteigne une valeur de 6,0 + 0,1, la température étant maintenue à une valeur inférieure à 25"C. L'agitation se poursuit jusqu ce que la solution soit pratiquement totale. La solution est filtrée sur un filtre présentant des mailles de 0,45 p, puis le filtre est rincé avec 5 kg d'eau déminéralisée. Tout en maintenant la température du mélange entre 20 et 25"C par refroidissement, le pH du mélange du produit aqueux est ajusté à 2,5 + 0,1 à l'aide d'une solution aqueuse filtrée d'acide chlorhydrique à 37%. A une vitesse de 0,5 à 1 1/minute, on charge 28 kg d'éthanol 2B anhydre filtré dans le mélange aqueux de produit maintenu sous agitation. Lorsque la cristallisation commence, l'agitation est poursuivie, et la température est maintenue entre 15 et 25"C pendant une période de 24 à 48 heures. Le produit cristallin est isolé par centrifugation et le produit est lavé à l'aide de 20 kg d'éthanol 2B anhydre. Le solide cristallin est séché autant qu'il est possible par centrifugation, puis transféré sur des plateaux à revêtements multiples et séché dans un séchoir à plateau sous vide, à une température de 40*5 C sous un vide de 660,4 à 711,2 mm de mercure (26 à 28 inches de Hg) jusqu'à ce que les résultats de l'analyse de Karl Fischer montrent que la teneur en eau est inférieure à 7 et que l'analyse du solvant résiduel montre que la teneur en éthanol est inférieure à 1,0%. On obtient 1,76 kg de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)- adénine 5'-phosphate hautement pur (rendement à 70%) (test contre Vidarabine = 88,38% poids/poids, non corrigé pour le solvant, test contre étalon de référence du produit = 94,81 poids/poids). REVENDICATIONS 1.- Un procédé de préparation de 9-(ss-D-arabinofura- nosyl)-adénine, 5'-phosphate: qui comprend: - étape (a): séchage du monohydrate de 9-(ss-D-arabino- furanozyl)-adénine: - étape (b): addition de triéthyl phosphate; - étape (c): refroidissement et addition d'une solution d'oxyde chlorure phosphoreux dans du dichlorométhane; - étape (d): hydrolyse du mélange réactionnel de l'étape (c) avec de l'eau; et - étape (e): séparation des phases aqueuses et non aqueuses formées et addition de la phase aqueuse à une solution d'oxyde de propylène dans de méthanol pour conduire à du 9- ( p-D-arabinofuranosyl ) -adénine 5' phosphate cristallin. 2.- Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le monohydrate de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine de l'étape A est séché jusqu'à une teneur en eau inférieure ou égale à 0,1% d'eau. 3.- Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la quantité d'oxychlorure phosphoreux utilisée dans l'étape C est calculée par multiplication de la quantité de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine anhydre par un facteur de 0,717 + 5%. 4.- Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la quantité de dichlorométhane utilisée dans l'étape C est calculé par multiplication de la quantité de 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine anhydre par un facteur compris entre 2 et 3. 5.- Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que dans l'étape C est ajoutée, entre environ -10 C et environ 25"C, une solution d'oxychlorure phosphoreux dans du dichlorométhane. 6.- Un procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce qu'est ajoutée, entre environ -15 C et environ -20 C, une solution d'oxychlorure phosphoreux dans du dichlorométhane est ajoutée. 7.- Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'hydrolyse dans l'étape (d) est mise en oeuvre entre environ O"C et environ 25"C. 8.- Un procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'hydrolyse est mise en oeuvre à environ 15"C + 2"C et on laisse le mélange se réchauffer à une température comprise entre environ 20"C et environ 25"C. 9.- Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que de l'oxyde de propylène en excès par rapport à l'acide chlorhydrique théorique produit pour l'hydrolyse de l'oxychlorure phosphoreux est utilisé dans l'étape (e). 10.- Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que dans l'étape (e) le 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adé- nine 5'-phosphate cristallin est isolé par filtration ou centrifugation 11.- Un procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate, est isolé par centrifugation. 12.- Un procédé de purification de 9-(p-D-arabinofura- nosyl)-adénine 5-phosphate, préparé selon le procédé de la revendication 1, qui comprend: - étape (a): mise en suspension de 9-(ss-D-arabinofurano- syl)-adénine 5-phosphate dans de l'eau et ajustement du pH à environ 6, à l'aide d'une solution aqueuse d'hydroxyde ammonium à 28t; - étape (b): filtration pour éliminer les matières parti culaires; - étape (c): ajustement du pH à environ 2,5 à l'aide d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 37; et - étape (d): addition d'éthanol anhydre pour obtenir du 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate. 13.- Un procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que dans l'étape (b) la solution est filtrée sur un filtre présentant des mailles de 0,45 p. 14.- Un procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que dans l'étape (d) le 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adé- nine 5'-phosphate cristallin est isolé par filtration ou centrifugation. 15.- Un procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que le 9-(ss-D-arabinofuranosyl)-adénine 5'-phosphate est isolé par centrifugation.