Brevet FR2701952A1 — publié le 19940902

-1 La présente invention concerne de nouveaux dérivés peptidiques de l'angiopeptine, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. L'angiopeptine est un octapeptide amide contenant les acides aminés non naturels 3-( 2-naphtyl)-o-alanine (D-Nal) et D-tryptophane (D-Trp) Cet octapeptide est partiellement cyclique, un pont disulfure relie les deux chaînes latérales des cystéines en position 2 et 7; il répond à la formule: 1 2 3 4 5 6 7 8 H-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH 2 Lundergan et al (Atherosclerosis, 80, 49-55, ( 1989)) ont décrit pour l'angiopeptine un effet antiprolifératif in vivo sur des cellules du muscle lisse vasculaire dans un modèle d'artère carotide du rat impliquant une dessication à l'air de l'endothélium. La demanderesse a découvert que les propriétés pharmacologiques de l'angiopeptine pouvaient être grandement améliorées grâce aux deux modifications structurales suivantes: 1) remplacement du pont disulfure par une liaison amide. 2) optimisation de la taille du cycle grâce au choix de longueur correcte des chaînes latérales des résidus d'acides aminés sur lesquels s'effectue la cyclisation. Le remplacement du pont disulfure par une liaison amide a été guidé par les différences structurales fondamentales de ces deux types de cyclisation: -2- Pont disulfure Liaison amide non planaire libre rotation autour de la liaison sigma liaisons hydrogène impossibles planaire position relative "trans" des substituants liaisons hydrogène possi- bles avec d'autres accep- teurs ou donneurs La taille du cycle entre les positions 2 et 7 est de nature à modifier considérablement sa conformation ainsi que l'orientation des résidus 1 et 8 à l'extérieur du cycle. La demanderesse a découvert que les composés possédant l'effet inhibiteur optimal vis à vis d'une lésion vasculaire proliférative sont ceux dont le cycle admet 22 atomes. Les dérivés de l'invention possèdent donc des propriétés pharmacologiques supérieures aux analogues décrits ou revendiqués à ce jour Notamment, ils inhibent la prolifération myointimale de la carotide de rat in vivo de façon plus efficace que l'angiopeptine ou autres analogues connus. L'invention concerne plus particulièrement de nouveaux dérivés peptidiques répondant à la formule générale (I): 1 2 3 4 5 6 7 8 Rl-Xl-Tyr-D-Trp-Lys-Val-X 2-R 2 (I) dans laquelle: Ri représente un résidu d'acide aminé de configuration L ou D, acétylé ou non, naturel ou non naturel, communément utilisé par l'homme de l'art, -3- R 2 représente un résidu d'acide aminé de configuration L ou D, naturel ou non naturel, communément utilisé par l'homme de l'art et possédant une fonction C-terminale amide, acide libre ou alcool, X 1 et X 2 sont choisis parmi des résidus d'acides aminés permettant une cyclisation par une liaison amide et conférant au cycle ainsi formé un nombre d'atomes égal à 22, Tyr représente le résidu L-Tyrosyle, D-Trp représente le résidu D-Tryptophyle, Lys représente le résidu L-Lysyle, Val représente le résidu L-Valyle, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. Le terme résidu d'acide aminé représente un acide aminé auquel il manque un atome d'hydrogène sur la fonction amine, ou le groupement hydroxyle sur la fonction acide, ou bien auquel il manque à la fois un atome d'hydrogène sur la fonction amine et le groupement hydroxyle de la fonction acide. D'une manière générale, les règles de nomenclature peptidique utilisées dans la présente invention sont conformes aux recommandations de 1983 de l'IUPAC-IUB (Eur J Biochem, 138, 9-36, ( 1984)). Plus précisément, l'invention concerne les composés de formule générale (I) dans laquelle: Rl représente un résidu d'acide aminé de configuration L ou D, dont l'amine terminale peut être acétylée ou non et choisi parmi l'alanine, la cystéine, la glycine, l'histidine, la leucine, l'acide glutamique, la glutamine, l'arginine, l'asparagine, l'acide aspartique, -4- la lysine, la méthionine, la phénylalanine, la proline, la sérine, la thréonine, le tryptophane, la tyrosine, la valine, la naphtylalanine, R 2 représente un résidu d'acide aminé de configuration L ou D, possédant une fonction C-terminale amide, acide libre ou alcool, l'acide aminé étant choisi parmi l'alanine, la méthylalanine, la phénylalanine, la naphtylalanine, l'arginine, l'aspargine, l'acide aspartique, la cystéine, la glutamine, l'acide glutamique, la glycine, l'histidine, la leucine, la lysine, la méthionine, la proline, l'hydroxyproline, la sérine, la thréonine, le tryptophane, la tyrosine, la valine, X 1 et X 2 sont choisis de manière à ce que le cycle des composés de la formule générale (I) contienne 22 atomes, ils sont dépendants et sont choisis parmi les résidus d'acides aminés suivants: -Glu- -Asp- -homo Glu- -Dab- -Orn- -Dpr- -Dab- -Orn- -Dpr- -Glu- -Asp- -homo Glu- -Dab représente le résidu de l'acide L-diaminobutyrique et -Dpr-, le résidu de l'acide L-diaminopropionique, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. -5- Parmi les acides pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif les acides chlorhydrique, bromhydrique, sulfurique, phosphonique, acétique, trifluoroacétique, lactique, pyruvique, malonique, succinique, glutarique, fumarique, tartrique, maléique, citrique, ascorbique, oxalique, méthanesulfonique, camphorique, etc Parmi les bases pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, la tributylamine, la tertbutylamine, etc L'invention s'étend aussi au procédé de préparation des dérivés de formule (I) qui peuvent être obtenus par différentes méthodes telles que la synthèse séquentielle sur phase solide, la synthèse de fragments et leur couplage en solution, la synthèse enzymatique, la synthèse génétique par clonage et expression de gènes dans des bactéries transformées ou par des combinaisons diverses de ces techniques. Les méthodes générales de la synthèse des peptides sur phase solide ont été décrites par B W Erickson et R B Merrifield ("The proteins", Solid-Phase Peptide Synthesis, 3rd edition, Volume II, 257-527, ( 1976)). La synthèse sur phase solide peut se réaliser sur un automate qui effectue de façon répétitive et programmable des cycles de déprotections, couplages et lavages nécessaires à l'introduction séquentielle des acides aminés dans la chaîne peptidique L'acide aminé, de préférence C-terminal, est fixé sur une résine conventionnellement utilisée pour la préparation de polypeptides, de préférence un polystyrène réticulé à l'aide de 0,5 à 3,0 % de divinylbenzène et muni de restes activés tels que le chlorométhylène ou l'hydroxyméthylène qui permettent la fixation covalente du premier acide aminé sur la résine Le choix approprié de la résine permet la fixation d'une fonction C-terminale, acide carboxylique, amide ou alcool. Le choix du site de couplage des fragments est souvent déterminé de façon à minimiser les risques de racémisation Trois sites possibles de couplage non-racémisants sont, par exemple, la fonction C-terminale de la 2-proline, de la 3-hydroxyproline et de la 4-glycine. -6- Les acides aminés sont alors introduits un à un dans l'ordre déterminé par l'opérateur Chaque cycle de synthèse correspondant à l'introduction d'un acide aminé comporte une déprotection, de préférence N-terminale de la chaîne peptidique, des lavages successifs destinés à éliminer les réactifs, un couplage avec activation de l'acide aminé et de nouveaux lavages Chacune de ces opérations est suivie d'une filtration réalisée sur verre fritté incorporé au réacteur dans lequel s'effectue la synthèse. Les réactifs de couplage utilisés sont des réactifs classiques de la synthèse peptidique comme le dicyclohexylcarbodiimide (DCC) et l'hydroxybenzotriazole (HO Bt) ou le benzotriazol-1-yl-oxytris (diméthylamino)phosphonium hexafluorophosphate (BOP) ou encore le diphénylphosphorylazide (DPPA) Des activations par formation d'anhydrides mixtes sont également possibles. Chaque acide aminé est introduit dans le réacteur en excès, par exemple quadruple excès, par rapport au degré de substitution de la résine et en quantité environ équivalente par rapport aux agents de couplage La réaction de couplage peut être vérifiée à chaque étape de la synthèse par le test de réaction à la ninhydrine décrit par E Kaiser et coll (Analyt. Biochem, 34, 595-599, ( 1970)). Après assemblage de la chaîne peptidique sur la résine, un traitement par un acide fort tel que l'acide trifluoroacétique, ou l'acide fluorhydrique en présence d'anisole, d'éthanedithiol ou de 2- méthylindole permet de séparer le peptide de la résine et de libérer éventuellement le peptide de ses groupes protecteurs Le composé est alors purifié par des techniques classiques de purification, notamment chromatographiques. Les peptides de la présente invention peuvent être également obtenus par couplage en solution de fragments peptidiques sélectivement protégés, qui peuvent être préparés soit sur phase solide, soit en solution Les méthodes générales de la synthèse des peptides en solution sont, par exemple, décrites par F M Finn et K Hofmann ("The Proteins", 3rd edition, Volume II, 105-253, ( 1976), "Synthesis of peptides by solution methods"). -7L'emploi des groupes protecteurs et la mise à profit de leur stabilité différentielle est analogue aux méthodes sur phase solide à l'exception de l'attachement de la chaîne peptidique sur la résine Le groupe carboxylique C-terminal est protégé, par exemple, par un ester méthylique ou une fonction amide Les méthodes d'activation lors des couplages sont également analogues à celles employées dans la synthèse sur phase solide. Les composés de l'invention possèdent des propriétés pharmacologiques très intéressantes Les études réalisées sur les produits de la présente invention montrent que ceux-ci permettent de prévenir efficacement in vivo le développement d'une lésion vasculaire sténosante notamment par une activité inhibitrice sur la composante de prolifération des cellules musculaires lisses vasculaires. Ces propriétés permettent l'utilisation des composés de la présente invention comme médicament dans le traitement et la prévention des lésions vasculaires athéroscléreuses et en particulier pour prévenir les resténoses vasculaires après pontage, dilatation vasculaire, notamment coronaire, ou autres formes de reperméabilisation vasculaire, et après transplantation cardiaque. Les produits de l'invention peuvent être également particulièrement utiles pour prévenir et traiter les altérations vasculaires liées à l'hypertension artérielle ou au diabète et notamment les atteintes rétiniennes. L'activité antiprolifératrice des composés peut par ailleurs être utilisée dans le traitement de certains cancers et de certaines maladies dermatologiques comme le psoriasis. La présente invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un composé de formule générale (I) ou un de ses sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques. Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, -8- parentérale, nasale, les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les sachets, les paquets, les gélules, les glossettes, les tablettes, les suppositoires, crèmes, pommades, gels dermiques, les aérosols. La posologie varie selon l'âge et le poids du patient, la nature et la sévérité de l'affection ainsi que la voie d'administration. Celle-ci peut être orale, nasale, rectale ou parenterale D'une manière générale, elle s'échelonne entre 0,2 et 100 mg pour un traitement en une ou plusieurs prises par 24 heures. Les exemples suivants illustrent l'invention et ne la limitent en aucune façon. EXEMPLE 1: H-o-Nal-Glu-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Dab-Thr-NH 2 (pont amide) 2 g d'une résine amide substituée à 0,5 mmoles/g de par la pipéridine à 20 % dans le diméthylformamide proprement dite est alors effectuée selon le protocole résine sont traités (DMF) La synthèse répétitif suivant: N opération Fonction Solvant/Réactif Répétition/temps 4 lavage déprotection déprotection lavage lavage couplage DMF % pipéridine/DMF % pipéridine/DMF DMF dichlorométhane acide aminé protégé activé 2 x 2 min 1 x 5 min 1 x 15 min 3 x 2 min 3 x 2 min 1 x 90 min 9 lavage lavage lavage DMF isopropylique alcool dichlorométhane 3 x 2 min 3 x 2 min 3 x 2 min -9- Les acides aminés protégés ont été introduits dans l'ordre suivant: Fmoc-Thr(But)-OH, Fmoc-Dbu(Boc)-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Lys(Z)-OH, Fmoc-o-Trp-OH, Fmoc-Tyr(But)-OH, Fmoc-Glu(O But)-OH, Fmoc-D-Nal-OH. Les couplages sont effectués par dissolution de 4 équivalents de l'acide aminé protégé, avec 4 équivalents de HO Bt et 4,4 équivalents de DCC Les solvants utilisés sont 30 ml de DMF et 10 ml de dichlorométhane. A la fin des huit cycles correspondant à la fixation séquentielle des huit acides aminés, la résine est traitée par un mélange d'acide trifluoroacétique ( 18 ml), éthanedithiol ( 1 ml) et anisole 1 ml, pendant 4 heures à 30 C Le filtrat et les solvants de lavage de la résine sont réunis et évaporés à sec Le produit obtenu, de formule: Z I Fmoc-o-Nal-Glu-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Dab-Thr-NH 2, est précipité dans l'éther. La cyclisation du peptide est ensuite réalisée en solution dans le DMF, en présence de BOP et de DIPEA Le mélange est laissé sous agitation pendant 12 heures à température ambiante Après évaporation du DMF, l'huile obtenue est purifiée sur colonne LH 20 Le produit cyclisé ainsi obtenu: Z Fmoc-D-Nal-Glu-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Dab-Thr-NH 2, est traité par la pipéridine à 20 % dans le DMF puis soumis à une hydrogénation catalytique dans un mélange de méthanol/eau ( 3/1) Le produit attendu est obtenu après purification par HPLC préparative sur phase inverse (colonne C 18; d = 47 mm, longueur 300 mm) puis lyophilisation. - L'analyse du peptide est réalisée après décomposition de celui-ci en acides aminés par hydrolyse dans de l'acide chlorhydrique 6 N pendant 18 heures à 110 C et dosage quantitatif des acides aminés par HPLC. Compositions en acide aminés: Glu Thr Val D-Nal Lys Tvr Calculé Trouvé 1.04 0.97 0.97 0.95 i.06 1.02 Dab: non déterminé, d- Trp: non déterminé Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 1103. Les exemples suivants sont réalisés selon le même procédé que celui décrit dans l'exemple 1. EXEMPLE 2: EXEMPLE 3: H-Ala-Asp-Tyr-o-Trp-Lys-Val-Orn-Ser-NH 2 I l H-DNal-homo-Glu-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Dpr-Thr-NH 2 1 1 EXEMPLE 4: EXEMPLE 5: H-D-Nal-Dab-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Glu-Ser-NH 2 I I H-Val-Orn-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Asp-Thr-NH 2 EXEMPLE 6: H-D-Nal-Dpr-Tyr-D-Trp-Lys-Val-homo-Glu-Ser-NH 2 I I ETUDE PHARMACOLOGIQUE DES COMPOSES DE L'INVENTION EXEMPLE 7: Effets sur la prolifération myointimale induite par dénudation endothéliale. Des rats Wistar mâles ( 450-500 g, Charles River) sont prétraités par voie sous cutanée pendant les 2 jours précédant la dénudation endothéliale j 1 1 - avec le composé de l'exemple 1 ( 100 pg/kg/jour), ou son véhicule La dose journalière est administrée en deux fois Après 2 jours de prétraitement, la carotide gauche commune est désendothélialisée par 3 passages successifs d'une sonde à embolectomie (Fogarty 2 F, Baxter) et le traitement est poursuivi pendant 5 jours Quatorze jours après la dénudation endothéliale, les rats sont anesthésiés au pentobartital ( 60 mg/kg ip) et les carotides sont fixées sous pression ( 11996 Pa) avant d'être prélevées La partie centrale de chaque artère est divisée en 4 segments qui sont inclus en paraffine Des coupes transversales de 5 pm o 10 non sériées sont ensuite réalisées sur chaque segment et colorées à l'orcéine Les surfaces de la média et de la néointima sont mesurées par analyse d'images (Logiciel Histo, Biocom, Les Ulis) Les résultats sont reproduits dans le tableau I suivant: TABLEAU 1: EFFETS SUR LA PROLIFERATION MYOINTIMALE INDUITE PAR DENUDATION ENDOTHELIALE I/M % NEOINTIMA 1000 xgm 2 VEHICULE VEHICULE 133 13 160 + 18 (n = 11) EXEMPLE 1 ,g/kg sc 75 + 11 (n = 6) Durée du traitement: -2 et + 5 jours après la lésion Mesures effectuées 14 jours après la lésion sur la carotide de rat n = nombre de rats I/M %: rapport Néointima/Média. -12- EXEMPLE 8: Effets sur l'incorporation de l 3 Hl-Thymidine Des rats Wistar mâles de 300 g (Charles River) sont prétraités par voie sous cutanée pendant les 2 jours précédant la dénudation endothéliale avec le composé de l'exemple 1 ( 100 pg/kg/jour), ou son véhicule La dose journalière est administrée en 2 fois Après 2 jours de prétraitement, les animaux sont désendothélialisés selon la méthode suivante Après anesthésie au méthohexital (Brietal, 60 mg/kg ip), une sonde à embolectomie (Fogarty 2 F, Baxter) est introduite dans l'aorte par voie carotidienne La désendothélialisation aortique est réalisée par trois passages successifs de la sonde à ballonnet Le traitement est poursuivi pendant 3 jours. Trois jours après la dénudation endothéliale, les rats sont sacrifiés et l'aorte est prélevée pour la détermination de l'incorporation de l 3 Hl- thymidine L'aorte thoracique est nettoyée des tissus adipeux adjacents dans du Krebs-Henseleit de composition suivante (en mmoles/l): Na Cl: 120; KC 1: 4,8; Ca C 12: 1,8; KH 2 PO 4: 1,4; Mg 504: 1,2; Na HC 03: 25; glucose: 5, et sérum albumine bovine: 10 g/l; p H: 7,4, carbogène La préparation vasculaire est ensuite préincubée à 37 C pendant une heure dans cette solution physiologique, puis transférée dans un KrebsHenseleit de même composition mais enrichi en l 3 Hl-thymidine (activité spécifique: 1,48-2,22 T Bq/mmole) pendant 1 heure à 37 C Une post-incubation d'une heure suit dans un Krebs-Henseleit dépourvu de l 3 Hl-thymidine Après lavage dans un tampon Tris-EDTA (Tris: 10 m M; EDTA: 10 m M; Na Cl: 100 m M) l'aorte est stockée à -20 C Après décongélation, l'intima-média est prélevée, broyée et incubée pendant 30 minutes en présence de pronase (type B, nuclease free, à 4 mg/ml) et de SDS ( 5 mg/ml) L'homogénat est centrifugé à 2250 g pendant 10 minutes à 10 C et le surnageant est divisé en 2 fractions, l'une pour le dosage de l 3 Hl-ADN, l'autre pour le dosage de l'ADN total. Pour le dosage de l 3 Hl-ADN, l'ADN est coprécipité par addition de 13,3 pl de BSA ( 3 mg/ml de Tris-EDTA) et de 1 ml d'acide trichloracétique à 20 % par ml de surnageant Après 30 minutes à 4 C, le précipité est filtré sur -13 - une membrane en nitrocellulose (porosité: 45 em), et la radioactivité est déterminée par un spectrofluorimètre à scintillation liquide La détermination de la quantité d'ADN total est effectuée par spectrofluorimétrie en utilisant comme sonde fluorescente le DA Pl ( 100 ng/ml) qui s'intercale entres les bases A et T de l'ADN La longueur d'onde d'excitation est de 360 nm et celle d'émission de 450 nm La concentration d'ADN est déterminée par rapport à une gamme d'étalon d'ADN, et la quantité d'ADN contenue dans l'aorte est ensuite calculée ainsi que le rapport cpm/gg d'ADN correspondant à l'index de prolifération. Les résultats sont reproduits dans le tableau II: TABLEAU Il: EFFETS SUR L'INCORPORATION DE l 3 Hl-THYMIDINE l 3 Hl THYMIDINE UPTAKE (dpm/ig ADN) % INHIBITION VEHICULE 10116 + 1172 (n = 17) EXEMPLE 1 7568 608 ,g/kg sc (n = 17) Durée du traitement: -2 et + 3 jours après la lésion Mesures effectuées 3 jours après la lésion sur la carotide de rat -14- COMPOSITION PHARMACEUTIQUE EXEMPLE 9: Comprimé: formule de préparation pour 1000 comprimés dosés à 2 mg. Composé de l'exemple 1 2 g Hydroxypropyl cellulose 2 g Amidon de blé log Lactose l Oog Stéarate de magnésium 3 g Tale 3 g -15- REVENDICATIONS 1 Composés de formule (I) R 1 -Xl -Tyr-D-Trp-Lys-Val-X 2-R 2 (I) dans laquelle: R 1 représente un résidu d'acide aminé naturel ou non naturel, de configuration L ou D, acétylé ou non acétylé, R 2 représente un résidu d'acide aminé naturel ou non naturel, de configuration L ou D, possédant une fonction C-terminale amide, acide libre ou alcool, X 1 et X 2 sont choisis parmi des résidus d'acides aminés naturels ou non naturels permettant une cyclisation par une liaison amide et conférant au cycle ainsi formé un nombre d'atomes égal à 22, Tyr représente le résidu L-Tyrosyle, D-Trp représente le résidu D-Tryptophyle, Lys représente le résidu L-Lysyle, Val représente le résidu L-Valyle, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. -16- 2 Composés selon la revendication 1 dans lesquels Xi représente le résidu de l'acide L-glutamique (Glu) et X 2 le résidu de l'acide L-2,4-diaminobutyrique (Dab), leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un uuuu 5 u acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 3 Composés selon la revendication 1 dans lesquels X 1 représente le résidu de l'acide L-aspartique (Asp) et X 2 le résidu de la L-ornithine (Orn), leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 4 Composés selon la revendication 1 dans lesquels Xi représente le résidu de l'acide L-homoglutamique (homo Glu) et X 2 le résidu de l'acide L-2,3-diaminopropionique (Dpr), leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. Composés selon la revendication 1 dans lesquels Xi représente le résidu de l'acide L-2,4-diaminobutyrique (Dab) et X 2 le résidu de l'acide glutamique (Glu), leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 6 Composés selon la revendication 1 dans lesquels Xi représente le résidu de la L-ornithine (Orn) et X 2 le résidu de l'acide L- aspartique (Asp), leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 7 Composés selon la revendication 1 dans lesquels Xi représente le résidu de l'acide L-2,3-diaminopropionique (Dpr) et X 2 le résidu de l'acide L-homoglutamique (homo Glu), leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. -17- 8 Composé selon la revendication l qui est le H-D-Nal-Glu-Tyr-DTrp-Lys-Val-Dab-Thr-NH 2 (pont amide) ses énantiomères, diastéréoisomères et épimères, ainsi que ses sels d'addition à un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable. 9 Procédé de préparation des composés de formule (I) selon la revendication l caractérisé en ce qu'il est effectué sur un automate qui effectue de façon répétitive et programmable des cycles de déprotections, couplages et lavages nécessaires à l'introduction séquentielle des acides aminés dans la chaîne peptidique, l'acide aminé, de préférence C-terminal, étant fixé sur une résine conventionnellement utilisée pour la préparation de polypeptides, le choix de la résine permettant la fixation de la fonction C-terminale souhaitée, en introduisant les acides aminés en excès, par rapport au degré de substitution de la résine et en quantité environ équivalente par rapport aux agents de couplage, un à un, dans l'ordre déterminé par l'opérateur, chaque cycle de synthèse correspondant à l'introduction d'un acide aminé comportant une déprotection, des lavages successifs destinés à éliminer les réactifs, un couplage avec activation de l'acide aminé et de nouveaux lavages, chacune de ces opérations étant suivie d'une filtration réalisée sur verre fritté incorporé au réacteur dans lequel s'effectue la synthèse, puis, les cycles de déprotections, couplages et lavages étant terminés, par traitement par un acide fort en présence d'anisole, afin de séparer le peptide de la résine et de libérer éventuellement le peptide de ses groupes protecteurs, les composés de formule (I) ainsi obtenus sont alors purifiés par des techniques classiques de purification. -18- Compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 11 Compositions pharmaceutiques selon la revendication 10 contenant au moins un principe actif selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, utiles, par leur activité inhibitrice sur la composante de prolifération des cellules musculaires lisses vasculaires, dans le traitement et la prévention des lésions vasculaires athéroscléreuses, dans la prévention des resténoses vasculaires après pontage, dilatation vasculaire, et après transplantation cardiaque et utiles dans la prévention et le traitement des altérations vasculaires liées à l'hypertension artérielle, au diabète ainsi que dans le traitement de cancers et de maladies dermatologiques.