Brevet FR2705566A1 — publié le 19941202

La présente invention a pour objet des compositions pharmaceutiques contenant des macrolides, par exemple des composés de la famille des rapamycines. L'invention concerne en particulier des formulations galéniques qui sont sous forme de micro-émulsions, de préconcentrés de micro-émulsions, d'émulsions ou de pré-concentrés d'émulsions. Le macrolide peut contenir par exemple 1, 2 ou 3 atomes d'oxygène ou d'azote cycliques ou d'autres atomes cycliques en dehors des atomes de carbone. Il peut comporter des chaînes latérales, par exemple sous forme de cycles condensés, ou des substituants, par exemple des groupes oxy. Il peut contenir des doubles liaisons. Il peut contenir par exemple de 15 à 35 atomes cycliques, par exemple des atomes de carbone. La rapamycine est un antibiotique de la classe des macrolides produit par Streptomyces hygroscopicus. On a trouvé qu'elle était pharmaceutiquement utile pour diverses applications, en particulier comme immunosuppresseur dans le traitement et la prévention des rejets de greffes d'organes et des maladies auto- immunes. La rapamycine a la structure suivante: O O(O CHH Ct00 HC 3 t OOCHH3 C HO CH i o CH3 / CH3 OCH3 CHH CH3 C1 OCH3 C1 C1 (40) (Kesseler, H. et coll., Helv. Chim. Acta (1993) 76; brevet américain n 3 929 992). De nombreux dérivés de la rapamycine ont été synthétisés, 2 2705566 comprenant par exemple ceux décrits dans les brevets américains 5221670 et 5221740, certaines -acyl- et aminoacyl-rapamycines (voir par exemple le brevet américain 4316885, le brevet américain 4650803 et le brevet américain 5151413), les carbonates et amide-esters (voir par exemple EP 509795 et 515140), la 27-déméthyl-rapamycine (voir par exemple WO 92/14737), la 26-dihydro- rapamycine (voir par exemple le brevet américain 5138051), les esters alcoxyliques (voir par exemple le brevet américain 5233036) et certains dérivés du pyrazole (voir le brevet américain 5164399). La rapamycine, ses analogues et ses dérivés de structure similaire sont désignés collectivement ci-après "composés de la famille des rapamycines". Les composés de la famille des rapamycines sont des immuno- suppresseurs extrêmement puissants et ont également une activité antitumorale et anti-fongique. Toutefois, leur utilité comme médicaments, spécialement pour l'administration par voie orale, est limitée par leur très faible solubilité, leur bio- disponibilité faible et variable et leur toxicité élevée. On sait peu de choses sur les causes de ces propriétés et le site d'absorption. Ainsi, une faible bio-disponibilité pourrait être provoquée par le métabolisme accentué du cycle du macrolide et ne serait pas corrigée par une formulation galénique. Il existe donc un besoin pour une composition pharmaceutiquement acceptable contenant des composés de la famille des rapamycines. Le FK506 est un macrolide immunosuppresseur qui est produit par Streptomyces tsukubaensis N 9993. La structure du FK506 est donnée dans l'appendice du Merck Index, sous la référence AS. De nombreux composés similaires qui ont la structure de base et les propriétés immunologiques du KF506 sont également connus. Ces composés sont décrits dans de nombreuses publications, par exemple EP 184162, EP 315973, EP 323042, EP 423714, EP 427680, EP 465426, EP 474126, WO 91/13889, WO 91/19495, EP 484936, EP 532088, EP 532089, WO 93/5059 etc... On sait peu de choses sur les propriétés biopharmaceutiques de tels composés. Dans la présente demande, ces composés sont désignés collectivement "composés FK506". La Demanderesse a maintenant trouvé de façon surprenante qu'en formulant les macrolides avec certains véhicules, on peut obtenir des compositions 3 2705566 stables de macrolides à pouvoir d'absorption élevé. L'invention concerne donc une composition pharmaceutique comprenant un macrolide et un véhicule constitué d'une phase hydrophile, d'une phase lipophile et d'un agent tensio-actif. Selon un autre aspect, l'invention concerne une composition pharmaceutique qui comprend une substance active administrable par voie orale autre qu'une cyclosporine, et un pré-concentré de micro-émulsion servant de véhicule qui comprend i) un produit de réaction de l'huile de ricin avec l'oxyde d'éthylène, ii) un produit de transestérification d'une huile végétale avec le glycérol comprenant essentiellement des mono-, di- et tri-glycérides de l'acide linoléique ou de l'acide oléique, ou une huile végétale polyoxyalkylée, iii) du 1,2-propylèneglycol, et iv) de l'éthanol. La composition pharmaceutique est stable et se signale de façon surprenante par un pouvoir d'absorption élevé lorsqu'elle est administrée par voie orale. Le macrolide peut donc être administré à des doses inférieures, ce qui réduit les problèmes de toxicité. Par exemple, dans les essais sur animaux dans lesquels on administre les compositions pharmaceutiques par voie orale, lesdites compositions ont donné des biodisponibilités élevées. Les compositions pharmaceutiques ont donc des propriétés surprenantes qui présentent de grands avantages. De préférence, la composition est sous forme d'un "pré-concentré de micro- émulsions" ou d'un "pré-concentré d'émulsions", en particulier du type fournissant des micro-émulsions ou des émulsions h/e (huile-dans-l'eau). Toutefois, la composition peut se présenter sous forme d'une microémulsion ou d'une émulsion qui contient également une phase aqueuse, de préférence de l'eau. Par l'expression "pré-concentré de micro-émulsion", on entend une formulation qui, après administration par voie orale, forme spontanément une micro-émulsion dans un milieu aqueux, par exemple dans l'eau ou dans les sucs gastriques. Une "micro-émulsion" est une dispersion colloïdale non opaque ou essentiellement non opaque qui se forme spontanément ou essentiellement spontanément lorsque ses composants sont mis en contact. Une micro-émulsion est thermodynamiquement stable et contient des particules dispersées d'une dimension inférieure à environ 2000 . En général, les micro-émulsions comprennent des gouttelettes ou des particules ayant un diamètre inférieur à environ 1500 A, habituellement de 30 à 1000 . D'autres caractéristiques peuvent être trouvées dans la demande de brevet britannique 2 222 770 A, dont le contenu est incorporé à la présente demande à titre de référence. Par l'expression "pré-concentré d'émulsion", on entend une formulation qui forme spontanément une émulsion dans un milieu aqueux, par exemple dans l'eau ou dans les sucs gastriques après administration par voie orale. L'émulsion formée est opaque, thermodynamiquement stable et contient des gouttelettes dispersées d'une dimension supérieure à environ 100 nm, de préférence supérieure à environ 200 rnm. On obtient souvent des distributions bimodales de l'ordre de grandeur. Les pré- concentrés d'émulsions sont de préférence du type fournissant des émulsions h/e (huile-dans-l'eau). Par "composition pharmaceutique", on entend une composition dans laquelle les composants ou les ingrédients individuels sont eux-mêmes pharma- ceutiquement acceptables et qui, lorsqu'on envisage une forme d'administration particulière, sont appropriés ou acceptables pour cette forme d'administration. La phase lipophile peut représenter de 10 à 85% en poids du véhicule, de préférence de 15 à 70%, de préférence de 20 à 60% et même en particulier environ 25% en poids. L'agent tensio-actif peut représenter de 5 à 80% en poids du véhicule, de préférence de 10 à 70%, de préférence de 20 à 60% et même en particulier environ 40% en poids. La phase hydrophile peut représenter de 10 à 50% en poids du véhicule, de préférence de 15 à 40%, plus spécialement de 20 à 35% et même en particulier environ 30% en poids. Le macrolide est présent de préférence en une quantité de 1 à 15% en poids de la composition, plus particulièrement d'environ 2 à 10%. Le macrolide peut être la rapamycine ou un dérivé O-substitué dans 2705566 lequel le groupe hydroxy en position 40 de la formule illustrée plus haut est remplacé par -OR, o R. signifie un groupe hydroxyalkyle, hydroxyalcoxyalkyle, acylaminoalkyle ou aminoalkyle, par exemple la 40-O-(2-hydroxy)éthyl- rapamycine, la 40-O-(3-hydroxy)propyl-rapamycine, la 40-0-[2-(2- hydroxy)éthoxy]éthyl-rapamycine et la 40-O-(2-acétaminoéthyl)-rapamycine. Ces dérivés O-substitués peuvent être préparés par réaction de la rapamycine (ou de la dihydro- ou désoxorapamycine) avec un reste organique fixé à un groupe éliminable sous des conditions de réaction appropriées (par exemple RX o R signifie le reste organique qui est désiré comme substituant sur l'oxygène, tel qu'un groupe alkyle, allyle ou un reste benzyle, et X signifie un groupe éliminable tel que CC13C(NH)O ou CF3SO3). Ces conditions peuvent être acides ou neutres, par exemple en présence d'un acide tel que I'acide trifluorométhanesulfonique, l'acide camphosulfonique, l'acide p- toluènesulfonique ou leurs sels respectifs de pyridinium ou pyridinium substitué lorsque X signifie CC13C(NH)O, ou en présence d'une base telle que la pyridine, une pyridine substituée, la diisopropyl- éthylamine ou la pentaméthylpipéridine lorsque X signifie CF3SO3. Un composé préféré est la 40-O-(2-hydroxyéthyl)-rapamycine (désignée ci-après composé A) comme décrit dans PCT/EP/93/02604. Des exemples de composés de la famille du FK 506 sont ceux indiqués plus haut. Ils comprennent par exemple le FK 506, l'ascomycine, et les autres composés d'origine naturelle. Ils comprennent également les analogues synthétiques. Un composé préféré de la famille du FK 506 est décrit dans le brevet européen 427 680, par exemple à l'exemple 66a. D'autres composés préférés sont décrits dans le brevet européen 465 426. La phase hydrophile peut être choisie parmi le Transcutol (qui répond à la formule C2Hs-[O-(CH2)2]2-OH), le Glycofurol (également connu comme éther polyéthylèneglycolique de l'alcool tétrahydrofurfurylique) et le 1,2propylène- glycol, ou les mélanges de ces composés, de préférence le 1,2propylèneglycol. La phase hydrophile peut comprendre d'autres cocomposants hydrophiles, par exemple des alcanols inférieurs tels que l'éthanol. Ces co-composants seront utilisés en général en remplacement partiel d'autres composants de la phase 6 2705566 hydrophile. Bien que l'utilisation d'éthanol dans les compositions ne soit pas primordiale, on a trouvé qu'elle était particulièrement avantageuse lorsque les compositions sont préparées sous forme de capsules de gélatine molles en raison de l'amélioration des caractéristiques de conservation, réduisant en particulier le risque de précipitation de la rapamycine suite à l'encapsulation. Ainsi, la durée de conservation peut être prolongée en utilisant de l'éthanol ou tout autre co- composant de ce type comme ingrédient supplémentaire de la phase hydrophile. L'éthanol peut représenter de 0 à 60% en poids de la phase hydrophile, de préférence de 20 à 55% et plus particulièrement de 40 à 50%. On peut également inclure des petites quantités de polyéthylèneglycols liquides dans la phase hydrophile. Les composants préférés de la phase lipophile sont les triglycérides d'acides gras à chaîne moyenne, les mélanges de mono-, di- et triglycérides et les huiles végétales éthoxylées et transestérifiées. Comme triglycérides d'acides gras à chaîne moyenne, on peut citer ceux connus et disponibles dans le commerce sous les marques Miglyol, Captex, Myritol, Capmul, Neobee et Mazol, le Miglyol 812 étant particulièrement préféré. Ces triglycérides sont décrits dans Fiedler H.P., "Lexikon der Hilfstoffe fur Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete", Editio Cantor, D-7960 Aulendorf, 3ème édition revue et complétée (1989), dont le contenu est incorporé à la présente demande à titre de référence. Les mélanges de mono-, di- et triglycérides comprennent de préférence les mélanges de mono-, di- et triglycérides d'acides gras en C2-C20, spécialement des mélanges de mono-, di- et triglycérides d'acides gras en C,6-C,8. Le composant acide gras des mono-, di- et triglycérides peut comprendre des restes d'acides gras saturés et insaturés. De préférence, il comprend essentiellement des restes d'acides gras insaturés, en particulier des restes d'acides gras insaturés en C,8. Avantageusement, les mélanges de mono-, di- et triglycérides comprennent au moins 60%, de préférence au moins 75%, plus particulièrement au moins 85% en poids d'un acide gras insaturé en C18 (par exemple l'acide linolénique, l'acide linoléique et l'acide oléique). Les mélanges de mono-, di- et triglycérides comprennent avantageusement moins de 20%, par exemple environ 15% ou 10% en poids ou moins de mono-, di- et triglycérides d'acides gras saturés (par exemple l'acide palmitique et l'acide stéarique). Les mélanges de mono-, di- et triglycérides comprennent essentielle- ment des mono- et diglycérides; par exemple, la teneur en mono- et diglycérides est d'au moins 50%, de préférence d'au moins 70% par rapport au poids total de la phase lipophile. Plus spécialement, les mono- et diglycérides représentent au moins 75% par exemple environ 80% ou 85%, en poids de la phase lipophile. Les monoglycérides représentent de préférence environ 25% à environ % en poids, par rapport au poids total de la phase lipophile, du mélange de mono-, di- et triglycérides. Plus spécialement, environ 30% à environ 40% (par exemple de 35 à 40%) de monoglycérides sont présents. Les diglycérides représentent environ 30% à environ 60% en poids, par rapport au poids total de la phase liphophile, du mélange de mono-, di- et triglycérides. Plus spécialement, environ 40% à environ 55% (par exemple de 48% à 50%) de diglycérides sont présents. Les triglycérides représentent avantageusement au moins 5% mais moins d'environ 25% en poids, par rapport au poids total de la phase lipophile, du mélange de mono-, di- et triglycérides. Plus spécialement, ils représentent environ 7,5% à environ 15% (par exemple d'environ 9% à 12%). Les mélanges de mono-, di- et triglycérides peuvent être préparés en mélangeant les mono-, di- et triglycérides individuels dans des proportions relatives appropriées. Toutefois, de tels mélanges sont avantageusement les produits de transestérification d'huiles végétales, par exemple l'huile d'amandes, l'huile d'arachides, l'huile d'olive, l'huile de pêche, l'huile de palme ou, de préférence, l'huile de maïs, l'huile de tournesol ou l'huile de carthame, spécialement l'huile de mais, avec le glycérol. De tels produits de transestérification sont obtenus en général par chauffage de l'huile végétale choisie avec du glycérol, à une température élevée en présence d'un catalyseur approprié, sous atmosphère inerte et sous agitation continue, par exemple dans un réacteur en inox, pour effectuer la transestérifica- tion ou la glycérolyse. Outre leurs composants mono-, di- ou triglycérides, de tels produits de transestéridication en général comprennent également de faibles quantités de glycérol libre. La quantité de glycérol libre est de préférence inférieure à 10%, plus particulièrement inférieure à 5%, spécialement d'environ 1 à 2% en poids par rapport au poids total du glycérol libre plus les mono-, di- et triglycérides. De préférence, on élimine tout d'abord un peu de glycérol, ce qui donne un "lot essentiellement exempt de glycérol", lorsqu'on doit préparer des capsules de gélatine molles. Les produits de transestérification de l'huile de maïs et du glycérol donnent des mélanges de mono-, di- et triglycérides particulièrement appropriés. Comme exemple de mélanges de glycérides appropriés, on peut citer le produit de transestérification commercialisé sous la marque Maisine. Ce produit comprend essentiellement des mono-, di- et triglycérides de l'acide linoléique et de l'acide oléique avec de faibles quantités de mono-, di- et triglycérides de l'acide palmitique et de l'acide stéarique (l'huile de maïs étant elle-même constituée d'environ 56% en poids d'acide linoléique, de 30% en poids d'acide oléique, d'environ 10% en poids d'acide palmitique et d'environ 3% en poids d'acide stéarique). Les caractéristiques physiques de la Maisine [disponible auprès des Etablissements Gattefossé, 36 chemin de Genas, B.P. 603, 69804 SaintPriest, Cedex France] sont les suivantes: Glycérol libre: 10% max (typiquement 3, 9- 4,9% ou "dans des lots essentiellement exempts de glycérol", environ 0, 2%; Monoglycérides: environ 35% (typiquement 30-40% ou, "dans des lots essentiellement exempts de glycérol", par exemple 32-36%, par exemple environ 36%; Diglycérides: environ 50% (ou, "dans des lots essentiellement exempts de glycérol", environ 46-48%); Triglycérides: environ 10% (ou, "dans des lots essentiellement exempts de glycérol", environ 12-15%); Acide oléique libre: environ 1%. Les autres caractéristiques physiques de la Maisine sont les suivantes: indice d'acide = au maximum environ 2; indice d'iode = environ 85-105; indice de saponification = environ 150-175 (voir Fiedler "Lexikon der Hilfsstoffe", 3ème édition revue et complétée (1989) vol. 2, page 768). La teneur en acides gras de la Maisine est la suivante: acide palmitique = environ 11%; acide stéarique = environ 2,5%; acide oléique = environ 29%; acide linoléique = environ 56%; autres acides = environ 1,5%. Les mélanges de mono-, di- et triglycérides doivent de préférence être limpides et le rester pendant plus de 20 jours de conservation à des températures de 20 C à 25 C. Un échantillon du mélange de mono-, di- et triglycérides qui a été conservé pendant 24 heures dans un réfrigérateur à une température comprise entre 2 et 8 C doit donc rester limpide à la température ambiante une heure après avoir été sorti du réfrigérateur. De préférence, les mono-, di- et triglycérides ont une faible teneur en acides gras saturés. Les mélanges de mono-, di- et triglycérides répondant à ces critères peuvent être obtenus à partir de produits disponibles dans le commerce, tels que ceux obtenus selon des techniques connues de séparation, par exemple les procédés de congélation couplés à des techniques de séparation, à savoir la centrifugation, pour éliminer les composants acides gras saturés et augmenter la teneur en composants acides gras insaturés. En général, la teneur totale en composants acides gras saturés est internationale WO 93/09211. Les mélanges de mono-, di- et triglycérides contiennent donc de préférence des quantités inférieures d'acides gras saturés, par exemple l'acide palmitique et l'acide stéarique, et des quantités relativement plus importantes d'acides gras insaturés, par exemple l'acide oléique et l'acide linoléique, que le produit de départ. Les mélanges de mono-, di- et triglycérides appropriés ayant des quantités inférieures d'acides gras saturés contiennent de 32 à 36% en poids de monoglycérides, de 45 à 55% en poids de diglycérides et de 12 à 20% en poids de triglycérides par rapport au poids total de la phase lipophile. Les autres caractéristiques sont les suivantes: 2705566 Teneur en acides gras Linoléate de méthyle: 53 à 63%, (déterminée par chromatographie Oléate de méthyle: 24 à 34%, sous forme d'esters méthyliques) Linolénate de méthyle: 0 à 3%, Arachidate de méthyle: 0 à 3%, Palmitate de méthyle: 6 à 12%, Stéarate de méthyle: 1 à 3% Densité relative 0,94 à 0,96 Indice d'hydroxy 140 à 210 Indice d'iode 110 à 120 Indice de peroxyde stables pendant longtemps. La phase lipophile peut également être constituée d'huiles végétales éthoxylées et transestérifiées telles que celles obtenues par réaction de diverses huiles végétales naturelles (par exemple l'huile de maïs, l'huile de noyau, l'huile d'amandes, l'huile d'arachides, l'huile d'olive, l'huile de soja, l'huile de tournesol, l'huile de carthame et l'huile de palme, ou leurs mélanges) avec des polyéthylène- glycols qui ont un poids moléculaire moyen de 200 à 800, en présence d'un catalyseur approprié. Leurs procédés de préparation sont connus et un exemple est décrit dans le brevet américain 3 288 824. L'huile de maïis éthoxylée et transestérifiée est en particulier préférée. Les huiles végétales éthoxylées et transestérifiées sont connues et commercialisées sous la marque Labrafil (H. Fiedler, vol. 2, page 707). On peut citer le Labrafil M 2125 CS (obtenu à partir d'huile de maïs et ayant un indice d'acide inférieur à environ 2, un indice de saponification de 155 à 175, une valeur HLB de 3 à 4 et un indice d'iode de 90 à 110) et le Labrafil M 1944 CS (obtenu à partir d'huile de noyau et ayant un indice d'acide d'environ 2, un indice de saponification de 145 à 175 et un indice d'iode de 60 à 90). Le Labrafil M 2130 CS (qui est un produit de transestérification d'un glycéride en C,2-CI8 avec un polyéthylèneglycol et qui a un point de fusion d'environ 35 à 40 C, un indice d'acide inférieur à environ 2, un indice de saponification de 185 à 200 et un indice d'iode inférieur à environ 3) peut également être utilisé. L'huile végétale éthoxylée et transestérifiée préférée est le Labrafil M 2125 CS que l'on peut obtenir par exemple auprès des établissements Gattefossé, à Saint Priest, Cedex France. Comme exemples d'agents tensio-actifs appropriés, on peut citer les suivants: i) les produits de réaction de l'huile de ricin naturelle ou hydrogénée avec l'oxyde d'éthylène. L'huile de ricin naturelle ou hydrogénée peut être mise à réagir avec de l'oxyde d'éthylène dans un rapport molaire compris entre environ 1:35 et environ 1:60, avec élimination éventuelle du polyéthylèneglycol du produit. Les divers tensio-actifs de ce type sont disponibles dans le commerce. Les produits commercialisés sous la marque Cremophor sont particulièrement appropriées, spécialement le Cremophor RH 40 ayant un indice de saponification d'environ 50- , un indice d'acide inférieur à environ 1, une teneur en eau (Fischer) 16, et le Cremophor RH 60 ayant un indice de saponification d'environ 50, un indice d'acide inférieur à environ 1, un indice d'iode inférieur à environ 1, une teneur en eau (Fischer) d'environ 4,5-5,5%, un nD25 d'environ 1,453-1,457 et une valeur HLB d'environ 15-17. Un produit particulièrement préféré de cette classe est le Cremophor RH 40. Le produit disponible sous la marque Cremophor EL est également approprié et a un poids moléculaire (par osmométrie en phase vapeur) d'environ 1630, un indice de saponification d'environ 65 à 70, un indice d'acide d'environ 2, un indice d'iode d'environ 28 à 32 et un 12 2705566 nD25 d'environ 1471. Des produits similaires ou identiques pouvant également être utilisés sont commercialisés sous les marques Nikkol (par exemple Nikkol HCO40 et HCO-60), Mapeg (par exemple Mapeg CO-40h), Incrocas (par exemple Incrocas 40) et Tagat (par exemple Tagat RH 40). Ces agents tensio-actifs sont décrits dans l'ouvrage de Fiedler. ii) Les esters d'acides gras d'un polyoxyéthylène-sorbitane, par exemple les mono- et tri-esters de l'acide laurique, palmitique, stéarique et oléique, par exemple ceux connus et commercialisés sous la marque Tween (voir Fiedler, pages 1300-1304), comprenant les produits Tween monolaurate de polyoxyéthylène(20)sorbitane, 21 monolaurate de polyoxyéthylène(4)sorbitane, monopalmitate de polyoxyéthylène(20)sorbitane, monostéarate de polyoxyéthylène(20)sorbitane, tristéarate de polyoxyéthylène(20)sorbitane, monooléate de polyoxyéthyléne(20)sorbitane, 81 monooléate de polyoxyéthylène(5)sorbitane, trioléate de polyoxyéthylène(20)sorbitane. Les produits spécialement préférés de cette classe sont les produits Tween 40 et Tween 80. iii) Les esters d'acides gras d'un polyoxyéthylène, par exemple les esters de l'acide stéarique avec un polyoxyéthylène, connus et commercialisés sous la marque Myrj (voir Fiedler, 2, pages 834-835). Un produit spécialement préféré de cette classe est le produit Myrj 52 ayant une D25 d'environ 1,1, un point de fusion d'environ 40 à 44 C, une valeur HLB d'environ 16,9, un indice d'acide d'environ 0-1 et un indice de saponification d'environ 25-35. iv) Les copolymères du polyoxyéthylène et du polyoxypropylène et les copolymères séquencés, par exemple ceux commercialisés sous les marques Pluronic, Emkalyx et Poloxamer (voir Fiedler, 2, page 959). Un produit particulièrement préféré de cette classe est le produit Pluronic F68, ayant un point de fusion d'environ 52'C et un poids 13 2705566 13 =wu moléculaire d'environ 6800 à 8975. Un autre produit préféré de cette classe est le produit Poloxamer 188. v) Le sulfosuccinate de dioctyle ou le succinate de di-[2- éthylhexyle] (voir Fiedler, 1, pages 107-108). vi) Les phospholipides, en particulier les lécithines (voir Fiedler, 2, pages 943-944). Les lécithines appropriées comprennent en particulier les lécithines de soja. vii) Les mono- et diesters d'acides gras du propylèneglycol (commer- cialisés sous la marque Miglyol 840), le dilaurate de propylèneglycol, l'hydroxystéarate de propylèneglycol, l'isostéarate de propylèneglycol, le laurate de propylèneglycol, le ricinoléate de propylèneglycol, le stéarate de propylèneglycol etc... (voir Fiedler, 2, pages 808-809). On notera également que les composants du véhicule peuvent contenir des produits de départ qui n'ont pas réagi, par exemple du polyéthylèneglycol. L'agent tensio-actif choisi a de préférence une valeur HLB d'au moins 10. De préférence, la proportion relative du (ou des) composant(s) de la phase hydrophile, de la phase lipophile et de l'agent tensio-actif se situe dans les limites de la zone de "micro-émulsion" selon un système ternaire. Les compositions ainsi obtenues sont des pré-concentrés de micro-émulsions à stabilité élevée, susceptibles de fournir, par addition d'eau, des micro-émulsions ayant une dimension moyenne des particules périodes supérieures à 24 heures. Les compositions sous forme de pré-concentrés de micro-émulsions présentent de bonnes caractéristiques de stabilité comme indiqué par des essais classiques de stabilité, par exemple une durée de conservation allant jusqu'à 3 ans et même plus. Les composants peuvent également être choisis pour fournir un pré- concentré d'émulsion. Les compositions sous forme de pré-concentrés d'émulsions présentent de bonnes caractéristiques de stabilité comme indiqué par des essais classiques de stabilité, par exemple une durée de conservation allant jusqu'à 3 ans et même plus. 14 2705566 Les compositions pharmaceutiques peuvent également comprendre d'autres additifs ou. ingrédients, par exemple des anti-oxydants tels que le palmitate d'ascorbyle, le butylhydroxyanisole (BHA), le butylhydroxytoluène (BHT) et des tocophérols, par exemple l'a-tocophérol (vitamine E), et/ou des agents de conservation. Ces additifs ou ingrédients représentent environ 0,05 à 1% en poids par rapport au poids total de la composition. La composition pharma- ceutique peut également comprendre des édulcorants ou des aromatisants en une quantité allant jusqu'à environ 2,5 ou 5% en poids par rapport au poids total de la composition. L'anti-oxydant est de préférence l'a-tocophérol (vitamine E). Les compositions pharmaceutiques de l'invention peuvent également comprendre un ou plusieurs immuno-suppresseurs comme par exemple une cyclosporine ou, lorsqu'une rapamycine est présente, un composé FK 506 comme décrit plus haut. Les cyclosporines appartiennent à une classe d'undécapeptides cycliques, poly-N-méthylés, exercant en général une activié immuno-suppressive, anti-inflammatoire, anti-virale et/ou antiparasitaire, chacune à un degré plus ou moins élevé. La première des cyclosporines à avoir été identifiée est le métabolite fongique, la Cyclosporine A ou Ciclosporine, dont la structure est indiquée dans le Merck Index, 1 lème édition; Merck & CO, Inc; Rahway, New Jersey, U.S.A. (1989) sous le n 2759. Les cyclosporines identifiées par la suite sont les cyclosporines B, C, D et G qui sont également indiquées dans le Merck Index sous le n 2759. De nombreux autres analogues synthétiques sont également connus et des exemples sont décrits dans EP 296 122, EP 484 281 et GB 2222770. Dans la présente demande, ces composés sont désignés collectivement "cyclosporines". Les compositions pharmaceutiques de l'invention se signalent par des propriétés particulièrement avantageuses lorsqu'elles sont administrées par voie orale, par exemple en termes de consistance et de degré élevé de biodisponibilité comme mis en évidence dans des essais classiques de biodisponibilité, laquelle est par exemple 2 à 4 fois supérieure à celle des émulsions. Ces essais sont effectués sur des animaux ou des patients sains en utilisant un kit d'anticorps monoclonaux spécifiques ou non spécifiques pour déterminer les taux de macrolide dans le sang. C'est ainsi par exemple que dans l'essai décrit à l'exemple 3, après administration 2705566 zw o par voie orale de 10 mg de rapamycine à des rats on a trouvé, selon la méthode ELISA en utilisant.un anticorps monoclonal spécifique, des valeurs Cm. élevées, comprises entre 2670 et 3400 ng/mli. Dans l'essai décrit à l'exemple 4, on a également trouvé que le pré-concentré d'émulsion et le pré-concentré de micro- émulsion ont des propriétés pharmacocinétiques nettement supérieures à celles du système de solvant habituel. Les paramètres pharmacocinétiques, par exemple l'absorption et les taux sanguins, deviennent de façon surprenante plus prévisibles permettant ainsi d'éliminer ou de réduire les problèmes d'administration liés à l'absorption irrégulière. Les compositions pharmaceutiques de l'invention sont également compatibles avec les tensio-actifs, par exemple les sels biliaires, présents dans le tractus gastro-intestinal. Elles sont ainsi totalement dispersables dans des systèmes aqueux comprenant de tels tensio-actifs naturels et sont donc capables de fournir des systèmes de micro-émulsions in situ qui sont stables et ne provoquent pas la précipitation de la substance active ou tout autre rupture de la structure des fines particules. La fonction de telles compositions lors d'une administration par voie orale demeure essentiellement indépendante et/ou non modifiée par la présence relative ou l'absence de sels biliaires à n'importe quel moment et pour tout individu. Les compositions de l'invention se présentent de préférence sous forme de doses unitaires, par exemple dans des capsules administrables par voie orale, par exemple sous forme de capsules de gélatine molles ou dures. Lorsque les compositions de l'invention se présentent sous forme de doses unitaires, chacune contient avantageusement de 10 à 100 mg de macrolide, de préférence de 10 à 50 mg, par exemple 15, 20, 25 ou 50 mg de macrolide. De telles doses unitaires sont appropriées pour une administration 1 à 5 fois par jour en fonction du traitement particulier, de la phase de traitement etc... Toutefois, si nécessaire, les compositions de l'invention peuvent se présenter sous forme de solutions buvables et peuvent comprendre de l'eau ou tout autre système aqueux, pour fournir des systèmes d'émulsions ou de micro- émulsions appropriés comme solutions buvables. L'utilité des compositions de l'invention peut être observée dans des 16 2705566 essais cliniques classiques pour les indications connues, à des doses de macrolide donnant des taux sanguins de macrolide équivalents, par exemple de l'ordre de 2,5 mg à 1000 mg de macrolide par jour pour un adulte de 75 kg, et dans des essais classiques sur animaux. La biodisponibilité accrue de la substance active fournie par les compositions de l'invention peut être observée dans des essais classiques sur animaux et dans des essais cliniques. Lorsqu'on inclut une cyclosporine ou un composé FK 506 dans la composition pharmaceutique, l'utilité peut également être observée dans des essais cliniques classiques et dans des essais sur animaux. Les doses de macrolide à utiliser dans les essais cliniques sont indiquées plus haut, alors que celles de cyclosporine peuvent être de l'ordre de 25 mg à 1000 mg par jour et celles du composé FK 506 de l'ordre de 2,5 mg à 1000 mg par jour pour un adulte de 75 kg. La dose optimale de macrolide à administrer à un patient particulier doit être envisagée avec précaution par le médecin traitant, étant donné que la réponse individuelle et le métabolisme de la rapamycine peuvent varier. Il est recommandé de contrôler les taux de rapamycine dans le sang selon la méthode de dosage radioimmunologique, selon l'essai aux anticorps monoclonaux ou tout autre méthode de dosage habituelle appropriée. En général, les doses de macrolide sont de l'ordre de 2,5 mg à 1000 mg par jour pour un adulte de 75 kg, de préférence de 25 mg à 500 mg, la dose optimale étant d'environ 50 à 100 mg par jour. On obtient des résultats satisfaisants en administrant environ 75 mg par jour, par exemple sous forme de 2 capsules, l'une contenant 50 mg et l'autre contenant mg, ou en administrant 3 capsules contenant chacune 25 mg. Lorsqu'une cyclosporine ou un composé FK 506 sont inclus dans la composition pharma- ceutique, la dose de cyclosporine peut être de 25 mg à 1000 mg par jour (de préférence de 50 à 500 mg) et la dose du composé FK 506 peut être de 2,5 mg à 1000 mg par jour (de préférence de 10 mg à 250 mg). Les compositions pharmaceutiques sont particulièrement utiles pour les conditions suivantes: a) le traitement ou la prévention des rejets de greffes d'organes ou de tissus, par exemple pour le traitement des rejets suite à une greffe du coeur, du poumon, du coeur-poumon, du foie, du rein, du pancréas, de la peau ou de la cornée. Les compositions de l'invention sont également indiquées pour la prévention de la maladie du greffon contre l'hôte, comme cela se produit parfois suite à une greffe de moëlle. b) le traitement ou la prévention de maladies auto-immunes ou d'états inflammatoires, en particulier d'états inflammatoires ayant une étiologie ayant une composante auto-immune comme l'arthrite (par exemple la polyarthrite rhumatoide, la polyarthrite chronique évolutive et l'arthrite déformante) et les maladies rhumatismales. Les maladies auto-immunes spécifiques pour lesquelles les compositions pharma- ceutiques de l'invention peuvent être utilisées comprennent les suivantes: les troubles hématologiques auto-immuns (par exemple l'anémie hémolytique, l'anémie aplastique, l'anémie purement érythrocytaire et la thrombocytopénie idiopathique), le lupus érythémateux systémique, la polychondrite, la sclérodermie, la granulomatose de Wegener, la dermatomyosite, l'hépatite active chronique, la myasthénie grave, le psoriasis, le syndrome de Steven- Johnson, la sprue idiopathique, les inflammations intestinales auto- immunes (par exemple la colite ulcérative et la maladie de Crohn), les maladies oculaires endocrines, la maladie de Grave, la sarcofdose, la sclérose en plaques, la cirrhose biliaire primitive, le diabète juvénile (le diabète sucré de type I), l'uvéite (antérieure et postérieure), la kérato- conjonctivite sèche et la kérato-conjonctivite vernale, la fibrose pulmonaire interstitielle, l'arthrite psoriasique, la glomérulonéphrite (avec et sans syndrome néphrotique, par exemple le syndrome néphrotique idiopathique ou la néphropathie à faibles changements) et la dermatomyosite juvénile. c) le traitement et la prévention de l'asthme. d) le traitement de la résistance multi-médicamenteuse (RMM). Les composés de la famille des rapamycines suppriment les P-glyco- protéines (Pgp) qui sont les molécules de transport de la membrane associées à la RMM. La RMM est particulièrement problématique chez les cancéreux ou les sidéens qui ne répondront pas à la chimiothérapie 18 2705566 classique, car la médication est pompée hors des cellules par les Pgp. Les compositions de l'invention sont donc utiles pour améliorer l'efficacité des autres agents chimiothérapeutiques dans le traitement et le contrôle d'états résistants aux divers médicaments tels que le cancer ou le sida résistants aux divers médicaments. Les composés de la famille des rapamycines exercent également une activité anti-tumorale et anti-fongique et les compositions de l'invention peuvent donc être utilisées comme agents anti-tumoraux et anti-fongiques. Selon un autre aspect, l'invention concerne également un procédé de préparation d'une composition pharmaceutique telle que définie plus haut, procédé selon lequel on mélange de façon homogène (1) une phase hydrophile, (2) une phase lipophile et (3) un tensio-actif et on ajoute le composé de la classe des macrolides. Si nécessaire, on peut formuler la composition sous forme de doses unitaires, par exemple sous forme de capsules de gélatine. D'autres composants ou additifs, en particulier un co-composant de la phase hydrophile, par exemple l'éthanol, peuvent éventuellement être mélangés avec les composants (1), (2) et (3) ou avec le macrolide ou après l'addition du macrolide. La composition peut être associée à une quantité suffisante d'eau ou d'un système de solvant aqueux pour obtenir une micro-émulsion ou une émulsion. Les exemples suivants illustrent les compositions de l'invention sous forme de doses unitaires, appropriées par exemple pour une utilisation dans la prévention des rejets de greffes ou pour le traitement de maladies autoimmunes, par administration de 1 à 5 doses unitaires/jour. Les exemples font essentiellement référence à la rapamycine, mais des compositions équivalentes peuvent être obtenues en utilisant tout autre macrolide. Exemple 1: Préparation d'huile de maïs transestérifiée avec du glycérol et raffinée On refroidit lentement à 20'C de l'huile de maïs transestérifiée avec du glycérol et essentiellement exempte de glycérol et on la maintient à cette tempé- rature pendant une nuit. On centrifuge l'huile de maïs à une accélération de 12 000 g et un taux d'écoulement de 103 kg/h dans une centrifugeuse à écoule- 19 2705566 19 =wu ment continu, ce qui donne une phase liquide (62 kg/h) et une phase contenant un sédiment (41 kg/h). -On refroidit lentement la phase liquide à 8'C et on la maintient à cette température pendant une nuit. On centrifuge ensuite la phase liquide à une accélération de 12 000 g et un taux d'écoulement de 112 kg/h, ce qui donne une phase liquide (76,2 kglh) et une phase contenant un sédiment (35,8 kglh). La phase liquide est de l'huile de maïs transestérifiée avec du glycérol et raffinée. On peut également obtenir un produit amélioré en effectuant la centrifugation en trois étapes, par exemple à 20'C, 10*C et 5 C. Le procédé se caractérise par une légère réduction des monoglycérides dans l'huile de maïs transestérifiée avec du glycérol et raffinée, par rapport au produit de départ (par exemple 35,6% par rapport à 38,3%). Exemple 2: On utilise l'huile de maïis transestérifiée avec du glycérol et raffinée obtenue comme décrit à l'exemple 1 pour la préparation des doses unitaires suivantes administrables par voie orale: Composant Quantité (mg/capsule) Rapamycine 20,0 1) Ethanol 75,0 2) 1,2- propylèneglycol 81,0 3) Huile raffinée 121,5 4) Cremophor RH40 202,5 Total 500,0 Sous agitation et à la température ambiante, on met en suspension la rapamycine dans (1) et, à la solution obtenue, on ajoute (2), (3) et (4) sous agitation. On verse le mélange obtenu dans des capsules de gélatine dures de dimension O et on les scelle selon la technique Quali-Seal. Exemple 3: Pharmacocinétiques On utilise deux formulations préparées selon l'exemple 2. Formulation Composant Quantité A Tween 80 41,5% Maisine 24,9% Propylèneglycol 16,6% Ethanol 15,0% Rapamycine 2,0% B Cremophor RH40 41,5% Maisine 24,9% Propylèneglycol 16,6% Ethanol 15,0% Rapamycine 2,0% La formulation A est un pré-concentré d'émulsion et la formulation B est un pré-concentré de micro-émulsion. Par formulation, on utilise 6 rats mâles Wistar d'un poids moyen de 300 g. Un jour avant le traitement, on retire toute nourriture aux rats, mais on leur laisse l'accès à de l'eau. On anesthésie ensuite les rats par injection intrapéritonéale de 2 x 1 ml d'uréthane à 20% et on insère un cathéter permanent dans la veine jugulaire droite, pour permettre les prélèvements de sang. 20 heures après l'intervention chirurgicale, par l'intermédiaire d'un tube gastrique, on administre 500 ml par animal de la formulation. On administre une dose totale de 10 mg de médicament par animal. On prélève des échantillons de sang de 0,7 ml à partir du cathéter jugulaire de chaque animal 15 minutes avant l'administration du médicament et ensuite 17 minutes, 30 minutes, 1, 1,5, 2, 3, 5 et 8 heures après l'administration du médicament. On conserve les échantillons dans des tubes héparinisés et on les analyse selon la méthode Elisa en utilisant des plaques pour microtitrage enduites d'anticorps spécifiques à la rapamycine. On sacrifie les animaux immédiatement après le dernier prélèvement de sang. Les résultats sont présentés dans le tableau suivant: 21] 2705566 Pour PrC (0-8 v CV CV m hrs) [ng.h/ml] [%] [ng/mil] [%/] [hrs] [%] A 11951 44 2671 42 3#8 29 B 13826 13 3405 30 4,0 35+ ) n = 5 +) n = 2 en raison de difficultés avec les échantillons de sang. Les résultats indiquent que la rapamycine est bien absorbée. Exemple 4: Comparaison On compare les formulations A et B avec une formulation comprenant 38,6% d'huile de maïs, 41,6% de Labrafil M21/25C, 17,8% d'éthanol et 2% de rapamycine (formulation C). On procède comme décrit à l'exemple 3, sauf que les animaux reçoivent chacun une dose totale de 0,5 mg de médicament. Les résultats sont présentés dans le tableau suivant: Pour ASC (0-8 CV C. GCV t=x CV m hrs) [ng.h/ml] [%] [ng/ml] [hrs] [/o] A 105,8 28 31,22 35 1,6 51' B 96,6 32 36i13 60 0,4 30 C 36,2 31 7,83 27 3,0 78 ) n = 4. Les résultats indiquent que les formulations A et B ont de meilleures propriétés pharmacocinétiques que la formulation C. Ad2 2705566 Exemple 5: On formule un composé actif de la famille du FK 506 ou de la famille des rapamycines, par exemple le composé A, en un pré-concentré de micro- émulsion ayant la composition suivante: 2% de composé actif, 44% de Cremophor RH40, 26,4% de mono-, di- et triglycérides de l'huile de maïs, 17,6% de 1,2- * propyléne-glycol et 10% d'éthanol. 23 2705566 REVENDICATIONS 1. Une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un macrolide et un véhicule constitué d'une phase hydrophile, d'une phase lipophile et d'un agent tensio-actif. 2. Une composition selon la revendication 1 sous forme d'une émulsion ou d'un pré-concentré d'émulsion. 3. Une composition selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que la phase lipophile représente de 5 à 85% en poids du véhicule. 4. Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l'agent tensio-actif représente de 5 à 80% en poids du véhicule. 5. Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la phase hydrophile représente de 10 à 50% en poids du véhicule. 6. Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que le macrolide est un composé de la famille des rapamycines. 7. Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que le macrolide est un composé de la famille du FK 506. 8. Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que le composé de la famille des rapamycines est présent en une quantité comprise entre 2 et 15% en poids de la composition. 9. Un pré-concentré de micro-émulsions servant de véhicule pour une administration par voie orale d'une substance active autre qu'une cyclosporine, caractérisé en ce qu'il comprend i) un produit de réaction de l'huile de ricin avec l'oxyde d'éthylène, ii) un produit de transestérification d'une huile végétale avec le glycérol comprenant essentiellement des mono-, di- et triglycérides de l'acide linoléique ou de l'acide oléique, ou d'une huile végétale polyoxyalkylée, iii) du 1,2-propylèneglycol, et iv) de l'éthanol.