Brevet FR2697913A1 — publié le 19940513

MICROEPROUVETTE COMPORTANT DES ORGANES ACCROISSANT LA SURFACE La présente invention se rapporte à une microéprouvette remplissant les fonctions d'une alvéole ou d'un puits et comportant des organes accroissant la surface. Des développements dans les analyses d'immunodiagnostic ont conduit à des demandes accrues pour des procédés et perfectionnements dans l'analyse au moyen desquels on puisse obtenir des résultats fiables et reproductibles dans des temps courts en utilisant une quantité minimum d'un échantillon et d'un agent réactif. La déposante a découvert qu'un rapport surface/volume supérieur pour les microéprouvettes utilisées dans les essais biologiques (ce qui implique des distances de diffusion plus courtes) peut conduire à une sensibilité plus élevée dans un temps d'incubation limité au cours d'un dosage en phase solide, tel que ELISA. Ainsi, l'avantage d'un rapport surface/volume plus élevé réside dans le fait que le temps de dosage peut être réduit. On estime qu'un rapport surface/volume plus grand n' a pas d'influence négative sur la sensibilité du dosage. Au contraire, il peut être possible d'obtenir une sensibilité plus grande dans un temps d'incubation limité. La présente invention propose une microéprouvette améliorée destinée à être utilisé dans des analyses biologiques, en particulier dans des analyses d'immunodiagnostic et dans d'autres analyses utilisant l'adsorption en phase solide dans lesquelles au moins un participant au dosage est immobilisé ou adsorbé. Cette microéprouvette est simple et commode à l'usage et fournit des résultats fiables dans une période de temps qui est plus courte que celle obtenue en utilisant les microéprouvettes bien connues. La présente invention propose une microéprouvette comprenant une paroi de fond et une paroi périphérique partant de celle-ci, caractérisé en ce qu'elle comporte une pluralité d'organes accroissant la surface et disposés dans un espace défini entre la surface intérieure de la paroi périphérique et une surface imaginaire centrale en forme de cylindre circulaire qui coupe la paroi de fond de manière à permettre l'introduction d'une pipette dans la microéprouvette à travers le cylindre circulaire pour introduire ou retirer de la matière dans la microéprouvettes et de manière à permettre à un faisceau lumineux de traverser le cylindre afin de permettre de mesurer la densité optique de la matière contenue dans la microéprouvette. La paroi de fond peut être une paroi de fond sensiblement plate ou bien elle peut être conique ou hémisphérique et cette paroi de fond peut être fusionnée ou réunie de manière étanche avec la paroi périphérique qui en part. Dans une forme de réalisation préférée, la paroi de fond est prévue avec une qualité optique dans un matériau approprié, tel que par exemple le polystyrène, le polyméthacrylate, le chlorure de polyvinyle (PVC), le polyéthylènetérephtalate, le polyéthylènetérephtalateglycol ou le polycarbonate, pour permettre des lectures optiques et colorimétriques d'échantillons à travers le fond des microéprouvettes pour l'analyse par des techniques optiques ou de colorimétrie. Dans une forme davantage préférée de 1 invention, la paroi de fond est sensiblement plane. Afin d'obtenir un temps de dosage relativement court, la microéprouvette est munie d'au moins un organe accroissant la surface et, de préférence, d'une pluralité d'organes accroissant la surface. Comme cela sera montré dans la partie traitant de l'expérimentation (voir l'exemple 2), le temps de dosage est spectaculairement réduit si on utilise des microéprouvettes munies d'organes accroissant la surface.Ceci est dû au fait que la présence d'organes accroissant la surface donne lieu à une augmentation de l'aire de la surface intérieure et ainsi à un accroissement du rapport surface/volume; le terme "rapport surface/volume" tel qu'utilisé dans la présente description et les revendications, est destiné à signifier le rapport entre l'aire de la surface et le volume de la partie de la microéprouvette qui est remplie par les participants au dosage, et l'aire de la surface est la somme des aires des surfaces des organes accroissant la surface plus l'aire de la surface intérieure de la paroi périphérique et l'aire de la surface intérieure de la paroi du fond. Cette alimentation à son tour conduit à une distance de diffusion plus courte entre les molécules interactives pendant le dosage et entraîne une réduction de la durée du dosage. Les organes accroissant la surface sont disposés dans un espace défini entre la surface intérieure de la paroi périphérique et une surface centrale imaginaire en forme de cylindre circulaire et coupant la paroi de fond, de sorte qu il est possible d'introduire une pipette dans la microéprouvette à travers le cylindre circulaire pour introduire ou retirer de la matière de la microéprouvette. En général, l'échantillon qui doit être analysé (appelé "analyte") est introduit dans la microéprouvette au moyen d'une pipette. Ainsi, il est important que la surface centrale imaginaire en forme de cylindre circulaire coupant la paroi de fond ait un diamètre d'au moins 2 mm, de préférence d'au moins 3 mm, et atteigne par exemple environ 4 mm. En outre, l'espace contenu d'une surface centrale imaginaire en forme de cylindre circulaire coupant la paroi de fond est important pour permettre à un faisceau de lumière de traverser le cylindre afin de mesurer la densité optique de la matière contenue dans la microéprouvette. D'une manière générale, les exigences quant à la taille du diamètre de la surface centrale imaginaire en forme de cylindre circulaire destinée à permettre des mesures optiques fiables conduisent à estimer que le diamètre doit être d'au moins 2 mm, de préférence d'au moins 3 mm, par exemple d'environ 4 mm. Pour obtenir une réduction prononcée de la durée du dosage, c'est-à-dire une réduction supérieure à 10%, de préférence supérieure à 30%, l'aire de la surface des organes accroissant la surface avec la surface intérieure de la paroi périphérique et de la paroi de fond de la microéprouvette est supérieure de préférence d'au moins 1,1, de préférence d'au moins 1,2 et de préférence encore d'au moins 1,4 fois à l'aire de la surface intérieure de la paroi périphérique et de la paroi de fond de la microéprouvette seules. Dans une forme de réalisation préférée, le rapport -1 surface/volume de la microéprouvette est d'au moins 7,7 cm ce rapport surface/volume étant calculé sur la base de la partie de la microéprouvette qui est remplie avec les participants au dosage pendant le dosage Sedans les exemples donnés ci-dessous, le volume de la microéprouvette qui est rempli des participants au dosage correspond à 200 pl. Lorsque ce volume est utilisé, les organes accroissant la surface en forme de nervure (voir plus bas) sont juste couverts par le liquide].Dans l'exemple 2 de la partie concernant l'expérimentation, il ressort qu'un accroissement du rapport surface/volume d'environ 30% donne lieu à une diminution de Tgg (T90 est la durée d'incubation nécessaire pour obtenir 90 de l'adsorption maximale) d'environ 42,6% (résultat obtenu à partir des microéprouvettes contenant six organes accroissant la surface) et pour des microéprouvettes contenant dix organes accroissant la surface, les valeurs correspondantes sont respectivement d'environ 49 et d'environ 57,3%. Les organes accroissant la surface peuvent être disposés libres dans la microéprouvette sous la forme d'un insert séparé ou bien ils peuvent être fixés à la surface intérieure de la paroi de fond et/ou de la surface intérieure de la paroi périphérique. Dans une forme de réalisation préférée, les organes accroissant la surface sont fixés à la surface intérieure de la paroi périphérique. Dans une forme de réalisation préférée, les organes accroissant la surface sont disposés adjacents à la paroi de fond, par exemple fixés à la paroi de fond. En outre, les organes accroissant la surface s'étendent de préférence depuis la surface intérieure de la paroi périphérique, radialement dans l'espace intérieur de la microéprouvette. Les organes accroissant la surface peuvent avoir toutes formes appropriées, sous réserve que les exigences de ménager un espace contenant la surface imaginaire centrale en forme de cylindre circulaire, soient satisfaites. Dans une forme de réalisation préférée, les organes accroissant la surface comprennent des nervures ou parties en saillie s'détendant axialement, ménagées sur la surface intérieure de la paroi périphérique. Dans une forme de réalisation préférée, les organes accroissant la surface sont réalisés sous la forme de nervures fixées à la surface intérieure de la paroi de fond aussi bien qu'à la surface intérieure de la paroi périphérique. Les nervures sont en forme de coins et la partie en saillie radiale des nervures vers le haut décroît à partir du fond. Le nombre des organes accroissant la surface selon l'invention est de préférence d'au moins quatre des organes, de préférence d'au moins six organes, par exemple six, huit ou dix organes accroissant la surface. La distance minimale entre deux organes accroissant la surface disposés de manière adjacente est de préférence comprise entre 0,4 et 0,6 mm. La surface intérieure de la paroi périphérique définit de préférence une surface cylindrique sensiblement circulaire. La microéprouvette, aussi bien que les organes accroissant la surface, peuvent être réalisés dans le même matériau ou dans des matériaux différents. La microéprouvettes et/ou les organes accroissant la surface peuvent être non traités mais ils peuvent aussi être traités physiquement ou chimiquement pour augmenter l'adsorption et/ou l'immobilisation de certains réactifs ou analytes. A des fins d'analyse, l'utilisation d'une pluralité de microéprouvettes est généralement nécessaire. Ces microéprouvettes peuvent en conséquence être assemblées en ce qu'on appelle une plaque de microdosage. On doit comprendre que les microéprouvettes d'une telle plaque de microdosage peuvent être disposées sous la forme d'une matrice, par exemple une matrice 8x12, c'est-à-dire huit rangées et douze colonnes avec un total de 96 microéprouvettes. Ces microéprouvettes peuvent être facilement séparables les unes des autres ou certaines d'entre eux au moins peuvent être réunis. D'autres buts, avantages et caractéristiques apparaîtront à la lecture de la description de divers modes de réalisation de l'invention, faite à titre non limitatif et en regard du dessin annexé, ou: - la figure 1 est une vue en perspective d'une première forme de réalisation de la microéprouvette selon l'invention; - la figure 2 est une vue en perspective d'une seconde forme de réalisation de la microéprouvette selon l'invention; - la figure 3 est une vue en perspective d'une troisième forme de réalisation selon l'invention, disposée suivant une rangée dans un cadre de microdosage; - les figures 4, 5 et 6 illustrent trois formes de réali sation différentes de la microéprouvette selon ltinvention, représentées à échelle réduite;; - la figure 7 illustre. la matrice de la plaque de micro dosage utilisée dans l'exemple 1; - la figure 8 illustre la matrice de la plaque de micro dosage utilisée dans l'exemple 1; et - la figure 9 représente des courbes de simulation de données cinétiques d'adsorption. La microéprouvette représentée aux figures 1 et 2 comprend une paroi de fond 10 qui est réalisée en un matériau transparent de qualité optique, tel qu'une matière plastique comme le polystyrène. A partir de cette paroi de fond 10, s'étend une paroi périphérique 11 qui, dans ces modes de réalisation, définit une surface cylindrique sensiblement circulaire. Une pluralité de nervures accroissant la surface 12 formées monobloc avec la paroi périphérique ll s'étend radialement à partir de la surface intérieure de la paroi périphérique 11 et axialement vers le haut à partir de la paroi de fond 10. La forme de réalisation représentée à la figure 1 comprend dix nervures accroissant la surface et la forme de réalisation représentée à la figure 2 comprend six nervures accroissant la surface.Les parties de surface dirigées radialement vers l'intérieur des nervures 12 définissent une surface centrale imaginaire en forme de cylindre circulaire coupant la paroi de fond 10. Lorsque les microéprouvettes représentées aux figures 1 et 2 sont utilisées, elles sont placées en position verticale telle que représentée aux figures 1 et 2. Une quantité appropriée d'échantillons sous forme liquide est introduite au moyen d'une pipette dans l'espace intérieur de la microéprouvette, suivie par des réactifs appropriés. Afin d'assurer des résultats analytiques fiables, le remplissage total de la microéprouvette doit être le même pour les mêmes types d'analyse. En général, le remplissage de la microéprouvette par la matière est tel qu'au plus la totalité ou sensiblement la totalité des organes accroissant la surface 12 est couverte par la matière. L'utilisation d'une microéprouvette selon l'invention est destinée à des buts analytiques. Pendant l'analyse, il est très courant pour des mesures optiques d'utiliser la même microéprouvette que celle qui était utilisée pendant la réaction analytique. Dans ce cas, la surface centrale en forme de cylindre circulaire coupant la paroi de fond 10 mentionnée précédemment doit permettre à un faisceau lumineux de traverser la microéprouvette sans donner naissance à une réfraction et/ou adsorption intempestive. La figure 3 représente une partie d'un chassies de microdosage comprenant des microéprouvettes selon l'invention. Les microéprouvettes selon 1 invention sont très similaires aux microéprouvettes des figures 1 et 2 mais les microéprouvettes représentées à la figure 3 contiennent huit organes accroissant la surface 12. En référence aux figures 1 et 2, les éléments semblables sont affectés des mêmes chiffres de référence. Dans une plaque de microdosage, les microéprouvettes sont disposées suivant une rangée et la figure 3 illustre une variation de disposition spécifique entre des microéprouvettes ayant des organes accroissant la surface 12 et des microéprouvettes dépourvus de tels organes.En général, on préfère que la plaque de microdosage comprenne des microéprouvettes qui tous ont des nervures d'accroissement de surface 12. Les figures 4, 5 et 6 représentent des formes de réalisation modifiées de la microéprouvette selon l'invention. Ainsi, la forme de réalisation des figures 4 et 6 présente une paroi de fond plane 10 tandis que la paroi de fond de la forme de réalisation représentée à la figure 5 présente une forme de dôme ou sensiblement hémisphérique. La forme de réalisation de la figure 4 présente un bord relativement aigu défini entre la paroi de fond et la paroi périphérique. La forme de réalisation de la figure 5 a un bord incurvé défini entre la paroi de fond et la paroi périphérique. La figure 7 représente la matrice d'une des plaques de microdosage utiliséesdans l'exemple 1. Le symbole (o) correspond aux microéprouvettes normales et le symbole (n) correspond à des microéprouvettes ayant six nervures accroissant la surface. La figure 8 représente la matrice d'une autre des plaques de microdosage utilisées dans l'exemple 1. Le symbole (o) correspond à des microéprouvettes normales et (*) correspond à des microéprouvettes ayant dix nervures d'accroissement de surface. Les plaques de microdosage représentées aux figures 7 et 8 ont été utilisées dans des expériences (voir l'exemple 1) réalisées pour démontrer que des microéprouvettes ayant des nervures accroissant la surface présentent sensiblement la même uniformité d'adsorption ou meilleure que des microéprouvettes sans aucune organe accroissant la surface. L'exemple 1 a démontré que des microéprouvettes ayant des nervures accroissant la surface ont sensiblement la même uniformité d'adsorption que des microéprouvettes sans aucun organe accroissant la surface. Ainsi, l'utilisation de microéprouvettes ayant des nervures accroissant la surface s'est avérée satisfaisante pour des besoins analytiques. La figure 9 représente des courbes de simulation de données cinétiques d'adsorption avec des microéprouvettes normales (o/ ~ ), des microéprouvettes à six organes accroissant la surface (o/---) et des microéprouvettes à dix organes accroissant la surface (*/...). La figure 9 montre des points de densité optique à 490 nm en milli-unités d'extinction (mEU) rapportés à des durées d'incubation en heures. La durée d'incubation illustrée par interpolation est la Tgo, c'est à-dire la durée d'incubation nécessaire pour obtenir 90% de l'adsorption maximum.La courbe démontre que Tg0 est atteint plus rapidement pour des microéprouvettes à dix nervures accroissant la surface que pour des microéprouvettes ayant six nervures d'accroissement de surface, lesqueesâ leur tour atteignent Tgg plus rapidement que des microéprouvettes dépourvues d'organe accroissant la surface. On comprendra que différentes variations et modifications des formes de réalisation décrites en référence aux dessins peuvent être réalisées dans le cadre de la présente invention. Ainsi, les organes accroissant la surface peuvent être réalisés sous la forme d'un insert séparé qui peut être inséré dans une microéprouvette. En outre, les organes accroissant la surface peuvent présenter toutes formes augmentant la surface et peuvent être réalisés en tous matériaux appropriés, tels que par exemple des matériaux poreux comme, par exemple, des fibres minérales ou métalliques. L'invention est décrite en outre dans les exemples suivants non limitatifs. EXEMPLES Exemple 1 Comparaison de microéprouvettes dépourvues d'organe accroissant la surface avec des microéprouvettes munies d'organes accroissant la surface - Détermination du coefficient de variation Le coefficient de variation (CV) est une mesure de la variation des valeurs de la densité optique (OD) entre des microéprouvettes dans la matrice d'une plaque de microdosage et il est utilisé comme mesure de l'uniformité d'adsorption entre les microéprouvettes. Plus CV est petit, plus la per formance en matière d'adsorption des microéprouvettes est uniforme sous réserve que toutes les autres incertitudes expérimentales soient égales. L'expérience suivante a été réalisée pour démontrer s'il était possible, dans le cas de microéprouvettes munies d'organes accroissant la surface d'obtenir des coefficients de variation du même ordre d'amplitude que les coefficients de variation pour des microéprouvettes dépourvues d'organe accroissant la surface (dans la présente description dénommées "microéprouvettes normales"). On a essayé deux types de bandes d'essai MaxiSorp F8 à huit éprouvettes à fond plat (catalogue Nunc n" 468667), l'une avec des microéprouvettes à six organes accroissant la surface (dénommées ci-après microéprouvettes à six nervures) en position E et H (voir la figure 7), et l'autre avec des microéprouvettes à dix organes accroissant la surface (dénommées ci-après microéprouvettes à dix nervures) en position A' et B' (voir la figure 8). Chaque type a été assemblé dans des matrices de microdosage ayant 8x12 microéprouvettes. Les microéprouvettes à six nervures et à dix nervures furent respectivement essayées selon le test standard décrit ci-dessous en même temps qu'avec deux rangées (B et G' des figures respectives 7 et 8) de microéprouvettes normales (catalogue Nunc n" 468667) selon trois expériences indépendantes avec cinq de chaque matrice, c' est-à-dire 120 microéprouvettes de chacun des types, pour chaque expérience. La procédure standard utilisée était la suivante (cf. bulletin Nunc, n" 4, juin 1987): 1. ajouter un mélange de revêtement anticorps consistant en 3 300 ng de IgG de lapin (Dako 1008, 10 mg/ml, dilué à 1/3000) et 36 ng de IgG/HRP de lapin (Dako D128, 1,3 mg/ml, dilué à 1/36 000) par ml de tampon carbonaté 0,05M, pH 9,6, 200 pl.Sceller les microéprouvettes avec un ruban adhésif pour prévenir l'évaporation; 2. incuber dans l'obscurité à température ambiante pendant une nuit; 3. laver trois fois (Nunc-Immuno Wash) dans PBS à 0,15M (tampon salin au phosphate) avec 0,2M d'extra NaCl contenant 0,05% de Triton X-100, pH 7,2; 4. ajouter une solution au substrat, consistant en 0,5 pl de H202 à 30t et 0,6 mg de OPD.2HC1 (dichlorhydrate d'orthophénylènediamine, Fluka 78440) par ml de tampon 0,1M de phosphate-citrate, pH 5,0, 200 p1; 5.Arrêter la réaction du substrat après 3,5 à 4 minutes en ajoutant H2 S04 2N, 150 pl; 6. lire les valeurs OD (densité optique) à 490 nm comparé à un substrat non converti dans un lecteur immuno NJ 2000 (Nippon InterMed); 7. calculer le CV pour les mesures OD d'une matrice 8x12 de microéprouvettes selon la formule suivante: dans laquelle: S = déviation standard des lectures OD X = moyenne des lectures OD X = lecture OD individuelle N = nombre de lecture (microéprouvettes) On a obtenues résultats suivants:: TABLEAU 1 Exp. 1 Exp. 2 Exp. 3 X mEU 961 954 908 rangée B CV % 1,6 2,2 2,7 X mEU 1006 977 919 o rangée G' CV % 1,6 2,4 2,6 X mEU 984 966 913 total CV % 2,8 2,6 2,7 X mEU 1132 1126 1074 rangée E CV % 2,1 2,4 2,4 X mEU 1185 1182 1115 2 rangée H CV % 2,5 3,1 2,6 X mEU 1159 1154 1095 total CV % 3,3 3,7 3,1 Exp. 1 Exp. 2 Exp. 3 X mEU 1315 1344 1198 rangée A' CV % 1,7 2,1 3,0 X mEU 1279 1297 1162 * rangée D' CV % 2,1 2,0 2,1 X mEU 1297 1320 1180 total CV % 2,3 2,7 3,0 Les symboles dans la première colonne du tableau 1 correspondent au type de microéprouvettes utilisé (cf. figures 7 et 8, et mEU = milli-unités d'extinction). Selon les exigences générales du déposant en matière de CV, on devrait obtenir un CV de moins de 5% pour une matrice de microéprouvettes de 8x12. Comme cela ressort des résultats donnés dans le tableau 1 ci-dessus, ce critère est satisfait pour toutes les microéprouvettes qui ont été essayées au cours de cette expérience. En outre, comme aucune lecture OD individuelle ne dévie de plus de 10% de la valeur moyenne pour chaque type de microéprouvettes, on a conclu qu'une matrice consistant en microéprouvettes à nervures satisferait plus vraisemblablement à un critère de certification de CV Exemple 2 Détermination du temps d'incubation Huit microéprouvettes du même type que celles utilisées dans l'exemple 1 étaient mises à incuber pour des durées différentes avec 200 ,ul d'un mélange d'une conjugaison IgG-HRP (Dako P128) et d'IgG pur (Dako A008) (1/10) sous une concentration totale de 0,333 pg/ml, suivi par une réaction du substrat avec 200 ul d'une solution de substrat H202/0PD (cf. exemple 1, article 4), pour rechercher une relation possible entre le rapport surface/volume et la durée d'incubation. Les cinétiques d'adsorption (figure 9) étaient simulées suivant l'équation suivante: dans laquelle: Bt nombre de molécules liées à l'instant t t = durée d'adsorption écoulée en heures A = nombre de molécules en monocouche E t = fraction de A occupé à l'instant t F = C/A dans lequel C = nombre initial de molécules en solution -1 P = rapport surface/volume en cm D = constante de diffusion de IgG = 1,44 x 10 3 cm2 h La figure 9 montre les valeurs obtenues pour les types expérimentés de microéprouvettes (représentées par des points simples) avec les courbes de simulation obtenues en utilisant l'équation des cinétiques d'adsorption mentionnée ci-dessus et les paramètres donnés ci-dessous sur le tableau 2. TABLEAU 2 Paramètres des simulations de données de la figure 9. est est la durée d'incubation nécessaire pour obtenir 90% de l'adsorption maximum calculée à partir de l'équation mentionnée ci-dessus; V = volume de liquide; S = aire de la surface. Les symboles donnés dans la première colonne indiquent le type de microéprouvettes employé (cf. figures 7 et 8). La dernière rangée donne les chiffres interpolés pour une éprouvette à huit nervures (8) qui peut être la configuration préférée, eu égard aux laveurs et aux distributeurs. V S P Conc. T90 T90.p2 -1 Config. cm3 cm2 cm g/cm3 F h h/cm2 o 0,2 1,54 7,7 0,333.10-6 0,108 17,8 1055 t, 0,2 2,0 10,0 0,333 " 0,0832 10,2 1020 * 0,2 2,3 11,5 0,333 " 0,0723 7,6 1005 (8) 0,2 2,15 10,8 0,333 " 0,0774 8,8 1025 Comme on le voit à la figure 9, une diminution accentuée de la durée d'incubation est obtenue dans ceux des cas où l'on utilise des microéprouvettes nervurées.Quand on utilise des microéprouvettes normales, une durée d'incubation d'environ 17,8 heures est nécessaire pour obtenir 90% de l'adsorption maximum, tandis qu'une durée d'incubation de seulement 7,6 heures approximativement est nécessaire avec des microéprouvettes à dix nervures (ctest-à-dire une réduction de la durée d'incubation d'approximativement 57,3%). La constance approchée des chiffres de la dernière colonne (T90.P2) du tableau 2 indique que la durée d'incubation peut être réduite par des facteurs qui sont égaux aux carrés des facteurs d'incrément spécifiques surface/volume. On a trouvé en outre que cette réduction de la durée d'incubation serait également valable non seulement pour des adsorptions de la première couche, mais pour n'importe quelle couche d'une séquence de biodosage en phase solide. Bien entendu, la présente invention n' est pas limitée aux modes de réalisation décrits et représentés mais elle est susceptible de nombreuses variantes accessibles à l'homme de l'art sans que l'on ne s'écarte de l'esprit de l'invention. REVENDICATIONS 1.- Microéprouvettes destinée à être utilisée pour les analyses biologiques et comprenant une paroi de fond et une paroi périphérique partant de celle-ci, caractérisé en ce qu'elle comporte une pluralité d'organes (12) accroissant la surface et disposés dans un espace défini entre la surface intérieure de la paroi périphérique (11) et une surface centrale imaginaire en forme de cylindre circulaire coupant ladite paroi de fond (10) de manière à permettre l'introduction d'une pipette dans la microéprouvette à travers ledit cylindre circulaire pour introduire ou retirer de la matière dans la microéprouvette de manière à permettre à un faisceau lumineux de traverser ledit cylindre circulaire afin de permettre de mesurer la densité optique de la matière contenue dans la microéprouvette. 2.- Microéprouvette selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'aire de la surface desdits organes (12) accroissant la surface augmentée de ladite surface intérieure de la paroi périphérique (11) et de la surface intérieure de ladite paroi de fond (10) de la microéprouvette est supérieure d'au moins 1,1 fois et de préférence d'au moins 1,2 fois à l'aire de la surface intérieure de la paroi périphérique (12) et de la surface intérieure de la paroi de fond (10) seules. 3.- Microéprouvette selon la revendication 1, caractérisée en ce que le rapport surface/volume de ladite micro -1 éprouvette est d'au moins 7,7 cm 4.- Microéprouvette selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que chacun desdits organes (12) accroissant la surface est fixé à la surface intérieure de la paroi périphérique (11). 5.- Microéprouvette selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les organes (12) accroissant la surface sont disposés adjacents à la paroi de fond (10). 6.- Microéprouvette selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la surface intérieure de la paroi périphérique (11) définit une surface cylindrique sensiblement circulaire. 7.- Microéprouvette selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les organes (12) accroissant la surface comprennent des nervures ou parties en saillie s'étendant axialement, ménagées sur la surface intérieure de la paroi périphérique (11). 8.- Microéprouvette selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les organes (12) accroissant la surface s'étendent à partir de la surface intérieure de la paroi périphérique (11) radialement dans l'espace intérieur de la microéprouvette. 9.- Microéprouvette selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle comporte au moins quatre organes (12) accroissant la surface. 10.- Microéprouvette selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle comporte huit organes (12) accroissant la surface. 11.- Microéprouvette selon la revendication 7, caractérisée en ce que la distance minimale entre deux nervures ou parties en saillie accroissant la surface et disposées de manière adjacente est de l'ordre d'environ 0,4 à 0,6 mm. 12.- Microéprouvette selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit cylindre circulaire central présente un diamètre d'au moins 2 mm. 13.- Une plaque de microdosage caractérisée en ce qu'elle comprend une pluralité de microéprouvettes selon l'une quelconque des revendications 1 à 12.