Brevet FR2709421A1 — publié le 19950310

Utilisation de dérivé du benzimidazole comme agent stabilisant les radicaux libres dérivés de chlorpromazine et leur application thérapeutique. L'invention est relative à l'utilisation comme agent stabilisateur de radicaux libres d'un dérivé de benzimidazole et aux compositions pharmaceutiques ou vétérinaires contenant une substance pharmaceutiquement active sous forme de radicaux libres et cet agent stabilisateur. Le brevet FR-2.626.178 décrit un procédé de préparation extemporané d'un soluté médicamenteux injectable contenant des molécules irradiées par des photons et ayant subi une photodis sociation. Ce brevet décrit plus particulièrement que de telles molécules présentaient des propriétés mutagènes et thérapeutiques particulièrement intéressantes. La chlorpromazine (CPZ) bien connue en thérapeutique pour ses propriétés neuroleptiques, vagolitiques et sympatholitiques lorsqu'elle a été fractionnée en radicaux libres par absorption UV, possède des propriétés mutagènes, antitumorales et antivirales. Les inventeurs ont cependant constaté que les molécules sous forme de radicaux libres du fait de leur grande réactivité sont très instables de sorte que leur emploi thérapeutique est très difficile, alors que certaines d'entre elles ont des propriétés qui justifieraient un tel emploi. C'est en particulier le cas pour le radical libre obtenu par irradiation aux UV d'un soluté aqueux de chlorpromazine. Le radical libre obtenu par exclusion du chlore sur la chlorpromazine a provoqué la mutation létale d'un virus, celui de la leucémie aviacre et la mutation non létale de cellules cancéreuses. Traitées par ce radical, ces cellules continuent à consommer de l'oxygène, à produire de l'acide lactique et deviennent incapables de développer un cancer. Or, les inventeurs ont constaté par examen par spectroscopie par résonance paramagnétique électronique la durée très courte de ce radical et donc son effet thérapeutique limité. Les inventeurs viennent de découvrir qu'un dérivé de benzimidazole, en particulier le parachlorohydroxybenzylbenzimidazole avait un effet stabilisateur particulièrement intéressant pour le radical libre et permettait, de façon surprenante, de stabiliser le radical libre et donc de prolonger son activité thérapeutique. L'invention a donc pour objet l'utilisation d'un dérivé de benzimidazole comme agent stabilisateur de radicaux libres, en particulier de la chlorpromazine sous forme de radicaux libres. Un autre objet de l'invention est constitué par les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires contenant au moins de la chlorpromazine sous forme de radicaux libres et à titre d'agent stabilisateur, un dérivé de benzimidazole. D'autres objets de l'invention apparaîtront à la lecture de la description et des exemples qui suivent. L'invention a pour objet l'utilisation du parachlorohydroxybenzylbenzimidazole de formule (I): comme agent stabilisateur des radicaux libres issus de l'irradiation de la chlorpromazine. La composition pharmaceutique ou vétérinaire conforme à l'invention se présente sous forme d'un soluté aqueux de chlorpromazine de formule (II): irradié par des rayonnements UV et présente sous forme de radicaux libres de formule (III): et au moins du parachlorohydroxybenzylbenzimidazole de formule (I) dans des proportions suffisantes pour stabiliser les radicaux libres. De préférence, la composition conforme à l'invention contient 0,1 à 1% de chlorpromazine et en particulier 0,15 à 0,40% de chlorpromazine en poids par rapport au poids de la composition. Le parachlorohydroxybenzylbenzimidazole est utilisé de préférence dans les proportions comprises entre 1 et 0,01% en poids, en particulier entre 0,5 et 0,1%. Le milieu est constitué de préférence par un milieu isotonique approprié pour l'injection contenant des électrolytes physiologiquement acceptables, de préférence du chlorure de sodium. Les inventeurs ont constaté que le radical libre dérivé de chlorpromazine ainsi stabilisé permettait d'avoir une conservation de l'activité, en particulier sur des cellules cancéreuses. Ceci a plus particulièrement été mis en évidence par l'inhlbition de la croissance des cellules de la leucémie murine L12 10 sur 48 heures de culture après 15 minutes de contact avec l'irradiat. La composition ainsi préparée peut notamment être appliquée en mettant en oeuvre le dispositif décrit dans le brevet FR-2.626.178. L'exemple suivant est destiné à illustrer l'invention sans pour autant présenter un caractère limitatif. 5 cm3 d'une solution aqueuse de chlorpromazine (CPZ) à 0,5 g/1000 sont placés dans une boîte de Pétri en verre de 9 cm de diamètre et à 10 cm sous une lampe à UV de 100 W. L'irradiation dure 10 minutes. L'échantillon stabilisé contient 15 mg de parachlorohydroxybenzylbenzimidazole (HBBPC) pour 5 cm3 de solution irradiée. La stabilité a été examinée par résonance paramagnétique électronique. Conditions d'enregistrement par résonance paramagnétique électronique : gain 8105 modulation 2 G, balayage 100 G. Le spectre a été enregistré aux temps O, 10, 25 minutes pour la chlorpromazine seule 0, 10, 25, 35 minutes pour la chlorpromazine + HBBPC. Le tableau suivant donne les résultats dans lesquels les chiffres indiquent en centimètre l'amplitude en hauteur du signal. TEMPS 0 10 minutes 25 minutes 35 minutes CPZ irradié 5,5 0 0 CPZ + HBBPC 7,5 5,5 5 5 On constate que le radical ainsi stabilisé conserve son activité sur les cellules cancéreuses. Cette activité a été mise en évidence par l'inhibition de la croissance des cellules de la leucémie murine L12 10 sur 48 heures de culture après 15 minutes de contact avec l'irradiat. Ces cellules sont cultivées sur un milieu RPMI 1640 enrichi avec 10% de sérum de veau foetal et d'antibiotiques. La température est de 370C. L'atmosphère humide est à 5% de CO2. Le repiquage est 2 fois par semaine. Le tableau ci-dessous donne les pourcentages d'inhibition de croissance. Temps 0 Termps 30 minutes CPZ irradié 38 0 CPZ + HBBPC 36 46 REVENDICATIONS 1. Utilisation du parachlorohydroxybenzylbenzimidazole répondant à la formule (I): comme agent stabilisateur de radicaux libres dérivés de chlorpromazine irradiée par rayonnements UV. 2. Composition pharmaceutique ou vétérinaire, caractérisée par le fait qu'elle se présente sous forme d'un soluté aqueux de chlorpromazine ayant subi une irradiation aux UV et présente dans la composition sous forme de radicaux libres répondant à la formule (III) et au moins du parachlorohydroxybenzylbenzimidazole répondant à la du arachlorohydroxybenzyl et au moms p formule (I): dans des proportions suffisantes pour stabiliser le radical libre dérivé de la chlorpromazine. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée par le fait que la composition contient 0,1 à 1% de chlorpromazine irradiée pour former un radical libre, exprimé en poids par rapport au poids total de la composition. 4. Composition selon la revendication 2 ou 3, caractérisée par le fait que le parachlorohydroxybenzylbenzimidazole est présent dans des proportions comprises entre 1 et 0,01% par rapport au poids total de la composition. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, pour son application au traitement de cancers. 6. Utilisation de la composition telle que définie dans l'une quelconque des revendications 2 à 4, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de cancers. 7. Utilisation selon la revendication 6, pour le traitement de leucémies.