Brevet FR2706464A1 — publié le 19941223

La présente invention, réalisée au Centre de Recherche Pierre Fabre. a pour objet de nouveaux composés chimiques. leur préparation et leur application en therapeutique. Les composes de l'invention répondent à la formule générale 1: Es Ri R2N Ra, R E" t:---P p 'h R,'/ N/ 'XN> i L NP W X (CHI)n dans laquelle: n peut prendre les valeurs O, 1 ou 2, R1 et Rz représentent, indépendamment l'un de l'autre, un hydrogène ou un groupement méthyle, l'un au moins des radicaux R1 etR2 représentant un groupement méthyle, X est un atome d'oxygène ou un groupement NR3, R et R3 peuvent être indifféremment un atome d'hydrogène, un groupement alkyl en CI à C6 (linéaire, ramifié ou cyclique) ou un groupement CH2-Ar, Ar représente un phényle substitué ou non par un ou plusieurs substituants choisis parmi: un groupe alkyl en C1 à C4 linéaire ou ramifié, un groupe alkoxy en CI à C16 linéaire ou ramifié, un atome d'halogène. Les composés de formule générale 1 peuvent être synthétisés en deux étapes selon le schéma réactionnel suivant à partir des diamines ou des aminoalcools 3 convenablement substitués et préparés selon des procédés classiques décrits dans la littérature. Schéma de synthèse des composes de formule generale I ci ci ci ci Cl ó1 C1 Cl No IN HX (CHI " NP'RN ; C.P-e, i- CI ' I " C c-P X NR CF, ci N Ci H Ci X..H)n 2 3 4 Ri cic p R R R2 ' N- N N' p R /NH N CiN1 R - N' N 4 5 1 o R, R1, R2, X et n sont définis comme ci-dessus. La réaction entre l'hexachlorocyclotriphosphazène () et la diamine ou l'aminoalcool 3 s'effectue soit: a en milieu monophasique à une température comprise entre -10 C et la température de reflux du milieu réactionnel, dans un solvant tel que le tétrahydrofuranne (THF), le toluène, l'acétonitrile ou l'éther éthylique en présence d'une base organique telle qu'une amine tertiaire. = en milieu biphasique comportant une solution aqueuse d'une base minérale telle que la soude, la potasse ou un carbonate de sodium ou de potassium et un solvant organique tel que l'éther éthylique ou diisopropylique, le toluène ou le chlorure de méthylène et à une température comprise entre 0 C et la température de reflux du milieu réactionnel. On obtient ainsi, après extraction du milieu réactionnel et purification, le composé de formule générale 4 qui, par réaction avec l'aziridine convenablement substituée 5 mise en excès et éventuellement d'une base organique telle que la triéthylamine, à une température comprise entre -10 C et 50 C et dans un solvant tel que le TEF, donne le composé de formule générale 1. Les analyses élémentaires et les spectres IR et RMN du proton et du phosphore confirment la structure des composés obtenus selon l'invention. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée. EXEMPLES Exemple I 2.2,44-Tétrachloro-2,2.4,4-tétrahydro- 1,3,5,7,1 1-pen taaza-2,4,615triphosphaspiro- [5,51-undéca-1,3,5-triène, Composé: 4a (n = 1, X = NR3, R3 et R = H). Dans un ballon de 5Oml et sous agitation, on introduit 10ml (0,12 mole) de NN'-diethyl- 1.3-propanediamine, 300ml d'éther diisopropylique, 8,8g (0,22 mole) de soude, 30g de chlorure de sodium, 100g de glace et 34,8g (0,1 mole) d'hexachlorocvclotriphosphazène. L'agitation est maintenue 2 heures en laissant la température s'élever à 20 C. Les deux phases sont séparées, la phase aqueuse est extraite par 50ml d'éther diisopropylique. Les deux phases organiques réunies sont lavées par 20ml d'eau puis par 20ml de saumure. Après séchage sur sulfate de magnésium, l'éther diisopropylique est évaporé et le résidu cristallin est trituré dans 200ml d'hexane. Après filtration, rinçage et séchage sous vide à 30 C, on obtient 30,6g de composé 4a sous forme de cristaux blancs. Rendement: 88%. PF: 164 C. RMN 1H (CDCI3): 1,79 (quint, 2H, C-CH2-C); 2,77 (large, 2H, NH); 3,31l (dt, 4H, N- CH2-C, JPH: 15,6-Hz, JH.: 5,85Hz). Analyse % Calc C: 10,33 H: 2,31 N: 20,08 Cl: 40,65 élémentaire: % Tr. C: 10,60 H: 2,25 N: 19,83 Cl: 40,73 2,2,4,4-Tétra-(1-[2-méthyl-aziridinyl])-2,2,4,4-tétrahydro-1, 3,5,7,1 1-pentaaza-2,4, 6X5-triphosphaspiro-[5,51-undéca-1,3,5-triène, Composé: la (n = 1, X = NR3, R1 = Me, R2, R3 et R= H). Dans un réacteur double enveloppe de 250ml, on introduit 5g (0,0143 mole) de composé 4a, 40ml de THF et 12ml (0,086 mole) de triéthylamine. Le milieu réactionnel est maintenu à -10 C par circulation de saumure dans la double enveloppe. Sous agitation, une solution composée de 7,1ml (0,1 mole) d'aziridine et de 10ml de THF est introduite en 15mn dans le réacteur. L'agitation est maintenue lh à -10 C puis 24h à température ambiante. Le milieu réactionnel est filtré, la solution est évaporée et le résidu est chromatographié par passage à travers une colonne de silice (75g) en éluant par un mélange constitué de chloroforme, de méthanol et d'ammoniaque dans les proportions: 95 / 4,5 / 0,5. Le produit ainsi purifié est repris dans 20ml de chlorure de méthylène et évaporé sous vide. L'huile résiduelle est chauffée à 30 C sous 10-2 mbar pendant une heure. On obtient ainsi 4g de composé la sous forme d'huile incolore contenant 7,2% de chlorure de méthylène. Rendement: 60%. RMN tH (CDC13): 1,4 à 1,45 (m, 12H, -CH3); 1,56 (q, 2H, -C-CH2-C-); 1,74 (d large, 4H, -CH-Me, JPH: 10Hz); 2,1 à 2,5 (m, 10H, N-CH2-CMe et NH); 3,15 à 3,30 (m, 4H, N-CH2- C-C-); 5,28 (s, 0,SH, CH2CI2). Analyse % Calc* C: 39.77 H: 7.11 N: 27,11 élémentaire: % Tr. C: 39.38 H: 7,33 N: 26,72 * En intégrant le chlorure de méthylene Exemple 2 4-(Phénylméthyl)-7,7,9,9-tétrachloro-7,7,9,9-tétrahydro- l-oxa-4,6,8,10tétraaza-5?5,7, 9-triphosphaspiro-[4,51-déca-5,7,9-triène: Composé 4h (n = 0, X = O, R = CH2Ar, Ar = Phényl). Dans un ballon de 500ml, on introduit 12,65g (0, 0364 mole) d'hexachlorocyclotriphosphazene, 100ml de THF et 9,2ml (0,066 mole) de triéthylamine. Sous agitation et à 0 C on introduit, en 15mn une solution composee de 5g (0,033 mole) de 2-benzylaminoéthanol et de 20ml de THF. L'agitation est maintenue 30mn à 0 C puis 24 heures à 20 C. Le milieu réactionnel est filtré. La solution est évaporee et le résidu est chromatographié par passage à travers une colonne de silice (65g) en éluant par un mélange constitué de cyclohexane, de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle dans les proportions: 65 / 30 / 5. Le produit ainsi purifié est recristallisé dans 200ml d'hexane puis filtré, rincé et séché sous vide à 30 C. On obtient ainsi 8,13g de composé 4h sous forme de cristaux blancs. Rendement: 58%. PF: 116-117 C. RMN 1H (CDCI3): 3,21 à 3,33 (m, 2H, C-CH2-N); 4,1 (d, 2H, N-CH2-Ar, JPH: 9,4 H-z); 4,32 à 4,43 (m, 2H, C-CH2-O); 7,28 à 7,43 (m, 5, Ar). Analyse % Calc C: 25,38 H: 2,60 N: 13,15 élémentaire: % Tr. C: 25,47 H: 2,66 N: 13,04 4(Phénylméthyl)-7,7,9,9-tétra-(1-[2-méthyl-aziridinyll)-7,7,9,9tétrahydro- l-oxa-4,6, 8,10-tétraaza-5=S5,7,9-triphosphaspiro-[4,5]-déca5,7,9-triène: Composé lh (n = O, X = O, R1 = Me, R2 = H, R = CH2Ar, Ar = Phényl). Dans un réacteur double enveloppe de 125ml, on introduit 4g (0,00937 mole) de composé 4h, 80ml de THF et 7,8mJ (0,0562 mole) de triéthylamine. Le milieu réactionnel est maintenu à -10 C par circulation de saumure dans la double enveloppe. Sous agitation, une solution composée de 5,3ml (0,075 mole) d'aziridine et de 20ml de TIF est introduite en lSrnn dans le réacteur. L'agitation est maintenue lh à -10 C puis 48h à température ambiante. Le milieu réactionnel est filtré, la solution est évaporee et le résidu cristallin est chromatographié par passage à travers une colonne de silice (200g) en éluant par un mélange constitué de chloroforme, de méthanol et d'ammoniaque dans les proportions: 95 / 4,5 / 0,5. Le produit ainsi purifié est cristallisé dans 20ml de cyclohexane, filtré, puis recristallisé dans le minimum d'hexane avant d'être rincé et séché sous vide à 30 C. On obtient ainsi 1, l2g de composé 1 h sous forme de cristaux blancs Rendement: 25%. PF: 95-97 C. RNMN IH (CDCI3): 1,2 à 1,27 (4s. 12H. C-CH3): 1,77 (large. 4H. -CH-Me); 2.12 à 2.40 (large, 8H, N-CH2-CMe); 3.06 à 3.17 (m, 2H, N-CH,-C): 4.02 i 4.23 (m. 4H.Nr-CH2-Ar et O-CH,-C); 7.25 à 7,45 (m. 5H. Ar) Analyse % Calc C: 49,60 H: 6,94 N:.2.,04 élémentaire: % Tr. C: 49.75 H: 6,98 N: 21,70 Le tableau 1 ci-après résume les principaux produits synthétisés qui illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée. Tableau 1 Composé n X| RI R,1 R3 i R Ar *c F C v s31 P n * J in P. 4-- P sptro JPPH: la I NR3 Me H H H - ' Hu m 36.5 t 18.26 32.9 I. I NR3 Me H H Ethd. - Hu m36.1 i36.6 m20.4i21.2 leI NR3 Me H Effi1 Edfti -_ Hu m 35.4 i 35.9m 22.3 à 23.2 Id 1 NR3 Me H H CH2Ar Phén i 92-93 m36.2i37 m20.8i21.6 le 1 NR3 Me H H CH2Ar. 4-Hexadoe.y- 59.60m36.3i36.6m20. i5à21.5 - 1I 2 O Me H 1 H * -. Hu m 37.1 i37.8 t24.85 42 l O!SMe H - CH2Are. PhéM Hu m36.8 i 37.4m20.5 i 21.4 lh O O Mc H CH2Ar Phérvn 95-97 m37.4 i38.9 m 31.1 â32.3 Pl O Me H - Me * - '* Hu m37.6 i 38.2m31.7 i 32.7 1_ 0 O 1Mc Me -Me. _M 90- 9128.37 et28.39 q30.29 40.2et51.5 Hu: Huile non cistallisable. P Az: Déplaemet chniquc des phosphore portant deux azridnes. P Spiro: Dépement chimque du phosore ponant la boucle. J PP: Fréquece de couplage dus phophoes {e eux. ACTIVITE PHIARMACOLOGIQUE Les composés de l'invention ont été testés in vivo sur les modèle P 388 et MXT. Le modèle P 388 consiste à injecter des cellules leucémiques P 388 dans la cavité périto- neale de souris puis à traiter les animaux par la même voie avec un composé afin de déterminer le gain de survie conféré éventuellement par la molécule par rapport à la survie des animaux non traités. Le résultat est exprimé par le rapport, exprimé en pourcentage, entre le temps médian de survie du lot de souris traitées et celui du lot contrôle (T/C). L'expérience est arrêtée quand T/C est égal à 300 et les animaux survivants sont comptabilisés (L.S.). L'activité est considérée comme significative lorsque T/C > 130. Le tableau 2 montre, à titre d'exemple. les résultats obtenus, aux posologies 4 x 80 et 4 x mg/kg, pour le dérivé la. Tableau 2 Composé no MIodèle Posologie T/C LS. la P 388 4 x 80mg/kg 300 7 la P 388 4 x 120mg/kg 300 9 Le modèle MXT consiste à greffer, en sous-cutané, un petit fragment tumoral au niveau du dos des souris. Le traitement et l'évaluation, (T/C, L.S.), se font comme pour le modèle P 388. A la cinquième semaine, la surface de la tumeur des animaux traités est comparée à celle des animaux du lot contrôle et le résultat est exprimé en pourcentage de régression tumorale (R.T.). Le tableau 3 montre, à titre d'exemple, les résultats obtenus aux posologies 6 x 40 et 9 x mg/kg, pour le dérivé la. Tableau 3 Composé n| Modèle Posologie T/C LS. R.T. l1a MXT 6 x 40mg/kg 142 0 59% la MXT 9 x 40mg/kg 165 0 40% Compte tenu de leurs propriétés pharmacologiques, les composés de l'invention peuvent être utilisés en thérapie humaine dans le traitement de la pathologie cancéreuse. Les préparations pharmaceutiques contenant ces principes actifs peuvent être mises en forme pour l'administration par voie orale, intraveineuse ou souscutanée. REVENDICATIONS (1) Nouveaux dérivés de spirodiaza ou spirooxaaza alkylcyclotriphosphazènes correspondant à la formule générale 1: R2 /N R N j i:N--P. P--, dans laquelle: n peut prendre les valeurs O, I ou 2, R_ et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un hydrogène ou un groupement méthyle, l'un au moins des radicaux R1 etR2 représentant un groupement méthyle, X est un atome d'oxygène ou un groupement NR3, R et R3 peuvent être indifféremment un atome d'hydrogène, un groupement alkyl en CI à C6 (linéaire, ramifié ou cyclique) ou un groupement CH2-Ar, Ar représente un phényle substitué ou non par un ou plusieurs substituants choisis parmi: un groupe alkyl en C1 à C4 linéaire ou ramifié, un groupe alkoxy en C1 à C16 linéaire ou ramifié, un atome d'halogène. (2) Composés de formule générale 1 selon la revendication 1, caractérisés par le fait qu'ils sont choisis parmi: 2,2,4,4-Tétra-(1 -[2méthyl-aziridinyl])-2,2,4,4-tétrahydro- 1,3,5,7,1 1-pentaaza-2,4, 6X5-triphosphaspiro-[5,5]-undéca- 1,3,5-triène. 7-Ethyl-2,2,4,4-tétra-( 1-[2-méthyl-aziridinyl])-2,2,4,4-tétrahydro-1,3, 5,7,11 -pentaaza -2,4,6x.5 -triphosphaspiro-[5,5]-undéca-1,3,5-triène. 7,1 l-Diéthyl-2,2,4,4-tétra-(1-[2-méthyl-aziridinyl])-2,2,4,4-tétrahydro1,3,5,7, 1-pen taaza-2,4,6X5 -triphosphaspiro-[5.5]-undéca- 1,3.5-triène. 7-(Phénylméthyl)-2.2,4,4-tétra-( -[2-méthyl-aziridinyl])-2,2,4.4tétrahydro- 1,3,5,7.1 1l pentaaza -2,4, 6X5 -triphosphaspiro-[5, 5]-undéca-1,3,5-triène. 7-([4-Hexadécyloxyphényl]méthyl)-2,2,4,4-tétra-( i-[2-méthylaziridinyl])-2,2,4,4-te- trahydro- 1,3,5,7, 1 1 pentaaza -2,4,6X5 -triphosphaspiro-[5,5]-undéca1,3,5-triene. 2,2,4,4-Tétra-( 1-[2-méthyl-aziridinyl])-2,2,4,4-tétrahydro-7-oxa- 1,3,5, 12-tetraaza-2, 4,6A5-triphosphaspiro-[5,6]-dodéca- 1,3,5-triène. 1 -(Phénylméthyl)-2,2,4,4-tétra-(1-[2-méthyl-aziridinyl])-2,2,4,4tétrahydro-7-oxa- 1,3,5,11 -tétraaza-2,4,6X5-triphosphaspiro-[5, 5]-undéca- 1,3,5-triéne. 4-(Phénylméthyl)-7,7,9,9-tétra-( 1 -[2-méthyl-aziridinyl])-7,7,9,9tétrahydro- 1-oxa-4,6, 8, 1 O-têtraaza-5.5,7,9-triphosphaspiro-[4, 5]-déca-5,7,9-triène. 4-Méthyl-7,7,9,9-tétra-( 1 -[2-méthyl-aziridinyl])-7,7,9,9-tétrahydro- 1oxa-4,6,8,10-té- traaza-5X5,7,9-triphosphaspiro-[4, 5]-déca-5,7,9-triène. 4-Méthyl-7,7,9,9-tétra-(1 -[2,2-diméthyl-aziridinyl])-7,7,9,9-tétrahydro1-oxa-4,6,8, i 0-tétraaza-5X5,7,9-triphosphaspiro-[4,5]-déca-5,7,9-triène. (3) Procédé de préparation de composés de formule générale L selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule générale 4 avec l'aziridine convenablement substituée 5 en présence d'une base selon le schéma suivant: R2 Cl iR Cl XN R 2N... R Ncl N NI SNH Cl-p1-, p/N ± pN ci N R X H)n RzX (C5H)n 4 1 o X, n. R, R1 et R2 sont définis comme precédemment. Procédé de préparation de composes selon la revendication 3. caractérisé en ce que la réaction entre un composé de formule générale 4 et l'aziridine convenablement substituée 5 mise en excès s'effectue au sein d'un solvant tel que le tétrahydrofuranne. éventuellement en présence d'une base organique telle que la triéthylamine et de préférence à une température comprise entre -10OC et 50 C. (5) A titre de médicaments nouveaux utiles en thérapeutique humaine, en particulier dans le traitement de la pathologie cancéreuse, les composés définis selon l'une des revendications 1 et 2. (6) Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient à titre de principe actif au moins un composé selon l'une des revendications 1 et 2, associé à un véhicule pharmaceutique acceptable.