Brevet FR2693107A1 — publié le 19940107

La présente invention vise a fournir des moyens pour la prévention de la cataracte secondaire. La cataracte secondaire est l'opacification qui survient dans un grand nombre de cas après l'extraction extracapsulaire de cristallins cataractés. Pour prévenir la cataracte secondaire, on a déjà proposé dans EP-A-O 299 467 d'instiller dans la chambre antérieure ou postérieure de l'oeil, pendant ou après l'extraction de cristallin, un conjugué d'un anticorps, tel qu'un anticollagène, et d'une cytotoxine capable d'inhiber la croissance de cellules épithéliales. Dans WO-A- 89/12093, on a également proposé de prévenir la cataracte secondaire pour l'administration d'anticorps monoclonaux spécifiques conjugués éventuellement à des cytotoxines. La présente invention vise à fournir de nouveaux moyens pour prévenir la cataracte secondaire. La présente invention a ainsi pour objet un procédé pour prévenir la cataracte secondaire, qui consiste à administrer un composé de formule dans laquelle : X1 représente un atome d'hydrogène, un résidu Gly, un groupe N-protecteur, notamment un groupe - COR3 ou - CO - OR3 R3 étant un groupe alkyle en C1-C18, un groupe cycloalkyle en C3-C8, un groupe aryle, notamment phényle, un groupe aryle, notamment phényle, portant un ou plusieurs substituants choisis parmi un groupe alkyle en C1 -C6, un groupe hydroxy, un groupe alcoxy en C1-C6, un groupe alkyle en C1- C6 mono ou polyhydroxylé, un groupe mono ou poly(alcoxy en C1-C6) (alkyle en C1-C6), un groupe amino, un groupe mono ou di(alkyl en C1-C6) amino, un groupe acétamido et un groupe sulfonamido, ou un groupe aryl(alkyle en C1-C4), notamment phényl(alkyle en C1-C4), et X2 représente un groupe hydroxy, un résidu Ser, un groupe Ser-Pro ou Ser-Pro-Cys, ou un groupe de formule R1 et R2 représentant, indépendamment l'un de l'autre, un groupe akyle en C1-C18, un groupe cycloalkyle en C3-C8, un groupe aryl(alkyle en C1-C4), notamment phényl(alkyle en C1-C4), R1 pouvant en outre représenter un atome d'hydrogène, ou R1 et R2 forment ensemble et avec l'atome d'azote sur lequel ils sont fixés un groupe pyrrolidono, pipéridino ou pipérazinyle éventuellement substitué par un radical alkyle en C1-C4 ou un groupe 4-hydroxypipéridino, ou un de ses sels d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable. La présente invention a également pour objet des compositions ophtalmiques contenant en solution dans un solvant ophtalmique un composé de formule I tel que défini ci-dessus ou un de ses sels d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable. La présente invention a également pour objet des implants et anses cristalliniens dans lesquels sont incorporés ou sur lesquels sont déposés un composé de formule I tel que défini ci-dessus ou l'un de ses sels d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable. La présente invention a également pour objet des composés nouveaux pour la mise en oeuvre de l'invention. Ces composés sont des composés de formule I dans laquelle XX représente un groupe N-protecteur tel que défini cidessus et X2 représente un groupe de formule tel que défini ci-dessus, et leurs sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables. Par "sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables", on désigne les sels qui donnent les propriétés biologiques des bases libres, sans avoir d'effet indésirable. Ces sels peuvent être notamment ceux formés avec des acides minéraux, tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique; des sels métalliques acides, tels que l'orthophosphate disodique et le sulfate monopotassique, et des acides organiques, tels que l'acide formique, l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide glycolique, l'acide oxalique, l'acide fumarique, l'acide lactique, l'acide succinique, l'acide tartrique et l'acide pamoïque. Les composés de formule I peuvent être préparés de manière classique par synthèse peptidique en phase liquide ou solide, par couplages successifs des différents résidus d'acides aminés à incorporer, de l'extrémité C-terminale vers l'extrémité N-terminale, et dont les extrémités N-terminales et les chaînes latérales réactives sont préalablement bloquées par des groupements tels que ceux mentionnés ci-dessous - extrémité N-terminale bloquée par les groupes BOC, Fmoc, Acyl - extrémité C-terminale bloquée par les groupes ester, amide - extrémités latérales de l'aspartyle : bloquée par un groupe ester tel que ester benzylique, de l'arginyle : bloquée par un groupe Hs (protonation) ou tosyle. On peut utiliser différentes méthodes de couplage 1) couplage des résidus par les carbodiimides (exemple : DCC, EDC) avec ou sans catalyse (HOBT), ou autre agent couplant (EEDQ); 2) utilisation des anhydrides symétriques des acides aminés utilisés 3) utilisation des esters activés des acides aminés employés (exemple : HOBT, ester, p-nitro phénylester). La synthèse en phase liquide d'un composé de formule I peut être effectuée en six étapes, huit étapes si le dernier acide aminé, l'arginine Na-substituée, n'est pas obtenue commercialement. Les solvants employés sont le plus souvent le diméthylformamide (DMF), le tétrahydrofurane (THF), le dioxane 1,4; les réactifs de couplage le dicyclohexyl carbodiimide (DCC), le catalyseur l'hydroxybenzotriazole (HOBT). On donnera ci-après un exemple de schéma de synthèse (schéma I) dans lequel GP1, GP2, GP3 et GP4 désignent des groupes N-protecteurs. SCHEMA I La première étape (étape A) consiste tout d'abord à préparer les analogues Ca-amide d'un acide aspartique protégé en Na- et Cp par réaction sur ce dernier d'une amine HNR1R2 en présence d'un agent de couplage et de catalyseur, dans un solvant approprié. Après purification et contrôle de sa pureté, le produit est déprotégé (étape B) par un réactif de déprotection caractéristique du groupe protecteur GP1. Purifié, ce dérivé d'aminoacide est transformé en dipeptide (étape C) par réaction d'un résidu glycine protégé sur son groupement amino (groupe protecteur GP4) en présence d'un réactif de couplage et d'un catalyseur dans un solvant approprié. L'addition d'un équivalent de triéthylamine (ou d'une base encombrée) est nécessaire si le dérive aspartyl est obtenu sous forme protonnée. le dipeptide protégé ainsi obtenu est purifié. L'étape D est une étape de déprotection spécifique du groupe protecteur GP4. Le dipeptide ainsi obtenu, après purification est mis en réaction avec un résidu arginine protégé en Na et en NG(H+) (étape E) en présence d'un agent de couplage et d'un catalyseur, dans un solvant approprié. l'addition d'un équivalent de triéthylamine est effectué lorsque le dipeptide déprotégé est obtenu sous forme protonnée. Le produit tripeptidique obtenu est purifié puis traité par un réactif de déprotection du groupe protecteur GP2, libérant ainsi la fonction carboxylate du résidu aspartique (étape F) pour donner le tripeptide terminal de formule I. Les exemples suivants illustrent la préparation des composés de formule I. Dans ces exemples, les méthodes de caractérisation employées sont les suivantes 1) Chromatographie en couche mince - support silice Merck 5719 avec détection W et 12 - solvants de migration - CH2Cl2:CH3OH (16/1 à 16/4) pour les intermédiaires de synthèse - CH3OH:AcOH pour les produits terminaux (Rf compris entre 0,3 et 0,5). 2) RMN1H - 250 MHz Brücker. Contrôle de la pureté à 1-2 % près par étude spectroscopique de tous les intermédiaires et produits finis. 3) Spectroscopie de masse Chaque tripeptide terminal est étudié en Mode Fast Atom Bombardment Positif (FAB+) en matrice glycérol ou thioglycérol. EXEMPLE 1 Préparation du chlorure de (Na-acétyl-N#(H+)- arginyl]-glycyl-[Css(H)-C&alpha;-benzyl]-aspartamide (X1 = acétyle, X2 = a) Préparation du ENa-(t-butoxycarbonyl)-Cp - benzylester ] -benzyl aspartamide. On dissout à 0-5 C l'acide ENa-(t-Boc)-Cp (benzylester) ] aspartique (8g ; 0,025 mole), l'hydroxybenzotriazole (3,37 g ; 0,025 mole) dans 160 ml de THF. On additionne à ce mélange une solution de DCC (5,15 g; 0,025 mole) dans un minimum de THF et la solution est laissée sous agitation. Au début de formation du précipité de DCU, la benzylamine (2,68 g ; 0,025 mole) est additionnée. On laisse alors le mélange revenir à température ambiante et sous agitation pendant 24 heures. Le DCU est enfin filtrée et le THF évaporé. Le résidu est repris par un excès d'éther éthylique et l'insoluble est filtré. L'éther est évaporé et le résidu chromatographié (SiO2; CH2Cl2:CH3OH 90/10) pour donner l'amide souhaité (9 g : 87 %). RMN1H:(CDCl3). 1,42 (sing; 9H; BOC); 2,93 (AB dédoublé; 2H ; CH2asp.) ; 4,39-4,70 (q. dédoublé + massif ; 3H : H asp + CH2 benzylamide) ; 5,13 (s ; 2H ; CH2 benzylester) 5,69 (d large ; 1H : NH carbamate) ; 6,80 (d large 1H ; NH benzylamide) ; 7,19-7,5 (massif ; 10 H ; H ar.) CCM:SiO2; CH2Cl2:CH30H 90/10 ; Rf = 0,8-0,9; b) Préparation du chlorhydrate du ECP -benzylester-Ca -benzyl) -aspartamide. On dissout le dérivé aspartique précédent (9 g ; 0,0218 mole) dans l'acétate d'éthyle (200 ml) à 0-5 C. on fait ensuite passer à travers la solution du HCl gazeux à cette température et on laisse agiter pendant 4 heures. Le précipité formé est alors filtré et séché pour donner le chlorhydrate souhaité sous forme d'une poudre blanche (7 g ; 0,02 mole ; 92 %). RMN1H:(DMS0-d6). 2,98 (t ; 2H ; CH2 asp.) ; 4,12 (t ; 1H; H asp.) ; 4,30 (d ; 2H ; CH2 benzylamide) ; 5,14 (s ; 2H; CH2 benzylester) ; 7,10-7,15 (massif ; 10H ; H ar.); 8,28 (s. large ; 3H ; H ammonium) ; 8,95 (t ; 1H ; H amide). CCM:SiO2; ne migre pas. c) Préparation du (Na -(t-butyloxycarbonyl)- glycyll-CCB -benzylester-Ca -benzyll-aspartamide On dissout à 0-5 C dans le THF (40 ml) la Na -(t-BOC)-glycine (3,5 g ; 0,02 mole), le HOBT (2,7 g ; 0,02 mole), puis le DCC (4,12 g ; 0,02 mole). Le tout est agité pendant 20 minutes à cette température puis on ajoute un mélange du produit obtenu en b) et de triéthylamine (équimolaire ; 7 g de produit obtenu en b) (0,02 Mole) ; 2 g de NEt3 (0,02 mole)) dans le minimum de THF (&num; 10ml). L'ensemble est agité pendant 24 heures (contrôle CCM) puis la DCU formée est filtrée. Le THF est évaporé et le résidu repris à l'éther éthylique. Le précipité qui se forme à nouveau (DCU) est éliminé par filtration et le solvant est évaporé. Ce dernier résidu est dissout dans CH2Cl2, filtré à nouveau et chromatographié (SiO2; CH2Cl2: CH3OH 9/1) pour donner le produit souhaité (8 g ; 0,017 mole ; 85 %) sous forme d'une huile qui cristallise par trituration à l'éther de pétrole. RMN1H;(CDCl3).1,39 (s.; 9H ; BOC); 2,94 (AB dédoublé disymétrique; 2H ; CH2 asp.) ; 3,72 (t ; 2H ; CH2 glycyl); 4,42 (d. dédoublé ; 2H ; CH2 benzylamide); 4,88 (m; 1H ; H asp) ; 5,11 (d ; 3H ; CH2 benzylester + NH BOC); 7,0 - 7,50 (massif ; 12 H ; Har + 2 NH). CCM : SiO2; CH2Cl2:CH30H 95/5 ; Rf = 0,5-0,6. d) Préparation du chlorhydrate du (glycyl) ECP -benzylester-Ca -benzyl# -aspartamide. On dissout dans l'acétate d'éthyle (300 ml) le dérivé dipeptidique I,C (8 g ; 0,017 mole) à 0O C. La solution est traitée à cette température par bullage d'HCl gazeux. La réaction de déprotection est suivie par CCM sur 2 heures. Après avoir dégazé à l'aide d'azote, l'acétate d'éthyle est évaporée de moitié à température ambiante sous vide. Les cristaux formés sont récupérés par filtration, lavés à l'éther éthylique et séchés sous vide (6,7 g ; 0,0165 mole ; 97 %). RMN1H:(DMSO-d6). 2,80 (AB dédoublé ; 2H ; CH2 asp.) ; 3,61 (q ; 2H ; CH2 glycyl) ; 4,27 (d ; 2H ; CH2 benzylamide); 4,76 (q ; 1H ; H asp.) ; 5,10 (s ; 2H ; CH2 benzylester); 7,0-7,50 (massif ; 10H ; Har); 8,20 (s large ; 3H ammonium) ; 8,70 (t; 1H ; NH benzylamide); 8,89 (d ; 1H; NH amide). CCM:SiO2 ; ne migre pas. e) Préparation du chlorure de ENa -acétyl NG -arginylj -glycyl- ces -benzylester-Ca benzyl 1 -aspar- tamide On dissout dans le DMF (200 ml) la Na-acétylarginine dihydrate finement pulvérisée (1,86 g ; 0,00738 mole) et le composé obtenu en d) (3g ; 0,00738 mole) à température ambiante. Après 20 minutes d'agitation, la DCC (1,52 g ; 0,00738 mole) et 1'HOBT (0,998 g ; 0,00738 mole) sont ajoutés. L'ensemble est agité pendant 3 jours. L'insoluble est filtré et le DMF est évaporé sous vide. Le résidu est repris par le minimum de dichlorométhane et l'insoluble est filtré. Le solvant est évaporé et le résidu trituré par l'acétate d'éthyle, puis l'éther éthylique. Le solide ainsi obtenu est filtré, séché pour donner le composé souhaité (3 g ; 0,005 mole; 67 %). RMN1H:(DMSO-d6). 1,30-1,80 (massif ; 4H ; 2CH2 Arg.) 1,85 (s ; CH3 acétyl) ; 2,79 (AB dédoublé ; 2H ; CH2 asp.); 3,08 (d. large ; 2H ; CH2 Arg.) ; 3,75 (q. dédoublé ; 2H ; CH2 glycyl); 4,10-4,40 (d+ m ; 3H ; CH2 benzylamide + H arg.) ; 4,72 (m ; 1H ; H asp.) ; 5,08 (s, 2H ; CH2 benzylester) ; 6,7-7,5 (m ; 15 H ; H ar. + guanidinium) ; 7,76 (t. large ; 1H ; NH) ; 8,80-8,70 (m; 3H ; 3 NH). CCM;SiO2;CH2Cl2:CH3OH 80/20; Rf = 0,1 f) Préparation du chlorure de ENa-acétyl- NG(H+) -arginylj -glycyl- ECP (H) -Ca-benzylj -aspartamide Le tripeptide protégé obtenu en e) (3g ; 0,005 Mole) est réduit dans le méthanol (100 ml) par l'hydrogène en présence de catalyseur 5% Pd/charbon (0,3 g) à température ambiante pendant une nuit. L'ensemble est alors filtré sur célite et le méthanol évaporé pour donner le composé désiré sous forme d'une poudre blanche hydroscopique (2,3 g ; 0,0045 mole ; 90 %). RMN1H:(DMSO-d6). 1,30-1,80 (massif ; 4H ; 2CH2 arg.); 1,86 (s ; 3H ; CH3 acétyl); 2,65 (AB dédoublé ; 2H ; CH2 Asp.); 3,09 (d + m ; 2H ; CH2 Arg.); 3,72 (q. dédoublé; 2H ; CH2 glycyl) ; 4,10-4,50 (d+m ; 3H ; CH2 benzylamide + H arg.); 4,61 (q ; 1H ; H Asp.) ; 7,24 (massif ; 10 H; H ar. + guanidinium) ; 7,80 (massif ; 1H ; NH); 8,10-8,60 (massif ; 3H ; 3 NH) ; 12,38 (s large ; 1H ; COOH). FAB+ : pour (C21H32N7O6]+, Cl : [ M ] + = 478; CCM:SiO2 ; CH3OH ; AcOH 99,75/0,25 Rf = 0,5-0,6. EXEMPLE 2 Préparation du chlorure de (Na -acétyl-N#(H+) - arginyl ] glycyl-[Css (H)-Ca -isopropyl]aspartamide (X1 = acétyle, X2 = -NH-CH(CH3)2) Il est obtenu comme à l'exemple 1. Ses caractéristiques sont les suivantes RMN1H 1,00-1,20 (2 doublets, 2 CH3 isopropyl); 1,45-1,80 (massif, 2 CH2 arg.);1,90 (s, CH3 acétyl) ; 2,60 (AB dédoublé, CH2 Asp.) ; 3,10 (q mal défini, CH2 Arg.); 3,70 (q, CH2 Gly.) ; 3,85 (m, H isopropyl) ; 4,20 (q. mal défini, CH Arg.); 4,50 (q mal défini, CH Asp.) ; 6,807,60 (massif + d, 4H guanidine+N-H); 7,80 (t mal défini, N-H); 8,05 (d, N-H) ; 8,25: (d,N-H) ; 8,35 : (t, N-H). CCM : SiO2, MeOH-AcOH(20:0,05); Rf=0,45. FAB+ : pour [C17H32N7O6]+, C1: EM ] + =430 EXEMPLE 3 Préparation du chlorure de [N&alpha; -acétyl-NG(H+)- arginyl] glycyl-[Css (H)-Ca -cyclohexyl) aspartamide (X1 = acétyle, Il est obtenu comme à l'exemple 1. Ses caractéristiques sont les suivantes RMN1H 1,00-1,80 (massif, 5 CH2 cyclohexyl + 2 CH2 Arg.) ; 1,88 (s, CH3 acétyl); 2,50 (massif, DMSO + CH2 Asp.); 3,10 (q mal défini, CH2 Arg.); 3,25-3,55 (s + massif, H2O + H cyclohexyl); 3,70 (d, CH2 Gly.); 4,00-4,30 (m, CH Arg.); 4,50 (m, CH Asp.); 6,80-7,50 (massif + d, N-H+4H guanidine); 8,00-8,20 (2 doublets, 2N-H); 8,40 (t, N-H). CCM: SiO2, MeOH:AcOH (20:0,05); Rf = 0,5. FAB+ : pour [C20H36N7O6]+, Cl-[M]+ = 470. EXEMPLE 4 Préparation du chlorure de (N&alpha;-acétyl-NG(H+)- arginyl]glycyl-[Css X1 = acétyle, X2 = diéthyl aspartamide Il est obtenu comme à l'exemple I. Ses caractéristiques sont les suivantes RMN1H 0,99 (t, CH3 éthyl); 1,14 (t, CH3 éthyl); 1,35-1,80 (massif, 2CH2Arg.); 1,89 (s, CH3, acétyl); 2,22-2,80 (AB dedoublé, disymétrique centré sur 2.50, CH2 Asp.); 2,953,50 (massif, H2O + 2 CH2 éthyl + CH2 Arg.); 3,69 (d, CH2 Gly); 4,25 (massif, CH Arg.); 4,95 (q, CH Asp.); 6,707,60 (massif large, 4H guanidine); 7,95 (s large, H+ guanidinium); 8,10 (d, N-H Asp. ou Arg.); 8,22 (t, N-H Gly); 8,32 (d, N-H Arg. ou Asp.). CCM: SiO2, MeOH:AcOH (20:0,05); Rf = 0,3. FAB+: pour [ C18H34N706)+, Cl : [ MJ+ = 444 + dimère à 887 (5 %). EXEMPLE 5 Préparation du chlorure de [N&alpha;-benzoyl-NG(H+) arginyll glycyl-[Css (H) (X1 = acétyle, X2 = -NH nzyl]aspartamide RMN1H 1,40-2,00 (massif, 2 CH2 Arg.); 2,79 (massif, CH2 Asp.); 3,12 (q, CH2 Arg.); 3,79 (m, CH2 Gly.); 4,29 (d, CH2phé nyl); 4,44 (m, CH, Arg.); 4,60 (q, CH, Asp.); 6,75-8,12 (massif, 10 H ar. + 5 H guanidinium); 8,29 (massif, 2N H); 8,40 (t mal défini, N-H Gly); 8,64 (d, N,H). CCM : SiO2, MeOH:AcOH (20:0,05); Rf = 0,75. FAB+ : pour [C26H34N7O6]+, Cl : [ M)+ =540 EXEMPLE 6 Préparation du chlorure de EN -Boc-NG(H+) arginyl] glycyl- EC (H)-C benzyllaspartamide (X1 = Boc, X2 = RMN1H 1,20-1,80 (massif + s, 3 CH3BOC + 2CH2 Arg.); 2,55-3,20 (massif, CH2 Arg. + CH2 Asp.); 3,75 (d mal défini, CH2 Gly.); 3,92 (m, CH Arg.); 4,20-4,70 (d+m, CH2-phényl + CH Asp.); 6,70-7,60 (massif, 5H Ar. + N-H BOC+4H guanidine); 7,70 (t mal défini, N-H); 8,05-8,40 (massif, 2N-H). CCM:SiO2, MeOH:AcOH (20:0,05); Rf=0,8 (décompose). FAB+ : pour [ Q4H38N7Q)+, Cl : [ MJ+ = 436. On donnera ci-après des résultats d'essai mettant en évidence l'intérêt des composés de formule I dans la prévention de la cataracte secondaire. Essai d'inhibition de l'adhésion des cellules épithéliales sur des capsules cristalliniennes a) Préparation des capsules cristalliniennes bovines Le cristallin est extrait de l'oeil de boeuf par la face postérieure. Le cristallin est stocké dans du tampon phosphate sans calcium ni magnésium (Phosphate Buffer Saline). Les cristallins sont congelés à 200 C à cette étape. la capsule antérieure est découpée à l'aide de petits ciseaux et déposée sur le fond d'une boîte de culture. Une incubation avec du Triton X100 1% pendant 30 minutes permet de décoller les cellules épithéliales cristalliniennes adhérentes à la capsule. Les capsules sont ensuite rincées trois fois avec du PBS. Avant l'utilisation, chauqe capsule est observée au microscope optique afin de vérifier l'absence totale de cellules sur la capsule. b) Marquage des cellules épithéliales cristalliniennes bovines à la 3H-leucine La solution de D.Lt(4,5)-3H ] -leucine provient d'Amersham, en solution aqueuse 2 % éthanol. L'activité spécifique est de 25-50 Ci/mmole. La solution de 3H-leucine utilisée est diluée extemporanément dans du milieu de culture DMEM (Dulbecco modified essential medium). Pour le marquage des cellules, on utilise 40 pCi pour 106 cellules. Une incubation de 18 à 20 heures à 370 C dans une étuve à CO, permet l'incorporation de la leucine dans les protéines cellulaires. Après 3 lavages avec du DMEM, les cellules sont décollées avec la Trypsine-EDTA 0,05 %, les cellules en suspension dans le DMEM sont conservées au bain-marie à 370 C sous agitation pendant 1 heure. Ce protocole permet un marquage des cellules avec une activité spécifique de 2-10 dpm/cellule. c) Adhésion des cellules épithéliales cristalliniennes bobines sur capsules Les capsules sont découpées avec un percebouchon de diamètre n0 9 (18 mm) et étalées au fond d'un puits d'une boîte de culture, multipuits 24 puits, de 20 mm de diamètre chacun. Un joint torique en caoutchouc est apposé au fond du puits pour accoler parfaitement la capsule. les capsules sont incubées dans du PBS+ (10 mM Cal2, 5 mM MgCl2) jusqu'à utilisation. Milieu d'adhésion = milieu de culture DMEM + 2mg/ml sérum albumine bovine (DMEM+0,2 % BSA). Les solutions concentrées de composés de formule I testés sont préparées extemporanément, elles sont diluées à la concentration voulue dans le milieu d'adhésion. 150 ul de volume total sont déposés par puits, ils contiennent 10 000 cellules en présence de concentrations croissantes de composés testés. Après une incubation de 1 h à 370 C dans l'étuve à CO2, les puits sont lavés trois fois avec du PBS calcium, magnésium. Une solubilisation d'une nuit avec 1,5 ml de NaOH 0,2N et sodium dodécyl sulfate de sodium 1 * permet le comptage au compteur à scintillation. d) Résultats Pour chaque composé testé, les courbes d'adhésion en fonction de la concentration en composé sont tracées. La dose à laquelle on observe une inhibition de l'adhésion de 50 % (IC50) est calculée. Le tableau suivant résume les résultats COMPOSE IC 50 | Ex. 1 1 mM Ex. 2 5 mM Ex. 3 1 mM Ex 4 10 mM Ex. 6 3 mM Arg-Gly-Asp 10 mM Arg-Gly-Asp-Ser 2 mM | Arg-Gly-Asp-Ser-Pro 1 mM Gly-Arg-Gly-Asp-Ser-Pro-Cys 1 mM Les composés de formule I peuvent être administrés notamment sous forme - de solutions stériles conditionnées en seringue, injectées dans l'oeil ouvert pendant l'intervention chirurgicale, - d'implants cristalliniens dans la matrice desquels ces composés ont été préalablement incorporés ou dont la surface est imprégnée avant mise en place, - de collyres stériles conditionnés en flacons unidose ou multidose et instillés pendant la période post-opératoire. Les compositions ophtalmiques précédemment citées peuvent se présenter sous forme de solutions prêtes à l'emploi ou extemporanées (lyophilisat et solvant) selon la stabilité en milieu aqueux du composé de formule I mis en oeuvre. Elles répondent aux critères de stérilité, de neutralité et d'isotonie imposés par l'usage ophtalmique. On donnera ci-après des exemples de solutions ophtalmiques. Composition 1 Composé de formule I ......................... 1,00 g Chlorure de calcium anhydre .................. 0,01 g Chlorure de potassium ........................ 0,02 g Dihydrogénophosphate de potassium ............ 0,02 g Chlorure de magnésium hexahydraté ............ 0,01 g Chlorure de sodium ........................... 0,80 g Sodium hydrogénophosphate heptahydraté ,...... 0,22 g Eau purifiée ............... q.s.p. 100,00 ml Solution ophtalmique dont la composition correspond au tampon phosphate salin. Composition 2 Composé de formule I .......................... 1,00 g Hydrogénophosphate de sodium .................. 1,04 g Dihydrogénophosphate de sodium * 0,24 g Chlorobutanol ................................. 0,50 g Eau purifiée ............. q.s.p. ........... 100,00 ml Collyre prêt à l'emploi multidose dont la conservation est assurée par le chlorobutanol ou tout autre agent antibactérien. Composition 3 Composé de formule I ........................ 1,00 g Hydrogénophosphate de sodium ................ 1,04 g Dihydrogénosphosphate de sodium ............. 0,24 g Hydroxypropylméthyl cellulose ............... 0,50 g Eau purifiée ,...... q.s.p. ................. 100,00 ml Collyre prêt à l'emploi unidose dont la viscosité est obtenue par l'hydroxypropylméthyl cellulose ou tout autre agent épaississant. Composition 4 Lyophilisat Composé de formule I ......................... 2,500 g Dextran 70.000 ............................... 2,500 g Chlorure de calcium anhydre .................. 0,025 g Chlorure de potassium ........................ 0,050 g Dihydrogénophosphate de potassium ............ 0,050 g Chlorure de magnésium hexahydraté ............ 0,025 g Hydrogénophosphate de sodium heptahydraté ....0,550 g Eau purifiée ....... q.s.p. .................. 100,00 ml Solvant Chlorure de sodium ........................... 0,80 g Chlorure de benzalkonium ..................... 0,01 g Eau purifiée ....... q.s.p. .................. 100,00 ml Collyre extemporané constitué d'un lyophilisat contenant le principe actif et une charge de dextran 70.000 ou tout autre agent de texture . d'un solvant renfermant un agent antibactérien le chlorure de benzalkonium et permettant la réhydratation du lyophilisat avant usage. REVENDICATIONS 1. Composés de formule X1 - NH - CH - CO - NH - CH2 - CO - NH - CH - CO - X2 (CH2)3 CH2 NH COOH (I) C=NH NH2 dans laquelle XX représente un groupe N-protecteur, et X2 un groupe de formule R1 et R2 représentant, indépendamment l'un de l'autre, un groupe alkyle en C1-C18, un groupe cycloalkyle en C3-C8, un groupe aryl ( alkyle en C1-C4) , R1 pouvant en outre représenter un atome d'hydrogène, ou R1 et R2 forment ensemble et avec l'atome d'azote sur lequel ils sont fixés un groupe pyrrolidino, pipéridino ou pipérazinyle éventuellement substitué par un radical alkyle en C1-C4 ou un groupe 4-hydroxypipéridino, et leurs sels d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable. 2. Composés selon la revendication 1, de formule I dans laquelle X1 représente un groupe - COR3 ou - CO - OR3 R3 étantr un groupe alkyle en C1-C18, un groupe cycloalkyle en C3-C8, un groupe aryle, un groupe aryle portant un ou plusieurs substituants choisis parmi un groupe alkyle en C1-C6, un groupe hydroxy, un groupe alcoxy en C1-C6, un groupe alkyle en C1-C6 mono ou polyhydroxylé, un groupe mono ou poly(alcoxy en C1-C6) (alkyle en C1-C6), un groupe amino, un groupe mono ou di(alkyl en C1-C6) amino, un groupe acétamido et un groupe sulfonamido, ou un groupe aryl(alkyle en C1-C4). 3. Composé de formule I selon la revendication 1, dans laquelle X1 est un groupe acétyle et X2 est un groupe benzylamino. 4. Composé de formule I selon la revendication 1, dans laquelle X1 est un groupe acétyle et X2 est un groupe cyclohexylamino. 5. Utilisation des composés de formule I définis à l'une quelconque des revendications 1 à 4 ou un de ses sels d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable, pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention de la cataracte secondaire. 6. Composition ophtalmique comprenant un composé de formule I défini à l'une quelconque des revendications 1 à 4 ou un de ses sels d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable, dans un solvant ophtalmique. 7. Implants et anses cristalliniens comprenant un composé de formule I tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 4 ou un de ses sels d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable.