Brevet FR2687898A1 — publié le 19930903

i La présente invention concerne une composition bactéricide pour la désinfection de contact notamment en milieu hospitalier. Une caractéristique de la présente composition bactéricide est qu'elle est dépourvue d'aldéhydes et de phénols. FR-A-90 12 035 de la demanderesse, déposée le 28 Septembre 1990 pour "Composition d'agent nettoyant- décontaminant, notamment pour instruments chirurgicaux", décrit une composition qui renferme à titre de produit actif d'une part un composé amphotère sur lequel sont greffés des groupes ammonium quaternaires et d'autre part un composé cationique ammonium quaternaire. Le composé amphotère est plus particulièrement la NlN'(N"-2-hydroxyéthyl-N"-carboxyéthylaminoéthyl)-amidoacéta- tel N,N-diméthyl-N-coco-ammoniumbétaïne, tandis que le composé cationique est de préférence le chlorure de didécyl- diméthylammonium. La composition de la présente invention est destinée à être appliquée sur des surfaces inertes et n'est pas un produit destiné à être appliqué sur le corps humain. Cette composition présente de nombreux avantages par rapport aux compositions de la technique antérieure. Elle ne comporte pas de produits toxiques et sa mise en oeuvre est très aisée. Son prix de revient est peu important et surtout son efficacité est bien supérieure à celle des produits connus jusqu'à ce jour. Selon la présente invention on a trouvé, de façon surprenante, qu'en combinant un composé amphotère, sur lequel sont greffés des groupes ammonium quaternaires, à une chaîne carbonée renfermant un groupe dipropylène triamine de formule -N (CH 2)3 NH 2 h.(CH 2)3 NH 2 on obtenait une composition bactéricide à effet amélioré. Plus particulièrement, la présente invention a pour objet une composition bactéricide pour la désinfection de contact en milieu hospitalier comprenant: (a) un composé amphotère sur lequel sont greffés des groupes ammonium quaternaires, répondant à la formule générale: CHI 3 z CH 2-CH 20 H (+) I/ Rj-N-CK 2-CONH-CH 2-CH 2-N 1 CH 3 CH 2-CH 2-COOM dans laquelle R 1 représente une chaîne d'acide gras saturé ou non saturé et M est un métal alcalin et, en quantité synergique, (b) un composé de formule (CH 2)3 NH 2 \N (CH 2)3 NH 2 dans laquelle R est un radical alkyle en C 8 à C 20, le rapport pondéral de (b):(a) étant de 0,5 à 6 et voisin de 1,5. Dans la présente invention le composé (b) représente généralement de 0,1 à 30 %, de préférence, de 0,5 à 20 % du poids total de la composition. La composition de la présente invention peut comprendre également (c) au moins un alcanol inférieur. La composition de l'invention peut comporter aussi un composé (d) de formule générale + R 2 N O CH 3 N Cl' LR 3 CH 3 dans laquelle R 2 et R 3 sont des groupes alkyles en C 1 à C 15. Le composé (c) lorsqu'il est présent est utilisé à raison de 5 à 50 %, de préférence, de 10 à 30 % du poids total de la composition. Le composé (d) lorsqu'il est présent est utilisé à raison de 0,1 à 30 %, de préférence, de 0,2 à 20 % du poids total de la composition. Le composé (b) est avantageusement la N,N-bis-( 3- aminopropyldodécylamine). L'alcanol inférieur (composant (c)) est de préférence l'éthanol ou l'isopropanol ou un mélange de ceux-ci. Le composé (d) est avantageusement le chlorure de didécyldiméthylammonium. Le composé (a) préféré est la NlN'(N"-2-hydroxyéthyl- N"-carboxyéthylaminoéthyl)-amidoacétatel-N,N-diméthyl-N-coco- ammonium bétaïne. Pour permettre sa formulation, la composition de l'invention peut encore contenir de l'eau déminéralisée. La composition selon la présente invention est le plus commodément présentée sous la forme d'un produit à pulvériser. Sauf indication contraire, toutes les parties et pour- cents sont calculés en poids. On indique ci-après un exemple de mise en oeuvre préféré de la composition de l'invention, les quantités indiquées étant exprimées en pour-cent de la composition totale: NlN'(N"-2-hydroxyéthyl-N"-carboxyéthylamino-éthyl)- amidoacétatel-N,N-diméthyl-N-coco-ammonium bétaïne 0,3 % N-N bis( 3aminopropyldodécylamine) 2 % Ethanol- isopropanol 30 % Chlorure de didécyl- diméthylammonium 0,2 % Eau déminéralisée quantité suffisante pour obtenir 100 % La composition ci-dessus est obtenue en mélangeant les composés dans l'ordre mentionné sous agitation modérée pendant une durée de deux heures environ. La NlN'(N"-2-hydroxyéthyl-N"-carboxyéthylamino-éthyl)- amidoacétatel-N,N-diméthyl-N-coco-ammonium bétaïne est un liquide limpide jaunâtre à 20 C Elle présente les caractéristiques ci-après: couleur (Gardner): 3-5 matières solides (%): 50 + 1 p H (à 10 %): 8-9 teneur en Na Cl (%): 5,5-6,2 teneur en éthanol:(%) environ 10 caractère cationique. Il s'agit d'un tensio-actif amphotère cationique ayant à la fois la bonne compatibilité envers la peau des amphotères et l'effet biocide des quaternaires. Ce tensio-actif est compatible avec les tensio-actifs non ioniques et amphotères et est partiellement miscible avec les tensio-actifs cationiques Il est soluble de façon limpide dans l'eau, l'éthanol, l'isopropanol Son domaine d'utilisation est p H 4-10 Sa valeur moussante selon la norme DIN 53901 est de 180/O et son pouvoir mouillant selon la norme DIN 53901 est de 1 minute 4 secondes. La N,N-bis( 3-aminopropyldodécylamine) est un liquide incolore à jaune clair, son odeur est ammoniacale, sa densité est de 0,967 La solution renferme environ 70 % d'eau et son p H est voisin de 11 Son indice de réfraction est de 1,379. Le chlorure de didécyldiméthylammonium est dépourvu de noyaux phényliques et comporte deux chaînes hydrocarbonées en C 10 reliées à l'atome central. L'alcanol inférieur est habituellement un mélange d'éthanol ou d'isopropanol Toutefois, on peut utiliser un seul alcool ou plus de deux alcools si cela est nécessaire. L'activité anti-microbienne de la composition bactéricide de la présente invention a été mise en évidence selon les normes AFNOR. Les normes AFNOR sont respectivement: NFT 72 151: détermination de l'activité bactéricide, spectre 5, méthode par filtration sur membranes NFT 72 171: détermination de l'activité bactéricide en présence d'une substance interférente de référence (mélange albumine-extrait de levure), méthode par filtration sur membranes NFT 72-190: détermination de l'activité bactéricide (méthode des porte-germes) NFT 72-201: détermination de l'activité fongicide, méthode par filtration sur membranes A) Détermination de l'activité bactéricide selon la norme AFNOR 72 151 (méthode par filtration sur membranes): 1) Conditions expérimentales Température d'essai: 20 'C + 1 'C Diluant du produit: eau distillée stérile 2) Mode opératoire déterminé à la suite de l'essai préliminaire: * Référence et nature des membranes: SARTORIUS 13906-47 ACN, nitrate de cellulose, porosité 0,45 pm, blanches, quadrillées SARTORIUS 13006-47 ACN, nitrate de cellulose, porosité 0,45 pm, noires, quadrillées pour Enterococcus hirae Liquide de lavage des membranes: Nature: eau distillée additionnée de 0,5 % (v/v) de Tween 80. Mode de préparation: autoclavage à 121 C pendant 25 minutes. Nombre de lavages avec ce liquide: 3 Volume de liquide utilisé pour chaque lavage: 100 ml Neutralisant(s) ajouté(s) au milieu de dénombrement et concentration(s): 0,5 % (v/v de Tween 80) 0,72 /* (p/v) de lécithine Autres additions au milieu de dénombrement et milieu de dénombrement particulier: 0,0025 % (p/v) de chlorure de triphényltétrazolium pour une meilleure visualisation des colonies 3) Résultats des essais préliminaires dans les conditions décrites TABLEAU I Les essais préliminaires sont validés si N,N' et N sont peu différents. La composition du liquide de lavage des membranes et le mode de lavage des membranes sont validés sur les 5 souches bactériennes pour toutes concentrations du produit de l'invention non supérieures à 90 % v/v). Concentrations Souches collection d'o N N' n essayées du rigine et numéro dans produit de la collection l'invention % (v/v) Pseudomonas aeruginosa 81 96 81 CIP A 22 % (v/v) Escherichia coli 124 106 76 CIP 54 127 % (v/v) Staphylococcus aureus 117 105 117 CIP 53 154 % (v/v) Enterococcus hirae 115 95 75 CIP 58 55 % (v/v) Mycobacterium smegnatis 106 100 103 CIP 73 26 N: contrôle inoculum N': témoin filtration n: conditions expérimentales TABLEAU II 4) Essai proprement dit Résultats expérimentaux: X Souches, collection Concentration en pourcentage d'origine et numéro N N N' (v/v) au contact avec les p H dans la collection microorganismes 30 50 70 90 Cmin Cmax Pseudomonas aeruginosa 81 81 96 O O O O O 9,9 10,6 CIP A 22 Escherichia coli 124 76 106 O O O O O 9,8 10,3 CIP 54 127 Staphylococcus aureus 117 117 105 O O O O O 9,6 10,5 CIP 53 154 Enterococcus hirae 115 75 95 O O O O O 9,7 10,5 CIP 58 55 Mycobacterium smegmatis 106 103 100 O O O O O 9,9 10,5 CIP 73 26 N: contrôle inoculum X: essai N': témoin filtration +: plus de 150 colonies n: conditions expérimentales K, 0 % (O al Sont bactéricides les concentrations pour lesquelles: X est inférieur ou égal à N', si N, N' et N sont peu différents. CONCLUSION: Le produit de l'invention présente à 20 'C une activité bactéricide spectre 5 en eau distillée conforme à la norme AFNOR NF T 72-151. B) Détermination de l'activité bactéricide en présence d'une substance interférente de référence selon la norme NF T 72-171, mélange albumine-extrait de levure (méthode par filtration sur membranes) 1) Conditions expérimentales Température d'essai: 20 'C + 1 'C Diluant du produit: eau distillée stérile Substance interférente: protéines, mélange albumine bovine 1 % + extrait de levure 1 % Stabilité en présence du produit: absence de précipité 2) Mode opératoire déterminé à la suite de l'essai préliminaire Nature des membranes et référence Sartorius 13 906-47 ACN, nitrate de cellulose, porosité 0,45 Mm, blanches, quadrillées. Liquide de lavage des membranes: nature: eau distillée additionnée de 0, 5 % (v/v) de Tween 80, eau distillée additionnée de 5 % (v/v) de Tween 80 et 0,3 % (p/v) de lécithine d'oeufs pour Escherichia coli Mode de préparation: autoclavage à 121 C pendant 25 minutes Nombre de lavages avec ce liquide: 5 Volume de liquide utilisé pour chaque lavage: 100 ml Neutralisants ajoutés au milieu de dénombrement et concentrations: 0,5 % (v/v) de Tween 80, 0,072 % (p/v) de lécithine d'oeuf. Autres additions au milieu de dénombrement et milieux de dénombrements particuliers: 0,0025 % (p/v) de chlorure de triphényltétrazolium, pour une meilleure visualisation des colonies Pour Enterococcus hirae, utilisation d'un milieu gélosé à la bile, l'esculine et le nitrure de sodium (Biokar OBK 016) qui noircit en présence d'entérocoques. 3) Résultats des essais préliminaires dans les conditions décrites TABLEAU III Concentrations Souches collection d'o N N' n essayées du rigine et numéro dans produit de la collection l'invention % (v/v) Pseudomonas aeruginosa 54 83 79 CIP A 22 % (v/v) Escherichia coli 90 78 56 CIP 54 127 % (v/v) Staphylococcus aureus 148 149 94 CIP 53 154 % (v/v) Enterococcus hirae 132 122 107 CIP 58 55 N: contrôle inoculum N': témoin filtration n: conditions expérimentales Les essais préliminaires sont validées si N,N' et n sont peu différents. La composition du liquide de lavage des membranes et le mode de lavage des membranes sont validés sur la souche d'Escherichia coli pour toutes concentrations du produit de l'invention non supérieures à 15 % (v/v) et pour les 3 autres souches bactériennes pour toutes concentrations non supérieures à 10 % (v/v). TABLEAU IV 4) Essai proprement dit Résultats expérimentaux X Souches, collection Concentration en pourcentage d'origine et numéro N N' N (v/v) au contact avec les p H dans la collection microorganismes 1,0 2,5 5,0 7,5 10,0 Cmin Cmax Pseudomonas aeruginosa 54 83 79 + + + 1 O 7,1 7,7 CIP A 22 Staphylococcus aureus 148 149 94 + + + + 5 7,0 7,8 CIP 53 154 Enterococcus hirae 132 122 107 + + + + O 7,1 7,6 CIP 58 55 ,0 7,5 10,0 12,5 15,0 Escherichia coli 90 78 56 + + 58 O O 7,4 8,0 CIP 54 127 N: contrôle inoculum X: essai N': témoin filtration +: plus de 150 colonies n: conditions expérimentales o A o% o, (O al il Sont bactéricides les concentrations pour lesquelles: X est inférieur ou égal à N', si N, N' et N sont peu différents. Le produit de l'invention présente à 20 C une activité bactéricides spectre 4 en présence d'un mélange d'albumine et d'extrait de levure, conforme à la norme AFNOR NF T 72-171. C) Détermination de l'activité bactéricide selon la norme AFNOR NF-T 72-190 Méthode des porte-qermes: 1) Conditions expérimentales Nature et caractéristiques des porte-germes utilisés: Verres de montre, de 40 mm de diamètre, de 58 mm de rayon de courbure et de 3,5 mm de hauteur Temps de séchage des porte-germes après dépôt de l'inoculum: 45 minutes Temps de contact produit-inoculum: 15 minutes Quantité de désinfectant déposée sur chaque porte-germes: 0,2 ml Température ambiante pendant les essais: 20 C environ Référence et nature des membranes utilisées: Sartorius 13 906-47 ACN, nitrate de cellulose, porosité 0,45 pm, blanches, quadrillées Sartorius 13 006-47 ACN, nitrate de cellulose, porosité 0,45 Mm, noires, quadrillées (pour Enterococcus hirae) Liquide de lavage des membranes: nature: eau distillée additionnée de 0, 5 % (v/v) de Tween 80 mode de préparation: autoclavage à 121 C pendant 25 minutes nombre de lavages avec ce liquide: 3 ( 5 pour Escherichia coli) volume de liquide utilisé pour chaque lavage: 100 ml Neutralisant(s) ajouté(s) au milieu de dénombrement et concentrations(s) lécithine à 0,7 '/ (p/v) Tween 80 à 0,5 '/ (v/v) Autres additions au milieu de dénombrement et milieux de dénombrements particuliers: 0,0025 % (p/v) de chlorure de triphényl tétrazolium, pour une meilleure visualisation des colonies. 2) Résultats des essais préliminaires dans les conditions décrites TABLEAU V N 1 étant peu différent de nl, les conditions expérimentales décrites sont applicables lors de l'essai proprement dit pour une concentration de produit de 100 % sur les souches de bactéries testées. Les essais préliminaires et les essais proprement dits ont été conduits en parallèle. 3) Essai proprement dit Résultats expérimentaux: Les résultats (Tableau VI): détaillés sont rapportés ci-après Concentrations Souches collection d'o N 1 N 1 essayées du rigine et numéro dans produit de la collection l'invention % Pseudomonas aeruginosa 146 131 CIP A 22 % Escherichia coli 56 41 CIP 54 127 % Staphylococcus aureus 130 128 CIP 53 154 % Enterococcus hirae 106 94 CIP 58 55 % Mycobacterium smegmatis 104 108 CIP 73 26 N 1: contrôle inoculum n 1: essai préliminaire (dénombrement des micro- organismes sur membranes ayant été au préalable en contact avec le produit TABLEAU VI Souches, collection T = inoculum Concentrations n'1 n'2 d = taux de d'origine et numéro témoin essayées du réduction dans la collection (moyenne de deux produit supports) Pseudomonas aeruginosa 21 105 100 % O O dl = 6,3 logs CIP A 22 Escherichia coli 16 105 100 % O O d 2 = 6,2 logs CIP 54 127 Staphylococcus aureus 61 105 100 % O O d 3 = 6,8 logs CIP 53 154 Enterococcus hirae 75 105 100 % O O d 4 = 6,9 logs CIP 58 55 Mycobacterium smegmatis 18 105 100 % O O d 5 = 6,3 logs CIP 73 26 T =nombre de bactéries par support témoin n'1 = nombre de bactéries retrouvées viables, rapport à 100 ml n'2 = nombre de bactéries viables autour ou sur le support, en inclusion en gélose d = log T log (n'1 + n'2); si n'1 et n'2 = 0, d = log T K, 0 % (O al Taux de déduction minimum exigé pour satisfaire à la norme AFNOR NF T 72-190 activité bactéricide > 5 Le produit de l'invention est bactéricide selon la norme AFNOR NF T 72-190 à la concentration de 100 %, en 15 minutes de contact, à 20 'C. On a récapitulé dans le Tableau VII ci-après les résultats des essais selon la norme AFNOR NF T 72-190 pour la détermination de l'activité bactéricide du produit de la présente invention. B) Détermination de l'activité fongicide selon la norme AFNOR NF T 72-201 (méthode par filtration sur membranes, essai partiel) 1) Conditions expérimentales: Température d'essai: 20 'C + 1 C Temps de contact: 15 minutes Diluant du produit utilisé lors des essais: eau distillée stérile 2) Mode opératoire déterminé à la suite de l'essai préliminaire Référence et nature des membranes: Sartorius 13 906-47 ACN, nitrate de cellulose, porosité 0,45 pm, blanches, quadrillées Sartorius 13 006-47 ACN, nitrate de cellulose, porosité 0,45 pm, noires, quadrillées (pour Candida albicans) Liquide de lavage des membranes: Nature: eau distillée additionnée de 0,5 % (v/v) de Tween 80 Mode de préparation: autoclavage à 121 C pendant 25 minutes Nombre de lavages avec ce liquide: 3 Volume de liquide utilisé pour chaque lavage: 100 ml Neutralisant(s) ajouté(s) au milieu de dénombrement et concentrations (s): 0,5 % (v/v) de Tween 80 et 0,7 /-* (p/v) de lécithine d'oeuf. Autres additions au milieu de dénombrement: (néant) TABLEAU VII Souches, collection Dénombrements des Dénombrements Dénombrements d'origine et numéro microorganismes essais témoins dans la collection récupérés E 1 E 2 E 3 T 1 T 2 Pseudomonas aeruginosa 1 ml dilution 10-2 O O O 172 239 CIP A 22 1 ml erlen O O O 98,9 ml O O O porte-germes O O O Escherichia coli 1 ml dilution 10-2 O O O 161 154 CIP 54 127 1 ml erlen O O O 98,9 ml O O O porte-germes O O O Staplylococcus aureus 1 ml dilution 10-2 O O O 70 52 CIP 53 154 1 ml erlen O O O 98, 9 ml O O O porte-germes O O O Enterococcus hirae 1 ml dilution 10-2 O O O 81 68 CIP 58 55 1 ml erlen O O O 98,9 ml O O O porte- germes O O O Mycobacterium smegmatis 1 ml dilution 10-2 O O O 181 176 CIP 73 26 1 ml erlen O O O 98,9 ml O O O porte-germes O O O +: plus de 150 colonies K, o% M al o, Ili al 3) Résultats des essais préliminaires dans les conditions décrites: TABLEAU VIII Les essais préliminaires sont validés si N,N', et n sont peu différents. La composition du liquide de lavage des membranes et le mode de lavage des membranes sont validés sur les 3 souches fongiques pour toutes concentrations du produit de l'invention non supérieures à 90 % (v/v). Concentrations Souches collection d'o N N' n essayées du rigine et numéro dans produit de la collection l'invention % (v/v) Cladosporium cladosporioïdes 78 74 80 IP 1232-80 % (v/v) Candida albicans 55 52 67 IP 1180-79 % (v/v) Penicillium verrucosum var cyclopium 128 143 125 IP 1231-60 N: contrôle inoculum N': témoin filtration n: conditions expérimentales TABLEAU IX 4) Essai proprement dit Résultats expérimentaux X Souches, collection Concentration en pourcentage d'origine et numéro N N' N (v/v) au contact avec les p H dans la collection microorganismes 25 50 75 90 Cmin Cmax Cladosporium 78 74 80 + + + O O 9,5 10,5 cladosporioïdes IP 1232 80 Candidas albicans 55 52 67 13 O O O O 9,1 10,4 IP 1180 79 Penicillium verrucosum 128 143 125 1 O O O O 9,2 10,3 var cyclopium IP 1231 80 N: contrôle inoculum x: essai N': témoin filtration +: plus de 150 colonies ou thalles n: conditions expérimentales K, 0 % (O al Sont fongicides les concentrations pour lesquelles: X est inférieur ou égal à N', si N, N' et N sont peu différents. Conclusion: Le produit de l'invention présente à 20 'C une activité fongicide en eau distillée conforme à la norme AFNOR NF T 72- 201 sur les trois souches: Cladosporium cladosporioïdes IP 1232-80, Candida albicans IP 1180-79, Penicillium verrucosum var cyclopium IP 1231-80. Le produit de l'invention peut être présenté sous divers conditionnements comme une solution ou un produit susceptible d'être pulvérisé Ce dernier mode est généralement préféré. L'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation décrits en détails et diverses modifications peuvent y être apportées sans sortir de son cadre. REVENDICATIONS 1 Composition bactéricide pour la désinfection de contact en milieu hospitalier comprenant: a) un composé amphotère sur lequel sont greffés des groupes ammonium quaternaires répondant à la formule générale: CH 3 CH 2-CH 2 OH R(-N-CH 2-CONH-CH 2-CH 2-N CH 3 CH 2-CH 2-COOM dans laquelle R 1 représente une chaîne d'acide gras saturé ou non saturé et M un métal alcalin et, en quantité synergique, un composé (b) de formule générale (C H 2)3 N H 2 R N /(CH 2)3 NH 2 dans laquelle R est un radical alkyle en C 8 à C 20, le rapport pondéral de (b):(a) étant de 0,5 à 6 et voisin de 1,5. 2 Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé (b) représente de 0,1 à 30 %, de préférence, de 0,5 à 20 % du poids total de la composition. 3 Composition selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce qu'elle comprend également au moins un alcanol inférieur (c). 4 Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comporte aussi (d) un composé de formule générale + R 2 CH 3 N Cil R 3 CH 3 dans laquelle R 2 et R 3 sont des groupes alkyles en C 1 à C 15. Composition selon la revendication 3, caractérisée en ce que le composé (c) est utilisé à raison de 5 à 50 %, de préférence de 10 à 30 % du poids total de la composition. 6 Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que le composé (d) est utilisé à raison de 0,1 à 30 %, de préférence, de 012 à 20 % du poids total de la composition. 7 Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que le composé (b) est la N,N-bis-( 3-aminopropyldodécylamine). 8 Composition selon l'une des revendications 3 ou 5, caractérisée en ce que l'alcanol inférieur est l'éthanol ou l'isopropanol ou un mélange de ceux-ci. 9 Composition selon l'une des revendications 4 ou 6, caractérisée en ce que le composé (d) est le chlorure de didécyl-diméthylammonium. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que le composé (a) est la NlN'(N"-2-hydroxyéthyl-N"-carboxyéthylaminoéthyl)- amidoacétatel-N,N-diméthyl-N-cocoammonium bétaïne. 11 Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle contient de l'eau déminéralisée. 12 Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisée en ce qu'elle renferme: NlN'(N"-2-hydroxyéthyl-N"-carboxyéthylamino-éthyl) 0,3 % amidoacétatel-N,N'-diméthyl-N-coco-ammonium béta ne N-N bis( 3aminopropyldodécylamine) 2 % Ethanol-isopropanol 30 % Chlorure de didécyldiméthylammonium 0,2 % Eau déminéralisée quantité suffisante pour 100 %