Brevet FR2686618A1 — publié le 19930730

DISPOSITIF DE CARACTERISATION BIOCHIMIQUE, ET/OU MISE EN CULTURE DE BACTERIES, ET/OU ANTIBIOGRAMMES, ET/OU TESTS CHIMIQUES SIMULTANES SOUS DIFFERENTES ATMOSPHERES La présente invention a pour objet un dispositif de caractérisation biochimique, et/ou mise en culture de bactéries, et/ou antibiogrammes, et/ou tests chimiques simultanés sous différentes atmosphères. I1 concerne le matériel de laboratoire pour analyses bactériologiques et/ou chimiques. Lors de recherches biologiques, le prélèvement initial à étudier est disposé sur un ou, le plus souvent, plusieurs milieux de culture différents adaptés au type de recherche effectuée et, si les germes analysés l'exigent, sous différentes atmosphères, à savoir aérobie, anaérobie, enrichie en C02, micro-aérophilie, etc, et parfois sans humidité Dans le cas où la culture est positive, meme sur un milieu sélectif, il est habituellement nécessaire de faire des tests biochimiques complémentaires afin d'identifier spécifiquement les germes mis en évidence par la culture, la plupart des germes ayant des caracteres biochimiques spécifiques permettant de les identifier, l'étude de certains de ces caractères pouvant très bien être effectuée dès le départ, en même temps que la mise en culture.Ces tests sont en outre frequemment complétés par un antibiogramme. Par exemple, à partir d'urine l'on peut rechercher tous les germes à caractère nitrite + ou -, ou autres caractères biochimiques, tout en procédant à la mise en culture sur milieu large spectre et/ou sélectif, le tout sous atmosphère aérobie. Le résultat sera facilité par la détermination d'au moins un caractère biochimique spécifique en plus des caractères généraux déterminés grâce au milieu de culture de pré-identification (lactose, suchrose, par exemple) permettant de donner la numération, c'est à dire la quantité de germes par unité, et de connaître ainsi le taux d'infection dans le cas de bactériologie médicale, ou le taux de contamination en cas de bactériologie industrielle. Autre exemple, recherche de Mycoplasmes urogénitaux en analyse biomédicale: test des caractères biochimiques sous atmosphere enrichie en C02. La détection par utilisation d'arginine, d'urée, de glucose, confirmera la présence de Mycoplasmes urogénitaux, ainsi que le type de Mycoplasme, lourée + ou l'arginine + correspondant à l'Ureaplasma uréaliticum ou Mycoplasma hominis, etc. L'intéret immédiat de ce test est le dépistage avec identification du germe, mais pour la numération le technicien devra ensemencer de la gélose (type A7 pour les mycoplasmes) sous atmosphère anaérobie. De la même manière, pour l'étude de produits chimiques, il est souvent nécessaire d'effectuer des tests avec plusieurs réactifs sous des atmosphères différentes. L'expérience montre en outre qu'il est parfois nécessaire de prévoir un emplacement pour un générateur d'oxygène, un générateur coditionneur d'atmosphère et/ou un produit absorbeur d'humidité (dessicant), ce dernier pouvant éventuellement, pendant le stockage et le transport du produit, etre placé dans les logements prévus pour les générateurs d'oxygene. Les tests de caractères chimiques ou biochimiques ne nécessitent généralement que de petits récipients appelés communement "puits à réaction" ou encore "spots" ayant généralement une faible capacité en réactifs, à l'inverse, les cultures biologiques demandent une certaine surface afin de bien répartir l'échantillon biologique en vue d'isolement (milieux permettant la préidentification) et/ou la numération, souvent à l'aide d'oeusses calibrées pour l'ensemencement de l'échantillon. Actuellement, pour effectuer une culture biologique et des tests biochimiques, il faut avoir recours à au moins une boîte de culture, par exemple boîte de Pétri, et à un ou plusieurs tubes à essais ou similaire, ces équipements et leurs accessoires respectifs devant être multipliés en cas de recherches sous atmosphères différentes. Ces contraintes nécessitent, pour un même prélevement, la manipulation d'une série d'éléments, ce qui, outre un prix élevé et une importante perte de temps, entraîne des risques d'erreurs de diagnostique. De nombreux brevets décrivent des boîtes de culture pouvant être utilisées sous atmosphère aérobie ou anaérobie (par exemple les brevets Nos FR 1 572 527, EP 119 984, EP 171 174 ou US 3 183 553), d'autres revendiquent des botes à plusieurs compartiments pouvant comporter des milieux de culture différents (Nos FR 2 157 050, EP 045 041, GB 1 026 253, US 4 072 577, etc), d'autres enfin proposent des supports pourvus de plusieurs tubes à essai, ou zones, avec des réactifs pour tests chimiques ou biochimiques (Nos FR 2 384 023, WO 89/02 927....). Le brevet N" FR88 05 191, déposé par le demandeur, décrit une boîte de culture à plusieurs compartiments permettant d'effectuer des analyses en même temps sous atmosphères aérobie et anaérobie ou atmosphère contrôlée. Cependant, il n'existe à notre connaissance aucun matériel unique permettant d'effectuer simultanément des cultures biologiques, des tests biochimiques ou chimiques et/ou des antibiogrammes, et ceci sous plusieurs atmosphères différentes. L'invention consiste en un dispositif unique, simple et peu onéreux, permettant soit de faire des tests à caractere biochimique sous une ou plusieurs atmosphères et, simultanément, une ou plusieurs cultures biologiques, également sous une ou plusieurs atmosphères, les atmosphères tant des tests biochimiques que des milieux de croissance/isolement/identification pouvant être différentes, soit d'effectuer simultanément plusieurs tests chimiques sous des atmosphères différentes. Il est constitué par la combinaison d'un socle et d'un couvercle préférentiellement en matière plastique moulée par injection ou thermoformée, le socle comportant, d'une part, des empreintes en creux aptes à former des puits pour tests chimiques ou biochimiques, des logements pour produits de contrôle d'atmosphère et éventuellement des emplacemements pour culture biologique, et d'autre part, des rainures ou nervures et des plots ou cales délimitant des zones isolées entre elles, le couvercle coopérant avec le socle, grâce à des rainures ou nervures complémentaires pour rendre certaines de ces zones étanches entre elles et/ou vis à vis de l'atmosphère extérieure. Sur les dessins annexés, donnés à titre d'exemple non limitatif d'une des formes de réalisation de l'objet de l'invention: la figure 1 représente le dispositif sans couvercle, vu de dessus, et les figures 2 et 3 sont des coupes transversales verticales, respectivement suivant les flèches A-A et B-B de la figure 1, montrant le socle et le couvercle non assemblés. Le dispositif, figures 1 à 3, est constitué d'un boîtier plat rectangulaire composé d'un socle 1 et d'un couvercle 2 formes chacun d'une seule pièce et pouvant être réalisés en matériaux divers tels que verre ou métal. Toutefois, etant surtout destiné à un "usage unique", le dispositif sera de préférence fabriqué en matière plastique moulée par injection ou thermoformée. Le socle 1 comporte des formes en creux à concavité dirigée vers le haut constituant des puits 3, 4 pour tests chimiques ou biochimiques, des emplacement ou réceptacles 5, 6 pour culture biologique ou antibiogrammes ainsi que, le cas échéant, des logements 10 destinés à recevoir des produits dessicants 8 ou contrôleurs d'atmosphère 9. Les puits 3, 4 ou spots de lecture des tests chimiques ou biochimiques et/ou les emplacements 5,6 pour culture biologique peuvent être pourvus de fonds comportant une finition optiquement transparente, nécessaire pour la lecture par néphélémétrie, spectrométrie ou autres systèmes optiques, la partie correspondante du couvercle recevra dans ce cas la même finition. Les emplacements pour culture biologique peuvent être soit l'équivalent d'une boîte de culture, soit des réceptacles 6 pouvant recevoir des boîtes de culture type boîte de Petri. Dans ce cas, des creux 7 permettant le passage des doigts pourront avantageusement etre prévus à la périphérie du réceptacle pour faciliter la préhension de la boîte. Des logements 10 seront présents pour recevoir les contrôleurs d'atmosphère 9 tels que générateurs d'oxygène, ou des produits dessicants 8 ou absorbeur d'humidité. Des nervures 12 et des plots 13 ou cales de ventilation délimitent respectivement des zones aérobies 15 et anaérobies 14 (ou à atmosphère contrôlée). Certains puits 4 pourront comporter une étanchéité spécifique et unitaire localisée au seul puits par un profil mâle 11 formé dans le couvercle 2 et venant s'emboîter sur la périphérie du bord supérieur du puits. Cette disposition permet de créer une anaérobiose, si le profil mâle vient affleurer le volume du réactif (inoculum compris) contenu dans le puits, ce qui permet de supprimer l'utilisation d'huile de paraffine ou autre produit similaire, habituellement déposée sur le réactif pour obtenir l'anaérobiose, ceci en particulier dans le cas où ledit puits est situé dans un compartiment où la réaction effectuée produit un dégagement gazeux nocif aux autres réactions ou cultures. Le couvercle 2 comporte des rainures 16 s'adaptant de façon étanche sur les nervurs 12 du socle 1 entourant les zones anaérobies 14 ou a atmosphère contrôlée, ainsi que des plages 17 servant d'appui aux plots 13 ou cales de ventilation permettant à l'air de circuler librement dans les zones aérobies 15. Il est bien évident que les rainures peuvent être portées par le couvercle et les nervures par le socle sans modifier le fonctionnement du système. De même, les plots 13 de ventilation peuvent indifféremment se trouver sur le couvercle ou sur le socle. L'ensemble est préférentiellement réalisé en plastique moulé par injection, par exemple du polystyrène, ou en plastique thermoforme, de préférence en polyéthylène ou en co-polyester, seule matière connue à ce jour stérilisable par rayons gamma ionisant sans alterer la qualité de transparence de ces films, ou alors en PVC ou autre matériau stérilisable par décontamination chimique, dans le cas où une boîte optiquement transparente s' avérait nécesssaire (exemple: numération des mycoplasmes sur gélose type A7, celle-ci se fait à l'aide d'un microscope, la boîte renversée, c'est à dire que l'on lit la gélose par transparence à travers le fond de la boîte plaqué à l'objectif du microscope), car les matières thermoformées ne sont pas toujours optiquement transparentes; il peut en être de même pour les spots de lecture des caractères chimiques ou biochimiques, afin que ceux-ci puissent être lus sur un système optique, nephélemétrique, spectrométrique ou autre. Le socle 1 et/ou le couvercle 2 peuvent avantageusement être équipes d'ergots 18 en relief permettant de maintenir le boîtier sur la platine portelames d'un microscope à l'aide du systeme prévu pour la fixation des dites lames. Le dispositif décrit peut être réalisé en une multitude de versions différentes, adaptées spécifiquement à un type d'analyse bien déterminé ou, au contraire, permettant d'effectuer des recherches différentes avec un seul modèle, de manière à faciliter le stockage et à diminuer les prix de revient. I1 peut s'appliquer aussi bien aux analyses biochimiques qu'aux analyses chimiques de toute nature. Le positionnement des divers éléments constitutifs donne à l'objet de l'invention un maximum d'effets utiles qui n'avaient pas éte, à ce jour, obtenus par des dispositifs similaires. REVENDICATIONS 1". Dispositif pour mise en culture, antibiogrammes, caracterisation biochimique de bactéries simultanés sous différentes atmosphères, destiné à la fabrication de matériel de laboratoire pour analyses bactériologiques, caractérisé par la combinaison d'un boîtier compos9 d'un socle (1) et d'un couvercle (2) formés chacun d'une seule pièce, le socle comportant, d'une part, des empreintes en creux à concavité dirigée vers le haut aptes à former des puits (3, 4) pour tests biochimiques, des emplacemements (5, 6) pour culture biologique ou antibiogrammes et, éventuellement des logements (10) pour produits de contrôle d'atmosphère (8, 9) et, d'autre part des rainures ou nervures (12) et des plots (13) ou cales delimitant des zones isolées respectivement anaérobies ou à atmosphère contrôlée (14) et aérobies (15), le couvercle coopérant avec le socle, grâce à des rainures ou nervures (17) complémentaires pour rendre les différentes zones anaérobies ou à atmosphère contrôlée (14) étanches entre elles et/ou vis à vis de l'atmosphère extérieure, le socle (-1) ou le couvercle (2) étant équipés d'ergots (18) en relief permettant de maintenir le boîtier sur la platine porte-lames d'un microscope a l'aide du système prévu pour la fixation des dites lames. 2". Dispositif selon la revendication 1, se caractérisant par le fait qu'il est réalisé en plastique moulé par injection, par exemple du polystyrène, ou en plastique thermoformé, de préférence en polyéthylène ou en co-polyester, ou alors en PVC ou autre matériau stérilisable par décontamination chimique. 3 . Dispositif selon la revendication 2, se caractérisant par le fait que que la matière plastique utilisée est transparente. 4 . Dispositif selon les revendications 2 et 3, se caractérisant par le fait que le fond des puits (3, 4) de lecture des tests biochimiques et/ou les emplacements (5, 6) pour culture biologique, ainsi que la zone correspondante du couvercle (2), comportent une finition optiquement transparente permettant la lecture par néphélémétrie, spectrométrie ou autres systèmes optiques. 5". Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, se caractérisant par le fait que certains puits (4) pour tests biochimiques comportent une étanchéité spécifique et unitaire localisée au seul puits grâce à un profil mâle (11) formé dans le couvercle (2) et venant s'emboîter sur la périphérie du bord supérieur du puits (4). 6". Dispositif selon la revendication 5, se caractérisant par le fait que le profil mâle (11) vient affleurer le volume du réactif (inoculum compris) contenu le puits (4), de manière à créer une anaérobiose sans utilisation d'huile de paraffine ou autre produit similaire, habituellement déposé sur le réactif pour obtenir une anaérobiose. 7". Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, se caractérisant par le fait que certains emplacements pour culture biologique sont des receptacles (6) pouvant recevoir des boîtes de culture type boîte de Pétri, des creux (7) permettant le passage des doigts étant ménagés à la périphérie du receptacle pour faciliter la préhension de ladite boîte. 8". Dispositif pour tests chimiques simultanés sous différentes atmospheres, destiné à la fabrication de matériel de laboratoire, caractérise par la combinaison d'un boîtier composé d'un socle (1) et d'un couvercle (2) formés chacun d'une seule pièce en matière plastique transparente moulée ou thermoformée, le socle comportant, d'une part, des empreintes en creux à concavité dirigée vers le haut aptes à former des puits (3, 4) pour tests chimiques, des logements (10) pour produits de contrôle d'atmosphère (8, 9) et, d'autre part des rainures ou nervures (12) et des plots (13) ou cales délimitant des zones isolées respectivement anaérobies ou à atmosphère contrôlée (14) et aérobies (15), le couvercle coopérant avec le socle, grâce à des rainures ou nervures (17) complémentaires pour rendre les différentes zones anaérobies ou à atmosphère contrôlee (14) étanches entre elles et/ou vis à vis de l'atmosphère extérieure, le socle (1) ou le couvercle (2) étant équipés d'ergots (18) permettant de maintenir le boîtier sur la platine porte-lames d'un microscope à l'aide du système prévu pour la fixation des dites lames. 9". Dispositif selon la revendication 8, se caractérisant par le fait que certains puits (4) pour tests chimiques comportent une étanchéité spécifique et unitaire localisée au seul puits grâce à un profil mâle (11) formé dans le couvercle (2) et venant s1 emboîter sur la périphérie du bord supérieur du puits (4). 10 . Dispositif selon la revendication 9, se caractérisant par le fait que le profil mâle (11) vient affleurer le volume du réactif (inoculum compris) contenu le puits (4), de maniere à créer une anaérobiose sans utilisation d'huile de paraffine ou autre produit similaire, habituellement déposé sur le réactif pour obtenir le même résultat.