Brevet FR2694196A1 — publié le 19940204

COMPOSITION MEDICINALE UTILISABLE COMME AGENT ANTIVIRAL L'invention concerne une composition médicinale utilisable en particulier comme agent antiviral ; elle vise notamment une composition ayant une activité antivirale sur les virus oncogènes. De nombreux travaux ont été menés pour mettre au point des compositions ayant des effets antiviraux ; certains auteurs ont préconisé l'utilisation de polysaccharides sulfatés (type dextrane ou curdlan) brevet EP-A-464.759 ; Aoki T et al, Eurodlan sulfate and HIV-1, I. In Vitro inhibitory effects of curdlan sulfat on HIV-1 infection, AIDS Res Hum Retrovirus, Avril 1991-7(4), pages 409-415 ; McClure et al, Investigations into the mechanism by which sulfated polysaccharides inhib HIV infection in vitro, AIDS Res Hum Retroviruses, Janvier 1992,8(1), pages 19-26. Ces travaux ont mis en évidence certaines propriétés antivirales de ces polysaccharides sulfatés, mais ceux-ci ne sont pas utilisés à l'heure actuelle probablement en raison d'une efficacité trop faible in vivo et d'effets secondaires liés à leur mode d'administration. D'autres travaux ont été menés sur les dérivés des uridines et ont mis en lumière des propriétés antitumorales et antivirales de certains de ces composés. En particulier, les dérivés fluorés des uridines présentent généralement des propriétés antitumorales (brevet EP-A331.032 ; brevet DE-A-3.828.156), cependant que les dérivés iodés des uridines présentent généralement des propriétés antivirales (brevet EP-A-56265). Ces composés sont connus pour être très actifs mais présentent le grave défaut d'être fortement cytotoxiques. Récemment, des composés de nature peptidique ont été présentés comme ayant des propriétés antivirales (demande internationale WO-A-91.17760 ; brevets US 5.066.783 et 5.073.542). Ces peptides agissent comme inhibiteurs de protéase et sont très actifs in vitro, mais se sont avérés peu actifs in vivo (demande internationale WO-A-92.04908). Par ailleurs, des formulations injectables ont été proposées combinant plusieurs composés. Par exemple la demande internationale WO-A-91.18629 décrit une formulation dans laquelle des peptides sont encapsulées dans une matrice polymérique ; la demande internationale WO-A-91.17660 décrit une préparation médicinale contenant un mélange de tétrahydrofolate (sel d'acide folique) et de 5-fluoro uracile ; le brevet japonais -A-89.252008 décrit un médicament combinant une polygalactosamine et le 5fluoro uracile ; le brevet japonais -A-88.078182 décrit une composition antitumorale combinant des dérivés du chitosane et le 5-fluoro uracile ; le brevet japonais -A-82.142664 décrit une formulation combinant un copolymère polylactique et un dérivé du 5-fluoro uracile. Ces formulations sont uniquement injectables et présentent soit une faible activité intrinsèque soit une cytotoxicité gênante. La présente invention se propose de fournir une nouvelle composition médicinale. Elle vise une composition ne présentant aucun effet cytotoxique et possédant des propriétés pharmacologiques, en particulier une activité antivirale très efficace. La composition médicinale conforme à la présente invention se caractérise en ce qu'elle combine (a) des peptides inhibiteurs de protéase, de poids moléculaire inférieur à 30 000 Daltons, (b) au moins un sel d'acide orotique, et (c) de l'acide lactique L dextrogyre. De préférence, cette composition comprend également (d) un polysaccharide, (e) au moins un sel d'acide folique, et (f) de 1 'urée. Les essais in vivo dont certains exemples sont fournis plus loin, ont montré que la composition susdéfinie (a, b, c, éventuellement complétés par d, e, f) présente de remarquables propriétés antivirales, en particulier à l'égard des virus oncogènes. On a constaté chez les animaux traités une absence totale de virus circulant au niveau plasmatique. En outre, on a pu observer un effet immunostimulant entraînant une augmentation significative de la survie des animaux infectés.Ces effets sont dus à une action synergique des composés, qui conduit à un rétablissement des échanges de la cellule infectée avec le milieu extérieur (échanges intra et extracellulaires et échanges intercellulaires), en particulier à une bonne absorption des peptides et des minéraux par la cellule : la cellule infectée est ainsi rétablie dans ses fonctions normales (respiration, métabolisme, flux), cependant que le virus peut être directement attaqué notamment par l'action inhibitrice des peptides ayant pénétré dans celle-ci.Les travaux des inventeurs permettent, avec une bonne vraisemblance, d'attribuer les rôles suivants aux trois composés essentiels (a), (b) et (c) : le ou les sels d'acide orotique ont un effet transporteur consistant à rétablir les échanges, d'une part, à travers la membrane cytoplasmatique, d'autre part, à l'intérieur du cytoplasme, avec les mitochondries, les lysosomes et le noyau ; en particulier est ainsi favorisée la pénétration des minéraux et des peptides, ces derniers étant ainsi en mesure de développer dans le cytoplasme leur action inhibitrice de protéase, entraînant la destruction du virus. L'acide lactique L dextrogyre rétablit l'acidité normale de la cellule et permet le rétablissement de la fonction respiratoire de la cellule, contribuant ainsi au passage de la cellule de l'état pathologique fermentaire à l'état normal respiratoire. Il convient de souligner que les effets sus-évoqués diffèrent fondamentalement de ceux des formulations antivirales connues ; dans 1 invention, la cellule infectée est rétablie dans ses fonctions normales, en même temps que le virus est attaqué, les cellules saines n'étant pas affectées, alors que les formulations connues visent à détruire les cellules infectées par un effet cytotoxique détruisant simultanément de nombreuses cellules saines. Selon une formulation préférée, la composition médicinale conforme à l'invention contient les sels d'acide orotique suivants : orotate de lysine, orotate de calcium, orotate de magnésium, orotate de fer et orotate de sélénium sous forme de sélénométhionine. Les proportions des divers composés qui paraissent donner les meilleurs résultats sont les suivantes, rapportées à 100 g d'acide lactique L dextrogyre (a) entre 8 et 30 g de peptides inhibiteurs de protéase, (b) entre 1 et 2 g de sel d'acide orotique, (d) avantageusement entre 5 et 15 g de polysaccha ride, (e) avantageusement entre 10-3 et 4.10-3g de sel d'acide folique, (f) avantageusement entre 1 et 3 g d'urée. Le polysaccharide utilisé est de préférence un glucogalactane, constitué en particulier d'un complexe de glucose et de galactose, de poids moléculaire moyen compris entre 5000 et 30 000 Daltons. Ce polysaccharide paraît présenter un bon effet immunostimulant sur la cellule ; de plus, dans la formulation visée plus loin contenant des vitamines, il améliore la stabilité de celles-ci De plus, on accroît la stimulation de la cellule, en ajoutant à la composition les composés suivants dont la pénétration à l'intérieur de la cellule est favorisée par les sels d'acide orotique - (g) combinaison des vitamines du groupe B suivantes : riboflavine (B2), pyridoxine (B6) et biotine (B8), - (h) en complément, au moins l'une des vitamines du groupe B suivants : cyanocobalamine (B12), nicotinamide (B3), pantothénate (B5), thiamine, - (i) avantageusement les oligo-éléments suivants : zinc, cuivre. Par exemple, on obtient d'excellents résultats en prévoyant entre 0,1 et 0,3 g de vitamines du groupe B, entre 2.10-2 et 8.10-2 g de zinc, et entre et 3.10-3 g de cuivre (poids rapporté à 100 g d'acide lactique L dextrogyre). La composition médicinale sus-visée est avantageusement complétée par (j) au moins l'un des excipients suivants : lactose, protéines lactées, acides gras d'origine lactique. Cet excipient peut être prévu dans une proportion comprise entre 103 et 4.103 g, rapporté à 100 g d'acide lactique L dextrogyre. La composition médicinale conforme à l'invention peut être préparée par mélange des composés. Elle peut également être préparée par un procédé naturel de double fermentation d'un lait ou d'un lactosérum en présence d'un levain lactique, ce procédé comprenant les étapes suivantes - on utilise un levain lactique contenant des polysaccharides en solution, la levure Candida PseudotroPicalis, la levure Pichia membranaefaciens, des bactéries du genre Lactococcus et des bactéries du genre Lactobacillus, - le lait ou le lactosérum contenant ledit levain est soumis à une première fermentation à une température sensiblement comprise entre 260 C et 350 C, - le produit obtenu est soumis à une seconde fermentation à une température sensiblement comprise entre 180 C et 280 C. Les levures et bactéries du levain agissent en symbiose au cours de la double fermentation ci-dessus définie pour conduire à une composition combinant les composés précités ; il est à noter qu'aucun rajout n'est effectué entre les deux fermentations. De préférence, on utilise pour réaliser cette double fermentation un levain lactique contenant également les bactéries des genres suivants Bifidobacterium, acetobacter, Leuconostac. Dans le cas où la composition est obtenue par double fermentation d'un lait, le levain lactique utilisé est en particulier du type visé dans la demande de brevet FR 91.02290. Un tel levain est préparé par fermentation d'un lait en présence d'un ferment lactique mixte renfermant une symbiose de levures et de bactéries, dans les conditions suivantes - le ferment utilisé comprend une matrice polysaccharidique englobant, d'une part, au moins une levure du genre Pichia espèce membranaefaciens, d'autre part, au moins les deux bactéries suivantes : bactérie du genre Lactococcus espèce lactis, bactérie du genre Lactobacillus espèce fermentum, - le lait contenant le ferment est soumis à une fermentation à température sensiblement constante comprise entre 260 C et 350 C pendant une durée sensiblement comprise entre 16 heures et 25 heures. Le ferment utilisé renferme de préférence l'ensemble des microorganismes suivants levure du genre Pichia espèce membranaefaciens, levure du genre Candida espèce pseudo trosicalis, bactéries du genre Lactococcus espèce lactis sous-espèce lactis, bactéries du genre Lactobacillus espèce fermentum, bactéries du genre Bifidobacterium, bactéries du genre Acetobacter. De plus, sa matrice polysaccharidique est préférentiellement à base de glucose et de galactose. Il est possible d'utiliser un ferment préalablement préparé à partir de cultures des microorganismes sus-évoqués. Il est également possible d'utiliser comme ferment un produit naturel qui est un sous-produit du lait caillé, en particulier ferment fabriqué et distribué par la Société "Bioadditive", Toulouse, France. Le levain lactique obtenu se caractérise essentiellement par la présence dans le milieu lacté de polysaccharides en solution, de concentration comprise entre 0,01 et 0,05 g par gramme de milieu, de levure Pichia membranaefaciens, en quantité comprise entre 105 et 107 germes par gramme de milieu, de bactéries Lactococcus en quantité comprise entre 107 et 109 bactéries par gramme de milieu, et de bactéries Lactobacillus en quantité comprise entre 105 et 107 bactéries par gramme de milieu. Outre ces germes essentiels, le levain conforme à l'invention peut également contenir les germes suivants levure supplémentaire : Candida nseudo- troPicalis, la quantité de cette levure étant comprise entre 104 et 106 germes par gramme de milieu, bactéries supplémentaires : Bifidobacterium entre 103 et 105 par gramme, Acetobacter entre 103 et 105 par gramme. La préparation de la composition médicinale conforme à l'invention au moyen d'un tel levain lactique peut être effectuée dans les conditions optimales suivantes - proportion pondérale de levain par rapport au lait comprise entre 1 % et 4 %, - première fermentation à une température sensiblement comprise entre 260 C et 350 C, en particulier sensiblement égale à 300 C, pendant une durée sensiblement comprise entre 4 et 8 heures, en particulier sensiblement égale à 6 heures, - seconde fermentation à une température sensiblement comprise entre 180 C et 240 C, en particulier sensiblement égale à 210 C, pendant une durée sensiblement comprise entre 9 et 16 heures, en particulier sensiblement égale à 12 heures. Par ailleurs, dans le cas où la composition médicinale conforme à l'invention est obtenue par double fermentation d'un lactosérum, le levain lactique utilisé est en particulier du type visé dans la demande de brevet FR 91.02291. Un tel levain est préparé par double fermentation d'un lactosérum en présence d'un ferment d'un type analogue à celui décrit plus haut, dans les conditions suivantes - le lactosérum contenant le ferment est soumis à une première fermentation à une température sensiblement comprise entre 260 C et 350 C pendant une durée sensiblement comprise entre 16 heures et 25 heures, - le produit obtenu est soumis à une seconde fermentation à une température sensiblement comprise entre 210 C et 280 C pendant une durée sensiblement comprise entre 24 et 48 heures. Le levain lactique obtenu contient des levures et souches de même nature que celles déjà évoquées, mais avec des proportions différentes. La préparation de la composition médicinale conforme à l'invention au moyen de ce levain lactique est dans ce cas effectuée dans les conditions optimales suivantes - proportion pondérale de levain par rapport au lactosérum comprise entre 1 % et 4 %, - première fermentation à une température sensiblement comprise entre 260 C et 350 C, en particulier sensiblement égale à 300 C, pendant une durée sensiblement comprise entre 24 et 72 heures, en particulier sensiblement égale à 48 heures, - seconde fermentation à une température sensiblement comprise entre 210 C et 280 C inférieure à la première, en particulier sensiblement égale à 250 C, pendant une durée sensiblement comprise entre 48 et 96 heures, en particulier sensiblement égale à 72 heures. Les procédés d'obtention ci-dessus décrits (double fermentation d'un lait, ou double fermentation d'un lactosérum) conduisent à une composition comprenant les divers composés (a)-(j) définis précédemment, avec des proportions relatives entrant dans les plages mentionnées. Cette composition contient également des microorganismes qui peuvent être conservés ou, au contraire, éliminés au terme de la seconde fermentation. Les exemples 1 et 2 qui suivent présentent des procédés de préparation de compositions médicinales conformes à l'invention ; les exemples 3 et 4 décrivent les expérimentations in vivo de ces compositions respectivement sur des souris et sur des poules pondeuses. Les figures 1, 2 et 3 des dessins annexés présentent des diagrammes obtenus à l'exemple 3 - figure 1 : diagramme donnant le pourcentage d'apparition de tumeur chez les souris traitées, - figure 2 : diagramme donnant le pourcentage de survie, - figure 3 : diagramme donnant l'évolution de la consommation de produits. EXEMPLE 1 : PréParation d'une comPosition médicinale par double fermentation d'un lait. Ferment utilisé Le ferment utilisé est le ferment distribué par la Société "Bioadditive" sous la référence "RDR91A". Ce ferment se présente sous la forme d'une masse granulaire blanchâtre de taille comprise entre 1 et 3 centimètres. Lait utilisé Le lait utilisé est du lait demi-écrémé à 105 g/kg + 1 g de matière sèche, 15 g/kg + 1 g de matière grasse et 47 g/kg + 1 g de lactose. Ce lait a été pasteurisé deux fois à 90/950 C pendant une durée de 30 mn à chaque pasteurisation (pasteurisateur à plaques). Le lait est ensuite refroidi dans une cuve fermenteur (type "GOAVEC") jusqu'à 300 C. Fabrication du levain lactique La cuve fermenteur contenant 100 litres de lait a été régulée à une température de 300 C + 0,50. Cette cuve étant du type complètement fermé, étanche, stérilisable à la vapeur sous 2 bars est munie d'un système de filtre microbien pour les échanges d'air et d'un moyen d'ensemencement aseptique. L'ensemencement au moyen du ferment visé plus haut a été effectué à raison de 20 g de ferment par litre de lait. Un brassage par agitation (40 trs/mn), de 30 mn en début et 30 mn en fin de fermentation, homogénéise le milieu. Le produit est laissé à 300 C dans la cuve fermenteur pendant 20 heures. Des contrôles de pH toutes les deux heures montrent que le pH égal au départ à 6,5 s'abaisse régulièrement jusqu'à une valeur finale de 4,5 au terme de 20 heures. Le produit est ensuite refroidi en moins de 30 mn jusqu'à 40 C, et la fraction liquide est soutirée de la cuve aseptiquement. Elle est lyophilisée par un procédé traditionnel, par un appareil "Sérail" (congélation à -400 C, mise sous vide et sublimation). Levain obtenu Avant la lyophilisation, le levain ainsi fabriqué a été analysé et les résultats suivants ont été obtenus (nombre de germes par gramme, valeur moyenne) . 6.105 Pichia membranaefaciens, . 6.104 Candida Pseudotronicalis, . 9.107 Lactocoques, . 25.105 Lactobacilles, . 9.103 Bifidobacterium, . 7.103 Acetobacter. Après lyophilisation, on constate une perte de 50 %. De plus, le levain avant lyophilisation présente une concentration en polysaccharides en solution, de 0,03 g par gramme de levain ; ces polysaccharides comprennent du glucose et du galactose en pourcentage relatif égal à 0,8 g de glucose par gramme de galactose. En outre, le levain comprend 73 mg d'acide orotique par litre. Fabrication de la comPosition médicinale à Partir dudit levain Le lait utilisé pour cette fabrication est un mélange de lait après réglage de la teneur en matière grasse et de la poudre de lait écrémé pour standardiser en extrait sec - 125 g/kg + 1 g de matière sèche, - 36 g/kg + 1 g de matière grasse, - 50 g/kg + 1 g de lactose. Ce lait a été envoyé dans un échangeur à plaques pour y subir un préchauffage avant d'être homogénéisé (150-200 kg/cm2, à une température de 700 C) puis pasteurisé à 90/950 C pendant une durée de 30 mn (pasteurisateur à plaques). Le lait est ensuite refroidi dans une cuve de maturation (type "GOAVEC") jusqu'à 300 C. La cuve de maturation est une cuve ultrapropre d'essai type "GOAVEC" régulée à une température de 300 C + 0,50 C. L'ensemencement, au moyen du levain précité est réalisé en direct à l'aide d'une pompe "MOUVEX S4" à raison de 2 % sous agitation 10 trs/mn pendant le remplissage. Le produit est laissé à 300 C dans la cuve de maturation pendant 6 heures. Des contrôles de pH ont lieu toutes les deux heures pour arriver à un pH de décaillage de 5,2. Le décaillage se fait par agitation à 10 trs/mn, avec une circulation d'eau glacée à 0 C (+ 20 C maximum), pour refroidir à 210 C en 30 mn. Le lait subit alors une deuxième fermentation dans la même cuve de maturation à 210 C pendant 12 heures jusqu'à pH de 4,5. Le produit liquide obtenu est pasteurisé dans la cuve à 950 C pendant 5 minutes, ce qui inactive les microorganismes, puis refroidi et concentré à l'aide d'un évaporateur sous vide à couche mince centrifugée ("EVAPOR type CEP1) à une température de 250 C, jusqu'à réduction de son volume de moitié (viscosité obtenue : 4 000 centipoises). Le produit concentré est ensuite lyophilisé par un procédé traditionnel (appareil "SERAIL type CS80"). On obtient une poudre blanchâtre, de taux d'humidité inférieur à 5 %, soluble à raison de 0,3 g par ml d'eau. Cette poudre constitue la composition médicinale visée par l'invention. Son administration est de préférence faite par voie orale. Caractérisation galénique de la comnosition Cette caractérisation a été effectuée par les méthodes suivantes - dosage des protéines par la méthode de KJELDAHL (sur appareil KJELFOSS), - dosage des peptides par chromatographie H.P.L.C. (JASCO 875) suivie d'une spectrographie ultra-violette (SECOMAM S 1000 PC), - dosage des sucres et des polysaccharides par chromatographie H.P.L.C. (JASCO 875) colonne p-Bondapak/carbohydrate, - dosage des lipides (matières grasses) par butyrométrie et chromatographie C.P.G. (HEWLETT-PACKARD 5890 série 11), - dosage des minéraux par chromatographie ionique (JASCO 875) avec détecteur conductimétrique Wescan 315, colonne SCK 01 pour les anions et colonne SCA 03 pour les cations, - dosage des vitamines liposolubles par chromatographie H.P.L.C. (JASCO 875) et dosage des vitamines hydrosolubles par microbiologie et colorimétrie, - dosage de l'urée par la méthode de CONWAY (à l'uréase). La formulation (en g, rapportée à 100 g d'acide lactique) est la suivante Protéines lactées : 700 Acide gras d'origine lactique : 600 Lactose : 440 Peptides : 12,00 Orotates : 1,40 Acide lactique : 100 Glucogalactane : 10 Folates : 0,002 Urée : 2 Zinc : 0,050 Cuivre : 0,0018 Vitamines B : 0,19 B1 thiamine : 0,01 B2 riboflavine : 0,042 B3 nicotinamide : 0,024 B5 prantothénate : 0,102 B6 pyridoxine : 0,0094 B8 biotine : 0,0004 B12 cyanocobalamine : 0,00006 Vit A : 0,0084 Vit C : 0,222 Vit E : 0,0186 Calcium : 22 Magnésium : 2 Phosphore : 16 Potassium : 27 Sodium : 8 Iodure : 0,0008 Fer : 0,042 Manganèse : 0,0006 Sélénium : 0,00018 Les peptides sont des peptides inhibiteurs de protéase de poids moléculaire de l'ordre de 10 000 à 15 000 Daltons.Les orotates sont constitués d'un mélange d'orotate de calcium et d'orotate de magnésium (majoritaires) avec également de l'orotate de fer, de l'orotate de lysine et, en très faible quantité, de l'orotate de sélénium (sélénométhionine). L'acide lactique est constitué par de l'acide lactique L dextrogyre (à plus de 95 %). Le glucogalactane est un complexe de glucose et de galactose de poids moléculaire moyen de l'ordre de 16 300 Daltons. Les folates sont des tétrahydrofolates. La composition peut être présentée sous forme de poudres, ou de composés à dissoudre dans de l'eau ou à consommer tels quels par voie orale. EXEMPLE 2 : PréParation d'une comPosition médicinale par double fermentation d'un lactosérum Ferment utilisé Le ferment utilisé est le ferment distribué par la Société "Bioadditive" sous la référence "RDR91B". Lactosérum utilisé Le lactosérum utilisé est du lactosérum doux pasteurisé à 90/950 C pendant 30 minutes, avec la composition suivante : 52 g/kg + 1 g de matière sèche, 0,6 g/kg de matière grasse, 44 g/kg + 1 g de lactose et 0,9 g/kg de protéines. Le pH de ce lactosérum est de 5,6. Fabrication du levain lactique Un récipient de type Erlen Meyer de 0,5 litre de lactosérum sous agitation en va-et-vient (80 oscillations/minute) a été régulé à une température de 300 C + 0,50. Un ensemencement au moyen du ferment précité a été effectué à raison de 50 g de ferment par litre de lactosérum. Le produit est laissé à 300 C dans le récipient pendant 20 heures sous agitation continue. Des contrôles de pH toutes les deux heures montrent que le pH égal au départ à 5,6 s'abaisse régulièrement jusqu'à une valeur finale de 4,4 au terme des 20 heures. Le produit est ensuite refroidi en moins de 30 mn jusqu'à 250 C, et il est laissé 36 heures à cette température sous agitation continue pour une nouvelle fermentation ; le pH final est de 4,4. La fraction liquide est soutirée du récipient aseptiquement. Elle est lyophilisée par un procédé traditionnel, par un appareil "Sérail" (congélation à - 40 0 C, mise sous vide et sublimation). Levain obtenu Avant la lyophilisation, le levain ainsi fabriqué a été analysé et les résultats suivants ont été obtenus (nombre de germes par gramme, valeur moyenne) 4.105 Pichia membranaefaciens, 6.105 Candida oseudotroPicalis, 2.108 Lactocoaues, . 15.105 Lactobacilles, 104 104 Bifidobacterium, 7.103 Acetobacter, . 8.103 Leuconostoc. Après la lyophilisation, on constate une perte de 50 %. De plus, le levain avant lyophilisation présente une concentration en polysaccharides en solution, de 0,03 g par gramme de levain ; ces polysaccharides comprennent du glucose et du galactose en pourcentage relatif égal à 0,8 g de glucose par g de galactose. En outre, le levain comprend 71 mg d'acide orotique par litre. Préparation de la comPosition médicinale à partir du levain précité Le lactosérum doux utilisé pour cette préparation est le même que celui utilisé pour la fabrication du levain. Ce lactosérum est introduit dans une cuve de maturation ultra-propre (600 litres) type "GOAVEC" régulée à une température de 300 C + 0,50 C. L'ensemencement au moyen du levain lyophilisé est réalisé en direct à l'aide d'une pompe "MOUVEX S4", à raison de 2 % en poids sous agitation 10 trs/mn pendant le remplissage. Le produit est laissé à 300 C dans la cuve de maturation pendant 48 heures. Le pH au bout de 48 heures est de 4,9. Le lactosérum qui a subi cette première fermentation, est refroidi à 250 C et est laissé à cette température pendant 72 heures pour subir une seconde fermentation ; son pH final est de 4,5. Le produit est ensuite soutiré par une pompe positive type "MOUVEX S4" à vitesse de rotation lente et à débit régulé. Le produit est conditionné en conteneur de 100 1. Il est ensuite réduit en poudre par atomisation dans des conditions traditionnelles. Caractérisation aaléniaue de la composition Outre les microorganismes présents, la formulation de la composition est la suivante (en g, rapportée à 100 g d'acide lactique) Protéines lactées : 1143 Acide gras d'origine lactique : 257 Lactose : 300 Peptides : 21,43 Orotates : 1,43 Acide lactique : 100 Glucogalactane : 7,43 Folates : 0,003 Urée : 2 Zinc : 0,043 Cuivre : 0,002 Vitamines B : 0,15 B1 thiamine : 0,01 B2 riboflavine : 0,04 B3 nicotinamide : 0,02 B5 prantothénate : 0,08 B6 pyridoxine : 0,0073 B8 biotine : 0,0004 B12 cyanocobalamine : 0,00000 Vit A : 0,0040 Vit C : 0,08 Vit E : 0,064 Calcium : 20,71 Magnésium : 2,14 Phosphore : 10,00 Potassium : 17,14 Sodium : 7,43 Iodure : 0,0009 Fer : 0,02 Manganèse : 0,0004 Sélénium : 0,0002 Les mêmes commentaires que précédemment peuvent être formulés au sujet de la nature des composés présents. Toutefois, l'orotate majoritaire est l'orotate de lysine et la teneur en peptides est augmentée (presque doublée). La composition peut être présentée sous forme de poudre que l'on peut dissoudre dans de l'eau ou de granulés à consommer tels quels. EXEMPLE 3 : ExPérimentations sur des souris Les souris utilisées sont des souris C3H/Bi infectées néonatalement par le virus oncogène MTV (Mamary Tumor Virus) qui constitue une infection virale latente. Les souris C3H/Bi se caractérisent par le développement avec une haute fréquence (90 % des souris femelles) de tumeurs mammaires entre l'âge de 5 à 8 mois et par une altération des fonctions cytotoxiques naturelles. LOTS Les souris C3H/Bi sont réparties en trois lots de 12 souris nommés A, B et C. NOURRITURE La nourriture sous forme d'aliments composés granulaires est distribuée deux fois par jour. Elle est identique en quantité et en qualité pour les trois lots A, B, C. BOISSON La boisson contenue dans des biberons de 100 ml est renouvelée tous les jours. Elle est identique en quantité et différente en qualité suivant les lots A, B, C. - lot A : eau stérile. - lot B : eau stérile + 5 % de poudre de lait écrémé standardisé et lyophilisé. - lot C : eau stérile + 5 % de composition médicinale préparée à l'exemple 1 (sous forme de poudre). EXPERIMENTATION Elle débute à partir du 4ème mois de vie des souris C3H/Bi. Les souris ont un accès permanent et libre aux biberons. RESULTATS On constate par toucher trois fois par semaine l'apparition des tumeurs mammaires, et on relève la consommation de boissons tous les jours. Des prélèvements sanguins sont effectués chaque semaine. La mortalité est notée au fur et à mesure. Le diagramme de la figure 1 donne le pourcentage d'apparition de tumeurs par lot. La courbe témoin A (boisson : eau stérile) est conforme à la génétique connue des souris utilisées (90 % des souris présentent une tumeur mammaire au 8ème mois). La courbe B montre un décalage d'environ 1 mois de cette apparition (boisson : lait), le taux d'apparition demeurant identique au bout du 9ème mois. La courbe C obtenue avec la composition conforme à l'invention montre, d'une part, un décalage dans le temps, d'autre part et surtout une réduction très significative du taux d'apparition de tumeurs (30 % d'apparition à comparer à 90 % pour les deux autres lots). Ce test renouvelé donne des résultats sensiblement identiques. Le diagramme de la figure 2 donne le pourcentage de survie pour les trois lots. Pour les lots A et B, on observe 10 % de survie au terme du 10ème mois (avec un léger décalage en faveur du lot B), alors que pour le lot C (composition conforme à l'invention), le taux de survie est de 90 % au terme du 10ème mois (une seule souris morte). L'écart moyen en jours de survie entre le moment d'apparition d'une tumeur et la mort de la souris est le suivant - lot A : 37 jours, - lot B : 27 jours, - lot C : 84 jours Ces résultats démontrent une efficacité antivirale et antitumorale remarquable de la composition. Le diagramme de la figure 3 montre l'évolution de la consommation pour les trois lots. On remarque que la consommation est plus élevée pour le lot C et qu'elle se stabilise au terme du 8ème mois, alors que cette consommation chute de façon continue pour les lots A et B. Les prélèvements sanguins ont fait l'objet de recherches sur la réponse tumorale et sur la réponse cellulaire. On a observé, pour les lots A et B, des réponses tumorales et cellulaires identiques démontrant l'existence de virus circulants, alors que, pour le lot C, on a observé l'absence de virus circulants. De plus, pour la souris morte du lot C, une analyse hystopathologique a montré que sa tumeur était nécrosée, contenant des virus inactifs. EXEMPLE 4 : Traitement des tumeurs induites par oncogène viral (sarcome et leucémie aviaire) dans un élevaae de Poules Pondeuses L'élevage est un élevage français comprenant 10550 poules pondeuses âgées de 20 semaines lorsque débute le traitement. Historiquement, dans cet élevage, on a pu observer jusqu'à la date des tests, une apparition spontanée de tumeurs virales, de type sarcome de Peyton et leucose (leucémie érythro-myéloblastique) qui provoquent de l'ordre de 90 % de la mortalité naturelle. Les poules sont réparties en deux lots A. Lot témoin de 5300 poules, B. Lot traité de 5250 poules. L'alimentation de base (céréales...) est identique pour les deux lots. Le lot témoin A reçoit une dose de poudre de lactosérum doux mélangé à l'aliment de base, tandis que le lot traité B reçoit la même dose de poudre mais constituée par la composition médicinale préparée dans l'exemple 2. La dose est fournie de la manière suivante - de la 22ème à la 37ème semaine : 0,5 g/kg d'aliment de base, - de la 28ème à la 62ème semaine : 1 g/kg d'aliment. La recherche porte sur le nombre de poules pondeuses mortes par tumeur induite après une analyse histopathologique des carcasses. De la 22ème à la 37ème semaine le nombre de poules mortes - dans le lot A : 55 dont 50 par tumeur induite, - dans le lot B : 35 dont 20 par tumeur induite. De la 28ème à la 62ème semaine - dans le lot A : 165 dont 151 par tumeur induite, - dans le lot B : 86 dont 44 par tumeur induite. Les résultats montrent que le traitement par la composition médicinale permet de diminuer la mortalité totale des poules de 55 % et de diminuer le taux de tumeurs induites par un oncogène viral - 91 % des poules mortes du lot A ont présenté des tumeurs induites, - 53 % des poules mortes du lot B ont présenté des tumeurs induites. REVENDICATIONS 1/ - Composition médicinale, combinant (a) des peptides inhibiteurs de protéase, de poids moléculaire inférieur à 30 000 Daltons, (b) au moins un sel d'acide orotique, et (c) de l'acide lactique L dextrogyre. 2/ - Composition médicinale selon la revendication 1, comprenant (b) les sels d'acide orotique suivants : orotate de lysine, orotate de calcium, orotate de magnésium, orotate de fer et orotate de sélénium sous forme de sélénométhionine. 3/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 1 ou 2, comprenant, rapporté à 100 g d'acide lactique L dextrogyre (a) entre 8 et 30 g de peptides, (b) entre 1 et 2 g de sel d'acide orotique. 4/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 1, 2 ou 3, combinant (a) des peptides inhibiteurs de protéase, de poids moléculaire inférieur à 30 000 Daltons, (b) au moins un sel d'acide orotique, (c) de l'acide lactique L dextrogyre, (d) un polysaccharide, (e) au moins un sel d'acide folique, et (f) de l'urée. 5/ - Composition médicinale selon la revendication 4, dans laquelle (d) le polysaccharide est un glucogalactane. 6/ - Composition médicinale selon la revendication 5, dans laquelle (d) le glucogalactane est constitué d'un complexe de glucose et de galactose, de poids moléculaire moyen compris entre 5 000 et 30 000 Daltons. 7/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 4, 5 ou 6, comprenant, rapporté à 100 g d'acide lactique L dextrogyre (a) entre 8 et 30 g de peptides, (b) entre 1 et 2 g de sel d'acide orotique, (d) entre 5 et 15 g de polysaccharide, (e) entre 10-3 et 4.10-3 g de sel d'acide folique, (f) entre 1 et 3 g d'urée. 8/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 1 à 7, comprenant, en outre, (g) les vitamines du groupe B suivantes : riboflavine (B2), pyridoxine (B6) et biotine (B8). 9/ - Composition médicinale selon la revendication 8, comprenant également (h) au moins l'une des vitamines du groupe B suivantes : cyanocobalamine (B12), nicotinamide (B3), pantothénate (B5), thiamine (B1). 10/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 8 ou 9, comprenant, rapporté à 100 g d'acide lactique L dextrogyre, entre 0,1 et 0,3 g de vitamines du groupe B. 11/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 1 à 10, comprenant (i) les oligoéléments suivants : zinc, cuivre. 12/ - Composition médicinale selon la revendication 11, comprenant, rapporté à 100 g d'acide lactique L dextrogyre . entre 2.10-2 et 8.10-2 g de zinc, . entre 10-3 et 3.10-3 g de cuivre. 13/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 1 à 12, comprenant (j) au moins l'un des excipients suivants : lactose, protéines lactées, acides gras d'origine lactique. 14/ - Composition médicinale selon la revendication 13, comprenant entre 103 et 4.103 g d'excipients rapporté à 100 g d'acide lactique L de dextrogyre. 15/ - Composition selon l'une des revendications 1 à 14, pour une utilisation comme agent antiviral, ayant en particulier une activité antivirale sur les virus oncogènes. 16/ - Composition médicinale selon l'une des revendications précédentes, obtenue par un procédé de double fermentation d'un lait ou d'un lactosérum en présence d'un levain lactique, comprenant les étapes suivantes - on utilise un levain lactique contenant des polysaccharides en solution, la levure Candida pseudotroPicalis, la levure Pichia membranaefaciens, des bactéries du genre Lactococcus et des bactéries du genre Lactobacillus, - le lait ou le lactosérum contenant ledit levain est soumis à une première fermentation à une température sensiblement comprise entre 260 C et 350 C, - le produit obtenu est soumis à une seconde fermentation à une température sensiblement comprise entre 180 C et 280 C. 17/ - Composition médicinale selon la revendication 16, obtenue par double fermentation en présence d'un levain lactique contenant également les bactéries des genres suivants : Bifidobacterium, Acetobacter, Leuconostoc. 18/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 16 ou 17, obtenue par double fermentation d'un lait, la première fermentation réalisée entre 260 C et 350 C ayant une durée sensiblement comprise entre 4 et 8 heures, la seconde fermentation réalisée entre 180 C et 240 C ayant une durée sensiblement comprise entre 9 et 16 heures. 19/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 16 ou 17, obtenue par double fermentation d'un lactosérum, la première fermentation réalisée entre 260 C et 350 C ayant une durée sensiblement comprise entre 24 et 72 heures, la seconde fermentation réalisée entre 210 C et 280 C ayant une durée sensiblement comprise entre 48 et 96 heures. 20/ - Composition médicinale selon l'une des revendications 16, 17, 18 ou 19, obtenue par double fermentation, les microorganismes étant éliminés au terme de la seconde fermentation.