Brevet FR2694693A1 — publié le 19940218

La présente invention concerne l'utilisation antivirale de la flavopéreirine. Elle concerne plus particulièrement une composition pharmaceutique contenant comme seul principe actif de la flavopéreirine et l'utilisation de celle-ci pour le traitement chez l'homme des infections virales, en particulier telles que celles provoquées par le virus de l'immunodéficience humaine VIH. La flavopéreirine est un alcaloïde de la classe des bêta-carbolines. Elle est également dénommée classiquement 'tcomposé H ou PB 10011 et présente une fluorescence W d'émission à 250-254 et 306 nm. On peut l'obtenir à partir de l'écorce de Pao Pereira (Tariri Ciliata Martius), qui est une variété d'apocynacées et/ou de Geissospermum vellosii-Baillon (voir H. Rapoport et al. (J. Am. Chem. Soc. 80, 1601-1608 (1958); et M. Beljanski et J. Bugiel: demande de 1er certificat d'addition No. 79 05853 à la demande de brevet français No. 78 07155 et document EP-A-0 059 817]. Il est connu que la flavopéreirine, administrée à la dose de 200-600 g par voie intradermique ou de 2,5-500 mg/jour, de préférence 30 mg/jour, empêche l'apparition et le développement des papules virales dans le cas de virus du type de ceux du fibrome de Shope et de la vaccine. On sait également que la flavopéreirine est sensée agir in vivo contre le virus de llinfluenza(virus à ARN) et qu'elle peut en outre inhiber la multiplication du virus de la mosaïque du tabac (VMT) lors d'un bref contact avec ce virus. Le document sP-A-0 059 817 divulgue en outre que la flavopéreirine est active contre le virus de la grippe, mais que la demi-vie d'une telle bêta-carboline quaternaire est trop courte pour qu'elle puisse être administrée efficacement chez l'homme sous une forme galénique autre que des microgranules à effet retard. Le document FR 88 15845 décrit quant à lui un système d'amélioration de la défense immunitaire chez les humains (contre les virus à ARN -SIDA en particulier- et les virus à ADN). Selon ce document l'inhibition de la multiplication des virus concernés n'est possible que par un système de quatre substances différentes, dont la flavopéreirine n'est que l'une d'entre elles. La composition pharmaceutique ainsi divulguée comprend obligatoirement au moins un représentant de chacune de ces quatre catégories de substances actives. La flavopéreirine comprise dans un tel système composite est administrée à une dose de 0,25 à 1 g/jour, de préférence par voie orale. On a maintenant trouvé de façon inattendue que la flavopéreirine peut constituer à elle seule un principe actif efficace dans la lutte contre les virus de VIH chez les mammifères, y compris l'homme. On a plus particulièrement trouvé que la flavopéreirine est un principe actif qui à lui seul exerce, tant in vitro que in vivo, une action d'inhibition sélective sur l'infection virale par VIH, notamment chez des patients infectés par VIH-1. La présente invention a donc pour premier objet une composition pharmaceutique, notamment pour utilisation comme médicament contre les infections virales par VIH, comportant de la flavopéreirine comme unique principe actif, avantageusement sous une forme solide contenant par dose unitaire environ 500 mg de flavopéreirine ou d'un de ses sels ou autres dérivés pharmacologiquement acceptables. Elle a également pour objet l'utilisation d'une telle composition pharmaceutique à base de flavopéreirine pour l'obtention d'un médicament destiné à un traitement antiviral contre le virus VIH. Ces objets, ainsi que d'autres, ressortiront mieux de la suite de la présente description, dans laquelle les essais et expérimentations relatés ne sont donnés qu'à titre indicatif et ne limitent aucunement l'invention. La flavopéreirine est dénuée d'effet toxique et d'effets secondaires chez les mammifères, y compris l'homme. La DL50 chez le rat Sprague-Dawley EOPS est de 10,45 g/kg (limites de confiance: 9,63 à 11,35) par voie orale et de 2,45 g/kg (limites de confiance: 2,35 à 2,55) pour une administration intrapéritonéale. L'animal meurt dans les 30 à 60 minutes suivant l'administration orale ou intrapéritonéale, par arrêt respiratoire. Il n'a pas été observé de mort différée durant les 14 jours suivants. Une administration sous-chronique par voie orale chez des rats Sprague-Dawley mâles et femelles (OFA) a démontré l'absence de toxicité à des doses égales à 1/20 de la DL50 (soit 530 mg.kg'l.d'l) ou à 1/5 de la DL5O (soit 2120 mg.kg1.d1). A ces doses on n'a détecté de modifications ni dans le poids corporel, ni dans la prise de nourriture. On n'a pas non plus décelé d'altération de la numération globulaire sanguine et les fonctions hépatiques et rénales restaient normales. On n'a observé au microscope aucune lésion du foie, des reins, du duodénum, du myocarde, de la rate, des glandes thyroïdes et parathyroïdes, des testicules et des ovaires. La flavopéreirine franchit la barrière hématoencéphalique, ainsi que l'a montré le fait que chez des souris mâles CDI ayant reçu 10 mg de ce composé par voie orale, la teneur encéphalique en flavopéreirine était de 7 Fg environ (soit une concentration de 14 Ag/g, pour des souris de 20 g ayant un cerveau pesant 0,5 g). Dans la pratique on prépare la flavopéreirine, en vue de son utilisation selon la présente invention, par exemple par hydrolyse dans HCl 1N de poudre de Geissospermum vellosii à 1000C, suivie d'une neutralisation par KOH, d'une extraction à l'éthanol et d'une réduction par distillation. On reprend ensuite le résidu de la distillation par du chloroforme, on élimine l'excès de sels par précipitation à froid en présence d'méthanol et on concentre le résidu, qui contient essentiellement la flavopéreirine. Aux fins de la présente invention, la flavopéreirine peut être mise en oeuvre soit telle quelle, soit sous forme dlun sel ou autre dérivé pharmacologiquement acceptable. Les essais pharmacologiques suivants, correspondant à 1 ' indication thérapeutique susdite, ont été réalisés. Ils sont complétés par les figures annexées, dans lesquelles: - Fig. 1 représente un graphique montrant les comptages comparés de cellules/ml en fonction du temps en heures suivant l'infection, l'addition de flavopéreirine (dénommée "H") étant faite 12 heures après l'infection; - Fig. 2 représente les titrages comparés des unités infectieuses (en UI/ml) en fonction du temps en heures suivant l'infection, sans addition de composé H et avec addition de celui-ci respectivement à raison de 30 et 60 Zg/ml. Effet antiviral contre VIH de la flavopéreirine La destruction du VIH dans des cellules en culture in vitro sans effet sur les cellules normales ou saines a été démontrée par l'utilisation de la souche H-9 des lymphocytes T4 obtenue auprès du Dr. R. Gallo via le Paul Ehrlich Institute (Francfort, Allemagne) et propagée à l'institut für Medizinische Mikrobiologie und Hygiene (Université de Berne, Suisse). Le VIH avait été obtenu en tant que HTLV III auprès du Dr. Gallo et propagé dans les cellules H-9 susmentionnées. Le surnageant provenant de la culture de cellules H-9 infectées a été stocké à -800C. Ce surnageant avait une concentration de 106 UI/ml lorsqu'on l'utilisait. On a cultivé les cellules H-9 dans un milieu RPMI 1640 contenant 15% de sérum de veau foetal, 0,002 pm de glutamine et 100 UI de pénicilline/ml dans des fioles de Falcon (25 cm2). On a utilisé 8 à 20 ml de milieu par fiole. On a mis les fioles, en position droite, à incuber à 370C. On a débuté la culture à une concentration de 2 x 105 cellules H-9 par ml et on l'a scindée lorsque le nombre de cellules atteignait 1 x 106 cellules/ml. Pour tester la flavopéreirine dans des cultures de cellules H-9 infectées et non infectées, on a utilisé des plaques de microtitrage.Dans ce cas les cultures ont été débutées à une concentration de 6 x 105 cellules/ml. Après 23 heures d'incubation on a ajouté à chaque alvéole contenant 0,1 ml de cette suspension cellulaire 0,1 ml de milieu RPMI 1640 contenant 102 UI de VIH. Cela correspondait à une multiplicité d'infection de 1,6 x 10,4, soit une unité infectieuse pour 500 cellules. 16 heures après llinfec- tion, on a ajouté dans les alvéoles infectées et dans les alvéoles non infectées 0,1 ml de milieu RPMI 1640 avec ou sans flavopéreirine. On a utilisé la flavopéreirine à la concentration de 30 Rg et de 60 Rg/ml. On a recouvert les plaques de microtitrage avec un couvercle de plaques d'Amersham et on a incubé à 370C. On a déterminé les comptages cellulaires dans une chambre de Neubauer.On a déterminé la quantité totale d'antigène de VIH en utilisant un kit ou trousse d'antigène de VIH fourni par la société Abbott Laboratories. Pour le titrage on a prédilué un volume de 10 Rl (provenant de chacune des alvéoles de la plaque de microtitrage) dans 1 ml de milieu RPMI 1640. On a fait à partir de ce stock 8 dilutions en série respectivement de 1 à 3 et de 1 à 5. On a prélevé un volume de 0,1 ml de chaque dilution et on l'a ajouté à 0,2 ml d'une culture préincubée de cellules H-9 contenant 5 x 105 cellules/ml. Après incubation à 370C, on a testé la présence d'antigène de VIH en utilisant le kit d'antigène de VIH fourni par la société Abbott Laboratories. Les résultats reprooduits sous forme graphique sur la figure 1 ci-annexée montrent que la flavopéreirine n'affecte pas la multiplication de cellules non infectées. Au contraire la quantité de cellules infectées est d'environ 40% inférieure en présence de la flavopéreirine. Ce qui est plus frappant encore, c'est que (voir la présentation des résultats sur la figure 2), alors qu'il y avait un accroissement de particules virales de cellules infectées non traitées avec le temps, on n'a pas pu, dans les limites du test appliqué, détecter la présence d'unités infectieuses au-delà de 3000 dans les séries de cellules infectées traitées avec la flavopéreirine (30 Rg ou 60 Fg). Cela montre que l'inhibition de l'infection dépasse au moins 99%. On a également effectué une évaluation de l'effet antiviral de la flavopéreirine en étudiant l'effet cytopathogène du virus de VIH sur des cellules MT4, étant donné que l'on avait observé une formation de syncytia 4 à 6 jours après l'infection par VIH 1, suivie de la mort des cellules. On a utilisé la flavopéreirine sous la forme d'une solution alcoolique (40 mg dans 100 Fl d'alcool). On a fait des dilutions dans du milieu RPMI à 10% de FCS, 1% de PSN, 1% de glutamine. On a fait pré-incuber les cellules MT4 pendant deux heures à 370C avec une dilution successive de flavopéreirine contenant 3 x 105 cellules pour 10 Rl de solution de flavopéreirine. On a obtenu la solution en ajoutant 100 Rl d'une dilution par 10-4 du virus VIH-1, produisant une formation de syncytia en 4 à 6 jours. Après 1 heure d'incubation à 370C, on a lavé les cellules MT4 infectées 3 fois avec du milieu RPMI avant de les mettre en culture (3 x 105 celllules/l dans des microplaques à 24 alvéoles) en présence de différentes dilutions de flavopéreirine.On a effectué le comptage des syncytia chaque jour en double. Les résultats sont résumés dans les tableaux I, II et III ci-dessous. Tableau I H d3 d4 d6 d7 400 g/ml Tax Tax 100 Tax Tax 50 (+) (+) (+) (+) - - - 10 + + + (+) + ++ ++ ++ 1 + (+) + + ++ ++ ++/T ++/T 100 ng/ml + + + + ++ ++ ++/T ++/T VIH-1 seul + + + + ++ ++ ++ ++/T MT4 - - - - - - - Tableau II H d3 d4 d5 d6 d7 d10 100 g/ml Tax Tax 50 - - - - - - - - - - - 10 - - + (+) + + + ++ ++ ++ 1 - - + + + ++ ++ ++ ++ ++/T 100 ng/ml - (+) + + + + ++ ++ ++ ++ VIH-1 seul - (+) (+) + + ++ ++ ++ ++/T ++/T Tableau III H d3 d4 d5 d6 d7 60 g/ml 30 - - - - - - (+) - ++ (+) 10 (+) - (+) (+) + (+) ++ ++ ++ ++ 1 (+) (+) (+) (+) (+) (+) ++ + ++ ++ 100 ng/ml - (+) (+) (+) + (+) + ++ ++ ++ VIH-1 seul (+) (+) (+) (+) + + ++ ++ ++ ++ MT4 Le tableau I montre une toxicité cellulaire pour 100 et 400 Rg/ml de flavopéreirine. A 50 Rg/ml il ne se formait pas de syncytia après 7 jours de culture. De 10 Rg/ml à 100 ng/ml on a observé des syncytia comme dans le VIH-1 témoin. Le tableau II confirme la protection procurée par la flavopéreirine à 50 Rg/ml et le tableau C confirme une nouvelle fois ces résultats: il ne se formait pas de syncytia à 60 g/ml après 7 jours de culture et on en observait un peu après 2 jours avec la dose de 30 g/ml. Essai d'infection virale (détermination de l'antigène P24) On a inoculé 1 nanogramme d'isolats primaires de VIH-1, BRE1 (d'un patient asymptomatique) et TIG2 (d'un patient atteint du SIDA) avec 106 cellules sanguines mononucléaires périphériques (PBMC) stimulées au PHA recueillies à partir de cinq donneurs négatifs pour VIH pris au hasard. Après 2 heures d'incubation, on a lavé les cellules deux fois et on les a cultivées dans 1 ml de RPMI 1640 contenant 20 UI de IL-2 par ml (Boehringer Mannheim, Allemagne), 2 g de Polybrène (bromure d'hexadiméthrine) par ml (Sigma, St Louis, MO, USA) et 10-7 UI d'antisérum de chèvre par ml, agissant contre l'interféron humain alpha (Janssen, Beerse, Belgique). On a changé la moitié du milieu de culture après 72 heures et ensuite toutes les 48 heures jusqu'au 30ème jour.On a testé les surnageants de culture par un dosage immuno-enzymatique (ELISA) quant à la production d'antigène P24 (Abbott, Chicago, IL, USA) et la densité optique (DO) de la couleur résultante a été convertie en concentration en protéine P24 par le biais d'un nomogramme standard, comme décrit par W. Lu et J.-M. Andrieu, Journal of Virology, 66(1): 334-340 (1992). Test d'efficacité de la flavopéreirine sur le pouvoir infectant du VIH-1 1) Première expérience: avant l'inoculation du virus par PBMC stimulées par PHA (cellules blastiques), on a prétraité des stocks viraux extracellulaires en triple avec 30 ou 60 g de flavopéreirine par ml pendant 2 heures. 2) Deuxième expérience: on a prétraité des cellules blastiques en triple avec 30 ou 60 Rg de flavopéreirine par ml pendant 2 heures, et on a ensuite lavé deux fois avant d'exposer à l'inoculum viral. Cytotoxicité de la flavopéreirine dans le PBMC au repos et dans des cellules blastiques On a réuni du PBMC frais et du PBMC blastique prélevé sur cinq donneurs sains, séronégatifs pour VIH, pris au hasard et traités à trois reprises avec 30 ou 60 Rg de flavopéreirine par ml de solution alcoolique pendant 2 heures. Après lavage à deux reprises, on a mis les cellules en culture dans du milieu de culture cellulaire jusqu'au quinzième jour. On a examiné la viabilité des cellules de chaque groupe par coloration d'exclusion au bleu trypan et par analyse quantimétrique. On a utilisé comme témoins des cultures de PBMC séronégatives pour VIH sans flavopéreirine (composé H). Inhibition de l'infection productive par VIH-1 par le composé H 1) Un prétraitement de VIH-1 par le composé H (à raison de 30 ou 60 Fg/ml) a complètement inhibé l'infection des PBMC cibles par des isolats de VIH-1 primaires dérivés de patients aussi bien asymptomatiques que symptomatiques (voir tableau V plus loin). 2) Seul cependant le prétraitement des PBMC cibles avec 60 Rg/ml a conduit à une inhibition complète des infections virales productives (voir tableau VI). Cytotoxicité du composé H dans les PBMC humaines au repos et les cellules blastiques stimulées par PHA 1) La viabilité des PBMC au repos diminuait significativement (p 2) La viabilité des cellules blastiques est apparue dépendante de l'exposition au composé H (voir tableaux IV, V et VI). Inhibition de l'infection productive par VIH-1 au moyen du composé H Un prétraitement de VIH-1 avec du composé H (à raison de 10, 30, 60, 100, 200 Rg/ml) inhibait l'infection des PBMC cibles par le virus d'une manière dépendante de la dose (voir tableau VII plus loin). La dose égale ou supérieure à 60 g de composé H par ml est apparue être la concentration requise pour l'inhibition complète des infections virales productives. Dans le système de culture de PBMC humaines primaires, l'efficacité du composé H dans l'inhibition du VIH-1 de type sauvage demeurait inchangée lorsqu'on mettait le médicament à incuber dans un milieu de culture contenant 50% de sérum humain avant l'essai d'inhibition (voir tableau VIII). Cytotoxicité du composé H dans les PBMC humaines stimulées par PHA La viabilité des PBMC blastiques diminuait significativement (p La réplication du VIH-1 était totalement inhibée par 60-100 Rg de composé H par ml. Ces concentrations sont 2 à 4 fois plus faibles que les concentrations cytotoxiques. Un tel effet est apparu ne pas être influencé par les constituants du sérum humain. Tolérance clinique et efficacité de la flavopéreirine On a effectué l'étude clinique sur 24 patients séropositifs présentant une numération de lymphocytes T4 comprise en valeur absolue entre 0,200 et 0,400 x 109tri. Tous les patients avaient été informés sur le composé actif concerné et sur les autres médicaments antirétrovirus couramment utilisés à l'époque de l'étude. On a effectué la sélection des patients sur la base du nombre absolu de lymphocytes T4: hommes et femmes de plus de 18 ans, ayant un indice de Karnofsky égal ou supérieur à 90%, présentant des anticorps anti-VIH-1, dans deux essais témoins successifs (méthode ELISA), des groupes CDC II, CDC III, CDC IV C2, CDC IV E de la classification CDC 87; l'hémoglobine étant supérieure à 100-120 g/l, les polynucléaires neutrophiles étant supérieurs à 1,5 x 109/l, les plaquettes étant de plus de 80 x 109/l, les lymphocytes T4 étant égaux ou supérieurs à 0,2 x 109/l et inférieurs ou égaux à 0,4 x 109/l, en l'absence de thérapie antirétrovirale, en particulier par l'AZT. 20 patients ont été admis sur la base de ces critères d'inclusion. Avant de les inclure dans l'étude, on a fait pour chacun d'eux un bilan préthérapeutique: état historique postclinique et thérapeutique, examen clinique avec détermination de la fièvre, l'anorexie et les nausées, les maux de tête, le prurit, la toux et l'expectoration, la diarrhée, les adénopathies, la mycose buccale, la dermatite séborrhéique et les lésions de Kaposi. On a également effectué une étude biologique incluant les hématies et les plaquettes, les souspopulations lymphocytaires (CD2, CD4, VD8, CD19, CD4/8), la détermination de l'antigène P24 et de la bêta-2 microglobuline, de la LDH (lactate déshydrogénase), de la ferritine plasmatique, de l'ALAT (alanine-aminotransférase), de l'ASAT (aspartate-aminotransférase) et de la créatinine plasmatique. On a administré la flavopéreirine (composé H) sous forme de gélules de 600 mg à une dose journalière de 1-3 g, de préférence d'environ 2 g. La durée moyenne du traitement était de 43 + 11 semaines. I1 y a eu peu d'effets secondaires seulement pendant les trois premiers mois. On n'a observé ni toxicité sanguine ou rénale, ni modification significative dans l'ALAT ou l'ASAT. On n'a noté aucune dégradation dans la classification CDC et aucune infection; l'indice de Karnofsky se maintenait toujours autour de 100%. L'activité physique ou professionnelle des patients restait strictement normale. La réponse immunitaire au traitement était essentiellement une augmentation significative des cellules CD4+ (p Tous les résultats obtenus in vitro et in vivo indiquent clairement que le composé flavopéreirine exerce un effet inhibiteur significatif sur le pouvoir infectant viral du VIH tant in vitro sur des cellules humaines que in vivo chez des patients infectés par VIH-1. Sur 10 des malades qui ont été traités pendant 1 an, on a en outre noté les variations significatives suivantes: - augmentation des hématies à 9 mois; - augmentation de l'hémoglobine à 9 mois; - augmentation de la masse totale des lymphocytes à 9 et 12 mois; - augmentation des CD2 à 9 mois; - augmentation des CD4 à 12 mois; - augmentation des CD8 à 9 mois; - augmentation des CD19 à 6-9 et 12 mois; - augmentation des bêta-2 microglobulines à 3-6 et 12 mois. Dans la pratique on préconise de préférence une administration par voie orale sous forme solide, telle que des comprimés ou des gélules, par exemple. Une dose unitaire d'environ 500 mg du principe actif est tout particulièrement appropriée. La posologie recommandée est, compte-tenu des résultats susmentionnés et des indications de toxicité relatées, d'environ 1 à 3 g/d, et de préférence d'environ 2 g/d, avantageusement par des prises successives réparties au cours de la journée. Les dosages et/ou formes galéniques retenues peuvent cependant varier selon l'état du malade et le stade de l'atteinte virale à traiter. Leur adaptation au cas spécifique concerné dans chaque traitement particulier peut être réalisée aisément par l'homme du métier, sur la base de ses connaissances en la matière et si besoin est avec l'aide d'essais de routine préliminaires. A cet égard, il est tout particulièrement recommandé de prendre en compte les données fournies par une étude de pharmacocinétique faite sur l'homme pour évaluer la durée de demi-vie du principe actif administré et éventuellement d'adapter en fonction des résultats obtenus la forme de préparation pharmaceutique pour administration. Celle-ci peut ainsi comporter des formes galéniques à effet retard, par exemple. Les doses à administrer comprennent en pratique, outre le principe actif ou un sel ou autre dérivé de celui-ci, au moins un support ou vecteur pharmaceutique et des excipients, charges, agents parfumants et/ou colorants habituels. Tableau IV Prétraitement d'inoculum viral avec du composé H (expériences en triple) Stock viral VIH prétraité Production postinfection (1 ng/ml) avec H de P24 de VIH (pg/ml) pendant 2 h. d3 d5 d14 d21 d30 VIH-1 Asym. Témoin 250-25 > 1500 (Stock Bret) +30 g/ml - - - +60 g/ml - - - VIH-1SIDA Témoin 575129 > 1500 (Stock Tigr) +30 g/ml - - - +BOpta/ml - - Cellules mononucléaires de sang périphérique (PBMC) réunies issues de cinq donneurs en bonne santé séronégatifs pour VIH choisis au hasard Tableau V Prétraitement de cellules cibles avec du composé H (expériences en triple) Stock viral PBMC prétraitées Production postinfection (1 ng/ml) avec H de P24 de VIH (pglml) pendant 2h. d3 d5 d14 d21 d30 VIH-1Asym. Témoin 250-25 > 1500 (Stock Bret) +30 g/ml 113#7 > 1500 - +60 g/ml - - - VIH-1 Asym. Témoin 250#129 > 1500 - (Stock Tigr) +30 g/ml 515#103 > 1500 - +60 g/ml - - - * PBMC réunies à partir de cinq donneurs en bonne santé séronégatifs pour VIH choisis au hasard Tableau VI Cytotoxicité du composé H dans des PBMC humaines au repos et des PBMC stimulées par PHA (blastiques) (expériences en 5 fois) Cellules Cellules Viabilité (%) des PBMC après exposition cibles traitées au composé H avec H ( 2 h.) d3 d7 dll d13 dl5 PBMC* Témoin 97#2 95#3 98#2 91#8 85#9 +30 g/ml 95#4 93#2 88#7 82#10 81#11 +60 g/ml 56#6 23#4 17#4 12#5 25#8 Blastes** Témoin 86#5 84#6 76#4 75#5 68#7 +30 g/ml 88±3 85+7 71+3 76+9 69+8 +60 g/ml 79+4 74#5 70D4 71±S 63+7 * PBMC réunies provenant de cinq donneurs en bonne santé séronégatifs pour VIH choisis au hasard ** Cellules blastiques stimulées par PHA provenant de cinq donneurs sains séronégatifs pour VIH choisis au hasard Tableau VII Prétraitement d'inoculum viral avec du composé H en l'absence de sérum humain du groupe AB (expériences en 5 fois) VIH prétraité Production de P24 de VIH (pg/ml) avec H pendant 2 h. d4 d10 d14 d21 Témoin 510±235 > 1500 +200 g/ml - - +100 g/ml - - +60 g/ml - - +30 g/ml 173+102 > 1500 +10 g/ml 388#124 > 1500 Cellules mononucléaires de sang périphérique (PBMC) réunies issues de cinq donneurs en bonne santé séronégatifs pour VIH choisis au hasard Tableau VIII Prétraitement d'inoculum viral avec du composé H en présence de sérum humain du groupe AB (expériences en triple) VIH prétraité sans/avec Production de P24 de VIH (pg/ml) avec H pendant 2 h. 50% de d4 d10 d14 d21 sérum AB Témoin - 510#235 > 1500 +200 g/ml + - - +100 g/ml + - - +60 Ag/ml + - + - - - +30 g/ml + 275-+98 > 1500 +10 g/ml + 384+83 > 1500 Cellules mononucléaires de sang périphérique (PBMC) réunies issues de cinq donneurs en bonne santé séronégatifs pour VIH choisis au hasard Tableau IX Cytotoxicité du composé H sur des PBMC humaines stimulées par PHA (blastiques) en présence ou en l'absence de sérum humain du groupe AB (expériences en cinq fois) Cellules sans/avec Cytotoxicité du composé H après traitées (-/+) exposition à des PBMC* avec H 50% de (2 h.) sérum AB d4 d10 d14 d21 Témoin - 85#1,4 86#1,3 80#2,7 77#3,1 +200 g/ml - 45#6,3 33#7,8 24#7,6 15#5,4 +100 g/ml - 84#1,6 79#3,1 73#5,3 74#4,7 +60 g/ml - 86#1,5 82#2,4 82#2,6 80#3,3 +30 g/ml - 81#2,8 83#2,6 80#3,9 78#4,5 +10 g/ml - 87#1,2 86#1,4 84#1,5 81#2,3 +200 g/ml - 37#6,8 24#6,8 17#7,9 11#5,6 +100 g/ml - 83#2,3 80#4,5 77#5,6 73#4,4 +60 g/ml - 85#1,2 84#1,7 82#2,1 79#3,5 +30 g/ml - 88#1,3 84#2,5 82#3,7 81#4,6 +10 g/ml - 87#1,1 88#1,4 84#3,2 82#3,1 Cellules blastiques stimulées par PHA provenant de cinq donneurs sains séronégatifs pour VIH choisis au hasard *** Pourcentage (moyenne # écert-type) de cellules viables REVENDICATIONS 1. Composition pharmaceutique pour utilisation comme médicament contre le virus VIH, caractérisée en ce qu'elle comporte de la flavopéreirine comme unique principe actif sous une forme solide contenant par dose unitaire environ 500 mg de flavopéreirine ou dlun de ses sels ou autres dérivés pharmacologiquement acceptables. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est sous la forme de comprimés ou de gélules. 3. Composition selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce qu'elle est sous une forme galénique à effet retard. 4. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que la flavopéreirine est extraite de l'écorce de Pao Pereira (Tariri Ciliata Martius) et/ou de Geissospermum vellosii-Baillon. 5. Utilisation d'une composition pharmaceutique contenant de la flavopéreirine comme unique principe actif pour l'obtention d'un médicament destiné à un traitement antiviral contre le virus VIH. 6. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que la flavopéreirine est présente dans une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4.