Brevet FR2677361A1 — publié le 19921211

La présente invention concerne de nouveaux peptides et pseudopeptides dérivés de tachykinines, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. Les tachykinines forment une famille de peptides produisant des contractions rapides des fibres musculaires lisses, par opposition aux contractions lentes développées par les bradykinines La substance P, la neurokinine A et la neurokinine B constituent les principales tachykinines endogènes correspondant respectivement aux récepteurs NK 1, NK 2 et NK 3. De nombreux peptides antagonistes de tachykinines ont été décrits dans la littérature C'est le cas par exemple des composés décrits dans les brevets EP 0333174, EP 0394989. La présente invention a pour objet des peptides synthétiques, qui, outre le fait qu'ils soient nouveaux, se sont montrés particulièrement intéressants par l'intensité de leurs propriétés pharmacologiques Ils possèdent non seulement des propriétés antagonistes puissantes vis-à- vis des récepteurs aux tachykinines et plus particulièrement sélectives et intenses vis-à-vis des récepteurs NK 1 c'est-à-dire de substance P Ces propriétés les rendent utilisables plus particulièrement dans le traitement de la douleur, de l'inflammation, des troubles gastro- intestinaux, de l'asthme, des allergies et des maladies du système nerveux central. L'invention concerne plus particulièrement de nouveaux dérivés peptidiques répondant à la formule générale (I) _ R 1 A B N(I R 2 dans laquelle Rl ou R 2 identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène, un groupement alkyle (Cl-C 6) linéaire ou ramifié, un groupement cycloalkyle (C 3-C 7) ou un groupement benzyle, - 2 2677361 B représente un résidu d'amino-acide aromatique, A représente * soit un résidu peptidique de formule: I A 2 Ai 1 I A 3 dans lequel: Al représente une liaison, un résidu tryptophane (Trp), tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)) ou tryptophane protégé par un radical méthyle (Trp (CH 3)), A 2 représente un résidu acide aspartique (Asp) ou acide glutamique (Glu), A 3 représente un résidu ( 1,2,3,4)-tétrahydroisoquinoléine-3- carbonyl (Tic), 2-azabicyclol 2 2 2 loctane-3-carbonyl (Abo), méthylphénylalanine (Me Phe), arginine (Arg), arginine protégé par un radical nitro (Arg (NO 2)), 6,7-dihydroxy-( 1,2,3,4)- tétrahydroisoquinoléine (Dht), spinacine (Spi), 4-hydroxyproline (Hyp) ou P-naphtylalanine (Nal), étant entendu que la liaison peptidique (-CO- NH-) entre Al et A 2 ou entre A 2 et B dans le cas o A 1 est une liaison, peut être remplacée par une liaison pseudopeptidique choisie parmi -CH 2-NH ou -CH 2-S-, * soit un résidu peptidique de formule: P A 6 A 5 A 4 - dans lequel: A 4 représente un résidu 2-azabicyclol 2 2 2 loctane3-carbonyl (Abo), leucine (Leu), P-naphtylalanine (Nal), tryptophane (Trp), tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)) ou tryptophane protégé par un radical méthyle (Trp (CH 3)), -3 - A 5 représente une liaison ou un résidu phénylalanine (Phe), f- naphtylalanine (Nal) ou 2-azabicyclol 2 2 2 loctane-3-carbonyl (Abo), A 6 représente une liaison ou un résidu tryptophane (Trp), tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)), tryptophane protégé par un radical méthyle (Trp (CH 3)), ou 2- azabicyclol 2 2 2 loctane-3-carbonyl (Abo), P représente un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur de la fonction amine tel que benzyloxycarbonyl (Z), tert- butoxycarbonyl (Boc), 3-indolylcarbonyl, benzhydrylcarbonyl ou 9fluorénylméthyloxycarbonyl (Fmoc), étant entendu que la liaison peptidique (-CO-NH-) entre A 5 et A 6, dans le cas o A 5 et A 6 ne sont pas des liaisons, peut être remplacée par une liaison pseudopeptidique choisie parmi -CH 2-NH ou -CH 2-S-, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable, étant entendu que chaque amino-acide de la séquence peptidique est optiquement pur et que le carbone ade chaque amino-acide peut être de configuration D ou L. Par résidu d'amino-acide aromatique, on entend plus particulièrement résidu phénylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), ( 1,2,3,4)- tétrahydroisoquinoléine-3-carbonyl (Tic), tryptophane (Trp) ou tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)). Parmi les acides pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif les acides chlorhydrique, bromhydrique, sulfurique, phosphonique, acétique, trifluoroacétique, lactique, pyruvique, malonique, succinique, glutarique, fumarique, tartrique, maléïque, citrique, ascorbique, oxalique, méthane sulfonique, camphorique, etc 4 2677361 Parmi les bases pharmaceutiquement acceptables, on peut citer à titre non limitatif l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, la triéthylamine, la tertbutylamine, etc L'invention s'étend aussi au procédé de préparation des composés de formule (I) qui peuvent être obtenus par différentes méthodes telles que la synthèse séquentielle sur phase solide, la synthèse enzymatique, la synthèse génétique par clonage et expression des gènes dans des bactéries transformées ou par des combinaisons diverses de ces techniques. Les peptides de la présente invention sont généralement obtenus par couplage en solution de fragments peptidiques sélectivement protégés, qui peuvent être préparés soit sur phase solide, soit en solution. Les méthodes générales de la synthèse des peptides sur phase solide ont été décrites par B W ERICKSON et R B MERRIFIELD ("The Proteins", Solid-Phase Peptide Synthesis, 3 ème édition, 257-527, 1976). Plus spécifiquement, le procédé de préparation des composés de l'invention suit la méthode de synthèse et de couplage des fragments en solution, bien adaptée à la taille et aux modifications des composés. Ce procédé est caractérisé en ce que l'on fait réagir un amide de formule (II), optiquement pur: z R 1 H B N (II) R 2 dans laquelle B, Rl et R 2 ont la même signification que dans la formule (I), avec une deuxième amino-acide, optiquement pur, dont la fonction amine N- terminale est protégée, de formule (III) ou (IV), selon le composé de formule (I) que l'on souhaite obtenir Pl Ai OH (III) Pl A 4 OH (IV) dans lesquelles: Pl représente un groupement protecteur choisi parmi benzyl- oxycarbonyl (Z), tert-butuloxycarbonyl (Boc), 9-fluoro- méthylcarbonyl (Fmoc), A 1 et A 4 ont la même signification que dans la formule (I), en présence d'un réactif de couplage classique de la synthèse peptidique choisi parmi le couple dicyclohexylcarbodiimide (DCC) hydroxybenzo- triazole (HOBT), le benzotriazol-1-oxytris (diméthylamino) phosphonium hexafluorophosphate (BOP) ou encore le diphénylphosphorylazide (DPPA), pour conduire respectivement, après déprotection sélective de la fonction amine N-terminale, aux composés des formules (V) et (VI), selon le dérivé de formule (I) que l'on souhaite obtenir: R 1 H Al B (V) R 2 R 1 H A 4 B (VI) R 2 dans lesquelles A 1, A 4, B, R 1 et R 2 ont les mêmes significations que dans la formule (I), composé de formule (V) que l'on fait réagir avec un composé de formule (VII): OH l A 3 A 2 (VII) dans laquelle A 2 et A 3 ont la même signification que dans la formule (I) (dérivé de formule (VII) lui-même obtenu par couplage peptidique classique des amino-acides optiquement purs, A 3-OH et A 2-OH protégés, cyclisation en dicétopipérazine correspondante par chauffage dans un solvant organique, déprotection et purification), - 6 2677361 en présence d'un réactif de couplage classique de la synthèse peptidique décrit précédemment, pour conduire à un composé de formule (I/a), cas particulier des composés de formule (I), A-B-NX R 1 | 1 R 2 (I/a) FA 3 A 2-I dans laquelle A 1, A 2, A 3, B, R 1 et R 2 ont la même signification quedans la formule (I), composé de formule (VI) que l'on fait réagir avec un composé de formule (VIII): Pl -A 6 A 5 -OH (VIII) dans laquelle Pl a la même signification que précédemment, A 5 et A 6 la même signification que dans la formule (I), (dérivé de formule (VIII), lui-même obtenu par couplage peptidique classique des amino-acides As-OH et A 6-OH protégés), en présence d'un réactif de couplage classique de la synthèse peptidique décrit précédemment, pour conduire, après traitement usuel à un composé de formule (I/b), cas particulier des composés de formule (I), Rl P-A 6 -As -A 4-B -N (I/b) R 2 dans laquelle A 4, A 5, A 6, B, R 1, R 2 et P ont la même signification que dans la formule (I), composés de formule (I/a) ou (I/b): que l'on purifie par une technique classique de purification, 7 2677361 que l'on transforme, le cas échéant, en leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable, qui, lorsqu'ils contiennent une liaison pseudopeptique -CH 2-NH ou -CH 2-S- sont préparés selon le procédé décrit précédemment, l'introduction de la liaison -CH 2-NH-, se faisant en préparant en solution l'aldéhyde Pl-NH-CHR-CHO (Pl = groupement protecteur choisi parmi Boc, Fmoc, Z) selon la technique décrite par FEHRENTZ et CASTRO (Synthesis, 676-678, 1983) et en le condensant avec la chaîne peptidique croissante soit sur phase solide, selon la technique décrite par SASAKI et Coy (Peptides, 8, 119-121, 1988), soit en solution, l'introduction de la liaison -CH 2-S se faisant en condensant le thiol de formule Pl-NH-CHR-CH 2 SH, préparé à partir de l'alcool correspondant, sur le bromure de désamino-peptide C-terminal. Les composés de l'invention possèdent des propriétés pharmacologiques très intéressantes Ce sont des ligands spécifiques aux récepteurs des tachykinines qui possèdent des propriétés antagonistes vis- à-vis des récepteurs NK 1, NK 2 et NK 3 Ces propriétés antagonistes sont particulièrement intenses vis-à-vis des récepteurs NK 1 Les récepteurs NK 1 et NK 3 sont impliqués dans la régulation de la transmission de la douleur et l'augmentation de la perméabilité vasculaire De plus, la stimulation des récepteurs NK 1 induit une hypersalivation, celle des récepteurs NK 2 entraîne tachycardie, hypotension et bronchoconstriction, enfin celle des récepteurs NK 3 est suivie de bradycardie, d'hypotension et de vasodilatation périphérique (D REGOLI et coll, TIPS, 9, 290-295, 1988). La présente invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un composé de formule générale (I) ou un de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques. Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, nasale, les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les sachets, les paquets, les gélules, les glossettes, les tablettes, les suppositoires, crèmes, pommades, gels dermiques, les aérosols. -8 -2677361 La posologie varie selon l'âge et le poids du patient, la nature et la sévérité de l'affection ainsi que la voie d'administration. Celle-ci peut être orale, nasale, rectale ou parentérale D'une manière générale, elle s'échelonne entre 0,2 et 100 mg pour un traitement en une ou plusieurs prises par 24 heures. Les exemples suivants illustrent l'invention et ne la limitent en aucune façon. Les acides aminés dont les abréviations commencent par une lettre majuscule sont de configuration L. Les acides aminés dont les abréviations commencent par une lettre minuscule sont de configuration D. L'acide aminé nommé Abo est de configuration 35. La lettre qr indique la présence d'une liaison pseudopeptidique dont la nature est indiquée entre parenthèses. Les préparations suivantes ne permettent pas d'obtenir les composés de l'invention mais conduisent à des intermédiaires utiles dans la préparation des composés de l'invention. PREPARATION A: / CH 3 H-Phe N X CH 2 C 6 H 5, CF 3 CO 2 H 60 mmoles de Boc-Phe-OH et 60 mmoles de méthylbenzylamine sont dissoutes dans 150 ml de diméthylformamide 60 mmoles d'hydroxy- benzotriazole (HOBT) dans 100 ml de diméthylformamide sont ajoutées au mélange précédent puis 80 mmoles de dicyclohexylcarbodiimide (DCC) en solution dans 40 ml de diméthylformamide L'agitation est maintenue 16 heures à température ambiante. 9 - Après filtration de la dicyclohexylurée formée et évaporation du solvant, le résidu est repris par de l'acétate d'éthyle et la phase organique est lavée par une solution à 5 % d'hydrogénocarbonate de sodium puis par une solution de sulfate de potassium et enfin par une solution saturée de chlorure de sodium. Après évaporation du solvant, le résidu brut est purifié par chromatographie sur colonne de silice La fonction amine terminale de la phénylalanine est déprotégée par traitement du composé obtenu pendant 20 minutes dans de l'acide trifluoroacétique Le produit attendu est alors obtenu sous forme de trifluoroacétate. Rendement: 92 % PREPARATION B: / CH 3 H trp (CHO) Phe N CC C 6 H 5, CF 3 CO 2 H mmoles du composé obtenu dans la préparation A sont dissoutes dans 100 ml de diméthylformamide en présence de 50 mmoles de triéthylamine Une solution contenant 50 mmoles de Boc-trp (CHO)-OH, 50 mmoles de HOBT dans 70 mi de diméthylformamide est ajoutée au mélange précédent, suivie par l'addition d'une solution contenant 70 mmoles de DCC dans 30 ml de diméthylformamide L'ensemble est maintenu 16 heures sous agitation à température ambiante Le produit attendu sous forme de trifluoroacétate est isolé, purifié et déprotégé procédant comme dans la préparation A. Rendement: 78 % EXEMPLE 1: /CH 3 trp (CHO) Phe N b I CH 2 C 6 H 5 Abo Asp 2 - STADE A: Fmoc Asp (O Bu) Abo O He mmoles de H-Abo-O Me, HCL sont dissoutes dans 70 ml de diméthylformamide en présence de 35 mmoles de triéthylamine Une solution contenant 35 mmoles de Fmoc-Asp (O Bu)-OH et 35 mmoles de HOBT est alors ajouté au mélange précédent, suivie par l'addition d'une solution contenant 42 mmoles de DCC dans 20 ml de diméthylformamide L'ensemble est maintenu 14 heures sous agitation à température ambiante Le produit attendu est isolé en procédant comme dans la préparation A et purifié par chromatographie sur colonne de silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange acétate d'éthyle/pentane: 1/1. Rendement: 96 % STADE B: r Abo Asp (Ot Bu)7 12 mmoles du composé obtenu au stade précédent sont dissoutes dans 60 ml d'un mélange diméthylformamide/pipéridine ( 80/20) L'ensemble est maintenu sous agitation pendant 15 minutes à température ambiante, sous agitation. Après évaporation des solvants, le résidu est repris par 60 ml de méthanol, porté 2 heures à reflux. Après refroidissement et évaporation du solvant, le produit attendu est obtenu et purifié sur colonne de silice en utilisant l'acétate d'éthyle comme solvant d'élution. Rendement: 69 % STADE C: F Abo Asp l _ 11 2677361 9 mmoles du composé obtenu au stade précédent sont dissoutes dans 80 ml d'un mélange dichlorométhane/acide acétique ( 50/50) et l'ensemble est agité 1 heure à température ambiante. Après évaporation des solvants, le résidu est repris par de l'éther éthylique Le produit attendu précipite, est isolé par filtration, puis lavé et séché. Rendement: 69 % STADE D: /CH 3 trp (CHO) Phe N I CH 2 C 6 H 5 F Abo Asp 1 1,7 mmoles du composé obtenu dans la préparation B sont dissoutes dans 15 ml de diméthylformamide en présence de 1,7 mmoles de triéthylamine Une solution contenant 1,7 mmoles du composé obtenu au stade C et 1,7 mmoles de HOBT dans 12 ml de diméthylformamide est ajoutée au mélange précédent, suivie par l'addition d'une solution contenant 1,8 mmoles de DCC dans 1 ml de diméthylformamide L'ensemble est maintenu 14 heures sous agitation à température ambiante Le produit attendu est isolé en procédant comme dans la préparation A et purifié par chromatographie sur silice C 18 en utilisant comme solvant d'élution un mélange acétonitrile/eau/acide trifluoroacétique ( 40/60/0,2). Rendement: 64 % Spectre de masse (FAB) MH+: m/z = 717 (masse moléculaire: 716,8) L'analyse du produit obtenu est réalisée après décomposition de celui-ci en acides aminés par hydrolyse acide et dosage quantitatif des acides aminés obtenus par chromatographie liquide: Abo Asp Phe + Trp % calculé 1 1 2 % trouvé 1,09 1,09 1,82 12 - Les exemples suivants ont été obtenus en utilisant le même procédé de synthèse que celui décrit dans l'exemple 1. EXEMPLE 2: j CH 3 trp (CHO) Phe N CH 2 C 6 H I CH C 6 H 5 Fabo Asp 1 Spectre de masse (Fab): MH+: m/z = 717 (masse moléculaire: 716,8) EXEMPLE 3: /Me trp (CHO) Phe N \CH 2 C 6 H 1 CH 2 C 6 H 5 F Tic Asp 1 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 739 (masse moléculaire: 738,8) EXEMPLE 4: / CH 3 trp (CHO) Phe NC I O1 \ CH 2 C 6 H 5 F Abo asp 1 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 717 (masse moléculaire: 716,8) EXEMPLE 5: j CH 3 trp (CHO) Phe N I CH 2 C 6 H 5 labo asp Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 717 (masse moléculaire: 716,8) EXEMPLE 6: 13 2677361 13 - / CH 3 trp (CHO) Phe NC I CH 2 C 6 H 5 F Tic asp 2 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 739 (masse moléculaire: 738,8) EXEMPLE 7: /CH 3 trp (CHO) Phe N I CH 2 C 6 H 5 F Me Phe Asp 1 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 741 (masse moléculaire: 740,8) EXEMPLE 8: /CH 3 trp (CHO) Phe N I CH 2 C 6 H 5 Arg (N 02) Asp-1 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 781 (masse moléculaire: 780,8) EXEMPLE 9: trp Phe N CH 3 I c H 2 C 6 H 5 F Abo Asp C 6 H 5 EXEMPLE 10: trp Phe N CH 3 Ib \Ip CH 2 C 6 H 5 Fabo asp EXEMPLE 11: / CH 3 trp (CHO) Phe N CH 3 I \CH 2 C 6 H 5 F hyp asp 1 EXEMPLE 12: trp (CHO) Phe N /CH 3 I p CH 2 C 6 H 5 F Hyp Aspsl Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 693 (masse moléculaire: 692,8) Dans les exemples suivants, on procède comme dans l'exemple 1 mais on utilise au stade D le produit obtenu dans la préparation A. EXEMPLE 13: / CH 3 Phe NCH 3 I \CH 2 C 6 H 5 Me Phe Asp - Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 527 (masse moléculaire: 526,6) EXEMPLE 14: Phe NCH 3 I \CHC r Tic asp- 26 H 5 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 525 (masse moléculaire: 524,6) EXEMPLE 15: r- 1 2677361 / CH 3 Phe NCH 3 I \CH 2 C 6 H 5 Tic Asp 2 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 525 (masse moléculaire: 524,6) EXEMPLE 16: Phe N CH 3 | \ CH 2 C 6 H 5 r Abo Asp EXEMPLE 17: / CH 3 Phe N I \CH 2 C 6 H 5 Dht Asp EXEMPLE 18: / CH 3 Phe NC I ",CH 2 C 6 H 5 r Spi asp 2 EXEMPLE 19: / CH 3 Tie N CH 3 I "CH 2 C 6 H 5 Tic asp EXEMPLE 20: Phe Nc H 3 I \CH 2 C 6 H 5 r abo asp 1 16 - EXEMPLE 21: /CH 3 Phe N \x l CH 2 C 6 H 5 r tic aspq EXEMPLE 22: /CH 3 W(CH 2 NH) Phe N\ I CH 2 C 6 H 5 r Tic asp 1 EXEMPLE 23: CH 3 W(CH 2 S) Phe NCH 3 I \CH 2 C 6 H 5 r Tic asp EXEMPLE 24: /CH 3 (indol-3-yl) carbonyl Abo Phe NC CH 2 C 6 H 5 STADE A: /CH 3 Boc Abo Phe N\ CH 2 C 6 H 5 A une solution contenant 3,3 mmoles du composé obtenu dans la préparation A (sous forme de chlorhydrate) et 3,3 mmoles de triéthylamine dans 35 ml de diméthylformamide, sont ajoutées 3,3 mmoles de Boc-Abo-OH, 3,3 mmoles d'HOBT et 3,6 mmoles de DCC Le mélange est maintenu 18 heures sous agitation Le produit attendu est isolé en procédant comme dans la préparation A et purifié par chromatographie sur colonne de silice en utilisant comme solvant d'élution l'acétate d'éthyle. 17 - Rendement: 83 % STADE B: /CH 3 H Abo Phe N C, chlorhydrate CH 2 C 6 H 5 2,8 mmoles du produit obtenu au stade A sont introduites dans une solution d'acide chlorhydrique 3,2 N dans de l'acétate d'éthyle. L'ensemble est maintenu sous agitation à température ambiante pendant une heure, puis concentré sous vide Le résidu est repris par de l'éther Le produit attendu précipite, est filtré, lavé à l'éther et séché. Rendement: 54 % STADE C: /CH 3 (Indol-3-yl) carbonyl Abo Phe N CH 2 \CH 2 C 6 H 5 A une solution contenant 1,13 mmole du composé obtenu au stade précédent et 1,13 mmole de triéthylamine dans 12 ml de diméthylformamide sont ajoutées successivement 1,13 mmole d'acide 3-indolecarboxylique, 1,13 mmole d'HOBT et 1,24 mmole de DCC Le mélange est maintenu 24 heures sous agitation Le produit attendu est obtenu en procédant comme dans la préparation A et purifié par chromatographie. Rendement: 23 % Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 549 (masse moléculaire: 548,7) Les exemples suivants ont été obtenus en utilisant le même * procédé de synthèse que celui décrit dans l'exemple 24. EXEMPLE 25: H trp Phe Abo Phe NH 2, CF 3 CO 2 H 18 - Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 635 (masse moléculaire, base libre: 634,8) EXEMPLE 26 Soectre de EXEMPLE 27 Spectre de : Z Phe abo trp - masse (FAB): MH+: m/z : Benzhydryl carbonyl - masse (FAB): MH+: m/z NH 2 = 622 (masse moléculaire: 621,7) abo Leu Trp NH 2 = 648 (masse moléculaire: 647,8) EXEMPLE 28: / CH 3 Boc Abo nal Phe N \CH 2 C 6 H 5 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 703 (masse moléculaire: 702,9) EXEMPLE 29: Boc abo nal Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = /CH 3 Phe N\ CH 2 C 6 H 5 703 (masse moléculaire: 702,9) EXEMPLE 30: H trp W(CH 2 S) Phe Abo Phe NH 2 Les exemples suivants ont l'exemple 1. été préparés en procédant comme dans EXEMPLE 31: 19 2677361 /CH 3 trp (CHO) Tic N I \CH 2 C 6 H 5 r Abo Asp 1 Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 729 (masse moléculaire: 728,8) EXEMPLE 32: /CH 3 trp (CHO) Tyr N \ CH 2 C 6 H 5 r Abo A Spi Spectre de masse (FAB): MH+: m/z = 733 (masse moléculaire: 732,8) ETUDE PHARMACOLOGIQUE DES DERIVES DE L'INVENTION EXEMPLE 33: Bio-essais sur le muscle lisse isolé Afin d'évaluer le potentiel antagoniste des neurokinines des composés de l'invention, trois préparations de muscle lisse ont été utilisées Chacune de ces préparations, décrite comme présentant une bonne spécificité pour un type de récepteur aux neurokinines, a été réalisée conformément aux techniques suivantes décrites dans la littérature: veine cave de lapin pour l'étude du récepteur NK 1 selon D REGOLI et Coll (J Cardiovasc Pharmacol, sous presse); artère pulmonaire de lapin sans endothélium pour l'étude de récepteur NK 2 selon D REGOLI et Coll (European J Pharmacol 125, 37-44, 1985); veine porte de rat pour l'étude du récepteur NK 3 selon D REGOLI et Coll. (European J Pharmacol 134, 321-326, 1986). - Le pouvoir antagoniste des composés de l'invention est exprimé sous forme de PA 2 tel que défini par O ARUNLAKSHANA et H O SCHILD (Brit. J Pharmacol, 14, 48-58, 1959). Les résultats sont regroupés dans le tableau ci-dessous. p A 2 EXEMPLE NK 1 NK 2 NK 3 1 6,46 4,86 4,86 7,16 5,70 4,86 6 6,87 7 6,87 4,87 4,87 6,02 4,72 4,72 24 7,34 4,86 5,04 Les composés de l'invention présentent une puissante activité antagoniste vis-à-vis des récepteurs NK 1, avec, pour la plupart, une moindre activité pour les récepteurs NK 2 et NK 3. C'est le cas plus particulièrement du composé de l'exemple 24. EXEMPLE 34: Activité in vivo Test d'Eddy chez la souris. En raison de l'implication de la substance P dans la transmission de la douleur au niveau spinal (M OTSUKA et S KONISHI, TINS, 6, 317-320, 1983), l'activité pharmacologique in vivo des composés de l'invention a été recherchée chez la souris sur le test d'hyperalgésie thermique initialement décrit par N B EDDY et Coll (J Pharmacol Exp. Ther, 107, 385-393, 1953) Ce test consiste à mesurer le temps de réaction à la chaleur déterminé par le léchage des pattes antérieures chez une souris (CD 1 mâle, Ch River, 25-30 g) placée sur une plaque métallique chauffée à 55 C. Les animaux ont été traités avec les composés d'invention, 5 minutes avant le passage sur la plaque chauffante par voie intraveineuse. 21 - La moyenne des temps de réaction obtenue pour chaque lot traité ( 12 souris par lot) a été comparée à la moyenne du lot témoin correspondant Les résultats sont exprimés sous forme de DE 50 qui correspond à la dose augmentant de 50 % le temps de réaction. Ces résultats sont regroupés dans le tableau ci-dessous. EXEMPLE morphine Test d'Eddy chez la souris DE 5 o (mg/kg IV) 0,2 3,5 3,0 4,0 3, 0 4,0 0,5 Les composés de l'invention présentent des propriétés antalgiques importantes Le composé de l'exemple 1 possède plus particulièrement un pouvoir analgésique supérieur à celui de la morphine. COMPOSITION PHARMACEUTIQUE Comprimé à 2 mg : formule de préparation pour 1000 comprimés dosés Composé de l'exemple 1 Hydroxypropyl cellulose Amidon de blé Lactose Stéarate de magnésium Talc EXEMPLE 35: 2 g 2 g g g 3 g 3 g 22 - REVENDICATIONS 1/ Composés de formule (I): R 1 A B N \ R 2 (I) dans laquelle: R 1 ou R 2 identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène, un groupement alkyle (C 1-C 6) linéaire ou ramifié, un groupement cycloalkyle (C 3-C 7) ou un groupement benzyle, B représente un résidu d'amino-acide aromatique, A représente * soit un résidu peptidique de formule: A 2-A 1 A 3 I dans lequel: représente une liaison, un résidu tryptophane (Trp), un résidu tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)) ou tryptophane protégé par un radical méthyle (Trp (CH 3)), représente un résidu acide aspartique (Asp) ou acide glutamique (Glu), représente un résidu ( 1,2,3,4)-tétrahydroisoquinoléine-3- carbonyl (Tic), 2-azabicyclol 2 2 2 loctane-3-carbonyl (Abo), méthylphénylalanine (Me Phe), arginine (Arg), arginine protégé par un radical nitro (Arg (NO 2)), 6,7-dihydroxy-( 1,2,3,4)- tétrahydroisoquinoléine (Dht), spinacine (Spi), 4-hydroxyproline (Hyp) ou P-naphtylalanine (Nal), A 1 A 2 A 3 23 2677361 étant entendu que la liaison peptidique (-CO-NH-) entre A 1 et A 2 ou entre A 2 et B dans le cas o Al est une liaison, peut être remplacée par une liaison pseudopeptidique choisie parmi -CH 2-NH ou -CH 2-S-, *soit un résidu peptidique de formule: P A 6 A 5 A 4 - dans lequel: A 4 représente un résidu 2-azabicyclol 2 2 2 loctane3-carbonyl (Abo), leucine (Leu), P-naphtylalanine (Nal), tryptophane (Trp), tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)) ou tryptophane protégé par un radical méthyle (Trp (CH 3)), A 5 représente une liaison, un résidu phénylalanine (Phe), f- naphtylalanine (Nal) ou 2-azabicyclol 2 2 2 loctane-3-carbonyl (Abo), A 6 représente une liaison, un résidu tryptophane (Trp), tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)), tryptophane protégé par un radical méthyle (Trp (CH 3)) ou 2-azabicyclol 2 2 2 loctane- 3-carbonyl (Abo), P représente un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur de la fonction amine tel que benzyloxycarbonyl (Z), tert- butoxycarbonyl (Boc), 3-indolylcarbonyl, benzhydrylcarbonyl ou 9fluorénylméthyloxycarbonyl (Fmoc), étant entendu que la liaison peptidique (-CO-NH-) entre A 5 et A 6, dans le cas o A 5 et A 6 ne sont pas des liaisons, peut être remplacée par une liaison pseudopeptidique choisie parmi -CH 2-NH ou -CH 2-S-, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable, étant entendu que chaque amino-acide de la séquence peptidique est optiquement pur et que le carbone ade chaque amino-acide peut être de configuration D ou L. " 2 4 -2677361 24 - 2/ Composés selon la revendication 1 dans lesquels B représente un résidu phénylalanine (Phe), tyrosine (Tyr), ( 1,2,3,4)-tétrahydroisoquinoléine3- carbonyl (Tic), tryptophane (Trp) ou tryptophane protégé par un radical formyle (Trp (CHO)), leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 3/ Composés selon la revendication 1 dans lesquels A représente un résidu peptidique de formule: I A 2 A 1 I A 3 I selon la revendication 1, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 4/ Composés selon la revendication 1 dans lesquels A représente un résidu peptidique de formule P A 6 A 5 A 4 selon la revendication 1, leurs énantiomères, diastéréoisomères et épimères ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. / Composé selon la revendication 1 qui est le /CH 3 trp (CHO) Phe N I CH 2 C 6 H 5 7 Abo Asp -1 ses énantiomères, diastéréoisomères et épimères. 6/ Composé selon la revendication 1 qui est le / CH 3 (indol-3-yl) carbonyl Abo Phe N CH 3 C CH 2 C 6 H 5 ses énantiomères, diastéréoisomères et épimères. 2677361 7/ Procédé de préparation des composés de formule (I) selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'on fait réagir un amide de formule (II), optiquement pur: R 1 H B N\ (II) R 2 dans laquelle B, Ri et R 2 ont la même signification que dans la formule (I), avec une deuxième amino-acide, optiquement pur, dont la fonction amine N- terminale est protégée, de formule (III) ou (IV), selon le composé de formule (I) que l'on souhaite obtenir: Pl A 1 OH (III) Pl A 4 OH (IV) dans lesquelles: Pl représente un groupement protecteur choisi parmi benzyl- oxycarbonyl (Z), tert-butuloxycarbonyl (Boc), 9-fluoro- méthylcarbonyl (Fmoc), Al et A 4 ont la même signification que dans la formule (I), en présence d'un réactif de couplage classique de la synthèse peptidique choisi parmi le couple dicyclohexylcarbodiimide (DCC) hydroxybenzo- triazole (HOBT), le benzotriazol-1-oxytris (diméthylamino) phosphonium hexafluorophosphate (BOP) ou encore le diphénylphosphorylazide (DPPA), pour conduire respectivement, après déprotection sélective de la fonction amine N-terminale, aux composés des formules (V) et (VI), selon le dérivé de formule (I) que l'on souhaite obtenir: dans lesquelles A 1, A 4, B, Ri et R 2 ont les mêmes significations que dans la formule (I), composé de formule (V) que l'on fait réagir avec un composé de formule (VII): 26 - R 1 H Al B N\ (V) R 2 R 1 (VI) H A 4 B N\(VI) R 2 OH I (VII) dans laquelle A 2 et A 3 ont la même signification que dans la formule (I) (dérivé de formule (VII) lui-même obtenu par couplage peptidique classique des amino-acides optiquement purs, A 3-OH et A 2-OH protégés, cyclisation en dicétopipérazine correspondante par chauffage dans un solvant organique, déprotection et purification), en présence d'un réactif de couplage classique de la synthèse peptidique décrit précédemment, pour conduire à un composé de formule (I/a), cas particulier des composés de formule (I), R 1 A 1 B N \ I R 2 (I/a) RA 3-A I dans laquelle Al, A 2, A 3, B, R 1 et R 2 ont la même signification que dans la formule (I), composé de formule (VI) que l'on fait réagir avec un composé de formule (VIII): Pl A 6 A 5 -OH (VIII) dans laquelle Pl a la même signification que précédemment, A 5 et A 6 la même signification que dans la formule (I), 27 - (dérivé de formule (VIII), lui-même obtenu par couplage peptidique classique des amino-acides A 5-OH et A 6-OH protégés), en présence d'un réactif de couplage classique de la synthèse peptidique décrit précédemment, pour conduire, après traitement usuel à un composé de formule (I/b), cas particulier des composés de formule (I), R 1 P-A 6 -A 5 -A 4 -B -N (I/b) R 2 dans laquelle A 4, A 5, A 6, B, R 1, R 2 et P ont la même signification que dans la formule (I), composés de formule (I/a) ou (I/b), que l'on purifie par une technique classique de purification, que l'on transforme, le cas échéant, en leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable, qui, lorsqu'ils contiennent une liaison pseudopeptique -CH 2-NH ou -CH 2-S- sont préparés selon le procédé décrit précédemment, l'introduction de la liaison -CH 2-NH-, se faisant en préparant en solution l'aldéhyde P 1-NHCHR-CHO (Pl = groupement protecteur choisi parmi Boc, Fmoc, Z) et en le condensant avec la chaîne peptidique croissante soit sur phase solide, soit en solution, l'introduction de la liaison -CH 2-S se faisant en condensant le thiol de formule P 1-NH-CHR-CH 2 SH, préparé à partir de l'alcool correspondant, sur le bromure de désamino-peptide C-terminal. 8/ Compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 9/ Compositions pharmaceutiques selon la revendication 8 contenant au moins un principe actif selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 utiles comme antagonistes de substance P dans le traitement de la douleur, O de l'inflammation, des troubles gastro-intestinaux, de l'asthme, des allergies et des maladies du système nerveux central.