Brevet FR2673292A1 — publié le 19920828

PROCEDE D'INMUNOFIXATION OU D'IZMUNOELECTROPHORESE A L'AIDE D'UN ENSEMBLE D'AU NOIRS DEUX INNUNSERUNS DIFFERENTS OU DEUX 80LUTIONS D'INXUNOGLOBULINES DIFFERENTES ET KIT POUR LA MISE EN OEUVRE D'UN TEL PROCEDE L'invention a pour objet un procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse mettant en oeuvre des réactions immunologiques, à l'aide d'un ensemble d'au moins deux immunsérums différents ou deux solutions d'immunoglobulines différentes et un kit (ou trousse) dans lequel ces immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont réunis, pour la mise en oeuvre d'un tel procédé. L'immunofixation est un procédé destiné à la mise en évidence et à la caractérisation par exemple de paraprotéines (protéines sécrétées de façon anormale au cours de toute gammapathie bénigne ou maligne) de la famille des immunoglobulines, et ce procédé peut être effectué par exemple comme suit - on réalise sur une plaque d'électrophorèse plusieurs dépôts alignés (par exemple 6) d'un même échantillon, - on effectue une migration électrophorétique pour séparer les différentes espèces moléculaires de l'échantillon selon les six pistes, - une fois la migration terminée, on effectue, selon ces pistes, des dépôts parallèles des différents antisérums, chaque antisérum recouvrant l'ensemble d'une piste, ces antisérums étant par exemple de spécificité anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-kappa et anti-lambda, une des pistes étant fixée par un fixateur des protéines qui insolubilise l'ensemble des protéines dans la zone qu'il recouvre pour servir de témoin. Après incubation, lavage et coloration, on peut déterminer en fonction des zones précipitées par les antisérums spécifiques qui sont situées au niveau de la paraprotéine visualisée sur le protéinogramme, le type de chaîne lourde (gamma, alpha et mu) et de chaîne légère (kappa ou lambda) de la paraprotéine concernée. L'invention a pour but de fournir un procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse mettant en oeuvre des réactions immunologiques, à l'aide d'un ensemble d'immunsérums différents ou de solutions d'immunoglobulines différentes présentant l'avantage de permettre de contrôler que le bon immunsérum (ou la bonne solution d'immunoglobulines) soit utilisé, et notamment que le même immunsérum (ou la même solution d'immunoglobulines) ne soit pas utilisé plusieurs fois, alors qu'il (elle) ne devrait l'être qu'une fois. L'invention a également pour but de proposer un procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse mettant en oeuvre un ensemble d'immunsérums différents ou des solutions d'immunoglobulines différentes, présentant l'avantage de contrôler le dépôt et la qualité de la répartition des immunsérums sur la plaque d' immunofixation ou d'immunoélectrophorèse. L'invention a également pour but de proposer un procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse mettant en oeuvre un ensemble d'immunsérums différents ou de solutions d'immunoglobulines différentes, présentant l'avantage de contrôler, après que la réaction immunologique a eu lieu, que le bon immunsérum ou la bonne solution d'immunoglobulines a été utilisé. L'invention concerne un procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse mettant en oeuvre des réactions immunologiques, à l'aide d'un ensemble d'immunsérums ou de solutions d'immunoglobulines, tous différents les uns des autres, ce procédé étant caractérisé en ce que chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines utilisé est coloré à l'aide d'un colorant ou d'un mélange de colorants, le colorant ou le mélange présentant les propriétés suivantes - il garde une coloration appropriée dans l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la réaction immunologique et, - de préférence, il n'affecte pas la conservation de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, l'ensemble des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines étant coloré par au moins deux colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente ou par au moins deux mélanges de colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente. L'expression "l'immunsérum, ou la solution d'immunoglobulines, garde une coloration appropriée dans l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines" signifie d'une part que l'intensité de coloration évaluée par la mesure de la densité optique à la longueur d'onde correspondant à l'absorption maximum n'évolue pas au cours du temps et d'autre part que le spectre visible de cet immunsérum ou de cette solution d'immunoglobulines coloré reste inchangé au cours du temps. L'expression "l'immunsérum, ou la solution d'immunoglobulines, n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines" implique qu'il n'entraîne pas de modification de la structure des fractions protéiques de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines et en particulier qu'il n'entraîne pas de précipitation de ces fractions protéiques qui pourraient se traduire par l'apparition d'un trouble. L'expression "l'immunsérum, ou la solution d'immunoglobulines, n'affecte pas la réaction immunologique" signifie que l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines coloré possède le même titre que l'immunsérum ou solution d'immunoglobulines avant coloration à la même dilution. L'expression "l'immunsérum, ou la solution d'immunoglobulines, n'affecte pas la conservation de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines" signifie que le titre de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines possède la même stabilité dans le temps que l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines non coloré et conservé dans les mêmes conditions. Deux immunsérums ou deux solutions d'immunoglobulines ont une intensité de couleur différente, lorsque leur couleur est la même (même spectre d'adsorption dans le visible), mais qu'ils présentent une intensité de coloration différente, l'un des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines étant plus coloré que l'autre, ce qui se traduit par le fait que le rapport entre la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le plus coloré et la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le moins coloré est supérieur ou égal à 2. Le colorant (ou le mélange de colorants) utilisé est choisi parmi les colorants hydrosolubles, de nature ionique ou non ionique, dans la mesure où il presente les propriétés énonces ci-dessus. Le colorant ou le mélange de colorants doit être tel qu'il garde une coloration appropriée, c'est-à-dire suffisante pour pouvoir permettre de repérer sa présence dans l'immunsérum ou dans la solution d'immunoglobulines dans lequel il est mis. Le colorant doit être également tel qu'il n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, c'est-à-dire que les anticorps de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines ne perdent rien de leur propriété de participer à une réaction immunologique. Le colorant ne doit pas affecter la réaction immunologique. De préférence, le colorant ne doit pas affecter la conservation de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, qui doit pouvoir être conservé pendant au moins environ 1 an et avantageusement environ 3 ans. Dans le cas où le colorant pourrait affecter la conservation de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, il conviendrait de ne l'introduire dans l'immunsérum ou dans la solution d'immunoglobulines qu'au moment de l'utilisation dudit immunsérum ou de ladite solution d'immunoglobulines sur la plaque d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse. Lorsque l'ensemble des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines est coloré par deux colorants ou deux mélanges de colorants de couleur différente, on obtient un ensemble bicolore d'immunsérums ou de solutions d'immunoglobulines. Selon un mode de réalisation avantageux du procédé de l'invention, chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines est coloré par un colorant ou par un mélange de colorants tel que tous les immunsérums ou toutes les solutions d'immunoglobulines sont de couleur différente ou d'intensité de couleur différente. Selon un autre procédé de l'invention au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont colorés par un même colorant ou même mélange de colorants tels qu'au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont de même couleur (même spectre d'adsorption dans le visible), mais présentent une intensité de coloration différente, l'un des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines étant plus coloré que l'autre, ce qui se traduit par le fait que le rapport entre la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le plus coloré et la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le moins coloré est supérieur ou égal à 2. Selon un autre mode de réalisation du procédé de l'invention, on utilise cinq immunsérums différents colorés ou cinq solutions d'immunoglobulines différentes colorées, ces cinq immunsérums différents ou ces cinq solutions d'immunoglobulines différentes ayant une couleur ou une intensité de couleur différente, par exemple: - rose présentant un maximum d'absorption à 555 nm - bleu nuit " " " " 625 nm - kaki " " " " 480 nm - vert " " " " 427 nm - bleu clair " " " 625 nm ou par exemple cinq immunsérums différents ou solutions d'immunoglobulines différentes ayant chacun une couleur différente, par exemple:: - violet présentant un maximum d'absorption à 555 nm - vert " " " " 427 nm - bleu clair " " " " 625 nm - orange " " " " 480 nm - rouge " " " " 520 nm Selon un autre mode de réalisation du procédé de l'invention, la quantité de colorant destinée à colorer chaque immunsérum ou solution d'immunoglobulines varie d'environ 0,1 mg/100 ml à environ 1 g/100 ml, avantageusement d'environ 0,5 mg/100 ml à environ 100 mg/100 ml. Selon un autre mode de réalisation du procédé de l'invention, la quantité de colorant destinée à colorer chaque immunsérum, ou chaque solution d'immunoglobulines, est telle que l'on obtienne une coloration visible d'une goutte d'immunsérum ou de solution d'immunoglobulines d'environ 80 Al répartis sur une surface d'environ 3,6 cm2. Cela signifie que l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines coloré réparti sur cette surface de gel présente au maximum d'absorption de la solution colorée une densité optique supérieure ou égale à 0,015. L'invention concerne également un kit (ou trousse) pour la mise en oeuvre d'un procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse, comportant - un ensemble d'immunsérums ou de solutions d'immunoglobulines, - et au moins deux colorants de couleur différente ou deux mélanges de colorants de couleur différente, pour colorer les immunsérums ou les solutions d'immunoglobulines de façon telle que l'ensemble des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines soit coloré par au moins deux colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente ou par au moins deux mélanges de colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente, le colorant ou le mélange de colorants étant tel que - il garde une coloration appropriée dans l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la réaction immunologique, - de préférence il n'affecte pas la conservation des immunsérums ou de solutions d'immunoglobulines, ou - un ensemble d'immunsérums ou de solutions d'immunoglobulines coloré par au moins deux colorants de couleur différente ou par au moins deux mélanges de colorants de couleur différente, le colorant ou le mélange de colorants étant tel que - il garde une coloration appropriée dans l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la réaction immunologique, et - de préférence, il n'affecte pas la conservation des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines. Un kit avantageux est tel que chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines est coloré par un colorant ou par un mélange de colorants tel que tous les immunsérums ou les solutions d'immunoglobulines sont de couleur différente. Dans un kit avantageux de l'invention, au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont colorés par un même colorant ou même mélange de colorants tels qu'au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont de même couleur (même spectre d'adsorption dans le visible), mais présentent une intensité de coloration différente, comme indiqué ci-dessus. Un autre kit avantageux contient cinq immunsérums différents ou cinq solutions d'immunoglobulines différents, chacun de ces immunsérums ou de ces solutions d'immunoglobulines ayant une couleur ou une intensité de couleur différente, par exemple - le rose présentant un maximum d'absorption à 555 nm - le bleu nuit " " " " 625 nm - le kaki " " " " 480 nm - le vert " " " " 427 nm - le bleu clair " " " 625 nm ou par exemple cinq immunsérums différents ou solutions d'immunoglobulines différentes ayant chacun une couleur différente, par exemple - le violet présentant un maximum d'absorption à 555 nm - le vert " " 'I 11 427 nm - le bleu clair " " " IF 625 nm - l'orange " " " " 480 nm - le rouge " " " " 520 nm Un autre kit avantageux est tel que la quantité de colorant destinée à colorer chaque immunsérum ou chaque solution dlimmunoglobulines varie d'environ 0,1 mg/100 ml à environ 1 g/100 ml, avantageusement d'environ 0,5 mg/100 ml à environ 100 mg/100 ml. Un autre kit avantageux est tel que la quantité de colorant destinée à colorer chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines est telle que l'on obtienne une coloration visible d'une goutte d'immunsérum ou de solution d'immunoglobulines d'environ 80 pl répartis sur une surface d'environ 3,6 cm2. Selon un mode de réalisation avantageux, le kit de l'invention est tel que les immunsérums colorés ou les solutions d'immunoglobulines colorées sont conditionnes dans des flacons portant des étiquettes de même couleur que celle de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines qu'ils contiennent respectivement. EXEMPLES Exemple 1 On a préparé un kit d'immunofixation destiné à l'identification de gammapathies du sérum humain dans lequel - l'immunsérum anti-IgG ou solution d'immunoglobulines anti-IgG est coloré en rose par un colorant classique connu de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 555 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 2,0; - l'immunsérum anti-IgA ou solution d'immunoglobulines anti-IgA est coloré en bleu nuit par un colorant classique connu de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 625 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 7,0;; - l'immunsérum anti-IgM ou solution d'immunoglobulines anti-IgM est coloré en kaki par un mélange de deux colorants classiques connus de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 480 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 6,8; - l'immunsérum anti-kappa en solution d'immunoglobulines anti-kappa est coloré en vert par un mélange de deux colorants classiques connus de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 427 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 2,0; - l'immunsérum anti-lambda ou solution d'immunoglobulines anti-lambda est coloré en bleu clair par un colorant classique connu de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 625 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 1,5. Exemple 2 On a préparé un kit d'immunofixation destiné à l'identification des protéines de Bence Jones dans lequel - l'immunsérum trispécifique anti-IgG, -IgA, -IgM, ou solution d'immunoglobulines anti-IgG, -IgA, -IgM, est coloré en violet par un colorant classique connu de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 555 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 2,0; - l'immunsérum anti-kappa ou solution d'immunoglobulines anti-kappa est coloré en vert par un mélange de deux colorants classiques connus de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 427 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 2,0;; - l'immunsérum anti-lambda ou solution d'immunoglobulines anti-lambda est coloré en bleu clair par un colorant classique connu de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 625 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 1,5; - l'immunsérum anti-kappa libre ou solution d'immunoglobulines anti-kappa libre est coloré en orange par un colorant classique connu de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 480 nm et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 10,8; - l'immunsérum anti-lambda libre ou solution d'immunoglobulines anti-lambda libre est coloré en rouge par un colorant classique connu de l'homme de l'art et présente un maximum d'absorption à environ 520 mii et une densité optique à cette longueur d'onde d'environ 20,5. Exemple 3 on a préparé un kit destiné à l'immunoélectrophorèse avec les mêmes immunsérums colorés ou les mêmes solutions d'immunoglobulines colorées que ceux décrits à l'exemple 1. REVENDICATIONS 1. Procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse mettant en oeuvre des réactions immunologiques à l'aide d'un ensemble d'immunserums ou de solutions d'immunoglobulines, tous différents les uns des autres, ce procédé étant caractérisé en ce que chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines utilisé est coloré à l'aide d'un colorant ou d'un mélange de colorants, le colorant ou le mélange présentant les propriétés suivantes - il garde une coloration appropriée dans l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la réaction immunologique et, - de préférence, il n'affecte pas la conservation de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, l'ensemble des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines étant coloré par au moins deux colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente ou par au moins deux mélanges de colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente. 2. Procédé, selon la revendication 1, dans lequel chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines est coloré par un colorant ou par un mélange de colorants tel que tous les immunsérums ou toutes les solutions d'immunoglobulines sont de couleur différente ou d'intensité de couleur différente. 3. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, dans lequel chaque immunsérum, ou chaque solution d'immunoglobulines, est coloré au moment de l'utilisation en vue de déterminer la formation éventuelle d'une réaction immunologique. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont colorés par un même colorant ou même mélange de colorants tels qu'au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont de même couleur (même spectre d'adsorption dans le visible), mais présentent une intensité de coloration différente, l'un des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines etant plus coloré que l'autre, ce qui se traduit par le fait que le rapport entre la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le plus coloré et la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le moins coloré est supérieur ou égal à 2. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans lequel on utilise cinq immunsérums différents colorés ou cinq solutions d'immunoglobulines différentes colorées, ces cinq immunsérums différents ou ces cinq solutions d'immunoglobulines différentes ayant une couleur ou une intensité de couleur différente, par exemple: - rose présentant un maximum d'absorption à 555 nm - bleu nuit " " " " 625 nm - kaki " " " " 480 nm - vert " " " " 427 nm - bleu clair " " " 625 nm ou par exemple cinq immunsérums différents ou solutions d'immunoglobulines différentes ayant chacun une couleur différente, par exemple:: - violet présentant un maximum d'absorption à 555 nm - vert " " " " 427 nm - bleu clair " " " " 625 nm - orange " " " " 480 nm - rouge " " " " 520 nm 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel la quantité de colorant destinee à colorer chaque immunsérum ou solution d'immunoglobulines varie d'environ 0,1 mg/100 ml à environ 1 g/100 ml, avantageusement d'environ 0,5 mg/100 ml à environ 100 mg/100 ml. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel la quantité de colorant destinée à colorer chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines est telle que l'on obtienne une coloration visible d'une goutte d'immunsérum ou de solution d'immunoglobulines d'environ 80 pl répartis sur une surface d'environ 3,6 cm2. 8. Kit (ou trousse) pour la mise en oeuvre d'un procédé d'immunofixation ou d'immunoélectrophorèse, comportant: - un ensemble d'immunsérums ou de solutions d' immunoglobulines, - et au moins deux colorants de couleur differente ou deux mélanges de colorants de couleur différente, pour colorer les immunsérums ou les solutions d'immunoglobulines de façon telle que l'ensemble des immunserums ou des solutions d'immunoglobulines soit coloré par au moins deux colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente ou par au moins deux mélanges de colorants de couleur différente ou d'intensité de couleur différente, le colorant ou le mélange de colorants étant tel que - il garde une coloration appropriée dans l'immunsêrum ou la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la réaction immunologique, - de préférence il n'affecte pas la conservation des immunsérums ou de solutions d'immunoglobulines, ou - un ensemble d'immunsérums ou de solutions d'immunoglobulines coloré par au moins deux colorants de couleur différente ou par au moins deux mélanges de colorants de couleur différente, le colorant ou le mélange de colorants étant tel que - il garde une coloration appropriée dans l'immunsérum ou la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la qualité de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines, - il n'affecte pas la réaction immunologique, et - de préférence, il n'affecte pas la conservation des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines. 9. Kit selon la revendication 8, dans lequel chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines est coloré par un colorant ou par un mélange de colorants tel que tous les immunsérums ou les solutions d'immunoglobulines sont de couleur différente. 10. Kit selon l'une quelconque des revendications 8 ou 9, dans lequel au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont colorés par un même colorant ou même mélange de colorants tels qu'au moins deux immunsérums ou solutions d'immunoglobulines sont de même couleur (même spectre d'adsorption dans le visible), mais présentent une intensité de coloration différente, l'un des immunsérums ou des solutions d'immunoglobulines étant plus coloré que l'autre, ce qui se traduit par le fait que le rapport entre la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le plus coloré et la densité optique (correspondant au maximum d'adsorption) de l'immunsérum ou de la solution d'immunoglobulines le moins colore est supérieur ou égal à 2. 11. Kit selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, contenant cinq immunsérums différents ou cinq solutions d'immunoglobulines différentes, chacun de ces immunsérums ou de ces solutions d'immunoglobulines ayant une couleur ou une intensité de couleur différente, par exemple - le rose présentant un maximum d'absorption à 555 nm - le bleu nuit " " " " 625 nm - le kaki " " " " 480 nm - le vert " " " " 427 nm - le bleu clair " " " 625 nm ou par exemple cinq immunsérums différents ou solutions d'immunoglobulines différentes ayant chacun couleur différente, par exemple :: - le violet présentant un maximum d'absorption à 555 nm - le vert " " " " IF 427 nm - le bleu clair " " " " 625 nm - l'orange " " " " 480 nm - le rouge " " " " 520 nm 12. Kit selon l'une quelconque des revendications 8 à 11, dans lequel la quantité de colorant destinée à colorer chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines varie d'environ 0,1 mg/100 ml à environ 1 g/100 ml, avantageusement d'environ 0,5 mg/100 ml à environ 100 mg/100 ml. 13. Kit selon l'une quelconque des revendications 8 à 11, dans lequel la quantité de colorant destinée à colorer chaque immunsérum ou chaque solution d'immunoglobulines est telle que l'on obtienne une coloration visible d'une goutte d'immunsérum ou de solution d'immunoglobulines d'environ 80 l répartis sur une surface d'environ 3,6 cm.