Brevet FR2677038A1 — publié le 19921204

La présente invention est relative à un nouvel additif alimentaire microbien, à son application comme biorégulateur aussi bien dans l'alimentation humaine qu'animale ainsi qu'aux aliments le contenant. De manière générale, au sens de la présente invention, un biorégulateur est un produit qui contribue à l'équilibre digestif et microbien de l'intestin. Ce dernier est essentiellement d'origine microbienne et on peut citer parmi les plus connus ceux dont on a démontré cette activité biorégulatrice - des bactéries à Gram + telles que Lactobacillus, Streptoccocus, Propionibacterium, Bifidobacterium, certains Clostridium et Bacillus - des bactéries à Gram - telle que Bacteroides - des levures : Saccharonlyces ; - des champignons, tels que Aspergillus. Ils sont utilisés, selon les aliments auxquels ils sont incorporés et selon l'effet recherché, seuls ou en association, et dans ce dernier cas, en particulier pour leur effet symbiotique. On peut citer, à titre d'exemples de biorégulateurs utilisés dans l'alimentation humaine, les microorganismes employés dans les laits fermentés, principalement les bactéries du yaourt ou produits similaires (association de Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus, Bifidobactéries, etc...), ou les grains de kéfir (association naturelles de bactéries et de levures) ; on peut citer à titre d'exemples de biorégulateurs utilisés dans l'alimentation animale certains Bacillus tels que Bacillus toyoi, Bacillus cereus ou un mélange symbiotique de Streptococcus et Lactobacillus tel que décrit dans la Demande de Brevet Européen n 0 406 117. De nombreuses hypothèses et mécanismes ont été proposés pour expliquer le rôle biorégulateur de ces microorganismes ; parmi les mécanismes proposés on peut notamment citer - l'activité anti-microbienne : ces microorganismes s'opposeraient à la prolifération de bactéries pathogènes en produisant des acides organiques, des antibiotiques, en détoxifiant des entérotoxines bactériennes ou en utilisant la production de métabolites toxiques. Toutefois, le rôle précis de chacun de ces facteurs est difficile à évaluer, car de nombreuses études réalisées in vitro sont difficilement transposables au tractus intestinal humain ou animal et actuellement aucune expérimentation humaine ne permet d'affirmer un effet anti-microbien in vivo. - la stimulation du système immunitaire : on a observé que l'absorption régulière des yaourts et par voie de conséquence des souches présentes dans le yaourt (Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophil us) sur des souris axéniques entraînait une augmentation sensible de la quantité d'immunoglobulines G et la présence de Lactobacillus vivants dans les ganglions mésentériques. - l'amélioration de la capacité digestive de l'intestin grêle. - une induction enzymatique, qui peut avoir deux origines la 5-galactosidase des biorégulateurs hydrolyserait une partie du lactose ingéré au niveau de l'intestin grêle venant ainsi à supplémenter la lactase endogène défail lante, les biorégulateurs ingérés per os stimuleraient la lactase endogène. On a montré qu'un changement de la microflore intestinale serait à l'origine des activités dissacharidiques de l'intestin grêle. En effet, pour être assimilé, le lactose présent dans la lumière intestinale doit être hydrolysé par une glycoprotéine située à la surface des enterocytes appelée lactase. Cette hydrolyse est indispensable à l'assimilation du lactose, ce dernier ne pouvant être réabsorbé au niveau de l'intestin que sous ses formes glucose et galactose. Toutefois, une grande partie de la population est déficiente en cette enzyme, soit pour des raisons génétiques, soit parce que son activité diminue avec l'âge, ce qui interdit à ces populations toute consommation de produits riches en lactose. Or, on a montré que le yaourt, bien que contenant une grande quantité de lactose peut être assimilé par des personnes présentant une déficience en lactase, ce qui laisse supposer que les microorganismes présents dans le yaourt permettaient l'assimilation du lactose. Le lait étant un aliment de base pour les mammifères (l'homme et les mammifères d'élevage), il est nécessaire d'assurer une bonne assimilation du lactose, constituant important du lait et de certains produits laitiers et ceci tout au long de leur vie ; à cet égard, les biorégulateurs microbiens, à l'exemple de ceux présents dans les laits fermentés peuvent, par leur activité (3-galactosidasique, être de précieuses aides à cette assimilation. Toutefois, dans le cas des produits lactés de l'Art antérieur, contenant des biorégulateurs microbiens, ces produits ont une durée de conservation courte, même à basse température, du fait de l'impossibilité de les stabiliser par traitements thermiques, car de tels traitements détruiraient les biorégulateurs habituellement présents dans le tractus digestif et présentant une activité 13-galactosidasique, et rendraient alors ces produits inefficaces dans le tractus digestif. C'est pourquoi, la Demanderesse s'est donné pour but de pourvoir à un additif alimentaire microbien, comprenant une souche de Sporolactobacillus, particulièrement utile comme biorégulateur du lactose, et qui répond mieux aux besoins de la pratique que les additifs de l'Art antérieur, notamment en ce qu'il se présente sous forme de spores naturelles résistantes aux traitements thermiques, et plus particulièrement à la pasteurisation, utilisée de manière habituelle dans les procédés de fabrication de produits lactés ou à la granulation à la vapeur, utilisée dans la préparation des aliments pelletisés, pour l'alimentation animale et en ce qu'il augmente ainsi la durée de conservation des aliments les contenant. La présente invention a pour objet une souche de Sporolactobacillus, caractérisée en ce que 1'ADN de ladite bactérie présente notamment des sites de clivage par les endonucléases de restriction Bgl II, Cla I, Sma I, Xba I, Bgl I, Pvu II, EcoR I, Hind III, EcoR V, Xho I, Pst I, Mlu I, lesdites enzymes de restriction fournissant respectivement les fragments suivants (exprimé en Kilobasepaires en Kpb) - Bgl II : 20,4 - 14,9 - 8,7 - 7,2. - Cla I : 9,5 - 9,3 - 7,6 - 6,8 - 6,4 - 4,2 - 3,2 - 2,6. - Sma I : 20,4 - (16,7) - (14,9) - 13,5 - 10,5 - (8,3) 7,6 - 5,9 - 4,0. - Xba I : 20,4 - 19,8 - 18,5 - 10,5 - 8,3 - 6,8 - (4,5) (2,0). - Bgl I : (20,4) - 18,5 - (16,7) - 12,6 - 10,7 - 6,8. - Pvu II : 14,9 - 12,5 - 10,6 - 8,4 - 7,5 - 6,5 - (3,2). - EcoR I : 14,4 - 10,6 - 5,8 - 5,3 - 3,5 - 2,7 - 2,5. - Hind III : 17,0 - 7,9 - 7,4 - 7,0 - 5,3 - 3,8 - 3,7 3,5 - (3,3) - (3,2) - (2,9) - 1,8. - EcoR V : (17,0) - 13,2 - 12,0 - 8,1 - 6,3 - 5,3 (3,5). - Xho I : 22,8 - 20,6 - 8,5 - 8,1. - Pst I : 13,2 - 8,5 - 7,8 - 7,3 - 7,0 - 6,6 - (4,1) (3,2) - (2,5). - Mlu I : (20,6) - 17,0 - 9,5 - 8,1 - 7,0 - 5,8. Le genre Sporolactobacillus a été plus parti culièrement décrit dans BERGEY's Bacteriological Manual (Ed. Lavoisier, 1986, 1139-1141). La méthode de clivage enzymatique est celle décrite par GRIMONT (Annales de l'Institut Pasteur Microbiologie, 1986, 137B, 165-175). Cette nouvelle souche, dénommée par les Inventeurs, Sporolactobacillus P44, a été déposée auprès de la Collection Nationale de Culture de Microorganismes de 1'INSTITUT PASTEUR, en date du 30 avril 1991 sous le n 1-1089. Cette souche de Sporolactobacillus présente notamment des propriétés de biorégulateurs de l'assimilation du lactose non par son activité ss- galactosidasique mais par un effet d'induction de la lactase intestinale endogène. La présente invention a également pour objet un additif alimentaire microbien pour l'alimentation humaine ou animale, caractérisé en ce qu'il comprend au moins une souche de Sporolactobacillus présentant des propriétés biorégulatrices, notamment vis-à-vis de l'assimilation du lactose. Selon un mode de réalisation avantageux dudit additif alimentaire microbien, la souche de Sporolactobacillus est sélectionnée parmi les espèces appartenant au genre taxonomique Sporolactobacillus et notamment Sporolactobacillus inulinus et Sporolactobacillus P44, tel que décrit ci-dessus. L'espèce Sporolactobacillus inulinus, dont la souche de référence est déposée sous le n ATCC/15538, est plus particulièrement décrite dans le BERGEY Bacteriological Manual (Ed. Lavoisier, 1986, p. 11391141). Un tel additif présente un certain nombre d'avantages, notamment liés à la présence d'au moins une souche de Sporolactobacillus ; en effet, de manière inattendue, l'additif conforme à l'invention - résiste aux traitements thermiques, plus particulièrement de pasteurisation et de granulation à la vapeur, notamment du fait de la possibilité de se présenter sous forme de spores naturelles ; et - présente, aussi bien sous forme d'aliments que d'additifs à destination de l'alimentation humaine qu'animale, des propriétés de biorégulation pour l'assimilation du lactose, par un effet d'induction de la lactose endogène. Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'additif conforme à l'invention, il comprend au moins la souche de Sporolactobacillus P44 conforme à l'invention. Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'additif conforme à l'invention, il comprend, en outre, en association toute autre souche appropriée agissant en symbiose ou en complément de la/les souches de Sporolactobacillus. Un tel additif comprend avantageusement l'association de deux souches appartenant au genre Sporolactobacillus. Conformément à l'invention, l'additif peut, en outre, également être associé à des supports, diluants, conservateurs et autres composants appropriés. La présente invention a également pour objet des aliments supplémentés aussi bien pour l'alimentation animale qu'humaine, caractérisés en ce qu'ils contiennent l'additif conforme à l'invention. Ces aliments supplémentés, conformes à l'invention, peuvent être présentés sous toute forme connue en alimentation, forme d'aliment simple ou forme d'aliment composé, etc... Dans le cadre de l'alimentation animale, les formes d'aliments utilisées seront celles habituellement connues en élevage : poudre, liquide, pâteux ou granulés, etc... Dans le cadre de l'alimentation humaine, les formes d'aliments utilisées seront celles habituellement connues : poudre, pâte, liquide, etc... Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre, qui se réfèrent à des exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la présente invention. I1 doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMPLE 1 : Caractéristiques morphologiques et biochimiques de la souche Sporolactobacillus P44 selon 1' invention. La souche Sporolactobacillus P44 possède les caractères phénotypiques du genre Sporolactobacillus elle possède en outre certaines caractéristiques génomiques spécifiques de son espèce. - Les caractéristiques morphologiques de cette souche sont les suivantes bacilles droits ou légèrement incurvés, assez fins, extrémités arrondies, de largeur 3 à 5 Rm et de diamètre 0,7 - 0,8 pm ; ils se présentent sous forme de bacilles isolés ou par paires, rarement sous forme de chaînettes courtes mobilité positive par ciliature péritriche spores centrales déformantes. - Les caractéristiques biochimiques sont les suivantes . Gram + ; . microaérophile à anaérobie facultatif . température optimale de croissance : 30 à 37'C . homo-fermentaire . absence de catalase et de cytochromes . pH de fin de culture sur bouillon MRS (après incubation en 48 heures en microaérophilie à 37 C): environ 4,30 . dans ces mêmes conditions, forte production d'acide lactique * acide D - lactique : environ 54 %, * acide L - lactique : environ 46 %, . dans des conditions différentes (culture sur bouillon MRS ensemencé à 5 % et incubé 24 heures à 37'C en aérobiose), il y a production * d'acides gras volatils (99,9 % de C2 et traces de C4), * et d'acide lactique : Isomère D : 97,5 % Isomère L : 2,5 %. Les résultats d'une galerie API 50 CHL donnant le profil de fermentation des sucres sont présentés sur la figure 1 ; la souche est inoculée selon les spécifications API 50 CHL avec une suspension de densité optique d'environ 0,5 à 0,75 mesurée à 550 nm, soit à tube 5 dans l'échelle de Mac Farland. EXEMPLE 2 : Profil de restriction de Sporolactobacillus P44. La méthodologie utilisée est celle décrite par GRIMONT (Annales Institut Pasteur Microbiologie, 1986, 137 B, 165-175) et comprend les étapes - lyse des bactéries et extraction de 1'ADN chromosomique, - dénaturation de 1'ADN par traitement au phénol et au chloroforme et purification par précipitation à l'éthanol, - clivage de 1'ADN avec 25 endonucléases de restriction et séparation des fragments obtenus 12 endonucléases ont été capables de cliver 1'ADN Bgl II, Cla I, Sma I, Xba I, Bgl I, Pvu II, EcoR I, Hind III, EcoR V, Xho I, Pst I, Mlu I, comme suit - Bgl II : 20,4 - 14,9 - 8,7 - 7,2. - Cla I : 9,5 - 9,3 - 7,6 - 6,8 - 6,4 - 4,2 - 3,2 - 2,6. - Sma I : 20,4 - (16,7) - (14,9) - 13,5 - 10,5 - (8,3) 7,6 - 5,9 - 4,0. - Xba I : 20,4 - 19,8 - 18,5 - 10,5 - 8,3 - 6,8 - (4,5) (2,0). - Bgl I : (20,4) - 18,5 - (16,7) - 12,6 - 10,7 - 6,8. - Pvu II : 14,9 - 12,5 - 10,6 - 8,4 - 7,5 - 6,5 - (3,2). - EcoR I : 14,4 - 10,6 - 5,8 - 5,3 - 3,5 - 2,7 - 2,5. - Hind III : 17,0 - 7,9 - 7,4 - 7,0 - 5,3 - 3,8 - 3,7 3,5 - (3,3) - (3,2) - (2,9) - 1,8. - EcoR V : (17,0) - 13,2 - 12,0 - 8,1 - 6,3 - 5,3 (3,5). - Xho I : 22,8 - 20,6 - 8,5 - 8,1. - Pst I : 13,2 - 8,5 - 7,8 - 7,3 - 7,0 - 6,6 - (4,1) (3,2) - (2,5). - Mlu I : (20,6) - 17,0 - 9,5 - 8,1 - 7,0 - 5,8, - transfert de Southern des fragments d'ADN obtenus, sur membrane de nylon, - hybridation des fragments avec de 1'ARNr 16 et 23 S d'Escherichia coli, marqué à l'extrémité 5 par du phosphore radioactif, - lavage, autoradiographie des fragments d'ADN portant des gènes pour les acides ribonucléiques ribosomaux ARN (ARNr). EXEMPLE 3 : Effet biorégulateur du Sporolactobacillus P44 sur l'assimilation du lactose selon l'invention par rapport à un lot témoin et à une souche Clostridfum butyricum 1002.5, sur des rats mâles de race Fisher 344. Les essais sont réalisés sur trois lots de rats gnotoxéniques élevés dans des isolateurs expérimentaux stériles selon un dispositif expérimental décrit par LECOZ et al. (Sci. Techn. Anim. Lab., (1989), 14, (1), p. 35-39). Les aliments dont ils sont nourris sont stérilisés ; ce sont des régimes semi-synthétiques adaptés au rat à base d'amidon de mais et de farine de poisson dont une fraction de l'amidon a été remplacée soit par 8 % de lactose (Merck) (régime lactose 8 %), soit par 2 % de lactulose (Duphalac, Duphar) (régime lactulose 2 %). Ces trois lots sont conformes à la description suivante 1. rats axéniques (lot témoin). 2. rats à l'état monoxénique (avec apport d'une seule souche microbienne dans l'alimentation) : * soit avec la souche de Clostridium butyricum 1002.5 décrite dans POPOFF et al. (Infection and Immunity (1985), 47, 3, p. 697-776). Les rats sont assoiffés durant une nuit et reçoivent le lendemain matin comme eau de boisson, 5 ml d'un bouillon de culture de LAPTTWISS (10 g autolysat de levure DIFCO, 15 g peptone Evans, 10 g tryptone DIFCO, 1 g -Tween 80, 1 1 d'eau distillée, pH = 6,5), de 24 heures (108 C. butyricum/ml), dilué dans environ 20 ml d'eau distillée. Après consommation de cette solution", les rats reçoivent de nouveau de l'eau distillée comme boisson. * soit au Sporolactobacillus P44 : en fonction des besoins, la suspension bactérienne (107 germes/ml) est diluée au quart dans de l'eau distillée stérile et versée dans les biberons. La souche devant être donnée en continu, un nouvel aliquot est introduit dans l'isolateur toutes les 48 heures. 3. rats à l'état dixénique (avec apport continu de Sporolactobacillus P44 sur rats monoxéniques après implantation dans l'intestin de Clostridium butyricum 1002.5) Les rats monoxénisés au C. butyricum 1002.5 reçoivent en continu le Sporolactobacillus P44 dans leur eau de boisson, comme décrit ci-dessus. Le rat a été choisi, car il possède un équipement enzymatique intestinal endogène proche de celui des jeunes mammifères. On a mesuré sur ces différents lots les paramètres métaboliques suivants * Caractéristiques de l'assimilation du lactose et/ou du lactulose ingérés, - mesure de l'hydrogène excrété, - bilan lactose/lactulose : détermination de la quantité de lactose ou de lactulose ingérée et excrétée quotidiennement afin d'en déduire la quantité de sucre métabolisée par l'animal, ce qui permet de calculer le CUD (Coefficient d'Utilisation Digestive) de chacun de ces sucres. quantité sucre ingérée-quantité sucre excrétée x 100 CUD= quantité sucre ingérée - dosage des activités spécifiques de la ss-galactosidase dans les fécès et de la lactase neutre endogène de la muqueuse intestinale. * Caractéristiques fermentaires des 2 souches utilisées - Sporolactobacillus P44 Les produits de fermentation présents dans le milieu de culture MRS dans les conditions de l'exemple 1 sont . des acides gras volatils : acétate 99,8 % et butyrate (traces), . de l'acide lactique : plus grande quantité d'isomère D (97,5 %) que L (2,5 %). Cette souche ne présente pas de ss- galactosidase constitutive ni inductible. - Clostriditira butyricum 1002.5 Cette souche produit des AGV : beaucoup plus de butyrate (63 %) que d'acétate (37 %), . de l'acide lactique : faible quantité, des gaz (hydrogène). Cette souche possède une ss-galactosidase inductible avec le lactose, dont l'activité est maximale à 40 C (pH = 7). Ces caractéristiques sont résumées dans le Tableau I ci-après TABLEAU I Bactéries Bacille sporulé C. butyricum P44 (BOUSSEBOUA, 1989) Métabolites Milieu MRS glucose lactose fermentaires CT 101,2 34,1 36 AGV C2 101 12,6 13,3 (%) 100 37 36,9 (mmoles/l) C4 0,2 21,5 22,7 (O 0,2 63 63,1 CT 113,4 1,2 D 110,6 Acide (%) 97,5 lactique (mmole/l) L 2,8 (O 2,5 Gaz (hydrogèn?) + + P-galactosidase + RESULTATS : : Dans les régimes lactose 8 % et lactulose 2 %, la fermentation du lactose comme celle du lactulose se traduit par une production d'hydrogène chez les rats monoxéniques en Clostridium butyricum 1002.5. Quand on apporte à ces rats en continu la souche du Sporolactobacillus P44, on obtient une diminution de la production de gaz uniquement chez les rats en régime lactose 8 %, cette diminution étant due à une plus faible quantité de sucre fermenté par le Cl os tri dium butyricum 1002.5. Les rats axéniques et monoxéniques avec la souche Sporolactobacillus P44, ingérant la même quantité de lactose, l'excrètent dans des proportions diffé rentes : le CUD du lactose des rats monoxéniques qui est égal à (95,2 i 0,4) est significativement plus élevé que le CUD des rats axéniques (91,7 + 0,6), ce qui indique que la quantité de lactose métabolisée chez les animaux monoxéniques avec cette souche, est améliorée de 3,5 %. De plus, les rats dixéniques dégradent totalement le lactose et le lactulose (CUD = 100 %), du fait de leur fermentation dans le gros intestin par Clostridium butyricum 1002.5. Les résultats de la mesure de l'activité spécifique de la lactase à différents niveaux de l'intestin indiquent que l'apport continu de la souche Sporolactobacillus P44 induit chez le rat monoxénique une augmentation de l'activité spécifique lactasique duodé nale. Ces résultats mettent parfaitement en évidence le rôle biorégulateur de la souche Sporolactobacillus P44 dans l'assimilation du lactose et donc toute l'importance de l'utilisation de cette souche dans des produits laitiers riches en lactose destinés à des populations plus particulièrement déficientes en lactase. En outre, du fait de la possibilité de présenter la souche sous forme de spores naturelles, cette souche peut être utilisée dans des aliments nécessitant des traitements thermiques et/ou mécaniques importants tout en gardant ses propriétés biorégulatrices. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite ; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. REVENDICATIONS 1') Souche de Sporolactobacillus, caractérisée en ce que 1'ADN de ladite bactérie présente notamment des sites de clivage par les endonucléases de restriction Bgl II, Cla I, Sma I, Xba I, Bgl I, Pvu II, EcoR I, Hind III, EcoR V, Xho I, Pst I, Mlu I, lesdites enzymes de restriction fournissant respectivement les fragments suivants (exprimé en Kilobasepaires en Kpb) - Bgl II : 20,4 - 14,9 - 8,7 - 7,2. - Cla I : 9,5 - 9,3 - 7,6 - 6,8 - 6,4 - 4,2 - 3,2 - 2,6. - Sma I : 20,4 - (16,7) - (14,9) - 13,5 - 10,5 - (8,3) 7,6 - 5,9 - 4,0. - Xba I : 20,4 - 19,8 - 18,5 - 10,5 - 8,3 - 6,8 - (4,5) (2,0). - Bgl I : (20,4) - 18,5 - (16,7) - 12,6 - 10,7 - 6,8. - Pvu II : 14,9 - 12,5 - 10,6 - 8,4 - 7,5 - 6,5 - (3,2). - EcoR I : 14,4 - 10,6 - 5,8 - 5,3 - 3,5 - 2,7 - 2,5. - Hind III : 17,0 - 7,9 - 7,4 - 7,0 - 5,3 - 3,8 - 3,7 3,5 - (3,3) - (3,2) - (2,9) - 1,8. - EcoR V : (17,0) - 13,2 - 12,0 - 8,1 - 6,3 - 5,3 (3,5). - Xho I : 22,8 - 20,6 - 8,5 - 8,1. - Pst I : 13,2 - 8,5 - 7,8 - 7,3 - 7,0 - 6,6 - (4,1) (3,2) - (2,5). - Mlu I : (20,6) - 17,0 - 9,5 - 8,1 - 7,0 - 5,8. 2 ) Souche de Sporolactobacillus selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle a été déposée auprès de la Collection Nationale de Culture de Microorganismes de 1'INSTITUT PASTEUR, en date du 30 avril 1991 sous le n I-1089. 3 ) Additif alimentaire microbien pour l'alimentation humaine ou animale, caractérisé en ce qu'il comprend au moins une souche de Sporolactobacillus présentant des propriétés biorégulatrices, notamment visà-vis de l'assimilation du lactose. 4 ) Additif alimentaire microbien selon la revendication 3, caractérisé en ce que la souche de Sporolactobacillus est sélectionnée parmi les espèces appartenant au genre taxonomique Sporolactobacillus et notamment Sporolactobacillus inulinus et Sporolactobacillus P44 selon la revendication 1 ou la revendication 2. 5 ) Additif alimentaire microbien selon la revendication 3 ou la revendication 4, caractérisé en ce qu'il comprend au moins la souche de Sporolactobacillus P44 selon la revendication 1 ou la revendication 2. 6 ) Additif alimentaire microbien selon l'une quelconque des revendications 3 à 5, caractérisé en ce qu'il comprend, en outre, toute autre souche agissant en symbiose ou en complément de la/les souches de Sporo lactobacillus. 7 ) Additif alimentaire microbien selon l'une quelconque des revendications 3 à 6, caractérisé en ce qu'il peut, en outre, également être associé à des supports, diluants, conservateurs et autres composants appropriés. 8 ) Aliments supplémentés aussi bien pour l'alimentation animale qu'humaine, caractérisés en ce qu'ils contiennent l'additif selon l'une quelconque des revendications 3 à 7.