Brevet FR2680508A1 — publié le 19930226

L'invention concerne de nouveaux composés amidiques (alcoxybenzyl)pipérazines, leurs procédés de préparation compositions pharmaceutiques qui les contiennent. des 1- et les On connait dans la littérature de nombreux composés amidiques des 1- (alcoxybenzyl)pipérazines. Ainsi certains composés de formule générale (a): CH 30 f N CH 2 N -I/ N CO Aryl sont décrits comme antagonistes du Platelet Activating Factor ou P A F. (EP 318 235, EP 284 359). D'autres composés comportant un groupement oxo-4 quinol-3 yl possèdent des propriétés anti-inflammatoires (JP 8 961 461), et des composés possédant un groupement benzamidique sont présentés comme inhibiteurs de l'anhydrase carbonique (EP 171 636). On note également que certains cinnamides (alcoxybenzyl)pipérazines sont décrits comme antihypertenseurs 8199). de 1- (US 436 Structurellement plus proches des composés de l'invention, on connait dans la littérature des dérivés pyroglutamidiques de la 1-(p- méthoxybenzyl)pipérazine décrits comme possédant une activité nootrope (DE 3 701 494). On connait également des composés de formule (b): CH 30 CH 30 (a) L" z 2680508 CH 30 CH 2 N N CO CH NH Rb (b) CH 2 CH 30 CH 30 l CH CH 3 CH 3 dans laquelle Rb représente un groupe protecteur pour la fonction amine d'un aminoacide, pour lequels aucune activité pharmacologique n'a été mentionnée et qui sont utilisés comme intermédiaires de synthèse de composés caractérisés par la présence d'un cycle oxirane et présentés notamment comme inhibiteurs d'enzymes protéolytiques (Biochemical Pharmacology 1985; vol 34 (n 21): 3875 3880 et Arzneim Forsch - 1986; vol 36 (n 4): 671 675). La demanderesse a présentement découvert de nouveaux composés amidiques d'alcoxybenzyl pipérazines qui possèdent une action antiischémique et antianoxique, tant au niveau cérébral qu'au niveau périphérique, nettement supérieure à celle des 1-(alcoxybenzyl) pipérazines les plus proches comme la trimétazidine ou 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) pipérazine. Plus spécifiquement, l'invention concerne les composés de formule générale (I): (R 1-O)n CH 2 N N CO R 2 (I) dans laquelle: N nombre entier peut prendre les valeurs 1, 2, ou 3, R 1 est un alkyle linéaire ou ramifié contenant de 1 à 4 atomes de carbone, R 2 représente: 3 -2680508 1) un groupement -CH (CH 2)r NR 4 R 5 i R 3 dans lequel: r nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, R 3 représente: a) un atome d'hydrogène, b) un alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone éventuellement substitué par un groupement choisi parmi: i) -OH, ou -COOH, ii) -O-R 6,-CO-R 6, -CO-O-R 6, -O-CO-R 6, ou -O-CO-O-R 6 avec R 6 o 10 étant un groupement choisi parmi: alkyle linéaire ou ramifié saturé insaturé ou polyinsaturé de 1 à 12 atomes de carbone, et -(CH 2)m-phényle éventuellement substitué o m nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, iii) - NR 7 R 8 avec R 7 et R 8, identiques ou différents, représentant chacun indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, - CO-R 6 ou -CO-O-R 6 avec R 6 ayant la même signification que précédemment, et -(CH 2)m-phényle éventuellement substitué, o m nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, iv) - CO-N Rg R 10 avec R 9 et RO 10, identiques ou différents, ayant la même définition que R 6 avec R 6 tel que défini précedemment, ou pouvant également représenter un atome d'hydrogène, ou former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte en système cyclique de 5 à 7 sommets pouvant comprendre éventuellement un second hétéroatome choisi parmi oxygène, azote, soufre, v) -SH, ou -Se H, vi) un groupement -S-R 6, -Se-R 6, -S-CO-O-R 6, -S-S-R 6 ou -Se- Se-R 6 avec R 6 tel que défini précédemment, vii) guanidino, viii) nitro3 guanidino, ix) un groupement indole ou imidazole éventuellement substitué, c) un groupement -(CH 2)m-phényle éventuellement substitué o m nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, étant entendu que R 3 ne peut pas représenter un groupement isobutyle, R 4 représente un atome d'hydrogène, un alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, un groupement -(CH 2)p-phényle éventuellement substitué o p nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, ou forme avec R 3 et les atomes auxquels ils sont liés un système mono ou bicyclique choisi parmi: pyrrolidine, pipéridine, perhydroindole, indoline, 2-aza bicyclol 2, 2, 2 loctane, et 2-aza bicyclol 3, 3, Oloctane, ces systèmes cycliques pouvant être éventuellement substitués par un ou plusieurs groupements ehoisis parmi: hydroxy, oxo, alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, avec la réserve que si N = 1 alors R 3 et R 4 ne peuvent pas former ensemble, avec les atomes auxquels ils sont liés, une pyrrolidine substitué par un groupement oxo en a de l'azote, R 5 représente: un atome d'hydrogène, un groupement -(CH 2)q-phényle éventuellement substitué o q nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, 2680508 une chaine alkyle de 1 à 20 atomes de carbone, linéaire ou ramifiée, saturée, insaturée ou polyinsaturée, éventuellement interrompue par un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre, ou d'azote, et éventuellement substituée par un ou plusieurs hydroxy, amino, alkylamino ou alcoxy contenant de 1 à 6 atomes de carbone, un groupement -CO-R 11 ou -CO-O-R 11 o Rll représente: une chaine alkyle de 1 à 20 atomes de carbone, linéaire ou ramifiée, saturée, insaturée ou polyinsaturée, éventuellement interrompue par un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre, ou d'azote, et éventuellement substituée par un ou plusieurs hydroxy, amino, alkylamino ou alcoxy contenant de 1 à 6 atomes de carbone, un groupement -(CH 2)q-phényle éventuellement substitué o q nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, 2) un groupement: CH 2 H CH 2 NO(CH 3)3 I R 12 dans lequel: R 12 représente: 9 g o un atome d'hydrogène, un groupement -CO-R 6, ou -CO-O-R 6 avec R 6 ayant la même signification que précédemment, le terme substitué associé aux expressions "-(CH 2)m-phényle", "-(CH 2)p- phényle", "-(CH 2)q-phényle", "imidazole", et "indole" signifie que ces radicaux peuvent être substitués sur le cycle par un ou plusieurs groupements choisis parmi: hydroxy, halogène, nitro, trifluorométhyle, alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, -(CH 2)t-phényle, et -O-(CH 2)t-phényle o t nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, leurs isomères, diastéréoisomères, épimères, isolés ou sous forme de mélange ainsi que, le cas échéant, leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. La présente invention a également pour objet le procédé de préparation des composés de formule (I), caractérisé en ce que l'on condense, en utilisant les techniques de couplage classiques passant par la formation d'un ester activé (hydroxy succinimide, hydroxybenzotriazole en présence de dicyclohexyl carbodiimide),un composé de formule (I I): HOOC R'2 (II) dans laquelle R'2 a la même signification que R 2 dans la formule générale (I) avec la réserve que lorsque R'2 représente en groupement CH (CH 2)r NR 4 R 5 tel que défini dans la formule générale (I) et R 3 que R 4 représente un atome d'hydrogène, alors R 5 représente un groupement -CO-R 11 ou -CO-O-R 11 avec R 11 ayant la même signification que dans la formule générale (I), avec une (alcoxybenzyl)pipérazine de formule (III) (Rl-O)n /- s -) "CH 2 N N H (III) / / dans laquelle R 1 et N sont tels que définis dans la formule (I) afin d'obtenir un composé de formule (I/a): (Rl-O)n/ CH 2 N N CO R'2 (I/a) / 7 2680508 dans laquelle Rl, R'2 et N sont tels que définis précédemment, composés de formule (I/a) qui sont, dans le cas o R 5 représente un groupement CO-O-R 1 l, éventuellement soumis si on le désire, aux réactions de déprotection des fonctions aminées en synthèse peptidique (traitement acide ou hydrogénation catalytique suivant la nature de Rjj) afin d'accéder aux composés de formule (I) pour lesquels R 5 représente un hydrogène, les composés de formule (I) peuvent, si nécessaire être purifiés, par une technique classique comme la cristallisation et/ou la chromatographie sur colonne de silice, ils peuvent également être salifiés, soit avec un acide pharmaceutiquement acceptable, soit, si cela est possible et si on le désire avec une base pharmaceutiquement acceptable. Les matières premières utilisées dans le procédé précédemment décrit sont soit commerciales, soit aisément accessibles à l'homme de l'art selon des procédés décrits dans la littérature. Comparés à la trimétazidine, les composés de la présente invention présentent tant in vivo que in vitro une activité protectrice cellulaire très largement supérieure, notamment au niveau cérébral. Les tests réalisés in vitro, sur des astrocytes de rats en culture, placés en condition hypoxique, ont montré que les composés de la présente invention protégeaient de façon remarquable, et bien supérieure à celle de la trimétazidine, l'intégrité cellulaire de ces astrocytes. D'autres tests effectués in vivo chez la gerbille ont montré que les composés de l'invention augmentaient de façon significative et largement supérieure à celle de la trimétazidine la survie des aminaux chez lesquels on provoque une ischémie cérébrale par ligature de la carotide gauche et retardaient de façon importante l'apparition des premières suffocations chez des animaux que l'on place en condition d'hypoxie normobare. 8 2680508 Les remarquables propriétés des composés de la présente invention les rendent précieux notamment au niveau cérébral pour le traitement et la prévention de l'ischémie cérébrale, de l'hypoxie vasculaire cérébrale, de l'anoxie vasculaire cérébrale et des oedèmes cérébraux. Plus généralement, le pouvoir protecteur des composés de la présente invention leur confère un interêt certain dans le traitement des accidents vasculaires cérébraux d'origines diverses, des traumatismes crâniens, des encéphalopathies, des maladie neuro-dégénératives et des troubles de la sénescence. La capacité des composés de l'invention à protéger les cellules au cours d'une hypoxie permet également leur utilisation dans le traitement et la prévention de l'ischémie de type périphérique, notamment en cardiologie l'ischémie myocardique et l'ischémie coronarienne et leurs différentes expressions cliniques: angine de poitrine, infarctus du myocarde, troubles du rythme, spasme vasculaire, insuffisance cardiaque, ainsi qu'en ophtamologie et en oto-rhino-laryngologie lors d'atteintes vasculaires chorio-rétiniennes, de vertiges d'origine vasculaire, de vertiges de Menière ou d'acouphènes. L'invention concerne également les sels d'addition des composés de formule (I) obtenus avec une base ou un acide minéral ou organique, pharmaceutiquement acceptable. Parmi les acides pharmaceutiquement acceptables que l'on peut utiliser pour former un sel d'addition avec les composés de l'invention, on peut citer, à titre d'exemple, les acides chlorhydrique, sulfurique, phosphorique, tartrique, malique, maléique, fumarique, oxalique, méthanesulfonique, éthanesulfonique, camphorique, citrique, etc Comme bases pharmaceutiquement acceptables pouvant salifier les composés de formule (I) on pourra utiliser les hydroxydes de sodium, de potassium, de calcium ou d'aluminium, les carbonates de métaux alcalins ou alcalinoterreux ou les bases organiques comme la triéthylamine, la 9 2680508 benzylamine, la diéthanolamine, la tert-butylamine, la dicyclohexylamine, l'arginine, etc L'invention s'étend aussi aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif un composé de formule générale (I) ou un de ses sels d'addition, avec une base ou un acide, minéral ou organique, en association avec un ou plusieurs excipients inertes, non toxiques convenant pour l'usage pharmaceutique et/ou un agent liant, un agent aromatisant, un agent de délitement, un agent édulcorant, un agent lubrifiant ou bien encore un véhicule liquide adapté à l'administration par voie intraveineuse, tel que l'eau stérile apyrogène. Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer, plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, oculaire, per ou transcutanée, nasale, rectale perlinguale, ou respiratoire et notamment les préparations injectables, les aérosols, les gouttes oculaires ou nasales, les comprimés, les comprimés sublinguaux, les gélules, capsules, tablettes, glossettes, suppositoires, crèmes, pommades, gels, etc Les compositions ainsi obtenues se présentent généralement sous forme dosée et peuvent contenir selon les affections traitées, l'âge et le sexe du malade, de 0,1 à 500 mg de principe actif. Elles peuvent selon le cas être administrées par voie orale, rectale ou parentérale à la dose de 0,1 à 500 mg de une à plusieurs fois par jour. Les exemples suivants illustrent l'invention et ne la limitent en aucune façon. EXEMPLE 1: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lS- BENZYL N-BENZYLOXYCARBONYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE Stade A: N-lS- benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cytéinylloxy succinimide. 2680508 Ajouter 29,4 mmoles de N-hydroxysuccinimide en solution dans 30 cm 3 de chlorure de méthylène, à 29,4 mmoles de S-benzyl N-benzyloxycarbonyl L- cystéine en solution dans 20 cm 3 de chlorure de méthylène Refroidir à C, puis ajouter 29,4 mmoles de dicyclohexylcarbodiimide. Agiter pendant 4 heures à -10 C puis pendant 1 heure à 20 C. La dicyclohexylurée formée est éliminée par filtration et la solution de NlS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéinylloxy succinimide est utilisée telle quelle dans l'étape suivante Stade B: 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N- o benzyloxycarbonyl L-cysteinyll pipérazine La solution chlorométhylènique de N-lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L- cystéinylloxy succinimide obtenue au stade précédent est ajoutée à une solution préalablement préparée, et maintenue à 4 C, de 29,4 mmmoles de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) pipérazine dans 40 cm 3 de chlorure de méthylène. Après 3 heures d'agitation à 4 C et 15 heures d'agitation à 20 C, le milieu est mis à sec sous pression réduite et purifié par chromatographie sur colonne de silice (éluant: chloroforme/méthanol ( 99/1) puis chloroforme/méthanol ( 98/2)). Après mise à sec des fractions collectées,on obtient la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéinyll pipérazine. Pouvoir rotatoire ( c = 1, éthanol absolu) l l 20 = _ 21,7 o D Caractéristiques spectrales: Infrarouge (CHC 13, 5 mg/ml, 0,1 mm) en cm-1: 3000, 2920, 1705, 1635, 1485, 1460, 1250, et 1090. RMN 1 H (CD C 13, référence interne: tétraméthysilane) 11 2680508 c b CH 2 CH 2 \ CH 2CH 2 \CH 2 CH 2 a J CO CH NH CO O - CH 2 k CH 2 k l j _ 0 H 2 S S -CH 2 o 2,30 3,30 3,75 3,89 4,78 ,12 ,32 ,70 6,65 7,22 7,33 2,80 ppm 3,70 ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm et 6,95 ppm ppm ppm triplet triplet singulet 2 singulets multiplet singulet singulet doublet doublet multiplet multiplet 4 H; c 4 H; b 2 H; d 9 H; e, f, g 1 H; a 2 H; j 2 H; 1 1 H; -NH- 2 H; h, i (J = 10 Hz) H; phényle H; phényle Stade C: chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) N-benzyloxycarbonyl L-cysteinyll pipérazine 4-lS-benzyl La base obtenue au stade B est mise en suspension dans d'eau Après acidification avec de l'acide chlorhydrique dissolution totale (PH 2-3), la solution obtenue est mise à lyophilisation. cm 3 jusqu'à sec par On obtient ainsi le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lS- benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cysteinyll pipérazine sous forme de cristaux blancs. Pouvoir rotatoire ( c = 1, éthanol absolu) l a l 20 = _ 11,8 o D H d CH 2 N CH 30 - g CH 30 f OCH 3 e EXEMPLE 2 : CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) BENZYLOXYCARBONYL L-PROLYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant au stade A la S-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéine par la N-benzyloxycarbonyl L- proline, on obtient le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN- benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine. Point de fusion (base): 117 C Pouvoir rotatoire (c: 1, éthanol absolu) (base) l 2 a O l= -4,40 l a l 20 D Pouvoir rotatoire (C: 1, eau) (chlorhydrate): D O = -8,90 lCa l 20 D Caractéristiques spectrales (base): Infrarouge (CH C 13; 5 mg/ml; 0,1 mm) en cm-1: 3000, 1490, 1465, 1415, 1090. RMN 1 H (CD C 13; référence interne: tetraméthylsilane) CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 j k 2930, 1690, m CO O CH 2 (n * CH 30 g CH 30 f d CH 2 N / OCH 3 e 1,8 2,6 ppm 3,3 3,8 ppm 3,89 ppm 4,7 ppm ,12 ppm 6,66 et 6,96 ppm 7,35 ppm multiplet multiplet 2 singulet multiplet doublet multiplet 8 H; c, j, k 8 H; b, d, 1 9 H; e, f, g 1 H; a 2 H;m 2 H; h, i (J = 9 Hz) H; phényle 1645, c b I CH 2 CH 2 a, N N CO CH CH 2 1 \ EXEMPLE 3: DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-(L- PROLYL) PIPERAZINE Une solution de 3 grammes de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN- benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine dans 100 cm 3 de méthanol est hydrogénée pendant 1 heure sous une pression de 1 bar d'hydrogène, en présence de palladium sur charbon à 10 %. Après élimination du catalyseur par filtration et mise à sec du milieu réactionnel, on obtient la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-(L-prolyl) pipérazine sous forme d'huile avec un rendement quantitatif de 100 %. Cette huile peut être reprise dans de l'eau pour donner après acidification avec de l'acide chlorhydrique 1 N et isolement par lyophilisation le dichlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4- (L- prolyl) pipérazine. EXEMPLE 4: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL S-ETHYLTHIO L-CYSTEINYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant la S-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéine par la S-éthylthio N-benzyloxycarbonyl L- cystéine, on obtient le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4- lN- benzyloxycarbonyl S-éthylthio L-cystéinyll pipérazine. EXEMPLE 5: DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lS- ETHYLTHIO L-CYSTEINYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 3, mais en remplaçant la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-prolyllpipérazine par la 1- ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl S-éthylthio L- cystéinyll pipérazine, on obtient le dichlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4- lS-éthylthio L-cystéinyll pipérazine. EXEMPLE 6: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL L-ALANYLl PIPERAZINE IPARAC;nn En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant la S-benzyl N-benzyloxycarbonyl cystéine par la N-benzyloxycarbonyl L-alanine, on obtient le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4- lN- benzyloxycarbonyl L-alanyll pipérazine. Pouvoir rotatoire (c = 1, éthanol absolu) (base): D 20 = _ 8,4 o D Pouvoir rotatoire (c = 1, eau) (chlorhydrate): = 1 O Caractéristiques spectrales (base): Infrarouge (CH C 13; 5 mg/ml; 0,1 mm) en cm-1: 3060, 2990, 1710, 1640, 1490, 1465, 1445, 1095. RMN 1 H (CD C 13, référence interne: tétraméthylsilane) d CH 2 N c b CH 2 CH 2 N CO - f CH 2 CH 2 OCH 3 e a j CH NH CO O CH 2 CH 3 k 1,09 2,46 3,60 3,91 4,63 ,11 5,85 6,65 7,32 1,18 ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm et 6,95 ppm ppm doublet multiplet multiplet singulets multiplet singulet doublet doublet multiplet 3 H; k 4 H; c 6 H; b, d 9 H; e, f, g 1 H; a 2 H; j 1 H; -NH- 2 H; h, i (J = 9 Hz) H; phényl : DICHLORHYDRATE DE ALANYL) PIPERAZINE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) En procédant comme dans l'exemple 3, mais en remplaçant la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine par la 1- CH 30 - g CH 30 f EXEMPLE 7 2680508 ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-alanyll pipérazine, on obtient le dichlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-(L-alanyl) pipérazine. EXEMPLE 8: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL D-ALANYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant la S-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéine par la N-benzyloxycarbonyl D-alanine, on obtient le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN- benzyloxycarbonyl D-alanyll pipérazine. Pouvoir rotatoire (c = 1, éthanol absolu): C La 2 l base= + 8,1 D EXEMPLE 9: DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-(D- ALANYL) PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 3, mais en remplaçant la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine par la 1- ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl D-alanyl| pipérazine, on obtient le dichlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-(D-alanyl) pipérazine. EXEMPLE 10: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL L-PHENYLALANYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant la S-benzyl N-benzyloxycarbonyl Lcystéine par la N-benzyloxycarbonyl L-phénylalanine, on obtient le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN- benzyloxycarbonyl L-phénylalanyll pipérazine. Pouvoir rotatoire (c = 1, éthanol absolu): 16 2680508 l a l 20 (base) = + 3,0 D a l 20 (chlorhydrate) = + 9,9 D Caractéristiques spectrales (base): Infrarouge (CH C 13; 5 mg/ml; 0,1 mm) en cm-1: 2980, 2900, 1710, 1635, 1490, 1460, 1090. RMN 1 H (CD C 13, référence interne: tétraméthylsilane) c b CH 2 CH 2 / \ N - \ / CH 2 CH 2 a j CO CH NH CO O CH 2 CH 2 k 2,2 2,5 ppm 3,39 ppm 3,40 3,60 ppm 3,88 ppm 4,89 ppm ,11 ppm ,70 ppm; doublet 6,64 et 6,90 ppm 7,12 7,34 ppm multiplet singulet multiplet 2 singulets multiplet singulet 1 H doublet multiplet 4 H; 2 H; 4 H; 9 H; 1 H; 2 H; -NH- 2 H; H c d b e, f, g a i h, i (J = 8 Hz) phényl EXEMPLE 11 : DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) PHENYLALANYL) PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 3, mais en remplaçant la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine par la 1- ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-phénylalanyll H d CH 2 N CH 30 - g CH 30 f OCH 3 e 4-(L- 17 2680508 pipérazine, on obtient le dichlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4- (L-phénylalanyl) pipérazine. EXEMPLE 12: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL GLYCYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant au stade A la S-benzyl N- benzyloxycarbonyl L-cystéine par la N-benzyloxycarbonyl glycine, on obtient le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN- benzyloxycarbonyl glycyll pipérazine. EXEMPLE 13: DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-GLYCYL PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 3, mais en remplaçant la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine par la 1- ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl glycyll pipérazine, on obtient le dichlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4- glycyl pipérazine. EXEMPLES 14 A 40 En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant au stade A la Sbenzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéine par: la N-benzyloxycarbonyl Lvaline, on obtient: EXEMPLE 14: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL L-VALYLI PIPERAZINE * l'acide N-benzyloxycarbonyl 4-aminobutyrique, on obtient: EXEMPLE 15: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL 4-AMINOBUTYRYLl PIPERAZINE l'acide N- benzyloxycarbonyl y-tert-butylester a-L-glutamique, on obtient: EXEMPLE 16: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL y-TERT-BUTYLESTER a-GLUTAMYLl PIPERAZINE 18 2680508 la N-benzyloxyearbonyl O-tert-butyl L-tyrosine, on obtient: EXEMPLE 17: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL O-TERT-BUTYL L-TYROSYLl PIPERAZINE la Nbenzyloxyearbonyl O-tert-butyl L-thréonine, on obtient: EXEMPLE 18: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL O-TERT-BUTYL L-THREONYLl PIPERAZINE la N- benzyloxycarbonyl O-tert-butyl L-sérine, on obtient: EXEMPLE 19: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL O-TERT-BUTYL L-SERYLl PIPERAZINE la Nabenzyloxyearbonyl N -tert-butyloxycarbonyl L-lysine, on obtient: EXEMPLE 20: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lNa- BENZYLOXYCARBONYL N,-TERT-BUTYLOXYCARBONYL L-LYSYL l PIPERAZINE la N-benzyloxycarbonyl O-benzyl D-tyrosine, on obtient EXEMPLE 21: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL O-BENZYL D-TYROSYLl PIPERAZINE la NQ-benzyloxycarbonyl L-histidine, on obtient: EXEMPLE 22: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lNa- BENZYLOXYCARBONYL L-HISTIDYLl PIPERAZINE l'acide N-benzyloxycarbonyl 3tert-butylester a-L-aspartique, on obtient: EXEMPLE 23: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL P-TERTBUTYLESTER a-L-ASPARTYL l PIPERAZINE la Na-benzyloxycarbonyl L-asparagine, on obtient EXEMPLE 24: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lNa- BENZYLOXYCARBONYL L-ASPARAGINYLl PIPERAZINE la NQ-benzyloxycarbonyl Lglutamine, on obtient: 19 2680508 EXEMPLE 25: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lNa- BENZYLOXYCARBONYL L-GLUTAMINYLl PIPERAZINE la N-benzyloxycarbonyl ytrans-hydroxy L-proline, on obtient EXEMPLE 26: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL y-TRANS-HYDROXY L-PROLYL l PIPERAZINE la N-benzyloxycarbonyl L-isoleucine, on obtient EXEMPLE 27: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL L-ISOLEUCYLl PIPERAZINE la Na-benzyloxycarbonyl Nc,-nitro L-arginine, on obtient: EXEMPLE 28: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lNa- BENZYLOXYCARBONYL N,-NITRO L-ARGINYLl PIPERAZINE la N-benzyloxycarbonyl L-méthionine, on obtient: EXEMPLE 29: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL L-METHIONYLl PIPERAZINE le Na-benzyloxycarbonyl Ltryptophane, on obtient: EXEMPLE 30: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lNa- BENZYLOXYCARBONYL L-TRYPTOPHYLl PIPERAZINE l'acide N-benzyloxycarbonyl perhydroindol-2-yl( 2 S,3 a S,7 a S) carboxylique, on obtient: EXEMPLE 31: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-{lN- BENZYLOXYCARBONYL PERHYDROINDOL-2- YL( 2 S,3 a S,7 a S) lCARBONYL} PIPERAZINE la N,O-di(benzyloxycarbonyl) L-tyrosine, on obtient EXEMPLE 32: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN,O- DI(BENZYLOXYCARBONYL) L-TYROSYL l PIPERAZINE par la N,Sdi(benzyloxycarbonyl) L-cystéine, on obtient EXEMPLE 33: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN,S- di(BENZYLOXYCARBONYL) L-CYSTEINYLI PIPERAZINE 2680508 par la N-tert-butyloxycarbonyl S-benzyl L-cystéine, on obtient: EXEMPLE 34: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- TERT-BUTYLOXYCARBONYL S-BENZYL L-CYSTÉINYLl PIPERAZINE par la N-pivaloyl S-benzyl L-cystéine, on obtient: EXEMPLE 35: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- PIVALOYL S-BENZYL L-CYSTÉINYLl PIPERAZINE par la N-acétyl S-benzyl Lcystéine, on obtient: EXEMPLE 36: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- ACETYL S-BENZYL L-CYSTÉINYLl PIPERAZINE par l'acide N-benzyloxycarbonyl L-pyroglutamique, on obtient: EXEMPLE 37: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL 5-OXO L-PROLYLl PIPERAZINE par la N-palmitoyl S-benzyl L-cystéine, on obtient: EXEMPLE 38: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- PALMITOYL S-BENZYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE par la N-eicosanoyl S-benzyl L-cystéine, on obtient: EXEMPLE 39: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN- EICOSANOYL S-BENZYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE l'acétyl-DL- carnitine, on obtient: EXEMPLE 40: LE CHLORURE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-l 3- (TRIMETHYLAMMONIUM) 2-(ACETOXY) PROP-1-YL l CARBONYL} PIPERAZINE EXEMPLE 41: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,5-DIMETHOXYBENZYL) 4-lS-BENZYL N-BENZYLOXYCARBONYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant au stade B la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) pipérazine par la 1-( 2,5-diméthoxybenzyl) pipérazine, on obtient le chlorhydrate de 1-( 2,5-diméthoxybenzyl) 4-lS- benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéinyll pipérazine. 21 2680508 EXEMPLES 42 A 44 En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant au stade B la 1- ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) pipérazine par la 1-( 2,5-diméthoxybenzyl) pipérazine, et en remplaçant au stade A la S-benzyl N-benzyloxycarbonyl L- cystéine par la N-benzyloxycarbonyl L-proline, on obtient: EXEMPLE 42: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,5-DIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL L-PROLYLl PIPERAZINE À par la S-éthylthio Nbenzyloxycarbonyl L-cystéine on obtient: EXEMPLE 43: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,5-DIMETHOXYBENZYL) 4-lS- ETHYLTHIO N-BENZYLOXYCARBONYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE par la Nbenzyloxycarbonyl L-alanine, on obtient: EXEMPLE 44: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 2,5-DIMETHOXYBENZYL) 4-lN- BENZYLOXYCARBONYL L-ALANYLl PIPERAZINE EXEMPLE 45: LE CHLORHYDRATE DE 1-( 3-METHOXYBENZYL) 4-lS-(BENZYL) N-(BENZYLOXYCARBONYL) L-CYSTEINYLl PIPERAZINE En procédant comme dans l'exemple 1, mais en remplaçant au stade B la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) pipérazine par la 1- ( 3-méthoxybenzyl) pipérazine, on obtient le chlorhydrate de 1-( 3méthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéinyll pipérazine. EXEMPLES 46 A 57 En procédant comme dans l'exemple 3, mais en remplaçant la 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine par: la 1- ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-valyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 46: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-(L- VALYL) PIPERAZINE 22 2680508 la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl 4- aminobutyryll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 47: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-( 4- AMINOBUTYRYL) PIPERAZINE la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl y-tert- butylester a-L-glutamyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 48: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-ly- TERT-BUTYLESTER a-L-GLUTAMYLl PIPERAZINE la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl O-tert-butyl L-tyrosyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 49: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-l 0- TERT-BUTYL L-TYROSYLl PIPERAZINE la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lNbenzyloxycarbonyl O-tert-butyl L-séryll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 50: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lO- TERT-BUTYL L-SERYLl PIPERAZINE la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN,-benzyloxycarbonyl N,-tert- butyloxycarbonyl L-lysyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 51: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-lN,- TERT-BUTYLOXYCARBONYL L-LYSYLI PIPERAZINE la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lNa-benzyloxycarbonyl L-histidyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 52: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-(L- HISTIDYL) PIPERAZINE la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L- glutaminyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 53: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-(L- GLUTAMINYL) PIPERAZINE la 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-{lN-benzyloxycarbonyl perhydroindol-2-yl( 2 S,3 a S,7 a S) lcarbonyl} pipérazine, on obtient: 23 2680508 EXEMPLE 54: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4- l(PERHYDROINDOL-2-YL( 2 S,3 a S,7 a S)CARBONYLl PIPERAZINE la 1-( 2,5-diméthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L- cystéinyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 55: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,5-DIMETHOXYBENZYL) 4-lS- BENZYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE la 1-( 2,5-diméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-alanyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 56: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 2,5-DIMETHOXYBENZYL) 4-(L- ALANYL) PIPERAZINE la 1-( 3-méthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L- cystéinyll pipérazine, on obtient: EXEMPLE 57: LE DICHLORHYDRATE DE 1-( 3-METHOXYBENZYL) 4-lS-BENZYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE EXEMPLE 58: CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4-TRIMETHOXYBENZYL) 4-(L- LYSYL) PIPERAZINE cm 3 d'acide trifluoroacétique sont ajoutés à une solution de 0,9 grammes de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lNg-tert-butyloxycarbonyl L- lysyll pipérazine dans 20 cm 3 de chlorure de méthylène. On laisse sous agitation durant 20 mn à 20 C Après évaporation du chlorure de méthylène, et élimination l'acide trifluoroacétique on obtient la 1- ( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-(L-lysyl) pipérazine sous forme d'huile. Cette huile peut-être reprise dans de l'eau pour donner après acidification avec de l'acide chlorhydrique 1 N et isolement par lyophilisation le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-(L- lysyl) pipérazine. ETUDE PHARMACOLOGIQUE DES COMPOSES DE LA PRESENTE INVENTION : Recherche de l'activité anti-hypoxique in vitro EXEMPLE A 24 2680508 Principe: Les astrocytes en culture constituent un modèle de choix pour la recherche d'une activité cytoprotectrice face à une situation d'hypoxie. En effet, la première réaction cellulaire visible à toute agression cérébrale est un gonflement astrocytaire, alors même que les neurones, les oligodendrocytes et les cellules endothéliales ont encore un profil morphologique normal. En outre, il a été montré récemment que l'astrocyte avait un rôle majeur au niveau cérébral, notamment dans l'élaboration des acides aminés neurotransmetteurs et dans la préservation de l'équilibre ionique extracellulaire (Rothman, S M et al Ann Neurol ( 1986); 19: 105-111). La demanderesse a donc testé l'effet des composés de l'invention sur la protection cellulaire d'astrocytes en culture placés en situation d'hypoxie, en: mesurant la consommation en oxygène de ces astrocytes, ce qui permet un suivi de l'activité respiratoire, en analysant certains marqueurs enzymatiques, qui permettent de mesurer l'intégrité métabolique et membranaire de ces astrocytes Méthodologie: Les astrocytes de rats en culture primaire sont préparés à partir de cortex provenant de cerveaux de rats nouveau-nés. Le traitement hypoxique consiste en une exposition des cellules, en atmosphère humide, à un mélange gazeux constitué de 95 % N 2 et 5 % C 02, à 37 C pendant 15 heures. Les composés à tester sont ajoutés au milieu de culture 12 heures avant l'hypoxie Un second ajout est réalisé à la fin de la période hypoxique. 2680508 2 heures après la fin de l'hypoxie, on mesure la consommation cellulaire d'oxygène ainsi que l'activité enzymatique lactate déshydrogénase (LDH) intra-cellulaire et extra-cellulaire et le rapport des différentes isoenzymes de la LDH (isoenzyme Heart/isoenzyme Muscle ou H/M). a) Consommation d'oxygène: On détermine la consommation d'oxygène des cellules en milieu salin isotonique par mesure polarimétrique dans un oxygraphe GILSON, muni d'une électrode de Clark à oxygène. b) Activité LDH intra-cellulaire: Elle est déterminée par mesure spectrophotométrique à 340 nm sur un extrait cellulaire obtenu après désintégration des cellules aux ultrasons. c) Activité LDH extra-cellulaire: Elle est déterminée par mesure spectrophotométrique à 340 nm sur le milieu de culture. d) Rapport H/M: Les différentes formes isoenzymatiques intracellulaires de la LDH sont estimées par électrophorèse en gel de polyacrylamide à 7 % et identification spécifique des bandes isoenzymatiques. Résultats: Les composés de l'invention permettent une amélioration de l'activité respiratoire (consommation d'oxygène), après hypoxie des cellules, largement supérieure à celle obtenue après traitement avec de la trimétazidine. En outre, l'analyse des différents marqueurs enzymatiques montre que les composés de l'invention présentent un effet protecteur remarquable de l'intégralité métabolique (activité LDH intra-cellulaire et rapport des isoenzymes: H/M) et de l'intégrité membranaire (activité LDH extra- cellulaire). A titre d'exemple, la chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4- lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéinyll pipérazine provoque une amélioration de l'activité respiratoire de 34 % par rapport aux cellules non traitées. Le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lS-benzyl Nbenzyloxycarbonyl L-cystéinyll pipérazine augmente également de plus de 20 % la valeur du rapport H/M, une augmentation de la valeur du rapport étant le signe d'un bon fonctionnement métabolique, alors qu'on observe une baisse de 17 % de la valeur du ce rapport dans les cellules non traitées. Exemple B: Recherche d'une activité anti-ischémiante in vivo Principe: Certaines gerbilles ( 40 à 60 % des cas), dites sensibles, présentent une anomalie du cercle de Willis (Levine et al Exp Neurol 1966; 16: 255 262). Grâce à cette anomalie, l'occlusion d'une carotide chez la gerbille permet de reproduire, contrairement aux autres espèces animales, la pathologie de l'ischémie cérébrale humaine. La demanderesse a donc présentement testé l'influence des composés de l'invention sur la survie des gerbilles ayant subi une ischémie cérébrale par ligature de la carotide gauche. Méthodologie: On anesthésie les gerbilles "sensibles" au Kétalar à la dose de 60 mg/kg par voie intapéritonéale 30 minutes avant la ligature de la carotide gauche, on administre, par la voie intrapéritonéale, différentes concentrations des composés à tester en solution dans le polyéthylène glycol à 3 %. 27 2680508 On analyse le comportement des animaux à différents temps et les signes observés sont traduits en score selon l'indice de Mac Graw modifié (Mac Graw, CP et al; Stroke ( 1976); 7: 485). L'étude statistique est faite selon le test U de Mann Whitney. Résultats: Les composés de l'invention présentent une activité protectrice anti-ischémiante très importante et bien supérieure à celle de la trimétazidine. A titre d'exemple, le pourcentage de survie des animaux après ligature de la carotide gauche dépasse les 70 %, au temps 96 h, sous l'action du chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N- benzyloxycarbonyl L-cystéinyll pypérazine, alors que tous les animaux sont morts dans les expériences contrôle. Exemple C: Recherche d'une activité anti-hypoxique in vivo lb Princi De: les animaux (souris) sont placées dans une atmosphère pauvre en oxygène, ce qui provoque l'apparition de suffocations (ou "gasps"). Les composés possédant des propriétés anti-hypoxiques provoquent un retard dans l'apparition de ces suffocations. La demanderesse a présentement testé les composés de l'invention dans ce test. Méthodologie: Les souris mâles (Swiss CD 1) pesant 25 30 g sont stabulées durant 1 semaine avant toute expérience dans les conditions usuelles d'animalerie ( 20-22 C, 55 % d'humidité, cycle lumière/obscurité 12/12, nourriture industrielle et eau à volonté). 28 2680508 Les souris sont placées dans une boite ( 7 X 5 X 5 cm) dans laquelle on crée une atmosphère pauvre en oxygène par le passage d'un courant d'air ( 96 % N 2, 4 % 02, 12 1/mm). Le délai d'apparition des premières suffocations ou ("gasps") est mesuré. Les souris reçoivent une dose des composés à tester par voie intrapéritonéale 30 mn avant la réalisation de l'hypoxie. La vincamine ( 14,15-dihydro 14-hydroxyeburnamenine 14-carboxylate de méthyle) est utilisée comme drogue de référence. Résultats: Les résultats sont présentés dans le tableau 1 pour le composé de l'invention qui est le chlorhydrate de 1-( 2,3,4-triméthoxybenzyl) 4-lS- benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéinyll pipérazine. DOSE DELAI D'APPARITION DES TRAITEMENT (m/k) PREMIERES SUFFOCATIONS OU (mg/kg) "GASPS" TEMOIN 30 7 VINCAMINE 2,5 48 8 (non significatif) VINCAMINE 20 167 12 (significatif) CHLORHYDRATE DE 1-( 2,3,4 2,5 70 + 13 (significatif) TRIMETHOXYBENZYL) 4-lS-BENZYL N- BENZYLOXYCARBONYL L-CYSTEINYLl PIPERAZINE Le résultats montrent que le chlorhydrate de 1-( 2,3,4- triméthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl cystéinyll pipérazine est actif comme antihypoxique dès la dose de 2,5 mg/kg alors que le composé de référence, à la même dose, ne provoque aucune différence significative. REVENDICATIONS 1 Composés de formule générale (I): (R 1-O)n CH 2 N N CO R 2 (I) dans laquelle: N nombre entier peut prendre les valeurs 1, 2, ou 3, R 1 est un alkyle linéaire ou ramifié contenant de 1 à 4 atomes de carbone, R 2 représente: 1) un groupement -CH (CH 2)r NR 4 R 5 I R 3 dans lequel: r nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, R 3 représente: a) un atome d'hydrogène, b) un alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone éventuellement substitué par un groupement choisi parmi: i) -OH, ou -COOH, ii) -O-R 6,-CO-R 6, -CO-O-R 6, -O-CO- R 6, ou -O-CO-O-R 6 avec R 6 étant un groupement choisi parmi: alkyle linéaire ou ramifié saturé insaturé ou polyinsaturé de 1 à 12 atomes 2680508 de carbone, et -(CH 2)m-phényle éventuellement substitué o m nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, iii) -NR 7 R 8 avec R 7 et R 8, identiques ou différents, représentant chacun indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, -CO-R 6 ou -CO-O-R 6 avec R 6 ayant la même signification que précédemment, et -(CH 2)m-phényle éventuellement substitué, o m nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, iv) -CO-NR 9 R 10 avec R 9 et R 10, identiques ou différents, ayant la même définition que R 6 avec R 6 tel que défini précedemment ou pouvant également représenter un atome d'hydrogène, ou former ensemble avec l'atome d'azote qui les porte un système cyclique de 5 à 7 sommets pouvant comprendre éventuellement un second hétéroatome choisi parmi oxygène, azote, soufre, v) -SH, ou - Se H, vi) un groupement -S-R 6, -Se-R 6, -S-CO-O-R 6, -S-S-R 6 ou -Se- Se-R 6 avec R 6 tel que défini précédemment, vii) guanidino, viii) nitro-3 guanidino, ix) un groupement indole ou imidazole éventuellement substitué, c) un groupement -(CH 2)m-phényle éventuellement substitué o m nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, étant entendu que R 3 ne peut pas représenter un groupement isobutyle, R 4 représente un atome d'hydrogène, un alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, un groupement -(CH 2)p-phényle 31 2680508 éventuellement substitué o p nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, ou forme avec R 3 et les atomes auxquels ils sont liés un système mono ou bicyclique choisi parmi: pyrrolidine, pipéridine, perhydroindole, indoline, 2-aza bicyclol 2, 2, 2 loctane, et 2-aza bicyclol 3, 3, Oloctane, ces systèmes cycliques pouvant être éventuellement substitués par un ou plusieurs groupements choisis parmi: hydroxy, oxo, alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, avec la réserve que si N = 1 alors R 3 et R 4 ne peuvent pas former ensemble, avec les atomes auxquels ils sont liés, une pyrrolidine substitué par un groupement oxo en a de l'azote, R 5 représente: un atome d'hydrogène, un groupement -(CH 2)q- phényle éventuellement substitué o q nombre entier peut prendre les valeurs O, 1, 2, 3, une chaine alkyle de 1 à 20 atomes de carbone, linéaire ou ramifiée, saturée, insaturée ou polyinsaturée, éventuellement interrompue par un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre, ou d'azote, et éventuellement substituée par un ou plusieurs hydroxy, amino, alkylamino ou alcoxy contenant de 1 à 6 atomes de carbone, un groupement -CO-R 11 ou -CO-O-R 11 o Rll représente: une chaine alkyle de 1 à 20 atomes de carbone, linéaire ou ramifiée, saturée, insaturée ou polyinsaturée, éventuellement interrompue par un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre, ou d'azote, et éventuellement substituée par un ou plusieurs hydroxy, amino, alkylamino ou alcoxy contenant de 1 à 6 atomes de carbone, un groupement -(CH 2)q-phényle éventuellement substitué o q nombre entier peut prendre les valeurs 0, 1, 2, 3, 2) un groupement: CH 2 f H CH 2 NE(CH 3)3 R 12 R 12 dans lequel: R 12 représente: un atome d'hydrogène, un groupement -CO-R 6, ou -CO-O-R 6 signification que précédemment, avec R 6 ayant la même le terme substitué associé aux expressions "-(CH 2)m-phényle", "-(CH 2)p- phényle", "-(CH 2)q-phényle", "imidazole", et "indole" signifie que ces radicaux peuvent être substitués sur le cycle par un ou plusieurs groupements choisis parmi: hydroxy, halogène, nitro, trifluorométhyle, alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, -(CH 2)t-phényle, et -O 0-(CH 2)t-phényle o t nombre entier peut prendre les valeurs 0, 1, 2, 3, leurs isomères, diastéréoisomères, épimères, isolés ou sous forme de mélange ainsi que, le cas échéant, leurs sels d'addition d'un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 2 Composés de formule (I) selon la revendication 1 pour lesquels N est égal à 3 et R 1 représente un méthyle, les trois groupements méthoxy ainsi définis étant portés en positions 2, 3, et 4 par le noyau aromatique de la benzylpipérazine, ce qui correspond aux composés de formule générale (I a) OCH 3 CH 2 N \ / N CO R 2 dans laquelle R 2 est tel que défini dans la revendication 1: leurs isomères, diastéréoisomères, épimères isolés ou sous forme de mélange, CH 30 CH 30 (I a) 33 2680508 leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaeeutiquement acceptable. 3 Composés de formule (I) selon la revendication 1 pour lesquels R 2 représente un groupement 1 H (CH 2)r NR 4 R 5 tel que défini dans la R 3 revendication 1, dans lequel R 3 représente spécifiquement un alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone substitué par un groupement -SH ou -S-R 6 avec R 6 tel que défini dans la revendication 1, leurs isomères, diastéréoisomères, épimères, isolés ou sous forme de mélange leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 4 Composés de formule (I) selon la revendication 1 pour lesquels N est égal à 3, R 1 est un groupement méthyl, les trois groupements méthoxy ainsi définis étant portés en position 2, 3 et 4 par le noyau aromatique de la benzylpipérazine, R 2 est un groupement CH (CH 2)r NR 4 R 5 tel que défini dans la I R 3 revendication 1 pour lequel R 3 représente un alkyl linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone substitué par un groupement -SH ou -S- R 6 avec R 6 tel que défini dans la revendication 1, leurs isomères, diostéréoisomères, épimères isolés ou sous forme de mélange, leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. Composés de formule (I) selon la revendication 1 pour lesquels R 2 représente un groupement 1 H (CH 2)r NR 4 R 5 tel que défini dans la R 3 revendication 1, dans lequel R 3 et R 4 forment ensemble, avec les atomes auxquels ils sont liés un système mono ou bicyclique choisi parmi: _ 34 2680508 pyrrolidine, pipéridine, perhydroindole, indoline, 2-aza bicyclol 2, 2, 2 l octane, et 2-aza bicyclol 3, 3, Ol octane, ces systèmes cycliques pouvant être éventuellement substitués par un ou plusieurs groupements choisis parmi: hydroxy, oxo, alkyle linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy linéaire ou ramifié de 1 à 6 atomes de carbone, avec la réserve que si n, tel que défini dans la revendication 1, est égal à 1 alors R 3 et R 4 ne peuvent pas former ensemble, avec les atomes auxquels ils sont liés, une pyrrolidine substitué par un groupement oxo en a de l'azote, leurs isomères, diastéréoisomères, épimères, isolés ou sous forme de mélange, leurs sels d'addition à un acide ou à une base pharmaceutiquement acceptable. 6 Le composé selon la revendication 1 qui est la 1-( 2, 3,4- triméthoxybenzyl) 4-lS-benzyl N-benzyloxycarbonyl L-cystéinyll pipérazine, ainsi que son isomère, isolés ou sous forme de mélange, et leurs sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable. 7 Le composé selon la revendication 1 qui est la 1-( 2, 3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-alanyll pipérazine, ainsi que son isomère, isolés ou sous forme de mélange, et leurs sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable. 8 Le composé selon la revendication 1 qui est la 1-( 2, 3,4- triméthoxybenzyl) 4-glycyl pipérazine, ainsi que ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable. 9 Le composé selon la revendication 1 qui est la 1-( 2, 3,4- triméthoxybenzyl) 4-lN-benzyloxycarbonyl L-prolyll pipérazine, ainsi que son isomère, isolés ou sous forme de mélange, et leurs sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable. 10 Procédé de préparation des composés de formule (I), caractérisé en ce que l'on condense, en utilisant les techniques de couplage classiques 2680508 passant par la formation d'un ester activé (hydroxy succinimide, hydroxybenzotriazole en présence de dicyclohexyl carbodiimide),un composé de formule (II): HOOC R'2 (II) dans laquelle R'2 a la même signification que R 2 dans la formule générale (I) avec la réserve que lorsque R'2 représente en groupement CH (CH 2)r NR 4 R 5 tel que défini dans la formule générale (I) et R 3 que R 4 représente un atome d'hydrogène, alors R 5 représente un groupement -CO-R 11 ou -CO-O-R 11 avec Rll ayant la même signification que dans la formule générale (I), avec une (alcoxybenzyl) pipérazine de formule (III) (R 10)n R l-) t CH 2N N H (III) / / dans laquelle R 1 et N sont tels que définis dans la formule (I) afin d'obtenir un composé de formule (I/a): (Rl-O 1)n A CH 2 N N CO R'2 (I/a) dans laquelle R 1, R'2 et N sont tels que définis précédemment, composés de formule (I/a) qui sont, dans le cas o R 5 représente un groupement -CO-O-R 11, éventuellement soumis si on le désire, aux réactions de déprotection des fonctions aminées en synthèse peptidique (traitement acide ou hydrogénation catalytique suivant la nature de Rll) afin d'accéder aux composés de formule (I) pour lesquels R 5 représente un hydrogène, 36 2680508 les composés de formule (I) peuvent, si nécessaire être purifiés, par une technique classique comme la cristallisation et/ou la chromatographie sur colonne de silice, ils peuvent également être salifiés, soit avec un acide pharmaceutiquement acceptable, soit, si cela est possible et si on le désire avec une base pharmaceutiquement acceptable. 11 Composition pharmaceutique contenant comme principe actif au moins un composé selon l'une des revendications 1 à 9 en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques, et pharmaceutiquement acceptables. 12 Composition pharmaceutique selon la revendication 11, utilisable pour le traitement et la prévention de l'ischémie cérébrale, de l'hypoxie vasculaire cérébrale, de l'anoxie vasculaire cérébrale et des oedèmes cérébraux, pour le traitement des accidents vasculaires cérébraux d'origines diverses, des traumatismes crâniens, des encéphalopathies, des maladie neuro-dégénératives et des troubles de la sénescence, ainsi que pour le traitement et la prévention de l'ischémie de type périphérique, notamment en cardiologie l'ischémie myocardique et l'ischémie coronarienne et leurs différentes expressions cliniques: angine de poitrine, infarctus du myocarde, troubles du rythme, spasme vasculaire, insuffisance cardiaque, ainsi qu'en ophtamologie et en oto- rhino-laryngologie lors d'atteintes vasculaires chorio-rétiniennes, de vertiges d'origine vasculaire, de vertiges de Menière ou d'acouphènes.