Brevet FR2682965A1 — publié le 19930430

PRODUCTION D'OS ET DE PERLE A PARTIR DE CULTURE DE CELLULES FORMATRICES D'OS La présente invention concerne un procédé de production d'os naturel et de nacre sous forme de perle à partir de cellules formatrices d'os et de biocristaux provenant du test nacré de mollusques aquatiques. Jusqutà ce jour on n' a jamais pu produire de manière artificielle en quantité suffisante du tissu osseux d'origine animale ou humaine destiné à servir de greffon. Les circonstances chirurgicales pouvant donner lieu à la nécessité d'effectuer des greffes osseuses sont nombreuses : chirurgie orthopédique - chirurgie réparatrice - chirurgie plastique - carcinologique etc...Dans tous les cas les greffons proviennent soit du patient lui-même et dans ce cas on pratique une autogreffe, soit d'une banque d'os constituée de pièces osseuses traitées de façon à les débarrasser de leur partie organique pouvant provoquer des réactions immunitaires, stérilisées par rayonnement ionisant et congelées, on pratique alors une hétérogreffe. Ces pièces osseuses, une fois greffées constituent une trame minérale dans laquelle se développera un processus de néoformation osseuse. De la-3nêne façon l'obtention de perle de culture se fait à partir de fragments de nacre que l'on introduit dans un organe spécifique du mollusque vivant. L'inclusion d'un tel fragment produit un phénomène irritatif qui lui même induit un' processus de minéralisation par apposition de biocristaux autour du fragment de nacre, les perlés ainsi obtenues étant obligatoirement de forme arrondie. Les inconvénients liés aux greffes osseuses sont de plusieurs ordres, toutefois les plus importantes sont les difficultés d'approvisionnement et de stockage ainsi que les réactions immunitaires de rejet dans les cas d'hétérogreffes. Dans le cas d'autogreffes l'inconvénient majeur réside dans le fait que l'on ne peut disposer de fragment osseux de volume suffisant lorsqu'il sagit de remplacer une grande perte de substance. C'est la raison pour laquelle certains inventeurs ont proposé des pièces osseuses réalisées dans des biomatériaux naturels biologiquement compatibles tel que le corail. Ces biomatériaux ne sont en fait que des réserves de calcium occupant le volume laissé vide par la perte de substance et qui peu à peu sera remplacé par de l'os néoformé. Le problème majeur vient du fait que le pouvoir ostéogénique des cellules osseuses entrant dans le processus de minéralisation s'épuise, limitant de ce fait la colonisation totale du greffon de biomatériau. D'autre inventeurs ont proposé comme substitut de pièces osseuses des éléments usinés à partir du test nacré de certains mollusques mais là aussi la taille et le volume limités de ces pièces usinées les rend impropres à une utilisation dans le remplacement des pertes de substances de la plupart des os longs du squelette. C'est pour ces raisons que nous avons expérimenté un procédé artificiel simple de production simultannée ou séparée de tissu osseux et de perle de culture. Le procédé selon l'invention consiste à mettre en oeuvre un processus histochimique destiné à produire artificiellement dans le même temps ou séparémment d'une part de l'os d'origine animale ou humaine et d'autre part de la perle de culture. Le procédé selon l'invention consiste à mettre en présence dans un milieu de culture approprié une couche de cellules formatrices d'os (ostéoblastes), des particules ou de la poudre de biocristaux de nacre. Les cellules formatrices d'os seront de préférence issues d'explants de jeunes mamifères ou de fragments d'os humains sans que cet exemple soit limitatif. Les biocristaux proviennent du test nacré de mollusques aquatiques bivalves, gasté ropodes, ou cephalopodes. Le procédé selon l'invention est mis en oeuvre dans des modules de taille et de forme variables, ces modules serviront de moules dans lesquels se développera le procédé selon l'invention afin d'en obtenir des répliques en os ou en perle. Selon un mode de réalisation préférentielle le procédé selon l'invention peut servir à la fabrication-de pièces osseuses destinées à servir de greffon en chirurgie osseuse ; et à la réali sation d'objets ou de bijoux en perle de forme ét de dimension variables sans que cela soit limitatif. Ce mode de réalisation étant présenté à titre d'exemple non exhaustif. I1 revient à l'homme de métier de mettre en oeuvre les cultures de cellules formatrices d'os issues d'explants osseux et de biocristaux de test nacré de mollusque aquatique toutes les fois ou il aura besoin de produire artificiellement ou de l'os ou de la perle de culture. REVENDICATIONS 1) Procédé de fabrication d'os ou de perle de culture caractérisé en ce qu'il est réalisé à partir des interactions histochimiques produites par la mise en culture de cellules formatrices d'os et de fragments ou de poudre de biocristaux issus de la couche nacré du test de mollusque aquatique. 2) Procédé selon la revendication 1 caractérisé en ce que les fragments ou la poudre de biocristaux proviennent du test nacré de mollusques bivalves gastropodes ou céphalopodes. 3) Procédé selon les revendications 1,2 caractérisé en ce que I'explant producteur de cellules formatrices d'os est issu d'os de mamifères. 4) Procédé selon les revendications 1,2 et 3 caractérisé en ce que les cultures de cellules formatrices d'os et de biocristaux sont contenus dans des moules de formes et de dimensions variables destinés à en obtenir des répliques d'os ou de perle de culture. 5) Utilisation de cellules formatrices d'os et de fragments ou de poudre de nacre pour la fabrication d'os artificiel animal ou humain. sJ Ytilisation de cellules formatrices d'os et de fragments ou de poudre de nacre pour la fabrication de perle de culture.