Brevet FR2684109A1 — publié le 19930528

La présente invention concerne un dispositif de culture pour la produc- tion par fermentation de substances utiles par culture aérobie, ce dispositif com- prenant un dispositif de démoussage, ainsi qu'un procédé de démoussage et de contrôle des mousses qui se forment au cours de la production par fermentation de substances utiles par culture aérobie. Dans les industries mettant en oeuvre des fermentations, on utilise en général des organismes aérobies pour la production de substances intéressantes. Lorsqu'une grande quantité d'air est injectée dans un liquide de culture disposé dans un réservoir de culture pour la culture de tels microorganismes, il se forme en général des mousses Si les mousses produites sont laissées en l'état au cours de la culture, le réservoir se remplit de mousse ce qui provoque un problème du fait que la mousse déborde dans le système d'évacuation En particulier, lorsque la quantité de liquide de culture est importante par rapport à la capacité du réservoir de culture, le problème mentionné ci-dessus peut se poser de manière plus aiguë. Dans ces conditions, on utilise en général un procédé de démoussage afin d'empêcher l'apparition de mousse au cours de la culture, en disposant un détecteur de mousse dans le réservoir de culture et en ajoutant dans le réservoir de culture un agent démoussant constitué par un tensioactif ou un agent siliconé (voir par exemple C L Kroll et al; dans I E C, 48, 2190 ( 1956)) Cependant, dans ce procédé il est difficile de contrôler de manière appropriée la quantité d'agent démoussant qui doit être présent dans le réservoir de sorte que le rendement en produits utiles est faible. On connaît également un procédé de démoussage par contact gaz- liquide au moyen de pales de démoussage placées au-dessus des pales d'agitation. Selon ce procédé, cependant, la mousse produite est simplement repoussée vers le milieu de culture lorsque la quantité de liquide de culture présent dans le réservoir de culture augmente au cours du déroulement de la fermentation dans le réservoir. De ce fait, il est impossible de contrôler totalement la surface de la mousse produite en utilisant uniquement le dispositif selon ce procédé Pour permettre une production par ce dispositif, on emploie un procédé combiné dans lequel la surface de la mousse produite est détectée au moyen d'un détecteur à électrode ou analogue disposé dans la partie supérieure du réservoir de culture, et un tensioactif, un agent siliconé ou analogue est introduit dans le réservoir en tant qu'agent de démoussage de telle manière que la surface de la mousse produite est maintenue dans la position inférieure sous les pales de démoussage (voir par exemple le brevet japonais publié N 46-30786) Cependant, selon ce procédé combiné, la quantité de liquide de culture qui doit être introduite dans le réservoir de culture est limitée à cause des pales de démoussage si bien que ce procédé présente d'autres problèmes du fait que l'espace compris dans la partie supérieure du réservoir de culture ne peut pas être utilisé efficacement et que le moteur destiné à faire tourner les pales de démoussage consomme une grande quantité d'énergie si bien que les coûts en énergie sont élevés par rapport au cas o l'on ne fait tourner que les pales d'agitation. On connaît également un autre procédé de démoussage qui consiste à retirer la mousse au moyen d'un rotor séparé qui est prévu dans la partie supérieure du réservoir de culture et qui est entraîné en rotation à grande vitesse par un moteur électrique afin d'éliminer la mousse produite pendant la culture (voir par exemple I.H MULLER dans Process Biochem, juin, 37 ( 1972)) et un dispositif de démoussage comportant un réservoir de démoussage combiné à des hélices tour- nant horizontalement qui sont disposées au niveau de la sortie d'évacuation du réservoir (voir le modèle d'utilité japonais publié n' 39-36996) Ces dispositifs présentent encore un inconvénient du fait que les coûts en énergie pour le moteur électrique sont importants lorsque le réservoir de culture est de grandes dimensions et lorsque la quantité de liquide de culture qu'il contient est importante, de sorte que la quantité de liquide de culture est limitée. On connaît encore un autre procédé de démoussage qui a été utilisé jusqu'à présent, selon lequel la mousse produite est amenée en contact avec un cyclone, une chicane ou analogue, disposé à l'extérieur du réservoir de culture si bien que la mousse est détruite et que le liquide de culture dont on a supprimé la mousse est renvoyé dans le réservoir de culture (voir les brevets japonais publiés 39-29800 et 39-26041) Cependant, selon ce procédé, un démoussage complet est impossible de sorte que le liquide de culture qui doit être renvoyé dans le réservoir de culture contient encore une grande quantité de mousse si bien que la rétention de gaz dans le liquide de culture n'est pas diminuée et qu'en définitive la quantité de liquide de culture susceptible d'être introduite dans le réservoir de culture ne peut pas être augmentée Ainsi, ce procédé pose un problème du fait que le rendement est faible pour un procédé de production réel. On connaît encore un autre dispositif de démoussage dans lequel la mousse produite dans un réservoir de culture est détruite par introduction du liquide de culture dans un cyclone prévu à l'extérieur du réservoir, après quoi le liquide démoussé est introduit dans le réservoir de culture par le sommet de celui- ci et est amené en contact à contre-courant avec un gaz introduit par le fond du réservoir, le liquide de culture démoussé étant renvoyé dans le réservoir de culture (voir la demande de brevet japonais mise à la disposition du public N 51142585). Cependant, il est difficile de stériliser ce dispositif de démoussage lorsque l'on met en oeuvre réellement le procédé de production et les conduites du dispositif sont souvent colmatées par les solides contenus dans le liquide de culture Ainsi, ce dispositif pose un problème délicat lorsqu'il s'agit de l'utiliser dans un procédé de production réel. On connaît également un procédé de démoussage qui consiste à faire ruisseler une partie du liquide de culture (voir la demande de brevet japonais mise à la disposition du public n 51-35470) Cependant, ce procédé pose également des problèmes du fait que le dispositif pour sa mise en oeuvre est compliqué, qu'il est susceptible de subir une pollution microbienne et qu'un démoussage total est impossible On connaît également un dispositif de démoussage destiné à fonctionner par déversement (voir la demande de brevet japonais mise à la dispo- sition du public N 55-15639) Ce dispositif est intéressant lorsqu'il est de petite taille Cependant, avec un dispositif de grande taille de ce type, destiné à une pro- duction à grande échelle, il se pose un problème de sécurité et également un pro- blème du fait que l'appareillage est compliqué Ce dispositif n'est donc pas d'uti- lisation commode. Ainsi, les dispositifs et procédés de démoussage et de contrôle de la surface de la mousse connus qui ont été mentionnés ci-dessus ne peuvent pas être appliqués pour une production réelle puisqu'ils ne permettent pas de porter à 60 %, % ou plus de la capacité totale du réservoir de culture la quantité de liquide de culture sans réduire le rendement en les produits recherchés. Pour remédier à ces inconvénients, la présente invention a pour but de proposer un dispositif de culture grâce auquel la quantité de liquide de culture contenue dans le réservoir de culture peut être portée à 60 %, 70 % ou plus de la capacité du réservoir de culture sans aucune influence néfaste sur le rendement en les produits recherchés, et l'opération de culture peut être accomplie de manière satisfaisante à l'aide d'une quantité appropriée d'agent de démoussage sans que se posent des problèmes d'introduction de microbes dans le réservoir de culture. L'invention a également pour but de proposer un procédé de démoussage et de contrôle de la mousse pour retirer la mousse produite au cours de fermentations en culture aérobie. Ces buts sont atteints selon la présente invention grâce à un dispositif et un procédé de culture et de démoussage dans lesquels la mousse produite dans un réservoir de culture est retirée sans aucune influence néfaste sur le rendement en les produits souhaités grâce à un agencement à deux étages comprenant un dispo- sitif séparateur gaz-liquide tel qu'un cyclone ou analogue et un dispositif sépara- teur de gouttelettes disposé en aval du dispositif séparateur gazliquide, tandis qu'un détecteur est prévu à l'intérieur du dispositif séparateur de gouttelettes ou dans la conduite d'entrée de celui-ci ou bien encore dans la conduite de recyclage du liquide de culture démoussé dans le réservoir de culture de sorte que les mousses qui débordent du dispositif séparateur gaz-liquide sont détectées par le détecteur et qu'un agent de démoussage est introduit dans le réservoir de culture en fonction du signal produit par le détecteur si bien que la mousse est empêchée de déborder dans le système d'évacuation. De plus, on a constaté selon l'invention que le fait de prévoir un dispo- sitif de démoussage mécanique pour battre la mousse produite par un rotor entraîé à grande vitesse par un moteur électrique séparé ou pour atomiser la mousse par atomisation centrifuge, dans le dispositif équipé du dispositif séparateur gaz- liquide mentionné ci-dessus, du dispositif séparateur de gouttelettes et du détec- teur de mousse, entre le dispositif séparateur gaz-liquide et le dispositif séparateur de gouttelettes, de manière à augmenter l'effet du dispositif, produit un effet sen- siblement identique ou supérieur à l'effet mentionné ci-dessus. Ainsi, la présente invention concerne un dispositif de culture pour la production de substances par fermentation en culture aérobie, dans lequel un dispositif séparateur gaz-liquide est disposé à la sortie d'évacuation du dispositif, un dispositif séparateur de gouttelettes est disposé à la sortie des gaz du dispositif séparateur gaz-liquide et un détecteur de mousse est prévu dans la conduite d'entrée, dans la conduite de recirculation et/ou à l'intérieur du dispositif séparateur de gouttelettes La présente invention concerne également un dispositif de culture dans lequel un dispositif de démoussage pour battre la mousse par rotation d'un corps rotatif à grande vitesse au moyen d'un moteur électrique séparé ou pour atomiser la mousse par atomisation centrifuge est prévu entre le dispositif sépara- teur gaz-liquide et le dispositif séparateur de gouttelettes. En outre, la présente invention concerne également un procédé de démoussage et de contrôle de la mousse dans la production de substances par fermentation en culture aérobie, dans lequel un dispositif séparateur gaz-liquide est disposé au niveau de la sortie d'évacuation d'un dispositif de culture pour la mise en oeuvre du procédé, un dispositif séparateur de gouttelettes est disposé au niveau de la sortie des gaz du dispositif séparateur gaz-liquide et un détecteur de mousse est prévu dans la conduite d'entrée, dans la conduite de recirculation et/ou à l'intérieur du dispositif séparateur de gouttelettes. Comme culture aérobie à laquelle la présente invention s'applique on peut citer par exemple la fermentation des acides aminés, des nucléosides et analogues, ces exemples n'étant pas limitatifs Les acides aminés sont par exemple l'acide glutamique, la lysine ou l'arginine La guanosine est un exemple de nucléo- side Le procédé de culture peut être un procédé discontinu, un procédé à addition de débit ou un procédé continu Les conditions appliquées peuvent être les conditions des procédés de culture conventionnels. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront mieux dans la description détaillée qui suit et se réfère aux dessins annexés, donnés uniquement à titre d'exemple, et dans lesquels: la figure 1 représente un dispositif séparateur gaz-liquide et un dispo- sitif séparateur de gouttelettes, la figure 2 représente un appareil de fermentation selon la présente invention, la figure 3 représente un autre appareil de fermentation selon la pré- sente invention, et la figure 4 représente un appareil de fermentation connu, utilisé dans les exemples comparatifs ci-dessous. Le dispositif séparateur gaz-liquide et le dispositif séparateur de gout- telettes qui peuvent être utilisés selon la présente invention peuvent être des cyclones tels que celui représenté sur la figure 1 et dont les dimensions sont les suivantes: b = D/5 h = D/2 dl = 2 D/5 d 2 = 8 D/25 L=D H= 2 D AC = 3 D/5 avec: D = diamètre du cyclone dl = diamètre de la conduite de sortie des gaz du cyclone b = largeur de la conduite rectangulaire d'entrée du cyclone h = hauteur de la conduite rectangulaire d'entrée du cyclone d 2 = diamètre de la conduite de sortie des liquides du cyclone L = longueur de la chambre cylindrique du cyclone H = longueur de la chambre conique du cyclone AC = longueur de la conduite de trop plein. Deux ou plus de deux dispositifs séparateurs gaz-liquide disposés en série peuvent être utilisés pour obtenir le même effet. Le dispositif séparateur de gouttelettes peut être également un appareil de Bergius-M ller de type à projection Comme détecteur on peut utiliser un débitmètre à ultrasons, un détecteur d'écoulement volumique électrostatique, un débitmètre électromagnétique, un détecteur d'écoulement optique, un détecteur d'écoulement à diffusion de chaleur et un détecteur de type électrode Parmi ceux- ci, on préfère un détecteur d'écoulement optique et un détecteur d'écoulement à diffusion de chaleur. Comme mode de réalisation du dispositif mécanique de démoussage capable de battre la mousse par rotation d'un corps rotatif à grande vitesse au moyen d'un moteur électrique séparé ou de détruire la mousse par atomisation centrifuge, on peut citer le dispositif FOAMJET de la société allemande EKATO. Les figures 2 et 3 montrent deux variantes de dispositifs de culture pour la production de substances par fermentation en culture aérobie selon la pré- sente invention, dans lesquels la mousse formée est contrôlée. La figure 2 est une vue en coupe longitudinale du dispositif de culture utilisé dans l'exemple 1 présenté ci-dessous Un réservoir de culture 1 est rempli d'un liquide de culture 22 par la conduite 21 et une conduite d'introduction d'air 2 est prévue au fond du réservoir 1 Une conduite d'évacuation 4, qui est destinée à retirer du réservoir de culture 1 la mousse 3 qui s'y forme, est disposée au sommet du réservoir 1 La conduite d'évacuation 4 est reliée à un cyclone 5 relié lui-même au réservoir de culture par une conduite de recirculation de liquide 11 La conduite d'évacuation 10 du cyclone 5 est reliée à un cyclone 7 qui est relié au résevoir de culture par une conduite de recirculation 12 La conduite de recirculation 11 et la conduite de recirculation 12 peuvent bien entendu être reliées entre elles Le signe de référence 6 désigne une conduite d'évacuation, le signe de référence 8 désigne une pale d'agitation et le signe de référence 9 désigne un moteur d'agitation Le dispositif comporte également un détecteur de mousse 13, une conduite d'introduction d'agent de démoussage 14, un dispositif de commande d'addition d'agent de démoussage 15 et une vanne d'addition d'agent de démoussage 16 Le détecteur de mousse 13 peut être disposé dans la conduite d'évacuation 10 et/ou dans la conduite de recirculation 12. L'air injecté par le fond du réservoir de culture 1 et la mousse 3 produite par l'action des pales d'agitation sont prélevés par la conduite d'évacuation 4 prévue au sommet du réservoir et sont introduits dans le cyclone 5 dans lequel la mousse est détruite et le liquide démoussé est renvoyé dans le réservoir de culture. Cependant, lorsque la production de mousse est trop importante, la mousse déborde par la conduite d'évacuation 10 du cyclone 5 Lorsque le détecteur de mousse 13 prévu dans la conduite d'évacuation 10 et/ou dans la conduite de recir- culation 12 détecte la mousse, un agent de démoussage est ajouté Lorsque le détecteur de mousse ne détecte pas de mousse, l'addition de l'agent de démoussage est interrompue Ces opérations sont répétées jusqu'à la fin du processus de culture. La figure 3 représente un dispositif de culture dans lequel il est prévu un dispositif mécanique de démoussage entre le dispositif séparateur gazliquide et le dispositif séparateur de gouttelettes. Concrètement, un réservoir de petite taille 17 équipé d'un dispositif mécanique de démoussage est relié à la conduite d'évacuation 10 du cyclone 5, et ce réservoir de petite taille 17 et le réservoir de culture sont reliés entre eux par une conduite de recirculation 18 La conduite d'évacuation 19 du réservoir de petite taille 17 est reliée à un cyclone 7 qui est lui-même relié au réservoir de culture par les conduites de recirculation 12 et 18 Les conduites de recirculation 11, 12 et 18 peuvent être reliées entre elles Un détecteur de mousse 13 peut être prévu dans la conduite d'évacuation 19, dans la conduite de recirculation 12 ou dans ces deux conduites Le signe de référence 20 désigne un dispositif mécanique de démousssage. Le dispositif de culture de la figure 3 diffère du dispositif de culture de la figure 2 par le fait que la mousse qui déborde du cyclone 5 est détruite par le dispositif mécanique de démoussage et que le liquide démoussé est renvoyé dans le réservoir de culture Lorsque la mousse qui déborde du réservoir de petite taille est détectée par le détecteur de mousse un agent de démoussage est ajouté Lorsque le détecteur de mousse ne détecte pas de mousse, l'addition de l'agent de démoussage est interrompue Ces opérations sont répétées jusqu'à la fin du processus de culture. Du fait que le dispositif de culture selon la présente invention permet de contrôler la formation de mousse, l'utilisation de pales de démoussage n'est pas nécessaire si bien qu'un supplément d'énergie pour entraîner les pales est superflu. De plus, il ne se pose pas de problème de contamination du système de culture par des micro-organismes et le processus de culture peut se dérouler sans addition d'un excès d'agent de démoussage Dans le dispositif selon la figure 2, la quantité de liquide de culture peut être portée à une valeur de 73 à 80 % de la capacité totale du réservoir de culture Dans le dispositif selon la figure 3, de manière surprenante la quantité de liquide de culture peut être portée à une valeur de 76 à 86 % de la capacité totale du réservoir de culture, bien que ceci s'accompagne d'une légère augmentation des coûts en énergie. La présente invention va maintenant être illustrée de manière plus détaillée à l'aide des exemples non limitatifs suivants. Exemple 1 Au moyen du dispositif de culture de la figure 2 (capacité totale du réservoir de culture 300 000 1, vitesse du courant d'air à l'entrée du cyclone du dis- positif: 15 à 30 m/s) on a réalisé une production d'acide glutamique par fermen- tation à l'aide de bactéries productrices d'acide glutamique Brevibacterium lactofermentum ATCC (American Type Culture Collection) 13869 Pour ce faire, les additifs présentés dans le tableau 1 ci- dessous ont été ajoutés à 140 000 1 de mélasse ayant une concentration en sucre de 80 g/l pour préparer un milieu Dans celui-ci ont été introduits environ 10 000 1 de Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 cultivées au préalable et qui ont ensuite été cultivées dans ce milieu à 31,5 C sous agitation en présence d'air, tandis que le p H du milieu était maintenu à 7,5 par introduction d'ammoniac gazeux Lorsque la concentration en sucre du milieu est devenue inférieure à 3 % au cours de la culture, une mélasse ayant une concentration en sucre de 300 g/l a été ajoutée peu à peu au milieu de manière à ajuster la concentration en sucre entre 2 et 4 % au cours de la culture Lorsque la quantité de cellules cultivées a atteint une valeur déterminée au cours de la culture, le tensioactif Tween 60 a été ajouté au milieu en une quantité de 0,6 % par rapport au milieu L'agent démoussant utilisé était un composé du polypropylène- glycol. Tableau 1 Additif Quantité Phosphate de potassium 3 g/l Urée 4 g/l Sulfate de magnésium heptahydraté 0,5 g/l Sulfate ferreux heptahydraté 20 mg/l Sulfate de manganèse tétrahydraté 20 mg/I Chlorhydrate de thiamine 200 /ug/l Hydrolysat de protéines de soja (teneur 5 ml/i totale en azote: 40 g/l) Biotine 30 /ug/l Cinq heures après le début de la culture il est apparu une mousse importante qui est passée temporairement dans le cyclone du dispositif séparateur gaz-liquide et la mousse non totalement détruite dans le cyclone a débordé et a été détectée par le détecteur de mousse En conséquence, l'agent de démoussage a été introduit dans le réservoir ce qui a permis de contrôler temporairement la mousse. Environ 15 h après le début de la culture une mousse abondante est apparue de nouveau et cette mousse a débordé temporairement dans le cyclone par la sortie d'évacuation du réservoir de culture La mousse qui n'a pas été détruite dans le cyclone du dispositif séparateur gaz-liquide a débordé dans le cyclone du dispo- sitif séparateur de gouttelettes après quoi le détecteur de mousse a détecté instan- tanément la mousse et a entraîné une introduction d'agents de démoussage dans le réservoir La mousse a été contrôlée par cette addition d'agent de démoussage puis a atteint de nouveau le cyclone du dispositif séparateur de gouttelettes ce qui a entraîné une addition supplémentaire d'agent de démoussage Au bout de 26 h de culture, le contrôle du niveau de mousse devenant difficile, l'addition de sucre a été interrompue et le processus de culture a été arrêté La quantité finale de liquide de culture a atteint 240 0001 et l'on a obtenu 86 g/Il d'acide glutamique. Il ressort du processus mis en oeuvre de la manière décrite ci-dessus que le dispositif de culture peut fonctionner sans débordement du liquide de culture depuis la sortie d'évacuation du cyclone du dispositif séparateur de goutte- lettes même lorsque la quantité de liquide de culture atteint finalement 73 à 80 % de la capacité du réservoir de culture. Exemple 2 On a réalisé de même une culture de Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 dans le dispositif de culture de la figure 3 pour produire de l'acide glutamique Les additifs présentés dans le tableau 1 ci-dessus ont été ajoutés à 1400001 de mélasse ayant une concentration en sucre de 80 g/l pour préparer un milieu Dans ce celui-ci ont été introduits environ 10 0001 de Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 cultivées au préalable qui ont ensuite été cultivées dans ce milieu à 31,5 C sous agitation en présence d'air tandis que le p H du milieu était maintenu à 7,5 par introduction d'ammoniac gazeux Lorsque la concentration en sucre du milieu est devenue inférieure à 3 % au cours de la culture, une mélasse ayant une concentration en sucre de 300 g/l a été ajoutée peu à peu de manière à amener la concentration en sucre à une valeur de 2 à 4 % au cours de la culture. Lorsque la quantité de cellules cultivées a atteint une valeur déterminée au cours de la culture, le tensioactif Tween 600 a été ajouté au milieu en une quantité de 0,6 % par rapport au milieu Un composé du polypropylèneglycol a été utilisé comme agent de démoussage. Cinq heures après le début de la culture il est apparu une mousse abon- dante qui est passée temporairement dans le cyclone du dispositif séparateur gaz- liquide, et la mousse qui n'a pas été totalement détruite dans le cyclone a débordé et a été détruite par le dispositif mécanique de démoussage prévu entre le cyclone du dispositif séparateur gaz-liquide et le cyclone du dispositif séparateur de gout- telettes si bien que le niveau de mousse a été contrôlé temporairement Environ h après le début de la culture, il est apparu de nouveau une mousse importante qui a débordé dans le cyclone du dispositif séparateur gaz-liquide par la sortie d'évacuation du réservoir de culture La mousse non entièrement détruite par le dispositif mécanique de démoussage est passée dans le cyclone du dispositif séparateur de gouttelettes et a été détectée instantanément par le détecteur de mousse ce qui a entraîné l'introduction automatique de l'agent de démoussage dans le réservoir La mousse ainsi contrôlée par addition de l'agent de démoussage s'est développée de nouveau au bout d'un certain temps et a pénétré dans le cyclone du dispositif séparateur de gouttelettes ce qui a entraîné une nouvelle addition d'agent de démoussage Au bout de 27 h de culture, le contrôle du niveau de mousse devenant difficile, l'addition de sucre a été interrompue et le processus de culture a été arrêté La quantité finale de liquide de culture a atteint 258 000 l et l'on a obtenu 90 g/I d'acide glutamique. Exemple comparatif 1 On a utilisé le dispositif de culture représenté sur la figure 4 dans lequel des pales de démoussage 23 de grande taille sont prévues au sommet de la tige d'agitation du réservoir de fermentation 1 Ce dispositif est équipé d'un détec- teur 13 de type à électrode situé au sommet du réservoir de fermentation de sorte i 1 que lorsque le détecteur détecte de la mousse un agent de démoussage est introduit dans le réservoir Au moyen de ce dispositif on a réalisé une culture de Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 dans les mêmes conditions de culture que celles de l'exemple 1 et en utilisant une mélasse ayant la même con- centration en sucre que celle utilisée dans l'exemple 1 Quatorze heures après le début de la culture le dispositif fonctionnait de telle manière que l'agent de démoussage était introduit de temps à autre dans le réservoir Ensuite, la fréquence d'addition de l'agent de démoussage a augmenté Enfin la quantité de liquide de culture au bout de 24 h de culture a augmenté dans des proportions telles que l'énergie nécessaire pour l'agitation a sensiblement triplé et qu'il s'est formé une mousse abondante De ce fait, le fonctionnement du dispositif est devenu impos- sible La quantité finale de liquide de culture était de 210 000 1 et l'on a obtenu 78 g/l d'acide glutamique. Les résultats obtenus dans les exemples 1 et 2 et dans l'exemple com- paratif 1 sont regroupés dans le tableau 2 ci-dessous. Tableau 2 Eléments de comparaison Exemple Exemple 1 Exemple 2 comparatif 1 Quantité finale de liquide de culture 210 240 258 ( 1031) (Quantité finale de liquide de 70 80 86 culture)/(capacité totale du réservoir de culture) (%o) Concentration de l'acide L 78 86 90 glutamique formé (g/l) Energie consommée (celle de 1 0,6 0,8 l'exemple comparatif 1étant égale à 1) Quantité d'agent de démoussage 1 1,1 0,9 utilisée (celle de l'exemple compa- ratif 1 étant égale à 1) Durée de culture (h) 28 29 30 Rendement (%o) 50,8 50,0 49,8 Exemple 3 On a réalisé une culture de Brevibacterium lactofermentum FERM BP-1071 dans le dispositif de culture de la figure 2 pour la production de L- phénylalanine Les additifs montrés dans le tableau 3 ci-dessous ont été ajoutés à 140 0001 de mélasse ayant une concentration en sucre de 150 g/l pour préparer un milieu Dans celui-ci ont été introduits environ 10 000 1 de Brevibacterium lactofermentum FERM BP-1071 préalablement cultivées qui ont ensuite été cultivées dans ce milieu à 30,0 C sous agitation en présence d'air tandis que le p H du milieu était maintenu à 7,5 par addition d'ammoniac gazeux Lorsque la con- centration en sucre du milieu est devenue inférieure à 3 % au cours de la culture, une mélasse ayant une concentration en sucre de 450 g/1 a été ajoutée peu à peu de manière à régler la concentration en sucre à une valeur de 2 à 4 % au cours de la culture L'agent de démoussage utilisé était un composé siliconé. Tableau 3 Additif Quantité Acide phosphorique 1 g/1 Sulfate de magnésium heptahydraté 0,5 g/l Sulfate de manganèse tétrahydraté 10 mg/l Hydrolysat de protéines de soja (teneur totale en 5 ml/1 azote: 40 g/l) Biotine 50 4 ug/I Chlorhydrate de thiamine 2 mg/l Tyrosine 1 g/l Hydroxyde de potassium 0,7 g/I DL-méthionine 1 g/1 Exemple 4 On a réalisé une culture de Brevibacterium lactofermentum FERM BP-1071 dans le dispositif de culture de la figure 3 pour produire de la L- phénylalanine Les additifs présentés dans le tableau 3 ci-dessus ont été ajoutés à 0001 de mélasse ayant une concentration en sucre de 150 g/l pour préparer un milieu Dans celui-ci ont été introduits environ 10 0001 de Brevibacterium lactofermentum FERM BP-1071 cultivées au préalable qui ont ensuite été cultivées dans ce milieu à 30 C sous agitation en présence d'air tandis que le p H du milieu était maintenu à 7,5 par addition d'ammoniac gazeux Lorsque la concen- tration en sucre du milieu est devenue inférieure à 3 % au cours de la culture, une mélasse ayant une concentration en sucre de 450 g/l a été ajoutée peu à peu de manière à régler la concentration en sucre à une valeur de 2 à 4 % au cours de la culture L'agent de démoussage utilisé était un composé siliconé. Exemple comparatif 2 On a utilisé le dispositif de culture représenté sur la figure 4 comme pour l'exemple comparatif 1 Dans ce dispositif on a cultivé Brevibacterium lactofermentum FERM BP-1071 dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 3 On a utilisé une mélasse ayant la même concentration que celle de l'exemple 3. L'agent de démoussage utilisé était un composé silicone. Les résultats obtenus dans les exemples 3 et 4 et dans l'exemple com- paratif 2 sont regroupés dans le tableau 4 ci-dessous. Tableau 4 Eléments de comparaison Exemple Exemple 3 Exemple 4 comparatif 2 Quantité finale de liquide de culture 207 220 228 ( 103 1) (Quantité finale de liquide de 69 73 76 culture)/(capacité totale du réservoir de culture) (%) Energie consommée (celle de 1,0 0,6 0,9 l'exemple comparatif 2 étant égale à 1) Quantité d'agent de démoussage 1, 0 1,2 1,1 utilisée (celle de l'exemple compa- ratif 2 étant égale à 1) Durée de culture (h) 13,0 12,5 12,3 Rendement (%) 13,0 12,5 12,3 REVENDICATIONS 1 Dispositif de culture pour la production de substances par fermen- tation en culture aérobie, caractérisé en ce qu'un dispositif séparateur gaz-liquide ( 5) est prévu à la sortie d'évacuation ( 4) du dispositif de culture ( 1), un dispositif séparateur de gouttelettes ( 7) est prévu à la sortie des gaz ( 10) du dispositif séparateur gaz- liquide et un détecteur de mousse ( 13) est prévu dans la conduite d'entrée, dans la conduite de recirculation ( 12) et/ou à l'intérieur du dispositif séparateur de gouttelettes ( 7). 2 Dispositif de culture selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'un dispositif de démoussage ( 17) destiné à battre la mousse par rotation à grande vitesse d'un corps rotatif au moyen d'un moteur électrique séparé ou à détruire la mousse par atomisation centrifuge est prévu entre le dispositif séparateur gaz- liquide ( 5) et le dispositif séparateur de gouttelettes ( 7). 3 Procédé de démoussage et de contrôle de la mousse pour la pro- duction de substances par fermentation en culture aéorobie, caractérisé en ce qu'un dispositif séparateur gaz-liquide ( 5) est prévu à la sortie d'évacuation ( 4) d'un dis- positif de culture ( 1) pour la mise en oeuvre du procédé, un dispositif séparateur de gouttelettes ( 7) est prévu à la sortie des gaz ( 10) du dispositif séparateur gaz- liquide ( 5) et un détecteur de mousse ( 13) est prévu dans la conduite d'entrée, dans la conduite de recirculation ( 12) et/ou à l'intérieur du dispositif séparateur de gouttelettes ( 7).