Brevet FR2677646A1 — publié le 19921218

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de 1,5-diyne-3- cycloalcène, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. Les esperamicines et les calicheamicines appartiennent à deux familles d'antibiotiques naturels possédant des propriétés antitumorales nettement plus puissantes que celle des composés anticancéreux connus comme décrit par B LONG et coll (Proc Natl Acad Sci, 86, 2-6, 1989). Les propriétés antitumorales de ces deux séries de composés sont dues à la présence d'un noyau 1,5-diyne-3-cycloalcène commun à ces deux familles (Nature, 389, 566-567, 1991). La présente invention a pour objet des dérivés de 1,5-diyne-3- cycloalcène qui outre le fait qu'ils soient nouveaux présentent des propriétés antitumorales particulièrement intenses. L'invention concerne plus particulièrement de nouveaux dérivés de 1,5-diyne-3-cycloalcène répondant à la formule générale (I): (c H 2)n O R 1/ ( 1) dans laquelle: R représente un atome d'hydrogène ou un groupement acyl (C 1-C 6) linéaire ou ramifié, N est égal à 1 ou 2, leurs isomères et énantiomères. L'invention s'étend aussi au procédé de préparation des composés de formule (I) caractérisé en ce que l'on fait réagir, en milieu anhydre, 1 sous atmosphère inerte, le (Z)-1,2-dichloroéthylène avec un alcool de formule (II): (CH 2)n/AOH (II) dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), en présence d'un catalyseur palladié préparé à partir de tétrakis (triphénylphosphine) palladium, de n-propylamine et d'iodure de cuivre, selon les techniques décrites par K SONOGASHIRA et coll (Tetrahedron lett 4467-4470, 1975) et D GUILLERM (Tetrahedron lett, 26, 3811-3812, 1985), pour conduire au composé de formule (III) Cl \ A (c H 2)n/A\ OH dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), qui est couplé, comme précédemment, en présence de tétrakis (triphénylphosphine) palladium, de n-propylamine et d'iodure de cuivre, avec du triméthylsilylacétylène, en milieu anhydre, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (IV): Si(CH 3)3 if C 2 no (IV) (CH 2)n //\OH dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), que l'on soumet à une désilylation en milieu basique anhydre, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (V): -2- -3 2677646 t I (y(V) (CH 2)n/AOH dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), sur lequel on fait réagir de l'iode en milieu organique anhydre en présence de morpholine, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (VI): I It (VI) (CH 2)n A/OH dans laquelle N à la même signification que dans la formule (I), que l'on soumet à une oxydation en présence de chlorochromate de pyridinium en milieu organique anhydre, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (VII): I IW (VII) (CH 2)n /A dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), que l'on cyclise à l'aide d'un mélange de chlorure de chrome contenant 1,3 % de chlorure de nickel en suspension dans du tétrahydrofurane anhydre, à température ambiante, sous atmosphère inerte, selon les techniques décrites par K TAKAI et coll (Tetrahedron lett, 26, 5585- 5588, 1985) et T D AICHER (Tetrahedron lett, 28, 3463-3466, 1987), pour conduire au composé de formule (I/a), cas particulier des composés de formule (I): (CH 2)n OH Jl W(I/a) dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), qui est transformé, si on le désire, en ester correspondant, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (I/b), cas particulier des composés de formule (I), (CH 2)n O R' %/1 (I/b) dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I) et R' représente un groupement acyl (Cl-C 6) linéaire ou ramifié, composés de formule (I/a) et (I/b) que l'on purifie, le cas échéant, selon une technique classique de préparation et dont on sépare les isomères, si on le souhaite, selon une technique classique de séparation. Les composés de l'invention possèdent des propriétés pharmacologiques très intéressantes Ils inhibent la prolifération des cellules L 1210 (leucémie murine) en culture, ce qui est prédictif d'une bonne activité antitumorale chez l'animal et aussi chez l'homme. La présente invention a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un composé de formule générale (I) ou un de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques. -4 - Parmi les compositions pharmaceutiques selon l'invention, on pourra citer plus particulièrement celles qui conviennent pour l'administration orale, parentérale, nasale, les comprimés simples ou dragéifiés, les comprimés sublinguaux, les sachets, les paquets, les gélules, les glossettes, les tablettes, les suppositoires, crèmes, pommades, gels dermiques, les aérosols. La posologie varie selon l'âge et le poids du patient, la nature et la sévérité de l'affection ainsi que la voie d'administration Celle-ci peut être orale, nasale, rectale ou parentérale D'une manière générale, elle s'échelonne entre 0,2 et 200 mg pour un traitement en une ou plusieurs prises par 24 heures. Les exemples suivants illustrent l'invention et ne la limitent en aucune façon. EXEMPLE 1: 1,5-Diyne-( 3 Z)-cyclodécène-7-ol Stade A: 8Chloro-5-yne-7-octène-1-ol A une solution de 85 mg ( 0,074 mmole) de tétrakis (triphénylphosphine) palladium dans 8 ml de benzène anhydre sont successivement ajoutés 650 pli ( 7,01 mmoles) de n-propylamine, 480 Il ( 4,26 mmoles) de 5-hexyne-1-ol, 420 pl ( 5,40 mmoles) de cisdichloroéthylène et 35 mg ( 0,184 mmole) d'iodure de cuivre. Le mélange réactionnel est chauffé pendant 100 minutes à 400 C sous atmosphère inerte puis concentré et repris par de l'éther diéthylique La phase organique est lavée avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séchée puis évaporée Le produit attendu est obtenu sous forme d'un liquide incolore après purification par chromatographie sur silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange dichlorométhane/acétone ( 40/1). Rendement: 78 % Spectre de masse: ionisation chimique (NH 3) M + NH 4 +: m/z = 176 -5- Stade B: 10-Triméthylsilyl-5,9-diyne-7-décène- 1-ol 516 mg ( 3,25 mmoles) du composé obtenu au stade A dans 7 ml de benzène anhydre sont traités par 500 pl ( 6,08 mmoles) de n-propylamine, 70 mg ( 0,061 mmole) de tétrakis (triphénylphosphine) palladium, 32 mg ( 0,168 mmole) d'iodure de cuivre et 650 pi ( 4,51 mmoles) de triméthyl- silylacétylène Le milieu réactionnel est agité 100 minutes, à température ambiante, sous atmosphère inerte, puis concentré et repris par de l'éther diéthylique La phase organique est lavée par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium puis par de l'eau, séchée et évaporée Le produit O 10 attendu est obtenu, sous forme d'huile, après purification par chromatographie liquide sur silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange dichlorométhane/acétone/triéthylamine ( 40/1/0,04). Rendement: 82 % Stade C: 5,9-Diyne-7-décène-1-ol 1,12 g ( 5, 08 mmoles) du composé obtenu au stade B en solution dans ml de méthanol anhydre sont traités par 770 mg ( 5,57 mmoles) de carbonate de potassium à température ambiante, sous atmosphère inerte, pendant 15 minutes Le milieu réactionnel est alors concentré, repris par du dichlorométhane et lavé à l'eau La phase organique est alors séchée et évaporée Le produit attendu est obtenu, sous forme d'huile incolore, après purification par chromatographie liquide sur silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange dichlorométhane/acétone ( 20/1). Rendement: 90 % Spectre de masse: ionisation chimique (NH 3) M + NH 4 +: m/z = 166 Stade D: 10-Iodo-5,9-diyne-7-décène-1-ol A une solution contenant 2,42 g ( 9,53 mmoles) d'iode dans 20 ml de benzène anhydre chauffée à 45 C sont ajoutés 2,49 ml ( 28,55 mmoles) de -6- morpholine Après 20 minutes d'agitation à 45 C, sous atmosphère inerte, 675 mg ( 4,55 mmoles) du composé obtenu au stade C, en solution dans 5 ml de benzène anhydre, sont ajoutés Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation 3 heures à 45 C, concentré, repris par de l'éther diéthylique, et lavé successivement avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, une solution aqueuse à 20 % de dihydrogénophosphate de sodium, une solution aqueuse à 20 % de thiosulfate de sodium, une solution aqueuse à % de bicarbonate de sodium puis à l'eau La phase organique est alors lavée et évaporée Le produit attendu est alors obtenu, sous forme d'huile, après purification par chromatographie sur silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange hexane/éther diéthylique ( 1/1). Rendement: 80 % Spectre de masse: Ionisation chimique (NH 3) M + NH 4 +: m/z = 292 Stade E: 10-Iodo-5,9-diyne-7-décène-1-al 250 mg ( 1,16 mmole) de chlorochromate de pyridinium, 2 ml de dichlorométhane sont agités dans du tamis moléculaire ( 4 A) activé en poudre pendant 20 minutes, à température ambiante, sous atmosphère inerte. 94 mg ( 0,343 mmole) du composé obtenu au stade D en solution dans 3 ml de dichlorométhane anhydre sont ajoutés au mélange précédent L'ensemble est maintenu sous agitation 30 minutes, à température ambiante puis 20 ml d'éther diéthylique sont ajoutés Le milieu réactionnel est alors filtré puis concentré Le produit attendu est obtenu après purification par chromatographie sur silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange hexane/éther diéthylique ( 1/1). Rendement: 83 % Spectre de masse: Ionisation chimique (NH 3) M + NH 4 +: m/z = 290 Stade F: 1,5-Diyne-3-cyclodécène-7-ol 181 mg ( 1,47 mmole) de chlorure de chrome contenant 1,3 % de chlorure de nickel en suspension dans 20 ml de tétrahydrofurane sont agités 20 minutes, à température ambiante, sous atmosphère inerte 78 mg -7- -8 2677646 ( 0,29 mmole) du composé obtenu au stade E en solution dans 9 ml de tétrahydrofurane sont ajoutés très lentement au milieu précédent Après l'addition qui dure environ 2 heures 40 minutes, le milieu réactionnel est concentré et repris par de l'acétate d'éthyle La phase organique est lavée par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séchée puis évaporée Le produit attendu est obtenu sous forme d'huile après purification par chromatographie liquide sur silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange hexane/acétate d'éthyle/triéthylamine ( 75/25/0,1). Rendement: 34 % Spectre de masse: Ionisation chimique (NH 3) M + NH 4 +: m/z = 164 EXEMPLE 2: 7-Acétoxy-1,5-diyne-3-cyclodécène 14,6 mg ( 0,1 mmole) du composé obtenu dans l'exemple 1 sont traités par 1 ml de pyridine et 0,5 ml d'anhydride acétique pendant 45 minutes, à température ambiante, sous atmosphère inerte Le milieu réactionnel est dilué à l'éther diéthylique, lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse à 50 % d'hydrogénosulfate de potassium, une solution aqueuse à 50 % de bicarbonate de sodium puis avec de l'eau La phase organique est séchée puis évaporée Le produit attendu est obtenu sous forme d'huile après purification par chromatographie liquide sur silice en utilisant comme solvant d'élution un mélange hexane/acétate d'éthyle/triéthylamine ( 83/17/0,1). Rendement: 59 % Spectre de masse: impact électronique M: m/z = 188 EXEMPLE 3: 1,5-Diyne-3-cycloundécène-7-ol Le produit attendu est obtenu en procédant comme dans l'exemple 1 mais en utilisant au stade A le 6-heptyne-1-ol à la place du 5-hexyne-1- ol. -9 2677646 Rendement (stade F): 76 % Spectre de masse: Ionisation chimique (NH 3) M + NH 4 +: m/z = 178 EXEMPLE 4: 7-Acétoxy-1,5-diyne-3-cycloundécène Le produit attendu est obtenu en procédant comme dans l'exemple 2 mais en remplaçant le composé de l'exemple 1 par le composé de l'exemple 3. Rendement: 90 % Spectre de masse: impact électronique M: m/z = 202 ETUDE PHARMACOLOGIQUE DES DERIVES DE L'INVENTION EXEMPLE 5: Cytotoxicité in vitro Les cellules L 1210 (Leucémie murine) sont cultivées dans du RPMI 1640 complémenté avec 10 % de sérum de veau foetal, 2 m M de L-glutamine, unités/ml de pénicilline, 100 pg/ml de streptomycine et 10 m M d'Hepes (p H: 7,4) L'inhibition de la croissance cellulaire est mesurée selon le "Microculture Tetrazolium Assay" décrit par M ALLEY et coll (Cancer Res, 48, 589-601, 1988). Les résultats de ce test sont exprimés en IC 50 so,concentration inhibant à 50 % la croissance cellulaire Le produit de référence utilisé est le BCNU, agent alkylant très actif utilisé en clinique. Lors de ce test, l'IC 50 du composé de l'exemple 2 est égale à 5,6 p M alors que celle du BCNU est égale à 6,4 p M. -10 2677646 COMPOSITION PHARMACEUTIQUE EXEMPLE 6: Comprimé: formule de préparation pour 1000 comprimés dosés à 2 mg Composé de l'exemple 2 2 g Hydroxypropylcellulose 2 g Amidonde blé 10 g Lactose 100 g Stéarate de magnésium 3 g Talc 3 g 11 2677646 REVENDICATIONS 1/ Composés de formule (I): (CH 2)n Q R (I) dans laquelle: R représente un atome d'hydrogène ou un groupement acyl (C 1-C 6) linéaire ou ramifié, n est égal à 1 ou 2, leurs isomères et énantiomères. 2/ Composés de formule (I) selon la revendication 1 dans laquelle N est égal à 1. 3/ Composé de formule (I) selon la revendication 1 qui est le 7-acétoxy- 1,5-diyne-3-cyclodécène ainsi que ses énantiomères. 4/ Procédé de préparation des composés de formule (I) selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'on fait réagir, en milieu anhydre, sous atmosphère inerte, le (Z)-1,2-dichloroéthylène avec un alcool de formule (II): -=A(CH 2)n AOH (I) dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), en présence d'un catalyseur palladié préparé à partir de tétrakis (triphénylphosphine) palladium, de n-propylamine et d'iodure de cuivre, pour conduire au composé de formule (III): -12 2677646 Cl ó (III) (CH 2)n /A OH dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), qui est couplé, comme précédemment, en présence de tétrakis (triphénylphosphine) palladium, de n-propylamine et d'iodure de cuivre, avec du triméthylsilylacétylène, en milieu anhydre, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (IV): Si(CH 3)3 ló (IV) A (CH 2)n/\AOH dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), que l'on soumet à une désilylation en milieu basique anhydre, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (V): (V) A (CH 2)n /\OH dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), sur lequel on fait réagir de l'iode en milieu organique anhydre en présence de morpholine, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (VI): -13- I (CH 2)n /\OH (VI) dans laquelle N à la même signification que dans la formule (I), que l'on soumet à une oxydation en présence de chlorochromate de pyridinium en milieu organique anhydre, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (VII): I (VII) (CH 2)n /\\o dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I), que l'on cyclise à l'aide d'un mélange de chlorure de chrome contenant 1,3 % de chlorure de nickel en suspension dans du tétrahydrofurane anhydre, à température ambiante, sous atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (I/a), cas particulier des composés de formule (I): (CH 2) N OH dans laquelle N a la même signification que qui est transformé, si on le désire, atmosphère inerte, pour conduire au composé de formule (I/b), formule (I), (I/a) dans la formule (I), en ester correspondant, sous cas particulier des composés de -14 2677646 (CH 2)n N R' (I/b) dans laquelle N a la même signification que dans la formule (I) et R' représente un groupement acyl (Cl-C 6) linéaire ou ramifié, composés de formule (I/a) et (I/b) que l'on purifie, le cas échéant, selon une technique classique de préparation et dont on sépare les isomères, si on le souhaite, selon une technique classique de séparation. / Compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, seul ou en combinaison avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes, non toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 6/ Compositions pharmaceutiques selon la revendication 5 contenant au moins un principe actif selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 utiles dans le traitement du cancer.