Brevet FR2681249A1 — publié le 19930319

NOUVELLES COMPOSITIONS PHAMARCEUTIQUES IMMUNO-STIMULANTES ET LEUR PROCEDE D'OBTENTION La présente invention se rapporte à un nouvel emploi thérapeutique des dérivés de l'acide N-méthylpyrrolyl 2-carboxylique et aux compositions pharmaceutiques destinées à ce nouvel emploi. Elle a plus particulièrement pour objet l'utilisation de dérivés de l'acide N-méthylpyrrolyl 2-carboxylique comme agent de potentialisation d'immunomodulateurs ou d'immunoadjuvants. L'invention a spécifiquement pour objet de nouvelles compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles renferment à titre de principes actifs au moins un immunomodulateur ou un immunoadjuvant et un dérivé de l'acide (4-aroyl pyrrolyl-2) carboxylique de formule générale I dans laquelle Ar est choisi dans le groupe constitué par un radical phényle, halogénophényle, naphtyl-1 et naphtyl-2 et R est de l'hydrogène ou le cation monovalent d'une base minérale ou organique pharmaceutiquement acceptable en association ou en mélange avec un excipient ou un véhicule inerte, non toxique, pharmaceutiquement acceptable. On utilise les termes "immuno modulateur" ou "immuno adjuvant" pour désigner des composés qui ont dans une certaine gamme de posologie une action stimulante sur le système itnmunitaire. Cette action se manifeste en général à des doses variables selon les substances et les tests utilisés. Cet effet immuno-stimulant se manifeste également par la stimulation de l'activité phagocytaire des macrophages mise en évidence par l'augmentation de leur activité enzymatique. Par contre, ces mêmes substances à d'autres doses et notamment à des doses plus élevées ne manifestent plus d'activité immuno stimulantes et même, peuvent manifester des propriétés immunosuppressives. Il en est ainsi pour- des mélanges d'Eniatines, du Levamisole, de l'Isoprinosine ou du diethylthiocarbonate de sodium (DTC), C'est pourquoi on utilise le terme d'immunomodulateur pour définir ces substances agissant sur le système immunitaire soit pour le stimuler, soit pour l'inhiber. Au contraire, les immuns adjuvants sont des substances d'origine bactérienne, le plus souvent, glycoprotéique qui sont peu antigéniques par elles-mêmes, mais qui renforcent l'effet antigénique de molécules biologiques. C'est le cas des différentes fractions du BCG, de l'antigène de Freund ou encore, du Muramyldipeptide ou du Murabutide. Ces immuno adjuvants jouent un grand rôle dans les processus de protection par vacccination en déclanchant la formation durable d'anticorps. Les acides pyrrolyl-2 carboxyliques principes actifs utilisés dans la présente invention, sont des produits connus. Certains ont déjà été décrits dans le brevet US 2.479.972 en tant qu'anesthesiques locaux et surtout dans le brevet français 2.405.246 au nom de la demanderesse. L'étude pharmacologique de ces composés avait montré qu'ils possédaient une activité uricosurique et pouvaient de ce fait, être utilisés dans le traitement des hyperuricémies pathologiques comme dans la goutte ou pour éviter une augmentation de l'acide urique sanguin à la suite de la prise de certains médicaments. Par la suite, dans son certificat d'utilité 2.564.831, la demanderesse a montré que les composés de formule générale I manifestaient également des propriétés immuno-suppressives qui se concrétisent notamment par une inhibition du phénomène de rosettes. De ce fait, ces composés sont utiles pour le traitement des maladies auto-immunes, pour la prévention du rejet des greffes, dans la prévention et le traitement des réactions de rejet du greffon vis-à-vis de l'hôte. Ultérieurement, il a été trouvé que les composés de formule générale I possédaient en outre une activité anti-phospholipase A2 à la fois "in vitro" vis-à-vis d'une phospholipase A2 de pancréas de porc et vis-à-vis des phospholipses A2 cellulaires et principalement une phospholipase de monocytes humains. Maintenant, il vient d'être trouvé que les composés de formule générale I sans posséder par eux-mêmes, d'action stimulante sur la production de Tumor Necrosis Factor (TNF), potentialisait fortement l'action stimulante des immuno modulateurs ou immuno adjuvants comme par exemple, le Muramyldipeptide ou le Murabutide. Cette propriété dans l'étant actuel des connaissances de la demanderesse était inattendue et surtout ne pouvait découler des propriétés pharmacologiques déjà connues de ces composés. Dans ce qui précède, les sels des composés de formule I avec une base minérale ou organique peuvent être définis comme des sels de métaux alcalins, comme le sodium, le potassium, le lithium, l'ammonium ou le rubidium; des sels de métaux alcalion-terreux comme le calcium ou le strontium; le magnésium, l'aluminium ou les métaux ferreux. On peut également y inclure les sels d'alcoylamines, de cyclo-alcoylamines, d'arylalcoylamines, de pyridyl-alcoylamines, de furylalcoylamines, d' hydroxylalcoyl amines, d'amino acides, de desoxyosamines, d'aminocyclitols, de guanidines substituées, de poly peptides ou de composés similaires. Les compositions pharmaceutiques selon 1'invention présentent d'intéressantes propriétés thérapeutiques liées à la potentialisation des propriétés connues des immuno-modulateurs ou des immuno adjuvants comme par exemple - la stimulation de production d'anticorps - la stimulation des macrophages et des lymphocytes T et B - l'augmentation de la résistance non spécifique des animaux à certaines maladies parasitiques ou liées à des micro-organismes pathogènes (bactéries, virus) - le traitement de certaines tumeurs - la protection contre les effets hépato-toxiques de certaines substances. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont destinées à être administrées par voie parentérale, orale, rectale, permuqueuse ou percutanée. A cette fin, les compositions pharmaceutiques se présentent sous la forme de comprimés nus ou enrobés, de dragées, de gélules, de capsules, de gouttes, de solutions ou suspensions buvables, de solutés ou suspensions injectables, de suppositoires ou de solutions dans un solvant polaire pour l'usage percutané. Les proportions respectives de composé de formule générale I et d'agent immuno modulateur ou immuno adjuvant peuvent varier dans des limites très importantes en fonction de la nature et de la posologie habituelle de 1' immuno modulateur ou immuno adjuvant. Les essais biologiques menés avec le zuramyl dipeptide (MDP) pris comme substance de référence, ont montré que ce n' est pas tellement la concentration en NDP qui joue un rôle -l'effet immuno stimulant étant peu différent selon les doses administrées- que le choix des concentrations en composé de formule générale I. L'addition de composé de formule générale I à des concentrations variant de 10-16M à 10-6M amène un effet initial à partir de 10-16M qui passe par un maximum à 10-12M et qui reste encore appréciable à la concentration de 10 8M. Les doses de composés de formule générale I sont donc faibles. Mais la posologie utile peut varier dans de larges proportions en fonction de la nature de la maladie à traiter. En règle générale, elle varie de 2 mg à 1 g de principe actif de formule générale I par prise unitaire en fonction du poids du sujet et de la sévérité de la pathologie à traiter. Les doses d'immuno adjuvant ou d'immuno modulateur administrées conjointement ou successivement, peuvent varier selon le produit, de 5 à 500 mg par prise unitaire. Dans le cas du NDP, la posologie sera par exemple un minimun de 2 mg de principe actif de formule générale I et de 25 à 100 mg de NDP. L'invention concerne également un procédé d'obtention des compositions pharmaceutiques définies comme cidessus, qui consiste en ce que l'on mélange, au préalable, un composé de formule générale I et un immuno modulateur ou un immuno adjuvant puis dilue ou dissout ce prémélange dans un ou plusieurs véhicules ou excipients inertes non toxiques pharmaceutiquement acceptables. Pour l'administration parentérale, le véhicule est de préférence un véhicule aqueux additionné éventuellement d'éthanol, de propylèneglycol, de glycerol ou de polyéthylèneglycol selon le degré de solubilité des composés de formule générale I. Pour l'administration par voie orale, le lactose, les amidons, le carbonate de calcium ou la silice colloïdale sont des diluants appropriés. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter szneLE I Comprimés à 0,002 g d'acide 4-[(Naphtyl-2)-carbonyl] N-méthyl pyrrolyl-2 carboxylique et à 0,05 g de Muramyl dipeptide Muramyl dipeptide ........................... 500 g Acide 4-[(Naphtyl-2)-carbonyl] N-méthyl ..... 20 g pyrrolyl-2 carboxylique Amidon de blé ............................... 225 g Amidon de Maïs .............................. 182 g Silice colloïdale ........................... 30 g Ethylcellulose .............................. 20 g Hydroxypropyl méthylcellulose ............... 12 g Talc ........................................ 15 g pour 10.000 comprimés terminés au poids moyen de 0,100 g EXEMPLE II Etude pharmacologique des compositions selon l'invention Potentialisation par les composés de formule générale I, des effets du Myramyl dipeptide, sur la production, par le monocyte humain, de Tumor Necrosis Factor (TNF). L'action immunosuppressive et/ou immunomodulatrice des composés de formule générale I a été évaluée sur des fonctions spécifiques du monocyte humain. Les activités cellulaires étudiées au niveau du monocyte ont été plus particulièrement la production de 'Tumor Necrosis Factor" (TNFoe), stimulée ou non par le muramyl dipeptide. Néthodologie La production de TNF par les monocytes humains est réalisée par stimulation au muramyl dipeptide (NDP). Les monocytes sont isolés du sang périphérique humain sur gradient de Ficoll hypaque et séparés par adhérence sur plastique ou par élutriation. Les cellules sont mises en culture à la concentration de 106/ml en présence du NDP (1 pg et 10 pG/h1) et le surnageant est recueilli à 24 heures de culture. Pour le dosage du TNF, des cellules tumorales, très sensibles aux effets toxiques de ce dernier, sont marquées au chrome radioactif et incubées pendant 24 heures avec des dilutions successives de surnageant de monocytes. L'activité TNF est alors mesurée par analyse probit avec des standards de TNF recombinant. Résultats Corne montré sur la figure n01, si les composés de formule générale I ne semblent pas stimuler directement la production de TNF, ils potentialisent fortement l'action stimulante du NDP, le pic de l'activité potentialisatrice se situant à la concentration de 1o~12M REVENDICATIONS L'invention a pour objet De De nouvelles compositions pharmaceutiques immuno stimulantes caractérisées en ce qu'elles renferment à titre de principes actifs, au moins un immuno modulateur ou un immuno adjuvant et un dérivé (4-aroyl pyrrolyl-2) carboxylique de formule générale I dans laquelle Ar est choisi dans le groupe constitué par un phényle, un halogénophényle, un naphtyl-l et un naphtyl-2 et R est de l'hydrogène ou le cation monovalent d'une base minérale ou organique thérapeutiquement compatible en association ou en mélange avec un excipient ou un véhicule inerte, non toxique, pharmaceutiquement acceptable. 20- Une composition pharmaceutique selon la revendication 10 dans laquelle le dérivé de formule générale I est l'acide 4-(Naphtyl-2 carbonyl) N-méthyl pyrrolyl-2 carboxylique. 3 - Une composition pharmaceutique selon la revendication 10 dans laquelle le dérivé de formule générale I est un sel de métal alcalin de l'acide 4-(Naphtyl-2 carbonyl) N-méthyl pyrrolyl-2 carboxylique. 4 - Une composition pharmaceutique selon la revendication 10 dans laquelle on incorpore un immuno modulateur et un composé de formule générale I à un excipient inerte 5 - Une composition pharmaceutique selon la revendication 10 dans laquelle on incorpore un immuno adjuvant et un composé de formule générale I à un excipient inerte 60- Une composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 4 dans laquelle l'immuno modulateur est l'Isoprinosine, le diéthylthiocarbonate de sodium (DTC) ou le levamisole. 70- Une composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1, 2, 3 ou 5 dans laquelle l'lmmuno adjuvant est le Muramyl dipeptide ou le Murabutide. 80- Une composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 70 dans laquelle l'excipient ou le véhicule est un de ceux qui conviennent pour l'administration par voie parentérale, orale, rectale, permuqueuse ou percutanée. 90- Une composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 80 dans laquelle la teneur en principe actif de formule générale I s'échelonne de 2 mg à 1 g par prise unitaire. 100-Une composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 90 dans laquelle la teneur en immuno adjuvant ou en immuno modulateur peut varier de 5 mg à 500 mg par prise unitaire. 11 -Un procédé d'obtention des compositions pharmaceutiques selon l'une des revendications 1 à 100 dans lequel on mélange au préalable le composé de formule générale I et l'immuno modulateur ou immuno adjuvant puis dilue ou dissout ce prémélange dans un ou plusieurs véhicules ou excipients inertes, non toxiques, pharmaceutiquement-acceptables.