Brevet FR2678283A1 — publié le 19921231

SEQUENCES DE NUCLEOTIDES, SEQUENCES D'ACIDES AMINES CORRESPONDANTES ET LEURS APPLICATIONS BIOLOGIQUES. L' invention a pour objet des séquences de nucléotides et les séquences d'acides aminés correspondantes. Elle concerne également l'obtention de ces séquences et leurs applications. I1 est admis depuis de nombreuses années que le néphroblastome induit par le virus auxiliaire de la myéloblastose aviaire (MAV) constitue un modèle animal de la tumeur de Wilms chez l'enfant. Bien que ces deux types de tumeurs aient des éthiologies différentes, aucun virus n'ayant été associé jusqu a présent au développement du néphroblastome humain, on conçoit que l'étude, au niveau moléculaire des néphroblastomes viro-induits, peut permettre de caractériser des paramètres difficilement accessibles dans le système humain. Les études des inventeurs concernant de tels néphroblastomes aviaires induits par le MAV leur ont permis de caractériser chez la poule un gène embryonnaire appelé gène non dont l'expression s'avère stimulée à des niveaux variables dans les tumeurs, mais qui est éteint dans les cellules de rein adulte normal. En développant leurs travaux dans ce domaine, les inventeurs ont élaboré des outils leur permettant d'étudier l'expression de gènes homologues dans les tumeurs humaines et dans certains types cellulaires. Ainsi, en clonant les séquences désoxyribonucléiques et un ADN complémentaire correspondant au gène nov des cellules normales de poule, les inventeurs ont établi la séquence nucléotidique partielle des ADN et la séquence nucléotidique complète de l'ADNc. Des sondes moléculaires spécifiques ont été établies sur la base de cette séquence et utilisées pour détecter la présence et l'expression de gènes homologues dans divers types cellulaires humains. L'invention a donc pour but de fournir de nouvelles séquences de nucléotides d'un gène impliqué notamment dans les cellules tumorales. Elle a également pour but de fournir des moyens pour l'isolement de ces séquences. L'invention vise en outre les protéines codées correspondantes et les anticorps polyclonaux et monoclonaux dirigés contre ces protéines. L'invention vise de plus l'utilisation de ces séquences, protéines et anticorps dans des applications biologiques, en particulier dans des tests de détection. Les séquences de nucléotides de l'invention sont caractérisées en ce qu'elles renferment un enchaînement de nucléotides capable de s'hybrider, dans des conditions stringentes (50 de formamide 5 X SC), avec une ou plusieurs séquences du gène na de poule dont 1'ADNc présente l'enchaînement de nucléotides (I) suivant GCGGCGGGTAGACGGCCGGGACT ATG GAG ACG GGC GGC GGG CAG GGG CTG CCC GTC CTG CTG CTG CTC CTG CTC CTC CTC CGG CCG TGC GAG GTG 95 AGC GGG CGG GAG GCG GCG TGC CCC CGG CCC TGC GGC GGG CGC TGC CCC CCG GCG GAG CCG CCG CGC TGC GCC CCG GGA GTG CCC GCC CTG 185 GAC GGC TGC GCC TGC TGC CTG GTG TGC GCC CGG CAG CGC GGC GAG AGC TGC TCC CCT CTG CTG CCC TGC GAC GAG AGC GGC GGC CTC TAC 275 TGC GAC CGC GGC CCC GAG GAC GGC GGC GGC GGC GCC GGC ATC TGC ATG ATG GTG CTG GAA AAC TGC GTG TTC GAT GGG ATG ATT TAC CGC 365 AAC GGG GAG ACG TTC CAG CCC AGC TGC AAG TAC CAG TGC ACC TGC CGG GAC GGG CAG ATC GGG TGC CTG CCC CGC TGC AAC CTG GGC CTG 455 CTG CTC CCC GGC CCC GAC TGC CCC TTC CCG CGG AAG ATC GAA GTC CCC GGA GAG TGC TGC GAG AAG TGG GTG TGC GAC CCC AGG GAT GAA 545 GTG CTC CTG GGA GGC TTT GCT ATG GCT GCA TAC AGA CAG GAG GCC ACA CTT GGG ATA GAC GTG TCT GAT TCA AGT GCC AAT TGT ATT GAA 635 CAG ACA ACA GAA TGG AGC GCT TGT TCC AAA AGC TGT GGA ATG GGC TTT TCT ACC CGT GTT ACC AAC AGA AAT CAG CAG TGT GAG ATG GTG 725 AAG CAG ACA CGA CTT TGC ATG ATG AGA CCT TGT GAA AAC GAA GAG CCA TCT GAT CCT AAG AAA GGA AAA TGT ATC CAA ACA AAG AAA TCC 215 TGT AAA GCT GTT CGT TTT GAA TAC AAG AAC TGC ACC AGT GTG CAG ACT TAC AAA CCT CGT TAC TGT GGC CTC TGC AAT GAT GGG CGA TGC 905 TGT GTC TGT CAT GGT AAC AAA ACG ATT CAA GTT GAG TTC CGC TGT CCT CAG GGC AAA TTC CTA AAA AAG CCA ATG ATG TTG ATC AAT ACC 995 TGT GTC TGT CAT GGT AAC TGT CCT CAG AGT AAC AAT GCT TTC TTC CAG CCA TTA GAT CCC ATG TCT AGT GAA GCA AAA ATA TGAAATGTATA 1087 GTTTAGGTGGCCCAAAAGGTATGTAGTTTGTACAAACTTGACCCACAATCAGGTGAATGTAATAATTGCATATGTAAAAATATCTGAGATTTTTTTCTAAACAGTCTGAGTGCCTTTTT 1206 TTTCCTGTAGTTTACTAAATACCTCATGACGTTTCACCCCTCCAAATGTCTTTTATTCATTTGAAGGAAATTTTGTACCTTGGACAGAGCGCCTTCTGTTTTCTTGACAGTGGCATAAC 1325 GATTACAAAGTCAACAGCTAGTCTTTCTCTCTGAGTTTAGAGGACCTTGCCATGATTTTCAGTAGCCATAAGACTGGGCTTTTTAATAATGGATTCCTTGGGGAATGCATGATAATATG 1444 TCACAAAAGCTTCCAGAGTTTTCACTTTGAATAATGTGTACAAACACTTACACAGCCTTCTTCTTTCTGTTCAAGTTAAATTCTTCCGGATAACTGAAAATGTTACTGATGAGAGTCTG 1563 AATTCTCCTGGCTTATAAAGTACCTTCTATCTGTACCTCTTGACTTTCTCTGAGGGATTAGTTTGCACATAGCCTCAGAAATGACATAGCTAAGATCTCGTATCTTGAAGCATAGGAGA 1682 TTGATAGCTGATAACAAATTTCTCATTCGTAGCTTTATTAGCAGCCTAATCCAAAACCTACTGAAGAAAGTGTCTTACAAGAGCTTGGTTCTAACCAGTGTCTGTCTGTAGATAAAGTA 1801 GTTGTATGCAAAAATAAAATTTCTGTAAATTCCTTTAAAATACTAACTGTATCAGATGGTGCTTCACTTACTAGAAAGATGTTTATGTAAATAGAAACTGTATATATTGTAATATAAACT 1920 TTTATTAGGTAAATAAACTTTATGTGATCAAAATGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA 1975 plus spécialement avec l'enchaînement (Il) suivant CCC CGG CCC TGC GGG GGG CGC TGC CCC CCG GAG CCG CCG CGC TGC GCC CCG GGA GTG CCC GCC CAC CGC TGC CGC TGC TGC CTG CTG TGC GCC CCC CAC CCC GGC CTG ACC TGG TCC CCT CTC CTG CCC TGC SAC CAC ACC CGC CGC CTC TAC TGG GAC CGC GGC CCC GAG GAC GGC GGC GGC GCG GGG ATG TGG ATG GTG CTG GAA GGG GAC AAC TGT GTG TTC GAT GGG ATG ATT TAC CGC AAC GGC GAG ACG TTC CAG CCC AGG TGT AAG TAC CAG TGT ACC TGG CGG GAC GGG CAG ATT GGG TGC CTG CCT CCC TGG AAC CTG GGC CTG CTC CTC CCC CCC CCC CAC TGC CCC TTC CCC CGG AAG ATC CAA GTC CCC GGA GAC TGC TGC GAG MG TCC CTC TGC GAC CCC ACC CAT CAA GTG CTC CTC CTA GGC TTT GCT ATG GCT GCA TAC AGA CAG GAC GCC ACA CTT CCC ATA GAC GTG TCT GAT TCA AGT GCC AAT TCA ATT CAA CAC ACA ACA CAA TGG AGT GCT TCT TCC AAA AGC TCT GGA ATC GGC m TCT ACC CGT CTT ACC AAC AGA AAT La séquence nucléotidique entière du clone d'ADNc nov de poule est formée de 1975 pb et comprend au moins 5 exons. Cette séquence comprend un cadre ouvert de lecture de 1,0 kb, codant pour une protéine potentielle de 32300 Da, allant du nucléotide 24 au nucléotide 1076. Ce cadre ouvert de lecture est suivi de 899 pb de séquences 3' non codantes qui contiennent deux signaux de motifs potentiels de polyadénylation AATAAA en position 1914 et 1932. Ce gène nov de poule est surexprimé dans des néphroblastomes aviaires induits par MAV étudiés par les inventeurs. Les expériences d'hybridation réalisées dans des conditions stringentes définies ci-dessus montrent que, de manière inattendue, des séquences homologues du gène nov de poule existent dans le génome humain. Des séquences de l'invention sont plus particulièrement caractérisées en ce qu'elles comprennent ou sont formées par un enchaînement de nucléotides capable de s'hybrider, dans les conditions stringentes évoquées cidessus, avec au moins une partie du deuxième exon du gène nov de poule qui comprend la séquence nucléotidique (III) suivante CTCCTGCTCCTCCTCCGGCCGTGCGAGGTGAGCGGGCGGGAGGCGGCG-TGCCCCCGG 70 80 90 100 110 120 CCCTGCGGCGGGC-GCTGCCCCGCGGAGCCGCCGCGCTGCGCCCCGGGAGTGCCCGCC 130 140 150 160 170 180 GTGCTGGACGGCTGCGGCTGCTGCCTGGTGTGCGCCCGGCAGCGCGGCGAGAGCTGC 190 200 210 220 230 TCCCCTCTGCTGCCCTGCGACGAGAGCGGCGGCCTCTACTGCGACCGCGGCCCCGAGGA 240 250 260 270 280 290 CGGCGGCGGCGCCGGCATCTGCATGG 300 310 320 Les séquences de nucléotides capables de s'hybrider avec l'enchaînement (III) ci-dessus sont également caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une partie d'un fragment PstI d'environ 600 pb tel qu'obtenu à partir d'un sous-clone plasmidique dérivé d'un clone recombinant isolé d'une banque d'ADN de placenta humain. La carte de restriction enzymatique du clone recombinant ainsi que celle du sous-clone plasmidique dérivé renfermant la séquence nucléotidique en question sont représentées sur la figure 2A. De telles séquences sont en outre caractérisées en ce qu'elles comportent l'information génétique pour coder pour une protéine renfermant une séquence ayant une homologie d'au moins 62 g avec le fragment de protéine correspondant au deuxième exon du gène noyez de poule, ce fragment présentant la séquence d'acides aminés (IV) suivante R V P G A R Y K T C A G R D R 47 62 77 Q A P D Q G E G E Q C Q S T A K K V S F G K S E R G K P E H 137 152 167 A E C A E H E L L S R E S S A 182 197 212 F A * P S C F S I S W D S K W 227 242 257 H T L K M P P K L L C P P W W 272 287 302 P P F G H R A H C V F C P S * 317 332 347 V V S P C L A C L Q V A A T Q 362 377 392 R C P P Q C P G R C P A T P P 407 422 437 T C A P G V R A V L D G C S C 452 467 482 C L V C A R Q R G E S C S D L 497 512 527 E P C D E S S G L Y C D R S A 542 557 572 D P S N Q T G I C T G N P A P 587 S A V * P L L L Q Les lettres indiquées dans ces enchaînements présentent les significations conventionnelles figurant dans "A practical guide to molecular cloning, second edition, B. Perbal, John Wiley and Sons, New York, 1988". L'invention vise en particulier les séquences nucléotidiques comportant l'information génétique pour coder pour une protéine ayant une homologie de plus de 70 % avec le fragment de protéine correspondant au deuxième exon du gène nov de poule répondant à la séquence (V) suivante PCEVSGREAACPRPCGGRCPAEPPRCAPGVPAVLDGCSCCLVCARQRGES CSPLLPCD 30 40 50 60 70 ESGGLYCDRGPEDGGGAGIC 80 90 100 et plus spécialement pour une séquence d'acides aminés ayant une homologie d'environ 65 % avec la séquence d'acides aminés déduite du fragment nucléotidique du deuxième exon du gène nov de poule, cette séquence présentant l'enchaînement (VI) suivant 120 130 140 150 160 170 ACLQVAATQRCPPQCPGRCPATPPTCAPGVRAVLDGCSCCLVCARQRGESCSDLEPCD 180 190 ESSGLYCDRSADPSNQTGIC On notera la présence dans ces séquences d'acides aminés d'une séquence consensus de liaison aux facteurs de croissance du type insuline (IGF), cette séquence apparaissant donc conservée chez l'homme. Ces séquences comportent plus particulièrement au moins une partie de l'enchaînement nucléotidique (VII) suivant 10 20 30 40 50 60 GCGCGTCCCA GGAGCGCGCT ATAAAACCTG TGCTGGGCGT GATCGGCAAG CACCGGACCA 70 80 90 100 110 120 GGGGGAAGGC GAGCAGTGCC AATCTACAGC GAAGAAAGTC TCGTTTGGTA AAAGCGAGAG 130 140 150 160 170 180 GGGAAAGCCT GAGCATGCAG AGTGTGCAGA GCACGAGCTT TTGTCTCGCG AAAGCAGTGC 190 200 210 220 230 240 CTTTGCCTGA CCTTCCTGCT TCTCCATCTC CTGGGACAGT AAGTGGCACA CCCTTAAGAT 250 260 270 280 290 300 GCCCCCAAAG TTACTTTGCC CGCCTTGGTG GCCCCCATTT GGTCACCGGG CTCACTGCGT 310 320 330 340 350 360 CTTCTGTCCC AGCTGAGTGG TTTCTCCTTG TCTCGCCTGC CTTCAGGTCG CTGCGACTCA 370 380 390 400 410 420 GCGCTGCCCT CCCCAGTGCC CGGGCCGGTG CCCTGCGACG CCGCCGACCT GCGCCCCCGG 430 440 450 460 470 480 GGTGCGCGCG GTGCTGGACG GCTGCTCATG CTGTCTGGTG TGTGCCCGCC AGCGTGGCGA 490 500 510 520 530 540 GAGCTGCTCA GATCTGGAGC CATGCGACGA GAGCAGTGGC CTCTACTGTG ATCGCAGCGC 550 560 570 580 590 600 GGACCCCAGC AACCAGACTG GCATCTGCAC GGGTAATCCT GCTCCCTCTG CTGTTTGACC 610 TCTTCTCCTG CAG plus spécialement de l'enchaînement (VIII) suivant 330 340 350 360 370 380 CTCCTTGTC-TCG-CCTGCCTT-C-AGGTC-GCTG-CG--ACTCAGCGCTGCCCTCCCCAGTGCC 390 400 410 420 430 440 45 CGGGCCGGTGCCCTGCGACGCCGCCGACCTGCGCCCCCGGGGTGCGCGCGGTGCTGGACGGCTGCI 460 470 480 490 500 510 CATGCTGTCTGGTGTGTGCCCGCCAGCGTGGCGAGAGCTGCTCAGATCTGGAGCCATGCGACGAG 520 530 540 550 560 570 GCAGTGGCCTCTACTGTGATCGCAGCGCGGACCCCAGCAACCAGACTGGCATCTGCACGG L'enchaînement (VIII) comporte 249 nucléotides avec 73 % d'homologie environ avec l'exon 2 du gène nov de poule. D'autres séquences nucléotidiques de l'invention sont caractérisées en ce qu'elles sont formées par ou qu'elles comprennent un enchaînement de nucléotides capable de s'hybrider, dans les conditions stringentes évoquées ci dessus, avec au moins une partie des troisième et quatrième exons du gène nov de poule qui comprennent la séquence nucléotidique (IX) suivante TG CTC CAA GGG GAC AAC TGC CTC TTC CAT GGG ATC ATT TAC CCC 365 AAC GGC GAG ACC TTC CAG CCC AGC TGC AAG TAC CAG TGC ACC TCC CCC CAC GCC CAG ATC GGC TGC CTG CCC CCC TGG AAC CTG GGC CTC 455 CTC CTC CCC GGC CCC GAC TGC CCC TTC CCC CCG AAC ATC GAA CTC CCC CGA GAG TGG TGC GAG AAG TGG GTG TGC CAC CCC AGG CAT CAA 545 GTG CTC CTC GGA CCC TTT TTT GCT ATC GCT CCA TAC AGA CAG GAC GCC ACA CTT GGC ATA GAC CTG TCT CAT TCA ACT CCC MT TGT ATT GM 635 CAG ACA ACA GM TGC AGT GCT TCT TCC MA ACC TCT GGA ATG CGC m TCT ACC CGT CTT ACC MC AGA MT CAC CAC TCT GAG ATC CTG 725 AAG CAG ACA CGA CTT TCC ATC ATG AGA CCT TGT GAA MC GAA CAC CCA TCT GAT MC Ces séquences sont également caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une partie d'un fragment PstI d'environ 700 pb tel qu'obtenu à partir d'un sous clone plasmidique dérivé d'un clone recombinant isolé d'une banque d'ADN de placenta humain La carte de restriction enzymatique du clone recombinant ainsi que du sous-clone plasmidique dérivé renfermant la séquence nucléotidique en question est représentée sur la figure 2B. De telles séquences sont encore caractérisées en ce qu'elles codent pour un fragment de protéine répondant à l'enchaînement (X) suivant d'acides aminés. Q I P T R I P D A L D V R V P 48 63 78 Q C L T S A S P T P L F P S S 93 108 123 S P A K D G A P C I F G G T V 138 153 168 Y R S G E S F Q S S C K Y Q C 183 198 213 T C L D G A V G C M P L C S M 228 243 258 D V R L P S P D C P F P R R V 273 288 303 K L P G K C C E E W V C D E P 318 333 346 K D Q T V L G P A S R V S R V 363 378 393 F L * V R V V I L S Q G G S P 408 423 438 N C A D R T G E I P Y P G V D 453 468 483 H G V C V L C S R S L P T G R 498 513 528 H V W P R P N Y D * S Q L p G 543 558 573 p D T E W S A C S K T C G M G 588 603 Y S T R V T N D N A Des séquences du type de celles du fragment PstI de 700 pb ci-dessus sont plus particulièrement caractérisées en ce qu'elles sont formées par ou qu'elles comprennent un enchaînement de nucléotides capable de s'hybrider dans les conditions stringentes définies cidessous, avec au moins une partie du troisième exon du gène nov de poule qui comprend la séquence (XI) suivante CTGCGTGTTCGATGGGATGATTTACCGCAACGGGGAGACGTTCCAGCCCAGCTGCAAGTACCAGTGCACC 350 360 370 380 390 400 190 200 210 220 230 240 250 TGCCGGGACGGGCAGATCGGGTGCCTGCCCCGCTGCAACCTGGGCCTGCTGCTCCCCGGCCCCGACTGCC 420 430 440 450 460 470 CCTTCCCGCGGAAGATCGAAG-TCCCCGGAGAGTGCTGCGAGAAGTGGGTGTGCGAC 490 500 510 520 530 D'autres séquences de nucléotides de l'invention comportent l'information génétique pour coder pour une protéine ayant une homologie d'au moins 60 g environ avec le fragment de protéine potentiel du troisième exon du gène nov de poulé répondant à la séquence (XII) suivante EGDNCVFDGMIYRNGETFQPSCKYQCTCRDGQIGCLPRCNLGLLLPGPDCPFPRKIEVPGECCEKW 110 120 130 140 150 160 VCD-PR 170 Il s'agit en particulier de séquences comportant l'information génétique pour coder pour une protéine ayant la séquence(XIII > d'acides aminés suivants 40 50 60 70 80 90 100 DGAPCIFGGTVYRSGESFQSSCKYQCTCLDGAVGCMPLCSMDVRLPSPDCPFPRRVKLPGKCCEEWVCDE PR Ces séquences comportent plus particulièrement au moins une partie de l'enchaînement nucléotidique (XIV) suivant: 1 CC 3 18 33 CAG ATC CCA ACT CGC ATC CCT GAC GCT CTG GAT GTG AGA GTG CCC 48 63 78 CAA TGC CTG ACC TCT GCA TCC CCC ACC CCT CTC TTC.CCT TCC TCT 93 108 123 TCT CCA GCC AAA GAT GGT GCT CCC TGC ATC TTC GGT GGT ACG GTG 138 153 168 TAC CGC AGC GGA GAG TCC TTC CAG AGC AGC TGC AAG TAC CAC TGC 183 198 213 ACG TGC CTG GAC GGG GCG GTG GGC TGC ATG CCC CTG T.GC AGC ATG 228 243 258 GAC GTT CGT CTG CCC AGC CCT GAC TGC CCC TTC CCG AGG AGG GTC 273 288 303 AAG CTG CCC GGG AAA TGC TGC GAG GAG TGG GTG TGT GAC GAG CCC 318 333 348 AAG GAC CAA ACC GTC CTT GGG CCT GCC TCG CGG GTG AGT CGA GTC 363 378 393 TTC CTC TAA GTC AGG GTC GTG ATT CTC TCC CAG GGA GGG AGT CCT 408 423 438 AAC TGT GCC GAC CGA ACG GGG GAA ATA CCT TAT CCA GGC GTT TTA 453 468 483 CAT GGT GTT TGT GTG CTC TGC TCT CGC AGC TTA CCG ACT GGA AGA 498 513 528 CAC GTT TGG CCC AGA CCC AAC TAT GAT TAG AGC CAA CTG CCT GGT 543 558 573 CCA GAC ACA GAG TGG AGC GCC TGT TCC AAG ACC TGT GGG ATG GGC 588 603 ATC TCC ACC CGG GTT ACC AAT GAC AAC GCC TC Ces séquences comprennent plus particulièrement l'enchaînement nucléotidique (XV) suivant : 190 200 210 220 230 240 250 TGCCTGGTCCAGACA CAGAGTGGAGCGCCTGTTCCAAGACCTGTGGGATGGGCATCTCCACCCGGGT 260 CCAA D'autres séquences du type de celles du fragment PstI de 700 pb sont encore caractérisées en ce qu'elles sont formees par ou qu'elles comprennent un enchaînement de nucléotides capable de s'hybrider dans les conditions stringentes définies ci-dessus avec au moins une partie du quatrième exon du gène nov de poule, qui comprend 1 'enchaînement (XVI) suivant GCTTTGCTATGGCTGCATACAGACAGGAGGCCACACTTGGGATAGACGTGTCT--GATTCAAGTGCCAAT 570 580 590 600 610- 620 TGTATTGAACAGACAACAGAATGGAGTGCTTGTTCCAAAAGCTGTGGAATGGGCTTTTCTACCCGTGTTA 630 640 650 660 670 680 690 CCAA De telles séquences sont encore caractérisées en ce qu'elles sont capables de coder pour une protéine ayant une homologie d'au moins 86 % avec le fragment de proteine potentiel du quatrième exon du gène nov de poule répondant à l'enchaînement (XVII) suivant TEWSACSKSCGMGFSTRVTNRN 210 220 Il s'agit en particulier de séquences comportant l'information génétique pour coder pour une proteine ayant la séquence (XVIII) suivante en acides aminés. 70 80 TEWSACSKTCGMGISTRVTNDN Ces séquences sont formées par ou comprennent plus particulièrement l'enchaînement nucléotidique (XIX) suivant 130 140 150 160 170 180 GCTCTGCTCTCGCAGCTTACCGACTGGAAGACACGTTTGGCCCAGACCCAACTATGATT-A-GAGCCAAC 190 200 210 220 230 240 250 TGCCTGGTCCAGACA-CAGAGTGGAGCGCCTGTTCCAAGACCTGTGGGATGGGCATCTCCACCCGGGTTA 260 CCAA Selon un autre aspect, l'invention vise une séquence recombinante comprenant l'une des séquences définies ci-dessus, le cas échéant associée à un promoteur capable de contrôler la transcription de la séquence et une séquence d'ADN codant pour les signaux de terminaison de la transcription. Il est entendu que les bases des séquences de nucléotides considérées peuvent être dans un ordre différent de celui trouvé dans les gènes et/ou que ces bases peuvent être, le cas échéant, substituées. Les séquences correspondantes entrent dans le cadre de l'invention, dès lors qu'un fragment de ces séquences utilisé comme sonde donne une réponse caracteristique et non équivoque quant à la capacité de reconnaître la présence de gènes codant pour des protéines telles que définies ci-dessus exprimées dans les cellules tumorales. L'invention vise également en tant que nouveaux produits les ARN correspondant aux différentes sequences définies ci-dessus et les séquences complémentaires des différents enchaînements nucleotidiques définis. L'invention se rapporte également aux vecteurs recombinants de clonage et d'expression capables de transformer ' une cellule hôte appropriée, comportant au moins une partie d'une séquence de nucléotides telle que définie ci-dessus sous le contrôle d'éléments de régulation permettant son expression. Les souches de microorganismes transformées ou transfectées entrent egalement dans le cadre de l'invention. Ces souches comportent l'une des sequences de nucléotides définies ci-dessus ou encore un vecteur recombinant tel que défini précédemment. Elle vise également les séquences d'acides aminés correspondant, selon le code génétique universel, aux séquences de nucléotides définies plus haut, et les protéines exprimées par les gènes comportant ces séquences. Les séquences d'acides aminés homologues à celles codées par l'exon 2, qui contiennent le site de liaison aux facteurs de croissance IGF présentent - un intérêt particulier, étant donné que le gène IGFII, qui se trouve chez l'homme sur le chromosome llp15, est surexprimé dans certaines tumeurs de Wilms et pourrait donc être impliqué dans cette pathologie. Dès lors que le motif consensus des protéines se liant à 1'IGF joue une rôle important dans le développement des néphroblastomes en conjonction avec la dérégulation de l'expression d'IGFII, on mesure l'intérêt de la détection d'une expression anormale des protéines de l'invention qui renferment un tel motif. Les protéines de l'invention sont également caractérisées en ce qu'elles sont telles qu'obtenues par transformation de cellules hôtes au moyen d'un vecteur recombinant comme défini ci-dessus, mise en culture, dans un milieu approprié, des cellules hôtes transformées ou transfectées et récupération de la protéine à partir de ces cellules ou directement à partir du milieu de culture. La production de ces protéines par un tel procédé fait également partie de l'invention. Les protéines de l'invention et leurs fragments, qui peuvent être également obtenus par synthèse chimique, présentent avantageusement un degré de pureté élevé et sont utilisés pour former, selon les techniques classiques, des anticorps polyclonaux. De tels anticorps polyclonaux, ainsi que les anticorps monoclonaux capables de reconnaître spécifiquement un épitope des protéines ci-dessus, ou d'un fragment de ces protéines, sont également visés par l'invention. L'invention vise en outre les applications biologiques des séquences de nucléotides, des protéines correspondantes et des anticorps monoclonaux ou polyclonaux. Ces applications comprennent l'élaboration, à partir de fragments intragéniques purifiés, ou d'ARN correspondants, de sondes moléculaires pour rechercher la présence éventuelle de sequences de nucléotides apparentées au gène non dans divers types cellulaires. L'élaboration de ces sondes comprend, notamment, la dénaturation des séquences double-brin pour obtenir une séquence monobrin. Les essais effectués pour détecter la présence de séquences complémentaires dans diverses tumeurs et tissus humaines ont mis en évidence la grande spécificité de ces fragments intragéniques. L'utilisation de ces sondes a ainsi permis de montrer que le gène renfermant les séquences nucléotidiques definies ci-dessus est exprimé dans plusieurs s types de cellules humaines, y compris certaines tumeurs du rein. L'invention vise donc des sondes de détection caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une partie d'une séquence de nucléotides définie ci-dessus. Toute sonde ne se distinguant de la précédente, au niveau de sa séquence de nucléotides, que par des substitutions ou alterations de nucléotides n'entraînant pas de modification de ses propriétés d'hybridation avec le gène humain apparenté au gène nov de poule comme défini plus haut entre dans le cadre de l'invention. Le fragment d'ADN utilisé comme sonde comporte un nombre de nucléotides suffisant pour obtenir la spécificité requise et la formation d'un hybride stable. Il est possible d'utiliser des fragments atteignant plusieurs kb, des résultats de haute spécificité étant cependant également obtenus avec des fragments plus cours d'environ 25 à 40 nucléotides. Des sondes appropriées pour ce type de détection sont avantageusement marquées par un élément radio-actif ou tout autre groupe permettant sa reconnaissance à l'état hybridé avec la préparation renfermant les nucléotides à étudier. Selon les techniques classiques, ces sondes sont mises en contact avec l'échantillon biologique à tester ou leurs acides nucléiques, dans des conditions autorisant l'hybridation éventuelle de la séquence de nucléotides de la sonde avec une séquence complementaire, éventuellement contenue dans le produit étudie. On peut, par exemple, avoir recours à la méthode d'hybridation sur taches ou à la méthode d'hybridation sur réplique, selon la technique de Southern. Dans la première méthode, selon la technique classique, on depose une quantité aliquote d'ADN denaturé sur des membranes de nitrocellulose. La deuxième méthode comprend la separation électrophorétique en gel d'agarose des fragments d'ADNs engendrés après traitement de l'ADN par des enzymes de restriction, le transfert après dénaturation alcaline sur des membranes appropriées et leur hybridation avec la sonde dans les conditions usuelles. Ces sondes constituent des marqueurs tumoraux en permettant la détection précoce de l'expression du gène renfermant lesdites séquences nucléotidiques, qui normalement n'est pas ou peu exprimé dans les tissus normaux correspondants. L'invention fournit ainsi des moyens permettant d'évaluer le développement et/ou la différentiation tumorale. La détection pour l'identification spécifique des ADN peut être également réalisée par des techniques d'amplification de l'ADN (PCR) telles que décrites dans les brevets US 4683202 et 4683195 au nom de Cetus Corportation. Dans ces techniques, on utilise deux amorces d'environ une quinzaine de nucléotides comprises dans l'une des séquences de nucléotides définies ci-dessus et distantes d'environ 200 à 250 nucléotides. L'une des séquences est capable de se lier à une séquence de nucléotides de l'un des brins du fragment d'ADN à amplifier et située au niveau de l'une des extremites de ce fragment, par exemple à l'extrémité 5'. L'autre séquence est capable de se lier à une séquence de nucléotides du deuxième brin du fragment d'ADN à amplifier, et se trouve située au niveau de l'extrémité de ce fragment opposee à celle mentionnée plus haut (à l'extrémité 3', lorsque la première se trouver à l'extrémité 5'). L'invention vise également un procédé de détection in vitre de la présence dans un échantillon biologique de séquences complémentaires de celles définies ci-dessus. Ce procédé est caractérisé en ce qu il comprend les étapes suivantes - la mise en contact de l'échantillon biologique à étudier avec une sonde nucléotidique telle que définie plus haut dans des conditions permettant la production d'un complexe d'hybridation formé entre la sonde et la séquence de nucléotides recherchée, - la détection du complexe d'hybridation. Le cas échéant, on procède à une amplification préalable de la quantité de séquences de nucléotides susceptibles d'être contenues dans l'échantillon, à l'aide d'amorces, telles que décrites ci-dessus, susceptibles respectivement de se lier, d'une part à l'extrémité 5' d'un brin de ladite séquence de nucléotides et d'autre part, à l'extrémité 3' de l'autre brin de ladite séquence de nucléotides. L'utilisation d'un tel procédé représente une augmentation de sensibilité et un gain de temps considérable par rapport aux techniques classiques qui nécessitent souvent une technologie ne pouvant être mise en oeuvre que dans des services spécialisés. I1 permet de plus une détection rapide et de grande spécificité des ADN et des différentes espèces d'ARNm de transcription. Ce procédé constitue un moyen de détection d'un remaniement chromosomique au niveau des gènes qui codent pour les ARN nov sans avoir recours à des cultures cellulaires. Pour la mise en oeuvre d'une telle méthode de dépistage invitro, basée sur l'utilisation de sondes nucléotidiques, on a recours avantageusement à des nécessaires ou kits comprenant - une quantité déterminée d'une sonde nucléotidique selon l'invention, - un milieu approprié à la formation d'une réaction d'hybridation entre la séquence à détecter et la sonde et, avantageusement, - des réactifs permettant la détection des complexes d'hybridation formés entre la séquence de nucléotides et la sonde lors de la réaction d'hybridation. L'invention vise également les applications immunologiques des protéines définies ci-dessus, plus spécialement pour l'élaboration d'antisérums spécifiques ainsi que d'anticorps polyclonaux et monoclonaux. Les anticorps polyclonaux sont induits selon les techniques classiques par injection des protéines à des animaux, récupération des antisérums puis, à partir de ces derniers, des anticorps, par exemple par chromatographie d'affinité. Les anticorps monoclonaux sont produits de manière habituelle en fusionnant des cellules de myélomes avec des cellules de rates d'animaux préalablement immunisés à l'aide des protéines de l'invention. Ces anticorps revêtent un grand intérêt pour détecter in vitre l'expression du gène renfermant les séquences ci-dessous. La méthode de dépistage in vitro dans un échantillon biologique de la présence éventuelle des produits d'expression d'un tel gène est caractérisé en ce qu'il comprend - la mise en contact de l'échantillon biologique à étudier avec un anticorps selon l'invention, dans des conditions permettant la production d'un complexe immunologique formé entre tout ou partie des protéines exprimées par le gène humain apparenté au gène nov de poule et cet anticorps, et - la détection du complexe immunologique. Dans cette méthode de dépistage invitro, on aura recours avantageusement à des nécessaires ou kits, comprenant - une quantité déterminée d'un anticorps polyclonal ou monoclonal selon l'invention, - un milieu approprié à la formation d'une réaction immunologique entre au moins une partie des produits exprimés et l'anticorps et, avantageusement, - des réactifs permettant la détection des complexes immunologiques formés lors de la réaction immunologique. La présence dans les protéines de l'invention d'une séquence de liaison aux facteurs de croissance du type insuline (IGF) est avantageusement mise à profit selon l'invention pour le dosage des protéines. A cet effet, on met en contact les protéines de l'échantillon biologique à étudier avec un IGF comportant un groupe marqué, par exemple un groupe radioactif ou sonde froide et on effectue le dosage de la quantité de produit fixé. On rapporte ci-après à titre d'exemples non limitatifs le clonage et le séquençage du gène nov de poule, et de séquences de nucléotides répondant aux définitions données plus haut. Dans ces exemples, il est fait référence aux figures 1 à 6, - la figure 1 représentant la séquence d'ADNc du gène nov de poule et celle de la protéine potentielle codée - les figures 2 A et 2 B les cartes de restriction de fragments d'ADN de l'invention - les figures 3 et 4, les séquences nucléotidiques de fragments d'ADN et les fragments de protéines codées, et - les figures 5 et 6, les séquences de ces fragments homologués avec le gène nov de poule. Procédés de clonage moléculaire et séquençage rapportés dans les exemples purification des acides nucléiques : utilisation de dichlorométhane comme décrit dans V. Maloisel et al., Met. Mol. Cell. Biol. 1, 245-247, 1990. Southern et Northern blots, et autres procédés de clonage : effectués selon les protocoles standards publiés par B. Perbal dans "A practical guide to molecular cloning, second edition, B. Perbal John Wiley and Sons, New York, 1988 purification des fragments d'ADN BamHI-HindIII de 7 kb et SacI de 6,6 kb : méthode Geneclean (Bio 101). Sondes radioactives : préparées par nick translation en présence d'a dCTP 32P. Séquençage des nucléotides : selon la méthode de terminaison de chaîne au didéoxy en présence d'a dATP 3ES, de T7 polymérase ou de Séquenase (USB). Example 1: Isolement de 1'ANDC du gène nov de poule 25 ng d'ADNc correspondant à de llARN poly A de fibroblastes d'embryons de poule de 13 jours sont ligaturés avec 1 pg de bras lambda gtlO pour préparer une banque d'ADNc de fibroblastes normaux de poule en utilisant le kit d'Amersham. Après criblage avec une sonde cellulaire dérivée d'une tumeur, on purifie 7 clones, l'insert le plus long (1,9 kb) est purifié selon la méthode de Geneclean (BIO 101) et sous-cloné au site KpnI de Bluescript KS+ (Stratagène) pour générer le clone pClK. Séquençage nucléotidique Le séquençage est réalisé par la méthode de terminaison de chaînes didéoxy-nucléotide en présence d'a 35S dATP et de polymérase T7 (Pharmacia) ou de Séquenase dans les conditions décrites par les fabricants. Des matrices sont obtenues à partir des clones recombinants M13mpl8 et -M13mp19. Les amorces de séquençage proviennent de Biolabs, New England. Les compressions GC sont résolues en utilisant la déoxy-inosine (USB). Caractérisation du gène cellulaire nov On effectue une analyse par Northern Blot d'ARN isolés de reins normaux, de fibroblastes d'embryons de poule (FEP) et de néphroblastomes en utilisant les sondes cellulaires dérivées d'une tumeur. La sonde HX1024 permet de détecter dans les FEP normaux une espèce d'ARNm de 2,2 kb dont l'expression est altérée dans tous les autres néphroblastomes. Le criblage d'une banque d'ADNc de FEP permet d'isoler un clone d'ADNc de 1,9 kb représentant l'ARNm de 2,2 kb exprimé dans les FEP normaux. On a représenté sur la figure 1 la séquence entière nucléotidique de 1975 pb du clone d'ADNc de ce nouveau gène, surexprimé dans les néphroblastomes étudiés, appelé gène nov. Ce gène apparaît constitué de 5 exons. Un cadre ouvert de lecture de 1,0 kb codant pour une protéine potentielle de 32300 Da a été identifié du nucléotide 24 au nucléotide 1076. Ce cadre ouvert de lecture est suivi de 899 pb de séquences 3' non codantes qui contiennent deux motifs potentiels de signaux de polyadénylation (AATAAA) aux positions 1914 et 1932. On a également indiqué sur cette figure les acides aminés potentiellement codés. Le polypeptide nov potentiel contient un noyau hydrophobe caractéristique d'un signal peptidique à son extrémité amino (avec 6 leucines). Cette protéine nov étant dépourvue d'autres régions hydrophobes présentes dans les protéines trans-membranaires, il est vraisemblable qu'elle est sécrétée. La protéine nov contient , également le motif consensus GCGCCXXC des protéines liant les facteurs de croissance du type insuline (IGF) et un total de 39 résidus cystéine ne formant pas de cluster. Exemple2 : Isolement dans des cellules humaines de séquences de nucléotides apparentées au gène nov de poule. On effectue un Southern blot de fragments d'ADN humain digéré par EcoRI avec le clone d'ADNc du gène nov de poule pClK. On opère dans les conditions stringentes rapportées par B. Perbal (voir référence ci-dessus). On constate que quatre fragments EcoRI s'hybrident avec des séquences du gène nov de poule. Ces fragments comportent respectivement 15, 12, 8 et'5,6 kb. Exemple3 : Isolement de séquences de nucléotides apparentées au gène nov de poule. A partir d'une banque d'ADN de placenta humain, on isole à l'aide de la sonde pClK radiomarquée deux groupes de clones lambda gtll recombinants. Les cartes de restriction de ces deux clones, établies par hybridations successives, sont rapportées sur la figure 2A et 2B. Les séquences de nucléotides humaines homologues à celles du gène nov de poule sont localisées dans un fragment d'ADN de 7,0 kb BamHI-HindIII du clone Hu92 et dans un fragment d'ADN de 6,6 kb SacI du clone Hu93. Le sous-clonage de ces fragments dans les vecteurs pUC18 et pUC19, appelés respectivement clones pBH7 et pS6 permet de localiser plus précisément les séquences homologues dans deux fragments PstI d'ADN de 600 et 700 pb, désignés ci-après PBP06 et PSP07. Sur ces cartes, les enzymes de restriction sont désignées comme suit : B = BglII, P = PstI, K = KpnI, H = HindIII, S = SacI, E = EcoRI et X = Xba. L'utilisation des fragments PstI d'ADN purifiés comme sondes dans des expériences d'hybridation Southern avec les fragments EcoRI de l'exemple 2 conduit à la seule détection du fragment EcoRI d'ADN de 12 kb avec PB06 et du fragment EcoRI de 15 kb avec PS07 démontrant que les séquences de PB06 et PS07 correspondent à un sous-ensemble des exons nov de l'ADNc de poule. On rapporte sur les figures 3 et 4 les séquences nucléotidiques des fragments PBP06 etPS P07 avec celles des acides aminés potentiellement codés. Sur la figure 5, on a représenté la séquence de PBP06 en correspondance avec la séquence homologue du gène nov de poule, le signe ":" désignant l'homologie entre les nucléotides de ces deux chaînes. De même la figure 6 représente les homologies existant entre la séquence PSP07 et le gène nov de poule au niveau nucléotidique. Exemple : Détection d'ARN du génome humain apparentés au gène non de poule. On rapporte dans le tableau suivant les résultats d'expériences d'hybridation Northern avec différents tissus et lignées cellulaires en utilisant comme sondes les enchaînements de formule VIII, XV et XVI ci-dessus homologues respectivement des exons E2, E3 et E4 du gène nov de poule (ces codes étant utilisés dans le tableau pour les désigner). TISSUS ET LIGNEES CELLULAIRES SONDES HUMAINES NOV E2 E3-E4 kb de l'ARNm Moelle osseuse Thymus - + (7,4) Foie (foetal) + - (2,7) HEL - + (2,7) Cerveau (foetal) + - (2,7) - + (7,4) Neuroblastome 1 + + (2,7) Neuroblastome 162 + + (2,7) + (7,4) Rein nt + (2,7) Nephroblastome Bou nt + (2,7) Tissu mammaire nt + (2,7) Tumeur mammaire gg nt + (2,7) Tumeur mammaire sc nt + (2,7) + + (3,5) + (7,4) SK-BR3 + + (2,7) + + (3,5) - + (7,4) MCF7 - + (7,4) Carcinome embry test. 8 nt + (2,7) - + (7,4) Teratocarcinome test. 10 nt + (2,7) - + (7,4) Teratocarcinome test. 11 nt + (2,7) - + (7,4) Adenocarcinome U377 nt + (2,7) - + (7,4) HL6O nt + (7,4) nt = non testé Les résultats obtenus montrent que le gène humain homologue du gène nov de poule est exprimé selon les tissus ou lignées sous la forme de différentes espèces d'ARN détectés soit par les deux sondes, soit par une seule d'entre elles. Ainsi, on constate que les cellules de moelle osseuse normale, d'un neuroblastome et de la lignée SK-BR3 expriment un ARNm de 2,7 kb et que cet ARNm est reconnu par les deux sondes utilisées. L'espèce d'ARNm de 7,4 kb exprimée par certains tissus et lignées n'apparaît reconnue que par la sonde PSP07. Ces résultats indiquent que la régulation du gène nov chez l'homme dépendrait de la spécificité tissulaire. REVENDICATIONS 1/ Séquences de nucléotides caractérisées en ce qu'elles renferment un enchaînement de nucléotides capable de s'hybrider, dans des conditions stringentes (50 % de formamide, 5XSC) avec une ou plusieurs séquences du gène nov de poule dont l'ADNc présente l'enchainement de nucléotides (I) suivant GCGGCGGGTAGACGGCCCGACT ATG GAG ACG GGC GGC ggg CAG GCG CTG CCC GTC CTC CTC CTC CTC CTG CTC CTC CTC CGC CCC TGC GAG CTC 95 AGC GGG CGC GAG CCC CCC TGC CCC CGC CCC TGC GGC GGG CCC TGC CCC CCC GAG CCG CCG CGC TGC GCC CCC GGA GTG CCC GCC GTG CTC 185 GAC CCC TGC CCC TGC TGC CTG GTC TGC GCC CCC CAG CGC CCC GAG AGC TGC TCC CCT CTC CTG CCC TGC CAC GAG ACC CCC CCC CTC TAC 275 TGC GAC CGC GGC CCC GAG GAC GGC GGC GGC GCC CCC ATC TGC ATG CTC CTC GM GGG GAC MC TGC GTG TTC GAT CGC ATG ATT TAC CCC 365 MC GGG GAG ACG TTC CAG CCC AGC TGC MG TAC CAG TGC ACC TGC CGG GAC GGC CAG ATC GGG TGC CTC CCC CCC TGC MC CTC CGC CTG 455 CTC CTC CCC CCC CCC GAC TGC CCC TTC CCC CCC MG ATC GM CTC CCC CGA GAC TCC TGC CAG MG TCG GTG TGC CAC CCC AGG GAT GAA 545 GTC CTC CTG CGA GGC TTT GCT ATG GCT GCA TAC AGA CAG GAG GCC ACA CTT CGC ATA GAC GTG TCT GAT TCA AGT CCC AAT TGT ATT GM 635 CAG ACA ACA GM TGG AGT GCT TCT TCC AM AGC TGT GGA ATG GGC TTT TCT ACC CGT GTT ACC MC AGA MT CAC CAG TCT GAG ATG GTG 725 AAG CAG ACA CGA CTT TGC ATC ATG AGA CCT TGT GAA AAC GAA GAG CCA TCT GAT MC MA GGA MA MA TCT ATC CAA ACA MC MA TCC 815 ATG AAA GCT GTT CGT TTT GAA TAC AAG MC TGC ACC AGT GTC CAG ACT TAC MA CCT CGT TAC TCT GGC CTC TGC MT GAT tGC CGA TGC 905 TCT ACC CCA CAC MC ACC AAA ACC ATT CAA GTT GAG TTC CCC TCT CCT CAG CGC AAA TTC CTA AM MC CCA ATG ATG TTC ATC MT ACC 995 TCT GTC TGT CAT GGT AAC TGT CCT CAG AGT MC AAT GCT TTC TTC CAG CCA TTA CAT CCC ATG TCT AGT GM GCA MA ATA TGAAATGTATA 1087 GTTTAGGTGGCCCAAAAGGTATGTAGTTTGTACAAAACTTGACCCACAATCAGGTGAATGTAATAATTGCATATGTAAAATATCTGAGATTTTTTTCTAAACAGTCTGAGTGCCTTTTT 1206 TTTCCTGTAGTTTACTAAATACCTCATGACGTTTCACCCCTCCAAATGTCTTTTATTCATTTGAAGGAAATTTTGTACCTTGGACAGAGCCTTCTGTTGTTTCTTGACAGTGGCATAAC 1325 GATTACAAAGTGAACAGCTAGTCTTTCTCTCTGAGTTTAGAGGACCTTGCCATGATTCAGTAGCCATAAGACTGGGCTTTTTAATAATGGATTCCTTGTCGGGAATGCATGATAATATG 1444 TCACAAAAGCGGCCAGAGTTTTCACTTTGAATAATGTGTACAAACACTTACACAGCCTTCTTCTTTCTGTTCAAGTTAAATTCTTCCGGATAACTGAAAATGTTACTGATGAGAGTCTG 1563 AATTCTTCTGGCTTATAAAGTATCTTCTATGTGTACCTCTTGACTTTCTCTGAGGGATTACTTTGCACATAGCCTCAGAAATGACATAGCTAAGATCTCGTATCTTGAAGCATAGGAGA 1682 TTGATAGCTGATAACAAATTTCTCATTCGTAGCTTTATTAGGAGGCTAATGGAAAAGGTACTGAAGAAAGTGTCTTACAAGTGGTTGGTTGTAACCAGTGTCTGTCTGTAGATAAAGTA 1601 GTTGTATGCAAAAATAAAATTTCTGTAAATTCCTTTAAAATACTAACTGTATGAGATGGTGGTTCACTTACTACAAAGATGTTTATGTAAATAGAAACTGTATATATTGTAATATAACT 1920 TTTATTAGGTAAATAAACTTTATGTGATCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA 1975 plus spécialement avec l'enchaînement (II) suivant TGC CCC CCC CCC TCC CCC GGC CCC TGC CCC CCC GAG CCC CCC CGC TGC GCC CCG GGA GTC CCC GCC CTC CTG CAC GGC TGC CCC TGC TGC CTG CTC TGC GCC CGC CAG CGC CCC GAG ACC TCC TCC CCT CTC CTG CCC TCC GAC GAG ACC CCC GGC CTC TAC TGC GAC CGC CGC CCC GAG GAC GGC GGC CGC GCC CCC ATC TGC ATC CTG CTC GM GCC CAC MC TGC GTG TTC GAT CGC AN ATT TAC CCC AAC CGC GAG ACC TTC CAC CCC AGC TGC AAC TAC CAG TGG ACC TGC CGC GAG CCC CAG ATC GGC TGC CTG CCC CGC TGC MC CTG CGC CTG CTC CTC CCC CCC CCC CAC TGC CCC TTC CCC CCG MC ATC CM GTC CCC CGA GAG TGG TGC GAG AAG TCG GTG TGC GAG CCC AGC GAT GAA CTC CTC CTC CGA GGC TTT GCT ATG GCT CCA TAC AGA CAG GAG GCC ACA CTT GGG ATA GAC GTG TCT GAT TCA AGT GCC MT TGT ATT GM GAG ACA ACA GM TGG AGT GCT TCT TGG MA AGC TGT CGA ATG GAG TTT TCT ACC CGT GTT ACC MC AGA MT 2/ Séquences de nucléotides selon la revendication 1, caractérisées en ce qu'elles sont formées par ou qu'elles comprennent un enchaînement de nucléotides capable de s'hybrider, dans les conditions stringentes de la revendication 1, avec au moins une partie du deuxième exon du gène nov de poule qui comprend la séquence nucléotidique (III) suivante CTCCTGCTCCTCCTCCGGCCGTGCGAGGTGAGCGGGCGGGAGGCGGCG-TGCCCCCGG 70 80 90 100 110 120 CCCTGCGGCGGGC-GCTGCCCCGCGGAGCCGCCGCGCTGCGCCCCGGGAGTGCCCGCC 130 140 150 160 170 180 GTGCTGGACGGCTGCGGCTGCTGCCTGGTGTGCGCCCGGCAGCGCGGCGAGAGCTGC 190 200 210 220 230 TCCCCTCTGCTGCCCTGCGACGAGAGCGGCGGCCTCTATGCGACCGCGGCCCCGAGGA 240 250 260 270 280 290 CGGCGGCGGCGCCGGCATCTGCATGG 300 310 320 3/ Séquences de nucléotides selon la revendication 2, caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une partie d'un fragment PstI d'environ 600 pb tel qu'obtenu à partir d'un sous-clone plasmidique dérivé d'un clone recombinant isolé d'une banque d'ADN de placenta humain, la carte de restriction enzymatique du clone recombinant ainsi que du sous-clone plasmidique dérivé renfermant la séquence nucléotidique étant représentée sur la figure 2A. 4/ Séquences de nucléotides selon la revendication 2 ou 3, caractérisées en ce qu'elles comportent l'information génétique pour coder pour une protéine renfermant une séquence ayant une homologie d'au moins 62 avec le fragment de protéine correspondant au deuxième exon du gène non de poule, ce fragment présentant la séquence d'acides aminés (IV) suivante R V P G A R Y K T C A G R D R 47 62 77 Q A P D Q G E G E Q C Q S T A K K V S F G K S E R G K P E H 137 152 167 A E C A E H E L L S R E S S A 182 197 212 F A * P S C F S I S W D S K W 227 242 257 H T L K M P P K L L C P P W W 272 287 302 P P F G H R A H C V F C P S * 317 332 347 V V S P C L A C L Q V A A T Q 362 377 392 R C P P Q C P G R C P A T P P 407 422 437 T C A P G V R A V L D G C S C 452 467 482 C L V C A R Q R G E S C S D L 497 512 527 E P C D E S. S G L Y C D R S A 542 557 572 D P S N Q T G I C T G N P A P 587 S A V * P L L L Q 5/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 2 à 4 comportant l'information génétique pour coder pour une protéine ayant une homologie de plus de 70% avec le fragment de protéine correspondant au deuxième exon du gène nov de poule répondant à la séquence (V) suivante PCEVSGREAACPRPCGGRCPAEPPRCAPGVPAVLDGCSCCLVCARQRGESCSPLLPCD 30 40 50 60 70 ESGGLYCDRGPEDGGGAGIC 80 90 100 et plus spécialement pour une séquence d'acides aminés ayant une homologie d'environ 65 g avec la séquence d'acides aminés déduite du fragment nucléotidique du deuxième exon du gène na de poule, cette séquence présentant l'enchaînement (VI) suivant 120 130 140 150 160 170 ACLQVAATQRCPPQCPGRCPATPPTCAPGVRAVLDGCSCCLVCARQRGESCSDLEPCD 180 190 ESSGLYCDRSADPSNQTGIC 6/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 2 à 5, caractérisées en ce qu'elles comportent au moins une partie du l'enchaînement nucléotidique (VII) suivant 10 20 30 40 50 60 GCGCGTCCCA GGAGCGCGCT ATAAAACCTG TGCTGGGCGT GATCGGCAAG CACCGGACCA 70 80 90 100 110 120 GGGGGAAGGC GAGCAGTGCC AATCTACAGC GAAGAAAGTC TCGTTTGGTA AAAGCGAGAG 130 140 150 160 170 180 GGGAAAGCCT GAGCATGCAG AGTGTGCAGA GCACGAGCTT TTGTCTCGCG AAAGCAGTGC 190 200 210 220 230 240 CTTTGCCTGA CCTTCCTGCT TCTCCATCTC CTGGGACAGT AAGTGGCACA CCCTTAAGAT 250 260 270 280 290 300 GCCCCCAAAG TTACTTTGCC CGCCTTGGTG GCCCCCATTT GGTCACCGGG CTCACTGCGT 310 320 330 340 350 360 CTTCTGTCCC AGCTGAGTGG TTTCTCCTTG TCTCGCCTGC CTTCAGGTCG CTGCGACTCA 370 380 390 400 410 420 GCGCTGCCCT CCCCAGTGCC CGGGCCGGTG CCCTGCGACG CCGCCGACCT GCGCCCCCGG 430 440 450 460 470 480 GGTGCGCGCG GTGCTGGACG GCTGCTCATG CTGTCTGGTG TGTGCCCGCC AGCGTGGCGA 490 500 510 520 530 540 GAGCTGCTCA GATCTGGAGC CATGCGACGA GAGCAGTGGC CTCTACTGTG ATCGCAGCGC 550 560 570 580 590 600 GGACCCCAGC AACCAGACTG GCATCTGCAC GGGTAATCCT GCTCCCTCTG CTGTTTGACC 610 TCTTCTCCTG CAG plus spécialement de l'enchaînement (VIII) suivant 330 340 350 360 370 380 CTCCTTGTC-TCG-CCTGCCTT-C-AGGTC-GCTG-CG-ACTCAGCGCTGCCCTCCCCAGTGCC 390 400 410 420 430 440 450 CGGGCCGGTGCCCTGCGACGCCGCCGACCTGCGCCCCCGGGGTGCGCGCGGTGCTGGACGGCTGCT 460 470 480 490 500 510 CATGCTGTCTGGTGTGTGCCCGCCAGCGTGGCGAGAGCTGCTCAGATCTGGAGCCATGCGACGAGA 520 530 540 550 560 570 GCAGTGGCCTCTACTGTGATCGCAGCGCGGACCCCAGCAACCAGACTGGCATCTGCACGG 7/ Séquences de nucléotides selon la revendication 1, caractérisées en ce qu'elles sont capables de s'hybrider, dans les conditions stringentes définies dans la revendication 1, avec au moins une partie des troisième et quatrième exons du gène nov de poule qui comprennent la séquence nucléotidique (IX) suivante TG CTC GM CCC GAC MC TGC GTG TTC CAT GGC ATG ATT TAC CCC MC GGC GAG ACG TTC CAG CCC ACC TCC AAC TAC CAC TGC ACC TGC CGC CAC CGC GAG ATC GGC TGC CTG CCC CCC TGC AAC CTG CCC CTG CTG CTC CCC CGC CCC GAC TGC CCC TTC CCC CGC AAG ATC GAA GTC CCC GGA GAG TGC TGC GAG Mt TGC CTC TGC GAC CCC AGC CAT GAA CTC CTC CTG CGA CCC TTT GCT ATC GCT GCA TAC AGA CAG GAG CCC ACA CTT CCC ATA GAC CTC TCT CAT TAC AGT GCC MT TGT ATT GAA CAG ACA ACA GM TGC AGT GCT TGT TCC MA AGC TGT GGA ATG CGC TTT TCT ACC CGT GTT ACC MC AGA AAT CAG CAG TGT GAG ATC GTC AAG CAG ACA CCA CTT TGC ATG ATG AGA CCT TGT GAA MC GM GAG CCA TCT CAT Mc 8/ Séquences de nucléotides selon la revendication 7, caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins une partie d'un fragment PstI d'environ 700 pb tel qu'obtenu à partir d'un sous clone plasmidique dérivé d'un clone recombinant isolé d'une banque d'ADN de placenta humain, la carte de restriction enzymatique du clone recombinant ainsi que celle du sous-clone plasmidique dérivé renfermant la séquence nucléotidique en question étant représentées sur la figure 2 B. 9/ Séquences de nucléotides selon la revendication 7 ou 8, caractérisées en ce qu'elles codent pour une proteine répondant à l'enchaînement (X) suivant d'acides aminés. Q I P T R I P D A L D V R V P 48 63 78 Q C L T S A S P T P L F P S S 93 108 123 S P A K D G A P C I F G G T V 138 153 168 Y R S G E S F O S S C K Y Q C 183 198 213 T C I D G A V G C M P I C S M 228 243 258 D V R L P S P D C P F P R R V 273 288 303 K L P G K C C E E W V C .D E P 318 333 346 K D Q T V L G P A S R V S R V 363 378 393 F I * V R V V I I S Q G G S P 408 423 438 N C A D R T -G E I P Y P G V D 453 468 483 H G V C V L C S R S L P T G R 498 513 528 H V W P R P N Y D * S Q L P G 543 558 573 P D T E W S A C S K T C G M G 588 603 Y S T R V T N D N A 10/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 7 à 9, caractérisées en ce qu'elles sont formées par ou qu'elles comprennent un enchaînement capable de s'hybrider dans les conditions stringentes définies dans la revendication 1, avec au moins une partie du troisième exon du gène nov de poule qui comprend la séquence (XI) suivante CTGCGTGTTCGATGGGATGATTTACCGCAACGGGGAGACGTTCCAGCCCAGCTGCAAGTACCAGTGCACC 350 360 370 380 390 400 190 200 210 220 230 240 250 TGCCGGGACGGGCAGATCGGGTGCCTGCCCCGCTGCAACCTGGGCCTGCTGCTCCCCGGCCCCGACTGCC 420 430 440 450 460 470 CCTTCCCGCGGAAGATCGAAG-TCCCCGGAGAGTGCTGCGAGAAGTGGGTGTGCGAC 490 500 510 520 530 11/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 7 à 10, caractérisées en ce qu'elles comportent l'information génétique pour coder pour une protéine ayant une homologie d'au moins 60 g environ avec le fragment de protéine potentiel correspondant au troisième exon du gène non de poule répondant à la séquence (XII) suivante EGDNCVFDGMIYRNGETFQPSCKYQCTCRDGQIGCLPRCNLGLLLPGPDCPFPRKIEVPGECCEKI 110 120 130 140 150 160 VCD-PR 170 12/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 7 à 11, caractérisées en ce qu'elles comportent l'information génétique pour coder pour une protéine ayant la séquence (XIII) d'acides aminés suivants: : 40 50 60 70 80 90 100 DGAPCIFGGTVYRSGESFQSSCKYQCTCLDGAVGCMPLCSMDVRLPSPDCPFPRRVKLPGKCCEEWVCDE PR 13/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 7 à 12, caractérisées en ce qu'elles comportent au moins une partie de l'enchaînement nucléotidique (XIV) suivant CC 3 18 33 CAG ATC CCA ACT CGC ATC CCT GAC GCT CTG GAT GTG AGA GTG CCC 48 63 78 CAA TGC CTG ACC TCT GCA TCC CCC ACC CCT CTC TTC CCT TCC TCT 93 108 123 TCT CCA GCC AAA GAT GGT GCT CCC TGC ATC TTC GGT GGT ACG GTG 138 153 168 TAC CGC AGC GGA GAG TCC TTC CAG AGC AGC TGC AAG TAC CAC TGC 183 198 213 ACG TGC CTG GAC GGG GCG GTG GGC TGC ATG CCC CTG TGC AGC ATG 228 243 258 GAC GTT CGT CTG CCC AGC CCT GAC TGC CCC TTC CCG AGG AGG GTC 273 288 303 AAG CTG CCC GGG AAA TGC TGC GAG GAG TGG GTG TGT GAC GAG CCC 318 333 348 AAG GAC CAA ACC GTC CTT GGG CCT GCC TCG CGG GTG AGT CGA GTC 363 378 393 TTC CTC TAA GTC AGG GTC GTG ATT CTC TCC CAG GGA GGG AGT CCT 408 423 438 AAC TGT GCC GAC CGA ACG GGG GAA ATA CCT TAT CCA GGC GTT TTA 453 468 483 CAT GGT GTT TGT GTG CTC TGC TCT CGC AGC TTA CCG ACT GGA AGA 498 513 528 CAC GTT TGG CCC AGA CCC AAC TAT GAT TAG AGC CAA CTG CCT GGT 543 558 573 CCA GAC ACA GAG TGG AGC GCC TGT TCC AAG ACC TGT GGG ATG GGC 588 603 ATC TCC ACC CGG GTT ACC AAT GAC AAC GCC TC plus particulièrement, l'enchaînement nucléotidique (XV) suivant 190 200 210 220 230 240 250 TGCCTGGTCCAGACA-CAGAGTGGAGCGCCTGTTCCAAGACCTGTGGGATGGGCATCTCCACCCGGGTTA 260 CCAA 14/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 7 à 13, caractérisées en ce qu'elles sont formées par ou qu'elles comprennent un enchaînement capable de s'hybrider dans les conditions stringentes données dans la revendication 1 avec au moins une partie du quatrième exon du gène nov de poule, qui comprend l'enchaînement (XVI) suivant GCTTTGCTATGGCTGCATACAGACAGGAGGCCACACTTGGGATAGACGTGTCT--GATTCAAGTGCCAAT 570 580 590 600 610 620 TGTATTGAACAGACAACAGAATGGAGTGCTTGTTCCAAAAGCTGTGGAATGGGCTTTTCTACCCGTGTTA 630 640 650 660 670 680 690 CCAA 15/ Séquences de nucléotides selon la revendication 14, caractérisées en ce qu'elles sont capables de coder pour le fragment de protéine ayant une homologie d'au moins 86 % avec le fragment de protéine potentiel correspondant au quatrième exon du gène nov de poule répondant à l'enchaînement (XVII) suivant TEWSACSKSCGMGFSTRVTNRN 210 220 16/ Séquences de nucléotides selon la revendication 14 ou 15, caractérisées en ce qu'elles comportent l'information génétique pour coder pour une protéine ayant la séquence (XVIII) suivante en acides aminés. 70 80 TEWSACSKTCGMGISTRVTNDN 17/ Séquences de nucléotides selon l'une des revendications 14 à 16, caractérisées en ce qu'elles sont formées par. ou qu'elles comprennent l'enchaînement nucléotidique (XIX) suivant 130 140 150 160 170 180 GCTCTGCTCTCGCAGCTTACCGACTGGAAGACACGTTTGGCCCAGACCCAACTATGATT-A-GAGCCAAC 190 200 210 220 230 240 250 TGCCTGGTCCAGACA-CAGAGTGGAGCGCCTGTTCCAAGACCTGTGGGATGGGCATCTCCACCCGGGTTA 260 CCAA 18/ Les ARN et séquences complémentaires des séquences selon l'une quelconque des revendications 1 à 17. 19/ Vecteurs recombinants de clonage et d'expression, capables de tranformer une cellule hôte appropriée, comportant au moins une partie d'une séquence de nucléotides selon l'une quelconque des revendications 1 à 17 sous le contrôle d'éléments de régulation permettant son expression dans la cellule hôte. 20/ Souches de microorganismes transformées ou transfectées, caractérisées en ce qu'elles comportent une séquence de nucléotides selon l'une quelconque des revendications 1 à 17 ou encore un vecteur recombinant selon la revendication 19. 21/ Les protéines correspondant aux séquences nucléotidiques selon l'une quelconque des revendications 1 à 18. 22/ Les anticorps polyclonaux et monoclonaux caractérisés en ce qu ils reconnaissent spécifiquement une protéine selon la revendication 21, ou un fragment d'une telle protéine. 23/ Sonde de détection,caractérisée en ce qu'elle comprend tout ou partie des séquences de nucléotides selon l'une quelconque des revendications 1 à 18. 24/ Procédé de dépistage in vitre de la présence éventuelle dans un échantillon biologique de séquences de nucléotides complémentaires de celles selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes - la mise en contact de l'échantillon biologique avec une sonde nucléotidique selon la revendication 23 dans des conditions permettant la production d'un complexe d'hybridation formé entre ladite sonde et ladite séquence de nucléotides, - la détection du complexe d'hybridation, et - le cas échéant l'amplification, avant l'étape de mise en contact, des séquences de nucléotides selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, susceptibles d'être contenues dans l'échantillon, à l'aide d'amorces susceptibles respectivement de se lier, d'une part à l'extrémité 5' d'un brin de ladite séquence de nucléotides et, d'autre part, à l'extrémité 3' de l'autre brin de ladite séquence de nucléotides, 25/ Kit pour la mise en oeuvre d'une méthode de dépistage in vitre de la présence éventuelle dans un échantillon biologique de séquences complémentaires des séquences selon l'une quelconque des revendications 1 à 18 caractérisé en ce qu'il comprend - une quantité déterminée d'une sonde nucléotidique selon la revendication 23, - un milieu approprié à la formation d'une réaction d'hybridation entre la séquence à détecter, et la sonde, et, avantageusement, - des réactifs permettant la détection des complexes d'hybridation formés entre la séquence de nucléotides et la sonde lors de la réaction d'hybridation. 26/ Procédé de dépistage in vitre de la présence dans un échantillon biologique des protéines selon la revendication 21, caractérisé en ce qu'il comprend - la mise en contact de l'échantillon avec un anticorps selon la revendication 22, dans des conditions permettant la production d'un complexe immunologique formé entre tout ou partie des protéines et cet anticorps, et - la détection du complexe immunologique. 27/ Kit pour la mise en oeuvre d'une méthode de dépistage in vitre de la présence éventuelle de protéines selon la revendication 21 dans un échantillon biologique, caractérisé en ce qu'il comprend - une quantité déterminée d'un anticorps selon la revendication 22, - avantageusement un milieu approprié à la formation d'une réaction immunologique entre au moins une partie d'une protéine et l'anticorps et, avantageusement, - des réactifs permettant la détection des complexes immunologiques formés entre au moins une partie de la protéine recherchée et l'anticorps lors de la réaction immunologique. 28/ Procédé de détection dans un échantillon biologique de protéines selon la revendication 21, ou de leurs fragments, caractérisé par la mise en contact des protéines de l'échantillon, ou de leurs fragments, avec un IGF portant un groupe marqueur et le dosage de la quantité de produit fixé. 29/ Utilisation en tant qu'amorces dans des techniques d'amplification d'ADN, de type PCR, de deux amplimères d'environ 15 nucléotides, compris dans l'une des séquences selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, et distantes de 200 à 250 nucléotides environ, l'une des séquences étant capable de se lier à l'extrémité 5' d'un brin de la séquence à amplifier et la deuxième séquence à l'extrémité 3' de l'autre brin.