Brevet FR2673718A1 — publié le 19920911

Appareil de spectrométrie RAMAN L'invention se rapporte au domaine de la spectrométrie RAMAN. On connaît déjà des appareils de spectrométrie RAMAN. Généralement de tels appareils comprennent des moyens pour produire une lumière d'excitation cohérente; au moins un premier échantillon; un spectromètre possédant une ouverture d'entrée; des moyens séparateurs propres à séparer le faisceau d'excitation cohérent en une première partie réfléchie RFE supérieure à O et inférieure à 1 et une seconde partie transmise TFE avec sensiblement RFE + TFE = 1; des premiers moyens de couplage optique propres à conduire la seconde partie transmise TFE ou la première partie réfléchie RFE du faisceau d'excitation cohérent sur le premier échantillon, ainsi qu'à recueillir le faisceau de diffusion incohérent RAMAN de longueur d'onde différente de celle du faisceau d'excitation qui en résulte, les moyens séparateurs étant propres à séparer ledit faisceau de diffusion incohérent en une première partie réfléchie RFD supérieure à O et inférieure à 1 et en une seconde partie transmise TFD avec sensiblement RFD + TFD = 1; et des seconds moyens de couplage optique propres à conduire la première partie réfléchie RFD ou la seconde partie transmise TFD du faisceau de diffusion incohérent vers l'ouverture d'entrée du spectromètre. Lorsque l'échantillon à analyser est éclairé avec un rayonnement monochromatique de nombre d'ondes No et que le spectre de rayonnement diffusé est étudié, il est observé une raie intense de nombre d'ondes NO correspondant à la diffusion RAYLEIGH, appelée raie excitatrice, et des raies beaucoup moins intenses de nombre d'ondes NO X et NO + X appelées respectivement raies Stokes et raies anti-Stokes. L'énergie ainsi perdue ou gagnée par le rayonnement (faisceau d'excitation) correspond exactement à de l'énergie gagnée ou perdue par les molécules qui effectuent une transition entre deux niveaux d'énergie, ce qui permet de déduire les caractéristiques de ladite molécule. La Demanderesse s'est posé le problème de fournir un appareil de spectrométrie RAMAN permettant d'améliorer le flux lumineux incohérent de longueur d'onde différente de celle du faisceau d'excitation reçu par l'ouverture d'entrée du spectromètre, qui définit le signal ou spectre RAMAN. L'invention part d'un appareil de spectrométrie RAMAN du type mentionné ci-avant. Selon une définition générale de l'invention, les premiers moyens de couplage optique comprennent des moyens de focalisation propres à focaliser le faisceau d'excitation cohérent dans une première ouverture variable choisie formant diaphragme pour filtrer spatialement ledit faisceau d'excitation cohérent, et les seconds moyens de couplage optique comprennent des seconds moyens formant diaphragme comprenant une seconde ouverture variable conjuguée de la première ouverture pour filtrer la première partie réfléchie ou la seconde partie transmise du faisceau de diffusion incohérent, ce qui permet d'améliorer la résolution spatiale de l'appareil. Il est à remarquer ici que le montage mentionné ci-avant relatif aux premiers et seconds moyens de couplage optique, a l'avantage de réaliser un microscope de spectrométrie RAMAN de type confocal, lorsque l'échantillon est placé sous l'objectif d'un microscope. Selon un mode de réalisation de l'invention, les premiers moyens de couplage optique conduisent en outre la première partie réfléchie ou la seconde partie transmise du faisceau d'excitation cohérent sur le premier échantillon, les moyens séparateurs étant propres en outre à séparer le faisceau de diffusion incohérent RAMAN qui résulte de l'éclairement dudit premier échantillon par la première partie réfléchie ou la seconde partie transmise du faisceau d'excitation en une première partie réfléchie et une seconde partie transmise et à conduire ladite seconde partie transmise ou ladite première partie réfléchie dudit faisceau de diffusion incohérent sur l'ouverture d'entrée du spectromètre. Selon un autre mode de réalisation préféré de l'invention, l'appareil comprend en outre un second échantillon, et les premiers moyens de couplage optique conduisent en outre la première partie réfléchie ou la seconde partie transmise du faisceau d'excitation cohérent sur ledit second échantillon, les moyens séparateurs étant propres à séparer en outre le faisceau de diffusion incohérent RAMAN qui résulte de l'éclairement du second échantillon par la première partie réfléchie ou la seconde partie transmise du faisceau d'excitation en une première partie réfléchie et une seconde partie transmise et à conduire ladite seconde partie transmise ou ladite première partie réfléchie dudit faisceau de diffusion incohérent sur l'ouverture d'entrée du spectromètre. Une telle structure a l'avantage d'utiliser de façon optimale les parties réfléchie et transmise du faisceau d'excitation issues des moyens séparateurs et les faisceaux de diffusion qui résulte de l'éclairement du premier échantillon seul ou des premier et second échantillons par lesdites parties réfléchie et transmise du faisceau d'excitation. Une telle structure permet en outre de réaliser une comparaison des spectres sans aucun déplacement des premiers moyens de couplage optique. En pratique, la comparaison du spectre du premier échantillon avec le spectre du second échantillon est réalisée à l'aide de premiers moyens formant obturateur pour la première partie réfléchie du faisceau d'excitation cohérent et à l'aide de seconds moyens formant obturateur pour la seconde partie transmise du faisceau d'excitation cohérent. De préférence, il est prévu un porte-échantillon monté en translations horizontale et verticale et des moyens de commande propres à piloter les translations horizontale ou verticale dudit porte-échantillon. Selon un aspect de l'invention, les moyens séparateurs comprennent une lame séparatrice de type dichroïque, c'est à- dire dont le pouvoir séparateur est fonction de la longueur d'onde du faisceau incident, ce qui permet d'acquérir les raies Stokes, les raies anti-Stokes et le signal basse fréquence du signal RAMAN. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lumière de la description détaillée ciaprès et des dessins annexés dans lesquels: la figure 1 représente une vue schématique des premiers et seconds moyens de couplage optique permettant d'améliorer la résolution latérale et axiale de l'appareil selon l'invention ainsi que la comparaison des spectres de deux échantillons distincts éclairés respectivement par les parties réfléchie et transmise du faisceau d'excitation; la figure 2 est une vue schématique des premiers moyens de couplage optique permettant d'éclairer en outre l'échantillon à analyser par les parties réfléchie et transmise du faisceau d'excitation cohérent selon l'invention; la figure 3 est une vue schématique des moyens expanseurs de faisceau d'excitation selon l'invention; la figure 4 est une vue schématique des moyens adaptateurs d'ouverture du faisceau de diffusion selon l'invention; la figure 5 est une platine supportant les premiers et seconds moyens de couplage optique selon l'invention; et la figure 6 est une vue schématique des moyens formant manivelle optique selon l'invention. Sur la figure 1, on a représenté schématiquement un appareil conformément à l'invention permettant d'améliorer les réso lutions axiale et latérale du spectre RAMAN. Cet appareil comprend une source lumineuse LA engendrant un faisceau de lumière excitatrice monochromatique cohérente selon un axe d'entrée A 3 Le faisceau d'excitation FE de lumière monochromatique a une longueur d'onde se situant dans le visible ou proche ultraviolet ou proche infrarouge Comme source de lumière, on peut utiliser une source laser fonctionnant en continu ou bien en impulsions telle qu'un laser à Argon développant une puissance maximale 1 Watt par exemple et émettant un faisceau lumineux ayant une longueur d'onde de 488 nm et 514,5 nm. Le faisceau d'excitation cohérent FE est d'abord filtré par des filtres Tl de type à absorption ou interférentiel puis polarisé par un organe polariseur Rl ou un rotateur de polarisation. Le filtre Tl et le polariseur Rl sont disposés selon l'axe d'entrée A 3. Le faisceau d'excitation cohérent FE est ensuite focalisé par des moyens de focalisation FL Al de type convergent sur une ouverture Dl réglable formant diaphragme MD 1. Les moyens de focalisation FLAI sont par exemple des lentilles ou des miroirs cylindriques ou sphériques En corollaire, l'ouverture Dl est choisie rectangulaire ou circulaire. Le faisceau d'excitation cohérent sortant du diaphragme MD 1 est ensuite conduit sur des moyens séparateurs L 51 propres à séparer ledit faisceau d'excitation en une première partie réfléchie RFE supérieure à O et inférieure à 1 et en une seconde partie transmise TFE avec sensiblement RFE + TFE = 1. Un organe de couplage optique Li tel qu'une lentille va conduire ensuite la seconde partie transmise TFE du faisceau d'excitation sur l'échantillon à analyser EA disposé selon l'axe d'entrée A 3. Par exemple, l'échantillon EA est placé sous l'objectif Jl d'un microscope. L'organe de couplage optique Li va également recueillir le faisceau de diffusion incohérent qui résulte de l'éclairement de l'échantillon à analyser EA par la seconde partie transmise TFE du faisceau d'excitation cohérent. Les moyens séparateurs L 51 séparent alors le faisceau de diffusion incohérent FDEA en une première partie réfléchie RFDEA supérieure à O et inférieure à 1 et en une seconde partie transmise TFDEA avec sensiblement RFDEA + TFDEA = 1. La première partie réléchie RFDEA du faisceau de diffusion incohérent FDEA est conduite ensuite vers une ouverture D 2 réglable formant diaphragme MD 2 conjuguée de la première ouverture Dl Ainsi, dans le cas d'une ouverture Dl choisie rectangulaire ou circulaire, l'ouverture D 2 est choisie rectangulaire ou circulaire. La première partie réfléchie RFDEA du faisceau de diffusion incohérent sortant du diaphragme MD 2 est enfin acheminée par des organes de couplage optique Mi, M 2, T 2 et L 4 vers l'ouverture d'entrée Fx du spectromètre SPR agencé selon un axe de sortie AO. Les deux miroirs Ml et M 2 sont ici disposés pour conduire la première partie réfléchie RFDEA du faisceau de diffusion incohérent sortant du diaphragme MD 2 de l'axe A 2 parallèle à l'axe de sortie AO vers ledit axe de sortie AO Bien entendu, les miroirs M 1 et M 2 ne sont pas nécessaires dans le cas o les moyens séparateurs L 51 agissent selon l'axe de sortie AO. Le filtre T 2 et la lentille de collimation L 4 agencés selon l'axe de sortie AO permettent de focaliser la première partie réfléchie RFDEA du faisceau de diffusion incohérent sortant du miroir M 2 dans l'ouverture d'entrée FX du spectromètre SPR. Selon l'invention, la focalisation du faisceau d'excitation cohérent FE dans l'ouverture Dl réglable du diaphragme MD 1 permet de filtrer spatialement ledit faisceau d'excitation cohérent d'une part et la focalisation de l'image de l'échantillon en lumière diffusée incohérente sur un diaphragme MD 2 dont l'ouverture D 2 est réglable et conjuguée de l'ouverture Dl, c'est-à-dire de l'échantillon à analyser, permet d'améliorer la résolution axiale et latérale de l'appareil d'autre part. Il est à remarquer que les moyens formant diaphragme MD 1 sont éloignés des moyens séparateurs L 51 d'une distance différente de celle séparant les seconds moyens formant diaphragme MD 2 des moyens séparateurs L 51 Cette différence de distance est due au fait que le faisceau d'excitation filtré par le diaphragme MD 1 est un faiceau de lumière cohérente tandis que le faisceau de diffusion filtré par le diaphragme MD 2 est un faisceau de lumière incohérente. De plus, il y a lieu de remarquer que le faisceau de diffusion incohérent est observé à une longueur d'onde différente de celle du faisceau d'excitation. Selon l'invention, l'utilisation conjuguée des moyens formant diaphragme MD 1 et MD 2 et des moyens de focalisation du faisceau d'excitation FLA 1 lorsque l'échantillon est placé sous l'objectif d'un microscope permet ainsi de façon surprenante de réaliser un microscope de spectrométrie RAMAN confocal. L'avantage essentiel d'un tel microscope RAMAN confocal, en déplaçant l'échantillon horizontalement ou verticalement, est de permettre des analyses de type tomographique, c'està-dire selon plusieurs couches. Il est à remarquer que la séparation du faisceau d'excitation et de diffusion en deux parties est symétrique, il en résulte que ce qui s'applique à la première partie réfléchie du faisceau peut s'appliquer mutatis mutandis à la seconde partie transmise du faisceau et réciproquement. Ainsi, la configuration décrite en référence à la figure 1 n'est qu'un exemple pratique de réalisation Bien entendu, l'utilisation conjuguée des moyens formant diaphragme MD 1 et MD 2 et des moyens de focalisation du faisceau d'excitation FLA 1 s'applique aussi à la configuration dans laquelle la partie réfléchie du faisceau d'excitation éclaire le premier échantillon et dans laquelle la partie transmise du faisceau de diffusion résultant est acheminée vers l'ouverture d'entrée du spectromètre. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, il est prévu de disposer un second échantillon ER selon le second axe A 2 parallèle à l'axe de sortie AO. Il y a lieu de remarquer que l'axe d'entrée A 3 et le second axe A 2 se coupent en un point donné PT 2 appartenant aux moyens séparateurs L 51, ici les deux axes A 3 et Al sont perpendiculaires en ce point PT 2. La Demanderesse s'est posé le problème d'utiliser de façon optimale les parties réfléchie RFE et transmise TFE du faisceau d'excitation cohérent FE séparé par les moyens séparateurs L 51. Selon l'invention, il est prévu un organe de couplage L 2 de type lentille de focalisation pour conduire la première partie réfléchie RFE du faisceau d'excitation sur le second échantillon ER selon l'axe de sortie AO. Les moyens séparateurs L 51 séparent en outre le faisceau de diffusion FDER qui résulte de l'éclairement du second échantillon ER par la première partie réfléchie RFE du faisceau d'excitation en une première partie réfléchie RFDER et une seconde partie transmise TFDER La seconde partie transmise TFDER est alors conduite vers l'ouverture FX du spectromètre SPR. Le second échantillon ER est soit disposé sous l'objectif d'un microscope, on parle alors de microsonde RAMAN, soit il est placé sur un porte-échantillon classique, on parle alors de macrosonde RAMAN. En intercalant des moyens formant obturateur 02 sur la première partie réfléchie du faisceau d'excitation RFE éclairant le second échantillon ER et des moyens formant obturateur 01 sur la seconde partie transmise TFE du faisceau d'excitation éclairant le premier échantillon EA, il est possible d'effectuer des comparaisons des deux spectres RAMAN sans déplacer les moyens de couplage optique. Par exemple, il est possible de faire des mesures de soustraction, d'addition ou de rapport entre les deux spectres RAMAN résultants. Il y a lieu de remarquer que ces mesures bénéficient avantageusement sur les deux échantillons de l'amélioration apportées à la résolution axiale et latérale selon l'invention. Il est maintenant fait référence à la figure 2. Le Demandeur a constaté de façon surprenante que l'utilisation optimale du faisceau d'excitation séparé par les moyens séparateurs L 51 pour éclairer deux échantillons distincts peut être aussi appliquée avantageusement à un seul échantillon. L'échantillon à analyser EA est ici disposé selon l'axe A 2. Des organes de couplage optiques comprenant deux miroirs M 3 et M 4 conduisent ici le faisceau d'excitation cohérent FE de l'axe d'entrée A 3 vers l'axe de sortie AO via le premier axe Ai parallèle à l'axe de sortie A 0. Les moyens séparateurs L 51 sont ici agencés selon l'axe de sortie AO. La première partie réfléchie RFE du faisceau d'excitation cohérent FE est conduite sur l'échantillon à analyser EA par une lentille de focalisation L 5 et un miroir M 5. Par exemple, l'échantillon à analyser EA est placé sous l'objectif J 3 d'un microscope RAMAN. De son côté, la seconde partie transmise TFE du faisceaud'excitation est acheminée sur l'échantillon à analyser EA à l'aide d'un miroir M 6, d'une lentille L 6 et d'un objectif J 4. Les moyens séparateurs L 51 séparent d'un côté le faisceau de diffusion incohérent FDRFE qui résulte de l'éclairement de l'échantillon EA par la première partie réfléchie RFE en une première partie réfléchie RFDRFE et une seconde partie transmise TFDRFE Dans la configuration décrite en référence à la figure 2, c'est la seconde partie TFDRFE qui est ensuite acheminée vers l'ouverture d'entrée FX du spectromètre SPR. Les moyens séparateurs L 51 séparent de l'autre côté le faisceau de diffusion FDTFE résultant de l'éclairement du même échantillon EA par la seconde partie transmise TFE du faisceau d'excitation en une première partie réfléchie RFDTFE et une seconde partie transmise TFDTFE Dans la configuration décrite en référence à il la figure 2, c'est la première partie réfléchie RFDTFE qui est ensuite acheminée vers l'ouverture d'entrée FX du spectromètre SPR. L'homme de l'art comprendra qu'une telle configuration permet d'éclairer à la fois l'échantillon à analyser selon deux orientations et de collecter les deux faisceaux de diffusion résultant de ce double éclairement. Il en résulte un gain du flux lumineux qui va être conduit dans l'ouverture d'entrée du spectromètre Ce gain est sensiblement double par rapport à l'éclairement simple classique. Cette configuration procure aussi un avantage lorsqu'il s'agit d'analyser des échantillons dont le positionnement n'est pas critique, par exemple en phase d'industrialisation. Il est à noter que le double éclairement de l'échantillon et la double collection des faisceaux de diffusion qui en résulte bénéficient avantageusement de l'amélioration apportées à la résolution axiale et latérale selon l'invention telle que décrite en référence à la figure 1. Il est aussi à noter qu'il est possible d'interposer des moyens formant obturateur sur le trajet des première et seconde parties du faisceau d'excitation pour effectuer des mesures comparées du spectre RAMAN. Il y a lieu de remarquer qu'en ôtant la lame séparatrice L 51, le faisceau d'excitation cohérent FE est réfléchi par le miroir M 6 puis éclaire l'échantillon à analyser EA, le faisceau de diffusion incohérent qui en résulte est ensuite réfléchi par le miroir M 5 pour être conduit vers l'ouverture d'entrée FX du spectromètre SPR. On remarque que l'on se retrouve ici dans un cas limite o le faisceau d'excitation réfléchi est nul tandis que le faisceau d'excitation transmis est maximal. D'un autre côté, en remplaçant la lame séparatrice par un miroir, on se retrouve dans l'effet contraire, c'est-à-dire dans lequel le faisceau d'excitation réfléchi est maximal tandis que le faisceau d'excitation transmis est nul. Avantageusement, les moyens séparateurs L 51 peuvent être constitués d'une lame séparatrice semi-transparente de type dichroïque, c'est-à- dire une lame dont le pouvoir séparateur est fonction de la longueur d'onde du faisceau incident. L'utilisation d'une lame séparatrice dichroïque a l'avantage par rapport au montage classique d'acquérir les raies Stokes, anti- Stokes et le spectre basse fréquence du signal RAMAN. En effet, classiquement, la courbe de réponse de la lame séparatrice dichroïque est généralement choisie de telle sorte que la partie transmise du faisceau d'excitation cohérent est très élevée par rapport à la partie réfléchie dudit faisceau d'excitation ou inversement Il en résulte que le faisceau reçu par l'ouverture du spectromètre qui définit le signal RAMAN contient seulement la raie Stokes ou la raie anti-Stokes et ne contient pas la zone intermédiaire appelée par l'homme de l'art signal basse fréquence. Par contre, grâce à l'invention, du fait du double éclairement de l'échantillon et de la double collection des faisceaux de diffusion qui en résulte, il est possible d'acquérir les raies Stokes, anti-Stokes et le spectre basse fréquence du signal RAMAN. Il est à noter aussi ici que le double éclairement de l'échantillon et la double collection des faisceaux de diffusion qui en résulte bénéficient avantageusement de l'amélioration apportées à la résolution axiale et latérale selon l'invention telle que décrite en référence à la figure 1. Il est maintenant fait référence à la figure 3. Il s'agit ici de moyens formant expanseur du faisceau d'excitation FE qui sont montés en amont des moyens séparateurs L 52. En pratique, les moyens expanseurs forment une lunette dite de Galilé constituée d'une lentille divergente L 7 et d'une lentille convergente LB. Les deux lentilles L 7 et L 8 sont disposés ici autour d'un miroir M 4 conduisant le faisceau d'excitation FE vers les moyens séparateurs L 52. Il est maintenant fait référence à la figure 4. Il s'agit ici de moyens formant adaptateur d'ouverture du faisceau de diffusion FD qui sont montés en aval des moyens séparateurs L 53 Par exemple les moyens séparateurs sont de type prisme séparateur. En pratique, les moyens adaptateurs forme une lunette dite de Galilée constituée d'une lentille de focalisation L 10, d'une lentille convergente L 11, et d'une lentille divergente L 12. Il est à noter aussi ici que l'expansion du faisceau d'excitation et l'adaptation d'ouverture du faisceau de diffusion bénéficient avantageusement de l'amélioration apportées à la résolution axiale et latérale selon l'invention telle que décrite en référence à la figure 1. Il est maintenant fait référence à la figure 5. Il s'agit ici d'une platine selon l'invention, destinée à recevoir les moyens de couplage optiques permettant d'améliorer le fonctionnement d'un appareil de spectrométrie RAMAN selon l'invention. On retrouve les éléments essentiels et constitutifs d'un appareil de spectrométrie RAMAN, à savoir une source laser LA pour produire une lumière d'excitation cohérente selon l'axe d'entrée A 3; au moins un échantillon à analyser, (sur la figure 3, il est représenté un premier échantillon EA à analyser disposé sous l'objectif d'un microscope MC 1 d'une part et un second échantillon ER disposé sur un porteéchantillon formant macrosonde MA d'autre part). Selon l'invention, les moyens permettant d'améliorer les résolutions axiale et latérale de l'appareil sont astucieusement disposés autour des moyens séparateurs L 51 disposés à l'intersection de l'axe d'entrée A 3 et du second axe A 2 au point PT 2. La Demanderesse s'est posé aussi le problème de rendre modulaires les différents éléments de couplage optiques pour permettre une commutation facile et reproductible desdits éléments. Pour cela, il y a lieu d'éviter que le faisceau d'excitation et le faisceau de diffusion qui en résulte passent simultanément par le point PT 1 formant intersection entre l'axe d'entrée A 3 et l'axe de sortie AO. A partir de cette constatation, la Demanderesse a disposé les éléments optiques de couplage de façon astucieuse. Par exemple, le miroir M 3 commutable permet de faire agir le faisceau d'excitation selon le premier axe Ai parallèle à l'axe de sortie AO. Il est prévu une première entrée Il pour un premier microscope MC 1, une seconde entrée I 2 pour un second microscope MC 2, le cas échéant, et une troisième entrée I 3 pour une macrosonde MA. L'échantillon EA peut être ainsi analysé par la seconde partie TFE du second faisceau d'excitation FE transmise par les moyens séparateurs L 51 tandis que la première partie réfléchie RFE du faisceau d'excitation FE peut éclairer un autre échantillon via l'entrée I 2 comme décrit en référence à la figure 1, ou le même échantillon comme décrit en référence à la figure 2. Selon un autre aspect de l'invention, il est prévu d'interposer en amont des moyens séparateurs L 52, des moyens formant expanseur du faisceau d'excitation FE comme décrit en référence à la figure 3. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, il est prévu d'interposer sur l'axe de sortie A 0, un prisme séparateur L 53 propre à séparer le faisceau d'excitation en une première partie d'excitation réfléchie propre à éclairer l'échantillon ER et d'interposer toujours sur l'axe de sortie A O des moyens formant adaptateur d'ouverture du faisceau de diffusion, comme décrit en référence à la figure 4 Il y a lieu de remarquer que les moyens formant diaphragme MD 1 et MD 2 permettant l'amélioration des résolutions axiale et latérale de l'appareil peuvent être disposés autour des moyens séparateurs L 52 et L 53 conformément à l'invention. Il est maintenant fait référence à la figure 6 qui représente une manivelle optique. Cette manivelle optique s'adapte avantageusement sur la platine telle que décrite en référence à la figure 5 au niveau de la seconde entrée I 2. Plus précisément, la manivelle optique comprend un jeu de miroirs M 1 l, M 12 et M 13 tournant par rapport à un axe parallèle à l'axe d'entrée A 3. Par exemple, le faisceau d'excitation cohérent est d'abord réfléchi par un miroir M 3 disposé selon le premier axe Ai Des moyens polarisateurs R 2 polarisent le faisceau d'excitation FE. Le faisceau d'excitation ainsi polarisé est ensuite conduit via un miroir M 10 sur le miroir tournant Mil qui réfléchit ensuite selon un angle variable le faisceau d'excitation FE sur un * 2673718 mécanisme à miroirs M 12 et M 13 solidaire du miroir Mil Une lentille de localisation L 20 est interposée entre le miroir tournant Mll et l'échantillon à analyser EA. L'homme de l'art comprendra qu'avec une telle manivelle optique, il sera possible d'analyser l'échantillon sous plusieurs orientations. Pour la facilité de la compréhension de l'exposé de l'invention, les dispositions des différents éléments optiques les uns par rapport aux autres décrites en référence aux figures là 6 sont choisies selon des angles droits Bien entendu, l'invention s'applique à d'autres dispositions des différents éléments optiques selon des angles différents. Revendications 1 Appareil de spectrométrie RAMAN comprenant: des moyens (LA) pour produire une lumière d'excitation cohérente selon un axe d'entrée (A 3), au moins un premier échantillon (EA), un spectromètre (SPR) possédant une ouverture d'entrée (FX) selon un axe de sortie (A 0), des moyens séparateurs (L 51,L 52,L 53) propres à séparer le faisceau d'excitation cohérent (FE) en une première partie réfléchie (RFE) et en une seconde partie transmise (TFE), et des premiers moyens de couplage optique propres à conduire la seconde partie transmise (TFE) ou la première partie réléchie (RFE) du faisceau d'excitation cohérent sur le premier échantillon (EA), ainsi qu'à recueillir le faisceau de diffusion incohérent RAMAN de longueur d'onde différente de celle du faisceau d'excitation qui en résulte, les moyens séparateurs étant propres à séparer ledit faisceau de diffusion incohérent (FD) en une première partie réfléchie (RFDEA) et une seconde partie transmise (TFDEA), et des seconds moyens de couplage optique propres à conduire la première partie réfléchie (RFDEA) ou la seconde partie transmise (TFDEA) du faisceau de diffusion incohérent (FD) vers l'ouverture d'entrée (FX), caractérisé en ce que les premiers moyens de couplage optique comprennent des moyens de focalisation (FLA 1) propres à focaliser le faisceau d'excitation cohérent (FE) dans une première ouverture variable choisie (Dl) formant diaphragme pour filtrer spatialement le faisceau d'excitation cohérent (FE), et en ce que les seconds moyens de couplage optique comprennent des seconds moyens formant diaphragme (D 2) comprenant une seconde ouverture variable (D 2) conjuguée de la première ouverture (Dl) pour filtrer la première partie réfléchie (RFD) ou la seconde partie transmise (TFD) du faisceau de diffusion incohérent, ce qui permet d'améliorer la résolution spatiale de l'appareil. 2 Appareil selon la revendication 1, caractérisé en ce que le premier échantillon (EA) est placé sous l'objectif (Jl) d'un microscope RAMAN. 3 Appareil selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce que les premiers moyens de couplage optique (L 5,M 5) conduisent en outre la première partie réfléchie (RFE) ou la seconde partie transmise (TFE) du faisceau d'excitation cohérent sur ledit premier échantillon (EA), les moyens séparateurs (L 51) étant propres en outre à séparer le faisceau de diffusion incohérent RAMAN qui résulte de l'éclairement dudit premier échantillon (EA) par la première partie réfléchie (RFE) ou la seconde partie transmise (TFE) du faisceau d'excitation en une première partie réfléchie (RFDEA) et une seconde partie transmise (TFDEA) et à conduire la seconde partie transmise (TFDRFE) ou la première partie réfléchie (RFDTFE) dudit faisceau de diffusion incohérent sur l'ouverture d'entrée (FX) du spectromètre (SPR). 4 Appareil selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce qu'il comprend en outre un second échantillon (ER), et en ce que les premiers moyens de couplage optique (L 2,J 2) conduisent en outre la première partie réfléchie (RFE) ou la seconde partie transmise (TFE) du faisceau d'excitation cohérent sur le second échantillon (ER), les moyens séparateurs (L 51) étant propres en outre à séparer le faisceau de diffusion (FDER) incohérent RAMAN qui résulte de l'éclairement du second échantillon (ER) par la première partie réfléchie (RFE) ou la seconde partie transmise (TFE) du faisceau d'excitation en une première partie réfléchie (RFDER) et une seconde partie transmise (TFDER) et à conduire la seconde partie transmise (TFDER) ou la première partie réfléchie (RFDER) dudit faisceau de diffusion incohérent sur l'ouverture d'entrée (FX) du spectromètre (SPR). Appareil selon la revendication 3 ou la revendication 4, caractérisé en ce que les premiers moyens de couplage comprennent en outre: des premiers moyens formant obturateur ( 01) pour la première partie réfléchie (RFE) du faisceau d'excitation cohérent; et des seconds moyens formant obturateur ( 02) pour la seconde partie transmise (TFE) du faisceau d'excitation cohérent. 6 Appareil selon l'une quelconque des revendications pré- cédentes, caractérisé en ce qu'il comprend un porte-échantillon monté en translations horizontale et verticale et des moyens de commande propres à piloter les translations horizontale ou verticale du porte-échantillon. 7 Appareil selon l'une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que les moyens séparateurs (L 51) comprennent une lame séparatrice de type dichroïque, c'est- à-dire dont le pouvoir séparateur est fonction de la longueur d'onde du faisceau incident, ce qui permet d'acquérir les raies Stokes, les raies anti-Stokes et le signal basse fréquence du signal RAMAN. 8 Appareil selon l'une quelconque des revendications précé- dentes, caractérisé en ce que les premiers moyens de couplage optique comprennent en outre des moyens formant manivelle optique comprenant une lentille de focalisation (L 20) et un mécanisme à miroirs (M 11, M 12,M 13) mobile en rotation autour d'un axe parallèle à l'axe d'entrée (A 3), ce qui permet d'éclairer les premier (EA) ou second (ER) échantillons selon un angle variable (A). 9 Appareil selon l'une quelconque des revendications pré- cédentes, caractérisé en ce que les premiers moyens de couplage optique comprennent en outre des moyens formant expanseur (L 7,L 8) du faisceau d'excitation cohérent. Appareil selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les seconds moyens de couplage optique comprennent en outre des moyens formant adaptateur d'ouverture (Ll O,Lll,L 12) du faisceau de diffusion incohérent. 11 Appareil selon l'une quelconques des précédentes revendications, caractérisé en ce que les moyens de focalisation (FLA 1) sont formés de lentilles ou de miroirs cylindriques ou sphériques tandis que les ouvertures (Di et D 2) des moyens formant diaphragme (MD 1 et MD 2) sont choisies rectangulaires ou circulaires. 12 Appareil selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les premiers et seconds moyens de couplage optique sont disposés sur une platine et agencés sous la forme d'une pluralité de modules facilement commutable et reproductible sur le faisceau d'excitation et de diffusion. 13 Appareil selon la revendication 12, caractérisé en ce qu'il comprend au moins une première entrée (Il) pour un microscope de spectrométrie RAMAN et une entrée (I 3) pour une macrosonde RAMAN.