Brevet FR2679230A1 — publié le 19930122

i NOUVEAUX DERIVES D'ANALOGUES DU TAXOL. LEUR PREPARATION ET LES COMPOSITIONS QUI LES CONTIENNENT La présente invention concerne de nouveaux dérivés d'analogues du taxol de formule générale: R 1 À R 2 N-(CH 2)n-NHCOO O OH R-CONH O C 6 H 5 'k-" " O (I) (i) : l O OH HO _ÈOCOCH 3 OCOC 6 H 5 leur préparation et les compositions qui les contiennent. Dans la formule générale (I), R représente un radical phényle ou t butoxy, R 1 et R 2, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle contenant 1 à 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, ou bien R 1 et R 2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle, saturé ou non saturé, à 5 ou 6 chamons contenant éventuellement un second hétéroatome choisi parmi les atomes d'azote (éventuellement substitué par un radical alkyle conte- nant 1 à 4 atomes de carbone ou benzyle), d'oxygène et de soufre, et N est égal à 2 ou 3. Selon la présente invention, les nouveaux dérivés d'analogues du taxol de formule générale (I) peuvent être obtenus par action d'une amine de formule générale: RI\ N-(CH 2)n-NH 2 (II) R 2 dans laquelle R 1, R 2 et N sont définis comme précédemment sur un dérivé du taxane de formule générale: C 13 CCH 2 COO o OCOOCH 2 CCI 3 R-CONH o C 6 H 5 O " " O (III OH HO _ "OCOCH 3 OCOC 6 H 5 dans laquelle R est défini comme précédemment, pour obtenir le produit de formule générale: R 1 R-N-(CH 2)n-NHCOO CCH 2 CC 3 R-CONH o (V (IV) O OH HO' _ "OCOCH 3 OCOC 6 H 5 dans laquelle R est défini comme précédemment, suivie du remplacement du grou- pement protecteur en -7 (CC 13 CH 2 OCO-) par un atome d'hydrogène. Généralement, l'action de l'amine de formule (H) sur le dérivé du taxane de formule (HI) est réalisée dans un solvant organique inerte tel que le chlorure de méthylène à une température inférieure à 50 C afin d'éviter l'attaque du groupement protecteur en position -7. Le remplacement du groupement protecteur en position -7 est généralement effectué par traitement par le zinc dans l'acide acétique éventuellement en présence de méthanol à une température comprise entre 30 et 80 C. Le produit de formule générale (I) obtenu par le procédé selon l'invention peut être purifié par des méthodes physiques telles que la cristallisation ou la chroma- tographie sur un support approprié. Le produit de formule générale (I) peut être transformé en sel d'addition avec les acides minéraux (acides chlorhydrique, sulfurique, nitrique, phosphorique) ou organiques (acides acétique, oxalique, maléique, fumarique). Le produit de formule générale (III) peut être obtenu selon les procédés décrits dans les brevets européens EP-0 253 738 et EP-0 253 739. Les produits de formule générale (I), et en particulier ceux pour lesquels R représente un radical t butoxy, présentent des propriétés biologiques remarquables. In vitro, la mesure de l'activité biologique est effectuée sur la tubuline extraite du cerveau de porc par la méthode de M L Shelanski et coll, Proc Natl. Acad Sci USA, 70, 765-768 ( 1973) L'étude de la dépolymérisation des microtu- bules en tubuline est effectuée selon la méthode de G Chauvière et co 11, C R Acad. Sci, 293, Série II, 501-503 ( 1981) Dans cette étude les produits de formule générale (I) se sont montrés au moins aussi actifs que le taxol. In vivo, les produits de formule générale (I) se sont montrés actifs chez la souris greffée par le mélanome B 16 à des doses comprises entre 1 et 10 mg/kg par voie intrapéritonéale, ainsi que sur d'autres tumeurs liquides ou solides. Par ailleurs, les produits de formule générale (I) ont une solubilité dans l'eau meilleure que celle du taxol ou des dérivés du taxane qui font l'objet du brevet euro- péen EP-0 253 738. L'exemple suivant illustre la présente invention. EXEMPLE 1 Dans un ballon muni d'une agitation magnétique et d'un réfrigérant, on introduit 365 mg de t butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate- ( 2 R,3 S) d'acétoxy-4 a benzoyloxy-2 a époxy-5 p,20 hydroxy-1 l oxo-9 bis-l(trichloro- 2,2,2 éthoxy)carbonyloxyl-7 p,103 taxène-11 yle-13 a en solution dans 10 cm 3 de chlorure de méthylène On ajoute 80 îl de diméthylamino-3 propylamine Le mélange réactionnel est chauffé à 40 C sous atmosphère d'argon pendant 4 heures La solution est lavée par 2 fois 10 cm 3 d'eau Après séchage et évaporation du solvant, le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur couche épaisse de silice en éluant avec un mélange chlorure de méthylène-méthanol ( 8-2 en volumes) On obtient ainsi 250 mg de t butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-( 2 R,3 S) d'acé- toxy-4 a benzoyloxy-2 a époxy-51,20 hydroxy-1 l oxo-9 (diméthylamino-3 pro- pyl)aminocarbonyloxy-10 P (trichloro-2,2,2 éthoxy)carbonyloxy I-71 taxène-11 yle- 13 a dont la structure est confirmée par le spectre de résonance magnétique nueléaire du proton déterminé dans le chloroforme deutéré, les déplacements chimiques étant exprimés en ppm et les constantes de couplage (J) en Hertz: 1,16 (s, 3 H); 1,25 (s, 3 H); 1,35 (s, 9 H); 1,83 (s, 3 H); 1,93 (s, 3 H); 2,26 (s, 6 H) 2,38 (s, 3 H); 3,25 (m, 2 H); 3, 93 (d, J= 7, 1 H); 4,16 et 4,33 ( 2 d, J= 9, 2 H); 4,62 (s, large, 1 H); 4,73 et 4,99 ( 2 d, J= 12, 2 H); 4,96 (d, J= 9, 1 H); 5,29 (d, J= 9, 1 H); 5,47 (d, J= 9, 1 H); 5,54 (m, 1 H); 5,66 (d, J= 7, 1 H); 6,19 (t, J= 9, 1 H); 6,29 (s, 1 H); 7,37 ( 5 H); 7,49, 7,62 et 8,09 ( 5 H). A une solution de 137 mg du produit obtenu précédemment dâns un mélange acide actique-méthanol ( 1-1 en volumes), on ajoute 130 mg de zinc en poudre Le mélange réactionnel est agité à 60 C pendant 1 heure Après filtration et concentra- tion à sec, le résidu est repris par de l'eau puis extrait par de l'acétate d'éthyle Après décantation et séchage, les phases organiques sont concentrées à sec Le résidu obtenu est purifié par chromatographie en couche épaisse de silice en éluant avec un mélange chlorure de méthylène-méthanol ( 8-2 en volumes) On obtient ainsi 73 mg de t butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-( 2 R,3 S) d'acétoxy-4 a ben- zoyloxy-2 a époxy-5 p 3,20 dihydroxy-13,7 l oxo-9 (diméthylamino-3 pro- pyl)aminocarbonyloxy-103 taxène-ll yle-13 a qui présente les caractéristiques suivantes: spectre ultra-violet (éthanol): X max = 230 nm (e = 12700) X max = 275 nm (ú = 1040) spectre infra-rouge (en solution dans le chlorure de méthylène): principales bandes d'absorption caractéristiques à 3400, 2960 et 1729 cm- 1 spectre de résonance magnétique nucléaire du proton: 1,18 (s, 3 H); 1, 23 (s, 3 H); 1,33 (s, 9 H); 1,66 (s, 3 H); 1,87 (s, 3 H); 2,28 (s, 6 H) 2,38 (s, 3 H); 3,20 (m, 2 H); 3,78 (d, J= 7, 1 H); 4,17 et 4,31 ( 2 d, J= 8, 2 H); 4,43 (dd, J= 6 et 12, 1 H); 4,62 (s large, 1 H); 4,97 (d, J= 9, 1 H); 5,26 (d, J= 9, 1 H); 5,54 (d, J= 9, 1 H); 5,66 (d, J= 7, 1 H); 6,21 (m, 2 H); 7,39 ( 5 H); 7,51, 7,62 et 8,11 ( 5 H) spectre de masse (FAB): 936 (MH+) A une solution du produit obtenu précédemment dans 0,5 cm 3 d'éthanol, on ajoute 0,780 cm 3 d'une solution d'acide chlorhydrique 0,1 M Le mélange réactionnel est concentré à sec puis lyophilisé On obtient ainsi le chlorhydrate du t.butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-( 2 R,3 S) d'acétoxy-4 a ben- zoyloxy-2 a époxy-553,20 dihydroxy-lf 3,7 f oxo-9 (diméthylamino-3 pro- pyl)aminocarbonyloxy-10 f 5 taxène-ll yle-13 cc dont les caractéristiques sont les suivantes: pouvoir rotatoire: lcl 20 D = -29 (c = 0,4; éthanol) spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (CDC 13-CD 3 OD): 1,16 (s, 3 H); 1,21 (s, 3 H); 1,40 (s, 9 H); 1,66 (s, 3 H); 1,93 (s, 3 H); 2,38 (s, 3 H) 2,83 (s, 6 H); 3,16 (m, 2 H); 3,81 (d, J= 7, 1 H); 4,23 et 4,31 ( 2 d, J= 8, 2 H); 4,38 (m, 1 H); 4,58 (m, 1 H); 4,99 (d, J= 9, 1 H); 5,16 (s, 1 H); 5,66 (d, J= 7, 1 H); 6,16 (t, J= 9, 1 H); 6,26 (s, 1 H); 7,37 ( 5 H); 7,52, 7,70 et 8,09 ( 5 H). La présente invention concerne également les compositions pharmaceutiques contenant un produit de formule générale (I) en association avec tout autre produit pharmaceutiquement acceptable qu'il soit inerte ou physiologiquement actif. Ces compositions peuvent être présentées sous toute forme appropriée à la voie d'administration prévue La voie parentérale est la voie d'administration préfé- rentielle et notamment la voie intra-veineuse. Les compositions pour administration parentérale peuvent être des solutions stériles aqueuses ou non aqueuses, des suspensions ou des émulsions Comme solvant ou véhicule, on peut employer le propylèneglycol, les huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, et les esters organiques injectables, par exemple l'oléate d'éthyle Ces compositions peuvent également comprendre des adjuvants, en particulier des agents mouillants, émulsifiants ou dispersants La stérilisation peut se faire de plusieurs façons, par exemple à l'aide d'un filtre bactériologique, en incorporant à la composi- tion des agents stérilisants, par irradiation ou par chauffage Elles peuvent être éga- lement sous forme de compositions stériles qui peuvent être dissoutes ou dispersées dans de l'eau stérile ou tout autre milieu stérile injectable. Ces compositions sont particulièrement utiles dans le traitement des leucé- mies aiguës et des tumeurs solides. L'exemple suivant illustre une composition selon l'invention. EXEMPLE On dissout 40 mg du chlorhydrate obtenu à l'exemple 1 dans 80 cm 3 de sérum physiologique. La composition est administrée par introduction dans une perfusion d'un soluté physiologique pendant 1 heure. REVENDICATIONS 1 Nouveaux dérivés d'analogues du taxol de formule générale: R 2 N - (CH 2)n-NHCOO R-CONH O (I) OH HO _ OCOCH 3 ()COC 6 H 5 dans laquelle: R représente un radical phényle ou t butoxy, R 1 et R 2, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle contenant 1 à 4 atomes de carbone en chaine droite ou ramifiée, ou bien R 1 et R 2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle saturé ou non saturé à 5 ou 6 chaîmons contenant éventuellement un second hétéroatome choisi parmi les atomes d'azote, éventuellement substitué par un radical alkyle conte- nant 1 à 4 atomes de carbone ou benzyle, d'oxygène et de soufre, et N est égal à 2 ou 3, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides. 2 Procédé de préparation des nouveaux dérivés selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'on fait agir une amine de formule générale: RI\ N-(CH 2)n-NH 2 (I) R 2 dans laquelle R 1, R 2 et N sont définis comme dans la revendication 1 sur un dérivé du taxane de formule générale: CI 3 CCH 20 COO o OCOOCH 2 CCI 3 R-CONH O C 6 H 50 " " O (III) OH HO _ " O C O C Hs OCOC 6 H 5 dans laquelle R est défini comme dans la revendication 1 pour obtenir un produit de formule générale: R 2 N-(CH 2)n-NHCOO / OCOOCH 2 CCI 3 R-CONH O C 6 H 5 O ";_(> " ' (IV) OH HO' _ "OCOCH 3 OCOC 6 H 5 dans laquelle R, R 1, R 2 et N sont définis comme précédemment, puis on remplace le groupement protecteur trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyle par un atome d'hydrogène et on isole le produit obtenu éventuellement sous forme de sel. 3 Procédé selon la revendication 2 caractérisé en ce que l'on fait réagir l'amine de formule générale (I) sur le dérivé du taxane de formule générale (III) en opérant dans un solvant organique inerte tel que le chlorure de méthylène à une tem- pérature inférieure à 50 C. 4 Procédé selon la revendication 3 caractérisé en ce que le remplacement du groupement protecteur trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyle par un atome d'hydrogène est effectué au moyen de zinc dans l'acide acétique éventuellement en présence de méthanol à une température comprise entre 30 et 80 C. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient une quantité suffisante d'un produit selon la revendication 1 en association avec un ou plusieurs diluants ou adjuvants pharmaceutiquement acceptables inertes ou pharma- cologiquement actifs.