Brevet FR2661831A1 — publié le 19911115

La présente invention concerne le traitement des maladies vasculaires périphériques d'origine fonctionnelle parmi lesquelles l'acrocyanose, le syndrome de Raynaud et les symptômes apparentés d'insuffisance vasculaire périphérique, par exemple l'angiospasme des extrémités provoqué par le froid et par des troubles trophiques de la peau L'invention concerne en outre des compositions pharmaceutiques destinées à l'utilisation dans ces traitements. La vincamine est un alcaloïde indolique et elle a été isolée pour la première fois de Vinca minor L., une plante appartenant à la famille des Apocynaceae. Le principe actif peut être obtenu à l'état pur par extraction à partir de la plante ou encore par synthèse partielle (à partir d'un alcaloïde indolique la tabersonine) ou par synthèse totale. La vincamine a des propriétés pharmacologiques qui se sont révélées présenter un intérêt thérapeutique dans le traitement des maladies cérébro-vasculaires Elle est en fait capable d'améliorer le débit sanguin cérébral en exerçant un effet vasodilatateur sur les vaisseaux sanguins encéphaliques, permettant ainsi la redistribution de l'écoulement au bénéfice des régions ischémiques La vincamine intervient également dans le métabolisme neuronal, améliorant l'utilisation de glucose et d'oxygène. En plus de cette activité cérébrale, la vincamine peut exercer des effets anti-hypertenseurs résultant de la dilatation du lit vasculaire périphérique. L'action anti-hypertensive peut être clairement démontrée lorsque le médicament est administré par voie parentérale et elle est liée à la dose Cependant, lorsque le médicament est administré par voie orale, l'action anti-hypertensive est négligeable. En conséquence, l'utilisation de la vincamine comme agent anti-hypertenseur n'a pas été proposée comme l'une des applications cliniques du médicament Ceci provient principalement du fait que pour obtenir une réaction pharmacologique significative, il serait nécessaire d'élever la dose à un niveau qui produirait des effets secondaires indésirables, en particulier sur le coeur. L'EP-A-O 266 968 décrit des pommades gélifiées contenant un agent vasodilatateur qui est un membre du groupe constitué de la papavérine, de la procaine, de la théophylline, de l'acide nicotinique, du vérapamil et de la vincamine et leur utilisation pour lutter contre l'insuffisance érectile humaine Les seules pommades spécifiquement décrites contiennent la papavérine comme ingrédient actif, et aucune donnée pharmacologique n'est présentée à propos d'aucun autre agent vasodilatateur. Les substances vasodilatatrices décrites dans l'EP-A-O 266 968 comprennent un groupes hétérogène de médicaments ayant des mécanismes d'action différents. Jusqu'à présent, ils ont été utilisés dans divers traitements, comme l'indique le tableau suivant. Médicament Mécanisme d'action Emploi thérapeutique Procaine Modulation de la Anesthésique locale transmission nerveuse Théophylline Inhibiteur de la Antiasthmatique phosphodiestérase Acide nicoti Dépresseur des fi Vasodilatateur nique bres lisses Vérapamil Antagoniste du Antihypertenseur, calcium anti-angineux Papavérine Inhibiteur de la Myorelaxant phosphodiestérase Vincamine Inhibiteur de la Antiischémique phosphodiestérase cérébral Ainsi, les données contenues dans l'EP-A-O 266 968 relatives à l'effet de la papavérine sur la stimulation des érections chez l'homme après application de compositions locales de celles-ci sur le pénis ne permettent pas de prévoir les effets d'un emploi similaire de n'importe quel autre agent vasodilatateur auquel il est fait référence De même, compte-tenu de la structure anatomique particulière des vaisseaux du corps caverneux (corpora cavernosa), il n'est pas possible d'extrapoler les effets revendiqués pour l'application de la papavérine sur le pénis à d'autres parties du corps. A cet égard, les corps caverneux, considérés par certains auteurs comme étant des cavités veineuses, sont en réalité des capillaires qui sont exceptionnellement dilatés et richement anastomosés Ces espaces caverneux sont doublés d'une couche de cellules musculaires lisses constituant une structure contractile autour des cavités vasculaires Cette structure contractile est une caractéristique qui n'existe pas dans d'autres capillaires du corps Par conséquent, les capillaires du corps caverneux diffèrent significativement de ceux d'autres tissus en ce qu'ils possèdent la capacité de se contracter (qui est fondamentale pour remplir leurs fonctions particulières) De même, les artères qui apportent le sang aux tissus érectiles, les artères " 1 hélicines" diffèrent de celles des autres tissus et ont pour fonction de remplir les espaces caverneux au moment de l'érection. En raison de ces caractéristiques anatomiques particulières, le lit vasculaire du pénis ne peut pas être comparé à celui d'autres tissus. On a trouvé à présent d'une manière surprenante que la vincamine, lorsqu'elle est appliquée localement sur la peau dans le traitement des maladies vasculaires périphériques favorise un effet vasodilatateur qui est essentiellement limité à la région se trouvant au-dessous de la surface d'application, mais sans produire d'effets vasodilatateurs systémiques. On n'obtient pas d'effets vasodilatateurs périphériques comparables en administrant la vincamine par voie orale, même à des doses allant jusqu'à 5 fois les doses locales, et proches de la limite de tolérance. Ainsi, conformément à un aspect de la présente invention,, il est fourni un procédé de traitement de la maladie vasculaire périphérique chez un sujet de manière à obtenir un effet vasodilatateur local, qui comprend l'application locale de vincamine, ou d'un de ses sels pharmacologiquement acceptable, sur la peau située au-dessus de l'endroit o l'effet vasodilatateur est recherché. L'invention fournit en outre l'utilisation de la vincamine, ou d'un de ses sels pharmacologiquement acceptable, pour la fabrication d'une composition pharmaceutique pour le traitement des maladies vasculaires périphériques chez un sujet de manière à obtenir un effet vasodilatateur en appliquant localement la vincamine, ou un de ses sels pharmacologiquement acceptable sur la peau recouvrant l'endroit o l'effet vasodilatateur est recherché. Des compositions pharmaceutiques locales pour traiter les maladies vasculaires périphériques chez un sujet de manière à obtenir un effet vasodilatateur local, cette composition comprenant de la vincamine ou un de ses sels pharmacologiquement acceptable, et un excipient pharmaceutiquement acceptable, constituent un autre aspect de l'invention. Il est à noter que le terme "maladie vasculaire périphérique" désigne ici des maladies impliquant les capillaires périphériques, comme l'acrocyanose et la maladie de Raynaud, et ne comprend pas les états liés à l'impuissance des mâles faisant intervenir le corps caverneux du pénis Par conséquent, le terme "localement" tel qu'il est utilisé ici, exclut spécifiquement l'application sur le pénis. Des formes préférés d'administration sont des crèmes, pommades, gels et lotions. La concentration de la vincamine est de préférence comprise entre 0,1 et 10 % en poids, de préférence entre 0,5 et 3 % en poids Des excipients pharmaceutiquement acceptables qui peuvent être utilisés comprennent des cires naturelles et synthétiques, des huiles de pétrole, des polymères de polyoxyéthylène, des tampons et des stabilisants, des conservateurs et des parfums Des exemples de ceux-ci comprennent l'alcool cétostéarylique, le myristate d'isopropyle, des glycols, par exemple le glycérol, des polysorbates, des huiles végétales, la lécithine et d'autres substances appartenant à la classe des phytostérols et des glucosaminoglycanes, en particulier ceux indiqués pour l'utilisation locale. Des exemples de sels pharmacologiquement acceptables de la vincamine qui peuvent être utilisés conformément à l'invention comprennent des sels avec des anions minéraux, par exemple le chlorure, le sulfate et le phosphate, ainsi que des sels avec des anions organiques, par exemple les acétates et les citrates. Comme il a été indiqué précédemment, les procédés, compositions et utilisations conformes à la présente invention concernent particulièrement le traitement de maladies vasculaires périphériques telles que l'acrocyanose et la maladie de Raynaud. La capacité de la vincamine d'exercer un effet vasodilatateur chez un modèle animal est illustrée par les essais pharmacologiques suivants. 1 EFFET SUR LA CIRCULATION PERIPHERIQUE L'effet local de la vincamine sur la circulation périphérique a été établi par le procédé consistant à mesurer la température de la peau chez la souris Il est bien connu qu'un des essais non sanglants, les plus simples pour mesurer la circulation périphérique est basé sur l'enregistrement de la température de la peau ( 1 vasoconstrictives des abaissements de température. L'activité locale de la crème à la vincamine a été établie chez 75 souris Swiss mâles d'un poids moyen de 31,0 0,3 g, qui avaient logé dans des salles à une température de 21 10 C et une humidité relative de 50 5 %, et qui avaient reçu une alimentation normalisée avec de l'eau ad libitum. La température de la peau était mesurée dans l'aponévrose plantaire des pattes arrière en mettant une sonde thermo-sensible, du type TM-16 S, reliée à un dispositif Termit II (L S I, Settala, Milan, Italie) en contact avec la peau pendant 20 secondes. Les souris ont été divisées par randomisation en 4 groupes de 15 animaux, qui ont été traités comme suit: Groupe 1 Témoins: on a appliqué 100 mg de Groupe 2 Groupe 3 Groupe 4 crème placébo sur le dos de la patte avant droite et on l'a massée doucement pendant 30 secondes. On a appliqué 100 mg d'une crème contenant 2 % de vincamine base sur le dos de la patte droite et on l'a massée comme dans le groupe 1. On a appliqué 100 mg d'une crème contenant 0,5 % de vincamine base sur le dos de la patte droite et on l'a massée comme dans le groupe 1. Témoins on a administré par voie orale, par une sonde gastrique, 10 ml/kg d'une solution aqueuse à 0,5 % de Méthocel. Groupe 5 On a administré par voie orale, par une sonde gastrique, 300 mg/kg de vincamine base, en suspension dans 10 ml/kg de Méthocel, comme dans le groupe 4. La quantité de vincamine base administrée par voie orale correspond à 4,5 fois celle administrée localement dans la crème à 2 %. Chez tous les animaux, la température de la peau a été mesurée à la fois sur la patte droite et sur la patte gauche avant traitement et après 30, 60, 90, , 150 et 180 minutes de traitement Les résultats ont été soumis à une analyse statistique par analyse de variance selon un plan à tracé divisé (split-plot design). Les résultats obtenus sont donnés dans le Tableau 1 On voit que chez les animaux traités par 100 mg de crème placébo appliquée localement et chez ceux traités par 10 ml/kg de Méthocel à 0,5 % administrés par voie orale, il n'y a pas eu de modification significative de la température de la peau, par rapport aux valeurs initiales dans l'une et l'autre patte tout au long de la durée de l'expérience On n'a pas constaté de différences significatives entre les surfaces sous les courbes (AUC) pour la température des pattes droites et celle pour la température des pattes gauches. Chez les animaux traités par 100 mg de crème à la vincamine à 2 %, la patte droite présentait des élévations statistiquement significatives de la température par rapport aux valeurs initiales à partir d'une heure après l'application; Au contraire, on n'a pas constaté de modification statistiquement significative de la température de la patte controlatérale, non traitée Les AUC pour la patte droite étaient significativement plus élevées à la fois que celles mesurées pour les témoins et celles mesurées pour la patte gauche, non traitée Il n'y avait pas de différence entre les AUC pour la patte gauche et celles pour les témoins. Chez les animaux traités par 100 mg de crème à la vincamine à 0,5 %,la patte droite, traitée, présentait des augmentations significatives de température par rapport aux valeurs initiales à partir de 90 minutes après l'application Cependant, ces augmentations étaient plus faibles que celles produites par une même quantité de crème à 2 % et la surface sous la courbe pour la patte droite chez les animaux traités par la crème à 0, 5 % était à peu près la moitié de celle mesurée chez les animaux traités par la crème à 2 %. Toujours dans ce groupe, la AUC pour la patte droite était significativement plus élevée que pour la patte droite des témoins, tandis qu'il n'existait pas de différence significative entre l'AUC pour la patte gauche et celle pour les témoins. 9 - TABLEAU 1 Température de la peau chez la souris Modifications en C dans la patte droite (PD) et la patte gauche (PG) par comparaison avec les valeurs initiales (moyenne + écart-type) Tempéra lurfaces ubstanceNombre Pat Tempéra Surfaces ture su e d'animaux te ture 30 ',)' () ' 120 ' 150 ' 18 courbes (AU basale courbes (AUC rème PD 23, 110, 13-0,11 + 0,080, 171 (,) OO; 0,050, 150,0,10,09 + 0,090,19 + 0,0613 60 5,89 lacebo 15 00 rag 2 O OmgPG 23 t 3 0,111 -O,0 l 10 +,080,030 (),80,20,0 ()60,23 t 0,030,19 t O,070,21 0,0521,2 + 6,75 rème à 36 a vincà 15 PD 23,1 015 -0,09 * 0,10 0,/191 t,l "" 0,6 o i O 08 "" O,68 o O 08 ** O o 68 t 0,07 ** o,60 0,06 *# 82,211,05 "* a vine O ca-5 15 O Oing PG 23,2 0, 200,0310,11-(,( 5 (,12(), 1 (t(,( 50,15 * O > 060,17 * 0,080)20 * 0,01116, 80 * 8,93 émoin PD 23 t 5 O t 12 O o,01 0,080,( 03 (,(;)(,I;)'),o 80, 13 * 0,070,20 * 0,060,16 IO,0718,B O 7,70 léthocel 15 PG 23,11 * 0,13-0, 08 * 0,1 ((>(,( 7 ((),()Ilj()ol)0,110,08 0,13 t 0,050,12 0,067,80 o 9, 112 0. incamine PD 23,11 t O 100,05 * 0,090,0 C),10 M 9(,o( 4 J o I O0,20 * 0,090,20 * 0,080,17 * 0,0619,1409,81 6 O Omg/kg 15 .o O PG 23,3 * 0,12- 0,09 * 0,090,( 10 l(),I(,070,I()0109 * 0,090,200,0060,2170,06 12 O tlo,, 45 09, * p Méthocel à 0,5 %. On peut donc en conclure que la vincamine, lorsqu'elle est appliquée localement sur la patte, pénètre dans le derme et provoque une augmentation du débit sanguin dans le lit vasculaire sous-jacent sans provoquer d'effet systémique L'absence d'effet systémique est démontrée par l'absence de modifications de la température dans la patte controlatérale, non traitée. Au contraire, lorsque la vincamine est administrée par voie orale, même à une dose plus forte que celle appliquée localement, elle ne réussit à produire aucune modification dans le débit sanguin périphérique. Cette absence d'effet peut être attribuée à l'effet inotrope négatif de la vincamine, ce qui signifie que la dilatation des vaisseaux sanguins périphériques n'est pas accompagnée d'une augmentation du débit cardiaque et par conséquent, du débit sanguin périphérique. 2 TOXICITE SYSTEMIQUE DOSE UNIQUE La toxicité aiguë d'une dose unique de vincamine a été déterminée chez des souris Swiss des deux sexes d'un poids de 30 g en administration de la vincamine base par voie intraveineuse, intrapéritonéale ou par une sonde gastrique et en enregistrant le nombre de morts au cours des 15 jours suivants. Les DL 5 o, calculés par la méthode de Litchfield et Wilcoxon ( 4) ont été de 85 ( 75-95) mg/kg pour la voie intraveineuse, 220 ( 200-242) mg/kg pour la voie intrapéritonéale et 915 ( 795-1053) mg/kg pour la voie orale. il 3 TOLERANCE LOCALE La tolérance locale sur une peau intacte et abrasée a été déterminée en appliquant 500 mg de crème sur une surface épilée de la peau de la souris mesurant 3 x 4 cm (équivalent en gros à un tiers de la surface totale du corps) Des souris Swiss des deux sexes d'un poids moyens d'environ 30 g ont été utilisées dans cet essai Pour la moitié des animaux, la peau a été laissée intacte, tandis que pour l'autre moitié, elle a été scarifiée. Les réactions locales, les signes de toxicité et les morts ont été enregistrés sur la période de 15 jours suivant l'application. La crème a été parfaitement tolérée à la fois chez les animaux à la peau intacte et chez ceux à la peau abrasée, et elle n'a provoqué ni morts ni signes d'irrigation locale. 4 EXPERIENCES COMPARATIVES L'activité vasodilatatrice périphérique de la vincamine (mesurée par la variation de la température cutanée chez la souris après application locale) a été comparée à celle des médicaments suivants: acide nicotinique, procaine et vérapamil Les résultats démontrent que: ( 1) l'activité vasodilatatrice tant de l'acide nicotinique (Tableau 2) que de la procaïne (Tableau 3) est nettement inférieure à celle de la vincamine (Tableau 2), laquelle est le seul médicament exerçant un effet statistiquement significatif. ( 2) Dans le plan expérimental utilisé, le vérapamil exerce un effet statistiquement significatif contraire à celui de la vincamine (Tableau 4). Tableau 2 Vincamine et acide nicotinique Action sur la température cutanée chez la souris Preparations Témoins Gel à 2 % de Natrosol Crème à 2,5 % de vincamine base Gel à 2,5 % d'acide nicotinique Dose mg/sou- ris Nombre d'animaux I I 1 Valeurs au Surface sous la % de variation de. repos courbe la surface sous la courbe O J O 1 I 5816 17,7 22,,i () 1 133,5 i19,6 * + 127,8 21,() O JO 1 911 i O 22,9 + 60;Il t' * p Tableau 3 Procaine Action sur la température cutanée chez la souris Dose Nombre Valeurs au Surface sous % de variation Preparations mg/souri d'ani repos la courbe de la surface maux sous la courbe Témoins - Natrosol R Gel à 2,5 ne.HC 1 Gel à 5 % ne.H Cl Gel à 2 % de % de Procai- de Procai- I I;' 1.l ),7 I (, I. ?,()t(), 1 2, 1J O I 91,8 10,5 107)9 i 20,11 106,0, 18,1 + 17 > 5 + 15) 5 K) O Tableau 4 Vérapamil Action sur la température cutanée chez la souris Préparations Témoins Gel à 2 % de Natrosol Gel à 0,25 % de Vérapa- mil H Cl Dose mg/souri E Nombre d'ani- maux I ( Valeurs au repos 22, 8 i 0, 1 22,; '/ JM Surface sous la courbe 89 ( O 7; 5 58,2 i 8,9 * % de variation de la surface sous la courbe 31 IJ 6 w M M F al w F * p 2661831 Les exemples ci-dessous décrivent des modes de réalisation non limitatifs de compositions pharmaceutiques conformes à l'invention. Exem Dle 1: crème à 2 % 100 g de crème contiennent: vincamine 2,0 g alcool cétostéarylique 12,0 g myristate d'isopropyle 6,0 g propylène glycol 5,0 g polysorbate 60 3,8 g acide citrique 0,3 g p-hydroxybenzoate de méthyle 0,2 g eau purifiée 70,7 g Exemole 2: Qel à 1 % 100 g de gel contiennent: vincamine 1,0 g propylène glycol 5,0 g hydroxyéthylcellulose 2,0 g acide tartrique 0,5 g -polysorbate 60 0,2 g p-hydroxybenzoate de méthyle 0,2 g eau purifiée 91,1 g Exem Dle 3: lotion à 2 % ml de lotion contiennent vincamine 2,0 g propylène glycol 10,0 g acide tartrique 0,9 g polysorbate 60 0,2 g p-hydroxybenzoate de méthyle 0,1 g eau purifiée q s pour faire 100 ml Exem Dle 4 crème à 0,5 % g de crème contiennent: vincamine 0,5 g lécithine de soja 10,0 g alcool cétostéarylique 15,0 g polysorbate 60 5,0 g p-hydroxybenzoate de méthyle 0,2 g eau purifiée 69,3 g 16 2661831 Exemo Dle 5 crème à 2 % g de crème contiennent vincamine 2,0 g alcool cétostéarylique 15,0 g polysorbate 60 3,0 g glucosaminoglycanes 5,0 g phydroxybenzoate de méthyle 0,2 g eau purifiée 74,8 g REFERENCES 1) Richter; Acta Pharmacol et Toxicol, 21 ( 1), 91, 1964 2) Kramer, Lochner, Wetterer; Varied methods and instruments for Flow measurements, dans Hamilton, W.K: Handbook of Physiology, Washington D C: Am. Physiol Soc, 1963, Sect 2, vol II, p 1277. 3) Green; Blood Flow Measurement, dans Potter, V R: Methods in Medical Research, Chicago, The Year Book Publishers, 1948, vol I, p 66. 4) Litchfield, Wilcoxon; J Pharm exp Ther, 96, 99, 1949. La présente invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation qui viennent d'être décrits, elle est au contraire susceptible de modifications et de variantes qui apparaîtront à l'homme de l'art. REVENDICATIONS 1 Utilisation de la vincamine ou d'un de ses sels pharmacologiquement acceptable pour la fabrication d'une composition pharmaceutique pour le traitement des maladies vasculaires périphériques chez un sujet de manière à obtenir chez ce sujet un effet vasodilatateur local, par un procédé qui comprend l'application de vincamine ou d'un de ses sels pharmaceutiquement acceptable, localement sur la peau recouvrant l'endroit o l'effet vasodilatateur est recherché. 2 Utilisation selon la revendication 1 dans laquelle cette maladie est l'acrocyanose ou la maladie de Raynaud. 3 Composition pharmaceutique locale pour le traitement des maladies vasculaires périphériques chez un sujet de manière à obtenir un effet vasodilatateur local chez ce sujet, cette composition comprenant de la vincamine ou un de ses sels pharmacologiquement acceptable et un excipient pharmaceutiquement acceptable. 4 Composition pharmaceutique selon la revendication 3, sous la forme d'une pommade, d'une crème, d'une lotion ou d'un gel. Composition pharmaceutique selon les revendications 3 ou 4, contenant de 0,1 à 10 % en poids de cette vincamine, ou de son sel pharmacologiquement acceptable. 6 Composition pharmaceutique selon la revendication 5, contenant de 0,5 à 3,0 % en poids de cette vincamine ou de son sel pharmacologiquement acceptable. f 9