Brevet FR2672801A1 — publié le 19920821

La présente invention concerne l'utilisation de dérivés de tétrahydrothiénopyridine pour la prépa- ration de compositions pharmaceutiques pour prévenir ou traiter les pathologies impliquant ou dépendant d'une néovascularisation et notamment des rétinopa- thies, l'arthrite rhumatoide, le psoriasis, certaines tumeurs cancéreuses, les angiomes, le syndrome de Kaposi et les complications du SIDA, les chéloides cutanées, les complications des brûlures, les rejets de greffe et l'endométriose. Ces composés sont, en effet, des inhibiteurs de l'angiogénèse. Les composés utilisables selon l'invention sont ceux répondant à la formule (CH 2 W N-CH-Ar I 2/q S COZ dans laquelle p vaut 2 et q vaut 1 ou p vaut 1 et q vaut 2; Ar représente un phényle non substitué, ou portant un ou plusieurs substituants choisis parmi halogéno, alkyle en C 1 à C 3, alkoxy en C 1 à C 3, nitro ou tri- fluorométhyle; et Z représente NR 1 R 2 dans lequel R 1 et R 2, identiques ou différents, représentent H, alkyle en C 1 à C 4 éventuellement substitué par NR 3 R 4 ou par phényle, substitué ou non par halogéno, alkyle en C 1 à C 3, alkoxy en C 1 à C 3, nitro ou trifluorométhyle, ou for- ment avec l'atome d'azote un hétérocycle saturé, ou Z représente OR dans lequel R est H ou alkyle en C 1 à C 6 éventuellement substitué par OH ou NR'3 R'4 et R 3, R'3, R 4 et R'4, représentent chacun HI, alkyle en C 1 à C 4 ou forment avec l'atome d'azote un hétéro- cycle saturé, et leurs sels d'addition avec des acides minéraux ou organiques pharmaceutiquement acceptables. Par hétérocycle saturé on entend piperidino, pyrrolidinyle, morpholino et piperazinyle-1 et, par alkyle et alkoxy, les radicaux à chaîne droite ou ramifié. Ces composés comportent au moins un carbone asymétrique et les énantiomères purs comme leurs mé- langes en toutes proportions et notamment les racémi- ques sont utilisables selon l'invention. On préfère les composés de formule I, dans lesquels Ar représente un noyau phényle substitué par un atome d'halogène, et mieux un noyau phényle ortho- chloré, et Z représente méthoxy ou éthoxy Parmi ces composés, les isomères lévogyres, de configuration absolue S, définie selon la méthode de la règle séquentielle, sont préférés. Ces composés, dont un certain nombre sont connus et notamment décrits dans EP-A-99802 et EP-A- 281459, peuvent être préparés de façon classique par action d'un dérivé phénylacétique de formule Ar-CH-COZ II x X dans laquelle X représent Cl ou Br sur la 4,5,6,7-tétrahydrothiénoú 3,2-clpyridine, connue, de formule S III ou son isomère, connu, de formule IV s dans un solvant polaire protique, tel qu'un alcool, ou aprotique, tel que l'acétone ou le diméthylformamide, en présence d'une base minérale ou organique pour neu- traliser l'acide formé. Dans le cas o Z est OH, on effectue généra- lement la substitution de l'azote hétérocyclique avec un composé de formule II dans lequ Lel Z représente un alkoxy et l'ester obtenu sera hydrolysé de façon clas- sique en milieu aqueux de préférence en présence d'une base; on peut aussi préparer à partir des esters d'al- kyle les composés dans lesquels Z représente NR 1 R 2 ou des esters d'alkyle substitués, par des méthodes con- nues en elles-mêmes. Les énantiomères des composés de formule I peuvent être obtenus de façon classique, soit à partir du mélange racémique par recristallisations d'un sel avec un acide optiquement actif, tel que l'un des énantiomères de l'acide camphosulfonique-10 ou de l'acide tartrique, soit en faisant réagir sur les com- posés de formule III ou IV, un seul des énantiomères du composé de formule Il, dans des conditions non racémisantes. Les compositions pharmaceutiques selon la présente invention, comprenant les composés de formule I ou leurs sels, associés aux excipients usuels com- patibles, seront préparées selon les méthodes galéni- ques habituelles pour être administrables par voie orale, transmuqueuse ou par injection. Les doses unitaires et journalières dépen- dront de l'activité intrinsèque du principe actif et seront adaptées au type et à l'intensité de la patho- logie à prévenir ou à traiter, comme à l'âge et au poids du patient Chez l'adulte pour une administra- tion par voie orale, la dose unitaire peut être com- prise entre 5 mg et 500 mg. Lorsque l'un des énantiomères est nettement plus actif que son homologue, sans qu'il y ait une augmentation parallèle de la toxicité, on utilisera de préférence cet énantiomère pur ou associé avec moins de 10 % de son homologue. On sait, en outre, des brevets EP-99802 et EP-281459 que certains des composés de formule I ont aussi une activité antiagrégante plaquettaire, dont l'intensité est fonction de la configuration de la molécule autour du carbone asymétrique fixé sur l'azote hétérocyclique, et on préfère utiliser pour préparer les compositions pharmaceutiques de l'inven- tion, inhibitrices de l'angiogénèse, les énantiomères des produits ne présentant qu'une faible activité antiagrégante associée. On décrit dans ce qui suit des essais phar- macologiques qui montrent l'activité inhibitrice de l'angiogénèse de composés représentatifs de l'inven- tion. Essai in vitro un milieu nutritif (Dulbecco's modified Eagle medium - DMEM), complémenté avec du sérum de veau foetal (con- centration 5 % V/V) et contenant de la glutamine ( 4 m M), de la pénicilline ( 100 U/ml), du sulfate de streptomycine ( 100 pg/ml), introduit dans des puits de 1 ml est ensemencé avec des cellules endothéliales capillaires de cortex cérébral de bovin ( 20 x 103 cel- lules/ml), isolées et cultivées comme décrit par D. Gospodarowicz et coll dans J Cell physiol 127, p. 121-136 ( 1986). Dès l'adhésion cellulaire, on ajoute 1 ng/ml de facteur de croissance fibroblastique basique bovin, recombinant (rb-FGF) commercialisé par Amersham, fac- teur connu de stimulation de l'angiogénèse in vivo, puis les solutions à étudier. Une numération cellulaire est effectuée 5 jours après l'addition de 20 pl d'une solution dans le diméthylsulfoxyde des produits à l'étude, de telle sorte que leur concentration finale dans le milieu soit comprise entre 10-4 et 10-8 M; les puits témoins reçoivent 20 pl de solvant. A partir des résultats obtenus pour plu- sieurs concentrations de chacun des produits à étu- dier, on calcule de façon classique à quelle concen- tration ceux-ci inhibent 50 % de la prolifération cellulaire. Les résultats obtenus figurent dans le tableau I. Essai in vivo H.F Dvorak et coll ont montré que des gels de fibri- ne induisent une réponse angiogène, in vivo, chez le rat. Leur technique, décrite dans Laboratory Investigation 57 ( 6) 673- 686 ( 1987) a été utilisée pour mettre en évidence l'activité inhibitrice de l'angiogénèse des composés de l'invention. On implante, en sous-cutané, chez le rat, des chambres perforées de plexiglas contenant un gel de fibrine, obtenu par polymérisation de fibrinogène de rat en présence de thrombine La fibrine est envahie de manière séquentielle et ordonnée par dif- férents types de cellules, tels que des leucocytes, des macrophages, des fibroblastes et des cellules endothéliales, aboutissant à la formation d'un tissu de granulation néovascularisé. On administre aux rats par voie orale les produits à tester, en suspension dans l'alcool absolu et la gomme arabique à 5 % ( 10 ml/kg), à la dose de 5 et 25 mg/kg/jour pour les composés des exemples 3 et 4, pendant 5 jours avant l'implantation et jusqu'au retrait des chambres Au bout de 14 jours, un bourgeon de granulation est formé et les chambres sont préle- vées afin d'observer la hauteur du bourgeon de granu- lation ancré dans la matrice et la quantité de néo- vaisseaux apparus. Dans une autre expérience pour étudier la régression de l'angiogénèse, les chambres sont im- plantées sur des rats non traités et l'administration journalière des produits à étudier n'est débutée qu'après 14 jours; l'aspect du bourgeon formé est observé après 8 et 14 jours de traitement. On a constaté dans les deux séries d'expé- riences que le composé Ne 3 est nettement plus actif que son homologue le composé N' 4, lorsqu'ils sont administrés à la dose de 25 mg/kg/jour et le composé Ne 3 est encore très actif à la dose de 5 mg/kg/jour. L'inhibition de la réponse angiogénique a été évaluée par: (i) la hauteur et le diamètre des bourgeons de gra- nulation; (ii) le nombre de néovaisseaux par bourgeon et leur localisation, (iii) la qualité du tissu de granulation. La hauteur des bourgeons de granulation est inhibiée de 50 % après gavage avec le composé de l'exemple 3 et de 30 % après gavage avec celui de l'exemple 4 ( 25 mg/kg/jour) Le premier reste efficace à 5 mg/kg/jour ( 50 % d'inhibition) contrairement au second ( 5 mg/kg/jour) Le nombre de néovaisseaux par bourgeon est significativement abaissé de 90 % par le premier ( 25 mg/kg/jour) et de 60 % par le second ( 25 mg/kg/jour), de 50 % en présence du premier à 5 mg/kg/jour. Le tissu de granulation apparaît plus lâche et désorganisé après traitement avec le composé de l'exemple 3. TABLEAU I Composé Formule isomère F CI 50 N'a (sel) (n M) s I j Ci CH COOH + + + Cl CH sj: c COOCH 3 N -CH S COCC 2 H 5 + 205 'C HC 1 *C HC 1 178 'C H 25 O 4 178 'C H 25 04 'C H Br 2,3 0,8 3, 7 TABLEAU I (suite 1) Composé Formule isomère F' CI 50 N' (sel) (n M) CH 1 Cl - + 155 'C 220 H 25 04 _+ + 'C base 137 'C 50 base + CON c L-,C C s C o e (COD (N o + C 320 base 203 'C 20 (COOH)2 TABLEAU I (suite 2) Composé Formule isomère F' CI 50 N (sel) (n M) Cl -CH 2 CONH(CH 2) 3 N(CH 3) 2 + 210 'C 2 HC 1 + 122 'C 30 base Cl IONHCH 2 3 Cl ci I CH S COOCH 3 S G N-CH ci S COOCH 3 + 116 'C base + 186 'C H Cl + 202 'C H Cl USJC 1 1 1,9 1 1 TABLEAU I (suite 3) Composé Formule isomère F' CI 50 N' (sel) (n M) F CH S -C C 2 H 5 H u S COOC 2 H 5 N-CH S COOCH 3 mvç Cl + 100 'C H Cl + 188 'C H 25 04 + 200 'C H Cl + 150 *C H Cl REVENDICATIONS 1 Utilisation de composés de formule (CH t N-CH-Ar _S 1 (CH 2)/ COZ dans laquelle p vaut 2 et q vaut 1 ou p vaut 1 et q vaut 2; Ar représente un phényle non substitué, ou portant un ou plusieurs substituants choisis parmi halogéno, alkyle en C 1 à C 3, alkoxy en C 1 à C 3, nitro ou tri- fluorométhyle; et Z représente NR 1 R 2 dans lequel R 1 et R 2, identiques ou différents, représentent H, alkyle en C 1 à C 4 éventuellement substitué par NR 3 R 4 ou par phényle, substitué ou non par halogéno, alkyle en C 1 à C 3, alkoxy en C 1 à C 3, nitro ou trifluorométhyle, ou for- ment avec l'atome d'azote un hétérocycle saturé; ou Z représente OR dans lequel R est H ou alkyle en C 1 à C 6 éventuellement substitué par OH ou NR' 3 R'4 et R 3, R 3 ' R 4 et R'4, représentent chacun H, alkyle en C 1 à C 4 ou forment avec l'atome d'azote un hétérocycle saturé, et leurs sels d'addition avec des acides minéraux ou organiques phamaceutiquement acceptables, les composés de formule I pouvant être sous forme d'énantiomère pur ou de leurs mélanges en proportion quelconque et les hétérocycles saturés pouvant être piperidino, pyrrolidinyle, morpholino et piperazi- nyle-1, pour la préparation de compositions pharmaceutiques pour prévenir ou traiter les pathologies impliquant ou dépendant d'une néovascularisation. 2 Utilisation selon la revendication 1 d'un composé de formule I dans laquelle Ar représente un phényle substitué par un atome d'halogène et de sels. 3 Utilisation selon la revendication 1 d'un composé de formule I dans laquelle Ar représente un phényle ortho-chloré et Z représente un groupe alkoxy en C 1 ou C 2 et de ses sels. 4 Utilisation selon la revendication 1 de l'isomère lévogyre du composé de formule Cl -CH s 5 COOCH 3 et de ses sels.