Brevet FR2649395A1 — publié le 19910111

1i 2 6 49649395 La présente invention concerne un nouveau dérivé de la dihydro-1,4 pyridine, la (-) ([(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyll-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyri- dine, son procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui le contiennent. Certains dérivés de la dihydro-1,4 pyridine possédant d'intéres- santes propriétés pharmacologiques ont été décrits dans le brevet EP 259206. Ce brevet décrit et revendique parmi un grand nombre de composés l'l[[(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyll-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine. Le procédé d'obtention de ce composé sous sa forme racémique est exemplifié dans ce brevet. Compte-tenu des résultats thérapeutiques très intéressants obtenus sur ce produit, des recherches plus approfondies ont été entreprises pour i5 séparer les isomères optiques du composé et ont abouti à la découverte de la (-) {[(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine. En effet, les différents procédés de séparations d'isomères ou de synthèses stéréosélectives décrits dans la littérature ne permettent pas l'obtention des isomères de l'{[(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl}-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 di- hydro-1,4 pyridine. Il a donc été nécessaire d'inventer un nouveau pro- cédé, qui également fait l'objet de la présente invention. La (-) [[(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl}-2 (dichloro-2,3 phé- nyl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4l. pyridine est un puissant inhibiteur de la pénétration intracellulaire du calcium. Théoriquement, l'isomère actif d'un composé doué de propriétés pharmacologiques, possède au maximum le double de l'activité par rapport au racémique. Dans le cas présent, les essais pharmacologiques ont démontré que l'activité du composé de l'invention est très supérieure. La présente invention a plus particulièrement pour objet la (-) {[(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl]-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxy- carbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine composé de formule I: ci 0 c0 (1) H3C-O-C O // H 0C-O-CH2CH3 H3C N H CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2NH2 et ses sels d'addition avec un acide minéral ou organique pharmaceu- tiquement acceptable. Parmi les acides utilisés, on peut citer les acides fumarique, tartrique, camphosulfonique, chlorhydrique, citrique, méthane sulfonique, benzène sulfonique etc... La présente invention a également pour objet le procédé de préparation du composé de formule I, caractérisé en ce que l'on condense le [(chloro-2 éthoxy)-2 éthoxy]-2 éthanol avec la phtalimide potassique, dans la diméthylformamide à chaud, pour former le [(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] -2 éthanol, composé de formule II, Q N-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH20 H (II) o0 3 2649395 que l'on transforme à l'aide du réactif de Jones en acide [(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy]-2 acétique, composé de formule III: O o Q N-CH2CH2OCH2CH2OCH2COOH *) O o que l'on traite avec le carbonyldiimidazoie et l'acide de Meldrum en présence de pyridine dans le chlorure de méthylène, pour obtenir le composé de formule IV: o 0 CH3 O " C-CH2OCH2CH2OCH2CH2-N (IV) CH3 O O O lequel ensuite on fait réagir avec le (R) phényl'-2 méthoxy-2 éthanol, composé de formule V: (R) CH-CH2OH (V) à OCH3 pour obtenir le P-cétoester de formule VI: O O' OCH3 N-CH2CH2OCH2CH2OCH2-C-CH2-C-OCH2-CH- (VI) (R) O 4 2649395 qu'on condense en présence de formiate d'ammonium dans l'éthanol avec un benzylidène de formule VII: CI ci CH300C (VII) x H3C 0 pour obtenir la (4R4'R/4S4'R) (dichloro-2,3 phényl)-4 méthoxycarbonyl-5 (méthoxy-2 phényl-2 éthoxycarbonyl)-3 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl}-2 dihydro-1,4 pyridine, composé de formule VIII: ci o (VIII) CH300C 1 0 H CH3 N11 CH20CH2CH20CH2CH2N Q H (4R4'R14S4'R) 0 laquelle ensuite: soit: lO qu'on soumet à l'action d'une solution aqueuse de.bicarbonate de sodium, en solution dans l'acétonitrile, pour obtenir la (4R4'R/4S4'R) {[[(car- boxy-2 phénylcarboxamido)-2 éthoxy)]-2 éthoxy] méthyl}-2 (dichloro-2,3 2649395 phényl)-4 méthoxycarbonyl-5 (méthoxy-2 phényl-2 éthoxycarbonyl)-3 méthyl6 dihydro-1,4 pyridine, composé de formule IX: ci(x 2' COOH CI ci (IX) CH300C.O t I 2 OCH3! CH3 N CH20CH2CH20CH2CH2NH-C-- Q H 0 (4R4'R/4S4'R) que l'on traite, après séparation par HPLC, par un mélange.de glyme et d'éthylate de sodium, pour obtenir un mélange contenant la (-) {[[(carboxy-2 phénylcarboxamido)-2 éthoxy]-2 éthoxy] méthyl}-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine, composé de formule X, ci ci' (x) CH300C COOC2H5 COOH CH3 CH2OCH2CH2OCH2CH2NH-C H O et son homologue, substitué en position 5 par un radical éthoxycarbonyle, soit: qu'on sépare le composé de formule VIII par chromatographie sur colonne de silice en utilisant comme éluant un mélange de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle (95:5 V/V) pour obtenir l'isomère le moins polaire de la (dichloro-2,3 phényl)-4 méthoxycarbonyl-5 (méthoxy-2 phényl-2 éthoxycarbonyl)-3 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy]. méthyl}-2 6 2649395 dihydro-1,4 pyridine, lequel ensuite est soumis à l'action d'éthanolate de sodium en présence de glyme en solution dans l'éthanol, pour obtenir un mélange contenant le composé de formule X et son homologue, substitué en position 5 par un radical éthoxycarbonyle, lequel est ensuite soumis à l'action du carbonyldiimidazole en solution dans un alcane halogéné à température ambiante pour obtenir un mélange contenant de la (-) (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl}-2 dihydro-1,4 pyridine composé de formule XI: cI 1 o CH300C COOC2H5 CH3 N CH2OCH2CH2OCH2CH2N (XI) (I)f H o et son homologue substitué en 5 par un radical éthoxycarbonyle lequel mélange est ensuite séparé par HPLC, pour obtenir la (-) (dichloro2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxyl méthyll-2 dihydro-1,4 pyridine pure, laquelle est ensuite portée au reflux dans l'éthanol en présence d'hydrate d'hydrazine pour donner le composé de la formule I qui peut être ensuite salifié avec un acide'organique ou minéral pharmaceutiquement compatible. Le (R) phényl-2 méthoxy-2 éthanol composé de formule V est obtenu par réduction de l'acide correspondant, optiquement actif. Ce dernier composé est préparé selon le procédé décrit dans J.Chem.Soc.,1962,p.1519. L'ester méthylique de l'acide (dichloro-2,3 benzylidène)-2 oxo-3 butanoïque, composé de formule VII est obtenu par condensation du dichloro-2,3 benzaldéhyde avec l'acétoacétate de méthyle. 7 2649395 Le composé de formule I, est un inhibiteur de la pénétration intra- cellulaire du calcium nettement. plus puissant que son racémique corres- pondant. En effet, de manière surprenante, les résultats des essais pharmacologiques ont démontré que le composé de formule I possède une activité qui est de 4 à 30 fois supérieure par rapport à l'activité du racémique. La concentration en calcium intracellulaire joue un rôle de messager pour de nombreuses fonctions biologiques: contractions, sécrétions; cette concentration dépend largement de la pénétration transmembranaire en calcium, qui, très concentrée dans les milieux extracellulaires, transite à travers les canaux sélectifs pour le calcium situés dans la membrane. C'est ainsi que des inhibiteurs de ces canaux limitant ou supprimant la pénétration du calcium peuvent avoir des effets thérapeutiques intéressants dans un nombre de pathologies comme par exemple vasorelaxation, pour le traitement de l'hypertension artérielle et l'hypertension pulmonaire, des maladies vasculaires périphériques et coronaires. (Am.J.Card.1980,46,p.1047-1058; Burger's Medicinal Chemistry 4ème Edition, Part III,p.5456 - John Wiley and Sons Inc. USA.,1981; Life Sciences,1983,33,p.2571-2581). Des effets bénéfiques induits sont également constatés pour le traitement des insuffisances cardiaques. La modération de la contraction myocardique est aussi utile dans les situations ischémiques cardiaques. (Medicine,1985,64,p.61-73). La limitation de la pénétration du calcium dans les cellules peut également jouer un rôle important pour prévenir l'accumulation calcique caractéris- tique du vieillisement cellulaire et liée à certaines maladies dégénéra- tives vasculaires '-athéromatoses en particulier- (Medicinal Research Review,1985,5,p.394-425). La modulation calcique présente également un intérêt pour le traitement de l'épilepsie et des vertiges d'origine centrale. La limitation du calcium ionisé dans les fibres lisses des parois du tube digestif permet aussi la levée des spasmes oesophagiens et au niveau pulmonaire celui du spasme bronchique (traitement de l'asthme). Cette 8 2649395 modération du calcium peut aussi être utile comme adjuvant dans les traitements du cancer et de l'hypercoagulation. La présente description n'est d'ailleurs pas limitative, les travaux fondamentaux mettent en effet l'accent sur le rôle de premier plan Joué par le calcium dans nombre de phénomènes physiologiques et physiopathologiques. Les essais pharmacologiques chez le rat, ont prouvé in vivo, que l'activité du composé de l'invention est supérieure à celle de son racémique et qu'il est doué d'une durée d'action plus longue et confirment l'intérêt de son emploi en thérapeutique. L'invention s'étend aussi aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif le composé de formule I, ou un de ses sels d'addition avec un acide minéral ou organique avec un ou plusieurs excipients, inertes,-non toxiques et appropriés. Les compositions pharmaceutiques ainsi obtenues sont présentées avantageusement sous des formes diverses telles que par exemple comprimés, dragées, gélules, glossettes ou autres préparations galéniques appro- priées. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent en outre contenir un principe actif d'action complémentaire ou synergique. La posologie peut varier largement en fonction de l'âge, du poids du patient, de la nature et de la sévérité de l'affection ainsi que de la voie buccale ou parentérale. D'une manière générale, la posologie unitaire s'échelonnera entre 0,02 et 50 mg et la posologie Journalière administrée par voie orale, utilisable en thérapeutique humaine ou animale entre 0,02 et 100 mg. Les exemple suivants, donnés à titre non-limitatif, illustrent l'invention. Les points de fusion indiqués sont mesurés selon la technique micro-K6fler. 9 2649395 Les spectres de résonance magnétique nucléaire du proton (R.M.N.) ont été enregistrés à 200 MHz. EXEMPLE 1 Acide [(pDhtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxvl-2 acétique STADE A [(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy]-2 éthanol Porter à 95 C, pendant 17 heures, 188 g de [(chloro-2 éthoxy)-2 éthoxy]-2 éthanol, 146 g de phtalimide potassique dans 700 ml de diméthylformamide. Diluer au chlorure de méthylène, laver par une solution saturée de chlorure de sodium, sécher, évaporer. Distiller au Kugelrhor Ebo,05 mm: 180-185 C Rendement: 90% Spectre de résonance magnétjqUe nueléaire du prêt2n iSolvant CDCli): 4H(m)7,5 à 8 ppm; 12H(m)3,4 à 4 ppm; 1H (massif échangeable D20) 2,5 à 3 ppm. STADE B Dissoudre 3 g de l'alcool obtenu au stade précédent dans 150 ml d'acétone. Couler le réactif de Jones en maintenant la température entre 200 et 25 C. Laisser reposer une heure à la température ambiante. Concen- trer, diluer ensuite au chlorure de méthylène, laver à l'eau. Sécher et évaporer le solvant pour obtenir ie composé attendu. Point de Fusion: 88-900C Rendement: 90% Speetre de r4sonance magnétique nucléaire du pLoloR (Solvant CDC131: 1H (massif échangeable) 8,8 à 9,5 ppm; 4H(m)7,6 à 8,1 ppm; 2H(s)4,1 ppm; 8H (m)3,6 à 4 ppm. 2649395 EXEMPLE 2 (R) Dhénvl-2 méthoxv-2 éthanol Réduire 72 g d'acide (R) phényl-2 méthoxy2 acétique (préparé selon la méthode décrite dans J.Chem.Soc.,1962,p.1519) , par 16,5 g d'hydrure de lithium et d'aluminium dans 300 ml de tétrahydrofuranne. Hydrolyser et filtrer les sels minéraux et ensuite distiller l'huile résiduelle au Kugelrhor. Eb15mm = 105 C. Rendement: 76% pctre de résonance magnétique nucléaire du prgtQn (Solvant CDCl): 5H(m) 7,35 ppm; 1H(d)4,35 ppm; 2H(m)3,65 ppm; 3H(s)3,3 ppm; 1H (d échangeable) 2,35 ppm. Pouvoir rotatoire en solution à 11 dans l'éthanol: Aà(nm) | [a]240C 589 - 122 578 - 127 546 - 145 436 - 249 365 - 396 11 2649395S EXEMPLE 3 Ester (R) Dhénvl-2 méthoxy-2 éthylique de l'acide dioxa-5.8 oxo-3 phtalimido-10 décanoique A une suspension contenant 34,7 g du composé de l'exemple 1 dans 210 ml de chlorure de méthylène on ajoute en une lois 20 g de carbonyldiimidazole. Agiter jusqu'à fin de dégagement gazeux. Couler ensuite en un goutte à goutte rapide un mélange constitué de 17,7 g d'acide de Meldrum et 9,2 g de pyridine dans 70 ml de chlorure de méthylène. Agiter sous azote pendant une nuit. Transvaser dans une ampoule à décanter, laver à l'acide sulfurique N jusqu'à pH acide, puis une lois à l'eau, sécher et évaporer le solvant. Porter l'huile au bain marie avec 25 g de l'alcool obtenu dans l'exemple 2, jusqu'à fin de dégagement. Soumettre le milieu réactionnel à une chromatographie sur colonne (chromatographie flash) contenant 1,8 kg de silice en utilisant comme éluant un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle (1:1 V/V) pour obtenir le composé attendu. Rendement: 70%. Spectre de résonance magnétjque nucléaire duproton (solvant CDCi3): 4H(m) 7,6 à 8,1 ppm, 5H(s)7,35 ppm, 3H(m)4 à 4,6 ppm, 2H(s)4,1 ppm, 1OH(m)3,5 à 4 ppm, 3H(s)3,3 ppm. Pouvoir rotatoire en solution à 1i dans l'éthanol: A(nm) [a]21'C 589 - 35,1 578 - 36,5 546 - 41,4 436 - 69,8 365 - 107,2 12 2649395 EXEMPLE 4 Ester méthvlique de l'acide (dichloro-2,3 benzvlidène)-2 oxo-3 butanoïque Porter au reflux sous agitation pendant 4 heures, un mélange contenant 8, 7 g de dichloro-2,3 benzaldéhyde, 5,8 g d'acétoacétate de méthyle, 28 gouttes de pyridine et 38 gouttes d'acide hexanoïque dans 280 ml de benzène. Transvaser dans une ampoule, laver avec une solution à % de bicarbonate de sodium, puis avec une solution d'acide chlorhydrique N, puis à l'eau. Sécher et évaporer. Les cristaux obtenus sont lavés par l'éther isopropylique. Rendement: 65% Spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (Solvant CDC13): 1H(2s)8 et 8,05 ppm; 3H(m),7,1 à 7,8 ppm; 3H(2s)3,9 et 3, 75 ppm, 3H(2s) 2,45 et 2,2 ppm. EXEMPLE 5 (4R4'R/4S4'R) (dichloro-2.3 phényl)-4 méthoxycarbonvl-5 (méthoxv-2 phénvl2 éthoxvearbonyl)-3 méthvl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxyl méthvll-2 dihvdro-1.4 pyridine Agiter sous azote à 40 C pendant 48 heures un mélange contenant 22,2 g du composé décrit dans l'exemple 4, 38 g du composé décrit dans l'exemple 3, et 6,3 g de formiate d'ammonium dans 200 ml d'éthanol. Le milieu résiduel est évaporé et purifié sur une colonne contenant 4 kg de silice en utilisant comme éluant un mélange constitué de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle (9:1 V/V). _pectre de résonance magn tique nucléaire du proton (Solvant CDC_3: 2H(m) 7,8 ppm; 2H(m)7,7 ppm; 7H(m)7,3 à 7,1 ppm, 1H(t)7,05 ppm; 1H(s)5,45 ppm; 2H(m)4,6 ppm, 11H(m)3,6 à 4,4 ppm; 3H(2s)3,6 ppm; 3H(2s)3,2 et 3,05 ppm; 3H(s)2,3 ppm; 1H(s) non échangeable par D20, 7,4 ppm. 13 2649395 Pouvoir rotatoire en solution à 1% dans le chloroforme: I À A(nm) [a]21 C 589 - 13,3 f 578 - 13,8 546 - 15,1 EXEMPLE 6 4R4' R/4S4' R) f f [ (carboxv-2 phénvlearboxamido)-2 éthorv l-2 éthoxv éthvli-2 (dichloro-2.3 ohénvl)-4 méthoxvcearbonvl-5 (méthoxv-2 phénvl-2 éthoxvearbonvl)-3 méthyl-6 dihvdro-1.,4 Dyridine Porter au reflux sous agitation pendant 24 heures un mélange contenant 16,5 g du composé de l'exemple 5, 100 ml de solution aqueuse à % de bicarbonate de sodium et 230 ml d'acétonitrile. Evaporer le solvant, reprendre à l'eau, acidifier à l'acide chlorhydrique N et extraire pour obtenir le composé attendu. Rendement: 87% Spectre de résonance magnetque nucléaire du proton (Solvant CDC!3): 1H(m)7,9 ppm; 3H(m)7,5 ppm; 7H(m)7,4 à 7,15 pppm; 1H(t)7, 05 ppm; 1H(2s)5,45 ppm; 2H(m)4,8 ppm; 2H(m)4,4 à 4,1.ppm, 1H(m)3,9 ppm; 8H(m)3,8 à 3,5 ppm; 3H(2s)3,6 ppm; 3H(2s)3,2 et 3,05 ppm; 3H(s)2,3 ppm; 1H(t)6,55 ppm; 1H (signal masqué échangé par D20) 7,45 ppm; 1H (signal plat) 7 à 5 ppm échangé par D20. Pouvoir rotatoire en solution à 1_ dans le chloroforme Mrm) | [a]21 C 589 - 14,2 578 - 14,8 546 - 16,3 *2649395 EXEMPLE 7 Mélange de (-) {[F(carboxv-2 phényl carboxamido)-2 éthoxvl-2 éthoxvl méthvll-2 (dichloro-2.3 phényl)-4 éthoxvearbonvl-3 méthoxv- carbonvl-5 méthvl-6 dihvdro-1.4 pyridine et de son homologue substitué en Dosition 5 par un radical éthoxycarbonyle * Premier procédé Le composé de l'exemple 6 est séparé en ses deux isomères par HPLC en utilisant comme colonne une Lichroprep RP18 de 50 cm de long et comme éluant un mélange de méthanol et de phosphate disodique 0,025M t0 (55:45 V/V), débit 10 ml/min. 3 g du deuxième composé issu de la séparation sont portés au reflux avec 30 ml de glyme et 28,6 ml d'une solution d'éthylate de sodium 0,26M. Evaporer, reprendre à l'eau, acidifier et extraire à l'acétate d'éthyle pour obtenir les composés attendus. Rendement global: 10% * Deuxième procédé STADE A Le composé de l'exemple 5 est chromatographié sur une colonne préparative contenant 4 kg de silice, en utilisant comme éluant un mélange de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle (95:5). Isoler le premier composé issu de la séparation qui est le moins polaire. Rendement: 20% Spectre de résonanee magntique nucléaire du proton isolvant CDC13): 2H(m)7,8 ppm; 2H(m)7,7 ppm; 7H(m)7,4 à 7,1 ppm; 1H(t)7, 05 ppm; 1H(s),5,45 ppm; 2H(m)4,4 ppm; 11H(m)4 à 3,7 ppm; 3H(s)3,6 ppm; 3H(s)3,05 ppm; 3H(s)2,3 ppm; 1H(s)7,45 ppm (difficilement échangeable par D20). 2649395 Pouvoir rotatoire en solution à 1i dans le chloroforme: A(nm) [O]21 C E 589 - 9 578 -9,6 546 - 10,4 STADE B Porter 3 g du composé obtenu au stade précédent à reflux avec 30 ml de glyme et 28,6 ml d'une solution éthanolique d'éthanolate de sodium 0,26M. Evaporer, reprendre à l'eau, acidifier et extraire à l'acétate d'éthyle pour obtenir les composés attendus. Rendement: 65% EXEMPLE 8 Mélanme de (-) (dichloro-2.3 phényl)-4 éthoxvearbonvl-3 méthoxycarbonvl-5 méthyl-6 f f(Dhtalimido-2 éthoxv)-2 éthoxvl méthvll-2 dihvdro-1,4 vpyridine et de son homologue substitué en 5-par un radical éthoxvearbonvle. Dissoudre 1,9 g du mélange obtenu dans l'exemple 7 dans 30 ml de -15 chlorure de méthylène et ajouter err une fois 0,9 g de carbonyldiimidazole; Laisser sous agitation pendant une nuit. Transvaser le milieu réactionnel dans une ampoule à décanter, laver au bicarbonate de sodium à 10% et ensuite à l'acide chlorhydrique N et à l'eau. Sécher et évaporer pour obtenir les composés attendus. Rendement: 65% EXEMPLE 9 (-) (dichloro-2.3 phénvl)-4 éthoxycarbonvl-3 méthoxvearbonvl-5 méthvl-6 [f(Dhtaliido-2 éthoxvy)-2 éthorvyl méthvll-2 dihvdro-1.4 vpyridine Séparer le mélange obtenu dans l'exemple 8 par HPLC préparative en utilisant une colonne Lichroprep RP 18 de 50 cm de long et comme éluant un 16 2649395 mélange d'éthanol, d'eau et de TFA (500:500:1). Le composé attendu est isolé en premier. Rendement: 30% Pouvoir rotatoire en solution à 11 dans le DMS0: A(nm) [a] 20 C 589 - 34,6 578 - 36,5 546 - 43,9 436 - 119,0 EXEMPLE 10 (-) f[(amino-2 éthoxv)-2 éthoxvl méthyl}-2 (dichloro-2.3 phénvl)-4 éthoxvearbonvl-3 méthoxvearbonvl-5 méthvl-6 dihvdro-1.4 oyridine Mettre à reflux 1 g du composé préparé dans l'exemple 9 avec 10 ml d'éthanol et 0, 25 ml d'hydrate d'hydrazine pendant 4 heures. Evaporer le solvant, reprendre à l'éther éthylique, laver avec 5 ml de soude normale. et épuiser la phase éthérée à l'aeide chlorhydrique N. Les phases aqueuses sont ensuite basifiées et extraites à l'éther éthylique pour obtenir le composé attendu. Rendement: 60% Point de fusion: 69 -71 C. Spectre de résonance magnétque nucléaire du poton isolvant CDCi3.: 1H(m)7, 3 à7,7 ppm échangeable par D20; 3H(m)7,6 à 6,9 ppm; 1H(s)5,5 ppm; 2H(s)4, 8 ppm; 2H(q)4 ppm; 4H(s)9,7 ppm; 2H(m)3,4 à 3,7 ppm; 3H(s)3,6 ppm; 2H(t)2, 9 ppm; 3H(s)2,3 ppm; 2H(m)échangeables par D20 1,4 à 1,8 ppm; 3H(t)1,2 ppm. 17 2649395 Pouvoir rotatoire en solution à 1i dans le chloroforme: A(nm) [a]20,5'C 589 - 36,5 578 - 38,7 546 - 46,8 [ - 436 -133 EXEMPLE 11 Fumarate de la (-) {f(amino-2 éthoxv)-2 éthoxyl méthvyll-2 (di- chloro-2.3 phénvl)-4 éthoxycearbonyl-3 méthoxycarbonvl-5 méthvl-6 dihvdro-1.4 ovridine Le fumarate de la (-) {t(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl]-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine est obtenu après solubilisation de 4,2 g de base dans 50 ml d'une solution éthanolique d'acide fumarique 0,172M. Recristalli- sation dans l'acétonitrile. * Rendement: 92% Point de fusion: 1150C _pectre de résonance magnétique nucléaire du proto_ (Solvant CDCi3 et DMSO-d6). 2H(2d dédoublés)7,3 ppm; 1H(t)7,1 ppm; 2H(s)6,7 ppm; 1H(s)5,45 ppm; 2H(m)4,7 ppm; 2H(q)4 ppm; 6H(m) 5,7 ppm; 3H(s)3,6 ppm; 2H(m)3,1 ppm; 3H(s)2,3 ppm; 3H(t)1,3 ppm; 1H(s échangé D20)7,7 ppm; 4H(s échangé D20)5,7 ppm. Pouvoir rotatoire en solution à '1 dans le DMSO: (rm) [aL]20,5 C 589 - 33,1 578 - 35,2 546 - 43,0 436 - 134,6 18 2649395 EXEMPLE 12 (+) Tartrate de la (-) f f[(amino-2 éthoxv)-2 éthoxyvl méthvll-2 (di- chloro-2.3 phénvl)-4 éthoxvcarbonvl-3 méthoxyearbonvl-5 méthvl-6 di- hydro-1.4 pyovridine 0,2 g du composé de l'exemple 10 sont dissous dans 3, 1 ml de solution éthanolique d'acide (+) tartrique 0,133M. Après évaporation du solvant, on obtient 0,24 g du sel attendu. Point de fusion: 150 C Pouvoir rotatoire en solution à 1 dans le DMSO _ À(nm) [a]21,5 C 589 - 29,9 578 - 32,5 546 - 40,5 436 - 133,9 EXEMPLE 13 (-) Tartrate de la (-) {[(amino-2 éthoxv)-2 éthoxvy] méthvll-2 (di- chloro-2.3 Dhénvl)-4 éthoxvearbonvl-3 méthoxyearbonvl-5 méthvl-6 di- hvdro-1.4 vpyridine 0,3 g du composé de l'exemple 10 sont dissous dans 4, 6 ml d'une solution éthanolique d'acide (-) tartrique 0,133M. On isole le sel attendu après filtration. Point de fusion: 161-166 C (sublimation) Pouvoir rotatoire en solution à 1% dans le DMSO A(n-) [a]21,5 C 589 - 32,9 578 - 35 546 -.42,8 436 - 142,4 19 2649395 EXEMPLE 14 Tartrate racémique de la (-) [f(amino-2 éthoxv)-2 éthoxyl méthyll-2 (dichloro-2,3 Dhényl)-4 éthoxvyearbonvl-3 méthoxyoarbonyl-5 méthyl-6 dihvdro-l.14 pyridine 0,45 g du composé de l'exemple 10 sont dissous dans 6,9 ml d'une solution éthanolique d'acide tartrique racémique 0,133M. On isole le sel attendu après filtration. Point de fusion: 160-170 C Pouvoir rotatoire en solution à 1i dans le DMSO (nm) [a]21,5 C 589 - 31,2 578 - 33,5 ! 546 - 41,1 | 436 - 135,9 2649395 ETUDE PHARMACOLOGIQUE EXEMPLE 15 Affinité pour le site de fixation des dihydrovpyridines L'étude du déplacement par la (-) {[(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyll-2 (dichloro-2, 3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine et par son racémique du PN 200-110 tritié, fixé de façon spécifique au site de dihydropyridines associé au canal calcique lent, a permis de démontrer que le composé de l'invention présente une affinité pour ces sites 30 fois supérieure par rapport à son racémique. Cette étude -a été réalisée sur-des préparations de membranes microsomales préparées à partir de muscle squelettique des membres postérieurs de rat (Wistar). Les rats sont tués par décapitation. Les muscles squelettiques sont prélevés et lavés dans le tampon I (MOPS/KOH pH 7,4 20mM, saccharose 0,3 M, EDTA 1 mM, iodoacétamide 0,1 mM, pepstatine A 1 pM, leupeptine 1 mg/l et PMSF 0,1 pM). Ensuite les muscles sont fragmentés mécaniquement et repris dans 4 volumes de tampon I par gramme de tissus et homogénéisés. L'homogénat est ensuite centrifugé, pendant 10 minutes à 3.200 g les culots sont éliminés et les surnageants sont ensuite centrifugés pendant 20 minutes à 15.000 g, les surnageants sont agités durant 15 minutes à 4 C dans le tampon I contenant 0.6 M final de KCI, puis centrifugés 45 minutes à 70 000 g. Les culots sont repris dans le tampon I, homogénéisés au potter. Les homogénats sont centrifugés à 100 000 g durant 45 minutes et les culots ainsi obtenus correspondent à la fraction microsomale utilisée pour les études de liaison et de déplacement. L'activité des produits est appréciée par le déplacement du [3H] PN -110, fixé de façon spécifique à son récepteur associé au canal calcique lent par des concentrations croissantes des produits à examiner. 21 2649395 La valeur obtenue (KO.5), pour chacun des produits, qui représente la concentration de produit déplaçant 50% du [3H] PN 200-110, permet le calcul d'une constante de dissociation vraie (KI): I + IL] KO.5 =K1 x Kd o [L*] est la concentration du [3H] PN 200-110 libre et Kd la constante de dissociation à l'équilibre du complexe [3H] PN 200-110 déterminée par fixation directe. Les KI des deux produits sont rapportés au Tableau I: T A B L E A U I COMPOSE KI EXPRIME EN nM COMPOSE DE L'INVENTION 0,28, 0,15 RACEMIQUE 8,2 1,7 EXEMPLE 16 Etude sur l'artère mésentértiue isolée de lapin contractée par le caleiu Cet essai est effectué sur des organes isolés prélevés chez le lapin mâle de Nouvelle Zélande de 2,5 à 3 kg placé sous diète hydrique 18 heures avant le sacrifice. - Après sacrifice rapide de l'animal, l'artère mésentérique est prélevée et disséquée en anneau de 2 mm de longueur; l'endothélium est éliminé de façon mécanique. Après une période de stabilisation de 90 minutes, les préparations sont soumises à un milieu dépolarisant (35 mM KC1) et sans calcium (0,1 mM EGTA) pendant 15 minutes. Une gamme contrôle est réalisée en ajoutant au bain toutes les 6 minutes des doses cumulées de calcium jusqu'à l'effet maximal. Les 22 2649395 préparations sont alors rincées pendant une période de 15 minutes et le produit est incubé une heure avant le renouvellement de la gamme de calcium. Une seule concentration de produit est testée par organe. Les réponses obtenues en présence de produit sont exprimées en pourcentage de la valeur maximale de la gamme contrôle. Le pD'2 est calculé selon la méthode de Van Rossum (1963). Les valeurs de pD'2 du composé de l'invention et de son racémique figurent au Tableau II. Ces données indiquent la très nette supériorité (plus que le double) du composé de l'invention, par rapport à son racémique, à prévenir une contraction vasculaire induite par le calcium. T A B L E A U II COMPOSE pD'2 COMPOSE DE L'INVENTION 7,97 RACEMIQUE 7,64 EXEMPLE 17 Etude chez le rat spontanément hypertendu (SHR) éveillé Des rats mâles SHR de 280 à 350 g, âgés de 18 à 24 semaines sont anesthésiés à l'imalgène (150 mg/kg i.p.). Deux cathéters en polyéthylène sont introduits, l'un dans l'aorte abdominale pour l'enregistrement de paramètres hémodynamiques, l'autre dans la veine Jugulaire pour l'administration des produits. Les cathéters sont tunellisés au niveau du cou. Les animaux sont utilisés au moins 48 heures après intervention. Les pressions artérielles abdominales systolique et diastolique sont enregistrées à l'aide d'un capteur Statham P23XL sur un enregistreur Gould ES 1000. Les produits sont administrés par voie intraveineuse sous un volume de 0,5 ml/kg. Les doses administrées des composés étudiés sont exprimées en mg/kg de base. La pression artérielle est enregistrée en continu Jusqu'à 6 heures après le traitement. 23 2649395 Les variations de pression artérielle systolique après traitement sont reportées dans le Tableau III. Le composé de l'invention se distingue de son racémique par son activité plus puissante et encore mieux soutenue dans le temps, ce qui constitue un avantage considérable en thérapeutique. En effet, pour la même dose six heures après traitement, l'activité du composé de l'invention est environ 4 fois supérieure par rapport à son racémique. T A B L E A U III Variations de pression O EDOSE artérielle systolique COMPOSE (mg/kg) (mmHg) après traitement 1H30 3H 6H COMPOSE DE L'INVENTION 0,1 -16 2 -18 2 -21 5 RACEMIQUE 0,1 -11 3 -5 3 -5 2 PREPARATION PHARMACEUTIQUE EXEMPLE 18 Comprimés dosés à 1 mg de (-) 1[(amino-2 éthoxy)-2 éthozy] méthyl]-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine (A.D.E.M.M.D.P.): A.D.E.M.M.D.P.. .......;-......... 1 mg Saccharose amidon. . .............. 64 mg Cellulose excipient. . .... ....... 25 mg Acide alginique. ............... 10 mg..DTD: pour un comprimé d'un poids théorique de 100,00 mg. 24 2649395 R E V E N D I C A T ION S 1. La (-) {[(amino-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl]-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine composé de formule I: ci I i(-) / H 3C.0 C-O-CH2CH3 H3C N H CH2-0-CH2CH2-0-CH2CH2NH2 et ses sels d'addition avec un acide minéral ou organique pharmaceu- tiquement acceptable. 2. Procédé de préparation du composé de formule I, caractérisé en ce que l'on condense le [(chloro-2 éthoxy)-2 lO éthoxy]-2 éthanol avec la phtalimide potassique, dans la diméthylformamide à chaud, pour former le [(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy]-2 éthanol, composé de formule II, o Q N-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OH (I o lequel ensuite on transforme à l'aide du réactif de Jones en acide [(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy]-2 acétique, composé de formule III: o ( O 2649395 que l'on traite avec le carbonyldiimidazole et l'acide de Meldrum en présence de pyridine dans le. chlorure de méthylène, pour obtenir le composé de formule IV: o o CH3O O Il C-CH2OCH2CH2OCH2CH2-N (IV) CH3 0 O O lequel ensuite on fait réagir avec le (R) phényl-2 méthoxy-2 éthanol, composé de formule V: (R) CH-CH2OH 0 0 OCH3 (VI) o ol o cli 1 1 I 1 w I N-CH2CH2OCH2CH2OCH2-C-CH2-C-OCH2CH- (R) qu'on condense en présence de formiate d'anmmonium dans l'éthanol avec un benzylidène de formule VII: CI CH30 O X s H(VII) CH300C H3C O pour obtenir la (4R4'R/4S4'R) (dichloro-2,3 phényl)-4 méthoxycarbonyl-5 (méthoxy-2 phényl-2 éthoxycarbonyl)-3 méthyl-6 [[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyll-2 dihydro-1,4 pyridine, composé de formule VIII: ci ci (VIII) CH300ooc ( c R) CH2 N OCH3 CH3 i CH2OCH2CH2OCH2CH2N H (4R4'R/4S4'R) O laquelle ensuite: soit: qu'on soumet à l'action d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium, en solution dans l'acétonitrile, pour obtenir la (4R4'R/4S4'R) [[[(car- boxy-2 phénylcarboxamido)-2 éthoxy)]-2 éthoxy] méthyl]-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 méthoxycarbonyl-5 (méthoxy-2 phényl-2 éthoxycarbonyl)-3 mé- thyl-6 dihydro-1,4 pyridine, composé de formule IX: ci Ooo (ci (IX) 0- CH300C o C0 COOH 1' 2' OCH3 CO CH3 N CH2OCH2CH2 0CH2CH2NH-C Q H O (4R4'R/4S4'R) 27 2649395 que l'on traite par un mélange de glyme et d'éthylate de sodium, à chaud pour obtenir un mélange contenant la (-) {[ carboxamido)-2 éthoxy]-2 éthoxy] méthyll-2 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxy- carbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 dihydro-1,4 pyridine, composé de formule X, ci (x) CH300C COOC2H5 COOH CH3 N CH2OCH2CH20CH2CH2NH-C- Q H 0 et son homologue, substitué en position 5 par un radical éthoxycarbonyle, soit: qu'on sépare le composé de formule VIII par chromatographie sur colonne de silice en utilisant comme éluant un mélange de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle (95:5 V/V) pour obtenir l'isomère le moins polaire de la (dichloro-2,3 phényl)-4 méthoxycarbonyl-5 (méthoxy-2 phényl-2 éthoxy- carbonyl)-3 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl}-2 dihydro1,4 pyridine, lequel ensuite est soumis à l'action d'éthanolate de l5 sodium en présence de glyme en solution dans l'éthanol, pour obtenir un mélange contenant le composé de formule X et son.homologue, substitué en t position 5 par un radical éthoxycarbonyle, lequel est ensuite soumis à l'action du carbonyldiimidazole en solution dans un alcane halogéné à température ambiante pour obtenir un mélange contenant de la (-) 28 2649395 (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl]-2 dihydro-1,4 pyridine composé de formule XI: cI (-)o CH300C ' COOC2H5 CH3 ' N CH2OCH2CH2OCH2CH2N Q (XI) H o et son homologue substitué en 5 par un radical éthoxycarbonyle lequel mélange est ensuite purifié par HPLC, (phase inverse), pour obtenir la (-) (dichloro-2,3 phényl)-4 éthoxycarbonyl-3 méthoxycarbonyl-5 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyll-2 dihydro-1,4 pyridine, laquelle est ensuite portée au reflux dans l'éthanol en présence d'hydrate d'hydrazine pour donner le composé de la formule I qui peut- être ensuite salifié avec un acide organique ou minéral pharmaceutiquement compatible. 3. Composition pharmaceutique contenant comme principe actif le composé selon la revendication 1, en association ou en mélange avec un excipient ou un véhicule inerte non toxique, pharmaceutiquement acceptable. 4. Composition pharmaceutique selon la revendication 3 renfermant le principe actif à la dose de 0,02 a 50 mg. 5. Composition pharmaceutique selon les revendications 3 à 4 utilis- able dans le traitement des maladies nécessitant des modulateurs de calcium. 6. Composition pharmaceutique selon les revendications 3 à 4 utili- sable dans le traitement de l'athérome. 29 2649395 7. La (4R4'R/4S4'R) (dichloro-2,3 phényl)-4 méthoxycarbonyl-5 (méthoxy-2 phényl-2 éthoxycarbonyl)-3 méthyl-6 {[(phtalimido-2 éthoxy)-2 éthoxy] méthyl}-2 dihydro-1,4 pyridine, composé de formule VIII: c' cC (VIII) CH300C I (R) OCH3 I CH2OCH2CH2OCH2CH2N (4R4'R/4S4'R) 0 intermédiaire utile pour la préparation du composé de formule I selon la revendication 1.