Brevet FR2655343A1 — publié le 19910607

La présente invention concerne la préparation de dérivés de synergistines de formule générale: O NH OH (I) dans laquelle Y représente un atome d'hydrogène ou radical diméthylamino. Les produits de formule générale (I) ont été décrits comme intermédiaires pour la préparation de dérivés solubles de la pristinamycine IA ou de la virginiamycine, dans les brevets européens 133 097 et 248 703. Selon l'enseignement du brevet européen 133 097, les dérivés de synergistine de formule générale (I) peuvent être obtenus à partir de pristinamycine IA naturelle (Y = diméthylamino) ou de virginiamycine (Y = hydrogène), par l'intermédiaire d'une énamine, traitée par un borohydrure alcalin en présence d'un acide organique fort. Il a maintenant été trouvé que les dérivés de y synergistine de formule générale (I) peuvent être obtenus à partir de pristinamycine IA naturelle ou de virginiamycine, en passant par l'intermédiaire d'une base de Mannich de formule générale (III), dans laquelle Y est défini comme précédemment et R 1 et R 2 sont définis comme pour la formule générale (IV), puis par élimination de l'amine introduite, selon le schéma ci-après. Il est entendu que la base de Mannich de formule générale (III) présente des formes épimères et que ses épimères et leurs mélanges entrent dans le cadre de la présente invention. Y O NH N-,OH NI t Polyoxyméthyl ne O NH N.-OH N 5 U (I) R 1 HN R 2 La base de Mannich est préparée en présence d'un acide, par action de polyoxyméthylène et d'une amine de formule générale: R HN 2 (IV) R 2 dans laquelle R, est un radical alcoyle droit ou ramifié contenant 1 à 3 atomes de carbone, R 2 est un radical alcoyle tel que défini ci- dessus ou un radical phényle, ou bien RI et R 2 forment ensemble avec l'atome d'azote auquel ils sont rattachés, un hétérocycle saturé ou insaturé contenant 5 ou 6 chainons et éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi l'azote ou l'oxygène. Dans la pratique, on opère à une température comprise entre 20 et 50 C, dans un solvant protique polaire tel qu'un alcool (méthanol, éthanol, isopropanol, polyéthylèneglycol par exemple) ou dans un solvant aprotique polaire comme par exemple le diméthylsulfoxyde et l'on utilise avantageusement un large excès d'amine ( 10 à 40 équivalents) et de polyoxyméthylène ( 4 à 20 équivalents), et de préférence un léger excès d'amine par rapport à la quantité d'acide introduite, le rapport amine/acide pouvant varier de 1 à 1,3. Lorsque l'on opère en présence d'une amine de formule générale (I) de structure cyclique, on utilise avanta- geusement la morpholine, la pipéridine, la pyrrolidine ou l'imidazole. Les acides permettant de catalyser la réaction sont choisis parmi les acides forts, par exemple: les acides sulfoniques (acide méthanesulfonique, acide p toluène- sulfonique), les acides minéraux (acide sulfurique, acide chlorhydrique), les acides organiques halogénés, (acide trifluoroacétique, acide trichloroacétique) Il est également possible d'opérer dans l'acide acétique. Une autre alternative possible est l'utilisation du sel de l'amine et de l'acide employés. De préférence l'acide sera choisi en fonction de l'amine employée A titre d'exemple, lorsque l'on utilise la morpholine, on opère de préférence en présence d'acide méthanesulfonique ou en présence d'acide acétique ou sulfurique; lorsque l'on utilise la pipéridine, on opère en présence d'acide acétique ou paratoluène sulfonique; lorsque l'on utilise la diméthylamine, on opère de préférence en présence d'acide chlorhydrique. L'élimination de l'amine est mise en oeuvre en phase hétérogène biphasique, en milieu acide tamponné, à un p H compris entre 3,5 et 5. A titre d'exemple, on opère avantageusement en milieu acétique ou phosphorique. La phase organique peut être choisie parmi les solvants comme les esters (acétate d'éthyle, acétate d'isopropyle par exemple), les solvants chlorés (dichlorométhane par exemple), les solvants aromatiques (toluène par exemple) On opère généralement à une température comprise entre 20 et 800 C. Les exemples suivants donnés à titre non limitatif illustrent la présente invention. EXEMPLE 1 A/ Réaction de Mannich Dans un ballon tricol de 250 cm 3, sous argon sont successivement introduits, lentement et sous agitation, cm 3 de méthanol, 13,8 cm 3 de morpholine ( 0,157 mole, distillée sur potasse) et enfin 8, 25 cm 3 d'acide méthanesulfonique (O,125 mole, distillé), en maintenant la température du mélange à la température ambiante. 14,996 g de pristinamycine IA( 15,7 10-3 mole, titre = 91 % en pristinamycine IA) sont ajoutés en une fois, suivie de l'addition de 2, 294 g de polyxyméthylène ( 76,3 -3 mole) et le mélange réactionnel est chauffé à C, sous agitation pendant 5 heures et 30 minutes. Après retour à la température ambiante, 100 cm 3 d'acétate d'éthyle sont ajoutés et le mélange est concentré sous pression réduite (à l'évaporateur rotatif) jusqu'à obtenion d'un miel (évaporation de l'azéotrope Me OH-CH 3 COO Et) On ajoute de nouveau 350 cm 3 d'acétate d'éthyle et 350 cm 3 d'eau, puis le p H de la phase aqueuse est ramené de 6,3 à 7,5 par addition de 60 cm 3 d'une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium Les phases sont séparées et la phase aqueuse est extraite 3 fois par 80 cm 3 d'acétate d'éthyle Les phases organiques réunies, sont lavées par 3 fois 100 cm 3 d'eau et ces 3 dernières phases aqueuses sont extaites par 150 cm 3 d'acétate d'éthyle. L'ensemble des phases organiques est séché sur sulfate de sodium, filtré et concentré à l'évaporateur rotatif ljusqu'à obtention de 335 g de solution de base de Mannich brute (morpholinométhyl-58 pristinamycine IA)l. B/ Elimination de la morpholine Dans un ballon tricol de 1 litre, sont successivement placés 350 cm 3 d'eau, 18 cm 3 d'acide acétique ( 18,88 g, 0,314 mole), 1,336 g d'acétate de sodium ( 16,3 10-3 mole), puis la solution de base de Mannich est ajoutée en 5 minutes (exothermie de + 2 C) Le mélange réactionnel est chauffé à + 40 C pendant 1 heure et 50 minutes sous agitation Après retour à température ambiante, le p H est ramené de 4 à 6,5 par addition d'une solution saturée de 250 cm 3 d'hydrogènocarbonate de sodium et les phases sont séparées La phase organique est lavée 3 fois par 100 cm 3 d'eau et les phases aqueuses sont réunies et contre-extraites 3 fois par 100 cm 3 d'acétate d'éthyle Les phases organiques sont réunies et additionnées de 80 cm 3 d'acétate d'éthyle pour solubiliser le produit qui commence à précipiter, puis séchées sur sulfate de sodium Après filtration, le solvant est évaporé jusqu'à une masse totale de 116 g de la solution Le produit cristallise Après une nuit à + 4 C, le solide est filtré sur verre fritté ( 4) pour fournir 10,084 g de méthylène-56 pristinamycine IA sous forme d'un solide blanc (rendement pondéral = 72,9 %) et le filtrat est concentré à sec pour fournir encore 4,279 g de méthylène-58 pristinamycine IA(mélange des épimères) sous forme d'un solide jaune clair (rendement pondéral = 30,9 %). Dosage CLHP Cristaux: 10,08 g Titre en méthylène-56 pristinamycine IA: 93, 5 % RR: 68 % Concentrat des jus-mères: 4,28 g titre en méthylène-56 pristinamycine IA: 33 % RR: 10 % Soit un RR total = 78 % en méthylène-58 pristinamycine IA- EXEMPLE 2 A/ Réaction de Mannich Dans un ballon de 25 cm 3, sous argon, sont successive- ment introduits, lentement et sous agitation, 10 cm 3 de méthanol, 0,846 cm 3 de morpholine ( 9,7 10-3 mole, distillée sur potasse) et enfin 1,476 g d'acide p.toluènesulfonique ( 7,76 10-3 mole), en maintenant la température du mélange à 45 C. 1 g de pristinamycine IA ( 0,97 10-3 mole, titre = 84 % en pristinamycine IA), est ajouté en une fois Le mélange réactionnel est additionné de 0, 140 g de polyoxyméthylène ( 5 10-3 mole) puis chauffé à 50 C sous agitation pendant 7 heures et 45 minutes Après retour à température ambiante, 10 cm 3 d'acétate d'éthyle sont ajoutés et le mélange est concentré sous pression réduite (à l'évaporateur rotatif) jusqu'à obtention d'un miel (évaporation de l'azéotrope Me OH-CH 3 COO Et) On ajoute de nouveau 30 cm 3 d'acétate d'éthyle et 10 cm 3 d'eau. Les phases aqueuse et organique sont séparées et la phase aqueuse est extraite 1 fois par 10 cm 3 d'acétate d'éthyle Les phases organiques réunies sont lavées par 3 fois 10 cm 3 d'eau puis concentrées à l'évaporateur rotatif (jusqu'à obtention d'environ 25 g de solution de base de Mannich brute l morpholinométhyl-56 pristina- mycine IA(mélange des épimères)l. B/ Elimination de la morpholine Dans un ballon de 100 cm 3 sont successivement placés 25 cm 3 d'eau, 0,838 cm 3 d'acide acétique, 0,082 g d'acétate de sodium, puis la solution de base de Mannich est ajoutée en une fois Le mélange réactionnel est chauffé à + 50 C pendant 1 heure sous agitation Après retour à température ambiante, la phase aqueuse est séparée, contre-extraite par 15 cm 3 d'acétate d'éthyle et les phases organiques réunies sont additionnées de 20 cm 3 d'eau Le p H est ajusté à neutralité par addition d'une solution de soude ( 1 N) et la phase organique est séparée, lavée 2 fois par 10 cm 3 d'eau et 1 fois par 10 cm 3 de saumure, puis séchée sur sulfate de sodium Après filtration, le solvant est évaporé pour obtenir 900 mg de produit sec titrant 77,5 %, soit un rendement de 81 %. Ce produit pourrait être recristallisé, pour fournir la qualité habituelle avec 80 % de rendement de recristallisation. EXEMPLE 3 Réaction de Mannich morpholinométhyl-56 pristinamycine IA (mélange des épimères). Dans un ballon tricol de 15 cm 3, sous argon sont successivement introduits, lentement et sous agitation, 1 cm 3 de méthanol et 421,4 mg de méthanesulfonate de morpholine ( 2,30 10-3 mole) 100 mg de pristinamycine IA (O 0,115 10-3 mole) sont ajoutés en une fois, suivie de l'addition de 69 mg de polyoxyméthylène ( 2,31 10-3 mole) et le mélange réactionnel est agité à 28 C pendant 24 heures Un dosage en CLHP du brut réactionnel permet de faire une estimation du rendement. Taux de transformation: 98 % Rendement réel: 70 % L'élimination de la morpholine peut être effectuée dans les conditions décrites précédemment à l'exemple 1 ou à l'exemple 2. EXEMPLE 4 Réaction de Mannich morpholinométhyl-56 pristinamycine IA (mélanqe des épimères). Dans un ballon tricol de 15 cm 3,sous argon, sont successivement introduits, lentement et sous agitation, 3,2 cm 3 de méthanol, 0,368 cm 3 de morpholine ( 4,187 -3 mole, distillée sur potasse), et enfin 0,223 cm 3 d'acide sulfurique ( 4,187 10-3 mole, distillé), en maintenant la température du mélange à la température ambiante 0,1 g de pristinamycine IA(O,105 10-3 mole, titre = 91 % en pristinamycine IA) sont ajoutés en une fois, suivie de l'addition de 69 mg de polyoxyméthylène ( 2,31 10-3 mole), et le mélange réactionnel est agité à C pendant 48 heures. Un dosage CLHP du brut réactionnel permet de faire une estimation du rendement: Taux de transformation: 99 % Rendement réel: 80 % L'élimination de la morpholine peut être effectuée comme décrit précédemment à l'exemple 1 ou à l'exemple 2. EXEMPLE 5 Réaction de Mannich morpholinométhyl-58 pristinamycine IA (mélanqe des épimères). Dans un ballon tricol de 15 cm 3, sous argon, sont successivement introduits, lentement et sous agitation, 3,2 cm 3 de méthanol, 0,368 cm 3 de morpholine ( 4,187 g -3 mole, distillée sur potasse) et enfin 0,251 g d'acide acétique ( 4,187 10-3 mole) en maintenant la température du mélange à la température ambiante 0,1 g de pristinamycine IA ( 0,105 10-3 mole, titre = 91 % en pristinamycine IA) sont ajoutés, en une fois, suivie de l'addition de 69 mg de polyoxyméthylène ( 2,31 10-3 mole) et le mélange réactionnel est agité à 25 C pendant 24 heures. Le dosage en CLHP du brut réactionnel, permet de faire une estimation du rendement: Taux de transformation: 98 % Rendement réel: 70 % L'élimination de la morpholine peut être effectuée comme décrit précédemment à l'exemple 1 ou à l'exemple 2. EXEMPLE 6 A 430 cm 3 de méthanol chauffé à 45 C, on ajoute, en agitant, 81,5 g de chlorhydrate de diméthylamine, 30 g de polyoxyméthylène et 43,3 g de pristinamycine IA La suspension obtenue est ensuite agitée 10 heures à 45 C. Le mélange réactionnel est ensuite filtré, le gâteau est lavé avec 2 fois 25 cm 3 de méthanol Aux filtrats réunis, on ajoute 900 cm 3 d'acétate d'éthyle; le p H de la phase aqueuse est amené à 7 par addition de 65 cm 3 d'une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium. La phase organique est décantée; la phase aqueuse est extraite avec 200 cm 3 d'acétate d'éthyle, puis les phases organiques réunies sont lavées avec un mélange de 500 cm 3 d'eau et de 50 cm 3 d'une solution saturée de chlorure de sodium La phase organique précédente contenant la diméthylaminométhyl-56 pristinamycine IA est alors versée dans une solution agitée de 43,3 cm 3 d'acide acétique et de 4,3 g d'acétate de sodium dans 1000 cm 3 d'eau maintenue à 35 C Le mélange réactionnel est agité et chauffé à 35 C pendant 1 heure La phase organique est ensuite décantée, lavée 2 fois avec un mélange de 500 cm 3 d'eau et de 50 cm 3 d'une solution saturée de chlorure de sodium puis, après addition de cm 3 de chlorure de méthylène, lavée avec 195 cm 3 d'une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium. La phase organique est de nouveau lavée 2 fois avec un mélange de 500 cm 3 d'eau et de 50 cm 3 d'une solution saturée de chlorure de sodium, puis séchée sur du sulfate de sodium, filtrée et concentrée sous pression réduite ( 2,7 k Pa) à 30 C Le solide obtenu est ensuite agité pendant 1 heure à une température voisine de 20 C dans 400 cm 3 d'éther éthylique La suspension obtenue est filtrée sur verre fritté, après séchage à l'air pendant une nuit à une température voisine de 20 C, on obtient 36,4 g de méthylène-56 pristinamycine IA SOUS forme d'une poudre blanche fondant vers 230 C Le titre de ce produit est de 77,6 % (CLHP). EXEMPLE 7 A/ Réaction de Mannich Dans un ballon tricol de 250 cm 3, sous azote, sont successivement chargés 150 cm 3 de méthanol, 13,8 cm 3 de morpholine ( 0,157 mole), puis, en 10 minutes, 8,3 cm 3 d'acide méthanesulfonique ( 0,126 mole), et enfin 2,3707 g de polyoxyméthylène ( 0,0785 mole) et 17, 0055 g de pristinamycine IA (titre: 80,5 %, soit 15,78 10-3 mole) Le mélange réactionnel est agité pendant 5 heures 25 minutes à 40-43 C, puis filtré sur clarcel après retour à température ambiante Le filtrat est concentré sous pression réduite jusqu'à un poids de 75,30 g, puis additionné de 35 cm 3 d'eau, 250 cm 3 d'acétate d'éthyle et 100 cm 3 d'eau La phase organique est décantée et lavée par 3 fois 50 cm 3 d'eau Les phases aqueuses sont réunies et contre-extraites par 3 fois 20 cm 3 d'acétate d'éthyle Ces solutions de contre-extraction sont réunies et lavées par 20 cm 3 d'eau Les phases organiques sont réunies, séchées sur sulfate de sodium et concentrées à sec sous pression réduite pour obtenir 19,21 g de produit brut 10,3405 g de ce produit brut sont battus dans 150 cm 3 d'eau, à température ambiante, pendant 3 heures 30 minutes, puis filtrés sur verre fritté Le solide est lavé par 3 fois 20 cm 3 d'eau, puis séché pour obtenir 8,9397 g du mélange des deux épimères de morpholinométhyl-58 pristinamycine IA. RMN 13 C, CD C 13, 90 M Hz, HMDS (référence), 8 en ppm. (numérotation indiquée selon la recommandation de J O. Anteunis et al, Eur J Biochem, 58, 259 ( 1975) et mentionnée dans le brevet européen 133 037). Epimère majoritaire: 71,95 (d; 16) 67,00 (t; -CH 2 morpholine) 57,6 (d; 3 a) 57,3 (d; 5 a) 56,1 (d; la+ 6 a) ,4; 55,1} (t; 5 E + -CH 2-N en 55) 53, 9 (d; 4 a) 53,6 (t; -CH 2 morpholine) 51,4 (d; 2 a) 47,8 (t; 38) ,4 (d; 58) 41,4 (t; 56) 40,6 (q; -N(CH 3)2) ,6 (t; 46) 31,0 (q; -N-CH 3) 27,7 (t; 36) ,1 (t; 26) 24,6 (t; 3 X) 16,6 (q; 1 T) ,O (q; 2-T) B/ Elimination de la morpholine A une solution de 4,25 cm 3 d'acide acétique ( 74,2 10-3 mole) et de 312,7 mg d'acétate de sodium ( 3,76 10-3 mole) dans 75 cm 3 d'eau est additionnée une solution dans 75 cm 3 d'acétate d'éthyle de 3, 9989 g de base de Mannich préparée précédemment (correspondant à environ 3,72 10-3 mole) Le mélange est agité à 41-44 C pendant 4 heures 40 minutes La réaction est terminée en 1 heure Après retour à la température ambiante, le p H est ramené de 3,9 à 7 par addition de 60 cm 3 de bicarbonate de sodium (solution aqueuse saturée) La phase aqueuse est séparée, lavée par 20 cm 3 d'acétate d'éthyle et les phases organiques sont réunies, lavées par 3 fois 20 cm 3 d'eau, puis séchées sur sulfate de sodium Après concentration à sec, sous pression réduite, on obtient 3,4419 g de méthylène-53 pristina- mycine IA (titre: 70 %) sous forme d'un solide blanc, avec un rendement global de 72 % à partir de la pristinamycine IA. EXEMPLE 8 Réaction de Mannich morpholinométhyl-56 pristinamycine I (mélange des épimères). Dans un ballon tricol de 25 cm 3, sont successivement introduits 5 cm 3 de propanol-2, 0,40 cm 3 de morpholine ( 4,57 10-3 mole) , 0,24 cm 3 d'acide méthanesulfonique ( 3,64 10-3 mole), 70,0 mg de polyoxyméthylène ( 2,32 10-3 mole) et 501 mg de pristinamycine IA (titrant ,5 %, soit 4,65 10-4 mole) Le mélange réactionnel est agité pendant 9 heures 40 minutes à 43-45 C Un chroma- togramme CLHP de ce mélange réactionnel permet alors d'estimer un taux de transformation: TT = 92 % et un rendement en produit transformé: RT = 75 %. L'élimination de la morpholine peut être effectuée dans les conditions décrites aux exemples précédents ou à l'exemple 9. EXEMPLE 9 A/ Réaction de Mannich Dans un ballon tricol de 25 cm 3 sont successivement introduits 5 cm 3 d'éthanol, 0,40 cm 3 de morpholine ( 4, 57 -3 mole), 0,24 cm 3 d'acide méthanesulfonique ( 3,64 -3 mole), 69,5 mg de polyoxyméthylène ( 2,31 10-3 mole) et 498,6 mg de pristinamycine IA (titrant: ,5 %, soit 4,63 10-4) Le mélange réactionnel est agité pendant 5 heures 15 minutes à 40-45 C Après retour à température ambiante et addition de 25 cm 3 de toluène et de 25 cm 3 d'eau, le p H est ramené de 6 à 7 par addition d'une solution saturée de bicarbonate de sodium La phase aqueuse est décantée et lavée par 3 fois 10 cm 3 de toluène Les phases organiques contenant la morpholinométhyl-56 pristinamycine IA (mélange des épimères), sont réunies et lavées par 3 fois 10 cm 3 d'eau. B/ Elimination de la morpholine La solution toluènique, de bases de Mannich brutes, obtenue précédemment est versée en une fois sur une solution de 0,53 cm 3 d'acide acétique ( 9,26 10-3 mole) et 41,4 mg d'acétate de sodium ( 4,98 10-4 mole) dans 50 cm 3 d'eau Ce mélange biphasique est agité à 45-47 C pendant 3 heures 30 minutes Après retour à la température ambiante, le p H est ramené de 4,7 à 7 par addition d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium La phase aqueuse est décantée et lavée par 2 fois 10 cm 3 de toluène Les phases organiques sont réunies et lavées par 2 fois 25 cm 3 d'eau Après séchage, la solution toluènique est concentrée à sec, sous pression réduite pour obtenir la méthylène-56 pristinamycine IA avec un rendement de 62 % (dosé par CLHP). EXEMPLE 10 Réaction de Mannich morpholinométhyl-58 pristinamycine IA (mélange des épimères). Dans un ballon de 25 cm 3 sont successivement introduits cm 3 de diméthylsulfoxyde, 0,40 cm 3 de morpholine ( 4,57 10-3 mole), 0,24 cm 3 d'acide méthanesulfonique ( 3,64 -3 mole), 498 mg de pristinamycine IA (titre 80,5 %, soit 4,62 10-4 mole) et 72,7 mg de polyoxyméthylène ( 2,42 10-3 mole) Le mélange réactionnel est agité pendant 4 heures 45 minutes à 43-46 C Un dosage par CLHP permet d'estimer le taux de transformation: TT = 97 % et le rendement en produits utiles (base de Mannich contenant en outre de la méthylène-56 pristinamycine IA) par rapport au produit transformé: RT = 70 %. L'élimination de la morpholine peut être effectuée comme décrit précédemment. EXEMPLE 11 Réaction de Mannich morpholinométhyl-56 pristinamvcine IA (mélange des épimères). Dans un ballon de 25 cm 3 sont successivement introduits cm 3 d'éthylèneglycol, 0,40 cm 3 de morpholine ( 4,57 -3 mole), 0,24 cm 3 d'acide méthanesulfonique ( 3,64 -3 mole), 69,9 mg de polyoxyméthylène ( 2,32 10-3 mole) et 506,8 mg de pristinamycine IA (titre: 80,5 %, soit 4,7 10-4 mole) Le mélange réactionnel est agité pendant 1 heure à environ 45 C Un dosage par CLHP permet d'estimer le taux de transformation: TT = 95 % et le rendement en produits utiles (base de Mannich contenant en outre de la méthylène-56 pristinamycine IA) par rapport à la pristinamycine IA transformée: RT = %. EXEMPLE 12 A/ Réaction de Mannich Dans un ballon tricol de 25 cm 3 sont successivement introduits 14 cm 3 de méthanol, 1,50 cm 3 de morpholine ( 17,1 10-3 mole), 0,90 cm 3 d'acide méthanesulfonique ( 13,6 10-3 mole), 1, 4032 g de virginiamycine 51 ( 1,70 -3 mole) et 253 mg de polyoxyméthylène ( 8,4 10-3 mole) Après 3 heures 30 minutes d'agitation à 45 C, la température est ramenée à environ 20 C, et le méthanol est évaporé sous pression réduite Le résidu brut est repris par 30 cm 3 d'acétate d'éthyle et 30 cm 3 d'eau le p H est ramené de 6 à 7 par addition d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, la phase aqueuse est décantée et lavée par 3 fois 10 cm 3 d'acétate d'éthyle Les phases organiques contenant la morpholinométhyl-58 virginiamycine Sl (mélange des épimères), sont réunies et lavées par 3 fois 10 cm 3 d'eau. B/ Elimination de la morpholine Dans un ballon rond de 250 cm 3, la solution organique de base de Mannich obtenue précédemmant est versée sur une solution de 1,95 cm 3 d'acide acétique ( 34 10-3 mole) et de 149 mg d'acétate de sodium ( 1,79 10-3 mole) dans cm 3 Le mélange biphasique est agité à 46 C pendant 3 heures Après retour à la température ambiante, le p H de la phase aqueuse est ramené de 4,05 à 6,7 par addition d'une solution saturée de bicarbonate de sodium La phase aqueuse est décantée et lavée par 3 fois 10 cm 3 d'acétate d'éthyle, les phases organiques sont réunies, et l'ensemble est lavé par 3 fois 10 cm 3 d'eau Après séchage sur sulfate de sodium et filtration, la solution organique est concentrée à 15,3 g et la méthylène-58 virginiamycine 51 cristallise pendant une nuit à + 4 C. Après filtration, on obtient ainsi 581,5 mg de produit pur (les jus mères peuvent être concentrés pour fournir un second lot de produit cristallisé de bonne pureté). REVENDICATIONS 1 Procédé de préparation de synergistines de formule générale: CH O N 1,CH 3 N y ,'CH 2 /HNC 0 " CH 2 0 HNH v N 5 H /0 H OH dans laquelle Y représente un atome d'hydrogène ou un radical diméthylamino, caractérisé en ce que l'on prépare une base de Mannich de formule générale: CH 3 N Y o o e N> R 2 O NH N ? 5 OH N O dans laquelle Y est défini comme ci-dessus et R 1 représente un radical alcoyle droit ou ramifié contenant 1 à 3 atomes de carbone, R 2 est un radical alcoyle tel que défini précédemment ou un radical phényle, ou bien R 1 et R 2 forment ensemble, avec l'atome d'azote auquel ils sont attachés, un hétérocycle saturé ou insaturé contenant 5 ou 6 chaînons et éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi l'azote ou l'oxygène, à partir de la pristinamycine IA OU de la virginiamycine, puis élimine l'amine introduite. 2 Nouveau dérivé de synergistine de formule générale: dans laquelle R 1, R 2 et Y sont définis comme dans la revendication 1, sous ses formes épimères ou leurs mélanges.