Brevet FR2649889A1 — publié le 19910125

ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIQUE DE L'INVENTION Domaine de l'invention La présente invention concerne un agent pour La préven- tion et le traitement de l'opacité du cristallin; plus particu- lièrement, la présente invention concerne un agent pour la préven- tion et le traitement de L'opacité du cristallin, cet agent comprenant comme ingrédients actifs un composé organique spécifique du germanium ou bien ce composé organique spécifique du germanium ensemble avec l'aminoguanidine. La présente invention concerne également un agent parti- culièrement efficace pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristallin, cet agent comprenant une combinaison du composé organique spécifique du germanium avec des dérivés spéci- fiques de la phénoxazine. Art antérieur Le cristallin est composé, en tant que composants princi- paux, d'environ 65 % d'eau et d'environ 35 % de protéine, la proportion de protéine contenue dans le cristallin étant supérieure à celle des autres tissus. D'après divers contrôles biologiques, la protéine à une concentration éLevée, en même temps que l'eau à l'intérieur des cellules, forme et maintient le cristallin à l'état colloidal hydrophile pour retenir la transparence dudit cristallin. Lorsque le cristallin, qui doit être transparent, devient opaque par suite d'une certaine étiologie, toutefois, la quantité de lumière qui atteint la rétine diminue. Ainsi, l'acuité visuelle par l'intermédiaire du cristallin se détériore d'une manière générale, selon le degré d'opacité induit. Etant donné que l'incidence étiologique de l'opacité dans le cristallin est diversifiée, il est tout à fait difficile de donner une discussion générale. L'un des mécanismes proposés est que les protéines solubles dans l'eau de la membrane et les protéines insolubles dans l'eau du cristallin décrites ci-dessus, contiennent de grandes quantités de groupes SH (groupes thiols), qui sont transformés en une liaison S-S par réaction d'oxydation biologique, pour former des produits agrégés insolubles, entraînant l'opacification du cristallin. L'autre explication la plus fiable est que les protéines mentionnées ci-dessus réagissent avec des sucres d'une manière non enzymatique et irréversible pour former un mélange de réaction dénommé produits d'Amadori, dont les réactions sont des réactions générales entre des groupes amino des protéines et des groupes carbonyles des sucres, connues sous le nombre de réaction de Maillard. Cette réaction de Maillard est considérée comme une réaction clé conduisant au vieillissement. Une telle explication est considérée comme une explication de l'étiologie pour le cristallin opaque. L'exemple typique de la maladie associée au cristallin opaque est connu sous le nom de cataracte, qui est classifiée en cataracte congénitale et en cataracte aquise. Cette dernière est encore classifiée en cataracte sénile, en cataracte traumatique et en cataracte diabétique, etc. Dans chaque type de cataracte, la formation des produits d'Amadori est considérée comme la cause de l'opacité. PROBLEMES A RESOUDRE PAR L'INVENTION Une chose qui est certainement claire dans ce domaine est que l'on n'a pas encore établi de traitement thérapeutique pour la prévention de l'opacité du cristallin ou pour la réduction de l'opacité lorsqu'elle s'est produite. Ainsi, un grand nombre de problèmes n'a pas encore été résolu en ce qui concerne l'opacification du cristallin, incluant la cataracte comme expliquée ci-dessus, et ainsi des agents spéci- fiques pour la prévention ou le traitement de l'opacité du cris- tallin n'ont pas été développés. Ainsi, les agents pour exercer des effets significatifs seulement pour la récupération de l'acuité visuelle ou pour le blocage du progrès de l'opacification sont maintenant couramment utilisés. SOMMAIRE DE L'INVENTION L'objet de la présente invention est de fournir un agent capable de fournir une prévention et un traitement efficace de l'opacité du cristallin, sur la base de l'art antérieur décrit ci-dessus. Un autre objet de la présente invention est de fournir un agent sans toxicité ni effets secondaires, étant donné que ces agents doivent être administrés pendant de Longues périodes de temps. En vue d'atteindre les objectifs mentionnés ci-dessus, la présente invention est conçue pour fournir un agent pour la préven- tion et le traitement de l'opacité du cristallin, cet agent conte- nant comme composant efficace un composé organique du germanium représenté par la formule: R R il13 (Ge - C - CH - COX)203 (1) I 2 R2 dans laquelle R1 à R3 représentent des atomes d'hydrogène, des groupes alkyles inférieurs qui peuvent être identiques ou diffé- rents et qui sont choisis dans le groupe comprenant Les groupes méthyle, éthyle, et analogue, ou phényle substitué ou non substitué; X représente un groupe hydroxyle, un groupe O-alkyle inférieur, un groupe amino ou O-Y+ (Y représente un métal tel que sodium, potassium, et analogue, ou un composé ayant un groupe basique tel que lysozyme, un aminoacide basique, et analogue). En vue d'atteindre les objectifs mentionnés ci-dessus, la présente invention est conçue pour fournir un agent pour la préven- - tion et le traitement de l'opacité du cristallin, cet agent contenant comme composants efficaces le composé organique du germa- nium représenté par la formule (1) ensemble avec L'aminoguanidine. En vue d'atteindre les objectifs mentionnés ci-dessus, la présente inention est encore conçue pour fournir un agent pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristallin, cet agent contenant comme composants efficaces le composé organique du germa- nium représenté par La formule (1) et des dérivés spécifiques de la phénoxazine. DESCRIPTION BREVET DES DESSINS La figure 1 est un graphique montrant l'état de survie des souris à sénilité accélérée. La figure 2 est un graphique montrant la comparaison de l'état de survie entre un groupe recevant un collyre et un groupe témoin. La figure 3 est un diagramme montrant le pourcentage de distribution des symptômes du cristallin. La figure 4 est une photographie d'un cristallin opaque d'un animal avant le traitement par le collyre. La figure 5 est une photographie de l'état du même cris- tallin de l'animal de la figure 4, un mois après le traitement par le collyre. La figure 6 est un graphique montrant le progrès de la formation des produits d'Amadori à partir de l'albumine du sérum bovin et du D-glucose, et l'effet de l'agent de la présente inven- tion sur la formation des produits d'Amadori à partir de l'albumine du sérum bovin et du D-glucose. La figure 7 est un graphique montrant l'effet de l'agent de la présente invention sur la formation des produits d'Amadori à partir de l'albumine de sérum bovin et du D-glucose. Les figures 8 à 13 montrent le pourcentage de distribu- tion des symptômes du cristallin dans chaque groupe recevant le collyre. Les figures 8 à 10 montrent les résultats de l'adminis- tration du collyre contenant l'agent selon l'invention à des souris âgées de 1 mois et plus. Les figures 11 à 13 montrent les résultats de l'adminis- tration du collyre contenant l'agent de l'invention aux animaux âgés de 5 mois et plus. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION La présente invention sera maintenant expliquée en détail ci-après. L'agent pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristallin contient comme composant efficace un composé orga- nique spécifique du germanium représenté par la formule (1): R 'R j1l 3 (Ge - C - CH- COX) O (1) I 203 Une explication de la structure du composé sera faite en premier lieu. La structure principale du composé est composée d'acide germytpropionique dans lequel l'atome de germanium est lié à un dérivé de l'acide propionique ayant trois substituants R à R et 1 3 un groupe fonctionnel contenant de l'oxygène, c'est-à-dire OX, et les atomes de germanium de la structure principale et les atomes d'oxygène sont liés dans le rapport de 2:3. Chacun des substituants R1 à R3 représente ici un atome d'hydrogène, un groupe alkyle inférieur tel qu'un groupe méthyle, un groupe éthyle, un groupe propyle, un groupe butyle, et analogues, ou un groupe phényle substitué ou non substitué; le substituant X représente un groupe hydroxyle, un groupe O-alkyle inférieur, un groupe amino ou O Y représentant le sel de l'acide carboxylique, individuellement. Le substituant Y représente un métal tel que le sodium, le potassium ou analogue (le métal n'est pas nécessairement monovalent), ou un composé basique représenté par un aminoacide basique et analogue, tel que lysozyme ou lysine. Les substituants R1 et R2, et le substituant R3 sont liés à l'atome de germanium dans les positions a et À, respectivement. Ainsi, les exemples de composés organiques du germanium à utiliser conformément à la présente invention sont illustrés comme suit: (Ge - CH CH - COOH)203 (1-1) 2 2 2 3(1-1) CH i 3 (Ge -CH C- 2 - COOH) 203 (1-2) CH3 (Ge - CH2 - CH - COOH)203 (1-2) (Ge - CH2 - CH - COOH) 203 2 23 (1-3) CH 1 3 (Ge - CH - CH - COOH)203 (1-4) 1 2 3(-) CH3 CH 1H3 (Ge- C - CH -COOH) (1-5) 2 2 3 CH3 (Ge - CH - CH- COOH)20 (1-6) 1 2 23 (1-6) C LC6H5 CH i 3 (Ge - CH - CH - COOH)203 (1-7) 2 3(17 C6H5 6H5 (Ge - CH- CH - COOCH) O (1-8) (Ge - CH2 - CH2 - CONH2)203 (1-9) -+ (Ge - CH2 - CH2- CO0 Na)2 3 (1-10) Les composés organiques du germanium ayant la structure mentionnée ci-dessus peuvent être produits par divers procédés. Par exemple, le composé dans lequel X est OH dans la formule (1) peut être produit comme montré dans le schéma réac- tionnel suivant: Schéma réactionnel - R R H20 R- R il 13 HO ilî Cl3Ge - C - CH - COOH 3 (Ge - C -CH - COOH)203 3 i2 3 R2 (2) R2 Ainsi, un acide trihalogénogermylpropionique dans lequel les substituants R1 à R3 sont préalablement introduits, tel que L'acide trichlorogermylpropionique (2) et analogue, peut être hydrolysé. Par ailleurs, le composé dans lequel X est un groupe O-alkyle inférieur peut être obtenu, par exemple, par la réaction du chlorure de thionyle, etc., avec le composé (2) mentionné ci-dessus pour transformer ce composé en halogénure d'acide corres- pondant et réaction subséquente de l'alcool correspondant au groupe O-alkyle inférieur mentionné ci-dessus, suivie de l'hydro- lyse du composé résultant. Le composé de formule (1) dans lequel X est NH2 peut être obtenu, par exemple, par réaction de l'ammo- niaque àvec l'halogénure d'acide mentionné ci-dessus, suivie d'une hydrolyse. Le composé de formule (1) contenant le groupe COO Y comme substituant X, dans lequel Y est un métal, peut être obtenu, par exemple, par réaction d'un hydroxyde métallique avec le composé (1) mentionné cidessus, tandis que le composé contenant un groupe basique représentant Y peut être soumis à la réaction acide-base connue. Les composés organiques du germanium obtenus de la manière mentionnée ci-dessus sont soumis à l'analyse instrumentale pour établir les spectres de résonance magnétique nucléaire (RMN) et d'absorption d'infrarouge (IR), et les résultats supportent fortement le fait que le composé mentionné ci-dessus peut être représenté par la formule (1) donnée ci-dessus. Les formules données ci-dessus représentent les composés organiques du germanium à l'état cristallisé, qui sont hydrolysés en solution aqueuse au niveau de la liaison germanium-oxygène. Par exemple, le composé (1-1) mentionné ci-dessus est transformé de sa structure initiale à la structure suivante: OH HO - Ge - CH - CH - COOH 0 2 2 OH Parmi les composés mentionnés ci-dessus, le composé (1-1) est préférable du fait qu'il est facilement disponible. L'aminoguanidine à utiliser dans la présente invention est représentée par la formule suivante: NH2 - C = NH NHNH2 et est l'un des composés connus comme réactifs fortement nucléo- philes. Le dérivé de phénoxazine à utiliser conformément à la présente invention est représenté par la formule structurale principale suivante: N N et plus spécifiquement, l'acide 1-hydroxy-5-oxo-5H-pyrido(3,2-a)- phénoxazine-3-carboxyLique (nom générique, pyrénoxine) de formule suivante: HO CCH N N 0 o ou son sel avec un métal tel que le sodium, le potassium et analogue, peut être préférable. Ce composé a été utilisé conventionnellement pour le traitement de la cataracte. Le résultat d'un tel traitement a été rapporté dans les publications académiques (par exemple, voir ophtalmologie clinique japonaise 11:272, 1957). D'autres dérivés de ta phénoxazine représentés par La formute structurate principale donnée ci-dessus sont décrits publi- quement dans la publication de brevet japonais n 10570/1980. L'agent pour La prévention et te traitement de l'opacité du cristallin conformément à la présente invention contient comme composant efficace le composé organique du germanium synthétisé de la manière indiquée cidessus, ou le composé organique du germanium en même temps que l'aminoguanidine mentionnée ci-dessus, ou le composé organique du germanium avec le dérivé de phénoxazine décrit ci-dessus; il peut être préparé sous forme de collyre, de préfé- rence, ensemble avec des composants connus tels que l'acide borique, le chlorure de sodium, l'hydroxyde de sodium ou le chlorure de benzalconium, l'acide ú-aminocaproique, l'acide méthyl- p-oxyaminobenzoique et le chlorobutanol. La solubilité du composé organique du germanium et analogue comme composant efficace de la présente invention peut augmenter dans un collyre basique. Etant donné que le composé organique du germanium en tant que composant efficace de la présente invention a des caractéris- tiques telles qu'une toxicité extrêmement faible et peu d'effets secondaires, sa quantité à utiliser dans un collyre peut être déterminée d'une manière relativement libre. La quantité peut être illustrée par exemple dans l'intervalle de 0,5 à 5 % de la quantité totale de collyre. Alternativement, pour le collyre contenant comme agents principaux le composé organique du germanium et l'amino- guanidine, le composé organique du germanium est utilisé dans -5. -7 l'intervalle par exemple d'environ 105 à 107 de la teneur en aminoguanidine. Le collyre contenant comme agents principaux le composé organique du germanium et le dérivé de phénoxazine peut être préparé de façon que 1 ml de collyre contienne 5-500 mg de composé organogermanium et 0,05-0,5 mg de dérivé de phénoxazine. Les dérivés de phénoxazine ont été utilisés pour le traitement de la cataracte pendant une longue période de temps et par conséquent leur sécurité a été évaluée et vérifiée. En outre, l'agent contenant le composé organique du germanium et l'agent contenant un dérivé de phénoxazine peuvent être préparés séparément à l'avance, puis méLangés ensemble pour préparer L'agent de La présente invention. AVANTAGE DE L'INVENTION Le test des effets de l'agent de la présente invention, sur les souris à sénilité accélérée susceptibles d'opacité du cristallin, indique ces effets, sous la forme d'une diminution du nombre d'yeux opaques, et d'une augmentation du nombre d'yeux transparents, donnés par le collyre contenant l'agent de la présente invention. Les essais in vitro utilisant le cristallin a provenant du cristallin bovin et le glucose démontrent les effets de l'agent contenant comme composant efficace le composé organique du germa- nium décrit ci-dessus ou contenant le composé organique du germanium et l'aminoguanidine sur la prévention de l'opacification - du cristallin ou la réduction de l'opacité du cristallin, par suppression de la formation des produits d'Amadori et la décompo- sition des produits d'Amadori une fois formés en substances à poids moléculaire inférieur. Exemples La présente invention sera maintenant expliquée dans les modes de réalisation suivants. Exemple 1 (1) Procédé - 18 souris à sénilité accélérée de 10 mois (5 mâles et 13 femelles) sont divisées en deux groupes; un groupe constitué de 10 souris reçoit l'administration d'une goutte de collyre, cons- titué par l'agent de la présente invention qui contient le composé organique du germanium (1-1) dans un rapport de 4 %, 4 fois par jour, 6 jours/semaine sur 123 jours, tandis que l'autre groupe constitué de 8 souris est utilisé comme témoin sans administration de collyre. Les deux groupes sont maintenus et alimentés dans les mêmes conditions. Les cristallins de chaque animal sont examinés au microscope pendant que l'animal est maintenu sous anesthésie par injection intrapéritonéale de 0,7 ml/kg de nembutal sodique. L'examen est conduit à quatre reprises, c'est-à-dire avant le commencement des expériences et au 39e, 78e et 123e jour après le commencement. (2) Résultats Survie des souris à sénilité accélérée Avant le commencement des expériences, le nombre des souris à sénilité accélérée est de 18 au total comme montré à la 10. figure 1. Le nombre total de survivants montre une diminution graduelle jusqu'à l'âge de 12 mois, c'est-à-dire une diminution de 1 animal au 39e jour et de 5 autres animaux au 78e jour. Toutefois, le nombre de survivants montre une diminution rapide à L'âge de 14 mois correspondant au 123e jour. Ceci veut dire que le nombre total de survivants a diminué de moitié ou plus. Les survivants au 123e jour sont comparés entre le groupe recevant le collyre et le groupe témoin. Comme montré à la figure 2, 3 morts sur 10 souris sont observés dans le groupe recevant le collyre, alors que 6 morts chez 8 souris sont observés dans le groupe témoin. Par conséquent, il est clairement démontré que le groupe recevant le collyre a une survie plus longue. Symptômes du cristallin chez les souris à sénilité accélérée et état des survivants Les cristallins des souris à sénilité accélérée âgées de 10 mois sont soumis à l'examen au microscope. Par conséquent, des différences subjectives sont observées dans l'incidence de l'opaci- fication des cristallins. Les états opaques des cristallins sont classifiés en trois types, à savoir transparence, durcissement du noyau et opacité. Les cristallins transparents ne présentent pas de symptômes anormaux de sorte que le vaisseau rétinien peut être observé au travers; dans un cristallin ayant un durcissement du noyau, le durcissement du noyau s'étend dans la couche corticale intermédiaire, suivi de l'apparition de cercles concentriques sous la forme d'ondes lumineuses sur la surface polaire. Histologique- ment parlant, une certaine couche périphérique avec différentes propriétés de teinture est observée entre la région entourant le noyau et la couche de surface corticale, et des portions récessives ou en saillie de diverses tailles sont observées au niveau des cercles concentriques. Le diagnostic du cristallin opaque est établi, sur la base de l'observation de l'apparition de l'opacité sous la forme de h che sur le cortex normal. Des cristallins sévèrement opaques n'ont pas été observés au 78e jour après le début des expériences. Effets de l'agent de la présente invention par l'intermédiaire d'un collyre Le tableau 1 ci-après montre les observations du cris- tallin dans le groupe recevant du collyre et dans le groupe témoin, avant le commencement des expériences et au 39e, 78e et 123e jour après le commencement. TABLEAU 1 Groupe traité 0 39e 78e 123e jour Transparence 3 0 4 0 yeux 2Q Durcissement du noyau 13 16 6 9 Opacité 4 2 6 3 Grouoe témoin 0 39e 78e 123e jour Transparence 3 0 0 0 yeux Durcissement du noyau 11 12 6 2 Opacité O 0 4 2 La figure 3 montre les pourcentages des observations de cristallins mentionnées ci-dessus. Dans le groupe recevant le collyre, le rapport des cristallins opaques est de 20 % avant l'administration du collyre, mais il décroît jusqu'à 11 %; le rapport des cristallins transparents est de 15 % avant l'adminis- tration du collyre, mais il décroît à O au 39e jour et, subséquem- ment, il croît jusqu'à 38 % au 78e jour. Comme décrit ci-dessus, les effets du collyre de l'agent de la présente invention sont clairement démontrés. Au contraire, le rapport des yeux transparents dans Le groupe témoin diminue lorsque Le rapport des yeux opaques augmente comme Le progrès du vieillissement. L'exacerbation des symptômes est remarquabLe. Les figures 4 et 5 montrent La comparaison des effets de L'agent de la présente invention dans le même échantillon de l'oeil. Le cristallin à la figure 4 montre une légère opacité, mais le cristallin, un mois après, de la figure 5, montre une améliora- tion considérable concernant la transparence. De plus, les symptômes sont localement améliorés grâce au collyre, par exemple avec une diminution du nombre de cercles concentriques qui sont observés dans le cristallin ayant reçu un diagnostic de durcissement du noyau, et une diminution du change- ment de la construction de l'arc équatorial en raison du vieillis- sement. Exemple 2 (1) Procédé Procédé utilisant le cristallin a bovin Des quantités égales de 20 mg/ml de cristallin (x obtenues à partir du cristallin bovin (fabriqué par Sigma Co.) et 200 mM de D-glucose sont mélangés, et 100 pI du mélange résultant sont versés dans une plaque de microtitrage à 96 puits. A chacun de ces puits, on ajoute la solution de 200 mM de chlorure d'aminoguanidine et 20 mM de composé organique du germanium (1-1) décrit précédemment, avec dilution à 5 fois pour chaque dilution, en utilisant la méthode de titrage en boite. Une portion de 7 pl de la solution est prélevée d'un puits selon un programme de temps planifié, et diluée par 133 pt de tampon phosphate 50 mM. Ensuite, la solution diluée est appliquée sur une colonne de TSK-G3000SW équipée d'un système de chromatographie liquide haute performance, auquel sont reliés un détecteur de fluorescence pour une longueur d'onde d'excitation de 350 nm et pour une longueur d'onde de fluorescence de 440 nm, et un détecteur d'ultraviolet pour 280 nm, pour la détection simultanée. De cette manière, les produits d'Amadori formés avec le cristallin-oc et le D-glucose sont recueillis et lavés, puis remis en suspension dans un tampon phosphate 0,5 mol et redivisés dans une plaque de microtitrage à 96 puits, en vue d'examiner les effets du composé organique du germanium (1-1) et de l'aminoguanidine. Procédé utilisant l'albumine du sérum bovin On mélange des quantités égales de 200 mg/ml d'albumine de sérum bovin dans 0,5 M de tampon phosphate (pH 7,4) et 400 mM de D-glucose, et on y ajoute 3 mM de NaN3. L'aminoguanidine et le composé organique du germanium (1-1) décrit cidessus sont ajustés à diverses concentrations données, séparément, conformément à la méthode de titrage en boite et ensuite ils sont ajoutés à la solution précédente. En employant l'intensité de fluorescence comme indicateur, leurs effets sur la formation des produits d'Amadori sont examinés. Alternativement, un méLange d'albumine du sérum bovin et de Dglycose est chauffé à 37 C pendant une longue période pour produire des produits d'Amadori. L'addition du composé orga- nique du germanium (1-1) et de l'aminoguanidine est conduite durant le procédé de chauffage et la mesure est faite subséquemment pour évaluer les effets par chromatographie liquide haute performance. (2) Résultats Procédé utilisant le cristallin î bovin Alors qu'une dose d'aminoguanidine seule à une concen- tration inférieure favorise la formation des produits d'Amadori, il est clairement démontré que l'agent de la présente invention conte- nant le composé organique du germanium (1-1) allant d'une concen- tration inférieure à une concentration supérieure est efficace pour supprimer la formation des produits d'Amadori. De plus, l'agent de la présente invention contenant le composé organique du germanium (1-1) et L'aminoguanidine supprime la formation des produits d'Amadori alors qu'elle est favorisée dans le groupe recevant l'aminoguanidine seule. De plus, le degré de formation des produits d'Amadori est inférieur dans. tout l'intervalle de concentrations dans le groupe précédent par rapport au témoin positif. Une dose d'aminoguanidine seule de 40 mM ou de 200 mM est efficace pour la solubilisation réversible des produits d'Amadori produits par le cristallin-c. L'agent de la présente invention contenant le composé organique du germanium (1-1) à une concentra- tion de 20 mN, et l'agent de la présente invention contenant le composé organique du germanium (1-1) et l'aminoguanidine, à une concentration aussi faible que 800 pM et 320 pM, respectivement, sont efficaces. Les résultats sont partiellement montrés dans le tableau 2. Les chiffres dans le tableau 2 représentent les valeurs intégrales de l'intensité de fluorescence mesurées par un détecteur de fluorescence pour la longueur d'onde d'excitation de 350 nm et pour la longueur d'onde de fluorescence de 440 nm. TABLEAU 2 Chlorhydrate d'aminoguanidine (mM) 0 4 20 Composé 0 825* 812 368 (1-1) 0,010240 407 352 263 (PM) 0,051200 321 390 232 La valeur obtenue par le cristallin " seule est de 137. La valeur marquée d'un astérisque est obtenue dans le cas o le * D-glucose est ajouté au cristallin ". Procédé utilisant l'albumine du sérum bovin Il a été confirmé que l'albumine du sérum bovin et le D-glucose forment des produits d'Amadori ayant une intensité de fluorescence dépassant 4 x 104 pendant 50 jours. Le système expéri- mental est examiné par chromatographie liquide haute performance et les résultats montrent un accroissement remarquable des dimères ou des trimères de tl'albumine du sérum. A ce système, on ajoute l'agent de la présente invention contenant le composé organique du germanium (1-1) (4 mM) et l'aminoguanidine (200 mM), qui produit une suppression significa- tive de la formation des produits d'Amadori. Selon les résultats, l'action de coopération entre le composé organique du germanium (1-1) et l'aminoguanidine est confirmée. Les résultats sont montrés à la figure 6. Le système expérimental est soumis à l'analyse par chromatographie liquide haute performance, et les pics correspon- dant aux dimères et aux trimères de l'albumine du sérum deviennent plus bas, tandis qu'un pic de substances à poids moléculaire infé- rieur apparaît. Un mélange d'albumine du sérum bovin et de D-glucose est chauffé à 370C pendant 9 semaines pour produire une quantité suffi- sante de produits d'Amadori, auquel on ajoute l'agent de la présente invention contenant le composé organique du germanium (1-1) (20 mM) etl'aminoguanidine (200 mM). Comme montré à la figure 7, une suppression significative de la formation des produits d'Amadori est observée, indiquant la présence, également dans ce système, d'une action de coopération entre le composé orga- nique du germanium (1-1) et l'aminoguanidine. Lorsque le système-est soumis à l'analyse par chromato- graphie liquide haute performance, le pic correspondant aux trimères de l'albumine du sérum devient le pic principal, tandis que le pic des substances à poids moLéculaire inférieur apparait, montrant un pic d'absorption intense de l'ultraviolet en même temps qu'une diminution de la fluorescence apparait. Ces résultats indiquent que la formation des produits d'Amadori est perturbée et que les protéines constitutives sont transformées en substances à poids moléculaire inférieur. Exemple 3 Comme animaux d'expérimentation, on emploie des. souris à sénilité accélérée âgées de 1 mois (12 souris) et de 5 mois (12 souris). Les deux groupes d'âges sont divisés en trois groupes, individuellement; le groupe 1 reçoit la solution de 0,05 mg/ml d'acide 1-hydroxy-5-oxy-5H-pyrido(3,2a)phénoxazine-3-carboxylique (nom générique: pyrénoxine) (la solution est désignée par solution de pyrénoxine ci-après); le groupe 2 reçoit à la fois la solution à 4 X de composé organique du germanium (1-1) (désignée par solution de Ge) et la solution de pyrénoxine; le groupe 3, en tant que groupe témoin, reçoit de l'eau distillée contenant un agent de suppression de l'activité superficielle comme solution placébo. L'administration est conduite avec le collyre, 4 fois par jour, pendant 6 jours/semaine. Avant le commencement de l'administration du collyre, et au 30e, 60e, 90e et 120e jour après ce commencement, la mydriase est induite en utilisant le Midorin P (nom de produit) - chez chaque sujet sous anesthésie de 0,7 ml/kg de nembutal sodique injecté par voie intrapéritonéale, avant de soumettre à l'observa- tion du cristallin au stéréomicroscope. L'observation du cristallin chez les souris à sénilité accélérée peut être classifiée grossièrement en 4 types, transpa- rence, formation de cercles concentriques, distorsion et opacité corticale dans cet exemple. Par le terme "transparence", on désigne l'absence de symptôme anormal dans le cristallin de sorte que le vaisseau rétinien peut être observé au travers; par le terme "formation de cercles concentriques", on désigne 2 à 5 anneaux observés dans les cercles concentriques dans un cristallin; par le terme "distorsion", on désigne l'incidence de la distorsion dans l'image sur les fonds d'oeil, en raison de la réfraction anormale du cristallin; par le terme "opacité corticale", on désigne l'incidence de l'opacité diffuse ou cunéiforme. Deux de ces symptômes, à savoir la formation des cercles concentriques et la distorsion sont observés dans certains cristallins et dans ces cas, le symptôme montrant le changement le plus fort est sélectionné comme symptôme anormal. 1. Expériences du collyre commençant 1 mois après la naissance Les yeux des souris à sénilité accélérée âgées de 1 mois sont examinés avant l'administration du collyre. La plupart des yeux incluant ceux du groupe témoin ont des cristallins transpa- rents sans symptômes anormaux; une opacité corticale moyenne et l'absence d'anophtalmie oculaire sont observées simultanément chez un sujet du groupe 2 (un groupe à administration simultanée de solution de Ge et de solution de pyrénoxine). L'examen qui est conduit au 30e jour après le commencement de l'administration du collyre démontre que l'opacité corticale observée avant le commencement de l'admistration du collyre a disparu. Toutefois, il se produit des cercles concen- triques analogues à des anneaux dans un oeiL du groupe 1 (groupe recevant l'administration de pyrénoxine), un oeil du groupe 2 (administration simultanée de solution de Ge et de solution de pyrénoxine) et deux yeux du groupe 3 (comme groupe témoin). L'examen au 60e jour après le commencement de l'administration du collyre démontre que les signes anormaux dans le cristallin tels que la formation de cercles concentriques et la distorsion sont observés dans un oeil du groupe 1 et dans quatre yeux du groupe 3. L'examen au 90e jour après le commencement de l'adminis- tration du collyre démontre que les six yeux avec des cristallins transparents du groupe 1 montrent la formation de cercles concen- triques (dans quatre yeux) et la distorsion (dans deux yeux), indiquant l'apparition de la cataracte au stade initial. Pour le groupe 3, quatre yeux avec des cristallins atteints de distorsion ne montrent aucun changement des sympt6mes observés lors de l'examen antérieur. Au contraire, les cristallins du groupe 2 sont en bon état, de sorte que les cristallins..sont considérés comme transparents. L'examen au 120e jour après le commencement de l'adminis- tration du collyre démontre que la distorsion qui était observée dans deux yeux du groupe 1 au 90e jour a disparu. La distorsion a disparu dans l'un des quatre cristallins du groupe 3, qui a été diagnostiqué comme étant dans un état de-distorsion. Ces résultats indiquent que la distorsion dans le cristallin n'est pas générale- ment fixe. Chez le groupe 2, un animal meurt durant l'expérimen- tation, mais toutes les autres souris restantes sont jugées normales à cet examen. Les résultats mentionnés jusqu'à présent sont montrés dans le tableau 3 ci-après. Les rapports de chaque symptôme au total sont montrés sur les figures 8 à 10. On peut dire que ces expérimentations vérifient l'effet préventif de l'agent de la présente invention. TABLEAU 3 Symptômes Avant le début de l'administration du collyre au 30e jour au 60e jour Groupe traité 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Nombre d'yeux 6 7 4 6 7 4 6 7 4 Transparence 6 6 4 5 6 2 5 7 0 Formation de cercles concen- O O 0 1 1 2 0 0 0 triques Distorsion O O O O O 0 1 0 4 Opacité corticale O 1 0 0 0 0 0 0 0 Symptômes au 50e jour au 120e jour Groupe traité 1 2 3 1 2 3 Nombre d'yeux 6 7 4 6 5 4 Transparence 0 7 0 0 5 0 Formation de cercles 4 0 0 6 0 1 concentriques Distorsion 2 0 4 0 0 3 Opacité corticale 0 O O 0 0 0O 2. Expérience avec le collyre débutant à 5 mois à partir de la naissance Une trace des cercles concentriques dans un ou deux noyaux commence à apparaître autour des cristallins dans les yeux des souris à sénilité accélérée âgées de 5 mois, mais la transpa- rence de leur fond de l'oeil est jugée bonne. Comme résultat, on les juge temporairement comme ayant des cristallins transparents avant te commencement de l'administration du collyre. L'examen qui est conduit au 30e jour après Le commence- ment de l'administration du collyre démontre la présence de cercles concentriques clairs dans deux cristallins du groupe 2 et quatre cristallins du groupe 3, mais les yeux du groupe 1' ne montrent aucun changement. L'examen au 60e jour après le commencement de l'adminis- tration du collyre démontre que les groupes 1 et 2 montrent un bon progrès de sorte que tous Les yeux des souris sont jugés transpa- rents, et que la formation des cercles concentriques accompagnée de distorsion est induite dans quatre yeux du groupe 3. L'examen au 90e jour après le commencement de l'adminis- tration du collyre démontre en ce qui concerne les groupes 1 et 2, l'apparition d'un changement sévère induisant la formation des cercles concentriques (dans 12 yeux) et la distorsion (dans 2 yeux). Pour le groupe 3, quatre yeux présentent une distorsion et un changement intense des cristallins. - L'examen au 120e jour après Le commencement de l'adminis- tration du collyre démontre la formation des cercles concentriques dans tous les cristallins des groupes 1 et 2 (14 cristallins); en particulier, la tendance de l'exacerbation accompagnée de distor- sion est observée dans 4 yeux du groupe 1 (groupe recevant l'administration de pyrénoxine). Par contre, dans le groupe 3 en tant que groupe témoin, la distorsion disparaît dans l'un des quatre yeux présentant une distorsion. Toutefois, l'apparition de l'opacité corticale est observée dans un oeil différent, indiquant un progrès de la cataracte. Les résultats mentionnés jusqu'à présent sont montrés dans le tableau 4 ci-après. Les rapports de chaque symptôme au total sont montrés dans les figures 11 à 13. On peut dire que ces expériences vérifient les effets de l'agent de la présente invention, dans la prévention du progrès et dans le traitement. TABLEAU 4 Symptômes Avant le début de l'administration du collyre au 30e jour au 60e jour Groupe traité 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Nombre d'yeux 6 8 4 6 8 4 6 8 4 Transparence 6 8 4 6 6 0 6 8 0 Formation de cercles concen- O O O 0 2 4 0 0 0 triques Distorsion O O O O O O 0 0 4 Opacité corticale O O 0 0 O 0 O O O Symptômes au 90e jour au 120e jour Groupe traité 1 2 3 1 2 3 Nombre d'yeux 6 8 4 6 8 4 Transparence 0 0 0 0 0 0 Formation de cercles 4 8 0 2 8 1 concentriques Distorsion 2 0 4 4 0 2 Opacité corticale O O O O 0 i Comme il est clairement démontré dans l'exemple 3, les effets de prévention ou d'arrêt du progrès de la cataracte sont observés chez les souris à sénilité accélérée dans les groupes 1 et 2, en comparaison avec le groupe 3. Pour le groupe recevant une solution de pyrénoxine seule, toutefois, on a observé un petit nombre de souris'atteint de cataracte à l'état avancé. Ceci veut dire que les effets précités ne sont pas nécessairement des effets absolus désignés. Au contraire, pour le groupe 2, à savoir le groupe recevant une combinaison de solution de Ge et de solution de pyrénoxine, tous les cristaLlins demeurent transparents sur une longue période. Additionnellement aux effets précédents, on a obtenu des effets d'amélioration remarquables en ce que des cris- tallins montrant des symptômes sévères tels que l'opacité corticale ont retrouvé La transparence. Dans l'exemple précédent, même les autres composés à l'exception du composé (1-1), lorsqu'ils sont administrés, montrent des effets approximativement identiques à ceux décrits ci-dessus. La présente invention a été décrite ci-dessus, et ainsi l'agent de la présente invention est excellent comme agent pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristallin. REVENDICATIONS 1. Agent pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristallin, caractérisé en ce qu'il contient comme composant efficace un composé organique du germanium représenté par la formule: R R il 13 (Ge - C - CH COX) O (1) I 2 3 R2 dans laquelle R1 à R3 représentent des atomes d'hydrogène, ou des groupes alkyles inférieurs qui peuvent être identiques ou diffé- rents et choisis de préférence parmi les groupes méthyle, éthyle, propyle, butyle, et analogues, ou bien des groupes phényles substi- tués ou non substitués; X représente un groupe hydroxyle, un groupe Oalkyle inférieur, un groupe amino ou un groupe O Y dans lequel Y représente un métal, notamment le sodium, le potassium ou analogue, ou un composé ayant un groupe basique tel que le lysozyme ou un aminoacide basique et analogue. 2. Agent pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristallin, contenant comme composants efficaces un composé organique du germanium de formule: R R Il 1 3 (Ge - C - CH - COX) (1) 2 3 1 R2 dans laquelle R1 à R3 et X sont comme définis dans la revendication 1 et l'aminoguanidine. 3. Agent pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristallin, caractérisé en ce qu'il contient comme composants efficaces un composé organique du germanium représenté par la formule: R R 1 1 1iR3 (Ge - - CH - COX)203 (1) R2 dans laqueLLe R1 à R3 et X sont comme définis dans La revendication 1 et un dérivé de phénoxazine. 4. Agent pour la prévention et le traitement de l'opacité du cristaLLin seLon La revendication 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que le composé organique du germanium représenté par la formule (1) est le composé dans lequel R1 à R3 sont des atomes d'hydrogène, et X est un groupe hydroxyle. 5. Agent pour La prévention et le traitement de l'cpacité du cristallin selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que l'agent est préparé sous la forme de collyre, ensemble avec des composants connus, notamment L'acide boricue, le chlorure de sodium, l'hydroxyde de sodium, le chlorure de benzaLconium, l'acide ú-aminocaproique, l'acide méthyl-p-oxyamino- benzo;que, le chlorobutanoL et anaLogue. 6. Agent pour la prévention et le traitement de l'cpacité du cristaLLin selon la revendication 3 ou 4, caractérisé en ce que le dérivé de phénoxazine est représenté par la formule: HO - COOM N -x dans laquelle M est un atome d'hydrogène ou un métal, notamment le sodium, le potassium ou analogue. 7. Agent pour la prévention et le traitement de L'opacité du cristallin selon la revendication 3, 4 ou 6, caractérisé en ce qu'il contient le sel de sodium du composé organique du germanium et/ou le sel de sodium du dérivé de phénoxazine. 8. Agent pour la prévention et Le traitement de L'opacité du cristallin selon l'une quelconque des revendications 3, 4, 6 et 7, caractérisé en ce qu'au moins le composé organique du germanium et le dérivé de phénoxazine sont préparés séparément sous forme de formulations et les formulations résultantes sont mélangées pour l'emploi. 9. Agent pour la prévention et Le traitement de l'opacité du cristallin selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que le composé organique du germanium est choisi parmi les suivants: (Ge - CH2 - CH2 - COOH)203 (1-1) CH3 (Ge - CH - CH - COOH) 3 (1-2) 2 2 3 CH (Ge - CH2 - CH - COOH)203 (1-3) CH 1 3 (Ge - CH - H - COOH)203 (1-4) CH3 CH (Ge - C - CH -COOH) (1-5) 1 2 2 3(1-) CH3 (Ge - CH - CH - COOH)203 (1-6) 2 23 C6H5 CH3 (Ge - CH - CH - COOH) 0 (1-7) C6H5 (01-1) ú0Z( eN 003 - H HH3 3 - a9) (6-1) 'OZ(ZHNO3 - H3 - H3 - e9) (8-L) úOZ(úH3003o - ZH3 - H - a9) 69S96'9?9Z 69969Z