Brevet FR2654743A1 — publié le 19910524

L'invention concerne un procédé de culture-en masse de la diato- mée Haslea ostrearia Simonsen, également appelée 'navicule bleue" ou algue bleue. L'Haslea ostrearia est connue principalement pour son action de verdissement des huîtres du genre "fines de claires" On peut pen- ser qu'elle aurait d'autres applications dans le domaine des pig- ments des arômes, des produits alimentaires et cosmétiques, etc. mais sa présence aléatoire à l'état naturel n'a pas permis beau- coup de travaux dans cette direction. Haslea ostrearia appartient à la classe des Diatomées, algues uni- cellulaires, dont déjà quelques espèces sont cultivées en aquacul- ture. La culture et l'exploitation des algues unicellulaires marines a longtemps porté et porte encore sur un nombre restreint d'espèces dont on connaît bien la physiologie et dont la culture est relati- vement aisée: cellules de petite taille, mobiles, vivant en sus- pension dans le milieu, à paroi mince, faciles à traiter. L'essor des biotechnologies marines et de l'aquaculture se trouve donc limité en l'état actuel à un certain nombre d'espèces qui se multiplient sans difficulté et dont on extrait un certain nombre de composés tels que pigments, protéines, vitamines, acides gras, etc mais aucune de ces espèces ne permet le verdissement des hui- tres On ressent donc vivement le besoin d'un procédé de culture d'un nouveau type qui permettrait la production en masse de cette algue en vue en particulier de son exploitation directe pour le verdissement des huîtres L'industrie est donc à la recherche d'u- ne telle production en masse de manière à satisfaire des demandes de plus en plus pressantes d'algues marines. L'invention a donc pour but de fournir un procédé de culture de l'algue bleue dans des volumes de milieu de plusieurs mètres cu- bes pour mieux répondre à une exploitation de type industriel. Elle a aussi pour but d'utiliser le milieu après culture de l'al- gue pour le verdissement des huîtres: celui-ci est en èffet tein- té en bleu vert par le pigment libéré par l'algue, la marennine. A cet effet, le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que on prépare un milieu de culture constitué d'eau salée ayant une salinité comprise entre 25 et 34 Zoo et une concentra- tion en ammoniaque inférieure à 110 i M/dm 3, des concentrations en éléments minéraux majeurs telles que azote nitrique: entre 60 et 150 g M/dm 3 phosphore: entre 3 et 6 P M/dm W silicium: entre 60 et 200 p M/dm 3 des concentrations en oligo-éléments métalliques telles que: cuivre: entre 2 10-8 et 6 10-8 M/dmà fer: entre 5 10-' et 20 10-' M/dm' zinc: entre 6 10-8 et 12 10-' M/dm' nickel: entre 1 10-8 et 2 10-' M/dm', on ramène le p H du milieu à une valeur supérieure ou égale à 7,30, on filtre le milieu à une maille de 0,45 gm, on choisit des algues issues de clones isolés et mis en culture en laboratoire dans des récipients en verre à une tempé- rature de l'ordre de 18 C, avec un éclairement de l'ordre de 3000 lux à un rythme de 14 heures de lumière suivies de 10 heures d'obs- curité, pendant 6 jours, on fait incuber les algues sous serre dans des bacs circulaires de 300 à 500 dm 3 de manière à maintenir la températu- re entre 12 ' C et 25 C, en éclairement naturel, sans agitation, en milieu calme, les bacs étant recouverts de toile à bluter, pen- dant 8 jours. Dans ces conditions, on atteint dans les bacs de 300 dm 3 une bio- masse de 60 à 120 106 cellules/dm 3, avec une couleur bleu-vert ca- ractéristique de la production par l'algue du pigment bleu surnumé- raire Cette biomasse représente une masse fraîche d'algues de 20 g pour 100 dm 3 de culture, avec une teneur en eau comprise entre 70 et 90 % après concentration par centrifugation avec cylindre clari- ficateur. Selon une forme de mise en oeuvre du procédé selon l'invention, le milieu de culture est constitué d'eau de mer souterraine addition- née de nitrates pour obtenir la concentration en azote voulue. De préférence, la concentration en ammoniaque du milieu de cultu- re est inférieure ou égale à 80 M/dm 3 Avantageusement, la sali- nité du milieu de culture est comprise entre 28 et 32 */oo. Selon une forme de mise en oeuvre, les concentrations en éléments minéraux essentiels sont: azote nitrique: environ 100 p M/dm 3 phosphore: environ 4 g M/dm 3 silicium: environ 100 p M/dm 3. Avantageusement, les concentrations en oligo-éléments métalliques sont cuivre: environ 4 10-8 M/dm 3 fer: environ 12 10-6 M/dm 3 zinc: environ 8 10-8 M/dm 3 nickel: environ 1,5 10-B M/dm 3. La culture de la diatomée Haslea ostrearia Simonsen ainsi effec- tuée conformément à l'invention se caractérise par la production du pigment bleu qui diffuse en partie dans le milieu de culture, ce qui lui donne cette couleur bleu-vert caractéristique La con- centration en pigment bleu dans le milieu de culture, après concen tration des algues, pour les cultures de 300 dm 3, est de l'ordre de 130 mg/dm 3 L'eau verte ainsi produite peut être utilisée après filtration, pour le verdissement d'huîtres, processus qui s'effec- tue naturellement dans l'affinage des huîtres "fines de claires". Cette eau conduit au verdissement des huîtres en 12 heures, pour une proportion d'environ 1 huître/dm 3 d'eau L'eau peut ensuite servir au verdissement d'un autre lot d'huîtres. Le procédé de culture en masse selon l'invention permet d'obtenir simultanément, en masse, de l'eau de mer pour le verdissement des huîtres, et des algues bleues qui peuvent être conservées par con- gélation ou lyophilisation ou qui peuvent être traitées, en parti- culier pour en extraire le pigment bleu. Pour le verdissement des huîtres, on peut opérer en bacs du type "raceway" permettant un verdissement accéléré On peut également effectuer un écoulement constant dans des claires ostréicoles atte nantes à la structure de production des algues, pour le verdisse- ment d'huîtres du type "fine de claire" ou du type "spéciale". Revendications 1 Procédé de culture en masse de la diatomée Haslea ostrearia Si- monsen, caractérisé en ce que on prépare un milieu de culture constitué d'eau salée ayant une salinité comprise entre 25 et 34 /oo et une concentra- tion en ammoniaque inférieure à 110 p M/dm 3, des concentrations en éléments minéraux majeurs telles que: azote nitrique: entre 60 et 150 p M/dm 3 phosphore: entre 3 et 6 p M/dm 3 silicium: entre 60 et 200 p M/dm 3 des concentrations en oligo-éléments métalliques telles que: cuivre: entre 2 10-8 et 6 10-8 M/dm 3 fer: entre 5 10-8 et 20 10-6 M/dm 3 zinc: entre 6 10-8 et 12 10-8 M/dm 3 nickel: entre 1 10-8 et 2 10-8 M/dm 3, on ramène le p H du milieu à une valeur supérieure ou égale à 7,30, on filtre le milieu à une maille de 0,45 Rm, on choisit des algues issues de clones isolés et mis en culture en laboratoire dans des récipients en verre à une tempé rature de l'ordre de 18 ' C, avec un éclairement de l'ordre de 3000 lux à un rythme de 14 heures de lumière suivies de 10 heures d'obs curité, pendant 6 jours, on fait incuber les algues sous serre dans des bacs circulaires de 300 à 500 dm 3 de manière à maintenir la températu- re entre 12 ' C et 25 ' C, en éclairement naturel, sans agitation, en milieu calme, les bacs étant recouverts de toile à bluter, pen- dant 8 jours. 2 Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le milieu de culture est constitué d'eau de mer souterraine additionnée de nitrates pour obtenir la concentra- tion en azote voulue. 3 Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que la concentration en ammoniaque du milieu de culture est inférieure ou égale à 80 g M/dm 3. 4 Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la salinité du milieu de culture est compri- se entre 28 et 32 '/oo. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que les concentrations en éléments minéraux es- sentiels sont: azote nitrique: environ 100 g M/dm 3 phosphore: environ 4 g M/dm 3 silicium: environ 100 g M/dm 3. 6 Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que les concentrations en oligo-éléments métalli- ques sont: cuivre: environ 4 10-8 M/dm 3 fer: environ 12 10-6 M/dm 3 zinc: environ 8 10-8 M/dm 3 nickel: environ 1,5 10-8 M/dm 3. 7 Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'on sépare les algues produites d'avec l'eau enrichie de pigments bleus. g 8 Procédé de verdissement des huîtres, caractérisé en ce qu'on place des huîtres dans l'eau obtenue par le procédé selon la revendication 7, en proportion d'environ une huître par dm 1 d'eau, et on laisse les huîtres pendant environ 12 heures dans ladite eau. 9 Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que le verdissement est effectué dans des bacs du type "race-way". Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'on effectue un écoulement constant de ladite eau dans des claires ostréicoles attenantes à la structure de cul- ture en masse des algues. 11 Algue de l'espèce haslea ostrearia Simonsen, caractérisée en ce qu'elle est obtenue par le procédé selon l'une des revendications 1 à 10. 12 Application de l'algue selon la revendication 11 au verdisse- ment des huitres.