Brevet FR2649319A1 — publié le 19910111

La présente invention a pour objet des - formulations à libération prolongée de médicaments. En particulier, l'invention concerne des formulations à libération prolongée de peptides hydro- solubles, par exemple la somatostatine ou un analogue de la somatostatine, tel que l'octréotide, dans un véhicule polymère biodégradable et biocompatible, par exemple une matrice ou une enveloppe, par exemple sous forme d'un implant ou de préférence sous forme de microparticules (également connues comme microcapsules ou microsphères). L'invention concerne également de telles formulations présentant des profils satisfaisants de libération des peptides pendant une période de temps particulière. Les médicaments peptidiques présentent, après leur administration, que ce soit par voie orale ou par voie parentérale, une faible biodisponibilité dans le sang due, par exemple à leur biodégradabilité élevée dans l'organisme. Lorsqu'on les administre par voie orale ou par voie nasale, ils présentent souvent en plus une faible résorption à travers les membranes de la muqueuse. Il est alors difficile d'obtenir des taux sanguins thérapeutiquement actifs pendant une longue période de temps. On a proposé d'administrer les médicaments peptidiques par voie parentérale, à savoir sous forme d'une formulation dépôt dans un polymère biodégradable, par exemple sous forme de microparticules ou d'un implant, afin de permettre leur libération prolongée après un temps de présence dans le polymère, ce dernier protégeant le peptide contre les influences enzymati- ques et hydrolytiques des fluides biologiques. Bien que certaines formulations dépôt, destinées à une administration par voie parentérale, de médicaments peptidiques dans un polymère sous forme de microparticules ou d'implant soient connues, on n'obtient en pratique une libération satisfaisante des peptides que dans très peu de cas. Des mesures spéciales garantissant une libération constante des peptides doivent donc être prises pour obtenir des taux sériques en médicament qui soient thérapeutiquement actifs et, si nécessaire, pour éviter des concentra- tions trop élevées de médicament dans le sérum qui provoquent des effets secondaires indésirables. La libération des peptides est fonction de divers facteurs, notamment du type de peptide, et de sa présentation, par exemple sous forme libre ou sous une autre forme, par exemple sous forme de sel, ce qui peut avoir un effet sur sa solubilité dans l'eau. Un autre facteur important est le choix du polymère parmi la liste étendue des possibilités décrites dans la litté- rature. Chaque polymère a sa propre vitesse de bio- dégradation. Il peut se former des groupes carboxy qui ont une influence sur la valeur du pH dans le polymère et ont également un effet sur la solubilité dans l'eau du peptide et donc sur sa libération. D'autres facteurs qui peuvent avoir une influence sur la libération des peptides, sont la concentration du peptide dans le véhicule, sa répar- tition dans le polymère et la forme dans le cas d'un implant et sa dimension. Jusqu'à présent, aucune composition à base de somatostatine sous une forme à libération prolongée destinée à une administration par voie parentérale, n'a été mise sur le marché, peut être en raison du fait qu'aucune composition présentant des taux sanguins satisfaisants n'a pu être obtenue. Des compositions pharmaceutiques qui sont à base de polymères, et qui permettent d'obtenir une libération prolongée ou retardée du principe actif, sont connues dans la technique. Le brevet américain n 3 773 919 décrit des formulations à libération contrôlée de principe actif dans lesquelles le principe actif, par exemple un peptide hydrosoluble, est dispersé dans un polymère linéaire de l'acide lactique ou dans un co-polymère linéaire de l'acide lactique et de l'acide glycolique, biodégradable et biocompatible. Le document, cependant, ne donne aucune donnée sur la libération du médicament et la somatostatine n'y est pas mentionnée. Le brevet américain 4 293 539 décrit des formulations anti- bactériennes sous forme de microparticules. Le brevet américain n 4 675 189 décrit des formulations & libération prolongée de la nafaréline, un décapeptide analogue de la LHRH, et autres analogues de la LHRH dans des copolymères de l'acide lactique et de l'acide glycolique, mais ne donne aucune donnée sur la libération du principe actif. T. Chang, dans J. Bioneng., vol. 1, pages -32, 1976, décrit la libération prolongée de produits biologiques, d'enzymes et de vaccins à partir de micro- particules. Les brevets américains n 3 991 776, 4 076 798 et 4 118 470 décrivent des polymères et copo- lymères de l'acide lactique et des compositions les contenant destinées à une utilisation chirurgicale et à une libération prolongée par biodégradation du poly- mère. La demande de brevet européen n 0 203 031 décrit une série d'octapeptides analogues de la somatostatine, par exemple le composé RC160 répondant à la formule * * D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NE2 ayant un pont entre les restes Cys-. La revendication 18 mentionne la possibilité de présenter les somatos- tatines sous forme de microcapsules avec un copolymère de l'acide lactique et de l'acide glycolique, mais ne décrit pas comment obtenir des taux sériques constants qui soient thérapeutiquement actifs. Le brevet américain n0 4 011 312 indique que l'on peut obtenir une libération continue d'un médi- cament antimicrobien, par exemple la polymyxine B hydrosoluble, à partir d'une matrice, sous forme d'implant, d'un copolymère de l'acide lactique et de l'acide glycolique à bas poids moléculaire (inférieur à 2000) et à teneur relativement élevée en unités d'acide glycolique, lorsque l'implant est inséré dans le canal mammaire d'une vache. Le principe actif est libéré en un temps très court, en raison de la teneur élevée en unités d'acide glycolique et du bas poids moléculaire du polymère, ce qui favorise une rapide biodégradation du polymère et donc une libération rapide du principe actif. Une teneur relativement élevée en principe actif favorise également une rapide libération de ce dernier. Ledit brevet ne mentionne cependant aucune somatostatine et ne fournit aucune donnée sur la libération du principe actif. Le brevet européen n0 58481 mentionne qu'une libération continue d'un peptide hydrosoluble à partir d'un implant d'acide polylactique est stimulée par l'abaissement du poids moléculaire d'au moins une partie des molécules du polymère, par introduction d'unités d'acide glycolique dans la molécule du poly- mère, par augmentation du caractère séquensé du poly- mère lorsqu'on utilise un copolymère d'acide lactique et d'acide glycolique, et par augmentation de la teneur en principe actif de la matrice du polymère et de la dimension de l'implant. Bien que les somatostatines soient mentionnées comme peptides hydrosolubles, le document ne décrit aucun profil de libération d'une somatostatine et on ne donne aucune indication sur la manière de combiner tous ces paramètres pour obtenir, par exemple, des taux constants de somatostatine dans le sérum pendant au moins une semaine, par exemple un mois. Le brevet européen né 92918 indique qu'on peut obtenir une libération continue de peptides, de préférence de peptides hydrophiles, pendant un temps prolongé, lorsque le peptide est incorporé dans une matrice polymère hydrophobe, par exemple d'acide poly- lactique, que l'on rend plus accessible à l'eau en introduisant dans sa molécule une unité hydrophile, par exemple de polyéthylèneglycol, d'alcool polyvinylique, de dextrane ou de polyméthacrylamide. Le caractère hydrophile du polymère amphiphile provient des groupes éthylèneoxy dans le cas d'une unité de polyéthylène- glycol, des groupes hydroxy libres dans. le cas d'une unité d'alcool polyvinylique ou d'une unité de dextrane, et des groupes amide dans le cas d'une unité de polyméthacrylamide. En raison de la présence d'une unité hydrophile dans la molécule du polymère, l'implant aura les propriétés d'un hydrogel après absorption de l'eau. La somatostatine est mentionnée comme peptide hydrophile, mais le document ne fournit aucun profil de libération et ne donne aucune indica- tion sur le type de polymère préféré pour ce peptide et sur le poids moléculaire et le nombre de groupes hydro- philes que le polymère devrait avoir. La demande de brevet britannique 2 145 422 indique qu'on peut obtenir une libération prolongée de médicaments de divers types, par exemple de vitamines, d'enzymes, d'antibiotiques et d'antigènes, lorsque le principe actif est incorporé dans une matrice, par exemple sous forme de microcapsules ou d'implant, constituée par un polymère d'un polyol, par exemple le glucose ou le mannitol, comprenant un ou plusieurs groupes ester avec un acide polylactique, de préférence au moins 3. Les restes de l'acide polylactique contiennent de préférence des unités d'acide glyco- lique. Les peptides, par exemple les somatostatines, ne sont cependant pas mentionnés comme médicaments susceptibles d'être utilisés sous une telle forme à libération prolongée. L'invention concerne donc des formulations à libération prolongée, par exemple des formulations de microparticules, d'un médicament, spécialement d'une somatostatine ou d'un analogue de la somatostatine, tel que l'octréotide, hydrosoluble et à activité hormonale, qui fournissent des taux plasmatiques satisfaisants en principe actif, par exemple dans un polymère bio- compatible et biodégradable, par exemple dans une matrice polymère obtenue par microencapsulation. La matrice polymère peut être un polymère synthétique ou naturel. Les microparticules de l'invention peuvent être préparées selon l'une quelconque des techniques habituelles, par exemple selon la technique de s4para- tion de phase organique, la technique de séchage par nébulisation (spray drying) ou la technique d'émulsion triple, selon lesquelles on provoque la précipitation du polymère avec le principe actif, et ensuite on durcit le produit résultant lorsqu'on utilise la technique de séparation de phase ou d'émulsion triple. Si nécessaire, les formulations à libération prolongée peuvent se présenter sous forme d'un implant. La Demanderesse a trouvé une modification particulièrement utile de la technique de séparation de phase pour préparer des microparticules de n'importe quel principe actif. L'invention concerne donc également un procédé de préparation de microparticules comprenant un principe actif dans un véhicule biodégradable et bio- compatible, procédé selon lequel a) on dissout la matière polymère dans un solvant approprié dans lequel le principe actif n'est pas soluble, b) dans la solution de l'étape a), on ajoute et on disperse une solution du principe actif dans un solvant appraprié, par exemple un alcool, qui n'est pas un solvant pour le polymère, c) on ajoute un agent inducteur de phase à la dis- persion de l'étape b), pour provoquer la formation de microparticules, d) on ajoute une émulsion huile dans l'eau au mélange de l'étape c) pour durcir les microparticules, et e) on récupère les microparticules. La Demanderesse a également trouvé une modification particulièrement utile de la technique d'émulsion triple pour la préparation de micro- particules de n'importe quel principe actif. L'invention concerne donc un procédé de préparation de microparticules, procédé selon lequel (i) on mélange intimement une émulsion eau-dansl'huile formée à partir d'un milieu aqueux et d'un solvant organique non miscible dans l'eau, contenant dans une phase le principe actif et dans l'autre phase un poly- mère biodégradable et biocompatible, avec un excès d'un milieu aqueux contenant une substance émulsifiante ou un colloïde protecteur, pour former une émulsion eau- dans-l'huile-dans-l'eau, sans ajouter à l'émulsion eau-dans-l'huile de substance retenant le principe actif ou sans appliquer une étape intermédiaire augmentant la viscosité, (ii) on soumet le solvant organique à une désorptionet (iii) on isole et on sèche les microparticules résul- tantes. L'invention concerne également les micro- particules obtenues selon ces procédés. L'invention concerne également a) une formulation à libération prolongée comprenant un peptide dans un ester d'un polyol avec un acide poly(40/60 à 60/40 lactique-co-glycolique), le reste polyol étant choisi parmi les alcools conte- nant une chaîne hydrocarbonée en C3-C6 et de 3 à 6 groupes hydroxy et les mono- et di-saccharides, et le polyol estérifié ayant au moins 3 chaînes d'acide poly(lactique-co-glycolique), b) une formulation à libération prolongée comprenant un peptide qui est une calcitonine, la lypressine ou une somatostatine, dans un copolymère linéaire /60 à 60/40 d'acide lactique et d'acide glycolique ayant un poids moléculaire Mw compris entre 25 000 et 100 000 et une polydispersité Mw/Mn comprise entre 1,2 et 2, en une concentration comprise entre 0,2 et 10%, de préférence entre 2 et % en poids de peptide, c) une formulation à libération prolongée comprenant l'octréotide ou l'un de ses dérivés, ou un sel du composé dans un véhicule polymère biodégradable et bio- compatible. La Demanderesse a trouvé qu'un nouveau sel de l'octréotide, le pamoate, est très stable dans de telles formulations. L'invention concerne donc (i) le pamoate d'octréotide et (ii) un procédé de préparation du pamoate d'octréotide, procédé selon laquel on fait réagir l'octréotide avec l'acide pamoïque (ou un dérivé réactif de ce composé). L'invention concerne en outre les formula- tions indiquées plus haut pour l'utilisation dans le traitement de l'acromégalie ou du cancer du sein. Les principes actifs utilisés dans les procédés de l'invention sont de préférence des principes actifs hydrosolubles, par exemple des peptides. Les peptides utilisés dans les procédés et les formulations de l'invention peuvent être une calcitonine, telle que la calcitonine de saumon, la lypressine et la somatostatine d'origine naturelle et ses analogues synthétiques. La somatostatine d'origine naturelle qui est l'un des composés préférés, est un tétradécapeptide ré- pondant à la formule Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp I I Cys-Ser-Thr-Phe-Thr-Lys Cette hormone est produite par l'hypo- thalamus ainsi que par d'autres organes, par exemple le tractus gastrointestinal.La somatostatine intervient au niveau hypophysaire pour inhiber les sécrétions de la hGH (hormone somatotrope)-et de la TSH (thyréo- stimuline). Au niveau digestif, elle inhibe de nombreux processus sécrétoires (dans le pancréas, l'estomac, le duodénum et l'intestin grêle). Par l'expresion "analogue ou dérivé de la somatostatine", on entend l'un quelconque des polypep- tides cycliques ou à chaîne linéaire dérivé de la somatostatine naturelle dans laquelle un ou plusieurs restes d'amino-acides ont été supprimés et/ou substi- tués par un ou plusieurs autres restes d'amino-acides et/ou dans laquelle un ou plusieurs groupes fonction- nels ont été remplacés par un ou plusieurs autres groupes fonctionnels et/ou dans laquelle un ou plusieurs groupes ont été remplacés par un ou plusieurs autres groupes isostères. En général, le terme englobe tous les dérivés modifiés d'un peptide biologiquement actif qui exercent un effet qualitativement similaire à celui de la somatostatine non modifiée. Les analogues agonistes de la somatostatine sont donc utiles pour remplacer la somatostatine d'origine naturelle dans son action sur la régulation de fonctions physiologiques. Les somatostatines connues préférées sont les suivantes: a) (D)Phe-CysPhe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Throl (dénomination commune octréotide) b) (D)PheCys-Tyr_(D)TrpLysValCysThrNH2 c) (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-TrpNH2 d) (D)Trp-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-ThrNH2 e) (D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-LysThr-Cys-ThrNH2 f) 3_(2_(Naphthyl)-(D)Ala-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-CysThrNH2 g) (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-.B--Nal-NH2 h) 3-(2-naphthyl)AlazC-ys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-0-Nal-NH2 i) (D)Phe-Cys-B--Nal-(D)Trp-LysVal-Cys-Thr-NH2 o dans chaque composés a) à i) il y a un.pont entre les amino-acides marqués d'un astérisque (*) comme indiqué dans la formule ci-dessous. Les autres somatostatines préférées sont les suivantes: I I H-Cys-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Cys-OH [voir Vale et coll., Metabolism, 27, Supp. 1, 139, (1978)] Asn-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba [voir la demande de brevet européen ne 1295] * * MeAla-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Phe [voir Verber et coll., Life Sciences, 34, 1371-1378 (1984) et la demande de brevet européen n 70 021] également connue sous la désignation cy c 1 o(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe). * * NMePhe-His-(D)Trp-Lys-Val-Ala [voir R.F. Mutt et coll., Klin. Wochenschr. (1986) 64 (Suppl. VII)] *-* H-Cys-His-His-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-ThrSer-Cys-OH ( voir la demande de brevet européen 200 188) * * X-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NIH2 et * * X-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol dans laquelle X signifie une fixation cationique spécialement * * Ac-hArg(Et2)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-NE2 (voir la demande de brevet européen 363589) et dans les formules ci-dessus, un pont étant présent entre les amino-acides marqués d'un astérisque (*). Le contenu de ces publications est incorporé à la présente demande à titre de référence. L'expression dérivé comprend également les composés correspondants comportant un reste glucidique. Lorsque les somatostatines comportent un reste glucidique, ce dernier est couplé de préférence à un groupe amino N-terminal et/ou à au moins un groupe amino présent dans la chaîne latérale du peptide, plus préférablement à un groupe amino N-terminal. De tels composés et leur préparation sont décrits par exemple dans la demande internationale WO 88/02756. L'expression dérivés de l'octréotide comprend les dérivés comprenant un reste * * -D-Phe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys- dans lequel les restes Cys sont reliés par un pont. Les dérivés particulièrement préférés sont le N"-[c-glucosyl-(1-4-désoxyfructosyll-DPhe-Cys-Phe- DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol et le Na-[O-désoxyfructosyl]- DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol, chacun comprenant un pont entre les restes -Cys-, de préférence sous forme d'acétate, et décrits respectivement aux exemples 2 et 1 de la demande mentionnée plus haut. Les somatostatines peuvent se présenter par exemple sous forme libre, sous forme de sel, ou sous forme de complexes. Les sels d'addition d'acides peuvent être formés par exemple avec des acides organi- ques, des acides polymères et des acides minéraux. Les sels d'addition d'acides comprennent par exemple le chlorhydrate et l'acétate. Les complexes sont formés par exemple à partir des somatostatines par addition de substances minérales, par exemple de sels minéraux ou d'hydroxydes tels que les sels de Ca et de Zn et/ou par addition de substances organiques polymères. L'acétate est le sel préféré pour de telles formulations, spécialement pour les microparticules provoquant un pic plasmatique réduit. L'invention concerne également le pamoate qui est utile en particulier pour les implants. On peut obtenir le pamoate selon les mé- thodes habituelles, par exemple en faisant réagir l'acide embonique (acide pamoïque) avec l'octréotide, par exemple sous forme de base libre. On peut effectuer la réaction dans un solvant polaire, par exemple à température ambiante. Les somatostatines sont indiquées pour une utilisation dans le traitement des troubles pour les- quels une application à long terme du médicament est envisagée, par exemple pour le traitement de troubles ayant une étiologie comprenant ou associée avec un excès de sécrétion de l'hormone de croissance, par exemple dans le traitement de l'acromégalie, pour une utilisation dans le traitement des troubles gastro- intestinaux, par exemple des ulcères peptiques, des fistules entérocutanées et pancréatocutanées, du syndrome du côlon irritable, du syndrome de dumping, des diarrhées aqueuses, de la pancréatite aiguë et des tumeurs gastro-intestinales productrices d'hormones (par exemple le vipome, les tumeurs secrétant du GRF, le glucagonome, l'insulinome, le gastrinome et tumeurs carcinoïdes) ainsi que des saignements gastro-intes- tinaux, du cancer du sein et des complications liées au diabète. Le véhicule polymère peut être préparé à partir de polymères biocompatibles et biodégradables, tels que les polyesters linéaires, les polyesters ramifiés constitués de chaînes linéaires se développant à partir d'un reste polyol, par exemple le glucose; les autres esters sont l'acide polylactique, l'acide poly- glycolique, l'acide polyhydroxybutyrique, la poly- caprolactone, l'oxalate de polyalkylène, les esters d'un polyalkylèneglycol avec des acides du cycle de Krebs, par exemple l'acide citrique et autres, et leurs copolymères. Les polymères préférés de l'invention sont les polyesters linéaires et les polyesters à chaîne ramifiée. Les polyesters linéaires peuvent être pré- parés par condensation d'acides a-hydroxycarboxyliques, par exemple l'acide lactique et l'acide glycolique, ou par polymérisation de la lactone (dimère de l'acide) (voir par exemple le brevet américain no 3 773 919). Les copolymères linéaires de l'acide lactique et de l'acide glycolique préférés pour une utilisation selon l'invention, ont avantageusement un poids moléculaire compris entre 25 000 et 100 000 et une polydispersibilité Mw/Mn comprise par exemple entre 1,2 et 2. Les polyesters ramifiés préférés pour une utilisation selon l'invention peuvent être préparés en utilisant des composés polyhydroxylés, par exemple les polyols, tels que le glucose et le mannitol, comme initiateurs. Ces esters de polyols sont connus et décrits dans la demande de brevet britannique n 2 145 422. Le polyol contient au moins 3 groupes hydroxy et peut avoir un un poids moléculaire allant jusqu'à 20 000 et au moins 1, de préférence au moins 2, par exemple en moyenne 3 groupes hydroxy du polyol étant sous forme d'ester avec un acide polylactique ou un acide poly(lactique-co-glycolique). On utilise habituellement 0,2% de glucose pour initier la polymé- risation. La structure des polyesters ramifiés est en forme d'étoile. Les chaînes de polyester dans les composés polymères linéaires et à structure en étoile utilisés de préférence dans les formulations de l'in- vention, sont de préférence des chaînes de copolymères d'acides =carboxyliques, l'acide lactique et l'acide glycolique, ou de leurs dimères cycliques (lactones). Les rapport molaires de l'acide lactique à l'acide glycolique sont compris entre environ 75:25 et 25:75, par exemple entre 60:40 et 40:60, les rapports compris entre 55:45 et 45:55, par exemple entre 55:45 et 50:50 étant particulièrement préférés. Les polymères à structure en étoile sont obtenus de préférence en faisant réagir un polyol avec le dilactide et de préférence également avec le diglycolide à une température élevée et en présence d'un catalyseur, ce qui rend possible l'ouverture du cycle lactone pour la polymérisation. Un avantage du polymère à structure en étoile dans les formulations de l'invention est que son poids moléculaire peut être relativement élevé, ce qui confère une stabilité physique, par exemple une certaine dureté, aux implants et aux microparticules et leur évite de s'agglomérer, tout en comportant des chaînes relativement courtes d'acide polylactique ou de copolymère de l'acide lactique; cela permet une vitesse de biodégradation contrôlable du polymère, allant de quelques semaines à un ou deux mois et une libération prolongée correspondante du peptide, les formulations obtenues avec ces polymères étant appropriées, par exemple, pour une libération sur un mois. Les polymères à structure en étoile ont de préférence un poids moléculaire (M") compris entre environ 10 000 et 200 000, plus préférablement entre 000 et 100 000, spécialement entre 35 000 et 000 et une polydispersité comprise par exemple entre 1,7 et 3,0, par exemple entre 2,0 et 2,5. Les visco- sités intrinsèques des polymères à structure en étoile de poids moléculaire de 35 000 et de 60 000 sont respectivement de 0,36 et 0,51 dl/g dans le chloro- forme. Un polymère à structure en étoile ayant un poids moléculaire de 52 000 possède une viscosité de 0,475 dl/g dans le chloroforme. Les expressions microsphères, microcapsules et microparticules sont des expressions inter- changeables selon l'invention et signifient la micro- encapsulation des peptides par le polymère, le peptide étant réparti de préférence à travers le polymère, lequel devient ensuite une matrice pour le peptide. Dans ce cas, on utilise de préférence l'expression microsphères ou plus généralement celle de micro- particules. En utilisant la technique de séparation de phase de l'invention, on peut par exemple préparer les formulations de l'invention par dissolution du véhicule polymère dans un solvant qui n'est pas un solvant pour le peptide, et addition et dispersion d'une solution de peptide dans la composition constituée par le polymère et le solvant. On ajoute ensuite un inducteur de phase, par exemple un fluide de silicone pour permettre la micro-encapsulation du peptide par le polymère. On peut fortement réduire l'effet de pic plasmatique par précipitation in situ de particules ultra fines de principe actif, en ajoutant une solution du principe actif à la solution du polymère, avant la phase de séparation. Dans le procédé décrit dans l'état de la technique, on ajoute les particules sèches directement à la solution du polymère. La durée de libération du peptide et l'activité thérapeutique du peptide peuvent être augmentées par une étape durcissement/lavage des micro- particules avec une émulsion tampon/heptane. Le procédé de l'état de la technique comprend une étape de durcissement non suivie par un lavage ultérieur ou suivie par une étape séparée de lavage aqueux. On peut utiliser une émulsion du type huile- dans-l'eau pour laver et durcir les microparticules et éliminer le peptide non encapsulé. Le lavage sert à éliminer de la surface des microparticules le peptide non encapsulé. L'élimination de l'excès de peptide des microparticules diminue le pic plasmatique initial qui caractérise de nombreuses formulations courantes obtenues par microencapsulation. Ainsi, une libération plus importante du principe actif dans un intervalle de temps donné est rendu possible par les formulations de l'invention. L'émulsion sert également à éliminer le solvant résiduel du polymère et le fluide de silicone. L'émulsion peut ainsi être ajoutée au mélange de poly- mère et de peptide, ou le mélange peut être ajouté à l'émulsion. On préfère cependant la deuxième solution. L'émulsion huile-dans-l'eau peut être pré- parée en utilisant un émulsifiant tel que le mono- oléate de sorbitane (Span 80, ICI corp.) et analogues, afin de former une émulsion stable. On peut tamponner l'émulsion avec un tampon qui ne nuit pas au peptide et à la matrice polymère. Le pH du tampon peut être compris entre 2 et 8, de préférence pH 4. On peut préparer le tampon à partir de tampons acides tels qu'un tampon phosphate, acétate et autres... On peut remplacer le tampon par de l'eau seule. On peut égale- ment utiliser de l'heptane, de l'hexane etc... comme phase organique de l'émulsion. L'émulsion peut contenir des agents de dispersion tels que l'huile de silicone. Une émulsion préférée comprend de l'heptane, un tampon phosphate à pH 4, de l'huile de silicone et du mono-oléate de sorbitane. Lorsqu'on désire une libération initiale du principe actif, on peut remplacer l'étape durcissement/lavage par une étape de durcissement avec un solvant organique tel que l'heptane, l'hexane etc... Comme autre alternative à l'émulsion huile- dans-l'eau pour le durcissement des microparticules, on peut utiliser par exemple un solvant-plus un émul- sifiant pour durcir les microparticules sans lavage, et un solvant plus un émulsifiant pour le durcissement suivi d'une étape séparée de lavage. L'émulsion huile-dans-l'eau peut être utili- sée sans agent de dispersion. Toutefois, l'agent de dispersion évite l'aggrégation des particules-sèches des microparticules provoquée par l'électricité statique et permet de réduire le taux de solvant ré- siduel. Comme exemples de solvants destinés à la matrice polymère, on peut citer le chlorure de mé- thylène, le chloroforme, le benzène, l'acétate d'éthyle etc... On dissout de préférence le peptide dans un solvant alcoolique, par exemple du méthanol, qui est * miscible avec le solvant du polymère. Les inducteurs de phase (agents de coacer- vation) sont des solvants miscibles avec le mélange principe actif/polymère et provoquent la formation de microparticules embryonnaires avant le durcissement; comme inducteurs de phase, on préfère les huiles de silicone. On peut préparer l'émulsion huile-dans- l'eau selon les méthodes habituelles, en utilisant de l'heptane, de l'hexane etc..., pour la phase organique. On peut également préparer les micro- particules de l'invention selon le procédé connu de séchage par nébulisation. Selon ce procédé, on mélange intimement la somatostatine ou une solution de ce peptide dans un solvant organique, par exemple le méthanol, dans l'eau ou dans un tampon, par exemple de pH 3-8, avec une solution du polymère dans un solvant organique, non miscible avec le premier, par exemple le chlorure de méthylène. On pulvérise ensuite la solution, la suspen- sion ou l'émulsion formées dans un courant d'air, de préférence d'air chaud. On recueille ensuite les micro- particules formées, par exemple dans un cyclone, et, si nécessaire, on les lave, par exemple dans une solution tampon de pH compris entre 3,0 et 8,0, de préférence de pH 4,0, ou dans de l'eau distillée, et on les sèche sous vide, par exemple à une température comprise entre et 400C. On peut appliquer l'étape de lavage lorsque les particules présentent un pic plasmatique in vivo et lorsqu'on ne désire pas que le pic plasmatique ait une importance excessive. Comme tampon, on peut utiliser un tampon acétate. On peut donc obtenir des microparticules présentant un profil amélioré de libération de somatostatine in vivo. L'invention concerne donc également les - microparticules préparées selon ce procédé. L'invention concerne en outre une formulation à libération pro- longée préparée en mélangeant une somatostatine ou une solution de somatostatine dans du méthanol, dans de l'eau ou dans un tampon pH 3-8, avec une solution d'un copolymère des acides lactique et glycolique dans du chlorure de méthylène. On pulvérise ensuite dans un courant d'air chaud la solution, l'émulsion ou la suspension obtenue de somatostatine dans la solution du polymère, on recueille les microparticules et on les lave dans une solution tampon de pH compris entre 3,0 et 8,0 ou dans de l'eau distillée et on les sèche sous vide à une température comprise entre 20 et 40 C. Comparées aux microparticules préparées selon la technique de séparation de phase, les microparticules ainsi obtenues ne contiennent pas d'huile de silicone, même sous forme de traces, l'huile de silicone n'étant pas utilisée dans la technique de séchage par nébulisa- tion. Les formulations de l'invention peuvent également être préparées en utilisant le procédé d'émulsion triple. Selon ce procédé, on dissout le peptide, par exemple l'octréotide, dans un solvant approprié, par exemple de l'eau, et on l'émulsifie à fond dans une solution du polymère, par exemple du poly(acide D,L-lactique-co-acide glycolique)glucose (50/50) dans un solvant dans lequel le peptide n'est pas soluble, par exemple le chlorure de méthylène. Comme exemples de solvants appropriés pour la matrice polymère, on peut citer le chlorure de méthylène, le chloroforme, le benzène, l'acétate d'éthyle etc... L'émulsion eau-dans-l'huile résultante est émulsifiée dans un excès d'eau contenant un émulsifiant, par exemple un surfactif anionique ou non ionique ou la lécithine, ou un colloïde protecteur, par exemple la gélatine, la dextrine, la carboxyméthylcellulose, la polyvinylpyrrolidone ou l'alcool polyvinylique, qui génère en continu une émulsion triple (eau-dans- l'huile-dans-l'eau). Les microparticules sont formées par précipitation spontanée du polymère et sont durcies par évaporation du solvant organique. La gélatine sert à empêcher l'agglomération des microparticules. Après la sédimentation des microparticules, on décante le surnageant et on lave les microparticules avec de l'eau et ensuite avec un tampon acétate. On filtre ensuite et on sèche les microparticules. On peut également disperser le peptide directement dans la solution polymère et mélanger ensuite la suspension résultante avec la phase aqueuse contenant de la gélatine. L'émulsion triple est connue d'après le brevet américain n0 4 652 441. Selon ce brevet, on mélange à fond dans une première étape une solution du principe actif (1) dans un solvant, par exemple de la somatostatine dans de l'eau (colonne 2, lignes 31-32), avec un excès d'une solution d'acide poly- (lactique-co-glycolique) (2) dans un autre solvant o le premier solvant est insoluble, par exemple du chlorure de méthylène, ce qui donne une émulsion du type eau dans l'huile (3) constituée de fines gouttelettes de la solution (1) dans la solution (2). Dans la solution (1), on dissout également une substance retenant le principe actif (colonne 1, ligne 31), par exemple de la gélatine, de l'albumine, de la pectine ou de la gélose. Dans une seconde étape, on augmente la viscosité de la phase interne (1) en utili- sant des moyens appropriés, par exemple par chauffage, refroidissement, réglage du pH, addition d'ions métal- liques ou réticulation par exemple de la gélatine avec un aldéhyde. Dans une troisième étape, on mélange intimement l'émulsion eau-dans-l'huile (3) avec un excès d'eau (colonne 7, lignes 52-54), ce qui donne une émulsion à trois phases du type eau-dans-l'huile- dans-l'eau. Si nécessaire, un agent dit émulsifiant peut être présent dans l'excès d'eau (colonne 7, ligne 56), choisi par exemple parmi les tensio-actifs anioniques ou non ioniques, la polyvinylpyrrolidone, l'alcool polyvinylique et la gélatine. Dans la quatrième étape, on soumet l'émulsion eau-dans-l'huile- dans-l'eau à un "séchage dans l'eau" (ligne 52). Cela signifie que le solvant organique dans la couche d'huile est désorbé pour donner les microparticules. La désorption du solvant est effectuée selon les méthodes connues (colonne 8, lignes 3-5), par exemple par diminution de la pression sous agitation (colonne 8, lignes 5-7) ou par barbotage d'azote à travers la couche huileuse (par exemple de chlorure de méthylène) (ligne 19). Les microparticules formées sont récupérées par centrifugation ou par filtration (lignes 26-27) et les composants qui ne se sont pas incorporés dans le polymère sont éliminés par lavage avec de l'eau (ligne 29). Si nécessaire, on chauffe les microparticules sous pression réduite afin de pouvoir mieux éliminer l'eau et le solvant (par exemple le chlorure de méthylène de la paroi des microparticules) (lignes 30-32). Bien que le procédé ci-dessus soit satis- faisant pour la préparation des formulations de l'in- vention, la substance retenant le principe actif mentionnée plus haut, par exemple la gélatine, l'albumine, la pectine ou la gélose, est toujours incluse dans les microparticules résultantes. La Demanderesse a trouvé qu'en omettant l'addition, dans la solution a), de la substance retenant le principe actif ainsi que l'étape servant à augmenter la viscosité de la phase interne et qu'en maintenant l'addition d'une substance émulsifiante ou d'un colloïde protecteur, comme la gélatine, dans l'excès d'eau de l'émulsion triple eau-dans-l'huile- dans-l'eau, on peut encore obtenir des microparticules satisfaisantes. En outre, les microparticules ne contiennent pas de substance retenant le principe actif et seulement une très faible quantité de chlorure-de méthylène. L'invention concerne donc un procédé de préparation de microparticules, procédé selon lequel on mélange intimement: a) une solution d'un principe actif, de.préférence une somatostatine, spécialement l'octréotide, dans un milieu aqueux, de préférence l'eau ou un tampon, de préférence dans un rapport poids/volume de 0,8 à 4,0 g / 1 à 120 ml, spécialement de 2,5 /10, et' dans un tampon à pH 3-8, spécialement un tampon acétate, avec b) une solution d'un polymère, de préférence un acide poly(lactique-co-glycolique) tel que mentionné plus haut, dans un solvant organique non miscible avec le milieu aqueux, par exemple le chlorure de méthy- lène, de préférence dans un rapport poids/volume de g/90 à 400 ml, spécialement 40/100, afin que le rapport pondéral du principe actif au polymère soit de préférence de 1/10 à 50, spécialement de 1/16, et le rapport volume/volume du milieu aqueux au solvant organique soit de 1/1,5 à 30, spécialement de 1/10, on mélange intimement l'émulsion eau-dansl'huile de a) dans b) ainsi obtenue avec c) un excès d'un milieu aqueux, de préférence l'eau ou un tampon, par exemple un tampon acétate ou phosphate, de préférence à pH 3-8, contenant une substance émulsifiante ou un colloïde protecteur, de préférence en une concentration comprise entre 0,01 et 15,0%, en particulier la gélatine, spécialement en une concentration comprise entre 0,1 et 3%, en particulier de 0,5% en poids, le mélange étant effectué de préférence à une vitesse telle que le rapport volume/volume de ab) / c) soit de 1/10 à 100, spécialement de 1/40, sans ajouter à l'émulsion eau-dans-l'huile de-substance retenant le principe actif ou sans effectuer d'étape intermédiaire pour augmenter la viscosité, on durcit les microparticules embryonnaires dans l'émulsion formée eau-dans-l'huile-dans l'eau, par désorption, de préférence par évaporation du solvant organique, de préférence le chlorure de méthylène, et on isole, éventuellement on lave et on sèche les micro- particules générées. L'invention concerne également une variante du procédé, selon laquelle on disperse le principe actif directement dans la solution du polymère, et on mélange ensuite la dispersion résultante avec la phase aqueuse contenant la gélatine. L'invention concerne également les micro- particules préparées selon ces procédés. Tout comme les microparticules préparées selon la technique de séchage par nébulisation, elles ne contiennent pas d'huile de silicone. Comparées aux microparticules préparées selon le procédé connu d'émulsion triple, elles ne contiennent pas de colloïde protecteur. Les formulations à libération prolongée peuvent également être préparées selon d'autres méthodes connues, par exemple lorsque le peptide est suffisamment stable pour la préparation d'un implant, par chauffage des microparticules de peptide, par exemple une somatostatine, dans un acide poly(lactique- co-glycolique), spécialement tel que décrit plus haut, ou par chauffage d'un mélange du peptide et du poly- mère, à une température comprise par exemple entre 70 et 1001C, et par extrusion et refroidissement de la masse compacte. Le produit d'extrusion est ensuite coupé et éventuellement lavé et séché. Les formulations de l'invention sont avantageusement préparées sous des conditions aseptiques. Les formulations de l'invention peuvent être utilisées sous une forme dépôt, par exemple sous forme de microparticules injectables ou d'implants. Elles peuvent être administrées selon les méthodes habituelles, par exemple par injection sous- cutanée ou intramusculaire, par exemple en fonction des indications connues pour le médicament qu'elles contiennent. Les formulations à libération prolongée contenant l'octréotide peuvent être administrées pour toutes les indications connues de l'octréotide ou de ses dérivés, par exemple celles décrites dans la demande de brevet britannique 2 199 829, ainsi que pour le traitement de l'acromégalie ou du cancer du sein. Les microparticules de l'invention peuvent avoir un diamètre compris entre environ 1 et 250 microns; elles ont de préférence un diamètre compris entre 10 et 200, spécialement entre 10 et 130, par exemple entre 10 et 90 microns. Les implants peuvent être par exemple d'environ 1 et 10 mm3. La quantité de principe actif, c'est-à-dire du peptide présent dans la formulation, dépend de la dose nécessaire qui doit être libérée par jour et donc de la biodégradation du poly- mère servant à l'encapsuler. La quantité exacte de peptide peut être déterminée par des essais de bio- disponibilité. Les formulations peuvent contenir le peptide en une quantité d'au moins 0,2, de préférence de 0,5 à 20% en poids par rapport à la matrice poly- mère, de préférence entre 2,0 et 10, spécialement entre 3,0 et 6% en poids. Le temps de libération du peptide à partir des microparticules peut être compris entre 1 ou 2 semaines à environ 2 mois. La formulation à libération prolongée est avantageusement une formulation comprenant une somatostatine, par exemple l'octréotide, dans un véhicule polymère biodégradable et biocompatible, laquelle formulation, lorsqu'elle est administrée à un rat par voie sous-cutanée à une dose de 10 mg de somatostatine par kg, donne une concentration plasmatique en somatostatine d'au moins 0,3 ng/ml et de préférence inférieure à 20 ng/ml pendant 30 jours, ou avantageusement pendant 60 jours, ou bien, lorsqu'elle est administrée à un lapin par voie intramusculaire à une dose de 5 mg/kg, donne une concentration plasmatique en somatostatine d'au moins 0,3 ng/ml pendant 50 jours et avantageusement inférieure à 20 ng/ml. D'autres propriétés préférées des formula- tions dépôt obtenues contenant une somatostatine, par exemple l'octréotide, sont les suivantes, en fonction du procédé de préparation utilisé: Technique de séparation de phase Lapin: 5 mg de somatostatine/kg, par voie intra- musculaire Retard (0-42 jours) 76% Taux plasmatique moyen (cp, idéale) (042 jours) 4 ng/ml ASC (0-42 jours) 170 ng/ml x jours Technique de séchage par nébulisation Rat: 10 mg de somatostatine/kg, par voie sous-cutanée Retard (0-42 jours) > 75% Taux plasmatique moyen (cp, idéale) (0-42 jours) 4-6 ng/ml ASC (0-42 jours) 170-210 ng/ml x jours Lapin: 5 mg de somatostatine/kg, par voie intra- musculaire Retard (0-43 jours) > 75% Taux plasmatique moyen (cp, idéale) (0-43 jours) 4-6 ng/ml ASC (0-43 jours) 200-240 ng/ml x jours Technique d'émulsion triple Rat: 10 mg de somatostatine/kg, par voie sous-cutanée Retard (0-42 jours) > 75% Taux plasmatique moyen (cp, idéale) (0-42 jours) 4-6,5 ng/ml ASC (0-42 jours) 170-230 ng/ml x jours Lapin: 5 mg de somatostatine/kg, par voie intra- musculaire Retard (0-42-43 jours) > 74% Taux plasmatique moyen (cp, idéale) (0-42-43 jours) 3,5- 6,5-ng/ml ASC (0-42-43 jours) 160-270 ng/ml x jours L'invention concerne donc également des formulations comprenant une somatostatine, de préfé- rence l'octréotide ou un analogue de l'octréotide, ayant les propriétés suivantes: 1. Un retard d'au moins 70%, de préférence d'au moins 74%, par exemple d'au moins 75%, 80%, 88% ou d'au moins 89% pendant une période allant de 0 à 42 ou 43 jours et/ou 2. Une concentration plasmatique moyenne (cp idéale) chez le rat de 2,5-6,5, de préférence de 4-6,5 ng/ml pendant une période allant de 0 à 42 jours, après administration de 10 mg de somatostatine par voie sous-cutanée et/ou une concentration plasma- tique mryenne chez le lapin de 3,5-6,5, par exemple de 4-6,5 ng/ml pendant une période allant de 0 à 42 ou 43 jours, après administration de 5 mg de somatostatine par voie intra-musculaire et/ou 3. Une aire sous la courbe pendant une période allant de 0 à 42 jours d'au moins 160, de préférence comprise entre 160 et 230 ng/ml x jours chez le rat, après administration de 10 mg de somatostatine par voie sous-cutanée et/ou une aire sous la courbe pendant une période allant de 0 à 42 ou 43 jours d'au moins 160, de préférence comprise entre 160 et 275, par exemple entre 200 et 275 ng/ml x jours chez le lapin, après administration de 5 mg de somatostatine par voie intra-musculaire. Pour caractériser quantitativement les 264931 9 formulations à libération prolongée décrites plus haut, on utilise la méthode des écarts de surface (AD - Area Deviation) décrite par F. Nimmerfall et J. Rosenthaler; Intern. J. Pharmaceut. 32, 1-6 (1986). Cette méthode calcule les écarts de surface du profil plasmatique expérimental par rapport au profil idéal qui est une concentration plasmatique moyenne constante (- cp idéale) obtenue en conver- tissant en un rectangle de même surface l'aire sous la courbe (ASC) des taux plasmatiques en fonction du temps obtenue expérimentalement. On calcule le retard en % de la manière suivante: % de retard - 100 x (1 AD/ASC) Selon cette méthode, le profil plasmatique total mesuré pendant un temps pré-déterminé est caractérisé par un seul indice numérique. Dans Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85 (1988) 5688-5692, on décrit à la figure 4 un profil de taux plasmatique chez le rat d'un octapeptide analogue de la somatostatine, répondant à la formule * * D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 Toutefois, une comparaison nette ne peut être établie avec les taux plasmatiques reportés plus haut et obtenus chez le rat avec les compositions de l'invention, attendu que le profil des taux plasma- tiques décrit dans ce document est basé sur une autre méthode d'administration, à savoir l'injection par voie intramusculaire et que, ce qui est beaucoup plus important, on ne trouve aucune indication précise sur la concentration de principe actif dans les micro- capsules et sur la dose administrée, le document se bornant à indiquer une concentration de principe actif dans les microcapsules comprise entre 2 et 6% et une dose de 25 à 50 mg de microcapsules pendant 30 jours, bien que les évaluations aient porté sur au moins 45 jours. En outre, on ne précise pas le type d'acide poly(DL-lactique-co-glycolique) utilisé. Compte-tenu de l'insuffisance de données, ce document ne peut donc en aucune façon être considéré comme donnant un enseigne- ment quelconque en particulier sur les formulations bien définies de l'invention présentant les avantages déjà mentionnés, spécialement les taux plasmatiques tels que reportés précédemment. Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter la portée. Dans ces exemples, Mw signifie le poids moléculaire moyen du polymère déterminé par chromatographie d'exclusion (GPC) en utilisant le polystyrène comme substance de référence. EXEMPLE 1: On dissout 1 g d'acide poly(D,L-lactique- co-glycolique) (50/50 molaire, Mw - 45 000; poly- dispersité - environ 1,7) dans 15 ml de chlorure de méthylène sous agitation magnétique et on ajoute 75 mg d'acétate d'octréotide dissous dans 0,5 ml de méthanol. Au mélange polymère-peptide, on ajoute 15 ml d'huile de silicone (marque Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs). On ajoute le mélange résultant à une émulsion sous agitation contenant 400 ml de n-heptane, 100 ml de tampon phosphate à pH 4, 40 ml de Dow 360 Medical Fluid, 350 cs et 2 ml de Span 80 (émulsifiant). On agite encore le mélange pendant au moins 10 minutes. On récupère les microparticules résultantes par filtration sous vide et on les sèche pendant la nuit sous vide. Le rendement est d'environ 90% en microparticules d'une dimension comprise entre 10 et 40 microns. On met les microparticules en suspension dans un véhicule et on les administre par voie intra- musculaire à une dose de 4 mg d'octréotide à des lapins (Nouvelle Zélande) . Des échantillons de sang prélevés à intervalles réguliers indiquent des taux plasmatiques de 0,5 à 1,0 ng/ml pendant 30 jours (déterminé par la méthode de dosage radioimmunologique). EXEMPLE 2: Dans 25 ml d'acétate d'éthyle sous agitation magnétique, on dissout 1 g de poly(acide D,L-lactique- co-acide glycolique)-glucose préparé selon le procédé décrit dans la demande de brevet britannique 2 145 422 (Mw - 45 000; 55/45 molaire; polydispersité - environ 1,7; préparé à partir de 0,2% de glucose) et on ajoute mg d'acétate d'octréotide dissous dans 3 ml de méthanol. A ce mélange polymère-peptide, on ajoute 25 ml d'huile de silicone (marque Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs). On ajoute le mélange résultant à l'émulsion décrite à l'exemple 1. On continue à agiter le mélange pendant encore au moins 10 minutes. On récupère les microparticules résultantes par filtration sous vide et on les sèche pendant la nuit sous vide. On obtient un rendement de plus de 80% en microparticules d'une dimension comprise entre 10 et 40 microns. On met les microparticules en suspension dans un véhicule et on les administre par voie intra- musculaire à une dose de 4 mg d'octréotide à des lapins (Nouvelle Zélande) . Des échantillons de sang prélevés à intervalles réguliers indiquent des taux plasmatiques de 0,5 à 2 ng/ml pendant 21 jours (déterminé par la méthode de dosage radioimmunologique). EXEMPLE 3: On ajoute sous agitation une solution de 1,5 g d'acétate d'octréotide dans 20 ml de méthanol à une solution de 18,5 g de poly(acide D,L-lactique-co- acide glycolique)glucose (50:50 molaire, Mw 45 000) dans 500 ml de chlorure de méthylène. On effectue la séparation de phase en ajoutant 500 ml de Dow 360 Medical Fluid (1000 cs) et 800 ml de Dow 360 Medical Fluid (350 cs) à la suspension du peptide et du poly- mère. On ajoute le mélange résultant à une émulsion sous agitation comprenant 1800 ml de n-heptane, 2000 ml d'eau stérile et 40 ml de Span 80. Après agitation pendant 10 minutes, on recueille les microparticules par filtration sous vide. On sèche la'moitié du produit pendant la nuit sous vide à 37 C. Le taux résiduel de chlorure de méthylène est de 1,2%. Sous agitation, on lave l'autre moitié du produit avec 1000 ml d'éthanol contenant 1 ml de Span 80. Après agitation pendant 1 heure, on décante l'éthanol et on agite les microparticules dans 1000 ml de n-heptane contenant 1 ml de Span 80. Après agitation pendant 1 heure, on recueille les microparticules par filtration sous vide et on les sèche pendant la nuit sous vide à 37 C. Le taux de chlorure de méthylène résiduel des microparticules lavées de cette manière a été réduit de 1,2 à 0,12%. Le rendement combiné du produit est de 91% (18,2 g) en microparticules contenant 5,6% d'octréo- tide; le diamètre moyen est de 24 microns et le taux en heptane résiduel est de 1,5%. On met les microparticules en suspension dans un véhicule et on les injecte par voie intra- musculaire à une dose de 5 mg/kg d'octréotide à des lapins blancs. Des échantillons de sang prélevés à intervalles réguliers indiquent des taux plasmatiques de 0,3 à 7,7 ng/ml pendant 49 jours (déterminé par la méthode de dosage radioimmunologique). EXEMPLE 4: Sous agitation magnétique, on dissout 1 g de poly(acide D,L-lactique-co-acide glycolique)glucose (M. - 46 000; 50/50 molaire, produit selon le procédé décrit dans la demande de brevet britannique 2 145 422; polydispersité - environ 1,7; préparé à partir de 0,2% de glucose) dans 10 ml de chlorure de méthylène et on ajoute 75 mg d'acétate d'octréotide dissous dans 0,133 ml de méthanol. Pendant 1 minute, on mélange intimement, par exemple à l'aide d'un UltraTurax, à 000 tours/mn, ce qui donne une suspension de cristaux très fins d'octréotide dans la solution de polymère. On pulvérise la suspension à l'aide d'une turbine à vitesse élevée (Niro Atomizer) et on sèche les fines gouttelettes dans un courant d'air chaud générant les microparticules. On recueille ces dernières au moyen d'un cyclone et on les sèche pendant la nuit à la température ambiante sous vide. On lave les microparticules avec 1/15 molaire d'un tampon acétate à pH 4, 0 pendant 5 minutes et on les sèche à nouveau à la température ambiante sous vide. Au bout de 72 heures, on tamise les micro- particules (tamis 0,125 mm) pour obtenir le produit final. On met les microparticules en suspension dans un véhicule et on les administre par voie intra- musculaire à une dose de 5 mg/kg d'octréotide à des lapins blancs (bâtards de chinchilla) et par voie sous-cutanée à une dose de 10 mg/kg à des rats mâles. Des échantillons de sang prélevés à intervalles réguliers indiquent des taux plasmatiques de 0,3 à ,0 ng/ml chez les lapins et de 0,5 à 7,0 ng/ml chez les rats pendant 42 jours (déterminé par la méthode de dosage radioimmunologique). EXEMPLE 5: En procédant comme décrit à l'exemple 4, on prépare des microparticules par séchage par nébulisa- tion, la seule différence étant qu'on met en suspension l'acétate d'octréotide directement dans la solution du polymère, sans utiliser de méthanol. On met les microparticules en suspension dans un véhicule et on les administre par voie sous- cutanée à une dose de 10 mg/kg d'octréotide à des rats mâles. Des échantillons de sang prélevés à intervalles réguliers indiquent des taux plasmatiques de 0,5 à ,0 ng/ml chez les rats pendant 42 jours (déterminé par la méthode de dosage radioimmunologique). EXEMPLE 6: Dans 2,5 ml de chlorure de méthylène, on dissout i g de poly(acide D,L,-lactique-co- acide glycolique)glucose (Mw - 46 000; 50/50 molaire préparé selon le procédé de la demande de brevet britannique 2 145 422; polydispersité - environ 1,7, préparé à partir de 0,2% de glucose), on ajoute 75 mg d'acétate d'octréotide dissous dans 0,125 ml d'eau déminéralisée et on mélange à fond, par exemple à l'aide d'un Ultra-Turax, . pendant 1 minute à 20 000 tours/mn (phase interne eau-dans-l'huile). On dissout 1 g de gélatine A dans 200 ml d'eau déminéralisée à 50 C et on refroidit la solution à 20 C (phase aqueuse externe). On mélange intimement la phase eau-dans-l'huile et la phase aqueuse. La phase interne eau-dans-l'huile se sépare sous forme de fines gouttelettes que l'on disperse de façon homogène dans la phase aqueuse externe. On agite lentement l'émulsion triple résultante pendant 1 heure. Le chlorure de méthylène s'évapore et les gouttelettes de la phase interne se durcissent sous forme de microparticules. Après sédimentation des microparticules, on aspire le surnageant, on récupère les microparticules par filtration sous vide et on les rince avec de l'eau pour éliminer la gélatine. On sèche, on tamise, on lave et on sèche à nouveau les microparticules en procédant comme décrit à l'exemple 4. On met les microparticules en suspension dans un véhicule et on les administre par voie intra- musculaire à une dose de 5 mg/kg d'octréotide à des lapins blancs (bâtards de chinchilla) et par voie sous-cutanée à une dose de 10 mg/kg à des rats mâles. Des échantillons de sang prélevés à intervalles réguliers indiquent des taux plasmatiques de 0,3 à ,0 ng/ml chez les lapins et de 0,5 à 8,0 ng/ml chez les rats pendant 42 jours (déterminé par la méthode de dosage radioimmunologique). EXEMPLE 7: En procédant comme décrit à l'exemple 6, on prépare des microparticules selon la technique d'émulsion triple, mais en apportant les modifications suivantes: 1. On utilise 0,25 ml de tampon acétate à pH 4,0 à la place de 0,125 ml d'eau, pour préparer la phase interne eau-dans-l'huile. 2. Après avoir recueilli les microparticules, on effectue le rinçage avec 1/45 molaire de tampon acétate à pH 4,0, et non avec de l'eau. 3. On n'effectue pas de lavage ultérieur des micro- particules. EXEMPLE 8: On prépare des microparticules selon la technique d'émulsion triple en procédant comme décrit à l'exemple 7, mais en préparant la phase interne eau- dans-l'huile avec de l'eau contenant 0,7% de chlorure de sodium (poids/volume) et non pas avec un tampon acétate. EXEMPLE 9: En procédant comme décrit à l'exemple 6, on prépare des microparticules, mais avec la différence que le principe actif est dispersé directement dans la solution du polymère et qu'on mélange la dispersion résultante avec la phase aqueuse contenant de la gélatine. EXEMPLE 10: Pamoate d'octréotide Dans 1 litre d'un mélange eau/dioxanne (1:1), on dissout 10,19 g d'octréotide base et 3,88 g d'acide embonique (10mM). On filtre le mélange ré- actionnel et on le lyophilise, ce qui donne une poudre jaune [t]20D - + 7, 5 (c - 0,35, dans du DMF) d'hydrate de pamoate d'octréotide. Facteur - 1, 4 (le facteur signifie le poids du lyophilisat par rapport au poids d'octréotide qu'il contient). On peut utiliser le pamoate d'octréotide à la place de l'acétate dans les microparticules des exemples 1 à 9; il se caractérise par une excellente stabilité. EXEMPLE 11: Sous agitation, on ajoute une solution de 1 g d'acide poly(D,L-lactiqueco-glycolique) (50/50 molaire, M. - 36 100) dans 20 ml de chlorure de méthylène à une solution de 100 mg de calcitonine dans 1,5 ml de méthanol. On effectue la séparation de phase par addition de 20 ml de fluide de silicone (Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs). On ajoute le mélange résultant à une émulsion sous agitation comprenant 100 ml de tampon phosphate à pH 4, 400 ml de n-heptane, 4 ml de Span 80 et 40 ml de fluide de silicone (Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs). Après agitation pendant 10 minutes, on recueille les microparticules par filtration sous vide et on les sèche pendant la nuit sous vide à 37 C. On obtient 1,1 g de microparticules contenant 5,9% de calcitonine. EXEMPLE 12: A 100 mg de lypressine, on ajoute une solution de 9,9 g d'acide poly(D,L-lactique-co- glycolique) (50/50 molaire, Mw - 44 300) dans 140 ml de chlorure de méthylène. On agite avec un agitateur magnétique la dispersion pendant 1 heure avant d'ajouter 140 ml de fluide de silicone (Dow 360 Medical Fluid, 1000 cs) et 2,5 ml de Span 80. On ajoute le mélange à 2000 ml d'heptane et on agite pendant 10 minutes. On recueille les microparticules par filtration sous vide, on les lave 3 fois avec de l'heptane et on les essore pendant 10 minutes pour les sécher. On lave la moitié de l'échantillon sous agitation dans de l'eau pendant 10 minutes. On ne lave pas l'autre moitié. On sèche ensuite les deux échantillons pendant la nuit à 30 C sous vide. On obtient 10,65 g de microparticules. L'échantillon lavé contient 0,5% de lypressine et l'échantillon non lavé avec de l'eau contient 0,6% de lypressine (déterminé par analyse). 26493 19 REVENDICATIONS 1. Un procédé de préparation de micro- particules comprenant un principe actif dans un véhicule biodégradable et biocompatible, caractérisé en ce que a) on dissout la matière polymère dans un solvant approprié dans lequel le principe actif n'est pas soluble, b) dans la solution de l'étape a), on ajoute et on disperse une solution du principe actif dans un solvant approprié qui n'est pas un solvant pour le polymère, c) on ajoute un agent inducteur de phase à la dis- persion de l'étape b), pour provoquer la formation de microparticules, d) on ajoute une émulsion huile dans l'eau au mélange de l'étape c) pour durcir les microparticules, et e) on récupère les microparticules. 2. Un procédé de préparation de micro- particules comprenant un principe actif dans un véhicule biodégradable et biocompatible, caractérisé en ce que (i) on mélange intimement une émulsion eau-dans-l'huile formée & partir d'un milieu aqueux et d'un solvant organique non miscible dans l'eau, contenant dans une phase le principe actif et dans l'autre phase un poly- mère biodégradable et biocompatible, avec un excès d'un milieu aqueux contenant une substance émulsifiante ou un colloïde protecteur, pour former une émulsion eau- dans-l'huile-dans-l'eau, sans ajouter à l'émulsion eau-dans-l'huile de substance retenant le principe actif ou sans appliquer une étape intermédiaire augmentant la viscosité, (ii) on soumet le solvant organique à une désorption et (iii) on isole et on sèche les microparticules résul- tantes. 3. Un procédé de préparation de micro- particules comprenant un principe actif dans un poly- mère biodégradable et biocompatible, caractérisé en ce que (i) on mélange intimement une suspension formée à partir d'un principe actif et d'un solvant organique non miscible dans l'eau contenant un polymère bio- dégradable et biocompatible, avec un excès d'un milieu aqueux contenant une substance émulsifiante ou un colloïde protecteur, pour former une émulsion eau- dans-l'huile, le principe actif étant dispersé dans l'huile, sans ajouter de substance retenant le médi- cament ou sans appliquer une étape intermédiaire augmentant la viscosité, (ii) on soumet le solvant organique à une désorption, et (iii) on isole et on sèche les microparticules résul- tantes 4. Un procédé de préparation de micro- particules, caractérisé en ce que on mélange intimement a) une solution d'un principe actif dans un milieu aqueux avec b) une solution d'un polymère dans un solvant organique non miscible avec le milieu aqueux, on mélange intimement l'émulsion eau-dans-l'huile de a) dans b) ainsi obtenue avec - c) un excès d'un milieu aqueux contenant un colloïde protecteur, sans ajouter à l'émulsion eau-dans-l'huile de substance retenant le principe actif ou sans effectuer d'étape intermédiaire pour augmenter la viscosité, on durcit les microparticules embryonnaires dans l'émulsion formée eaudans-l'huile-dans l'eau, par désorption, et on isole les microparticules générées. 5. Un procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le principe actif est une somatostatine. 6. Un procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le principe actif est l'octréotide. 7. Un procédé de préparation de micro- particules, caractérisé en ce que on mélange intimement a) une solution d'une somatostatine dans l'eau ou dans un tampon, dans un rapport poids/volume de 0,8 à 4,0 g / 1 à 120 ml, avec b) une solution d'un acide poly(lactique-co-glyco- lique) dans un solvant organique non miscible avec ie milieu aqueux, dans un rapport poids/volume de g/90 à 400 ml, afin que le rapport pondéral du principe actif au polymère soit de 1/10 à 50 et le rapport volume/volume du milieu aqueux au solvant organique soit de 1/1,5 à 30, on mélange intimement l'émulsion eau-dans-l'huile de a) dans b) avec c) un excès d'eau ou d'un tampon contenant un colloïde protecteur, à une vitesse telle que le rapport volume/volume de ab) / c) soit de 1/10 à 100, sans ajouter à l'émulsion eau-dans-l'huile de substance retenant le principe actif ou sans effectuer d'étape intermédiaire pour augmenter la viscosité, on durcit les microparticules embryonnaires dans l'émulsion formée eaudans-l'huile-dans l'eau, par évaporation du solvant organique, et on isole les microparticules générées. 8. Une formulation à libération prolongée, caractérisée en ce qu'elle comprend l'octréotide ou l'un de ses dérivés, ou un sel du composé, dans un véhicule polymère biodégradable et biocompatible. 9. Une formulation à libération prolongée, caractérisée en ce qu'elle comprend un peptide dans un ester d'un polyol avec un acide poly(40/60 à 60/40 lactique-co-glycolique), le reste polyol étant choisi parmi les alcools contenant une chaîne hydrocarbonée en C3-C6 et de 3 à 6 groupes hydroxy et les mono- et di- saccharides, et le polyol estérifié ayant au moins 3 chaînes d'acide poly(lactique-co-glycolique). 10. Une formulation à libération prolongée, caractérisée en ce qu'elle comprend une calcitonine, la lypressine ou une somatostatine, dans un copolymère linéaire 40/60 à 60/40 d'acide lactique et d'acide glycolique ayant un poids moléculaire Mw compris entre 000 et 100 000 et une polydispersité Mw/Mn comprise entre 1,2 et 2, en une concentration comprise entre 0,2 et 10% en poids de peptide. 11. Une formulation à libération prolongée selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, qui, lorsqu'elle est administrée à un rat par voie sous- cutanée à une dose de 10 mg/kg, donne une concentration plasmatique d'au moins 0,3 ng/ml et inférieure à ng/ml pendant 30 jours. 12. Une formulation à libération prolongée selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, qui, lorsqu'elle est administrée à un lapin par voie intra- musculaire à une dose de 5 mg/kg, donne une concen- tration plasmatique d'au moins 0,3 ng/ml et inférieure à 20 ng/ml pendant 50 jours. 13. Une formulation à libération prolongée selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, qui, lorsqu'elle est administrée à un lapin par voie intra- musculaire à une dose de 5 mg/kg donne un retard d'au moins 70% pendant une période allant de 0 à 42 ou 43 jours. 14. Une formulation à libération prolongée selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, qui, lorsqu'elle est administrée à un rat par voie sous- cutanée à une dose de 10 mg/kg, donne une concentration plasmatique moyenne (cp idéale) comprise entre 2,5 et 6,5 ng/ml pendant une période allant de 0 à 42 jours. 15. Une formulation à libération prolongée selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, qui, lorsqu'elle est administrée à un lapin par voie intra- musculaire à.une dose de 5 mg/kg, donne une concen- tration plasmatique moyenne (cp idéale) comprise entre 3,5 et 6,5 ng/ml pendant une période allant de 0 à 42 jours. 16. Une formulation à libération prolongée selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, qui, lorsqu'elle est administrée à un rat par voie sous- cutanée à une dose de 10 mg/kg, donne une aire sous la courbe comprise entre 160 et 230 ng/ml x jours pendant une période allant de 0 à 42 ou 43 jours. 17. Une formulation à libération prolongée selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, qui, lorsqu'elle est administrée à un lapin par voie intra- musculaire à une dose de 5 mg/kg, donne une aire sous la courbe comprise entre 160 et 275 ng/ml x jours pendant une période allant de 0 à 42 ou 43 jours. 18. Le pamoate d'octréotide. 19. Une formulation à libération prolongée, caractérisée en ce qu'elle comprend un peptide choisi parmi une calcitonine et la lypressine et les sels pharmaceutiquement acceptables de ces composés, dans une matrice polymère biodégradable et biocompatible. 20. Une formulation selon la revendication 8, pour l'utilisation dans le traitement de l'acromégalie ou du cancer du sein.