Brevet FR2655546A1 — publié le 19910614

La présente invention concerne une composition formée d'une suspension de particules d'une substance colorante et son application en cancérologie au marquage de tumeurs solides et aux traitements utilisant l'énergie d'absorption, notamment la laserothérapie et la thermothérapie. En règle générale, un certain laps de temps s'écoule entre le diagnostic dlune tumeur cancéreuse solide et une intervention chirurgicale éventuelle. Ceci est d'autant plus vrai que la tendance est très souvent de recourir à une chimiothérapie préopératoire. Un des impératifs de la chirurgie d'exérèse est d'enlever en totalité la tumeur avec des limites périphériques passant en tissu sain sans pour autant causer au patient un préjudice esthétique trop important, en particulier dans le cas de tumeurs mammaires. Pour cette raison, il est particulièrement intéressant de pouvoir localiser précisément la tumeur entre le moment du diagnostic et l'intervention chirurgicale. Par ailleurs, dans le cas de chimiothérapie préopératoire, le tumeur primitive peut avoir suffisamment régressée pour ne plus être visible lors de l'exérèse opératoire. I1 s'avère donc nécessaire de localiser la tumeur pré-existante, pour ne pas risquer de laisser des cellules carcinomateuses après une intervention chirurgicale Ces réflexions montrent ainsi tout l'intérêt d'un marquage préchimiothérapique et préopératoire des tumeurs. Des tentatives de marquage ont été faites sur des tumeurs du sein avec des colorants. Cependant, l'intervention devait avoir lieu peu de temps après le marquage, en raison de la tendance à la diffusion du colorant. Une autre technique décrite par Svane Gunilla (Thèse Stockholm 1983) a été mise au point pour le marquage des lésions non palpables du sein. Bien que seules 10% de ces lésions correspondent à un véritable cancer invasif, un diagnostic cytologique des lésions non palpables du sein est précieux car il peut entrainer la mise en route plus précoce d'un traitement dans le cas d'un diagnostic malin. Si l'excision chirurgicale avec l'étude histologique du prélèvement apportent les informations nécessaires, le problème technique pour le chirurgien réside donc en la localisation précise de ces lésions non palpables, en vue d'une exérèse satisfaisante. Avec un instrument de stéréotaxie, les lésions étaient localisées de façon précise et avec une aiguille de biopsie montée sur l'appareil, une suspension aqueuse à 1 à 4% de charbon était injectée dans la lésion laissant un trait distinct de carbone de la lésion à la peau servant de guide au chirurgien. Dans la majorité des cas, l'opération était réalisée le même jour. Cependant, ce colorant a tendance à diffuser au moins en partie dans les tissus avoisinants quand l'intervention est pratiquée plusieurs semaines après l'injection. Par ailleurs, il est également connu d'utiliser un colorant dérivé de l'hématoporphyrine (HPD), qui injecté par voie intraveineuse a la propriété d'être retenu par les tissus cancéreux et peut être utilisé aussi bien pour la localisation de lésions cancéreuses, qu'à des fins thérapeutiques. En effet, l'HPD, quand il est éclairé dans une de ses bandes d'absorption, en particulier au moyen d'une source laser, provoque des effets cytotoxiques aboutissant à la nécrose du tissu qui la contient. Cependant, l'HPD présente des inconvénients graves qui sont d'une part une réaction inflammatoire extrêmement intense qui apparait après axe traitement ainsi que des réactions de photosensibilisation fréquentes. On a maintenant découvert qu'il était possible grâce à une suspension de pigment dont on a sélectionné une certaine dimension particulaire de marquer des tumeurs solides sans diffusion du pigment même après des durées relativement longues de 3 mois. On a également découvert que cette composition pouvait être utilisée dans le traitement de tumeurs cancéreuses utilisant l'énergie d'absorption, notamment la laserothérapie ou la thermothérapie et agumenter de manière inattendue et tout à fait importante l'effet du rayonnement laser ou de l'absorption de chaleur dans ces utilisations. A cet effet, la présente invention a pour objet une composition pour injection intratumorale comprenant une suspension dans un milieu aqueux de particules d'une substance colorante atoxique, insoluble en milieu aqueux, caractérisée en ce que la population de particules est composée d'au moins 50% de particules ayant une dimension comprise dans l'une des plages choisies parmi 1,0 à 2,1 ,um et 2,1 à 6,8 m, pratiquement aucune particule n'ayant une dimension supérieure à 10,8 um Par pratiquement aucune particule ayant une dimension supérieure à 10,8 Mm, on entend que le nombre de ces particules peut être tout au plus de quelques unités pour une population totale de particules de l'ordre de 50 000 à 60 000. La composition selon l'invention comporte avantageusement au moins 70% de particules ayant une dimension comprise dans la plage de 2,1 à 6,8 m, et de préférence, au moins 80% de telles particules. La population de particules de la composition objet de l'invention est obtenue de préférence par micronisation de la substance colorante à l'aide d'un microniseur à jet d'air comprimé. Toutefois, d'autres techniques sont utilisables telles que la sonificationr ou les techniques par ultrasons ou tamiseur à ultrasons, éventuellement après un broyage en milieu humide ou une micronisation préalable des particules. La taille et le nombre des particules des suspensions micronisées est mesurée à l'aide d'un appareil de type "Coulter-Counter". La composition selon l'invention que l'on préfère comprend du charbon non activé ou faiblement activé choisi parmi le charbon de bois, de tourbe, de lignite, de houille et d'anthracite, en suspension dans un milieu aqueux. Une composition particulièrement préférée est celle comprenant du charbon de tourbe. Le milieu aqueux peut être constitué de sérum physiologique ou d'eau pour préparations injectables. La quantité de substance colorante administrée en injection intratumorale est comprise entre 0,04 et 4 g et, de préférence, 0,04 g à 0,2 g pour le marquage des tumeurs, 0,04 g et 0,8 g pour le traitement par laserothérapie et 0,2g à 4 g pour le traitement par thermothérapie. Des additifs habituellement utilisés en galénique peuvent être ajoutés à la suspension tels que surfactifs, émulsifiants, conservateurs, régulateurs de pH1 etc... La composition selon l'invention est utilisée à une concentration qui est de préférence de 4 à 80% en poids. La composition peut également se présenter comme une suspension sèche ou lyophilisée à reconstituer au moment de l'utilisation ou être encapsulée dans des microsphères, des liposomes, des nanoparticules ou des niosomes. Selon un autre de ces aspects, la présente invention a pour objet l'utilisation de la suspension de particules d'une substance colorante atoxique décrite ci-dessus pour le marquage de tumeurs solides, en particulier le marquage préchimiothérapique et préopératoire, consistant à injecter la suspension dans la tumeur de manière à la visualiser par coloration. Ce marquage réalisé, au moment de la biopsie par exemple, permet au chirurgien de visualiser la tumeur au moment de l'exérèse qui a lieu généralement plusieurs semaines et généralement trois mois après la biopsie. Ceci est particulièrment utile car souvent la tumeur, par suite de la chimiothérapie, a régressé jusqu ne plus pouvoir être détectée à l'examen clinique. Selon un autre de ses aspects encore, l'invention a pour objet l'utilisation de la suspension colorante atoxique décrite précédemment dans les traitements de tumeurs cancéreuses utilisant l'énergie d'absorption, consistant à injecter la suspension dans la tumeur préalablement au traitement de manière à augmenter l'énergie d'absorption. La suspension colorante atoxique selon l'invention est ainsi utilisée1 de préférence, en laserothérapie ou en thermothérapie. Ainsi, dans le traitement par laserothérapie, on injecte la suspension dans la tumeur, puis on soumet celle-ci à un rayonnement laser jusqu'à disparition de la tumeur. Dans le traitement par thermothérapie, on injecte la suspension dans la tumeur puis on soumet celle-ci à une hyperthermie de préférence obtenue au moyen d'ondes électromagnétiques. La suspension colorante atoxique selon l'invention s'est révélée efficace dans les techniques de thermothérapie, capacitive profonde, radiative ou encore interstitielle. L'invention a ainsi également pour objet une composition thérapeutique destinée à être utilisée dans le traitement par laserothérapie ou thermothérapie de tumeurs cancéreuses, constituée par une composition telle que décrite précédemment. On donnera ci-après un exemple d'une composition selon l'invention comprenant une suspension de charbon. La matière de départ est un charbon Norit (Prolabo) SX 4 à base de tourbe d'activité relativement faible ayant les caractéristiques suivantes SPECIFICATION Humidité (au conditionnement) (% max.) 10 Adsorption bleu de méthylène (g/100g; min.) 9 Teneur en cendres (% max.) 5 Matières solubles dans l'acide (HCl) (% max.) 1,0 Calcium (Ca) (ppm max.) 200 Fer (Fe) (ppm max.) 200 ANALYSES TYPIQUES Indice de mélasse 525 Surface interne (B.E.T.) (m2/g) 650 Teneur en cendres (%) 3 Matières solubles dans l'eau (%) 0,3 pH 6-8 Densité (tassé) (g/l) 490 * - Les analyses typiques sont les moyennes sur la production de deux années. - Toutes données ont été évaluées suivant "METHODES DE TESTS NORIT". La taille moyenne des particules est de 7,5 à 9,5 Mm. Un grand nombre d'entre elles ont une taille supérieure à 10 Mm, certaines même une taille avoisinant 50 pm. Les particules préalablement micronisées et radiostérilisées sont mises en suspension dans de l'eau pour préparations injectables (p.p.i.) ou du sérum physiologique préalablement dégazés avec un gaz inerte, tel l'argon ou l'azote, à une concentration de 4%, puis sousmises à un broyage au mortier. La suspension homogénéisée est répartie à l'aide d'une seringue stérile dans des flacons type pénicilline. Après remplissage sous gaz inerte, les flacons sont sertis puis autoclavés à 120 pendant 20 minutes. La détermination du nombre et de la taille des particules donne la répartition mesurée à l'aide d'un appareil Coulter Counter, suivante TABLEAU 1 Granulométrie, d'une suspension de charbon selon l'invention mesuré à l'aide d'un appareil COULTER TA II échantillon 1 Canal Popul. % pop % Vol. Intervalle ( m) 1 2944 5,2 0,1 1,0 à 1,3 2 3946 7,0 0,3 1,3 à 1,7 3 4823 8,5 0,7 1,7 à 2,1 4 5924 10,5 1,6 2,1 à 2,7 5 8531 15,1 4,9 2,7 à 3,4 6 10935 19,3 12,6 3,4 à 4,3 7 10893 19,2 25,0 4,3 à 5,4 8 6636 11,7 30,3 5,4 à 6,8 9 1811 3,2 16,7 6,8 à 8,6 10 172 0,3 3,2 8,6 à 10,8 11 10 0,0 0,4 10,8 à 13,6 12 2 0,0 0,1 13,6 à 17,1 13 1 0,0 0,1 17,1 à 21,5 14 0 0,0 0,0 21,5 à 27,1 15 3 0,0 1,7 27,1 à 34,1 16- 2 0,0 2,3 34,1 à 43,0 granulométrie moyenne : 6,84 + 0,5 échantillon 2 Canal Popul. % Pop Z Vol.Intervalle ( m) 1 3131 5,7 0,1 1,0 à 1,3 2 4067 7,4 0,3 1,3 à 1,7 3 4771 8,7 0,7 1,7 à 2,1 4 5823 10,6 1,7 2,1 à 2,7 5 7909 14,4 4,7 2,7 à 3,4 6 10151 18,5 12,2 3,4 à 4,3 7 10170 18,6 24,4 4,3 à 5,4 8 6641 12,1 31,7 5,4 à 6,8 9 1892 3,5 18,2 6,8 à 8,6 10 189 0,3 3,6 8,6 à 10,8 11 17 0,0 0,7 10,8 à 13,6 12 4 0,0 0,3 13,6 à 17,1 13 1 0,0 0,2 17,1 à 21,5 14 2 0,0 0,6 21,5 à 27,1 15 1 0,0 0,6 27,1 à 34,1 16 0 0,0 0,0 34,1 à 43,0 granulométrie moyenne : 6,04 # 0,5 échantillon 3 Canal Popul. % Pop % Vol.Intervalle ( m) 1 3463 6,3 0,1 1,0 à 1,3 2 4246 7,7 0,3 1,3 à 1,7 3 4839 8,7 0,7 1,7 à 2,1 4 5636 10,2 1,6 2,1 à 2,7 5 7786 14,1 4,6 2,7 à 3,4 6 9874 17,8 11,8 3,4 à 4,3 7 10557 19,1 25,2 4,3 à 5,4 8 6815 12,3 32,3 5,4 à 6,8 9 1903 3,4 18,1 6,8 à 8,6 10 165 0,3 3,1 8,6 à 10,8 11 17 0,0 0,6 10,8 à 13,6 12 6 0,0 0,5 13,6 à 17,1 13 1 0,0 0,2 17,1 à 21,5 14 3 0,0 0,9 21,5 à 27,1 15 0 0,0 0,0 27,1 à 34,1 16 0 0,0 0,0 34,1 à 43,0 granulométrie moyenne : 5,95 # 0,6 Ce tableau fait apparaitre que de 75 à 80% des particules ont un diamètre compris entre 2,1 et 6,8 m, alors que moins de 0,05% des particules ont une taille supérieure à 10,8 m. Une analyse comparative a été réalisée avec la suspension de charbon non micronisé. Les résultats sont récapitulés sur le tableau II ci-dessous TABLEAU II Analyse granulométrique de la suspension de charbon Echantillon Norit non micronisé Norit micronisé Granulométrie moyenne ( m) 7,71+/-0,3 5,27+/-0,4 Moyenne long/NB ( m) 3,53+/-0,0 3,69+/-0,0 DVS (pm) 6,14+/-0,1 5,1+/-0,0 DSL ( m) 4,85+/-0,0 4,45/-0,0 dimension particulaire 1-3,4 m 55,2+/-0,5 46,7+/-0,3 (% pop.) dimension particulaire 2,7-5,4 m 38,4+/-0,7 52+/-1 (% pop.) dimension particulaire 5,4-10,8 m 17,2+/-0,4 15,7+/0,3 (% pop.) dimension particulaire 10,8-43 m 0,6+/-0,0 (% pop.) Ces résultats indiquent que par rapport à la suspension de charbon de l'invention, le charbon non micronisé comporte un nombre non négligeable de grosses particules et comporte en revanche une proportion notablement plus faible de particules dont la dimension est comprise ente 2,7 et 5,4 tlm. Les suspensions selon l'invention ont montré des qualités les rendant utiles pour le marquage préchimiothérapie et préopératoire et l'utilisation en laserothérapie et en thermothérapie. On donnera ci-après les résultats toxicologiques et pharmacologiques mettant en évidence les propriétés d'une suspension de charbon selon l'invention I - Etude de la toxicité La suspension de charbon micronisé est destinée à être administrée directement dans la tumeur. Des études préalables ont montré que le charbon micronisé diffusait très peu à partir du point d'injection, ce qui constituait une garantie pour l'utilisation de ce colorant comme marqueur préchimiothérapique et préopératoire. Cependant, certaines tumeurs étant très vascularisées, l'injection de particules de charbon pourrait être faite accidentellement dans un vaisseau. Cette étude de toxicité a eu pour but d'évaluer la conséquence d'une administration accidentelle de la suspension de charbon dans la circulation sanguine. La toxicité a été étudiée par voie intraveineuse et intrapéritonéale chez la souris black C57 BL6. L'essai de toxicité I.V. a été réalisé sur 5 lots de 2 souris femelles de poids moyen 24 g, âgées de 2 mois. Les doses testées pour des lots de souris différents étaient 4 mg; 0,4 mg; 400 m; 20 g de la solution de charbon à 4% pour un volume de 0,1 ml de suspension administrée. Aucune mortalité n'a été notée pour les doses de 0,4 mg; 400 g et 20 pg. Sur les prélèvements d'autopsie d'animaux sacrifiés à J22 et J60, il n'a pas été retrouvé de charbon à l'examen macroscopique. La toxicité par voie I.P. a été effectuée sur 3 lots de 2 souris. 0,1 ml de la suspension à 4% de charbon micronisé a été injecté par voie I.P. et les animaux ont été sacrifiés à J8, J15, J60. Aucune mortalité n'a été observée pour le 3 lots de souris étudiés. L'autopsie des souris à J8 et J15 montre une localisation du charbon au sein du péritoine ou de la capsule de différents organes (foie, rein, pancréas, rate) sous forme d'un épaississement fibreux, qui disparait progressivement. A J30 et J60 les quantités retrouvées sont très faibles, à la limite de la détection. Il semblerait que le charbon soit bien toléré aux doses de 0,4 mg et moins, et éliminé lentement de ltorganisme. II - Etudes Pharmacoloaiques 1. Marauaae nréchimiothéraiaue et PréoDé- ratoire Par une susPension de charbon de tumeurs mammaires humaines L'étude a porté sur 11 cas. Il s'agissait de femmes âgées de moins de 70 ans présentant un adéno carcinome mammaire, canalaire ou tubulaire infiltrant. La taille de la tumeur initiale était supérieure à 3 cm. Les patientes ne présentaient pas de métastases à l'examen clinique et sur la radiographie du thorax. Lors de la biopsie initiale, le chirurgien effectue un marquage de la tumeur par injection à l'aide d'une seringue de 1 à 2 ml d'une suspension de charbon à 4% micronisé. Avant l'injection, il doit réaliser une aspiration par la seringue afin de s'assurer de ne pas être dans un vaisseau. Après avoir injecté la suspension en intratumoral, le chirurgien retire l'aiguille en laissant un trait de charbon afin de le guider le jour de l'exérèse tumorale. Les patients reçoivent en traitement 3 cures de chimiothérapie de type A.V.C.M.F. comprenant . Adriamycine ........... 50 mg/m2 - jour 1 . Vincristine ......... 1 mg/m2 - jour 1 Cyclophosphamide ...200 mg/m2 - jour 2-3-4 voie I.M. Méthotrexate 10 mg/m2 - jour 2-3-4 voie I.M. . Fluoro-uracile 300 mg/m2 - jour 2-3-4 voie I.M. à quatre semaines d'intervalle. La chirurgie est réalisée 3 semaines après la troisième cure. Dans tous les cas, le charbon a été retrouvé, et bien visualisé sur la pièce d'exérèse chirurgicale du nodule tumoral résiduel après traitement. Il forme le plus souvent de larges plages grisâtres dues à l'infiltration au sein du tissu mam maire, en moyenne de 10 à 15 mm de diamètre, allant jusqu'à 30 x 10 mm. Plus rarement, il forme des nodules noirs arrondis de 1 à 4 mm de diamètre. Dans deux cas, il n'a été retrouvé qu'un fin piqueté noirâtre. Le charbon est généralement observé au maximum à 5 mm du nodule tumoral résiduel, ou dans le nodule. Dans le cas où aucun nodule tumoral n'était observable, le charbon a permis de guider l'exérèse chrirugicale. Ces résultats montrent que l'injection de charbon est précise et a lieu dans la tumeur. Ceci est important pour savoir si le charbon permet de bien repérer le siège de la tumeur cliniquement observée avant traitement. Après administration intratumorale de la suspension de charbon et durant trois mois de chimiothérapie première, aucune réaction d'intolérance locale n'a été signalée. En conclusion, cette technique de marquage préchimiothérapique et préopératoire de tumeurs mammaires permet au chirurgien de réaliser une exérèse certaine du foyer tumoral résiduel, grâce à une analyse microscopique puis histologique précise par l'anatomopathologiste. 2. Traitement des tumeurs villeuses par le laser après inection intratumorale d'une suspension de charbon. La tumeur villeuse est une tumeur epithéliale du revêtement muqueux colique ou rectal caractérisée par la présence de villosités tapissées de muqueuses glandulaires saillant dans la lumière. Ces tumeurs douées d'une malignité potentielle imposent un traitement permettant une exérèse totale. En raison de la localisation de ces tumeurs, une intervention chirurgicale est généralement nécessaire. Les patients inopérables du fait d'un risque opératoire élevé, refusant l'intervention ou ayant une tumeur villeuse suffisamment petite pour faire hésiter à poser l'indication d'une chirurgie jugée trop agressive bénéficient d'autres thérapeutiques, parmi lesquelles le laser semble la plus efficace car permettant la destruction totale des tumeurs. 4 patients, 2 femmes et 2 hommes, âgés en moyenne de 77 ans (extrêmes 68-85 ans), ayant tous une contre-indication à une intervention chirurgicale ont été traités. Deux tumeurs siègeaient au niveau du sigmoide, 2 au niveau du rectum. Leur extension longitudinale en hauteur était respectivement de 7 cm, de 6,5 cm, de 5 et 5 cm. Le coloscope utilisé pour l'endoscopie est un Olympus CF 101. Le laser employé est un laser Nd YAG MEDILAS 2 MBB délivrant une puissance de 100 watts en bout de fibre. Le but des tirs laser était d'obtenir une vaporisation de ces grosses tumeurs exophytiques. Avant chaque séance, en moyenne, 6 cm3 de la suspension de charbon à 4% étaient injectées (extrêmes 4-10 cm2). Les tirs étaient continus mais limités à un maximum de 9.9 secondes. La distance entre l'extrémité de la fibre et de la tumeur a été la plus réduite possible mais l'extrémité distale était maintenue à distance de la tumeur. Chaque séance durait environ 30 minutes. Le rythme des séances était de 2 séances par semaine jusqu'à la destruction complète de la tumeur. Les résultats obtenus sont comparés pour chaque tumeur à deux tumeurs de référence de même taille précédemment détruites sans injection préalable de charbon. Les tumeurs ont été totalement détruites avec contrôle histologique négatif à deux semaines après la destruction après un nombre moyen de 6 + 1 séances (extrêmes 5-7). Le nombre moyen de séances nécessaires pour les tumeurs de référence était de 11 (extrêmes 8-16). Cette différence est significative : p = 0,005. En outre, dans la série n'ayant pas bénéficié d'une injection préalable de la suspension de charbon, 3 tumeurs villeuses qui présentaient une extension en hauteur de 5 cm n'ont pas été détruites malgré respectivement 8, 9 et 13 séances. L'utilisation de la suspension de charbon en intratumoral pour le traitement par rayonnement laser pourrait permettre par conséquent de diminuer de ma nière importante le nombre de séances nécessaires pour détruire totalement les tumeurs, et dans certains cas de détruire des tumeurs résistant à un nombre élevé de séances. Ceci est particulièrement intéressant à la fois pour le confort du malade, et le coût moindre en termes de santé publique. 3. Etude in vitro de l'effet d'une suspension de charbon en thermothéraPie. a) thermothérapie radiative L'effet d'une suspension de charbon sur une hyperthermie produite par un chauffage électromagnétique a été étudié en utilisant la méthodologie des "fantômes", décrite par H. EL AKOUM et M. GAUTHERIE dans ITBM vol. 9, numéro special, 2-1988, p. 91-97. Le fantôme était constitué essentiellement d'un gel organique transparent à haute viscosité coulé dans une enceinte en plexiglass dont les propriétés diélectriques et thermiques étaient voisines de celles du tissu musculaire. On a par ailleurs utilisé un système de chauffage radiatif obtenu avec un applicateur microondes 915 MHz (système HYLCAR II) en plaçant deux tubes de 1 cm de diamètre remplis respectivement de gel fantôme et de gel fantôme additionné de la suspension de charbon à 4% (1 ml) dans le fantôme à une profondeur de 1,5 cm et à une distance de 1,5 cm de la source radiative. On enregistre les températures mesurées dans les deux gels au cours du chauffage. Les résultats sont illustrés sur la Figure annexée et montrent que la température mesurée dans le gel auquel on a ajouté la suspension de charbon est supérieure en moyenne de 1,5 à 2,40C, même 35 minutes après le début du chauffage à la température mesurée dans le gel de référence ne comportant pas la suspension de charbon. b) thermothérapie capacitive L'effet d'une suspension de charbon sur une hyperthermie a été étudié en utilisant un chauffage en hyperthermie capacitive à 2 électrodes, 13,56 MHz (Jasmin 3-1000) selon la méthodologie décrite par Gilbert H. NUSSBAUM dans IEEE Transactions on microwave theory and techniques, vol. MTT-34, N 5, Mai 1986. A cet effet, un fantôme constitué par un morceau de viande de boeuf (15 cm x 10 cm x 10 cm) est coupé en 2 morceaux de mêmes dimensions selon une coupe longitudinale. Ce fantôme est placé entre deux électrodes, une électrode supérieure dite "pubienne" et une électrode inférieure dite "fessière". Des vessies de 5 cm d'épaisseur renfermant une solution saline sont placées entre chaque électrode et la surface du fantôme. Deux thermistances de haute résistance placées dans des tubes de Téflon (diamètre 1 mm) et préalablement calibrées sont placées à égale distance (5 cm) des deux bords du fantôme et à une profondeur de 5 cm. On chauffe le fantôme de t0 à t7, de t17 à t27, de t34 à t37 et de t49 à t52, la suspension de charbon à 4% dans de l'eau ppi (5 ml) étant injectée à t17, au niveau de la thermistance n 1, tandis qu'au niveau de la thermistance 2, on injecte 5 ml d'eau ppi seule; et on mesure l'évolution des températures des thermistances 1 et 2 avant et après l'injection de la suspension de charbon. Les résultats sont répertoriés sur le tableau III. TABLEAU III Temps Puissance Puissance Températ. Températ. (min.) électrode électrode thermist. thermist. fessière pubienne 1 2 (W) (W) ( C) ( C) O O O 6,2 5,1 1 120 50 7,2 6,8 2 170 100 8,8 8,0 3 40 50 8,3 8,0 5 110 110 9,7 9,9 8 0 O 11,5 11,5 16 0 0 13,1 14,0 17 O 0 12,3 12,0 18 130 90 13,1 13,4 27 110 100 22,4 24,2 34 O O 28,7 28,6 35 110 100 29,6 31,8 37 110 100 33,2 34,9 48 O 0 29,7 25,3 49 110 100 31,8 31,2 52 110 100 36,6 35,9 54 O O 37,4 32,3 55 110 100 37,9 33,2 58 0 O 37,7 31,0 Ces résultats indiquent que la suspension de charbon selon l'invention permet de maintenir une hyperthermie locale lorsqu'on arrête le chauffage, alors qu'au niveau de la zone témoin (thermistance 2), on observe une chute rapide de la température. On recommence l'expérience précédente sauf que l'on injecte d'emblée la suspension de charbon au temps t0. Les résultats sont répertoriés sur le tableau IV. TABLEAU IV Temps Puissance Puissance Températ. Températ. (min.) électrode électrode thermist. thermist. fessière pubienne 1 2 (W) (W) ( C) ( C) O O O 30,8 29,0 5 210 130 38,1 38,0 10 240 180 46,7 46,1 15 240 180 52,7 50,1 18 240 180 52,7 50,1 21 240 180 52,7 50,1 Ces résultats indiquent que la suspension de charbon selon l'invention permet une augmentation locale d'au moins 2 C de la température après une hyperthermie capacitive à deux électrodes, par rapport au témoin (thermistance 2) qui n'a reçu qu'une injection d'eau ppi de même volume. L'ensemble de ces résultats est extrêmement intéressant dans la mesure où il laisse supposer qu'une suspension de charbon injectée dans une tumeur permet d'augmenter et de conserver l'énergie d'absorption fournie par le système de chauffage et par conséquent d'augmenter l'efficacité d'un traitement par thermothérapie. REVENDICATIONS 1. Composition pour injection intratumorale comprenant une suspension dans un milieu aqueux de particules d'une substance colorante atoxique, insoluble en milieu aqueux, caractérisé en ce que la population de particules est composée d'au moins 50% de particules ayant une dimension comprise dans l'une des plages choisies parmi 1,0 à 2,1 um et 2,1 à 6,8 um, pratiquement aucune particule n'ayant une dimension supérieure à 10,8 pm. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'au moins 70% des particules ont une dimension comprise dans la plage de 2,1 à 6,8 pm. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que au moins 80% des particules ont une dimension comprise dans la plage de 2,1 à 6,8 um. 4. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la population de particules est obtenue par micronisation. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la substance colorante est du charbon non activé ou légèrement activé. 6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que le charbon est choisi parmi le charbon de bois, de tourbe, de lignite, de houille et d'anthracite. 7. Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que le charbon est choisi parmi le charbon de tourbe. 8. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le milieu aqueux est de l'eau pour préparations injectables ou du sérum physiologique. 9. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 pour la préparation d'un agent de marquage de tumeurs solides destiné à visualiser ladite tumeur par coloration. 10. Utilisation de la suspension selon la revendication 9 pour la préparation d'un agent de marquage préchimiothérapique et préopératoire. 11. Utilisation de la suspension selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des tumeurs cancéreuses utilisant l'énergie d'absorption. 12. Utilisation de la suspension selon la revendication il pour la préparation d'un médicament destiné au traitement par laserothérapie des tumeurs cancéreuses. 13. Utilisation de la suspension selon la revendication 11 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement par thermothérapie des tumeurs cancéreuses. 14. Utilisation de la suspension selon la revendication 13 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement par thermothérapie utilisant des ondes électromagnétiques. 15. Utilisation de la suspension selon la revendication 14 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement par thermothérapie capacitive profonde, thermothérapie radiative ou thermothérapie interstitielle.