Brevet FR2656797A1 — publié le 19910712

La présente invention concerne des compositions théra- peutiques à base de nouveaux dérivés des phospholipides et, plus particulièrement, de nouveaux dérivés du (N-méthyl-N- alcoyl)amino-3 méthoxyméthylene-2 propane 1-ol, de formule: CH 3 N R -CH 20 CH 3 -O-A-Y I. dans laquelle: R représente un groupement alcoyle de 10 carbone; o A représente: -P-O-(CH 2)2-, -C-(CH 2) -, 0 n o o à 20 atomes de -C-NH (CH 2)n o m 0 n pour lesquels N est un entier de 2 à 10; Y représente les ammoniums quaternaires suivants: ammonium, alcoylammonium, dialcoylammonium, trialcoylam- monium, pyridinium, piperidinium, pyrrolium ou pyrroli- dinium, chaque groupement alcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, ou un de leurs sels thérapeutiquement acceptables. 2 - Les principes actifs de ces nouvelles compositions thérapeutiques, sont plus particulièrement intéressants pour leur activité anti-tumorale, que l'on a montrée comme étant beaucoup plus intéressante de celle des composés précédemment évoqués dans l'état de l'art, comme, par exemple, ceux décrits dans "Synthesis of Thioether Phosphocholine Analogues" (Eimar BOSIES, Dieter B J. HERRMANN, Uwe BICKER, Rudi GALL and Wulf PAHIKE LIPIDS. Vol 22 No 11, 1987, p 947-951). Les nouveaux dérivés qui constituent les principes actifs de ces compositions thérapeutiques peuvent être préparés en faisant réagir, dans un solvant aprotique, en présence de triéthylamine, à une température comprise entre O et 80 C et sous circulation d'azote, le composé CH 3 N-R -CH 20 CH 3 L_OH II. dans lequel R est défini comme ci-dessus, avec un excès stoechiométrique de 10 à 100 % d'un compose o sélectionné parmi: Cl-Pl Br-(CH 2)n-C-Cl ou O=C=N (CH 2) n Br (n étant défini comme ci-dessus), et un excès stochiométrique de 30 à 50 % d'un composé Z sélectionné parmi l'amine associée aux ammoniums quater- naires de formule Y définis ci-dessus, c'est-à-dire l'am- moniac, la N-alcoyl-amine, la N,N-dialcoylamine, la N,N,N- trialcoylamine, la pyridine, la piperidine, le pyrrole ou la pyrrolidine Bien sur, dans certains cas, le réactif Z peut aussi être le solvant de la réaction Alors, la définition "un excès stechiométrique" n'a plus de sens. Le procédé peut être illustré par le schéma réactionnel I. X ( ZH) HNCO HDOZHD - H-Hi - g Hm A I co Z + zl/{U(ZHD) 1/ = D = O I ú Z X ( 2 HD) DO EHDOZHD - H N - EHD il Z + IDD U(ZHO) la o -m Xz ( ZHD) O CO - o HDOZHD - H H- EHD s HD A z + di O' E>O HO- úHDOZHD H HO I Trm NNO Ia V'F vf/JHDS a O O ui ( O e * II 4 - L'invention concerne, plus particulièrement, des compo- sitions thérapeutiques contenant un des composés I comme ingrédient actif, en association avec des diluents et/ou supports appropriés. Le produit de départ II des principes actifs, peut etre préparé selon le schéma réactionnel II et décrit en détail dans les exemples préparatifs 1 à 9 pour lesquels R représente C 12 H 25 S C 16 H 33 et C 18 H 37. EXEMPLES PREPARATIFS 1 Phényl-2 bis(éthoxycarbonyl)-5,5 dioxane-l,3 1 Un mélange de bis(hydroxyméthyl)-malonate de diéthyl ( 27 g, 0,12 mole), de benzaldéhyde fraîchement distillé ( 12,5 ml, 0,12 mole) et d'acide p-toluènesulfonique ( 0,2 g), dans 250 ml de toluène anhydre, est porté au reflux pendant 3 heures dans un appareil de Dean Stark Le toluène est éliminé sous vide et le résidu est distillé. E 0.5: 170 C ( 29,5 g, rendement 78 %) Poids moléculaire = 308 IR: 1 740 cm-1 (C= 0) RMN-'H 60 M Hz CD C 13, TMS 6: 7,35 (s, 5 H, A); 5,4 (s, 1 H, CHO); 4,8 (d, 2 H); 4,2 (m, 6 H, 2 H + OCH 2 CH 3); 1,2 (m, 6 H, O C Hz CH 3) 2 Phényl-2 éthoxycarbonyl-5 carboxy-5 dioxane-1,3 2 g du composé 1 ( 0,08 mol) sont ajoutés à une solution de 6,6 g de KOH ( 0,11 mol) dans 140 ml d'éthanol Après une agitation de 4 heures à température ambiante, l'éthanol est évaporé et le résidu est traité avec H Cl 1 N ( 125 ml) à 0 "C Le précipité est filtré, lavé et séché. - SCHEKA REACTIONNEL II HOH 2 C / C 02 C 2 H 5 C HOH 2 Có/ \ Co 2 C 2 H 5 X CH O O > 0) _ O C 02-C 2 H 5 1) KOH 2 >) HC 2) HC 1 -:0 C 02-C 2 H 5 0 CO 2 H Pyridine O > O A CO 0-C 2 H 5> O A 0 0 CH 2 OH 1) H Na, THF > O 2) CH 3 I OH OSO 2 CH 3 BH 3/THF IC 15 02 CH 3 > -CH 20 CH 3 > -CH 20 CH 3 L OCH 2 Et 3 NOCH 2 OCH 2 OCH 2 CH 3 N-R CH 20 CH 3 > -OCH 20 CH 3 1 I HN-R N(C 2 H 5) 3, DMSO 6 - 21,6 gr du composé 2 sont ainsi obtenus ( 95 %) P f 108 C Poids moléculaire = 280 IR (cm-1): 3400 (OH); 3100 3040 (X); 1740 (COO Et); 1690 (COOH); 1100 (C-O-) RMN-1 H 60 M Hz, CD C 13, TMS. 6: 7,4 (s, 5 H, o); 5,5 (s, 1 H, CHO); 4,9 (d, 2 H, CH 2); 4,25 (m, 4 H, 2 H and OCH 2 CH 3); 1,3 (t, 3 H, OCH 2 CH 3) 3 Phényl-2 éthoxycarbonyl-5 dioxane-1,3 3 9,2 g ( 33 mmol) du composé 2 dans 20 ml de pyridine anhydre sont portés au reflux pendant 5 heures La pyridine est éliminée sous vide, et le résidu obtenu est dissout dans CH 2 Cl 2, lavé avec de l'eau, puis avec de l'eau salée, séché et évaporé, pour donner le composé 3 ( 6,8 g, 88 %) P.f 690 C. Poids moléculaire = 236 -1 IR: 1 740 cm (C= 0) RMN-1 H 60 M Hz, CD C 13, TMS 6: 7,4 (s, 5 H, 0); 5,4 (d, 1 H, C Hq); 3,8 4,8 (m, 6 H); 3,2 (m, 1 H, H-C-CO 2 Et); 1,3 (m, 3 H, OCH 2 CH 3). 4 Hydroxyméthylène-5 phényl-2 dioxane-l,3 4 A un mélange de 0,62 g de Li Al H 4 ( 16 mmol) dans de l'éther absolu ( 80 ml), on ajoute, doucement, une solution de 6,8 g du composé 3 ( 29 mmol) dans 60 ml d'éther absolu Le mélange est alors agité pendant 4 heures à température ambiante Puis, à O C, on ajoute de l'acétate d'éthyle ( 8 ml), de l'eau ( 4 ml) et une solution de soude à 15 % ( 4 ml) La phase éthérée est décantée, séchée et évaporée pour former 5,12 g ( 92 %) du composé 4, sous l'aspect d'une huile jaune Poids moléculaire = 194 CCM rf: 0,5 (CH 2 C 12) sur alumine. IR: 3430 cm (OH) RMN-1 H 60 M Hz, CD C 13, TMS 6: 7,4 (s, 5 H, 0); 5,3 (d, 1 H, CHO); 4,3 3,2 (m, 6 H); 2,2 (m, 1 H, CH CH 2 OH); 1,3 ( 1 H, OH) 7 Méthoxyméthylène-5 phényl-2 dioxane-l,3 5 A un mélange de H Na ( 50 %, 1, 06 g) dans 40 ml de THF anhydre, sous agitation et à O C, on ajoute goutte à goutte une solution de 5,12 g du composé 4 dans 40 ml de THF. Après 30 minutes, on ajoute CH 3 I ( 6,6 ml) et le mélange est agité à O C pendant 6 heures, puis toute la nuit à température ambiante Après avoir ajouté de l'eau, le mélange est extrait avec de l'éther et la couche organique obtenue est lavée avec de l'eau jusqu'à neutralité, puis avec de l'eau salée, séchée puis évaporée Le résidu est purifié sur colonne d'alumine (éluant CH 2 C 12) pour former 4,8 g du composé 5 ( 86 %). Poids moléculaire = 208 CCM rf: 0,86 (CH 2 Cl 2) alumine. IR (cm-1): 3100 3040 ( 0), 1100 (C-O-) RMN-1 H 60 M Hz, CDC 13, TMS ô: 7, 4 (s, 5 H, y); 5,5 (d, 1 H, H -C) ; 4,8 3,2 (m, 9 H); 2,3 (m, 1 H, CH CH 2 O Me). 6 Méthoxyméthylène-2 benzyl-0-1 propane diol-l,3 6 On ajoute goutte à goutte, au composé 5 ( 5,4 g, 26 mmol) sous agitation et à O C, une solution de BH 3 dans du THF (M, 52 ml) Le mélange est agité à température ambiante pendant 48 heures, puis plongé brusquement dans de l'eau glacée et extrait avec de l'éther Après élimination du solvant, le produit brut est chromatographié sur silicagel (éluant CH 2 Cl 2 puis CH 2 C 12/Me OH 99:1) pour former le composé 6 ( 4 g, 73 %), sous l'aspect d'une huile visqueuse. Poids moléculaire = 210 CCM rf: 0,24 (CH 2 C 12) alumine IR (cm 1): 3450 (OH); 3100 3040 (q); 1100 (C-O-) -8 - RMN-'H 60 M Hz, CD Cl 3, TMS 6: 7,3 (s, 5 H,) ; 4,5 (s, 2 H, CH 2 ?); 3,1 3,7 (m, H); 2,1 (m, 1 H, CH CH 2 O-) ; 2,6 ( 1 H, OH) 7 Méthylènesulfonyl-0-3 méthoxyméthylène-2 benzyl-0-1 propane diol-1,3 7 A une solution du composé 6 ( 4 g, 19 mmol) dans un mélange de 60 ml d'éther anhydre et de 40 ml de CH 2 Cl 2 anhydre, on ajoute goutte à goutte Cl SO 2 Me ( 2,24 ml, 29 mmol) Le mélange est agité à température ambiante pendant 24 heures. Après extraction avec du CH 2 C 12, la phase organique est lavée avec de l'eau salée jusqu'au p H 7 et séchée Le solvant est évaporé et le résidu obtenu est chromatographié sur silicagel (éluant CH 2 C 12/Me OH 99:1) pour obtenir le composé 7 ( 4,6 g, 84 %), sous l'aspect d'une huile visqueuse. Poids moléculaire = 288 CCM rf: 0,7 (CH 2 C 12/Me OH: 95:5) silicagel IR (cm): 1350 ( 502); 1170 (SO 2); 1100 (C-O-C) RMN-1 H 60 M Hz, CD C 13, TMS ( 6) 4,35 (d, 2 H, CHO 502); 3,3 3,6 (m, 7 H); 3,0 (s, 3 H, 502 CH 3); 2,3 (m, 1 H, CH CH 2 O). Les différentes N,N-(méthyl alcoyl)amines, à l'exclusion de la N,N(octadécyl méthyl) amine (Aldrich), sont obtenues à partir de l'halogénure d'alcoyle correspondant et de la N-(méthyl)amine selon I G Farbening A G Fr 784,599, 22 Juillet, 1935. 8 N,N-(méthyl alcoyl)amino-1 méthoxyméthylène-2 benzyloxy- 0-3 propane 8 Une solution du composé 7 ( 16 mmol) dans du DMSO ( 15 ml) est ajoutée à une solution de N,N-(méthyl alcoyl)amine ( 16 mmol) et Et 3 N ( 1,4 ml) dans du DMSO ( 60 ml) Le mélange est agité à 80 C pendant 24 heures. -9 - Après élimination du DMSO sous pression réduite, le résidu est dissout dans CH 2 C 12, et la phase organique obtenue est lavée avec de l'eau puis séchée Le produit brut est chromatographié (éluant CH 2 C 12/Me OH 98:2) pour donner le composé 8. 8 a R = CI 2 H 25 (rendement 50 % huile visqueuse) CCM rf: 0,16 (CH 2 Clz/Me OH 95:5) 8 b R = C,6 H 33 (rendement 61 % huile visqueuse) CCM rf: 0,18 (CH 2 C 12/Me OH 95:5) 8 c R = CI 8 H 37 (rendement 58 % huile visqueuse) CCM rf: 0,18 (CH 2 Cl 2/Me OH 95:5) -1 IR: 1100 (C-O-) cm RMN-1 H 60 M Hz, CDC 13, TMS 6: 7,3 (s, 5 H, 5); 4,5 (s, 2 H, CH 20); 3,3 3,6 (m, 7 H, CH 3 OCH 3, 2 CH 20); 2,15 2, 4 (m, 7 H, CH 2 N CH 2); 1,8 (m, 1 H, CH CH 2 O); 1,25 llarge sing, 2 n H, NCH 2 (CH 2)n CH 3 l; 0,9 (t, 3 H, CH 3) 9 N,N-(méthyl alcoyl)amino-3 méthoxyméthylène-2 pro- pane 1-ol 9 Le composé 9 est obtenu par hydrogénolyse du composé 8 dans du CH C 13 avec Pd/C 10 % ( 40 psi, 5 heures à 40 C). 9 a R = C 12 H 2 S (rendement 79 %) CCM rf: 0,36 (CH 2 Cl 2/Me OH 90:10) 9 b R = C 16 H 33 (rendement 87 %) CCM rf: 0,39 (CH 2 Cl 2/Me OH 90:10) 9 c R = C 18 H 37 (rendement 85 %) CCM rf: 0,39 (CH 2 Cl 2/Me OH 90:10) Poids moléculaire = 385 IR (cm): 3450 (OH); 1100 (C-O-C) - RMN-1 H 60 M Hz, CD Cl 3, TMS 6: 5,3 ( 1 H, OH); 3,3 3,8 (m, 7 H, OCH 3, 2 CH 2 O) 2,7 (m, 7 H, NCH 3 and CH 2-N-CH 2); 2,2 (m, 1 H, CH-CH 2 O); 1,25 llarge sing, 2 n H, NCH 2 (CH 2)n CH 3 l; 0,9 (t, 3 H, CH 3) La préparation des principes actifs est illustrée par les exemples qui suivent. Exemple 10: N,N-(méthyl alcoyl)amino-3 méthoxyméthylène-2 propan 1-0 phosphocholine L'alcoyle représente -C 12 H 25, -C 16 H 33 et -C 18 H 37 à + A = -P-O (CH 2)2, Y = -N(CH 3)3 I _ On ajoute, sous circulation d'azote, du chloro-2 oxo-2 dioxaphospholane-1,3,2 ( 2 g, 14 mmol) dans 4 ml de benzène, à une solution refroidie ( 5 C) et agitée du composé 9 ( 7 mmol) et de N Et 3 ( 3 ml) dans du benzene anhydre ( 20 ml). Le mélange est agité à température ambiante pendant 8 heures, puis filtré Le filtrat est évaporé sous pression réduite Le résidu obtenu est dissout dans CH 3 CN anhydre ( 50 ml) et transvasé dans un réacteur 30 ml de CH 3 CN saturé de N Me 3 gazeux sont ajoutés, et le mélange est ainsi chauffé à 65 C pendant 24 heures Le solvant est ensuite évaporé et le résidu obtenu est chromatographié sur silicagel (éluant CH C 13/Me OH 90:10; 70:30; 30:70 puis Me OH) pour obtenir le composé souhaité. 10 a R = C 12 H 25 (rendement 40 %) MH = 467 CCM rf: 0,25 (CH C 13/Me OH/NH 4 OH 70:30:7) b R = C 16 H 33 (rendement 44 %) MH = 523 CCM rf: 0, 26 (CH C 13/Me OH/NH 4 OH 70:30:7) c R = C 18 H 37 (rendement 45 %) MH = 551 CCM rf: 0,26 (CH C 13/Me OH/NH 4 OH 70:30:7) il - IR (cm): 1240 (P=O); 1100 (C-O-C); 1040 (P-O) RMN-IH 500 M Hz, CH 30 D, TMS 6: 0,85 (t, 3 H, CH 3); 1,2 llarge sing, 2 n H, (C Hz)nl; 1,45 (m, 2 H, NCH 2 CH 2); 2,0 (m, 1 H, CH-CH 2 O); 2,15 (s, 3 H, NCH 3); 2,3 (m, 4 H, CH 2-N-CH 2); 3, 15 ls, 9 H, N (CH 3)3 l; 3,35 (s, 3 H, OCH 3); 3,4 (d, 2 H, C_ 2-OCH 3); 3,55 (m, 2 H, CH 2 N); 3,85 (m, 2 H, CH 20 P); 4,25 (m, 2 H, POCH 2). Exemple 11: Bromure de N,N-(méthyl alcoyl)amino-3 méthoxyméthylène-2 l(N-pyridinium)6 ' pentylcarboxyl-1 propane L'alcoyle représente -C 12 H 25, -C 16 H 33 et -C 18 H 37 A = -C (CH 2)5, n= 5, Y =- O Une solution du composé 9 ( 9 mmol) et de triéthylamine ( 25 mmol) dans 15 ml de trichlorométhane sans éthanol, est ajoutée goutte à goutte à une solution de 10 mmol de chlorure de bromohexanoyl-5 dans 10 ml du meme solvant, à 0 C et sous circulation d'azote Le mélange est agité pendant environ 15 heures à température ambiante Après évaporation du solvent, 30 ml de pyridine anhydre sont ainsi ajoutés au résidu obtenu, et le mélange est alors agité à 800 C sous circulation d'azote pendant 24 heures La pyridine est éliminée sous vide et le résidu est purifié par chromatographie sur colonne (éluant CH C 13, puis CH C 13/Me OH 90:10) pour former le composé souhaité. lia R = C 12 H 25 (rendement 68 %) llb R = C,6 H 33 (rendement 60 %) llc R = C,8 H 37 (rendement 71 %) IR (cm-1): 1100 (C-O-C); 1740 (C=O); 1640 (pyridine) RMN-1 H 500 M Hz, CD C 13, TMS 6: 0,85 (t, 3 H, CH 3); 1,2 llarge sing, 2 n H, (CH 2)nl; 2,2 (s, 3 H, NCH 3); 2,35 lt, 2 H, C(O)CH 2 l; 3,35 (s, 3 H, OCH 3); 3,45 (d, 2 H, CH 2-OCH 3) 12 - Exemple 12: Bromure de N,N-(méthyl alcoyl)amino-3 méthoxyméthylène-2 lN-(pyridinium)6 ' pentylcarbamoyloxyl-1 propane bromide L'alcoyle représente -Cl H 25, C 16 H 33 et -Cs 18 H 37 A = -C-NH(CH 2)5-, n= 5, Y =- Un mélange du composé 9 ( 9 mmol), d'isocyanate de bromo- -pentyle ( 12 mmol) dans du benzene et de 30 ml de pyridine, est chauffé pendant 2 jours à 800 C sous circulation d'azote La pyridine est éliminée sous vide et le résidu obtenu est dissout dans CH C 13, lavé et séché Le solvant est évaporé et le résidu est chromatographié (CH Cl 3 puis CH C 13/Me OH, 95:5, 90:10) pour obtenir le composé souhaité. 12 a R = C 12 H 25 (rendement 49 %) 12 b R = C 16 H 3 (rendement 52 %) 12 c R = C 18 H 37 (rendement 62 %) IR (cm-1): 1100 (C-O-C); 1640 (pyridine); 1720 (CONH); 3350 (NH) RMN-1 H 500 M Hz, CD Cl 3, TMS 6: 0,90 (t, 3 H, CH 3); 1,2 llarg sing, 2 n H, (CH 2)nl; 2,15 (s, 3 H, NCH 3); 3,25 lt, 2 H, C(O)NHCH 2 l; 3,35 (s, 3 H, + OCH 3); 3,4 (d, 2 H, CH 2-OCH 3); 5,1 (t, 2 H, CH 2 N); 5,6 (d, 1 H, NH) Exemple 13: Bromure de N,N-(méthyl alcoyl)amino-3 méthoxyméthylène-2 lN-(piperidinium) -6 ' pentylcarbamoyloxyl-l propane L'alcoyle représente -C 12 H 35, -Cî 6 H 33 et -Cî 8 H 37 A = -C-NH(CH 2)5-, n= 5, Y =- 13 - Ce composé est préparé par le même procédé décrit à l'exemple 12, mais en remplaçant la pyridine par la piperidine. 13 a R = Ci 2 H 25 (rendement 49 %) 13 b R = C 16 H 33 (rendement 42 %) 13 c R = C 18 H 37 (rendement 53 %) IR (cm-1): 1100 (C-O-C); 1720 (CONH); 3350 (NH) RMN-1 H 500 M Hz, CD C 13, TMS 6: 0,85 (t, 3 H, CH 3); 1,2 llarg sing, 2 n H, (CH 2)nl; 2,15 (s, 3 H, NCH 3); 3,25 lt, 2 H, C(O)NHCH 2 l; 3,35 (s, 3 H, OCH 3); 3,4 (d, 2 H, C Hz-O-CH 3); 5 (t, 2 H, CH 2 N); 5,6 (d, lh, NH) Exemple 14: Bromure de N,N-(méthyl alcoyl)amino-3 méthoxyméthylène-2 lN-(pyrrolium)-6 ' pentylcarbamoyloxyl-1 propane L'alcoyle représente -C 12 H 35, -C 16 H 33 et -C 18 H 3 ? A = -C-NH(CH 2)5-, n= 5, Y =- Ce composé est préparé par le même procédé décrit à l'exemple 12, mais en remplaçant la pyridine par du pyrrole. 14 a R = C 12 H 25 (rendement 53 %) 14 b R = C 16 H 33 (rendement 61 %) 14 c R = C 18 H 37 (rendement 48 %) IR (cm-1): 1100 (C-O-C); 1720 (CONH); 3350 (NH) RMN-1 H 500 M Hz, CD C 13, TMS 6: 0,85 (t, 3 H, CH 3); 1,2 llarg sing, 2 n H, (CH 2)nl; 2,2 (s, 3 H, NCH 3); 3,25 lt, 2 H, C(O)NHCH 2 l; 3,35 (s, 3 H, + OCH 3); 3,4 (d, 2 H, CH 2-O-CH 3); 5 (t, 2 H, CH 2 N) ; 5,6 (d, 1 H, NH) 14 - Rxemple 15: Bromure de N,N-(méthyl alcoyl)amino-3 méthoxyméthylène-2 lN-(pyrrolidinium)-6 ' pentylcarbamoyloxyl-1 propane L'alcoyle représente -C 16 H 33, -C 17 H 35 et -Cs 18 H 37 A = -C-NH(CH 2)5-, n= 5, Y =- Ce composé est préparé par le même procédé que celui décrit à l'exemple 12, mais en remplaçant la pyridine par la pyrrolidine. 515 a R = Ci 2 H 2 S (rendement 49 %) 15 b R = C 16 H 33 (rendement 45 %) c R = C 18 H 37 (rendement 56 %) IR (cm-1): 1100 (C-O-C); 1720 (CONH); 3350 (NH) RMN-'H 500 M Hz, CD Cl 3, TMS 6: 0,85 (t, 3 H, CH 3); 1,2 llarg sing, 2 n H, (CH 2)nl; 2,15 (s, 3 H, NCH 3); 3,25 lt, 2 H, C(O)NHCH 2 l; 3,35 (s, 3 H, OCH 3); 3,4 (d, 2 H, CH 2-O-CH 3); 5 (t, 2 H, CH 2 N); 5,6 (d, 1 H, NH) TOXICITE La toxicité des composés de l'invention, a été déterminée per os sur la souris, par des méthodes usuelles Leurs DL O sont supérieures à 650 mg/kg. PHARMACOLOGIE Les composés selon l'invention, ont été étudiés pour leur habilité à inhiber la prolifération de cellules tumorales in vitro. - Ils inhibent la prolifération des cellules tumorales HL 60 et A 427 après 24 heures. HL.60: cellule de leucémie promyélocytique A.427: cellule de carcinome pulmonaire Ils montrent un effet cytostatique à la dose de 0,02 m M qui n'est pas une dose toxique pour les deux lignées de cellules tumorales humaines La lignée de cellules de carcinome pulmonaire semble plus sensible que la lignée de cellule de leucémie promyélocytique. L'effet des composés selon l'invention, sur la prolifération à long terme, est décrit plus précisément comme suit. Tous les exemples de l'invention ont été testés et compares avec l'un des premiers composés voisins, découverts comme inhibant la croissance cellulaire néoplastique: l'octa- décyl-0-1 méthylglycéro-0-2 phosphocholine-3 (Et 18 OCH 3 ou méthoxy-PAF, Andreesen, 1988). Pour cette étude, une lignée de cellules de carcinome pulmonaire, appelée aussi A 427, a été utilisée; ce sont des cellules capables d'adhérer à un substrat Les cellules A.427 sont cultivées dans un milieu EMEM contenant du pyruvate de sodium et des amino-acides non essentiels (Flow Labs), complété avec du sérum bovin foetal 10 % (SBF; Gibco) Le milieu de croissance contient 100 U/ml de pénicilline et 100 g/ml de streptomycine (Flow Labs). Les composés de l'invention et le composé de référence Et 18 OCH 3 (Bachem, Suisse) sont dissouts dans une solution contenant 60 % d'éthanol et 40 % de tampon salin de phosphate Les dilutions en série sont préparées dans le même tampon phosphate. 16 - La dose testée est de 0,02 m M Le temps de traitement dure 24 heures à 370 C. L'effet des composés de l'invention sur la prolifération des cellules à long terme et sur leur survie, a été évalué en étudiant l'efficacité de clonage et la morphologie des colonies de cellules A 427 Pour mener cette étude, 1 103 cellules A 427, préalablement traitées avec les composés de l'invention pendant 24 heures, sont déposées dans des fioles de culture tissulaire de 25 cm 2. Ces cultures cellulaires sont alors incubées à 370 C pendant jours A la fin de ce temps d'incubation, les cultures cellulaires sont rinsées deux fois avec le tampon phosphate, fixées avec de l'éthanol à 70 % pendant minutes et teintées pendant le même temps avec du Giemsa 10 % (Sigma Chemicals). Les résultats correspondent à la valeur de l"'efficacité de clonage relative", calculée comme suit: Nombre de colonies formées E.C = x 100 Nombre de cellules recouvertes et sont rassemblés dans les tableaux suivants. Il a été montré que les colonies formées, après traitement par les composés de l'invention, ont perdu leur profil régulier, ont une réaction plus faible à la tache de Giemsa et leur taille est plus petite que les colonies non traitées. 17 - COMPOSES E C (N) Témoin 100 + 2 2 ET 18 OCH 333 4 + 1 5 EX 10 a 27 1 + 2 6 ** EX 10 b 21 4 + 1 8 * EX 10 c 14 2 + O 9 *** EX 11 a 23 2 + 2 4 * EX 11 -b 18 5 + 2 1 * EX 12 a 25 6 + 3 1 ** Les symboles statistiques entre chaque exemple et différents symboles: *, résultat est respectivement et hautement significatif. COMPOSES E C (%) EX 12 b 20 2 + 2 3 ** EX 13 -b 19 1 + 3 6 *** EX 13 c 17 6 + 2 7 * EX 14a 22 7 + 3 1 * EX 14 b 27 3 + 3 3 * EX 14 c 18 6 + 2 7 ** EX 15 b 21 7 + 3 3 ** EX 15 c 26 4 + 2 6 ** se réfèrent à la comparaison la référence ET 180 CH 3 Les ** et *** signifient que le significatif, très significatif POSOLOGIE En thérapie humaine, les composés de administrés de préférence par voie I V. l'invention sont La posologie usuelle est de 2,5 à 5 mg/dm 2 par jour, 3 à 6 jours par mois en perfusion lente. 18 - REVEND I CAT IO N S 1. Compositions thérapeutiques à base de dérivés du (N-mé- thyl-N-alcoyl)-amino-3 méthoxyméthylène-2 propane 1-ol de formule générale: CH 3 I N-R -CH 20 CH 3 O-A-Y I. dans laquelle: R représente un groupement alcoyle de 10 à 20 atomes de carbone; o A représente: -P O (CH 2)2-, C (CH 2)n- 0 O -C-NH -(CH 2)n-, N étant un entier de 2 à 10; # nm o Y représente les ammoniums quaternaires suivants: ammonium, alcoylammonium, dialcoylammonium, trial- coylammonium, pyridinium, piperidinium, pyrrolium ou pyrrolidinium, chaque groupement alcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, ou un de leurs sels thérapeutiquement acceptables, associé à des diluents et/ou supports appropriés pour la voie d'administration sélectionnée. 19 - 2. Compositions thérapeutiques conformément à la reven- dication 1, administrées à la dose de 2,5 à 5 mg/dm 2 par jour, 3 à 6 jours par mois en perfusion lente.