Brevet FR2650590A1 — publié le 19910208

La présente invention se rapporte à des dérivés d'indole, leur production et leurs applications. Le demandeur a réalisé la synthese chimique de dérivés du Dioxo-6,13 Pyrazino01,2-a : 4,5-a'jDiindole. Il a étudié les propriétés de ces composés diindoliques, et, en particulier, leur activité d'inhibition des mécanismes de différenciation cellulaire. La présente invention représente l'aboutissement du développement indiqué ci-dessus. Pour contrôler les mécanismes de différenciation cellulaire, les biologistes disposent, aujourd'hui, de produits inducteurs (M. Reiss, C.Gamba-Vitallo, A. Sartorelli - Cancer Treatment Reports 70-1,201,86), mais ntont pas de produit spécifiquement inhibiteur de différenciation. Le demandeur a mis au point la synthèse dé composés nouveaux, comme le diméthoxy-2 9 Dioxo-6, 13 Pyrazino Ll ,2-a : 4,5-a'] Diindole,(A où R = R' = CH30), inhibant la différenciation érythroide des cellules leucémiques de la souche K562 (Lozzio), qu'elle soit spontanée ou induite par l'hémine (J. Sutherland R. Turner, P. Mannoni -J. ofBiologicalResponse Modifiers 5,250,86 ). Ces produits ralentissent le développement des cellules pathologiques en culture et, ont, de fait, des propriétés anticancéreuses. Ce sont des agents thérapeutiques dans les maladies liées à la pathologie de la différenciation. Ils n'ont jamais été décrits, à ce titre, dans la littérature auparavant. Tous les produits de la présente invention-possèdent la formule générale (A): où R et R' représentent respectivement H, OH, un halogène, un groupe méthoxy ou acyloxy, CH3. La synthèse de ces dérivés d'indole est effectuée par condensation de deux molécules d'acide Indole2-carboxylique, substituées de façon adéquate, sous l'action du Dicyclohexylcarbodiimide, ou, dans un second temps, par modification des composés ainsi obtenus. EXEMPLE 1 Synthèse du Diméthoxy-2,9 Dioxo-6,13 Pyrazino[1,2-a:4,5-a'] Dijadole (A où R=R'=CH30) . Substance î] 1 g d'acide méthoxy-5 Indole2-carboxylique et 2g de Dicyclohexylcarbodiimide sont chauffés doucement jusqu'à reflux (115 ), dans 8ml de pyridine, sous atmosphère sèche ou sous argon. Après trois heures, le précipité formé est séparé et repris, à chaud, par de l'acétylacétone, puis par de l'étha- nol, lavé à l'éther et séché. Par le mode opératoire indiqué cidessus, on obtient 180mg de substance C11, sous forme de cristaux jaunes, fondant à 317-3180C, insoluble à froid dans les solvants usuels de RMN, et, d'un poids moléculaire (en se basant sur le spectre de masse ) de 346. Le rendement, de 20%, est porté à33%, voire plus, par l'emploi de catalyseur adapté. Des solutions de substance[l], dans du HMPA, sont utilisées pour tester l'activité de ce produit sur des cultures de cellules leucémiques de la soucheK562. Après trois jours, une solution à 5.10 5moles/1 inhibe la multiplication cellulaire, qui demeure à 60000cel/ml dans la culture test, avec une différenciation érythroide spontanée nulle, contre 600000 cel/ml dans la culture témoin, avec 20% de différenciation érythroide.Le HMPAseul ralentit la croissance de 600 à 400000cel/ml, mais n'agit pas sur la différenciation (20%). La différenciation érythroide induite par l'hémine, à 90% dans le témoin, n'est que de 17% dans les cultures contenant 5.10 5moles/1 de substance [î]. Les études en cours tendent à confirmer, parmi les applications des agents de contrôle de la différenciation, l'action anticancéreuse de cés produits, et, en particulier, de la substance [1], ou Diméthoxy-2,9Dioxo-6,13Pyra- zino[1,2-a :4,5-a' Diindole. EXEMPLE 2 Synthèse du Dioxo-6,13 Pyrazino r,2-a 4,5-a;l Diindole (A où R=R'=H) , substance [2] 2g d'acide Indole2-carboxylique et 3g de Dicyclohexylcarbodiimide sont chauffés doucement, et jusqu'à reflux, dans 15ml de pyridine, pendant une heure, en présence de catalyseur adapté. Le précipité, de couleur crême, est séparé par filtration à chaud, lavé et recristallisé dans l'acétylacétone, puis lavé-à l'éthanol et séché. Dans les conditions indiquées ci-dessus, on a obtenu 0.925g de substance [2], Dipxo-6,13 Pyrazino,2-a :4,5-aS Diindole, sous forme de fins cristaux de couleur jaune-clair, fondant à environ 3l30C. (Rendement : 52%) La présente invention n'est pas limitée aux exemples de réalisations, qui viennent d'être décrits. Les autres dérivés de pyrazinodiindole sont obtenus par la même réaction de condensation d'acides Indole2-carboxyliques, substitués de façon adéquate, ou par modification des substances ainsi obtenues. Toutes les variantes et modifications qu'admet cette invention apparaitront à l'homme de l'art. REVENDICATIONS 1 - Dioxo-5,11 Pyrazinor(l,2-a)(4,5-a' ,1DiIndole et nouveaux dérivés diindoliques, caractérisés en ce qu'ils ont la formule générale suivante (A): où R et R' représentent respectivement H, OH, CH3, un halogène, un groupe méthoxy ou acyloxy. 2 - Procédé de préparation de composés pyrazinodiindoliques, caractérisé par la condensation d'acides Indole2-carboxyliques, sous l'action du DicyclohexylCarbodiimide. 3 - Compositions pharmaceutiques et réactifs biologiques, notamment à activité d'inhibition des mécanismes de différenciation cellulaire, carac térisés en ce qu'ils renferment, en tant qu'ingrédient actif, au moins un des composés selon la revendication 1.