Brevet FR2644787A1 — publié le 19900928

La présente invention concerne de nouveaux stéroides 21 aminosubstitués, leur procédé de préparation et les inter- médiaires de ce procédé, leur application comme médicaments et les compositions pharmaceutiques les contenant. L'invention a pour objet, les composés de formule (I): / O Cll N/ N.. vN/RB RB R1 N /\T RA RA' R6 dans laquelle: - R6 représente un atome d'hydrogène, un radical méthyle, un atome de fluor ou un atome de chlore, - Rg et R1l forment ensemble une seconde liaison entre les carbones C9 et Cll ou R9 est un atome d'hydrogène ou un atome de fluor et Rll est un atome d'hydrogène, un radical hydroxyle ou un radical oxo, - R16 représente un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, - R17 représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxyle ou un radical acyloxy, - RA et RA', RB et RB', identiques ou différents, représen- tent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle à 5 ou 6 chaînons, éventuellement substitué par un radical alkyle ayant de 1 à 3 atomes de carbone, - les traits pointillés, dans les cycles A et B, indiquent la présence éventuelle d'une seconde liaison en position 1(2) et 6(7), - le trait ondulé en position 16 indique que le substituant R16 peut se trouver en position alpha ou béta, et les sels de ces composés. Lorsque Rl représente un radical oxo il est lié au cycle C par une double liaison. Lorsque R17 représente un radical acyloxy, il peut s'agir du radical acétyloxy, propionyloxy ou benzoyloxy. Lorsque RA, RA', RB ou RB' représentent un radical alkyle, il peut s'agir des radicaux méthyle, éthyle, n-propyle, isopro- pyle, n-butyle, isobutyle, sec-butyle, tert-butyle; il s'agit toutefois de préférence du radical méthyle ou éthyle. Lorsque RA et RA' et/ou RB et RB' forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle, il s'agit d'un hétérocycle saturé, de préférence une pyrrolidine ou une pipéridine, éventuellement substitué par un radical alkyle tel qu'un radical méthyle, éthyle, propyle ou isopropyle, de préférence méthyle ou éthyle, ou d'un hétérocycle insaturé, de préférence un pyrrole, éventuellement substitué par un radical alkyle tel qu'un radical méthyle. L'invention s'étend naturellement aux sels des composés de formule (I), comme par exemple les sels formés avec les acides chlorhydrique, bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphori- que, acétique, formique, propionique, benzoique, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxy- lique, aspartique, alcanesulfoniques tels que les acides méthane ou éthanesulfoniques, arènesulfoniques, tels que les acides benzène ou paratoluène sulfoniques et arylcarboxyli- ques. Parmi les composés de l'invention, on peut citer notamment les composés de formule (I) pour lesquels R6 est un atome. d'hydrogène. Parmi les composés de l'invention, on peut citer parti- culièrement les composés de formule (I) pour lesquels R9 et Rll forment ensemble une seconde liaison entre les carbones qui les portent et ceux pour lesquels R16 est un radical méthyle en position alpha. L'invention a plus particulièrement pour objet les compo- sés de formule (I) pour lesquels R17 est un atome d'hydrogène. ainsi que ceux pour lesquels le trait pointillé en position 1(2) indique la présence d'une seconde liaison. L'invention a tout particulièrement pour objet le composé dont la préparation est donnée plus loin dans la partie expe- rimentale à savoir la 21-[4-[3,6-bis(diéthylamino) 2-pyridyl] 1-pipérazinyl] 16alpha-méthyl pregna-l,4,9(11)-triène-3,20- dione et ses sels. L'invention a également pour objet un procédé de prépa- ration des composés de formule (I) caractérisé en ce que l'on soumet, dans un solvant neutre et en présence d'une base, un composé de formule (II): Rll'.R17 CH2-X (II) o,'R16 R6 dans laquelle X est un atome d'halogène et R6, Rg, Rll, R16, R17, les traits pointillés et le trait ondulé ont la même signification que précédemment, à l'action d'un composé de formule (III): -RB H-N N- N N %B O RE' (III) N RA RA' dans laquelle RA, RA', RB et RB' ont la signification indi- quée précédemment, et si désiré, l'on soumet le composé obtenu à l'action d'un acide pour obtenir le sel correspondant. Les composés de formule (I) sont obtenus en faisant réagir un composé de formule (II) dont le substituant halogéné X peut être un atome de chlore, de brome ou d'iode, dans un solvant neutre tel que par exemple le diméthylformamide, le tétrahydrofuranne, le chlorure de méthylène, l'acétonitrile, l'éther éthylique ou l'acétone, en présence d'une base telle que par exemple un carbonate ou un bicarbonate de métal alca- lin, de préférence de sodium ou de potassium, la triéthylamine ou la diisopropyléthylamine avec la pipérazine N-substituée de formule (III). Dans un mode de réalisation préféré du procédé de l'inven- tion, le composé de formule (II) est le 21-iodo 16alpha- méthyl pregna-l,4,9(ll)-triène-3,20-dione décrit dans la demande de brevet WO 87/01706, le solvant neutre est l'acéto- ne, la base est le carbonate de potassium et le composé de formule (III) est la N,N,N',N'-tétraéthyl 6-(l-pipérazinyl) 2,5-pyridinediamine dont la préparation est donnée plus loin ou bien encore la N,N'-dipyrrolidyl 6-(1-pipérazinyl) 2,5- pyridinediamine. Les composés de formule (I) concernés par l'invention peuvent être obtenus à l'état de sels par des méthodes connues qui consistent à faire réagir le composé I avec un acide minéral tel que, par exemple, l'acide chlorhydrique, bromhy- drique, nitrique, sulfurique, phosphorique, ou avec un acide organique tel que par exemple l'acide acétique, formique, propionique, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartique, ou bien un acide alcanesulfonique tel que l'acide méthane ou éthanesulfonique, arènesulfonique, tel que ltacide benzène ou paratoluène sul- fonique ou arylcarboxylique, tel que l'acide benzoique. Les acides préférés, selon l'invention, sont l'acide méthane- sulfonique ou l'acide fumarique. Les composés de formule (I) ainsi que leurs sels présen- tent d'intéressantes propriétés pharmacologiques, notamment, une activité antioxydante par inhibition de la péroxydation lipidique tissulaire, par exemple au niveau du rein, du coeur, plus particulièrement au niveau du cerveau et de la moelle épinière. Les composés de formule (I) ainsi que leurs sels présentent aussi une activité détoxifiante dans les intoxica- tions aigues associées à la péroxydation des lipides des tissus cérébraux tels que le cerveau ou la moelle épinière, ces propriétés justifient leur application en thérapeutique. L'invention a donc pour objet les composés de formule (I) ainsi que leurs sels avec les acides pharmaceutiquement accep- tables, à titre de médicaments. Parmi les médicaments de l'invention, on peut citer tout particulièrement le composé de l'exemple 1, répondant à la formule 21-[4-[3,6bis(diéthylamino) 2-pyridyl] 1-pipérazinyl] 16alpha-méthyl pregna-l,4, 9(ll)-triène-3,20-dione et ses sels avec les acides pharmaceutiquement acceptables. Les médicaments selon l'invention peuvent être utilisés dans le traitement de désordres biologiques consécutifs à des traumatismes. On entend, par traumatismes, des dommages tissu- laires dans lesquels interviennent la génération de peroxydes lipidiques et qui peuvent être provoqués par des agents variés, par exemple des agents physiques tels que des contu- sions, en particulier des contusions cérébrales associées ou non à des hémorragies locales, ou des agents chimiques tels que ceux utilisés en chimiothérapie antitumorale comme l'adri- amycine ou tels que ceux utilisés en immunothérapie cancéreuse comme l'IL2 ou le TNF. Ils sont surtout intéressants dans le traitement de l'ischémie cérébrale, en particulier dans le traitement de l'infarctus cérébral et dans la prévention de sa récidive, ou dans le traitement d'intoxications médicamenteuses provoquées par une chimiothérapie ou une immunothérapie ou l'association des deux. Les médicaments de l'invention peuvent être administrés par voie orale ou par voie parentérale, telle qu'en injection intra-musculaire, intra-articulaire, intrathécale et de préfé- rence en injection intraveineuse en bolus ou en perfusion continue. L'invention s'étend aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un médicament tel que défini ci-dessus. Les compositions pharmaceutiques sont préparées selon les méthodes usuelles. Le principe actif peut être incorporé à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, l'amidon, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants et les conservateurs. Les sels pharmaceutiquement acceptables des produits de for- mule (I), plus solubles dans l'eau, sont utilisés de prefé- rence pour les formulations aqueuses destinées à l'injection intraveineuse. La posologie utile, la fréquence et la durée du traitement qui dépendent de l'aminostéroide et de la voie d'administration choisis varient, notamment en fonction du sujet et de la sévé- rité de l'affection à traiter. La dose peut être comprise entre 0,02 et 100 mg/kg/j, de préférence entre 0,01 et 1 mg/kg/j par voie intraveineuse ou par voie intramusculaire et éventuellement répétée plusieurs fois par jour. Les composés de formule (II) utilisés comme produits de départ du procédé de l'invention sont des 21-halo stéroides qui peuvent être préparés, d'une manière générale, à partir des stéroides correspondants 21- hydroxylés selon des méthodes connues de l'homme de métier ou par exemple selon le procédé décrit dans la demande de brevet WO 87/1706. Les stéroides 21-hydroxylés ayant un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle en 17alpha sont des stéroides connus ou dont la préparation est connue de l'homme de métier. Ils peuvent, par exemple, être préparés à partir des stéroides 17-céto correspondants en utilisant les procédés décrits dans les demandes de brevets FR 2 462 445 et FR 2 498 607. Les stéroï- des 17-céto sont eux-mêmes des produits connus décrits par exemple dans les brevets USP 2.775.602, 2.793.218, 4.189.431, 3.505.365 ou 2.656.370. Les stéroides ayant un radical acyloxy en 17 sont préparés par acylation des stéroides 17alpha-hydroxylés correspondants. Les stéroides ayant une double liaison en 9(11) sont des produits connus ou préparés selon les méthodes connues de l'homme de métier, par exemple par deshydratation d'un sté- roide 11-hydroxylé correspondant par un mélange de chlorure de méthanesulfonyle et de chlorure de thionyle. Les stéroides ayant une double liaison en 1(2) ou en 6(7) sont obtenus à partir d'un dérivé delta-4 correspondant, selon les méthodes connues de l'homme de métier, par exemple par action d'un dérivé de la p. benzoquinone tel que le chloranile ou la 2,3-dichloro 5,6dicyanobenzoquinone (DDQ). Les dérivés ayant une double liaison en 1(2) peuvent être aussi obtenus par voie biochimique à l'aide de microorganismes tel que Arthrobacter Simplex. Les stéroides ayant un radical méthyle en C6 sont préparés selon des méthodes connues de l'homme de métier, par exemple par action d'un halogénure de méthylmagnésium sur un 5(6)- époxy stéroïde correspondant ayant une cétone en position 3 bloquée par exemple par un groupement cétal. Les stéroides ayant un atome de fluor en C6 sont préparés selon les méthodes connues, par exemple par addition du complexe acide fluorhydrique-diméthylformamide sur un 5(6)- époxy stéroide correspondant ayant une cétone en position 3 bloquée par exemple par un groupement cétal. Les stéroides ayant un atome de chlore en C6 sont préparés selon des méthodes connues, par exemple par addition du complexe acide chlorhydrique-diméthylformamide sur un 5(6)- époxy stéroide correspondant ayant une cétone en position 3 bloquée par exemple par un groupement cétal. Les stéroides ayant un radical méthyle en C16 alpha sont préparés selon des méthodes connues, par exemple par addition d'un halogènure de méthylmagnésium en présence d'un sel de cuivre sur un delta-16 20-céto stéroide correspondant, lui- même obtenu par déshydratation du stéroïde 17-hydroxylé correspondant. Les stéroides ayant un radical méthyle en C16 béta sont prépa- rés selon des méthodes connues, par exemple à partir d'un delta-16 20céto stéroide correspondant que l'on traite au diazométhane, chauffe puis soumet à une réaction d'hydrogéna- tion. Les composés de formule (III) utilisés comme produit de départ sont des produits nouveaux et l'invention a donc égale- ment pour objet les composés de formule (III) à titre de produits intermédiaires nouveaux. Les composés de formule (III) sont préparés selon un mode opératoire, dont un exemple de préparation est donné plus loin dans la partie expérimentale. Les composés de formule (III) peuvent être préparés selon le schéma suivant: On fait agir un produit de formule (IV): H-N N-R' (IV) dans laquelle R' représente un groupement protecteur de la fonction amino, par exemple un radical acétyle, sur un produit de formule (V): Hal N Hal (V) NO2 dans laquelle Hal représente un atome d'halogène, de préfé- rence un atome de chlore, pour obtenir un produit de formule (VI): Hal N N N-R' NO2 sur lequel on fait réagir un produit de formule (VII): RiB H-N (VII) dans laquelle R1B et RiB' ont soit la signification indiquée ci-dessus pour RB et RB' soit sont tels que, ou bien l'un représente un groupement protecteur monovalent de la fonction amino, par exemple un groupement benzyle ou un groupement trityle, et l'autre représente un atome d'hydrogène, ou bien R1B et RlB' représentent ensemble un groupement protecteur divalent, par exemple R1B et RîB' forment ensemble avec l'azote auquel ils sont liés un 2,5-dimnéthyl pyrrole, pour obtenir un produit de formule (VIII): RiB (VIII) R1B'-N N N N-R' NO2 N2 que l'on soumet à une réaction d'hydrogénation pour obtenir un produit de formule (IX): RIB I} \ (IX) RIB'- N N N-R' NH2 produit que, si désiré soit a) l'on soumet à l'action d'un ou deux équivalents d'un dérivé monohalogéné de RA ou de RA' pour obtenir un produit de formule (IX'): RIB r% -Rl (IX') RîBI. N N-R' ORAI N -RA1' dans laquelle RAI et RAI' représentent soit l'un un atome d'hydrogène et l'autre un radical alkyle, soit tous les deux le même radical alkyle, soit b) l'on soumet à l'action d'un dérivé monohalogéné de RA ou de RA', puis à l'action d'un dérivé monohalogéné de RA' ou de RA pour obtenir un produit de formule (IX''): R1B ] R1B'-N N N N-R' RA2 (IX'') RA2' dans laquelle RA2 et RA2' représentent des radicaux alkyles différents, soit c) l'on soumet à l'action d'un dérivé dihalogéné du butane ou du pentane, éventuellement substitué par un radical alkyle ayant de 1 à 3 atomes de carbone pour obtenir un pro- duit de formule (IX'''): R1B N - iN. /'N N-R' RB O (IX"'') RA3'- dans laquelle RA3 et RA3' forment avec l'atome auquel ils sont liés un hétérocycle à 5 ou 6 chaînons, produits de formule (IX), (IX'), (IX'') et (IX''') que l'on soumet à une réaction de déblocage du groupement R' et si désiré des groupements RlB et/ou RlB' pour obtenir les compo- sés de formule (III) correspondants. Les composés de formule (IX), (IX'), (IX'') et (IX''') sont des produits nouveaux et l'invention a donc également pour objet les composés de formule (IX), (IX'), (IX'') et (IX''') à titre de produits intermédiaires nouveaux. Parmi lep produits intermédiaires nouveaux préférés de l'invention, on peut citer le composé de formule (III) dont la préparation est donnée plus loin dans la partie expérimentale, à savoir la N,N,N',N'-tétraéthyl 6-(1-pipérazinyl) 2,5- pyridinediamine. CH 1H3 CH2 /.N N --CH2-CH3 2 0 H-'Nts " 3 CH3-CH2 N 4 CH2 CH3 Ce produit, comme tous les produits de formule (III) ainsi que les produits de formule (IX), (IX'), (IX'') et (IX'''), contrairement à ce qui est indiqué, ne peut être obtenu selon la préparation décrite dans la demande de brevet WO 87/01706. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. On peut également citer le composé de formule (I): 21-[4-[3,6-bis(ipyrrolidinyl) 2-pyridyl] 1-pipérazinyl] 16alpha-méthyl pregna-l,4,9(11)triène-3,20-dione qui peut être obtenu par le procédé de l'invention au départ de la 21-iodo lalpha-méthyl pregna-l,4,9(11)-triène-3,20-dione et de la N,N'-dipyrrolidyl 6-(1-pipérazinyl) 2,5-pyridinediamine. Préparation 1: N,N,N',N'-tétraéthyl 6-(1-pipérazinyl) 2,5- pyridinediamine. Stade A: 1-acétyl 4-[6-(diéthylamino) 3-nitro 2-pyridylt pipérazine. A un mélange de 78 g de 2,6-dichloro 3-nitro pyridine, 600 cm3 d'acétonitrile et 66,3 g de carbonate de potassium, on ajoute en 50 minutes à 0 C, une solution de 51,22 g de N- acétyl pipérazine dans 200 cm3 d'acétonitrile. On laisse revenir à température ambiante et agite 1 heure 15. On filtre les sels minéraux, ajoute au filtrat, 180 cm3 de N-diéthyl- amine et 76-g de carbonate de potassium et chauffe le mélange 1 heure 15 au reflux, après refroidissement, on filtre les sels minéraux, et évapore à sec sous pression réduite, le résidu (166,9 g) est recristallisé dans 200 cm3 d'acétate d'éthyle, on obtient 87,4 g de produit attendu. F = 120 C. Spectre IR (CHC13) - 0 1637 cm-1 Système conjugué 1593 cm-1 lère bande NO2 1569 cm-1 - 1510 cm-1 2ème bande NO2 1346 ou 1299 Stade B: N,N,N',N'-tétraéthyl 6-(1-pipérazinyl) 2,5-pyridine- diamine. On hydrogène sous une pression maximum de 1250 mbar de mercure à 25 C, un mélange de 70 g du produit obtenu au stade A, 1500 cm3 de méthanol, 61,5 cm3 d'acétaldéhyde et 10 g de charbon actif à 10 % de palladium. On absorbe environ 20 litres d'hydrogène, on filtre le catalyseur et évapore le filtrat à sec sous pression réduite. On reprend le résidu (89,8 g) avec 500 cm3 de n-propanol et 91,3 g de potasse en pastilles, et chauffe 3 heures au reflux. On coule la solution refroidie dans 1 litre d'eau glacée et extrait avec du chlo- rure de méthylène, lave la solution organique avec une solu- tion saturée de chlorure de sodium, sèche, filtre et concentre à sec, sous pression réduite. On chromatographie le résidu (58,9 g) sur silice (éluant: chlorure de méthylène-méthanol- ammoniaque (95-5-0,5)). On obtient 48,35 g de produit attendu que l'on utilise tel quel. Analyse pour C17H31N5 C % H% N% Calculé 66,84 10,23 22,93- Trouvé 66,9 10,5 22,6 Spectre IR (CHC13) C = C 1596 cm1 C = N 1560 cm-1 Hétéroaromatique 1531cm-1 5.1487 cm-1 EXEMPLE 1: 21-[4-[3,6-bis(diéthylamino) 2-pyridyl] 'l-pipéra- zinyl] 16alpha-méthyl pregna-1,4,9(11)-triène-3,20-dione. On mélange à température ambiante 1,395 g de 21-iodo 16alpha-méthyl pregna-1,4,9(11)-triène-3,20-dione (préparé selon brevet WO 87/01706) 40 cm3 d'acétone, 1,88 g de produit obtenu au stade B de la préparation et 0, 9 g de carbonate de potassium. On agite pendant 2 heures 30, filtre et amène le filtrat à sec sous pression réduite. On chromatographie le résidu (3,47 g) sur silice (éluant: cyclohexane-acétate d'éthyle (7- 3)). On obtient 1,4 g de produit attendu. [alpha]D = +41 2'5 (c = 0,4 % éthanol). Analyse pour C39H57N502 C % H % N % Calculé 74,6 9,15 11,15 Trouvé 74,5 9,4 11,5 Spectre IR (CHC13) delta-l,4 3-one 1663 cm1 1624 cm-1 1604 cm-1 889 cm-1 cétone non conjuguée 1714 cm1 1701 cm-1 hétéroaromatique 1594 cm-1 1561 cm-1 1486 cm-1 Etude pharmacoloqicue: activité antioxydante. L'activité antioxydante est recherchée, in vitro, par le test de formation de la malonyldialdéhyde (MDA) qui mesure la péroxydation lipidique déclenchée soit a) de façon non enzymatique par le sulfate ferreux, dans 1) des homogénats de cerveau ou 2) des microsomes hépatiques de rat soit b) de façon enzymatique par NADPH et le tétrachlorure de carbone, dans des microsomes hépatiques de rat. 1.1: La formation de MDA est mesurée sur des homogénats au 1/10e (V/V) de cerveaux de rat S.D (200 g) préparés dans un tampon de Krebs pH 7,4 selon les conditions décrites dans J. Biol. Chem. 262 (1987) 10438-10440. On incube 1 ml d'homogénat pendant 60 mn à 37C en présence de 25 microlitres d'éthanol contenant ou non le produit à tester, après addition de microlitres de solution de sulfate ferreux préparée extem- poranément dans de l'eau dégazée à l'argon (200 micromoles final). On prélève 0,25 ml de mélange incubé et ajoute 1,5 ml d'acide phosphorique à 1 %, 0,25 ml de solution 200 micromoles de déféroxamine (Desféral Ciba Geigy) dans l'eau, 10 micro- litres de tert-butylhydroxytoluène (BHT) à 8,7 mg/ml dans l'éthanol et 0, 5 ml d'acide thiobarbiturique (TBA) à 0,6 % dans l'eau. On chauffe le mélange à 100 C pendant 45 mn, refroidi, ajoute 4 ml de n-butanol, centrifuge pendant 15 mn à 4000 t/mn puis lit la DO à 535 nm de la fraction surnageante. On incube dans les mêmes conditions les blancs de réaction en absence de Fe++. On calcule le pourcentage d'inhibition: DO en présence de produit pourcentage = ------------------------- d'inhibition DO en absence de produit Résultats: concentration 5.10-4M 1. 10-4M 1.10-5M pourcentage d'inhibition 60,4 4,4 55,6 1.3 63,8 4,3 1.2: La formation de MDA est mesurée sur des microsomes hépa- tiques de rat S.D (200 g) préparés à partir de la fraction sédimentée à 100.000 G d'un homogénat de foie dans un tampon sucrose dont on utilise la fraction restant insoluble à 100.000 G dans un tampon de pyrophosphate de sodium 100 mM pH 7,4 et que l'on homogénéise dans un-tampon phosphate de sodium 100 mM pH 7,4 à 20 % de glycérol, puis que l'on conser- ve à -80'C. On incube les microsomes pendant 15 mn à 37 C dans 1 ml conte- nant du tampon Tris-HCl 35 mM, KC1 0,1 M pH 7,4, 1 mg de pro- téine microsomale, 5 microlitres d'éthanol renfermant ou non le produit à tester, 250 microlitres de solution d'ascorbate i5 dans le tampon Tris (0, 5 mM final), après l'addition de 250 microlitres de sulfate ferreux préparée extemporanément dans le tampon Tris (6 micromoles final). On arrête la réac- tion par addition de 2 ml d'une solution d'acide trichloracé- tique 1 M dans l'acide chlorhydrique 0,25 M contenant 0,4 % d'acide thiobarbiturique. On chauffe le mélange à 85C pendant mn, refroidit, centrifuge pendant 15 mn à 3500 t/mn puis lit la DO à 535 nm de la fraction surnageante. On effectue en même temps les blancs de réaction en absence de Fe++. On calcule le pourcentage d'inhibition comme précédemment. Résultats: concentration 1.10-5M 5.10-6M 1.10-6M pourcentage d'inhibition 99,8 99,5 42,0 5 2: La formation de MDA est mesurée sur des microsomes hépati- ques de rats prétraités au phénobarbital (80 mg/kg par 3 injections i.p), préparés comme décrit précédemment. On incube les microsomes pendant 15 mn à 37C dans 1 ml contenant du tampon phosphate 0,1 M pH 7,4, 1 mg de protéine microso- male, 5 microlitres d'éthanol renfermant ou non le produit à tester, 5 microlitres de tétrachlorure de carbone (5,5 mM final) après l'addition de 50 microlitres de solution de NADPH dans le tampon phosphate (1 mM final). On arrête la réaction puis effectue le dosage selon les conditions décrites précé- demment. Résultats: concentration 1.10-5M 5.10-6M 1.10-6M pourcentage d'inhibition 91 1 88 1 49 1,5 REVENDICATIONS 1) Les composés de formule (I): 9 '16.() /\ RA RA R6 dans laquelle: - R6 représente un atome d'hydrogène, un radical méthyle, un atome de fluor ou un atome de chlore, - R9 et Rll forment ensemble une seconde liaison entre les carbones C9 et Cll ou R9 est un atome d'hydrogène ou un atome de fluor et Rll est un atome d'hydrogène, un radical hydroxyle ou un radical oxo, - R16 représente un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, - R17 représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxyle ou un radical acyloxy, - RA et RA', RB et RB', identiques ou différents, représen- tent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un hétérocycle à 5 ou 6 chaînons, éventuellement substitué par un radical alkyle ayant de 1 à 3 atomes de carbone, - les traits pointillés, dans les cycles A et B, indiquent la présence éventuelle d'une seconde liaison en position 1(2) et 6(7), - le trait ondulé en position 16 indique que le substituant R16 peut se trouver en position alpha ou bêta, et les sels de ces composés. 2) Les composés de formule (I) telle que définie à la reven- dication i pour lesquels R6 est un atome d'hydrogène. 3) Les composés de formule (1) telle que définie à la reven- dication 1 ou 2 pour lesquels Rg et Rl1 forment ensemble une seconde liaison entre les carbones qui les portent. 4) Les composés de formule (I) telle que définie à l'une quel- conque des revendications 1 à 3 pour lesquels R16 est un radical méthyle en position alpha. ) Les composés de formule (I) telle que définie à l'une quel- conque des revendications 1 à 4 pour lesquels R17 est un atome d'hydrogène. 6) Les composés de formule (I) telle que définie à l'une quel- conque des revendications 1 à 5 pour lesquels le trait poin- tillé en position 1(2) indique la présence d'une seconde liaison. 7) Les composés de formule (I) telle que définie à l'une quel- conque des revendications 1 à 6 et répondant à la formule suivante: 21-[4-[3,6-bis(diéthylamino) 2-pyridyl] 1-pipérazinyl] 16alpha-méthyl pregna-l,4,9(11)-triène-3,20-dione et ses sels. 8) Procédé de préparation des composés de formule (I) telle que définie à la revendication 1 caractérisé en ce que l'on soumet, dans un solvant neutre et en présence d'une base, un composé de formule (II): Rll L-Jk _ R16 = R16 (II) R6 dans laquelle X est un atome d'halogène et R6, R9, Rll, R16, R17, les traits pointillés et le trait ondulé ont la signifi- cation indiquée dans la revendication 1, à l'action d'un composé de formule (III): NN RB H-N -R O RBI (III) / \ RA RA' dans laquelle RA, RA', RB et RB' ont la signification indi- quée dans la revendication 1, et si désiré, l'on soumet le composé de formule (I) à l'action d'un acide pour obtenir le sel correspondant. 9) A titre de médicament, les composés de formule (I) telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 6 et leurs sels avec les acides pharmaceutiquement acceptables. ) A titre de médicament, selon la revendication 9, le com- posé défini à la revendication 7 et ses sels avec les acides pharmaceutiquement acceptables. 11) Les compositions-pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un médicament tel que défini à la revendication 9 ou 10. 12) A titre de produits intermédiaires nouveaux, les composés de formule (IX), (IX'), (IX''), (IX''') et (III). 13) Le produit intermédiaire nouveau, selon la revendication 12, répondant à la formule: N,N,N',N'-tétraéthyl 6-(1-pipérazinyl) 2,5-pyridinediamine.