Brevet FR2637600A1 — publié le 19900413

La présente invention concerne de nouveaux peptides qui sont des prod-uits de maturation de polypeptides secrétés par la glande sous maxillaire du rat et des analogues de ces peptides. De nombreux polypeptides ayant des propriétés biologiques définies sont synthétisées en grandes quantités dans la glande sous-maxillaire (GSM) de rongeurs et en particulier dans la GSM de la souris. Ces protéines, comprenant le facteur de croissance des nerfs (nif), le facteur de croissance de l'épiderme (EGF) et la rénine, ont en commun un certain nombre de propriétés. Elles sont toutes synthétisées dans le même type de cellule à savoir les cellules des tubules contournés GCT (granular convoluted tubular), en réponse à divers stimulus hormonaux. notamment aux androgénes. On peut en outre constater la présence de ces protéines secrétoires dans la salive de la souris1 et elles sont synthetisées sous forme de précurseurs qui deviennent actifs après des processus de maturation faisant peut-être intervenir des protéases de type kallicréine. Certaines de ces protéases de type kallicréine sont également synthétisées. sous controle par les androgénes, dans la GSM. Des tentatives de caracterisation des gênes contrôlés par les androgènes dans la GSM du rat ont conduit les inventeurs à analyser le profil électro phonétique des produits de traduction in vitro des ARNm de ce tissu. Un ARNm spécifique de la glande sous-maxillaire de rat mâle a été isolé. Cet ARNm correspond à un polypeptide qui a éte dénommé SMR1 . Ce polypeptide donne des produits de maturation à activité physiologique. La présente invention vise principalement ces peptides et d autres peptides ayant des propriétés analogues. La présente invention a ainsi pour objet des peptides de formule X-His-Asn-Pro-Y I dans laquelle X représente un résidu glutamine (Gln), ou acide pyroglutamique (pyro-Glu), Y représente un groupe OH ou un résidu d'acide aminé basique. Les acides aminés basiques peuvent être la lysine ou l'arginine. Plus spécifiquement, la présente invention a pour objet des peptides de formule Gln-His-Asn-Pro II pyro-Glu-His-Asn-Pro ITI Gln-His-Asn-Pro-Arg IV pyro-Glu-His-Asn-Pro-Arg V Gln-His-Asn-Pro-Lys VI pyro-Glu-His-Asn-Pro-Lys VII La présente invention a également pour objet le polypeptide SMR1 qui donne les produits de maturation de formules II, III. IV et V.Ce polypeptide répond à la formule Met Lys Ser Leu Tyr Leu Ile Phe Gly Leu Trp Ile Leu 20 Leu Ala Cys Phe Gln Ser Gly Glu Gly Val Arg Gly Pro 30 Arg Arg Gln His Asn Pro Arg Arg Gin Gln Asp Pro Ser 40 Thr Leu Pro His Tyr Leu Gy Leu Gln Pro Asp Pro Asn 60 Gly Gly Gln Ile Gly Val Thr Ile Thr Ile Pro Leu Asn 70 Leu Gln Pro Pro Arg Val Leu Val Asn Leu Pro Gly Phe 80 Ile Thr Gly Pro Pro Leu Val Val Gln Gly Thr Thr Glu 100 Tyr Gln Tyr Gln Trp Gln Leu Thr Ala Pro Asp Pro Thr 110 Pro Leu Ser Asn Pro Pro Thr Gln Leu His Ser Thr Glu 120 130 Gln Ala Asn Thr Lys Thr Asp Ala Lys Ile Ser Asn Thr 140 Thr Ala Thr Thr Gln Asn Ser Thr Asp Ile Phe Glu Gly Gly Gly Lys La présente invention a également pour objet des anticorps polyclonaux et monoclonaux dirigés contre les peptides et le polypeptide selon l invention. La présente invention a également pour objet des hybridomes produisant des anticorps monoclonaux dirigés contre les peptides I à VII et le polypeptide selon l'invention La présente invention a également pour objet un procédé de dosage ou de détection des peptides et polypeptides selon l invention dans des tissus et des liquides biologiques qui comprend l'utilisation d'an- ticorps polyclonaux ou monoclonaux selon 1 invention. A cet effet, on peut utiliser notamment une méthode de type RIA utilisant un peptide marqué par un radioisotope, et la compétition entre ce peptide et le peptide à doser (Niswender G.D. et al; Porc. Soc. Exp. Biol. 128, 807. 1968). On peut également utiliser une méthode de type ELISA utilisant par exemple un peptide fixé sur un support et la compétition entre ce peptide et le peptide à doser vis-à-vis des anticorps préparés contre ce peptide. Les anticorps retenus par le peptide fixe au support sont détectés par des anticorps dirigés contre le premier et liés à une enzyme (méthode dérivée de Avromeas J. et Guilbert B. C.R. Acad. Sci. Paris 1971, 273, 2305). Les peptides selon la présente invention peuvent être préparés de manière classique par synthé se peptidique en phase liquide ou solide par couplages successifs des différents résidus d'acides aminés à incorporer (de l'extrémité N-terminale vers I'extrémite C-terminale en phase liquide. ou de I'extrémité C-terminale vers l'extrémité N-terminale en phase solide) et dont les extrémités N-terminale et les chaines latérales réactives sont préalablement bloquées p-ar des groupements classiques. Pour la synthèse en phase solide on peut utiliser notamment la technique décrite par Merrifield, dans l'article intitulé Solid phase peptide synthesis" (3. Am. Chem. Soc., 85. 2149-2154). Pour fabriquer une chaine peptidique selon le procédé Merrifield, on a recours à une résine polymère très poreuse, sur laquelle on fixe le premier acide aminé C-terminal de la chaine. Cet acide aminé est fixé sur la résine par l'intermédiaire de son groupe carboxylique et sa fonction amine est protégée, par exemple par le groupe t-butyloxycarbonyle. Lorsque le premier acide aminé C-terminal est ainsi fixé sur la résine, on enlève le groupe protecteur de la fonction amine en lavant la résine avec un acide. Dans le cas où le groupe protecteur de la fonction amine est le groupe t-butyloxycarbonyle, il peut etre éliminé par traitement de la résine à l'aide diacide trifluoroacétique. On couple ensuite le deuxième acide aminé qui fournit le second résidu de la séquence recher chée, sur la fonction amine déprotégée du premier acide aminé C-terminal fixé sur la chaine. De préférence, la fonction carboxyle de ce deuxième acide aminé est activée, par exemple par le dicyclohexylcarbodiimide, et la fonction amine est protégée, par exemple parole t-hutyloxycarbonyle. On obtient ainsi la première partie de la chaine peptidique recherchée. qui cpmporte deux acides aminés, et dont la fonction amine terminale est pro tétée. Comme précédemment, on déprotège la fonction amine et on peut ensuite procéder à la fixation du troisième résidu, dans les conditions analogues à celle de l addition du deuxième acide aminé C-terminal. On fixe ainsi. les uns après les autres. les acides aminés qui vont constituer la chaine peptidique sur le groupe amine chaque fois déprotégé au préalable de la portion de la chaine peptidique déjà formée, et qui est rattachée à la résine. Lorsque la totalité de la chaine peptidique désirée est formée, on élimine les groupes protecteurs des différents aminoacides constituant la chaine peptidique et on détache le peptide de la résine par exemple à l'aide d'acide fluorhydrique. Le peptide ainsi obtenu peut etre purifié, par exemple par chromatographie sur colonne. Le peptide SMR1 ou des dérivés de ce peptide peuvent aussi être obtenus à l'aide des techniques du génie génétique; ils peuvent aussi être obtenus par purification à partir de matériel biologique par des techniques de chromatographie ou de précipitation analogue à celles utilisées par exemple pour la purification de l'hormone de croissance humaine à partir de l'hypophyse. Les sérums polyclonaux et monoclonaux peuvent etre préparés selon une technique classique. A cet effet les tétrapeptides ou les pentapeptides, ou des dérivés multimériques de ces peptides peuvent être couplés à des agents immunogènes, tels que la KLH (Keyhole Lympet Hemocyanin), l'ovalbumine, la serumalbumine bovine etc, par un agent de couplage tel que le glutaraldéhyde. La protéine SMR1, et les dérivés de cette protéine (peptides dérives de cette protéine, ou proteines hybrides contenant un morceau ou la totalit.é de SMR1 lié une autre protéine telle que la protéine A) peuvent aussi être injectés directement. Les immunisations peuvent être effectuées de manière classique par exemple chez le lapin et chez la souris, en injectant à l'animal par exemple 100 microgrammes du produit de couplage en présence d'adjuvant de Freund 3 à 4 fois à 3 semaines d'intervalle. Il est ainsi possible d'obtenir chez le lapin des sérums polyclonaux. Les hybridomes et lea anticorps monoclonaux peuvent etre obtenus par les procédés classiques. On décrira ci après plus en détail l'isolement de l'ARNm qui correspond au polypeptide SMR1, et les caractéristiques du polypeptide et des produits de maturation. 1) MATERIELS ET METHODES Animaux et traitements hormonaux On a acquis auprès de Iffa-Credo des rats Wistar maies et femelles, ragés de 10 semaines. On a retiré les androgènes par castration et, dans les cas indiqués, on a injecté 10 jours après, par voie intrapéritonéale, 35 mg de testostérone (Sterandryl retard. Roussel). Dans les cas indiqués, on a administré la même dose de testostérone à des rats femelles. On a obtenu auprès de 1'Institut Pasteur des souris DBAi2 et "Swiss" géies de 8 semaines, Extraction de l'ARN et traduction in vitro On a préparé de l'ARN à partir de tissus de rat et de souris, comme décrits dans la littérature (Tronik D. et coll, 1987, EMBO J.6, 983-987). On a effectué la traduction in vitro des ARN en utilisant le système de traduction ARNm-dépendant au lysat en présence de réticulocytes ARNm-dependant (Pelham H. RB et coll, 1976, Eur. J. Biochem 6?, 247-256). On a analysé les produits par électrophorèse sur gel de polyacrylamide-NaDodS04 dénaturant. Clonage et caractérisation de l'ADNc codant oour SMR1 En tant que matrice pour la transcriptase réverse, on a utilisé de l'ARN-poly{A) obtenu à partir de GSM de rats Wistar mâles. et on a obtenu les ADNc bicaténaires au moyen du système de synthèse d'ADN d Amersham, avec le protocole fourni par le fabricant. On a ensuite inséré l'ADNc bicaténaire dans le site PstI de pUCS, par la méthode aux extrémités oligo-d(C) (Maniatis, T. et coll (1982) dans Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y.) pp 241-242). On a transformé des bactéries hotes (souche bactérienne DH 5-1 dérivée de DH1 et permettant de hautes efficacités de transformation, voir Hanatian DNA cloning vol. 1, p. 111) et on a criblé les colonies par hybridation avec les sondes décrites ci-après. En bref, on a fractionnné dans un gradient de saccharose à 5-20t l'ARNm provenant de GSM de males et de femelles.On a fait précipiter dans de l'éthanol les fractions enrichies en ARNm à bas poids moléculaires (qui se sont révélées, par traduction in vitro, contenir de l'ARNm codant pour SMR1), et on les a utilisées comme matrice pour la transcriptase rêver se en présence de dGTP et dCTP radiomarqués au 32P. On a criblé environ 3 000 recombinants sur des filtres en doubles échantillons, avec l'ADNc radiomarqué obtenu à partir de GSM de rats males et femelles. Les clones sélectionnés ont fait preuve d'une forte hybridation avec la sonde d'ADNc malte, mais d'une très faible hybridation avec la sonde femelle. On a identifié les clones recombinants par des expériences d'inhibition de traduction des ARNm en système acellulaire par hybridation ADN-ARNm (Paterson, et coll (1977) Proc. Natl. Acad. Sci. USA74, 4370-4374). Séguencage de l'ADNc codant pour SMR 1 A l'aide de diverses enzymes de restriction, on a coupé l'ADNc codant pour SMRt et on a sous-cloné dans le vecteur M13 mp9 les fragments obtenus. On a effectué le séquençage de l'ADN par la méthode de la terminaison aux didésoxyrîbonucléotîdes (Sanger, F. et coll (1977) Proc. Natl. Acad. Sci. USA74, 54635467). 2) RESULTATS Analvse de la traduction in vitro d'ARNm DréDaré à partir de GSM de rats et de souris 5 ;jg d'ARN total obtenu à partir de GSM de souris males et femelles ou de rats mâles et femelles ont été traduits dans un système acellulaire de réticulocytes, en présence de 35S-méthionine. On a soumis les produits de traduction in vitro à une électro- phorése sur un gel de dodécylsulfate de sodium-polyacrylamide à 12,57., et on les a autoradiographiés. La comparaison des produits de la traduction in vitro d'ARN préparés à partir de GSM de rats mâles et femelles montre la présence de plusieurs polypeptides (de poids moléculaires apparents 18 000, 19 000, 35 000, 46 000) en plus grandes quantites chez les rats males que chez les femelles. Ces données montrent l'existence d'un dimorphisme sexuel dans la GSM du rat. En outre, la comparaison de ces produits de traduction avec ceux obtenus avec des ARN provenant de GSM de souris, montre que la plupart des polypeptides majoritaires sont différents dans les deux espèces. En particulier, bien que des différences liées au sexe aient également pu ètre observées chez la souris1 celles-ci ne concernent pas les mêmes polypeptides que chez le rat. Inversement, les produits de traduction spécifiques du male observés chez le rat semblent etre absents chez la souris. Isolement et séquence d'un ADNc complémentaire d'un ARNm spécifique du rat male Afin d'isoler des ARNm, spécifiques du mâle, de la GSM du rat, on a construit dans pUC9 une banque d'ADNc préparée à partir de ce tissu. On a criblé les clones recombinants en utilisant une stratégie de criblage différentiel tel que décrite dans la partie Matériels et méthodes. On a caractérise les clones positifs par des experiences d inhibition de traduction des ARNm en système cellulaire par hybridation ADN-ARNm. Une catégorie d'ADNc recombinants supprimait la synthèse in vitro d'un polypeptide ayant un poids moléculaire apparent de 19 000 daltons. Ce polypeptide, dénommé SMR1, est présent dans les produits de traduction in vitro d'ARN de rats mâles, et ne l'est pas dans ceux de femelles.On a utilisé l'ADNc correspondant en tant que sonde dans des expériences d'hybridation d ARN avec transfert sur membrane de nitrocellulose. Pour l'hybridation on a utilisé une solution contenant - 0,5 M phosphate de sodium pH 2,2 - 7Z dodecylsulfate de sodium (SDS) - 1 mM EDTA -- 1% serumalbumine bovine - ADN sperme de saumon soniqué : 100 mg/ml On a opéré à 65 C pendant 16 à 20 h. On a effectué 4 lavages de 10 minutes à 85C avec une solution contenant - phosphate de sodium pH 7.2 40 mM - SDS 1% - EDTA 1 mM L'ADNc s'est hybride avec un ARNm de 700 nucléotides de longueur, présent en grandes quantités dans la GSM de rats males. On a caractérisé plus en détail cet élément d ADNc inséré. La séquence de l'ADNc codant pour SMR1 et la séquence déduite de la protéine sont représentées ci-apres AAA CTC ACT CAC CAC AGA GCT TCT CAC CAG CAC ATT TCC CCG CTC AGA AGT TTC 54 1 Met Lys Ser Leu Tyr Leu Ile Phe Gly Leu Trp Ile TCC AAG GGG CTA CCA AAG ATG AAG TCA CTG TAT TTG ATC TTT GGC CTG TGG ATC 108 20 Leu Leu Ala Cys Phe Gln Ser Gly Glu Gly Val Arg Gly Pro Arg Arg Gln His CTT CTA GCA TGC TTC CAG TCA GGT GAG GGT CTC AGA GGC CCA ACA AGA CAA CAT 162 40 Asn Pro Arg Arg Gln Gln Asp Pro Scr Thr Leu Pro His Tyr Leu Gly Leu Gln AAT CCT AGA AGA CAA CAA GAT CCT TCA ACT CTT CCT CAT TAT CTT GGT CTT CAG 216 50 60 Pro Asp Pro Asn Gly Gly Gln Ile Gly Val Thr Ile Thr Ile Pro Leu Asn Leu CCT CAT CCC AAT GGT GGA CAA ATA GGA GTA ACA ATC ACT ATA CCC TTA AAT CTT 270 70 80 Cln Pro Pro Arg Val Leu Val Asn Leu Pro Gly Phe Ile Thr Cly Pro Pro Leu CAA CCA CCT CGT GTT CTT GTT AAT CTT CCC GGT TTT ATC ACT GGA CCA CCA TTG 324 90 100 Val Val Gin Cly Thr Thr Clu Tyr Cln Tyr Clu Trp Cln Leu Tir Ala Pro Asp GTT GTA CAA GGT ACC ACT CAA TAT CAA TAT CAC TGG CAG CTA ACT GCT CCA GAC 378 110 120 Pro Thr Pro Leu Ser Asn Pro Pro Thr Cln Leu His Ser Thr Glu Gin Ais Asn CCT ACA CCT CTA AGG AAT CCT CCT ACT CAA CTT CAT TCC ACA GAA CAA CCA AAT 432 130 Thr Lys Thr Asp Ala Lys Ile Ser Asn Thr Thr Ala Thr Thr Gln Asn Ser Thr ACA AAA ACA CAT CCC AAA ATC TCC AAC ACT ACT CCC ACT ACC CAA AAT TCC ACT 486 140 Asp Ile Phe Clu Cly Cly Cly Lys CAT ATT TTT GAA GGT CGT GGC AAA TAATAAATTCCTTTTGGCAGTTACAATAGCATAAATCAA 549 AACACTGTGTAGTTTTGGGCGAAATAATCTTTAAAGGCTTGAGAAACAACCTTTACCCGCATTATAGAAAA 620 TGACAATAAACAGCTAAGCACCATTACACAGCAAAAAA 658 L'ADNc inséré a une longueur de 652 nucléotides, si l'on exclut le fragment poly(A). La séquence comporte un cadre ouvert de lecture de 510 nucléotides. Le seul ATG qui peut servir de codon d'initiation est situé 73 nucléotides en aval de l'extrémité 5' du clone d'ADNc. La région non traduite en 3' (142 nucléotides de longueur) contient le signal consensus de polyadénylation (AATAAA), 23 nucléotides en amont de la queue poly(A) (nucléotides 625-630). Le codon d'arrêt de traduction se trouve dans une autre séquence AATAAA (512-517) qui apparemment n'est pas reconnue en tant que signal de polyadénylation. La protéine correspondante a une longueur de 146 acides aminés, ce qui correspond à un poids moleculaire d'environ 16 000 daltons. Ce poids moléculaire est légèrement inférieur à celui déterminé d'après la mobilité électrophoretique du produit de traduction in vitro (19 000 daltons). Une telle différence entre le poids moléculaire prévu d'après l'analyse de la séquence et celui determiné d'après la mobilité électrophorétique a été déjà décrite pour d'autres pro téines de la GSM du rat ou de la souris. SMR1 a une teneur relativement élevée en résidus glutamine et proline, mais ne contient pas de région répétitive. Il n'appartient donc pas à la famille des polypeptides "riches en proline" ou "riches en glutamine", qui sont des protéines essentielles de la GSM. En outre, la séquence de l'ARNm ne comporte pas à son extrémité 5' la séquence de 80 nucléotides qui est caractéristique de cette famille. Toutefois, pareillement à ces protéines, SMR1 ne contient pas de résidus cystine ni méthionine (sauf dans son peptide signal) La partie amino-terminale de SMR1 est fortement hydrophobe, ce qui est caractéristique des peptides signal de la plupart des protéines secrétées. Bien que la séquence amino-terminale de la protéine mature n'ait pas été déterminée directement, d'après l'analyse statistique réalisée selon G. Von Heijne XNucleic Acids Res, 14, 4683-4690, 1986), (régle "-3, -1"), on peut penser que le site'de coupure du peptide signal se situe entre les residus 18 et 19. La protéine SMR1 présente également certains traits caractéristiques des glycoprotéines. Aux positions 139 et 136, on constate la présence de deux sites potentiels de glycosylation liée à N. La protéine est relativement riche en proline (12X), en thréonine (12%) et en glutamine (9,5X). PLusieurs sites de glycosylation liée à 0 pourraient donc être présents dans le fragment carboxy-terminal de SMR1, car des régions riches en restes proline et thréonine sont normalement présentes dans des protéines fortement O-glycosylées, telles que les mucoprotéines et les sialoglycoprotéines. Une particularité intéressante est la présence de paires d'acides aminés basiques Arg-Arg aux positions 27-28 et 33-34. De tels dipeptides représentent des sites potentiels de coupure par des enzymes de maturation (Lazure, C., et coîl (1983) Can. J. Biochem, Cell Biol,61, 501-515 et Docherty, K. et coll (1982) Ann. Rev. Physiol.44, 625-638). ils encadrent un tétrapeptide Gln-His-Asn-Pro. Le tétra- peptide et ses séquences adjacents sont situés dans un environnement hydrophile qui rend cette région accessible à d'éventuelles enzymes de maturation. La coupure des liaisons Arg-Arg par une enzyme de maturation suivie de l'élimination des restes basiques par la carboxypeptidase E (Fricker, L.O. et coll (1983) J. Biol. Chem.258, 10950-10955) et éventuellement une aminopeptidase (Loh. Y.P., et coll (1984) Ann. Rev. Neurosci.7, 189- 222) devrait produire un mélange de tétrapeptide (Gln-His-Asn-Pro) et pentapeptide (Gln-His-Asn-Pro-Arg), car "Pro-Arg" n'est pas un bon substrat pour la carboxypeptidase E. D'autres modifications post-traductionnelles pour raient également inclure la formation de dérives acides pyroGlu de ces produits. donnant un mélange de pyroGlu-His-Asn-Pro-Arg et pyroGlu-His-Asn-Pro. Ces structures rappellent celles de la thyreoliberine (TRH) Réaulation par des androgènes de l'accumulation d'ARNm codant pour SMR1 dans la GSM du rat Afin d'étudier la régulation par des androgènes de l'accumulation d'ARNm codant pour SMR1 dans la GSM du rat, on a préparé de l'ARNm contenant une séquence poly(A), à partir de GSM mâles adultes, de maltes castrés depuis 20 jours, de mâles castrés soumis à un traitement avec des androgènes, de femelles et de femelles traitées avec des androgènes.On a soumis à une électrophorèse sur un gel d'agarose-formaldéhyde à 1,4Z 1 ug d'ARN total de rats males, de rats femelles traités avec de la testostérone, de rats mâles castrès, de rats males castrés traités avec de la testostérone, et de rats femelles, on a transféré ces ARN sur une membrane de Nylon et on les a hybridés avec la sonde d'ADNc codant pour SMR1. Le temps d'exposition pour l'autoradiographie était de 2 heures. Les résultats de l'analyse d'ARN par transfert sur support solide de ces ARNm, au moyen d'une sonde SMR1 marquée au P, sont représentés sur la figure (partie A). On constate une différence importante d'accumulation d'ARNm codant pour SMR1 dans les GSM de rats mâles et dans celles de femelles. On a par ailleurs soumis à une électrophorèse sur un gel d'agarose-formaldéhyde à 2% diverses quantités (comme indiqué sur la figure) d'ARN de GSM de rats mâles et de rats femelles, on les a transféré sur filtre et hybridés avec la sonde d'ADNc codant pour SMR1. On a exposé le film pendant 30 heures. Comme il apparait Sur a partie B, l'ARNm codant pour SMR1 s'accumule en tés grande quantité dans les GSM de rats Wistar mâles, car une quantité aussi faible que 1,5 ng d'ARN total était suffisante pour donner un signal d'hybridation. Par contre, le niveau d'accumulatin d'ARNm codant pour SMR1 dans les GSM de rats Wistar femelles était d'environ 1 000 à 3 000 fois plus faible que chez les males. Chez les mâles castrés, la quantité d'ARNm codant pour SMR1 était réduite de 10 à 20 fois. L'administration de testostérone à ces mâles a ramené la quantité d'ARNm codant pour SMR1 à la meme valeur que celle constatée chez les males non castrés . En outre, l'administration de testostérone à des rats femellès adultes a provoqué l'accumulation d'ARNm codant pour SMR1, jusqu'à une quantité similaire à celle constatée chez les mâles. Une propriété remarquable de l'ARNm codant pour SMR1 est son haut degré d'accumulation dans la GSM du rat en réponse à un traitement par des androgènes. Cela donne fortement à penser que SMR1 est synthétisé dans les cellules GCT de la GSM (au même titre que l'EGF, le NGF et la rénine ainsi que d'autres protéines sous le contrôle d'androgènes dans la GSM de la souris). En outre, la différence de taux d'accumulation d'ARNm codant pour SMR1 chez le male et chez la femelle est très élevée (supérieure à trois ordres de grandeur), comparativement à celle constatée habituellement pour d'autres gènes contrôlés par des androgènes dans les organes cibles (rein, foie, GSM). Ces résultats et en particulier le haut degré d'induction du gène de SMR1 par des androgènes donnent à penser que SMR1 peut remplir chez le rat une importante fonction spécifique du mâle. SMR1 pourrait être le précurseur d'une molécule (les tétra- ou pentapeptides ou la partie C-terminale de SMR1) con trôlant des caractéristiques comportementales chez le rat male. Les produits décrits dans la présente invention sont utilisables àdes fins thérapeutiques ou comme réactifs de laboratoire. REVENDICATIONS 1. Peptide de formule X-Kis--ASn-Pro-Y . I dans laquelle X représente un résidu Gln ou pyro-Glu, Y représente un groupe OH ou un résidu d'acide aminé basique. 2. Peptide selon la revendication 1, dans lequel Y est un résidu Lys ou Arg. 3. Peptide de formule Gln-His-Asn-Pro Il 4. Peptide de formule pyro-Glu-His-Asn-Pro III 5. Peptide de formule Gln-His-Asn-Pro-Arg IV 6. Peptide de formule pyro-Glu-His-Asn-Pro-Arg V 7. Peptide de formule Gln-His-Asn-Pro-Lys VI 8. Peptide de formule pyro-Glu-His-Asn-Pro-Lys VII 9. Polypeptide de formule 1 Met Lys Ser Leu Tyr Leu Ile Phe Gly Leu Trp Ile Leu 20 Leu Ala Cys Phe Gln Ser Gly Glu Gly Val Arg Gly Pro 30 Arg Arg Gln His Asn Pro Arg Arg Gln Gln Asp Pro Ser 40 50 Thr Leu Pro His Tyr Leu Gly Leu Gin Pro Asp Pro Asn 60 Gly Gly Gln Ile Gly Val Thr Ile Thr Ile Pro Leu Asn 70 Leu Gin Pro Pro Arg Val Leu Val Asn Leu Pro Gly Phe 80 90 Ile Thr Gly Pro Pro Leu Val Val Gln Gly Thr Thr Glu 100 Tyr Gln Tyr Gln Trp Glon Leu Thr Ala Pro Asp Pro Thr 110 Pro Leu Ser Asn Pro Pro Thr Gln Leu His Ser Thr Glu 120 130 Gln Ala Asn Thr Lys Thr Asp Ala Lys île Ser Asn Thr 140 Thr Ala Thr Thr Gin Asn Ser Thr Asp Ile Phe Glu Gly Gly Gly Lys et dérivés de ce polypeptide. 10. Anticorps monoclonaux et polyclonaux dirigés contre un peptide ou polypeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 9. 11. Hybridomes caractérisés en ce qu'ils produisent des anticorps monoclonaux selon la revendication 10. 12. Procédé de dosage ou de détection d'un peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 comprenant l'utilisation d'anticorps monoclonaux dirigés contre ces peptides. 13. Procédé de dosage d'un polypeptide selon la revendication 9 comprenant l'utilisation d'anticorps monoclonaux dirigés contre ce polypeptide. 14. Composition thérapeutique comprenant un peptide ou un polypeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 9.