Brevet FR2636063A1 — publié le 19900309

-1-- La présente invention concerne de nouveaux composés de phénylpyrrole, leur préparation et leur application à titre de principe actif, en particulier en tant que médicament à activité antimitotique. Le but de la présente invention est de proposer de nouveaux composés utiles dans la lutte contre les cellules cancéreuses, révélés dans un premier temps par leur réactivité vis-à-vis de la tubuline, puis par la mise en évidence de leurs propriétés antimitotiques. La tubuline est une protéine cellulaire de poids moléculaire de l'ordre de 110 000 à 120 000 dal- tons, constituée de deux sous-unités. et 0 étroitement associées. Elle constitue un élément de base dont l'assemblage sous forme hélicoidale permet la construc- tion de structures macromoléculaires complexes communé- ment appelées microtubules. Ceux-ci sont rencontrés dans pratiquement toutes les cellules eucaryotes et servent à la formation de nombreuses architectures cytoplasmiques: fuseau mitotique, centrioles, flagelles, axonèmes, neurotubules... Les microtubules ont ainsi des rôles fondamentaux, non encore tous répertoriés, dans la vie cellulaire (division, motilité, transport, croissance...). L'assemblage de la tubuline est un mécanisme dynamique, réversible et faisant l'objet d'une régulation pour l'instant non élucidée. Après extraction de la protéine (à partir de la cervelle de porc), on peut suivre in vitro ses comportements d'assemblage et de désassemblage sous l'effet de la variation de différents paramètres physico-chimiques: polymérisation sous forme de microtubules à la suite d'une élévation de température à 37C; favorisée par la présence de GTP, de polycations, de glycérol... - dépolymérisation provoquée par une température -2- basse (4 C) et favorisée par l'ion Ca, un excès GTP... Un certain nombre de substances naturelles sont capables de se fixer sur des sites récepteurs spécifiques de la tubuline. Elles inhibent sa polymérisation (col- chicine, vinblastine, vincristine, podophyllotoxine...), sa dépolymérisation (taxol, rhazinilame) et peuvent provoquer sa spiralisation (vinblastine). La présente invention s'est orientée vers des substances présentant un caractère biarylique, capables d'inter-réagir avec la tubuline et donc présentant une activité en tant que poison du fuseau mitotique. En ce sens, il a été synthétisé des composés à squelette phénylpyrrole. Les composés, objet de la présente invention, répondent à la formule générale I R- R3A -IN -R R i i () R4 dans laquelle - R1, R2 et R3 indépendamment l'un de l'autre sont représentés par: (1) - H (2) - alcoyle C1_6, - R' situé en position 2' ou 3' est représenté par: (1) - H (2) - NO2 vA (3) - N dans lequel A1 et A2 indépen- A2 damment l'un de l'autre représentent: -3- (a) - H (b) - alcoyle C1_4, (c) - alcoylène en C1 6 ou alcénylène en C1-6 qui se cyclise sur l'atome de C en position 5 du cycle pyrrole, (d) - -C-B dans lequel B représente: o O - phénylalcoxy C1_4 - N-benzyloxycarbonylaminoal- coyle C1_4, - alcoylène en C1_6 ou alcény- lène en C1i6 qui se cyclise sur l'atome de C en position du cycle pyrrole. - R est représenté par: (1) - hétérocycloalcoyl-(alcoyle C1i4) conte- nant 5 ou 6 chaînons, (2) - C-Y dans lequel Y représente: I o (a) - alcoxy C1_4 (b) - NN'-cycloalcoyl-(uréido) contenant à 6 chaînons (c) - amino cyclisable en position R'. La présente invention se rapporte également à la préparation des composés représentés par la formule générale I. Ce procédé de préparation est caractérisé en ce que l'on fait réagir un nitrostyrène de formule II. 3' NO5 dans laquelle(II) dans laquelle: -4-- le groupe NO2 est situé en position 2' ou 3', avec un isocyanoacétate d'alcoyle de formule III R-O-CO-CH2-NC (III) dans laquelle: R est un groupement éthyle ou méthyle. La réaction est réalisée selon la méthode de Barton et Zard permettant la formation de pyrroles à partir de nitroalcènes aliphatiques ou aromatiques, dans un mélange THF/tertiobutanol absolu (2/1) à une température de 40-50 C. Le point de départ de la réac- tion est l'addition de type Michaël d'un X isocyano- acétate sur le nitrostyrène en présence d'une base, dans ce cas, le D.B.U. Le nitrostyrène utilisé, est préliminairement préparé par condensation de nitroéthane sur le nitro- benzaldéhyde correspondant selon une réaction de Knoevenagel. A partir des nitrostyrènes, on accède donc de manière directe ou par une transformation fonction- nelle simple, aux phénylpyrroles, objet de la présente invention. Ainsi, dans le cas o le composé I' est obtenu CH / __ 92 N-H CO Et C2 il est transformé en d'autres composés représentés par la formule générale I selon l'une ou plusieurs des transformations suivantes: -5- (1) - réduction simultanée du groupe nitro du cycle aromatique et de la fonction ester du cycle pyrrole et dans ce cas cyclisation, (2) réduction du groupe nitro en amine, (3) - acylation de la fonction amine obtenue selon (2), (4) - alcoylation du carbamate obtenu selon (3), éventuellement suivie d'une hydrogénolyse, (5) - saponification de la fonction ester du cycle pyrrole, (6) - condensation du NN'-cyclohexylurée sur la fonction acide obtenue selon (5), (7) - réduction de la fonction acide obtenue selon (5) en aldéhyde, (8) - condensation d'Horner-Emmons sur la fonction aldéhyde obtenue selon (6), (9) - substitution électiophile sur le cycle pyrrole, (10) - réaction de cyclisation intramoléculaire entre les deux cycles aromatiques. La création d'un troisième cycle, selon cette dernière transformation, joignant les noyaux aromatiques, est réalisée à partir de chaînes fonctionnalisées ou de groupements réactifs fixés,éventuellement à partir d'une ou plusieurs des transformations citées ci-dessus, sur chacun des noyaux phényJ et pyrrole, qui permettent une fermeture de type intramoléculaire. Compte-tenu de leurs intéressantes propriétés antimitotiques, les composés phénylpyrroles, représentés par la formule générale I, s'avèrent utiles en tant que médicaments. L'invention s'étend également aux compo- sitions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles contiennent en tant que principe actif un composé de formule générale I. -6- D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture de la des- cription faite ci-après, notamment à l'aide d'un certain nombre d'exemples donnés à simple titre d'illustration. Les composés phénylpyrroles suivants ont été préparés selon le mode opératoire décrit ci-dessous en II, à partir des nitrostyrènes correspondants, eux- mêmes synthétisés préliminairement selon la méthode I. I Préparation des nitrostyrènes: L'aldéhyde (2 mmoles) est dissous dans le mélange tampon: acide acétique glacial 10 ml / acétate d'ammonium 600 mg. On ajoute 1,4 équivalent de nitro- éthane et on porte au reflux. Au bout de 3 à 4 heures, l'aldéhyde a disparu et il se forme un produit principal moins polaire. On verse le mélange réactionnel dans ml d'eau glacée et on extrait par du chlorure de méthylène. La phase organique est lavée 2 fois à l'eau, 2 fois à l'eau carbonatée puis séchée sur sulfate de sodium et enfin évaporée. On isole le nitrostyrène sur colonne de silice (éluant: CH2C12/hexane; 4/1). II Méthode générale de préparation des composés de type phénylpyrrole à partir des nitrostyrènes correspon- dants: Le nitrostyrène (20 mmoles) est dissous dans 50 ml d'un mélange de tétrahydrofuranne distillé / ter- tiobutanol absolu (2/1). On ajoute 1,5 équivalent de DBU puis goutte à goutte et à température ambiante 1,2 équivalent (2,7 ml) d'isocyanoacétate dréthyle. Le mé- lange réactionnel est porté à 40-50 C et agité pendant 3 à 4 heures (sauf précision). La réaction est totale et un produit majoritaire moins polaire que le nitro- styrène de départ se forme. Les phénylpyrroles ainsi obtenus se révèlent en rose sur plaque chromatographique par pulvérisation du mélange vanilline / HC1 concentré. Les solvants sont évaporés et on sépare directement le -7- produit sur colonne de silice (éluant: CH2C12/hexane 4/1). Remarque: Le remplacement de l'isocyanoacétate d'éthyle par l'isocyanoacétate de méthyle donne l'ester méthylique avec le même rendement. Exemple 1 Méthyl-4-phényl-3 pyrrolecarboxylate-2 d'éthyle. COOEt H / N óA (1) CH* La synthèse est réalisée à partir du phényl-1- nitro-2-propène-l selon la méthode générale II. Le méthyl-4-phényl-3 pyrrolecarboxylate-2 d'éthyle, ainsi obtenu, est purifié sur colonne de silice pour donner une poudre blanche (3,9 g; Rdt = 85%). PF: 62-64 C IR (CHC13): 3480, 3300, 2990, 2940, 1675, 1490, -1 1460, 1290 cm1 UV(méthanol) Amax: 276,4 220,3 207,2 nm ú: 13900 11700 12800 mole-1 xlxcm 1 SM: m/z: 229 (M+), 200, 183, 156, 155, 154 Microanalyse C14 H15 NO2 calculée %: C 73,34 H 6,59 N 6,10 trouvée %: 72, 85 6,38 6,06 30. RMN 1H (CDC13, 400 MHz) 1.1 (3H, t J=7Hz, CH2CH3) 2 (3H, s, CH3) 4.05 (2H, q J=7Hz, CH2CH3) 6.7 (1H, d, H pyrrolique) 7.15-7.4 (5H, m, Ph) 9.15 (1H, br, NH) --8-- Exemple 2 Méthyl-4 (nitro-3' phényl)-3 pyrrolecarboxylate-2 de méthyle COOCH3 H \ / (2) I1 est obtenu à partir du (nitro-3' phényl)-l nitro-2 propène-l selon le mode opératoire II. On obtient 4,2 g de composé (2) (Rdt: 80%) qui peut être recris- tallisé dans un mélange acétate d'éthyle/hexane. PF: 146 C IR (CHC13): 3460, 1690 (COOMe), 1540, 1360, 1160 cm UV (éthanol absolu) Amax: 270,2 205,5 nm t:16700 13700 mole xl lxcm-1 SM: m/z: 260 (M+), 228, 153 Microanalyse: C13H N204 calculée %: C 59,99 H 4,65 N 10,77 O 24,59 trouvée % 60,07 4,84 10,82 24,82 25. RMN1H (CDC13, 200 MHz) 2.0 31 2.03 (3H, s, OCH3 3.75 3.75 (3H, s, CH3) 6,91 (1H, d J=2Hz, H pyrrolique) 7,63 (1H, t J=8Hz, H5') 7,8 (1H, d J=8Hz, H6') 8,28 (1H, d J=8Hz, H4') 8, 33 (iH, s, H2') 9,33 (1H, br, NH) -9- Exemple 3 Méthyl-3 pyrrolo[2,3c]quinolin-one-4(5H) O H H t >.(4) CH3 La synthèse est réalisée en plusieurs étapes, à partir du (nitro-2'phényl)-l nitro-2 propène-l préa- lablement préparé selon la méthode I: a) Synthèse du méthyl-4 (nitro-2' phényl).-3 pyrrole- carboxylate-2 d'éthyle (3) Elle est réalisée à partir du (nitro-2' phényl)- 1 nitro-2 propène-selon le mode opératoire décrit en II. La purification sur colonne de silice donne ,4 g d'une poudre jaune (Rdt = 98%). La recristalli- sation du produit dans un mélange DMSO/H20 permet d'obtenir des cristaux jaunes, (PF:'116 C) b) Synthèse du méthyl-3 pyrrolo[2,3c]quinolin-one-4(5H): (4) Dans 10 ml de méthanol sont mélangés: 274 mg (1 mmole) de (3), 1 g de FeCl3. 6H20 (et 50 mg de char- bon activé). On porte le milieu réactionnel au reflux pendant 10 minutes, puis on ajoute goutte à goutte, 1,5 équivalent d'hydrazine. Le reflux est maintenu pendant 12 heures. Le produit attendu (4) apparaît, ainsi que du (amino-2' phényl)-3 méthyl-4 pyrrolecarboxylate d'éthyle, composé (5). Le catalyseur est filtré sur célite et on laisse refroidir la solution recueillie dans laquelle le produit de cyclisation cristallise. On recueille 80 mg de cristaux blanc-cassé (Rdt = 40%). La solution -10contenant le produit de réduction est évaporée et on purifie celui-ci par chromatographie sur colonne de silice (110 mg de (5) sont obtenus, Rdt = 45%). Analyses de (4) 5. PF: 254 - 256 C -1 IR (nujol): 1620 cm UV(DMSO): Amax: 320 306 258 nm -: 11100 9700 8200 mole lxlxcm-1 SM: m/z: 198 (M+), 197, 179, 169 10. RMN H (CD3OD, 60 MHz) 2.5 (3H, s, CH3) 7.1-7.5 (5H, m, Ph, H pyrrolique) 8.1 (1H, m, CONH) Analyses de (5) 15. SM: m/z: 224 (M+'-), 199 (M-OEt) RMN1H (CDC13, 60 MHz) 1.06 (3H, t J=7Hz, CH2CH3) 1.91 (3H, s, CH3) 3.38 (2H, br, NH2) 4.13 (2H, q J=7Hz, CH2CH3) 6.53-7.33 (5H, m, Ph, H pyrrolique) Exemple 4 (N-benzyloxycarbonylglycylamido-2' phényl)-3 méthyl-4 pyrrolecarboxylate2 d'éthyle COOEt H ZNHCH2--- H -N- N " N N CH3 O La synthèse du composé (6) est réalisée à partir de l'(amino-2' phényl)-3 méthyl-4 pyrrolecarbo- xylate-2 d'éthyle (5) obtenu dans l'exemple 3. -11- 843 mg (4,05 mmoles) de glycine N-benzylcar- bamate (Z-glycine) sont dissous dans 80 ml de tétra- hydrofuranne anhydre. A la solution placée sous argon et refroidie à 15 C, on ajoute 580 mg (4,05 mmoles) de N-méthylmorpholine puis 570 mg de chloroformate d'isobutylè goutte à goutte. Après 10 minutes d'agita- tion à -15 C, on verse goutte à goutte une solution de 500 mg (2,23 mmoles) de (5) dans 50 ml de tétrahydro- furanne. La température du milieu réactionnel est maintenue 5 minutes à -15 C; puis on revient à tempé- rature ambiante. La réaction est totale en 1 heure. Le sel de N-méthylmorpholine est filtré et lavé par du tétrahydrofuranne. Après évaporation du tétrahydrofuranne, on reprend par de l'acétate d'éthyle la partie insoluble est filtrée; on lave la phase or- ganique successivement par de l'eau acidulée (HCl 0,lN), de l'eau saturée en carbonate de sodium puis en chlorure de sodium. Après séchage sur sulfate de sodium et éva- poration, on isole 700 mg de (diméthoxy-4',5' N-benzyl- oxycarbonylglycylamido-2' phényl)-3 méthyl-4 pyrrole- carboxylate d'éthyle (Rdt=79%). La recristallisation dans un mélange acétate d'éthyle/hexane donne des cristaux jaunes pâles. PF: 124 C 25. IR (CHCl3): 3460, 1690, 1590, 1510, 1290 cm UV (DMSO): Amax: 258 nm t:11300 mole Xlxcm1 (éthanol absolu)"max: 276 (épaulement), 239, 207 nm SM: m/z: 435 (M ), 244, 243, 199 30. Microanalyse: C24H25N305 calculée %: C 66,19 H 5,78 N 9,65 O 18,37 trouvée %: 65,97 5,63 9,68 18,65 RMN1H (CDC1 80 MHz) 3, -12- 0.95 (3H, t J=7Hz, CH2CH3) 1.8 (3H, s, CH3) 3.72 (2H, d, J=5Hz, CH2NH) 4 (2H, q J=7Hz, CH2CH3) 2 3 5 (2H, s, CH2 Ph) ,66 (1H, br, CH2NH) 6.61 (1H, d J=2Hz, H pyrrolique) 7-7.25 (8H, m, Ph) 7.87 (1H, br, s, Ph NH) 8.2 (1H, d J=7Hz, H3) Exemple 5 Diméthyl-1,4 (nitro-2' phényl)-3 pyrrole N,N'-cyclo- hexyluréido-carboxamide-2 cO1 Cy3 \\ (10) NO2 N H Il est synthétisé à partir du méthyl-4 (nitro- 2' phényl)-3 pyrrolecarboxylate-2 d'éthyle f3) préparé selon le mode opératoire décrit précédemment dans l'exemple 3. a) Synthèse du diméthyl-1,4(nitro-2' phényl)-3 pyrrole- carboxvlate-2 d'éthyle (7). 1 g (3,65 mmoles) de (3) est dissous dans 20 ml de tétrahydrofuranne anhydre. Le mélange est refroidi dans la glace et on forme l'anion en ajoutant un équi- valent d'hydrure de sodium. Après 15 minutes d'agitation à froid, on passe à température ambiante. On ajoute alors 1,3 équivalent de paratoluènesulfonate de méthyle et on chauffe le milieu réactionnel à 50 C pendant 3 -13- heures. La réaction est quantitative. Il se forme un produit moins polaire que (3). On laisse refroidir, filtre sur célite et lave celle-ci par du chlorure de méthylène. Le produit est obtenu sous forme d'une huile jaune après purification sur colonne de silice (éluant: CH2C12/hexane; 3/2). On obtient 0,95 g de (7) (Rdt: %). b) Synthèse de l'acide diméthyl-1,4 (nitro-2' phényl)-3 pyrrolecarboxylique-2 (8). (7) est saponifié dans un mélange méthanol/ soude 30% (5/1), à chaud (60 C) pendant 2 heures. On acidifie la solution jusqu'à pH=3 en refroidissant dans la glace. L'acide précipite et est extrait par du chlo- rure de méthylène. La phase organique est lavée par de l'eau saturée en chlorure de sodium et séchée sur sul- fate de sodium. On purifie le produit sur colonne de silice Géluant: CH2C12/MeOH 95/5). Le composé (8) attendu est isolé sous forme de cristaux jaunes recris- tallisés dans un mélange éther éthylique/hexane, PF 205 C, (190 mg; Rdt: 73%). c) Synthèse du diméthyl-l,4 (nitro-2' phényl)-3 pyrrole N,N'-cyclohexyluréidocarboxamide-2 (10). 78 mg (1,5 équivalent) de chlorhydrate de l'ester éthylique de la glycine et 0,08 ml (1,5 équi- valent) de triéthylamine anhydre sont dissous dans 5 ml d'acétonitrile. On ajoute 100 mg (0,38 mmole) de (8) et refroidit la solution à -5 C. 117 mg de dicyclohexylcarbodiimide (DCCI) sont alors introduits; le mélange réactionnel est agité 4 heures à -5 C puis 12 heures à température ambiante. Sur plaque chromatographique, on voit apparaître 2 produits moins polaires que l'acide (8). Il s'agit du composé attendu (10) et du diméthyl-l,4 (nitro-2' phé- nyl)-3 pyrrole éthylate de glycylcarboxamide-2, (11). L'acide n'est pas totalement consommé. On -14- évapore le solvant de réaction et reprend par l'acétate d'éthyle. La partie insoluble est filtrée; la phase organique est lavée successivement par de l'eau saturée en carbonate de sodium, une solution 1 N d'acide chlorhydrique, de l'eau saturée en chlorure de sodium. Après séchage sur sulfate de sodium et évaporation, on obtient 160 mg d'un mélange brut de 2 produits qui sont séparés sur colonne de silice; ce qui donne: (10): 70 mg (Rdt = 39%) 10. SM: m/z: 466 (M+'), 341, 243, 199 RMN1H (CDC13, 80MHz) 1-1.87 (22H, br, H cyclohexyle) 1.8 (3H, s, CH3) 3.6 (3H, s, N CH3) 6.47 - (1H, s, H pyrrolique) 7.2-7.7 (3H, m, Ph) 7.87 (1H, d J=7Hz, H3,) Exemple 6 Butyl-5 diméthyl-l,4 (dioxa-1,4 éthylcarbaldéhyde-2) -2 (Nbenzyloxycarbonyl N-méthylamino-2' phényl)-3 pyrrole On Orx Ph-CH2O \ CH3 CH3 (22) Il est obtenu à partir du diméthyl-l,4 (nitro- 2' phényl)-3 pyrrolecarboxylate-2 d'éthyle (7) dont la préparation a été décrite dans l'exemple 5. La synthèse du composé (22) nécessite les étapes suivantes: -15- a) Synthèse du diméthyl-1,4 hydroxyméthyl-2 (nitro- 2' phénylpyrrole (12). On dissout 200 mg de (7) dans 30 ml de chlorure de méthylène anhydre et on refroidit à -78 C dans un bain (acétone/carboglace). 2,8 ml (4 équivalents) de dibal 1M dans le toluène sont ajoutés goutte à goutte. L'agitation est maintenue 2 heures à -78 C puis on sort le ballon du milieu réfrigérant et on verse 50 ml d'une solution aqueuse de carbonate de sodium (10%). Une émulsion importante apparaît que l'on élimine par fil- tration sur célite. La phase organique limpide recueil- lie est lavée par de l'eau saturée en chlorure de sodium et séchée sur sulfate de sodium. L'alcool (12) est purifié sur colonne de silice, (120 mg; Rdt 71%)-. b) Synthèse du diméthyl-l,4 (nitro-2' phényl)-3 pyrrole- carbaldéhyde (13). mg de MnO2 préparé selon la méthode d'Attenburrow sont mis en suspension dans un mélange tétrachlorure de carbone/chlorure de méthylène (4/1) contenant 500 mg d'alcool (12). On agite le milieu réactionnel à température ambiante pendant 1 heure . L'agent d'oxydation est alors filtré sur célite. On obtient 230 mg de composé (13), (Rdt: 46%). Ce composé est purifié par chromatographie sur colonne de silice (éluant: acétate d'éthyle/hexane: 1/1). Il a l'aspect d'une huile jaune. c) Synthèse du diméthyl-1,4 (nitro-2' phényl)-3 (éthylate de carboxy-2 vinyl)-2 pyrrole (14). 470 mg (3 équivalents) d'hydrure de sodium (en poudre à 97%) sont mis en suspension sous argon dans 40 ml d'éther diméthylique de l'éthylène glycol (DME) anhydre. On refroidit dans la glace et on ajoute 3,9 ml (3 équivalents) de triéthylphosphonoacétate dilué dans 5 ml de DME. Un dégagement gazeux se produit et le mélange réactionnel est agité à température ambiante -16- jusqu'à consommation totale de l'hydrure. Dans la solu- tion réactionnelle devenue limpide, on verse 1,6 g de (13) dissous dans 30 ml de DME. Après 6 heures d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré sur célite. On évapore le DME et reprend par du chlorure de méthy- lene. La phase organique esf lavée par une solution aqueuse de chlorure de sodium jusqu'à disparition de l'émulsion produite, puis séchée sur sulfate de sodium. On obtient après évaporation du solvant, 4 g de produit brut qui, une fois purifié sur colonne de silice (éluant: acétate d'éthyle/hexane, 2/3), fournit une poudre jaune de composé (14), (2 g: Rdt 97%). d) Synthèse du (butène-l-yl)-5 diméthyl-l,4 (éthylate de carboxy-2 vinyl)2 (nitro-2' phényl)-3 pvrrole: (15) 4 g (12,7 mmoles) de (14) sont mis en solution à C dans 60 ml d'un mélange tétrahydrofuranne/ECl à 6% (50 ml de tétrahydrofuranne/10 ml d'acide chlorhy- drique à 36%). 1,5 ml (3 équivalents) de butyraldéhyde sont ajoutés goutte à goutte. Le mélange réactionnel est agité pendant 7 heures à froid. On neutralise la solution acide par une solution aqueuse saturée en carbonate de sodium puis on extrait le produit par de l'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par de l'eau carbonatée (10%) puis séchée sur sulfate de sodium. Le composé (15) obtenu est purifié sur colonne de silice (éluant: acétate d'éthyle/hexane; 1/4). On obtient des cristaux rouges (1,8 g; Rdt: 38%). e) Synthèse du (butène-l-yl)-5 diméthyl-l,4 (hydroxy- méthyl-2 vinyl)-2 (nitro-2' phényl)-3 pyrrole: (16). 4 g du composé (15) sont réduits par 3 équiva- lents d'hydrure de diisobutylaluminium. On isole le composé (16) sous forme d'une poudre rouge (3 g Rdt = 85%). -17- f) Synthèse du (butène-l-yl)-5 diméthyl-1,4 (nitro-2' phényl)-3 (vinylcarbaldéhyde-2)-2 pyrrole: (17) 3 g de (16) sont oxydés en 1 heure par 20 g de dioxyde de manganèse, préparé selon la méthode d'Attenburrow dans 60 ml de tétrachlorure de carbone. Après filtration du mélange réactionnel sur célite et purification du produit sur colonne de silice, on isole des cristaux rouge-orangé de composé (17), (2 g; Rdt = 67%). g) Synthèse du (butène-l-yl)-5 diméthyl-l,4 (nitro-2' phényl)-3 (dioxa-1, 4 vinylcarbaldéhyde-2)-2 pyrrole: (18). 2,6 g (8 mmoles) de (17),4,5 ml (10 équivalents) d'éthylèneglycol, ainsi qu'une quantité catalytique (20 mg) de tosylate de pyridinium sont mis en solution dans 60 ml de benzène. Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 4 heures et vire au vert. (L'eau est éliminée azéotropiquement à l'aide d'un Deanstark). I1 se forme un produit moins polaire que l'aldéhyde. Après refroidissement, on lave 3 fois la phase benzé- nique par une solution aqueuse de carbonate de sodium et on la sèche sur sulfate de sodium. Le produit brut obtenu après évaporation est purifié sur colonne d'alumine (éluant: acétate d'éthyle/ hexane 1 2/3) il a l'aspect d'une pâte rouge (nous avons noté une légère instabilité du produit lors de son passage sur silice). On obtient 2,2 g de composé (18), (Rdt = 75%). h) Synthèse de l'(amino-2'phényl)-3 (butène-l-yl)-5 diméthyl-1,4 (dioxa-1, 4 vinylcarbaldéhyde-2)-2 pyrrole: (19). Le composé (18) est réduit par l'hydrazine dans l'éthanol en présence de nickel de Raney. 2 g de composé (18) donnent 1,7 g d'une pâte jaune de composé (19), (Rdt = 93%). -18- i) Synthèse de l'(amino-2'phényl)-3 butyl-5 diméthyl-1,4 (dioxa-1,4 éthylcarbaldéhyde-2)-2 pyrrole: (20). 1,9 g de (19) est réduit dans 40 ml d'éthanol en présence de 400 mg de palladium sur charbon (10%), sous une atmosphère d'hydrogène. Après 12 heures de réaction, le catalyseur est filtré sur célite et le produit est purifié sur colonne d'alumine (éluant: acétate d'éthyle/hexane; 2/3). On isole le composé (20) sous forme d'une pâte jaune (1,6 g; Rdt = 83%). j) Synthèse du (benzyloxycarbonylamino-2'phényl)-3 butyl-5 diméthyl-1,4 (dioxa-l,4 éthylcarbaldéhyde- 2)-2 pyrrole: (21). 1,6 g de (20) est dissous dans 150 ml d'éther diméthylique de l'éthylène glycol (DME) anhydre. La solution est refroidie dans la glace et on ajoute 5,5 ml (20 équivalents) de pyridine distillée. On introduit ensuite geotte à goutte en deux heures, une solution de 1,2 ml (1,8 équivalent) de chloroformate de benzyle dans 20 ml de DME (l'introduction lente du réactif donne un meilleur rendement). Le milieu réactionnel est agité une heure à température ambiante puis on filtre le chlorhydrate de pyridinium formé. On évapore le DME et reprend par l'acétate d'éthyle; la phase organique est lavée par des solutions aqueuses de chlo- * rure de sodium et de carbonate de sodium saturées puis, séchée sur sulfate de sodium et évaporée. On obtient le composé (21) sous forme d'une huile jaune que l'on purifie sur colonne d'alumine (éluant: acétate d'éthyle/hexane; 2/3), (Rdt = 67%). k) Synthèse du butyl-5 diméthyl-1,4 (dioxa-l,4 éthyl- carbaldéhyde-2)-2 (N-benzyloxycarbonyl N-méthylamino- 2' phényl)-3 pyrrole: (22). 1,5 g de (21) est mis en solution sous argon dans 100 ml de DME anhydre. Après avoir refroidi à -20 C (glace/chlorure de sodium), on forme l'anion de -19- (21) en ajoutant 453 mg (1,3 équivalent) de tertiobuty- late de potassium. La solution jaune vire au rouge-brun et un précipité apparaît. Le mélange réactionnel est agité 30 minutes à -20 C puis 0,6 ml (3 équivalents) d'iodure de méthyle est introduit goutte à goutte. L'agitation est poursuivie une heure à -20 C. On élimine le précipité par filtration sur célite; le DME est évaporé et on reprend par de l'acétate d'éthyle. La phase organique une fois lavée par une solution saline de chlorure de sodium est séchée sur sulfate de sodium et évaporée. Le produit est purifié sur colonne d'alu- mine (éluant: acétate d'éthyle/hexane; 2/3). On isole une huile jaune. Le composé (22), ainsi obtenu, est un mélange de diastéréoisomères (1,1 g; Rdt = 71%). 15. IR (C6H6): 2980, 2940, 2880, 1710, 1450, 1390, 1350, 1160 cm1 UV (DMSO):)max: 257 nm (éthanol absolu): max: 208 nm 20. SM: m/z: 490 (M+), 447 (M-CH2CH2CH3), 403, 390, 220, 205 RMN1H (C6D6, 200 MHz) 0,87 (3H, t J=7Hz, CH2CH3) 1.29 (4H, m, CH2CH2CH3) 1.91 (5H, br, s, CH2CHOO, CH3) 2.41 (2H, br, t, CH2CH2CH2) 2.78 (2H, m, CH2CH2CHOO) 3.03 (3H, s, NCH3) 3.09 3.09 (3H, s, NCH3) 3.41 (4H, m, OCH2CH20) 4.65 (1H, t, CHOO) 5.3 (2H, br s, Ph CH2) 6.85-7.9 (4H, m, Ph) 20- Exemple 7 Butyl-5 diméthyl-l,4 (dioxa-1,4 éthylcarbaldéhyde-2)-2 (K-méthylamino-2'phényl)-3 pyrrole. t H -- CH3 \N5H 3 b -(23) C3 Ce composé est obtenu par hydrogénolyse du groupement carbamate de benzyle du composé (22). L'hydrogénolyse est réalisée sous une atmosphère d'hydrogène, en présence de palladium sur charbon (à 10%), dans l'acétate d'éthyle. Au bout de 15 heures d'agitation, on filtre le catalyseur sur célite, puis le produit est purifié sur colonne d'alumine (éluant: acétate d'éthyle/hexane; 3/7). 1 g de composé (22) fournit après déprotection 500 mg d'un produit huileux rouge-brun (23) (Rdt = 70%). IR (C 6H6): 3350 (massif), 2900, 2850, 1680, 1600, 1360, 1120 cm1 25. UV (DMSO): max: 306 (épaulement) 257 nm SM: m/z: 356 (M+), 269 RMN H (C6D6, 200 MHz) 6 60 0,87 (3H, t J=7Hz, CH2CH3) 1.33 (4H, m, CH2CH2CH3) 1.95 (2H, m, CH2CHOO) 2.03 (3H, s, CH3) 2.45 (3H, d J=5Hz, CH3NH) 2.47 (2H, t J=7Hz,CH2CH2CH2CH3) 2.78 (2H, m, CH2CH2CHOO) 3.16 (3H, s, NCH3) -21- 3. 39 (4H, m, OCH2CH2O) 4.03 (1H, q J=5Hz, CH3NH) 4.64 (1H, t J=5Hz, CH2CHOO) 6.74 (1H, d J=8Hz, H6') 6.95 (1H, t J=8Hz, H4') 7.36 (2H, m, H3', H5') Etude biologique L'évaluation de l'activité biologique des produits synthétisés a été effectuée en mettant en oeuvre plusieurs tests biologiques: Après avoir étudié l'interaction de ces composés avec la tubuline (inhibi- tion de la polymérisation ou de la dépolymérisation) et de cette façon, avoir mis en évidence leur activité en tant que poison du fuseau mitotique, il a été procédé à des études de cytotoxicité. Les études de cytotoxicité ont été réalisées, d'une part sur la lignée véro (cellule normale de rein de singe) Tableau I, et d'autre part, sur la lignée KB (carcinome humain du nasopharynx) Tableau II, selon la méthode suivante: Matériel et méthode. Les produits ont été déposés au moment de la mise en culture, laquelle est maintenue pendant 72 heures. Les produits sont testés à 100, 80, 40, 20 et 10 pm. A ces concentrations, le D.M.S.O. utilisé pour dissoudre les composés n'excède pas 1% dans les cultures et est non toxique. Les pourcentages d'inhibition de la prolifération cellulaire ont été évalués par une méthode colorimétrique au cristal violet, relativement à des cultures témoins contenant du D.M.S.O. ( 4 1%) -22- Tableau I Cellules Véro produits soumis aux essais de cytostase % d'inhibition de la prolifération. Concentration Composés N en pm (1) (2) (4) (6) (10) (22) (23) 63 77 69-84 78 100 54 80 46 75 49-70 48 100 54 69 20 38 45 4 25 0 25 0 3 0 0 0 0 0 O O O O O O O0 Tableau II | Cellules KB produits soumis aux essais de cytostase % d'inhibition de la prolifération Concentration Composés en pm (1) (2) (4) (6) (10) (22) (23) 43 72 68 68 45 59 100 35 50 60 52 27 44 94 0 10 100 31 0 0 81 0 0 72 22 0 0 66 0 0- 0 0 0 0 48 x x x x x x 4 -23- Résultats: Les composés de la présente invention, en particulier ceux des exemples 4, 6 et surtbut 23, se révèlent particulièrement intéressants. Ils montrent une certaine sélectivité à faible concentration à l'égard de la lignée KB. La présente invention concerne également des compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif au moins un composé représenté par la formule générale I associé à tout véhicule pharmacolo- gique classique, permettant son administration en particulier par voie orale et par voie parentérale. -24- REVENDICATIONS 1. Composés caractérisés en ce qu'ils sont représentés par la formule générale (I): R2 R R 2't R N - R1 () RI) R' dans laquelle - R1, R2 et R3 indépendamment l'un de l'autre, sont représentés par: (1) - H (2) - alcoyle C16, - R' situé en position 2' ou 3' est représenté par: (1) - H (2) - NO2 A (3) - N dans lequel A1 et A2 indépendamment A2 l'un de l'autre, représentent: (a) - H (b) - alcoyle C1_4, (c) - alcoylène en C1i6 ou alcénylène en C1i6 qui se cyclise sur l'atome de C en position 5 du cycle pyrrole, (d) - -C-B dans lequel B représente: - phénylalcoxy en C1_4, - N-benzyloxycarbonylamino- alcoyle C1_4, - alcoylène en C16 ou alcény- lène en C_16 qui se cyclise sur l'atome de C en position du cycle pyrrole, -25- - R4 est représenté par: (1) - hétérocycloalcoyl- (alcoyle C1_4) conte- nant 5 ou 6 chaînons, (2) - P-Y dans lequel Y représente: O (a) - alcoxy C1_4, (b) - NN'-cycloalcoyl-(uréido) contenant ou 6 chaînons, (c) - amino cyclisable en position R'. 2. Les composés caractérisés selon la revendi- cation 1, en ce qu'il s'agit de: - méthyl-4 phényl-3 pyrrolecarboxylate-2 d'éthyle, - méthyl-4 (nitro-3' phényl)-3 pyrrolecarboxylate-2 de méthyle, - méthyl-3 pyrrolo [2,3c] quinolin-one-4(5H), - (Nbenzyloxycarbonylglycylamido-2'phényl)-3 méthyl-4 pyrrolecarboxylate-2 d'éthyle, - diméthyl-l,4 (nitro-2' phényl)-3 pyrrole N,N'-cyclo- hexyluréidocarboxamide-2, - butyl-5 diméthyl-l,4 (dioxa-1,4 éthylcarbaldéhyde-2)- 2 (N-benzyloxycarbonyl N-méthylamino-2' phényl)-3 pyrrole, - butyl-5 diméthyl-1,4 (dioxa-l,4 éthylcarbaldéhyde-2)- 2 (N-méthylamino-2' phényl)-3 pyrrole. 3. Procédé de préparation des composés repré- sentés par la formule générale (I) selon les revendica- tions 1 et 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir un nitro-styrène de formule II NO2 2 (I) 2' 3 -26- dans laquelle: le groupe NO2 est situé en position 2' ou 3', avec un isocyanoacétate d'alcoyle de formule III R-O-CO-CH2-NC (III) dans laquelle: R est un groupement éthyle ou méthyle, et dans le cas o le composé I' est obtenu, en ce qu'on le transforme en d'autres composés représentés par la formule générale I CH3 NO2 N - H CO2Et par la mise en oeuvre d'au moins une des opérations suivantes: (1) réduction simultanée du groupe nitro du cycle aromatique et de la fonction ester du cycle pyrrole et dans ce cas cyclisation, (2) - réduction du groupe nitro en amine, (3) - acylation de la fonction amine obtenue selon (2), (4) - alcoylation du carbamate obtenu selon (3), éventuellement suivie d'une hydrogénolyse, (5) - saponification de la fonction ester du cycle pyrrole, (6) - condensation du NN'-cyclohexylurée sur la fonction acide obtenue selon (5), (7) - réduction de la fonction acide obtenue selon (5) en aldéhyde, -27- (8) - condensation d'Horner- Emmons sur la fonction aldéhyde obtenue selon (6), (9) - substitution électrophile sur le cycle pyrrole, et (10) - réaction de cyclisation de type intra- moléculaire entre les deux noyaux aromatiques. 4. Les composés représentés par la formule générale I selon les revendications 1 et 2, à titre de médicaments. 5. Compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles contiennent en tant que principe actif au moins un composé de formule générale I selon l'une des revendications 1 et 2.