Brevet FR2646778A1 — publié le 19901116

La présente invention concerne un procédé de préparation et de culture de suspension de cellules mémoire immunitaires utilisée pour la prévention et/ou le traitement d'une maladie infectieuse ou d'une tumeur maligne telle que le cancer. La présente invention concerne également une suspension de cellules mémoire immunitaires préparée à partir d'un tel procédé. Un être humain ou tout animal, qui a eu une fois une maladie bactérienne ou virale et qui a réagi contre une espèce particulière d'antigène, présente une réaction de défense remarquable à l'antigène lorsqu'il est soumis une seconde fois à une stimulation due au même type d'antigène. Cette réaction de défense ainsi provoquée est le résultat de l'immunité conférée à l'individu contre la maladie particulière et est appelée habituellement réponse immunitaire secondaire ou réponse anamnestique de l'organisme à l'antigène. L'homme de l'art sait qu'une réponse immunitaire provient d'une multiplication excessive des lymphocytes comprise dans la réaction de l'organisme à la stimulation par l'antigène qui a contribué à la première manifestation de la maladie. Les lymphocytes ainsi développés en réponse à la stimulation par un antigène sont généralement appelés cellules mémoire immunitaires. Les cellules mémoire immunitaires produites dans le corps d'un individu sont une espèce de lymphocytes présents dans la lymphe et le sang circulant dans les vaisseaux du système circulatoire de l'organisme. Les lymphocytes du système circulatoire migrent dans le thymus de l'organisme o ils se transforment en lymphocytes T ou cellules T.ce qui confère à l'organisme une compétence immunitaire. Comme il est connu dans l'état de la technique, ces cellules T compétentes immunologiquement, appelées aussi parfois cellules dérivées du thymus ou dépendantes du thymus, sont réparties de façon importante dans presque tous les tissus périphériques du système circulatoire d'un organisme. Comme pour les cellules mémoire immunitaires faisant partie des cellules T ainsi développées à partir des lymphocytes, l'état de la technique indique que de telles cellules sont reconnues simplement conceptuellement comme cellules mémoire "immunologiques". Il n'y a pas eu d'essais pratiques pour isoler ou extraire de telles cellules ou au moins une fraction contenant de telles cellules à partir d'un tissu de l'organisme et pour prélever les cellules mémoire immunitaires résultantes ou la fraction contenant les cellules dans un état utilisable en pratique ou in- vitro. De même aucune recherche positive pour l'utilisation des cellules à mémoire immunologique pour la prévention et/ou le traitement de maladie infectieuse ou de tumeur maligne n'a été évoquée ou suggérée sur une base sérieuse, et aucune approche clinique ou expérimentale visant une utilisation pratique des cellules mémoire immunologiques n'a été entreprise de façon sérieuse. La présente invention prévoit la réalisation d'un procédé de séparation de cellules mémoire immunitaires directement à partir d'un tissu de l'organisme, avec un rendement significativement élevé. Un tel procédé. selon la présente invention dépend pour son effet des diverses natures et propriétés des cellules mémoire immunitaires qui confèrent à l'organisme une immunité de type cellulaire. La présente invention prévoit également l'établissement d'un procédé de culture des-cellules mémoire immunitaires pendant plusieurs générations pour fournir une lignée de cellules établies, continue, qui fournit des cellules mémoire immunitaires indépendantes d'un tissu ou d'un organisme. La présente invention prévoit en outre une suspension de cellules mémoire immunitaires préparée à partir d'un tissu d'un individu sensibilisé immunitairement en conformité avec la présente invention ou de n'importe quelles cellules mémoire immunitaires préparées à partir d'un tissu d'un individu. Conformément à un aspect de la présente invention, il est présenté un procédé de préparation d'une suspension de cellules mémoire immunitaires caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes: - séparation de cellules consistant essentiellement en cellules T à partir de cellules prélevées chez un individu sensibilisé immunitairement par une immunisation contre un pathogène particulier, - addition aux cellules séparées d'un anticorps réagissant à un antigène d'histocompatibilité spécifique d'une espèce définie de cellules qui forment les complexes antigènes- anticorps avec lesdits anticorps et lesdites cellules séparées présentant lesdits antigènes d'histocompatibilité, - addition d'un sérum sanguin aux cellules contenant lesdits complexes antigène-anticorps pour provoquer dans le sérum sanguin la liaison du complément auxdits complexes antigène- anticorps et de ce fait la destruction des cellules présentant lesdits antigènes d'histocompatibilité et la survie des cellules restantes, addition aux cellules persistantes d'un anticorps réagissant à un antigène d'histocompatibilité spécifique des cellules mémoire immunitaires, et séparation à partir des cellules résultantes, de celles que présentent les antigènes d'histocompatibilité spécifiques des cellules mémoire immunitaires. Selon un autre aspect de la présente invention, il est proposé une suspension de cellules mémoire immunitaires qui comprend des cellules qui sont prélevées chez un individu sensibilisé immunitairement par immunisation contre un pathogène particulier et qui consistent essentiellement en des cellules T, dans lesquelles les cellules représentant environ 98 % en nombre desdites cellules T contiennent au moins 103 cellules mémoire immunitaires. On remarquera que le terme "pathogène" tel qu'il est utilisé ici. peut être une tumeur cancéreuse ou maligne ou tout microbe pathogène tel qu'une bactérie ou un virus qui est connu comme étant la cause d'une maladie ou d'une réponse toxique dans un être humain ou un autre animal. Une suspension de cellules mémoire immunitaires préparée selon le procédé de la présente invention peut être séparée, purifiée et cultivée à partir de tout tissu d'un organisme qui a été sensibilisé immunologiquement contre une maladie infectieuse ou une tumeur maligne. Ceci signifie que la prévention immunologique et/ou le traitement d'une maladie peut être effectué contre toute maladie infectieuse d'origine virale ou bactérienne ou contre toute tumeur maligne dans la mesure o un organisme sensibilisé immunologiquement, qui a été guéri d'une telle maladie ou tumeur, est disponible. Des maladies typiques auxquelles on peut faire face par une telle prévention immunologique et/ou un tel traitement sont celles provoquées par des pathogènes comprenant des cellules cancéreuses, des Salmonella, Corynebacterium, Pseudomas, Pasteurella, Streptococcus, le virus ectromelia et le virus Sendai (virus parainfluenza type I de souris). On notera aussi que le mécanisme immunitaire suscité par une suspension de cellules mémoire immunitaires diffère fondamentalement de l'immunité humorale qui dépend de la réaction anticorps-antigène représentée par la vaccination. Aucun des effets défavorables qui sont le résultat inévitable de la vaccination ne devrait être causé par la prévention et/ou le traitement d'une maladie par l'utilisation d'une suspension de cellules mémoire immunitaires. Lorsque les cellules mémoire immunitaires fournies par la présente invention sont cultivées à partir des cellules obtenues sous la forme d'une suspension de cellules mémoire immunitaires ou premier stade et ensuite successivement sous-cultivées pendant plusieurs générations à partir d'une suspension de cellules mémoire immunitaires au second stade, une lignée continue de cellules mémoire immunitaires peut être établie pour rendre possible la production de cellules de manière stable et économique sur une base quantitative. Pour préparer une suspension de cellules mémoire immunitaires selon la présente invention, les cellules contenant les lymphocytes sont d'abord prélevées chez un individu dont on sait qu'il a été guéri et en conséquence immunisé contre une quelconque maladie infectieuse d'origine virale ou bactérienne ou une tumeur maligne ou cancéreuse. Ces cellules contenant des lymphocytes peuvent par exemple être extraites à partir du sang périphérique prélevé dans le coeur ou une veine de l'individu sensibilisé immunitairement. Alternativement, les cellules contenant les lymphocytes peuvent être isolées à partir d'un prélèvement du tissu de rate d'un individu sensibilisé immunitairement. Les cellules T sont ensuite séparées des cellules contenant les lymphocytes. Dans ce but, les cellules contenant les lymphocytes sont traitées par chromatographie d'affinité sur colonne utilisant un adsorbant solide approprié permettant sélectivement le passage des cellules T. Des cellules B sont également contenues dans les cellules constituées des lymphocytes qui confèrent à l'organisme une immunité de type cellulaire.La majorité de ces cellules B va adhérer sur l'adsorbant solide et, par conséquent, une suspension cellulaire consistant essentiellement en cellules T est éluée de la colonne de façon fractionnée. Il est utilisé de préférence dans le procédé chromatographique une laine de nylon empaquetée dans un tube. Un adsorbant solide de laine de nylon n'adsorbe pas seulement les cellules B mais également les cellules non désirées telles que particulièrement les macrophages et les leucocytes, comme c'est connu dans l'état de la technique, et pour cette raison, la chromatographie d'affinité utilisant un adsorbant solide unique de laine de nylon ne peut fournir une efficacité d'adsorption élevée satisfaisante des cellules B. Selon un procédé de la présente invention, il est préférable que l'étape de chromatographie d'affinité sur laine de nylon soit effectuée, après une autre étape de chromatographie sur colonne utilisant un autre adsorbant solide tel que la laine de verre. Comme il est connu dans l'état de la technique, à la fois les cellules T et les cellules B adhèrent fortement à la laine de verre qui est cependant capable d'arrêter les macrophages et les leucocytes avec des hauts degrés significatifs d'affinité. Par l'utilisation d'un procédé chromatographique d'affinité à deux étapes utilisant d'abord la laine de verre et ensuite la laine de nylon, les cellules B contenues dans la suspension initiale de lymphocytes peuvent être séparées avec une efficacité élevée satisfaisante à partir de la suspension cellulaire débarrassée des macrophages et leucocytes. En substitution à un tel procédé chromatographique d'affinité à deux étapes on peut utiliser un procédé de séparation des cellules T qui dépend, dans son principe, de la différence entre les antigènes de surface (antigènes d'histocompatibilité) spécifiques des cellules T et B respectivement. Lorsqu'une souris est utilisée comme individu sensibilisé immunitairement, l'antigène de surface Thy 1 peut être utilisé pour identifier les cellules T dans un tel procédé de séparation des cellules T. Les cellules, contenues dans la suspension de cellules résultant du procédé chromatographique d'affinité sur colonne à deux étapes, sont largement constituées de cellules T mais contiennent encore une petite quantité d'espèces non désirées telles que typiquement les lymphocytes immatures dépourvus de capacité immunitaire. En conséquence, il faut appliquer ultérieurement un procédé qui enlève les cellules immatures indésirables en provoquant une réaction antigène-anticorps en utilisant les cellules de la suspension cellulaire comme l'antigène. Dans ce but, un anticorps qui réagit spécifiquement avec un antigène d'histocompatibilité particulier est ajouté à la suspension de cellules qui provient du procédé chromatographique d'affinité sur colonne à deux étapes. La préparation d'anticorps à ajouter à la suspension de cellules est choisie de façon à être capable de réagir avec les cellules qui présentent des antigènes d'histocompatibilité spécifiques des lymphocytes non désirés contenus dans la suspension de cellules. Comme résultat de la réaction antigène-anticorps ainsi provoquée entre la préparation d'anticorps et les cellules présentant ces antigènes d'histocompatibilité, des complexes antigènes-anticorps sont formés par les molécules d'anticorps liées avec les cellules présentant les antigènes d'histocompatibilité. Aux complexes antigènes-anticorps on ajoute un sérum sanguin approprié tel que, typiquement, le sérum de lapin de sorte que le complément contenu dans le sérum de lapin se lie aux complexes antigènes-anticorps et détruise les cellules présentant les antigènes d'histocompatibilité spécifiques des lymphocytes non désirés. Le résultat est que seules les cellules présentant une activité antigénique de surface négative vis à vis des antigènes d'histocompatibilité, peuvent survivre dans la suspension de cellules résultantes. Il sera évident que ces cellules sont essentiellement des cellules mémoire. immmunitaires. Lorsqu'une souris est utilisée comme individu sensibilisé immunitairement, l'antigène la associé à la région I) peut être utilisé comme l'antigène d'histocompatibilité dans la réaction de production des complexes antigènes-anticorps. Dans ce cas, on ajoute l'anticorps monoclonal anti-antigène la à la suspension de cellules pour former les complexes antigènes-anticorps pour la liaison des molécules d'antigènes la avec les cellules présentant une activité antigénique la positive. Un sérum sanguin approprié est ajouté à ces complexes antigènes- anticorps de sorte que le complément du sérum se lie aux complexes antigènes-anticorps. Les cellules présentant une activité antigénique la positive sont ainsi détruites et, par conséquent, seules les cellules présentant une activité antigénique Ia négative peuvent persister dans la suspension de cellules résultantes. On peut noter que l'antigène la de la souris correspond à l'antigène d'histocompatibilité HLA- D (ou HLA-DR) chez l'homme. La suspension de cellules obtenue à cette étape consiste en des cellules qui présentent une activité antigénique de surface négative contre les antigènes d'histocompatibilité spécifiques des lymphocytes non désirés et qui sont constituées essentiellement de cellules mémoire immunitaires. A cette suspension de cellules, on ajoute ensuite une préparation d'anticorps contenant typiquement un anticorps de rat réagissant avec les antigènes de surface spécifiques des cellules mémoire immunitaires. Des couches d'anticorps de rat se forment sur les molécules d'antigènes de surface pour produire des complexes antigènes-anticorps avec l'anticorps de rat dressés contre les molécules d'antigène spécifiques des cellules mémoire immunitaires. A ces cellules mémoire immunitaires prélevées au moyen des réactions antigène-anticorps et de fixation du complément on ajoute ensuite un anticorps, tel que par exemple l'anticorps de rat, qui est particulièrement réactif avec les antigènes de surface spécifiques des cellules mémoire immunitaires. Une couche d'anticorps de rat est donc formée sur l'antigène de surface de chaque cellule mémoire immunitaire. Séparément de la suspension de cellules mémoire immunitaires ainsi obtenue, on prépare un mélange d'anticorps IgG (immunoglobines gamma) anti-rat à partir d'un sérum IgG anti-rat approprié. La préparation d'anticorps IgG anti-rat est appliquée sur la surface interne d'un récipient en verre, dans lequel on introduit la suspension de cellules contenant les cellules mémoire immunitaires pour obtenir la réaction avec l'anticorps IgG anti-rat fixé au récipient. L'anticorps IgG anti-rat réagit avec l'anticorps de rat enveloppant l'antigène de surface présent sur chaque cellule mémoire immunitaire et, par conséquent, joue le rôle de l'antigène dans la réaction antigène-anticorps qui se produit entre l'anticorps IgG anti-rat et l'anticorps de rat. Il en résulte que chacune des cellules qui a lié l'anticorps de rat à son antigène de surface va adhérer à la surface interne du récipient. Les cellules qui n'ont pas adhéré à la surface interne du récipient.sont apparemment dépourvues de la capacité de se lier à l'anticorps IgG antirat sur la surface du récipient et sont donc considérées comme n'ayant pas d'antigènes de surface pour former des complexes antigènes-anticorps. Ceci signifie que les cellules qui n'adhèrent pas à la surface du récipient sont essentiellement d'autres cellules que les cellules mémoire immunitaires et peuvent être éliminées du récipient comme inutiles. Selon un procédé de la présente invention, seules les cellules fixées sur la surface interne du récipient et considérées comme étant des cellules mémoire immunitaires sont prélevées comme des cellules utiles. La suspension de cellules contenant ces cellules utiles est appelée ici suspension des cellules mémoire immunitaires au premier stade. Des exemples connus d'antigènes d'histocompatibilité spécifiques des cellules mémoire immunitaires de souris comprennent lés antigènes Thyl, Lytl, Lyt2, et Lyt3. Des expériences ont montré que les cellules contenues dans la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade représentent approximativement 0,1 % des cellules dans la suspension de cellules issues de la chromatographie d'affinité sur colonne en deux étapes. Les résultats de ces expériences indiquent de plus que la mémoire immunitaire que présentent ces cellules dans la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade est transférée presque parfaitement à un individu non immunisé lorsque la suspension de cellules contient au moins 103 cellules mémoire immunitaires. Selon un second aspect remarquable de la présente invention, des cellules mémoire immunitaires sont cultivées avec efficacité à partir des cellules obtenues sous forme de suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade. Des cellules mémoire immunitaires peuvent donc être cultivées et sous-cultivées successivement pendant plusieurs générations pour établir une lignée continue de cellules qui aboutit à des cellules mémoire immunitaires "de première génération" à partir d'un individu sensibilisé immunitairement. Pour cultiver des cellules ou des cellules - mémoire immunitaires "de seconde génération" à partir des cellules mémoire immunitaires de première génération, des cellules diploïdes normales sont d'abord isolées à partir d'une souris syngénique de la souris utilisée comme individu sensibilisé immunitairement. Ces cellules diploïdes normales sont, après multiplication, exposées à une irradiation radioactive telle que, par exemple, les rayons gamma du cobalt 60 inhibant la capacité des cellules de se diviser et se multiplier mais permettent aux cellules de continuer à vivre. Les cellules diploïdes normales dont la capacité de division et de multiplication est ainsi inhibée seront appelées ici cellules diploïdes normales à mitose inhibée. D'autre part, les cellules pathogènes du type qui ont entraîné la maladie contractée par l'individu sensibilisé immunitairement, sont inactivées pour préparer une suspension d'antigènes pathogènes inactivés. Ces cellules pathogènes sont utilisées comme l'antigène du type mémorisé par les cellules mémoire immunitaires fournies sous la forme de la suspension de cellules mémoire immunitaires - au premier stade. Dans ce but, ces cellules pathogènes sont prélevées chez un individu qui est en train de développer la maladie provoquée par le pathogène en cause et mises en suspension dans un milieu de culture; la suspension de cellules résultantes est soumise à une irradiation électromagnétique ou radioactive avec par exemple des rayons ultra-violets ou des rayons gamma du cobalt 60. Les cellules diploïdes normales à mitose inhibée sont ensuite ajoutées à une suspension de cellules mémoire immmunitaires au premier stade. A ce mélange on ajoute ensuite une suspension d'antigène pathogène inactive. Le mélange résultant est incubé pour favoriser la multiplication des cellules 11 mémoire immunitaires dans la suspension de façon à donner, de ce fait, une suspension de cellules mémoire immunitaires au second stade. On peut noter que cette suspension des cellules mémoire immunitaires au second stade est le produit de la culture primaire des cellules mémoire immunitaires de première génération séparées à partir de l'individu sensibilisé immunitairement. Les cellules mémoire immunitaires de génération suivante peuvent être facilement sous-cultivées lorsque la suspension de cellules mémoire immunitaires au second stade est traitée selon une manière similaire à celle utilisée pour la culture primaire de cellules à partir de la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade. Ainsi, des cellules mémoires immunitaires de la troisième génération peuvent être obtenues au moyen du mélange résultant incubé dans des conditions semblables à celles utilisées pour la culture des cellules mémoire immunitaires de seconde génération. Les cellules mémoire immunitaires selon la présente invention peuvent être ainsi facilement cultivées d'une génération à une autre pour établir une souche de cellules mémoire immunitaires avec une bonne efficacité en suivant de manière répétée une procédure semblable à celle utilisée pour la culture de cellules mémoire immunitaires de seconde génération. Selon les résultats des expériences réalisées par l'inventeur, les cellules mémoire immunitaires selon la présente invention se multiplient à un rythme qui, en terme de nombre de cellules, augmente approximativement d'un facteur trois pendant cinq jours d'incubation depuis le début de la culture des cellules obtenues par la culture primaire. Un tel rythme de multiplication des cellules assure la création d'une lignée établie de cellules mémoire immunitaires et la préparation de telles cellules de manière stable et économique sur une base quantitative. On pourra noter en outre que les cellules mémoire immunitaires de la seconde génération apparaissent généralement de forme globulaire et sont approximativement trois fois plus larges que les cellules mémoire immunitaires de la première génération, quand on les observe au microscope. On peut ajouter que les cellules mémoire immunitaires de seconde génération présentent des noyaux qui sont presque tous de plus grande taille que ceux des cellules mémoire immunitaires de première génération, et des molécules d'antigènes capsulaires qui sont largement identiques à celles des cellules mémoire immunitaires de première génération. Le procédé selon la présente invention peut être mis en oeuvre de différentes façons tout en restant du domaine de la présente invention. Un mode de réalisation préféré parmi ces diverses possibilités est décrit dans l'exemple suivant mais celui-ci ne limite pas la portée de l'invention. EXEMPLE (1) Séparation des cellules mémoire immunitaires de l'organisme: On utilise une souris guérie de et sensibilisée immunologiquement contre la salmonellose comme individu sensibilisé immunitairement. Il sera cependant évident que, si on veut, une souris immunisée contre toute maladie infectieuse bactérienne ou guérie d'une maladie infectieuse virale ou d'un cancer ou de toute autre tumeur maligne peut être utilisée en remplacement de l'individu sensibilisé immunitairement qu'on a choisi d'utiliser ici. Préparation de la suspension de cellules initiales (1-1) On prélève le sang périphérique dans le coeur de la souris pour être utilisé comme matière de départ. Le sang prélevé est dilué dans cinq fois le même volume de solution de Hanks de façon à dissocier les aggrégats en une suspension de cellules isolées, puis centrifugé à 200 t.p.m. pendant 15 minutes à une température de 4 C. On sépare une peau superficielle (connue sous le nom de "buffy coat") formée par le surnageant, de la préparation résultante, du reste de cette préparation en aspirant délicatement ce surnageant. (1-2) La fraction de peau superficielle contenant dans une large proportion des leucocytes est à nouveau diluée dans cinq fois son volume de solution de Hanks. La suspension de cellules résultantes est centrifugée à 2000 t.p.m pendant 15 minutes, à une température de 4 C, et on prélève ensuite le surnageant. La suspension de cellules ainsi obtenue est à nouveau centrifugée en deux étapes, chacune dans des conditions semblables à celles utilisées pour l'étape de centrifugation la précédant immédiatement. Le surnageant formé à la surface de la suspension de cellules, produit pendant chacune des deux étapes de centrifugation, est prélevé à la fin de chaque étape de centrifugation. A ces cellules qui ont été lavées lors des trois étapes de centrifugation, chacune suivie par le prélèvement du surnageant, on ajoute une solution de Htanks dans une proportion donnant une densité cellulaire de 4 x 107 cellules/ml et contenant 5 % en volume de sérum fétal de veau. La suspension de cellules obtenue à ce stade du procédé sera ci-dessous appelée "suspension initiale de cellules". (1-3) A la place du sang périphérique, on peut utiliser si on veut le tissu de la rate d'un individu sensibilisé immunitairement. Lorsqu'on utilise le tissu de la rate d'une souris comme matière de départ, on excise un prélèvement du tissu de la rate de la souris et on le presse sur un tamis en acier présentant des trous du type par exemple de l'écran standard de Tyler format n 100. Les cellules qui passent au travers des trous d'un tel tamis en acier sont dispersées dans un volume approprié de solution de Hanks et peuvent ensuite subir le même traitement que celui de la suspension de cellules préparée à partir du sang périphérique de la souris. Ainsi, la suspension de cellules contenant des lymphocytes dérivés de la rate peut subir le même traitement que la suspension de cellules préparée à partir du sang périphérique de la souris. Séparation des cellules T (1-4) On dispose la suspension de cellules initiales préparée à partir du sang périphérique de la souris sur une colonne en laine de verre comprenant 10 g de 14 2646778 laine de verre disposés dans un tube de verre vertical (d'un diamètre intérieur de 20 mm et d'une longueur de 100 mm), puis on ajoute de la solution de Hanks contenant 5 % en volume de sérum fétai de veau. On chauffe ensuite la suspension de cellules dans la colonne à une température de 37 C pendant 45 minutes pour l'incubation des cellules de la suspension Après l'incubation on laisse couler la suspension de cellules goutte à goutte au travers de la colonne en ajoutant continuellement de la solution de Hanks de la même composition et maintenue à une température de 37 C.La suspension de cellules éluéesde la colonne est prélevée dans un tube à centrifuger. (1-5) Comme on l'a compris dans ce qui précède on observe en effet que les cellules contenues dans la suspension de cellules résultant de la chromatographie d'affinité sur colonne de laine de verre, sont constituées essentiellement de cellules T et B. Les cellules du type qui sont séparées des cellules T et B et retenues dans la colonne sont des macrophages et des leucocytes. (1-6) Des expériences ont été conduites avec la suspension de cellulesprélevée par le procédé chromatographique d'affinité sur colonne de laine de verre. Les résultats des expériences montrent que les cellules T et B séparées par la chromatographie représentent environ 30 % de la quantité totale des cellules qui étaient contenues dans la suspension initiale de cellules injectées dans la colonne. (1-7) Ultérieurement à la chromatographie d'affinité sur colonne de laine de verre, on soumet la suspension de cellules prélevée dans le tube à centrifuger à une centrifugation à 2000 t.p.m pendant 15 minutes à une température de 4 C, puis on -prélève le surnageant de la suspension résultante. A la suspension de cellules ainsi obtenue, on ajoute une solution de Hanks en proportion donnant 4 x 107 cellules/ml et contenant 5 % en volume de sérum fétal de veau. On injecte la préparation résultante 2646778 dans une colonne de laine de nylon comprenant 10 g de laine de nylon (produite par Fenwal Laboratories) disposée dans un tube de verre vertical (diamètre intérieur 20 m, longueur mm), puis on ajoute de la solution de Hanks contenant 5 % en volume de sérum fétal de veau. On chauffe la suspension de cellules dans la colonne à une température de 37 C pendant 45 minutes pour l'incubation des cellules contenues dans la suspension. Après l'incubation on laisse couler la suspension de cellules goutte à goutte au travers de la colonne en ajoutant continuellement de la solution de Hanks de la même composition et maintenue à une température de 37 C. La suspension de cellules éluée de la colonne est prélevée dans un tube à centrifuger. (1-8) Des expériences ont été réalisées avec la suspension de cellules prélevée à la sortie de la colonne chromatographique d'affinité sur laine de nylon; les résultats montrent que les cellules séparées par la chromatographie d'affinité sur colonne de laine de nylon représentent environ 10 % de la quantité totale de cellules qui étaient contenues dans la suspension initiale de cellules injectée sur la colonne de laine de verre. (1-9) Les cellules contenues dans la suspension de cellules résultant du procédé chromatographique à deux phases contiennent essentiellement des cellules T qui, selon les résultats des essais réalisés, représentent environ 95 % de la population de cellules totales contenues dans la suspension. La plupart des cellules, autres que les cellules T qui étaient contenues dans la suspension initiale de cellules avant la chromatographie à deux phases sont considérées comme étant adsorbées partiellement par les fibres de laine de verre et partiellement par les fibres de laine de nylon. Cependant, comme on l'a noté précédemment, ia suspension dg cellules obtenue par le procédé chromatographique à deux phases contient encore des lymphocytes et d'autres cellules non désirées. Purification des cellules T (1-10) Dans le but d'éliminer ces cellules indésirables on soumet la suspension de cellules prélevée dans le tube à centrifuger après la chromatographie d'affinité sur colonne de laine de nylon, à une centrifugation à 2000 t.p.m pendant 15 mn à une température de 4 C; puis on prélève le surnageant. On ajoute à la suspension de cellules résultante un milieu de culture dans une proportion qui aboutit à une densité cellulaire de 8 x 107 cellules/ml. Le milieu de culture est un mélange de "Milieu 199" contenant 2 % en volume de sérum fétal de veau. Le milieu de culture présentant une telle composition sera ensuite appelé "milieu A". (1-11) On ajoute ensuite à une partie en volume de la suspension de cellules ainsi obtenue, deux parties en volume d'une préparation d'anticorps monoclonal anti- antigène Ia (fabriquée par Cedarlane Laboratories Ltd) diluée dans 30 fois le même volume de "milieu A" et une partie en volume de sérum de lapin diluée dans deux fois le même volume de "milieu A". On chauffe le mélange de ces trois préparations pour obtenir leur interaction à une température de 37 C pendant 30 minutes. (1-12) Il résulte de la réaction qui se produit dans ce mélange la formation des complexes antigènes- anticorps, par liaison des anticorps monoclonaux anti-Ia sur des cellules présentant une activité antigénique Ia positive. On ajoute aux complexes ainsi formés un sérum de lapin de sorte que le complément de sérum de lapin se lie aux complexes antigènes-anticorps. Les cellules présentant une activité antigénique Ia positive sont détruites par le sérum de lapin et, en conséquence, seules les cellules présentant une activité antigénique la négative peuvent survivre. Cette suspension de cellules, contenant une population concentrée de cellules mémoire immunitaires, subit une centrifugation à 2000 t.p.m pendant 15 mn à une température de 4 C de façon à prélever les cellules mémoire immunitaires. (1-13) La suspension de cellules résultante est ensuite centrifugée en trois étapes successives, chacune à 17 2646778 2000 t.p.m pendant 15 mn à une température de 4 C en "milieu A". La suspension de cellules obtenue à la fin de ces trois étapes de centrifugation est diluée dans le "milieu A" dans une proportion donnant une densité cellulaire de 8 x 107 cellules/ml. (1-14) En plus de cette suspension de cellules une suspension d'anticorps de rat anti-cellules mémoire immunitaires est préparée selon un protocole qui sera décrit chapitre 3 et est diluée dans 5 fois le même volume du "milieu A". On mélange un volume égal de la suspension d'anticorps de rat et de la suspension de cellules, préparées chacune comme décrit ci-dessus et on laisse la réaction se dérouler à une température de 4 C pendant 60 minutes. Comme résultat de cette réaction, l'anticorps de rat se lie aux molécules d'antigènes spécifiques des cellules mémoire immunitaires. Des complexes antigènes- anticorps se forment entre les couches d'anticorps de rat formées sur les molécules d'antigènes spécifiques des cellules mémoire immunitaires. La suspension de cellules contenant les cellules mémoire immunitaires portant les complexes antigènes-anticorps ainsi formés est soumise à une centrifugation à 2000 t.p.m pendant 15 mn à une température de 4 C en milieu "A". La centrifugation est poursuivie sur la suspension de cellules résultante, en trois étapes successives, chacune dans des conditions semblables à celles utilisées pour l'étape précédente de la centrifugation. A ces cellules obtenues après les étapes de centrifugation, le "milieu A" est ajouté dans des proportions telles que la densité cellulaire est de 8 x 106 cellules/ml. (1-15) Outre cette suspension de cellules mémoire immunitaires, on réalise une préparation d'anticorps IgG de chèvre, anti-rat. Dans ce but, une solution contenant ml de sérum de chèvre IgG anti-rat est diluée avec trente cinq fois le même volume de "milieu A" dans une boite de Pétri en plastique stérile (fabriquée par Becton Dickinson Co., Ltd.) mesurant 100 mm de diamètre intérieur et on laisse reposer une-nuit à 4 C. L'excès d'antisérum est ensuite éliminé de la boîte par lavage et on laisse subsister l'anticorps IgG de chèvre, anti-ratr sous forme d'une mince couche liquide recouvrant la surface interne de la boite. (1-16) On verse la suspension de cellules préparée comme décrit ci-dessus. dans la boîte présentant la couche liquide d'anticorps IgG, de chèvre, anti-rat. La boite est ensuite maintenue horizontalement et ne doit pas être bougée pendant 60 minutes. Sur ce, les cellules qui n'ont pas adhéré sur la couche d'anticorps recouvrant la boîte sont enlevées et éliminées de la boite en lui appliquant de légères vibrations. Comme il a été expliqué, les cellules qui ne se sont pas liées à la couche d'anticorps IgG de chèvrer anti-rat ne présentent pas de complexes antigènes-anticorps qui autrement se seraient formés entre l'anticorps de rat et les antigènes spécifiques des cellules mémoire immunitaires. La plupart des cellules flottant au-dessus de la couche d'anticorps IgG de chèvre, anti-rat présente sur la surface de la boite sont considérées comme n'étant pas des cellules mémoire immunitaires. (1-17) On rince ensuite la surface intérieure de la boite en trois étapes, en utilisant à chacune un mélange du milieu RPMI 1640 contenant 10 % en volume de sérum fétal de veau, et ensuite on pulvérise ce même milieu sur la surface intérieure de la boite. Les cellules qui ont adhéré à la boite sont détachées de la boite et sont prélevées comme suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade selon le procédé de la présente invention. (1-18) Les cellules prélevées à cette étape du procédé représentent environ 0,1 % des cellules qui étaient contenues dans la suspension de cellules provenant de la chromatographie d'affinité sur colonne en deux étapes. Des expériences avec cette suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade montrent que les cellules représentant 98 % des cellules contenues dans la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade: (1) appartiennent à la famille des petits lymphocytes; (2) présentent une activité antigénique positive par rapport aux molécules d'antigènes spécifiques des cellules mémoire immunitaires, et (3) présentent une activité antigénique positive par rapport aux antigènes Thyl, Lytl, Lyt2 et Lyt3 et une activité antigénique négative par rapport à l'antigène Ia. (1-19) On a réalisé en outre des expériences dans lesquelles les cellules mémoire immunitaires sous la forme de la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade sont introduites chez un individu non immunisé syngénique de la souris utilisée comme individu sensibilisé immunitairement. Les résultats des expériences montrent que la mémoire immunitaire possédée par les cellules mémoire immunitaires est transférée parfaitement au récepteur, c'est-à-dire avec une probabilité de 100 % lorsque la suspension de cellules mémoire immunitaires contient au moins 103 cellules mémoire immunitaires. D'autres expériences ont été réalisées avec la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade, expériences dans lesquelles on irradie les individus, dans lesquels des cellules mémoire immunitaires ont été introduites, avec des rayons gamma du cobalt 60. Les résultats de ces expériences montrent que la mémoire immunitaire, que chacun de ces individus avait acquise, reste inaltérée lorsque l'individu est exposé aux rayons gamma du cobalt 60 à une dose de 600 roentgens au moins, mais est détruite quand il est soumis à une irradiation de plus de 1100 roentgens. Ceci démontre que les cellules mémoire immunitaires contenues dans la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade appartiennent à une famille des cellules qui-sont résistantes, de façon significative, aux radiations radioactives. (2) Culture des cellules pour l'établissement de lignée cellulaireOn cultie ensuite des cellules parti des On cultive ensuite des cellules à partir des cellules mémoire immunitaires obtenues sous la forme de la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade. Culture des cellules normales svngénicaues (2-1) On sépare des cellules diploïdes normales sous la forme d'une suspension de cellules à partir d'une souris syngénique de la souris utilisée comme individu sensibilisé immmunitairement et on les met en culture dans une boite de Pétri stérile. Approximativement, lorsqu'on s'apperçoit qu'une monocouche de cellules s'est formée dans la boite, ces cellules Sont exposées aux rayons gamma du cobalt 60 à une dose de 2000 roentgens pour inhiber la capacité des cellules à se diviser et à se multiplier. Préparation d'ant aène pathoaène inactivé (2-2) Des cellules pathogènes du type de celles qui ont provoqué la maladie chez l'individu sensibilisé immunitairement, sont inactivées pour produire une suspension d'antigène pathogène inactive. Dans ce but on ajoute des cellules bactériennes de Salmonella dans un milieu de culture, dans une proportion qui donne -une densité cellulaire de 107 cellules/ml. Le milieu de culture consiste en un mélange du milieu RPMI 1640 contenant 10 % en volume de sérum fétal de veau, 2 g/l d'hydrogénocarbonate de sodium (NaHCO3), 0,11 g/1 de pyruvate de sodium (NaOOCCOCCH3), et 0,1 % en volume d'oléate de levure. Un milieu de culture présentant cette composition sera ci- dessous appelé "milieu B'" (2-3) La suspension contenant les cellules bactériennes de Salmonella dispersées dans "milieu B" est irradiée aux rayons ultraviolets à une intensité de 3,6 x 103 erg/cm2.s pendant 5 mn afin d'inactiver les bactéries. L'utilisation du "milieu B" dans le procédé d'inactivation est simplement un exemple et, au même titre, tout autre milieu présentant une composition souhaitée peut être utilisé en substitution du milieu B. (2-4) Lorsqu'un individu sensibilisé immunitairement après avoir contracté une maladie infectieuse virale est utilisé pour la préparation de cellules mémoire immunitaires, des particules de virus peuvent être dispersées dans le "milieu B" selon une proportion qui donne une densité de 109particules/ml. (2.5) Si on désire utiliser des cellules de tumeur telles que des cellules de cancer, on excise un fragment de tissu comprenant la tumeur du corps d'un individu et on le coupe en petits morceaux. On immerge les fragments du tissu tumoral dans une solution saline physiologique, tamponnée au phosphate, contenant 0,02 % en volume d'acide éthylène diamine tétracétique (EDTA) et on agite pendant 60 minutes à une température de 4 C. Les fragments du tissu résultants peuvent être pressés contre un tamis en acier comportant des trous conformément par exemple à l'écran standard de Tyler n 100. On force le passage de la suspension de cellules au travers du tamis et ensuite on la centrifuge' à une vitesse de 700 à 800 tpm pendant 5 mn à une température de 4 C. Les cellules de tumeur récoltées ainsi sont dispersées dans le milieu B selon une proportion telle que la densité cellulaire est de 2 x 103 cellules/ml; la suspension de cellules résultante est exposée aux rayons gamma du cobalt 60 à une dose de 2000 roentgens de façon à produire une suspension d'antigène pathogène inactivée équivalent à celle utilisée dans cet exemple. Il paraît évident que lorsqu'une suspension d'antigène pathogène inactivée doit être préparée à partir d'un tissu de cellules de tumeur, tout milieu de culture désiré autre que le milieu B peut être utilisé pour la manipulation des cellules extraites du tissu. Culture des cellules mémoire immunitaires. (2.6) On ajoute à la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade qui a été préparée comme décrit ci-dessus, le milieu B selon des proportions donnant une densité cellulaire de 8 x 105 cellules/ml. La suspension résultante est versée lentement dans la boîte contenant les cellules à mitose inhibée isolées à partir d'une souris syngénique. Le volume de la suspension de - cellules ainsi ajouté aux cellules à mitose inhibée peut être choisi en fonction de la taille de la boîte utilisée et est choisi de 5 ml pour une boite d'un diamètre intérieur de mm. Si-une boite de Petri présentant un autre diamètre, par exemple 60 mm, doit être utilisée, il est judicieux d'utiliser 2,5 ml de la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade dans le boite. (2.7) On ajoute un volume égal de la suspension d'antigène pathogène inactive, préparé comme indiqué ci- dessus au mélange de la suspension de cellules mémoire immunitaires et de cellules à mitose inhibée fixées sur la botte. L'ensemble résultant est incubé à une température de 37 C dans une atmosphère contenant 5% de dioxyde de carbone pour favoriser la multiplication des cellules mémoire immunitaires. La préparation résultant de cette manipulation est la suspension de cellules mémoire immunitaires préparée selon le procédé de la présente invention. (2.8) Lorsque la suspension de cellules mémoire immunitaires au second stade est réalisée de façon analogue à celle de la culture primaire à partir de la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade, on peut facilement sous-cultiver des cellules mémoire immunitaires d'une génération ultérieure. Dans ce but, la suspension de cellules mémoire immunitaires au second stade peut être diluée dans le "milieu B" selon une proportion donnant une densité cellulaire de 8 x 105 cellules/ml. On mélange la suspension de cellules résultante avec des cellules à mitose inhibée de l'individu syngénique avec la suspension d'antigène pathogène inactivé préparée comme décrit précédemment. Des cellules mémoire immunitaires de la génération ultérieure, c'est-à-dire la troisième, peuvent ainsi être obtenues quand le mélange résultant est incubé et centrifugé dans les conditions spécifiées plus haut. Comme il a été noté, les expériences réalisées par l'inventeur ont révélé que, pendant la culture des cellules mémoire immunitaires dérivant des cellules obtenues par la culture primaire, les cellules mémoire immunitaires se multiplient à un rythme qui augmente d'un facteur d'environ 3 pour 5 jours d'incubation. (3) Effet préventif des cellules mémoires immunitaires. On réalise des expériences avec des suspensions de cellules mémoire immunitaires préparées chacune selon un procédé de la présente invention pour tester les effets préventifs des cellules sur la maladie provoquée par divers pathogènes. Les suspensions de cellules utilisées pour cette expérience incluent celles constituées par la suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade contenant des cellules mémoire immunitaires isolées d'un individu sensibilisé immunitairement et celles constituées par la suspension de cellules mémoire immunitaires au second stade contenant des cellules qui sont dérivées des cellules mémoire immunitaires au premier stade. Les suspensions de cellules utilisées pour les essais contiennent différentes quantités de cellules mémoire immunitaires dans une plage comprise entre 102 et 104. Ces suspensions de cellules sont inoculées dans des souris non immunisées comme individus récepteurs, et ensuite ces récepteurs sont contaminés par différents pathogènes pour évaluer le pourcentage d'effets préventifs sur la maladie. Les pathogènes utilisés dans ces expériences comprennent les cellules cancéreuses, les bactéries Salmonella, Corynebacterum, Pseudmonas, Pasteurella, Streptococcus, et les virus Electromelia et Sendai. Ces pathogènes bactériens, viraux ou cellulaires cancéreux sont introduits chez les individus en quantités choisies pour provoquer un taux d'incidence de maladie de % pour chacun des pathogènes. Les résultats de ces expériences sont présentés dans le tableau suivant: TAB L E A U Pathogènes Nbre de cellules Effet préventif Cellules cancéreuses 1 x 104 100% 1 x 103 100% 6 x 102 70% 3 x102 42% 1 x 102 34% Salmonella 1 x 104 100% 1 x 103 100% 6 x 102 68% 3 x 102 34% 1 x102 20% Corvnebacterium 1 x 10 100% 1 x 103 100% 6 x 102 48% 3 x 102 26% 1 x102 14% Pseudmonas 1 x 14 100% 1 x 103 100% 6 x 102 41% 3 x 102 23% 1 x 102 11% Pasteurella 1 x 104 100% 1 x 103 100% 6 x 102 78% 3 x102 53% 1 x102 35% StreDtococcus 1 x 104 100% i x 10 3 100% 6 x 102 44% 3 x 102 31% 1 x 102 17% virus ectromelia 1 x 104 100% 1 x 103 100% 6 x 102 51% 3 x102 27% 1 x 102 13% virus Sendai 1 x 10 100% 1 x 103 100% 6 x 10 88% 3 x o102 63% 1 x 102 29%.. Comme on le voit à l'analyse de ces résultats, la mémoire iummunitaire est transférée avec succès à l'individu non immunisé, avec une probabilité de 100 % lorsque la suspension de cellules contient 103 cellules mémoire immunitaires ou plus. Les résultats de ces expériences montrent en outre que des degrés considérablement élevés de l'effet préventif de la maladie peuvent être obtenus lorsqu'une suspension de cellules contenant moins de 103 cellules mémoire immunitaires est introduite chez l'individu récepteur. Par exemple, quand une suspension de cellules mémoire immunitaires contenant moins de 6 x 102 cellules mémoire immunitaires est introduite chez un individu non immunisé, la mémoire immunitaire est transférée à l'individu récepteur avec une probabilité d'environ 50 % et, si une suspension de cellules mémoire immunitaires contenant moins de 3 x 102 cellules mémoire immunitaires est utilisée, la mémoire immunitaire est transférée au récepteur avec une probabilité d'environ 30 %. (4) Préparation d'anticor=s de rat anti-cellule mémoire. Une description sera faite ci-après du procédé de préparation de la suspension d'anticorps de rat anti- cellule mémoire immunitaire utilisée dans les étapes du procédé décrites au paragraphe 1.14. On dilue la suspension de cellules mémoire immunitaires, préparée comme décrit au paragraphe 1.13, dans une solution saline physiologique, tamponnée au phosphate, et on centrifuge la préparation résultante sous des conditions appropriées. On dilue, après lavage la suspension de cellules obtenue après les trois étapes de la centrifugation, à nouveau avec une solution saline identique, dans une proportion donnant une densité cellulaire de 108 cellules/ml. On injecte une suspension de 0,25 ml des cellules mémoire immunitaires résultantes dans le tissu souscutané de la région fémorale d'une série de rats femelles (de l'espèce Wistor). Après dix et vingt jours respectivement, on réinjecte des fractions semblables de cellules dans le tissu sous-cutané fémoral des mêmes rats. La suspension de cellules, dilée dans une solution saline physiologique, tamponnée au phosphate, et centrifugée en trois étapes successives comme décrit ci- dessus, est à nouveau diluée dans la même solution saline physiologique selon une proportion cette fois choisie pour obtenir une densité cellulaire de 109 cellules/ml. On injecte une fraction de 0,25 ml dans la cavité abdominale de chaque rat femelle 40 jours après la première injection de cellules. On mélange ensuite le volume total du sang de chacun des rats, 50 à 60 jours après la première injection de cellules aux rats. On obtient cinq à six ml de sérum de sang à partir de chaque rat. D'un autre côté, on excise un prélèvement de - tissu de rate à partir d'un souriceau nouveau-né syngénique de la souris à partir de laquelle les cellules mémoire immunitaires ont été prélevées. Le.prélèvement du tissu de la rate est forcé au travers d'un tamis en acier et les cellules de la-rate passées au travers du tamis sont dispersés dans la solution saline physiologique tamponnée au phosphate. La suspension de cellules ainsi préparée est centrifugée en trois étapes successives et, ensuite on ajoute environ 1,5 partie en volume du sérum du rat préparé comme décrit ci-dessuss à la population résultante de cellules, et on agite minutieusement. On laisse reposer la préparation ainsi obtenue dans de l'eau glacée pendant 60 mn, sous agitation toutes les 15 minutes puis on centrifuge -la préparation dans des conditions appropriées. On prélève le surnageant à partir de la préparation résultante et on le dilue dans une solution saline physiologique tamponnée au phosphate, et on le trante ensuite comme la suspension de cellules dérivées du tissu de rate. Le surnageant est ensuite prélevé de la préparation finalement obtenue ainsi et est utilisé comme la préparation d'anticorps de rat anticellules mémoire immunitaires dans les étapes décrites ci-dessus au paragraphe 1-4. REVENDICATIONS 1.- Procédé de préparation d'une suspension de cellules mémoire immunitaires caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes: séparation de cellules consistant essentiellement en cellules T à partir des cellules prélevées chez un individu sensibilisé immunitairement par une immunisation contre un pathogène particulier, - addition aux cellules séparées d'un anticorps réagissant à un antigène d'histocompatibilité spécifique d'une espèce définie de cellules pour former les complexes antigènes-anticorps avec lesdits anticorps et lesdites cellules séparées présentant lesdits antigènes d 'histocompatibilité, - addition d'un sérum sanguin aux cellules contenant lesdits complexes antigène-anticorps pour provoquer la liaison du complément présent dans le sérum sanguin auxdits complexes antigène-anticorps et de ce fait la destruction des cellules présentant lesdits antigènes d'histocompatibilité et la survie des cellules restantes. - addition aux cellules persistantes d'un anticorps réagissant à un antigène d'histocompatibilité spécifique des cellules mémoire immunitaires, et - séparation à partir des cellules résultantes, des cellules qui présentent les antigènes d'histocompatibilité spécifiques des cellules mémoire immunitaires. 2.- Procédé selon la revendication 1, dans lequel les cellules qui présentent ledit antigène d'histocompatibilité spécifique des cellules mémoire immunitaires sont séparées sous la forme d'une suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade, à partir des cellules qui ont résulté de l'addition dudit anticorps auxdites cellules persistantes, caractérisé en ce qu'il comporte en outre les étapes suivantes: - - préparation de cellules normales syngéniques des cellules prélevées à partir dudit individu sensibilisé immunitairement, exposition desdites cellules normales à une irradiation radioactive pour inhiber leur capacité à se diviser, - préparation de cellules pathogènes à partir d'un agent pathogène de type identique audit pathogène particulier, - - inactivation des cellules séparées à partir du pathogène identique audit pathogène particulier, - préparation d'un mélange de ladite suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade des cellules normales dont la capacité de division est inhibée et des cellules inactivées, et incubation dudit mélange pour permettre aux cellules de ladite suspension de cellules mémoire immunitaires au premier stade de se multiplier et de former une suspension de cellules mémoire immunitaires au second stade. 3.- Procédé selon l'une des revendications 1 et 2 caractérisé en ce que les cellules présentant les antigènes d'histocompatibilité spécifiques des cellules mémoire immunitaires sont séparées par - l'étalement d'une préparation d'anticorps anti-IgG sur une surface pour former une couche de la préparation d'anticorps anti-IgG sur ladite surface, - l'application sur ladite couche d'anticorps de cellules qui ont résulté de l'addition desdites molécules d'anticorps sur lesdites cellules persistantes de sorte que les cellules présentant lesdits antigènes d'histocompatibilité spécifiques des cellules mémoire immunitaires adhèrent à ladite surface, et - l'enlèvement de ladite surface des cellules qui y ont adhéré. 4.- Procédé selon l'une des revendications 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que lesdites cellules, consistant essentiellement en cellules T, sont séparées des cellules prélevées dudit individu sensibilisé úmmunitairement par les étapes suivantes: - traitement des cellules consistant essentiellement en des cellules T par une première étape de chromatographie d'affinité sur colonne utilisant un adsorbant solide de laine de verre et - ensuite traitment des cellules résultantes par une seconde étape de chromatographie d'affinité sur colonne utilisant un adsorbant solide de laine de nylon. 5.- Suspension de cellules mémoire immunitaires caractérisé en ce qu'elle comprend des cellules qui sont prélevées chez un individu sensibilisé immunitairement par immunisation contre un pathogène particulier et qui consistent essentiellement en des cellules T, dans lesquelles les cellules représentant environ 98 % en nombre desdites cellules T contiennent au moins lx103 cellules mémoire immunitaires.