Brevet FR2642972A1 — publié le 19900817

La présente invention concerne des agents pour le diagnostic et le traitement des mélanomes ma- lins et de nouveaux dérivés halogénés aromatiques éventuellement marqués utilisables comme de tels agents. Le mélanome malin est l'une des plus dan- gereuses tumeurs de la peau avec une incidence en augmentation régulière. La survie à 5 ans ne dépasse pas 14Z sauf dans le cas o l'épaisseur de la tumeur est inférieure à 0,76 mm. Dans le cas o la lésion dépasse cette épaisseur, cette tumeur donne des mé- tastases de façon imprévisible et silencieuse. C'est pourquoi on/ recherche actuellement une méthode d'in- vestigation qui permette d'évaluer précocement aussi bien l'extension locale que l'extension à distance de la tumeur. Durant ces dix dernières années, un certain nombre de produits radiopharmaceutiques, retenus,pour leur potentielle affinité pour la mélanine, ont été expérimentés mais peu ont eu un développement clinique satisfaisant. Nous ne citerons que les iodoquinolines, iodométhyltyrosines aujourd'hui abandonnées et le ci- trate de gallium 67 dont les inconvénients sont bien connus: élimination très lente à partir du tractus digestif, localisation tardive et importante dans le foie et le rein pouvant rendre difficile la visuali- sation de la tumeur. Par ailleurs le marquage se fait de façon non spécifique sur les foyers inflammatoires, infectieux ou le tissu tumoral en voie de développe- ment. De nombreuses recherches s'attachent à mon- trer l'utilité des anticorps monoclonaux pour l'immu- noscintigraphie des tumeurs. Les premiers essais ont - été réalisés avec un anticorps.monoclonal marqué 131I dirigé contre la protéine p 97 présente dans la majo- rité des cellules de mélanome humain. Les expérimen- tations chez l'animal, puis l'étude en clinique. ont montré la supériorité de l'utilisation d'un anticorps. dirigé contre un fragment de la protéine p 97, F (a b ')2 par rapport à l'anticorps dirigé contre la pro- téine complète, pour la réalisation des immunoscinti- graphies. Ces anticorps permettent de détecter des mélanomes de taille supérieure à 1,5 cm mais la sen- sibilité est influencée par le site anatomique des tumeurs et par leur teneur en antigènes. La limite majeure de l'immunoscintigraphie reste l'accumulation non spécifique de la radio-activité dans la moelle osseuse, la rate, le foie, le rein. Il parait impé- ratif d'améliorer soit le marquage et/ou la purifi- cation de l'anticorps pour diminuer les activités rénales et hépatiques. Plus récemment l'iodothiouracile marqué par I a été étudié chez des animaux porteurs de tumeurs greffées. Il semble etre un agent prometteur pour la localisation et le traitement du mélanome malin: cependant le marquage de ce composé par synthèse totale n'est pas encore adapté à l'utilisation de 123I. Par ailleurs son incorporation comme pseudo-pré- curseur de la mélanine au cours du processus de bio- synthése peut en limiter l'emploi. Des études préli- minaires menées avec des porphyrines marqués par In ont permis de détecter des -tumeurs greffées chez l'animal. Enfin 123I-IMP a été utilisé pour la détec- tion du mélanome chez l'homme, Une étude comparative avec les anticorps monoclonaux antimélanomes marqués par 11In a montré une sensibilité supérieure de l'im- munoscintigraphie. D'un autre côté les présents auteurs ont décrit des composés benzéniques marqués par 25I décrit des composés benzéniques marqués par I, utilisables en médecine nucléaire pour l'exploration du système nerveux central (Eur. 3. Med. Chem.-Chim. Ther. 1986, 21, N'5, 423-31). On a maintenant trouvé que ces composés ainsi que de nouveaux composés de structure analogue peuvent être utilisés comme traceurs de mélanomes. La présente invention a donc pour objet des agents pour le diagnostic et le traitement des mêla- nomes malins, répondant à la formule générale R Y-(CH2)nN Y 2n \IR2 X dans laquelle X représente un atome d'hydrogène ou d'halogéne. Y représente un groupement Z-CONH-,Z-0-,Z-S(O)- avec ni n1 = 0,1,2 ou 3, Z-SO -NH- ou Z-NHCO-, Z étant une liaison, -CH2- ou - CH -, Ct n est un entier de 2 à 4, et R1 et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène. un groupe alkyle en C1 à C6, aryle ou aralkyle en C6 à C 12' ces composés pouvant être marqués par des radioisoto- 123 125 131 75 77 18 pes choisis parmi 123I, 125I, 131I. Br, Br, F. ou C, ou des isotopes stables choisis parmi C et F, ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharma- ceutiquement acceptables. L'invention concerne plus particulièrement les agents radiopharmaceutiques de formule I dans la- quelle X reprsente 123I, I, ou125 131I, reprsente quelle X représente 1, I, ou I. Y représente 4. Z-CONH- ou Z-SO 2NH-, Z étant une liaison, -CH2--ou - CH - et R et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C1 à C6. Parmi ces agents (I). les composésede for- mule générale II suivante sont nouveaux: X. Y - NH -(CH2)n - N II R2 dans laquelle X représente un atome d'halogène ou un de ses ra- dioisotopes. Y représente un groupe CO ou SO2, n est un entier de 2 à 4, et RI et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C1 à C6 R1 et R2 ne pouvant re- présenter simultanément un groupe éthyle lorsque X est l'iode en para et n = 2. ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharma- ceutiquement acceptables. Les composés de' formule II peuvent être préparés par condensation d'un chlorure d'acide halo- génobenzoique ou -benzénesulfonique de formule x x \. Y1Cl III dans laquelle X1 et Y1 ont la même signification que dans la formule Il. avec une diamine de formule Ni (CH NR RIV 2 2n12 IV dans laquelle n, R1 et R2 ont la même signification que dans la formule II, puis marquage éventuel de la structure (Il) ainsi obtenue par un radioisotope de 123 1 25' 131 75 77 l'halogène X1, notamment 1, 131I 75Br, 77Br ou F. La réaction de condensation entre (III) et (IV) peut être effectuée à température ambiante, dans un solvant neutre tel que le têtrahydrofuranne (THF). La réaction est effectuée de préférence avec un excès de diamine (IV), en particulier d'environ 2 moles de (IV) pour une mole de (III). Les composés de formule II dans laquelle Y = CO peuvent également être préparés par condensation d'un chlorure d'acide halobenzoique (III) avec le par- anitrophénol pour obtenir un ester de formule X \ \ V CO /x -NO v// 2 puis réaction du composé (V) avec une diamine (IV). et enfin marquage éventuel de la structure (II) ainsi obtenue par un radioisotope de X 1' La réaction de condensation de l'acide (III) avec le paranitrophénol peut être effectuée à une tem- pérature de 30 à 50'C, dans un solvant neutre tel que le THF, et en présence d'un accepteur d'acide' (carbo- nate, amine). La réaction entre les composés (V) et (IV) peut être effectuée à température ambiante dans un solvant neutre tel que le THF, de préférence avec un excès de dlamine (IV), en particulier d'environ 2 moles de.(IV) pour une mole de (V). Le marquage de la structure (II) est'effec- tuée par échange en milieu acide entre la molécule iodée non radioactive et un halogénure alcalin radio- actif, par exemple Na I. L'échange peut etre réalisé par chauffage au reflux d'une solution aqueuse du com- posé (II) et de l'halogénure radioactif, acidifiée par exemple par l'acide acétique en présence de sulfate de cuivre. tes exemples suivants illustrent l'inven- tion. EXEMPLE 1: N-(diéthylamino-2-éthyl) iodo-4.benzamide et son chlorhydrate (produit A). a) On laisse réagir une nuit à température ambiante une solution de 20 mM de NN-diéthyl éthyl- ènediamine du commerce avec 10 mM de chlorure d'acide paraiodobenzo que (préparé à partir de 10 mM d'acide paraiodobenzoique et de 10 mM de chlorure de thionyle) dans 50 ml de THF. On évapore le solvant, reprendpar l'eau et extrait au chloroforme. On sèche sur MgSO4,. puis on purifie sur colonne de chromatographie (si- lice; éluant:gradient CHCl 3-EtOH de 52 à 20Z. ou Q CHCl 3-EtOH-Et2NH 92X - 6Z - 22 v/v). Rendement: envi- ron 80Z. Préparation du chlorhydrate Le 'composé A, isolé sous forme base, est solubilisé dans le minimum de chloroforme, et traité par HCl/éther (_û 2N) jusqu'à précipitation totale. On évapore sous vide et lave le chlorhydrate formé à l'éther anhydre, et filtre. F 184-185 'C. IR (pastille KBr,9 cm1: 3220 (NH); 3030 (CH aromatique); 1970 (CH3); 2930 (CH2); 1635 (CO); 1575,1520 (C-NH). 25. H-RMN (solvant: méthanol (04): 1,35 (t, 6H CH3; 3,10-3,53 (m, 6H. CH 2-N-(CHCH 3)2 -); 3.65- 3,90 (m, 2H, CONH-CH2); 7,46-7,93 (m, 4H. aromati- ques). b) marquage par I Méthode 1: Produit A (52 PM) en solution dans 1 ml d'eau. Acide acétique: 250 pl. Sulfate de cuivre: 80 PM. Na 12I. 45 mn à 170'. Hydrolyse (NaOH N). Passage sur "Extrelut" (élution chloroforme}. Eva- poration. Traitement du résidu par HCl, éther. Le produit A est isolé sous forme chlorhydrate. Rendement radiochimique: 95Z. Pureté radiochimique >,98X (CCM, HPLC). Méthode 2: Produit A (26 PM) en solution dans 500 ul de tampon acétate 0, 1 M, pH 4,62. Sulfate de cuivre: 1,26 PM. Na 125I. 45 mn à 120-. CCM, HPLC du milieu -- pureté radiochimique >,97,51 (perte de radioactivité observée Méthode 3: Produit A (26 pM) en solution dans 500 pl de tampon citrate 0, 05 M, pH 4. Sulfate de cuivre: 3 pM. Na 125I. 35 mn à 150'. CCM, HPLC du milieu -- pureté radiochimique}98Z (perte de radio- activité observée EXEMPLE 2: N-(éthylamino-2 éthyl) iodo-4 benzamide et son 'chlo- rhydrate (produit 8). a) p-iodobenzoate de p-nitrophényle On fait réagir une nuit à 40 C 2 mM de p- nitrophénol avec 2 mM de chlorure de l'acide p-iodo- benzoïque, en présence 2 mM de triéthylamine dans 20 ml de THF. On évapore le solvant et reprend le résidu par le chloroforme et lave avec HC11N, puis H20. On sèche sur MgSO 4. On purifie sur colonne de chromato- graphie (silice; éluant CHCl 3-hexane 85/15 v/v). Ren- dement: 90%. b) on fait réagir l'ester précédent (1 mM) avec de la Néthyléthylènediamine du commerce; 2 mM) dans 20 ml de THF pendant 24 h. à température am- biante. On évapore le solvant, reprend par l'eau et extrait au chloroforme. On lave la phase organique avec NaOH1N, puis H20. On sèche sur MgS04, On purifie sur colonne de chromatographie (silice; éluant: CHC1 3-EtOH-Et2NH 92. SZ 21 vfv). On prépare le chlo- 9. rhydrate du composé du titre de la même manière que dans l'exemple 1. F =242-243'C. IR (pastille KBr, cm1): 3280 (NH); 1635 (CO), 1575 (C-NH); 1540 (NH). H-RMN (solvant: DMSO D6 + D20 + CF COOH) 6 2 3 1i,20 (t, 3H, CH 3); 2,83-3,27 (m. 4H, -CH2-NH-CH 2- CH3); 3,43-3,70 (m, 2H, CONH-CH 2) 7,50-7.93 (m, 4H, aromatiques). - 1 25 c) marquage par I Méthode 1: Le protocole utilisé est le même que celui décrit pour le composé A dans l'exemple 1. Rendement radiochimique: 90Z. Pureté radiochimique >98Z. (CCM,HPLC). Méthode 2: Méme protocole que dans 1;exem- ple 1. Pureté radiochimique 97X (CCM). Ces composés ainsi que d'autres dérivés de formule II préparés de manière analogue sont rassem- blés dans le tableau suivant: TABLEAU Dérivé X1 Y1 n R1 R2 A(*). para-I CO 2 H C2H5 2i5 2i5 B para-I Co 2 H C2H5 CiH5 C ortho-I Co 2 C H C2H5 2i5 C i5 D para-I Co 2 H H E para-I Co 2 CH CH C3 3 F para-I Co 2 H CH3 G para-I CO 2 CH(CH3)2 CH(CH32 H para-I Co 2 H CH(CH3) J3 para-I C 3 CH3 CH3 K para-I C0 3 H CH3 L para-I Co 3 C2H5 C2H5 M para-I SO 2 2 H5 CH5 2 2Ci5 2i5 N para-F Co 2 C H C H 2C5 2C 5 (*Idécrit dans Eur. J. Med. Chem. précité sous le N'14 - i0 - Les points de fusion sont pris sur Banc Kofler. Les spectres H-RMN sont effectués sur un appareil JEOL C60 HL, les déplacements chimiques sont exprimés en ppmrn par rapport au TMS utilisé comme référence interne. Produit C: F( =169-170 i0 H-RM.\l. (solvant: Méthanol D): 1,40 (t, 6H, CH3); 3,0-4,0 (m, 8H, CONH I0 C:CH2CH2-N(CHH2CH3)2); 7,07-7,63 (m, 3H, aromatiques); 7,87-8,10 (m, 1H, aromatique). Produit D: F(O C) > 250 IH-R.MN (solvant ' Méthanol D4); 3,03-3,43 (m, 2H, CH2NH2); 3,53-3,83 (m, 2H, CONH CH2); 7,50-7,93 (m, 4H, aromatiques). Produit E: 2C F(oC) = 240-241 H-RMN (solvant: méthanol D4): 3,0 (s, 6H, CH3>; 3,27-3,60 (m, 2H, CH2 N(CH3)2); 3,67-4,0 (m, 2H, CONH CH2); 7,53-8, 07 (m, 4H, aromatiques) Produit F: F(OC) >250 1H-RMN (solvant: DMSO + D20): 2,67 (s, 3H, CH3); 3,05-3,33 (m, 2H, CH2-NHCH3); 3,50-3,77 (m, 2H, CONH CH2; 7,53-8,0 (m, 4H, aromatiques) Produit G: F(C) = 185-1 86 1H-RMN (solvant: méthanol D4): 1,37 et 1,47 (2s, 12 H, CH3); 3,23-4,0 (m, 6H, CH2 et CH); 7,57-&0 (m, 4H, aromatiques) - -11 - Produit H: F(oC) 219-220 IH-RMN (solvant: méthanol D4): 1,30 et 1,43 (2s, 6H, CH3); 3,13-3,50 (m, 3H, CH2 NH-CH (CH3)2); 3,57-3,90 (m, 2H. CONH CH2) ; 7,50-7,93. (m, 4H, aromatiques) Produit J: F() = 165-166 1 0 (C) 1H-RMN (solvant méthanol D4) 1,77-2.33 (m, 2H, CH2-CH2-CH); 2,93 (s, 6H, CH3); 3,0-3,67 (m, 4H, CONH CH2-CH2CH2) 7,47-7,97 (m, 4H, aromatiques) i 5 Produit K: F(oC) = 243-244 1H-RMN (solvant: méthanol D4) 1,87-2,30 (m, 2H, CH2CH2CH2); 2,73 (s, 3H, CH3) 2,93-3.23 (m, 2H, CH2 NH CH3); 3,33-3, 70 (m, 2H, CONH CH2; 7,50-8,0 (m, 4H, aromatiques) Produit L: F(oC) = 88IH-RMN (solvant: méthanol D4): 1,33 (t, 6H, CH3); 1,93-2,40 (m, 2H, CONHCH2 CH_2 CH2; 3,03-3,70 (m, 8H, CONH CH2CH2CH2 N(CH2CH3)2) 7,53-7,97 (m, 4H, aromatiques) 3 0 Produit M: F(oC) = 154-155 1H-RMN (solvant:'méthanol D4): 1,33 (t, 6H, CH3); 3,0-3,53 (m, 8H, CH2); 7,50-8, 13 (m, 4H, aromatiques) Produit N: liquide visaueux 1H-RMN (solvant: méthanol D4): 1,43 (t, 6H, CH3); 3,03-4,13 (m, 8H, CH2); 6,93-7,47 (m, 2H, aromatiques); 7,83-8,30 (m, 2H, aromatiques). i2 Les produits de l'invention ont été soumis à des essais pharmacologiques et biologiques. 1. Etude de toxicité La détermination de la DL50 est faite chez la souris après injection i.v. des molécules d après la méthodologyli décrite par Karber et Behrens. Elle a été réalisée chez: - des souris mâles OF 1, de 6 semaines - des souris nudes nu/nu SSCUP, miles gées de 6 semaines - des souris nudes nu/nu SSCUP, mâles por- teuses d'hétérotransplants de mélanomes humains. a. après l'injection i.v. du dérivé A. Scurs mâles OF 1 de 6 semaines. CLO: 75 mg/kg DL50: 125 mg/kg DL 100: 150-mg/kg Souris nudes nu/nu SSCUP, mâles, 6 semaines. DL 0: 60 mg/kg DL 50: 90 ma/kg DL 10: 150 mg/kg Souris nudes nu/nu SSCUP, mâles, porteuses d'hétérotransplants (mélanome Beu) DL 0: 60 mg/kg DL 50: 90 mq/kq DL 100: 150 mg/kg b. après l'injection i.v. dérivé B. Souris males OF 1,6 semaines. DL 0: 150 mg/kg DL 50: 175 mq/kq DL 100: 200 mg/kg 2. Autoradiographies Les autoradiographies sont réalisées chez des souris porteuses de mélanomes greffés: a. C57 BL6 porteuses du mélanome murin B16. b. nudes nu/nu SSCUP porteuses d',hétéro- transplants de mélanomes humains mélaniques (Beu) ou amélaniques (Dau). L'intérêt de ce modèle réside dans le fait que ces tumeurs humaines gardent leurs propri- étés histologiques et biochimiques. Les animaux porteurs de tumeurs greffées reçoivent dans une veine caudale les composés marqués sous forme de chlorhydrate en solution saline (10 à 15 uCi/animal). A des intervalles de temps différents après l'administration des produits (de 15 minutes à 24 heures), Iles souris sont anesthésiées à l'éther et plongées dans l'azote liquide. Selon le protocole décrit par Ullberg des coupes de 30 pm, parallèles au plan sagittal, sont réalisées dans un cryotome à congélation (TS 260. SLEE). Les coupes déshydratées au froid sont appli- quées sur des films sensibles, Ultrofim H (LKB, 2208- ) ou Hyperfilm H (Amerham. RPN 535). Après 3 se- maines d'exposition les films sont révélés selon les méthodes classiques de développement. c. Résultats. 1 25 De 1 à 4 h aprés-l'injection i.v. de I-A chez des souris C57 BL6 porteuses du mélanome B16..on peut noter un noircissement important du film au ni- veau de. la tumeur, noircissement non homogène. Cette hétérogénéité correspond à des zones de nécrose de la tumeur. Des images identiques, aux mêmes temps, sont obtenues chez des souris nudes nu/nu SSCUP porteuses d'hétérotransplants de mélanome humain mélanique, Beu. 24 h après l'injection le mélanome B16 est encore vi- sible mais nous ne notons plus de noircissement du film au niveau de la tumeur Beu. 1h après l'injection de125I-B, chez des sou- ris porteuses du mélanome B16, le noircissement du film au niveau de la tumeur est qualitativement aussi important qu'après l'injection de A. La cinétique est légèrement différente avec une concentration radio- active tumorale plus intense à 4 h et surtout 6 h. 24 heures après l'injection la tumeur est encore visible alors qu'il ne reste plus de radioactivité dans l'or- ganîsme. L'hètérotransplant Beu est visible jusqu'à 6 h après l'injection, et, à ce temps présente un noir- cissement plus prononcé sur le pourtour de la tumeur. Après l'injection i.v. de cellules de méla- nome B16 on note l'apparition de colonies métasta- siantes en majorité pulmonaires. Ces colonies pulmo- naires sont bien visualisées sur les autoradiographies de 1 a 7 heures après l'injection de B. 3. Distribution tissulaire chez l'animal L'étude de la distribution tissulaire des composés marqués I a été réalisée chez des souris porteuses de mélanomes greffés (cf. autoradiographies cidessus}. Les animaux reçoivent une injection dans une veine caudale de 3)moles. 5 à 8 pCi, de produit mar- qué sous forme de chlorhydrate. Les animaux sont sa- crifiés à des intervalles de temps différents après l'injection, de 1 à 24 heures. Le sang est prélevé et les principaux organes sont excisés. Des aliquotes 26429g72 sont pesées et la radioactivité des échantillons'. est mesurée dans un compteur Gammatrac 1191 (Traceur ana- lytiquel. Le rendement de comptage pour l'iode 125 est de 607. Souris porteuses de mélanomes. Les résultats sont exprimés: - en pourcentage de la dose injectée fixé par g de tissu (1. DI/g); - sous forme des rapports radioactivité tissu radioactivité sang Ce rapport reflète plus précisément la sé- lectivité d'une molécule pour un organe (tableaux 2, 4, 6, 8. 10 et 12). Dérivé A Jusqu'à 8 heures après l'injection de A à des souris porteuses de mélanomes mélaniques, B16 et Beu, on note des concentrations intratumorales supé- rieures à tI DI/g avec des valeurs toujours plus éle- vées pour B16. Entre 6 et 12 heures les rapport tu- meur/sang sont de l'ordre de 20 pour les 2 tumeurs. * 24 h après l'injection si le rapport pour B16 est supérieur à 30, celui de Beu n'est que de 6. (cf. tableaux 1 à 4 ci-après). La fixation pulmonaire relativement impor- tante pendant les 4 premières heures devient infé- rieure à 1. DI/g dès la 6Sème heure. Cette étude permet aussi de constater que 6 heures après l'injection les mélanomes mélaniques sont les tissus qui présentent les pourcentages de fixation et les rapports tissulsang les plus élevés. Les rap- ports tumeur/muscle, poumon, cerveau et foie, tous très supérieurs à l"unité de 6 à 24 heures après l'in- jection chez les souris porteuses de Seu ou 816 sont des éléments positifs pouf une étude scintigraphique de recherche de métastases. Pour le mélanome amélanique (Dau) la concen- tration intratumorale de A n'est supérieure à 1% DI/g que pendant les 2 heures qui suivent l'injection. Les rapports tumeur/sang qui varient entre I et 2 de 1 à 24 heures ont cependant permis d'obtenir des images (cf. tableaux 5 et S ci-après). Dérivé B Les résultats préliminaires montrent pour les mélanomes mélaniques des concentrations intratu- morales et des rapports nettement supérieurs à ceux observés avec A de 4 à 8 h après l'injection. Par con- tre au temps 24 heures les concentrations et les rap- ports tumeur/sang sont inférieurs à ceux de A (ta- bleaux 7, 8 ci-après). Par ailleurs si l'on cherche à déterminer un "index" de contraste des tumeurs mélaniques par rap- port aux muscles avoisinants ou aux organes suscepti- bles d'être le siège de métastases on peut constater qu'au temps 6 heures la majorité de ces index est plus élevée pour B que pour A, résultat en faveur de l'uti- lisation de B pour li'imagerie à ce temps. En ce qui concerne l'analyse des résultats chez les animaux porteurs de la tumeur amélanique, les concentrations intratumorales sont légèrement plus élevées de 4 à 6 h mais les rapports tumeur/sang ne sont pas significativement différents (tableaux 9 et ci-après). 4. Imagerie Les souris porteuses de tumeurs greffées sont anesthésiées par injection I P de pentobarbital sodique 1/5 et immobilisées sous une caméra à scin- tillation. (Gammatome II, CGR) munie d'un collimateur -4 pinhole 3-360. sensibilité 3,2 10 Les images ont été obtenues après l'injection i.v. de 60 à 100 pCi de I et 123I-, chez des souris I et I-A. chez des souris: - C57 BL6 porteuses de mélanomes B16 à dif- férents stades d'évolution. - C57 BL6 porteuses de métastases pulmo- naires de mélanome B16. En effet; après l'injection i.v. de cellules oe B16 l'animal développe des "co- lonies" pulmonaires mélaniques assimilées à des métas- tases. - nudes nu/nu SSCUP porteuses de mélanomes humains Beu et Dau. - nudes -nu/nu SSCUP porteuses de mélanome humain mélanique FOSS(ORIS). Dans tous ces modèles humains et murins nous avons observé une bonne définition tumorale. Les ima- ges précoces sont plus difficiles à interpréter en raison d'une radioactivité pulmonaire et intraabdomi- nale (digestive, rénale et urinaire) importante. Par contre à partir du temps 4 h les images tumorales sont de bonne qualité. Il est à noter que les zones de nécrose intratumorale ne sont pas visualisées. Nous avons pu obtenir des images de mélanome humain infé- rieur à 5 mm. En ce qui concerne l'étude de spécificité nous n avons obtenu aucune image après l'injection de A à des souris: - BALB porteuses de la tumeur EMT6 (carci- nome mammaire spontané de la souris) - nudes nu/nu SSCUP porteuses d'hétéro- transplants: SW 948 (adénocarcinome du colon) et A 431 (tumeur de la vulve) 1 23 Une étude réalisée avec - I-A a permis de confirmer les données obtenues en imagerie après l'in- jection de 125I-A. Nous avons en effet pu observer des images identiques chez des souris porteuses du méla- nome B16 et d'un hétérotransplant mélanique Beu et l'absence d'image chez les animaux porteurs de l'EMT6. Des examens scintigraphiques ont aussi été réalisés après l'injection de B à des souris: - C57 BL6 porteuses du mélanome 816 - nudes nu/nu SSCUP porteuses de l'hétéro- transplant Beu Nous avons pu observer une très bonne défi- nition tumorale de 3 à 17 H après l'injection chez les animaux porteurs de ces deux modèles tumoraux. Cette étude biologique montre que les déri- vés selon l'invention sont des marqueurs intéressants du mélanome: - leur toxicité est relativement faible, - les autoradiographies donnent des images contrastées durables, - la comparaison de la biodistribution chez les souris C57 BL6 porteuses du mélanome B16 est en faveur de leur utilisation pour l'imagerie. En effet, au niveau de la tumeur,les pourcentages de fixation et les rapports tissu/sang sont élevés jusqu'à la 8ème heure après l'injection. Les composés marqués de l'invention sont donc particulièrement utiles comme agents radiophar- maceutiques pour le diagnostic des mélanomes malins, mais pourront aussi être utilisés comme agents pour le traitement de ces mélanomes après marquage par 131I. Par ailleurs, les dérivés de formule I por- 19 13 teurs d'isotopes stables tels que F ou C peuvent être utilisés pour l'imagerie en résonance magnétique nucléaire (I.R.M.). j nDalqDJ iv, a v '0; $ZOú6ú'0; W' 1Oúb.; c+'ú 161'!; zs',r'o +I - 9 E9'0. S1'9.fimun. ooo'o.; 600zoo'a ú0' 0úo -r rOa + 61'0.i'o; 99s0 90'0; ú1']Z.O 9+1 sr 7, Zi1O0'0; 60' 0 ZO'O +,,,0 Vs'; 96b0 Os'Or; Zl' ozl! r; 89'E 660; 09' zZ'O. 90'9 arnw n"mua 900ooo0' + oo'rwo; IO ú0'0;.Osr a.'Z;. Zoú'o; olbo 1 o 0'0; o. -!sor'o + 9'z zs&ss úS+ s4 6b+ +o IO';4dl ú6,s'r ss +SBZ úS 4 9'1r zy'0, T9'9g;O T 6,8 56g'0; LO'8lo0';; V!'Z1ú06'0; 9-'zT96O'0 86'Ziúgolf tg,ú[ IDO oo'o 90 '0 o 80'0 o; ozo À 61'b; +r'r o0,1'; 66'r 'St3o'0 6z', Fz,'o; ZI'9 Z96 ,, . 00'O; zobs90o; 9slO060b0; -0z9rb0 s990 3úZb + 9c 60'0; +o' 9 o >Z Zl.8 9, Z 9 9ril - 99!9 D C 57 BL 6 - B16 Temps I 2 4 6 8 12 24 Plasma 0,77 0,034 0,74 + 0,016 0,83 - 0,081 1,00 0,034 1,13 - 0,025 1,17 - 0,059 1,12 0,033 Foie 5,88 0,402 5,44 - 0,157 4, 37 + 0,397 4,62 - 0,198 2,29 - 0,212 3,67 t 0,580 7,47 + 0,5J0 lIate 5,78 - 0,804 3,9J + 0,551 2,51 - 0,437 2,83 + 0,938 1,34 - 0,266 2,36 - 1,260 2,39 + 1,127 Pancréas 5,30 0,374 4,61 + 0,166 3,55 + 0,326 2,67 + 0,180 1, 21 + 0,253 1,74 1 0,183 1,88 + 0,104 Rein 8,78 0,111 7,93 - 0,3J7 6,69 + 0,725 5,42 + 0,542,43 - 0,397 2,56 - 0,364 3,12 0,168 Intestin 5,13 0,400 5,31 + 0,281 4,96 + 0,398 3,63 - 0,431 2,15 0,249 1,75 0,347 1,11 0,022 Fstomac 5,82 + 0,721 5,1 8 + 1,168 4,12 + 0,525 5,38 + 0,931 4,81 1,227 2, 42 + 0,360 3,07 0,137 Poumons 10,69 + 0,954 8,30 + 0,479 7,55 + 0,565 8, 78 1,068 3,20 + 0,4t 2,19 + 0,117 2,37 0,133 Oeil 13,22 - 0,776 17,51 - 0, 582 23,40 1,943 59,48 5,914 ?3,90 - 1,899 129,62 + 25,312309,54 - 22,214 Cerveau 2,54 + 0,092 1,89 + 0,020 1,28 + 0,064 1,53 + 0,063 0,52 + 0,077 0,46 ± 0,045 0,25 + 0,031 a/des + sout-,naxUalr 5,92 - 0,815 4,84 -+ 0, 237 6,16 -+ 1,360 5,45 + 0,282 2,83 + 0,343 4,63 + 0,745 4,26 0,560 J,52 0,030 J,17 î4 -O,4,2 0,560 Muscle 1,46 -+ 0,126 1,52! 0,030 1,17 0,096 0,94 + 0,078 0,40 0,037 -+ 0,033 0,38 0,01 8 f03 f ' 001 Tumeur 6,56 - 0,595,23 0,684 8,57 -1,215 17, 66 - 2,170 10,34 - 1,775 17,12 - 9,505 37,4 - 7,04 Tissu A sangw Tableau 2. Swis nY/nu SSCUP - Beu Temps 1r I i 2 4 6' 8 12 24. Sang 0,87 + 0,024 0,53 + 0,056 0,32 t 0,032 0,13 + 0,021 0,05 + O, o 01 0, 02 + 0,003 0,01 o 0,002 ,,,.. ,. Plasma 0,46 + 0,022 0,35 + 0,057 0,20 + 0,021 0,12 + 0,034 0,04 + 0,013 0, 02 + 0,002 0,01 + 0,002 Foie 5,27 + 0,220 3,50 - 0,332 2,28 0,164 0,94 + 0,086 0,52 t 0,042 0,28 + 0,033 0,13 f 0,019 Rate 4,11 0,217 2,12 + 0,292 1 +07 0,023 0,28 - 0,029 0,11 - 0,015 0,04 - 0,006 0,02 + 0,002 Pancréas 3,99 - 0,104 2,28 + 0,210 1,39 + 0,123 0,36 + 0,039 0,2 -+ 0,010 0,06 0, 011 0,05 + 0,004 Rein 7,63 + 0,227 5,90 + 0,691 4,28 + 0,611 0,99 + 0,140 0,28 + 0,0029 0,10 - 0,024 0,06.0,016 /taestin 3,76 - 0,348 2,35 + 0,299 1,56 + 0,204 0,52 + 0,119 0,15 - 0,020 0,08 + 0,033 0,03 - 0,009 , .,. . ...... Estomac 2,49 + 0,074 1,51 + 0,239 1,16 + 0,123 0,49 - 0,067 0,22 + 0,025 0,07 t 0,022 0,04 + 0,006 f. .. Poumoru 7,77 0,1J72 4,71 + 0,622 3,60 + 0,272 1,25 + 0,154 0,35 + 0,058 0, 08 + 0,023 0,05 os0,009 Oeit 0,64 - 0,041 0,56 + 0,135 0,34 + 0,007 0,13 + 0,009 0,0 7 + 0,005 0,03! 0,002 0,03 + 0,005 Cerveau 1,66 + 0,103 1,13 + 0,134 0,78 + 0,054 0,28 +t 0,02S 0,13 + 0,019 0,01 ± 0,002 0,006 + 0,0012 l.ea '. sous-naxt:aels 5,11 + 0,346 2,90 -+ 0,215 1,71 - 0,171 0,95 ± 0,255 0,24 ± 0,042 0,04 -+ 0,007 0,03 + 0,004 Mwucle 1,30 + 0,050 0,93 + 0,144 0,51 -+ 0,046 0,33 +' 0,063 0,08 t 0,015 0,01 t+ 0,002 0,01 + 0,002 Tumeur w3, 51 + 0,397 3,17 + 0,405 3,25 + 0,172 1,96 + 0,241 1,07 t+ 0,159 0,36 t 0, 050 0,07' o 0,005os % Dilg Tableau 3 ' 'o % Dl/g - Tableau 3 ' Swiss n/hu SSCUP - Beu \ Temps I 2 4 6 8 12 24 plsma 0,53 + 0,022 0,66 t+ 0,064 0,63 + 0,010 0,95 + 0,059 0,99 + 0,047 1,06 - 0,106 1,06 + 0,169 Foie 6,07 + 0, 267 6,66 + 0,297 7,37 + 0,374 7,68 + 1,136 11,47 + 1,690 16,09 ' 1,576 10, 48 - 0,947 Rate 4,72 - 0,216 4,00 0,352 3,58 - 0,393 2,31 + 0,394 2,45 0,495 2,11 + 0,121 2,01 - 0,219 Pancrm a 4,59 + 0,098 4,28 + 0,104 4,47 + 0,222 2,97 + 0,397 3,00t-.%,5 3,10 + 0,290 3,70 + 0,447 Rein 8,95 - 0,306 11,17 - 0,736 13,J7 - 0,980 6,62 + 1,281 6,29 - 1,071 5,52 - 0,592 4,79 0,428 Intestin 4,31 0,363 4,52 + 0,536 5,05 + 0,576 3,57 t 0,814 3,51 + 0, 709 4,00 + 1,449 2,31 + 0,291 Estomac 2,88 0,170 2,84 - 0,260 3,71 - 0, 252 3,75 + 0,262 4,74 + 0,687 3,44 + 0,495 3,06 0,265 Poumons 8.95 + 0, 152 8,75 - 0,319 11,74 + 1,029 8,76 + 1,714 7,60 + 1,088 4,06 + 0,117 3, 45 + 0,151 * 4 Oeil 0,74 - 0,042 1,04 + 0,178 1,13 t 0,131 1,07 + 0,117 1,69 + 0,287 1, 90 + 0,300 2,38 0,712 Cerveau 1,89 + 0,094 2,13 + 0,070 2,51 + 0,173 1,87 + 0,610 2,94 + 0,644 0,94 + 0,085 0,44 + 0,034 soumuillres sous-maiUaires 5,86 + 0,297 5,53 + 0,296 5,46 + 0,282 6,73 + 0,863 5,04 + 0,504 2,33 0, 179 2,80 + 0,207 Muscle 1,50 -+ 0,052 1,75- 0,141 1,65 ± 0,083 2,08 - 0, 315 1,78 -+ 0,514 0,80 - 0,089 0 + 0,910,131 Tumeur 4,08 t- 0,508 6,26 + 0,947 9,70 -+ 1,018 16,30 + 4,185 24,43 ± 5,417 19,93 - 2;180 6,41 + 2, 022 N TLsu A r Tableau 4 Swis nu/nu SSCU - Dau \ Temp.... Ihr 2 4 6 8 12 24 anW os+0,890,054 0,52 + 0,044 0,29 + 0,025 0,23 - 0,019 0,14 + 0,042 0,06 + 0,007 0,008 + 0,0003 Pla3ma 0,S -t 0,039 0,33 + 0,035 0,24 - 0,030 0,24 + 0,025 0,15 + 0,055 0,06 +0,006 0,007 0,0005 Foie 5,68 - 0,621 3,35 - 0,262 2,10 0,281 1,10 O,045 0,71 - 0,085 0,3 0,015 0,1 0, 06 Rate 3,48 - 0,178 1,95 -t 0,097 0,80 0,078 0,30 t 0,023 0,16 - 0,017 0, 07 - 0,006 0,02 - 0,008 i i.... i . i iI I Iii Pancréas 4,06 - 0,208 2,29 - 0,101 0,97 - 0,108 0,41 + 0,028 0,24 + 0,024 0,13 - 0,00 0,03 - 0,004 Rein 8,39 t 0,908 5,12 + 0,456 2,15 + 0,296 0,78 + 0,034 0,32 + 0,059 0, 14 - 0,011 0,011 03 - 0,004 Intestin 3,74 + 0,340 2,67 + 0,328 1,10 + 0, 174 0,42 + 0,042 0,38 + 0,101 0,27 + 0,118 0,01 + 0,002 N Estomac 2,32 + 0,172 1,85 + 0,173 1,36 + 0,349 1,17 + 0,025 0,7J + 0,182 0,38 + 0,093 0, 03 t 0,004 Poumons 6,88 + 0,840 5,63 + 0,655 2,84 + 0,393 0,76 + 0,092 0, 45 -+ 0,082 0,11 + 0,009 0,02 - 0,004 oeil. 0,68 + 0,146 0,54 + 0,097 0, 31 + 0,039 0,16 + 0,010oo 0,10 + 0,012 0,04 - 0,004 0,02 ' 0,009 Cerveau 1,40 + 0,114 0,99 + 0,081 0,51 + 0,060 0,20 + 0,011 0,12 + 0,008 0,02 -+ 0,002 0,002 + 0,0003 GOndxes f + m-millauires 4,75 -+ 0,467 3,56 + 0,280 1,50 -+ 0,144 0,86 + 0,124 0,77 + 0,291 0,30 + 0;040 0,02 + 0,002 MNuscde 1,28 - 0,092 0,79 -+ 0,064 0,32 -+ 0,035 0,il -+ 0,003 0,07 + 0,011 0,02 0,006 - 0,0005 ueur 1,51 + 0,074 1,29 + 0,299 0,45 -+ 0,033 0,23 +0,024 0, 11 0,031 0,0 i 0,024 0,009 +0,0005 Dl/g A _ Tableau $ Swisa nt/nu SSCUP - Dau Temps. \ r) Tep 2 4 6 8 12 24 Tissu \. ... Plasma 0,62 + 0,044 0,64 - 0,038 0,82 -+ 0,052 1,06 - 0,019 1,07! 0,066 1, 01 * 0,077 0,97! 0,042 Foie 6,37 + 0,593 6,47! 0,246 7,16 - 0,528 4,91 + 0,502 6,06! 1,210 5,19 + 0,621 13,18 - 1,199 ...-- Rate 3,91! 0,051 3,83 0,280 2,76 - 0,205 1,37 + 0,157 1,43 -+ 0,375 1,22 - 0,135 2,59 1,002 Pancra.s 4,56 0,058 4,47 - 0,250 3,64 ' 0,523 1,85 + 0,189 2,06 - 0,526 2, 29 - 0,215 3,82 - 0,484 Rein 9,13! 0,717 9,83 - 0,360 7,46! 0,952 3,37 0,421 2,9 + 0,956 2,58 0,433 4,6 + 0,667 Intestin 4,23 0,427 5,04 + 0,290 3,7S - 0,462 1,77 ' 0,237 2,93 + 0,667 4,47 -+1,625 1,52 ± 0,301 Estomac 2,63 0,241 3,58 + 0,209 4,50 0,788 5,01 o 0,598 5,16 - 0,918 6,25! 0,1264 3,39 - 0,540 Poumons 7,71! 0,767 10,92 - 0,815 9,94 ± 1,404 3,34 + 0,388 3,96! 0,961 1,84 - 0,135 3,45 0,597 Oeil 0,74! 0,113 1,02 - 0,127 1,1 + 0, 093 0,73 ± 0,033 0,78 + 0,130 0,72 0,033 2,99 - 1,419 . Cerveau 1,56 0, 065 1,91 - 0,110 1,80 0,209 0,91 + 0,082 1,06 + 0,278 0,44 - 0,044 0,28 + 0,039 Clmade$ * :ous-maxiillire, 5,32 - 0,379 6,97 ± 0,600 5,19 - 0,382 3,70 + 0,373 5,14 -+ 0541 21 + 0,945 3,13 + 0,281 Muscle 1,44 + 0,087 1, 53 - 0,082 1,12 + 0,110 0,49 + 0,038 0,67 + 0,181 0,36 + 0,039 0,82 0,064 nmneur, 1,70 + 0,036 2,47 + 0,487 1,59 +0,140 0,98 + 0,080 1,43 + 0,329 1, 36 + 0,528 1,17 ± 108 Tissu A sang Tableau 6 Tableau 7 C57 BL6 - B16 Temps. Oir) I 2 4 6 24 %Di. I Ig LUU Sang 1,31 0,67 0,27 0.14 0,03 Plasma 0,73 0,40 0,21 0,13 0,02 I I' Foie 6,96 1 3, 2 2,05 0,96 0,22 Rein 14,37 8.6J 4,42 1,86 0,16 ! i. ' Poumons 14,42 I 8,00 4,49 2,10 0,05 Oeil 0,45 0,43 0,42 0,38 0,24 Cerveau 3,26 2,09 1,17 0,50 0,01 Muscle 2,55 1,33 0,67 0,20 0,02 Tumeur 6,03 5,73 4,36 4,69 0,49 ix) Bo 91 9' 9 1Q o I mawn |.c'-ol 'I: 6t i 6' 616'al:>S' 003 ci 0Lz6t 0iI 0f OZ'6 I'aO - t,. _/-'- pi. t 99' 991, !6sr OOi: obilo ou.Od t1'3.! IúO 8ú'91 | _ZI Z6'0ï uMail i t 6i1 08'9 jfj ç'] si 00 ' 06'0 61 '60 09'0 9 O " D.06.d nZ 9 ' '! _ ___[ 9. odua.L 9Ia - 97IU lS 8 nDalqDL Tableau 9 Swiss nu/u SSCUP - Dau Tbe Teme. 2 4 6 8 12 24 Sang 0,$9 90,033 0,93 + 0, 099 0,30 - O,053 0,53 - 0,083 0,11 + 0,016 0,015, 0,0024 0,009 - 0,0005 Plasma 0,71 0,038 0,85 t 15 0,28- 0,049 0,61 0,047 0,13 F 0,017 0,02 + 0, 002 0,009 0,0008 Foie 4,95 + 0,177 3,16 0,39 1,52 0,201 0,74 0,054 0,63 00 0,20820 0,2 0 +0 0,008 Rate 2,54 - 0,114 2,02 + 0,17 0,62 + 0,135 0,33 0,030 0,14.- 0,022 0,05 0,005 0,09 0,009 Pancréas 2,86 + 0,127 2,13 0, 17 0,83 0,185 0,40 0,026 0,14 +0,034 0,08 + 0,005' 0,01 Rein 8,15 + 0,499 6,17 t 0,46 2,51 0,589 1,07 + 0,164 0,42 + 0,144 0,08 - 0,005 0,04 - 0, 002 ' Intestin 3,10- 0,314 2,57 - 0,16 1,1i9 - 0,218 1,05 - 0,120 0,36 0,057 0,05 - 0,006 0,01 - 0,0004 Estomac 2,38 0,154 3,03 + 0,547 1,23 0, 201 2 + 0,253 0,58 0,098 0,10 + 0,009 *0,02 + 0,002 Poumons 5,35 ' 0,319 5,56 0,598 2,63 + 0,485 0,93 + 0,038 0,43 0,1l43 0,04 0,004 0,02 0,002 Oeil 0,51 - 0,028 0,50 t 0,024 0,21 - 0,021 0,19 + 0,012 0,06 + 0,012 0, 01 0,002 0,008 0,0010 Cerveau 1,28 0,079 1,25 + 0,J42 0,63: 0,101 0,22 + 0,020 j0,14 + 0,035 0,01 0,002 0,002 0,0002 CGlaIndes' 4,28 * 0,207 4,14! 0,370 1,68 t 0,351 2,74 + 0,492 0,39 - 0,046 0,04 0,005 0,02 0,002 oasmaxillaires Muscle 1,04 - 0,040 0,86 + 0,101 0,41 - 0,120 0,12 ± 0,026 0ot7 + 0,014 0,008! 0,0013 0,002 0,0002 ___,0 _______1 ___0 __ __ ____00_ Tumeur 1,19 + 0,048 1,27 0,086 0,93 - 0,425 0,34 0,020 0,12 + 0,024 02 0, 007 00006 9B%00 Dl/g0 - 0,0006 %O/9 _ Swiss nu/nu SSCUP - JauTableau Tableau! 0 1 2 4 6 8 12 24 Plasma 0,80 - 0,017 0,89 - 0,068 0,94 - 0,058 1,16 - 0,016 1,19 + 0,020 1, j6 + 0,037 1,0 or0,154 Foie 5,56 - 0,225 3,62 - 0,68 5,21 - 0,519 1,43 0,139 6,03 - 0,678 13,34 + 0,462 21,88- 1,493 Rate 2,84 0,091 2,31 - 0,36 2,07 - 0,256 0,62 + 0,045 1,28+ 0,158 3,68- 0,1193 11,17 - 1,75 Pancréas 3,20 + 0,099 2,42 + 0,36 2,7d + 0,300 0,76 0,050 1,22 + 0,151 5 t 0,310 1, 40 + 0,120 Rein 9,10 L0,286 7,00 + 1,03 8,03 + 0,813 2,01 e 0,252 3,72 + 0,573 5,46 ' 0,217 4,64 + 0,328 lntestin 3,44 + 0,231 2,87 + 0,34 4,08 0,599 1,97 + 0,112 3,30 + 0,269 3,20 0,SU; 1,16 0,141 Cl: Estomac 2,66 + 0,101o 3,40 + 0,694 4,34 + 0,924 3,78 + 0,400 5,35 * 0,355 7,03 0,728 2, 28 0,165 Poumons 6! 0,353 6,33+ 1,166 8,77 +0,838 1,82 + 0,187 3,69 +0,85 3,04+ 0,401. 1,72 0,182 Oeil 0,57 + 0,011 0,55 - 0,052 0,71 + 0,056 0,36 + 0,023 0,60 + 0,040 0,88 + 081 0,08940,213 Cerveau 1,44 * 0,069 1,43 + 0, 261 2,21 + 0,304 0,44 A 0,060 1,31 + 0,180 0,74 0,072 022.0,029 Glandes 4, 82 + 0,285 4,48! 0,220 5,44 + 0,297 5,16 + 0,3 3,65 0,266 2,52 0,236. 1, 81 0,169 ou-maxillaimres Muscle 1,17 + 0,040 0,98! 0,182 1,24'! 0,153 0, 24 +0,056 0,74 0,216 0,45 0,111 0,27 0,043 Tumeur 1,33 + 0,015 1,39 - 0, 103 2,68 ± 0,757 0,65 + 0,025 1,17 - 0,314 1,11 0,059, 0,092 1,11-+ 00590,79 -10,092 B sang REVENDICATIONS - 1. Agents pour le diagnostic et le traite- ment des mélanomes malins, répondant à la formule générale Y-_(CH2) N I X: R2 x dans laquelle X représente un atome d'hydrogène ou d'halogène, Y représente un groupement Z-CONH-,Z-O-,Z-S(O)-ni avec n1 = 0,1,2 ou 3, ZSOz -NH- ou Z-NHCO-, Z étant une liaison, -CH2- ou - CH -, O l n est un entier de 2 à 4, et RI et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C6, aryle ou aralkyle en C à C12' ces composés pouvant etre marqués par des radioisoto- pes choisis parmi 123I. 1 3 25,r 31I,7Br Br, 18F. il 13 ou C, ou des isotopes stables choisis parmi C et tsF, ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharma- ceutiquement acceptables. 2. Agents selon la revendication 1 répondant 123 125 à la formule I dans laquelle X représente 23I 125 I ou I, Y représente ZCONH- ou Z-SO -NH-, Z étant une liaison, -CH2- ou - CH - et R1 et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C1 à C6. 264Z972 3. Agent radiopharmaceutique pour le diag- nostic et le traitement des mélanomes malins, répon- dant à la formule *I -. *. CONH-CH2CH2-N(C2Hs 2 I étant 125I 123, 131I 4. Composés répondant à la formule générale /"ll - -( N 1Y - N -N (CH2)n - NI R2 dans laquelle X représente un atome d'halogène ou un de ses radioi- sotopes, Y représente un groupe Co ou S02, n est un entier de 2 à 4, et R1 et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C à C6, R1 et R2 ne pouvant re- présenter simultanément un groupe éthyle lorsque X est p-I et n = 2, ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharma- ceutiquement acceptables. 5. Composé répondant à la formule à/O -COMNH-CH2CH -NHC2 H I étant 125 123 131 I étant I, I, I. 6. Procédé de préparation des composés selon la revendication 4. caractérisé en ce que l'on con- dense un. chlorure d'acide halogéno-benzoïque ou -ben- zènesulfonique de formule x -: III X0lc. o- no 1ci dans laquelle X et Y1 ont la même signification que dans la formule III avec une diamine de formule NH2-(CH2)n- NR1R2 IV dans laquelle n. R et R ont la même signification que dans la formule II, puis on marque éventuellement la structure (II) ainsi obtenue par un radioisotope de l'halogène X1. 7. Procédé de préparation des composés II dans laquelle Y1 = CO selon la revendication 4. carac- térisé en ce que l'on condense un chlorure-d'acide halobenzoique (III) X k III xno Y1C dans laquelle X1 et Y1 ont la même signification que dans la formule III avec le paranitrophénol pour obte- nir un ester de formule x 00 NOv NO2 V puis on fait réagir le composé (V) avec une diamine de formule NH2-(CH2)nNR1R2 IV dans laquelle n. R et R2 ont la même signification que dans la formule II, puis on- marque-éventuellement la structure ainsi obtenue par un radioisotope de X1. 8. Agents marqués par de.s isotopes stables 13 19 choisis parmi 13C et F selon la revendication t pour l'utilisation dans l'imagerie en résonance magnétique nucléaire.