Brevet FR2645151A1 — publié le 19901005

L'invention concerne une méthode de séparation des stéréoisomères de dérivés de la furo [3,4-c] pyridine. Cette méthode s'applique, notamment, aux dérivés de la furo[3,4-c] pyridine de formule générale I HO Ho X t R3 R, R4 I. dans laquelle: - R3 représente un atome d'hydrogène, un groupement hydrocarboné saturé en chaîne droite comprenant de 1 à 5 atomes de carbone ou un groupement hydrocarboné non saturé comprenant de 2 à 5 atomes de carbone, un groupement hétérocyclique comprenant jusqu'à 6 atomes dans le cycle, un groupement phényl, un groupement alcoylphényl ou alcénylphényl, lesdits groupements étant éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes de chlore ou de fluore, groupements trifluorométhyl, groupements alcoyle comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, groupements alcoxy comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, groupements thioalcoyle comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, groupements aminodialcoyle dans lesquels chacun des alcoyles comporte de 1 à 5 atomes de carbone, groupements alcoxyaminodialcoyle dans lesquels chacun des alcoyles et le groupement alcoxy ont de 1 à 5 atomes de carbone ou groupements a- ou Balcoxy-N-pyrrolidinyle dans lesquels le groupement alcoxy comporte de 1 à 5 atomes de carbone; -2- - R4 représente un atome d'hydrogène ou de chlore et - R6 représente un reste hydrocarboné inférieur jusqu'en Cs, saturé ou insaturé, éventuellement substitué par un radical hydroxy ou par un reste amino N(R2) dans lequel R représente de l'hydrogène ou un alcoyle inférieur jusqu'en C3. Ces composés sont déjà connus sous forme de leurs mélanges racémiques, par exemple dans nos brevets No. 2 499 574, 2 553 417, 2 555 181, 2 554 817 et 2 559 152. Ils présen- tent diverses activités thérapeutiques, mais il a été découvert que, pour la plupart d'entre eux, l'un des stéréoisomères était plus actif que l'autre. C'est pourquoi il était souhaitable de trouver une méthode pour les séparer. La présente invention concerne une méthode pour la séparation des stéréoisomères de dérivés de la hydroxy-7 furo [3,4-c] pyridine qui consiste à faire réagir un halogénure de monosaccharide complètement O-acétylé sur le mélange racémique correspondant du dérivé de la hydroxy-7- furo [3,4-c] pyridine, pour former les éthers mixtes (+) et (-) du monosaccharide O-acétylé et du dérivé de la furo [3,4-c] pyridine yl-7, puis à séparer les éthers (+) et (-) par une cristallisation sélective, en milieu hydroalcoolique, des formes acétylées ou des formes désacétylées correspondantes de ces éthers et, finalement, à traiter chacun de ces dérivés séparés, hydrolysant éventuellement la fonction ester, et coupant le pont éther entre le monosaccharide et le dérivé de la furo [3,4-c] pyridine. La désacétylation doit être faite avant la cristallisation sélective lorsque les dérivés désacétylés présentent une plus grande différence de solubilité, dans le milieu hydroalcoolique, que les dérivés acétylés correspondants. -3- Par "monosaccharide", il faut comprendre "glucuronate" ou "glucoside"; par "halogénure de monosaccharide complètement O-acétylé", il faut comprendre, soit un bromure, soit un chlorure du monosaccharide dans lequel tous les groupes hydroxy sont acétylés. Le milieu hydroalcoolique utilisé pour la cristallisation sélective de la présente invention est constitué d'une solution aqueuse d'alcanols inférieurs, jusqu'en C3, c'est-à-dire le méthanol, l'éthanol ou les propanols. EXEMPLE 1 Séparation des stéréoisomères de la dihydro-l,3-methyl- 6-(p-chlorophényl)-3-furo [3,4-c] pyridine. (I: R3 = Cl 1, R4 = H, R6 = CH3). Réaction No. 1 Synthèse du (+) et du (-) de l'éther mixte du dihydro-1,3- méthyl-6-(p-chlorophényl)-3-yl-7-furo [3,4-c] pyridine et du triacetyl-2, 3,4-désoxy-l-yl-l-p-D-glucuronate de méthyl 4,06 g (0,015 mole) de la base dihydro-l,3-p-phényl- (p-chlorophényl)-3-hydroxy-7-furo [3,4-c] pyridine, 1,13 g (4 mmole) de chlorure mercurique et 6,75 g de tamis moléculaire (4 A) sont mis en suspension dans 85 ml de dichloroéthane-l,2 et le mélange est porté au reflux pendant 15 minutes. 8,18 g (0,020 mole) de triacetyl-2,3, 4-desoxyl-bromo-l-p-D glucuronate de méthyl sont alors ajoutés en une seule fois. Le reflux est maintenu pendant heures sous circulation d'azote. Après refroidissement, le solvant est décanté dans une ampoule à brome, le flacon et le tamis sont rincés 5 fois avec des aliquotes de 50 ml de dichlorométhane. -4 - Les phases organiques sont combinées, et extraites 3 fois avec des aliquotes de 75 ml d'une solution d'iodure de potassium à 10 %, 3 fois avec des aliquotes d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 % et 2 fois avec des aliquotes de 30 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium. La solution est ensuite séchée avec du sulfate de magnésium anhydre, filtrée et le filtrat est concentré jusqu'à siccité sur un évaporateur rotatif. Le résidu obtenu (7,5 g) est dissout dans 150 ml d'éthanol. Tout en restant à température ambiante, deux traces d'un solide blanc et pelucheux (2,26 g) apparaissent. Ces derniers sont filtrés et le filtrat est- alors concentré à 20 ml. Après refroidissement, un second solide se forme qui est recristallisé dans du méthanol. La filtration donne 1,6 g d'un solide blanc cristallisé (rendement = 44,5 %). Basé sur une évaluation spectroscopique, le premier solide est déterminé comme étant l'éther mixte (-) de la dihydro- 1,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)-3-yl-7-furo [3,4-c] pyridine et du triacetyl-2,3,4-desoxy-l-yl-l-p-D-glucuronate de méthyl, le second solide comme étant l'éther mixte (+) de ces mêmes composés. Analyse pour le composé (+) calculé pour C27H28C1 N 01, C = 56.11%, H = 4. 88 %, N = 2.42 %, observé: C = 55.90 %, H = 4.80 %, N = 2.64 %, 1H NMR dans CDC13, 2.03 ppm (3H, s), 2.05 ppm (3H, s), 2.13 ppm (3H, s), 2.49 ppm (3H, s), 3.75 ppm (3H, s); 13C NMR dans CDC13, 18.7 ppm (CH3), 20.42 ppm (CH,), 52.77 ppm (0-CH3), 101.0 ppm (C-1'); (C = 0.41 dans CHC13); HPLC, RT = 10.88 min. (98.0 %), p.f.: 230-231 C. Réaction No. 2 Synthèse de la forme désacétylée de l'éther mixte (-) de la dihydro-1,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)-3-yl-7-furo [3,4-c] pyridine et du triacetyl-2,3,4-désoxy-l-yl-l-a-D-glucu- ronate de méthyl de la réaction 1 - 5 - 0.5 g (0.8 mmole) de l'éther mixte (-) obtenu au cours de la réaction No. 1 est dissout dans 5 ml d'une solution méthalonique de chlorure d'hydrogène 1,5N. La solution est placée dans une fiole à fond rond de 25 ml équipée d'un réfrigérant et d'une arrivée d'azote. Le profil chromatographique HPLC dans le système de solvant sélectionné, est établi au temps t = 0 par échantillonage d'aliquote. Le flacon est alors placé dans un bain d'huile à 85C, et le taux d'hydrolyse est suivi à 10 minutes, 30 minutes et 45 minutes. Pendant ce temps, presque la totalité de la substance de départ (seulement 2,1 % n'a pas réagi) a été converti en un produit plus polaire (RT = 4,58 minutes) qui représente 75,6 % du mélange. 2 ml d'eau sont ajoutés et le méthanol est supprimé sur évaporateur rotatif à température ambiante. La solution aqueuse est neutralisée avec 2 ml d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 %. Un précipité blanc se forme et est filtré. La cristallisation du solide par l'éthanol donne (76,7 %) un solide blanc pelucheux (280 mg). Analyse: 'H RNM dans CD30D 2.54 ppm (3H, s), 3.77 ppm (3H, s), 7.3 ppm (4H, s), HPLC RT = 4.44 min. (77.5 %) p.f. > + 300 C. Réaction No. 3 Hydrolyse de la fonction ester de l'éther mixte (-) de la dihydro-l,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)-3-yl-7-furo [3,4-cl pyridine et du désoxy-l-yl-l-f-D-glucuronate de méthyl de la réaction No. 2 Dans un tube scellable, 0,18 g (0,4 mmole) de l'éther mixte obtenu au cours de la réaction No. 2 sont dissouts dans 1 ml d'acide chlorhydrique 2N. Le tube est ensuite scellé sous atmosphère d'azote, et chauffé à 86 C. Le taux d'hydrolyse est suivi par HPLC à 30 minutes, 1 heure et 18 heures. -6- Après ce temps, la plupart du composé de départ (il ne reste que 2,5 % qui n'a pas réagi), s'est transformé en un produit majoritaire (91,2 %) éluant à RT = 5,17 minutes. La solution est amenée à un pH d'environ 7 par addition d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 %, et le solvant est alors supprimé par lyophilisation. Le résidu solide est alors rincé plusieurs fois avec du méthanol gelé, puis filtré. Le filtrat est évaporé jusqu'à siccité. Le résidu solide est cristallisé dans un mélange méthanol:eau (1:1 par volume) pour former 150 mg (85,2 %) d'un solide blanc. Analyse: 'H RMN dans CDOD 2.50 ppm (3H, s), 3.48 ppm (3H, m), 5.33 ppm (2H, a, J = 13 Hz), 7.28 ppm (4H, s), 13C RMN dans CD30D 19.39 ppm (CH3), 104.9 ppm (C-l'), M.S. m+/z 261, HPLC RT = 12.78 min. (98.5 %), p.f.: 247-248 C. Réaction No. 4 Synthèse de (-)-dihydro-l,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)- 3-hydroxy-7-furo [3,4-cl pyridine 0,14 g (0,4 mmole) du composé obtenu au cours de la réaction No. 3 sont placés dans une fiole de 25 ml à fond rond équipée d'un réfrigérant et d'une arrivée d'azote. Le solide est dissout dans 1 ml d'acide chlorhydrique 6N. Le mélange est alors chauffé à 85 C pendant 1 heure , puis refroidi dans un bain de glace. Il est ensuite neutralisé avec une solution de bicarbonate de sodium à 5 %. Le mélange hétérogène est séché sur un évaporateur rotatif, et le résidu solide obtenu est rincé plusieurs fois avec du méthanol. Après avoir éliminé presque tout le méthanol, la solution est placée sur une plaque de CCM (silice 2000p) et éluée avec du dichlorométhane:méthanol (5:1 en volume). La bande UV majoritaire à Rf = 0,65 a disparu. La substance organique est rincée avec du méthanol et débarrassée de la silice et le filtrat est alors concentré jusqu'à siccité. -7- Le solide blanc (0,1 g, 96 %) co-élue avec de l'authentique (-) dihydro-l,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)-3-hydroxy-7-furo [3,4-c] pyridine par HPLC. Analyse: IH RMN dans CDC13/CD3OD 2.46 ppm (3H, s), 5.21 ppm (2H, q. J = 12Hz), 6.16 ppm (1H, s), 7.31 ppm (4H, s), 7.560 ppm (1H, s), [6]26 = 109.4 (C = 73 dans du méthanol). Réaction No. 5 Synthèse de la forme désacétylée de l'éther mixte (+) de la dihydro-l,3-méthyl-6-(pchlorophényl)-3-yl-7-furo [3,4-c] pyridine et du triacetyl-2,3,4-désoxy-l-yl-l-e-D-glucu- ronate de méthyl de la réaction No. 1 0,5 g (0,8 mmole) de l'éther mixte (+) obtenu au cours de la réaction No. 1 sont dissouts dans 5 ml d'une solution méthanolique d'acide chlorhydrique 1,5 N. La solution est placée dans une fiole de 25 ml à fond rond équipée d'un réfrigérant et d'une arrivée d'azote. Le profil chromatographique HPLC dans le système de solvant sélectionné est établi au temps t = 0 par échantillonnage d'aliquote. La fiole est ensuite placée dans un bain d'huile à 85 C et le taux d'hydrolyse est suivi aux temps t = 20 minutes, 40 minutes and 60 minutes. Pendant ce temps, la consommation totale du produit de départ est observée et un produit majoritaire (86,7 %) est découvert à RT = 5,74 minutes. 2 ml d'eau sont ajoutés et le méthanol est évacué sur évaporateur rotatif à température ambiante. La solution aqueuse est neutralisée avec 2 ml d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 %. On obtient 340 mg d'un solide blanc. Analyse: 'H RMN dans CD3OD/CDCl3, 2.54 ppm (3H, s), 3.76 ppm (3H, s), 5. 40 ppm (2H, a, j = 102 Hz), 7.29 ppm (4H, s). -8-- Réaction No. 6 Hydrolyse de la fonction ester de l'éther mixte (+) de la dihydro-l,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)-3-yl-7-furo [3,4-c] pyridine et du désoxy-l-yl-l-6-D-glucuronate de méthyl de la réaction No. 5 Sans aucune purification, la totalité (340 mg, 0,74 mmole) du produit obtenu au cours de la réaction No. 5 est placée dans un tube scellable avec 1 ml d'acide chlorhydrique 2N. Le tube est scellé sous atmosphère d'azote, puis chauffé à 85 C pendant 18 heures. La solution est alors refroidie et une solution de bicarbonate de sodium à 5 % est ajoutée pour amener le pH aux environs de 7. Le solvant est évacué par lyophilisation et le résidu résultant est rincé plusieurs fois avec du méthanol glacé, et ensuite filtré. Le filtrat est concentré jusqu'à siccité et le résidu solide obtenu est cristallisé dans un mélange méthanol:eau (4:1 en volume). Après cristallisation, 180 mg (58,4 %) d'un solide blanc sont récupérés. Analyse: IH RMN dans CD30D 2.56 ppm (3H, s), 3.55 ppm (3H, m), 5.48 ppm (2H, s), 6.16 ppm (1H, s), 7.34 ppm (4H, s); 13C RMN dans CD30D 19.56 ppm (CH3), 105.21 ppm (C-1'); M.S. m+/z 261; HPLC p.f.: 259-261 C. Réaction No. 7 Synthèse de la (+) dihydro-1,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)- 3-hydroxy-7-furo [3,4-c] pyridine 0,17 g (00,38 mmole) du composé obtenu au cours de la réaction No. 6 sont placés dans un flacon à fond rond de ml équipé d'un réfrigérant et d'une arrivée d'azote. Le solide est dissout dans 1 ml d'acide chlorhydrique 6N. La solution est chauffée à 85 C pendant 1 heure}, puis refroidie dans un bain de glace. --9-- Le mélange est alors neutralisé avec une solution de bicarbonate de sodium à 5 %. Le mélange hétérogène est séché sur un évaporateur rotatif et le résidu solide obtenu est rincé plusieurs fois avec du méthanol. Après avoir éliminé tout le méthanol, la solution est placée sur une plaque de CCM (silice 2000 y) et éluée avec un mélange de dichlorométhane:méthanol (5:1 en volume). La bande UV majoritaire à Rf = 0,65 a disparu. La substance organique ainsi obtenue est rincée avec du méthanol et débarrassée de la silice et le filtrat est alors concentré jusqu'à siccité. Le solide blanc (70 mg, 70,5 % de rendement) co-élue avec de l'authentique (+) dihydro-l,3-méthyl-6- (p-chlorophényl)-3-hydroxy-7-furo [3,4-c] pyridine sur CCM et a un temps de rétention identique à celui de l'authentique (+) dihydro-l,3-méthyl-6-(p-chlorophényl)-3- hydroxy-7-furo [3,4-c] pyridine par HPLC. Analyse: [6]26 = + 117,3' (C = 4,67 dans du méthanol). D EXEMPLE 2 Cet exemple décrit la séparation des stéréoisomères de dihydro-l,3-méthyl6-isopropyl-3-furo [3,4-c] pyridine (I: R3 = (CH3)2CH R4 = H R6 = CH3) avec du bromure de D-tetraacétate glucosyl. Réaction No. 1 Synthèse de (+) et du (-) dihydro-l,3-méthyl-6-(isopropyl)- 3-(tetraacetyl-2,3,4,6 P-D-glucopyranosyloxy)-7-furo [3,4- c] pyridine La réaction du bromure de tetraacetyl-2,3,4,6 f-D-gluco- pyranosyl est réalisée dans les même conditions que celles décrites dans la réaction No. 1 de l'exemple 1, mais sans cristallisation sélective, car la différence de solubilité dans le milieu alcoolique, des formes (+) et (-) du composé résultant, n'est pas suffisante. - 10 - Réaction No. 2 Désacétylation et séparation du (+) et du (-) de la dihydro- 1,3-méthyl-6-(isopropyl)- 3-(tetraacetyl-2 r 3,4,6 B-Dglucopyranosyloxy)-7-furo [3,4-c] pyridine Dans un erlen de 100 ml, on verse 6 g (12,4 mmole) du produit obtenu lors de la réaction No. 1 et 50 ml d'éthanol. Le mélange est refroidi avec de la glace à 10DC, puis saturé avec de l'ammoniaque et, enfin, laissé au repos pendant une nuit dans le réfrigérateur. Le précipité formé est alors filtré, lavé avec du méthanol, puis avec du diéthyléther et repris avec 160 ml d'un mélange éthanol:eau (50:50 par volume). 1,3 g d'un solide blanc sont filtrés et le filtrat est concentré. Un second solide se forme qui est recristallisé dans l'éthanol. 1,4 g d'un solide cristallisé sont ainsi obtenus (rendement total: 67 %). Basé sur une évaluation spectroscopique, le premier solide est déterminé comme étant le (-) et le second solide comme étant le (+) de la dihydro-l,3-méthyl-6-(isopropyl)-3- (,e-D-glucopyranosyloxy)-7-furo [3,4-c] pyridine. Réaction No. 3 Synthèse de la (+) dihydro-l,3-méthyl-6-isopropyl-3- hydroxy-7-furo [3,r4-c] pyridine Dans un erlen de 50 ml, on verse 0,57 g (1,6 mmole) du composé (+) obtenu dans la réaction mentionnée ci-dessus, 3 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 6N et 1 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 80 C pendant environ 2 heures, puis refroidi à température ambiante. Le précipité obtenu est filtré, puis lavé avec de l'eau et se dissout dans l'eau. Les eaux de lavage sont alors neutralisées avec du bicarbonate de sodium et il se forme à nouveau un précipité. - il - Ce précipité est alors lavé avec de l'eau et séché pour donner 0,20 g (65 %) du composé recherché. - 12 - R E V E N D I C A T I ON S 1) Méthode de séparation des stéréoisomères de dérivés de la 7-hydroxyfuro [3,4-c] pyridine de formule HO R3 R6 R4 dans laquelle: - R3 représente un atome d'hydrogène, un groupement hydrocarboné en chaîne droite saturé comprenant de 1 à atomes de carbone ou un groupement hydrocarboné non saturé comprenant de 2 à 5 atomes de carbone, un groupement hétérocyclique comprenant jusqu'à 6 atomes dans le cycle, un groupement phényl, un groupement alcoylphényl ou alcénylphényl, lesdits groupements étant éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes de chlore ou de fluore, groupements trifluoro- méthyl, groupements alcyle comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, groupements alcoxy comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, groupements thioalcoyle comprenant de 1 à 5 atomes de carbone, groupements aminodialcoyle dans lesquels chacun des alcoyles comporte de 1 à 5 atomes de carbone, groupements alcoxyaminodialcoyle dans lesquels chacun des alcoyles et le groupe alcoxy ont de 1 à 5 atomes de carbone ou groupements a- ou f-alcoxy-N-pyrrodidinyle dans lesquels le groupement alcoxy comporte de 1 à 5 atomes de carbone; - 13 - - R4 représente un atome d'hydrogène ou de chlore et - R6 représente un reste hydrocarboné inférieur jusqu'en Cs saturé ou insaturé, éventuellement substitué par un radical hydroxy ou par un reste amino N(R. ) dans lequel R représente de l'hydrogène ou un alcoyl inférieur jusqu'en C3, méthode qui comprend: - la réaction d'halogénure de monosaccharide complètement O-acétylé sur le mélange racémique du dérivé de l'hydroxy-7furo [3,4-c] pyridine, pour former les éthers mixtes (+) et (-) du monosaccharide O-acétylé et du dérivé furo [3,4-c] pyridine yl-7, puis la séparation des éthers (+) et (-) par la cristallisation sélective, en milieu hydroalcoolique, des formes acétylées ou des formes désacétylées correspondantes, - le traitement de chacun de ces dérivés séparés, l'hydrolyse éventuelle de la fonction ester et - la coupure de la liaison éther entre le monosaccharide et le dérivé de la furo [3,4-c] pyridine. 2) Méthode de la revendication 1 au cours de laquelle la désacétylation est réalisée avant la cristallisation sélective. 3) Méthode de la revendication 1 au cours de laquelle la cristallisation sélective est réalisée avant la désacétylation. - 14 - 4) Méthode des revendications 2 et 3 au cours desquelles la cristallisation sélective est réalisée dans une solution aqueuse d'alcanols inférieurs jusqu'en C3. ) Méthode de la revendication 1 au cours de laquelle l'halogénure de monosaccharide est un bromure de glucoside, un chlorure de glucoside, un bromure du glucuronate-ester ou un chlorure du glucuronate-ester.