Brevet FR2648046A1 — publié le 19901214

L'invention a pour objet une composition à base de ginseng pour le traitement d'un déficit immunitaire. Les actions du ginseng sont connues depuis des temps très anciens. La médecine préconise l'utilisation du ginseng dans les cas suivants - fatigue, neurasthénie, anémie, impuissance, palpitations, diabète, indigestion chronique, troubles cardio-vasculaires, hypotension artérielle. L'invention permet de lutter contre le déficit immunitaire et ce, en augmentant le système d'auto défense de l'organisme. L'état de la technique peut être défini par les brevets suivants FR-A-2.531.864 : l'invention concerne un adminiculum augmentant l'activité anti-tumeur de la mitomycine C et du chlorhydrate de doxorubicine. Cet adminiculum comprend un extrait dans de l'eau ou dans un solvant organique aqueux en tant que composant actif, d'un produit pharmaceutique brut constitué d'Astragali radix, de chinnamomi cortex, de Rehmanniae radix, de Paeoniae radix, de Cnidii rhizoma, d'Atractylodis lanceae rhizoma, d'Angelicae radix, de ginseng radix, de Hoelen et de Glycyrrhizae radix. Application au traitement de tumeurs. FR-A-2.532.179 : l'invention concerne une préparation pharmaceutique. Cette préparation comprend un extrait dans de l'eau ou un solvant organique aqueux, comme composant actif, d'un ou de plusieurs produits pharmaceutiques bruts choisis dans le groupe constitué d'Astragali radix, de Chinnanomi cortex, de Rehmanniae radix, de Paeniae radix, de Cnidii rhizoma, d'Atractylodis lancea rhizoma, d'Angelicae radix, de ginseng radix, de Hoelen et de Glycyrrhizae radix. Cette préparation améliore les symptômes du cancer. L'invention met en évidence, par un test dthémagglutination, une nouvelle application d'une composition à base de ginseng. TEST D'HEMAGGLUTINATION Les résultats obtenus en réalisant ce test permettront de vérifier si le ginseng peut favoriser la production d'anti-corps chez la souris C57BL soumise à des injections intra-péritonales d'érythrocytes de mouton. CONDITIONS EXPERIMENTALES Cette expérimentation a été réalisé sur des souris de souche C57BL en provenance de l'élevage IFFA-CRED3. Durée de l'expérimentation : 10 jours Date de début d'expérience : 17 août 198?. - Matériel animaux : Quatre lots de 20 souris C57BL d'un poids moyen variant entre 18 et 23 g. sont sélectionnés. - Conditions d'animalerie Température = 210C Hygromètrie = 65 % Nourriture : boisson et aliment complet extra-labo, ad libitum. MODE OPERATOIRE Produits à tester : ginseng rouge semi-sauvage renfermant 8 % de saponines. Le ginseng est mis en suspension dans l'eau à raison de 9,43 g de poudre dans 100 ml (suspension S), cette solution renferme donc 750 mg de saponines pour 100 ml. Le lot A : souris femelles numérotées Al à A20, recevra per os 0,2 ml de suspension pour 10 g de poidscorporel. Le lot B : souris mâles munérotées de B1 à B20, recevra 0,2 ml de la suspension S pour 10 g de poids corporel. Le lot C : souris femelles numérotées Cl à C20, constitue le lot témoin. Le lot D : souris mâles numérotées D1 à D20, constitue le lot témoin. Au temps T = O et au temps T = 8 jours, les animaux sont pesés. On réalise une observation comportementale des animaux quotidiennement, pendant tout le temps de l'expérimentation. Tous les jours, pendant sept jours, les souris reçoivent, à l'aide d'une sonde gastrique, 0,2 ml de la suspension S pour 10 g de poids corporel. Parallèlement, les souris sont soumises à des injections intrapérîtonéales d'érythrocytes de mouton en suspension dans du sérum physiologique dans les proportions de 3:5. Ces injections sont au nombre de trois et sont pratiquées tous les deux jours, à partir du temps T = O, à la dose de 0,2 ml/souris. Vingt quatre heures après la dernière administration de ginseng, le sang est prélevé à l'aide d'une pipette pasteur effilée, au niveau du sinus rétro-orbital (entre 1,5 et 2 ml de sang par animal). Le sérum recueilli est ensuite soumis au test d'hémagglutination selon la méthode de Takatsy, légèrement modifiée comme indiqué ci-dessous. TRAITEMENT DU SERUM Recueillir le sang dans un tube propre et sec. Laisser coaguler lentement à la température du laboratoire, décanter le sérum et le centrifUger. Ne pas utiliser de sérum lactescent ou très hémolyse. Le sérum peut entre conservé à la température de 4oC pendant quatre jours. Exécution de la réaction 1) dilution initiale des sérums dans un tube à hémolyse, verser 0,2 ml de sérum à examiner, ajouter 0,8 m1 d'eau physiologique. Laisser reposer pendant une heure à la température ordinaire en agitant tous les quarts d'heure. Titrage des agglutinines Disposer dans deux supports à dix trous, vingt tubes à hémolyse, verser dans tous les tubes, sauf le premier, 0,25 ml d'eau physiologique. Répartir dans le premier et le deuxième tube, le sérum à examiner dilué au 1/5e au volume de 0,25 ml. Agiter le tube nO 2, puis prélever 0,25 ml et verser dans le tube n03, agiter ce tube et prélever 0,25 ml que l'on verse dans le tube n04, ainsi de suite jusqu'au tube nO 20. Verser les 0,5 ml prélevés dans un tube nO 21 que l'on conserve à T = 40C pour pousser plus loin les dilutions si nécessaire. Ajouter alors dans tous les tubes 0,1 ml d'une suspension d'hématies de mouton à 2% dans l'eau physiologique. Agiter et laisser à la température du laboratoire pendant deux heures. Agiter de nouveau, et on peut, à ce moment, faire une première lecture. Après dix huit heures à vingt heures à T = 4CC, faire, si nécessaire, une deuxième lecture à l'aide d'ur. miroir concave. Quotation des résultats : 0,1,2 O - pas d'agglutination. 1 - agglutination moyenne. 2 - agglutination totale. RESULTATS L'ensemble des résultats est consigné de façon détaillée dans les tableaux en annexe. Pouvoir agglutinant du sérum du lot A : 1/3494 Pouvoir agglutinant du sérum du lot B : 1/3852 Pouvoir agglutinant du sérum du lot C : 1/43 Pouvoir agglutinant du sérum du lot D : 1/34 Le coefficient moyen déterminant l'augmentation de la production d'anticorps chez les animaux traités avec du ginseng rouge semi-sauvage est le suivant M témoins femelles = 1/43 = 81,255 M traités femelles 1/3494 M témoins mâles = 1/34 = 113,294 M traités mâles 1/3852 M témoins total = 1/38,5 = 95,558 M traités total = 1/3673 On constate que ces coefficients diffèrent peu en fonction du sexe et qu'ils sont considérablement élevés chez les animaux traités. Ce qui confirme l'activité du ginseng rouge semi-sauvage sur la production d'anti-corps. CONCLUSION Le traitement du ginseng rouge semi-sauvage a permis de mettre en évidence une augmentation considérable de la production d'anti-corps. Les agglutinines manifestent encore leur activité aux dilutions suivantes Animaux traités : mâles : 1/3852 femelles : 1/3494 Animaux témoins : mâles : 1/34 femelles : 1/43 Notons que pendant tout le temps de l'expérimentation, l'état comportemental des animaux est resté normal, les animaux traités ont eu une croissance pondérale légèrement plus importante que les animaux témoins. POUVOIR AGGLUTINANT DU SERUM LOT A N 1/7 1/14 1/28 1/56 1/112 1/224 1/448 1/896 1/1792 1/3584 1/7168 1/14336 tube 1 tube 2 tube 3 Tube 4 tube 5 tube 6 tube 7 tube 8 tube 9 tube 10 tube 11 tube 12 A1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 A2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 0 0 A3 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 A4 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 0 A5 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 A6 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 0 A7 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 0 0 A8 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 A9 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 A10 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 0 0 A11 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 A12 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 A13 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 0 A14 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 A15 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 A16 2 2 2 2 2 2 1 1 0 0 0 0 A17 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 A18 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 0 A19 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 A20 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 Dilution moyenne = 1/3494 POUVOIR AGGLUTINANT DU SERUM LOT B N 1/7 1/14 1/28 1/56 1/112 1/224 1/448 1/896 1/1792 1/3584 1/7168 1/14336 tube 1 tube 2 tube 3 Tube 4 tube 5 tube 6 tube 7 tube 8 tube 9 tube 10 tube 11 tube 12 B1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 B2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 B3 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 0 0 B4 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 B5 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 0 0 B6 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 B7 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 0 B8 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 0 B9 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 B10 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 B11 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 0 B12 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 B13 2 2 2 2 2 2 2 2 0 0 0 0 B14 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 B15 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 B16 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 0 B17 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 0 B18 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 0 0 B19 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 B20 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 0 Dilution moyenne = 1/3852 POUVOIR AGGLUTINANT DU SERUM LOT C N 1/7 1/14 1/28 1/56 1/112 1/224 1/448 1/896 1/1792 1/3584 1/7168 1/14336 tube 1 tube 2 tube 3 Tube 4 tube 5 tube 6 tube 7 tube 8 tube 9 tube 10 tube 11 tube 12 C1 2 2 2 1 1 0 0 0 0 0 0 0 C2 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 C3 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 C4 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C5 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C6 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 C7 2 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C8 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C9 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 C10 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C11 2 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C12 2 2 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 C13 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C14 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C15 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 C16 2 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C17 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C18 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 C19 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 C20 2 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 Dilution moyenne = 1/43 POUVOIR AGGLUTINANT DU SERUM LOT D N 1/7 1/14 1/28 1/56 1/112 1/224 1/448 1/896 1/1792 1/3584 1/7168 1/14336 tube 1 tube 2 tube 3 Tube 4 tube 5 tube 6 tube 7 tube 8 tube 9 tube 10 tube 11 tube 12 D1 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 D2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D3 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D4 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 D5 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D6 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D7 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D8 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 D9 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D10 2 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D11 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D12 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 D13 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D14 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D15 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D16 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 D17 2 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 D18 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D19 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 D20 2 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Dilution moyenne = 1/34 LOT A TRAITE - POIDS AU TEMPS T = O (en g) A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 A11 A12 A13 A14 A15 A16 A17 A18 A19 A0 19,1 0,4 18,3 19,8 19,5 0,1 18,0 18,6 19,4 18,9 0,5 18,7 18,7 0,5 18,5 19,5 19,1 19,0 19,0 0,0 POIDS AU TEMPS T = 8 jours (en g) 18,5 20,7 18,6 20,0 19,9 20,4 18,1 18,7 19,4 18,8 20,6 18,7 18,7 20,6 20,5 19,7 19,3 19,3 19,3 20,0 AU TEMPS T = O : M = 19,3 g (+1,27 - 1,23) AU TEMPS T = 8 : M = 19,5 g (+ 1,1 - 1,4) LOT B TRAITE - POIDS AU TEMPS T = O (en g) B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 B11 B12 B13 B14 B15 B16 B17 B18 B19 B0 19,5 20,2 20,4 21,3 20,8 19,9 19,8 21,8 22,1 20,7 20,8 19,8 19,5 19,7 20,8 21,6 20,5 19,5 21,6 20,2 POIDS AU TEMPS T = 8 jours (en g) 19,7 20,5 20,8 21,2 21,1 20,0 19,9 21,7 22,4 20,8 20,9 20,7 19,9 20,1 20,8 21,7 20,3 20,3 21,7 20,4 AU TEMPS T = O . M = 20,52 g (+1,875 - 0,825) AU TEMPS T = 8 : M = 20,745 g (+ 1,655 - 1,045) LOT C TEMOIN - POIDS AU TEMPS T = O (en g) C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9 C10 C11 C12 C13 C14 C15 C16 C17 C18 C19 C20 18,5 19,2 18,4 19,3 20,8 19,2 19,8 18,8 18,1 19,7 20,5 19,2 18,5 21,1 20,8 20,0 20,1 19,5 18,6 19,2 POIDS AU TEMPS T = 8 jours (en g) 18,7 19,5 18,8 19,2 20,9 19,0 19,7 18,9 18,2 19,8 20,5 19,3 18,7 20,9 20,8 20,3 19,9 19,9 18,4 19,4 AU TEMPS T = O : M = 19,465 g (+1,335 - 1,065) AU TEMPS T = 8 : M = 19,54 g (+ 1,36 - 1,14) LOT D TEMOIN - POIDS AU TEMPS T = O (en g) D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D8 D9 D10 D11 D12 D13 D14 D15 D16 D17 D18 D19 D20 20,5 21,2 20,4 22,3 21,8 19,8 19,8 20,8 21,1 21,7 20,5 20,4 19,5 21,1 20,5 20,2 20,8 19,2 19,8 19,1 POIDS AU TEMPS T = 8 jours (en g) 20,7 21,2 20,3 22,2 21,9 19,9 19,7 20,6 21,2 21,8 20,5 20,3 19,7 21,0 20,8 20,3 20,9 19,6 19,8 19,0 AU TEMPS T = O : M = 20,51 g (+1,79 - 1,41) AU TEMPS T = 8 M = 20,565 g (+ 1,635 - 1,565) REVENDICATIONS 1. Composition pour le traitement d'un déficit immunitaire en augmentant le système d'auto défense de l'organisme caractérisé par le fait qu'elle utilise du ginseng rouge semi-sauvage en suspension dans de l'eau ou un produit aqueux ou une poudre pure. 2. Composition selon la revendication 1 caractérisé par le fait que le ginseng rouge semi-sauvage renferme environ 8% de saponines. 3. Composition selon la revendication 1 caractérisé par le fait que le ginseng rouge semi-sauvage est mis en suspension dans un produit aqueux ou une poudre pure à raison de 9,43 g de poudre dans 100 ml.