Brevet FR2647113A1 — publié le 19901123

La présente invention concerne la chimie or- ganique, et plus précisément, des composés nouveaux, notamment les esters adamantyliques de l'acide 2,6- dimétyl-1,4-dihydropyrfidine-3,5-dicarboxylique possé- O5 dant une activité radioprotectrice. Les composés in- diqués peuvent trouver une application dans la pré- vention et le traitement des lésions par rayons de la peau, des muqueuses et des yeux de patients, par exemple dans les conditions cliniques de cancérologie au cours de la radiothérapie. Ces dernières années, le nombre de malades subissant une radiothérapie s'est incessamment accru. Comme le témoignent de nombreux examens cliniques, la peau, les muqueuses et les tissus sous-cutanés mous restent les organes les plus lésés, chez les patients subissant la radiothérapie. Actuellement, on élabore et met en pratique divers moyens pour la prophylaxie et le traitement de différentes lésions de la peau et d'autres orga- nes des malades subissant la radiothérapie. Cepen- dant, bien qu'il y ait un nombre de bonnes élabora- tions liées à l'utilisation des moyens locaux pour la protection et le traitement des téguments cutanés des malades et un grand choix des moyens m9dicamen- taux traditionnels pour la prophylaxie et pharmaco- thérapie des lésions par rayons, le problème n'est pas encore radicalement résolu et reste actuel. On connait, à l'heure actuelle, des moyens de traitement des lésions par rayons tels que le di- méthylsulfoxyde, la mexamine (hydrochlorure de 5-mé- thoxytriptamine), la cystamine ( Â-mercapto-éthyla- mine), l'ionol (4-méthyl-2,6-di-tertbutylphénol), la pommade au méthyluracile et autres (Bardychev M. S., Tsyb A. F. "Les radiolésions locales". Ed. Me- ditsina, Moscou, 1985, pp. 55-67; Ivanov E. V. et ai. "Evaluation quantitative de l'action protectrice de quelques protecteurs de la peau", Meditsinskaya radiologia, Moscou, 1983, N 7, pp. 40-44). Les préparations indiquées, bien que pré- sentant une certaine action préventive, sont prati- quement inefficaces quant elles sont utilisées en thérapeutique. Etant toxiques, elles sont inutilisa- bles en tant que moyens préventifs semi-cosmétiques qui seraient appliqués chaque jour sur la peau des mains du personnel travaillant avec les sources de radiation ionisante. On connaft une substance dont la structure est proche de celle des composés selon l'invention, à savoir la 2,6-diméthyl-3,5-bis-(1-adamantyloxycar- bonyl)-4-(2-difluorméthoxyphényl)-1,4-dihydropyridi- ne répondant à la formule suivante: H (US-A-4 487 932). Ce composé ne possède pas d'acti- vité radioprotectrice. Les composés selon l'invention sont nouveaux et non-décrits dans les publications. On s'est proposé de créer de nouvelles sub- stances possédant une haute activité radioprotectri- ce, une faible toxicité, qui peuvent être utilisées pour la prophylaxie et le traitement des lésions par rayons de la peau, des muqueuses, des yeux et des glandes salivaires, y compris à des doses d'irradia- tion élevées. La solution selon l'invention consiste en de nouveaux composés, notamment les esters adamantyli- ques de l'acide 2,6-diméthyl-l,4-dihydropyridine-3,5- dicarboxylique de formule générale: H H ROOC I H dans laquelle R = 1' - adamantyle ou 2' - adamantyle. Les structures des composés selon l'inven- tion sont prouvées par les données de l'analyse élé- mentaire, des spectres infrarouge et ultraviolet et des spectres de résonance magnétique nucléaire. La 2,6-diméthyl-3,5-bis-(l'-adamantyloxy- carbonyl)-1,4-dihydropyridine (composé 1 selon l'in- vention) est une substance cristalline jaune-clair avec fluorescence bleuâtre dans la lumière ultravio- lette; température de décomposition 213 à 219 C. Trouvé, %: C 74,9; H 8,2; N 2,9; Calculé, %: C 74,8; H 8,4; N 3,0. Spectre RMN dans CDC13, S: 1,67 (singl., 12Hó 2,6-CH3 et f- H d'adamantane); 2,15 (singl., 24H, t- H et &-H d'adamantane); 3,17 (singl., 2H, 4-CH2); ,12 ppm (large singl., 1H, NH). Spectre ultraviolet dans l'éthanol, max (lg): max 233(4,15), bras 252(3,90), 377 nm(3,81). Spectre infrarouge (dans Nujol): 1703 cm-1 (C=O), 3340 cm-1 (NH). La 2,6-diméthyl-3,5-bis-(2'-adamantyloxy- carbonyl)-1,4-dihydropyridine (composé 2 selon l'in- vention) est une substance cristalline jaune-clair avec fluorescence bleuâtre dans la lumière ultravio- lette; température de décomposition 205 à 208 C (à partir du mélange de benzène et d'hexane 1:1). Trouvé, %: C 74,6; H 8,4; N 2,8; Calculé, %: C 74,8; H 8,4; N 3,0. Spectre RMN dans CDC13, È: 1,40-2,13 (mult. o05 28H, Q-H, ' -H et -H d'adamantane); 2,20 (singl., 6H, 2,6-CH3); 3,43 (singl., 2H, 4-CH2); 4,98 (singl., 2H, C -H d'adamantane); 5,28 ppm (large singl., 1H, NH). Spectre ultraviolet dans l'éthanol, À max (lg &): 233(4,21), bras 252 (3,97), 380 nm(3,84). Spectre infrarouge (dans Nujol): 1693 cm-1 (C=0), 3350 cm-1 (NH). Les composés selon l'invention possedent une activité radioprotectrice et peuvent trouver une application à titre d'agents prophylactiques et de traitement des lésions par rayons de la peau, des muqueuses, des yeux et des glandes salivaires. L'invention concerne donc aussi les compositions pharmaceutiques comprenant ces composés ainsi qu'un excipient ou véhicule pharmaceutiquement acceptable. L'activité radioprotectrice des composés selon l'invention a fait l'objet d'études expérimen- tales portant sur les animaux. L'étude de l'action radioprotectrice du composé selon l'invention a été réalisée sur 520 souris sans lignée et 270 rats des deux sexes à la suite de l'irradiation locale (peau, tête, ventre) et l'irradiation totale de la peau à des doses de à 100 Gy (1500 à 10000 rad) ou des doses sublé- thale et léthale (tête, ventre) de 7 à 30 Gy (700 à 3000 rad) à la suite d'une irradiation unique ou d'1uvsérie d'irradiations. Le composé 1 selon l'invention fut essayé sous forme de pommades cutanées et ophtalmologiques à base de vaseline et de lanoline à une teneur en -2647113 principe actif de 2 à 30 %, sous forme de solution huileuse pour la pulvérisation de la muqueuse de la cavité buccale, à base d'huile de vaseline ou d'hui- le de tournesol a une teneur en principe actif de 20 à 30 % ainsi que sous forme de suppositoires con- tenant 30 % de composé 1 selon l'invention. La pom- made était appliquée sur la peau une fois ou plu- sieurs fois avant ou après l'irradiation ainsi que par fractions avant chaque irradiation de la série. Pour tous les groupes d'animaux était établi le con- trôle respectif à l'irradiation mais sans l'action chimique et le contrôle avec l'emploi de la vaseli- ne, de certains radioprotecteurs connus, tels que la mexamine, la cystamine, l'ionol, le diméthylsulfoxy- - de, sous forme de solutions à 5 % ou de pommades. L'ionol (4-méthyl-2,6-di-tertbutylphénol) était pris en tant que témoin comme analogue pour la caractéristique de comparaison, vu qu'on disposait de données sur sa bonne efficacité radioprotectrice. Afin d'étudier l'effet radioprotecteur lo- cal, on soumettait à l'irradiation la peau de la plante des pattes. L'irradiation était effectuée par un émetteur de rayons X à l'intensité de courant de 62,5 pA et à la tension anodique de 26 kV. L'énergie effective (Eeff) au régime indiqué était égale à 8 keV. La dose d'absorption dans la couche cutanée de 1 mm d'épaisseur était de 61 % par rapport à la dose d'entrée. A l'aide d'un embout spécial installé sur le tube de l'émetteur, les pattes postérieures du rat étaient immobilisées sur une distance de i cm du tube de rayons X, ce qui assurait des conditions standards d'irradiation et la protection du reste du corps du rat. On soumit à l'irradiation des surfaces du derme de 90 mm sur chaque patte. La puissance de la dose d'exposition était de 5.10-3 A/kg (ou 11,6 Gy par minute), la dose à la surface était de 7,7.10-1 C/kg ou 30 Gy. On réalise l'irradiation de la tête et du corps à la tension anodique de 200 kV, à l'intensité de courant de 15A, à la distance focale de 30 cm, sur le filtre de 0,5 mm Cu + 1 mm A1. La puissance de la dose était de 1, 5 Gy par minute ou 0,645 A/kg et on utilisait un protecteur de plomb. Pour déterminer l'action protectrice et biostimulante furent utilisées les méthodes radio- biologiques, oncologiques, dermatologiques, ophtal- mologiques à l'aide desquelles on observait et exa- minait en dynamique journellement les animaux pendant un mois et enregistrait les lésions. En certains cas, on observait les animaux vivants durant 6 à 12 mois, afin d'étudier des lésions chroniques. On appréciait la survie et la durée de vie des animaux soumis à l'irradiation, l'état de la san- té en comparaison avec le témoin respectif; on effec- tuait l'autopsie des animaux tombés et endormis à di- vers moments, l'observation et la pesée des organes intérieurs, l'examen pathomorphologique de la peau, de la langue, du rectum, des yeux. On effectuait éga- lement les examens morphologiques lumino-microscopi- ques de la peau, des muqueuses et des yeux à de divers délais après l'irradiation, en commençant par un jour jusqu'à 30 jours et les examens par microscopie électro- nique. L'appréciation quantitative de l'effet radio- protecteur des composés 1 et 2 selon l'invention sur la peau chez des animaux vivants, fut réalisée par des observations régulières de l'évolution clinique de la "radiodermite". On enregistrait les manifestations du- rant un mois jusqu'à une guérison clinique complète des radiolésions. Les substances à essayer (composés selon l'invention, méxamine, cystamine, diméthylsulfoxyde) sous forme de solutions à 5 % et de pommades à base de vaseline ou d'autres excipients, furent appliquées sur la peau 20 minutes avant l'irradiation une seule fois ou selon des schémas spéciaux, en partant de mg de la préparation médicinale prête (5 mg de principe actif) par 1 cm2 de la peau à chaque appli- cation. Les résultats des études indiquées sont pré- sentés aux tableaux 1-5 ci-dessous. Tableau 1 Résultats de l'évaluation de l'action radioprotectrice sur les téguments cutanés des rats des composés 1 et 2 selon l'invention ___________ ___________ ___________ ___________ ___________ E.,ssProduit Type Dose:Nombre: Nombre N0 N Produit: d'irradiation: en * d 1 Produit en de de N o:dlîrradiation Gy 'rats: locus - - - - - - - - - - - - - - - - -_ _ _ _ __-- - - - -_-- - - -_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 1 * 2 3: 4: 5: 6 ______________ ______________ ______:_______ ______________ 1. Témoin Rayons X 20 il 22 2. Diméthylsulfoxyde eff = 8 keV 7 14 eff=8ke 3. Composé 1 selon 7 14 l'invention 4. Témoin idem 30 16 31 5. Diméthylsulfoxyde 14 26 6. Composé 1 selon 14 26 l'invention 7. Témoin idem 30 26 52 8. Composé 2 selon 7 14 l'invention 9. Témoin idem 40 7 14 10. Composé 1 selon - 14 28 l'invention 11. Dimétylsulfoxyde 7 14 12. Témoin idem 100 5 10 13. Composé 1 selon 5 10 l'invention 14. Diméthyls1ulfoxyde 5 10 Tableau 1 (suite) ____________________________________________________________ ESsai Durée de la reaction (jours) X + m N : Erythème Desquamation leger grave sèche suintante l7 * 8 9 10 1. 2,G6!,3 4,t!O,6 0,2-_,0 2. 2,9+O,3 2,8+0,6 0,1 0,1 3. 1,7-0,3x 1,4ZO,4xxx o,O O,Oxxx 4. 1,6-0,3 1,6-0,2 4,5+0,4 2,9 0,3 5. 1,8-10,2 1,8-0,2 3,4-0,4x 1,4-0,4X 6. 2,7 O,3x 1,8ZO,2 3,4!0,4x 0,0,1x 7. 1,6!0,1 2,1ZO,1 5,9O0,2 5,0 0,3 8. 2,20,2 1,6O+C,2x 8,9-0,6 3,!0O,6x 9. 1,D0,2 2,eC,,2 7,#6O,9 7,210,6 l. 2,80ZO,4 2,1+1,2x 8,2:0,G 4,5-C,6xxx 11. 1,4+0,2 1,6o0-2xx O,'l-0,8 8,701, 12. 2,+0,5 l,0,3 9,4ZC,9 2,60,9 13. 2,3O0,5 O,7!0,2 10,01,1 c,6+C,9X 14. 1,4!0,3 1,80O,3 9,0!O,9 10,30O,9 Note: X - moyenne arithmétique n - erreur moyenne quadratique de la moyenne arithmétique x - différence par rapport aux témoins statis- tiquement significative avec -ne probabilité d'au moins 0,95 (x), 0,99 (xx) et Y,999 (xxx), - dans les autres cas la probabilité est moins de 0, 95 Tableau 1 (suite) ____________________________________________-___________ : Diminution de la durée de la reaction_ % ___ Essyt * Desquamation No: Erythème -----------------.------------------ :.:, sèche suintante i ' ll: 12 13 _____________________________________:__________________ 1. 0 0 0 2. 3. 35 66 100 4. 0 0 0 5. - 25 52 6. - 25 75 7. 0 0 0 8. 24 - 28 9. 10. 20 - 43 il. 39 - 12. - - 13. 37 32 14. - -------------------------------------------------------- -2647113 Tableau 2 Résultats des essais de l'activité radioprotectrice de la pommade à base du composé 1 selon l'invention à différentes concentrations à la suite de l'ir- radiation de la peau des pattes à la dose de 30 Gy :: :Durée de la reaction(jours) Essai. Nombre: __m N : Produit: de: locus: erythème . À * leger grave l 2 ' 3: 5 . 4. 5 1. Témoin 13 0,810,1 3,8-0,3 2. Composé 1 selon 4 l'invention (2%) 14 2,20,4 1,40t,2xXX 3 _ t- (5%) 14 2,1+0,3x 1,'-0,3 4. - " - (10%) 14 2,2-0, 2xx 1,6+O,2xx Tableau 2 (suite) : Durée de la reaction (jours): Es=> X- + m *Durée totale O: Desquamation de la reaction sèche suintante 1l *6 7 8 1. 3,6 0,3 6,5+0,3 14,7*0,3 2. 5,2!0,3XX 2i,410,4XX 11,2-0,3 3. 5,GS0,5x 2,2!0,4xx 11,5+0,3 4. 5,70, 3xx 1,9+05 XxX 11,4-0,3 Note: x -difference par rapport aux témoins statistique- ment significative avec uneprobabilité d'au moins 0,95 (x), 0,99 (xx) et 0,999 (xxx) 12 2647113 Tableau 3 Résultats de l'évaluation de l'effet radioprotecteur sur la peau des rats du composé selon l'invention en comparaison avec les agents radioprotecteurs connus :.eDurée de la réaction(jours)XZm Essa Nombre NO Produit de ' Erythème locus ::: léger grave l ' 2 3 4 5 1. Témoin 14 1,40,2 3,2 0,2 2. Composé 1 selon 14 2,0-0,2 1,9+0,3x l'invention + xx 3. Mexamine 12 1,9-0,4 1,7-0,4x 4. Ionol 14 1,1 0,2 2,6 0,4 5. Diméthylsulfoxyde 8 1,7 0,5 1,70,4xxx Tableau 3 (suite) Essai Durée de la réaction (jours) X m N : Essai____________________ :Durée totale No Desquamation Drettl N:0 Desquamation: de la réaction sèche suintante !: * 6 7 * 8 1. 4,1-,0,3. 5,1+0,6 13,8+0,6 2. 6,0 0,2 1,5-0,4 x 11,4O0,6 3. 5,9 0,5 2,4-0,5x 11,9 1,1 4. 7,9 0,5xx 3, 1 0,6xx 16,7 1,3 5. 7,9 0,8 3,5 0,4x 14,8+0,6 Note: x _ différence par rapport aux témoins statistique- mentsignificative à uneprobabilité d'au moins 0,95 (x), 0,99 (xx), 0,999 (xxx). Tableau 4 Résultats de l'étude de l'action radioprotectrice des solutions et des pommades à base du composé 1 selon l'invention en comparaison avec les agents radioprotecteurs connus sur la peau des rats * * *Durée de la réaction(jours)Xkm ESsaL: Nombre - N : Produit * de. Erythème locus léger grave l. 2 3: 4 5 1. Témoin 14 1, 3 0,4 1,3 0,4 2. Composé 1 selon 14 2,8+0,4 2,30,3 l'invention 2,8-0,4 2, 3-0,3 l'invention 3. Composé 1 selon + l'invention + 14 1,4-0,3 2,3-0,4 + dimethylsulfoxyde 4. Témoin 14 1,6-0,4 2,1-0,4 5. Composé 1 selon 14 2,60,7 0,50,2xx l'invention 6. Cystamine 4 2,7!0,3 3,4 0,3 Tableau 4 (suite) saL. Durée de la réaction (jours) X + m. N , : tDurée totale NO * Desquamation e : de la réaction sèche suintante 1: 6:6 7 8 1. 4,5+0,3 4,2+0,5 11,9 0,4 2. 3,8 0,2 1,5Z0,3xxx 11,4 0,4 3. 4,5 0,4 1,4 0,3xxx 9,6 0,6 4. 4,3 0,7 2,6 0,3 10,6 1,0 5. 2,9 0,8 0,9 0,3xxx 6,9*0,4 6. 4,1 0,4 1,6 0,3X 11,8 0,4 Note: analogue à celle du tableau 3 Tableau 5 Résultats de l'étude de l'effet radioprotecteur de la pomade a base du composé selon l'invention sur la peau des rats à des applications unique et multiple :: Durée de la réaction(jours)X+m Essat Conditions:Nombre: Erythème N : de l'essai de r y t h _ e :::locus -.loeus * léger grave 1l 2: 3 4 5 1. Témoin 14 1,2+0,2 1,8+0,2 2. Co-ocsé 1 ^e;- invention 14 2,0 0,2 1,9 0,3 (une fois) 3. idem (plusieurs fois) 14 1,4-0, 2 0,7+0,2x Tableau 5 (suite) Durée de la réaction (jours) X m Essai:*_ 1To.: Durée totale Descuaration to:escuar ation.: de la réaction sèche suintante 1. * 1 ' 6 ' 7: 1. 6,3 0,4 5,3 t,3 4,6 0,3 2. 6,0 0,2xx 1,-0,6xx + XXX 3. 8, 93+0,6x 0,8C0,2x 2 11i,2+0, 6x Note: analogue à celle du tableau 3. -15 Les essais réalisés ont démontré que chez la plupart des animaux ayant subi l'irradiation, on n'observait pas de dermatite ulcéreuse suintante et la manifestation de la radioréaction était limitée par un léger érythème avec une desquamation intense subséquente de l'épiderme. Les résultats de ces es- sais témoignent de ce que les composés 1 et 2 selon l'invention, en possédant une activité antioxydante, exercent une action bienfaisante non seulement au moment de l'irradiation, mais également dans la pé- riode de post-radiation (1 à 10 jours) quand se ré- vèlent des lésions latentes et se déroulent active- ment les processus de réparation intracellulaire, déterminant le destin ultérieur des cellules - leur perte ou leur survie et, par conséquent, le degré et la forme clinique de la radiolésion. Le fait que dans les essais avec l'utili- sation quotidienne du composé 1 selon l'invention le résultat après l'irradiation était meilleur (de 15 %) que dans tous les essais avec son unique uti- lisation prophylactique, nous convaint de ce que le composé 1 selon l'invention possède non seule- ment un effet radioprotecteur marque, mais aussi exerce-t-il une action positive sur les processus de réparation intracellulaire des cellules irra- * diées. Ce fait hausse la valeur du composé 1 selon l'invention et élargit son domaine d'utilisation éventuelle, par exemple à titre de moyen d'antibrû- lures en pratique chirurgicale. Ces données permettent de considérer com- me préférable l'application multiple du composé 1 selon l'invention au cours de la radiothérapie, vu qu'il est le plus efficace pour la prévention des radiolésions cutanées. Cependant, l'effet principal est déterminé par l'action prophylactique du compo- sé selon l'invention, c'est-a-dire par la prévention des lésions primaires ou leur inactivation rapide. - Dans le tableau 6, on présente les résultats de l'évaluation comparative de différents composés ayant subi les essais à titre de témoins, y compris les agents radioprotecteurs et les solvants en % par rapport aux données moyennes de contrôle de tous les essais. Tous les chiffres indiqués sont statis- tiquement certains, là o il n'y a pas de probabili- té, on n'indique pas de chiffres. Vu l'absence d'in- fluence statistiquement importante sur.les formes de la dermatite telles que l'érythème léger et la des- quamation sèche, les colonnes correspondantes ont été omises. Tableau 6 Résultats de l'évaluation comparative de l'effet radioprotecteur sur la peau du composé 1 selon l'invention et des préparations connues dans des conditions d'irradiation aux rayons X Réduction de la durée du stade! Estimation de radioréaction, en % totale Composé soumis:: calculée de l ' e s e a i s l'effica- a l'essais: Erythème: Desquamation: cité dla *cité de-la : grave suintante: prépara- :*::tion, en,o l.2 3 4 Vaseline - - - Diméthylsulfoxyde - 30,011,4x 22,5 Ionol 28,015,4x 43,0-19,3x 37,85 CystaZmine 58,0- 3,2x 52,0-25,Oxxx 39,0 Composé 1 selon xx + 6xx 5 l'invention (2%) o3,0-14,2 3,0-1,6 45,8 Composé 1 selon + xx l'invention * - 67,0214x 46, 9 idiméthylsulfoxyde Composé 1 selon + x l'invention (5%) 76,0-40,0 45,4-33,3x 47,0 (rats vieux) Composé 1 selon 58xxx 71ç,2S3xxx 49,7 l'invention (10%) 58,0-12, Composé 1 selon l'invention(5,o) 61,2+28, 5x x 5,,+25,x 71,7 (utilisation multiple) Composé 1 selon 41,0 15,2xx 71, 0C20,2xxx 61,45 l'invention (5%) (utilisation unique) Tote: Différences significatives: x _(P >0,C5), xx _(p > 0,005), xxx _(p o,0A4) Les études réalisées ont permis d'établir que l'utilisation des composés selon l'invention dans des compositions à base de vaseline à diffé- rentes teneurs en principe actif (de 2 à 10 %) dans le but prophylactique 30 minutes avant l'ir- radiation exerce une action radioprotectrice mar- quée à tous les stades de radiodermatite. La pom- made à 5 % de principe actif est douée d'un effet radioprotecteur un peu plus grand. Ainsi, la durée de la desquamation suintante se voit réduite à 70 % et la gravité d'érythème diminue de 40 %. Les composés selon l'invention, tant selon certains critères de l'action sur divers stades de la dermatite que selon l'action sur la durée totale de la réaction, dépasse sensiblement tous les com- posés connus mentionnés. Le composé 1 selon l'invention conserve son effet radioprotecteur à l'état dissous dans le diméthylsulfoxyde, ce qui permet de l'utiliser sous forme d'aérosol en même temps que le diméthylsul- foxyde qui lui-même est administré pour le traite- ment clinique des radiolésions locales cutanées en radiothérapie. Le composé 1 selon l'invention manifeste son effet radioprotecteur aussi sur les animaux agés avec unre réactivité réduite, ce qui permet d'utiliser avec succès la préparation selon l'in- vention pour le traitement des malades oncologiques dont la plupart appartiennent aux groupes d'age su- périeur. Comme le démontrent les essais avec appli- cation multiple, le composé 1 selon l'invention possède, avec l'action prophylactique, également un effet thérapeutique bien marqué. L'application multiple de la pommade à ba- se de composé i selon l'invention (30 minutes avant l'irradiation et ensuite tous les jours dans la pé- riode latente durant 7 à 9 jours jusqu'à l'appari- tion des symptômes nets de la radiodermatite) per- mit pratiquement de prévenir (de 85 %) de la des- quamation suintante et de réduire fortement la ma- nifestation d'érythème. De cette façon, la comparaison de l'effi- cacité des composés selon l'invention avec celle des agents radioprotecteurs connus témoigne d'un avantage évident des composés selon l'invention tant quant à leur action sur certaines manifesta- tions qu'à leurs propriétés propres. Il est très important de noter l'action de la pommade à base de composé selon l'invention sur la desquamation suintante: à la place du processus ulcéreux typi- que commençant a la suite d'une réaction d'érythè- me violente chez 100 % de témoins, chez la plupart des animaux traités prophylactiquement par le com- posé selon l'invention, les dermatites se dérou- lent sous forme légère avec une réaction d'érythè- me de courte durée, en passant directement à la desquamation sans phase d'ulcération. L'effet ra- dioprotecteur du composé 1 selon l'invention est conservé lors de l'irradiation de la peau à doses plus fortes. On a étudié l'effet radioprotecteur des composés selon l'invention au cours de l'irradia- tion de la peau à différentes doses. Afin de dé- terminer la largeur de l'action des composés selon l'invention et la dépendance de l'effet protecteur de la doee, on a réalisé un essai spécial avec l'irradiation aux rayons X de la peau à doses de ,60 et 100 Gy en comparaison avec le diméthyl- sulfoxyde. Les résultats des essais sont donnés dans le tableau 7. Comme cela découle des essais avec l'irra- diation à différentes doses nocives, le composé 1 selon l'invention a un large éventail des effets protecteurs. A la suite de l'utilisation du composé 1 selon l'invention lors de l'irradiation de la peau à la dose de 20 Gy, l'effet radioprotecteur positif se manifeste à tous les stades de la radio- dermatite, La durée de l'erythème se voit réduite à 35 % et la durée moyenne de la période de desqua- mation sèche diminue d'environ trois fois. On n'ob- serve pas d'ulcération de la surface de plaie, à la différence du témoin et des essais avec l'utili- sation du diméthylsulfoxyde. Tableau 7 Résultats de l'évaluation de l'effet radioprotecteur sur la peau du composé selon l'invention dans des conditions de l'irradiation aux rayons X à doses de 20 jusqu'à lO0 Gy Dose:Durée moyenne dg la réaction :de:Nombre: (jours) X - m Produit l'ir-: Produi. . dLeÀ iradia-:locus; Erythème :tion,: :en Gy léger - grave 1 2. 3: 4 5 Témoin 10 6 0,0 0,0 Témoin 15 10 0,3 0,0 Témoin 20 16 1,6o,4 0,30O,1 Diméthylsulfoxyde 14 1,6 0,4 0,4-0,3 Composé 1 selon 14 1,7-0,4 0,2-0,2 l'invention Témoin 25 26 1,70,2 1,6 0,2 Témoin 30 14 1,4-0,2 3,2-0,2 Diméthylsulfoxyde 8 1,7-0,5 1,7-0,4 Composé 1 selon 14 2,0-0,2 1,9-0,3xx l'tinvention Témoin 40 14 1,0-0,2 2,6-0,2 Diméthylsulfoxyde 14 1,4-0,2 1, 60,2xx Composé 1 selon 28 2,80,4 2,10,2 l'invention 2,StO,4 2,11O,2x Témoin 60 14 0,3+0,1 1,7-0,2 Diméthylsulfoxyde 12 1,7-0,3 2,3-0,1 Composé 1 selon 14 0,7-0,2 2,0-+0,2 l'invention Témoin 100 9 2,0-0,5 1,1-0,3 Diméthylsulfoxyde 10 1,4-0,3 1,8-0,3 Composé 1 selon 10 2,310,5 0,7±0,2 l'invention 22 2647113 Tableau 7 (suite) * s :Dose::Durée moyenne.d$ la réaction :de Nombre (jours) x - m Produit:l'ir-:Nobe :radia-: de Desquamation :locus D tion, :: ah :en Gy: sèche suintante i: 2: 3: 6 7 Témoin 10 6 0,0 0,0 Témoin 15 10 0,5 0,0 Témoin 20 15 4,9+0,6 0,2 0,1 Diméthylsulfoxyde 14 2,9+0,6 0,10,1 Composé i selnti on 14 1,7-0,5xxx 0,0-0,0 l' invention Témoin 25 26 3, 6-0,3 1,6-0,2 Témoin 30 14 4,1-0,3 5,1-0,6 Diméthjlsulfoxyde 8 7,9-0,8 3, 5-0,4x Composé 1 selon 14 6,0:0,2 1,5-0,4xxx l'invention Témoin 40 14 7,60,9 7,9Z0,6 Liméthylsulfoxyde 14 10,4-0,8 8,7+0,8 Composé 1 selon 28 8,20,6 4,5+0,6X 1 'invention Témoin 60 14 8,9+0,G E,6c0,6 Diméti;ylsulfaxyde 12 -9,110,5 8,0-0,6 Composé 1 selon 14 1-0, 8,31,0 l'invention Témoin 100 9 9,4_0,9 12,6!O,9 Diméthylsulfoxyde 10 9,, 10,3tO,9 Comnosé I1 selon 10 10, +1,1 _: analogueècee10 10, a 1,1eau16. linvention Note: analogue à celle du tableau 6. L'action protectrice du composé 1 suivant l'invention lors de l'irradiation à dose de 30 Gy se manifeste vis-à-vis des formes les plus graves de la dermatite actinique. Ainsi, la période de l'erythème grave diminue de 41 %, celle de la des- quamation suintante de 3,5 fois (d'environ 1,5 à 2 fois plus vite qu'avec d'autres radioprotecteurs connus). La gravité de la lésion diminue sensible- ment et la dermatite actinique passe à une forme atténuée. La protection de la peau avec le composé 1 suivant l'invention lors de l'irradiation à doses de 40 et 100 Gy donne des résultats meilleurs que ceux obtenus avec le diméthylsulfoxyde. Si l'action radioprotectrice dudiméthylsulfoxyde a doses de 40 a 100 Gy est pratiquement absente, par contre le composé suivant l'invention protège efficacement la peau lors de l'irradiation aux grandes doses, ce qui est très important en traitement radiothérapeu- tique. L'examen histomorphologique de la lésion actinique de la peau dans la dynamique de son déve- loppement a démontré que chez les animaux traités avec le composé 1 suivant l'invention, les modifi- cations destructives et dégénératives de l'épithé- lium se manifestent à un moindre degré et disparais- sent plus tôt que chez les témoins irradiés: au - 8ême jour, elles ne se révèlent pratiquement pas et la restructuration réactive et les modifications ré- paratives des kératinocytes surgissent plus tôt et se développent d'une façon plus intense que chez les animaux irradiés. On n'observe pas, chez la plupart des ani- maux ayant reçu le composé 1 suivant l'invention, d'exfoliation de l'épiderme et d'ulcération, la des- quamation suintante est absente et dans 13 jours à l'endroit de la lésion se forme la régénération épithéliale multicouche-vitale, tandis que chez les témoins la cicatrisation ne s'achève qu'à la fin du mois. Les examens par microscopie électronique ont démontré qu'à la suite de l'irradiation dans les cellules de la couche basale surgissent des modifications notables et la perturbation dans la structure des organelles essentiellement de carac- tère dégénératif. Les modifications dégénératives sont les plus manifestes dans la structure des mitochondries - en particulier hyperplastiques - dans la structu- re des dictyosomes. Dans les expériences avec l'em- ploi prophylactique du composé 1 suivant l'inven- tion, la régénération des ultrastructures se dérou- lait d'une façon plus intense et les processus de destruction intracellulaire étaient moins manifes- tes. Ainsi, si dans le groupe témoin, le processus de destruction englobe 70 % de toute la population des mitochondries, par contre, dans les essais avec le composé 1 suivant l'invention, seulement 29 % de mitochondries étaient lésées; la synthèse des aci- des ribonucléiques dans le cytoplasme s'active à un degré plus élevé, ce qui témoigne d'un assez rapide accroissement du nombre de ribosomes et de polyri- bosomes, l'activation du constituant granulaire des plasmosomes, l'augmentation de la dimension et de la quantité d'éléments du réseau endoplasmique gra- nulaire. L'hyalome reste moins làche, plus structu- re, ce qui témoigne de l'amélioration du métabolis- me de l'eau. Une moindre hydratation des cellules, par la suite de la radioprophylaxie chimique est liée à une perméabilité réduite des cytomembranes et à la conservation de l'état natif des molécules de protéides. Au 30 me jour, dans la structure des cellules épithéliales des témoins irradiés, on dé- termine des perturbations sensibles, à savoir les foyers de nécrose focale coagulante, des perturba- tions multiples dans la structure des mitochondries et même la perte de certaines cellules. Dans les essais avec le composé 1 suivant l'invention, la structure des cellules épidermiques était presque complètement normalisée et les modi- fications destructives étaient absentes; toutes les espèces de membranes cellulaires étaient nette- ment contournées; la structure des desmosomes étaient restituée. Dans le cytoplasme, sont présen- tes toutes les espèces d'organoides, certains d'en- tre ceux-ci sont quelque peu hyperplasiés, la quan- tité et le polymorphisme des mitochondries sont augmentés, les dimensions des plasmosomes et la quantité de ribosomes sont également augmentées. Le réseau de Golgi est sensiblement développé. La "qualité" de la réparation des ultrastructures, ainsi que le niveau de leur activité fonctionnelle dans les essais avec le composé 1 suivant l'inven- tion, étaient plus hauts que dans les essais ana- logues avec la cystamine et la mexamine. Vu que le composé 1 suivant l'invention est destiné à l'emploi essentiellement en clinique radiologique, y compris chez les malades oncologi- ques, il était nécessaire de savoir dans quelle mesure se manifeste l'action radioprotectrice du produit suivant l'invention (en cas de l'applica- tion percutanée) sur le tissu de la tumeur. Dans ce but, trois jours avant l'irradiation de la peau du rat, on a greffé au coussinet de sa patte ar- rière droite le sarcome de Walker (Walker-256). minutes avant l'irradiation, la peau était enduite avec le composé 1 ou l'onguent de principe actif. L'obse ation de la croissance de la tumeur était effectuée durant 21 jours (dès le jour du greffage). Les résultats des essais sont présentés au tableau 8. Comme on le voit au tableau 8, la régres- sion de la tumeur dans le groupe témoin et dans l'essai avec l'onguent de principe actif s'est ma- nifestée dès le 6ème jour, dans l'essai avec le composé 1 - dès le 3 me jour. Les volumesminimaux des tumeurs dans le groupe témoin et dans l'essai avec l'onguent de principe actif se distinguaient de 25 % du témoin non irradié, avec le composé 1 de 50 %, ce qui caractérise un plus grand degré d'inhibition de la croissance de la tumeur. La croissance de la tumeur recommençait alors plus lentement et plus faiblement que dans le groupe témoin. Tableau 8 Influence du composé 1 sur la modification du volume de la tumeur (carcinosarcome) après l'irradiation aux rayons X local de la peau à dose de 20 Gy Conditions de l'essai Indice: Témoin:Onguent deCComposé 1 irradié principe:selon actif:l'invention 2 _ 1 2: 3: 4 Volume minimal de la tumeur dans -- à 15 jours (mm) 1,13-0,1 1,16+0,3 0,80 0,2x Degré de régression de la tumeur (% par rapport au témoin irradié) 59 58 40 Inhibition de la croissance de la tu- meur (% par rapport au nombre d'animaux) 83 83 100 Recommencement de la croissance de la tu- meur (% du nombre d'animaux) 100 100 67 De cette façon, le composé 1 suivant l'in- vention n'exerce pas d'action radioprotectrice sur le tissu tumoral et ne favorise pas la croissance accélérée de la tumeur dans la période de sa forma- tion. On a également étudié l'action radiopro- tectrice des composés suivant l'invention sur cer- tains autres organes. Comme le montrent les essais avec l'irra- diation locale de la tête, après humification par une solution huileuse à 20 % de composé suivant l'invention des muqueuses buccale et de l'oesophage, la survie des souris augmente, après l'irradiation à des doses surléthales avec 100 % de perte dans le groupe témoin à cause du syndrome oral manifestant la maladie due aux rayons. Cela témoigne du fait que les composés suivant l'invention ont une action protectrice locale prononcée, ainsi que de la réduc- tion de l'hypérémie, de l'oedème et de l'hémorragie dans les tissus moux de la cavité buccale, du pha- rynx, des voies respiratoires supérieures, ce que confirment les résultats de l'observation directe des animaux et les examens histomorphologiques. Les résultats des examens sont présentés au tableau 9. Tableau 9 Résultats de l'examen de l'action radioprotectrice du composé 1 selon l'invention lors de l'irradiation locale de la tête des souris Dose Durée Survie vers gcndit:ione iombre'3 jouse u de bd:-d'irra-: moyenne 30 jours souris -iation,:de vie, aeu soris Gy jour Vlu Gy: jor: absolue:. 1 2 3 4 5: Témoin 10 20 9,7 0,2 - - Composé 1 selon 10 20 1C,2t0,3 l' invention emoions 10 30 9,3-0,2 - - i'orrosé 1 selon 10 30 9,4-0,3 - l'invention j. 9, 4 03 - éTmoin 10 50x4 9,3C,4 7 7C,0 nCompos& 1 selon nvposé i1 selon 50x4 100,0 invention L'examen physique des souris était effectué une fois avant l'irradiation et ensuite tous les jours après l'irradiation. Lors de l'examen des yeux, on enregistrait le développement des blépha- rites, des conjonctivites et des kératites. Comme montrent les examens, après une ap- plication locale sous forme d'onguents ophtalmiques, le composé 1 selon l'invention protège les tissus de l'oeil tant après l'unique irradiation qu'après l'irradiation fractionnée de la tête dans une large gamme de doses, en prévenant le développement des conjonctivites et la formation du leucome. L'irradiation aux doses nocives provoque, même aux premiers jours, un nombre de perturbations histostructurales dans les tissus de l'oeil: un épaississement brusque et l'oedème de la cornée avec une desquamation partielle ou complète de l'épithélium et l'infiltration du stroma conjonc- tif tissé, la formation des infiltrations purulen- tes inflammatoires dans la chambre antérieure de * l'oeil, des perturbations displastiques dans l'épi- derme des paupières et l'épithélium de la conjonc- tive. L'emploi du composé 1 selon l'invention sous la forme d'onguent avant l'irradiation permet de diminuer notablement le degré de ces modifica- tions, en rapprochant de la norme la structure de la chambre antérieure de l'oeil des animaux irra- diés. On a étudié l'influence du composé 1 sui- vant l'invention sur les muqueuses lésées de la ca- vité buccale, de la cavité nasale et de l'oeil à la suite de l'irradiation locale aux rayons X de la partie antérieure de la tête des rats. Les ré- sultats des études sont présentés au tableau 10. Apres l'irradiation de la tête à des doses de 17,20 Gy et d'avantage chez les animaux, surgis- saient des lésions actiniques des muqueuses des ca- vités buccale et nasale, les conjonctivites dues aux rayons et, dans certains cas, les kératites dues aux rayons. Les stomatites dues aux rayons étaient les plus manifestes et durables. Elles se développaient dès le 6me jour et, dans les cas légers, se mani- festaient par l'oedème et l'hypérémie, donc elles avaient un caractère catarrheux (désigné au tableau par le chiffre "2"). Dans les cas graves, se dévelop- paient les stomatites hémorragiques (désignées par le chiffre "3"), purulentes (chiffre "4"), ulcéreuses (chiffre "5"), ou ulcéraiss -nécrotiques (chiffre "6"). Chaque forme clinique de la maladie désignée au ta- bleau par un chiffre correspondant avait une durée différente en fonction de la gravité de la lésion. Comme on voit au tableau 10, l'emploi du composé 1 suivant l'invention a permis de modifier sensiblement la gravité des stomatites par rayons, de prévenir les plus graves lésions ulcéreuses né- crotiques de la cavité buccale et d'accélérer leur cicatrisation. En effet, à la dose de 20 Gy, le nombre de ces lésions est dimunué de 3,3 fois. A l'aide du composé'l selon l'invention, on est arrivé à rédui- re la durée des stomatites ulcéreuses-nécrotiques chez les animaux irradiés à la dose de 20 Gy jus- qu'au niveau qu'on observait à la suite de l'irra- diation à la dose de 17 Gy et à la suite de l'admi- nistration du composé 1 selon l'invention aux ani- maux à la dose de 17 Gy - jusqu'au niveau qu'on no- * tait de l'irradiation à la dose de 15 Gy (dose- seuil selon cet indice). De ce fait, cette prépara- tion permet de réduire la dose nocive (obtenue en plus de la dose de seuil) d'irradiation. Les conjonctivites par rayons se dévelop- pent un peu plus tard avec l'achèvement du processus de réparation dans la cavité buccale. Vu que les animaux irradiés à la dose de 20 Gy n'arrivent pas à vivre jusqu'à ce stade, il est possible de faire la comparaison seulement entre les groupes d'animaux irradiés à doses égales. Les conjonctivites par rayons se caractérisent essentiellement par trois formes cliniques: catarrheuse ("2"), hémorragique ("3") et hémorragique purulente ("4") et n'attei- gnent pas le stade ulcéro-nécrotique. Des sécrétions sanguignolentes et purulentes-sanguignolentes abon- dantes dans la période aiguë de la maladie sont dues à la lésion de l'appareil lacrymal et à la perturba- tion de la production de larmes. L'emploi du composé 1 selon l'invention sous forme de pommade permit de diminuer la gravité de l'affection, de réduire de 3 fois la durée des plus graves formes de lésions et à la dose de 20 Gy d'éviter le stade hémorragique pu- rulente. Les rhinites par rayons s'aggravent brusque- ment au 18-20ème jour, en se manifestant sous forme catarrheuse ("2"), hémorragique ("3"), et hémorragi- que purulente ("4") en fonction de la dose d'irradia- tion. Les rhinites sont la cause d'une brusque aggra- vation de l'état des animaux à la troisième semaine de l'affection. L'emploi du composé 1 selon l'inven- tion sous forme de pommade permet de réduire la du- rée de tous les stades de lésion des muqueuses nasa- les de 1,5 à 3,5 fois. Tableau 10 Influence du composé I selon l'invention sur la lésion des enveloppes muqueuses des cavités buccale, nasale et oculaire à la suite de l'irradiation locale aux rayons X de la partie antérieure de la tête des rats :.:Nom'ore.Durée de la réction 0:a-Dosee Produit:d'ani-. (jours) X m ay *,maux * "2". 3a : f 1:2 3: 4: 5 :: 3ouche 20 2émoin 6 - 0,67 0,18 Composé 1 selon 12 - 1,25 0,28 l'invention 17 Témoin 0 1,40 0,65 3,0 0,76 Composé 1 selon 10 3,20 0,5 1, 00,43 l'invention Témoin 6 1,00 1,07 0,33 0,43 Yeux 20 Témoin 6 1,83 0,35 1,08 0,35 Composé I selon 12 1,83 0,28 1,50O0,46 l'invention 17 Témoin 10 4,000,65 1,60 0,65 Composé 1 selon 10 3,20 0,43 0,50-0,22 l'invention à ---- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 33 2647113 Tableau 10 (suite) 1:2; 3: 4 5 6 Nez 20 Témoin 6 3.,33 0,35 2,00 0,88 Composé 1 selon 12 2,75+0,28 0,58+0, 19 l'invention 17 Témoin 10 8,50!0,43 0,90 0,33 Composé 1 selon 10 6,30+O, 87 0,80 0,33 l'invention Tableau 10 (suite) Durée de la réaction (jours) X+m ' Delai de Organe:. - l'observation "4" "5":"6" (jours) 1 739 1o Bouche 1,00-0,18 0,670,53 2,50+0,35 10 3, 92 OL 9 _,1 I7fOL223 0,7 -.0.28 1,90-0,65 0,70-0,54 0,80-0,43 30 1,920-0, 97 Oe0,_10133 - - -- - - - - - - - - - - 1,33 0,64 - - 30 Yeux 0,3340,35 - - 10 1,80 0,76 - 30 0,50 0,43 Nez 10 1,-70tO,54 - 30 0,70-0,33 Note' - différences significatives par raprt au témoin P oral est très grave et dangeureuse et peut éventuelle- ment être l'une des causes de la mort précoce des ani- maux. Les parotites par rayons s'accompagnent d'une forte salivation et d'une sialorrhée extérieure dont l'intensité dépend de la dose d'irradiation et dans nombre de cas provoque une déshydratation de l'orga- nisme, une perte en poids et une cachexie totale des animaux au stade d'agonie. Les résultats de l'influen- ce du composé 1 selon l'invention sur la salivation à la suite de l'irradiation locale aux rayons X de la partie antérieure de la tête du rat sont donnés dans le tableau 11. Tableau 11 influence du composé 1 selon l'invention sur la salivation à la suite de la radiation locale aux rayons X de la partie antérieure de la tête du rat 0.. Durée de la réaction Dose, *.oombre (jours) X - m en P Produit:d'ani- Gy;:maux Lésion: Lésion maux: légère: moyenne 1: 2 3 4 5 20 Témoin 6 2,00-0,00 1,17-0,35 Composé 1 + - - - selon l'inventionà _ 12_ 3,17028 -,92+0L19 17 Témoin 10 2,50-0,54 0,80-0,22 - Composé 1 - - - selon l'invention 1 o 4,700L65 _ 0,50+022 15 Témoin - Témoin6-- Tableau 11 (suite) Durée de la réaction Delai de Dose,: (jours) X - m l'observation en ỷ * Lésion: Lésion (jours) Lé:Ls on sii : grave: très grave: 1.6 7. 1,17!0,35 0,33-0,35 10 -00 08o0,09K - 2,08+0 09 7 0,40 0,22 - 30 10 Note: - différence siagnificative par rapport au Témoin p Comme on voit au tableau 11, l'intensité de la salivation dépend de la dose d'irradiation. Le composé 1 selon l'invention favorise une réduction brusque de la salivation chez les animaux irradiés à la dose de 20 Gy chez lesquels la durée de la réac- tion est de 5 fois inférieure à celle des témoins irradiés à la dose de 17 Gy. Compte tenu de ce que la salivation accrue se développe chez les animaux seulement en commençant par la dose de 15 Gy, on ar- rive à diminuer de 2,5 fois la dose nocive, grâce à l'introduction du composé 1 selon l'invention. Ainsi, les études montrent que le composé 1 selon l'inven- tion, en cas d'utilisation locale sous forme de pom- made, possède une action radioprotectrice manifeste sur la muqueuse de la bouche, du nez et de la con- jonctive et sur les glandes salivaires, réduit forte- ment la sialorrhée, diminue la gravité des catarrhes actiniques et prévient le développement des processus peroxydes des lipides, exerce une action stabilisante sur les cytomembranes et réduit leur perméabilité. La gravité atténuée des lésions locales sous l'effet du composé 1 selon l'invention favorise la convalescence accélérée du syndrome oral de la maladie due aux rayons, la survie élevée et la durée de vie accrue des animaux ayant subi l'irradiation locale de la partie antérieure de la tête. Comme il s'ensuit des résultats des études, le composé 1 selon l'invention pDeut trouver une ap- plication à titre de moyen local extérieur, en cas de radiolésions des muqueuses de la bouche, du nez et de la conjonctive, afin de prévenir ces complica- tions répandues de la radiothérapie dans le domaine de la tête et du cou. On a réalisé également l'étude de l'effet radioprotecteur du composé 1 selon l'invention sur la muqueuse du rectum et de l'oesophage. On a étudié l'action radioprotectrice locale du composé 1 selon l'invention sur la muqueuse du rectum par son intro- duction prophylactique per rectum sous forme de sup- positoires à la teneur à 30 % en principe actif (ba- se des suppositoires: butyrum cacao) 30 minutes avant l'irradiation locale de la partie postérieure du corps.des. souris à la dose de 25 Gy. Il a été établi que chez 90 % d'animaux té- moins irradiés se développait une proctite hemorra- gique grave ou ulcéreuse-nécrotique. Chez les ani- maux soumis à la prophylaxie avec le composé 1 sui- vant l'invention, des formes graves de la lésion ne se développaient que dans 30 % de cas (tableau 12). Tableau 12 Résultats de la détermination de l'action radioprotectrice du composé 1 suivant l'invention sur le développement de la proctite actinique et de l'oesophagite chez les rats 7 jours après l'irradiation locale :::Nomore d'animaux dans le Zone:groupe avec la forme cli- d'irradia- Conditions:ose,:nique de l'affection (%) tion:de l'essaintacte y_:Catar-: iémorra- 2:::zntac Qe:rheuse: îgique : * 2 *3 4 5 6 Rectum Témoin 25 - - 10 Composé 1 selon 10 60 10 l'invention Oesophage Témoin 30 - - 50 Corilposé 1 selon 30 40 - l'invention Tableau 12 (suite) --- -: Nombre d'animaux dans-le groupe:Nombre Conditions: avec la forme clinique de odesquama- Corditions:desqamia- de l'essai; l'affection ()tion par :Ulcêreuse-_Isch'mi:ue:formes der a ial :nécrotiQ ue an"'i'e 2 7 8 9 10 Témoin 80 10 90 11,0 Composé 1 selon 20 - 30 0,2 -l'invention Témoin 30 30 -2,8 Composé 1 selon 10 - 10 1,8 l'invention L'examen histomorphologique a démontré que chez les animaux, n'ayant pas subi la prophylaxie avec le composé 1 suivant l'invention, au 8ème jour, la muqueuse rectale était fortement modifiée. L'épi- thélium de revêtement était presque complètement dé- truit ou desquamé, le stroma de la couche propre était infiltré par les leucocytes, la lumière de l'intestin était rempli de détritus tissulaire. La coupe transversale ne contenait que 2 à 6 colonies O10 d'etérocytes vitaux, les cellules régénératrices pé- rissaient souvent dans l'interphase ou lors du pro- cessus de division, en subissant le gonflement ou la pycnose. Plusieurs figures mitotiques étaient aberrantes. Les cellules proliférantes de l'épithé- lium étaient très polymorphes, plusieurs d'entre elles avaient des modifications dégénératives, el- les étaient vaculisées ou ridées. L'épithélisation des lésions actiniques du rectum se passe très lentement. En effet, après 13 jours passés, malgré une régénération intense des clones d'entérocytes isolés, la repopulation de l'épithélium ne se produit pas. La surface de la muqueuse à une vaste étendue est privée de revête- ment épithélial, érodée ou ulcérée avec le dévelop- pement des modifications inflammatoires. Le stroma de l'intestin subit l'oedème et l'infiltration avec la formation des sécrétions de pus abondantes à la surface et dans la lumière du rectum. La prolifération des cellules tronculaires cloniques survivantes, se trouvant dans la profon- deur de la paroi intestinale sous la couche d'in- filtration, se passe d'une façon intramurale et ne conduit pas à l'épithélisation de la lumière de l'intestin. Le processus de différenciation des en- térocytes se régénérant d'une façon intramurale se voit perturbé. Les cellules épithéliales proliféran- tes, en croissant, forment à l'intérieur de la paroi intestinale des cavités fermées ou des kystes de forme bizarre aux bords festonnés. Les cellules les revêtant dont la structure est proche de celle des cellules cryptiques cloniques immaturées sont très polymorphes, elles ne subissent pas de différencia- tion propre à elles et forment des entassements iso- lés. Une partie de ces cellules régénérées subissent la nécrose, plusieurs figures de la mitose sont pa- thologiques ou pycnotiques. Chez les animaux soumis à la prophylaxie avec le composé 1 suivant l'invention au 8me jour, la muqueuse est totalement épithélisée, l'épithé- lium subit même une certaine hyperplasie, malgré un oedéme insignifiant de la muqueuse et la perte des cryptes isolés. La division mitotique des cellules se produit plus correctement - la perte dans la mi- tose est très rare et la plupart des cellules régé- nérées restent vitales et participent à la restau- ration du revêtement de l'intestin. Des secteurs ulcérés isolés de la muqueuse (leur surface est in- férieur à celle du témoin) subissent plus vite l'épithélisation et vers le 13éme jour la surface intérieure de l'intestin est presque totalement épithélisée. Le processus inflammatoire se manifes- te sensiblement moins fortement et se caractérise par une infiltration insignifiante de la couche propre de la muqueuse et par la croissance dans celle-ci du tissu granulaire. L'inflammation puru- lente n'a pas de lieu. Les cellules dans les cryp- tes régénérateurs ont une disposition plus correc- te, des cavités intramurales fermées, comme règle, ne se forment pas. L'oedème et l'infiltration sont insignifiantes, il n'y a pas de sécrétions purulen- tes, les tissus nécrotisés sont rejetés dans la lumiè- re de l'intestin. Le polymorphisme cellulaire est moins manifestant, les éléments cellulaires dégénéra- tifs sont plus rares. Le processus de régénération se fait plus vite et plus correctement. Les études de l'action radioprotectrice du composé 1 suivant l'invention sur la muqueuse du rec- tum montre que le composé indiqué à l'irradiation lo- cale du bassin exerce une action favorable sur la formation et la cicatrisation des lésions actiniques dans le rectum. Comme on voit au tableau 12, l'introduction prophylactique d'une suspension huileuse à 30 % de composé 1 suivant l'invention dans l'oesophage, 30 minutes avant l'irradiation du thorax des rats à do- se de 30 Gy, a permis d'atténuer les manifestations de l'oesophagite actinique: des formes graves de la lésion étaient observées chez 10 % d'animaux contre % dans le groupe de témoins irradiés. La toxicité du composé 1 suivant l'inven- tion était étudiée dans les essais sur les souris et les rats sous forme d'onguent à 5,10 et 30 % ainsi que sous forme de principe actif. L'onguent dermique à 5 % de.composé i suivant l'invention était essayé sur 14 rats. L'onguent était appliqué sur la peau tondue du dos constituant 10 % de la surface du corps, fois par semaine durant un mois. Les rats étaient décapités. On a soumis à l'examen histologique le foie, le coeur, les poumons, les surrénales, la rate, les reins, les testicules et un lambeau de la peau pris à l'endroit d'application de la préparation. La peau des animaux témoins était lubrifiée par de la vaseline. L'examen histologique montre que tous les échantillons d'organes intérieurs suivant leur struc- ture ne diffèrent pas de ceux pris chez les témoins et des différences insignifiantes entre les animaux dans les limites du lot ne dépassent pas les cadres du contrôle biologique. On ne note pas d'écarts de la structure normale et de modifications pathologi- ques dans les organes intérieurs. A la suite d'une action locale durable du composé 1 selon l'invention, on n'observe nul indice de modifications pathologiques ou d'altération de la structure /ni dans la peau, ni dans l'épiderme, ni dans le derme. Le composé 1 selon l'invention, à titre de principe actif, a été étudié dans les essais sur des rats à qui l'on administrait par voie intrapéritoné- ale journellement, durant un mois, la suspension aqueuse de composé 1 selon l'invention, aux doses de 50, 150 et 450 mg/kg de la masse des animaux. Les animaux ont été décapités. L'examen histologique des organes parenchymateux: le foie, le coeur, les pou- mons, la rate, les surrénales et les testicules a montré qu'à toutes les doses de composé 1 selon l'in- vention, on n'a décelé de modifications pathologiques et d'écarts du témoin, dans aucun des organes indi- qués. Les différences individuelles dans la structure des organes des animaux isolés, notamment une plus grande ou plus petite densité du cytoplasme des hépa- cytes, la différence des quantités d'inclusion de li- pides, peuvent être liées aux modifications de l'état fonctionnel des animaux. La manifestation et l'éven- tail de ces différences dans le groupe d'essai et le groupe témoin sont identiques, d'o l'on peut conclu- re que le composé 1 selon l'invention, administré par voie parentérale durant un mois aux doses sensible- ment supérieures à celles recommandables pour les es- sais cliniques en cas de l'introduction per rectum, ne provoque pas de modification de la structure des organes intérieurs. L'action du composé 1 selon l'invention, sous forme de suppositoires à sateneur de 30 %, a été étudiée sur les lapins obtenant la préparation per rectum à des doses de 10 et 50 mg/kg de la mas- se 5 fois par semaine pendant un mois. L'examen histomorphologique du foie, du coeur, des reins, des poumons, de la rate, des testicules, des ovai- res et du rectum montre l'absence de modifications histopathologiques qu'on pourrait lier à l'action toxique du composé 1 selon l'invention. La toxicité du composé 1 selon l'invention, sous forme de pommade ophtalmologique à 10 %, a été essayée sur les lapins. On appliquait la pommade sur la muqueuse de l'oeil gauche, journellement, pendant 14 jours. L'oeil droit fut le témoin. L'examen histomorphologique des paupières n'a montré aucun indices de modifications inflamma- toires ou pathologiques dans la conjonctive à la sui- te de l'application de la pommade à 10 % de composé 1 selon l'invention. La structure de la paupière droite ne différait pas de celle de la paupière gau- che. Ainsi, les examens histomorphologiques réa- lisés sur 700 échantillons de tissus de deux espèces d'animaux ayant subi pendant un mois une action chro- nique de,trois formes médicamenteuses différentes de composé 1 selon l'invention (pommade de 5 % dermique, pommade de 10 % ophtalmologique, suppositoires de %) et d'administration intrapéritonéale du princi- pe actif du composé 1 selon l'invention sous forme de suspensions aqueuses à différentes teneurs montrent que le composé selon l'invention à des doses d'essai (dépassant les doses de la préparation recommandables pour le traitement) n'exerce pas d'action toxique lo- cale ou générale sur les organes intérieurs, la peau et les muqueuses et ne provoque pas de modifications structurales néfastes indésirables. De cette façon, les études réalisées démon- trent que les composés selon l'invention exercent une action radioprotectrice notable sur la peau, en limi- tant la durée et la gravité de la radiodermatite. L'action radioprotectrice est conservée à la suite de l'irradiation de la peau à des doses plus élevées tandis que l'action protectrice des autres radiopro- tecteurs ne se manifeste plus. Les composés selon l'invention protègent les tissus de l'oeil, tant lors de l'unique irradia- tion que lors de l'irradiation fractionnée de la tête dans une large gamme de doses, en prévenant le déve- loppement des conjonctivites des rayons et la forma- tion de leucome. Les composés selon l'invention exercent une action radioprotectrice bien nette, au cours de la protection locale des muqueuses, en réduisant l'hypé- rémie, l'oedème et les hémorragies dans les tissus mous de la cavité buccale, du pharynx, de l'oesopha- ge, des voies respiratoires supérieures et du rectum et ils exercent une action radioprotectrice sensible sur les glandes salivaires. Les composés selon l'invention ont une ac- tion régénératrice sur les tissus. Un mois après l'irradiation, on note des indices nets de l'augmen- tation de l'activité proliférante et régénératrice, tant dans l'épithélium que dans le tissu conjonctif. On note également l'hypertrophie des cellules épi- théliales, une réparation accélérée des ultrastruc- tures. Les composés selon l'invention sont peu toxiques, ils n'ont pas d'action toxique locale ou générale sur les organes intérieurs, la peau et les muqueuses, ne provoquent pas de modifications structu- *rales néfastes indésirables. On obtient les composés selon l'invention, à savoir les esters adamantyliques de l'acide 2,6-dimé- thyl-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylique à partir des esters correspondants de l'acide acétylacétique ou de l'acide t -aminocrotonique et de l'hexaméthylè- netétramine sous ébullition dans un solvant organique (éthanol, méthanol, isopropanol, dioxane) en présence d'acétate d'ammonium. Les produits cristallins préci- pités dans le mélange réactionnel sont séparés par la filtration. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention seront mieux compris à la lecture de la description qui va suivre d'exemples de réalisation concrets non limitatifs. EXEMPLE 1 On dissout 5,54 g (0,0234 mole) d'ester 1-adamantylique de l'acide acétylacétique, 2,50 g (0,0178 mole) d'hexaméthylènetétramine et 2,5 g (0,0325 mole) d'acétate d'ammonium dans 40 ml d'é- thanol et on fait bouillir 0,5 h. Après le refroi- dissement du mélange réactionnel, on sépare par filtration le dépôt précipité, on lave sur le fil- tre avec 15 ml d'éthanol. On sèche à température ambiante. On obtient 4,53 g (83 %) de 2,6-diméthyl- 3,5-bis-(1'-adamantyloxycarbonyl)-1,4-dihydropyri- dine présentant une substance cristalline de jaune- clair, à fluorescence bleuatre dans la lumière ul- traviolette; la température de décomposition est de 213 à 219 C. Trouvé, %: C 74,9; H 8,2; N 2,9; C29H39N04. Calculé, %: C 74,8; H 8,4; N 3,0. Spectre de RMN dans CDC13,: 1-,67 (singl,, 12 H, 2,6-CH3 et r- H d'adamantane); 2,15 (singl., 24H, -H et -H d'adamantane); 3,17 (singl., 2H, 4-CH2); 5,12 ppm (singl., large, 1H, NH). - Spectre infrarouge (dans Nujol): 1703 cm- (C=O); 3340 cm 1 (NH). Spectre ultraviolet dans l'éthanol, A max max (lg): 233 (4,15), bras 252 (3,901 377 nm (3,81). EXEMPLE 2 On dissout 30,0 g (0,128 mole) d'ester 1- adamantylique de l'acide ( -aminocrotonique, 10,0 g (0,070 mole) d'hexaméthylènetétramine et 10,0 g (0,128 mole) d'acétate d'ammonium dans 300 ml d'é- thanol et on fait bouillir 15 minutes. On isoler après le refroidissement du mélange réactionnel, 21,5 g (73 %) de 2,6-diméthyl-3,5-bis-(1'-adaman- tyloxycarbonyl)-1,4-dihydropyridine. La température de décomposition est de 213 à 219 C. La substance obtenue est analogue a celle décrite dans l'exemple 1. EXEMPLE 3 On dissout 1,53 g (0,006 mole) d'ester 2- adamantylique de l'acide acétylacétique, 0,80 g (0,006 mole) d'hexaméthylènetétramine et 0,8 g (0,011 mole) d'acétate d'ammonium dans un mélange de 10 ml d'éthanol et de 2 ml d'eau et on fait bouillir 10 minutes. On sépare par filtration le précipité après le refroidissement du mélange ré- actionnel. On obtient, après le séchage à la tem- pérature ambiante 1,27 g (84 %) de 2,6-diméthyl- 3,5-bis-(2'-adamantyloxycarbonyl)-1,4-dihydropyri- dine qui est une substance cristalline de jaune- clair, à fluorescence bleuAtre dans la lumière ul- traviolettL; la température de décomposition est de 205 à 208 C (à partir du mélange de benzène et d'hexane 1:1). Trouve, %: C 74,6; H 8,4; N 2,8; C29H39N04. Calculé, %: C 74,8; H 8,4; N 3,0. Spectre RMN dans CDCl3, 3: 1,40-2,13 (mult., 28H, D -H, -H et -H d'adamantane); 2,20 (singl., 6H, 2,6-CH3); 3,43 (singl., 2H, 4-CH2); 4,98 (singl., 2H, O -H d'adamantane); 5,28 ppm (singl., large 1H, NH). Spectre infrarouge (dans Nujol): 1693 cm-1 (C=O), 3350 cm-1 (NH). Spectre ultraviolet dans l'éthanol, fmax (lg): 233 (4,21), bras 252 (3,97), 380 nm (3,84). EXEMPLE 4 On dissout 0,14 g (0,0006 mole) d'ester 2- adamantylique de l'acide ( -aminocrotonique, 0,09 g (0,0006 mole) d'hexaméthylènetétramine et 0,09 g (0,0012 mole) d'acétate d'ammonium dans un mélange de 5 ml d'éthanol et 2 ml d'eau et on fait bouillir pendant 10 minutes. On isole, après le refroidisse- ment du mélange réactionnel, 0,092 g (66 %) de 2,6- diméthyl-3,5-bis-(2' -adamantyloxycarbonyl)-1,4-dihy- dropyridine, avec une température de décomposition de 205 à 208 C. La substance obtenue est analogue à celle décrite dans l'exemple 3. REVENDICATIONS 1. Esters adamantyliques de l'acide 2,6-di- méthyl-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylique répon- dant à la formule générale suivante: H ROOC > COOR H C C 00R H3C-' N CH) H dans laquelle R = l'-adamantyle ou 2'-adamantyle. 2. Composition pharmaceutique comprenant un composé selon la revendication 1 ainsi qu'un excipient ou véhicule pharmaceutiquement accepta- ble. 3. Utilisation d'un composé selon la reven- dication 1 comme agent de prévention et de traite- ment des lésions par rayons.