Brevet FR2639638A1 — publié le 19900601

PROCEDE DE PREPARATION DE COMPLEXES DE METAUX DE TRANSITION UTILISABLES COMME PRODUITS RADIOPHARMACEUTIQUES OU POUR LA SYNTHESE DE NOUVEAUX PRODUITS RADIOPHARMACEUTIQUES DESCRIPTION La présente invention a pour objet un procédé de préparation de complexes de métaux de transition, utilisables en particulier comme produits radiopharmaceutiques ou pour la synthèse de nouveaux produits radiopharmaceutiques. De façon plus précise, elle concerne la préparation de complexes nitrido de métaux de transition comportant une partie MN, dans laquelle M représente un métal de transition. On précise que l'on entend par métal de transition un métal dont la couche d est partielLement remplie dans le degré d'oxydation usuel de ce métal. Il s'agit des éléments remplissant les périodes III à XII du tableau périodique des éléments à 18 colonnes. A titre d'exemple de tels métaux, on peut citer Tc, Ru, Co, Pt, Fe, Os, Ir, W, Re, Cr, Mo, Mn, Ni, Rh, Pd, Nb et Ta. L'invention concerne en particulier la préparation de complexes de métaux de transition radioactifs utilisables comme produits radiopharmaceutiques pour le diagnostic ou La thérapie. Parmi les complexes utiLisables pour le diagnostic, on peut citer en particulier les complexes de technétium 99-m. Les complexes utilisables pour la thérapie peuvent être par exemple des complexes de rhénium. Les produits radiopharmaceutiques utilisant 99m le radionucleide Tc sont des composés fréquezment utilisés en médecine nucléaire pour le diagnostic en raison des caractéristiques physiques et chimiques de ce radionucléide. En effet, celui-ci donne uniquement une emission gamma, présente une énergie gamma optimale pour la détection externe (140 Kev) et une courte demivie physique (6,02h), ce qui permet de ne délivrer qu'une faible dose d'irradiation au patient. Par ailleurs, le court de ce radiolément est peu élevé et il est disponible commercialement. Enfin, la richesse de La chimie du technétium permet d'obtenir une grande variété de produits radiopharmaceutiques. La source de ce radionucléide est le 99m 99m générateur Mo- Tc qui fournit généralement une solution aqueuse de NaCI, O,154M pure ou contenant des agents stabilisants, dans laquelle est présent l'ion 99m 99 pertechnétate ( TcO'+ TcO') à des concentrations 4 4 -7 -9 totales pouvant aller de 10 à 10 mol/l. Généralement, on utilise ce radionucléide sous la forme de complexes. Ceux-ci sont formés par réduction de l'ion pertechnétate au moyen d'agents réducteurs tels que les ions ferreux, les ions stanneux etc., et réaction du technétium réduit avec des Ligands appropriés. On peut aussi former te complexe par une réaction d'échange de Ligands sur un compLexe labile préforme de technétium, par exemple par échange de ligands sur le complexe Tc-Sn pyrophosphate, Tc-Sn glucoheptonate, Tc-Sn tartrate, comme il est décrit par E. Deutsh et al dans Progr. Inorg. Chem. (Australia), vol. 30, pp.75-139 (1983). Lorsqu'on utilise pour la préparation de ces complexes de technêtium, un procédé comportant une étape de réduction, le complexe formé correspond aux états d'oxydation +5 ou +4 du technétium et peut aussi correspondre à des états d'oxydation inférieurs tels que +3 et +1. Dans le cas des complexes de Tc(V), on peut avoir une partie oxo (TcO) ou transdioxo (TcO ) . 2 On connaît aussi un procédé de préparation de 2+ complexes de technétium comportant une partie (TcssN) qui est décrit par J. Baldas et Col. dans J. Chem. Soc. Dalton Trans. 1981, pp. 1798-1801 ; dans Int. J. Appl. Radiat. Isot. 36 (1985), pp.133-139 et dans La demande de brevet internationale i085/03063. Des complexes de ce type sont intéressants car ils sont très stables à l'hydrolyse et peuvent être utilisés sans modification de la partie TcN pour des réactions de substitution avec d'autres ligands, ce qui permet d'obtenir une grande diversité de complexes de technétium. Le procédé connu actuellement pour préparer de tels complexes consiste à faire réagir un pertechnétate tel que le pertechnétate de sodium avec de L'azoture de sodium et un hydracide halogéné tel que l'acide chlorhydrique, pour obtenir un produit + 99m + intermédiaire de formule R ( TcNX ) dans laquelle R 4 est un cation, par exemple le sodium, l'ammonium ou un autre métal alcalin, et X représente un halogène tel que le chlore ou le brome. Pour effectuer cette réaction, on évapore à sec une solution de pertechnétate de sodium (Tc-99m) en utilisant un évaporateur rotatif, puis on ajoute au résidu sec de L'azoture de sodium et de l'acide chlorhydrique conçentré. On porte au reflux pendant environ 5 min pour compléter la réduction et détruire l'excès d'azoture et on évapore de nouveau à sec en utilisant un évaporateur rotatif. On obtient ainsi un + 99m résidu contenant le composé R ( Tc:NCl ) qui est 4 le produit intermédiaire à partir duquel on peut former par réaction avec des Ligands appropriés, des complexes de technétium utilisables comme produits radiopharmaceutiques. Ce procédé est difficilement applicable à la fabrication de trousses à usage médical car il est long et comprend au moins trois étapes dans lesquelles on utilise deux fois un évaporateur rotatif, ce qui n'est pas facile à mettre en oeuvre dans un service hospitalier de médecine nucléaire. De plus, ce procédé est difficilement utilisable pour la fabrication de trousses à usage médical car la stérilité et l'apyrogénéité des solutions sont difficilement contrôlables tout au long des opérations. De ce fait, le produit finalement obtenu doit être stérilisé apres marquage par le Tc-99m, soit par passage sur une membrane stérilisante, soit par stérilisation à la chaleur, et il doit subir un contrôle d'absence de pyrogène avant l'injection sur l'homme. Dans le cas de la préparation de complexes utilisables pour la thérapie, il est important d'utiliser un procédé de préparation conduisant à un rendement éleva en produits désirés. Or, dans le cas du produit mis au point par Baldas ou Griffith (Coord. Chem. Rev. vol 8, 1972, pp.369-396) pour la préparation de complexes nitrido de technétium, on ne peut obtenir des rendements élevés en complexes. Il en est de meme avec les procédés généralement utilisés pour préparer des complexes de rhénium. La présente invention a précisément pour objet un procédé de préparation de complexes de métaux de transition tels que le technétium et le rhénium, qui pallie les inconvénients décrits ci-dessus. Le procédé selon l'invention de préparation d'un produit comprenant un complexe nitrido d'un métal de transition comportant une partie MN avec M représentant le métal de transition, se caractérise en ce que l'on fait réagir un composé oxygéné du métal de transition M avec un premier ligand choisi dans le groupe des phosphines et polyphosphines aliphatiques et aromatiques, et un second ligand azoté choisi parmi les azotures d'ammonium ou de métaux pharmaceutiquement acceptables et les composés azotés comportant un motif dans Lequel les N sont reliés à des atomes d'hydrogène et/ou à des groupements organiques monovalents par l'intermédiaire d'un atome de carbone ou dans lequel l'un des N est relié à L'atome de carbone d'un groupe organique bivalent par L'intermédiaire d'une double liaison et l'autre N est relié à des atomes d'hydrogène et/ou à des groupements organiques monovalents par l'intermédiaire d'un atome de carbone. Selon ce procédé, on peut obtenir facilement un complexe nitrido d'un métal de transition car il suffit de mélanger les réactifs décrits ci-dessus pour former le complexe nitrido. Généralement, les premier et second ligands sont utilisés sous la forme de solutions aqueuses alcoolique ou hydroalcoolique, et par simple addition de ces solutions au composé oxygéné du métal de transition, par exemple à du pertechnétate de sodium ou du perrhénate de sodium, on obtient directement un produit comportant te complexe nitrido recherché. Ainsi, dans ce cas, il n'est pas nécessaire d'effectuer tout d'abord des étapes d'évaporation à sec des réactifs. Il n1 est pas davantage nécessaire de stériliser le produit obtenu en fin de réaction car il suffit d'utiliser une solution stérile du compose oxygéné du métal de transition. De plus, le procédé de l'invention permet l'obtention de rendements élevés, ce qui n'était pas le cas avec les procédées de l'art antérieur. Les composés oxygénés de métaux de transition M utilisés dans l'invention sont des sels du type MO4M', avec M' representant un métal alcalin ou l'ammonium. Dans le procédé de l'invention, le premier ligand à base de phosphine agit comme agent réducteur du métal de transition et favorise la formation du coeur M=N ainsi que la fixation quantitative du second ligand azoté. En effet, en L'absence du premier ligand, il est impossible d'obtenir par réaction du second ligand avec le composé oxygéné du métal de transition un complexe comportant une partie M-N. De préférence, selon l'invention, la réaction entre le composé oxygéné du métal de transition et le premier et le second Ligands est effectuée en solution aqueuse. Pour réaliser la réaction, on peut introduire aseptiquement le second ligand azoté et la phosphine, de préférence en solution aqueuse, dans un récipient, puis ajouter la quantité requise de composé oxygéné de métal de transition, par exemple de pertechnétate de technétium 99m, après avoir ajusté le pH à une valeur appropriée par addition d'acide ou de base. On peut ensuite effectuer la réaction à la température ambiante ou à une température supérieure allant de 50 à 1000C. La température et le pH utilisés dépendent en particulier du second ligand azoté. Géneralement on opère à des pH inférieurs à 4. Le produit obtenu par ce procédé peut etre utilisé tel quel comme produit radiopharmaceutique pour la thérapie ou le diagnostic. Il peut aussi servir de produit intermédiaire pour la fabrication d'autres complexes nitrido utilisables comme produits radiopharmaceutiques pour le diagnostic ou la thérapie. Dans ce cas, on échange les ligands du complexe nitrido de technétium obtenu précédemment par un troisième ligand organique à groupement nucléophile ayant par exemple un tropisme meilleur pour certains organes du corps humain ou encore par un anticorps monoclonal ou un fragment d'anticorps. Cette réaction d'échange peut etre effectuée simultanément, de préférence en solution aqueuse, lors de la formation du complexe nitrido en faisant réagir ensemble le compose oxygéné du métal de transition, le premier ligand, le second ligand azoté et le troisième ligand organique à groupement nucléophile, l'anticorps monoclonal ou le fragment d'anticorps. On peut aussi effectuer cette réaction en deux étapes, soit une première étape réalisée de préférence en solution aqueuse dans laquelle on fait réagir le composé oxygéne du métal de transition avec le premier et le second ligands, puis une deuxième étape réalisée de préférence aussi en solution aqueuse dans laquelle on fait réagir le produit obtenu a' la suite de la première étape avec le troisième ligand, l'anticorps monoclonal ou le fragment d'anticorps. On peut toutefois réaliser cette réaction d'échange en solution alcoolique ou hydroalcoolique ; il est aussi possible d'effectuer la première étape et la deuxième étape dans des solutions différentes par exemple la première étape en solution aqueuse et la deuxième étape en solution aLcooLique ou hydroalcoolique ou l'inverse. Les Ligands organiques à groupement nucléophile utilisés pour cette réaction d'échange peuvent être trés divers. A titre d'exemple, on peut utiliser des amines, des thiols, des thioéthers, ces oximes, des phosphines et des ligands polyfonctionnels du type polyaminopolythiol. Lorsque la réaction est effectuée avec un anticorps monoclonal ou un fragment d'anticorps, on peut préparer de cette façon un anticorps marqué par un métal de transition. Pour cette réaction, l'anticorps monoclonal ou le fragment d'anticorps utilisé peut être activé, par exemple par prétraitement avec La p -mercapto éthanol amine ou un agent réducteur tel que le dithiothréitol, pour convertir les Liaisons disulfure en groupes sulfhydryle. On peut utiliser de nombreux types d'anticorps, en particulier ceux capables de se lier à la partie M.N par des atomes de soufre. A titre d'exempLes de tels anticorns, on peut citer les anticorps anti-ACE (anti-antigène carci noeiryonnaire), les anticorps anti-carcinome ovarien (OC125), les anti-colorectal, anti-fibrine, anti-nyosine. L'anticorps ou le fragment d'anticorps marqué obtenu est très intéressant, par exemple pour la détection des tumeurs. En effet, après réaction avec te complexe de métal de transition, l'anticorps monoclonal ou le fragment d'anticorps est lie à l'élément de transition tel que le technétium 99m, mais il peut réagir avec les antigènes correspondants. Ainsi, la spécificité de l'anticorps est maintenue et L'anticorps marqué est stable. Aussi, on peut utiliser cet anticorps marqué pour la détection de tumeurs car il se dirigera naturellement vers l'antigène correspondant et permettra la visualisation des tumeurs. Dans le procédé de L'invention, le choix des ligands utilisés est important car il conditionne les propriétés du produit obtenu. Le premier ligand qui permet d'obtenir La formation d'un complexe nitrido, est un ligand organique à atome de phosphore donneur d'électrons choisi parmi les phosphines et les polyphosphines aliphatiques et aromatiques. Les phosphines utilisables peuvent répondre å la formule : 1 2 3 dans laquelle R , R et R qui peuvent etre identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical aryle, un radical alcoxy ou un radical alkyle ou aryle substitué par un groupement choisi parmi les radicaux amino, amido ou cyano. A titre d'exemple de phosphines de ce type, on peut citer la triphénylphosphine, la diéthylphénylphosphine, la triéthylphosphine, la triméthylphosphine et la tris(cyanoéthyl-2) phosphine. Généralement, on préfère utiliser des triarylphosphines comme La triphénylphosphine, car celles-ci sont moins oxydables que les trialkylphosphines. Les polyphosphines susceptibles d'etre utilises dans L'invention peuvent répondre aux formules : 1 2 dans lesquelles R et R qui peuvent être identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical aryle, un radical alcoxy ou un radical alkyle ou aryle substitué par un groupement choisi parmi les radicaux amino et amido, et m est un nombre entier allant de 1 à 4. A titre d'exemples de telles polyphosphines, on peut citer le bis(diméhyL-1,2-phosphino)éthane et le bis(diphényl-l,2-phosphino)éthane. Comme on l'a vu précédemment, Le second Ligand peut etre un azoture d'un métal pharmaceutiquement acceptable ou d'ammonium, ou un composé azoté comportant le motif Les azotures de métaux pharmaceutiquement acceptables peuvent être en particulier les azotures de métaux alcalins, par exemple l'azoture de sodium. Les composés azotés comportant le motif peuvent répondre à La formule : 4 5 6 7 dans laquelle R , R , R et R qui peuvent être identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ; un radical alkyle ; un radical aryle ; un radical alcoxy ; un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi les radicaux hydroxy, carboxy, amino, amido et mercapto ; un radical aryle substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux alcoxy, hydroxy, amino, mercapto et amino substitué par au moins un radical alkyle ; un radical répondant aux formules : 8 9 dans lesquelles R et R qui peuvent être identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alkyle, ou un radical amino ; un radical de formule 10 dans laquelle R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou un radical aryle ; un radical de 11 11 formule R -CO- avec R représentant un radical alkyle, un radical alcoxy, un radical aryle non substitué ou substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxy, ou un radical dérivé d'un hétérocycle non substitué ou substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux 4 5 hydroxy ; ou dans laquelle R et R peuvent former ensemble un radical bivalent de formule : 12 dans laquelle R représente -CH2-NH , un radical aryle non substitué ou substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxy, alcoxy, amino, mercapto et amino substitué par au moins un radical alkyle, ou un radical dérivé d'un hétérocycle non substitué ou substitué par un ou plusieurs groupements choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxy, alcoxy, amino, mercapto et amino substitué par au moins un radical 13 alkyle et, R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi les radicaux hydroxy, 6 7 carboxy, amino, amido et mercapto ; et R et R ont la signification donnée ci-dessus. Ces composés azotés peuvent appartenir en particulier : - au groupe de l'hydrazine et de ses dérivés comme par exemple les alkylhydrazines, les semicarbazides, les hydrazides, * les thiosemicarbazides, les carbohydrazides, les thiocarbohydrazides, l'acéthydrazide, les hydrazinecarboxylates et les aminoguanidines, - au groupe de l'acide dithiocarbazique et de ses dérivés, et - au groupe des produits obtenus par condensation des composés décrits ci-dessus avec des cétones ou des aldéhydes aliphatiques ou aromatiques. Ainsi, le second ligand azoté peut etre t'acide dithiocarbazique ou un dérivé de celui-ci répondant à la formule 10 dans laquelle R représente un atome d'hydrogène, un 14 radical alkyle ou un radical aryle, et R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical aryle, un radical alcoxy, un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi les radicaux hydroxy, carboxy, amino, amido et mercapto, ou un radical aryle substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux aLcoxy, hydroxy, amino, mercapto et amino substitué par au moins un radical alkyle. IL peut également être un produit de condensation obtenu par réaction de l'acide dithiocarbazique avec une cétone ou un aldéhyde 15 16 aliphatique de formule R -CO-R . Dans ce cas, il répond à La formule : 10 dans Laquelle R représente un atome d'hydrogène, un 14 radical alkyle ou un radical aryle ;R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical aryle, un radical alcoxy, un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi les radicaux hydroxy, carboxy, amino, amido et mercapto, ou un radical aryle substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et Les radicaux alcoxy, hydroxy, amino, mercapto et amino substitué par au moins un 15 16 radical alkyle ; et R et R qui peuvent être identiques ou différents representent un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi les radicaux hydroxy, carboxy, amino, amido et mercapto. Le dérivé d'acide dithiocarbazique utilisé comme second ligand peut aussi être le produit de condensation de l'acide dithiocarbazique avec une cétone ou un aldéhyde aromatique. Dans ce cas, le dérivé répond à 10 dans laquelle R représente un atome d'hydrogène, un 14 radical alkyle ou un radical aryle ; R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical aryle, un radical alcoxy, un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi Les radicaux hydroxy, carboxy, amino, amido et mercapto ou un radical aryle substitué par au moins un groupement choisi parmi Les atomes d'halogène et les radicaux alcoxy, hydroxy, amino, mercapto et amino substitué par au moins un radical alkyle ;R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi les radicaux hydroxy, 18 carboxy, amino, amido et mercapto, R représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical alcoxy, un radical amino, ou un radical amino substitué 19 par au moins un groupement alkyle, R représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxy ou un radical mercapto, E représente un atome de carbone ou un atome d'azote, et n est un nombre entier allant de 1 à 4, ou 18 dans laquelle n est égal à 2 et les deux R sont voisins et forment ensemble un cycle aromatique. On peut également utiliser comme second Ligand le produit obtenu par condensation de l'acide dithiocarbazique avec une cétone comportant un hétérocycle à 5 maillons. Dans ce cas, Le second ligand répond à la formule 10 dans Laquelle R représente un atome d'hydrogène, un 14 radical alkyle ou un radical aryle ; R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical aryle, un radical alcoxy, un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi les radicaux hydroxy, carboxy, amino, amido et mercapto, ou un radical aryle substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux alcoxy, hydroxy, amino, mercapto et amino substitué par au moins un 17 radical alkyle ;R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle, un radical alkyle substitué par au moins un groupement choisi parmi Les radicaux hydroxy, 18 carboxy, amino, amido et mercapto, R représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical alcoxy, un radical amino, ou un radical amino substitué par au moins un groupement alkyle, G est S ou 0, et p est 1, 2 ou 3. Le second-ligand peut encore être l'hydrazine ou un dérivé d'hydrazine répondant à la formule : 20 21 R -NH-NH-R 20 dans Laquelle R est un atome d'hydrogène ou un 21 radical alkyle et R est un atome d'hydrogène ou un radical choisi parmi les radicaux de formule : 22 23 dans lesquelles R et R qui peuvent etre identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un 24 radical alkyle ou un radical amino, R représente un 25 radical alkyle et R représente un radical aryle non substitué ou substitue par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et Les radicaux hydroxy ou un radical dérivé d'un hétérocycle non substitué ou substitué par au moins un groupement choisi parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxy. Les radicaux alkyle et alcoxy.utilisés dans Les Ligands décrits ci-dessus peuvent être des radicaux Linaires ou ramifiés ; ils ont généralement de 1 à 3 atomes de carbone. Les radicaux aryle sont des radicaux dérivés d'un noyau par élimination d'un atome d'hydrogène tels que les radicaux phényle et naphtyle. A titre d'exemple, les radicaux dérivés des noyaux hétérocycliques peuvent être des radicaux furfuryle, pyridyle, thiofurfuryle. Les ligands décrits ci-dessus sont des produits du commerce ou peuvent être préparés par des procédés classiques. Dans le procédé de L'invention, lorsqu'on utilise le technétium ou le rhénium comme métal de transition, LeS ligands azotés utilisés peuvent être monodentés, bidentés ou tridentés. En effet, il semble que le complexe nitrido obtenu ait la structure pyramidale de base carrée suivante dans le cas du Tc : dans laquelle A représente le ligand à base de phosphine et B, C et D représentent le ou les ligands azotés. Dans le cas d'un ligand azoté tridenté, tel que le S-méthyl-bêta-N(2-hydroxyphényl)méthylène- dithiocarbazate de formule : la position B est occupée par L'un des atomes d'azote du dithiocarbazate alors que les positions C et D sont occupées par les atomes O et S- du dithiocarbazate ionisé. Le complexe a ainsi la structure suivante Ainsi, si l'on utilise un ligand azoté tridenté, on obtiendra un seul complexe. En revanche, lorsqu'on utilise des ligands azotes monodentés, on peut avoir différents types de complexes selon que Le premier ligand du type phosphine occupe une ou plusieurs des positions A, B, C et D du complexe. Lorsqu'on fait réagir le complexe obtenu à partir du premier et du second ligands avec un troisième ligand organique à groupement nucléophile, il est nécessaire que ce troisième ligand organique soit monodenté, bidenté ou tétradenté dans le cas où le métal de transition est Tc. En effet, dans ce cas, on peut obtenir le remplacement du premier et du second Ligands par le troisième ligand tétradenté. Dans le cas de ligands mono ou bidentés, plusieurs complexes peuvent être préparés, mais on observe qu'il se produit généralement un réarrangement des complexes obtenus en faveur du complexe de technétium comportant surtout le troisième ligand. Dans L'invention, le choix des Ligands utilisés a une grande importance car il conditionne en particulier les propriétés du complexe obtenu. En effet, en choisissant un second Ligand azoté ayant une affinité particulière pour certains organes et en utilisant un métal de transition radioactif tel que Tc99m, convenant aux examens par scintigraphie, on peut utiliser Le procédé de l'invention pour préparer une composition radiopharmaceutique utilisable directement pour le diagnostic. Dans ce cas, il est bien entendu nécessaire également que le premier et le second ligands ne soient pas toxiques et puissent être administrés à l'homme. Aussi, L'invention a également pour objet une trousse pour La préparation d'un complexe nitrido de métal de transition radioactif, en particulier de technétium, qui comprend : - un premier flacon contenant le premier ligand du type phosphine et un second flacon contenant Le second Ligand azoté, en particulier un azoture d'ammonium ou d'un métal pharmaceutiquement acceptable. Ainsi, on peut préparer directement à partir de cette trousse le produit radiopharmaceutique voulu, dans un service hospitalier de médecine nucléaire, en méLangeant le contenu des deux flacons et en lui ajoutant par exemple une solution de pertechnétate de métal alcalin ou d'ammonium. Le premier et le second ligands peuvent etre présents respectivement dans les premier et second flacons sous forme liquide ou sous forme lyophylisée. Dans certains cas, on peut aussi mélanger dans le même flacon le premier et te second ligands et ajouter au dernier moment la solution du composé oxygéné de métal de transition, par exemple de pertechnétate ou de perrhénate pour préparer le produit radiopharmaceutique. Comme on l'a vu précédemment, on peut aussi utiliser le complexe de métal de transition obtenu à partir du premier et du second ligands comme produit intermédiaire pour la préparation d'un autre complexe nitrido de métal de transition par réaction d'echange avec un troisième ligand, un anticorps monoclonal ou un fragment d'anticorps. Le produit obtenu à La suite de cette réaction peut également être utilisé tel quel comme produit radiopharmaceutique soit pour le diagnostic, soit pour la thérapie. Dans ce cas, la trousse permettant la préparation du produit radiopharmaceutique peut comprendre un troisième flacon contenant le troisième Ligand organique à groupement nucléophile, l'anticorps monoclonal ou le fragment d'anticorps. D'autres caractéristiques et avantages de L'invention apparaitront mieux à la lecture des exemples suivants donnés bien entendu à titre illustratif et non limitatif. 99m EXEMPLE 1 : Préparation d'un complexe Tc=N contenant de la 8-mercapto quinoléine. a) - Préparation du produit intermédiaire. Dans un flacon type pénicilline, on introduit -2 0,2 ml d'une solution contenant 7,7.10 mole/l (5mg/ml) d'azoture de sodium dans l'eau, puis 0,5 ml -3 d'une solution contenant 5,2.10 mole/l (îmg/ml) de tris(cyanoéthyl-2) phosphine dans l'eau. On ajoute ensuite 0,5 à 5 ml d'une solution 99m de pertechnétate de sodium ( Tc) et on effectue la réaction à 800C pendant 30 minutes ou à 1000C pendant 15 minutes. b) - PyPeayairo~bu~coQelexe~fial. Au contenu du flacon obtenu dans l'étape a), ou à une fraction de celui-ci, on ajoute 0,3 ml d'une solution tampon carbonate-bicarbonate de sodium 0,5 mole/l à pH 9,0 et 0,4 ml d'une solution contenant -2 5.10 mole/l de chlorhydrate de 8-mercapto quinoléine (10 mg/ml) dans l'éthanol. On effectue la réaction 15 minutes à 1000C, 30 minutes à 800C ou pendant 60 minutes à température ambiante. La pureté radiochimique du complexe obtenu est testée en effectuant une chromatographie sur couche mince en utilisant un gel de silice et un mélange d'éthanol, chloroforme, toluène, et acete d'ammonium (0,5M) dans Les proportions 6/3/3/1. Le complexe obtenu a un Rf de 0,95 alors que 99m le TcO à un Rf de 0,5. 4 La pureté radiochimique est supérieure ou égale à 95X. EXEMPLE~~ : Préparation d'anticorps marqué avec Le complexe intermédiaire Tc-N. a) - Préparation du produit intermédiaire Dans un flacon type péniciLLine on introduit -2 0,4 ml d'une solution contenant 2.1û moLe/L (2,7mg/ml) de S-méthyl, N-méthyl dithiocarbazate dans -3 l'eau, puis 0,5 ml d'une solution contenant 5,2.10 mole/l de tris(cyanoéthyl-2) phosphine dans l'eau et 0,1 ml d'acide chlorhydrique 1N. On ajoute ensuite 0 5 à 5 ml d'une solution 94m de pertechnétate de sodium ( Tc) et on effectue la réaction à 800C pendant 30 minutes ou à 1000C pendant 15 minutes. b) - Préparation de l'anticorps marqué. Au contenu du flacon obtenu dans l'étape a) amené à pH 7, ou à une fraction de celui-ci, on ajoute 1 mg d'anticorps monoclonal entier anti-ACE (antiantigène carcinoembryonnaire) prétraité par La Mercapto éthanolamine pour activer les groupements sulfhydryle (anticorps entier activé) dans une solution tampon phosphate O,1M à pH 7,0. La réaction a Lieu pendant 30 minutes à 350C. La pureté radiochimique est testée en effectuant une chromatographie par filtration sur gel sur colonne TSK type G 3000 SW (0,75x30 cm) par tampon phosphate 0,1M pH 7,0 au débit de 1 ml/minute. La radioactivité et L'absorbance de l'échantillon sont enregistrées simultanément. 95% de La radioactivité est éluée entre 7 et 99m 7,8 ml et La quantité de TcO détectabLe, à 12 ml 4 est inférieure à 5X. REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation d'un produit comprenant un complexe nitrido d'un métal de transition comportant une partie M=N avec M représentant Le métal de transition, caractérise en ce que l'on fait réagir un composé oxygéne du métal de transition M avec un premier ligand choisi dans Le groupe des phosphines et polyphosphines aliphatiques et aromatiques, et un second ligand azoté constitué par un azoture de métal pharmaceutiquement acceptable ou d'ammonium. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Le second ligand azoté est un azoture de métal alcalin. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on effectue la réaction en solution aqueuse 4. Procédé de préparation d'un produit comprenant un complexe nitrido d'un métal de transition comportant une partie M-N dans laquelle M représente le métal de transition, caractérisé en ce que L'on fait réagir un composé oxygéné du métal de transition M avec 1) - un premier Ligand choisi dans le groupe des phosphines et poLyphosphines aliphatiques et aromatiques, 2) - un second ligand azoté constitué par un azoture de métal pharmaceutiquement acceptable ou d'ammonium ou par un composé azoté comportant un motif dans lequel les N sont reliés à des atomes d'hydrogène et/ou à des groupements organiques monovalents par l'intermédiaire d'un atome de carbone, ou dans Lequel L'un des N est relié à l'atome de carbone d'un groupe organique bivaLent par L'intermédiaire d'une double liaison et L'autre N est relié à des atomes d'hydrogene et/ou à des groupements organiques monovalents par l'intermédiaire d'un atome de carbone, et 3) - un troisième ligand organique à groupement nucléophile, un anticorps monoclonal ou un fragment d'anticorps, au moins l'une des réactions étant effectuée en solution aqueuse. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'on fait réagir simultanément les trois ligands en solution aqueuse. 6. Procédé selon La revendication 4, caractérisé en ce que, dans une première etape, on fait réagir en solution aqueuse le composé oxygéné du métal de transition avec le premier et le second ligands, et, dans une deuxième étape, on fait réagir Le produit obtenu à La suite de la première étape avec le troisième ligand, l'anticorps monoclonal ou le fragment d'anticorps. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que pour la deuxième etape, Le troisième Ligand, L'anticorps monoclonal ou Le fragment d'anticorps est en solution aqueuse. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 et 3, caractérisé en ce que -le troisième ligand est Le chlorhydrate de la 8-mercapto quinoléine ou un anticorps anti-ACE. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 8, caractérisé en ce que le métal de transition est le technétium. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que le composé oxygéné du métal de transition est un pertechnétate de métal alcalin ou d'ammonium. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que le métal de transition est Le rhénium. 12. Procédé selon La revendication 8, caractérisé en ce que le composé oxygéné du métal de transition est du perrhénate de métal alcalin ou d'ammonium. 13. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisé en ce que Le premier ligand est la tris(cyanoéthyl-2) phosphine. 14. Trousse pour la préparation d'un complexe nitrido de technétium par mise en oeuvre du procédé selon L'une quelconque des revendications 1 à 13, caractérisée en ce qu'elle comprend : - un premier flacon contenant le premier ligand organique, et - un second flacon contenant un azoture d'ammonium ou d'un métal pharmaceutiquement acceptable. 15. Trousse selon la revendication 14, caractérisée en ce qu'elle comprend un troisième flacon contenant un troisième Ligand organique à groupement nucléophi le.