Brevet FR2640977A2 — publié le 19900629

FR 2640977 A2 19900629 FR 8816996 A 19881222 Dans sa demande de brevet principal déposée le 11 juin 1982 sous le nZ 82-10205 et publiée sous le n 2.528.434, la société demanderesse a décrit de nouveaux 19-nor stéroïdes substitués en ll-beta et éventuellement en 2 de formule générale (I) dans laquelle R1 représente un radical organique renfermant de 1 & 18 atomes de carbone et éventuellement un ou plusieurs hétéroatomes, l'atome immédiatement adjacent au carbone en 11 étant un atome de carbone, R2 représente un radical hydrocarboné renfermant de 1 @ 8 atomes de carbone, X représente le reste d'un cycle pentagonal ou hexagonal éventuellement substitué et éventuellement porteur d'une insaturation, les cycles A et B ayant l'une des structures suivantes a) soit A et B représentent le groupement dans lequel R' et R" identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène, un radical nitrile ou un radical alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone étant entendu que l'un au moins des radicaux R' ou R" ne représente pas un atome d'hydrogène. b) soit A et B représentent le groupement dans lequel Re représente un atome dthydrogène, un radical alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un radical acyle. c) soit A et B représentent le groupement d) soit A et B représentent le groupement dans lequel Ra représente un radical dans lequel R'a et R"a représentent soit un radical alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, soit R'a et R"a représentent avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, un hétérocycle à 5 ou 6 chaînons comportant éventuellement un autre hétéroatome, ou Ra représente un radical acyloxy, le trait ondulé signifiant que Ra peut se trouver dans la position E ou Z. e) soit A et B représentent le groupement étant entendu que lorsque A et B représentent le groupement le radical R1 contient au moins un atome d'azote, de phosphore ou de silicium, et que lorsque A et B représentent le groupement le radical R1 ne représente pas un radical alkyle saturé linéaire, ainsi que les sels d'addition des produits de formule (I) avec les acides. La demanderesse a également décrit un procédé de préparation de ces produits ainsi que leur application comme médicaments et les compositions pharmaceutiques renfermant ces produits. La présente demande de premier certificat d'addition a pour objet d'illustrer, par de nouveaux exemples, la formule générale (I) telle que figurant à la revendication 1 du brevet principal. La présente demande a également pour objet de décrire un produit apparenté à ladite formule générale (I) du brevet principal. La présente demande d'addition concerne les produits suivants Les produits répondant à la formule générale (I) du brevet principal et dont les noms suivent - 11béta-[4-(méthyl sulfonyl) phényl] estra-1,3,5(10)-triène3,17béta-diol. - llbéta- (4- (diiéthylaiino) phényl] estra-1,3,5(10)-triène3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(1-pyrrolidinyl) éthoxy] phényl] estra1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(4-morpholinyl) éthoxy] phényl] estra1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] estra1,3,5(10)-trièn-3-ol. - 11béta-[4-(diméthylamino) phényl] 19-nor 17alpha-prègna1,3,5,(10)-trièn-20-yne-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] 19-nor 17alphaprègna-1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] 17alpha-(1propynyl) estra-1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. ainsi que les produits répondant à la formule (IAD) dans laquelle R11 représente un radical CH3-S ; ainsi que les sels d'addition de tous les produits indiqués ci-dessus et le produit apparenté à la formule générale (I) du brevet principal répondant à la dénomination suivante - llalpha-4-(2-(di1éthylamino) éthoxy) phényle estra-1,3,5- (10)-triène-3,17béta-diol ainsi que ses sels d'addition avec les acides. L'invention objet de la présente demande de certificat d'addition a plus particulièrement pour objet le - Ilbéta-C4-12-(1-pyrrolidinyl) éthoxy) phényl] estra-1,3,5 (10)-triène-3,17béta-diol ainsi que ses sels d'addition avec les acides. Comme sels d'addition avec les acides, on comprend notamment les sels formés avec les acides chlorhydrique, bromhydri que, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, propionique, benzoïque; maléfique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartiqùe, alcane sulfoniques tels que les acides méthane ou éthane sulfoniques, arylsulfoniques, tels que les acides benzène ou paratoluène sulfoniques et arylcarboxyliques. Les produits énoncés ci-dessus peuvent être préparés par les procédés décrits dans la demande principale. Un exemple de préparation de ces produits est donné ciaprès dans les exemples. Les produits objets de la présente demande de premier certificat d'addition ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables sont des produits particulièrement intéressants du point de vue pharmacologique ; ils possèdent en particulier une remarquable activité antigluco corticoïde comme le montrent les résultats des tests joints en annexe. L'étude des produits sur les récepteurs hormonaux a permis de mettre en évidence des activités progestomimétiques ou anti-progestomimétiques, androgènes ou anti-androgènes. Les produits de la présente demande de premier certificat d'addition ainsi que leurs sels peuvent également présenter des propriétés antiprolifératives, anti-estrogènes et/ou estrogènes. Ces produits ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables peuvent donc être utilisés comme médicaments pour lutter principalement contre les effets secondaires des glucocorticoïdes ; ils permettent de lutter également contre les troubles dus à une hypersécrétion de glucocorticoïdes et notamment contre le vieillissement en général et plus particulièrement contre l'hypertension, l'athérosclérose, l'ostéoporose, le diabète, l'obésité ainsi que la dépression de l'immunité et l'insomnie. Ces produits ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, qui possèdent des propriétés antiprogestomimétiques peuvent être utilisés pour préparer des contraceptifs originaux ou comme agents d'interruption de grossesse. Les produits objets de la présente demande de premier certificat d'addition peuvent ainsi être utilisés comme inducteurs de règles chez la femme et plus généralement chez les animaux femelles à sang chaud. Ces produits sont alors administrés pendant les périodes où la progestérone joue un rôle physiologique essentiel, c'est-à-dire notamment pendant la phase lutéale du cycle, au moment de la nidation (ou implantation de l'embryon) et pendant la grossesse. Une méthode de contraception selon l'invention consiste à administrer à la femme un au moins des produits de formule (I) pendant 1 à 5 jours se situant préférentiellement à la fin du cycle. Ce produit est administré alors préférentiellement par la voie orale ou in vagino mais ils peuvent également être utilisés par la voie parentérale. Les produits objets de la présente demande de premier certificat d'addition peuvent également être utilisés par la voie endonasale. Ces produits possèdant des propriétés antiprogestomimétiques peuvent également être utilisés contre les dérèglements hormonaux et, par ailleurs, ils peuvent présenter un intérêt dans le traitement des tumeurs hormonodépendantes. Leurs actions sur les sécrétions hypophysaires rendent les produits utilisables dans la ménopause. Ces produits peuvent également être utilisés dans la synchronisation de l'estrus chez les animaux d'élevage, en particulier les bovins et les ovins. Ces produits peuvent également être utilisés pour contrôler la fertilité des animaux familiers tels que chiensou chats. Les produits objets de la présente demande de premier certificat d'addition ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables peuvent également présenter des propriétés progestomimétiques et peuvent ainsi être utilisés dans le traitement des aménorrhées, des dysménorrhées et des insuffisances lutéales. Ces produits ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, qui présentent des propriétés anti-androgenes peuvent être utilisés dans le traitement des hypertrophies et du cancer de -la prostate, de l'hyperandrogénie, de l'anémie, de l'hirsutisme et de l'acné. Ils peuvent également être utilisés pour la contraception chez 1'homme. Enfin les produits objets de la présente demande de premier certificat d'addition ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables qui présentent des propriétés anti-prolifératives, anti-estrogènes et/ou estrogènes peuvent être utilisables dans le traitement des carcinomes hormono-dépendants, comme par exemple les carcinones mammaires et leurs métastases. Ces propriétés rendent ces produits ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables également utilisables dans le traitement des tumeurs bénignes du sein. Les propriétés estrogènes que peuvent également présenter lesdits produits ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables les rendent utilisables également dans le traitement des troubles liés à une hypofolliculinie, par exemple les aménorrhées, les dysménorrhées, les avortements répétés, les troubles prémenstruels ainsi que le traitement de la ménopause. L'invention a donc pour objet, à titre de médicaments, les produits objets de la présente demande de premier certificat d'addition ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, c'est-à-dire non toxiques aux doses utilisées. L'invention a particulièrement pour objet, à titre de médicaments, le - Ilbéta-C4-12-(1-pyrrolidinyl) éthoxy) phényle estra-1,3,5 (10)-triène-3,17béta-diol ainsi que ses sels d'addition aveu les acides. La posologie utile varie en fonction de l'affection à traiter et de la voie d'administration ; elle peut varier par exemple de 10 mg à 1 g par jour chez l'adulte par voie orale. Les nouveaux produits objets de la présente demande de premier certificat d'addition et leurs sels, tels que définis ci-dessus peuvent être employés pour préparer des compositions pharmaceutiques renfermant, à titre de principe actif, l'un au moins desdits produits. Ces produits et leurs sels sont utilisés par voie digestive, parentérale ou locale. Ils peuvent être prescrits sous forme de comprimés simples ou dragéifiés, de gélules, de granulés, de suppositoires, ovules, de préparations injectables, de pommades, de crèmes, de gels, lesquels sont préparés selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, les dispersants ou émulsifiants, les conservateurs. L'invention a donc pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un produit objet de la présente demande de premier certificat d'addition. L'invention a également pour objet, à titre de produits industriels nouveaux et notamment à titre de produits intermédiaires nécessaires à la préparation des produits de formule (I), telle que définie ci-dessus, les produits répondant la formule générale (II1) dans laquelle R'11 représente un radical CH3-S et à la formule (II2) Les produits de formules générales (II1) et (II2) répondent aux formules générales des demandes de brevets français déposées respectivement le ler mars 1982 sous le n 82 00338 (et publié sous le n 2.522.328) et le 9 janvier 1981 sous le n 81 00272 ( et publié sous le n 2.497.807). Comme les produits décrits dans ces brevets, les produits de formules (II1) et (II2) sont susceptibles de présenter des propriétés pharmaceutiques intéressantes, notamment des propriétés anti-glucocorticoïdes et/ou antiprogestomimétiques. Ces propriétés les rendent aptes aux utilisations pharmaceutiques prévues ci-dessus. EXEMPLE 1 : llbéta-L4-(fléthyl sulfonyl) phényl] estra1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. Stade A : 11béta-[4-(méthylthio) phényl] estra-4,9-diène-3,17dione. On agite pendant 3 heures un mélange de 3,9 g de 3-(1,2- éthanediyl) acétal cyclique de 5alpha-hydroxy 11béta-[4 (méthylthio) phényl] estr-9-ène-3,17-dione, 80 cm de méthanol, 10 cm3 d'éthanol et 12 cm3 d'acide chlorhydrique 5N. I1 y a dissolution. On ajoute 250 cm3 d'eau glacée, on essore, lave à l'eau puis à l'éther. On obtient 3 g de produit attendu F = llO'C. Stade B : 3-hydroxy llbéta-(4-(méthylthio > phényle estra1,3,5(10)-triène-17-one. A une solution refroidie à 0 C de 3 g de produit obtenu au stade A dans 70 cm3 de chlorure de méthylène on ajoute 3,5 cm3 d'anhydride acétique puis lentement 1,5 cm3 de bromure d'acétyle, en laissant revenir à température ambiante. On refroidit à OC et ajoute 50 cm3 d'une solution de bicarbonate de sodium, extrait avec du chlorure de méthylène et concentre à sec. On reprend la résine avec 60 cm3 de méthanol et 60 cm3 d'éthanol, ajoute 5 cm3 de soude 2N et agite pendant 1 heure à température ambiante. On concentre sous pression réduite, reprend à l'eau, neutralise avec de l'acide chlorhydrique 2N puis extrait avec du chlorure de méthylène. On chromatographie le résidu sur silice (éluant : hexane-acétate d'éthyle (1-1)). On obtient 2,1 g de produit attendu F - 2520C après cristallisation dans l'éther éthylique. Stade C : 3-hydroxy 1lbéta-t4-(méthyl sulfonyl) phényle estra 1,3,5(10) -trièn-17-one. A une solution refroidie à 0 C de 1,28 g de produit obtenu au stade B dans 50 cm3 de dichloroéthane on ajoute 2 g d'acide métachloroperbenzoïque. On agite quelques minutes puis ajoute 100 cm3 d'une solution saturée de thiosulfate de sodium. On agite 15 minutes puis extrait avec du chlorure de méthylène. On lave la solution organique avec une solution saturée de bicarbonate de sodium puis concentre à sec sous pression réduite. On obtient 1,4 g de produit attendu utilisé tel quel pour le stade suivant. Stade D : llbéta-[4-(méthyl sulfonyl) phényl] estra1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. A une suspension de 0,424 g de produit obtenu au stade C et 16 cm3 d'éthanol, on ajoute 0,2 g de borohydrure de sodium, on agite pendant 30 minutes puis évapore sous pression réduite. On reprend à l'eau glacée, acidifie à pH 1 avec de l'acide chlorhydrique 2N et extrait à l'acétate d'éthyle. On concentre à sec sous pression réduite et chromatographie le résidu sur silice (éluant : n-hexane-acétate d'éthyle (3-7)). On obtient 186 mg de produit attendu, cristallisé dans l'éther. Analyse pour : C25H30O4S : C % H % S % % calculés 70,39 7,09 7,52 % trouvés 70,3 7,1 7,2 Le 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de Salpha-hydroxy 11béta [4-(méthylthio) phényl] estr-9 (11) -ène-3 , 17-dione, utilisé au départ de l'exemple 1 a été préparé comme suit On refroidit à -6*C, 0,672 g de chlorure cuivrique, 0,212 g de chlorure de lithium, 165 cm3 de tétrahydrofuranne et 16,5 g de 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de 5alpha, 10alpha-époxy estr-9(11)-ène-3,17-dione et introduit, goutte à goutte en 1 heure 15 minutes, 100 cm3 d'une solution O,75M de bromure de t4-(méthylthio) phényl] magnésium et agite à -10 C sous atmosphère inerte pendant encore 1 heure.On ajoute 100 cm3 d'une solution saturée en chlorure d'ammonium, agite 10 minutes, extrait à l'acétate d'éthyle, lave à l'eau, seche et concentre à sec sous pression réduite. On reprend le résidu par un peu d'hexane, essore le produit cristallisé, lave à l'hexane, sèche et obtient 22,2 g de produit brut attendu. F P 202-C. On purifie 2 g de celui-ci par chromatographie sur silice (éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle-triéthylamine 1-1-1 %) puis par cristallisation dans l'acétate d'éthyle et obtient 0,928 g de produit purifié. F = 209 C. EXEMPLE 2 : 11béta-[4-(diméthylamino) phényl] estra-1,3,5(10)triène-3,17béta-diol. A une solution de 1,215 g de llbéta-(4-(diméthylamino > phényle 17béta-hydroxy estra-4,9-dièn-3-one décrit dans le brevet européen n 57115, dans 12 cm3 de chlorure de méthylène, à 0C on ajoute 1,17 cm3 d'anhydride acétique et 0,58 cm3 de bromure d'acétyle, on agite pendant 1 heure à température ambiante puis on alcalinise par addition de'30 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium. On extrait avec de l'acétate d'éthyle, lave et évapore à sec. On dissout le diacétate obtenu dans 12 cm3 de méthanol et 6 cm3 de dioxane, on ajoute 1,2 cm3 de lessive de soude et agite pendant 1 heure à température ambiante. On acidifie à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique 2N puis alcalinise à nouveau avec une solution saturée de bicarbonate de sodium. On extrait avec du chlorure de méthylène et évapore à sec. On obtient 1,35 g de résidu que l'on chromatographie sur silice (éluant : benzène-acétate d'éthyle (65-35)), on obtient 528 mg de produit attendu talpha]D -39 5 # 2 (C = 0,7 % CHCl3) isolé de l'éther isopropylique (produit solvaté à 1 mole éther isopropylique par mole). Analyse pour : C26H33NO2, C6H14O : C % H % N % % calculés 77,85 9,59 2,84 % trouvés 77,75 9,7 2,9 EXEMPLE 3 : llbéta-(4-(diméthylamino) phényle estra-1,3,5(10) triène-3,l7béta-diol. On dissout 25 g de 11béta-[4-(diméthylamino) phényl] 3hydroxy estra-1,3,5(10)-trièn-17-one dans 350 cm3 de méthanol puis on ajoute 2,55 g de borohydrure de sodium. On agite pendant 45 minutes puis coule dans 500 cm3 d'eau glacée, on extrait avec du chlorure de méthylène, lave à l'eau et concentre à sec sous pression réduite, la résine obtenue est chromatographiée sur silice (éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle (1-1)). On obtient 15,7 g de produit attendu cristallisé de l'éther isopropylique. IR CHCl3 sur Nicolet OH : 3602 (F) (F > + associé Aromatique : 1615 - 1583 - 1508 - 1501 cm-1 Le Ilbéta-[4- (diméthylamino) phényl] 3-hydroxy estra1,3,5(10)-trièn-17-one utilisé au départ de l'exemple 3 a été préparé comme suit stade A : llbéta-[4-(diméthylamino) phényl] estra-4,9-diène- 3,17-dione. On agite à température ambiante pendant 1 heure, 1 g de 3 (1, 2-éthanediyl) acétal cyclique de 11béta-[4-(diméthylamino) phényl] 5alpha-hydroxy estr-9-ène-3,17-dione, 30 cm3 d'éthanol et 5 cm3 d'acide chlorhydrique 2N. On neutralise le mélange par de la triéthylamine puis concentre à faible volume. On extrait au chlorure de méthy lente, sèche la phase organique, évapore à sec le solvant. On chromatographie le résidu sur silice, élue par un mélange chlorure de méthylène-acétone 95-5 et recueille 588 mg de produit attendu. Celui-ci est repris dans 2 cm3 d'éther. On sépare ainsi 510 mg de produit. F = 166 C. Stade B : 11béta-[4-(diméthylamino) phényle 3-hydroxy estra1,3,5(10)-trièn-17-one. On dissout 8,9 g du produit obtenu comme précédemment dans 225 cm3 de méthanol, ajoute 8,9 g d'hydroxyde de palladium sur magnésie et porte au reflux pendant 1 heure. On filtre, éva pore sec le filtrat, chromatographie sur silice le résidu en (éluant : par un mélange éther-acétate d'éthyle (1-1)) + 1 % de triéthylamine. On recueille 8,9 g de résine que l'on cristallise dans un mélange acétate d'éthyle-éther isopropylique et isole 5,1 g de produit attendu. F = 256*C. EXEMPLE 4 : 11béta-[4-[2-(1-pyrrolidinyl) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. Préparation 1 : magnésien de 2-[4-(bromophénoxy) éthyl] pyrrolidine. a) A un mélange de 100 g de chlorhydrate de N(bétachloroéthyl) pyrrolidine et 170 cm3 d'éthanol à 96 % on ajoute à 20-22C, 600 cm3 d'une solution = N de soude dans l'éthanol à 96 t puis en 30 minutes à 20-22-C, on ajoute une solution de 97,2 g de parabromophénol, 55 cm3 d'éthanol à 96 % et 600 cm3 d'une solution 1N de soude dans l'éthanol à 96 t. On chauffe ensuite 5 heures au reflux sous agitation. On filtre l'insoluble puis on distille à sec sous pression réduite. On reprend le résidu par 1 litre d'eau déminéralisée et 300 cm3 de chlo rure de méthylène, décante, lave à l'eau, sèche et évapore à sec sous pression réduite.On obtient 140 g de produit brut que l'on chromatographie sur silice (éluant : chloroformeéthanol (7-3)). On obtient 118,5 g de 2-E4-(bromophénoxy) éthyl] pyrrolidine. b) A une suspension de 6,5 g de magnésium en tournures et 60 cm3 de tétrahydrofuranne, on ajoute 0,2 cm3 de dibromoéthane puis 2 cm3 de la solution de réactif ci-dessous, on chauffe à 60iC puis ajoute en 1 heure à 50C une solution de 60,4 g de 2-[4-(bromophénoxy) éthyle pyrrolidine (préparée cidessus) dans 120 cm3 de tétrahydrofuranne. On agite encore 1 heure à 50iC puis ramène à 20 C, on obtient 226 cm3 de solution de produit attendu, titrant 0,92 à 0,94 mol/litre. Stade A : 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de 5alpha-hydroxy llbéta-[4-[2-(pyrrolidinyl) éthoxy) phényl] estr-9-ène-3,17- dione. On prépare une solution de 0,29 g de chlorure cuivrique et 0,09 g de chlorure de lithium dans 210 cm3 de tétrahydrofuranne à laquelle on ajoute 30 g de 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de 5alpha, 10alpha-époxy-estr-9(11)-ène-3,17-dione, décrit dans le brevet européen n 57115. On refroidit la solution à 0C et on ajoute 220 cm3 d'une solution de magnésien de 4-bromophényl 2-éthoxy pyrrolidine (préparation 1). On agite pendant 1 heure à O'C puis coule dans une solution de 370 g de chlorure d'ammonium dans 500 cm3 d'eau puis extrait avec du chlorure de méthylène, amène à sec sous pression réduite. On obtient 73 g de produit brut que l'on chromatographie sur silice (éluant : chlorure de méthylène-acétone-triéthylamine (70-25-5)). L'extrait sec obtenu est chromatographié une seconde fois dans les mêmes conditions.On obtient 57 g de produit attendu utilisé tel quel pour le stade suivant. Stade B : llbéta-[4-E2-(1-pyrrolidinyl) éthoxy) phényle estra4,9-diène-3,17-dione. A une solution de 57 g (47,4 g en pur) de produit obtenu au stade A dans 475 cm3 de méthanol, on ajoute à 20-22'C, 272 cm3 d'acide chlorhydrique 2N. On agite pendant 2 heures 30 à 20-22*C puis coule dans 2 litres d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, extrait avec du chlorure de méthylène, lave à l'eau et concentre à sec sous pression réduite. On reprend le résidu avec 135 cm3 d'éther isopropylique pendant 30 minutes à 40C puis 30 minutes à 0 + 2*C. On obtient 30 g de produit brut attendu que l'on purifie par chromatographie sur silice (éluant : chlorure de méthylène-méthanol (9-1)), on obtient 20 g de produit attendu F = 220'C. Analyse pour : C30H37NO3 C % H % N % % calculés 78,39 8,11 3,05 t trouvés 78,1 8,1 2,8 Stade C : 3-hydroxy 11béta-[4-[2-(1-pyrrolidinyl) éthoxy] phényle estra-1,3,5(10)-trièn-17-one. A une suspension de 19 g du produit obtenu au stade A dans 475 cm3 de méthanol, on ajoute 19 g d'hydroxyde de palladium à 10 t sur oxyde de magnésium. On chauffe pendant 3 heures au reflux et ramène ensuite à 20-C, filtre le catalyseur et évapore à sec sous pression réduite. Le résidu (18 g) est chromatographié sur silice (éluant : chlorure de méthylèneméthanol (9-1)). On obtient 7 g de produit attendu utilisé tel quel pour le stade suivant. Variante 1) Acétylation : 3-acétoxy llbéta-[4-[2-(l-pyrrolidinyl) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-trièn-17-one. A une solution de 6 g de produit obtenu au stade B de l'exemple 4 dans 60 cm3 de chlorure de méthylène on ajoute à O.C : 4,9 cm3 d'anhydride acétique puis 2,4 cm3 de bromure d'acétyle. On ramène à 20'C et laisse agiter 1 heure à 20 C. On ajoute à 20 C, 60 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium. On extrait au chlorure de méthylène et évapore à sec sous pression réduite, on obtient 8,46 g de produit acé tylé utilisé tel quel. 2) Saponification : 3-hydroxy 11béta-[4-[2-(1-pyrrolidinyl) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-trièn-17-one. A une solution de 8,46 g de produit acétylé obtenu précédampent dans 65 cm3 de méthanol, on ajoute à 20 C, 13 cm3 de soude 2N. On agite pendant 1 heure à 20C puis on ajoute 13 cm3 d'acide chlorhydrique 2N et 65 cm3 de chlorure de méthylène. On sépare par décantation réextrait avec du chlorure de méthylène puis évapore à sec sous pression réduite. On chromatographie le résidu (5,9 g) sur silice en éluant avec le mélange chlorure de méthylène méthanol (8-2), on obtient 3,3 g de produit attendu utilisé tel quel pour le stade suivant. Stade D : llbéta-(4-[2-(l-pyrrolidinyl) éthoxy] phényl] estra1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. A une solution de 3 g de produit obtenu au stade C dans 30 cm3 de méthanol et 15 cm3 de tétrahydrofuranne, on ajoute à 20-22-C, 0,52 g d'hydroborure de sodium. On agite 1 heure à 20 C, coule dans 100 cm3 d'eau et extrait avec du chlorure de méthylène. On évapore à sec la fraction organique et on chromatographie le résidu (3,1 g) sur silice (éluant : acétate d'éthyle-méthylbutyléther (6-4)) à 10 t de triéthylamine. On obtient 1,4 g de résidu que l'on recristallise dans 14 cm3 d'acétate d'éthyle saturé d'eau. On obtient 1,35 g de produit attendu. F = 136'C. Analyse pour : C30H39NO3 : Ci Ht Nt % calculés 78,05 8,51 3,03 % trouvés 78,0 8,6 3,1 Préparation 2 : magnésien de 4-[2-(4-bromophénoxy) éthyl] morpholine. a) On opère comme à la préparation 1 de l'exemple 4, en utilisant 93 g de bromophénol et 100 g de chlorhydrate de N (béta-chloroéthyl) morpholine au lieu de chlorhydrate de N (béta-chloroéthyl) pyrrolidine. On obtient 153,8 gde 4-t2-(4- bromophénoxy) éthyl] morpholine. b) Préparation du magnésien. A une suspension de 2,4 g de magnésium en tournures et 5 cm3 de tétrahydrofuranne, on ajoute en 1 heure 15 minutes à 500C, 22,5 g de produit précédemment obtenu, en solution dans 55 cm3 de tétrahydrofuranne. On obtient une solution 0,75N de magnésien attendu, utilisable telle quelle. EXEMPLE 5 : 3-hydroxy llbéta(4-[2-(4-norpholinyl) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-trièn-17-one. Stade A : 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de 5alpha-hydroxy 11béta-[4-[2-(4-morpholinyl) éthoxy] phényl] estr-9-ène-3,17dione. A une solution de 67 mg de chlorure cuivrique et 21 mg de chlorure de lithium dans 66 cm3 de tétrahydrofuranne refroidie à 0vC, on ajoute 6,6 g de 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de Salpha,lOalpha-epoxy-estra-9(11)-diène-3,17-dione, décrit dans le brevet européen n' 57115. On ajoute en 2 heures à 0'C, 35 cm3 de la solution de magnésien de 4-[2-(4-bromophénoxy) éthyl] morpholine préparée ci-dessus. On agite 2 heures à 0 C. On ajoute ensuite 50 cm3 d'une solution saturée de chlorure d'ammonium, extrait à l'acétate d'éthyle et évapore sous pression réduite. On chromatographie le résidu (16,1 g) sur silice (éluant : éther-triéthylamine (9-1)) pour éliminer le composé le plus mobile puis ensuite mélange (éluant : éther-triéthylamine-acétate d'éthyle (8-1-1)). On obtient 7,75 g de produit attendu utilisé tel quel pour le stade suivant. Stade B : llbéta-[4-[2-(4-morpholinyl) éthoxy) phényl] estra 4 ,9-diène-3, 17-dione. On agite pendant 3 heures à température ambiante, 7,75 g de produit obtenu au stade A, 100 cm3 de méthanol et 22 cm3 d'acide chlorhydrique 2N. On verse ensuite le mélange réactionnel dans 100 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium puis dilue avec 600 cm3 d'eau, on essore le précipité (5,94 g) que l'on recristallise dans le mélange chlorure de méthylène-éther isopropylique. On obtient 4,49 g de produit attendu. F = 220-1'C. Stade C : 3-hydroxy llbéta-[4-[2-(4-morpholinyl) éthoxy] phinyl] estra-1,3,5(10)-trièn-17-one. A une solution de 400 mg du produit obtenu au stade B, dans 20 cm3 de méthanol, on ajoute 400 mg d'hydroxyde de palladium à 10 t sur oxyde de magnésium. On chauffe au reflux que l'on maintient 45 minutes. On refroidit, filtre le catalyseur et évapore à sec sous pression réduite. On chromatographie le résidu (434 mg) bur silice (éluant : éther-acétate d'éthyle (1-1)). On obtient 342 mg de produit que l'on chromatographie à nouveau dans les mêmes conditions. On obtient 225 mg de produit attendu. [alpha]D -11'5 + 1 (C - 1 t CHC13). EXEMPLE 6 : 11béta-[4-[2-(4-morpholinyl) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. A une solution de 4,49 g de produit obtenu comme au stade C de l'exemple 5, dans 50 cm3 de méthanol, on ajoute 493 mg d'hydroborure de sodium et on agite pendant 2 heures en température ambiante. On ajoute, ensuite, 3,5 cm3 d'acide chlorhydrique au 1/2, puis on alcalinise par addition d'une solution de bicarbonate de sodium. On extrait avec de l'acé- tate d'éthyle et évapore à sec. sous pression réduite. On chromatographie sur silice la résine obtenue (éluant : chlorure de méthylène-éthanol (95-5) à 0,5 t d'ammoniaque), on obtient 4,1 g de produit que l'on chromatographie à nouveau sur silice (éluant : acétate d'éthyle-triéthylamine (8-2)), on obtient 2,6 g de produit attendu. F - 130 C cristallisé du mélange chlorure de méthylène-éther isopropylique.Après recristallisation dans le toluène, on obtient 1,8 g de produit F # 135 C. Analyse pour : C30H33NO4 Ci Ht Nt t calculés 75,43 8,23 2,93 % trouvés 74,9 8,4 2,9 EXEMPLE 7 : 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-trièn-3-ol. Stade A : 3-(l,2-éthanediyl) acétal cyclique de 17-hydrazone de 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] 5alpha-hydroxy estr-9-ène-3,17-dione. A une solution de 4,95 g de 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de Ilbéta-[4-C2-(diméthylamino) éthoxy) phényl] 5alpha-hydroxy estr-9-ène-3,17-dione, préparé dans le brevet européen n 97572, dans 25 cm3 d'éthanol à 96 et 5 cm3 de triéthylamine, on ajoute 1 cm3 d'hydrate d'hydrazine, on chauffe au reflux, après 1 heure 45 on ajoute, à la solution chaude, 4 cm3 d'hydrate d'hydrazine, on maintient 1 heure 30 au reflux puis évapore les solvants sous pression réduite, on reprend le résidu avec du chlorure de méthylène, lave à l'eau et concentre à sec sous pression réduite, on obtient 5,1 g de produit attendu que l'on utilise tel quel pour le stade suivant. Stade B : 3-(1,2-éthanediyl) acétal cyclique de Salpha-hydroxy Ilbéta-[4-C2-(diméthylamino) éthoxy] phényle estr-9-èn-3-one. A une suspension de 3,88 g du produit obtenu au stade A dans 39 cm3 de toluène, on ajoute 3,4 g de terbutylate de potassium et 800 mg d'éther couronne (18-crown-6) on agite pendant 2 heures 30 au reflux, refroidit, verse sur 100 cm3 d'une solution de chlorure d'ammonium et extrait avec de l'acétate d'éthyle. On évapore à sec et chromatographie le résidu sur silice (éluant : chlorure de méthylène-isopropanolammoniaque (95-5-0,5)), on obtient le produit attendu que l'on utilise tel quel pour le stade suivant. Stade : llbeta-t4-t2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] estra4,9-dièn-3-one. A une solution de 2,6 g de produit obtenu au stade B, dans 25 cm3 de méthanol, on ajoute 5,4 cm3 d'acide chlorhydrique 2N et on agite 5 heures 30 à température ambiante, on distille ensuite le méthanol à 30-35C sous pression réduite, alcalinise avec du bicarbonate de sodium, extrait avec du chlorure de méthylène et évapore à sec sous pression réduite. On chromatographie le résidu (2,15 g) sur silice (éluant : cyclo hexane-acAtate d'éthyle-triéthylamine (6-2-2)). On obtient 1,62 g de produit attendu F = 136-C, cristallisé de l'éther isopropylique. Stade D : 11béta-[4-[2-diméthylamino) éthoxy] phényl] estra1,3,5(10)-trièn-3-ol. A une solution de 0,6 g de produit obtenu comme au stade C dans 12 cm3 de méthanol, on ajoute 0,6 g d'hydroxyde de palladium sur magnésie et on agite pendant 1 heure 30 au reflux. On filtre le catalyseur et évapore à sec le filtrat. On chromatographie le résidu (0,65 g) sur silice (éluant : acétate d'éthyle-triéthylamine (95-5)), on obtient 0,325 g de produit attendu. F = 172'C recristallisé de l'éthanol aqueux. Analyse pour : C28H37NO2 Ct Ht Nt t calculés 79,49 8,96 3,30 % trouvés 79,5 9,0 3,1 EXEMPLE 8 : 11alpha-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. Stade : Dimethyl acétal du 5béta, 10béta-époxy-17béta-hydroxy estr-9(11)-èn-3-one. A une suspension de 10 g de 3-diméthyl acétal d'estra- 5(10),9(11)-diène-3,17-dione (décrit dans le brevet français n 1.514.086), dans 100 cm3 de méthanol, on ajoute à 15-20 C 2,5 g de borohydrure de sodium, agite pendant 1 heure, distille à sec, reprend à l'eau et extrait chlorure de méthylène. On évapore à sec, on obtient 7,8 g de 17béta-hydroxy intermédiaire. A une solution de 7,15 g de l'intermédiaire obtenu dans 70 cm3 de chlorure de méthylène à 1 % de pyridine, on ajoute à 0C, 1,3 cm3 de sesquihydrate d'hexafluoro acétone et 2,6 cm3 d'eau oxygénée à 50 %. On agite pendant 26 heures à 0C puis ajoute un excès de thiosulfate de sodium, décante, lave à l'eau, évapore à sec. On chromatographie le résidu (7,9 g) sur silice, (éluant : cyclohexane-acétate d'éthyle (6-4)) à 1 % de triéthylamine. On obtient le produit attendu que l'on utilise tel quel pour le stade suivant. Stade B : Diméthyl acétal du 5béta, 17béta-dihydroxy llalpha- [4-[2-(diméthylamino) éthoxy) phényl] estr-9-èn-3-one. A une suspension de 100 mg de chlorure cuivreux dans 4 cm3 de tétrahydrofuranne, on ajoute à 20'C, 12,7 cm3 de magnésien de 4-(2-(diméthylamino) éthoxy) bromobenzène en solution 0,57M dans le tétrahydrofuranne, préparée comme ci-dessous, on refroidit à 0 0 + 5'C et ajoute en 20 minutes une solution de 600 mg de produit obtenu au stade A dans 6 cm3 de tétrahydrofuranne. On agite pendant 19 heures à température ambiante, on ajoute une solution de chlorure d'ammonium, extrait avec de l'acétate d'éthyle et évapore à sec sous pression réduite. On chromatographie le résidu 2,2 g sur silice (éluant : acétate d'éthyle-triéthylamine (8-2)), on obtient 680 mg de produit attendu. F = 136'C. Stade C : llalpha-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy) phényle 17béta-hydroxy estra-4,9-dièn-3-one. A une solution de 650 mg de produit obtenu au stade B dans 10 cm3 de méthanol on ajoute 2 cm3 d'acide chlorhydrique 2N et agite pendant 1 heure 30 à 200C. On neutralise ensuite avec une solution de bicarbonate de sodium, extrait à l'acétate d'éthyle et évapore à sec sous pression réduite. On chromatographie le résidu (560 mg), sur silice (éluant : acétate d'éthyle-triéthylamine (8-2)). On obtient 335 mg de produit attendu utilisé tel quel pour le stade suivant. Stade D : 11alpha-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy) phényl] estra-1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. A une solution de 310 mg de produit obtenu au stade C, dans 10 cm3 de méthanol, on ajoute 620 mg d'hydroxyde de palladium sur magnésie. On agite au reflux pendant 3 heures 45 puis refroidit et filtre le catalyseur. On évapore à sec sous pression réduite, on chromatographie le résidu (290 mg) sur silice (éluant : acétate d'éthyle-triéthylamine (8-2)), on obtient 115 mg de produit attendu. Analyse pour : C28H37NO3 C % H % N % t calculés 77,20 8,56 3,22 % trouvés 77,1 .8,6 3,3 Préparation 3 magnésien de 4-[2-(diméthylamino) éthoxy] bromobenzène. A un mélange de 34,6 g de bromophénol et 20 cm3 d'éthanol à 95 â, on ajoute, à température ambiante, 200 cm3 d'une solution N de soude éthanolique. On ajoute ensuite un mélange de 28,8 g de chlorhydrate de l-diméthylamino 2-chloro éthane, 60 cm3 d'éthanol 95 % auquel on ajoute une solution N de soude éthanolique. On chauffe jusqu'au reflux que l'on maintient 24 heures, on filtre l'insoluble, lave à l'éthanol et évapore sous pression réduite. Le résidu est repris à l'eau puis extrait à l'éther. On évapore à sec sous pression réduite puis purifie par distillation Eb 70-72 C. sous 0,1 mbar. On introduit, en 1 heure, une solution de 97,4 g du 4 [2-(diméthylamino) éthoxy] bromobenzine, obtenu comme cidessus, dans 480 cm3 de tétrahydrofuranne sur le mélange agité à 35C de 11,5 g de magnésium en tournures et 20 cm3 de tétrahydrofuranne. On agite encore 1 heure à 35iC puis refroidit, on obtient une solution titrant 0,57-0,6 mol/litre. EXEMPLE 9 : 11béta-[4-(diméthylamino) phényl] 19-nor 17alphaprègna-1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17béta-diol. A une solution de 500 mg de llbéta-(4-diméthylamino) phényl-17béta-hydroxy 19-nor 17alpha-prègna-4,9-dièn-3-one (préparé selon EP 0.0057.115) dans 3 cm3 de chlorure de méthy lène on ajoute à 0 C, 0,45 cm3 d'anhydride acétique et 0,25 cm3 de bromure d'acétyle. On agite pendant 1 heure à 0C puis on verse dans une solution aqueuse de bicarbonate de sodium et extrait avec du chlorure de méthylène. On amène à sec, sous pression réduite, la fraction organique et dissout le résidu dans 20 cm3 de méthanol. On ajoute 2 cm3 de lessive de soude et agite 2 heures. On verse la solution dans 200 cm3 d'eau contenant 15 cm3 d'acide chlorhydrique 2N.On extrait avec du chlorure de méthylène, après évaporation à sec sous pression réduite, le résidu est chromatographié sur silice (éluant chlorure de méthylène-acétate d'éthyle (9-1)). On obtient 300 mg de produit que l'on recristallise dans le mélange chlorure de méthylène-éther isopropylique, on recueille 165 mg de produit recherché. F = 260'C. [alpha]D = -162'5 + 3 5 (c = 0,6 % CHCl3) Analyse pour C28H33N 2 C % H % N % % calculés 80,92 8,00 3,37 % trouvés 81,0 8,1 3,4 EXEMPLE 10 : 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] 19nor 17alpha-prègna-1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17béta-diol. On prépare une suspension d'acétylure de potassium en diluant 15 cm3 d'une solution 2M de terbutylate de potassium dans le tétrahydrofuranne avec 50 cm3 de tétrahydrofuranne et en y faisant barboter de l'acétylène pendant 2 heures (titre par acidimétrie - 0,53 M). 30,5 cm3 de la suspension d'acéty- lure sont ajoutés à une solution de 1,75 g de 3-hydroxyllbéta-[4-[2-(diméthylamino) ethoxy] phényl] estra-1,3,5(10)trièn-17-one (préparé selon EP 0.0097.572). On agite pendant deux heures à température ambiante puis verse dans l'eau et acidifie avec de l'acide chlorhydrique N jusqu'S pH 1. On alcalinise ensuite le milieu avec une solution saturée de bicarbonate de sodium et extrait avec de l'acétate d'éthyle. On évapore à sec sous pression réduite. On chromatographie le produit brut (1,7 g) sur silice (éluant : chlorure de méthylène-méthanol-ammoniaque (90-10-0,5)). On recueille 1,516 g de produit que l'on recristallise par dissolution dans le chlorure de méthylène, ajout d'éther isopropylique et concentration à petit volume. On obtient 1 g de produit recherché. [alpha]D = -126 + 2 (C = 0,7 % CHC13). IR (CHCl3) : OH 3598 cm-1 C E C-H 3598 cm-l C # C 2100 cm-1 aromatique 1609 - 1589 - 1511 cm-1 bandes de Bohlmann. Analyse pour C3oH37NO3 C % H % t calculés 78,4 8,11 3,05 â trouvés @ 78,4 8,3 3,0 EXEMPLE 11 : 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] 17alpha-(1-propynyl) estra-1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. Dans une solution de 7,7 cm3 de solution 1,8 M de bromure d'éthyle magnésium dans éther et 40 cm3 de tétrahydrofuranne, on fait barboter du méthylacétylène pendant 1 heure à 0 C, puis 1 heure à température ambiante. On ajoute ensuite une solution de 2 g de 3-hydroxy-11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] estra-1,3,5(10)-trièn-17-one (préparation décrite dans EP 0.0097.572) dans 10 cm3 de tétrahydrofuranne, on agite pendant 2 heures 30 à température ambiante puis coule le mélange réactionnel dans une solution de chlorure d'ammo nium et de glace, on extrait avec de l'acétate d'éthyle et évapore à sec sous pression réduite. On chromatographie le résidu (2,1 g) sur silice (éluant : chlorure de méthylène- méthanol-ammoniaque (90-10-0,5)).On obtient 1,95 g de produit attendu que lton recristallise dans l'éthanol pour obtenir 1,6 g de produit recherché. F = 194 C. [alpha]D 1 -182D5 + 3 (C = 1% CHC13). IR (CHCl3) Aromatiques 1610-1581-1510 - 1500 cm-l -C " C- 2245 cm-l Analyse pour : C31H39NO3 C % H % N % t calcules 78,6 8,30 2,96 5 trouvés 78,5 8,5 2,8 EXEMPLE 12 : Compositions pharmaceutiques. On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante - Produit de l'exemple 4 ................. 50 mg - Excipient (talc, amidon, stéarate de magnésium) q.s.p. un comprimé terminé à ........... 200 mg Etude pharmacologique des Droduits de l'invention. 1) Etude de l'activité des produits de l'invention sur les récepteurs hornonaux Récepteur clucocorticoïde du thvmus de rat Des rats mâles Sprague Dawley EOPS de 160 à 200 g sont surrénalectomisés. 4 à 8 jours-après cette ablation, les animaux sont sacrifiés, et les thymus sont prélevés et homogénéisés à 0 C dans un tampon Tris 10mM, saccharose 0,25 M, dithiothreitol 2mM, CH1 pH 7,4 , à l'aide d'un Potter polytétrafluoroéthylène-verre (1 g de tissu pour 10 ml de TS). L'homogénat est ensuite ultracentrifugé (105 000 g x 90 mn) à 0iC. Des aliquotes du surnageant ainsi obtenu, sont incubées à 0C pendant un temps (t) avec une concentration constante (T) de dexaméthasone tritiée en présence de concentrations croissantes (0 - 2.500.10-9M) soit de dexaméthasone froide, soit du produit froid à tester. La concentration de la dexaméthasone tritiée liée (B) est ensuite mesurée dans chaque incubat par la technique d'adsorption au charbon-destran. Récepteur estrogène de l'utérus de souris Des souris femelles impubères âgées de 18 à 21 jours sont sacrifiées, les utérus sont prélevés puis homogénéisés à 0iC à l'aide d'un Potter teflon-verre dans une solution tamponnée TS Tris 10mM, saccharose 0,25 M, HCl pH 7,4 (1 g de tissu pour 25 ml de TS). L'homogénat est ensuite ultra-centrifugé (105 000 g x 90 mn) à 0*C. Des aliquotes du surnageant ainsi obtenu, sont incubées à 0*C ou à 250C pendant un temps (t) avec une concentration constante (T) d'estradiol tritié en présence de concentrations croissantes (0 - 1000.10-9M) soit d'estradiol froid, soit du produit froid à tester.La concentration d'estradiol tritié lié (B) est ensuite mesurée dans chaque incubat par la technique d'adsorption au charbondextran. Calcul de l'affinité relative de liaison Le calcul de l'affinité relative de liaison (ARL) est identique pour tous les récepteurs. On trace les 2 courbes suivantes : le pourcentage de l'hormone tritiée liée B en fonction du logarithme de la T concentration de l'hormone de référence froide et B en T fonction du logarithme de la concentration du produit froid testé. On détermine la droite d'équation I50 = (B max + B min) /2. T T B max = Pourcentage de l'hormone tritiée liée pour une incu T bation de cette hormone tritiée à la concentration (T). B min = Pourcentage de l'hormone tritiée liée pour une incu T bation de cette hormone tritiée à la concentration (T) en présence d'un grand excès d'hormone froide (2500.10-9M). Les intersections de la droit I50 et des courbes permettent d'évaluer les concentrations de l'hormone de référence froide (CH) et du produit froid testé (CX) qui inhibent de 50 5 la liaison de l'hormone tritiée sur le récepteur. L'affinité relative de liaison (ARL) du produit testé est déterminée par l'équation ARL = 100 (CH) (CX) Les résultats obtenus sont les suivants i Temps d'incu- I Glucocorticoïde I Estrogène I tion I I Produits I 1 4H I 24H I 2H I 5H Ides exemples I I I I I I i I EX. 1 I 3 | 0,8 1 22 1 10 1 I EX, 2 et 3 1 39 l 10 1 19 1 6 j EX. 4 1 4 1 0,7 1 47 l 109 1 I EX. 5 1 5 l 1,5 1 21 1 26 ss EX. 6 g 11 j 2,5 1 29 1 71 1 EX. 8 1 0,4 1 0,1 i 5 1 12 1 j I 2) Activité anti-proliférative des produits sur la croissance de cellules tumorales mammaires MCF-7. Description du test : a) Culture cellulaire Les lignées MCF-7 sont maintenues en culture en milieu SVF(1) à 37C en atmosphère humide contenant 5 % C02. Les cellules à subconfluence sont récoltées par trypsination (trypsine 0,05 %, EDTA 0,02 %) puis rincées par centrifugation douce. Un échantillon des cellules en suspension est compté sur cellule de Malassez. b) Etude de la croissance Les cellules resuspendues dans le milieu SVF sont ensemencées à raison de 30.000 cellules par puits dans des plaques multipuits (24 puits de 2,5 cm2). Vingt quatre heures après l'ensemencement (JO), le produit à tester est ajouté au milieu en solution éthanolique (concentration finale en éthanol 0,1 %), la concentration de 10-5M, les puits contrôles recevant la même concentration en éthanol. Les milieux sont renouvelés toutes les 48 heures. En fin d'expérience (J6), le milieu est aspiré et les cellules sont immédiatement fixées par 150 microlitres de méthanol afin de doser 1'ADN. L'activité anti-proliférative des produits est évaluée par leur capacité à inhiber l'augmentation d'ADN. c) Dosage de 1'ADN L'ADN est dosé par une méthode fluorimétrique utilisant le DABA (Acide 3,5 diaminobenzoïque) (2) 150 microlitres de DABA sont ajoutés dans chaque puits ; les plaques sont alors incubées 45 mn à 56'C, puis 1,5 ml d'HCL 1N sont ajoutés. La fluorescence est mesurée à l'aide d'un fluorimètre (longueur excitatrice : 400 nanomètres, longueur d'onde d'émission 500 nanomètres). La quantité d'ADN par puits est évaluée par rapport à une gamme étalon obtenue en traitant dans les mêmes conditions un standard d'ADN de thymus de veau. Résultats La concentration en M qui inhibe de 50 % la croissance des cellules MCF7 (C150) a été déterminée de la manière indiquée ci-dessus pour les produits des exemples 1 et 4 à 8. On a obtenu les résultats suivants Produit de l'exemple 1 : CI50 = 2.10-9M. Produit de l'exemple 4 : CI50 = 4.10-11M. Produit de l'exemple 5 : CI50 = 10-9M. Produit de l'exemple 6 : CI50 = 4.10-11M. Produit de l'exemple 7 : CI50 = 8.l011X. Produit de l'exemple 8 : CI50 = 5.l09M. (1) Le milieu de culture sérum de veau foetal (SVF) est pré paré comme suit Milieu MEM (Minimal Essential Medium) auquel sont ajoutés - acides aminés non essentiels (GIBCO), - péni-strepto (pénicilline 100 U/ml, streptomycine 0,1 mg/ml), - fungizone 0,1 %, - insuline (5 nanogrammes/ml), - sérum de veau foetal (4 t concentration finale). (2) Puzas et Goodman, Analytical Biochemistry, Vol. 86, pp. 50, 1978. Compositions pharmaceutiques On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante - Produit de l'exemple 4 ........................ 50 mg Excipient (talc, amidon, stéarate de magnésien) q.s. pour un comprimé terminé à ............... 120 mg REVENDICATIONS 1) Les produits répondant à la formule générale (I) du brevet principal et dont les noms suivent - 11béta-[4-(méthyl sulfonyl) phényl] estra-1,3,5(10)-triène3,17béta-diol. - 11béta-[4-(diméthylamino) phényl] estra-1,3,5(10)-triène3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(1-pyrrolidinyl) éthoxy] phényl] estra 1,3,5(10)-triene-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(4-morpholinyl) éthoxy] phényl] estra 1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] estra1,3,5(10)-trièn-3-ol. - 11béta-[4-(diméthylamino) phényle 19-nor 17alpha-prègna1,3,5,(10)-trièn-20-yne-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] 19-nor 17alphaprègna-1,3,5(10)-trièn-20-yne-3,17béta-diol. - 11béta-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] 17alpha-(1propynyl) estra-1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol. ainsi que les produits répondant à la formule (IAD) (IAD) dans laquelle R11 représente un radical CH3-S ainsi que les sels d'addition de tous les produits indiqués ci-dessus. 2) Le produit apparenté à la formule générale (I) du brevet principal répondant à la dénomination suivante - 11alpha-[4-[2-(diméthylamino) éthoxy] phényl] estra1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol ainsi que ses sels d'addition avec les acides. 3) Le produit selon la revendication 1 répondant à la dénomination suivante - 11béta-[4-[2-(1-pyrrolidinyl) éthoxy) phényl] estra1,3,5(10)-triène-3,17béta-diol ainsi que ses sels d'addition avec les acides. 4) A titre de médicaments, les produits tels que définis à l'une quelconque des revendications 1 à 3 pharmaceutiquement acceptables. 5) Les compositions pharmaceutiques renfermant, comme principe actif au moins un médicament défini à la revendication 4. 6) A titre de produits industriels nouveaux, les produits repondant à la formule suivante (II1) dans laquelle R'11 représente un radical CH3-S et à la formule (II2)