Brevet FR2647793A1 — publié le 19901207

La présente invention se rapporte à l'ophtalmolo- gie, et plus précisément à un procédé d'obtention d'un biopolymère réticulé, à l'implant fait en ce biopolymère pour une hermétisation de blessures cornéennes et scléra- les à la suite de traumas de l'oeil ainsi qu'au mode d'ob- tention de cet implant. Le biopolymère réticulé obtenu selon la présente invention trouvera un large champs d'application pour la fabrication de verres de contact, de revêtements et d'im- plants utilisés dans tous les types d'interventions ophtal- mologiques, ainsi que pour le traitement conservatif des lésions trophiques de la cornée de différentes étiologies. L'implant selon l'invention sera utilisé dans le traite- ment des affections traumatiques de la scléorotique et de la cornée de l'oeil. On connaît actuellement toute une série de biopo- lymères mis au point pour l'ophtalmologie, qui sont biologi- quement compatibles avec les tissus de l'oeil et qui pré- sentent une faible antigénicité, ces biopolymères étant obtenus à partir de collagène, une protéine naturelle. Dans le but de créer de tels biopolymères, la stabilité radiative du collagène a été étudiée en détail. On a pu établir que l'effet de l'irradiation dépendait de la dose utilisée et des conditions de réalisation. A la suite de l'irradiation de solutions de collagène, il peut aussi bien se produire un processus de réticulation des fibrilles du collagène qu'un processus de dégradation. Cela dépend de la concentration du collagène et de la spécificité des promoteurs de la réticulation. On connaît un gel collagénique qui est obtenu par irradiation du collagène par un rayonnement ionisant à une dose de 33 kGy. Le changement du tableau électrophorétique et la diminution de la solubilité dans des acides confir- ment que sous l'action du rayonnement, il se forme, dans le gel, de nouvelles liaisons de structuration. On note également une augmentation de la prédisposition à l'accès protéolytique, ce qui agit favorablement sur le processus de cicatrisation des plaies traitées par ce gel collagéni- que (Problemy techniki w medicynie, t. XII, NO 3, 1981, S. Bartelik, Wplyw sterylizacji radiacyjues na niektore wlasciwosci fizyko-chemiczne zelu kolagenowego). Cependant, le procédé ci-dessus mentionné ne peut être utilisé pour la création, par exemple, de transplants de forme volumé- trique volue ayant une résistance mécanique et un degré donné de gonflement et une stabilité enzymatique, étant donné que pour la dose d'irradiation ci-dessus mentionnée en présence d'oxygène atmosphérique, il se produit un processus de destruction des fibrilles du collagène. On connait un procédé de préparation de revête- ments ophtalmologiques en collagène (SU, A, 13211420) con- sistant à soumettre la sclérotique de l'oeil d'animaux agricoles à un traitement alcalino-salin, puis à homogé- néiser le tissu obtenu par une solution aqueuse d'acide organique, par exemple d'acide acétique jusqu'à constitu- tion d'une solution de collagène que l'on épure de ses impuretés de faible poids moléculaire par dialyse contre une solution tampon en amenant le pH de la solution colla- génique entre 4,5 et 7,5 et on effectue la dessication de la solution du collagène obtenue, en formant simultanément des revêtements sphériques qui répètent la courbure de la partie antérieure de l'oeil. Les revêtements collagéniques ainsi obtenus sont caractérisés par une faible résistance mécanique et un faible degré de gonflement et ils se résorbent facilement. Ce procédé ne permet pas d'obtenir des implants de forme volumétrique voulue étant donné que l'on ne peut utiliser que la dessication pour leur constitution. Le problème posé par la présente invention con- siste à mettre au point un procédé d'obtention d'un biopo- lymère réticulé pour les besoins de l'ophtalmologique par irradiation d'une solution de collagène par un rayonnement ionisant dans des conditions spécialement choisies assu- rant, au polymère obtenu, une résistance mécanique suffi- sante, un degré élevé de gonflement et une stabilité enzy- matique, ainsi que de créer, à partir de ce biopolymère, un implant pour l'hermétisation des blessures cornéennes et sclérales à la suite de traumas de l'oeil et d'élaborer un procédé pour son obtention par le biais d'une sélection qualitative des opérations technologiques, permettant ainsi, tout en préservant les propriétés optimales du biopolymère de cet implant, de lui donner la forme et les dimensions voulues pour l'hermétisation complète des plaies. Ce problème se voit résolu par le fait que l'on propose un procédé d'obtention d'un biopolymère réticulé à base de collagène pour les besoins de l'ophtalmologie par traitement alcalino-salin de la sclérotique de l'oeil d'animaux, homogénisation du tissu obtenu par une solu- tion aqueuse d'un acide organique jusqu'à la formation d'une solution de collagène dont on extrait des impuretés de faibles poids moléculaires, ou, selon l'invention, on sature la solution de collagène, épurée des impuretés, de protoxyde d'azote et on la porte à une concentration qui ne dépasse pas 80% en poids, ensuite on irradie la solution obtenue de collagène par un rayonnement ionisant à une dose de 0,5 à 15 kGy jusqu'à constitution du biopolymère réticulé. La dose d'irradiation choisie, la concentration en collagène dans la solution, l'utilisation du protoxyde d'azote en tant que promoteur de la réticulation assurent, au biopolymère réticulé obtenu, une homogénéité de réticu- lation dans tout le volume du collagène. L'homogénéité et la possibilité de réglage du degré de réticulation permet- tent de conserver l'élasticité du biopolymère, d'accroi- tre sa résistance mécanique et son degré de gonflement ainsi que sa stabilité enzymatique de près de deux fois. L'absence d'impuretés nocives dans le biopolymère et sa base collagénique lui assurent une bonne compatibilité biologique avec les tissus de l'oeil. Dans le but d'augmenter la qualité du biopolymère réticulé selon l'invention, en excluant la constitution, dans sa structure,decavités, il est recommandé, avant l'irradiation, de soumettre la solution de collagène à un dégazage partiel par centrifugation entre 3 et 40.103 tours/mn pendant 10 à 30 minutes. Un implant pour l'hermétisation des plaies cor- néennes et sclérales conséquentes à des traumas de l'oeil est proposé ici, ledit implant étant préparé à partir d'un biopolymère réticulé à base de collagène selon l'invention. Grâce à un degré élevé de gonflement et à la possibilité de régulation, ainsi qu'à une résistance suffisante du biopolymère de l'implant selon l'invention, ce dernier assure une hermétisation complète des plaies conséquentes aux traumas de l'oeil sans avoir recours à d'autres moyens pouvant avoir une action traumatisante supplémentaire sur les tissus oculaires. Dans le but de résoudre ce problème, nous pro- posons également un procédé d'obtention de cet implant consistant en un traitement alcalino-salin de la scléro- tique de l'oeil des animaux, l'homogénisation du tissu obtenu par une solution aqueuse d'acide organique jusqu'à formation d'une solution de collagène suivie de l'extrac- tion des impuretés de faible poids moléculaire, dans lequel, selon l'invention, la concentration de la solu- tion de collagène,épurée des impuretés,est portée à une valeur de 0,2 àl1, 3% en poids, cette solution est saturée en protoxyde d'azote et un moule en est rempli, ensuite on irradie par un rayonnement ionisant à une dose de 0,5 à 15 kGy, la pièce brute obtenue pour l'implant du biopo- lymère réticulé à base de collagène est soumise à une dia- lyse à l'eau pendant 24 à 48 heures puis elle est séchée jusqu'à un taux d'humidité dans le biopolymère réticulé de 30 à 50% en poids, en attribuant, par la suite, à cette pièce brute, la forme et les dimensions de l'implant qui as- sureront l'hermétisation complète des plaies de la cornée et de la sclérotique conséquentes à des traumas du globe oculaire. Le procédé cidessus mentionné selon l'invention permet de régler, dans l'implant, les paramètres des pro- priétés du biopolymère, ainsi que sa forme et ses dimen- sions,ce qui est une condition nécessaire pour son utili- sation. Pour l'optimisation des paramètres des propriétés de l'implant selon l'invention, il est rationnel, avant de couler la solution de collagène dans le moule, de la soumettre à un dégazage partiel par congélation, suivie d'une décongélation à une température de 20 à 25 C et une centrifugation entre 1 et 2.103 tours/mn pendant 10 à minutes. Afin de rendre commode l'installation de l'implant selon l'invention dans la plaie du globe oculaire, il est avantageux de lui donner la forme d'un cylindre à bout ef- filé de 3 à 5 mm de longueur et ayant un diamètre à sa base de 0,5 à 4,0 mm. Le procédé d'obtention du biopolymère réticulé à base de collagène selon l'invention peut être réalisé comme suit. On soumet la sclérotique des yeux d'animaux agrico- les à un traitement alcalino-salin, puis on la dégage minu- tieusement des membranes internes de l'oeil, des restes de la conjonctive et des muscles et ensuite on extrait le stroma que l'on découpe en petits morceaux. La suspension de tissu est lavée dans de l'eau distillée jusqu'à élimi- nation complète des impuretés mécaniques et du sang, elle est placée dans une fiole et on y ajoute une solution de soude caustique à 10% dans une solution saturée de sul- fate de sodium à raison de 500ml pour 10 g de tissu pen- dant 48 heures à une température de 18 à 20 C. La solution est évacuée et on effectue la neutralisation du tissu à un pH de 6,0 à 7, 0 par son mélange dans une solution à 2% d'acide borique que l'on change à plusieurs reprises. Le tissu est lavé dans de l'eau distillée jusqu'à élimi- nation complète de l'ion sulfate dans le liquide de lavage. Le tissu obtenu est soumis à une homogénéisation en le pla- çant dans une solution de 1moled'acide organique, par exem- ple de l'acide acétique, de l'acide citrique ou de l'acide ascorbique de façon à ce que la concentration définitive de la protéine dans la solution atteigne 1% en poids. On mélange la masse et on la laisse dans un refrigérateur à basse température pendant i à 3 jours. La masse homogène est centrifugée puis on la laisse à basse température pendant 24 heures. La solution de collagène ainsi obtenue est filtrée. Dans le but d'extraire les impuretés de fai- ble poids moléculaire, la solution du collagène dans l'acide acétique est diluée avec de l'acide acétique jus- qu'à une concentration de la protéine de 0,7 à 0,8%o en poids puis on dialyse contre un tampon phosphate ou ci- trate à une température de 18 à 20 C à un pH de 4,5 à 7,5. On remplit un verre de laboratoire de la solu- tion de collagène, et on le place dans une chambre à vide pour éliminer l'oxygène atmosphérique qui représente un inhibiteur du processus ultérieur d'irradiation, puis on centrifuge la solution. On sature la solution obtenue de collagène en protoxyde d'azote chimiquement pur qui repré- sente un promoteur non toxique de la réticulation du col- lagène. Ensuite, on porte la concentration de cette solu- tion à 80% en poids mais pas plus, car cette concentra- tion est limite étant donné que par la suite, le biopoly- mère réticulé obtenu deviendra fragile après son gonfle- ment. Afin d'améliorer la qualité du biopolymère réticulé, c'est-à-dire d'exclure la formation de cavités et la dimi- nution de sa résistance mécanique, il est recommandé de le soumettre à un dégazage partiel par centrifugation entre 3 et 40.10 tours/mn pendant 10 à 30 minutes, ce qui garan- tit la complète élimination de l'excédent du protoxyde d'azote conformément à la concentration de la solution de collagène. La solution de collagène est irradiée d'un rayonnement ionisant à une dose de 0,5 à 15 kGy à la température ambiante jusqu'à formation du biopolymère réti- culé selon l'invention. A une dose inférieure à 0,5 kGy, le biopolymère réticulé obtenu présente une mauvaise résis- tance mécanique et une faible stabilité enzymatique alors qu'à des doses supérieures à 15 kGy, le biopolymère perd de son élasticité et devient fragile. Le biopolymère réti- culé obtenu est soumis à une dialyse dans de l'eau dis- tillée pendant 1 à 3 jours afin d'éliminer l'acide acéti- que. L'eau de lavage doit avoir un pH inférieur à 6,3. Le biopolymère réticulé épuré est ensuite placé dans de l'eau distillée, puis y est hermétisé et stérilisé. Le procédé d'obtention de l'implant à partir du biopolymère réticulé pour l'hermétisation des blessures cornéennes et sclérales conséquentes à un trauma de l'oeil est réalisé, selon l'invention, comme suit. On entreprend le traitement alcalino-salin de la sclérotique de l'oeil d'animaux agricoles, l'homogénisa- tion du tissu obtenu par une solution aqueuse d'acide organique et l'extraction des impuretés de faible poids moléculaire de la solution obtenue de collagène comme on l'a décrit ci-dessus. On dilue ou on concentre la solution obtenue de collagène selon l'invention jusqu'à une concen- tration de 0,2 à 1,3% en poids en assurant ainsi, par la suite, au biopolymère de l'implant, une résistance mécani- que optimale et une propriété de gonflement rapide, ainsi qu'une bonne élasticité. La solution de collagène est ver- sée dans un verre de laboratoire, on la soumet à un trai- tement par le vide et à une centrifugation pour éliminer, au maximum, l'oxygène atmosphérique. On fait barboter, à travers la solution obtenue, du protoxyde d'azote chimique- ment pur en mélangeant constamment jusqu'à saturation com- plète de cette solution en protoxyde d'azote. Pour le déga- zage partiel de la solution de collagène, il est avantageux de la congéler au réfrigérateur et de la décongeler lente- ment à une température ambiante comprise entre 20 et 25 C puis de la centrifuger entre 1 et 2.103 tours/mn pen- dant 10 à 60 minutes. Dans ces conditions, on a la garan- tie d'éliminer complètement l'excédent de protoxyde d'azote qui mène à la constitution de cavités dans la structure du biopolymère réticulé pour l'implant selon l'invention. Par suite, on remplit, de la solution de collagène, un moule, et on soumet à une irradiation par un rayonnement ioni- sant à raison de 0,5 à 15 kGy. La pièce brute ainsi obtenue du biopolymère réticulé à base de collagène selon l'inven- tion est soumise à une dialyse dans de l'eau distillée jus- qu'à un pH de 6, 5 à 7,0 pendant 24 à 48 heures. La pièce brute traitée est séchée jusqu'à un taux d'humidité de 30 à 50% en poids dans le biopolymère. Cela assure un degré de gonflement de 7 à 10 fois de l'implant lors de son uti- lisation pour l'hermétisation des plaies de l'oeil. On con- gèle rapidement la pièce brute séchée dans de l'azote li- quide et on la lyophilise pendant 48 heures, ensuite, on donne,à la pièce brute, la forme et les dimensions de l'im- plant qui assureront l'hermétisation complète des blessures cornéennes et sclérales. Il est avantageux que l'implant ait la forme d'un cylindre avec bout effilé, de 3 à 5 mm de longueur et d'un diamètre à sa base de 0, 5 à 4,0 mm. Cette forme assure la meilleure commodité pour l'introduction de l'implant selon l'invention dans la plaie de l'oeil, la longueur étant choisie pour assurer la commodité de la manipulation par le chirurgien, et le diamètre assurant le degré requis de contact des bords de la plaie avec la surface du cylindre après sa fixation dans cette plaie. Nous reportons ci-dessous les exemples donnés à titre indicatif mais nullement limitatif de réalisation de la présente invention. Exemple 1. Recouvrir 20 g de stroma oculaire découpé et épuré de 1 litre de soude caustique à 10% en solution saturée de sulfate de sodium et laisser à une température de 1B à 20 C pendant 48 heures. Déverser la solution, laver le tissu avec une petite quantité d'eau distillée et le recouvrir de 1 litre de la solution à 2% d'acide borique puis mélan- ger pendant 2 heures en changeant deux fois la solution d'acide borique. En agitant de façon continue, laver minu- tieusement le tissu avec de l'eau distillée à raison de 5 litres jusqu'à élimination totale de l'ion sulfate du li- quide de lavage. Soumettre le tissu inondé obtenu en une quantité de 250 ml à une homogénéisation en y ajoutant 350 ml d'acide acétique 0,5 M. Mélanger la masse et la laisser pendant 24 heures à 4 C. Centrifuger la masse homo- généisée à 2.10 tours/mn pendant 30 minutes et laisser pendant 3 jours à 4 C puis filtrer la solution de colla- gène obtenue au moyen d'un filtre en verre. Dans cette solution, la concentration de la protéine est égale à 1% en poids. Dans le but d'éliminer les impuretés de faible poids moléculaire, diluer la solution de collagène dans l'acide acétique au moyen d'une solution d'acide acétique 0,5M jusqu'à une concentration de la protéine de 0,8% en poids puis dialyser contre un tampon citrate 0,2M à une température de 18 à 200C jusqu'à un pH de 4,5. Trai- ter la solution de collagène par vide à température ambian- te jusqu'à l'apparition de bulles de gaz et centrifuger à 2.103 tours/mn pendant 30 minutes. Remplir de la solution obtenue un verre de laboratoire et saturer la solution en protoxyde d'azote chimiquement pur en faisant barboter ce gaz à raison de 5 ml/s à travers 20 ml de la solution pendant 20 minutes. Après la saturation, réaliser un déga- zage partiel de la solution de collagène par centrifugation à 3.103 tours/mn. Effectuer la saturation et la centrifu- gation à deux reprises. Lyophiliser la solution de colla- gène jusqu'à une concentration de 1% en poids et l'irra- dier par un rayonnement ionisant à une dose de 1 kGy. Reti- rer du verre le biopolymère réticulé à base de collagène ainsi obtenu et le soumettre à une dialyse en eau distillée pendant 24 heures, jusqu'à ce que le pH de l'eau deversée atteigne 6,4. Placer le biopolymère réticulé dans un fla- con avec de l'eau distillée et l'étanchéiser. Placer le flacon dans l'azote liquide à une température de -196 C et l'irradier par un rayonnement gamma à une dose de 30 kGy. Descendre le flacon dans un récipient avec de l'eau à 80 C pendant 6 à 7 secondes afin de décongeler le biopolymère réticulé. Le biopolymère réticulé traité de cette façon est caractérisé par sa stérilité, sa bonne résistance méca- nique et sa stabilité enzymatique. Exemple 2. Soumettre la solution de collagène saturée en protoxyde d'azote, obtenue comme à l'exemple 1, à une concentration. A cette fin, y ajouter 6 9 d'une pellicule de collagène pour 20 ml de la solution de collagène à 0, 8%o en poids et homogénéiser en mélangeant sous atmosphère d'azote jusqu'à l'obtention d'une solution à 30% de col- lagène. Centrifuger cette solution à 2.103 tours/mn pen- dant 20 minutes, et la transférer dans un verre de labora- toire, puis l'irradier par un rayonnement ionisant à rai- son de 10 kGy. Placer le biopolymère réticulé à base de collagène ainsi obtenu dans un verre avec une solution aqueuse de formol à 10% pendant 2 heures, ce qui permet d'augmenter l'hydrophobie du biopolymère. Soumettre ce biopolymère à une dialyse en eau distillée pendant 48 heu- res jusqu'à ce que le pH de l'eau déversée atteigne 6,7. Par la suite, réaliser cette stérilisation comme décrit à l'exemple 1, à l'exclusion du fait que l'irradiation gamma s'effectue à la dose de 15 kGy. Le biopolymère réti- culé à base de collagène ainsi obtenu est stérile, possède une bonne résistance mécanique et une stabilité enzyma- tique. Exemple 3. Soumettre la solution de collagène saturée en protoxyde d'azote obtenue à l'exemple 1, à une concentra- tion. A cette fin, réaliser le séchage de la solution de collagène dans un moule descendu dans Sefadex G-10 qui se trouve dans l'atmosphère du protoxyde d'azote. Réaliser le contrôle du séchage d'après le changement de poids de la solution de collagène dans l'une des moitiés du moule afin de pouvoir, après la réduction du poids de la solution de 100 fois, ajouter, dans le moule, une nouvelle portion de cette solution. Cette opération sera répetée jusqu'à ce que tout le moule soit rempli d'une solution à 80%' de collagène. Transférer le moule avec la solution dans une cuvette de la centrifugeuse et centrifuger à 40.103 tours/mn. Fermer le moule par sa seconde moitié et irradier par un rayonnement gamma à une dose de 15 kGy. Soumettre le bio- pomymère réticulé à base de collagène ainsi obtenu à une dialyse en eau distillée pendant 3 jours jusqu'à ce que, dans l'eau déversée, le pH atteigne 6,8. Réaliser la stéri- lisation du biopolymère comme décrit à l'exemple 1 à l'ex- clusion de ce que l'irradiation par rayonnement gamma s'effectue à une dose de 30 kGy. le biopolymère réticulé ainsi traité est stérile et caractérisé par une bonne ré- sistance mécanique et une bonne stabilité enzymatique. Exemple 4. Recouvrir 20 g de stroma découpé et épuré de sclérotique d'oeil d'animaux agricoles, dans un litre de soude caustique à 10% dans une solution saturée de sul- fate de sodium et laisser à une température de 18 à 20C pendant 48 heures. Déverser la solution et recouvrir le tissu de 1 litre de la solution à 2% d'acide borique et mélanger pendant 2 heures en changeant deux fois la solu- tion d'acide borique. En agitant de façon continue, laver minutieusement, avec de l'eau distillée à raison de 5 litres, le tissu jusqu'à élimination complète del'ion sulfate du liquide de lavage. Homogénéiser 250 ml de tissu inondé ainsi obtenu en y ajoutant de l'acide acétique 0,5 M, en mélangeant et en laissant la masse pendant 24 heures à 4 C. Centrifuger la masse homogénéisée à 2.103 tours/mn et la laisser à 4 C pendant 3 jours. La solution obtenue de col- lagène, filtrée à travers un filtre de verre, contient 1% en poids de collagène. Diluer cette solution avec de l'aci- de acétique 0,5 M jusqu'à une concentration de 0,8% en poids et dialyser contre un tampon phosphate 0,5 M entre 18 et 20 C en portant le pH à 7,0. Diluer de 4 fois la solution à 0,8% en poids de collagène avec de l'acide acé- tique 0,25 M en portant la concentration à 0,2% en poids et traiter par le vide à température ambiante jusqu'à l'apparition de bulles de gaz, puis centrifuger à 1.103 tours/mn pendant 60 minutes. Saturer la solution de col- lagène obtenue en protoxyde d'azote chimiquement pur jusqu'à sa complète saturation, centrifuger pour éliminer le gaz non dilué à 1.103 tours/mn pendant 60 minutes. Con- geler la solution en la plaçant au réfrigérateur pendant 24 heures, puis la décongeler à la température ambiante et centrifuger à 1.103 tours/mn. Transférer la solution obtenue à l'aide d'une pompe péristaltique dans un capil- laire de 0,5 mm de diamètre et l'irradier par un rayonne- ment ionisant à une dose de 15 kGy à température ambiante. Soumettre le biopolymère réticulé à base de collagène ainsi obtenu en forme de cylindre à une dialyse de 24 heu- res à température ambiante jusqu'à pH 6,4 dans l'eau dé- * versée. Suspendre la pièce cylindrique dans une chambre sans poussière et sécher à température ambiante jusqu'à un taux d'humidité de 30% en poids dans le biopolymère de cette pièce brute. Congeler rapidement la pièce brute dans l'azote liquide et la placer dans une chambre de séchage lyophile. Réaliser le séchage pendant 7 heures. A l'aide d'une lame, découper, de la pièce brute ainsi traitée, des cylindres ayant un bout effilé de 3 mm de lon- gueur. Empaqueter l'implant obtenu pour l'hermétisation des plaies de la cornée et de la sclérotique dans des fla- cons étanches et stériliser par rayonnement gamma à une dose de 25 kGy. Le biopolymère réticulé de cet implant est stérile, possède une bonne résistance mécanique et une bonne stabilité enzymatique et est optiquement trans- parent. Exemple 5. Préparer la solution de 0,8% en poids du collagène comme décrit à l'exemple4. Centrifuger la solution de col- lagène à 12.103 tours/mn pendant 30 minutes et la saturer en protoxyde d'azote, puis centrifuger à 2.103 tours/mn. Pour le dégazage partiel, congeler au réfrigérateur la solution de collagène pendant 24 heures et la décongeler à température ambiante, centrifuger à 2.10 tours/mn pen- dant 30 minutes. Couler la solution obtenue dans un moule cylindrique de 4 mm de diamètre, l'irradier par un rayon- nement ionisant à une dose 5 kGy. Placer la pièce brute du biopolymère réticulé à base de collagène dans de l'eau distillée pendant 48 heures et changer l'eau jusqu'à ce que dans l'eau déversée, le pH atteigne 6,8. Suspendre, par l'un de ses bouts, la pièce brute dans une chambre sans poussière et la sécher à température ambiante jusqu'à un taux d'humidité dans son biopolymère égal à 50% en poids. Congeler la pièce brute dans de l'azote liquide puis la placer dans une chambre de séchage lyophile pendant 7 heu- res. Découper, de la pièce brute, des cylindres ayant un bout effilé, la longueur du cylindre étant de 4 mm. Empa- queter l'implant obtenu pour l'hermétisation des plaies de la cornée et de la sclérotique dans des flacons étanches et stériliser par rayonnement gamma à une dose de 25 kGy. Le biopolymère réticulé de l'implant est sté- rile et est caractérisé par une bonne résistance mécanique et une bonne stabilité enzymatique. Exemple 6. Préparer une solution à 0,8%' en poids de collagène comme décrit à l'exemple 4. Réaliser la concentration de la solution sur un appareil AMICON avec un filtre XM50 en contrôlant la concentration d'après la diminution du ni- veau de la solution dans la cuvette de l'appareil. Trai- ter la solution obtenue de 1,3% en poids de collagène par le vide jusqu'à formation de bulles de gaz, centrifuger à 2.103 tours/mn pendant 30 minutes. Congeler lentement la solution de collagène au réfrigérateur pendant 24 heures et décongeler à la température ambiante, puis centrifuger à 2.103 tours/mn pendant 30 minutes. Couler la solution ainsi traitée dans un moule cylindrique de 2 mm de diamè- tre et irradier par un rayonnement ionisant à une dose de 0,5 kGy. Soumettre le biopolymère réticulé obtenu en forme de pièce brute cylindrique à une dialyse en eau distillée pendant 48 heures jusqu'à ce que, dans l'eau de lavage, le pH atteigne 6,8. Suspendre la pièce brute, par l'un des bouts, dans une chambre de séchage sans pous- sière et concentrer à température ambiante jusqu'à un taux d'humidité dans le biopolymère de 50% en poids. Con- geler la pièce brute dans de l'azote liquide et la placer dans une chambre de séchage lyophile pendant 8 heures. Découper la pièce brute en forme de cylindresde 5 mm de longueur avec un bout effilé. Empaqueter l'implant ainsi obtenu pour l'hermétisation des plaies de la cornée et de la sclérotique dans des flacons étanches et stériliser par un rayonnement gamma à une dose de 30 kGy. Le biopoly- mère réticulé pour l'implant est stérile et possède une bonne résistance mécanique et une bonne stabilité enzyma- tique. R E V E N D I C A T I 0 N S 1. Procédé d'obtention d'un biopolymère réticulé à base de collagène pour les besoins de l'ophtalmologie par traitement alcalino-salin de la sclérotique d'yeux d'animaux, homogénisation du tissu obtenu par une solution aqueuse d'acide organique jusqu'à formation d'une solution de collagène avec par suite extraction, de cette solution de collagène, des impuretés de faible poids moléculaire, caractérisé en ce que la solution de collagène, délivrée de ses impuretés, est saturée de protoxyde d'azote et est portée à une concentration ne dépassant pas B0% en poids, ensuite la solution obtenue de collagène est irradiée par un rayonnement ionisant à une dose de 0,5 à 15 kGy jusqu'à formation d'un biopolymère réticulé. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'avant l'irradiation, la solution de collagène est soumise à un dégazage partiel par centrifugation entre 3 et 40.103 tours/mn pendant 10 à 30 minutes. 3. Implant pour l'hermétisation des plaies de la cornée et de la sclérotique conséquentes à des traumas de l'oeil,caractérisé en ce qu'il est préparé à partir du biopolymère réticulé à base de collagène obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications précéden- tes. 4. Procédé d'obtention de l'implant selon la revendication 3, du type comprenant le traitement alcalino- salin de la sclérotique d'yeux d'animaux, l'homogénéisation du tissu obtenu par une solution aqueuse d'acide organique jusqu'à formation de la solution de collagène avec par sui- te extraction des impuretés de faible poids moléculaire, caractérisé en ce que la concentration de la solution de collagène épurée de ses impuretés est portée entre 0,2 et 1,3%o en poids, elle est saturée en protoxyde d'azote et ensuite on en remplit un moule et on l'irradie par unrayon- nement ionisant à une dose de 0,5 à 15 kGy, puis la pièce brute constituée pour l'implant en un biopolymère réticulé à base de collagène est soumise à une dialyse par l'eau pendant 24 à 48 heures, elle est séchée jusqu'à un taux d'humidité de 30 à 50% en poids dans son biopolymère réticulé, puis on attribue à la pièce brute la forme et les dimensions de l'implant,assurant une hermétisation complète des plaies de la cornée et de la sclérotique conséquentes à des trau- mas de l'oeil. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'avant de couler la solution dans le moule, elle est soumise à un dégazage partiel par congélation avec en- suite décongélation à une température de 20 à 250C et une centrifugation entre 1 et 2.103 tours/mn pendant 10 à 30 minutes. 6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce qu'on attribue, à l'implant, la forme d'un cylindre de 3 à 5 mm de longueur et de 0,5 à 4,0 mm de diamètre, ayant un bout effilé.