Brevet FR2640511A1 — publié le 19900622

Médicament pour le traitement ou la prévention par immunisation passive de l'infection par le virus HIV et procédés de préparation. La présente invention a trait à un médicament pour le traitement ou la prévention, par immunisation passive, de l'infection par le virus HIV. On a déjà envisagé l'utilisation de gammaglobulines spécifiques anti-HIV d'origine humaine obtenues à partir de donneurs séro-positifs pour la séroprophylaxie et le traite- ment de l'infection par le virus HIV (virus de l'immunodéficience humaine) . Voir Immunoglobulin preparation for HIV-infected patients - P.L. YAP et P.E. WILLIAMS - Vox Sanguinis 55: 65-74 (1988). Cependant, ces gammaglobulines contiennent un grand nombre d'anticorps anti-HIV différents, parmi lesquels on peut citer des anticorps dirigés contre les protéines de la paroi du virus (dans le cas de HIV1: glycoprotéine gp120 et gp41 ou leur précurseur gp160), les anticorps dirigés contre les protéines du noyau viral (protéines p24, pl8 et p15) ou anticorps dirigés contre les enzymes virales, notamment la transcriptase inverse (RT). De plus, les donneurs séro- positifs pourraient également posséder des anticorps dirigés contre la protéine marqueur des lymphocytes T4 (protéine CD4) par suite d'une autoimmunisation déclenchée par l'interaction de la protéine gp120 du virus avec la protéine CD4 qui constitue son récepteur naturel au niveau des lym- phocytes T4. Or, les anticorps dirigés contre les protéines de l'enveloppe du virus sont soupçonnés d'être "facilitants" au lieu de protéger contre l'infection virale, du fait qu'ils formeraient un complexe immun avec le virus et provo- queraient sa phagocytose par les macrophages, conduisant ainsi à une infection des macrophages qui constitueraient un réservoir pour le virus HIV. Par ailleurs, les anticorps dirigés contre la protéine CD4 seraient également soup onn3s d'avoir un effek néfaste -ors de l'infection HIV en provoquant la cyrolyse des lym- phocytes T4 et en participant ainsi à l'établissement du syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA), manifestation clinique de l'infection par le virus HIV. De plus, il a été observé que l'apparition des signes cliniques du SIDA chez une personne séropositive, auparavant asymptomatique, est accompagnée d'un effondrement des anticorps anti p24 et anti RT alors que le titre d'anticorps neutralisants in vitro n'est pas modifié. Voir: Prospects for the control of AIDS by immunizing seropositive indivi- dual: J. SALK, Nature 327: 473-76, 11 juin 1987). D'autres détails sur les processus de l'infection par le virus HIV apparaissent dans: Replication of the human immunodeficiency virus - Strategies for inhibition. B.M. PETERLIN and P.A. LUCIW, Biotechnology 6: 794-799, juillet 1988. La présente invention se propose de fournir un médicament pour le traitement ou la prévention de l'infection par le virus HIV en utilisant des immunoglobulines humaines hyperimmunes anti-HIV. L'invention a pour objet un médicament constitué par ou comprenant une préparation de gammaglobulines IgG et/ou IgM d'origine humaine hyperimmunes anti-HIV dépourvue d'anticorps dirigés contre les glycoprotéines d'enveloppe du virus HIV et/ou d'anticorps anti CD4. Le médicament selon l'invention est avantageusement conditionné pour être administré par voie parentérale, notamment injection intramusculaire ou intraveineuse de la même façon que les préparations usuelles d'immunoglobulines. L'invention a également pour objet des procédés de préparation de ce médicament. Selon un tel procédé, on collecte du plasma, du sang ou des placentas de donneurs ou mères séropositifs pour le virus HIV. A partir de ce matériau, on obtient, par des procédés d'isolation ou de fractionnement connus, la préparation d'immunoglobulines totales IgG et/ou IgM, et on traite cette préparation pour en éliminer les anticorps anti-enveloppe HIV et/ou anti CD4. En cas de présence de particules virales HIV dans le matériau, le procédé comporte également une étape d'élimination ou d'inactivation du virus. Les donneurs ou les mères séropositifs peuvent être soit des personnes infectées par le virus HIV soit des per- sonnes vaccinées avec du virus HIV total inactivé ou pro- venant d'une souche non-infectieuse. -A titre d'exemple, on choisit du plasma, sang ou pla- centa de donneurs ou mères séropositifs pour HIV1, mais on peut également mettre en oeuvre le procédé pour HIV2 ou utiliser un mélange de matériaux relatifs à HIV1 et HIV2. L'étape d'obtention des IgG et/ou IgM totales peut utiliser différents procédés bien connus, par exemple, par fractionnement alcoolique de COHN pour le plasma ou de TAY- LOR pour le placenta, ou encore par chromatographie. Les détails de ces fractionnements sont largement disponibles dans la littérature spécialisée. L'étape de traitement spécifique d'inactivation virale anti-HIV, dans le cas o le matériau provient d'un donneur séropositif infecté par le virus sauvage, peut être, par exemple, un traitement à la béta-propiolactone ou par la chaleur ou par un solvant organique en présence éventuelle- ment d'un détergent. De telles étapes d'inactivation sont maintenant usuelles ou décrites, par exemple dans les procédés de préparation d'immunoglobulines d'origine plasma- tique ou placentaire. L'étape d'élimination des anticorps anti-enveloppe de HIV ou anti CD4 peut être avantageusement effectuée par immunoadsorption en bain ou en colonne par mise en contact de la préparation d'immunoglobulines avec un support insolu- ble sur lequel on a fixé auparavant par toute méthode connue les protéines d'enveloppe gp41 et gp120 et/ou leur précurseur gp160 (pour ce qui concerne HIV 1) et/ou la protéine CD4. Les protéines peuvent, par exemple, etre fixées sur u n support d' agarose activé au bromure de cyanogène. Ces protéines peuvent être obtenues soit à par- tir de sources naturelles (HIV et lymphocytes) soit par recombinaison génétique. Selon un autre procédé, on utilise du plasma, du sang ou des placentas de donneurs ou mères séropositifs HIV à la suite d'une vaccination avec des protéines isolées du virus HI',' ou obtenues par recombinaison génétique, à l'exclusion des protéines d'enveloppe du virus. Dans ce procédé, les étapes d'élimination des anticorps anti-enveloppe et/ou anti CD4 sont alors omises. La préparation obtenue par l'un des deux procédés précités est conditionnée pour être administrable par voie intramusculaire ou intraveineuse, par des étapes classiques de stabilisation, purification supplémentaire éventuelle, filtration stérile, et éventuellement lyophilisation. Le médicament selon l'invention peut recevoir les applications suivantes: - prévention de l'infection HIV chez les personnes à risque par séroprophylaxie, - traitement adjuvant ou complémentaire d'une vaccination anti-HIV, - traitement de l'infection HIV et prévention de sa man- ifestation clinique, le SIDA, - traitement du SIDA. REVENDICATIONS. 1. Médicament constitué par ou comprenant une préparation de gammaglobulines IgG et/ou IgM d'origine humaine hyperimmunes anti-HIV dépourvue d'anticorps dirigés contre les glycoprotéines d'enveloppe du virus HIV et/ou d'anticorps anti CD4. 2. Procédé de préparation d'un médicament selon la revendication 1, caractérisé en ce que, à partir de plasma, sang ou placenta de donneurs ou mères séropositifs pour le virus HIV, on isole ou fractionne une préparation d'immunoglobulines totales IgG et/ou IgM, et on traite cette préparation pour en éliminer les anticorps anti- enveloppe HIV et/ou anti-CD4. 3. Procédé selon la revendication 2, caractéri. e en ce que l'on met également en oeuvre une étape d'élimination ou d'inactivation du virus HIV. 4. Procédé selon l'une des revendications 2 et 3, caractérisé en ce que l'on prépare les immunoglobulines totales par un procédé choisi parmi le fractionnement alcoolique de COHN pour le plasma, le fractionnement de TAY- LOR pour le placenta, et la chromatographie. 6. Procédé selon l'une des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que l'on procède à l'élimination des anticorps anti-enveloppe de HIV et/ou anti CD4 par immunoad- sorption en bain ou colonne. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que l'on effectue l'immunoadsorption sur un support insolu- ble sur lequel on a fixé les protéines d'enveloppe gp 41 et gp 120 et/ou gp 160 et/ou la protéine CD4. 8. Procédé pour la préparation d'un médicament selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare les gam- maglobulines totales IgG et/ou IgM à partir de plasma, sang ou placenta de donneurs ou mères séropositifs HIV à la suite d'une vaccination avec des protéines isolées du virus HIV ou obtenues par recombinaison génétique, à l'exclusion des protéines d'enveloppes du virus. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 8, caractérisé en ce qu'il est conditionné pour être administrable par voie intramusculaire et/ou intraveineuse.