Brevet FR2637806A1 — publié le 19900420

La présente invention concerne une méthode et un procédé d'obtention de sérum de veau par extraction du sang d'un foetus de veau. Jusqu'ici, le sérum de foetus de veau a été obtenu par plusieurs méthodes ; une méthode consiste à couper le cordon ombilical d'un foetus de veau et à permettre au sang de s'écouler depuis le cordon coupé vers un récipient dans lequel on laisse le sang coaguler pendant approximativement une heure, après quoi l'on extrait le sérum surnageant. Si on laissait le sang au repos pendant une période supérieure à une heure, la qualité du sérum dégénérerait par suite des endotoxines formées par les bactéries dans le sang. Le degré de séparation qui peut être obtenu en une heure est faible et, en conséquence, le sérum ne se divise pas en ses fractions constitutives autant qu'on le souhaiterait. Une autre méthode d'obtention de sérum de foetus de veau consiste à insérer une canule dans une veine ou dans le ceour du foetus de veau et d'extraire le sang dans une chambre sous pression réduite en utilisant une pompe à vide. Le sang est ensuite conditionné dans des sacs en matière plastique scellés et laissé à coaguler pendant une période de douze heures ; du fait que le sang est enfermé dans un sac scellé en matière plastique, il peut résister à la dégradation pendant une période pouvant atteindre douze heures. Cependant, même avec cette période prolongée, on n'obtient pas le degré voulu de séparation. Il est naturellement possible de passer le sang recueilli par l'une ou l'autre méthodes décrites ci-dessus dans une centrifugeuse pour améliorer la séparation du sang, mais, même de cette façon, la séparation n'est pas aussi bonne qu'elle pourrait l'être. Il serait plus souhaitable de laisser le sang coaguler sous l'effet de la gravité pendant une période plus longue, mais jusqu'ici cela n'a pas été possible sans qu'il en résulte une détérioration de la qualité du sang en raison des endotoxines formées. L'inventeur a maintenant conçu un appareil et un procédé d'obtention et de traitement du sang qui permettent de laisser coaguler le sang pendant une période excédant un jour sans détérioration. Selon un premier aspect, la présente invention apporte un procédé de traitement du sang extrait du foetus de veau, lequel procédé consiste à extraire le sang d'un foetus de veau à l'aide d'une pompe, à faire passer le sang au travers d'une chambre réfrigérée pour le refroidir à une température comprise entre 00C et IOOC, à irradier le sang dans la chambre à l'aide de lumière ultra-violette, à faire passer le sang ainsi traité au travers d'un conduit contenant des surfaces revêtues de vicia villosa, à enfermer hermétiquement le sang ayant passé au travers du conduit dans un récipient, par exemple un récipient en polyuréthane, et à stocker le sang pendant au moins un jour à une température comprise entre 00C et 100C. Les étapes séparées du procédé sont mises en oeuvre en continu, c'est-à-dire sans interruption entre les étapes individuelles. Selon un second aspect, la présente invention apporte un appareil d'extraction et de traitement du sang d'un foetus de veau qui permet de laisser coaguler le sang sans dégradation appréciable pendant une durée excédant un jour, lequel appareil comprend une canule destinée à être insérée dans le foetus de veau, une pompe pour extraire le sang du foetus via la canule, une chambre réfrigérée capable de réfrigérer le sang ainsi extrait à une température comprise entre 00C et 100C, des moyens d'irradiation du sang dans ladite chambre à l'aide de lumière ultra-violette, un conduit recevant le sang sortant de la chambre, lequel conduit comporte des surfaces revêtues de vicia villosa, et des moyens pour faire passer le sang depuis le conduit dans des récipients. De préférence, la canule, la chambre de réfrigération et le conduit sont tous montés en série et le sang est successivement aspiré au travers de l'appareil vers les récipients par la pompe. Vicia villosa est une lectine connue et qui peut être obtenue à partir d'une vesce ; elle est commercialement disponible auprès de Sera-Lab Limited de Crawley Down, Sussex, RH10 4FF et elle a été décrite dans un article publié dans The Journal of Biological Chemistry, Volume 258, 8, page 5165. On sait que vicia villosa est formée de plusieurs composants individuels et la présente invention étend également sa portée à l'utilisation des composants individuels ou des fragment de vicia villosa au lieu de vicia villosa totale.On sait que vicia villosa fixe sélectivement un sous-jeu de cellules humaines T8+ qui agissent comme contra-suppresseuses et qu'elle peut être utilisée dans le traitement d'êtres humains pour éliminer les cellules contra-suppresseuses de patients souffrant, par exemple, de maladies auto-immunes, et donc permettent également l'action non inhibée des cellules suppresseuses du sang dans la suppression de la formation des anticorps dans le sang (voir wo 86/#22?4). La présente invention sera décrite avec davantage de détails par référence à la figure unique du dessin annexé qui montre, sous forme schématique, un appareil selon l'invention. Si l'on se réfère à cette figure, on voit une canule 10 destinée à être insérée dans une veine du foetus de veau, une chambre 12 qui est réunie à la canule pour recevoir le sang du foetus ; la chambre a approximativement 9 mètres de long et elle est réfrigérée à une température de + 40C (à l'extrémité de sortie de la chambre 12) par un manchon réfrigérant 14 entourant la chambre ; les parois de la chambre 12 et du manchon 14 sont translucides à la lumière ultra-violette de sorte que le sang, lorsqu'il passe le long de la chambre, est irradié depuis la source 16. Le rayonnement ultra-viol-et tue les bactéries et empêche ainsi la formation d'endotoxines dans le sang.L'extrémité de sortie de la chambre 12 est réunie à un conduit 18 dont les parois sont revêtues de vicia villosa 19 (ou des composants séparés de vicia villosal. Le conduit a approximativement 4,9 mètres de long et pendant son passage au travers du conduit 18r les cellules contra-suppresseuses du sang sont éliminées. Une pompe 20 est prévue qui aspire le sang du foetus de veau, au travers de la chambre 12 et du conduit 18. Le sang quittant la pompe 20 est introduit dans des récipients en polyuréthane 22. Une fois que les récipients 22 ont été scellés, ils peuvent etre stockés à une température de, par exemple, + 40C pendant une période pouvant atteindre 5 jours, période au cours de laquelle le sang sédimente jusqu'au degré voulu et l'on obtient du sérum de haute qualité à partir du liquide surnageant. On doit noter que c'est seulement lorsque le sang est traité à l'aide de lumière ultra-violette et qu'il est mis en contact avec vicia villosa que l'on obtient les avantages de l'invention et que si l'on omet l'une ou l'autre étape, les avantages en question ne sont pas obtenus. REVENDTC#TI0NS 1 - Procédé de traitement du sang extrait d'un foetus de veau, caractérisé en ce qu'il consiste à extraire le sang d'un foetus de veau à l'aide d'une pompe (20), à faire passer le sang au travers d'une chambre réfrigérée (12) pour le refroidir à une température comprise entre 00C et 10 C, à irradier le sang, de préférence dans la chambre, à l'aide de lumière ultra-violette, à faire passer le sang au travers d'un conduit (18) contenant des surfaces revêtues de vicia villosa (19), à enfermer hermétiquement le sang ainsi traité dans un récipient (22), par exemple un récipient en polyuréthane, et à stocker le sang pendant au moins un jour à une température comprise entre c.0C et 100C. 2 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les étapes séparées du procédé sont mises en oeuvre en continu, c'est-à-dire sans interruption entre les étapes individuelles. 3 - Appareil d'extraction et de traitement du sang d'un foetus de veau qui permet de laisser coaguler le sang sans dégradation pendant une durée excédant un jour, caractérisé en ce qu'il comprend une canule (10.) destinée à être insérée dans le foetus de veau, une pompe (20) pour extraire le sang du foetus via la canule (10}, une chambre réfrigérée (12) capable de réfrigérer le sang ainsi extrait à une température comprise entre 00C et 100C, des moyens d'irradiation (16) du sang à l'aide de lumière ultra-violette, un conduit (18) recevant le sang sortant de la chambre (12), lequel conduit (18) comporte des surfaces revêtues de vicia villosa (19), et des moyens (2~) pour faire passer le sang depuis le conduit dans des récipients (22). 4 - Appareil selon la revendication 3 r caractérisé en ce que la canule, la chambre de réfrigération et le conduit sont tous montés en série et le sang est successivement aspiré au travers de l'appareil vers les récipients par la pompe.