Brevet FR2639228A1 — publié le 19900525

Nouvelle utilisation d'EUPHORBIA HIRTA L. en thérapeutique. La présente invention a trait à une nouvelle utilisation en thérapeutique de La plante EUPHORBIA HIRTA L. (synonyme EUPHORBIA PILULIFERA). Cette plante est une euphorbiacée appartenant à la sous section des Hypericifoliae selon les études chimiotaxonomiques. EUPHORBIA HIRTA occupe déjà une place privilégiée dans diverses pharmacopées, notamment d'Asie orientale et d'Afrique tropicale. Elle est utilisée sous diverses formes, pour traiter de nombreuses affections, en particulier, gastrointestinales, hépatiques, cardiaques, respiratoires, génitales. Diverses parties de la plante peuvent être utilisées (plante entière, parties aériennes, racines, sommités fleuries, feuilles, latex), de diverses façons (en usage externe ou interne, plante fraîche ou cuite, macérat, décocté...). Les indications thérapeutiques traditionnelles, attribuées à la plante entière, administrée sous forme de décoction en usage interne, sont - diarrhées, coliques - amoebiase, helminthiase - lithiase rénale ictère - asthme, bronchite, toux - troubles du sommeil - fièvre troubles de la Lactation, dysménorrhée. On a notamment décrit dans la demande de brevet FR 2 607 006 l'utilisation d'EUPHORBIA HIRTA comme cicatrisant et/ou désinfectant intestinal. Cette plante est également indiquée en homéopathie dans le traitement de ta dysenterie et des affections respiratoires, telles que l'asthme. Elle est, dans ce cas particulier, utilise sous forme de préparation hydroalcoolique (teinture mère). La Demanderesse préconise présentement une nouvelle utilisation d'EUPHORBIA HIRTA, pour l'obtention de nouveaux analgésiques. Elle a, en effet, mis en évidence les propriétés analgésiques d'EUPHORBIA HIRTA. Plus précisément, la présente invention concerne l'utilisation d'EUPHORBIA HIRTA L. pour la préparation de compositions pharmaceutiques, destinées au traitement symptomatique des affections douloureuses. Aux fins de l'invention -obtention de nouveaux analgésiques- on peut utiliser toutes les parties de la plante. Le (ou les) principe(s) actif(s) selon L'invention n'a (ont) pas, à ce jour, été identifié(s). Toutefois, le (ou les) dit(s) principe(s) actif(s), selon l'invention, parait (paraissent) présent(s), à plus ou moins forte concentration, dans toutes les parties de la plante. Avantageusement, on utilise, pour la préparation des compositions pharmaceutiques selon l'invention, la plante entière. Celle-ci, ou une partie de celle-ci, est de préférence préalablement séchée et réduite en poudre. On peut utiliser, selon l'invention, ladite plante ou des parties de celle-ci, sous différentes formes, notamment sous forme de poudre fine ou sous forme d'extraits. Lesdits extraits peuvent être obtenus avec différents solvants d'extraction et/ou dans diverses conditions d'extraction. Il s'agit avantageusement d'extraits aqueux, hydroalcooliques ou alcooliques. On peut aussi utiliser, selon l'invention, des extraits glycéroalcooliques ou glycérohydroalcooliques... Lesdits extraits hydroalcooliques ou alcooliques peuvent notamment être préparés conformément à la méthode décrite à la Pharmacopée Française : la plante, séchée ou pas, est mise en suspension dans le soLvant ; le mélange est écrasé, le jus récupéré. De préférence, on utilise selon l'invention des extraits aqueux, préparés à partir de la plante entière, séchée puis réduite en poudre ; lesdits extraits aqueux étant obtenus par infusionmacération. La plante entière, séchée, réduite en poudre -avantageusement les particules présentent alors un diamètre inférieur à 1,5 mm- est jetée dans de l'eau bouillante puis macère. La macération se déroule avantageusement aux environs de 40du, pendant 7 à 24 heures. L'utilisation d'autres solvants et la mise en oeuvre de l'extraction dans d'autres conditions ne doivent pas être encartées, dans la mesure où le (ou les) principe(s) actif(s), selon L'invention, n'est (ne sont) pas encore identifié(s). La plante EUPHORBIA HIRTA ou des parties de celle-ci, sous forme de poudre ou d'extraits, peuvent être utilisées selon l'invention, tel que ou après avoir subi un traitement type lyophilisation, nébulisation... On utilise avantageusement des lyophitisats ou nébulisats d'extraits aqueux. A titre illustratif, la Demanderesse décrit ci-apres le mode de préparation d'un extrait aqueux d'EUPHORBIA HIRTA, plante dont elle a mis en évidence les propriétés analgésiques. La plante utilisée provenait des Nouvelles Hébrides. La plante entière, séchée, est préalablement réduite en poudre fine (particules d'un diamètre inférieur à 1,5 mm). Elle est ensuite. jetée dans de l'eau distillée bouillante, à raison de 60 g de plante sèche pour 600 ml d'eau. Après agitation, la préparation est placée à l'étuve, à 440C, pendant 24 heures. Le macérat aqueux ainsi obtenu est filtré sur Büchner. Il est ensuite lyophilisé. On obtient alors une poudre ocre que l'on conserve dans des flacons munis d'un bouchon dessicateur, à l'abri de la lumière. Le rendement de l'extraction est généralement proche de 14 % (10 - 17 X). La Demanderesse a, sur lesdits extraits, mené une étude pharmacoLogique, résumée ci-après. L'activité analgésique d'EUPHORBIA HIRTA chez la souris a été évaluée au moyen de deux tests : test du writhing, test de la plaque chauffante. L'effet de La naloxone, antagoniste morphinique, a été également étudié. a) Test du writhing La technique est inspirée de la méthode de Siegmund (1957) décrite dans la revue J. Pharmacol. Expil. Ther. vol. 119, page 453. Les lots étaient composés de 10 souris mâles Swiss âgées de 7 à 9 semaines, à l'exception des témoins (lots de 20). Les produits sont administrés par voie i.p. 30 min avant l'injection i.p. d'acide acétique à 1,2 X. EUPHORBIA HIRTA est administrée aux doses de 12,5 - 20 - 25 -50 - 100 - 200 et 400 mg/kg ; quatre produits de référence sont testés : le clorazépate dipotassique (Tranxéne# Clin-Midy) à la dose de 40 mg/kg, l'acétylsalicylate de lysine (Aspégic# , Synthelabo) à la dose de 68 mg/kg, le paracétamol (Pro-Dafalgane , Upsa) à la dose de 68 mg/kg et le sulfate de morphine, à raison de 1,15 mg/kg ; les animaux témoins reçoivent le solvant (NaCI 0,9 %) dans les mêmes conditions. Le paramètre pris en compte est le nombre total de contorsions et/ou d'étirement des pattes postérieures. La DE50 est évaluée par la méthode de Lichtfield et Wilcoxon (1949) décrite dans la revue J. Pharmacol. vol. 13, pages 99 à 113. Les résultats obtenus sont reportés dans le Tableau I ci-après TABLEAU I (Nombre de contorsions) LOTS Témoin EH EH EH EH EH EH EH en mg/kg NaCI 12,5 20 25 50 100 200 400 Moyenne 50,4 41,1 23,3 18 19,7 11,3 6,6 5,8 Ecart-type 5,2 5,7 4,6- 1,5 1.6 2,2 I 1,8 %/Témoins -18% -54X -64% -61X -78X -87X -88Z ** p La DE50 est estimée à 25 mg/kg(24,4 - 25,4). L'influence des produits de référence vis-å-vis d'une douleur induite par l'acide acétique par rapport aux mêmes témoins est la suivante : - 24 % pour le clorazépate di potassique, - 58 % pour l'acétylsalîcylate de lysine, - 60 X pour le paracétamol et - 68 x pour le sulfate de morphine. b) Test de la plaque chauffante La méthode est inspirée de Janssen et Jagueneau, - décrite par Boissier et coll. (1956) dans la revue Anesthésie et analgésie, vol. 13, pages 569 à 574. Deux mesures préalables à 10 min d'intervalle sont effectuées pour déterminer le temps de réaction individuel ; EUPHORBIA HIRTA est injectée aux doses de 12,5 - 25 - 50 - 100 - 200 et 400 mg/kg, 30 min avant le test ; quatre produits de référence sont testés : le clorazépate di potassique (Tranxenet Clin-Midy) aux doses de 20 et 40 mg/kg, l'acétylsalicylate de lysine (Aspegic# , Synthelabo) à la dose de 68 mg/kg, le paracétamol (Pro-Dafalgan# , Upsa) à la dose de 68 mg/kg et le sulfate de morphine aux doses de 1,15 - 2,30 - 4,60 et 9,20 mg/kg ; les animaux sont pris comme leur propre témoin. Deux paramètres sont étudiés te pourcentage de variation du seuil douloureux, calculé selon le rapport : T avant traitement - T après traitement x 100 T avant traitement (T correspond au temps moyen de réaction) Le pourcentage d'animaux présentant une analgésie positive ; t'analgésie est considérée comme positive, si le T après traitement est au moins le double de T avant traitement. La DE50 est évaluée de la même façon que précédemment par la méthode de Lichtfield et Wilcoxon (1949). Les résultats obtenus sont reportés dans le Tableau II ci-après TABLEAU II (Pourcentage de variation et d'analgésie positive) LOTS E.HIRTA E.HIRTA E.HIRTA E.HIRTA E.HIRTA E.HIRTA en mg/kg 12,5 25 50 100 200 400 A P A P A P A P A P A P Moyenne 4,4 5,4 5,5 8,3 4,9 7,1 5,1 9 5 9,8 4,6 10,4 en secondes ** * *** *** *** Ecart-type 0,3 0,4 0,4 0,9 0,4 0,7 0,3 0,7 0,3 0,7 0,2 0,9 % Variation 23 51 45 77 96 126 X analg. + 10 30 20 40 55 70 A = avant traitement P = après traitement * P La DE50 est estimée à 141 mg/kg (138,6 - 143,5). Sur ce modèle, l'influence des produits de référence vis å-vis du pourcentage de variation du temps de réaction est la suivante : le clorazépate dipotassique augmente significativement le temps de réaction aux 2 doses testées (43 X pour 20 mg/kg et 35 % pour 40 mg/kg) ainsi que le sulfate de morphine aux doses de 2,30 (40 %) - 4,60 (46 X) et 9,20 (84 X). L'acétylsalicylate de lysine et le paracétamol à 68 mg/kg n'exercent aucune protection (respectivement - 11 X et - 4 %). c) Effet de La naloxone sur le test de la plaque chauffante La naloxone N (Narcan# , Ciba-Geigy, Bâle) est injectée par voie sous-cutanée à raison de 1 mg/kg, 15 min avant l'injection d'EUPHORBIA HIRTA (200 mg/kg) et le sulfate de morphine (10 mg/kg). Le lot témoin naloxone reçoit le solvant (NaCl à 0,9 %). Les résultats obtenus sont reportés dans le Tableau III ci-apres : TABLEAU III (Pourcentage de variation et d'analgésie positive après naloxone) LOTS Témoin Morphine E. HIRTA naloxone 10 mg/kg 200 mglkg A P A P A P Moyenne 5,3 4,7 4,9 5,5 5,3 5,2 Ecart-type 0,3 0,5 0,2 0,3 0,2 0,3 % variation -11% +12% -2% % analgésie t 0% 0% OX La naloxone antagonise l'effet de EUPHORBIA HIRTA et de la morphine à la dose. de 1 mg/kg sur le test de la plaque chauffante. Des études toxicologiques ont également été menées. a) Détermination de la DL50 chez la souris après administration aigüe par voie intra-peritonéale : les extrait aqueux d'EUPHORBIA HIRTA ont été administrés par voie i.p., à des lots de souris mâles Swiss, âgées de 7 à 9 semaines. La toxicité a été relevée pendant les 72 h suivant l'administration. Les résultats obtenus sont reportés dans le tableau IV ci-après. TABLEAU IV Doses Mortalité (g/kg) (X) 7 20 8 40 10 60 11 60 11,5 80 12 90 12,5 80 13 90 14 100 15 80 17 100 La DL5Q est estimée à 8,82 g/kg (8,79 - 8,85). par voie orale : administrée aux doses de 3, 6 et 9 mg/kg à des souris Swiss de 7 à 9 semaines, EUPHORBIA HIRTA n'entraine aucune mortalité. L'évolution pondérale n'est pas modifiée. IL en est de même de l'activité spontanée des animaux. b) Administration chez l'homme Comme indiqué ci-dessus, EUPHORBIA HIRTA a déjà été administrée, sous différentes formes. Ainsi, un décocté lyophilisé d'EUPHORBIA HIRTA, administré par voie orale à la dose journalière de 10 g durant 3 jours a été bien toléré au cours d'un essai thérapeutique chez des malades atteints d'amibiase intestinale (Dalil M. : Essai thérapeutique d'un décocté lyophilisé d'EUPHORBIA HIRTA L. (MBAL) dans le traitement ambulatoire de L'amibiase intestinale - Thèse d'état de Docteur en Pharmacie,1984, Université DAKAR, Faculté de Médecine et de Pharmacie, 70 p). Pour l'utilisation d'EUPHORBIA HIRTA selon l'invention, on conditionne la poudre de plante ou l'extrait de celle-ci, éventuellement sous forme de lyophilisat ou de nébulisat, de façon classique. On peut notamment préparer diverses formulations galéniques, administrables par différentes voies en faisant intervenir des excipients, couramment utilisés dans l'industrie pharmaceutique. Pour l'administration par voie orale : on peut préparer des comprimés, des gélules, des solutés... pour l'administration par voie externe : des pommades, collyres... pour l'administration par voie rectale : des suppositoires... par voie gynécologique des ovules... On peut également préparer des ampoules injectables par voie intraveineuse. La préparation de ces diverses formes galéniques est à la portée de l'homme de métier. La posologie peut varier dans de larges proportions, en particulier suivant le type et la gravité de l'affection à traiter et suivant le mode d'administration. On peut, à titre indicatif, la chiffrer à 1,75 g par jour. A titre d'exemple, on peut indiquer la préparation galénique suivante : COMPRIMES à 300 mg comprenant . Lyophilisat de l'extrait aqueux d'EUPHORBIA HIRTA préparé selon le modeopératoire décrit ci-dessus 175 mg . Stéarate de magnésium 2 mg . Ac-Di-Sol 6 mg Lactose fast flo 117 mg La posologie est évaluée à titre indicatif, de 8 à 12 comprimés par jour. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'EUPHORBIA HIRTA L. pour la préparation de compositions pharmaceutiques destinées au traitement symptomatique des affections douloureuses. 2. Utilisation selon la revendication 1 d'EUPHORBIA HIRTA, plante entière. 3. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, d'extraits d'EUPHORBIA HIRTA. 4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisé en ce que lesdits extraits sont des extraits aqueux, alcooliques ou hydroalcooliques. 5. Utilisation seLon l'une quelconque des revendications 1 à 4, d'un extrait aqueux d'EUPHORBIA HIRTA obtenu par infusionmacération d'une poudre préparée à partir de la plante entière séchée. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, de lyophilisats ou de nébulisats préparés à partir d'EUPHORBIA HIRTA. 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1:à 6, pour la préparation de comprimés, dosés à 175 mg de lyophiilisat d'un extrait aqueux d'EUPHORBIA HIRTA.