Brevet FR2648047A2 — publié le 19901214

FR 2648047 A2 19901214 FR 8907654 A 19890609 La présente invention concerne une application du produit polyphénolique objet de la demande de brevet principal n" 89 06282. Cette demande revendique un produit polyphénolique caractérisé par le fait qu'il peut être obtenu par extraction à partir d'organes végétaux au moyen de solvant polaire volatil et par concentration de l'extrait. Il a également pour objet des compositions pharmaceutiques comportant ledit produit et l'utilisation dudit produit pour fabriquer des compositions pharmaceutiques anti-virales. Au cours de l'étude ultérieure au dépôt de cette demande de brevet, il a été montré que le produit polyphénolique décrit dans la demande de brevet principal présentait des propriétés anti-virales à la fois exceptionnelles et à large spectre. Ainsi, le présent certificat d'addition a pour objet de nouvelles utilisations dudit produit. Selon la revendication 9 de la demande de brevet principal, "l'utilisation du produit selon l'une des revendications I à 6 de la demande de brevet principal pour fabriquer des compositions pharmaceutiques anti-virales" donne de bons résultats, notamment pour les cas d'herpès. Selon la présente invention, I'utilisation des produits selon l'une des revendications I à 6 pour fabriquer des compositions pharmaceutiques anti-virales donne des résultats particulièrement intéressants lorsqu'il s'agit de combattre des virus choisis dans le groupe constitué par le virus du syndrome immunodéficitaire acquis humain, de l'herpès de la varicelle-zona, de l'Influenza A et Echo 25. Il convient en outre d'indiquer que le produit selon les revendications I à 6 de la demande de brevet principal, présente une excellente activité virucide vis-à-vis du virus du syndrome immunodéficitaire acquis humain (HIV1). Les exemples qui suivent illustrent cette activité anti-virale plus spécifique du produit selon la demande de brevet principal. Exemple I Essai des proceanidols solubles dans l'eau de Cupressus sempervirens sur le virus du syndrome immunodéficitaire acquis humain (HIVI). a) Effet antiviral L'essai est réalisé sur des cellules H9 infectées par des dilutions décimales successives de HIVI pendant 90 minutes. Après infection des cellules, celles-ci sont traitées par des concentrations décroissantes de procyanidols à des doses inférieures à la cytotoxicité constatée sur cette lignée cellulaire (150 pg/ml). Après 10 jours de culture, les cellules sont centrifugées et les virus sont recherchés par un examen radio-immunologique (recherche de la protéine p 24) sur le surnageant. Résultats Les procyanidols solubles du cyprès obtenus selon l'exemple I de la demande de brevet principal n" 89 06282, procurent une inhibition de l'expression virale de 97 % à la concentration de 50 pg/ml. b) Effet virucide La suspension virale (HIV1) est traitée pendant 30 minutes à 37"C par des concentrations décroissantes de procyanidols solubles du cyprès. Puis les cellules H9 sont infectées par des dilutions décimales successives de la suspension précédente. Résultats Les procyanidols solubles du cyprès procurent une réduction du titre viral de 1,5 log (titre initial : 3.104) à la concentration de 50 pg/ml, et une réduction de 2,5 log à la concentration de 150 pg/ml. Exemple 2 Essai des procyanidols solubles dans l'eau de Cupressus sempervirens sur le virus de l'herpès Simplex de type 11 Les essais antiviraux ont été réalisés sur le virus de l'herpès simplex type 11 implanté sur des fibroblastes de poumon embryonnaire humain. On a déterminé sur un lot de suspension virale correspondant à une dose infectante 50 (Dl 50 ) 2,5.104 virus par puit, l'efficacité antivirale des procyanidols solubles de Cupressus sempervirens, ctest-à-dire la quantité de produit par puit (c'est-à-dire dans 100 pI de milieu) qui provoque une diminution de moitié de la Du 50. La valeur trouvée est de 3,3 pg/100 ml. Exemple 3 Essai des procyanidols solubles dans l'eau de Cupressus sempervirens sur le virus Varicelle-Zona Les essais antiviraux ont été réalisés sur le virus de la varicelle et du zona implanté sur des fibroblastes. de poumon embryonnaire humain. On a déterminé un lot de suspension virale correspondant à une dose infectante 50 (DIS0) 5.103 virus par puit, I'efficacité anti-virale des procyanidols solubles de Cupressus sempervirens, c'est-à-dire la quantité de produit par puit (c'est-à-dire 100 pI de milieu) qui provoque une diminution de moitié de la D150. La valeur trouvée est de 6 pg/100 ml. Exemple 4 Essai des procyanidols solubles dans l'eau de Cupressus sempervirens sur le virus Influenza A Les essais antiviraux ont été réalisés sur le virus Influenza A implanté sur des cellules d'adénocarinome de colon humain. On a déterminé sur un lot de suspension virale correspondant à une dose infectante 50 (DIS0) 7.103 virus par puit, I'efficacité antivirale des procyanidols solubles de Cupressus sempervirens, c'est-à-dire la quantité de produit par puit (c'est-à-dire dans 100 PI de milieu) qui provoque une diminution de moitié de la DISE. La valeur trouvée est de 12 pu/100 ml. Exemple 5 Essai des procyanidols solubles dans l'eau de Cupressus sempervirens sur le virus ECHO 25 Les essais antiviraux ont été réalisés sur le virus ECHO 25 implanté sur des fibroblastes de poumon embryonnaire humain On a déterminé sur un lot de suspension virale correspondant à une dose infectante 50 (D150) 104 virus par puit, I'efficacité antivirale des procyanidols solubles de Cupressus sempervirens, c'est-à-dire la quantité de produit par puit (c'est-à-dire dans 100 pI de milieu) qui provoque une diminution de moitié de la DISO. La valeur trouvée est de 31 pu/ 100 ml. REVENDICATIONS 1. Utilisation selon la revendication 9 de la demande de brevet principal nO 89 06282, caractérisée par le fait que lesdites compositions pharmaceutiques antivirales sont des compositions pharmaceutiques contre un virus choisi dans le groupe constitué par les virus du SIDA, de l'herpès, de la varicelle, de l'lnfluenza A et ECHO 25. 2. Utilisation selon la revendication I, caractérisée par le fait que ladite composition pharmaceutique antivirale est une composition virucide.