Brevet FR2634886A1 — publié le 19900202

Procédé et appareil pour réaliser et évaluer automatiquement des réactions d'agglutination, en particulier pour détecter les faibles agglutinations La présente invention concerne un procéda et un appareil pour réaliser et évaluer automatiquement des réac- tions d'agglutination, en particulier pour détecter les faibles agglutinations, du genre dans lequel on essaie après des traitements connus un mélange réactif constitué par une suspension, par exemple d'hématies, et du sérum, et on détermine le taux d'agglutination par détermination photomé- trique de la sédimentation. Avant toute transfusion sanguine, on pratique des tests de dépistage des anticorps, et surtout un test à l'antiglobuline humaine, pour détecter les incompatibilités additionnelles possibles avec les groupes de base ABC et Rh, de façon à augmenter la sécurité des transfusions sanguines. Il existe des méthodes immuno-analytiques analogues aux réactions des groupes sanguins au cours desquelles on utilise des anticorps- réactifs liés à des hématies et à des particules plastiques. Les procédés connus consistent généralement en des opérations analogues. Le procédé le plus complexe et le plus R0 -fréqueuent utilisé est le test de Coombs qui utilise une antiglobuline humaine. Bn conséquence, les équipements utilisés pour de tels tests sont également aptes à réaliser les autres réactions d'agglutination. Coma On le sait, les tests à l'antiglobuline humaine comprennent les opérations suivantes: - Préparation de mélanges d'hématies et de sérum, Incubation, - Lavage des cellules au moins trois fois, avec les étapes suivantes: - Amenée du liquide de lavage, - Agitation par secousses, Séparation, - Enlèvement du liquide de lavage (décantation), - Amenée du sérum d'antiglobuline humaine, - Agitation par secousses, - Séparation, Légère agitation par secousses et évaluation des résultats (taux d'agglutination). Lorsqu'il y a de nombreux échantillons, la répéti- tien de la séquence d'opérations précitée par des moyens classiques met à l'épreuve l'attention et la patience de la personne qui réalise les mesures, et le traitement prolongé et direct des échantillons de sang augmente le risque d'infection. Des appareils qui réalisent automatiquement le triple lavage des cellules sont disponibles sur le marché depuis de nombreuses années. Ils sont fabriqués par les sociétés Hitachi, DuPont-Sorvall, Mertz & Dade et Heraeus, mais ils ne permettent pas la réalisation automatique des autres opérations. En outre, les propriétés désavantageuses de ces procédés connus sont les suivantes: a) Lors de la décantation, le liquide de lavage retiré des hématies est en contact avec la paroi intérieure du séparateur sur une surface importante, ce qui augmente le risque d'infection. b) Au cours de l'opération de lavage, il n'y a aucun moyen permettant de détecter la diminution et l'épuisement des hématies qui sont dûs à l'hémolyse et qui perturbent le fonctionnement du séparateur. c) L'évaluation de l'agglutination est subjective, et la standardisation du test est donc impossible. Il existe des solutions qui ne sont pas associées au test de Coombs, mais qui permettent de réaliser chacune de ses opérations. Ainsi, le brevet hongrois n' 192.531 décrit un séparateur à fonctions multiples qui comporte des tubes séparateurs particuliers comprenant des chambres gravita- tionnelles et des chambres de séparation entre lesquelles le liquide s'écoule librement dans les deux directions. Cette solution connue convient donc au mélange et à la séparation du liquide dans le tube de séparation. Ce dispositif connu comporte en outre des tubes d'aepiration au moyen desquels la décantation peut être réalisée. Toutefois, la décantation peut seulement être réalisée avec des échantillons agglutinés, parce que les hématies séparées et non agglutinées ne peuvent pas rester dans la chambre du séparateur, et qu'elles sont donc aspirées vers l'extérieur. Il existe donc une perte de cellules d'un niveau inadmissible. Selon le brevet précité, le tube de séparation est fixé dans le séparateur de telle manière que l'axe de la chambre de séparation et sa paroi ne sont pas perpendiculaires à l'axe de rotation au cours de la rotation. Cette solution ne permet donc pas de réaliser la masure au moyen de la détermination photométrique de la Sêdimentation, parce que les fronts de dépôt sont étalés sur la paroi inclinée du tube de séparation. Des dispositifs connus, comme l'appareil Gamma STS A de Groupmatic, permettent d'évaluer automatiquement l'agglu- tination, mais ce sont des unités de mesure séparées et compiquées qui sont indépendantes du séparateur. Ils ne présentent pas une sensibilité suffisante pour détecter les faibles agglutinations. Le but de la présente invention est de proposer une solution qui assure la réalisation de la séquence d'opérations précitée & l'intérieur du tube de séparation de telle manière qu'il soit possible de détecter les faibles agglutinations. --- " Un autre but est d'éviter la contamination de la paroi intérieure du séparateur, et, en outre, il doit être possible de contrôler la perte occasionnelle de cellules, comei la décroissance des hématies, au cours de la décantation. Les expériences qui ont eu lieu dans le cadre de la présente invention ont montré que la solution la plus favorable pour évaluer l'agglutination est la détermination photoemtrique de la sédimentation sous centrifugation. Les appareils connus ont besoin d'un échantillon dont le volume est important, et leur utilisation en sérologie conduit à consommer le matériau d'essai en de grandes quantités qui correspondent à dix fois la quantité habituelle. Les expé- riences des inventeurs ont montré au contraire que la quantité habituelle peut être suffisante pour évaluer la réaction d'agglutination au moyen de la détermination photo- métrique de la sédimentation qui est utilisable en outre pour détecter des agglutinations faibles. Dans le cadre de l'invention, il a été montré que, malgré les conditions connues de la détermination photomé- trique de la sédimentation, les courbes de sédimentation obtenues présentent une particularité qui permet de distin- guer les échantillons qui sont légèrement agglutinés de ceux qui ne le sont certainement pas. En analysant un grand nombre d'échantillons, on a vérifié que la courbe de sédi- mentation présente un point d'inflexion explicite lorsque l'échantillon ne contient pas d'agglomérés, et qu'il ne contient donc que des hématies individuelles. Au cours de ces expériences, on a déterminé les courbes de sédimentation sur la base de la relation entre le facteur de transmission en % et le temps. L'existence de l'agglutination peut être établie & partir de la différence, calculée en % du facteur de transmission, entre la courbe de sédimentation mesurée et la droite de référence qui relie l'origine de la courbe de sédimentation et son point d'inflexion. Si la plus grande différence est de 3% au moins pour le facteur de transmission, on conclut & un manque d'agglutination. L'obJet de l'invention est un procédé pour réaliser et évaluer automatiquement des réactions d'agglutination, en particulier pour détecter de faibles agglutinations, dans lequel on prépare un mélange réactif consituté par une suspension et du sérum. On sépare le mélange incubé, on l'agite en le secouant, et on détermine le taux d'agglutina- tion au moyen de la détermination photométrique de la sédimentation. L'essence de l'invention est que l'on réalise la séparation, l'agitation du mélange et la détermination de l'agglutination dans les tubes de réparation d'un séparateur centrifuge de telle' manière que ces tubes soient traversés par la lumière selon une direction prédéterminée, de préfé- rence parallèlement & l'axe du séparateur, et que l'on mesure en continu le facteur de transmission du mélange réactif. Si la densité optique change, on détermine, s'il existe, le point d'inflexion de la courbe des valeurs mesurées. Dans le cas de l'inflexion, mi la différence entre la courbe mesurée et la droite de référence est suffisamment importante, on conclut au manque d'agglutination. Selon l'invention, la *droite de référence relie l'origine des mesures et le point d'inflexion, en % du facteur de trans- mission, et on conclut au manque d'agglutination si l'écart maximal avec la droite de référence est au moins égal à 3% en facteur de transmission. Au cours de la mise en oeuvre du procédé, on conclut à une faible agglutination si la plus grande différence AT_ vérifie la relation: O Il est préférable de déterminer le taux d'agglutination à partir de la pente initiale de la courbe des facteurs de transmission mesurés en l'absence de point d'inflexion. Si la densité optique du mélange réactif n'a pas changé et demeure constante, on conclut à une agglutination très élevée ou à une erreur selon que le facteur de trans- mission est supérieur ou inférieur à 95%, respectivement. Dans le procédé décrit ci-avant, l'évaluation auto- matique des réactions d'agglutination peut être réalisée dans les tubes de séparation. Pour réaliser les opérations connues-avant l'évaluation selon l'invention, et afin d'évi- ter les pertes par décantation, il est prévu, selon un mode de réalisation avantageux, que les tubes de séparation soient réalisée sous la forme de récipients communicants fermés à une extrémité dont les branches fermées sont- remplies de liquide de lavage de telle manière que le ménisque du liquide de lavage touche la paroi supérieure de la portion sensiblement horizontale qui relie les deux branches du récipient communicant. La décantation est réalisée de telle manière que ce ménisque du liquide de lavage balaye sans interruption la branche fermée du récipient communicant au cours de l'aspiration. En outre, l'obJet de l'invention est un procédé pour réaliser et évaluer automatiquement les réactions d'aggluti- nation, en particulier pour détecter les faibles agglutina- tions, dans lequel on prépare un mélange réactif constitué par une suspension et du sérum. On lave le mélange incubé avant sa séparation, l'alimentation, la séparation et la décantation ayant lieu au moyen d'un tube d'aspiration, ou on le décante après avoir introduit le réactif. Le réactif est amené au mélange, et, après séparation et agitation, on détermine le taux d'agglutination par détermination photo- électrique de la sédimentation. L'essence de l'invention est que les tubes de séparation sont réalisés sous la forme de récipients communicants fermés à une extrémité dont les branches fermées sont remplies de liquide de lavage de telle manière que le ménisque du liquide de lavage touche la paroi supérieure de la portion sensiblement horizontale qui relie les deux branches du récipient communicant. La décantation est réalisée de telle manière que ce ménisque du liquide de lavage balaye sans interruption la branche fermée du réci- pient communicant au cours de l'aspiration. On réalise la séparation, l'agitation du mélange et la détermination de l'agglutination dans les tubes de séparation d'un séparateur centrifuge de telle manière que ces tubes soient traversés par la lumière selon une direction prédéterminée, de préfé- rence parallèlement à l'axe du séparateur, et on mesure en continu le facteur de transmission du mélange réactif. Si la densité optique change, on détermine, s'il existe, le point d'inflexion de la courbe des valeurs mesurées. Dans le cas de l'inflexion, mi la différence entre la courbe mesurée et la droite de référence. est suffisamment importante, on conclut au manque d'agglutination. Selon l'invention, la droite de référence relie l'origine des mesures et le point d'inflexion, en % du facteur de transmission, et on conclut au manque d'agglutination si l'écart maximal avec la droite de référence est au moins égal à 3% en facteur de trans- mission. L'invention concerne en outre un appareil pour réaliser et évaluer automatiquement des réactions d'aggluti- nation, en particulier pour détecter les faibles agglutina- tions, comprenant un rotor de centrifugeuse qui est muni de tubes de séparation et dont le moteur est muni d'une unité de commande. Il comprend une source de lumière d'un côté des tubes de séparation et un photométre de l'autre côté. L'uni-t de commande est une unité de traitement des données munie d'un affichage et reliée au photométre. Dans cet appareil, les tubes de séparation sont des récipients comeunicants fermés à l'une de leurs extrémités dont les deux branches sont reliées entre elles par une portion de tube sensiblement horizonale. Les tubes de séparation sont placés dans des entailles radiales fermées sur les extrémités périphériques du rotor de la centrifugeuse de telle manière que les portions horizontales des tubes de séparation soient sensiblement perpendiculaires à l'axe du rotor de la centrifugeuse lorsque ce dernier est à l'arrêt. Les tubes de séparation sont mobiles dans les entailles radiales, des organes de support disposés au-dessus des entailles limitant les déplacements des tubes de séparation. Dans une forme de réalisation préférée, les tubes de séparation sont des tubes incurvés, de préférence en verre, à parois transparentes, dont les deux branches sont inclinées l'une par rapport à l'autre de 90 à 150', et de preférence de 125 à 135'. L'appareil est muni de préférence d'une amenée de liquide de lavage et/ou d'une amenée de réactif qui sont reliées à l'unité de commande. Dans une autre forme de réalisation préférée, des tubes d'aspiration sont disposés au-dessous d'une partie au moins des tubes de séparation, et l'appareil est muni d'un mécanisme qui fait plonger les tubes d'aspiration dans les tubes de séparation. La description qui va suivre, et qui ne présente aucun caractère limitatif, permettra de bien comprendre com- ment la présente invention peut être mise en pratique. Elle doit être lue en regard des dessins annexés, parmi lesquels: - Les figures 1 à 3 montrent des courbes de sédimen- tation pour des échantillons agglutinés à divers degrés; - La figure 4 montre une forme de réalisation possible pour l'appareil selon l'invention; - La figure 5 montre une disposition préférée du tube de séparation dans le rotor; et: - La figure 6 une forme de réalisation préférée du tube de séparation rempli de liquide de lavage. Dans la forme de réalisation de l'appareil selon l'invention qui est représentée sur la figure 4, les tubes de séparation 2 sont placés dans le rotor 1 d'une centrifu- geuse dont le moteur 3 est muni d'une unité de commande 4. Le long des tubes de séparation 2 sont disposés, d'un côté une source lumineuse 5, et de l'autre côté un photomètre 6. L'unité de commande 4 est une unité de traitement des données qui est munie d'un affichage et qui est reliée à l'unité de commande 4. Les tubes de séparation 2 sont des récipients communicants fermés à une extrémité, leurs branches A et B étant reliées entre elles par une portion de tube C sensiblement horizontale, comme on le voit sur la figure 6. Selon la figure 4, l'appareil est de préférence équipé d'une amenée de liquide de lavage 8 et/ou d'une amenée de réactif 9 reliées à l'unité de commande 4. Ces g amenées sont des dispositifs connus dont la construction précise ne fait pas partie de l'invention et qui comprennent par exemple des pompes, comme des pompes péristaltiques à canaux multiples. La figure 4 montre que des tubes d'aspiration 10 sont disposés au-dessus d'une partie des tubes de séparation ou de tous. L'appareil est équipé d'un mécanisme 11 qui permet de plonger les tubes d'aspiration 10 dans les tubes de séparation 2 et qui est relié à l'unité de commande 4. Selon la figure 5, les tubes de séparation 2 sont placés dans des entailles radiales 12 du rotor 1 de la centrifugeuse, fermées à leurs extrémités périphériques, de telle manière que, lorsque le rotor 1 est à l'arrêt, les portions horizontales C des tubes de séparation 2 soient perpendiculaires à l'axe du même rotor 1. Les tubes de sépa- ration 2 sont mobiles dans les entailles 12, et des organes de retenue 13 mont disposés au-dessus de ces dernières pour limiter leur déplacement lors de la rotation du rotor i de la centrifugeuse pendant laquelle ils prennent la position représentée en traits interrompus sur la figure 5. De préférence, les tubes de séparation 2 sont des tubes incurvés, de préférence en verre, dont les deux branches A et B sont inclinées l'une par rapport à l'autre de 90 A 150', et de préférence de 125 à 135'. Le mode de fonctionnement de cet appareil est le suivant. De préférence, le mélange réactif composé de suspension et de sérum est introduit dans les tubes de séparation 2 à l'extérieur de l'appreil, et il est incubé si nécesseire. Après cela, on place les tubes de séparation 2 contenant le mélange réactif dans les entailles 12 du rotor 1 de la centrifugeuse à partir de l'axe de ce rotor. Si cela est nécessaire, on lave le mélange réactif contenu dans les tubes de séparation 2, ou on le laisse décanter après l'ape- née de réactif, comme par exemple pour le test Polybrene. Ces opérations peuvent être exécutées à la main, ou on peut utiliser les dispositifs d'amenée 8 et 9, respectivement pour le liquide de lavage et le réactif, et les tubes d'aspiration 10 munis du mécanisme de descente 11, dont le fonctionnement est commandé par l'unité de commande 4. Dans le cas o le lavage a lieu dans l'appareil selon l'invention, on remplit sans bulles les branches fermées A des tubes de séparation 2, de telle manière que le ménisque 14 du liquide de lavage touche la paroi supérieure de la portion sensiblement horizontale C du tube qui relie les branches A, B du récipient communiquant. Si le remplis- sage n'était pas réalisé selon ce critère, une perte de particules déposées aurait lieu pendant la décantation. Pendant le mouvement du ménisque 14 vers la branche fermée A, des bulles viendraient donc près de cette branche A en perturbant le sédiment avant la décantation. Si l'on remplit le tube, le ménisque 14 se déplace vers la branche B et, en conséquence, une fraction des particules se dépose sur la paroi de cette branche B lors de la séparation réalisée pendant le lavage, ce qui se traduit aussi par des pertes. Il est également très important de réaliser la décantation après la séparation de telle manière que le ménisque 14 du liquide de lavage passe de manière ininter- rompue le long de la paroi de la branche fermée A. L'appareil selon l'invention réalise donc la décantation avec un taux volumique élevé, mais si l'aspiration était trop lente, des bulles se formeraient et viendraient dans la branche fermée A. Xême le contact de la fraction séparée avec l'interface air-liquide perturbe de manière inadmissi- ble les particules séparées et déposées qui sont par exemple des hématies. La décantation doit être réalisée avec un taux volumique qui évite la formation de bulles, et qui évite donc l'interruption du ménisque 14. L'appareil réalise ensuite, si nécessaire, l'agita- tion par secousses du mélange réactif traité ou non au moyen d'un réactif additionnel, et il détermine le taux d'aggluti- nation par sédimentation photométrique. Exemple 1: Pour réaliser la réaction d'agglutination, on prend une goutte de suspension d'hématies à 3% et deux gouttes de Sérum. Après les opérations décrites ci-avant, l'appareil selon l'invention mesure les valeurs représentées sur la figure 1 par traitement des signaux du photomètre 6. La figure 1 montre le facteur de transmission de l'échantillon en %, T, en fonction du temps t en secondes. On voit sur la figure que la courbe présente un point d'inflexion explicite au voisinage de t = 25 s. On appelle droite de référence 1l droite qui relie le point de la courbe à l'origine des mesures au point d'inflexion et qui est représentée en tirets sur la figure, et on constate que la plus grande différence entre cette droite de référence et la sédimenta- tion mesurée est au moins de 20% de T. Cette valeur est supérieure A la valeur selon l'invention, laquelle est égale & 3% de T, dans une proportion suffisante pour que l'on puisse cOnclure au manque d'agglutination. Exemple 2: Dans le cas d'un autre mélange réactif préparé selon l'exemple 1, on obtient la courbe de sédimentation représen- tée sur la figure 2. Sur cette courbe, le point d'inflexion est voisin de t = 20 s. La plus grande différence entre la droite de référence et la courbe de sédimentation n'est pas supérieure à 2% de T, ce qui suggère une faible agglutina- tion. Exemple: Avec un troisième mélange réactif préparé dans les mêmes conditions initiales que précédemment, les valeurs mesurées sont représentées sur la figure 3. La courbe de sédientation ne présente pas de point d'inflexion, ce qui suggère une forte agglutination. Les exemples ci-avant correspondent à des conditions rencontrées avec un appareil comprenant des tubes de sépara- tion 2 de 8 mm de diamètre intérieur placés dans un sépara- téur I de 140 mm de diamètre. Le volume final des échantillons utilisés pour les mesures était de 400 pil, et la distance entre le trajet lumineux du photométre 6 et la surface du mélange réactif était de 3 mm, cependant que la vitesse de rotation du séparateur 1 était de 240 tr/mn. Les résultats de mesure précédents ont été confirmés par des études au microscope. Grâce A la solution fournie par l'invention, on peut détecter automatiquement une agglutination légère dans le tube de séparation 2 luimême au moyen du photométre 6 dont la construction est simple. Cette solution permet de réali- ser le lavage au cours du traitement du mélange réactif et, parce que ceci est réalisé dans le même tube de séparation 2, on peut vérifier au cours des opérations, par le photo- mètre 6, la perte des particules de dépôt, par exemple des hématies. L'appareil selon l'invention fournit une protection adéquate de l'opérateur contre les infections en évitant la contamination de l'intérieur du séparateur. La solution selon l'invention se prête à la standardisation des réactions d'agglutination. - REVENDICATIONS - 1. Procédé pour réaliser et évaluer automatiquement des réactions d'agglutination, en particulier pour détecter les faibles agglutinations, du genre dans lequel on prépare un -mélange réactif constitué par une suspension et du sérum, on -5 sépare le mélange incubé, on le secoue et on détermine le taux d'agglutination par détermination photométrique de la sédimentation, caractérisé par le fait que l'on réalise la séparation, l'agitation du mélange et la détermination de l'agglutination dans les tubes de séparation d'un séparateur centrifuge de telle manière que ces tubes soient traversés par la lumière selon une direction prédéterminée, de préfé- rence parallèlement à l'axe du séparateur, que l'on mesure en continu le facteur de transmission du mélange réactif, que l'on détermine, s'il existe, le point d'inflexion de la i:$5 ourbe des facteurs de transmission, que l'on appelle - "droite de référence" la droite reliant ce point d'inflexion au point de la courbe des facteurs de transmission à l'origine des mesures, et que l'on conclut au manque d'agglutination si l'écart maximal entre la droite de référence et la courbe des facteurs de transmission est au moins égal à 3% en facteur de transmission. 2. Procédé selon la revendication 1, dans lequel on prépare un mélange réactif constitué par une suspension et du sérum, on lave le mélange incubé, l'alimentation, la séparation et la décantation ayant -lieu au moyen d'un tube d'aspiration, ou on le décante après avoir introduit le réactif, on amène le réactif dans le mélange, et, après la séparation et l'agitation, on détermine le taux d'agglutina- tion par détermination photométrique de la sédimentation, caractérisé par le fait que les tubes de séparation sont réalisé sous la forme de récipients communicants fermés à une extrémité dont les branches fermées sont remplies de liquide de lavage de telle manière que le ménisque du liquide de lavage touche la paroi supérieure de la portion sensiblement horizontale qui relie les deux branches du récipient communicant, que la décantation est réalisée de telle manière que ce ménisque du liquide de lavage balaye sans interruption la branche fermée du récipient communicant au cours de l'aspiration, que l'on réalise la séparation, l'agitation du mélange et la détermination de l'agglutina- tion dans les tubes de séparation d'un séparateur centrifuge de telle manière que ces tubes soient traversés par la lumière selon une direction prédéterminée, de préférence o10 parallèlement à l'axe du séparateur, que l'on mesure en continu le facteur de transmission du mélange réactif, que l'on détermine, s'il existe, le point d'inflexion de la courbe des facteurs de transmission, que l'on appelle "droite de référence" la droite reliant ce point d'inflexion au point de la courbe des facteurs de transmission à l'origine des mesures, et que l'on conclut au manque d'agglutination si l'écart maximal entre la droite de référence et la courbe des facteurs de transmission est au moins égal A 3% en facteur de transmission. 3. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait que l'on conclut à une faible agglutination si ledit écart maximal T.. en pourcentage du facteur de transmission T, vérifie la relation: 0 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait que le taux d'agglutination est déterminé à partir de la pente initiale de la courbe des facteurs de transmission mesurés en l'absence de point d'inflexion. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait que lorsque la densité optique du mélange réactif ne change plus et demeure constante, on conclut à une agglutination très élevée ou à une erreur selon que le facteur de transmission est supérieur ou inférieur à 95%, respectivement. 6. Appareil pour la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, du genre comprenant un rotor de centrifugeuse qui est muni de tubes de séparation et dont le moteur est muni d'une unité de commande, ainsi qu'une source de lumière d'un côté des tubes de séparation et un photométre de l'autre côté, l'unité de commande étant une unité de traitement des données munie d'un affichage et reliée au photométre, caractérisé par le fait que les tubes de séparation (2) sont des récipients communicants fermés à l'une de leurs extrémités dont les deux branches (A, B) sont reliées entre elles par une por- tion de tube sensiblement horizonale (C), que les tubes de séparation (2) sont placés dans des entailles radiales (12) feraes sur les extrémités périphériques du rotor (1) de la centrifugeuse de telle manière que les portions horizontales (C) des tubes de séparation (2) soient sensiblement perpen- diculaires à l'axe du rotor (1) de la centrifugeuse lorsque ce dernier (1) est à l'arrêt, et que les tubes de séparation (2) sont mobiles dans les entailles radiales (12), des organes de support (12) limitant les déplacements des tubes de séparation (2). 7. Appareil selon la revendication 6, caractérisé par le fait que les tubes de séparation (2) sont des tubes incurvés, de préférence en verre, à parois transparentes, dont les deux branches (A, B) sont inclinées l'une par rapport à l'autre de 90 à 150', et de préférence de 125 à '. 8. Appareil selon l'une quelconque des revendications 6 et 7, caractérisé par le fait qu'il est muni d'une amenée de liquide de lavage (8) et/ou d'une amenée de réactif (9) qui sont reliées à 1'unité de commande (4). 9. Appareil selon l'une quelconque des revendications 6 à 8,..aractérisé par le fait que des tubes d'aspiration (10) sont disposés au-dessous d'une partie au moins des tubes de déparation (2), et par le fait qu'il est muni d'un mécanisme (11) qui fait plonger les tubes d'aspiration (10) dans les tubes de séparation (2) et qui est relié à l'unité de commande (4).