Brevet FR2630648A1 — publié le 19891103

La présente invention concerne le traitement d'affections infla- mmatoires dans le domaine de la médecine humaine et, en particulier, concerne le traitement de maladies inflammatoires chroniques de l'or- ganisme, telle que l'arthrite rhumatoîde et les irritations dermiques locales persistentes, par exemple des psoriasis, en utilisant des sels de zinc d'acides gras insaturés (UFA) ou polyinsaturés (PUFA), ou leurs dérivés cycliques, tels que l'acide prostanoique, les acides prosténoiques et les prostaglandines. On connaît de la littérature formnant la technique antérieure et concernant l'utilisation de l'acide linoléique et l'acide Y-lino- lénique et leurs dérivés pour le traitement de diverses maladies et affections dans le domaine de la médecine humaine, et concernant également des compositions pharmaceutiques et diététiques contenant les substances mentionnées. A cet égard, on peut se référer aux descriptions des brevets des Etats-Unis d'Amérique. n 4 273 763, 4 309 415, 4 393 049 et 4 444 755. Bien que certains de ces brevets décrivent également l'usage du zinc en combinaison avec l'acide -linolénique (et d'autres acides) pour former des compositions phar- maceutiques pour le traitement de telles maladies et affections, leurs descriptions se bornent essentiellement à des compositions qui sont administrées par voie orale et les recherches de Horrobin, nommnné conme inventeur dans ces brevets, n'apparaissent pas s'être étendues à l'utilisation des sels de zinc d'acides gras insaturés et polyin- saturés, ou à leurs dérivés cycliques pour le traitement de certaines affections inflammnatoires, tels que l'arthrite rhiumatoide dans les- quels s'appliquent d'une manière topique les préparations. On sait également que la demande de brevet PCT/AU86/00251 déposée par la société Glyzinc Pharmaceuticals Limited, décrit l'uti- lisation d'un complexe de glycérolate de zinc, appelé "Glyzinc", en tant que formulation à libération lente de zinc et appliqué dans des applications dermiques sur la peaux pour traiter des affections inflammatoires, en particulier l'arthrite. Suivant l'invention, on a découvert, sans s'y attendre, que certains sels de zinc d'acides gras insaturés et polyinsaturés, ou leurs dérivés cycliques, avaient, quand ils étaient appliqués locale- ment, une activité anti-inflammatoire. Les acides gras polyinsaturés 2630648- concernés sont les acides alcanoiques linéaires se présentant naturel- lement avec trois liaisons éthènoides ou plus, disponibles dans la nourriture. D'une manière générale, suivant la présente invention, il est donc prévu un traitement des affections inflammatoires, spécialement de l'arthrite rhumatoide, par l'application locale ou dermique d'une quantité sensible d'un préparation contenant un ou plusieurs sels de zinc d'acides gras insaturés ou polyinsaturés, ou de leurs dérivés cycliques, associés avec un excipient acceptable en pharmacie. L'activité anti-inflammatoire des acides gras insaturés (ZnUFA) ou polyinsaturés (ZnPUFA) et de leurs dérivés cycliques a été testée avec succès par le présent demandeur sur des rats. Pour simplifier l'exposé de l'invention, les acides gras insaturés seront désignés ci-après par 1 'abréviation ZnUFA et les acides gras polyinsaturés par ZnPUFA. Sans désirer se limiter à la théorie, on croit que l'effica- cité des sels, mentionnés ci-dessus, de zinc de UFA, de PUFA et de leurs dérivés cycliques commre agents anti-inflammatoires peut être attribuée à une synergie physique dans laquelle le zinc fournit les acides UFA, PUFA et leurs dérivés cycliques à travers la peau et dans laquelle de la même façon lesdits acides UFA, PUFA et leurs dérivés cycliques délivre le zinc. On croit également qu'une telle synergie physique s'accompagne d'une synergie biologique car, à la fois, le zinc seul, c'est-à-dire le monoglycérolate de zinc ci-après désigné par ZMG, ou d'autres dérivés des acides UFA et PUFA, ou l'acide proténoîque et ses dérivés, chacun en luimême peut montrer une certaine activité anti-inflammatoire. Cependant 1 'activité anti-infla- mmatoire propre des acides UFA ou PUFA est détruite en cas d'adminis- tration simultanée d'aspirine. Cela est évidemment un inconvénient car l'aspirine est un mécidament très couramment utilisé dans le traitement des affections inflammatoires. D'une manière surprenante, on a trouvé que les sels de zinc des acides UFA et PUFA conservaient leurs activités en présence d'aspirine. Donc, suivant un autre aspect de 1 'invention, il est prévu une méthode de traitement qui comprend l'administration conjointe de (a) une composition topique comprenant une quantité efficace d'un ou de plusieurs sels de zinc suivant l'invention et (b) une quantité effective d'aspirine. Les sels de zinc d'UFA, de PUFA ou de leurs dérivés cycliques sont préparés en neutralisant des acides gras libres purifiés avec de l'oxyde de zinc ou, en variante, avec du carbonate de zinc ou de l'hydroxyde de zinc. Les sels de zinc de PUFA les plus saturés sont généralement des solides cristallins tandis que les sels de zinc de PUFA les moins saturés sont, en général, des pâtes graisseuses. Les matières premières doivent être stockées à -70 C dans une atmosphère de CO2 ou de N2 pour avoir une stabilité optimale. De préférence, les acides gras insaturés ou polyinsaturés sont choisis parmi les acides eicosapentaénoique (EPA), -linolénique, Des excipients convenables comprennent l'éthanol, le diméthyl- sulphoxyde (DMSO), 1'isopropanol, le glycérol, le glycérol de pro- pylène, la diméthylacétamide ou des mélanges de ces produits. Bien entendu, tout autre solvant compatible avec la peau humaine peut aussi convenir comme excipient. Dans une formulation préférée, l'acide UFA, PUFA ou de leurs dérivés cycliques est sous forme solidifiée sèche et est dissout ou dispersé dans du diméthylsulphoxyde, puis partiellement dilué avec du glycérol pour réduire la dessication de la peau (dans la proportion de quatre parts de DMS0 pour une part de glycérol). Dans une autre formulation, l'acide UFA, PUFA et de leurs dérivés cycliques est dispersé dans de l'alcool, puis dilué dans 0,5 volume de glycol de propylène. Ces formulations peuvent être utilisées sous forme de cr*me ou de lotion pour être appliquées sur la peau humaine. Dans la suite, on va décrire un exemple de procédé de prépa- ration des sels de zinc d'acides gras polyinsaturés à longue chaîne. Les esters de méthyle hautement purifiés (HPLC, pureté supé- rieure à 96 %) ont été déestérifiés par dissolution dans 90 % d'éthanol aqueux contenant IM d'hydroxyde de potasse que l'on laisse à la température ordinaire de 12 à 16 heures. Aprés acidification jusqu'à un pH égal à 3, les acides gras libres ont été extraits dans du n-hexane et récupérés par évaporation du solvant. La fin de ?63O64& l'hydrolyse a été confirmée par la chromatographie d'une couche mince. L'acide gras a été dissout dans un volume triple d'un mélange de méthanol/eau à 85 % et a été mis en réaction, en agitant doucement, avec l'équivalent demi-molaire d'oxyde de zinc pur pendant une heure. Le sel de zinc, qui se sépare conmme une huile, a été recueilli, rinçé dans de l'acétone froide et séché dans un courant d'azote, sans oxygène. La synthèse des sels de zinc a été confirmée par analyse du produit, en ce qui concerne le zinc, par absorption atomique et spectrophotométrie RMN. Des solutions de sels, 2 mg/ml dans de l'éthanol, ont été diluées cent fois dans de l'eau pour obtenir des solutions de 25 à 30 micromoles par litre, suivant les poids molé- culaires calculés du produit à analyser. L'absorption atomique a été réalisée suivant une analyse de routine pour le zinc dans des specimens biologiques. Une analyse pratique pour le zinc (DHA)2 a conduit aux résultats suivants: Poids moléculaire calculé de Zn (DHA)2 = 719; Zinc calculé conc. dans la solution analysée 27,8 micromoles par litre (2 mg pour 100 ml); Analyse 23 micromoles par litre. Les formulations d'acide ZnPUFA ont été testées, en ce qui concerne 1 'activité anti-inflammatoire, en utilisant des rats et les détails des tests qui ont été obtenus sont donnés ci-dessous. Essai pharmnnacologique sur l'organisme (par rapport à l'effet local) Activité anti-inflanmmatoire de ZnUFA, ZnPUFA ou de leurs dérivés On a injecté à des rats capuchonnés et à des rats Agouti Noir (DA), à la base de leurs queues, 500 microgrammes d'adjuvant arthrito- génique contenant du "Mycobacterium tuberculosis" tuée à la chaleur, dispersés dans 50 microlitres de squalane le jour JO. Le jour J10, pour les rats DA, et le jour J12, pour les rats capuchonnés, la partie supérieurc du dos de chaque rat est rasée, au-dessous du cou, sur environ 6 cm2. On a appliqué le ZnUFA, ZnPUFA ou son dérivé cyclique, à une concentration de 14 mg/ml dans une formulation de DMSO-glycérol (4:1 v/v) ou de propylène d'éthanol- glycol (2:1 v/v), une fois par jour pendant quatre jours.sur le dos rasé des rats. Au cinquième jour, la croissance de signes d'arthrite par rapport au jours J10, pour les rats DA, et J12, pour les rats capuchonnés, a été constatée et comparée à celle des rats qui avaient reçus du DMS0glycérol ou du propylène d'éthanol-glycol, c'est-à-dire de l'excipient seul dosé à 2,5 ml/kg. Les signes d'arthrite sont la perte de poids, l'augmnentation de l'épaisseur des pattes arrière et de la largeur maximale de la queue, mesurée avec une gauge micrométrique à vis, l'augmentation de l'in- flammation des pattes avant, mesurée sur une échelle 0-4+, et, en général, la perte de condition prouvée par le hérissement; la perte de la luisance du poil et la capacité de monter le long d'un cadre en treillis. Ces signes d'arthrite sont encore mesurés trois jours plus tard (jour J17 pour les rats DA et J19 pour les rats capuchonnés) afin de vérifier le rebondissement des symptomes arthritiques sur les rats traités à la suppression du traitement. Dans cet essai, les préparations de ZnUFA, de ZnPUFA et de leurs dérivés cycliques, les ZnPUFA étant ceux qui ont le plus de liaisons éthénoides, ont montré avoir une activité effective anti- inflamnatoire/suppresseur d'arthrite, quand elles sont appliquées aux rats ayant une maladie arthritique préétablie. Des doses efficaces de préparations de ZnUFA ou de ZnPUFA sont de l'ordre de: - 400 micromoles/kg de monoglycerolate de zinc (ZMG), utilisé -romme complexe de zinc lipophilique/hydrophobique de référen- ce; - 140 micromoles/kg pour les ou e-linolénates (18,3); - 20 micromoles pour le zinc EPA ou DHA, ceux-ci étant les PUFA principaux des huiles marines ou de poissons. Contrairement aux médicaments classiques anti-inflammatoires nonstéroides (NSAID), qui sont couramment donnés par voie orale, les présentes formulations de ZnUFA, de ZnPUFA ou de leurs dérivés cycliques ne causent aucun saignement gastrique. Certaines prépara- tions NSAID qui sont également efficaces quand elles sont appliquées sur la peau dans des excipients au DMSO-glycérol, par exemple, le prioxicam ou la phénylbutazone, entraînent encore des irritations gastriques, qui se manifestent par des hémorragies gastriques chez les rats polyarthritiques en état de frissonnement. De plus, appliqués de trois à dix fois par jour, les dosages utilisés pour traiter les rats arthritiques, les préparations de ZnUFA, de ZnPUFA ou de leurs dérivés cycles n'affectent pas le gain de poids de Jeunes rats mâles normaux, ce qui indique qu'ils n'ont pas de toxicité sur l'organisme. Des sels de zinc moins cristallins d'acides gras à branches (iso) ou 6ylciques, par exemple l'acide prostanoique, préparés et appliqués commie décrit ci-dessus, ont aussi été trouvés anti-in- flammatoires. Des tests faits en utilisant des sels de zinc d'acides gras stéarique, undécylénique, propionique et acétique sont beaucoup moins puissants et montrent moins d'activité anti-inflammatoire. De même, d'autres dérivés des acides UFA, PUFA, de l'acide prostanoique, etc., par exemple des esters de méthyle et des triglycérides, sont moins puissants que les préparations de ZnUFA, de ZnPUFA ou de prostanoate de zinc. Des données chiffrées des tests obtenues jusqu'à ce jour ont aussi montré que les ZnUFA, ZnPUFA et leurs dérivés cycliques sont aproximativement huit fois, quelques uns jusqu'à 50 fois aussi puis- sants que ZMG cormmne agents anti-inflammatoires quand on les applique topiquement, ce qui indique encore que le zinc peut agir synergétique- ment avec les acides UFA, PUFA et leurs dérivés cycliques. Les données tirées de l'essai sur l'arthrite de rat préétablie démontre clairement que 1 'activité pharmaceutique des sels de zinc de UFA, PUFA et de leurs dérivés cycliques sont actifs à travers le derme, sont des agents anti-inflammatoires efficaces, et sont des moyens efficaces pour fournir le zinc, les acides UFA, PUFA, etc., comme supplément nutritionnel. REVENDICATIONS 1) Composition topique anti-inflammatoire ou anti-irritante caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité effective de sel de zinc d'un ou de plusieurs composés choisis parmi les acides gras insaturés, les acides gras polyinsaturés et leurs dérivés cycliques, dans un excipient agréé en pharmacie. 2) Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce. qu'elle contient aussi de l'aspirine. 3) Composition suivant la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que l'acide gras est de l'acide eicosapentaénoique, de l'acide Y-linolénique, de l'acide o-linolénique, de l'acide docosa- hexaénoîque, de l'acide crépénynique, de l'acide linoléique ou de l 'acide éléostéarique. 4) Compositiont suivant la revendication 1 ou 2, caractéri- sée en ce que l'acide gras ou son dérivé cyclique est un acide gras (iso) à chaîne branchée, de l'acide prostanoïque, un acide prosténoique ou une prostaglandine. ) Méthode de traitement d'une affection inflamnatoire ou d'une irritation dermique caractérisée en ce qu'elle consiste en l'administration topique au patient qui en souffre d'une composi- tion suivant l 'une des revendications 1 à 4.