Brevet FR2632861A1 — publié le 19891222

La présente invention concerne de nouveaux dérivés d'amino-4 carboxy-3 quinoléines et naphtyridines, leur procédé de préparation et leur application en thérapeutique. On connait déjâ des dérivés de naphtyridines et surtout de quinoléines utiles en thérapeutique pour des activités pharmacologique-s très diverses, telles que antibactériennes, antihypertensives, anxiolytiques, anti-inflammatoires, et analgésiques. activités dépendant essentiellement des groupes substituant les noyaux aromatiques. Parmi ceux-ci quelques dérives ontg été signalés comme se fixant sur les récepteurs de benzodiazépines : -les amino-4 carbamoyl-3 quinoléines, decrites dans EP-A-0 245 054, de formule A dans laquelle R1, R2, R3, R4 sont H ou des groupes hydrocarbonés : alkyle. aryle. aralkyle. -les quinoléines, décrites dans FR-A-2 582 514. de formule B dans laquelle R1, R2 R3 , R4 représentent H ou des groupes alkyles ou aryles. Z représente un groupe aryle et X représente CH-R4, N-R4 SO, S02, 0 ou S et V et W représentent H, halogène, alkyle, alkoxy, N02 ou CF3. Les naphtyridines, décrites dans EP-A-O 234 971, de formule C dans laquelle R représente un groupe cycloalkyle, hétéroaryle, phényle substituté ou non, A représente N, S, SO, ou O et R1, R2 représentent notamment H ou un groupe alkyle. - Les quinoléines, décrites dans FR-A-2 581 382, de formule D dans laquelle R1, R2, R3 représentent H, un groupe alkyle ou aryle, et R4 représente OH, un groupe OR ou un alkyle. On a maintenant trouvé qu'une modification de la formule D permettait d'obtenir des composés qui ne se fixent pas, à des doses pharmacologiquement significatives, sur des récepteurs centraux des benzodiazépines comme les composés D, mais se fixent uniquement sur les récepteurs de type périphérique dont on sait que l'activation entraine des activités pharmacologiques différentes de celles résultant de l'activation des récepteurs centraux. L'invention concerne les composés répondant à la formule I dans laquelle R1 et R 2' identiques ou différents, représentant 1 atome d'hydrogène, un groupe aikyle en C1 à C6, un groupe phényle ou benzyle, ou R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont attachés un héterocyle saturé en C4 à C8, R3 représente un groupe alkyle en C1 a C6 ou phénylalkyle en C7 à Cg, R4 et R7 représentent, indépendamment l'un de l'autre, l'atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en- C1 à C4, R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou d halogène. un groupe alkyle ou alkoxy en C1 à C3, un groupe nitro, trifluorométhyle, cyclohexyle ou ensemble un groupe methylènedioxy, R8 représente l'atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C 4 ou groupe phényle n représente 0,1 ou 2. et l'un des symboles A,B,C,D représente N et les autres CH ou A,B,C,D représentent chacun CH, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides ou les bases pharmaceutiquement acceptables. Parmi les acides. on peut citer les acides halogénhydriques, nitrique, sulfurique, phosphorique ou les acides carboxyliques tels que l'acide acétique, formique. succinique, tartrique, oxalique et aspartique ou les acides sulfoniques tels que l'acide métha nesulfonique ou benzénesulfonique; les sels avec les bases peuvent être des sels alcalins, alcalino-terreux ou des sels avec des maines telles que la lysine, la piperazine ou l'éthanolamine. Les groupes alkyles peuvent etre linéaires, ramifiés ou cycliques. Les groupes phényles ou benzyles peuvent etre substitués par des halogènes, des groupes alkoxy en C1 à C3 ou alkyles en C1 à C3. Parmi les produits préférés objets de l'invention, on peut citer les esters de quinoléine ou de naphtyridine-1,5 de formule I dans laquelle R8 est H, R3 représente un alkyle en C1 à C 3 et plus particufièrement le groupe méthyle, n est O et R4 représente H. Un autre objet de l'invention est le procédé de préparation des composés de formule I qui consiste à faire réagir sur l'amine de formule II Je dérivé de formule III dans lesquelles R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, A, B, C, D, et n ont les mêmes significations nue dans la formule I et X représente un halogène tel que Cl ou Br ou un groupe sulfonate RSO3 dans lequel R est un grou pe alkyle ou benzyle. La substitution de l'amine Il peut être effectuée dans des conditions classiques, à une température comprise entre 80 C et t80-C, de préférence en présence, pour complexer l'acide formé, d'une base telle qu'une amine tertiaire ou un carbonate alcalin on opère en général dans un solvant organique, tel qu'un hydrocarbure comme le toluène, tel qu'un alcool comme l'éthanol ou l'isopropanol, tel qu'un éther comme le dioxanne, ou tel qu'un solvant aprotique polaire, comme le dimèthylformamide ; la la réaction peut aussi entre effectuée à une pression supérieure à la pression atmosphérique, comprise entre 5 et 70 x 10 Pa, dans une enceinte close. Certains dérivés de formule II ont déjà été décrits, tel que l'amino-2 N-N-diéthylpropanamide dans J. Chem. Soc. p. 2972-2980 (19521. Les autres peuvent entre préparés à partir de produits connus en appliquant des méthodes classiques et par exemple - à partir des dérivés aminoacides IV, dont la fonction amine est protégée sous forme de carbamate labile et la fonction acide est activée par un groupe succinimidoyle comme décrit par G.W. Anderson dans J.A.C.S. 86 p. 1839-1842 (1964). dans laquelle R3 R4, et n ont les mêmes significations que dans la formule I et R représente un groupe alkyle en C1 à C4, sur lesquels on fait réagir l'amine HN R1 R2, pour donner le composé de formule V (dans laquelle R1, R2 R3 R4, et n ont la meme signification que dans la formule I et R est un alkyle), avant d'éliminer le groupement carboxylique protégeant l'amine terminale par action d'un acide tel que les acides trifluoroacétique, sulfurique ou chlorhydrique; - à partir d'amides de formule VI (dans laquelle X représente Cl ou Br, et R1, R2, R3 et n ont les mêmes significations qu'à la formule I) qui peuvent etre préparés selon le procédé décrit dans Synthetic Organic Chemistry - chap. 19; ; R.B. Wagner et H.D. Zook (1953), publié par J. Wiley et Sons. On fait réagir le composé de formule VI avec l'amine R4-N H2, à une température comprise entre 60'C et 130 C, en solution dans un alcool ou un éther, à pression atmosphérique ou entre 5 et 40 x 105 Pa. Certaines quinoléines de départ ou les dérivés hydroxylés en 4 correspondants (formule III A = B = C - D = CH; X = OH ou Cl) sont des composés connus décrits notamment dans J. Med. Chem. li. 7 p. 816-823 (1979) ou dans FR-A-2 581 382, précédemment cité; et celles dans lesquelles R est différent de H, peuvent etre préparées par la méthode décrite par R.P. Staiger et E.B. Miller dans J. Org. Chem. 24, p. 1214 (1959). Les naphtyridines de formule III, dans lesquelles X = OH sont préparées par des méthodes classiques, précédemment décrites, par exemple.dans Heterocyclic compounds - vol. 7 (1961) : naphtyridines (Chap. 2) Ed. J. Wiley. Les composés de formule III dans lesquelles X = halogène sont préparés, par exemple par action de POX3 ou PX3 sur les dérivés hydroxylés correspondants, suivant une technique classique. L'invention concerne aussi les médicaments comprenant au moins un composé de formule I ou l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables.. Ces composés ont, en effet, une affinité, in vitro et in vive, pour les récepteurs des benzodiazépines de type périphérique sans présenter d'affinité spécifique pour les récepteurs centraux et leurs acti- vités pharmacologiques seront celles des ligands des récepteurs de type périphérique des benzodiazépines c'est-à-dire anxiolytîques, vasodilatatrices ou immunomodulatrices. Les médicaments de l'invention seront administrés par exemple .par voie orale, sous forme de comprimés, gélules ou granulés, ou par voie rectale -sous forme de suppositoires ou par voie parentérale sous forme de soluté injectable, à raison de 1 mg à 400 mg par jour. en une ou plusieurs prises selon la structure du composé, l'âge du malade et la nature et la gravité de la maladie. Les composés de formule I, ou leurs sels, seront associé aux excipients usuels compatibles avec leur structure chimique. Les exemples suivants illustrent l'invention. Les analyses élémentaires des produits isolés répondent aux normes habituelles. Les produits sont caractérisés par leurs points de fusion instantanés éventuellement par leur spectre RMN (m signifie massif, d doublet, s singulet, t triplet et (x H) que la bande correspond à x protons) la réféence interne est Si(CH3)4); les spectres infra rouge présentent les bandes caractéristiques des structures attendues. Préparation des amines de formule Il a) N,N-dipropyl (amino-2) propanamide (formule II : R1 = R2 = C3H7, R3 = CH3, R4 H, n = 1) 58g de N-(terbutoxycarbonyl) alanine, préparéE à partir d'alanine racémique, 33g de N-hydroxysuccinimide et 59g de dicyclohexylcarbodiimide, en solution dans 1400 ml de dioxanne, sont maintenus sous agitation pendant 6 heures. On sépare alors le précipité et évapore le solvant sous pression réduite. Le résidu est lavé par une solution aqueuse de Na2CO3 à 5% Après séchage, on isole 819 de composé de formule IV (R 3 = CH 3' R4 = H, R = C2H5, n = 1) qui fond à 143 C. (A partir de L-alanine, on obtient dans les memes conditions un produit fondant à 168-C). On dissout 80g de ce produit dans 700 ml de tétrahydrofuranne contenant 140 ml de dipropylamine et on laisse 48 heures sous agitation. On évapore alors le solvant sous pression réduite et on obtient après lavage à l'eau et séchage 80g de composé de formule V dans laquelle R1 = R2 = C3 H?, R3 = CH3, R4 = H, R C2H5, n = 1, qui fond à 92'C. (Le produit préparé à partir du produit IV dérivé de L - alanine ne cristallise pas). Ce composé est dissous dans 400ml de chloro forme; on y ajoute, à 5 Cl 160ml d'acide trîfluàracé- tique en solution dans 200ml de chloroforme et après 3 heures d'agitation, on évapore le solvant sous pression réduite-. On verse de l'eau sur le résidu et neu tralise par addition de NaOH ava-nt d'extraire le produit attendu dans le dichlorométhane. On obtient ainsi 299 d'huile jaune. Spectre (H-RMN-: 60 MHz, OMSOd6) # (ppm) : 0,6 - 1,2 (m, 9H); 1,2 - 1,8 (m,4H); 2,2 2,6 (s,2H échangeables); 3 - .3,4 (m.5H). (On isole de la même façon l'amine dérivée de la Lalanine ou son trifluoroacétate après évaporation du chloroforme) b) N,N-dibutyl (amino-2) propanamide : 79 du composé de formule IV. préparé en a) sont dissous dans 100 ml de tétrahydrofuranne contenant 30 ml de N,N-dibutylamine; après 30 heures sous agitation, le solvant est éliminé par distillation et le résidu est lavé à- l'eau pour donner 7,59 de produit de formule V, dans laquelle R1 = R2 =C4H9, R3 = CH3. R4 = H, R = C2H5 et n = 1, qui fond à 80 C. Ce produit est dissous dans 100 ml de CHCl3 contenant 28 ml de CF@-COOH à 0 C: et traité comme son analogue. c) N-méthyl N-(chloro-4)phenyl (amino-2)propanamide On introduit lentement, à 5-C, 17,6ml de chlorure de chloro-2propionyle dans une solution, dans 50ml d'éther éthylique, de 24,2ml de N-methyl (chlo ro-4)phênylamine et 30ml de triéthylamine; on laisse le mélange revenir à température ambiante, sous agitation; 5 heures après la f@n de l'addition le précipité est séparé, le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est dissous dans l'éther éthyli- que; la solution organique est lavée par une solution aqueuse de HCl (0,5 N) puis à l'eau avant élimination du solvant pour donner. avec 55Z de rendement, le produit de formule VI, dans laquelle R1 = CH3 R2 = (Cl-4) C6H4, R3 = CH3, n = o X = Cl. 59 de ce composé sont maintenus à 100-C, pendant 3 heures, da-ns un autoclave de 100ml contenant 60ml d'ammoniac liquide. Après 12 heures, au cours desquelles le milieu revient à température ambiante, on élimine l'ammoniac et on extrait l'amine cherchée dans l'éther éthylique. On obtient ainsi 2,5 g d'huile. 1H RMN (60 mHz, CDCl3) # : 1,1 - 1,2 (d,6H); 2 - 2,3 (m,2H échangeables); 3,2 (s, 3H); 3,3 - 3,6 (m,1H); 6,9 - 7,5 (m,4H). d) N,N-dipropyl (amino-2)-phényl-3 propanamide (formule II : R1 = R2 = C3H7, R3 = CH2 C6 H5, R4 = H, n = 0) 26,5g de N-(tert-butoxycarbonyl) phényl alanine (F = 110-C), préparée par action du ditert-butyldicarbonate sur la phényl alanine racémique, 11,59 de N-hydroxysuccinimide, 20,6g de dicyclohexylcarbodiimide sont introduits dans 500ml de dioxanne; après 4 heures d'agitation, l'insoluble est séparé et le solvant évaporé sous pression réduite. On obtient le produit de formule IV correspondant, fondant à 138'C. Après réaction avec 12g de dipropylamine on obtient le produit de formule V correspondant, fondant à 94 C, qui par action de l'acide trifluoracétique dans le chloroforme, donne le trifluoroacétate de l'amide de formule II recherché, fondant à 108 C, avec un rendement global de 40%. ExemDle 1 {[N,N-dipropylcarbamoyl)-1 éthylamino]-4 trifluorométhyl-7 quinoléinyl-3} carboxylate d'éthyle (formule I : R1 = R2 = C3H7; R3 = CH3, R4 = H, n = o, R5 = H, R6 = 7-CF3, R8 = H, R7 = C2H5, A = B = C = D = CH) numéro de référence : SR 26241. On chauffe 6 heures a sa température de reflux, une solution dans 100 ml d'éthanol, de 2,6y de N,N-dipropyl(amino-2) propanamide, 3g de (chloro-4 trifluorométhyl-7 quinoléinyl-3)carboxylate d'éthyle (F = 60 C) et 2ml de triéthylamine. Après élimination du solvant le résidu est repris dans l'eau- et le dichlorométhane. La phase organique est décantée, le solvant évaporé et le résidu purifié par chromatographie sur une colonne de silice en éluant à l'éther isopropylique. Après recristallisation dans l hexane, on obtient avec 327. de rendement le produit recherché; F = 100 C. H RMN (80 mHz, CDCl3) #: 0,6-1 (m,6H); 1,3-1,8 (m,10H); 2,9-3,8 (m,4H); 4,3-4,7 (Q,2H); 4,9-5,3 (m,1H); 7,5-8,35 (m,3H); 9,2 (s,1H); 9,5-9,7 (d, 1H échangeable). Exemples 2 à 24 : Dérivés de quinoléine Ces exemples de composés de formule I dans laquelle A = B = C = D = CH et n = O, figurent dans le tableau I; les produits ont été préparés en appliquant la méthode décrite à l'exemple 1. ExemDle 25 {[Chloro-6 (N,N-dipropylcarbamoyl)-1 éthylamino)-4 naphtyridine-1,5]yl-3} carboxylate d'éthyle. (formule I : R1 = R2 = C3H7, R3 = CH3, 3 R4 = H, R6 = 6-Cl-, R7 = C2H5 , R8 = H, A = N, B = C = D = CH n = o) Réféence : SR 26293 On maintient 1 heure, à sa température de relfux, une solution dans 30 ml d'éthanol de 2,7 g de [(dichloro-4,6 naphtirydine-1,5)yl-3] carboxylate d'éthyle F = 114 C, 2,2 g d'hémisulfate de N,N-dipropyl(amino-2)propanamide et 3,1 ml de triéthylamine. Le solvant est alors éliminé sous pression réduite et le résidu est dissous dans 50ml de dichlorométhane; la solution organique est lavée par 2 fois 1Oml d'eau, puis le solvant est éliminé, après séchage. Le résidu est purifié par chromatographie sur colonne de silice en éluant avec un mélange de toluène et d'éthanol (99/1). Après recristallisation dans le cyclohexane, le produit attendu fond à 133 C. H RMN (60MH, CDCl3)#: 0,6-1 (t,6H); 1,1-1,8 (m, 10H); 2,8-3,8 (m,4H); 4,1-4,6 (q,2H); 6,1-6,5 (m, 1H); 7,27,5 (d,1H); 7,7-8 (s,1H); 8,95 (s,1H); 10,4-10,7 (d,1H échangeable). Exemple 26 : {[chloro-6(N,N-dipropylcarbamoylméthyl)-1 éthylamino) -4 naphtyridine-1,5]-yl-3} carboxylate d'étyle (formule I : R1 = R2 = C3H7, R3 = CH3; R4 = R5 = H; = 6-Cl; R7 = C2H5; R8 = H; A = N, B = C = D = CH; n = 1) Référence : SR 26331. -TABLEAU I Caractéristiques physiques Ex N SR R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 F C (sel) [&alpha;]20 2 26399 C 3H7 C3H7 CH3 H H- 5-C1 C2H5 H 94 3 26058 C3H7 C3 H7 CH3 H H 6-Cl C2H5 (C.SOLVANT) H 59 4 26274 C3H7 C3H7 CH3 H H 6-Cl C2H5 H 170 (HCl) - 19(1;H2O) 5 26310 C3H7 C3H7 CH3 H H 7-Cl C2H5 H 83 6 26378 C3H7 C3H7 CH3 H H 7-Cl C2H5 H 160(HCl) -0,9(1; CH3OH) 7 26422 C3H7 C3H7 CH3 H H 7-Cl C2H5 H 175(HCl) +1,9(1;; CH3OH) 8 26351 C3H7 C3H7 CH3 H H 8-Cl C2H5 H 98 9 26377 C3H7 C3H7 CH3 H H 7-Br C2H5 H 160 (HCl,H2O) 10 26421 C3H7 C3H7 CH3 H 6-CH3 7-CH3 C2H5 H 170 (HCl,H2O) 11 26492 C3H7 C3H7 CH3 H 6-Cl 7-Cl C2H5 H 106 12 26357 C3H7 C3H7 CH3 H H 6-OCH3 C2H5 H 140 (maléate) 13 26522 C3H7 C3H7 CH3 H H 7-OCH3 C2H5 H 102 14 25552 C3H7 C3H7 CH3 H 6,7-OCH2-O C2H5 H 130 (maléate H2O) 15 26426 C3H7 C3H7 CH3 H H H C2H5 H 170(maléate) 16 26487 C3H7 C3H7 CH3 H H 6-cyclo- C2H5 H 100 hexyl 17 26449 C3H7 C3H7 CH3 H H 7-Cl C4H9 H 84 18 26454 C2H5 C2H5 CH3 H H 7-Cl C 2H5 H 100 19 26362 C4H9 C4H9 CH3 H H 7-CF3 C2H5 H 140 20 26423 CH3 (Cl-4)- CH3 H H 7-Cl C2H5 H 146 -C6H4 21 26306 C3H7 C3H7 C2H5 H H 7-CF3 C2H5 H 60 22 26258 C3H7 C3H7 C6H5 H H 7-CF3 C2H5 H 95 23 26319 C3H7 C3H7 CH3 H H 6-Cl CH3 CH3 huile 24 26269 C3H7 C3H7 CH3 H H 6-Cl CH3 C6H5 110 En appliquant le mode opératoire décrit à l'exemple 25, on obtient avec 37% de rendement, le produit re cherché qui fond à 102'C après recristallisation dans l'acétate d'éthyle. H RMN (80 MHz, CDCl3) #: 0,55-1,00 (E, 6H); 1,15-1,80 (m,10H); 2,50-2,95 (m, 2H); 3,00-3,50 (m, 4H); 4,10-4,50 (q, 2H); 5,40-5,80 (m, 1H); 7,30-7,50 (d, 1H); 7,90-8,10 (d, 1H); 9,01 (s, 1H); 9,40-9,60 (d, 1H). Exemple 27 {[bromo-7(N,N-dipropylcarbamoyléthylamino)-4 dine-1,5]yl-3} carboxylate d'éthyle)-4 naphtyri (formule I : R1 = R2 = C3 H7, R3 = CH3, R4 = R5 = R8 = H, R6 = 7-Br, R7 = C2H5, n = O, A = N, B = C = D = CH). Référence : SR 26579. a) [(bromo-7 chloro-4 naphtyridine-1,5) yl37carboxylate d'éthyle Préparé par action de POCl3 sur le (bromo-7 hydroxy-4 naphtyridine-1,5)yl-3 carboxylate d'éthyle. Ce produit fond à 130 C. b) 3,019 de naphtyridine ainsi préparée, 2,86 de trifluoracétate de N,N-dipropylamino-2 propanamide et 2,7 ml de triéthylamine sont dissous dans 50ml d'éthanol et la solution est portée une heure au reflux. Le solvant est évaporé; une solution du résidu dans le chlorure de méthylène est lavée à l'eau et le solvant évaporé. Le produit attendu, après recristallisation dans le cyclohexane fond à 96 C. Exemple 28 {[chloro-7(N,N-dipropylcarbamoylméthylamino)-4 naphtyridine-1,87-yl-3} carboxylate d'éthyle (formule I : R1 = R2 = C3H7, R3 = CH3, R4 = R5 = R8 = H, R6 = 7 7-Cl, R = C 2H5, A = B = C = CH. D = N, n = O). Référence : SR 26493. a) [(dichloro-4,7 naphtyridine-1,8) yl-3]carboxylate d'éthyle 109 de (chloro-7 hydroxy-4 naphtyridine-1,8) yl-3 carboxylate d'éthyle sont portés 1h au reflux dans 100ml de POCl3. La réaction terminée, l'excès de POCl3 est éliminé et le résidu repris par le dichlorométhane est neutralisé par une solution,de soude concentrée. Le produit est purifié par chromatographie sur colonne de silice, en éluant avec un mélange de toluène et d'éthanol 98/2. Après recristallisation dans le cyclohexane, il fond à 134-136-C. b) 39 de la naphtyridine précédemment obtenue, 2,59 d'hémisulfate de N,N-dipropyl-(amino-2)pro- panamide et 3,6ml de triéthylamine sont introduits dans 30ml d'isopropanol et le mélange est maintenu 3h au reflux. Le solvant est évaporé; le résidu, en solution dans. le chlorure de méthylène, est lavé à l'eau puis chromatographié sur colonne de silice en éluant avec un mélange de cyclohexane et d acétate d'éthyle (80/20). Après recristallisation dans l'éther éthylique, il fond à 93-C. Les composés des exemples précédents sont peu toxiques, et. chez la souris leur DL50 est en général supérieure à 1000 mg/kg, par voie orale; ainsi celle du composé de l'exemple 1 est de 1100 mg/kg. On a aussi étudié leur affinité in vitre, pour les récepteurs centraux des benzodiazépines et ceux de type périphérique selon les méthodes décrites dans ce qui suit; les valeurs déterminées des concentrations du produit étudié inhibant 50Z de la fixation spécifique du ligand marqué sur son récepteur (CI 50) figurent dans le tableau II; elles montrent que les produits de l'invention ont une affinité spécifique pour les récepteurs périphériques mais ne se fixent pas sur les récepteurs centraux. a) détermination de la concentration du produit étudié inhibant 507. de la fixation spécifique du récepteur de type périphérique du (chloro-2 phényl) -1N-méthyl N-(méthylpropyl)isoquinolyl-3 carboxamide (ou PK 11195) La technique est analogue à celle décrite par J. Benavides et Coll. dans Brain Res. Bull. 13 p. 69-77 (1984). Les suspensions de protéines membranaires de cerveau de chat ont été préparées comme décrit par J. Benavides. Les essais d'inhibition de la fixation du [ H]PK11195 sur les récepteurs par les produits à tester ont été effectués à 4C. sur 2ml de suspension contenant 0,05mg de protéine et 0,5nM de[ H]PK11195; les incubations ont duré 2h 30. La fixation spécifique a été déterminée en remplaçant le produit de l'invention par 10 pM de chloro-7 dihydro-1,3 méthyl-1 (chloro-4 phényl)-5 2H-benzodiazépine-t,4 one-2 ou RO 5-4864. Les concentrations de produit à tester inhibant 50% de la fixation spécifique de PK11195 au récepteur (CI50), ont été calculées en appliquant la méthode logit-log décrite par Finney dans Probit analysis-Cambridge University Press. 1979. b) détermination de la concentration du produit étudié inhibant 50% de la fixation spécifique du flunitrazépam sur le récepteur central. Les cerveaux de rats, prélevés après décap:- tation, sont broyés puis mis en suspension dans une solution aqueuse de saccharose (0,32 M). Le mélange est centrifugé et le culot remis en suspension homo gène dans une solution tamponnée par TRIS-HCl '(5'0mM; PH = 7.4). Des parties aliquotes de cette suspension sont incubées à 4 C après introduction de [ H]flunitrazepam, seul ou avec des quantités croissantes du composé à tester. On détermine par scintillation liquide, la quantité de produit marqué fixé sur les membranes séparées du milieu d incubation par fixation sur filtre de fibres de verre eut calcule par la méthode logit-log la CI50; la fixaiton non spécifique du flunitrazépam est déterminée en introduisant 2 pM de clonazépam. TABLEAU II SR CI50nM CI50nM (périphérique) (central) 26241 3 > 20000 26399 7 12700 26310 1 > 20000 26351 6 30000 26377 1 > 20000 26421 5 53000 26492 1 > 20000 26522 11 > 20000 26552 31 12400 26487 39 > 20000 26378 1 > 20000 26579 1 > 20000 26493 12 > 20000 26449 1 > 20000 26-362 3 > 20000 26423 1 12600 26306 11 > 20000 26319 8 14000 26269 16 > 20000 PK11195 1,3 21400 R05-4864 44 inactif DIAZEPAM 523 11 CHLORDIAZE- inactif 654 POXIDE On a aussi étudié l'affinité pour les récepteurs de type périphérique du composé de l'exemple 5, in vivo, chez la souris, en utilisant le ligand ?H) PK11195. Les produits à tester, en suspension dans une solution aqueuse de carboxyméthylcellulose (îX p/v) sont administrés, par voie orale à des groupes de 4 souris, 25mn avant l'injection intra-veineuse de [ H] PK11195, à raison de 200 pCi/kg (activité spécifique 66 Ci/mmole). 5 mn après l'injection, les animaux sont sacrifiés par décapitation et les différents organes sont prélevés et broyés dans 1Oml de tampon à base de- Tris-HCl Les groupes témoins reçoivent la solution de carboxyméthylcellulose et l'injection de 3H2PK11195. On détermine pour chaque organe par scintigraphie 1 - la quantité de ligand radioactif présente dans un organe en mesurant la radioactivité d'une partie aliqu-ote de l'homogénat. 2 - la quantité de ligand radioactif fixée sur les tissus membranaires d'un organe en mesurant la radioactivité fixée sur un filtre de fibres de verre par filtration d'une autre partie aliquote de l'homogénat. 3 - la quantité de ligand radioactif fixée non spécifiquement sur les tissus membranaires en incubant un homogénat témoin avec un excès de RO54864, suivi de la fixation des membranes sur filtre et mesure de la radioactivité. L'inhibition de la fixation spécifique, notée FS, est égale à la différence des radioactivités mesurées en 2 et 3 divisée par la mesure en 1. Les pourcentages d'inhibition déterminés pour un composé de l'invention et les produits de référence figurent dans le tableau III; ils sont donnés par la formule FS (témoin) - FS (produit) 100 x FS (témoin) TABLEAU III PRODUIT DOSE % INHIBITION DE LA FIXATION SPECIFIOUE DANS mg/kg CERVEAU : RATE : THYMUS : REIN : COEUR SR26310 25 76 52 31 39 PK11195 25 71 29 30 27 Ro 5-4864 15 74 Il 28 73 27 REVENDICATIONS 1. Composés de formule I dans laquelle R1 et R2 identiques ou différents, représentent l'atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C6, un groupe phényle ou benzyle ou R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont rattachés un hétérocycle saturé en C4 à R3 représente un groupe alkyle en C1 à C6 ou phénylalkyle en C7 à Cg, R4 et R7 représentent, indépendamment l'un de l'autre, l'atome d hydrogène ou un groupe alkyle en C1- à C4, R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou d halogène, un groupe alkyle ou alkoxy en C1 à C3, un groupe nitro, trifluorométhyle, cyclohexyle ou ensemble un-groupe méthylènedioxy, R8 représente l'atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C4 ou groupe phényle n représente 0,1 ou 2, et l'un des symboles A,B,C,D représente N et les autres CH ou A,B,C,D représentent chacun CH, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides ou les bases pharmaceutiquement acceptables. 2. Composés de formule I, selon la revendication 1, dans laquelle A = B = C = D = CH. 3. Composés de formule I, selon la revendication 1, dans laquelle l'un parmi A, B, C, D repré sente N et les autres CH. 4. Composés selon la revendication 3 dans laquelle A est N. 5. Composés de formule I, selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle R7 représente un groupe alkyle en C1. à C4, 6. Composés de formule I, selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle R3 est un groupe alkyle en C1 à C3, R4 est l'atome d'hydrogène et n est o. 7. Procédé de préparation des composés de l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que l'on fait réagir l'amine de formule avec un dérivé de formule III dans lesquelles R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, A, B, C, D et n ont les mêmes significations que dans la formule I et X représente un halogène ou un groupe sulfona te. 8. Composition pharmaceutique comprenant un produit selon l'une des revendications 1 à 6.