Brevet FR2634123A1 — publié le 19900119

UIITS.ATCtN D'ACllGE INSEN MIAPEMIQC E AN'TIPARASIAIRAE IXDM&INE DE L'INVENCoE La présente invention concerne une nouvelle utilisation en thérapeutique des composés qui appartiennent à la famille des acétogénines en tant que substances antiparasitaires. Les acétogénines décrites ci-après sont des produits principalement extraits de plantes appartenant à la famille des annonacées et notamment des genres Rollinia, Uvaria, Annona et Asimina. ANTERI = R On sait que l'on a déjà décrit dans la littérature les propriétés cytotoxiques et antitumorales de lactones d'acide gras comportant dans leur molécule un groupe bis(tétrahydrofurannyle) et répondant à la formule zo 25.1H On cornait en particulier une acétogénine de formule II [o Zg-Z4-H, Z2=OH et Z3=OCOCH3] décrite par JOLAD et al., J. Org. Chem., 47, pages 3151-3153, (1982) qui a été extraite de Uvaria 26 3 4123 accuminata et a été dénommée "uvaricine". On connait également la "désacétyluvaricine", qui est une acétogénine de formule II [o k=Z4=H et Z2=Z3=OH] décrite par JOLAD et al., J. Nat. Prod. 48 (NI 4), pages 644-645, (1985). De DABRAR et al., Phytochemistry, 23 (N 9), pages 2013- 2016, (1984), on connait deux stéréoisomères de formule II (appelés "rollinine" et "isorollinine") [o Z=H et Z2=Z3=Z4=OH]', extraits de Rollinia papilionella et présentés comme ayant une activité cytotoxique. On connait encore de DABRAH et al., J. Nat. Prod., 47 (N 4), pages 652657, (1984), la "rollinone" qui est un composé de formule II [o Z4=H, Z2=Z3=OH, Z représente une fonction oxo, et, dans le cycle lactone, la liaison Cl-C35 est totalement saturéè. On connait aussi de CORTES et al., Tetrahedron Letters (N 30), pages 31993202 (1984) des acétogénines extraites de Annona cherimolia de formule OH Z5 to r 'III) OH OH o Z5 est un reste 3-(2-oxo-5-methyl-2,5-dihydrofurannyle [produit dénommé "chérimoline"] ou 3-(2-oxo-5-méthyl-2,3,4,5-tétrahydro- furannyle [produit dénommn "dihydrochérimoline"] et qui sont si- gnalées commrne ayant des propriétés antimicrobiennes vis-à-vis des bactéries G- et de Candida. On sait enfin que le brevet américain US-A-4 -721 727 propose l'utilisation en agriculture, en tant qu'agents pesticides, des acétogénines de formule C.. CA1A,)m CAA A (IV) CA1A12)n-. w dans laquelle le couple (A1A2) est choisi parmi les couples (H,H), (H,OH), (H,OAc) et (=0), avec la condition que le nombre total de substituants oxy des groupes A1 et A2 ne soit pas supérieur à 6; m = 9-15; n = 10-18; r = 1; et, w= 1 ou2. A3 représente un groupe choisi parmi CH3 5 X C2 C C C _ ( C1A2> CH. ou r- -. /- (CA1A2)r CHF; Le composé pesticide préféré selon ledit US-A-4 721 727 est (un mélange de stéréoisomères)extrait de l'écorce et des graines de Asimina triloba, dénommé "asimicine" et a pour formule développée -OH 02t XJ 17- 0' 17 ' 1s 36A (v)l 0 _ 7 CH3 w 26 Il 3032 CH3 OBJET DE L'INVERON Selon un premier aspect de l'invention on préconise une nouvelle utilisation de composés acétogénines qui sont inclus ou non dans la formule générale (voir formule IV précitée) dudit brevet US-A-4 721 727 en tant que substances antiparasitaires. Plus précisément, on préconise suivant l'invention l'utilisation d'une substance choisie parmi l'ensemble comprenant les (tétrahydrofurannyl)lactones qui renferment dans leur formule (a) un groupe terminal r-lactonique, éventuel- lement substitué, (b) un groupe alkylène divalent à chatne hydrocarbonée linéaire en C9-C20 com- portant 1 à 6 groupes OH secondaires qui sont le cas échéant protégés sous la forme éther ou ester, d'une part, ou transformés sous la forme oxo, d'autre part, ledit groupe alkylène étant lié par l'une de ses valences audit groupe '- lactonique, (c) au moins un groupe tétrahydrofurannyle divalent éventuellement substitué, ledit groupe tétrahydrofurannyle étant lié en position 2 de son cycle audit groupe alkylène, et (d) un groupe alkyle monovalent à chatne hydrocarbonnée linéaire en C7-C17 pouvant comporter jusqu'à 6 groupes OH secondaires qui sont le cas échéant protégés sous la forme éther ou ester, d'une part, ou transformés sous la forme oxo, d'autre part, ledit groupe alkyle linéaire étant lié par sa valence audit groupe tétrahy- drofurannyle en position 5 du cycle dudit groupe tétrahydrofurannyle, le nombre to- tal de groupes OH, le cas échéant protégés ou transformés en groupe oxo, étant, par molécule, inférieur ou égal à 8, pour la préparation d'un médicament antiparasitaire destiné à une utilisation en thérapeutique humaine et vétérinaire vis-à-vis des parasitoses. Lesdites (tétrahydrofurannyl)-lactones sont en général des substances extraites de plantes appartenant à la famille des annonacées. Selon un second aspect de l'invention on préconise en tant que produits industriels nouveaux des (tétrahydrofurannyl)- lactones non encore décrites dans l'art antérieur. Selon un troisième aspect de l'invention on préconise également un procédé de préparation de ces nouveaux produits. Selon un autre aspect de l'invention on préconise une composition thérapeutique renfermant commne ingrédient actif au moins un dit composé acétogénine, notamment en tant que médicament antiparasitaire. DESCRIPIION DETAILLEE DE L'INVETION Les acétogénines que l'on utilise suivant l'invention en tant que substances antiparasitaires sont des composés choisis parmi l'ensemble constitué par 26 3 4123 (i) les (tétrahydrofurannyl)-lactones répondant à la formule X CH3(CZA1) iy CZ1 Z2)z- 3 dans laquelle, les groupes CZ1Z2, qui peuvent être identiques ou différents, représentent chacun un groupe CH2, CHOH, CHOR ou CO, R est un groupe protecteur de la fonction OH, Z3 représente un groupe lactone choisi parmi les groupes ' ', Z O <> A et (ii) leurs stéréoisomères optiques et géométriques. Par "stéréoisomères" on entend ici les isomères optiques qui résultent de la présence de plusieurs atomes de carbone asymétriques, notamment ceux qui comportent un substituant OH ou OR, pouvant être de configuration R ou S, d'une part, et les isomères géométriques de constitution qui résultent des configurations respectives (notamment E ou Z) des substituants de chaque cycle. Le groupe R qui intervient dans la définition des composés de formule I est un groupe protecteur approprié de la fonction hydroxyle. Parmi les groupes R susceptibles de convenir, on peut citer notamment les groupes alkyle (tels que par exemple les groupes alkyle en C1-C4), les groupes aryle (tels que par exemple les groupes phényle, >(- et4-naphtyle, o- met p-tolyle) et les groupes aralkyle (tels que par exemple les groupes benzyle, p-chlorobenzyle et 3,4-méthylènedioxybenzyle) pour la protection du groupe OH sous la forme éther, les groupes acyle (tels que notamment les groupes formyle, acétyle, benzoyle, p-chlorobenzoyle et 3,4méthylènedioxybenzoyle) pour la protection du groupe OH sous la forme ester, et, les groupes silyle notamment triméthyl- silyle. Les composés de formule I préférés selon l'invention sont ceux dans lesquels x vaut 11, y vaut 2, z vaut 13, et Z3 représente un groupe lactone éthylèniquement insaturé de formule Z 0- CH3 et qui comportent de 3 à 4 groupes CZ1Z2 oxygénés sous la forme CHOH, CHOR ou CO. Parmi ces composés préférés, les plus intéressants sur le plan pharmacologique sont choisis parmi l'ensemble constitué par (i) les produits répondant à la formule générale OR R'_,:, 0 9,7 5- l, 3 y 1 x OZ--o -CH3 OR dans laquelle R1, R2 et R4, identiques ou différents représentent chacun H ou R; R3 représente H, OH ou OR; X, Y et Z, identiques ou différents représentent chacun H, OH, OR ou un groupe alkyle en C1-C4; R est un groupe protecteur comme indiqué ci-dessus; et, (ii) leurs stéréoisomères optiques et géométriques. Conviennent également les composés de formule Ia o un au moins des groupes CHOR1 (en position 24), CHOR2 (en position ), CHR3 (en position 11) et CHOR4 (en position 4) est remplacé par un groupe carbonyle CO. Les composés de formule Ia dans laquelle (1) R3 est différent de H, d'une part, et (2) quand R3 est H, l'un au moins des X,Y et Z est différent de H, d'autre part, sont nouveaux. Le meilleur mode de mise en oeuvre de l'invention consiste à faire appel, en tant que substances antiparasitaires, aux composés tétrahydroxylés (en position 4,11,15 et 24 suivant la notation de la formule Ia) et trihydroxylés (en position 4,15 et 24 suivant la notation de la formule Ia) suivants: a) le 2-[5-(2-hydroxyundécyl)-2-tétrahydrofurannyl] -5-[14- (5-méthyl-2-oxo-2,5-dihydro-3-furannyl)-1, 5,12-trihydroxytétra- décyl]-tétrahydrofuranne (qui est un composé de formule Ia o RI= R2=R4=H; R3=OH; et X=Y=Z=H) et ses stéréoisomères optiques et géométriques qui sont des composés tétrahydroxylés; et, b) le composé analogue trihydroxylé (qui est un composé de formule Ia o R1=R2=R3=R4=H; et, X=Y=Z=H) et ses stéréoisomères optiques et géométriques. Les composés acétogénines selon l'invention peuvent être préparés suivant des modalités opératoires connues en soi par application de mécanismes réactionnels ou extractifs classiques. Le procédé de préparation, que l'on préconise pour l'obtention des composés acétogénines est caractérisé en ce que l'on soumet la plante, une espèce du genre Rollinia ou une espèce apparentée appartenant à la famille des annonacées, à une extraction avec au moins un solvant approprié de façon à retenir les fractions donnant une réaction positive avec le réactif de KEDDE, puis isole lesdites fractions. Le réactif de KEDDE est une solution à 2 % (p/v) d'acide 3,5dinitrobenzoique dans l'éthanol. On introduit quelques gouttes de ce réactif dans l'échantillon à tester qui a été préalablement mis en solution dans quelques gouttes de KOH à 6 % p/v dans de l'éthanol. L'apparition d'une coloration rose à violet-intense traduit la présence dans l'échantillon à tester d'une molécule comprenant un reste'rlactonique. Voir à cet effet la publication de K.G. KREBBS et al., "Spray Reagents" dans l'ouvrage de E. STAHL "Thin-Layer Chromatography", Springer-Verlag, Berlin, Reideberg, New York, 1969. Pour l'obtention des composés de formule Ia o R1 = R2 = R4 = H, R3 = H ou OH, X = Y = Z = H on préconise un procédé d'extraction qui est mis en oeuvre à partir d'une plante d'une espèce appartenant au genre Rollinia ou d'une espèce apparentée de la famille des annonacées, préalablement broyée et séchée aux opérations suivantes: 1 ) extraction par un solvant choisi parmi l'ensemble comprenant les éthers, les hydrocarbures aliphatiques saturés, les hydrocarbures aliphatiques halogénés, les hydrocarbures alicycliques, les hydrocarbures aromati- ques, les hydrocarbures aromatiques halogénés, les - alcools en C1-C5, les cétones en C3-C7, le tétrahydrofu- ranne, le diméthylformamide, les esters et leurs mélan- ges; 2 ) séparation du milieu d'extraction pour écarter s5 l'insoluble et recueillir le milieu liquide d'extrac-. tion; 3 ) concentration sous pression réduite du milieu liqui- de d'extraction ainsi obtenu; 4 ) lavage du concentrat ainsi obtenu avec un acide minéral dilué 0,5-1,5 M puis de l'eau distillée; ) évaporation du solvant d'extraction contenu dans le concentrat ainsi lavé pour obtenir un résidu substan- tiellement dépourvu dudit solvant; 6 ) chromatographie dudit résidu ainsi obtenu avec des solvants de polarité croissante, sur colonne de silice, pour ne recueillir que les fractions d'éluat donnant une réaction positive au réactif de KEDDE; 7 ) purification desdites fractions dormnnant une réaction positive au réactif de KEDDE et séparation des composés de formule I o R1 =R2 = R4 =H, R3=HouOH,X=Y = Z = H. Dans ce procédé la matière première végétale broyée et séchée est constituée par une partie de la plante (les racines, l'écorce, le bois, les feuilles, les tiges, les graines ou les sommités fleuries) ou la plante entière. De préférence, on utilisera les feuilles ou les graines de Rollinia ou d'une espèce appartenant à la famille des annonacées, préalablement séchées et broyées. Le genre Rollinia est bien connu. Il comprend notamment des espèces poussant notamment en Amérique du Sud et plus préci- sément au Pérou et en Equateur, à savoir l'espèce Rollinia ulei [décrite notamment par DIELS, Verh. Bot. Vereins Prov. Brandeburg, 47, 136 (1905)], l'espèce Rollinia microcarpa [décrite notamment par FRIES, Acta Horti Berg., 12 (No 1), 187, (1934)], l'espèce Rollinia ruboides, l'espèce Rollinia papilionella et l'espèce Rollinia sylvatica. Les espèces apparentées comprennent notamment les Asimina triloba, Uvaria accuminataAnnona cherimolia et Annona densicoma. La variété préférée selon l'invention appartient à l'espèce Rollinia ulei et est dénommée ci-après la variété Rollinia ulei (MAAS 5972) ou Rollinia sp MAAS (5972). Elle a été décrite par le Professeur P.J.M. MAAS et enregistrée sous le No 5972 du catalogue de l'herbier tenu par l'Institut de Botannique Systématique de l'Université d'Etat d'Utrecht, Pays-Bas. Pour l'obtention des composés de formule Ia sus-visés les parties préférées de la plante sont constituées principalement par les feuilles et les graines. Parmi les solvants d'extraction utilisables pour la mise en oeuvre du stade 1 ), on peut citer les éthers (tels que notamment le diméthyléther, le diéthyléther et le. diisopropyléther), les hydrocarbures aliphatiques (tels que notamment le pentane, l'hexane, l'heptane et l'éther de pétrole), les hydrocarbures aliphatiques halogénés (tels que notamment le tétrachlorure de carbone, le chloroforme, le dichlorométhane, le 1,1- dichloroéthane, le 1,2-dichloroéthane et le 1,2- dichloroéthylène), les hydrocarbures alicycliques (tels que notamment le cyclopentane et le cyclohexane), les hydrocarbures 26 3 4123 aromatiques (tels que notamminent le benzène, le toluène et les o-, m- et p-toluènes), les hydrocarbures aromatiques halogénés (tels que notamment le chlorobenzène, les dichlorobenzènes et le bromo- benzène), le tétrahydrofuranne, le diméthylformamide, les alcools en C1C5 (tels que notamment le méthanol, l'éthanol, le n-propanol et l'isopropanol), les cétones en C3-C7, (tels que notamment l'acétone, la méthyléthylcétone, la méthylpropylcétone),les esters (tels que notamment les acétates d'alkyle inférieur en C1-C4, par exemple l'acétate d'éthyle) et leurs mélanges. Les solvants préférés sont le chloroforme, le dichloro- méthane, le méthanol, l'éthanol, les mélanges eau-méthanol et eau- éthanol, l'acétate d'éthyle et (surtout) l'éther de pétrole, ou encore les mélanges desdits solvants. L'extraction du stade 1 ) est mise en oeuvre à une tem- pérature se situant entre 10 C et la température de reflux du milieu d'extraction notamment à une température se situant dans la gaminme de 15 C à 35 C, sous pression atmosphérique (i.e. environ Pa). Le cas échéant, cette extraction peut être réalisée sous pression réduite. De façon avantageuse on utilisera un volume de solvant d'extraction de 1 litre pour une quantité de 90 à 180 g de matière première végétale broyée et séchée -de départ. La séparation du stade 2 ) est une filtration classique qui a pour objet d'écarter l'insoluble et de recueillir l'extrait liquide ou milieu liquide d'extraction. Elle est réalisée notamment par gravité. La concentration prévue au stade 3 ) est réalisée sous pression réduite. De préférence cette concentration sera mise en oeuvre de façon à obtenir 0,07 à 0,15 volume de concentrat à partir de 1 volume de solvant d'extraction utilisé au stade 1 ), et mieux 0,1 volume de concentrat à partir de 1 volume de solvant d'extraction utilisé au stade 1 ). On utilisera notamment un évaporateur rotatif opérant sous pression réduite avec un bain- marie à une température de 40 à 70 C. Le lavage du stade 40) est entrepris avec un acide minéral dilué puis avec de l'eau distillée. L'acide minéral dilué peut être HC1, H2S04 ou HNO3. De façon avantageuse on utilisera deux fois 1 volume d'acide HC1 0, 5-1,5N et mieux 1 volume d'acide HC1 IN pour 4 volumes de concentrat obtenu au stade 3 ), puis, au moins 1 volume d'eau distillée pour 4 volumes de concentrat obtenu au stade 3 ). L'évaporation du stade 5 ) est avantageusement effectuée sous pression réduite de façon à éliminer pratiquement tout le solvant d'extraction contenu dans le concentrat lavé obtenu après réalisation du stade 4 ). La chromatographie du stade 6 ) est effectuée avec des solvants de polarité croissante en vue de retenir les fractions d'éluat donnant une réaction positive au réactif de KEDDE selon les modalités données ci-dessus. En bref, le stade 6 ) comprend une série d'élutions successives. De façon avantageuse ces élutions successives sont réalisées par "chromatographieéclair" (en anglais: "flash chromatography") c'est-à-dire par chromatographie sur colonne et sous pression, suivant la technique décrite par W.C. STILL et al., J. Org. Chem., 43, pages 2923-2925, (1978). De préférence, la colonne utilisée ici sera garnie de silice de faible granulométrie, par exemple une silice ayant des particules d'un diamètre moyen inférieur ou égal à 80,tm. De préférence, la purification du stade 7 ) comprend une chromatographie-éclair puis une séparation sur plaque de silice. De façon avantageuse les chromatographies des stades 6 ) et 7 ) sont mises en oeuvre successivement avec les éluants suivants: pour le stade 6 ): a) un mélange hexane/acétate d'éthyle oh les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [convient notamment le mélange hexane/acétate d'éthyle (60/40) v/v], b) l'acétate d'éthyle pur, c) un mélange acétate d'éthyle/méthanol o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange acétate d'éthyle/méthanol (98/2) v/v], is _Pour le stade 7 1): - d1) un mélange toluène/isopropanol o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange toluène/isopropanol (88/12) v/v] pouvant contenir le cas échéant une faible quantité [qui est inférieure ou égale à 5 % en volume par rapport au volume dudit mélange] de diéthylamine, d2) un mélange chloroforme/acétone/éthanol o les quantités respectives des trois composants sont en proportion variables, ou d3) un mélange des solvants d1 et d2 en proportions variables. En variante, on peut utiliser lors de la mise en oeuvre du stade 60), un ou plusieurs solvants dl, d2 ou d3; on utilisera alors au stade 7 ) un solvant dl, d2 ou d3 moins polaire. Par ailleurs, lorsque l'on effectue la chromatographie- éclair des stades 6 ) et 7 ), l'on recommande avantageusement que la pression de gaz dans la colonne d'élution soit comprise entre 0,2 et 0,25 bars quand l'éluant est un mélange toluène/isopropa- nol, d'une part, et comprise entre 0,18 et 0,22 bars quand l'élu- ant ne comporte pas ledit mélange toluène/isopropanol, d'autre part. Le meilleur mode de mise en oeuvre de ce procédé d'extraction consiste à soumettre les feuilles broyées et séchées de Rollinia sp MAAS (5972) aux opérations suivantes: 1 ) extraction avec l'éther de pétrole à une température comprise entre 10 C et la température de reflux du milieu d'extraction (i.e. la température d'ébullition du solvant d'extraction), à raison de 1 litre d'éther de pétrole pour 90 à 180 g de matière végétale broyée et séchée; 2 ) filtration pour écarter l'insoluble et recueillir l'extrait éthéropétrolique ainsi obtenu; 3 ) concentration dudit extrait éthéropétrolique sous pression réduite de façon à obtenir 0, 07 à 0,15 volume de concentrat à partir de 1 volume d'éther de pétrole utilisé au stade 1 ); 4 ) lavage du concentrat ainsi obtenu avec de l'acide HC1 dilué puis de l'eau, à raison d'au moins deux fois 1 volume d'acide HC1 0,5-1,5N puis d'au moins une fois 1 volume d'eau distillée pour 4 volumes de concentrat ob- tenu au stade 3 ); ) évaporation du concentrat ainsi lavé sous pression réduite de façon à éliminer pratiquement tout l'éther de pétrole contenu dans ledit concentrat lavé; 6 ) chromatographie sous pression du résidu d'évapo- ration ainsi obtenu avec des solvants de polarité croissante sur colonne de silice de granulométrie inférieure ou égale à 80,.m, lesdits solvants comprenant successivement a) un mélange hexane/acétate d'éthyle o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange hexane/acétate d'éthyle (60/40) v/v], b) l'acétate d'éthyle pur, c) un mélange acétate d'éthyle/méthanol o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange acétate d'éthyle/métha- nol (98/2) v/v], ou des solvants analogues, de façon à ne retenir que les fractions d'éluat donnant une réaction positive au réactif de KEDDE; 7 ) purification desdites fractions donnant une réaction positive au réactif de KEDDE par chromatographie sous pression sur colonne de silice de faible granulométrie avec conmmne éluant d1) un mélange toluène/isopropanol o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange 26 3 4123 toluène/isopropanol (88/12) v/v] pouvant conte- nir le cas échéant une faible quantité [qui est inférieure ou égale à 5 % en volume par rapport au volume dudit mélange] de diéthylamine, d2) un mélange chloroforme/acétone/éthanol o les quantités respectives des trois composants sont en proportion variables, ou d3) un mélange des solvants d1 et d2 en propor- tions variables, ou un éluant analogue, puis séparation par chromatographie sur couche mince de silice pour isoler au moins un des composés de formule Ia o R1 = R2 = R4 = H, R3 = H ou O1gX = Y = Z = H. De façon pratique les stades 1 ) et 2 ) sont réalisables successivement avec un appareil de type Soxhlet. Les composés de formule Ia, o l'un au moins des groupes R1, R2, et R4 est différent de H, le groupe R3 est différent de H et OH, ou l'un au moins des groupes X Y et Z est différent de H sont obtenus par hémisynthèse, selon des mécanismes réactionnels classiques, à partir des composés de formule Ia o R1 = R2 = R4 = H, R3=HouOH, X =Y= Z = H. Selon l'invention on préconise une composition thérapeutique tant humaine que vétérinaire, caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement acceptable, au moins un composé choisi parmi l'ensemble comprenant les composés acétogénines suivant l'invention notamment les composés extraits d'annonacées, les composés de formule I ou mieux des composés de formule Ia et leurs stéréoisomères optiques et géométriques. Bien entendu dans une telle composition qui convient tant en thérapeutique humaine et vétérinaire, et notammentpour les mammifères, l'ingrédient actif intervient suivant une quantité pharmaceutiquement efficace. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention seront mieux compris à la lecture qui va suivre d'exemples de préparation et de résultats d'essais pharmacologiques. Bien entendu, l'ensemble de ces éléments n'est nullement limitatif mais est donné à titre d'illustration. Obtention de 2-[5-(2-hydroxyundécyl)-2-tétrahydro- furannyl] -5-[14-(5-méthyl-2-oxo-2,5-dihydro-3-furannyl)-1,5,12- trihydroxytétradécyl] -tétrahydrofuranne (No de Code: OL 261087) 260 g de feuilles de Rollinia sp MAAS (5972) réduites en poudre et séchées sont extraites par 2 litres d'éther de pétrole dans un appareil de type Soxhlet. La solution éthéropétrolique est concentrée sous pression réduite jusqu'à 200 ml, lavée par 2 fois ml d'acide chlorhydrique IN, 1 fois par 50 ml d'eau distillée et séchée sur sulfate de sodium anhydre. L'évaporation de l'éther de pétrole laisse un résidu de 11,3 g (rendement: 4,4 %). 8 g de l'extrait éthéropétrolique, en solution dans le mélange hexane/ acétate d'éthyle (60/40) v/v sont chromatographiés sous pression, sur 190 g de silice (Kieselgel Merck 9385). L'élution est effec- tuée par ledit mélange hexane/acétate d'éthyle (60/40) v/v, en- suite par de l'acétate d'éthyle pur puis par le mélange acétate d'éthyle/méthanol (98/2) v/v. On obtient deux fractions A et B donnant une réaction positive au réactif de KEDDE. La fraction A qui est éluée par ledit mélange acétate d'éthyle/méthanol (0,5 g) donne une réaction très positive au réactif de KEDDE. Cette première fraction est rechromatographiée sous pression sur colonne de silice (95 g) en utilisant le solvant toluène/isopropanol (88/12) v/v. On recueille la deuxième fraction d'élution ainsi obtenue, qui est constituée par 200 mg du composé OL 261087 pur [Rf 0,30 par CCM sur plaque de silice; solvant: toluène/isopro- panol/diéthylamine, (87,5/10/2,5) v/v]. Le rendement global est de 1,1 g pour 1 kg de matière première végétale broyée et séchée de départ. EXEMPLES 2 Er 3 Obtention de deux isomères du produit de l'exemple I (Nos de Code: OL 291087 et OL 301087) La fraction B obtenue lors de la séparation de l'extrait éthéropétrolique suivant les modalités opératoires décrites à l'exemple 1 ci-dessus fournit une réaction positive au réactif de KEDDE. Cette fraction (0,8 g) est rechromatographiée sous pression sur colonne de silice (95 g) en utilisant cormmne éluant le mélange toluène/isopropanol/acétone (75/6/19) v/v. On obtient plusieurs fractions et recueille les fractions 3 et 5. La fraction 3 est constituée par 155 mg du composé OL 291087 pur [Rf 0,25 par, CCM sur plaque de silice; éluant: toluène/isopropanol/diéthylamine, (87,5/10/2,5) v/v]. Le rendement est de 0,8 g pour 1 kg de matière première végétale broyée et séchée de départ. La fraction 5 est constituée par 95 mg du composé OL 301087 pur [Rf 0,220,23 par CCM sur plaque de silice; éluant.: toluène/isopropanol/diéthylamine, (87,5/10/2,5) v/v]. Ce produit se distingue faiblement par CCM du composé OL 291087. Le rendement est de 0, 5 g pour 1 kg de matière première végétale broyée et séchée de départ. EXEMPLES 4 A 6 Obtention de trois autres isomères du produit de l'exemple 1 (Nos de Code: OL 161187, OL 171187 et OL 181187) Après l'extraction par l'éther de pétrole de 260 g de feuilles de Rollinia ulei (MAAS 5972) selon les modalités décrites à l'exemple 1, le marc est séché pendant deux mois sous hotte ventilée. Il est ensuite trituré pendant deux heures avec 30 ml d'ammoniaque diluée au demi. La poudre végétale ainsi alcalinisée est alors extraite par 2,5 litres de dichlorométhane dans un appareil de type Soxhlet. La solution dichlorométhylique est concentrée sous pression réduite dans un évaporateur rotatif jusqu'à occuper un volume de 1 litre. Le concentrat ainsi obtenu est lavé 3 fois par 200 ml d'acide HC1 IN, 2 fois par 200 ml d'eau distillée puis séché sur sulfate de sodium anhydre. Le concentrat lavé ainsi obtenu est débarassé d'une partie de ses pigments par agitation en présence de charbon végétal puis, après filtration sur célite, ledit chlorométhane est évaporé sous pression réduite au moyen d'un évaporateur rotatif. Le résidu (8,5 g) est remis en solution dans le mélange chloroforme/acétone/éthanol (95/4/1) v/v et chromatographié sous pression sur 190 g de silice (Kielselgel Merck 9385). L'élution est effectuée au moyen dudit mélange chloroforme/acétone/éthanol (95/4/1) v/v. Parmi les 16 fractions obtenues, trois présentent des réactions très positives au réactif de KEDDE, à savoir: les fractions 10, 11 et 13. La fraction 11 (1,5 g) est soumise à une nouvelle chromatographie sous pression sur colonne de silice (112 g) en utilisant le mélange toluène/isopropanol (90/10) v/v. Cette chromatographie permet d'obtenir successivement trois composés purs, à savoir les composés OL 161187 (40 mg), OL 171187 (405 mg) et respectivement OL 181187 (219 mg). Les Rf respectifs sont 0,22 0,20 et 0,15 par CCM sur plaque de silice avec commne éluant le mélange toluène/isopropanol/diéthylamine, (87,5/10/2,5) v/v. Les rendements obtenus pour 1 kg de matière première végétale broyée et séchée de départ sont les suivants: 0,15 g (OL 161187, Ex 4), 1,5 g (OL 171187, Ex 5) et 0,8 g (OL 181187, Ex 6). EXEMPLE 7 Obtention d'un autre isomère du produit de l'exemple 1 (No de Code: OL 301187) La fraction 13, obtenue lors de la chromatographie de l'extrait dichlorométhylique selon les modalités opératoires décrites aux exemples 4-6, est soumise à une nouvelle chromatographie sous pression sur colonne de silice (112 g) en utilisant comme éluant le mélange toluène/isopropanol (87,5/12,5) v/v. La deuxième fraction que l'on recueille est constituée par 78 mg du composé OL 301187 pur [Rf 0,25 par CCM sur plaque de silice; éluant: toluène/isopropanol/diéthylamine, (87, 5/10/2,5) v/v]. Le rendement global est de environ 0,3 g de OL 301187 pour 1 kg de matière première végétale broyée et séchée de départ. EEMPOE 8 Obtention de 2-[5-(2-hydroxyundécyl)-2-tétrahydro- furannyl]-5-[14-(5-méthyl-2-oxo-2,5-dihydro-3-furannyl)-1 12dihydroxytétradécyl]-tétrahydrofuranne (No de Code: OL 051187) La fraction 10, obtenue lors de la chromatographie de l'extrait dichlorométhylique selon les modlalités opératoires décrites aux exemples 4-6, est soumise à une nouvelle chromato- graphie sous pression sur colonne de silice (112 g) en utilisant cornroe êluant le mélange toluène/isopropanol (87,5/12,5) v/v. La deuxième fraction que l'on recueille est constituée par 76 mg du composé OL 051187 pur [Rf 0,3 par CCM sur plaque de silice; é1u- ant: toluène/isopropanol/diéthylamine, (87,5/10/2,5) v/v]. Le rendement global est de environ 0,3 g de OL 301187 pour 1 kg de matière première végétale broyée et séchée de départ. EIT-DE MRMACOGiOGIQUE On a résumé ci-après les résultats des essais qui ont été entrepris avec les composés selon l'invention. La toxicité a été évaluée par la mesure de la cytotoxicité et de la cytostase vis-à-vis de cellules KB selon une technique usuelle. L'activité antiparasitaire a été déterminée in vitro sur Leishmania donovani, promastigote selon un protocole opératoire décrit ci-après. ETUDE DE KrCITE E CYTOSTASE Souche testée On fait appel à des cellules épithéliales KB provenant d'un carcinome oral épidermolde humain obtenues selon H. EAGLE "Propagation in a fluid medium of a human epidermoid carcinoma strain KB (21811)", Proc. Soc. Exp. Biol. and Med., 89, pages 362- 364, (1955) et commercialisées par la Société dite EUROBIO. Milieu de culture: Le milieu de culture utilisé avait la composition suivante - milieu de culture 199............... 90 % en volume - milieu SVF.......................... 10 % en volume - tampon HEPES (acide N-2-hydroxyéthyl- pipérazine-N'-2-éthanesulfonique)... 2 ml pour 100 ml de milieu Mesure de l'effet cytostatique: L'ensemencement se fait en botte de 12 cupules contenant chacune 2 ml du milieu. Le produit à tester est mis en solution dans le diméthylsulfoxyde (DMSO) et dilué par du milieu de culture. La solution ainsi obtenue est ajoutée au milieu de culture pour obtenir des concentrations en produit à tester de 5, , 20, 30, 40, et 5OAm par ml de milieu. Les cellules sont ajoutées en méme temps que la solution du produit à tester. Le milieu ensemencé et ainsi traité est mis à l'étuve à 37 C pendant 3 jours. Après fixation des cellules par la méthode dite au cristal violet [selon la technique de R.J. GILLIER et al., "Determination of cell number in monolayer cultures", Analytical Biochemistry 159, pages 109-113, (1986) ]. La mesure de l'activité cytostatique est effectuée par lecture de la densité optique à 590 nm. La valeur obtenue est rapportée% à un témoin dépourvu de produit (densité optique de 100 %). Mesure de l'effet cytotoxique: Dans les conditions précédentes, la dose eytotoxique correspond à la dose létale pour 100 % des cellules (disparition complète du tapis cellulaire). Résultats: Les résultats obtenus sont consignés dans le tableau I ciaprès. lIDE ANTIPARAS RA Souche testée: On fait appel à une souche de Lieshmania donovani LRC L52 (de la collection OMS). Milieu de culture: 26 3 4123 Le milieu de culture utilisé avait la composition suivante - milieu EAGLE modifié DUBBELC0........ 45 % en volume - milieu RPMI 1640 contenant 25 % milli- molaire de tampon HEPES.............. 45 % en volume - sérum de veau foetal inactivé à la chaleur.......*................... 10 % en volume pénicilline à 5 LI/ml................ 5 g/ml - kanamycine................. ........ 5. g/ml..DTD: Mesure de l'effet anti-Leishmania: - L'ensemencement se fait dans des bottes de 24 cupules contenant chacune 500>1 de milieu. Le milieu est ensemencé par 500 000 promastigotes par cupule puis placé dans une étuve à C02 à 26 C pendant 3 à 4 heures. Le produit à tester est ajouté en solution dans le DMSO à des concentrations variables sous un volume de 25/I1 par cupule. Les bottes ensemencées et traitées par le produit sont laissées à l'étuve pendant 3 à 4 jours. La mesure de l'activité est effectuée par comptage des cellules à l'hémocytomètre, le nombre obtenu étant rapporté à un témoin dépourvu de produit (100 % de cellules, soit 0 % d'inhibition de croissance). Chaque manipulation est effectuée 2 fois. Résultats: Les résultats obtenus sont également consignés dans le tableau I ci-après o sont données les doses d'inhibition à 50 % (DI-50) et les doses d'inhibition maximale mesurées (DImax). Avec les acétogénines suivant l'invention, on a obtenu de bons résultats dans le traitement de parasitoses, notamment la bilharziose chez l'honmme et la leptospirose chez le chien. % 66 ap uoTlqiquT inod jw/3n/ OZ '= Ia () Z ú6 ap UoTiTqTquI nmod Im/2W OZ = Ia (]) Z 001 ap UOTiTqTqut miod jw/2n/ OZ = Ia a % 56 op uoTITqlquT mnod /[ f = IG (o) % 017 ap uoTITqF-T anod I/2/ S = Ia (P) % ú8 ap uoTiTqTtuT manod im/n' 5 = Ia (D) jw/ar/ ua (q) a saInTiaD ap TA-z-STA (B) 3fluDTJTu2Ts lumbTibsTiel TliDTiTuTUS sai iuamanbTslteBls 4 sa'oN (%Il) oz 0Z REVMIDICAIIONS 1. Utilisation d'une substance choisie parmi l'ensemble comprenant les (tétrahydrofurannyl)-lactones qui renferment dans leur formule (a) un groupe terminal I'-lactonique, éven- lement substitué, (b) un groupe alkylène divalent à chaîne hydrocarbonée linéaire en C9-C20 com- portant 1 à 6 groupes OH secondaires qui sont le cas échéant protégés sous la forme éther ou ester, d'une part, ou transformés sous la forme oxo, d'autre part, ledit groupe alkylène étant lié par l'une de ses valences audit grouper - lactonique, (c) au moins un groupe tétrahydrofurannyle divalent éventuellement substitué, ledit groupe tétrahydrofurannyle étant lié en position 2 de son cycle audit groupe alkylène, et (d) un groupe alkyle monovalent à chaîne hydrocarbonnée linéaire en C7-C17 pouvant comporter jusqu'à 6 groupes OH secondaires qui sont le cas échéant protégés sous la forme éther ou ester, d'une part, ou transformés sous la forme oxo, d'autre part, ledit groupe alkyle linéaire étant * lié par sa valence audit groupe tétrahy- drofurannyle-en position 5 du cycle dudit groupe tétrahydrofurannyle, le nombre to- tal de. groupes OH, le cas échéant protégés ou transformes en groupe oxo, contenus dans ledit groupe alkylène linéaire et ledit groupe alkyle linéaire étant infé- rieur ou égal à 8, pour la préparation d'un médicament antiparasitaire destiné à une utilisation en thérapeutique humaine et vétérinaire vis-àvis des parasitoses. 2. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée an ce que la substance (tétrahydrofurannyl)-lactone est extraite d'une plante d'une espèce appartenant au genre Rollinia ou à une espèce apparentée appartenant à la famille des annonacées. 3. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que la substance (tétrahydrofurannyl)-lactone est extraite d'une plante choisie parmi l'ensemble comprenant les Rollinia ulei, Rollinia microcarpa, Rollinia ruboides Rollinia papilionella, Rollinia sylvatica, Asimina triloba, Uvaria accuminata, Annona cherimolia et Annona densicoma. 4. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que la substance (tétrahydrofurannyl)-lactone est extraite de la variété Rollinia ulei (MAAS 5972). 5. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que la substance (tétrahydrofurannyl)-lactone est choisie parmi l'ensemble constitué par (i) les (tétrahydrofurannyl)-lactones répondant à la formule X F CH3(CZ 1 Z) L (I) XL 3 C 2)z - Z3 dans laquelle, les groupes CZ1Z2, qui peuvent Etre identiques ou différents, représentent chacun un groupe CH2, CHOH, CHOR ou CO, R est un groupe protecteur de la fonction OH, Z3 représente un groupe lactone choisi parmi les groupes 0- A et O A A A représente CH3 ou CZ1Z2CH3 (o CZ lZ2 est défini comme indiqué ci-dessus), Z représente H, OH, OR (o R est défini comme indiqué ci- dessus), ou un groupe alkyle en C1-C4, -- X' représente H, OH, OR (o R est défini comme indiqué ci-dessus), ou un groupe alkyle en C1-C4, x représente un nombre entier ayant pour valeur 6 à 16, le nombre total de groupes oxygénés CHOH, CHOR et CO contenus dans le reste (CZ1Z2)x étant un entier valant de 1 à 6, y représente un nombre entier ayant pour valeur 1 ou 2, z représente un nombre entier ayant pour valeur 9 à 20, le nombre total de groupes oxygénés CHOH, CHOR et CO contenus dans le reste (CZlZ2)z étant un nombre de O à 6, le nombre total de groupes CZ1Z2 contenant de l'oxygène sous la forme CHOH, CHOR et CO, eu égard aux valeurs de x, z et A, étant inférieur ou égal à 8; et, (ii) leurs stéréoisomères optiques et géométriques. 6. Utilisation suivant la revendication 5, caractérisée en ce que la substance (tétrahydrofurannyl)-lactone est un composé de formule I dans laquelle x vaut 11, y vaut 2, z vaut 13, et Z3 26 3 4 1 2 3 représente un groupe lactone éthylèniquement insaturé de formule o- CH 3 s o et qui comportent de 3 à 4 groupes CZ1Z2 oxygénés sous la forme CHOH, CHOR ou CO. 7. Utilisation suivant la revendication 5, caractérisée en ce que la substance antiparasitaire est choisie parmi l'ensemble constitué par (i) les (tétrahydrofurannyl)-lactones répondant à la formule 1-, OR2, i. R3 ? 5 3 O y i0 x _H2 O Z CH 2: > 23zt ^^C^ OR1 dans laquelle, R1, R2 et R4, identiques ou différents, représentent chacun H ou R; R3 représente H, OH ou OR; X, Y et Z, identiques ou différents, représentent chacun H, OH, OR ou un groupe alkyle en C1-C4; H R est un groupe protecteur de la fonction OH; et, (ii) leurs stéréoisomres optiques et géométriques. 8. Utilisation suivant la revendication 7, caractérisée en ce que la substance antiparasitaire est choisie parmi l'ensemble constitué par a) le 2-[5-(2-hydroxyundécyl)-2-tétrahydrofurannyl]-5- [14-(5-méthyl-2-oxo-2,5-dihydro-3-furannyl)-1, 5,12-trihydroxyté- tradécyl]-tétrahydrofuranne et ses stéréoisomeres optiques et géométriques; et, b) le 2-[ 5-(2-hydroxyundécyl)-2-tétrahydrofurannyl]-5- [14-(5-méthyl-2-oxo-2,5-dihydro-3-furannyl)-1,12-dihydroxyté- tradécyl]-tétrahydrofuranne et ses stéréoisomères optiques et géométriques. 9. Composition thérapeutique caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement acceptable, au moins un composé antiparasitaire choisi parmi- l'ensemble comprenant les (tétrahydrofurannyl)-lactones suivant l'une quelconque des revendications 1 et 2. 10. Procédé de préparation d'une acétogénine choisie parmi l'ensemble constitué par les (tétrahydrofurannyl)-lactones suivant l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'on soumet une plante d'une espèce appartenant au genre Rollinia ou a une espèce apparentée appartenant à la famille des anno- nacées, à une extraction avec au moins un solvant approprié de façon à retenir les fractions donnant une réaction positive avec le réactif de KEDDE, puis isole lesdites fractions. 11. Procédé suivant la revendication 10, pour la préparation d'un composé de formule Ia suivant la revendication 7 o R1 = R2 = R4 = H, R3 = H ou OH, X = Y = Z = H, ledit procédé étant caractérisé en ce que l'on soumet une plante d'une espèce appar- tenant au genre Rollinia ou d'une espèce apparentée de la famille des annonacées, préalablement broyée et séchée aux opérations suivantes: 1 ) extraction par un solvant choisi parmi l'ensemble comprenant les éthers, les hydrocarbures aliphatiques saturés, les hydrocarbures aliphatiques halogénés, les hydrocarbures alicycliques, les hydrocarbures aromati- ques, les hydrocarbures aromatiques halogénés, les alcools en C1-C5, les cétones en C3-C7, le tétrahydrofu- ranne, le diméthylformamide, les esters et leurs mélan- ges; 2 ) séparation du milieu d'extraction pour écarter l'insoluble et recueillir le milieu liquide d'extrac- tion; 3 ) concentration sous pression réduite du milieu liqui- de d'extraction ainsi obtenu; 4 ) lavage du concentrat ainsi obtenu avec un acide minéral dilué 0,5-1,5 M puis de l'eau distillée; 5 ) évaporation du solvant d'extraction contenu dans le concentrat ainsi lavé pour obtenir un résidu substan- tiellement dépourvu dudit solvant; 6 ) chromatographie dudit résidu ainsi obtenu avec des solvants de polarité croissante, sur colonne de silice, pour ne recueillir que les fractions d'éluat donnant une réaction positive au réactif de KEDDE; 7 ) purification desdites fractions donnant une réaction positive au réactif de KEDDE et séparation des composés de formule I o R1=R2=R4=H, R3=H ou OH, X=Y=Z=-H. 12. Procédé suivant la revendication 10, caractérisé en ce qu'il consiste à soumettre les feuilles broyées et séchées de la variété Rollinia ulei (MAAS 5972) aux opérations suivantes: ) extraction avec l'éther de pétrole à une température comprise entre 10 C et la température de reflux du milieu d'extraction du solvant d'extraction), à raison de 1 litre d'éther de pétrole pour 90 à 180 g de matière végétale broyée et séchée; ) filtration pour écarter l'insoluble et recueillir l'extrait éthéropétrolique ainsi obtenu; 3 ) concentration dudit extrait éthéropétrolique sous pression réduite de façon à obtenir 0,07 à 0,15 volume de concentrat à partir de 1 volume d'éther de pétrole utilisé au stade 10); ) lavage du concentrat ainsi obtenu avec de l'acide HC1 dilué puis de l'eau, à raison d'au moins deux fois 1 26 3 4123 volume d'acide HCl 0,5-1,5N puis d'au moins une fois 1 volume d'eau distillée pour 4 volumes de concentrat obtenu au stade 3 ); ) évaporation du concentrat ainsi lavé sous pression réduite de façon à éliminer pratiquement tout l'éther de pétrole contenu dans ledit concentrat lavé; 6 ) chromatographie sous pression du résidu d'évapo- ration ainsi obtenu avec des solvants de polarité croissante sur colonne de silice de granulométrie inférieure ou égale à 80,Jm, lesdits solvants comprenant successivement a) un mélange hexane/âcétate d'éthyle o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange hexane/acétate d'éthyle (60/40) v/v], b) l'acétate d'éthyle pur, c) un mélange acétate d'éthyle/méthanol o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange acétate d'éthyle/métha- nol (98/2) v/v], ou des solvants analogues, de façon à ne retenir que les fractions d'éluat donnant une réaction positive au réactif de KEDDE; 7 ) purification desdites fractions donnant une réaction positive au réactif de KEDDE par chromatographie sous pression sur colonne de silice de faible granulométrie avec comme éluant d1) un mélange toluène/isopropanol o les quantités respectives des deux composants sont en proportions variables [notamment le mélange toluène/isopropanol (88/12) v/v] pouvant conte- nir le cas échéant une faible quantité [qui est inférieure ou égale à 5 % en volume par rapport au volume dudit mélange] de diéthylamine, d2) un mélange chloroforme/acétone/éthanol o les quantités respectives des trois composants sont en proportion variables, ou d3) un mélange des solvants d1 et d2 en propor- tions variables, ou un éluant analogue, puis séparation par chromatographie sur couche mince de silice pour isoler au moins un des composés de formule Ia o Rl=R2=R4=H, R3=H ou OH, X=Y=Z=H. 13. Composé acétogénine caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par (i) les (tétrahydrofurannyl)-lactones répondant à la formule CR2 13 R3 O OR Cl J (la) Xs CF4,C0 x 2: -. CR dans laquelle, R1, R2 et R4, identiques ou différents représentent chacun H ou R; X, Y et Z, identiques ou différents, représentent chacun H, OH, OR ou un groupe alkyle en C1-C4; R3 représente OH ou OR, R3 pouvant représenter H quand un au moins des R1, R2, R4, X, Y et Z est différent de H; R est un groupe protecteur de la fonction OH; et, (ii) leurs stéréoisomères optiques et géométriques. 14. Composé acétogénine suivant la revendication 13, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par le 2-[5-(2-hydroxyundécyl)-2-tétrahydrofurannyll-5-[14-(5-méthyl- 2-oxo-2,5-dihydro-3-furannyl)-1,5,12-trihydroxyté- tradécyl]-tétrahydrofuranne et ses stéréoisomères optiques et géométriques.