Brevet FR2628741A1 — publié le 19890922

La présente invention se rapporte à de nouveaux 5-pyrimidinecarboxamides et leurs nucléosides. Plus particulièrement, l'invention se rapporte à de nouveaux dérivés de N-phényl-5-pyrimidinecarboxamides qui ont une activité sur la régression de- la leucémie ou des tumeurs, aux compositions pharmaceutiques contenant de tels dérivés en tant que leurs constituants thérapeutiquement efficaces chez les mammifères. Or, la préparation de composés 5-pyrimidinecarboxamides est connue, et plus particulièrement les composés de formule dans laquelle R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate choisi dans le groupe consistant en groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés désoxy et les groupes hydroxyalcoxyalcoyle et polyhydroxyalcoyle ayant de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et alcoyle et leurs sels d'addition d'acide acceptables en pharmacie. Ces composés sont dénommés dans la présente demande comme les composés "3,4-dihydro" ou "dihydro". Cette désignation fait référence à la saturation de la liaison entre la position 3 et la position 4 et à la double liaison entre la position 1 et la position 2 sur le noyau pyrimidine. Le procédé connu pour préparer les composés de formule (A) consiste généralement en une réaction d'une 4,6-dihydroxy-pyrimidine ou d'une 4,6-dihydroxy-2-alcoxypyrimidine appropriée avec de l'isocyanate de phényle ou un isocyanate de phényle substitué de manière appropriée en présence d'un solvant ou d'un milieu dispersant comme le diméthylsulfoxyde, la pyridine, le diméthylformamide, la N-méthylpyrrolidone, le diméthylacétamide, le sulfolane, l'oxyde de tétrahydrothiophène, l'acétonitrile ou une amine tertiaire comme la triéthylamine. Les proportions molaires de la pyrimidine à l'isocyanate de phényle comme réactif peuvent être comprises entre environ 2:1 et 1:2 et sont de préférence d'environ 1,1 1 à 1:1,1, des proportions stoechiométriques étant généralement suffisantes.La réaction peut être effectuée à des températures variant entre environ O et et-2000C, usuellement entre environ 240 et 16000 ; dans la plupart des cas, la réaction se passe assez bien à des températures comprises entre environ 80 et 1000C. La formation des 5-carboxamides est sensiblement complète dans des périodes de réaction variant entre environ une demi-heure et 6 heures et usuellement entre environ 2 et 4 heures. Alternativement, les 5-pyrimidinecarboxamides peuvent être préparés à partir des 2-thioxo-5-pyrimidinecarboxamides correspondants décrits dans la demande de brevet US en cours No. 699 776 déposée le 8 Février 1985 (5933 KON 1A), par réduction avec du nickel de Raney. Un tel genre de préparation connue conduit en réalité à un mélange de corps qui présente une activité sur la régression de la leucémie ou des tumeurs. L'invention a pour objet ces nouveaux corps présents dans le mélange précité, qui n'ont jamais été isolés; La présente invention a alors pour objet un nouveau composé N-phényl-5-pyrimidinecarboxamide de formule dans laquelle R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate choisi dans le groupe consistant en groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés désoxy et les groupes hydroxyalcoxyalcoyle et polyhydroxyalcoyle ayant de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et alcoyle ; et leurs sels d'addition d'acide acceptables en pharmacie. Ces composés sont dénommés "1,2,3,4-tétrahydro" ou "tétrahydro". La désignation "1,2,3,4-tétrahydro" fait référence à la saturation de chacune des liaisons entre les positions 1,2,3 et 4 sur le noyau pyrimidine. Les composés tétrahydro sont formés plus particulièrement par sur-réduction des composés dihydro au cours de leur formation par réduction au nickel de Raney. L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique utilisable pour induire la régression de la leucémie et/ou des tumeurs contenant des quantités efficaces d'un composé de formule (I) et d'un composé 3,4-dihydro correspondant de formule dans laquelle R1 est tel que défini ci-dessus, et leurs sels acceptables en pharmacie. Les composés tétrahydro de formule (I), et les mélanges contenant au moins environ 5% en mole des composés tétrahydro en mélange avec les composés dihydro correspondants de formule (A) sont actifs in vivo contre la leucémie implantée par voie intrapéritonéale L 1210 suivant un protocole d'essai 3LE31 du National Cancer Institut (NCI), décrit plus amplement dans ce qui suit. Les composés tétrahydro de la présente invention ne forment pas de sels d'addition. Les composés dihydro (qui peuvent être en mélange avec les composés tétrahydro), forment, quant à eux, des sels d'addition avec une variété de réactifs organiques ou inorganiques pharmaceutiquement acceptables, formant des sels. Les sels d'addition sont en général des solides cristallins qui sont relativement insolubles à la fois dans des solvants polaires comme l'eau, le méthanol et l'éthanol, et dans des solvants organiques non polaires comme le diéthyl éther, le benzène, le toluène et analogues. Ils sont un peu solubles dans des solvants aprotiques tels que le diméthylformamide et le diméthylsulfoxyde. Par ailleurs, lorsque R1 est un résidu de carbohydrate, il peut être furanosyle (comme ribofuranosyle), pyranosyle (comme arabinopyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle), leurs dérivés désoxy ou leurs analogues aliphatiques (comme des groupes hydroxyalcoxyalcoyle ou polyhydroxyalcoyle ayant de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et alcoyle, comme 2-hydroxyéthoxyméthyle ou 2,3-dihydroxypropyle). Tel qu'utilisé ici, le terme "résidu de carbohydrate" est destiné à indiquer les groupes cycliques et acycliques qui forment des pyrimidine nucléosides ou les pseudo nucléosides, comme les matières comprenant à la fois les groupes cycliques ou acycliques spécifiés précédemment. Les N-phényl-5-pyrimidinecarboxamides de l'invention peuvent exister sous la forme illustrée dans la formule (I) ci-dessus, ou sous chacune de ses formes tautomères. Pour la facilité de la compréhension, les composés de l'invention seront simplement illustrés ici sous la forme montrée dans la formule ci-dessus mais on comprendra qu'ils englobent les formes tautomères ou leurs mélanges tautomères. Les N-phényl-5-pyrimidecarboxamides peuvent être préparés à partir des N-phényl-2-thioxo-5-pyrimidecarboxamides correspondants décrits dans la demande de brevet en cours No. 699 776 déposée le 8 Février 1985 (5933 KON 1 A), par réduction avec du nickel de Raney. Les nouveaux composés de l'invention sont des agents cytotoxiques utiles pour induire la régression des malignités du sang comme la leucémie, ainsi que pour inhiber la croissance des tumeurs solides et non solides. On p-ut les utiliser seuls ou en combinaison avec d'autres agents chimiothérapeutiques actifs dans ce but. Tels qu'utilisés ici, les termes "régression" et "inhibition" comprennent l'arrêt ou le retard de la croissance de la malignité ou autre manifestation de la maladie, en comparaison au cours de la maladie en l'absence de traitement. L'administration des nouveaux N-phényl-5pyrimidinecarboxamides à des souris en quantités comprises entre environ 12 et 200 mg/kg, de préférence entre environ 25 et 100 mg/kg de poids corporel s'est révélée efficace pour induire la régression de la leucémie. La relation des doses pour les mammifères d'autres dimensions et espèces est décrite par Freireich, E.J. et autres, Quantitative Comparison of Toxicity of Anti-Cancer Agents in Mouse, Rat, Hamster, Dog, Monkey, and Man, Cancer Chemotherapy, Reg. 50, No. 4, 219-244, Mai 1966. Le niveau de la dose peut bien entendu être ajusté pour obtenir une réponse thérapeutique optimale. Par exemple, plusieurs doses divisées peuvent être administrées quotidiennement ou bien la dose peut être réduite proportionnellement, comme cela est indiqué par les exigences de la situation thérapeutique. Les composés actifs peuvent être administrés de manière appropriée par voie parentérale, intrapéritonéale, intraveineuse ou orale. Des solutions ou dispersions des composés actifs peuvent être préparées dans l'eau, en mélange approprié avec un agent tensio-actif tel que de l'hydroxypropylcellulose. Des dispersions peuvent également être préparées dans le glycérol, des polyéthylène glycols liquides et leurs mélanges et dans des huiles. En conditions ordinaires de stockage et d'utilisation, ces préparations contiennent un conservateur pour empêcher la croissance des microorganismes. Les formes pharmaceutiques appropriées à un usage injectable comprennent des solutions ou dispersions aqueuses stériles et des poudres stériles pour la préparation extemporanée de solutions ou dispersions injectables stériles. Pour de telles utilisations, la forme doit être stérile et doit être fluide au point nécessaire pour obtenir une utilisation facile à la seringue. Elle doit être stable aux conditions de fabrication et de stockage et doit être préservée contre l'action de contamination des micro-organismes comme les bactéries et les champignons. Le support peut être un solvant ou milieu de dispersion contenant, par exemple, de l'eau, de 1'méthanol, un polyol (par exemple glycérol, propylène glycol et polyéthylène glycol liquide, ou analogues) leurs mélanges appropriés et des huiles végétales. La fluidité appropriée peut être maintenue, par exemple, par utilisation d'un film comme de la-lécithine, par le maintien de la granulométrie requise dans le cas d'une dispersion et par l'utilisation d'agents tensio-actifs. La prévention de l'action des micro-organismes peut être assurée par divers agents antibactériens et fongicides, par exemple parabène chlorobutanol, phénol, acide sorbique, thimérosal ou analogue. Dans de nombreux cas, il peut être préférable d'inclure des agents isotoniques, par exemple du sucre ou du chlorure de sodium, dans la forme du dosage. Une absorption prolongée des formules injectables peut être produite par incorporation d'agents retardant l'absorption, par exemple du monostéarate d'aluminium et de la gélatine. Des solutions injectables stériles sont préparées en. incorporant le composé actif dans le solvant approprié en mélange avec divers des autres ingrédients énumérés ci-dessus, selon ce qui est requis, avec ensuite stérilisation filtrée. En général, les dispersions sont préparées en incorporant l'ingrédient actif stérilisé dans un véhicule stérile qui contient le milieu de dispersion et tout autre ingrédient requis. Si par ailleurs des poudres stériles sont utilisées pour préparer des solutions stériles injectables, il est préférable de soumettre une solution stérile filtrée des ingrédients souhaités à un séchage sous vide ou une lyophilisation, pour donner une poudre de l'ingrédient actif plus tout ingrédient supplémentaire souhaité. Tel qu'utilisé ici, "support ou excipient sensiblement non toxique acceptable en pharmacie" comprend des solvants, milieux de dispersion, revêtements ou films, agents bactéricides et -fongicides,. agents isotoniques et retardant l'absorption et analogues. L'utilisation de tels milieux et agents en tant que supports ou excipients pour des substances pharmaceutiquement actives est bien connue. A l'exception du fait qu'un milieu ou agent conventionnel peut être incompatible avec l'ingrédient actif ou bien toxique, son utilisation dans les formules thérapeutiques de l'invention est envisagée ici. Des ingrédients actifs supplémentaires peuvent également être incorporés dans les compositions thérapeutiques. I1 peut être avantageux de formuler les compositions de l'invention sous forme de dose unitaire pour la facilité de l'administration et l'uniformité du dosage. Une forme de dose unitaire, telle qu'utilisée ici, indique une unité physiquement distincte appropriée à une utilisation comme dose unitaire pour les sujets mammifères à traiter ; chaque unité contient une quantité prédéterminée de la matière active calculée pour produire l'effet thérapeutique souhaité, en association avec le support pharmaceutiquement acceptable requis.Les spécifications des formes de dose unitaire sont dictées par et dépendent directement de (a) les caractéristiques uniques de la matière active et l'effet thérapeutique particulier à obtenir et (b) les limites inhérentes à la technique du mélange d'une telle matière active pour le traitement d'une maladie chez des sujets vivants ayant une condition de maladie, sans effets secondaires cytotoxiques excessifs. La régression de la leucémie ou l'inhibition de la croissance des tumeurs peut être atteinte par exemple, par l'utilisation de doses quotidiennes pendant 5 à 10 jours ou plus, de N-phényl-5-pyrimidinecarboxamides selon l'invention. Des doses multiples ou des doses sur toute base périodique souhaitée, peuvent également être utilisées. L'ingrédient thérapeutiquement actif est ainsi administré en quantités suffisantes pour aider à la régression et à l'inhibition d'une plus ample croissance de la leucémie en l'absence d'effets secondaires excessifs néfastes d'une nature cytotoxique. L'invention sera décrite en plus de détail en se référant aux exemples spécifiques suivants illustrant la préparation et les essais de ces composés ainsi qu'aux figures dans lesquelles - la figure 1 représente un spectre RMN (résonance magnétique nucléaire) du mélange des composés obtenus selon l'exemple 1 décrit ci-dessous - la figure 2 représente un spectre de masse du mélange des composés obtenus selon l'exemple 1 décrit ci-dessous ; et - la figure 3 est un spectre RMN du composé pur 3,4-dihydro du témoin A ci-dessous. Dans les 5-pyrimidinecarboxamides selon la présente invention, le composé : N-phényl-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide et les mélanges contenant le composé précité et le composé 3,4-dihydro correspondant sont détaillés dans les exemples qui suivent. Exemple 1. Préparation du N-phényl-1,2,3,4-tétrahydro-6hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide, en mélange avec du N-phényl-3, 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine- carboxamide. A un mélange d'ammoniaque aqueuse concentrée (400 ml) avec de l'eau (400 ml), on a ajouté 13,2 g de N-phényl-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-2-thioxo-5pyrimidinecarboxamide comme composé de départ (préparé de la même manière que les composés analogues décrits à l'exemple 1 de la demande de brevet US en cours ci-dessus mentionné No. 699 776). A cette solution, on a ajouté une bouillie de nickel de Raney dans l'eau (50g). La suspension a été doucement soumise au reflux avec agitation pendant 4 heures. On l'a refroidie et les solides, consistant en produits et matières inorganiques, ont été traités avec de l'acide chlorhydrique dilué. Le mélange a été filtré et les solides ont été extraits avec une solution de soude à 2N puis filtrés.Le filtrat a alors été acidifié avec de l'acide chlorhydrique dilué, le précipité résultant redissous dans de l'ammoniaque aqueuse, purifié avec du charbon de bois activé et de la célite et reprécipité avec de l'acide dilué. Le solide a été recueilli, lavé avec de l'eau et séché. Cette préparation a fourni 5,8 g d'un produit qui a pour point de fusion : 200 à 2080C. Le produit montre un spectre RMN représenté à la figure 1. Son spectre de masse présente des pics dominants à 231 m/e et 233 m/e, indiquant le mélange des composés tétrahydro-et dihydro. Le produit obtenu contient 39% en poids de N-phényl-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5- pyrimidinecarboxamide et 61% en poids de N-phényl 3, 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide. Le composé 1,2,3,4-tétrahydro a été obtenu en mélange avec le composé correspondant 3,4-dihydro. Les propriétés du composé correspondant 3,4-dihydro sont connus. Dans ces conditions, il a été facile de déterniner les propriétés et la structure du nouveau composé à partir des analyses par spectre de masse et RMN réalisées sur le mélange. Par conséquent, le composé 1,2,3,4-tétrahydro a bien été déterminé à partir du mélange contenant le composé correspondant 3,4-dihydro. Témoin A. Préparation du N-phényl-3,4-dihydro-6-hydroxy 4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide. Du N-phényl-3 , 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5- pyrimidinecarboxamide purifié a été préparé par une oxydation contrôlée du composé 1,2,3,4-tétrahydro contenu dans le mélange de l'exemple 1 comme suit. Le mélange (2,8g) a été mis en suspension dans 25 ml d'acide acétique pur et on a ajouté 10 ml d'acide acétique dans de l'acide peracétique à 40%. La suspension a été chauffée doucement pendant 10 minutes. Une fois que la plupart des solides se soit dissous, le mélange de la réaction a été filtré lorsqu'il était chaud et la solution limpide au été refroidie toute la nuit. Un solide jaune s'est cristallisé. Les cristaux ont été récupérés, puis lavés successivement dans un peu d'acide acétique et d'éthanol puis séchés. (point d'ébullition : -2480C sous décomposition ; rendement 1,4, 512. Le spectre de résonance magnétique nucléaire RtN (DMSO) n'a montré aucun pic à 4,48 8 ; et les rapports des pics à 8,35 6 avec le multiplet aromatique étaient 1:5, indiquant l'absence du composé tétrahydro. Activité anti-leucémie des composés de l'exemple 1 sur la régression de la leucémie lymphoide L 1210. Des échantillons des composés d'essai de l'exemple 1 ont été testés in vivo selon le protocole d'essai du National Cancer Institut 3LE31 (NCI Protocol 1100, Cancer Chemotherapy Reports, Partie 3, Volume 3, No.2, Septembre 1972) pour déterminer les effets des composés sur la leucémie L 1210 implantée par voie intrapéritonéale (J. Natal. Cancer Inst. 13 (5) : 1328, 1953). Chaque essai a compris l'implantation des cellules de leucémie dans 6 souris DBA/2, un sexe par expérience, les souris males pesant un minimum de 18 grammes et les souris femelles pesant un minimum de 17 grammes, et tous les animaux d'essai étant dans une gamme de poids ayant des variations de 3 grammes.Les composés d'essai ont été administrés par injection intrapéritonéale, en doses de 0,1 mi de fluide ascitique dilué (105 cellules par dose), en commençant un jour après l'implantation de la tumeur et en continuant quotidiennement pendant 9 jours. Les animaux d'essai ont été pesés et les survivants enregistrés sur une base régulière pendant une période d'essai de 30 jours. Le rapport du temps de survie pour les animaux traités et témoins (T/C) a été déterminé en pourcentage. Les essais ont été effectués à diverses doses. On a pu déterminer statisquement dans le système d'essai 3LE31 qu'une valeur initiale de T/C au moins égale à 125% est nécessaire pour démontrer l'activité tandis qu'une valeur reproductible de T/C égale à ou supérieure à 125% garantit une plus ample étude. Une valeur reproductible de T/C de 150% ou plus est considérée comme étant une activité significative. Les résultats des tests sont résumés au tableau I ci-dessous. Dans le système d'essai 3LE31, les composés de l'exemple 1 ont montré une activité anti-leucémie (T/C% > 125 só) à une dose aussi basse que 50 mg/kg (exemple 1). Tableau I. Activité contre la leucémie L1210 implantée par voie intrapéritoné ale . Dose (mg/kg) T/C% T/C % (répété) 200 110 116 100 186 185 50 122 131 25 116 107 Au vu de ce qui précède, on peut voir que, selon la présente invention, une classe de nouveaux 5-pyrimidinecarboxamides est fournie, dont les éléments montrent une activité cytotoxique importante et induisent la régression et/ou l'inhibition de la croissance de la leucémie et des tumeurs chez les mammifères. Il est évident que divers changements peuvent être apportés au procédé de préparation et à l'utilisation des composés thérapeutiquement actifs de l'invention. 'REVENDICATIONS 1. N-phényl-5-pyrimidinecarboxamide, caractérisé en ce qu'il a pour formule dans laquelle R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate choisi dans le groupe consistant en groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés désoxy et les groupes hydroxyalcoyle et polyhydroxyalcoyle ayant de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et alcoyle ; et leurs sels d'addition d'acide acceptables en pharmacie. 2. N-phényl-5-pyrimidinecarboxamide selon la revendication 1,caractérisé en ce que c'est un N-phényl-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide. 3. Composition pharmaceutique utilisable pour induire la régression de la leucémie et/ou des tumeurs, caractérisée en ce qu'elle comprend des quantités efficaces notamment d'un N-phényl-5-pyrimidinecarboxamide selon la revendication 1. 4. Composition pharmaceutique selon la revendication 3, caractérisée en ce qu'elle comprend des quantités efficaces du N-phényl-1,2,3,4-tétrahydro 6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide et d'un N-phényl-3, 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo- 5-pyrimi dine- carboxamide.