Brevet FR2629818A1 — publié le 19891013

La présente invention concerne un procédé de préparation du taxol par hémisynthése a partir de la désacétyl-10 baccatine III et de la baccatine. Parmi les dérivés du taxane qui répondent & la formule générale RO O OH I (5COCH 6COC6H5 le taxol est celui pour lequel R représente un radical acétyle et R1 représente un radical -OCO-CHOH-CH(C6H5)-NHCOC6H5 (2'R,3'S), la désacétyl10 baccatine III est celui pour lequel R représente un atome d'hydrogène et R1 représente un radical hydroxy et la bacca- tine III est celui pour lequel R représente un radical acétyle et R représente un radical hydroxy. Alors que le taxol présente in vitro des propriétés remarquables comme promoteur de la polymérisation de la tubuline et comme inhibiteur de la dépolymérisation des tubules et, de ce fait, constitue un agent antileucémique et antitumoral particulièrement intéressant, la désacétyl10 baccatine III et la baccatine III ne manifestent pas ces activités. Le taxol et la baccatine III sont extraits difficilement et avec des rendements généralement faibles, de l'ordre de 100 mg/kg dans le cas du taxol, des écorces de tronc de différentes espèces de Taxus. La baccatine III se trouve en quantité plus importante dans le bois de ces différentes espces végétales. En revanche, la désacétyl-10 baccatine III est extraite beaucoup plus facilement et avec de meilleurs rendements (310 mg/kg de feuilles) à partir des feuilles d'ifs. Il est donc particulièrement intéressant de pouvoir disposer d'un procédé permettant de préparer le taxol à partir de la désacétyl-10 baccatine III qui est facilement accessible et dont l'obtention ne nécessite pas la destruction totale de l'espèce végétale. Dans la demande de brevet européen EP 253 739 a été décrite la préparation du taxol et du désacétyl10 taxol & partir d'un dérivé du taxane de formule générale: RO - OH COo--- (II) CH-OH C6H5 -CH-NH-COOC(CH3)3 OCCOC OCHH dont la préparation, & partir de la baccatine III ou de la désacé- tyl-10 baccatine III, qui fait l'objet de la demande de brevet européen EP 253 738, nécessite la séparation intermédiaire des diastéréoisomères. Il en résulte que la totalité de la baccatine III ou de la désacétyl-10 baccatine III mise en oeuvre ne peut pas conduire au taxol ayant la configuration convenable. Il a maintenant été trouvé, et c'est ce qui fait l'objet de la présente invention, que le taxol peut être obtenu avec de bons rendements par condensation d'un dérivé de la phényl-3 isosérine (2R,3S) de formule générale: O-R2 C6H5CONH COOH (III) 6H5 dans laquelle R2 représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy, sur un dérivé du taxane de formule générale: CH3COO g O-R3 HO---- (IV) OCOCH3 OCOC6H5 dans laquelle R3 représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy, suivie du remplacement des groupements protecteurs R2 et R par un atome d'hydrogène. Dans la formule générale (III), le radical R2 représente plus particulièrement un radical méthoxyméthyle, éthoxy-1 éthyle, benzyloxyméthyle, (P-triméthylsilyléthoxy) méthyle, tétrahydropyran- nyle ou trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyle. De préférence, le radical R2 est le radical éthoxy-1 éthyle. Dans la formule générale (IV), le radical R3 représente plus particulièrement un radical trialkylsilyle dont chaque partie alcoyle contient 1 à 3 atomes de carbone. De préférence, le radical R3 est le radical triméthylsilyle ou triéthylsilyle. Il est particu- lièrement avantageux d'utiliser un produit de formule générale (IV) dans laquelle R3 représente un radical triéthylsilyle. Généralement, l'estérification du dérivé du taxane de formule générale (IV) par l'acide de formule générale (III) est effectuée en présence d'un agent de condensation tel qu'un carbodi- imide comme le dicyclohexylcarbodiimide ou un carbonate réactif comme le dipyridyl-2 carbonate et d'un agent d'activation tel qu'une dialcoylaminopyridine comme la diméthylamino-4 pyridine en opérant dans un solvant aromatique tel que le benzène, le toluène, les xylènes, l'éthylbenzène, l'isopropylbenzène ou le chlorobenzène & une température comprise entre 60 et 90 C. Généralement, on utilise un excès d'acide de formule générale (III) et d'agent de condensation (dicyclohexylcarbodiimide, dipyridyl-2 carbonate), de préférence 6 à 10 moles par mole de dérivé du taxane de formule générale (IV) et au moins une mole, de préférence 2 à 4 moles, de diméthylamino-4 pyridine par mole de derive du taxane de formule generale (IV). L'ellmlnatlon des groupements protecteurs de l'ester (2'R, 3'2_ obtenuL. de formule genérale: CH 3COO 0 O -R C6H CONHN2Y 6COO__ __ C6H5 OH OCOCH OC OCH3 OCOC6H5 dans laquelle R2 et R3 sont définis comme précédemment, est généra- lement effectuée par traitement en milieu acide. Il est particulie- rement avantageux d'utiliser un acide tel que l'acide chlorhydrique en solution dans un alcool aliphatique contenant 1 à 3 atomes de carbone (methanol, éthanol, propanol, isopropanol) à une température voisine de 0 C. Le produit de formule générale (III) peut être obtenu par saponification d'un ester (2R, 3S) de formule générale: O-R C6HsCONH\fYR2 6 S /COOR4 6H5 dans laquelle R2 est défini comme précédemment et R4 représente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone et, de préférence, un radical méthyle, au moyen d'une base minérale telle qu'un hydro- xyde de métal alcalin (lithine, soude), un carbonate ou bicarbonate de métal alcalin (bicarbonate de sodium, carbonate de potassium) en milieu hydro-alcoolique tel qu'un mélange éthanol-eau ou méthanol- eau, en opérant à une température comprise-entre 10 et 40 C et de préférence voisine de 25 C. Le produit de formule générale (VI) peut être obtenu dans les conditions habituelles de préparation des éthers et, plus particulièrement selon les procédés décrits par J.N. Denis et coll., J. Org. Chem., 51, 46-50 (1986). 2629 8 18 Le produit de formule générale (IV) peut être obtenu par action d'un halogénotrialkylsilane sur la baccatine III ou sur la désacétyl-10 baccatine III suivie, dans ce dernier cas, de l'acéty- lation de la trialkylsilyl-7 désacétyl-10 baccatine III intermédiai- rement obtenue. Généralement, la réaction de l'halogénotrialkylsilane sur la baccatine III ou sur la désacétyl-10 baccatine III s'effectue à une température voisine de 20 C en opérant dans un solvant organique basique tel que la pyridine ou dans un solvant organique inerte tel que le chloroforme ou le dichloroéthane en présence d'une amine tertiaire telle que la triéthylazine, la base de Hunig ou la pyridine. L'acétylation de la trialkylsilyl-7 désacétyl-10 bacca- tine III est généralement effectuée au moyen de chlorure d'acétyle en opérant à une température voisine de 0 C dans un solvant orga- nique basique tel que la pyridine ou dans un solvant organique inerte tel que le chlorure de méthylène, le chloroforme ou le dichloroéthane en présence d'une amine tertiaire telle que la pyridine ou la base de Hunig. L'exemple suivant, donné à titre non limitatif, montre comment l'invention peut être mise en pratique. EXEMPLE Dans un ballon de 5 cm3 muni d'une agitation magnétique, on introduit, sous atmosphère d'argon, 42,8 mg (0,12 mmole) de N-benzoyl O-(éthoxy-1 éthyl) phényl-3 isosérine dans 1 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 25,9 mg (0,12 mole) de dipyri- dyl-2 carbonate. On laisse réagir pendant 4 & 5 minutes puis on ajoute, en une seule fois, 4,9 mg (0,04 mmole) de diméthylamino-4 pyridine et 14 mg (0,02 umole) de triéthylsilyl-7 baccatine III. On laisse la solution homogène et incolore pendant 3 à 4 minutes puis la chauffe pendant 10 heures à 72-74 C. Apres refroidissement, on dilue le mélange réactionnel par addition d'acétate d'éthyle. On lave la solution organique 3 fois avec une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, 2 fois & l'eau puis 2 fois avec une solution saturée de chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et élimina- tion des solvants sous pression réduite (20 mm de mercure; 2,7 kPa), le résidu obtenu est purifié par chromatographie analy- tique sur couche mince de silice en éluant avec un mélange éther- chlorure de méthylène (5-95 en volumes) en effectuant 4 passages. On obtient ainsi, avec un rendement de 40 %, 8,4 mg (0,0081 mmole) d'ester de formule générale (V) dans laquelle R2 représente un radical éthoxy-1 éthyle et R3 représente un radical triéthylsilyle, sous forme d'un mélange de 2 épimères dans le rapport 60/40, fondant à 169-173 C après recristallisation dans un mélange chlorure de méthylène-pentane. On récupère 5,8 mg de triéthylsilyl-7 baccatine III. L'ester obtenu présente les caractéristiques suivantes - pouvoir rotatoire b["] -= 33,7 (c = 0,41; méthanol) D - spectre infra-rouge (film) 3450, 3300, 3060, 3025, 2950, 2930, 2900, 2870, 1740, 1720, 1640, 1600, 1580, 1520, 1480, 1450, 1365, 1310, 1260, 1240, 1175, 1140, 1105, 1090, 1080, 1020, 980, 945, 820 et 710 cm - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz; chloroforme deutéré; déplacement chimique en ppm; constantes de couplage J en Hz): 0,53-0,62 (m, 6H); 0,93 (t, J = 8, 9H); 1,00 (t, J = 7, épimère minoritaire 3H); 1,04 (t, J = 7, épimère majoritaire 3H); 1,18 (épimère majoritaire) et 1,19 (épimère minoritaire) (2s, 3H); 1,22 (s, 3H); 1,20 et 1,29 (2d, J = 5,3, 3H); 1,70 (s, 3H); 1,85-1,95 (m, 1H); 2,00 et 2,01 (2d, J = 1,2, 3H); 2,05-2,20 (m, 1H); 2,16 (s, 3H); 2,26-2,40 (m, 1H); 2, 40 (épimère majoritaire) et 2,53 (épimère minoritaire) (2s, 3H); 2,46-2, 59 (m, 1H); 3,04-3,44 (m, 2H); 3,81 (épimère majoritaire) et 3,83 (épimère minoritaire) (2d, J = 7, 1H); 4,24 (épimère minoritaire) et 4,26 (épimère majori- taire) (2ABq, JA = 8,1, 6A-6B = 34, 2H); 4,47 (dd, J = 6,6 et ,6, 1H); 4, 64 (épimère minoritaire) et 4,72 (épimère majoiitaire) (2d, J = 2,7 et 3, 7, 1H); 4,54 (épimère minoritaire) et 4,80 (épimère majoritaire) (2q, J = 5,3, 1H); 4,94 (ps.t, J = 6,7 et 7,3, 1H); 5,68-5,76 (m, 2H); 6,24 (ps.t, J = 8 et 9, 1H); 6;44 (s, 1H); 7,08 (épimère minoritaire) et 7,18 (épimère majoritaire) (2d, J = 8,6 et 8,1, 1H); 7,28-7,53 (m, 10H); 7,57- 7,63 (m, 1H); 7,77-7,80 (m, 2H); 8,10-8,15 (m, 2H) - spectre de masse (FAB; matrice NBA): m/e = 1040 (MH+) - analyse élémentaire: C57H73015 SiN Calculé % C 65,81 H 7,07 N 1,35 Trouvé 65,57 7,34 1,62 Dans un ballon de 10 cm3 muni d'une agitation magnétique, on introduit, à 0 C sous atmosphère d'argon, 72 mg (0,009 mmole) de l'ester obtenu précédemment. On ajoute 3,6 cm3 d'une solution d'acide chlorhydrique dans l'éthanol à 0, 5 % préalablement refroidie à 0 C. On agite à 0 C pendant 30 heures. La réaction terminée, on dilue le mélange réactionnel par addition d'acétate d'éthyle à 0 C puis on ajoute de l'eau. Après décantation, la phase organique est lavée 5 fois à l'eau et 2 fois avec une solution saturée de chlorure de sodium puis elle est séchée sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration, les solvants sont éliminés sous pression réduite (20 mm de mercure; 2,6 kPa). Le résidu obtenu (72 mg) est purifié par chromatographie préparative sur couche mince de silice en éluant avec un mélange dichlorométhane-méthanol (90-10 en volumes). On obtient ainsi 54 mg (0,063 mmole) de taxol. Le rendement est de 91 %. Le taxol ainsi obtenu présente les caractéristiques suivantes: - pouvoir rotatoire ["] = _49,70 (c = 0,36; méthanol) D - spectre infra-rouge (film) : 3400, 3060, 3025, 3000, 2950, 2900, 1740, 1720, 1650, 1600, 1580, 1520, 1480, 1450, 1370, 1315, 1260, -1 1240, 1180, 1110, 1070, 1030, 980, 950, 905, 800 et 710 cm 1 - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz; chloroforme deutéré; déplacements chimiques en ppm; constantes de couplage en Hz) 1,15 (s, 3H) ; 1,24 (s, 3H); 1,69 (s, 3H); 1,80 (s, 3H); 1,83 (s, 1H); 1,83-1,93 (m, 1H); 2,24 (s, 3H); 2,28-2,39 (m, 2H); 2,39 (s, 3H); 2,47 (d, J = 4, 1H); 2,48-2,57 (m, 1H); 3,55 (d, J = 5, 1H); 3,80 (d, J = 7, 1H); 4,25 (ABq, JAB = 8,4, 6 A-6B = 32, 2H); 4,37-4,44 (m, 1H); 4,80 (dd, J = 2,5 et 5, 1H); 4,95 (d, J = 7,7, 1H); 5,68 (d, J = 7, 1H); 5,79 (dd, J = 2,5 et 8,8, 1H); 6,23 (t, J = 9, 1H); 6,27 (s, 1H); 6,98 (d, J = 8,8, 1H); 7,33- 7,54 (m, 10H); 7,59-7,64 (m, 1H); 7,72-7,75 (m, 2H); 8,.12-8,15 (m, 2H) spectre de résonance magnétique nucléaire du 13C (chloroforme deutéré): 9,57 (CH3); 14,83 (CH3); 20,83 (CH3); 21,62 (CH3); 22,85 (CH3); 26,69 (CH3); 35,65 (CH2); 35,73 (CH2); 43,20 (C); 45,86 (CH); ,05 (CH); 58,67 (C); 72,20 (CH); 72,41 (CH); 73,23 (CH); 75,00 (CH); 75,5& (CH); 76,58 (CH2); 79,10 (C); 81,21 (C); 84,42 (CH); 127,06 (CH); 128,38 (CH); 128,72 (CH); 129,04 (CH); 129,21 (C); 130,22 (CH); 131,97 (CH); 133,26 (C); 133,71 (CH); 138,03 (C); 141,98 (C); 167,04 (C); 170,37 (C); 171,22 (C); 172,73 (C); 203,62 (C) - spectre de masse (FAB; matrice NAB) m/e = 854 (MH+). La N-benzoyl O-(éthoxy-1 éthyl) phényl-3 isosérine (2R, 3S) peut être obtenue de la manière suivante: Dans un ballon de 100 cm3 muni d'une agitation magnétique contenant 30 cm3 de méthanol, on ajoute 380 mg d'ester *méthylique de la N-benzoyl 0-(éthoxy-1 éthyl) phényl-3 isosérine. 'A la solution obtenue, on ajoute 15 cm3 d'eau distillée et 414 mg (3 uoles) de carbonate de potassium solide. On agite pendant 40 heures & 25 C puis on évapore le méthanol sous pression réduite. La phase aqueuse résiduelle est extraite plusieurs fois & l'éther. La phase aqueuse est acidifiée par une solution aqueuse d'acide chlorhydrique & 10 S (p/v) puis elle est extraite au dichlorométhane. Les phases orga- niques réunies sont lavées plusieurs fois & l'eau puis avec une solution saturée de chlorure de sodium. Les phases organiques sont séchées sur sulfate de magnésium anhydre. Après filtration et élimination du solvant sous pression réduite, on obtient 254 mg (0,711 mmole) de N-benzoyl O(éthoxy-1 éthyl) phényl-3 isosérine dont les caractéristiques sont les suivantes: - point de fusion: 93-94 C - spectre infra-rouge (film): 3425, 3600-2100, 3060, 3025, 2950, 2925, 1740, 1640, 1600, 1580, 1520, 1480, 1440, 1300, 1140, 1075, -1 1020, 950, 920, 865, 800, 770 et 700 cm - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz; chloroforme deutéré; déplacements chimiques en ppm; constantes de couplage J en Hz): 0,90 et 1, 07 (2t, J = 7, 3H); 1,24 (d, J = 5,3, 3H); 2,88-2,99 et 3,24-3,45 (2m, 2H) ; 4,50 et 4,63 (2d, J = 2,4, 1H); 4,60 et 4,81 (2q, J = 5,3, 1H); 5,74-5, 80 (m, 1H); 7,26-7,52 (m,4H); 7,48-7,83 (m, 2H); 7,0-7,8 (s large, 1H). L'ester méthylique de la N-benzoyl O-(éthoxy-1 éthyl) phényl-3 isosérine (2R, 35) peut être préparé de la manière suivante: Dans un ballon de 25 cm3 muni d'une agitation magnétique, on introduit successivement 299 mg (1 mmole) d'ester méthylique de la N-benzoyl phényl-3 isosérine, 10 cm3 de dichlorométhane sec, ,1 mg (0,1 mmole) de p.toluénesulfonate de pyridinium et 956,4 pl (721 mg, 10 mmoles) d'éthylvinyléther. On agite le mélange réaction- nel pendant 3 heures à 25 C. La réaction terminée, on ajoute i goutte de pyridine puis on dilue le mélange réactionnel par addition de dichlorométhane. On lave la phase organique 2 fois à l'eau puis avec une solution saturée de chlorure de sodium et la sèche sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et élimination des solvants sous pression réduite, on obtient 380 mg d'ester méthylique de la N-benzoyl O-(éthoxy-1 éthyl) phényl-3 isosérine sous forme d'un mélange équimoléculaire de 2 épimères dont les caractéristiques sont les suivantes: - point de fusion: 124-125 C (après recristallisation dans un mélange dichlorométhanepentane) 23 - - pouvoir rotatoire: [o]D = -25,9o (c = 0,54; méthanol) - spectre infrarouge (film): 3350, 3060, 3025, 2980, 2940, 1740, 1635, 1600, 1580, 1530, 1490, 1435, 1380, 1340, 1320, 1275, 1242, 1198, 1175, 1150, 1080, 1030, 990, 955, 900, 800, 702 et 698 ca-1 1198, 1175, 1150, 1080, 1030, 990, 955, 900, 800, 702 et 698 cm - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz; chloroforme deutéré; déplacements chimiques en ppm; constantes de couplage J en Hz): 0,87 et 0, 98 (2t, J = 7, 3H); 1,13 et 1,22 (2d, J = 5,4, 3H); 2,82 et 2,89 et 3,223,36 (m, 2H); 3,755 et 3,76 (2s, 3H); 4,48 et 4,60 (2d, J = 2,4, 1H); 4, 50 et 4,78 (2q, J = 5,4, 1H); 5,64 et 5,68 (2dd, J = 2,4 et 8,2, 1H); 7,18 et 7,19 (2d, J = 8,2, 1H); 7,23- 7,55 (m, 8H); 7,80-7,84 (m, 2H) - spectre de masse (FAB; matrice NBA): m/e = 372 (MH+) - analyse élémentaire: C21H2505N 21 25 5 Calculé % C 67,90 H 6,78 N 3,77 Trouvé 67,98 6,94 3,75 L'ester méthylique de la N-benzoyl phényl-3 isosérine peut être préparé selon J.N. Denis et coll., J. Org. Chem., 51, 46-50 (1986). La triéthylsilyl-7 baccatine III peut être préparée selon l'une des manières suivantes: a) Dans un ballon de 100 cm3 muni d'une agitation magné- tique, on introduit, sous atmosphère d'argon, 544 mg (1 mmole) de désacétyl-10 baccatine III en solution dans 50 cm3 de pyridine anhydre. On ajoute ensuite 3,36 cm3 (3,014 g, 20 mmoles) de. chlorure de triéthylsilyle. On agite le mélange réactionnel homogêne et jaune pendant 24 heures à 0 C. On ajoute alors de l'acétate d'éthyle et de l'eau. Après décantation, la phase aqueuse est extraite avec de l'acétate d'éthyle. Les phases organiques réunies sont traitées par une solution aqueuse saturée de sulfate de cuivre jusqu'à élimina- tion totale de la pyridine. Les phases organiques sont lavées à l'eau puis avec une solution saturée de chlorure de sodium puis séchées sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et évapora- tion des solvants sous pression réduite, on obtient 2,73 g d'un produit qui est purifié sur une colonne de silice en éluant avec un mélange dichlorométhane-méthanol (99-1 en volumes). On obtient ainsi, avec un rendement de 78 %, 512 mg (0,778 mmole) de désacé- tyl-10 triéthylsilyl-7 baccatine III sous forme d'un solide blanc dont les caractéristiques sont les suivantes: - point de fusion: 256-257 C (apres recristallisation dans un mélange dichlorométhane-pentane) - pouvoir rotatoire [(]D = _23,6 (c = 0,41; méthanol) - spectre infra- rouge (film): 3450, 2950, 2875, 1735, 1705, 1600, 1580, 1450, 1380, 1275, 1242, 1180, 1140, 1115, 1100, 1075, 1060, -1 1030, 1020, 1000, 990, 950, 925, 885, 860, 822, 740 et 715 cm - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz chloroforme deutéré; déplacements chimiques en ppm; constantes de couplage J en Hz) 0, 48-0,70 (m, 6H); 0,94 (t, J = 8, 9H); 1,08 (s, 6H); 1,57 (s, 1H); 1,74 (s, 3H); 1,86-1,95 (m, 1H); 2,02 (d, J = 5, 1H); 2,09 (d, J = 1,1, 3H); 2,25- 2,35 (m, 2H); 2,28 (s, 3H); 2,42-2,52 (m, 1H); 3,95 (d, J = 7, 1H); 4,24 (ABq, JAB = 8,2, 6A-6 =42, 2H); 4,24 (d,J = 2, 1H); 4,41 (dd,J = 6,6 et 10,6, 1H); 4,85-4,90 (m, 1H); 4,95 (dd, J = 1,9 et 9,6, 1H); 5,17 (d, J = 2, 1H); 5,60 (d, J = 7, 1H); 7,44-7,50 (a, 2H); 7,57-7,62 (m, 1H); 8,08-8, 11 (m, 2H) - spectre de résonance magnétique nucléaire du 13C (chloroforme deutéré): 5,16 (CH2); 6,72 (CH3); 9,92 (CH3); 15,13 (CH3); 19,50 (CH3); 22,60 (CH3); 26,86 (CH3); 37,26 (CH2); 38,64 (CH2); 42,70 (C); 46,99 (CH); 57,96 (C); 67,95 (CH); 72,95 (CH); 74,68 (CH); 74,83 (CH); 76,57 (CH2); 78,78 (C); 80,75 (C); 84,25 (CH); 128,57 (CH); 129,44 (C); 130,07 (CH); 133,57 (CH); 135,20 (C); 141,78 (C); 167,04 (C); 170,76 (C); 210,31 (C) - spectre de masse (FAB; matrice NBA): m/e = 659 (MH+) - analyse élémentaire: C35H5001Si Calculé % C 63,80 H 7,65 Si 4,26 Trouvé 63,57 7, 72 4,04 Dans un ballon de 10 cm3 muni d'une agitation agnétique, on introduit, sous atmosphère d'argon, 43,9 mg (0,075 meole) de désacétyl-10 triéthylsilyl-7 baccatine III en solution dans 1,87 cm3 de pyridine anhydre. On refroidit & 0 C, puis on ajoute goutte & goutte, 26,6 4l (29, 4 mg; 0,375 mmole) de chlorure d'acétyle. On agite le mélange qui devient hétérogène pendant 20 heures à 0 C. On ajoute à nouveau 26,6 pl de chlorure d'acétyle puis agite pendant heures à 0 C. On ajoute de l'acétate d'éthyle puis de l'eau à 0 C. Après décantation, la phase aqueuse est extraite 2 fois avec de l'acétate d'éthyle. Les phases organiques réunies sont lavées avec une solution aqueuse saturée de sulfate de cuivre jusqu'à élimina- tion totale de la pyridine puis à l'eau puis avec une solution saturée de chlorure de sodium et enfin séchées sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et élimination des solvants sous pression réduite, le résidu obtenu (65 mg) est purifié par chromatographie sur une colonne de gel de silice en éluant avec un mélange dichloro- méthane-méthanol (99-1 en volumes). On obtient ainsi, avec un rendement de 86 %, 45 mg (0,0643 mmole) de triéthylsilyl-7 bacca- tine III dont les caractéristiques sont les suivantes: - point de fusion: 253-254 C (après recristallisation dans un mélange dichlorométhanepentane) - pouvoir rotatoire: [] = _48,6o (c = 0,36; méthanol) - spectre infra-rouge (film): 3500, 2950, 2875, 1720, 1600, 1580, 1450, 1370, 1270, 1240, 1180, 1140, 1110, 1100, 1075, 1050, 1020, -1 990, 970, 950, 820, 740 et 710 cm 1 - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz; chloroforme deutéré; déplacements chimiques en ppm; constantes de couplage J en Hz): 0,52-0,65 (m, 6H); 0,93 ((t, J = 8, 9H); 1,05 (s, 3H); 1,20 (s, 3H); 1,61 (s, 1H); 1,68 (s, 3H); 1,83-1,92 (m, 1H); 2,01 (d, J = , 1H); 2,17 (s, 3H); 2,19 (d, J = 1,1, 3H); 2,24-2, 28 (m, 2H); 2,28 (s, 3H); 2,41-2,58 (m, 1H); 3,88 (d, J = 7, 1H); 4,23 (ABq, JAB = 8,1, A -6B = 45, 2H); 4,45 (dd, J = 6,6 et 10,5, 1H); 4,83 (m, 1H); 4,96 (d, J = 9,6, 1H); 5,63 (d, J = 7, 1H); 6,46 (s, 1H) ; 7,45- 7, 50 (m, 2H); 7,57-7,63 (E, 1H); 8,09-8,12 (a, 2H) - spectre de résonance magnétique nucléaire du 13C (chloroforme deutéré): 5,28; 6,72; 9,93; 14, 93; 20,06; 20,93; 22,68 26,83; 37,24; 38,24; 42,79; 47,24; 58,67; 68,00; 72,35; 74,35; 75,77; 76,57; 78,73; 80,89; 84,22; 128,57; 129,38; 130,09; 132,78; 133,61; 143,83; 167,12; 169,33; 170,76 et 202,12 2 6 2 9818 - spectre de masse (FAB; matrice NBA): m/e = 701 (MH+) - analyse élémentaire: C37H52OllSi Calculé % C 63,40 N 7,48 Si 4,01 Trouvé 63,50 7, 59 3,94 b) Dans un ballon de 25 cm3 muni d'une agitation magné- tique, on introduit, sous atmosphère d'argon, 250 mg (0,4266 mmole) de baccatine III en solution dans 8,5 cm3 de pyridine anhydre. On ajoute ensuite 1,43 ca3 (1,286 g; 8,53 mmoles) de chlorure de triéthylsilyle. On agite pendant 28 heures à 20 C. On ajoute de l'acétate d'éthyle puis de l'eau. Après décantation, la phase aqueuse est extraite avec de l'acétate d'éthyle. Les phases orga- niques réunies sont lavées par une solution aqueuse saturée de sulfate de cuivre jusqu'à élimination totale de la pyridine, puis à l'eau et enfin avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Les phases organiques sont séchées sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et évaporation des solvants sous pression réduite, on obtient un résidu (1,35 g) qui est purifié par filtra- tion sur une colonne de gel de silice en éluant avec un mélange dichlorométhane-méthanol (99-1 en volumes). On obtient ainsi, avec un rendement de 83 %, 248 mg (0,354 mmole) de triéthylsilyl-7 baccatine III sous forme d'un-solide blanc fondant à 253-254 C après recristallisation dans un mélange dichlorométhane-pentane. REVENDICATIONS 1 - Procédé de préparation du taxol de formule: CH3CO0 0 OH COO___C> CH-OH C6Hs-CH-NH-COC6H5 OH OCOC6H5 caractérisé en ce que l'on estérifie un dérivé de la phényl-3 isosérine (2R, 3S) de formule générale: O-R2 CH CON COOH 6H5 dans laquelle R2 représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy, sur un dérivé du taxane de formule générale: CH3COO 0 O-R3 HO_ OC COCH OCOC6H5 dans laquelle R représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy, puis remplace les groupements protecteurs R2 et R3 par un atome d'hydrogène. 2 - Procédé selon la revendication 1 caractérisé en ce que le radical R est choisi parmi les radicaux méthoxyméthyle, éthoxy-1 éthyle, benzyloxyméthyle, (P-triméthylsilyléthoxy) méthyle, tétra- hydropyrannyle et trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyle et le radical R3 est choisi parmi les radicaux trialkylsilyle dont chaque partie alcoyle contient 1 à 3 atomes de carbone. 3 - Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2 caracté- risé en ce que l'estérification est effectuée en présence d'un agent de condensation et d'un agent d'activation. 4 - Procédé selon la revendication 3 caractérisé en ce que l'agent de condensation est choisi parmi les carbodiimides et les carbonates réactifs et l'agent d'activation est choisi parmi les dialcoylaminopyridines. 5 - Procédé selon la revendication 4 caractérisé en ce que l'agent de condensation est choisi parmi le dicyclohexylcarbodiimide et le dipyridyl-2 carbonate et l'agent d'activation est la diméthyl- amino-4 pyridine. 6 - Procédé selon l'une des revendications 1 & 5 caracté- risé en ce que l'on opère dans un solvant organique aromatique choisi parmi le benzène, le toluène, les xylènes, l'éthylbenzène, l'isopropylbenzène ou le chlorobenzène. 7 - Procédé selon l'une des revendications 1 & 6 caracté- risé en ce que l'on opère & une température comprise entre 60 et 90 C. 8 - Procédé selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'élimination des groupements protecteurs de l'ester intermédiaire (2'R, 3'S) obtenu de formule générale: CH'3COO4 O O-R 3 O-R CHSCONH\, 2 6 2 6H5 OCOCH 3 OCOC6H5 dans laquelle R2 et R3 sont définis comme dans la revendication 1 est effectuée en milieu acide. 9 - Procédé selon la revendication 8 caractérisé en ce que l'on utilise un acide minéral en solution dans un alcool aliphatique contenant 1 à 3 atomes de carbone. - Procédé selon la revendication 9 caractérisé en ce que l'acide minéral est l'acide chlorhydrique. 11 - Procédé selon l'une des revendications 8 à 10 caractérisé en ce que l'on opère à une température voisine de 0 C.