Brevet FR2620333A1 — publié le 19890317

La présente invention est relative à des liposo- mes, à leur procédé de préparation, ainsi qu'à l'application desdits liposomes, notamment comme vecteur de produits à action pharmacologique. Que ce soit en recherche fondamentale, en recher che clinique, en pharmacologie ou en cosmétologie, les liposo- mes offrent de nombreuses perspectives dont certaines sont susceptibles d'applications industrielles, telle que, notamment, leur utilisation en tant que vecteurs d'enzymes, de médicaments, d'hormones, d'acides nucléiques, etc... Deux types de liposomes sont à distinguer - les vésicules multilamellaires (MLV), constituées par une superposition concentrique de phases in- terfaciales en bicouches séparées entre elles par une phase polaire aqueuse, - les vésicules unilamellaires, constituées par une seule couche externe d'une phase interfacia- le en bicouche entourant une phase polaire aqueu se. Le diamètre de ces vésicules dépend de la méthode de préparation employée ; on distingue ainsi les petits liposomes unilamellaires (SUV) d'un diamètre inférieur à 1000.10- 8 cm ou 1000 et les grands liposomes unilamellaires (LUV), - 8 d'un diamètre supérieur à 5000.10 cm ou 5000 A. Les liposomes (ou vésicules unilamellaires ou multilamellaires en bicouche encapsulant une phase polaire aqueuse) peuvent être formés à partir d'une variété de lipides ou mélanges de lipides de la classe 4 rtels que phospholipides] associés ou non à des lipides de la classe 3 [tels que choles térol libre] ou 2. Les paramètres physico-chimiques des liposomes peuvent être déterminés par une nouvelle méthode de calcul déri vant du concept biodynamique de HAUTON et coll., qui respecte strictement le système d'unités C.G.S. et l'unité chimique masse/volume mol.cm- 3 (HAUTON, MARTIGNE, DOMINGO et LAFONT, (1987), Biochimie 69 ; sous press" & ). Cette méthode de calcul permet de définir dans le cas des lipsomes multilamellaires, le volume de la phase interfaciale en bicouche et le volume de la phase polaire aqueuse-encapsulée, et dans le cas des vésicules unilamellaires, de définir, en plus, le rayon mo yen de celles-ci. Différentes méthodes sont utilisées afin d'obtenir les vési cules multilanellaires ou unilanellaires. L'agitation mécanique de phospholipides hydratés produit ainsi des vésicules multila- mellaires (MLV) (OLSON et coll., Biochem., Biophys., Acta 557, 9 - 23) qui, par sonication ou par extrusion à l'aide d'une presse de FRENCH (BARENHOLTZ et coll. (1979), FEBS Lett. 99, 210-214 et HAMILTON et coll. (1980), J. Lip. Res. 21, 981 - 992) peuvent être transformés en petits liposomes unilamel- laires (SUV) ; cette catégorie de liposomes peut également être préparée par la technique d'injection d'éthanol (BATZI et KORN (1973), Biochem. Biophys., Acta 298, 1015 - 1019) ou par l'élimination de détergent par dialyse (KAGAWA et coll. (1971), J. Biol. Chem. 246, 5477 - 5487, HILS.MANN et coll. (1978), Biochem. Biophys., Acta 512, 147 - 155, ZUMBUEHL et coll. (1981), Biochem. Biophys., Acta 640, 252 - 262, RHODEN et coll. (1979), Biochemistry 18, 4173-4176), ou par filtra tion sur gel (BRUNNER et coll. (1976), Biochem. Biophys., Ac- ta 455, 322 - 331 et ENOCH et coll. (1979), Proc. Natl. Acad. Soi. USA 76, 145 - 149) ; les grands liposomes unilamellaires (LUV) peuvent être préparés soit par évaporation en phase re verse (SZAKA et coll.(1978), Proc. Natl. Acad. Soi. USA 75, 4194-4198 et SZAKA et coll. (1980), Biochem. Biophys., Acta 601, 559 - 571) ou par vaporisation d'éther (DEANER et coll. (1976), Biochem. Biophys., Acta 443, 629 - 634). Afin de sélectionner des populations de liposomes SUV de grandes tailles homogènes, on procède soit par ultracen trifugation (WATTS et coll. (1978), Biochemistry 17, 1792- 1801), soit par filtration sur gel (HUANG (1969), Biochemistry 9, 344 - 352). Pour obtenir des populations homogènes de lipo- somes MLV, LUV ou SUV, on peut utiliser la technique de filtra- tion sous pression d'azote à travers des membranes de polycar- bonate calibrées (OLSON et coll. (1979), Biochem. Biophys., Acta 557, 9 - 23 et SAZKA et col!. (1980), Biochem. Biophys., Acta 601, 559 - 571). Toutes ces techniques permettent d'obtenir des préparations de liposomes qui peuvent retenir encapsulés des Composés hydrosolubles, dont la quantité dépend du volume de l'espace aqueux encapsulé par mole de lipide et du pourcenta ge de composé ajouté. La stabilité des liposomes dépend de nombreux paramètres, tels que la stabilité chimique des lipides, le maintien de la structure des vésicules, la formation d'agrégats de vésicules et/ou de produits de fusion, et la rétention des contenus encapsulés dans différentes condi tions. Or, un obstacle important à l'utilisation des liposomes, tels que préparés par les techniques ci-dessus# est constitué par une instabilité de ces particules en fonc tion du temps, se traduisant par des agrégations, des fu sions, des ruptures et des dégradations enzymatiques souvent d'origine bactérienne. Il a été proposé dans la Demande de Brevet Euro- péen-No 0 162 724, afin d'éviter les problèmes d'agrégation et de fusion des liposomes, de stocker des liposomes dans une matrice de gel polymérique constituée par exemple de polysaccharides et de polypeptides. Dans ces conditions, la taille et les propriétés des liposomes ne sont pas modi fiées pendant le stockage, tant que le gel demeure à l'état solide. Lorsqu'on expose le gel à la température ambiante, ou à une température supérieure, le gel va fondre, les lipo- somes se retrouveront sous forme de suspension dans un mi lieu aqueux et pourront être ainsi utilisés ultérieurement de la même manière que des liposomes fraichement préparés. La présente invention s'est en conséquence donné pour but de pourvoir à un autre moyen de préparer des lipo- somes que celui proposé par la Demande de Brevet Européen N" 0 162 724, ce moyen permettant d'obtenir des liposomes stables dans le temps avec d'excellents rendements et dans des conditions économiques intéressantes. La nouvelle classification des lipides proposée #ar le Professeur HAUTON et coll. basée sur les coefficients de partage K D entre une phase polaire aqueuse et une phase interfaciale en monocouche ou en bicouche et Kc entre une pha se interfaciale et une phase hydrophobe ou apolaire, sera u tilisée (HAUTON et LAFONT, (1987), Biochimie, 69, 177 - 204). Les concentrations en mol.cm-3 d'une espèce moléculaire X par CM3 d'un système multiphase sont exprimées par M dans le système multiphase, par [XE] dans la phase polaire aqueuse, par XD ctans la phase interfaciale en monocouche ou en bicou- che, par XC dans la phase apolaire. Les coefficients de par tage KD et K C expriment respectivement les rapports XD/[XE] et XD/xc* Selon cette classification quantitative deslipides, on répertorie les classes suivantes ; KC 0 - Classe 1 KD/KC KC 1 - Classe 2 KD/KC CID KC > 1 - Classe 3 KD/KC KC et KD CD - Classe 4 RD/KC 0 SA KD/KC 0 - Classe 5 SB KD mesurable w/_ KD/KC 0 - Classe 6 1- KD 0 La classe 4 représente les espèces moléculaires clés des phases interfaciales en monocouche ou en bicouche dans les quelles peuvent être incorporées également des espèces Molé- culaires de la classe 5, 3 ou 2. Les lipides de la classe 5 sont des molécules amphiphiles solubles formant des micelles. Les espèces moléculaires de la classe 6 ne sont pas des lipi des, mais des molécules hydrosolubles. La présente invention a pour objet des liposomes du type comportant au moins une couche lipidique externe et au moins une phase polaire aqueuse interne, caractérisés en ce que leur(s) phase(s) polaire(s) aqueuse(s) interne(s) con tien(nen)t une substance gélifiée. Selon une disposition avantageuse de la présente invention, la substance gélifiée est un gel polymérique de polysaccharides et de polypeptides. Selon une autre disposition avantageuse de,la pré sente invention, la substance gélifiée est de la gélatine. Selon encore une autre disposition avantageuse de la présente invention, la substance gélifiée est l'agarose. Selon un mode de réalisation avantageux de la pré sente invention, la substance gélifiée est choisie parmi les substances gélifiantes dont le point de fusion est supérieur à la température corporelle, pour former des liposomes géli fiés stables dont la phase polaire aqueuse gélifiée est apte à être dégradée lentement dans l'organisme et à libérer de fa çon retardée la (les) substance (s) incorporée (s) dans ladite phase. Selon un autre mode de réalisation avantageux des liposomes objet de la présente invention, la phase molaire a queuse gélifiée contient du saccharose. Selon un mode de réalisation avantageux des liposo- mes conformes à la présente invention, ceux-ci sont constitués par une phase interfaciale en bicouche dans le cas de liposomes unilamellaires ou une pluralité de phases interfaciales en bi- couche superposées concentriquement, dans le cas de liposomes multilamellaires, et par une phase polaire aqueuse interne géli fiée. Selon une disposition avantageuse de ce mode de .réalisation, la ou les phase(s) interfaciale(s) contien(nen)t des produits liposolubles des classes 2 à 5 et/ou la-phase-po- laire aqueuse interne gélifiée contient des produits hydroso lubles des classes 5 et 6, les liposomes conformes à l'inven tion servant ainsi de vecteurs d'espèces moléculaires des classes 2 à 6, notamment de produits à action pharmacologique. La présente invention a également pour objet un-pro- cédé de préparation de liposomes par formation d'au moins une phase interfaciale en bicouche, constituée par des lipides de la classe 4 éventuellement associés à des lipides de la classe 2 et de la classe 3 et/ou des lipides de la classe 5, entou rant au moins une phase polaire aqueuse interne, lequel pro cédé est caractérisé en ce que les liposomes sont préparés en utilisant comme phase polaire aqueuse une solution aqueuse contenant une substance gélifiante à une concentration appro priée, à une température supérieure au point de fusion de la dite substance, en ce que les liposomes formés, en suspension dans la phase.polaire aqueuse contenant de la substance géli fiante, sont séparés de cette dernière par dilution de celle- ci pour diminuer la concentration de la subtance gélifiante et la rendre ingélifiable, et en ce que les liposomes ainsi séparés sont refroidis à une température inférieure au point de fusion de la substance gélifiante pour fournir des liposo- mes comportant une phase polaire aqueuse interne gélifiée stable, lesquels liposomes sont en suspension dans une phase polaire aqueuse à l'état liquide. Selon un mode de mise en oeuvre avantageux du procédé conforme à la présente invention, la substance gélifiante est avantageusement choisie parmi celles présen- tant un point de fusion voisin de 37*C. Selon un autre mode de mise en oeuvre avantageux du procédé conforme à l'invention, la substance gélifiante est avantageusement choisie parmi celles présentant un point de fusion supérieur à la température corporelle maxi mum. Selon encore un autre mode de mise en oeuvre avan tageux du procédé conforme à la présente invention, la con centration de la substance gélifiante est comprise entre 5 et 10 % en poids par rapport au volume de la phase aqueuse. Selon un mode de mise en oeuvre avantageuse du pro cédé conforme à la présente invention, on ajuste la densité de la solution polaire aqueuse contenant la substance géli fiante, en fonction de la densité que l'on cherche à conférer aux liposomes, à l'aide d'agents de densification appropriés. Selon une disposition avantageuse de ce mode de mise en oeuvre, la densité est ajustée par adjonction de saccharo se à une concentration appropriée, à ladite solution aqueuse. Selon un mode de mise en oeuvre avantageux du pro cédé conforme à la présente invention, ladite substance géli fiante est cI##isie àans le groupe qui comprend notamment lés gels polymériques de polysaccharides et de polypeptides, la gé- latine et l'agarose. Selon un autre mode de mise en oeuvre avantageux du procédé conforme à la présente invention, les liposomes sont préparés en formant des micelles mixtes de lipides appropriés dans une phase polaire aqueuse contenant 5 à 10 % en poids en viron de substance gélifiante, à une température de l'ordre de 45'C environ, supérieure au point de fusion de la substance gélifiante, puis en diluant ou en dialysant les micelles obte nues pour éliminer les lipides amphiphiles solubles des clas ses 5A et 5B, tout en maintenant la température à 45'C environ, pour transformer lesdites micelles en liposomes unilamellaires, en diluant ensuite la phase polaire aqueuse contenant les li- posomes en suspension, pour diminuer sa concentration en subz- tance gélifiante-et la réndre ingélifiable, puis en abaissant la température de la suspension de liposomes au-dessous du point de fusion de la substance gélifiante pour gélifier la phase aqueuse interne desdits liposomes. Selon une disposition avantageuse de ce mode de mise en oeuvre, les micelles mixtes sont constituées par des mé langes de sels biliaires et/Ou de lécithines'et/ou de choles terol. Selon une disposition avantageuse de ce mode de mise en oeuvre, la phase polaire aqueuse mise en oeuvre pour la préparation des micelles contient en outre du saccharose à une concentration appropriée, 1DOuvant aller iiismilà 15 %, et la dilution ou la dialyse subséquente est réalisée respecti vement par ou contre une solution aqueuse sans lipides et contenant la même concentration en saccharose que la phase polaire aqueuse susdite, les liposomes obtenus présentant une densité fonction de la concentration en saccharose mise en oeuvre. Selon une modalité avantageuse d-,# cette disposition; là phase aqueuse contenant des lipides comprend des mélanges de léci- thines contenant des sels biliaires et éventuellement du choleàtérol. Selon une autre . disposition avantageuse de ce mode de mise en oeuvre, la dilution de la phase polaire aqueuse contenant les liposomes en suspension est réalisée à l'aide d'une solution aqueuse dont la densité est ajustée, de préfé rence à l'aide de saccharose, pour être différente de celle des liposomes et faciliter de ce fait la séparation de ces der niers. . Selon un mode de mise en oeuvre avantageux du procé- dé conforme à la présente invention, des liposomes multila- mellaires sont préparés en substituant au processus de dilution ou de dialyse mis en oeuvre pour la préparation de liposomes unilamellairesyà partir de micelles mixtes, un processus de so- nication, en l'absence de lipides amphiphiles solubles 4e la classe 5A ou 5B, suivi d'une filtration sur gel permettant de séparer les vésicules multilamellaires des petits et grands liposomes unilamellaires au-dessus de la température de fusion de la substance gélifiante utilisée. Conformément à l'invention, la phase polaire aqueuse contenant une substance gélifiante et éventuellement un agent d'ajustement de la densité, contient en outre des produits hy- drosolubles des classes 5 et 6 à visées pharmacologiques et/ou la phase lipidique contient des produits liposolubles des clas ses 2 à 5 à visées pharmacologiques. L'invention sera mieux comprise à l'aide du com plément de description qui va suivre, qui se réfère à des -exemples de mise en oeuvre du procédé conforme à la présente invention. il doit être bien entendu toutefois, que ces exem ples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMPLE 1 Préparation de petits liposomes unilamellaires (SUV) Pour un volume donné d'une phase polaire aqueuse contenant de 5 à 15 _% en poids de gélatine, on prépare à une température de 45*C des micelles mixtes sels biliaires- lécithines. Ces micelles mixtes sont ensuite dialysées à 45*C afin d'abaisser la concentration des sels biliaires de la classe 5B, ce qui a pour résultat de transformer lesdites micelles en petits liposomes unilamellaires. Il est procédé à une dilution diminuant la concentration en gélatine de la phase polaire aqueuse contenant la suspension de liposomes, ce qui permet de rendre ladite phase polaire aqueuse ingéli- fiable. L'abaissement ultérieur de la température au-dessous du point de fusion de la gélatine sélectionnée transforme la phase aqueuse interne des vésicules unilamellaires isoléesi en un gel. La dialyse peut être remplacée d'emblée par une di lution par une solution aqueuse appropriée afin que la con- centration des sels biliaires de la classe 5B soit suffisam ment abaissée pour transformer les micelles mixtes en petites vésicules unilamellaires. EXEMPLE 2 Préparation de petis liposomes unilamellaires.(SUV) avec utilisation de sacchorose. On suit la procédure décrite dans l'Exemple pré cédent, mais l'on ajoute, en outre, du saccharose à la phase polaire aqueuse à une concentration pouvant aller jusqu'à 15 % ; on effectue la dialyse contre une solution contenant une même concentration en saccharose, ce qui permet d'obtenir des liposomes dont la phase aqueuse gélifiée a une densité qui est fonction de la concentration de saccharose utilisée. Suivant la densité de la solution aqueuse utilisée lors de la dilution finale, les liposomes sédimentent ou surnagent. En effet, si la dilution finale est faite avec une solution aqueuse de densité moindre que la solution aqueuse gélifiante mise en oeuvre, les liposomes sédimentent, alors que si la solution finale est faite avec une solution aqueuse de densi té supérieure à la solution aqueuse gélifiante mise en oeuvre, les liposomes surnagent. EXEMPLE 3 Préparation de grands liposomes unilamellaires.(LUV). Les LUV sont préparées selon des techniques connues en elles- mêmes décrites dans la Littérature dont il est fait mention dans le préambule de la présente demande de brevet, à ceci près que ces techniques sont modifiées conformément à la pré sente invention par l'addition d'une substance gélifiante à une concentration appropriée et en opérant au-dessus du point de pression de cette substance.. EXEMPLE 4 Préparation de vésicules multilamellaires (MLV). Les MLV sont préparées selon des techniques connues en elles- mêmes décrites dans la Littérature citée plus haut, à ceci près que ces techniques sont modifiées conformément à la pré- sente invention par l'introduction d'une substance géli fiante à une concentration appropriée et par le maintien de la température de préparation au-dessus du point de fu sion de ladite substance. EXEMPLE 5 Application des liposomes conformes à l'invention comme vecteurs de produits à action pharmacologique. En choisissant une substance gélifiante dont le point de fusion est supérieur à la température corporelle, par exemple en utilisant de la gélatine modifiée chimique ment pour porter son point de fusion, qui est normalement de 37*C, à 45*C, et en ajoutant en outre à la phase polaire un agent thérapeutique, on prépare des liposomes gélifiés stables dont la phase polaire aqueuse gélifiée sera lente ment dégradée par l'organisme, ce qui se traduit par une libération progressive, programmée des agents thérapeutiques incorporés dans la phase aqueuse gélifiée, et confère aux médicaments en question une action retard qui peut s'étendre sur des durées prolongées. EXEMPLE 6 Application des liposomes conformes à l'invention dans des processus de diagnostic._ Il est possible d'utiliser les liposomes stables conformes à la présente invention dans des processus de diag- nostict, tel que notamment la néphélométrie laser dans les technique d'immunoprécipitation en milieu liquide, dans les quelles les particules de latex actuellement utilisées pour ront être avantageusement remplacées par des particules plus petites constituées par des SUV gélifiés stables. Des ligands divers peuvent être associés à la phase interfaciale en bicouche pour favoriser la captation des liposomes par des sites de réception donnés. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'inven tion ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite ; elle en embrasse au con traire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. REVENDICATIONS 1.- Liposomes du type comportant au moins une couche lipidique externe et au moins une phase polaire aqueuse interne, caractérisés en ce que leur (s) phase (s) polaire (s) aqueuse (s) interne (s) contien (nen)t une sub stance gélifiée. 2.- Liposomes selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance gélifiée est un gel polymérique de polysaccharides et de polypeptides. 3.- Liposomes selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance gélifiée est de la gélatine. 4.- Liposomes selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance gélifiée est Ilagarose. 5.- Liposomes selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance gélifiée est choisie parmi les sub stances gélifiantes dont le point de fusion est supérieur à la température corporelle, pour former des liposomes géli fiés stables dont la phase polaire aqueuse gélifiée est apte à être dégradée lentement dans l'organisme et à libérer de façon retardée la (les) substance (s) incorporée (s) dans ladite phase. 6.- Liposomes selon l'une quelconque des revendica tions 1 à 5, caractérisés en ce que la phase polaire aqueuse gélifée contient du saccharose. 7.- Liposomes selon l'une quelconque des revendica tions 1 à 6, caractérisés en ce que ceux-ci sont constitués par une phase interfaciale en bicouche dans le cas de lipo- somes unilamellaires ou une pluralité de phases interfa- ciales en bicouche superposées concentriquement, dans le cas de liposomes multilamellaires, et par une phase polaire aqueuse interne gélifiée. 8.- Liposomes selon la revendication 7, caractérisés en ce que la ou les phase (s) interfaciale (s) contien- (ne)t des produits liposolubles des classes 2 à 5 et/ou la phase polaire aqueuse interne gélifiée contient des pro- duits hydrosolubles des classes 5 et 6 les liposomes ser vant ainsi de vecteurs d'espèces moléculaires des classes 2 à 6, notamment de produits à action pharmacologique. 9.- Procédé de préparation de liposomes par forma- 'tion d'au moins une phase interfaciale en bicouche, cons tituée par des lipides de la classe 4 éventuellement asso ciés à des lipides de la classe 2 et de la classe 3 et/ou des lipides de la classe 5 entourant au moins une phase polaire aqueuse interne, lequel procédé est caractérisé en ce que les liposomes sont préparés en utilisant comme phase polaire aqueuse une solution aqueuse contenant une substance gélifiante à une concentration appropriée, à une température supérieure au point de fusion de ladite sub stance, en ce que les liposomes formés, en suspension dans la phase polaire aqueuse contenant de la substance géli fiante, sont séparés de cette dernière par dilution de celle- ci pour diminuer la concentration de la substance gélifiante et la rendre ingélifiable, et en ce que les liposomes ainsi séparés sont refroidis à une température inférieure au point de fusion de la substance gélifiante pour fournir des lipo- somes comportant une phase polaire aqueuse interne gélifiée stable, lesquels liposomes sont en suspension dans une phase polaire aqueuse à l'état liquide. 10.- Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que la substance gélifiante est avantageusement choi sie parmi celles présentant un point de fusion voisin de 3711C. Il.- Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que la substance gélifiante est avantageusement choi sie parmi celles présentant un point de fusion supérieur à la température corporelle maximum. 12.- Procédé selon l'une quelconque des revendica tions 9 à 11, caractérisé en ce que la concentration de la substance gélifiante est comprise entre 5 et 10 % en poids par rapport au volume de la phase aqueuse. 13.- Procédé selon l'une quelconque des revendica tions 9 à 12 caractérisé en ce qu'on ajuste la densité de la solution polaire aqueuse contenant la substance géli fiante, en fonction de la densité que l'on cherche à con férer aux liposomes, à l'aide d'agents de densification appropriés. 14.- Procédé selon la revendication 13, caractéri sé en ce que la densité est ajustée par adjonction de sa ccharose à une concentration appropriée, à ladite solution aqueuse. 15.- Procédé slon l'une quelconque des revendica tions 9 à 14, caractérisé en ce que ladite substance géli fiante est choisie dans le groupe qui comprend notamment les gels polymériques de polysaccharides et de polypeptides, la gélatine et l'agarose. 16.- Procédé selon l'une quelconque des revendica tions 9 à 15, caractérisé en ce que les liposomes sont pré parés en formant des micelles mixtes de lipides appropriés dans une phase polaire aqueuse contenant 5 à 10 % en poids environ de substance gélifiante, à une température de l'or dre de 45*C environ, supérieure au point de fusion de la substance gélifiante, puis en diluant ou dialysant les mi celles obtenues, pour éliminer les lipides amphiphiles so lubles des classes 5A et 5B, tout en maintenant la tempéra ture à 450C environ, pour transformer lesdites micelles en petits liposomes unilamellaires, en diluant ensuite la phase polaire aqueuse contenant les liposomes en suspension, pour diminuer sa concentration en substance gélifiante et la rendre ingélifiable, puis en abaissant la température de la suspension de liposomes au-dessous du point de fusion de la substance gélifiante pour gélifier la phase aqueuse interne desdists liposomes. 17.- Procédé selon la revendication 16, caractér#;sé en ce que les micelles sont constituées par des mélanges de sels biliaires et/ou lécithines et/ou de cholestérol. 18.- Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce que la phase polaire aqueuse mise en oeuvre pour la préparation des micelles contient en outre du saccharose à une concentration appropriée, pouvant atteindre 15 % en poids, et la dilution ou la dialyse subséquente est réali sée par ou contre une solution aqueuse sans lipides et con tenant la même concentration en saccharose que la phase po laire aqueuse susdite, les liposomes obtenus présentant une densitti fonction de la concentration en saccharose mise en oeuvre. 19.- Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce que la phase aqueuse lipidique comprend des mé langes de lécithines et de sels biliaires et éven tuellement du cholestérol. 20.- Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce que la dilution de la phase polaire aqueuse contenant les liposomes en suspension est réalisée à l'aide d'une so lution aqueuse dont la densité est ajustée, de préférence à l'aide de saccharose, pour être différente de celle des liposomes et faciliter de ce fait la séparation de ces der nières. 21.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 9 à 15, caractérisé en ce que les liposomes multilamellaires sont préparés en substituant au processus de dilution ou de dialyse mis en oeuvre pour la préparation de liposomes uni- lamellaires à partir de micelles mixtes, un processus de so- nication, en l'absence de lipides amphiphiles solubles de la classe 5A ou 5B, suivi d'une filtration sur gel permettant de séparer les vésicules multilamellaires des petits et grands liposomes.unilamellaires, au-dessus de la température de fusion de la substance gélifiante utilisée. 22.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 9 à 21, caractérisé en ce que la phase polaire aqueuse con tenant une substance gélifiante et éventuellement un agent d'ajustement de la densité, contient en outre des produits hydrosolubles des classes 5 et 6 visées phamacologiques et/ ou la phase lipidique contient des produits liposolubles des classes 2 à 5 à visées pharmacologiques.