Brevet FR2614204A1 — publié le 19881028

Utilisation d'un extrait obtenu à partir d'une plante de La famille des résédacées, comme les résédas, pour la fabrication d'un médica- ment à activité inotrope et extrait particulier de réséda. L'invention concerne essentiellement l'utilisation d'un extrait obtenu à partir d'une plante de la famille des résédacées, comme les résédas, pour la fabrication d'un médicament à activité inotrope ainsi que des extraits particuliers de cette plante. On a déjà décrit dans le document FR-A-2 581 310 du déposant une composition thérapeutique comprenant un extrait de plante de la famille des résédacées, comme les résédas, pour la fabrication d'un médicament à activité anti-inflammatoire, antihistaminique, antihémorroidaire, antivariqueuse, anticoagulante, vasoconstricteur ou antisporiasique (voir les revendications et page 3, lignes 5 à 8). La concentration de l'extrait dans le produit fini a été décrite comme étant avantageusement comprise entre 10 et 25% en poids pour l'extrait obtenu par extraction aqueuse et de 2 à 12% pour un extrait obtenu à partir d'un solvant organique. L'administration pouvait être faite par une voie quelconque, qu'elle soit Locale, intradermique ou générale. Selon la présente invention, on a maintenant découvert de manière totalement surprenante et inattendue qu'un extrait obtenu à partir d'une plante de la famille des résédacées, comme les résédas, présentait une activité inotrope, de sorte que cet extrait pouvait être utilisé pour La fabrication d'un médicament à activité inotrope. En particulier, il a pu être prouvé qu'un tel extrait de plante de la famille des résédacées, comme les résédas, possède une activité inotrope positive sans activité chronotrope positive, ce qui permet de traiter efficacement l'insuffisance cardiaque. Tous les résédas sont utilisables, en particulier les Résédas Alba L., Balansae Müller, Inodora Reichb, Lutea L., Luteola L., Microcarpa Müller, Odorata L., Orienta lis (buller) Boiss., Phyteuma L., Tomentosa Boiss. On peut utiliser les plantes entières récoltées en fleurs ou en fruits ou des graines. On les sèche ensuite à l'abri de la lumière sous courant d'air. Il peut s'agir d'un extrait aqueux ou organique qui résulte de l'action d'un solvant aqueux ou organique, ou d'un mélange de tels solvants, sur un broyat de plantes. Il s'agit donc de l'extraction des produits solubles ou miscibles dans L'un ou l'autre de ces solvants ou dans les deux. L'extrait aqueux résulte avantageusement de l'épuisement par de l'eau d'un broyat de plantes ou de graines, puis de la récupération par un moyen approprié du soluté sec, comme la lyophilisation, ou la nébulisation auxquelles peut éventuellement être associée une préconcentration qui peut être obtenue par une osmose inverse. Dans le cas d'une lyophilisation ou nébulisation, il peut être avantageux d'utiliser un agent support physiologiquement inerte, par exemple à effet viscosifiant ou adsorbant, tel que l'hydroxy-propyl-méthylcellulose ou HPMC, ou l'acide silicique, une maltodextrine ou un dextran. On peut également procéder à une extraction par solvant organique et L'extrait obtenu peut ensuite être concentré pour éli- miner tout ou partie du solvant organique utilisé. On peut éventuellement terminer par un fractionnement chromatographique de cet extrait. L'extrait organique résulte avantageusement de l'épuise- ment par un solvant organique, tel que l'éther, l'hexane, le méthanol, l'éthanol ou du C02 liquide en phase supercritique, d'un broyat de plantes ou de graines, puis de la récupération par évaporation du soluté sec. Comme solvant, on préférera toutefois l'éther, L'hexane ou l'éther de pétrole et encore de préférence le methyl-tertiobutyl-éther, ou le C02 liquide en phase supercritique à l'état pur ou éventuellement avec des traces d'eau ou d'ethanol ou similaire. On peut également réaliser une extraction simultanee de ces plantes, par une action simultanée du solvant aqueux ou du sol-. vant organique. Le solvant organique est avantageusement choisi parmi le groupe consistant d'un alcool, tel que l'éthanol, d'une cetone, telle que L'acétone, d'un solvant des lipides, tel que L'hexane. Ce solvant peut également être utilisé dans le cas d'obtention d'un extrait organique. Certains extraits particuliers de plantes sont nouveau. Le déposant les revendique à titre de produits nouveaux, caracterisés par un procédé d'obtention, comme il résulte de la description précédente. IL s'agit en particulier de l'extrait des plantes suivantes : Reseda Balansae, Reseda Inodora, Reseda Microcarpa, Reseda Orientalis et Reseda Tomentosa. L'invention concerne également un procédé de fabrication d'un médicament à activité cardiotonique notamment inotrope posive, caractérisé en ce qu'il comprend le mélange d'un extrait de plante de la famille des résédacées avec un excipient ou support ph,rma- ceutiquement acceptable. De préférence, cet extrait de plante et tel que défini dans la description précédente et dans la description suivante. L'invention est maintenant illustrée par des exemples particuliers de réalisation non limitatifs. Obtention des extraits. EXEMPLE 1 : Obtention d'un extrait hydroalcoolique (1erse méthode) La paille séchée de Reseda Alba L. est mise à macérer à température ambiante dans 12 fois son poids d'alcool éthylique à 14 % volume chauffé à 500C et additionné de 2 g/l d'acide sorbique, puis périodiquement agitée dans le solvant durant 6 h. Après refroidissement à 300C, l'ensemble est mis en vidange : le marc imbibé est exprimé sur pressoir de type viticole. Les deux solutions rejointes sont filtrées sur tamis de 1 mm de vide de maille, puis clarifiées sur diatomées. Le filtrat obtenu est stérilisé par passage sur membrane de microfiltration à 0,2 p puis traité. par 20 g/l de maltodextrine de bas poids moléculaire moyen et la solution est enfin atomisée à 1750C. L'extrait pulvérulent obtenu est stocké en sacs étanches dans un lieu sec frais et sombre. EXEMPLE 2 : Obtention d'un extrait hydroalcoolique (2émue méthode) La paille séchée de Reseda Phyteuma L. est mouillée par 2,5 fois leur poids d'alcool éthylique à 95 % volume et laissée en macération à température ambiante pendant 15 h en présence de 5 g/l d'acide citrique. L'ensemble est ensuite repris par 10 fois Le poids des feuilles d'eau purifiée et agité par intermittance pendant 4 h à température de 400C. La séparation est effectuée selon l'exemple 1. Le filtrat clarifié est concentré au cinquième de son volume par osmose inverse à température stabilitée de 300C. Le concentrat est ensuite soumis à une lyophilisation, L'extrait lyophilisé est tamisé puis mis en sacs et stocké en lieu sec et frais. EXEMPLE 3 : Obtention d'un extrait aqueux La paille broyée et séchée de Reseda Lutea L. est mise à macérer pendant 2 h à température ambiante dans 5 fois son poids d'eau préalablement traitée par 2 g/l de métabisulfite de sodium. L'ensemble est ensuite percolé par 8 fois le poids de la paille de la même eau chauffée à 600C au débit de 3 fois le poids de feuilles par heure pendant 2 h. L'ensemble refroidi est ensuite passé sur pressoir, l'extrait obtenu est clarifié sur diatomées puis filtré sur membrane stérilisante. Le filtrat clarifié est traité par 1 g/l de métabisulfite de sodium puis par 200 g/l d'amidon de riz précuit sous agitation pendant 2 h. L'ensemble est séché sur sécheur à rouleaux chauffés par la vapeur à 5 bars et Le film obtenu réduit en poudre. Cette poudre ou farine est conditionnée en sacs polyéthylène puis stockée dans un lieu sec, frais et sombre. EXEMPLE 4 : Obtention d'un extrait organique La paille séchée de Reseda Luteola L., plante entière en fleurs et en graines, est épuisée par 20 fois son poids d'hexane à température ambiante, avec agitation mécanique durant 6 h. Le solvant séparé est concentré sous vide à 250C et le concentrat repris par une fois le poids de paille d'alcool à 50 % volume. La solution est clarifiée sur diatomées puis traitée comme dans l'exemple 1. EXEMPLE 5 : Obtention d'un extrait hydroalcoolique, aqueux et organique des plantes Reseda Balansae, Reseda Inodora, Reseda Microcarpa, Reseda Orientalis et Reseda Tomentosa. En procédant comme décrit respectivement à chacun des exemples 1 à 4, on obtient Les extraits individuels hydroalcooliques, aqueux et organiques des plantes résédas suivantes : Reseda Balansae, Reseda Inodora, Reseda Microcarpa, Reseda Orientalis et Reseda Tomentosa. Les extraits individuels peuvent être obtenus sous forme de poudre stockée en sacs étanches comme indiqué dans les exemples 1 à 4. EXEMPLE 6 : Spécialité de gélules L'extrait de L'exemple 2 est additionné de silice microcristalline à raison de 1 partie d'additif pour 100 d'extrait. Le mélange homogène est reparti au moyen d'un équipement garantissant L'absence de contamination en gélules de gélatine module 1 à raison de 200 mg par unité ; les gélules sont conditionnées sous blister en plaquettes de 10, regroupées en boites de deux. EXEMPLE 7 : Spécialité de comprimés L'extrait selon l'exemple 1 est additionné de 1% de silice microcristalline puis de 10% de cellulose microcristalline, et le tout est homogénéisé avec un poids équivalent d'un mélange de Lactose, de stéarate de magnésium et de carbonate de calcium composé dans les règles de l'art. L'ensemble obtenu est ensuite granulé en lit fluidisé puis comprimé. Les comprimés sont alors enrobés au moyen de gomme arabique, d'esters de cellulose et d'oxyde de titane. Les comprimés terminés sont conditionnés sous blister en plaquettes de 10,- regroupées par étuis de 2. Détermination expérimentale de l'activité inotrope. L'activité inotrope découverte selon la présente invention est mise en évidence par les essais pharmacologiques suivants : L'activité inotrope correspond au développement par le muscle cardiaque d'une certaine force à la suite de la contraction de ce dernier. La relation entre la force contractile et la vitesse initiale de raccourcissement s'inscrit sous la forme d'une courbe d'allure hyperbolique. L'administration de substances à effet inotrope positif a pour résultat de déplacer ladite courbe vers le haut, ainsi que vers la droite. En d'autres termes, cet effet ino trope se traduit par un renforcement de la contraction cardiaque, la fois dans sa force et sa vitesse. Les performances de la porpe cardiaque sont ainsi améliorées. L'activité inotrope cardiaque de L'atomisat de réséda a été recherchée par la méthode bien connue de l'homme de l'art des oreillettes isolées de rats. Pour ce faire, des rats des deux sexes d'un poids moyen de 300 g sont assommés, puis le coeur est rapidement prélevé et placé dans un bécher contenant de la solution oxygénée de CHENOWETH-KOELLE (SCK) de composition suivante (millimoles) : NaCl : 1,20; KCl : 5,63; CACA2 : 2,0; dextrose : 9,7; MEC:2 : 2,0; NaHC03 : 26,0. Les oreilletes droite et gauche sont détachées du coeur et placées dans une cuve à organe isolé contenant de la solution SCK oxygénée de façon permanente et maintenue à une température de 37 C à l'aide d'une pompe à circulation. La portion libre de l'oreillette est accrochée à une électrode de Plexiglas, alors que l'autre extrémité (détachée du coeur) est pincée par un clips qui est ensuite connecté à un enregistreur isométrique. L'oreillette droite bat spontanément et permet de suivre l'effet chronotrope par enregistrement du rythme. L'oreillette gauche, entraînée électriquement à la fréquence de 1,6 Hz, avec une duree de l'impulsion de 5 ms et un voltage double du seuil à l'aide d'un stimulateur Grass, permet de mesurer l'effet inotrope par éva Luation des variations de tensions. Les réponses chronotrope et inotrope sont enregistrées sur Physiograph (Narco-bio Systems). La tension de base des oreillettes est ajustée à 1 g. Les oreillettes ainsi disposées ne sont utilisées qu'après 45 min d'attente. Pendant cette période, le liquide du bain est remplacé toutes les 15 min. On utilise l'atomisat de Reseda Alba L. de l'exemple 1 que l'on rajoute directement dans la cuve à organe isolé, sous la forme d'une solution concentrée contenant diverses concentrations d'atomisat par millilitre de solution en partant de 0, jusqu'à 2,70 mg d'atomisat par millilitre de la solution SCK, dans laquelle beigne l'organe isolé. Après obtention de la tension maxima le induite par l'administration d'une première dose d'atomisat, par exemple 0,25 mg d'atomisat par millilitre, la dose suivante est rajoutée sans lavage et ainsi de suite, de manière à obtenir successivement 0,5 mg/ml, etc. On peut ainsi tracer une courbe exprimant l'activité inotrope ou chronotrope de l'extrait, telle que représentée à la figure 1 annexée. On observera que l'activité chronotrope est mesurée sur l'oreillette droite et l'activité inotrope sur l'oreillette gauche. Les valeurs basales sont respectivement 192 battements/min (oreil- lette droite) et 0,5 g (oreillette gauche). On observera qu'ainsi les concentrations indiquées en abscisse à la figure 1 correspondent aux concentrations cumulées présentes dans la cuve. Les résultats sont exprimés en pourcentages de variation d'effet par rapport aux valeurs basa les mesurées avant toute ad;- nistration. Les résultats tels qu'ils ressortent des figures indiquent que les extraits de réséda possèdent une activité inotrope positive sans activité chronotrope positive. La valeur moyenne, sur trois expériences, de l'augmentation de tension induite par 1,5 mg d'atomisat par millilitre (c'est-à-dire l'équivalence de 7,5 mg de plante/ml) est de 85 + 5%. Dans des conditions similaires, L'isoprénaline (10-6 M) induit une augmentation de tension de 200%, mais également une augmentation de rythme de 100% environ. Les essais effectués avec les autres extraits de réséda objet des exemples 1 à 7 aboutissent à des résultats similaires. On peut donc conclure que les extraits de réséda pos redent une activité inotrope positive sans activité chronotrope positive et possèdent par conséquent des propriétés pharmacologiques potentiellement très intéressantes dans le cadre du traitement de l'insuffisance cardiaque. Habituellement, la dose d'utilisation en thérapeutique animale et humaine sera comprise entre environ 5 et environ 40 mg de plante/kg de poids du corps par jour, de préférence entre environ 10 et environ 25 mg de plante/kg de poids du corps par jour. On peut formuler les compositions pharmaceutiques sous forme de dosage administrable par voie générale, en particulier orale. On peut utiliser des doses unitaires de 200 mg d'extrait conditionné en gélules selon l'exemple 6. La posologie habituelle sera de deux gélules par jour. La concentration de l'extrait peut être de 30 à 60% en poids pour les extraits aqueux, organique ou hydro-organique, par rapport au poids total de la composition pharmaceutique. L'invention comprend donc tous les moyens constituants des équivalents techniques des moyens décrits, ainsi que leurs diverses combinaisons. REVENDICATIONS 1 - Utilisation d'un extrait de plante de la famille des résédacées, comme les résédas, pour la fabrication d'un médicament a activité inotrope. 2 - Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que la plante de la famille des résédacées précitée est un réséda choisi parmi les Resedas Galba L., Balansae Müller, Inodora Reichb, Lutea L., Luteola L., Microcarpa Müller, Odorata L., Orientais (Müller) Boiss., Phyteuma L., Tomentosa Boiss. 3 - Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce qu'il s'agit d'un extrait de plante entière récoltée en fleurs ou en fruits, ou un extrait de graines. 4 - Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce qu'il s'agit d'un extrait aqueux ou d'un extrait organique, ou d'un extrait simultané des deux. 5 - Utilisation selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un extrait hydro-organique de la plante précitée, le solvant étant avantageusement choisi parmi le groupe consistant d'un alcool, tel que l'éthanol, d'une cétone, telle que l'acétone, d'un solvant des lipides, tel que l'hexane. 6 - Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que la composition pharmaceutique est préparée sous une forme de dosage administrable par voie générale, en partie culier orale. 7 - Utilisation selon L'une des revendicaitons 1 à 6, caractérisée en ce que la concentration de l'extrait est de 30 à 60% en poids, par rapport au poids total de la composition pharmaceutique. 8 - Extrait aqueux, organique ou hydro-organique d'une plante de la famille des résédacées, comme les résédas, choisie notamment parmi les Reseda Balansae MOller, Inodora Reichb, Microcarpa Buller, Orientalis (Müller) Boiss., Tomentosa Boiss. 9 - Procédé de fabrication d'un médicament à activité cardiotonique notamment inotrope positive, caractérisé en ce qu'il comprend le mélange d'un extrait de plante de la famille des résédacées, avec un excipient ou un support pharmaceutiquement acceptable. 10 - Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'extrait des plantes précitées est tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 8.