Brevet FR2622889A1 — publié le 19890512

NOUVEAUX DERIVES DE DEMETHOXY-4 ANTHRACYCLINE. La présente invention porte sur de nouveaux dérivés d'anthracycline, sur des procédés de préparation ce ces dérivés, et sur des compositions pharmaceutiques qui les contiennent. Conformément à la présente invention, il est proposé des anthracycline glycosides qui sont représentés par la formule générale O HO COCH R X OH O HO 0 (I) Me I NH2 NH2 o R. représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy, et leurs sels pharmaceutiquement acceptables d'addition avec les acides. Un sel préféré est le chlorhydrate. Les composés de la présente invention sont des dérivés de la déméthoxy-4 daunorubicine (idarubicine) qui est un antibiotique antitumoral connu. Les anthracycline glycosides de formule (I) qui sont préférés sont la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' daunorubicine (I: Ri = H) et la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' doxorubicine (I-B> Conformément à la présente invention, il est également proposé un procédé de préparation des anthracycline glycosides de formule (I) ou de leurs sels pharmaceutiquement acceptables d'addition avec les acides, ce procédé comprenant': (i) la réaction de la déméthoxy-4 deunomycinone, qui est un aElycone connu de l'anthracycline idarubicine antitumoraie, avec le chlorure de tétradésoxv-2,3,4,6 ditrifluoroacétamido-3, 4 L-lyxohexapyranosyle représenté par la formule (II): Cl Me h i (II>; NHCOCF3 NHCOCF3 O HO 1 5 COCH2R1 OH i 5! 0 HO, O0 (III) Me O INHR2 - NHR2 o - R1 représente hydrogène; et - R2 représente CF3CO-, afin d'obtenir un glycoside de formule (I> o R1 représente hydrogène; (iii) si on le désire,la converasion dudit glycoside de formule o R1 représente un groupe hydroxy; et (V) si on le désire,la conversion dudit glycoside de formule (I), o R représente un groupe hydroxy, en l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables d'addition avec un acide. Le chlorure de tétradésoxy-2,3,4,6 ditrifluoro- acétamido-3,4 L-lvxo-hexopyranosyle de formule de tétradésoxy-2,3,4,6 ditrifluoracétamido-3,4 L-lyxo- hexopyranosyle, en présence d'un tamis moléculaire et de trifluorométhane sulfonate d'argent. Après l'étape (i), mais avant l'étape (ii). on peut soumettre le composé de formule (II) à une purification chromatographicue sur une colonne de gel de silice, en utilisant comme éluant un mélange de dichlorure de méthylène et d'acétone (97:3 v/v). On peut conduire l'étepe (ii> en soumettant le composé de formule (III> à une hydrolyse alcaline avec de l'hydroxyde de sodium aqueux 0,2 N, à la température ambiante, sous une atmosphère d'azote et pendant 1,5 heure. On peut conduire l'étape (iii> en traitant la déméthoxy-4 amino-4' désoxy4' daunorubicine par du chlorure d'hydrogène méthanolioue, et en isolant la déméthoxy-4 amino-4' dêsoxy-4' daunorubicine sous forme de son chlorhydrate. L'étape (iv> peut être effectuée par bromation et hydrolyse modérée come décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique US-A-4 112 076. Le dérivé bromé en position 14 peut être hydrolysé par traitement par du formiate de sodium aqueux à la température ambiante. La déméthoxy- 4 amino-4' désoxy-4' doxorubicine résultante est isolée de façon typique sous forme de son chlorhydrate à l'étape (v) par traitement par du chlorure d'hydrogène méthanolique. La présente invention propose également des compositions pharmaceutiques comprenant un anthracycline glycoside de formule ment acceptables d'addition avec un acide, conjointement avec un support ou diluant phermaceutiquement acceptable. Des supports et diluants classiques peuvent être utilisés. La composition peut être formulée et administrée d'une manière classique. Les composés de formule (I) et leurs sels sont utiles dans des méthodes de traitement du corps humain ou animal par thérapie. Ils sont utiles comme agents antitumoraux par administation à un patient humain d'une quantité thérapeutiquement efficace pour un patient. Une quantité suffisante pour inhiber la croissance d'une tumeur peut être administrée. La tumeur peut être un adéno- carcinome ou côlon ou une tumeur de leucémie de Gross. EXEM='Er- 1 Préearation de la déméthoxv-4 amino-4' désoxy-4' daunrorubicine (I-A) Le couplage de la déméthoxy-4 daunomycinone (0.O,5F g, 1,5 mmole) dans du dichlorure de méthylène sec (75 m._ avec du chlorure de tétradésoxy-2,3, 4, 6 ditrifluoroacétamido-3,4 L-lyxo- hexopyranosyle ((IV>, 0,43 g, 1,2 mmole) en présence d'un tamis moléculaire (0,4 nm (4A) - Merck, 4 y) a été effectué à i'aiae de trifluorométhane sulforiate d'argent (0,31 g dans 10 ml d'éthe:- diéthylioue sec) comme catalyseur. Au bout de minutes d'agitation énergique à la température ambiante, le mélange réactionnel a été traité par une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium, et la phase organique a été séparée, et on l'a fait évaporer sous vide. La purification chromatographique du résidu brut sur une colonne de gel de silice, à l'aide d'un mélange à 97:3 en volume dichlorure de méthylène: acétone comme éluant, a donné la déméthoxy-4 trifluoroacétamido-4' désoxy-4' N-trifluoroacétyldaunorubicine ((III), 0, 56 g, 68%): p.f.: 163-164C 6 Le spectre de résonance magnétique du proton (RMT' (200 KHz, CDC13) a montré des absorptions à: 1,24 (d, 3=6,6 Hz, 3H, CH3-s'), 2,42 (s, 3H, COCH3), 4,33 (m, 2H, H-3', H-4'), 4,49 13,63 (s, 1H, OH-6). 0.5 g (0,73 mmole) de (III) dans 45 ml d'hydroxyde de sodium aqueux 0.2 N a été agité sous azote à la température ambiante. Au bout de 1,5 heure, le mélange réactionnel a été acidifié (pH 2,5) par de l'acide chlorhydrique aqueux, puis il a été extrait par du dichlorure de méthylène, afin d'éliminer des impuretés. La phase aqueuse, qui a été ajustée à pH 8, 1, a été extraite par du dichlorure de méthylène, et l'extrait a été lavé avec de l'eau, séché sur sulfate de sodium anhydre et concentré jusqu'à faible volume. L'acidification (pH 4,5) par du chlorure d'hydrogène méthanolique, suivie par l'addition d'éther diéthylique, ont donné la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' daunorubicine ( de son chlorhydrate; p.f.: 155-156'C (avec décomposition>. EXEMPLE 2 Préparation de la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' doxorubicine (I-B) 0,2 g de (I-A) dissous dans un mélange de 2,7 ml de méthanol anhydre et 7,5 ml de dioxanne, a été mélangé avec 0.2 ml d'orthoformiate d'éthyle et 0,75 ml d'une solution de 0,94 g de bi-ome dans 10 ml de dichlorure de méthylène.. Au bout de 1,5 heure à la température ambiante, le mélange réactionnel a été versé dans un mélange de 40 ml d'éther diéthylique et de 20 ml d'éther de pétrole. Il s'est formé un précipité rouge, qui a été filtré et lavé plusieurs fois avec de l'éther diéthylique afin d'éliminer complètement l'acidité. La précipité a été dissous dans un mélange de 6 ml d'acétone et de 6 ml de bromure d'hydrogène aqueux 0,25 N. Au bout de 10 heures à la température ambiante, on a ajouté 0,3 g de formiete de sodium dissous dans 1 mi d'eau. Le mélange réactionnel a été agitéà la température ambiante pendant 30 heures, 6 ml d'eau ont été ajoutés au mélange et la solution a été extraite par du dichlorure de méthylène pour éliminer les aglycones. La phase aqueuse a été additionnée de 5 ml d'une solution aqueuse à 8% d'hydrogénocarbonate de sodium, et elle a été extraite à plusieurs reprises par du dichlorure de méthylène. Les extraits organiques ont été séchés avec du sulfate de sodium et on les a fait évaporer jusqu'à faible volume, sous vide. La solution rouge résultante, ajustée à pH 3,5 par du chlorure d'hydrogène méthanolique anhydre, a été additionnée d'éther diéthylique en excès, pour donner 0,17 g de démthoxy-4 amino-4' désoxy-4' doxorubicine (I-B), sous la forme de son chlorhydrate, p.f.: 156-157'C (avec décomposition). ACTIVITE BIOLOGIQUE "IN VITRO" Les composés (I-A) et et LOVO/DX (adénocarcinome du côlon résistant à la doxorubicine). Les deux composés se sont avérés plus cytotoxiques que les médicaments de base, à savoir, respectivement, l'amino-4' désoxy-4' daunorubicine et l'amino-4' désoxy-4' doxorubicine (Brevet des Etats-Unis d'Amérioue US-A-4 366 149) sur LOVO et LOVO/DX (Tableau 1>. Par comparaison avec la daunorubicine et la doxorubicine, une activité supérieure remarquable sur le lignée cellulaire résistante à la doxorubicine a été observée pour TABLEAU 1. ACTIVITE CYTOTOXIQUE SUR LOVO ET LOVO/DX - TRAITEMENT: 4 HEURES DI50 I.R. d (mg/ml) COMPOSE LOVO LOVO/DX DOXORUBICINEa 56,5 2087 36,9 AMINO-4' DESOXY-4' DXb 34,6 121,6 3,5 I-Bb 8, 6 31,5 3,6 DAUNORUBICINEa 42,4 2357 55,5 AMINO-4' DESOXY-4' DNb 82,5 440 5,3 I-Ab 12,5 65.6 5,24 a) Données de dix expériences b) Données de trois expériences c) DI50: Dose Inhibitrice 50%: issue de courbes dose-réponse d> I.R.: Indice de Résistance: rapport entre DI50 sur LOVO vs DI50 sur LOVO/DX "IN VIVO" Les composés (I-A) et Gross chez la souris '(Tableau 2). Les deux composés se sont avérés plus puissants que les médicaments de base. TABLEAU 2. ACTIVITE A L'ENCONTRE DE LA LEUCEMIE DISSEMINEE DE GROSS - TRAITEMENT PAR LA VOIE INTRAVEINEUSE LE JOUR 1 APRES L'INOCULATION DE LA TUMEUR COMPOSE D.O. a T/C %b (mg/kg) DOXORUBICINE 13 200 AMINO-4' DESOXY-4' DX 26 183 I-B 3,9 250 DAUNORUBICINE 15 200 AMINO-4' DESOXY-4' DN 28 185 I-A 4,4 240 a) Dose optimaie b) Temps de survie moyen des souris traitées/temps de survie moyen des témoins x 100. REVENDICATIONS 1 - Anthracycline glycoside représenté par la formule générale (1): 0 Ho o OO O COCH2R1 MNe O NH2 o R1 représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy, et ses sels pharmaceutiquement acceptables d'addition avec un acide. 2 - Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il consiste en la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' daunorubicine, ou en.-son chlorhydrate. 3 - Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il consiste en la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' doxorubicine, ou en son chlorhydrate. 4 - Procédé de préparation d'un anthracycline glycoside de formule (I) telle que définie à la revendication 1, ou d'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables d'addition avec un acide, ce procédé étant caractérisé par le fait qu' il comprend la réaction de la déméthoxy-4 daunomycinone avec le chlorure de tétradésoxy-2,3,4,6 ditrifluoro- acétamido-3,4 L-lyxo-hexapyranosyle représenté par la formule (II): Me-' C1 HCOCF3 NHCOCF3 (ii)l'éliminationdesgroupes N-trifluoroacétyle du composé de formule (III) ainsi obtenu: / O COCH2Ri a "HOH (III> Me O | NHR2 NHR2 o - R représente hydrogène; et - R2 représente CF3CO-. afin d'obtenir un glycoside de formule (I) o R1 représente hydrogène; (iii) si on le désire, la conversion dudit glycoside de formule (I) en l'un de ses sels pharmaceutiquement'acceptables d'addition avec un acide; (iv) si on le désire. labromation duditglycoside de formule (I) ou 1' un de ses sels pharmaceutiquement acceptables d'addition avec un acide, etl'hydrolyse du dérivé bromé en position 14 ainsi obtenu, afin de former l'anthracycline glycoside correspondant de formule (I) o R1 représente un groupe hydroxy; et (V) si on le désire, la conversion dudit glycoside de formule d'addition avec un acide. - Procédé selon la revendication 4, caractérisé par le fait qu'on conduit l'étape de tétradésoxy-2,3,4,6 ditrifluoracétamido-3,4 L-lyxo- hexopyranosyle, en présence d'un tamis moléculaire et de trifluorométhane sulfonate d'argent. 6 - Procédé selon la revendication 4 ou 5, caractérisé par le fait qu'après l'étape (i), mais avant l'étape (ii), on soumet le composé de formule de méthylène et d'acétone (97:3 v/v). 7 - Procédé selon l'une des revendications 4 à 6, caractérisé par le fait qu'on conduit l'étape (ii) en soumettant le composé de formule (III) à une hydrolyse alcaline avec de l'hydroxyde de sodium aqueux 0,2 N, à la température ambiante, sous une atmosphère d'azote et pendant 1,5 heure. 8 - Procédé selon l'une des revendications 4 à 7, caractérisé par le fait qu'on conduit l'étape (iii) en traitant la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' daunorubicine par du chlorure d'hydrogène méthanolique et en isolant la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' daunorubicine sous forme de son chlorhydrate. 9 - Procédé selon l'une des revendications 4 à 8, caractérisé par le fait qu'à l'étape (iv), on hydrolyse ledit dérivé bromé en position 14 par traitement par du formiate de sodium aqueux à la température ambiante. - Procédé selon l'une des revendications 4 à 9, caractérisé par le fait qu'on isole la déméthoxy-4 amino-4' désoxy-4' doxorubicine à l'étape support pharmaceutiquement acceptable. 12 - Anthracydline glycoside de formule utilisation comme agent antitumoral.