Brevet FR2623191A1 — publié le 19890519

l 2623191 La présente invention concerne un procédé de préparation de chloro-1 alkyl-5 isoquinoléines condensées suivant leur liaison [g] avec des groupes aromatiques, ces isoquinoléines étant représentées par la formule (I) ca- après: Cl f N t Ar R o: - R représente un groupe alkyle en C1 & C3; et - Ar représente un groupe aromatique ou htéroaromatique. -mono- ou polycyclique, éventuellement substitué, ainsi que les composés correspondants obtenus par substitution nucléophile du chlore du noyau pyridinique. Certains de ces composés sont déjà connus. On peut citer notamment le composé (Ia): Cl CH3O 3 =N H CH3 qui est un intermédiaire de synthèse de substances anticancéreuses décrites dans la demande de brevet français n' 2 436 786 et qui est obtenu par un procédé complexe, 0855 FR 2 2623191 puisqu'il comporte douze étapes, a partir de: CH30 C + 0 CiG On peut oiter également le composé (lb): N NN H CH3 qui est un intermédiaire de synthèse de substances anticancéreuses décrites dans la demande de brevet français n' 2 387 229, et qui est obtenu, avec un faible rendement, par un procédé en onze étapes à partir du compos: - H3COO-NNN NH2 H CH3 Le procédé selon la présente invention n'implique qu'un nombre d'étapes limité, et il permet d'obtenir, avec de bons rendements, des chloro-1 alkyl-5 isoquinoléines condensées avec des groupes aromatiques et hétéroaromatiques. 0855 FR 3 2623191 Ce procédé est essentiellement, caractérisé par le fait qu'il comorend les étapes consistant à: (a) effectuer une lithiation du composé de formule II): Cl o R est tel que défini ci-dessus, de façon à former le composé de formule (III): Cl Li /L - C O ( III) i\ R (b) faire réagir un aldéhyde de formule (IV): ArCHO (IV) o Ar est tel que défini ci-dessus, avec le composé de formule (III) précité, ce qui conduit à l'alcool secondaire de formule (V): OH ci C1 Ar - CH- N (V) Coc Lo/ R :35 0855 FR 4 2623191 (c) on soumet l'alcool secondaire de formule (V) à une réduction de la fonction alcool secondaire en groupe mIthylêrnique, ce qui conduit au composé de formule (VI): Cl Ar-CH1 t3 N 0 XCf (VI) et C lO L à R (d) on soumet le composé de formule (VI) à une réaction d'hydrolyse (de la fonction dioxolanne)-cyclisation- déshydratation, ce qui conduit au composé de formule I) 1 et l'on peut faire suivre par une réaction de substitution nucléophile du chlore. Le composé de formule (II) est préparé selon le mode opératoire décrit par 3.L..Lamattina dans "J. Het. Chem. 30 p. 353 (1983>) pour l'acétyl-4 chloro-2 pyridine éthylène glycol acétal (composé de formule (II) o R représente CH3). L'étape (a) de lithiation du composé de formule (II), conduisant au composé de formule (-III), est effectuée comme pour celle d'autres dérivés de la pyridine, par action du diisopropyiamidure de lithium dans le tétrahydrofuranne anhydre, à basse température. L'étape (b) du procédé de la présente invention, & savoir la condensation avec l'aldéhyde de formule (IV) a lieu, de façon classique, par addition de ce dernier à la solution, par exemple dans le tétrahydrofuranne anhydre, du composé organolithien de formule (III). 03855 FR On peut condenser, sur le composé organolithien de formule (III), de nombreux aldéhydes aromatiques et hétêroaromatiques, substitués ou non substitués, par exemple avec les derivés du pyrrole ou de l'indole protégés par des groupes tels que les groupes alkyle, arylalkyle, alkylcarbonyle, alkyle et arylsulfonyle ou carbamoyle sur leur sommet 1. Ainsi, on peut citer l'application de ce procédé & la préparation de composés de formule (I) dans laquelle Ar représente: OCH3 3 ! 5I dOCH3 CH3O- NI R! R R étant tel que défini ci-après. 1 - La réduction de la fonction alcool secondaire en groupe méthylénique, qui est la réaction de l'étape (c) du procédé selon la présente invention, peut être effectuée par tout moyen connu pour réduire les benzhydrols, choisi de telle sorte qu'il n'y ait pas réduction de la fonction acétal ni élimination du chlore du noyau pyridine. Le triéthylsilane en solution dans l'acide trifluoracétique convient pour cette réduction. 0355 FR La rèa-tion de l'étape (d) est une triple réaction qui peut être schutiséecomme suit: Cl Cl Ar - CH hydrolyse r C de la fonction C N cyclisation : R C 1- dioxolanne L C cl t o (VI)-_(VII)- H H Ci 1'r - déshydratation fAr---- _-.j -H20 Ar R - R (VIII) (I) Les com>osés de formule (VII) et (VIII) ne sont pas isolés. Par ailleurs, il n'est pas obligatoire d'isoler le composé de formule (VI). La fonction dioxolanne est aisément hydrolysable en milieu acide et il apparait simultanément le produit résultant de la cyclodéshydratation de la cétone correspondante. Autrement dit, le composé de formule (VI) peut être cyclisé en milieu aqueux par action d'un acide fort, tel que H SO4 ou HC1, de préférence, à une température 2 4 comprise entre 40'C et 70'C. En particulier, le procédé selon la présente invention s'applique avantageusement à.la préparation des chloro-1 alkyl-5 isoquinoléines condensées suivant leur liaison tg] avec des héterocycles azotés, susbtitués sur l'azote, et, notamment, des dérivés de l'indole et homologues, les composés obtenus répondant à la formule (I'): 0855 FR 7 2623191 Cl Z /fI N \ t (I') - R représente un groupe alkyle en C1 à 3; - R1 représente un groupe alkyle en C1 & C3 ou un groupement protecteur éliminable; et - Z représente un groupe aromatique ou hétéroaromatique, substitué ou non substitué, tel que: a CHX N Dans ce cas, on fait réagir, comme composé de formule (IV), l'aldéhyde de formule (IVa) N-protégé: Iz {'\Z C(IVa) N R1 cS R1 est tel que défini ci-dessus. La présente invention concerne également les produits obtenus par la mise en ouvre de ce procédé, et à titre de produits nouveaux, les produits de formule (I) dans 0855 FR 8 2 623191 laquelle Ar représente: OCH3 a. OCH3 et notamment CH3 En Particulier, les troduits de formule -"i C1 CH3.R peuvent conduire par substitution nucléophile du chlore du noyau pyridinique à de nombreux composés, par exemple, à des amines. On peut ainsi mentionner les composés de formule: NH(CH2)n 2 N N = - o: CH3 3 - n =2 à 4; et - R et R représentent chacun, indépendamment l'un de l'autre, H ou alkyle en C1-C3. 0855 FR 9 2623191 Ces Composas, qui sont prépares par action des diamines voulues sur le dérivé chloré corresDondant obtenu par le procède de l'invention, et obtenus sous la forme des bases libres ou des sels pharmacoloaiquement acceptables correspondants (par e:emple maléates ou chiorhydrates) ont une activité anticancéreuse au moins comparable & celle de leurs homologues non alkylés sur l'azote indolique. La presente irnvention porte également sur ces -agents thérapeutiques pour le traitement de divers cancers dont les leucémies. ainsi que sur des compositions médicamenteuses les contenant en combinaison avec un support pharmaceutiquement acceptable, adapté à une administration des compositions par la voie intraveineuse ou la voie intrapéritonéale, comme le soluté physiologique. i5 Le màdecin déterminera le dosage de ces agents thérapeutiques qui cornviendra le mieux. Ce dosage variera selon la forme 'administration et le composé particulier choisi et, par ailleurs, il variera avec le patient particulier soumis au traitement Les composés sont utiles de la même manière que d'autres agents analogues, et le niveau de dosage sera du même ordre eue pour ces derniers. On décrira dans ce qui suit des exemples de mise en oeuvre du procédé de l'invention pour l'obtention de chloro-! méthyl-5 isoquinoléines condensées par leur liaison g à des noyaux aromatiques, nouvelles ou précédemment décrites, ainsi que de préparation de certains de leurs dérivés ayant une activité pharmacologique. Les points de fusion ont été pris au banc Kofler. Les spectres de RM 1H ont été enregistrés sur un appareil Varian XL 100", dans les solvants indiqués, et les déplacements chimiques sont donnés en ppm par rapport au (CH3 4Si. 0855 FE o 2- -2623191 EXEMPLE 1 a) Première étape: Preparation du dioxolanne de l'acêtyl-4 chloro-2 pyridine: H N 1o 00/ -. Ce composé a été préparé comme indiqué par Lamattina J.L. dans "J. Het. Chem. 1983, 20, 353" qui le décrit corme un liquide. Distillé à 128'C sou:s 1333,22 Pa (10 mmHg), il cristallise en donnant un solide qui fond aux environs de 30'C. b> Deuxième étape Préparation des trois.acétyl-4 chloro-2 (a-aryl ahydroxy) méthyl-3 pyridine éthylène glycol acétals: ICC vH I H ( N & HN N.) 2. 5, F( o/ \% (o/ %% 5 %I\C Dans un tricol de 250 ml, séché à 120'C et maintenu sous argon, on introduit le tetrahydrofuranne (THEF, ml) fraichement distillé sur le mélange benzophénone + sodium. Après avoir refroidi à O'C, le butyllithium (6,9 ml de la solution commerciale 1,6 X, 11 mmoles) et la 0855 FR -. 2623191 diisoprotpylamirne distillee sur hydrure de calcium (1,54 ml, 11 mmoles), sont ajoutés successivement. L'ensemble est agité à O'C. rendant 1 heure, puis refroidi à -70'C. En continuant à refroidir à cette dernière température, le dioxolanne obtenu à la première étape (1,995 g, 10 mmoles) , en solution dans le THF (10 ml), est alors ajouté, goutte a goutte. Au bout de 30 minutes après-la fin de l'addition, on observe l'apparition d'un précipité Jaune, et le mélange hétérogène se transforme progressivement en un gel. Après 4 heures -.70'C, l'aldéhyde choisi (10 mmoles) en solution dans le THF (10 ml) est aJoute goutte à goutte, et le nouveau mélange est agité à la même température pendant 1 heure, puis abandonné à la température ambiante, pendant heures. L'ensemble est versé dans l'eau, extrait au chlorure de méthylene, et les phases organiques réunies sont séchées sur sulfate de sodium et évaporées. Le résidu huileux cristallise progressivement dans l'hexane ou le cyclohexane, et le solide obtenu est recristallisé dans le même solvant pour fournir le composé attendu, sous la forme de cristaux incolores. Acétal (A) Rendement: 72% P.f.: 92'C (cyclohexane);. L'analyse élémentaire de l'acétal (A) ainsi obtenu donne les résultats suivants: C H N Ci Calculé pour C18H20C1N05 59,10 5,51 3,83 9,69 Trouvé 58,82 5,47 4,02 9,67 0855 FR -. 12 2623191 Le spectre de résonance magnétique nucléaire -confirme la structure attendue: H R.R (CDC13) 6: 1,73 (s,3H,CH3), 3,72 (s,2x3H,OCH3), 3,8-4,6 (m,4H,CH2CH), 4,29 (dlH,OH,JcH OH 8,2Hz), 6,66-6,84 (m,4H,CIOH + 3H-Ar) 7, 57 (d, 1H,H-5 PYs356 = 5Hz) 8,31 (d,!H,H-6 py) Acétal):B Rendement: 73% P. f.: 146'C (cyclohexane> L'analyse élementaire de l'acètal (B) ainsi obtenu donne les résultats suivants: C H N C! Calculê pour C20 HCNO3 67 9, rrouvé 67,71 5,16 3,96 9,89 Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: 1H R (CDC13) S: 1,77 (s,3H,CH3), 3,58-3,93 (m,4H,CH,CH2), 4,35 (d, lH,O, JoHCH= 11,2Hz), 6,81 (d,1H,Ci-OH), 7,41-7,50 (m,SH,5H-Ar), 7,61 (d,lH,H-5 py,J _6=5Hz), -6 7,78-7,87 (m,2H,2H-Ar), 8,41 (d,1H,H-6 py). 0855 FR S - gS N --N N'.. ZH CH lCH:Do 0 Z SlIn&iOZ sep 'uOfluaAUT. UoI|s senbTIoXoIodi SeA;Z4p sep uoa:imia; g1 @p enA ue CD>;. ) z2o 'b-Z 'ú ('HO'H 'S) S 'I: (1DiCO) XIK H. e.x;waronu enDu-euRua sgaoE.u.Z @p a;Doaes al -cg' | ' b SQ IZ ' 'ti''17 ún TznafLO úz'1i Zlt'Ol úb '' 85 gg' l'ú5 0HGZ:'O 'S 0110I Ht Tl |.znod @InoIe^ I3 S _ H O s-4ugeAns sj e;însa-i sal @uUop nTie4qa F3mure (D) |eVs, p @aTie-4uameli as.1euie,- (eurxDti) D.9SO: *; 9;I9:%u@O@pue : (L) I%Zo9 14 2623191 Le compose precité (A) ou (B) ou (C) triflucroacétique est évaporé sous pression réduite. L'acide chlorhydrique 6N (20 ml) est aJouté au résidu, et le mélange est agité à 55-60'C pendant 4 heures pour former les composées (IA) et (IB), et seulement pendant 45 minutes pour préparer la thiénoisoquinoléine (IC). Le mélange refroidi est alcalinisé par l'ammoniaque, extrait au chlorure de méthylène, et la phase organique, séchée sur sulfate de sodium. est filtrée et évaporée. Le résidu obtenu cristallise dans le minimum de methanol (composés IA et IC) ou dans l'hexane (composé IB) et les produits obtenus sont recristallisés dans le même solvant. (!A): p.f.: 17?O0'C; rendement: 55% (IB): p.f.: 15!'C rendement: 37% Q20 C^(IC): p.f.: S138'C rendement: 60%. Pour les composés (IB) et (IC). les points de fusion, les rf en CCK sur plaque de silice, avec plusieurs mélanges et solvants comme éluants, de même que les spectres de RMN 1H sont en tous points identiques à ceux des mêmes produits déjà décrits. 2 5 EXEMPLE 2: a) Première étape: Préparation du formyl-3 méthoxy-5 méthyl-1 indole: CH PCHO CH, 35055 F 0855 FR En. refroidissant pour maintenir la température du milieu réactionnel audessous de 15'C, l'oxychlorure de phosphore (9 ml) est ajouté goutte à goutte dans 35 ml de diméthylformiate (D]F) et le méthoxy-5 méthyl-1 indole (14,1 g) en solution dans le DMF (25 ml) est ajouté en une seule fois. Le mélange hétérogène résultant est chauffé à 'C pendant 1 minute, puis maintenu à 65'C, pendant minutes, en l'agitant mécaniquemènt. Apres l'avoir laissé refroidir, il est décomposé par addition de 200 ml d'eau glacée, puis traité par une solution d'hydroxyde de sodium 5N (100 ml).Le précipité formé est filtré et recristallisé dans l'éthanol pour donner 14,53 g (87,7/%) de paillettes incolores, p.f. = 134'C. L'analyse élémentaire du produit obtenu donne les résultats suivants: . C 'C H N..DTD: Calcul& pour C11H1NO2 69,82 5,86 7,40 rouvé 69,84 7,71 7,4 Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: H RXN (CDCl) ': 3,82 + 3,90 (2s,2x3H,N-CH3+ OCH3), 6,97 (q,lH,H-6,J6_?=8,3 Hz,J 6-42,5Hz), 7,24 (d,lH,H-7), 7,80 9,94 (s,IH,CHO). 0855 PR b) Deuxième tape: Préparation de l'acêtyl-4 chloro-2 [a-méthoxy-5' méthyl!' indolyl-3') o-hydroxy méthyl-3 pyridine éthylène glycol acétal. J Cl CH2O ' m C4 A 100 ml de THF refroidi & O'C et maintenu sous argon sec, sont ajoutées, successivement, une solution de butyllithium 1,6N dans l'hexane . Le mélange est agité pendant 1 heure à O'C, refroidi à -70'C, et l'acétyl-4 chloro-2 pyridine éthylène glycol acétal {4 g, 20 mmoles) en solution dans le TEHF (10 ml) est ajouté en une seule fois. Après 4 heures d'agitation à -70'C, l'aldéhyde obtenu & la première étape (3,78 g, 20 mmoles), en solution dans le THF (20 ml), est additionné progressivement, et le mélange est agité à -70'C pendant 2 heures, puis abandonné à température ambiante pendant 15 heures. Le mélange est versé dans l'eau, extrait au chlorure de méthylène, et l'évaporation du solvant fournit un résidu, qui cristallise lentement dans l'acétate d'éthyle. Le solide filtré recristallise dans le même solvant pour donner 5,04 g (65%) de microcristaux incolores, p.f.: 125'C. L'analyse élémentaire du produit obtenu donne les résultats suivants: __ __C H N C1 Calculé pour C20H21ClN204 61,78 5,44 7,21 9,12 ____ ______. __ Trouvé 61,98 5,30 7,31 9,42 0855 FR Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: H NKR (CDCl3) S 1,73 (s,3H,CH3, 3,66 (s,3H,NCH3>, 3,58-3,95 (m, 2x2H,CH2CH2), 3,85 (Cs,3H,OCH3), 4,24 , 6,89 (m, 2H,CH-OH + H-6 Ar), 7,15-7,27 (m,2H,H-4 Ar + H-7 Ar'), 7,60 (d,IH,H-5 pyj5 6= 5,3 Hz), 8,37 (d,!HH-6 py). c) Troisième étape: Préparation du chloro-1 méthoxy-9 diméthyl-5,6 6Hpyrido[ 4, S-b] carbazole: CH3o i Le mélange formé par l'alcool obtenu 4 la deuxième étape (388 mg, 1 mmole), le triéthylsilane (0,18 ml, 1,1 mmole) et l'acide trifluoroacétique (2 ml) est agité à la température ambiante, pendant 20 heures, et évaporé à sec. Au résidu obtenu, on ajoute 5 ml d'eau et 5 ml d'acide sulfurique (d = 1,86), et le mélange est chauffé A 60'C pendant 4 heures, sous agitation. Après 15 heures à la température ambiante, on ajoute 50 ml d'eau, alcalinisé avec l'ammoniaque concentrée et on extrait au chlorure de méthylène. L'évaporation du solvant fournit un résidu qui cristallise et recristalllse dans l'acétate d'éthyle, pour :35 donner 170 mg (55%) de microcristaux Jaunes, p..f.:-206'C. Le composé ainsi obtenu est identique à celui décrit antérieurement (p.f., analyse, R!N)>. 0855 FR H RXN (CDCl3) 6 = 3,07 (s,3H,CH3-5), 3,99 + 4,13 (2s,2 x 3H,OCH3+ NCH3), 7,28-7,38 (m, 2H, H-7 + H-8), 7,72 (q,l1H,H-10,J108 2,SHz,J10_0,7Hz), '08107 7,83 (q,lH,H-4,J4_3=6,1Hz,J4ll1Hz), 8,21 (d,IH,H-3), 8,90 (d, lH,H-11). EXEMPLE 3 a) Première étape: Préparation de la formyl-3 méthyl-1 1H- pyrrolot3,2]pyridine _HO CH, Le mélange formé par la méthyl-1 IH-pyrrolo- 13,2-c]pyridine (2,64 g, 20 mmoles), l'hexaméthylène tétramine (5,6 g, 40 mmoles) et l'acide trifluoracétique (35 ml) est chauffé au reflux pendant 3 heures. Après addition d'acide chlorhydrique 3N (100 ml), le reflux est poursuivi pendant 3 heures, et le mélange est évaporé & sec. Le résidu est repris dans l'eau (75 ml), alcalinisé par une solution d'hydroxyde de sodium N, et la solution résultante, saturée par du chlorure de sodium, est extraite au-chlorure de méthylène. L'évaporation du solvant laisse un solide qui recristallise dans l'acétate d'éthyle, pour fournir 2,3 g (?2%) d'aiguilles incolores, p.f. = 109-110'C. 0855 FR L'analyse élémentaire du produit obtenu donne les résultats suivants: -H N Calculé pour CH8N20 |, 67,50 5,00 17,50 Trouvé 67,46 5,08 17,34 Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: 1H NFR (CDC13): 3,83 (s,3H,CH.), 7,21 (q,iH,H-7,J_6=5,7Hz, J4_7=IHZ), 7, 655 (s,lH,H-2), Z54-" 8.42 (d,1H,H-6), 9,45 (d,lH,H-4), 9,93 (s,!H,CHO). b) Deuxième étape: Préparation de l'acétyl-4 chloro-2 E[- CH CH, La réaction a été réalisée en appliquant le mode opératoire décrit à la deuxième étape de l'Exemple 2 avec l'aldéhyde obtenu A la première étape ci-dessus(3,2 g, mmoles). Après avoir traité comme indiqué, il s'est formé 4,24 g (59%) de microcristaux incolores, p.f. = 150'C. 0855 FR L'analyse élémentaire du produit obtenu donne les résultats suivants: C H N Ci - -....... _____|_H__ ___ _____ ___ Calculé pour C H 18CiN303 60,09 5,04 11,68 9,85 Trouvé 59,92 5,22 11,62 9, 84 0 Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: H NKR (CDC3) 6: 1,74 (s,3H,CH3), 3,59-3,96 (m,2x2H,CH2-CH2), 3, 72 (s,3H,'NCH3), 4,35 (s large,lH,OH) 6,61 (s,lH,H-2 Ar), 6,82 (s large, lH,CH-OH), 7,20 (d,lH,H-? Ar,J 6?= 6Hz), 7,61 (d,1H,H-5 py, J5 6= 5,5 Hz), 8,33 (d,lH,H-6 Ar), 8,38 (d, 1H,H-6 py), 8,81 c) Troisième étape: Préparation de la chloro-10 diméthyl-5,6 H-pyrido[3', 4': 4,5] pyrrolot2,3-g] isoquinoléine: ci N CH, HC Le composé obtenu à la deuxième étape (0,720 g, 0855 FR 2 mmoles) est réduit, sous agitation, à la température ambiante, pendant 24 heures, dars l'acide trifluoracétique (4 ml) en présence de triéthylsilane (0,64 ml. 4 mmoles). Le résidu de l'évaporation est ensuite traité par 10 ml d'eau et 10 ml d'acide sulfurique (d = 1,86),- à la température du laboratoire pendant 24 heures, sous agitation. Le mélange réactionnel est alors traité comme dans l'exemple précédent, pour fournir un solide qui recristallise dans l'acétate d'éthyle en donnant 271 mg (48%) de microcristaux Jaune-pâle du composé attendu, p.f.: 256'C. L'analyse élémentaire du produit obtenu donne les résultats suivants: C H N Ci Calculé pour 16H12C1N3 68,21 4,29 14,92 12,58 ITrouvé. 67,93 4,23 14, 98 12,51 Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: H RMN ((CD3)280) 6: 3,14 (s,3H,CH3-6), 4,03 (s,3H, NCH3), 7,70 (q, lH,H-4,J 4_3= 5,9Hz,J41 =0,6Hz), 8,14 (q,lH,H-7,J7_=6Hz, J? 11 =OSHz), 8,29 (d, 1H, H-8), 8,66 (d, HH-3), 9,14 (s élargi, 1H,H-11), 9,63 (s élargi, 1H,H-i). 0855 FR 22> EXEYXPLE 4 Application du produit obtenu & l'Exemple 3 à la préparation des trois composéms selon l'invention ci-après: a) (Diéthylamino-3 propyl-l) amino10 dimithyl-5.6 H-pyrido t3',4':4,5) pyrrolo ú2,3 g] isoquinoléine: NH CH4cHMN(CHCHm3 NN N CH, CH3 Le compose obtenu à la troisième étape de l'Exemple 3 (400 mg) est chauffé dans la diéthylamino-3 propylamine en excès (20ml), au bain d'huile, & 160'C, pendant 6 heures, et l'excès de diethylaminopropylamine est évaporé sous pression réduite. Le résidu est repris dans l'eau, alcalinisé par une solution d'hydroxyde de sodium N et extrait au chlorure -de méthylène. L'évaporation du solvant fournit une huile résiduelle qui cristallise progressivement dans le cyclohexane. Le solide obtenu recristallise dans ce solvant en donnant 476 mg (89%) de cristaux correspondant à l'hydrate du composé attendu, p.f.: 149'C. L'analyse élémentaire du produit obtenu donne les résultats suivants: IC H N aloulé pour C23H29N5, H20 70,23 7,89 17,81 O j__ ___ _ _ _ _ _ jrouvé 70, 80 7,74 17,65 0855 FR -. - 23 Le spectre de resonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: H RMN ((CD3SO): S = 1,02 (t,2 x 3H, (CH2C% l2) 1,86 (m,2H,CH2-f) , 2, 45-2,66 (m, 6H, (CE2 CH3)2+ CH2-Y), 2,99 (s,3H,CH3-6), 3,61 (m,2H, CH2-c), 4,17 (s, SH,NCL3), 7,14 (d, lH,H-7,J78=6,3SHz), 7,59 (s large, 1H, NH), 7,62 (q,iH,H-4,J43=5,8Hz,J4=0,8Hz), 8,57 (d,lH,H-3), 9,01 (s,1H,H-11) , 9,29 (dc,H-1). On a ensuite préparé le trimaléate acide de la (diéthylamino-3 propyl-1) amino-10 diméthyl-5,6 H-pyrido E3',4': 4,5] pyrrolo E2,3 g] isoquinoléine (composé précédent): On obtient ce sel en versant une solution de la base précédente (406 mg) dans 50 ml d'acétone bouillante, dans une solution, également bouillante, de 415 mg d'acide maléique dans 50 ml du même solvant. Le mélange est maintenu à l'ébullition pendant 1 minute, refroidi, et le solide formé est essoré pour donner 736 mg (94%) de microcristaux du trimaléate acide attendu, hydraté avec 2 molécules d'eau, p.f.: 193'C. L'analyse élémentaire de ce sel donne les résultats suivants: C H N Calculé pour C35H41N5012 2H0 55,33 5,93 9,22 3 151, 2 -Trouvé -55,18 5,80 9,05 0855 FR b) (Diméthylamino-3 propyl-1)-amino-10 dim&thyl-5.6 H-pyrido [3',4':4,5] pyrrolo [2,3 g] isoquinoléine: NH CHCMCNN(CH, N N N N.s CH, Le mélange du composé obtenu & la troisième étape de l'Exemple 3 (2 g) et de la dièthylamino-3 propylamine ______ C H N Calculé pour C 3H37N5012 H20 55,54 5,47 9,82 3375O H0...,i,, Trouvé | 55, 60 5,43 9,89 0855 FR 0855 FR Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: H RN (D20) S: 2,4 (m. 2H, CHX-S) 3,04 , 3,5 (m,2H,CH2-Y), 3, 84 '(t, 2H, CH2-0), 4,3 (s,3H,NCH3-5), 6, 07 (s,6H,CH = CH maléate), 7,55 (d, lH,H-7,J7 8=7,7Hz), 7,69 (d,1H,H-8), 8,05 (d,1H,H-4,J4 3= 7Hz), 8,74 (d,!H,H-3), 9,15 (s,lH,H-l1), 9,47 (s,IH,H-l). c> (Ethylamino-3 propyl-l)-aminio-10 diméthyl-5,6 H-pyrido[3',4':4.53 pyrrolo [2,3-g] isoquinoleine: NHCH2,CCH2NCH NH CHCH No II HCH, . Le composé obtenu à la troisième étape de l'Exemple 3 (300 mg) est chauffe au bain d'huile, à 140'C, pendant 5 heures dans l'éthylamino-3 propylamine (15 ml), et l'excès de cette dernière est évaporé. Le résidu. est repris dans l'eau, alcalinisé par une solution d'hydroxyde de sodium N et extrait au chlorure de méthylène. L'évaporation du solvant fournit une huile qui est directement traitée par un excès d'acide maléique, dans l'acétone bouillante. Il se forme ainsi, 560 mg (73,7%) de l'hydrate du trimaléate acide de 1' (éthylamino- 3 propyl-1l)-amino-10 diméthyl-5,6 5H-pyrido[3',4':4,5) pyrrolo [2,3-g] isoquinoléine, p.f.: progressivement entre 165'C et 170'C. 0855 FR À. Z2623191 * L'analyse élémentaire de ce sel obtenu donne les résultats suivants: I___ _ _ __ C H N Calculé pour C33H N5012 H20 55,54 5,47 9,82 Trouvé 55,37 5,58 10,17 Le spectre de résonance magnétique nucléaire confirme la structure attendue: H RN (D 20) 6: 1,35 (t,3H,CH2Cf3); 2,29 (m,2H,CH2-B); 2,96 2 3,75 (t,2H,CH2-ca); 4,21 (s,3H,NCH3); 6,11 (s,6H,CH = CH-maléate); 7,44 (d,lH,H-7,J7-8= 8Hz); 7,63 (d,lH,H-8); 7,90 (d,1H,H-4,J4_3= 6,9 Hz); - 8, 65 (d,1H,H-3); 8,94 (s,1H,H-11>; 9,32 (s,l1H, H-1). Les trois composés des exemples 4a), 4b) et 4c) ci-dessus, obtenus comme décrit ainsi que sous forme de sels présentent une activité antitumorale, les résultats de leur étude pharmacologique in vitro et in vivo, étant décrits dans ci-après: 1/ Essai in vitro La méthode est celle décrite par Paoletti et col. dans "Chem. Biol Interaction 25, pages 45-58 (1979)". On ajoute des concentrations croissantes du composé & tester à une culture cellulaire de la lignée leucémie L 1210 en phase 0855 FR exponentielle de croissance. La culture est incubée à 37'C dans une etuve a COS et les cellules sont comptées toutes les 24 heures. Le calcul de la DI50, concentration du produit en micromoles par litre qui inhibe la prolifération cellulaire A 501%, est effectué après 48 heures. La DI50 du composé de l'exemple 4a) est de 0,017 M; du composé de l'exemple 4b) est de 0,019 pX; et du composé de l'exemple 4c) est de 0,033 pX. A titre de comparaison, celle du composé non substitué sur l'azote de l'indole, décrit dans la demande de brevet français n' 2 436 786, qui est étudié en clinique, est de 0,018 pX. 2/ Essai in vivo La méthode est celle décrite par Geran et col. dans "Cancer Chemother. Z, pages 7-57 (1972)". Toutes les souris mAles ou femelles sont inoculées par voie intrapéritonéale au jout J0 avec une quantité déterminée de cellules tumorales viables, variable selon la tumeur choisie pour l'essai. Elles sont ensuite réparties en différents lots. Chaque lot correspondant aux animaux traités par le produit à tester, à une dose donnée, est composé de 10 souris. Le produit & tester est dissous dans l'eau distillée, et il est administré, pendant n Jours (J - Jn) variables selon le il n protocole choisi, par voie intrapéritonéale à raison de 0,1 ml par 10 g de poids des souris traitées; les doses du produit administré sont précisées dans les tableaux ci- dessous. Le lot "contrôle négatif", pour lequel les animaux ne sont pas traités par un produit, comprend plus de 2 animaux, N étant égal au nombre total de souris traitées par un produit. 0855 FR On évalue l'activité antitumorale en considérant l'augmentation du temps de survie des animaux traités par raport à celui des animaux du lot "Contrôle négatif") selon la formule: jour médian de survie des animaux traités A une dose de produit - TIC = ---------------------- ---------------------- -----------------..... jour médian de survie des animaux icontrble négatif) Un composé est considéré comme étant toxique lorsque cette valeur est égale ou inférieure à 85% ou -c lorsque la variation du poids des animaux, exprimée en grammes et calculée en faisant la différence entre le poids moyen du lot mesure au jour 5 et le poids moyen du même lot au Jour 1 est égale ou inférieure à -4 g. Les essais sont effectués avec des souris hybrides femelles CD2Fi, inoculées par voie intrapéritonéale avec 106 cellules leucémiques de la lignée P 388. Le composé à tester est administré soit une fois (J1), soit pendant Jours (J-J5; le produit à tester est comparé au 1 5 5-fluoro uracile (témoin positif>, qui est aministré dans les mêmes conditions. Le nombre d'animaux survivants est évalué au jour J30. Dans ces conditions, un composé est considéré comme étant actif lorsque le rapportT/C est supérieur à 128%. Les résultats sont indiqués dans les tableaux suivants: Tableau I pour l'administration unique à J1 Tableau II pour une administration répétée. S5 0855 FR 26Z3191 Tableau I PRODUIT DOSES VARIATION JOUR KEDIAN T/C mg/kg;PONDERALE DE SURVIE % ___ ___ - P5-P1 (g) omposé de 2,5 -1,8 13,8'18 exemple 4c) 5 8 14,0 121 sous forme du -l sel obtenu 10! -0.2 14,1 122 -1,2 15,2 131 4 1.. 40.'-2,3 16,0 138 -4,3 8,1 '70 3omposé de 2,5 1 -1,6 12,6 109 i lexemple 4a) sousefome du 5 -1.0 13,8 118 sous forme du sel obtenu 10 -2,2 14,1 122 i 1,8 15,4 133 -2,6 15,2 131 -3,5 17,0 146 -Fluoro racile 200 -2,2 16,0 138 au istillée -0,9 11,6 0855 FR TABLEAU II PRODUIT DOSES VARIATION JOUR MEDIAN T/C mg/kg FONDERALE DE SURVIE % ?5-P1 !'exemple 4b) i 0,75 +0,5 14,8 125 sous forme du sel obtenu 1,5 +0,5 16,1 136 3 -0,3 17,0 144 6 +0,9 16,3 138 12 I -0,7 17,0 144 24 -4,5 17,3 146 48 -4,5 7,2 61 :5-Fluoro uracile 20 +1,0 20 169 !Eau jdistillée +2,6 11,8 0855 FR REVENDICATIONS I - Procédé de préparation d'un composé représenté par la formule (I) ciaprès: 5.Cl \.Ar I R - R représente un groupe alkyle en C1 à C3; et Ar représente un groupe aromatique ou hétéroaromatique, mono- ou polycyclique, éventuellement substitué, ainsi que les composés correspondants obtenus par substitution nucléophile du chlore du noyau pyridinique, caractérise par le fait qu'il comprend les étapes consistant &: - (a) effectuer une lithiation du composé de formule (II): Cl ci e I ' Il) O \ R. o R est tel que défini ci-dessus, de façon à former le composé de formule (III): Cl Li 0 O \ O (b) faire r4agir un aldéhyde de formule (IV): ArCHO (IV) o Ar est tel que défini ci-dessus, avec le composé de formule (III) précité, ce qui conduit à l'alcool secondaire de formule (V): OH ci C Ar - CH I o./C(y) N - EVV _0 C (c) on soumet l'alcool secondaire de formule (V) à une réduction de la fonction alcool secondaire en groupe mêthyl!nique, ce qui conduit au composé de formule (VI): C1 Ar -CH2 j N -F ô ^(VI); et L C R d'hydrolyse (de la fonction dioxolanne)-cyclisation- déshydratation, ce qui conduit au composé de formule (I); et l'on peut faire suivre par une réaction de substitution nucléophile du chlore. 2 - Procédé selon la revendication 1, caracterisé par le fait que l'on conduit l'étape (a) de lithiation-du composé de formule (II? par action du diisopropylamidure de lithium dans le tétrahydrofuranne anhydre. S - Procédé selon l'une des revendications 1 et 2. caractérisé par le fait que l'on conduit l'étape (b) de condensation du composé organolithien de formule (III) avec l'aldéhyde de formule (IV), par addition de ce dernier à une solution, notamment dans le tétrahydrofuranne anhydre, dudit composé organolithien de formule (III). 4 - Procédé selon l'une des revendications 1 & 3, caractérisé par le fait que l'on conduit la réaction de réduction de l'étape en solution dans l'acide trifluoracêtique. 5 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que l'on conduit la triple réaction de l'étape (d) en milieu aqueux par action d'un acide fort, a une température comprise entre 40'C et ?O'C. 6 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé par le fait que l'on n'isole pas le composé de formule (VI). 7 - Procédé selon l'une des revendications 1 a 6, caractérisé par le fait que l'on prépare des composés de formule (I) dans laquelle Ar représente: OCH3 A; a i i i 4 s OCH3 8 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé par le fait que l'on prépare des composés de formule (I') Cl /5 N I (I') tZ \ R R, o: - R représente un groupe alkyle en C1 à C3; - R représente un groupe alkyle en C -C ou un R1 rersneu rop!yee C-3oun groupement protecteur éliminable; et Z représente un groupe aromatique ou hétéroaromatique, substitué ou non substitué, tel que: CH30 '' auquel cas, on fait réagir, comme composé de formule (IV), l'aldéhyde de formule I R1 o R est tel que défini ci-dessus. - 35 9 - Compo$s de formule (I) tels que définis à la revendication 1, dans laquelle Ar représente OCH3 OH et notamment I CH3 - Composés selon la revendication 9, caractérisés par le fait qu'ils sont représentés par la formule CH3 R o R est tel que défini à la revendication 1, et les composés résultant de la substitution nucléophile du chlore. 11 - Composés selon la revendication 9, caractérisés par le fait qu'ils sont représentés par la formule: -. (2' 2nR. RN CH3 CH3 o - n 2 à 4;et - R2 et R3 représentent chacun indépendamment l'un de l'autre, H ou alkyle en C 1-C3. 12 - Composition pharmaceutique, caractérisée par le fait qu'elle comprend, dans un support pharmaceutiquement acceptable, au moins un composé tel que défini & la 0 revendication 11. 13 - Composition selon la revendication 12, caractérisée par le fait qu'elle est destinée au traitement des cancers. 14 - Composition selon l'une des revendications 12 et 13, caractérisée par le fait qu'elle se présente sous une forme administrable par la voie intraveineuse ou la voie intrapéritonéale.