Brevet FR2613621A1 — publié le 19881014

La présente invention a pour objet les composés chimiques constitués par les butyl hydroxyanisoles et leurs sels pour leur utilisation dans une méthode de traitement thérapeutique du corps humain ou animal, en particulier pour leur utilisation dans une méthode de traitement prophylactique. Les composés de l'inven- tion, dénommés composés (I), comprennent notamment les ter-butyl hydroxyanisoles, comme le 3-ter butyl 4-hydroxyanisole (II), le 2-ter butyl 4-hydroxyanisole (III) et le mélange (IV) en propor- tion variable de ces 2 produits, mélange quelquefois désigné sous le terme B.H.A. L'invention a pour objet notamment l'utilisation locale préven- tive des composés (I) pour le traitement prophylactique des maladies provoquées par les rétro-virus, par exemple pour le traitement prophylactique du Sida. Les composés de l'invention et leurs sels, tels que les sels alcalins, sont des composés chimiques, connus depuis longtemps. Les composés (II) et (III) et leur mélange, notamment le composé (IV) dénommé B.H.A, possèdent de très intéressantes propriétés anti-oxydantes, tout en étant aussi peu toxiques que possible vis-à-vis de l'homme et des animaux. Ils sont de ce fait largement utilisés, tel le B.H.A, comme additifs alimentaires pour la conservation des graisses et des huiles comestibles et de nombreux autres aliments à usage humain. Ils sont également utilisés comme conservateurs dans la fabrication des médicaments. Toutefois, il apparaît que ces composés n'ont jamais été utilisés en tant que principes actifs dans un but thérapeutique à l'égard de l'homme ou des animaux. On sait, par ailleurs, que les rétro-virus, dont fait partie le virus du Sida (H.I.V ou H.T.L.V III ou L.A.V.) sont des virus à enveloppe. Or, d'après les connaissances actuelles, il semblerait que le virus du Sida soit pathogène du fait d'un mécanisme en 2 temps: - dans un premier temps, l'enveloppe du rétro-virus adhère à un récepteur de la membrane des cellules telles les lymphocytes T4. - dans un second temps, le rétro-virus pénètre la cellule et, du fait de la transcriptase réverse, son RNA est transcrit en DNA, lequel s'intègre au génome de la cellule infectée, qui, dès lors, est susceptible d'assurer la multiplication du virus. Jusqu'à maintenant les recherches thérapeutiques en matière de Sida ont été essentiellement à visée curative. Dans ce but, elles continuent à porter sur le second temps du mécanisme décrit plus haut, en faisant appel en particulier aux inhibiteurs de la transcriptase réverse ou d'autres enzymes impliquées dans la réplication, la transcription et la traduction des acides nucléiques. Il ne semble pas, au contraire, que jusqu'ici le premier temps du mécanisme supposé d'action du rétro-virus du Sida, ait donné lieu à des études approfondies. C'est précisément pour tenter de développer une thérapeutique prophylactique ou préventive du Sida que l'auteur de la présente invention a porté son attention sur le premier temps de ce mécanisme, c'est-à-dire sur l'adhésion de l'enveloppe virale au récepteur cellulaire, son mécanisme, son substrat biochimique et les moyens de le modifier. L'importance de cette enveloppe est attestée par la taille de l'unité de transcription (ou gène, ou "open reading frame" = orf) correspon- dante. En effet le H.I.V. possède au moins 6 orfs: le plus volumineux (ou "pol") code pour la transcriptase réverse, le suivant en volume (ou "env") code pour une glycoprotéine précurseur (g Pr 160) qui est clivée en glycoprotéine externe (gp ) et glycoprotéine trans-membranaire (gp 41), de dimensions inhabituelles. Il a été alors montré, et c'est ce qui fait l'objet essentiel de la présente invention, que les composés (I) tels que définis plus haut présentent des propriétés remarquables et surprenantes ayant pour effet de supprimer, réduire ou modifier l'infectivité du virus du Sida. Cet effet est dû très vraisemblablement à l'altération de l'enveloppe de ce rétro-virus et, dans cette hypothèse, pourrait donc intervenir au niveau du premier temps du mécanisme évoqué ci-dessus. Un effet voisin a certes été envisagé récemment pour le 2,6-di- ter-butyl-4-méthylphénol ou B.H.T.; il ne s'agissait là toute- fois que d'une hypothèse de travail. Par ailleurs, les études menées antérieurement sur le B.H.A. et le B.H.T., tout particu- lièrement sur ce dernier composé, concernaient des virus n'ap- partenant pas à la catégorie des rétro-virus et suggéraient avant tout des potentialités d'utilisation. Par la suite, l'application du B.H.T. à la prophylaxie de la maladie de Newcastle des poules et au traitement curatif de l'herpès fut essayée mais se révéla très décevante (cf Snipes, Person, Keith, Cupp Science (1975), 187, 64; Wanda, Cupp, Snipes et coll. Antimicrobial Agents and Chemotherapy (1976), vol. 10, page 96; Brugh M. Science. (1977), vol. 197 pages 1291-1292; Freeman D.F., Wenerstrom G., Spruance S.L. Clin. Pharmacol. Therap. (1985), vol. 38, pages 56-59). La présente invention a donc pour objet l'utilisation des compo- sés (I) en tant que agents antiviraux et/ou anti-infectants ou antiseptiques. L'activité antivirale des composés (I) de l'invention, notam- ment du composé (II), a été mise en évidence sur des virus H.I.V. provenant d'un surnageant de culture de cellules continuellement productrices de ce virus. Elle est illustrée plus loin dans la partie expérimentale. En raison de leurs propriétés antivirales et/ou anti-infectantes ainsi que de leur innocuité reconnue à l'égard de l'homme, les composés (I) selon l'invention trouvent leur emploi comme médicaments par exemple dans le traitement prophylactique du Sida, en application locale préventive. Pour une telle utilisa- tion thérapeutique, on prépare, selon les méthodes usuelles, des compositions pharmaceutiques, objet également de l'invention, comportant comme principe actif un composé (I) ou un mélange de composés (I) et un excipient pharmaceutique inerte. Parmi les formes galéniques habituelles propres à assurer au mieux la prophylaxie recherchée, on peut citer notamment les crèmes, pommades, gels, lotions, poudres, émulsions, aérosols. Parmi celles-ci, les aérosols génitaux, les aérosols oraux, les gels vaginaux avec applicateur sont tout particulièrement recommandés. L'excipient utilisé dans ces compositions sera de préférence un excipient visqueux permettant la rémanence du principe actif au niveau des sites potentiels d'inoculation. Parmi de tels excipients, on peut citer: (A) les huiles neutres du type triglycérides d'acides gras saturés d'origine végétale en C8-C12, avec ou sans ions Ca++ (B) l'éthanol à 90-97 %, renfermant 0,10 à 0,20 % d'esters de cellulose, avec ou sans ions Ca++. La dose de composés (I) dans ces compositions peut dépendre de la forme utilisée. Elle sera notamment comprise entre 0,01 % et 1% de principe actif, de préférence de l'ordre de 0,02 %. La dose maximale quotidienne de principe actif, variable selon le sujet à traiter, est de l'ordre de 30 mg, ce qui peut correspondre par exemple pour un aérosol oral à une trentaine de vaporisations. La présente invention a également pour objet l'utilisation des composés (I) pour la fabrication de médicaments destinés au traitement prophylactique des maladies à rétro-virus telles que le Sida, notamment de médicaments permettant une application locale préventive ainsi que pour la fabrication de médicaments ayant une activité antivirale et/ou anti-infectante. La propriété mise en évidence pour les composés (I) d'agir sur l'infectivité du virus responsable du Sida, permet l'utilisation des composés de l'invention, notamment des composés (II) et (IV), pour la préparation de vaccins anti Sida selon les méthodes usuelles de préparation des vaccins. Dans cette utilisation, objet également de la présente invention, les composés (I) agissent comme agents modificateurs de l'infectivité des rétro- virus tout en n'en détruisant pas les caractéristiques physiques et antigéniques. Ils permettent par cette action de préparer des rétro-virus à infectivité atténuée mais à anti-génicité persis- tante pouvant être ainsi à l'origine d'un vaccin. Egalement, Compte tenu des propriétés des composés (I), notamment de leurs propriétés anti-infectantes et/ou antiseptiques, l'invention a encore pour objet ces composés en tant que produits anti-infectants et/ou antiseptiques ainsi que les compositions renfermant ces produits. Ces compositions sont destinées à combattre localement les rétro-virus tels que le virus du Sida en supprimant ou réduisant leur infectivité. De telles compositions, destinées à un usage humain, au vu de leur forme et destination, ne seraient pas ou pourraient ne pas être considérées comme des compositions pharmaceutiques. Parmi les formes possibles d'utili- sation, citons en particulier les gommes à mâcher, les pommades pour lèvres, les savons, les laits, les gels de douche, les bains de bouche. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. L'invention a encore pour objet les produits désinfectants et/ou antiseptiques tels que définis ci-dessus et les compositions les renfermant, destinées à être appliquées sur des objets ou dans des locaux susceptibles d'être infectés par le virus du Sida. 261362i Parmi ces compositions possibles pour un tel usage, on peut citer les aérosols, cires, enduits. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Exemple 1 Une solution mère de 3-ter-butyl 4-hydroxyanisole (II) à 0,5 M dans l'éthanol à 95 % a été préparée et sa compatibilité testée avec le milieu de culture RPMI 1640 additionné de sérum de veau foetal (10 %), d'interleukine II (10 %) et de sérum anti-interfé- ron humain. Il est vérifié que les concentrations 10-5 à 10-3 M de composé (II) ne sont pas toxiques pour les lymphocytes T directement et après lavage. Des virus H.I.V. (provenant d'un surnageant de cellules conti- nuellement productrices de virus H.I.V. de titre supérieur en activité transcriptase réverse à 10-5 cpm/ml) incubés 5, 10, 30 ou 60 minutes à 37 avec des concentrations de 10-5 à 10-3 M de composé (II), sont ensuite mis en contact avec des lymphocytes T d'un donneur normal (stimulés par PHA pendant 3 jours, puis cultivés en milieu additionné d'IL II et de sérum anti-interféron humain). L'infectivité de ces préparations est déterminée en suivant la production virale (activité transcriptase réverse) dans les surnageants de culture de cellules T infectées, à chaque passage cellulaire (tous les 3 ou 4 jours), pendant un mois. L'infectivité des virus H.I.V. est maintenue pour des témoins non traités ou traités par des concentrations de composé (II) 10-5 ou -4 M. Elle disparaît lorsqu'on utilise le composé (II) à la concentration finale de 10-3 M. Exemple 2: aérosol génital L'aérosol génital est constitué par une solution 10-3 M de composé (II) dans un excipient du type (A) ou (B). Cette solution visqueuse est destinée à permettre de recouvrir les régions génitales susceptibles d'être contaminées. Une vaporisation correspondra à 5 ml soit 0,9 mg de principe actif, ce qui permet 30 vaporisations par jour sans dépasser la dose maximale admise pour la voie orale. Exemple 3: aérosol oral L'aérosol oral est constitué par une solution mentholée 10-3 M de composé (II) dans un excipient du type (A) ou (B). Cette solution visqueuse est destinée à permettre de recouvrir la muqueuse endo-buccale. Une vaporisation correspondra également à ml soit 0,9 mg de principe actif. Exemple 4: gel vaginal avec applicateur Le gel vaginal est constitué par un gel 10-3 M de composé (II) destiné à permettre de recouvrir la muqueuse vaginale. La dose unitaire est de 5 ml soit 0,9 mg de principe actif. REVENDICATIONS 1. Composés constitués par les butyl hydroxyanisoles et leurs sels pour utilisation dans une méthode de traitement thérapeuti- que du corps humain ou animal. 2. Composé selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'il est constitué par le 3-ter butyl 4-hydroxyanisole. 3. Composé selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'il est constitué par un mélange de 3-ter butyl 4-hydroxyanisole et de 2- ter butyl 4-hydroxyanisole. 4. Composés selon la revendication 1, 2 ou 3 pour utilisation dans une méthode de traitement prophylactique du corps humain ou animal. 5. Composés selon la revendication 1, 2 ou 3 pour utilisation locale préventive dans une méthode de traitement prophylactique du corps humain ou animal. 6. Composés selon la revendication 1, 2 ou 3 pour utilisation locale préventive dans une méthode de traitement prophylactique des maladies à rétro-virus. 7. Composés selon la revendication 1, 2 ou 3 pour utilisation locale préventive dans une méthode de traitement prophylactique du Sida. 8. Composés selon l'une des revendications 1 à 7 pour utilisa- tion en tant que agents antiviraux. 9. Composés selon l'une des revendications 1 à 7 pour utilisa- tion en tant que agents anti-infectants ou antiseptiques. 10. Composés selon la revendication 8 ou 9 caractérisés en ce que l'effet est exercé sur le virus du Sida. 11. Compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles renferment à titre de principe actif un au moins des composés tels que définis à l'une quelconque des revendications 1 à 10 et un excipient pharmaceutique inerte. 12. Compositions selon la revendication 11 caractérisées en ce que l'excipient est visqueux. 13. Composés constitués par les butyl hydroxyanisoles et leurs sels pour utilisation dans la préparation de vaccins anti-Sida. 14. Composé selon la revendication 13 caractérisé en ce qu'il est constitué par le 3-ter butyl 4-hydroxyanisole seul ou en mélange avec le 2-ter butyl 4-hydroxyanisole. 15. Composés constitués par les butyl hydroxyanisoles et leurs sels pour utilisation comme agents modificateurs de l'infectivité des rétro-virus. 16. Composé selon la revendication 15 caractérisé en ce qu'il est constitué par le 3-ter butyl 4-hydroxyanisole seul ou en mélange avec le 2-ter butyl 4-hydroxyanisole. 17. Composés tels que définis à la revendication 15 ou 16 pour utilisation dans la préparation de rétro-virus à infectivité atténuée mais à anti-génécité persistante 18. Produits anti-infectants et/ou antiseptiques destinés à combattre-l'infectivité des rétro-virus tel que le virus du Sida caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les butyl hydroxy- anisoles et leurs sels. 19. Produit selon la revendication 18 caractérisé en ce qu'il est constitué par le 3-ter butyl 4-hydroxyanisole seul ou en mélange avec le 2-ter butyl 4-hydroxyanisole. 20. Compositions anti-infectantes et/ou antiseptiques à usage humain caractérisées en ce qu'elles renferment au moins un produit tel que défini à la revendication 18 ou 19. 21. Composition selon la revendication 20 caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme de gomme à mâcher. 22. Composition selon la revendication 20 caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'une pommade pour lèvres. 23. Composition selon la revendication 20 caactérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un savon. 24. Composition selon la revendication 20 caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un gel de douche. 25. Composition selon la revendication 20 caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un bain de bouche. 26. Compositions destinées à être appliquées à des objets ou locaux susceptibles d'être infectés par le virus du Sida caracté- risées en ce qu'elles renferment au moins un produit tel que défini à la revendication 18 ou 19. 27. Utilisation de composés tels que définis à la revendication 1, 2 ou 3 pour la fabrication de médicaments destinés au traitement prophylactique du Sida. 28. Utilisation selon la revendication 27 caractérisée en ce que les médicaments sont destinés à une application locale préventi- ve. 29. Utilisation des composés selon la revendication 1, 2 ou 3 pour la fabrication de médicaments ayant une activité antivirale sur le virus du Sida. 30. Utilisation des composés selon la revendication 1, 2 ou 3 pour la fabrication de médicaments ayant une activité anti- infectante sur le virus du Sida. 31. Utilisation du 3-ter butyl 4-hydroxyanisole pour la fabrication d'un médicament selon l'une des revendications 27 à 30.