Brevet FR2618679A1 — publié le 19890203

La présente invention concerne l'utilisation de l'élastine pour la préparation d'une composition pharmaceutique utile dans le traitement des maladies parodontales. La parodonte est l'ensemble des tissus de soutien de la dent. Au niveau de la jonction dent-gencive, il existe un espace, appelé sulcus gingivo-dentaire qui est fermé par l'attache épithélio-conjonctive. Cette attache constitue une barrière entre le milieu extérieur et le milieu interne. La poche parondontale, conséquence de la parodontite se traduit comme le résultat d'un accroissement anormal de la profondeur du sulcus gingivo-dentaire, dû à des réactions inflammatoires successives qui provoquent la dégénérescence des tissus conjonctifs. L'absence d'hygiène bucco-dentaire conduit à une accumulation de la plaque à la jonction dent-gencive et dans, les espaces interdentaires. L'augmentation en volume de la plaque provoque une gingivite qui évolue le plus souvent vers la parodontite. Le traitement de la parodontite consiste à éliminer les irritants locaux (plaque dentaire sous-gingivalef et à restaurer l'architecture osseuse et gingivale. Les moyens utilisés jusqu'ici consistent essentiellement à irriguer quotidiennement les poches parodontales avec une solution de principe actif anti-bactérien ou à introduire dans les poches des capsules contenant un principe actif libéré progressivement. L'élastine est une protéine fibreuse qui est à l'origine de l'élasticité des tissus. Elle existe en très fortes proportions dans les parois des artères et des tendons. Elle entre également dans la composition des tissus constituant le parodonte. De nombreuses applications de l'élastine sont connues, en cosmétologie et en pharmacie, par exemple pour le traitement de la peau vieillissante et de la cholestérolémie, respectivement. La Demanderesse a maintenant découvert que, contre toute attente, l'élastine peut être utilisée avec succès dans le traitement des maladies parondontales. C'est pourquoi, la présente invention concerne l'utilisation de l'élastine pour la fabrication d'une composition utile dans le traitement des maladies parodontales. Ladite composition comporte de préférence jusqu'S environ 2 % en poids d'élastine et plus spécifiquement environ 1 e. Ladite composition peut consister en un gel, un bain de bouche, une solution injectable intra-gingivale, ou encore une solution d'irrigation intra-sulculaire. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaitront à la lecture de la description détaillée qui va suivre, illustrée par un exemple non limitatif. L'inflammation parondontale suit le même modèle que les inflammations d'autres régions. Pour lagencive, ce sont les enzymes protéolytiques libérées par les bactéries de la plaque dentaire et accumulées sur les surfaces dentaires, qui entrainent la disjonction des cellules de la couche basale de l'épithélium. Les formations élastiques du parondonte sont la cible d'enzymes à activité élastasique, et sont rapidement hydrolysées. Une approche pour protéger les formations élastiques de l'hydrolyse consisterait à faire interagir avec leurs composantes des corps capables de se fixer sur de tels substrats, empêchant ainsi l'action élastolytique des enzymes. L'exemple ci-dessous illustre la présente invention et montre l'intért de l'emploi de l'élastine dans le traitement d'une parodontite. EXEMPLE t -: 1) Création d'un modèle inflammatoire chez le rat Les expérimentations détaillées ci-dessous ont été réalisées sur des rats albinos de souche Wistar-Commentry, vivant dans des locaux maintenus à température et à degré hygrométrique constants. 1.a) Définition des lots Les animaux d'un poids moyen de 200 grammes, âgés de 6 semaines en début d'expérimentation, ont été répartis en quatre groupes Dans le lot 1, les animaux subissent une impaction entre la première et la deuxième molaire droites au maxillaire supérieur. L'impaction est réalisée par mise en place d'un coin de bois au niveau du point de contact ; le coin le plus aigu est enfoncé dans l'es- pace interdentaire jusqu'à blanchiment de la gencive adjacente. Dans certains cas, la pression exercée en gendre un léger saignement. Cette intervention est faite sous loupe binoculaire à l'aide d'une précelle et de pinces à écarter les joues ; les rats sont endormis à l'éther. Dans le lot 2, les animaux sont seulement soumis à un régime hyperglucidique 2000 de KEYER (UAR, France). Cet aliment est présenté sous forme pulvérulente il a été transformé en biscuit par adjonction d'eau. La composition du régime hyperglucidique est la suivante (pourcentage en poids) Saccharose 56 % Lait en poudre écrémé 28 % Farine complète de blé 6 % Levure de bière 4% Luzerne en poudre 3 % Poudre de foie 1 % Chlorure de sodium 2 % Dans le lot 3, les animaux subissent à la fois l'im paction et le régime hyperglucidique. Le lot 4 est un groupe de témoins sans aucun traite ment. 1.b) Evolution et modification 81astiques lors~de~l'~n~lam- mation Lot 1 : L'impaction a entrainé une gène à l'alimen tation, dont témoigne la perte de poids des animaux. La gencive palatine ne montre aucun signe dinflam- mation. Après deux semaines, certains animaux ont perdu le matériel d'impaction. La cicatrisation comble progressivement la brèche. Au bout de cinq semaines, les animaux sont identiques aux animaux témoins (lot 4). Lot 2 : Les animaux de ce groupe sont nourris au régime KEYES 2000. L'utilisation de ce régime est une des méthodes les plus fréquemment employées pour induire une maladie parodontale. La plaque bactérienne recouvre progressivement toutes les surfaces dentaires. Le chorion est, dans sa partie superficielle, in- filtré de cellules inflammatoires. Lot 3 : Ces animaux sont nourris au régime de KEYES 2000 et ont subi, en plus, une impaction. Le poids corporel baisse et l'état général se dégrade, avec un début de chute de poils. Au bout de deux semaines, la totalité des molaires est recouverte de plaque bactérienne. Les altérations gingivales sont visibles. Après cinq semaines, on repère un oedème considérable avec une gencive dehiscente. Le modèle d'inflammation décrit en 1.a) montre - une réponse inflammatoire fugace lors d'une impaction induite ; les animaux cicatrisent rapidement ; le réseau élastique lésé se reconstitue de la profondeur vers la surface ; - l'association du régime de KEYES 2000 et d'une effrac tion gingivale perturbe rapidement l'organisation du parodonte. 2) Injection d'une solution d'élastine De l'élastine fibreuse a été préparée à partir de ligament nucal de veau et purifiée par la technique de l'hydrolyse alcaline à chaud. Cette élastine est exempte de toute protéine contaminante, sa pureté a été vérifiée par des procédés d'analyse conventionnels (ROBERT et HORNEBECK 1976). Des peptides de kappa-élastine, obtenus à partir de ltélastine insoluble du ligament nucal de veau, sont préparés par hydrolyse à la potasse en milieu éthanolique (ROBERT et HORNEBECK, 1976). En outre, les peptides d'élastine de faible poids moléculaire (15 KD) sont ensuite éliminés par une chromatographie d'exclusion sur une colonne de Sephadex G-150. Le poids moléculaire apparent des peptides d'élastine qui ont été utilisés, est compris entre 20 et 60 KD. Une solution de ces-peptides d'élastine à 1% en poids, neutralisée à pH 7 dans un tampon P.B.S., a été injectée tous les trois jours, pendant toute la durée de l'expérimentation (5 semaines) aux animaux du lot 3. 3) Résultats 3.a) A l'examen endobuccal Dès la première semaine, les animaux s'alimentent nor malement ; l'observation répétée de la cavité buccale montre un dépôt de plaque de faible quantité au niveau du maxillaire opéré et injecté. Le territoire lésé ne présente pas de signes d'inflammation. Après 5 semaines, du câté non injecté, la plaque dentaire est importante. 3.b) A ltexamen microscopigue En microscopie photonique, les colorations topographiques montrent un épithélium normal de chaque câté de l'ef frac- tion et un chorion organisé en fibres collagènes de type I. Les formations élastiques mises en évidence par un colo rant spécifique sont tout à fait identiques dans leur organisation d celle des gencives de témoins sains. On a déterminé la fraction d'aire A A dans le chorion gingival. AA se définit comme suit avec Ag = aire occupée par les éléments élastiques AT = surface de champ analysée. Pour les animaux du lot 3, traités avec une solution d'élastine, on trouve AA = 9,2 + 0,5 %. Ce résultat est à comparer aux valeurs A'A = 9,7 + 0,5 %, déterminée pour les animaux témoins sains (lot 4) et A" A = 5,1 + 0,3 % pour les animaux impactés (lot 1). Ces résultats montrent que l'utilisation de l'élastine dans le traitement de la parondontite permet de restaurer rapidement la région buccale lésée. On observe une dis parition de l'inflammation par rapport aux sujets témoins impactés et une "protection" des formations élastiques. Dans le cadre de la présente invention, la composition comportant de llélastine peut également se présenter sous la forme d'un bain de bouche, d'un gel ou d'une solution d 'irri- gation intra-sulculaire pour le traitement non chirurgical des poches parodontales. Par solution d'irrigation intra-sulculaire, on entend une solution injectable au moyen d'une pipette ou tout autre moyen (hydropropulseur, seringue...) à l'intérieur des poches parodontales ou au niveau du rebord gingival. REVENDICATIONS 1. Utilisation de ltélastine pour la préparation d'une composition pharmaceutique utile dans le traitement des maladies parodontales. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite composition comporte jusqu'S environ 2 % en poids d'élastine. 3. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que ladite composition comporte environ 1 % en poids d'élastine. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ladite composition est sous la forme d'un gel. 5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ladite est sous la forme d'un bain de bouche. 6. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ladite composition est sous la forme d'une solution injectable intra-gingivale. 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ladite composition est sous la forme d'une solution d'irrigation intra-sulculaire.