Brevet FR2611698A1 — publié le 19880909

ENGRAIS CONTENANT DES MICROORGANISMES ET PROCEDES DE FABRICATION DE CES ENGRAIS. La présente invention concerne un engrais contenant des microorga- nismes et des procédés de fabrication de ces engrais. Il est connu que les plantes de grande culture entretiennent une microflore, constituée par exemple de bactéries fixatrices de l'azote, associées à leurs racines. On a clairement démontré que ces associations rhizosphériques ont un effet de promotion de la croissance végétale. Par addition d'un inoculum d'une bactérie de la rhizosphère on observe une modification du développement racinaire (élongation, poids sec, degré de branchement, nombre de poils absorbants), une modification de la matière sèche totale, et une augmentation du rendement en grains. Ces effets sont probablement dus à une conjonction de plusieurs phénomènes tels que fixation d'azote, production d'hormones de croissance végétale, activité pectinolytique permettant une meilleure absorption minérale... L'influence de l'addition d'inocula de bactéries dans la rhizosphère de plantes est par exemple décrit dans l'article de Gaskins M.H., Albrecht S.L. et Hubbel D. H. Agric. Ecos. Environ 1984 (2) p99-116. On a donc cherché à utiliser un inoculum dans la culture des plantes. Les méthodes utilisées par les chercheurs:inoculation liquide ou sous forme de granulés indépendamment de toute autre pratique agricole ne sont pas réalisables pratiquement au champ du fait du surcroît de travail qu'elles imposeraient aux agriculteurs. On a proposé, pour la culture des légumineuses, de conditionner des inocula sur de la tourbe et d'enrober les semences à l'aide du produit obtenu. Mais ce procédé présente l'inconvénient de mettre en contact direct les microorganismes avec les différents pesticides qui enrobent généralement les graines. Or ces pesticides présentent le plus souvent une forte toxicité vis-à-vis de la plupart des espèces bactériennes. Il serait intéressant de pouvoir mélanger les engrais et les inocula de bactéries de la rhizosphère car on a montré que l'effet d'une inoculation était meilleur en présence de fertilisants minéraux et en parti- culier azotés. En effet, les plantes ayant une bonne nutrition minérale, présentent une forte exsudation racinaire qui favorise le développement de la microfore rhizosphérique. Cependant jusqu'à présent on se heurtait au fait que les inoculums n'avaient pas au contact de l'engrais une viabilité suffisante. Selon la présente invention on a trouvé une forme d'inoculum ayant une viabilité suffisante au contact de l'engrais. La présente invention concerne un engrais contenant des microorga- nismes isolés de la rhizosphère conditionnés par microencapsulation dans une matrice de polysaccharide. On connaît des procédés de microencapsulation de microorganismes dans une matrice de polysaccharide. Un tel procédé est par exemple décrit dans le FR-B-2.320.349 et dans le FR-B-86/09.257 déposé le 26 Juin 1986. Selon le procédé décrit dans ce dernier brevet on: - prépare une culture de microorganismes dans un fermenteur en présence d'oxygène, - arrête l'arrivée d'oxygène et on ajoute du polysaccharide au milieu de culture, applique sur la surface du mélange une surpression de 0,2 à 1,9 bar, introduit le mélange sous pression dans un dispositif comprenant au moins une buse calibrée ayant un diamètre de 0,1 à 0,8 mm, - projette le mélange à l'aide de la (des) buse(s) sous forme de gouttes dans une solution de sel minéral, - rince et sèche le gel obtenu de façon à obtenir un inoculum stockable. Le microorganisme encapsulé est une poudre beige clair; cette poudre beige clair peut être mélangée à tout engrais contenant de l'azote et/ou du phosphore et/ou du potassium. Elle est plus particulièrement mélan- gée aux engrais azotés tels que nitrate d'ammonium ou urée. L'engrais peut être sous forme solide, de suspension ou sous forme liquide. Dans le cas o on traite un engrais solide on peut par exemple mélanger l'engrais granulé avec la poudre d'inoculum microencapsulé dans un tambour, jusqu'à ce que le mélange soit homogène. Les quantités relatives engrais/inoculum utilisables sont de l'ordre de 1000/1 De préférence on pulvérise ensuite sur les granulés un produit d'enrobage. Ce produit peut être une amine, une cire naturelle ou synthéti- que. Le produit d'enrobage a l'avantage de réaliser une adhésion homo- gène de l'inoculum. L'engrais solide peut ensuite être stocké. Dans le cas o l'engrais est sous forme de suspension ou de solu- tion on mélange juste avant épandage l'engrais et l'inoculum et on épand l'ensemble sur le champ à fertiliser. Les exemples donnés ci-dessous à titre non limitatif permettront de mieux comprendre l'invention. EXEMPLE 1. La poudre d'inoculum renfermant une bactérie de l'espèce Azospirillum lipoferum isolée de la rhizosphère du maïs a été encapsulée selon l'exemple 2 du FR-B 86 02 257. On mélange une quantité A d'inoculum pendant 5 minutes environ avec une quantité B de nitrate d'ammonium granulé dans un tambour de granu- lation. Le rapport B/A est de 1000. On pulvérise sur les granulés une quan- tité C d'une huile aminée LILAMINE AC 81L. Cette amine en figeant vient enrober les granulés de nitrate d'ammonium et on obtient une adhésion homo- gène de l'inoculum. Le rapport A/C est de 1. On mesure ensuite le nombre des bactéries viables selon le proto- cole suivant: - 2g de nitrate d'ammonium sont dissous dans 500 ml d'eau distillée stérile. On recueille l'inoculum pulvérulent par filtration sur filtre de porosité (0,45.) - le filtre est mis dans 50 ml de tampon phosphate ayant la composition suivante: KH2P04, 3,336g; NA2HP04, 18,773g; H20 qsp 1 litre et ayant un pH de 7,2. Dans cette solution tampon le polysaccharide est déréticulé. On facilite cette opération en mettant le flacon utilisé 1 heure sur table agitante orbitale. On étale des dilutions décimales sur boite de Petri et on procède à une numération des colonies apparues après incubation de 48 à 72 heures à la température de 35 température optimale de croissance de l'Azopirillum lipoferum. On observe une viabilité de: 1,6 x 109 cellules viables après 26 heures de stockage. 1,5 x 109 " " " 3 jours " 0,7 x 109 " " " 9 jours " 0,3 x 109 " " " I mois " EXEMPLE 2. On utilise une solution azotée de SOLONIA S 390 ayant la compo- sition suivante en poids: CO(NH2)2: 33,2 % NH4NO3: 41,5 % H20: 25,3% On utilise le même inoculum que dans l'exemple 1. On laisse en contact l'inoculum dans le SOLONIA, on filtre la solution contenant les bactéries en l'état et à intervalles réguliers on mesure la viabilité résiduelle des bactéries. La suite du protocole est identique à l'exemple 1. La courbe annexée illustre la survie des bactéries dans un tel milieu. Il est interessant de noter que la plupart des épandeurs de liquides actuels se vident en un temps d'environ 0,5 heure. Par conséquent l'inoculum peut être épandu alors qu'il présente une viabilité importante compatible avec les doses utilisées lors d'inoculation bactérienne au champ. REVENDICATIONS 1. Engrais contenant des microorganismes isolés de la rhizosphère conditionnés par microencapsulation dans une matrice de polysaccaride. 2. Engrais selon la revendication 1 dans lequel la microencapsula- tion est effectuée selon le procédé suivant: - préparation d'une culture de microorganismes dans un fermenteur en présen- ce d'oxygène. - arrêt de l'arrivée d'oxygène et addition du polysaccharide au milieu de culture, - application sur la surface du mélange d'une surpression de 0,2 à 1,9 bar, - introduction du mélange sous pression dans un dispositif comprenant au moins une buse calibrée ayant un diamètre de 0,1 à 0,8 mm. - projection du mélange à l'iade de la (des) buse(s) sous forme de gouttes dans une solution d'un sel minéral. - rinçage et séchage du gel obtenu de façon à obtenir un inoculum stockable. 3. Engrais selon la revendication 1 caractérisé par le fait qu'il est sous forme solide. 4. Engrais selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'on mélange l'engrais solide granulé avec l'inoculum. 5. Engrais selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'on pulvérise une substance d'enrobage sur le mélange d'engrais granulé et d'inoculum. 6. Engrais selon la revendication 4, caractérisé par le fait que l'engrais est sous forme liquide. 7. Engrais selon la revendication 4 préparé par mélange de l'engrais et de l'inoculum juste avant épandage.