Brevet FR2621918A1 — publié le 19890421

2',3'-Didésoxy-4-thio-uridines, procédé de prépa- ration de ces substances et médicaments qui en contiennent. La présente invention concerne de nouvelles 2',3'-didésoxy-4-thio-uridines, un procédé pour les prépa- rer et des médicaments qui en contiennent comme matières actives. Ces composés ont une excellente action antivira- le, et ils sont de ce fait très intéressants comme médica- ments, par exemple et notamment contre la maladie virale qu'est le SIDA. En recherchant de nouveaux composés pouvant avoir une action antivirale et qui soient peu toxiques, les pré- sents inventeurs ont trouvé que la 2',3'-didésoxy-4-thio- uridine, ainsi que des dérivés de cette substance, exercent une excellente action anti-virale et sont de ce fait très intéressants par exemple pour lutter contre le SIDA. Cette invention concerne ainsi les 2', 3'-didésoxy-4-thio-uridines qui sont représentées par la formule générale I ci-dessous, ainsi que des agents anti- viraux,notamment contre le SIDA, qui contiennent ces uridi- nes comme matières actives; S - 2- EN ROH2 0[ Dans cette formule, R représente l'hydrogène ou un groupe protecteur tel que le groupe acétyle, benzoyle, tri- tyle ou autres. La présente invention apporte également un pro- cédé de préparation des 2',3'-didésoxy-4-thio-uridines de formule générale I' ci-dessous: S HNt ! il f R'OHC [I dans laquelle R' représente un groupe protecteur tel que le groupe acétyle, benzoyle, trityle ou autres, procédé caractérisé en ce que l'on fait réagir du pentasul- fure de phosphore avec une 2',3'-didésoxy-uridine de formu- le II OH - NC O 1N[I R'OH2C O. dans de la pyridine, ainsi qu'un procédé de préparation de la 2',3'didésoxy-4-thio-uridine de formule I": - 3- S _ HOH2C I" procédé caractérisé en ce que l'on hydrolyse une 2',3'- didésoxy-4-thio-uridine de formule I' précédente. Les figures 1 et 2 annexées représentent respec- tivement les spectres infra-rouge et ultra-violet du com- posé de cette invention. On peut facilement préparer les présents composés à partir de la 2',3'-didésoxyuridine. En partant de cette substance, on commence par protéger le groupe hydroxyle à la position 5' par un groupe protecteur approprié tel que le groupe acétyle, benzoyle, trityle ou autres, puis on fait réagir le composé ainsi protégé avec du pentasulfure de phosphore dans de la pyri- dine pour le transformer en 2',3'-didésoxy-4-thio-uridine. En éliminant ensuite le groupe protecteur par une méthode courante on obtient avec un haut rendement le composé de l'invention, c'est-à-dire la 2',3'-didésoxy-4-thio-uridine. Dans la réaction d'un dérivé de 2',3'-didésoxy-uridine avec le pentasulfure de phosphore dans de la pyridine comme solvant, il est souhaitable que la proportion du pentasulfure ne soit pas inférieure à 0, 5 mol et soit de préférence de 1 à 2 mol par mol du dérivé, et pour élever encore le rendement de la réaction, il est préférable d'ajouter de l'eau au milieu réactionnel dans une proportion de préférence de 0,5 mol par équivalent mo- laire du pentasulfure de phosphore, car bien que la réac- tion puisse se faire sans addition d'eau, sans cette addition le liquide réactionnel prend une couleur brun noi- ratre et il se forme des matières goudronneuses, ce qui abaisse le rendement. On achève la réaction en chauffant le mélange au reflux pendant 2 à 5 heures puis on concentre la solution en éliminant la pyridine par distillation et on soumet la matière restante à une extraction avec du chloroforme. On peut ainsi obtenir facilement les 2', 3'-didésoxy-4-thio-uridines avec un rendement d'au moins %. En éliminant ensuite le groupe protecteur au moyen d'un alcali ou d'un acide, par une méthode usuelle, on peut obtenir facilement et avec un haut rendement la 2',3'-didésoxy-4-thio-uridine. On peut facilement purifier cette substance par une méthode courante, par exemple chromatographie sur co- lonne, recristallisation ou association de ces deux méthodes. On peut facilement obtenir de manière connue la 2',3'-didésoxy-uridine et ses dérivés à partir de l'uridine qui est un constituant de l'acide ribonucléique. Par exem- ple, dans la méthode décrite dans la publication Chem. Pharm. Bull., 18 (3), 554-560, 1970, on traite l'uridine avec du chlorure de mâthanesulfonyle dans de la pyridine comme solvant pour former la 2',3',5'-tri-O-méthane- sulfonyl-uridine, que l'on fait ensuite réagir avec du ben- zoate de sodium dans de l'acétamide ou du diméthylformamide comme solvant, ce qui donne le 2,2'-anhydro-l(5'-O-benzoyl- 3'-O-mésyl-B-arabinosyl)uracile. On fait alors réagir celui-ci avec du bromure d'hydrogène ou le bromure d'acétyle pour le transformer en 5'-O-benzoyl-2'-bromo-2'- désoxy-3'-O-mésyluridine, que l'on traite avec du charbon palladié ou du nickel Raney comme catalyseur dans de l'éthanol, sous atmosphère d'hydrogène, ce qui donne la '-O-benzoyl-2',3'-didésoxy-uridine avec un rendement d'environ 60% (voir Chem. Pharm. Bull., 18(3), 554-560, 1970). - (1) Exemple de préparation On dissout 3,16 g de 5'-benzoyl-2',3'-didésoxy- uridine dans 50 ml de pyridine avec 0,22 g d'eau distillée, on ajoute à la solution 2,67 g de pentasulfure de phospho- re à la température ambiante et tout en agitant, puis on chauffe le mélange à reflux pendant 3 heures et quand la réaction est terminée on refroidit et on recueille par fil- tration la matière solide qui s'est déposée, qu'on lave avec une petite quantité de pyridine. On concentre à siccité puis on soumet la matière restante à une extraction au chloroforme, ce qui donne 3,15 g de 5'-benzoyl-2',3'- didésoxy-4-thio-uridine avec un rendement de 95%. On dissout cette substance dans 40 ml d'une solu- tion méthanolique à 2% de méthylate de sodium, on chauffe la solution au reflux pendant une heure puis on la neutra- lise avec de l'acide acétique, on la concentre et on puri- fie par chromatographie sur colonne. On purifie encore les cristaux ainsi obtenus en les recristallisant dans du mé- thanol, ce qui donne 1,84 g de 2',3'-didésoxy-4-thio- uridine avec un rendement de 85%, substance qui présente les propriétés physiques suivantes: Cristaux en aiguilles d'un jaune pâle, point de fusion 121-122 C. Spectre de RMN (DMSO-d6); J 1,40-2,70 (4H, m, C2' et C3'-H) 3,40-3,80 (2H, m, C5'-H) 3,80-4,30 (1H, m, C4'-H) ,10 (1H, t, C5'-OH, disparition par addition de D2O) ,90 (1H, q, C1'-H) 6,25 (1H, d, C5-H) 7,95 (1H, d, C6-H) 12,60 (1H, is, N-H, disparition par addition de D2O) Analyse élémentaire: pour la formule C9H12N2SO3 Calculé: C; 47,36, H; 5,30, N; 12,27, S; 14,05 Trouvé: C; 47,46, H; 5,33, N; 12,12, S; 14,08 -- 6 2--91 -6- IR (KBr): voir la figure 1 UV (EtOH): voir la figure 2 (2) Essais antiviraux Exemple i On a déterminé l'action antivirale du composé de formule I' par la méthode de Rowe et al (J.W. Virology 1970, 42, 1136), les résultats obtenus étant indiqués au tableau 1 ci-dessous. Virus: virus de la leucémie murine de Moloney Cellules: SC-1 Tableau 1 Action anti-virale Composé.examiné DE50 (Àm) Composé de l'invention 3,7 AZT 0,02 DDC 4,0 Notes: DE: dose efficace Jm: micromol AZT: 3'-azido-3'-désoxy-thymidine DDC: 2',3'-didésoxy-cytidine Exemple 2: Action sur le virus du sarcome de Rous (RSV) On infecte de ce virus pendant environ 30 minutes des cellules en culture de la première génération (fibroblastes d'embryon de poulet) puis on leur ajoute les -7- échantillons dilués par degrés et après une période de 4 à 7 jours on détermine par un examen au microscope jusqu'à quel degr de concentration est inhibée la transformation des cel- lules due à l'infection par le virus. Tableau 2 Action anti-virale (sur le RSV) Composé examiné Concentration (jg/ml) Composé de l'invention 5 - DDC 0,5 - 1,0 Exemple 3: Action sur le HIV (Virus d'immunodéficience humaine) On infecte du virus HIV des cellules MT-4 pendant une heure à la température de 370C puis on leur ajoute les échantillons dilués par degrés et après une période de 3 jours on détermine par un examen au microscope jusqu'à quel degré de concentration est inhibée la transformation des cellules in- duite par l'infection par le virus. Tableau 3 Action anti-virale (sur le HIV) Composé examiné Concentration (kg/ml) Composé de l'invention 10 DDC 1,0 Comme le montrent les tableaux 1 à 3, les compo- sés de cete invention exercent une excellente action anti- virale, semblable à cille de la DDC,ce qui montre qu'ils sont efficaces comme médicaments contre des maladies virales, par exemple le SIDA ou autres. -9 REVENDICATIONS 1. 2',3'-Didésoxy-4-thio-uridines de formule gé- nérale I ci-dessous: S HN J HN: [I] ROH-C dans laquelle R représente l'hydrogène ou un groupe protec- teur tel que le groupe acétyle, benzoyle, trityle ou autres. 2. Un procédé de préparation des 2',3'-didésoxy-4- thio-uridines de formule générale I' ci-dessous: S HN OkN Y[I'] R'OH2C .0 dans laquelle R' représente un groupe protecteur tel que le groupe acétyle, benzoyle, trityle ou autres, procédé caractérisé en ce que l'on fait réagir avec du pen- tasulfure de phosphore, dans de la pyridine, une 2',3'-didésoxy-uridine de formule générale II: OH O N [II] R'OH2C 3. Un procédé de préparation de la 2',3'-didé- soxy-4-thio-uridine de formule I": - 10- S 01; a Il"] HOH? C. C7 Procédé caractérisé en ce que l'on hydrolyse une 2',3'-didésoxy-4-thio-uridine de formule générale I' défi- nie à la revendication 2 précédente. 4. Médicaments anti-viraux, par exemple contre le SIDA ou autres maladies virales, qui contiennent comme matière active une 2',3'-didésoxy-4-thiouridine de formule générale I ci-dessous: HIZ ROH2C l Oo dans laquelle R représente l'hydrogène ou un groupe protec- teur tel que le groupe acétyle, benzoyle, trityle ou au- tres.