Brevet FR2615508A1 — publié le 19881125

INHIBITEURS DE LA HMG-CqA REDUCTASE CONTENANT DU PHOSPHORE, NOUVEAUX INTERMEDIAIRES ET PROCEDES La présente invention concerne de nouveaux composés phosphorés qui inhibent l'activité de la 3-hydroxy-3- méthylglutaryl-coenzyme A réductase et sont donc utilisables pour inhiber la biosynthèse du cholestérol, des compositions hypocholestérolémiantes contenant ces composés, de nouveaux intermédiaires formés dans la préparation de ces composés et un procédé d'utilisation de ces composés dans ces applications. F.M. Singer et coll., Proc. Soc. Exper. Biol. Med., 102, 370 (1959) et F. H. Hulcher, Arch. Biochem. Biophys., 146, 422 (1971) indiquent que certains dérivés du mevalonate inhibent la biosynthèse du cholestérol. Endo et coll. dans US-A-4 049 495, 4 137 322 et 3 983 140 décrivent un produit de fermentation qui est actif pour l'inhibition de la biosynthèse du cholestérol. Ce produit est appelé compactine et il est indiqué par Brown et coll., (J. Chem. Soc. Perkin I. 1165 (1976)) comme ayant une structure de mévalonolactone complexe. GB 1 586 152 décrit un groupe de composés de synthèse répondant a la formule CE O R2 E R 3 R4 dans laquelle E représente une liaison directe, un pont alkylène en C1 à C3 ou un pont vinylène, et les divers R représentent divers substituants. L'activité indiquée dans le brevet britannique est inférieure à 1 % de celle de la compactine. 2 2615508 US-A-4 375 475 délivré à Willard et coll. décrit des composés hypocholesterolémiants et hypolipemiants ayant la structure H O E 6 2 R1 RR dans laquelle A est H ou un groupe méthyle; E est une liaison directe, CH2-, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2- ou -CH=CH-; R1, R2 et R3 sont choisis chacun parmi H., un atome d'halogène, un groupe alkyle en C1 à C4, haloalkyle en C1 à C4, phényle, phényle substitué par halogène, alcoxy en C1 à C4, alcanoyloxy en C2 à C8, alkyle en Ci à C4 ou haloalkyle en C1 à C4, et OR4 o R4 est H, un groupe alcanoyle en C2 à C8, benzoyle, phényle, halophényle, phényl(alkyle en C1 à C3), alkyle en C1 à C9, cinnamyle, haloalkyle en C1 à C4, allyle, cycloalkyl(alkyle en C1 à C3), adamantyl(alkyle en C1 à C3), ou (phényl substitué)-(alkyle en C1 à C3), dans chacun desquels les substituants sont choisis parmi un atome d'halogène, un groupe alcoxy en C1 à C4, alkyle en C1 à C4 ou haloalkyle en C1 à C4 -; et les dihydroxyacides correspondants, résultant de l'ouverture hydrolytique du cycle lactone, et les sels pharmaceutiquement acceptables de ces acides, et les esters d'alkyle en C1 à C3 des dihydroxyacides substitués par des groupes alkyle en C1 a C3 et phényle, diméthylamino ou acétylamino; tous les composés étant les énantiomères ayant une configuration 4 R dans la partie tetrahydropyrane du racémate trans représenté dans la formule ci-dessus. WO 84/02131 (PCT/EP83/00308) (basé sur la demande de brevet des EUA n 443 668, déposée le 22 novembre 1982, et sur la demande de brevet des EUA né 548 850 déposée le 4 novembre 1983), déposé au nom de la société Sandoz AG, décrit des analogues hétérocycliques de la mévalono- lactone et des dérivés de celle-ci ayant la structure R2 R R o dans laquelle un des symboles R et R est R5 R5a et l'autre est un groupe alkyle en C1 à C6 primaire ou secondaire, cycloalkyle en C3 à C6 ou phényl-(CHz2)m, dans laquelle R4 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C4, alcoxy en C1 à C4 (à l'exception du groupe t-butoxy), trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, R5 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C3, alcoxy en C1 à C3, trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, R5a est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C2, alcoxy en C1 à C2, fluoro ou chloro, et m est 1, 2 ou-3, sous réserve que R et Ra doivent tous deux être un atome d'hydrogène lorsque R4 est un atome d'hydrogène, 1Sa doit être un atome d'hydrogène lorsque R5 est un atome d'hydrogène, pas plus d'un des symboles R4 et R5 n'est un groupe trifluorométhyle, pas plus d'un des symboles R4 et R5 n'est un groupe phénoxy et pas plus d'un des symboles R4 et R5 n'est un groupe benzyloxy, R2 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en CI à C4, cycloalkyle en C3 à C6, alcoxy en C1 à C4 (à l'exception du groupe t-butoxy), trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, R3 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en Ci à C3, alcoxy en C1 à C3, trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, sous les réserves que R3 doit être un atome d'hydrogène lorsque R2 est un atome d'hydrogène, pas plus d'un des symboles R2 et R3 n'est un groupe trifluorométhyle, pas plus d'un des symboles R2 et R3 n'est un groupe phénoxy et pas plus d'un des symboles R2 et R3 n'est un groupe benzyloxy. X est -(CH2)n- ou -CH=CH- (n = 0, 1, 2 ou 3), R6 K6 5 4 3 2 1 Z est -CH-CH2 -C-CH2-COOH II 1 2 1 2 OH o R6 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C1 à C3 sous la forme de l'acide libre ou sous la forme d'un ester physiologiquement hydrolysable et acceptable ou d'une 8-lactone de celui-ci ou sous forme de sel. GB 2162179-A décrit des analogues naphtylés de la mévalolactone utilisable comme inhibiteur de la biosynthèse du cholestérol, ayant la structure Me Me Z R1 dans laquelle R1 est un groupe alkyle en C1 à C3; Zest un groupe répondant aux formules Z1 ou Z2: -CHCH2 CH2 COOR7 OH OH O O (Z1) (Z2) R7 est un atome d'hydrogène, un groupe ester hydrolysable, ou un cation. Le brevet européen nô 164698-A décrit la préparation de lactones utilisables comme agents anti- hypercholestérolémiants en traitant un amide par un halogénure de sulfonyle organique R5SO2X, puis en éliminant le groupe protecteur Pr. R1 R | R3R4 HOH YOH R R o X = halo; Pr = groupe protecteur du carbinol; R1 = H ou CH3; R3, R4 = H, un groupe alkyle en C1 à C3 ou phényl(alkyle en C1 à C3), le groupe phényle étant substitué facultativement par un groupe alkyle en C1 à C3, alcoxy en C1 à C3 ou halo; R2 est un groupe répondant aux formules (A) ou (B): O CH CH3 H 3' H 7 a H[%j'=.3R 7\g R8 (A) R9 (B) Q = R6-C- ou R6-CH; CH3 R6 = H ou OH R = H ou CH3 a, b, c et d sont des doubles liaisons facultatives; R7 est un groupe phényle ou benzyloxy, le cycle étant substitué dans chacun des cas, facultativement, par un groupe alkyle en C1 à C3 ou halo; R8, R9 sont des groupes alkyle en C1 à C3 ou halo; R5 est un groupe alkyle en C1 à C3, phényle ou mono- ou di-(alkyl en C1 à C3)phényle. Anderson, Paul Leroy, dans DE 3 525 256 décrit des analogues naphtylés de mévalonolactones ayant les structures M e. OH H Z -CHCCCC0oR7 A N CMC à 2 2 2 H OH OH O R1 Q, dans lesquelles R1 est un groupe alkyle, Z = Q, Q1; R7 = H, ou un groupe ester hydrolysable, utilisables comme inhibiteurs de la biosynthèse du cholestérol et dans le traitement de l'athérosclérose. WO 8402-903 (basé sur la demande de brevet des EUA 7 2615508 n 460 600, déposée le 24 janvier 1983), déposé au nom de la société Sandoz AG, décrit des analogues de la mevalono- lactone utilisables comme agents hypolipoprotéinémiants ayant la structure X-2 R5a Ro R4 1 4 dans laquelle les deux groupes Ro forment ensemble un radical répondant à la formule [.7 6 57 C - C = C ou -(CE2)4- I Il R2 R3 dans laquelle R2 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C4, alcoxy en C1 à C4 (à l'exception du groupe t-butoxy), trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, R3 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C3, alcoxy en C1 à C3, trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, sous les réserves que pas plus d'un des symboles R et R3 n'est un groupe trifluorométhyle, pas plus d'un des symboles R, et R3 n'est un groupe phénoxy et pas plus d'un des symboles R2 et R3 n'est un groupe benzyloxy, R1 est.un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C6, fluoro, chloro ou benzyloxy, R4 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C4, alcoxy en C1 à C4 (à l'exception du groupe t-butoxy), un groupe trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, R5 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C3, alcoxy en C1 à C3, trifluorométhyle, fluoro, chloro, phénoxy ou benzyloxy, Rs5a est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en Ci à C2, alcoxy en C1 à C2, fluoro ou chloro, et sous les réserves que pas plus d'un des symboles R4 et R5 n'est un groupe trifluorométhyle, pas plus d'un des symboles R4 et R5 n'est un groupe phénoxy et pas plus d'un des symboles R4 et R5 n'est un groupe benzyloxy, E\ (CE2)q X est -(CE2)n-. /C = C\ -(CH2)q E o n est 0, 1, 2 ou 3.et les deux q sont 0, ou bien l'un est 0 et l'autre est 1, Zest R 4 3 2 1 -'CH2E--E CH2-COOH II | 2 F1 2 I OHI OH o R6 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C1 à C3, sous la réserve générale que -X-Z et le groupe phényle portant R4 sont en ortho l'un par rapport à l'autre, sous la forme de l'acide libre ou sous la forme d'un ester physiologiquement hydrolysable et acceptable ou d'une S-lactone de celui-ci, ou sous forme de sel. La demande de brevet européen 127 848-A (Merck & Co., Inc.) décrit des dérivés d'acide 3-hydroxy-5-thia-w- aryl-alcanoiques ayant la formule développée: go 0 S (O) ()n z dans laquelle Z estZ dans laquelle Z est: 9 2615508 R6 j R4 R1 R2 ou R3 R5 n est 0, 1 ou 2; E est -CH2 -, -CH2 -CH2-, -CH2 CH2 -CH2-, -CH=CH-CH2-; ou -CH2-CH=CH-; R1, R2 et R3 sont par exemple un atome d'hydrogène, de chlore, de brome, de fluor, un groupe alkyle en Cl, phényle, phényle substitué ou OR7 o R7 est par exemple un atome d'hydrogène; un groupe alcanoyle en C2 à C8, benzoyle, phényle, phényle substitué,; alkyle en C1 à C9, cinnamyle, haloalkyle en C1 à C4, allyle, cycloalkyl(alkyle en C1 à C3), adamantyl(alkyle en C1 à C3) ou phényl(alkyle en Cl à C3); R4, R5 et R6 sont un atome d'hydrogène, de chlore, de brome ou de fluor ou un groupe alkyle en C1 à C3; et X est par exemple un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C3, un cation dérivant d'un métal alcalin ou l'ammonium. Ces composés ont une activité antihyper- cholestérolémiante en raison de leur capacité d'inhiber la 3-hydroxy-3méthylglutaryl-coenzyme A (HMG-CoA) réductase, et une activité antifongique. La demande de brevet français n 2 596 393 déposée le ler avril 1986 (Sanofi SA) décrit l'acide 3-carboxy-2-hydroxy-propane-phosphonique, y compris ses sels, qui sont utilisables comme agents hypolipemiants et qui répondent à la formule R O OR R 0OC-E 12 1,1 3 R1lOCC2-C2-C-CH -P OH OR4 dans laquelle R1 et R2 sont des atomes d'hydrogène, des groupes alkyle inférieur ou des groupes aralkyle éventuellement substitués; R3 et R4 sont un atome d'hydrogène, un groupe alkyle inférieur, ou un groupe aryle ou aralkyle éventuellement substitué. Ces composés sont indiqués comme donnant des réductions plus importantes des taux de cholestérol, de triglycérides et de phospholipides que le méglutol. La demande de brevet europeen 142 146-A (Merck & Co., Inc.) décrit des composés analogues à la mévinoline, répondant à la formule HO 0 E I z dans laquelle: R1 est par exemple un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C1 à C4; E est -CH2CH2, -CH=CH-, ou -(CH2)r-; et Zest 1) O roue a enR7n C 3 5 o X est -0- ou -NR9 o R est un atome d'hydrogène ou un, groupe alkyle en c1 a C3; R7 est un groupe alkyle en C2 à C8; et R8 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle; 2) R 10 Rl1 R12 o Ro, R1T et R12 sont indépendamment, par exemple un o10 atome d'hydrogène, d'halogène ou un groupe alkyle en C1 à C4 3) :> (R14)n Conformément à la présente invention, il est fourni des composés phosphorés qui inhibent l'enzyme 3hydroxy-3-méthylglutaryl-coenzyme A réductase (HMG-CoA réductase) et sont par conséquent utilisables comme agents hypocholestérolémiants et comprennent la partie suivante t' -P-CE2 -CE-CE2 -Co- 1 C2 C X OH i 2)n dans laquelle X est -O- ou -NH-, n est 1 ou 2 et Z est une "ancre hydrophobe". L'expression "ancre hydrophobe" désigne ici un groupe lipophile qui, lorsqu'il est lié à une chaîne latérale supérieure de la molécule analogue à la HMG par le groupe de liaison approprié ("X"), se fixe à une poche hydrophobe de l'enzyme non utilisée pour fixer le substrat HMG CoA, ce qui conduit à une augmentation de la puissance par rapport aux composés dans lesquels Z est H. Dans des modes de réalisation préférés, les composés de l'invention répondent à la formule I O H 1 2 I I R-p-CH-C-CH2-CO2Rx X OH 1 (CH2)n Z z comprenant les sels de ceux-ci, dans laquelle R est OH, un groupe alcoxy inférieur ou alkyle inférieur; Rx est H ou un groupe alkyle inférieur; X est -O- ou -NH-; n est 1 ou 2 z est une anc1e hydrophobe; et comprenant les sels pharmaceutiquement acceptables de ceux-ci. Les termes "sel" et "sels" désignent des sels basiques formés avec des bases minérales et organiques. Ces sels comprennent les sels d'ammonium, les sels de métaux alcalins comme les sels de lithium, de sodium et de potassium (qui sont les préférés), les sels de métaux alcalino-terreux comme les sels de calcium et de magnésium, les sels avec des bases organiques tels que des sels analogues à des amines, par exemple le sel de dicyclohexylamine, les sels de benzathine, de N-méthyl-D- glucamine, d'hydrabamine, les sels avec des aminoacides tels que l'arginine, la lysine, etc. Les sels non toxiques, pharmaceutiquement acceptables sont préférés, bien que d'autres sels soient également utilisables, par exemple pour isoler ou purifier le produit. Des exemples d'ancres hydrophobes qui peuvent être incluses conformément a la présente invention comprennent, à titre non limitatif i R 2 R2a Ri t Ra R 2 ou R6 I o RS alkyle s (R6a)q dans lesquelles les lignes pointillées représentent des doubles liaisons facultatives, par exemple, R6 R6 I I O O 2 R alkyle alkvle R5 R5 (Ra) (R R- R5w(R 6a) R5 Ra) R6. q R6 q 2R o I i. alkyle alkvle o o alkylealkl R6)q R (Ra)q 6a R5 (R6 o R1, R2, R2 a et R2b peeuvent être identiques ou différents et sont choisis chacun indépendamment parmi H, un halogène, un groupe alkyle inférieur, haloalkyle, phényle, phényle substitué ou ORY, ou Ry est H, un groupe alcanoyle, benzoyle, phényle, halophényle, phényl(alkyle inférieur) , alkyle inférieur, cinnamyle, haloalkyle, allyle, cycloalkyl(alkyle inférieur), adamantyl(alkyle inférieur) ou (phényl substitué)-(alkyle inférieur). Lorsque Z est R6 O ' RS'-'" a!kyle (R6a q R5 et R5 'sont identiques ou différents et sont H, un groupe alkyle inférieur, ou OH; O6R6 est une groupe alkyle inférieur-C tel que O l CH3 -CH2 -C-C- ou arylCH2-; CH3 R7 R6a est un groupe alkyle inférieur, hydroxy, oxo ou un atome d'halogène; q est 0, 1, 2 ou 3, et R7 est H ou un groupe alkyle inférieur; Ainsi, les' composés répondant à la formule I comprennent O II R-P-CHE -CH-CH -CO2RX j 2: H-O 0O OH (CH2)n Z et z O fI R-P-CH -CH-CH2-C02RX 1 2 = 2 O2R NH OH I -'i ( ir2) n z L'expression "alkyle inférieur" ou "alkyle" utilisée ici isolément ou en tant que partie d'un autre groupe comprend à la fois des hydrocarbures à chaines linéaires et ramifiées, contenant 1 à 12 atomes de carbone dans la chaine normale, de préférence 1 à 7 atomes de carbone, tels que les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, tbutyle, isobutyle, pentyle, hexyle, isohexyle, heptyle, 4,4-diméthylpentyle, octyle, 1,2,4-triméthyl- pentyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, leurs divers isomères à chaine ramifiée, etc., ainsi que des groupes comprenant un substituant halo tels que F, Br, Cl ou I ou CF3, un substituant alcoxy, un substituant aryle, un substituant alkyl-aryle, un substituant haloaryle, un substituant cycloalkyle, un substituant alkylcycloalkyle, un substituant hydroxy, alkylamino, un substituant alcanoylamino, un substituant arylcarbonylamino, un substituant nitro, un substituant cyano, un substituant thiol ou un substituant alkylthio. Le terme "cycloalkyle" utilisé ici isolément ou en tant que partie d'un autre groupe comprend des groupes hydrocarbures cycliques saturés contenant 3 à 12 atomes de carbone, de préférence 3 à 8 atomes de carbone, qui comprennent. les groupes cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclohexyle, cycloheptyle, cyclodécyle et cyclododécyle, l'un quelconque de ces groupes pouvant être substitué par 1 ou 2 atomes d'halogène, par 1 ou 2 groupes alkyle inférieur, par 1 ou 2 groupes alcoxy inférieur, par 1 ou 2 groupes hydroxy, par 1 ou 2 groupes alkylamino, par 1 ou 2 groupes alcanoylamino, par 1 ou 2 groupes arylcarbonylamino, par 1 ou 2 groupes amino, par 1 ou 2 groupes nitro, par 1 ou 2 groupes cyano, par 1 ou 2 groupes thiol, et/ou par 1 ou 2 groupes alkylthio. Les termes "aryle" ou "Ar" désignent ici des groupes aromatiques monocycliques ou bicycliques contenant de 6 à atomes de carbone dans la partie cyclique, tels que les groupes phényle, naphtyle, phényle substitué ou naphtyle substitué, dans lesquels le substituant, soit sur le groupe phényle, soit sur le groupe naphtyle, peut être 1, 2 ou 3 groupes alkyle inférieur, des halogènes (Cl, Br ou F), 1, 2 ou 3 groupes alcoxy inférieur, 1, 2 ou 3 groupes hydroxy, 1, 2 ou 3 groupes phényle, 1, 2 ou 3 groupes alcanoyloxy, 1, 2 ou 3 groupes benzoyloxy, 1, 2 ou 3 groupes haloalkyle, 1, 2 ou 3 groupes halophényle, 1, 2 ou 3 groupes allyle, 1, 2 ou 3 groupes cycloalkylalkyle, 1, 2 ou 3 groupes adamantylalkyle, 1, 2 ou 3 groupes alkylamino, 1, 2 ou 3 groupes alcanoylamino, 1, 2 ou 3 groupes arylcarbonylamino, 1, 2 ou 3 groupes amino, 1, 2 ou 3 groupes nitro, 1, 2 ou 3 groupes cyano, 1, 2 ou 3 groupes thiol et/ou 1, 2 ou 3 groupes alkylthio, le groupe aryle contenant de préférence 3 substituants. Les termes "aralkyle", "arylalkyle" ou "aryl(alkyle inférieur)" utilisés ici seuls ou en tant que partie d'un autre groupe, désignent des groupes alkyle inférieur tels que discutés ci-dessus, ayant un substituant aryle, tel que le groupe benzyle. Les expressions "alcoxy inférieur", "alcoxy" ou "aryloxy" ou "aralcoxy" utilisées ici seules ou en tant que partie d'un autre groupe, désignent l'un quelconque des groupes alkyle inférieur, alkyle, aralkyle ou aryle ci-dessus, lié à un atome d'oxygène. Les expressions "alkylthio inférieur", "alkylthio", "arylthio" ou "aralkylthio", utilisées ici seules ou en tant que partie d'un autre groupe comprennent l'un quelconque des groupes alkyle inférieur, alkyle, aralkyle ou aryle ci-dessus, lié à un atome de soufre. Les expressions "alkylamino inférieur", alkylamino", "arylamino", "arylalkylamino", utilisées seules ou en tant que partie d'un autre groupe, comprennent l'un quelconque des groupes alyle inférieur, alkyle, aryle ou arylalkyle ci-dessus, lié à un atome d'azote. Le terme "alcanoyle" utilisé ici en tant que partie d'un autre groupe, désigne un groupe alkyle inférieur lié à un groupe carbonyle. Les termes "halogène" ou "halo" désignent ici le chlore, le brome, le fluor, l'iode et CF3, le chlore ou le fluor étant préféré. On préfère les composés répondant à la formule I qui ont la structure suivante II R 0 CH CH2\ \,, /a2\ 2\ / P C CO R 1 - 2 C2x /A zCE OH Z dans laquelle R est OH, OLi; Rx est Li ou H; X est O ou NH; et Zest R1 R2 dans laquelle R1 est OL Iun groupe phényle qui comprend un substituant -R2a alkyle et/ou halo ou bien Ri est un groupe benzyloxy qui contient un substituant halo; R2 et R2a sont identiques et sont des atomes d'halogène ou des groupes alkyle inférieur R1 Z peut aussi être de préférence R2 o R1 et R2 sont tels qu'ils viennent d'être définis à propos du composé répondant à la formule II, ou bien R6 Z est R5 o R5 est H, CH3 ou OH et R6 est O I CE CE,- 2-,c11, 8ou un groupe (phényl 3- Y"CH 3 substitue) méthyle o R7 est H ou CH3. Les composés répondant à la formule I de l'invention peuvent se préparer conformément à la séquence de réactions suivante et à la description de celle-ci. 6 1 1 a 6H5 Ra-P(Oalky 2 0 OSi-C (CHi3)3 2 al III R -P-CH -Cil-CH -CO alkyle -12 2 2 I 6 5 t Oalkyu 'C(Ci 3)3 I-CIl2-C-Cl2-CO2alkyle Réaction d'Arbuzov\ 2 H 2(Ra = alkyle inférieur Cl C u A ou alcoxy inférieur 6 5 C65 IV o 1. (Ci!3)3- SiBré C112C12 a alkyle Ra 2 -P-CH -ClI-CII2-CO2alkyIe IV 2. 1l20 OII m > si-c Icll Coupure de l'ester i(CH3) de phosphore 15 C6 5 - 6/ 5 C6ll5 VA. - Ra = alkyle inférieur lorsaue Ra était un alkyle inférieur VB. -Ra = O lorsque R était un alcoxy inférieur os Un C> V1 B Rb0o!-DCC O 011) (Rb = alkyle inférieur) Rb-P-Cl 2--C2Co2alkyle _ _ _ _ _ _ _ _ I 2 Pyridine. (Es terification) si -C C3) 3 $i-C {CI!3)] C6115 c6115 oC VI r3 Lni os u3 o VI 1) (COC1)2; C!12C12 (Formation de chlorure d'acide)O c II ou 2) Z- (CII2)n-Xi (Réaction de couplacoe) R -,-CII2- H-CII2CO2alkyle VA. X O (C2115) 3N, DMAP 2(Ci2 Si- (Cil3)3 S/'Y C6115 C61t5 VIl (Re = alkyle inférieur ou alcoxy inférieur) 1) (n-C Il9)4NF, CIl3COOII, TIF (coupure de O VI9I4 3 l'éther silylimue) il X Vil RPCi -I2_Cii.C-2Co2RX 2) OH, dioxane (Hydrolyse) 2 I2 z I. C> CoI Comme on le voit dans la séquence de réactions ci-dessus, les composés répondant à la formule I peuvent se préparer en soumettant l'iodure A à une réaction d'Arbuzov en chauffant l'iodure A O-Si-C(CH3)3 C6H5 I-CH2-C-CH2-CO2alkyl H et le phosphonite/phosphite III III RaP(Oalkyle)2 o Ra est un groupe alkyle inférieur ou alcoxy inférieur, en utilisant les conditions et modes opératoires habituels d'Arbuzov pour former un phosphinate/phosphonate IV IVf IV R-PR-C CH2-H-CH2-CO2alkylE Oalkyl $Si-C(CH3)3 CC6H5 \6H5 Le phosphinate/phosphonate IV est un composé nouveau, et en tant que tel, il fait partie de la présente invention. Le phosphinate/phosphonate IV est ensuite soumis à une coupure de l'ester de phosphore en traitant une solution du composé IV dans un solvant organique inerte tel que le chlorure de méthylène, successivement avec du bis(triméthylsilyl) trifluoracétamide (BSTFA) et du bromure de triméthylsilyle, dans une atmosphère inerte telle-que l'argon pour former l'acide phosphinique VA dans lequel Ra dans IV est un groupe alkyle inférieur, c'est-à-dire O VA alkyle inférieur -_-CH2__- CH2-CO2alkyle OH 0 C5 C6 3)3 C6H5 C6H5 23 21550 ou l'acide phosphonique VB (dans lequel Ra dans IV est un groupe alcoxy inférieur), c'est-à-dire O I VB HO--CH2-CEH-CH2-CO2 alkyle OH O I > si-C(CH3)3 C6E5 C6H5 Les composés VA et VB sont de nouveaux intermédiaires, et en tant que tels, ils font partie de la présente invention. Lorsqu'on obtient l'acide phosphonique VB, on l'estérifie en traitant VB dans de la pyridine sèche par un alcool VC RbOH (o Rb est un alkyle inférieur) et du dicyclohexylcarbodiimide, et on agite le mélange réactionnel en atmosphère inerte, par exemple dans de l'argon, pour former l'ester monoalkylique phosphonique VI O V-I il _ alkyle VI RO-P-C- H-CE Calkyle 1.2= 2 2 OH O I. OR 0 Sî-C(CH3>3 >_j \- 3)3' C6E5 C6H5 L'ester VI ou l'acide phosphinique VA est ensuite dissous dans un solvant organique inerte, tel que le chlorure de méthylène, le benzène ou le tétrahydrofurane (THF) et traité par la triméthylsilyldiéthylamine et agité en atmosphère inerte, par exemple dans de l'argon; on fait évaporer le mélange puis on le dissout dans du chlorure de méthylène (ou un autre solvant organique inerte approprié). On refroidit la solution obtenue à une température dans l'intervalle d'environ 0'C à environ 'C, on la traite par le chlorure d'oxalyle puis on la fait évaporer, ce qui donne du phosphonochloridate brut. On dissout le phosphonochloridate dans un solvant organique tel que le chlorure de méthylène, le benzène, la pyridine ou le THF; on refroidit la solution à une temperature dans l'intervalle d'environ -20 C à environ 0oC et on la traite par B Z-(CH2)n -XH en utilisant un rapport molaire de VI ou VA:B dans l'intervalle d'environ 0,5:1 à environ 3:1, et de préférence d'environ 1:1 à environ 2:1, après quoi on traite par la triéthylamine et la 4-diméthylaminopyridine (DMAP) catalytique pour former le produit d'addition VII VII RC-P- CH2 CH-CH2-C O2alky X 0 (E 2)n S-C(CH3) Z - C6H5 C6H5 o Rc est un groupe alkyle inférieur ou alcoxy inférieur. On soumet le composé VII à une coupure de l'éther silylique en traitant un composé VII dans un solvant organique inerte tel que le tétrahydrofurane, par l'acide acétique glacial et le fluorure de têtrabutylammonium pour former l'ester VIII VIII RC-P-cHE2-CH-CH2-CO2R X OH (CH2)n z (Rx = alkyle). L'ester VIII peut ensuite être hydrolysé en le sel de métal alcalin correspondant ou l'acide, c'est-à-dire, lorsque Rx est un métal alcalin ou H. par traitement par une base forte, telle que l'hydroxyde de lithium en présence de dioxanne, le tétrahydrofurane ou un autre solvant organique inerte, dans une atmosphère inerte telle que l'argon, à 25 C, en utilisant un rapport molaire base:ester VIII dans l'intervalle d'environ 1:1 à environ 1,1:1, pour former le sel de métal alcalin correspondant 0O il VIIIA R-P-CH2-CH-CH2-C02 métal alcalin X OH n z ICtt2)n Z o R est un groupe alkyle inférieur ou alcoxy inférieur. Le composé VIIIA peut alors être traité par un acide fort tel que HCl pour former l'acide correspondant VIIIB O I VIIIB R-P-CH2-CH-CH2-Co2H X OHE I ( iCH2)n. Z L'ester VIII dans lequel R est un groupe alcoxy inférieur, peut être tansformé en le sel de di-métal alcalin correspondant, en traitant i'ester VIII par une base forte à 50-60 C en utilisant un rapport molaire base:ester VIII dans l'intervalle d'environ 2:1 à envrion 4:1 pour former VIIIC O VIIIC métal alcalin O-P-CH2-CH-CH2-C02 métal alcalin X OH (CH2)n Z Le sel de di-métal alcalin VIIIC peut être transformé en l'acide correspondant dans lequel R est OH par traitement par un acide fort tel que HCl, pour former VIIID O0 Il VIIID HO-P-CH -CH-CHE-CO2H VIIID t 2 2-O2 X OH I (CE2)n L'iodure de dpart A peut tre prpar en partant duz L'iodure de départ A peut être préparé en partant du bromure C OE Br-CH2-CHCH2CO2alkyie (préparé en utilisant les modes opératoires décrits dans Tetrahedron Lett. 26,,295l (1985)) lequel est dissous e, solution dans du diméthylformamide (DMF) avec de l'imidazole et de la 4diméthylaminopyridine, et la solution obtenue est traitée par le chlorure de t-butyldiphénylsilyle en atmosphère inerte, par exemple dans l'argon, pour former l'éther silylique D C6H5 C6E5 \/ oSi-C(CH3)3 D Br-CH2-C-CCE2CO2alkye On traite une solution de l'éther silylique D dans un solvant organique inerte tel que la méthyléthylcétone ou le DMF par l'iodure de sodium, dans une atmosphère inerte telle que l'argon, pour former l'iodure A. Le composé de départ B B Z-(CH2)n-XH peut se préparer comme il est décrit ci-dessous, suivant la définition de Z et X. Ainsi, les composés répondant à la formule B dans laquelle Z est R1 R2a R2 et X est 0, c'est-à-dire les composés répondant à la formule R1 Bi R (CE2) n-OH R peuvent se préparer en traitant l'aldéhyde E R1 E R2a (CE2)n 1-CHO l0 R2 par un agent réducteur tel que l'hydrure de lithium et d'aluminium ou le borohydrure de sodium. Les composés répondant à la formule B dans laquelle Z est R1 R2a R2 et X est N, c'est-à-dire les composés répondant à la formule R1 B2 R2a CH) n-NE2 2 n 2 peuvent se préparer en oxydant l'aldéhyde E en traitant E en solution dans de l'acétone, avec par exemple du réactif de Jones pour former l'acide F R1 F R2a (CH2) 2 n COOH 28 2615508 lequel, en suspension dans du chlorure de méthylène, est traité par le chlorure d'oxalyle pour former le chlorure d'acide correspondant, qui est dissous dans un solvant organique inerte tel que le tétrahydrofurane et traité par un mélange d'hydroxyde d'ammonium concentré dans le tétrahydrofurane pour former un amide répondant à la formule R1 G R2a (CE2)l--N L'amide G est ensuite réduit en l'amide correspondant B2 en traitant G par un agent réducteur tel que l'hydrure de lithium et d'aluminium. Les composés de départ répondant à la formule B dans laquelle Z est *R' O-R6 H (R6a)g alkyle et X est O ou -NH-, c'est-à-dire les composés répondant à la formule 5 R, R5 '.._R6 0 R6 2)nX (R6a)> alkyle (Ra)- 29 2615508 dans laquelle X est O, sont décrits par C. H. Heathcock et coll., J. Org. Chem. 50, 1190 (1985). Les composes répondant à la formule EH' dans laquelle X est NH peuvent se préparer par amination réductrice de N0 CHO Ji a!lky le R5'. RR6a R q (préparé comme il est décrit par C. H. Heathcock et coll., article précité) en traitant J par l'acétate d'ammonium et le cyanoborohydrure de sodium, en présence d'un alcool tel que le méthanol comme solvant. Le composé de départ répondant à la formule B dans laquelle Z est R2a R1 RZb R2 et X est 0, c'est-à-dire les composés répondant à la formule R2a R1 X0 ( CE2) n-OH R2b R2 sont décrits dans WO 8402-903-A et dans GB 2.162. 179A, tous deux déposés au nom de Sandoz. Les composés de départ répondant à la formule B dans 2615508 laquelle Z est R2a R -A R2b R2 et X est NH, c'est-à-dire les composés répondant à la formule R2a R1 N l5 N (CE2) n-NH2 N 2 R2b 'R2 peuvent se préparer par amination réductrice de l'aldéhyde o R R2a R1 > (CE 2)R-1 CEO RZb R2 en traitant O par l'acétate d'ammonium et le cyanoborohydrure de sodium en présence d'un alcool tel que le méthanol comme solvant. Les composés de l'invention peuvent se préparer sous forme de mélanges racémiques et peuvent être dédoublés ultérieurement pour obtenir l'isomère S qui est préféré. Cependant, les composés de l'invention peuvent se préparer directement sous la forme de leurs isomères S comme il est décrit dans le présent mémoire, et dans les exemples de travail donnés ci-dessous. Les composés de l'invention sont des inhibiteurs de la 3-hydroxy-3-méthylglutaryl coenzyme A (HMG-CoA) 31 2615508 réductase et sont par conséquent utilisables pour inhiber la biosynthèse du cholestérol, comme le démontrent les essais suivants. 1) Réductase du HMG-CoA hépatique du rat L'activité de la réductase du HMG-CoA hépatique du rat est mesurée en utilisant une variante de la méthode décrite par Edwards (Edwards, P.A., et coll. J. Lipid Res. :40, 1979). Des microsomes hépatiques de rat sont utilisés comme source d'enzyme, et l'activité de l'enzyme est déterminée en mesurant le taux de conversion du substrat de 14C-HMG-CoA en acide 14 C-mevalonique. a. Préparation des microsomes Les foies sont prélevés sur 2 à 4 rats Sprague Dawley, nourris à la cholestyramine, décapités, et ils sont homogénéisés dans un tampon phosphate A (phosphate de potassium 0,04 M, pH 7,2; KC1, 0,05 M; saccharose, 0,1 M; EDTA, 0,03 M; aprotinine, 500 unités KI/ml). L'homogénéisat est centrifugé à 16 000 x g pendant 15 minutes à 4 C. Le liquide surnageant est retiré et centrifugé dans les mêmes conditions une seconde fois. Le second liquide surnageant à 16 000 x g est centrifugé à 000 x g pendant 70 minutes à 4'C. Les microsomes granulés sont remis en suspension dans un volume minimum de tampon A (3-5 ml par foie), et homogénéisés dans un homogénéiseur verre/verre. On ajoute du dithiothréitol (10 mM) et on prélève des parties aliquotes de la préparation, que l'on surgèle dans de l'acétone/glace sèche et que l'on stocke à -80 C. L'activité spécifique de la première préparation microsomique est de 0,68 nmole d'acide mévalonique/mg de proteine/minute. b. Dosage de l'enzyme La réductase est dosée dans 0,25 ml qui contiennent les constituants suivants aux concentrations finales indiquées: Phosphate de potassium 0,04 M, pH 7,0 KC1 0,05 M Saccharose 0,10 M EDTA 0,03 M 32 2615508 Dithiothréitol 0,10 M NaCl 3,5 mM Sulfoxyde de diméthyle à 1 % Protéine microsomale 50-200 pg 14C-[DL]HMG-CoA 100 gm (0,05 pJCi, -60 mCi/mmole) NADPH (nicotinamide adénine dinucleotide phosphate) 2,7 mM Les mélanges réactionnels sont incubés à 37 C. Dans les conditions décrites, l'activité enzymatique augmente linéairement jusqu'à 300 jg de protéine microsomique par mélange réactionnel, et elle est linéaire-par rapport au temps d'incubation jusqu'à 30 minutes. Le - temps d'incubation étalon choisi pour les études de médicaments est de 20 minutes, ce qui conduit à un taux de conversion de 12 à 15 % du substrat de HMG-CoA par rapport à l'acide mévalonique formé. Le substrat de [DL-]HMG-CoA est utilisé à 100 jM, soit deux fois la concentration nécessaire pour saturer l'enzyme dans les conditions décrites. Le NADPH est utilisé en excès à raison de 2,7 fois la concentration nécessaire pour obtenir la vitesse maxima de l'enzyme. Des essais normalisés pour l'évaluation des inhibiteurs sont effectués par le mode opératoire suivant. L'enzyme microsomique est incubée en présence de NADPH à 37'C pendant 15 minutes. Comme véhicule, on ajoute du DMSO avec ou sans composé d'essai, et on continue à incuber le mélange pendant 15 minutes à 37"C. Le dosage de l'enzyme est amorcé en ajoutant du 14C-HMG-CoA comme substrat. Au bout de 20 minutes d'incubation à 37'C, on arrête la réaction par addition de 25 pl de KOH à 33 %. On ajoute de l'acide 3H-mévalonique (0,05 pCi), et on laisse reposer le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 30 minutes. On ajoute 50 pil de HC1 5N pour lactoniser l'acide mévalonique. On ajoute du bleu de bromophénol comme indicateur de pH pour suivre une baisse adéquate du pH. On laisse la lactonisation s'effectuer pendant 30 minutes à la température ambiante. On centrifuge les mélanges 33 2615508 réactionnels pendant 15 minutes à 2800 tours/minute. On forme une couche des liquides surnageants sur 2 grammes de résine échangeuse d'anions AG AX8 (Biorad, forme formiate), on les verse dans des colonnes de verre de 0, 7 cm de diamètre interne et on les élue avec 2,0 ml de H2 O. On jette les premiers 0,5 ml, on recueille les 1,5 ml suivants et on les soumet à un comptage à la fois du tritium et du carbone 14 dans 10,0 ml de fluide de scintillation Opti-fluor. On calcule les résultats en nmoles d'acide mévalonique produit en 20 minutes, et on les corrige pour une récupération du tritium de 100 -%. Les effets des médicaments sont exprimés par les valeurs I50 (concentration du médicament produisant une inhibition de % de l'activité de l'enzyme) obtenues à partir des résultats de réponses à la dose - composite avec l'intervalle de confiance à 95 % indiqué. La transformation des médicaments dans la forme lactone en leurs sels de sodium est effectuée en solubilisant la lactone dans du DMSO, en ajoutant un excès molaire de NaOH de 10 fois, et en laissant reposer le mélange à la température ambiante pendant 15 minutes. On neutralise ensuite le mélange partiellement (pH 7,5-8,0) en utilisant du HC1 0,1N, et on le dilue dans le mélange réactionnel d'enzyme. 2) Synthèse du cholestérol dans des hépatocvtes de rat fraîchement isolés On évalue les composés qui montrent une activité comme inhibiteurs de la HMG-CoA réductase en ce qui concerne leur capacité- d'inhiber l'incorporation du 14C-acetate dans le cholestérol dans des suspensions d'hépatocytes de rat fraichement isolés en utilisant des méthodes initialement décrites par Capuzzi et coll. (Capuzzi, et Margolis, S., Lipids, 6:602, 1971). a. Isolement d'hépatocytes de rat On anesthésie des rats Sprague Dawley (180-220 grammes) avec du Nembutol (50 mg/kg). On ouvre l'abdomen et on ligature la première branche de la veine porte. On injecte de l'héparine (100-200 unités) directement dans la 34. 2615508 veine cave abdominale. On place une suture de fermeture unique sur la section distale de la veine porte, et on munit la veine porte d'une canule entre la suture et la première ramification. On perfuse le foie, à un débit de 20 ml/minute avec un tampon A préchauffé (à 37 C), oxygéné (HBSS sans calcium ni magnésium, contenant 0,5 mM d'EDTA) après avoir coupé la veine cave pour permettre le drainage de l'effluent. On perfuse en outre le foie avec 200 ml de tampon B préchauffé (HBSS contenant 0,05 % de collagénase bactérienne). Après perfusion avec le tampon B, on excise le foie et on le décapsule dans 60 ml de milieu de Waymouth, en permettant aux cellules libres de se disperser dans le milieu. On isole les hépatocytes par centrifugation à faible vitesse pendant 3 minutes à 50 g à la température ambiante. On lave une fois les hépatocytes tranformés en pastilles dans du milieu de Waymouth, on les compte et on les soumet à un essai de viabilité par exclusion de bleu trypan. Ces suspensions cellulaires enrichies en hépatocytes présentent habituellement une viabilité de 70 à 90 %. b. Incorporation de L6-C-acetate dans du cholestérol On remet les hépatocytes en suspension à raison de 5 x 106 cellules pour 2,0 ml dans un milieu d'incubation (IM) [tris-HCl 0,02 M (pH 7,4), KC1 0,1 M, citrate de sodium 3,3 mM, nicotinamide 6,7 mM, NADP 0,23 nM, glucose-6-phosphate 1,7 mM]. On soumet les composés d'essai à une dissolution de routine dans du DMSO ou du DMSO:H2O (1:3) et on les ajoute au IM. La concentration finale en DMSO dans le IM est du cholestérol. On amorce l'incubation en ajoutant du 14C-acétate (58 mCi/mmole, 2 pCi/ml) et en plaçant les suspensions cellulaires (2,0 ml) dans des récipients pour culture de tissus de 35 mm, à 37 C pendant 2,0 heures. Après incubation, on fait passer les suspensions cellulaires dans des tubes de centrifugeuse en verre et on les centrifuge à 50 x g pendant 3 minutes à la température 2615508 ambiante. On remet en suspension les pastilles de cellules et on les lyse dans 1,0 ml d'H20, et on les place dans un bain de glace. On extrait les lipides en se conformant essentiellement à la description de Bligh, E. G. et W. J. Dyer, Can. J. Biochem. and Physiol., 37:911, 1959. On élimine la phase organique inférieure et on la sèche sous un courant d'azote, et on remet le résidu en suspension dans 100 pl de chloroforme:méthanol (2:1). On dépose l'échantillon total sous forme de tache sur des plaques portant une couche mince de gel de silice (LK6D) et on les développe dans de l'hexane:éther éthylique:acide acétique (75:25:1). On balaye les plaques et on les compte en utilisant un système de balayage automatisé BioScan. On détermine le radiomarquage dans le pic du cholestérol (Rf 0,28) et on exprime en coups totaux par pic et en pourcentage du marquage dans l'extrait lipidique total. Les pics du cholestérol dans les cultures témoins contiennent habituellement 800-1000 cpm et constituent 9 à 20 % du marquage présent dans l'extrait lipidique total; résultats compatibles avec Capuzzi et coll., indiquant 9 % du marquage extrait dans le cholestérol. On détermine les effets des médicaments (pourcentage d'inhibition de la synthèse du cholestérol) en comparant le pourcentage de marquage dans le cholestérol pour les cultures témoins et traitées par le médicament. On construit des courbes dose-réponse à partir des résultats composites de deux études ou davantage, et on exprime les résultats en valeur de I50 avec un intervalle de confiance de 95 %. 3. Synthèse du cholestérol dans des fibroblastes de peau humaine La sélectivité du composé favorisant une activité inhibitrice plus élevée dans un tissu hépatique serait un attribut favorable pour un inhibiteur de la synthèse du cholestérol. Par conséquent, en plus de l'évaluation des inhibiteurs de la synthèse du cholestérol dans les hépatocytes, ces composés sont également soumis à des 36 - 2615508 essais d'activité comme inibiteurs de la synthèse du cholestérol dans des fibroblastes cultivés. a. Culture de fibroblastes de peau humaine On cultive des fibroblastes de peau humaine (passage 7-27) dans du milieu essentiel minimum- d'Eagle (EM) contenant 10 % de sérum de veau foetal. Pour chaque expérience, des cellules de réserve sont trypsonisées pour disperser la monocouche cellulaire, elles sont comptées et appliquees dans des puits de culture de tissus de 35 mm (5 x 105 cellules/2,0 ml). Les cellules sont incubées pendant 18 heures à 37 C dans l'air d'une pièce humidifiée à 95 % contenant 5 % de C02. Les enzymes de la biosynthèse du cholestérol sont induites en éliminant le milieu contenant du sérum, en lavant les monocouches de cellules et en ajoutant 1,0 ml de EM contenant 1,0 % de sérum albumine de bovin exempte d'acide gras, et en faisant incuber les cultures pendant 24 heures supplémentaires. b. Incorporation de 1-4-C-acétate dans du cholestérol On lave les cultures de fibroblastes induites avec du EMEM100 (milieu essentiel minimum d'Earle). On dissout les composés d'essai dans du DMSO ou du DMSO:EM (1:3) (concentration finale en DMSO dans les cultures cellulaires 37 2615508 l'analyse comme il a été décrit pour les hepatocytes. L'inhibition de la synthèse du cholestérol est déterminée en comparant le pourcentage de marquage dans le pic du cholestérol provenant du témoin et des cultures traitées par le médicament. Les résultats sont exprimés par les valeurs de I50 et sont obtenus à partir des courbes dose-réponse composites provenant de deux expériences ou davantage. On calcule également l'intervalle de confiance à 95 % pour la valeur de I50 à partir des courbes dose-réponse composite. Un autre aspect de la présente invention est une composition pharmaceutique constituée d'au moins un des composés répondant à la formule I, associée à un excipient ou diluant pharmaceutique. La composition pharmaceutique peut être formulée en utilisant des excipients ou diluants solides ou liquides classiques et des additifs pharmaceutiques d'un type approprié au mode d'administration désiré. Les composés peuvent être administrés par voie orale, par exemple sous la forme de comprimés, de capsules, de granulés ou de poudre, ou ils peuvent être administrés par voie parentérale sous la forme de préparations injectables, ces formes d'administration contenant de 1 à 2000 mg de composé actif par dose pour l'utilisation dans le traitement. La dose à administrer dépend de la dose unitaire, des symptômes, de l'àge et du poids corporel du malade. Les composés répondant à la formule I peuvent être administrés d'une manière similaire aux composés connus dont l'utilisation est suggérée pour inhiber la biosynthèse du cholestérol, tels que la lovastatine, chez des espèces de mammifères tels que l'homme, le chien, le chat, etc. Ainsi, les composés de l'invention peuvent être administrés dans des quantités d'environ 4 à 2000 mg en une dose unique ou sous la forme de doses individuelles de 1 à 4 fois par jour, de préférence de 4 à 200 mg par doses divisées de 1 à 100 mg, adéquatement de 0,5 à 50 mg 2 à 4 fois par jour ou sous une forme à libération retardée. Les exemples de travail suivants représentent des 2 6 1 55 0 8 modes de réalisation préférés de la présente invention. Sauf indication contraire, toutes les températures sont en degrés celsius. La chromatographie éclair a été effectuée sur du gel de silice soit Merck 60, soit Whatmann LPS-I. La chromatographie en phase inversée a été effectuée sur un gel de résine CHP-20 MCI fourni par Mitsubishi, Ltd. Exemple 1 Acide (S)-4-rrr4'-fluoro-3,3',5-triméthylrl,l'- biphénvll-2-yllméthoxylméthoxvphosDhinvll-3-hydroxy- butanoicue, sel monolithique A. N-(2 4-diméthylbenzylidène)benzènamine Réf. Merck US-A-4 375 475, p. 39. On chauffe sous reflux pendant 3,0 heures sous argon, dans un ballon équipé d'un appareil Dean-Stark, une solution de 2,4-diméthylbenzaldéhyde fraîchement distillé (Aldrich, 4,56 ml, 50 mmoles) et d'aniline distillée (Aldrich, 4,56 ml, 50 mmoles) dans du toluène sec (80,0 ml). On refroidit le mélange puis on le fait évaporer sous vide pour donner une huile jaune. On purifie l'huile brute par distillation dans un tube à boule (0,5 mm de Hg, 160-180 C) ce qui donne 8,172 g (78,1 %) de la benzènimine désirée sous la forme d'une huile jaune clair qui cristallise au repos pour donner un solide à bas point de fusion. Chromatographie sur couche mince hexane-acétone (4:1), Rf = 0,67 et 0,77 (isomères géométriques), U.V. et 12. B. N H3C Pd OCCH CE3 2 Réf. Merck US-A-4 375 475, p. 39. On traite un mélange de benzènimine de la partie A (6,0 g, 28,7 mmoles) dans du HOAc glacial (144 ml) par de l'acétate de palladium (II) (6,44 g, 28,7 mmoles) et on chauffe sous reflux la solution homogène limpide, rouge, pendant une heure. On filtre à chaud le mélange trouble obtenu à travers un lit tassé de Célite de 12,7 mm dans 900 ml d'H2O. On recueille par filtration le solide orangé qui précipite et on le sèche sous vide à 65 C sur P205 pendant 16,0 heures, ce qui donne 10,627 g (85,5 %) du complexe du palladium en titre désiré sous la forme d'un solide orangé fondant à 194-196"C. (Point de fusion d'un échantillon analytique recristallisé, dans la littérature = 203-205oC). C. 4'-fluoro-33',5-triméthvlrl,1'-biphényll-2- carboxaldéhyde (1) Bromor4-fluoro-3-méthylphényll-maqnésium Réf. Merck US-A-4 375 475, p. 37 et 38. On prépare le réactif de Grignard de la partie C(1) en titre en ajoutant goutte à goutte du 5-bromo-2-fluoro- toluène (22,5 g, 60,9 mmoles, Fairfield Chemical Co.) avec un débit suffisant pour maintenir la réaction au reflux, à des tournures de magnésium (1,35 g, 55,4 mmoles, 8,0 eq.) dans du Et2O sec (70,0 ml). On amorce la réaction dans un dispositif à ultrasons. Lorsque l'addition de bromure est terminée, on agite le mélange pendant une heure sous argon à la température ambiante, on le chauffe sous reflux pendant 15 minutes puis on le laisse refroidir à la température ambiante. (2) 4'-fluoro-3,3',5-triméthvlr1,1'-biphényl]-2- carboxaldéhyde Dans un second ballon, on agite à la température ambiante, sous argon, pendant 30 minutes, un mélange du complexe de dipalladium de la partie B (3,0 g, 6,92 mmoles) et de triphénylphosphine (14,52 g, 55,4 mmoles, 8,0 eq.) dans du benzène sec (100 ml). On ajoute alors en une seule portion, au moyen d'une canule, à cette solution, du réactif de Grignard fraîchement préparé et filtré (sur un tampon de laine de verre) de la partie C(i) et on agite le meélange pendant 1,5 heure à la température ambiante, sous argon. On ajoute du HCl 6,0 N (35 ml), on agite le mélange pendant une heure supplémentaire à la température ambiante, puis on le filtre sur un lit de Celite tassé de 12,7 mm. On extrait le filtrat avec de l'Et2O (250 ml), on lave l'extrait avec de la saumure (2 x ml), on le sèche sur MgSO4 et le fait évaporer sous vide, ce qui donne 13,35 g d'une huile orangée visqueuse qui cristallise au repos. On purifie le solide orangé brut par chromatographie éclair sur gel de silice (700 g) en éluant avec de l'hexane, puis de l'hexane-EtzO (95:5). On fait eaporer les fractions de produit, ce qui donne 1,507 g (89,9 %) de l'aldéhyde en titre désiré sous la forme d'un solide jaune clair fondant à 72-75 C (La littérature indique p.f. = 73-74 C). Chromatographie sur couche mince : hexane-Et2O (95:5), Rf = 0,40, U.V. et PMA. D. 4'-fluoro-3.3',5-triméthvlrl,l'-biphényl!-2- méthanol On traite une solution refroidie (à 0OC, au bain de glace) d'Et2O sec (15,0 ml) par LiAlH4 (259 mg, 6,82 mmoles, 0,55 eq) et on traite goutte à goutte la suspension grise, sur une durée de 15 minutes, par une solution de l'aldéhyde de la partie C (3,0 g, 12,4 mmoles) dans de l'Et2 O sec (15 ml). On agite le mélange à la température ambiante, sous argon, pendant 30 minutes, puis on le refroidit à 0 C et on fixe sa réaction par addition goutte à goutte successive de 260 pi d'H20O, 260 pl de NaOH à 15 % et 780 p1 d'H2O. On dilue la suspension avec de i'EtOAc, on la filtre à travers du Na2 S04 anhydre sur de la Celite tassée (lit de 6,35 mm) et on fait évaporer le filtrat incolore sous vide, ce qui donne 2,99 g (98,8 %) d'un solide blanc. La trituration du solide brut avec de l'hexane froid et le séchage sous vide fournissent 2,467 g (80,6 %) de l'alcool désiré, sous la forme d'un solide blanc fondant à 102-103 C. Chromatographie sur couche mince: hex-EtOAc (9:1), Rf = 0,24, U.V. et PMA. E. Acide (S)-3-rr(1,1 diméth léthyl)diDhén lsilv17- oxYl-4-(hydroxyméthoxyrhosphinyl)butanoique, ester methy- lique 41 2 6 1 5 5 8 (1) Acide (S)-4-bromo-3-hydroxybutanoique, ester méthvliaue (l)(a) Acide rR-(R*-_R)1 -2,3,4-trihydroxvbutanoicue sel de calcium, hydrate. Réf. Carbohydrate Research 72, p. 301-304 (1979). On ajoute du carbonate de calcium (50 g) à une solution d'acide D-isoascorbique (44,0 g, 250 mmoles) dans de l'eau (625 ml), on refroidit la suspension à 0C (au bain de glace), et on la traite par portions avec H202 à 30% (100 ml). On agite le mélange à 30-40 C (au bain d'huile) pendant 30 minutes. On ajoute du Darco (10 g) et' on chauffe la suspension noire sur un bain de vapeur jusqu'à ce que cesse le dégagement d'O2. On filtre la suspension sur Celite, on la fait évaporer sous vide (température du bain 40 C). On reprend le résidu dans de l'eau (50 ml), on le chauffe au bain de vapeur et on ajoute de l'alcool méthylique jusqu'à ce que la solution soit trouble. On recueille par filtration le solide gommeux qui précipite et on le sèche à l'air, ce qui donne 30,836 g (75,2 %) du sel de calcium désiré, sous la forme d'un solide blanc pulvérulent. Chromatographie sur couche mince iPrOH-NH4OH-H2O (7:2:1), Rf = 0,19, PMA. (1) (b) Acide rS-(RL-S-L)]2 4-dibromo-3-hvdroxv- butanoique, ester méthylicue. Réf. Bock, K. et coll., Acta Scandinavica (B) 37, p. 341-344 (1983). On dissout le sel de calcium de la partie (1) (a) (30 g) dans du HBr à 3032 % dans de l'acide acétique (210 ml) et on agite à la température ambiante pendant 24 heures. On ajoute ensuite du méthanol (990 ml) à la solution brune et on l'agite pendant une nuit. On fait évaporer le mélange pour donner une huile orangée, on le reprend dans de l'alcool méthylique (75 ml), on le chauffe sous reflux pendant 2,0 heures et on le fait évaporer. On partage le résidu entre de l'EtOAc (100 ml) et de l'eau, on lave la phase organique avec de l'eau (2 fois) et de la saumure, puis on la sèche sur sulfate de sodium anhydre et on la fait évaporer, ce qui donne 22,83 g (90,5 %) de dibromure brut sous la forme d'une huile orangée claire. Chromatographie sur couche mince EtOAc-hex (1:1), Rf = 0,69, UV et PMA. (1)(c) Acide (S)-4-bromo-3-hvdroxvbutanoioue, ester méthylique Réf. La même que pour la préparation de (1)(b). On traite par du Pd à 5 %/C (1,30 g) une solution purgée à l'argon du dibromure (20,80 g, 75,4 mmoles) et de NaOAc anhydre (21,0 g) dans de l'EtOAc (370 ml) et du HOAc glacial (37 ml) et on agite la suspension noire sous Hz (1 atm) tout en suivant la fixation de H2. Au bout de 2,0 heures, la fixation de H2 est terminée, on filtre le mélange sur Celite, on lave le filtrat avec du NaHcO3 et de la saumure, puis on le sèche sur MgSO4 anhydre et on le fait évaporer, ce qui donne le dibromester brut sous la forme d'une huile brune. On réunit l'huile brune avec un autre lot (en partant de 36,77 g du dibromure) et on la distille sous vide, ce qui donne 25,77 g (61,3 %) du bromoester désiré, sous la forme d'une huile limpide bouillant à 79-80 C (1,0 mm de Hg). Chromatographie sur couche mince EtOAc-hex (1:1), Rf = 0,44, PMA. Anal. calculé pour C5H0O3Br: C, 30,48; H, 4,60; Br, 40,56 Trouvé C, 29,76; H, 4,50; Br, 39,86. (2) Acide (S)-4-bromo-3-[rr(1,1-diméthyléthvl)- diDhénylsilvlloxvlbutanoique, ester méthylique On traite une solution de la bromhydrine de la partie E(1) (4,0 g, 20,4 mmoles), d'imidazole (6,94 g, 5,0 eq.) et de 4-diméthylamino pyridine (4-DMAP) (12 mg, 0,005 eq.) dans du DMF sec (40 ml) par du chlorure de t-butyl-diphénylsilyle (5,84 ml, 1,1 eq.) et on agite le mélange homogène pendant une nuit sous argon à la température ambiante. On partage le mélange entre du KHSO4 à 5 % et du EtOAc, on lave la phase organique avec H2O et de la saumure, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre et on la fait évaporer, ce qui donne 9,32 g (100 %) d'éther silylique brut sous la forme d'une huile limpide, visqueuse. Chromatographie sur couche mince Hex-EtOAc (1:1), Rf éther silylique = 0,75, U.V. et PMA. (3) Acide (S)-4-iodo-3-rr(1,1-diméthyléthyl)- diphénvlsilvl oxvlbutanoicue, ester méthylirue. On traite une solution du bromure de la partie E(2) brut (9,32 g, 201 mmoles) dans de la méthyléthylcétone (60 ml, séchée sur tamis de 4 A) par de l'iodure de sodium (15,06 g, 100,5 mmoles, 5,0 eq.) et on chauffe sous reflux la suspension jaune pendant 5,0 heures sous argon. On refroidit le mélange, on le dilue avec de l'EtOAc, on le filtre, on lave le filtrat avec du NaHSO3 dilué (jusqu'à ce qu'il soit incolore) et de la saumure, puis on le sèche avec du Na S04 anhydre et. on le fait évaporer sous vide, ce qui donne 10,17 g d'une huile jaune. On purifie i'huile brute par chromatographie éclair sur gel de silice (600 g) en éluant avec de l'hexane-CH2Cl2 (3:1). On réunit les fractions du produit et on les fait évaporer, ce qui donne 7,691 g (74,2 %, rendement global pour les deux opérations) de l'iodure désiré sous la forme d'une huile limpide, incolore, visqueuse. Chromatographie sur couche mince Hex-EtOAC (3:1), produit. Rf = 0,75, U.V. et PMA. (Note: les taches de l'iodure formé sont confondues avec celles du bromure de départ). (4) Acide (S)-4-(diéthoxyvhosphinvl)-3-r[(l.l- diméthyléthyl)diphénylsilylloxylbutanoicue, ester méthy- lique On chauffe à 155 C (bain d'huile) pendant 3,5 heures, sous argon, une solution de l'iodure (7,691 g) dans du phosphite de triéthyle (20 ml). On refroidit le mélange et on élimine par distillation sous vide (0,5 mm de Hg, 75 C) le phosphite en excès, ce qui laisse une huile jaune (environ 8,0 g). On purifie l'huile brute par chromatographie éclair sur gel de silice (400 g) en éluant avec de l'hexane-acétone (4:1). On fait évaporer les fractions de produit, ce qui donne 3,222 g (41,1 %) du phosphonate désiré, sous la forme d'une huile limpide, incolore, visqueuse. Chromatographie sur couche mince hexane-acétone (1:1), Rf = 0, 51, U.V. et PMA. On recueille en outre 2,519 g (rendement corrigé 61,1 %) de l'iodure de la partie (3) de départ. (5) Acide (S)-3- r (1,l-diméthyléthyl)dilphénylsilyll- oxyl-4-phosphonobutanoi;ue, ester méthylique. On traite successivement une solution du phosphonate de la partie (4) (9, 85 g, 20,0 mmoles) dans du CH2Cl2 sec (60 ml) par du bistriméthylsilyltrifluoracétamide (BSTFA) (5,31 ml, 32,0 mmole, 1,6 eq.) et du bromure de triméthyl- silyle (TMSBr) (6,60 ml, 50,0 mmole, 2,5 eq.) et on agite le mélange limpide pendant une nuit sous argon, à la température ambiante. On ajoute du KHSO4 (80 ml) et on extrait le mélange par du EtOAc. On sature la phase aqueuse avec du NaCl et on la réextrait avec du EtOAc. On lave les couches organiques réunies avec de la saumure, on les sèche sur Na2SO4 anhydre et on les fait évaporer sous vide, ce qui donne l'acide phosphonique en titre brut sous la forme d'une huile visqueuse. Chromatographie sur couche mince iPrOH-NH4OH-H20 (7:2:1), Rf = 0,30, U.V. et PMA. (6) Acide (s)-3-rr(1,1-diméthvléthyl)diphénylsilyl]- oxyl-4-(hydroxyméthoxyphosphinvl)butanoiaue, ester méthv- lique On traite l'acide phosphonique brut de la partie (5) (environ 20,0 mmoles) dans de la pyridine sèche (25 ml) par de l'alcool méthylique séché (sur tamis de 3 A, 1,62 ml, 40,0 mmoles, 2,0 eq.) et du dicyclohexylcarbo- diîmide (DCC) (4,54 g, 22,0 mmoles, 1,10 eq.) et on agite la suspension blanche obtenue sous argon à la température ambiante pendant une nuit. On élimine la pyridine sous vide, puis sous forme d'azéotrope avec le benzène (2 x 15 ml). On dissout l'huile-résiduelle dans de l'EtOAc,. on la filtre et on la lave avec du HCl 1,0 N et de la saumure, on la sèche, sur Na2 S04 anhydre et on la fait évaporer sous vide, ce qui donne 8,272 g de l'ester en titre brut sous la forme d'une huile contenant une faible quantité de dicyclohexyl-urée (DCU) précipitee. Chromatographie sur couche mince iPrOH-NH4OH-H20O (7:2:1), Rf = 0,60, U.V. et PMA. F. Acide (S)-4-rr4'-fluOro-3,3',5-triméthvlrl,l'- biphénvlI-2-Vl1méthoxvqhosphinvli-3-t-butyldiphénYlsilyl- oxvbutanoioue. ester méthvliaue On dissout l'ester monométhylique de l'acide phosphonique brut de la partie E (6,595 g, environ 14,7 mmoles) dans du CH2Cl2 sec (30 ml), on le traite par de la triméthylsilyldiéthylamine distillée (5,60 ml, 29,4 mmoles, 2,0 eq.) et on l'agite sous argon à la température ambiante pendant 1 heure. On fait évaporer le mélange sous vide, on l'additionne de benzène (1 x 30 ml) et on le sèche sous vide. On dissout l'huile visqueuse jaune clair dans du CH2Cl2 sec (30 ml) et du DMF (séché sur tamis de 4 A, 2 gouttes), on refroidit la solution limpide à -20 C (bain glace/sel) et on la traite goutte à goutte au moyen d'une seringue par du chlorure d'oxalyle distillé (1,41 ml, 16,2 mmoles, 1,1 eq.). Il se produit un vigoureux dégagement gazeux et la solution devient d'un jaune plus foncé. On agite le mélange sous argon à -10"C pendant 15 minutes, puis à la température ambiante pendant 1 heure. On fait évaporer le mélange sous vide, on l'additionne de benzène (1 x 30 ml) et on le sèche sous vide, ce qui donne le phosphonochloridate brut sous la forme d'une huile jaune. A une solution du phosphonochloridate brut (environ 14,7 mmoles) dans du CHzC12 sec (10 ml), on ajoute goutte à goutte une solution de l'alcool biphénylique de la partie D (2,06 g, 8,43 mmoles) dans de la pyridine sèche (15 ml) et on agite le mélange obtenu à la température ambiante, sous argon, pendant 16 heures. On fait évaporer le mélange à sec et on partage le résidu entre du KHSO4 à 5 % et de l'EtOAc. On lave la phase organique avec du NaHCO3 saturé et de la saumure, puis on la sèche sur Na2 S04 et on la fait évaporer sous vide, ce qui donne 8,290 g d'une huile brute. On purifie l'huile brute par chromatographie éclair sur gel de silice (370 g) en éluant avec de l'hexane-acétone (70:30). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 3,681 g (66 %) du phosphonate désiré sous la forme d'une huile jaune clair. Chromatographie sur couche mince hexane-acétone (3:2), Rf = 0,59, U.V. et PMA. G. Acide (S)-4-rrr4'-fluoro-3,3',5-triméthylr1,1, - biphényl -2-VllméthoxvyphosDhinyvll-3-hydroxybutanoicque, ester méthylique On traite un mélange de l'éther silylique de la partie F (1, 103 g, 1,66 mmoles) dans du THF sec (20,0 ml) par de l'acide acétique glacial (380 pl, 6,64 mmoles, 4,0 eq.) et une solution de fluorure de tétrabutyl- ammonium 1,0 M (4,98 ml, 4,98 mmoles, 3,0 eq.) et on agite la solution jaune limpide pendant une nuit à la température ambiante, sous argon. On partage le mélange. entre de l'H2 O froid et EtOAc, on lave la phase organique avec du NaHCO3 saturé et de la saumure, on la sèche sur Na SO4 anhydre et on la fait évaporer pour donner une huile jaune visqueuse (1,174 g). On purifie l'huile brute par chromatographie éclair sur' gel de silice (47 g) en éluant avec du CH2C12-acétone (85:15). On fait évaporer les fractions de produit, ce qui donne 679 mg (93,1 %) de l'alcool désire sous la forme d'une huile visqueuse limpide. Chromatographie sur couche mince hexaneacétone (1:1), Rf = 0,41, U.V. et PMA. H. Acide (S)-4-rrr4'-fluoro-3.3',5-triméthvlrl,l'- biphényll-2-vllméthoxylméthoxvphosphinvl]-3-hydroxy- butanoiue, sel monolithique On traite une solution de l'ester méthylique de la partie G (184 mmg, 0,420 mmole) dans du dioxanne (5,0 ml) par LiOH 1,0 N (0,50 ml, 1,2 eq.) et on agite le mélange à la température ambiante, sous argon, pendant 3 heures. On dilue le mélange avec H20, on le filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 j et on le fait évaporer sous vide. On dissout le résidu dans H20 (75 ml), on le congèle et le lyophilise. On dissout l'acide brut dans la quantité minima d'H2 O et on le chromatographie sur 100 ml de lit de résine CHP-20 en éluant avec un système de gradient linéaire H2O/CH CN. On fait évaporer les fractions de produit, on les dissout dans H20 (50 ml), oh les filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 g et on les lyophilise, ce qui donne 174 mg (89,1 % sur la base du poids d'hydrate) du sel monolithique désiré, sous la forme d'un solide blanc. Chromatographie sur couche mince iPrOH-NH4 OH-H2O (7:2:1), Rf = 0,58, U.V. et PMA. Anal. calculé pour C21H25 06 PFLi + 1,95 mole de H2 O (MM 465,46): C, 54,19; H, 6,26; F, 4,08; P, 6,65 Trouvé: C, 54,19; H, 6,21; F. 4,29; P, 6,43 H1 RMN (400 MHz): S 1,74-2,08 ppm (2H, m, -PO(OCH3)CH2-) 2,30 (3H, s, méthyle aromatique) 2,32 (3H, d, méthyle aromatique en du. fluor, JK F2,2 Hz) 2,35-2,62 (2H, m, -CH2COLi) 2,46 (3H, s, méthyle aromatique) 3,57 & 3,63 (3H, 2 doublets, -OP(OCH3)-, 2 diastéréoisomères, JH-p = 10,3 Hz) 4, 28 (1H, m, -CH2CH(OH)CH2CO2Li) on 4,97 (2H, m, PhCH20P(OCH3)R) 6,87-7,25 (5H, m, H aromatiques) Exemple 2 Acide (S)-4-rrr4'-fluoro-3,3'.5-triméthvlrll'- biphényl]-2-vliméthoxylhvdroxvphosDhinvll-3-hydroxy- butanoique. sel dilithiqcrue On traite une solution de diester de l'exemple 1 (374 mg, 0,853 mmole) dans du dioxanne (8,0 ml) par LiOH 1,0 N (2,6 ml, 3,0 eq.) et on la chauffe à 50'C (au bain d'huile) pendant 5,0 heures sous argon. On observe un précipité blanc. On dilue le mélange avec H20O et on le filtre. On extrait la solution aqueuse une fois avec Et2O, on la filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 g et on la concentre sous vide. On chromatographie le produit brut sur une résine CHP-20 (100 ml de lit), en éluant avec un système de gradient linéaire H20/CH3CN. On fait évaporer sous vide les fractions de produit, on les reprend dans H2O (50 ml), on les filtre -à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 p et on les lyophilise, 48 2615508 ce qui donne 260 mg (67,1 % par rapport au poids d'hydrate) du sel dilithique désiré, sous la forme d'un solide blanc. Chromatographie sur couche mince PrOH-NH4OH-H20 (7:2:1), Rf = 0,47, U.V. et PMA. Anal. calculé pour C20H22 06 PFLi2 + 1,77 mole de HzO2: C, 52,88; H, 5,67; F, 4,18; P, 6,82 Trouvé: C, 52,88; H, 5,26; F, 4,24; P, 6,43- H1 RMN (400 MHz, CD3OD): O i 8 1,69 ppm (2H, m, -OP2CHzCH(OH)-) 2,26-2,42 (2H, m, CH2CO2Li) 2,30 (3H, s, méthyle aromatique) 2,31 (3H, d, méthyle aromatique ena *de F, JHF = 1,9 HZ) 2,38 (3H, s, méthyle aromatique) 4,22 (1H, m, -CH(OH)CH2-) O I 4,75 (2H, m, PhCH2OP-) 6,86-7,23 (5H, m, protons aromatiques) Exemple 3 Acide (3S)-4-rrr4'-fluoro-3.3',5-triméthvlrl!l'- biphényli-2-vl méthoxv]méthylphosphinvli]-3-hydroxy- butanoiqcrue, sel monolithique A. Acide (S)-4-r(chloro)méthylphosphinyll-3-[rr(l.l- diméthvléthyl)diphénylsilvlloxyl-butanoicrue, ester mnéthy- lique Le phosphinochloridate en titre se prépare comme il est décrit dans l'exemple 6, Partie B, trois premiers paragraphes. B. Acide (3S)-4-rrr4'-fluoro-3.3'.5-triméthyl-[rl.l'- biphén1y]-2-vl1méthoxvylméthylphosphinvl]-3-t-butyl- diphénvlsilyloxybutanoique, ester méthylique On traite une solution refroidie (à 0OC, au bain de glace) du phosphinochloridate de la Partie A (environ 2,2 mmoles) et d'alcool biphénylique de la Partie C(2) de l'exemple 1 (429 mg, 2,2 mmoles,, 1,0 eq.) dans du CH2Cl2 sec (10 ml) par Et3N (425 pi, 3,04 mmoles, 1,4 eq.) et 4-DMAP (27 mg, 0,22 mmole) et on agite la solution orangée à la température ambiante pendant une nuit sous argon. On partage le mélange entre KHSO4 à 5 % et EtOAc, on lave la couche organique avec de la saumure, on la sèche sur sulfate de sodium et on la fait évaporer, ce qui donne 1,1 g d'une huile orangée. On purifie l'huile brute par chromatographie éclair sur gel de silice LPS-1 (44 g) en éluant avec un mélange EtOAC:hexane (1:1). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 298 mg (21 %) du produit en titre couplé désiré,sous la forme d'une huile jaune pâle. On recueille également 460 mg (rendement corrigé 67 %) d'alcool diphénylique de la Partie C(2) de l'exemple 1 de départ. Chromatographie sur couche mince EtOAc:hex (1:1), Rf = 0,i8, UV et PMA. C. Acide (3S)-4-rr[r4'-fluoro-3,3',5-triméthvlrl,1'- biphényll-2-vl]méthoxylméthylphosphinyll-3-hydroxy- butanoicque, ester méthylique. On traite une solution de l'éther silylique de la partie B (298 mg, 0,46 mmole) dans du THF sec (6,0 ml) par de l'acide acétique glacial (110 pi, 1,84 mmole, 4,0 eq.) et par une solution de fluorure de tétrabutylammonium 1,0 M dans du THF (1,43 ml, 3,1 eq.) et on agite la solution obtenue pendant une nuit sous argon, à la température ambiante. On partage le mélange entre de l'eau froide et EtOAc, on lave la phase organique avec du bicarbonate de sodium saturé et de la saumure, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre et on la fait évaporer, ce qui donne une huile jaune (273 mg). On purifie l'huile brute par chromatographie éclair sur gel de silice LPS-1 (11 g) en éluant avec de l'hexane-acétone (3:2). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne mg (80 %) de l'alcool désiré, sous la forme d'une huile visqueuse. Chromatographie sur couche mince hex-acétone (1:1), Rf = 0,23, UV et PMA. D. Acide (3S)-4-rrr4'-fluoro-3,3',5-triméthvlrl,l'- biphényl]-2-yl]méthoxv]méthvlphosphinvll-3-hydroxy- butanoiaue, sel monolithicue On traite une solution de l'ester méthylique de la partie C (150 mg, 0,367 mmole) dans du dioxanne (3,0 ml) par LiOH 1, 0 N (0,44 ml, 1,2 eq.) et on agite la suspension blanche obtenue à la température ambiante, sous argon,pendant 2 heures. On dilue le mélange avec H20, on le filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 g et on le fait évaporer sous vide, ce qui donne un verre incolore. On reprend le produit brut dans la quantité minima de H2O et on le chromatographie sur HP-20 (100 ml de lit), en éluant avec un gradient linéaire H2 O/CH3CN. On fait évaporer les fractions de produit, on les reprend dans H2 O (50 ml), on les filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 p et. on les lyophilise, ce qui donne mg (79 % par rapport au poids d'hydrate) du sel de lithium désiré sous la forme d'un solide blanc. Chromatographie sur couche mince CH2Cl2-CH3OH-HOAc (8:1:1) Rf = 0,52, UV et PMA. Anal. calculé pour C21H2505FLiP + 1,73 mole de H20 (MM 445,49): C, 56,61; H, 6,44; F, 4,26; P, 6,95 Trouvé: C, 56,67; H, 6,36; F, 4,31; P, 7,43. Hl RMN (400 MHz): Il 8 1,49 ppm (3H, d, -OP(CH3)-, JH-P = 14,7 Hz) O0 Il 1,83-2,0 (2H, m, P-(CH3CH2-) 2,27-2,40 (2H, m, CH CO2Li) 2,30 (6H, s, 2 méthyles aromatiques) 2,44 (3H, s, méthyle aromatique) 4,26 (1H, m, -CH CH(OH)CH2CO2Li) Oil 4,87 (2H, m, ArCH2 OP(CH3)-) 6,90-7,20 (5H, m, H aromatiques) Exemple 4 Acide (S)-4-rrr2,4-dichloro-6-r(4-fluorophénvl)- méthoxylphénvllméthoxvlméthoxvphosphinvli-3-hydroxv- butanoique, sel monolithique * A. 2,4-Dichloro-6-(4-fluorophény1lméthoxy)-benzal- déhyde (Réf.: J. Med Chem., 1986, 29, 167) On agite une solution de 13,77 g (72,5 mmoles) de 4,6-dichloro-2-hydroxybenzaldéhyde dans 100 ml de DMF et on ajoute 12,02 g (87 mmoles) de K2 C03. On chauffe ce mélange à 70 C environ pendant 60 minutes, puis on ajoute 11,7 ml de bromure de 4fluorobenzyle. On agite la solution obtenue à 70 C pendant 3,5 heures, puis on la verse sur de l'eau glacée (1,5 1), on la filtre et on la lave avec H20, et on la fait recristalliser dans Et2O/ éther de pétrole. Rendement: 17,88 g (83 %) de cristaux d'un blanc légèrement teinté, p.f. = 107-108'C. B. 2.,4-Dichloro-6-r (4-fluorophényl)méthoxvylbenzène- méthanol On traite Et2O sec froid (à 'ec, au bain de glace) (10,0 ml) par LiAlH4 (158 mg, 4,16 mmoles, 0,6 eq.) et on traite goutte à goutte la suspension grise par une solution de l'aldéhyde de la partie A (2,06 g, 6, 93 mmoles) dans 10 ml de THF sec. On chauffe le mélange à la température ambiante et on l'agite pendant 1 heure sous argon. On refroidit le mélange à 0 C (au bain de glace) et on fixe la réaction par additions successives goutte à goutte de IH2O (160 pj1), NaOH 15 % (160 i1) et H20 (475 jil). On élimine les sels qui précipitent par filtration à travers le Na2SO4 anhydre sur de la Celite tassée (lit de 6,35 mm). On fait évaporer le filtrat limpide, ce qui donne 2,052 g (98,9 %) d'alcool brut sous la forme de cristaux blancs. Une trituration avec de l'hexane froid donne 1,892 g (91,2 %) de l'alcool en titre pur sous la forme d'un solide cristallin blanc fondant à 72-73 C. Chromatographie sur couche mince hex-acétone (4:1), Rf = 0,31, UV et PMA. Anal. calculé pour C14H1102C12F (MM 301,142) C, 55,84; H, 3,68; Cl, 23,55; F, 6,31 Trouvé: C, 55,97; H, 3,71; Cl, 23,42; F, 6,30. C. Acide (S)-4-rrr2,4-dichloro-6-r(4-fluorophénvl)- méthoxylphénvllméthoxv1méthoxvphosDhinv1]-3-t-butyl- diphénvlsilvloxybutanoaque, ester méthylique 52 215 On traite une solution de l'ester méthylique de l'exemple 1, partie E(6) (environ 3,84 mmoles) dans du CH2Cl12 (10 ml) par de la triméthylsilyldiéthylamine distillée (1,46 ml, 7,68 mmoles, 2,0 eq.) et on agite la solution obtenue à la température ambiante, sous argon, pendant 1,0 heure. On fait évaporer le mélange sous vide, on l'additionne de benzène (1 x 20 ml) et on le sèche sous vide, ce qui donne de l'ester monométhylique de l'acide phosphonique silylé brut sous la forme d'une huile incolore. On refroidit à -100C (dans un bain de glace/sel) une' solution de l'ester brut (environ 3,84 mmoles) dans du CH2C12 (10 ml) et du DMF sec (1 goutte) et on la traite goutte à goutte par du chlorure d'oxalyle distillé (368 1l, 4,22 mmoles, 1,1 eq.). Un dégagement de gaz est visible dans le mélange jaune limpide. On agite le mélange à la température ambiante sous argon pendant 1 heure, on le fait évaporer sous vide, on le traite par du benzène (2 x 20 ml), ce qui donne du phosphonochloridate brut sous la forme d'une huile jaune visqueuse. - On traite le phosphonochloridate brut (environ 3,84 mmoles) dans du CH2Cl2 sec (10 ml) à 0C (au bain de glace) par l'alcool de la partie B (1, 15 g, 3,84 mmoles, 1,0 eq.) puis par Et3N (805 pi, 5,75 mmoles, 1,5 eg.) et du 4-DMAP (47 mg, 0,384 mmole, 0,1 eq.) et on agite le mélange brun pendant une nuit à la température ambiante, sous argon. On partage le mélange entre KHSO4 à 5 % et EtOAc, on lave la phase organique avec de la saumure, on la sèche sur Na2SO4 anhydre et on la fait évaporer, ce qui donne 3,19.7 g d'une huile brun foncé. On purifie le produit brut par chromatographie éclair sur gel de silice (160 g) en éluant avec Hex-EtOAc (7:3). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 594 mg (21,1 %) du phosphonate désiré, sous la forme d'une huile jaune. On recueille en outre 688 mg (rendement corrigé 52,4 %) de l'alcool de la partie B de départ. Chromatographie sur couche mince Hex-acétone (1:1), Rf = 0,29, UV et PMA. 26 15508 D. Acide (S)-4- r r2,4-dichloro-6-r (4-fluoroehénvl)- méthoxy]phénvliméthoxvmnéthoxyvhosphinvli-3-hydroxy- butanoicue. ester méthylique On traite une solution de l'ester silylique de la partie C (578 mg, 0,788 mmole) dans du THF sec (8 ml) par de l'acide acétique glacial (180 jl, 3,2 mmoles, 4,0 eq.), puis par une solution 1,0 M de n-Bu4NF dans du THF (2,36 ml, 2,36 mmoles, 3,0 eq.), et on agite la solution jaune pale obtenue pendant une nuit sous argon à la température ambiante. On verse le mélange dans de l'eau froide et on l'extrait par de l'EtOAc (2 fois). On lave la phase organique avec du NaHCO3 saturé et de la saumure, on la sèche sur Na2 SO4 et on la fait évaporer, ce qui donne 625 mg d'une huile jaune. On purifie le produit brut par chromatographie éclair sur gel de silice (31 g) en éluant avec de l'hexane-acétone (7:3). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 339 mg - (86,9 %) de l'alcool désiré, sous la forme d'une huile visqueuse, limpide, incolore. Chromatographie sur couche mince hex-acétone (1:1), Rf = 0,25, UV et PMA. E. Acide (S)-4-r rr2,4-dichloro-6-r (4-fluorophényl)- méthoxvlphénvllméthoxvlméthoxvphosDhinvll-3-hvdroxv- butanoique, sel monolithique On traite une solution du phosphonate de la partie D(132 mg, 0,267 mmole) dans du dioxanne (2,5 ml) par du LiOH 1,0 N (0,32 ml, 1,2 eq.) et on agite le mélange sous argon à la température ambiante pendant 4,0 heures. On observe un précipité blanc. On dilue le mélange avec H20, on le filtre et on fait évaporer le filtrat à sec sous vide. On chromatographie le résidu sur de la résine -HP-20 (lit de 100 ml) en éluant avec un système de de gradient linéaire H O/CH3 CN. On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, on les reprend dans H2 O, on les filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 g et on les lyophilise, ce qui donne 108 mg (79 % par rapport au poids d'hydrate) du sel de lithium désire, sous la forme d'un solide blanc. Chromatographie sur couche mince CH2C2-CH3 OH-HOAC (20:1:1), Rf = 0,41, UV et PMA. Anal. calculé pour C19H18 7 C12FLi2P + 1,42 mole de H2 0 (MM 511,72): C, 44,59; H, 4,10; Cl, 13,86: F, 3,71; P? 6,05 Trouvé: C, 44,22; H, 4,09; Cl, 13,91; F, 3,72; P, 6,11. H1 RMN (400 MHz): O 8 1,98-2,11 ppm (2H, m, OP(OCH3)CH2CH(OH)- 2,26-2,45 ppm (2H, m, -CH(OH)CH2Co2Li) 3,63 et - 3,62 (3H, 2 doublets, 2 diastéréoiso- mères, OP(OCH3)CH2-, JHP-11 Hz) 4,23 (1H, m, (-CHgCH(OH)CH2CO2Li) ,16 (2H, s, F-PhCH2O) 5,24 (2H, d, ArCH2OP, JP = 6,2 Hz) 7,13-7,53 (6H, m, H aromatiques) Exemple 5 Acide (3S)-4-rrr2,4-dichloro-6-r(4-fluorophénvyl)- méthoxvlihényllméthoxylhydroxvphosphinyll-3-hydrox - butanoique, sel dilithiqcue On traite un mélange du diester de l'exemple 4 partie D (210 mg, 0,424 mmole) dans du dioxanne (4,0 ml) par LiOH 1,0 N (1,30 ml, 3,0 eq.) et on chauffe la solution incolore à 50 C (au bain d'huile) dans l'argon pendant 3,5 heures. On observe un précipité blanc au bout de 15 minutes. On dilue le mélange avec H20, on le filtre et on fait évaporer le filtrat sous vide. On dissout le résidu dans la quantité minimale d'eau et on le chromatographie sur de la résine HP-20 (lit de 100 ml) en éluant avec un gradient linéaire H20/CH2CN. On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer. On reprend le résidu dans H2O (50 ml), on les filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 p et on les lyophilise, 2615508 ce qui donne 175 mg (81 % par rapport au poids d'hydrate) du sel dilithique désiré, sous la forme d'un solide blanc. Chromatographie sur couche mince CH2Cl2-CH3OH-HOAc (8:1:1), Rf = 0,07, UV et PMA. Anal. calc. pour C18H1607C12FLi2P + 1,70 mole de H2 0 (MM 509,62): C, 42, 42; H, 3,84; F, 3,73; Ci, 13,91; P, 6,08 Trouvé: C, 42,46; H, 3,90; F, 3,93; Cl, 13,42; P, 5,66 H1 RMN (400 MHz): Or o 8 1,73-1,92 ppm (2H, m, -OP(OLi)-CH2CH(OH)- 2,27 (1H, dd, -CH(OH)CH2CO2Li, JHH = 8,8 Hz) 2,39 (1H, dd, -CH(OH) CH2CO2Li, JHH = 4,4 Hz) 4,26 (1H, m, CH2CH(OH)CH2CO2Li) ,08 (2H, s, F-PhCH2OAr) 7,03-7,53(6H, m, H aromatiques). ExemDle 6 Acide (3S)-4-r[[2,4-dichloro-6-r(4-fluorophényl)- méthoxylphényl]méthoxy]méthylphosphinvll1-3-hydroxv- butanoicue, ester méthylicue A. Acide (S)3-rr(l.l-diméthyléthvl)diphénvlsilvll- oxy]-4-(éthoxyméthyl1phosDhinyl)butanoicque, ester méthy- licue On chauffe à 1001C (au bain d'huile) pendant 2,5 heures, puis à 150'C pendant 3 heures supplémentaires, sous argon, un mélange de l'iodure de l'exemple 1, partie E(3) (4,68 g, 9,18 mmoles) dans de la méthyldiéthoxy- phosphine (Strem Chemicals, 5,0 g, 36,7 mmoles). Il se forme lentement un précipité blanc dans la solution jaune. On élimine la phosphine en excès par distillation sous vide (0,5 mm de Hg) et on purifie le produit brut par chromatographie éclair sur gel de silice, en éluant avec de l'hexane-acétone (65:35). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 1,590 g (38 %) de l'ester phosphinique désiré (mélange de 56 2615508 diastéréoisomères) sous la forme d'une huile visqueuse limpide. Chromatographie sur couche mince hex-acetone (3:2), Rf (2 diastéréoisomères) = 0,19 et 0,22, TV et PMA. B. Acide (3S)-4-rr2,4-dichloro-6-r(4-fluorophényl)- méthoxylphényllméthoxylméthvlphosphinyll -3-t-butyvl- diphénylsilylbutanoicque, ester méthylique On traite une solution de l'ester phosphinique de la partie A (605 mg, 1,3 mmole) dans du CH2Cl2 sec (6,0 ml) par du bis(triméthylsilyl)trifluoracétamide (BSTFA) (280 pl, 1,05 mmole, 0,8 eq.) et du bromure de triméthylsilyle. (TMSBr) (210 pil, 1,57 mmole, 1,2 eq.) et on agite la solution obtenue à la température ambiante, sous argon, pendant une nuit. On ajoute KHSO4 à 5 % (15 ml) et on extrait le mélange par EtOAc. On lave la phase organique avec de la saumure, on la sèche sur Na2SO4 et on la fait évaporer sous vide, ce qui donne l'acide phosphinique brut sous la forme d'une huile incolore. On traite une solution de l'acide phosphinique brut (environ 1,3 mmole) dans du CH2Cl2 sec (6,0 ml) par de la triméthylsilyldiéthylamine distillée (270 pil, 1,44 mmole, 1,1 eq.) et on agite le mélange limpide à la température ambiante, sous argon, pendant 1,0 heure. On fait évaporer le mélange sous vide, on le traite par du benzène (1 x 15 ml) et on le sèche sous vide. On traite goutte à goutte une solution refroidie (à 0 C, au bain de glace) de l'acide phosphinique silylé brut (environ 1,3 mmole) dans du CH2C12 (6,0 ml) et du DMF (1 goutte) au moyen d'une seringue, par du chlorure d'oxalyle distillé (130 pl, 1,44 mmole, 1,1 eq.) On observe un dégagement gazeux. On agite le mélange à la température ambiante, sous argon, pendant une heure, puis on le fait évaporer sous vide, on le traite par du benzène (2 x ml), et on le sèche sous vide, ce qui donne le phosphinochloridate brut sous la forme d'une huile jaune. On traite une solution refroidie (à 0OC, au bain de glace) de phosphinochloridate (1,3 mmole) et de l'alcool de l'exemple 1 partie E(6) (392 mg, 1,3 mmole) dans du CH2C12 (6,0 ml) par de la Et3N (275 pil, 1,97 mmole, 1,5 eq.) et du 4-DMAP (16 mg, 0,13 mmole, 0,1 eq.) et on agite le mélange jaune obtenu sous argon, à la température ambiante, pendant une nuit. On partage le mélange entre KHSO4 à 5 % et EtOAc, on lave la phase organique avec de la saumure, on la sèche sur Na2SO04 anhydre et on la fait évaporer, ce qui donne 908 mg de produit brut sous la forme d'une huile foncée. On purifie le produit brut par chromatographie éclair sur gel de silice (45 g) en éluant avec de l'hexane-EtOAc (3:2). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 266 mg (28, 3 %) du produit désiré, sous la forme d'une huile limpide, incolore. On recueille également 197 mg (rendement corrigé 57 %) de l'alcool de départ. C. Acide (3S)-4-r[[2,4-dichloro-6-r(4-fluorophényl)- méthoxy]phénvl1méthoxvy]méthvlphosDhinvll-3-hydroxy- butanoiacue, ester méthvlique On traite une solution de l'ester silylique de la partie B (275 mg, 0,38 mmole) dans du THF sec (6,0 ml) par de l'acide acétique glacial (90 pl, 1,53 mmole, 4,0 eq.) et une solution 1,0 M de fluorure de tétrabutylammonium dans du THF (1,2 ml, 3,1 eq.). On agite la solution obtenue pendant une nuit sous argon, à la température ambiante. On partage le mélange entre de l'eau froide et EtOAc, on lave la phase organique avec du NaHCO3 saturé et de la saumure, on la sèche sur Na2SO4 anhydre et on la fait évaporer, ce qui donne 258 mg d'une huile jaune. On purifie le produit brut par chromatographie éclair sur un gel de silice LPS-1 (8 g) en éluant avec de l'hexane-acétone (1:1). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 142 mg (77 %) de l'alcool désiré, sous la forme d'une huile limpide, incolore. Chromatographie sur couche mince hexane-acétone (1:1), Rf = 0,20, UV et PMA D. (3S)-4-rr2,4-dichloro-6-r(4-fluoroDhényl)- méthoxylphényliméthoxy méthylphosphinyll-3-hvdroxv- butanoicue, sel monolithique 6 D 8 On traite une solution de l'ester méthylique de la partie C (142 mg, 0, 296 mmole) dans du dioxanne (3,0 ml) par du LiOH 1,0 N (0,36 ml, 1,2 eq.) et on agite la suspension blanche obtenue sous argon à la température ambiante pendant 2,0 heures. On dilue le mélange avec H20, on le filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 g et on fait évaporer le filtrat sous vide. On dissout le produit brut dans la quantité minima d'eau et on le chromatographie sur 100 ml d'un lit de résine HP-20 en éluant avec un gradient linéaire H2O/CH3CN. On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer. On reprend le résidu dans de l'eau, on le filtre à travers une membrane de polycarbonate et on le lyophilise, ce qui donne 93 mg (63 % par rapport au poids d'hydrate) du sel de lithium désiré, sous la forme d'un solide blanc. Chromatographie sur couche mince CH2 Cl2-CH30OH-HOAc (8:1:1), Rf = 0,51, UV et PMA. Anal. calculé pour C19H19 O7Cl2FLiP + 1,38 mole H2 O (MM 495,94): C, 46, 01; H, 4,42; F, 3,83; Cl1 14,30; P, 6,24. Trouvé: C, 46,10; H,4,49; F, 3,82; Cl, 14,32; P, 6,43. H1 RMN (400 MHz): O t 8 1,53 ppm (3H, d, -OP(CH3)CH2-, JH.Pp = 14,6 Hz) O I 1,87-2,10 (2H, m, -OP(OCH3)CH2-) 2,27 (1H, dd, -CH(OH)CH2CO2Li, J..H=8, 4 Hz, JH.p = 1,1 Hz) 2,38 (1H, dd, -CH(OH)CH2CO2Li, J,=H 4,7 Hz, JH.p = 1, 1 Hz) 4,29 (1H, m, -CH2CH(OH)CH2CO2Li) ,16+5,18 (4H, m, ArCH2OP et FPhCH2O)-) 7,11-7,52 (6H, m, aromatique) Exemple 7 Acide (S)-4-rrF4'-fluoro-3,3'.5-triméthvlrll, - biDphénvl-2-vllméthyll aminolméthoxvphosphinyll-3-hydroxy- butanoicue, sel monolithique A. Acide 4'-fluoro-3,3',5-triméthvlrl1,'-biphénvli- 2-carboxylioue On traite goutte à goutte une solution d'aldéhyde de l'exemple 1 partie C(2) (1,0 g, 4,13 mmoles) dans de l'acétone (10,0 ml) à 0'C (au bain de glace) avec du réactif de Jones 8,0 N (4,1 ml, excès) et on agite la suspension vert-brune obtenue pendant une nuit sous argon, à la température ordinaire. On détruit l'oxydant en excès en ajoutant de l'isopropanol (10,0 ml) et on élimine les sels de chrome qui précipitent, par filtration à travers un tampon de 6,35 mm de Celite. On fait évaporer le filtrat, on le reprend dans EtOAc, on le lave avec HC1 1,0 N (2 fois), du NH4Cl saturé (2 fois) et de la saumure, puis on le sèche sur Na2SO4 et on le fait évaporer, ce qui donne 1,011 g d'un solide vert fondant à 153-154 C. On purifie l'acide brut en passant par le sel de dicyclohexylamine. A une solution de l'acide brut dans EtOAc (5,0 ml), on ajoute de la dicyclohexylamine (DCHA) (823 1.1, 1,0 eq.). On dilue la solution avec de l'hexane et on recueille le sel cristallin qui précipite, ce qui donne 997 mg (55 % par rapport à l'aldéhyde, p.f. = 181-183'C) du produit désiré, sous la forme d'un sel de DCHA cristallin d'un blanc légèrement teinté. On régénère l'acide libre en titre à partir du sel de DCHA en partageant le sel entre KHSO4 à 5 % et EtOAc. On lave la phase organique avec de la saumure, on la sèche sur Na2 S04 anhydre et on la fait évaporer sous vide, ce qui donne 554 mg (52 % par rapport à l'aldéhyde) de l'acide désiré. Chromatographie sur couche mince CH2C12-CH3OH (1:1), Rf = 0,37, UV et PMA. B. 4'-Fluoro-3,3',5-triméth l1,1'-biDhényll-2- carboxamide On traite goutte à goutte au moyen d'une seringue une suspension de l'acide de la partie A (554 mg, 2,14 mmoles) dans du CH2C12 sec (6,0 ml) et du DMF sec (1 goutte) à 0OC (bain de glace) par du chlorure d'oxalyle 2615508 distillé (205 p1, 2,35 mmoles, 1,1 eq.) et on agite la solution jaune limpide sous argon à la température ambiante pendant 1 heure. On fait évaporer le mélange sous vide, on le traite par du benzène (2 fois) et on le sèche sous vide, ce qui donne le chlorure d'acide brut sous la forme d'une huile jaune. On traite goutte à goutte un mélange refroidi (à 0OC, au bain de glace) de THF (3,0 ml) et de NH40H concentré (2,0 ml, excès) par une solution dans le THF (3,0 ml) du chlorure d'acide brut et on agite la solution orangé brillant à la température ambiante, sous argon, pendant 1,0 heure. On partage le mélange entre HzO et EtOAc, on lave la phase.organique avec du NaHCO3 saturé, H20 et de la saumure, puis on la sèche sur Na2 S04 anhydre et on la fait évaporer, ce qui donne 528 mg (96,1 %) de l'amide brut sous la forme d'un solide orangé clair. Une recristallisation dans EtOAc-hexane donne 435 mg (79,1 %) de l'amide purifié, sous la forme d'aiguilles jaune pâle fondant à 197-198 C. Chromatographie sur couche mince Et20-acétone (1:1), Rf = 0,83, UV et PMA. C. 4'-Fluoro-3,3',5-triméthvlrl,l'-biphényll-2- méthanamine On traite une solution refroidie (à 0'C, au bain de glace) de THF sec (5,0 ml) par du LiAlH4 solide (125 mg, 3,3 mmoles) et on traite goutte à goutte la suspension grise, sur une durée de 5 minutes, par une solution de l'amide de la partie B (424 mg, 1,65 mmoles) dans du TEF (5,0 ml). On agite la suspension obtenue à la température ambiante, sous argon, pendant 2,5 heures, puis on la chauffe sous reflux pendant 45 minutes. On refroidit le mélange à 0 C (au bain de glace) et on fixe la réaction par addition goutte à goutte successive de 125 p1 d'H20, p1 de NaOH à 15 % et 375 pi d'H2 O. On élimine les sels d'aluminium qui précipitent par filtration à travers du Na2SO4 anhydre sur de la Celite tassée. On fait évaporer sous vide le filtrat limpide, ce qui donne l'amine brute sous la forme d'une huile limpide. Chromatographie sur couche mince Et20-acétone (7:3), Rf = 0,60, UV et PMA. On purifie l'amine sous la forme de son chlorhydrate. On traite une solution de l'amine brute (environ 1,65 mmole) dans de l'EtOH absolu (8,0 ml) par du HC1 concentré (152 il, 1,82 mmole) et on agite le mélange pendant 15 minutes à la température ambiante, sous argon. On fait évaporer le mélange sous vide pour donner un solide cristallin blanc. On triture le solide avec de l'Et2O, on le recueille par filtration et on le sèche sous vide, ce qui donne 426 mg (92,4 %) du chlorhydrate d'amine en titre sous la forme de fins cristaux blancs. D. Acide (S)-4-rrrr4'-fluoro-3,3',5-triméthvlrl,1'- biphényll-2-yl1méthyl]aminolméthoxyphosphinvll]-3-t-butyl- diphénylsilyloxy butanoique, ester méthylique On traite une solution de l'ester méthylique de l'exemple 1 partie E(6) (environ 2,0 mmoles) dans du CH2Cl2 sec (5,0 ml) par de la triméthylsilyldiéthylamine distillée (758 jl, 4,0 mmoles, 2,0 eq.) et on agite le mélange limpide à la température ambiante, sous argon, pendant une heure. On fait évaporer le mélange sous vide, on le traite par du benzène (1 x 15 ml) et on le sèche sous vide. On traite goutte à goutte une solution refroidie (à 0'C) du phosphonate de silyle brut dans du CH2C12 sec (7,0 ml) et du DMF (1 goutte) par du chlorure d'oxalyle distillé (192 p1, 2,2 mmoles, 1,1 eq.). On observe qu'un gaz se dégage du mélange jaune limpide. On agite la solution à la température ambiante pendant 1 heure, on la fait évaporer sous vide, on la traite par du benzène (2 x ml) et on la sèche sous vide, ce qui donne le phosphonochloridate brut sous la forme d'une huile jaune, visqueuse. On traite une solution refroidie (à 0'C) du phosphonochloridate et du chlorhydrate de biphénylamine de la partie C (416 mg, 1,49 mmole) dans du CH2Cl2 sec (10 ml) par Et3N (641 jil, 4,6 mmoles, 2,3 eq.) et du 4-DMAP (24 mg, 0,2 mmole, 0,1 eq.) et on agite le mélange jaune limpide pendant une nuit, à la température ambiante, sous argon. On partage le mélange entre KHSO4 à 5 % et EtOAc, on lave la phase organique avec de la saumure, on la sèche sur Na2 SO4 et on la fait-évaporer sous vide, ce qui donne 1,19 g d'une huile jaune. On purifie le produit. brut par chromatographie éclair sur gel de silice (60 g) en éluant avec de l'hexane-acétone (7:3). On fait évaporer les fractions de produit pour donner 588 mg (59,5 %) du phosphonamide désiré, sous la forme d'une huile jaune pâle, visqueuse. Chromatographie sur couche mince hexane-acétone (7:3), Rf = 0,20, UV et PMA. E. Acide (S)-4-rrrr4'-fluoro-3,3',5-triméthvlrl,1'- biphényl)-2-vllméthyllaminol-méthoxvyphosphinvl1-3-hydroxy- butanoiaue, ester méthylique On traite une solution de l'éther silylique de la partie D (588 mg, 0,888 mmole) dans du THF sec (10,0 ml) par de l'acide acétique glacial (203 jil, 3,55 mmoles, 4,0 eq.) et une solution 1,0 M de fluorure de tétrabutylammonium (2,66 ml, 2,66 mmoles, 3,0 eq.) dans du THF, et on agite la solution obtenue pendant une nuit sous argon, à la température ambiante. On verse le mélange dans de l'eau froide et on l'extrait par EtOAc. On lave la phase organique avec NaHCO3 saturé et de la saumure, puis on la sèche sur Na2 SO4 et on la fait évaporer sous vide pour donner 605 mg d'une huile orangée. On purifie le produit brut par chromatographie éclair sur gel de silice (36 g) en éluant par de l'hexaneacétone (1:1). On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer, ce qui donne 196 mg (50,4 %) de l'alcool désiré, sous la forme d'une huile orangé clair. Chromatographie sur couche mince hexane-acétone (1:1), Rf = 0,16, UV et PMA. F. Acide (S)-4-rrrr4'-fluoro-3,3',5-triméthvlrl,l'- biphényll1-2-vl méthyllaminométhoxyphosphinyll-3-hydroxv- butanoiqcrue, sel monolithique - On traite une solution du diester de la partie E (105 mg, 0,240 mmole) dans du dioxanne (2,0 ml) par du LiOH 1,0 N (288 pl, 1,2 eq.) et on agite la suspension blanche sous argon, à la température ambiante, pendant 4,0 63 2615508 heures. On dilue le mélange avec de l'eau, on le filtre, et on fait évaporer le filtrat sous vide. On chromatographie le résidu sur une résine HP-20 (100 ml de lit) en éluant avec un gradient linéaire H20/CH3CN. On réunit les fractions de produit et on les fait évaporer. On reprend le résidu dans de l'eau (50 ml), on le filtre à travers une membrane de polycarbonate de 0,4 j et on le lyophilise, ce qui donne 70 mg (62,7 % par rapport au poids d'hydrate) du sel de lithium désiré, sous la forme d'un solide blanc. Chromatographie sur couche mince CH2C12-CH2 OH-HOAc (20:1:1), Rf = 0,19, UV et PMA. Anal. calculé pour C2 lH26NO5 PFLi + 2,41 moles de H20O (MM 472,75): C, 53,35; H, 6,57; N, 2,96; F. 4,02; P, 6,55 trouvé: C, 53,35; H, 6,52; N, 2,98; F, 4,05; P, 6,59. Ht RMN (400 MHz): il 8 1,79-1,97 ppm (2H, m, -P(OCH3)CH2-) 2,26-2,44 ppm (2H, m, CH2Co2Li 2,29 (3H, s, méthyle aromatique) 2,31 (3H, d, méthyle aromatique en du fluor, JH F = 1,4 HZ) 2,47 (3H, méthyle aromatique) 3,46 et 3,50 (3H, 2 doublets, 2 diastéro- isomères, JHP = 10,5 Hz) 3,96 (2H, m, -PhCH2NHP(OCH3)- 4,17 (1H, m, (-CH2CHH(OH)CH2CO2Li) 6,84-7,21 (5H, m, protons aromatiques) Exemples 8 à 20 En suivant les modes opératoires indiqués précédemment et décrits dans les exemples de travail ci-dessus, on peut préparer les composés supplémentaires suivants. O H I I x R-P-C2-C H2-CO-R | 2 -, 2 2 X OH (CE2)n z Ex. No. R Z n X RX 8. OH OH2 H O C1-3 9 2 5. CH0 2 NH CH3 CH3 ci 10. C3H7 1 0 L cia C1H C2a5 11. CH30 CH2-l 2 NH H 12. OH 2 0 H OCO 13. C4Hg90 CH2 1 0 Li Ex. No. R Z n X R 14. CH 1 NH CH3 2 ' C2H5 CH Il3 15. OK CH-CH 2 0 OK 2 I C"O O H CH3 CH3 CH3 16. ONa - 2 O H CH3 17. CH3 F CH2 1 NH H HO> [N Ex. x No. R 2 n X R CH -C-C-O 18. CH \ È i O H CE CH c3 c:3 'CH OH 19. HO 2 0 Li 20. CH30 1 NH H \Q 3w2 Exemple 21 Acide (S)-4-diisoproDpyloxyphosphinvl)-3-r(l,1- diméthyléthvl)diphénylsilyl]oxvyl-butanoique. ester méthvylique On agite l'iodure de l'exemple 1 partie E(3) (45,1 mmoles, 21,70 g) sous un vide poussé, pendant 30 minutes. On ajoute en une seule portion du.phosphite de triisopropyle fraîchement distillé (0,451 mole, 93,92 g, 113,37 ml) et on agite le mélange réactionnel sous argon, et on le chauffe dans un bain d'huile à 155 C pendant 16,5 heures. On refroidit ensuite le mélange à la température ambiante. On élimine le phosphite de triisopropyle en excès et les produits- de réaction volatils par une distillation à court trajet (10 mm de Hg) suivie d'une distillation en tube à boules (0,50 mm de Hg, 100 C, 8 heures). On purifie encore le produit par chromatographie éclair (colonne de 95 mm de diamètre, 152,4 mm/gel de silice Merck, éluant hexane/acétone/toluène/6/3/1, débit ,8 mm/minute, fractions de 50 ml), ce qui donne 17,68 g '(33,96 mmoles, rendement 75 %) de l'isopropylphosphonate en titre sous la forme d'une huile visqueuse limpide. Chromatographie sur couche mince: gel de silice Rf = 0,32 hexane/acétone/toluène (6:3:1). RMN-1H: (270 MHz, CDC13) 8 7,70-7,65 (m, 4H) 7,45-7,35 (m, 6H) 4,57-4,44 (m, 3H) 3,59 (s, 3H) 2,94 et 2,88 (2xd, 1H J = 3,7 Hz) 2,65 et 2,60 (2xd, 1H J = 7,4 Hz) 2,24-1,87 (série de m, 2H) 1,19 et 1,12 (2xd, 12H J = 6,3 Hz) 1,01 (s, 9H) Exemple 22 Acide (S)-4-(hydroxvméthoxyPhosphinvl)-3-r r(1,1- diméthyléthyl)diDhénylsilylloxylbutanoique, ester méthv- licue. sel de dicyclohexylamine solution goutte à goutte (5 minutes) par du bistri- méthylsilyltrifluoracétamide (BSTFA) (32,8 mmoles, 8,44 g, 8,71 ml), après quoi on l'additionne goutte à goutte (10 minutes) de bromure de triméthylsilyle (TMSBr) (51,3 mmoles, 7,84 g, 6,75 ml). Après avoir agité à la température ambiante pendant 20 heures, on fixe la réaction avec 200 ml de KHS02 aqueux à 5 % et on l'agite énergiquement pendant 15 minutes. On extrait 3 fois la couche aqueuse avec de l'acétate d'éthyle. On réunit les extrait organiques, on les lave une fois avec de la saumure, on les sèche sur Na2S04 et on les concentre sous vide. On distille azéotropiquement 2 fois le résidu avec 50 ml de toluène. On met en suspension dans du toluène le précipité qui se forme et on le filtre. On concentre le filtrat et on répète le processus formation d'azétrope/filtration. On fait évaporer le filtrat sous vide puis on le pompe sous un vide poussé pendant 5 heures. On agite l'huile limpide visqueuse obtenue sous argon, à la température ambiante, dans 50 ml de pyridine sèche. On traite cette solution en une portion par du dicyclohexylcarbodiimide (DCC) (22,6 mmoles, 4,65 g), après quoi on ajoute du méthanol (41,0 mmoles, 1,31 g, 1,67 ml). Après avoir agité à la température ambiante pendant 20 heures, on filtre le mélange réactionnel à travers un tampon de Celite dans un entonnoir en verre fritté. On lave la Celite avec de l'acétate d'éthyle et on fait évaporer sous vide les filtrats réunis. On redissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on le lave 2 fois avec du KHS04 aqueux à 5 % et une fois avec de la saumure. On sèche l'extrait organique sur Na2SO4, on le filtre, on concentre le filtrat et on le distille azéotropiquement 2 fois avec du toluène, on le met en suspension dans du toluène et on le filtre. On concentre à nouveau le filtrat obtenu, on le distille azéotropiquement, on le filtre et on fait évaporer le filtrat sous vide, puis on le place sous un vide poussé pendant 6 heures, ce qui donne le phosphonate monoester sous la forme d'une huile visqueuse limpide (10,2 g, rendement > 100 %). Chromatographie sur couche mince: gel de silice Rf = 0,50 (nPrOH/NH4OH/H2O 7:2:1). On dissout le phosphonate monoester [1,21 g ont été pompés sous un vide poussé pendant 4 heures, ce qui donne 1,16 g (2, 57 mmoles)] dans 10 ml d'éther éthylique sec et on le traite goutte à goutte par de la dicyclo- hexylamine (2,65 mmoles, 0,481 g, 0,528 ml). On laisse reposer la solution homogène obtenue à la température ambiante pendant 7 heures, ce qui conduit à une formation importante de cristaux. On stocke le mélange à -20 C' pendant 16 heures, puis on le réchauffe à la température ambiante et on le filtre. On lave les cristaux avec de l'éther éthylique froid, sec, puis on le pompe sous vide poussé sur P205 pendant 18 heures. On pompe ensuite les cristaux sous vide poussé à 45 C pendant 4 heures, ce qui donne 1,25 g (1,98 mmole, rendement 77 %) du sel de dicyclohexylamine en titre sous. la forme d'un solide pulvérulent blanc, p.f.= 155-156 C. Chromatographie sur couche mince: gel de silice Rf = 0, 57 (MeOH 20%/ CH2C12)> RMN-1H: (270 MHz, CDC13). 7,71-7,65 (m 4H) 7,40-7,32 (m, 6H) 4,02 (m, 1H) 3,52 (s, 3H) 3,28 et 3,22 (m, 1H) 3,11 (d, 3H J = 11 Hz) 2,77-2,64 (m, 2H) 2,62-2,56 (m, 1H) 1,92-1, 08 (série de m, 22H) 1,00 (s, 9H) Spectre de masse: (FAB) 632 (M&H)" IR: (KBr) 3466-3457 (large) 3046, 3016, 2997, 2937, 2858, 2836, 2798, 2721, 2704, 2633, 2533, 2447, 1736, 1449, 1435, 1426, 1379, 1243, 1231, 1191, 1107, 1074, 1061, 1051, 820 cm'I Anal. calculé pour C22H31 6PSi.C12H23N: C, 64,63 H, 8,61; N, 2,22 Trouvé: C, 64,51; H, 8,49; N, 2,18 71 2615508 REVENDICATIONS 1. Composé utilisable pour inhiber l'enzyme 3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzyme A réductase,comportant la partie o 0 H C X. OH (H2)n Z dans laquelle X est -O- ou -NH-, n est 1 ou 2 et Z est une ancre hydrophobe. 2. Composé selon la revendication 1, dans. lequel l'ancre hydrophobe est un groupe lipophile qui, lorsqu'il est lié à la chaine latérale supérieure analogue à l'HMG de la molécule par un agent de liaison (X) approprié, se fixe- à la poche hydrophobe de l'enzyme non utilisée pour fixer le substrat HMG CoA, ce qui conduit à une augmentation de la puissance par rapport aux composés dans lesquels Z = H. 3. Composé selon la revendication 1, répondant à la formule o l R-P-CHI -CH-CH -COx X OH (S2)n z Z y compris ses sels, dans laquelle R est OH, un groupe alcoxy inférieur ou alkyle inférieur, et Rx est H ou un groupe alkyle inférieur; X est -O- ou -NH-; nest 1 ou 2 Z est une ancre hydrophobe qui est R1 t R2 R2 R1 R2a R R RR R6 o O l alkyl.e 10. ou R5. R5 R5 (R6a) o les traits en pointillés représentent des doubles liaisons facultatives, dans laquelle R1, R, R2a et R2b peuvent être identiques ou différents et sont H, un atome d'halogène, un groupe alkyle inférieur, haloalkyle, phényle, phényle substitué ou ORY, o RT est H, un groupe alcanoyle, benzoyle, phényle, halophényle, phényl(alkyle inférieur), alkyle inférieur, cinnamyle, haloalkyle, allyle, cycloalkyl(alkyle inférieur), adamantyl(alkyle inférieur) ou phényl substitué (alkyle inférieur); dans laquelle Z est R6 R ( s un groupe alkyle inférieur ou OH, un des symboles Rs et R5' étant présent lorsque l'atome de carbone auquel il est fixé est lié à une double liaison; R6 est un groupe alkyle-C-ou aryleCH2--; R6a est un groupe alkyle inférieur, hydroxy, oxo ou un atome d'halogène, et q est 0, 1, 2 ou 3, o Rx est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur, sous la forme acide libre ou sous la forme d'un ester physiologiquement hydrolysable et acceptable, ou sous forme de sel. 4. Composé selon la revendication 3, dans lequel X est -O-, R est un groupe alcoxy, et Z est R1 R2 R2 a 5. Composé selon la revendication 3, dans lequel X est -NH-, R est un grbupe alcoxy et (CH2)n est CH2, et Z est R1 R2 202a R2 6. Composé selon la revendication 4, qui est l'acide (S)-4-[[[4'-fluoro-3,3',5-triméthyl[l,l'-biphénylj-2-yl]- méthoxy]méthoxyphosphinyl]-3-hydroxy-butanoique, ester méthylique ou son sel monolithique, l'acide (S)-4-[[[4'-fluoro-3,3',5-triméthyl[l,l'- biphényl]-2-yl]méthoxy]hydroxyphosphonyl]-3-hydroxy- butanoique, sel dilithique l'acide (3S)-4-[[[4'-fluoro-3,3',5-triméthyl[l,l'- biphényl]-2-yl]méthoxy]méthylphosphinyl]-3-hydroxy- butanoique, sel monolithique l'acide (S)-4-[[[2,4-dichloro-6-[(4-fluorophényl)- méthoxy]phényl]méthoxy]méthoxyphosphinyl]-3-hydroxy- butanoique, sel monolithique l'acide (3S)-4-[[[2,4-dichloro-6-[(4-fluorophényl)- méthoxy]phényl]méthoxy]hydroxyphosphinyl]-3-hydroxy- butanoique, sel dilithique 74 2615508 l'acide (3S)-4-[[2,4-dichloro-6-[(4-fluorophényl)- méthoxy]phényl]méthoxy]méthylphosphinyl]-3-hydroxy- butanoique ou son ester méthylique, ou l'acide (S)-4-[[[[4'-fluoro-3,3',5-triméthyl[l,l'- biphényl-2-yl]méthyl]amino]méthoxyphosphinyl]-3-hydroxy- butanoique, sel monolithique. 7. Composition hypocholestérolémiante ou hypo- lipémiante comprenant un composé selon la revendication 3, et un support pharmaceutiquement acceptable pour celui-ci. 8. Composé répondant à la formule a l Ra-P-CH2-- cH-CH2-CO2alkyle Oalkyl OSi-C(CE3) C6a5 C6H5 dans laquelle R est un groupe alkyle inférieur ou alcoxy inférieur, y compris tous ses stéreoisomères. 9. Composé répondant à la formule O2 R-P-C2 -CE-C2-CO2alkyl, OH Osi-C(CH3) Oi / / 3 3 C6H5 C6H5 dans laquelle Ra' est un groupe alkyle inférieur ou OH, y compris tous ses stéréoisomères. 10. Utilisation d'un composé selon la revendication 3 pour inhiber la biosynthèse du cholestérol.