Brevet FR2619108A1 — publié le 19890210

La présente invention concerne un nouveau procédé de préparation de l'acide N -benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélamique de formule: H N - CH - COOH 2 1 (CH2)3 () C H5 - CH 2OCO - HN - CH - CONH sous les formes L,L ou D,D ou racémique. Le produit de formule (Il est un intermédiaire de synthè- se des peptides qui font l'objet des brevets français FR 79 16844 (2 460 289), FR 79 16845 (2 460 290), FR 80 11231 (2 482 958) et FR 80 11233 (2 482 960) et qui présentent des propriétés immunosti- mulantes remarquables. Selon le brevet français FR 79 16844 (2 460 289), le pro- duit de formule (I) peut être obtenu à partir de l'acide diami- no-2,6 pimelique. A cet effet, on prépare selon les méthodes con- nues l'ester dibenzylique de l'acide dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimelique qui est mono-saponifie selon la méthode décrite par A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum, 48, 1305 (1974) [Chem. Abstr., 82, 31497 g (1975)] puis transformé, par action du méthanol ammoniacal, en monoamlde de formule: Z - NH - CH - COOH (CH2)3 (Il) Z - NH - CH - CONH2 dans laquelle Z représente un radical benzyloxycarbonyle qui, après hydrogénolyse en présence de palladium sur noir, fournit l'acide diamino-2,6 pimélamique. Par action d'un sel de cuivre, tel que le bromure cuivri- que ou le carbonate basique de cuivre, sur l'acide diamino-2,6 pimélamique, il se forme un complexe qui peut être représenté par la formule: 2 6 1 9 1 0 8 H2N - CH - CONH I (CH2)3 f H NH - cCH COo Cu (III) OCQ - CH - NH2 (CH2)3 H NCO - CH - NH dont les fonctions amines libres sont protégées par action d'un halogénoformiate de benzyle. Le complexe ainsi formé est déplacé par action de l'hydrogène sulfure pour donner le produit de formule (I). A partir de l'acide dibenzyloxycarbonylamino-2,6 piméli- que, l'acide N -benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélamique est obtenu avec un rendement global voisin de 9 %. - Il a maintenant éte trouvé, et c'est ce qui fait l'objet de la présente invention, que l'acide N -benzyloxycarbonyl diami- no-2,6 pimelamique de formule (I) peut être obtenu a partir de l'acide dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimelique avec un rendement nettement ameliore par un procédé comportant un plus petit nombre d'étapes. Selon la présente invention, l'acide N -benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimelamique peut être obtenu par action d'un agent d'amidlfication sur l'acide 0 -p.nitrobenzyl N2-benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélique. Généralement, l'amidification est réalisée à une température voisine de 20 C au moyen d'une solution d'ammonia- que en opérant en présence d'un solvant non miscible & l'eau choisi parmi les hydrocarbures aromatiques (toluène), les hydrocarbures aliphatiques halogénés (chlorure de méthylène), les éthers (éther éthylique) ou les esters (acétate d'éthyle). L'acide O -p.nitrobenzyl N--benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélique peut être obtenu par action d'un agent capable de trans- former un acide en l'halogénure d'acyle correspondant, tel que le pentachlorure de phosphore, le tribromure de phosphore ou le chlo- rure de thionyle, sur l'acide O -p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonyl- amino-2,.6 pimélique. De préférence, on utilise le pentachlorure de phosphore en opérant dans un solvant organique tel que le chlorure de méthy- lene à une température comprise entre 0 et 30 C. L'acide O -p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique peut être préparé à partir de l'acide diamino-2,6 piméli- que selon le procédé décrit par A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum, 48, 15C1 (1974) [Chem. Abstr., 82, 171409 n(1975)]. Le procédé selon la présente invention permet, à partir d'un acide O -p. nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimelique sous forme L,L ou D.D ou racémique, d'obtenir l'acide N -benzyloxy- carbonyl diamino-2,6 pimélamique respectivement sous forme L,L ou D,D ou racemique. A partir de l'acide dibenzv.'oxycarbonylamino-2,6 pimeli- que, l'acide N -benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimelamique est obte- nu, selon le procede de la présente invention, avec un rendement global qeneralement supérieur à 20 %. Les exemples suivants, donnés à titre non limitatif, montrent comment l'invention peut être mise en pratique. EXEMPLE 1 A un mélange de 1,24 1 d'ammoniaque à 20 % et de 175 cm d'acétate d'éthyle, on ajoute 57,9 g d'acide O 1-p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélique. On agite pendant 24 heures à 20 C environ. La phase aqueuse est séparée par décantation et est lavée 3 fois avec 600 cm3 au total d'acétate d'éthyle, puis 2 6 1 9 1 0 8 est refroidie vers 10 C et enfin est neutralisée à pH=6 par addi- tion de 250 cm d'acide acétique anhydre. On obtient une bouillie que l'on agite pendant 1/2 heure vers 5 C. On filtre, lave l'inso- luble 2 fois par 400 cm au total d'acide acétique et 2 fois par 400 cm au total d'acétate d'éthyle. Apres séchage sous pression réduite (20 mm de mercure; 2,7 kPa), on obtient 23,5 g d'acide N -benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélamique dont les caracté- ristiques sont les suivantes: - Rf = 0,46 [silicagel; n.butanol-pyridine-acide acéti- que-eau (50-20-6-24 en volumes)], - Rf = 0,44 [silicagel; acétate d'éthyle-acide acétique- eau (40-12-10 en volumes)], - apres hydrolyse methylante (methanol chlorhydrique 6N à ébullition) suivie d'une acylation avec l'anhydride trifluoracétl- que, le dosage par chromatographie en phase gazeuse sur colonne CHIRASILVAL montre que le produit obtenu contient 99,8 % de forme L,L et 0,2 % de forme meso. - [î] = +18,2 (acide acetique, c = 0,3) L'acide O -p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl L,L diami- no-2,6 plmélique peut être prepare de la façon suivante: A une solution refroidie à 5 C de 268 a d'acide L,L O -p.nitrobenzyl dibenzvloxycarbonylamino-2,6 pimélique dans 4 1 de chlorure de méthylène, on ajoute en 15 minutes, par petites por- tions, 112,8 g de pentachlorure de phosphore. On agite le milieu réactionnel pendant 50 minutes à 5 C, puis pendant 15 minutes à C. Ensuite, en 50 minutes, on élimine du milieu réactionnel 2 1 de chlorure de méthylène par distillation a pression ordinaire. Au concentrat refroidi à 5 C, on ajoute 6,66 1 d'éther de pétrole. On abandonne à 5 C pendant 24 heures puis on élimine la phase éthérée. L'huile résiduelle est triturée 3 fois avec 1,5 1 au total d'éther de pétrole puis est dissoute dans 1 1 de chlorure de méthylène. Après concentration à sec sous pression réduite (20 mm de mercure 2,7 kPa) & 50 C, la meringue obtenue est dissoute dans 1,74 1 d'acide acétique anhydre. A cette solution, on ajoute 0,87 1 d'eau. On abandonne à 20 C pendant 24 heures, puis on verse la solution dans un mélange de 7,2 i d'eau et de 2 1 d'éther. On amène la phase aqueuse à pH=5 par addition lente de 400 g de carbonate de sodium. Le préciDité formé est séparé par filtration, lavé successivement 2 fois par 1 1 au total d'eau distillée et 3 fois par 1,5 1 au total d'éther. Apres séchage & l'air libre, puis sous pression réduite (20 mm de mercure: 2,7 kPa) à 50 C, on obtient 169,3 g d'acide i 2 O -p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélique dont les caractéristiques sont les suivantes: - Rf = 0,61 [silicagel; n.butanol-pyridine-acide acéti- que-eau (50-20-6-24 en volumes)]. L'acide ol-p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl L,L diami- no-2,6 pimelique peut être préparé selon la methode de A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum, 48, 1501 (1974). EXEMPLE 2 A un mélange de 226 cm d'ammoniaque à 20 % et de 35 cm d'acetate d'éthvle, on ajoute 10,4 q d'acide O -p.nitrobenzyl N -benzvloxycarbonyl D,D diamino-2,6 pimélique. On agite pendant 3 heures a une température voisine de 20 C. La phase aqueuse est séDaree par décantation, lavée 3 fois avec 120 cm3 au total d'acé- tate d'éthyle, concentrée partiellement jusqu'à pH=7 sous pression réduite (20 mm de mercure; 2,7 kPa) à 50 C. On obtient ainsi une bouillie qui est refroidie à 4 C pendant 1 heure, filtrée et lavée 3 fois par 30 cm au total d'eau. Apres séchage sous pression réduite (20 mm de mercure; 2,7 kPa) à 20 C, on obtient 5,36 g d'acide N -benzyloxycarbonyl D,D diamino-2,6 pimélamique dont les caractéristiques sont les suivantes: - Rf = 0,46 [silicagel; n.butanol-pyridine-acide acéti- que-eau (50-20-6-24 en volumes)]. 2 6 1 9 1 0 8 i 2 L'acide O -p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl D,D diami- no-2,6 pimélique peut être préparé de la même manière que l'isomère L,L. Ainsi à partir de 26,57 g d'acide D,D 0 -p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique, de 11,18 g de pentachlorure de phosphore et de 460 cm de chlorure de méthylène, on obtient 1 2 ,44 g d'acide 0 -p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl D,D diami- no-2,6 pimelique dont les caractéristiques sont les suivantes: - Rf = 0,61 [silicagel: n.butanol-pyridine-acide aceti- que-eau (50-20-6-24 en volumes)]. L'acide D,D 0 -p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique peut être préparé selon la méthode de A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum, 48, 1501 (1974). EXEMPLE 3 En operant de la même manière que dans l'exemple 2, à i- 2 partir de 52, 38 g d'acide 0 -p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl DD,LL diamino-2,6 pimélique, de 1900 cm d'ammoniaque a 20 % et de 270 cm d'acetate déthyle, on obtient 26,58 g d'acide N -benzyloxy- carbonyl DDLL diamino-2,6 pimelamiaue dont les caractéristiques soint les suivantes: - Rf = 0,46 [silicagel; n.butanol-pyridine-acide acéti- que-eau (50-20-6-24 en volumes)]. L'acide 0 -p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl DD,LL diamino-2,6 pimelique peut être prepare de la même manière que l'isomère L,L. Ainsi à partir de 114 g d'acide DD,LL 0 -p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique, de 48 g de pentachlorure de phosphore et de 1,5 1 de chlorure de méthylène, on obtient 52,9 g d'acide 0 -p.nitrobenzyl N -benzyloxycarbonyl DD,LL diamino-2,6 pimélique dont les caractéristiques sont les suivantes: - Rf = 0,61 [silicagel; n.butanol-pyridine-acide acéti- que-eau (50-20-6-24 en volumes)]. L'acide DD,LL 0 -p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylami- no-2,6 pimélique peut être préparé selon la méthode de A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum, 48, 1501 (1974). REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation de l'acide N -benzyloxycarbonyl diamino-2.6-pimélamique sous forme L,L ou D,D ou racémique caracté- risé en ce que l'on fait réagir un agent d'amidification sur l'acide O-p. nitrobenzVl N -benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélique sous forme L,L ou D,D ou racémique qui peut lui-même être obtenu oar action d'un agent capable de transformer un acide en l'haloge- nure d'acyle correspondant choisi parmi le pentachlorure de phos- phore, le tribromure de phosphore et le chlorure de thionyle sur l'acide O -p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique sous forme L,L ou D,D ou racemique. 2. Procéde selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'amidification est réalisée au moyen d'une solution aqueuse d'ammoniaque en operant dans un solvant organique non miscible & l'eau choisi parmi les hydrocarbures aromatiques, les hydrocarbures aliDhatiaues haloaenés, les éthers ou les esters. 3. Procédé selon la revendication 2 caractérisé en ce que le solvant est l'acétate d'éthyle.