Brevet FR2602232A1 — publié le 19880205

La présente invention se rapporte à la chimie organique et, plus precìsement, elle a trait a de nouveaux composés des acides N-nicotinoylamines, pré- sentant une activité antihypoxique et antiamnésique, qui peuvent trouver une application en médecine à titre d'agents d'action nootrope pour le traitement des états pathologiques relevant de perturbations de la mémoire et de la circulation cérébrale, des séquelles de traumas craniocérébraux, ainsi que dans la pratique gériatrique. A l'heure actuelle, pour le traitement des séquelles de l'hypoxie et pour l'amélioration de la mémoire lors de ses diverses perturbations, on utilise dans la pratique clinique les médicaments de type à action nootrope. Le produit ayant une telle action le plus utilise actuellement est le nootropil (2-oxopyrrolidine-l-il-acétamide), qui accroît la capacité de travail mental et confère un effet antihypoxique (K. Giurgea et al., L'importance clinique du produit Nootropil. Moscou, 1976, pp. 9-20, M. D. Mashkovsky. Les progrès de la neuropharmacologie moderne, Léningrad, 1982, pp. 107-111). Cependant, l'effet du nootropil ne se manifeste qu'à la suite de l'administration de fortes doses (300-600 mg/kg) et après un traitement prolongé. On connait également des argents psychoénergiques qui ont un composant nootrope. On compte parmi ces produits le centrophénoxine (ester 2-diméthylaminoéthylique de l'acide p-chlorophénoxyacétique) et le cleregil (diméthylaminoéthanol de l'acide N-acétyl-Lglutamique) (O. Benezova, Pharmacology of nootropic drugs. 21 Annual Czechslova psychopharmacological meeting. Nootropic drugs, Iesenic Spa, January 1979, 914, pp. 20-32 ; Fischer H. D., Schmidt J., Wustman Ch., Biomed. biochim. Acta, 1984, 4, pp. 541-543 ; Hoffman W., Rostock A-Pharmazie, 1983,38, 12, pp. 869-871). On connaît le médicament pyritinol (encé phabol de la Société Merck de R. F. A.) - (bis g3-hy- droxy-4-hydroxyméthyl-2-méthylpyride-5-il) méthyle du sulfure dihydrochlorure monohydrate de structure suivante Le pyritinol est utilisé lors des perturbations de l'apport sanguin et du métabolisme cérébraux. Les composés revendiqués sont -nouveaux et ne sont pas décrits dans la littérature. On s'est proposé d'obtenir de nouveaux composés peu toxiques présentant une haute activité antihypoxique et antiamnésique. Ce problème se voit résolu par le fait que, suivant l'invention, les composés revendiqués de l'acide N-nicotinoylaminé ont une formule générale Les composés revendiqués sont des produits cristallins peu solubles dans l'eau froide et modérément solubles dans l'eau chaude, difficilement solubles dans le méthanol, l'éthanol et l'isopropanol, pratiquement insolubles dans le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle, solubles dans le diméthylsulfoxyde et le diméthylformamide, ainsi que dans les solutions diluées d'acides et d'alcalis.La structure desdits com posés a été confirmée par les données des spectres infrarouge, ultra-violet et paramagnétique, l'individualité des substances a été déterminée par analyse élémentaire et chromatographie sur couche mince de silufol (dans un système de C1 - MeOH - NH4OH = 2,5: 7,5:0,01) Les composés revendiqués manifestent une action antihypoxique et antiamnésique marquée, tout en ne présentant qu'un effet secondaire minime. Dans les expériences portant sur des animaux, on a étudié l'activité des composés revendiqués suivants l'acide N- (5-hydroxynicotinoyl-L-glutamique (composé I) t l'acide N- (5-hydroxynicotinoyl) -DL-glutamique (composé II) ; l'acide N-(5-hydroxynicotinoyl)- # -aminobutyrique (composé III) l'acide N-(5-bromonicotinoyl) -L-glutamique (composé IV). L'étude de l'activité antihypoxique des composés revendiqués, en comparaison avec l'activité du pyritinol a été portée sur deux modèles de l'hypoxie : celle hypercapnique et celle humique, générale- ment utilisées pour l'évaluation des antihypoxiques (E. Van Lir, K. Stickney. "L'hypoxie". Moscou, Ed. "Méditsina", 1967). Les expériences ont été réalisées chez des souris blanches mles sans lignée de 18-20 g (de 25 à 28 g dans le cas d'hypoxie hypobare). Chaque dose de produit a été étudiée chez 10 animaux, les produits étant administrés par la voie intrapéritonê- ale 40 minutes avant le début de l'expérience. L'hypoxie hypercapnique a été reproduite dans des bocaux étanchement fermés d'une capacité de 200 cm3. L'hypoxie hémique était obtenue par injection sous-cutanée du nitrate de sodium à raison de 200-300 mg/kg. L'étude de l'activité antihypoxique a mon trê que tous les produits revendiqués possèdent le pouvoir de prolonger la survie des souris dans les conditions d'hypoxémie aigue. L'injection des composés revendiqués en dose de 100 mg/kg a apporte un accroissement de 20 à 70 % de la survie des souris dans les conditions d'hypoxie avec hypercapnie dans le bocal étanche par rapport aux témoins. Dans ces mimes conditions, le nootropil donne un effet identique pour une dose nettement plus importante (500 mg/kg). Dans les conditions de "forte" hypoxie hémique (méthémoglobinique), les composés, suivant l'invention, se sont généralement avérés efficaces, alors que le nootropil, indépendamment des doses appliquées, ne manifestait pas d'activité dans ce type d'hypoxie. Les résultats de ces expériences figurent dans le Tableau 1. TABLEAU 1 Activité antihypoxique Survie des souris en % par rapport à la survie des témoins, considérée pour 100 % Dose Composé mg/kg Hypoxie avec Hypoxie hémique hypercapnie Nootropil 250 - 98,0+7,8 Nootropil 500 130 + 30,2 103,0+9,6 Composé I 50 105,0i 11,8 120,0+21,6 100 121,0+ 6,6 127,0+16,1 200 134,0+ 13,6 142,0#14,7 Composé II 100 130,0# 18,1 Composé III 50 127,5il7,7 10O 125,0+ 10,9 134,0#19,9 Composé IV 50 114,0# 8,4 L'étude de l'action antiamnésique des composés revendiqués a porté sur des souris blanches males sans lignée d'une masse de 17 à 20 g , en utilisant la méthode d'esquive passive de Bures et al. en variante modifiée, qui est généralement adoptée pour l'étude de l'action des produits nootropes (Bures I., Buresova O., Huston G., Techniques and Basic Experiments for the Study of Brain and Behavior. Elsevier/North-Holland Biomedical Press, 1976). L'installation expérimentale comporte deux chambres : l'une obscure (petite) avec un plancher électrique, et l'autre claire (grande) où l'on place l'animal. On enregistrait, au cours de deux minutes, la durée de séjour de l'animal respectivement dans la chambre claire et celle obscure. Ensuite, dans la chambre obscure, l'animal obtenait un choc électrique à une reprise (0,4 mA) par le biais du plancherélectri- que tapprentissage). Pour obtenir l'amnésie, on utilisait la crise électroconvulsive maximale (choc électrique maximal, 50 Hz, 0,2 sec.). La réalisation de l'ê- lectrochoc immédiatement après l'apprentissage produisait l'effacement de la trace de mémorisation. Le test de reproduction était réalisé 24 heures après l'apprentissage : l'animal était placé dans la chambre claire et, de même qu'auparavant, on enregistrait la durée de séjour dans la chambre claire et celle obscure au cours de deux minutes. Lors de la reproduction du reflexe d'esquive passive sans l'action de l'électrochoc, les animaux du lot témoin préféraient rester dans la chambre claire pour une plus grande partie de cette période de deux minutes. L'électrochoc provoquait chez les animaux une amnésie du réflexe conditionné, et pour cette raison, après une brève période latente les animaux entraient dans la chambre obscure et y séjournaient une plus grande partie du temps. Les médicaments étaient administrés par la voie intrapéritonéale 40 minutes avant le début de l'apprentissage, chaque dose des médicaments étant étudiée chez 6 animaux. Les résultats de l'étude de l'action antiamnésique sont représentés dans le Tableau 2. TABLEAU 2 Influence des composés I-IN revendiqués et du nootropil sur l'amnésie, produite par électrochoc, lors de la reproduction des traces de mémorisation chez les souris à l'échéance de 24 heures. Temps de séjour des souris lors de la reproduction, sec. COIPOSE, DOSE mg/kg dans la chambre dans la chambre claire obscunre Témoins sans amnésie 112,8 (108-120) 7,2 (5-12) Témoins avec amnésie 74,3 ( 55-85) 45,7 (30-75) Nootropil 300 81,8 ( 61-93) 38,2 (27-49) Composé I 25 94,4 ( 75-110) 25,6 (15-36) 50 106,6 ( 95-120) 13,4 ( 5-25) Composé II 50 101,4 (93,8-109) 18,6 (10,6-28,6) Composé III 25 82,3 (63,5-101,1)37,7 (18,9-56,5) Composé IV 50 91,3 (80,1-102,5)28,7 (16,7-40,7) Comme il ressort du Tableau 2, les composés revendiqués possèdent une activité antiamnésique, ce qui se caractérise par le pouvoir desdits composés de décliner l'action défavorable de l'électrochoc sur la mémoire, ce qui se traduisait dans l'expérience par une nette augmentation de la durée de séjour des animaux dans la chambre claire par rapport aux témoins, et,respectivement, par une nette réduction de la durée de sé- jour dans la chambre obscure. L'effet susmentionné des produits présente une dépendance de la dose administrée. La comparaison de l'action des composés revendiqués, avec l'action du nootropil d'après le test d'entrée et de séjour des animaux dans la chambre obscure (critère primordial de l'expérience) montre une meilleure conservation de la trace de mémorisation a la suite de l'application des composés revendiqués qu'après l'administration du nootropil. USe des particularités avantageuses des composés revendiqués consiste egalement en leur plus forte activité en fonction de la dose utilisée l'effet antiamnésique desdits composés se manifeste à des doses 6 fois moins importantes, que celles du nootropi I. Les effets secondaires et la toxicité ai guë des composés, revendiqués ont été étudiés ches les souris blanches males sans lignée d'une masse de 17 à 20 g, dans les conditions d'injection intrapéritonéale des doses croissantes : 25, 100, 400, 800 et 1200 mg/kg. Etaient évaluées l'action de myorelaxation d'après la perturbation de la coordination des mouvements sur une tige tournante, et la mort des animaux. L'étude de la toxicité aiguë était réalisée dans les conditions de température stable (220C) du milieu ambiant et d'entretien individuel des animaux ayant un accès permanent à l'eau et aux aliments. A cette fin, les animaux étaient placés dans des cages-cellules de 8x8x8 cm, à raison d'un animal dans chaque cage. On enregistrait la mort des animaux 24 heures après l'injection des produits, compte tenu du nombre d'animaux tombés et de ceux en survie. Les résultats de cette étude figurent dans le Tableau 3. TABLEAU 3 Effets secondaires et toxicité Perturbation de la coor- Toxicité Produit dination des mouvements, journalière DE50, mg/kg DL50, mg/kg Composé 1 800 2200 (2000 2420) Composé II 700 2000 Composé III 500 1500 Composé IV 500 1500 Ces expériences ont permis d'établir que l'administration des composés revendiqués a des doses de 25 à 200 mg/kg n'entrain pas de perturbation visible dans l'état et le comportement des animaux. Aux doses indiquées et même plus fortes, les composes re vendiqués ne provoquent pas de myorelaxation et ne perturbent pas la coDrdination motrice. Les effets toxiques font leur apparition chez les animaux à partir des doses de 800-900 mg/kg, et à la suite de l'injection de doses de 1000 à 1300 mg/kg une partie des animaux meurt. Ainsi donc, dans les expériences portant sur des animaux, les composés revendiqués présentent le pouvoir de protéger les souris contre la mort dans les cas d'hypoxie aiguë, de déficience partielle d'oxygène et d'hypoxémie methémoglobinique. Les composés revendiqués, présentent également une activité de préservation de mémoire brève, autrement dit possèdent une activité antiamnésique. Comparativement au nootropil, les composés revendiqués présentent un net avantage, compte tenu de ce qu'ils lui sont supérieurs comme par les types et la caractéristique quantitative de l'action antihypoxique, ainsi que par la profondeur de l'effet antiamnésique. Parmi les composés revendiqués, l'acide N (5-hydroxynicotinoyl)-L-glutamique (composé I) possède la plus forte activité. L'étude de l'action antiamnésique dudit composé I, suivant l'invention, a été réalisée sur de différents modèles d'amnésie du reflexe conditionné d'esquive passive en utilisant plusieurs types d'animaux et de différentes voies d'administration, et en comparaison avec les produits de référence nootropil, pyritinol, centrophenoxine et cleregil. Il a été montré dans les expériences, portant chez les rats, que chez les animaux du lot témoin, après l'apprentissage du réflexe conditionné d'esquive passive (excitation douloureuse dans la chambre obscure), l'électrochoc maximal provoque une amnésie de l'acquis et les animaux passent beaucoup plus de temps dans la chambre obscure. A la suite de l'administration perorale ou intrapéritonéale du composé 1 revendiqué ladite administration, précédant ou suivant l'electro- choc maximal, entraîne la conservation de la trace de mémorisation. Les animaux conservent leur acquis d'est quive passive. On constate un net accroissement de la période latente du réflexe d'entrée dans la chambre obscure. L'efficacité du composé I, revendiqué se manifeste aux doses de 10, 20, 50 mg/kg. Le Tableau 4 ré su- me les résultats de ces expériences. Le nootropil ne manifeste son pouvoir de prévenir l'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive qu'à une dose de 300 mg/kg. Les résultats de ces expériences figurent dans le Tableau 5. Aux doses de 50 à 100 mg/kg, le composé 1 revendiqué diminue également l'amnésie du réflexe con ditionné d'esquive passive, conditionnée par électrochoc maximal chez les souris. TABLEAU 4 Action antiamnésique du composé I revendiqué sur le module d'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive, produit par électrochoc maximal chez les rats no Substan- Conditions de l'expérience d'ordre ces Dose Voie Inter- Admi- Adminis- mg/kg d'ad- valle nis- tration minis- entre tra- juste trati- l'admi- tion aprés on nistra- av- appren tion ant tissage et app- ap- et choc rentis- pren sage tis sage 3 4 5 6 7 1Témoins sans Soluté intra amnésie physio- péri logi- toné que ale 2 Témoins avec amnésie par électrochoc maximal -" 3 Composé I 10 -"- 30 min + 4 Témoins soluté per os sans amnésie physio logi que 5 Témoins avec amnésie par électrochoc maximal -"- -" 6 Composé I 20 intrapé ritoné ale 7 Composé I 20 per os 30 min + 8 Témoins sans soluté intra amnésie physio- @@@@@@ logique néale Tableau 4 (suite) 1 2 3 4 5 6 7 9 Témoins avec solut6 intra amnésie par physio- \C8périto- électrochoc log4- néale maximal que 10 Composé I revendiqué 50 -"- 45 min + Tableau 4 (suite) no Apprentissage, électrochoc Reproduction d'ordre maximal après 24 heures Animaux intacts avant Temps Temps an sec apprentissage du réf- ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ Temps de séjour, sec lexe Temps chambre cham passé dans la condi latent ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ tionné claire bre du ré- chambre chambre d'esqu- obs flexe claire obscure cure de ter- ive rier passive, sec 1 8 9 10 11 12 13 1 4,8 +1,9 20#3,6 100#3,6 82,5+28,4 94,0+ 26,0+ #23,8 #23,8 2 1,8 # 0,56 14,2 # 5,04 105,8 # 5,0 1,8 # 0,56 11,5# 108,5# #5,3 #5,3 3 2,5 # 0,3 22,8 # 5,8 97,2 # 5,8 39,6 # 9,1 64,0# 56# +2,0 +20,8 4 9,6+6,4 27+7 93+7 120 120 0 5 4,8+19,5 19,5+8,7 100,5#8,7 5,7+1,9 5,7+ 114,2+ +1,9 +1,9 Tableau 4 (suite) 1 8 9 10 11 12 13 6 11#4,38 21,2+5,1 98,8+5,1 37,7+17,8 49,5+ 70,5+ +17,8 +17,8 7 10+6,3 26,7+7,2 93,3+7,2 49,2+15,3 53,0+ 67,0+ +15,3+15,3 8 6,8+2,4 40,2+6,5 79,8+6,5 83,8#19,4 83,3+ 36,7+ + 19,4 +19,4 9 2,0#0,5 26,3#4,2 93,7#4,2 28,1#20,6 19,1# 90,9# #20,6 #20,6 10 7,7+10,9 12,7+10,9 107,3+10,9 58,7+ 58,7+ 86,3+ +30,8 +30,8 +30,8 Tableau 5 Action antiamnésique du nootropil sur le modèle d'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive, Produit par électrochoc maximal chez les rats no Substances Conditions de l'éxpérience d'ordre Dose V@ie Inter- Admini- Admi- mg/kg d'ad- valle striation nistra minis- entre avant tion tra- l'ad- appre- juste tion minis- ntis- apres .trati- sage appre on et ntissa l'ap- ge et preùti- choc ssage 2 3 4 5 6 7 1 Témoins avec amnésie 2 Témoins avec amné- sie par électro choc maximal 3 ootropil 200 intrapé- 50 + ritonéale min 4 Témoins avec am nésie 5 Témoins avec am nésie par électro- choc maximal 6 Nootropil 300 intrapé- 50 min + ritonéale 7 Témoins avec amnésie 8 Témoins avec amnésie par éle ctrochoc maximal 9 Nootropil 300 intrapé ri tonéale Tableau 5 (suite) 1 2 3 4 5 6 7 10 Témoins avec amnésie 11 Témoins avec amnésie par électrochoc maxi mal 12 Nootropil 400 intrapéri- 60 min + tonéale Tableau 5 (suite) no Apprentissage, électrochoc Reproduction apres d'ordre maximal 24 heures Animaux intacts avant l'ap- Temps la- Durée de séjour, prentissage tent du sec passée dans Temps la- Temps en sec passé la tent du dans la condi- chambre chambre réflexe tionné claire obscure de ter- chambre chambre d'esqu claire obscure ive pas- rier sive 1 8 9 10 11 12 13 1 8,0#4,48 14,7#1,9 105,3#1,9 105,3#1,9 105,3#16,8 85# #16,8 2 11,0#5,0 17,6#5,0 102,4#5,0 7,6#5,0 19,3#5,0 100,7# +5,0 3 9,4#5,1 14,6#4,7 105,4#4,7 20,8#12,6 23,8#11,1 96,2# #11,1 4 4,8+1,9 20,0+3,6 100,0+3,6 82,5+28,4 94,0#23,8 26,0+ +23,8 5 1,8+0,6 14,2+5,0 105,8+5,0 1,8+0,6 11,5+5,3 108,5 #5,3 6 3,2+u,7 15+0,9 105#0,9 26,6+20,8 34,4+19,9 85,6+ +19,9 Tableau 5 (suite) 1 8 9 10 11 12 13 7 8,5+5,0 24,2+7,0 95,8+7,0 120 120 b 8 5,6+5,4 30,3+10,0 89,7+10,0 23,3+21,3 28,0+21,3 92+21,3 9 10,3+7,8 22,6+7,8 97,4#7,8 60,7+17,3 85,0+17,3 35,0+17,3 10 6,8+2,4 40,2+6,5 79,8#6,5 83,3+19,4 83,3+19,4 36,7+19,4 11 2,0#0,5 26,3#4,2 93,7#4,2 28,1#20,6 29,1#20,6 90,9#20,6 12 8#3,3 21,2#6,3 98,8#6,3 28,2#7,6 28,6#7,9 91,4#7,9 L'efficacité du nootropil d'après ce test n'apparut qu'à la suit de son utilisation à une dose -de 300 mg/kg. Le centrophenoxine octroyait une action antiamnésique à une dose de 50 mg/kg, le pyritinol également à une dose de 50 mg/kg. Les résultats de ces expériences figurent dans le Tableau 6. TAB-LEAU 6 Influence du composé 1 revendiqué sur l'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive, provoquée par électrochoc maximal chez les souris. Influence du composé I revendiqué sur l'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive, provoquée par électrochoc maximal chez les souris N Substances Dose en mg/kg Reproduction du d'ordre en injection réflexe condition intrapéritoné- né d'esquive pas ale sive, temps latent du réflexe en sec. 1 Témoins sans soluté physio amnésie logique 87,08 + 10,5 2 Témoins avec - " - 17,5 t 6,9 amnésie par électrochoc maximal 3 Composé I 25 70,0 t 20,2 4 50 78,5 + 25,7 5 Nootropil 100 26,3 t 3,1 6 300 80,0 + 13,9 7 Centrophénoxine 25 39,0 + 3,4 8 50 68,4 t 8,4 9 Pyritinol 25 31,0 t 5,4 10 50 98,0 t 7,7 A une dose 100 mg/kg, le composé I revendiqué prévient de même que le nootropil à une dose de 800 mg/kg le développement d'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive, conditionnoe par l'injection intrapéritonéale de scopolamine à raison de 2,5 mg/kg avant l'apprentissage.Les résultats de cette étude sont représentés dans le Tableau 7. TABLEAU 7 Influence des substances sur l'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive chez les souris provoquée par scopolamine (2,5 mg/kg, introduction intrapéritonéale avant l'apprentissage) Reproduction du réflexe Doses en mg/kg conditionné d'esquive Introduction passive Substances intrapérito- -------------------------- néale Temps latent Temps passé du réflexe, dans la cham sec bre claire, sec. Témoins sans amnésie - 91,5 t 12,4 110,0 + 5,2 Témoins avec amnésie (scopolamine) - 17,2 + 1,6 27,2 t 4,3 Composé I 100 51,9 t 11,4 56,9 i 10,8 Nootropil 400 26,0 t 9,2 35,0 t 9,7 Nootropil 800 60,5 + 11,0 69,5 + 11,4 L'amnésie du réflexe conditionné de l'esquive passive était également provoquée par deprivation de la phase paradoxale du sommeil d'après la méthode de Jouvet (Jouvet M., Physiol. Revs., 1967, 47, 2, p. 117). A cette fin, juste après l'apprentissage du réflexe conditionné d'esquive passive les rats sont places pour 24 heures dans un bassin d'eau sur des plateaux de 4,5 x 4,5 cm, ê 1 cm au-dessus de la surface d'eau. Comme en témoignent les donnees électrophysiologiques, dans ces conditions la part de la phase paradoxale du sommeil était réduite de 13 % (norme) à 1 %. La conservation du reflexe conditionné d'esquive passive était évaluée d'après la grandeur du temps latent d'entréedes rats dans la chambre obscure de l'installation, dans laquelle ils obtenaient un choc électrique au cours de l'apprentissage. Les résultats de la peproduction du réflexe conditionné d'esquive passive à la suite de dérivation de la phase paradoxale du sommeil montrent que les rats perdaient presque entièrement l'acquis obtenu. Le compose I revendiqué à une dose de 25 mg/kg par injection intrapéritonéale 40 minutes avant l'apprentissage restituait pour 40 % la réaction per turbée, ce qui témoigne de l'activité antiamnésique dudit composé sur le modèle susmentionné. Dans des conditions analogues, le nootropil (à une dose de 400 mg/kg) ne restitue la réaction que de 10 %, et le centrophénoxine de 74 %. Le Tableau 8 résume les résultats de cette étude. TABLEAU 8 Action antiamnésique des substances nootropes sur le modèle d'amnésie du réflexe conditionné d'esquive passive, produite par déprivation de la phase paradoxale du sommeil Temps latent d'entrée dans Substances la chambre obscure (sec.) Témoins sans déprivation de la phase paradoxale du sommeil 102,4 + 34,25 Témoins avec déprivation de la phase paradoxale du sommeil 2,6 t 0,70 Composé I (25 mg/kg) 42,0 t 15,20 Nootropil (400 mg/kg) 10,6 + 2,65 Centrophénoxine (50 mg/kg) 74,3 + 15,42 L'action antihypoxique du composé I reven diqu; a fait l'objet d'etudes expérimentales chez les souris avec 3 modèles d'hypoxie : hypobare, hémique et hypoxie en capacité étanche. On a utilise pour l'évaluation de l'hypoxie hypobare une chambre barométrique du type insufflation-aspiration, avec l'enregistrement de la pression et de la vitesse d'ascension. On faisait "monter" les animaux avec une vitesse de 50 m/sec. jusqu'à la "hauteur" de 10,5 - 11 km. Etaient enregistrés la durée de survie (temps de réserve) et le taux d'animaux restés vivants. A une dose de 50 mg/kg, et particulièrement à celles de 100 et 400 mg/kg, le composé I revendiqué conférait un net effet antihypoxique, augmentant de fa çon significative le temps de réserve et le taux d'animaux en vie, alors qu'aucun des produits nootropes connus (nootropil, centrophénoxine, pyritinol) ne présentait pas de tel effet. Les résultats de ces expériences figurent dans le Tableau 9. L'efficacité du composé I revendiqué se manisfesta également sur le modèle d'hypoxie avec hypercapnie en reservoir étanche, obtenu en plaçant les souris dans des bocaux de 200 cm3 avec des couvercles étanches. Des différences significatives dans la survie des animaux du lot témoin et de celui expérimental étaient observées à la suite de l'utilisation dudit composé I, aux doses de 100 et 200 mg/kg. Pour des doses variant de 50 a 500 mg/kg pyritinol, centrophenoxine, cleregil et nootropil ne donnaient pas tel effet. Les résultats de cette expérience figurent dans le Tableau 10. L'hypoxie hemique était provoquée chez les souris par injection hypodermique de nitrite de sodium à raison de 300 mg/kg, et elle était affaiblie par l'utilisation du composé I revendiqué aux doses de 100 et 200 mg/kg, la survie des animaux augmentant respectivement de 1,38 et de 1,48 fois. Un effet analogue était obtenu par le pyritinol à une dose de 200 mg/kg et le nootropil â une dose de 1000 mg/kg. Le Tableau 11 résume les résultats de cette étude. TABLEAU 9 Effet antihypoxique du composé I revendiqué en comparaison avec les substances à composant nootrope d'action sur le modèle d'hypoxie hypobare dans les expériences portant sur des souris N Substances Dose Temps de Taux de survie d'ordre mg/kg reserve, des animaux min. 1 Témoins (Sol. physiologique) - 9,4+1,0 22 2 Composé I 50 12,6*4,3 33 3 -"- 100 25,7i5,6 4 Témoins - 11,2#5,3 16,6 5 Composé I 400 20,9i5,12 66,6 6 Témoins - 9,7#1,0 22 7 Nootropil 300 10,1#1,2 22 8 Témoins - 9,7#1,0 22 9 Centrophé- 100 9,6+3,5 22 noxine 10 Témoins - 6,05+2,7 16,6 11 Centrophé- 200 11,1#3,4 33,3 noxine 12 Témoins - 9,7#1,0 22 13 Pyritinol 100 6,3#3,5 0 14 Témoins - 5,75+2,7 11,1 15 Pyritinol 200 8,9+3,5 22,2 TABLEAU 10 Effet antihypoxique du composé I revendiqué en comparaison avec l'action des produits nootropes connus sur le modèle d'hypoxie avec hypercapnie en capacité étanche N Substance Dose Durée de Effet d'ordre mg/kg vie, min. % 1 Témoins (sol. physio. - 25,1 - 1,2 100 logique) 2 Composé I 50 26,6 ± 2,7 105 3 Témoins - 20,3 t 2,7 100 4 Composé I 100 24,5 + 3,2 120,7 5 - " - 200 27,1 + 5,4 133,5 6 Témoins - 29,3 t 3,6 100 7 Nootropil 500 29,2 t 5,9 93 8 Témoins - 30,2 t 3,18 100 9 Centrophénoxine 50 32,7 t 2,2 108 10 Témoins - 30,2 t 3,18 100 11 Cleregil 200 35,7 + 4,5 111 12 Témoins - 25,9 t 4,1 100 13 Pyritinol 100 29,5 + 5,5 114 14 Témoins - 26,22+ 4,3 100 15 Pyritinol 200 30,96+ 4,5 118 TABLEAU 11 Effet antihypoxique du compose I revendiqué sur le modèle d'hypoxie hémique (Na N02 - 300 mgzkg en injection hypodermique) N Substances Dose Durée de vie, Effet modid'ordre mg/kg minutes fié, % 1 Témoins (Sol. physiol.) - 14,5 # 2,7 100 2 Composé I 50 16,5 + 3,2 113,8 3 Témoins - 13,2 + 2,7 100 4 Composé I 100 17,5 + 4,5 132,6 5 - " - 200 19,6 t 7,3 148,5 6 Témoins - 20,4 i 2,2 100 7 Nootropil 500 23,5 t 2,8 115 8 Témoins - 18,2 t 4,4 100 9 Nootropil 1000 26,1 + 4,7 143 10 Témoins - 17;;6 t 2,2 100 11 Pyritinol 100 19,6 + 2,2 111 12 Témoins - 16,53 # 2,0 100 13 Pyritinol 200 24,04 + 6 144 Par conséquent, à la différence de nootropil, pyritinol, centrophénoxine et des autres produits nootropes, dont l'effet antihypoxique ne se manifeste que dans quelques modèles de l'hypoxie et à condition d'adminxstration de fortes doses, le composé I revendiqué prolonge la survie des animaux dans tous les mo dèles d'nypoxie utilisés : hémique, hypobare et hypoxie en capacité étanche. On a réalisé -l'étude de l'action du composé I revendiqué sur l'apprentissage des réflexes conditionnés. Aux doses de 10,. 20, 50, 100 et 200 mg/kg, le composé I ne présentait pas d'action sur l'acquisition du réflexe conditionné d'esquive passive chez les souris et les rats. A la suite d'une administration prolongée du composé I, å une dose de 70 mg/kg, on n'observa pas de modification dans la rapidité d'acquisition du réflexe conditionné d'étanchement de la soif dans le labyrinthe en T. Les résultats de ces expériences figurent dans les Tableaux 4 et 12. L'étude de l'influence du composé I revendiqué sur la reproduction du réflexe chez les souris était réalisée sur le modèle du réflexe conditionné d'esquive passive à l'échéance de 24 heures, 7 et 14 jours après l'apprentissage. Et, si à l'échéance de deux semaines dans le lot de témoins, la plupart des animaux (58 %) oubliaient la situation et perdaient le réflexe, à la suite de l'administration durant deux semaines dudit composé I, le taux d'animaux pre- sentant une perturbation du réflexe conditionné d'esquive passive n'arrivait plus qu'à 15 %, alors que 85 % d'animaux se rappelaient de la situation et passaient la plus grande partie du temps dans la chambre claire de l'installation. TABLEAU 12 Influence du composé I revendiqué sur l'apprentissage des rats au réflexe conditionne dans le labyrinthe en T Temps du réflexe, sec. Seances ----------------------------------- d'apprentissage Témoins Composé 1,50 mg/kg, injectin intrapé ritonéale Avant l'injection du produit 54,61(48,42-60,8) 48,57(42,5-54,57) 1 79,2(68,72-89,68) 53,7 (43,5-63,9) 2 53,4(42,92-63,88) 71,2 (60,4-82) 3 74,0(63,52-84,48) 65,0 (54,8-75,2) 4 59,4(48,92-69,88) 74,5 (63,8-85,2) 5 79,7(68,74-90,66) 62,6 (52,4-72,8) 6 68,0(57,04-78,96) 49,06(38,8-59,2) 7 77,7(67,22-88,18) 54,3 -(42,1-64,5) 8 52,7(42,22-63,18) 70,3 (61,0-79,6) 9 62,9(51,94-73,86) 66,4 (57,1-75,7) 10 76,9(66,42-87,38) 34,0-(23,3-44,7) 11 49,1(40,05-58,15) 24,0 (13,1-34,9) 12 37,4(28,16-46,64) 24,5 (13,6-35,4) 13 29,4(24,16-34,64) 18,4 (12,2-24,6) 14 30,0(23,71-36,29) 31,8 (20,9-42,7) 15 31,1(24,81-37,39) 23,8 (16,7-30,9) 16 18,5(15,07-21,93) 19,9 (11,8-28,0) 17 47,3(39,7 -54,9 ) 22,2 (16,9-28,1) 18 36,0(30,29-41,71) 26,9 (21,6-32,2) 19 40,2(31,44-48,96) 17,7 (13,3-22,1) 20 12,9( 8,52-17,28) 10,7 ( 7,3-14,1) 21 18,6(12,22-24,98) 6,4 ( 4,8- 8,0). Dans des expériences portant sur les rats, l'action des médicaments en administration prolongée sur la reproduction et l'extinction du réflexe d'esqui- ve passive était étudiée dans les conditions de la méthode de situation de conflit (T. Klygul, V. Krivopalov. Pharmacologia i. toxicologia, 1966, 2, p. 241). Le conflit était créé par confrontation des motivations de soif et de défense au moment où les animaux prennent l'eau de l'abreuvoir, en assenant à ce moment un choc électrique. On enregistrait le temps de première approche à l'abreuvoir et de première prise d'eau. Lors de la reproduction du réflexe conditionné d'esquive passive 24 heures après l'apprentissage, les rats témoins se rappelaient bien de la situation et ne prenaient pas l'eau, alors que lors de la reproduction deux semaines plus tard, le réflexe s'éteignait progressivement et la plupart des animaux réalisait la prise d'eau. Une administration prolongée du composé I revendiqué et des autres médicaments (nootropil, cleregil) n'octroyait pas d'influence sur l'apprentissage et la reproduction du réflexe conditionné d'esquive passive dans les conditions de situation de conflit à l'échéance de 24 heures. Cependant, deux semaines après l'apprentissage, alors que la plupart des animaux du lot témoin avaient oublié la situation et que le temps du réflexe (la prise d'eau) s'était réduit de plus de deux fois, chez les animaux obtenant le composé I revendiqué, la trace de mémorisation s'était presque entiè-re- ment conservée, et le temps du réflexe (de la prise d'eau) ne s'était pratiquement pas modifié. Un effet analogue fut obtenu avec le nootropil a une dose de 300 mg/kg, alors que le cleregil favorisait la reproduction de la trace de mémorisation à un moindre degré. Les résultats de ces expériences sont rapportés dans le Tableau 13. Tableau 13 Action des produits en administration prolongée sur la reproduction du réflexe d'esquive passive chez les rats dans les conditions de la méthode de ituation de conflit n Remps de Temps de 1-r d'or- Produit Conditions 1-re approche choc élecdre de sec. trique, sec. l'expérience 2 2 3 4 5 1 Témoins Solute physiolo gique 50,0#41,5 50,0#41,5 2 -"- Reproduction 24 h après l'apprentissage 181,0#0,06 300 3 -"- Reproduction du réflexe 14 jours après l'appren- tissage 149,29#44,4 149,57#44,5 4 Composé I Administration 50 mg/kg unique 31,5#14,3 31,5#14.3 5 -"- Administration durant 18 jours 35,29#12,2 35,29#10,2 6 -"- Reproduction 24 h après l'apprentissage 300 7 - - Reproduction 14 jours après l'apprentissage (administration durant 32 jours) 209,29#43,5 273,57#44,5 8 Noctropil Administration 300 mg/kg unhique 13,0#4,29 13,0#4,29 9 -"- Administration durant 21 jours 38,0#20,4 38,0#20,4 10 -"- Reproduction après 24 h 282 #53,6 Reproduction 14 jours après l'apprentissage (administ5ration durant 35 jours) 191,8#71,3 251,0#68,3 12 Cleregil Administration 150 mg/kg unique 30 # 24,2 30 #24,2 bleaa 13 (suite) 1 2 # 3 4 5 13 150 mg/kg Reproduction 24 h après l'apprentissage 300 14 -"- Reproduction 14 jour après l'apprentissage (administration durant 35 jours) 143#116,5 200#94,8 L' étude de l'influence du composé I revendiqué sur le. processus d'extinction du réflexe d' e 5 q u i v e passive sans renforcement dans les conditions .ce situation de conflit montre, que dans le lot de témoins 12 minutes après la présentation du test tous les rats effectuent la prise d'eau. Sous l'influence du composé I revendiqué, l'extinction de la trace de mémorisation s'effectue plus graduellement, et à l'échéance de 12 minutes après l'emplacement des animaux dans l'installation pour la réalisation du réflexe, seulement la moitié des animaux prennent l'eau de l'abreuvoir.On constate également une nette augmentation par rapport aux témoins du temps de première approche, et, plus particulièrement, de première prise d'eau. I1 convient également de noter une importante différenciation dans le temps d'approche et de prise d'eau chez ces animaux. Les résultats des expériences figurent dans les tableaux 14, 15. Tableau 14 Action du composé I revendiqué (50 mg/kg, injection intrapéritonéale administration durant 14 jours) sur l'extinction du réflexe dtesquive passive chez les rats dans les conditions de la méthode de situation de conflit Taux des animaux se rappelant Temps moyen de la situation et ne s'appro- d'approche à Produit chant pas de l'abreuvoir du- l'abreuvoir, ou rant 12 minutes sec. Intervalles de temps,min. 1 - 2 3 - 4 5 - 6 7 - 8 9-10 11-12 Témoins 42,6 42,6 28,4 28,4 14,2 0 231,3#64,5 (solute physiologique) Composé I 71,0 71,0 42,6 28,4 28,4 28,4 40,7±277,5 Tableau 15 Taux des animaux n'ayant pas Temps moyen pris d'eau de l'abreuvoir du réflexe Produit pendant 12 minutes (prise d'eau) Intervalles de temps,min. 1 -2 3 -4 5 -6 7 -8 9-10 11-12 Témoins 42,6 42,6 28,4 28,4 14,2 0 235,3#79,0 (soluté physiologique) Composé I,100 85,2 56,8 56,8 56,8 56,8 513,6#189,8 revendique On a réalisé l'étude du composé I revendi qué sur le potentiel transcallosal évoqué. Les expériences étaient portées sur des lapins non narcotisés et non immobilisés par les myo- relaxants. Le potentiel transcallosal évoqué était enregistré au moyen d'un neuroanalyseur électronique (paramètres de l'excitation : 25-35 V, 0,1-1,0 ms), on prenait la moyenne sur vingt realisations et on l'analysait au cours de 200 ms après l'apport de l'excitation. Dans les expériences concernant l'étude des produits de type à action nootrope, on a établi que le composé I revendiqué agit sur le potentiel transcallosal évoqué du cerveau de la même façon, que le nootropil, le pyritinol et le cleregil. Le composé I provoque une hausse de l'amplitude des composants P1 primaire positif et N1 primaire négatif du potentiel transcallosal évoqué, sans modifier les périodes latentes desdits composants.La particularité de l'action du composé I revendiqué sur le potentiel transcallosal évoqué par rapport aux autres produits de type a action nootrope consiste en l'absence d'action sur le composant P2 secondaire positif, qui est con ditionné par la conduction de l'excitation non pas à travers le corps calleu-x, mais à travers la formation réticulée du mésencéphale. Ainsi donc, le composé I revendiqué, de même que les autres produits a action nootrope, contribue à la transmission entre les deux hémisphères cérébraux. Les résultats des expériences figurent dans le Tableau 16. L'action anticonvulsive du composé I revendiqué était évaluée d'après le pouvoir du produit de prévenir les convulsions et la mort des souris à la suite de l'injection de convulsivants : pentylènetérazol (140 mg/kg en sous-cutanée), thiosémicarbazide (28 mg/kg, en intrapéritonéale), bicuculline (2 mg/kg en sous-cutanée), ainsi que de choc électrique maximal. TABLEAU 16 Action des produits de type à action nootrope sur les différents composants du potentiel transcallosal évoqué Produit, Composant Composant Composant dose(mg/kg) positif P1 négatif N1 P1+N1 positif P2 Nootropil (300-500) ++ ++ ++ ++ Pyritinol (100-150) + + + + Cleregil (25-50) ++ - + + Composé I revendiqué + augmentation jusqu'à 50 %, - diminution, o absence d'effet. Dans tous les tests utilisés, l'effet anticonvulsif du composé I revendiqué ne se manifestait qu'à une dose de 200 mg/kg, et il était observé chez 30 % d'animaux. Par ailleurs, le composé I revendiqué, à une dose de 100 mg/kg, prolongeait la durée latente d'apparition des convulsions, provoquées par la bicuculline. Après l'accroissement de la dose à 400 mg/kg, l'effet anticonvulsif du composé disparaissait (les résultats des expériences sont rapportés dans lestableaux 17, 18, 19, 20). Aux doses de 25, 50 et 100 mg/ kg, le composé I revendiqué n'octroyait pas d'influence ce sur le trémor provoqué par l'arécoline (26 mg/kg en injection sous-cutanée).L'utilisation du composé I revendiqué à raison de 100 et 200 mg/kg contribuait dans une grande mesure à la prévention de l'hypercinèse chez les souris (secouement de la têtue), provoquée par le 5-hydroxytriptophane (200 mg/kg en injection intrapéritonéale). Les resultats de ces expériences sont représentés dans les Tableaux 21, 22. Un effet anti-àgressif se manifestait de la part du compose I revendiqué sur le modèle expéri- mental d'agressivité, provoqué chez une paire de souris par excitation électrique (0,45 mA) par le biais du plancher électrique, aux doses de 200 et 400 mg/kg. On a constaté la réduction de 1,5 à 2 fois du nombre de combats entre les deux souris. Les résultats de cette expérience figurent dans le Tableau 23. Aux doses de 50 à 400 mg/kg, le compose I revendiqué ne présentait pas d'influence significative sur le comportement d'orientation et de recherche d'après le test de grimper sur le treillis, et ne produisait pas de perturbation de la motricité d'après le test d'axe tournant. Les résultats de ces expériences sont rapportés dans les Tableaux 24, 25. Ainsi donc, par rapport au produit nootrope, le nootropil qui est utilisé à titre d'agent antiamnésique et antihypoxique, le composé I revendiqué possede dans l'expérience sur les animaux un certain nombre d'avantages. Ledit composé I, surpasse nettement par son activité le nootropil et présente un large éventail thérapeutique. Par son action antiamnésique en fonction du type d'amnésie (de choc, de scopolamine, amnésie provoquée par déprivation de la phase paradoxale du sommeil et par isolation), le composé I revendiqué surpasse de 6 à 10 fois le nootropil par ses doses et contribue à une conservation plus prolongée de la trace de mémorisation. En ce qui concerne son action anti-hypoxique, le composé I, surpasse le nootropil non seulement pas son activité (de 5 à 10 fois), mais aussi par un plus large éventail d'activité, contribuant à une sur vie plus prolongée dans les conditions d'hypoxie hypobare (où le nootropil est peu efficace), d'hypoxie avec hypercapnie et d'hypoxie hémique. Le composé I est peu toxique et ne présente pas d'effets secondaires de caractère de myorelaxation. TABLEAU 17 Action du composé I revendiqué sur les convulsions, provoquées par le pentylénetétrazol (140 mg/kg en souscutanée) chez les souris Dose du composé I Extension toxique Produit mg/kg en injection et tombée des ani intrapéritonéale maux chiffres absolus %% Pentylénetétrazol 9/10 90 Composé I + pentylénetétrazol 50 5/6 83 - " - 200 4/6 66 - " - 400 6/6 100 Tableau 18 Action du composé I revendiqué sur les convul sions provoquées par le choc électrique maximal chez le. souris Effet de protection Produit Dose estension tonique Tombée des mg/kg animaux en inj. chiffres %% chiffres intrapéritonéale absolus absolus Compose' I + électrochoc maximal 50 0,6 0 0/6 0 200 2/6 33 4/6 66 400 0/6 0 2/6 33 Tableau 19 Action du composé I revendiqué sur les convulsions, provoquées par le thosémi carbazide (28 mg/kg en injection intra péritonéale) dans le. expériences sur les souris Dose, mg/kg du tombée des animaux compose I çn Produit inj, intraperi- chiffres %% toneale absclus Thiosémicarbazde 10/10 100 Composé I + thiosémicarbaside 25 7/10 70 50 50 7/10 70 -"- 100 7/10 70 Action du compose I revendiqué sur les convulsions provoquées par la bicuculline (2 mg/kg sous-cutanée) dans les expEriences sur les souris Dose, mg/kg du Temps latent Tombée Produit composé I en d'apparition des ani injection in- des convul- maux trapéritonéale sions chiffres %% absolus Bicuculline 2,6 +0,97 10/11 90,9 Composé I + bicuculline 100 11,9 +2,93 7/10 70 On fait réagir les éthers éthyliques initiaux de l'acide 5-bromnicotinique ou 5-hydroxynicotinique avec l'hydrate d'hydrazine en milieux aqueux ou alcoolique. On transforme les hydrazides des acides 5-bromnicotinique ou 5-hydroxynicotinique ainsi obtenus par interaction avec le nitrite de sodium en pré- sence d'acide chlorhydrique aqueux en azides d'acides, à partir desquels on obtient en suite, par la réaction avec les acides L- et DL-glutamique et l'acide ff amino-butyrique en milieu aqueux-alcalin (pH = 8-10) les produits désirs. Dans le but de mieux faire comprendre la présente invention, nous rapporterons les exemples suivants d'obtention des nouveaux composés, des acides N-nicotinoilaminés. EXEMPLE 1 On mélange 16,7 g (0,1 mole) d'éther éthylique de l'acide 5-hydroxynicotinique et 100 ml d'hydrate d'hydrazine aqueux à 50 % et fait bouillir pendant 1 heure. On évapore à sec la solution foncée obtenue et recristallise le résidu sec dans le diméthylformamide. Le rendement en hydrazide de l'acide 5-hy- droxynicotinique est de 11 g (72 %), la température de décomposition est de 261 C. Trouvé en % : C 46,91 ; H 4,5 ; N 27,67 C6H7N302 Calculé en 8 : C 47,06 ; H 4,57 ; N 27,45. On dissout 11 g (0,072 mole)d'hydrazide de l'acide 5-hydroxynicotinique dans un mélange de 17 ml d'acide chlorhydrique concentré (d = 1,19) et de 20 ml d'eau, on refroidit jusqu'à la température de O à -50C, et à cette température on ajoute très lentement, goutte à goutte et sous brassage continu une solution de 11,7 g (0,18 mole) de nitrite de sodium dans 20 ml d'eau. Au cours de la réaction, à mesure de l'augmentation de la solution de nitrite de sodium, il se forme un précipité blanc volumineux. Après l'adjonction de la solution de nitrite de sodium, on brasse le mélange encore pendant une demiheure à la température de OgC, puis on filtre le précipité. On ajoute dans la solution mère une solution saturée d'hydrocarbonate de sodium jusqu'à la cessation de la sédimentation. On réunit les précipités obtenus et on sèche à l'air. Le rendement en azide d'acide 5-hydroxynicotinique est égal à 11,5 g (97 %) avec une température de décomposition d'environ 1380C. On dissout 1,47 g (0,01 mole) d'acide Lglutamique dans 10 ml de solution 1H de soude caustique et sous agitation, on ajoute par portion 1,64 g (0,01 mole) d'azide de l'acide 5-hydroxynicotinique en maintenant le pH = 9-9,5 par addition périodique d'une solution 5N de soude caustique. Après une dissolution complete de l'azide, on mélange encore pendant une heure à la température ambiante. Puis, on acidifie jusqu'à pH = 4-4,5 avec de l'acide chlorhydrique concentré. On filtre le produit precipité et le recristallise dans de l'eau.On obtient 1,83 - 2 g d'acide N-(5-hydroxynicotinoyl)-L-glutamique (composé I) (68-75 l), température de décomposition 222 - 223oC, [&alpha;D20-14,8 (avec acide chlorhydrique à 5,8 %). Trouvé en % ; C 49,37 ; H 4,59 ; N 10,25 ; C11H12N2O6. Calculé en % : C 49,20 ; H 4,48 ; N 10,48. Spectre IR (en KBr), cm-1 ; 3278 (OH, NH), 1719 (COOH), L655 (CONH). Spectre UV Spectre de résonance paramagnétique (dans CD3 OD - D2SO4, standard interne hexaméthyl-disilazan) #2,0-2,7 (4H, m, CH2CH2COON), 4,60 [1H, m, NCH (COONH)], 8,52 (1H, g, 2-H de pyridine), 8,80 (1H, g, 6-H de pyridine) 8,40 (1H,K,4-H de pyridine). EXEMPLE 2 On obtient de la même façon que dans l'Exemple 1 l'azide de l'acide 5-hydroxynicotinique. Ensuite, on obtient à partir de 1,47 g (0,01 mole) d'acide DLglutamique dans 10 ml de solution 1N de soude caustique et de 1,64 g (0,01 mole) d'azide de l'acide 5-hydroxynicotinique dans des conditions analogues à celles décrites dans l'Exemple 1 l'acide N-(5-hydroxynicotinoyl) DL-glutamique (composé II) avec un rendement de 2 g (75 %), températuré de décomposition 219 - 2200C (dans l'eau). Trouvé % : C 49,28, H 4,36, N 10,19. EXEMPLE 3 De la même façon que dans l'Exemple 1, on obtient l'azide de l'acide 5-hydroxynicotinique. Puis, à partir de 1,03 g (0,01 mole) d'acide # -aminobutyrique dans 10 ml de solution 1N de soude caustique et de 1,64 g (0,01 mole) d'azide de l'acide 5-hydroxynicotinique on obtient, de même que dans l'Exemple 1, l'acide N-(5-hydroxynicotinoyl)-#-aminobutyrique (composé III) avec un rendement de 1,89 g (89 %), température de fusion 220 - 221 C (dans l'eau). Trouvé en % : C 53,56, H 5,39, N 12,18, C10H12N2O4 Calculé en % : C 53,57, H 5,36, N 12,50. Spectre IR (dans KBr), cm~l : 3304 (OH, NH), 1639 (CONH). Spectre UV (dans l'eau) : Nmax = 288 nm. Spectre de résonance para-magnétique dans CD3OD D2S04, standard interne héxamOthyl-disilazan) : # 1,95 (2H, m, CH2COOH), 8,52 EXEMPLE 4 On mélange 5 g d'éther éthylique de l'acide de 5-bromnicotinique et 50 mg d'hydrate d'hydrazine et fait bouillir pendant une heure. Après refroidissement, on filtre le précipité et recristallise dans de l'eau. On obtient 4,05 g (90 %) d'hydrazide de l'acide 5-bromnicotinique, température de fusion 183 - 1840C. Trouvé en % : N 19,23, Br 37,41 , C6H6BrN O. Calculé en % : N 19,44, Br 37,00. On dissout 4,5 g (0,021 mole)d'hydrazide de l'acide 5-bromnicotinique dans un mélange de 7 ml d'acide chlorhydrique concentré et de 3 ml d'eau, on refroidit jusqu'à 0-(-5 )C, et additionne à cette solution goutte à goutte une solution de 5,3 g (0,077 mole) de nitrite de sodium dans 7 ml d'eau. Après l'achèvement de l'addition de nitrite de sodium, on maintient la masse de réaction durant une demi-heure à la température de 0 C. On filtre le précipité volumineux et traite la solution mère par une solution saturée d'hydrocarbonate de sodium froide jusqu'à la cessation de la précipitation de sédiment. On réunit les sédiments, lave à l'eau glacée et séche à l'air. Rendement en azide de l'acide 5-bromnicotinique 4,1 g (88 %), température de fusion d'environ 870C. On traite la solution de 1,47 g (0,01 mole) d'acide L-glutamique dans 10 ml de solution 1N de soude caustique par petites portions de 2,27 g (0,01 mole) d'axide de l'acide 5-bromnicotinique dans les conditions de pH = 9-9,5. On réalise la précipitation de la même façon que dans l'Exemple 1. On obtient 2,42 g (73 %) de composé IV, avec une température de fusion de 185-1860C (dans l'eau), [&alpha;]D20 - 8,6 (avec acide chlorhydrique à 5,8 %). Trouvé % : C 39,71 ; H 3,11 ; N 8,23 ; Br 24,36. C11H11BrN205. Calculé % : C 39,89 ; H 3,32 ; N N 8,46 ; Br 24,15. Spectre Ir (dans KBr), cm-1 : 3372(NH), 1714 (COOH), 1646(CONH) Spectre W (dans l'eau) : # max = 276 nm. Spectre de résonance para-magnétique en CD30D - D2S04 (standard interne (héxaméthyl-disilizan) # 2,0-2,7 (4H, m, CH2CH2COOH), 4,60 /1H, m, NCH(COOH)], 9,04 (1H, g, 2H de pyridine), 8,78 (1H, k, 4H de pyridine), 9,00 (1H, g, 6H de pyridine). Tableau 21 Action du composé I revendiqué sur le trémor des souris, provoqué par l'arécoline (26 mg/kg, sous cutanée) Produit Dose, mg/kg du composé I Durée du trémor en injection intrapérito- en min néale Arécoline 12,33#5,0 Composé I + Arécoline 25 15,77+5,0 50 100 13,04#3,18 Tableau 22 Influence du composé I, revendiqué sur l'action 5-hydroxytriptophane (200 mg/kg en i.p.) (test de secouer la tête) dans les expériences chez les souris Produit Dose, mg/kg du composé I Nombre de Degré de (injection intrapérito- secousses modificati- néale) on de l'ef fet 4 1 2 5-hydroxytrip- 26 1 tophane Composé I + 5- hydroxy triptophane 50 28 1,07 -"- 100 16 0,57 5-hydroxyt- riptophane 28 1 Composé I + 5 hydroxytriptophane 200 11 0,39 - Tableau 23 Action du composé I revendiqué sur l'agressivité expérimentalement provoquée des souris Produit Sose, mg/kg Nombre de combats chez la paire de souris en deux minutes Témoins - 11,6 + 3,2 Composé I 50 10,8+4,2 100 9,6 + 3,4 200 7,4 + 3,4 400 5,0 + 1,5 Tableau 24 Action du composé I revendiqué sur le comportement d'orientation et de recherche des souris (treillis) Produit Dose, mg/kg Effet chiffres absolus Composé I 50 0,10 o -"- 100 2/10 20 200 2/46 12,6 400 3/16 18,9 Tableau 25 Action du composé I revendiqué sur la coordination motrice d'après le test d'ase tournant chez les souris Produit Dose, mg/kg Effet chiffres absolus Composé I 50 0/10 o 100 0/10. o 200 0/10 0 400 0/10 0 Les composés d'acide N-nicotinoylaminé reVendiqués sont obtenus d'après le schéma suivant où pour R - OH, Br, R' = H, COOH. REVENDICATION Acides N-nicotinoylaminés de formule générale pour R' = NH(CH2 )3COOH , R" = OH.