Brevet FR2607702A1 — publié le 19880610

La présente invention concerne une solution injectable prête à l'emploi, stable au stockage, d'un agent antitumeur du type anthracycline-glucoside, par exemple la doxorubicine, un procédé pour la fabrication de cette solution et son application au traite- ment des tumeurs. Les anthracycline-glucosides constituent une classe de composés bien connus du groupe des agents antinéoplastiques, dont le représentant typique et le plus couramment utilisé est la doxorubicine: cf. Doxorubicin, Anticancer Antibiotics, Federico Arcamone, 1981, Publ: Academic Press, New York, N.Y.; Adriamycin Review, EROTC International Symposium, Bruxelles, Mai 1974, éditeur M. Staquet, Publ. Eur. Press Medikon, Gand, Belgique; Results of Adriamycin Therapy, Adriamycin Symposium de Francfort/Main 1974, par M. Ghione, J. Fetzer et H. Maier, éditeur Springer, New York, Etats-Unis d'Amérique. Actuellement, les médicaments antitumeurs du type anthra- cycline-glucoside, en particulier la doxorubicine par exemple, n'existent dans le commerce que sous la forme de préparations lyo- philisées qui doivent être reconstituées avant l'administration. La fabrication et la reconstitution de ces compositions exposent toutes deux le personnel intervenant (ouvriers, pharmaciens, personnel médical, infirmières) à des risques de contamination qui sont particulièrement sérieux en raison de la toxicité des subs- tances antitumeurs. Dans la Martindale Extra Pharmacopoeia, 28e édition, page , colonne de gauche, on rapporte des effets nuisibles des médi- caments antinéoplastiques et on recommande "de les manipuler avec grand soin et d'éviter un contact avec la peau et les yeux; on ne doit pas les inhaler. Il faut veiller à éviter un épanchement hors de la veine,car il peut en résulter des douleurs et des dommages pour les tissus". De manière semblable, dans Scand. J. Work Environ Health vol. 10 (2), pages 71-74 (1984), ainsi que dans des articles de Chemistry Industry, Numéro du 4 juillet 1983, page 488 et dans Drug-Topics-Medical-Economics-Co, Numéro du 7 février 1983, page 99, on rapporte des effets défavorables sévères observés sur le personnel médical exposé à l'utilisation des agents cytosta- tiques, y compris La doxorubicine. Pour administrer une composition lyophilisée, il faut une double manipulation du médicament: le tourteau lyophilisé doit d'abord être reconstitué et ensuite administré. En outre, dans certains cas, la dissolution complète de la poudre peut exiger une agitation prolongée si la solubilisation pose des problèmes. La reconstitution d'un tourteau lyophilisé ou d'une poudre peut entraîner la formation de gouttelettes d'aérosol qui peuvent être inhalées ou entrer en contact avec la peau ou les muqueuses des personnes manipulant la solution. Les risques associés à la préparation et à la reconstitu- tion d'une composition lyophilisée seraient fortement réduits si l'on pouvait disposer d'une solution du médicament prête à l'emploi; c'est pourquoi la demanderesse a mis au point une solu- tion stable injectable par voie intraveineuse, acceptable pour l'usage thérapeutique, d'un médicament du type anthracycline- glucoside, par exemple la doxorubicine, dont la préparation et l'administration n'exigent pas de lyophilisation ou de reconsti- tution. La demande de brevet français FR-A-8608964 décrit et revendique des solutions stériles, apyrogènes, d'un anthracy- cline-glucoside consistant essentiellement en un sel acceptable pour l'usage pharmaceutique d'un anthracycline-glucoside tel que la doxorubicine dissous dans un solvant de ce composé acceptable en pharmacie, qui n'ont pas été reconstituées à partir d'un lyophili- sat et qui ont un pH de 2,5 à 6,5. Des pH particulièrement préférés sont d'environ 3 et environ 5. Les exemples illustrent des solu- tions ayant des pH variant de 2,62 à 3,14, et des pH de 4,6 et de de 5,2. Il n'est pas fait mention d'agents stabilisants. On cite le dextrose, le lactose et le mannitol comme agents de réglage de la tonicité, mais on ne donne pas d'indication des proportions dans lesquelles ils doivent être utilisés. La demanderesse a maintenant découvert que ces solutions ont une meilleure stabilité Lorsqu'elles possèdent un pH de 2,5 à 4,0. En conséquence, la présente invention propose une solution injectable, apyrogène, stérile, stable au stockage d'un anthracy- cline-glucoside qui consiste essentiellement en un sel acceptable en pharmacie d'un anthracycline-glucoside dissous dans un solvant de ce composé acceptable en pharmacie, solution qui n'a pas été reconstituée à partir d'un lyophilisat et dont le pH a été réglé dans la gamme de 2,5 à 4,0. Il est donc possible de proposer des solutions qui sont stables au stockage et qui ont une durée de conservation signi- ficative du point de vue commercial. De préférence, la solution de l'invention est proposée dans un récipient hermétiquement fermé, spécialement un récipient de verre. La solution peut être offerte de cette manière soit sous forme de dosage unitaire, soit sous une forme de dosage multiple. De préférence, l'anthracycline-glucoside est choisi parmi la doxorubicine, la 4'-épi-doxorubicine (c'est-à-dire l'épirubi- cine), la 4'-désoxy-doxorubicine (c'est-à-dire l'ésorubicine), la 4'-désoxy-4'-iodo-doxorubicine, la daunorubicine et la 4-démé- thoxydaunorubicine (c'est-à-dire l'idarubicine). La doxorubicine est un anthracycline-glucoside particulièrement préféré. On peut utiliser pour préparer la solution de l'invention un sel quelconque, acceptable en pharmacie, de l'anthracycline- glucoside. A titre d'exemples de sels convenables, on peut citer les sels d'acides inorganiques tels qu'acides chlorhydrique, brom- hydrique, sulfurique, phosphorique, nitrique, etc., et les sels de certains acides organiques comme les acides acétique, succinique, tartrique, ascorbique, citrique, glutamique, benzo;que, méthane- sulfonique, éthane-sulfonique, etc.Le sel de l'acide chlorhydrique est particulièrement apprécié, spécialement lorsque l'anthracy- cline-glucoside est la doxorubicine. On peut utiliser un solvant quelconque acceptable en phar- macie et capable de dissoudre le sel de l'anthracycline-glucoside. La solution selon l'invention peut aussi contenir un ou plusieurs adjuvants de formulation tels qu'un agent solubilisant (qui peut être identique au solvant), un agent stabilisant, un agent de réglage de la tonicité, un conservateur et un agent chélatant acceptable en pharmacie. Les solvants et agents solubilisants convenables peuvent être par exemple l'eau, par exemple l'eau pour injection; une solution à 0,9 % de chlorure de sodium, c'est-à-dire le sérum physiologique; une solution aqueuse à 5 % de dextrose; des amides aliphatiques, par exemple N,N-diméthylacétamide, N-hydroxy-2- éthyl-lactamide, etc.; des alcools, par exemple éthanol, alcool benzylique, etc.; des glycols et polyalcools, par exemple propy- lèneglycol, glycérol, etc.; des esters de polyalcools, par exemple diacétine, triacétine, etc.; des polyglycols et polyéthers, par exemple polyéthylèneglycol 400, éthers méthyliques de propyLènegly- col, etc.; des dioxolannes, par exempleO2,0 3-isopropylidène-glycérol, etc.; le diméthyLisosorbide; des dérivés de pyrrolidone, par exemple 2pyrrolidone, N-méthyl-2-pyrrolidone, polyvinylpyrrolidone (uniquement comme agent solubilisant), etc.; des alcools gras polyoxyéthylénés, par exemple Brij (marque déposée), etc.; des esters d'acides gras polyoxyéthylénés, par exemple Cremophor (marque déposée), Myrj (marque déposée), etc.; des polysorbates, par exemple Tweens (marque déposée); des dérivés de polyoxyéthy- lène de propylèneglycols, par exemple Pluronics (marque déposée). Des exemples de solvants préférés sont l'eau, le sérum physiologique, une solution aqueuse à 5 % de dextrose, l'éthanol, le polyéthylèneglycol et le diméthylacétamide ainsi que leurs mélanges en proportions diverses. L'eau, le sérum physiologique et le dextrose à 5 % sont particulièrement appréciés. Un agent solubilisant particulièrement préféré est la polyvinylpyrrolidone. Un sucre ou alcool de sucre peut être présent comme agent stabilisant. Des agents stabilisants convenables comprennent les saccharides tels que les monosaccharides (par exemple dextrose, galactose, fructose et fucose), les disaccharides (par exemple lactose), les polysaccharides (par exemple le dextranne) et les oligosaccharides cycliques (par exemple a-, A- ou y-cyclodex- trine); et les mono- ou polyalcools aliphatiquesy compris les polyoLs cycliques (par exempLe mannitol, sorbitoL, gLycéroL, thio- gLycéroL, éthanoL et inositol). L'agent stabilisant peut être con- tenu dans La solution à des concentrations d'environ 0,25 à 10 % en poids par volume, de préférence de 0,5 à 5 % en poids par volume. Les sucres et alcools des sucres peuvent aussi servir d'agents de réglage de la tonicité. Les agents convenables de réglage de la tonicité peuvent être, par exemple,des chlorures inor- ganiques physiologiquement acceptables, par exemple le chlorure de sodium (de préférence chlorure de sodium à 0,9 % en poids), le dextrose, le lactose, le mannitol, le sorbitol, etc. Lorsqu'un sucre ou alcool de sucre tel que le dextrose, le lactose, le man- nitol ou le sorbitol est présent, on l'utilise de préférence à une concentration de 2,5 à 7,5 % en poids, en particulier de 4 à 6 % en poids et mieux encore d'environ 5 % en poids. Les conservateurs convenant pour l'administration théra- peutique peuvent être par exemple des esters de l'acide para- hydroxybenzo;que (par exemple les esters méthylique, éthylique, pro- pylique et butylique ou leurs mélanges), le chlorocrésol, etc. Un agent chélatant acceptable en pharmacie convenable peut être l'acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA). La solution con- tient l'agent chélatant en faible quantité, de manière typique de 0,001 à 0,05 % en poids. Les solvants et agents solubilisants, agents stabilisants, agents de réglage de la tonicité, conservateurs et agents chéla- tants cités ci-dessus peuvent être utilisés seuls ou sous forme d'un mélange de deux ou plusieurs d'entre eux. Pour régler le pH dans la gamme d'environ 2,5 à 4,0, on ajoute selon le besoin un acide ou agent tampon acceptable en pharmacie. L'acide peut être n'importe quel acide acceptable en pharmacie, par exemple un acide inorganique tel qu'acide chlorhy- drique, bromhydrique, sulfurique, phosphorique, nitrique, etc., ou un acide organique tel qu'acide acétique, succinique, tartrique, ascorbique, citrique, glutamique, benzo;que, méthanesulfonique, éthanesulfonique, etc. , ou également une solution tampon acide acceptable en pharmacie, par exemple un tampon au chlorure, un tampon à la glycine, un tampon au formiate, un tampon à l'acétate, un tampon au phosphate, etc. La gamme de pH préférée pour la solution prête à l'emploi selon l'invention est de 2, 5, par exemple d'environ 2,6, à environ 3,7, par exemple à environ 3,5. Une gamme de pH plus appréciée est d'environ 3 à environ 3,5. On préfère en particulier un pH d'envi- ron 3, spécialement lorsque la solution selon l'invention contient du sorbitol ou de 2,5 à 7,5 % en poids de dextrose, de lactose ou de mannitol. D'autres gammes de pH préférées sont de plus de 3,14, par exemple d'environ 3,2, à 4 et de préférence d'environ 3,7, mieux encore d'environ 3,5. Une solution utile ayant un pH de 2,62 à 3,14 comprend en outre: (i) de 0,25 à 10 % en poids par volume d'un agent stabi- lisant et/ou de réglage de la tonicité choisi parmi les saccharides et les mono- et polyalcools aliphatiques, avec la condition que, lorsque le dextrose, le mannitol ou le lactose, est présent comme agent de réglage de la tonicité, il soit en quantité de 2,5 à 7,5 % en poids; et/ou (ii) un agent chéLatant acceptable en pharmacie. Dans les solutions selon l'invention, la concentration de l'anthracyclineglucoside peut varier dans de larges limites, de préférence de 0,1 à 100 mg/ml, plus spécialement de 0,1 à 50 mg/ml et mieux encore de 1 à 20 mg/ml. Les intervalles de concentration préférés peuvent être légèrement différents pour des anthracycline-glucosides différents. Ainsi par exemple, les concentrations préférées pour la doxorubicine sont d'environ2à environ 50Omg/ml, de préférence de 2à 20Omg/ml et mieux encore de 2 et 5 mg/ml. Les concentrations préférées sont analogues pour la 4'-épi-doxorubicine, la 4'-désoxy-doxorubicine et la 4'-désoxy-4'-iododoxorubicine. Les intervalles de concentration préférés pour la daunorubicine et la 4-déméthoxy-daunorubicine sont de 0,1 à 50 mg/ml, plus spécialement de 1 à 20 mg/ml et mieux encore de 1 et 5 mg/ml. Les emballages convenant pour les solutions d'anthracy- cline-glucoside peuvent être tous Les récipients admis destinés à l'usage parentéral, par exemple des récipients en matière plastique et en verre, des seringues prêtes à l'emploi et les analogues. De préférence, le récipient est en verre, fermé hermétiquement, par exemple une fiole ou une ampoule. On préfère en particulier une fiole de verre fermée hermétiquement. OS L'invention propose également un procédé pour la fabrica- tion d'une solution injectable stérile, apyrogène, stable au stoc- kage, d'anthracycline-glucosides, ce procédé consistant (i) à dissoudre le sel acceptable en pharmacie de l'antracycline-glucoside, sel qui n'est pas sous la forme d'un lyophilisat, dans un solvant de ce sel acceptable en pharmacie; (ii) à ajouter le cas échéant le ou les adjuvant(s) de formulation choisi(s) parmi les agents solubilisants, les agents stabilisants, les agents de réglage de la tonicité, les conserva- teurs et les agents chélatants acceptables en pharmacie; et (iii) à ajouter comme on le désire un acide ou agent tampon acceptable en pharmacie pour régler le pH à une valeur de 2,5 à 4,0; le procédé étant mis en oeuvre de telle manière que la solution résultante soit stérile et apyrogène. On peut adopter n'importe quel mode opératoire convenable pour assurer que la solution résultante soit stérile et apyrogène. De préférence, on fait passer la solution à travers un filtre stérilisant après l'étape (iii), bien qu'un ou plusieurs des produits utilisés puissentbien entendu,être de toute manière stériles et apyrogènes. Lorsque tous les produits utilisés sont stériles et apyrogènes, il peut alors ne pas être nécessaire de faire passer la solution résultante à travers un filtre stérili- sant. Avec les solutions selon l'invention, il est possible d'obtenir des compositions à une très haute concentration de la substance active, l'anthracycline-glucoside, ces concentrations pouvant aller jusqu'à 50 mg/ml et même au-dessus. Il s'agit là d'un gros avantage sur les compositions lyophilisées dont on disposait antérieurement, avec lesquelles on ne pouvait obtenir que très difficilement de fortes concentrations d'anthracycline-glucoside en raison des problèmes de solubilisation rencontrés à la recons- titution, principalement avec du sérum physiologique. La présence de l'excipient, par exemple du lactose, dans le gâteau lyophilisé, et sa proportion en général forte par rapport à la substance active, qui peut atteindre 5 parties d'excipient par partie de substance active, a un effet négatif sur la solubilisationde sorte qu'on peut se heurter à des difficultés pour dissoudre le gâteau lyophilisé, spécialement à des concentrations d'anthracycline- glucoside supérieures à 2 mg/ml. Les solutions selon l'invention se caractérisent par une bonne stabilité. On a constaté que des solutions dans des solvants variés et à des pH et des concentrations différents étaient stables pendant de longues durées aux températures acceptables pour la conservation de compositions pharmaceutiques. Cette stabilité est mise en évidence dans les exemples ci-après. En raison de l'activité antitumeur bien connue de la substance active, l'anthracycline-glucoside, les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont utiles notamment pour le traitement des tumeurs des humains et des animaux. Comme exemples de tumeurs qu'on peut ainsi traiter, on citera les sarcomes, y compris les sarcomes ostéogéniques et les sarcomes de tissus mous, les carcinomes, par exemple les carcinomes du sein, du poumon, de la vessie, de la thyroïde, de la prostate et de l'ovaire, les lymphomes, y compris les lymphomes de Hodgkin et non Hodgkin, les neuroblastomes, les mélanomes, les myélomes, la tumeur de Wilms et les leucémies, y compris la leucémie lymphoblastique aiguë et la leucémie myéloblastique aiguë. Comme exemples de tumeurs spécifiques qu'on peut traiter, on citera le sarcome viral de Moloney, le sarcome ascitique 180, le sarcome solide 180, la leucémie de Gross transplantable, la leucémie L 1 210 et la leucémie lymphocytique P 388. On peut également inhiber la croissance d'une tumeur, en particulier l'une de celles indiquées ci-dessus, en administrant à un patient souffrant de ladite tumeur une solution injectable selon l'invention contenant le médicament actif en quantité suffisante pour inhiber la croissance de ladite tumeur. Les solutions injectables selon l'invention sont adminis- trées par injection intraveineuse rapide ou par perfusion selon divers programmes de dosage. Une posologie appropriée pour la doxorubicine peut consis- ter par exemple en 60 à 75 mg de médicament actif par m2 de surface du corps, administrés par perfusion rapide unique répétée à 21 jours; une autre posologie peut consister en 30 mg/m2.j par voie intraveineuse pendant 3 jours tous les 28 jours. Les posolo- gies qui conviennent pour la 4'-épi-doxorubicine et la 4'-désoxy- doxorubicine peuvent consister par exemple en 75 à 90 mg/m2 admi- nistrés par perfusion unique à répéter à 21 jours, et des posolo- gies analogues peuvent convenir également pour la 4'-iodo- doxorubicine. L'idarubicine, c'est-à-dire la 4-déméthoxy-daunorubicine, peut être administrée par exemple par voie intraveineuse à une dose unique de 13 à 15 mg/m2 tous les 21 jours pour le traitement des tumeurs solides, alors que pour le traitement des leucémies, une posologie préférée consiste par exemple en 10 à 12 mg/m2.j adminis- trés par voie intraveineuse pendant 3 jours, à répéter tous les 15 à 21 jours; on peut respecter des posologies analogues par exemple pour la daunorubicine. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui suit en référence aux dessins annexes dans lesquels "E + 3" signifie "x 103" et "d" signifie "jours", et dans lesquels la figure 1 représente le profil Kobs-pH pour la dégrada- tion du sel doxorubicine,HCl à 55 C dans l'eau stérile (exemple 1), la figure 2 représente le profil Kobs-pH pour la dégrada- tion du sel doxorubicine,HCl à 55 C dans une solution à 5 % de dextrose (exemple 1); la figure 3 représente le profil Kobs-pH pour la dégrada- tion du sel doxorubicineHCl à 55 C dans le sérum (physiologique) à 0,9 % (exemple 1); la figure 4 représente le profil Kobs-pH pour la dégrada- tion du sel épirubicine HCl à 55 C dans l'eau stérile (eau pour injection) (exemple 7); la figure 5 représente le profil KobsPH pour la dégrada- tion du sel épirubicine,HCL à 55 C dans le sérum (physiologique) à 0,9 % (exemple 7); et la figure 6 représente le profil Kobs-pH pour la dégrada- tion du sel épirubicine,HCL à 550 C dans une solution à 5 % de dex- trose (exemple 7). Les exemples suivants illustrent l'invention sans toute- fois en limiter la portée. Exemple 1: profil de stabilité au pH à 55 C de solutions doxoru- bicine HCl dans l'eau stérile, dans le dextrose à 5 % ou dans le sérum physiologique à 0,9 %. On dissout le chlorhydrate de doxorubicine (doxorubicine, HCL) à une concentration de 2 mg/ml dans les tampons suivants à I = 0,05: (a) glycine,HCL à pH 2,0, pH 2,5 et pH 3,0; (b) formiate à pH 3,5; et (c) acétate à pH 4,0, pH 5,0 et pH 5,5. On filtre chaque solution à travers une membrane micropo- reuse de 0,22 pm sous pression d'azote. On conserve 5,0 ml de chaque solution à 55 C dans des fioles de verre type I d'une capa- cité de 8 ml, bouchées par un bouchon en caoutchouc chlorobutyl revêtu de Teflon (Marque déposée) et fermées hermétiquement par une capsule d'aluminium. On contrôle chaque solution après des durées prédéterminées (jusqu'à 120 h) en dosant le chlorhydrate de doxoru- bicine et en déterminant le pH. Les résultats sont indiqués dans les tableaux I, II et III ci-aprèsqui donnent la concentration résiduelle en chlorhydrate de doxorubicine et la stabilité en pour- cent à 55 0C à des pH et des durées de stockage différents pour des solutions dans l'eau stérile, dans le dextrose à 5 % et dans le sérum physiologique à 0,9 %, respectivement. Les dosages de doxorubicineHCl sont les valeurs moyennes de trois déterminations indépendantes effectuées par chromatogra- phie liquide à haute performance (CLHP) par la méthode de la- Pharmacopée des USA (méthode USP XXI). A chaque valeur de pH, on calcule lesconstantes de vitesse de pseudo- premier ordre (Kobs) pour la dégradation par analyse de régression linéaire du logarithme naturel de la concentration résiduelle de doxorubicine, HCltou lDxI ten fonction du temps comme décrit par l'équation sui- vante: In IDx!t = In JDxjo -Kobs - t Les tableaux IV, V et VI donnent les constantes de vitesse observées (Kobs) pour la cinétique de dégradation de solutions de doxorubicine,HCl à 55 C et à différents pH dans l'eau stérile, dans le dextrose à 5 % et dans le sérum physiologique à 0,9 %, respecti- vement. Les figures 1, 2 et 3 des dessins annexés représentent le profil Kobs - pH pour la dégradation du chlorhydrate de doxorubi- cine à 55 C dans les milieux mentionnés ci-dessus. Les données des tableaux I à VI et des figures 1 à 3 prouvent que les solutions de doxorubicineHCl à 2 mg/ml présentent à 55 C une bonne stabilité à pH 2,5-4,0 et un maximum de stabilité à pH 3,0-3,5 pour les trois milieux essayes. On montre ainsi un comportement commun quant à la stabilité pour les solutions aqueuses en général, puisque l'on n'observe pas de différences pratiques de stabilité lorsqu'on passe de l'eau stérile telle quelle à l'eau stérile contenant un agent de réglage de la tonici- té soit ionique comme le chlorure de sodium, soit non ionique comme le dextrose, par exemple. TABLEAU I Tests accélérés (55 C) de stabilité de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL dans l'eau stérile à divers pH. Analyse de doxorubi- Temps (h) Tampons cine,HCl 0 8 16 24 48 72 120 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 2,022 1,892 1,669 1,554 1,145 0,801 pH 2,0. stabilité, % 100,0 93,6 82,6 76,9 56,6 39,6 pH 2,00 2,01 2,02 2,01 2,01 2, 02 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 1,992 1,926 1,835 1,718 1,557 1,00 pH 2, 5. stabilité, % 100,0 96,7 92,1 86,2 78,2 50,2 pH 2,51 2,50 2,50 2,52 2, 51 2,52 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 2,003 1,958 1,881 1,831 1,696 1,525 1,258 pH 3,0. stabilité, % 100,0 97,8 93,9 91,4 84,7 76,1 62,8 pH 3,00 3, 03 3,02 3,02 3,01 3,02 3,00 formiate.. dosage, mg/ml 2,035 1,950 1,887 1, 840 1,650 1,538 1,241 pH 3,5. stabilité, % 100,0 95,8 92,7 90,4 81,1 75,6 61,0 pH 3,51 3,51 3,51 3,51 3,52 3,52 3,51 acétate à. dosage, mg/ml 2,032 1,788 1,681 1,561 1,167 pH 4,0. stabilité, % 100,0 88,0 82,7 76,8 57,4 pH 4,00 4,00 4,04 4,02 4,02 acétate à. dosage, mg/ml 2,019 1,823 1,688 1,512 1,060 pH 5,0. stabilité, % 100,0 90,3 83,6 74,9 52,5 pH 5,03 5,05 5,04 5, 04 5,05 acétate à. dosage, mg/ml 2,047 1,808 1,427 1,228 0,903 pH 5,5. stabilité, % 100,0 88,3 69,7 60,0 44,1 pH 5,50 5,53 5,53 5,54 5,56 C> C> , 56r TABLEAU II Tests accélérés (55 C) de stabilité de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl dans le dextrose à 5 % à divers pH. Analyse de doxorubi- Temps (h) Tampons cine,HCl 0 8 16 24 34 48 72 96 120 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 1,993 1,851 1,683 1,513 1,361 1,078 0,765 pH 2,0. stabilité, % 100,0 92,8 84,4 75,9 68,3 54,1 38,4 pH 2,14 2,13 2, 14 2,15 2,18 2,21 2,16 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 1,967 1,897 1,822 1, 760 1,682 1,499 1,305 pH 2,5. stabilité, % 100,0 96,4 92,6 89,5 85,5 76,2 66,3 pH 2,56 2,56 2,56 2,58 2,60 2,56 2,61 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 1,975 1,908 1,832 1,645 1,508 1,344 1,206 pH 3,0. stabilité, % 100,0 96,6 92,7 83,3 76,4 68,0 61,1 pH 3,04 3,05 3,05 3,06 3,00 3,13 3,10 formiate à. dosage, mg/ml 1,983 1,897 1,858 1,622 1,324 1,222 pH 3,5. stabilité, % 100,0 95,7 93,7 81,8 66,8 61,6 pH 3,58 3,59 3,60 3,63 3,60 3,63 acétate à. dosage, mg/ml 2,003 1,913 1,716 1,665 1,487 1,312 1,081 pH 4,0. stabilité, % 100,0 95,5 85,6 83,1 74,2 65,5 53,9 pH 4,10 4,10 4,11 4,11 4, 16 4,15 4,12 acétate à. dosage, mg/ml 2,012 1,906 1,673 1,608 1,416 1,163 pH 5,0. stabilité, % 100,0 94,7 83,2 79,9 70,4 57,8 pH 5,06 5,06 5,06 5, 06 5,07 5,04 acétate à. dosage, mg/ml 1,991 1,841 1,470 1,246 1,091 pH 5, 5. stabilité, % 100,0 92,5 73,8 62,6 54,8 pH 5,56 5,54 5,48 5,50 5,46 o TABLEAU III Tests accélérés (55 C) de stabilité de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL dans le sérum physiologique à 0,9 % à divers pH. Analyse de doxorubi- Temps (h) Tampons cine,HCL 0 4 8 16 24 34 48 72 96 120 glycine à. dosage, mg/ml 1,998 1,857 1,580 1,397 1,231 0,931 0,701 pH 2,0. stabilité, % 100,0 92,9 79,1 69,9 61,6 46,6 35,1 pH 2,16 2,16 2,18 2, 16 2,22 2,20 2,19 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 1,946 1,875 1,670 1,602 1, 368 1,132 pH 2,5. stabilité, % 100,0 96,3 85,8 82,3 70,3 58,1 pH 2,59 2, 59 2,59 2,58 2,62 2,62 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 1,994 1,818 1,771 1, 571 1,375 1,205 1,003 pH 3,0. stabilité, % 100,0 91,2 88,8 78,8 69,0 60,4 50,3 pH 3,06 3,07 3,07 3,08 3,13 3,14 3,12 formiate à. dosage, mg/ml 1, 997 1,824 1,742 1,543 1,323 1,176 0,919 pH 3,5. stabilité, % 100,0 91,4 87,2 77,3 66,2 58,9 46,0 pH 3,58 3,56 3,56 3,66 3,61 3,64 3,63 acétate à. dosage, mg/ml 1,972 1,885 1,828 1,653 1,594 pH 4,0. stabilité, % 100,0 95, 6 92,7 83,8 80,8 pH 4,10 4,10 4,10 4,10 4,11 acétate à. dosage, mg/ml 1, 979 1,732 1,469 1,442 1,278 pH 5,0. stabilité, % 100,0 87,5 74,2 72,8 64, 6 pH 5,04 5,06 5,04 5,05 5,05 acétate à. dosage, mg/ml 2,023 1,847 1,548 1,330 r pH 5,5. stabilité, % 100,0 91,3 76,5 65,7 pH 5,58 5,56 5,55 5,53 _ o> TABLEAU IV Valeurs de Kobs (jour-1) pour la dégradation de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl dans l'eau stérile à divers pH à 550C. Limites de confiance Tampon pH Kobs x 10 à 95 % obs Glycine, HCl 2,0 309, 5 + 12,7 (I = 0,05) - Glycine, HCl 2,5 138,3 + 0,6 (I = 0,05) 15. Glycine, HCl 3,0 93,1 + 4,6 (I = 0,05) Formiate 3,5 96,7 + 4,4 (I = 0,05) Acétate 4,0 269,8 + 18,7 (I = 0,05) Acetate 5,0 322,6 + 19,2 (I = 0,05) Acétate 5,5 415,4 + 45,7 (I = 0,05) TABLEAU V Valeurs de Kobs (jour 1) pour la dégradation de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL dans le dextrose à 5 % à 55 C à divers pH. Limites de confiance Tampon pH Kobs x 103 à 95 % obs Glycine, HCl 2,0 323, 8 + 17,2 (I = 0,05) Glycine, HCl 2,5 138,7 + 9,9 (I = 0,05) 15. Glycine, HCL 3,0 100,5 + 5,9 (I = 0,05) Formiate 3,5 132,0 + 20,7 (I = 0,05) _ Acétate 4,0 209,7 + 12,7 (I = 0,05) *Acétate 5,0 273,1 + 27,7 (I = 0,05) Acetate 5,5 453,7 + 59,2 (I = 0,05) TABLEAU VI Valeurs de Kobs (jour 1) pour la dégradation de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine, HCI dans le sérum physiologique (NaCl à 0,9 %) à 55 C à divers pH. Limites de confiance Tampon pH Kobs x 103 à 95 % Glycine, HCl 2,0 362,4 + 19,4 (I = 0,05) Glycine, HCl 2,5 276,5 + 30,2 (I = 0,05) 15. Glycine, HCl 3,0 133,2 + 8,0 (I =0,05) Formiate 3,5 148,1 + 11,1 (I = 0,05) Acetate 4,0 215,7 + 35,4 (I = 0,05) Acétate 5,0 301,2 + 60,1 (I = 0,05) Acétate 5,5 430,3 + 59,9 (I = 0,05) Exemple 2: Durée de conservation à 90 % (t90) extrapolée d'une soLu- tion à 2mq/ ml doxorubicine, HCldans l'eau stérile ajustée à pH 3,0. On dissout le chlorhydrate de doxorubicine à une concen- tration de 2 mg/ml dans l'eau pour injection et on ajuste la solu- tion à pH 3,0 par HCL 0,5 N. On filtre la solution à travers une membrane microporeuse de 0,22 pm sous pression d'azote. On conserve des portions aliquotes de 5,0 ml (a) à 55 C pendant 21 jours, (b) à 45 et 35 0C pendant 28 jours et (c) à 27 C pendant 90 jours dans des fioles de verre de type I de 8 ml de capacité avec bouchon de caoutchouc chlorobutyl à revêtement de Teflon et capsule d'alu- minium. A des instants prédéterminés, on analyse les fioles pour doser le chlorhydrate de doxorubicine et déterminer le pH. Les résultats sont indiqués dans le tableau VII ci-après. Pour chaque série de résultats, on trace la courbe du logarithme de la concentration résiduelle en doxorubicine, HCL en fonction du temps. Ceci révèle une relation linéaire, indiquant que la dégradation du médicament suit une cinétique de pseudo-premier- ordre à pH et températures constants. On calcule à nouveau les constantes de vitesse observées (Kobs) pour la dégradation par analyse de régression linéaire d'une courbe du logarithme naturel de la concentration résiduelle de doxorubicine, HCl, c'est-à-dire IDxlten fonction du temps comme décrit par l'équation indiquée précédemment: Ln IDxlt = Ln IDxIo - Kobs - t On calcule L'équation d'Arrhenius pour le processus de dégradation à partir du Kobs obtenu aux différentes températures considérées pour l'essai (tableau VIII). En appliquant l'équation, on calcule les constantes de vitesse pour les réactions de pseudo- premier ordre à 4 C, 8 C, 15 C et 27 C, ainsi que la durée attendue de con- servation à 90 % de la valeur initiale (t90o) à ces tempé- ratures. Les valeurs extrapolées de t90 dans le tableau VIII montrent que l'on peut attribuer une durée de conservation signifi- cative à une solution aqueuse à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL à pH 3,0 si le produit est stocké au réfrigérateur entre 2 et 8 C. TABLEAU VII Température Analyse de doxoru- Temps (jours) au stockage bicine, HCl 0 4 8 14 21 28 60 90 27 C. dosage, mg/ml 1,992 1,993 1,988 1,962 1,941 1,908 1,850 stabilité, % 100,0 100,1 99,8 98,5 97,4 95,8 92,9 pH 3,00 2,95 2,94 2,95 2,94 2,96 2,93 C. dosage, mg/ml 1,992 1,985 1,952 1,889 1,876 1,808 stabilité, % 100,0 99,6 98,0 94,8 94,2 90,8 pH 3,00 2,96 2,98 2,93 2,92 2, 92 C. dosage, mg/ml 1,992 1,919 1,851 1,677 1,565 1,393 stabilité, % 100, 0 96,3 92,9 84,2 78,6 69,9 pH 3,00 2,97 2,95 2e85 2,92 2,90 C. dosage, mg/ml 1,992 1,760 1,493 1,036 0,730 o stabilité, % 100,0 88,4 74,9 52,0 36,6 pH 3,00 2,94 2,90 2,80 2,82 os o ce TABLEAU VIII Approximation d'Arrhenius. Constantes de vitesse de pseudo-premier ordre, équation d'Arrhenius, valeur calculée t90. Constantes de vitesse de pseudo-premier ordre, valeurs observées (Kobs) Coefficient de Temperature Kobs x 103 (jour-1) corrélation ____________ob s s 270C 0,850 0,986 C 3,506 0,983 C 12,790 0,995 55 C 49,340 0,995 Equation d'Arrhenius d'après les constantes de vitesse à 27, 35, et 55 C Ln K =obs- + 39,95 T coefficient de corrélation = 0,9988 Constantes de vitesse de pseudo-premier ordre, valeurs calculées (K) Température K x 103 t90 -1 9 (jour 1) (jours) Limites de confiance à 95 % 4 C 0,019 5652 3079 - 10380 8 C 0,038 2745 1603 - 4697 C 0,130 810 532 - 1238 27 C 0,918 115 89 - 147 ExempLe 3: stabiLité à Long terme de formulations de doxorubicine ayant un pH de 2,5 à 3,5. Les lots essayés, les formulations essayées et les embal- lages utilisés (conditionnement) sont indiqués dans les tableaux IX à XI et XVIII à XX. Les formulations sont préparées de la manière suivante. On dissout le chlorhydrate de doxorubicine dans environ 90 % de la quantité indiquée d'eau pour injections ou de sérum physio- logique, désaérés par barbottage d'azote. On ajoute goutte à goutte de l'acide chlorhydrique pour ajuster le pH de la solution aux valeurs indiquées dans les tableaux IX et XVIII. On ajoute ensuite de l'eau pour injections ou du sérum physiologique, désaérés, pour obtenir une concentration de doxorubicine, HCl de 2 mg/ml. On filtre la solution sur une membrane microporeuse de 0,22 pm sous pression d'azote. On répartit des volumes de 5 ml, 10 ml et 25 mLdes solutions dans des fioles de verre incolore de type I de 8 ou ml, 14 ml et 39 ml de capacité, respectivement. On ferme ensuite les fioles avec des bouchons de caoutchouc chlorobutyl revêtus de Teflon et on les ferme hermétiquement par des capsules d'aluminium. On examine les formulations ainsi préparées en ce qui concerne l'aspect, la limpidité des solutions, le pH, la stérilité (8 C, un an), le dosage de doxorubicine, HCl. Techniques d'essais Pour l'aspect et la limpidité: examen visuel. Pour le pH: méthode USP XXI Pour la stérilité: méthode USP XXI (filtration sur membrane) Pour le dosage de doxorubicine, HCl: méthode CLHP à la paire d'ions et méthode CLHP de l'USP (USP XXI) Brève description de la méthode CLHP à la paire d'ions pour le dosage du chlorhydrate de doxorubicine: Garnissage à la colonne: phase inverse Zorbax TMS Phase mobile: eau/acétonitrile/méthanol (54: 29: 17 en volume) contenant 2 ml/l d'acide phos- phorique à 85 % et 1 mg/ml de laurylsul- fate de sodium (agent d'appariement), réglage du pH à 3,5 par NaOH 2N Débit de la phase mobile: 1,5 ml/min Température de la colonne: ambiante (22 C + 2 C) Longueur d'onde analytique: 254 nm Paramètres d'aptitude du système: facteur de symétrie entre 0,7 et 1,2; nombre de plateaux théo- riques - 2500; reproductibilité de la mesure: coefficient de variation , 12 La méthode à la paire d'ions par CLHP pour le dosage du chlorhydrate de doxorubicine est validée pour l'exactitude, la pré- cision, la linéarité, la sensibilité, la spécificité et l'indica- tion de stabilité. Les résultats obtenus pour la stabilité de doxorubicine, HCl en % (méthode à la paire d'ions) et le pH concernant les fioles conservées en position droite sont donnés: dans le tableau XII pour la conservation à - 20 C dans les tableaux XIII et XXI pour la conservation à +4 0 C dans les tableaux XIV et XXII pour la conservation à +8 C dans les tableaux XV et XXIII pour la conservation à +15 C dans les tableaux XVI et XXIV pour la conservation à +27 C dans le tableau XVII pour la conservation à 1076 et 2690 lx (lm/m2), et dans le tableau XXV pour la conservation à 2690 lx. Les valeurs de dosage de doxorubicine,HCl données dans ces tableaux sont l-es moyennes de trois déterminations indépen- dantes. On indique également dans le tableau XXVI l'effet stabi- lisant de divers agents. En ce qui concerne les autres paramètres contrôlés pendant la durée de stabilité: - la limpidité de la solution est inchangée à tous les contrôles effectués dans toutes les conditions de conservation appliquées, - l'aspect de la solution est: a) inchangé à tous les contrôles effectués sur des échantillons conservés à 4 C et 8 C, b) légèrement foncé après 9 mois à 15 C, après 3 mois à 27 C, après 3 mois sous 1076 et 2690 lx, - le système de fermeture est inchangé à tous les con- trôLes effectués dans toutes les conditions de conservation, - la stérilité est maintenue après 12 mois à 8 C. Les résultats des contrôles effectués sur les fioles con- servées en position renversée ne diffèrent pas de manière signifi- cative de ceux obtenus sur les fioles en position droite. Les valeurs de stabilité pourcent de doxorubicine, HCL obtenues par la méthode CLHP de l'USP ne diffèrent pas de manière significative de celles obtenues par la méthode CLHP à la paire d'ions données dans les tableaux XII à XVII. Les données de stabilité obtenues indiquent que les solu- tions essayées de doxorubicine, HCl ayant des pH différents dans la gamme de 2,5 à 3,5 atteignent la limite inférieure ou tolérance d'acceptation (90 % de la concentration nominale) en environ 9 mois et 2-3 mois à 15 C et 27 C,respectivement, mais se révèlent stables jusqu'à 12 mois à 4 et 8 C, c'est-à-dire à la température ordinai- rement adoptée pour la conservation des produits au réfrigérateur. Ceci est en opposition avec les solutions de doxorubicine, HCl obtenues par reconstitution de la préparation lyophilisée du com- merce, dont les pH varient entre 4,5 et 6 et qui présentent une stabilité beaucoup plus faible. Bien entendu, il est recommandé de jeter les solutions reconstituées après 48 h seulement de stockage au réfrigérateur. TABLEAU IX Etudes de stabilité-Lots essayés. Caractéris- No de tiques du lot TF/23049 TF/23077 TF/23078 TF/23117 TF/23119 H0001 L0001 M0001 lot Doxorubicine, HCL oxorubicine, HC(g 10 10 10 20 50 10 20 50 par fiole (mg) pH 3,06 2,81 3,50 2,97 3,08 3,15 3,05 3, 20 N' de for- FI6804/IL1 FI6804/IL1 FI6804/ILI FI6804/IL2 FI6804/Il3 FI6804IL4 FI6804IL5 FI604/IL6 mulation Grandeur du Lot 700 400 400 500 500 2 400 2 300 2 400 nombre de fioles ré3 os o C> M) TABLEAU X Etudes de stabilité. Formulations essayées. Composition Numéro de formulation par fiole FI6804/IL1 FI6804/IL2 F16804/IL3 FI6804/IL4 FI6804/IL5 FI6804/IL6 Doxorubicine, Doxorubicine, 10 20 50 10 20 50 HCI mg Acide chlor- pH pH pH pH pH pH hydrique q.s.p. 2, 8-3,5 2,8-3,5 2,8-3,5 2,8-3,5 2,8-3,5 2,8-3,5 Eau q.s.p. 5,0 ml 10,0 ml 25,0 ml 5,0 ml 10,0 ml 25,0 mi N os -%j o rN TABLEAU XI Etudes de stabilité. Conditionnement utilisé. N de lot dition- TF/23049 TF/23077 TF/23078 TF/23117 TF/23119 HOO01 L0001 MOO01 nement Type de verre Type de verre I I I I I I de la fiole Capacité de 8 ml 8 ml 8 ml 14 ml 39 ml 10 ml 14 ml 39 ml la fiole Bouchon Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc chloro- chloro- chloro- chloro- chloro- chloro- chloro- chlorobu- butyl, butyl, butyl, butyl, butyl, butyl, butyl, tyl, revêtement revêtement revêtement revêtement revêtement revêtement revêtement revêtement de Téflon de Téflon de Téflon de Téflon de Téflon de Téflon de Téflon de Téflon Capsule aluminium' aluminium aluminium aluminium aluminium aluminium aluminium aluminium C> TABLEAU XII Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL. Stabilité à -20 C (fioles droites) jusqu'à 3 mois. Temps, mois Lot, dosage DoxorubicineHCl 0 I 3 H0001 Stabilité, % 100 99,9 99,6 mg pH 3,15 3,12 2,98 L0001 Stabilité, % 100 100,8 99,8 20 mg pH 3,05 2,84 2,97 MO001 Stabilité, % 100 100,7 101,0 mg pH 3,20 2,96 2,99 Tableau XIII Solution à 2 mg/ml de doxorubicine,HCl. Stabilité à 4 C (fioles droites) jusqu'à 24 mois. Lot, Temps, Lot, Temps, o 1 3 6 9 12 18 24 dosage mois TF/23049 * 100 99,9 100,6 98,3 98,2 97,7 96,9 97,1 mg ** 3,06 3,10 3,09 3,10 3,05 2,97 3,07 3,00 TF/23077 * 100 101,7 99,3 97,9 98,0 99,8 96,8 mg ** 2,81 2,86 2,75 2,65 2,67 2,76 2,70 TF/23078 * 100 101,2 98,8 97,8 98,8 96,8 96,3 mg ** 3,50 3,54 3,49 3,44 3,43 3,54 3,50 TF/23117 * 100 96,8 96,6 98,1 98,8 97,5 98,7 mg ** 2,97 2,98 2,92 2,86 2,95 2,98 3,00 TF/23119 * 100 98,6 99,1 98,9 98,4 97,5 98,8 mg ** 3,08 2,98 2,98 2,89 2,99 3.00 3,00 H0001 * 100 97,6 99,2 99,6 100,4 98,6 mq ** 3,15 n.d. 3,06 3,22 3,20 3,10 3,20 LO001 * 100 98,8 98,4 99,2 99,4 99,9 mg ** 3,05 n.d. 2,99 2,94 3,00 2,90 3,00 MO001 * 100 99,7 99,7 100,3 100,6 100,4 mq ** 3,20 n.d. 3,00 3,04 3.10 3,00 3,10 * stabilité du chlorhydrate de doxorubicine, % ** pH n.d. = non déterminé r> oC o -.4 TABLEAU XIV Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl. Stabilité à 8 C (fioles droites) jusqu'à 24 mois. Lot, Temps, dosage mois 0 1 2 3 6 9 12 18 24 TF/23049 * 100 99,7 100,1 96,5 96,1 96,5 95,4 91,0 mg ** 3,06 3,07 3,09 3,07 3,04 2,96 3,04 3,0 TF/23077 * 100 102,1 101,6 97,5 96,6 95,0 94,7 mg ** 2,81 2,81 2,74 2,65 2,67 2,75 2,70 TF/23078 * 100 98,3 97,7 96,5 95,9 98,8 92,8 mg ** 3,50 3,59 3,47 3,27 3,43 3,51 3,40 O TF/23117 * 100 95,7 95,8 97,8 96,2 95,5 95,9 mg ** 2,97 2,97 2,92 2,85 2,96 2,98 3,00 TF/23119 * 100 97,6 97,8 96,2 97,3 96,8 97,2 mg ** 3,08 2,94 2,94 2,87 2,99 3,00 3,00 HOO01 * 100 98,2 99,4 96,4 96,7 98,0 98,9 96,7 mg ** 3,15 3,12 3,16 3,05 3,23 3,20 3,10 3,20 LO001 * 100 100,6 99,1 98,1 98,3 98,1 99,5 99,7 mg ** 3,05 2,84 2,83 2,97 2,94 3,00 2,90 3,00 MO001 * 100 100,3 100,6 98, 7 99,0 98,4 99,1 97,7 o I-, mg ** 3,20 2,96 2,97 3,01 3,03 3,10 3,00 3,10 %j * stabilité du chlorhydrate de doxorubicine, % ** pH N TABLEAU XV Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCI. Stabilité à 15 C (fioles droites) jusqu'à 12 mois. Lot, Temps, dosage mois 0 0,5 1 2 3 6 9 12 TF/23049 * 100 97,8 98,9 97,1 92,7 92,9 90,2 mq ** 3,06 3,03 3,07 3,10 3,08 3,02 2,95 TF/23077 * 100 100,4 101,9 98,8 94,6 92,7 91,1 mg ** 2,81 2,81 2,85 2,71 2,63 2,67 2,74 TF/23078 * 100 101,9 98,4 95,3 94,6 91,9 90,7 mg ** 3,50 3,51 3,58 3,47 3,38 3,41 3,47 TF/23117 * 100 99,1 96,4 95,2 94,6 90,7 88,0 mg ** 2,97 2,95 2r95 2,90 2,81 2,95 3e00 TF/23119 * 100 97,4 97,1 95,9 92,7 90,6 87,4 mg ** 3,08 2,99 2,95 2,91 2,87 2,98 3,00 HOO01 * 100 97,9 97,1 94,8 94,6 95,5 91,8 mg ** 3,15 3,12 3,16 3,06 3,23 3,10 3,00 LO001 * 100 100,5 98,7 96,3 95,5 96,3 93,2 mg ** 3,05 2,85 2,87 2,98 2,96 3,00 3,00 M0001 * 100 99,4 100,3 97,2 95,6 95,6 93,7 mg ** 3,20 2,96 2,94 3,01 3,04 3,00 3,00 * stabilité du chlorhydrate de doxorubicine, % ** pH 1%> o o TABLEAU XVI Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl. Stabilité à 27 C (fioles droites) jusqu'à 6 mois. Lot, Temps, dosage mois 0 0,5 1 2 3 6 TF/23049 * 100 97,2 95,8 87,9 73,6 mg ** 3,06 2,98 3,07 3,08 3,03 TF/23077 * 100 98,5 96,2 86,4 69,2 mg ** 2.81 2,80 2,85 2,71 2,64 TF/23078 * 100 101,2 94,5 80,5 71,1 mg ** 3,50 3,51 3,58 3,38 3,13 TF/23117 * 100 97,4 93,2 81,9 66,6 mg ** 2,97 2,95 2,94 2,88 2,77 TF/23119 * 100 96,0 93,3 85,3 66,8 mq ** 3,08 2,97 2,97 2,91 2,82 H0001 * 100 94,5 94,2 86,6 mq ** 3,15 3,10 3,09 3,01 LO001 * 100 97,2 94,3 89,3 mq ** 3,05 2,84 2,85 2,96 M0001 * 100 96,5 93,6 88,1 mg ** 3,20 2,95 2,95 2,99 * stabilité du chlorhydrate de doxorubicine, % ** pH j, C:) ?. TABLEAU XVII Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl. Stabilité à 1076 et 2690 lx (fioles renversées) jusqu'à 3 mois. Lot, Temps, 1076 lx 2690 lx dosage mois 0 0,5 1 3 0,5 1 2 3 TF/23049 * 100 96,3 95,9 81,3 95,9 94,8 mg ** 3,06 3,05 3,05 3,06 2,99 3,04 TF/23077 * 100 98,3 98,1 87,7 97,3 94,5 mg ** 2,81 2e79 2e84 2e70 2,79 2e84 TF/23078 * 100 99,6 96,4 88,0 97,8 89,7 mg ** 3,50 3,50 3,58 3.39 3,47 3,53 TF/23117 * 100 96,8 96,7 91,7 98,1 94,6 mg ** 2,97 2,93 2,95 2t87 2,95 2,93 TF/23119 * 100 96,9 96,7 89,6 96,4 95,0 mg ** 3,08 2,96 2,95 2.93 2,96 2,97 HO001 * 100 95,2 93,7 87,8 mg ** 3,15 3,10 3,06 2,97 L0001 * 100 96,5 93,0 86,5 mg ** 3.05 2,84 2,85 2,97 MOO01 * 100 97,8 91,5 85,3 mg ** 3,20 2,95 2,94 2,99 * stabilité du chlorhydrate de doxorubicine, % ** pH c:; CD CD j' D i2607702 TABLEAU XVIII Etudes de stabilité. Lots essayes. Caractéristiques Numéro de lot du lot P0001 Q0001 R0001 Doxorubicine, HCl 10 20 50 par fiole (mg) pH 3,00 3,00 3,00 N0 de formulation F16804/IL7 F16804/IL8 F16804/IL9 grandeur du lot, 2 400 2 200 2 500 nombre de fioles TABLEAU XIX Etudes de stabilité. Formulations essayées. Composition Numéro de formulation par fiole F16804/IL7 F16804/IL8 F16804/IL9 Doxorubicine, HCl, 19 20 50 mg Acide chlorhydrique 2,8 - 3,5 2, 8 - 3,5 2,8 - 3,5 q.s.p. pH NaCl à 0,9 % pour 5,0 10,0 25,0 injections, q. s.p. ml ml ml 260 7702 TABLEAU XX Etudes de stabilité. Conditionnement utilisé. Numéro de lot Conditionnement P0001 Q0001 R0001 Type de verre de La I I I fiole Capacité de la fiole 10 mL 14 ml 39 mL Bouchon caoutchouc caoutchouc caoutchouc chLorobutyl chlorobutyl chlorobutyl revêtu de revêtu de revêtu de Téflon Téflon Téflon Capsule aluminium aluminium aluminium TABLEAU XXI Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL dans le sérum physiologique pour injections à pH 3. Stabilité à 4 C (fioles conservées droites) jusqu'à 12 et 18 mois. Lot, Chlorhydrate de Temps, mois dosaqe doxorubicine 0 3 6 9 12 18 PO001 stabilité, % 100 98,3 98,0 99,2 97,9 mg pH 3,00 2,93 2,98 2,90 2,90 QOO01 stabilité, % 100 97,5 97,0 100,1 98,9 mg pH 3,01 3,06 3,03 3,00 3,00 RO001 stabilité, % 100 99,8 100,7 101,2 101,7 100,9 mg pH 3,02 3,08 3,15 3,14 3,10 3,10 TABLEAU XXII Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL dans le sérum physiologique pour injections à pH 3. Stabilité à 8 C (fioles conservées droites) jusqu'à 12 et 18 mois. Lot, Chlorhydrate de Temps, mois dosage doxorubicine 0 1 2 3 6 9 12 18 PO001 stabilité, % 100 101,0 100,6 97,9 97,4 96,8 96,1 mg pH 3,00 2,93 2, 89 2,91 3,00 2,90 3,00 QO001 stabilité, % 100 99,4 99,9 96,8 96,7 95,7 96, 0 mg pH 3,01 3,02 3,01 3,05 3,02 3,00 3,00 RO001 stabilité, % 100 99,8 99, 8 98,4 98,5 99,5 100,9 99,7 mg pH 3,02 3,02 3,09 3,08 3,13 3,13 3,10 3,10 TABLEAU XXIII Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl dans le sérum physiologique pour injections à pH 3. Stabilité à 15 C (fioles conservées droites) jusqu'à 12 mois. Lot, Chlorhydrate de Temps, mois dosaqe doxorubicine 0 1 2 3 6 9 12 POO01 stabilité, % 100 100,6 99,9 95,9 94,0 89,1 89,7 mg pH 3,00 2,93 2,89 2,90 2,99 2,90 2,90 QO001 stabilité, % 100 98,6 97,8 95,1 96,4 89,8 88,3 mg pH 3,01 3,01 3,01 3,04 3,01 3,00 3,00 R0001 stabilité, % 100 98,8 97,5 97,6 94,7 96,0 94,5 mg pH 3,02 3,02 3,08 3,08 3,14 3,11 3,10 TABLEAU XXIV Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl dans le sérum physiologique pour injections à pH 3. Stabilité à 27 C (fioles conservées droites) jusqu'à 3 mois. Lot, Chlorhydrate de Temps, mois dosage doxorubicine 0 1 2 3 P0001 stabilité, % 100 98,3 95,0 84,9 mg pH 3,00 2,93 2,89 2,88 Q0001 stabilité, % 100 96,0 93,2 83,8 mg pH 3,01 3,01 2,99 3,03 R0001 stabilité, % 100 95, 6 92,2 88,7 mg pH 3,02 3,02 3,06 3,05 260770 02 TABLEAU XXV Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL dans le sérum physiologique pour injections à pH 3. Stabilité à température ambiante sous 2690 lx (fioles conservées droites) jusqu'à 3 mois. Lot, Chlorhydrate de Temps, mois dosage doxorubicine 0 1 2 3 PO001 stabilité, % 100 89,6 86,5 70,3 mg pH 3,00 2,92 2,86 2,84 QOO01 stabilité, % 100 91,1 84,5 72,7 mg pH 3,01 2,99 2,97 2,98 ROO01 stabilité, % 100 96, 0 91,4 86,6 mg pH 3,02 3,01 3,04 3,02 TABLEAU XXVI Effet de divers agents sur la stabilité à 450C d'une solution à 2mg/ml de doxorubicine à pH 3,0. Stabilité, % de la concentration initiale Temps, semaines *Agent stabilisant et concen- tration 1 2 4 8 Eau 87,8 75,9 53,8 25,5 Dextrose, 5 % 91,1 82,3 65,6 38,8 Galactose, 5 % 91,5 86,1 64,3 -- Fructose, 5 % 91,9 80,6 64,1 -- o-L(-)-Fucose, 4 % 91,2 81,9 63,8 -- a-D(+)-Fucose, 4 % 91,8 81,9 63,3 -- Lactose, 1 % 91,3 81,7 64,5 34,8 Dextranne, PM 9 000, 4 % 90,5 81,5 -- -- Dextranne, PM 506 000, 4 % 92,0 84,0 -- -- p-Cyclodextrine, 4 % 92,1 84,1 --- y-Cyclodextrine, 4 % 94,3 89,0 -- -- Mannitol, 5 % 90,7 81,4 65,8 41,1 Sorbitol, 5 % 91,4 83,0 67,2 42,5 Thioglycérol, 0,5 % 90,8 83,2 63,5 -- Inositol, 5 % 91,7 84,9 -- -- Ethanol, 5 % 92,2 85,6 -- -- Glycérol, 10 % 92,2 83,4 65,5 -- Remarques: on peut observer le même effet stabilisant, par exemple, jusqu'à des concentrations plus faibles de 25-50 % en poids ExemDle 4: Durée de conservation à 90 % (t90) extrapolée d'une solu- tion à 2 mq/ml de doxorubicine HCL dans l'eau stérileaiustée à pH3,0 et contenant 0,9 % en poids de chlorure de sodium On dissout le chlorhydrate de doxorubicine à une concen- tration de 2 mg/ml dans le sérum physiologique et on ajuste le pH à 3,0 par HCl 0,5 N. On filtre la solution à travers une membrane microporeuse de 0,22 pm sous pression d'azote. On conserve des portions aliquotes de 5, 0 ml (a) à 60 C pendant 4 jours, (b) à 55 C pendant 11 jours, (c) à 45 C pendant 21 jours et (d) à 35 C pendant 28 jours dans des fioles de verre type I, de 8 ml de capacité, avec bouchon en caoutchouc chlorobutyl à revêtement de Téflon et capsule d'alu- minium. A des instants prédéterminés, on dose le chlorhydrate de doxorubicine dans les fioles et on détermine le pH. Les résultats sont indiqués dans le tableau XXVII ci-après. On trace pour chaque série de résultats la courbe du logarithme de la concentration résiduelle en doxorubicine, HCl en fonction du temps. Ceci révèle une relation linéaire indiquant que la dégradation du médicament suit une cinétique de pseudo-premier ordre à pH et température constants. On calcule à nouveau les constantes de vitesse observées (Kobs) pour la dégradation par analyse de régression linéaire d'une courbe du logarithme naturel de la concentration résiduelle de doxorubicine, HCl, soit IDxJt, en fonction du temps comme défini par l'équation indiquée précé- demment: In I Dxl t = In IDxl o- Kobs t On calcule l'équation d'Arrhenius pour le processus de dégradation à partir des valeurs Kobs obtenues aux différentes températures considérées pour l'essai (tableau XXVIII). En appli- quant l'équation, on calcule les constantes de vitesse pour les réactions de pseudo-premier ordre à 4 C, 8 C, 15 O C et 27 C, ainsi que la durée attendue de conservation à 90 % (t90) à ces tempéra- tures. Les valeurs t90 extrapolées dans le tableau XXVIII montrent qu'une durée de conservation significative peut être attribuée à une solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl dans le sérum physio- logique à pH 3,0 si le produit est conservé au réfrigérateur entre 2 et 8 C. TABLEAU XXVII Test accéléré de stabilité de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine,HCl dans le sérum physiologique (NaCl à 0,9 %) à des durées et des températures différentes. Doxorubicine, Temps, jours Température HCl,dosage 0 1 2 3 4 8 11 14 21 28 C. mg/ml 2,061 2,045 1,946 1,932 1,852 stabilité, % 100,0 99,2 94,4 93,7 89,9 pH 3,05 2,98 2,92 2,92 2,98 C. mg/ml 2,061 1,996 1,724 1,517 1,344 stabilité, % 100,0 96,5 83,6 73,6 65,2 pH 3,05 2,98 2,97 2,98 2,93 C. mg/ml 2,061 1,450 1,066 0,900 stabilité, % 100,0 70,4 51,7 43,7 pH 3,05 2, 90 2,97 2,95 C. mg/ml 2,061 1,742 1,481 1,290 1,050 stabilité, % 100,0 84,5 71,9 62,6 50,9 pH 3,05 2,97 2,96 2,98 2,96 0D 2B0770 TABLEAU XXVIII Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl à pH 3,0 dans NaCl à 0,9 %. Approximation d'Arrhenius. Constantes de vitesse de pseudo-ler ordre, équation d'Arrhenius, valeur calculée de t90. CONSTANTES DE VITESSE DE PSEUDO-ler ORDRE, VALEURS OBSERVEES (Kobs) T emr3 u-1 Coefficient de Température obsx 10 (jour) corrélation C 3,89 0,965 45 C 21,61 0,987 C 75,90 0,996 C 164,9 0,998 EQUATION d'ARRHENIUS D'APRES LES CONSTANTES DE VITESSE A 35, 45 ET 60 C In K 15100 + 43,53 obs T Coefficient de corrélation = 0,9986 CONSTANTES DE VITESSE DE PSEUDO-ler ORDRE, VALEURS CALCULEES (K) Limites de confiance à Température K x 10 (jour1) t90 (jours) 95 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _9 5 % 4 C 0,017 6 166 (1 670 - 22 756) 8 C 0,037 2 838 ( 861 - 9 351) C 0,137 768 ( 281 - 2 105) 27 C 1,112 94 ( 45 - 197) Exemple 5: Durée de conservation (t90) extrapolée d'une solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl dans l'eau stérile ajustée à pH 3,0 et contenant 5 % en poids de dextrose On dissout le chlorhydrate de doxorubicine à une concen- tration de 2 mg/ml dans l'eau pour injections contenant 5 % en poids de dextrose et on ajuste le pH à 3,0 par HCL 0,5 N. On filtre la solution à travers une membrane microporeuse de 0,22 pm sous pression d'azote. On conserve des portions aliquotes de 5,0 ml (a) à 60 C pendant 8 jours, (b) à 55 C pendant 28 jours, (c) à 45 C pendant 28 jours et (d) à 35 C pendant 28 jours dans des fioles de verre de type I, de 8 ml de capacité, avec bou- chon de caoutchouc chlorobutyl à revêtement de Téflon et capsule d'aluminium. A des instants prédéterminés, on analyse les fioles par dosage du chlorhydrate de doxorubicine et on détermine le pH. Les résultats sont indiqués dans le tableau XXIX ci-après. On trace pour chaque série de résultats la courbe du logarithme de la concentration résiduelle de doxorubicine, HCl en fonction du temps. Ceci révèle une relation linéaire indiquant que la dégradation du médicament suit une cinétique de pseudo-premier ordre à pH et température constants. On calcule à nouveau les constantes de vitesse observées (Kobs) pour la dégradation par analyse dée régression linéaire d'une courbe du logarithme naturel de la concentration résiduelle de doxorubicine, HCl ou IDxit en fonction du temps comme défini par l'équation précédemment indi- quée: In lDxI t = In IDxl - Kobs ' t On caLcule L'équation d'Arrhenius pour le processus de dégradation à partir des vaLeurs de Kobs obtenues pour différentes températures considérées pour l'essai (tabLeau XXX). En appliquant L'équation, on caLcule les constantes de vitesse pour Les réactions de pseudo-premier ordre à 4 C, 8 C, 15 C et 27 C, ainsi que La durée de conservation (t90) attendue à ces températures. Les valeurs extrapolées de t90 dans le tableau XXX montrent qu'une durée de conservation significative peut être attribuée à une solu- tion aqueuse à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl à pH 3,0 contenant 5 % de dextrose si le produit est conservé au réfrigérateur entre 2 et 8 C. TABLEAU XXIX Test accéléré de stabilité de solutions à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl dans le dextrose à 5 % à des durées et des températures différentes. Doxorubi- Temps, jours TemDérature cine, HCl.dosaqe 0 2 4 6 8 11 14 17 2128 C. mg/ml 2,114 2,044 2,034 2,015 1,934 1,859 stabilité, % 100,0 96,7 96,2 53,3 91,5 87,9 pH 3,02 2,98 2,94 2,95 2,90 2,94 C. mg/ml 2,114 1, 940 1,870 1,684 1,510 1,410 stabilité, % 100,0 91,8 88,5 79,7 71,5 66,7 pH 3,02 2,97 2,98 2,95 2,96 2,96 C. mg/ml 2,114 1,718 1,415 1,112 0,957 0,796 stabilité, % 100,0 81,3 66,9 52,6 45,3 37,7 pH 3,02 2,95 2,92 2,99 2,91 2,95 C. mg/ml 2,14 1,752 1,393 1,176 0,925 stabilité, % 100,0 82,9 65,9 55,7 43,8 pH 3,02 2,96 2,98 2,96 2,97 cD r-D 260 7702 TABLEAU XXX Solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCl à pH 3,0 dans NaCL à 5 %. Approximation d'Arrhenius. Constantes de vitesse de pseudo-ler ordre, équation d'Arrhenius, valeur calculée de t90. CONSTANTES DE VITESSE DE PSEUDO-ler ORDRE, VALEURS OBSERVEES (Kobs) K___ _3 (jouKosr -1 Coefficient de Tempoératurebs x 10 (jour) corrélation C 4,190 0,990 C 14,55 0,995 C 58,11 0,998 60 C 102,6 0,999 EQUATION d'ARRHENIUS D'APRES LES CONSTANTES DE VITESSE A 35, 45, ET 60 C Ln Kobs = + 37,56 obs T Coefficient de corrélation = 0,9993 CONSTANTES DE VITESSE DE PSEUDO-ler ORDRE, VALEURS CALCULEES (K) Limites de 3 -1 t (jours) confiance à Température K x 10 (jour1) t90 (jours)95 4 C 0,0326 3 218 (1 463 - 7 082) 8 C 0,0645 1 628 ( 792 - 3 344) 15 C 0,203 516 ( 281 - 949) 27 C 1,283 82 ( 53 - 128) 260770.2 Exemple 6: Stabilité à long terme de solutions de doxorubicine, HCl à pH 3,7. On prépare une solution à 2 mg/ml de doxorubicine, HCL dans l'eau stérile contenant 0,9 % en poids de chlorure de sodium (lot TF/23256, 10omg). On ajuste la solution à pH 3,7 par l'acide chlorhydrique 0,1 N. Les données de stabilité pour la solution à différentes températures de conservation sont indiquées dans le tableau XXXI ci-dessous. TABLEAU XXXI Doxorubicine, Temps, mois Température HCL, dosage 0 1 3 8 C. mg/ml 2,064 2,054 2,063 stabilité, % 100,0 99,3 100,0 pH 3,7 3,7 3,6 C. mg/ml 2,064 2,073 2,029 20. stabilité, % 100,0 100,5 98,4 pH 3,7 3,7 3,6 27 C. mg/ml 2,064 1,888 1,545 stabilité, % 100,0 91,5 74,9 pH 3,7 3,6 3,3 Exemple 7: Stabilité de solutions de 4'-épi-doxorubicine (épiru- bicine). On prépare des solutions d'épirubicine de la même manière que les solutions correspondantes de doxorubicine dans les exemples précédents. On détermine ensuite leur stabilité de la même manière. Les résultats sont présentés dans les tableaux XXXII à LXI ci-dessous et illustrés dans Les figures 4 à 6 ci-annexées. 260770 02 IL est entendu que L'invention n'est pas Limitée aux modes de réaLisation préférés décrits ci-dessus à titre d'iLLustration et que L'homme de L'art peut y apporter diverses modifications et divers changements sans toutefois s'écarter du cadre et de L'esprit de l'invention. TABLEAU XXXII Tests accélérés (55 C) de stabilité de solutions à 2 mg/ml d'épirubicine, HCl dans l'eau stérile à divers pH. Analyse, l'épirubi- Temps (h) Tampons cine,HCl 0 16 24 48 72 96 120 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 2,007 1,874 1,801 1,725 1,697 1,478 1,330 pH 2,0. stabilité, % 100,0 93,4 89,7 85,9 83,7 73,7 66,3 pH 2,0 2,0 2,0 2, 0 2,0 2,0 2,0 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 2,033 1,972 1,923 1,823 1,777 1,622 1,572 pH 2,5. stabilité, % 100,0 99,9 94,6 89,7 87,4 79,8 77,3 pH 2, 5 2,4 2,5 2,5 2,4 2,4 2,4 glycine, HCl à. dosage, mg/ml 2,055 2,008 1,917 1,764 1,709 1,571 1,494 pH 3,0. stabilité, % 100,0 97,7 93,3 85,8 83,2 76, 4 72,7 pH 2,9 2,9 2,9 2,8 2,9 2,9 2,9 formiate à. dosage, mg/ml 2,047 1, 829 1,764 1,604 1,505 1,192 1,101 o pH 3,5. stabilité, % 100,0 89,4 86,2 78,3 73,5 58,2 53,8 pH 3,4 3,4 3,4 3,4 3,3 3,3 3,3 acetate à. dosage, mg/ml 2,011 1,848 1,442 1,301 0,964 0,573 pH 4,0. stabilité, % 100,0 91,9 71,7 64,7 47,9 n.d. 28,5 pH 4,0 4,0 4,0 4,0 4,0 3,9 acetate à. dosage, mg/ml 2,064 1,868 1,541 1,263 0,896 pH 5,0. stabilité, % 100,0 90,5 74,6 61,2 43,4 n.d. n.d. pH 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0 acétate à. dosage, mg/ml 2,056 1,794 1,426 pH 5,5. stabilité, % 100,0 87,3 69,4 n.d. n.d. n.d. n.d. pH 5,5 5,5 5,4 n.d. = non déterminé. C_ jo --j TABLEAU XXXIII Tests accélérés (55 C) de stabilité de solutions à 2 mg/ml d'épirubicine, HCl dans le sérum physiologique pour injections à 0,9 % de NaCl à divers pH. Analyse, l'épiru- Temps, (h) Tampons bicine,HCl 0 4 8 16 24 34 48 72 96 120 144 HCl, KCl. dosage, mg/ml 2,085 1,675 1,372 1,246 1,062 pH 1,5. stabilité, % 100,0 n.d. n.d. 80,3 65,8 59,8 50,9 n.d. n.d. n.d. n. d. pH 1,6 1,5 1,5 1,6 1,6 glycine,. dosage, mg/ml 2,077 2,065 1,994 1,940 1, 657 1,587 1,282 1,121 0,928 HCl à. stabilité, % 100,0 n.d. 99,4 96,0 93,0 79,8 76,4 61,8 54,0 44,7 n. d. pH 2,0 pH 2,0 2,0 1,9 1,9 2,0 2,0 2,0 2,0 1,9 glycine,. dosage, mg/ml 2, 077 2,066 1,987 1,781 1,665 1,449 1,285 1,175 HCl à. stabilité, % 100,0 n. d. 99,5 95,7 n.d. n.d. 85,7 80,2 69,8 61,9 56,6 pH 2,5 pH 2,4 2,4 2,4 2,4 2,4 2,4 2,4 2,4 glycine,. dosage, mg/ml 2,058 1,951 1,934 1,869 1,784 1, 668 1,483 1,349 1,253 HCl à. stabilité, % 100,0 n.d. n.d. 94,8 94,0 90,8 86,7 81,0 72,1 65,5 60,9 pH 3,0 pH 3,0 2,9 2,9 2,9 2,9 2,9 2,9 2,9 2,9 formiate. dosage, mg/ml 2,047 1,891 1,711 1,662 1,360 1,265 à pH 3,5. stabilité, % 100,0 n.d. n.d. 92,4 n.d. 83,6 81,2 70,5 61,8 n.d. n.d. pH 3,3 3,2 3,3 3,3 3,2 3,2 acetate à. dosage, mg/ml 2,088 2,073 1,892 1, 699 1,606 1,454 pH 4,0. stabilité, % 100,0 99,3 n.d. 90,6 n.d. 81,3 76,9 69,4 n.d. n.d. n. d. pH 4,0 3,9 3,9 3,9 3,9 3,9 acetate à. dosage, mg/ml 2,114 2,049 1,954 1, 782 1,535 pH 5,0. stabilité, % 100,0 97,0 92,4 84,3 72,6 n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n. d. pH 5,0 5,0 5,0 5,0 4,9 n.d. = non déterminé dtermin c TABLEAU XXXIV Tests accélérés (55 C) de stabilité de solutions à 2 mg/ml d'épirubicine I HCl dans le dextrose à 5 % à divers pH. Analyse, l'épiru- Temps, (h) Tampons bicine,HCl o 4 8 16 24 34 48 72 96 120 144 HCl, KCl. dosage, mg/ml 2,032 1,932 1,782 1,649 1,418 0,982 0,625 pH 1,5. stabilité, % 100,0 n.d. 94,6 87,7 81,1 69,8 n.d. 48,3 30,7 n.d. n. d. pH 1,4 1,4 1,4 1,4 1,4 1,4 1,4 glycine,. dosage, mg/ml 2,033 1,968 1,959 1,822 1,809 1,574 1,380 1,252 1,094 HCl à. stabilité, % 100,0 n.d. n.d. 96,8 96,4 89,6 89,0 77,4 67,9 61,6 53,8 pH 2,0 pH 1,9 1,9 1,9 1,9 1,9 1,9 1,9 1,9 1,9 glycine,. dosage, mg/ml 2,105 1,921 1,909 1,815 1,819 1,624 1, 521 1,264 HCl à. stabilité, % 100,0 n.d. n.d. 91,3 90,7 86,2 86,4 77,1 72, 3 n.d. 60,0 pH 2,5 pH 2,4 2,3 2,3 2,3 2,3 2,3 2,3 2,3 glycine,. dosage, mg/ml 2,029 1,990 1,914 1,949 1,866 1,743 1,562 1,442 1,318 HCl à. stabilité, % 100,0 n.d. 98,1 94,3 96,1 92,0 85,9 n.d. 77,0 71,1 65,0 pH 3, 0 pH 2,9 2,8 2,9 2,8 2,8 2,8 2,8 2,8 2,8 formiate à. dosage, mg/ml 2,024 1,949 1,938 1,851 1,807 1,613 1,356 pH 3,5. stabilité, % 100,0 n.d. 96,3 95,7 91,4 89,3 n.d. 79,7 67,0 n.d. n. d. pH 3,3 3,3 3,3 3,3 3,3 3,3 3,2 acetate à. dosage, mg/ml 2,056 1,964 1,937 1,787 1,501 pH 4,0. stabilité, % 100,0 95,5 94,2 n.d. 86,9 n.d. 73,0 n.d. n.d. n.d. n. d. pH 4,0 3,9 3,9 4,0 4,0 acétate à. dosage, mg/ml 2,026 1,935 1,840 1,734 1, 608 1,279 pH 5,0. stabilité, % 100,0 95,5 90,8 84,3 79,4 62,2 n.d. n.d. n.d. n.d. n. d. pH 5,1 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0 n.d. = non déterminé TABLEAU XXXV Valeurs de Kobs (d-1) pour la dégradation de solutions à 2 mg/ml d'épirubicine, HCl dans l'eau stérile pour injections à 55 C à divers pH. oK x 103 Limites de confiance Tampon H obs x 10 95 % Glycine, HCL 2,0 79, 0 + 6,9 (I = 0,05) Glycine, HCl 2,5 55,1 + 4,0 (I = 0,05) Glycine, HCL 3,0 66,8 + 5,4 (I = 0,05) Formiate 3,5 125,4 + 17,1 (I = 0,05) Acétate 4,0 376,7 + 60,6 (I = 0,05) Acétate 5,0 430,4 + 42,8 (I = 0,05) 26077.02 TABLEAU XXXVI Valeurs de Kobs (d-1) pour la dégradation de solutions à 2 mg/ml d'épirubicine, HCL dans Le sérum physiologique (NaCL à 0,9 %) pour injections à 53 0 à divers pH. K x 103 Limites de confiance Tampons pH obs à 95 % HCL, KCl 1,5 343,2 + 51,1 (I = 0,05) Glycine, HCl 2,0 168,9 + 10,2 (I = 0,05) Glycine, HCl 2,5 97,3 + 6,4 (I = 0,05) Glycine, HCl 3,0 84,8 + 6,5 (I = 0,05) Formiate 3,5 124,5 + 14,0 (I = 0,05) Acetate 4,0 124,8 + 13,6 (I = 0,05) Acétate 5,0 318,1 + 52,1 (I = 0,05) TABLEAU XXXVII Valeurs de Kobs (d1) pour la dégradation de solutions à 2 mg/mL d'épirubicine,HCL dans le dextrose à 5 % à 55 0C à divers pH. TKapspx 103 Limites de confiance ____Tampons pH obs___ à 95 % HCl,KCl 1,5 288,1 + 23,1 (I = 0,05) Glycine,HCL 2,0 106,9 + 7,7 (I = 0,05) Glycine,HCL 2,5 81,1 + 6,6 (I = 0,05) Glycine,HCL 3,0 70,9 + 4,8 (I = 0,05) Formiate (I = 0,05) 3,5 89,1 9,3 Acétate 4,0 150,6 + 17,0 (I = 0,05) Acétate 5,0 225,7 + 12,9 (I = 0,05) TABLEAU XXXVIII Etudes de stabilité. Lots essayés dans le sérum physiologique (NaCL à 0,9 %) pour injections. N du Caractéris- lot TF/23274 TF/23275 6001LA tique du lot Epirubicine, HCl 10 10 10 par fiole (mg) pH 2,9 3,5 3,0 N de formulation FI7701/IL2 FI7701/IL2 FI7701/IL2 Taille du lot, nombre 584 586 595 de fioles Echelle de Echelle de Lab Lab S-i fabrication* No de lot d'épiru- 6016G669 6016G669 6016G669 bicine,HCL N du Caractéris- lot 6001LB 6001LC tique du lot Epirubicine,HCl 20 50 par fiole (mg) PH 3,1 2,7 N de formulation FI7701/IL3 FI7701/IL4 Taille du lot, nombre 500 760 de fioles Echelle de S-i S-i fabrication* N0 de lot d'épiru- 6017G703 6017G703 bicine,HCl * Lab = laboratoire S-i = semi-industrielle TABLEAU XXXIX Etudes de stabilité. Lots essayés en solution à 5 % de dextrose. N du Caractéris- lot TF/23270 TF/23273 6001MA tiques du lot Epirubicine, HCl 10 10 10 par fiole (mg) pH 2,7 3,5 2,9 N de formulation FI7701/IL5 FI7701/IL5 FI7701/IL5 Taille du lot, nombre 564 573 553 de fioles EcheLLe de Lab Lab S-i fabrication* No de lot d'épirubi- 6016G669 6016G669 6016G669 cine,HCl Caractéris- N du 6001MB 6001MC tiques du lot ot Epirubicine,HCl 20 50 par fiole (mg) pH 3,1 2,6 N de formulation FI7701/IL6 FI7701/IL7 Taille du lot, nombre 500 751 de fioles Echelle de S-i S-i fabrication* N de lot d'épirubi- 6017G703 6017G703 cine,HCl * Lab = laboratoire S-i = semi-industrielle 26077u2 TABLEAU XL Etudes de stabilité. Lots essayés dans l'eau pour injection. N0 du Caractéristiques Nl du du lot lot TF/23176 du lot Epirubicine,HCl par fiole (mg) 10 pH 3,0 No de formulation F17701/IL1 Taille du lot, nombre 430 de fioles Echelle de fabrication Laboratoire N de lot d'épirubicine, HCL 5009D646 TABLEAU XLI Etudes de stabilité. Conditionnement utilisé pour une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans le sérum physiologique (NaCl à 0,9 %) pour injection. \ "' de lot Condition- TF/23274 TF/23275 6001LA 6001LB 6001LC nement Type de verre de la I fiole Capacité de La 10 ml 10 ml 10 ml 14 ml 39 ml fiole -n Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc o Bouchon chlorobutyl, chlorobutyl, chlorobutyl, chlorobutyl, chlorobutyl, revêtu de revêtu de revêtu de revêtu de revêtu de Téflon Téflon Téflon Téflon Téflon Capsule aluminium aluminium aluminium aluminium aluminium ..- TABLEAU XLII Etudes de stabilité. Conditionnement utilisé pour une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans le dextrose à 5 %. \ N de lot Condition- TF/23270 TF/23273 6001MA 6001MB 6001MC nement . Type de verre I I I I I La fioLe . 0 o0 ou Capacité de la fiole 10 ml 10 ml 10 ml 14 ml 39 ml Caoutchouc Caoutchouc Caoutchouc Caouchouc Caoutchouc chlorobutyl, chlorobutyl, chlorobutyl, chlorobutyl, chlorobutyl, Bouchon revêtu de revêtu de revêtu de revêtu de revêtu de Téflon Téflon Téflon Téflon Téflon Capsule aluminium aluminium aluminium aluminium aluminium r TABLEAU XLIII Etudes de stabilité. Conditionnement utilisé pour une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans l'eau pour injections. \ N de lot TF/23176 Condition- nement Type de verre I I de la fiole Capacité de la fiole 10 ml Caoutchouc Bouchon chlorobutyl, revêtu de TéfLon Capsule aluminium TABLEAU XLIV Stabilité d'une solution prête à L'emploi d'épirubicine, HCL dans le sérum physiologique (NaCL à 0,9 %) pour injections, à 4 C. Fioles conservées droites Lot, Contrôle dosage initial 6 mois * 2,218 TF/23274 ** 100,0 n.d. mg *** 2,7 **** 2,9 * 2,223 TF/23275 ** 100,0 n.d. mg *** 2,8 **** 3,5 * 2,155 2,266 6001LA ** 100,0 105,2 mg *** 1,9 3,3 **** 3,0 3,0 * 1,961 2,013 6001LB ** 100,0 102,6 mg *** 1,2 3,3 **** 3,1 3,1 * 2,072 2,086 6001LC ** 100,0 100,7 mg *** 1,4 3,0 **** 2,7 2,7 * concentration initiale d'épirubicineÀ HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine/ HCL, % de la concentra- tion initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU XLV Stabilité d'une solution prête à L'emploi d'épirubicine, HCl * dans le sérum physiologique (NaCL à 0,9 %) pour injections, à 8 C. Fioles conservées droites Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois 6 mois * 2,218 TF/23274 ** 100,0 n.d. n.d. n.d. mg *** 2,7 **** 2,9 * 2,223 TF/23275 ** 100,0 n.d. n.d. n.d. mg *** 2,8 **** 3,5 * 2,155 2,165 2,143 2,182 6001LA ** 100,0 100,5 99,4 101,3 mg *** 1,9 3,8 2,9 3,7 **** 3,0 3,0 3,0 3,0 * 1,961 1,983 1,949 6001LB ** 100,0 101,1 99,4 n.d. mg *** 1,2 2,6 3,0 **** 3,1 3,1 3,0 * 2,072 2,095 2,116 2,012 6001LC ** 100,0 101,1 102,1 97,1 mg *** 1,4 2,4 3,2 3,7 **** 2,7 2,7 2,7 2,7 * concentration initiale d'épirubicine, HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine, HC1, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU XLVI Stabilité d'une solution prête à L'emploi d'épirubicine,HCI dans le sérum physiologique (NaCL à 0,9 %) pour injections, à 4 C. Fioles conservées renversées Lot, ContrSle dosage initial 6 mois * 2,218 2,247 TF/23274 ** 100,0 101,3 mg *** 2,7 4,1 **** 2,9 2,9 * 2,223 2,235 TF/23275 ** 100,0 100,5 mg *** 2,8 3,6 **** 3,5 3,6 * 2,155 2,219 6001LA ** 100,0 103,0 mg *** 1,9 3,5 **** 3,0 3,0 * 1,961 1,955 6001LB ** 100,0 99,7 mg *** 1,2 2,8 **** 3,1 3,1 * 2,072 2,154 6001LC ** 100,0 104,0 mg *** 1,4 3,0 **** 2,7 2,7 * concentration initiale d'épirubicine, HCL (mg/ml) ** concentration d'épirubicine, HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH TABLEAU XLVII Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine, HCl dans le sérum physiologique (NaCl à 0,9 %)pour injections, à 8 C. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois 6 mois * 2,218 2,223 2,139 2,227 TF/23274 ** 100,0 100,2 96,4 100,4 mg *** 2,7 2,5 3,9 3,7 **** 2,9 2,8 2,9 2,9 * 2,223 2,226 2,121 2,228 TF/23275 ** 100,0 101,1 95,4 100,2 mg *** 2,8 2,9 5,0 5,9 **** 3,5 3,5 3,5 3,5 * 2,155 2,220 2,156 2,215 6001LA ** 100,0 103,0 100,0 102,8 mg *** 1,9 3,6 3,3 3,6 **** 3,0 3,0 3,0 3,0 * 1,961 2,019 1,951 1,980 6001LB ** 100,0 102,9 99,5 101,0 mg *** 1,2 2,8 3,5 3,6 **** 3,1 3,1 3,0 3,1 * 2,072 2,066 2,132 2,060 6001LC ** 100,0 99,7 102,9 99,4 mg *** 1,4 2,8 3,3 3,2 **** 2,7 2,7 2,6 2,7 * concentration initiale d'épirubicine, HCL (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH TABLEAU XLVIII Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine, HCL dans le sérum physiologique (NaCl à 0,9 %) pour injections, à 15 C. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois 6 mois * 2,218 2,235 2,173 2,081 TF/23274 ** 100,0 100,8 98,0 93,8 mg *** 2,7 4,1 3,9 5,4 **** 2,9 2,9 2,9 2,9 * 2,223 2,221 2,108 TF/23275 ** 100,0 99,9 94,8 n.d. mg *** 2,8 3,2 5,0 **** 3,5 3,5 3,4 * 2,155 2,210 2,121 2,088 6001LA ** 100,0 102,5 98,4 96,8 mg *** 1,9 3,4 3,5 n.d. **** 3,0 3,0 3,0 3,0 * 1,961 2,009 1,915 6001LB ** 100,0 102,4 97,6 n.d. mg *** 1,2 3,6 3,7 **** 3,1 3,1 3,0 * 2,072 2,052 2,081 2,036 6001LC ** 100,0 99,0 100,4 98,3 mg *** 1,4 2,6 4,0 3,1 **** 2,7 2,7 2,6 2,7 * concentration initiale d'épirubicine, HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine, HCL, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU XLIX Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans le sérum physiologique (NaCl à 0,9 %) pour injections, à 27 C. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois * 2,218 2,111 1,941 TF/23274 ** 100,0 95,2 87,5 mg *** 2,7 5,4 7,1 **** 2,9 2,9 2,9 * 2,223 2,041 1,729 TF/23275 ** 100,0 91,8 77,8 mg *** 2,8 6,5 15,3 **** 3,5 3,5 3,2 * 2,155 2,144 1,938 6001LA ** 100,0 99,5 89,9 mg *** 1,9 5,2 9,9 **** 3,0 3,0 3,0 * 1,961 1,867 1,738 6001LB ** 100,0 95,7 88,8 mg *** 1,2 4,1 8,5 **** 3,1 3,1 3,0 * 2,072 2,009 1,866 6001LC ** 100,0 96,9 90,1 mg *** 1,4 4,1 9,1 **** 2,7 2,7 2,6 * concentration initiale d'épirubicine, HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCL, % de La concentration initiale *** substances voisines **** pH TABLEAU L Stabilité d'une solution prête à l'empLoi d'épirubicine,HCL dans le sérum physiologique (NaCl à 0,9 %) pour injections sous 2690 lx. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle dosage initiaL 1 mois 3 mois * 2,218 2,059 1,764 TF/23274 ** 100,0 92,8 79,5 mg *** 2,7 5,3 11,3 **** 2,9 2,9 2,9 * 2,223 1,974 1,363 TF/23275 ** 100,0 88,8 61,3 mg *** 2,8 11,3 15,1 **** 3,5 3,5 3,1 * 2,155 1,984 1,667 6001LA ** 100,0 92,1 77,4 mg *** 1,9 5,0 12,6 **** 3,0 3,0 3,0 * 1,961 1,864 1,626 6001LB ** 100,0 95,0 82,9 mg *** 1,2 5,9 10,7 **** 3,1 3,0 2,9 * 2,072 2,118 2,002 6001LC ** 100,0 102,2 96,6 mg *** 1,4 2,6 5,9 **** 2,7 2,7 2,6 * concentration initiale d'épirubicine, HCL (mg/mL) ** concentration d'épirubicine, HCL, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH TABLEAU LI Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCL dans le sérum physiologique (NaCL à 0,9 %) pour injections, à -20 C. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois * 2,218 TF/23274 ** 100,0 n.d. n.d. mg *** 2,7 **** 2,9 * 2,223 TF/23275 ** 100,0 n.d. n.d. mg *** 2,8 **** 3,5 * 2,155 2,185 2,131 6001LA ** 100,0 101,4 98,9 mg *** 1,9 2,8 3,0 **** 3,0 3,0 3,0 * 1,961 1,991 1,958 6001LB ** 100,0 101,5 99,8 mg *** 1,2 3,0 3,3 **** 3,1 3,0 3,0 * 2,072 2,049 2,184 6001LC ** 100,0 98,9 105,4 mg *** 1,4 2,9 3,3 **** 2,7 2,7 2,7 * concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU LII Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans Le dextrose à 5 %, à 4 C. Fioles conservées droites Lot, Contrôle dosage initial 6 mois * 2,178 TF/23270 ** 100,0 n.d. mg *** 3,7 **2,7 * 2,132 TF/23273 ** 100,0 n.d. mg *** 3,1 **** 3,5 * 2,131 2,173 6001MA ** 100,0 102,0 mg *** 2,0 4,0 * * * 3,0 3,0 * 1,973 1,917 6001MB ** 100,0 97,5 mg *** 1,7 4,0 **** 3,1 3,1 * 2,091 2,183 6001MC ** 100,0 104,4 mg *** 1,1 3,3 **** 2,7 2,7 * concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU LIII StabiLité d'une solution prête à L'emploi d'épirubicine,HCl dans le dextrose à 5 %, à 8 C. Fioles conservées droites Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois 6 mois * 2,178 TF/23270 ** 100,0 n.d. n.d. n.d. mg *** 3,7 **** 2,9 * 2,132 TF/23273 ** 100,0 n.d. n.d. n.d. mg *** 3,1 **** 3,5 * 2,131 2,133 2,185 2,152 6001MA ** 100,0 97,8 102,5 101,0 mg *** 2,0 2,9 3,1 4,4 **** 3,0 3,0 3,0 3,0 * 1,973 1,979 1,936 1,934 6001MB ** 100,0 100,3 98,1 98,4 mg *** 1,7 2,2 3,3 3,3 **** 3,1 3,1 3,0 3,1 * 2,091 2,093 2,073 2,053 6001MC ** 100,0 100,1 99,1 98,2 mg *** 1,1 3,3 2,5 3,3 **** 2,7 2,6 2,6 2,7 * concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU LIV StabiLité d'une soLution prête à L'empLoi d'épirubicine,HCL dans Le dextrose à 5 %, à 40C. FioLes conservées renversées Lot, ContrôLe dosage initiaL 6 mois * 2,178 2,171 TF/23270 ** 100,0 99,7 mg 3,7 4,3 2,7 2,7 * 2,132 2,214 TF/23273 ** 100,0 103,8 mg 3,1 n.d. 3,5 3,5 * 2,131 2,241 6001MA ** 100,0 105,2 mg 2,0 3,6 3,0 3,0 * 1,973 1,899 6001MB ** 100,0 96,6 mg *** 1,7 2,9 3,1 3,1 * 2,091 2,128 6001MC ** 100,0 101,8 mg 1,1 3,0 2,7 2,7 * * concentration initiale d'épirubicine,HC1 (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCL, % de La concentration initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU LV Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans le dextrose à 5 %, à 8 C. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois 6 mois * 2,178 2,207 2,201 2,228 TF/23270 ** 100,0 101,3 101,0 102,3 mg *** 3,7 3,9 3,8 2,6 **** 2,7 2,7 2,7 2,7 * 2,132 2,189 2,143 2,149 TF/23273 ** 100,0 102,7 100,5 100,8 mg *** 3,1 3,2 4,3 2,8 **** 3,5 3,5 3,4 3,5 * 2,131 2,184 2,179 2,227 6001MA ** 100,0 100,1 99,9 104,4 mg *** 2,0 3,2 3,0 3,6 **** 3,0 3,0 3,0 3,0 * 1,973 1,964 1,913 1,893 6001MB ** 100,0 99,5 97,0 96,3 mg *** 1,7 2,3 3,6 3,5 **** 3,1 3,0 3,0 3,1 * 2,091 2,060 2,078 2,161 6001MC ** 100,0 98,5 99,4 103,3 mg *** 1,1 2,9 2,9 3,5 **** 2,7 2,6 2,6 2,7 * concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH 2o 077 02 TABLEAU LVI Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCL dans le dextrose à 5 %, à 15 C. Fioles conservées renversées Lot, Contr6ôle dosage initial 1 mois 3 mois 6 mois * 2,178 2,219 2,170 2,237 TF/23270 ** 100,0 101,9 99,6 102,7 mg *** 3,7 3,4 4,3 2,7 **** 2,7 2,7 2,6 2,7 * 2,132 2,153 2,079 2,119 TF/23273 ** 100,0 101,0 97,5 99,4 mg *** 3,1 3,4 4,5 n.d. **** 3,5 3,5 3,4 3,4 * 2,131 2,158 2,155 2,133 6001MA ** 100,0 98,9 98,8 100,1 mg *** 2,0 3,3 2,4 4,5 **** 3,0 3,0 3,0 3,0 * 1,973 1,978 1,893 6001MB ** 100,0 100,2 95,9 n.d. mg *** 1,7 2,0 3,7 **** 3,1 3,1 3,0 * 2,091 2,121 2,066 2,061 6001MC ** 100,0 101,4 98,8 98,5 mg *** 1,1 3,2 2,9 5,1 **** 2,7 2,6 2,7 2,7 * concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH n.d. = non déterminé 260 7702 TABLEAU LVII Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans le dextrose à 5 %, à 27 C. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle dosage initial 1 mois 3 mois * 2,178 2,113 2,052 TF/23270 ** 100,0 97,0 94,2 mg *** 3,7 4,7 4,7 **** 2,7 2,7 2,7 * 2,132 2,068 1,944 TF/23273 ** 100,0 97,0 91,2 mg *** 3,1 6,0 7,5 **** 3,5 3,5 3,3 * 2,131 2,144 2,033 6001MA ** 100,0 96,9 93,2 mg *** 2,0 3,2 7,3 **** 3,0 3,0 3,0 * 1,973 1,919 1,796 6001MB ** 100,0 97,3 91,1 mg *** 1,7 2,1 6,2 **** 3,1 3,0 3,0 * 2,091 2,096 1,896 6001MC ** 100,0 100,6 90,7 mg *** 1,1 3,0 6,6 **** 2,7 2,6 2,6 * concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** substances voisines **** pH TABLEAU LVIII Stabilité d'une solution prête à L'emploi d'épirubicine,HCL dans le dextrose à 5 %, sous 2690 Lx. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle Dosage initial 1 mois 3 mois * 2,178 2,132 2,003 TF/23270 ** 100,0 97,9 92,0 mg *** 3,7 6,7 9,2 *-*** 2,7 2,7 2,7 * 2,132 2,046 1,796 TF/23273 ** 100,0 96,0 84,2 mg *** 3,1 5,8 10,3 **** 3,5 3,4 3,2 * 2,131 2,079 1,988 6001MA ** 100,0 95,3 91,1 mg *** 2,0 3,7 8,2 **** 3,0 3,0 3,0 * 1,973 1,894 1,803 6001MB ** 100,0 96,0 91,4 mg *** 1,7 2,0 5,6 **** 3,1 3,0 3,0 * 2,091 2,022 1,988 6001MC ** 100,0 96,7 95,1 mg *** 1,1 4,0 4,2 **** 2,7 2,6 2,6 * Concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** Concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** Substances voisines **** pH TABLEAU LIX Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans le dextrose à 5 %, à-20 C. Fioles conservées renversées Lot, Contrôle Dosage initial 1 mois 3 mois * 2,178 TF/23270 ** 100,0 n.d. n.d. mg *** 3,7 **** 2,7 * 2,132 TF/23273 ** 100,0 n.d. n.d. mg *** 3,1 **** 3,5 * 2,131 2,168 2,162 6001MA ** 100,0 99,4 99,1 mg *** 2,0 2,2 3,3 **** 3,0 3,0 3,0 * 1,973 1,985 1,994 6001MB ** 100,0 100,6 101,4 mg *** 1,7 2,6 3,8 **** 3,1 3,0 3,0 * 2,091 2,114 2,090 6001MC ** 100,0 101,9 99,9 mg *** 1,1 2,5 2,6 **** 2,7 2,6 2,6 * Concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** Concentration d'épirubicine,HCl, % de la concentration initiale *** Substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU LX Stabilité d'une solution prête à L'empLoi d'épirubicine,HCL dans L'eau pour injections, Lot TF/23176. FioLes conservées droites Tempéra- Temps (mois) ture de conser- Tests 0 I 2 3 6 9 12 vation * 2,079 2,061 2,059 -20 C ** 100,0 99,1 n.d. 99,0 n.d. n.d. *** 4,0 3,8 4,9 **** 3,0 3,1 3,2 * 2,079 2,062 2,061 1,976 4c** 100,0 n.d. n.d. 99,2 99,1 n.d. 95,0 *** 4,0 3,7 3,4 6,7 **** 3,0 3,2 3,2 3,1 * 2,079 2,041 2,043 1,995 1,986 1,950 8 C ** 100,0 98,2 98,3 96,0 95,5 n.d. 93,8 *** 4,0 3,6 3,8 4,0 3,4 6,7 **** 3,0 3,0 3,0 3,1 3,2 3,1 * 2,079 2,001 1,989 1,990 1,923 1,757 C ** 100,0 96,2 95,7 95,7 95,2 n.d. 84,5 *** 4,0 3,7 3,9 3,9 3,5 8,8 **** 3,0 3,0 3,0 3,1 3,2 3,1 * 2,079 1,977 1,879 1,830 1,480 27oC ** 100,0 95,1 90,4 88,0 71,2 n.d. *** 4,0 5,0 6,8 6,9 9,0 **** 3,0 3,0 3,1 3,1 3,1 * Concentration initiale d'épirubicine,HCL (mg/ml) ** Concentration d'épirubicine,HCl, % de la concen- tration initiale *** Substances voisines **** pH n.d. = non déterminé TABLEAU LXI Stabilité d'une solution prête à l'emploi d'épirubicine,HCl dans l'eau pour injections, Lot 23176. Fioles conservées renversées Tempéra- ture de Temps (mois) tu re de conser- Tests 0 1 2 3 6 9 12 vation * 2,079 2,052 2,060 -20 C ** 100,0 98,7 n.d. 99,1 n.d. n.d. n.d. *** 4,0 3,7 4,6 **** 3,0 3,1 3,2* 2,079 2,045 2,067 4C * 100,0 n.d. n.d. 98,4 99,4 n.d. n.d. *** 4,0 3,6 2,9 **** 3,0 3,2 3,2 * 2,079 2,033 2,039 2,022 1,977 8 C ** 100,0 97,8 98,1 97,3 95,1 n.d. n.d. *** 4,0 3,5 3,8 3,7 3,1 **** 3,0 3,0 3,0 3,1 3,2 * 2,079 1,992 1,994 1,994 1,934 1,759 C ** 100,0 95,8 95,9 95,9 93,0 n.d. 84,6 *** 4,0 3,6 3,9 4,6 4,4 8,6 **** 3,0 3,0 3,0 3,1 3,2 3,1 * 2,079 1,964 1,836 1,779 1,568 27 C ** 100,0 94,5 88,3 85,6 75,4 *** 4,0 5,0 7,9 6,9 7,4 **** 3,0 3,0 3,1 3,1 3,1 * 2,079 1,923 1,778 R.T. + ** 100,0 92,5 n.d. 85,5 F.C *** 4,0 4,8 7,5 **** 3,0 3,1 3,1 * 2,079 1,886 1,493 R.T. + ** 100,0 90,7 n.d. 71,8 250 F.C. *** 4,0 6,6 13,5 **** 3,0 3,0 3,0 * Concentration initiale d'épirubicine,HCl (mg/ml) ** Concentration d'épirubicine,HCl, %de la concentration initiale *** Substances voisines **** pH n.d. = non déterminé REVENDICATIONS 1. Solution stérile injectable, apyrogène, stable au stockage d'un anthracycline-glucosideconsistant essentiellement en un sel acceptable en pharmacie d'un anthracycline-glucoside dissous dans un solvant de ce sel acceptable en pharmacie et n'ayant pas été reconstituée à partir d'un lyophilisat, caracté- risée en ce que ladite solution a été ajustée à un pH de 2,5 à 4,0. 2. Solution selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est conditionnée dans un récipient fermé hermétiquement. 3. Solution selon la revendication I ou 2, caractérisée en ce que l'anthracycline-glucoside est la doxorubicine ou la 4'-épi- doxorubicine. 4. Solution selon l'une quelconque des revendications pré- cédentes, caractérisée en ce qu'elle a un pH de 2,5 à 3,7. 5. Solution selon la revendication 4, caractérisée en ce que le pH est de 2,6 à 3,5. 6. Solution selon l'une quelconque des revendications pré- cédentes, caractérisée en ce qu'elle contient du dextrose, du lactose, du sorbitol ou du mannitol comme agent stabilisant ou de réglage de la tonicité ou remplissant ces deux fonctions. 7. Solution selon l'une quelconque des revendications pré- cédentes, caractérisée en ce que le solvant acceptable en pharmacie est l'eau ou le sérum physiologique ou une solution aqueuse à 5 % de dextrose. 8. Solution selon l'une quelconque des revendications pré- cédentes, caractérisée en ce qu'elle a un pH d'environ 3. 9. Procédé pour la préparation d'une solution injectable stérile, apyrogène, stable au stockage selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il consiste: (i) à dissoudre le sel acceptable en pharmacie, qui n'est pas sous la forme d'un lyophilisat, dans le solvant de ce sel acceptable en pharmacie; (ii) à ajouter facultativement un ou plusieurs adjuvants de formulation choisis parmi les agents solubilisants, les agents sta- 260 7702 bilisants, les agents de réglage de la tonicité, les conservateurs et les agents chélatants acceptables en pharmacie; et (iii) à ajouter selon qu'on le désire un acide ou agent tampon acceptable en pharmacie pour ajuster la solution à un pH de 2,5 à 4,0; le procédé étant mis en oeuvre de telle manière que la solution résultante soit stérile et apyrogène. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'on fait passer la solution à travers un filtre stérilisant après l'étape (iii).