Brevet FR2598617A1 — publié le 19871120

La présente invention concerne de nouveaux composés, leurs mélanges et des procédés pour les préparer. Le nédocromil sadique, qui est le sel de sodium de l'acide 9-éthyl-6,9dihydro-4,6-dioxo-10-propyl-4Hpyranno[3,2-g]quinoléine-2,8-dicarboxylique, a été recommandé pour le traitement d'états allergiques et autres, en particulier des affections obstructives réversibles des voies aériennes. Les bronchodilatateurs et les stéroides ont été recommandés aussi pour le traitement des affections obstructives réversibles des voies aériennes. Toutefois, le traitement au moyen d'une combinaison de constituants actifs, en particulier des combinaisons à dose fixée, 15 peut susciter des inconvénients et il existe une forte prévention contre l'administration de ces combinaisons. Chez de nombreux patients, le traitement au moyen d'un bronchodilatateur sur une base régulière pendant une longue durée, par exemple six semaines, conduit à une baisse de la réponse à l'agent thérapeutique qui laisse le patient sans protection. Dans certains cas, l'administration prolongée d'un bronchodilatateur peut même provoquer une bronchoconstriction de rebond. Dans d'autres cas, l'un des constituants du mélange peut par 25 lui-même suffire à maîtriser l'affection, rendant ainsi les autres constituants superflus. La Demanderesse a découvert à présent que les mélanges de nédocromil sodique avec des agents propres à l'inhalation choisis parmi les bronchodilatateurs et les stéroïdes, les sels de l'acide 9-éthyl5 6,9dihydro-4,6-dioxo-10-propyl-4H-pyranno[3,2-g]quinoléine-2,8dicarboxylique avec ces agents, et les mélanges de ces sels avec le nédocromil sodique ou l'agent dans le rapport thérapeutique approprié offrent l'avantage qu'ils sont tant palliatifs que prophylactiques, 10 sont plus efficaces, exposent moins à une perte de réponse, induisent moins d'effets secondaires, réduisent l'hyperactivité bronchique, peuvent être administres en doses plus faibles, peuvent être administrés directement au site de l'affection, par exemple par inhalation, 15 peuvent être administrés moins fréquemment, par exemple 1 ou 2 fois par jour, peuvent être administrés en thérapie à long terme, ont un effet plus durable, réduisent la candidiase induite par les stéroïdes, sont plus stables, sont synergiques, mènent le patient à une meilleure 20 observance, ont un goût moins désagréable ou ont d'autres propriétés souhaitables par comparaison avec les stéroides ou bronchodilatateurs administrés tels quels, le nédocromil sodique administré tel quel ou certains autres mélanges lors d'épreuves sur des modèles pharma25 cologiques compétents. L'invention a pour objet un mélange pharmaceutique comprenant a) un ou plusieurs d'entre l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro4,6-dioxo-10-propyl-4Hpyranno[3,2-g]quinoléine-2,8-di30 carboxylique et les sels pharmaceutiquement acceptables de celui-ci, comme "constituant actif A", en combinaison avec b) un ou plusieurs agents propres à l'inhalation choisis parmi les bronchodilatateurs, les stéroides et leurs 35 dérivés pharmaceutiquement acceptables, comme "consti- 25986 17 tuant actif B". La Demanderesse préfère utiliser le sel disodique de l'acide 9-éthyl-6,9dihydro-10-propyl-4H-pyranno[3,2-g]quinoléine-2,8-dicarboxylique, connu sous le nom de nédocromil sadique. Elle préfère aussi utiliser un seul constituant actif A en mélange avec soit un bronchodilatateur, soit un stéroïde comme constituant actif B. Les bronchodilatateurs que le constituant B peut représenter comprennent l'isoprénaline. La Demanderesse préfère toutefois que le bronchodilatateur soit bêta-2- sélectif. Un bronchodilatateur bêta-2-sélectif est un agoniste des récepteurs bêta-adrénergiques qui a davan15 tage d'affinité pour les récepteurs bêta-2-adrénergiques, dont la stimulation se traduit par le relâchement des muscles bronchiques (et aussi artériels et utérins) que pour les récepteurs bêta-l-adrénergiques, dont les agonistes induisent la stimulation cardiaque (et la lipo20 lyse). Pour la détermination de la bêta-2-sélectivité, une comparaison est établie entre l'activité du composé (a) comme agent de relâchement des préparations de trachée isolée de cobaye sous tonus spontané (CE50 = concentration molaire donnant 50% de la réponse de relâche25 ment maximale a lisoprénaline) et (b) l'augmentation de la fréquence de battement auriculaire de l'oreillette isolée en battement spontané du coeur de cobaye (CE50 =concentration molaire induisant 50% de l'augmentation maximale de rythme induite par l'isoprénaline). 30 Un composé bêta-2-sélectif doit avoir une CE50 plus faible sur la trachée que sur l'oreillette. Il est possible de déterminer un rapport de sélectivité qui est l'antilogarithme de la différence entre le logarithme négatif de CE50 (trachée) et le logarithme négatif de 35 CE50 (oreillette). Plus ce rapport de sélectivité est élevé et plus le composé est sélectif pour les récepteurs bêta-2adrénergiques. La Demanderesse préfère que le bronchodilatateur bêta-2-sélectif soit à action durable. Par l'ex5 pression "à action durable", on entend que le composé a comme agent de relâchement du muscle bronchique lisse dans les épreuves pharmacologiques une durée d'action plus longue que celle de l'isoprénaline ou de l'orciprénaline. Pour les études de la durée d'action, une 10 comparaison est établie entre l'effet de doses i.v. également actives pour l'inhibition du bronchospasme induit par l'acétylcholine ou l'histamine chez le cobaye anesthésié. La durée d'action de l'isoprénaline dans une telle épreuve est relativement brève (retour de la 15 réponse témoin à la valeur normale en 10 à 25 minutes). Dans le cas d'un composé ayant une plus longue durée d'action, la réponse témoin ne devrait retourner à la valeur normale qu'en une durée plusieurs fois plus longue. Des bronchodilatateurs spécifiques qui peuvent 20 être cités sont la terbutaline, le fénotérol, le réprotérol, le pirbutérol, le rimitérol, l'orciprénaline et en particulier le salbutamol. Des stéroïdes convenantcomme constituant actif B sont notamment l'hydrocortisone, outre des composés 25 plus actifs tels que le valérate de bêtaméthasone, le butyrate de clobétasone, l'acétonide de fluocinolone, l'hexanoate de fluocortolone, le dipropionate de béclométhasone, le butyrate d'hydrocortisone, le valérate de difluocortolone, l'acétonide de triamcinolone, le flucinonide, le désonide, la flurandrénalone, le pivalate de fluméthasone, la méthylprednisolone, le propionate de clobétasol, l'haicinonide, le tixocortol, la prednisolone et le 21-acétate de fluprednylidène.La Demanderesse préfère que le constituant actif B soit le di35 propionate de béclométhasone. 2598 6 17 L'invention a aussi pour objet un sel de l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro-4,6-dioxo-10-propyl-4H-pyranno[3,2-g] quinoléine-2,8-dicarboxylique avec un agent basique propre à l'inhalation choisi parmi les broncho5 dilatateurs bêta-2-sélectifs et les stéroides. Le sel peut être préparé par un procédé de double décomposition, par exemple par réaction d'un sel approprié, tel que le sel disodique, de l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro-4,6-dioxo-10-propyl-4H-pyranno10 [3,2-g] quinoléine-2,8-dicarboxylique avec un sel convenable, par exemple le chlorhydrate ou le sulfate, de la base de l'agent propre à l'inhalation. Toutefois, le sel est de préférence produit par réaction de l'acide libre, à savoir l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro-4,6-dioxo15 10-propyl-4H-pyranno[3, 2-g]quinoiéine-2,8-dicarboxylique, avec la base libre de l'agent propre à l'inhalation, parce qu'un tel procédé ne donne pas de sel inorganique comme sous-produit. La réaction peut être exécutée dans un solvant qui est inerte dans les conditions de réac20 tion. Le solvant est de préférence un solvant dans lequel le sel souhaité est soluble, par exemple l'eau. Le sel souhaité peut être isolé et purifié, par exemple, par cristallisation ou lyophilisation. L'invention a donc pour objet le sel lorsqu'il 25 n'est pas en solution, par exemple le sel lorsqu'il se trouve sous une forme sensiblement sèche, ou lorsqu'il se trouve en mélange avec insuffisamment de liquide, par exemple d'eau, pour le dissoudre complètement. Le sel peut, si la chose est souhaitée, être 30 utilisé conjointement avec un ou plusieurs autres sels de l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro-4,6-dioxo10-propyl-4Hpyranno[3,2-g]quinoléine-2,8-dicarboxylique, notamment son sel disodique. Le rapport des constituants actifs A et B dans 35 la composition variera avec la nature des constituants actifs particuliers et les fins spécifiques auxquelles la composition est destinée. Lorsque le constituant actif A est lui-même un sel de l'acide 9-éthyl-6,9dihydro-10propyl-4H-pyranno[3,2-g]quinoléine-2,8-di5 carboxylique avec un agent basique propre à l'inhalation, par exemple un bronchodilatateur bêta-2sélectif, il peut être nécessaire d'utiliser une proportion nulle ou tout au plus très faible de l'agent basique "libre" ou d'un autre sel de celuici comme constituant actif B. 10 Une dose appropriée du constituant actif A pour l'inhalation se situe dans l'intervalle de 1 à mg et de préférence de 1 à 20 mg (à mesurer en nédocromil sodique). Une dose appropriée du constituant actif B 15 pour l'inhalation et un nombre approprié de parties en poids de constituant actif A (à mesurer en nédocromil sodique) pour une partie en poids de constituant actif B sont spécifiés ci-après: Composé Salbutamol (sous forme de sulfate) Terbutaline (sous forme de sulfate) 10 Fénotérol (sous forme de bromhydrate) Pirbutérol (sous forme de 15 chlorhydrate) Réprotérol (sous forme de chlorhydrate) Dipropionate de 20 béclométhasone Dose en microgrammes à 300 de préférence à 200 ioo00 à 600 de préférence à 500 100 à 500 à 500 à 750 à 500 de préférence à 200 Rapport A:B (composition en aérosol sous pression) 4 à 20: 1 2 à 10 2 à 10 2 à 15 : 1: 1: 1 1,3 à 6,7: 1 2 à 40: 1 Il est hautement préféré que la dose de constituant B soit de nature à exercer un effet persistant plutôt que transitoire. Le mélange peut être administré en doses subdivisées 1 à 6 et de préférence 2 à 4 fois par jour. Chaque dose peut comprendre une ou plusieurs doses unitaires. Les rapports spécifiques des constituants ac30 tifs A et B particuliers dans toute composition conforme à l'invention peuvent varier dans un large intervalle. La Demanderesse préfère toutefois une composition contenant 0,4 à 400 parties en poids et plus avantageusement 2 à 200 parties en poids de constituant actif A (à mesu35 rer en nédocromil sodique) par partie en poids de con- stituant actif B. Les mélanges conformes à l'invention peuvent être préparés en mélangeant ensemble les différents constituants actifs suivant des techniques habituelles connues. Les sels, mélanges et compositions de l'invention sont utiles parce qu'ils ont une activité pharmacologique chez les animaux; en particulier, ils sont utiles parce qu'ils inhibent le dégagement et/ou l'ac10 tion des médiateurs pharmacologiques qui résultent de la combinaison in vivo de certains types d'anticorps et d'antigènes spécifiques, par exemple la combinaison d'un anticorps réaginique avec un antigène spécifique (voir exemple 27 du brevet anglais n 1.292.601). Les 15 sels et compositions se sont aussi révélés inhiber la dégranulation des mastocytes et intervenir dans les trajets réflexes chez les animaux d'expérience et l'homme, en particulier dans les réflexes associés à la fonction pulmonaire. Chez l'homme, les altérations tant subjec20 tives qu'objectives qui résultent de l'inhalation d'un antigène spécifique par un sujet sensibilisé sont inhibées par une administration préalable des nouveaux sels et nouvelles compositions. Les nouveaux sels et nouvelles compositions sont donc utiles pour le traitement 25 d'une obstruction réversible des voies aériennes et/ou pour la prévention de la sécrétion d'un excès de mucus. Ils sont donc utiles pour le traitement de l'asthme allergique, de l'asthme dit "intrinsèque" (pour lequel aucune sensibilité à un antigène extrinsèque ne peut 30 être démontrée), de l'asthme induit par l'exercice etc., de la rhinite, du poumon du fermier, de la maladie des oiseleurs, de la bronchite, des toux (y compris la coqueluche) et des obstructions du nez et des bronches associées au rhume ordinaire. Les nouveaux sels, 35 mélanges et compositions sont précieux aussi pour le 25986 17 traitement d'autres états dans lesquels des réactions antigènes-anticorps ou une sécrétion excessive de mucus sont la cause ou une cause accessoire de la maladie. Les nouveaux sels, mélanges et compositions 5 de l'invention peuvent être administrés par des voies très diverses et peuvent agir par voie systémique ou locale. Par conséquent, les composés peuvent être administrés par inhalation orale ou nasale dans les poumons, directement dans le nez ou les yeux, dans la cavité buccale, dans l'oesophage ou sur d'autres surfaces accessibles du corps. Les nouveaux sels et mélanges peuvent être administrés directement sur l'organe ou la partie du corps manifestant les sympt6mes ou sur une partie éloignée que celle manifestant les symp15 tômes. L'invention a aussi pour objet un procédé de traitement des affections obstructives et réversibles des voies aériennes, qui comprend l'administration d'une quantité thérapeutiquement efficace de a) un ou plusieurs d'entre l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro-4,6-dioxo-10-propyl-4Hpyranno[3,2-g]quinoléine2,8-dicarboxylique et les sels pharmaceutiquement acceptables de celui-ci comme "constituant actif A", en combinaison avec b) une quantité thérapeutiquement efficace d'un ou plusieurs agents propres à l'inhalation choisis parmi les bronchodilatateurs bêta-2sélectifs, les stéroides et leurs dérivés pharmaceutiquement acceptables comme "constituant actif B", simultanément ou séparément dans le temps à un patient souffrant d'une telle affection. Le procédé de traitement est exécuté de préférence sur base quotidienne régulière, par exemple 1 à 4 fois par jour. Le procédé est exécuté de pré35 férence pendant une longue durée, par exemple au moins 4 semaines et de préférence au moins 8 semaines. Le procédé comprend de préférence l'administration simultanée de doses fixées du constituant actif A avec des doses fixées du constituant actif B. Les nouveaux sels, mélanges et compositions de l'invention peuvent être administrés suivant une grande variété de posologies, soit tels quels, soit conjointement avec un ou plusieurs autres composés actifs. Les nouveaux sels de l'invention et les constituants actifs des mélanges et compositions peuvent être préparés à des granulométries d'une grande variété. Par exemple, pour l'inhalation et d'autres applications, les composés peuvent avoir un diamètre médian en masse i5 de 0,01 à 10 l m, de préférence de 2 à 6/m et plus avantageusement de 2 à 4 /m. L'invention a aussi pour objet une composition pharmaceutique comprenant (de préférence à raison de moins de 80% et plus avantageusement à raison de moins 20 de 50% en poids) un sel ou mélange conforme à l'invention, en association avec un adjuvant, diluant ou excipient pharmaceutiquement acceptable. Des exemples d'adjuvants, diluants ou excipients appropriés sont: pour les comprimés, capsules et dragées: la cellulose microcristalline, le phosphate de calcium, la terre de diatomées, un sucre tel que le lactose, le dextrose ou le mannitol, le talc, l'acide stéarique, l'amidon, le bicarbonate de sodium et/ou la gélatine; pour les suppositores: les cires et huiles naturelles ou durcies, et pour les compositions à inhaler: le lactose grossier. Pour l'administration par inhalation, les nouveaux sels ou mélanges peuvent être mis en composi35 tion avec un gaz comprime, par exemple l'azote, ou avec 2-5 9 8 6 1 7 un agent propulseur liquéfié à l'état de composition en aérosol sous pression, la composition contenant de préférence 1 à 20% p/v du ou des agents actifs. Les nouveaux sels ou mélanges peuvent être administrés aussi à l'état de solution nébulisée. L'invention est illustrée par les exemples suivan-ts. EXEMPLE 1 Aérosol sous pression débitant du nédocromil sodique 10 (2 mg) et du sulfate de salbutamol (0,1 mg) Nédocromil sodique (micronisé, séché) 1, 4420% p/p Salbutamol (micronisé) 0,0721 Trioléate de sorbitan 0,5000 Dichlorotétrafluoroéthane 39,1944 Dichlorodifluorométhane 58,7915 Refroidir le dichlorodifluoroméethane à -55 C et y disperser le trioléate de sorbitan au moyen d'un mélangeur à cisaillement intense. Disperser le nédocromil sodique et le sulfate 20 de salbutamol dans le mélange et ajouter le dichlorotétrafluoroéthane préalablement refroidi à 55 C. Introduire la suspension dans des bidons et sertir sur chaque bidon une valve doseuse d'une capacité de 100/).s EXEMPLE 2 Aérosol sous pression débitant du nédocromil sodique (2 mg) et de la terbutaline (0,25 mg). Nédocromil sadique (séché, micronisé) 1,4286% p/p Terbutaline (micronisée) 0,1786 Trioléate de sorbitan 0,5000 Trichlorofluorométhane 24,4732 Dichlorotétrafluoroéthane 24,4732 Dichlorodifluorométhane 48,9464 Dissoudre le trioléate de sorbitan dans le trichlorofluorométhane et disperser le nédocromil sodi- que et le sulfate de terbutaline dans la solution. Refroidir la solution à -55 C et ajouter le dichlorotétrafluoroéthane et le dichlorodifluorométhane refroidis à -55 C. Introduire la suspension dans des 5 bidons et sertir sur chaque bidon une valve doseuse d'une capacité de 100 1. EXEMPLE 3 Aérosol sous pression débitant du nédocromil sodique (2 mg) et du réprotérol (0,5 mg). Nédocromil sodique (séché, micronisé) 1,4663% p/p Chlorhydrate de réprotérol (micronisé) 0,3666 Trioléate de sorbitan 1,0000 Trichlorofluoroméethane 10,0000 Dichlorotétrafluoroéthane 13,0751 Dichlorodifluorométhane 74,0920 Préparer comme dans l'exemple 2. EXEMPLE 4 Aérosol sous pression débitant du nédocromil sodique (2 mg) et du dipropionate de béclométhasone (0,05 mg) 20 Nédocromil sodique (séché, micronisé) 1,4420% p/p Dipropionate de béclométhasone (micronisé) 0,0361% Trioléate de sorbitan 0,5000 Dichlorotétrafluoroéthane 39,2088 Dichlorodifluorométhane 58,8131 Préparer comme dans l'exemple 1. On a examiné les effets des mélanges, sels et compositions conformes à l'invention dans les systèmes suivants: EXEMPLE A Epreuve d'anaphylaxie pulmonaire passive chez le rat On a sensibilisé passivement des femelles de rat (Charles River) d'un poids de 250 g par injection intraveineuse de 0,5 ml d'antisérum à l'IgE de rat potentialisée dirigée contre l'ovalbumine. On a anesthésie les rats à la pentobarbitone A' 2598 6 1 7 sodique (70 mg/kg) par voie intraveineuse. On a canulé la trachée et on a ventilé le rat à l'aide d'une pompe respiratoire Palmer Miniature Ideal en système clos. On a enregistré la pression dans la trachée au moyen d'une dérivation de la canule connectée à un transducteur de différence de pression de l'air (UPI, Pye Ether Ltd.). On a réglé le rythme respiratoire à 99 coups par minute avec une pression dans la trachée de 6 cm d'eau. On a agressé les rats, 48 heures après la sensibilisation, avec de l'ovalbumine (25 mg/kg par voie intraveineuse) et on a mesuré,en pinçant la trachée, l'augmentation résultante de la pression dans la trachée exprimée en pourcentage du degré maximum possible de 15 bronchoconstriction ( PCB max). On a administré le constituant actif A et/ou le constituant actif B, soit isolément, soit en combinaison, par voie intraveineuse dans de la solution physiologique salée au cours de la période de 1 à 5 minutes 20 avant l'agression par l'antigène. On a analysé les résultats de l'administration des deux composés en combinaison en exécutant une analyse de variance pour un agencement factoriel avec des mesures répétées dans chaque cellule. On a effectué une 25 transformation par racine carrée avant l'analyse. On a examiné plus en détail un effet antagoniste ou synergique éventuel des deux composés en appliquant le procédé décrit par Berenbaum, Clin. Exp. Immunol., 28, 1 (1977). Celui-ci consiste à calculer 30 la grandeur: dose de A dose de B Ae Be ou (A,B) est la combinaison exerçant un effet X. Ae est la dose de A seul donnant un effet X. 35 2 598617 Be est la dose de B seul donnant un effet X. Si Z Z = 1, A et B sont additifs. Z>l 1, A et B sont antagonistes. EXEMPLE B Inhibition du dégagement du médiateur par les cellules broncho-alvéolaire Matériels et procédés Matériels On a acquis de la [E 3H]-S-adénosyl-Lmethionine (500mCi/mmole) et du [32P]-orthophosphate (sans entraîneur) chez Amersham International (Amersham, Buckinghamshire, Royaume-Uni),de l'antisérum de mouton contre l'IgE de rat, de l'antisérum de chèvre contre de l'IgE 15 humaine et du sérum de chèvre normal chez Miles Laboratories (Slough, Buckinghamshire, Royaume-Uni). On a précipité le sérum de chèvre anti-IgE humaine et le témoin avec du sulfate d'ammonium saturé à 40% (Largman et al, Methods Enzymol (1981) 74:22) et après dialyse, on a 20 ajusté la fraction de globuline au volume original du sérum. On a préparé l'antigène d'ascaris à partir du liquide pseudocoelomique d'Ascaris suum adulte par chromatographie sur Sephadex G200 (Pharmacia, Milton Keynes, Buckinghamshire, Royaume-Uni) suivant le procédéd'Ambler 25 et al, J. Immunol. Meth. (1972), 1, 317. Infection et lavage broncho-alvéolaire chez des macaques On a utilisé pour ces études un groupe de 20 singes Macaca arctoides, d'un poids de 8- 18 kg. On a infecté les animaux au moyen d'A. suum et on a effectué 30 le lavage comme décrit par Pritchard et al, Clin. Exp. Immunol., (1983), 54:469. On a recueilli le liquide du lavage dans des tubes héparinisés etonl'amis surglace. Traitement de cellules du lavage broncho-alvéolaire On a filtré le liquide de lavage à travers un 35 filtre en Nylon de 175/ m et on a recueilli les cellules 2 598617 par centrifugation(450 g pendant 5 minutes à 4 C). On a lavé les cellules et on les a remise en suspension à la dilution de travail requise dans du tampon (Tyrode tamponné à l'HEPES 10 mM, pH 7,4, contenant 1 mg/ml de gélatine et 5 unités/ml d'héparine). On a effectué les comptages différentiels de cellules sur les préparations humides dans du milieu colorant de Kimura (20). Lorsque seul le dégagement d'histamine devait être mesuré, les cellules ont été agressées, en triple expé10 rience, par addition de 0,05 ml de cellules, à une densité de 105 mastocytes/ml, à du constituant A, par exemple à 0,05 ml de tampon contenant l'agent de dégagement outre le constituant B, par exemple (3 x 10-8 - 10 6M), et du nédocromil sodique (3 x 10-6 - 10 4M) isolément et en combinaison à 37 C. Après 20 minutes d'incubation à 37 C, le processus de dégagement a été bloqué par addition de 0,25 ml de tampon glacé exempt de Ca2+ et 2+ Mg contenant de l'EDTA 2 mM. Après centrifugation (450 g pendant 5 minutes à 4 C), on a recueilli 0,2 ml 20 de liquide surnageant pour le dosage de l'histamine. Dans toutes les expériences d'inhibition, on a choisi un taux d'agression submaximal qui, d'après l'expérience de lavages antérieurs du même animal, dégage 15-25% de l'histamine totale, mais pas plus de la moitié du déga25 gement maximum réalisable. Mesures de l'histamine On a mesuré l'histamine par le procédé isotopique doublede Beaven et al, Clin. Chim. Acta, (1972), 37,97 modifié comme décrit dans Pritchard et al. 30 EXEMPLE C Hyperactivité bronchique non spécifique chez l'asthmatique adulte Des adultes asthmatiques ont donné leur consentement après information et participé à l'étude. On a effectué l'agression par l'histamine 25986 17 suivant le procédé de Cockcroft, Clin. Allergy, (1977), 7, 235. On a fait inhaler pendant 2 minutes à intervalles de 5 minutes, des concentrations doublées de phosphate acide d'histamine (0,03 - 8 mg/ml). On a mesuré le volume expiratoire forcé à une seconde (VEF1) au moyen d'un spiromètre Vitalograph à coin sec avant, de même que 0,5 et 1,5 minute après chaque inhalation. On a interrompu l'agression lorsque le VEF1 a été diminué de 20% ou davantage par rapport à la ligne de base 10 mesuree. On a établi les courbes Log-dose/réponse et mesuré la CP20 par interpolation des deux derniers points. EXEMPLE D On a rassemblé pour cette étude des volon15 taires souffrant d'asthme allergique spécifique. Chez ces volontaires, une crise d'asthme succède normalement à l'inhalation d'un antigène auquel ils sont spécifiquement sensibles. Le degré d'asthme provoqué par ce mode opératoire peut être mesuré par examen répété de la 20 résistance des voles aériennes. On utilise un spiromètre approprié conçu pour mesurer le volume expiratoire forcé à une seconde (VEF1) et dès lors les modifications de la résistance des voies aériennes. On mesure les modifications de VEF1 induites par le médicament 5 minutes après l'administration du médicament. Six heures après l'administration du médicament, on déclenche une attaque témoin par antigène chez le volontaire et on mesure la baisse de VEF1 5 minutes après l'administration de l'antigène. R E V E N D I C AT I O N S 1 - Melange pharmaceutique comprenant a) un ou plusieurs d'entre l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro4,6-dioxo-10-propyl-4H-pyranno[3,2-g]quinoléine-2,8di5 carboxylique et les sels pharmaceutiquement acceptables de celui-ci, comme "constituant actif A", en combinaison avec b) un ou plusieurs agents propres à l'inhalation choisis parmi les bronchodilatateurs, les stéroides et leurs 10 dérivés pharmaceutiquement acceptables, comme "constituant actif B". 2 - Mélange suivant la revendication 1, dans lequel le constituant actif A est le nédocromil sodique. 3 - Mélange suivant la revendication 1, com15 prenant 0,4 à 400 parties en poids de constituant actif A, à mesurer en nédocromil sodique, par partie en poids de constituant actif B. 4 - Mélange suivant l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le constituant 20 actif B est un bronchodilatateur ou un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celui-ci. - Mélange suivant l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le constituant actif B est un bronchodilatateur bêta-2-sélectif ou 25 un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celui-ci. 6 - Mélange suivant l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le constituant actif B est le salbutamol ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci. 7 - Mélange suivant l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans lequel le constituant actif B est la terbutaline, le fénotérol, le réprotérol, le pirbutérol, le rimitérol ou un sel pharmaceutiquement acceptable de l'un de ceux-ci. 8 - Melange suivant l'une quelconque des re- vendications 1 à 3, dans lequel le constituant actif B est un stéroide ou un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celui-ci. 9 - Mélange suivant la revendication 8, dans lequel le constituant actif Best la béclométhasone, un solvate de celle-ci ou un dérivé pharmaceutiquement acceptable de l'un ou l'autre. - Mélange suivant la revendication 8, dans lequel le constituant actif B est l'hydrocortisone, le valérate de bêtaméthasone, le butyrate de clobétasone, l'acétonide de fluocinolone, l'hexanoate de fluocortolone, le butyrate d'hydrocortisone, le valérate de diflucortolone, l'acétonide de triamcinolone, le flucinonide, le désonide, la flurandrénalone, le piva15 late de fluméthasone, la méthylprednisolone, le propionate de clobétasol, l'halcinonide, le tixocortol, la prednisolone, le 21-acétate de fluprednylidène ou un solvate de l'un de ceux-ci. 11 - Sel de l'acide 9-éthyl-6,9-dihydro-4,620 dioxo-10-propyl-4Hpyranno[3,2-g]quinoléine-2,8-dicarboxylique avec un agent basique propre à l'inhalation choisi parmi les bronchodilatateurs bêta-2-sélectifs et les stéroïdes. 12 - Composition pharmaceutique comprenant un mélange suivant l'une quelconque des revendications 1 à 10 ou un sel suivant la revendication 9 en association avec un adjuvant, diluant ou excipient pharmaceutiquement acceptable et sous une forme propre à l'inhalation. 13 - Composition suivant la revendication 12, sous la forme d'une composition en aérosol sous pression contenant 1 à 20% p/p du ou des constituants actifs et comprenant 0,05 à 1,5% en poids d'un agent tensio-actif.