Brevet FR2600080A1 — publié le 19871218

La présente invention se rapporte à un agent de floculation (appelé le PF- 102), ainsi qu'à ses sels, qui s'avèrent être très intéressants pour faire floculer de fines substances en suspension. Différents agents de floculation, y compris des substances minérales comme le chlorure ferrique, et des polymères synthétiques comme des polyacrylamides, ont été utilisés selon le but cherché. Toutefois, tous les agents de floculation connus présentent quelqu'inconvénientPar 10 exemple, un monomère acrylamide, servant à fabriquer des agents de floculation polyacrylamidiques, présente une toxicité intense qui provoque quelques inconvénients au point de vue sécurité. C'est-à-dire que le procédé de production de ces agents de floculation peut se révéler dangereux. En 15 outre, ces agents de floculation peuvent être contaminés par ce monomère. L'utilisation de chlorure ferrique comme agent de floculation des boues activées peut restreindre l'emploi de la boue obtenue en tant qu'engrais. De plus, la combustion de la boue, ainsi traitée, peut être nocive 20 et son rejet peut s'accompagner de toxicité résiduelle. Le polyacrylate de sodium, qui est un agent de floculation anionique, ne peut être utilisé que dans un intervalle limité, et est inutilisable, par exemple, pour faire floculer des microorganismes. Les agents de floculation polymères, naturels, classiques, comme chitosane, gomme guar, alginate de sodium et CMC, ne sont pas avantageux en raison de leurs aptitudes limitées à entraîner la floculation, bien qu'ils soient exempts d'inconvénients comme toxicité et pollution de 30 l'environnement, lors de leur rejet. D'autre part, une demande croissante d'agents de floculation nécessite de façon urgente la production d'un tel agent, utilisable pour différentes matières à floculer, dans des conditions variées, y compris de température, de 35 valeur de pH et de présence de substances inhibitrices, et qui ne présente ni toxicité, ni inconvénient lors du rejet.C'est pour satisfaire ces exigences que la demanderesse avait antérieurement examiné différents micro5 organismes, et qu'elle avait découvert qu'un fongus I-1 imparfait, isolé à partir de l'humus du sol de Wakayama, au Japon, accumulait un agent de floculation,.qui s'avera être une substance entièrement nouvelle et fut dénommée PF-101, dans un filtrat de culture (Publication du brevet Japonais 10 N 12639/1981). Cependant, cet agent de floculation PF-101 présente différents inconvénients: il ne peut être purifié que par un procédé très compliqué, qui comprend l'addition d'éthanol au milieu de culture, la dissolution dans l'eau chaude de la fraction ainsi précipitée, et son adsorption sur du Sepharose 6B, suivie de l'élution à l'aide d'une solution tampon de malate; ce procédé donne une récupération de produit extrêmement faible; et le produit obtenu est difficilement soluble dans différents solvants et mal 20 commode à traiter. La présente invention est basée sur-la constatation suivante: lorsqu'on ajoute des sels au filtrat du milieu de culture, dont il est question plus haut, ou à son concentré, il précipite plus aisément et plus effica25 cement un agent de floculation. Cet agent, qui est soluble à température ambiante, dans une solution aqueuse d'un acide, après des purifications répétées, présente des propriétés physico-chimiques nettement différentes de celles du PF-101. Il s'agit donc d'une nouvelle substance que l'on 30 a dénommé PF-102. Dans les dessins annexés, la figure 1 est un spectre d'absorption dans l'ultraviolet du chlorhydrate de PF-102, tandis que la figure 2 représente un spectre d'absorption dans l'infrarouge de PF-102,Les figures 3, 4, 5, 6 35 et 7 représentent les spectres d'absorption dans l'infra- rouge respectivement du phosphate, du chlorhydrate,de l'acétate, du lactate et du citrate de PF-102. Le PF-102, selon la présente invention, est soluble dans une solution aqueuse de presque tous les acides, avec formation d'un sel d'acide. Bien que PF-102 puisse être isolé, il est difficilement soluble dans une solution aqueuse et très difficile à manipuler. Aussi utilise-t-on son chlorhydrate pour déterminer parmi ses propriétés physico-chimiques, son activité floculante, l'intervalle de pH ainsi 10 que l'intervalle de température dans lesquels elle se manifeste, son spectre d'absorption dans l'ultraviolet et ses réactions colorées. Les propriétés physico-chimiques du PF-102 selon la présente invention sont les suivantes: 15 1) Activité floculante: très faibles quantités de PF-102 peuvent produire la floculation de matières en fine suspension. 2) Intervalle de pH de l'activité floculante: On observe une activité floculante stable dans un inter20 valle de pH entre 2 et 9. 3) Intervalle de température de l'activité floculante: On observe cette activité entre 0 et 100 C. 4) Force ionique et activité floculante: Cette activité est inhibée par l'acide carbonique etFe2(S04)3, 25 mais n'est pas affectée par d'autres différents ions ou forces ioniques, et ni NaCl ni K2SO4 n'exercent d'action jusqu'à une concentration de 1M. ) Analyse élémentaire: N = 8,64 % C = 42,8 % H = 6,87 % Formule générale: (C6H1ilNO4.xH2O)n. 6) Spectre d'absorption dans l'ultraviolet: Comme indiqué dans la figure 1. 7) Spectre d'absorption dans l'infrarouge: Comme représenté dans la figure 2. 8) Réactions colorées: Réaction à la ninhydrine; positive Réaction à la xanthoprotéine: négative Réaction de Ehrlich: négative Réaction au sulfate de phénol: Essai de Lerozent: négatif Réaction de Molisch: négative. 9) Constituants: Après hydrolyse de PF-102, on ne décèle comme saccharide que de la galactosamine et ne trouve ni saccharides neutres, ni aminoacides. Cela indique que PF-102 est un polymère comprenant de la galactosamine. Des résultats de la mesure du pouvoir rotatoire spécifique, de l'oxydation par du periodate et du traitement de décomposition de Smith, on déduit que la liaison principale peut être supposée être une liaison o 1-4. ) Electrophorèse: Elle confirme l'existence d'une substance unique par foca20 lisation isoélectrique au gradient de densité, indiquant un point isoélectrique (pI) de 8,5. 11) Coloration de la substance: Jaune pâle. 12) Basicité, acidité ou neutralité: La substance, mise en suspension dans de l'eau à une concentration de 0,5% poids/volume, indique une valeur du pH de 7,5 (la valeur du pH de l'eau désionisée étant de 5,8). 13) Solubilité dans les solvants: Très peu soluble dans l'eau chaude. 30 Très peu soluble dans l'eau froide. Hautement soluble dans un acide dilué. Très peu soluble dans un alcali dilué. Insoluble dans les alcools, l'acétone, le chloroforme, le benzène et le npentane. 35 14) Poids moléculaire moyen: Au moins 160 000. Les exemples préférés de sel d'acide de PF-102 selon la présente invention sont le phosphate, le chlorhydrate, l'acétate, le lactate et le citrate. Les figures 3, 4, , 6 et 7 représentent respectivement les spectres d'ab5 sorption dans l'infrarouge de ces sels d'acide de PF-102. Un sel d'acide de PF-102 selon la présente invention présente une activité floculante élevée, qui le rend intéressant en tant qu'agent de floculation. En outre, on s'attend à ce que PF-102, qui est un polysaccharide 10 hautement purifié, soit une substance active, largement utilisable in vivo dans le domaine des produits pharmaceutiques et des produits chimiques pour l'agriculture. L'ageht de floculation PF-102 selon l'invention peut être produit par exemple par le champignon I-1 impar15 fait, isolé par la demanderesse de l'humus du sol de Wakayama. Ce champignon appartient au genre Paecilomyces, il a été nommé Paecilomyces I-1 et a été déposé au Fermentation Research Institute (FERM BP-1180, FERM-P N 3928). Paecilomyces I-1 présente les propriétés mycolo20 giques suivantes: a) Observation au microscope: Il n'y a pas de conidiphore, et elle montre la formation d'une longue chaîne de conidies à l'extrémité de chaque phialide qui se sépare individuellement, directement à par25 tir d'une ou de plusieurs hyphes végétatives. Le phialide, qui est semi-transparent et mesure 20 à 45 g de longueur, presente une base quelque peu large (1 à 1, 5 A) et une extrémité assez étroite (0,5 à 1g). Il a une forme linéaire, ou quelquefois une extrémité légèrement courbe. L'examen microscopique d'un conidium montre qu'il a une forme de type cigare ou en bâtonnet, et une dimension de 4à 6 x 1 à 1,4 A. Une chaîne comprend habituellement 25 à 35 conidies, ou parfois plus. Cette chaîne est très fragile et susceptible d'être brisée même sous un léger impact. b) Croissance dans différents milieux (culture sur plaque à 25 C) 1) Milieu agar de Czapek: Une colonie présente une excellente croissance et acquiert une dimension de l'ordre de 45 mm de diamètre au quatorzième jour. Une colonie a l'aspect de laine, ou de velours blanc, avec un centre gonflé en bandes et un bord circulaire. On n'observe ni goutte d'eau ni plissement. Le côté opposé de la colonie est blanc au stade initial de l'incubation, et vire ensuite au jaune en son centre au sta10 de ultérieur. Il n'y a pas de production de pigment dans l'agar. 2) Milieu agar-malt: Une colonie présente une excellente croissance et acquiert une dimension de l'ordre de 54 mm de diamètre au quatorzième jour. Le bord de la colonie n'est pas circulaire mais ondulé. Son centre est blanc et lé voisinage est jaune pâle. L'épaisseur du milieu de la colonie est quelque peu affaissé en son centre. On n'observe ni goutte d'eau ni plissement. Le côté opposé de la colonie est jaune 20 pâle dans l'ensemble. Il se produit une pigmentation jaune pâle dans le milieu d'agar. 3) Milieu agar-dextrose-patate: Une colonie présente une croissance remarquablement excellente et acquiert une dimension de l'ordre. de 60 mm de diamètre au quatorzième jour. Il se forme une colonie nettement épaisse, ayant l'aspect de laine ou de velours blanc. Son centre est quelque peu gonflé et est entouré d'une colonie jaune pâle Iégèrement plus mince, et en plus par une colonie blanche relativement épaisse. On 30 n'observe pas de plissement, mais à la surface plusieurs gouttes d'eau brun pâle. Le côté opposé de la colonie montre plusieurs plissements radiés et des colorations jaune pâle et jaune foncé concentriques. On observe la diffusion d'un pigment jaune pâle vers l'agar. 4) Milieu agar-YpSs (composition: 1,5% d'amidon; 0,4% d'extrait de levure; 0,1% de K2HPO4; 0,05% de MgSO4 et 2% d'agar) Une colonie présente une excellente croissance et acquiert une dimension de l'ordre de 50 mm de diamètre au quatorzième jour. La colonie est épaisse et dans l'ensemble bouffante comme de la laine. On n'observe ni plissement ni goutte d'eau. Le côté opposé de la colonie ne montre pas de caractéristique particulière. Il n'y a pas de production de pigment. 5) Milieu agar-MY20 (composition: 20% de glucose; 0,5% de polypeptone; 0, 3% d'extrait de levure; 0,3% d'extrait de malt et 2% d'agar): Une colonie présente une croissance quelque peu faible et acquiert une dimension de l'ordre de 30 mm au quatorzième jour. On n'observe que peu d'hyphes et un certain nombre de fins plissements. Le centre est brun pâle, et est entouré d'une partie jaune pâle. Le côté opposé de la colonie est jaune pâle avec de fins plissements. Il n'y a pas de production de pigment. Ces caractéristiques de la culture et de la morphologie suggèrent qu'il s'agit d'un champignon imparfait de monophialide. Plusieurs de ces caractéristiques sont semblables à celles de Paecilomyces bacillisporus, reportées par Agnès H.S. Oniosand et G.L. Barron (Monophia25 lidic Species of Paecilomyces, Mycological Papers N 107, Common Wealth Mycological Institute, Kew, England (1967)). C'est-à-dire que cette souche présente des conidies, ce qui est considéré comme le plus important dans la classification des champignons imparfaits (Deuteromycètes), très semblables au point de vue morphologique à ceux de P. bacillisporus. En outre, la morphologie du phialide du premier est étroitement similaire à celle du dernier. Toutefois, le premier présente des caractéristiques de culture dans différents milieux qui diffèrent quelque peu de celles du dernier. 35 C'est-à-dire qu'il est décrit dans l'article cité plus haut que P. bacillisporus croît relativement lentement, et que les hyphesde cette souche sont blanches au stade initial et deviennent rosâtres au stade ultérieur de l'incubation. Par contre, les hyphes de la souche essayée sont blanches au stade-initial et deviennent jaune pâle au stade ultérieur de l'incubation dans quelques milieux. L'article ci-dessus précise cependant que des souches de P. bacillisporus présentent des variations des caractéristiques de culture et de dimension de spore. Ainsi peut-on supposer que la souche essayée peut être P. bacillisporus ou une souche en dérivant. Cependant on l'a dénommée Paecilomyces I-1 puisqu'il n'existe pas de facteur concluant. Les propriétés physiologiques de cette souche sont indiquées ci-après bien que leur importance soit con15 sidérée être moindre pour la classification des fongi imparfaits. c) Propriétés physiologiques: 1) Utilisation des sources de carbone: On utilise comme milieu de base le milieu de Czapek, et on remplace le sucrose qu'il renferme par dif20 férentes sources carbonées. Les résultats indiquent que cette souche utilise fortement l'amidon soluble, le glycogène, le tréhalose, le raffinose, le cellobiose, le maltose, le sucrose, le glucose, le fructose, le galactose, le mannose, l'inositol, le sorbitol et le glycérol. Elle utilise nettement l'inuline, le lactose, l'arabinose, le ribose, le mannitol, l'acide lactique et l'acide succinique; elle utilise légèrement le xylose, le rhamnose et l'acide citrique, et jamais l'acide tartrique et l'acide oxalique. 2) Utilisation des sources d'azote: On se sert comme milieu-de base du milieu de Czapek dont on remplace la source d'azote par différentes autres sources azotées. Les résultats indiquent que cette souche utilise fortement l'azote sous forme d'ammoniac, de 35 composés amino et d'acide nitrique. 3) Température de croissance: La température optimale de croissance de cette souche est de 23 à 25 C. Elle croît encore à- 30 C, mais ne peut le faire à 35 C. 4) pH de croissance On fait incuber cette souche dans du milieu GYe comprenant 2% de glucose et 0,2% d'extrait de levure, dans un intervalle de pH de 2 à 10. On constate une excellente croissance à toutes les valeurs de pH. La souche productrice de l'agent de floculation PF-101 peut être mise à incuber dans un milieu liquide, d'une manière classiquement utilisée pour l'incubation des moisissures. Les spores ou les hyphes de la souche productrice de l'agent 15 de floculation PF-101 sont ensemencés dans un milieu liquide et sont mis à incuber dans des conditions aérobiques. On peut utiliser comme source de carbone, du glucose, du maltose, du sucrose, de l'amidon et des mélasses de "blockstrap". Parmi ces substances, le glucose est la préférée. En tant 20 que source d'azote conviennent des composés minéraux comme sulfate d'ammonium et nitrate de sodium, et des composés organiques comme peptone et extrait de levure. La température d'incubation peut varier dans l'intervalle, dans lequel la souche productrice fabrique l'agent de flo25 culation. Il est habituellement préférable d'opérer entre et 25 C. La durée de l'incubation varie en fonction des conditions opératoires. L'incubation peut généralement se dérouler pendant 4 à 5 jours, et est achevée de manière appropriée lorsque l'accumulation de l'agent de floculation 30 atteint le maximum. Puis on concentre sous vide le filtrat de la culture, ou par ultrafiltration, et on ajoute au concentré obtenu un solvant organique tel que l'éthanol.On obtient ainsi, sous forme de précipité, le PF-101 décrit dans la publication de brevet japonais N 12639/1981. Conformément à la présente invention, on ajoute au filtrat de la culture, ou à son concentré, différents sels. Lorsque cela n'entraîne pas de formation de précipité, on ajoute un alcali pour porter la valeur du pH entre 7 et 9, formant ainsi un précipité. Le précipité obtenu est isolé, rincé avec de l'eau et est dissous dans une solution aqueuse diluée d'un acide. Ensuite, on forme à nouveau un précipité par addition supplémentaire de sels, ou addition d'un alcali pour obtenir une valeur de pH allant de 7 à 9. Ainsi, peut-on obtenir le PF-102 sous une forme très pure. 10 On peut ajouter à la solution renfermant PF-102 un ou plusieurs des sels énumérés ci-après. Conviennent par exemple des chlorures comme chlorure de potassium, de sodium, de calcium ou d'ammonium; des nitrates comme nitrate de potassium ou de sodium; des acétates comme acétate de sodium; des sulfates comme sulfate dipotassique, sulfate d'ammonium, de calcium ou de cuivre; et des phosphates comme phosphate mono- ou dipotassique, ou phosphate mono- ou di-sodique. Le sel à ajouter peut l'être en toute quantité, aussi longtemps qu'il reste en solution. Il est préférable que cette quantité soit comprise entre 0,5 et 50%, de préférence entre 2 et 40%, rapportée à la solution renfermant PF-102. L'addition de quelques sels amènela valeur du pH. du mélange à dépasser 7. Dans ce cas, le PF-102 peut être isolé par précipitation sans ajustage de la valeur du pH. Lorsqu'il n'y a pas formation de précipité lors de l'addition du ou des sels, la valeur de pH du mélange peut être ajustée entre 7 et 9, de préférence aux alentours de 8,5, ce qui correspond au point isoélectrique du produit cherché. PF-102 ne peut --être obtenu sous forme de précipité à par30 tir du filtrat ou du concentré de la culture,par le seul réglage de la valeur du pH entre 7 et 9. Cependant, il peut être précipité par addition de sels, avec éventuellement réglage de la valeur du pH entre 7 et 9. De cette manière on isole PF-102 de ses impuretés telles que polysaccharides 35 neutres, qui sont produits simultanément dans la culture. Ce précipité peut être isolé par centrifugation ou filtration à travers un tissu filtrant. Il est tout à fait surprenant que l'on puisse réaliser une précipitation complète de PF-102 par simple ad5 dition de sels, puisqu'on n'observe aucune précipitation de cette substance même par traitement d'un milieu au point isoélectrique (pH 8,5), Comme le précipité renferme une grande quantité de sel, on le dessale par rinçage avec de 1'au ou un solvant et on le 10 dissout dans un acide. Conviennent notamment des acides organiques comme l'acide acétique et des acides minéraux comme l'acide chlorhydrique. L'acide peut être utilisé à une concentration de l'ordre de 0,01 à 3M. Après dissolution du précipité dans l'acide, la valeur du 15 pH de la solution obtenue est réglée entre 7 et 9, de préférence à 8,5 ce qui correspond au point isoélectrique du produit cherché, par addition d'un alcali comme l'hydroxyde de sodium, afin d'avoir un précipité. En vue de pousser la purification, on peut rincer le pré20 cipité avec, par exemple, de l'eau et régler le pH entre 7 et 9 pour obtenir un précipité. Cette opération de purification peut être répétée. A la fin de la purification, le précipité est à l'état pratiquement pur. Ainsi, obtient-on du PF-102. Les exemple et exemple d'essai ci-après constituent une illustration non limitative de la présente invention. EXEMPLE D'ESSAI On met à incuber des Paecilomyces I-1 (FERM BP-1180, FERM P-3928) dans un milieu comprenant 3% de glucose, 0,3% de polypeptone et 0,5% de CaCl2 (pH 7) afin d'obtenir 20 litres d'un filtrat de culture. On fait ensuite passer ce filtrat à travers une membrane UF d'un poids moléculaire de fractionnement de 160 000, avec chauffage à 55 à 60 C, 35 afin de le concentrer et d'éliminer les substances de bas poids moléculaire. Des portions de 100 ml de ce filtrat de culture concentré, limpide, sont déposées à l'aide d'une pipette dans 21 tubes, et on y ajoute des sels comme indiqué dans le tableau 1. Après réglage de la valeur du pH de chaque mélange, comme indiqué dans ce tableau, on dose le précipité formé. Les résultats figurent dans le tableau 1, le rendement étant déterminé conformément à l'équation suivante: Poids du précipité (base sèche) Rendement x 100 Poids total de galactosamine dans le milieu, déterminé par le procédé indole/ acide chlorhydrique TABLEAU 1 de 8,5 dans tous les essais. Le pH est N Sel ajouté 1 2 3 4 6 7 8 9 1 1 12 13 30 14 16 17 18 35 19 néant K2HPO4 KH2PO4 Na2SO4 MgSO4 (NH4)2SO4 CuSO4 K2SO4 CaSO4 (NH2)2H2SO4 NH4Cl NaCl KC1 CaC12 LiCl KNO3 NaNO3 Ca(NO3)2 CH3COONa Quantité Rendement (%) - en PF-102 (%) 0 O 98 98 98 58 - 93 96 97 47 88 88 98 81 92 -93 52 93 46 99 TABLEAU 1 (suite) N Sel ajouté Quantité Rendement (%) en PF-102 ___ _ _(%) (CH2COO)2.2Na 20 86 21 (CH2COONa)2.C(OH)COONa 20 77 22 HCOONa 30 95 23 CH3CH(OH)COONa 30 93 24 úCH2-CH(OH)-COONa)2 20 87 EXEMPLE 1 On dissout dans 17 litres d'eau du robinet, 600 g de glucose, 60 g de polypeptone et 125 g de CaCl2.2H20 et on règle la valeur de pH de la solution à 7 avec une solution concentrée de NaOH. Puis on introduit cette solution dans un 15 fermenteur de 30 litres de volume. Le milieu liquide, ainsi préparé, est stérilisé à température élevée (121 C) sous pression élevée, par injection de vapeur pendant 20 minutes. Après refroidissement, on ensemence ce milieu (volume final 20 1) de façon stérile avec 20 des Paecilomyces I-1 (FERM BP-1180, FERM P-3928) qui ont été mis à incuber sous agitationdans 150 ml d'un milieu de même composition, c'est-à-dire renfermant3% de glucose, 0,3% de polypeptone et 0,5% de CaCl2 (pH 7) dans un flacon d'Erlenmeyer de 500 ml de volume, à 26 C pendant 4 jours, dans une proportion de l'ordre de 10%. Après cet ensemencement, la souche est mise à incuber à 27 C sous aération à une vitesse de 0,5 WVVM, et avec rotation à 200 tours/ minute pendant 5 jours. Lorsque l'incubation est achevée, le milieu est filtré sur 30 un tissu filtrant et donne 17 litres d'un filtrat de culture. Ce filtrat, chauffé à 50 C-60 C, est passé par une membrane d'ultrafiltration de poids moléculaire de fractionnement 160 000 (Membrane UF de type de module tubulaire F, fabriqué par Mitsubishi Engineering Co. LTD), afin d'éliminer les fractions à bas poids moléculaire. Ainsi, il se trouve concentré à un volume voisin de 3 litres. On centrifuge ensuite à environ 14 000 x G, pour éliminer les cellules résiduelles et les protéines dénaturées par la chaleur. Après centrifugation, on ajoute aux 3 litres de produit surnageant limpide, 750 g de sel de cuisine, c'est-à-dire environ une concentration de 25%, et on agite le mélange. Après dissolution du sel, la valeur du pH de ce mélange est réglée entre 7 et 8, 5 au moyen de NaOH concentré. On 10 laisse reposer une nuit durant pour précipiter suffisamment le produit déssalé, puis on recueille le précipité sur une toile de Saran, faited'un copolymère de chlorure de vinylidène et de chlorure de vinyle. On applique une grande quantité d'eau légèrement alcalinisée (pH égal ou supérieur à 7) au produit dessalé, afin d'éliminer par rinçage l'excès de sel de cuisine et des impuretés comme des sucres neutres, présents dans le milieu. Après rinçage à l'eau, le produit dessalé est dissous à raison d'environ 3 fois son volume, dans une solution 0,1M d'acide chlorhy20 drique. Puis on ajoute à cette solution NaOH concentré et on règle la valeur du pH du mélange à 8,5, correspondant au point isoélectrique de la polygalactosamine. Après repos une nuit durant, afin que le produit précipite suffisamment, on recueille le précipité sur une toiletde Saran sem25 blable à celle qui est décrite plus haut, et on rince avec une grande quantité d'eau du robinet. Le précipité lavé à l'eau est dissous à nouveau dans de l'acide chlorhydrique 0,1 M, est précipité au point isoélectrique et est rincé à maintes reprises avec de l'eau en vue de sa purification. Le précipité ainsi purifié est lyophilisé et donne 7 g d'une poudre pure de PF-102 renfermant comme constituant principal de la polygalactosamine, c'est-à-dire ayant une teneur en polygalactosamine de 99%. Ultérieurement, une partie du produit purifié peut être dissoute dans de l'acide chlorhydrique 0,1 M et être frac- tionnée à l'aide d'une membrane ultrafiltrante de poids moléculaire de fractionnement de 300 000 (type XM 300, fabriqué par Amicon Corporation), afin de séparer une fraction de poids moléculaire moyen de 160 000 à 300 000 et une fraction de poids moléculaire. égal ou supérieur à 300 000, selon l'application. Revendications 1. Nouveau produit dénommé PF-102, ainsi que ses sels, caractérisé par les propriétés physico-chimiques suivantes: (a) à très faible dose ils font floculer des suspensions de diverses matières, (b) activité floculante à des pH de 2 à 9; (c) à des températures de O à 100 C; (d) activité inhibée par du CO2 et du Fe2(S04)3, non inhibée par d'autres' ions, ni par NaCl ou K2SO4 10 jusqu'à la concentration 1M; (e) analyse élémentaire N 8,64%; C 42,8%; H 6,8%; formule (C6HilNO4.xH2O)n (f) spectre d'absorption UV selon figure 1, et dans IR fig.2; (g) réactions colorées négatives: xanthoprotéine, Ehrlich, Lerozent et Molish; + positive: ninhydrine; sulfate de phénol; (h) l'hydrolyse donne seulement de la galactosamine, sans saccharides neutres ni aminoacides; liaison 20 principale K1-4; (i) à l'électrophorèse,point isoélectrique trouvé 8,5; (j) coloration jaune pâle; (k) suspension aqueuse à 0,5% poids/vol. pH 7,5; (1) solubilité très faible dans l'eau froide ou chaude 25 et dans des alcalis dilués; fortement soluble dans un acide dilué; insoluble dans les alcools, l'acétone, le chloroforme, le benzène et le n- pentane; (m) masse moléculaire moyenne au moins 160 000. 2. Sel de PF-102, selon la revendication 1, ca30 ractérisé en ce qu'il est à l'état de chlorhydrate, sulfate, phosphate, nitrate, lactate, citrate, succinate, malate, formate ou acétate. 3. Procédé d'obtention de PF-102 selon la revendication 1 ou 2, qui consiste à cultiver un c-hampignon I-1 imparfait, producteur de PF-101, caractérisé en ce qu'on ajoute au filtrat du milieu de culture obtenu, ou à son concentré, des sels, afin de précipiter PF-102. 4. Procédé d'obtention de PF-102, selon la reven5 dication 3, caractérisé en ce que, afin de favoriser la précipitation, on ajoute un alcali de manière à porter la valeur du pH entre 7 et 9, de préférence à 8,5. 5. Procédé selon la revendication 3 ou 4, caractérisé en ce que le champignon imparfait est Paecilomyces 10 I-1 (FERM-BP-1180).