Brevet FR2609991A1 — publié le 19880729

La présente invention a pour objet de nou- veaux dérivés de peptides, leur préparation et leur utilisation comme médicaments. L'invention concerne en particulier un dérivé glucosylé d'un peptide biologiquement actif, lequel dérivé possède une durée d'action prolongée par rapport au peptide non modifié et contient au moins sur un des restes d'amino-acides, un reste glucidique fixé au groupe amino du reste d'aminoacide par une liaison autre qu'une liaison N-glucosidique directe et, lorsque le dérivé est un produit de condensation d'un glucide contenant un groupe carboxy avec un peptide ayant moins de 8 restes d'amino-acides, par une liaison autre qu'une liaison amide. Ces composés seront désignés par la suite les composés de l'invention. Par peptide non modifié, on entend le peptide de structure correspondante ne possédant aucun reste glucidicue. La Demanderesse a trou.vé en outre que les composés de l'invention se signalent par des propriétés pharmacologiques particulièrement intéressantes et surprenantes, spécialement par une durée d'action plus longue, par exemple comme décrit ci-après. On a trouvé que l'incorporation d'un ou plusieurs restes glucidiques même lorsqu'ils sont liés de manière différente qu'une glucosydation normale par exemple de Asn ou Ser, entraîne de telles propriétés. Ces restes glucidiques sont introduits de préférence sur des groupes amino d' amino-acides éloignés du site actif du peptide. 2 2609991 Le terme peptide utilisé dans la présente demande comprendles peptides, par exemple les di- et tri-peptides, les oligo-peptides, les polypeptides et les protéines. Dé préférence, le peptide contient plus de 7 restes d'amino-acides. Avantageusement, le peptide contient de 8 à 32 restes d'amino-acides. Par reste d'amino-acide, on entend également un reste d'amino-alcool correspondant aux restes d'amino-acides. Le terme peptide biologiquement actif utilisé dans la présente demande couvre en particulier les composés ayant une activité pharmacologique ou thérapeutique, par exemple les composés ayant une activi.té hormonale, enzymatique ou immunomodulatrice, ou qui stimulent ou inhibent une telle activité. Ces peptides biologiquement actifs englobent les peptides naturels isolés de source naturelle ou par fermentation de cellules, par exemple par génie génitique, ou obtenus par synthèse, et également leurs dérivés ou analogues. Par dérivés et analogues de ces peptides, on entend en particulier les peptides naturels dans lesquels un ou plusieurs restes d'amino-acides ont été supprimés et/ou substitués par un ou plusieurs autres restes d'aminoacides et/ou dans lesquels un ou plusieurs groupes fonctionnels ont été remplacés par un ou plu- sieurs autres groupes fonctionnels et/ou dans lesquels un ou plusieurs groupes ont été remplacés par un ou plusieurs autres groupes isostères. En général, le terme couvre tous les dérivés modifiés d'un peptide biologiquement actif qui présentent un effet qualita- tivement similaire à celui du peptide non modifié. Le glucide utilisé peut être par exemple n'importe quel mono-,di- ou oligo-saccharide connu, spécialement un mono-, di- ou triose ou l'un de ses dérivés, par exemple l'un de ses dérivés aminé et/ou carboxylé et/ou réduit et/ou estérifié. Le glucide peut être couplé par exemple à un groupe amino N-terminal et/ou à au moins un groupe amino du peptide, présent dans la chalne latérale de ce peptide. Le glucide peut être couplé par l'un de ses groupes fonctionnels au peptide soit directement, soit indirectement par l'intermédiaire d'un pont, par exemple un groupe alkylenecarbonyle. Ce couplage peut être réalisé selon les méthodes connues, spécialement comme décrit ci-après. Les composés préférés de l'invention sont ceux dans lesquels le reste glucidique est fixe à un groupe amino du peptide par une liaison autre qu'une liaison N-glucosidique directe ou une liaison amide. Un groupe de composés de l'invention peut être préparé par réarrangement d'Amadori ou de Heyns. L'invention comprend également les compositions pharmaceutiques administrables par voie orale contenant un composé de l'invention, spécialement ceux ayant au moins 8 restes d'amino-acides. La présente invention concerne en particulier les dérivés glucosylés suivants de peptides biologi- quement actifs a) de formule I i" / CHOR ( I) dans laquelle ono -.-o \. n k.. /'9' 32- représente le reste désoxy d'un cétose, le groupe CH2 de ce reste étant lié au groupe NH d'un peptide biologiquement actif, et P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, dans laquelle le groupe NH2 représente le groupe amino N-terminal du peptide P ou un groupe amino situé dans une chaîne latérale du peptide P, b) de formule II t (Ii "-- dans laquelle G2 représente le reste désoxy d'un aldose, la liaison libre de ce reste étant lié au groupe NH d'un peptide biologiquement actif,.et P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, dans laquelle le groupe NH2 représente le groupe amino N-terminal du peptide P ou un groupe amino situé dans une chaîne latérale du pep- tide P, c) de formule III G3-CO-NRyP (III) dans laquelle G3CO représente le reste d'un acide uronique ou d'un acide polyhydroxymono- ou dicarboxylique, Ry représente l'hydrogène ou un groupe alkyle en Ci-C3 ou alcanoyle en C1-C4, et P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, contenant au moins 8 restes d'amino-acides, NR étant situé sur le groupe amino N-terminal du peptide P y ou dans un chaîne latérale du peptide P, d) de formule IVa, IVb, IVc ou IVd -à Ryo y ", Y --'y G.4 H-q-N.p(I(V,) G4Q ^ N _p (IVa) 04 F.o-Q-N - (b I--O ) OH R a G, li - p t. t.y (w I d, 2-,,Q-N-P 4- i (Vd dans lesquelles P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, les restes - 0 _ -O OH.--O _. XcH2. G4... représentent des restes glucidiques, R représente l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3 ou alcanoyle en C1-C4 et Q, Q', Q" et Q"' représentent des groupes couplant le reste du peptide avec le reste du glucide, le groupe NH lié à P représentant le groupe amino N-ter- minal du peptide P ou un groupe aminQ situé dans la chaîne latérale du peptide P, ou e) de formule Va ou Vb HOH2C-(CHOH)c-CY-CH2-NH-P (Va) HOH2C(CHOH)c-CH-CH20H (Vb) NHP dans lesquelles Y représente H ou H, OH c signifie 2 ou 3 ou 4, et P représente un reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, le groupe NH lié à P représentant le groupe amino N-terminal du peptide P ou un groupe amino situé dans la chaîne latérale du peptide P, et-n'importe lequel des groupes hydroxy libresdans le reste du polyol du composé de formule Va ou Vb est éventuellement lié par une liaison glucosidique à un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur ou à un sucre aminé, ainsi que les sels d'addition d'acides et les complexes de ces dérivés, avec les conditions que a) dans les composés de formule I ci-dessus, P soit autre qu'un reste d'un peptide de la gastrine ayant un groupe terminal se terminant par - Asp-Phe-NH2, b) lorsque dans les composés de formule IVb Q' signifie un cycle phényle contenant un radical divalent 26099 1I ou lorsque dans les composés de formule IVd Q"' signifie le reste d'un acide aliphatique dicarboxy- lique, P-NH2 soit autre qu'une insuline naturelle, c) lorsque dans les composés de formule III G3-CO représente le reste d'un acide muramique éventuel- lement N-acylé, le second reste d'amino acideà l'extrémité Nterminaledu peptide P-NHR soit autre y que le reste d'un acide aminodicarboxylique Tous les restes elucidiques mentionnés ci-dessus peuvent être des mono-, di- ou oligosaccharides. Ces glucides peuvent contenir des heptoses, des hexoses et/ou des pentoses qui peuvent exister sous forme pyranniques ou furannique. Dans toutes les formules I à V représentées ci-dessus, seul un reste de glucide est représenté par reste de peptide. Cependant, l'invention couvre également des dérivés glucosylés de peptides ayant plus qu'un groupe amino libre sur le reste peptidique, ces dérivés contenant 2 ou 3 restes glucidiques par reste peptidique L'invention concerne en outre tous les peptides biologiquement actifs qui comportent plus d'un reste glucidique lié comme indiqué précédemment. Les peptides glucosylés contiennent de préférence 1 à 3 restes de monosaccharide, qui peuvent être liés ensemble pour former un disaccharide ou un tri-saccharide. Dans tous les composés mentionnés précédemment, le symbole v indique que la liaison peut être en position a ou 6. Dans la formule I, le reste ' c représente de préférence a) un reste de formule VIa G g G h (VIa) Gt cR2G G G Gd Gb dans laquelle l'un des symboles Ga et Gb signifie l'hydrogène et l'autre OH, l'un des symboles Gc et Gd signifie l'hydrogène et l'autre OH ou un reste glucosyloxy dans lequel le reste glucosyle peut dériver d'un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur, l'un des symboles Ge et Gf représente l'hydrogène et l'autre OH, l'un des symboles Gg et Gh représente l'hydrogène et l'autre OH ou CH OH, par exemple dans laquelle les symboles Ga à Gh sont choisis de telle manière que le reste de formule VIa corresponde un reste pouvant être obtenu par réarrangement d'Amadori à partir d'un mono-, di- ou oligosaccharide naturel ou accessible par synthèse. Comme exemples de restes glucidiques de formule VIa, on peut citer les restes désoxyfructosyle, désoxytagatosyle, désoxysorbosyle, a-glucosyl-(1-4)- désoxyfructosyle, a-glucosyl(1-4)-a-glucosyl(1-4)- désoxyfructosyle b) Un reste de formule VIb (VIb) a 32 Gf G v G Gd Gb dans laquelle l'un des symboles Ga et Gb signifie l'hydrogène et l'autre OH, l'un des symboles Gc et Gd signifie l'hydrogène et l'autre OH ou glucosyloxy dans lequel le reste glucosyle peut dériver d'un mono-, di- ou oligo- saccharide réducteur, l'un des symboles Ge et Gf signifie l'hydrogène et l'autre signifie l'hydrogène, COOH, CH20H, CH2-O-P(O)-(OH)2 ou CH20glucosyle, dans lequel le reste glucosyle peut dériver d'un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur, par exemple dans laquelle les symboles Ga à Gf sont choisis de telle manière que le reste de formule VIb corresponde un reste qui peut être obtenu par réarran- gement d'Amadori à partir d'un mono-, di- ou oligo- saccharide naturel ou accessible par synthèse. Les restes de formule VIb peuvent être obtenus par exemple par réarrangement d'Amadori à partir de saccharides tels que le gentiobiose, le mélibiose, le ribose, le xylose ou à partir des acides uroniques tels quel'acide glucuronique ou galacturonique. Dans la formule II, le reste de formule Gw signifie de préférence a) un reste de formule VIIa G Gh G (VIla) Gf Gb dans laquelle l'un des symboles Ga et Gb signifie l'hydrogène et l'autre une liaison directe, l'un des symboles Gc et Gd signifie l'hydrogène et l'autre OH, l'un des symboles Ge et Gf signifie l'hydrogène et l'autre OH ou glucosyloxy dans lequel le reste glucosyle peut dériver d'un mono-, di- ou oligo- saccharide réducteur, l'un des symboles Gg et Gh signifie l'hydrogène et l'autre CH20H ou CH2-0-glucosyle, dans lequel le reste glucosyle peut dériver d'un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur, par exemple dans laquelle les symboles Ga à Gh sont choisis de telle manière que-le reste de formule VIIa correspondeà un reste qui peut être obtenu par réarran- I1 gement de Heyns à partir d'un mono-, di- ou oligo- cétose naturel ou accessible par synthèse, b) un reste de formule VIIb G 1e /o Gv (VIIb) Gd Gb dans laquelle l'un des symboles Ga et Gb signifie l'hydrogène et l'autre une liaison directe, l'un des symboles Gc et Gd signifie l'hydrogène et l'autre OH, l'un des symboles G et G signifie l'hydrogène et e f l'autre CH20H ou CH2-O-glucosyle, dans lequel le reste glucosyle peut dériver d'un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur, par exemple dans laquelle les symboles Ga à Gf a sont choisis de telle manière que le reste de formule VIIb correspondeà un reste qui peut être obtenu par réarrangement de Heyns à partir d'un mono-, di- ou oligocétose naturel ou accessible par synthèse. Les restes de formule VIIa ou VIIb peuvent être obtenus par exemple par réarrangement de Heyns d'un glucide tel que le D-fructose, le lactulose, le L-sorbose, le D-tagatose ou le D-ribulose. Dans la formule III, l'acide polyhydroxy- mono- ou di-carboxylique, contient par exemple au moins 3 groupes hydroxy et peut également contenir d'autres substituants, par exemple des groupes amino ou acétylamino. Comme exemples de tels acides polyhdroxy- carboxyliques, on peut citer les acides oniques dérivés des glucides tels que l'acide gluconique, ou les acides ariques tels que l'acide glucarique, ainsi que l'acide quinique, l'acide acétylmuramique, l'acide acétylneuraminique et l'acide D-glucosaminique. Comme exemples d'acides uroniques on peut citer l'acide glucuronique et l'acide galacturonique. Dans les composés de formule IV, G4, G, G" et G' ont les significations données précédemment pour G1 ou G2. Le symbole Q ou Q' relie un groupe NH du peptide avec un groupe NH2 ou OH du reste glucidique et signifie par exemple le reste d'un acide dicarboxy- lique ou de préférence un reste -CbH2-CO dans lequel b signifie de O à 6. Le reste peut être ramifié. Q' signifie par exemple un reste )D-t 'CC2-CO, ou en particulier un reste -CbH2b-CO- (b = par exemple de 1 à 6). Q signifie par exemple un reste -CH2-CO-. Q signifie spécialement -CO- ou -CS-, -NH-Q"- et -NH-Q"'- signifient un reste qui relie le groupe NH du peptide avec le reste glucidique, spécialement les restes d'acides w-aminocarboxyliques. Ils peuvent signifier par exemple un reste -NH-CbH2b-CO -. Les composés de formule V préférés sont ceux de formule Va, spécialement ceux dans lesquels n signifie 3. Tous les restes P mentionnés précédemment sont des restes de peptides biologiquement actifs. De tels peptides comprennent tous les peptides naturels ou synthétiques ainsi que, comme indiqué au début de la présente demande, les dérivés et analogues de ces peptides ayant une activité hormonale,enzyma- tique ou immunomodulatrice. Cette activité peut être aussi bien stimulante qu'inhibitrice. A titre d'exemples, on peut citer les peptides suivants: la somatostatine, la calcitonine, l'oxytocine, la vasopressine, l'insuline, la LH (hormone lutéinisante), la LHRH (gonadoréline) le GRF (Facteur déclenchant la sécrétion de l'hormone somatotrope), la gastrine, la substance P. la cathepsine, les encépha- lines, ainsi que tous leurs dérivés et analogues ayant une activité similaire à celle du peptide ou ayant une activité antagoniste. Les composés de l'invention contiennent de préférence au moins 8 restes d'amino-acides, par exemple de 8 à 32, spécialement de 8 à 20,en particulier de E à 10 restes d'amino-acides. Les peptides préférés sont ceux correspondant aux formules I et II. Pour des raisons de simplicité, dans les formules précédentes et suivantes le reste glucidique est représenté sous forme pyrannique. Il va de soi que l'invention comprend également les formes furanniques et les formes linéaires de ces glucides, pour autant qu'elles existent pour les glucides concernés. L'invention concerne également un procédé de préparation des composés de l'invention. Ces composés peuvent être préparés selon les méthodes généralement connues pour la synthèse de composés de ce type. Les composés de l'invention peuvent être préparés par exemple comme suit: a) on élimine au moins un groupe protecteur présent dans un peptide glucosylé de l'invention protége, ou b) on couple par une liaison amide deux unités pepti- diques, dont chacune contient au moins un amino- acide ou un amino alcool sous forme protégée ou non protegee et dont une unité peptidique contient le reste glucidique, le couplage étant effectué de telle manière qu'on obtient la séquence d'amino- acidesdésirée, et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procéde, ou c) on introduit au moins un reste glucidique éventuellement protégé dans un peptide protégé ou non protegé et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou d) on transforme un groupe fonctionnel d'un peptide glucosylé de l'invention protége ou non protégé, en un autre groupe fonctionnel ou bien on élimine ce groupe fonctionnel, et éventuellement Dû on met en oeuvre l'étape a) du procéde, ou e) on oxyde un peptide glucosylé de l'invention dans lequel le groupe mercapto des restes Cys sont sous forme libre, de manière à produire un peptide dans lequel les deux restes Cys sont reliés par un pont -S-S. Comme indiqué au début de cette description, le terme "glucide" tel qu'utilisé dans la présente demande, couvre également les dérivés de glucides tels que les oses aminés, les oses oxydés et réduits ou les oses estérifiés. Les réactions ci-dessus peuvent être effectuées de manière analogue au procédé décrit dans les exemples suivants, en particulier les procédes a) et b) peuvent être effectués selon la synthèse de l'invention décrite ci-après. Si on le désire, les groupes pro- tecteurs qui sont appropriés pour être utilisés dans les peptides ou les glucides peuvent être utilisés dans ces réactions pour protéger des groupes fonctionnels qui ne participent pas à la réaction. Le terme groupe protecteur comprend une résine polymère ayant des groupes fonctionnels. Les composés de formule I peuvent être préparés en faisant réagir en milieu légèrement acide un peptide protégé ayant un groupe amino libre avec un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur ou un acide uronique correspondant ou un ester de cet acide (réarrangement de Amadori), et en éliminant ensuite les groupes protecteurs. Cette réaction peut être effectuée de manière classique pour un réarrangement d'Amadori. L'acide ajouté peut être par -exemple l'acide acetique glacial. Lorsqu'on fait réagir avec un acide uronique, il n'est pas nécessaire d'ajouter un autre acide. On utilise de préférence un excès de glucide, par exemple 10 équivalents pour un équivalent de peptide. La réaction peut être effectuée dans un solvant polaire tel que le méthanol, de préférence à des températures d'environ 60 à 70 C. Les composés de formule II peuvent être préparés en faisant réagir en milieu faiblement acide un peptide protégé ayant un groupe amino libre avec un cetose (réarrangement de Heyns). La réaction peut être effectuée sous les mêmes conditions qu'un réarran- gement d'Amadori, comme indiqué ci-dessus. Les composés de formule III peuvent être préparés en faisant réagir un peptide protegé ayant un groupe amino libre avec un acide de formule G3COOH ou l'un de ses dérivés réactifs, et en éliminant ensuite tous les groups protecteurs. Cette réaction peut être une amidation classique qui peut être effectuée de manière connue en soi. Comme dérivés réactifs de l'acide carboxylique, on peut utiliser en particulier l'halogénure d'acide. Les amides peuvent également être préparés par exemple en faisant réagir l'acide libre en présence d'hydroxybenzotriazole et de dicyclohexylcarbodiimide. Les composés de formule IVa, IVb, IVc et IVd peuvent être préparés a) en faisant réagir d'abord le peptide avec le composé formant pont puis le produit obtenu avec le glucide, ou b) en faisant réagir d'abord le glucide avec le composé formant pont puis le composé formant pont glucosylé ainsi obtenu avec le peptide. Ces réactions peuvent être effectuées selon les méthodes connues. Les composés formés sont princi- palement des amides,des esters ou des acétals. Les composés de l'invention peuvent être purifiés selon les méthodes connues. Les composés de formule IVa dans laquelle Q signifie -CO- ou -CS- peuvent être préparés par exemple en couplant 1 'isocyanate ou l'iso- thiocyanate de glucosyle correspondant de formule G4 N=C= L dans laquelle L signifie 0 ou S et -G4 a la signification donnée précédemment, et dans laquelle les groupes hydroxy libres présents dans G4 sont sous forme protégée, par exemple par acylation, avec un peptide PNH2 sous forme protégée, et on élimine ensuite les groupes protecteurs. La réaction peut être effectuée selon les méthodes connues pour la préparation des dérivés de l'urée. Les composés de formule IVc et IVd peuvent être obtenus par exemple par réarrangement d'Amadori ou de Heyns, par exemple comme décrit précédemment pour la préparation des composés de formule I et II. Les composés de formule Va ou Vb peuvent être préparés par exemple a') par amination réductrice d'un aldose, d'un désoxy- aldose ou d'un cétose avec le peptide P-NH2, ou b') par réduction du groupe hémi-acétal dans un composé de formule I ou II, chaque produit participant à la réaction pouvant, si on le désire, être protégé provisoirement. L'amination réductrice et la réduction peuvent être effectuées selon les méthodes connues. L'amination réductrice peut être effectuée par exemple avec NaBH3CN, de préférence à pH 7. La réduction du groupe hémi-acétal peut être effectuée avec du borohydrure, par exemple avec NaBH4, de préférence à un pH d!environ 6. Les produits de départ utilisés dans les réactions précédentes sont connus ou peuvent être préparés selon les méthodes connues. Une classe préférée de peptides glucosylés comprend les dérivés glucosylés des somatostatines, contenant par exemple de 4 à 9 amino- acides. Le terme somatostatine comprend les analogues de la somatostatine et leurs dérivés. Les dérivés glucosylés particulièrement préférés sont les dérivés glucosylés de peptides de formule VIII ZA' CE -S-Y y -S-cE A, 2.1 2 12 ( v I I) A - NE - CE - C -N - CE - CO - B - C - D - - NE - CE - F 1 2 3 4 5 6 7 dans laquelle A représente l'hydrogène, ou un groupe alkyle en C -C3 ou alcanoyle en C -C4 )N-CH(Z1)-CO signifie 1) un reste (L)- ou (D)phénylalanine éventuellement substitué par des halogènes ou par des groupes NO2, NH2, OH,alkyle en Ci-C et/ou alcoxy en 1 3' C1 -C3, ou 2) le reste d'un a-amino-acide lipophile naturel ou d'un (D)amino-acide correspondant autre que celui indiqué sous 1), Z dans le reste 'N-CH(Z1)-CO- représente le reste d'un amino-acide défini sous 1) et 2), A' signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, Y1 et Y2 signifient,indépendamment l'un de l'autre, 1) l'hydrogène 2) a -Co-C(CH2)m-H *19 2609991 o m signifie un nombre entier de 1 à 4 inclus, Ra signifie CH3 ou C2H5 et Rb signifie H, CH3 ou C2H5, 3) (cC2) o n signifie un nombre entier del à 5 inclus, 4) -CO-NHRc o R signifie un groupe alkyle linéaire ou ramifié c en C -C 1 6' ) -CO-NH-CH-COOR e Rd o Rd signifie le reste d'un a-amino-acide naturel (y compris l'hydrogène) situé sur l'atome de carbone a et Re signifie un groupe alkyle en C1-C5, ou 6) (C}(2) r A'Z dans laquelle Ra et Rb, indépendamment l'un de l'autre, signifient l'hydrogène, CH3 ou C2H5, R8 et R9, indépendamment l'un de l'autre, signifient l'hydrogène, F, Cl, Br, alkyle en C1-C3 ou alcoxy en C1-C3, p signifie O ou 1, q signifie O ou 1, et r signifie O, 1 ou 2, ou bien Y1 et Y2 forment ensemble une liaison, B signifie Phe ou Phe substitué dans le cycle phényle par F. C1, Br, NO2, NH2, OH, alkyle en C1-C3 ou alcoxy en C1-C3, C signifie L- ou D-Trp éventuellement substitué dans le cycle phényle par F. C1, Br, NO2, NH2, OH, alkyle en C1-C3 ou alcoxy en C1-C3, D signifie Lys, dans lequel le groupe a-amino peut être substitué Par un groupe méthyle, E signifieThr, Ser, Val, F signifie COOR1, CH20R2, CO-NR3R4 ou _-c- R1 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, R2 sign'ifie l'hydrogène ou le reste d'un ester physio- logiquement acceptable et physiologiquement hydro- lysable, R3 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en Ci-C3, phényle, ou phénylalkye en C7-C10, R3 signifiant uniquement l'hydrogène ou un groupe méthyle lorsque R4 signifie -CH(R5)-X1, R4 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, ou R5 -CH-X% ( IX) R5 représente le reste d'un amino-acide naturel (y com- pris l'hydrogène) situé sur l'atome de carbone a, un groupe OH-CH2-CH2 ou OH(-CH2)3, le groupe de formule IX pouvant avoir la configuration L ou D, X1 signifie COOR1, CH2OR2 ou. R7 R6 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, R7 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, ou phénylalkyle en C7-C1o, les restes B, D et E pouvant exister sous forme L et les restes en position 2 et 7 ainsi que les restes Y14)et Y24)pouvant exister indépendamment sous forme D ou L, ainsi que les sels et les complexes de ces composés. De tels composés sont décrits dans le brevet américain n 4 395 403 dont le contenu est incorporé à la présente demande à titre de référence. Dans les dérivés polypeptidiques de formule VIII ci-dessus, les définitions suivantes, prises isolément ou en combinaison, sont préférées: Lorsque YN-CH(Z1)-CO- a la définition donnée sous 1), ce reste est de préférence un reste de (L)- ou (D)-phénylalanine ou un reste de (L)- ou (D)- tyrosine (o Z signifie benzyle ou p-OH-benzyle), spécialement un reste (D)-phénylalanine. Lorsque le reste ?N-CH(Z1)-CO- a la défini- tion donnée sous 2), Z1 signifie de préférence un groupe alkyle contenant 3 atomes de carbone, de préférence 4 atomes de carbone, ou plus, par exemple jusqu'à 7 atomes de carbone. Le reste >N-CH(Z1)-CO- est plus préférablement un reste tel que défini sous 1). Y1 et Y2 ont de préférence les significations données ci-dessus sous 1, 2 ou 4, et tout particulière- ment forment ensemble une liaison. B signifie de préférence Phe ou Tyr. C signifie de préférence -(D)-Trp. D signifie de préférence Lys E signifie de préférence Thr. F signifie de préférence cO-w 13,, it spécialement sCB (15)-XL dans lequel le radical -CH(R5)-X1 a de préférence la configuration L. R3 signifie de préférence l'hydrogène, R5 signifie de préférence CH20H, CH- OH, i-butyl, CH2CH20H ou (CH2) 3-OH, CH3 spécialement CEH2OH ou CEH-OH, CH3 en particulier CH-OH CH3 X1 signifie de préférence -CO-N 6 R7 ou CH20R2, spécialement CH20R2, R2 signifie de préférence l'hydrogène. R2, comme reste d'un ester, signifie de préférence HCO, alkylcarbonyle en C2-C12, phénylalkyl- carbonyle en C8-C12 ou benzoyle. Les restes en position 2 et 7 ont de préfé- rence la configuration L. Les dérivés glucosylés de somatostatine particulièrement préférés sont ceux qui ont un reste glucidique sur le groupe amino N-terminal, par exemple les composés de formule (i.IIIA) 0E À -H3-HN-3-0-O8-03-HO-N-03-HO-N-ZH --3- (HOHD) -ZH30H i 1 I1 ZH-S-Z-A LA-$-ZHHDV lZ H ( aIIIA) SD no 08 a.LJ46.LS b eaLenbeL suep - D - N --- D e - OD -D -N -OD -ED -N-b-b 8-S-RD *Y Tz H - (PiIIA) CZ i BD - EN - - a - D - a - D 8 - N - O - BD - N-;b-o 5, '_$_ZA1 -A-S- BD,Y LZ Y' - (D IIIA) ú SL ED - RN- a - D - E - OD - D -N -OD -D-N-OD- D -Z D'S-ZA(qI xA). (IIA)z y - ED- - EN 3 - - D - - OD - BD - N -OD- RD-EN IS-A A-SZED.Y Z - -1 /.OL O..- - BD - RN - a -D - -OD - ED--N-z -- -A-S- BD O-" .6609. Les composés particulièrement préférés sont * les composés de formule VIIIa, VIIIb, VIIIe et VIIIf. Un groupe de composés comprend les composés de formule VIIIpa 1A' CH2SLY Y -S-CE2 AP - A - CS - CO - N - CH - CO - 3 - C - D - NH - CH - V APCHCONCHCOBCDKNHCMF (VIIIap) i. 2 3 4 56 7 dans laquelle AP signifie le reste désoxy d'un cétose ou d'un acide uronique correspondant, le groupe CH2 de ce reste étant lié au groupe NH, ledit groupe désoxy pouvant être obtenu par réaction d'Amadori d'un aldose ou d'un acide uronique correspondant avec le groupe amino libre de la somatostatine et Z1, A', Y1, B, C, D, E, Y2 ont les significations données précédemment pour la formule VIII. Un autre groupe de composés comprend les composés de formule VIIIpb A z A' C 2-s-YL Y2-S-C2 G c -CO - - tCOC - a - c - OC - C- N - - -- - F 1 2 3 4 5 4 7 (VIIIP) dans laquelle G représente le reste acyle d'un acide uronique, d'un acide polyhydroxycyclohexanecarboxylique, d'un acide N-acétylmuraminique ou d'un acide N-acétyl-neurami- nique, A représente l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3 ou alcanoyle en Cl-C4, et Z, A', Y1, B, C, D, E, Y2 et F ont les significations données précédemment. Avantageusement, G signifie le reste d'un acide glucuronique, galacturonique ou quinique. Un autre groupe de composés comprend les composés de formule VIIIpc A Z A' CE2-S-Yi Y2-S -CO-NCH-C-N-Cg-CO-I E-NS-CS- (VIIIpc) QO.CnH2.__XO.__C._. .H...DTD: O10 2 3 4 5 6 7 dans laquelle Q représente l'hydrogène ou le reste glucosylique d'un mono, di- ou oligosaccharide, n signifie un nombre entier de 1 à 6 inclus, A signifie l'hydrogène, un groupe alkyle en C1-C3 ou alcanoyle en C1-C4, et Z, A', Y1, B, C, D, E, Y2 et F ont les significations données précédemment. Une autre classe préférée de peptides glucosylés comprend les dérivés glucosylés de la calcitonine. Le terme calcitonine comprend les calcitoni- nes se trouvant dans la nature (obtenues à partir de sources naturelles, de cultures de cellules etc ou obtenues par synthèse) et leurs dérivés et analogues. Les calcitonines naturelles qui peuvent être utilisées comprennent la calcitonine humaine, de saumon, d'anguille, de poulet, de boeuf, de mouton, de rat ou de porc, spécialement la calcitonine humaine, de saumon, de poulet et d'anguille. Les dérivés et analogues de ces calcitonines comprennent en particulier les calcitonines naturelles dans lesquelles un ou plusieurs restes d'amino-acides ont été remplacés par un ou plusieurs autres restes d'aminoacides et/ou le pont S-S- a été remplacé par un pont alkylène, et/ou dans lesquels un ou plusieurs restes d'amino-acides ont été supprimés. Les dérivés glucosylés de calcitonines particulièrement préférés sont les dérivés glucosylés des calcitonines répondant à la formule X Y2 (X) R-(N-C-CO) o-A6 N-E.-COA-8 A9-Z-PrON2 dans laquelle R signifie H ou R"CO R"CO représente le radical acyle d'un acide carboxy- 1 ique, Yi représente le reste situé sur l'atome de carbone a d'un aamino-acide, Y2 représente le reste situé sous l'atome de carbone a d'un a-amino-acide, ou un reste -CH2-S-SCH2-CH-COOH, -CH2-S-S-CH2-CH2-COOH, I NH2 -(CH2)s-COOH ou -C2SY3, Y3 signifie un groupe alkyle en-C1-C4, benzyle éven- tuellement substitué par méthyle ou méthoxy, ou CH3CONH-CH2-, o signifie un nombre entier de 1 à 4, A6 signifie Thr ou D-Thr s signifie un nombre entier de 3 à 5, A8 représente le reste amino-acyle d'un L-aamino-acide lipophile neutre, 260999! Ag représente le reste amino-acyle d'un L- ou D-a-amino- acide lipophile neutre, et Z1 signifie un reste polypeptidiquesitué en position 10 à 31 d'une calcitonine naturelle ou l'un de ses dérivés ou analogues, qui possède une activité hypocalcémiante, les 1 à 4 restes Yi dans la formule X pouvant être identiques ou indépendamment différents, et, à l'exception du reste amino-acyle A8, tous les restes d'aminoacidesdans la formule X ont la configuration L ou D, ainsi que les sels et complexes de ces composés. De tels composés sont décrits par exemple dans la demande de brevet britannique 2 184 729 dont le contenu est incorporé dans la présente demande à titre de référence. Z1 dans la formule X signifie un reste pep- tidique qui peut être présent en position 10 à 31 dans de nombreuses calcitonines connues, par exemple dans la calcitonine humaine, de saumon, d'anguille, de poulet, de boeuf, de mouton, de rat ou de porc,ainsi que dans des dérivés et analogues de ces calcitonines ayant une activité similaire. Par dérivés et analogues de ces calcitonines, on entend spécialement des calcitonines naturelles dans lesquelles un ou plusieurs restes d'amino-acides ont été remplacés par un ou plusieurs autres restes d'amino-acides, ou dans lesquelles le pont S-S a été remplacé par un pont alkylène, ou dans lesquelles un ou plusieurs restes d'amino-acides ont été supprimés. Ces restes peptidiques Z1 contiennent normalement 22 aminoacides,mais peuvent également contenir de façon correspondante un nombre moins élevé de restes d'amino-acides par élimination de un ou plusieurs restes d'amino-acides (dérivés des-aminoacylés). Z1 signifie de préférence a) Gly-Thr-Tyr-Thr-Gln'Asp-Phe-Asn-Lys-Phe-HRis-Thr- Phe-Pro-Gln-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly-Ala b) GIy-Ly s-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln- Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp-Val-Gly-Ala-Gly-Thr c) Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln- Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr Les composés de formule X dans laquelle Z1 a la définition de b) ou c), de préférence ceux dans lesquels Z a la définition donnée sous c), sont spécialement préférés. R"CO signifie de préférence le reste acyle d'un acide carboxylique aliphatique, cycloaliphatique, aromatique ou hétérocyclique. R" signifie de préférence a') un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, contenant de 1 à 17 atomes de carbone, spécialement un groupe alkyle saturé en C3-C9, b') un groupe cycloalkyle en C5-C7 ou cycloalkylalkyle dans lequel le reste cycloalkyle est en C5-C7 et le reste alkyle en C1-C2, c')un groupe adamantyle, adamantylméthyle ou adaman- tyléthyle, ou d')un groupe phényle, benzyle ou phénétyle. Dans les définitions données ci-dessus pour R", les groupes alkyle, cycloalkyle ou phényle peuvent comporter des substituants usuels, par exemple des halogènes ou des groupes NO2, OH, alcoxy,etc. Le reste R"CO peut être par exemple le reste a-désamino ou d'un a-amino-acide naturel. Pour R", les définitions a'), b') et c') sont préférées. Yi et Y comme restes se trouvant sur l'atome de carbone a d'un a-aminoacide, repré- sentent en particulier les restes qui sont liés sur l'atome de carbone a d'un a-amino-acide naturel, mais peuvent également signifier des restes d'autres a-amino-acides, par exemple de la 3-cyclohexylalanine ou d'un acide a-amino-isobutyrique. Lorsque o dans la formule X signifie 4, a) le reste aminoacyle N-terminal (correspondant au deuxième reste d'amino-acide dans la séquence des calci- tonines naturelles) signifie de préférence Ser, Gly ou Ala, b) le deuxième reste aminoacyle (correspondant au troisième reste d'amino-acide dans la séquence des calcitonines naturelles) signifie de préférence Asn ou Ser, c) le troisième reste amino-acyle (correspondant au quatrième reste d'amino-acide dans la séquence des calcitonines naturelles) signifie de préférence Leu, Asn, Ser, Phe, D-Leu ou le reste de la cyclo- hexylalanine, d) le quatrième reste amino-acyle (correspondant au cinquième reste d'amino-acide dans la séquence des calcitonines naturelles) signifie de préférence Ser ou Ala. Lorsque o dans la formule X signifie 3, le N-terminal,le deuxième et le troisième reste d'amino-acide ont les mêmes définitions préférees que celles données ci-dessus pour le cas o o = 4 sous b). Lorsque o dans la formule X signifie 2, le N-terminal et le deuxième reste d'amino-acide ont les mêmes définitions préférées que celles données ci-dessus pour le cas o o = 4 sous c) et d). Lorsque o dans la formule X signifie 1, le N-terminal et le deuxième reste d'amino-acide signi- fient de préférence Ser ou Ala. A6 signifie de préférenc Thr y -NH-CH-CO signifie de préférence Cys, un dérivé de la cystéine tel que donné ci-dessus pour Y' ou un reste a-aminoacyle lipophile neutre, spécialement Ala ou un autre reste a- amino-acyle lipophile neutre, tout particulièrement Ala. A8 signifie de préférence le reste amino- acyle d'un a-amino-acide lipophile neutre, spécialement Val ou Gly. A9 signifie de préférence également le reste amino-acyle d'un a-aminoacide lipophile neutre, spécialement Leu ou Phe. Dans les composés de formule X, o signifie de préférenc 2, R signifiant H ou R"CO, ou en particu- lier o signifie 1 et R signifie R"CO. Tous les restes d'amino-acides ont de préférence la configuration L. Les calcitonines glucosylées (y compris les dérivés et analogues) sont spécialement celles qui sont glucosyléessur le groupe amino N-terminal ou sur un ou plusieurs groupes amino situés dans une ou plusieurs chaînes latérales, par exemple les composés de formules XIa à XIf o al,..)î'c: NUCL(XIa) -5 CH2-Na-.C&lc G4 '"ct XId) r0% G2 / ( XIb) -3Cala A (G 3CO-C-C O (XIc) G4 -Nc1 ( XId) 1 5 G4 '\jNH-Q.NH- aîc ( XIe) (Q =CO or CS) ou hOH2C(CHOH)ECY-CH2NH-Calc (XIf) dans lesquelles Calc représente le reste d'une calci- tonine naturelle ou l'un de ses dérivés ou analogues, lié au reste glucidique par l'intermédiaire d'un groupe amino sur l'extrémité Nterminale ou dans une chaine latérale. Les dérivés de calcitonine de formule X peuvent être préparés selon les méthodes généralement connues pour la synthèse de polypeptides de ce type. Les polypeptides correspondants aux formules ci-dessus peuvent être préparés par exemple comme suit: a) on élimine au moins un groupe protecteur présent dans un polypeptide protégé ayant la séquence donnée dans la formule X, ou b) on couple par une liaison amide deux unités pepti- diques dont chacune contient au moins un reste d'amino-acide ou l'un de ses dérivés, comme décrit pour la formule X, sous forme protégée ou non-protégée, les unités pepti- diques étant telles qu'on obtient la séquence d'amino-acidescorrespondant à la formule X et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou c) on fait réagir un composé de formule X, dans laquelle R signifie l'hydrogène, sous forme protégée ou non-protégée, avec un acide formule R"COOH ou l'un de ses dérivés réactifs et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou d) pour préparer un composé de formule X dans laquelle Y' signifieCH2-S-S-CH2-CH-COOH ou CH2-S-S-CH2-CH2-COOH, 2 22.ou C2 --H-C NH2 on fait réagir un composé de formule XII Y R- (NE oH-O XA--a---z 2 ( X I I) sous forme protégée ou non protégée, avec un composé de formule XIII (XIII) dans laquelle Rlo représente un groupe qui facilite la formation d'un pont S-S- avec l'atome de soufre et l'autre groupe CH2SH présent dans le peptide de formule XII, Rll signifie l'hydrogène ou un groupe protecteur du groupe amino, R12 signifie OH ou un groupe protecteur du groupe carboxy, et V signifie l'hydrogène ou un groupe NH, ou bien on fait réagir un composé de formule XIV C2-SRo0 (XIV) R-(Na-CH-CO) o-A6-N-CE-CO- A.Ag. -Z1.-PoN2 sous forme protégee ou non protégée, dans laquelle RlO a la signification donnée précédemment, avec un composé de formule XV c32-sa RLIV-CZCCR3 ((XV) et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procéde. Lorsque la préparation des produits de départ n'est pas décrite, ces composés sont connus ou peuvent être préparés et purifiés selon les méthodes connues. Les produits finals de formule X peuvent être purifiés' selon les méthodes habituelles de manière qu'ils contiennent moins de 5% de sous-produits polypeptidiques. Les peptides utilisés comme produits de départ dans les étapes a) et b) du procédé peuvent de manière similaire être préparés de manière connue en solution ou selon le procédé en phase solide. Les unités peptidiques qui contiennent un groupe -CH2-S-S-CH2-CH2-COOH ou CH2-S-S-CH2-CH(NH2)-COOH en tant que reste Y, peuvent être préparés de manière analogue à l'étape d) du procédé mentionné précédemment. Dans cette étape du procédé d), on utilise des composés de formule XIII ou XIV dans lesquels Rlo signifie des restes connus qui réagissent avec les thiols, tuten formant une liaison S-S-. Rlo signifie en particulier Salkyle, -S-COOalkyle, s C2 ou S-S03-. Dans ces restes, alkyle signifie spécialement un groupe alkyle inférieur contenant de 1 à 4 atomes de carbone. L'introduction de ces restes dans les composés ayant des groupes SH libres peut être effectuée de manière analogue aux méthodes connues dans la-chimie du soufre. Une autre classe préférée de composés de l'invention comprend un groupe d'antagonistes de la LH RH. De préférence, les composés comprennent les dérivés glucosylés des composés de formule XVI 'AI-BI'8 - -DF-X -l'-G' -H - -K -NH (EX V I dans laquelle R1 signifie H ou un groupe acyle en C1-C7, A1 signifie D-Phe, éventuellement substitué dans le cycle phényle par F, CI, Br, NH2, CH3 ou OCH3, spécialement en position 4, un reste 6-D-naphtylalanine, D-Trp éventuellement substitué en position 5 ou 6 par F, Cl, Br, NH2, ou OCH3 et/ou substitué en position 1 par un groupe formyle ou acétyle, un reste proline, 3,4-déhydroproline ou D-pyroglutamine B1 signifie D-Phe éventuellement substitué par F. Cl, Br, NH2, CH3 ou CH30 dans le cycle phényle, D-a-méthylphénylalanine, éventuellement substituée en position 4 par C1-, ou -D-naphtylalanine. C1 signifie D-Trp éventuellement substitué en position 5 ou 6 par F, C1, Br, NH2 et/ou OCH3 et/ou en position 1 par HCO ou CH3CO, --D-naphtylalanine, 3-D-pyridylalanine, D-Tyr, ou Phe éventuellement substitué par F, C1, Br, NH2, CH3,ou CH30, D1 signifie Ser, E1 signifie Tyr ou-phénylalanine éventuellement substituée dans le cycle phényle parCl, Br, NH2, CH3 ou CH30, F1 signifie D-Phe, éventuellement substitué dans le cycle phényle par F, C1, Br, NH2, CH3 ou CH30, D-Trp éventuellement substitué en position 5 ou 6 par F, C1, Br, NH2 ou CH30 et/ou en position 1 par formyle ou acétyle, D Tyr, 6-D-naphtylalanine, D-Leu, D-Ile, D-Nle, DVal, D-Ser- (OtBu), D-Arg, éventuellement dialkylé par des groupes alkyle en Ci-C6 ou cycloalkyle en C5-C6, D-homoarginine éventuellement dialkylée par des groupes alkyle en C1-C6 ou cycloalkyle en C5-C6, D-His, D-His(Bzl), D-Lys ou D-Orn, tous les-deux éventuellement dialkylés par des groupes alkyle en C1-C6 ou cycloalkyle en C5-C6, D-Phe (p-NH2) ou a-p-aminocyclohexylalanine, G1 signifie Leu, Nle, Nva, Na-méthylleucine, Trp, Phe, Met ou Tyr, H1 signifie Arg, Lys ou Orn éventuellement substitués par des groupes alkyle en C1-C6 ou cycloalkyle en C5-C6, I1 signifie Pro, hydroxyproline, ou 3,4-déhydroproline, et K1 signifie D-Ala. Si on le désire, E1 et F1 peuvent être remplacés l'un par l'autre. D1 et K1 peuvent, si on le désire, signifier des restesCys liés par un pont S-S-. Si on le désire, un des symboles D1 et K1 signifie Asp ou Glu et l'autre signifie Orn, l'acide diaminopropionique ou l'acide diaminobutyrique, et les restes D1 et K1 sont liés par un pont amide. Les significations préférées sont les suivantes: R = acétyle ou formyle A1 = D-Phe, D-Phe (p-Cl), 5-D-naphtylalanine, 3,4-déhy- droprol i ne, B1 = D-Phe éventuellement substitué comme indiqué précédemment, C1: D-Trp éventuellement substitué comme indiqué précédemment, D1: Ser Lorsque le reste est substitué, il est de préférence mono-substitué. (i) E1 = Tyr ou Phe éventuellement substitué comme indiqué précédemment, lorsque F1 = D-Phe ou Lys, ou bien (ii) E1 = D-Phe ou Lys lorsque F1 = Tyr ou Phe éventuel- lement substitué comme indiqué précédemment, G1 = Leu H1 = Arg I = Pro K1 = D-Ala Dans les antagonistes de la LHRH mentionnés ci-dessus, le reste glucidique est de préférence fixé au groupe amino N-terminal ou à un groupe amino libre situé dans une chaîne latérale du peptide. Les dérivés glucosylés ont de préférence les structures XVIa à XVIf suivantes danslesquelles"NH2-LHRH antag." signifie un antagoniste de la LHRH de formule XVI donnée précédemment: G1)5 (xvIa) -- I2NE-LaR-Antag. G os G - O H 2 P ( XVIb) :_4-.LiE-taq. G3-co-N'-Ls-Antag. ( XVIc) G; 5-NHSNS- HBHAntq ( XVId G- 9'- E- m-tag. ( XVIe) \4 -NuEC- cC2--Lm-Anta. (XVIf) Y Dans les formules XVIa à XVIf ci-dessus, pour des raisons de simplicité on a représenté uniquement un reste glucidique lié à un groupe amino. Cependant, la molécule peut contenir plus d'un reste glucidique lorsque l'antagoniste de la LHRH contient plusieurs groupes amino. De préférence, la molécule contient deux restes glucidiques. Les antagonistes de la LHRH, utilisés comme produits de départ, sont connus ou peuvent être préparés selon les méthodes connues, par exemple comme décrit dans les demandes de brevet européen no 81887 et 201260. D'autres dérivés glucosylés préférés sont ceux qui dérivent des peptides suivants: a) l'oxytocine et la vasopressine, ainsi que leurs dérivés, par exemple la Lys -vasopressine et la Orn8-vasopressine, b) l'insuline, c) le GRF et ses dérivés. Les produits de départ et les composés de l'invention peuvent être préparés par synthèse en phase liquide ou en phase solide. Les composés de l'invention peuvent être avantageusement préparés par synthèse en phase solide. La demanderesse a trouvé un procédé spéciale- ment avantageux pour la préparation de peptide-alcools qui comportent à l'extrémité C-terminale de la chaîne peptidique deux groupes alcool ou un groupe alcool et un groupe thiol. Le procédé est spécialement approprié pour la préparation de peptide- alcools contenant un reste C-terminal thréoninol, sérinol ou cystéinol. Des exemples de composés appropriés comprennent certaines des somatostatines décrites précédemment. La synthèse du peptide en phase solide s'est révélée être un procédé spécialement rapide et favorable pour la préparation de peptideset est devenue par conséquent une méthode généralement courante. Comme on le sait, un amino-acide est d'abord lié par ses groupes carboxy au groupe hydroxy ou amino d'une résine synthétique insoluble pour former un groupement ester ou amide; les autres amino-acides sont ensuite ajoutés à cette résine dans l'ordre désiré et le polypeptide final est scindé à partir de la résine support. Cette syn-thèse s'effectue sans problème pour des polypeptides normaux ayant des amino-acides C-terminaux. Cependant, des polypeptide-alcools qui comportent à l'extrémité C--terminaleun amino-alcool à la place d'un amino-acide, ne forment pas facilement une liaison avec des résines support comportant des groupes OH ou NH2 et/ou ne sont pas facilement scindés 1lorsque l-a synthèse est terminée. Les procédés suivants ont été proposés aupara- vant comme procédés possiblesen phase solide pour la préparation de peptide -alcools a) préparation classique du polypeptide correspondant contenant à l'extrémitéC-terminale un amino-acide (sous forme d'ester avec unerésine comportant des groupes OH) et ensuite scission par réduction en utilisant des hydrures du bore, le groupe carboxy étant transformé simultanément en fonction alcool (brevet américain n 4 254 023 / 4). b) Addition de l'amino-alcool terminal sous forme I d'éther avec une résine hydroxyméthylée en utilisant le carbonyl -diimidazole et, après synthèse du peptide, scission en utilisant HC1/TFA ou HBr/TFA (Kun-hwa Hsieh et G.R. Marshall, ACS National Meeting, New Orleans, 21-25, 3. 1977). Cependant, ces deux procédés nécessitent des conditions de scission énergiques. La demanderesse a trouvé que la scission du peptide à partir de la résine, tout en formant simultanément le peptide-alcool C-terminal, est effectuée sous des conditions douces lorsque l'amino- alcool C-terminal est relié àla résine par une liaison acétal. Selon l'invention, le peptide-alcool qui comporte à l'extrémité C-terminalede la chaine peptidique deux groupes alcool ou un groupe alcool et un groupe thiol, est préparé par hydrolyse acide d'un acétal du peptide-alcool avec unerésine polymère comportant des groupes formylphényle (désigné synthèse de 1 'in- vention dans la présente demande).- La réaction peut être illustrée schématique- ment comme suit-: R + nez _( c\ -CE-NIR-CC-Y cel _,ç CE + Y.co...2o (zzS/ -oiHC-NO ou est le reste d'une résine synthétique insoluble Z représente une liaison directe ou un reste qui relie la résine avec le groupe formylphényle acEtalisé X signifie 0 ou S R signifie l'hydrogène ou un groupe méthyle, et Y est le reste d'un peptide-alcool qui peut par exemple comporter des groupes protecteurs, le groupe CHO- éventuellement acétalisé étant situé en position méta ou para du reste Z. Pour des raisons de simplicité, dans les formules Iret lIrdu schéma ci-dessus, on a représenté seulement un substituant sur la résine; il va de soi cependant qu'un certain nombre de ces groupes sont liés à la molécule de la résine polymère. La scission du peptide-alcool à partir de la résine,par hydrolyse du groupe acétal, est effectuée comme mentionné ci-dessus sous des conditions acides, par exemple avec de l'acide trifluoroacétique dilué. L'hydrolyse peut être effectuée à la température ambiante. Lorsque Z dans la formule Ir signifie une liaison directe, les restes phényle comportant les groupes acétal sont directement liés au reste polymère et appartiennent au polymère. Des exemples de tels composés de formule Ir sont les acEtals d'une résine de polystyrène formylé (dans la formule I r ( signifie dans ce cas une chalne polyethylene). Lorsque Z signifie un reste, ce reste contient dans ce cas un groupe qui résulte de la réaction d'un groupe réactif, lié directement ou indirectement au polymère, avec un autre groupe réactif lié directement ou indirectement au groupe formylphényle ( acétalisé). Le reste Z peut être représenté par exemple par la formule IIIr suivante: ( - -(D)p-QQ2(E)q (IIIr) dans laquelle Q1 = le reste d'un groupe réactif lié au polymère Q2 = le reste d'un groupe réactif lié au groupe Q2 formylphényle (acétalisé) D = un reste qui relie le groupe Q1 au polymère E = un reste qui relie le groupe Q2 avec le groupe formylphényle (acétalisé) p et q, indépendamment l'un de l'autre, signifie 0 ou 1. Le groupe QI-Q2 signifie de préférence un groupe ester ou amide, spécialement un groupe carboxa- mide. Q1 signifie de préférence NH et Q2 signifie de préférence CO. D et E, indépendamment l'un de l'autre, repré- sentent par exemple des restes alkylènes ou alkylène- oxy contenant de 1 à 5 atomes de carbone. Les composés de formule Ir dans laquelle Z signifie un reste de formule IIIr, sont par exemple des composés dans lesquels()-D-Q1 est le reste d'une résine de polystyrène aminométhyleet le reste R X-CB cH ac'-NH-CO-Y 02int d f m -CI2 signifie un reste de formule IVr -C-CH- (0- HNHC- X-CECH-NH-CO-Y - 0 O-C8-NH (IVr) dans laquelle R = l'hydrogène ou un groupe méthyle et m signifie 0 ou 1, le groupe acetal étant situé en position méta ou para. Dans ce cas, Z représente par conséquent -CH2-NH-CO-CH-(O) m- et (Psignifie le polystyrène. Le reste IVr signifie de préférence un reste -IR -Co-CE -0- -CO-CE2-4 -CH2 _.,. -6à2 A la place du polystyrène aminométhylé, on peut utiliser également d'autres polymères, spéciale- ment ceux comportant des groupes NH2 libres, par exemple les polyacrylamides comportant des groupes aminoethyle. Comme mentionné ci-dessus, le groupe formylphényle acetalisé est de préférence lié au poly- mère par une liaison amide. Cela garantitque la liaison du reste formylphényle acetalisé à la résine est stable durant la synthèse et la scission du polypeptide et que la scission a lieu sur la liaison acetal comme désiré de sorte que d'une part le peptide-alcool est synthétise et que, d'autre part, le reste formylphényle reste sur la résine. Si on le désire, le peptide-alcool peut être fixé à une distance plus grande de la résine par incorporation d'un groupement dit groupement d'espace- ment ( spacer) entre les groupes réactifs du polymère (spécialement les groupes amino) et les groupes réactifs du dérivé formylphényle acétalisé (spéciale- ment les groupes carboxy). Pour certaines réactions sur le peptide alcool, cela peut avantageusement avoir lieu avant la scission (par exemple oxydation des restes cystéines). Dans ce cas, le reste D ou E dans la formule IIr contient en plus le groupement d'espace- ment et Q1 ou Q2 représentent le reste réactif du groupement d'espacement. Le groupement d'espacement utilisé peut être par exemple un acide C'aminocarboxylique, tel que l'acide E-aminocaprolque. Dans un cas spécifique, lorsqu'on utilise du polystyrène aminométhylé, un reste de formule IVr et l'acide E-aminocaprolque comme groupement d'espa- cement, Z signifie -CH2-NH-CO-(CH2) 5-NE-CO-CH-(Om- R Les composés de formule Ir peuvent être préparés selon des méthodes qui sont usuelles dans la technologie en phase solide, en utilisant comme produit de départ le composé de formule Vr R / x-cg &-Z- N @ f NU2 (Vr) 0C2 dans laquelle A représente un groupe protecteur du groupe amino et le groupe acétal est en position méta ou para du reste Z. A cet effet, on scinde d'abord le groupe protecteur A puis on fait réagir le groupe amino libre avec l'amino-acide N-protégé suivant etc.., jusqu'à ce que tous les amino-acides aient été ajoutés à la résine dans la séquence correspondant à celle du peptide-alcool désiré. Les groupes protecteurs du groupe amino qui doivent être choisis pour les amino-acides utilisés ou pour l'amino-alcool, doivent être ceux qui sont scindés sous des conditions non acides, étant donné que sous des conditions acides il se produit une hydrolyse du groupe acétal. Le groupe CF3CO- ou le groupe FMOC- (9-fluorénylméthyloxycarbonyle) peuvent être utilisés, par exemple comme groupes protecteurs du groupe amino. Ces groupes protecteurs sont scindés en milieu basique selon les méthodes connues dans la chimie des peptides. Uniquement les groupes protecteurs situés dans la chaîne latérale et le groupe protecteur du groupe amino du dernier amino-acide introduit peu V:nt être labiles aux acides et sont donc éliminés simulta- nément de la résine avec la libération du peptide- alcool. De préférence, les groupes Boc sont présents comme groupes protecteurs. Comme bases, on utilise de préférence KOH, ou la pipéridine ou NaBH4. La synthèse de la chaine peptidique peut être effectuée de manière classique à partir d'un reste peptidique ayant des groupes amino libres et un amino-acide dont le groupe carboxy est libre ou activé. La réaction peut être effectuée par addition par exemple d'hydroxybenzotriazole et de dicyclohexyl- carbodiimide. Les composés de formule Vr peuvent être préparés par exemple a) par réaction d'une résine comportant un groupe aldéhyde et répondant à la formule IIr (.,. z (IIr) dans laquelle le groupe CHO est en position méta ou para du substituant Z, avec un amino-alcool N-protégé de formule HX-CHR1-CH(NHA)-CH20H éventuellement sous forme activée,ou b) par réaction d'une résine de formule p () - (D) -,Q! * P avec un composé de formule VIr Ré x-cu cil CH \ C -(VIr) dans laquelle groupe acétal est en position méta ou para du groupe Q -(E)-q et Qj et Q2 sont deux groupes réactifs qui réagissent ensemble pour former un pont Q1 - Q2' L'acétalisation du procédé a) peut être effectuée en présence d'un acide comme catalyseur. Les acides appropriés comprennent les acides p-toluène- sulfonique et l'acide p-trifluorométhylphépylsulfonique. Si on le désire, on peut utiliser le groupe triméthylsilyle comme groupe protecteur d'un alcool libre. Le procédé d'estérification b) peut être effectué sous des conditions très douces, par exemple par réaction d'un dérivé d'un acide carboxylique avec un polymère comportant des groupes OH ou NH2. Les composés de formule VIr peuvent être préparés par acétalisation d'un composé de formule Q'(D)q 0- CHO avec un composé de formule HX-CHR1 -CH(NHA)-CH20H L'acétalisation peut être effectuée comme indiqué dans le procédé a). Durant la synthèse et la scission du peptide- alcool à partir de la résine, d'autres réactions peuvent être effectuées, par exemple élimination des groupes protecteurs, par exemple élimination des groupes protecteurs du groupe thiol, ou oxydation des restes cystéines. De telles réactions peuvent être effectuées après scission du peptide-alcool en phase liquide. Selon la synthèse de l'invention, on peut préparer avec facilité des peptides pharmacologiquement actifs et d'autres peptides qui contiennent sur l'extré- mité C-terminale2 groupes alcool ou un groupe alcool et un groupe thiol Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter la portée. Toutes les températures sont données en degrés celsius et les valeurs [E]20 sont non corrigées. Les abrévia- tions suivantes ont été utilisées: AcOH = acide acétique Boc = tert.butoxycarbonyle But = tert.-butyl DCCI = dicylcohexylcarbodiimide DMF = diméthylformamide Fmoc = 9-fluorénylméthoxycarbonyle MeOH = méthanol NEt3 = triéthylamine Thr-ol reste thréoninol = CH3-CHOH-CH(CH20H)-NH- TFA = acide trifluoroacétique HOBt = N-hydroxybenzotriazole hpGRF = facteur déclenchant la sécrétion de l'hormone de croissance pancréatique humaine HOSu = N-hydroxy-succinimide. Tous les peptides sont obtenus sous forme de polyacétates polyhydratés ayant une teneur en peptide de 70 à 90%. La chromatographie en phase liquide (HPLC indique que les peptides contiennent moins de 5% d'autres peptides. Le facteur "F" mentionné dans les exemples suivants indique la teneur en peptide dans le produit obtenu ( F = 1 indique une teneur en peptide de 100%). La différence jusqu'à 100% [(l-F) x 100] est constituée par de l'acide acétique et de l'eau. Tous les sucres ont la configuration a, sauf indication contraire. Exemple 1 Na --désoxyfructosyl-DPhe-,ys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol, aceé tate I4 wt (0) Ph*-Cys-Phe- (O) Tr-y-h-i-h-o ectaci. O Nw A 400 mg de [Na-_-désoxyfructosyl]-D-Phe- Cys-Phe-DTrp-Lys(BOC)-Thr-Cys-Thr-ol on ajoute 3 ml d'acide trifluoroacetique (100%) et on maintient à la température ambiante jusqu'à ce que tout le produit de départ soit dissous (5 minutes). Après addition de 20 ml d'éther diisopropylique, on sépare par filtra- tion le composé du titre qui a précipité et on le lave à l'éther diisopropylique. Le composé est purifié par chroma- tographie sur gel de silice (éluant: CHC13/MeOH/HOAc/H20 7/3/0.5/0.5) et isolé sous forme d'un lyophilisat blanc. [a] 20 -31,3 (c= 0,52 dans HOAc à 95%) F: 0,88. Le produit de départ peut être préparé comme suit: a) U7DPte-aIgQ:o ryu-Thr-o. A une solution de 10 g de H-DPhe-Cys-Phe-DTrp- Lys-Thr-Cys-Thr-ol,acetate dans 10 ml de DMF, on ajoute lentement goutte à goutte à la température ambiante 2,25 g de percarbonate de di-tert.butyle dissous dans 30 ml de DMF. Après deux heures à la température ambiante, on élimine le solvant sous vide et on ajoute 200 ml d'éther diisopropylique au résidu. Le produit qui s'est formé est séparé par filtration, lavé à l'éther diisopropylique et séché. Le produit brut est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant: CH2Cl2/MeOH 9/1) et ensuite isolé sous forme d'une poudre amorphe blanche. [a]D0=29,8 (c = 1,28 dans le DMF). b) Nl-l-desoxyfructolyl-DPhe-Cys-Phep-DTr - Lys(BCg-Thr-Is-Thr-ol On dissout 2 g de D-(+)-glucose et 0,5 g du composé de l'étape a) ci-dessus dans 20 ml d'un mélange 9/1 (vol./vol.) de MeOH et de HOAc et on maintient à 60-70 pendant trois heures. Après évaporation, on reprend le produit dans un peu de méthanol et on fait précipiter le composé par addition d'éther diisoprooylique. Le composé du titre ainsi obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant: CH2C12/MeOH 9/1). Le produit est obtenu sous forme d'une poudre amorphe. [a] 0 = 12,0 (c = 1,04 dans le DMF). En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 1, on obtient les acétates des composés suivants dans lesquels SMS signifie le reste polypeptidique de formule -DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol Exemple 2 Ne-ca-qlucos lj1-4i:desox^Yfructqsylj:îM 2-SMS Comme produit de départ, on utilise le D(+)-maltose à la place du D-glucose. [a]= -7,9 (c = 0,71 dans AcOH 95%) F: 0,91. Exemple 3 fructosyl-SMS L -F5 F: 078 Comme produit de départ,on utilise le maltotriose à la place du D-glucose. ta]0 = +11,3 (c = 0,71 dans AcOH à 95%). NExemple 4 N -acide fructofurannurontpue-SMS go 2F 088 Comme produit de départ,on utilise l'acide D-glucuronique à la place du Dglucose. []0 = -29,4 (c = 0,34 dans AcOH à 95% ). Exemple 5 Na-désoxysorbosyl-SMS oX rô F: 085 H 2 5 Comme produit de départ, on utilise le D(+)-galactose à la place du D-glucose. [a] =30,4 (c = 0,50 dans AcOH à 95%). Exemple 6 Na. r-_-n-nllrncvl-fl-4-désnxyvfructosvl -SMS i ó ^,,:y.L r:,1., Comme produit de départ, on utilise le EJ20 - D(+)-cellobiose.]0: 28,1 (c = 0,47 dans AcOH à 95,%). Exemple 7 N -L(-)-désoxyfructosyl-SMS oC a"U : OH F: os09. Comme produit de départ, on utilise le L(-)-glucose à la place du D(+)-glucose. a20 = -20 (c = 0,46 dans AcOH à 95%). Exemple 8 N-[O--D-lucosyl- (1-6) -désoxyfructosy 1]-SMS -± H oX ONSN 0 C 14 Sl Comme produit de départ, on utilise le gentiobiose à la place du D-glucose. [a =:23,5 (c = 0,46 dans AcOH à 95%) F: 0,76 Exemple 9 N=-[EO-0-D-galactosyl-(1-4) -désoxyfructosyl]-SMS Lo. 0 Comme produit de départ, on utilise le D(+)-lactose à la place du D-glucose. [a] = 29,3 [D: (c = 0,55 dans AcOH à 95%). Exemple 10 Nc [)O---0lactosyl-(1-6--désoxyfructosyl)-SMS H KH HO H Comme produit de départ, on utilise le mélibiose à la place du D-glucose. [a]20 = +8,4 (c = 0,5 dans AcOH à 95%) F:0,76. Exemple 11 [N-(l-démxy-D-fructosyl)-Tyr-3]-SMS 'cMz- ()Phe-Cys-Tyr-(O)Trp-Lys-ThrCys-Thr-oL HO r Comme produit de départ, on utilise la 3_ 20 Tyr3-SMS à la place de la SMS. [a]= _32,2 (c = 0,9 dans AcOH à 95%) F: 0,87. Exemple 12 [N-( a -D-91 ucopyranosyl-(1-4)-l-desoxy- fructoslj_ T-r3-]SMS ------i ------------------------I I HO. HO -(O)PhoCys-Tyr-(O)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-o ON F = 0,81 Comme produit de départ, on utilise le D(+)-maltose à la place du Dglucose et la Tyr -SMS :4,O=10dnAcH 9% à la place de la SMS. 20] à la place de la SMS. tEaJD =4,70(c=l,0 dans AcOH à 95%) Exemple 13 HOCH2 HO HO - (0) PheCyus-Phe()Trp-Ly,-Thr-Cys-Thr.ol Comme produit de départ, on utilise le D- glucoheptose à la place du D-glucose. [a]0 = -12,9o (c = 1,0 dans AcOH à 95%) F = 0,91. Exemple 14 ! R i R -(D)Ph-Cys - Phe-(OTrp-Lys -Thr-Cys -Thr- ai HO Comme produit de départ, on utilise le D(+)-glucose et la SMS non protégée sur le groupe -NH de la lysine. [o]D = -42,4e (c = 0,37 dans AcOH à 95%'). F = 0,83. Exemple 15 HO I R R R -(O)Phe-Cys- Phe-(D)Trp - Lys -Thr-Cys-Thr- ol H2- HO Comme produit de départ, on utilise le glucoheptose et la SMS non protégée sur le groupe -NH2 de la lysine. [a]20 = -9,3 (c = 0,41 dans AcOH à 95%). F = 0,84. Exemple 16 Fructos.__ - 6 - ____e2e a SMS o w HO-P -O Cóo OH 2 OH \HOJóCH2- ( PhE-Cys-Phe-(o)Tró-{.ys-Thr-Cs-Thr-o Oi Comme produit de départ, on utilise le D-glucose-6-phosphate à la place du D-glucose. [a]20 = 19,5 (c = 1,0 dans AcOH à 95%). F = 0,89. Exemple 17 0 OH CE2- () PheCys-Phe-(Or-Lys-rh-Cy-rh-o O Ou Comme produit de départ, on utilise le -1,8 D-ribose à la place du D-glucose. [a]D =31,8 (c = 1,0 dans AcOH à 95%). Exemple 18 N -désxyfructosyl-(D)Phe-Cys[COC(CH3)3]- Phe-(D)-Trp-Lys-Thr-Cys [COC(CH3) 3]-Thr-ol a) Désoxyfructosyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys(BOC)-Thr-Cys- Thr-ol3- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - On mélange 0,58 g du composé de l'exemple 1 dans 10 ml de DMF avec 0,08 ml de NEt3 puis avec 0,12 ml de (BOC)20. On agite le mélange pendant environ 15 heures à la température ambiante, on le concentre sous vide et on le délaye dans de l'éther. On sépare le produit qui a précipité par filtration. On dissout le résidu dans un peu de méthanol et on fait précipiter le produit par addition d'eau. On filtre le produit, on le lave avec un peu d'eau et on le sèche, ce qui donne le composé du titre. [a]D2 = +14,5 (c = 0,7 dans le DMF). ) N-désoxyfructosyl-(D)-Ph',-Cys-Phe-(D)Trp-Lys(BOC)-Thr- Cys-Thr-ol A 0,51 g du composé de l'étape a) ci-dessus dans un mélange de 10 ml de dioxanne et de 2 ml de tampon NEt3/AcOH à pH 8,6, on ajoute sous argon un total de 0,4 g de dithioérythritol. On agite le mélange pendant environ 15 heures à la température ambiante et on le concentre sous vide. On sépare par centrifugation le produit qui a précipité, on lave le résidu avec un peu d'eau et on le sèche sous vide. On obtient ainsi le composé du titre. 2n = +3,8 (c = 0,8 dans le DMF). c)N -désoxyfructosyl- (D) Phe' -Cys [COC (CH3) 3]-Phe- (D) Trp-Lys- (BOC)-Thr-Cys(COC(CH3) 3]-Thr-ol On dissout sous argon 0,38 g du composé de l'étape b) ci-dessus dans 25 ml de N-méthylpyrrolidone, on ajoute à 0 0,3 ml de N-méthylmorpholine et 0,31 ml de chlorure de pivaloyle, on agite pendant environ 16 heures à 0 , et on délaye dans un mélange d'éther et d'éther diisopropylique. On sépare par centrifugation le produit qui a précipité. Le résidu est dissous dans un peu de DMF et on fait précipiter le produit par addition de méthanol et d'eau. Le produit est centrifugé, séché sous vide et utilisé pour la réaction suivante sans autre purification. d) N!-dés oxyfructosyl- (D) Phe-Cys [COC (C3) 31] -Phe- (D) Trp-Lys- Thr-Cys [COC(CH3) 3] -Thr-ol _- - -- - -------------------------------------____ _____ On dissout à 0 le résidu de l'étape c) ci-dessus dans 5 ml d'un mélange 9:1 de TFA et d'eau et on agite pendant 15 minutes. On fait précipiter le produit par addition d'un mélange éther/10% Hcl 5N/étner. On filtre le produit, on le lave à l'éther et on le sèche. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice avec un mélange CHC13/MeOH/AcOH/H20. On réunit les fractions contenant le produit désiré, on les con- centre sous vide tout en ajoutant de l'eau puis on les lyophylise. On obtient ainsi le composé du titre. [2a = -15,3 ( c = 1,0 dans AcOH à 95%). F: 0,88. Exemple 19 2- [ (D) Phe-Cys-Phe- (D) Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol] -2- désoxy-D-glucose H. - S 0o r I (D) Phe-Cys-Phe- (D) Trp-LY8-Thr-CyU-hr-o1 On dissout 2 g de O-()-fructose et 1 g F_ n de H-(D)-Phe-Cys-Phe-(D)-Trp-Lys(BOC)-Thr-Cys-Throl (préparé comme décrit à l'exemple la) dans 100 ml d'un mélange 9/1 de MeOH et de AcOH et on maintient à 65 pendant 16 heures. Après évapo- ration, on dissout le produit dans un peu de méthanol et on fait précipiter le produit avec de l'éther diiso- propylique. Pour éliminer le groupe protecteur (scission du groupe BOC), on utilise le produit brut ainsi obtenu, sans purification préalable. On mélange 1 g du produit brut ainsi obtenu avec 20 ml d'acide trifluoroacétique (100%) et on maintient à la température ambiante jusqu'à ce que le produit de départ soit dissous (5 minutes). On ajoute ensuite 200 ml d'éther diisopropylique, on sépare par filtration le produit qui a précipité et on le lave à l'éther diisopropylique. On purifie le composé du titre par chromatographie sur gel de silice (éluant: CHCI3/meOH/AcOH/H20 7/3/0,5/0,5) et on l'isole sous forme d'un lyophilisat blanc. 2] -6,7 (c = 0,3 dans AcOH à 95%') F: 0,73. Un second produit, le mélange 1:1 suivant d'isomèresayant la configuration inverse sur l'atome de carbone C2 du reste glucidique, peut être obtenu: H0, Ho J o lllVl,. O-.pY Ph tf t.I'Y' 0I. t.S r.I-i l4 ttl,-ct##'4't#r- Exemple 20 ____ _ _ _ _ _ _ l ucose O Mo (O)Phe.-Cys-Tyr-(O)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-oL En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exempe 19 et en utilisant comme produit de départ la Tyr3-SMS à la place de la SMS, on obtient le composé du titre. a20 - 2,9 (c = 1,0 dans Ac0H à 95%) F: 0,95. [a] F: 0,95. D Exemple 21 Glucuronamide du H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol C-(D)Pha-Cys-Ph.(D)Trp-Lys-Thr-CyS-Thr-ol I On traite 170 mg du glucuronamide du H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-($OC)-ThrCys-Thr-ol par 3 ml d'acide trifluoroacétique à 100% jusqu'à obtenir une dissolu- tion complète (5 minutes). On fait précipiter le composé du titre sous forme de trifluoroacétate par addition de 20 ml d'éther diisopropylique. Après filtration, séchage et chromatographie sur gel de silice (éluant: CHC13/MeOH/AcOH/H20 7/3/0,5/0,5), on obtient le composé du titre à l'état pur sous forme d'un lyophilisat (acétate). la]0 = 29,2o (c = 0,48 dans AcOH à 95%) F: 0,85. Le produit de départ peut être obtenu comme suit: A une solution refroidie à -30 C de 450 mg de H-DPhe-C'ys-Phe-DTrp-Lys(BOC)-Thr-Cy's-Thr- ol, 117 mg d'acide glucuronique et de 135 mg de HOBT dans du diméthylformamide, on ajoute une solution à 135 mg de DCCI dans 2 ml de DMF. Après 48 heures avec décon- gélation simultanée à la température ambiante, on sépare la dicyclohexylurée par filtration et on fait précipiter le composé du titre par addition de 20 ml d'éther diisopropylique. Après filtration, séchage et chromatographie sur gel de silice (éluant: CH2C12/ MeOH 9:1), on obtient le composé du titre à l'état pur. [a]D = +16,7 (c = 0,50 dans le DMF). Exemple 22 Quinaride du N-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol (O)Phe-Cys-Phe-(O)TrpLys-Thr-Cys-Thr-a1 En procédant de la manière analogue à celle décrite à l'exemple 21 et en utilisant comme produit de départ l'acide L(-)quinique, on obtient le composé du titre. [2]0 = 50 (c = 0,44 dans AcOH à 95%) F: 0,97. EaD Exemple 23 Sialamide du H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol HO OH OH l C(O)PheCys-Phe-(O)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-a L H OH En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 21 et en utilisation comme produit de départ l'acide sialique, on obtient le composé du titre. [a]J0= -60,8o (c = 0,6 dans AcOH à 95%) F:0,95. Exemple 24 Ne-(O-O-D-glucosyl-oxyaCetyl)-DPhe- Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol \OCH CO "e," xo)P" cys.Pht..o)rrp-Lys-trh-cs-fhr-l On dissout 250 mg de (tétra-O-acétyl-O-B- D-glucosyl)-oxyacétyl-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-(BOC)-Thr-Cys- Thr-ol dans 10 ml de méthanol et on règle à un pH de avec quelques gouttes d'une solution 1N de NaOCH3 dans du méthanol. Après réaction pendant 15 minutes, on neutralise la solution avec une résine échangeuse d'ion (par exemple AMBERLYSTO15, H*) et on sépare la résine par filtration. On concentre le filtrat et on traite le résidu pendant 5 minutes avec 3 ml d'acide trifluoroacétique. On fait précipiter le composé du titre sous forme de trifluoroacétate par addition de 20 ml d'éther diisopropylique et on l'isole à l'état pur sous forme d'un lyophilisat blanc après filtration, séchage et chromatographie sur gel de silice (éluant: CHC13/MeOH/AcOH/H20 7/3/0,5/0,5). [a]0= _39,2 (c = 0,60 dans AcOH à 95%) F:O,91. Le produit de départ peut être préparé comme suit: a) ster benzyli9ue de l'acide tétra -0-acétyl-0-B-D A une solution de 830 mg de glycolate de benzyle dans 50 ml de CH2C12, on ajoute 2,5 g de tamis moléculaire 4 A pulvérisé et, après addition de 2,8 g de trifluorométhane-sulfonate d'argent, on ajoute goutte à goutte une solution de 4,1 g d'acétobromoglucose dans 50 ml de CH2C12. Après 2 2V minutes, on arrête la réaction par addition de 4 ml de pyridine, on sépare les produits solides par filtration et on extrait le filtrat avec une solution à 10% de NaHS04. Le composé du titre est isolé à l'état pur après chromatographie sur gel de silice ( éluant: CH2C12 / MeOH 99/1). [a] = _22,4 (c = 1,7 dans CHC13). b) Acide tétra-:0-aceétyl-:-:-D- ucosy:l-:ycoliaue On dissout 800 mg d'ester benzylique de l'acide têtra-O-acetyl-0-6-D-glucosyl-glycolique dans 40 ml d'un mélange à parts égales en volume d'éthanol et d'eau, on ajoute 400 mg de charbon palladié à 10%0 et on hydrogène sous environ 3, 45 bar dans un appareil "PARR".Le composé du titre est isolé à l'état cristallisé après filtra- tion et concentration sous vide. [a]io = _35,5 (c = 1,03 dans MeOH). c) N--(tetra-O-actyl-O--D-glucosyl-oxyacétyl)-DPhe- Cy-heD2-lr27 LTr-y-Tr -------------- A une solution refroidie à -30 C et constituée de 81 mg d'acide têtra-0-acètyl-0-6-D-gucosyl- glycolique, de 225 mg de H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys(BOC)- Thr-Cys-Thr-ol et de 45 mg de HOBT dans 2 ml de DMF, on ajoute 45 mg de DCCI dissous dans 1 ml de DMF. Après 48 heures et après réchauffement à la tempéra- ture ambiante, on sépare la dicyclohexylurée par filtration et on ajoute 200 ml d'éther diiso- propylique au filtrat, ce qui fait précipiter le composé du titre. En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 24, on peut préparer également les composés suivants dans lesquels SMS signifie le reste polypeptidique de formule -DPhe-Cs-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol). Exemple 25 Na-(O-O-D-galactosyl-oxyacétyl)-SMS m " ? i cw ô_S O _ _ _ _ _ _ 0 'O OCHW-(O)Phe-Cys-Phe-(O)Tr:-Lys-Thr-Cys-Thr-ol tN H : 09 [a]D0 = 37, 5O (c = 1 dans AcOH à 95%) F 0,95 Exemple 26 N NO O CZ 9Z a Ld0ax3 ú6'0: Jg (%'6 e HO: suep c I -D).6'Z =) oz 6o):ú- - 0 [oz Z aLdmax3 CL L6'0 =_(% H0DV SUep L =D) oS Zú- = 0 nL 0 ou To-D o i66609f I9 6 66 0 9Z Ss Exemple 29 (N-acétylmuramyl- (D) Phe] -SMS H HO O HCH OH H HO H H \NHAc i] HE CO)NPh-C -Phe -( O)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-o1 [=20.-154 * Da] -D-15,4 (c 1 0,13, dans AcOH à 95,) F 0,9 Exemple 30 :D_:G_!u.co.-thiocarbam.oz!:SMS OH HO W A 620 mg de E-Fmoc-SMS dans 50 ml de CH3CN/H20 3:1, on ajoute 0,45 ml de triéthylamine puis 272 mg d'isothiocyanate de 2,3,4,6-tétra-0- acétyl-f-D-glucosyleet on maitient le mélange pendant une heure à la température ambiante. Après évaporation du mélange sous vide, on reprend le résidu dans un peu de méthanol et on le-traite par de l'éther diisopropylique, ce qui fait précipiter leproduit à l'état pratique- ment pur. Pour éliminer le groupe Fmoc et lesgroupes acétyle, on traite le produit dans 50 ml de méthanol absolu par une quantité catalytique de NaOCH3 1N dans du méthanol.Après 30 minutes (vérification par chromatographie en couche mince), on neutra- lise le mélange par de l'acide acétique à 1% et on évapore sous vide. On reprend le résidu dans de l'eau et on l'extrait avec de l'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est lyophilisée et le résidu est purifié sur gel de silice et déminéralisé par exemple sur Duolite. On obtient ainsi le composé du titre sous forme d'un lyophilisat. r]20 = -48,5 (c=l,AcOH à 95%) F: 1 D' La ú- Fmoc-SMS utilisée comme produit de départ peut être préparée comme suit: A 5 9 d'acétate de SMS et 5 g de NaHCO3 dans 100 ml d'un mélange 3:1 de DMF et d'eau,on ajoute 1, 6 g de Fmoc-HOSu. Après une heure à la température ambiante, on dilue le mélange avec 400 ml d'eau et on l'extrait avec 250 ml d'un mélange 95:5 d'acétate d'éthyle et de méthanol. On sèche. la phase organique sur Na2 SO4 et on la concentre. Après chromatographie sur gel de silice, on obtient le produit sous forme d'une substance amorphe. [a]J0 = 24,3 (c = 1,13 dans le DMF). D En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 30, on peut obtenir les composés suivants: Exemple 31 Cellobiosylthiocarbamoyl-SMS _________ -___ ________ -___ HO Phe.Cys. phEm-(O>Trli-LlThr-CylSTbo OH c20 []D: -4,3 (c - i, dans AcOH à 95%/) F - 087 Comme produit de départ, on utilise l'iso- thiocyanate d'octa-acétyl-cellobiosyle. Exemple 32 cyanate de 2,3, o,6-têr--céyM-Sguoye _=D. _.! _. S. _. _! _. _.. b _ _.m9 =S -,HC- 20. 20 ] =s - 39,9 (c- l, dans AcOH à95%) F = 0,] Comme produit de départ, on utilise l'iso- cyanate de 2,3,4,6-tétra-0-acétyl--D-glucosyle. Exemple 33 ce!lobios! carba..mo_1-SMS O ON.C{)P -Cys. phe..O)>TLT#hf- CySlTht'ol HO ON Ea]J0._37 9O (c = 1, dans/OHà95%) F - 0,85 Comme produit de départ, on utilise l'iso- cyanate d'octa-acétyl-cellobiosyle. Exemple 34 l..déoxy D-sorbitX1:SMS HO (O} Phl.CyI.Phl*(O)l)t-Ly$-Thó'Cyl'Thi"ol OH OH HO # (O> phe.Cyl.Ph. Ttp.ys -Thi-Cyl -Thr,-oI On traite 0,5 mg du composé du titre de l'exemple 1 dans 50 ml de méthanol d'abord par NaBH4 puis par de l'acide acétique à 5%,, sous des con- ditions telles que le pH ne dépasse pas 7. La quantité totale de NaBH4 utilisée est d'environ 10 équivalents La réaction terminée (4-5 heures), on traite le mélange par de l'acide acétique pour détruire l'excès de NaBH4 et on concentre le mélange sous vide. Le résidu est déminéralisé par exemple sur duolite et purifié sur gel de silice. Le produit principal est le composé du titre sous forme d'un lyophilisat, accompagné de l-désoxy-D-mannityl-SMS. 2a0 -17,6 (c = 1 dans AcOH à 95%) F = o,88. Exemple 35 -D- lucosyl(1-4)dêsoxysorbityl-SMS En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 34 et en utilisant 'comme produit de départ le composé du titre de l'exemple 2, on obtient le composé suivant: HO.H "0 O CR I Co phelCy sphe.(DJTrp-.sy-Thr-Cys-Thr.oi [a]0 = +1,60 (c = 1 dans AcOt)! F:O,9. Exemple 36 Z-s. rt!:it-SMS. D; H O; (O) Mh-pl(orpI '! t On traite 0,55 g de Boc-SMS 'ans 30 ml d'un mélange 3:7 de dioxanne et d'eau paP 50 ml de NaBH3CN. On ajoute 250 mg de 2-désoxy-D-glucose, on règle le pH du mélange à 7 avec duq-Cl 0,1 n et on le chauffe à 100 pendant 6 heures. On refroidit le mélange, on le congèle et on le lyophilise. On reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle (50ml) et on l'extrait à l'eau. On sèche la phase organique et on l'évapore sous vide. Le groupe BOC est éliminé selon les méthodes classiques à l'aide de TFA. Le produit est purifié sur gel de silice et déminéralisé par exemple sur duolite, ce qui donne le composé 25 du titre. [la]0 25,5 (c = 1, AcOH à 95%) F:0,83. En procédant de manière analogue, on peut préparer le composé de l'exemple 34 précédent (en partant du glucose) et le composé de l'exemple 35 précédent (en partant du maltose) Exemple 37 N-isocaproyl-des(1-4)-[A1 a7,Nú-(1-désoxyfructosyl)-Lysl,18] calcitonine de saumon CH. 7 CX P -4AThrh-cT--Gly-/.y.4.-The-tZR.y-oC 1t t ' Ma 2 On dissout 10,3 g de polyacétate dE '-iso- caproyl-des(1-4)-[Ala7]-calcitonine de saumc et 1,8 g de D(+)-glucose dans un mélange de 94 ml de IF et de 6 ml d'acide acétique. Apres 2 heures à 50 on fait précipiter entièrement le produit par E tition d'éther, on l'essore, on le lave à l'éther E on le sèche sous vide. Pour purifier le produit, c dissout environ 5 à 10 g de produit dans de l'eau, o injecte la solution sur une colonne à phase inversée de 4 x 25 cm (silicagel, C-18) et on chromatgraphie avec un gradient d'eau et de O à 80% d'un mé ange de solvants comprenant 38 parties d'eau, 60 prties d'acétonitrile et 2 parties d'acide phosphorique à 85%. Les fractions contenant le produit à l'état iur sont réunies, filtrées sur une colonne d'environ 100 ml d'une résine échangeuse d'ionslégèrement bas que sous forme acétate,et lavées à l'eau. Le filtrat -st lyophi- lisé, ce qui donne le composé du titre sous forme de polyacétate, polyhydraté. a[D] = 34,8 (c = 0,73 dans CH3COOH à 95%1) F:0,93. Spectre de masse par bombardement d'atomes rapides: 3407 (MH+). Le Na-isocaproyl-Ser-Thr-Ala-Val-Leu-Gly-Lys- Leu-Ser-GlnGlu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Thr-Po-Arg-Thr-Asn- Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH utilisé comme produit de départ peut être préparé comme suit: a N=-isocaproyl-Ser(But)-Thr(But)-Ala-Val-Leu-OCH2-phényL- (p)OCH2-co-(polystyrmne-l%-divinyLbenz&ne) On laisse gonfler 1 g de p-hydroxyméthyl- phénoxyméthyl-co(polystyrène-l%-divinylbenzène) dans un mélange 1:4 (vol. /vol.) de DMF et de chlorure de méthylène, on essore et on mélange avec une solution de 0,74 g de Fmoc-leucine et 0,19 g de l1hydroxybenzotriazole dans 5 ml du mélange de solvant mentionné ci-dessus. Tout en agitant, on ajoute 0,43 g de dicyclohexylcarbodiimide et 85 mg de 4-diméthylaminopyridine, chacun dans 5 ml du même mélange de solvant. On agite le mélange pendant 16 heures à 20 , on l'essore et on le lave avec le mélange de solvant, puis avec du diméthylformamide. On obtient ainsi le Fmoc-Leu- OCH2-phényl-(p)-OCH2-co(polystyrène-l%-divinyl- benzène). Le groupe Na-Fmoc de ce produit ( 1,56 g correspondant à 0,7 mMole) est éliminié par traite- ment avec de la pyridine (20%i vol./vol.) dans du DMF pendant 10 minutes. On lave bien avec du DMF et on ajoute ensuite 0,71 g de Fmoc-Val-OH, 0,28 g de l-hydroxybenzotriazole et 0,32 ml de diisopropylcarbodiimide, chaque produit étant dissous dans 5 ml de DMF. Après 45 minutes, on essore le mélange et on rince bien la résine avec du DMF. On répète l'élimination du groupe Na- Fmoc ainsi que le couplage avec les amino_ acides suivants et dans l'ordre indiqué: Fmoc-Ala-OH (0,65 g), Fmoc-Thr(But)-OH (0,83 g) et Fmoc-Ser(But)-OH (0,80 g). Dans le dernier cycle de réaction (élimination du groupe protecteur Fmoc, acylation avec l'amino-acide protégé), le dérivé d'amino-acide est remplacé par l'acide isocaprolque (0,41 g), la quantité de l-hydroxybenzotriazole est portée à 0,53 g et celle du diisopropylcarbodi- imide à 0,54 g, et le couplage est effectué pendant heures. La résine avec le peptide protégé est bien lavée avec du DMF et du chlorure de méthylène et séchée sous vide à 40 C pendant 15 heures, ce qui - donne la résine avec le peptide orotégé sous forme d'une poudre incolore. b) Nz-isocaurovl-Ser-Thr-Ala-Val-Leu-OH On agite 1 g de composé du titre de l'exemple a) ci-dessus, dans un mélange de 5 ml d'acide trifluo- roacétique et de 5 ml de chlorure de méthylène. On filtre le produit, on le lave avec 5 ml du même mélange, puis avec du chlorure de méthylène, on concentre fortement sous vide et on fait précipiter entièrement par addition d'éther. On lave bien le précipité à l'éther et on le sèche sous vide sur hydroxyde de potassium solide, ce qui donne le composé du titre sous forme d'une poudre amorphe incolore. c)N -isocaproyl-Ser-Thr-Ala-Val-Leu-Gly-Lys(Boc)-Leu-Ser- Gln-Glu(OBut)-Leu-His-Lys(Boc)-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg- Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 ____________________________________________________ A une solution de 0,165 a du composé de l'étape b) ci-dessus dans 7 ml de DMF, on ajoute 0,59 g de chlorhydrate de H-Gly-Lys(Boc)-Leu-Ser- Gln-Glu(OBut)-Leu-His-Lys(Boc)-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro- Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2, 0,017 g de 3,4-dihydro-3-hydroxy4-oxo-l1,2,3-benzotriazine, 0,065 g de dicyclohexylcarbodiimide et suffisamment de N-éthyl-N,N-diisopropylamine pour qu'un échantil- lon du mélange réactionnel indique un pH d'environ 6 sur du papier pH humide. Après 16 heures, on fait précipiter le produit par addition d'éther et on le sèche. On obtient ainsi le composé du titre. d) Na-isocaproyl-Ser-Thr-Ala-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu- His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser- Gly-Thr-Pro-NE2 On dissout 0,50 g du peptide partiellement protégé de l'étape c) ci-dessus dans un mélange d'acide trifluoroacêtique à 50% (vol. /vol.) et de chlorure de méthylène. Après 1 heure, on ajoute 50 ml d'éther contenant 0,6 mMole de HC1. On filtre le produit, on le lave à l'éther et on le sèche sous vide. Le produit est purifié par chromato- graphie en phase inversée avec un gradient d'acé- tonitrile dans H3P04 (2%). Les fractions réunies contenant la substance à l'état pur sont filtrées sur résine échangeuse d'ionsbasique sous forme acétate, et le filtrat est lyophilisé, ce qui donne le composé du titre sous forme de poly- acétate polyhydraté. []0 = _32,2o (c = 0,3 dans AcOH à 95%) F: 0,87. Exemple 38 N -isocaproyl-des-(1-4)-[Ala7, N-(a-D-glucosyl(1-4)-dés- oxyfructosyl)-Lys11'18] calcitonine de saumon CH_ CH 2 5 --C / 5 CHZ R 1 2 7 Il1 H -CO-Ser-Thr-Al4_Val Alrjy Lys-Leu-Ser-Gln-lu-Leuis-Lys-Leuln- R Thr-Tyr-Prorg-Thr-Amn-thrG1ly-Ser-Gly-Thr-wro.NH2. CHco R3 11 M Le dérivé di-NL- -maltulosylique correspon- dant est préparé de manière analogue à celle décrite à l'exemple 37 en utilisant le monohydrate de D(+)- maltose à la place du D(+)-glucose. La durée de réac- tion à 500C est de 15 heures. L'isolement et la purifi- cation du produit sont identiques. On obtient le composé du titre sous forme de polyacétate polyhydraté. Spectre de masse par bombardement d'atomes rapides: + 3730,9 (MH). [ =] 15,2o (c = 0,16 dans AcOH à 95%). F: 0,97. En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 37, on peut préparer les composés suivants: Exemple 39 N_-isocaproyl-[Nf -(1-désoxyfructosyl)-Lys7]-calci- tonine de saumon-(5-32)amide CH CH, CH H H2 5' 7 1.0 Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-S.c-Gy-Thr-Pr.-!,h. 3 CH.3Co1 la]20 _ 40,0O (c= 0,27 dans AcOH à 95%) F: 0,84. Exemple 40 Na,Lysl -Nú, LyslMNE -tris-(l-désoxyfructosyl)-calci- tonine de saumon zl if No [a20 =.5,30 (c = 0,38 dans AcOH à 95%) F:0,75. Exemple 41 Ns-isocaproyl-des(1-4)-NE-(1-désoxyfructosyl)-Lys7'11'18] calcitonine de saumon-(5-32)amide CH CH) I À 2,7i 10 " i CH.l-CO-SertThr.y.S.Val-Leu-Gly Lyg -Leu-Ser-Gln-Gl u-Lou 4syS-LeuCIn Z 32 rhr-ryr Pro. pArg-.rThr-A.n-Thr-.ly-Ser-GIy-Thr-Pro.M2 R -q o t.20, 37,4' (c C* o 155 AcOH, 95%) r-yl* Exemple 42 N -quinoyl-[Ala7]-calcitonine de saumon-(5-32)-amide 7 /CO-Ser-Thr-Al-Val-Leu-Gly -Lys-Leu-Ser-GJ-Glu-Leu-4i-L ys-Leu-Gln- Thr.Tyr,.Po.rq-AgThr.A n.Thr.Gly-Ser.Gly.Thr-Pro. 2 * CH C Le composé du titre est préparé de manière analogue à celle décrite à l'exemple 21. 7 (c=0,37 dans AcOH à 95%) F:0,88. [=] _ -35,7 (c:0,37 dans AcOH ài 95%) F:0,88. Exemple 43 Na-quinoyl-EAla7]-calcitonine de saumon-(4-32)-amide NO rmr-Ty"r-pA.' rThIS,.Gy4.NK M 3CHm rhrTYrPrerg-Thr-Aon-Thr-Gly-SerCly-Thr-Pte {.5>C Le composé du titre est préparé de manière analogue à celle décrite à l'exemple 21. :_,3 [a]D =393 (c= 0,29 dans AcOH à 95,%) F:0,89. O 7 Le [Ala]-calcitonine de saumon -[5-32]- amideet le [Ala7]-calcitonine de saumon-(4-32)-amide nécessaires comme produitsde départ pour les exemples 42 et 43, peuvent être préparés de manière analogue à celle décrite pour le produit de départ de l'exemple 37. Exemple 44 [N-désoxy-fructosyl-Cysl]-oxytocine e CM2-Cyu-Tyr.-t [le4l-An-Cys-r@Leuly-NH2 on I On dissout 0,5 g de D(+)-glucose et 0,5 g d'oxytocine dans 50 ml d'un mélange 9/1 de MeOH et de AcOH et on maintient le mélange pendant 3 heures à 650. On concentre ensuite la solution par évaporation, on la chromatographie sur gel de silice et on la débarrasse du sel sur Duolite (gradient: H20/éthanol/AcOH).On obtient un lyophilisat blanc. 2a]0= 23 (c= 0,32 dans AcOH à 95%) F: 0,95. Exemple 45 Ac-(D)-Phe(4-CI)-(D)Phe(4-Cl)-(D)Trp-Ser-Tyr- (D}Lys#)'-c P) -(r- ->a'(lA&N'2 On dissout 60 mg de Ac-(D)-Phe-(4-Cl)-(D)- Phe(4-Cl)-(D)-Trp-Ser-Tyr-(D)-Lys-Leu-Arg-Pro-(D)-Ala- NH2 et 72 mg de D(+)glucose dans un mélange de 10 ml de MeOH et 1 ml de AcOH et on agite le mélange pendant Environ 20 heures à 60 .On fait précipiter le produit par addition d'éther et on le centrifuge. On dissout le résidu dans environ 100 ml de H20 et on règle le pH à 8 avec une solution diluée de NaOH. On fait passer le produit sur une colonne de Duolite ES 861 en éluant avec un gradient H20--> dioxanne-H20-AcOH (60:40:3). Les fractions contenant le produit désiré sont concentrées sous vide et lyophilisées. On obtient ainsi le composé du titre. [ =o -25 (c = 0,5 dans AcOH à 95%) F: 0,83. Exemple 46 N,N B,N B29-tris(l-désoxyfructosyl)-insuline de porc On agite pendant 2 heures à 60 une suspen- sion de 1 g (0,17 mmole) d'insuline de porc et 0,47 g (2,6 mmole) de glucose dans 10 ml d'un mélange 9:1 de DMF et d'acide acétique. On élimine le solvant par évaporation à 30 sous vide poussé, on dissout le résidu dans 300 ml d'eau, on règle le pH à 7 et on fait passer la solution à travers une colonne déminéralisante (Duolite ES 861, 2,5 x 15 cm). Le glucose est élué avec de l'eau et le peptide avecun mélange 59:39:2 d'isopropanol, d'eau et d'acide acétique glacial. Après évaporation du solvant et lyophilisation, on dissout la. substance dans 300 ml d'eau et on la purifie par chromatographie en phase inversée (2 x 25 cm, RP 18, 10 nm, solution tampon: 57 mmoles NaClO4, mmoles de triéthylamine, 8,4 mmoles d'acide phospho- rique, pH réglé à 3 avec NaOH 4N; gradient: 0-65%i' A-B: Tampon A: Tampon pH 3 / acétonitrile 9:1 Tampon B: Tampon pH 3 / acétonitrile 4:6). Les fractions contenant le composé du titre sont recueillies, réunies, concentrées, diluées avec 300 ml d'eau et passées à travers une colonne déminé- ralisante comme décrit ci-dessus. Les sels sont élués avec de l'eau et le peptide est élué avec un mélange 59:39:2 d'isopropanol, d'eau et d'acide acétique glacial. Les fractions appropriées sont réunies, concentrées et lyophilisées, ce Qui donne le composé du titre. [a]2 0 =-56,3 (c = 0,5 dans AcOH à 95%) F: 0,88. Exemple 47 Na Lys 2.NLys21.-Nú-tri$i(-d(1 xyfructosy - (OCAl ]-hpGRF-(1-29)-NH2 Arg._L>s4N le-4-2 *ÀBah 30. En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 37 et en utilisant comme produit de départ la EDAla2]hpGRF, on obtient le composé du titre. [a] -5, 6 (c = 0,2 dans AcOH à 95%) F: 0,82. Exemple 48 N,Ni-bis(l-désoxyfructosyl)-Lys-vasopressine R R-Cys-Tyr-Phe-G 1.-As nCys-Prol.ys4 Iy 2 R.L o O O OH, ak On agite pendant 2 à 4 heures à 65 une sus- pension de 118 mg (0,1 mmole) de Lys -vasopressine et 360 mg (2 mmoles) de glucose dans 5 ml d'un mélange 9:1 de méthanol et d'acide acétique glacial. On élimine le solvant sous vide, on reprend le résidu dans 30 ml d'eau et on lyophilise la solution. Pour éliminer l'excès de glucose, le peptide (solution dans 40 ml d'eau, pH 7,3).est adsorbé sur une colonne de Duolite (1,5 x 10 cm). Le glucose est élué à l'eau et le peptide avec un mélange 59:39:2 d'iso- propanol, d'eau et d'acide acétique glacial. Après évaporation sous vide et lyophilisation, on purifie le produit par chromatographie sur gel de silice (chloroforme/méthanol/acide acétique glacial/ eau 7:4:1:1). On réunit les fractions contenant la substance pure, on les concentre et on les lyophilise. On obtient ainsi le composé du titre. [a]:52o (c = 0,5 dans AcOH à 95%) F: 0,84. [D Exemple 49 fêlt (11)(0h"(O) yl()-(O)h4) 2. Aette En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 45 et en utilisant comme produit de départ le Ac-(D)-Phe(pCl)-(D)Phe(pCl)-(D)-Trp-Ser- Lys-(D)-Phe-Leu-Arg-Pro(D)Ala-NH2 acétate et le D(+)glucose, on obtient le compose du titre. 320 = -36 (c = 0,5 dans AcOH à 95%') F = 0,86. [D Exemole 50 1 o I L(.D)Phe(pCl)-(O)Ph,(pCl)-(D)Trp-Ser-Tyr-(D)Ph4.eu.Arg..Pro. (D)AIla-z, Aetmte& En procédant de manière analogue à celle décrite à l'exemple 45 et en utilisant comme produit de départ le H-(D)-Phe)pCl)-(D)Phe(pCl)-(D)-Trp-Ser- Tyr-(D)-Phe-Leu-Arg-Pro-(D)Ala-NH2 acetate et le D(+)glucose, on obtient lé composé du titre. [2]0 = _32 (c = 0,5 dans AcOH à 95%) F:0,94. D Exemple 51 (-30E(pC)-(O)')))S--O).D)A, ( ' ' On agite pendant environ 3 heures à 60 mg de H-(D)Phe(pCl)-(D)Phe(pCl)(D)Trp-Ser-Tyr-(D) Lys-Leu-Arg-Pro-(D)Ala-NH2 et 520 mg de D(+)glucose dans un mélange 15:1 de DMF et de AcOH. On concentre le mélange sous vide, on le fait précipiter par de l'éther, on le filtre et on sèche le produit. Le résidu est purifié comme suit: 1) Adsorption sur Duolite ES 861 et élution avec un mélange dioxanne / H20/AcOH. 2) Chromatographie sur colonne de gel de silice (mélange CHC13/AcOH/H20). 3) Chromatographie préparative (HPLC) sur phase inversée (C18-silicagel). Elution avec un gradient acétoni- trile dans i3P04 à 2%. On réunit les fractions contenant le composé du titre, on les filtre sur une colonne contenant une résine échangeuse d'ionsfaiblement basique sous forme acétate, on les concentre et on les lyophilise On obtient ainsi le composé du titre. [a] =22,6o (c = 0,5 dans AcOH à 95%) F:0,63. L'exemple suivant illustre le procéde en phase solide de préparation du peptide-alcool H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-Ol Exemple 52 1) N-CF CO-thr-oninol-acétal de l'acide _-formylehénoxy: ac tique A 200 ml de méthanol, on ajoute sous courant d'azote 105 g de L-threoninol. A la solution limpide ainsi obtenue, on ajoute goutte à goutte à 0 une solution de 200 ml de trifluoroacétate de méthyle dans 250 ml de méthanol. Le mélange est main- tenu à une température d'environ IU par refroidissement avec un bain de glace. Après une heure et demie, on ne peut plus déceler de threoninol libre dans le mélange. Par évaporation à 40 , on obtient un résidu cristallisé blanc. On dissout le résidu à 70 dans 200 ml d'acétate d'éthyle et on le fait précipiter par addition de 100 ml d'hexane. On refroidit le mélange à 0 , on filtre le produit, on le lave à l'hexane et on le sèche à la température ambiante. On obtient ainsi le N-tri- fluoroacétylthréoninol. Sous azote, on dissout 50,3 g (0,25 mole) du produit obtenu ci-dessus dans 1,25 litre de tétrahydrofuranne et on ajoute goutte à goutte à la température ambiante 75 ml de triméthyl- chlorosilane. Immédiatement après, on ajoute un mélange de 70 ml de triéthylamine et de 250 ml de tétrahydrofuranne. Il se forme une suspension blanche que l'on agite pendant 4 heures à la tempéra- ture ambiante. On filtre ensuite le mélange et on évapore le filtrat à environ 40 , ce qui donne une huile. * On dissout l'huile dans 1,5 litre de chlorure de méthylène et on ajoute par portions 90,4 g d'acide p-formyl-phénoxyacétique. On ajoute ensuite par portions 9 ml de trifluorométhane-sulfonate de triméthylsilyle, on agite le mélange pendant 24 heures à la température ambiante, on le filtre et-on lave bien le résidu avec du chlorure de méthylène. On évapore le filtrat à 40 , ce qui donne un produit résineux rouge orangé. On chromatographie ce produit sur gel de silice en utilisant de l'acétate d'éthyle comme éluant. Par évaporation des fractions appropriées, on obtient le composé- du titre ayant une pureté de 97% (HPLC). 2) Synthèse de l'octa-2eptiderotgé 17,2 g de polystyrène aminométhylé (0, 7% en poids d'azote correspondant à 0,5 mmole de groupes amino-méthyle par g de résine) sont mis en suspension dans 80 ml d'un mélange 4:1 de chlorure de méthylène et de DMF.et on y ajoute successivement 4,17 g du produit final de l'étape 1, 1,6 g d'hydroxybenzotriazole et 4,0 g de DCCI. Après 2 heures d'agitation à la température ambiante, le test Kaiser est négatif. On filtre ensuite le mélange et on lave. On met à nouveau la résine en suspension dans 100 ml d'un mélange 3:1 de tétrahydrofuranne et de méthanol et on ajoute par portions 10,4 g de borohydrure de sodium. On agite le mélange pendant 6 heures a la température ambiante, on le filtre et on lave la résine. On met à nouveau la résine en suspension dans un mélange 4:1 de chlo- rure de méthylène et de DMF et on ajoute 5,57 g de Fmoc-Cys (S-t-Bu)OH, 1, 74 g d'hydroxybenzotriazole et 3,6 g de DCCI. Après élimination du groupe protecteur Fmoc avec de la pipéridine (2 x 20 minutes), on couple successivement dans l'ordre indiqué les amino-ecides suivants protégés à l'azote par un groupe Fmoc, en utilisant de l'hydroxybenzo- triazole et du DCCI: ThrOH, Lys (BOC)-OH, D-TrpOH, Phe-OH, Cys(S-tBu)OH et D-Phe-OH. On obtient ainsi le Fmoc-octapeptide sur résine. Charge finale = 0,26 mmole/g. 3) Oxydation et scission La résine ainsi obtenue est mise en suspen- sion dans 100 ml d'un mélange 1:1 de trifluoro- éthanol et de chlorure de méthylène. On ajoute ensuite 50 ml de tributylphosphine et on agite le mélange pendant 70 heures à la température ambiante. On filtre le mélange, on le lave et on ajoute 100 ml d'un mélange 1:1 de tétrahydro- furanne et d'une solution 1N d'acétate d'ammonium. On ajoute ensuite 1,1 ml d'une solution aqueuse à 30% d'eau oxygénée et on agite le mélange à la température ambiante pendant 24 heures. On ajoute ensuite un mélange de 20 ml d'acide tri- fluoroacétique, de 80 ml de chlorure de méthylène, de 10 ml d'eau et de 2 ml de thioanisole et on agite pendant 2 heures. Après filtration, on lave avec de l'acide trifluoroacétique et du chlorure de méthylène. On ajoute 200 ml d'éther diéthylique au filtrat, on sépare par filtration le produit qui a précipité, on dissout le produit dans un tampon aqueux, on déminéralise la solution par traitement avec de la Duolite et on la lyophilise sous forme d'acétate. On obtient ainsi l'octa-peptide sous forme d'acétate. Les composés des exemples précédents, par exemple les composés des exemples 1 et 2 peuvent être préparés de manière analogue. Exemple 53 Préparation de la Na-[a-glucosyl(-4)-désoxyfructosyl)- SMS (voir exemple 2) En procédant comme décrit à l'exemple 52, on prépare 393 g de l'octapeptide lié à la résine. Les groupes protecteurs de la cystéine sont éliminés par réduction. Le peptide lié à la résine est oxydé en octapeptide cyclique par l'eau oxygénée dans un mélange de tétrahydrofuranne et d'eau. Après lavage dans du tétrahydrofuranne et ensuite dans du DMF, la résine est extraite par 3600 ml d'un mélange 8:1 de DMF et de AcOH. On traite la suspension par 526 g de D(+)maltose monohydraté. On chauffe le mélange à 60 et on l'agite pendant 18 heures à cette température. Le mélange est refroidi et la résine est séparée par filtration et lavée successive- ment avec du DMF et du méthanol puis avec du chlorure de méthylène. Le peptide est scindé de la résine pendant 1 heure avec un mélange de 2900 ml de chlorure de méthylène et 716 ml d'acide trifluoroacétique avec une trace d'eau. On agite ensuite le filtrat, on ajoute par portions 597 g de carbonate de sodium, on agite pendant minutes et on filtre. On lave le résidu avec du chlorure de méthylène et du méthanol et on concentre le filtrat à sec. On le déminéralise à l'aide d'une colonne de polystyrène du type Duolite, ou en phase liquide (HPLC) à phase inversée, par exemple sur gel de silice traité au silicone et comportant des groupes alcools gras à chaîne longue (par exemple Labomatic, Suisse, marque HB-SIL-18-20-10O). On obtient ainsi le composé du titre à l'état pur. Les composés de l'invention présentent d'intéressantes propriétés pharmacologiques et peuvent donc être utilisés en thérapeutique comme médicaments. L'activité des composés de l'invention peut être mise en évidence dans des essais biopharmaceutiques et pharmaceutiques classiques. Les composés sont en général au moins aussi puissants que le peptide non modifié (c'est-à-dire le peptide correspondant non glucosylé) après administration par injection ou par voie orale. Ils sont en général mieux absorbés, sont plus facilement solubles dans l'eau, et ont une plus longue durée d'action. Les composés de l'invention sont donc indiqués pour être utilisés pour les mêmes indications que celles des peptides non modifiés. Les composés de l'invention peuvent être comparés aux peptides non modifiés dans des essais classiques de biodisponibi- lité. Les composés de l'invention peuvent par exemple être décelés dans le plasma sanguin sur une plus longue période après leur administration que les peptides non modifiés, comme il résulte des essais de biodisponibilité classiques. Les composés de l'invention et le peptide non modifié peuvent être administrés par voie orale ou intraveineuse par exemple à des chiens, en une seule dose suffisante pour obtenir l'effet thérapeutique désiré. Les doses utilisées sont celles permettant de déceler le peptide ou l'un de ses métabolites dans le sang. La détection peut être effectuée selon les méthodes habituelles, par exemple selon la méthode de dosage radioimmunologique (RIA). Dans l'essai mentionné plus haut, on a trouvé par exemple que le composé de l'exemple 2 administré par voie orale, produit des concentrations dans le sang dix fois supérieures à celles obtenues avec l'octréotide. La biodisponibilité absolue du composé de l'exemple 2 administré par voie orale ou intraveineuse, déterminée par l'AUC (aire sous la courbe) est 5 fois supérieure à celle de l'octréotide. La demi-vie d'élimination par voie intraveineuse est d'environ 2,3 heures alors quelle est d'environ 0,5 heure pour l'octréotide. De plus, les composés de l'invention présentent l'avantage d'être éliminés en grande partie par les reins. Ceci peut être misen évidence par des essais classiques. On fait jeOner des rats mâles (d'un poids de 225-375 g) et on leur administre de l'eau par voie orale (50 ml/kg). On anesthésie les animaux au bout de 30 minutes avec, par exemple, de l'inactine (100 mg/kg par voie intrapéritonéale). On place une canule dans le canal biliaire et la vessie. On met à nu les deux veines jugulaires. Dans l'une d'entre elles, on pratique une perfusion à 5% de glucose et 1 % d'éthanol (5 ml/heure) afin de stimuler la diurèse. On utilise l'autre veine pour effectuer des prélèevements de sang (0,5 ml) toutes les heures pendant 4 heures. On administre le composé de l'invention et le peptide non modifié par voie sous-cutanée à une dose comprise entre environ 10 et environ 1000 microgrammes/kg. On détermine la concentration en composé selon les méthodes habituelles, par exemple par RIA. Dans l'essai ci-dessus par exemple, les résultats suivants ont été obtenus avec le composé de l'exemple 2 et l'octréotide à raison de 10 microgramme/kg: Pourcentage éliminé par voie Biliaire Urinaire Composé de l'exemple 2 1,6 36 Octréotide 22 19 Alors que l'octréotide est éliminé par voie biliaire et urinaire, le composé de l'exemple 2 est essentiellement éliminé par voie urinaire. On peut montrer une absorption améliorée des composés de l'invention par administration par voie orale, de la manière suivante: On administre par voie orale le composé de l'invention et le peptide non modifié à des rats OFA (par exemple 10 mg/kg). A divers intervalles de temps précis, par exemple 15, 30 et 60 minutes, on prélève des échantillons de sang et on analyse leur teneur en substance active, par exemple par RIA. Dans cet essai, on a trouvé par exemple que le composé de l'exemple 44, administré à une dose de 10 mg/kg, présente une absorption de 50 à 100 % supérieure à celle du peptide non modifié, l'oxytocine. Les résultats sont les suivants: Taux plasmatiques chez le rat, après administration par voie orale. Les résultats sont donnés en ng/ml 15 minutes 30 minutes 60 minutes Oxytocine 7,53 3,60 2,55 Composé de l'exemple 44 11,79 6,98 3, 98 Les activités pharmacologiques des composés de l'invention peuvent être mises en évidence dans des essais pharma- cologiques usuels, par exemple après injection, et, si nécessaire, être comparées à celles des peptides non modifiés, par exemple en termes de puissance et de durée d'action. On peut par exemple effectuer des essais pharmaco- logiques pour vérifier chez les animaux les effets des composés de l'invention sur les hormones. Ainsi, les composés qui inhibitent la sécrétion d'hormones peuvent être soumis à des essais permettant de déterminer la baisse des taux sanguins de l'hormone. Les composés de l'invention qui inhibitent la sécrétion de l' hormone de croissance,en particulier les composés de formule VIII, et plus particulièrement les composés de formule VIII a à f, et réduisent les concentrations de l'hormone de croissance dans le sang, peuvent être soumis aux essais suivants: On fait jeûner des singes rhésus (au moins 5 singes) maintenus sur des chaises et on leur administre le composé de l'invention dans un morceau de banane servant de véhicule. On administre les composés à une dose comprise entre environ 0,1 mg/kg et environ 10 mg/kg par voie orale. On prélève du sang de la veine saphène par un cathéter. On mesure par RIA la concentration de l'hormone de croissance dans le sang. Dans cet essai effectué sur des singes rhésus, on a trouvé par exemple que le composé de l'exemple 2 administré a une dose de 0,1 mg/kg, provoque une baisse de la sécrétion de l'hormone de croissance d'environ 50 % pendant plus de 10 heures, alors que cet effet ne dure que 5 heures avec le peptide non modifié, l'octréotide. Dans un autre essai, on décapite des rats mâles et on prélève du sang 1 heure après administration de manière loga- rithmique du composé inhibant la sécrétion de l'hormone de croissance. On détermine le taux de l'hormone de croissance dans le sang par RIA. Dans cet essai, les composés de l'invention sont actifs à des doses comprises entre environ 0,02 et environ 30 microgrammes/kg par voie sous-cutanée. On a trouvé, par exemple que les composés des exemples 1, 2, 21 et 24 administrés par voie sous-cutanée, ont respectivement une D150 de 0,045, 0,190, 0,3 et 0,2 microgrammes/kg, la D5Is0 de la stomatostatine naturelle administrée par voie sous-cutanée dans le même essai étant de 93 microgrammes/kg (la DI50 indique la quantité de composé requise pour abaisser de 50% la teneur en hormone de croissance par rapport aux animaux témoins non traités). Contrairement à la somatostine naturelle, les composés inhibiteurs de la sécrétion de l'hormone de croissance de l'invention sont fortement actifs dans cet essai pendant une longue période (par exemple 6 heures). L'activité inhibitrice de ces composés a été également mise en évidence après administration par voie orale à des rats mâles ayant des implants d'oestradiol. Dans cet essai, on observe des variations relativement minimes du taux de l'hormone de croissance. L'essai est effectué de la manière suivante: A des rats mâles d'un poids d'environ 300 g, on implante sous la peau dorsale un tube (longueur= 50 mm, di1mètre = 3 mm) de silastic avec 50 mg d'oestradiol, sous anesthésie à l'éther. On ré- utilise ces animaux plusieurs fois (1 à 6 mois plus tard) pour les essais. On administre la substance à essayer par voie sous-cutanée ou par voie orale. Juste avant, ainsi qu'à divers intervalles de temps après l'administration de la substance, on prélève environ 0,8 ml de sang du plexus rétro-orbital, on le centrifuge et on détermine le taux de l'hormone de croissance dans le sérum par RIA. Les composés de l'invention sont plus actifs après administration par voie orale que les peptides correspondants non modifiés, même après plusieurs heures. La DIs50 de chaque composé des exemples 1 et 2 est, au bout de 2 heures, environ 17 à O40 fois Dlus faible que celle du peptide non modifié, l'octréotide. D'autres résultats sont les suivants: Composé de l'exemple DISO par voie orale microgramme/kg 21 500 24 25 Octréotide 1400 Les composés de l'invention sont donc indiqués lorsqu'une inhibition de la sécrétion de l'hormone de croissance est nécessaire. Les indications comprennent le diabète sucré, la prévention et le traitement de l'angiopathie et de la rétinopathie proliférative, ainsi que de l'acromégalie. L'action inhibitrice des composés de l'invention sur'la sécrétion de l'hormone de croissance, inhibe également la sécrétion pancréatique. Cette inhibition peut être mise en évidence dans des essais effectués chez l'animal. La méthode décrite dans Scand. J. Gastroint. 6, 423 (1975) par S.J. Konturek et col. peut être Dtilisée. Les composés de l'invention qui inhibent la sécrétion de l'hormone de croissance inhibent également la sécrétion du suc gastrique et augmentent le pH du suc gastrique de plusieurs unités. Cette activité des composés de l'invention peut être mise en évidence par exemple dans l'essai suivant: On administre les composés de l'invention qui inhibent la sécrétion de l'hormone de croissance, à une dose comprise entre environ 0,05 mg/kg et environ 5 mg/kg, à des rats à jeun chez lesquels on a pratiqué une fistule dans l'estomac. Au bout d'l heure, on ouvre la fistule et on prélève le suc gastrique toutes les 30 minutes. On note les volumes prélevés et on détermine la concentration en acide. Dans cet essai, le composé de l'exemple 2 provoque une augmentation du pH de 6 à 8 pendant 3,5 heures. L'octréotide a provoqué une augmentation des valeurs du pH de 6 à 7 pendant seulement 2 heures. Cet essai montre que le composé de l'exemple 2 est au moins 60 fois plus actif que la cimétidine. Les composés de l'invention qui inhibent la sécrétion de l'hormone de croissance, en particulier les composés de formule VIII, peuvent donc être utilisés en thérapeutique pour le traitement des troubles gastrointestinaux, par exemple pour les ulcères gastriques, les saignements gastro-intestinaux, la pancréatite aigUe et les tumeurs gastro-entéropancréatiques (par exemple, les vipomes insulinomes, glucagonomes etc). Les composés de l'invention qui inhibent la sécrétion de l'hormone de croissance inhibent également la prolifération et/ou la kératinisation des cellules épidermiques, et sont donc indiqués pour le traitement des maladies dermatologiques associés à une prolifé- ration pathologique et/ou à une kératinisation des cellules épidermiques, spécialement pour le traitement du psoriasis. En outre, ces composés peuvent également être utilisés en thérapeutique dans le traitement de la démence sénile dégénérative, également la démence sénile du type Alzheimer (DSTA), ou dans le traitement des algies vasculaires de la face (céphalées répétitives). Pour toutes ces indications, les composés de l'invention qui inhibent la sécrétion de l'hormone de croissance sont avantageusement administrés à des doses comprises entre 2 microgrammes et 20 milligrammes. Si nécessaire, les composés peuvent être administrés en doses fractionnées 2 à 4 fois par jour sous forme de doses unitaires, ou sous une forme à libération prolongée. Les doses unitaires peuvent comprendre entre 0,5 microgramme et mg de substance active. Les dérivés glucosylés de la calcitonine et de ses dérivés et analogues selon l'invention, plus particulièrement les dérivés de formule X, réduisent les taux de calcium dans le plasma sanguin. En outre, ils agissent comme antagonistes fonctionnels de la parathormone pour donner un bilan calcique positif en faveur de l'os. L'activité hypocalcémiante des nouveaux composés peut être déterminée selon les méthodes habituelles, par exemple selon la méthode de M. Azria et col., exposée le 2-4 octobre 1984 lors du Symposium sur la calcitonine qui s'est tenu à Milan et publiée sous forme de brève communication dans "Current Clinical Practice Series" N 42, Excerpta Medica 1986, page 104. Dans cette méthode, on utilise une électrode sélective pour l'ion calcium, afin de déterminer en continu la teneur en ions calcium dans le sang de jeunes lapins ou de chiens. On administre les composés par voie intra-veineuse à raison d'environ 0,1 à environ 10 microgrammes/kg, par exemple correspondant à environ 1 unité internationale par kg. On effectue les mesures pendant 5 heures et on calcule les AUC. On peut également effectuer d'autres essais avec les composés de l'invention, par exemple l'essai décrit par M. Kumar et col., dans J. Endocrinology (1965), 33 page 469, et pratiqué sur des rats auxquels on administre différentes doses provoquant une hypocalcémie, soit de 300 à 6000 U.I. par mg pour les composés de l'invention exerçant une activité hypocalcémiante. On a trouvé, par exemple, que les composés des exemples 37 et 38 administrés par voie intraveineuse à des chiens (5pg/kg), ont une durée d'action bien plus longue que le peptide non modifié. Dans cet essai, on observe après 3 heures une baisse du taux de calcium dans le sang comprise entre 15 et 18 % pour les composés 37 et 38; après 6 heures, on ne peut plus détecter de baisse de calcium dans le sang pour le peptide non modifié, alors qu'avec les composés des exemples 37 et 38, la baisse du taux de calcium était encore aussi prononcée qu'après 3 heures. Les composés hypocalcémiants de l'invention peuvent donc être utilisés en thérapeutique pour le traitement de tous les états nécessitant une baisse du taux de calcium dans le plasma sanguin ou un effet sur le métabolisme osseux, par exemple pour le traitement de l'hypercalcémie résultant d'une déficience en thyrocalcitonine endogène due à la perte de la fonction sécrétrice des cellules C de la thyroïde ou à une hyperfonction de la glande parathyroïde. Ils peuvent également être utilisés pour le traitement de toutes les affections osseuses associées à une friabilité osseuse accrue ou dans lesquelles une fixation du calcium dans les os est nécessaire, par exemple pour le traitement de l'ostéoporose d'origine diverse (par exemple post-climatérique, post-traumatique, consécutive à une corticothérapie ou à l'immobilisation, d'origine maligne etc), des fractures, de l'ostéomalacie, de l'ostéodystrophie rénale et provoquée par le rachitisme, des douleurs, par exemple les douleurs osseuses associées à une ostéoporose, des troubles neuro-dystro- phiques, de la maladie de Paget et pour la thérapie combinée avec le calcium ou les phosphates. Pour les indications ci-dessus liées au calcium, la dose quotidienne appropriée est comprise entre environ 5 et environ 1500 U.I., administrée quotidiennement en une seule fois ou, si nécessaire, tous les 2 ou 3 jours. Les composés de l'invention, qui sont des dérivés glucosylés de la LHRH ou de ses analogues, inhibent la sécrétion de l'hormone lutéinisante, par exemple comme indiqué par l'inhibition de l'ovulation chez les animaux. Cet essai est effectué selon la méthode décrite par M. Marko et E. Fluckiger, dans Experientia 30, p. 1174-1176 (1974). En général, ces composés de l'invention sont actifs à une dose comprise entre environ 0,0005 et environ 10 mg/kg. Par exemple, le composé de l'exemple 45 administré par voie sous-cutanée est actif à une dose de 0, 01 mg/kg. L'effet inhibiteur des composés sur la sécrétion de l'hormone lutéinisante peut également être déterminé in vitro. On prépare des cultures de cellules hypo- physaires selon la méthode décrite par Vale (W. Vale et G. Grant, Enzymology 37, p. 82-93; 1975) et par M. Marko et D. Rdmer dans Life Sciences, 33, p. 233-240 (1983). On maintient des cellules primaires pendant 4 jours dans un incubateur à 37 C. On lave ensuite les cellules et on les incube pendant 3 heures dans 1 ml d'un milieu contenant la LHRH ou le composé à essayer. A la fin de l'incubation, on récupère le surnageant et on détermine l'activité de l'hormone lutéinisante à l'aide de la. méthode de dosage radioimmunologique (RIA). Dans cet essai, les composés de l'invention sont actifs en général à une concentration d'environ 10-12 à environ 10 -7, et inhibent la sécrétion de l'hormone lutéinisante induite par la LHRH en fonction de la dose. Pour toutes les indications de la LHRH, la dose quotidienne appropriée est comprise entre 2 microgrammes et 20 mg de substance active. Si nécessaire, on peut administrer les composés en doses fractionnées 2 à 4 fois par jour sous forme de doses unitaires ou, si nécessaire, sous une forme à libération prolongée. De telles doses unitaires comprennent entre environ de 0,5 microgrammes et 10 mg de substance active. On peut administrer les composés de l'invention selon les méthodes habituelles, par exemple par voie entérale, par voie orale, par exemple sous forme de solutions buvables, de comprimés ou de gélules, par voie nasale, par exemple sous forme de sprays liquides ou de poudre pour pulvérisations et de crèmes, ou par voie parentérale, par exemple sous forme de solutions ou de suspensions injectables. Pour le composé de l'exemple 2, une dose appropriée est comprise entre 3 et 10 mg administrée 3 fois par jour, par exemple par voie orale pour le traitement du diabète, des ulcères et de l'acromégalie. Les composés de l'invention peuvent être administrés sous n'importe qu'elle forme pharmaceutiquement acceptable, par exemple sous forme libre, c'est-à-dire de base libre, ou lorsque le composé est un acide, sous forme d'acide libre, ou sous forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable. Le sel peut être un sel d'addition d'acide ou, lorsque le composé est un acide, un sel cationique. On peut également administrer le composé sous forme de complexe. Les composés peuvent se présenter sous forme d'un solvat, par exemple d'un hydrate. La présente invention a également pour objet des compositions pharmaceutiques comprenant un composé de l'invention sous une forme pharmaceutiquement acceptable, en association avec au moins un véhicule ou diluant pharmaceutiquement acceptable. De telles compositions peuvent être préparées selon les méthodes habituelles. Une ampoule buvable ou une solution injectable peut contenir par ml, par exemple 0,5 mg du composé de l'exemple 2 sous forme d'acétate, 11,45 mg d'acide citrique, 6,32 mg de NaOH, 4,5 mg de NaCl. La présente invention a également pour objet un composé de l'invention approprié pour l'une quelconque des utilisations indiquées plus haut, y compris l'abaissement de la sécrétion de l'hormone de croissance, le diabète sucré, la réduction des sécrétions gastriques et l'acromégalie pour les dérivés glucosylés de peptides du type somatostatine. La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé de l'invention pour la préparation d'un médicament approprié pour l'utilisation dans le traitement des indications mentionnées plus haut, y compris l'abaissement de la sécrétion de l'hormone de croissance, le diabète sucré, la réduction des sécrétions gastriques et l'acromégalie pour les dérivés glucosylés de peptides du type somatostatine. REVENDICATIONS 1. Un dérivé glucosylé d'un peptide biologiquement actif, caractérisé en ce qu'il possède une durée d'action prolongée par rapport au peptide non modifié et contient au moins sur un des restes d'amino-acides, un reste glucidique fixé au groupe amino du reste d'amino-acide par une liaison autre qu'une liaison N-gluco- sidique directe et, lorsque le dérivé est un produit de condensation d'un glucide contenant un groupe carboxy avec un peptide ayant moins de 8 restes d'amino-acides, par une liaison autre qu'une liaison amide. 2. Un dérivé glucosylé d'un peptide biologiquement actif selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond a) à la formule I --A _OH /I) 1. /' CH2- p ( dans laquelle o représente le reste désoxy d'un cétose, le groupe CH de ce reste étant lié au groupe NH d'un peptide biologiquement actif, et P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, dans laquelle le groupe NH2 représente le groupe amino Nterminal du peptide P ou un groupe amino situé dans une chaine latérale du peptide P, 99 2609991 b) à la formule II G, (r) dans laquelle G2 représente le reste désoxy d'un aldose, la liaison 1) libre de ce reste étant lié au groupe NH d'un peptide biologiquement actif, et P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, dans laquelle le groupe NH2 représente le groupe amino N-terminal du peptide P ou un 13 groupe amino situé dans une chaîne latérale du pep- tide P, c) à la formule III G3-CO-NRy-P (III) dans laquelle G3CO représente le reste d'un acide uronique ou d'un acide polyhydroxymono- ou di-carboxylique, R représente l'hydrogène ou un groupe alkyle Y en Cl-C3 ou alcanoyle en C1-C4, et P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, contenant au moins 8 restes d'amino-acides, NR étant situé sur le groupe amino N-terminal du peptide P ou dans un chayne latrale du peptide P ou dans un chaîne latérale du peptide P, d) de formule IVa, IVb, IVc ou IVd R R o-'-N -o Ib NH-Q- N -p (IVa) N (IVb) si l GY (IVc) 4. ( d G4 -....NHf-N-P R.y ( r v d) 0 P'-N-P dans lesquelles P représente le reste d'un peptide biologiquement actif de formule NH2-P, les restes G 4 v;. . 0 "-O- OR- --O ", - 1.I H-- G4 -I2À représentent des restes glucidiques, Ry représente l'hydrogène ou un groupe alkyle en Ct-C3 ou alcanoyle en C1-C4 et Q, Q', Q" et Q"' représentent des goupes couplant le reste du peptide avec le reste du glucide, le groupe NH lié à P représentant le groupe amino N-terminal du peptide P ou un groupe amino situé dans la chaîne latérale du peptide P. ou e) à la formule Va ou Vb HOH2C-(CHOH)c-CY-CH2-NH-P (Va) HOH2C-(CHOH)cCH-CH2OH (Vb) NHP dans lesquelles Y représente H2 ou H, OH c signifie 2 ou 3 ou 4, et P représente un reste d'un peptide biologiquement actif de O10 formule NH2P, le groupe NH lié à P représentant le groupe amino N-terminal du peptide P ou un groupe amino situé dans la chaîne latérale du peptide P, et n'importe lequel des groupes hydroxy libres dans le reste du polyol du composé de formule Va ou Vb est éventuellement lié par une liaison glucosidique à un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur ou à un sucre aminé, ainsi que les sels d'addition d'acides et les complexes de ces dérivés, avec les conditions que a) dans les composés de formule I cidessus, P soit autre qu'un reste d'un peptide de la gastrine ayant un groupe terminal se terminant par -Asp-Phe-NH2, b) lorsque dans les composés de formule IVb Q' signifie un cycle phényle contenant un radical divalent ou lorsque dans les tomposés de formule IVd Q"' signifie le reste d'un acide aliphatique dicarboxy- lique, P-NH2 soit autre qu'une insuline naturelle, c) lorsque dans les composés de formule III G3-CO représente le reste d'un acide muramique éventuel- lement N-acylé, le second reste d'amino acideà l'extrémité N-terminaledu peptide P-NHRy soit autre que le reste d'un acide amino-dicarboxylique 3. Un composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que Q signifie CO ou CS. 4. Un composé selon l'une quelconque des revendications 1 3, caractérisé en ce que le peptide est un dérivé de la somatostatine. 5. Un dérivé glucosylé d'un peptide biologiquement actif selon la revendication 4, caractérisé en ce que le peptide répond à la formule VIII 2-S-Y. y-S-C_ &' 2 C1- S-Y 2,e (VIII) o A- U - Ca - CO - N - C - CO - B C - D - E -NH - a - r 1 2 3 4 5 6 7 dans laquelle A représente l'hydrogène, ou un groupe alkyle en C1-3 ou alcanoyle en C1-C4, )N-CH(Z1)-CO signifie 1) un reste (L)- ou (D)phénylalanine éventuellement substitué par des halogènes ou par des groupes NO2, NH2, OH,alkyle en C1-C3 et/ou alcoxy en C1 -C3, ou 2) le reste d'un a-amino-acide lipophile naturel ou d'un (D)-amino-acide correspondant autre que celui indiqué sous 1), Z1 dans le reste)N-CH(Zl)CO- représente le reste d'un amino-acide défini sous 1) et 2), A' signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en Cl-C3, Y1 et Y2 signifient, indépendamment l'un de l'autre, 1) l'hydrogène 2) R -CO-C- (CE2)m 7- !b o m signifie un nombre entier de 1 à 4 inclus, Ra signifie CH3 ou C2H5 et Rb signifie H, CH3 ou C2H5, 3) (C2z J n o n signifie un nombre entier del à 5 inclus, 4) -CO-NHRc o Rc signifie un groupe alkyle linéaire ou ramifié en C 1-C6, ) _CO-__-CH-COORe o R signifie le reste d'un a-amino-acide naturel dd o Rd signifie le reste d'un a'amino-acide naturel (y compris l'hydrogène) situé sur l'atome de carbone a et Re signifie un groupe alkyle en C1-C5, ou 6) ,& X -_s-(NR] - C-l (C2) À X Ré dans laquelle Ra' et R, indépendamment l'un de l'autre, signifient l'hydrogène, CH3 ou C2H5, R8 et R9, indépendamment l'un de l'autre, signifient l'hydrogène, F. CI, Br, alkyle en Cl-C3 ou alcoxy en C1-C3, p signifie 0 ou l, q signifie 0 ou 1, et r signifie 0, 1 ou 2, ou bien Y1 et Y2 forment ensemble une liaison, B signifie Phe ou Phe substitué dans le cycle phényle par F. Cl, Br, NO2, NH2, OH, alkyle en C1-C3 ou alcoxy en C1-C3, C signifie L- ou D-Trp éventuellement substitué dans le cycle phényle par F, Cl, Br, NO2, NH2, OH, alkyle en C1- C3 ou alcoxy en C1-C3, D signifie Lys, dans lequel le groupe a-amino peut être substitué par un groupe méthyle, E signifieThr, Ser, Val, F signifie COOR1, CH20R2, CO-NR3R4 ou -n-9 R1 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, R2 signifie l'hydrogène ou le reste d'un ester physio- logiquement acceptable et physiologiquement hydro- lysable, R3 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, phényle, ou phénylalkye en C7-C10, R3 signifiant uniquement l'hydrogène ou un groupe méthyle lorsque R4 signifie -CH(R5)-X1, R4 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, ou R5 -CH-X1 ( I X) R5 représente le reste d'un amino-acide naturel (y com- pris l'hydrogène) situé sur l'atome de carbone a, un groupe OH-CH2-CH2 ou OH(-CH2)3, le groupe de formule IX pouvant avoir la configuration L ou D, X1 signifie COOR1, CH20R2 ou Cj 7 R6 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en Cl-C3, R7 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, phényle ou phénylalkyle en C7C1O, les restes B, D et E pouvant exister sous forme L, et les restes en position 2 et 7 ainsi que les restes Y14) et Y24) pouvant exister indépendamment sous forme D ou L, ainsi que les sels et les complexes de ces composés. 6. La Na-eLa-glucosyl(1-4)-désoxyfructosyl]-SMS, o SMS signifie le reste _ -(D)-Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol 7. Un composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le peptide est une calcitonine. 8. Un composé selon la revendication 7, caractérisé en ce que la calcitonine est la calcitonine de saumon, d'anguille ou humaine. 9. Un dérivé glucosylé d'une calcitonine selon la reven- dication 8,caractérisé en ce que la calcitonine répond à la formule X y I y (X) R- (NE-CH-CO)o -A6-NE-CE-CO-AAg 1 PN2 dans laquelle R signifie H ou R"CO R"CO représente le radical acyle d'un acide carboxy- lique, Y' représente le reste situé sur l'atome de carbone a d'un a-aminoacide, Y2 représente le reste situé sous l'atome de carbone a d'un aamino-acide, ou un reste 30.-CH2-S-S-CH2-CH-COOH, -CH2-S-S-CH2-CH2-COOH, NH2 -(CH2)$-COOH ou -CH2-S-Y3, Y3 signifie un groupe alkyle en C1-C4, benzyle éven- tuellement substitué par méthyle ou méthoxy, ou CH3CONH-CH2-, 3 2 o signifie un nombre entier de 1 à 4, A6 signifie Thr ou D-Thr s signifie un nombre entier de 3 à 5, A8 représente le reste amino-acyle d'un L-aamino-acide lipophile neutre, A9 représente le reste amino-acyle d'un L- ou D-a-amino- acide lipophile neutre, et Z1 signifie un reste polypeptidiquesitué en position, 10 à 31 d'une calcitonine naturelle ou l'un de ses dérivés ou analogues, qui possède une activité hypocalcémiante, les 1 à 4 restes Yi dans la formule X pouvant être identiques ou indépendamment différents, et, à l'exception du reste amino-acyle A8, tous les restes d'aminoacidesdans la formule'X ont la configuration L ou D, ainsi que les sels et complexes de ces composés. 10. Un composé selon l'une quelconque des revendications i ou 3, caractérisé en ce que le peptide est un antagoniste de la LHRH. 11. Un dérivé glucosylé selon la revendication 10, caractérisé en ce que l'antagoniste de la LHRH correspond à la formule XVI -^-i'-'Cl'D- -tr-G H -I'-x N (XVI) dans laquelle R1 signifie H ou un groupe acyle en C1-C7, Alsignifie D-Phe, éventuellement substitué dans le cycle phényle par F, Cl, Br, NH2, CH3 ou OCH3, spécialement en position 4, un reste P-Dnaphtylalamine, un reste D-Trp éventuellement substitué en position 5 ou 6 par F, C1, Br, NH2, ou OCH3 et/ou substitué en position 1 par un groupe formyle ou acétyle, un reste proline, 3,4-déhydroproline ou Dpyroglutamine B1 signifie D-Phe éventuellement substitué par F, C1, Br, NH2, CH3 ou CH30 dans le cycle phényle, D-a-méthylphénylalanine, éventuellement substituée en position 4 par C1, ou -D-naphtylalanine. C1 signifie D-Trp éventuellement substitué en position ou 6 par F, C1, Br, NH2 et/ou OCH3 et/ou en position 1 par HCO ou CH3CO, B-D-naphty alanine, 3-D-pyridylalanine, D-Tyr, ou Phe éventuellement substitué par F, C1, Br, NH2, CH3,ou CH30, D1 signifie Ser, E1 signifie Tyr ou phénylalanine éventuellement substituée dans le cycle phényle par Ci, Br, NH2, CH3 ou CH30, F1 signifie D-Phe, éventuellement substitué dans le cycle phényle par F, C1, Br, NH2, CH3 ou CH30, D-Trp éventuelleme.nt substitué en position 5 ou 6 par F, C1, Br, NH2 ou CH30 et/ou en position 1 par formyle ou acétyle, D Tyr, -D-naphtylalanine, D-Leu, D-Ile, D-Nle, DVal, D-Ser(OtBu), D-Arg, éventuellement dialkylé par des groupes alkyle en Cl-C6 ou cycloalkyle en C5-C6, D-homoarginine éventuellement dialkylee par des groupes alkyle en C1-C6 ou cycloalkyle en C5-C6, D-His, D-His(Bzl) , D-Lys ou D-Orn, tous les deux éventuellement dialkylés par des groupes alkyle en C1-C6 ou cycloalkyle en 260999 1 C5-C6, D-Phe (p-NH2) ou a-p-aminocyclohexylalanine, G1 signifie Leu, Nle, Nva, Na-méthylleucine, Trp, Phe, Met ou Tyr, H1 signifie Arg, Lys ou Orn éventuellement substitués par des groupes alkyle en Cl-C6 ou cycloalkyle en C5-C6 Il signifie Pro, hydroxyproline, ou 3,4-dehydroproline, et K1 signifie D-Ala. et E1 et F1 peuvent être remplacés l'un par l'autre, Dl et K1 peuvent, si on le désire, signifier des restes Cys liés par un pont S-S, un des symboles Dl et K1 signifie Asp ou Glu et l'autre signifie Orn, l'acide diaminopropionique ou l'acide diaminobutyrique, et les restes D1 et K1 sont liés par un pont amide. 12. Un dérivé glucosylé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le reste glucoside est fixé au groupe amino du peptide par une liaison autre qu'une liaison amide ou N-glucosidique directe. 13. Un dérivé glucosylé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est préparé par réarrangement de Amadori ou de Heyns. 14. Un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, caractérisé en ce qu'il contient un, deux ou trois restes glucidiques. 15. Un dérivé glucosylé selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, caractérisé en ce que le peptide auquel est fixé le reste glucidique exerce une activité hormonale, inhibitrice d'une hormone, enzymatique, inhibitrice d'une enzyme ou immunomodu- latrice. 16. Un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 15, caractérisé en ce qu'il se présente sous forme d'un sel ou d'un complexe. 17. Un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe pharmaceutiquement acceptable, pour l'utilisation comme médicament. 18. Une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient un composé selon l'une quelconque des revendi- cations 1 à 14, sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe pharmaceutiquement acceptable, en association avec un véhicule ou diluant pharmaceutiquement acceptable. 19. Un procédé de préparation d'un composé tel que spécifié à la revendication 1, caractérisé en ce que a) on élimine au moins un groupe protecteur présent dans un peptide glucosylé,selon la revendication lprctégé,ou b) on couple par une liaison amide deux unités pepti- diques, dont chacune contient au moins un amino- acide ou un amino alcool sous forme protégée ou non protégée et dont une unité peptidique contient le reste glucidique, le couplage étant effectué de telle manière qu'on obtient la séquence d'amino- acidesdésirée, et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou c) on introduit au moins un reste glucidique éventuellement protégé dans un peptide protégé ou non protégé et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou d) on transforme un groupe fonctionnel d'un peptide glucosylé selon la revendication 1, protégé ou non protégé, en un autre groupe fonctionnel ou bien on élimine ce groupe fonctionnel, et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou e) on. oxyde un peptide glucosylé, selon la revendieationldnslequel le groupe mercapto des restes Cys sont sous forme libre, de manière à produire un peptide dans lequel les deux restes Cys sont reliés par un pont -S-S, et on isole le composé obtenu sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe. 20. Un procédé de préparation des composés spécifiés à la revendication 2, caractérisé en ce que a) on élimine au moins un groupe protecteur présent dans un peptide glucosylé,selon la revendication2,protégé,cu b) on couple par une liaison amide deux unités pepti- diques, dont chacune contient au moins un amino- acide ou un amino alcool sous forme protégée ou non protégée et dont une unité peptidique contient le reste glucidique, le couplage étant effectué de telle manière qu'on obtient la séquence d'amino- acidesdésirée, et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou c) on introduit au moins un reste glucidique éventuellement protégé dans un peptide protégé ou non protégé et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou d) on transforme un groupe fonctionnel d'un peptide glucosylé, selon la revendication2, protégé ou non protégé, en un autre groupe fonctionnel ou bien on élimine ce groupe fonctionnel, et éventuellement on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou e) on oxyde un peptide glucosylé,slonla evendication 2,nslequel le groupe mercapto des restes Cys sont sous forme libre, de manière à produire un peptide dans lequel les deux restes Cys sont reliés par un pont -S-S, et on isole le composé obtenu sous forme libre, ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.