Brevet FR2602241A1 — publié le 19880205

Botte Pour í lobservation au microscope de cultures cellulaires vivantes. Dans l'état actuel de la technique, il est pratiquement impossible d'observer des cultures cellulaires vivantes à l'aide d'un microscope utilisant une optique à lumière polarisée, par exemple le contraste d'interférence différentieN Les boîtes de Petri qui sont couramment utilisées pour contenir les cultures cellulaires ne se prêtent pas à une telle observation, étant donné que la matière plastique dans laquelle elles sont réalisées est fortement dépolarisante. De plus, leur grande hauteur, même pour les plus petits modèles, en interdit le passage entre la platine du microscope et la lentille frontale du condenseur. La présente invention vise à remédier à ces inconvénients et à cet effet, elle concerne une bote pour l'observation au microscope de cultures cellulaires, qui se caractérise en ce qu'elle comprend au moins un puits dont le fond est réalisé par une lame porte-objet en verre pour microscope, et dont les parois sont réalisées en une matière plastique de qualité alimentaire, ledit puitsétant assemblé à la lame porte-objet par collage, la hauteur de l'ensemble étant choisie pour permettre le passage de la boîte entre la platine et la lentille frontale d'un condenseur de microscope. La boIte est recouverte d'un couvercle constitué d'une fine lamelle de verre. Celle-ci est maintenue en place par des moyens de guidage, par exemple par des glissières latérales formées sur le bord de la face supérieure de la boite. Ces boltes sont entreposées dans un incubateur à gaz carbonique et les échanges gazeux avec I'atmosphère de l'incubateur s'effectuent à travers les minusculs passages formés entre le couvercle et les rugosités de surface du corps. Un mode de réalisation de l'invention sera décrit à présent en détail à titre d'exemple non limitatif, en regard de l'unique figure annexée qui représente une vue en perspective de la boîte et de son couvercle. La botte comprend un corps 10 réalisé en une matière plastique alimentaire, par exemple en polychlorure de vinyle, et dans l'exemple illustré, elle a la forme d'un parallélépi perde rectangle aplati pourvu de trois alvéoles ou puits 12 disposés cate-à-cate sur la longueur du corps et qui traversent ce dernier de part en part. Mais, une telle forme n'est pas limitative, car le corps peut être également en forme de disque circulaire ou ovale ou avoir toute autre forme aplatie De même, il peut comporter un nombre quelconaue de puits disposés en une ou plusieurs rangées, ou radialement0 Les puits sont séparés par des cloisons 13. Sur l'une des grandes faces du corps 10 est fixée par tout moyen approprié, et de préférence par collage, une lame porte-objet 14 en verre pour microscope, destinée à constituer le fond des puits et à assurer en même tenps la rigidité du corps, Sur cette lame et dans chaque puits, est déposée une certaine quantité de suspension de culture cellulaire. Sur son autre grande face, le corps présente deux rebords longitudinaux 16, 18 surélevés par rapport au plan de ladite face et longeant les deux catés longitudinaux du corps, et un rebord transversal 20. Un couvercle 22 de surface sensiblement égale à celle définie entre les trois rebords et constitué par une fine lame de verre, peut être glissé entre les rebords longitudinaux jusqu a venir en butée contre le rebord transversal. Les cultures cellulaires vivantes contenues dans les puits doivent être en communication avec le milieu gazeux extérieur. I1 n'est toutefois pas nécessaire pour cela de former sur le corps des ouvertures de communication. En effet, les rugosités de surface de la matière plastique suffisent à établir de points d'échange gazeux avec l'atmosphare de l'incubateur. Comme on l'a déjà précisé, la hauteur de la boite est choisie pour que cette dernière puisse être passée entre la platine d'un microscope et la lentille frontale du condenseur. De plus, le rapport surface/hauteur de la boite est choisi pour faciliter les échanges gazeux. Après la fabrication et l'assemblage de la boite, celle-ci est soumise, avant la premiere utilisation, à une série de traitements, tels que des rinçages à l'eau, afin d'éliminer le maximum de substances toxiques diffusibles, contenues dans la matière plastique et dans la colle, puis à une stérilisation en la rinçant par exemple avec de l'alcool éthylique. En utilisation chaque puits peut recevoir jusqu'à 0,4 ml de suspension cellulaire. REVENDICATIONS 1.- Boute pour l'observation au microscope de cultures cellulaires vivantes, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un puits (12) dont le fond est réalisé par une lame porte-objet (14) en verre pour microscope, et dont les parois sont réalisées en une matière plastique de qualité alimentaire, ledit puits étant assemblé à la lame porte-objet par collage, la hauteur de l'ensemble étant choisie pour permettre le passage de la botte entre la platine et la lentille frontale d'un condenseur de microscope. 2.- Botte selon la revendication 1, caractériséeen ce qu'elle est recouverte d'un couvercle (22) constitué d'une fine lamelle de verre. 3.- Botte selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend un corps plat en matiere plastique alimentaire, des forme quelconque et de préférence en forme de parallélépipède ou de disque circulaire ou ovale, dans lequel sont formés un ou plusieurs alvéoles distincts ou puits (12) qui le traversent de part en part. 4.- Botte selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la lame porte-objet (14) est collée sur l'une des grandes faces dudit corps et en ce que le corps est pourvu sur son autre grande face de moyens de guidage et de maintien permettant de mettre en place et de maintenir la lamelle en verre. 5.- Boîte selon la revendication 4, caractérisée en ce que lesdits moyens de guidage et de maintien sont constitués par deux rebords parallèles (16, 18) disposés par exemple le long des deux côtés longitudinaux du corps, et surélevés par rapport au plan de ladite face. 6.- Botte selon la revendication 5, caractérisée en ce qu'un troisième rebord surélevé (20) est également formé le long d'un côté transversal du corps de manière a constituer une butée pour le couvercle dans l'un des sens de glissement, ledit couvercle ayant une surface sensiblement égale à celle définie entre les rebords longitudinaux et le rebord transversal.