Brevet FR2598423A1 — publié le 19871113

Produit à base d'élastine, procédé pour sa préparation et ses applications biologiques. en particulier en tant que biomatériaux et supports artificiels. L'invention a pour objet un produit à base d'élastine dote. notamment,de propriétés d'élasticité et de ro robustesse Elle vise également un procédé pour sa préparation ainsi que les applications biologiques de ce produit, notamment pour l'élaboration de biomatériaux et de matériaux supports utilisables en particulier comme tissus artificiels ou supports de cultures cellulaires. On sait que l'élastine est un constituant des éléments élastiques de l'organisme. notamment, dans le poumon. la peau. les parois artérielles et les ligaments. I1 s'agit d'une protéine résistant d'une manière générale à l'action des acides, des alcalis et des enzymes protéolytiques. à l'exception de l'élastase, pour laquelle elle constitue un substrat spécifique et qui la dégrade. In vivo. l'élastine est protégée de l'action de l'élastase. notamment par des complexes élastase-inhibiteurs sériques. Cependant. dans divers processus pathologiques d'origine inflammatoire ou liés à l'âge. tels que lsemphy- seme pulmonaire ou l'athérosclérose. on observe une dégradatation de l'élastine. vraisemblablement sous l'effet de ltélastase, dès un stade précoce de la maladie. Au cours de travaux antérieurs, certains des co-inventeurs de la présente invention ont mis en évidence. in vitro. les complexes élastases-inhibiteurs sériques formés in vivo dans le plasma ou le sérum et oit étudié leur capacité à se fixer sur l'élas-tine et leur activité élastinolytique induite par Une élévation du pW de 6 à 8.6. Lors de l'étude d'une éventuelle activité élastinolytique dans le plasma ou le sérum humain, il avait été rapporté que l'adsorption de plasma ou de sérum sur l'élastine, dans des conditions d'incubation à 37"C, dans un Lampon acétate C,2M. lmM en acétates de calcium, de magné-. sium et de manganèse, de pH 6. s'accompagne d'une modification visible de l'aspect de cette protéine qui perd son caractère granuleux pour devenir floconneuse. Une recherche explicative de ce phénomène a amené les -inventeurs à constater qu'en opérant dans certaines con ditions, il est possible de former et d'isoler un nouveau produit à base d'élastine doté à la fois de remarquables propriétés de solidité et d'élasticité Un autre aspect particulièrement avantageux.réside dans sa plasticité. L'invention a donc pour but de fournir un produit nouveau à base d'élastine, dont les propriétés. en particulier de souplesse et de robustesse, permettent d'établir un biomatériau ou un matériau support sous diverses formes. en particulier sous forme de membranes, de tubulures ou de filaments,présentant des qualités satisfaisantes au regard de diverses applications biologiques. Elle a également pour but de fournir un procédé de préparation de ce produit permettant d'obtenir les propriétés requises dans des conditions de mise en oeuvre aisée. Elle vise également la mise à profit des qualités de ce produit pour l'élaboration de biomatériaux et de matériaux supports répondant à des besoins de grande importance par exemple pour la réparation de tissus ou l'élaboration de supports pour cultures cellulaires. Le produit selon l'invention à base d'élastine est caractérisé en ce qu'il comprend un adduit renfermant de l'élastine et au moins une protéine du type de celles coa gulables par la thrombine. D'une manière avantageuse. un produit de ce type possède une résistance chimique et des propriétés d'élasticité et de solidité de charpente élevées. I1 présente en outre une grande plasticité et souplesse ainsi que des propriétés d'étanchéité et peut être en outre moulé, ce qui lui confère un grand intérêt notamment en vue d'applications biologiques. Selon l'un de ses aspects. le produit à base d'élastine de l'invention comprend un adduit renfermant de l'élastine et de la fibrine soluble. On rappelle que la fibrine soluble est formée de manière intermédiaire, à partir de fibrinogène. durant-le processus de coagulation. selon le schéma suivant fibrinogène Fibrine monomères + fibrinopeptides Fibrine soluble Fibrine insoluble Un produit préféré comprend un adduit élaboré à partir de fibrinogène et d'élastine. Un autre produit préféré comprend un adduit élaboré à partir de plasma et d'élastine. Selon un autre aspect de l'invention, le produit à base d'élastine comprend de la fibronectine. Des adduits de ce type sont élaborés avantageusement à partir d'élastine et de cryoglobulines. Des cryoglobulines appropriées comprennent du fibrinogène et de la fibronectine selon des rapports variables. I1 s'agit par exemple de la fraction dite anti-hémophilique A, cryodesséchée. qui comprend environ 10 à 15 g/l (c'est-à-dire par litre de produit reconstitué dans un tampon) de fibrinogène et environ 2 à 4 g/l de fibronectine. Un autre fraction correspond au facteur VIII concentré et renferme environ 9 à 20 g/l de fibrinogèneet lOi 14 g/l environ de fibronectine. Une autre fraction encore est formée d'un complexe protéique cryodesséché comprenant en particulier 50 à 90 g/l environ de fibrinogène et 8 à 15 g/l de fibronectine. Ce complexe. appelée transglutine (décrit notamment par Thiebaut et al dans la Nouvelle Presse Médicale du 11 septembre 1982, 11, n" 35 page 538) comprend en outre de 950 + 250 u/ml de facteur XIII, avec 95 + 35 g/l environ de protéines totales et 35 à 90 % environ de protéines coagulables par la thrombine. La fibrine soluble,ou les dérivés à partir desquels elle est produite, et l'élastine sont d'origine animale ou humaine. En particulier, l'élastine provient de ligament nucal de boeuf ou encore d'aorte humaine. Des adduits correspondants sont formés d'élastine de ligament nucal de boeuf et de fibrinogène, ou encore d'élastine d'aorte humaine et de fibronogène. Les adduits des produits de l'invention présentent une grande stabilité. I1 est ainsi possible de les conserver plusieurs mois sur des conservateurs biologiques classiques tels que L'azoture de sodium ou l'éthylmercrylthiosalicylate de sodium. Selon les propriétés que l'on souhaite renforcer ou conférer à ces produits. divers additifs appropriés peuvent être incorporés, dans la mesure où ces additifs n'altèrent pas l'affinité de la fibrine soluble pour l'élastine dans l'adduit formé et leurs qualités résultantes. Des additifs avantageux comprennent des composés des tillés à renforcer les qualités mécaniques. tels que du collagène , ou encore des dérivés de cellulose ou de l'alginote de calcium. L'addition de composés présentant une action de vulcanisation tels que les composés soufrés, notamment du type de léthylmercrylthio salicylate de sodium mentionné cidessus, permettent d'améliorer l'élasticité. Il est ainsi possible d'élaborer le produit sous forme de tubulures ou filaments. Selon une variante importante, le produit de l'invention peut être formé dans les milieux utilisés pour la Le procédé de l'invention, pour la préparation des produits à base d'élastine définis ci-dessus, est caracté risé en ce qu'il comporte une étape d'incubation de fibrogène ou d'un milieu le renfermant, en particulier du plasma, et d'élastine, en présence de thrombine et d'ions Ca++, avantageusement dans des conditions pratiquement physiologiques, en particulier en ce qui concerne la température et le pH, afin que le fibrinogène. sous l'action de la thrombine activée par les ions Ca++, se transforme en fibrine soluble, ce qui se traduit par l'apparition d'un produit floconneux ou fibrillaire dans le mélange réactionnel. La température, la concentration en ions Ca++ et le pH se sont révélés des facteurs prépondérants. traduisant l'intervention d'un système enzymatique. L'étape d'incubation est réalisée avantageusement à 37"C environ. Les produits mis en oeuvre sont équilibrés de préférence à un pH voisin de 7,4. La teneur en Ca++ libre correspond avantageusement à la teneur in vivo, à savoir, de l'ordre de 2mM. L'élastine mise en oeuvre est d'origine animale ou humaine et provient. en particulier. de ligament nucal de boeuf ou d'aorte humaine. Dans la variante comportant la mise en oeuvre de plasma comme source de fibrinogène, il s'agit de plasma provenant de sang recueilli sur anticoagulant contenant gené- ralement un tampon citrate, de l'acide éthylène diamine tévracétique(EDTA). ce qui entraîne une complexation des ions ou , où encore de ''Séparine. Afin de libérer ces ions Ca++ en vue de l'activation de la thrombine pour transformer le fibrinogène comme sou- haité, le plasma est soumis à un traitement préalable consistant avantageusement en une dialyse. L'opération de dialyse est effectuée contre un tampon de caractéristiques proches de celles du milieu physiologique, en particulier, dont le pH et la teneur en Ca++ répondent aux exigences ci-dessus. L'élastine est également mise en équilibre dans ce tampon. Parmi des tampons de ce type particulièrement appropriés, on citera un tampon phosphate de pH 7,4 de composition : phosphate lmM, NaCl 150 mM, Ca++ 2mM, Mg 1 mM. Lors de la dialyse, l'agent complexant des ions Ca ++ est éliminé du compartiment de dialyse et le fibrinogène est transformé en fibrine soluble, puis en fibrine insoluble selon le schéma rappelé ci-dessus. La durée de la dialyse est avantageusement de l'ordre d'au moins 60 mn. L'étape d'incubation réalisée dans les conditions définies ci-dessus conduit immédiatement, à savoir en l'espace de quelques minutes, à la transformation physique de l'élastine qui de l'état de poudre granulaire. devient fi fibrillaire, présentant l'aspect d'un tissu conjonctif dilacéré. Par agitation du mélange réactionnel, on obtient la formation de fibres qui sont séparées, par exemple par centrifugation. Pour l'obtention du produit sous forme de membranes, on laisse au contraire le mélange réactionnel au repos dans une matrice de forme correspondant à celle souhaitée pour la membrane. On mesurera aisément l'importance du caractère moulable du produit de l'invention qui permet d'obtenir des surfaces membranaires présentant des formes et dimensions~ souhaitées pour une application donnée. L'étude des propriétés des produits à base d'élastine selon l'invention, a permis en outre de mettre en évidence leur stabilité élevée. Grâce à leurs propriétés de robustesse et d'élasticité, auxquelles s'ajoutent avanta tageusement des qualités de biocompatibilité et d'étanchéité, les produits à base d'élastine selon l'invention sont utili- sables notamment comme biomatériaux. L'invention vise donc également de nouveaux biomatériaux comprenant des produits à base d'élastine tels que définis ci-dessus. Ces biomatériaux présentent plus spécialement un grand intérêt en tant que "peaux artificielles" ou "tissus conjonctifs artificiels". Ils constituent notamment des pièces de soutien, de renforcement ou d'obturation, utilisées en association avec des colles biocompatibles et/ou des sutures, particulièrement précieuses en chirurgie. Ils permettent de compenser certaines pertes de tissus et en particulier de traiter des brûlés. Selon un autre aspect, les produits de l'invention constituent des matériaux supports particulièrement intéressants comme supports de culture cellulaire. Des cultures de cellules musculaires lisses, de fibroblastes, de cellules épithéliales et de cellules endothéliales peuvent être effectuées avec des rendements élevés. Ils sont également utilisables comme greffons de culture, constituant des socles dermiques sur lesquels on ensemence par exemple des cellules épithéliales qui se multiplient, avec un grand rendement, pour former un épiderme. Ces greffons, compte-tenu de leur caractère biocompatible, sont transplantables sur l'organisme du receveur. En tant que supports, ils sont utilisables en outre pour le greffage de produits biologiques, tels que des enzymes, notamment ou des inhibiteurs spécifiques ou généraux des enzymes responsables de la protéolyse de l'élastine, du collagène, du fibrinogène et de la f-bronectine Des supports de ce type comprennent. par exemple, incorporés dans les produits à base d'élastine, des enzymes telles que 1' 4-2 macroglobuline, l'aprotinine, 1' i-1-antitrypsine ou des antiplasmines. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention sont rapportés dans les exemples qui suivent relatifs à la préparation de produits selon l'invention et à leurs applications comme "tissus artificiels". Dans ces exemples, on se réfère aux-figures t à 5 qui représentent respectivement - des photos illustrant la formation d'un adduit à élastine et de fibrine (figures la à 1d). - des courbes correspondant à la variation, lors de la dialyse contre un tampon phosphate, des teneurs en Ca++, Mg++, en fonction du temps (figure 2) et en fonction de la teneur en Ca ++ du tampon de dialyse (figure 3), - des courbes montrant la formation de fibrinopeptides A et la diminution de la teneur en fibrinogène en fonction du temps (figure 4), et - le temps de formation de l'adduit en fonction de la quantité de thrombine ajoutée (figure 5). La provenance des matériaux mis en oeuvre est précisée ci-après. On utilise de l'élastine de ligament nucal de boeuf fournie par EUROBIO, Paris, provenant de Worthington. L'élastine d'aorte humaine est préparée selon la méthode de LANSING décrite par LEPPERT et dans Arch. Biochem. Biophys. 1983 ; 222 : 53-58. L'élastine est lavée intensément puis gonflée à l'aide d'un tampon approprié à 37-C, juste avant utilisation. Les échantillons de plasma humain sont obtenus sur citrate et maintenus à -40'C. Le fibrinogène humain ( qualité L) provient de KABI DIAGNOSTIC, Stockholm, Suède. Le radio-marquage est effectué selon la technique de GREENWOOD et al décrite dans Biochem. J. 1963 ; 39 : 114-123. On dissout 10 mg de fibrinogène dans 1 ml de PBS 0.1 M, pH 7,5. Le fibri nogène est marqué avec 500 pCi d'iode 125. Pour éviter la réduction du fibrinogène marqué par le métabisulfite, on n'effectue pas l'étape de réduction, et, immédiatement après l'oxydation de I en I , on applique le produit brut directement et rapidement sur une colonne aux fins de gel filtration (.Séphadex G 50). On obtient 5 x 106 cpm/mg de fibrinogène 1251. Comme thrombine humaine, on utilise le produit fourni par Ortho Diagnostic systems Inc, dosé à 50 u/ml. L'hirudine est un produit fourni par OSI Paris, provenant de Sigma. Les taux en Ca ++ et Pg sont déterminés par absorption atomique. Les concentrations en fibrinogène dans le plasma sont mesurées selon la méthode Von Clauss et al décrite dans Acta Hemat. 1957 ; 17 : 237-247., et les teneurs en citrate par la méthode enzymatique de ZENDER et al (Clin. Chim. Acta 1969 ; 24 : 335-340). On mesure le fibrinopeptide A humain en utilisant le test immuno-enzymologique en phase solide décrit par SORIA et al dans Thromb. Research 1980 ; 20 425-435. Exemple 1 : Préparation d'un adduit à base d'élastine de ligament nucal de boeuf et de fibrine soluble provenant de la fraction facteur VIII de cryoglobuline. Dans un tube à hémolyse de 5 ml, on lave soigneusement 50 mg d'élastine à l'aide d'un tampon phosphate de pH 7,4 (phosphate 1 mM, NaC1 150 mM, Ca++2 mM, Mg 1 mM). On élimine le tampon de lavage par centrifugation. On place l'élastine dans 1,5 ml de tampon phosphate. On ajoute un conservateur (par exemple de l'azoture de sodium, à raison de 200 mg/l). On effectue une dispersion de l'élastine à l'aide d'un Vortex, puis on ajoute 0,5 ml de facteur VIII (renfermant 15 mg de fibrinogène et 8 mg de fibronectine dans 1,5 ml de tampon phosphate contenant également en plus de l'azoture de sodium). On effectue également une dispersion du mélange à l'aide d'un Vortex. A la température ambiante, on ajoute 6 unités de thrombine (50 pl d'une solution de Thrombase 500). Après agitation à l'aide d'un Vortex, on coule le mélange dans un moule préalablement enduit de thrombine pour faciliter ensuite le démoulage, et on soumet à incubation à 37*C pendant environ 30 mn. Le produit est récupéré, lavé et séché. En variante, au lieu de verser le mélange dans un moule, on effectue l'incubation dans le tube de réaction et on sépare le produit formé par centrifugation. ExemPle 2 : Préparation d'un produit comprenant un adduit de fibrine et d'élastine à partir de plasma humain citraté et d'élastine d'aorte humaine. On dialyse 10 ml de plasma humain citraté contre trois charges de trente minutes chacune, du tampon phosphate de pH 7,4 décrit plus haut. A la fin de ces opérations, le compartiment de dialyse ne renferme plus de fibrinogène, mais ne renferme pas encore de fibrine insoluble. On ajoute environ 1 g d'élastine, lavée, gonflée et équilibrée à l'aide du même tampon, à 37il. Le plasma dialysé est ajouté à 1'élastine en suspension dans le tampon, à raison de 10 ml de volume final par gramme, sous faible agitation à la main. La réaction se produit immédiatement et est arrêtée par centrifugation à 3 000 t/mn durant 2 mn. On sépare le produit formé de la fibrine insoluble (caillot), qui précipite à nouveau, et on le lave abondamment avec le tampon phosphate. Le produit se présente sous forme quasi-fibrillaire lorsqu'on soumet la suspension à une faible agitation manuelle et forme une membrane lorsqu'on laisse la réaction s'effectuer. Sur la figure 1, on a rapporté les photos représentant respectivement a) la suspension d'élastine seule dans le tampon phosphate, b) le caillot de fibrine au début de sa formation, c) l'adduit après agitation manuelle du mélange d'élastine et de plasma, et d) l'adduit formé lorsqu'on laisse le mélange au repos. ExemPle 3 : Résultats relatifs aux conditions de formation d'un produit selon l'invention. L'étude au microscope électronique montre qu'une partie fibrillaire du plasma apparaît liée à l'élastine. La liaison apparaît très forte tout le long de l'élastine avec le dérivé de fibrinogène. 1. Etude de l'influence de la teneur en Ca . a) On rapporte sur la figure 2 les résultats obtenus, concernant les teneurs en Ca , en citrate et en fibrinogène, en fonction du temps, en dialysant un plasma citraté contre un tampon phosphate. Les quatre courbes données sur cette figure correspondent aux mesures suivantes Courbe O...O... : teneur en Ca++ en utilisant pour la dialyse un tampon phosphate 1 mM, CaCl2 1 mM, MgCl2 1 mM, NaCl 150 mM, pH 7,4. Courbe ...O. .. : teneur en Ca avec un tampon de dialyse comme ci-dessous, mais avec CaCl2 2 mM. -1 Courbe #...#... : teneur en citrate en gl Courbe #...#... : teneur en fibrinogène en gl On constate que la teneur en Ca++ dans le compartiment de dialyse reste inchangé lorsqu'on utilise un tampon de dialyse 1 mMl 1 Ca++, et ce bien que la teneur en Ca++ du plasma humain normal soit d'environ 2 mM1-1. Il apparaît en outre que, lorsque le même plasma est dialysé contre un tampon PO+à 2 mol 1 Ca++ (c'està-dire que la concentration en Ca++ est la même à l'intérieur et à l'extérieur du compartiment de dialyse), la concentration en Ca + du plasma augmente jus qu'â environ 3 mMl , après 2 heures de dialyse. Durant ce processus, le citrate est éliminé du compartiment de dialyse et le fifrinogène transformé en fibrine soluble puis insoluble selon le schéma rappelé plus haut. b) Sur la figure 3, on rapporte les courbes de variation de la concentration en citrate et en fibrinogène en fonction de la concentration en Ca++ du tampon de dialyse, après 30 mn de dialyse contre un tampon PO lmM, NaCl 150 mM, MgClz lmM, Catît O ; 0, 1 ; 0, 5 ; 1, O ; 1,5 et 2 mM, pH 7,4. Les différentes mesures sont représentées par les courbes suivantes Variation de la concentration en Ca++ : courbe 0...0... en Mg++ (mM1-l) : courbe en citrate (gl-l) : courbe en fibrinogène (gl-l) : courbe On constate, qu'excepté pour Mg++, la variation de concentration en citrate et en fibrinogène dépend de la concentration en Ca ++ du tampon de dialyse. La teneur en Ca++ diminue légèrement avec une concentration nulle en Ca++ du bain puis augmente lorsque la teneur en Ca++ du bain croît. 2. Etude de la transformation du fibrinogène. Sur la figure 4, on représente les résultats obtenus concernant la teneur en fibrinogène dans le compartiment de dialyse en fonction du temps (courbe et la teneur en fibrinopepdes A (courbe Il apparaît clairement que la teneur en fibrinogène décroît alors que celle en fibrinopeptides A augmente. 3. Etude du mécanisme de formation de l'adduit. On ajoute 1,2 ou 3 ml de plasma dialysé sur 100 mg d'élastine et 12 mg de fibrinogène contenant un ali quot de fibrinogène 125I dans 10 ml (volume total) de tampon phosphate pH 7,4. Les quantités d'adduit sont déterminées après lyophilisation. Les résultats obtenus sont rapportés dans le tableau suivant. 1 Plasma mol 1 2 3 I t Supernageant 300 i 300 I Adduit CPM 10-3 ; 750 1 800 910 Adduit mg 94 750 , 100 Ces résultats montrent que la plus grande partie de la radioactivité est retenue sur le produit formé et qu'une faible quantité de fibrine est nécessaire pour former l'adduit. 4. Influence de la thrombine. Sur la figure 5, on rapporte les résultats obtenus en étudiant l'effet de l'addition de quantités croissantes de thrombine (.u ml-l volume total) à une suspension de 100 mg d'élastine avec 15 mg de fibrinogène humain marqué à l'aide de l25I dans 10 ml de tampon phosphate pH 7,4. On constate que l'adduit se forme selon un rapport inverse avec le temps. Lorsqu'on ajoute une quantité donnée de thrombine (0,1 u,/ml) à l'élastine (100 mg), avec des quantités croissantes de fibrinogène-125I, on constate que le temps de formation de l'adduit dépend de la concentration en fibrinogène. En outre, lorsqu'on ajoute au préalable de l'hirudi ne, qui est un inhibiteur spécifique de la thrombine, au système élastine-plasma, on n'observe aucun effet. EXEMPLE 4 : Application comme "peau artificielle" a : étude de l'aptitude au collage. . principe On effectue un test de résistance mécanique à l'ar rachement d'un carré de membrane formé d'un produit selon l'exemple 1, collé d'une part sur le dos d'une souris sacri fiée, d'autre part sur un carré de peau d'animal. Un crochet fixé au carré de peau transmet la force exercée Far une quantité croissante d'eau mesurée à la burette. L'arrachement total du carré de peau correspond à la force de traction maximale exprimée en gr. La colle uti lisée est constituée par les cryoglobulines correspondant au produit appelé transglutine dont il est question plus haut. Mode opératoire On sacrifie une souris d'environ 20 gr. par confine ment dans un récipient contenant de l'éther. On fixe l'animal sur une planchette, le dos étant tourné vers le haut. On découpe un carré de 2c/2cn qu'on rcd-coupe en quatre carrés de 1cmi 1 c.. On enduit le carré de membrane de l'invention avec une colle biologique constituée par une préparation de transglutine, à raison de 0.05ml pour 1cm2, Le carré de mem- brane ainsi préparé est appliqué sur le dos préalablement imprégné de thrombine (Thrombase 500). On enduit ce carré avec de la transglutine et on applique un carré de peau de l'animal dessus. On laisse reposer 30 minutes, puis on accrocne par le centre du carré le dispositif de traction. On vide progressivement la burette, jusqu'à décollement total du carré de peau. La quantité d'eau mesurée ne s'avère pas inférieure à 60 gr. . Résultats On effectue une série de quatre mesures sur le même animal et on prend la moyenne des valeurs obtenues après 30 minutes de collage. Les valeurs obtenues sont comprises entre 62 et 116 g. Aucune mesure ne s'avère inférieure à 60 g. Les résultats obtenus montrent la résistance de la membrane selon l'invention, cette membrane restant collée à la peau lors de l'arrachement. Etude de la biocompatibilité Les éléments collés restent bien en place et sur une observation de plusieurs semaines, on n'observe aucune intolérance. REVENDICATIONS Produit à base d'élastine caractérisé en ce qu'il comprend un adduit renfermant de l'élastine et au moins une protéine du type de celles coagulables par la thrombine. 2. Produit selon la revendication l, caractérisé en ce qu'il comprend un adduit renfermant de l'élastine et de la fibrine soluble. 3. Produit à base d'élastine, caractérisé en ce qu'il comprend un adduit élaboré à partir de fibrinogène et d'élastine. 4. Produit selon l'une quelconque des revendications l à 3, caractérisé en ce que l'adduit à base d'élastine comprend de la fibronectine. 5. Produit selon la revendication 4 caractérisé en ce qu'il est élaboré à partir d'élastine et de cryoglobulines, notamment de cryoglobulines renfermant la fraction cryodésséchée, dite antihémophilique A, qui comprend environ 10 à 15 g/l de fibrinogène et 2 à 4 g/l environ de fibronectine, ou encore le facteur VIII concentré, qui comprend 9 à20g/l, environ, de fibrinogène et 10 à 14 g/l environ de fibronectine, ou un complexe protéique cryodesséché, appelé transglutine,qui comprend de 50 à 90 g/l environ de fibrinogène et de 8 à 15 g/l environ de fibronectine. 6. Produit selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il renferme en outre un additif destiné notamment à renforcer ses propriétés mécaniques, tel que du collagène. 7. Produit à base d'élastine, caractérisé en ce qu'il comprend un adduit élaboré à partir de plasma ou d'élastine. 8. Produit selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la fibrine soluble ou les dérivés à partir desquels elle est produite, et l'élastine sont d'origine animale ou humaine. 9. Procédé de préparation d'un produit à base d'élastine selon l'une quelconque des revendications l à e, caractérisé en ce outil comporte une étape d'incubation de fibrinogène ou d'un milieu le renfermant, en particulier du plasma, et d'élastine, en présence de thrombine et d'ions Ca avantageusement dans des conditions pratiquement physiologiques, en particulier en ce qui concerne la température et le pH, afin que le fibrinogène, sous l'action de la thrombine activée par les ions Ca++, se transforme en fibrine soluble, ce qui se traduit par l'apparition d'un produit floconneux ou fibrillaire dans le mélange réactionnel. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'on effectue l'étape d'incubation à 37"C environ, dans un tampon de pH voisin de 7,4 et dont la teneur en Ca++ est de l'ordre de 2 mM. 11. Application des produits selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, comme biomatériaux, en particulier comme tissus conjonctifs artificiels. 12. Application des produits selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 comme supports pour cultures cellulaires. 13. Application des produits selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 pour le greffage de produits biologiques tels que enzymes ou des inhibiteurs d'enzymes.