Brevet FR2586902A1 — publié le 19870313

La présente invention concerne généralement un procédé pour préparer une protéine de soja par isolation, cette protéine étant destinée à une utilisation alimentaire. On a traité de façon considérable dans l'art antérieur le sujet de l'isolation, la purification et l'amélioration de la qualité nutritive et du goût de la protéine de soja. La protéine de soja, à l'état natif n'a pas un goût agréable et sa qualité nutritionnelle est réduite en raison de la présence de complexes d'acide phytique (ou phytinique),qui gênent l'absorption des minéraux-- chez les mammifères, et la présence de facteurs anti- nutritionnels comprenant des inhibiteurs de la trypsine qui gênent la digestion de la protéine chez les mammifères. On a décrit dans l'art antérieur la destruction d'inhibi- teurs de trypsine au moyen d'un traitement thermique ainsi que l'élimination d'acide phytique. On a également traité le problème de l'amélioration des rendements en protéine pure, relativement à celle contenue dans le soja à l'état de matière première. McKinney, et al, J. Biol. Chem., Vol. 178, pages 117-132 (1949) révèlent que la phytine se dissocie lentement de la protéine de soja dans des dispersions alcalines à un pH compris entre 11 et 11,5 et peut être éliminée par centrifugation. Iacobucci, et al (Brevet américain N 3 736 147) révèlent un procédé d'uitrafiltration pour l'obtention d'un isolat de protéine de soja ayant une teneur en acide phytique réduite, comprenant des traitements chimiques variés en combinaison avec une ultrafiltration poussée. Le traitement chimique comporte soit une hydrolyse enzyma- tique de l'acide phytique par la phytase à un pH neutre, préalablement à l'ultrafiltration, l'ultrafiltration en présence d'ions calcium à pH bas, soit l'utilisation d'acide éthylènediaminetétraacétique à un pH élevé. Bolley, et al, (brevet américain NO 2 732 395), révèlent un procédé pour la séparation de phytine de graines oléagineusesvariées. Le procédé comporte l'extraction acide d'une farine ou fécule de graine sans huile avec de l'acide aqueux à un pH compris dans la gamme isoélectrique de la protéine de graine particulière, généralement d'envi- ron 4,5. La phytine est récupérée de la portion soluble et la protéine est récupérée de la fraction figée ou "lait caillé" par extraction à un pH supérieur à 8 avec séparation des matières insolubles, et coagulation subséquente de la protéine dans le produit d'extraction alcalin clarifié, par acidification, également dans la gamme isoélectrique de la protéine. Le procédé est appliqué à des graines oléagi- neuses variées comprenant des fécules de soja dégraissées pour fournir la protéine purifiée qui est pratiquement libérée des composés organiques phosphoreux. Sair (brevet américain N 3 001 875) révèle un procédé comprenant l'extraction aqueuse de flocons de soja dégraissés à pH 6-10,5 pour former une solution de la protéine de soja, l'élimination des matières insolubles, la précipitation de la protéine extraite à pH 4,5 et la redissolution de la fraction figée ou lait caillé à pH 6, et le séchage. Johnson (brevet américain N 3 397 991) révèle un procédé o l'on forme un isolat de protéine à partir d'un mélange de farinesvégétalesextraitesau solvant compre- nant de la farine de soja,pour fournir la composition d'acide aminé souhaitée dans la protéine isolée résultante par solubilisation à l'état colloïdal de la protéine dans l'eau à 66 - 94 C et à un pH de 9-12, séparation des matières insolubles et récupération de la protéine solubilisée à partir de la solution aqueuse par séchage ou par précipitation à l'acide dans la gamme de valeur iso- électrique. Robbins, et al, (brevet américain N 3 261 822) illustrent l'obtention de protéine de soja à l'état isolé par extraction de farine de soja dégraissé avec de l'eau à un pH de 3,5 à 5,5, élimination de la matière soluble et redissolution du lait caillé de protéine dans l'eau à un pH compris entre 6 et 11. Goodnight, Jr, et al (brevet américain NO 4 072670) révèle un défaut de base dans les procédés de base d'obten- tion de protéine de soja à l'état isolé par précipitation à l'acide telle que décrite dans les exemples des brevets précités Bolley, et al, et Robbins, et al. Dans la technique antérieure, on précipitait la protéine de soja contenue dans le flocon avec de l'acide en présence d'acide phytique. Goodnight, et al ont découvert qu'un complexe alcalin stable est formé entre la protéine et l'acide phytique dans ces conditions, ce qui empêche la dissociation de la phytine de la protéine de soja à un pH alacalin comme révélé dans l'article de McKinney précité. Goodnight, et ai ont résolu certains problèmes des méthodes antérieures en rendant insoluble le phytate à un pH de 10,6 à 14, et en le séparant des protéines préalablement à la précipitation des protéines à leur point isoélectrique, i.e., pH 4,5. Les inconvénients du procédé décrit par Goodnight, et al résident en ce que l'exposition des protéines à un pH alcalin extrêmement élevé affecte de façon défavorable leur valeur nutritionnelle, et les centrifugeuses continues commerciales ne peuvent être utilisées pour séparer le précipité de phytate en suspension (qui est très léger), formé à un pH alcalin élevé. L'art antérieur décrit des procédés par lesquels on a réussi à réduire, jusqu'à un certain point, la teneur en phytate des produits d'isolation du soja, à une petite échelle de laboratoire. Cependant, aucun des procédés précités n'est susceptible de permettre l'obtention de protéine de soja à faible teneur en phytate, à l'échelle commerciale, d'une façon économique. La présente invention a pour but de résoudre les inconvénients précités en proposant un procédé pour l'obten- tion d'une protéine de soja purifiée améliorée présentant une teneur en acide phytique extrêmement faible, un goût sensiblement amélioré, une fonctionnalité meilleure, une qualité nutritionnelle élevée. De plus, le présent procédé réduit de façon substantielle la teneur en aluminium du -i 2586902 produit de soja obtenu. La teneur en aluminium de formule pour enfants à base de soja est significativement plus élevée que la teneur trouvée dans du lait maternel. Ainsi, des formules pour enfants préparées à partir de la protéine de soja isolée conformément à l'invention sont plus acceptables du point de vue nutritionnel puisque la réduction de la teneur en aluminium rend ces compositions à base de soja plus proches du lait maternel. Le terme " isolat de protéine de soja ayant une faible teneur en phytate" employé ici indique un produit à base de protéine de soja contenant environ 88% ou plus en poids de protéine de soja et moins d'environ 0,3% en poids de phytates (exprimé en équivalent d'acide phytique), de préférence moins de 0,2 g de phytates pour 100 g de protéine. L'acide phytique, l'ester hexaorthomonophosphate de myo-inositol, se trouve à des taux assez élevés dans les grains et les graines oléagineusessous forme du sel de calcium et de magnésium, la phytine. Dans la farine de soja, 70% environ de la teneur en phosphore totale est apporté par la phytine. En se basant sur une teneur en phosphore de 0,6% pour la farine de soja dégraissée, on estime à environ 2% en poids la teneur en phytine dans la farine de soja dégraissée. L'acide phytique forme un complexe phytateminéraux-protéine durant sa mise en oeuvre et on a montré qu'il réduisait la biodispenibilité de minéraux variés, tels que zinc, magnésium, calcium, fer, etc. Durant la préparation d'isolats de protéine, une grande quantité d'acide phytique et de phytates restent associés à la protéine sous la forme de complexes. Les termes phytate ou phytates utilisés ici, désignent également des sels d'acide phytique ou les complexes moléculaires d'acide phytique avec d'autres constituants du soja. Dans le cas des isolats de protéine de soja disponibles dans Ie commerce utilisées ici, telles que Edi-Pro A (RaIston Purina) et Ardex F (Archer Daniel Midland) 2 à 2,5% en poids du produit isolé est sous forme de phytate. L'élimination de phytate de la protéine de soja isolée est souhaitable ein raison du fait que le phosphore n'est pas une entité nutritionnelle pour les humains, et gêne l'absorption de cations multivalents essentiels d'un point de vue nutri- tionnel, tels que calcium, fer et zinc. Les enfants ne peuvent utiliser de phytate phosphoreux et la présence d'une quantité relativement élevée de tels composés non utilisables peut conduire à une minéralisation inadéquate des os Par conséquent, il est souhaitable d'éliminer ou de réduire la teneur en phytate des formules à base de soja pour enfants. Dans son aspect le plus large, la présente invention comprend la formation d'une solution aqueuse de protéine de soja à pH 8,0-10,0 et à une température supérieure à C, par extraction aqueuse d'une matière première à base de soja contenant deSpr&Gpifnes de soja. Une source préférentielle de protéines de soja estf}e a dégraissé sous forme de particules, telles que grains, floco&g-- ou farine de soja dégraissés. '. contact préalable d'une. matière à base de soja natif avec un acide conduit à la formation d'une liaison entre le phytate et la protéine et rend la matière brute à base de protéine traitée à l'acide ou au point isoélectrique inappropriée pour la présente invention. Les conditions d'extraction précitées diminuent l'extraction de phytates et la formation de complexes protéine-phytate. Elles sensibilisent également les protéines à la précipitation à un pH quelque peu supérieur à celui de leur point isoélectrique. Le produit d'extraction de la protéine de soja ainsi obtenu est clarifié par centrifugation, filtration, ou tout autre moyen donnu, et ensuite la protéine de soja est précipitée par acidification à pH 5,0-5,5, et le précipité est éliminé. A ce pH, le phytate est éliminé dans le petit lait. Dans un procédé typiquement commercial, les protéines de soja sont extraites à un pH alcalin faible des flocons de soja ou fécule de soja. La fraction principale de protéine est ensuite précipitée de l'extrait clarifié en ajustant le pH au point isoélectrique des protéines (pH 4,5). Puisque les protéines sont insolubles à ce pH, la protéine peut être séparée des sels, sucres solubles, etc, par centrifugation. Pour achever la purifi- cation, la fraction figée de protéine est lavée avec de l'eau au moins une fois au pH du point isoélectrique, puis la protéine est séchée par vaporisation soit telle quelle, soit après ressolubilisation à pH neutre. Dans ces condi- tions, une partie majeure du phytate présent dans le flocon de protéine forme un complexe avec la protéine et est présent dans la fraction isolée comprenant la protéine. D'une façon typique, les fractions isolées de protéine commerciale présentent une teneur en phytate de 2,0 à 2,5% et dans certains cas jusqu'à 3% en poids. Le traitement des protéines de soja dans des conditions fortement alcalines (pH 11,6) peut affecter de façon défavorable la valeur nutritive ou la pureté de telles protéines. Lors de nombreux procédés commerciaux d'obten- tion de protéines de soja par isolation, les protéines sont - ?précipitées à environ pH 4,5. Cependant, à ce pH, il se produit--- fte interaction phytate-protéine et la plupart du phytate pr r-t avec la protéine, conduisant à une fraction isolée de protéine c' op-rtant plus de 2% de phytate. La présente invention fournit une nouvelle amélio- ration aux procédés commerciaux antérieurs en éliminant l'exposition à des conditions alcalines extrêmes et fournit, dans son aspect le plus important, pour la première fois un procédé économique d'obtention de fractions isolées à partir de soja, avec de bons rendements et présentant des concentrations en phytate de 0,3% en poids ou moins. La matière première à base de protéine de soja pour le procédé estle soja dégraissé sous forme particulaire, de préférence la farine de soja dégraissée ou les flocons de soja dégraissés. Le procédé comporte la formation d'une solution aqueuse de protéine de soja à un pH alcalin à partir de la matière première contenant la protéine de soja. L'invention n'est pas limitée à un type spécifié de matière première contenant du soja ni à une façon spécifique de préparer l'extrait de soja initial, puisque de nombreuses modifications peuvent être réalisées selon les objectifs variés du procédé. La boue d'extraction initiale est formée en ajoutant sous agitation, une partie en poids de matière brute contenant de la protéine de soja à 10 à 20 parties en poids d'un milieu de boue aqueux à un pH de 8 à 10 et une température supérieure à 65 C. Bien que des pH plus élevés puissent être employés, on a découvert qu'à de tels pH élevés, Ia f6rmat-in non souhaitable de lysinoalanine a tendance à s'accroître. De préférence, le pH est maintenu à 8,5 à 9,5 à une température de 70 C à 85 C et de façon encore plus préférentielle à 75 C à 80 C. Bien que des températures supérieures à 85 C puissent être employées de façon satisfaisante durant l'extraction, on a découvert qu'à de telles températures élevées, il y avait une tendance à voir s'accroître la- formation non souhaitable de lysinoalanine. La boue est maintenue au pH et à la tempé- rature souhaités pendant environ 1=à 15, et de préférence 2 à 5 minutes. Ensuite, la température est rapidement réduite à 25 C à 65 C, de préférence 50 C à 607C, et encore plus préférentiellement 55 C à 60 C et la boue est maintenue à une telle température pendant une durée supplémentaire de à 60 minutes, de préférence 10 à 30 minutes, pour continuer l'extraction de la protéine de soja de la matière première. La fraction insoluble contenant une partie substantielle des phytates et carbohydrates est séparée de la fraction solubilisée de protéine par un procédé conventionnel de séparation des matières solides tel que filtration ou centrifugation. Les gammes de température précitées sont les valeurs optimum pour la dissociation de la protéine de soja soluble du complexe d'acide phytique et pour le maintien des phytates et des dérivés d'acide phytique à l'état insoluble. Dans certaines conditions de mise en oeuvre, cependant, d'autres gammes de température peuvent s'avérer plus convenables, puisque la température à laquelle la solubilité du phytate est réalisée a un effet sur la nature physique de celui-ci qui affecte sa filtration et ses caractéristiques de centrifugation. Une sélection empirique de la température optimale de solubilisation du phytate pour une installation de mise en oeuvre donnée est, bien entendu, souhaitable. Le pH de la fraction solubilisée de protéine est ajusté à 5,0-5,5, et de préférence 5,2 à 5,4 et encore plus préférentiellement 5,3 avec un acide soluble dans l'eau non toxique tel que l'acide chlorhydrique pour précipiter la protéine solubilisée de soja. Bien que d'autres pH plus élevés que 5,5 puissent être employés, un tel pH tend à diminuer le rendement en protéine de soja. La protéine est précipitée de la fraction de protéine solubilisée à une température de 25 C à 65 C, de préférence C à 60 C. La protéine précipitée est séparée des sucres, phytate soluble, etc., par centrifugation ou d'autres moyens conventionnels. Le pH choisi entraînera la précipi- tation des protéines sensibles à la chaleur, mais permettra d'entraîner par lavage le phytate soluble dans le petit lait. Le complexe protéinephytate ne se formera pas, puisque,à ce pH,à la fois les protéines et les phytates sont chargés négativement. Un tel complexe se formerait à un pH de 4,5 ou moins. La protéine précipitée et séparée peut être lavée à l'eau, puis mise en suspension dans l'eau, la suspension broyée à l'état humide, et ensuite séchée par vaporisation ou lyophilisée. D'une façon alternative, la fraction figée de protéine peut être dissoute dans une solution aqueuse dilué-e à un pH en excès relativement à la gamme isoélectrique et la solution résultante peut être séchée par vaporisation comme il est bien connu dans l'art antérieur pour l'obten- tion de protéinats de soja. Enfin, plutôt que d'être séchée par vaporisation, la protéine précipitée et séparée peut être dissoute à un pH en excès relativement à la gamme isoélectrique, et la solution de protéine de soja résultante peut être ensuite formulée sans séchage dans des produits diététiques par combinaison avec des ingrédients gras et carbohydrate souhaités et, si on le désire, des vitamines, minéraux, parfums, etc. Ceci n'est pas seulement un mode d'opération intéressant puisqu'il permet de combiner des ingrédients variés, mais également puisqu'il permet d'obtenir un produit diététique liquide présentant des caractéristiques fonctionnelles améliorées telles que solubilité, pouvoir de mise en suspension, viscosité, goût et stabilité en émulsion. En réalisant le procédé conforme à la présente invention, on a découvert que la température'd'extraction, le pH d'extraction, le pH de précipitation, la température de précipitation et la quantité de lavage sont importants pour obtenir les résultats souhaités. le rendement est également affecté par la durée d'extraction, et le nombre de fois o le fécule de soja est extrait. L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples qui suivent donnés uniquement à titre indicatif et qui ne sauraient en aucun cas limiter le cadre de l'invention. EXEMPLE 1 On a réalisé une boue avec 16 kilogrammes d'eau chaude et 1 kilogramme de fécule de soja dégraissé à un pH égal à 9 et une température maintenue à 75 C pendant 2 minutes. La boue est ensuite rapidement refroidie à -60 C et extraite pendant 10 à 30 minutes. La partie insoluble est séparée par centrifugation. Le pH du surna- geant est ajusté à 5,3 avec de l'acide chlorhydrique, et la fraction figée de protéine insolubilisée qui précipite est séparée par centrifugation. La fraction figée peut ensuite être lavée une fois par resuspension dans 10 à 16 kilogrammes d'eau à un pH de 5,3-5,4 et une température de 50-60 C puis centrifugée à nouveau. La fraction figée lavée est collectée et peut être séchée par vaporisation telle quelle, ou d'abord neutralisée avec un agent alcalin approprié puis séchée par vaporisation. EXEMPLE 2 Le processus de l'Exemple 1 a été répété six fois avec les résultats suivants: Pourcentage de phytate et rendement en fractions isolées de soja préparées selon le procédé de la présente invention Phytate (%) Rendement (%) (g d'isolat de soja/100 g de fécule de soja) 0,02 31,3 0 03 28,9 0,05 30,5 0,05 30,9 0,11 29,9 0,07 30,4 a. Les isolats de soja commerciaux présentent une teneur en phytate de 2 à 2,5% et ces valeurs illustrent que la fraction isolée de soja conforme à la présente invention ne présente seulement qu'une teneur en phytate de 1 à 5% de celle des fractions isolées de soja commercial. Comparaison de la teneur en aluminium de fractions isolées de soja préparées selon le procédé de la présente invention et des fractions isolées de de soja commercial (EdiPro A) Echantillon 1 Echantillon 2 EdiPro A Aluminium (yg/9) 7,5 6,2 24-40 Phytate (%) 0,11 0,13 >2 Les données précédentes démontrent clairement que le procédé de l'invention permet l'obtention de frac- tions isolées de soja ne comportant pratiquement pas de phytates, et pouvant être obtenues avec des rendements bons et avec une réduction significative de la teneur en aluminium. EXEMPLE 3 Des échantillons isolés à partir de soja ont été préparés selon le processus de l'Exemple 1 en faisant varier la température et le pH d'extraction, le 'pH de précipitation, comme le montre le Tableau suivant. Sont également inclus le pourcentage en phytate dans la fraction isolée et le rendement. Echan- tillon N0 5 10 Extraction Temp.en C pH 9,0 9,0 88 9,0 8,0 10,0 9,0 9,0 8,0 9,0 8,0 Précipitation pH ,3 ,3 ,3 ,3 ,3 ,2 ,5 ,3 4,5 4,5 Phytate Rendement (%) (%) 0,02 31,3 0,46 32,7 0,04 29,9 0,20 28,6 0,08 32,5 0,06 31,4 0,02 29,4 0,41 28,0 0,54.- 31,3 1,96 32,9 Comme on peut le voir, on peut obtenir des teneurs en phytate faibles, lorsque la fraction isolée de soja est préparée dans des conditions expérimentales décrites dans la présente invention. Des teneurs en phytate moyennes peuvent être obtenues si certains des enseignemnts de cette demande sont utilisés, tels que par exemple lorsque des conditions d'extraction commerciales sont combinées avec des conditions de précipitation acides de la présente invention (échantillon 8), ou lorsque les conditions d'extraction de protéine selon la présente invention sont combinées avec les conditions de pH typiques de précipitation (échantillon 9). L'échantillon 10 représente les conditions typiques de préparation de fractions isolées de soja commercial avec une teneur en phytate élevée. R E V E N D I C A T I ONS 1.- Procédé d'obtention d'isolat de protéine de soja, ladite fraction isolée de protéine de soja présentant une teneur en aluminium réduite de façon significative et une faible teneur en phytate, caractérisé en ce qu'il comprend le traitement d'une matière première à base de soja dégraisséecontenant de la protéine de soja par formation d'une boue avec un milieu aqueux à un pH compris entre 8 et 10 et une température supérieure à 65 C pendant une durée suffi- sante pour solubiliser la protéine de soja; mais réduire l'extraction des phytates; la séparation de ladite boue en une fraction insoluble contenant une partie substantielle despolysaccharides et de phytates insolubles et une fraction soluble qui comprend la protéine de soja solubilisée; l'ajustement du pH de ladite fraction soluble à environ ,0 à 5,5 pour précipiter la protéine de soja et produire ainsi une fraction de petit lait contenant du phytate soluble et une fraction de protéine de soja solide ayant une concentration en phytate inférieure à 0,3%; ladite fraction solide de protéine de soja pouvant être lavée dans des milieuxaqueux; et la séparation de la fraction solide de protéine de soja du milieu de lavage. 2.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la fraction de protéine de soja précitée est formée dans une solution aqueuse à un pH en excès relative- ment à la gamme isoélectrique de ladite protéine de soja. 3.- Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que la fraction de protéine de soja précitée est séchée. 4.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le milieu aqueux précité est de l'eau et en ce qu'on réalise une boue avec cette eau et la matière première contenant la protéine de soja précitée, dans un rapport de 1 partie de matière première pour 10 à 20 parties en poids d'eau, et de préférence I partie en poids de matière - 14 première pour 16 parties en poids d'eau. 5.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la matière première à base de protéine de soja est maintenue dans la boue précitée à 70 C-85 C pendant 1 à 15 minutes et pendant une durée supplémentaire de 10 à minutes après que la température de la boue ait été ajustée à 50 C-60 C. 6.- Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le pH de la fraction soluble précitée est ajusté à 5,2-5,4 après la séparation des solidesperdusà une température d'environ 50 à 60 C. 7.- Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que le pH des solides des protéines de soja solubilisées est ajusté à 5,3. 8.- Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que la matière première de soja dégraissé précitée est des flocons de soja dégraissés 9.- Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'on réalise une boue avec 1 partie en poids de la matière première précitée et 16 parties en poids d'eau, ajustée à un pH égal à 9 et à une température de 75 C pendant 2 minutes, ladite boue étant ensuite refroidie à C et agitée pendant une durée supplémentaire de 10 minutes, ladite boue étant ensuite séparée en une fraction insoluble et une fraction soluble, en ce qu'on élimine ladite fraction insoluble et on ajuste le pH de ladite fraction soluble à 5,3 en précipitant ainsi une fraction figée de protéine, en ce que l'on sépare ladite fraction figée de protéine, on lave ladite fraction figée de protéine avec 10 parties en poids d'eau à un pH de 5,3 et on sépare ladite fraction figée de protéine lavée de ladite eau de lavage. 10.- Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que la fraction figée de protéine lavée précitée est séchée. 11.- Procédé selon la revendication 9 ou 10, caractérisé en ce que le pH de ladite fraction figée de protéine lavée est formé dans une solution aqueuse à un pH en excès relativement à la gamme isoélectrique de ladite protéine de soja. 12.- Procédé d'obtention d'isolat de protéine de soja, ladite fraction isolée de protéine ne contenant pratiquement pas de phytate et présentant une teneur en aluminium réduite de façon significative, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes de: a) former une boue aqueuse à partir d'une matière première de soja dégraissé à un pH compris dans la gamme de 8 à 10 à une température supérieure à 65 C pendant une période de 1'à 15 minutes pour solubiliser ladite protéine de soja; b) réduire la température à 25-650C pendant une période de 10 à 60 minutes; c) séparer ladite boue en une fraction insoluble et une fraction soluble qui comprend la protéine de soja solubilisée; d) ajuster le pH de ladite fraction soluble à une valeur de 5 à 5,5 avec un acide soluble dans l'eau non toxique à une température de 25-65 C en précipitant ainsi et an séparant ladite fraction séparée de protéine de soja ne contenant pratiquement pas de phytate et présentant une teneur en aluminium réduite de façon significative. 13.- Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'étape (a) précitée est réalisée à un pH de 8,5 à 9,5 à 70-85 C pendant 1 à 15 minutes; l'étape (b) est réalisée à 50-60 C pendant 10 à 60 minutes; et l'étape (d) est réalisée à un pH de 5,2 à 5,4 à 50-60 C. 14.- Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'étape (a) précitée est réalisée à un pH de 8,5 à 9,5 à 75-80 C pendant 2 à 5 minutes; en ce que l'étape (b) est réalisée à 55-60 C pendant 10 à 30 minutes; et en ce que l'étape (d) estréalisée à un pH de 5,3 à 50-60 C.