Brevet FR2591106A1 — publié le 19870612

Nouveau médicament utile notamment pour le traitement de fond des rhumatismes inflammatoires : thiopropanolsulfonate de sodium. On sait qu'il existe en rhumatologie une pathologie dégénérative et une pathologie inflammatoire. La présente invention concerne le traitement de cette dernière et plus spécialement, mais non limitativement, son traitement de fond, qu'il ne faut pas confondre avec le traitement symptomatique que représentent les anti-inflammatoires et les antalgiques. Dans le domaine concerné on connatt essentiellement quatre médicaments : la D-Pénicillamine, le Lévamisole, le Plaquenil et les sels d'or parmi lesquels 1 ''auro-thiopropanol- sulfone te de sodium de formule Au - S - CH2- CHOH - CH2 S03 Na (1) (Allochrysine). Ce dernier composé a été utilisé en photographie dès le début du siècle. Koch ayant découvert les propriétés antiinfectieuses des colloïdes d'or, on a cherché à utiliser l'or en pathologie infectieuse : on ne disposait pratiquement à cette époque que d'un seul sel d'or administrable, l'allochrysine. La polyarthrite rhumatoïde était alors assimilée à un rhumatisme tuberculeux et l'on s'aperçut que l'allochrysine, en fait inefficace contre la tuberculose, agissait sur la polyarthrite rhumatoïde. Depuis, les publications concernant ce composé, et les sels d'or en général, sont nombreuses. Toutes ces publications visant à affiner l'étude de la chrysothérapie reconnaissent l'or comme étant l'élément actif. Nous citeront notamment Ann. Rhum. Dis. (1976), 35, 477, p 479-480, p 485; Ann. of the Rheumatic Diseases, 1977, 36, 209-215, p 214; Annals of the Rheumatic Diseases, 1980, 39, 25-30, p 30; J. of Rheum, 1979, 6 61, 67, p 66; Arthrites and Rheumatism, Vol. 22, n" 8, Aoflt 1979 "management of rheumatoid arthritis with oral gold"; J. of Anal. Toxicology, vol 3, Nov/Dec. 79 (... gold therapy). Pour le rhumatologue, il est bien établi que, dans les sels d'or, le principe actif est l'or. On sait qu'il existe des oxydants sur les sites inflammés et on pensait, dans l'état de la technique, que le méca nisme d'action de l'allochrysine était le suivant : l'allochrysine donnait son or à un radical thiol réduit qui se trouvait ainsi inactivé, biais par lequel l'or agissait. I1 a maintenant été découvert que, contrairement à ce que l'on pensait depuis de nombreuses années, l'or n'était pas actif. L'invention concerne un nouveau médicament, de formule (thiopropanolsulfonate de sodium ou " TPSS ") HS - CH2 - CH0H - CH2 - S03 3a (2) Ce médicament est utile notamment pour le traitement e fond des rhumatismes inflammatoires. Son mode d'action n'est pas connu; ('n peut l'administrer sous une forme injectable, en solution dans l'eau, préparée extemporanément. Ae produit chimique (2) a déjà été décrit dans l'art antérieur. On citera å ce sujet C.A. 25-11-1960, 24379, C. Dans cet article, le composé (2) est cité mais l'article ne lui attribue aucune propriété particulière. Cet article vise en fait les propriétés d'antidote de l'arsenic et des métaux lourds d'une famille de dithiols. Le composé (2) ne présente pas ces propriétés, ce qui n'est pas anormal, car les molécules présentant deux fonctions thiols proches présentent souvent des propriétés particulières. On considère que les dithiols constituent un groupe pharmacologique homogène. Selon C.D. KIAASSEN, les dithiols sont des agents chélateurs des métaux lourds. Ils ont ainsi été utilisés contre les effets des gaz de combat à l'arsenic (LEwlSITE), ce qui corrobore l'enseignement du Chemical Abstract précité. On sait, par ailleurs, que la classe des monothiols ne constitue pas une famille présentant des propriétés homogènes. C'est ainsi que l'on connaît des monothiols anti thyroidiens, hypouricémiants, anticancéreux, antibiotiques, neuroleptiques. Le composé actif le plus proche du produit selon l'invention et dont le demandeur ait connaissance est le 3-mercapto 1,2-propanediol de formule OH - CR2 - CHOH - CH2SH Ce composé est connu pour son aptidude à favoriser la cicatrisation des blessures (Martindale, the Extrat Pharmacopoeia, 27e édition, 1977, 1280). On trouvera ci-dessous les comptes-rendus d'essais in vivo établissant l'activité anti-rhumatismale du composé (2). Rappelons d'emblée qu'à 11 opposé des AINS pour lesquels on dispose de nombreux modèles animaux, on n'a jamais pu mettre au point un modèle animal qui répond correctement aux traitements de fond, c'est-à-dire qui respecte des critères précis : doses comparables (on utilise des doses jusqu'à 100 fois la dose humaine) régime d'administration (délai d'apparition des effets bénéfiques, donc administration prolongée) critères d'amélioration comparables à ceux de l'homme moindre dégradation des articulations des animaux malades traités par rapport aux animaux non traités). Il a donc fallu choisir un bon modèle : on a choisi l'arthrite à collagène II (coll. II) chez le rat. Le colt, Il est un des principaux constituants du cartilage articulaire. En le purifiant et en l'injectant à des rats avec un adjuvant (sorte de stimulant de l'immunité) ceux-ci vont développer une réaction immunitaire contre le coll. Il qui va attaquer les articulations et provoquer une maladie comparable à la polyarthrite rhumatoïde (P.R.). On a donc injecté le produit à des rats Lewis et obtenu une incidence d'arthrite supérieure à 85%. Selon la littérature, l'incidence est à 50%, mais les rats Lewis étaient très sensibles. On utilise des rats consanguins, de sorte que, si l'on constate une évolution différente entre différents groupes, elle ne puisse être attribuée à des sensibilités différentes selon les souches. L'arthrite est entretenue par des injections de rappel au colt. Il L'essai porte sur 6 groupes de 15 rats rendus arthritiques et un groupe de 10 rats non rendus arthritiques.' Dans chaque groupe thérapeutique, le traitement est débuté au moment où on induit l'arthrite, de sorte qu'il n'y ait pas de délai thérapeutique. X AINS : anti-inflammatoires non stéroidiques Groupe 1 : témoin, série de 10 rats non arthritiques Groupe 2 : rats non traités Groupe 3 : rats traités par la D-pénicillamine per os mélangée à la nourriture et adaptée chaque jour en fonction de l'appé tit des rats. La dose en fonction du poids est trois fois la dose humaine, laquelle est de 500-S00 mg/kg per os Groupe 4 : traité à l'allochrysine à la dose de 15 mg/kg/semaine en une injection intrapéritonéale par semaine. Cette dose correspond à 6 fois la dose humaine Groupe 5 : Thiopropanolsulfonate (TPSS) en injection 8 mg/kg/semaine. Ceci correspond à la meme dose de thiol que pour les rats du groupe 4 Groupe 6 : TPSS per os à la même molarité que la D-pénicillamine du groupe 3 Groupe 7 : Chloropropanolsulfonate (ne comportant pas de groupe thiol) en injection à la meme molarité que le produit utilisé pour le groupe 4. On notera que les groupes 3 et 6, d'une part, et les groupes 4, 5, 7,d'autre part, ont été traités avec la meme molarité des produits. Dans les deux cas, nous avons donc un groupe traité par le TPSS qui pourra être comparé aux autres groupes qui reçoivent des médicaments réputés actifs-: D-pénicillamine et allochrysine. Le groupe 7 est constitué pour vérifier si la molécule sans thiol est déjà douée de propriétés thérapeutiques. Au bout de 100 jours d'arthrite, les animaux sont sacrifiés et l'on prélève les articulations des deux genoux. Les deux genoux sont décalcifiés et l'on prépare des coupes histologiques intéressant toute l'articulation selon un plan sagittal. On colore les coupes selon la technique du tétrachrome de Rallis qui permet une très bonne individualisation des différents tissus et une bonne visualisation des lésions. On a alors noté, en aveugle, l'importance des lésions en gradant à chaque fois les images élémentaires suivantes 1) atteinte du cartilage articulaire 2) prolifération synoviale 3) prolifération fibreuse articulaire 4) atteinte osseuse 5) prolifération sous-chondrale (sous le cartilage) Nous avons fait des prises de sang et avons dosé le glutathion (GSH) de sang. Le GSH est le principal thiol de l'orga- nisme. I1 est surtout présent dans les cellules, donc dans les globules rouges (GR) dans le sang où il est 1000 fois plus concentré que dans le sérum (sérum = sang - GR). Le glutathion a été déterminé par la technique de Tietze et Akerboom (méthode de dosage du glutathion total par cinétique enzymatique). Une expérience ayant par ailleurs montré que les rats arthritiques ne souffrent pas d'anémie, une éventuelle chute de la teneur en GSH ne sera pas due à une anémie. Les résultats sont rassemblés dans les tableaux I et II. COMMENTAIRES 1. Le nombre de rats varie selon les groupes. En effet, tous les rats n'ont pas toujours été malades, auquel cas ils sortaient de l'étude. I1 y a eu quelques décès lors des injections de rappel (en raison de l'anesthésie). Un animal a été sacrifié car atteint d'une otite contagieuse et mortelle. Aucun décès n'est imputable au traitement. 2. L'analyse de variance selon le test F montre que les moyennes diffèrent significativement dans leur ensemble au risque de I pour mille. Le test t montre une amélioration significative entre les groupes 6 et 2 avec un risque inférieur à 10 % et une aggravation significative entre les groupes 4 et 2 avec un risque inférieur à I %. Les autres groupes ne diffèrent pas du groupe 2. Dans cette expérience, le TPSS per os s'est donc avéré largement supérieur à des drogues reconnues efficaces comme la D-pénicillamine et l'allochrysine. Dans cette expérience, 1' Alochrysine a même été toxique aux mêmes doses que le TPSS. Le maniement du TPSS en thérapeutique humaine devrait donc être plus aisé que celui de l'allochrysine. L'effet thérapeutique est lié à la fonction thiol puisqu'il n'a pas été constaté avec le chloropropanolsulfonate sodique. 3. Pour le glutathion, le test de Student montre une différence significative entre les groupes 2 et 7 (niveau abaissé) et les groupes 1, 3, 4, 5 (niveau normal). Le groupe 6 n'a pas atteint le niveau normal : ceci est peut être lié à la conservation du sang puisque le groupe 5 est revenu à la normale. Le TPSS s'avère donc capable de ramener à la normale le glutathion quand il était abaissé. Le glutathion joue un rôle essentiel dans la défense contre les radiations ionisantes puisque,s'il est abaissé, une même dose de radiation est beaucoup plus toxique (Nature Vol 271, p. 660-662 du 16.02.1978 et Proc. Natl. Acad. Sci. USA Vol 78, n" 12, p. 7492-7496 décembre 1981). Dans ces conditions, ie TPSS peut être une drogue efficace contre les effets nocifs des radiations ionisantes. Les traitements thérapeutiques par le composé (2), pour le traitement de fond des rhumatismes inflammatoires, seront par exemple de 30-50 mg/semaine, en une injection par semaine, avec possibilité d'une dose d'attaque atteignant 600 mg (en quatre mois) et retour ensuite à une dose d'entretien et de l'ordre de 50 mg/mois, ou bien per os à la dose de 600 à 900 mg/jour. La préparation du composé (2) est connue de l'homme de métier. TABLEAU I Résultats du dosage du glutathion (mg/ml de sang complet) Rat Groupe 1 Groupe 2 Groupe 3 Groupe 4 Groupe 5 Groupe 6 Groupe 7 1 267,7 266 367,5 299 254 2 315 269,5 279,5 288,3 263,5 253,7 3 295 322,5 268 276 311,7 229,5 4 237,7 249 290 311,5 292,5 315,3 5 234 234,5 260,5 293,5 285,3 269,6 248,5 6 307,5 272 308,5 220 262,3 190 (?) 297 7 347 264,7 274,2 314 266,3 284 8 283,5 259 311,5 249,4 285,5 280 9 329 250,5 279 284 258,3 227 10 320,3 260,5 272 301,7 244,5 285,5 325,5 11 280 298,5 324 304,5 276,1 12 255 275 299 318,5 244,3 296,5 13 328,5 333,3 314,5 345 14 285,5 279 250,5 15 319,5 273,3 295 327 245,5 TABLEAU II Lésions histologiques (en rang croissant) Rat Groupe 2 Groupe 3 Groupe 4 Groupe 5 Groupe 6 Groupe 7 1 4 0,25 18 11,75 7,5 5,3 2 13,65 8,35 23,15 12,9 10,05 9,5 3 14,05 11,2 23,4 14,8 10,5 10,7 4 18,70 15,55 25,25 15,3 12,8 11,95 5 19,8 15,7 25,7 17,8 12,95 12,75 6 21,1 18 27,55 17,95 13,8 13,05 7 23,2 18,5 28,2 21,6 14 15,9 8 23,3 19,2 31,1 22 14,4 20 9 23,7 21,5 32,2 22,1 14,8 20,55 10 23,75 22,6 33,3 23,5 16,8 25,4 11 32,2 26,2 34 25,9 17,75 26,2 12 64,9 33,7 45 26,65 18,25 31,5 13 50,8 27,9 22,3 14 51,4 31,85 26,1 15 52,3 27,1 REVENDICATIONS 1 - Nouveau médicament, caractérisé en ce qu'il consiste en le thiopropanolsulfonate de sodium de formule HS - CH2 - CHOH - CH2-SO3 Na 2 - Formes injectables du médicament selon la revendication 1, préparées extemporanément.