Brevet FR2585699A1 — publié le 19870206

Dérivé d'acide acétohydroxamique, procédé de prépara- tion et utilisation en thérapeutique. La présente invention concerne un dérivé d'acide acétohydroxamique en tant que produit indus- triel nouveau, à savoir l'acide 2-(5-chloro-4-nitro- 2-méthoxybenzamido)acétohydroxamique. Elle concerne également son procédé de préparation et son utilisa- tion en thérapeutique, notamment en tant qu'agent sédatif. On connaît de BE-A-852 738 le chlorhydrate de l'acide 2-(4-aminobenzamido)acétohydroxamique qui a pour No. de Code: CRL 40 473 et qui a des effets sur le système nerveux central (voir exemple 18 dudit bre- vet belge). On connaît également le chlorhydrate de l'acide 3-(3aminobenzamido)-propionhydroxamique qui a pour No. de Code: CRL 40816 et qui présente des propriétés antidépressives particulièrement intéres- santes. On vient de trouver de façon surprenante que le nouveau composé selon l'invention, à savoir l'acide 2-(5-chloro-4-nitro-2-méthoxybenzamido)-acétohydroxa- mique (No. de Code: CRL 40 636), qui est structurel- lement différent des produits connus précités, est particulièrement intéressant en thérapeutique eu égard à ses effets sur le système nerveux central (SNC). En bref, le CRL 40 636 selon l'invention est remarquable par ses effets sédatifs, alors que (i) le CRL 40 473 présente des effets antidépresseurs et sédatifs modérés, et que (ii) le CRL 40 816 est plus antidépresseur que sédatif. Les résultats d'essais comparatifs consignés dans le tableau I ci-après mettent en évidence que le CRL 40 636 (produit de l'exemple 1 selon l'invention) est plus actif et agit à des doses plus faibles que le CRL 40 473 (produit de comparaison CP-1) et le CRL 40 816 (produit de comparaison CP-2) précités, selon le test dit de l'agressivité intergroupes. Selon l'invention on préconise une composi- tion thérapeutique qui est caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologi- quement acceptable, l'acide 2-(5-chloro-4-nitro-2- méthoxybenzamido)-acétohydroxamique qui a pour formu- le développée: Cl 02N- CO-NH-CH2-CO-NHOH () OCH3 Le composé selon l'invention peut être prépa- ré suivant une méthode connue en soi par application de mécanismes réactionnels classiques. Le procédé que l'on préconise ici consiste à faire réagir l'hydroxyl- amine avec un 5-chloro-4-nitro-2-méthoxybenzamidoacé- tate d'alkyle inférieur en C1-C3, à la température ambiante (15-20 C), pendant au moins 1 h, de préfé- rence pendant au moins 4 h, à raison de 1 à 1,1 mole de NH2OH pour une mole de 5-chloro-4-nitro-2-méthoxy- benzamidoacétate d'alkyle. La synthèse totale du produit de l'invention, à partir de la 5-nitro-4chloro-2-méthylaniline, est illustrée par le diagramme A qui suit. DIAGRAMME A - CH3 NH2 F = 112-113 C CH3 OH OCH3 I Cl 02N/ COOH F = 74-750 C F = 167-168 C OCH3 -C1 O, I Cl O, Cl Ci 2 2EtF = 128-129 C 02N CONHCH2CO2Et F 128-129 C OCH3 C1 02N / CONHCH2CONHOH OCH3 D'autres avantages et caractéristiques de l'in- vention seront mieux compris à la lecture qui va suivre d'un exemple de préparation, d'une part, et de résul- tats d'essais neurophychopharmacologiques, d'autre part. Bien entendu, l'ensemble de ces éléments n'est nullement limitatif mais est donné à titre d'illustration EXEMPLE 1 Préparation de l'acide 2-(5-chloro-4-nitro-2-métho- xybenzamido) -acé2tohydroxami2ue. (No. de Code: CRL 40 636). On prépare une solution d'hydroxylamine avec ,6 g (0,08 mole) de chlorhydrate d'hydroxylamine et 3,68 g (0,16 Atg) de sodium dans 250 ml de méthanol. On ajoute 23,8 g (0,075 mole) de 5-chloro-4-nitro-2- méthoxybenzamidoacétate d'éthyle, et laisse une nuit en contact. On essore le sel de sodium, lave au métha- nol et sèche. On reprend le produit séché ainsi obte- nu dans 200 ml d'eau, filtre et précipite le filtrat avec HCl 3N. On essore, lave à l'eau, sèche. Par re- cristallisation du mélange pondéral C2H50H-H20 (96:4), on obtient le CRL 40 636 avec un rendement de 44 %. F = 196-198 C (avec décomposition). On a résumé ci-après les résultats des essais qui ont été entrepris avec le composé selon l'inven- tion. Dans la présente étude neuropsychopharmacologi- que le CRL 40 636 en suspension dans une solution aqueuse de gomme arabique a été administré par voie intrapéritonéale sous un volume de 20 ml/kg chez la souris male et de 5 ml/kg chez le rat male. I. TOXICITE Le CRL 40 636 n'est pas toxique. En effet la DL-O (dose maximale non mortelle) chez la souris par voie intrapéritonéale est supérieure à 1024 mg/kg. II. COMPORTEMENT GLOBAL ET REACTIVITES Des lots de trois animaux sont observés avant, puis 0,25 h, 0,50 h. 1 h, 2 h, 3 h et 24 h après l'administration de CRL 40 636. On constate: ) Chez la souris à la dose de 512 mkg: - une sédation avec diminution des réactions de peur et d'agressivité, de la force muscu- laire et de la réactivité au toucher pendant 3 h, - une hypothermie (-6, 8 C) pendant plus de 3 h, - une respiration déprimée pendant 2 à 3 h; à la dose de 128 m9Zkq: - une sédation avec diminution de la réaction de peur et d'agressivité pendant 3 h, - une hypothermie (-3,1 C) pendant 2 h, une respiration déprimée pendant 2 à 3 h; à la dose de 32 mq/kg: - une sédation (2 animaux sur 3) pendant 3 h, - une hypothermie modérée (-2,2 C) pendant 1 h, - une respiration déprimée (2 animaux sur 3) pendant 2 h; la dose de 8 mgkg - une sédation inconstante (2 animaux sur 3) pendant 0, 5 à 1 h; et, 2 ) chez le rat à la dose de 256 mLkg: - une sédation pendant 24 h avec diminution de la force et du tonus musculaire pendant 1 à 3 h, une mydriase pendant 2 h, - une respiration déprimée durant l à 3 h; à la dose de 64 m/kg: - une sédation pendant 1 à 3 h avec diminution de la force et du tonus musculaires, - une respiration déprimée durant 1 h; à la dose de 16 m/kg: - une sédation (0,25 à 1 h) avec diminution de la force et du tonus musculaires, - une respiration déprimée durant 0,25 à 1 h; à la dose de 4 mgkg: - une sédation pendant 0,25 à 0,50 h accompa- gnée d'hypotonie musculaire, - une respiration déprimée pendant 0,25 h. III. INTERACTION AVEC L'APOMORPHINE 1 ) Chez la souris Une demi-heure après l'administration de CRL 636, des lots de 6 souris reçoivent par voie sous- cutanée une injection d'apomorphine à la dose de 1 ou 16 mg/kg. On constate que, aux doses de 128 et 512 mg/ kg, le CRL 40 636 (qui administré seul exerce un effet hypothermisant important) ne s'oppose pas à l'hypo- thermie, à l'attitude de verticalisation ni aux sté- réotypies induites par l'apomorphine chez la souris. 2 ) Chez le rat L'apomorphine est injectée par voie sous-cuta- née à la dose de 0,5 mg/kg à des lots de 6 rats 0,5 h après l'administration du CRL 40 636. On observe que les stéréotypies induites par l'apomorphine chez le rat ne sont pas modifiées par le CRL 40 636. IV. INTERACTION AVEC L'AMPHETAMINE 0,5 h ou 1 h après l'administration de CRL 636, des lots de 6 rats reçoivent une injection par voie intrapéritonéale de 2 mg/kg d'amphétamine. On constate que,dès la dose de 4nmg/kg,.leCRL 40 636 antagonise fortement les stéréotypies amphétaminiques (alors que le CRL 40 816 précité n'entraîne qu'une diminution modérée desdites stéréotypies qu'à partir de la dose de 256 mg/kg i.p.); on observe en outre que, si l'antagonisme de ces stéréotypies par le CRL 636 est très intense au départ, il semble dispa- raitre rapidement. V. INTERACTION AVEC LA RESERPINE Quatre heures après l'administration de ré- serpine (2,5 mg/kg), des lots de 6 souris reçoivent le CRL 40 636. On constate que le CRL 40 636 ne modi- fie pas l'hypothermie et le ptôsis réserpiniques. VI. INTERACTION AVEC L'OXOTREMORINE L'oxotrémorine (0,5 mg/kg) est injectée par voie intrapéritonéale à des lots de 6 souris une demi- heure après l'administration de CRL 40 636. On obser- ve que le CRL 40 636 qui exerce un effet hypothermi- sant important aux doses de 32, 128 et 512 mg/kg, ne s'oppose pas à ces doses à l'hypothermie induite par l'oxotrémorine, qu'il est dépourvu d'effet vis-à-vis des tremblements provoqués par l'oxotrémorine, mais qu'il semble entraîner une prolongation de la lacryma- tion (ce qui implique une action sur les symptômes cholinergiques périphériques). VII. ACTION SUR LE TEST DES QUATRE PLAQUES, LA TRACTION ET L'ELECTROCHOC Des lots de 10 souris sont soumis au test une demi-heure après l'administration de CRL 40 636. On constate que le CRL 40 636 ne provoque pas d'augmenta- tion du nombre de passages punis; que, à forte dose, il entraîne chez 30 % des animaux une incapacité mo- trice; et qu'il ne modifie pas les effets convulsi- vants et létaux de l'électrochoc. VIII. ACTION SUR LA MOTILITE SPONTANEE Une demi-heure après avoir reçu le CRL 40 636, les souris (6 par dose, 12 témoins)sont placées en actimètre o leur motilité est enregistrée pendant 0,5 h. On constate que, aux doses de 128 et 512 mg/kg, le CRL 40 636 entraîne une diminution importante de la motilité spontanée, alors que le CRL 40 816 précité ne provoque qu'une diminution modérée de ladite moti- lité à la dose de 512 mg/kg. IX. ACTION SUR L'AGRESSIVITE INTERGROUPES (.étude comparative) Apres avoir séjourné durant 3 semaines de part et d'autre d'une cloison opaque séparant leur cage par le milieu, des groupes de 3 souris mâles (chaque sou- ris pesant environ 20 g) reçoivent les produits à tes- ter, à savoir le CRL 40 636 (exemple 1), le CRL 473 (CP-1) et le CRL 40 816 (CP-2), par voie intra- péritonéale dans une solution aqueuse de gomme arabi- que, à raison de trois cages par produit et par dose et de six cages pour les animaux témoins ne recevant que la solution aqueuse de gomme arabique par voie intrapéritonéale. Une demi-heure plus tard, les deux groupes d'une même cage sont réunis et on note le nombre de combats qui surviennent en 10 minutes. Les résultats sont consignés dans le tableau I qui suit et démontrent que le CRL 40 636 selon l'invention (i) diminue fortement le nombre de combats à la dose de 64 mg/kg, (ii) supprime totalement les combats à la dose de 128 mg/kg, et (iii) possède un effet anti- 258569 agressif bénéfique nettement supérieur à celui du CRL 40 473 selon l'exemple 18 du brevet belge précité, d'une part, et à celui du CRL 40 816, d'autre part. TABLEAU I Essais comparatifs Nombre Diminution du Produit No. de Code Dosenombre de combats (mg/kg) par souris par rapport aux témoins témoins - - 3,05 O % Ex I CRL 40 636 64 1,48 51 % Ex I CRL 40 636 128 O 100 % CP-1 CRL 40 473 128 1,80 40 % CP-I CRL 40 473 512 2,23 26 % CP-2 CRL 40 816 128 1,42 53 % CP-2 CRL 40 816 512 O 100% Note: formules développées des produits C1 Ex 1: 02N CO-NH-CH2-CO-NHOH OCH3 CP-I: H2N CO-NH-CH2-CO-NHOH, HC1 CP-2: CO-NH-CH2-CH2-CO-NHOH, HC1 H2N X. ACTION VIS-A-VIS DE QUELQUES COMPORTEMENTS PERTURBES PAR DIVERS AGENTS 1 ) Motilité réduite par habituation à l'enceinte Apres 18 heures de séjour dans les actimètres, les souris (6 par dose, 12 témoins) reçoivent le CRL 636. Elles sont aissitôt replacées dans leurs encein- tes respectives et, une demi-heure plus tard, on enre- gistre leur motilité pendant 30 minutes. On observe que le CRL 40 636 n'entraîne pas une reprise nette de l'activité motrice chez la souris habituée à son enceinte. 2 ) Motilité réduite par agression hy9oxigue Une demi-heure après avoir reçu le CRL 40 636, les souris (10 par dose, 20 témoins) sont soumises à une anoxie hypobare aiguë [dépression de 600 mmHg (i.e. environ 8 x 104 Pa) en 90 secondes; détente de secondes], puis elles sont placées en actimètre ou leur motilité est enregistrée pendant 10 minutes. On observe que le CRL 40 636 ne provoque pas d'amélioration nette de la récupération motrice chez la souris dont la motilité a été déprimée à la suite d'un séjour bref dans une enceinte à pression réduite. 3 ) Anoxie ashyxigue Des lots de 10 souris reçoivent le CRL 40 636 une demi-heure avant l'administration intrapéritonéa- le de 32 mg/kg de triiodoéthylate de gallamine (agent curarisant de référence). On observe que le CRL 40 636 ne modifie pas le délai d'apparition des convulsions et de la mort consécutives à une anoxie asphyxique provoquée par un curarisant. XI. ESSAI COMPLEMENTAIRE Un essai complémentaire a été réalisé avec le produit selon l'invention, celui-ci étant administré en suspension dans une solution aqueuse de gomme ara- bique, par voie gastrique, sous un volume de 5 ml/kg, à des lots de 6 rats mâles 0,5 h ou i h avant l'admi- nistration de 2 mg/kg intrapér'itonéale d'amphétamine. On constate que le CRL 40 636 antagonise briè- vement les stéréotypies induites par l'amphétamine chez le rat. XII.CONCLUSIONS Les résultats des essais donnés ci-dessus met- tent en évidence que le CRL 40 636 présente dans son profil neuropsychopharmacologique des effets essentiel- lement sédatifs très intenses, objectivés par une hy- pomotilité, une hypothermie, une diminution des réac- tivités, et une diminution de l'agressivité inter- groupes, et qu'il est pratiquement dépourvu d'effets antidépresseurs (pas d'antagonisme des hypothermies induites par l'apomorphine, la réserpine et l'oxotré- morine). En clinique le CRL 40 636 s'est révélé chez l'homme adulte comme étant un excellent sédatif par voie orale à la dose quotidienne de 50 à 100 mg. La posologie à utiliser consiste hotamnent à administrer deux à trois comprimés ou gélules par jour renfermant chacun mg de CRL 40 636. On préconise l'utilisation de l'acide 2-(5- chloro-4-nitro-2-méthoxybenzamido)-acétohydroxamique pour l'obtention d'un médicament sédatif destiné à un usage en thérapeutique chez les patients ayant besoin d'un tel médicament, notamment dans les cas de sur- excitation. REVENDICATIONS 1. Acide 2-(5-chloro-4-nitro-2-méthoxybenzami- do)-acétohydroxamique. 2. Composition thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement acceptable, l'acide 2-(5-chloro-4- nitro-2-méthoxybenzamido)-acétohydroxamique en tant que principe actif. 3. Procédé de préparation de l'acide 2-(5- chloro-4-nitro-2-méthoxybenzamido)-acétohydroxamique, caractérisé en ce que l'on fait réagir l'hydroxylami- ne avec un 5-chloro-4-nitro-2-méthoxybenzamidoacétate d'alkyle inférieur en C1-C3. 4. Utilisation de l'acide 2-(5-chloro-4-nitro- 2-méthoxybenzamido)-acétohydroxamique pour l'obtention d'un médicament sédatif destiné à un usage en théra- peutique chez les patients ayant besoin d'un tel médicament.