Brevet FR2592769A1 — publié le 19870717

La présente invention a pour objet un procédé d'obtention d'une matière enrichie en caséine à partir d'un lait de mammifère ou d'un dérivé de lait de mammifère qui consiste en un caséinate, un co-produit appauvri en caséine étant obtenu sirnultansment; la présente invention a également pour objet un appareillage pour la mise en oeuvre de ce procédé, ainsi que l'application des substances enrichie et appauvrie en caséine ss , comrne aliments, compléments alimentaires ou additifs, notamment dans les industries alimen taires et pharmaceutiques,de même que l'application de la- substance enrichie en caséine ss , comme substance de départ dans la préparation de peptides à activité physiologique, comme la ss -casomorphine. La caséine ss représente 34 % en poids de la caséine entière du lait de vache, soit 8,5 g/l environ, et 65 % en poids de la caséine entière des laits de femme et de chèvre. Dans ces derniers cas, elle constitue la protéine dominante. La caséine ss du lait de vache est formée d'une chaîne peptidique unique, ne contenant ni cystéine, ni glucides, mais riche en proline. C'est une molécule relativement hydrophobe et sensible au calcium, à température égale ou supérieure à 200C (Alais, Science du Lait, 1984). En dehors de ses applications nutritionnelles bien connues, la caséine ss provenant des laits de vache, de chèvre ou de femme est une matière première particulièrement intéressante pour la préparation de produits dérivés à activités pharmacologiques. Outre un phosphopeptide situé en position 15-13, ayant un pouvoir chélatant très marqué vis-à-vis des alcalino-terreux et d'autres oligo-élements, elle contient, en position 60-66, un segment dénommé casomorphine (Brantl et Teschemacher, Milchwissenschaft, 1982, 37, 641-644), ayant une activité biologique analogue à celle des opiates ou médiateur de la synthèse des endorphines (endy, Biofutur, 1984, 24, 601-661). Les seules méthodes de préparation de la cassine qui existent à ce jour, sont des méthodes de laboratoire, conduisant à l'obtention de quantités de produit purifiées de l'ordre de quelques centaines de milligrammes, voire de quelques grammes. Toutes ces méthodes mettent en oeuvre l'utilisation d'urée en concentration relativement élevée (3,3M) et, de ce fait, susceptible de carbamyler les résidus lysyle de la chaîne peptidique de la caséine ss ou des autres caséines. Leur rendement d'extraction est faible : 0,5 à 1 % de la caséine /j présente dans le lait (Groves et Al., 1963) à 30 % pour la mothode d'Aschaffenburg (1963).De plus, la purification finale est effectuée par chromatographie sur échangeurs d'ions et requiert l'utilisation de substances à pouvoir tampon, telles que l'imidazole ou le Tris, qui sont inacceptables sur le plan sanitaire. La présente invention propose un nouveau procédé d'obtention d'une matière enrichie en caséine 4 , ce nouveau procédé ne présentant aucun des inconvénients de la technique antérieure, puisqu'il conduit à l'obtention de cette matière enrichie en caséine j avec d'excellents rendements, qu'il est apte à être extrapolé sur une échelle industrielle, et qu'il n'utilise pas de contaminants chl- miques. Le Déposant a en effet découvert que les membranes minérales de microfiltration réalisent, d'une manière surprenante - ce qui sera explicité plus loin - la séparation phy sique de la caséine ss après dépolymérisation de cette protéine des micelles de caséine présentes dans le lait. On voit donc que cette nouvelle methode metenjeu un mécanisme différent de celui utilise dans l'état antérieur de la technique, puisqu'il consiste en une séparation purement physique, relevant du simple tamisage moléculaire, et ne faisant donc pas appel à des additifs chimiques contaminants. La présente invention a donc d'abord pour objet un procédé d'obtention, d'une part, d'une matière enrichie en caséine ss et, d'autre part, d'un co-produit appauvri en caséine ss , à partir d'un lait de nammifère et/ou d'un caséinate en solution aqueuse, ledit lait et ledit caséine pouvant avoir été reconstitués à partir de poudres, caractérisé par le fait que a) 1) on ajoute à la substance de départ, soit un agent com plexant du calcium si la matière de départ est un lait de mammifère, soit un agent polymérisant de toutes les caséi nes si la matière de départ est un caséinate, et 2) on porte la substance de depart ainsi additionnée à une tem pérature comprise entre environ 0 C et 70C, l'ordre des étapes al) et a2) pouvant être inversé; et b) on soumet la substance obtenue à l'étape a) à une micro filtration sur membrane minérale, en flux tangentiel, la vitesse de circulation de ladite substance étant de l'ordre de 4,5 m/s à 10 m/s, pour obtenir, d'une part, la matière enrichie en caséine ss constituée par le microfiltrat, et, d'autre part, le co-produit constitué par le rétentat de microfiltration. On utilise notamment, comme lait de mammifère, le lait de vache ou le lait de chèvre. On utilise cependant, de préférence, une solution aqueuse de caséinate, en choisissant, comme caseinate, un ca séinate d'ammonium, de potassium, de sodium ou de calcium, ou encore un phosphocaséinate natif (une telle substance étant décrite dans le brevet français n 74-39311), la concentration en caséinate de la solution aqueuse étant de l'ordre de 2 à 5 % en poids. Dans le cas ou la matière de départ est un lait de mammifère, on utilise à l'étape al), comme agent complexant du calcium, un agent séquestrant consistant en du citrate de sodium, ce composé présentant la propriété d'être de qualité alimentaire, ou encore des phosphopeptides de caséine (substances décrites dans le brevet français n0 80-02 281). Dans le cas où la matière de départ est un caséinate, on utilise à l'étapeal), comme agent polymérisant de toutes les caséines, au moins un cation bivalent choisi parmi le calcium, le magnésium, le cuivre, le fer et le zinc. En particulier, on choisit, comme agent polymérisant dans ce cas, le calcium et/ou le magnésium en mélange avec éventuellement l'un parmi le cuivre, le fer et le zinc, ce qui présente l'avantage que dans les hydrolysats peptidiques obtenus à partir de la caséine t résultant du procédé selon la présente invention, il y a apport dloligo-éléments. Dans le cas où l'on utilise le calcium, éventuellement avec un autre cation, en tant qu'agent polymérisant des caséines, on ajoute notamment de O à 2 g/l d'ion Ca pour une solution contenant 25g/l de caséines. Dans le cas des autres ions, on ne peut mentionner de gammes de concentra- tion spécifiques mais l'homme de l'art pourra les choisir compte tenu de l'usage final du produit et de la conjugaison ++ Ca -autres cations. La différence de nature des agents complexant ou polymé- sant utilisés dans le cas où le produit de depart est un lait de mammifère ou, au contraire, est une solution aqueuse de caséinate, mérite une explication : - dans le cas où l'on utilise un caséinate, les constituants caséines de ce produit ne sont pas sous forme micellaire ; pour ce faire, on doit ajouter du calcium qui polymérise toutes les caséines y compris la caséine ss . Le refroi dissement de la solution calcique de caséinate, qui est prévu dans l'étape a) du procédé selon la présente inven tion, amène la dissociation de la caséine > principale ment, et des autres caséines, dans les proportions qui se ront indiquées ci-dessous. - lorsque l'on utilise du lait comme matière de départ, la situation est fondamentalement différente ; il y a trop d'ions Ca ++ pour obtenir une dissociation satisfaisante de la caséine ss et c'est, au contraire, un agent comple xant, ou plutôt séquestrant, du calcium que l'on doit ajouter au lait. Comme indiqué ci-dessus, à l'étape a), on refroidit la substance de départ additionnée de son agent complexant ou polymérisant. Il est bien connu que le refroidissement du lait de 300C à 50C nultiplie par 2,5 la quantité de caseine soluble (non micellaire) (Downey et Murphy, J. Dairy, Research, 1970, 37, 361-373), et l'on sait également que la caséine 2 représente 46% des protéines ainsi solubilisées par l'abaissement de température. Pierre et Brulé, dans l'articule "Mineral and protein equilibra between the colloidal and soluble phase of milk at low temperature", J.Dairy Research 1981, 48, 417-428, ont montré que cette solubilisation de la caséine1dont la proportion, dans la caséine soluble, passe de 25-30S à 200C à 50-60% à 2-40C, était due à une rupture partielle des liaisons hydrophobes existant dans la micelle entre cette caséine et les autres caséines et et K). I1 est, par ailleurs, admis que la caséine ainsi solubilisée, se présente sous différents états de polymérisation en équilibre, sous la dépendance étroite de la température. La forme monomère prédomine à une température égale ou inférieureà 40C, mais à 8,50C, une polymérisation élevée existe déjà. Concernant la gamme de températures préconisée pour la mise en oeuvre de l'étape a2) du procédé selon l1inven- tion, on indiquera qu'en-dessous de 50C, il est extrêmement difficile de faire fonctionner une installation de microfiltration, compte tenu des surfaces d'échange des membranes et des tuyauteries, ainsi que de l'énergie appor tée par la pompe, et qu'au-dessus de 70C, le passage sélectif de la caséine 2 est diminué jusqu'à complète annulation de la sélectivité. La valeur de 50C représente le compromis optimal entre la sélectivité, le débit de microfiltration et le coût énergétique du maintien à basse température de la boucle de microfiltration. Conformément au procédé de la présente invention, la substance de départ, additionnée de son agent complexant ou polymérisant et refroidie à la température indiquée, est mise à circuler à une vitesse comprise entre 4,5 m/s et 10 m/s tangentiellernent à des membranes minérales de microfiltration assemblées en modules. Parmi les membranes de microfiltration utilisables, on peut citer la membrane d'oxyde de zirconium sur support de carbone, présentant un diamètre de pores de 0,05 à 0,090 m, commercialisée sous la référence M6 1000 par la Société "SFEC"; et également la membrane d'alumine d (carémique), présentant un diamètre de pores de 0,2/um fabriquée par la Société"RSVER". Les membranes minérales offrent de multiplets avantages : moindre réactivité de surface, facilité de nettoyage, grande résistance rnecani- que, lenteur, voire absence de vieillissement. I1 est cependant également possible d'utiliser des membranes polymériques, par exemple des membranes à base de polycarbonate ou de polysulfones. La vitesse de balayage à observer dans l'étape de microfiltration dépend du type de membrane utilisée, du diamètre des pores et de l'é- tat de surface de ladite membrane. La valeur de 4,5 m/s constitue une borne inférieure qu'il y a lieu de ne pas dépasser et la limite supérieure de 10 m/s ne peut non plus être dépassée, pour des raisons techniques : perte de charge, énergie dissipée, etc... La valeur de 6 m/s constitue un compromis optimal entre la performance de la microfiltration et l'énergie à mettre en oeuvre pour assurer cette vitesse. On indique également qu'à l'étape b), c'est-à-dire à l'étape de nicrofiltration, on travaille de préférence à une pression qui, en amont du dispositif de microfiltration, est comprise entre 0,5 et 6 bar rela tifs, de préférence entre 1,5 et 2,5 bar relatifs, et qui, en aval du dispositif de microfiltration, est comprise entre 0,0 et 5 bar' relatifs, de préférence entre 0,5 et 1,0 bar relatif. Les plages possibles, qui vien nent d'être indiquées ci-dessus, sont fonction de la nature de la membrane (diamètre du tube qui la contient - longueur), de la vitesse de balayage, ainsi que de la viscosité du liquide circulant. Lors du traitement à basse température des solutions de caséinate par microfiltration, il était loin d'être évident que le transport intra-membranaire concerne préférentiellement la caséine 2 . En effet, la taille moléculaire de cette caséine est très voisine de celle des autres caséines solubilisées (caséine K et i 1) L'homme de l'art s'attendait par conséquent à un passage simultané des trois caséines i 1 2 et K et non pas à celui à 95% de la caséine 2 seule dans les conditions de l'invention. Le spécialiste biochimiste pourrait élever l'argumentation que le monomère de caséine 2 ayant un poids moléculaire de 24 000 daltons (ainsi que les monomères de caséines &alpha;s1 et K), l'emploi de membranes d'ultrafiltra- tion à pouvoir de coupure supérieur à 24 000 daltons aurait permis d'obtenir la meme séparation que l'emploi de membranes de microfiltration, la séparation de ces molécules par rapport aux micelles de caséine (poids moléculaire : 25 à 250 millions de daltons) semblant d'un point de vue théorique relativement aisé. Or, du fait du colmatage lié au phénomène de polarisation, l'ultrafiltration ne réalise pas ce genre de séparation. L'emploi de la technique de microfiltration tangentielle pour séparer des composants macromoléculaires est tout à fait nouvelle. En outre, il n'était absolument pas évident que le passage de la caséine 2 se fasse avec le rendement et la performance (taux exprimé en g/l) qui ont été observés par le Déposant. L'homme de l'art se serait plutôt attendu à un colmatage progressif et rapide de la membrane de microfiltration. I1 est donc possible, conformément au procéda de la présente invention, d'obtenir, après l'étape b), une matière contenant de 35 à 95% de caséine ss par rapport aux protéines totales. Dans le cas de la recherche d'une pureté maximale en caséine CL , sa teneur dans le microfiltrat varie de 1,0 à 2,Sg/l1 dans des conditions optimales de travail, mentionnées dans les exemples indiqués ci-après. Conformément à la présente invention, on peut faire suivre les étapes a) et b) du procédé, telles qu'elles ont été indiquées ci-dessus, par une étape c), suivant laquelle on soumet le microfiltrat obtenu à l'étape b) à une ultrafiltration, pour obtenir, d'une part, une substance enrichie en caséine 2 de plus forte concentration en caséine Q et, d'autre part, un perméat d'ultrafiltration comme co-produit. Cette ultrafiltration a pour but non seulement de concentrer la caséine 2 qui est obtenue sous forme diluée par la microfiltration de l'étape b), mais également d'ajuster la teneur en minéraux de la solution. On utilise, pour réaliser l'ultrafiltration de l'étape c) une membrane d'ultrafiltration ayant un pouvoir de coupure inférieur ou égal à 20 000, la valeur de 20 000 pouvant être dépass-esi l'on travaille à une température suffisante pour entrainer l'agrégation, sous forme de micelles, de la caséine Q. A l'étape c), on travaille notamment à une température comprise entre 50C environ et la température théo rique de dénaturation thermique de la caséine S en solution pure ; en particulier, on travaille à une température comprise entre 50C et 800C, et, mieux encore, à une température comprise en 550C et 600C. On constate que l'ultrafiltration de l'étape c) peut donc être effectuée à une température supérieure à celle à laquelle on effectue la microfiltration de l'étape b), l'objectif étant d'améliorer le débit. Les autres paramètres de cette ultrafiltration de l'étape c) sont classiques : on travaille à une pression qui, en amont du dispositif d'ultrafiltration, est comprise entre 1,5 et 10 bar relatifs, et qui, en aval du dispositif d'ultrafiltration, est comprise entre O et 8 bar relatifs, et on fait circuler la substance obtenue à l'étape b) à une vitesse comprise entre 1,5 et 6m/s. Conformément à d'autres caractéristiques du procédé selon la présente invention, on recycle en amont du dispositif de microfiltration, le rétentat de microfiltration obtenu à l'étape b) et. le cas échéant, le perméat d'ultra filtration obtenu à l'étape c). Le rétentat ainsi obtenu, présente une teneur en protéines pouvant aller jusqu'à 50 g/l. Dans une étape subséquente dl), on peut purifier par chromatographie à-basse ou haute pression la substance enrichie en caséine ss obtenue à l'étape c), pour obtenir, d'une part, de la caséine É pure, et, d'autre part, des caseines &alpha;s et K comme co-produits. On peut aussi, dans une étape d2), soumettre la substance enrichie en caséine ss obtenue à l'étape c) à une diafiltration (cette étape d2) et l'étape c) pouvant être réalisées de façon concomitante). On peut sécher la substance riche en caséine ss obtenue suivant le cas à l'étape b) ou à l'étape dl) ou à l'étape d2), pour donner une poudre enrichie en caséine ss , ainsi que le rétentat de microfiltration obtenu à la fin de l'étape b) ou le perméat de diafiltration obtenu à la fin de l'étape d2). Le but de la diafiltration est d'éliminer une partie du (ou des) cation(s). L'ajustement de la teneur en composants autres que la ca séine se fera en fonction de l'utilisation que l'on veut faire du produit final indique ci-dessus, soit utilisation en l'état). La présente invention a également pour objet un appareillage pour la mise en oeuvre du procédé qui vient d'étre décrit, cet appareillage étant caractérisé par le fait qu'il comporte -un récipient destiné à renfermer la substance de départ addi tionnée de son agent complexant ou polymérisant ; -un dispositif de microfiltration comprenant un ensemble de membranes de microfiltration tubulaires; une première canalisation reliant ledit récipient audit dispo sitif de microfiltration, ladite première canalisation permet tant d'introduire la substance prélevée dans ledit récipient dans ledit dispositif de microfiltration tangentiellement aux membranes, une pompe d'alimentation, une pompe de recircula tion et un échangeur de chaleur étant disposés successivement sur ladite première canalisation;; -une seconde canalisation reliant la sortie dudit dispositif de microfiltration et un point de ladite première canalisation situé entre ladite pompe d'alimentation et ladite pompe de recirculation,et-une troisième canalisation branchée en un point situé entre ledit échangeur de chaleur et ledit dispositif de microfiltration et constituant une canalisation de retour vers ledit récipient,lesdites seconde et troisième canalisations permettant le recyclage du rétentat de microfiltration, -éventuellement,un dispositif d'ultrafiltration disposé en aval dudit dispositif de microfiltration ,en vue du traitement du microfiltrat et un dispositif permettant de recycler le perméat d'ultrafiltration en amont dudit dispositif de microfiltration;; -éventuellement, un dispositif de purification par chromatographie à basse ou haute pression disposé en aval dudit dispositif d'ultrafiltration, en vue de traiter la substance enrichie en caséine fi concentrée provenant dudit dispositif d'ultrafiltration; -éventuellement un dispositif de diafiltration disposé en aval dudit dispositif d'ultrafiltration,en vue de traiter la substance enrichie en caséine ss concentrée provenant dudit dispositif d'ultrafiltration(ledit dispositif de diafiltration pouvant être directement inséré dans ledit dispositif d'ultrafiltration); et -éventuellement ,un dispositif de séchage de la caséine concentrée provenant dudit dispositif de microfiltration, dudit dispositif de purification par chromatographie et dudit dispositif de diafiltration,ainsi que du co-produit appauvri en caséine ss provenant dudit dispositif de microfiltration ou dudit dispositif de diafiltration. La présente invention concerne également l'application de la matière enrichie en caséine 9 obtenue, le cas échéant après séchage,aux étapes b), c) et d2)et de la caséine S pure obtenue,le cas échéant après séchage,à l'était pe dl)et du co-produit appauvri en caséine ss obtenu,le cas échéant après séchage,aux étapes b) et d2),comme aliments,compléments alimentaires ou additifs,notamment dans les industries laitières, fromagères, pharmaceutiques et diététiques. Ainsi,la poudre enrichie en caséine ss ,renfermant de 35 à 95% des protéines totales,présente de nombreuses applications nutritionnelles. Quant au co-produit appauvri en caséine XS ,qui représente moins de 15% des protéines totales, il présente des propriétés fromagères et laitières intéressantes, du fait que l'appauvrissement en caséine P améliore la stabilité thermique au lait et augmente la fer meté des gels obtenus par action de la présure. La présente invention concerne également l'application de la matière enrichie en caséine 4 obtenue, le cas échéant après séchage, aux étapes b), c) et d2), et de la caséine ss pure obtenue, le cas échéant après séchage, à l'étape dl) pour préparer, par fragmentation enzymatique notamment en réacteur à membrane , des peptides à activité physiologique directe ou indirecte (induction de la secrétion d'hormones), tels que la ss -casomorphine, laquelle présente une activité dite "opiate-like". Pour mieux faire comprendre l'objet de la présen- te invention, on décrira plus en détail ci-après, à titre indicatif et non limitatif, un mode particulier de réalisation du procédé d'obtention d'une matière enrichie en caséine par microfiltration, en référence au dessin annexé. Sur ce dessin - la figure 1 représente un schéma d'obtention de ladite ma tière enrichie en caséine ss; - la figure 2 représente le schéma de l'appareillage nécessai re pour la mise en oeuvre de l'étape de microfiltration du procédé; - la figure 3 représente les profils chromatographiques ob tenus avec un caséinate de départ et le microfiltrat-de l'exemple 1 décrit ci-dessous, cette chromatographie étant effectuée sur une colonne TStR 3000 5W, avec un tampon phos phate à pH 2,2. Le schéma de la figure 1 s'explique par lui-même; on y voit les étapes de microfiltration, d'ultrafiltration, de diafiltration ou de purification par chromatographie, qui sont les étapes respectivement b), c), et d2) ou dl), qui ont été définies ci -dessus, ainsi que les différentes étapes de séchage. L'appareillage représenté sur la figure 2 se compose d'un récipient 1 pour la matière de depart, d'un dispo sitif de microfiltration 2 constitué par plusieurs membranes de microfiltration 2a tubulaires, et d'une première conduite 3 reliant le récipient 1 à l'entrée du dispositif de microfiltration 2. Sur cette conduite 3, sont disposés, de façon successive, une pompe d'alimentation 4, une pompe de recirculation 5 et un échangeur de chaleur 6. La canalisation 3 est disposée de telle manière que la substance qu'elle transporte pénètre dans le dispositif de microfiltration 2, de façon tangentielle aux membranes 2a de microfiltration utilisées. L'appareillage représenté sur la figure 2 est complété par une deuxième conduite 7 reliant la sortie du dispositif de microfiltration 2 à un point situé sur la canalisation 3, entre les pompes 4 et 5, et également par une troisième conduite 8, qui est branchée sur la canalisation 3, en un point situé entre l'échangeur de chaleur 6 et le dispositif de microfiltration 2, cette conduite 8 étant une conduite de retour vers le récipient 1. Les différents essais de microfiltration ont été réalisés à l'aide de ce dispositif ; il constituent des exemples 1 à 5 illustrant la présente invention, les conditions dans lesquelles ont éte réalisés et les résultats obtenus étant résumés dans le Tableau I (les pourcentages indiqués étant donnés en poids). TABLEAU I Teneur Paramètres de la microfiltration Caséine ss cotenue en Membranes Débit de Pureté Concen la mi- par rap- tration Exemp- Matière Agent agent minérales Vitesse Pres- Pres- Tem- crofil- port rap- dans le comple- comple- de de sion sion péra- tration protéi- microple première xant micro- balayage entrée sortie ture (l.h.-1 nes to- filtrat tales xant (g/l) filtration (m.s-1) (bar) (bar) ( C) m-2) (%) (g/l) Solution Calcium 1 de caséina- sous for- 2 SFEC M 6 1000 6 2,0 0,9 5 C 25 à 30 95 1,1 te de so- me de dium à 2,5% CaCl2 Solution de 1,75 Jusqu'à caséinate 25à de sdium à (pour " " " " 1,7 0,5 " 15 à 20 " 5% de 2 2,5% cocnen Calcium 2,5% de trée à 5% caséinate) caséina par micro- te filtration Solution de 3 caséinate " 1,75 " " " " 1,5 0,5 " 25 " 1,0 d'ammonium à 2,5% TABLEAU I (Suite) Teneur Paramètres de la microfiltration Caséine ss cotenue en Membranes Débit de Pureté Concen la mi- par rap- tration Exemp- Matière Agent agent minérales Vitesse Pres- Pres- Tem- crofil- port rap- dans le comple- comple- de de sion sion péra- tration protéi- microple première xant micro- balayage entrée sortie ture (l.h.-1 nes to- filtrat tales xant (g/l) filtration (m.s-1) (bar) (bar) ( C) m-2) (%) (g/l) Solution de Calcium caséinate sous for- 0,8 de sodium me de à 2,5% CaCl2 CERAVER 5,2 1,5 0,5 5 C 15 à 20 95 0,6 4 + + magnésium sous for- 0,8 me de MgCl2 Calcium sous for5 " me de 0,5 SEEC M 6 1000 6 1,7 0,3 " 20 à 25 65 2,5 chlorure de cal cium La figure 3 illustre, comme indiqué ci-dessus, les profils chromatographiques obtenus pour le caséinate de départ et pour le microfiltrat de l'exemple 1, correspondant à l'obtention de caséine Q à 95% des protéines totales. On indiquera également ci-après, dans le tableau Il, les rapports de quelques amino-acides du microfiltrat de l'exemple 1 et du caséinate de départ TABLEAU II Pro Pro Val s Q+ rapports ---- ----- --- amino-acides Asp Tyr Lys caséinate de 1,80 3,86 1,23 122 départ microfiltrt 3,50 8,75 1,38 19 (exemple 1) caséine 3,89 8,75 1,73 0 théorique * s Q = paramètre de Marchalonis et Weltman : somme des carrés des différences de composition en acides aminés d'un produit par rapport à la composition théorique (ici : caséine 2 ) REVENDICATIONS 1. Procédé d'obtention , a1 une part, d'une matière enrichie en caseine 4 , et, d'autre part, d'un co-produit appauvri en caséine / , à partir d'un lait de mammifère et/ou d'un caséinate en solution aqueuse, ledit lait et ledit ca séinate pouvant avoir été reconstitués à partir de poudres, caractérisé par le fait que a) 1) on ajoute à la substance de départ, soit un agent complexant du calcium si la matière de départ est un lait de mammifere, soit un agent polymérisant de toutes les caséines si la matière de départ est un caséinate, et 2) on porte la substance de départ additionnée de son agent complexant ou polymérisant à une température comprise entre environ 0 C et 70C, l'ordre des étapes al) et a2) pouvant être inversé; et b) on soumet la substance obtenue à l'étape a) à une microfiltration sur membrane minérale, en flux tangentiel, la vitesse de circulation de ladite substance étant de l'ordre de 4,5 m/s à 10 m/s, pour obtenir, d'une part, la matière enrichie en caséine ,6constituée par le microfiltrat, et, d'autre part, le co-produit constitué par le rétentat de microfiltration. 2, Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'on choisit, comme caséinate, un caséinate d'ammonium, de potassium, de sodium ou de calcium, ou encore un phosphocaséinate natif, la concentration en caséinate de la solution aqueuse étant de l'ordre de 2 à 5 % en poids. 3. Procédé selon la revendication 1, dans lequel on utilise un lait de mammifère comme matière de départ, ca racterisë par le fait qu'à l'étape al) on utilise, comme agent complexant du calcium, un agent séquestrant consistant en du citrate de sodium ou en un phosphopeptide de caséine. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, dans lequel on utilise un caséinate comme matière de départ, caractérisé par le fait qu'à l'étape al), on utilise, comme agent polymérisant de toutes les caséines, au moins un cation bivalent choisi parmi le calcium, le magnésium, le cuivre, le fer et le zinc. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé par le fait qu'on choisit comme agent polymérisant le calcium et/ou le magnésium en mélange avec éventuellement l'un parmi le cuivre, le fer et le zinc. 6. Procédé selon la revendication 4, dans lequel on utilise le calcium, éventuellement avec un autre cation, en tant qu'agent complexant des caséines, caractérisé par le fait qu'on ajoute de O à 2 g/l d'ion Ca++ pour une solution contenant 25 g/l de caséines. 7. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé par le fait qu'à l'étape a2), on porte, à une temperature de l'ordre de 50C, la substance de départ à laquelle, si l'étape al) a déjà été effectuée , on a ajouté l'agent complexant ou l'agent polymérisant. 8. Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé par le fait qu'on utilise, pour la microfiltration de l'étape b), une membrane d'oxyde de zirconium sur support de carbone, dont le diamètre des pores est compris entre 0,085 et 0,090 m. 9. Procéde selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé par le fait qu'on utilise, pour la microfiltration de l'étape b), une membrane d'alumine o(, dont le diamètre des pores est de 0,2/um. 10. Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé par le fait qu'on utilise pour la microfiltration de l'étape b), une membrane polymérique choisie notamment parmi les membranes à base de polycarbonate ou de polysulfone. 11. Procédé selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisé par le fait qu'à l'étape b), on fait circuler la substance obtenue à étape a), à une vitesse de l'ordre de 6 m/s. 12. Procédé selon l'une des revendications 1 à 11, caractérisé par le fait qu'à l'étape b), on travaille à une pression qui, en amont du dispositif de microfiltration, est comprise entre 0,5 et 6 bar relatifs, de préférence, entre 1,5 et 2,5 bar relatifs, et qui, en aval du dispositif de microfiltration est comprise entre 0,0 et 5 bar relatifs, de préférence entre 0,5 et 1,0 bar relatif. 13. Procédé selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisé par le fait que, dans une étape subséquente c), on soumet le microfiltrat obtenu à l'étape b) à une ultrafiltration, pour obtenir, d'une part, une substance enrichie en caséine ss , de plus forte concentration en caséine et, d'autre part, un perméat d'ultrafiltration comme co-produit. 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé par le fait qu'on utilise, pour réaliser l'ultrafiltration de l'étape c), une membrane d'ultrafiltration ayant. un pouvoir de coupure inférieur ou égal à 20 000, la valeur de 20 000 pouvant être dépassée si l'on travaille à une température suffisante pour entraîner l'agrégation sous forme de micelles, de la caséine 15. Procédé selon l'une des revendications 13 et 14, caractérisé par le fait qu' l'étape c), on travaille à une température comprise entre 50C environ et la température théorique de dénaturation thermique de la caséine ss en solution pure, notamment à une température comprise entre 50C et 800 C, et, en particulier, à une température comprise entre 55 C et 60 C. 16. Procédé selon l'une des revendications 13 à 15, caractérisé par le fait qu'à l'étape c), on travaille à une pression qui, en amont du dispositif d'ultrafiltration, est comprise entre 1,5 et 10 bar relatifs, et qui, en aval du dispositif d'ultrafiltration, est comprise entre 0 et 8 bar relatifs, et qu'on fait circuler la substance obtenue à l'étape b) à une vitesse comprise entre 1,5 et 6 m/s. 17. Procédé selon l'une des revendications 1 à 16, caractérisé par le fait que l'on recycle en amont du dispositif de microfiltration, le rétentat de microfiltration obtenu à l'étape b), et, le cas échéant, le perméat d'ultrafiltration obtenu à l'étape c). 18. Procédé selon l'une des revendications 13 à 17, caractérisé par le fait que, dans une étape subséquente dl), on purifie par chromatographie à basse ou haute pression la substance enrichie en caséine 4 obtenue à l'étape c), pour obtenir, d'une part, de la caséine ss pure, et, d'autre part, des caséines o( et K comme co-produits. 19. Procédé selon l'une des revendications 13 à 17, caractérisé par le fait que, dans une étape d2), on soumet la substance enrichie en caseine ss obtenue à l'étape c) à une diafiltration, cette étape d2) et l'étape c) pouvant être réalisées de façon concomitante. 20. Procédé selon l'une des revendications 1, 18 et 19, caractérisé par le fait que l'on sèche la substance riche en caséine obtenue suivant le cas à l'étape b) ou à l'étape dl) ou à l'étape d2), pour donner une poudre enrichie en caséine ss , ainsi que le rétentat de microfiltration obtenu à la fin de l'étape b) ou le perméat de diafiltration obtenu à la fin de l'étape d2). 21. Appareillage pour la mise en oeuvre du procédé tel que défini à l'une des revendications 1 à 20, caractérisé par le fait qu'il comporte - un récipient (1) destiné à renfermer la substance de départ additionnée de son agent complexant ou polyméri- sant; - un dispositif de microfiltration (2) comprenant un ensemble de membranes de microfiltration (2a) tubulaires; - une première canalisation (3) reliant ledit récipient (1) audit dispositif de microfiltration (2), ladite première canalisation (3) permettant d'introduire la substance prélevée dans ledit récipient (1) dans ledit dispositif de microfiltration (2) tangentiellement aux membranes (2a), une pompe d'alimentation (4), une pompe de recirculation (5) et un échangeur de chaleur (6) étant disposés successivement sur ladite première canalisation (1); ; - une seconde canalisation (7) reliant la sortie dudit dispositif de microfiltration (2) et un point de ladite première canalisation (3) situé entre ladite pompe d'alimentation (4) et ladite pompe de recirculation (5), et une troisiè me canalisation (8) branchée en un point situé entre ledit échangeur de chaleur (6) et ledit dispositif de microfiltration (2) et constituant une canalisation de retour vers ledit récipient (1), lesdites seconde (7) et troisième (8) canalisations permettant le recyclage du rétentat de microfiltration. 22 - Appareillage selon la revendication 21, caractérisé par le fait qu'il comporte un dispositif d'ultrafiltration disposé en aval du dispositif de microfiltration (2), en vue du traitement du microfiltrat et un dispositif permettant de recycler le perméat d'ultrafiltration en amont dudit dispositif de microfiltration (2). 23 - Appareillage selon la revendication 22, caractérisé par le fait qu'il comporte un dispositif de purification par chromatographie à basse ou haute pression disposé en aval du dispositif d'ultrafiltration, en vue de traiter la substance enrichie en caséine 5 concentrée provenant dudit dispositif d'ultrafiltration. 24 - Appareillage selon la revendication 22, caractérisé par le fait qu'il comporte un dispositif de diafiltration disposé en aval du dispositif d'ultrafiltration, en vue de traiter la substance enrichie en caséines concentrée provenant dudit dispositif d'ultrafiltration, ledit dispositif de diafiltration pouvant être directement inséré dans ledit dispositif d'ultrafiltration. 25 - Appareillage selon l'une des revendications 21 à 24, caractérisé par le fait qu'il comporte un dispositif de séchage de la caséine q concentrée provenant du dispositif de microfiltration et, le cas échéant, du dispositif de purification par chromatographie, et du dispositif de diafiltration, ainsi que du co-produit appauvri en caséine 6 provenant du dispositif de microfiltration ou, le cas échéant, du dispositif de diafiltration. 26 - Application de la matière enrichie en caséine 25 , obtenue, le cas échéant après séchage, aux étapes b), c) et d2) du procédé tel que défini à l'une des reven dications 1 à 17, 19 et 20, comme aliment, complément alimentaire ou additif notamment dans les industries laitières, fromagères, pharmaceutiques et diététiques. 27 - Application de la matière enrichie en caséines pure, obtenue, le cas échéant après séchage, à l'étape dl) du procédé tel que défini à l'une des revendications 18 et 20, comme aliment, complément alimentaire ou additif, notamment dans les industries laitières, fromagères, pharmaceutiques et diététiques. 28 - Application du co-produit appauvri en caséine obtenu, le cas échéant apres séchage, aux étapes b) et d2) du procédé tel que défini à l'une des revendications 1 à 17, 19 et 20, comme complément alimentaire ou additif, notamment dans les industries laitières, fromagères, pharmaceutiques et diététiques. 29 - Application de la matière enrichie en caséine? obtenue, le cas échéant après séchage, aux étapes b), c) et d2) du procédé tel que défini à l'une des revendications 1 à 17, 19 et 20, comme produit de départ dans la préparation, par fragmentation enzymatique, éventuellement en réacteur à membrane, de peptides à activité physiologi que directe ou indirecte, telle que la CH2 ss-casomorphine. 30 - Application de la caséine? pure, obtenue, le cas échéant après séchage, à l'étape dl) du procédé tel que défini à l'une des revendications 18 et 20, comme produit de départ dans la préparation, par-fragmentation enzymatique, éventuellement en réacteur à membrane, de peptides à activité physiologique directe ou indirecte, telle que la -casomorphine.