Brevet FR2597750A1 — publié le 19871030

-1 La présente invention concerne une solution aqueuse stable de sulfate de vincristine. Les alcaloïdes des Vinca sont très utilisés en thérapeutique médicale. Parmi eux, les dimères de struc5 ture indolique, en particulier la vincristine, démontrent des propriétés intéressantes dans le domaine de la cancérologie. Plus particulièrement, le sulfate de vincristine, présenté sous forme de préparation injectable, administré par voie intra-veineuse, donne d'excellents résultats dans 10 ce domaine. Jusqu'à ces dernières années, cette préparation injectable était toujours présentée sous la forme d'un lyophilisat, essentiellement en raison des problèmes liés à l'instabilité de la molécule en solution aqueuse. Des études plus récentes, par exemple illustrées par GB-A-2 125 292, portent sur des compositions stables aqueuses d'alcaloïdes, comme la vincristine, qui contiennent à titre d'excipients, des polyols, un tampon acétate pour fixer la valeur du pH de la composition dans un do20 maine particulier, ainsi que des agents anti-microbiens. Le but de la présente invention a été de mettre au point une nouvelle formulation injectable de sulfate de vincristine en solution aqueuse, dont la stabilité soit particulièrement élevée. Cette nouvelle formulation, objet de la présente invention, consiste en une solution aqueuse stable de sulfate de vincristine, caractérisée en ce qu'elle comprend: a) une quantité thérapeutiquement efficace de sulfate de 30 vincristine; b) du glycocolle à raison de 0,1 % à 2,2 % (p/v); c) un tampon phosphate 0,05 M à 0,2 M, à base de phosphate monopotassique, et de l'acide phosphorique, pour fixer le pH de la solution à 4,15 - 0,15; -210 : 15 25 30 d) un conservateur anti-microbien en quantité efficace et pharmacologiquement compatible; et e) de l'eau pour préparation injectable. Le premier constituant essentiel de la composition aqueuse selon l'invention, est le glycocolle ou glycine. Il s'agit d'un amino-acide, l'acide amino-acétique, qui est destiné à ajuster l'isotonicité de la solution injectable. Le glycocolle intervient dans la composition selon l'invention à raison de 0,1 jusqu'à 2,2 % (p/v), la limite supérieure de 2,2 % poids/volume correspondant à l'obtention d'une solution qui est isoosmotique avec le sang. Le second constituant essentiel de la composition selon l'invention est un tampon phosphate, à base de phosphate monopotassique, associé à de l'acide phosphorique. Le tampon phosphate peut présenter une molarité comprise entre 0,05 M et 0,2 M et de préférence une molarité de l'ordre de 0,1 M. Ce couple tampon phosphate, acide phosphorique est destiné à fixer le pH de la solution aqueuse à une valeur de pH = 4,15 - 0,15, ce qui représente le pH de stabilité optimum de la composition à + 4 C. Les résultats analytiques indiqués ci-après démontrent clairement que lorsqu'on s'écarte de cette valeur, la stabilité de la solution décroSt très rapidement. La composition selon l'invention contient en outre des conservateurs antimicrobiens. Ils peuvent être utilisés seuls ou en association entre eux, en quantité efficace et pharmacologiquement compatible. Ces conservateurs anti-microbiens seront par exemple avantageusement choisis parmi la liste figurant ci-après et précisant en outre les teneurs maximales d'utilisation: -3 - parahydroxybenzoate de méthyle 1,5 0/0o (p/v) parahydroxybenzoate de propyle 1,5 0/0o (p/v) - phénol 5 0/0o (p/v) crésols 3 '/o (p/v) - dérivés mercuriels 0,1 0/0o (p/v) - alcool benzylique 10 0/0o (p/v). A titre d'illustration de l'objet de la présente invention, on indiquera ci-après un exemple particulier de solution aqueuse stable de sulfate de vincristine qui 10 répond à la formule: - sulfate de vincristine 1 mg parahydroxybenzoate de méthyle 1,275 mg - parahydroxybenzoate de propyle 0,225 mg - glycocolle 18,900 mg - tampon phosphate 0,1 M pH = 4,5 0,200 ml - acide phosphorique q.s. pH = 4,15 - eau pour préparations injectables q.s.p. 1 ml. La préparation d'une telle solution n'appelle aucun commentaire particulier étant données les caracté20 ristiques de solubilité dans l'eau de chacun de ces constituants. Cependant, à cause de la thermosensibilité du sulfate de vincristine, la stérilisation de la solution est assurée par filtration sur membrane de porosité 0,2 Dm. Le récipient de conditionnement peut être une 25 ampoule de verre blanc ou brun, un flacon également en verre et muni d'un bouchon en élastomère judicieusement choisi. Etude analytique en fonction de la température et du pH 30 Optimisation dans le cadre du modèle arrhénien. L'étude de la dégradation forcée du sulfate de vincristine en solution a été suivie par chromatographie liquide haute performance. -4 Les conditions ont été les suivantes: - Colonne: microbondapak(R) (WATERS) L = 30 cm di = 4,2mm remplie par de l'octadécysilane (C 18 - 10 dm). - Eluant: eau 650 ml acétonitrile 350 ml chlorure de potassium 7,45 g acide chlorhydrique N 15 ml. - Débit: 1 ml/min - Longueur d'onde de détection: 276 nm. La figure 1 représente le chromatogramme type de la solution injectable préparée suivant la formule citée ci-dessus. L'analyse des points expérimentaux montre que la dégradation du sulfate de vincristine en solution suit 15 une loi cinétique du premier ordre. Log C = - kt CO (1) avec C = concentration en mole/1 de sulfate de vincristine intact à l'instant (t) C0 = concentration initiale en mole/1 de sulfate de vincristine t = le temps en secondes k = constante cinétique de dégradation en s 1du sulfate de vincristine. Cette constante k est fonction de la température et du pH de la solution considérée. Elle obéit à la loi d'ARRHENIUS classique: Log k (T,pH) = Log k0 (T,pH) - EA (pH) RT (2) o: EA est l'énergie d'activation du processus de dégradation en kcal.mole-1 qui est fonction du pH de la solution considérée. - 5 k0 est le facteur de fréquence en s1 relié à l'entropie d'activation-de l'état de transition du processus dégradatif qui est également fonction du pH de la solution considérée. T = la température absolue en degré RELVIN ( K) R = la constante des gaz parfaits égale à 0,00198 en -1 0 Kcal.mole1. K1. La figure 2 représente la variation (*) de K en fonction du pH pour diverses températures (4 C, 10 C, 10 20 C, 40 C). La figure 3 représente la courbe dérivée: 6 Log K (T,pH) 6 pH en fonction du pH et pour la même série de température. On voit que pour une conservation à 4 C, l'optimum ( Lopg K = 0) est atteint pour une valeur de pH égale à 4,15 - 0,15. A partir de ces conditions, on peut prévoir un profil de décroissance de la teneur en sulfate de vincristine dans la solution injectable, conservée à 4 C, ayant l'allure représentée sur la figure 4 (environ 7,5 % de dégradation sur 2 ans). A titre de comparaison, on donne sur le même graphique l'évolution obtenue pour une solution injectable tamponnée à 4, 4 et maintenue à 4 C. (*) N.B.: Les courbes présentées résultent de l'utilisa30 tion d'une formule empirique polynomiale du type: y = a3 x3 + a2 x2 + a1 x + a0, les paramètres a0 aI a2, a3 étant ajustés par la méthode des moindres carrés à partir des valeurs expérimentales. -6- REVENDICATIONS 1. Solution aqueuse stable de sulfate de vincristine, destinée à être administrée par voie parentérale, caractérisée en ce qu'elle comprend: a) une quantité thérapeutiquement efficace de sulfate de vincristine; b) du glycocolle à raison de 0,1 % à 2,2 % (p/v); c) un tampon phosphate 0,05 M à 0,2 M, à base de phosphate monopotassique, et de l'acide phosphorique, pour fixer le pH de la solution à 4,15 + 0,15; d) un conservateur antimicrobien en quantité efficace et pharmacologiquement acceptable; et e) de l'eau pour préparation injectable. 2. Solution selon la revendication 1, caractérisée en ce que le conservateur est choisi parmi la liste 15 des produits suivants, précisant les teneurs maximales d'utilisation: - parahydroxybenzoate de méthyle 1,5 0/0o (p/v) - parahydroxybenzoate de propyle 1,5 %/o (p/v) - phénol 5 /o (p/v) - crésols 3 /0o (p/v) - dérivés mercuriels 0,1 /0o (p/v) - alcool benzylique 10 /0o (p/v). 3. Solution selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce qu'elle répond à la composition 25 suivante: sulfate de vincristine 1 mg - parahydroxybenzoate de méthyle 1,275 mg parahydroxybenzoate de propyle 0,225 mg - glycocolle 18,900 mg - tampon phosphate 0,1 M pH = 4,5 0,200 ml - acide phosphorique q.s. pH = 4,15 - eau pour préparations injectables q.s.p. 1 ml.