Brevet FR2588001A1 — publié le 19870403

La présente invention concerne un ester intermoléculaire de dicar- nitine: ayant, une action thérapeutique. Plus particulièrement, l'invention concerne le dichlorure d'acétyl- dicarnitine ayant la formule générale suivante: CH I3 CH)-CH2-CH-CH -C OH C 2 CH 3 2 CIi L cH3t 1H lH 2 EH 3 I 0 O-C-CH 3 LiaUn autre objet de l'invention est un procédé pour la préparation de dichlorure d'acétyldicarnitine. Selon l'invention, la préparation du dichlorure d'acétyldicarni- Line de formule] est essentiellement fondée sur deux réactions possibles. La ?remi.re consiste à transformer le chlorure d'acétylcarnitine en le chlorure a d'acle correspondant par traitement avec du chlorure de thionyle puis est.rification avec du chlorure de carnitine en une seule étape. Selon l'autre réaction, le composé de départ est le dichlorure de dicarnitine ester intermoléculaire de carnitine, obtenu en une seule eatape par traitement de chlorure de carnitine avec du chlorure de thionyle puis acC;tylation du groupe alcool libre secondaire, de façon connue, par réactiun avec de l'anhydride acétique ou du chlorure d'acétyle comme agent acvylant. L'utilisation de chlorure de thionyle comme catalyseur acide et agent déshydratant est connue dans la littérature. 2(1 La transformation du groupe carboxyle en l'halogénure d'acyle correspondant et l'estérification rendue ainsi plus facile avec le substrat alcoolique présent dans le mélange réactionnel, représente une synthèse très particulière et importante capable de favoriser à la fois la condensation des deux moles de carnitine et l'acétylation de la dicarnitine obtenue par addition supplémentaire d'anhydride acétique ou de chlorure d'acétyle. La réaction peut être conduite en une seule étape en partant du chlorure de carnitine ou de l'acétV!carnitinrie, sans isolement des composés intermédiaires ainsi obtenus. Un important objet de l'invention consiste en la découverte des conditions particulières du procédé de l'invention. Par conséquent, une maitrise optimale de ces conditions est très importante et critique. En outre, on a trouvé qu'un chauffage prolongé ou une température élevée provoquent la déshydratation pour donner l'acide y-triméthvlaminocrotonique. De plus, le composé obtenu par le procédé de l'invention est assez labile et est facilement hydrolysé en milieu acide, si bien que sa séparation d'avec le milieu réactionnel est très critique. On a trouvé qu'il est préférable que l'isolement soit effectué immédiatement et avec beaucoup de précision. D'un autre côté, les procédés connus dans la littérature nécessitent également une précision spéciale. De préférence, le procédé pour préparer le dichlorure d'acétyl- dicarnitine de l'invention est conduit en partant d'un mélange de chlorure d'acétylcarnitine et de chlorure de thionyle fraîchement distillé, dans un rapport moléculaire de 1:1,5. On laisse reposer le mélange tout en agitant pendant une période d'1/2 h à 2 h à la température ambiante. On ajoute le chlorure d'acyle de l'acétyl-carnitine ainsi obtenu, dissous dans le chlorure de méthylène, avec une quantité équivalente de chlorure de carnitine et on laisse reposer pendant une période de 18-36 h à 38-42 C. On sépare et on purifie de façon connue le produit brut ainsi obtenu. Toxicité aiguë: Le dichlorure d'acétyldicarnitine de l'invention est pratiquement un composé non toxique. On a trouvé que la Dl%0 par administration orale est supérieure à 20 g/kg (poids corporel) chez la souris et supérieure à 15 g/kg chez le rat. Par administration intraveineuse, la DL est supérieure à 0,75 g/kg chez la souris, supérieure à 1 g/kg chez le rat et supérieure à 2,5 g/kg chez le chien. Pharmacodynamigue Par administration orale de dichlorure d'acétyldicarnitine à une dose de 100 mg/kg (poids corporel) à des souris et à des rats séniles (âgés d'environ 20 mois) on note un accroissement de la curiosité et de la réactivité et une amélioration de la coordination motrice. Sur la base des essais pharmacologiques effectués pour établir les caractéristiques pharmacocinétiques du produit de l'invention et pour étudier son métabolisme, on a trouvé que le dichlorure d'acétyldicarnitine se scinde en L-acétyL-carnitine et L-carnitine dans l'organisme. Par conséquent, le composé de l'invention, outre les propriétés pharmacologiques de la L-carnitine qui, comme le savent Les experts, active le métabolisme protéique et stimule les sécrétions digestives avec une action anabolique et anti-anorexique, présente certaines propriétés originales et inattendues. Plus particulièrement, le composé de l'invention est particuliè- rement actif dans le traitement des syndromes d'involution cérébrale sénile et pré-sénile d'étiologie primaire et secondaire (vasculopathies) et dans les cas d'altération de la mémoire et de l'attention chez Les hommes âgés. En outre, le composé de l'invention est actif dans le traitement des cardiopathies, comme par exemple, l'ischémie myocardique aiguë et chro- nique, l'angine de poitrine, l'insuffisance cardiaque latente et déclarée et les arythmies. La L-acétyl-dicarnitine est également douée d'un effet cardio-protecteur contre tes atteintes du coeur induites par les médica- ments antitumoraux à base d'anthracyclines. En outre, grâce à sa pharmaco- cinétique extrêmement favorable, le produit a une plus grande biodisponi- bilité, aboutissant à un meilleur effet par comparaison avec d'autres médicaments disponibles. L'invention comprend également les compositions pharmaceutiques contenant le dichlorure d'acétyldicarnitine. Les compositions pharmaceutiques, administrables par voie orale ou parentérale, sont des agents thérapeutiques actifs pour le traitement des syndromes d'involution cérébrale séniles et pré-séniles d'étiologie primaire ou secondaire, pour le traitement de l'altération de la mémoire et de l'at- tention chez les malades âgés ainsi que des maladies vasculaires. Les com- positions pharmaceutiques comprennent une quantité thérapeutiquement effi- cace de dichlorure d'acétyldicarnitine et un support et/ou diluant pharma- ceutiquement acceptable pour l'administration orale ou intramusculaire. La quantité suggérée de dichlorure d'acétyldicarnitine pour les malades humains est comprise entre 0,5 et 2,0 g par jour. Les exemples non limitatifs suivants précisent l'invention. EXEMPLE 1 PRLPARATION DE CHLORURE DE L-ACETYLCARNITINE Selon un procédé décrit dans la littérature (Ziegler et colil., J3. Org. Chem., 1967. p. 3989), on ajoute 50 ml d'acide acétique avec 8 g de chlorure d'acétyle et on maintient à 80 C tout en agitant pendant 3 h. Après addition de 9,9 g de carnitine. on laisse reposer le mélange réactionnel tout en agitant pendant 1 h à 80 C. On ajoute alors avec 40 ml d'isopropanol bouillant un liquide très épais obtenu par distillation sous vide. On filtre le mélange réactionnel pour enlever la carnitine n'ayant pas réagi et on précipite lentement le produit du titre par addition de ml d'acétone. On obtient un solide cristallin blanc. Rendement 98%; Pf 180-182 C. Dichlorure d'acétyldicarnitine On ajoute 0,15 mole de chlorure de thionyle fraîchement distillé à 0,1 mole de chlorure de L-acétylcarnitine. On laisse reposer le mélange tout en agitant pendant environ 1 h à la température ambiante. Après avoir enlevé l'excès de chlorure de thionyle par distillation à pression réduite, on obtient le chlorure d'acétyle correspondant sous la forme d'un solide spongieux blanc, que l'on peut facilement hydrolyser à l'air. On dissout le chlorure d'acyle ainsi obtenu dans 30 ml de chlorure de méthylène anhydre puis on y ajoute 0,105 moles de chlorure de Lcarnitine. On laisse reposer le mélange obtenu tout en agitant pendant 24 h à 40 C. La réaction est suivie par une chromatographie en couche mince jusqu'à ce que le chlorure d'acyle de L-acétylcarnitine disparaisse complètement. Après enlèvement du solvant par évaporation à pression réduite, on lave un grand nombre de fois le produit brut avec de petites quantités de chlorure de méthylène. On dissout le composé solide blanc, spongieux, très hygroscopique ainsi obtenu dans la quantité minimale d'isopropanol (environ 150 ml) puis 25880 1 on filtre pour enlever la carnitine et]'acétyl-carnitine n'ayant pas réagi. A partir du filtrat le produit précipite par addition d'acétone (300 m]) sous la forme d'un solide blanc, très hygroscopique qu'on lave plu- sieurs fois avec de faibles quantités d'acétonitrile (environ 20 ml) pour enlever toutes traces d'esters. DUn obtient le composé du titre (rendement 90%): IR (DMSO) cSmax 1740, 1715 cm -1 IR (KBr) J max 3550, 2995, 2950, 2900, 1730 cm S$ ( So.rpFcn cde. canp) 347, 305, 287, 204, 162 m/e H-RW (200 MHz, DMSO-d6, 22 C) 2,02 (s, 3H, COCH3) 2,7-2,8 (m, 4H, CH-CH2-COO-CH-CH2-COOH) I OCOCH3 3,20 (s, 18H, 2 x N (CH33 3 3 + 3,8-4)1 (m, 4H, N -CH2-CH-CH2-COOCH-CH2N OCOCH3 OCOCH3 543, 2H, -CH-CH2-CO-CH-CH2COOH) ,43 (m, 2H, -CH-.CH2_COOCH_.CH2COOH) 25880 0o1l EXEMPLE 2 DICHLORURE D'ACETYL[DICARNITINE On laisse reposer 19,7 g (0,1 Mole) de chlorure de carnitine et ,7 g (0,3 Mole) de chlorure de thionyle dans un ballon, tout en agitant, S pendant environ 8 h, à 30 C. On enlève l'excès de chlorure de thionyle à pression réduite. Après addition de 10 ml d'eau on fait évaporer le mélange réactionnel jusqu'à siccité. On absorbe le produit brut avec de l'alcool isopropylique chaud, on filtre et après avoir enlevé la carnitine n'ayant pas réagi et l'acide -triméthylamino-crotonique, s'il V en a, on laisse le filtrat se cristalliser. On dissout alors le précipité ainsi obtenu dans 10,2 g (0,1 Mole) d'anhydride acétique et on laisse la solution reposer tout en agitant pendant environ 12 h à 40 C. On enlève l'excès d'anhydride acétique et d'acide acétique par distillation à pression réduite sur un bain d'eau (40 C). On dissout le résidu visqueux dans l'alcool isopropylique chaud et à partir du mélange réactionnel on sépare le produit du titre de façon connue sous la forme d'un solide blanc hygroscopique. EXEMPLE 3 PREPARATION D'UNE COMPOSITION PHARMACEUTIQUE INJECTABLE On conduit la préparation selon les procédés classiques bien connus des spécialistes. La composition préférée d'une forme injectable est: Dichlorure d'acétyldicarnitine 500 mg Glycine 750 mg Eau distillée 5 ml EXEMPLE 4 PREPARATION D'UNE COMPOSITION PHARMACEUTIQUE ORALE La préparation est conduite selon les procédés classiques bien connus des spécialistes. La composition préférée d'une forme administrable par voie orale (bouteille d'environ-15 ml) est: Dichlorure d'acétyldicarnitine 1 g Solution aqueuse de sorbitol à 70% 5 g p-hydroxybenzoate de méthyle 0,010 g Essence d'abricot 0,015 g Essence d'orange 0,025 g Eau distillée jusqu'à 10 ml de volume. RI VE NDICAl IONS 1. Dichlorure d'acétyldicarnitirie ayant la formule générale: CH CH 3-I-CH2-CH-CH2-COOH CH 2 C CH 5-HC-CH -CH-CH --CH 3 I 2 22H 3 O O-C-CH 3 I 2. Composition thérapeutique pour le traitement des syndromes d'involution cérébrale sénile et pré-sénile d'étiologie primaire ou secondaire, de l'alté- ration de la mémoire et de l'attention chez les malades âgés ainsi que des maladies vasculaires et des atteintes du coeur induites par les médicaments antitumoraux à base d'anthracycline, comprenant une quantité efficace du composé de la revendication 1 et un support et/ou diluant pharmaceu- tiquement acceptable pour l'administration orale ou parentérale. 3. Composition thérapeutique selon la revendication 2, o la quantité efficace de dichiorure d'acétyldicarnitine est comprise entre 0,5 et 2,0 g par jour. 4. Procédé de préparation du dichlorure d'acétyldicarnitine de formule I de la revendication 1, caractérisé en ce qu'on laisse reposer un mélange de chlorure d'acétylcarnitine et de chlorure de thionyle fraîchement dis- tillé, dans un rapport moléculaire de 1:1,5, tout en agitant pendant une période de 1/2 h - 2 h, à la température ambiante et, après enlèvement de l'excès de chlorure de thionyle, en ce qu'on dissout le chlorure d'acyle résultant dans le chlorure de méthylène, en ce qu'on y ajoute une quantité équivalente de chlorure de carnitine et en ce qu'on maintient le mélange réactionnel résultant pendant une période de 18-36 h à une température