Brevet FR2591599A1 — publié le 19870619

- 1- La présente invention est relative à des nouvelles anthracyclines et à des médicaments les contenant. De très nombreux efforts poursuivis au cours de ces dernières années par différentes équipes de chercheurs ont permis d'élargir la famille des anthracyclines, lesquelles constituent aujourd'hui une des classes de médicaments les plus prometteuses pour ses activités anticancereuses. La Demanderesse poursuivant l'étude entreprise déjà depuis plusieurs années (cf. notamment les Brevets Français 83 05217, 83 13877, 84 03634, 84 09405 et 85 10063) a mis au point de nouveaux dérivés d'anthracycline qui modifient d'une manière très intéressante les propriétés pharmacologiques de cette famille. La présente invention a pour objet de nouvelles anthracyclines représentées par la formule I ci-après: O B O A O OH (I) E N R' R" -2- dans laquelle: A représente les groupes OCH3 ou OH ou H, B représente le groupe OH ou un atome d'hydrogène, D représente un atome d'hydrogène ou le groupe OH, E représente le groupe OH ou un atome d'hydrogène, et R' et R" qui peuvent être identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène (et dans ce cas R' est différent de R") ou le groupe -(CH2)nRi-(CH2)m-R2 ou n est compris entre 1 et 6, m est compris entre 0 et 4 (avec, bien entendu, la condition que si m = 0, R2 est nul) R1 représente un des groupes suivants: -C-O- Il O -I-OH (dans ce cas m = 0) O R -3 -C-N 3 (dans ce cas m = 0 il 'R o R3 et R4 identiques ou différents représentent O 43 4 un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle substitué ou non) -C-N (dans ce cas m = 0) -S- -O- (avec la condition que m soit différent de 0) -R3 -N/3 (m = 0 et R3 et R4 ont la même signification que ci- \ 'R4 dessus) -/ COR3 (m = 0 et R3 et R4 ont la même signification que ci- -N dessus) I R4 et R2 représente (dans le cas o m est différent de 0) un atome d'hygrogène ou les groupes alkyle,alcoxy ou R3 R4 dessus) -3- Certains de ces nouveaux dérivés ont des propriétés cytotoxiques remarquables, comme indiqué plus loin lors du test de prolifération cellulaire. La Demanderesse a pu arriver à ces résultats grâce à la "fonctionnalisation" des radicaux alkyle R' et R". Parmi les différents dérivés conformes à la pré- sente invention doués des résultats pharmacologiques très in- téressants, il y a lieu de citer notamment les: N-(cyanométhyl)-3' daunorubicine N,N-(dicyanométhyl)-3' daunorubicine - N-(méthoxy-2 éthyl)-3' daunorubicine N-cyanométhyl-3', N-(méthoxy-2 éthyl) -3' daunorubicine N-(N,N-diéthylcarbamoyl)méthyl-3' daunorubicine N,N-bis (N,N-diéthylcarbamoyl) méthyl-3' daunorubicine N-(carbométhoxy méthyl)-3' daunorubicine N- [(méthoxy-2 éthoxy)-2 éthyl]-3' daunorubicine N,Nbisl(méthoxy-2 éthoxy)-2 éthyl]-3' daunorubicine L'invention sera mieux comprise à l'aide du complé- ment de description qui va suivre, qui se réfère à des exem- ples de mise en oeuvre des procédés ou de préparations des dérivés conformes à la présente invention ainsi qu'à un compte-rendu d'expérimentation pharmacologique. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exem- ples de mise en oeuvre et ce compte-rendu d'expérimentation pharmacologique sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. - 4- EXEMPLES PREPARATIO; DES N-(CYANOMETHYL)-3' ET N,N-DICYANOMETHYL-3' DAUNORUBICINE Au mélange de chlorhydrate de la daunorubicine (100 mg; 0,18 mmole) et de Et3N (0,54 mmole) dans 15 ml de DMF, on ajoute le iodoacétonitrile (10 éq. ). Après 48 h à température ambiante, on sépare par ordre de polarité croissante la N,N-(Dicyanométhyl)-3' daunorubicine (7 mg, 6,3%), la N(cyanométhyl)-3' daunorubicine (58 mg, 57%) et la daunorubicine n'ayant pas réagi (16 mg, 16,6%). O OH O CH30 O OH O HO NHCH2CN N-(CYANOMETHYL)-3' DAUNORUBICINE Rdt. = 57% Point de fusion: 134-140 C (déc.) S.M.: (FAB -): 566 RMN (CDCl3) 200 MHz: 1,35 (doublet, J = 5 Hz, 3H); 2,42 (singulet, 3H); 3, 00 (ABq, 2H); 3,59 (singulet, 1H); 3,69 (singulet, 1H); 4,07 (singulet, 3H); ,25 (signal fin, 1H); 5,50 (signal fin, 1H); 7,38 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,77 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,00 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 13,23 (singulet, 1H); 13,95 (singulet, 1H). IR (CH2Cl2): 3600, 3500, 1710, 1610, 1550, 1440 cm-1. -5- À0 OH CH30 O OH O O HO 2CN CH2CN N,N-(DICYANOMETHYL)-3' DAUNORUBICINE Rdt. = 6,3% Point de fusion: 155-165 C RMN (CDC13 200 MHz: 1,34 (doublet, J = 5,5 Hz, 3H); 2,40 (singulet, 3H); 3,10 (ABq, 2H); 3,80 (singulet); 4, 08 (singulet, 3H); 4,29-(singulet large, 1H); ,26 (signal fin, 1H); 5,57 signal fin, 1H); 7,38 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,79 triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,03 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 13,28 (singulet, 1H); 14,02 (singulet, 1H). IR (CH2Cl2): 3700, 3500 (large), 2980, 2920, 2840, 1710, 1610, 1580, 1420, 1380, 1350 cm-1. PREPARATION DE LA N-(METHOXY-2 ETHYL)-3' DAUNORUBICINE Au mélange du chlorhydrate de la daunorubicine (30 mg; 0,054 mmole) et de Et3N (0,16 mmole) dans 1,5 mL de DMF, on ajoute le iodo-2 éthylméthyl éther (15 éq.). Après 48 h à température ordinaire, on sépare la N(méthoxy-2 éthyl)-3' daunorubicine (60%) de la daunorubicine restante (22%). -6- 0 OH 0 CH30 O OH O 1 0 Ho O NH O '' CH N-(METHOXY-2 ETHYL)-3' DAUNORUBICINE Rendt.: 60% Point de fusion:(Banc Kofler): 113 C (déc) SM: (FAB-): 585 (12%); 515 (13%), 409 (9%), 380 (11%), 321 (12%), 301 (100%) lai]D = 253' (C = 0,15; CHCl3) RMN (CDCl3) 200 MHz: 1,38 (doublet, J = 5, 5 Hz, 3H); 2,41 (singulet, 3H); 2,74 (triplet, J = 5 Hz, 2H); 3,32 (singulet, 3H); 3,46 (triplet, J = 5 Hz, 2H); 4,09 (singulet, 3H); 4,73 (singulet large, 1H); 5,31 (signal fin, 1H); 5,53 (signal fin, 1H); 7,40 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,80 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,06 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H). PREPARATION DE LA N-(CYANOMETHYL)-3', N-(METHOXY-2 ETHYL)-3' DAUNORUBICINE Au mélange de N-(méthoxy-2 éthyl)-3' daunorubicine obtenu précédemment (10 mg; 0,017 mmole) et de Et3N (0,05 mmole) dans le DMF (0,5 mL), on ajoute le iodoacétonitrile (15 éq.). Après 48 h à température ambiante, on obtient la N-cyanométhyl-3' N-(méthoxy-2 éthyl)-3' daunorubicine (10,2 mg; 98%). -7- O OH 0 OH CH30 O OH O 1 01 10 HO O uCH2CN N-(CYANOMETHYL)-3', N-(METHOXY-2 ETHYL)-3' DAUNORUBICINE Rdt. = 98% [a]mD = 378 (C = 0,07; CHCl3) RMN (CDCl3)200 MHz: 1,38 (doublet, J = 5,5 Hz, 3H); 2,43 (singulet, 3H); 3,10 (ABq, 2H); 3,35 (singulet, 3H); 3,66 (singulet); 4,10 (singulet, 3H); 4,57 (singulet,1H); ,31 (signal fin, 1H); 5,59 (signal fin, 1H); 7,40 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,79 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,05 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 13,32 (singulet, 1H); 14,02 (singulet, 1H). Point de fusion (Banc Kofler): 120 (déc.) -8- De la même manière ont été obtenus: a) O OH CH3O O HO NHCH2CON N-(N,N-DIETHYLCARBAMOYL)METHYL-3' DAUNORUBICINE RMN: 1,37 (doublet, J = 5,5 Hz, 3H); 2,41 (singulet, 3H); 4,08 (singulet, 3H); 4,77 (singulet large, 1H); ,31 (signal fin, 1H); 5,53 (signal fin, 1H); 7,39 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,78 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,03 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 13,30 (singulet, 1H); 13,66 (singulet, 1H). b) O OH O CH30 OH O 3 I HO 2CON _ N-bis (N,N-DIETHYLCARBAMOYL) METHYL-3' DAUNORUBICINE -9- RMN: 2,40 (singulet, 3H); 4,09 (singulet, 3H); ,30 (signal fin, 1H); 5,57 (signal fin, 1H); 7,38 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,77 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,05 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 13,31 (singulet, 1H); 13,65 (singulet, 1H). c) CH30 O HO NHCH2 Co2CH3 N-(CARBOMETHOXY METHYL)-3' DAUNORUBICINE Point de fusion: 142-148 C RMN (CDC13) 200 MHz: 1,36 (doublet, J = 5,5 Hz, 3H); 2,41 (singulet, 3H); 3,10 (ABq, 2H); 3,41 (singulet, 2H); 3,52 (singulet, 1H); 3,70 (singulet, 3H); 4,09 (singulet, 3H); ,29 (signal fin, 1H); 5,52 (signal fin, 1H); 7,40 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,79 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,06 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H). -10- d) CH30 O OH O HO NH O NH, N- EMETHOXY-2 ETHOXY)-2 ETHYLS-3' DAUNORUBICINE Rdt. = 44% Point de fusion: 70-75 C / a/D = 270 (C = 0,1; CHC13) RMN (CDCl3) 200 MHz 1,36 (doublet, J = 5,5 Hz, 3H); 2,41 (singulet, 3H); 3,02 (ABq, 2H); 3,33 (singulet, 3H); 4,07 (singulet, 3H); 4,69 (singulet large, 1H); 5,25 (signal fin, 1H) ,50 (signal fin, 1H); 7,38 (doublet, J = 5 Hz, 1H); 7,76 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H); 8,00 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H). -11- e) CH30 O OH O N- 0II 0- N,N-bis EMETHOXY-2 ETHOXY)-2 ETHYLI -3' DAUNORUBICINE Rdt. = 9% [ ]D- = 294 (C = 0,07; CHCl3) RMN (CDCl3) 200 MHz: 1,34 (doublet, J = 5 Hz, 3H) ; 2,42 (singulet, 3H); 3,12 (ABq, 2H); 3,31 (singulet, 6H); 4,09 (singulet, 3H); 4,74 (singulet large, 1H); 5,30 (signal fin, 1H); ,58 (signal fin, 1H); 7,40 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 7,79 (triplet, J = 7,5 Hz, 1H) 8,02 (doublet, J = 7,5 Hz, 1H); 13,31 (singulet, 1H); 14,0 (singulet, 1H). 1 0 -12- Les propriétés cytotoxiques de certains dérivés revendiqués selon l'invention sont mises en évidence dans les tests de prolifération cellulaire qui sont résumés dans le Tableau I ci-après. Le protocole expérimental a été effectué selon la procédure de HAMBURGER et SALMON sur des cellules souches de la leucémie L 1210. Certaines modifications ont été introduites dans la procédure de HAMBURGER et SALMON et notamment: - le milieu conditionné a été remplacé par du McCoy5A. On a réduit le nombre de cellules dans une boîte à 5.102 cellules par boîte en raison de la forte efficacité de recouvrement de la leucémie L1210. Des cellules ont été incubées avec diverses concen- trations de la substance d'essai pendant 1 heure à 37 C. Les cellules ont ensuite été lavées à deux reprises avec du McCoy5A et enfin appliquées dans une couche supérieure gélo- sée, selon la méthode de HAMBURGER et SALMON. De plus, des expériences parallèles ont été réali- sées avec une incubation continue et avec diverses concentra- tions de la substance d'essai par mélange de celle-ci à la couche supérieure avant application. Les boîtes ont été stockées dans un incubateur avec % de CO2, 20% de 02, 95% d'humidité relative pendant 5 à 7 jours à 37 C. Après cette période, on a compté les colonies ayant un diamètre supérieur à 60 Mm avec un microscope in- verse. Les résultats ont été exprimés en pourcentage du nombre de colonies formées à partir de L1210 traité par rap- port à un témoin non-traité. Le coefficient de variation d'expériences répétées était inférieur à 15%. Les résultats ont été remis dans le Tableau I. J -13- TABLEAU I CI50 en mcg/ml PRODUIT (exposition continue) N-(cyanométhyl)-3' daunorubicine N,N-(dicyanométhyl)-3' daunorubicine N-(méthoxy-2 éthyl)-3' daunorubicine N-(cyanométhyl)-3' N-(méthoxy-2 éthyl)- 3' daunorubicine N-(N,N-diéthylcarbamoyl)méthyl- 3', daunorubicine N,N-bis (N,N-diéthylcarbamoyl)méthyl -3', daunorubicine N-(carbométhoxy méthyl)-3' daunorubicine N- [méthoxy-2 éthoxy)-2 éthyl]3' daunorubicine N,N-bis[(méthoxy-2 éthoxy)-2 éthyl]-3' daunorubicine DOXORUBICINE (référence) 0,0028 0,08 0,01 0,09 0,28 0,65 0,24 0,07 0,22 0,02 DAUNORUBICINE (référence) 0, 02 -14- Les médicaments contenant les dérivés conformes à la présente invention sont généralement administrés à des doses comprises entre 0,001 et 25 mg/kg/jour. Les dérivés selon la formule générale I sont administrés de préférence par voie orale, mais ils peuvent selon les besoins être administrés par les autres voies: parentérale, sous-cutanée, intraveineuse, intramusculaire, intrapéritonéale ou transcutanée. Cette administration peut être faite également en combinaison avec des excipients ou des diluants pharmaceutiquement acceptables. -15- REVENDICATIONS 1 ) Nouvelles anthracyclines représentées par la formule I ci-après: O B O A O OH, i I (I) E Ol N R' R" dans laquelle: A représente les groupes OCH3 ou OH ou H, B représente le groupe OH ou un atome d'hydrogène, D représente un atome d'hydrogène ou le groupe OH, E représente le groupe OH ou un atome d'hydrogène, et R' et R" qui peuvent être identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène (et dans ce cas R' est différent de R") ou le groupe -(CH2)nRj-(CH2)m-R2 -16- ou n est compris entre 1 et 6, m est compris entre 0 et 4 (avec, bien entendu, la condition que si m = O, R2 est nul) R1 représente un des groupes suivants: -C-O- Il o --OH (dans ce cas m = 0) C-N/R3 (dans ce cas m = 0 Il NR4 o R3 et R4 identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle substitué ou non) C=N (dans ce cas m = 0) -S- -O- (avec la condition que m soit différent de 0) -lR3 -N (m = 0 et R3 et R4 ont la même signification que ci- \R4 dessus) N/COR3 (m = 0 et R3 et R4 ont la même signification que ci- -N dessus) I R4 et R2 représente (dans le cas o m est différent de 0) un atome d'hygrogène ou les groupes alkyle,alcoxy ou R 3 -et R4 ayant la même signification que ci- 4 3 4dessus) 2') Anthracyclines selon la revendication 1, carac- trérisées en ce que ce sont des dérivés de la famille de la doxorubicine. 3 ) Anthracyclines selon la revendication 1, carac- terisées en ce que ce sont des d6rivés de la la famille de la daunorubicine. 4') Anthracylines selon la revendication 1, carac- térisées en ce que de sont des dérivés de la famille de la -17carminomycine. ) Anthracyclines selon la revendication 1, carac- térisées en ce que ce sont des dérivés épi-4'. ) Anthracyclines selon la revendication 1, carac- térisées en ce que ce sont des dérivés désoxy-4'. 7 ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N-(cyano- méthyl)-3' daunorubicine. 8 ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N,N-(dicyano- méthyl)-3' daunorubicine. 9 ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N-(méthoxy-2 éthyl)-3' daunorubicine. 10 ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N-(cyano- méthyl)-3', N-(méthoxy-2 éthyl)-3' daunorubicine. ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N-(N,N-diéthyl- carbamoyl)méthyl-3' daunorubicine. 12") Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N,N-bis (N,N)- diéthylcarbamoyl)méthyl-3', daunorubicine. 13 ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N-(carbométhoxy méthyl)-3' daunorubicine. 14 ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N-[(méthoxy-2 éthoxy)-2 éthyl]-3' daunorubicine. 15 ) Anthracycline selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle est constituée par la N,N-bisE(méthoxy-2 éthoxy)-2 éthyl]-3' daunorubicine. 16") Médicaments constitués ou contenant des anthra- cyclines selon l'une quelconque des revendications 1 à 15.