Brevet FR2574662A1 — publié le 19860620

i La présente invention est relative à un procédé de préparation d'un complexe d'arginate d'hémine ou de lysi- nate d'hémine soluble dans l'eau et physiologiquement actif, devant être utilisé dans des comprimés ou des capsules ou sous forme de substance sèche à injecter après reconstitution, par exemple avec une solution saline et stérile. L'hémine apparaît dans des organismes en tant que groupe prosthêtique de l'hémoglobine dans la plupart des cytochromes et dans certaines enzymes. L'hémoglobine est synthétisée dans la moelle des os. Lorsque les protéines de *l'hémine se décomposent, l'hémine est libérée, mais une partie mineure seulement de celle-ci est utilisée dans la synthèse de nouvelles protéines d'hémine, dans des conditions physiologiques normales. L'hémine est scindée par l'action de l'hémine oxygé- nase en biliverdine laquelle est réduite ensuite en bili- rubine. L'hémoglobine naturelle intacte ne sert pas naturel- lement de substrat pour l'hémnine oxygénase. On peut attribuer des défauts de la synthèse de l'hémoglobine à une synthèse perturbée de chaînes de globine ou d'hémine. La synthèse de l'hémine peut être troublée par: a) une carence en certains composants nécessaires à la synthèse, ou b) un dysfonctionnement d'une enzyme catalysant la synthèse. Une insuffisance en fer est le facteur limitant dans la synthèse de l'hémine. L'organisme prélève dans la nourriture ses besoins quotidiens en fer (1 à 2 mg). Une carence en fer peut être due à une alimentation insuffisante en fer, ou éventuellement à la présence de composés fixant le fer dans la nourriture. Des troubles du mécanisme d'absorption du fer peuvent aussi conduire à une insuffisance en fer, malgré une teneur en fer convenable dans l'alimentation. Quelle qu'en soit la cause, la carence en fer tend tôt ou tard à l'anémie. En cas d'insuffisance en vitamine B6, ce qui appa- rait rarement, l'absorption du fer est normale, mais son utili- sation par les cellules est empêchée. Il en résulte qu'il se développe un certain type d'anémie sidéroblastique. L'anémie par carence en fer est traitée, soit par des préparations orales de fer, par exemple de sulfate de fer ou de gluconate de fer, soit, plus rarement, par des injections telles que du sorbitol de fer. Lorsque le mécanisme d'absorption du fer est altéré, ces préparations orales classiques sont inutiles; le fer ne pénètre même pas dans les cellules des muqueuses intes- tinales. Contrairement au fer inorganique, le fer d'hémine, dans laquelle le fer est lié à l'hémine, est absorbé par ces cellules même dans ces cas d'absorption troublée du fer, qui résistent à un traitement oral classique. Ainsi, le fer d'hémine constitue le seul remède efficace connu pour traiter oralement les cas résistant aux traitements. On a constaté que le fer d'hémine est quatre à cinq fois mieux absorbé que le fer inorganique, même chez des sujets tout à fait en bonne santé. (Seppanen H & Takkunen H: Suomen Laakarilehti 36: 2071-2072, 1981). La synthèse de l'hémine est régulée enzymatique- ment. Un fonctionnement altéré des enzymes catalysant la syn- thèse de l'hémine, peut soit être héréditaire, soit être dû à des facteurs extérieurs. Il conduit invariablement à une formation d'hémine réduite, manifestée par le développement de porphyrie ou de certaines sortes d'anémies sidéroblastiques ou d'autres maladies. La porphyrie forme le groupe le plus important des maladies résultant d'un fonctionnement enzymatique altéré. Chez les malades atteints de porphyrie, il y a une accumulation de porphyrines, des produits intermédiaires dans la synthèse de l'hémine et une excrétion accrue de celles-ci dans l'urine et les fèces. La plupart des sortes de porphyries se manifeste par des attaques aigues, qui sont extrêmement difficiles à maîtriser. Il peut parfois se développer des anémies sidéro- blastiques de sortes différentes, à la place de la porphyrie résultant d'un mauvais fonctionnement des enzymes participant à la synthèse de l'h&mine. Les anémies sidéroblastiques, peu- vent aussi être héréditaires ou acquises. Le traitement de la porphyrie consiste actuellement principalement a éviter certains médicaments et à administrer d'importantes quantités d'hydrates de carbone pendant les attaques aigues, mais l'effet est médiocre. Depuis que l'étio- logie de la porphyrie est devenue plus claire, le traitement intraveineux avec des composés de l'hémine (hématine) a gagné du terrain de façon continue. L'hématine se révèle efficace dans le traitement des attaques de porphyrie, mais elle provoqu une thrombophlébite chez plus de 50 % des malades. De plus, lu elle est très instable et ne convient donc pas pour une pro- duction à l'échelle industrielle. Il y a donc très peu de chances de succès pour obtenir un traitement efficace des mala- des atteints de porphyrie. Le but de la présente invention est de fournir un compo de fer d'hémine soluble dans l'eau pour le traitement de cer- taines sortes d'anémies, tel qu'on ait le fer sous la main, si l'on peut dire, dans la molécule d'hémine. Le composé est conçu d'abord pour traiter la porphyrie, maladie dans laquelle la production normale de l'hémoglobine est troublée pour une raiso ou une autre. Comme le composé est prévu pour être administré par voie orale dans des comprimés ou des capsules, ainsi que pour être injecté, il doit être soluble dans l'eau. L'hémine, qui est peu soluble dans l'eau, peut être obtenue sous forme pure à partir du sang, par extraction avec ul mélange d'acides chlorhydrique ou acétique à partir d'une solu- tion aqueuse d'érythrocytes hémolysants. Une autre méthode consiste à extraire l'hémine avec de l'acétone en présence, par exemple d'histidylhistidine, de pilocarpine, ou d'imidazole à pH 7,0 (Wakid N.W. & Helou K.Y;: Int. J Biochem. 4: 259-267 (1973). La demande de brevet PCT N 813749 (PCT/F181/00026) décrit une méthode de préparation d'un concentré d'hémine solu- ble dans l'eau, comprenant environ 40 % en p/p d'hémine et une "substance sanguine" de nature inconnue en ce qui concerne le reste. Le produit est prévu pour être utilisé sous forme lyophilisée en tant quapprt complémentaire de fer dans l'alimentation ou que médicament anti-anémique. L'inconvénient de cette méthode réside en ce que le produit final est un mélange d'hémine et de "substance sanguine". Comme ce dernier composant n'est pas uniforme, le mélange ne convient pas pour l'injection. On a traité la porphyrie en hôpital, avec un mélange préparé de façon improvisée, par dissolution d'hémine dans une solution stérile de carbonate de sodium (hématine). Comme cette solution est instable, elle ne peut pas être fabriquée en tant que produit industriel à grande échelle. De plus, l'hématine -provoque une thrombophlébite au point d'injection chez environ 50 % des cas, sans doute en raison du pH élevé de la solution. Ceci constitue un sérieux incon- vénient qui réduit fortement l'utilité du produit. La présente invention est relative à un procédé de préparation d'un complexe d'hémine soluble dans l'eau, selon Iequel on fait réagir de l'hémine cristalline peu soluble dans l'eau, avec une base convenable, par exemple, un aminoacide comme la L-lysine ou la L-arginine dans un mélange de solvants, contenant par exemple de l'eau et de l'acétone. La composition du solvant, c'est-à-dire la pro- portion du solvant organique à l'eau, est étonnament importante pour l'intérêt médical du produit final. La teneur en eau du mélange de solvants est si basse, environ 7 %, que ni l'hémine ni la L-arginine, qui est tout à fait facilement soluble, ne sont dissoutes. La réaction a lieu sous agitation vigoureuse et le pH de la solution est contrôlé en continu. Le produit formé est séparé et séché; le composé d'hémine est ainsi obtenu sous forme sache et il est soluble dans l'eau, ce qui est essentiel des points de vue médical, ainsi que pharmacotechnique. La présente invention concerne aussi le complexe soluble dans l'eau de l'hémine et, soit de la de L-arginine, soit de la L-lysine, dans lequel la proportion molaire de l'hémine à l'aminoacide est de 1:1 à 1:4. Il est préférable que le rapport molaire d'hémine à L-arginine soit de 1:2 à 1:4 et plus avantageusement de 1:3, tandis que le rapport préféré de l'hémine à la L-lysine est de 1:3 à 1:4 et plus avantageusement de 1:3. De plus, la présente invention concer- ne des compositions contenant ces complexes, sous une forme injectable ou sous forme de comprimés. La molécule d'hémine contient deux groupes carbo- xyles qui réagissent avec les groupes amino basiques de la L-lysine ou de la L-arginine. L'arginate d'hémine et le lysinate d'hémine préparés conformément à la présente invention, sont dissous chacun dans de l'eau; le pH des solutions est mesuré et comparé à différents moments au pH d'un mélange mécanique d'hémine et de L-arginine dissous dans l'eau. Les résultats sont rassemblés dans le Tableau I. TABLEAU 1 Concentration pH 2 aiè complexe d' pH Matière hémine/eau 0 minute 60 minutes 24 h. Arginate d'hémine 0,02937 g/25 ml 8,22 8,22 8,22 Lysinate d'hémine 0,02760 g/25 ml 8,10 7,97 8,13 Hémine + 0,01630 g/25 ml 10,13 9, 81 9,33 L-arginine 0,01307 g/25 ml. Les mesures de pH du Tableau I indiquent que le pH de l'arginate d'hémine et du lysinate d'hémine est stable (pH d'environ 8) pendant une période allant jusqu'à 24 heures. Le pH du mélange mécanique, d'un autre c8té, diminue très lentement, sans doute à cause de la réaction extrêmement lente entre les groupes carboxyles de l'hémine et le groupe amino de L-aminoacide. On ne peut donc pas obtenir avec cette méthode, un produit utile en thérapie. L'arginate d'hômine et le lysi- rate d'hémine prépares conformément à la présente invention, consistent en un composé complexe dans lequel le L-amino- acide a réagi avec les groupes carboxyles de l'hémine. On effectue les tests suivants avec l'hémine et la L-arginine, pour déterminer d'un côté, la relation molaire optimale entre les deux réactifs et d'un autre côté, la composition la plus avantageuse du mélange de solvants. On fait réagir l'hémine cristalline et la L-arginine en des proportions molaires de 1:2 et 1:3, sous agitation vigoureuse, dans un mélange de solvants comprenant un solvant organique et de l'eau en diverses proportions. Les précipités formés sont séparés par filtration, lavés et séchés. On détermine la solubilité dans l'eau en dis- solvant, sous une vigoureuse agitation pendant environ une heure, environ 1,0 g du complexe d'arginate d'hémine obtenu dans chaque test, dans 50 ml d'eau distillée. Les solutions sont centrifugées (env. 3500 tpm) et le résidu est lavé avec 10 ml d'eau distillée et 10 ml d'acétone, puis séché et pesé. Le résidu insoluble consiste principalement en hémine n'ayant pas réagi. Les résultats du test sont fournis dans le Tableau II. uoapnoe oz. i vOçl S: ': M Z9 zz/ oz olo.'. ',,ç : 'ç 9' XZ v OZ '-Ol o. * OSIlj ú:1 ZZ g: Zç 9 zopofi OZ OISOOC "l 6:1ç Z: Zçl9 zi o oZ oZ*oot " ç:1 rr Zç3 9 Zú91 oz O5T'OOú.. S': ZZVi' ZS9 z0 01 Oz 01':OOC úI ZZ: zçg9 Zg Zl OZ OZ: 00ú,, Z:l 8q: Z5'9 r- Z8/91 OZ SI:O0ú r:T/auoqsoeZ:1 8q: ZS (9 ZL'6 OZ OZ'OOú " c:I ZZ: Z5'9 II lZzIZ OZ OZ:00ú neo /Iousdoidos. Z:I 8"ú: ZS'9 zoo 0 oz OZ 00 ouedoadosT Z:T 8V s 9 zz4 oz 08c 00 lX zz' Szssg ZOOT;; OZ 006 '1oueq:,,a Zsl 8: z;9 uoapnob OZ. aul a: trleZç, oz 'l:Ui alqnl Ua (')'UATOS eaTlow -osuT npTsgu dUa,:uwAos UOT: OdO d SPTFOd ap 4:T.4.unO. oOuTuT-à:3uTvarl{ mm,tm.,, , _ - m,, _!.,, _ m _, m La substance goudronneuse formée dans certains des essais ne peut pas être mise sous forme de poudre. On trouve que la proportion molaire optimale de l'hémine à la L-arginine est de 1:2 à 1:4, plus avantageu- sement de 1:3. Le mélange de solvants le plus intéressant comprend 300 ml d'acétone et 20 ml d'eau. On étudie l'effet local de l'injection intra- veineuse exercé par des composés d'hémine sur les tissus envi- ronnants, en en infusant 5 mg/kg dans les veines auriculaires de lapins blancs de Californie. Une solution de carbonate d'hémine classique (hématine) sert de référence. Après l'in- fusion de la solution d'arginate d'hémine, le tissu entourant la veine reste normal, c'est-à-dire qu'il n'apparaît aucune inflammation stérile (thrombophlébite). On observe un résultat analogue en infusant une solution de lysinate d'hémine correspondante. On peut donc en conclure que les composés ne provoquent pas de thrombophlébite, lorsqu'ils sont injectés par voie intraveineuse. Lorsqu'une solution de carbonate d'hémine est administrée de cette façon, le tissu entourant la veine devient rouge et irrité; c'est-à-dire qu'une inflammation stérile évidente s'est développée (thrombophlébite). Trois jours après l'infusion de la solution de carbonate d'hémine, on peut - encore observer la thrombophlébite. On évalue le caractère physiologique des dif- férents composés d'hémine solubles dans l'eau, en testant l'aptitude de l'hémine oxygénase à scinder les composés. Le substrat physiologique pour l'hémine oxygénase, la méthemalbu- mine, est scindé par celle-ci en biliverdine, qui est ensuite réduite en bilirudine par la biliverdine réductase. Ainsi, l'hémine en excès, que l'organisme ne peut pas utiliser, est décomposée, en premier lieu par l'hémine oxygénase en bili- verdine et en d'autres substances étroitement apparentées qui sont normalement alors excrétées. L'enzyme limitant la vitesse de réaction est donc l'hémine oxygénase. La demanderesse a effectué des analyses enzyma- tiques pour déterminer d'abord l'aptitude de l'arginate d'hémine et du lysinate d'hémine à servir de substrat pour l'hémine oxygénase, et à ce propos, elle a attribué la valeur de 100 à l'activité de la méthémalbumine, le substrat de référence. La valeur correspondante obtenue pour l'arginate d'hémine et le lysinate d'hémine est de 106. Les activités des autres dérivés d'hémine-amine, dans lesquels le composant amine est la diéthanol amine, l'éthyl amine, la cyclohexyl amine ou la piperidine sont de 13, 21, 31 et 78 respectivement. Les tests montrent que l'argénate de l'hémine et le lysinate d'hémine se comportent dans l'organisme comme des composés physiologiques normaux en ce qui concerne l'hémine oxygénase. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre. L'invention sera mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la présente invention. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples de mise en oeuvre sont donnés uniquement à titre d'il- lustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent enaucune manière une limitation. Exemple 1 On agite vigoureusement 6,52 g d'hémine cristal- line (0,01 M) et 3,48 g de L-arginine cristalline (0,02 M) pendant 10 à 15 heures, dans un bêcher pourvu d'un agitateur mécanique et contenant un mélange de solvants comprenant 300 ml d'acétone et 20 ml d'eau. Le produit formé est séparé par filtration, lavé à l'acétone et séché. Rendement en arginate d'hémine:C,5 g (95 %). Le résidu insoluble, déterminé par la méthode ci-dessus, pèse 0,14 g (1,4 %). Exemple 2 On traite 6,52 g d'hémine cristalline (0,01 M) et 4,36 g de L-arginine cristalline (0,025 M) selon la procé- dure qui est décrite dans l'exemple 1. Rendement en arginate d'hémine: 11,1 g (environ 100 %). Résidu insoluble: 0,042 g (0,42 %). Exemple 3 On traite 6,52 g d'hémine cristalline (0,01 M) et 5,23 g de L-arginine cristalline (0,03 M) selon la procé- dure qui est décrite dans l'exemple 1. - Rendement en arginate d'hémine: 12,0 g (environ 102 %). Résidu insoluble: 0,001 g (0,01 %). Exemple 4 On traite 6,52.g d'hémine cristalline (0,01 M) et 6,10 g de L-arginine cristalline (0,035 M) selon la procé- dure qui est décrite dans l'exemple 1. Rendement arginate-d'hémine: 12,0 g (95 %). Résidu insoluble: 0,0005 g (0,005 %). Exemple 5 On traite 6,52 g d'hémine cristalline (0,01 M) et 4,39 g de L-lysine cristalline (0,03 M) selon la procédure de l'exemple 1. Rendement en lysinate d'hémine: 10,8 g (99 %). Résidu insoluble: 0,020 g (0,20 %). Il apparaît que la proportion molaire optimale d'hémine à arginate est de 1:3 (exemple 3) parce que celle-ci fournit le plus fort rendement en arginate d'hémine, tandis que la quanti- té de résidu insoluble est minimale. Exemple 6 On rend porphyrique des rats mâles Sprague-Dawley (180-250 g) en leur administrant par voie sous-cutanée 300 mg/ kg de 2-allyl-2isopropylacétamide ZIA-), pendant trois jours consécutifs. Un autre groupe de rats est traité avec l'AIA et avec un complexe d'hémine-L- arginine préparé selon la procédure de l'exemple 3, à la dose de 10 mg/kg par voie intra- il péritonéale, pendant trois jours consécutifs. Chez les rats traités par 1'AIA, l'excrétion quotidienne de porphobilinogène urinaire (PBG) augmente depuis des valeurs moyennes de 0, 08 (gamme de 0,05 à 0,13) à 6,79 (gamme de 3,91 à 12,70)pmoles et l'excrétion quotidienne d'acide delta- aminolévulinique urinaire (ALA) passe de 0,20 (0,16 à 0,23) à 7,77 (2,49 à 11,50)pmoles. Chez les rats traités avec 1'AIA et la matière préparée conformément à la procédure de l'exem- ple 3, d'un autre côté, on constate de faibles augmentations de l'excrétion urinaire de PBG (à 0,28, gamme de 0,09 à 0,45 pmole (jour) et d'ALA (à 0,51, gamme de 0,23 à 0,82 pmole /24 heures. Les activités de l'acide delta-aminolivulique synthase (ALAS) dans les érythrocytes (3,97, gamme de 2,23 à 6,06 moles d'ALA/h/10 réticulocytes) et les foies (15,4, gamme de 12,5 à 17,1 pmoles d'ALA/mg de protéines /h) des rats traités par 1'AIA, sont nettement supérieurs aux valeurs correspondantes (1,42 gamme de 0,82 à 1,72 pmole d'ALA/g/10 réticulocytes et 11,5, gamme de 9,8 à 13,7 pmoles d'ALA (mg protéine/h) trouvés chez des rats traités avec 1'AIA et la matière conforme à la présente invention, selon l'exemple 3. L'activité de l'hème oxygénase (HO) diminue chez la plupart des rats traités avec l'AIA jusqu'à un niveau non-mesurable, tandis que chez les rats traités avec 1'AIA et la matière selon l'exemple 3, l'activité HO est de 16,2 (gamme de 9,3 à 29,3)pmoles/minute/mg de protéines. On peut aussi prévenir les effets porphyrinogène du traitement par i'AIA, en administrant par voie intramus- culaire le complexe d'hémine-L-arginine préparé conformément à la procédure de l'exemple 3, à des doses de 10 mg/kg. Une seule injection intraveineuse (20 mg/kg) provoque le même effet antiporphyrinogène. Des études montrent que cette préparation est au moins aussi efficace que l'hématine utilisée en général. Exemple 7 On étudie l'effet biochimique d'un dérivé d'hème stable et facilement soluble, préparé selon la procé- dure de l'exemple 3, chez 10 malades atteints de porphyrie hépatique aigue, dans la phase dépourvue de symptômes de la maladie. Six malades atteints de porphyrie intermittente aigue (AIP) reçoivent 2 mg (deux) ou 3 mg d'hème par kg et par jour dans les veines périphériques pendant quatre jours consécutifs. Au cours du traitement, l'excrétion urinaire moyenne de porphobilinogène tombe de 194 (gamme de 60 à 465) à 17,2 Vmoles /24 heures et celle de l'acide delta-aminolévulique de 133 (gamme de 47 à 281) à 13,8 pmoles/24 heures (8,1 à 23,4). Chez quatre malades atteints de porphyrie variée, l'adminis- tration de 3 mg/kg/jour du dérivé d'hème diminue la protopor- fyrine fécale moyenne de 650 (gamme de 193 à 1140) à 89 nmoles /g/jour, en poids sec (62 à 103) et la coproporfyrine de 232 (gamme de 102 à 360) à 23 nmoles/g en poids sec (8,5 à 40). Deux malades souffrant d'AIP reçoivent trois traitements d'hème (3 ou 4 mg/kg/jour pendant trois ou quatre jours) au cours d'une attaque aigue. Chez une femme de 21 ans des symptômes abdominaux cessent pendant le deuxième jour de traitement, à deux reprises. Chez un homme de 43 ans souf- frant de douleurs abdominales et de neuropathie périphérique, la douleur cesse et la neuropathie commence à s'améliorer après la dernière des quatre injections consécutives. Une thrombophlébite n 'apparaît chez aucun des patients porphyriques au cours des 51 injections. On ne constate aucun autre effet secondaire ou anomalie dans la chimie du sang, y compris dans les études de coagulation. On en conclut que la nouvelle préparation d'hème est stre et efficace dans le traitement de porphyries hépatiques aigues. Exemple 8 Un comprimé par l'administration-orale compre- nant l'arginate d'hémine conforme à la présente invention, comprend les matières suivantes: Matière Quantité (mg) Arginate d'hémine de l'Exemple 3 386,9 Amylum maidis 25,0 Lactose 50,0 Stearate de magnésium 4,2 Polyvidon K 30 24,9 Poids par comprimé: 491 Le comprimé ayant la composition indiquée ci- dessus est fabriqué selon des procédures d'empastillage classiques. Exemple 9 On produit ce comprimé de lysinate d'hémine en utilisant les matières et la procédure indiquées dans l'exem- ple 8, sauf que l'orginate d'hémine est remplacé par le lysinate d'hémine. Exemple 10 Une composition convenable pour l'injection intraveineuse d'arginate d'hémine conforme à la présente inven- tion comprend les matières suivantes: Matière Quantité (g.) Arginate d'hémine de l'exemple 3 5,24 Spir. Fort 10,50 Propylène glycol 42,00 Eau distillée 105 Exemple 11 On forme une solution pour injection intravei- neuse contenant le lusinate d'hémine, en utilisant les matières selon les proportions qui sont indiquées dans l'exemple 10, sauf que l'on remplace l'arginate d'hémine par le lysinate d'hémine préparé dans l'exemple 5. Exemple 12 Afin d'illustrer davantage les résultats supé- rieurs d'absorption fournis par l'arginate d'hémine et le lysinate d'hémine conformes à la présente invention, on traite 16 individus d'expérience en bonne santé, de la façon indi- quée dans le Tableau III avec un produit parmi une solution d'arginate d'hémine, telle qu'indiquée dans l'exemple 10, des -5 capsules d'arginate d'hémine ayant la composition du compri- mé qui est décrite dans l'exemple 8, des capsules d'arginate d'hémine ayant la composition définie dans l'exemple 8 plus une quantité environ égale de vitamine C, des capsules de lysinate d'hémine ayant la composition du comprimé, qui est indiquée dans l'exemple 9, ou des capsules ne contenant que de l'hémine. Dans chaque cas, le fer du composant hème est le radioisotope 59Fe qui sert de marqueur. Le pourcentage de fer d'hémine absorbé après administration de doses d'en- viron 4 PCi de chacune des compositions, est déterminé par comptage dans le corps entier et par utilisation d'un compteur à partir du flux sanguin périphérique. Les doses sont appli- quées aux volontaires le premier ou le deuxième jour du test et des essais supplémentaires sont effectués sur chacun des volontaires pendant huit jours, à partir des premiers essais. Ainsi qu'on le constate à partir des données du Tableau III, la solution d'arginate d'hémine induit une plus forte absorption de fer que tout autre préparation, tandis que toutes les préparations conformes à la présente invention conduisent à des absorptions de 6 à 20 fois celle que permet l'hémine seule. TABLEAU III Sujet NODésignation du Dose (Ci % absorbe, jours après administration Sujet N Désignation du Dose (Ci) produit ler 2ème 3ème 4ème 5ème 6ème 7ème Sème jour 1 A 3,8 100 99 92 6,7 6,7 6,1 2 A 4,3 100 99 98 74 13 7,9 3 B 4,1 100 87 29 4,4 4,2 3,8 4 B 4,0 100 91 55 1,2 1,2 1,1 C 4,o 100 94 19 4,1 3,9 3,7 6 C 3,4 100 100 40 4,0 3,0 2,5 7 D 3J5 100 19 3.3 2,8 2,8 2,5 8 D 4,0 100 78 4.8 4,8 4,7 4,4 " 9-16 E 4,0 100 0,15-0,3 A Solution d'arginate d'h6mine de l'exemple 10. B Capsule d'arginate d'h6mine ayant la formulation décrite dans l'exemple 8 C Capsule d'arginate d'h6mine ayant la formulation décrite dans l'exemple 8 plus la vitamine C. D Capsule de lysinate d'h6mine de l'Exemple 9. E Capsule d'hémine. Le fer dans chacune des matières d'h&mine est marqué avec le 59Fe. Mi m3 M o4 On a ainsi mis au point une nouvelle matière pour le traitement de l'anémie et de la porphyrie; cette nouvelle substance est à la fois stable, utile et n'entratne pas d'effets secondaires indésirables, comme une thrombo- phlébite. La préparation et l'utilisation de ces matières ont été illustrées ci-dessus. De plus, on a décrit un procédé de production d'un complexe d'hémine et d'aminoacides spé- cifiques. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée de la présente invention. REVENDICATIONS 1. Composition de matière utile dans le traite- ment de l'anémie, caractérisée en ce qu'elle comprend un complexe soluble dans l'eau d'hémine et d'une matière choisie dans le groupe consistant en L-arginine et en L-lysine, selon une proportion molaire de 1:1 à 1:4, formé par la réaction de deux matières dans un mélange d'un solvant organique et d'eau à la température ambiante, sous une agitation vigoureuse pendant 10 à 15 heures. 2. Composition suivant la revendication 1, carac- térisée en ce que le solvant organique est de l'acétone. 3. Composition suivant la revendication 2, carac- térisée en ce que le rapport d'acétone à eau est de 300:20, en volumes. 4. Composition suivant la revendication 1, carac- térisée en ce que le solvant organique est l'acétone, le rapport d'acétone à eau est de 300:20 en volumes et le rapport molaire est d'environ 1:3. 5. Procédé de préparation d'un complexe soluble dans l'eau et physiologiquement actif d'hémine et d'une matière choisie dans la classe consistant en L-arginine et L- lysine, caractérisé en ce qu'on agite vigoureusement un mélange d'hémine et de cette matière choisie dans le groupe formé par la L-arginine et la L-lysine, à la température ambiante pen- dant une période de 10 à 15 jours, le rapport de l'hémine à la matière choisie dans le groupe formé par le L-arginine et la L-lysine étant de 1:1 à 1:4, en effectuant la réaction dans un mélange de solvant organique et d'eau se trouvant selon un rapport en volumes de 300:10 à 300:25. 6. Procédé suivant la revendication 5, caracté- risé en ce que le solvant organique est l'acétone. 7. Procédé suivant la revendication 6, caracté- risé en ce que le rapport d'acétone à eau est de 300:20 en volumes. 8. Procédé suivant la revendication 5, caracté- risé en ce que la proportion molaire est de 1:3 environ. 9. Procédé suivant la revendication 5, carac- térisé en ce que la matière complexée avec l'hémine est la L-arginine. 10. Procédé suivant la revendication 5, caracté- risé en ce que la matière complexée avec l'hémine est la L-lysine. 11. Procédé suivant la revendication 5, caracté- risé en ce que le rapport d'acétone à eau est d'environ 300:20. 12. Procédé suivant la revendication 5, caracté- risé en ce que le solvant organique est l'acétone, le rapport d'acétone à eau est de 300:20 en volumes et la proportion molaire est d'environ 1:3.