Brevet FR2579867A1 — publié le 19861010

La présente invention concerne un nouveau procédé de lutte contre les protozoaires responsables de maladies des vertébrés et notamment d'endémies humaines et animales. L'invention a pour objet un procédé de lutte contre les endémies transmises aux êtres vivants par des protozoaires, caractérisé en ce que l'on applique dans le lieu o se trouvent les protozoaires une quantité de composé du type pyréthrinoide suffisante pour empêcher le dévelop- pement des protozaires. Par être vivant, on entend l'homme, les mammifères, les poissons et les oiseaux. Comme protozoaires visés par la présente invention, on peut citer les spirochètes, les tréponèmes, les amibes, les trypanosomes, les hématozoaires notamment l'hématozoaire du paludisme ou plasmodium et les leishmanias. L'invention concerne donc un procédé de lutte contre des maladies très diverses, comme les spirochètoses, les maladies causées par les tréponèmes, les amibiases, le paludisme, les trypanosomiases ou les leishmanoses. Les composés pyréthrinoides visés par l'invention sont des composés connus d'une façon générale: ils répondent à la formule générale A C02B dans laquelle: OI - ou bien A représente un radical: H3 \ H/ 3 > T 3 T _ \ 2 2579867 dans lequel Z3 représente un atome d'ydrogène ou d'halogène et ou bien T1 et T2 identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical alcoxyle, un radical alcoyle renfermant de 1 à 8 atomes de carbone, un radical CF3 ou CN ou un noyau phényle éventuellement substitué par un halogène, ou forment ensemble un radical cycloalcoyle renfermant de 3 à 6 atomes de carbone ou un radical: r B dans lequel B représente un atome d'oxygène ou de soufre: - soit Z, représente un radical a b c d dans lequel a, b, c et d identiques ou différents représentent chacun un atome d'halogène, - soit Z2 représente un radical D J-G dans lequel D représente un atome d'hydrogène ou d'halogène, un radical alcoxyle, G représente un atome d'oxygène ou de soufre et J représente ou bien un radical alcoyle linéaire, ramifié ou cyclique, saturé ou insaturé, renfermant de 1 à 8 atomes de carbone, éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements fonctionnels, identiques ou différents, ou bien un groupement aryle renfermant de 6 à 14 atomes de carbone, éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements fonctionnels 3 2579867 identiques ou différents, ou bien un radical hétérocyclique éventuellement substitué par un ou plusieurs groupements fonctionnels, identiques ou différents, - ou bien A représente un radical: /\ dn(U)m dans lequel U, en position quelconque sur le noyau benzénique, représente un atome d'halogène, un radical alcoyle renfermant de 1 à 8 atomes de carbone ou un radical alcoxy renfermant de 1 a 8 atomes de carbone, m représentant le nombre O, 1 ou 2. II - et B représente: - soit un radical benzyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis dans le groupe constitué par les radicaux alcoyles comportant de 1 à 4 atomes de carbone, les radicaux alcényles comportant de 2 à 6 atomes de carbone, les radicaux alcényloxy comportant de 2 à 6 atomes de carbone, les radicaux alcadiényles comportant de 4 à 8 atomes de carbone, le radical méthylène dioxy et les atomes d'halogène, - soit un groupement: CH2 oX CH2R2 Ri dans lequel le substituant R1 représente un atome d'hydrogène ou un radcal méthyle et le substituant R2 un aryle monocyclique ou un groupement -CH2-C = CH et notamment un groupement 5-benzyl 3-furyl méthyle, - soit un groupement: a R3 4 2579867 dans lequel a représente un atome d'hydrogène ou un radical méthyle et R3 représente un radical organique aliphatique comportant de 2 à 6 atomes de carbones et une ou plusieurs insaturations carbone-carbone et notamment le radical -CH2-CH=CH2, -CH2-CH = CH-CH3, -CH2-CH = CH-CH = CH2, -CH2-CH = CH-CH2-CH3, - soit un groupement: a R3 / XRE' 1 R'2 dans lequel a représente un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, R3 conserve la même signification que précédemment, R'1 et R'2, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical alcoyle renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, un radical aryle comportant de 6 a 10 atomes de carbone, un groupement alcoyloxycarbonyle comportant de 2 à 5 atomes de carbone, ou un groupement cyano, -soit un groupement: H C - B' (Rs)n dans lequel B' représente un atome d'oxygène ou de soufre, un groupement -- ou -CH2- ou un groupement sulfoxyde ou un groupement sulfone et R4 représente un atome d'hydrogène, un radical -C _ N, un radical méthyle, un radical -CONH2, un radical -CSNH2 ou un radical -C CH, R5 représente un atome d'halogène ou un radical méthyle et n représente un nombre égal à 0, 1 ou 2, et notamment le groupement 3-phénoxy benzyle, "-cyano 3-phénoxy benzyle, o(-éthynyl 3-phénoxy benzyle, 3-benzoyl benzyle, 1-(3-phénoxy phényl) éthyle ou o(-thioamido 3-phénoxy benzyle, soit un groupement: 2579867 H C- CN - soit un groupement: R6 R7 |S/I | N-CH2- R8 dans lequel les substituants R6, R7, R8, R9 représentent un atome d'hydrogène, un atome de chlore, ou un radical méthyle et dans lequel S/I symbolise un cycle aromatique ou un cycle analogue dihydro ou tétrahydro, - soit un groupement: S -/"-CH2-Cs-CH -CH2-N o - soit un groupement: RilH - R11- R12 dans lequel R10 représente un atome d'hydrogène ou un radical CN, R12 représente un radical -CH2 - ou un atome d'oxygène, Rll représente un radical thiazolyle ou thiadiazolyle dont 1 a -liaison avec -IH- peut se trouver à l'une quelconque des positions disponibles, R12 étant lié à R1l par l'atome de carbone compris entre l'atome de soufre et un atome d'azote, - soit un groupement: I - soit un groupement: F? R1 -C F F dans lequel R13 représente un atome d'hydrogène ou un radical CN, - soit un groupement: O 2 4 1 dans lequel R13 est défini comme ci-dessus, et le radical benzoyle est en position 3 ou 4, - soit un groupement: R14 C R16 10 7 2579867 dans lequel R14 représente un atome d'hydrogène, un radical méthyle, éthynyle ou cyano et R15 et R16, différents, représentent un atome d'hydrogène, de fluor ou de brome, - soit un groupement: H R14 I N B -CH t n ' ( 7) dans lequel R14 est défini comme ci-dessus, chacun des R17 représente indépendamment un groupement alcoyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, alcoylthio renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, alcoyl sulfonyl renfermant de i à 4 atomes de carbone, trifluorométhyl, 3,4-méthylène dioxy, chloro, fluoro ou bromo, p représente un nombre égal à 0, 1 ou 2 et B" repréesente un atome d'oxygène ou un atome de soufre. L'invention a tout particulièrement pour objet un procédé de lutte caractérisé en ce que l'on détruit ou limite la multiplication des protozoaires pathogènes des vertébrés et des invertébrés. Comme vertébrés vecteurs, on peut citer l'home ainsi que les mammifères notamment les bovins, les ovins, les porcins, les caprins et les chevaux, les oiseaux comme la volaille, les batraciens, les reptiles, les poissons et les diverses espèces aquatiques. Comme invertébrés vecteurs, on peut citer les arthropodes terrestres et marins, notamment les acariens, les insectes, les mollusques, notamment les gastéropodes et les vers. Comme insectes vecteurs, on peut citer les moustiques, les mouches, les punaises, les puces et les poux. Le procédé de lutte de l'invention, dans le cas ou les protozoaires combattus sont véhiculés par des arthropodes et notamment par des insectes, est particulièrement intéressant d'un point de vue économique et écologique: il est possible d'utiliser des doses de pyréthrinoides inférieures aux doses létales pour les arthropodes vecteurs. Les traitements peuvent être appliqués dans des aires de développement de ces animaux différentes de celles de leur hôte vertébré (ex: eau-moustique) sont plus aisés et reviennent moins chers que les traitements visant à supprimer les insectes vecteurs. De plus, en ne supprimant pas totalement l'arthropode, on respecte mieux l'équilibre du milieu naturel. 8 2579867 L'invention a tout spécialement pour objet un procédé de lutte caractérisé en ce que l'on détruit des protozoaires qui sont véhiculés par des insectes. L'invention a donc pour objet un procédé de lutte tel que défini cidessus caractérisé en ce que 1'on utilise un composé du type pyré- thrinoide à une dose inférieure à la dose létale des insectes vecteurs. L'invention a tout spécialement pour objet un procédé de lutte caractérisé en ce que les insectes vecteurs sont des anophèles. Comme anophèles plus spécialement visés par l'invention, on peut citer: anopheles gambiae, anopheles moucheti, anopheles funestus, anopheles hancocki, anopheles paludis, anopheles nili, anopheles littoralis, anopheles aconitus, anopheles flavirostris, anopheles mangyanus, anopheles stephensi, etc... L'invention a plus particulièrement pour objet un procédé de lutte caractérisé en ce que les protozoaires combattus sont des pl asmodium, comme par exemple pl asmodium falciparum, plasmodium malariae, plasmodi um vivax, ou plasmodium ovale, plasmodi um yoel ii. La lutte contre le paludisme est d'un très grand intérêt: le paludisme est encore de nos jours un des grands fléaux du monde moderne qui fait des ravages dans de très nombreux pays, notamment en Afrique, par exemple au Nigéria, en Haute-Volta, au Cameroun, au Congo, au Kenya ou en Ethiopie, en Amérique Latine, notamment au Vénézuela et au Guatémala, ou en Asie du Sud-Est: on évalue actuellement à 1 million environ, le nombre d'enfants tués par le paludisme chaque année dans le monde. L'invention a plus particulièrement pour objet un procédé caractérisé en ce que le pyréthrinoide utilisé est la deltaméthrine; elle a également pour objet un procédé caractérisé en ce que le pyréthrinoide est choisi dans le groupe des pyréthrines photostables ou photolabiles constitué par 1 a tralométhrine, 1 a cyperméethrine, 1 a perméthrine, l'alphaméthrine, la cyfluthrine, le cyhalothrine, la fenfluthrine, la fencythrine, le fenvalerate, et les dérivés de l'alléthrine de la néopynamine. L'invention a tout spécialement pour objet un procédé caractérisé en ce que l'on utilise une quantité de pyréthrinoYde très faible, toujours inférieure à celle nécessaire pour abattre l'arthropode vecteur. Pour lutter contre les protozoaires en milieu aqueux selon le procédé de l'invention, on répand des compositions renfermant le 9 2579867 pyréthrinoide dans la zone o sont situés des arthropodes vecteurs des protozoaires sur et dans les marécages, lacs, flaques d'eau, canaux, rivières, dans les forêts, les savanes. Pour lutter contre les proto- zoaires dans les locaux d'habitation des êtres humains ou des animaux, on répand des compositions renfermant le pyréthrinoYde par traitement des surfaces, murs, toits, moustiquaires, etc..., par exemple. Les compositions renfermant le pyréthrinoide sont répandues par avion, par traitement au sol (traitement liquide ou poudrage) sur les vertébrés à protéger et dans les locaux fréquentés par l'homme et les vertébrés à protéger en traitement résiduel ou d'atmosphère sur différents supports d'habitations. L'invention a également pour objet un procédé de lutte caractérisé en ce que l'on administre directement aux êtres vivants une quantité suffisante de composé du type pyréthrinoide pour empêcher le développement des protozoaires parasites. Dans ce procédé de lutte particulier, les composés du type pyréthrinoide peuvent être avantageusement incorporés dans les boissons ou aliments à consommer. Lorsqu'il s'agit de lutter contre les protozoaires parasites des vertébrés, on peut incorporer les produits de l'invention dans l'eau de boisson ou dans les compositions alimentaires en association avec un mélange nutritif adapté à l'alimentation animale. Le mélange nutritiel peut varier selon l'espèce animale, il peut renfermer des céréales, des sucres et des grains, des tourteaux de soja, d'arachide et de tournesol, des farines d'origine animale, par exemple des farines de poissons, des acides aminés de synthèse, des sels minéraux, des vitamines et des anti- oxydants. L'invention a tout naturellement pour objet les composés destinés à la mise en oeuvre du procédé ci-dessus: ces compositions sont caractérisées en ce qu'elles renferment une quantité suffisante de pyréthrinoide pour empêcher le développement des protozoaires. Les compositions de l'invention destinées au traitement des locaux renferment de préférence de 0,05 mg/l à 1 g/ 1 de pyréthrinoide; parmi ces compositions préférées, on peut citer tout spécialement les compositions renfermant de 0,25 à 5 mg/litre de deltaméthrine. Ces compositions sont préparées selon les procédés usuels de l'industrie agrochimique ou agroalimentaire. Elles peuvent être additionnées éventuellement d'un ou plusieurs autres agents pesticides. Ces compositions peuvent se présenter sous forme de poudres, granulés, 2579867 suspensions, émulsions, solutions, solutions pour aérosols, bandes combustibles, appâts. Outre le principe actif, ces compositions contiennent, en général, un véhicule et/ou un agent tensio-actif, non ionique, assurant, en outre, une dispersion uniforme des substances constitutives du mélange. Le véhicule utilisé peut être un liquide, tel que l'eau, l'alcool, les hydrocarbures ou autres solvants organiques, une huile minérale, animale ou végétale, une poudre telle que le talc, les argiles, les silicates, le kieselguhr ou un solide combustible. Les exemples suivants Illustrent l'invention, sans toutefois la limiter. 1/. Exemple de compositions destinées au traitement des marécages: Deltaméthrine.................... 0,1 g - Butoxyde de pipéronyl........... . 4 g - Tween 80......................... 0,25 g - Topanol -A............. ...... 0,1 g..DTD: - Xylène........................... q.s. pour 1 litre. 2/. Exemple de compositions destinées au traitement des locaux: Deltaméthrine.................... 5 mg - Vercoryl S....................... 899 g - Topanol A...................... 16 g - Emcol..................... ..... 35 g 3/. Expérimentation "in vitron sur cultures de "plasmodim falciparnum La culture est effectuée dans des cypules de plaques de polystyrène pour cultures de tissus placées à 37C dans une étuve à..DTD: C02 (6%) en utilisant un milieu modifié RPMI 1640. Chaque cupule contient 0,7 ml de la suspension de sang humain parisitée (taux de parasitémie de départ: 0,3 %). L'incubation est poursuivie pendant 48 heures sans renouvellement de milieu. Les produits antiplasmodium à tester sont ajoutés avant incubation dans le milieu de survie. La lecture des résultats est réalisée sur frottis après coloration spécifique au MGG et dénombrement des hématies parasitées. Les dénombrements portent sur 3 000 hématies environ par cupule. Les produits à tester sont introduits dans 3 cupules par concentration étudiée. Les résultats obtenus sont résumés au tableau 1. Les hématies parasitées comportent soit des trophozoites (forme jeune), soit des schizontes jeunes ou âges, soit des méerozoites (en 11i 22579867 rosace), toutes formes du plasmodium. La conclusion qui peut en être tirée est qu'une activité marquéee sur le développement du plasmodium se produit avec la dose de 0,75 /Ig/ml. TABLEAU 1 I IConcentra- INbre d'hé- INbre d'hé-lTaux de ITaux de I I Produit I tion Imaties Imaties Iparasitémielparasité- i 101 I(en g/ml) Idénombrées parasitéesl (en %) Imie par I I I I I I Irapport aul I i I I I I Itémoin I I I (%) I Idelmathrinel I I I I I Men formu- I I I I I Ilation 1 0,750 I 9 400 1 118 1 126 1 42 I laqueuse I I i (flowable) I I I I I là25 g/1 I I I I 201 I I I I i I I I I I 1 I I! I I Exemple 4 À Effet des pyréthrinoldes sur le cycle sporogonique chez les anopheles. Le modèle choisi a été le couple A. stephensi-P.y-yoelii dont le cycle peut être facilement entretenu sur souris blanche. Plasmodium yoelii yoel i i. Plasmodium de rongeurs, P.y. yoelii est originaire d'Afrique centrale. - Entretien du cycle de P.y. yoelii. Le maintien de la souche sur souris blanche OF1 a été réealisé par inoculation intraveineuse de sporozoltes obtenus selon le protocole suivant: - - Après vérification sur un échantillon que 75 à 80 % des anophèles femelles d'une cage sont porteurs de sporozoïtes dans leurs glandes salivaires, 120 à 150 femelles sont tuées, puis grossièrement disséquées de façon à ne garder que la tête et le thorax. - Ceux-ci sont déposés dans un "potter" de Thomas contenant 4 ml de RPMI 1640 maintenu à 4 C puis finement broyés. 12 25798677 - Le broyat obtenu est centrifugé une première fois à 1500 tours/minutes (800 g) pendant 5 minutes. - On réecupère 2 ml de surnageant dans des seringues, le reste est recentrifugé 5 minutes à 1500 tours-et l'on récupère 1 ml du surnageant. Apres verification de la présence de sprozoites, on inocule en intraveineuse 0,5 ml du surnageant par souris, soit au total 4 à 6 souris selon les résultats de la deuxième centrifugation. Sur une souris donneuse, dont on a préalablement vérifié que la parasitémie atteignait au moins 40 % des hématies, on préelève 1 ml de sang par ponction du sinus rétro orbitaire à l'aide d'une pipette pasteur héparinée. Ce sang est mélangé dans un verre de montre à 1 ml de RPMI 1 640 additionné d'une goutte d'héparine. Puis on inocule en intrapéritonéal 0,2 à 0,5 ml de ce mélange par souris. Cette méthode d'infestation des souris a l'inconvénient d'augmenter à chaque nouveau passage la virulence de la souche plasmodiale et surtout de lui faire perdre progressivement sa capacité à produire des gamétocytes infectieux. Nous nous sommes donc limités à prendre pour souris donneuses uniquement des souris infestées à partir des sporozoites. L'infectivité des souris est vérifée dès le 3ème jour après l'inoculation sur frottis sanguin. Les critères retenus sont: présence de gamétocytes immatures et de microgamites stade O et 1, absence de gamétocytes dégénérés dont le cytoplasme est parsemé de petites vacuoles rondes. Les souris reconnues infectieuses sont emprisonnées dans un grillage souple et mises dans une cage contenant environ 150 femelles d'anophèles âgées de moins d'une semaine. - Evaluation de l'action de deltaméthrine mise en solution dans l'eau d'élevage des larves de moustiques sur le développement des sporozoites de Pharmodium chez le moustique adulte. L'imprégnation avec la deltaméthrine à la DL50 ou à des doses inférieures est réalisée sur les larves de moustiques encore non infectieuses en élevage dans l'eau. Les adultes survivants sont ensuite portés sur souris infectées par le plasmodiun pour prise de repas sanguin. L'évolution complète du cycle sporogonique du plasmodium ne pouvant être jugée sur la présence d'oocystes au niveau de l'estomac de l'adulte, il nous a paru préférable de poursuivre l'expérimentation en évaluant l'effet de la deltaméthrine sur le pourcentage de 13 2579867 moustiques porteurs de sporozoites dans les glandes salivaires. Les dissections ont été effectuées 14 Jours après le repas sanguin. L'ensemble des résultats est reporté sur le tableau suivant: Série a:. Dose de deltaméthrine utilisée: 2.10-4 mg/l {DL 50 des larves de moustique). Le lot témoin a été infecté le premier. Aucun des 19 moustiques disséqués dans le lot traité n'était porteur de sporozoltes, alors que dans le lot téiimoin,14 sur 20 l'étaient. La différence est à l'évidence très significative. O Série b:. Dose de deltaméthrine utilisée: 2.10-4 mg/l (DL 50 des larves de moustique). Le lot témoin a été infeste en premier. Là encore aucun moustique n'a été retrouvé porteur de sporozoltes dans le lot traité (0/42) alors que plus de 50 % des moustiques sur deux l'étaient dans le lot témoin (16/31). La différence est à l'évidence très significative. CONCLUSION: Le cycle sporogonIque complet ne peut être réalisé chez les 0 insectes ayant été en contact avec la deltaméthrIne. TABLEAUJ: Répartition des moustiques porteurs de sporozoites dans les glandes salivaires selon les lots témoins et les lots traités par la deltamiéthrine. I I I I I I I I Série I Dose I Lot I Négatif I Positif I Effectif I I I I I I I I DI I I témoin 1 6 I 14 I 20 1 I a I I I I I I I 12.10-4mg/1 traité I 19 I 0 I 19 1 I.I I I I I I I I I témoin 1 15 I 16 I 31 1 i I b I I I I I I I 12.10-4mg/1 traité 1I 42 I O I i42 I I I! I I I Exemple 5: On a effectué une expérimentation analogue à celle de l'exemple 4 ) sur des Anophéles à l'état larvaire en utilisant une dose de 14 25 -55 deltéthrtne lnfral;tale de 2,5 10 -5mg/. On a également constaté que le cycle sporogonique complet ne pouvait être rialis$ chez les Insectes adultes ayant été mis en contact larvaire avec la deltadthrIne. Exemple 6: On à effectué l'expirtmentatlon de l'exemple 4 sur des Anophéles a l'état adulte, aises en contact avec un support de verre traité à une dose Infralitale de deltamithrine de 2,5 10-5 9g/1. On a également constaté que le cycle sporogonique complet ne pouvait être réalisé chez des Insectes ayant été mis en contact avec la deltamethrine. REVENDICATI ONS 1 /. Procédé de lutte contre les endémies transmises aux êtres vivants par des protozoaires, caractérisé en ce que l'on applique dans le lieu o se trouvent les protozoaires une quantité de composé du type pyréthrinoYde suffisante pour empêcher le développement des protozaires. 2 /. Procédé de lutte selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on détruit ou limite la multiplication des protozoaires pathogènes des vertébrés et des invertébrés. 3 /. Procédé de lutte selon la revendication 2 caractérisé en ce que les protozoaires sont véhiculés par des insectes. 4 /. Procédé de lutte selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'on utilise un composé du type pyréthrinoide à une dose inférieure à la dose létale des insectes vecteurs. /. Procédé selon la revendication 3 ou 4 caractérisé en ce que les insectes vecteurs sont des anophèles. 6 /. Procédé de lutte selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 caractérisé en ce que les protozoaires combattus sont des plasmodium. /. Procédé de lutte selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 caractérisé en ce que le pyréthrinoTde utilisé est la del taméthri ne. 8 /. Procédé de lutte-selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 caractérisé en ce que le pyréthrino7de est choisi dans le groupe des composés suivants: la tralomethrine, la cyperméthrine, la perméthrine, 'alphaméthrine, la cyfluthrine, le cyhalothrine, la fenfluthrine, la fencythrine et le fenvalerate et les dérivés de 1 alléthrine et de la néopynamine. /. Procédé de lutte selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 caractérisé en ce que l'on utilise une quantité de pyréthrinoTde inférieure à celle nécessaire pour abattre l'arthropode vecteur. /. Procédé de lutte selon l'une quelconque des revendications i à 8 caractérisé en ce que l'on administre directement aux êtres vivants une quantité suffisante de composé du type pyréthrinoTde pour empêcher le développement des plasmodium. 16 2579867 11 /. Les compositions destinées à la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications i à 10 caractérisées en ce qu'elles renferment une quantité suffisante de pyréthrinoTde pour empêcher le développement des protozoaires.