Brevet FR2580283A1 — publié le 19861017

La présente invention concerne un nouveau conjugué nucléoside- phospholipide ou son sel. Plus particulièrement, l'invention concerne le conjugué nucléoside-phospholipide de formule (1) CH: -O-Ri I{ CH}-O-R ( I) O H o R1 et R2 représentent un résidu acide gras à longue chaine, et Ns est un résidu nucléoside choisi dans le groupe constitué par 5- fluorouridine-5'-yl-, 5-fluoro-2'-désoxyuridine-5'-yl-, brédinin-5'- yl-, tubercidin-5'-yl-, néplanocin-A-6'-yl-, 5-fluorocytidine-5'-yl-, arabinosylcytosine-5'-yl-, arabinocyl-5-fluorocytosine-5'-yl-, arabinosyladénine-5'-yl- et arabinosylthymine-5'-yl-, ou un de ses sels. Les agents antitumoraux nucléosides sont largement utilisés comme agents chimiothérapeutiques efficaces pour les cellules néoplasiques; on a cependant souligné quelques problèmes dans l'application en chimiothérapie antitumorale. Il existe en effet certains inconvénients. Ainsi, dans un mécanisme d'action de l'agent antinéoplasique nucléoside, la phosphorylation du groupe hydroxyle en position 5' du nucléoside in vivo est essentielle pour l'activité antitumorale; le composé est décomposé en substance inactive par lnactivation comme par phosphorolyse et désamination; la résistance des cellules tumorales aux agents antitumoraux est accrue; et l'agent est quelquefois toxique pour les cellules mitotiques normales. On a synthétisé de nombreux types de dérivés de nucléosides pour pallier les Inconvénients des agents antitumoraux nucléosides. On sait que le CDP-diacylglycérol joue un rôle Important comme intermédiaire de la biosynthèse des glycérophospholipides in vivo, et leurs analogues conjugués arabinosylcytoslne-phospholipide ayant une activité antitumorale, ont été chimiquement synthétisés (Biochim. Biophys. Acta, 619 (1980), J. Med. Chem., 1982, 25, 1322-1329). Comme on l'a expliqué ci-dessus, le ribonucléoside est synthétisé par un procédé chimique et il faut donc des procédés de synthèse multi- étapes. Le rendement est donc faible et les procédés sont compliqués. En outre le cytosilne-arabinoside n'est connu que comme résidu nucléoside de dérivé de conjugué phospholipide-nucléoside et Il existe une demande d'un complexe phospholipide-nucléoside ayant d'autres types de résidus nucléosides. A cet effet on peut utiliser un nucléoside autre que le cytosinearabinoside; cependant la synthèse chimique de ce complexe phospholipidenucléoside nécessite des procédés de synthèse multi-étapes avec des conditions réaction- nelles difficiles, et ainsi en pratique la synthèse chimique est restée essen- tiellement impossible. On a trouvé que l'on peut synthétiser le nouveau complexe phospholipidenucléoside en faisant réagir du L-glycérophospholipide avec le nucléoside en présence de phospholipase D o l'on fait réagir le groupe hydroxyle primaire du nucléoside et le glycéro-phospholiplde. Un objet de l'invention est de fournir un nouveau conjugué nucléosidephosphollpide de formule (1) CHs -O-Ri C H - 0 - R ic I CH-O-R, (I) I, 11o t' CH, -O-P-O-Na { OH o R1, R2 et Ns ont les mêmes significations que ci-dessus. Comme exemple de glycérophospholipide, on peut citer la phospha- tidylcholine de formule (Il) CH, -0-R, CH-O-R1zII O CH, -O-P-0-Rs OH o R1 et R2 ont les mêmes significations que ci-dessus, et -OR3 est un résidu choline. Dans le glycérophospholipide de la série phosphatidylcholine, R1 et R2 représentent des résidus acide gras à longue chaîne semblables ou différents ayant de 16 à 20 atomes de carbone. On peut ainsi mentionner les résidus acide gras saturés à longue chaîne en C16 à C20 comme palmitoyle, stéaroyle ou dodécanoyle, et les résidus acide gras non saturés à longue chaîne en C16 à C20 ayant de 1 à 4 liaisons non saturées comme palmito- oléoyle, oléoyle, linoléoyle ou arachidonyle. Les exemples préférés sont la dipalmitoyl-phosphatidyl-choline o R1 et R2 représentent palmitoyle, dioléyl- phosphatidyl-choline o R1 et R2 représentent oléoyle, et dilinoléoylphospha- tidyl-choline o R1 et R2 représentent linoléoyle. D'autres phosphatidyl- cholines naturelles sont celles o R1 et R2 représentent des radyle de mélanges d'acides gras à longue chaîne en C16 à C20. Ces phosphatidylcholines peuvent être synthétisées ou se trouvent dans le commerce. Comme exemples de nucléosides, on peut citer par exemple la fluorouridine (appelée ci-dessous FUR), la 5-fluoro-2'-désoxyuridine (appelée ci-dessous FUDR), la brénidine (4-carbamoyl-1-B-D-ribofuranosylimidazollum- -oléate), la tubercidine (7-déazaadénosine), la néplanocine A (1-B-(6amino- 9H-9-yl)-4-hydroxyméthyl-4-cyclopentène-2, 30-diol) (appelée cidessous NepA), la 5-fluorocytidine (appelée ci-dessous FCR), l'arabinosylcytosine, l'arabinosyl-5-fluorocytosine, l'arabinosyl-adénine ou l'arabinosylthymine. On peut obtenir le complexe nucléoside-phospholipide de formule (1) en faisant réagir le glycérophospholipide ci-dessus et le nucléoside éventuel- lement en présence d'ions métalliques avec la phospholipase D. L'exemple préféré de phospholipase D est la phospholipase D-P obtenue à partir de Streptomyces sp. AA586 FERM P-6100 (brevet japonais non soumis à l'inspection publique N 58-152481, Toyo Jozo Co., catalogue N P-39). Sa quantité est de 0,01 unité de phospholipase D ou plus pour 1 mg de phosphatidyl-choline et est de préférence de 1-100 unités. Comme exemple de solvant que l'on peut utiliser, on peut citer un solvant bicouche de solvant organique et d'eau, par exemple un mélange d'un solvant organique comme l'éther, le benzène ou le chloroforme et d'une solution tampon de pH 3-9, de préférence pH 4-6. L'exemple de sol soluble dans l'eau pour la génération d'ions métalliques est généralement le chlorure de calcium. La température de la réaction est généralement de 20-600C et la durée de la réaction est de 30 minutes à 5 heures. On peut purifier le conjugué nucléoside-phospholipide ainsi obtenu par un procédé de partition et/ou par chromatographie sur gel de silice. On présente ci-dessous une synthèse en une étape du complexe nucléoside-phospholipide de l'invention. -s,,I quos (V daN ap se aEl suep,9 uoTl!sod ua no),; uoTiTSOd ua aaJIeWad alfixo.ipAq adnoi- ai,a epldlloqdo4d ai suep at4eqdsoqd adnoJ6 a[ Qo 9sodwoo un:sa snssap-li nuaqqo apldiloqdsoqd-apTlsoEIonu Vn6nCuoo al HO I SN-O-d-O- 1HO U I su!ioql + Ul-O-H- I C.H9 HO o I rHO-N- HO- H9-O-cd-O- tHO /+ I1 tri o O HO+ l-O-SN +H IH-0- sHO On peut préparer le produit ainsi obtenu sous la forme d'un de ses sels non toxiques comme le sel de sodium, et on peut l'administrer généralement en suspension dans de l'eau distillée stérilisée. Les avantages du complexe nucléoside-phospholipide de l'invention ainsi préparé sont qu'il est plus lipophile par comparaison avec le nucléoside original; il est excrété moins facilement, et est donc actif pendant plus longtemps; il n'est pas affecté par l'inactivation comme la phosphorolyse, la désamination ou la réduction; il a une plus grande affinité vis-à-vis de la membrane cellulaire; le nucléoside-5'-monophosphate antinéoplasique est généré dans les cellules; et il a une longue durée d'action et une activité accrue avec une faible toxicité. Le nouveau complexe nucléoside-phospholipide de l'invention révèle une activité antitumorale marquée in vivo et en outre une activité anti-métastatique pour les tumeurs et une activité antivirale. L'activité antitumorale contre le carcinome P-388 de la Ieucémie de la souris et le carcinome de l'ascite d'Ehrlich abd est mise en évidence comme suit. (Activité antitumorale) (1) Echantillons: présentés aux tableaux 1 et 2. (2) Animaux: souris BDF1 ou souris ICR, âgées de 5 à 6 semaines, mâles, souris par groupe et7 souris témoin. (3) Cellules tumorales: cellules de leucémie P-388; on inocule par voie intra- péritonéale 1 x 10 /0,2 ml à des souris BDF1. cellules de carcinome d'ascite d'Ehrlich; on inocule par voe intrapritonale 2 x 10/,2 ml 6 des souris ICR. par voie intrapéritonéale 2 x 10 /0,2 ml à des souris ICR. (4) Préparation d'échantillons et administration de médicaments: On met des échantillons en suspension dans une solution de sel physiologique Tris-HCI par traitement aux ultra-sons. On administre 0,1 ml/10 g de poids corporel. On conserve les échantillons à 4 C à l'obscurité. Administration: 2 jours après l'inoculation de la tumeur, une fois par jour pendant 2 à 7 jours. La posologie est donnée dans les tableaux. (5) L'allongement de la durée de vie (ADV) est calculée par l'équation suivante. ADV (%) - durée de vie moyenne (jours); traitées ADV (%) = 1- ____________ -1)x 100 durée de vie moyenne (jours); témoins Nb de jours d'expérience: 35 jours (pour partie 30 jours) Les souris vivant dans les derniers jours ne sont pas caculées dans l'ADV. (6) Résultat: Tableau 1. Conjugué Nucléoside- ellules Admin. ADV* Survie au bout de phospholipide. umorale mg/kg (Z) 35 Jours CI) (Nb. d' Nb./traitées adminis- R. et Ri Ns tration) palmitoyl FUR-5'-yl P-388 30( x5) 206,3 0/5 Ehrlic 15( X 5) >88,0 2/5' palmitoyl NepA-6'-yl P-388 50( x3) >159,3 1/5 Ehrlic 10( x7) >68,7 2/5 radyl PUR-5'-yl P-388 30( x5) 98,3 0/5 linoléoyl PUR-5'yl P-388 15( x 5) 100,8 0/5 radyl brédinin- Ehrli- 50( X7) 75,4 1/5 '-yl ch *: Date de survie moyenne dans le groupe témoin; Leucémie P-388: 7,57 7,79 jours Carcinome d'ascite d'Ehrlich: 15,14 - 15,43 jours Les exemples suivants précisent l'invention mais ne sont pas conçus comme limitatifs. EXEMPLE 1 On dissout de la 5-fluorouridine (FUR, 4,0 g) dans 100 mM de tampon acétate (pH 5,6, 20 ml) contenant 100 mM de CaCt2 et on agite à 45 C pendant 20 minutes. On y ajoute de la phospholipase D-P (10 mg, à partir de Streptomyces, Toyo Jozo Co., activité spécifique 160 unités/mg) et une solution chloroformique (30 ml) de dipalmitoyl-phosphatidyl-choline (1,5 g) et on agite à 450C pendant 3 heures, puis on refroidit. On y ajoute du méthanol (20 ml) et on sépare la couche organique. En outre, on extrait la couche aqueuse avec du chloroforme (30 ml) et du méthanol (15 ml). On combine la couche organique et on y ajoute de l'eau (20 ml) et du méthanol (20 ml) et on répartit, puis on sépare la couche organique et on sèche sous vide. On ajoute au résidu un mélange de chloroforme:éthanol (1:1)(30 ml) et on sèche à nouveau sous vide. On introduit le résidu dissous dans une faible quantité de chloro- forme dans une colonne instantanée de gel de silice (Merck, silica-gel Art 9385, 4 cm x 15 cm) et on élue graduellement avec du chloroforme, du chlorofor- me:méthanol (20:1), (7:1), (4:1), (3:1) et (2:1), dans cet ordre. On sèche l'éluat sous vide pour donner une poudre incolore de structure (Ia) ci-dessous (0,92 g, rendement: 50,5%). CH2-O-Rl Il CE-OO-R2 -C2 EN A lla) I O (la) CHZ0- 0Il il N OR CH CH CH-CE/- I I OH OH o R1 et R2 représentent un palmitoyle. Spectre d'absorption UV: 2 max = 268 nm (dans le méthanol:chloroforme = :1) Spectre de masse FAB: m/e 915 (M+Na) + Rf = 0,37 (chloroforme:méthanol:eau = 65: 25: 3, plaque Merck Art 5715, tache détectée par lampe UV et bleu de molybdène. Dans ce qui suit, la valeur du Rf est mesurée de la même manière). L'activité antitumorale est montrée dans le tableau. On n'observe pas de toxicité aiguë à une dose de 150 mg/kg i.p. chez les souris. 258.0283 EXEMPLE 2 Dans l'exemple 1 on utilise du Nep A (2,0 g) à la place de la FUR pour donner le composé de formule (Ib) (0,31 g, rendement: 17,0%). CE-'-0-R1 NE 2 I I ci -O-RZ F- C C CN 0 C I C l CHz--O- -0O-CH2 -.N/ - C CH CH-CH I I OE OE o R1 et R2 représentent un palmitoyle. Spectre d'absorption UV - max - 261 nm (dans le méthanol:chloroforme = 20:1) Spectre de masse FAB: m/e 894 (MH) + Rf = 0,38 L'activité antitumorale de ce composé est précisée dans le tableau. On n'observe aucune toxicité aiguë lorsqu'on administre le composé à raison de 250 mg/kg. EXEMPLE 3 On remplace la dipalmitoylphosphatidyl-choline de l'exemple 1 par la dilinoléoylphosphatidyl-choline (1,5 g) pour obtenir le composé de formule (Ic) (1,09 g). o CH=z- 0 - P,, il Cil-O-2 HN/C C-- F CI'i -- O-- 1, I (le) I ?,C , CH CHZ-0- P -0-CHZ 0 -N-H CEC-CHC I I OH OH o R1 et R2 représentent un linoléoyle. Spectre d'absorption UV: max - 268 nm (dans le méthanol:chloro- forme - 20: 1) Spectre de masse FAS: m/e 963 (M+Na) + Rf = 0,37 L'activité antitumorale de ce composé est ADV 100,8% (15 mg/kg, administration à 5 reprises) contre la leucémie P-388 de souris, et l'on n'observe aucune toxicité aiguë à des doses de 75 mg/kg chez la souris. EXEMPLE 4 On ajoute de la 5-fluorouridine (FUR, 4,0 g) dans 100 mM de tampon d'acétate (pH 5,6, 20 ml) contenant 100 mM de CaCl2 et on agite à 45"C pendant 20 minutes. On y ajoute de la phospholipase D-P (10 mg, Toyo Jozo Co.) et une solution chloroformique (30 ml) de phosphatidyl-choline (lécithine d'oeuf, 1,5 g) et on agite à 45 C pendant 3 heures, puis on refroidit. Après la réaction, on effectue l'isolement de la même manière que dans l'exemple 1 et on purifie par chromatographie sur gel de silice pour donner le composé de formule (Id) (1,11 g). CH2- O--R1 I 2-O-P-O-CÉ2 OI\N ZCHu(Id) * 01 1 0 I II OI CK CII I I OH OH o R1 et R2 représentent un radyle. Spectre d'absorption UV:-max- 268 nm (dans le méthanol:chloroforme = 20:1) Rf - 0,37. L'activité antitumorale de ce composé est ADV 98,3% (15 mg/kg, administration à 5 reprises) contre la leucémie P-388 de la souris, et on n'ob- serve pas de toxicité aiguë à des doses de 150 mg/kg chez la souris. EXEMPLES 5 - 8 On remplace la FUR dans l'exemple 1 par le nucléoside présenté au tableau 3 pour donner un complexe phospholipide-nucléoside (I) qui a des activités antitumorales utiles. On n'observe pas de toxicité aiguë à des doses de 150 mg/kg chez la souris. Au tableau 3, * désigne le cas o l'on utilise 100 mM de tampon d'acétate (pH 5,6) contenant 100 mM de chlorure de calcium (15 ml). ** en prenant le procédé de récupération du composé comme suit. Au mélange réactionnel après refroidissement on ajoute du méthanol (20 ml) pour filtrer les fractions insolubles, on lave avec du méthanol:chloroforme (1:1), et on lave la couche organique après séparation avec une solution de chlorure de sodium, on filtre à travers du papier filtre WIhatman 1-PS et on sèche sous vide. On introduit le résidu dissous dans une faible quantité de chloroforme dans une colonne instantanée (Merck, silica- gel Art 7747,- 3 cm x 15 cm) et on élue avec du chloroforme, du chlorofor- me:méthanol (10:1), (7:1), (5:1), (3:1) et (2:1), dans cet ordre. Tableau 3: EXEMPLE 5 Nucléoside: FUDR 1,5 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 0,75 g R1 et R2: palmitoyle Ns: FUDR-5'-yle Rendement: 0,41 g Spectre UV ( > max): 268 nm ' (méthanol:chloroforme (20:1)) Spectre de masse FAB (m/e): 899 (M+Na) + Rf: 0,44 EXEMPLE 6 Nucléoside: brédinine (*)(**) 10 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 2,0 g R1 et R2: palmitoyle Ns: brédinin-5'-yle Rendement: 1,36 g Spectre UV (? max): 280 nm (méthanol:chloroforme (20:1" Spectre de masse FAB (m/e): 890 (MH) + Rf: 0,25 EXEMPLE 7 Nucléoside: tubercidine 2,0 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 1,0 9 R1 et R2: palmitoyle - Ns: tubercidin-5'-yle Rendement: 0,91 g Spectre UV (A max): 270 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Spectre de masse FAB (m/e): 897 (M+Na) + Rf: 0,38 EXEMPLE 8 Nucléoside: FCR 0,65 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 0,73 g R1 et R2: palmitoyle Ns: FCR-5'-yle Rendement: 0,33 g Spectre UV (> max): 283 nm 241 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Spectre de masse FA8 (m/e): 914 (M+ Na) + Rf: 0,30 EXEMPLES 9 - 12 On remplace la FUR par le nucléoside présenté au tableau 4 pour obtenir le complexe phospholipide-nucléoside (I) qui a des activités antitumorales utiles. On n'observe pas de toxicité aiguë à des doses de 150 mg/kg. Dans le tableau, (*) et (**) ont les mêmes significations que ci-dessus. TABLEAU 4 EXEMPLE 9 Nucléoside: FUDR 2,0 g Phosphatidyl-choline: 1,0 g R1 et R2: radyle Ns: FUDR-5'-yle Rendement: 0,41 g Spectre UV (; max): 268 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Rf: 0,44 EXEMPLE 10 Nucléoside: brédinine (*)(**) 10 g Phosphatidyl-choline: 2,0 g R1 et- R2: radyle Ns: brédinin-5'-yl Rendement: 1,18 g Spectre UV (X max): 280 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Rf: 0,25 EXEMPLE 11 Nuclé6oside: tubercidine 2,0 9 Phosphatidyl-choline: 1,0 9 R1 et R2: radyle Ns: tubercidin-5'-yle Rendement: 0,71 g Spectre UV (A max): 270 nm (méthanol:chloroforme (20:1" Rf: 0,38 EXEMPLE 12 Nucléoside: NepA 2,0 g Phosphatidyl-choline: 1,5 g R1 et R2: radyle Ns: NepA-6'-yle Rendement: 1,24 g Spectre UV (X max): 261 nm (méthanol:chloroforme (20:1" Rf: 0,38. D'autres exemples de produits de départ et de produits de conjugué phospholipide-nucléoside sont présentés dans ce qui suit. Conjugué, Produits de départ phospholipidenucléosIde I phospholipide nucléoside Ri et R3 Ns dioloyl- phosphatidyl- PUR oléoyl PUR-5'-yl choline FCR FCR-5'-yl " NepA NepA-6'yl " PFUDR FUDR-5'-yl :" brédinine. bredinin-5'-yl tubercidine tubercidln -5'-yl dilinoleoyl- phosphatidyl- NepA linoleoyl NepA-6'-yl choline PFCR PFCR-5'-yl FUDR FUDR5'yl FUDR-5'-yl brédinin brédinin-5'-yl EXEMPLE 13 On dissout de l'arabinosyl-5-fluorocytosine (783 mg) dans 100 mM de tampon acétate (pH 5,4, 6 ml) contenant 100 mM de CaC2 et on agite à 450C pendant 5 minutes. ODn y ajoute de la phospholipase D-P (10 mg, à partir de Streptomyces, Toyo Jozo Co., activité spécifique 160 unités/mg) et une solution chloroformique (20 ml) de dipalmitoyl-phosphatidyl-choline (367 mg, 0,5 mM) et on agite à 45 C pendant 3 heures, puis on refroidit. Au mélange on ajoute de l'HCl 1 N (6 ml), du chloroforme (20 ml) et du méthanol et on sépare la couche organique. On lave la couche organique avec de l'eau et on sèche sous vide. On ajoute de l'éthanol au résidu et on sèche deux fois sous vide. On introduit le résidu dissous dans une faible quantité de chloroforme dans une colonne instantanée de gel de silice (Merck, silica-gel Art 9385, 2 cm x 12 cm) et on élue graduellement avec du chloroforme, du chloroforme:méthanol (20:1), (10:1), (5:1), (3:1) et (2:1), dans cet ordre. On sèche l'éluat sous vide et on dissout le résidu dans le chloro- forme:méthanol (2:1) (25 ml), puis on ajoute de l'eau pour séparer la couche organique, que l'on sèche sous vide pour fournir une poudre incolore (156 mg, rendement: 35,0%). - Spectre d'absorption UV: 1 max 284 nm, 240 nm (dans le chloroforme:méthanol - 20:1) Spectre de masse FAB: m/e 914 (M+Na) + Rf = 0,31 (chloroforme:méthanol:eau - 65:25:3, plaque Merck Art 5715, tache détectée par lampe UV et bleu de molybdène. Dans ce qui suit, la valeur de Rf est mesurée de la même manière.) L'activité antitumorale de ce -composé a été présentée ci-dessus. En outre on observe plus de 60% d'ADV lorsqu'on inocule par voie intrapéri- tonéale le carcinome d'ascite d'Ehrlich, 2 x 10 6cellules, 0,2 ml, à des souris, et deux jours plus tard on administre ce composé (30 mg/kg) une fois par jour pendant 7 jours. On n'observe aucune toxicité aiguë à des doses de mg/kg chez les souris. EXEMPLE 14 On dissout de l'arabinosylcytosine (962 mg, 15 équivalents) dans 100 mM de tampon acétate (pH 5,4, 5 ml) contenant 100 mM de CaCI2 et on agite à 45 C pendant 10 minutes. On y ajoute de la phospholipase D-P (5 mg) et une solution chloroformique (10 ml) de L-*-lécithine-dioléyle (200 mg, 0, 263 mM) et on agite à 45 C pendant 2 heures, puis on refroidit. On y ajoute du chloroforme (6,6 ml) et du méthanol (8,3 ml) et on sépare la couche organique. On lave la couche organique avec de l'eau (5 ml) et on sèche sous vide. On ajoute de l'éthanol (15 ml) au résidu et on sèche deux fois sous vide. On introduit le résidu dissous dans une faible quantité de chloroforme dans une colonne instantanée de gel de silice (Merck, silica-gel Art 9385, 2,5 x 12 cm) et on élue graduellement avec du chloroforme:méthanol (15:1) et (1:0,1), puis du chloroforme:méthanol:eau (100:10:1), (70:10:1) et (50:10:1), dans cet ordre. On sèche l'éluat sous vide et on dissout dans le chlorofor- me-méthanol (2:1) (25 ml), puis on ajoute de l'eau (5 ml) tout en agitant bien pour séparer la couche organique, que l'on sèche sous vide. On y ajoute du méthanol et on sèche à nouveau sous vide pour donner une poudre incolore (184 mg, rendement: 75,5%). Spectre d'absorption UV: i max = 273 nm (dans le chlorofor- me:méthanol = 20:1) Spectre de masse FAB: m/e 948 (M+Na) + Rf = 0,36 L'activité antitumorale de ce composé a été présentée ci-dessus. En outre l'activité antitumorale contre le carcinome d'ascite d'Ehrlich de la souris est ADV 65,6%. On n'observe pas de toxicité aiguë ni de mortalité à des doses de 150 mg/kg chez la souris. EXEMPLE 15 On remplace l'arabinosyl-5-fluorocytosine par l'arabinosyl- adénine dans l'exemple 13 et de l'arabinosylthymine pour obtenir la dipalmitoyI- phosphatidyl-arabinosyladénine et la dipalmitoyl-phosphatidyl-arabinosyl- thymine. Ces composés ont une activité antivirale et on n'observe pas de mortalité à des doses de 150 mg/kg chez la souris. Dipalmitoyl-phosphatidyl-arabinosyladénine: Spectre d'absorption UV: à max = 259 nm (dans le chlorofor- me:méthanoa = 20:1) Spectre de masse FAB: m/e 898 (MH) + et (M + Na) + Rf = 0,39 Dipalmitoyl-phosphatidyl-arabinosylthymine: Spectre d'absorption UV: L max = 269 nm (dans le chlorofor- me:méthanol = 20:1) - Spectre de masse FAB: m/e 911 (M + Na) + Rf = 0,46 TABLEAU 2 Complexe Nucléoside- phospholipide. Cellules Administ- ADV * (I)tumo- ration (Z) rales mg/kg R, et Rs Ns (XNO.) leucémie palmitoyl arabinosyl- P-388 15( x5) 151,9 fluoro- cytosine- ' -yl leucémie oléoyl arabinosyl- P-388 30( x5) 153,6 cytosine- ' -yI leucémie radyl arabinosyl- P-388 50( X5) 112,0 cytosine- '-yl *: Date moyenne de survie: Leucémie P-388: 7,57 - 7,64 jours EXEMPLES 16 - 21 Dans l'exemple 1, on remplace la FUR par le nucléoside présenté dans le tableau 5 et on remplace la FUR par le nucléoside présenté au tableau et on remplace la djpalmitoyl-phosphatidyl-choline par la distéaroyl-phosphatidyl-choline pour obtenir le composé de formule (I) tel que présenté au tableau 5. TABLEAU 5 Traitement de la Produit de départ Conjugué phospholipide-nucléoside (I j Traitement de la leucémie P-388 Exemple nucléoside distéaroyl-phosadministration (utilisé) phatidyl-choline Rendt I Àmax. Rf (m/kg) ADV C) (x nb d'admin.) 16 FUR (2,63g) 0,79g 0,65g 268m 0,37 30g ( x5) 206 % 17 NeP A(1,60g) 0,79g. 0,38g 260nm 0,38 30g ( x5) 128 Z 18 Ara FC(1,3g) 0, 79g 0,44g 285nm 0,31 30mg ( x5) 194 Z. 19 Ara C (3,6g) 0,79g 0,48g 273n" 0,36 30g ( x5) 160 X FUDR (3,3g) 0,79g 0,40g 268n. 0,44 3So ( X5) 36 X 21 Brédinine(5,Og) 0,79g 0,26g 280na 0,25 - - N .,.co o, co CO 2580Z83 REVENDICATIONS 1. Complexe nucléoside-phospholpide de formi. () CH: -O-R, CH-O-R-. (I) l O *0 CH, -O-P-O-Ns OH ou R1 et R2 représentent un résidu acide gras à longue chaine, et Ns est un résidu nucléoside choisi dans le groupe constitué par 5- fluorouridine-5'-yl-, 5-fluoro-2'-désoxyuridine-5' -yl-, brédinin-5'- yl-, tubercidin-5'-yl-, néplanocin-A-6'-yl-, 5-fluorocytidine-5'-yl-, arabinosylcytosine-5'-yl-, arabinocyl-5-fluorocytosine-5'-yl-, arabinosyladénine-5'-yl- et arabinosylthymine-5'-yl-, ou un de ses sels. 2. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un palmitoyle et Ns est le 5-fluorouridin-5'-yl ou un de ses sels. 3. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un palmitoyle et Ns est le néplanocin-A-6'-yl- ou un de ses sels. 4. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et RZ représentent un palmitoyle, Ns est l'arabinosyl-cytosine-5'-yl-, l'arabinosyl- adénine-5'-yl- ou l'arabinosyl-thymine-5'-yl- ou un de leurs sels. 5. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un olévyle et Ns est un arabinosyl-cytosine-5'-yl- ou un de ses sels. 6. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un stéaroyle, Ns est le 5-fluorouridine-5'-yl- ou un de ses sels. 7. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un stéaroyle, Ns est le néplanocin-A-6'-yl- ou un de ses sels. 8. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un stéaroyle, Ns est l'arabinosyl-cytosine-5'-yl- ou un de ses sels.