Brevet FR2576776A1 — publié le 19860808

25767-76 "Sonde pour la récolte d'embryons, notamment sur les juments". L'invention concerne une sonde pour la récolte d'em- bryons de grande dimension, tels que ceux des juments, rhinocéros ou éléphants, celle-ci étant constituée d'une canule pourvue d'au moins un orifice de récupération des embryons, raccordée à une ca- pacité contenant un milieu nourricier permettant de remplir les cornes utérines de l'animal pour assurer l'entratnement par im- mersion de l'embryon. De telles sondes pour la récolte d'embryons de grande dimension (environ 1mm à 7 jours) existent déjà,notamment pour la jument Ilfaut toutefois, observer que celle-ci sont mal adaptées à cette opéra- tion, en raison d'une part, de la nature même de la matière constituant la canule et, d'autre part, de la disposition et de la forme de l'orifice de récupération de l'embryon. En effet, les sondescon- nues pour ce type de prélèvement, sont jusqu'alors constituées d'u simple tube de caoutchouc, ayant un faible coefficient de glisse- ment, et l'extrémité introductive de cette canule ne comporte qu'u seule ouverture radiale, sa section terminale étant en outre, obturée. La position et la forme de cette ouverture radiale rend la récupération de l'embryon très aléatoire même lorsque les deux cornes utérines de l'animal ont été totalement immergées. L'invention concerne donc une sonde du type précité, présentant l'originalité d'une part, d'être réalisée en un matéria ayant un faible coefficient de frottement (pour permettre une in- troduction et un retrait plus aisés et d'autre part, de présenter une structure propre à permettre une récupération dans 90 % des cas de l'ovule fécondée. L'invention concerne donc une sonde pour la récolte d'embryons, notamment sur les juments, du type constitué d'une ca- nulepourvue sur sa périphérie, à distance de son extrémité intro- ductive, d'un ballonnet gonflable alimenté en fluide par un condui capillaire, la portion opérationnelle de canule,comprise entre ce lonnet et cette extrémité,comportant au moins un orifice de récupé ration du ou des embryons débouchant dans le canal intérieur de 1 canule, cette sonde étant caractérisée en ce que ladite canule 2. comporte une série d'orifices espacés sur toute la longueur de la portion opérationnelle, comprise entre ledit ballonnet et ladite extrémité introductive, ces orifices étant décalés angulairement les uns par rapport aux autres pour intéresser l'intégralité de la périphérie de cette portion, chaque orifice étant en outre en forme d'entonnoir pour canaliser les ovules féconds en direction du canal intérieur de la canule. La forme et la disposition en spirale des orifices permettent ai de récupérer les embryons sur 360'et de les canaliser, grace à la forme rétrécie des orifices qui sont sensiblement plus larges à leur en- trée afin de constituer des goulots de guidage, cette forme étant obtenue par un chanfrein pratiqué dans l'épaisseur de la matière constituant la canule proprement dite. Selon une disposition avantageuse de l'invention les orifices de récupération des embryons sont décalés angulairement de 900 selon un arrangement spiralé. D'autres caractéristiques et avantages de la sonde selon l'invention ressortiront de la description ci-après et des dessins annexés dans lesquels: - la Fig. 1 est une vue en coupe longitudinale tronquée de la sonde selon l'invention, - la Fig. 2 est une vue schématique illustrant la mise en place de ladite sonde. La sonde de récupération selon l'invention se présente, à l'instar des sondes connues, sous la forme d'une canule 1, suffi- samment longue pour pouvoir franchir le col de l'utérus de manière à ce que son extrémité introductive 11 puisse venir se positionner en regard de la zone de bifurcation 3 des deux cornes utérines 4 (fig.2). Cette canule est de préférence réalisée à partir d'un tube en matière plastique extridée, par exemple du PVC de type ali- mentaire, choisi non seulement pour sa neutralité, mais également pour son bon coefficient de glissement et aussi sa soi-rigidité. le dia- mètre extérieur de la canule est volontairementimportant (environ 10m) de façon à définir un canal intérieur 5 de section relativement 3. importante (diamètre supérieur aux dimensions usuelles d'un em- bryon de jument) de manière à permettre une bonne récupération des ovules fécondés,sans craindre la destruction partielle ou totale de leur enveloppe pellucide. Cette canule comporte un ballonnet gonflable 6, connu en soi, mais présentant la particularité d'avoir une forme conçue pour faciliter la récolte des embryons et d'être positionné sur la canule à un endroit précis pour favoriser là encore le guidage des embryons en direction du canal intérieur 5 de la canule. On observe en effet, sur l'illustration en trait mixte 61 (qui est donné en figure 1)que ce ballonnet, lorsqu'il est gonflé,a la forme en section transversale, d'une mandarine, son diamètre D'étant effec- tivement supérieur à sa largeur L, les flancs 62 dudit ballonnet gonflé formant des joues proéminentes définissant une sorte de rampe 63, du type "tobogan" orientant l'embryon en direction de l'extrémité introductive 11 de la canule. Avantageusement le bord avant 64 du ballonnet est situé à proximité immédiate du premier orifice 71 de récupération des embryons de manière à les canaliser en direction de cet ori- fice. Le ballonnet est collé et ligaturé sur la canule en un enroit prédéterminé, selon le type ou la nature de l'animal, et est alimenté en fluide comprimé par un conduit capillaire 8 logé dans l'épaisseur de la canule 1, oe conduit débouchant par un ou plusieurs orifices 9 dans le volume interne du bal- lonnet. L'extrémité arrière du conduit capillaire 8 est reliée, de façon conn ue, à une capacité témoin 10 qui se gonfle lorsque le ballonnet 6 est correc- tement gonflé. Les orifices 7 de récupération des embryons sont espacéE sur la longueury 'dite "portion opérationnelle" comprise entre le ballonnet 6 et l'extrémité introductive 11 de la canule. Ces ori- fices présentent la particularité d'être décales angulairement les uns par rapport aux autres, par exemple de 90 , de manière à interesser l'intégralité de la périphérie de cette portion opéra- tionnelle. Ainsi la communication entre la cavité utérine et le canal interne 5 de la canule peut se faire sur 360 . Selon une autre particularité importante de l'invention 4. les orifices 7 de récupération ont une forme d'entonnoir de ma- nière à participer au guidage de l'embryon dans le canal 5 de récupération. Cette forme d'entonnoir est obtenue par un chanfrein 11 pratiqué dans la matière, c'est-à-dire dans l'épaisseur de la canule. Enfin, ces orifices sont ovalisés pour accroitre encore leur surface spécifique. On peut, bien entendu, conserver ouverte la section terminale de la canule 1 ou encore, comme illustré en figure 1 l'obturer à l'aide d'un bouchon amovible 12 constituant l'extré- mité introductive de la sonde. Cette sonde est reliée, au moment de son emploi, à une capacité 12 (fig.2) contenant un milieu nourricier tel que du phosphate de saline tamponnée (phosphate buffered saline: P.B.S.). La liaison entre la sonde et cette capacité 12 pouvant être réalisée d'au moins deux façons distinctes: - selon le premier mode de réalisation la partie termi- nale arrière de la canule 1 est réunie à un raccord souple 13, facilemnt pinçable lui-mime accouplé à un enmbout 14, de type rigide, prolongé par un long tuyau souple, lm ou lm 50. C'est l'extrémité de ce long tuyau souple qui est raccordée à la capacité 12-placée en hauteur pour obtenir une certaine pression. - selon un second mode de réalisation, il est possible de supprimer les raccords 13 et 14 ainsi que le tuyaux souple en teflon et de réaliser sous la forme monobloc une sonde semi- rigide de plus de 2 m de long, directement reliée à la capacité 12. L'avantage de cette formule est d'obtenir une sonde présentant un canal interne 5,continu sur toute sa longueur et ne présentant aucune aspérité, rétrécissement ou saillie susceptible d'endonager ou de perd l'enveloppe pellucide de l'embryon. En outre, la nature même de la matière constituant la canule s'oppose aux plis, goulot ou étranglement pouvant endommager l'embryon. La mise en place de la sonde selon l'invention est d'une grande simplicité. On peut pour parfaire sa rigidité et parcorné- quent favoriser son introduction, glisser à l'intérieur du canal interne 5 un mandrin 15 se présentant sous la forme d'une longue tige métallique. On procède ensuite à l'introduction de la sonde 257677d 5. dans la cavité utérine de l'animal de manière à amener l'extrémitÉ 11 de la canule en regard de la bifurcation 3 des deux cornes utérines 4,après que ladite canule ait franchi le col de l'utérus Lorsque la canule est correctement positionnée on procède à son immobilisation axiale et à l'obturation de la cavité utérine 17 par gonflage du ballonnet 6 en aval du col 16 de l'utérus. Ce bal- lonnet vient alors s!appliquer sur la paroi utérine 18 afin de mae quer totalement l'orifice de sortie de l'utérus de manière à évitE que l'embryon puisse être entrainé dans l'utérus et soit ainsi pel du. Lorsque la cavité utérine est totalement obturée, on immerge les deux cornes 4 en déversant dans cette double cavité, le milieu nourricier contenu dans la capacité 12. Ce liquide vieni remplir par simple gravité les deux cornes utérines 4 immergeant ainsi totalement l'extrémité opérationnelle de la canule. Il suffit ensuite de récupérer le liquide nourricier el de "piéger" l'embryon afin qu'il soit évacué avec ce liquide qui lui sert alors de véhicule. La récupération du milieu nourricier s'effectue simplement en débranchant l'extrémité arrière de -la canule de la capacité 12 et en la reliant à un autre réservoir que l'on basculera ensuite progressivement vers le bas de manière à ci que le liquide s'écoule par simple gravité dans ce second réser- voir. Cette opération est d'ailleurs facilitée par la forme in- clinée de la cavité utérine de l'animal. On recommencera l'opération d'immersion des cornes uté rines une ou plusieurs fois, selon le type d'animal, en injectant dans la cav de l'animal 300 cm3 de P.B.S. afin d'être certain d'avoir récupéré réellement l'embryon. Cette opération de récolte sera effectuée de préférence 7 jours après la fécondation de l'ovule et l'embryon ainsi récupéré pour- ra être,s'il est viable, soit mis en culture dans un milieu com- parable à son environnement naturel, soit congelé par cryogénie, soit encore transféré immédiatement dans une mère porteuse. On pourra bien entendu, dans des conditions de température et de tem] prédéterminées récolter sur un même animal plusieurs embryons graci à la forme et à la disposition originale des orifices de récupé- ration. 6. REVENDICATIONS 1 ) Sonde pour la récolte d'embryons notamment sur les juments du type constitué d'une canule pourvue sur sa périphérie, à distance de son extrémité introductive, d'un ballonnet gonflable alimenté en fluide par un conduit capillaire, la portion opération- nelle de canule comprise entre ce ballonnet et cette extrémité com- portant au moins un orifice de récupération du ou des embryons débouchant dans le canal intérieur de la canule, sonde caractérisée en ce que ladite canule (1) comporte une série d'orifices(7) espa- cés sur toute la longueur de la portion opérationnelle "e" comprise entre son ballonnet (6) et son extrémité introductive (11), et déca- lés angulairement les uns par rapport aux autres pour intéresser l'intégralité de la périphérie de cette portion, chaque orifice (6) étant en forme d'entonnoir pour canaliser les embryons en direction du canal intérieur (5) de la canule (1). 2>) Sonde pour la récolted'embryons selon la revendica- tion 1, caractérisée en ce que lediamètre du canal interne (5) de la canule- est de. plusieurs millimètres, les orifices (6) de récupération d'embryons, étant de forme sensiblemert ovale, l'entrée biseautée étantréalisée par un chanfrein (11) pratiqué dans l'épaisseur de la matière constituant ladite canule (1). 3 ) Sonde pour la récolte d'embryons selon les revendica- tions 1 et 2, caractérisée en ce que les orifices (6) de récupéra- tion d'embryons sont répartis sur la portion opérationnelle "'" de la canule selon une disposition spiralée. 4 ) Sonde pour la récolte d'embryons selon l'une quel- conque des revendications 1 à3, caractérisée enoe que la section de l'extrémité introductive de la canule est obturée par un bouchon amovible (11). 5 ) Sonde pour la récolte d'embryons selon la revendica- tion 1, caractérisée en ce que le ballonnet (6) est collé et liga- turé sur la canule (1), le bord avant (64) de ce ballonnet, dirigé vers l'extrémité introductive (11) de ladite canule, étant situé pratiquement au droit du premier orifice (71) de récupération des embryons. 7. 6 ) Sonde pour la récolte d'embryons selon la revendica- tion 5, caractérisée en ce que le ballonnet (6) à une dimension axiale inférieure à son diamètre, le gonflage lui conférant, en coup longitudinale, une forme d'oméga définissant une rampe (63) du type "tobogan" guidant les embryons en direction- du premier orifice (71) de récupération des embryons. 7 ) Sonde pour la récolte d'embryons, selon la revendi- cation 1, caractérisée en ce que l'extrémité arrière de la canule est raccordée à un embout souple (13), facilement obturable par pin- gage, lui-même prolongé par un raccord rigide (14) relié à un tuyau souple fixé de façon amovible à une capacité.(12) contenant un mi- lieu nourricier. 8 ) Sonde pour la récolte d'embryons, selon la reven- dication 1, caractérisée en ce que la canule est d'une seule pièce et se prolon au delà du conduit capillaire (8) de gonflage du ballonnet (6) d'une longueur supérieure à celle introduite dans la cavité vaginale de l'animal. 9 ) Sonde pour larécolte d'embryons, selon l'une quelcon que des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que la canule (1) est en matière plastique semi-rigide glissante en particulier en PVC ne du type alimentaire. ) Sonde pour la récolte d'embryons, selon la revendi- cation 8, caractérisée en ce que la canule est exempte de toute as- périté sur toute la longueur de son canal intérieur évitant une des- truction totale ou partielle de l'enveloppe pellucide de l'embryon. 11 ) Sonde pour la récolte d'embryons, selon l'une quel- conque des revendications 1 à 10, caractérisée en ce que la. canule (1) comporte un mandrin rigide amovible {15) facilitant sa mise en place.