Brevet FR2582669A1 — publié le 19861205

Dispositif à base d'une matière cristalline minérale relié à une source d'énergie et utilisation dudit dispositif pour améliorer le métabolisme bactérien. La présente invention concerne un dispositif utilisable notamment pour améliorer Le métabolisme bactérien. Selon l'invention, le dispositif est constitué d'un mélange homogène d'une matière cristalline minérale en poudre formée de couches octaédriques et/ou tétraédriques et d'un maté- riau organique amorphe (non cristallin),ledit mélange étant enfermé dans une enveloppe inerte et l'ensemble étant relié à une source d'énergie. Parmi les matières cristallines qui conviennent pour la présente invention, il a été trouvé que les phyllosilicates seuls ou en mélange étaient particulièrement avantageux. Les phyllosilicates présentent une structure lamellaire et sont constitués par des feuilles formées de tétraèdres et d'octaèdres. Parmi ces matières, on peut citer la kaolinite, la serpentine, le talc, le mica, le quartz. Mais il est évident que cette liste n'est pas limitative. D'autres matières,comme l'amiante, peuvent également convenir. En général, les diélectriques absolus conviennent aussi. La poudre minérale finement divisée est mélangée, de manière homo- gène de préférence, avec un matériau amorphe ou non cristallin. Parmi ces matériaux, on choisira avantageusement les hydrates de carbone comme le glucose ou ses analogues. L'ensemble est enveloppé partiellement ou totalement par une enveloppe de maintien inerte, de préférence comme du carton, une feuille de matériau plastique ou le bois. Parmi les sources d'énergie, on emploiera avantageusement l'énergie électrique, sinusoldale (courant alternatif) ou continue. on pourra également utiliser une autre forme d'énergie appropriée. Ainsi, un mode de mise en oeuvre avantageux réside en un dispositif caractérisé en ce que la source d'énergie électrique est constituée par un filament noyé dans le mélange et relié à une source de courant alternatif ou continu. De préférence, l'intensité est comprise entre 0,1 mA et 10 A, la tension entre 0,1 et 100 V et, dans Le cas du courant alternatif, la fréquence entre 0,1 Hz et 2.109 Hz. De préférence, on choisit une intensité entre 0, 1 et 1 A, une tension entre 1 et 10 V et une fréquence entre 0,1 et 10 MHz. Il a été trouvé que le dispo- sitif décrit ci-dessus permettait d'accroître sensiblement La durée de vie des bactéries d'un milieu de culture lorsqu'il était placé à proximité de ce milieu dans une étuve permettant de conserver l'atmosphère appropriée au développement des organismes. L'utilisation du dispositif selon l'invention n'est pas limitée à une famille de bactéries particuLières et elle peut convenir à toutes les bactéries. Le milieu de culture permettant à des bactéries de se développer est bien connu de tous les microbiologistes. Rappelons simplement que ces organismes se développent dans un milieu aqueux tamponné dont le pH est voisin de 7, à température voisine de 37 C, en présence notamment d'une source d'hydrate de carbone. Avec le dispositif selon l'invention, on observe une augmentation considérable de la population bactérienne vivante en un temps très court (moins de 72 h). Bien entendu, le dispositif n'est pas limité à cette application, mais est revendiqué en tant que tel. L'invention sera mieux comprise à l'aide d'un exemple particulier de réalisation qui doit être considéré comme purement illustratif et ne limitant en rien l'invention. La figure 1 est une vue en coupe longitudinale du dispositif. La figure 2 est une vue en coupe longitudinale du dis- positif en cours d'utilisation. Selon la figure 1, le dispositif 1 est constitué d'une enveloppe cylindrique 2 ouverte à son sommet, en carton, contenant jusqu'à une certaine hauteur le mélange 3 de poudre suivant: 14,6 % en poids de kaolinite 72,2 % en poids de talc 13,2 % en poids de glucose. Un filament 4 en spirale est noyé dans la poudre et est relié à une source de courant alternatif 5. Cette enveloppe 2 est elle-même enfoncée dans un bac 6 en matière quelconque qui contient du mélange 3 et dans lequel est enfoncé un tube à essai 7 contenant le milieu de culture 8. Le bac 6 est lui-même placé dans une étuve 9. Les conditions d'utilisation sont les suivantes: intensité 500 mA tension alternative 5 V fréquence 1 MHz Le dispositif selon l'invention offre également la possibilité de conditionner des liquides aqueux ou organiques en plaçant le liquide à proximité du dispositif. L'invention est maintenant illustrée par des exemples de réalisation effectués avec différentes sortes de bactéries. Exemple 1 La souche bactérienne est Haemophilus influenzae CNCM S2/52 sérotype b. Elle est entretenue par réensemencements successifs en milieu liquide ou solide approprié et conservée en milieu liquide glycériné, congelée à -80 C. Le milieu de culture est un bouillon Eugon tamponné à pH 7,6 avant stérilisation, supplémenté en facteurs de croissance. Le facteur V est apporté par une solution de p Nicotinamide adénine dinucléotide (Sigma) à 0,2 % (p/v) stérilisée par filtration sur membrane, ajoutée à raison de 1 % (v/v). Le facteur X est apporté par une solution d'hémoglobine (Prolabo) à 2 % (p/v), précipitée et stérilisée à l'autoclave (15 min à 120 C) ajoutée à raison de % (v/v). Le milieu liquide est stérilisé par autoclave 15 min à 120 C. Le milieu de numération est une gélose chocolat (Bio. Mérieux) additionnée du liquide d'enrichissement Polyvitex. La température des tubes est de 37 + 0,5 C. L'ensemen- cement du bouillon de préculture est réalisé à raison de 5 % dans des tubes 18 x 180 contenant 20 ml de milieu de culture. Ce volume ensemencé est ensuite partagé en deux fractions égales, de façon que lescontenusdes deux tubes participant à L'essai soient au maximum identiques. La mise en incubation est réalisée très rapidement dans l'étuve dont la température est stabilisée depuis au moins 24 h. Après 24, 48, éventuellement 72 h, 7 jours et 14 jours, 1 ml de chaque tube est prélevé pour les numérations. La numération est réalisée en surface. Le nombre est ramené au ml. L'essai a été répété 15 fois avec numération aux temps t = 0, t = 24 h, t = 48 h. Les résultats sont reportés sur les tableaux I et II. Le tableau I correspond aux valeurs moyennes obtenues en fonction du temps cpqeLLe que soit la valeur de l'inoculum; le tableau II tient compte de la valeur de L'inoculum, les diffé- rentes valeurs de celui-ci étant réparties en classes. Chaque fois, des mesures sont faites avec l'un des tubes à essai non soumis à l'action du dispositif. Tableau I: Haemophilus influenzae: nombre de germes vivants après 24 et 48 h d'incubation (moyenne de 15 essais et intervalle de confiance au risque de 5 %) L\Culture Modifiée par Normale \ Normale le dispositif Temps \ d'incubation 24 h 1,3 + 0,6.108 1,9 + 0,2.108 48 h 3,4 + 1,3.106 31,4 + 10,5.106 Tableau II: Haemophilus influenzae:nombre de germes vivants après 24 et 48 h d'in- cubation en atmosphère normale et modifiée selon l'importance de l'ino- culum .. Temps d'incu- 24 h 48 h \ bation. \tion Culture Germes au t=0 normale modifiée normale modifiée x 106 x 108 x 108 x 106 x 106 0,87 1,2 1,63 3,60 15,00 1,15 1,25 1,54 3,70 14,50 1,42 1,16 1,58 4,00 16,00 1,50 1,40 2,80 0,69 23,00 1,65 1,20 1,65 3,10 13,00 2,44 0,50 1,84 1,18 18,00 3,23 0,63 2,14 1,13 21,00 4 0,76 1,60 0,82 17,00 4,43 0,79 1,90 8,60 63,00 4,9 1,60 2,40 6,50 52,00 6,2 4,90 2,50 0,60 13,00 6,6 0,32 1,40 3,40 52,00 8,6 1,55 1,80 4,50 55,00 12,6 0,52 1,60 2,70 46,00 14 1,70 2,10 6,50 52,00 Exemple 2 La souche bactérienne est Listeria monocytogènes CNCM 6089 sérotype 4. Le traitement de cette souche est identique à celui de l'exemple 1,mis à part le fait que le bouillon Eugon est tamponné à pH 7,2 avant stérilisation et que le milieu de numération est une gélose caséine soja (Merck) additionnée de glucose à raison de % (p/v). La numération est en outre réalisée en profondeur. Les résultats sont indiqués dans le tableau III ci-après. Tableau III: Listeria monocytogenes: nombre de germes vivants après 24, 48 et 72 h d'incubation en atmosphère normale et modifiée (moyenne de trois essais sur 3 tubes et intervalle de con- fiance au risque de 5 %) emps d'in- 24 h 48 h 72 h cubation Essai Culture n normale modifiée normale modifiée normale modifiée I 1,25.109 1,30.109 1,2.108 4,8.108 0,40.106 88.106 II 0,40.109 1,20.109 0,2.108 2,0.108 0,87.106 35.106 III 0,70.109 1,25.109 1,9.108 4,2.108 1,12.106 10,3.106 moyenne 0,79.109 1,25.109 1,09.108 3,708 0,80.106 15.106 intervalle 9 9 8 8 6 6 de con- 0,40.10 0,06.10 0,70.10 1,3.10 0,33.10 32.10 fiance (5 %) Exemple 3 La souche bactérienne est Escherichia Coli CNCM 54127. Le traitement de la souche est identique à celui de l'exemple 1,mis à part le fait que le bouillon est le Trypticase Soja (Bio. Mérieux) pour les précultures et un bouillon Protéose-peptone n 3 (Difco) pour les cultures et que le milieu de numération est une gélose caséine soja (Merck) additionnée de glucose à raison de 5 % (p/v). La numération est réalisée en profondeur. Les résultats sont réunis dans le tableau IV ci-après. Tableau IV: Escherichia Coli: nombre de germes vivants après 24, 72 h, 7 et 14 jours d'incubation en atmosphère normale et modifiée (moyenne de 3 essais sur 2 tubes et intervalle de confiance au risque de 5 %). Temps d'in- cTamps d'in- 24 h 72 h 7 jours 14 jours _ I r utr culture culture culture culture Essai n normale modifiée normale modifiée normale modifiée normale modifiée I 1,6.109 2,2.10 0,8.109 0,6.109 1,1.108 2,7.108 2.107 4,7.107 II 2,1.109 2,3.109 0,7.10 0,7.109 0,8.108 3,2.108 0,7.107 8,5.107 III 0,99.109 0,9.109 0,7.109 0,5.109 0,9.108 5,6.108 3,3.107 9.107 moyenne 1,5.109 1,8.109 0,7.109 0,6.109 0,98.108 3,8.108 2.107 7,4.107 intervalle de 09 9 confiance 0,6.10 0,7.10 0,1.10 0,2.109 0,3.108 1,6.108 2.107 3,5.10 ( = 5 %) NS NS p R E V E N D I C A T I 0 N S 1. Dispositif (1) constitué d'un mélange (3) homogène d'une matière cristalline minérale en poudre formée de couches octaédriques et/ou tétraédriques et d'un matériau organique amorphe (non cristallin), ledit mélange étant enfermé dans une enveloppe inerte (2) et L'ensemble étant relié à une source d'énergie (5). 2. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que la matière cristalline minérale est un phyllosilicate. 3. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que le matériau est un hydrate de carbone. 4. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'enveloppe inerte est constituée de carton, d'une feuille de matière plastique ou de bois. 5. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'ensemble est relié à une source d'énergie électrique. 6. Dispositif selon la revendication 5, caractérisé en ce que la source d'énergie électrique est constituée par un filament (4) noyé dans le mélange (3) relié à une source de courant alter- natif (5) ou continu. 7. Dispositif selon La revendication 6, caractérisé en ce que l'intensité du courant est comprise entre 0,1 mA et 10 A, la tension entre 0,1 et 100 V et, dans le cas du courant alternatif, la fréquence entre 0,1 Hz et 2.109 Hz. 8. Utilisation d'un dispositif selon l'une des revendications précédentes pour améliorer le métabolisme bactérien, caractérisée en ce qu'on met ledit dispositif à proximité d'un milieu de culture.