Brevet FR2580175A1 — publié le 19861017

La présente invention a pour objet un procédé pour activer la réparation des os et/ou des tendons chez l'homme et les autres animaux à sang chaud par l'utili- sation d'urogastrone, et l'utilisation d'urogastrone pour la préparation d'un médicament destiné à stimuler la répa- ration des os et/ou des tendons. L'urogastrone est un polypeptide à chaîne sim- ple de 53 résidus, d'environ 6000 daltons, répondant à la formule suivante: H-Asn-Ser-Asp-Ser-Glu-Cys-Pro-Leu-Ser-His-Asp-Gly - i -Tyr-Met-Cys-Val-Gly-Asp-His-Leu-Cys-Tyr- Ile-Glu-Ala-Leu-Asp-Lys-Tyr-Ala-Cys-l -Tyr-Gly-Val-Val-Cys-Asnr !5 IleGly-Glu-Arg-Cys-Gln-Tyr o.0 HO-Arg--Leu-Glu-Trp-Trp-Lys-Leu-Asp-Arg L'urogastrone a été isolée,à l'origine,de l'urine humaine et est décrite et revendiquée dans le brevet britannique de la Demanderesse n 1 394 846. La structure de l'urogastrone a été élucidée en premier par H. Gregory et Collaborateurs en 1975 [(Nature, 257,325 (19753. On sait que l'urogastrone inhibe la sécrétion acide de l'estomac lorsqu'elle est administrée par voie parentérale, mais la présente invention est basée sur la découverte que l'urogastrone stimulé la réparation des os et/ou des tendons. Cela est particulièrement intéressant, les os et les tendons se consolidant lentement en raison de leur faible vascularisation. Bien que la structure de l'urogastrone ait été publiée depuis déjà 1975, aucune recherche n'a été publiée dans la littérature, sur l'uti- lité de l'urogastrone pour stimuler la cicatrisation de ces blessures et les essais in vivo décrits ci-après cons- tituent la première mise en évidence de cette utilité pour la réparation des tendons. En outre, l'urogastrone propre- ment dite étant un produit naturel d'origine humaine, les problèmes potentiels d'immunogénicité inhérents aux ma- tières qui ne sont pas d'origine humaine sont minimisés. Ainsi, conformément à l'un des aspects de la présente invention, il est proposé un procédé pour stimu- ler la réparation des os et/ou des tendons chez un animal à sang chaud, qui consiste à administrer-par voie topique ou parentérale à cet animal une quantité efficace d'urogas- trone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine, comme défini ci-après. Conformément à un autre aspect de la présente invention, l'utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine est proposée pour la pré- paration d'un médicament adapté à l'administration topique ou parentérale et destiné à stimuler la réparation des os et/ou des tendons. Conformément à un autre aspect de la présente invention, l'utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine, telle qu'elle est définie ci-après, est proposée pour stimuler la réparation des os et/ou des tendons. Conformément à un autre aspect de la présente invention, il est proposé un agent pour stimuler la répa- ration des os et/ou des tendons, qui comprend comme ingré- dient actif de l'urogastrone humaine ou un fragment d'uro- gastrone humaine. La présente invention est particulièrement intéressante pour stimuler la consolidation de lésions des os et/ou des tendons,provoquées par un accident ou par intention plutôt que par une maladie ou un mau- vais fonctionnement physique, et comprend par exnmple les greffes de tendons. L'expression "urogastrone humaine ou fragment d'urogastrone humaine",telle qu'utilisée dans le présent mé- moire, concerne de préférence l'hormone polypeptidique dé- crite par H.Gregory dans Nature, 257, 325-327 (1975). Cepen- dant, lorsque cela est sounaitable, un fragment d'urogas- trone capable de stimuler la guérison des blessures men- tionnées ci-dessus peut être utilisé. Ce fragment peut être par exemple un polypeptide comprenant seulement les acides aminés 1 à 46, 1 à 47, 1 à 48, 1 à 49, 1 à 50, 1 à 51 ou 1 à 52.Il faut noter que les références faites dans le présent mémoire à l'urogastrone ou un fragment d'urogastrone comprennent des polypeptides qui portent un substituant méthionine ou formylméthionine en position N-terminale, de même que des polypeptides qui portent une séquence peptidique possédant jusqu'à 12 résidus d'acide aminé en position N-terminale, séquence qui peut être à son tour précédée par la méthioni- ne ou la formylméthionine, sous réserve que le nombre total de résidus d'acide aminé précédant l'azote terminal ne soit pas supérieur à 12. La présente invention s'applique aux animaux à sang chaud, non seulement à l'homme mais aussi, par exemple,aux animaux domestiques, comme les chats et les chiens, et les animaux d'élevage, comme le bétail et les chevaux. L'urogastrone humaine ou le fragment d'urogas- trone humaine tel que défini dans le présent mémoire est administré de préférence par voie parentérale, par exem- ple dans la circulation générale ou à l'endroit de la blessure ou non loin de celle-ci. Lorsque cela est sou- haitable, l'urogastrone humaine ou le fragment d'urogas- trone humaine peut également être administré sous forme d'implant à libération lente. Lorsque l'urogastrone hu- maine ou le fragment d'urogastrone humaine est appliqué localement, cette application est généralement effectuée à l'endroit de la blessure au cours d'une intervention chirurgicale. La présente invention présente un intérêt particulier pour la stimulation de la réparation des tendons chez l'homme et les autres animaux à sang chaud comme les animaux domestiques, par exemple le chat et le chien, de même que les chevaux chez lesquels l'urogastrone stimule la guérison de la tendinite équine provenant par exemple de la déchirure des tendons. L'utilisation d'urogas- trone pour la réparation des tendons est particulièrement avantageuse en ce qui concerne la manière par laquelle la consolidation est stimulée. L'utilisation d'urogastrone accroit la différenciation, aide le tendon à jouer son rôle de mobilisation par glissement des articulations, et stimule la régénération de l'architecture originelle du tendon et des tissus environnants. L'utilité de l'urogas- trone pour stimuler la réparation des tendons est illus- trée par les essais décrits ci-après, dans lesquels la ci- catrisation de tendons d'Achille de rats est stimulée par l'utilisation d'urogastrone. Dans ces essais l'effet de l'urogastrone a été le plus prononcé au cours des cinq pre- miers jours suivant l'opération, l'augmentation de la teneur en collagène des lésions traitées à l'urogastrone comparativement à des témoins traités avec une solution physiologique de sel étant particulièrement prononcée. Les teneurs en ADN des lésions témoins et des lésions traitées à l'urogastrone ont atteint toutes deux leur maximum neuf jours après l'opération, tandis que l'effet activant que l'urogastrone exerce sur ce paramètre a pratiquement disparu au bout de quinze jours. Les animaux maintenus pendant trente jours sous traitement à l'urogastrone ont continué à mon- trer une augmentation de la teneur en collagène des lésions bien que le poids sec et la teneur en ADN aient diminué après quinze jours de traitement. Les essais suggèrent que malgré le traitement prolongé à l'urogastrone, l'effet stimulant du facteur de croissance sur la teneur en cellu- les de la lésion en cours de réparation a été transitoire, tandis que l'augmentation de la teneur en collagène a été, maintenue. L'arrêt du traitement à l'urogastrone a eu pour résultat une diminution des paramètres de la lésion par rapport aux valeurs des témoins. Ainsi, le poids sec et la teneur en cellules(telle que mesurée par la teneur en ADN) du tissu cicatriciel prolifératif ont culminé dans les tissus traités à l'urogastrone et dans les témoins au bout de 9 jours, tandis que la synthèse du collagène a continué à augmenter pendant 15 jours chez les tendons traités comme chez les tendons témoins, montrant ainsi que la cicatrice paraît évoluer de manière naturelle. Le procédé de la présente invention est de pré- férence mis en oeuvre en administrant par voie parenté- rale ou topique de l'urogastrone humaine ou un fragment d'urogastrone humaine ou une composition pharmaceutique ou vétérinaire comprenant de l'urogastrone humaine ou un fragment d'urogastrone humaine comme ingrédient actif, associé à un support ou excipient physiologiquement com- patible. L'urogastrone peut être formulée en une com- position pharmaceutique ou vétérinaire par n'importe quel procédé classique. L'urogastrone est avantageusement l'unique facteur de croissance présent dans la composition. Les compositions peuvent être présentées sous une forme convenant à l'administration parentérale, par exemple en ampoules ou en flacons. Ainsi, pour l'administration par voie parentérale, l'urogastrone humaine ou le fragment d'urogastrone humaine tel que défini dans le présent mé- moire est de préférence formulé en solution isotonique, par exemple dans une solution de d-glucose ou une solu- tion physiologique de sel. Lorsque l'urogastrone humaine ou le fragment d'urogastrone humaine est appliqué locale- ment à l'endroit de la blessure au cours de l'opération chirurgicale, la composition utilisée peut être formulée avec n 'importe quel support convenable, tel qu'une solution physiologique de sel. Les compositions destinées à l'uti- lisation dans la présente invention peuvent lorsque cela est souhaitable comprendre des adjuvants, comme par exem- ple des antiseptiques ou des agents antimicrobiens. Lorsque la composition est présente sous une forme convenant à l'administration parentérale, elle peut être présentée sous une forme posologique unitaire, chaque unité de posologie contenant de préférence 1 gg à 10 mg, notamment 25 gg à 1 mg d'urogastrone humaine ou de frag- ment d'urogastrone humaine. Comme mentionné ci-dessus, le procédé d'admi- nistration préféré s'applique au lieu de la blessure ou de la lésion ou à proximité immédiate de celle-ci. En ce qui concerne l'administration parentérale, il peut être pré- férable de délivrer la formulation parentérale en un lieu suffisamment proche de la blessure afin de permettre au fragment d'urogastrone humaine de passer jusqu'au lieu de la blessure, tout en ne délivrant pas l'urogastrone hu- maine ou le fragment d'urogastrone humaine directement au lieu de la blessure proprement dit. L'administration pério- dique ou continue peut se révéler avantageuse, l'urogastro- ne étant utilisée par les cellules dont la croissance est stimulée. Lorsque cette administration est effectuée par voie topique, chaque individu, que ce soit l'homme ou un autre animal à sang chaud, reçoit normalement une dose d'urogastrone de 0,1 à 100 gg/kg. Un intervalle de posolo- gie préféré va de 1 à 100 gg /kg. Lorsque cette adminis- tration est effectuée par voie parentérale, chaque indivi- du, que ce soit l'homme ou un autre animal à sang chaud, reçoit normalement une dose d'urogastrone de 0,1 à 100 "g/ kg/jour. Un intervalle de posologie préféré va de 1 à 100 gg/kg/jour. La composition peut, par exemple,être adminis- trée 1 à 4 fois par jour, de préférence une ou deux fois par jour. La composition pharmaceutique ou vétérinaire comprenant de l'urogastrone comme ingrédient actif suit commodément les indications écrites ou publiées concernant l'utilisation de la composition ou du médicament destiné à stimuler la réparation des os et/ou des tendons. Les in- dications fixent par exemple la posologie, le procédé d'administration le plus avantageux et toutes les condi- tions dans lesquelles l'utilisation de la composition peut être contre-indiquée. La présente invention est illustrée par l'exem- ple de la stimulation de la cicatrisation qui s'est pro- duite après administration d'urogastrone de recombinaison à des rats après la section transversale simple de leurs tendons d'Achille. Les résultats présentés dans le tableau i et la figure 1 ci-après montrent que pendant les cinq premiers jours suivant l'intervention chirurgicale, l'urogastrone administrée pe du lieu de la lésion chirurgicale a provoqué une augmentation prononcée du poids sec du tissu cicatriciel et des teneurs tant en ADN qu'en collagène, comparativement aux témoins auxquels a été injectée une solution physiologique de sel. La teneur en collagène a été augmentée de 61 %, celle de l'ADN de 20 % et le poids sec a été augmenté de 38 %, toutes ces augmentations étant haute- ment significatives du point de vue statistique. Quinze jours après l'intervention chirurgicale, l'effet cumulatif de l'urogastrone a été moins marqué, les augmentations du poids sec et du collagène par rapport aux témoins auxquels a été injectée une solution physiologique de sel étant descendues respectivement à 24 % et 28 %. Lâugmentation apparente de la teneur en ADN des lésions traitées à l'urogastrone au quinzième jour (8%) n'était pas significativement différente de la valeur des témoins. Lorsque l'urogastrone a été injectée deux fois par jour à proximité du tendon non opéré de la patte opposée, cela n'a eu qu'un effet faible ou nul pendant toute la durée du traitement, éventuellement à l'exception d'une augmen- tation de teneur en ADN au bout de neuf jours de traite- ment. Dans une deuxième expérience, la durée des traite- ments biquotidiens à l'urogastrone a été portée à trente jours après l'intervention chirurgicale. Une autre groupe d'animaux a été traité seulement pendant quinze jours après l'opération chirurgicale et a été laissé sans autre traitement à l'urogastrone jusqu'au sacrifice quinze jours plus tard. Les résultats présentés dans le tableau II et'la figure 2 montrent que chez les animaux maintenus pendant 30 jours sous urogastrone, le poids sec et la teneur en collagène de la lésion réparée étaient respectivement supérieurs de 19 % et 27 % aux valeurs correspondantes dans les lésions témoins traitées avec une solution phy- siologique de sel. Les teneurs en ADN des lésions traitées l'urogastrone et des liaisons traitées avec une solution physiologique de sel ont été pratiquement identiques. Les augmen- tations des valeurs concernant les lésions observées au bout de quinze jours de traitement à l'urogastrone ont été simi- laires à celles de la première expérience. Lorsque l'ad- ministration d'urogastrone a été arrêtée au bout de quinze jours et que les animaux ont été maintenus sans traitement pendant quinze jours de plus, il a été découvert que le poids sec et la teneur en collagène des cicatrices ne pou- vaient plus être différenciés de ceux des animaux non trai- tés pendant toute la durée de l'expérience. Sur les dessins annexés: la figure 1 représente graphiquement les ef- fets de l'urogastrone de recombinaison sur la cicatrisation des lésions des tendons, les résultats étant portés dans le tableau I, et étant exprimés en pourcentages d'augmentation par rapport à des témoins traités avec une solution physio- logique de sel (axe Y) en fonction du nombre de jours après l'intervention chirurgicale (axe X). La figure 1 représente donc graphiquement le pourcentage d'augmentation de D par rapport à C pour chacun des paramètres mesurés, présentés en détail dans le tableau I, au bout de 5, 9 et jours après l'intervention chirurgicale. La figure 2 représente graphiquement les effets à long terme de l'urogastrone de recombinaison sur la cicatrisation des lésions des tendons, les résultats étant portés dans le tableau II et étant exprimés en pour- centages d'augmentation par rapport à des témoins traités avec une solution physiologique de sel (axe Y) en fonction du nombre de jours après l'intervention chirurgicale (axe X). La figure 2 représente donc graphiquement le pourcen- tage d'augmentation de C par rapport à B pour chacun des paramètres mesurés, présentés en détail dans le tableau II,au quinzième jour après l'intervention chirurgicale, et le pourcentage d'augmentation de D par rapport à B pour chacun des paramètres mesurés, présentés en détail dans le tableau II au trentième jour après l'intervention chi- rurgicale. Sur les figures 1 et 2, les colonnes repré- sentées de manières différentes ont les significations suivantes: le poids sec est représenté en blanc, la teneur en ADN est représentée par des hachures et la te- neur en collagène est représentée par des hachures croi- sées. La figure 3 représente graphiquement l'effet de l'augmentation progressive de doses d'urogastrone de recombinaison sur la cicatrisation de tendons d'Achille sectionnés chez des rats, telle que mesurée par le poids sec (en mg) du tissu cicatriciel formé au niveau du lieu d'injection 15 jours après l'intervention chirurgicale. Les doses augmentées progressivement ont été injectées deux fois par jour à proximité immédiate du tendon section- né. La figure 3 représente également (A) les poids secs correspondants (en mg) chez une patte intacte et une patte opérée auxquelles aucune quantité d'urogastrone n'a été adminis- trée, et (B) le poids sec correspondant (en mg) concernant des tendons intacts auxoquels de l'urogastrone a été injectée, chez des rats non opé- rés qui avaient reçu une dose de 100 gg/kg d'urogastrone injectée deux fois par jour dans le tendon intact, au point correspondant. La figure 4 correspond à la figure 3, mais représente gra- phiquement la teneur en collagène (en mg) des lésions réparées au lieu de l'injection 15 jours après l'intervention chirurgicale, à la place du poids sec du tissu cicatriciel formé à ce niveau 15 jours après l'intervention chirurgicale. Exemple 1 Des rats Wistar mâles (240 g) ont été soumis sous anesthésie générale à une tendonotomie partielle du tendon d'Achille gauche, la peau de la petite incision a été ensuite suturée et on a laissé ensuite les animaux reve- nir à eux. De l'urogastrone humaine de recombinaison portant -11 une séquence initiale de 14 acides aminés sur l'azote terminal et un oligopeptide d'Arg additionnel sur le carbone terminal a été isolée de E. coli, ayant été préparée de la manière décrite et revendiquée dans la demande de brevet européen n 81 303 517.7 de G.D. Searle & Co Skokie, Illinois, E U -A Elle a été transformée en la chaîne normale formée de 53 acides aminés par une hydrolyse trypsique limitée (15 minutes à 37 , rapport enzyme-substrat: 1 à 1000) et purification par chroma- tographie sur carboxyméthylcellulose et Biogel P-6. Le facteur de croissance purifié (pureté d'urogastrone su- périeure à 98 %) a été dissous dans de la solution phy- - siologique de sel normale et a été injecté deux fois par jour (20 gg/kg de poids corporel, 5,0 il) au lieu de la lésion du tendon pendant le nombre de jours mentionné après l'intervention chirurgicale. Dans l'expérience 1 (tableau I) de l'urogastrone a été également injectée à la même posologie et à la même fréquence dans la région correspondante de la patte non opérée (groupe [B]), pour déterminer si le même schéma d'administration possédait un; effet quelconque sur le tendon normal. De la solution physiologique de sel normale a été injectée chez un groupe témoin d'animaux opérés (groupe [C]). Dans l'expérience 2 (tableau II)le groupe [DJ a reçu de l'urogastrone (20 gg/ kg) deux fois par jour pendant 30 jours, tandis que le groupe [C] a reçu de l'urogastrone pendant 15 jours, puis est resté 15 jours sans traitement. Au bout de cette période, le tissu cicatriciel a été prélevé depuis le point d'insertion dans le calcanéum jusqu'au point o le tendon fusionne avec la masse musculaire. Lespoids du tissu cicatriciel ont été déterminés après déshydratation et dégraissage comme décrit par Greenwald, S.E. et Berry, C.L. Cardiovasc.Res.12, 364-372 (1978). La teneur en col- lagène a été obtenue à partir de dosages d'hydroxyproline tels que décrits par Grant R.A., J.Clin.Path.17,685-686 (1964) sur le tissu après protéolyse (voir Smith,R.L., Gilberson,E.,Koliatsu,N.,Merchant,T. et Schurman, D.J., Analyst.Biochem.103, 191-200 (1980)) et digestion alcaline (voir Huzar,G., Maiocco, J. et Naftolin, F.Analyt. Biochem. , 424-439 (1980)). La teneur en ADN des produits de digestion a été déterminée en utilisant une méthode fluori- métrique sensible (comme décrite dans Hinegardner, R.T. Analyt.Biochem.39, 197-201). Les résultats sont mentionnés avec l'écarttype et ont été analysés par le test t de Student. Les chiffres.entre parenthèses donnent le nombre d'animaux utilisés dans chaque groupe. Exemple 2 Cet exemple illustre les effets de doses d'uro- gastrone augmentées progressivement sur la cicatrisation des tendons. Les rats utilisés étaient des rats Wistar mâles (240 g) et les tendons d'Achille ont été sectionnés de la manière décrite dans l'exemple 1. L'urogastrone puri- fiée utilisée a été obtenue comme dans l'exemple 1 et le poids sec et la teneur en collagène ont été mesurés de la manière décrite dans cet exemple. Des doses d'urogastrone augmentées progressive- ment ont été administrées deux fois par jour par injection à proximité immédiate du tendon d'Achille sectionné des rats. Une dose de 100 Fg d'urogastrone/kg a été injectée deux fois par jour à l'endroit correspondant dans des tendons intacts de rats non opérés. Les figure 3 et 4 représentent respectivement les poids secs et les teneurs en collagène au niveau des lieux d'injection 15 jours après l'intervention chirurgicale. Des doses de 20 gg/kg ont entrainé une augmentation statistiquement significative des poids secs des lésions réparées mais non des teneurs en collagène. Des doses de 50 et 100.g/kg ont entraîné une augmentation significative tant des poids secs que des teneurs en collagène. Les doses les plus élevées ont également entraîné une augmentation des poids secs et des teneurs en collagène. TABLEAUI Effets d'injections journalières d.'uroaastrone de recobinaison sur la cicatrisation de tendons d'Achille sectionnés chez le rat, par injection à. proximité immédiate de la lésion du tendon I Traitement Nombre de jours après l'intervention chiruraicale 9 15 I I I Le'LsionI ADS IColla?ênel LeAsionI AD; ICollagèn4 Lesion I ADN I Collagenel poids (mg)l (g I (rg) Ipoids (mg)i (4g) I (mg) IPoids (ng)l (g) I (g) I le..___ Isec Isec ITendon intact (I0)[A] I l10,8+0J,6 6 854 +3,9 1 6,0+Oj3 1 13,2+1,2 I 99,5+9,51 5,9+0,3 1 12,6+0,7 968+5,11 6,3+0,2 1 "endon intact (10) [B] 12j,7+1)6 1 94,3+8,5 1 6,1+0O3 1 141+1,2 2 124+10 1 7,0+0,5 1 11,6+1,0 i 101+6 7,0+03 3 plus uronastrone I - Ir-ar rapport lB I NS I NS I NS I NS Ip 5 43,6+3j0 538+201 13,8+0,8 42,91+2,5 514+2 15,6+0J8 I I plus sérum physiologique I I I I I I I Wendon sectionné (10l) [DI 42,9+250 1 517+12 1 11,6+0,5 61,1+2,0 653+20 1 16,8+0j9 9 53,3+2,8 I 556+23 1 20,0+0) 8 1 I.plus uroaastrone I I I I I I I I I IC p r a o I peuI I 1 I 1 i I[Ci par rapport à ID)I p I I 15 30 I I Lsion IADN I Collagenel { LsionI ADN Colage- I poids poids I sec(n) I (9 ( ec '(ng) (9g) I) I _ I. I I_ I i I Tendon intact(10)A] I 12,6+0,51 94,4+7,2 1 7,2+0j315j7+0)8 120+15 b,9+0,6 Tendon sectionné (10)[B] 1 502+ 1,21 604+3223j3+1,24718+1>3 469+28 25,2+1,1 1 Iplus sérum physiologique I de sel ITendon sectionné (o10)'[C] I 61,8+1,31 668+321 28j1+0591 50,2+ 11I397+17 28,7+1;2 Iplus urogastrone, I I I I I I 11-15 joursI I I [B] par rapport à [C]I p0001 I NS I p0>01 NS I p II.. . . I.. ..... I I - "4 Exemples de formulations Exemple A De l'urogastrone humaine purifiée préparée de la manière décrite dans l'exemple 1 est dissoute dans une solution de d-glucose à 5 % en poids/volume dépourvue de substances pyrogènes, pour obtenir une coneentration finale de 40 gg/ml. Cette solution est répartie entre des flacons en des portions aliquotes de 2,5 ml chacune à travers un dispositif de filtration par membrane stérilisante, par exemple un filtre de 0,22 mnm. Le contenu de chaque flacon est ensuite lyophilisé et les flacons sont munis d'une coiffe et obturés dans des conditions de stérilité. Les flacons contenant un mélange stérile d'urogastrone et de d-glucose sont entreposés à 4 C. Exemple B On ajoute à un flacon préparé de la manière dé- crite dans l'exemple A 2,5 ml d'eau stérile immédiatement avant l'utilisation pour obtenir une solution injectable stérile à 40 Lg/ml d'urogastrone dans une solution de d- glucose à 5 % en poids/volume. Exemple C De l'urogastrone humaine purifiée préparée de la manière décrite dans l'exemple 1 a été dissoute dans de l'eau dépourvue de substances pyrogènes (50 ml) et la solution a été filtrée à travers un dispositif de filtra- tion par membrane stérilisante, par exemple un filtre de 0,22 mm, dans des -ampoules de sorte que chaque ampoule reçoive 0,5 ml. Le contenu de chaque apoule est ensuite lyophilisé et les ampoules sont obturées dans des condi- tions de stérilité. Les ampoules contenant chacune 100 g d'urogastrone, ont été maintenues à -20 C. Exemple D Le contenu d'une ampoule préparée comme dans l'exemple C a été dissous dans une solution de d-glucose à 5 % en poids/volume pour obtenir une solution contenant à 50 gg/ml d'urogastrone. En variante, la solution de d-glucose à 5 % en poids/volume peut être remplacée par une solution de sérum physiologique isotonique. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine pour la préparation d'un médicament destiné à l'administration topique ou paren- térale afin de stimuler la réparation des os et/ou des tendons. 2. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine suivant la revendication 1 pour la préparation d'un médicament, destiné à l'admi- nistration parentérale. 3. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine suivant la revendication 2, caractérisée en ce que le médicament est sous une forme posologique unitaire et chaque unité de posologie contient 1 gg à 10 mg d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'uro- gastrone humaine. 4. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine suivant la revendication 3, caractérisée en ce que chaque unité de posologie contient 25 Fg à 1 mg d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'uro- gastrone humaine. 5. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine telle que définie dans la revendication 1 pour la préparation d'un médicament des- tiné à l'administration à l'endroit d'une blessure. 6. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine pour stimuler la réparation des os et/ou des tendons. 7. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine suivant la revendication 1, caractérisée en ce que l'urogastrone humaine ou un frag- ment d'urogastrone humaine est sous forme d'un médicament destiné à l'administration parentérale ou l'administration topique. 8. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine suivant la revendication 7, caractérisée en ce que l'urogastrone humaine ou le frag- ment d'urogastrone humaine est sous forme d'un médicament présenté en une forme posologique unitaire adaptée à l'ad- ministration parentérale, et en ce que chaque unité de posologie contient 1 gg à 10 mg de ladite uro- gastrone ou dudit fragment d'urogastrone. 9. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine suivant la revendication 8, caractérisée en ce que chaque unité de posologie contient gg à 1 mg d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'uro- gastrone. 10. Utilisation d'urogastrone humaine ou d'un fragment d'urogastrone humaine suivant l'une quelconque des revendications 6 à 9 pour le traitement de la tendinite équine.