Brevet FR2581310A1 — publié le 19861107

Composition thérapeutique comportant de L'acide a-Linolénique et un composé susceptible de favoriser Le passage de l'acide au travers de la membrane cellulaire et extrait de plantes comprenant l'acide et le composé. L'invention concerne le domaine des médicaments, notamment anti-inflammatoires. Elle a pour objet une composition thérapeutique caractérisée en ce qu'elle comporte, en tant que principe actif, au moins de l'acide a- linolénique et au moins un composé susceptible de favoriser le passage de l'acide au travers de la membrane cellulaire, en association avec un excipient physiologiquement acceptable. ELle a également pour objet les extraits de plantes comportant le principe actif. L'acide a-linolénique n'a pas d'activité thérapeutique seul. Selon la présente invention, il a été trouvé que le principe actif décrit ci-dessus présentait des propriétés thérapeu- tiques, notamment anti-inflammatoires, parfaitement inattendues. Parmi les composés susceptibles de favoriser le passage de l'acide clinoLénique au travers de la membrane cellulaire, on peut citer les alcools d'origine végétale comme les tocophérols (ct-, À-, y-, 6-) ou les sitostérols comme le g-sitostérol. Outreces deux types de produits, le principe actif peut comporter d'autres composés et, notamment, des acides gras en C16 et C18 comme l'acide palmitique, l'acide stéarique, l'acide oléique, l'acide linoléique. Cette présence résulte d'ailleurs souvent du procédé d'obtention du principe actif comme cela sera compris ci-après. Ainsi, de préférence, le principe actif aura la composition suivante en pourcentage pondéraI: acide c-linolénique 10-80 et de préférence 15-60 composé 10-80 et de préférence 15-60 acide gras en C16 et C18 0-65 et de préférence 15-55 autres que l'acide a-linolénique Le principe actif est de préférence un extrait aqueux ou organique de plantes qui renferment de l'acide a-linolénique et 2581310- un composé susceptible de favoriser le passage de l'acide au travers de la membrane cellulaire. On appelle extrait aqueux ou organique le produit qui résulte de l'action d'un solvant aqueux ou organique sur un broyat de plantes. Il s'agit donc de l'extraction des produits solubles ou miscibles dans ces solvants. Parmi les plantes convenant pour la présente invention, on préférera celles de la famille des résédacées comme les réséda lutéa, luteola, glauca L, suffruticosa ou alba, Jacquini Rehb, odorata, complicata bory, phyteuma. On peut utiliser les plantes entières récoltées en fleurs ou en fruits ou des graines. On les sèche ensuite à l'abri de la lumière sous courant d'air. L'extrait aqueux résulte avantageusement de l'épuise- ment par de l'eau d'un broyat de plantes ou de graines puis de la récupération par un moyen approprié du soluté sec. Comme moyen approprié, on pourra utiliser la lyophili- sation ou la nébulisation (après addition pour cette dernière d'un viscosifiant ou adsorbant tel que l'hydroxy-propyl-methyl-cellulose (HPIiMC)), l'acide silicique. On peut également extraire la solution aqueuse o btenue par un solvant organique puis concentrer la phase organique et terminer éventuellement par un fractionnement chro- matographiquede celle-ci. De manière avantageuse, le fractionnement sera tel qu'il permettra de récupérer les fractions contenant les acides gras. De manière préférée, l'extrait aqueux résultera d'un fractionnementchromatographique solide-liquide, l'éluant - étant un mélange benzène-méthanol dans une proportion 50/50 et le support étant de la silice, l'élution étant effectuée par fraction de 10 ml et de la récupération des fractions comprises entre la quarante-troisième et la soixantième. L'extrait organique résulte de l'épuisement par un solvant organique tel que l'éther, l'hexane, le méthanol d'un broyat de plantes ou de graines puis de la récupération par évaporation du soluté sec. Comme solvant, on préférera toutefois l'éther, l'hexane ou l'éther de pétrole. Il faut souligner que tous Les extraits de plantes sont nouveaux et le déposant les revendique à titre de produits nouveaux caractérisés par Leur procédé d'obtention comme indiqué aux revendications 11 à 19. Les compositions thérapeutiques selon l'invention se sont révéLées utiles en tant qu'anti-inflammatoire- antihistaminique- antihémorro;daire -antivariqueux -anticoagulant - vasoconstricteur.ou antisporiasique. La concentration de l'extrait dans te produit fini est avantageusement comprise entre 10 et 25% en poids pour l'extrait aqueux et 2 à 12 X pour l'extrait organique. L'administration peut être effectuée par voie locale: pommade, crème, spray, lotion, gel ou par voie intradermique: ampoules ou à l'aide d'excipients classiques ou par voie générale: capsules, gouttes buvables. L'invention est maintenant illustrée par des exemples particuliers de réalisation non limitatifs. Obtention des extraits Exemple 1: Obtention de l'extrait aqueux La plante est pulvérisée jusqu'à obtention d'une poudre assez grossière avec un broyeur type à galets. La poudre obtenue est épuisée par 8 fois son poids d'eau distillée à une tempé- rature de 70 C pendant 8 h sous agitation mécanique. L'extrait obtenu après filtration et expression du marc est séché par nébulisation ou lyophilisation. La nébulisation est effectuée après addition d'hydroxy- propyl-méthyl-cellulose (HPMC). Exemple 2: Obtention de l'extrait aqueux (2e méthode) L'extrait aqueux de l'exemple 1 est précipité avec de l'éthanol à 95 . On obtient ainsi un mélange de corps gras. Exemple 3: Obtention de l'extrait aqueux (3e méthode) A partir de la phase aqueuse obtenue selon l'exemple 1, au lieu de lyophiliser o.l nébuliser, on extrait le soluté par de l'éther dans une ampoule à décanter. On concentre sous pression réduite la phase éthérée jusqu'à l'obtention d'une huile verte. Cet extrait est fractionné ensuite sur colonne de silice avec comme éluant un mélange de benzène et de méthanol dans les proportions 50/50. On recueille des fractions de 10 ml. A partir de la 45e fraction, la solution ne contient plus que des acides gras, jusqu'à la soixantième. On réunit de 45 à 60. Exemple 4: Obtention de l'extrait éthéré L'opération a été réalisée sur la plante entière ou sur les graines. - 1 kg de plante est épuisé par macération sous agi- tation mécanique pendant 48 h à température ambiante par 6 l de solvant organique (éther, éther de pétrole et surtout hexane) - Après filtration sur papier, la solution obtenue est concentrée sous pression réduite jusqu'à obtention d'un extrait huileux que l'on sèche sous courant d'azote. L'extrait éthéré a la composition chimique suivante (en pourcentage pondérai), à 10 % d'erreur près: - dL o-tocophérol 18 - 3-sitostérol 18 acide palmitique 13,5 - acide stéarique 1 - acide oléique 8 - acide linoléique- 10 - acide a-linolénique 31,5 NB: la conservation de cet extrait doit se faire à l'abri de la lumière et au frais. Exemple 5: Obtention de l'extrait alcoolisé L'opération est réalisée dans les mêmes conditions que pour l'exemple 4, mais en prenant comme solvant le méthanol. Propriétés pharmacologiques L'activité anti-inflammatoire des extraits obtenus selon les exemples 1 à 5 a été évaluée par comparaison avec un témoin chez le rat Wistar et avec l'indométacine anti-inflammatoire puissant par le pourcentage de diminution de l'enflure de la patte postérieure, pro- voquée par un agent phlogogène: la carragénine. Les résultats sont réunis dans le tableau I de la page suivante. TABLEAU I Pourcentage de diminution de l'enflure après 2 h 3 h 4 h 5 h Témoins 33, 70 34,40 24,02 29,45 Indométacine 38,60 71,62 40,42 32,8 mg/kg Exemple I 36 54,55 31,37 - mg/kg 49,73 41,22 22,47 7,83 Exemple 2 42,83 41,42 27,40 12,40 Exemple 3 48,24 55,80 46,46 43,76 Exemple 4 53,41 70 54,70 41,08 mg/kg Exemple 5 24,37 16,17 - - etQ correspondent à deux lots de rats différents. TOXICITE A/ Toxicité aiguë Déterminée chez le rat mâle de souche Wistar et la souris mâLe de souche Swiss selon deux voies d'administration: per os, intrapéritonéale. DL50 rat per os: DL50 supérieure à 5 g/kg IP: DL50 supérieure à 2 g/kg DL50 souris per os: DL50 supérieure à 5 g/kg IP: DL50 supérieure à 2 g/kg / Tolérance locale du nébulisat et de l'extrait éthéré sous forme de crème à 10%. La tolérance locale de la crème a été réalisée chez le lapin Fauve de Bourgogne par administration cutanée réitérée de 2 g/kg de crème pendant 4 semaines sur le flanc de l'animal préalablement rasé sur une surface de 80 cm. Le traitement n'a pas influencé l'évolution pondérale de nos animaux. La consommation de nourriture et d'eau de boisson a été identique chez les animaux témoins et animaux traités. La repousse des poils s'est effectuée normalement. L'examen des téguments a montré une peau lisse et extrêmement souple. A l'autopsie, l'examen et la pesée des organes suivants: foie, rate, reins, testicules, surrénales, coeur, thyroïde, hypophyse n'ontpas révélé de signe de toxicité. Aucune différence n'est apparue entre animaux témoins et animaux traités. L'examen minutieux de la muqueuse gastrique et duodénale n'a révélé aucune anomalie. Résultats cliniques Les tests ont été effectués avec l'extrait de l'exemple 1 sous forme d'une crème à 10% en poids d'extrait organique. Les résultats consignés dans le tableau II de la page suivante et relevés par des médecins sont très satisfaisants sur les hémorroïdes externes ou internes, accompagnées ou non de prurit ou de légères fissures, sur les varices, sur les piqûres d'insectes. Le produit est en outre un excellent adoucissant de la peau. TABLEAU II Sexe Age Diagnostic Résultats Tolérance Temps Durée Médecin Malade latence M 36 Thrombose avec B B B 2 j 15 j oedème externe M 75 Prurit anal B B B 2 8 M 78 Anite chez un Moyen Moyen B 10 10 diarrhéique M 48 Thrombose B B B 1 8 avec oedème F 43 Crise Non revue hémorroidaire M 50 Anite avec B B B 2 15 sang-douleur F 59 Fissure super- B B B 5 15 ficielle- douloureuse F 75 Hémorroides Moyen Moyen + mycose péri- r anale Un F 62 Anite avec sang B B B 3 15 W o TABLEAU II (suite) Sexe Age Diagnostic Résultats Tolérance Temps Durée Médecin Malade latence F 57 Brûlures anales B B B Utilisation chroniques occasionnelle M 36 Hémorroides B B B Immédiat 10 internes M 51 Prurit anal + B B B 2 15 hémorroides M 36 Anite + Prurit Moyen Moyen M 49 Inflammation B B B 2 8 hémorroidaire + prurit post- B B B 2 15 opératoire F 59 Douleur + B B B 15 inflammation après sclérose N> oL CD REV E N D I C A T I ONS Composition thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle tant que principe actif, au moins de l'acide a-linolé- moins un composé susceptible de favoriser le passage u travers de la membrane cellulaire, en association pient physiologiquement acceptable. Composition thérapeutique selon la revendication 1, e en ce que le composé est choisi parmi les tocophérols stérols seuls ou en mélange. Composition thérapeutique selon la revendication 1, e en ce qu'elle comporte d'autres acides gras en C16 et C18. Composition thérapeutique selon l'une des revendica- caractérisée en ce que le principe actif comprend en pondérai: acide alinolénique 10 à 80 composé 10 à 80 acides gras en C16 et C18 0 à 65 autres que l'acide a-linolénique Composition thérapeutique selon la revendication 4, ée en ce que le principe actif est un extrait aqueux ou de plantes qui renferment de l'acide a-linolénique et un Jsceptible de favoriser le passage de l'acide au travers de ie cellulaire. Composition thérapeutique selon la revendication 5, sée en ce que les plantes sont de la famille des résédacées. Composition thérapeutique selon l'une des revendica- ju 6, caractérisée en ce que l'extrait organique résulte de lent par un solvant organique d'un broyat de plantes ou de Duis de la récupération, par évaporation, du soluté sec. Extrait de plantes aqueux ou organique qui renferment de c-linolénique et un composé susceptible de favoriser le de l'acide au travers de la membrane cellulaire. Extrait de plantes selon la revendication 8, carac- n ce que les plantes sont de la famille des résédacées. 10. Extrait de plantes selon l'une des revendications 8 ou 9, caractérisé en ce qu'il résulte de l'épuisement par un solvant organique d'un broyat de plantes (entières récoltées.en fleurs et/ou en fruits) ou de graines puis de la récupération, par évaporation, du soluté sec. 11. Extrait de plantes aqueux ou organique selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il comporte en pourcentage pondéraI: acide alinolénique 10 à 80 composé 10 à 80 acides gras en C16 et C18 0 à 65 autres que l'acide ct-linolénique