Brevet FR2581312A1 — publié le 19861107

La nrpsente invention a pour objet une formula- tion pharmaceutique destinée en particulier à être utili- sée dans les dispensaires et les hôpitaux, caractérisée par une dose élevée de glutathion réduit. Plus particu- lièrement, un objet de l'invention est constitué par une formulation pharmaceutique, destinée en particulier à être utilisée dans les dispensaires ou les hôpitaux contenant, pour chaque dose unitaire, au moins 2,5 g de glutathion réduit, et de préférence 5 g de glutathion réduit, à utiliser comme agent protecteur à l'encontre des effets secondaires (en particulier la néphrotoxicité) provoqués par le "cis-oletine". On connaît l'emploi du cis-diamino-dichloro-pla- tine (CDDP) ou "cis-platine" en chimiothérapie antiblasti- que. On connaît de même la néphrotoxicité importante provoquée par le cis-platine au niveau des tubules rénaux. L'administration de CDDP est aussi effectuée concomitamment à une hydratation intense des malades par vole intravei- neuse, hydratation qui précède et qui suit l'injection du médicament et est souvent accompagnée du déclenchement de diurèse forcée par association avec des diurétiques. Cependant, ni une hydratation massive ni une diurèse forcée aussi. massive ne réussissent à éviter les désordres tubulaires de gravité importante consécutifs au traite- ment par le cis-platine. Il a été mis en évidence, chez l'animal traité par le cis-platine (F. Zunino, O. Tofanetti et coll., Tumori 69, 105-111, 1983) une certaine action néphrouro- tectrice de la part du glutathion réduit (GSH), relevée sur la base de quelques paramètres (azotémie, taux de créatinine, changement de poids corporel, rapport entre le poids du rein et le poids du corps). On a cependant constaté que même l'administration de doses relativement importantes de GSH (1 g/kg de poids corporel) ne permettait pas d'éviter totalement les troubles tubulaires chez le rat ou chez la souris. Par contre, on a maintenant découvert de façon inattendue que le GSH, administré à l'homme en doses élevées (supérieures à un seuil de valeur déterminé et nettement Plus élevées que cel'es utilisées pour d'autres indications) mais beaucoup moins fortes que celles théori- quement déductibles des expériences (encore insuffisantes) effectuées sur des animaux, esten mesure non seulement de protéger de façon presque totale des troubles tubu- laires provoqués par le cis-platine, mais de maintenir en même temps inaltérés les effets thérapeutiques du cis- platine lui-même. La constatation surprenante ci-dessus a en outre été effectuée sur la base de paramètres bien plus sensi- bles et précis que ceux adoptés dans l'expérimentation sur l'animal, et ceci en déterminant dans l'urine des malades le taux de deux microenzymes, l'alanine-aminopeptidase (AAP) et la N-acétyl- -glucosaminidase (NAG), qui subissent des augmentations très élevées (environ 8 à 10 fois les valeurs normales) dans le cas précis de troubles tubulaires. L'importance et la crédibilité des taux de AAP et NAG comme indices de néphrotoxicité ont été mises en évidence par de nombreux auteurs: voir par exemple B.R. Jones et coll., "Comparison of methods of evaluating nephrotoxicity of cis-platinum", Clin. Pharmacol. Ther., 1980, 557; R.L. Sherman et coll. "N-Acetyl-P -Glucosaminidase et t2-Microglobuline - Their Urinary Excretion in Patients with Renal Parenchimal Disease", Arch. Intern. Med. 143f 1183 (1983); B.R. Mayer et coll. "Increased Urinary Enzyme Excretion in Worders Exposed to Nephrotoxic Chemicals", Amer. Journ. Med. 76, 989 (1984). Par conséquent la pro- tection contre les troubles tubulaires induits par le cis- platine, au moyen de l'administration de GSH a été établie par le dosage systématique de AAP et NAG dans les urines des malades, comme rapporté ci-dessous. Cn a pris en considératior des sujets de sexe féminin affectés de néoplasie ovarienne pendant divers cycles de traitement avec le cisdiamino-dichloro-platine (CDDP) à posologie plut8t élevée (90 mg/m2 par voie intra- veineuse). On a procédé au dosage de AAP et de NAG dans les urines des malades en l'absence de traitement par GHS et en présence d'un tel traitement, effectué avant et/ou après injection de CDDP. (L'administration de GSH a été effectuée de toute fagon par voie intraveineuse). Le dosage du microenzyme alanine-aminopeptidase (AAP) a été effectué en déterminant par colorimétrie la p-nitroaniline que libère l'enzyme en question, en cata- lysant l'hydrolyse de l'alalanine-p-nitroanilide (voir J.E. Peters et coll., Clin.Chim. Acta 37, 213 (1972); K. Jung et coll., Clin. Chem. 26, 1251 (1980)). Egalement, la N-acétyl-P -glucosaminidase (NAG) a été dosée par colori- métrie, par la détermination, dans un milieu alcalin, du p-nitrophénol que libère le microenzyme à partir du p-nitrophényl-N-acétyl-P -Dglucosaminide (voir D. Marhun, Clin. Chim. Acta 73, 453 (1976); T.D. Lockwood et coll., Tox. Appl. Pharmacol. 49, 323 (1979); A.M. Gressner et coll., Clin. Chim. Acta 124, 315 (1982)). On a analysé au total 50 cycles de thérapie avec CDDP, avec les résultats résumés ci-après: A. Hydratation seule, sans traitement avec GSH: l'AAP subit une augmentation moyenne d'environ huit fois par rapport aux valeurs normales; la NAG subit une augmentation moyenne d'environ dix fois par rapport aux valeurs normales. B. Hydratation + 1 gramme (au total) de GSH administré minutes avant ou après l'injection de cIs-platine: on n'observe aucune action protectrice; le taux des enzymes urinaires AAP et NAG est pratiquement identique à celui présenté par le groupe A. C. Hydratation + 2 grammes (au total) de GSH administré à raison de 1 gramme 15 minutes avant et de 1 gramme 15 minutes après l'injection de cis-platine: on observe une action protectrice assez évidente, puisque le dosage des deux microenzymes révèle une augmentation moyenne de AAP de cinq fois par rapport au niveau normal, et de NAG de sept fois par rapport au niveau normal. D. Hydratation + 2,5 grammes (au total) de GSH, admi- nistré également dans ce cas pour moitié 15 minutes avant et pour moitié 15 minutes après l'injection de cis-platine: la protection est plus grande que dans le cas de C), les taux de AAP et de NAG augmen- tant en moyenne de trois fois et respectivement de trois-quatre fois par rapport aux valeurs normales. E. Hydratation + 5 grammes (au total) de GSH, adminis- tré selon les critères ci-dessus: le taux moyen.. des deux microenzymes est d'environ le double par rapport à la normale, ce qui démontre une protec- tion presque complète des malades. Il est opportun de souligner, comme on l'a déjà dit précédemment, que même dans le groupe E (et a fortiori dans les précédents), les effets thérapeutiques de l'administration de cis-platine restent inaltérés. Etant donné ce qui précède, on peut tirer les conclusion suivantes: a) l'administration de 1 gramme de GSH est sensiblement dépourvue d'efficacité; b) en passant de 2 grammes à 2,5 grammes de GSH, on passe n seuil posologique critique, puisqu'avec une augmen- tation de 25 % de GSH, on obtient une diminution de % du taux de AAP, et directement de 50 % environ du taux de NAG; c) la dose de GSH efficace dans la protection de la néphrotoxicité induite par le cis-platine est nettement supérieure aux doses de GSH utiliséespour d'autres indications thérapeutiques; en même temps, elle est inférieure d'au moins un ordre de grandeur par rapport à celle qui, chez l'animal, exerce une protection par ailleurs encore insatisfaisante. Un aspect essentiel de l'invention est donc constitué par des compositions Pharmaceutiques, destinées en particulier à être utilisées dans les dispensaires et hipitaux, adaptées à la protection contre les effets secondaires induits par le cis-platine (en particulier la néphrotoxicité), contenant une quantité de glutathion réduit non inférieure à 2,5 grammes par dose unitaire, de préférence 5 grammes par dose unitaire, éventuellement en mI.ange avec des excipients d'emploi courant dans la technique pharmaceutique et/ou avec d'autres principes actifs. Des exemples non limitatifs de telles compositions pharmaceutiques sont les suivants. EXEMPLE 1 a) Flacons lyophilisés contenant chacun: - glutathion réduit 2,50 g éthylènediamine 0,20 ml - polyvinylpyrrolidone 40 000 (qualité du Codex) 0,125 g b) Ampoules de solvant contenant chacune: - eau pour des préparations injectables (Codex) 15 ml EXEMPLE 2 a) Flacons lyophilisés contenant chacun: - glutathion réduit 5,00 g éthylènediamine 0,40 ml - polyvinylpyrrolidone 40 000 (Codex) 0,25 g b) Ampoules de solvant contenant chacune: - eau pour des préparations injectables (Codex) 30 ml REVENDICATIONS 1. Formulation pharmaceutique à activité pro- tectrice à l'encontre des effets secondaires provoqués par le cis-Dlatine, caractérisée en ce qu'elle contient comme principe actif au moins 2,5 grammes de glutathion réduit par dose unitaire, éventuellement en mélange avec des excipients d'emploi courant dans la technique pharma- ceutique et/ou avec d'autres principes actifs. 2. Formulation selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle exerce une activité protectrice à l'encontre de la néphrotoxicité provoquée par le cis- platine. 3. Formulation selon les revendications 1 et 2, caractérisée en ce qu'elle contient 5 grammes de glu- tathion réduit par dose unitaire.