Brevet FR2572286A1 — publié le 19860502

La recherche ininterrompue d'agents pharma- cologiques qui soient efficaces contre divers états pathologiques causés par plus de trois cents types immunologiques de virus différents est une entreprise importante. Les maladies virales comptent pour à peu près % de toutes les maladies chez les êtres humains. Parmi les états pathologiques viraux pour lesquels des remèdes ont été recherchés, on compte les suivants: (a) brochiolites, bronchites, bronchopneumonies, trachéo- bronchites, croup et maladie respiratoire fébrile associée au virus Syncytial respiratoire (RSV); (b) fièvre de Lassa accompagnée d'hémorragie, de fièvre, de pharyngite, d'entérite, de myocardite, de pneumonie et, dans les cas mortels, d'un collapsus circulatoire; (c) fièvre hémorragique de Corée associée à-des arénavirus et ses manifestations cliniques comprenant une toxémie grave, un état fébrile aigu, une altération étendue des capillaires, des phénomènes hémorragiques, une symptoma- tologie grave du système nerveux central et une insuffisance rénale (néphrosonéphrite); (d) néoplasmes, tumeurs, infections et états tels que le syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA) qui est caractérisé par le développement du sarcome de Kaposi et par diverses infections; leucémies et lymphomes associés à des rétrovirus (virus tumoraux à ARN) et à des adénovirus; (e) infections virales chez des patients dont l'immunité est compromise. Comme conséquence de la morbidité et de la mortalité importantes de ces maladies à virus et du fait que les efforts visant à mettre au point un vaccin efficace n'ont pas été couronnés de succès jusqu'à présent, il apparaît qu'un agent chimiothérapeutique efficace contre ces états pathologiques est nécessaire. La recherche d'agents pharmacothérapeutiques antiviraux efficaces est en outre compliquée par l'acquisition importante par les divers virus de la résistance à des agents antiviraux autres que le 1 - -D-ribufuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxamide. La présente invention a trait à l'utilisation du 1- -D-ribofuranosyl-1,2, 4-triazole-3-carboxanide dans le traitement d'états pathologiques causés par divers virus chez l'homme. Il a été démontré que le 1--Dribofuranosyl- 1,2,4-triazole-3-carboxamide déployait une activité anti- virale à large spectre tant in vitro qu'in vivo. Ce composé peut être administré par injection, par voie orale, topiquement, par voie ophtalmique ou par des pulvérisations ou en aérosol dans les voies respiratoires. En outre, le composé peut être administré seul ou en association avec d'autres agents pharmacologiques en fonction de l'état pathologique en traitement. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique N 3 798 209, qui a été republié le 14 novembre 1978 sous le N Re 29 835, a fait connaître le 1-C-D-ribofuranosyl- 1,2,4-triazole-3-carboxamide en tant qu'agent antiviral présentant une activité antivirale à large spectre tant in vitro qu'in vivo. L'usage médical du composé pour des états pathologiques viraux particuliers a été révélé dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique N 4 211 771. On donne ci-dessous une description détaillée de l'utilisation du 1-e-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3- carboxamide seul ou conjointement avec d'autres agents pharmacologiques dans le traitement de diverses maladies virales. Aux fins de l'illustration de l'invention, le 1-g-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3carboxamide sera appelé indifféremment (a) le composé, (b) Ribavirine (désignation non protégée admise par le United States Adopted Names Council) ou (c) son nom chimique indiqué ci-dessus. Le virus syncytial respiratoire (RSV) a été isolé pour la première fois en 1956 et on a trouvé par la suite qu'il était le principal agent pathogène de l'appareil respiratore inférieur chez le nourrisson et le jeune enfant dans le monde entier (R.M. Chanock et colla- borateurs, Acute Respiratory Disease in Infancy and Childhood: Present Understanding and Prospects for Prevention. Pediatrics, volume 36, pages 21-39 (1965)). On attache un intérêt particulier, mais à titre non limitatif, à des infections chez des patients dont l'immunité est comprimise. Par exemple, des nourrissons atteints du syndrome d'immunodéficience combinée grave (SICG) sont sujets à des infections dominantes ou prolongées de la part d'un certain nombre de virus comprenant le virus RSV, le virus grippal, le virus paragrippal et d'autres virus ARN (W.R. Jarvis, et collaborateurs, Significance of Viral Infections in Severe Combined Immunodeficiency Disease, Pediatr. Infect. Dis. volume 2, pages 187-192 (1983)). Comme conséquence de la gravité potentielle de la symptomatologie, de l'apparition et de la récurrence de ces infections virales, l'importance de la découverte d'un agent chimiothérapeutique particulier pour le traite- ment de patients ainsi infectés est évidente. Cette impor- tance est encore plus mise en lumière par le fait que des efforts visant à trouver un vaccin efficace ont été jusqu'à présent voués à l'échec (L.H. Taber et collaborateurs, Ribavarin Aerosol Treatment of bronchiolitis Associated with Respiratory Syncytial Virus Infection in Infants, Pediatrics, volume 72, N 5, pages 613-618 (novembre 1983)). L'importance de la découverte d'un agent anti- viral efficace qui ne soit pas sujet au développement d'une résistance à la drogue ne peut pas être soulignée chez des patients dont l'immunité est compromise. Des patients dont le système immunitaire est compromis ou atteints d'une maladie cardiaque et/ou pulmonaire congé- nitale peuvent nécessiter des chimiothérapies fréquentes et prolongées, faisant ainsi mûrir les conditions pour le développement d'une résistance à la drogue dans le cas d'agents sensibles. Le développement de souches virales résistantes dans le traitement de diverses maladies virales avec, par exemple, le produit Acyclovir, est un problème continuel (voir W.L. Whittington et collaborateurs, Acyclovir Therapy For Genital Herpes: Enthusiasm and Caution in Equal Doses, JAMA, volume 251 N 16, 27 avril 1984). Aucune résistance à la drogue n'a été rencontrée dans le cas de la Ribavirine. Parmi les autres états pathologiques pour lesquels on recherche un traitement chimiothérapeutique, on compte la fièvre de Lassa et la fièvre hémorragique de Corée (KHF). Les arénavirus produisent des fièvres hémor- ragiques à haute mortalité, bien que des infections plus douces et subcliniques se rencontrent aussi assez commu- nément: Bien qu'elle montre moins de manifestations hémorragiques que, par exemple, la fièvre hémorragique d'Argentine et de Bolivie, la fièvre de Lassa provoque de - graves symptômes de pharyngite, d'entérite, de myocardite et de pneumonie, et dans les cas mortels, un colapsus circulatoire (F.J. Fenner et collaborateurs, Medical Viro- logy, seconde édition, pages 416-417 (1976)). L'agent responsable de la fièvre de Lassa est un arénavirus endémique des régions de l'ouest africain. Le taux global de mortalité dans le cas des malades hospitalisés atteint 15 à 20 %. Lafièvxe hémorragique de Corée, également connue sous le nom de fièvre hémorragique à syndrome rénal, de fièvre hémorragique d'Extrême-Orient, de néphrosonéphrite endémique ou épidémique, de fièvre hémorragique épidémique de Mandchourie, de fièvre de Songo et de maladie de Churilov, suggère une étiologie à arénavirus ou à bunyavirus. La fièvre hémorragique associée à la fièvre KHF est plus grave que celle que l'on observe dans la fièvre de Lassa. En outre, la fièvre KHF s'accompagne d'un syndrome rénal appelé néphrosonéphrite hémorragique. La fièvre KHF est endémique en Russie, en Chine et en Corée. La fièvre hémorra- gique à syndrome rénal (HFRS) est une maladie débili- tante et parfois mortelle chez l'homme. Comme conséquence de la morbidité et de la mortalité importantes, liées à ses états pathologiques, on recherche un agent antiviral chimiothérapeutique efficace. On sait que des virus ARN provoquent des néoplasmes malins chez de nombreuses espèces (H.L. Robinson, Rev. Infect. Dis. volume 4, pages 10151025 (1982)). Un virus ARN de ce genre, appelé virus de la leucémie des cellules T humaines (HTLV) a été associé à la prolifération maligne de lymphocytes T chez l'homme. L'identification de particules du genre HTLV chez des patients atteints du syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA) implique égale- ment ce virus dans l'étiologie du SIDA, qui est caractérisé par une immunodéficience et par le développement du sarcome de Kaposi. En outre, ces patients sont sensibles à diverses infections (M. Essex et collaborateurs, Science, volume 220, pages 859-871 (1983)). Des particules analogues au rétrovirus contenant de l'ADN polymérase dirigé par l'ARN (transcriptase réverse) ont également été isolées de cellules de la prostate chez l'homme (S.K. Arya et collaborateurs, Oncologz, volume 37, pages 129-135 (1980)). En outre, on a découvert une activité en polymérase dépendant de l'ARN dans le sarcome granulocitaire humain, le mélanome primaire humain et le tissu d'ostéosarcome humain (P. Chandra, Proc. Fed. Eur. Biochem. Soc., volume 61, pages 215-218 (1980)). Ces études suggèrent des virus ARN oncogéniques en tant qu'agents potentiels responsables de certains types de cancers en médecine humaine. La particularité qui réunit des virus ARN tumoraux (rétrovirus) et qui les distingue de tous les autres virus animaux est la trancription de leur ARN simple brin en ADN double brin et la présence de transcrip- tase reverse, ADN polymérase dépendant de l'ARN qui est rencontré dans tous les virus ARN oncogéniques. Des virus ARN mutants manquant de transcriptase réverse perdent leur aptitude à déclencher une infection et une transformation cellulaire. La présence de transcriptase réverse dans tous les oncornavirus suggère fortement le rôle que joue cet enzyme dans la transformation néoplastique de ces virus. Le composé peut être administré au patient humain par injection, par voie orale, topiquement, par voie ophtalmique ou par les voies respiratoires, en aérosols ou en gouttes. Pour une utilisation systémique, le composé doit être administré en une quantité choisie de manière que la dose quotidienne totale du composé se situe entre environ 50 mg et environ 2500 mg. L'intervalle normal préféré va d'environ 8,5 à 50 mg/kg de poids corporel par jour. Selon le mode d'administration, le composé peut être formulé avec des diluants appropriés pour former des solutions, des suspensions, des comprimés, des capsules ou des sirops. Pour l'usage topique et ophtalmique, le composé peut être formulé avec les diluants et excipients appropriés pour former des pommades, des crèmes, des mousses et des solutions contenant environ 0,01 à environ 15 % en poids, de préférence environ 1 à 10 % en poids du composé. Dans tous les cas, la quantité réelle doit être suffisante pour fournir au patient une quantité chimiothérapeutique- ment efficace du composé, la détermination de la dose étant de la compétence de l'homme de l'art, sur la base des informations données dans le présent mémoire. Pour une description des diverses formes poso- logiques du composé, on renvoie au mémoire descriptif du brevet des Etats-Unis d'Amérique N 4 211 771. Des exemples représentatifs de l'utilisation de la présente invention dans le traitement de divers états pathologiques viraux chez l'homme sont décrits ci- après. Toutefois, les exemples ne sont nullement limi- tatifs, attendu que l'homme de l'art peut utiliser la présente invention de diverses autres façons dans le traitement de maladies virales. L'invention n'est limitée que par le cadre des revendications annexées. EXEMPLE 1 Virus syncytial respiratoire (RSV) Le virus syncytial respiratoire (RSV) est un ARN virus qui est enveloppé d'une gaine de lipoprotéine (L. Berthiaume et collaborateurs, Comparative Structure, Morphogenesis and Biological Characteristics of the Respiratory Syncytial (RS) Virus and the Pneumonia Virus of Mice, ARCH. GESAMTE VIRUSFORSCH., volume 45, pages 39-51 (1974)). Le virus mûrit au niveau de la membrane de délimitation de la cellule affectée (A.R. Kalica et collaborateurs, Electron Microscopic Studies of Respiratory Syncytial Temperature-Sensitive Mutants. ARCH. GESAMTE VIRUSFORSCH., volume 41, pages 248-258 (1973)). Attendu qu'il induit de façon caractéristique la formation de grandes masses syncytiales dans des culturesde tissus infectées, on l'a appelé virus syncytial respiratoire. Trente-trois enfants âgés de 6 jours à un an présentant des signes cliniques de bronchiolite et chez lesquels une infection à RSV a été confirmée par la suite, ont été répartis de façon statistique afin qu'ils aient une solution aqueuse de ribavirine à 20 mg/ml dans la chambre du nébuliseur ou de l'eau sous forme d'aérosol pendant environ 18 heures par jour pour des périodes totales de traitement de 61 à 91 heures réparties sur 3 à 5 jours. Lors des auscultations quotidiennes, les signes pathologiques suivants ont été évalués sur la base d'une échelle de 0 à 3: signes nasaux, inflammation des amygdales, toux, apnée, cyanose, crépitations, sifflement de respiration, hyperinflation, rétraction de la cage thoracique, trachéobronchite, pneumonie, anorexie, malaise, respiration striduleuse, signes cliniques de toxicité et de température. Des lavages nasaux ont été effectués quotidiennement et le titre en virus éliminé a été noté. Comparativement à un traitement avec un placebo, le traitement à la ribavirine s'est accompagné d'une bien plus grande amélioration des indices suivants: toux, cyanose, crépitations, respiration accompagnée d'un sifflement, pneumonie avec rétraction de la cage thoracique, malaises et libération de virus à la fin du traitement. La sévérité des notes d'évaluation de la maladie dérivant des observations cliniques a montré de bien plus faibles valeurs pour la ribavirine que pour les groupes recevant un placebo les troisième et quatrième jours (1,6 c.f. 2,5, p = 0,016 au troisième jour; 1 c.f. 2,4, p = 0,01 au quatrième jour). Les titres de libération de virus ont été notablement plus faibles dans les groupes recevant la ribavirine que dans les groupes recevant les placebo vers la fin du traitement (6,9 c.f. 4443. 2 log TCID50/ml (p placebo (p = 0,02). Seize jeunes adultes en bonne santé ont reçu un échantillon d'épreuve de virus RSV de 1 ml par voie intranasale le premier jour, puis ils ont été isolés et répartis de façon statistique selon une méthode à double insu en vue d'un traitement à la ribavirine ou à l'eau. Ces substances ont été administrées sous la forme d'un aérosol de petites particules à partir du troisième jour après l'inoculation. Le traitement a été administré pendant 12 heures par jour et pendant 3 jours. La concentration de la ribavirine dans la chembre du nébuliseur était de mg/ml. Tous les sujets ont été examinés quotidiennement par le même médecin et la gravité des symptômes correspon- dants a été évaluées selon une échelle de 0 à 3. Des échantillons de lavage nasal en vue de la détermination des titresviraux ont été prélevés et des tests de fonction pulmonaire ont été conduits sur tous les sujets avant l'administration du virus puis deux fois par jour. Les tests de fonction expiratoire maximale avant et après l'administration de carbachol ont été conduits avant l'administration du virus, à la fin de l'administration de l'aérosol et de nouveau deux mois plus tard. Sept des huits sujets traités avec le placebo et 6 des huit sujets traités à la ribavirine ont été infectés. La ribavirine a exercé peu d'effet apparent sur les signes mineurs des voies respiratoires supérieures, mais de la trachéobronchite, des troubles systémiques et de la fièvre sont apparus beaucoup moins suivent (p quelconque entre les groupes. Un enfant en bas âge atteint du syndrome d'immunodéficience combinée grave (SIDCG) consécutif à une déficience en adénosine-déaminase était atteint de pneumonie et d'infection combinée à virus syncytial respiratoire (RSV) et à virus paragrippal type 3 (PIV3). Quatre doses séparées de ribavirine ont été délivrées par un aérosol formé de petites particules. Le médicament a été administré au moyen d'un nébuliseur à petites parti- cules dans la tente à oxygène de la patiente chaque jour pendant une période de 20 heures. La patiente a recu deux traitements d'une durée de 5 jours (jours 9 à 14 et 22 à 27) et deux traitements d'une durée de 10 jours (jours 33 à 43 et 59 à 69). La concentration du médicament dans le réservoir pendant les deux premières phases de traitement a été de 20 mg/ml et elle a été portée à 25 mg/ml pendant les deux phases subséquentes plus longues. La symptomatologie du nourrisson âgé de 5 mois, au moment de l'admission, comportait une difficulté respiratoire-modérée, un rythme cardiaque et un rythme respiratoire accrus, de la fièvre, une toux humide, des râles bilatéraux, une éruption maculopapulaire fine et diffuse sur le tronc et les extrémités inférieures et une éruption érythémateuse avec des lésions satellites. Le virus RSV et le virus para- grippal 3 (PIV3) ont été identifiés par immunofluorescence rapide de cellules épithéliales qui ont été détachées dans le rhinopharynx. La patiente a présenté un changement lent mais spectaculaire au cours des dix semaines d'administration intermittente de ribavirine. Toutes les zones d'évaluation pulmonaire ont présenté une amélioration. Le virus PIV3 a disparu des sécrétions respiratoires pendant la première phase de traitement à la ribavirine et n'est pas réapparu. Après la seconde phase de traitement à la ribavirine d'une durée de cinq jours, l'excrétion de RSV est devenue intermittente et a cessé plusieursjours au cours de la quatrième phase. Pendant toute la durée du protocole thérapeutique prolongé, aucun changement important de sensibilité à la ribavirine n'a été observe. EXEMPLE II Fièvre de Lassa Le taux global de mortalité chez des patients hospitalisés atteints de fièvre de Lassa s'élève à 15-20 %. Des patients atteints de fièvre de Lassa peuvent être subdivisés selon deux indicateurs ou risques de mortalité; taux d'admission d'AST (SGOT) et virémie. Un taux sérique d'AST d'admission supérieur ou égal à comporte un risque de mortalité de 50 %, tandis qu'une virémie d'admission supérieure ou égale à 104 TCID50/ml comporte un taux de mortalité d'environ 70 %. Des essais chimiothé-rapeutiques chez des patients atteints de fièvre de Lassa ont débuté par un essai d'administration orale de ribavirine, suivi d'un essai d'administration intraveineuse de ribavirine à plus forte dose en vue d'améliorer la survie par rapport à celle que l'on observe avec la ribavirine orale. - Les patients ont été divisés de façon statis- tique en deux sous-groupes recevant ou bien 15 mg/kg par voie orale de ribavirine en trois doses divisées par jour (environ 1000 mg/kg/jour) pendant une période de 10 jours; ou bien une unité de plasma immun de fièvre de Lassa dont le titre IFA est supérieur ou égal à 1:128. Dans le second essai, des patients présentant des taux d'AST d'admission supérieurs ou égaux à 150 unités internationales ont été divisés de façon statistique en deux sous-groupes. Un groupe a reçu deux grammes de ribavirine par voie intraveineuse suivis d'un gramme toutes les six heures pendant 4 jours. La dose a ensuite été réduite à 0,5 gramme toutes les huit heures pendant six jours de plus. Le second groupe a reçu la même dose de ribavirine et une unité de plasma administrée avec la dose de charge de ribavirine. Des patients traités à la ribavirine orale ou intraveineuse qui avaient des valeurs d'AST d'admission inférieures à 150 ont eu une mortalité de 20 % comparée à une mortalité de 51 % chez des patients qui n'ont pas été traités ou qui ont reçu une unité de plasma et comparée à 38 % chez des patients qui ont reçu deux unités de plasma. Chez des patients traités à la ribavirine (orale ou intraveineuse) qui avaient des virémiesd'admission de 103,6 TCID/ml, la mortalité a été de 31 % comparée à 71 % chez des patients qui n'avaient pas été traités ou qui n'avaient reçu qu'une unité de plasma immun. Les deux comparaisons représentent une réduction du taux de mortalité de plus de 50 %. EXEMPLE III Fièvre hémorragique de Corée (KHF) Un groupe de virus étroitement apparentés qui provoquent la fièvre-hémorragique avec syndrome rénal associé dans des centaines de milliers de cas humains chaque année ont reçu une attention accrue qui a permis de reconnaître la relation sérologique existant entre la fièvre hémorragique de Corée et plusieurs maladies simi- laires répandues dans le monde entier. Des test in vitro ont montré la sensibilité du virus à la ribavirine. Des études in vivo effectuées sur la souris de l'espèce Apodemus agarius ont également montré une sensibilité à la ribarivine. Le traitement d'animaux infectés par la ribavirine à la dose de 25 mg/kg/jour pendant neuf jours a eu pour résultat que 3 animaux sur 4 donnaient un test pulmonaire négatif à l'antigène et un test à l'antigène de KHF réduit chez le quatrième. Dans une autre étude, le modèle de la souris en période d'allaitement portant le virus d'Hantaan (HV) a été utilisé pour évaluer l'efficacité du traitement à la ribavirine à partir des 6, 10 ou 14ème jours après l'infection, avec des doses variables de médicament. Les animaux infectés avec 10 DL50 de HV (souche 76/118) ont présenté une perte de poids à partir du 10ème jour et les animaux non traités ont été atteints de paralysie des deux membres postérieurs les 15 à 18ème jours, suivie de la mort. Un traitement avec 50 mg/kg débutant au 10ème jour après l'apparition des premiers signes cliniques et la possibilité de détection du virus dans le sérum et les organes, a sauvé 11 animaux sur 20, comparé à 0/70 dans le cas des témoins. Les animaux traités n'ont pas présenté de symptômes et au 22ème jour, les survivants ont repris un gain de poids normal. Le succès de l'intervention thérapeutique après le début des observations cliniques et virologiques suggère qu'une thérapeutique similaire pourrait être efficace en médecine humaine. REVENDICATIONS 1. Utilisation du 1- -D-ribofuranosyl-1,2,4- triazole-3-carboxamide pour la préparation d'une composi- tion pharmaceutique destinée au traitement médical de maladies virales, caractérisée en ce que ce médicament est utilisé chez les humains pour le traitement des maladies virales causées par le virus syncytial respiratoire, des rétrovirus, des arbovirus, des arénavirus ou des bunyavirus. 2. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que ladite maladie virale apparaît chez des patients dont l'immunité est compromise. 3. Utilisation suivant la revendication 1, caractériséeen ce que ladite maladie virale apparait chez des patients atteints d'une maladie cardiaque et/ou pulmo- naire congénitale. 4. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que ladite maladie virale causée par le virus syncytial respiratoire apparaît chez des patients présentant un syndrome d'immunodéficience combiné sévère. 5. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que lesdits virus provoquent une résistance à la drogue. 6. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que ledit composé est présent dans la composition pharmaceutique à administrer à un patient humain en une quantité d'environ 0,01 à 50 % en poids sur la base du poids total de la composition. 7. Utilisation suivant la revendication 6, caractérisée en ce que la composition est sous une forme qui convient à l'administration orale,à l'administration topique, à l'administration par injection, à l'administration par les voies respiratoires ou à l'administration ophtalmique. 8. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que le composé est utilisé pour l'obten- tion d'une préparation en aérosol contenant ledit composé à une dose quotidienne totale d'environ 40 à 60 mg/kg pour le traitement médical de maladies à virus causées par le virus syncytial respiratoire chez les patients humains présentant un syndrome d'immunodéficience combinée sévère. 9. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que le composé est utilisé pour l'obtention d'une préparation orale contenant ledit composé à une dose quotidienne totale d'environ 10 à 100 mg/kg pour le traitement médical de maladies à virus causées par des arénavirus chez des patients humains. 10. Utilisation suivant la revendication 1, caractérisée en ce que composé est utilisé pour la prépa- ration d'une composition destinée à être administrée par voie intraveineuse à une dose quotidienne totale d'environ 1 à 4g pour le traitement médical de maladies à virus causées par des arénavirus chez des patients humains.