Brevet FR2563829A1 — publié le 19851108

La présente invention concerne un procédé de production de N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]-2,2- dihydroxyéthanamide (appelé ci-après glyoxylylspermidine) de formule (II) suivante: HO HO CHCONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 (II) HO, 2/ qui est un composé intermédiaire utile pour la synthèse de composés apparentés à la spergualine qui sont des substances anticancéreuses, et qui exerce lui-même un effet immuno-modulateur. La présente invention a également trait à l'utilisation de la glyoxylylspermidine préparée comme indiqué ci-dessus pour la production de substances anticancéreuses (antitumorales), à savoir le N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]-2-@mide d'e-guanidino- acide gras)-2-hydroxyéthanamides (appelés ci-après "composés 15-déoxyapparentés à la spergualine") représen- tés par la formule générale (XV): H2NCNH(CH2)nCONHCHCONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 (XV) 2 il- I 4 NH OH dans laquelle n est un nombre entier de 6 à 8. La Demanderesse a proposé antérieurement un procédé de production de glyoxylylspermidine par hydrolyse de la spergualine, substance anticancéreuse, extraite du bouillon de culture de Baccillus laterosporus BMG 162-aF2 (déposé au Fermentation Research Institute sous le n 5230) qui est une souche appartenant au genre Bacillus [demande de brevet japonais mise à l'Ins- pection Publique sous le n 52263/1984; The Journal of Antibiotics, N 34, 1622 (1981)]. En outre, la Deman- deresse a proposé un procédé général de synthèse utili- sant le 3-amino-1-propanol comme l'une des substances de départ [demande de brevet japonais mise à l'Inspection Publique sous le n 192347/1982; The Journal of Antibio- tics, N 34, 1625 (1981)]. Tous ces procédés constituent un excellent moyen de production de la glyoxylylspermidine, mais on a été confronté à certains problèmes pour la produc- tion industrielle de cette substance en grandes quantités et à de bas prix de revient. Dans le premier procédé utilisant comme matière la spergualine qui est une substance naturelle, la purification et l'isolement de la spergualine du produit de culture du micro-organisme ont été si pénibles qu'il a été difficile d'obtenir la matière en grandes quantités. Le second procédé, qui est un procédé général de synthèse utilisant le 3-amino-1-propanol comme subs- tance de départ, utilise comme autre matière l'acide glyoxylique de formule (III) suivante: \/HOCHCOOH (III) HO/ qui est difficile à obtenir, et nécessite en outre l'introduction et l'élimination d'un groupe protégeant la fonction aldéhyde, ce qui présente des difficultés du point de vue opératoire. Comme dérivé protégeant la fonction aldéhyde, on peut mentionner par exemple les dérivés acétal, thioacétal, hydrazone, oxime et diacyle. Ces procédés classiques de synthèse passant par une étape de protection du groupe aldéhyde de l'acide glyoxylique présentent des difficultés de mise en oeuvre, si bienque leur adaptation à la production industrielle s'est montrée problématique. L'un des buts de la présente invention est de trouver un procédé simple de synthèse de la glyoxylyl- spermidine. Un autre but de l'invention est d'utiliser cette glyoxylylspermidine pour la production de composés -déoxy apparentés à la spergualine. En bref, la présente invention est axée sur un procédé de production de glyoxylylspermidine de formule (II) suivante: HO (II) HO CHCONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 procédé qui est caractérisé par le clivage sélectif par oxydation de la liaison C-C appropriée d'un composé représenté par la formule générale (I) suivante: CONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 Il CHR dans laquelle R1 représente un groupe hydroxyle ou amino, mais les deux groupes R1 ne peuvent pas être en même temps des groupes amino, et R2 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle qui peut être substi- tué, un groupe carboxyle, un groupe alkoxycarbonyle ou un groupe carbamoyle qui peut être substitué. Pour remédier aux problèmes des procédés classiques, la Demanderesse a entrepris des recherches poussées en vue de trouver un procédé nouveau de produc- tion de la glyoxylylspermidine, et il en est résulté la mise au point d'un procédé nouveau constituant un procédé simple de synthèse et ne nécessitant pas de protection ni d'élimination de la protection du groupe aldéhyde. La Demanderesse a ainsi réalisé la présente invention. Conformément au mécanisme du procédé de la présente invention, le composé représenté par la formule générale (I), qui est un composé de départ, donne le composé de formule (II) par clivage par oxyda- tion quel que soit le substituant R2. Cette réaction d'oxy- dation est elle-même une réaction bien connue pour la production d'un groupe aldéhyde ou cétone par clivage par voie d'oxydation de la liaison C-C d'un diol adjacent ou de son groupe fonctionnel équivalent. Des réactifs ou des procédés d'emploi classique peuvent être appliqués à la présente invention. L'acide periodique peut être indiqué comme exemple de réactif largement utilisable pour le composé de formule générale (I). Lorsque les deux groupes R1 dans la formule générale (I) sont des groupes hydroxyle, un réactif convenablement choisi dans le groupe comprenant le tétraacétate de plomb, des composés d'iodosyle, l'oxygène en présence d'un catalyseur [sel de cobalt (II) d'un acide organique], un sel d'argent (I) de l'acide peroxosulfurique, le nitrate de thallium (III), l'éthylate de thallium (I), le sulfate acide de cérium (IV),des sels d'acides bismu- thiques, le peroxyde de nickel, etc. peut être utilisé en même temps que l'acide periodique. Au fur et à mesure que la réaction désirée progresse, on peut faire varier les conditions réaction- nelles selon les réactifs particuliers que l'on utilise. Ainsi, par exemple, l'eau, l'acide acétique, l'acide trichloracétique, le méthanol, l'éthanol, - l'éther, le dioxanne, le benzène, le benzonitrile, l'acétonitrile, la pyridine, la 4-cyanopyridine, le N,N-diméthylformamide, l'anisole, le chlorobenzène, le sulfolane, etc. peuvent être utilisés seuls ou en association comme solvant pour la réaction. La température de réaction peut aussi varier dans un large intervalle, allant par exemple de 0 C au point d'ébullition du solvant utilisé. La durée de réaction varie également en fonction des condi- tions réactionnelles particulières et elle va générale- ment de quelques minutes à quelques jours. Parmi les réactifs mentionnés ci-dessus, on apprécie particulièrement l'acide périodique comme réactif pour le clivage par oxydation du composé repré- senté par la formule générale (I) qui est un composé soluble dans l'eau. Par exemple, il est avantageux d'utiliser l'acide ortho-periodique (H5106), le méta-perio- date de sodium (NaI04) ou le méta-periodate de potassium (KI04). Lorsqu'on utilise ces acides periodiques, la réaction peut généralement être conduite en solutions aqueuses, mais on peut la conduire dans des solutions aqueuses contenant un solvant organique tel que des alcools (par exemple méthanol, éthano), le dioxanne, un éther, etc. Le composé représenté par la formule générale (I), composé de départ pour la réaction de l'invention, peut être synthétisé par condensation du composant acide correspondant dont le groupe fonctionnel est protégé si le besoin s'en fait sentir, avec le composant aminé par la réaction bien connue de formation d'une liaison amidique, puis élimination éventuelle du groupe protégeant le groupe fonctionnel. Un acide portant un groupe hydroxyle ou amino dans les positions a et A, devant être utilisé comme corps réactionnel, est facile et peu coûteux à obtenir dans une large gamme de composés naturels et synthétiques. Par exemple, -on peut utiliser comme matière des g-hydroxy-a-amino- acides (par exemple sérine, thréonine), des acides polyhydroxymonocarboxyliques (par exemple l'acide glycé- rique, divers acides aldoniques) et des acides dihydroxy- dicarboxyliques (par exemple l'acide tartrique, l'acide a,Pdihydroxyglutarique). On peut utiliser comme composant aminé la spermidine ou un précurseur pour la synthèse de la spermidine, dont le groupe fonctionnel est éventuellement protégé. On peut utiliser par exemple le 1,5,10-triaza- décane dont les deux atomes N1 et N5 sont protégés, qui est représenté par la formule (IV) suivante: H2N (CH2) 4N(CH2) 3NHX2 (IV) Xl (IV) dans laquelle X1 et X2 représentent chacun un groupe protégeant la fonction amino, le N-(2-cyanéthyl)-1,4-diaminobutane (appelé ci-après cyanéthylputrescine) de formule (V) suivante: H2N(CH2)4NH(CH2)2CN (V) et le 1,4-diaminobutane (appelé ci-après putrescine) de formule (VI) suivante: H2N(CH2)4NH2 (VI) etc. Des exemples de synthèse du composé représenté par la formule générale (I) avec ces composants acides et aminés seront donnés ci-après. Le composé de formule générale (I) dans laquelle les groupes R1 sont des groupes amino et hydro- xyle et R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle (par exemple le groupe méthyle) peuvent être synthétisés par exemple en utilisant la sérine ou un autre amino- acide convenable (par exemple la théronine) comme compo- sant acide et la cyanéthylputrescine représentée par la formule (V) comme composant aminé. Par exemple, le composé de formule générale (I) dans laquelle R2 est un atome d'hydrogène peut être obtenu comme suit: de la sérine est tout d'abord protégée au niveau du groupe amino par le groupe bien connu protégeant la fonction amino, par exemple le -groupe benzyloxycarbonyle (groupe Z) et elle est condensée avec la cyanéthylputrescine de formule (V) conformément à la réaction bien connue de formation d'une liaison amidique pour obtenir un composé de formule (VII) sui- vante: CONH(CH2)4NH(CH2)2CN I CHNHZ (VII); CH2OH puis après élimination du groupe protégeant la fonction amino, le groupe nitrile est réduit en un groupe aminométhyle, ou bien après réduction du groupe nitrile en un groupe aminométhyle, le groupe protégeant la fonction amino est éliminé en donnant le composé désiré (appelé ci- après N-sérylspermidine). Le composé de formule générale (I) dans laquelle R est un groupe alkyle, par exemple un groupe méthyle, peut être synthétisé de la même façon en utili- sant la thréonine comme corps réactionnel. Le composé de formule générale (I) dans laquelle les deux groupes R1 sont des groupes hydroxyle et R2 est un groupe carboxyle peut être obtenu comme suit: on fait réagir de l'anhydride d'acide diacétyl- tartrique de formule (VIII) suivante: CO CHOCOCH3) (VII'I) CHOCOCH3 1 CO avec la putrescine représentée par la formule (VI) et on hydrolyse ensuite le groupe acétyle avec un alcali pour obtenir le monoamide d'acide N-(4-aminobutyl)- tartrique de formule (IX) suivante: CONH(CH2)4NH2 CHOH (IX); CHOH I COuOH on effectue la N-cyanéthylation du composé (IX) par l'action de l'acrylonitrile de formule (X) suivante: CH2=CHCN -(X) pour obtenir le monoamide d'acide N-[4-(2-cyanéthyl)amino- butyl]tartrique de formule (XI) suivante: CONH(CH2)4NH(CH2)2CN CHOH I (XI); CSOH COOH puis on réduit le groupe nitrile du composé (XI) en un groupe aminométhyle pour obtenir le composé désiré. En outre, le composé de formule générale (I) dans laquelle les deux groupes R1 sont des groupes hydroxyle et R2 est un groupe alkoxycarbonyle peut être obtenu par estérification du groupe carboxyle du composé (I) obtenu par le procédé précédent de la manière usuelle, ou estérification du groupe carboxyle du composé (XI) de la manière usuelle, puis réduction du groupe nitrile. De même, le composé de formule généra- le (I) dans laquelle les deux groupes R1 sont des grou- pes hydroxyle et R2 est un groupe carbamoyle peut être synthétisé par l'aminolyse du composé dans lequel R2 est un groupe alkoxycarbonyle obtenu par le procédé précédent. En particulier, le composé de formule générale (I) dans laquelle les deux groupes R1 sont des groupes hydroxyle et R2 est un groupe -CONH(CH2) 4NH(CH2)3NH2 peut être synthétisé en un bon rendement par le procédé suivant: on fait réagir du tartrate de diéthyle de formule (XII) ci-après, obtenu aisément à partir d'acide tartrique par l'estérification bien connue COOC H 1 2 5 CHOH 1 (XII) CHOH LOOC 2H5 avec la cyanéthylputrescine de formule (V) pour obtenir l'amide d'acide N,N'-bis[4-(2-cyanéthyl)aminobutyl]- tartrique de formule (XIII) suivante: CONH(CH2)4NH(CH2)2CN i CHOH I (XIII); CHOH 1 CONH(CH2)4NH(CH2) 2CN puis on réduit le groupe nitrile du composé (XIII) en un groupe aminométhyle pour obtenir le composé désiré. Comme expliqué en détail ci-dessus, le procédé de la présente invention, contrairement aux procédés classiques de synthèse, ne nécessite pas de protection du groupe aldéhyde ni d'élimination de la protection pour rétablir le groupe aldéhyde initial de la glyoxylyl- spermidine au stade final, et par conséquent le procédé de production peut être grandement raccourci et le composé désiré peut, en outre, être obtenu en de bons rendements. De même, la matière utilisée pour la mise en oeuvre de la présente invention est disponible à bon marché dans une large gamme de composés naturels et synthétiques. En conséquence, la présente invention propose un procédé de production de glyoxylylspermidine à un faible prix de revient. En utilisant la glyoxylylspermidine produite comme indiqué ci-dessus, on peut obtenir des composés -déoxy apparentés à la sperguahEne de façon plus écono- mique et plus avantageuse que jusqu'à présent. Conformément à la présente invention, la glyoxylylspermidine de formule (II) peut ainsi être condensée avec un amide d'(-çuanidinO - acide gras de formule générale (XVI): H2NCNH(CH2)nCONH2 (XVI) NH dans laquelle n est un nombre entier de 6 à 8, pour produire des composés 15-déoxy apparentés à la spergualine de formule (XV): H2NCNH(CH2) nCONHCHCONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 (XV) (xv) NH OH dans laquelle n a la définition donnée ci-dessus. La condensation entre la glyoxylylspermidine de formule (II) et l'amide d' w-guanidino-acide gras de formule (XVI) peut être conduite de la manière décrite en détail dans le brevet japonais mis à l'Inspection Publique sous le n 62152/83. Ainsi, attendu que cette réaction est une réaction de déshydratation, il est préférable de la conduire dans un solvant anhydre. Toutefois, les composés de formules (II) et (XVI). se présentent habituellement sous la forme de sels d'addition d'acides et, en consé- quence, du fait de la solubilité, la réaction est conduite en présence d'une petite quantité d'eau. La quantité d'eau doit être aussi faible que possible-du moment que les composés de formules (II) et (XVI) sont uniformé- ment dissous et elle va de 4 à 40 moles par mole du composé de formule (II). Etant donné que ces composés de formules (II) et (XVI) se présentent habituellement sous la forme de sels d'addition d'acides, il n'est pas nécessaire d'ajouter un acide. Toutefois, à cause du rendement, il est préférable d'utiliser un catalyseur acide. Des catalyseurs acides convenables comprennent des acides inorganiques tels que l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique, l'acide borique, etc., et des acides organiques tels que l'acide acétique, l'acide citrique, l'acide tartrique, l'acide succinique, l'acide glutarique, l'acide adipique, etc., parmi lesquels on apprécie des acides carboxyliques tels que l'acidecitrioue et l'acide glutarique. La quantité d'acide que l'on doit utiliser va de 0 x 10, de préférence de 0,5 à 4 moles par mole du composé de formule (II). La température de réaction va de la température ambiante à 80 C, de préférence de 40 à 60 C. La durée de réaction varie selon la température de réaction particulière et elle va avantageusement de quelques heures à quelques jours, pour obtenir un haut rendement. La présente invention est illustrée en détail par les exemples suivants, mais ne doit pas être considé- rée comme étant limitée à ces exemples. Exemple 1 1. Synthèse du N1-(N'-carbobenzyloxy-L-séryl)-N2-(2- cyanéthyl)-1,4-diaminobutane (VII) On a dissous 47,8 g (0,2 mole) de N-carbo- benzyloxy-L-sé-rine dans 200 ml de dioxanne et après addition de 25,3 g (0,22 mole) d'imide d'acide N-hydroxy- succinique à la solution, on a ajouté goutte à goutte en refroidissant à la glace et en agitant 50 ml d'une solution dans le dioxanne contenant 45, 4 g (0,22 mole) de dicyclohexylcarbodiimide (DCC). Après agitation pendant la nuit à la tempéra- ture ambiante, le dépôt de dicyclohexylurée a été enlevé par filtration et le filtrat a été concentré sous pres- sion réduite. La substance solide résiduelle obtenue a été dissoute dans 150 ml d'acétate d'éthyle et la solution obtenue a été ajoutée goutte à goutte à 300 ml d'une solution dans l'acétate d'éthyle contenant 42,36 g (0,3 mole) de cyanéthylputrescine (V), sous agitation. Ensuite, on a ajouté à la solution réaction- nelle 300 ml d'acétate d'éthyle et après agitation pendant environ 18 heures, on a ajouté 100 ml d'acétate d'éthyle, 100 ml d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium et 50 ml d'eau, puis on a agité pendant une heure. La solution réactionnelle a été divisée en une phase organique et une phase aqueuse et la phase organique a été lavée avec 200 ml de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, déshydratée sur du sulfate anhydre de sodium et concentrée sous pression réduite. La substance solide résiduelle a été dissoute dans ml d'éthanol, la solution obtenue a été acidifiée à l'acide chlorhydrique concentré en refroidissant à la glace, et après repos pendant environ 18 heures à 5 C, le produit déposé a été filtré en donnant 26,7g de cristaux blancs de monochlorhydrate de N1-(N'-carbo- benzyloxy-L-séryl)-N2-(2-cyanéthyl)-1,4-diaminobutane (VII). La phase aqueuse a été extraite 7 fois avec ml d'acétate d'éthyle et la phase d'acétate d'éthyle a été lavée avec 200 ml de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, déshydratée sur du sulfate anhydre de sodium -et concentrée sous pression réduite. La subs- tance solide résiduelle obtenue a été dissoute dans ml d'éthanol et la solution a été acidifiée avec de l'acide chlorhydrique concentré, en refroidissant à la glace, et après repos pendant environ 18 heures à 5 C, on a obtenu 34,5 g du monochlorhydrate du composé (VII). La quantité totale du monochlorhydrate de composé (VII) a été de 61,2 g (rendement 76,7%). p.f. 147- 149 C. RMN(CD30D): 6 1,4-1,75(C1 x 2), 2,4-3,0(CH2N x 2, CH2CN), 3,1-3,4(CONHCH2), 3,7(CH20H, d), 4,1-4,3(CHNH), ,0o7( 1540, 1475, 1365, 1300, 1240, 1140, 1100, 1020, 700 2. Synthèse du N1-L-séryl-N2-(2-cyanéthyl)-1,4-diamino- butane (XIV) On a dissous 20 g (0,05 mole) de monochlorhy- drate de N2-(N'-carbobenzyloxy-L-séryl)-N2-(2-cyanéthyl) 1,4diaminobutane (VII) dans 400 ml de méthanol en chauffant et après addition de 1 g de palladium à 10% fixé sur du carbone, on a effectué une hydcrogénolyse en faisant passer de l'hydrogène gazeux à 40 C pendant 3 h. Après la réaction, on a fait passer de l'azote gazeux pendant 30 minutes et on a enlevé le catalyseur par filtration. Après concentration du filtrat sous pression réduite, on a dissous la substance solide résiduelle dans 100 ml d'eau, on a fait passer la solu-- tion sur une colonne garnie de 250 ml de Dowex 50W x 8 (du type H+, produit de la firme Dow Chemical Co.) et après lavage avec 1 litre d'eau, on a effectué l'élution avec une solution aqueuse 2N d'ammoniac. Les fractions actives ont été rassemblées et concentrées sous pression réduite en donnant 9,18 g de N1-L-séryl-N2- (2-cyanéthyl)-1,4-dioaminobutane (XIV) sous forme de sirop (rendement 80,4%). RMN(CD30D): 1,4-18(CH2 x 2), 2,5-3,05(CH2N x 2, CH2CN), 312-3,5(CONHCH2, CHNH2), 3, 65(CH20H, d) IR(KBr): J 5 v(cm-1) 3280, 3060, 2930, 2850, 2230, 1650, 1540, 1460, 1360, 1265, 1120, 1050 3. Synthèse de la N-sérylspermidine (I) On a dissous 8,82 g (38,6 mmoles) de Ni-L- séryl-N2-(2-cyanéthyl)-1,4-diaminobutane (XIV) dans ml de méthanol et après addition de 11,04 g (46,4 mmoles) de CoCl2.6H20 à la solution, on a ajouté graduel- lement en refroidissant à la glace 8,77 g (231,8 mmoles) de NaBH4. Apr-ès l'addition, on a agité la solution réactionnelle à la température ambiante pendant 2 heures et après addition de 200 ml d'eau, on a ajusté son pH à 6,0 avec de l'acide chlorhydrique 2N. Le produit noir déposé a été séparé par filtration et le filtrat a été concentré sous pression réduite. La substance solide résiduelle obtenue a été dissoute dans 200 ml d'eau, la solution a été chargée sur une colonne garnie de 2 litres de CM-Sephadex (produit de la firme Pharma- cia Co.) et après lavage avec 2 litres d'eau, on a effectué une élution selon un gradient avec 3 litres d'eau et 3 litres de solution aqueuse de NaCl 1M. Les fractions actives ont été recueillies et évaporées à sec sous pression réduite. La substance solide rési- duelle a été extraite au méthanol et l'extrait méthanoli- que a été chargé sur une colonne garnie de 500 ml de Sephadex LH-20 et éluée au méthanol. Les fractions actives ont été recueillies et concentrées sous pression réduite en donnant 5,759 g de trichlorhydrate de N- sérylspermidine (I) sous la forme d'un sirop (rendement 43,63%). RMN(CD30D): 1,5-25(CH2X3), 2,9-3;5(CH2NX4), 3;95(CH2OH), 4/1(CHNH2) IR(KBr): - On a dissous 5,55 g (16,26 mmoles) de tri- chlorhydrate de N-sérylspermidine (I) dans 40 ml d'eau et on a ajouté goutte à goutte à la solution en agitant, à la température ambiante, 10 ml d'une solution aqueuse contenant 3,55 g (16,58 mmoles) de métaperiodiate de sodium. Après agitation pendant 45 minutes, on a ajusté le pH de la solution réactionnelle à 1 avec de l'acide chlorhydrique 2N, on a agité pendant 20 minutes, on a réajusté le pH à 4 avec de l'hydroxyde de sodium 2N et on a fait passer la solution sur une colonne garnie de 500 ml de CM-Sephadex . Une élution selon un gradient a ensuite été effectuée avec 2,5 1 d'eau et 2,5 1 de solution aqueuse de NaCl 1M et les fractions actives ont été recueillies et évaporées à sec sous pression réduite. Le résidu solide obtenu a été extrait au méthanol, et l'extrait méthanolique a été chargé sur une colonne garnie de 500 ml de Sephadex LH-20 et élué au méthanol; Les fractions actives ont été recueillies et concentrées sous pression réduite en donnant 1,583g d'un dichlorhydrate de glyoxylylspermidine (II) sous la forme d'un sirop (rendement 33,3%); Exemple 2 1. Synthèse du monoamide d'acide N-(4-aminobutyl)tartri- que (IX) On a dissous 13,225 g (150 mmoles) de putres- cine (VI) dans 75 ml de tétrahydrofuranne (THF) et on y a ajouté- goutte à goutte, craduellement en refroidissant à la glace et en agitant une solution de 10,8 g (50 uwoles), d'anhydride d'acide diacétyl-L-tartrique (VIII) dans 50 ml de THF. Après l'addition, on a continué d'agiter pendant 2 heures à la température ambiante et une fois la réaction terminée, on a chassé le solvant par évaporation sous pression réduite. Ensuite, on a ajouté 50 ml d'eau et on a ajusté le pH de la solution réactionnelle à 13 avec de l'hydroxyde de sodium 2N et on a agité à la température ambiante pendant 2 heures pour effectuer l'hydrolyse du groupe acétyle. La solution réactionnelle obtenue a été chargée sur une colonne garnie de 450 ml de Dowex 1x4 [OH-] et après lavage avec 1,8 ml d'eau, on a procédé à l'élution avec une solution aqueuse d'acide acétique 0,5N. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueil- lies et évaporées à sec sous pression réduite en donnant 4,03 g de monoamide d'acide N-(4-aminobutyl)tartrique (IX) sous forme de cristaux blancs (rendement 36,6%). RMN(D20): Si 114-1>9 (CH2X2), 298(CH2NHCO, t, J=8Hz), 2- 3,26(CH2NH, t, J=7,5Hz.), 4,35(CHOH, d, J=2Hz), 4,49(CHOH, d, J=2Hz) IR(KBr): 351310, 1280, 1225, 1130, 1070, 980 1310, 1280, 1225, 1130, 1070, 980 *25.63829 2. Synthèse du monoamide d'acide N-[4-(2-cyanéthyl)amino- butyl]tartrique (XI). On a dissous 2,01 g (9,127 mmoles) du mono- amide d'acide N-(4-aminobutyl)tartrique (IX) obtenu en 1. dans 40 ml d'eau et après addition de 1,273 ml de triéthylamine puis de 0,726 ml d'acrylonitrile, on a agité le mélange résultant pendant 27 heures à la température ambiante. La solution réactionnelle a ensuite été évaporée à sec sous pression réduite. Après addition de 20 ml d'eau à la substance solide résiduelle, on a fait passer la solution résultante sur une colonne garnie de 300 ml de Dowex 1 x 4 (OH-) et après lavage avec 1,2 1 d'eau, on a effectué l'élution avec une solution aqueuse d'acide acétique 0,5N. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies et concentrées sous pression réduite en donnant 2,235g de monoamide d'acide N-[4-(2-cyanéthyl)aminobutylltartri- que (XI) sous la forme d'un sirop (rendement 89,6%). RMN(DMSO-ds): 173-1/8(CH2X2), 2>4-3>3(NCH2X3, CH2CN), 4,20(CHOHX2), 7,7 (CONH) IR(KBr): 25.Q(cm-1) 3390, 2930, 2230, 1650, 1630, 1540, 1400, 1120, 1070, 600 3. Synthèse du monoamide d'acide N-[4-(3-aminopropyl)- aminobutyl]tartrique (I) On a dissous 2,101 g (7,688 mmoles) de mono- amide d'acide N-[4-(2-cyanéthyl)aminobutyl]tartrique (XI) obtenu en 2. dans 50 ml de méthanol et après addi- tion de 2,195 g (9,226 mmoles) de CoCl2.6H20, on a ajouté graduellement 1,746 g (46,13 mmoles) de NaBH4 tout en re- froidissant à la glace et en agitant. Après l'addition, on a continué d'agiter pendant 3 heures à la température ambiante. Une fois la réaction terminée, on a ajouté ml d'eau et on a ajusté le pH de la solution réac- tionnelle à 5,8 avec de l'acide chlorhydrique 2N. Les cristaux noirs déposés ont été séparés parfiltration et le filtrat'a été concentré sous pression réduite pour chasser le méthanol. La solution concentrée a été diluée avec 50 ml d'eau et chargée sur une colonne garnie de 500 ml de CMSephadex (C-25 (Na +) et après lavage avec 1,5 litre d'eau, on a effectué une élution selon un gradient avec 2 litres d'eau et 2 litres de solution aqueuse de NaCl 1M. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies, chargées sur une colonne garnie de 500 ml de Dowex 1 x 4 (OH-) et après lavageavec 2 litres d'eau, l'élution a été effectuée avec une solution aqueuse d'acide acétique 0,5N. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies et concentrées sous pression réduite en donnant 1,225g d'acétate de monoamide d'acide N-[4-(3-aminopropyl)amino- butyl]tartrique (I) rouge et sous la forme d'un sirop (rendement 39,8%). RMN(D20) l$4-2,3(CH2X 3), 2/8-3,4(NCH2X 4), 4,25(CHOH, d, J=2Hz), 4,4(CHOH, d, J=2Hz) IR(KBr): Q(cm-1) 3400, 3040, 2950, 1640, 1400, 1120, 1070, 4. Synthèse de la glyoxylylspermidine (Il) On a dissous 1,007 g (2,985 mmoles) d'acétate de monoamide d'acide N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]tar- trique (I) obtenu en 3. dans 80 ml d'eau et on a ajouté goutte à goutte en agitant, à la température ambiante, une solution de 650 mg (3,04 mmoles) de métaperiodate de sodium dans 20 ml d'eau. Après l'addition goutte à goutte, on a continué d'agiter pendant 30 minutes et on a fait passer la solution réactionnelle sur une colonne garnie de 300 ml de CM- Sephadex C-25 (Na +), et après lavage avec 1 litre d'eau, on a effectué une élution selon un gradient avec 1,5 litre d'eau et 1,5 litre de solution aqueuse de NaCl 1M. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies, évaporées à sec sous pression réduite, extraites au méthanol et l'extrait méthanolique a été chargé sur une colonne garnie de 300 ml de Sephadex LH-20 et éluée au méthanol. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies et concentrées sous pression réduite en donnant 681 mg de dichlorhydrate de glyoxylylspermidine (II) sous la forme d'un sirop (rendement 78,1%). Exemple 3 1. Synthèse de l'amide d'acide N,N'-bis[4-(2-cyanéthyl)- aminobutyl]tartrique (XIII) On a ajouté goutte à goutte 15,45 g (0,075 mole) de L-tartrate de diéthyle (XII) à 23,31 g (0,165 mole) de cyanéthylputrescine (V) et après l'addition goutte à goutte, on a chauffé le mélange résultant à 80 C pendant 2 heures. Après avoir refroidi la solution réactionnelle avec de la glace, on a lavé le produit solidifié avec de l'acétone pour obtenir 29,64 g d'amide d'acide N,N'-bis[4-(2cyanéthyl)aminobutyl]tartrique (XIII) sous la forme de cristaux bruts de couleur jaune pâle (rendement 99,8%). - On a dissous 5 g de ces cristaux dans 20 ml de- solution- aqueuse de NaCl 0,5M et on a fait passer la solution résultante sur une colonne contenant 1,5 litre de DIAION HP-20 (produit de la firme Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.) équilibrée avec une solution aqueuse de NaCl 0,5M et on a effectué l'élution successi- vement avec 10 litres d'eau, 5 litres de méthanol aqueux à 5% et 5 litres de méthanol aqueux à 20%. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies et concentrées sous pression réduite en donnant 3,1 g de cristaux blancs d'amide d'acide N,N'-bis[4-(2-cyan- éthyl)aminobutyl]tartrique (XIII) (rendement 61,9%). RMN(DMSO-ds): 8 1;3-117(CH2>X4), 2/4-2.,9(CH2NX6, CH2CNX 2), 3,3-3,7(NHX 2, OH X2), 4t20(CHX2), 7,60(CONHX 2) IR(KBr): Q(cm-1) 3370, 2905, 2220XCN), 1640, 1520, 1455, 1125 2. Synthèse de l'amide d'acide N,N'-bis[4-(3-aminopropyl)- aminobutyl]tartrique (I) On a dissous 19,8 g (50 mmoles) d'amide d'acide N,N'-bis[4-(2-cyanéthyl)aminobutyl]tartrique (XIII) obtenu sous la forme de cristaux bruts en 1. dans une solution mixte de 450 ml de méthanol et de 33 ml d'eau et après addition de 28,55 g (120 mmoles) de CoC12.6H20, on a ajouté peu à peu en refroidissant à la glace 22,71 g (600 mmoles) de NaBH4. Après l'addi- tion de NaBH4, on a agité la solution réactionnelle pendant 1,5 heure à la température ambiante et après addition de 200 ml d'eau, on a ajusté son pH à 6,5 avec de l'acide chlorhydrique 6N. La substance solide résiduelle noire déposée a été séparée par filtration et le filtrat a été concentré sous pression réduite pour chasser le méthanol. La solution résiduelle concentrée a été diluée à un volume total de 400 ml. Ensuite, ml de la solution ainsi obtenue ont été chargés sur une colonne garnie de 500 ml de CM-Sephadex C-25 (Na+) et une élution selon un gradient a été effectuée avec 3 litres d'eau et 3 litres de solution aqueuse de NaCl 1, 5M. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies et évaporées à sec sous pression réduite, extraites au méthanol,et l'extrait méthanolique a été chargé sur une colonne garnie de 500 ml de Sephadex NH-20 et éluée au méthanol. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies et évaporées à sec sous pression réduite en donnant 1,65 g de tétra- chlorhydrate d'amide d'acide N,N'-bis[4-(3-aminopropyl)- aminobutyl]tartrique (I) sous la forme d'un sirop (rende- ment 60,0%). RMN(CD30D): 8 1,5-2t4(CH2X 6), 2,9-3,4(NCH2X 8), 4;45(CHX2), IR(KBr): (cm1) 3380, 2950, 2800, 1640, 1540, 1460, 1125, 1070, 750 3. Synthèse de la glyoxylylspermidine (II) On a ajouté goutte à goutte une solution aqueuse contenant 16,04 g (75 mmoles) de métaperiodate de sodium à 360 ml d'une solution aqueuse contenant 45 mmoles du tétrachlorhydrate d'amide d'acide N,N'- bis[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]tartrique (I) non purifié obtenu en 2. et on a agité le mélange résultant pendant 2 heures à la température ambiante. Une fois la réaction terminée, on a ajouté 4,5 g (30 mmoles) d'acide L- tartrique, on a continué d'agiter pendant 15 minutes et on a séparé par filtration le produit vert jaunâtre déposé. Le filtrat a été ajusté à pH 5,0 avec de l'hy- droxyde de sodium 2N, il a été chargé sur une colonne garnie de 1000 ml de CM-Sephadex C-25 (Na+) et après lavage avec 3 litres d'eau, on a effectué une élution selon un gradient avec 3 litres d'eau et 3 litres de solution aqueuse de NaCl 0,6M. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies, évaporées à sec sous pression réduite et extraites au méthanol. On a fait passer l'extrait méthanolique sur une colonne garnie de 1000 ml de Sephadex LH-20 et on a effectué l'élution avec du méthanol. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueillies et concentrées sous pression réduite en donnant 8,23 g de dichlorhydrate de glyoxylylspermidine (II) sous la forme d'un sirop (rendement 31,3%). RMN(CD30D): OH 1,4-2,4(CH2X 3), 2,8-3/4(NCH2X 4), 4,89(CH") ---xOH IR(KBr): (cm l) 3370, 2950, 1660, 1540, 1460, 1100, 1070 Exemple 4 300 g (1,45 mole) de L-tartrate de diéthyle (XII) ont été ajoutés à 450 g (3,19 moles) de cyanéthyl- putrescine (V) et le mélange résultant a été chauffé à 80 C pendant 3 heures. Le mélange réactionnel a été dissous dans 4 litres de méthanol et la solution résul- tante a été saturée d'ammoniac gazeux par barbotage du gaz dans la solution avec refroidissement. Ensuite, on a ajouté 180 g de nickel de Raney et on a conduit l'hydrogénation à 40 C pendant 24 heures sous une pres- sion d'hydrogène de 1,2 MPa. Après la réaction, le catalyseur a été séparé par filtration et le filtrat a été concentré sous pression réduite. Le sirop obtenu a été dissous dans 3 litres d'eau et le pH de la solution a été ajusté à 5,0 avec de l'acide chlorhydrique 6N. On a ajouté à cette solution en une seule portion une solution de 397 g (1,66 mole) de métaperiodate de sodium dans 5 litres d'eau et on a agité le mélange à la température ambiante pendant 3 heures. Une fois la réaction terminée, on a ajouté à la solution réaction- nelle 10 ml d'éthylèneglycol pour consommer le réactif résiduel. La solution a ensuite été ajustée à un pH de 5,0 avec de l'hydroxyde de sodium 6N, diluée 4 fois à l'eau, chargée sur une colonne garnie de 12 litres de CM-Sephadexe C-25 (Na+) et éluée par étapes avec litres de NaCl 0,1M et 50 litres de NaCl 0,25M pour recueillir la fraction contenant le composé désiré. Cette fraction a été diluée 4 fois avec de l'eau, chargée sur une colonne garnie de 7,5 litres de CM-Sephadex C-25 (Na+) et éluée avec une solution de NaCl 0,8M. Les fractions contenant le composé désiré ont été recueil- lies et lyophilisées. Le produit lyophilisé a été extrait avec 4 litres de méthanol et l'extrait méthanolique a été évaporé à sec sous pression réduite en donnant 400,4 g de dichlorhydrate de glyoxylylspermidine (II) sous la forme d'un sirop [rendement total à partir du tartrate de diéthyle (XII) 43,5%]. Exemple 5 Synthèse du N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]-2- t (7-guanidlnoheptanamido)2-hydroxyéthanamide Un mélange de 360 mg (1,62 mmole) de chlor- hydrate de 7-guanidinoheptanamide, 568 mg (1,94 mmole) de dichlorhydrate de N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]- 2,2-dihydroxyéthanamide obtenu dans l'exemple 4, 214 mg (1,62 mmole) d acide glutarique et 0,36 ml d'eau a été chauffé à 60 C pendant 24 heures. Une fois la réaction terminée, on a ajouté 5 ml d'eau au mélange réactionnel que l'on a ensuite chargé sur une colonne (diamètre intérieur 20 mm) garnie de 150 ml de CM-Sephadex C-25 (type Na) et on a effectué un fractionnement par élution selon un gradient avec 1,5 litre d'eau et 1, 5 litre de solution aqueuse de chlorure de sodium O,8M. Les fractions contenant le produit désiré ont été rassemblées, puis concentrées et extraites trois fois avec 10 ml de méthanol. On a fait passer la phase méthanoli- que sur une colonne garnie de 150 ml de Sephadex LH- 20 et on a effectué l'élution au méthanol. Les fractions contenant le produit désiré ont été rassemblées et évaporées à sec en donnant 317 mg (rendement 39 %) d'une poudre blanche de trichlorhydrate de N-[4-(3-aminopropyl)amino- butyl]-2-(7-guanidinoheptanamido)-2-hydroxyéthanamide. Exemple 6 Synthèse du N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]- 2-(7-guanidinoheptanamido)-2-hydroxyéthanamide Un mélange de 18 g (80,9 mmoles) de chlorhydrate de 7-guanidinoheptanamide, 23,6 g (80,9 mmoles) de dichlor- hydrate de N-[4-(3- aminopropyl)aminobutyl]-2,2-dihydroxy- éthanamide obtenu dans l'exemple 4 et 5,7 g (27 mmoles) d'acide citrique dans l'eau (200 ml) a été évaporé à sec en donnant un sirop qui contenait 1,6 g d'eau. Le sirop résultant a été chauffé à 60 C pendant 8 heures et purifié dans un mode opératoire analogue à celui de l'exemple en donnant 19,0 g (rendement 47,3 %) de poudre blanche de trichlorhydrate de N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]- 2-(7-guanidinoheptanamido)-2-hydroxyéthanamide. Exemple 7 Synthèse du N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]- 2-(9-guanldlnononanamido)-2-hydroxyéthanamide Un mélange de 316 mg (1,26 mmole) de chlor- hydrate de 9-guanidinononanamide, 442 mg (1,51 mmole) de dichlorhydrate de N-[4-(3-aminopropyl)aminobutyl]-2,2- dihydroxyéthanamide obtenu dans l'exemple 4, 166 mg (1,26 mmole) d'acide glutarique et 0,01 ml d'eau a été chauffé à 60 C pendant 24 heures. Une fois la réaction terminée, le mélange a été purifié de la manière indiquée dans l'exemple 5 en utilisant du CM-Sephadex C-25 (type Na) et du Sephadex LH-20, ce qui a donné 324 mg (rendement 49 %) d'une poudre blanche de trichlorhydrate de N-[4-(3- aminopropyl)aminobutyl)]-2-(9-guanidinononanamido)-2- hydroxyéthanamide. REVENDICATIONS 1. Procédé de production de N-[4-(3-aminopropyl)- aminobutyl]-2,2-dihydroxyéthanamide de formule (II) sui- vante, HO H/ CHCONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 (I caractérisé par le clivage sélectif par oxydation de la liaison C-C appropriée d'un composé représenté par la formule générale (I), CONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 I1 CHR CHR1 (I) CHR1 R dans laquelle R1 représente un groupe hydroxyle ou amino, mais les deux groupes R1 ne peuvent pas être en même temps des groupes amino, et R2 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle qui peut être substitué, un groupe car- boxyle, un groupe alkoxycarbonyle ou un groupe carbamoyle qui peut être substitué. 2. Procédé de production du composé de formule (II) suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le composé représenté par la formule générale (I) est un composé de formule suivante, CONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 CHOH I CHOH CONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 - 27 2563829 3. Procédé de production du composé de formule (II) suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le composé représenté par la formule générale (I) est un composé de formule suivante, CONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 CHOH CHOH COOH 4. Procédé de production du composé de formule (II) suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le composé représenté par la formule générale (I) est un composé de formule suivante, CONH(CH2) 4NH(CH2) 3NH2 CHNH2 I2 CH2OH 5. Procédé de production d'un composé de formule générale (XV), H2NCNH(CH2)nCONHCHCONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 (XV) NH OH dans laquelle n est un nombre entier de 6 à 8, caractérisé en ce qu'il consiste à préparer le N-[4-(3-aminopropyl)amino- butyl]-2,2-dihydroxyéthanamide de formule (II), HO\ - HO Ho /CHCONH(CH2)4NH(CH2)3NH2 (I par clivage par oxydation au niveau de la liaison C-C appropriée d'un composé de formule générale (I), 28 2563829 CONH.(CH2)4NH(CH2)3NH2 CHR (I) CHR R2 dans laquelle R1 représente un groupe hydroxyle ou amino, mais les deux groupes R1 ne peuvent pas être des groupes amino en même temps, R2 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle qui peut être substitué, un groupe car- boxyle, un groupe alkoxycarbonyle ou un groupe carbamoyle qui peut être substitué, puis à condenser l'éthanamide de formule (II) préparé ci-dessus avec un amide d'w-guani- dino acide gras de formule (XVI), H2NCNH(CH2)nCONH2 (XVI) " (XVI) NH dans laquelle n a la définition donnée ci-dessus.