Brevet FR2571964A1 — publié le 19860425

1. La présente invention concerne des substances physiologiquement actives nommées SEN-366,utilisables comme produits pharmaceutiques et leur fabrication, et elle concerne plus particulièrement des substances physiologique- ment actives nommées SEN-366 répondant à la formrule généra- le (I) suivante et leur fabrication. CH CH3 CH3 3 30 O O 0 B n X dans laquelle: ------- est une simple liaison ou une dou- ble liaison X est l'hydrogène ou un groupe hydroxy, t i964 2. n est 0 ou 1 Z est - CH lorsque --- dans un cycle B est une double liaison et, lorsque ------- est un cycle, est une simple liaison, Z est O ou >-OW (o W est l'hy- drogene, un groupe acyle inférieur, un groupe arl1carbo- nyle non substitué, alkyle inférieur ou arylcarbonyle subs- titué). Pour une meilleure compréhension de la présente invention, on classera à présent le composé de la présente invention, c'est-à-dire (I),en les rQuatre groupes suivants. Il est à noter cependant que cette classification n'est donnée comme on vient de le dire que pour une meilleure compréhension,et que cette classification ne signifie ni ne suggère que la présente invention est composée de quatre inventions différentes. Le groupe I couvre le composé représenté par la formule (II) et correspond aux revendications 2 à 4 compri- se; le groupe 2 couvre le composé représenté par la formule (V) et correspond aux revendications 5 à 6, compri- se; le groupe 3 couvre le composé représenté par la formule (VIII) et correspond aux revendications 7 à 8, com- prise; et le groupe 4 couvre le composé représenté par la formule (X) et correspond aux revendications 9 à 10 compri- se Les formules chimiques (II), (V), (VIII) et (X) dont il a été question ci-dessus sont données ci- après avec les définitions des symboles. 3. [Groupe 1] CH3 CH3 CH 1H3 0 (II) x (l dans lequel R est l'hydrogène, un groupe acyle inférieur ou un groupe arylcarbonyle non substitué, X est l'hydrogène ou un groupe hydroxy; et - est une simple liaison ou une double liaison. [Groupe 2] CH3 CH3 CH3 0. X O O X (y) dans laquelle Y est =C=O ou =CHOR o R est un groupe alkyle inférieur en C1 à C4 ou un groupe arylcarbonyle substitué; X est l'hydrogène ou un groupe hydroxy; et est une liaison simple ou double. 4. [Groupe 3] H3 CH3 O t \ (VIII) / dans laquelle Y est =C=O ou =CHOR o R est l'hydrogène, un groupe alkyle inférieur, un groupe acyle inférieur ou un groupe arylcarbonyle substitué ou non substitué et à...... est une liaison simple ou double. [Groupe 4] CH2 CH CH ?2 cH3 3 t (0o n- dans laquelle n est 0 ou 1; et ------- est une liaison simple ou double. La présente invention sera expliquée et illus- trée à présent en suivant l'ordre des groupes 1, 2, 3 et 4. Le groupe 1 concerne des substances physiologique- ment actives nommées SEN-366,utilisables comme produits pharmaceutiques et leur fabrication, et elle concerne plus particulièrement des substances physiologiquement actives nommées SEN-366 répondant à la formule générale (II) et leur fabrication. 5. CH3 CH3 CH3 X O O X dans laquelle R est l'hydrogène,un groupe acyle inférieur ou arylcarbonyle non substitué; X est l'hydrogène ou un groupe hydroxy, et est une liaison simple ou double. Ces dernières années, les maladies vasculaires ont constitué le plus fort pourcentage dans le domaine clini- que en ce qui concerne à la fois la fréquence et les diffi- cultés de traitement. En particulier, les maladies suivan- tes ont attiré l'attention du public en tant que maladies de l'adulte: infarctus aigu du myocarde, thrombose vascu- laire oblitérante, artériosclérose obstructive, glomérulo- néphrite chronique, syndrome néphrétique, artériosclérose cérébrale, séquelles de thrombose cérébrale, angine de poi- trine, maladies observées chez des patients après des opé- rations intra-cardiaques,insuffisance rénale chronique chez des patients qui ont été sous dialyse pendant plus d'un mois; anémie locale, thrombose observée chez des patients équipés d'appareils auxiliaires tels que coeur artificiel ou rein artificiel, etc. Contre cette thrombose, on a ad- ministré un inhibiteur de l'agrégation plaquettaire pour la prévention et le traitement du thrombus. Par exemple,la ticlo- pidine est utilisée chez des malades souffrant de thrombose vasculaire oblitérante et d'insuffisance rénale chronique au cours de la dialyse et chez ceux qui ont subi une opéra- tion cardiaque. Il est également connu que l'on peut s'attendre à 6. ce que les inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire soient des substances inhibant la métastase du cancer et soient utiles comme produits pharmaceutiques. Par ailleurs, plusieurs espèces d'inhibiteurs de l'agrégation plaauettaire dérivant de microorganismes sont déjà connues, et leur utilité comme produits phar- maceutiques a été étudiée. Par exemple, on connait le WF-5239 du genre Aspergillus (cf. Journal of Antibiotics, vol. 37, n 5, pages 469-474) et le SEN-128-B (voir de- mande de brevet japonais non examinée 59-095893). Cependant, l'effet des inhibiteurs de l'agréga- tion plaquettaire indiquésci-dessus est limité. En outre, il n'existe pas de preuve nette en ce qui concerne leur sécurité. La demanderesse a effectué diverses études pour mettre au point des inhibiteurs de l'agrégation plaquet- taire ayant davantage d'effet et présentant davantage de sécurité que les produits pharmaceutiques classiques indiqués ci-dessus,et elle a trouvé qu'il existe une série de substances ayant à la fois un effet et une sécurité excel- lents, ces substances ayant des structures chimiques entiè- rement différentes de celles des inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire indiqués ci-dessus. En conséquence, un des buts de la présente inven- tion est de mettre au point de nouveaux produits pharmaceu- tiques qui sont bien meilleurs que les inhibiteurs clas- siques de l'agrégation plaquettaire indiqués ci-dessus. Les nouvelles substances physiologiquement acti- ves de la présente invention inhibent l'agrégation des plaquettes d'une façon marquée. Elles sont obtenues à par- tir des produits du microorganisme fraîchement isolé du sol, ou par une modification chimique des substances ainsi produites. Le microorganisme de la présente invention appar- tient, comme on le montrera complètement ci-après,au genre 7. Streptomyces et, parmi les substances physiologiquement actives de la présente invention, le SEN-366-D (la substance de (II) o R et X sont tous deux des hydrogènes et o- est une liaison simple ou double) et le SEN-366-P (la substance de (II) o R est l'hydrogène, X est un groupe hydroxy et------- est une simple liaison) sont les substances que le microorganisme produit directement. Le SEN-366-D n'est pas un composé unique,mais il peut être séparé en quatre substances ayant des propriétés similaires par transformation en composés acétylés (nommé SEN-366-A). Il a été confirmé que ces quatre substances sont de nouvelles substances physiologiquement actives ayant les mêmes structures excepté que, parmi leurs propriétés physiques et chimiques, leurs configurations stériques (anomères alpha et béta) de OR (R est un groupe acétyle dans la formule générale III]) dans le cycle 2pyranol et le degré d'insaturation du cycle pyran-3-one sont dif- férents. Les dérivés acétylés de ces quatre substances sont nommés SEN-A1, A21 A3 et A4. Leur différenciation en structures est celle donnée ci-dessous. Configuration de OR SEN-366-A1 alpha I double liaison A2 - - alpha simple liaison A3 béta double liaison A4 béta simple liaison Ci-après, les indices 1, 2, 3 et 4 sont don- nés aux composés correspondant à A1 à A4' respectivement en ce qui toncerne la configuration de OR et le degré d'insaturation ------ En partant du SEN-366-D qui est (II) lorsque R et X sont des hydrogènes et est une liaison simple ou double, on peut préparer par synthèse et isoler des dérivé. acylés par un groupe acyle inférieur et des dérivés aryl- carbonylés. Par exemple, on peut obtenir les composés ben- zoyls suivants dans lequel R est un groupe benzoyle X est zoylês suivants dans lequel R est un groupe benzoyle, X est 8. l'hydrogène et ------- est une liaison simple ou double dans la formule (II) dans lesquels le degré d'insaturation sur le cycle pyran-3-one et la configuration stérique de OR sur le cycle 2-pyranol sont différents (anomères alpha et bêta). Configuration de OR ------- SEN-366-B alpha double liaison B alpha simple liaison B3 béta double liaison B4 béta simple liaison Ces SEN-366-D et leursdérivés présentent une fai- ble toxicité et une forte action d'inhibition de l'agré- gation plaquettaire. Ainsi, comme il sera montré plus com- plètement ci-après en se référant à leurs propriétés biologiques, le SEN366-D et ses dérivés inhibent de façon marquée l'action d'agrégation plaquettaire chez des lapins dans lesquels l'adénosine-5'-diphosphate (ADP), l'acide arachi- donique (AA) ou le collagène sont utilisés comme induc- teurs de l'agrégation plaquettaire. En conséquence, les substances de la présente invention sont utilisables comme produits pharmaceutiques dans la prévention et le traite- ment de la thrombose indiquée ci-dessus. Des souches représentatives produisant le SEN-366-D, le SEN-366-F et le SEN-366-P ont été obtenues conformément à la présente invention par la demanderesse à partir du sol de la Préfecture de Kyoto. Leurs propriétés mycologi- ques sont les suivantes. A ce propos, l'expérience d'iden- tification a été effectuée conformément à la méthode décri- te dans l'International Streptomyces Project (ISP). Les milieux utilisés sont ceux décrits dans 1'ISP ou dans la Norme d'Examen "Applied Microbiology Industry" par l'Offi- ce japonais des brevets et,en ce qui concerne ceux qui ne sont pas décrits dans le document ci-dessus,on a utilisé les milieux indiqués dans S.A. Wabsman: The Actinomyces, 9. vol. 2, 1961. La description de la nuance colorée est conforme au "Color Harmony Manual" de la Container Corporation of America. (1) Description conforme à la méthode de l'ISP. (a) Caractéristiques morphologiques. Sous le microscope, de nombreux mycéliun aériens se développent à partir du mycélium de substrat et leurs extrémités forment des spirales présentant 5 à 6 torsions. Parfois, une forme ondulée est observée et celle-ci est par- ticulièrement fréquente dans le milieu glucose-asparagine- gélose. On n'observe pas de coupure du mycélium ni de formation de vrilles et de sporanges. Conformément à la norme de l'ISP, il appartient à la section spirale. Dans des chaînes de spores bien développées, il y a 10 spores ou davantage en série. Lorsqu'ils sont observés au microscope électroni- que à balayage, les spores sont généralement en colonnes et leurs tailles sont de 0,7-0,9 x 1,0-1,4 p. Leurs surfa- ces sont plates et lisses. Les caractéristiques morphologiques ci-dessus sont observées dans le milieu levure-malt-gélose, le milieu glycérol-aspargine-gélose, le milieu farine d'avoine-gélo- se, le milieu amidon-sel minéral-gélose et d'autres milieux dans lesquels les mycéliursaériens sont bien formés. (b) Couleur des colonies. La nuance colorée des mycéliums aériens ayant suf- fisamment de spores est grise (Roues des Couleurs de Tresner Backus) dans le milieu levure-malt-gélose, dans le milieu glycérol-asparagine-gélose, dans le milieu amidon- sel minéral-gélose et dans le milieu farine d'avoine-gélo- se. Une nuance représentative est le gris (3fe à 5fe). (c) Couleur des mycéliums de substrat (envers de la colonie). Jaune dans le milieu farine d'avoine-gélose. Dans le milieu glycérolasparagine-gélose et dans le milieu 10. levure-malt-gélose, ils sont jaunes à un stade précoce, mais virent au brun par la suite. Dans le milieu amidon- sel minéral-gélose, ils sont jaunes clairs et virent progressivement au jaune grisatre. Ces pigments jaunes sont des indicateurs de pH et virent au violet lorsqu'on leur ajoute de l'hydroxyde de sodium 0,05N. (d) Couleur des milieux (pigments solubles). La production de mélanoide est positive dans un milieu peptone-levure-fer-gélose, dans le milieu tyrosine- gélose et dans le bouillon tryptone-levure. D'autres pigments peuvent se former: dans le milieu farine d'avoinegélose, la couleur est jaune et dans le milieu glycérol-asparagine-gélose et dans le milieu levure-malt- gélose,elle est initialement jaune, puis vire au brun- jaunâtre par la suite. Ces pigments jaunes sont des indi- cateurs de pH et virent à une nuance violet rougeâtre à violette lorsqu'on leur ajoute de l'hydroxyde de sodium 0,05N. Aucune production de pigment n'est observée dans le milieu amidon-sel minéral-gélose. (e) Utilisation de sources de carbone. Utilisation des sucres énumérés dans i'ISP: le D-glucose, le L-arabinose, le D-xylose, le D-fructose, le rhamnose et le D-mannitol sont bien utilisés alors que le saccharose et le raffinose sont utilisés faiblement et que le i-inositol ne l'est pas du tout. Utilisation d'autres sucres: galactose, mannose, maltose et glycérol sont bien utilisés,tandis que le lacto- se et la salicine le sont faiblement et l'inuline pas du tout. (2) Autres propriétés. (a) Propriétés sur des milieux de culture (culti- vés à 27 C pendant 14 jours). 2 571964 11. tMilieu 'Croissance Forma- Cou- Couleur Pigment tion leur des mysoluble de mv- célia célia Saccharose-nitrate-g1lose Médiocre Aucune Incolore Aucun Glycérol-nitrate-gélose Modérée Modéré Gris Brun Brun (3fe) Glycérol-asparagine- Bonne ModéréGris Brun Brun gélose (3fe) jaunâ- jaunâ- tre tre Glucose-asparagine-géloseModérée Modérée Gris Jaune Jaune (d- fe) Amidon-sel minéral-gélose Bonne Abon- Gris Gris Aucun dante (2- 3fe) Tyrosine-gélose Bonne Abon- Gris Brun- Brun- dante (3- rougea- rougeâ- 15.fe) tre tre Gélose nutritive Modérée Aucune - Brun Brun clair clair Farine d'avoine-gélose Bonne ModéréeGris Jaune Jaune (d-g) Levure-malt-gélose Bonne ModéréeGris Brun Brun- (3- jauna- fe) tre Peptone-levure-fer- Modérée Aucune - Brun Brun gélose foncé foncé Gélose d'Emerson Bonne Aucune - Brun Brun Tranches de pomme de Bonne Aucune - Brun Brun terre foncé foncé Lait écrémé Bonne Aucune - Brun Brun clair Glucose-peptone-gélatine Bonne Aucune - Brun Brun clair foncé Bouillon Triptose-levure Bonne Aucune - Brun Brun (cultivé pendant 2 jours) clair foncé (b) Propriétés physiologiques 1o Liquefaction de la gélatine positive 2. Réduction des nitrates positive (faiblement 3. Hydrolyse de l'amidon positive 4. Coagulation du lait négative 12. 5. Peptonisation du lait positive 6. Formation d'hydrogène sulfuré: négative 7. Production de pigments mélanoides: positive 8. Tyrosinase: positive 9. Décomposition de la cellulose: négative 10. Intervalle de température pour la 10-30 C (la croissance: température opti- mum étant de -27 C) 11. Intervalle de pH pour la crois- 4,0-9,2 (le pH sance: optimum étant de 6,0-7,6). Les propriétés mycologiques de la souche SEN-366 se- ront résumées comme suit. Ainsi, elle produit des mycéliums aériens de couleur grise; la chaîne formée par les spores est spiralée et la surface des spores est lisse; les mycéliums de substrat sont jaunes à bruns, les pigments solubles sont jaunes à bruns jaunâtres et ces pigments sont des indica- teurs de pH qui virent au violet lorsqu'on leur ajoute de l'hydroxyde de sodium 0,05N; la mélanine est positive. Compte-tenu des propriétés mycologiques indiquées ci-dessus, la demanderesse a trouvé que le microorganisme de la présente invention appartenait à une catégorie de Streptomyces galilaeus. Comme la souche de la présente inven- tion a pour caractéristique de produire du SEN-366-D et/ou du SEN-366-P, elle a reçu le nom de Streptomyces sp.SEN-366 (FEZI BP-557). Cette souche a été déposée au Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Japon. Dans la présente invention,toutes les sortes de souches appartenant au genre Streptomyces en plus de la souche indiquée ci-dessus peuvent être utilisées dans la mesure o elles produisent SEN-366-D et/ou SEN-366-P. En outre, il existe plusieurs souches produisent SEN-366-D et/ou SEN-366- P qui sont des mutants artificiels (obtenus par 13. traitement par des rayons ultraviolets ou par des inducteurs de mutants pour les microorganismes tels que le nitrosogua- nidine) ou qui sont des mutants naturels, et, il va sans dire que ces mutants peuvent être utilisés eux-aussi dans la présente invention. Lorsqu'on applique la présente invention,le microorganisme qui produit SEN-366-D et/ou SEN-356-P est cultivé de la manière classique. Ainsi, le milieu peut être soit liquide, soit solide, et on utilise en général une culture agitée ou une culture avec agitation par de l'air en utilisant un milieu liquide. On peut utiliser n'im- porte quel milieu dans la mesure o il convient pour culti- ver les Actinomycetes et il produit du SEN-366-D et/ou du SEN-366-P. Des sources de carbone apporpriées sont le gluco- se, le saccharose, le maltose, le glycérol, le dextrine, la poudre d'amidon etc., et des sources d'azote appropriées sont la poudre de soja, la peptone, l'extrait de levure, l'extrait de viande, la liqueur de trempage du mais, le chlorure d'ammonium, etc. L'additiondi quantités appropriées de chlorure de sodium, de chlorure de potassium, de carbona- te de potassium, de divers phosphates etcopeut donner de bons résultatso Des quantités appropriées de fer, magnésium, etc. Peuvent être également ajoutées. Si nécessaire, on peut ajouter des vitamines ou un agent antimousse (pour inhiber la formation de mousses au cours de la fermentation). Les conditions de culture telles que le pH du mi- lieu, la température de culture, etc. peuvent être modifiées adéquatement à l'intérieur d'un intervalle ou dans des limi- tes tels que le SEN-366-D et/ou le SEN-366-P y soit pro- duits.Par exemple, le pH est de préférence de 6-8 et la tempé- rature est de préférence de 22-30 C (mieux encore de 24-27 C) dans le cas d'une culture agitée ou d'une culture avec aéra- tion/agitation. La durée de la culture dépend de l'échelle et d'autres circonstances et elle est ordinairement de 1 à 14. 7 jours au bout desquels le SEN-366-D et le SEN-366-P sont produits dans le liquide de culture. Les substances de la présente invention sont pré- sentes à la fois dans le filtrat de culture et dans le corps bactérien et elles peuvent être obtenues de l'un ou de l'autre.Lorsqu'on isole le SEN366-D et/ou le SEN-366-P à partir du filtrat ou à partir du corps bactérien, on peut utiliser des moyens classiques généralement admis. Par exemple,on peut utiliser isolément ou conjoin- tement la filtration, la centrifugation, l'extraction par divers solvants organiques (tels que les acétates, les al- cools, les cétones, les' éthers, etc.), l'adsorption/élution en utilisant divers adsorbants (tels que le gel de silice, l'alumine, etc.), la chromatographie, la filtration par gel, la chromatographie de partage, etc. Plus précisément, le filtrat de culture ou le mycélium est extrait avec unsolvant organique tel que l'acé- tate d'éthyle ou l'acétone, puis le filtrat de la culture, l'extrait cidessus ou une solution contenant les substances de la présente invention est envoyé à travers une colonne dans laquelle un adsorbant tel que le gel de silice (par exemple Wakogel C-300), et les substances adsorbées sont élues avec du méthanol, du chloroforme, de l'acétate d'éthy- le, du n-hexane et/ou d'autres solvants organiques. Si né- cessaire, l'éluat est traité par du charbon activé tel que le Darco G-60, il est adsorbé dans une colonne remplie d'un adsorbant tel que le gel de silice, élué avec du n- hexane, de l'acétate d'éthyle et/ou un autre solvant organi- que, et le solvant est évaporé de l'éluat pour donner le SEN-366-D et/ou le SEN-366-P huileux. Le SEN-366-P est alors chauffé à 30-120 C pendant 10 minutes à 18 heures (de préférence à 90-100 C pendant 15-60 minutes) pour donner un composé oléfinique *(IV) de SEN-366-D. 15. CH3 CH3 CH3 0O.. OH (Iv) On peut aussi chauffer une solution ou un filtrat de culture contenant le SEN-366-P comme ci-dessus puis le soumettre à une extraction et à une purification comme il a été décrit pour donner un composé oléfinique du SEN-366-D. Lorsque le SEN-366-D ainsi obtenu est soumis à une acétylation classique, purifié par chromatographie sur gel de silice et recristallisé,on obtient quatre espèces de dérivés acétylés (SEN-366-A1l SEN-366-A2, SEN-366-A3 et SEN-366-A4). De même, le SEN-366-D est benzoylé de la maniè- re classique et traité comme ci-dessus pour donner quatre espèces de dérivés benzoylés - SEN-366-Bl, SEN-366-B2, SEN-366-B3 et SEN-366-B&. Lorsque le SEN-366-D est traité de la même maniè- re, il donne des dérivés acylés par un radical acyle infé- rieur et arylcarbonylés. Lorsque les dérivés acylés par un radical acyle inférieur ou arylcarbonylés sont hydrolysés par des pro- cédés classiques, on obtient par exemple les substances suivantes. Ainsi, un composé oléfinique (mélange de D 3O et D3 indique ci-dessous) du SEN366-D d partir du SEN-366-A1 ou du SEN-366-A3; et un composé réduit (mélange de D2 et de D4 indiqus ci-dessous) à partir du SEN-366-A2 2 a -. 2 ou du SEN-366-A4. Lorsque le SEN-366-D est soumis à une réduction catalytique, on obtient seulement le composé ré- 3 duit (à savoir un mélange de D et D4)o 16. Configuration d'OR SEN-366D1 alpha double liaison SEN-366-D2 alpha simple liaison SEN-366-D3 béta double liaison SEN-366-D4 béta simple liaison Les propriétés des composés de la présente inven- tion sont les suivantes: (Propriétés physiques et Chimiques) (1) SEN-366-A Point de fu- Rf Pouvoir rotatoire spé- sion cifique [a]D dans CHC1l SEN-366-A1 125-127 C 0,77 -75,42 (c = 1,005) SEN-366-A2 125-128 0,75 -193,38 (c = 0,544) SEN-366-A3 Huileux 0,75 -58, 35 (c = 0,425) SEN-366-A4 129-131 0,73 -163,35 (c = 0,584) Les valeurs de Rf correspondent à une chromato- graphie sur couche mince en utilisant du gel de silice (Merck Art. 5554) et un mélange 2: 1 acétate d'éthyle/n- hexane. Spectres infrarouge: figure 1 à figure 4. Spectres de résonance magnétique nucléaire 1H: figure 11 à figure 14. Spectres de résonance magnétique nucléaire 13C: figure 19 à figure 22. (2) SEN-366-D: type oléfinique (D1, D3) et type réduit (D2, D4). Analyse élémentaire du type oléfinique: calculé pour C18H2807: C 60,66, H 7,92; Trouvé: C 60,45, H 8,17. Analyse élémentaire du type réduit: calculé pour C18H3007; C 60, 31, H 8,44; Trouvé: C 60,29, H 8,52. Masse moléculaire: 356 pour le type oléfinique et 358 pour le type réduit. Solubilité: soluble dans le méthanol, l'éthanol, 17. le chloroforme, l'acétone et l'acétate d'éthyle; peu soluble dans l'eau, l'éther de pétrole et le n-hexane. Acidité,neutralité ou basicité: neutre. Couleur de la substance: substance huileuse incolore ou poudre amorDhe. Réaction colorée: positive à l'acide sulfurique et au permanganate de potassium (pseudo-positive pour le type réduit); négative pour le réactif de Dragendorf; le réactif à la ninhydrine et le réactif de Ehrlich. Chromatographie sur couche mince: gel de silice (Merck Art 5554). La valeur de Rf est de 0,65 pour le chloroforme-mêthanol (10: 1) et de 0,32 pour l'acétate d'éthyle-n-hexane (2: 1). Spectres de RMN H: type oléfinique dans la figure 16 et type réduit dans la figure 17. Spectres IR: type oléfinique dans la figure 6 et type réduit dans la figure 7. (3) SEN-366-P Analyse élémentaire: calculé pour C18H3008: C 57,74, H 8,08; trouvé: C 57, 41, H 7,79. Masse moléculaire: 374. Solubilité: soluble dans l'eau, le méthanol, l'éthanol, le chloroforme, l'acétone et l'acétate d'éthyle; peu soluble dans l'éther de pétrole et le n-hexane. Acidité, neutralité ou basicité: neutre. Couleur de la substance: incolore. Réaction colorée: positive à l'acide sulfurique et au permanganate de potassium et négative au réactif de Dragendorf, au réactif à la ninhydrine et au réactif d'Ehrlich. Chromatographie sur couche mince: gel de silice (Merck Art. 5554). Rf pour le chloroforme/méthanol (10: 1): 0,38 et pour l'acétate d'éthyle/n-hexane (2: 1): 0,14. Spectres de RMN H: figure 18 Spectres IR: figure 8 18. (Propriétés biologiques) Les propriétés biologiques des composés de la présente invention sont les suivantes: Action inhibitrice contre l'agrégation plaquet- taire: (1) Matériels et méthode: L'échantillon est essayé après dissolutiondans du sulfoxyde de diméthyle. La préparation est effectuée de façon à obtenir une concentration finale du solvant de 1 %. Un sulfoxyde de diméthyle de la même concentration est utilisé comme témoin. Comme inducteurs de l'agrégation plaquettaire, on utilise de i'ADP (concentration finale: iM), de 1'AA (acide arachidonique) (concentration finale: pM) et du collagène (concentration finale: 10 pg/ml). (2) Préparation des plaquettes: Du sang est prélevé dans l'artère du cou totale de lapins mâles d'un poids corporel de 2,0-2,5 kg. On ajou- te au sang 1/10 volume de solution de citrate de sodium à 3,8 %, on agite doucement le mélange, on le centrifuge à 1300 x g pendant 2 minutes, et on utilise le liquide surnageant obtenu comme plasma avec une quantité abondante de plaquettes (désignée ci-après par PRP). On centrifuge encore le précipi- té à 1600 x g pendant 10 minutes et on utilise le liquide surnageant obtenu comme plasma avec peu de plaquettes (dési- gné ci-après en abrégé par PPP). (3) Procédé de mesure du pouvoir d'agrégation: On utilise un appareil de mesure de l'agrégation plaquettaire et on enregistre des modifications de l'absor- bance par agrégation en fonction du temps. Ainsi, on prélève 200 microlitres de PRP, on ajoute sa différence avec le PPP à une certaine valeur, puis on ajoute 25 microlitres de solutiontémoin ou de solu- tion d'essai, on agite le mélange (à 1000 tours/minute) pendant 1 minute, on ajoute 25 microlitres d'inducteur de l'agrégation et enregistre les variations d'absorbance. 19. Le rapport inhibiteur est calculé à partir de l'expres- sionsuivante à partir du rapport d'agrégation maximum du témoin (A en %) et de celui de la solution d'essai (B en %): Rapport inhibiteur (%)= (1 -) x 100 On calcule les rapports inhibiteurs avec diverses concentrations de la solutiond'essai et on calcule à partir de ceux-ci les CI50 (concentration inhibitrice à 50 %). Le résultat avec les composés représentatifs de la présente invention est donné dans le tableau 1. Dans le tableau, SEN-366-BT1 à SEN-366-BT4 sont les composés dans lesquels R est un radical butyryle. (Toxicité) Il a été confirmé que les composés de la présen- te invention présentent une très faible toxicité. Par exem- ple,la DL50 du SEN-366-D pour la souris n'est pas inférieu- re à 500 mg/kg et n'est pas inférieure à 100 mg/kgpar administration orale et par injection intrapéritonéale, respectivement. TABLEAU 1 CI50 (pg/ml) SEN-366 Collagène ADP AA i ____ 10 pg/ml 5 PM 150 IM - D 0,016 0,22 1,9 - A1 - A2 0,54 1,6 6,0 - A 0,47 0,44 1,6 - A4 0,27 >10 5,4 - P 1,6 4,4 25 - B1 0,16 1,1 0,32 - B2 1,7 5,7 1,6 - B3 0,17 1,0 0,55 - B4 2,9 6,5 112 - BT1 0,17 1,1 1,55 - BT2 0,53 1,35 2,1 - BT3 0,16 0,47 0,64 - BT4 1,6 5,3 5,7 20. Comme il a été décrit ci-dessus, les composés de la présente invention présentent des propriétés biologi- ques très importantes,à savoir une action inhibitrice contre l'agrégation plaquettaire,et sont utiles comme remède pour la thrombose, comme inhibiteur pour la métastase du cancer, etc. Lorsque le composé de la présente invention est administré à des malades souffrant de thrombose, le composé lui-même ou une composition contenant-0,1 a 99,5 % du compo- sé (de préférence 0,5 à 90 %) dans un excipient non toxique et inerte est administré à des animaux,parmi lesquels l'être humain. Comme excipients, on peut utiliser un ou plusieurs diluants, véhiculesou agentsauxiliairessous forme solide, semi-solide ou liquide. Il est souhaitable que la composi- tion pharmaceutique soit administrée sous forme de dose uni- taire. La composition pharmaceutique de la présente inven- tion peut être administrée par voie orale, tissulaire, loca- le, dermique ou rectale. Il va sans dire que l'on doit admi- nistrer des préparations pharmaceutiques appropriées à cha- que voie. Par exemple,des comprimés ou capsules délitables sont particulièrement recommandés dans l'administration ora- le. Il est souhaitable que la dose d'inhibiteur de l'agrégation plaquettaire soit réglée en fonction de l'age, du poids corporel, etc. du patient, de la voie d'adminis- tration et de la nature et de la gravité de la maladie. Ha- bituellement, la dose est en général de 0,1 à 1000 mg pour un adulte par jour. Dans certains cas, il suffit d'utiliser une dose plus faible que cidessus,tandis que dans d'autres cas, il sera nécessaire d'utiliser une dose supérieure. Lorsqu'on en administre une forte dose, il est souhaitable de l'administrer séparément, c'est-à-dire en la répartissant en plusieurs administrations par jour. L'administration orale peut être effectuée en 21. utilisant des formes de préparation pharmaceutique sous des formes d'unité de dosage solide ou liquide telles que par exemple poudres, poudres diluées, comprimés, comprimés enrobs de sucre, capsules,granulés,suspensions,liquides, sirops, gouttes, comprimés sublinguaux etc. La poudre peut être préparée en pulvérisant la substance active à une taille de particule appropriée. La poudre diluée peut être préparée en pulvérisant la substance active à une taille de particule appropriée puis en mélangeant avec un excipient pharmaceutique finement pulvérisé lui-aussi,tel que par exemple un hydrate de carbo- ne comestible (par exemple l'amidon, le mannitol, etc.). Si nécessaire, on peut lui ajouter un agent aromatisant, un conservateur, un dispersant, un colorant, un parfum, etc. Les capsules peuvent être préparées en introduisant de la poudre ou de la poudre diluée telle que préparée ci- dessus ou un granulé préparé d'une manière décrite à l'arti- cle comprimé dans une enveloppe de capsule telle qu'une capsule de gélatine. Il est également possible de mélanger à la poudre un lubrifiant ou un agent fluidisant (tel que de la silice colloïdale, du talc, du stéarate de magnésium, du stéarate de calcium, du polyéthylèneglycol solide, etc.), après quoi on l'introduit dans l'enveloppe de capsule. Lors- qu'on ajoute un agent désintégrant ou un agent solubilisant (tel que par exemple la carboxyméthylcellulose, la carboxy- méthylcellulose calcique, une hydroxypropylcellulose à fai- ble degré de substitution, du carbonate de calcium, du carbo- nate de sodium, etc.), il est possible d'améliorer l'efficaci- té du produit pharmaceutique lors de l'administrationee la capsule. Il est également possible d'amener la poudre fine de la présente invention sous forme de suspension ou de dispersion dans une huile végétale, du polyéthylèneglycol, du glycérol, un agent tensio-actif, etc. puis de l'emballer avec une feuille de gélatine pour donner une préparation de 22. capsule molle. Les comprimés peuvent se préparer en prépa- rant d'abord un mélange pulvérulent, en le transformant en granulé ou en briquette et en lui ajoutant un lubri- fiant ou un agent désintégrant, après quoi on le comprime pour fabriquer des comprimés. Le mélange pulvérulent est préparé en mélangeant la substance adéquatement pulvérisée avec le diluant ou la base indiqués cidessus. Si on le désire, on peut y associer un agent de combinaison (tel que la carboxyméthyl- cellulose sodique, les alginates, la gélatine, la polyvinyl- pyrrolidone, l'alcool polyvinylique, etc.), un agent retar- dant la solubilisation (tel que la paraffine), un agent de réabsorption (tel qu'un sel quaternaire) et/ou un adsor- bant (tel que la bentonite, le kaolin, le phosphate dical- cique, etc.). On humidifie ensuite le mélange pulvérulent obtenu avec un agent de combinaison (tel qu'un sirop, une pâte d'amidon, de la gomme arabique, une solution de cellu- lose ou une solution de polymère), puis on le fait passer à force à travers un tamis pour donner des granulés. Au lieu de préparer les granulés à partir de la poudre telle quelle, il est également possible de faire passer d'abord la matière de départ dans une machine à fabriquer les comprimés,puis de pulvériser la briquette obtenue de forme incomplète pour donner des granulés. Les granulés obtenus sont mélangés avec un lubri- fiant tel que l'acide stéarique, un stéarate, le talc, de l'huile minérale, etc. de façon à éviter leur adhérence les uns aux autres. Après addition de lubrifiant, le mélange tel quel est transformé en comprimés par compression. Au lieu de le transformer en granulés ou en briquettes, le produit pharmaceutique peut être mélangé avec un excipient flui- disé et inerte,après quoi on le transforme directement en comprimés. Un enrobage protecteur transparent ou semi-trans- parent (tel qu'un enrobage fermé de gomme laque), un 23. enrobage de sucre ou de polymère, et un enro- bage tel que de la cire peuvent également être utilisés. D'autres formes d'administration orale telles que solution, sirop, élixir, etc. peuvent être transformées en forme de dose unitaire dans lesquelles une certaine quan- tité du produit pharmaceutique est contenue dans une certaine quanttité de la forme. Le sirop peut être préparé en dissol- vant le composé dans une solution aqueuse appropriée à la- quelle on ajoute au préalable un parfum ou un aromate. L'élixir est fabriqué en utilisant un excipient alcoolique non toxique. La suspension est obtenue en dispersant le composé dans un excipient non toxique. Dans ces divers cas, on peut également ajouter si nécessaire un agent solubili- sant et des émulsionnants (tels que des alcools isostéary- liques éthoxylés, des esters du polyoxyêthylènesorbitol, etc.), des conservateurs, des aromates (tels que l'essence de menthe poivrée, la saccharine, etc.) etc. Si on le désire, la forme de dose unitaire pour l'administration orale est transformée en microcapsule Cette forme peut être enrobée ou incluse dans des poly- mères ou de la cire de façon à obtenir un prolongement de la durée d'action ouune libération sur une durée prolon- gee. L'administration parentérale peut être effectuée en utilisant la forme de dose unitaire liquide (telle que solution ou suspension) pour l'injection sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse. Celle-ci est fabri- quée en mettant en suspension ou en dissolvant une certaine quantité de composé dans un excipient liquide non toxique approprié à l'injection tel qu'un solvant aqueux ou huileux, après quoi on stérilise cette suspension ou solution. On peut aussi introduire une certaine quantité du composé dans un flacon et stériliser et fermer de manière étanche le flacon avec son contenu. Pour dissoudre ou mélanger aussi- tôt avant l'administration, on prépare un ingrédient actif 24. pulvérisé ou lyophilisé en même temps que des flacons et des excipients. Pour rendre la solution pour injection isotonique, on peut lui ajouter un sel non toxique ou une solution de sel. L'utilisation concomitante de stabilisants conservateurs, émulsionnants, etc. est également possible. L'administration rectale est effectuée en utilisant des suppositoires prépares en mélangeant le composé avec un solide à bas point de fusion et soluble ou insoluble dans l'eau (tel que le polyéthylèneglycol, le beurre de cacao, des esters supérieurs tels que le palmitate de myris- tyle, etc.) ou un mélange de ceux-ci. Aux préparations de l'invention, il est également possible d'ajouter d'autres produits pharmaceutiques tels que le ticlopidine à l'ingrédient actif de la présente inven- tion.On peut aussi administrer simultanément ces autres pro- duits pharmaceutiques. (EXEMPLES) Les exemples non limitatifs suivants sont donnés à titre d'illustrationde l'invention. EXEMPLE 1 Fabrication du SEN-366-D, A1_4, B1_4, D1, D3etD2 et D4 (1) On inocule une culture inclinée de Streptomyces sp. SEN-366 dans un Erlenmeyer de 500 ml contenant 100 ml de milieu d'ensemencement stérilisé contenant 2 % d'amidon soluble, 1 % de poudre de farine de soja, 0,5 % de chlorure de sodium, 0,05 % de chlorure de potassium, 0,05 % de sulfa- te de magnésium, 0,2 % de nitrate de sodium et 0,35 % de carbonate de calcium; pH = 7,0) et on la soumet à une cultu- re agitée à 27 C pendant 3 jours pour donner un liquide de cul- ture d'ensemencement. Le liquide de culture d'ensemencement (300 ml) est inoculé dans un fermenteur à bocaux de 30 litres conte- nant 15 litres de milieu de fermentation( le même milieu que la culture d'ensemencement) et il est soumis à une cul- ture aaitée avec aération à 28 C pendant 2 jours (aération: 25. litres par minute, vitesse d'agitation 500 tours/minute). Le liquide de culture (70 litres) obtenu ici est filtré pour le s3parer des mycéliums. (2)(Extraction; purification de la fraction D) Le filtrat de culture (70 litres) obtenu dans l'opé- ration ci-dessus est extrait deux fois avec 70 litres d'acé- tate d'éthyle. On rassemble les extraits, on fait évaporer le solvant de ceux-ci sous vide, et on obtient 5,7 g du résidu. On y ajoute 4 litres d'un mélange de chloroforme et d'eau (1: 1) et on le soumet à un partage. On recueille la couche chloroformique et on élimine le solvant sous vide, ce qui donne 3,2 g du résidu. On soumet le résidu à une chromatographie sur gel de silice, et on élue d'abord avec du chloroforme,puis avec un mélange de méthanol et de chlo- roforme (2 0% - 20 %). On recueille les fractions contenant les substances actives, on en fait évaporer le solvant sous vide,et l'on obtient 1,1 g de fraction brute contenant des substances actives.On les traite par 200 ml d'acétate d'éthyle contenant 2 g de charbon actif (Darco G-60), on fait évaporer l'acétate d'éthyle sous vide, puis on soumet une fois encore à une chromatographie sur une colonne de gel de silice, on élue avec un mélange 1: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle,et on fait évaporer le solvant sous-vide ce qui donne 200 mg de SEN-366-D. Les spectres IR du produit sont donnés dans la fi- gure 5. Les spectres de RMN H sont donnés dans la figure 15. (3) (Préparation du SEN-366-A1 à A4) On dissout 1 granmme de SEN-366-D obtenu de la même manière que ci-dessus dans 3 ml de pyridine, on ajoute 2 ml d'anhydride acétique, et on agite le mélange à la température ambiante pendant 3 heures. Lorsque la réaction est terminée, on ajoute 50 ml d'eau et on extrait deux fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle. On lave la couche acetate d'éthyle avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre et on en élimine l'acétate d'éthyle et la pyridine sous vide. On ?571964 26. soumet le résidu (1,05 g) à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on élue avec un mllancge 2: 1 de n-hexa- ne et d'acétate d'éthyle, ce qui donne quatre espèces de dérivés acétylés de SE4-366-D, à savoir SELN-3G66-A1, SEN-366-A2, SEN-366-A3 et SEN-366-A4 avec des rendements de 50, 65, 120 et 250 mg, respectivement. (4) (Préparation des SEN-366-D1, D3) On ajoute du SENi4-366-A3 (400 mg) obtenu de la même manière que ci-dessus à 5 ml d'hydroxyde de sodium O,lN, on chauffe le mélange à 50 C et on l'agite pendant 1 heure. Après hydrolyse,on l'extrait deux fois avec 50 ml d'éther et on fait évaporer l'éther sous vide, ce qui donne 250 mg de résidu. On soumet le résidu à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 1: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle,ce qui donne 190 mg du composé oléfinique de SEN-366-D. Ses spectres IR sont don- nés dans la figure 6; les spectres de RMN 1H dans la figure et les spectres UV dans la figure 9. (5) (Préparation de SEN-366-D2, D4) On dissout du SEN-366-D (2,5 g), obtenu de la même manière que ci-dessus,dans 25 ml d'éthanol, on ajoute 300 mg de palladium sur carbone (à 5 %), et on y ajoute de l'hydrogène gazeux en agitant.On obtient quantitativement le produit de réductionde SEN-366-D (2,43 g). Ses spectres IR, ses spectres UV et ses spectres de RMN H sont donnés dans se les figures 7, 10 et 17, respectivement. (6) (Préparation du composé benzoylé (SEN-366-B1 à B4)). On dissout du SEN-366-D (1 g) obtenu de la même manière que ci-dessus dans 5 ml de pyridine, on ajoute 2,5 g d'anhydride benzoique et on agite le mélange à 80 C pendant 4 heures. Après la réaction, on ajoute 100 ml d'eau et on extrait deux fois avec 100 ml d'acétate d'éthyle. On lave la couche acétate d'éthyle avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre et on en fait évaporer l'acétate 27. d'éthyle et la pyridine sous vide. On extrait deux fois le résidu obtenu (3,17 g) avec 100 ml d'éther de pétrole, on en fait évaporer le solvant, on soumet le résidu (2,75 g) à une chromatographie sur colonne de gel de silice, et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle,ce qui donne 4 espèces de composés benzoylés du SEN-366-D, à savoir SEN-366-B1, SEN-366-132, SEN366-B3 et SEN-366-B4, avec des rendements de 90, 60, 90 et 40 mg respectivement. Leurs spectres de RN 1H sont donnés dans les figures 23 à 26. Leurs spectres IR ont été mesurés en utilisant un comprimé de bromure de potassium. Les spectres de RM- 1H et de RNl 13C ont été mesurés tous deux dans CDC13 en utilisant du TMS comme étalon interne. Les spec- tres UV ont été mesurés en dissolvant la substance dans du méthanol. (7) (Préparation des composés-butyrylés (SEN-366-BT à BT4)) On dissout du SEN-366-D (1 g) obtenu de la même manière que ci-dessus dans 3 ml de pyridine, on ajoute 400 mg de chlorure de n-butyryle et on agite le mélange à la tempé- rature ambiante pendant 20 minutes. Après la réaction, on effectue la même opération qu'en (6) ci-dessusce qui donne 4 espèces de composés nbutyrylés de SEN-366-D, à savoir SEN-366-BT1, SEN-366-BT2 SEN-366-BT3 et SEN-366-BT4, avec des rendements de 50, 40e 200 et 150 mg, respectivement. Leur chromatographie sur couche mince (en utilisant du gel de silice * Merck Art. 5554; solvant de développement: mélange 1: 1 d'acétate d'éthyle et de n-hexane),donne des valeurs de Rf de 0,71, 0,67, 0,63 et 0,58, respectivement. * 24 d Par ailleurs, on trouve que les valeurs d' [a]24 de SEN-366-BT3 et de SEN-366-BT4 sont de -30,32 (c = 0,521) et de -138,07 (c = 0,562), respectivement.- EXEMPLE 2 (Préparation du SEN-366-P) On extrait deux fois avec 2 litres d'acétone des 28. mycéliurns humides frais (1,8 kg) obtenus de la même maniè- re que (1) de l'exemple l,et on les concentre sous vide. On soumet le résidu obtenu (35 g) à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 1: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle,ce qui donne 150 mg de SEN-366-P. Ces spectres IR et de RMU II sont donnés res- pectivement dans les figures 8 et 18. EXEMPLE 3 (Transformation du SEN-366-P en SEN-366-D) (1) Transformation par chauffage du SEN-366-P en composé oléfinique du SEN-366-D. On chauffe dans de l'eau bouillante (98-100 C) pendant 20 minutes une solution aqueuse (10 ml) contenant 2,8 mg de SEN-366-P obtenue de la même manière que dans l'exemple 2,et on l'extrait deux fois avec 10 ml d'acétate d'éthyle. On sèche la couche d'acétate d'éthyle sur du sul- fate de sodium anhydre et on fait évaporer l'acétate d'éthy- le sous vide,ce qui donne 2,2 mg de composé oléfinique du SEN-366-D. (2) (Transformation en composé oléfinique du SEN-366-D par un traitement de chauffage du liquide de cul- ture) On chauffe à 90-95 C pendant 20 minutes le liquide de culture (10 litres) obtenu de la même manière qu'en (1) de l'exemple 1, on le refroidit et on élimine le corps bac- térien par filtration. On extrait le filtrat deux fois avec litres d'acétate d'éthyle et on le concentre sous vide, ce qui donne 1,3 g de résidu. Celui-ci est traité de la même manière qu'en (2) de l'exemple 1 pour donner 100 mg de composé oléfinique du SEN-366-D. Lorsqu'on traite le même liquide de culture comme en (2) de l'exemple 1 sans le traitement de chauffa- ge, on obtient 15 ml de SEN-366-D. L'explication et l'illustration seront effectuées à présent en se référant aux composés du groupe 2. 257 1964 29. Le groupe 2 de l'invention concerne des substan- ces physiologiquement actives nommées SEN-366,utiles comme produits pharmaceutiques,et leur préparation. Il concer- ne plus particulièrement des substances physiologiquement actives nommées SEN-366,représentées par la formule géné- rale (V) suivante CH 3CH3 CH3 0 o o 0 0. .. y X() (V) dans laquelle Y est =C=O ou =CHOR o R est un radical alkyle inférieur en C1 à C4 ou un radical arylcarbonyle substitué; X est l'hydrogène ou un hydroxy; et -est une liaison simple ou double et leurs procédés de preparation. Les nouvelles substances physiologiquement acti- ves conformes à la présente invention inhibent de manière marquée l'agrégation des plaquettes et sont obtenues par modification substance de substances produites par un nou- veau microorganisme isolé du sol. Le microorganisme de la présente invention appar- tient au genre Streptomyces et SEN-366-D (substances répon- dant à la formule générale (VI), dans lesquelles R' et X" sont tous deux l'hydrogène et est une liaison simple ou double) et SEN-366-P (substances répondant à la formule générale (VI),dans laquelle R' est l'hydrogène, X' est un hydroxy et est une liaison simple ou double) sont des substances directement produites par le microorganisme. Dans la présente invention, ces composés produits par le microorganisme et leurs dérivés sont appelés SEN-366. 30. CH3 CH3 CH3 0 -0 0 O0 O O 0 OR' (VI) XI La demanderesse a effectué des études poussées sur des composés qui sont similaires à ceux connus et à ceux appartenant au Groupe 1, elle a trouvé plusieurs com- posés présentant des effets physiologiques identiques ou supérieurs par comparaison à ceux ci-dessus, et réalise la présente invention pour le GRoupe 2. Les composés de la présente invention sont repré- sentés par la formule générale (V) et des exemples des substituants présents dans cette formule sont les suivants. L'alkyle inférieur représenté par R dans la dé- finition de Y peut être soit linéaire,,soit ramifié, et ce sera par exemple un radical méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, sec-butyle, tert-butyle, etc. Le groupe aryle du groupe arylcarbonyle substitué est par exemple un groupe phényle,et ce phényle peut posséder des substituants identiques ou différents dans n'importe quelle position. Un exemple typique d'un tel substituant du groupe phényle est un halogène,et plus précisément le chlore ou le fluor. Les composés de la présente invention répondent à la formule générale (V) ci-dessus,et ils peuvent par exemple être ceux énumérés ci-dessous. Dans le tableau, les SEN-366-CB sont des composés répondant à la formule gé- nérale (V) dans lesquels R est un radical p-chlorobenzoyle; les SEN-366-M sont ceux dans lesquels R est un groupe mé- thyle, les SEN-366-E sont ceux dans lesquels R est un groupe éthyle, et les SEN-366-L sont ceux dans lesquels 31. Y est =C=O. Orientation de OR - SEN-366-CB1 a double liaison SEN-366-CB2 a simple liaison SEN-366-CB3 double liaison SEN-366-CB4 simple liaison SEN-366-M1 a double liaison SEN366-M a simple liaison SEN-366-M3 -idouble liaison SEN-366-M4 simple liaison SEN-366-E1 a double liaison SEN-366-E2 simple liaison SEN-366-E3 double liaison SEN-366-E4 _Lsimple liaison SEN-366-L31 double liaison SEN366-L2 simple liaison 20. _ Le SEN-366-D obtenu dans le Groupe 1 peut être alkylé par des moyens classiques. Cette alkylation peut utiliser un procédé utilisé dans la réaction des sucres0 à savoir l'O-alkylation du groupe hydroxy d'un carbone anomè- re. Par exempleg ce but peut être atteint par la réaction avec des alcools inférieurs en présence de catalyseurs aci- des tels que des acides minéraux, un acide de Lewis, un échangeur de cations, etc.;on préfère utiliser un acide de Lewis. Le SEN-366-D tel qu'il a été obtenu ci-dessus est purifié par chromatographie sur gel de silice et recris- talliser pour le séparer en quatre produits alkylés. Ainsi, à partir du SEN-366-D méthyléïon obtient le SEN-366-M le SEN-366M2, le SEN-366-M3 et le SEN-366-M4,et à partir du SEN-366-D éthylé, on obtient le SEN-366-E1 le SEN-366-E2, le 32. SEN-366-E3 et le Sen-366-E4. Le SEN-366-D peut aussi être arylcarbonylé par des moyens classiques. Dans cette arylcarbonylation, on peut utiliser la réaction d'estérification connue. Ainsi, par exemple,un anhydride d'acide ou un halogénure d'aci- de est utilisé isolément ou conjointement avec un cataly- seur approprié. Lorsque le SEN-366-D est arylcarbonylé tel quel, on obtient quatre espèces de substances arylcarbonylées. Par exemple la para-chlorobenzoylation donne SE.l-366-CB1, SEN-366-CB2, SEN-366-CB3 et SEN-366-CB4. Des cétones peuvent être préparées en partant de SEN-366-D. La préparation de ces cétones s'effectue par oxydation du groupe hydroxyleen une position de carbone anomère et,en ce qui concerne le procédé d'oxydation, on peut utiliser des moyens classiques. Ce sont par exemple l'oxydation directe par le sulfoxyde de diméthyle, l'oxy- dation avec du sulfoxyde de diméthyle activé en utilisant du sulfoxyde de diméthyle et du dicyclohexylcarbodiimide, etc. L'oxydation en utilisant des composés de l'argent tels que l'oxyde d'argent, le carbonate d'argent, le ni- trate d'argent, etc. est particulièrement préférée. Propriétés des composés de la présente invention telles qu'illustrées ci-dessous. (Propriétés physiques et chimiques) (1) SEN-366-CB: F Rf Pouvoir rotatoire spécifique [a]25 D dans CHC13 SEN-366-CB1 93-95 C 0,75 -53,1 (c = 0,513) SEN-366-CB2 112-114 0,70 -145,1 (c = 0,500) SEN366-CB3 91-93 0,62 -58,3 (c = 0,529) SEN-366-CB4 110-112 0,57 -136,5 (c = 0,532) Rf: chromatographie sur couche mince (gel de silice; Art 5554 (Marck)). Solvant de développement: 33. n-hexane/acétate d'éthyle (1: 1) Analyse élémentaire SEN-366-CB - SEN-366-CB3 (C25H3108C1) MM 494,5 Calculé (%): C: 60,67 H: 6,31 C1: 7,16 Trouvé (%) C: 60,42 H: 6,41 Cl: 7, 24 (CB1) C: 60,40 H: 6,45 C1:7,38 (CB3) SEN-366-CB - SEN-366-CB4 (C25H3308C1) MM 496,5 Calculé (%) C: 60,42 H: 6,69 C1:7,13 Trouvé (%) C: 60,32 H: 6,68 C1 7,01 (CB2) C: 60,14 H: 6,58 C1:6,91 (CB4) 2 SEN-366-M F ( C) Rf] dans CHC1 fD3 SEN-366-M1 (huileux) 0,62 -70,54 (c= 0,550) SEN366-M2 91-93 0,58 -193,50 (c = 0,475) SEN-366-M3 (huileux) 0,54 -56,21 (C = 0,429) 20. SEN-366-M4 91N93 0,51 -173,52 (c =_0,441) Rf chromatographie sur couche mince (gel de silice; Art 5554, de Merck). Solvant de développement: n-hexane/acétate d'éthyle (1: 1). Analyse élémentaire SEN-366-M - SEN-366-M3 (C19H3007) MM 370 Calculé (%) C: 61,60 H: 8,16 Trouvé (%) C: 61,35 H: 8,31 (M1) C 61,33 H: 8,28 (M3) SEN-366-M - SEN-366-M4 (C19H3207) MM 372 Calculé (%) C 61,27 H: 8,66 Trouvé (%) C 61,09 H: 8,81 (M2) C: 61,20 H: 8,79 (M4) 34. 3 SEN-366-E F (OC) Rf l[a]D dans CHC13 SEN-366-E1 (huileux) 0,79 -53,1 (c = 0,330) SEN-366-E2 42 - 43 0,74 -145,2 (c = 0,500) SEN-366-E3 (huileux) 0,69 -41, 3 (c = 0,420) SEN-366-E4 42 - 43 0,66 -126,7 (c = 0,380) Rf: chromatographie sur couche mince (gel de silice; Art 5554, de Merck). Solvant de développement: n-hexane/acétate d'éthyle (1: 1). Analyse élémentaire: SEN-366-E1 - SEN-366-E3 (C20H3207) MM 384 Calculé (%) C: 62,48 H: 8,39 Trouvé (%) C: 62,60 H: 8,21 (E1) C: 62,63 H: 8,35 (E3) SEN-366-E2 - SEN-366-E4 (C20H3407) MM 386 Calculé (%) C: 62,15 H: 8,87 Trouvé (%) C: 61,98 H: 8,99 (E2) C: 62,07 H: 8,92 (E4) 4 SEN-366-L F ( C) Rf [a]25 dans CHC13 SEN-366-L1 155'156 0,75 -41,33 (c = 0,300) SEN366-L2 135-136 0,75 -208,81 (c = 0,885) Rf: chromatographie sur couche mince (gel de silice; Art 554 de Merck). solvant de développement: CHC13/MeOH (25: 1). 35. Analyse élémentaire SEN-366-L1 (C18H2607) MM 354 Calculé (%) C: 61,00 H: 7,40 Trouvé (%) C: 61,13 H: 7,26 SEN-366-L2 (C18H2607) MM 356 Calculé (%) C: 60,66 H: 7,92 Trouvé (%) C: 60,42 H: 7,76 (Propriétés biologiques) Les propriétés biologiques des composés du Groupe 2 telles que déterminées par la méthode indiquée dans la par- tie correspondante du composé du Groupe 1 sont données dans le tableau 2. TABLEAU 2 CI50 (pg/ml) SEN-366 ICollagène ADP AA pg/ml 5 pM 150 pM - CB1 0,06 0D30 1,1 - CB2 1,0 3,2 6,2 - CB3 0,053 0,29 0,68 - CB4 1,7 4,2 5 - M1 5,5 17,0 29,0 - M2 16,3 55,0 42,0 - M3 5,2 15,0 25,0 - M4 18,0 53,0 47,0 -- E1 2,0 7,2 10,3 - E2 22,1 100 - E3 4,4 12,4 14,0 E4 16,5 100 - L1 5,0 12,0 27O,0 - L2 48,0 50,0 100 36. (Toxicité) Il a été confirmé que les composés de la pré- sente invention ont une très faible toxicité. Par exem- ple, les valeurs de DL50 du SEN-366-CB pour la souris ne sont pas inférieures à 500 mg/kg et ne sont pas infé- rieures à 100 mg/kg par administration orale et par injec- tion intrapéritonéale, respectivement. (EXEMPLES) Les exemples non limitatifs suivants sont donnés à titre d'illustration des composés du Groupe 2. EXEMPLE DE REFERENCE 1 Préparation du SEN-366-D (1) Une culture inclinée de Streptomyces sp. SEN366 est implantée dans un Erlenmeyer de 500 ml contenant 100 ml de culture d'ensemencement stérilisée contenant 2 % d'ami- don, 1 % de poudre de soja, 0,5 % de chlorure de sodium, 0,05 % de chlorure de potassium, 0,05 % de sulfate de magnésium,-0,2 % de nitrate de sodium et 0,35 % de carbona- te de calcium (pH = 7,0) et soumise à une culture agitée à 27 C pendant 3 jours pour donner un liquide de culture d'ensemencement. Le liquide de culture d'ensemencement (300 ml) est mis à incuber dans un fermenteur à bocaux de 30 litres contenant 15 litres de milieu de fermentation (le même mi- lieu que la culture d'ensemencement) et soumis à une cultu- re agitée avec aération à 28 C pendant 2 jours (aération: litres par minute; vitesse agitation: 500 tours/minute). Le liquide de culture (70 litres) obtenu est filtré pour le séparer du corps bactérien. (2) (Extraction; purification de la fraction D) Le filtrat de culture (70 litres) obtenu dans l'opération ci-dessus est extrait deux fois avec 70 li- tres d'acétate d'éthyle. On rassemble les extraits, on a fait évaporer le solvant sous vide et on obtient 5,7 g de résidu.On y ajoute 4 litres d'un mélange de chloroforme et 37. d'eau (1: 1) et on le soumet à un partage. On prélève la couche chloroformique et on élimine le solvant sous vide, ce qui donne 3,2 g de résidu. On soumet le résidu à une chromatographie sur gel de silice, et on l'.élue d'abord avec du chloroforme,puis avec un mélange de méthanol et de chloroforme (2 % -7 20 %). On recueille les fractions contenant les substances actives, on en fait évaporer le solvant sous vide et l'on obtient 1,1 g de fraction brute contenant des substances actives. On la traite par 200 ml 0o d'acétate d'éthyle contenant2 g de charbon actif (Darco G-60), on fait évaporer l'acétate d'éthyle sous vide, puis on la soumet une fois de plus à une chromatographie sur gel de silice, on l'élue avec un mélange 1: 1 de n- hexane et d'acétate d'éthyle et on fait évaporer le solvant sous vide, ce qui donne 200 mg de SEN-366-D. EXEMPLE 4 Préparation des SEN-366-CB1 à CB4 On dissout le SEN-366-D (200 mg) obtenu par le procédé ci-dessus dans 1,0 ml de pyridine, on ajoute 150 mg de chlorure de p-chlorobenzoyle et on agite le mélange à la température ambiante pendant 30 minutes. Après la réaction, on y ajoute de l'eau distillée (50 ml), et on extrait le mélange deux fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle. On lave la couche d'acétate d'éthyle à l'eau, on la sèche sur sul- fate de sodium anhydre et on en fait évaporer l'acétate d'éthyle et la pyridine sous vide. On soumet le résidu (300 mg) à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n- hexane et d'acétate d'éthyle,ce qui donne 4 espèces de composés p- chlorobenzoylés du SEN-366-D, à savoir les SEN-366-CB1, SEN-366-CB2, SEN- 366-CB3 et SEN-366-CB4 avec des rendements de 10, 15, 10 et 12 mg, respectivement. EXEMPLE 5 Préparation desSEN-366-M1 à M4 On dissout du SEJ-366-D (800 mg) obtenu par le 38. procédé ci-dessus dans 4,0 ml de méthanol anhydre, on y ajoute 400 mg de sulfate de magnésium anhydre et on chauf- fe le mélange sous reflux pendant 3 heures. Apres la réac- tion, on élimine les matières insolubles par filtration. On fait évaporer le filtrat à sec sous vide. On soumet le ré- sidu (750 mg) à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthylece qui donne 4 espèces d'éthers méthyli- ques du SEN-366-D, à savoir les SEN-366-M1, SEN-366-M2, SEN-366-M3 et SEN366-M4, avec des rendements de 15, 26, 10 et 10 mg respectivement. EXEMPLE 6 Préparation des SEN-366-E1 à E4 On dissout le SEN-366-D (300 mg) obtenu dans le procédé ci-dessus dans 2,0 ml de méthanol, on ajoute mg de sulfate de magnésium anhydre, et on chauffe le mélange sous reflux pendant 2 heures. Après la réaction, on élimine les matières insolubles par filtration. On fait évaporer le filtrat à sec sous vide.Onosoumet le résidu (290 mg) à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange de 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle, ce qui donne 4 espèces d'éthers éthyliques du SEN-366-D, à savoir les SEN-366-E1, SEN-366-E2, SEN-366-E3 et SEN-366-E4 avec des rendements de 10, 25, 10 et 20 mg respectivement. EXEMPLE DE REFERENCE 2 Préparation de composés réduits et de composés oléfiniques du SEN-366-D (1) On dissout du SEN-366-D (1 g) obtenu dans le procédé suivant dans 3 ml de pyridine, on ajoute 2 ml d'anhydride acétique et on agite le mélange à la température ambiante pendant 3 heures. Après la réaction, on y ajoute ml d'eau et on extrait le mélange deux fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle. On lave la couche d'acétate d'éthyle à l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre, et on 39. fait évaporer l'acétate d'éthyle et la pyridine sous vide. On soumet le résidu (1,05 g) a une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n- hexane et d'acétate d'éthyle, ce qui donne 4 espèces de composés acétylés du SEN-366-D, à savoir les SEN-366-A1, SEN-366-A2, SEN-366-A3 et SEN-366- AI, avec des rendements de 50, 65, 120 et 250 mg, respective- ment. (2) On ajoute du SEN-366-A3 (400 mg),.obtenu de la même manière que ci-dessus,à 5 ml d'hydroxyde de sodium O,1N, on chauffe le mélange à 50 C et on l'agite pendant 1 heure. Après l'hydrolyse, on l'extrait deux fois avec ml d'éther, on fait évaporer l'éther de l'extrait sous-vide et l'on obtient 250 mg de résiduo On soumet le résidu à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 1: 1 de n-hexane et d'acé- tate d'éthyle,ce qui donne 190 mg du composé oléfinique du SEN-366-D. (3) On dissout du SEN-366-D (2,5 g),obtenu par le même procédé que ci-dessus,dans 25 ml d'éthanol, on ajou- te 300 mg de palladium sur carbone (à 5 %), et on y fait passer de l'hydrogène gazeux en agitant. On obtient quanti- tativement le SEN-366-D réduit (2,43 g). EXEMPLE 7 Préparation du SEN-366-L1 On dissout le composé oléfinique (100 mg) du SEN-366-D obtenu par le procédé ci-dessus dans 2,0 ml de benzène; on ajoute 150 mg d'oxyde d'argent et on chauffe le mélange sous reflux pendant 1 heure. Après la réaction, on filtre le mélange et on fait évaporer le'filtrat à sec sous vide,ce qui donne 80 mg de SEN-366-L1l EXEMPLE 8 Préparation du SEN-366-L2 On dissout du produit réduit (100 mg) de SEN366-D obtenu par le procédé ci-dessus dans 2,0 ml de benzène, on 40. ajoute 150 mg d'oxyde d'argent et on chauffe le mélange sous reflux pendant 1 heure. Apres la réaction, on filtre le mélange et on fait évaporer le filtrat sous vide pour en éliminer le benzène,et l'on obtient 80 mg de SEN-366-L2. On se référera à présent au composé du Groupe 3. Le Groupe 3 concerne des substances physiologique- ment actives nommées SEN-366, utilisables comme produits pharmaceutiques,et un procédé pour les préparer, et il con- cerne plus particulièrement des substances phasiologique- ment actives nommées SEN-366 répondant à la formule généra- le (VIII) suivante: CH 3C 0 0 o y (VIII) dans laquelle Y est =C=O ou =CHOR, o R est l'hydrogène, un radical alkyle inférieur, un radical acyle inférieur ou un radical arylcarbonylé substitué ou non substitué et ------- est une liaison simple ou double,et un procédé pour les préparer. La demanderesse a effectué des études prolongées sur les substances qui sont connues ou qui sont déjà décri- tes comme Groupes 1 et 2 et au cours de ces études, elle a trouvé une série de composés ayant des effets pharmacologi- ques identiques ou supérieurs à ceux des substances ci-des- sus et réalisé la présente invention. Ainsi, un but de la présente invention est de mettre au point de nouveaux pro- duits pharmaceutiques, les mêmes que dans la demande ci- dessus, présentant des effets nettement meilleurs que les inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire classiques. 41. Les nouvelles substances physiologiquement acti- ves de la présente invention inhibent fortement l'agréga- * tion plaquettaire. Elles sont produites par des microorga- nismes récemment isolés du sol ou obtenues par une modifica- tion chimique de ces substances produites. Le microorganisme de la présente invention appar- tient au genre Streptomyces,comme il sera expliqué complète- ment ci-après. Les substances SEN-366-F (le composé répon- dant à la formule (VIII) dans laquelle R est l'hydrogène et --10------ est une liaison simple ou double) sont produites directement par le microorganisme. Dans la présente inven- tion, ces substances produites par le microorganisme et leurs dérivés sont appelés SEN-366. Lorsque du SEN-366-F est soumis à une chromato- graphie sur colonne, il peut être séparé en les deux subs- tances suivantes. Composés oléfiniques du SEN-366-F: la substance répondant à la formule générale (VIII) dans laquelle est une double liaison et R est l'hydrogène est nommée SEN-366-Fo, et, dans celle-ci, le composé dans lequel l'orientation de OR est alpha est appelé SEN-366-F1 et celui dans lequel l'orientation de OR est béta est appelé SEN-366-F3. Composés réduits de SEN-366-F: la substance répondant à la formule générale (VIII) dans laquelle ------- est une simple liaison et R est l'hydrogène est nommée SEN-366-FH et dans celle-ci, le composé dans lequel l'orientation de OR est alpha est appelé SEN-366-F2, et celui dans lequel l'orientation de OR est bêta est appelé SEN-3$6-F4. Ces SEN-366-F et leurs dérivés ont une faible toxicité et présentent une forte action d'inhibition de l'agrégation plaquettaire. Ainsi, comme il sera complète- ment décrit ci-après dans le paragraphe sur les propriétés biologiques, le SEN-366-F et ses dérivés inhibent de façon 42. marquée l'agrégation plaquettaire chez des rats dans le- quel l'adénosine-5'-diphosphate (ADP), l'acide arachidoni- que (AA) ou le collagène sont utilisés comme inducteurs de l'agrégation plaquettaire. En conséquence, ces substances sont utilisables comme produits pharmaceutiques pour la prévention et le traitement de la thrombose indi- quée ci-dessus. Les composés de la présente-invention seront illustrés plus en détail ci-après. Les composés de la présente invention répondent à la formule générale (VIII),et des exemples des substituants dans celle-ci sont les suivants. Le groupe alkyle inférieur représenté par R dans la définition de Y peut être en C1 à C4, linéaire ou ramifié. Par exemple, il peut être un radical méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, sec- butyle, tert-butyle, etc. Le radical acyle inférieur peut être linéaire en C2 à C6 ou ramifié, et être par exemple un radical acé- tyle, propionyle, n-butyryle, isobutyryle, n-pentanoyle, n-hexanoyle, etc. Le radical aryle dans l'arylcarbonyle peut par exem- ple être un radical phényle qui peut avoir des substituants identiques ou différents en n'importe quelle position. Un exemple typique du substituant sur le groupe phényle est un halogène et on préfère l'utilisation du chlore ou du fluor. Les composés de la présente invention sont repré- sentés par la formule générale (VIII) ci-dessus et, pour une meilleure compréhension,-on peut en donner les exemples suivants. Le SEN-366-F-A est un composé (VIII) dans lequel R est un radical acétyle; le SEN-366-F- BT est un composé (VIII) dans lequel R est un radical butyryle; le SEN366-F-B est un composé (VIII) dans lequel R est un radical benzoyle; 43. le SEN-366-F-CB est un composé (VIII) dans lequel R est un radical p-chlorobenzoyle; le SEN-366-F-M est un compo- sé (VIII) dans lequel R est un radical méthyle; le SEN-366-F-E est un composé (VIII) dans lequel R est un radical éthyle; le SEN-366-F-L est un composé (VIII) dans lequel Y est =C=O. Il y a quatre composés dans chacun de ceux-ci suivant les différences dans OR et dans la formule (VIII). Les composés dans lesquels OR est alpha et à est une double liaison sont nommés SEN-366-F-Al, BT1, Bi, CB1, M1 et El. respectivement; les composés dans lesquels OR est alpha et - est une liaison simple sont nommés SEN-366-F-A2, BT2, B2, CB2, M2 et E2, respectivement; les composés dans lesquels OR est béta et -est une double liaison sont nommés SEN-366-F-A3, BT3, B3- CB3, M3 et E3, respectivement; et les composés dans lesquels OR est béta et à est une simple liaison sont nommés SEN-366-F-A4, BT4, B4, CB4, M4 et E4, respectivement. Le composé dans lequel Y est =C=O et- est une double liaison est nommé SEN-366-F-L et celui dans lequel Y est =C=O et -est une simple liaison est nommé SEN-366-F-LHo Le SEN-366-F obtenu à-partir du microorganisme peut être acylé ou arylcarbonylé par des moyens-classiques. Dans une telle acylation ou arylcarbonvlationon peut utili- ser une réaction d'estérification usuelle par un anhydride d'acide, un halogénure d'acide, etc. avec ou-sans un solvant adéquat. Lbrsque le SEN-366-F est acétylé tel quel, on ob- tient quatre espèces de dérivés acétylés les SEN-366-F-A!-, SEN-366-F-A2, SEN-366-F-A3 et SEN-366-F-Ao. Lorsqu'on hydro- lyse un dérivé acylé par un acyle inférieur ou -un dérivé arylcarbonylé obtenu tel quel par des moyens habituels, on obtient par exemple les composés suivants: le composé oléfini- que SEN-366-FO (mélange de F1 et F3) à partir de SEN-366-F-A1 ou à partir de SEN-366-F-A3; et le composé réduit SEN-366-F 44. (un mélange de F2 et de F4) à partir du SEN-366-F-A2 ou à partir du SEN-366-F-A4. Lorsque le SEN-366-F ou FO est soumis à une réduction catalytique, le composé réduit SEN-366-FH (un mélange de F2 et de F4) est obtenu. Le SEN366-F peut être alkylé par des moyens classiques. Cette alkylation peut être effectuée par une réaction usuel-le qui est appliquée pour l'Oalkylation du groupe hydroxyle dans un carbone anomère ou par le procédé classique utilisé dans la réaction pour les sucres. La réaction avec un alcool inférieur en présence de cataly- seurs acides tels que des acides minéraux, un acide de Lewis,des échangeurs de cations, etc. peut aussi donner les produits alkylés désirés. La préparation de substances cétoniques à partir de SEN-366-F est également possible. La préparation de substances cétoniques est effectuée par oxydation du groupe hydroxyle du carbone en position anomère,et elle peut être effectuée par une oxydation classique, par exemple par oxydation directe en utilisant du sulfoxyde de diméthyle ou par une oxydation avec du sulfoxyde de diméthyle activé en utilisant du sulfoxyde de diméthyle et du dicyclohexyl- carbodiimide. L'oxydation en utilisant des composés d'ar- gent tels que l'oxyde d'argent, le carbonate d'argent et le nitrate d'argent est particulièrement préférée. En outre, les SEN-366-F, SEN-366-FO0 et SEN-366-FH peuvent être préparés par décomposition par les acides du composé répondant à la formule générale (IX) précédemment isolé (voir demande de brevet japonais n 222740/84): CH3 H3 H3 3O c o- H OH 0 ( (IX) 257 1964 45. (dans laquelle ------- est une liaison simple ou double), tel que par exemple le SEN-366-D (le composé (IX) dans lequel ------- est une liaison simple ou double, et -OH est un mélange d'anomères alpha ou bêta), le SEN366-DO0 (le composé (IX) dans lequel ------- est une double liai- son et OH est un mélange d'anomères alpha ou bêta), et le SEN-366-DH (le composé (IX) dans lequel ------- est une simple liaison et -OH est un mélange d'anomères alpha et bêta). (Propriétés physiques et chimiques). Les propriétés des composés de la présente inven- tion sont les suivantes: O SEN-366-F-A F (OC) R Pouvoir rotatoire spécifique [a]25 D dans CHC13 SEN-366-F-A1 (Huileux) 0,65 -35,0 (c = 0,44) SEN-366-F-A2 53"55 0,64 -188,2 (c = 0,80) SEN-366-F-A3 (Huileux) 0,59 53,33 (c = 0,62) SEN-366-F-A4 43,46 0,59 127, 2 (c = 0,70) Rf: chromatographie sur couche mince (gel de silice 60 F 254). Solvant de développement: n-hexane/AcOEt (1 1). Analyse élémentaire: SEN-366-F-A1 - SEN-366-F-A3 (C14H2006) Calculé (%) C: 59,14 H: 7,09 Trouvé (%) C: 59,43 H: 7,02 (F- A1) C: 59,29 H: 7,08 (F- A3) (C14H2206) Calculé (%) C: 58,73 H: 7,75 Trouvé (%) C: 58,96 H: 7,74 (F - A2) C: 58,76 H: 7,83 (F - A4) 257 t964 46. RMN (CDC13) 6: SEN-366-F-A1: 1,22 (3H, d), 1,39 (3H, d), 2,10 (3H, s), 3,68 (1H, large), 4,05 (1H, dq), 4,58 (1H, q), 5,25 (1H, d), 6,10 (1H, d), 6,15 (1H, large), 6,87 (1H, dd) SEN-366-F-A2: 1,20 (3H, d), 1,28 (3H,d), 2,10 (3H, s), 3, 65 (1H, large), 4,03 (1H, q), 4,33 (1H, q), 5,07 (1H,t), 6,16 (1H, large), SEN-366-F-A3: 1,29 (3H, d), 1,38 (3H, d), 2,09 (3H, s), 3,58 (1H, large), 3,79 (1H, dq), 4,59 (1H, q), 5,21 (1H, d), ,71 (1H, dd), 6,08 (1H, d), 6, 85 (1H, d), SEN-366-F-A4: 1,27 (3H, d), 1,28 (3H, d), 2,11 (3H, s), 3,55 (1H,large), 3,77 (1H, dq), 4,33 (1H,q), 5,05 (1H, t), ,71 (1H, dd). O SEN-366-F-BT F (OC) Rf [a]24 F ( C)Rf D[a]f Ddans CHC13 SEN-366--F-BT2 (Huileux) 0,42 91,9 (c = 0,46) SEN-366-F-BT4 59'62 0,37 -119,6 (c = 1,46) Rf:chromatographie sur couche mince (gel de silice 60 F 254) Solvant de développement: n-hexane/AcOEt (2: 1). 47. Analyse élémentaire: SEN-366-F-BT2 SEN-366-F-BT4 (C16H2606) Calculé (%) C: 61,13 H: 8,34 Trouvé (%) C: 61,21 H: 8,33 (F - BT2) C: 61,01 H: 8,24 (F - BT4) O SEN-366-F-B 25 F ( C) Rf [a] dans CHC3 SEN-366-F-B2 93-94 0,43 -197,2 (c = 0,57) SEN-366F-B4 131-132 0,38 -112,5 (c = 0,53) Rf:Chromatographie sur couche mince: (gel de silice 60 F 254) Solvant de développement e n-hexane/AcOEt (2: 1). Analyse élémentaire: SEN-366-F-B2 - SEN-366-F-B4; (C19H2406) Calculé (%) C: 65,50 H: 6,94 Trouvé (%) C z 65,27 H: 6,99 (F - B2) C: 65,49 H: 6,96 (F- B4) SEN-366-F-CB _ _F ( C) Rf [a]24 dans CHCl SEN-366-F-CB2 129-131 0,43 178,6 (c = 0,49) SEN-366-F-CB4 136-138 0,37 -90,8 (c 0,78) Rf: Chromatographie sur couche mince: (gel de silice 60 F 254) Solvant de développement: n-hexane/AcOEt (2: 1). 48. Analyse élémentaire: SEN-366-F-CB - SEN-366-F-CB4 (C19H2306C1) Calculé (%) C: 59,61 H: 6,06 Trouvé (%) C: 59,82 H: 6,07 (F-CB2) C: 59,59 H- 6,05 (F-CB4) SEN-366-F-M _F (OC) Rf [a]24 dans CHCl3 SEN-366-F-M2 (Huileux) 0,61 237,4 (c = 0,53) SEN-366-F-M4 (Huileux) 0,51 -108,7 (c = 0,55) Rf: Chromatographie sur couche mince (gel de silice 60 F 254) Solvant de développement: n-hexane/AcOEt (1: 1): Analyse élémentaire: SEN-366-F-M2 - SEN-366-F-M4 (C13H2205) Calculé (%) C: 60,44 H: 8,59 Trouvé (%) C: 60,41 H: 8,58 (F-M2) C: 60,59 H: 8,57 (F-M4) O SEN-366-F-E . 24 25.F (OC) Rf [a]D dans CHC13 SEN-366-F-E2 53"56 0,42 -251,1 (c = 0,77) SEN-366-F-E4 (Huileux) 0,36 (116,9 (c = 0,45) R: Chromatographie sur couche mince (gel de silice 60 F 254) Solvant de développement: n-hexane/AcOEt (2: 1). 49. Analyse élémentaire: SEN-366-F-E - SEN-366-F-E- 2 4 (C14H2405) Calculé (%) C 61,74 H: 8,88 Trouvé (%) C 61,79 H: 8,87 (F-E2) C: 61,57 H: 8,86 (F-E4) ) SEN-366-F-L |F (OC) R [a]24 dans CHC13 SEN-366-F-LH 8789 0,64 -193,8 (c = 0,52) Rf: Chromatographie sur couche mince (gel de silice 60 F 254) Solvant de développement: Chloroforme/métha- nol (25: 1). Analyse élémentaire: SEN-366-F-LH (C12H1805) Calculé (%) C: 59,49 H: 7,49 Trouvé (%) C: 59,73 H: 7,51 (Propriétés biologiques) Les propriétés biologiques des composés de la pré- sente invention sont les suivantes: Action d'inhibition contre l'agrégation plaquet- taire: (1) Matériel et méthode: L'échantillon est essayé après dissolution dans du sulfoxyde de diméthyle. La préparation est effectuée de façon à ce que la concentration finale du solvant soit de 1 %. Un sulfoxyde de diméthyle à la même concentration est utilisé comme témoin. Comme inducteurs de l'agrégation plaquettaire, on utilise de l'ADP (concentration finale: pM), de 1'AA (acide arachidonique) (concentration finale: pM) et du collagène (concentration finale: 10 pg/mll 50. (2) Préparation de plaquettes: On prélève du sang de l'artère du cou totale de lapins mâles d'un poids corporel de 2,0-2,5 kg. On ajoute au sang 1/10ème de son volume d'une solution d'aci- de citrique à 3,8 %, on agite doucement le mélange, on le centrifuge sous 1300 x g pendant 2 minutes, et on utili- se le liquide surnageant obtenu comme plasma contenant un grand nombre de plaquettes (désignées ci-après en abré- gé par PRP). On continue à centrifuger le précipité à 1600 x g pendant 10 minutes,et on utilise le liquide sur- nageant obtenu comme plasma contenant peu de plaquettes (désigné ci-après en abrégé par PPP). (3) Méthode de mesure du pouvoir d'agrégation: On utilise un appareil de mesure de l'agrégation plaquettaire et on enregistre les variations d'absorbance par agrégation en fonction du temps. Ainsi, on prélève 200 microlitres de PRP, on ajuste ces différence avec le PPP à une certaine valeur, puis on ajoute 25 microlitres de la solution témoin ou de la solution d'essai, on agite le mélange (1000 tours/minute) pendant 1 minute, on ajoute 25 microlitres d'inducteur de l'agrégation et on enregistre les variations d'absorbance. Le rapport inhibiteur est calculé à partir de l'expression suivante à partir du rapport d'agrégation maximum du témoin (A en %) et de celui de la solution d'essai (B en %): B Rapport inhibiteur (%) = (1 - -) x 100 A On calcule les rapports inhibiteurs avec diver- ses concentrations de la solution d'essai et on calcule à partir de ceuxci la CI50 (concentration inhibitrice à 50 %). Le résultat avec les composés représentatifs de la présente invention est donné dans le tableau 3. 51. TABLEAU 3 CI50 (Pg/ml) SEN-366 Collagène ADP AA Ug/ml 5 Pm 150 iM -F0 1,5 9,3 3,4 (EXEMPLES) Les composés du Groupe 3 seront en outre illustrés par les exemples suivants qui sont évidemment non limitatifs. EXEMPLE 9 Préparation des SEN-366-F, SEN-366-F et SEN-366-FH (1) Culture. A partir d'une culture inclinée de Streptomyces sp. SEN-366, on implante cette culture sur 100O ml de milieu d'en- semencement (contenant 2 % d'amidon, 1 % de poudre de soja, 0,5 % de chlorure de sodium, 0,05 % de chlorure de potassium, 0,05 % de sulfate de magnésium, 0,2 % de nitrate de sodium et 0,35 % de carbonate de calcium; pH 7,0) dans un Erlenmeyer de 500 ml stérilisé,puis on la soumet à une culture agitée à 27 C pendant 3 jours pour donner un liquide de culture d'ensemencement. On met à incuber ce liquide de culture d'ensemen- cement (300 ml) dans un fermenteur à bocaux de 30 litres dans lequel se trouvent 15 litres de milieu de fermentation (le mWe que le milieu d'ensemencement) et on le soumet à une culture avec aération (15 litres/min) et agitation (500 tours/ minute) à 28 C pendant 2 jours. On sépare le liquide de culture obtenu (70 litres) du corps bactérien par filtra- tion. (2) Isolement et purification de la fraction F faisant suite à une extraction Le filtrat de culture (70 litres) obtenu dans l'opé- ration ci-dessus est extrait deux fois avec 70 litres d'acé- tate d'éthyle. On fait évaporer sous vide les extraits 257 1964 52. combinés pour éliminer le solvant,ce qui donne 8,3 grammes de résidu. A ce résidu,on ajoute 6 litres d'un mélange 1: 1 de chloroforme et d'eau,et on le soumet à un parta- ge. On recueille la couche chloroformique, on en fait évapo- rer le solvant et l'on obtient 4,7 g de résidu. On soumet ce résidu à une chromatographie sur colonne de gel de sili- ce et on l'élue d'abord avec du chloroforme,puis avec un mélange de méthanol et de chloroforme (2 % + 20 %). On recueille les fractions contenant des substances actives, on fait évaporer le solvant de cellesci sous vide et l'on obtient 1,6 g de fractions substances actives brutes. On les traite avec 300 ml d'acétate d'éthyle con- tenant 2 g de Darco G-60 (charbon activé), on en fait évapo- rer l'acétate d'éthyle sous vide puis on les soumet une fois encore à une chromatographie sur colonne de gel de sili- ce et on les élue avec un mélange 7: 3 de n-hexane et d'acé- tate d'éthyle, après quoi on fait évaporer le solvant sous vide,ce qui donne 91 mg de SEN-366-F. (3) Séparation, isolement de FO et de FH et puri- fication Du SEN-366-F (1,0 g) obtenu de la même manière est soumis à une chromatographie sur colonne en phase inver- sée (Li Chrocrep RP 18) et on l'élue avec un mélange 25: 75 d'acétonitrile et d'eau, ce qui donne 110 mg de SEN-366-FO0 et 720 mg de SEN-366-FH. Les spectres de RMN H de ceux-ci sont donnés dans la figure 1 et dans la figure 2. EXEMPLE 10 Préparation des SEN-366-F-A1 à A4 Du SEN-366-F (2,0 g) obtenu par le même procédé que dans l'exemple 9(2) est dissous dans 8 ml de pyridine, on ajoute 10 ml d'anhydride acétique et on agite le mélan- ge à la température ambiante pendant 2 heures. Après la réaction, on y ajoute 70 ml d'eau et on extrait le mélange trois fois avec 80 ml d'acétate d'éthyle. On lave la cou- che acétate d'éthyle avec de l'eau, on la sèche sur sulfate 53. de sodium anhydre et on fait évaporer le solvant sous vide. On soumet le résidu (2,2 g) à une chromatographie sur une colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle, ce qui donne quatre espèces de dérivés acétylés du SEN-366-F-A, à savoir les SEN-366-F-A1, SEN-366-F-A2, SEN-366-F-A3 et SEN-366-F-A4 avec des rendements de 139, 1204, 163 et 149 mg, respectivement. EXEMPLE 11 Préparation du SEN-366-F-BT2 et du SEN-366-F-BT4 On dissout du SEN-366-FF(1,0 g) obtenu de la même manière que dans l'exemple 9(3) dans 3 ml de pyridine, on ajoute 1,1 g de chlorure debutyle et on agite le mélan- ge à la température ambiante pendant 30 minutes. Après la réac- tion, on ajoute 40 ml d'eau et on extrait le mélange trois fois avec 40 ml d'acétate d'éthyle. On lave la couche acé- tate d'éthyle avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de so- dium anhydre et on en fait évaporer le solvant sous vide. On soumet le résidu (2,1 g) à une chromatographie sur colon- ne de gel de silice (n-hexane: acétate d'éthyle = 2: 1) et à une chromatographie sur colonne sous moyenne pression (n-hexane: acétate d'éthyle = 4: l),ce qui donne deux espèces de dérivés n-butyrylés, à savoir le SEN-366-F-BT2 et le SEN-366-BT4 avec des rendements de 52 et 461 mg, respectivement. EXEMPLE 12 Préparation du SEN-366-F-B2 et du SEN-F-B4 On dissout du SEN-366-FH (1,1 g) obtenu de la même manière que dans l'exemple 9(3) dans 5 ml de pyridine, on ajoute 2 g d'anhydride benzoïque et on agite le mélange à 70 C pendant 6 heures. Après la réaction, on ajoute 40 ml d'eau et on extrait le mélange quatre fois avec 20 ml d'éther diéthylique.On sache l'extrait éthéré, on en fait évaporer l'éther sous vide et l'on obtient 3, 8 g d'un résidu sirupeux. On purifie le résidu par une chromatographie sur 54. colonne de gel de silice (n-hexane: acétate d'éthyle = 2: 1), ce qui donne 2 espèces de composés benzoylés, le SEN-366-F-B2 et le SEN-366F-B3, avec des rendements de 429 et 536 mg, respectivement. Tous deux sont sous forme d'aiguilles. EXEMPLE 13 Préparation du SEN-366-F-CB2 et du SEN-366-F-CB4 On dissout du SEN-366-FH (1,0 g) obtenu de la même manière que dans l'exemple 9(3) dans 4,0 ml de pyridine, on ajoute 0,8 ml de chlorure de p-chlorobenzoyle, on agite à la température ambiante pendant 1 heure, on ajoute 30 ml d'eau distillée et on extrait quatre fois avec 30 ml d'éther diéthylique. On lave la couche d'éther diéthylique avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre, on fait évaporer sous vide à la fois l'éther diéthylique et la pyri- dine, on soumet le résidu (1,2 g) à une chromatographie sur colonne de gel de silice, on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle,et on le purifie en le soumettant ensuite à une chromatographie sur colonne sous moyenne pression (solvant d'élution: n-hexane/acétate d'éthyle: 7/3), ce qui donne 2 espèces de dérivés p-chloro- benzoylés du SEN-366-F, à savoir le SEN-366-F-CB3 et le SEN-366-F-CB4, avec des rendements de 55 et 364 mg, respecti- vement. EXEMPLE 14 Préparation du SEN-366-F-M2 et du SEN-366-F-M4 On dissout du SEN-366-FH (1,0 g) obtenu de la même manière que dans l'exemple 9(3) dans 5,0 ml de métha- nol anhydre,on ajoute 500 mg de sulfate de magnésium anhy- dre, on chauffe sous reflux pendant 2 heures, on filtre pour éliminer les matières insolubles, on évapore le fil- trat à sec sous vide, on soumet le résidu (929 mg) à une chromatographie sur colonne de gel de silice, on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle et on le purifie en le soumettant à une chromatographie sur colonne 257 1964 55. sous moyenne pression (le solvant d'élution est un mélange 2:' 1 de nhexane et d'acétate d'éthvle), ce qui donne 2 espèces d'éthers méthyliques du SEN-366-F, à savoir le SEN-366-F-M2 et le SEN-366-F-M4, avec des rendements de 395 et 100 mg respectivement. EXEMPLE 15 Préparation du SEN-366-FP-E2 et du SEN-366-F-E4 On dissout du SEN-366-FH (1,09 g) obtenu de la même manière que dans l'exemple 9(3), dans 5,0 ml de méthanol anhydre, on ajoute 500 mg de sulfate de magnésium anhydre, on chauffe sous reflux pendant 15 heures, on filtre pour éli- miner les matières insolubles, on fait évaporer le filtrat à sec sous vide, on soumet le résidu (872 mg) à une chromato- graphie sur colonne de gel de silice, et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthylefce qui don- ne deux espèces de dérivés de l'éther éthylique du SEN-366-F, à savoir le SEN-366-F-E2 et le SEN-366-F-E4, * avec des rendements de 351 et de 102 mg respectivement. EXEMPLE 16 Preparation du SEN-366-FLH On dissout du SEN-366-FH (500 mg) obtenu dans le procédé de l'exemple 9(3) dans 5,0 ml de benzène, on ajoute 700 mg d'oxyde d'argent, on chauffe à 60 C pendant 1 heure, on filtre, on élimine le benzène du filtrat sous vide, et on fait recristalliser le résidu dans de l'éther-n-hexa- ne, ce qui donne 80 mg de SEN-366-F-LH. EXEMPLE DE REFERENCE 3 (1) Extraction, séparation et purification du SEN-366-D On extrait deux fois avec 70 litres d'acétate d'éthyle le filtrat de culture (70 litres) obtenu dans l'opé- ration de l'exemple 1(1), on fait évaporer sous vide l'ex- trait combiné, on mélange le résidu obtenu (5,7 g) avec 4 li- tres d'un mélange 1: 1 de chloroforme et d'eau et on-effec- tue un partage. On recueille la couche chloroformique, on en 56. élimine le solvant sous vide,on soumet-le résidu (3,2 g) à une chromatographie sur colonne de gel de silice, et on l'élue avec du chloroforme puis avec un mélange de métha- nol et de chloroforme (2 % - 20 %). On recueille les fractions contenant des substances actives, on fait évapo- rer le solvant sous vide, et on obtient l,1 g de fraction brute contenant des substances actives. On traite cette fraction avec 200 ml d'acétate d'éthyle contenant du Darcon G-60 (2 g) (charbon activé), on fait évaporer l'acétate d'éthyle sous vide, puis on la soumet une fois de plus à une chromatographie sur colonne de gel de silice, on l'élue avec un mélange 1: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle, et on en fait évaporer le solvant sous vide,ce qui donne mg de SEN-366-D. (2) Préparation des SEN-366-A1 à A4 On dissout du SEN-366-D (1 g) obtenu de la même manière que ci-dessus dans 3 ml de pyridine, on ajoute 2 ml d'anhydride acétique, on agite à la température ambiante pendant 3 heures, on ajoute 50 ml d'eau, on extrait deux fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle, on lave la auche d'acétate d'éthyle avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre, puis on en élimine l'acétate d'éthyle et la pyridine, on soumet le résidu (1,05 g) à une chromato- graphie sur colonne de gel de silice, et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle, ce qui donne 4 espèces de dérivés acétylés du SEN-366-D, à savoir les SEN-366-A1, SEN-366-A2, SEN-366-A3 et SEN-366-A4, avec des rendements de 50, 65, 120 et 250 mg, respectivement. (3) Préparation des composés oléfiniques du SEN-366-D. On ajoute du SEN-366-A3 (400 mg),obtenu de la même manière que ci-dessus, à 5 ml d'hydroxyde de sodium 0,1 N, on les chauffe à 50 C, on agite pendant 1 heure et, lors- que l'hydrolyse est terminée, on l'extrait deux fois avec 50 ml d'éther. On fait évaporer l'éther de l'extrait sous 57. vide, ce qui donne 250 mg de résidu. On soumet ce résidu à une chromatographie sur colonne de gel de silice et on l'élue avec un mélange 1: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle, ce qui donne 190 mg d'un composé oléfinique du SEN-366-D, à savoir le SEN-366-DO. EXEMPLE 17 On ajoute du SEN-366-D0 (520 mg) obtenu dans l'exemple de référence ci-dessus à 10 ml d'acide chlorhy- drique O,lN, on agite à la température ambiante pendant 1 heure, on neutralise avec de l'hydroxyde de sodium, on extrait trois fois avec 15 ml d'acétate d'éthyle, on vapore sous vide la couche d'acétate d'éthyle, on soumet le résidu à une chromatographie sur colonne sous moyenne pression (gel de silice), et on élue avec un mélange 3: 7 d'acétate d'éthyle et de n-hexane, ce qui donne 91,4 mg de SEN-366-F0 huileux. Le dernier groupe ou Groupe 4 concerne des subs- tances physiologiquement actives nommées SEN-366,utilisa- bles comme produits pharmaceutiques, et un procédé pour les fabriquer,et il concerne plus particulièrement des subs- tances physiologiquement actives nommées SEN-366 répondant à la formule générale (X) suivante: CH3 CH3 CH ^^^^_O^^^^^^^^ (X) 0 0 - n dans laquelle n est O ou 1; et ------- est simple ou double et un procédé pour les fabriquer. La demanderesse a effectué diverses études pour 257 1964 58. mettre au point des inhibiteurs de l'agrégation plaquettai- re ayant davantage d'effet et -lus de sécurité que les produits pharmaceutiques classiques,et elle a trouvé qu'il existe une série de substances excellentes en ce qui con- cerne à la fois l'effet et la sécurité, ces substances étant entièrement différentes des inhibiteurs d'agréga- tion plaquettaire indiqués ci-dessus par leurs structures chimiques. La demanderesse a poursuivi des;:études poussées sur ces composés et au cours de ces études, elle a trouvé une série de composés qui présentent une activité pharmacologique identique ou supérieure à celles des com- posés ci-dessus et elle a réalisé la présente invention. En conséquence, un des buts de la présente invention est de mettre au point de nouveaux produits pharmaceutiques qui sont des inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire ayant une efficacité plus marquée que les composés ci- dessus. Les nouvelles substances physiologiquement actives de la présente invention sont fabriquées en déshydratant le composé répondant à la formule générale (XI) suivante: CH3 C (XI) H OH n dans laquellen est 0 ou 1 et ------- est une liaison simple ou double. Il existe des anomères alpha et béta pour les com- posés de la formule (XI),suivant l'orientation stérique, 59. et tous deux peuvent être introduits dans les composés (X) de la formule générale de la-présente invention. Dans le présent mémoire,ces composés sont appelés SEN-366. Les composés répondant à la formule générale (X) ont une faible toxicité et présentent une forte action d'inhibition de l'agrégation plaquettaire. Ainsi, comme on le montrera plus complètement à propos des propriétés biologiques,les composés inhibent de façon marquée l'agré- gation plaquettaire chez le lapin, induite par l'adénosine- 5'-diphosphate (ADP), l'acide arachidonique (AA) ou le collagène. En conséquence, ces substances sont utiles pour la prévention et le traitement de la thrombose. Les composés répondant à la formule (XI) ont été ob- tenus par la demanderesse pour la première fois et sont des composés nouveaux. La demanderesse a déjà une demande de brevet pour eux (voir demandes de brevet japonais n 222740/84, etc.) dans laquelle leurs procédés de fabri- cation sont décrits en détail. La présente invention concerne aussi ces substances. Les composés de la présente invention repondant à la formule (X) sont préparés par une réaction de déshydra- tation directe du composé (XI). Par exemple, le composé (XI) est chauffé avec de la pyridine et de l'anhydride phtalique pour donner (X). Les propriétés physiques et chimiques de composés représentatifs de la présente invention sont donnés dans les exemples. Les propriétés biologiques des composés de la présente invention sont mesurées de la manière déjà décri- te dans la première partie de ce mémoireo. Le résultat est donné dans le tableau 4. 60. TABLEAU 4 CI50 (pg/ml) Composé Collagène ADP AA (Numéro d'exemple) 10 pg/ml 5 pM150 _lM 19 1,55 7,5 12,5 (EXEMPLES) Les composés du Groupe 4 sont encore illustrés au moyen des exemples suivants bien que la présente inven- tion ne soit limitée à ceux-ci. EXEMPLE 18 On dissout un composé (1 g) répondant à la formule (XI) dans laquelle est une simple liaison et n = 1, dans 3 ml de pyridine, on ajoute 750 mg d'anhy- dride phtalique et on agite à 70-8o0 C pendant 3 heures. Après la réaction, on ajoute 50 ml d'eau et on extrait le mélange deux fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle. On lave la couche d'acétate d'éthyle avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre et on en fait évaporer le solvant sous vide. On soumet le résidu (910 mg) à une chromatographie sur colonne de gel de silice (Wakogel C-300), on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle et on le fait recristalliser dans de l'éther,ce qui donne 265 mg du composé (X) dans lequel - - est une sim- ple liaison et n égal 1. Pouvoir rotatoire l:aid] -242,83 (c = 0,691, CHC13). Pouvir rtatire [aD 3 F = 86-87 C (cristaux incolores). Rf = 0,72. Chromatographie- sur couche mince (gel de silice 60F254). Le solvant de développement est un mélange 1: 1 d'acétate d'éthyle et de n-hexane. Analyse élémentaire: calculé pour C18H2806 18 28 6 C 63,51, H 8,29; Trouvé: C 63,38, H 8,40. EXEMPLE 19 - On dissout un composé (500 mg) répondant a la 61. formule (XI) dans laquelle est une simple liaison et n = 1 dans 2 ml de pyridine, on agite à 70-80 C avec 375 mg d'anhydride phtalique pendant 3 heures, on ajoute ml d'eau, on extrait deux fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle, on lave à l'eau la couche d'acétate d'éthyle, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre, on la fait évaporer sous vide,on soumet le résidu (470 mg) à une chromatographie sur colonne de gel de silice (Wakogel C-300), on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle et on le fait recristalliser dans de l'éther,ce qui donne 55 mg de (X) o ------- est une double liaison et n = 1. Pouvoir rotatoire, [a] = -46,82 (c = 0,615, CHC13), F = 113-115 C (cris- taux incolores). Rf = 0,76, chromatographie sur couche min- ce (gel de silice 60F254). Le solvant de développement est un mélange 1: 1 d'acétate d'éthyle et de n-hexane. Analy- se élémentaire: calculé pour C18H2606: C 63,88, H 7,74; Trouvé: C 63,61, H 7,82. EXEMPLE 20 On dissout un composé répondant à la formule (XI) dans laquelle ------est une simple liaison et n = O (1 g) dans 2 ml de pyridine, on ajoute OO mg d'anhydride phtali- que, on agite à 70-80 C pendant 3 heures, on ajoute 50 ml d'eau, on extrait deux fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle, on lave la couche d'acétate d'éthyle avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium anhydre, on fait évaporer le solvant sous vide, on soumet le résidu (760 mg) à une chro- matographie sur colonne de gel de silice (Wakogel C-300) et on l'élue avec un mélange 2: 1 de n-hexane et d'acétate d'éthyle,ce qui donne (X) o ------- est une simple liaison et n = O. Le rendement est de 180 mg. Pouvoir rotatoire []D = -241,41 (c = 1,019, CHC13). Huile. Rf = 0,75. Chroma- tographie sur couche mince (gel de silice 60F254). Le sol- vant de développement est un mélange 1: 1 d'acétate d'éthy- le et de n-hexane. Analyse élémentaire: calculé pour 62. C12H1804: C 63,70, H 8,02; Trouvé: C 63,84, H 7,93. La présente invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation qui viennent d'être décrits, elle est au contraire susceptible de modifications et de variantes qui apparaîtront à l'homme de l'art. 63. La figure 1 représente le spectre IR du SEN-366-A1 de la présente invention, mesuré sur un disque de KBr. Les transmittances (%O) sont en ordonnées et les nombres -1 d'onde (cm) en abscisses. La figure 2 représente le spectre IR du SEN-366-A2 de la présente invention, mesuré sur un disque de KBr. Les transmittances (%) et les nombres d'onde (cm -) en abscisses. La figure 3 représente le spectre IR du SEN-366-A3 de la présente invention, mesuré sur un disque de KBr. Les transmittances (%) sont en ordonnées et les nombres d'onde (cm-1) en abscisses. - La figure 4 représente le spectre IR du SEN-366-A4 de la présente invention, mesuré sur un disque de KBr. Les transmittances (%) sont en ordonnées et les nombres d'onde (cm 1) sont en abscisses. La figure 5 représente le spectre IR du SEN-366-D de la présente invention mesuré sur un disque KBr. Les transmittances(%) sont en ordonndes, et les nombres d'onde (cm -) sont en abscisses. La figure 6 représente le spectre IR d'un mélan- ge de SEN-366-D1 et de SEN-366-D3 de la présente invention, mesuré sur un disque de KBr. Les transmittances (%) sont en ordonnées et les nombres d'onde (cm -1) en abscis- ses. La figure 7 représente le spectre IR d'un mélange de SEN-366-D2 et de SEN366-D4 de la présente invention, mesuré sur un disque de KBr. Les transmittances (%) sont en ordonnées et les nombres d'onde (cm -1) sont en abscis- ses. La figure 8 représente le spectre IR du SEN-366-P de la présente invention,mesuré sur un disque de KBr. Les transmittances (%) sont en ordonnées et les nombres d'on- de (cm-1) en abscisses. La figure 9 représente un spectre UV d'un mélange 64. de SEN-3-66-D1 et de SEN-366-D3 de la présente invention, mesuré à une concentration de 0,1 % dans de l'alcool méthylique. L'absorbance est en ordonnées et la longueur d'onde (nm) en abscisses. La figure 10 représente le spectre UV d'un mélan- ge de SEN-366-D2 et de SEN-366-D4 de la présente invention à une concentration de 0,1 % dans de l'alcool méthylique. L'absorbance est en ordonnées et la longueur d'onde (nm) en abscisses. La figure 11 représente le spectre de RMN H du SEN-366-A1 de la présente invention, mesuré à 200 MHz dans CDC13, l'étalon interne étant du TMS. La figure 12 représente le spectre de RMN H du SEN-366-A2 de la présente invention, mesuré à 200 MHz dans CDC13, l'étalon interne étant du TMS. La figure 13 représente le spectre de RMN H du SEN-366-A3 de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans CDC13, l'étalon interne étant duTMS. La figure 14 représente le spectre de RMN H du SEN-366-A4 de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans du CDC13, l'étalon interne étant duTMS. La figure 15 représente le spectre de RMN H du SEN-366-D de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans CDC13, l'étalon interne étant dUTMS. La figure 16 représente le spectre de RMN H du mélange SEN-366-D1/SEN-366D3 de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans CDC13, l'étalon interne étant duTMS. La figure 17 représente un spectre de R 1 H d'un mélange SEN-366-D2/SEN-366-D4 de la présente inven- tion, mesuré à 200 MHz, dans CDCl3. L'étalon interne est du TMS. La figure 18 est un spectre de RMN H du SEN-366-P de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans CDCl3. L'étalon interne est du TMS. La figure 19 est un spectre de RMN 13C du SEN-366-A 257 1964 65. de la présente invention,mesuré à 50,3 MHz, dans CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 20 est un spectre de RMN 13C du SEN-366-A2 de la présente invention,mesuré à 50,3 MHz dans CDC13,l'étalon interne est du TMS. La figure 21 est un spectre RMN 13C du SEN-366-A3 de la présente invention, mesuré à 50,3 MHz, dans CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 22 est un spectre de RMN 3C du SEN-366-A4 de la présente invention, mesuré à 50,3 MHz, dans CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 23 est un spectre de RMN 1H du SEN-366-B1 de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 24 est un spectre de R4N H du SEN-366-B2 de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans du CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 25 est un spectre de RMN H du SEN-366-B3 de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans du CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 26 est un spectre de RMN 1H du SEN-366-B4 de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans du CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 27 est un spectre de RMN 1H du SEN-366-F0 de la présente invention mesuré à 200 MHz, dans du CDC13. L'étalon interne est du TMS. La figure 28 montre un spectre de R4N H du SEN-366-FH de la présente invention, mesuré à 200 MHz, dans CDCl3. L'étalon interne est du TMS. 2?71964 66. REVENDICATIONS 1 - Substances physiologiquement actives nommées SEN-366, représentées par la formule générale (I) suivan- te: CH3 CH3 CH3 0 03 0 O- O O O o A o-O o Biz n X dans laquelle: ------- est une liaison simple ou double, X est l'hydrogène ou un groupe hydroxy, n est O ou 1 Z est CH lorsque ------ dans un cycle,B est une double liaison et lorsque ------- est un cycle,B est une simple liaison, Z est>.O ou >-OW (o W est l'hydrogène, un groupe acyle inférieur, un groupe arylcarbonyle non subs- titué, un groupe alkyle inférieur ou un groupe arylcarbo- nyle substitué). 2 - Substances physiologiquement actives nommées SEN-366,répondant à la formule générale (II) suivante: CH3 -CH3 CH3 3 o 0 0 -OR x (II) dans laquelle R est l'hydrogène, un groupe acyle inférieur ou un groupe arylcarbonyle non substitué; 257 1 9 64 67. X est l'hydrogène ou un groupe hydroxy; et est une liaison simple ou double. 3 - Procédé de préparation de substances physio- logiquement actives nommées SEN-366, répondant à la formule générale (II) suivante: CH CH CH 3 3 3 o O O O O i OR X (II) dans laquelle R est l'hydrogène, un radical acyle inférieur ou un radical arylcarbonyle non substitué X est l'hydrogène ou un hydroxy; et ------ est une liaison simple ou double, caractérisé en ce qu'on cultive un micro- organisme producteur de SEN-366 appartenant au genre Streptomyces dans un milieu et en ce qu'on isole (II) de celui-ci avec ou sans acylation, arylcarbonylation; acylation suivie d'une hydrolyse, ou arylcarbonylation sui- vie d'une hydrolyse ultérieures. 4 - Procédé de préparation d'un composé répondant à la formule (IV) suivante, caractérisé en ce qu'on chauffe une solution d'un composé répondant à la formule (III) sui- vante: CH3 CH3 CH3 0 O0 O- X OH (IV) 2S71964 68. H3 CH CH 3 3 0 0 I - 0 OH H (III) 5 - Substances physiologiquement actives nommées SEN-366,répondant à la formule générale (V) suivante: CH3 H CH3 o= 0 X x (V) dans laquelle Y est =C=O ou =CHOR, o R est un radical alkyle inférieur en C1 à C4 ou un radical arylcarbonyle substitué; X est l'hydrogène ou un hydroxy et ------- est une liaison simple ou double.. 6 - Procédé de préparation de substances physiolo- giquement actives nommées SEN-366, répondant à la formule générale (V) suivante: CH3 CH3 CH3 II0 0 '0 o o- - x (V) 69. dans laquelle Y est =C=O ou =CHOR,o R est un radical alkyle inférieur en C1 à C4 ou un radical arylcarbonyle substitué; X est l'hydrogène ou un radical hydroxy; et à---- est une liaison simple ou double, caractérisé en ce que l'on cultive dans un milieu des bactéries produc- trices de SEN-366 appartenant au genre Streptomyces, en ce que la culture est traitée ou non de façon à élimi- ner une substance (V) dans laquelle Y est =CHOH, puis est soumise à une oxydation, à une alkylation ou une arylcar- bonylation. 7 - Substances physiologiquement actives nommées SEN-366 répondant à la formule générale (VIII) suivante: CH CH3 o\ o Y (VIII) dans laquelle Y est =C=O ou =CHOR o,R est l'hydrogène, un radical alkyle inférieur, un radical acyle inférieur ou un radical arylcarbonyle substitué ou non substitué et ------- est une liaison simple ou double. 8 - Procédé de préparation de substances physio- logiquement actives nommées SEN-366, répondant à la formule générale (VIII) suivante CH3 CH3 0 qu'on soumet le produit cultivé, directement ou après isole- ment de la substance répondant à la formule (VIII) dans la- quelle Y est =CHOH de celui-ci, à une la oxydation, à une alkylation, à une acylation ou à une aryl- carbonylation suivies de son isolement. 9 - Substances physiologiquement actives nommées SEN-366, répondant à la formule générale (X) suivante: CH3 C HH 3 3 o holo0 '(X' O. n dans laquelle n est O ou 1; et ------- est une liaison simple ou double. 10 - Procédé de préparation de substances physio- logiquement actives nommées SEN-366,répondant à la formule générale (X) suivante: CH3 CH3 CH3 () O0)- n 71. (dans laquelle n est O ou 1; est une liaison sim- ple ou double), caractérisé en ce que le composé répon- dant à la formule générale (XI) suivante: CH CH CH 3 J 3 3 O 0 O OH n (dans laquelle n est O ou 1; et -- est une liaison simple ou double) est soumis à une réaction d'hydratation.