Brevet FR2572810A1 — publié le 19860509

La présente invention concerne une feuille chro- matographique spéciale et un ensemble de feuilles chro- matographiques. La feuille chromatographique ou l'en- semble de feuilles chromatographiques de l'invention permet à l'utilisateur de développer simultanément plu- sieurs chromatogrammes par une technique chromatographique en couche surcomprimée. Ces dernières années, les techniques de chroma- tographie en liquide avec agencement planaire aussi bien qu'avec agencement en colonne ont évolué rapidement. La chromatographie en liquide de haute performance avec agencement en colonne (HPLC) [cf. J.J. Kirkland (ed.): Modern Practice of Liquid Chromatography, Wiley, New York, 1971] et ce qu'on appelle la chromatographie en couche mince de haute performance (HPTLC) (cf. W. Bertsch, S. Hara, R.E. Kaiser et A. Zlatkis: Instrumental HPTLC, H thig, Heidelberg, 1980) ont été mises au point. Les caractéristiques les plus importantes de cette dernière méthode consistent dans l'utilisation d'agents d'adsorp- tion comprenant de fines particules et un haut degré d'instrumentation. Le fait qu'une séparation efficace peut être obtenue seulement sur des couches d'adsorption de fines particules fait ressortir les possibilités limitées d'application de la technique de HPTLC, car une bonne résolution n'est obtenue que sur des distances assez courtes. Il a été raisonnable de mettre au point une technique qui soit d'une part semblable à la tech- nique de chromatographie en colonne du point de vue des conditions bien normalisables et qui possède d'autre part les avantages essentiels de la technique de chroma- tographie en couche mince (TLC) (la possibilité d'une évaluation visuelle, la possibilité d'utiliser des agents agressifs, l'identification analogue à une carte). Ces impératifs sont satisfaits par une technique qui est appelée chromatographie en couche surcomprimée (OPLC) qui combine les avantages des techniques HPLC, HPTLC et de la technique classique TLC. L'appareil essentiel de cette technique est l'ultramicro-chambre pressurisée dans laquelle la couche d'adsorption (par exemple un gel de silice, du talc, etc.) est complètement recouverte de préférence avec une membrane flexible et cette mem- brane est comprimée à la manière d'un coussin contre la couche d'adsorption, ce qui élimine par conséquent l'espace de vapeur au-dessus de la couche. La micro- pompe refoulant l'éluant fait passer cet éluant dans la couche d'adsorption avec un écoulement forcé réglable (cf. brevet hongrois No. 173 749; brevet britannique No. 1 570 760). Il est possible d'obtenir un dévelop- pement linéaire dans une ou deux directions, ainsi qu'un développement circulaire et triangulaire (anti- circulaire) en changeant la place et la forme dans l'entrée d'éluant. Les avantages essentiels de la technique OPLC par rapport à la technique TLC et à la technique moderne HPTLC sont les suivants: - le développement peut être effectué dans un temps plus court, - du fait du développement plus rapide, la diffusion est moindre, les points et les bandes sont plus petits, le nombre de plaques théoriques augmente, - le développement peut être effectué même par des mélanges d'éluants visqueux ou bien qui mouillent mal la couche d'adsorption, et dont le chromatogramme ne pourrait pas ou seulement difficilement, être développé par des moyens classiques. Pour obtenir un chromatogramme linéaire à l'aide de OPLC o les composants sont efficacement séparés, les bords des couches d'adsorption se trouvant sur les feuilles chromatographiques doivent être étanchés de façon appro- priée en enlevant l'agent d'adsorption des bords de la couche, en les fermant avec un agent d'étanchéité et en les recouvrant d'une pellicule élastique. Ainsi, l'éluant ne peut pas s'échapper sous l'effet d'une surpression. Cependant, cela n'est pas suffisant pour obtenir une séparation efficace. Le déplacement de l'éluant avec un front linéaire peut être assuré par formation d'un canal rejoignant l'entrée d'éluant. Ce-problème est résolu au moyen d'une feuille (plaque) flexible remplaçable et protégeant le coussin qui est placé sur la couche d'adsorption. Sur la feuille (bloc d'espacement), un ou plusieurs canaux sont formés à proximité de l'entrée d'éluant sur le côté communi- quant avec la couche d'adsorption. A l'heure actuelle, dans les appareils utilisant les techniques chromatographiques à couches en surpres- sion, une seule feuille chromatographique pourrait être développée, bien que l'efficacité de ces techniques puisse être considérablement augmentée s'il était pos- sible de développer simultanément plus d'une feuille chromatographique. La technique OPLC, de même que la technique classique TLC, fournit une possibilité avan- tageuse d'utiliser différentes réactions de couleurs spécifiques mais, lorsqu'un grand nombre d'échantillons doivent être comparés, chaque feuille chromatographique doit être développée séparément, ce qui dure longtemps et nécessite une grande place. La technique OPLC néces- site également l'utilisation de feuilles chromatogra- phiques comportant des couches d'adsorption différentes mais, pour choisir l'éluant approprié, on doit effectuer un grand nombre d'expériences. L'invention a pour but de créer une feuille chro- matographique (chromatoplaque) ou bien un ensemble des- dites feuilles qui satisfassent aux impératifs précités. L'invention est basée sur la connaissance qu'un appareil de chromatographie en couche surcomprimée est approprié pour le développement simultané de plusieurs feuilles chromatographiques si lesdites feuilles chroma- tographiques sont spécialement modifiées en vue de satisfaire aux impératifs précités, c'est-à-dire si elles sont perforées à une forme et dimension appropriées dans une zone adjacente à l'entrée d'éluant. Si la perforation a été faite au milieu des feuilles chromatographiques, ces feuilles, après avoir été placées l'une sur l'autre, conviennent pour un dé- veloppement multicouche circulaire. Cela est tout à fait préférable pour l'analyse rapide d'un grand nombre d'échantillons. En outre, l'invention est basée sur la connais- sance que le développement linéaire simultané des chro- matogrammes peut être effectué sur plusieurs feuilles chromatographiques si lesdites feuilles chromatographiques, perforées à une forme et dimension appropriées, étanchées sur leurs bords, sont alors incorporées à un système se composant desdites feuilles et d'une feuille classique étanchée sur ses bords mais non perforée, cette der- nière feuille étant utilisée complètement en bas. L'ensemble de feuilles chromatographiques peut aussi être créé en utilisant seulement les premières feuilles perforées, mais ensuite une pellicule de poly- mère, par exemple une pellicule de polyéthylène ou de Téflon qui a été placée en dessous de la feuille infé- rieure comme élément d'obturation. L'étalement de l'éluant sur les différentes feuilles chromatographiques, qui constitue une condition du développement linéaire, peut être effectué de diffé- rentes manières: - un ou plusieurs canaux canalisant l'éluant peuvent être découpés dans la suite d'adsorption, - un ou plusieurs canaux ou bords canalisant l'éluant peuvent être formés sur la feuille opérant à la manière d'un coussin, - la perforation est effectuée perpendiculairement à la direction de migration de l'éluant et elle a la forme d'une fente longitudinale, - chaque couche d'adsorption peut être recouverte par une feuille perforée pourvue d'un canal ou bord de canalisation. En outre, l'invention est basée sur la connais- sance que des feuilles chromatographiques comportant différents types de couches d'adsorption peuvent être utilisées dans ledit ensemble de feuilles, ce qui per- met ainsi de tester simultanément un éluant sur plu- sieurs couches d'adsorption. En outre, l'invention est basée sur la connais- sance que, si les mêmes échantillons sont testés simul- tanément, il est possible alors, après le développement, d'appliquer différents réactifs et on peut effectuer leur comparaison quantitative. Conformément à l'invention, lorsqu'un dévelop- pement linéaire doit être obtenu, les feuilles chroma- tographiques OPLC étanchées sur les bords correspondants sont superposées puis placées dans l'appareil OPLC de manière que les bords étanchés soient disposés l'un sur l'autre et que les côtés pourvus de la couche d'adsorp- tion soient orientés dans la même direction. En consé- quence, le coussin de l'appareil est étalé seulement sur les couches supérieures, mais chaque feuille chromatographique sert de coussin pour l'autre couche d'adsorption qui est en communication avec elle. En conséquence, chaque couche d'adsorption est sous pression et l'éluant ne peut pas pénétrer dans les bords étanchés, en pratique imprégnés ou revêtus. Cependant, cela ne permet pas le développement efficace des chromatogrammes de l'ensemble se composant de plu- sieurs couches d'adsorption. Les feuilles chromatogra- phiques, à l'exception de la feuille inférieure (comme indiqué sur la figure la) doivent être perforées à la même forme et à la même dimension que l'entrée de solvant. Cette modification est faite à proximité du bord de la feuille chromatographique si un développement linéaire et unidirectionnel est réalisé (comme indiqué sur les Fig. lb, lc, ld, le, if) alors que, si le développement est bidirectionnel, la perforation est ménagée au milieu de la feuille chromatographique (comme indiqué sur les feuilles 2a, 2b, 2c). L'éluant peut s'écouler pratique- ment sans entrave dans les couches d'adsorption placées l'une sur l'autre et, en conséquence, les chromatogrammes peuvent être développés simultanément de la même manière. L'utilisation des feuilles est analogue à l'uti- lisation des feuilles pour les techniques TLC, HPTLC et OPLC. Les bords de la couche d'adsorption (1) sont étanchés (2), les échantillons (3) sont injectés en avant de la partie perforée (4, 6) de profil et dimension appropriés. On peut aussi utiliser des feuilles chroma- tographiques comportant une zone de concentration (7) pourvue d'un agent d'adsorption inactif. Conformément à un mode de réalisation de l'in- vention (comme indiqué sur les Figs. 3a, 3b), un coin ou canal (8) est formé sur le côté arrière (9) de la feuille chromatographique. La feuille ou l'ensemble de feuilles conforme à l'invention peut être formé de toute feuille élastique et/ou moins élastique et uniforme (constituée par exemple d'une matière plastique, d'aluminium ou de verre) et pourvue d'une couche d'adsorption utilisée dans les techniques chromatographiques classiques ou avec sur- pression. Le nombre des feuilles pouvant être développé simultanément n'a théoriquement aucune limite supérieure. Dans la première étape de développement confor- mément à la technique en surpression, il est possible de développer simultanément 2 à 8 feuilles en fonction du type de l'appareillage. On peut choisir la dimension des feuilles et la direction de migration de l'éluant (unidirectionnelle, bidirectionnelle, circulaire). Des feuilles pourvues de différents types de couches d'adsorption peuvent être développées simultanément 25728 10 -7 avec le même élu;t si leur résistance est semblable du point de vue de la migration de 1'éluant et si elles sont géométriquement congruentes. En pratique, on peut superposer l'une sur l'autre dans l'appareil les feuilles chromatographiques perforées alimentées avec des canaux de distribution d'éluant sur le coté exempt d'agent d'adsorption. La couche supérieure peut être recouverte d'une feuille chromatographique de fermeture qui est alimentée avec des canaux tandis qu'une feuille chromatographique classique exempte de perforation est généralement utilisée dans les techniques de chromatographie en couche surcomprimée est employée comme couche inférieure (comme indiqué sur la Fig. 4). On peut relier un nombre approprié de feuilles de recouvrement perforées avec des canaux d'alimenta- tion sous la forme d'un livre de copies ou bien d'un classeur (comme indiqué sur la Fig. 5), ou bien chaque unité se composant d'un nombre approprié de feuilles et des feuilles de fermeture peuvent être ainsi jointes ensemble de manière à pouvoir être détachées ensuite d'une façon appropriée. Pour assembler avec précision ensemble les feuilles chromatographiques, les blocs d'espacement et la feuille de base, des-mandrins de guidage peuvent être formés sur le bloc d'espacement supérieur compor- tant un canal d'alimentation et un trou. Ces mandrins et les blocs d'espacement peuvent ensuite être associés aux feuilles chromatographiques et les mandrins peuvent être joints avec les trous formes dans ce but dans la feuille de base. L'éluant peut être évacué à partir des feuilles chromatographiques étanchées sur tous les bords (comme indiqué sur la Fig. 6) de façon analogue à son alimen- tation. Sur le côté opposé à l'entrée d'éluant, un autre trou (14) est ménagé et un canal - déjà cité lors de la description de l'étalement de l'éluant - est formé pour la canalisation de l'éluant. Ce canal collecte et -évacue l'éluant à la fin du développement. Cette solution fournit la possibilité d'un développement continu. Pour la feuille chromatographique conforme à l'invention, on peut utiliser des agents d'adsorption minéraux (par exemple un gel de silice, de l'oxyde d'aluminium, du talc) et organiques (par-exemple de la cellulose, un polyamide). Comme agents d'adsorption inactifs, on peut employer du verre siliceux et de la cellite. Lors de l'utilisation des feuilles chromatogra- phiques selon l'invention, il est possible de développer simultanément plus de feuillesde toutes dimensions et en conséquence, la capacité de l'appareil OPLC est sensiblement augmentée. La technique utilisant deux ou-plusieurs feuilles chromatographiques simultanément signifie un plus haut niveau de chromatographie en couche surcomprimée. La technique qui peut être appelée "chromatographie en couches multiples surcomprimées" correspond à la variété la plus récente de chromatographie planaire en liquide et elle peut être efficacement utilisée par exemple dans des installations d'élevage, des laboratoires cliniques et des laboratoires de contrôle industriel. L'invention est illustrée par les exemples suivants, donnés à titre non limitatif. Exemple 1 Une poudre de gel de silice de granulométrie moyenne de 5 microns est déposée sous forme d'une couche de 0,20 mm d'épaisseur sur une feuille de polytéréphta- late de 20 x 20 cm à l'aide d'un adhésif à base de poly- acrylamide d'un poids molaire moyen (teneur en substances sèches: 1,8%), de manière que des bandes de 5 mm restent non recouvertes sur les bords opposés. Ces parties sont ultérieurement recouvertes d'un film de polymère résis- tant à l'eau et aux solvants. La feuille chromatogra- phique est perforée au milieu avec une fente de 160 mm de longueur et 2 mm de largeur. Sur quatre feuilles chromatographiques perforées, qui ont été préparées de la même manière, on dispose 15.15 échantillons d'une matière de contrôle de couleur CAMAG II, en quantité égale et à une distance de 15 mm de la fente et à une distance de 10 mm l'un de l'autre. Les gouttes des échantillons sont séchées et les feuilles chromatographiques sont superposées avec précision l'une sur l'autre. La feuille inférieure n'est pas perforée mais ses bords sont imprégnés et les échantillons ont également été déposés sur elle. L'ensemble ainsi obtenu est placé dans un appareil chromatographique en couche surcomprimée et du chlorure de méthylène est utilisé pour le développement. Le débit de solvant est de 185 cm3/h, le temps de développement est de 4, 5 minutes. Dans les conditions indiquées, on a enregistré les mêmes valeurs pour la distance frontale, la valeur de Rf et la diffusion. Exempte 2 Une poudre de gel de silice de granulométrie moyenne de 5 microns est déposée sous forme d'une couche de 0,25 mm d'épaisseur sur une feuille d'aluminium de x 40 cm et de 0,20 mm d'épaisseur à l'aide d'un adhésif à base d'acétate de polyvinyle (teneur en substances sèches: 2%), de manière que des bandes d'une largeur de mm restent non recouvertes sur les bords opposés. Ces bandes sont ensuite recouvertes d'un film polymère ré- sistant à l'eau et aux solvants. La feuille chromato- graphiques est perforée en son milieu d'une fente d'une longueur de 182 mm et d'une largeur de 0,8 mm. Sur deux feuilles chromatographiques perforées, préparées de la même manière, on dépose 15.15 échan- tillons contenant 21 types d'amino-acides avec une quantité de 1.1 pg d'amino-acides/gouttes à une distance de 15 mm de la fente perforée et à une distance de 10 mm l'un de l'autre. Apres séchage des gouttes d'échantillons, les feuilles chromatographiques sont superposées avec précision l'une sur l'autre. La feuille inférieure n'est pas perforée mais ses bords sont étanchés et des échantillons sont également déposés sur elle. Le système ainsi obtenu est placé sur un appareil de chromatogra- phie en couche mince surcomprimée et on utilise comme éluant un mélange à 4:1:1 de n-butanol/acide acétique glacial/eau. Temps de développement: 65 minutes. Apres développement, les feuilles chromatogra- phiques séparées sont séchées. Une des feuilles est soumise à une pulvérisation d'un réactif à 0,2% de ninhydrine (0,2g de ninhydrine + 80 cm3 de méthanol + 20 cm d'acide acétique + 0,05 g de CuSO4.5 H20.) et elle est chauffée à 100 C pendant 5 minutes. Le-chromatogramme coloré ainsi obtenu est évalué à l'aide d'un spectrophotomètre. On a observé dans le cas des 2.15 échantillons une différence de + 1,5% par des amino-acides. On pulvérise sur l'autre feuille chromato- graphique séchée du réactif Sakaguchi. On peut ainsi spécifiquement détecter de l'arginine et on peut déterminer sa quantité. On pulvérise sur la troisième feuille chromatographique un réactif constitué par de l'o-phtaldialdéhyde et le chromatogramme ainsi obtenu est évalué en lumière ultraviolette au moyen d'un spec- trophotomètre. Exempte 3 On a suivi le processus de l'Exemple 1, excepté qu'on a utilisé quatre feuilles chromatographiques com- portant différentes couches d'agent d'adsorption. La couche d'agent.d'adsorption de la feuille chromatogra- phique inférieure est formée d'un gel de silice d'une granulométrie moyenne de 5 microns; la seconde est pourvue d'oxyde d'aluminium inerte d'une granulométrie moyenne de 5 microns; la troisième est pourvue de silicate de magnésium d'une granulométrie moyenne de 5 microns tandis que la quatrième est pourvue de terre siliceuse d'une granulométrie moyenne de 5 microns. Dans les conditions indiquées, on n'a pas observé de valeur sensiblement différente en ce qui concerne les distances frontales, les valeurs caractéristiques Rf pour les agents d'adsorption et les diamètres de spots. Exempte 4 Une poudre de gel de silice d'une granulométrie moyenne de 3 microns est déposée sous forme d'une couche de 0,15 mm d'épaisseur sur une feuille de polytéraphta- late de 20 x 20 cm à l'aide d'un adhésif à base de polyacrylamide d'un poids molaire élevé (teneur en substance sèche: 1,7%), de manière que trois bords de la feuille chromatographique soient imprégnés d'une dispersion de polymère. La feuille chromatographique ainsi obtenue est perforée d'une fente de 185 mm de longueur et 1 mm de largeur placée à proximité du bord étanché non uniforme. Sur cinq feuilles chromatographiques perforées, préparées de la même manière, on dépose 5.15 échantillons d'un extrait de fleurs de camomille sauvage,obtenu avec de l'éther de pétrole, ces échantillons étant répartis de façon égale à une distance de 15 mm de la fente perforée et à une distance de I0 mm l'un de l'autre. Apres que les gouttes d'échantillons déposées sont séchées, les feuilles chromatographiques sont superposées avec pré- cision l'une sur l'autre. La feuille chromatographique inférieure n'est pas perforée mais ses bords sont impré- gnés et des échantillons sont également déposés sur elle. Le système ainsi obtenu est placé dans un appareil de chromatographie en couche surcomprimée et du benzène est utilisé comme éluant. Temps de développement 15,5 min. Apres développement, les feuilles chromatogra- phiques séparées sont séchées, puis elles subissent une pulvérisation avec de l'acide sulfurique concentré con- tenant 0,2% de vanilline. Les chromatogrammes sont évalués visuellement et par un spectrophotomètre. Les résultats concernant les huilles essentielles contenues dans la camomille sauvage sont utilisées pour des essais chémotaxonomiques et de reproduction. ExemDLe 5 Le processus de l'Exemple 4 est suivi mais on utilise une feuille chromatographique dans laquelle une zone de concentration est formée. La bande inactive est formée de terre siliceuse tandis que la bande active comporte un gel de silice d'une granulométrie moyenne de 3 microns. Par l'effet de concentration, les composants d'huiles essentielles de la camomille sauvage peuvent être observés dans des bandes nettement définies, le pouvoir de résolution est meilleur que dans l'Exemple 4. ExempLe 6 Le processus de l'Exemple 4 est suivi mais 2.2 canaux d'alimentation en éluant sont formés sur le côté exempt d'agent d'absorption des feuilles chromatographiques. Un bloc d'espacement comportant des canaux d'alimentation en éluant est utilisé pour faire arriver le solvant sur la couche supérieure d'agent d'adsorption. La feuille chromatographique inférieure est une feuille chromatographique surcomprimée classique non perforée. Exempte 7 Le processus de l'Exemple 4 est suivi mais chaque couche d'agent d'adsorption est recouverte par une feuille perforée pourvue de canaux d'alimentation. Exempte 8 Une poudre de gel de silice d'une granulométrie moyenne de 5 microns est déposée sous forme d'une couche de 0,20 mm d'épaisseur sur une pellicule d'aluminium de x 20 cm à l'aide d'un adhésif à base de polyacrylo- amide de poids molaire moyen (teneur en substances sèches: 1,5%). Trois des bords de la pellicule sont imprégnés d'une dispersion polymère sur une largeur de 3 mm. La feuille chromatographique est perforée à proxi- mité du bord étanché non uniforme à l'aide d'une fente de 80 mm de longueur et 0,5 mm de largeur. 15.15 échan- tillons de 1 p2 sont déposés sur la feuille chromato- graphique à une distance de 15 mm de la fente perforée. Les échantillons contiennent de la formaldimédone obtenue à partir d'urine humaine et qu'on a fait précipiter par de la dimédone. (Les composés contenus dans 25 ml d'urine sont dissous dans 1 cm3 de chloroforme).Quatre feuilles chromatographiques sont placées dans une enveloppe formées de 5 feuilles de recouvrement perforées et pour- vues de canaux d'alimentation et cet ensemble est utilisé dans un appareil de chromatographie en couche surcomprimée. Un mélange à 95:5 de benzène/acétate d'éthyle est utilisé comme éluant (temps de développement: 12 min, pression de coussin externe: 1,2 MPa). Le réactif est formé par 0,2% de 2,6-dichlorokinone-chlorokinone-chloro- imide dans une solution méthanolique et, après séchage, % d'une solution de carbonate de sodium aqueuse. Les chromatogrammes ont été évalués visuellement, en enregistrant les quantités des composés. Les résultats ainsi obtenus peuvent être utilisés dans des tests de diagnostic. Exemplte 9 Le processus de l'Exemple 8 est suivi mais on utilise des feuilles de recouvrement qui sont pourvues de canaux non seulement pour l'admission mais pour l'évacuation du solvant. En conséquence, l'éluant peut parfaitement s'écouler et il en résulte une meilleure résolution. REVENDICATIONS 1. Feuille chromatographique et/ou ensemble de feuilles chromatographiques pour une chromatographie en couches multiples en surcompression, caractérisé en ce qu'il est prévu une ou plusieurs feuilles chromato- graphiques avec couchesd'agent d'adsorption (1),facul- tativement scellées (2) sur leurs bords de préférence par imprégnation ou par revêtement avec un film polymère et perforées (4) dans l'ouverture (6) d'entrée d'éluant avec une dimension et une forme appropriées, en étant facultativement incorporées dans un système avec couches, avec ou sans une feuille chromatographique classique scellée sur leurs bords. 2. Feuille chromatographique et/ou ensemble de feuilles chromatographiques pour chromatographie uni- directionnelle en couches multiples en surcompression selon la revendication 1, caractérisée en ce que trois bords de la feuille chromatographique (1) sont scellés (2) de préférence par imprégnation ou par revêtement avec un film polymère et la perforation (4) est réalisée à proximité du bord non scellé avec une dimension et une forme appropriées, en étant facultativement incorporée dans un système double ou multiple, avec ou sans une feuille chromatographique classique scellée-sur ses trois bords. 3. Feuille chromatographique et/ou ensemble de feuilles chromatographiques pour chromatographie bi- directionnelle en couches multiples en surcompression selon larevendication 1, caractérisée en ce que la feuille chromatographique (1) est scellée (2) sur ses bords opposés de préférence par imprégnation ou par revêtement avec un film polymère et la perforation (4) est formée au milieu avec une dimension et une forme appropriées, et la feuille chromatographique est incor- porée facultativement à un système double ou multiple, avec ou sans une feuille chromatographique classique scellée sur ses bords opposés. 4. Feuille chromatographique et/ou ensemble de feuilles chromatographiques pour chromatographie cir- culaire en couches multiples en surcompression selon la revendication 1, caractérisée en ce que la feuille chromatographique (1) n'est pas scellée et la perforation (4) est ménagée au milieu avec une forme et une dimen- sion appropriées, et les feuilles chromatographiques sont facultativement incorporées à un système, avec ou sans une feuille chromatographique classique. 5. Feuille chromatographique et/ou ensemble de feuilles chromatographiques pour chromatographie en couches multiples en surcompression selon la revendi- cation 1, caractérisée en ce que la feuille chromato- graphique (1) est pourvue d'une perforation (4) de dimension et profil appropriés pour faire arriver l'éluant de préférence sur le côté opposé à l'addition d'éluant et elle est facultativement incorporée à un système avec couches individuelles ou multiples, avec ou sans une feuille chromatographique classique scellée sur ses bords. 6. Feuille chromatographique selon la. reven- dication 1, caractérisée en ce qu'elle contient une zone à agent d'adsorption inerte, appelée une zone de concentration d'échantillons et de la perforation (4). 7. Feuille chromatographique selon la reven- dication 1, caractérisée en ce que la feuille porteuse comporte un ou plusieurs canaux ou passages d'admission d'éluant (8) sur le côté exempt d'agent d'adsorption et à proximité de la perforation (4). 8. Feuille chromatographique selon la reven- dication 1, caractérisée en ce qu'une fente de canali- sation d'éluant (6) est formée dans l'ouverture d'ad- mission d'éluant perpendiculairement à la direction du développement. 9. Ensemble de feuilles chromatographiques selon la revendication 1, caractérisé en ce que deux ou plusieurs feuilles chromatographiques (1) scellées sur leurs bords et perforées sont incorporées dans un système comportant une feuille chromatographique clas- sique scellée sur leurs bords de manière que les feuilles porteuses des feuilles chromatographiques superposées servent de feuilles de recouvrement pour l'autre feuille avec couches d'agent d'adsorption. 10. Ensemble de feuilles chromatographiques selon la revendication 1, caractérisé en ce que les feuilles chromatographiques sont accouplées avec un joint lâche en nombre quelconque. 11. Ensemble de feuilles chromatographiques selon la revendication 10, caractérisé en ce que les feuilles chromatographiques sont accouplées en nombre quelconque avec un joint lâche et sont maintenues par un encadrement approprié. 12. Ensemble de feuilles chromatographiques selon la revendication 1, caractérisé en ce que les feuilles chromatographiques portant différentes couches d'agent d'adsorption sont accouplées avec un joint lâche en nombre quelconque et dans une séquence quel- conque. 13. Ensemble de feuilles chromatographiques selon la revendication 1, caractérisé en ce que des blocs d'espacement de mêmes dimensions et formes et alimentés au moyen d'un canal approprié d'addition d'éluant sont placés entre ou au-dessus des feuilles chromatographiques perforées. 14. Feuille chromatographique selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est pourvue d'une couche d'agent d'adsorption comportant un composé organique (cellulose, polyamide, cellite) ou minéral (gel de silice, oxyde d'aluminium, talc, terre de diatomées).