Brevet FR2563232A1 — publié le 19851025

L'in-vencion se rapporte à une boîte de culture microbiologique en atmosphère contrôlée et plus particulièrement mais non exclusivement aux boîtes de culture des germes anaérobies. A ce jour, pour la plupart des cultures bactériologiques sur milieux solides, on fait appel à des boîtes dites de "Pétri", généralement réalisées en matière plastique et composées, d'une part, d'un couvercle et, d'autre part, d'un fond qui, selon qu'il a été obtenu par moulage ou par thermo-formage présente une paroi latérale soit tronconique, soit cylindrique et alors terminée par une collerette. Dans les boîtes de Pétri classiques, le couvercle est conçu de manière à maintenir une aération du contenu ce qui convient pour les cultures en aérobiose. Pour les cultures en atmosphère dite contrôlée et principalement à l'abri de l'oxygène de l'air, il est connu d'utiliser néanmoins de telles boîtes qui, alors, sont scellées par un ruban adhésif après - soit qu'elles aient été remplies avec des atmosphères synthétiques prélevées dans des contenants divers tels des gaines, des sachets ou des bouteilles, - soit qu'on y ait créé l'atmosphère souhaitée par déclenchement d'une réaction entre l'air qu'on emprisonne dans la boîte et au moins un réactif introduit dans celle-ci. Ce réactif peut se présenter sous des formes diver- ses : ou un sachet de produit solide tel du fer réducteur ou un tampon, par exemple en carton, imbibé dtun corps liquide approprié tel le pyrogallol alcalin, le borohydrure de sodium et le carbonate alcalin etc ... Dans tous les cas, la quantité de réactif est nécessairement limitée et ne peut donc traiter qu'un certain volume d'air. Or, avec une telle boîte, le temps nécessaire à la pose du ruban adhésif de scellage permet un échange important entre l'extérieur et l'intérieur de la boîte et donc un renouvellement de l'air, ce qui rend incertaine la composition de l'atmosphère. Le risque qui en découle est si important que, pour tenter d'y remédier, l est connu de placer la boîte de Pétri dans un sachet à atmosphère contrôlée. D'autre part, dans un tel procédé, il existe un risque grave de voir les réactifs entrés en contact des milieux de culture. Un résultat que l'invention vise à obtenir est une boîte de culture du type précité qui permet une culture en atmosphère parfaitement contrôlée. A cet effet, elle a pour objet une telle boîte de culture notamment caractérisée en ce que - d'une part, le couvercle qui est destiné à fermer le fond, est à double paroi dont une paroi externe qui est souple et imperméable aux gaz quelque soit leur masse moléculaire puis une paroi interne qui, par exemple par des orifices, est perméable à l'air et, - d'autre part, tout en étant destinées à être reliées entre elles à leur périphérie, les parois interne et externe sont espacées l'une de l'autre de manière à créer entre elles une chambre dans laquelle trouvent place des réactifs comprenant, d'une part, des corps solides isolément inactifs et, d'autre part, des corps liquides retenus dans des contenants destructibles et qui sont de nature, dès leur libération, à réagir avec les corps solides pour déclencher la creation de l'atmosphère contrôlée puis assurer une con nervation. Elle sera bien comprise à l'aide de la description ci-après faite, à titre d'exemple non limitatif, en regard du dessin ci-annexe, qui représente schématiquement - figure 1: une boîte de culture vue en coupe, - figure 2: une variante de réalisation de la boîte. En se reportant au dessin, on voit que la boîte 1, 2 comprend un couvercle 3, 4 et un fond 5, 6. Le fond 5, 6 présente une paroi latérale 7, 8 soit tronconique (7) dont le bord supérieur 9 est coiffé par le couvercle 3, soit cylindrique (8) et se termine alors par une collerette 10 sur laquelle est plaqué le couvercle 4 qui est éventuellement collé. Outre la culture 11, 12, la boîte abrite un certain volume d'air 13, 14 que l'on met en présence de réactifs 15, 16. Selon une caractéristique essentielle de l'invention - d'une part, le couvercle 3, 4, qui est destiné à fermer le fond, est à double paroi dont une paroi externe 17, 18 qui est souple et imperméable aux gaz quelque soit leur masse moléculaire puis une paroi interne 19, 20 qui, par exemple par des orifices 21, 22, est perméable à l'air et, - d'autre part, tout en étant destinées à être reliées entre elles à leur périphérie, les parois interne et externe sont espacées l'une de l'autre de manière à créer entre elles une chambre 23, 24 dans laquelle trouvent place des réactifs 15, 16 comprenant, d'une part, des corps solides isolément inactifs 25, 26 et, d'autre part, des corps liquides 27, 28 et 29, 30 retenus dans des contenants destructibles et qui sont de nature, dès leur libération, à réagir avec les corps solides pour déclencher la création de 1-' atmosphère contrôlée puis assurer sa conservation. Les contenants destructibles consistent de préférence en des ampoules de erre mince. Par dessus les ampoules, la paroi externe 17, 18 peut être renforcée par une surépaisseur 31, 32. Les corps solides sont avantageusement mélangés à des substances inertes à trop grande surface spécifique et contenus dans un récipient poreux 33, 34, par exemple en papier filtre à haute résistance ou en non tissé. L'étanchéité entre le couvercle et le fond peut être obtenue par tout moyen connu tel que par une nervure de coincement 35 ou par un ruban adhésif 36 ou un collage. L'étanchéité entre les deux parois du couvercle est assurée par un collage sur toute la périphérie. La stérilité de l'ensemble est assurée par tout moyen connu et par exemple par rayon gamma. La souplesse de la paroi externe est nécessaire pour lui permettre d'absorber les variations de pression inévi tables lors des processus. REVENDICATIONS 1. Boîte de culture (1, 2) comprenant un couvercle (3, 4) et un fond (5, 6) CARACTERISEE en ce que - d'une part, le couvercle (3, 4) qui est destiné à fermer le fond, est à double paroi dont une paroi externe (17, 18) qui est souple et imperméable aux gaz quelque soit leur masse moléculaire puis une paroi interne (19, 20) qui est perméable à l'air et, - d'autre part, tout en étant destinées à être reliées entre elles à leur périphérie, les parois interne et externe sont espacées l'une de l'autre de manière à créer entre elles une chambre (23, 24) dans laquelle trouvent place des réactifs (15, -16) comprenant, d'une part, des corps isolément inactifs (25, 26) et, d'autre part, des corps liquides (27, 28 et 29, 30) retenus dans des contenants destructibles et qui sont de nature, dès leur libération, à réagir avec les corps solides pour déclencher la création de l'atmosphère contrôlée puis assurer sa conservation. 2. Boite selon la revendication 1 caractérisée en ce que les contenants destructibles consistent en.des ampoules de verre mince. 3. Boîte selon la revendication 1 ou 2 caractérisée en ce que la paroi externe (17, 18) est renforcée par une surépaisseur (31, 32). 4. Boîte selon l'tune quelconque des revendications 1 à 3 caractérisée en ce que les corps solides sont mélangés à des substances inertes à très grande-surface spécifique. 5. Boîte selon la revendication 4 caractérisée en ce que les corps solides sont contenus dans un récipient poreux (33, 34). 6. Boîte selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 caractérisée en ce que, pour être perméable, la paroi -interne (19, 20) présente des orifice-s (21, 22).