Brevet FR2554347A1 — publié le 19850510

La présente invention concerne l'acide pressinique ou pres5inolque, ses dérivés substitués en 1 'une ou plus~evers des positions 2, 3, 4 et 5 par des aminoacides naturels et leurs homologues de configuration D ainsi que les dérivés acylés sur le côté N-terminal de l'acide pressinique et leurs applications dans les domaines thérapeutique, biologique, ou immunologique. Qn sait que la diurèse, et plus généralement, les échanges hydriques chez l'homme et les animaux supérieurs jouent un rôle très important. De mauvais échanges hydriques peuvent être à l'origine de maladies graves pouvant entraîner la mort. C'est le cas, par exemple, du "diabète insipide" caractérisé par l'incapacité du sujet à retenir l'eau ; la diurèse est très abondante et, par contrecoup, la soif est permanente (potomanie). I1 est alors difficile de compenser ou d'équilibrer les sujets qui en sont atteints.Des résultats plus ou moins satisfaisants peuvent être obtenus en faisant appel à des anti-diurétiques auxquels,dans certains cas, on reconnaît une efficacité mais à faible dose, d'où une action fugace et,dans d'autres cas, parce qu'utilisés à de plus fortes doses, une action "pressique" toxique. Le besoin d'agents actifs ne présentant pas ces inconvénients se fait donc de plus en plus sentir, bien que, récemment, on ait vu apparaître des médicaments dérivés de la vasopressine (D.D.A.V.P.) présentant une durée d'action relativement longue pour un seuil de toxicité relativement acceptable. Or, la Demanderesse a trouvé de façon tout à fait inattendue que l'aciae pressinique lui-même présentait des propriétés anti-diurétiques majeures . Cette propriété est d'autant plus inattendue que ce peptide synthétisé depuis de nombreuses années et répondant à la formule (dans laquelle - l'ensemble Cys(l-6f représente le motif cystine - Tyr représente le résidu tyrosine - Phe représente le résidu de phénylalanine - Gln représente le résidu de glutamine - Asn représente le résidu dàsparagine, tous ces amino-acides étant de configuration L) n'a jamais été décrit comme ayant une propriété thérapeutique En effet, l'acide pressinique injecté à un lapin ou à un rat, à raison de 0,1 ng/kg, provoque un freinage de la diurèse ; à 1 ng/kg, l'effet est maximal (32 minutes chez le rat) et, à 50 ng/kg, l'effet est toujours maximal avec manifestation d'un léger effet presseur mais sans toxicité. Si on le compare a un agent anti-diurétique connu comme, par exemple, la vasopressine, on constate que cette dernière manifeste une activité à partir de 2 ng/kg. Toutefoîs, à 30 ng/kg, une toxicité importante de cet agent se manifeste à cause d'un important effet presseur entraînant la mort des animaux. L'invention couvre donc, à titre de médicament nouveau, notamment anti-diurétique ne présentant pas les inconvénients dus aux agents anti-diurétiques connus, toute composition à base d'acide pressinique. La présente invention couvre également, en tant qu'agents actifs convenant dans le domaine thérapeutique, notamment en tant qu'agents anti-diurétiques, les dérivés de l'acide pressinique substitués en au moins une des positions 2, 3, 4 et 5 par des aminoacides naturels et leurs homologues de configuration D ainsi que les dérivés acylés sur le côté N-terminal de cet acide et les dérivés amides et esters sur le côté C-terminal. Comme exemples de tels dérivés, on peut citer - l'acide N-acétyl-pressinique - l'acide N-succinyl-pressinique - l'acide (Ileu3) pressinique - l'acide N-acétyl(Ileu3) pressinique - l'acide N-succinyl lIleu3) pressinique ainsi que les dérivés amides et esters à chaîne courte correspondants. Parmi les dérivés acylés, on citera plus particulièrement le composé répondant à la formule CH2-CO-NH-Gly-Tyr CH2-CO-NH-acide pressinique et les conjugués acide pressinique-support macromoléculaire (comme une protéine) dans lesquels l'acide pressinique est lié par une liaison amide entre son extrémité N-terminale et une fonction carboxylique portée par la macromolécule. En dehors de leur application comme agents anti-diurétiques, l'acide pressinique et ses ddrivés peuvent être utilisés dans le domaine de l'immunologie, de la biologie, de l'analyse immunologique. C'est ainsi que, par injection de conjugués entre l'acide pressinique et un support macromoléculaire (protéine en particulier), il se forme des anti-corps entraînant un important effet diurétique. Ces dérivés trouvent ainsi une application thérapeutique supplémentaire, notamment dans le domaine de la vaccination et de la sérothérapie. Ils présentent aussi de l'intérêt comme réactifs immunologiques pour le dosage de l'acide pressinique En effet, ces mêmes anti-corps utilisés in vitro, en associa- tion avec un traceur radioactif comprenant un analogue de l'acide pressinique selon l'invention, permettent le dosage de l'acide pressinique notamment dans les liquides biologiques. Ces analogues radioactifs de l'acide pressinique entrant dans le cadre de la présente invention peuvent aisément être obtenus par des procédés bien connus - soit par substitution d'un aminoacide par un analogue tritié radioactif - soit par iodation radioactive de la tyrosine 2 de 1 'acide pressinique ou d'un dérivé N-acylé - soit par greffe d'un peptide iodé radioactif à l'extrémité N-terminale de l'acide pressinique - soit par greffe d'un composé iodé radioactif (tel le réactif de Bolton-Hunter) à l'extrémité N-terminale de l'acide pressinique. Quant à l'acide pressinique lui-même, il peut être obtenu par les procédés de synthèse bien connus n'entrant pas dans le cadre de la présente invention. De façon générale, les enchaînements d'acides aminés peuvent être obtenus par la synthèse de Merrifield en phase solide ou par les procédés bien connus en phase homogène. Les dérivés N-acylés peuvent être obtenus par réaction avec les anhydrides correspondants (anhydride acétique, anhydride succinique, anhydrides mixtes et analogues), soit en milieu anhydre (alcool, diméthylformamide, etc), soit en milieu aqueux à pH légèrement alcalin. Pour leur administration en tant que médicament, les agents actifs selon l'invention sont conditionnés au poids médicinal dans tout véhicule, excipient ou support approprié. Ils peuvent se présenter sous forme liquide (solution ou suspension) ou solide (poudres, comprimés, dragées, cachets, etc) et être administrés par voie orale, parentérale, nasale (poudre à priser) ou rectale (suppositoires) etc. La posologie est éminemment variable d'un sujet à l'autre et laissée à l'appréciation du praticien suivant la gravité du cas à traiter. En tout état' due cause, cette posologie est de l'ordre d'au moins 1 ng/kg par jour Il va de soi que la présente invention n'a été décrite qu'à titre purement explicatif et nullement limitatif et que toute modification utile pourra y être apportée sans sortir de son cadre. REVENDICATIONS 1. En tant qu'agents actifs dans les domaines thérapeutique, biologique, immunologique, et du dosage immunologique, acide pressinique, ses dérivés substitués en l'une au moins des positions 2, 3, 4 et 5 par des aminoacides naturels et leurs homologues de configuration D, les dérivés acylés sur le côté N-terminal de l'acide pressinique, les dérivés amides et esters sur le côté C-terminal et les dérivés radioactifs de ces agents. 2. Agents actifs selon la revendication 1, caractériséspar le fait que ce sont outre l'acide pressinique, 1 'acide N-acétyl-pressinique, 1 'acide N-succinyl-pressinique, l'acide (Ileu3) pressinique, l'acide N-acétyl(Ileu3) pressinique, l'acide N-succinyl(Ileu3) pressinique, les conjugués acide pressinique-support macromoléculaire (du type protéine) dans lesquels l'acide pressinique est lié par une liaison amide entre son extrémité N-terminale et une fonction carboxylique portée par la macromolécule, ainsi que les analogues radioactifs obtenus, soit par substitution d'un aminoacide par un analogue tritié radioactif, soit par une iodation radioactive de la tyrosine 2 de l'acide pressinique ou d'un dérivé N-acylé, soit par greffe d'un peptide iodé radioactif à l'extrémité N-terminale de l'acide pressinique, soit par greffe d'un composé iodé radioactif (tel que le réactif de Bolton-Hunter) à l'extrémité N-terminale de l'acide pressinique. 3. Application des agents selon l'une des revendications 1 ou 2, en thérapeutique en tant qu'agents ayant un effet sur la diurèse. 4. Application des agents selon l'une des revendications 1 à 3 pour l'induction d'anti-corps ayant un effet sur la diurèse et utilisables en vaccination ou pour la sérothérapie. 5. Application des agents selon l'une des revendications 1 à 3 en immunologie pour induire la formation d'anti.-corps permettant le dosage de l'acide pressinique ou de ses analogues. 6. Application des agents radioactifs selon l'une des revendications 1, 2 ou 5 en tant qu'agents traceurs pour le dosage in vitro de l'acide pressinique.