Brevet FR2549051A1 — publié le 19850118

Y Les radioprotecteurs représentent une classe de composés particulièrement étudiés dans la littérature et caractérisés, pour la plupart d'entre eux, par la présence d'une fonction SH ou d'un de ses bio-précurseurs. Le principal mode d'action de ces composés est lié à la capacité présentée par le groupement thiol de piéger les radicaux libres induits intracellulairement par les radiations de diverse nature, empêchant ainsi des dommages permanents dans les cellules. Une structure type, des plus étudiées, est celle de la cystéamine (ou MEA) ( 1): NH 2-CH 2-CH 2-SH ( 1) et le radioprotecteur actuellement le plus actif est un dérivé de la cystéamine de structure ( 2): le WR 2721 o NH 2-(CH 2) 3-NH-CH 2-CH 2-S-POH OH ( 2) Ce composé est substitué du côté N terminal de la cystéamine par une chatne aminoalkyle et du côté S terminal par une fonction phosphorothioate qui présente le double avantage de conférer une bonne solubilité aqueuse à la molé5 cule et de protéger dans un premier stade la fonction thiol qui peut être libérée "in situ" par action des phosphatases ou même par hydrolyse. En général, les radioprotecteurs conduisent à une protection non sélective des cellules, qu'elles soient saines 10 ou malignes (par exemple la cystéamine, la cystéine, etc). Or, le WR 2721 possède la propriété remarquable de protéger sélectivement les tissus normaux contre les dommages induits par les radiations tout en laissant les tumeurs solides supporter seules l'effet des radiations. En d'autres termes, cette drogue se concentre sélectivement dans les cellules saines et non dans les cellules cancéreuses L'origine de cette sélectivité n'est pas encore fermement établie. Quoiqu'il en soit, l'intérêt de cette nouvelle classe 20 de radioprotecteurs sélectifs est très importante de par leur utilisation potentielle en radiothérapie, ce qui permettrait de diminuer le nombre de cancers induits. Il semblerait aussi que le WR 2721 puisse exercer un effet protecteur sélectif lors des chimiothérapies avec des 25 drogues alkylantes telles que le cis-platine, le cyclophosphamide et les moutardes à I 'azote De plus, ce composé est le premier radioprotecteur approuvé par la FDA et il a fait I 'objet d'études phase I tant aux Etats-Unis d'Amérique qu'au Japon. La présente invention concerne des dérivés de la cystéamine qui présentent un bon pouvoir radioprotecteur sélectif et dont certains sont des inducteurs d'interféron. Les composés selon la présente invention correspon5 dent à la formule i: R 1 -CO-NR 3-/A/-S-R 2 ( 1) dans laqueille Ri est un radical correspondant a un aminoacide R 1-CO Oli, /A/ est un radical aikylène en C 2 ou C 3 qui peut êtae substitué par un radical alcoyle en C 1 C 3, un rladicel hydroxy, hydroxycarbony 3 e ou un rad Ucal -COR dans lequel ê est un radical amine ou -NH-CH 2-CO 2-H 2 es' un radical protecteur de 3 a fonction thiol qui libère la fenrction thiol "in vivo", R 3 est l'hydrogène ou, relié au groupement R 2 P forme un cycle protecteur de la fonction thiol. L'invention concerne également les sels de ces conmposés avec des acides pharmaceutiquement accepta 1 bles. Parmi les aminoacides de formule R -COOH 2 il faut citer ceux dans lesquels R 1 est un radica aîcoylamino en C 1 à C 7 droit ou ramifié. Parmi les radicaux R 2, on peut envisager divers types de radicaux suivant ia nature de la réaction qui va libérer la fonction thiol: soit par transposition 5-3 N, par exemple: R 1 -CO-NH-CH 2-CH 2-5-CR 5 (=R 4) R -CO-N(R 4 R 5) -CH 2-CH 2-S-H 254905 1 J o R 4 = 0, S, NH, N(C 1-C 7)alkyle, R 5 = H C 1-C akyle 4 5 C 1-C 7 akye aryle substitué ou non, N Ht 2, SH; soit par une activation bioréductrice d'un pont disulfure, par exemple: R 1-CO-NH-CH 2-CH 2-S R 1-CO-NH-CH 2-CH 2-SH R 65 H R 6-S R 6 pouvant être une chaîne R 7-CO-NR 3-/A/, c'est-à-dire que le composé peut être un dérivé de la cystamine, ou bien un radical aryle ou C 1-C 7-alkyle non substitué ou substitué; soit par hydrolyse enzymatique ou non, dans ce cas 10 R 2 = SO 03 H ou P 03 H 2 ou alcanoyloxy en C 2 à C 7; enfin, le groupement thiol peut être masqué par inclusion dans une structure cyclique de type thiazolique, soit A A R 1-CO-N S R 1 -CO N S - Rt ' R' R" X R o R' = H, C 1-C-alkyle, aryle, NH 2 i 7 '2 R" = H, C 1-C 7-alkyle, aryle. La plupart de ces composés possédant des atomes d'azote basique peuvent être préparés sous forme de sels quaternaires l'anion utilisé X étant de nature diverse, par exemple: Br, Cl, CF 3 CO 2 CH 3-C 6 H 4-503 20 CH 3 C 02 Parmi les radicaux aryles mentionnés, il faut citer les radicaux aryles monocycliques, notamment le radical phényle qui peut être substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène notamment le chlore, par un ou plusieurs radicaux C 1-C 3alkyle ou hydroxy. Parmi les composés préférés de la présente invention, il faut citer les composés de formule NH 2-alk 1-(C=O)-NH-alk 2-S-(C=O)-alk 3 dans laquelle alk est une chaîne alkylène droite ou ramifiée en C 1 à C, alk 2 est une chaîne éthylényl ou propylényl portant un ou plusieurs radicaux méthyl ou hydroxy, alk 3 est un radical Cl-C 7-alkyl non substitué ou substitué par 10 un ou plusieurs atomes de chlore, et notamment la glycyl-N-(S-aceétyl)cystéamine, la L-alany l-N-(S-acéty I)-cystéamine, I a 6 -aminobutyry IlN-(S-acéty l)-cystéamine, I a g l ycy l-N-(S-dichloroacéty I)-cystéamine, ainsi que les sels d'ammonium quaternaires correspondants, ainsi que les composés de formule NH 2-alk 1-(C=O)-WH-alk 2-S NH 2-alk 1-(C=O)-NH-aik 2S dans laquelle alk est une chatne alkylényl droite ou ramifiée en Ci à C 7 et alk 2 est une chaîne éthylényl ou propyl20 ényl portant un ou plusieurs radicaux méthyl ou hydroxy, et notamment la diglycyl-NN'cystamine, la di-L-alanyl-N,N'-cystamine, le di aminobutyryl-N,N'cystamine, ainsi que les sels d'ammonium quaternaires correspondants. 25 L'un des avantages des composés selon l'invention par rapport au produit WR 2721 est qu'ils sont plus stables. Les composés selon la présente invention peuvent être préparés par des procédés analogues à ceux utilisés dans la synthèse des peptides. Les significations des abréviations utilisées ont été rassemblées à la fin de la description. De façon générale, les composés selon I 'invention sont obtenus par déprotection d'un composé de formule: (pro) R 1-CO-NR 3-/A/-S-R 2 en éliminant le ou les groupements protecteurs (pro) du radical amino, les groupements protecteurs étant, de préférence, les groupements benzyloxycarbonyl et ter-butoxycarbonyl Les composés protégés peuvent être synthétisés comme cela sera décrit ci-après. Ainsi, les composés sont obtenus en couplant un AA N-protégé par un Z ou par un BOC avec une cystéamine (P -mercaptoéthylamine-MEA) S-substituée (schéma 1) les solvants de condensation sont l'acétate d'éthyle ou le THF Le DCC ou le t-PNC (J Martinez et coil, Bull Soc Chim Fr, 20 1972, 12, 4707) en présence de TEA sont les agents de coupl age. Les amines terminales sont ensuite déprotégées, soit par Il'acide bromhydrique en solution dans I 'acide acétique glacial à basse température pour les Z, soit par il'acide tri25 fluoroacétique pour les BOC et obtenues sous forme de bromhydrates ou de trifluoroacétates. Il est également possible de reproduire toutes les séquences qui précèdent mais en utilisant une halogénoalkylamine au lieu de la MEA-S- substituée Les pseudopeptides 30 halogénés, en particulier bromés, seront ensuite condensés avec les réactifs appropriés pour obtenir les mêmes composés (schéma 2). 2549051 ' SCHEMA 1 Z ou BOC-AA Ac O Et ou THF Z-AA,-MEA S-substi tuée H Br/AO I ' -5 C + MEA 55-substituée DCC ou V R -P" 3 C/TEA 0 ou S;C->A A-MEA S-substituée FA/Thoanisole Hi Br, AA-MEA 5-substitu-e F TFA, A%-N 4 EA S-substituée SCHEMA 2 Z ou BOC-AA + H 2 N (CH 2)2 Br Z ou BOC-AA(ester actif) + H 2 N-(CH,),Br Ac O Et ou THF DCC ou t -PNC/TEA Z ou BOC-AA-NH-(CH 2)2 Br + Na SH Z ou BOC-AA-NH-(CH 2)25 H ( 1) 1 R-COC I MEA Z ou BOC-AA 7 NH-(CH 2)2 S C=O I R + H 3 C-CO-S-Na -> Z ou ( 2) BOC-AA-MEA-COCH 3 O O + S=C 2 ( 3) NH 2 -_>Z ou BOC-AA-MEA-C NH NH 2 + Na P 303 s ( 4) Z ou BOC-AA-MEA-PO 3 H + Na 2-5203 Z ou BOC-AA-MEA-SO 3 H ( 5) Ln 4 l o C, Usl 254905 t9 Il est également possible de parvenir aux mêmes S-substitutions de la façon suivante: H Br/Ac OH Z-AA-NH-(CH 2)2-Br -) H Br-AA-NH-(CH 2)2 Br l, 2, 3, 4 ou 5 H Br-AA-NH-(CH 2) 2-5-subst i tué. Parmi les esters actifs d'aminoacide utilisables dans 5 ce type de réaction, il faut citer les composés de formule Z-HN (CH 2) n-CO-O-R 7 AA ester actif R 7 = succinirmido, para-nitrophényl, = trichloro-2,4,5phényt, = dichloro-2,6-p-nitrophényl. La synthèse des dérivés de cystamine peut être réalisée selon deux méthodes différentes Méthode utilisant les dérivés précédents de la MEA (schémrna 3) Les deux pseudopeptides N-protégés par un Z ou 15 un BOC et S-substitués sont hydrolysés par le rméthylate de sodium côté S-terminal puis oxydés par i 'iode dans de l'acide acétique aqueux pour former les di-Z ou di-BOC pseudopeptides cystamines Les amines terminales sont ensuite déprotégées par l'acide bromhydrique en solution acide acé20 tique glacial ou par l'acide trifluoroacétique en présence de thioanisole Les pseudopeptides sont obtenus sous forme de leurs di-bromhydrates ou di-trifluoroacétates. 254905 ' Il est également possible d'éviter une étape en utilisant un dérivé halogéné (Z ou BOC) qui sera condensé avec I 'hydrogénosulfure de sodium et formera directement le thiol correspondant Z-AA-MEA ou BOC-AA-MEA. Méthode utilisant la cystamine (schéma 4) Dans ce cas, on obtient directement des di-Z-AAcystamine ou di-BOC-AA-cystamine Ces dérivés sont synthétisés par condensation, dans le DMF en présence de TEA, d'un Z-AA activé ou d'un BOC-AA activé côté acide terminal 10 par un ester approprié sur la cystamine. Les di-Z ou di-BOC-AA-cystamine sont ensuite traités par I'acide bromhydrique en solution acide acétique glacial ou par Il'acide trifluoroacétique et fournissent leurs sels d'amines respectifs. Les di-Z ou di-BOC-AA-cystamine sont également obtenus a partir des Z ou BOC glycines et de la cystamine en utilisant un agent de couplage (t-PNC ou DCC). Les sels d'amines peuvent être libérés et remplacés par d'autres ions De même, la libération des sels des diaminoacide-cystamines permet d'augmenter la chaîne côté N-terminal avec d'autres aminoacides et de former des tétrapseudopeptides, etc, par couplages classiques (schéma 5). -HN H 3-;HJ-S -Hi N HZD H::-b v 3 w E v 3 wl v W- v _ 3 W-'ó -308 3 W- -308 V 3 {- V "JSH I B- 18 no Z n O o Z z H/c-v, t v 3 r 4-vv-308 no Z t V 3 L%'- -30 Oq no Z *- j oz a - ZVWBHDS LL s O 6 s z 2549051. SCHEMA 4 Z ou BOC-AA-(ester actif) + cystamine DMNF/TE N TEA Z-AA-MEA -AA-MEA Z-AA-MEA Z ou BOC-AA + cystamine Ac O Et ou THF DCC ou t-PNC BOC-AA-MEA BOC-AA-MEAI BOC-AA-MEA ou 1 H Br /Ac OH H Br-AA-MEA H Br-AA-MEA H Br-AA-MEA 1 TFA/thioanisole TFA-AA-MEA I TFA-AA-MEA SCHEMA 5 MEA-AA ( 3 X O MEA-AA) X ( 3 2 A'A' MEA-AA-A'A' ( 3 X O TEADCC out-NC MEA-AA-A'A '( 3 X O TEA-AAX 254905 1 La présente invention concerne également Il'application des composés selon la présente invention à titre d'agent radioprotecteur et des compositions pharmaceutiques les contenant pour ce type d'application ou bien comme agent induc5 teur d'interféron dans le traitement des maladies sensibles à I'interféron. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture des exemples ci-après. EXEMPLE 1 Z-GLYCYL-N ( S-ACETYL)-CYSTEAM I NE Méthode générale de couplage faisant intervenir un Z-AA Une solution de 4,598 g {( 0,022 mole) de Z-glycine dans 80 ml de THF est agitée à O C avec 3,88 g ( 0,011 mole) de t-PNC (le dichlohexylcarbodiimide -DCC également utilisé conduit au mime rendement) préalablement dissous dans 20 ml de THF ou d'acétate d'éthyle Au bout de minutes d'agitation à O o C, on ajoute 2,4 mil de TEA et on laisse agiter à nouveau 30 minutes Au terme de ce temps 20 on verse une solution de 3, 421 g ( O 0022 mole) de chlorhydrate de S-acétyl-cystéamine (préparé selon T Wieland et E Bokelmann, Ann Chem, 1952, 576, 20) dans 50 ml de THF ou d'acétate d'éthyle L'agitation est-maintenue à O C durant 30 minutes puis on laisse revenir à température ambiante en maintenant le p H basique par addition de TEA. La réaction est suivie par CCM dans un éluant de chloroformre/méthanol ( 9/1) et le temps nécessaire au couplage est d'environ 2-3 heures dans ce cas. Le mélange est alors évaporé à sec sous pression 254905 ' réduite puis repris par 500 mi d'acétate d'éthyle et 2 x 200 ml de bicarbonate de sodium aqueux saturé glacé. La phase organique est ensuite décantée et lavée avec 2 x 200 ml d'acide chlorhydrique aqueux glacé 5 % et avec 2 x 200 ml d'eau (p H neutre) puis séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec sous vide On recueille 5 g d'une huile légèrement jaune. Le produit est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant: acétate d'éthyle/éther de 10 pétrole 8/2). CCM (chloroforme/méthanol 9/1) RF = 0,5 Détection: UV ou vapeurs d'iode, Rdt = 45 % Cristallise de l'acétate d'éthyle. F = 100-103 C. Analyse: C 14 18 N 2 SO 4 ( 310) calculé % C 54,19 H 5,80 N 9,03 trouvé % C 54,28 H 5,68 N 9,10 Spectre IR (K Br) e cm-1 3320,3280 (NH); 1665,1625 (C= 0); 1515 (amide 1) Spectre de RMN (DM 50 d 6): S ppm: 7,33 (s-5 H) benzyl; 20 6,75 et 5,75 { 2 m-2 H)2 NH (échangeable à Il'eau lourde); ,10 (s-2 H) CH 2 benzyl; 3,82 (d-2 H) CH 2 CO; multiplet entre 2,70 et 3,60 ( 4 H) CH 2-CH 2; 2,30 (s-3 H) COCH 3. EXEMPLE 2 BROMHYDRATE DE GLYCYL-N-(S-ACETYL)-CYSTEAM I NE 25 Méthode générale de déblocage de l'amine avec formation de bromhydrate On agite à une température inférieure à -5 C, sous atmosphère d'azote, en protégeant de la lumière, un mélange de 1,9 ( 4,8 10-3 mole) de -glycy-N-(S-acty)cystamine de 1,49 g ( 4,8 10 mole) de Z-glycyl-N-(S-acétyl)-cystéamine 254905 ' et de 4 ml d'une solution fratchement préparée d'acide acétique glacial (ACOH) saturé d'acide bromhydrique (H Br) En minutes, la réaction est terminée Le bromhydrate est précipité du mélange par addition de 80 ml d'éther anhydre glacé puis la phase éthérée est décantée Cette opération de lavage à l'éther est effectuée 5 fois L'huile résiduelle est ensuite reprise par 30 ml d'eau distillée et lyophiliséeo On recueille avec un rendement de 90 % le dérivé attendu sous forme d'une paie incolore et très hygroscopique I 1 sera con 10 servé sous atmosphère d'azote ou sous vide. Spectre de RMN (D 20): 3,78 (s-2 H) CH 2 glycine; 3,46 {in-2 H) NI-CH 2; 3,05 (rn-2 H) S-CH 2; 2,35 (s-3 H) COCH 3. EXEMPLE 3 Z-L-ALANYL-4 N-(S-ACETYL)-CYSTEAM I NE 15 Réaction de couplage selon la méthode générale Réacti Fs utilisés: 11 25 g ( 0,005 mole) de Z-alanine dans m l de THF 8,7 g de t-PNC clans 20 ml de THF, 7 ml de TEA 7,75 g (O,005 mole de chlorhydrete de S-acétylcystéamine dans 150 ml de THF. Le mélange est rnaintenu basique per addition de mi de TEA et la réaction suivie par CCM (éluant: dicÀiorométhane/méthanol 9/1 est terminee en 4 heures apres les traitements déjà décrits, on obtient 15 g d'une huile qui est chromatographiée sur colonne de gel de silice (éluant: acé25 tate d'éthyl/ éther de pétrole 8/2) Le dérivé attendu est recueilli sous forme d'une huile qui cristallise dans un mélange d'acétate d'éthyle/éther de pétrole 6/3 Rdt = % O o F = 78-80 C. Analyse: C 15 H 20 N 2 SO 4 ( 324) calculé % C 55,55 H 6 17 N 8,64 trouvé %: C 55,72 H 6,37 N 8,67 254905 1 Spectre IR (K Br) O cm 1: 3320, 3280 (NH); 1662, 1620 (C=O); 1520 (amide 1). Spectre de RMN (CDCI 3) ppm: 7,36 (S-5 H) benzyl; 7,0 (m-l H -échangeable à l'eau lourde) NH-CH 2; 5,90 (d-l H) -échangeable à l'eau lourde NH-CH; 5,11 (S-2 H) CH 2 benzyl 4,23 (m-l H)-CH; 3,40 (m-2 H) NH-CH 2; 3,0 (m-2 H) S-CH 2 2,30 (S-3 H) CO-CH 3; 1,36 (d-3 H) CH-CH 3. EXEMPLE 4 BROMHYDRATE DE L-ALANYL N-(S-ACETYL)-CYSTEAM I NE 10 Préparé selon la méthode générale décrite précédemment Réactifs utilisés: 1,418 9 ( 4,3 10-3 mole) de Z-alanyil-N(S-acétyl)cystéamine 3 ml H Br/Ac OH. On recueille, après lyophilisation dans 8 ml d'eau, 1,19 9 de bromhydrate (hygroscopique). Spectre de RMN (D 20) 8 ppm: 4,10 (m-l H) CH; 3,50 (m-2 H) N-CH 2; 3,10 (m-2 H) S-CH 2; 2,38 (S-3 H) COCH; 1,50 (d-3 H) CH-CH 3. EXEMPLE 5 Z -AMI NOBUTYRYL-N ( S-ACETYL) -CYSTEAM I NE 20 Réaction ae couplage selon la méthode générale. Réactifs utilisés: 9,48 g ( 0,04 mole) d'acide Z-9-aminobutyrique (préparé selon R L Evans et col, J Org Chem, 1959, 24, 863-4) dans 75 ml d'acétate d'éthyle 7,95 9 ( 0,02 mole) de t-PNC dans 18 ml d'acétate d'éthyle 8 mi 25 de TEA 6,22 g ( 0,04 mole) de chlorhydrate de S-acétylcystéamine dans 50 ml d'acétate d'éthyle. Le mélange est maintenu basique par addition de 6 ml de TEA La réaction suivie par CCM (éluant: dichloro- 2549051 ' méthane/méthanol 9,2/0,8) est terminée au bout de 20 heures. Après les différents traitements, on obtient 12,51 g d'une huile rosée qui est chromatographiée sur colonne de gel de silice (éluant: dichlorométhane/méthanol 96/4) On recueille 5 4,4 g de produit CCM (CH 2 CI 2/Me OH 8 %) RF: 0,45 Cristallise dans un mélange d'acétate d'éthyle/éther de pétrole ou de dichlorométhane/éther de pétrole F = 1001010 C. Analyse: C 16 H 22 N 2 Sa Q 4 ( 338) calculé % C 56,80 H 6,51 N 8, 28 10 trouve %: C 57,1300 H 6,68 N 8,21 -I Sp.cctre IR (K Br) ' cm: 33203290 (NH); 1870 (COCH 3); 1625 (CONH); 1625 (amide 1) Spectre de RMN (CDCI 3) d ppm: 7,31 (S-5 H) benzyl; 6,30 et 5,32 {m-2 H) NH; 5,10 (s-2 H) CH 2 benzyl; 3,66 à 2,80 15 (m-6 H) N-CH 2 et S-CH 2,; 2,35 (s-3 H) CO- CH 3; 2,30 à 1,60 (m-4 H) CH 2 CH 2 de I'aminobutyryl. EXEMPLE 6 BROMHYDRATE DE S -AM i NOBULITYRYL-N-(S-ACETYL)-CYSTEAM I NE Préparé selon la méthode générale décrite précédemment -3 Réactifs utilisés: 1,4 g ( 4,1 10 mole) de Z-d-aminobutyryl-N-(S-acétyl)cystéamine 3 ml H Br/Ac OH. On recueille après lyophilisation dans 5 ml d'eau, 1 9 de bromhydrate hygroscopique. Spectre de RMN (D 20) S ppm: 3,47 à 3,17 et 3,17 à 2,76 25 ( 2 m-61 H) NCH 2 et S-CH 2; 2,50 à 1,66 (m-4 H) CH 2-CH; 2,31 ( 55-3 H) COCH 3. EXEMPLE 7 BOC-GLYCYL-N ( S-ACETYL)-CYSTEAM I NE Méthode générale de couplage utilisant un BOC-AA. Une solution de 9 9 ( 0,05 mole) de BOC-glycine dans 150 ml d'acétate d'éthyle est agitée à O C avec 18 g ( 0,05 mole) de t-PNC (le DCC peut également remplacer le t-PNC) dans 100 ml d'acétate d'éthyle Au bout de minutes d'agitation à O C, on ajoute 7,25 ml de TEA et on laisse agiter à nouveau 15 minutes Au terme de ce temps 10 on verse dans le mélange 9,1 9 ( 0,05 mole) de chlorhydrate de S-acétyl-cystéamine puis, goutte à goutte, 11 ml de TEA. La réaction suivie par CCM dans un mélange de dichiorométhane/méthanol 9/1 est complète en 5 heures. Le mélange réactionnel est ensuite lavé à l'eau puis 15 au bicarbonate de sodium aqueux saturé, glacé, à nouveau à l'eau, ensuite avec une solution aqueuse glacée d'acide citrique 1 N et enfin à l'eau jusqu'à p H neutre La phase organique est alors séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec sous vide On recueille 12,5 g de brut sous forme d'une huile Ce produit est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant: dichlorométhane/méthanol 9,4/0,6). CCM: (dichlorométhane/méthanol 9/1) RF = 0,8 Détection UV, vapeurs d'iode ou pulvérisation d'une solution d'acide 25 sulfurique à 10 % dans de l'éthanol suivie du chauffage de la plaque Rdt = 40 % Cristallise un mélange de dichlorométhane/éther de pétrole F = 59-60 C. Analyse: Cl H 20 N 2 SO 4 ( 276) calculé %: C 47,82 H 7,24 N 10,14 30 trouvé %: C 47,65 H 7,26 N 10,04 254905 ' Spectre de PRMN (CDCI 3) 6 ppm: 7,20, 5, 45 ( 2 m-2 H -échangeable à l'eau lourde-) 2 NH; 4,07 (d-2 H) CH 2 gly; 3,57 (m-2 H) NHCH 2; 3,15 (m- 2 H) S-CH 2; 2,35 (S-3 H) COCH 3; 1,47 (S-9 H) terbutyl. EXEMPLE 8 TRIFLUOROACETATE DE GLYCYL-N-(S-ACETYL)-CYSTEAMINE Méthode générale de déproction d'un BOC-AA avec formation de son trifluoroacétate correspondant En protégeant de l'humidité 2,03 9 ( 7 10-3 mole) 10 de BOC-glycyl-N-(Sacetyl P-cystéamine sont agités è temperature armbiante avec 10 ml de TFA et 0,25 ml de thioanisole. La ractien suivie par CCM (éluant: dichioromethane contenant 8 % de méthanol) est complète en 4 heures Le trifluoroacétate est précipité du mélange sous forme huileuse par addition de 150 ml d'éther anhydre et lavé avec 2 x 150 ml d'éether puis séché dans un dessicateur sous vide contenant de I 'anhydride phosphorique et de la potasse en plaques. Rendement pratiquerment quantitatif Une haute pureté est obtenue par dissolution du sel dans 10 ml d'eau distillée 20 suivie d'une lyophilisation. Etant hygroscopiques, ces sels sont en générai sonservés sous vide ou sous atmosphère d'azote Néanmoins, pour ce composé il a été possible de le cristalliser dans un mnlange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole 3-1 F = 93-95 C. 25 Spectre IR (K Br,)9 cm-1: plusieurs bandes indiquant la presence d'un sel d'amine, 3340, 3220, 3080, 2995, 2960, 2800, 2740, 2620, 2540; 1700, 1670 (C=O); 1590 (anmide). Spectre de RMN (D 20) 6 ppm: 3,70 ( 5-2 H) CH 2 gly; 3,37 (t-2 H) N-CH 2; 2,98 (t-2 H) S-CH 2; 2,29 (S-3 H) COCH 3. EXEMPLE 9 BOC-GLYCYL-N (S-D i CHLOROACETYL)-CYSTEAM INE Réaction de couplage selon la méthode générale des BOC-AA. Réactifs utilisés: 8,69 g ( 49 10-3 mole) de BOC glycine dans ml d'acétate d'éthyle 17,3 g ( 49 10-3 mole de t-PNC dans ml d'acétate d'éthyle 7 ml de TEA 12,34 g ( 55 10-3 moie) de chlorohydrate de S-dichloro-acétyl-cystéamine. Le mélange est maintenu basique par addition goutte 5 à goutte de 11 ml de TEA et la réaction suivie par CCM (éluant: dichlorométhane contenant 10 % de méthanol) est complète en 12 heures. Après les traitements déjà décrits, on obtient 13 g d'un produit huileux qui est chromatographié sur colonne de gel de silice (solvant d'élution: dichlorornéthane contenant 3 % de méthanol) Le dérivé attendu est recueilli sous forme d'une huile qui cristallise dans un mélange de dichlorométhane/ éther de pétrole 3/1 CCM (dichlorométhane/méthanol 9/1) RF = 0,85. Analyse: C 1 O H 18 N 2 SO 3 C 12 ( 317) calculé %: C 37,85 H 5,67 N 8,83 trouvé %: C 37,78 H 5,69 N 8,80 Spectre IR (K Br)N cm-1: 3320 (NH); 1680 (C= 0); 1530 (amide I). Spectre de RMN (CDCI) S ppm: 7,22 et 5,47 ( 2 m-2 H) 2 NH; 6,0 (S-1 H) CHCI; 4,05 (d-2 H) CH 2 gly; 3,54 (m-2 H) N-CH 2; 2 C 2 ly 2 ' 3,13 (m-2 H) S-CH 2; 1,45 (S-9 H) terbutyl. EXEMPLE 10 TRIFLUOROACETATE DE GLYCYL25 N-(S-DI CHLOROACE TYL)-CYSTEAM I NE Méthode générale de déprotection d'un BOC (déjà décrite) Réactifs utilisés 2,2 9 ( 69 10-4 mole) de BOC-glycyl N-(Sdichloroacétyl)cystéamine 15 ml de TFA 0,3 mi de thioanisole. La réaction suivie par CCM (éluant: dichloro- 254905 ' rnmethane contenant 10 % de méthanol) est complète en 3 heures après les différents lavages, on recueille 1,86 g (Rdt = 75 %) d'une huile incolore que l'on dissout dans ml d'eau distillée et qu'on lyophilise Ce trifluoroacétate se présente alors sous forme d'une poudre hygroscopique. Spectre de RMN (D 20) S ppm: 6,15 ( 5-IH) CH-C Il; 4,07 (S-2 H) CFH 2 gly; de 3,63 à 3,00 ( 2 m-4 H) N-CH 2-CH 2-S. EXEMPLE 1 l 1 Z-GLYCYL-/N (BROMO-2-ETHYL)-/-AMIDE 10 Première méthode déjà décrite et qui fait intervenir un Z-AA en présence d'un agent de couplage et d'une amine. Réactifs utilisés: 5,2 g ( 24 10-3 mole) de Z-glycine dans ml d'acétate d'éthyle 8,7 ? ( 25 10 3 mole) de t-PNC dans 25 ml d'acétate d'éthyle 5 mi de TEA 9,83 g ( 48 10-3 mole) 15 de bromhydrate de bromo-2-éthylamire (Fluka) que l'on libère dans l'acétate d'éthyle par la TEA avant de l Iadditionner au rnmélange réactionnelo La réaction contrôlée par CCM (dichlorométhane contenant 5 % de méthanol) n'évolue plus au bout de 5 heures. 20 On procède alors aux différents lavages et on obtient, après évaporation puis chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant dichlorornéthane contenant 1,5 % de méthanol) 3 g d'une huile jaunâtre qui cristallise dans un mélange de dichlorométhane/ éther de pétrole Rdt 25 % 7 o F = 111-113 C. 25 Analyse: C 12 H 15 N 2 Br O 3 ( 315 >} calculé %: C 45,71 H 4,76 N 8,88 trouvé %: C 45,68 H 4,77 N 8,92 Spectre IR (K Br)W cm-1 ' 3300 (NH) 1680,1640 (C=); 1530 (amide 1 i). Spectre de RMN (CDCI 3) 3 ppm: 7,33 (S-5 H) benzyl; 6,55 et 5,50 ( 2 m-2 H -échangeables à Il'eau lourde-) 2 NH; 5,10 (S-2 H) CH 2 benzyl; 3,88 (d- 2 H) CH 2 gly; 3,65 (t-2 H) CH 2 Br; 3,42 (m-2 H) N-CH 2. Deuxième méthode (meilleurs rendements que la précédente) Elle fait intervenir un Z-aminoacide active. Une solution agitée à O C de 6,146 g ( 0,03 mole) de bromhydrate de bromo-2-éthylamine dans 60 ml de DMF 10 est additionnée goutte à goutte de 4,16 ml de TEA Après l'addition de la base ( 20 minutes), on ajoute au mélange et toujours à OC 6,12 9 ( 0,02 mole) de l'ester-Z-glycyl-O-Nsuccinimide, puis on laisse revenir à température ambiante. La réaction suvie par CCM (éluant: dichlorométhane conte15 nant 10 % de méthanoil) est complète en 3 heures. Le solvant est évaporé à sec sous vide et la pâte restante est reprise par 400 ml d'acétate d'éthyle On procède ensuite aux différents lavages: 300 ml d'eau puis 300 ml de bicarbonate de sodium aqueux saturé et glacé, 20 300 ml d'eau, 300 ml d'acide chlorhydrique ( 0,1 N) aqueux glacé et enfin à l'eau jusqu'à p H neutre La phase organique est ensuite séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec sous vide On recueille une poudre blanche qui cristallise dans un mélange de dichlorométhane/éther de pétrole. 25 Rdt = 5 g, soit 79 % Les données physico-chimiques de ce produit sont identiques aux précédentes. EXEMPLE 12 BROMHYDRATE DE GLYCYL-(N-(BROMO-2-ETHYL))-AMIDE Sous atmosphère diazote et en agitant, on traite à température ambiante 3, 4 g ( 10 10-3 mole) de 2-glycyl(N-(bromo-2-éthyl))-amide par 9 ml d'acide acétique glacial saturé d'acide bromhydrique sec La réaction suivie par CCM (éluant: dichlorométhane contenant 10 % de méthanol) ne contient plus de Z au bout de 30 minutes Le bromhydrate est pr'cipité du mélange sous forme d'une pete par addition de 100 mnl d'éther anhydre et le m&élnge est placé à O C urant 12 heures. Les cri 5staux ormés sont essores et séchés dans un 10 dessicateur sous:jide sur anhydride phosphorique Rdt 2.4 g soit 85,? % F = 158-10 C spectre IR (; 1660 (C=O); 1570 {amide 1). Spectre de RMN {ID 20) 5 ppm: 3,74 (S-2 H) CH 2 gly 3,70à 3,33 {m-4 H) CH 2-CH 2. EXEMPLE 13 DRROM 4 If HYDRATE DE G-L'CYL 3 T;IIR i -2 ETHYL)/A,lî 1 DE Jne soiu;ion de ',31 g { 5 o 10 3 tnooe) de bromhydrate de glycyl /N-{bromo-2-éthyl/óamude dans 10 mi d'&thanoi absolu est addi-onnée de 0,380 g 55 10-3 mole) de,hio urée so 1 ubilis$ e dans 8 rl d'éthanol abso 3 u Le mélange est porté a ébullition durant 6 heures puis le solvant est concentré 25 au 1/3 de son volumre initial Par re Froidissemnent, il se forme des crist- iau; qui seront ii'trés e recristailisés dans du méthanol Rdt = 53 % F = 178-1 DO"C Spectre de RMN (D) 0)} ppm: 3 2) C l gly; 3,56 et 3,4 ( 2 rn-4 H) C 52-S et t H C 25.4905 1 EXEMPLE 14 Z-GLYCYL-N-CYSTEAM I NE ( 2 méthodes de synthèse) Première méthode Une solution de 2,5 g ( 8 10-3 mole) de Z-glycylN-(S-acétyl)-cystéamine dans 40 ml de méthanoi est traitée par 5 ml de méthylate de sodium ( 0,263 9 de sodium dans mi de méthanol) Le mélange réactionnel est agité à température ambiante durant une heure puis amené à p H 1,2 par de l'acide chlorhydrique concentré On évapore à sec sous vide la solution et on chromatographie sur gel de silice la pate obtenue (éluant: dichlorométhane contenant 5 % de méthanol) . On recueille 1,5 g d'une huile incolore qui cristal15 lise dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole F = 95-96 C CCM (chloroforme/méthanol 9,2/0,8) * RF = 0,4 (détection à l'UV ou vapeurs d'iode). Analyse: C 12 H 16 N 2 SO 3 ( 268) calculé % C 53,73 H 5,97 N 10,45 20 trouvé % C 53,70 H 5,86 N 10,35 Spectre de masse: M+ 268 Spectre IR (K Br) ) cm-1: 3320, 3280 (NH); 1680, 1650 (C=O); 1540 (amide 1) Spectre de RMN (CDCI 3) ppm: 7,36 (S-5 H) benzyl; 6,83 25 (m-l H) NH (échangeables par addition de D 20) cystéamine, ,86 (t-1 H) NH (échangeables par addition de D 20)gly; 515 (S-2 H) CH 2 benzyl; 3,86 (d-2 H) CH 2 g 11 y; 3,40 (m-2 H) N-CH 2; 2,62 (m-2 H) S-CH i,38 (t-l H)SH. 2 21,8 t-H Deuxième méthode L'action de I 'hydrogénosulfure de sodium dans du méthanol sur le Z-glycyl-/-N-(bromo-2-éthy I)/-amide conduit, après un reflux d'une heure suivi de l'évaporation du soivant et filtration de Il'huile obtenue sur colonne de gel de silice, au même composé (données physico-chimiques iden5 tiques aux précédentes) Rdt = 74 %. EXEMPLE 15 D I -Z-D IGLYCVYL-N N '-CYSTAMINE ( 3 méthodes de synthèse) Première eméthode: oxydation du Z-gly-N-cysteamine. Une solution agitée à température ambiarite de 3,6 g ( 13 10-3 mole) de Zglycyl-N-cyst 4 amine dans 15 ml d'acide acétique et 15 ml d'eau distillée est additionnée de mi d'acide acétique contenant 250 mg d'iode, ce qui provoque la formation immédiate d'un précipité Le mélange réac15 tionnel est maintenu 15 minutes à température ambiarnte puis le précipité est filtré, lavé à li'eau distillée puis séché dans un dessicateur sous vide sur anhydride phosphorique Recristallise dans un mélange de DMF et d'eau distillée Les cristaux formés sont essorés puis lavés avec un mélange 20 d'éthanol et d'éther v/v, puis avec de l'éther Apres séchage sous vide sur anhydride phosphorique, on recueille avec un rendement de 40 % le dérivé attendu, F = 168-'70 C. CCM (chloroforme contenant 10 % O de méthanol) 3 F = 06. Analyse C 24 H 30 N 4 520 ( 534) calculé % C 53,93 H 5,61 N 10,48 trouvé % C 54,14 H 5,73 N 10,50 Spectre de masse M+ 534 Spectre IR (K Br)) cm: 3320 (NH); 1680, 1635 (C= 0) 1535 (amide 1) 254905 x Spectre de RMN (DMS Od 6) S ppm: 8,12 et 7,44 ( 2 m -échangeable à Il'eau lourde-) 2 x NH; 7, 38 (S) benzyl; 5,05 (S) CH 2 benzyl; 3,62 (d) CH 2 gly; 3,50 à 3,10 et 3, 10 à 2,58 ( 2 m) N-CH 2-CH 2-S. Deuxième méthode: réaction entre la Z-glycine et la cystamine faisant intervenir un agent de couplage selon la méthode générale déjà décrite. Réactifs utilisés: 7,2 g ( 34 10-3 mole) de Z-gly dans 150 ml d'acétate d'éthyle 12 g ( 34 10-3 mole) de t-PNC (le DCC peut remplacer le t-PNC) dans 50 ml d'acétate d'éthyle. ,1 ml de TEA 3,04 g ( 20 10-3 mole) de cystamine dans ml d'acétate d'éthyle. Lors de l'addition de la cystamine un précipité se forme instantanément Le mélange réact:onnel est agité à tem15 pérature ambiante durant 6 heures Le précipité qui contient le dérivé attendu et du chlorhydrate de triéthylamine est essoré, lavé avec 100 ml d'acétate d'éthyle et 100 ml d'eau, puis recristallisé à environ 80 C dans du DMF contenant % d'eau distillée On recueille, après filtration et séchage dans un dessicateur sous vide sur anhydride phosphorique, 3,1 g de di-Z-diglycyl-N,N'cystamine Rdt = 34 % (critères physico-chimiques identiques aux précédents). Troisième méthode: selon une réaction déjà décrite et faisant intervenir un ester activé d'un AA N-protégé et une amine Réactifs utilisés: 2,252 g ( 0,01 mole) de di-chlorhydrate de cystamine dans 20 ml de DMF et 1,70 ml de TEA 3,06 g (O,02 mole) d'ester Z-glycyl-O-N-succinimide dans 30 ml de DMF. Le mélange réactionnel est agité 6 heures à tempé30 rature ambiante puis évaporé à sec sous vide La pâte res- 254905 1 tante est triturée dans de l'acétate d'éthyle, ce qui provoque la formation d'une poudre incolore qui sera filtrée puis lavée à l'eau distillée Le produit restant cristallise dans les mêmes conditions que précédemment Apres filtration et séchage, on recueilile 3,5 9 d'un produit ayant des critères physico-chimiques identiques aux précédents. EXEMPLE 16 D ROMHYDRATE DE D I GLYCYL-NN ' -CYSTAM I 4 E Rqécction faite selon la méthode q 5 nérale déjà décrite Reéactifs ttilisés: 18 9 ( 3 o 1 lo moie) de di-Z-dig 9 ycyl-H 1 'cystam;ire 12 mrl d'acide acétique glaciai saturé d'acide brcmnhydrique, gazeux, sec. Le mréange est agité 4 heures à température ambiante, puis on lui additionne, sous forte agitation, 100 mfl d'éther anhydre ce qui favorise la formation d'une poudre léeg-rement jaune Cette poudre est essorée sous vide, puis lavée avec 2 x 50 ml d'éther anhydre et cristallise dans un mrélarnge de méthanol et d'éther On recueille, apr'ès cristallisation et séchage dans un dessicateur sous vide en 20 présence d'anhydride phosphorique et de potasse, 1,203 9 ( 85 %) de dibroomhydrate F = 183-'850 C. Spectre de RMN (D 20) 45 ppm 3,78 (S) CH 2 gly; 3,55 {) H-CH 2; 2,83 (t) S-CH 2. EXEMPLE 17 D -BOC-D ' GLYCY(L-N N ' -CYSTAM I NE ( 2 méthodes) Prenti&re mrihode: réaction entre la BOC-glycine et la cystamniine faisant intervenhir un agent de couplage selon la méthode générale djà décrite. Réactifs utilisés: 2,98 9 ( 17 10-3 mole) de BOC-glycine dans 50 mi d'acétate d'éthyle 5,92 9 ( 17 10-3 mole) de t-PNC (le DCC peut remplacer le t-PNC) 2,4 mi de TEA 2,6 9 ( 17 10-3 mole) de cystamine dans 30 ml d'acétate d'éthyle. La réaction contrôlée par CCM (éluant: dichlorométhane contenant 5 % de méthanol) est complète en 6 heures. On procède alors aux lavages classiques (eau, bicarbonate aqueux saturé glacé, eau, acide citrique 1 N glacé et eau jusqu'à p H neutre) La phase organique est séchée sur sul10 fate de sodium puis évaporée à sec sous vide l'huile recueillie (impure) est chromatographiée sur colonne de gel de silice (gradient d'éluant d'une solution de dichlorométhane/méthanol allant de 2 à 5 % de méthanol) On recueille 3 g (Rdt = 37 %) d'une huile incolore qui cristallise dans l I'acétate d'éthyle F = 97-98 C RF = (dichlorométhane contenant 10 % de méthanol) 0,4. Spectre de RMN (CDC 13) ppm 7,24 (m -échangeable à l'eau lourde-) NH; 3, 82 (d) CH 2 gly; 3,55 (m) N-CH 2; 2,77 (t) S-CH 2; 1,42 (S) ter-butyl. Deuxième méthode: réaction entre la BOC-glycine activée par un ester et la cystamine Réactifs utilisés: 5,4 g ( 24 10-3 mole) de dichlorhydrate de cystamine dans 50 ml de DMF 3,4 ml de TEA 5,449 ( 20 10-3 mole) d'ester BOC-glycyl-O-N-succinimide. Le mélange réactionnel est agité 6 heures à température ambiante et traité comme précédemment après évaporation à sec sous vide et reprise de la pâte obtenue par 500 ml d'acétate d'éthyle Le produit brut obtenu cristallisé 254905 1 et homogène en CCM ne nécessite pas de chromatographie. il sera directement recristallisé dans l'acétate d'éthyle. Rdt = 60 % (données physico-chimiques identiques aux précédentes). EXEMPLE 18 D I -TR I FLUOROACETATE DE D IGLYCYL-N, N' -CYSTAMINE Réaction effecutée selorn la méthode générale déjà décrite Réactifs utilisés 1,7 g ( 3,6 10-3 mole) de di-BOC-diglycylN,N' cystamine 6 mrl de TFA 0,06 ml de thioanisole. Au bout de 3 heures d'agitation à temperature ambiante, on ne distingue plus de produit de départ sur la CCM On procède alors aux traitements déjà décrits et on recueille, après lyophilisation, 1,79 g de produit sous forme huileuse (Rdt quantitatif). Ce sel sera conservé comme les précédents sous atmosphère d'azote ou sous vide. Spectre de RMN (D 20) ' ppm: 3,61 (S) CH 2 gly; 3,38 (t) N-CH 2; 2,66 (t) S-CH 2. EXEMPLE 19 D I BROMHYDRATE DE D IALANYL-N,N'-CYSTAM INE La réaction est effectuée conmme aux exemples 15 et 16 en remplaçant la Zgly-N-cystéamine par la Z-ala-Ncystéamnine, les proportions molaires restant les mêmes. Ce produit se présente apres lyophilisation sous 25 forme d'une huile. Spectre de RMN (D 20) 4,10 (m) CH; 3,60 (m) N-CH 2; 2,90 (t) S-CH 2; 1,52 (d) CH 3. EXEMPLE 20 D I -TR I F LUOROACETATE DE D I -ALANYL-N, N '-CYSTAM I NE La réaction est effectuée comme aux exemples 17 et 18 en remplaçant la glycine par l'alanine, les proportions molaires restant les mêmes Ce produit se présente après lyophilisation sous forme d'une huiie. Spectre de RMN (D 20): 3,98 (m) CH; 3,48 {m) N-CH 2; 2,76 (t) S-CH 2; 1,46 (d) CH 3. EXEMPLE 21 ACTI V I TE RAD IOPROTECTRICE Cette étude d'activité radioprotectrice a été réalisée selon une technique décrite par M Fatome et col, Eur J. Med Chem, 1977, 12, ( 1), 93 Les substances ont été injectées par voie intra-péritonéale aux doses indiquées sur 15 le tableau I, 15 minutes avant une irradiation à la D Lo 00/30 jours Cette dose étant égale à 950 Rad. 254905 1 TABLEAU I Taux de survie au 30 ème jour drogues 15 ' avant irradiation à 900 ou 950 Rad) (injection des Composé de DL O Doses de survie exemple {mg/k 9 -% de survie P) l 'exemnp Ie ({ /g mg/Jg p) 1 5 f O 1 500 8 10 16 18 19 1 200 1 500 1 200 750 87 750 188 400 750 300 750 750 400 67 40 60 93 40 100 100 100 1 200 EXEMPLE 22 ACT I V I TE ANT 1 -CARCINOGENE Drogue utilisée: H Br, H 2 N-CH 2 (C=O)-NH-(CH 2)2 S-_(C=O)-CH 3 L'activité anti-carcinogène a été déterminée sur des souris porteuses de tumeurs EMT 6 ou HT 19 On injecte par voie i.p 695 mg/kg 15 minutes avant le début de l'irradiation à Gy. Dans le premier cas, on observe pour la dose de 20 10 Gy une survie de 10-2, mais avec Il'administration de la drogue la survie cellulaire est comprise entre 5 et 8 10-2 (selon que Il'on tient compte ou non du coefficient de clonage). Pour le second type de tumeur, on observe pour la dose de 20 Gy une survie de 10-2 mais avec administration de 15 la drogue la survie cellulaire est comprise entre 2,4 et 4 10-2 (même remarque). On constate donc que ce composé, outre son pouvoir radioprotecteur ne protège pas (ou peu) les tumeurs, sauf si celles-ci sont nécrosées. ABREVIATIONS UTILISEES DANS LA PARTIE EXPERIMENTALE Z: benzyloxycarbonyl t-PNC: hexachlorocyclotriphosphazène THF: tétrahydrofuranne TEA: triéthylamine CCM: chromatographie sur couche mince (Kieselgel Merck 60 F 254) BOC: ter-butoxycarbonyl I AA: amino- acide ou un radical correspondant à R -CO TFA: acide trifluoroacétique 10 Ac O Et: acétate d'éthyle Spectre de RMN: S = singulet, d = doublet, t = triplet, m = multiplet Produits commerciaux de provenance Fluka MEA:J rnercapto-éthylamine (cystéamine) 15 4: température -DMF: diméthylformamide MEA: NH 2-CH 2-CH 2-SH ou le radical correspondant Chromratographies sur colonnes réalisées avec Kieselgel Merck ( 70,230 Mlesch). 2549051 ' REVEND I CAT IONS 1) Composé de formule I: R 1 -CO-NR 3-/A/-S-R 2 dans laquelle R 1 est un radical correspondant à un aminoacide R 1-COOH, /A/ est un radical alkylène en C 2 ou C 3 qui peut être substitué par un radical alcoyle en C 1 à C 3, un radical hydroxy, hydroxycarbonyl ou un radical -COR o R est un radical amino ou -NH-CH 2-CO 2 Hi R 2 est un radical protecteur de la fonction thiol qui libère la fonction thiol in vivo, R 3 est I 'hydrogène ou relié au groupement R 2 forme un cycle protec10 teur de R 2 fonction thiol, ainsi que les sels de ce composé avec des acides pharmaceutiquement acceptables. 2) Composé selon la revendication 1 dans lequel R 1 est un radical alcoylamino droit ou ramifié en C 1 à C 7. 3) Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, dans lequel R 2 est le radical 2 -ce' R 4 R 5 o R 4 = O, S, NH, N(C 1-C 7)alkyl, R 5 = H, C 1-C 7-alkyl, aryl substitué ou non, NH 2, SH. 4) Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, dans lequel R 2 est un radical -S-R 6, R 6 étant une chaîne R 1 -CO-NH-/A/- ou un radical aryl ou alkyl non substitué ou substitué. ) Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, dans lequel R 2 est -SO 3 H ou -PO H 6) Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, de formule: A / \ 5 R 1 -CO-N S ou R -CO+N S R' R" R dans lesquelles R' = H, C 1-C 7-aikyl, aryl, NH 2, R' = H, C -C alkyl, aryl. 7) Composé selon l'une des revendications l à 6, sous forme d'un sel d'ammonium quaternaire, l'anion étant choisi 10 parmi: Br CI -, CFC 2, CH 3-C 6 H 4 -SO CH CO 8) Composé selon la revendication 1 de formule NH 2-a H ch I ore. 9) Composé selon la revendication 8 la =lycyl-N-(S-acétyl)-cystéamine la L-alanyl-N-(S-acétyl)-cyst-amine I a aminobutyry l-N-(S-acéty I)cystéamine la g 3 ycyl-N-{(S-dich loroacéty l)-cystéamnine, ainsi que les sels d'amrnoniuml quaternaires correspondants. 254905 1 ) Composé selon la revendication 1 de formule NH 2-alk 1-C-NH-alk 2-S NH 2-alk 1-C-NH-alk 2-S dans laquelle alk 1 est une chaîne alkylényl droite ou ramifiée en C 1 à C 7 et alk 2 est une chaîne éthylényl ou propylényl por5 tant un ou plusieurs radicaux méthyle ou hydroxy. 11) Composé selon la revendication 10 la diglycyl-N,N'-cystamine la di-Lalanyl-N,N'-cystamine la di 6-aminobutyryl-N,N'-cystamine ainsi que les sels d'ammonium quaternaires correspondants. 12) Procédé de préparation d'un composé selon Il'une des revendications 1 -à 11, caractérisé en ce qu'on déprotège un composé de formule: (pro) R 1 -CO-NR 3-/A/-S-R 2 en éliminant le ou les groupements protecteur pro du radical amino. 13) Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que le groupement protecteur est le groupement benzyloxycarbonyl ou ter- butoxycarbonyl. 14) Application des composés selon Il'une des revendications 1 à 11 à titre d'agent radioprotecteur. ) Composition pharmaceutique comportant à titre de principe actif au moins un composé selon I 'une des revendications 1 à 11.