Brevet FR2558154A1 — publié le 19850719

La présente invention concerne la préparation et l'utilisation thérapeutique d'acides gras ramifiés en C10 à C20' Alors que les acides gras linéaires, saturés ou insaturés, ont fait l'objet d'études approfondies et contribuent à caractériser les différentes huiles et graisses animales et végétales, en revanche les acides gras ramifiés sont générale- ment passés sous silence. Cependant la présence de certains de ces acides gras à chatne ramifiée a été signalée essentiellement dans les matières d'origine animale: acide isovalérique (HANSEN R.P. et coll. J.New Zeeland Inst. Chem. 1950, 14,142) , acide 12-méthy I tétradécanoTque, et acide 13-méthy I tétradécanoTque (SHORLAND F.B. et col. Biochem. J. 1955, 61,702), acides isobutyrique et a-méthylbutyrique (Mc INNE-S A.G. et coll. Biochem. J.1956,63,702). Ces acides ramifiés ne représentent généralement qu'une très faible proportion, souvent inférieure à 1%, des graisses et des huiles naturelles. La demanderesse vient de découvrir de façon tout à fait surprenante que les acides gras ramifiés en C1 à C20 possédaient des propriétés thérapeutiques remarquables dans les domaines anti-inflammatoire, cardiovasculaire, antipros- tatique et hypocholestérolémiant. De telles propriétés n'avaient jamais pu être mises en évidence précédemment, du fait de la très forte dilution des acides gras ramifiés au sein d'ensem- bles complexes d'acides gras linéaires totalement inactifs ou bien du fait de leur présence à l'état naturel sous forme de dérivés inactifs, tels que les esters. Les acides gras ramifiés en C1o à C20 entrant dans le cadre de la présente invention, répondent à la formule générale I CH3(CH2)n-CH-(CH2)m-COOH (I) R dans laquelle: R est un radical alcoyle ou alcényle linéaire ou ramifié contenant 1 à 3 atomes de carbone, et les indices n et m sont des nombres entiers satisfai- sant aux inégalités suivantes O. n 14 O n des confirmations de structure ou quelques tests in vitro. Le seul procédé de synthèse rencontré dans la littérature (SILVIUS J.R. et coil. Chemistry andPhysics of lipids 1980, 26,67) permet d'accéder à l'acide antéisomyristique utilisé pour l'étude de diantéisoacylphosphotidyl choline C2H5 CH-(CH) -Br + Li C=C-(CH) COO Li I_ ê2 2 n CH3 CH3 C2H5 C H 2-5 H2\ CH(-CH2)2C-C(CH)nCOOH ------ CH- (CH2)n+4 -COOH CH3 CH3 2558 1 5 4. Cette synthèse nécessite Il'emploi de matières premières coOteuses, difficiles à préparer, et conduit à des rendements variant de 5 à 80 % suivant les cas. La demanderesse dans Il'optique d'une préparation industrielle, a mis au point un procédé plus simple, mettant en oeuvre des matières premières courantes: halogéno-alcoyl magnésium, a, w-dibromoalcane et malonate d'éthyl par exemple. Selon la présente invention, les acides gras ramifiés de formule générale I sont préparés par réaction d'un halogéno- alcoyl magnésium de formule Il CH3-(C2CH2)nCH(MgX)-R ( I l) o X représente un atome d'halogène, avec un O, w-dihalogénoalcane de formule III, en présence de tétrachlorocuprate de I i th i um, X-(CH2)-X (III) o X représente un atome d'halogène et p = m ou m-l, pour conduire à l'intermédiaire de synthèse de formule (IV) CH3-(CH2)n-CH-(CH2) p-X ( IV) R o X et p ont la même signification que ci-dessus. Dans ledit intermédiaire de synthèse de formule IV, la fonction halogène terminale est transformée en fonction acide carboxylique. Cette transformation peut par exemple être effectuée selon les deux variantes suivantes. L'intermédiaire de formule IV o p = m-1 est mis à réagir avec du malonate d'éthyle et le diester ainsi obtenu est hydrolysé et décarboxylé pour conduire à l'acide gras ramifié correspondant de formule I. Cette première variante correspond au schéma réactionnel suivant CH,-(CH2)n-CH(CH2)m-l-X R Ir CH2(COOc t)2 / COO-- t CH3- (CH2) n-CH-(CH2) m- 1-CH I N COE R COOS_ t hydrolyse et décarboxylation CH- ( CH2) n-CH ( CH2) p-COOH R L'intermédiaire de formule IV o p = m est mis à réagir avec un cyanure de métal alcalin et le produit réactionnel est soumis à une hydrolyse conduisant à l'acide gras ramifié de formule I correspondant. On mentionnera ci-après deux exemples de préparation d'acides gras ramifiés selon l'invention. Exemple 1: Préparation de l'acide méthyl-11 tridécanoTque (acide antéiso- myristique) On prépare une solution de bromo-2 butyl magnésium en dissolvant 9,85 g (0,41 mole) de magnésium dans 150 ml de THF sec, auxquels on ajoute 45,5 ml (0,41 mole) de bromo-2 butane. Ce réactif est introduit lentement dans un mélange de 75 mi. (0,41 mole) de dibromo-1,8 octane dans 150 ml de TMF à 0 C et de 0,2 ml d'une solution 0,1 M de tétrachloro- -cuprate de lithium. On laisse sous agitation pendant une heure. Le bromo-1 méthyl-9 undécane est purifié par chroma- tographie sur colonne de silice éluée à I 'hexane. On récupère ainsi 59 ml de produit. Rendement: 56 % On dissout 2,3 g (0,1 mole) de sodium dans 80 ml d'éthanol sec, auxquels on ajoute goutte à goutte 15,3 ml (0,1 mole) de malonate d'éthyle, puis 24 ml (0,1 mole) du dérivé bromé préparé précédemment. On porte ensuite à reflux pendant 2 heures. On distille alors sous pression réduite l'éthanol, et on lave Il'ester formé par 3 fois 100 ml d'eau. L'hydrolyse est réalisée en ajoutant 10,3 9 (0,03 mole) d'ester dans 10 ml d'une solution 18 M de potasse que l'on porte à reflux pendant 2 h 30. Après refroidissement, on ajoute 10 ml d'acide sulfurique concentré au milieu, que I'on chauffe à reflux jusqu'à ce que la décarboxylation soit terminée, soit environ 3 heures. La phase organique est extraite à l'hexane, traitée par un charbon actif, filtrée et concentrée. L'acide méthyl-11 tridécanoTque (5,4g) cristallise dans ce même solvant à -20 C. Exemple 2: Préparation de l'acide méthyl-12 tridécanoTque (acide isomyristique) En procédant de la même manière qu'à l'exemple 1, mais en utilisant au cours de la première étape le bromo-1 méthyl-2 propyl magnésium, on obtient le bromo-1 méthyl-10 undécane. La seconde étape de formation du diester par réaction avec le malonate d'éthyle puis la décarboxylation et l'hydrolyse conduisent finalement à l'acide isomyristique avec un rendement de 72 70. L'étude pharmacologique conduite sur les acides gras ramifiés de formule générale I a permis de mettre en évidence leurs remarquables propriétés pharmacologiques permettant leur utilisation en tant que médicaments anti- prostatique, anti-inflammatoire, antiaggrégant plaquettaire, veinoconstricteur et hypocholestérolémiant. La présente demande vise donc également les compositions pharmaceutiques contenant, à titre de principe actif, au moins un des acides gras ramifiés de formule générale I, en association avec un support pharmaceu- tiquement acceptable. Activité anti-inflammatoire a) Une solution à 1 % d'acide isomyristique dans l'huile d'arachide (voie orale chez le rat) possède des propriétés anti-inflammatoires marquées mises en évidence dans le test de Il'oedème généralisé au dextran, par action sur la phase vasculaire et diminution de I'aggrégation plaquettaire. b) Le même type d'activité anti-inflammatoire a été mis en évidence, lors de l'administration par voie orale chez le rat, pour Il'acide antéisomyristique ainsi que pour les acides gras ramifiés correspondantsen C12, C16 et C18. 2 5 5 8 1 5 4 REVEND I CAT IONS 1/ A titre de médicaments nouveaux les acides gras ramifiés répondant à la formule générale I CH3-(CH2)n-CH-(CH2)m-COOH (1) R dans laquelle: R est un radical alcoyle ou alcényle linéaire ou ramifié contenant 1 à 3 atomes de carbone, et les indices n et m sont des nombres entiers satisfaisant aux inégalités suivantes: O _ n 4 14 O R =-CH3 n = O, et 6 $ m 4 14 3/ A titre de médicaments nouveaux les acides gras ramifiés répondant à la formule générale I selon la revendication 1, dans laquelle: 2 5 58 1 5 4 R =-C2H5 n = 0, et 6 m; 14 4/ A titre de médicaments nouveaux les acides gras ramifiés répondant à la formule générale I selon la revendication 1, dans laquelle: R = -CH3 n = 0, et m = 10 5/ A titre de médicaments nouveaux les acides gras ramifiés répondant à la formule générale I selon la revendication 1, dans laquelle: R = -C2H5 n= 0, et m=9 6/ Procédé de préparation de composés de formule générale I selon Il'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'en présence de tétrachlorocuprate de lithium, on fait réagir un halogéno-alcoyl magnésium de formule Il CH3-(CH2)n-CH(MgX)-R (I 1) avec un a, -dihalogénoalcane de formule III X-(CH2)p-X (l l) o p = m ou m-1 pour conduire à l'intermédiaire de synthèse de formule IV CH3-(CH2)n-CH- (CH2) p-X (IV) R et en ce que, dans ledit intermédiaire de synthèse de formule IV, la fonction halogène terminale X est transformée en fonction acide carboxylique. 7/ Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que l'on fait réagir l'intermédiaire de synthèse de formule IV o p = m-1 avec le malonate d'éthyle et en ce que le diester obtenu est hydrolysé et décarboxylé pour conduire à Il'acide de formule générale I. 8/ Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que I 'on fait réagir l'intermédiaire de formule IV o p = m avec un cyanure de métal alcalin, et en ce que le produit réactionnel est soumis à une hydrolyse pour conduire à Il'acide de formule générale I. 9/ Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient à titre de principe actif au moins un acide gras ramifié de formule générale I selon la revendication 1, ainsi qu'un support pharmaceutiquement acceptable.