Brevet FR2557139A1 — publié le 19850628

L'invention concerne un procédé de purification de glucosides bruts. Plus précisément, l'invention concerne un procédé pour l'obtention d'un glucoside ne contenant pratiquement pas de sucres réducteurs qui provoquent une coloration du glucoside. Les glucosides sont très intéressants comme matériau de depart pour les glucosido-polyéthers utilisés dans la préparation de mousses de polyuréthanne (voir par exemple les brevets US 4 359 573, 4 366 265, 4 342 864, et "Modern Plastics International", Août 1983, page 45, etc). Mais, pour préparer des glucosido-polyéthers, on fait normalement réagir un glucoside avec un oxyde d'alcoylène tel que l'oxyde de propylène, en présence d'une base forte telle que l'hydroxyde de potassium. En conséquence, lorsqu'une substance telle qu'un sucre réducteur est contenue dans le glucoside, elle provoque une coloration et on obtient un glucosido-polyéther très coloré. Il est donc important de préparer un glucoside ne contenant pratiquement pas de sucres réducteurs et qui est stable vis-à-vis de la coloration par les alcalis. Pour la préparation de tels glucosides resistant à la coloration, on a proposé de nombreux procédés dans le passé, par exemple un procédé d'élimination de la substance réductrice par oxydation et réduction de cette substance, un procédé de cristallisation répétée du glucoside, et autres. Mais ces procédés ne sont pas très efficaces. On a également essayé de convertir la substance réductrice en un composé insoluble tel que l'hydrazone, l'osazone ou autres, par traitement avec la phénylhydrazine et séparation du composé insoluble par filtration, mais on n'a obtenu aucun résultat. Parmi les procédés préalablement décrits, les deux procédés suivants se sont avérés relativement efficaces. L'un est le procédé pour la préparation d'alcoyl glucosides résistant aux alcalis, tel que décrit dans le brevet japonais N 51-16405, dans lequel on traite une solution de glucoside brut avec un oxyde de métal alcalinoterreux en chauffant et on élimine le sous-produit formé pour obtenir un glucoside résistant aux alcalis. Mais, il est devenu évident que la solution de glucoside traitée avec l'oxyde est géneralement une solution très colorée qui nécessite une grande quantité de charbon actif ou autres pour la décoloration et il est en outre difficile d'effectuer parfaitement une telle décoloration. L'autre procédé efficace est celui utilisé pour la préparation de glucosides résistant à la coloration, tel que décrit dans le brevet japonais N" 50-31128, dans lequel on met en contact un glucoside brut avec une résine échangeuse d'anion basique pour obtenir un glucoside résistant à la coloration. On a également essayé de réduire la quantité de glucose n'ayant pas réagi en effectuant la glucosidation en présence de sulfate de calcium anhydre comme agent de déshydratation (brevet US 3 928 318). Cependant, ce procédé n'est pas non plus efficace, car il exige une grande quantité d'agent de déshydratation et la quantité de glucose résiduel ne peut pas être réduite comme prévu. L'invention fournit un procédé pour la purification de glucosides bruts, caractérisé en ce qu'on met en contact une solution aqueuse de glucoside brut avec un mycellium de levure pour diminuer la quantité de sucre réducteur (monosaccharide ou oligosaccharide). Le but de l'invention réside dans la fourniture d'un procédé simple et économique pour obtenir des glucosides ne contenant pas de matière colorante, ni d'ingrédient instable. - - La figure 1 est un diagramme montrant la relation entre la durée du traitement et la quantité de glucose residuel en fonction de la quantité de levure. - La figure 2 est un diagramme montrant la relation entre la durée du traitement et la quantité de glucose résiduel en fonction de la concentration du glucoside. Selon l'invention, on traite un glucoside brut sous forme de solution aqueuse et on le met en contact avec une levure. Le glucoside brut dans 1 'invention désigne un glucoside constitué d'un sucre et d'un alcool et comprenant, comme impureté, un sucre réducteur qui provoque une coloration lorsqu'il est chauffé en présence d'alcali. Cette impureté provient de la préparation de glucoside à partir d'un sucre et d'un alcool. Plus concrètement, les glucosides bruts utilisés conformément à 1 'invention sont des alcoyl glucosides obtenus par réaction d'un sucre avec un mono-alcool contenant de 1 à 8 atomes de carbone, des hydroxyalcoyl glucosides obtenus par réaction d'un sucre avec un poly-alcool et autres. Comme exemples de mono-alcool approprié, on peut citer l'alcool méthylique, l'alcool éthylique, l'alcool propylique, l'alcool butylique, l'alcool amylique, l'alcool 2-éthyl-hexylique, l'alcool octylique et autres. Comme exemples de poly-alcool approprié, on citera l'ethylene glycol, le propylène glycol, le butylène glycol et le glycérol Comme exemples représentatifs de monosaccharides parmi les sucres constituant les glucosides, on peut citer des hexoses tel que le glucose, le mannose, la galactose, etc. et des pentoses tels que l'arabinose, le xylose, le ribose, etc.Les sucres peuvent être également des disaccharides qui sont facilement hydrolysés en monosaccharides, tels que le maltose, le cellobiose, le sucrose, le lactose, etc., d'autres ol igosaccharides et polysaccharides tels que les dextrines, les amidons, les celluloses et autres. La formation de glucosides a lieu en utilisant un catalyseur acide approprie.Comme exemples de catalyseur acide, on peut mentionner des acides minéraux comme l'acide chl orhy- drique, l'acide sulfurique, l'acide phosphorique, etc., des acides de Lewis tels que l'éthérat de trifluorure de bore, le chlorure de titane, le chlorure d'étain, etc., des acides organiques tels que l'acide benzène sulfonique, 1 'a- cide p-toluene suitonique, l'acide trichloroacétique, l'aride oxalique, etc., des acides solides tels qu'une résine e,angeuse de cati on de type acide sulfonique, une résine d'acide perfluorosulfonique, un hétéropoly-acide, de la silice-alumine, etc. et autres. En ce qui concerne la levure pour réaliser 1 'in- vention, on peut choisir toute levure capable d'utiliser des sucres. Par exemple, on peut utiliser des levures appartenant aux Saccharomyces, Candida, Endomyces, Debaryomyces, Pichia, Torulopsis, etc. Comme exemples de levures preférées, on peut mentionner des cultures types de Saccharomyces cerevisiae IF0-0971, de Saccharomyces rouxii IF0-0493, de Candida utilis IFO-0396, de Candida lipolytica IFO-0746, de Debaryomyces hansenii IFO-0026, de Torulopsis candida IFO-0380, de Torulopsis pinus IFO-0026, de Torulopsis candida IFO0380, de Torulopsis pinus IFO-0741, de Saccharomyces diasticus IFO-1046, etc., ainsi que des levures de boulanger, des levures alimentaires et des levures de fourrage vendues dans le commerce.Ces levures peuvent être utilisées sous forme d'un mycélium de levure fraiche ou sous une forme élaborée, par exemple un mycélium de levure comprimée ou un mycélium de levure sèche active, commercialisés sur le marché comme levure de boulanger, lorsqu'une seule levure est moins efficace pour une certaine sorte de sucre, on peut utiliser plusieurs levures associees, de manière à éliminer le sucre résiduel. Par exemple, il est possible de faire coexister Saccharomyces diasticus et Saccharomyces cerevisiae dans un système mixte d'amidon, de glucose, etc. La concentration du glucoside brut dans une solution aqueuse de glucoside brut est normalement de 50 Z ou moins, de préférence de 40 Z ou moins. Plus la concentration est faible, plus le temps nécessaire pour le traitement est court. Cependant, une concentration de 10 Z ou moins n' est pas aussi efficace en raison de la quantité accrue de liquide à traiter. Le contact d'une solution aqueuse de glucoside brut avec une levure peut être effectué dans des conditions aérobies ou anaérobies. Par exemple, on ajoute un mycélium de levure à une solution aqueuse de glucoside brut en une quantité de 0,5 % poids/volume ou plus et on effectue le contact en agitant statiquement le melange ou en aérant simultanément à une température d'environ 25 à 36 "C, de préférence d'environ 30 à 33 "C. Pour cette opération, le pH est de préférence compris entre 4 et 8 et on l'ajuste à une telle valeur si nécessaire. De plus, on peut ajouter à ce moment au mélange des substances nutritives connues dans la technique pour etre nécessaires pour le métabolisme des levures. Comme substances nutritives, on peut citer des sels mineraux tels que le chlorure de potassium, le chlorure de sodium, le sulfate de magnésium, le sulfate de cuivre, le sulfate de fer, le sulfate de manganèse, etc. et des vitamines telles que l'inositol, la biotine, le pantothénate de calcium, la vitamine B1, la vitamine B6, etc. Lorsque le contact est effectué avec aération, la quantité d'aération est de préférence de 1 à 4 VVM (Vol/Vol/run). Lorsque le contact est effectué dans des conditions anaérobies, on peut balayer la solution avec un gaz inerte, tel que l'azote. Bien que le temps de réaction puisse varier en fonction de la quantité de levure ajoutée, de la concentration de la solution aqueuse de glycoside, etc. la réaction est généralement complete en de 5 à 20 heures. La levure est séparée par filtration. La levure séparée peut être réutilisée plusieurs fois. On neutralise le filtrat avec un alcali, si nécessaire. Puis, de préférence on decolore et on désodorise la solution en y ajoutant du charbon actif et en chauffant le melange. Après préparation du charbon actif par filtration et concentration du filtrat, on obtent une solution aqueuse de glucoside incolore et transparente.On peut recueillir le glucoside sous forme de cristaux à partir de cette solution. Un autre procédé pour mettre en contact une solution aqueuse de glucoside brut et une levure consiste à utiliser la levure sous une forme immobilisée. L'immobilisation de la levure peut être effectuée selon le procédé général. Par exemple, la préparation d'un gel de levure immobilisée peut se faire selon un procédé d'emprisonnement dans un gel, bien connu dans le public, au moyen de carraghénine, de gélose, d'un polysaccharide contenant un radical acide sulfurique tel que le sulfate de cellulose, d'un polyacrylamide, d'alcool polyvinylique, de succinate de cellulose, de succinate de caséine ou autres. Pour expliquer plus concrètement le procédé d'immobilisation de la levure, dont il est question ci-dessus, on peut préparer un gel contenant la levure, par exemple en mélangeant une quantité déterminée de levure avec une solution aqueuse contenant environ de 1 à 6 Z d'un polysaccharide comportant un radical acide sulfurique, de succinate de cellulose, de succinate de caseine ou autre, utilisé comme base de gel, en mettant le mélange en contact avec un agent gélifiant tel que du chlorure de magnésium, du chlorure de calcium, etc. et en formant le gel en granules d'environ 3 à 5 mm. Le gel de levure immobilisée peut être utilisé selon le procédé dit en colonne dans lequel il est chargé dan-s une colonne et mis en contact en continu avec une solution de glucoside, ou selon le procédé en discontinu dans lequel on traite une solution de glucoside avec le gel dans une cuve pendant un temps déterminé. Lorsqu'on utilise une levure immobilisée, selon le procédé dit en colonne, les conditions telles que la concentration de la solution de glucoside brut, la température de traitement, le pH de la solution, etc. sont les mêmes que celles décrites ci-dessus dans le cas où la levure est utilisée telle quelle. Le contact peut être effectue en ajoutant les substances nutritives pour la levure. Bien qu'il n'y ait pas de limite quant à la vitesse de passage de la solution dans la colonne, une vitesse de 2 SV (vitesse spatiale) ou moins, de préférence 1 SV ou moins, est utilise. Apres le contact avec une levure immobilisée, la solution de glucoside est ensuite soumise à une neutralisation, un traitement avec du charbon actif et une concentration (cristallisation), si nécessaire, tel que décrit ci-dessus. Les exemples suivants sont donnés à titre d'illustration de l'invention, sans toutefois vouloir la limiter. Exemple 1 On prépare une solution de méthyl glucoside en faisant réagir 120 g d'amidon de pomme de terre (contenant 18,3 Z d'humidité) avec 395 g de méthanol contenant 1,98 g d'acide chlorhydrique, en présence de 12 g d'une résine d'acide perfluorosulfonique ("Nafion" de du Pcnt), à 1200 pendant 2 heures. On fait passer la solution à travers une colonne remplie d"'Amberlite" A-21 (une résine échangeuse d'anion d'Organo) pour éliminer l'acide chlorhydrique. Puis, on ajoute de l'eau à la solution et on chasse le méthanol par évaporation, pour obtenir 400 ml d'une solution aqueuse de méthyl glucoside à 28,5 Z en poids/volume. Le pH de la solution est de 8,0 et les matières solides de la solution contiennent 2,5 % de glucose.Lorsqu'on porte une partie de la solution à l'ébullition avec de l'hydroxyde -de sodium, elle devient presque noir foncé. A la solution aqueuse on ajoute 6,0 g d'une levure de boulanger humide, du commerce, on agite le mélange sous aération à 30 C pendant 5 heures, puis on separe la levure par filtration pour obtenir une solution jaune pâle ayant un pH de 3,8. Après avoir ajusté le pH de la solution à 6,5 avec une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, on ajoute 2,3 g de charbon actif à la solution et on décolore en même temps qu'on désodorise à 75 - 80 C pendant 1 heure. Après la séparation du charbon actif par filtration, on obtient une solution aqueuse de méthyl glucoside, incolore et transparente. La teneur en glucose dans les matières solides de cette solution est réduite à 0,032 % et la valeur DE Sucre reducteur direct (calculé en glucose)/matieres solides x 1007 est de 0,09 %. La solution est stable vis-à-vis de la coloration lorsqu'on la porte à l'ébullition avec de l'hydroxyde de sodium. Exemple 2 On prépare une solution de glucoside incolore, transparente, par réaction de 50 g de glucose cristallin, anhydre, avec 133 g de méthanol en présence d'une résine d'acide perfluorosulfonique ("Nafion" en poudre 51 de du Pont) à 120su pendant 30 minutes .Après avoir séparé la résine par filtration, on ajoute de l'eau à la solution et on chasse le méthanol par évaporation, pour obtenir 200 ml d'une solution aqueu se contenant 27 Z en poids/volume de matières solides. ("En poids par volume" indique ci-après le nombre de grammes de matières solides par 100 ml de solution). La teneur en glucose dans les matières solides est de 2,9 S. Lorsqu'on porte une partie de la solution à 1 'é- bullition avec de l'hydroxyde de sodium, elle devient presque noir foncé. A la solution aqueuse, on ajoute 2,0 g d'une levure de boulanger commerciale et on agite sous aération à 30 "C pendant une nuit. On sépare ensuite la levure par filtration pour obtenir une solution presqu'incolore ayant un pH de 3,0. Après avoir ajusté le pH de la solution à 6,5 avec une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, on ajoute 1,0 g de charbon actif à la solution et on chauffe le mélange à 80 "C. Après séparation du charbon actif par filtration, on obtient une solution aqueuse de méthyl glucoside incclore, transparente. La teneur en glucose dans les matières solides de cette solution est de 0,013 %, et la solution résiste à la coloration lorsqu'elle est portée à l'ébullition avec de l'hydroxyde de sodium. Exemple 3 En ce qui concerne l'élimination du sucre réducteur d'une solution aqueuse de methyl glucoside par traitement avec de la levure de boulanger, on a rapporté sur la figure 1 les resultats des examens effectués à un pH de 8,0 et à une concentration en glucoside de 32,4 % en poids, e-n fonction de la quantité de levure, et sur la figure 2 les résultats des examens effectués à une concentration en levure de 1 % en poids/volume et à une température de 30 C en modifiant la concentration en glucoside. De manière générale, plus la quantité de levure est importante, plus le temps de réaction nécessaire est court. Plus la concentration en glucoside est faible, plus la réaction progresse efficacement. Exemple 4 On traite une solution de glucoside brut de la meme manière que dans l'exemple 1 avec Saccharomyces cerevisiae IFO-0971 et également avec Candida utilis IFO-0396, pour éliminer le sucre résiduel. Pour ce qui est de Saccharomyces cerevisiae, on a ef fectué le traitement dans des conditions aérobies et également dans des conditions anaérobies. Les resultats sont rapportés dans le Tableau 1. Le traitement est effectué à une concentration en a -méthyl glucoside de 25 Z en poids/volume, un pH de 6,0, une température de 30 "C, une vitesse d'agitant tion de 400 tours/mn et une quantité d'aération de 1 VVM en ajoutant des sels minéraux (KC1 5000 ppm, MgS04 . 7 H202000 ppm, CuSO4.5 H20 2,5 ppm, FeSO4. 7 H20 200 ppm, MnS04. 4-6 H20 25 ppm, NaCl 250 ppm), des vitamines (inositol 100 ppm, biotine 0,5 ppm, pantothénate de calcium 10 ppm, vitamine B1. 10 ppm, vitamine B6 10 ppm) et un extrait de levure (5000 ppm). Les résultats montrent que la résistance à la coloration d'un glucoside brut est améliorée par traitement avec une levure, dans la mesure où la levure est capable d'utiliser le sucne résiduel, bien que la vitesse d'elimination du sucre résiduel dépende de la sorte de levure et des conditions de traitement. TABLEAU 1 Résultats concernant l'élimination de sucre par une levure dans une solution de glucoside brut. O- C. utilis S. cerevisiae S. w (aérobie) (aérobie) v) D Stabilité Cl Stabilité O O O o n r 1 0,57 x 0,51 , N -000 2 k0 x C\J ~ O O O 3 0,23 O 0,05 0,10 .~ rQ, O O Q) C > r r 6 0,001 O 0,001 X O 0 .~ D I O > a) 4 o aJ; V) > nO 0 r. al o ~ e uz O tD sN N O O O O Q CD O O O O O O O sOU1 0 ~ ~ D I ~ O X X X X O O vl^ w ~ a) o ~ .s U) > n u O O b 00 77 1~ O0 -O D tD S N CsJ O O O C!:X O O O O O O O a// O ~ CfiJ X el- &commat; aérobie : aération avec de l'air anaérobie : aération avec de l'azote gazeux stabilité vis-à-vis de la coloration : 0 très bonne # assez bonne X coloré Exemple 5 On prépare une suspension de levure en ajoutant 40 ml d'eau et 10 mg d'une levure de boulanger compressée du commerce, et on ajoute 50 ml d'une solution à 1 Z d'alginate de sodium à la suspension. Après mélange , on introduit la suspension de levure dans la solution d'alginate de sodium dans un injecteur et on la verse lentement goutte.à goutte dans une solution à 5 Z de chlorure de sodium, de manière à immobiliser la levure en formant un gel d'emprisonnement à base d'alginate. En utilisant une quantité déterminée de cette levure immobilisée, on traite une solution de glucoside brut préparée de la manière décrite dans l'exemple 1 selon le procédé discontinu, pour éliminer le sucre résiduel. Les résultats sont rapportés dans le tableau 2. I1 ressort de ce tableau que, meme lorsque la levure est immobilisée, il est possible d'éliminer le sucre résiduel et la stabilité vis-à-vis de la coloration est améliorée. TABLEAU 2 Traitement d'un glucoside avec une levure immobilisée. Concentration Traitement 4 heures Traitement 8 heures en glucoside Glucose Stabilité Glucose Stabilité vus-à-vis vis-à-vis de la de la N coloration coloration % % % 1 50 1,2 X 1,0 X 2 40 0,53 X 0,10 X 3 30 0,12 X 0,008 0 4 20 0,08 # 0,005 0 5 10 0,03 # 0,001 0 Conditions de traitement : procédé discontinu. levure immobilisée 20 % en poids/volume, bios (vitamine B6, pantothénate de calcium, biotine, inositol), température : 30 C pH : neutre Exemple 6 Dans une colonne d'un volume de 20 ml, on introduit un gel d'alginate emprisonnant une levure de boulanger comprimée, immobilisée de la manière expliquée dans l'exemple 5, et on fait passer sur la colonne 40 ml d'une solution de glucoside brut (25 Z en poids/volume) préparée de la manière décrite dans l'exemple 1. A la solution de glucoside brut ci-dessus, on a ajouté auparavant un bios (pantothénate de calcium 10 ppm, vitamine B1 10 ppm, vitamine B6 10 ppm, biotine 0,5 ppm, inositol 100 ppm) comme substances nutritives pour la levure. En faisant passer la solution à une température de 30 OC et à une vitesse de SV 0,5 ("SV 0,5" représente une vitesse de passage de liquide à travers le lit dans la colonne en une quantité de la moitié du volume du lit dans la colonne en 1 heure), on obtient 400 ml d'une solution jaune pâle ayant un pH de 4,0. Après avoir ajusté le pH de la solution à 6,5, on ajoute à la solution 2,5 g de charbon actif et on effectue la décoloration ainsi que la désodorisation.à 75 - 80 C pendant 1 heure. Puis, on sépare le charbon actif par filtration pour obtenir une solution aqueuse de mêthyl glucoside brut, incolore, transparente. La teneur en glucose dans les matières solides de cette solution est de 0,04 %. La solution résiste à la coloration lorsqu'eTle est portée à l'ébullition avec de l'hydroxyde de sodium. Exemple 7 Dans un autoclave de 300 ml de volume, on charge 509 de glucose cristallin anhydre, 5,0 g de "Nafion" en poudre et 175 g d'éthanol, et on effectue la réaction à 130 OC pendant 30 minutes en agitant à 600 tours/mn. Après refroidissement à la température ambiante, on sépare le "Nafion" par filtration. Puis on ajoute de l'eau au filtrat et on chasse l'méthanol par évaporation pour obtenir une solution aqueuse contenant 27 Z en poids/volume de matières solides. La teneur en glucose dans les matières solides est de 2,0 %. Lors qu'on porte une partie de la solution aqueuse à 1 'ébulli- tion avec de 1 'hydroxyde de sodium, elle devient presque noir foncé.En agitant la solution aqueuse, avec aération, à 30 C pendant une nuit, avec 2,0 g d'une levure de boulanger du commerce, on obtient une solution incolore après séparation de la levure. Après avoir ajusté le pH de la solution à 6,5 avec une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, on ajoute du charbon actif à la solution et on effectue la déodorisation en chauffant. Puis, on élimine le charbon actif par filtration et on obtient une solution aqueuse de méthyl glucoside, transparente, incolore. La teneur en glucose dans les matières solides de cette solution est de 0,01 %, et la solution montre une excellente stabilité vis-à-vis de la coloration lorsqu'elle est portee à l'ébullition avec de 1 'hy- droxyde de sodium. Exemple 8 On chauffe 273 g d'ethylène glycol, 1,3 g d'acide sulfurique concentré et 200 g d'un amidon de ma1s commercial (pureté à sec 175,7 g) à 130 OC, sous une pression réduite de 173.102 Pa, en agitant. Puis on ajoute 4,3 g d'hydroxyde de baryum pour neutraliser le mélange réactionnel. On chasse l'excès d'éthylène glycol par distillation et on ajoute de l'eau au résidu. On sépare par filtration les précipités formés par neutralisation et on decolore le filtrat en le chauffant avec du charbon actif pour obtenir une solution aqueuse de glucoside glycolique incolore, transparente. Le produit contient 32 % de matières solides. La teneur en sucre réducteur dans les matieres solides est de 2,4 % calculé en dextrose. La solution devient presque noire lorsqu'elle est portée à l'ébullition en présence d'alcali. A la solution aqueuse, on ajoute une levure de boulanger commerciale en une quantité de 1 Z en poids/volume et on agite le mélange en aérant à 30 C pendant une nuit. Puis, on sépare la levure par filtration et on ajuste le pH du filtrat à 6,5 en ajoutant de l'hydroxyde de sodium. A la solution aqueuse obtenue, on ajoute du charbon actif et on désodorise la solution en chauffant. Après avoir séparé le charbon actif par filtration, on obtient-une solution aqueuse de glucoside glycolique incolore, transparente. La teneur en glucose dans les matières solides de cette solution aqueuse est de O ,0 et la solution est très stable vis-à-vis de la coloration en la portant à 1 'ébulli- tion avec un alcali. Exemple 9 Dans un autoclave revetu intérieurement de verre, d'un volume d'un litre, on charge 120 g d'amidon de maïs (teneur en humidité 12 %) et 500 g de n-butanol contenant 10 g d'acide chlorhydrique. On effectue la réaction à 135 C pendant 2 heures en agitant le mélange à 600 tours/mn pour obtenir une solution butanolique de butyl glucoside On fait passer la solution sur une colonne remplie d'Amberlite A-21 pour éliminer l'acide chlorhydrique. Après avoir chasse le n-butanol par évaporation sous pression réduite, on ajoute de l'eau pour obtenir une solution aqueuse de glucoside à 30 X. La teneur en sucre réducteur dans les matières solides de cette solution aqueuse est de 7 Z, calculée en dextrose, et la solution devient presque nuire lorsqu'elle est portée à l'ébullition en presence d'alcali. En ajoutant à la solution aqueuse une levure de boulanger commerciale en une quantité de 2 % en poids/volume, en agitant le mélange avec aération à 30 C pendant une nuit, puis en effectuant le même traitement que dans 1 'exemple 8 ci-dessus, la solution aqueuse montre une excellente stabilité vis-à-vis de la coloration lorsqu'on la porte à l'ébullition avec un alcali. REVENDICATIONS 1 - Procédé pour la purification de glucosides bruts, caractérise en ce qu'il consiste à mettre une solution aqueuse de glucoside brut contenant un sucre réducteur en contact avec une levure. 2 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution aqueuse de glucoside brut contenant un sucre réducteur est mise en contact avec une levure immobilisée. 3 - Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que le contact avec une levure immobilisée est effectué selon le procédé en colonne ou le procédé en discontinu. 4 - Procédé selon 1 'une des revendications 2 ou 3, caractérisé en ce qu'apres le contact avec une levure immo-. bilisée, on effectue un traitement avec du charbon actif. 5 - Procédé selon 1 ' une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la concentration en glucoside brut dans la solution aqueuse de glucoside brut est de 50 % ou moins. 6 - Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que la levure de la levure immobilisée est un mycélium capable d'utiliser du sucre, appartenant à Saccharomyces, Candida, Endomyces, Debaryomyces, Pichia ou Torulopsis, un produit obtenu par traitement d'un tel mycélium, ou un mélange de ces organismes.