Brevet FR2550193A1 — publié le 19850208

La présente invention est relative à des complexes d'inclusion du trisulfure de méthyle et d'allyle (dénommé ci-après;MATS) avec les cyclodextrines, un procédé de préparation de ceux-ci et des compositions charma ceutiques les contenant. I1 est connu (voir par exemple T. Ariga et al, The Lancet, 1981, pages 150-151) que le MATS, un composant mineur de l'huile d'ail, empêche la biosynthèse du thromboxane; c'est un inhibiteur de la formation des plaquettes du sang. On a trouvé que le MATS, pour des concentrations inférieures à 10 pimole/l de plasma humain riche en plaquettes, inhibe l'agrégation de ces plaquettes. On a trouvé également que son action peut être déon- trée contre l'acjrégation secondaire induite soit par I'adé- nosine diphosphate soit par l'épinéphrine. Le MATS pourrait donc en principe etre-utilisable pour la prévention et le traitement d'une série d'états pathologiques qui sont associés à l'agrégation des plaquettes.Le MATS pourrait ainsi être utilisé favorablement pour la prévention et le traitement des différentes formes de thrombose.En essayant d'incorporer le MATS dans des formulations galéniques intéressantes pour permettre une administration lors du traitement contre la thrombose, on rencontre de très graves difficultés dues aux propriétés physiques et chimiques du MATS. Le MATS a en effet la consistance d'une huile jaunâtre et présente en outre une odeur caractéristique très violente et agressive rendant sa manipulation extrêmement difficile.-Un autre inconvénient est son instabilité, spécialement vis-à-vis de l'oxygène de l'air.C'est pourquoi il a été pratiquement impossible et jusqu'ici non réalisé de mettre ie MATS sous une forme galénique stable, de goût et odeur acceptables, présentant une composition uniforme et qui pourrait donner une biodisponibilité, constante et optimale au vu du métabolisme rapide du MATS observé chez les humains. L'invention a donc pour but de fournir un produit comprenant du MATS ne présentant pas les inconvénients précités et pouvant être utilisé aisément pour la préparation de compositions pharmaceutiques. Le produit suivant l'invention est un complexe d'inclusion de trisulfure de méthyle et d'allyle avec une cyclodextrine ou un mélange de cyclodextrines. Suivant une autre caractéristique de l'invention, la cyclodextrine est de la ss -cyclodextrine. L'invention a également pour objet un procédé de préparation du complexe d'inclusion précité, caractérisé en ce qu'on met en contact du trisulfure de méthyle et d'allyle avec une cyclodextrine ou un mélange de cyclodextrines en solution ou en dispersion dans l'eau et on isole du milieu réactionnel le complexe d'inclusion formé. Suivant une autre caractéristique du procédé de l'invention, le trisulfure de méthyle et d'allyle est utilisé en solution dans un solvant organique. Suivant encore une autre caractéristique du procédé, on isole le complexe en refroidissant le mélange réactionnel et en séparant par filtration le complexe cristallin obtenu. Suivant une autre caractéristique, on isole le complexe par lyophilisation du mélange réactionnel. L'invention a encore pour objet une composition pharmaceutique utilisable notamment pour la prévention et le traitement des thromboses et autres états pathologiques liés à l'agrégation des plaquettes du sang, caractérisé en ce qu'elle contient à titre de principe actif un complexe d'inclusion tel que défini ci-dessus. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront au cours de la description qui va suivre. Le nouveau produit de l'invention est un complexe d'inclusion de MATS avec une cyclodextrine ou un mélange de cyclodextrines. Les cyclodextrines sont des molécules cycliques connues, constituées de 6, 7 ou 8 unités glucopyranose formant des unité alpha-1,4-glucose. Structuralement, elles se caractérisent par une disposition spéciale des groupes hydroxyle, tous les hydroxyles secondaires étant situes sur une arête du noyau, alors que tous les hydroxyles primaires sont situés sur l'autre arête. La surface externe du noyau est donc essentiellement hydrophile, ce qui assure la solubilité dans l'eau des cyclodextrines. La surface interne des noyaux a par contre un caractère hydrophobe car dans cette partie de la molécule on ne trouve que des atomes d'hydrogène et des ponts oxygène gluccsidiques. Par conséquent, si l'on ajoute à une solution aqueuse des cyclodextrines des molécules qui sont moins polaires que l'eau et dont la forme et la taille leur permet de pénétrer dans la cavité située à l'intérieur de la cyclodextrine, on forme un complexe d'inclusion de cyclodextrine, même en solution aqueuse. Le noyau constitué de 6 unités glucopyranose est appelé alphacyclodextrine, celui constitué de 7 unités est appelé bêta-cyclodextrine et enfin celui constitué de 8 unités glucopyranose est appelé gamma-cyclodextrine. Dans laprésente invention, la cyclodextrine est de préférence de la (3-cyclodextrine. Le MATS nécessaire pour la préparation des complexes d'inclusion suivant l'invention peut etre obtenu par différents procédés connus. Ainsi, il peut être isolé de l'huile d'ail naturelle par chromatographie gazeuse pre- parative. Le temps de rétention du MATS est compris entre ceux de deux composants connus de lthuile d'ail, le disulfure de diallyle et le trisulfure de diallyle. Le MATS peut aussi être préparé par synthèse,comme décrit par exemple dans l'article de Ariga et al. précité. La Demanderesse a trouvé que le MATS donne avec les cyclodextrines,en particulier avec les ss-cyclodextri nes, des complexes d'inclusion stables et que de tels complexes éliminent les inconvénients du MATS utilisé seul. Ces complexes d'inclusion ont une odeur fortement réduite par rapport au MATS seul et ils se présentent sous la forme d'une poudre blanchie qui peut être formulée en compositions pharmaceutiques acceptables. Leur stabilité vis-àvis de l'oxygène de l'air est très sensiblement améliorée par exemple d'un facteur de 5 à 10 par rapport à celle mesurée sur le MATS seul. Les complexes de l'invention peuvent ainsi être incorporés-dans des formulations galéniques classiques,telles que des comprimés, des dragées, des pilules, des gélules, des suppositoires, etc. conduisant à une forme galénique stable, qui est optimale pour le MATS lors du traitement et de la prévention des différentes formes de thrombose. Suivant le procédé de l'invention, on prépare le complexe d'inclusion tETS-cyclodextrine en mettant en contact une solution de MATS dans un solvant organique avec une solution aqueuse de la cyclodextrine ou du mélange de cyclodextrines. Le solvant organique du MATS est notamment un solvant miscible à l'eau tel qu'un alcanol inférieur (par exemple l'éthanol) ou une cétone inférieure; on peut utiliser également des solvants non miscibles à l'eau tels que des éthers (par exemple ltéther éthylique), etc. La mise en contact est effectuée de préférence progressivement avec agitation continuelle du mélange réactionnel, à une température qui dépend du solvant utilisé mais qui est normalement comprise entre la température ambiante et la température d'ébullition du solvant. Si le solvant est ltéthanol, la température sera notamment comprise entre 400C et 600C. Le 54STS étant susceptible de se décomposer a température élevée, on devra tenir compte de cette pro priété dans le choix de la température opératoire. La mise en contact s'effectue de préférence en introduisant la solution organique de MATS dans la solution aqueuse de cyclodextrine. On poursuit avantageusement l'agitation du mélange réactionnel pendant une à trois heures après la fin de la mise en contact, durée pendant laquelle le mélange réactionnel revient à la température ambiante. Pour isoler le complexe d'inclusion formé, on peut maintenir le mélange réactionnel au réfrigérateur pendant une nuit et séparer ensuite par filtration le complexe cristallin blanc formé. On peut aussi lyophiliser le mélange réactionnel ce qui permet d'obtenir le produit sous forme d'une poudre blanche. L'exemple non limitatif suivant est donné à titre d'illustration de la préparation du complexe d'inclusion suivant l'invention. Exemple On dissout 10 g defi-cyclodextrine (teneur en eau 13-ö) dans 180 ml d'eau à 500C tout en agitant continuellement. On dissout 1,2 g de rATS dans 5 ml d'éthanol et on l'ajoute graduellement à la solution aqueuse de ss -cyclo- dextrine. On refroidit le mélange jusqu'à température ambiante pendant 2 heures tout en maintenant l'agitation puis on laisse une nuit au repos dans. un réfrigérateur. On sépare par filtration le solide précipité et on le sèche sous vide, ce qui donne 9,7 g d'un complexe d'inclusion ;EATS-ss -cyclodextrine sous la forme d'une poudre cristalline blanche. Selon la chromatographie en phase gazeuse, le produit contient 11,7% en poids de ;VATS. Une analyse par diffraction des rayons X de la poudre selon Guinier de Wolff démontre la formation d'une nouvelle forme cristalline, celle du composé d'inclusion désiré. Des études du complexe obtenu effectuées par des méthodes telles que la calorimétrie différentielle, la thermogravimétrie et la thermogravimétrie différentielle montrent que le complexe -cyclodextrine/MATS est ther-miquement stable jusqu'à 260-280 C. A cette température, commencent la dissociation du complexe et la décomposition des produits complexés. Par contraste avec cette très haute stabilité thermique, le complexe est facilement dissocié dans des milieux physiologiques et le MATS ainsi libéré peut développer son activité biologique mentionnée ci-dessus. Ceci est illustré par l'activité inhibitrice développée par le complexe /j -cyclodextrine/MATS sur du plasma de lapin riche en plaquettes (méthode ae Born) contre des agents agrégogènes tels que 1'ADP (10 et l'acide arachidonique (10 4 M/1). Concentration r Inhibition Inhibition vis-a du complexe dans vis- -vis de vis de l'acide ara l'essai ( g/ml) l'-ADP (%) ehidoniauz (%) 100 82 88 75 16 72 60 12 60 50 11 4 L'agrégation induite par le collagène a de même été inhibée. Comme déjà indiqué ci-dessus, le complexe d'inclusion suivant l'invention peut être aisément utilisé pour la préparation de compositions pharmaceutiques utilisables en particulier pour la prévention et le traitement des thromboses et de divers états patholoaiques liés à l'agrégation des plaquettes du sang. Les compositions pharmaceutiques suivant l'invention peuvent être sous toute forme appropriée à l'administration du MATS, et notamment sous une forme administrable par voie orale, telle que comprimés, comprimés enrobés, dragées, pilules, gélules, etc..., dans lesquels le principe actif est associé aux véhicules et excipients habituels. On peut préparer par exemple des gélules de gélatine dure contenant chacune 169,5 mg de complexe d'inclusion MATS -cyclodextrine préparé suivant l'exemple ci-dessus (ce qui équivaut à 20 mg de MATS par dose), ou bien des gélules plus grosses contenant 424 mg du complexe ci-dessus, ce qui équivaut à 50 mg de MATS par dose. On peut également préparer par les procédés classiques des comprimés contenant en poids, en plus du complexe actif, par exemple de 1 à 2 % de liant, tel que de la gomine adragante; de 3 à 10 % d'un agent de désintégration, tel que l'amidon de mals; de 2 à 10 % d'un lubrifiant tel que du stéarate de magnésium et une charge, par exemple du lactose. Un tel comprimé peut contenir notamment 42,4 mg du complexe d'inclusion MATS -cyclodextrine et peut être enrobé de manière classique si on le désire. Des formulations du type à action retardée, à libération progressive du principe actif,à action répétée, etc... peuvent également être préparées à partir du complexe d'inclusion par les méthodes usuelles. La composition pharmaceutique de l'invention est également avantageusement présentée sous une forme appropriée à l'administration rectale, telle que des supposi: toires dans lesquels le principe actif est associé aux bases habituelles, notamment de l'huile de théobroma, du beurre de cacao, des triglycerides semi-synthétiques, etc... Une telle formulation de suppositoires comprendra par exemple 169 mg du complexe d'inclusion MATS-n- cyclodextrine de l'exemple ci-dessus dans une base d'huile de tneobroma. Un tel suppositoire contient 20 mg de MATS par dose. - REVENDICATIONS 1. Comple-xe d'inclusion du trisulfure de méthyle et d'allyle avec une cyclodextrine ou un mélange de cyclodextrines. 2. Complexe d'inclusion suivant la revendication 1, dans lequel la cyclodextrine est la 4-cyclodextrine. 3. Procédé de préparation d'un complexe d'inclusion suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on met en contact du trisulfure de méthyle et d'allyle avec une cyclodextrine ou un mélange de cyclodextring en solution ou en dispersion dans l'eau et on isole du milieu réactionnel le complexe d'inclusion formé. 4. Procédé suivant la revendication 3, caractérisé en ce que le trisulfure de méthyle et d'allyle est utilisé en solution dans un solvant organique. 5. Procédé suivant la revendication 4, caractérisé en ce qu'on effectue la mise en contact par addition progressive de la solution de trisulfure de méthyle et d'allyle à la solution aqueuse de cyclodextrine avec agitation constante du mélange réactionnel. 6. Procédé suivant la revendication 4 ou 5, caractérisé en ce que le solvant organique est un solvant miscible à l'eau. 7. Procédé suivant l'une quelconque des revendications 3 à 6, caractérisé en ce qu'on isole le complexe en refroidissant le mélange réactionnel et en séparant par filtration le complexe cristallin obtenu. 8. Procédé suivant l'une quelconque des revendications 3 à 6, caractérisé en ce qu'on isole le complexe d'inclusion par lyophilisation du mélange réactionnel. 9. Composition pharmaceutique utilisable notamment pour la prévention et le traitement des thromboses et autres états pathologiques liés à l'agrégation des plaquettes du sang, caractérisée en ce que'elle contient, à titre de principe actif, un complexe d'inclusion tel que défini à la revendication 1 ou 2. 10. Composition pharmaceutique suivant la revendication 9, caractérisée en ce qu'elle est présentée sous forme appropriée a l'administration orale ou rectale.