Brevet FR2554126A1 — publié le 19850503

-i 2554126 La présente invention concerne essentiellement un procédé et une installation de production d'acide glutamique par fermentation. On connait déjà, notamment par les brevets Asahi délivrés aux USA sous les N s USP 3.355 359 & 3.399 144 un procédé de production d'acide glutamique par fermenta- tion comprenant, dans une zone de fermentation et dans des conditions de fermentation appropriées, la fermentation d'une souche productrice d'acide glutamique sur un milieu de fermentation approprié, de préférence avec ajout d'un substrat nutritif au cours de la fermentation, ce procédé étant dénommé procédé " fed-batch". Selon ce procédé, on débute la fermentation avec un faible niveau de milieu de fermentation dans le réacteur, ce niveau augmentant régulièrement lors de l'ajout, habituellement continu, de substrat nutritif au cours de la fermentation, pour aboutir à un niveau supérieur dans le réacteur pour lequel on arrête la fermentation. La fermentation est en général réalisée avec une souche productrice d'acide glutamique constituée par une souche de Corynebacterium melassecola qui exige la présence de biotine comme facteur de croissance. Selon le niveau de biotine, il est nécessaire d'introduire un ou plusieurs additifs appropriés. Si le milieu est peu riche en biotine, on ajoute un seul additif et dans le cas o le milieu est riche en biotine, on ajoute au minimum deux additifs. Ces procédés connus du type " fed-batchIr présen- tent l'inconvénient majeur que, lors de l'ajout successif de substrat nutritif en cours de fermentation, une proportion importante de matières diverses, organiques et minérales,s'accumulent dans le fermenteur au fur et à mesure que la fermentation avance en âge et finissent par atteindre une concentration critique formant en quelque 2 2554126 sorte un seuil de toxicité pour la phase de production de l'acide glutamique ce qui limite par conséquent le rendement et la productivité en acide glutamique. Il en résulte que les procédés de type "fed batch" sont limités en rendement et en produc- tivité ce qui en constitue un grave inconvénient pour une production industrielle. Ainsi, compte tenu de l'état de la technique précédent, l'invention a pour but de résoudre le problème technique consistant en la production d'acide glutamique par fermentation, au niveau industriel avec un rendement et une productivité radicalement accrus par rapport aux procédés antérieurs et en particulier du type "fed batch". D'autre part, l'invention a également pour but de résoudre le problème technique de l'obtention d,'une concentration d'acide glutamique telle que les opérations futures d'extraction de celui-ci soient réalisables dans de bonnes conditions techniques et économiques. Ces divers problèmes techniques sont résolus pour la première fois par la présente invention. Ainsi, la présente invention, selon l'un de ses aspects, fournit un procédé de production d'acide glutamique par fermentation comprenant, dans une zone de fermentation et dans des conditions de fermentation appropriés, la fermentation d'une souche productrice d'acide glutamique sur un milieu de fermentation approprié, de préférence avec ajout d'un substrat nutritif en cours de fermentation selon le procédé "fed batch", caractérisé en âe que, 3 2554126 lorsque l'on atteint une concentration prédéterminée en acide glutamique, on procède à une filtration appropriée du milieu de fermentation en obtenant d'une part un rétentat contenant les cellules de la souche et d'autre part un filtrat contenant l'acide glutamique; on recycle au moins en partie le rétentat dans la zone de fermentation et on recueille-le filtrat pour de préférence en séparer ensuite l'acide glutamique; et on ajoute dans la zone de fermentation, lors de cette étape de filtration, par intermittence ou en continu, au moins un agent bloquant sensiblement la croissance de la souche. De préférence, cet agent bloquant la croissance de la souche est un dérivé d'acide gras, de préférence choisi parmi un ester d'acide gras de polyoxyéthylène, avantageusement l'ester monopalmitate en monostéarate de polyoxyéthylne ou encore un sel d'acylamine, avantageusement l'acétate de laurylamine ou de myristylamine. Lorsque la fermentation est aérobie, ce qui est habituellement le cas, le procédé selon l'invention est de préférence caractérisé en ce qu'on réalise l'aération en faisant passer le rétentat recyclé dans un hydro- injecteur avant son recyclage dans la zone de fermentation. De préférence, on procède à la filtration lorsque la concentration en acide glutamique arrive à un palier, c'est-à-dire est égale ou supérieure à environ grammes par litre de milieu de fermentation. Selon une autre caractéristique du procédé selon l'invention, on réalise la filtration en continu et on introduit du substrat nutritif dans la zone de fermen- tation en quantité suffisante pour compenser la quantité de substrat soutirée de la zone de fermentation et non réintroduite. Ainsi, selon l'invention on maintient la concentration en acide glutamique à une valeur sensiblement constante et également une biomasse maintenue sensiblement 4 2554126 constante ce qui aboutit, de manière totalement inattendue, à une augmentation radicale du rendement et de la productivité en acide glutamique. Le rendement en acide glutamique est exprimé en masse d'acide glutamique rapportée à la masse de sucre mise en oeuvre pour la fermentation tandis que la productivité en acide glutamique est exprimée en masse d'acide glutamique par litre de fermenteur utile et par heure de fermentation. Ces résultats seront mis en évidence dans les exemples comparatifs donnés plus loin. On a pu démontrer à ce sujet que ces résultats tout à fait inattendus sont dus à la combinaison de la filtration et de l'addition d'agent(s) bloquant la croissance de la souche. En effet, la simple combinaison de la filtration avec le procédé connu de production d'acide glutamique par fermentation, par exemple le procédé type "feed batch"aboutit à une diminution radicale de la productivité de la souche et ceci sera démontré plus loin par l'exemple N 6 de comparaison. Ainsi, bien que la technique de recyclage des cellules - par filtration ait déjà été utilisée dans les procédés de fermentation (voir par exemple la revue "Process Biochemistry, Août/Septembre 1980, pages 7 à 10; ou la demande brevet européen N 82 400 775.1 publiée sous le N 65 895, page 2, ligne 6 à page 5 ligne 25 et les revendications), ce recyclage des cellules par filtration conduit à une augmentation importante de la biomasse ce qui était considéré jusqu'alors comme un facteur déterminant pour l'augmentation du rendement et de la productivité. L'invention, de manière inattendue, au contraire, limite volontairement la croissance de la biomasse (donc 2554126 de la souche) lors de l'étape de filtration, par l'ajout par intermittence ou en continu d'agent(s)bloquant la croissance de la souche ce qui aboutit d'une manière inattendue à un accroissement radical du rendement et de la productivité de la souche. D'autre part, la concentration d'acide glutamique est telle que l'extraction de l'acide glutamique est réalisable dans de bonnes conditions techniques et économiques. L'invention concerne également selon un autre de ses aspects, une installation de production d'acide glutamique par fermentation, comprenant un fermenteur, des moyens d'alimentation en milieu de fermentation ou nutritif audit fermenteur, des moyens de soutirage de milieu fermenté du fermenteur; et de préférence des moyens d'agitation ainsi que des moyens d'aération du milieu de fermentation, caractérisée en ce que les moyens de soutirage sont reliés à l'entrée d'une unité de filtration comprenant une sortie de rétentat et une sortie de filtrat, de préférence la sortie de rétentat est reliée audit fermenteur pour réaliser au moins en partie un recyclage du rétentat; et des moyens d'introduction dans le fermenteur d'au moins un agent bloquant la croissance de la souche. Selon un mode de réalisation de cette installa- tion, l'unité de filtration comprend au moins un module de filtration tangentielle. Selon un autre mode de réalisation de cette installation, l'unité de filtration comprend au moins un module de iltration, de préférence tubulaire, à membrane de préférence minérale. Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux de cette installation, les moyens d'agitation et/ou d'aération comprennent un hydro-injecteur sur le circuit de recyclage du rétentat au fermenteur dans lequel passe le rétentat recyclé au fermenteur. 6 2554126 D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à la lumière de la description explicative qui va suivre relative à plusieurs exemples de l'art antérieur et comprenant plusieurs exemples de réalisation selon l'invention, en référence également aux dessins annexés dans lesquels: - la figure 1 représente schématiquement une installation de base de production d'acide glutamique montrant principalement le fermenteur; - la figure 2 représente le couplage du fermenteur avec une cellule de filtration seime i"n-enta- - la figure 3 représente un mode de réalisation d'une cellule de filtration de type tangentielle; - la figure 4 représente un autre mode de réalisation de module de filtration de type tubulaire à membrane minérale; - la figure 5 représente un mode de réalisation préféré de l'installation selon l'invention comprenant un fermenteur, une cellule de filtration et un hydmro- injecteur; et - la figure 6 représente une vue agrandie de déteil de l'hydro-injecteur représenté à la figure 5. Les exemples et les modes de réalisationme sont donnés naturellement qu'à titre d'illustration et ne sauraient donc en aucune façon limiter la portée de l'invention. EXEMPLE N0I DE COMPARAISON Cet exemple est relatif au procédé cnnu par le brevet Asahi usP No 3.355 359 de fermentation glutamique de type "fed-batch"en présence d'une concentration en biotine (facteur de croissance) insuffisante. Pour réaliser cet exemple, on utilise l'installa- tion simplifiée de la figure 1 et qui comprend 7 2554126 principalement un fermenteur I d'une capacité totale de litres, et de volume utile de 7 litres. Ce fermenteur est pourvu de moyens d'agitation 2 par exemple formés par un axe à trois turbines 2a, 2b, 2c; une sonde 3 et un régulateur de température 4 actionnant des moyens de chauffage 5 par résistance et le refroidissement du réacteur par circulation d'eau dans une baffle creuse 6. On prévoit également une sonde de contact 7 commandant une pompe 8 d'introduction d'un produit anti- mousse stocké dans un réservoir approprié 9 par l'inter- médiaire d'un relais 10. On prévoit également une sonde de pH 11 reliée à un bloc de mesure et régulation 12 commandant la pompe 13 d'une solution d'ammoniaque 14. Le fermenteur est également pourvu de moyens d'aération formés ici par une réserve d'air stérile 15 reliée à des tubes plongeants 16 et un diffuseur annulaire 17. Le fermenteur est également pourvu de moyens d'alimentation 18 en substrat nutritif pompé par une pompe 19 à partir d'une réserve 20 en substrat nutritif. On prévoit également des moyens 21 de soutirage de milieu fermenté, formésici simplement par un tube plongeant de prélèvement. Le fermenteur est également pourvu de moyens 50 formés par exemple par des tubes plongeants permettant l'introduction de divers produits lors de la fermentation tels que inoculum, NH3, mélasse, rétentat, etc. Dans cet exemple de comparaison selon le procédé Asahi précité, on introduit dans le fermenteur un milieu de fermentation (A) dont la composition est donnée dans le tableau I en fin de description et le pH est ajusté et régulé à 7,3 avec une solution d'ammoniaque. 8 2554126 Ce milieu est ensemencé à 5% (volume/volume) par une culture de Corynebacterium melassécola, cultivée sur le milieu de culture B donné également dans le tableau 1 et l'agitation est mise en place. La température de fermentation est réglée à 350 et le débit d'air est de 0,8 V/V.minute. La concentration initiale en biotine (facteur de croissance) est de 5 microgrammes par litre. A cette faible concentration il est seulement nécessaire l'emploi d'un seul tensio-actif constitué par du polyoxyéthylène monopalmitate à une concentration de 2 grammes par litre. Le milieu est alimenté avec un substrat nutritif depuis la réserve 20 du type mélasse de betterave dont la concentration en sucre est de 500 grammes par litre. Cette alimentation est réalisée selon un débit suffisant pour maintenir une concentration résiduelle en sucre de grammes par litre. La durée totale de la fermentation est de 34 heures. La concentration finale en acide glutamique est de 90 grammes par litre avec un rendement d'acide glutamique rapporté au sucre mis en oeuvre de 55% et une productivité en acide glutamique par litre de fermenteur utile et par heure de 2,7 (c'est-à-dire 2,7 grammes/litre.heure). EXEMPLE N 2 DE COMPARAISON Cet exemple est un exemple de comparaison de fermentation glutamique de type "fed-batch"en présence d'un excès de biotine comme facteur de croissance, ce qui exige l'addition de deux tensio-actifs. Ce procédé est réalisé selon le brevet Asahi USP N 3.399 114. Selon cet exemple on utilise également le milieude fermentation A du tableau 1 mais dans lequel la concentra- tion initiale en biotine est de 100 microgrammes par litre. La procédure est identique à l'exemple 1 avec également 9 2554126 alimentation en milieu nutritif comme décrit à l'exemple 1. L'addition du premier tensio-actif (polyoxy- éthylène monopalmitate) est réalisée lorsque la densité optique nette est égale à 0,35 avec une concentration de 1 gramme par litre;et 1 heure après l'addition du premier tensio-actif,quandla densité optique nette est de 0,65, on ajoute le deuxième tensio-actif (acétate de laurylamine) à une concentration de 0,3 gramme par litre. On arrête la fermentation après 16 heures de fonctionnement. La concentration finale en acide glutamique est de 65 grammes par litre avec un rendement de 49% et une productivité de 4 grammes/litre.heure. EXEMPLE N 3 DE COMPARAISON Cet exemple de comparaison est relatif à une fermentation glutamique de type "fed batch" toujours en présence d'un excès de biotine et emploi de deux agents tensio-actifs nécessité par l'excès de biotine. On procède comme décrit à l'exemple 2 mais la durée totale de fermentation est de 34 heures au lieu de 16 heures. La concentration finale en acide glutamique est de 100 grammes par litre soit un rendement de 58,5% et une productivité de 3 grammes/litre.heure. EXEMPLE N 4 SELON L'INVENTION Selon l'invention, on utilise l'installation représentée à la figure 2 couplant un mcdule de filtration avec le fermenteur. Selon cet exemple, la cellule de filtration est la cellule de filtration tangentielle représentée à la figure 3 et qui présente une entrée 24 reliée par une pompe 23 auxmoyensde soutirage21 et deux sorties: une sortie filtrat 25 reliée par une conduite 26 à une pompe 27 et une sortie rétentat 28 permettant le recyclage du rétentat dans le fermenteur 1 par la conduite 29 et le 2554126 tube plongeant 50. La cellule de filtration tangentielle est constituée par deux paquets 30 d'une série de filtres représentant une surface totale de filtration de 900 cm2. Chaque paquet comprend deux membranes 31 dont le diamètre de pores est de 0,45 micron, séparées par un séparateur de filtrat 32. Un séparateur de rétentat 33 est intercalé entre les deux paquets. L'ensemble est stérilisé chimiquement à l'eau de javel. Ce type de cellule de filtration tangentielle est couramment disponible sur le marché. Selon le procédé de l'invention, la première étape du procédé de fermentation est réalisée de préférence selon le procédé "fed batch" et est donc, pour une concentration en biotine insuffisante, réalisé comme décrit à l'exemple 1, c'est-à-dire tout d'abord sans l'utilisation de la cellule de filtration. Cependant, lorsque l'on arrive à une concentration prédéterminée en acide glutamique, qui est de préférence égale ou supérieure à 60 grammes par litre, c'est-à-dire dans le cas présent après 16 heures de fermentation, on met en fonctionnement la cellule de filtration 22 par actionnement de la pompe 23 selon un taux de recyclage de 6 litres par heure. D'autre part, l'alimentation est réalisée avec un milieu nutritif de plus faible concentration en glucose, c'est-à-dire dans le cas présent avec une mélasse dont la concentration en sucre est de 100 grammes par litre et le débit de soutirage etd'alimentation est identique pour maintenir le niveau constant dans le fermenteur. Ce débit est sélectionné pour maintenir un taux de dilution de 0,06 h-1. Au cours de la deuxième étape de filtration, on ajoute toutes les deux heures un agent bloquant la 11 2554126 croissance de la souche productrice d'acide glutamique qui est de préférence un dérivé d'acide gras. L'agent tensio-actif constitué par le polyoxyéthylène monopalmitate qui est un ester d'acide gras a été trouvé satisfaisant et celui-ci est ajouté toutes les 2 heures à une concentration de 1 gramme par litre. La durée de la fermentation totale est de 34 heures, soit 18 heures de fermentation avec la filtration des cellules de la souche. On observe que la concentration en acide glutamique déterminée dans le filtrat pompé par la pompe 27 de la conduite 26 se stabilise à la valeur de 60 grammes par litre et on obtient un rendement de 53% et une productivité de 3,6 grammes par litre.heure. On constate ainsi que la productivité est accrue de manière tout à fait inattendue par rapport à l'exemple de comparaison de l'exemple N 1. EXEMPLE N 5 SELON L'INVENTION Dans cet exemple, on réalise une fermentation glutamique avec un milieu de fermentation ayant un excès de biotine,soità une concentration initiale en biotine de 100 microgrammes par litre comme à l'exemple N 2. Ainsi, on réalise tout d'abord la fermentation comme décrit dans l'exemple N 2 o on aboutit après 16 heures de fonctionnement à une concentration en acide glutamique de 65 grammes par litre. L'installation utilisée est naturellement celle de la figure 2 avec le module de filtration tangen- tielle de la figure 3. On déclenche alors la filtration avec un taux de recyclage de 6 litres par heure et un taux de dilution maintenu à 0,06 h-1. On utilise également un milieu nutritif à teneur réduite en sucre, en l'occurrence une mélasse de betterave avec une concentration en sucre 12 2554126 de 100 grammes par litre. On ajoute périodiquement et alternativement deux agents bloquant la croissance de la souche, le premier étant un ester d'acide gras constitué de préférence par le polyoxyéthylène monopalmitate et le second étant un ester d'acylamine de préférence constitué par l'acétate de laurylamine. Cette addition périodique et alternative de ces deux agents bloquants est réalisée toutes les heures avec des concentrations respectives de 0,5 gramme par litre et 0,15 gramme par litre. La durée totale de la fermentation est de 34 heures. On observe que la concentration en acide glutamique se stabilise à la valeur de 65 grammes par litre avec un rendement de 54,5 % et une productivité de 3,9 grammes/litre.heure. Cette productivité est à rapprocher de celle obtenue à l'exemple 3 pour une même durée de fermentation. On observe encore un gain radical en productivité, de pratiquement un tiers soit environ 30% de gain de productivité. EXEMPLE N 6 Cet exemple a pour but de montrer l'effet critique de la combinaison de la -filtration et de l'addition d'au moins un agent bloquant la croissance de la souche. Pour ce faire, on procède comme décrit à l'exemple N 5 sauf qu'on ne réalise aucune addition d'agent bloquant la croissance de la souche, c'est-à-dire que l'on n'additionne pas de tensio-actif pendant la phase de filtration. La durée totale de la fermentation est également de 34 heures et on observe que la concentration en acide glutamique diminue progressivement de 65 à 20 grammes par litre avec une productivité moyenne de 1,7 grammes/litre.h. 13 2554126 On observe ainsi que la simple combinaison de la filtration avec la fermentation aboutit à une baisse radicale de la productivité qui est presque de 50%. Cette baisse de productivité apparaît être due à une croissance incontrôlée de la souche qui arrête la production d'acide glutamique. EXEMPLE N 7 SELON L'INVENTION On procède ici comme à l'exemple N 5 sauf que l'addition des deux agents bloquant la croissance de la souche est effectuée en continu à raison de 0,25 gramme/ litre.heure et 0,08 gramme/litre.heure respectivement. La durée totale de la fermentation est également de 34 heures. La concentration en acide glutamique s'est stabilisée à la valeur moyenne de 70 gramme/litre, ce qui représente un rendement de 56% et une productivité de 4,1 gramme/litre,heure. EXEMPLE N 8 SELON L'INVENTION On procède comme décrit à l'exemple N 7 mais la durée totale de fermentation est portée à 70 heures au lieu de 34 heures. La concentration en acide glutamique s'est stabilisée à la valeur moyenne de 69 gramme/litre, soit un rendement de 61% et une productivité de 4 gramme/litre.heure. Cet exemple permet de constater que même en doublant la durée de fermentation la productivité de la souche est maintenue à un niveau nettement supérieur à celui atteint selon l'art antérieur, et ce d'une manière tout à fait inattendue. EXEMPLE N 9 SELON L'INVENTION Dans une première étape, on utilise le procédé de fermentation "fed batch" décrit dans l'exemple N 2 à la suite duquel on déclenche la filtration. Le taux de dilution est maintenu à la valeur de 0,1 h-1 avec une mélasse d'alimentation dont la concentration en sucre est 14 2554126 de 75 grammes par litre et un taux de recyclage de 6 litres par heure. Lors de la filtration, on ajoute deux agents bloquant la croissance de la souche décrits à l'exemple 7 et selon les mêmes modalités. La durée totale de la fermentation est de 34 heures comme à l'exemple 7. La concentration en acide glutamique se stabilise à la valeur moyenne de 40 grammes par litre soit un rendement de 51% et une productivité de 4 grammes/litre.heure. Il est à noter que comme dans les cas précédents d'utilisation du module de filtration tangentielle représenté à la figure 3, toutes les 6 heures, on inverse le sens de filtration, la sortie 27 devenant ainsi l'entrée 24' l'entrée 24 devenant la sortie 27' la sortie 28 étant remplacée par la sortie 28' comme représenté à la figure 3. Ceci évite tout colmatage des membranes. EXEMPLE N 10 SELON L'INVENTION Dans cet exemple, on utilise comme souche une souche de Corynebacterium glutamicum. On réalise la première étape de fermentation par "fed batch" comme décrit à l'exemple N 2. On déclenche ensuite la filtration avec le module de filtration à membrane minérale de la figure 4. Le taux de dilution est maintenu à la valeur de 0,06 h avec un milieu nutritif constitué par une mélasse de betterave à 100 grammes/litre et un taux de recyclage de 800 litres/heure. On ajoute les deux agents de blocage de la croissance de la souche décrits à l'exemple N 5 selon les mêmes modalités, c'est-à-dire alternativement toutes les deux heures avec respectivement une concentration de 0,5 et 0,15 gramme par litre. La durée totale de la fermentation est de 34 heures. 2554126 La concentration en acide glutamique se stabilise à une valeur moyenne de 67 grammes/litre avec un rendement de 55% et une productivité de 3,9 grammes/litre.heure. EXEMPLE N 11 SENL'INVENTION Les conditions de fermentation sont identiques à celles décrites dans l'exemple N 10 mais la durée totale de la fermentation est portée à 70 heures. La concentration en acide glutamique se stabilise à la valeur moyenne de 68 grammes/litre, soit un rendement de 55,5% et une productivité de 4 grammes/litre. heure. Ceci confirme une fois de plus qu'en doublant la durée de la fermentation la productivité est au moins maintenue à la valeur très élevée obtenue selon l'invention. EXEMPLE N 12 SELON L'INVENTION Dans cet exemple, les conditions de fermentation sont identiques à celles décrites dans l'exemple 10 sauf qu'au lieu d'effectuer l'agitation par les moyens d'agitation 2 et l'aération par les moyens d'aération 15, on utilise l'installation de la figure 5 comportant la présence d'un hydroinjecteur 36 dans le circuit de recyclage du rétentat par le fermenteur 1. Le schéma de principe de l'hydro-injecteur 36 est donné à la figure 6. Le fluide issu de la sortie rétentat 28 est amené par la conduite 29 à l'entrée de la tuyère motrice 38 en provoquant une aspiration d'air par le conduit 37 dans la chambre 42. Cette aspiration d'air résulte en la formation d'une émulsion air-fluide à l'intérieur du mélangeur 39 qui est ensuite diffusée au niveau du fermenteur I par le système de diffusion 41, 40 relié au moyen d'introduction 50 de rétentat recyclé. L'hydro-injecteur est réglé de manière à réaliser une aération similaire à celle de l'exemple N 1. Les 16 2554126 conditions de fermentation sont identiques à celles décrites dans l'exemple 10 avec une durée totale de fermentation de 34 heures. La concentration en acide glutamique s'est stabilisée à la valeur moyenne de 72 grammes/litre soit un rendement de 57% et une productivité de 4,2 grammes/ litre.heure ce qui est tout à fait remarquable. En ce qui concerne le module de filtration tubulaire à membrane minérale de la figure 4, celui-ci comprend un support poreux en graphite 34 et une membrane minérale en oxyde de zirconium 35 présentant un seuil de coupure de 100.000. L'ensemble est stérilisé à la vapeur. TABLEAU 1 COMPOSITION DES MILIEUX Milieu de fermentationMilieu de culture (A) (B) Mélasse de betteraves (sucres) 80 g/l 40 g/l H3 P04 2 g/l 2 g/l Mg S04, 7H20 I g/l 0,5 g/l (NH4)2 S4 11 g/ 1 / pH ajusté après stérilisation 7,3 7,8 biotine tM g/1 50/ g/ nl 18 2554126 * L'invention n'est naturellement pas limitée aux modes de réalisation décrits et représentés qui ne sont donnés qu'à titre d'exemple. L'invention comprend donc tous les moyens constituant des équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs diverses combinaisons. La souche productrice d'acide glutamique est de préférence une souche de Corynebacterium et mieux une souche de Corynebacterium melassecola ou de Corynebacterium glutamicum Le milieu de fermentation ou de culture estégalement de préférence à base de mélasse de betterave tandis que le substrat nutritif est avantageusement constitué essentielle- ment par de la mélasse de betterave. D'autre part, il est avantageux que la concentra- tion en sucredu substrat nutritif utilisé lors de l'étape d'ultra-filtration soit inférieure à celle du substrat nutri- tif utilisé lors de la Première étape de fermentation selon le procédé "fed batch". 19 2554126 R E V E N D I C A T I 0 N S 1.- Procédé de production d'acide glutamique par fermentation comprenant dans une zone de fermentation et dans des conditions de fermentation appropriées, la fermentation d'une souche productrice d'acide glutamique sur un milieu de fermentation approprié, de préférence avec ajout d'un substrat nutritif en cours de fermentation selon le procédé "fed batch", caractérisé en ce que, lorsque l'on atteint une concentration prédéterminée en acide glutamique, on procède à une filtration appropriée du milieu de fermentation en obtenant d'une part un rétentat contenant les cellules de la souche et d'autre part un filtrat contenant l'acide glutamique; on recycle au moins en partie le rétentat dans la zone de fermentation et on recueille le filtrat pour de préférence en séparer ensuite l'acide glutamique; et on ajoute lors de cette étape de filtration par intermittence ou en continu dans la zone de fermentation au moins un agent bloquant sensiblement la croissance de la souche. 2.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on réalise la filtration en continu et on introduit du substrat nutritif dans la zone de fermentation en quantité suffisante pour compenser la quantité de substrat soutirée et non réintroduite dans la zone de fermentation. 3.- Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'agent précité bloquant la croissance de la souche est un dérivé d'acide gras de préférence choisi parmi un ester d'acide gras polyoxyéthylèné, avantageusement du polyoxyéthylène monopalmitate ou monostéarate et ou un sel d'acylamine avantageusement l'acétate de laurylamine ou de nTyristylamine. 4.- Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on introduit deux agents bloquant la croissance de 2554126 la souche de préférence constitués par le polyoxyéthylène mxnpaniitate ou mDnostéarate et l'acétate de laurylamine ou de myristylamine, ces deux agents lorsqu'ils sont ajoutés par intermittence sont ajoutés de manière alternée. 5.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la souche est une souche de Corynebacterium de préférence de Coryne- bacterium melassecola ou Corynebacterium glutamicum. 6.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, à fermentation aérobie, caractérisé en ce qu'on réalise l'aération en faisant passer le rétentat recyclé dans un hydro-injecteur avant son recyclage dans la zone de fermentation. - 7.- Procédé selon l'une quelconque des revendications I à 6, caractérisé en ce qu'on utilise un milieu de fermentation ou de culture à base de mélasse de betterave tandis que le substrat nutritif est constitué essentiellement par de la mélasse de betterave. 9.- Procédé selon l'une quelconque des revendications I à 8, caractérisé en ce que la concentra- tion en sucre du substrat nutritif utilisé lors de l'étape de filtration est inférieure à celle du substrat nutritif utilisé lors de la première étape de fermentation selon le procédé "fed batch". 10.- Installation de production d'acide glutamique par fermentation, comprenant un fermenteur (1), des moyens d'alimentation (18) en milieu de fermentation ou substrat nutritif audit fermenteur, des moyens de soutirage (21) de milieu fermenté du fermenteur, de préférence des moyens d'agitation (2; 36) ainsi que des moyens d'aération (15; 36), caractérisée en ce que les moyens de soutirage (21) sont reliés à l'entrée d'une unité de filtration (22) comprenant une sortie de rétentat (28) et une sortie de filtrat (25); de préférence la sortie de rétentat (28) est reliée au fermenteur (1) 21 2554126 pour réaliser au moins en partie un recyclage du rétentat; et des moyens (50) d'introduction dans le fermenteur (1) d'au moins un agent bloquant la croissance de la souche. 11.- Installation selon la revendication 10, caractérisée en ce que l'unité de filtration (22) comprend au moins un module d'ultra-filtration tangentielle. 12.- Installation selon la revendication 10, caractérisée en ce que l'unité de filtration (22) comprend au moins un module de filtration de préférence tubulaire à membrane de préférence minérale. 13.- Installation selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, caractérisée en ce que les moyens d'agitation et/ou d'aération comprennent un hydro-injecteur (36) sur le circuit de recyclage (29) du rétentat (28) au fermenteur (1) dans lequel passe le rétentat recyclé au fermenteur.