Brevet FR2559484A2 — publié le 19850816

FR 2559484 A2 19850816 FR 8402145 A 19840213 Le présent certificat d'addition à la demande de brevet français n 83 11250 se rapporte à un nouveau dérivé de l'acide 1-éthyl-1,4-dihydro-4-oxo-(1,8-naphtyridin)-3- carboxyli- que substitué en position 7 par le groupe pyrrol-1-yl. L'invention concerne également les sels alcalins ou alcalino-terreux physiologiquement acceptables de ce nouveau dérivé ainsi que sa préparation et son application en tant que médicament. L'acide 1-éthy I-1,4-dihydro-4-oxo-6-fluoro-7-(pyrrol- 1-yl)-1,8-naphtyridin-3-carboxylique et ses sels présentent en effet d'intéressantes propriétés pharmacologiques antimicrobiennes, en particulier antibactériennes et fongistatiques. Ils sont en outre doués d'une puissante activité antibactérienne à la fois à l'égard des bactéries Gram-positives et des bactéries Gram-négati- ves. Le nouveau dérivé selon l'invention peut être préparé conformément au schéma réactionnel mentionné dans la demande de brevet principal. Il convient cependant de remarquer que l'intermédiaire de synthèse, nécessaire à la mise en oeuvre de I'étape D de greffage du noyau pyrrole, est nouveau et fait à ce titre également partie de la présente demande de certificat d'addition. Cette étape réactionnelle D se schématise comme suit o CH2CH3 (I) Cet intermédiaire de synthèse peut par exemple être préparé à partir de l'acide 1-éthyl-l,4-dihydrô-4-oxo- 6-fluoro- 7-chloro-1,8-naphtyridin-3-carboxylique (par exemple décrit dans EP-A-O 027 752) conformément au schéma réactionnel suivant o O F F Acide acétique ci CH2CE3 Ca)2C!3 I'll I _ _s On indiquera ci-après un exemple de préparation du nouveau dérivé de l'invention. EXEMPLE 1 Préparation de I D cide 1-éthyl-1,4-dihydro-4-oxo-6-fluoro- 7- (pyrrol-1-yl)-1,8-naphtyridin-3-carboxylique (étape D) On met en suspension 1,4 gramme d'acide 1-éthyl-1,4- di hydro-4-oxo-6-f uoro-7-amino-1, 8-naphtyrid i n-3-carboxy I ique de point de fusion 299-303 C (décomp.) et ayant les données spectroscopiques suivantes: 1H RMN,J, [CF3COOH]: 1,70 (t,3H); 4,83 (q,2H); 8,10 [d(J = 9, 4Hz), 1Hi; 9,11 (s5lH) -1 IR(KBr): 1650, 1720, 3320, 3425 cm dans 20 ml d'un mélange d'acide acétique et de diméthyl- formamide (1:1). On ajoute 0,8 gramme de 2,5-diméthoxy- tétrahydrofurane et on chauffe au reflux pendant 10 minutes. On laisse refroidir, puis on laisse reposer pendant 8 heures à 5 C et on obtient un précipité qui, filtré et recristallisé dans l'acétone, donne O,95 gramme de cristaux aciformes de point de fusion 257-259 C. Données spectroscopiques H RMN,J, [C.F3COOHl: 1,67(t,3H); 4,88(q,2H); 6,36(m,2H);7,68- (m,2H); 8,40 [d(J = llHz),lH]; 9,23(s,lH) IR(KBr) 1625, 1725 cm-. Le composé de départ peut être préparé comme suit: 1 gramme d'acide 1-éthyl-1,4-dihydro-4-oxo-6-fluoro- 7-chloro-1,8-naphtyridin-3-carboxylique (par exemple décrit dans EP-A-O 027 752) est mélangé avec 25 ml d'ammoniaque concentrée contenant 20 % d'éthanol. On maintient le mélange dans un tube scellé à 120-125 C pendant 4 heures. On refroidit et on ajoute de l'acide acétique jusqu'à acidité légère et le précipité formé est filtré et lavé avec de l'eau. On sèche et on obtient 0,8 gramme d'acide 1-éthyl-1,4-dihydro-4-oxo-6- fluoro-7-amino-1,8-naphtyridin-3-carboxylique de point de fusion 299-303 C. Activité pharmacologique antimicrobienne (G.L.Daquet et Y.A. Chabbect, Techniques en bactériologie,vol.3,Flammarion Medecine-Sciences, Paris, 1972 et W.B.Hugo et A.D.Rusell, Pharmaceutical Microbiology, Blackwell Scientific Publications, London (1977). - Milieu de culture et solvant Agar d'antibiotiques n 1 (Oxoid CM 327) Bouillon de triptone-soja (Oxoid CM 129) Solution physiologique Ringer 1/4 (Oxoid BR 52) Agar Dextrose (BBL-11165) NaOH O,1 N - Microorganismes: "Bacilus subtilis" ATCC 6633 "Citrobacter freundii" ATCC 11606 "Enterobacter aerogenes" ATCC 15038 "Enterobacter cloacae" CHSP 20 "Escherichia coli* ATCC 10536 "Escherichia coliu" R-1513 Klebsiella pneumoniae' ATCC 10031 Micrococcus flavus" ATCC 10240 *Proteus mirabills" ATCC 4675 "Proteus morganii CHSP 16 'Pseudomonas aeruginosam ATCC 25115 "Pseudomonas aeruginosa" ADSA 47 "Salmonella tiphymurium" AMES 98 "Salmonella tiphymurium" AMES 100 "Sarcina luteas ATCC 9341 "Serratia marcescens" ATCC 13880 "Shigella flexnerii" eStaphylococcus aureus" ATCC 5488/23 "Staphylococcus aureus" ATCC 25178 "Streptococcus faecalis" ATCC 10541 - Préparation des inoculations Chacun des microorganismes est ensemencé par strie dans des tubes d'Agar d'antibiotiques n 1, et mis en incubation pendant 20 heures à 37 C. Ensuite on prend une anse de culture, on ensemence dans un bouillon de Triptone-soja et on incube pendant 20 heures à 37 C. On dilue à 1/4 la culture obtenue avec une solution physio- logique Ringer, de façon à obtenir une suspension norma- lisée de 107-109 ufc/ml pour chaque organisme. - Préparation du milieu contenant les dérivés de formule générale I A partir d'une solution de 1000 Mg/ml dans NaOH 0,1 N, chaque produit est dilué dans l'Agar Dextrose (préalablement fondu et maintenu à 50 C) par dilutions successives de façon & obtenir les concentrations suivantes: 64 - 32 - 16 - 8 - 4 - 2 - 1 - 0,5 - 0,25 - 0,125 mg de dérivé/ml du milieu. Postérieurement, chaque concentration de chaque produit est répartie dans des bottes de Petri de 10 cm de diamètre, à raison de 10 ml de milieu par botte et autant de bottes que de microorganismes à tester. Une fois le milieu refroidit, les bottes sont ensemencées avec les inoculations à raison de 0,4 ml d'inoculation par botte. On les étend avec une anse de Driglasky et on recueille le surnageant. Les boites ensemencées sont incubées à 37 C.pendant 20 heures. Résultats Les résul tats obtenus sont décrits dans le tableau I ci-après. Le produit de Il'exemple 1 a une activité "in vitro" supérieure à celle de Il'acide pipémidique, tant à l'égard des Enterobacteriaceas (pseudomonas aeruginosa) que des coques Gram-positifs. Tableau I CI in viro" comparée % l'acide pipémidique Les concentrations sont données en pg/ml. Microorganismes Couposê de ACIDE 1' EXEMPLE 1 PIPEMIDIQUE Bacillus subtilis ATCC 6633 0,03 8 Citrobacter freundii ATCC 11606 4,00 4 à____________________________________-- à4_ Enterobacter aerogernes ATCC 15038 4,00 32 à---- - -- - - --e-- - - - -- - - ---- --- -- -- -- Enterobacter cloacae CHSP 20 2,00 8 Escherichia coli ATCC 10536 0,12 2 Escherichia coli R 1513 4,00 16 e--- - --- - --- -à--- - - - - - - - -- - - - - ---- - Klebsiella pneunmoniaeATCC 10031 1,00 2 Micrococcus flavus ATCC 10240 1, 00 > 64 à e--- - -- - ----------------à-------------- -- - - - - - Proteus mirabilis ATCC 4675 8,00 16 à!---- - - -- -à - - - - e- - - e- - - - - Proteus morganii CHSP 16 4,00 8 Pseudomonas aeruginosa ATCC 25115 32,00 32 Pseudomonas aeruginosa ADSA 47 >64,00 32 Salmonella tiphymurAum AMES 98 0,12 4 Salmonella tiphymurium AMES 100 0,50 8 Sarcina lutea ATCC 9341 4,00 > 64 Serratia marcescens ATCC 13880 2,00 16 Shigella flenerii 2,00 4 Staphylococcus aureus ATCC 5488/23 0,50 64 Staphylococcus aureus ATCC 25178 0,50 64 Streptococcus faecalis ATCC 10541 8,00 > 64 Toxicité aigu_ chez la souril Pour déterminer cette toxicité, on a utllisé comme animaux d'expérimentation des souris albinos de souche C.F.L.P. des deux sexes et d'un poids compris entre 19 et 25 grammes. Après une période de jeune de 18 heures avec de l'eau "ad libitum", on administre les dérivés objets de la présente invention en suspension dans la gomme arabique & 5 % par voie intrapéritonéale. Le volume de la suspension administrée a été dans tous les cas de 0,4 ml/20 grammes (20 ml/kg), en changeant la concentration de la suspension selon la dose administrée. Une heure après l'administration des dérivés, on fournit aux animaux une nourriture standard rat-souris Panlab. La période d'observation de la mortalité a été de 7 jours. Avec aucun des produits on a observé des différences de mortalité entre les sexes. Les résultats obtenus sont décrits dans le tableau II. TABLEAU II Dérivés Voie DL-50 d'administration mg/kg Acide 1-éthyl-l,4-dihydro- 4-oxo-6-f 1 uoro-7- (py rrol - l-yl)-1,8-naphtyridin-3- carboxylique (Ex.1) i.p. >1000 Acide na I idixique i.p. 600 Acide pipémidique i.p. > 1600 REVEND I CAT IONS 1/ L'acide 1-éthy I-1,4-dihydro-4-oxo-6-fluoro-7- ( pyrrol-l-yl)-1,8-naphtyridin-3-carboxylique répondant à la formule générale I selon la revendication 1 de la demande de brevet principal n 83 11250, ainsi que ses sels alcalins ou alcalino-terreux physiologiquement acceptables. 2/ Procédé de préparation de l'acide l-éthyl-l1,4- dihydro-4-oxo-6-fluoro-7-(pyrrol-1-y l)-1,8-naphtyridin-3-carboxy- lique selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir le composé de formule Il o F.OOtH H2 N1l) CH2CH3 avec le 2,5-diméthoxytétrahydrofurane en milieu acide acétique. 3/ A titre de médicament nouveau, spécialement comme antibactérien et fongicide, I'acide 1-éthyl-1,4-dihydro-4- oxo-6-fluoro-7-(pyrrol-1-yl)-1,8-naphtyridin-3-carboxy I ique. 4/ Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles contiennent, outre un support pharmaceutiquement acceptable, I'acide 1-éthyl-1,4-dihydro-4-oxo-6-fluoro-7-(pyrrol- 1-y I)-,8-naphtyridin-3-carboxy l i que. / A titre d'intermédiaire de synthèse nécessaire à la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 2, le composé de formule 1: O F ( OOH 2N- CH2CH3 CH2CH3