Brevet FR2559075A1 — publié le 19850809

Procédé et dispositif pour la séparation de particules, systèmesde cellules biologiques et colloîdes par centri- fugation. La présente invention se rapporte à un procédé de séparation de particules, systèmesde cellules biologiques, colloides etc., suivant lequel on produit des gradients de densité liquides dans une cuve de centrifugation mise en ro- tation, et suivant lequelon introduit les particules ou analogues dans la cuve de centrifugation, de panière à créer des ban- des séparées de telle façon que des bandes contenant les particules plus lourdes soient davantage éloignées de l'axe de rotation que les bandes contenant les particules plus lourdes. L'invention se rapporte également à un dispositif pour la mise en oeuvre d'un tel procédé, dispositif dans lequel une cuve de centrifugation est montée mobile en ro- tation autour d'un axe d'un arbre d'entraînement, l'axe longitudinal de la cuve de centrifugation étant perpendicu- laire à l'axe à l'arbre d'entraînement, et l'arbre d'entra - nement pouvant être relié à un moteur. Il est connu de séparer les unes des autres des particules, molécules etc. de densitésdifférentespar centrifugation dans des gradients de densité liquides.De tels gradients de densité peuvent être obtenus par exemple par le fait que des cuves de centrifugation contenant des couches de liquidesde densités croissantesen direction du fond des cuves sont entraînées en rotation dans un plan ho- rizontal. Lorsque des particules, molécules, cellules bio- logiques etc. sont introduites par centrifugation dans ce champ de gravitation, des bandes s'établissent dans le tube de centrifugation, après obtention de l'équilibre de sédimenta- tion, et les bandes contenant les particules plus lourdes, tout comme les zones plus denses du gradient de densité, sont davantage éloignées de l'axe de rotation que les bandes contenant les particules plus légères. Alors que de tels dispositifs de centrifugation permettent bien de séparer en différents gradients à l'aide de centrifugeuses exis- tentes, des problèmes se posent pour-le prélèvement des bandes sous forme pure. De façon connue, les différentes bandes sont obtenues par le fait qu'elles sont prélevées par pipetage dans le tube de centrifugation retiré du rotor du dispositif. Lors de l'opération de pipetage, il n'est cependant pas possible d'empêcher des mélanges des différen- tes bandes par turbulence, diffusion etc. Suivant d'autres procédés connus, on repousse le gradient souvent dans le tube de centrifugation, conjointe- ment avec les bandes séparées, par pompage d'un liquide extrêmement dense, depuis le point le plus bas du tube vers le bord supérieur du tube, et on le retire de là pour le fractionner à l'aide d'un entonnoir relié à une conduite flexible. Un tel procédé est cependant compliqué et exige l'utilisation d'un appareil additionnel coûteux. En outre, ici également, il n'est pas possible d'empêcher avec cer- titude un mélange de différentes bandes et des phénomènes de diffusion. Le but de la présente invention est de perfec- tionner un dispositif et un procédé du type défini ci-dessus de manière à permettre une récupération aisée et nettement séparée des bandes séparées par centrifugation, cela encore pendant la centrifugation. Ce but est atteint par un dispositif du type défini ci-dessus, par le fait que le corps de base du rotor de centrifugation peut être rendu solidaire en rotation de l'arbre d'entraînement, que la cuve de centrifugation peut être fixée par une partie de support au corps de base de rotor, qu 'une canule pénétrant dans la cuve de centrifuga- tion peut être reliée de façon étanche à une extrémité d'un passage se trouvant dans le corps de base de rotor qu'un premier tube de canule est relié de façon étanche à l'autre extrémité dudit passage, que le premier tube de canule n'effectue pas de rotation par rapport au corps de base de rotor et est maintenu dans une vis de pression tour- nant avec le corps de base de rotor, et qu'un perçage du corps de base du rotor communique d'une part avec l'inté- rieur de la cuve de centrifugation et d'autre part avec un second tube de canule qui n'effectue pas de rotation par rapport au corps de base de rotor et est maintenu dans la vis de pression. Le procédé de séparation de particules, systèmesde cellules biologiques et colloides présente la particularité que les gradients de densité sont établis par introduction de fractions de densité différentEspar une canule qui s'étend dans la cuve de centrifugation jusqu'à proximité d'une pointe de cette cuve, que la fraction la plus légère est introduite en premier et la fraction la plus lourde en dernier, et qu'après l'introduction des par- ticules ou analogues et l'établissement des différentes ban- des, les différentes bandes sont prélevées de la cuve de centrifugation tournant à une vitesse de rotation de sé- paration prédéterminée, par pompage en passant par la canule. L'avantage principal de l'invention réside par le fait qu'elle permet d'obtenir les différentes bandes établies sans perte du pouvoir de séparation théoriquement et pratiquement réalisable et cela déjà pendant l'opération de centrifugation. Cela permet d'éviter complètement des phénomènes indésirables de mélange de diffusion. De préférence, le rotor horizontal conforme à l'invention est conçu de manière à pouvoir être facilement démonté et stérilisé ou traité en autoclave, contrairement aux rotors connus. Le rotor horizontal conforme à l'inven- tion est avantageusement construit de manière à pouvoir être traité en autoclave à l'état monté, ce qui permet de l'utiliser également pour la séparation de cellules bio- logiques ( sang, cultures tissulaires, etc.). Lors de l'utilisation en relation avec des problèmes de séparation en biologie cellulaire, le traitement par autoclave du rotor et la nature fermée du rotor empêchent également lors de l'obtention des bandes, la contamination des fractions de cellules et d'organes. Le rotor horizontal conforme à l'invention est avantageusement réalisé de manière qu'il soit possible d'utiliser des tubes de centrifugation du commerce. Le fait que le rotor horizontal conforme à l'in- vention permet de séparer d'une manière simple des espèces de cellules animales, végétales et humaines offre des possi- bilités nouvelles de cultiver ces cellules "in vitro" en la- boratoire, d' une manière plus définie que jusqu'à présent. Cela ouvre par exemple également de nouveaux hori- zons pour l'expérimentation de médicaments. Il est ainsi de préférence également possible de limiter davantage que jusqu'à présent les essais onéreux et indésirables sur ani- maux. En se référant aux dessins annexés, on va décrire ci-après plus en détail l'invention et ses modes de réali- sation; sur les dessins: les figures 1 à 3 sont des représentations sché- matiques expliquant le mode de fonctionnement du rotor horizontal conforme à l'invention et du procédé conforme à l'invention; la figure 4 montre la structure du rotor hori- zontal conforme à l'invention; la figure 5 représente un autre mode de réalisa- tion de l'invention. En se référant aux figures 1 à 3, on va d'abord décrire plus en détail le mode de fonctionnement de l'in- vention. Une cuve de centrifugation 1 qui peut être par exemple un tube de centrifugation, est d'abord amené à une vitesse de rotation de remplissage par un rotor horizontal qui sera décrit plus en détail ci- après. Cette vitesse de rotation de remplissage est par exemple de l'ordre de 100 à 200 tours/minute. Lorsque la vitesse de rotation de rem- plissage est atteinte, le gradient est établi en passant par le tube de canule 3 et la canule 18 qui s'étend le 2559075 - long de l'axe longitudinal du tube de centrifugation. L'établissement du gradient s'effectue par le fait qu'on introduit en premier la fraction a la plus légère et en dernier la fraction f la plus lourde. Le tube de centrifuga- tion 1 présente une forme cylindrique et un fond conformé en pointe 19. L'extrémité de la canule 18 se trouvant dans le tube de centrifugation 1 se termine à faible distance de la pointe 19. Après introduction des zones de gradient de densi- té a à f, on augmente la vitesse du moteur par exemple à 1500 tours/minute, afin d'obtenir ainsi une plus grande accélération et donc un effet centrifuge accru, afin de rendre plus nettes les zones d'interface des fractions (figure 1). Par le tube de canule 2 et la passage 25, on amè- ne ensuite l'échantillon à séparer et selon le problème de séparation, on le soumet à une centrifugation pendant 10 à minutes à une vitesse 1200 à 2000 tours/minute (figure 2). Ensuite, on réduit la vitesse du rotor à la vitesse de séparation de par exemple 250 tours/minute et on extrait par pompage les zones séparées a à f avec les bandes d'échantillon a' à f' qui s'y trouvent déposées, en passant par le tube de canule 3. Sur la figure 4 est illustré le rotor horizontal conforme à l'invention pour la mise en oeuvre du procédé décrit ci-dessus. Les détails qui ont déjà été mentionnés en relation avec les figures 1 à 3 portent les mêmes réfé- rences. Le rotor horizontal est disposé dans un carter qui se compose d'une bride de fond 6, de préférence horizontal, d'une bague de carter21s'étendant de préférence perpendicu- lairement à la bride de fond 6, et d'un couvercle 10. La bride de fond 6 et la bague de carter 21 sont avantageuse- ment en aluminium. La bague de carter 21 est par exemple fixée par vissage (non représentée) à la bride de fond 6, par son côté tourné vers cette bride 6. Le couvercle 10 qui est de préférence constitué par un matériau transparent tel que le polyacrylate("Plexiglas'D est avantageusement - emboîté dans une gorge 23 prévue sur le pourtour intérieur de la bague de carter 21. Autour de la bague de carter 21 peut être placé en hélice un serpentin 20 permettant de re- froidir ou de réchauffer le carter à l'aide d'un fluide circulant dans le serpentin. La bride de fond 6 comporte en son centre une douille de palier 22 qui est de préférence constituée d'alu- minium et est par exemple vissée dans un trou central de la bride de fond 6. La douille de palier 22 présente un alésage 25 traversé par l'arbre d'entraînement 5. L'arbre d'entraînement 5 est monté en rotation par des roulements dans la douille 22. A titre d'exemple, la douille 22 renfer- me deux roulements à billes 24 espacés, comme cela apparaît sur la figure 4. L'arbre d'entraînement 5 est entraîné en rotation par un moteur non représenté (flèche 26). Sur l'extrémité de l'arbre d'entraînement 5 péné- trant dans le carter est fixé de façon amovible et immobi- lisé en rotation un corps de base de rotor 4. De préfé- rence, l'extrémité de l'arbre d'entraînement 5 pénétrant dans le carter comporte une bride horizontale 27 circulaire, s'étendant radialement vers l'extérieur, sur laquelle repose une bride 28 également circulaire du corps de base de rotor 4. La partie d'extrémité 29 de l'arbre d'entraînement 5, dépassant de la bride 27 de l'arbre d'entraînement 20, pénè- tre dans un trou de centrage 30 central du corps de base de rotor 4. Lors de la mise en place du corps de base de rotor 4 sur la bride 27 et la partie d'extrémité 29 de l'arbre d'entraînement 5, une liaison rendant le corps de base de rotor 4 solidaire en rotation de l'arbre d'entraînement 5 est établie de préférence par des cannelures 31 ou analogue. Le corps de base de rotor est réalisé de préférence en acier allié ou acier inoxydable. Des tubes de centrifugation 1, 1' sont fixés, à l'aide de parties de support 7, 7' de préférence en acier, sur les c8tés opposés du corps de base de rotor 4, de telle manière que les axes longitudinaux coaxiaux des tubes de centrifuga- tion 1, 1' soient alignés horizontalement et soient perpen- diculaires à l'axe longitudinal commun du corps de base de rotor 4 et de l'arbre d'entraînement 5. Le corps de base de rotor 4 présente sur ses côtés opposés des saillies de pré- férence annulaires ou bagues d'appuietdecentrage 9, 9' dans lesquelles sont fixées les zones d'extrémité des parties de support 7, 7', tournées vers le corps de base de rotor 4. De préférence, la fixation des zones d'extrémité des parties de support 7, 7' s'effectuepar le fait que des-parties'et rebords 8, 8' dirigées radialement vers l'extérieur aux extrémités des parties de support 7, 7', tournées vers le corps de base de rotor 4, pénètrent dans des gorges prévues sur les parois intérieures des saillies annulaires 9, 9'. Ces gorges for- ment, conjointement avec les parties de rebords 8, 8'-, des systèmes de fixation à baîonnette. Un joint d'étanchéité annulaire 12, 12', de préférence un joint en silicone, est disposé dans chaque saillie annulaire 9, 9' de telle manière que les tubes de centrifugation 1, 1' maintenus dans les parties de support 7, 7' soient serrés de façon étanche, par leurs extrémités tournées vers le corps de base de rotor 4, contre les joints 12, 12' lorsque les parties de support 7, 7' ont été fixées par les systèmes à baïonnette déjà décrits au corps de base de rotor 4. La pression nécessaire à cet effet en direction longitudinale des tubes de centrifuga- tion 1, 1' est obtenue par le fait que les extrémités 32 opposées au corps de base de rotor 4 comportent des trous par lesquels les pointes 19, 19' des tubes de centrifuga- tion 1, 1' passent partiellement et s'appuient contre les bords de ces trous de manière que la longueur axiale entre le point d'appui et le fond des saillies 9, 9' soit tou- jours inférieure à la somme de la longueur axiale des joints 12, 12' non chargés et de la distance entre l'extrémité du tube de centrifugation 1, 1', tournée vers le corps de base de rotor 4, et le point d'appui. Tel que cela apparaît sur la figure 4, la canule 18 mentionnée déjà en relation avec les figures 1 à 3 n'est prévue que dans l'un (1) des tubes de centrifugation. S L'autre tube de centrifugation 1' et les parties correspondantes pour la fixation de ce dernier servent uniquement à obtenir une répartition de masse symétrique (équilibrage) pour l'opération de centrifugation. A cet effet, on introduit dans le tube de centrifugation 1' une quantité de liquide qui correspond à la quantité de gradient contenue dans le tube de centrifugation 1 plus l'échantillon introduit.- A la place de l'autre tube de centrifugation 1' on peut également prévoir un autre dispositif approprié assurant une répartition de masse symétrique. A son extrémité tournée vers l'arbre d'entraîne- ment 5, le corps de base de rotor 4 présente un trou cen- tral dans lequel peut être vissée une vis de pression 16. La vis de pression 16 présente, dans sa zone d'extrémité tournée vers le corps de base de rotor 4, un évidement 34 de préférence conique communiquant par un trou 40 avec l'espace intérieur du tube de centrifugation 1. Ce trou 40 traverse la zone marginale de l'évidement 34 de la vis de pression 16 et le corps de base de rotor 4. Sur le fond du trou prévu dans le corps de base de rotor 4 pour le vissage de la vis de pression se trouve un joint 15, de préférence en silicone.qui est serré contre le fond du trou par la partie marginale de l'évidement 34 de la vis de pression 16 enfoncée. Afin d'obtenir un serrage parti- culièrement efficace, une rondelle de pression 35 présen- tant un trou central dont la fonction sera décrite plus en détail ci-après est disposée sur la face du joint de sili- cone 15 tourné vers la vis de pression 16. Au centre de la vis de pression 16 est emmanchée une douille 17 constituée de préférence par un matériau susceptible de résister à un traitement en autoclave, par exemple du polytétrafluoréthylène, cette douille comportant un trou central dans lequel est montée en rotation une tige de guidage 11. Dans la tige de guidage 11 qui est de préfé- rence en acier sont fixés, de préférence par soudage, un premier tube de canule 3 s'étendant suivant l'axe longitudi- nal de la tige de guidage 11, et un second tube de canule 2 qui est excentré par rapport au premier tube de canule 3. L'extrémité du premier tube de canule 3, tournée vers le corps de base de rotor 4, dépasse la tige de guidage 11 et s'étend, à travers le trou central déjà mentionné de la vis de pression 34 et à travers le joint 15, dans un passage 36 p révu dans le corps de base de rotor 4, passage dans le- quel débouche également l'extrémité de la canule18; tournée vers le corps de base de rotor 4. Un joint 37 assure qu'un fluide introduit dans le tube de canule 3 parvient complè- tement du passage 36 dans la canule 18 et ne peut pas pas- ser latéralement à côté de la canule 18. Le joint 15 est appliqué de façon étanche contre le pourtour extérieur du premier tube de canule 3. Le second tube de canule 2 débouche dans l'évide- ment 34 qui communique par le trou 40 avec l'espace inté- rieur du tube de centrifugation 1. Dans le couvercle 10 du carter est prévu, en position centrale, une douille rapportée 14 suscepti- ble d'être traversée par la tige de guidage 11. La tige de guidage 11 traverse en outre, par sa partie d'extrémité tournée vers le couvercle 10, une vis de blocage 13 qui peut être vissée dans un trou de la douille rapportée 14 pour immobiliser en rotation la tige de guidage 11 sur le couvercle 10. Dans le mode de réalisation illustré par la figure 4, la canule 18 s'étend le long de l'axe longitudi- nal du tube de centrifugation 1 jusqu'à faibledistance de la pointe 19. Il est cependant concevable également de disposer cette canule de manière qu'elle soit décalée par 2559075 rapport à l'axe longitudinal du tube de centrifugation 1. On va décrire ci-après plus en détail le mode de fonctionnement du rotor horizontal conforme à l'invention. A cet effet, on va admettre qu'initialement, le corps de base de rotor 4, les tubes de centrifugation 1, 1', les parties de support 7, 7', la vis de pression 16, le cou- vercle 10, la tige de guidage 11 et la vis de blocage 13 sont séparés les uns des autres. Pour commencer, on fixe les deux tubes de centrifugation 1, 1' au corps de base de rotor 4, à l'aide des systèmes à baïonnette entre le corps de base de rotor 4 et les parties de support 7, 7'. Ainsi, les extrémités des tubes de centrifugation 1, 1', tournées vers le corps de base de rotor 4, sont serrées contre les joints de silicone 12, 12'. La canule 18 fixée au corps de base de rotor 4 s'étend jusqu'à proximité de la pointe 19 du tube de centrifugation 1, comme représenté sur la figure 4. Après mise en place du joint de silicone 15 et de la rondelle d'appui 35 dans le trou correspondant du corps de base de rotor 4, on visse la vis de pression 16 dans ce trou ce manière que le joint 15 soit serré par la rondelle 35 contre le fond du trou. Ensuite, on enfonce la tige de guidage 11 à travers la douille 17 en PTFE de la vis de pression 16, de sorte que la partie d'extrémité du premier tube de canule 3 soudée en position centrale dans la tige de guidage 11 traverse le trou central de la rondelle 35 et du joint de silicone 15 et débouche dans le passage sous-jacent 36. L'agencement ainsi assemblé peut ensuite être traité en autoclave, par exemple à environ 121 C dans de la vapeur d'eau, dans un dispositif approprié. Cela est particulièrement avantageux en vue de l'isolement et du nettoyage de toutes les sortes de systèmes cellulaires biologiques. Afin d'assurer une stérilisation, remplissage et prélèvement impeccables d'échantillons, les espaces in- térieurs des tubes de centrifugation 1, 1' communiquent par des trous d'aération non représentés dans le corps de base de rotor 4 avec l'espace environnant. Sur la figure 4, le tracé approximatif d'un tel trou est indiqué par la ligne a en tirets. Apres traitement en autoclave, on place l'agen- cement assemblé de la manière décrite, le couvercle 10 étant ouvert, sur la bride 27 et la partie d'extrémité 29 de l'arbre d!entraînement 5, de manière à l'immobiliser en rotation sur l'arbre 5. Pour fermer le carter, on fait passer la tige de guidage 11 à travers la douille rapportée 14 du couvercle 10 et la vis de blocage 13. On emboîte ensuite le couvercle 10 dans la gorge 23 de la bague de carter 21. Enfin, on visse la vis de blocage 13 dans la douille d'encliquetage 14. On peut alors effectuer le procédé déjà décrit en relation avec les figures 1 à 3. Tel que cela apparaît sur la figure 5, les cuves de centrifugation 1, 1' peuvent également être fixées au corps de base de rotor 4 à l'aide d'une bague de vissage 50, 50', A cet effet, la bague de vissage 50, 50' enfilée sur la cuve de centrifugation 1, 1' est vissée sur le corps de base de rotor 4>en particulier sur la bague d'appui de centrage 9, 9'. La bague de vissage 50, 50' agit sur un rebord 56, 56' de la cuve de centrifugation 1, 1' et appuie ce rebord contre le joint 12, 12'. Grâce à une douille de serrage 51, 51' qui est prévue entre le rebord 56, 56' de la cuve de centrifugation 1, 1' et la bague de vissage , 50' et qui transmet la pression de la bague de vissage , 50' au rebord 56, 56' et au joint 12, 12', la cuve de centrifugation 1, 1' centrée dans la bague d'appui et de centrage 9, 9' est serrée de façon étanche car en raison du découplage par la douille de serrage 50, 50', seuls des efforts de pression axiaux et non pas des efforts de ci- saillement sont transmis. Il ressort de la figure 5 que la bague de la figure 5 que la bague de carter 21' et la bride de fond 6' peuvent également être réalisées d'une seule pièce. le couvercle 10' peut être fixé à l'aide d'une vis 55 ou d'un organe analogue au carter. En tant que dispositif de chauffage, on peut prévoir également, à la place du serpentin, tout autre échangeur de chaleur approprié. Sur le carter peut être prévu un interrupteur (non représenté) qui interrompt le circuit d'excitation du moteur lorsque le couvercle 10, 10' est ouvert. De cette manière il est possible d'empêcher qu'un opérateur mette en circuit involontairement le moteur lorsque le couvercle 10, 10' est ouvert, et provoque ainsi la mise en marche du dispositif. REVENDICATIONS 1. Procédé de séparation de particules, systèmes cellulairesbiologiques, colloîdes etc., dans lequel des gra- dients de densité liquidessont produits dans une cuve de centrifugation (1) animée d'un mouvement de rotation et dans lequel les particules et analogues sont introduites dans la cuve de centriguration (1), des bandes individuelles étant établies de telle manière que les bandes contenant les particules plus lourdes soient davantage éloignées de l'axe de rotation que les bandes contenant les particules plus légères, caractérisé par le fait que les gradients de densité sont établis par l'introduction de fractions (a à f) de densitésdifférente, en passant par une canule (18) qui s'étend dans la cuve de centrifugation (1) jusqu'à proximi- té d'une pointe (19) de cette dernière, que la frac- tion (a) la plus légère est introduite en premier et la fraction (f) la plus lourde en dernier, et qu'après l'intro- duction des particules et analogues et l'établissement des différentes bandes (a'à f'), les différentes bandes (a' à f') sont prélevées par pompage, en passant par la canule (18), dans la cuve de centrifugation (1) tournant à une vitesse de rotation de séparation prédéterminée. 2. Procédé suivant la revendication 1, caracté- risé par le fait que la cuve de centrifugation (1) est fixée à un corps de base de rotor (4) rotatif, que les fractions (a à f) sont introduits par un premier tube de canule (3, 3') qui communique avec la canule (18) par un passage (36) dans le corps de base de rotor (4), et que les particules et analogues sont introduites dans la cuve de centrifugation (1) par un trou (40) qui se trouve dans corps de base de rotor (4) et mène de l'intérieur de la cuve de centrifugation (1) vers un second tube de canule (2, 2'). 3. Procédé suivant la revendication 2, caracté- risé par le fait que le corps de base de rotor (4), le tube de centrifugation (1) qui y est fixé et les tubes de canule (2, 3; 2', 3') reliés au-corps de base de rotor (4) sont stérilisés ou traités en autoclave avant la mise en oeuvre du procédé. 4. Dispositif dans lequel une cuve de centrifu- ggation (1) est montée mobile en rotation autour d'un axe d'un arbre d'entraînement (5), l'axe longitudinal de la cuve de centrifugation (1) étant perpendiculaire à l'axe de l'abre d'entraînement (5), et l'arbre d'entraînement (5) pouvant être relié à un moteur, pour la mise en oeuvre du procédé suivant l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que le corps de base du rotor (4) est relié à l'arbre d'entraînement (5) de manière à être solidaire en rotation de ce dernier, que la cuve de centri- fugation (1) peut être fixée à l'aide d'unepartie de support (7, 50) au corps de base de rotor (4), que la canu- le (18) pénétrant dans la cuve de centrifugation (1) peut être reliée de façon étanche à une extrémité d'un passage (36) se trouvant dans le corps de base de rotor (4), qu'un premier tube de canule (3, 3') communique de façon étanche avec l'autre extrémité du passage (36), que le premier tube de canule (3, 3') n'effectue pas de rotation par rapport au corps de base de rotor (4) et est maintenu dans une vis de pression (16) tournant avec le corps de base de rotor (4), et qu'un trou (40) du corps de base de rotor (4) débouche d'une part à l'intérieur de la cuve de centrifugation (1) et d'autre part dans un second tube de canule (2, 2') qui n'effectue pas de rotation par rap- port au corps de base de rotor (4) et est maintenu dans la vis de pression (16). 5. Dispositif suivant la revendication 4, caractérisé par le fait que le corps de base de rotor (4) présente, à son extrémité tournée vers l'arbre d'entraîne- ment (5), un trou de centrage (30) dans lequel pénètre un embout de centrage (29) de l'arbre d'entraînement (5), et que le corps de base de rotor (4) est fixé à une bride (27) de l'arbre d'entraînement (5). 6. Dispositif suivant la revendication 4 ou 5, caractérisé par le fait que la cuve de centrifugation (1) est centrée dans une bague d'appuietdecentrage (9) du corps de base de rotor (1) et que la cuve de centrifugation (1) est pressée contre un joint (12) prévu dans la bague d'appui et de centrage (9) au moyen d'une bague de vissage (50) qui peut être enfilée sur la cuve de centrifugation (1), prend appui contre la cuve de centrifugation (1) et peut être vissée sur la bague d'appui et de centrage (9). 7. Dispositif suivant la revendication 6, caractérisé par le fait que la bague de vissage (S0) prend appui contre une extrémité d'une douille de serrage (51) dont l'autre extrémité est appuyée contre un rebord (56) de la cuve de centrifugation (1). 8. Dispositif suivant la revendication 4 ou 5, caractérisé par le fait que la cuve de centrifugation (1) est disposée dans une partie de support (7) qui présente une partie de rebord (8) faisant saillie radialement vers l'extérieur et susceptible d'être reliée à la manière d'un système à baïonnette à une bague d'appui et de centrage (9) du corps de base de rotor (4). 9. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 4 à 8, caractérisé par le fait que le pas- sage (36) mène vers un joint (37) fixé au corps de base de rotor (4), joint à travers l'ouverture centrale duquel l'extrémité de la canule (18), tournée vers le corps de base de rotor (4), peut passer de façon étanche de manière à pénétrer dans le passage (36). 10. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 4 à 9, caractérisé par le fait que l'extré- mité de la canule (18), tournée vers le corps de base de rotor (4), s'étend à travers la cuve de centrifugation (1) jusqu'à proximité de la face intérieure d'une pointe (19) de la cuve de centrifugation (1). 11. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 6 à 10, caractérisé par le fait que le corps de base de rotor (4) comporte, sur le c8té opposé à la bague d'appui et de centrage (9), une autre bague d'appuiet de centrage (9') à laquelle peut être fixée, de la même manière que la cuve de centrifugation (1) est fixée à la bague de centrage (9), une autre cuve de centrifugation (1') ayant la même forme que la cuve de centrifugation (1). 12. Dispositif suivant l'une quelconque des revendication 4 à 11, caractérisé par le fait que les premier et second tubes de canule sont fixés dans une tige de guidage (11) maintenue dans la vis de pression (16). 13. Dispositif suivant la revendication 12, caractérisé par le fait que le corps de base de rotor (4) renferme un espace (34) au fond duquel se trouve un autre joint (15) surmonté d'une rondelle de pression 35), que la vis de pression (16) appuie contre la rondelle de pression, (35) que le premier tube de canule (3, 3') traverse de façon étanche des ouvertures centrales de la rondelle de pression (35) et du joint supplémentaire (15) et débouche dans le passage ( 6), et que le second tube de canule (2, 2') se termine dans l'espace (34) qui communique par le trou (40) avec l'intérieur de la cuve de centrifugation (1). 14. Dispositif suivant la revendication 12 ou 13, caractérisé par le fait que la tige de guidage (11) peut être fixée à l'aide d'une vis de blocage (13) de fa- çon solidaire en rotation dans un couvercle (10) d'un car- ter. - 15. Dispositif suivant la revendication 14, caractérisé par le fait que sur le côté extérieur du carter (10, 21; 6', 21') est disposé un échangeur de chaleur (20) pour refroidir ou réchauffer l'intérieur du carter.