Brevet FR2557878A1 — publié le 19850712

La présente invention est relative à un nouveau composé antibiotique. Le composé est le stéarate d'acétyle érythromycine qui présente d'intéressantes propriétés par rapport à certaines érythromycines connues et est représenté par la formule ci-après: CH., C OH CBHO 0 _ Ho CH L'invention concerne aussi un procédé pour la préparation du stéarate d'acétyl érythromycine et des compo- sitions le contenant. Conformément à la présente invention, on fait réagir l'érythromycine-base avec du chlorure d'acétyle en présence de carbonate acide de sodium, en utilisant de l'acétate d'éthyle comme solvant. Ensuite, on prépare le stéarate à partir de l'acétate d'érythromyoine ainsi obtenu, sans l'isoler au préalable. Le brevet GB. N 834 397 décrit une méthode de préparation de l'acétate d'érythromicine. Dans la réaction en question, on effectue la réaction d'acylation dans l'acétone et l'on isole l'ester obtenu en ajoutant de l'eau au mélange réactionnel. Cependant, on a observé en pratique, cae l'acétate se sépare très médiocrement par cristallisation à partir d'une solution aqueuse, si bien que le rendement total de la réac- tion est tout-à-fait modeste. De plus, le produit est diffi- cile à filtrer et il n'est pas possible d'éliminer la seule molécule d'eau de cristallisation présente dans le produit sans mettre en oeuvre des procédures très pénibles. Si l'on utilise le produit ainsi obtenu, pour préparer le stéarate, il serait très difficile de préparer et d'isoler celui-ci. Conformément à la présente invention, on prépare un acétate dans lequel le groupe acétyle est en position 2, tout d'abord dans l'acétate d'éthyle; puis, on sèche de façon azéotropique l'ester ainsi obtenu en chassant par distilla- tion une partie de l'acétate d'éthyle. On ajoute une quantité directement équivalente d'acide stéarique dans le mélange ainsi obtenu. On isole le stearate à partir de la solution, en chassant par distillation une partie de l'acétate d'éthyle (p.e. 76-77 C) et en le remplaçant simultanément par de l'éther de pétrole, qui a un point d'ébullition supérieur (p.e.= 120 C). La solution est lentement refroidie à la température ambiante, puis à 0 C, la solution est distillée et le sel obtenu est lavé et séché. Le rendement de cette procédure est tout-à- fait élevé, de l'ordre de 90 C. On a observé que la température la plus avanta- geuse est aux environs de 40 C pour la préparation de l'acétate d'érythromycine. On obtient un précipité en abaissant la - température et une certaine hydrolyse au moins, en élevant la température du système. Le plus intéressant des solvants semble l'acé- tate d'éthyle. Des hydrocarbures chlorés et du toluène convien- nent aussi à ce propos, bien qu'il ne soient pas aussi avan- tageux que l'acétate d'éthyle. Il est convenable de choisir un solvant qui a un point d'ébullition supérieur à 100 C pour isoler le sel, parce qu'ainsi, il est facile d'éliminer de la solution, à la fois toute l'eau et également le solvant utilisé au préalable, comme l'acétate d'éthyle. Le carbonate ou le carbonate acide d'alcalin ou d'alcalinoterreux utilisé est un accepteur d'acide conve- nable, grâce à ses propriétés de base faible. Des préparations d'érythromycine disponibles couramment sur le marché, comprennent l'érythromycine-base, le lactobionate d'érythromycine, le stéarate d'érythromycine (sel) et l'estolate d'érythromycine qui est le lauryl sulfate de l'ester propionylique de l'érythromycine. Le stéarate est médiocrement absorbé. L'absorption diminue encore si le patient mange au moment de prendre le médicament ou bien peu avant ou après cette prise. Le plus important inconvénient des préparations contenant le composé sous la forme base, réside en ce que les acides gastriques les convertissent en composés inefficaces. On peut éviter cette conversion, en fabriquant des comprimés de telle sorte qu'ils ne se dissolvent que dans les intestins. Cependant, ce qu'on nomme des entérocomprimés sont plus coûteux à fabriquer que les comprimés classiques et de plus, leur préparation implique une certaine incertitude, en ce qu'il est difficile de produire des préparations qui se dissolvent toujours précisément de la même façon. Il en résulte une variation de la concentration du composant actif dans le sang. L'estolate d'érythromycine est toxique pour le foie. Pour cette raison, on évite de l'utiliser à chaque fois que cela est possible. On évite avec succès les inconvénients impliqués par les autres dérivés d'érythromycine en utilisant le dérivé d'érythromycine conforme à la présente invention et l'on obtient un produit qui n'a pas besoin d'être préparé sous forme d'enté- rocomprimés ou d'entérocapsules pour assurer une pleine efficacité. De plus, l'absorption du compose est bonne, si bien qu'il suffit d'une quantité plus petite de composant actif qu'il n'était nécessaire auparavant, pour produire dans le sang une concentration qui nécessitait antérieurement uns plus grande quantité de composant actif. C'est pour cette raison que les comprimés préparés à partir du stearate d'acétyl érythromycine sont de plus petite dimension et donc moins désagréables à prendre. De gros comprimés offrent par exemple, l'inconvenient de souvent coller à l'oesophage et ils peuvent provoquer une lésion locale. Les tests suivants illustrent l'absorption et la toxicité pour le foie, présentées par le stéarate d'acétyl érythromycine. Tests d'absorption On compare dans les tests d'absorption, l'absorp- tion du stéarate d'acétyl érythromycine à l'absorption du stéarate d'érythromycine, chez des sujets humains après un jeûne et après un repas. Ainsi, la figure 1 ci-jointe illustre le résultat du test de comparaison mentionné plus haut chez des sujets ayant jeûné et la figure 2 montre le résultat correspondant chez des sujets qui ont eu un petit déjeuner standard. A partir des figures 1 et 2, on constate claire- ment que l'absorption du stéarate d'acétyl érythromycine est nettement supérieure à l'absorption du stearate d'érythromy- cine après un jeûne et de plus, que la différence est encore plus nette chez des sujets ayant mangé en prenant le médica- ment. La concentration du médicament dans le sérum du sang augmente beaucoup plus rapidement lorsque le composé conforme à la présente invention est utilisé par rapport au cas o le composé de référence est absorbé et de plus, le niveau s'élève trois fois plus haut qu'avec le composé de référence. De plus, on constate d'après les chiffres, que la concentration dans le sérum reste nettement supérieur à celle que fournit le composé de référence, même huit heures plus tard. La prise de nourriture avec le médicament abaisse la concentration maximum dans le sérum du sang également dans le cas du composé conforme à la présente invention, mais avec-le stéarate d'érythromycine l'abaissement est si impor- tant que le niveau obtenu n'est pas suffisant en tant que dos thérapeutique. Il est ainsi clairement démontré que le composé conforme à la présente invention est efficacement absorbé, quelles que soient les conditions. Expériences portant sur la toxicité pour le foie Pour déterminer la toxicité du stéarate d'acétyl érythromycine pour le foie, on compare son action sur des enzymes caractérisant la fonction hépatique par rapport à l'action de certainesautres érythromycines sur les mêmes enzymes. Les composés de référence utilisés dans les expé- riences, sont le stéarate d'érythromycine et l'estolate d'éry- thromycine. On utilise des chiens comme animaux d'expérience, chez lesquels on détermine avant et après la période de test de cinq jours, les enzymes caractérisant la fonction du foie. Les résultats sont rassemblés dans le Tableau I. Les valeurs indiquées dans ce tableau, montrent clairement que l'estolate d'érythromycine est le plus toxique des composés testés. L'augmentation provoquée par ce sel dans les valeurs d'ASAT et ALAT est la plus importante à l'évidence et de plus, ce sel est le seul des composés testés à provoquer une augmentation également des valeurs d'APHOS et y-GT. Etudes pharmacologiques On suit la procédure suivante pour évaluer l'activité pharmacologique du nouveau médicament, le stearate d'acétyl érythromycine. Culture bactérienne utilisée pour le test: On obtient des cultures de diplococcus pneumoniae type 3 provenant de l'Helsinki University, Department of Serology and Bacteriology. On transfère les bactéries à l'aide d'une anse métallique, du milieu de culture anaérobie dans des flacons de culture de sang de 50 ml (Hemobact, Orion Diagnostica, Espoo Finland). Les bactéries sont incubées à 37 C pendant 24 heures et fournissent environ 10 bactéries/ml. Animaux d'essai On utilise des souris blanches NMRI des deux sexes, pesant 20 à 25 g. Procédure du test Les souris d'expérience sont réparties en 12 groupes de 10 souris chacun. On administre par voie sous cutanée du stearate d'érythromycine et du stearate d'acétyl érythromycine de façon correspondante, aux animaux qui ont reçu 100 pil de la culture bactérienne (environ 105 bactéries/ml) par voie intrapéritonéale, de la façon suivante: Groupe traité par le stearate Stearate d'acétyl érythromycine d'érythromycine 1) 0 mg/kg (témoin non traité' 7) 0 mg/kg (témoin non traité) 2) 1,5 " 8) 1,5 " 3) 5 " 9) 5 " 4) 15 " 10) 15 " ) 50 " 11) 50 " 6) 150 " 12) 150- " Les médicaments sont mis en suspension dans 0,125 % de carboxyméthylcellulose (CMC), le pH est ajusté à 6 et la solution est maintenue dans de la glace pour réduire au minimum la vitesse d'hydrolyse. Les médicaments sont injec- tés par voie sous-cutanée à des intervalles de douze heures. Résultats Tous les animaux du groupe témoin meurent dans les 48 heures suivant l'infection. Le traitement par le stearate d'érythromycine et par le stearate d'acétyl érythro- mycine empêche les souris de mourir d'une façon qui dépend de la dose. Il ne meurt aucun des animaux traités avec du stearate d'acétyl érythromycine à la dose de 150 mg/kg, deux fois par jour, tandis qu'un dixième des animaux traités avec la même dose de stearate d'érythromycine meurt dans-ce test. Ainsi qu'on peut le constater, des études phar- macologiques montrent nettement que le stearate d'acétyl érythromycine présente une activité au moins aussi bonne que celle du stearate d'érythromycine, lorsqu'il est administré par voie sous-cutanée. L'activité du produit administré par voie orale est encore bien supérieure à celle du stearate d'érythromy- cine. Ce fait est dû à l'effet du suc gastrique sur le stéarate d'érythromycine. Les exemples suivants illustrent la préparation du stéarate d'acétyl érythromycine et également la préparation de compositions pharmaceutiques utiles, qui contiennent le stéarate d'acétyl érythromycine comme composant actif. Exemple 1 Préparation du stéarate d'acétyl érythromycine On ajoute 200 g (2,38 moles) de carbonate acide de sodium à une solution contenant 400 g (0,545 mole) d'éry- thromycine-base dans 3,6 litres d'acétate d'éthyle. La sus- pension obtenue est chauffée à 40 C, puis additionnée de 46,4 ml (0,65 mole) de chlorure d'acétyle dans 400 ml d'acétate d'éthyle, en une période de 2 à 3 heures. L'agitation est poursuivie après l'addition pendant deux heures supplémen- taires à 40 C, puis 1 litre d'eau à 40 C est ajouté au système. L'agitation est encore continuée un certain temps, puis la couche d'acétate d'éthyle est séparée, concentrée à 2,5 litres et additionnée de 155 g (0,545 mole) d'acide stéarique. L'acétate d'éthyle est classé par distillation à la pression normale et l'acétate d'éthyle qui part est remplacé par 2 litres d'éther de pétrole (p.e.= 120 C). Le mélange est lentement refroidi à la température ambiante, puis à 0 C. Le stéarate recherché est séparé de la solution par filtration, lavé avec de l'éther de pétrole et séché. Le rendement est de 90 % (soit 520 g de produit) Analyse: C57H105N016 (P. moléculaire 1060,42) Valeurs calculées: C = 64,56 Trouvées: C = 64,74 H = 9,98 H = 10,21 N = 1,32 N = 1,28 Exemple 2 Préparation de comprimés On prépare un comprimé ayant la composition suivante avec le composé conforme à la présente invention. Stearate d'acétyl érythromycine correspondant à 393 mg 250 mg d'érythromycine Polyvinyl pyrrolidone 6 mg Eau purifiée* 54 mg Cellulose microcristalline 80 mg R Gomme de cellulose modifiée** (Ac-di-Sol) 10 mg Stéarate de Mg 2 mg * S'élimine par évaporation pendant le procédé ** Croscarmellose de sodium USP Le composant actif est granulé au moyen d'une solution aqueuse de polyvinylpyrrolidone. Les granulés sont séchés et criblés, puis le reste des composants est mélangé aux granulés et les comprimés sont fabriqués à partir de la masse ainsi obtenue. Les comprimés sont enduits d'un revêtement pelliculaire classique de pigment de cellulose. Exemple 3 Préparation de comprimés On prépare des comprimés à partir des composants et selon les quantités indiquées dans l'exemple 2, sauf que l'on omet la polyvinyl pyrrolidone et l'eau. Le composant actif et la cellulose microcristalline, ainsi que la gomme de cellulose modifiée sont mélangés. Le mélange de poudres est granulé à sec par compression et criblage, puis le stéarate de Mg est ajouté et le mélange est pressé en compri- més. On utilise également un revêtement pelliculaire classique. Exemple 4 Préparation de granulés sphériques. Stéarate d'acétyl érythromycine correspondant à 125 ml d'érythromycine 196,5 mg Amidon de mais 50 mg Sucre cristallisé 50 mg Polyvinyl pyrrolidone 15 mg Eau purifiée * S'évapore pendant le procédé. 0) 0 Go t u I x 6:/bwt06Z tû LAW ho i-0 _L6t6-G OS0Z5 Z6t;D LLlsQid-e-a,CA laq c'à 04 P -StDX 0'0;04S:VOL OIBLv Z-6 eIO@LZC-L 4"519z éuap sReeapGs 0.,O o 04 ç 'Ha5b ';''{6L +6;'ZO@L Q 6Z6'i; d Zq-UAep a9'ea0'qS @ > tXz oç t L 59s0 t Z05+ 1119 3 XSZ+5 tLZ t O[Z+61 50Z Qsaid e zx 6fi/5U/Ip p Q3-4-4 QM O 4*& ú"+ 8z9 00 M8zQ 9 +i La0-L;OtUBU,p aqelo4sa Q,, o43, - i. L. 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Nouveau composé antibiotique, caractérisé en ce qu'il s'agit du stéarate d'acétyl érythromycine représenté par la formule I(I) ci-après: CH3 N3C OH >,pO cu3coo FovO | x C18 36 2 w :H3 2. Procédé de préparation d'un nouvel anti- biotique, le stéarate d'acétyl êrythromycine représenté par la formule (I) ci-après: CH3 13C OH H| C CH C"' C: cH3 Cli3COcOE HOAgo; X 18H3602I CH3 caractérisé en ce qu'on fait réagir l'érythromycine-base avec un halogénure d'acétyle dans un solvant organique en pré- sence d'un accepteur d'acide et que l'on prépare ensuite un stearate à partir de l'ester obtenu sans isoler cet ester au préalable. 3. Procédé suivant la revendication 2, caracté- risé en ce que l'accepteur d'acide utilisé est un carbonate ou un carbonate acide de métal alcalin ou alcalino terreux. 4. Procédé suivant la revendication 2, caracté- risé en ce que la réaction est effectuée en présence de carbonate acide de sodium, avec de l'acétate d'éthyl comme solvant et que la température de réaction est d'environ 40 C. 5. Procédé suivant la revendication 2, caracté- risé en ce que l'on remplace le solvant organique par un autre solvant ayant un point dóébullition supérieure à 100 C, comme l'éther de pétrole, pour séparer le sel. 6. Composition antibiotique caractérisée en ce qu'elle contient du stearate d'acétyl érythromycine comme composant actif, ainsi qu'un support liquide ou solide, une charge, un lubrifiant, etc.. des ingrédients additifs ou accessoires. 7. Composition suivant la revendication 6, carac- térisée en ce qu'elle contient un ou plusieurs des composants suivants: le polyvinyl pyrrolidone, la cellulose micro- cristalline, la gomme de cellulose modifiée, l'amidon de mais, le sucre cristallisé et le stearate de magnésium.