Brevet FR2555604A1 — publié le 19850531

COMPOSITIONS AQUEUSES CONTENANT DES ENZYMES STABILISEES L'invention concerne la stabilisation à long terme d'une enzyme contenue dans une composition aqueuse à l'aide d'un ester organique de faible poids moléculaire. L'interêt d'utiliser des enzymes de type protéolytique et alpha- amylolytique dans des compositions de nettoyage est bien connu. Ces enzymes sont utiles pour leur aptitude à réduire des macromolécules telles que des protéines et des amidons en molécules plus petites de telle sorte qu'elles peuvent être facilement éliminées par lavage par des détergents et/ou par de l'eau. Spécifiquement, les enzymes protéoly- tiques sont utiles à la dégradation des protéines et les enzymes alpha- mylolytiques sont utiles à la dégradation des hydrates de carbone. Les compositions détergentes contenant ces enzymes ont toute une série d'utilisations du fait qu'elles sont capables d'éliminer des tâches de protéines et d'amidons telles que des tâches d'oeuf, des tâches de sang, des tâches de sauce et analogues. Des compositions détergentes contenant des enzymes ont été mises dans le commerce sous la forme de poudre sèche. Cependant, ces composi- tions présentent des problèmes. Tout d'abord, elles doivent être stockées de façon à être protégées de l'humidité et de la forte chaleur pour garantir la stabilité de l'enzyme. Deuxièmement, ces compositions en poudre sèche ne conviennent pas bien pour diverses applications utiles telles que le nettoyage des tâches, le prétrempage en blanchisserie et le prédétachement qui nécessitent une application directe sur la surface tâchée. Pour ces applications et d'autres, il est souhaitable d'avoir une composition d'enzymes liquide. Il est également avantageux d'inclure des quantités significatives d'eau dans les compositions d'enzymes liquides pour des considérations économiques tant que pour des considéra- tions de traitement. Cependant, un problème découle de l'addition de quantités significatives d'eau à une composition contenant une enzyme en ce sens que les enzymes sont, par nature, instables en présence d'eau, ce qui occasionne une diminution rapide de l'activité enzymatique, c'est-àdire de la capacité de l'enzyme à réduire de façon efficace les macromolécules en molécules plus petites. On pense que la perte d'acti- vité enzymatique est due à l'action hydrolysante de l'eau sur l'enzyme. Une réduction supplémentaire de l'activité enzymatique résulte également de l'exposition des compositions aqueuses contenant une enzyme à des températures supérieures à 70 C. En fait, si ces compositions sont exposées à ces températures pendant plus de quelques heures, il en résulte une désactivation complète. Cependant, pour avoir une composition contenant une enzyme à base aqueuse qui convienne aux utilisations décrites ci-dessus, il est clair que l'enzyme non seulement doit rester stable dans l'eau, c'est-a-dire garder son activité enzymatique, mais elle doit également être capable de garder cette stabilité pendant des périodes de temps prolongées à des températures élevées, c'est-à-dire jusqu'à environ 37 C. Il n'est pas inhabituel que des produits commerciaux soit stockés dans des entrepôts pendant une certaine période de temps avant d'être vendus aux consomma- teurs, les températures pendant ce stockage pouvant excéder la tempéra- ture ambiante normale. Diverses tentatives ont été faites pour stabiliser les enzymes contenues dans les compositions aqueuses. On en donne ci-après quelques exemples. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3 296 094 de Cayle fait usage de collagène partiellement hydrolysé et solubilisé et de glycérol pour stabiliser une composition aqueuse d'enzyme protéolytique. La quantité de glycérol nécessaire pour la stabilisation de cette composition atteint entre 35 et 65% en poids de la composition totale. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3 557 002 de McCarthy fait usage d'un monohydroxyalcool ou d'un alkoxyalcool pour stabiliser une enzyme protéolytique. Bien que la quantité d'alcool utilisée dans cette composition soit inférieure à celle utilisée par Cayle, l'activité résiduaire de l'enzyme de cette composition diminue après de longues périodes de stockage à des températures relativement éleyées. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 4 169 817 de Weber fait usage soit de sels solubles dans l'eau tels que des sulfates ou chlorures de sodium ou de potassium et/ou de glycérol ou d'alkylène-glycols pour stabiliser une enzyme protéolytique de compositions contenant des additions ioniques et des tensio-actifs. Ici encore, des quantités significatives de glycérol et/ou d'autres solides sont nécessaires pour garder la stabilité à long terme de l'enzyme dans ces compositions. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3 682 842 de Innerfield fait usage d'une composition pour stabiliser un mélange d'enzymes protéoly- tique et amylolytique comprenant un agent de liaison enzyme-ion tel que l'acide trichloro-acétique ou l'acide tungstique et au moins deux d'entre les corps suivants: un sel tel que chlorure de sodium ou sulfate d'ammonium, un solvant organique tel que l'éthanol, et un tensio-actif anionique. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3 676 374 de Zaki et coll. fait usage d'un mélange de composés d'alkane sulfonates ou d'alpha- oléfine sulfonate, en même temps que de composés d'alkylalkylèneoxy- hydroxyle ou sulfate pour stabiliser une enzyme protéolytique dans une composition détergente liquide contenant de l'eau. En outre, divers agents stabilisants peuvent être employés avec ces compositions, tels que des chlorures, lactates et acétates de calcium et de magnésium solubles dans l'eau. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3 746 649 de Barret décrit un produit à base d'enzyme liquide stable vis-à-vis de la dégradation protéolytique, ce produit étant essentiellement constitué d'une enzyme et de 100 à 500 parties par partie de l'enzyme d'un milieu organique exempt de glycérine, ce milieu étant choisi parmi le groupe de certains des produits suivants: alcools, alkylèneglycols, alkyl ou phényléthers d'alkylèneglycol; esters d'alkylèneglycol; alkoxy éthanols, propanols et triglycols, et cétones. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3 953 353 de Barret et coll. décrit un produit solide applicable par frottement. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique 4 111 855 de Barret et coll. décrit une composi- tion détergente contenant une enzyme liquide formé d'un système d'amélio- ration de la stabilité comprenant de 0,05 à 1,5% en poids d'un polyacide capable de former des complexes de Ca solubles dans l'eau, de 0,5 à mmoles/litre d'ions calcium libres et un véhicule liquide formé d'eau et d'un alcool aliphatique inférieur. Ce dernier brevet enseigne que la stabilité de l'enzyme pour un niveau donné de polyacide est inversement proportionnelle au logarithme de la constante de stabilité des complexes Ca-polyacide au pH de la composition. La demanderesse, dans son brevet des Etats-Unis d'Amérique anté- rieur, n 4 243 546 indique qu'une alkanolamine en association avec un acide organique ou minéral améliore la stabilité de l'enzyme contenue dans des compositions de détergents comprenant une enzyme aqueuse. Dans la demande de brevet en cours de traitement de Shaer n U.S. de série 414 552, déposée le 3 septembre 1952, qui constitue une continuation de la demande U.S. n série 173 779 déposée le 30 juillet 1980 et mainte- nant abandonnée, est décrite la stabilisation de compositions de déter- gent contenant une enzyme avec un système de stabilisant contenant un sel d'un acide carboxylique de bas poids moléculaire en présence d'un alkyl-alcool comportant de 1 à 6 atomes de carbone. Le brevet des Etats-unis d'Amérique 4 287 082 de Tolfo indique que des compositions de détergent liquide contenant une enzyme aqueuse homogène comprenant des proportions importants d'acides gras saturés peuvent être stabilisées avec des quantités infimes de calcium accessi- ble à l'enzyme, et des teneurs additionnelles d'acides carboxyliques à chaîne courte sélectionnés. De même, Letton dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n 4 318 818 indique un système stabilisant comprenant des ions calcium et un acide ou un sel carboxylique de bas poids moléculai- re, de préférence un formiate, et de préférence en présence d'un alcool de bas poids moléculaire, le pH se situant dans l'intervalle d'environ 6,5 à environ 10. La stabilisation de compositions contenant une enzyme est égale- ment discutée dans les brevets des Etats-Unis d'Amérique 3 600 318 de Mast; 4 261 868 de Hora et coll.; 4 142 999 de Bloching et coll.; 4 243 543 de Guilbert et coll.; 3 532 599 et 3 813 342 de Cooperman; 3 869 399 de Collins; 3 575 864 de Innerfield et 3 023 168 de Doan. Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3 532 599 de Innerfield, est décrite une combinaison de nettoyage pour éliminer l'encre d'impri- merie à partir de cylindres de caoutchouc, la composition comprenant éventuellement un diluant inerte quelconque qui ne désactive pas l'enzyme. Les solvants organiques que l'on peut inclure comprennent des solvants aromatiques, par exemple le benzène, des hydrocarbures aliphatiques tels que l'hexane ou d'autres solvants tels que éthanol, acetate d'éthyle ou éther. Aucune information n'est donnée de l'effet de ces solvants ou diluants sur la stabilité. Innerfield indique seulement que l'enzyme est compatible avec ces matériaux. C'est un objet de la présente invention que de procurer des compositions à base aqueuse contenant des enzymes stabilisées suscepti- bles d'être utilisées comme agents de nettoyage, dans lesquelles les enzymes sont stabilisées, c'est-à-dire gardent leur activité pendant de longues périodes de temps. C'est encore un autre objet de la présente invention que d'obtenir cette stabilité en utilisant de petites quanti- tés d'un agent de stabilisation relativement peu coûteux. Les compositions selon la présente invention nécessitent seulement des quantités mineures d'un agent de stabilisation de l'enzyme pour - obtenir vraiment une stabilité de l'enzyme à long terme, cette stabilité se maintenant même à des températures élevées, c'est-à-dire à des températures allant jusqu'à environ 38 C que l'on peut rencontrer dans des conditions de stockage difficiles. Ces compositions sont particu- lièrement efficaces en tant que préparations de nettoyage dans toute une série d'applications. Les compositions selon la présente invention sont constituées des ingrédients suivants (toutes les quantités indiquées ci-dessous et dans la suite de la description sont exprimées sur une base pondérale): a) d'environ 0,1 à environ 2,5% d'un agent de stabilisation d'une enzyme qui est un éther de formule RCOOR' dans laquelle R repré- sente un radical alkyle comportant de 1 à 3 atomes de carbone ou l'hydrogène et R' est un radical alkyle comportant de 1 à 6 atomes de carbone; b) d'environ 0,006% à environ 5% d'une enzyme active choisie dans le groupe constitué par les protéases, alpha-amylases et des mélanges de celles-ci, cette enzyme étant introduite sous forme pure ou incorporée au sein d'une préparation d'enzyme du commerce compre- nant d'environ 2 a environ 80% de cette enzyme et d'environ 20 à 98% d'un véhicule de celle-ci; et c) le reste étant de l'eau. - Dans le cadre de la présente invention, on a trouvé que les esters ayant la formule générale RCOOR' dans laquelle R représente un radical alkyle possédant de 1 à 3 atomes de carbone ou l'hydrogène et R' repré- sente un radical alkyle possédant de 1 a 6 atomes de carbone, pouvaient stabiliser les enzymes protéolytique ou amylolytique ou des mélanges de celles-ci dans un milieu aqueux. On a également trouvé que l'enzyme ainsi stabilisée gardait son activité sur une période de temps prolongée de l'ordre de 1 an à dix huit mois. Les principaux ingrédients de la composition selon la présente invention sont l'eau, les enzymes et l'agent stabilisant à base d'ester. L'eau peut constituer d'environ 10% à environ 90% du total de la compo- sition selon la présente invention. L'eau sera de préférence présente en quantités allant d'environ 40% à environ 90% en poids. Bien que cela ne soit pas obligatoire, on préfère pour cette utilisation l'eau déminéra- lisee. Les enzymes ainsi stabilisées et convenant donc à l'utilisation selon la présente invention sont les proteases, les alpha-amylases et des mélanges de proteases et d'alpha-amylases. Les protéases qui dérivent de sources bactériennes ou fongiques peuvent être classées en trois catégories différentes, les protéases acides, neutres et alcalines, toutes étant utiles dans la présente invention. Les protéases dérivées de sources végétales et animales, bien qu'elles ne soient pas faciles à la classer dans les catégories indi- quees ci-dessus sont également utiles dans la présente invention. Ces enzymes sont actives dans des intervalles de pH allant de 3 à 11, bien que l'activité optimum de ces enzymes s'exprime en général dans l'inter- valle de pH d'environ 6 à 9. Les protéases catalysent l'hydrolyse des liaisons peptides des protéines, des polypeptides et d'autres composés apparentés. En brisant les liaisons peptides des protéines, il se forme des groupes amino et carboxy libres qui sont des molécules à chaîne courte que l'on peut facilement éliminer par lavage à l'eau et/ou avec un détergent. Toutes les catégories de proteases énumérées ci-dessus sont utiles dans la présente invention, cependant, celles ayant un optimum d'activité dans un pH allant d'environ 6 à 9 sont celles que l'on préfère. Une protéase que l'on préfère est par exemple la sérine- protease. Les alpha-amylases présentent une activité optimum dans les intervalles de pH acides. Ces enzymes catalysent des réactions qui brisent les molécules d'amidon en molécules de chaine plus courte que l'on élimine facilement par lavage avec des détergents et/ou avec de l'eau. Les alpha-amylases peuvent être obtenues à partir de sources animales, graines de céréales ou de sources bactériennes ou fongiques. L'ingrédient enzyme selon la présente invention peut être commodé- ment ajouté sous la forme d'une préparation d'enzymes du commerce. Celles-ci sont généralement vendues sous la forme d'une poudre sèche en solution ou en bouillon et elles sont constituées d'environ 2 à environ % d'enzymes actives en combinaison avec un véhicule tel que sulfate de sodium ou de calcium, chlorure de sodium, glycérol, agent tensio-actif non ionique ou des mélanges de ceux-ci pour constituer les 20 à 98% restants. Des préparations de protéases commerciales qui conviennent à l'utilisation dans les compositions selon la présente invention compren- nent par exemple la Savinase, par exemple la bouillie de Savinase 8,0; l'Esperase, par exemple la bouillie d'Esperase 8,0 et l'Alkalase, provenant toutes de Novo Industri A/S, Copenhage, Danemark, et la protéase hautement alcaline, par exemple la protéase alcaline 202 P et la Maxatase P. vendues par la société G.B. Fermentation Inc., Des Plaines, Illinois, U.S.A. Des préparations d'alpha-amylases du commerce que l'on peut utiliser selon la présente invention comprennent par exemple l'Amalase THC de chez G.B. Fermentation Inc., et les Termamyl 60L et Termamyl 60G de Novo Industri A/S. Une préparation d'enzyme commercia- le contenant un mélange d'alpha-amylase et de protéase alcaline que l'on peut utiliser selon la présente invention est par exemple la Maxatase P provenant de chez G.B. Fermentation Inc. La préparation d'enzymes commerciales que l'on préfère utiliser dans la présente invention est la bouillie de Savinase 8,0 de Novo Industri, préparation d'enzyme protéolytique alcaline obtenue à partir du genre Bacillus Subtilis contenant environ 6% en poids de l'enzyme et ayant une activité de 8 kilo/unités de Novo. Comme cela est bien connu du spécialiste, les véhicules à base de sel de calcium aident notamment à stabiliser les enzymes par mise en solution des ions stabilisants en solution. Cependant, bien que ces préparations d'enzymes du commerce faisant usage des véhicules mention- nés ci-dessus présentent plus de stabilité que l'enzyme pure, une stabilité encore plus grande est généralement recherchée. Les compositions selon la présente invention stabilisent d'environ 0,006% à environ 5,0% d'une enzyme active, la quantité préférée d'enzyme étant d'environ 0,006% à environ 2,5% en poids. Les agents de stabilisation qui stabilisent les enzymes décrites cidessus sont les esters de formule RCOOR', dans laquelle R représente un radical alkyle comportant de 1 à 3 atomes de carbone ou l'hydrogène et R' représente un radical alkyle possédant de 1 à 6 atomes de carbone. Les stabilisants à base d'esters comprennent donc formiate d'éthyle, acetate d'éthyle, acétate d'amyle, acétate de méthyle, propionate d'éthyle, acétate de butyle et butyrate de méthyle. Ces esters peuvent être utilisés en quantités efficaces allant d'environ 0,1 à environ 2,5% en poids de la composition. Les intervalles préférés pour ces agents sont d'environ 0,25% à environ 1,5% en poids de la composition tandis que l'intervalle que l'on préfère surtout est d'environ 0,5 à environ 1,0. Il est à noter que les stabilisants à base d'esters ont des solubi- lités faibles et que la concentration de l'ester dans les compositions selon la présente invention doit être inférieure à la limite de solubi- lité de l'ester utilisé. En général, il ne peut y avoir de problèmes que pour les esters de poids moléculaires supérieurs qui ont la solubilité la plus faible. En dehors des ingrédients essentiels décrits ci-dessus, la compo- sition selon la présente invention peut contenir d'autres ingrédients tels que des agents tensio-actifs du type non ioniques ou anioniques, des solvants organiques, des agents de solubilisation et des parfums. L'inclusion d'un agent tensio-actif que ce soit du type non ionique ou anionique est avantageuse en ce sens qu'elle tend à améliorer la stabilité enzymatique de ces compositions, cependant, et ceci est plus important, elle procure de façon significative des caractéristiques détergentes à ces compositions. Les agents non ioniques ou anioniques peuvent être utilisés en quantités allant jusqu'à 55% et, de préférence d'environ 5% à environ 30% par rapport au poids de la composition totale. Des agents non ioniques convenables comprennent par exemple: (1) les alcools gras éthoxylés de formule: RO-(CH2CH2O)nH dans laquelle: R possède de 8 à 18 atomnies de carbone, et n représente un nombre entier de 1 à 500. Ce sont par exemple: (a) le produit de condensation d'une mole d'un alcool aliphatique comportant de 12 à 13 atomes de carbone en configuration à chaîne soit droite, soit ramifiée, avec une moyenne de 6, 5 moles d'oxyde d'éthylène; (b) le produit de condensation d'une mole d'un acide aliphatique, possédant de 12 à 15 atomes de carbone et ayant une configura- tion droite ou ramifiée, avec 9 moles d'oxyde d'éthylène; et (c) le produit de condensation d'une mole d'un alcool aliphatique possédant entre 12 et 15 atomes de carbone en configuration à chaîne soit droite, soit ramifiée, avec 3 moles d'oxyde d'éthylène. Des exemples de (a), (b) et (c) sont disponibles dans le commerce en provenance de la Shell Oil Company sous les marques Nodol, Neodol 23-6,5, Neodol 25-9 et Neodol 25-3 respectivement. (2) Acides gras éthoxylés ayant la formule: o0 I R-C-O(CH2CH20)nH dans laquelle: R et n sont tels qu'en (1). (3) Alkylphénols éthoxylés ayant la formule: _ i > _0-(CH2CH20)nH dans laquelle: R représente un radical alkyle possédant de 6 à 16 atomes de carbone; et n est un nombre entier de 1 à 500. Des agents anioniques convenables comprennent par exemple: (1) Des savons ayant la formule: o R-C-OX dans laquelle: X représente sodium, potassium ou ammonium; et R est un acide gras à chaîne droite ou ramifiée, saturé ou insaturé, possédant de 10 à 18 atomes de carbone. (2) Les alkylbenzènesulfonates ayant la formule: dans laquelle: X représente ammonium, triéthanolammonium, sodium ou potassium; et R est un radical alkyle possédant de 8 à 18 atomes de carbone. (3) Les hydroxyalkanesulfonates ayant la formule: OH R-CH-CH2-CH2-SO3X dans laquelle: X est le même qu'en (2); et R est un radical alkyle possédant de 10 à 15 atomes de carbone. (4) Acides gras sulfonés ayant la formule: CH3(CH2)n -COOH S03X dans laquelle: X est tel qu'en (2); et n est un nombre entier compris entre 12 et 18. (5) Agents non ioniques sulfonés ayant la formule: R-O-(CH2CH20)nH S03X dans laquelle: X est tel qu'en (2); et n est un nombre entier de 8 à 16, et dans laquelle R est tel qu'en (1). (6) Sulfates d'alcools gras ayant la formule: CH3(CH2)nCH2o-SO3X dans laquelle: X est tel qu'en (2); et n est un entier de 8 à 16. (7) Agents non ioniques sulfatés ayant la formule: RO-(CH2CH20)nSO3X dans laquelle: X est tel qu'en (2); R est un radical alkyle possédant de 12 à 18 atomes de carbone; et n est un nombre entier de 1 à 50. (8) Mono- et diesters de sulfosuccinates de sodium ayant la formule: O O R1-O-CH-CH2-CO-R2 SO3 s03 dans laquelle: R1 représente sodium, hydrogène ou un radical alkyle possédant de 1 à 12 atomes de carbone; et R2 représente un radical alkyle possédant de 1 à 12 atomes de carbone. Les agents tensio-actifs que l'on préfère sont les agents non ioniques du type alcools gras éthoxylés. Les compositions selon la présente invention peuvent également contenir des solvants organiques tels que les mélanges isoparaffiniques de distillats de pétrole. Ceux-ci peuvent être ajoutés en quantités S5604 allant jusqu'à 75% en poids, les quantités de 10% à environ 40% en poids étant celles que l'on préfère. Les compositions contenant les solvants organiques exposés ci- dessus peuvent également contenir des composés de solubilisation. Ces composés sont par exemple les sels de sodium de benzène sulfonate, toluène sulfonate et xylène sulfonate. Ces agents peuvent être ajoutés en quantités allant jusqu'à 10% en poids; cependant la quantité que l'on préfère inclure est d'environ 3% à environ 6% en poids. Outre, les divers ingrédients indiqués ci-dessus, les compositions selon la présente invention peuvent également comprendre des brillan- teurs optiques, des adoucissants pour les tissus, des agents anti- statiques, des agents anti-redéposition et de petites quantités de parfums et de colorants. Le pH de ces compositions est en général voisin de 7. Selon l'enzyme utilisé, le pH peut être augmenté par addition d'hydroxyde de sodium ou abaissé par addition d'acide acétique. On préfère particu- lièrement incorporer un agent tampon, par exemple acetate de sodium ou un autre sel de métal alcalin d'ammonium ou d'alkanol ammonium d'acide possédant de 1 à 4 atomes de carbone, cet agent procurant un certain effet stabilisant. Comme indiqué dans les exemples ci-dessous, le bénéfice qui est obtenu par l'addition des agents tampons est augmenté par les stabilisants à base d'esters selon la présente invention. Le sel peut être incorporé en quantité de 0,1 à 10% en poids. Les divers constituants des compositions contenant l'enzyme peuvent être mélangés ensemble dans un ordre quelconque. Cependant, on préfère préparer tout d'abord un mélange ester et eau et ajouter ensuite- les enzymes pour prévenir toute dégradation et désactivation de l'enzyme. Les constituants facultatifs tels que les agents tensio-actifs peuvent être ajoutés à n'importe quel moment. Les compositions selon la présente invention sont applicables à toute une série d'utilisations. On peut par exemple les utiliser pour enlever les tâches. Ils peuvent être également utilisés dans quelques opérations de lessive, telles que prétrempage et comme additifs de lessive pour des utilisations pendant le cycle de lavage d'une machine à laver automatique. L'exemple suivant illustre la présente invention: Les compositions suivantes sont préparées et stockées dans des récipients en verre fermés à 38 C pendant les périodes de temps indi- quées. On estime qu'une semaine de stockage à 38 C est égale à environ 2 à 3 mois d'un stockage à la température ambiante. Le pH de chacune des compositions suivantes est d'environ 7. -.__Composition (% en poi5ds) 0 55 5 5 Echantillon n 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 il Ingrédients Neodol 25-9 5 5 5 5 5 5 5 5 2,5 2,5 5 Neodol 23-6,5 5 5 5 5 5 5 5 5 2,5 2,5 5 Bouillie de Savinase 8,0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Acétate de sodium 1 1 2 2 2 2 2 2 0 4 1 Acétate d'éthyle 1 0 0,5 2 0 0 0,5 0 0 0 0 Acétate d'amyle 0 1 0 0 0,5 2 0 0 0 0 0 Eau 87 87 86,5 85 86,5 85 86,5 87 94 90 88 Activité en % Activité initiale 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Activité après 2 semaines 79 81 83 83 80 64 56 Activité après 4 semaines 65 62 75 74 53 Activité après 6 semaines 63 60 51 61 63 44 21 45 Activité après 8 semaines 35 49 57 44 46 55 39 18 37 34 1. Agent tensio-actif non ionique constitué d'un alcool éthoxylé dans lequel une mole d'alcool aliphatique possédant de 12 à 15 atomes de carbone est éthoxylée avec une moyenne de 9 moles d'oxyde d'éthylène. 2. Agent tensio-actif non ionique constitué d'un alcool éthoxylé dans lequel une mole d'alcool aliphatique possédant de 12 à 13 atomes de carbone est éthoxylée avec une moyenne de 6,5 moles d'oxyde d'éthylène. 3. Enzyme protéolytique alcaline du commerce disponible chez Novo Industri contenant 6% d'enzyme active ayant une activité de 8,0 unités de protéase kilo Novo. 4. L'activité résiduaire en pour cent est déterminée par une méthode au trinitrobenzène sulfonate en faisant usage de caséine comme substrat. Les valeurs d'activité sont sujettes à une erreur expérimentale de + 10% dans les essais 1 et 2 et de + 5% dans les essais 3 à 11. 5. Les échantillons no 8 à 11 ne sont pas en accord avec la présente invention et n'ont été inclus qu'à des fins de comparaison. Comme indiqué sur le tableau, une amélioration significative est obtenue avec de petites quantités du stabilisant à base d'ester selon la présente invention. Ainsi, par exemple, après deux semaines, le pourcen- tage d'enzyme active dans l'échantillon n 3 est d'environ 23% supérieur à celui de l'exemple n 9. Apres quatre semaines, le pourcentage d'enzy- me active dans l'échantillon n 3 est d'environ 42% supérieur à celui de l'échantillon n 11l et après huit semaines, d'environ 68% meilleur. Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux modes de réalisa- tion décrits et représentés et elle est susceptible de nombreuses variantes accessibles à l'homme de l'art, sans que l'on ne s'écarte de l'esprit de l'invention. REVENDICATIONS 1.- Composition à base aqueuse contenant une enzyme dans laquelle les enzymes présentent une stabilité améliorée contre la perte d'acti- vité, la composition étant essentiellement constituée sur une base pondérale: (a) de O à environ 55% d'un agent tensio-actif choisi dans le groupe constitué par les agents tensio-actifs anioniques et non anio- niques, et leurs mélanges; (b) d'environ 0,006 à environ 5% d'une enzyme active choisie dans le groupe constitué par les proteases et les alphaamylases et des mélanges de celles-ci, cette enzyme étant introduite sous forme pure ou incorporée sous forme d'une préparation d'enzyme du commerce comprenant de 2 à 80% environ de cette enzyme et d'envi- ron 20 à environ 98% d'un véhicule pour celle-ci; (c) d'environ 0,1% à environ 2,5% d'un ester de formule RCOOR' dans lequel R représente un radical alkyle possédant de 1 à 3 atomes de carbone ou l'hydrogène et R' représente un radical alkyle possé- dant de 1 à 6 atomes de carbone; et (d) le reste étant de l'eau. 2.- Composition selon la revendication 1, dans laquelle le vehi- cule est choisi dans le groupe constitué par chlorure de sodium, sulfate de sodium, sulfate de calcium, glycérol et leurs combinaisons. 3.- Composition selon la revendication 1, comprenant encore d'environ 0,1 à 10% en poids d'un sel de metal alcalin, d'ammonium ou d'alkanol ammonium d'un acide carboxylique possédant de 1 à 4 atomes de carbone. 4.Composition selon la revendication 4, dans laquelle l'ester est choisi dans le groupe constitué par acetate d'éthyle, acétate de méthyle, propionate d'éthyle, acétate de butyle, butyrate de méthyle, formiate d'éthyle, acétate d'amyle et formiate d'amyle. 5.- Composition selon la revendication 4, dans laquelle le sel est l'acétate de sodium. 6.- Composition selon la revendication 4, dans laquelle le pour- centage en poids de l'ester est d'environ 0,25 à environ 1,5%. 7.- Composition selon la revendication 1, dans laquelle le pour- centage en poids de l'agent tensio-actif est d'environ 5% à environ 30%. 8.- Composition selon la revendication 6, dans laquelle le pour- centage en poids d'eau est d'environ 40% à environ 95%. 9.- Composition selon la revendication 6, dans laquelle le pour- centage en poids de l'enzyme est d'environ 0,006% à environ 2,5%. 10.- Composition selon la revendication 9, comprenant encore d'environ 0, 1 à environ 10% d'un sel de métal alcalin, d'ammonium ou d'alkanol ammonium d'un acide carboxylique possédant de 1 à 4 atomes de carbone. 11. - Composition selon la revendication 10, dans laquelle le pH est d'environ 6 à environ 9. 12.- Composition selon la revendication 11, dans laquelle l'enzyme est une enzyme protéolytique obtenue à partir du Bacillus Subtilis. 13.- Composition selon la revendication 12, dans laquelle l'ester est choisi dans le groupe constitué par acetate d'éthyle et acétate d'amyle. 14.- Composition selon la revendication 13, dans laquelle le pourcentage en poids de l'ester est d'environ 0,25 à environ 1,5% et dans laquelle le sel est l'acétate de sodium en quantité comprise entre environ 0,5 et environ 4%. 15.- Composition selon la revendication 13, dans laquelle le véhicule est choisi dans le groupe constitué par chlorure de sodium, sulfate de sodium, sulfate de calcium, glycérol et des combinaisons de ceux-ci. 16.Composition selon la revendication 13, dans laquelle le pourcentage en poids de l'agent tensio-actif est d'environ 30% et dans laquelle l'agent tensio-actif est un mélange constitué d'environ 33,3% en poids d'un agent tensio-actif anionique et d'environ 66,6% en poids d'un agent tensio-actif non ionique. 17.- Composition selon la revendication 16, dans laquelle l'agent tensioactif non ionique est un alcool gras éthoxylé ayant la formule: RO(CH2CH20)nH dans laquelle: R possède de 8 à 18 atomes de carbone; et n est un nombre entier de 1 a 500. 18.- Composition selon la revendication 17, dans laquelle l'agent tensioactif non ionique est un mélange de: (a) du produit de condensation d'une mole d'un alcool aliphatique possédant de 12 à 13 atomes de carbone en configuration a chaîne droite ou ramifiée, avec une moyenne de 6,5 moles d'oxyde d'éthy- lène; et (b) du produit de condensation d'une mole d'un alcool aliphatique possédant de 12 à 15 atomes de carbone en configuration à chaine droite ou ramifiée, avec 9 moles d'oxyde d'éthylène. 19.- Composition selon la revendication 18, dans laquelle le mélange d'agents tensio-actifs non ioniques est constitué d'environ 50% en poids du composant (a) et d'environ 50% en poids du composant (b). 20.- Composition selon la revendication 19, comprenant en outre par rapport au poids de la composition: (a) d'environ 1% à environ 10% d'un composé de solubilisation; et (b) d'environ 1% à environ 75% d'un mélange isoparaffinique de distil- lats du pétrole ayant un poids moléculaire moyen d'environ 154. 21.- Composition selon la revendication 20, dans laquelle l'agent de solubilisation représente d'environ 3 à environ 6% en poids de la composition; dans laquelle le mélange isoparaffinique de distillats du pétrole représente d'environ 10% à environ 40% en poids de la composi- tion et dans laquelle l'agent de solubilisation est le xylènesulfonate de sodium.