Brevet FR2558163A1 — publié le 19850719

La présente invention concerne la chimie organique et a pour objet des composés chimiques nouveaux, à savoir, les dérivés de phényl-6 tétrahydro-2, 3,5,6, imidazo r2,1-b] thiazole qui possèdent une activité immunomodulatrice, antibactérienne et antivirus et peuvent trouver des applications à titre de principes actifs de produits médicamenteux pour le traitement et la prophylaxie des maladies contagieuses et allergiques provoquées par les insuffisances d'immunité. On contact à l'heure actuelle des analogues structuraux proches, tels que le bromure de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 phéncyl-7 imidazo [2,1-b] thiazolium (certificat d'auteur URSS n 910 636) et le chlorhydrate de L(-) tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 imidazo [2,1-b] thiazole (Lévamizole) ["Le Lévamizole en tant qu'immunomodulateur" (chimie, pharmacologie, mécanisme d'action et applications cliniques), D-r Alaios Par, Usines chimiques Gedeon Richter S.A., 3udapest, Hogrie 1, qui manifestent un effet stimulant dans diverses réactions immunologiques. Tou-tefois, ledit produit Lévamizoley bien que possédant un large effet sur le système immunogène, mani- feste des propriétés toxiques et provoque diverses m,ani- festations secondaires On s'est donc proposé de crée des composés nouveaux qui, tout en possédant une activité immunomodulatrice mar quée de pair avec un effet antibactérien et anti-virus, seraient caractérisés par une basse toxicité et par l'absence d'effets secondaires, seraient capables de servir en méde- cine en tant que principes actif s de produits pharmaceuti- quels. Les composés revendiqués, dérivés de phényl-6 tétrahydro-2,3,5,6 imidazo [2,1-b] thiazolium, sont nouveau e n'ont pas été décrits jusqu'ici dans la littérature. Suivant l'invention, lesdits composés nouveaux répondent à la formule générale suivante R étant CH2COOCH3 CH2COOC10H21, CH 2CONH2 X étant Br L'un des composés revendiqués, le bromure de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 m6thoxycarbonylméthyl-7 imidazo[2,1 thiazolium, répondant à la formule suivante est une poutre cristalline incolore, sans odeur, à température de décomposition supérieure à 1300C, hygroscopique, soluble dans l'eau, dans les alcools inférieurs, peu soluble dans l'acétone, le benzène. Un autre composé revendiqué, le bromure de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 décylhydroxycarbonylméthyl-7 imidazo r-2,1-bq thiazolium, répond à la formule suivante C'est une poudre cristalline incolore, sans odeur, à température de décomposition supérieure à 1800C, hygroscopique, soluble dans l'eau, dans les alcool.s inférieurs. Un autre composé revendiqué, le brumure de tétrahydro-2, 3,5,6 phényl-6 carbamoylméthyl-7 imidazo [2,1-b] thiazolium répond à la formule suivante est une poudre cristalline incolore, à température de décomposition supérieure à 2200C. Il est facilement soluble dans l'eau, dans les alcools inférieurs. Il se dissout mal dans le benzène, l'acétone. Les composés revendiqués possèdent une activité immunomodulatrice marquée, une action antibactérienne et anti-virus et peuvent trouver des applications à titre de principes actifs de produits pharmaceutiques pour le traitement des affections non spécifiques inflammatoires aiguës des voies respiratoires supérieures et de la muqueuse buccale chez les malades immunodéficients, les affections chroniques non spécifiques des voies respiratoires supérieures et de la muqueuse buccale (rhinite contagieuse et allergique, trachéite, bronchite, tonsillite, stomatite herpétique aphteuse aigue, erythème exsudatif multiforme, ulcères traumatiques non spécifiques de la muqueuse, gingivo-stomatite,accompagnées d'ulcères et de nécrose), des infections focales d'autres localisations. L'activité des composés revendiqués a été testée expérimentalement sur des animaux par comparaison avec le produit connu, le Lévamizole. L'efficacité de l'action immunorégulatrice des composés nouveau a été évaluée par comparaison de leur influence sur les réactions immunogènes avec l'action exercée dans des conditions analogues par le Lévamizole. En partant des idées actuellement admises sur le rôle particulier que jouent les anticorps qui se classent parmi les immunoglobulines E (IgE) dans la pathogenèse des affections allergiques, on a étudié l'influence des composés revendiques sur la production de ces anticorps dans les organes de la respiration. On a induit la production locale des anticorps IgE dans la trachée et dans les poumons de rats de la lignée WAI, August d'une masse de 250 à 300 g, en leur instillant successivement à des intervalles de 40 minutes, une solution à 0,1 % d'histamine et d'allergène de l'ambroisie (10 000 PNU/ml dans les deux voies nasales).Les solutions aqueuses5 des composés revendiqués (100 et 500 Ag/ml) étaient instillées d'une manière analogue, à raison de 0,05 ml, 15 minutes avant l'instillation de l'allergène, Vingtquatre heures après l'administration de l'allergène on a dosé les anticorps IgE dans les homogénats de la trachée et des poumons préparés à raison de 0,1 ml de sérum physiologique par 10 mg de tissu par la méthode de la dégranulation indirecte des cellules grasses. Il a été établi que les composés revendiqués sont capables d'inhiber la formation des anticorps IgE dans les organes de la respiration à des concentrations 5 fois plus basses que le Lévamizole (100 dg/ml contre 500 Sg/ml pour le Lévamizole). Les résultats des tests sont réunis dans le Tableau 1. Tableau 1 Influence des composés revendiqués sur la formation des anticorps IgE dans les organes de la respiration N Pouroentage des masto- Crédibilité d'ord- Groupes d'ani- cytes dégranulés -------------re maux trachée poumons 1 2 3 4 5 1 Rats auxquels on 20,5 # 1,1 23,6 + 1,3 a administré le sérum physiolo gique (témoin) 2 Rats auxqueis on a administré le composé reven diqué (I) 500 g/ml 7,0 # 0,2 9,3 # 0,8 inférisure à 0,05 100 g/ml 17,8 # 1,3 19,4 # 1,8 supérisure à 0,05 3 Rats auxquels on a administré le compose revendi qué (II) 500 /ml 3,5 # 1,2 6,5 # 0,9 inférieure à 0,05 100 g/ml 15,0 # 1,8 6,8 # 0,9 inférieure à 0,05 4 Rats auxquels on a administré le composé revendi qué (III) 500 g/ml 7,1 # 1,7 6,1 # 1,1 inférieure à 0,05 100 g/ml 9,1 # 2,1 10,6 # 3,9 inférisure à 0,05 5 Rats auxquels on a administé le produit Lévami zole 500 g/ml 7,4 + 0,2 6,1 + 1,1inférieure à 0,05 110 g/ml 17,3 + 1,8 18,1 + 1,9 supérieure à 0,05 L'une des propriétés immunomodulatrices du Lévamizole est son influence sur le développement des réactions d'hypersensibilité du type ralenti qui jouent un rôle clef dans la pathogenèse des affections allergiques, inflammatoires et oncologiques. On a provoqué ladite réaction en appliquant à la surface rasée du ventre des souris SVA 0,1 ml d'une solution à 0,5 % de dinitrochlorobenzène dans l'acétone. 14 jours après on a appliqué à l'oreille gauche (testée) des souris une goutte de solution identique, et sur 'orteil le droite (témoin), une goutte d'acétone. On a évalué la réaction 24 heures après, d'après la différence d'épaisseur entre l'oreille gauche et l'oreille droite des animaux testés. On a administré les composés testés et le Lévamizole aux souris par os cinq fois, une fois tous les trois jours, à commerncer par le jour de la sensibilisation, å des doses de 2,5 mg/kg et de 25 mg/kg. On a administré au groupe témoin des volumes égaux de sérum physiologique . Les données ont été traitées statistiquement en utilisant le critère non paramétrique "U" de Wilcoxson-Mann-Whi+ney et sont résumées dans le Tableau 2. Il a été démontré que le Lévamizole n'inhibe le développement de l'hypersensibilité de contact qu'à la dose de 25 mg/kg, alors que les composés revendiqués (II) et (III) inhibent activement la réaction étudiée aussi bien à la dose de 25 mg/kg qu'à la dose de 2,5 mg/kg, c'est-à-dire que pour l'inhibition de l'hypersensibilité de contact il suffit d'administrer les produits à des doses 10 fois plus faibles que le Lévamizole, Tableau 2 Influence du Lévamizole et des composes revendiqués sur l'évolution de la réaction allergique du type ralenti chez la souris produit Epaisseur de l'oreille en micrométres d'ordre Test Témoin Valeur Limites Valeur Limites moyenne des va- moyenne des va riations riations 1 2 3 4 5 6 1 sérum phy siologique 203,0 130-260 168,0 120-190 2 Lévamizole 2,5 mg/kg 210,0 160-280 162,3 130-200 25 mg/kg 179,2 170-190 179,2 160-190 3 Composé re vendiqué (II) 2,5 mg/kg 222,8 175-300 202,2 150-250 25 mg/kg 184,4 170-240 178,9 150-240 4 Composé re vendiqué (III) 2,5 mg/kg 184,4 110-220 176,7 110-210 25 mg/kg 190,0 170-200 184,4 170-200 Nombre de tests Crédibilité d'ordre 1 7 8 1 10 inférieure à 0,05 2 7 inférieure à 0,05 6 supérieur à 0,05 3 9 supérieure à 0,05 9 supérieure à 0,05 4 9 supérieure à 0,05 9 supérieure à 0,05 L'influence du composé revendiqué (I) sur l'évo- lution de la réaction d'hypersensibilité du type ralenti a été analysée par la méthode développée par E.W. Gülling et M.B. Sambour (1981). On a sensibilisé les souris en indtroduisant dans les coussinets de leurs pattes arriére 104 thymocytes tués par chauffage (560C pendant 20 minutes) du rat. on a éva lué la réaction par la différence de poids des ganglions lymphatiques poplités du membre témoin et du membre testé 24 heures après l'injection déchaînante (106 thymocytes du rat) effectuée au cinquième jour du test. Chez le cobaye,ton a simulé ladite réaction par introduction double, à des intervalles de 14 jours, dans les coussinets des pattes arrière, de 0,1 mg de solution à 0,4 % de dinitro-2,4 chlorobenzêne dans l'éthanol à 25 %. On a évalué la réaction en fonction de la différence des températures des surfaces des plantes et de l'épaisseur des pattes arrière 24 heures après l'injection déchaînante de l'antigène. L'influence du composé revendiqué par comparaison avec le Lévamizole a été étudiée à des concentrations de 100, 500 et 1000 sg/ml par son introduction dans le coussinet de la patte arrière gauche à raison de 0,05 g/ml 4 heures avant la sensibilisation (aux souris) et à raison de 0,2 ml 24 heures avant l'injection sensibilisante et l'injection déchaînante (aux cobayes). Simultanément, on a injecté dans le coussinet de la patte arrière droite à raison de 0,05 ml aux souris et et à raison de 0,1 ml aux cobayes. Les résultats obtenus sont résumes dans le Tableau 3 Tableau 3 N Concentration Valeurs de la différence de tempéd'ordre du produit rature des surfaces des plantes et de l'épaisseur des plantes témoins et testées des pattes arrière chez les cobayes. Température Epaisseur, mm ( C) Valeur Valeur moyenne moyenne 1 2 3 4 1 Lévamizole -1,3 # 0,06* -0,75 # 0,08* 100 g/ml 2 Composé reven- -1,5 # 0,27* - 0,6 # 0,062* diqué (I) 100 g/ml 3 Lévamizole 500 g/ml 4 Composé reven diqué (I) 500 g/ml 5 Lévamizole +1,1 # 0,11 + 0,51 # 0,064 6 Composé reven diqué, (I) 1000 g/ml +1,2 # 0,16 +0,63 # 0,09 Tableau 3 (suite) NO Mombre Valeur de la différence Nombre d'ordre d'ani- des masses des ganglions d'ani- maux @@@@@@@@@@@@@@@ chez les souris, mg Valeur moyenne 1 5 6 7 1 7 -0,9 * 0,13* 8 2 7 -1,1 + 0,08* 3 +1,0 * 0,13 11 4 +1,3 # 0,2 7 5 9 +1,2 + 0,12 11 6 7 +1,3 + 0,29 7 SOn a considéré la différence comme négative si les valeurs expérimentales dépassaient les valeurs témoins. Les résultats présentés montrent qu'a la concentration de 100 Ag/ml le composé revendiqué (I), comme le Lévamizole, stimule de manière fiable, alors qu'en concentrations de 500 et de 1000)tg/ml il inhibe efficacement le développement des réactions d'hypersensibilité du type ralenti. Par ailleurs, les proprités immunomodulatrices du produit étudié sont légerement plus marquées que celles du Lévamizole. Un indice important de l'action immunomodulatrice du Lévamizole est son influence sur l'activité cytolytique des cellules T. En partant de cela on a étudié l'influence de l'un des composés les moins toxiques parmi les composés revendiqués, à savoir, le composé (III), sur l'activité cytolytique des cellules dépendant des anticorps. Dans les tests effectués in vitro, on a étudié l'influence du composé revendiqué (III) et du Lévamizole sur l'activation des tonsillocytes de l'homme. On a uti- lisé dans les tests les cellules des amygdales de sujets souffrant de la tonsillyte chronique. On a étudié l'action cytolytique des tonsillocytes par le procédé des isotopes radio-actifs, en utilisant pour cela 51Cr. La désintégration des cellules-cibles (érythrocytes des poulets) par les lymphocytes des amygdales a été considérée comme une cytolyse spontanée, alors que la degradation des cellules-cibles chargées > outre le traceur, d'anticorps homologues à la dose sublytique, a été consi dérée en tant que cytolyse dépendant des anticorps. On a utilisé les produits à la concentration finale de 1 Ag/ml, de 10 et de 100 sg/ml. On a cultivé 107 cellules d'amygdales pendant une heure à 370C avec les produits dans des conditions stériles. Ensuite on les a lavées deux fois par le milieu 199 en centrifugeant (105 g, 10 minutes). Ensuite on a additionné aux tonsillocytes des cellules-cibles appro priées et on a cultivé pendant 18-20 heures à 370C.Le taux de dégradation des cellules-cibles a été déterminé par radiométrie en fonction du rendement en 51Cr dans la phase liquide. Il a été démontré que le composé revendiqué (III) stimule l'activité cytolytique dépendant des anticorps à des concentrations 10 à 100 fois plus basses que le Lévamizole (1 à 10 g/ml contre 100 g/ml pour le Lévamizole). L'activité des killers naturels des cellules des amygdales n'était rehaussée que par le composé revendiqué (III) lorsqu'on l'utilisait à des concentrations de I et de 104tg/mi:L'activité des killers spontanés sous l'action du Lévamizole n'était pas sensiblement modifiée. Les résultats des essais sont résumés dans le Tableau 4. Tableau 4 Influence des immunomodulateurs sur la cytotoxicité naturelle et sur la cytotoxicité provoquée par les anticorps des tonsillocytes humains. N Indices statistiques Rendement en 51Cr à partir des des cellules-cibles (6 %) d'ordre Lévamizole Test 1 ssg/ml- 10 sg/ml 100 Ag/ml I 1 2 3 4 5 1 Valeur moyenne 16,2 18,4 20,5 2 -c, Limites des varia ooe tions 3,0-41,0 5,0-53,0 5,0-49,0 r' 3 g O n-nombre de tests 8 8 8 4 07 Témoins 13,3 4 X Temoins 13,3 5,0-28,0 5 z oe Valeur moyenne 14,0 14,2 22,8t 6 ci zk Limites des o O 8 variations 1,0-32,0 1,0-36,0 8,0-39,0 ç ri 7 x a A n-nombre de tests 8 8 8 o o > 8 Om > O Témoins 10,7 -- 3.0-34.0 , Tableau 4 (suite) N Rendement en51Cr à partir des cellules-cibles (6 %) d'ordre Composé revendiqué (III) 1 jg/ml 10 Ag/ml 100 jg/ml 1 6 7 8 * * 1 30,6 28,8 24,8 2 7,0-60,0 7,0-42,0 1,0-40,0 3 8 8 8 4 4 . . 5 23,2 22,6 19,1 6 10,0-57,0 13,0-36,0 4,0-40,0 7 8 8 8 * Valeur statistiquement crédible par rapport au témoin (P inferieur à 0,05) Etant donné que l'influence des immunomodulateurs sur la prolifération et la différenciation des lympthocytes est réalisée par le système des nucléotides cycliques, on peut considérer comme l'un des principaux indices de l'efficacité et du mécanisme d'action des composés revendiqués leur influence sur le niveau de l'adénosine monophosphate cyclique (c-AMP) et du guanosinemonophosphate cyclique (c-GMP), Comme l'ont montré les test, sous l'in- fluence aussi bien du Lévami zole que du composé revendiqué (III) on observe des variations réciproques de la concentration en c-AMP et de c-GMP, ce qui relfète probablement une prériodicité caractéristique de l'activation des cyclases dans le processus du cycle cellulaire. La baisse de la teneur en c-AMP due aux immunomodulateurs des splénocytes va Je pair avec une augmentation sensible de l'activité dans lesdites cellules de la phosphodiestérase c-AMP dont l'expression est une fonction directe de la concentration en composés. L'on des critère de l'opportunité des applications médicales des immunomdulateurs est l'accoissement de la sensihilité des lymphocytes des malades pour un produit oncret dont l'évaluation a été effectuée par la méthode e la formation des mosettes E. On jugeait des résultats de l'influence exercée sur les lymphocytes par le Lévamizole et les composés revendiqués d'après l'accroissement de la capacité des lymphocytes des malades de la rhinite contagieuse allergique à forrer des rosettes avec les érythrocytes du mouton en présence ce concentrations variées du produit en cas d'incubation préalable desdits lymphocytes. Les résultats des tests ont montré que les composés revendiqués sont au moins aussi efficaces, et que, lorsqu'ils sont pris à des concentrations identiques à celles du Lévamiaole, ils augmentent d'une manière crédible la cuantit des cellules génératrices de rosettes E. Les composés reven- diqués ont également la propriété d'induire la formation de de l'interférone. Afin d'étudier la génération de l'interférone in vivo, on a administré le composé revendiqué (III) par voie intranasale à des doses de 1 et de 10 g par soruis a raison de 0,1 ml. Les tests ont été effectués sur des souris de la lignée C57W. Six, vingt-quatre, soixante douze et cent soixante huit heures après, on a dosé dans lé sérum sanguin des souris la présence de l'interférone. Pour l'indication de l'interférone on a utilisé des cellules L cultivées dans des conditions artificielles des souris contre 100 TCD50 du virus de la stomatite vésiculaire. Pour le témoin, parallèlement aux sérums étudiés, on a titré l'interférone des souris induite chez les an- maux par administration intrapéritonéale du virus de la maladie de Newcastle. Les résultats des tests sont réunis dans le Tableau 5. Tableau 5 Titres d'interférone dans les sérums des souris à des époques variées après l'administration du Lévamizole et du composé (III) revendiqué Produits administrés Temps après l'administration des produIts, heures 6 24 72 168 Lévamizole 1 g 160 40 40 80 10 160 40 40 80 Composé revendiqué (III) 1 g 320 30 160 160 10 g 320 80 80 160 Ces résultats montrent que le composé revendiqué (III) est un inducteur plus actif de l'interférone in vivo que le Lévamizole. On a étudié l'influence des composés revendiqués (II) et (III) et du Lévamizole sur la reproduction du virus de la stomatite vésiculaire et la culture greffée des reins de guenons vertes Vero. On a introduit les produits dans le milieu nutritif des cellules cultivées à des doses non toxiques de 10,1 et 0,1 Ag/ml. On a maintenu les cellules pendant 24 heures à la température de 370C, après quoi on a introduit le virus avec un taux de contamination de 10 TCDsO. Les cellules témoins dans des conditions analogues ont été traitées par un milieu stérile. 24 à 48 heures après la dégénérescence totale de la couche cellulaire sous l'influence du virus, on a procédé à une congélation double des cellules témoins et des cellules testées, on les a soumises au centrifugeage à 1500 tr/min pendant 20 minutes, et on a dosé dans le liquide surnageant au-dessus du dépôt le titre du virus reproduit. Les résultats sont résumés dans le Tableau 6. Tableau 6 Influence des composés revendiqués sur la reproduction du virus de la stomatite vésiculaire Produit Taux d'inhibition de la repro duction du virus Lévamizole 1 hg/ml O 10 g/ml 10 fois Composé revendiqué (III) 1 g/ml 10 fois 10 g/ml 100 fois Composé revendiqué (II) 1 g/ml 10 fois 10 hg/ml 100 fois Comme le montrent les résultats résumés dans ce Tableau, les composés revendiqués (II) et (III) sont 10 fois plus actifs dans l'inhibition de la reproduction du virus de la stomatite vésiculaire en sa culture. Dans les tests in vitro on a étudié l'activité antibactérienne des composés revendiqués. A cet effet, on a préparé des séries de dilués des composés (II) et (III) à des concentrations de 1 % à 0,00001 % et on y a ajouté 0,1 ml de suspension microbienne (de staphylocoque doré, de protéus, de bacille pyocyanique). La charge microbienne pour le staphylocoque était de l'ordre de 1.105 cellules/ml, pour le protéus et le bacille pyocyanique, de 1.104 cellules/ml. On a utilisé comme témoins des antibiotiques ayant un large spectre d'activité et le Lévamizole. On a soumis les microbes à l'incubation de concert avec les composés revendiqués à 370C. Au bout de 1,3 et 24 heures, on a prélevé des échantillons à raison de 0,1 ml à partir d'un dilué correspondant des composés pour la détermination du nombre de bactéries viables dans la culture. On a procédé aux ensemencements par distribution avec un spatule de verre à la surface d'une boîte remplie de milieu de culture 0,1 ml d'une suspension microbienne dans le dilué requis de composés. On a démontré que l'activité antibactérienne la plus marquée était celle du composé (II), la concentration inhibitrice étant de 1 à 12,5 jeg/ml, tandis que l'activité du Lévamizole est deux fois moins forte que celle du composé revendiqué (III). L'obstacle majeur dans la voie d'une large valorisation du Lévamizole en clinique est sa haute toxicité et la fréquence des effets secondaires observée. Pour cette raison, on a procédé à une étude comparée approfondie de la toxicité des nouveaux composés. On a déterminé DL50 sur des souris de la lignée SVA des deux sexes, d'une masse de 20 à 21 g. on a admi nistré aux souris les composés revendiqués par voie souscutanée à raison de 0,5 ml. On a pris en compte les résultats par la méthode de Kerber et de Perchine. Il a été établi que DL50 en cas d'administration par voie souscutanée pour le composé (I) est de 262,2 mg/kg, pour le composé (II), de 166,7 mg/kg, pour le composé (III), de 1016,7 mg/kgtcontre 121 mg/kg pour le Lévamizole. Ainsi les composés revendiqués sont beaucoup moins toxiques que le Lévamizole. Le composé (III) est particulièrement digne d'attention. En effet, l'étude de sa toxicité 11aigue" sur les rats (lignée Wistar, masse 180 200 g), sur les cobayes (sans race, masse 200-300 g) et les lapins (masse 2 à 2,5 kgr a confirmé ses avantages, dont témoignent les résultats résumés dans le Tableau 7 qui suit. Tableau 7 Genre d'animal et DL50 en cas d'administration son sexe sous-cutanée, mg/kg Lévamizole Composé revendiqué (III) Rats # 136,7 2584,0 116,7 1416,7 Lapins # 38,4 316,7 Ttbleau 7 (suite) DL50 en das d'administration per os, mg/kg Levamizole Composé revendiqué (III) 533,4 5749,4 400,0 3500,0 266,7 3333,4 On a étudié l'action du composé revendiqué (III) sur l'état général des animaux, sur la composition de leur sang périphérique, l'état fonctionnel de leur système nerveux central, de leurs systèmes cardio-vasculaire et res- piratoire, de leur foie, de leurs reins, ainsi que sur 1a masse et la structure morphologique de leurs viscères. Avant d'effectuer les tests on a determiné pendant une sema ne, à trois reprises, les indices initiaux de l'état du sang périphérique, les fonctions du système nerveux central, du système cardiovasculaire, de 7a respira- tion, du foie, des reins. On a sacrifié les animaux au bout de 30 jours et on les a soumis à des examens patho-morp;hologiques (avec examen histologique des organes). Les tests ont été effectués sur 20 rats pubères d'une nasse de 180 à 200 g. On a administré journellement aux animaux 1/10 DL50 de produit. A en juger par les tests effectués, l'administration pendant un mois du produit aux rats n'entraîne aucun effet toxique. Au cours de cette période, les animaux testés manifestaient des accroissements normaux de poids. On na pas mis en évidence de différences statistiquement crédibles de l'état fonctionnel des systèmes vitaux de l'organisme (système nerveux central, système cardio-vasculaire, organes de la respiration) chez les animaux après un mois d'administration du composé revendiqué, ce qui témoigne de son innocuité. Ce fait est cor roboré par l'absence d'influence marquée du composé sur la composition qualitative et quantitative des cellules du sang périphérique (les variations infimes ne sortaient pas des limites des versions connues de la norme physiologique et ne se distinguaient pas des versions susdites chez les animaux qui servaient de témoins), sur la fonction du foie définie par l'aptitude des cellules du foie à capter un colorant tel que la bromosulfophtaléine. Les tests effectués montrent que les composés revendiqués se rapportent au groupe des substances pratiquement inoffensives qui présentent une toxicité beaucoup plus faible que le Lévamizole. D'autre part ces composés manifestent une influence marquée, en fonction de la dose, sur l'état du système immunologique, qui ne le cède en rien à l'action du produit immunotrope connu, le Lévamizole, et qui par un certain nombre d'indices (l'influence sur les réactions d'hypersensibilité des types immédiat et ralenti, sur la cytotoxicité spontanée et dépendant des anticorps), lui sont même supérieurs (ils agissent à des concentrations de 5 à 10 fois, et même encore plus faibleslque le Lévamizole). En outre, les composés revendiqués ont une activité antivirus et antibactérienne plus marquée que le Lorâvamizole et sondes inducteurs actifs de l'interférone in vivo. Les composés revendiqués, les dérivés du phnyl-6 tétrahydro-2,3,5,6 imidazo 2,i-b thiazole sont préparés par un procédé fondé sur la réaction connue des amines tertiaires sur les halogénures d'alcoyles et se présentent sous forme de poudres incolores hygroscopiques. Pour une meilleure compréhension de l'invention, plusieurs exemples de préparation des composés revendiqués sont décrits ci-après. Exemple 1 On dissout 2 g (0,01 mole) de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 imidazo [2,1-b]thiazole dans 20 ml d'acétone et on ajoute 1,53 g (0,01 mole) d'ester méthylique d'acide monobromoacétique. 12 heures après on sépare par filtration le dépôt et on le lave à l'acétone. On obtient 2,86 g (81 %) de bromure de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 méthoxycarbonylméthyl-7 imidazo 2,1-b] thiazolium, F = 81-820C (dans le dioxanne). Trouvé, % : Br 22,0 ; S 8,8. Calculé, %:Br 22,4 ; S 9,0. C14H17Br N202S. Spectre ultra-violet : dans le méthanol, le maximum d'absorption est supérieur à 220 nm (dans la zone d'absortion propre du solvant). Spectre infra-rouge (KBr) : 1720 cm-i (CO) Spectre de résonance magnétique des protons dans CF3COOH, (hexaméthyldimilosane), standard extérieur, ( s ) p.p.m. 3,67 singulet, 3H, 3,80-4,63 multiplet, 6H 5,60 triplet, 1H, 7,30 singulet, 5H. Exemple 2 On dissout 2 g (0,01 mole) de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 imidazo t2,1-b1thiazole et 2,8 g (0,01 mole) d'ester décylique de l'acide monobromoacétique dans 25 ml d'acétone et on abandonne à la température ambiante pendant une nuit. On sépare le produit par filtration, on le lave à l'acétone. Rendement4,5 g '96 %). Après cristallisation dans le dioxanne on obtient 3,6 g (75 %) de bromure de tétra- hydro-2,3,5,6 phényl-6 décyloxycarbonylméthyl-7 imidazo t2,1-b thiazolium, F =127-1280C. Trouvé, 8 : Br 17,2 ; H 6,8 ; N 5,9. C23H34Br N202S. Calculé, % : Br 16,5 ; H 6,6 ; N 5,2. Spectre ultra-violet : dans le méthanol, le maximum d'absorption est supérieur à 220 nm (dans la zone d'absorption propre du solvant). Spectre infra-rouge (KBr) : 1720 cml (CO) Résonance magnétique des protons dans CF3COOH hexaméthyldisilosane) - standard extérieur, (#), p.p.m. 0,93 - 1,63 multiplet, 19H ; 3,70 - 4,67 multiplet, 8H 5,70 triplet, 1H 7,46 singulet, 5H. Exemple 3 On ajoute a une solution de 2 g (0,01 mole) de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 imidazo 52,1-b] thiazole dans 10 ml d'acétone en refroidissant et brassant une solution de 1,4 g (0,01 mole) de bromoacétamide dans 10 ml d'acétone. On sépare par filtration le dépôt formé et on cristallise dans l'alcool. Rendement 2,4 g (70 %) de produit à température de fusion F = 214-2150C. Trouvé, % : Br 23,54 ; S 9,42.C13H16BrN303S. Calculé, % : Br 23,35 ; S 9,37. Spectre ulta-violet : dans le méthanol, le maximum d'absorption est supérieur à 220 nm (dans la zone d'absorption propre du solvant). Spectre infra-rouge (KBr) : 1695 cm 1 (CO) 3100-3300 cm 1 (N-H). Spectre de résonance magnétique des protons dans CF3COOH, standard extérieur hexaméthyldisilosane, ( ) p.p.m. 3,63 - 4,56 multiplet, 8H ; 5,56 triplet, 1H t 7,30 singulet, 5H. REVENDICATIONS 1.- Composés chimiques nouveaux, caractérisés en ce que ce sont des dérivés de phényl-6 tétrahydro-2,3,5,6 imidazo [2,1-b] thiazole répondant à la formule générale R étant CH2COOCH3 ; CH2COOC10H21 @ @@ @@ CH2CONH2 x étant Br 2.- Composé chimique suivant la revendication 1, caractérisé en ce qugil est constitué par le bromure de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 métho xycarbonylméthyl-7 imidazo [2,1-b] thiazolium répondant à la formule suivante 3.- Composé chimique suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est constitué par le bromure de t6trahydro-2,3,5,6 phényl-6 décylohydroxycarbonylméthyl-7 imidazo [2,1-b] thiazolium répondant à la formule suivante 4.- Composé chimique suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est constitué par le bromure de tétrahydro-2,3,5,6 phényl-6 carbamoylméthyl-7 imidazo [2,1-b] thiazolium répondant à la formule suivante :