Brevet FR2550091A1 — publié le 19850208

COMPOSITION PHARMACEUTIQUE OU VETERINAIRE DESTINEE A COMBATTRE DES TROUBLES ISCHEMIQUES CARDIAQUES. La présente invention se rapporte, d'une manière générale, à une composition pharmaceutique ou vétérinaire destinée notamment à combattre des troubles ischémiques cardiaques. En particulier, l'invention concerne une composition pharmaceutique ou vétérinaire contenant, comme principe actif essentiel, au moins un dérivé de benzofuranne de formule générale: X 1 C_ c I 22 CH 2-(CH 2)2-CH 32 ou un de ses sels d'addition non toxique par exemple le chlorhydrate ou l'oxalate, dans laquelle R représente un radical hydroxy, amino, monoéthyl15 amino ou diéthylamino et X 1 et X 2, qui sont identiques ou différents, représentent hydrogène ou iode à condition que lorsque R représente un radical diéthylamino, X 1 et X 2 sont différents Ces dérivés de benzofuranne ainsi que leurs sels d'addition non toxiques sont désignés ci-après sous le terme général: composés selon l'invention. On a trouvé que les composés selon l'invention sont doués d'intéressantes propriétés pharmacologiques dans le domaine cardiovasculaire En particulier, les composés en question se sont révélés capables de diminuer la fréquence cardiaque et la pression artérielle ainsi que de corriger des arythmies cardiaques d'étiologie diverses. Les composés selon l'invention ainsi que les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires les contenant seront, par conséquent, utiles en vue de combattre des troubles ischémiques cardiaques et, à cette fin, seront -2 particulièrement indiqués dans le traitement de l'angine de poitrine ou d'arythmies cardiaques. Des tests pharmacologiques effectués chez le chien, à la dose de 10 mg/kg par voie intraveineuse, ont montré que les: n-Butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 benzofuranne (Composé A) n-Butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 iodo-3 benzoyll-3 benzofuranne (Composé B) nButyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne (Composé C) nButyl-2 l(amino-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 benzofuranne (Composé D) sous forme de base libre ou de sel d'addition non toxique provoquent respectivement une diminution de 24 %, 25 %, 17 % et 25 % de la fréquence cardiaque ainsi qu'une chute brève et modérée de la pression artérielle. En outre, les composés B et C se sont révélés capables, dans ces conditions, de diminuer la consommation en oxygène du myocarde. Des études complémentaires ont, en outre, montré les propriétés antiarythmiques des composés selon l'invention vis-à-vis de diverses arythmies expérimentales, notamment vis-à-vis de l'arythmie provoquée, chez le rat anesthésié, par la ligature de l'artère coronaire gauche. A cet effet, on a anesthésié à l'uréthane des lots de 4 à 6 rats mâles et on a posé un fil de ligature sous l'artère coronaire gauche à 1 mm en dessous de l'oreillette gauche On a injecté le composé à étudier en 2 min. 25 par une veine fémorale, 5 min après la pose du fil et on a serré la ligature 5 min après l'injection en question. En fin d'essai, on a injecté, par voie veineuse, une solution de Bleu evans ( 0,2 %-1 ml/100 g de rat) pour déterminer au niveau du ventricule gauche, l'importance de la zone non irriguée provoquée par la ligature. On a ainsi constaté que les Composés A et C protègent, en administration aiguë, contre l'arythmie et la mortalité provoquées par une ligature coronaire chez le rat. Déjà légèrement actifs à 5 mg/kg, les Composés A et C administrés par voie intraveineuse 5 minutes avant le serrage de la ligature protègent totale35 ment 50 % des animaux à 10 mg/kg et assurent une protection de 100 %-à 15 mg/kg. Des essais comparatifs effectués dans les mêmes conditions avec l'amiodarone(BSM n 2280 M) ont montré que ce composé ne protège que 75 % des animaux à 15 mg/kg. 255-0091 -3 En outre, les Composés A, B et C ont montré une protection très hautement significative vis-à-vis de la tachycardie ventriculaire par perfusion d'aconitine chez le rat et ce, dès la dose de 5 mg/kg par voie intraveineuse, la DA 50 protectrice de chacun de ces composés étant de 2,5 mg/kg. De plus, les Composés A et C se sont révélés actifs vis-à-vis de la tachycardie ventriculaire provoquée chez le chien par l'administration intraveineuse de ouabaine puisqu'ils restaurent le rythme sinusal à la dose cumulée de 10 à 15 mg/kg par voie intraveineuse pendant plus de 90 minutes. Au surplus, on a montré que des composés selon l'invention, possèdent éga10 lement des propriétés inhibitrices de la translocation calcique au niveau membranaire significativement supérieures à celles de I'amiodarone Grace à cette action, de tels composés peuvent contrôler l'angor vasospastique, l'angine d'effort ou l'angine de poitrine double. Ces propriétés ont été mises en évidence au moyen du test décrit par POLSTER 15 et coll dans Biochemical Pharmacology Vol 30, No 8, pp 897-901 ( 1981) en mesurant l'action antagoniste de ces composés vis-à-vis de la réponse contractile à la dépolarisation provoquée par le potassium sur l'aorte isolée de rat. Ainsi, en présence d'une dose 10-5 molaire de Composé C, on n'enregistre, après 60 min d'incubation, que 13,6 % de l'effet contracturant maximal mesuré avant l'incubation avec la substance à tester. Dans les mêmes conditions, on enregistre encore, en présence d'une dose 10-5 molaire d'amiodarone, 89,3 % de l'effet contracturant maximal mesuré avant l'incubation avec ce composé. Des tests de toxicité ont également été effectués avec les composés selon l'invention lesquels ont montré la toxicité relativement faible de ces composés, les rendant potentiellement utilisables comme médicaments. La plupart des composés de formule I ci-dessus sont connus d'après la publication de FLANAGAN et coll dans J Pharm Pharmacol 1982, 34 pp 638643. 30 Toutefois, aucune propriété pharmacologique ou application thérapeutique n'y a été révélée les concernant Les dérivés de benzofuranne de formule I peuvent être préparés au départ de dérivés de benzoyl benzofuranne de formule générale: -4 X o t *-çC " -OH 0 CH 2-(CH 2)2-CH 3 X 2 par condensation de ces dérivés avec a) le chloro-1 diéthylamino-2 éthane en présence d'un carbonate de métal alcalin, par exemple le carbonate de potassium et dans un milieu approprié tel que le benzène pour obtenir les composés de formule I dans 10 laquelle R représente un radical monoéthylamino ou diéthylamino b) le dibromo-1,2 éthane en présence d'un carbonate de métal alcalin tel que par exemple le carbonate de potassium dans un milieu approprié par exemple la méthyl éthyl cétone, suivie de l'aminolyse du dérivé bromoéthoxy obtenu par l'éthylamine en milieu alcoolique par exemple en milieu.15 éthanolique, pour obtenir les composés de formule I dans laquelle R représente un radical monoéthylamino ou diéthylamino. c) le chloro-1 triphénylméthylamino-2 en milieu basique dans un solvant tel que le N,N-diméthylformamide suivie du clivage du groupement triphénylméthyle par passage enmilieu acide, pour obtenir les composés de formule 20 I dans laquelle R représente un groupement amino. d) le bromo-1 hydroxy-2 éthane en présence d'un carbonate de métal alcalin par exemple le carbonate de potassium dans un solvant tel que le N,Ndiméthylformamide, pour obtenir les composés de formule I dans laquelle R représente un groupement hydroxy. Quant aux sels d'addition non toxiques, ceux-ci peuvent être préparés, selon des méthodes classiques, en faisant réagir les susdits dérivés de benzofuranne de formule I avec l'acide organique ou inorganique approprié, par exemple d'acide oxalique ou chlorhydrique. Les composés selon l'invention peuvent être administrés, en tant que prin30 cipe actif médicamenteux sous forme de compositions unitaires convenant à l'administration en thérapie humaine ou vétérinaire Pour ce qui concerne l'unité d'administration, celle-ci peut prendre la forme, par exemple d'un comprimé, d'une dragée, d'une capsule, d'une gélule, d'une poudre, d'une suspension ou d'un sirop pour l'administration orale, d'un suppositoire pour l'administration rectale, d'une solution stérile ou suspension pour l'administration parentérale. La quantité de principe actif en question par unité d'administration varie selon que cette unité est destinée à l'administration orale, rectale ou parentérale Dans le cas d'administration orale, l'unité comprend de 50 à 300 mg, dans le cas d'administration rectale de 50 à 200 mg et dans le cas d'administration parentérale de 50 à 150 mg de principe actif. L'administration journalière de compositions de l'invention dépend de la voie d'administration choisie. Généralement, la quantité de principe actif peut varier de 50 à 1200 mg par jour à un être humain adulte. Sous son aspect le plus général et en tenant compte de la voie d'administration choisie, les compositions thérapeutiques de l'invention sont préparées en associant le principe actif constitué d'un composé selon l'in15 vention à savoir un dérivé de benzofuranne de formule I ou un de ses sels d'addition non toxiques, avec un véhicule pharmaceutique ou un excipient approprié, ce dernier pouvant être sélectionné parmi les substances telles que l'eau distillée, l'alcool benzylique, le lactose, les amidons, le talc, le stéarate de magnésium, la polyvinylpyrrolidone, I'acide alginique, la 20 silice colloidale, le dioxyde de titane, les agents édulcorants etc On décrit par la suite, de manière plus particulière mais non limitative, quelques modes de réalisation de compositions de l'invention. On prépare, par exemple, une composition de l'invention sous forme de comprimé en mélangeant le principe actif constitué par un composé selon 25 l'invention avec un véhicule pharmaceutique ou un excipient approprié par exemple le mannitol, l'amidon de mals ou la polyvinylpyrrolidone ou analogue, puis en granulant et en comprimant en présence d'un véhicule pharmaceutique tel que l'amidon de mais, le stéarate de magnésium ou analogues. Si nécessaire,les comprimés ainsi obtenus peuvent être dragéifiés,enrobés 30 d'un vernis à délitage entérique ou encore enrobés de manière telle que le principe actif se libère graduellement. De même, on obtient une composition de l'invention sous forme de gélule par simple mélange du principe actif en question avec un véhicule pharmaceutique, ce mélange étant par la suite introduit dans des gélules molles ou dures. 35 On peut également procéder au départ du granulé destiné à la préparation d'une composition sous forme de comprimé. En outre, on peut préparer une composition pour administration par voie rectale sous forme de suppositoire en coulant, dans un moule approprié, un -6 mélange formé du principe actif en question et d'un agent liant tel que le Witepsol " S 55 " (Witepsol est une marque appartenant à Dynamit Nobel A -G) ou la lanoline. Pour une administration parentérale, on réalise des solutions aqueuses sté5 riles et injectables contenant le principe actif en question ainsi qu'un adjuvant de solubilisation, si nécessaire, par exemple le polysorbate et un agent de conservation tel que l'alcool benzylique. Les composés selon l'invention peuvent être utilisés également dans des compositions pharmaceutiques ou vétérinaires en association avec d'autres 10 ingrédients actifs selon le résultat thérapeutique recherché. On peut envisager, à titre d'exemple, des compositions contenant outre le principe actif, un agent tranquillisant ou sédatif du système nerveux central tel qu'un dérivé de benzodiazépine comme le diazepam ou un dérivé d'acide barbiturique tel que le pentobarbital. A titre d'exemples non limitatifs, on décrira, par la suite, la préparation des composés selon l'invention ainsi que de compositions les contenant: EXEMPLE 1 Oxalate acide de n-butyl-2 liodo-3 (diéthylamino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne Dans un ballon tricol, on chauffe au reflux 105 g ( 0,25 mole) de n-butyl-2 (iodo-3 hydroxy-4 benzoyl)-3 benzofuranne et 103,5 g de carbonate de potassium dans 1,5 1 de benzène pendant 30 min. On ajoute ensuite 10 ml d'eau puis une solution de 43 g de chlorhydrate de chloro-1 diéthylamino-2 éthane dans 17,5 ml d'eau L'addition terminée, on 25 maintient le reflux pendant 4 h avec élimination d'eau au moyen d'un système Dean-Stark. On refroidit, on décante la phase benzénique et on la lave avec trois fois ml d'eau jusqu'à neutralité. On élimine le benzène sous vide et on reprend le résidu avec un peu d'acétate 30 d'éthyle On forme alors l'oxalate par addition d'une solution d'acide oxalique dans l'isopropanol. On recristallise l'oxalate obtenu dans un mélange isopropanol/acétate d'éthyle pour isoler environ 75 g d'oxalate acide de n-buty I-2 liodo-3 (diéthylamino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne. 35 P F: 101 1 C. -7 EXEMPLE 2 Oxalate acide de n-butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne. a) n-But l: ú 2 bromo-:2 _ éthoxy)-4 benzol-3 benzofuranne. Dans un ballon tricol de 11 muni d'un réfrigérant ascendant et d'un agita5 teur mécanique, on introduit 20,6 g ( 0,07 mole) de n-butyl-2 (hydroxy-4 benzoyl)-3 benzofuranne, 39,2 g de carbonate de potassium anhydre et 200 ml de méthyl éthyl cétone On agite et chauffe ce mélange à ébullition pendant une heure On laisse refroidir partiellement et on ajoute 65,8 g ( 0,35 mole) de dibromo-1,2 éthane On poursuit ensuite le chauffage à ébullition pen10 dant 6 heures. Après refroidissement, on filtre et lave le solide avec de la méthyl éthyl cétone. On chasse le solvant sous vide et on obtient ainsi un résidu huileux épais. On le purifie alors par chromatographie sèche sur colonne de silice en 15 utilisant le chloroforme comme solvant. On obtient ainsi 20,4 g de n-butyl-2 l(bromo-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne sous forme d'une huile de 98 % de pureté. Rendement: 72,6 % Suivant le même procédé, on a préparé les composés suivants: n-Butyl-2 l(bromo-2 éthoxy)-4 iodo-3 benzoyll-3 benzofuranne (huile) Rendement: 92 % n-Butyl-2 l(bromo-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll3 benzofuranne Rendement: 82 % P.F: 86 C b) Oxalate acide de n-butyl-2 i(éthylamino-_ 2 éthoxy)-4 benzoyll-_ 3 benzofuranne. On chauffe à 100 C pendant 20 h, dans une ampoule scellée, 8 g ( 0,02 mole) de n-butyl-2 l(bromo-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne, 75 ml d'éthanol et 10 ml d'une solution d'éthylamine à environ 33 % dans l'éthanol. On distille l'éthanol et l'excès d'éthylamine au rotavapor et on dissout le 30 résidu huileux dans le dichloréthane. On lave ensuite la phase dichloréthane avec une solution d'hydroxyde de sodium à 10 % puis deux fois à l'eau. On sèche avec du sulfate de sodium anhydre, filtre et chasse le solvant sous pression réduite On reprend le résidu huileux à l'éther éthylique sec, 35 filtre et forme l'oxalate par addition d'une solution d'acide oxalique anhydre dans l'éther éthylique. -8 Après deux recristallisations dans l'éthanol absolu, on obtient 5,1 g d'oxalate acide de n-butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne. Rendement: 56 % (pureté: 99,2 %) P.F: 204 C En suivant le même procédé, on a préparé les composés suivants: Oxalate de n-butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 iodo-3 benzoyll-3 benzofuranne Rendement: 18 % P.F: 183 C Oxalate de n-butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 10 Denzofuranne Rendement: 31 % P.F: 195 C Chlorhydrate de n-butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 benzofuranne P F: 175 C. EXEMPLE 3 Oxalate de n-butyl-2 l(amino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne On laisse réagir 0,5 g ( 0,022 at gr) de sodium avec 160 ml de méthanol et on distille ensuite le méthanol sous pression réduite Après sèchage sous 20 haut vide du méthylate de sodium ainsi obtenu, on le dissout dans 100 ml de N,N-diméthylformamide et on ajoute, à cette solution, 6 g ( 0,02 mole) de n-butyl-2 (hydroxy-4 benzoyl)-3 benzofuranne. Après dissolution de ce composé, on ajoute 7,5 g ( 0,032 mole) de chlorure de tritylaminoéthyle, on ajoute et on chauffe à 120 C pendant 5 heures. 25 Après refroidissement, on verse le produit de la-réaction dans 1000 ml d'eau On obtient une émulsion qui, détruite par addition de chlorure de sodium, donne naissance à un précipité gommeux On le dissoutdans 120 ml d'une solution acide acétique/eau 9/1 et on porte cette solution à l'ébullition pendant 1 minute Au cours du refroidissement, Ie triphénylcarbinol 30 cristallise On filtre, lave les cristaux avec de l'acide acétique et on distille, au rotavapor, l'acide acétique/eau du filtrat On dissout le résidu dans le chloroforme -et on lave la solution chloroformique d'abord avec une solution d'hydroxyde de sodium à 10 % ensuite deux fois avec de l'eau On sèche sur sulfate de sodium anhydre, filtre et chasse le chloro35 forme au rotavapor On dissout le résidu dans l'éther éthylique sec, on filtre et on forme l'oxalate par addition d'une solution d'acide oxalique -9 anhydre dans l'éther éthylique On obtient ainsi 3,1 g d'oxalate brut. Après recristallisation dans l'éthanol, on obtient 2,3 g d'oxalate de nbutyl-2 l(amino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne Rendement: 26,9 % P F: 128 C En suivant le même procédé, on a préparé les composés suivants: Oxalate de n-butyl-2 l(amino-2 éthoxy)-4 iodo-3 benzoyll-3 benzofuranne Rendement: 21,7 % P.F: 146 C. Oxalate de n-butyl-2 l(amino-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 benzofuranne Rendement: 20,6 % P.F: 218 C. EXEMPLE 4 n-Butyl-2 l(hydroxy-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 benzofuranne. Dans un ballon muni d'un agitateur et d'un réfrigérant, on fait réagir, sous agitation un mélange de 10 g ( 0,018 mole) de n-butyl-2 (hydroxy-4 diiodo3,5 benzoyl)-3 benzofuranne, 5,05 g de carbonate de potassium, 11,5 g de bromo-1 hydroxy-2 éthane et 100 ml de N,N-diméthylformamide, la réaction ayant lieu d'abord à 20 C durant 24 h, ensuite à 80 C durant 48 h. On refroidit et on coule sur eau glacée On extrait à l'éther éthylique, on lave à l'eau, on sèche sur sulfate de sodium anhydre et on filtre à sec sous vide On purifie par chromatographie liquide en utilisant un mélange dichlorométhane/acétate d'éthyle 90/10 et on chasse les solvants sans chauffer exagérément, ce qui provoque la cristallisation du n-butyl2 25 l(hydroxy-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 benzofuranne. P.F: 69-72 C En suivant le même procédé, on a préparé le n-butyl-2 l(hydroxy-2 éthoxy)4 benzoyll-3 benzofuranne lequel se présente sous forme d'une huile visqueuse. EXEMPLE 5 Compositions administrables par voie orale I Co Lnpri Ln a) On a préparé des comprimés à croquer ayant la composition ci-dessous: Composé selon l'invention 100 mg Mannitol 141,5 mg Amidon de mais 30 mg Polyvinylpyrrolidone 12 mg Saccharine sodique 0,5 mg Cyclamate sadique 5 mg Acide alginique 8 mg Stéarate de magnésium 3 mg et ce de la manière suivante: On mélange 200 g de composé selon l'invention avec 283 g de mannitol, 40 g d'amidon de mais et 10 g de cyclamate sodique puis on tamise les poudres On dissout 24 g de polyvinylpyrrolidone et lg de saccharine sodique dans 120 ml d'eau distillée, on malaxe les poudres avec la solution de polyvinylpyrrolidone et on granule On sèche le granulé pendant 8 heures à 40-50 C puis on le calibre Au granulé calibré, on ajoute 20 g d'amidon de mais, 16 g d'acide alginique et 6 g de stéarate de magnésium On comprime alors au poids unitaire de 300 mg. b) D'une manière semblable, on a également préparé des comprimés ayant la composition suivante: Composé selon l'invention 200 mg Lactose 96 mg Amidon de mais 60 mg Polyvinylpyrrolidone 12 mg Silice colloidale 2,4 mg Stéarate de magnésium 4,6 mg 375 mg c) On a préparé des comprimés dragéifiés au départ de comprimés de composi25 tion suivante: Composé selon l'invention 150 mg Lactose 100 mg Amidon de mais 54 mg Polyvinylpyrrolidone 10 mg Stéarate de magnésium 4 mg Silice colloidale 2 mg en les recouvrant de polivinylpyrrolidonelde polyéthylèneglycol 400 et de talc, puis en leur appliquant un vernis formé de méthylcellulose, éthylcellulose, diéthylphtalate, dioxyde de titane et hydroxypropylméthylcellulose. 11 - II Gélule On a prélevé du granulé obtenu au paragraphe Ib ci-dessus et on l'a introduit dans des gélules molles pour obtenir une composition unitaire identique à celle des comprimés du paragraphe Ib en question. EXEMPLE 6 Composition administrable par voie rectale On a préparé des suppositoires en coulant, dans des moules en chlorure de polyvinyle, le mélange ayant la composition suivante: Composé selon l'invention 10 Witepsol "S 55 " Lanoline anhydre mg 1030 mg 90 mg 1320 mg EXEMPLE 7 Composition administrable par voie parentérale Une composition aqueuse stérile injectable a été préparée, répondant à la formulation suivante: Composé selon l'invention mg Polysorbate 80 300 mg Alcool benzylique 60,6 i Eau pour préparations injectables q s pour 3 ml laquelle a été introduite dans une ampoule adéquate avec l'azote comme gaz protecteur. mg REVENDICATIONS 1 Composition pharmaceutique ou vétérinaire destinée à combattre des troubles ischémiques cardiaques caractérisée en ce qu'elle contient comme principe actif essentiel, au moins un dérivé de benzofuranne de formule générale: X Ox "i I C -O (CH 2)2-R CH 2-(CH 2)2-CH 3 X 2 ou un de ses sels d'addition non toxique, dans laquelle R représente un 10 radical hydroxy, amino, monoéthylamino ou diéthylamino et X 1 et X 2, qui sont identiques ou différents, représentent hydrogène ou iode à condition que lorsque R représente un radical diéthylamino, X 1 et X 2 sont différents, en association avec un véhicule pharmaceutique ou un excipient approprié. 2 Composition selon la Revendication 1 caractérisée en ce que le sel d'ad15 dition non toxique est le chlorhydrate ou l'oxalate acide. 3 Composition selon la Revendication 1 caractérisée en ce qu'elle contient le n-butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 benzoyll-3 benzofuranne ou un de ses sels d'addition non toxiques. 4 Composition selon la Revendication 1 caractérisée en ce qu'elle contient 20 le n-butyl-2 l(éthylamino-2 éthoxy)-4 diiodo-3,5 benzoyll-3 benzofuranne ou un de ses sels d'addition non toxiques. Composition selon l'une des Revendications 1 à 4 caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme d'unité d'administration pour l'administration orale. 6 Composition selon l'une des Revendications 1 à 4 caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme d'unité d'administration pour l'administration rectale. 7 Composition selon l'une des Revendications 1 à 4 caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme d'unité d'administration pour l'administration 30 parentérale. 8 Composition selon l'une des Revendications 1 à 7 'caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme d'unité d'administration contenant de 50 à 300 mg de dérivé de benzofuranne ou de ses sels d'addition non toxiques.