Brevet FR2540992A1 — publié le 19840817

: 2 54 0992 L'invention concerne un dispositif de vérification de la stérilité de fluides, en particulier dantibiotiques et d'autres fluides critiques, comprenant au moins un récipient de vérification fermé hermétiquement en matière plastique de préférence transparente, qui peut être raccordé, de façon stérile, par l'intermédiaire de liaisons flexibles et d'une canule, à un récipient d'échantillons et/ou a d'autres réci- pients de liquides, chaque récipient de vérification étant constitué par une partie supérieure en une seule pièce en for- me de godet ayant un raccord d'entrée, une entrée d'air et un filtre à air qui y est intégré, dans sa zone supérieure, ainsi que par une partie inférieure d'une seule pièce ayant un élément de drainage, un support mécanique destiné à un fil- tre de vérification microporeux et un raccord de sortie, et les deux parties de récipient étant alors soudées l'une à l'au- tre, par leurs bords, de façon étanche à la pression et au vide, le filtre de vérification étant scellé de façon inamo- vible et étanche entre le bord inférieur de forme générale- ment cylindrique de la partie supérieure et-le bord supérieur de forme généralement cylindrique de la partie inférieure du récipient. Dans le domaine médical et dans d'autres domaines tech- niques, il existe souvent une contrainte essentielle à respec- ter, à savoir que les objets usuels mis en oeuvre et les flui- des utilisés doivent être rigoureusement stériles, Ceci s'ap- plique tout particulièrement par exemple pour des solutions destinées à des perfusions qui sont injectées directement aux patients par voie parentérale, ainsi que pour les instru- ments de travail utilisés lors de leur mise en oeuvre Etant donné l'importance primordiale de la stérilité des instru- ments de travail et des fluides dans la pratique, on doit réaliser régulièrement des vérifications de stérilité au cours desquelles des prescriptions légales sévères doivent être sui- vies (Recommandations spécifiées dans les pharmacopées pro- pres à chaque pays) Lors de-la vérification de stérilité des * antibiotiques, on a rencontré jusqu'ici de façon courante des difficultés particulières provoquées par les propriétés spécifiques de ces produits pharmaceutiques et qui n'ont pu être surmontées que par des soins particulièrement élaborés lors de la réalisation de l'essai ainsi que par un nombre plus élevé correspondant de vérifications individuelles. Selon une méthode de recherche très répandue dans le passé, le liquide à vérifier au point de vue stérilité était filtré dans des récipients de vérification en plusieurs par- ties faits de matière plastique transparente (voir le docu- ment imprimé MRP-4 Millipore "Contrôle de Stérilité") Les récipients de vérification sont constitués par une partie supérieure cylindrique ayant un couvercle démontable dans la paroi frontale duquel plusieurs raccords pour flexibles et pour une cartouche de filtre à air sont disposés La partie inférieure du récipient en matière plastique présente un sup- port de filtre plat nervuré destiné à supporter une membrane microporeuse et, sur sa périphérie externe, un filet pour y visser l'extrémité inférieure rentrante de la partie supé- rieure Par ce vissage de la partie supérieure, la membrane microporeuse est serrée de manière fixe entre le support et un épaulement annulaire de la partie supérieure présentant un joint torique en caoutchouc Le fluide dont on veut vérifier la stérilité est versé manuellement dans des conditions sté- riles, le couvercle étant enlevé, dans la partie supérieure du récipient et s'écoule à travers la membrane microporeuse après application d'une dépression Après filtration, la par- tie supérieure est dévissée également dans des conditions stériles, la partie centrale du filtre à membrane est décou- pée et introduite dans un flacon contenant un milieu de cul- ture pour les bactéries, la couronne extérieure du filtre étant elle, introduite dans un flacon contenant un milieu de culture pour les levures et moisissures o elles incubent à des températures prédéterminées Cette procédure est nécessai- re en raison de la difficulté rencontrée pour obtenir un rin- çage efficace de la partie extérieure du filtre qui a tendance à retenir des produits tels que les antibiotiques qui inhi- beraient la croissance des bactéries. Cette méthode de vérification revient relativement Cher- car elle présuppose, des conditions denvîrôffnement toujours stériles dans ses différentes étapes et elle demande diffé- rentes interventions de l'extérieur comme par exemple le vis- sage des différentes parties du récipient, l'enlèvement de la membrane filtrante, son découpage et son transfert dans les récipients d'incubation, ainsi qu'un personnel particulière- ment expérimenté De plus, le récipient de vérification com- porte, entre ses différentes parties individuelles, des joints par lesquels l'air environnant peut pénétrer à l'intérieur du récipient et provoquer des contaminations secondaires En ou- tre, pour la vérification particulièrement critique des anti- biotiques, les membranes filtrantes comportent un bord qu'on a rendu hydrophobe dans le but d'éviter dans toute la mesure du possible la rétention de restes du liquide antibiotique à vérifier sur le bord le plus externe du filtre d'o ils se- raient difficiles à éliminer par rinçage. Récemment, s'est imposé parmi les utilisateurs un dis- positif pour 'la vérification de la stérilité du type mention- né ci-dessus (voir le brevet français N O 2 290 496 de Milli- pore Corporation déposé le 5 Novembre 1975) dans lequel deux ou trois récipients d'essais fermés hermétiquement et en ma- tière plastique transparente sont reliés de façon stérile à une canule par des liaisons flexibles soudées et par l'iiermê- diaire d'un diviseur de courant Chaque récipient de vérifi- cation est constitué par une partie supérieure en une seule pièce en forme de godet dans la paroi frontale de laquelle sont disposés un raccord d'entrée relié de façon fixe au fle- xible ainsi qu'une entrée d'air contenant un filtre à air in- tégré inamovible La partie supérieure du récipient comporte sur le bord inférieur de sa paroi de forme généralement cylin- drique, une bride annulaire par laquelle elle est soudée de façon durable et étanche aux gaz et aux liquides à la bride annulaire du bord supérieur de la partie inférieure du réci- pient Cette dernière est également réalisée en une seule pièce à partir d'une matière plastique et est constituée es- sentiellement d'un entonnoir collecteur conique qui, sur son côté supérieur, présente une pluralité de nervures radiales angulairement décalées servant de support plat à la membrane filtrante et qui débouchent dans un raccord de sortie central. L'avantage essentiel de ce dispositif connu de vérification par rapport à des réalisations plus anciennes réside dans le système fermé en soi de façon étanche à la pression et au vide et ainsi de prime abord stérile, constitué par plu- sieurs de ces récipients de vérification fermés hermétique- ment, et reliés par des liaisons flexibles soudées aux dif- férents récipients et par un diviseur de courant à une canule. Comme l'air ne peut parvenir à l'intérieur des récipients - respectifs que par le filtre à air microporeux soudé dans la paroi frontale, on exclut ainsi, lors de vérifications de stérilité, pratiquement toutes les erreurs de résultats pro- venant de contaminations secondaires De plus, avec ce dis- positif, on a pour la première fois la possibilité d'effec- tuer une filtration sous pression au cours de laquelle les li- quides sont filtrés non par application d'un vide sur le rac- cord central de décharge, mais par l'introduction des liqui- des avec une surpression dans les récipients En plus de la garantie-d'une stérilité pratiquement absolue du déroulement des essais, on obtient par la filtration sous pression qui devient possible pour la première fois une accélération im- portante du processus de vérification Après la filtration qui a lieu en même temps dans plusieurs récipients de vérifi- cation avec une quantité prédéterminée d'un échantillon li- quide à vérifier, tous les récipients sont débarrassés des dépôts et des restes du liquide dont on veut vérifier la sté- rilité par l'introduction simultanée d'un liquide de rinçage stérile Après l'étape de rinçage, les récipients individuels sont remplis de différents milieux de culture, ce qui a lieu de façon simple du fait que la canule est plongée dans l'ob- turateur-septum d'un récipient contenant un milieu de culture et que les liaisons flexibles menant du diviseur de courant aux récipients individuels peuvent être bloquées par des ar- rêts de flexibles habituels, pour que le milieu ne puisse s'écouler que dans le récipient de vérification prévu à cet effet Les récipients de vérification remplis de différents milieux de culture incubent ensuite pendant une période don- née à des températures prédéterminées, le raccord central de sortie étant alors fermé hermétiquement par un capuchon et une partie du flexible d'entrée préalablement obturé étant découpée, puis disposée sur le raccord d'entrée d'air, ce qui donne également une fermeture hermétique. On obtient avec ce dispositif de vérification connu de la stérilité des fluides des résultats excellents sur de nom- breux milieux à vérifier et la réalisation à effectuer expé- rimentalement pour cette vérification est très simple et ra- pide Cependant, comme précédemment, la vérification de li- quides contenant des substances antibiotiques est problèma- tique En effet, les membranes filtrantes sont coincées en- tre la partie supérieure et la partie inférieure du récipient par leur bord le plus externe à l'aide d'une soudure reliant les deux parties du récipient et qui est réalisée soit à l'ex- térieur dudit bord de la membrane soit à travers ce dernier, de ce fait, le bord de la membrane se trouve endommagé et de plus de faibles quantités d'antibiotiques se fixent dans la zone de liaison du bord de la membrane avec les deux parties du récipient et ne peuvent plus être enlevées même par des rin- çages répétés Pendant l'incubation qui s'étend sur des pério- des assez longues, ces restes infimes de substances antibio- tiques peuvent migrer par exemple par diffusion dans la par- tie centrale de la membrane du filtre et inhiber la crois- sance des bactéries éventuellement présentes, ce qui provoque des erreurs dans les résultats d'essais Pour tenter de résoudre ces problèmes, essentiels en pratique, on utilise, lors de la vé- rification des antibiotiques et des substances aussi criti- ques, des dispositifs dans lesquels les membranes filtrantes ont un bord relativement large hydrophobe et une zone cen- trale hydrophile La fabrication de telles membranes fil- trantes en forme de disque est cependant longue et dispen- dieuse, car leur bord ne peut être rendu hydrophobe que par des processus prolongés de diffusion Comme en outre la zone marginale hydrophobe est pratiquement imperméable aux liqui- des et ainsi ne participe pas au processus de filtration, les rendements de filtration diminuent même si on effectue une filtration sous pression. Par ailleurs, il existe également un autre inconvénient dû à la présence d'un bord de membrane hydrophobe car de l'oxy- gène peut diffuser dans le récipient à partir du côté o s'effectue la décharge et parvenir ainsi dans le milieu de culture qui se trouve audessus de la membrane filtrante, ce qui, lors des essais concernant la présence de bactéries dé- terminées, peut provoquer une altération des résultats obte- nus Lors de la vérification de la stérilité d'antibiotiques et de produits analogues, il est en outre tout à fait indis- pensable que la membrane filtrante repose complètement à plat et sans ondulation sur les nervures du support de fil- tration Les ondulations favorisent en effet des rétentions de liquide difficiles à éliminer par rinçages La fixation de la membrane filtrante prédécoupée entre les deux parties du récipient par un scellement ou un soudage directs provoque par poussée de la matière plastique fondue sur la périphérie de la membrane filtrante des tensions radiales internes qui déforment la membrane filtrante et créent ainsi des ondulations né- fastes dans la membrane, avant coincement des bords de cette membrane entre les parties inférieure et supérieure du récipient En pratique, ces déformations sont évitées en donnant aux membranes de filtra- tion une rigidité propre suffisante, qui est obtenue en incor- porant des fibres indéformables dans les matières constituant le filtre Bien que la littérature indique d'utiliser des mem- branes d'esters de cellulose inertes biologiquement d'épais- seur de 150 > comme étant avantageuses du point de vue de la technique de filtration, on ne peut pas en pratique uti- liser de telles membranes de filtration sans y incorporer des fibres à cause de leur trop faible rigidité. Comme on peut le voir, les problèmes énoncés ci-dessus, qui existent en particulier lors de la filtration de liquides contenant des substances antibiotiques ou des substances aussi critiques, dépendent du type de fixation et de liaison de la membrane filtrante avec les deux parties de récipient. Un des objets de la présente invention est de produire un dispositif pour la vérification de la stérilité de fluides, en particulier d'antibiotiques et de liquides aussi critiques, qui permette, avec une structure simplifiée et des performan- ces de débit ou de filtration plus élevées, d'éviter les in- convénients mentionnés ci-dessus et dans lequel les causes d'erreurs lors du déroulement des essais de vérification de la stérilité sont considérablement réduites. Selon la présente invention, le bord externe de la mem- brane filtrante microporeuse en forme de disque en matière polymérique inerte biologiquement est scellé de façon étanche à la pression et au vide d'une part par sa surface supérieure à la partie supérieure du récipient à l'aide d'une première liaison de soudage et d'autre part par sa surface inférieure à la partie inférieure du récipient à l'aide d'une seconde liaison de soudage, sans que la matière de la membrane elle- même soit détruite dans la zone o se trouvent les deux liai- sons de soudage et sans que la matière plastique du réci- pient, qui a fondu, traverse la membrane dans la zone o se trouvent les deux liaisons de soudage On doit s'assurer alors qu'entre chaque surface de la membrane et la partie du récipient en matière plastique qui lui est associée, il ne se forme ni joints ni intervalles et que de la matière plas- tique fluide fondue n'avance pas lors du processus de sou- dage au-delà de la paroi interne de l'une ou l'autre partie du récipient jusqu'à l'intérieur du récipient, afin d'éviter de façon st Cre que de petites quantités d'antibiotiques ne se déposent ou ne s'incrustent dans ces régions particulièrement critiques. Le dispositif de vérification de la stérilité des flui- des selon la présente invention se distingue des dispositifs antérieurement connus par le fait que le filtre en forme de disque est constitué par une membrane filtrante entièrement hydrophile, dans laquelle chacune des surfaces inférieure et supérieure de son bord externe est scellée de manière étanche à la pression et au vide à la partie du récipient qui lui est associée par une liaison de soudage qui se raccorde à l'a- plomb de la paroi interne de ladite partie du récipient qui lui est associée. Un scellement de la membrane filtrante réalisé de cette façon avec les deux parties du récipient qui sont soudées di- rectement l'une à l'autre radialement à l'extérieur de la membrane filtrante au voisinage de leurs brides annulaires permet l'utilisation de membranes filtrantes totalement hy- drophiles sans la zone marginale hydrophobe nécessaire jus- qu'ici, ce qui se traduit par la simplification structurelle recherchée du dispositif selon-l'invention Comme dorénavant la totalité de la membrane filtrante participe au processus de filtration, les-performances de débit ou de filtration dans les mêmes conditions d'essai augmentent d'environ 40 % par rapport aux dispositifs de même type ayant les mêmes dimensions de récipient Ce gain en temps de filtration a pour conséquence de diminuer les risques d'adsorption des an- tibiotiques dans la membrane filtrante puisqu'il est bien connu que, plus le temps de filtration des antibiotiques est important, plus le phénomène d'adsorption de ces derniers dans la membrane augmente Les étapes de traitement néces- saires à la fabrication de la sone marginale jusqu'ici obli- gatoirement hydrophobe sont supprimées et les membranes fil- trantes en forme de disque peuvent être découpées automati- quement à partir d'une matière en bande, ce qui permet une simplification considérable du procédé de fabrication des récipients selon l'invention Comme les liaisons respectives de soudage se limitent seulement aux surfaces du bord de la membrane filtrante, et que la matière plastique fluide fon- due des parties du récipient ne pénètre pratiquement pas dans les pores de la membrane, les sollicitations exercées sur la matière du filtre, lors des étapes de soudage ou de scelle- ment, sont plus faibles, ce qui permet d'éviter les déforma- tions ondulatoires, qui survenaient fréquemment jusqu'ici, dans la membrane filtrante scellée Ceci permet l'emploi, pratiquement impossible jusqu'ici, de membranes filtrantes plus fines, difficiles à manipuler sous forme de disques prédécoupés, et qui n'ont plus besoin d'être rigidifiées, notarnent par des fibres, ce qui a pour conséquence un écoulement amélioré des liquides et une adsorption plus faible des liquides dans le filtre proprement dit,puisqu'il est bien connu que, plus la membrane filtrante est mince, plus le phé- nomène d'adsorption est réduit. Dans une mise en oeuvre du procédé faisant également l'objet de la présente invention, et qui est spécialement ap- propriée à la fabrication de récipients étanches, l'une des surfaces inférieure ou supérieure du bord de la membrane est scellée à l'une des parties du récipient par une première liaison de soudage réalisée de préférence par un effet direct de chaleur et de pression sans que surviennent de phénomènes appréciables d'écoulement de la matière du récipient L'au- tre surface du bord de la membrane est alors scellée à l'au- tre partie du récipient par une deuxième liaison de soudage réalisée par un flux fondu de la matière du récipient s'écou- lant à partir d'une zone située à l'extérieur de la membrane et qui se propage dans l'intervalle se trouvant entre la surface de la membrane et la face de la partie du récipient à souder, alors que la membrane est déjà fixée par sa pre- mière liaison de soudage Ainsi la liaison de soudage de la première surface du bord de la membrane avec la partie du récipient qui lui est associée ressemble plutôt à une liaison par collage, dans laquelle le bord de la membrane filtrante est imprimé dans la matière plastique rendue fluide par fusion, alors que la liaison de soudage de la deuxième surface du bord de la membrane avec la partie du récipient qui'lui est associée est plutôt une liaison de soudage dans laquelle de la matière du récipient a été amenée de l'exté- rieur dans l'intervalle de liaison. Un avantage de cette technique de scellement de la mem- brane sur les deux parties du récipient selon l'invention et qui est d'autant plus important que la membrane est plus fine ou non renforcée, est de pouvoir tendre une bande de matière de la membrane avant la première liaison par soudage ce qui permet à la membrane non seulement d'être découpée à l'état tendu après cette première liaison par soudage, mais en outre, lors de la seconde liaison par soudage, de résister à la poussée de la matière plastique fondue sur la périphé- rie de la membrane. Pour obtenir cette liaison par écoulement depuis l'ex- térieur, il est approprié de former,sur le bord de liaison de l'une des parties de récipient, se présentant éventuellement sous forme d'une bride annulaire, un bourrelet annulaire cu- néiforme situé radialement à l'extérieur de la membrane fil- trante en forme de disque, ce bourrelet fournissant la matière en fusion qui va se propager dans l'intervalle pour effectuer la deuxième liaison de soudage Selon la présente invention, la disposition, la réalisation et l'importance de ce bourre- let annulaire sont choisies de telle manière que la quantité de matière plastique s'écoulant dans l'intervalle soit suf- fisante d'une part pour garantir une liaison effective de soudage sur tout le bord de la membrane filtrante jusqu'à la paroi interne de la partie du récipient, et d'autre part pour assurer aussi par fusion de matière une soudure sûre et étanche à la pression et au vide à l'extérieur de la membrane filtrante entre les deux parties du récipient. Pour étayer mécaniquement de façon sûre les membranes filtrantes plus fines complètement hydrophiles et en même temps éviter les contaminations provenant du côté inférieur du filtre soumis à l'atmosphère environnante, selon une forme de réalisation particulièrement intéressante de la présente invention, le drainage de la partie inférieure du récipient est assuré par un canal annulaire situé directement à l'a- plomb de la paroi interne du récipient, d'o part une plura- lité de canaux radiaux, courts et étroits, limités par des nervures porteuses et qui débouchent dans un canal cannu- laire, ces deux canaux annulaires étant reliés par des canaux radiaux de drainage au raccord central de sortie Grace à cette forme de réalisation, on est sûr que le liquide s'écou- lant sur les parois internes du récipient et traversant la zone périphérique de la membrane filtrante est drainé direc- tement et sur un trajet le plus court possible en direction du raccord central de sortie et qu'il ne peut pas stagner dans cette zone critique Ceci est particulièrement important lors de l'emploi de la filtration sous pression, car l'es- pace interne situé dans la partie supérieure de récipient se trouve en surpression, alors que dans le système de drainage en-dessous de la membrane filtrante, règne la pression atmos- phérique, ce qui ne facilite pas l'évacuation des liquides vers le raccord central de sortie. Dans un procédé pour fabriquer des récipients pour les dispositifs d'essai selon la présente invention, les deux parties du récipient sont fabriquées séparément par la tech- nique du moulage par injection, le filtre à air y compris son support mécanique bilatéral est soudé dans la partie su- périeure du récipient et la membrane filtrante est scellée entre les deux parties de récipient sur leurs bords A cet effet, selon la présente invention, la membrane filtrante est placée sur le bord d'une partie du récipient et la sur- face du bord de la membrane située en regard de cette partie du récipient est soudée à cette partie du récipient en ame- nant de la chaleur à travers la membrane et en appliquant une pression prédéterminée Dans une étape de travail supplémen- taire, le bord de l'autre partie de récipient est soudé à l'autre surface du bord de la membrane en produisant un flux de matière plastique fondue qui se dirige radialement vers l'intérieur ainsi que simultanément vers la première partie de récipient Pour souder la deuxième partie du récipient à la surface du bord de la membrane, et à la première partie du récipient, on peut chauffer jusqu'à la fusion un bourre- * let annulaire formé sur l'une des parties du récipient de telle manière que lors de l'assemblage des deux parties du récipient, le flux de matière fondue obtenue pénètre dans l'intervalle se trouvant entre la surface de la membrane fil- trante et la partie du récipient et le remplisse complètement. La fabrication des récipients est spécialement appro- priée lorsque les étape 5 individuelles sont automatisées et que la matière du filtre est déroulée cycliquement sous la forme d'une bande et transportée au-dessus des premières parties de récipient préfabriquées et placées de façon appro- priée On peut découper à partir de cette bande les membranes filtrantes sous-forme de disques de filtration circulaires soit avant soit de préférence après la réalisation de la pre- mière liaison par soudage pour assurer la fixation de la membrane filtrante sous tension, et ensuite la deuxième liai- son par soudage a lieu par fusion du bourrelet annulaire et production d'un flux radial de matière plastique fondue. On décrit ci-après en détail un exemple de réalisation selon la présente invention à l'aide des dessins ci-joints sur lesquels: la figure 1 montre un dispositif de vérification de stérilité selon la présente invention, ayant deux récipients d'essais représentés en coupe axiale; les figures 2 a et 2 b d'une part et 3 d'autre part montrent en vuesagrandies deux étapes successives de la 12 2540992 fabrication d'un récipient avec le soudage des deux parties du récipient entre elles la figure 4 est une vue de dessus de la partie infé- rieure de récipient avec le support de la membrane, avant l'assemblage des deux parties de récipient les figures 5 a à 5 c sont des coupes axiales de la par- tie inférieure de récipient effectuées selon les lignes de coupe A, B ou C de la figure 4. Le dispositif représenté à la figure l pour réaliser des vérifications de stérilité est constitué par deux réci- pients d'essais 1, 2 fermés hermétiquement, en matière plas- tique, de préférence transparente, qui sont raccordés res- pectivement à un diviseur de courant 5 par l'intermédiaire de flexibles 3, 4 Le diviseur de courant 5 est relié par l'intermédiaire d'un flexible commun 6 à une canule 7 qui peut être enfoncée à travers un couvercle 8 à l'intérieur d'un ré- servoir 9 rempli de liquide d'essai Comme le montre la figu- re 1, le couvercle 8 est également perforé par une seconde canule reliée par un flexible à un filtre à air 9 ', pour com- penser la diminution de volume du liquide dans le réservoir 9 Le liquide est transporté au moyen d'une pompe tubulaire par l'intermédiaire des flexibles et du diviseur dans les deux récipients d'essai 1, 2 simultanément sous une pression appropriée au produit à filtrer Pour pouvoir remplir sépa- rément les deux récipients d'essai 1, 2 de liquides diffé- rents, on peut réaliser le diviseur de courant 5 sous la forme d'un robinet à plusieurs voies ou bien les flexibles 3, 4 peuvent être bloqués sélectivement par les pinces ha- bituelles. Chaque récipient 1, 2 est constitué par une partie su- périeure en une seule pièce 11 et par une partie inférieure 12 également en une seule pièce qui sont soudées l'une à l'autre de façon fixe et étanche'à la pression et au vide. La partie supérieure il est réalisée sous la forme d'un godet et comporte dans sa paroi frontale supérieure 13 un raccord d'entrée 14 rapporté ainsi qu'une entrée d'air 15 qui est fermée hermétiquement dans la condition représentée par un capuchon en caoutchouc 26 L'entrée d'air 15 forme un canal dans le couvercle en matière plastique 16 d'un fil- tre à air 17 dont la membrane filtrante microporeuse 18 est Supporté d'un côté sur la surface supérieure 19 de la paroi frontale, par des nervures délimitées par des canaux débouchant dans la chambre inté- rieure de la partie supérieure 11 du récipient et de l'autre côté par la partie inférieure nervurée du couvercle de filtre 16 Ce dernier est soudé de façon étanche au gaz et aux liquides sur sa périphérie à la paroi fron- tale du récipient 13 de telle manière que lorsqu'on enlève le capuchon en caoutchouc, l'air ne peut passer que par la membrane filtrante microporeu Se 18 pour entrer ou sortir par rapport à l'intérieur du réci- pient A l'extrémité inférieure de la paroi légèrement coni- que 20 de la partie supérieure il se trouve un bord de forme généralement circulaire qui se présente de préférence sous forme d'une bride annulaire 21 La partie supérieure du réci- pient est fabriquée avec une matière plastique qui est de préférence transparente, pour permettre l'observation des co- lorations ou des opacités des liquides qui s'y trouvent inclus. La partie inférieure 12 en une seule pièce du récipient en matière plastique comporte un bord périphérique cylindri- que 22, un élément de drainage sous la forme d'une paroi d'en- tonnoir 23 ayant des nervures 24 ainsi qu'un raccord de sortie central 25 qui, dans la condition de fonctionnement représen- tée, est recouvert d'un capuchon en plastique 46 Pendant la filtration, les capuchons en plastique 46 sont bien entendu enlevés des raccords de sortie centraux 25 des deux récipients 1, 2 La partie inférieure 12 du récipient comporte à son ex- trémité supérieure un bord de forme généralement circulaire qui se présente de préférence sous forme d'une bride annu- laire 27 destinée à être reliée de façon durable par soudage à la bride annulaire 21 de la partie supérieure 11 du réci- pient Sur les nervures porteuses 24 de la partie inférieure 12 du récipient repose à plat une membrane filtrante 30 qui a une épaisseur de paroi d'environ 135 jum 10 % ou une épais- seur inférieure et qui est constituée par une matière entiè- rement hydrophile à base de polymère inerte biologiquement. La dimension des pores de cette membrane filtrante micropo- reuse est de 0,45 + 0,02 pm ou de dimension inférieure. Le scellement de la membrane 30 dans le récipient 1 ou 2 qui constitue une des caractéristiques essentielles de la présente invention est décrit ci-après en se référant aux figures 2 a, 2 b et 3. Selon la figure 2 a, une bande 30 ' de matière filtrante se présente automatiquement sous une certaine tension préala- ble, par déroulement d'un rouleau non représenté, au-dessus de parties inférieures de récipient fixées dans des positions prédéterminées, ce qui permet d'assurer une orientation par- faitement plane de la bande Un outil de soudage 31 cylin- drique creux dont la face inférieure de travail 32 est ame- née au moyen de dispositifs non représentés à une température très exactement déterminée, est avancé en direction de la flèche 32 ' La face de travail 32 en forme de couronne de l'outil 31 est calculée pour qu'elle corresponde exactement à la largeur du bord 33 d'une membrane filtrante à fixer par soudage L'outil chauffé 31 pousse par sa face de travail 32 en forme de couronne annulaire sur la bande 30 ' de matière filtrante et'la chaleur qui passe à travers la section annu- laire de la bande, chauffe la matière plastique de la partie du récipient qui se trouve en dessous de cette section annu- laire de la bande En maintenant simultanément la bande ap- pliquée-sur cette zone chauffée, on obtient une première liai- son de soudage 34 solide entre une portion annulaire de la bande et la matière plastique de la partie 12 du récipient qui est représentée à la figure 2 b en dessous du bord 33. Après établissement de cette liaison de collage ou de souda- ge 34, un couteau annulaire 34 ' disposé de façon à pouvoir se mouvoir verticalement, et à l'extérieur de l'outil de soudage 31 cylindrique creux est déplacé vers le bas et découpe dans la bande de matière filtrante 30 ' directement en dehors de la liaison par soudage 34 une membrane filtrante 30 en forme de disque Cette technique garantit que la membrane fil- trante 30 d'une part repose avec précision sur les nervures de support 24 pendant le processus de soudage et d'autre part ne dérape pas pendant le processus de découpe subséquent. Après les étapes de travail décrites ci-dessus, la par- tie inférieure 12 du récipient avec la membrane filtrante 30 qui se trouve soudée sur son bord supérieur, est amenée dans la position représentée sur la figure 2 b o on va pouvoir effectuer la soudure avec la partie supérieure du récipient. Comme on peut le voir sur cette figure 2 b, on a formé sur le bord inférieur de la partie supérieure du récipient un bour- relet annulaire 35 cunéiforme dont les dimensions et la dis- position sont d'une importance particulière pour la fabri- cation de la deuxième liaison de soudage 37 seloh la pré- sente invention Comme le montre la figure 2 b, la pointe de ce bourrelet annulaire cunéiforme se trouve légèrement à l'extérieur de l'arête périphérique du bord 33 de la-membrane filtrante Lorsque la partie supérieure Il est mise au con tact de la partie inférieure 12 du récipient, ce bourrelet annulaire 35 est chauffé de manière appropriée, par exemple par ultrasons, à la température de fusion della matière plas- tique du récipient La pointe chauffée du bourrelet annulaire fond au contact de la matière plastique de la partie in- férieure du récipient, précisément directement à côté de l'arête périphérique du bord 33 Lors de la progression du déplacement de la partie supérieure Il vers la partie infé- rieure 12 du récipient, une fraction de la matière plastique du bourrelet annulaire 35 commence à s'écouler radialement vers l'intérieur et, en amenant constamment de l'énergie thermique, une autre fraction de matière plastique du bour- relet annulaire s'écoule radialement vers l'extérieur; on obtient ainsi simultanément une liaison de soudage 37 entre la surface supérieure du bord 33 de la membrane et la partie supérieure 12 du récipient et une liaison de soudage étanche à la pression et au vide entre les deux parties 11 et 12 du récipient La disposition du bourrelet annulaire 35 sur le bord inférieur de la partie supérieure du récipient est telle que lors de la réunion des deux parties 11 et 12 du récipient, la pointe du bourrelet annulaire rencontre radialement à l'extérieur de la membrane filtrante la surface de la bride annulaire 27 de la partie infé- rieure 12 du récipient, ce qui permet d'éviter des pressions mécaniques excessives sur le bord 33 de la membrane fil- trante 30 L'importance et la forme en section transversale du bourrelet annulaire 35 sont choisies selon la présente invention d'une façon propre à assurer un écoulement suffi- sant de matière fondue précisément jusqu'à l'aplomb de la paroi interne 36 du récipient d'une part et à garantir d'au- tre part une fusion des matières plastiques des deux parties du récipient 11 et 12 radialement à l'extérieur du bord 33 de la membrane filtrante 30 pour obtenir une liaison de sou- dage très stable et étanche aux gaz et aux liquides Cette condition est représentée à la figure 3 Il est essentiel lors de la fabrication décrite de la manière ci-dessus que le bord 33 de la membrane filtrante 30 ne soit pas imprégné de la matière plastique du récipient, mais que les pores très fins de la membrane filtrante qui s'étendent-de préfé- rence transversalement, ne soient fermés par une liaison de soudage 34 ou 37 que sur leurs extrémités d'ouverture par cette matière plastique De cette façon, on évite des pressions mécaniques assez élevées sur la matière particulièrement fra- gile de la membrane filtrante et qui peuvent provoquer de fines fissures dans cette dernière Les dimensions et la dis- position du bourrelet annulaire 35 sont telles qu'une partie de la matière fondue en provenance du bourrelet s'écoule jus- qu'à l'aplomb de la paroi interne 36 en formant une liaison par soudage 37 entre la surface supérieure du bord 33 de la membrane et le bord inférieur de la partie Il du récipient; de cette façon, il n'y a aucun intervalle ni aucune formation de matière o pourraient se déposer éventuellement de faibles quantités du liquide d'essai qui ne pourraient être éliminées même par des rinçages répétés En outre, par le processus de soudage en deux étapes selon la présente invention, la mem- brane filtrante 30 repose complètement à plat sur les nervu- res de support 24 de la partie inférieure 12 du récipient. Comme le bord 33 des membranes filtrantes n'est soumis à au- cune sollicitation mécanique importante lors de ces deux étapes de soudage, on évite les déformations et les ondula- tions de la membrane filtrante 30 qui survenaient lorsqu'on mettait en oeuvre la technique habituelle de soudage de la mem- brane en une seule étape, ce qui permet maintenant l'emploi de membranes filtrantes non rigides ou non renforcées. Grâce à la présente invention, on peut utiliser des mem- branes filtrantes sensiblement plus minces, ce qui est parti- culièrement intéressant lors des étapes de rinçage effectuées après la filtration, car l'adsorption d'une membrane fil- trante est d'autant plus faible que son épaisseur est plus faible. La figure 4 représente une vue de dessus de la partie inférieure 12 du récipient avec le système de drainage et les nervures de support pour les membranes filtrantes hydrophiles fines mises en oeuvre selon la présente invention Les ner- vures de support de la membrane filtrante 30 sont dessinées en lignes pleines et les canaux de drainage sous forme de surfaces blanches et ils forment une zone périphérique et une zone centrale Comme on le voit en particulier sur les figures 5 a à 5 c, la zone périphérique est délimitée par deux canaux annulaires concentriques 40 et 42 reliés entre eux par une multitude de canaux radiaux de passage 41 tandis que, dans la zone centrale, sont disposés plusieurs canaux annu- laires concentriques 43 qui débouchent dans des canaux ra- diaux de drainage 44 disposés en étoile et qui relient les canaux annulaires 40, 42 et 43 au raccord central de drai- nage 25 Les canaux annulaires concentriques sont limités par des nervures 24 destinées au support-de la membrane fil- trante 30 On obtient grâce à la couronne de canaux radiaux 41 de -la zone périphérique un drainage par un trajet très court de cette zone marginale critique délimitée par les ca- naux annulaires 40 et 42 et on assure ainsi une évacuation optimale de tous les liquides circulant dans cette zone. Grâce à une telle combinaison des éléments de support et de drainage, on obtient un rinçage optimal de la zone périphérique qui est toujours la plus difficile à rincer ainsi qu'un bon support mécanique pour des membranes fil- trantes, qui peuvent être alors fines et non renforcées par exemple par des fibres. L'utilisation selon la présente invention de membranes filtrantes 30 complètement hydrophiles et non de membranes filtrantes habituelles jusqu'ici qui présentent une zone périphérique hydrophobe a encore l'avantage suivant: lors de filtration sous pression, comme les matières hydrophiles mouillées des membranes filtrantes sont imperméables aux gaz jusqu'à une certaine surpression qui est d'environ 2,3 x 105 Pa avec les matières microporeuses du type ester de cellulose, on peut maintenir audessus de la membrane filtrante une pression d'air d'environ 2 x 105 Pa après écou- lement d'une certaine quantité de liquide dans la chambre intérieure des parties supérieures 11 des récipients Lors- qu'on introduit par exemple un liquide de rinçage, il n'est plus nécessaire de repressuriser les chambres internes des récipients puisque celles-ci sont toujours sous pression, mais au contraire les étapes de rinçage ou de remplissage sous pression peuvent avoir lieu dès l'arrivée des liquides correspondants dans les chambres Il en résulte que les pé- riodes d'essai sont écourtées geace à l'invention d'une ma- nière substantielle. L'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation qui viennent d'être décrits Ainsi, on peut par exemple dé- couper des membranes filtrantes 30 préalablement en forme de disques circul-aires-et les placer séparément, manuelle- ment ou automatiquement, sur les parties inférieures des récipients En outre, le bourrelet annulaire 35 qui est cu- néiforme en section transversale n'a pas besoin d'être formé sur la face inférieure de la partie supérieure du récipient, mais peut être formé sur la surface de la bride annulaire 27 de la partie inférieure 12 du récipient, selon la disposi- tion et la conformation nécessaires, comme ceci est indiqué par des hachures sur les figures 5 a à 5 c De plus, le sup- port de la membrane filtrante 30 peut être éventuellement réalisé sous forme d'un élément séparé en forme de disque ayant des nervures de support et des canaux de drainage et qui est introduit dans la partie inférieure du récipient. Enfin la première liaison par collage ou soudage 34 d'une des surfaces du bord 33 de la membrane 30 sur l'une des parties du récipient peut s'effectuer selon la présente in- vention, non pas sur la partie inférieure 12 comme représenté en particulier sur la figure 2 b, mais sur la partie supérieure il du récipient, ce qui a l'avantage d'assurer une soudure étanche du côté de la chambre du récipient, sans avoir à con- trôler l'écoulement de la matière fondue provenant du bourre- let annulaire 35 lors de la réalisation de la deuxième liaison de soudage 37. REVENDICATIONS 1 Dispositif de vérification de la stérilité des fluides en particulier d'antibiotiques et d'autres liquides similaires, comprenant au moins un récipient de vérification ( 1, 2) fermé hermétiquement, en matière plastique de préfé- rence transparente, qui peut être raccordé de façon stérile, par des liaisons flexibles et une canule, à un réservoir d'échantillons ou à d'autres réservoirs de liquides, chaque récipient de vérification étant constitué par une partie su- périeure en une seule pièce ( 11) ayant un raccord d'entrée ( 14), une entrée d'air ( 15) et un filtre à air ( 17) qui est intégré à cette dernière, ainsi que par une partie inférieure en une seule pièce ( 12) ayant un élément de drainage ( 23), un support mécanique ( 24) destiné à un filtre de vérification, et un raccord de sortie ( 25), les deux parties ( 11 et 12) du récipient étant soudées de façon étanche à la pression et au vide avec les flexibles de raccordement ( 34) ainsi que l'un avec l'autre et le filtre de vérification qui consiste en une membrane filtrante microporeuse en forme de disque en matière polymérique inerte biologiquement étant scellé de ma- nière inamovible et étanche aux gaz et aux liquides entre le bord inférieur de forme généralement circulaire de la partie supérieure ( 11) et le bord supérieur de forme généralement circulaire de la partie inférieure ( 12) du récipient, dispo- sitif caractérisé en ce que la membrane filtrante est en une matière non renforcée et entièrement hydrophile ( 30) et en ce que chacune des surfaces, inférieure et supérieure, du bord externe ( 33) de cette membrane est scellée de manière étanche à la pression et au vide à la partie ( 11, 12) du ré- cipient qui lui est associée par une liaison de soudage ( 37 ou 34), se raccordant à l'aplomb de la paroi interne ( 36) du récipient. 2 Dispositif selon la-revendication 1, caractérisé en ce qu'une des surfaces du bord ( 3 S) de la membrane filtrante ( 30) est scellée à l'une des parties ( 12) du récipient par une première liaison de soudage ( 34) obtenue par un effet di- rect de chaleur et de pression et en ce que l'autre surface du bord ( 33) de la membrane filtrante ( 30) est scellée à l'autre partie ( 11) du récipient par une deuxième liaison de soudage ( 37) obtenue par un flux fondu de matière du réci- pient provenant d'une zone située radialement à l'extérieur du bord de la membrane filtrante. 3 Dispositif selon la revendication 2, caractérisé en ce que la matière fondue du récipient assurant la deuxième liaison de soudage ( 37) à partir d'une zone située radialeent à lex- térieur de la membrane filtrante provient d'un bourrelet an- nulaire ( 35) cunéiforme formé sur le bord de liaison de l'une des parties du récipient, qui peut être sous forme d'une bride annulaire ( 21). 4 Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la membrane filtrante en matière non renforcée et entièrement hydrophile a une épaisseur de 135 Pm + 10 % ou une épaisseur inférieure. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en'ce que la partie inférieure ( 12) du ré- cipient comporte une zone périphérique délimitée par deux ca- naux annulaires concentriques ( 40 et 42) reliés entre eux par une multitude de canaux radiaux ( 41) et une zone centrale com- prenant plusieurs canaux annulaires concentriques ( 43) qui débouchent dans des canaux radiaux de drainage ( 44), disposés en étoile et reliant les canaux annulaires ( 40, 42 et 43) à un raccord central de drainage ( 25), le canal annulaire péri- phérique ( 40) se trouvant de préférence à l'aplomb de la paroi interne ( 36) des deux-parties du récipient. 6 Procédé pour fabriquer un récipient de vérification de la stérilité tel que défini dans la revendication 1, dans lequel la partie supérieure ( 11) et la partie inférieure ( 12) du récipient sont formées séparément selon la technique-de moulage par injection à partir d'une matière plastique de pré- férence transparente, le filtre à air ( 17) de l'entrée d'air ( 15) est soudé dans la partie supérieure ( 11) et la membrane filtrante ( 30) est scellée de manière inamovible et étanche aux gaz et aux liquides entre les deux parties du récipient, caractérisé en ce qu'on scelle d'abord une des surfaces du bord externe ( 33) de la membrane filtrante ( 30) à l'une des parties du récipient par une première liaison de soudage ( 34) et qu'on scelle ensuite l'autre surface du bord externe ( 33) de la membrane filtrante à l'autre partie du récipient en ef- fectuant en même temps le soudage des deux parties du réci- pient entre elles. 7 Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que la première liaison de soudage ( 34) est réalisée en four- nissant de la chaleur à travers le bord ( 33) de la membrane filtrante ( 30) sous une pression déterminée et en ce que la deuxième liaison de soudage ( 37) est réalisée, en même temps que le soudage des deux parties ( 11 et 12) du récipient entre elles, par écoulement de matière fondue du récipient à partir d'une zone située radialement à l'extérieur du bord ( 33) de la membrane filtrante. 8 Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que, pour réaliser la deuxième liaison de soudage ( 37), on chauffe et on fait fondre, de préférence par ultrasons, un bourrelet annulaire cunéiforme ( 35) formé sur le bord de liai- son, ayant en particulier la forme d'une bride ( 21), d'une des parties du récipient, la matière plastique fondue fluide remplissant complètement, lors de l'assemblage des deux par- ties du récipient, l'intervalle se trouvant entre la surface du bord de la membrane filtrante et la partie du récipient à sceller. 9 Procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 8, caractérisé en ce que la membrane filtrante se pré- sente sous forme d'une bande continue de matière filtrante que l'on déroule pour la disposer vis-à-vis de l'une des par- ties du récipient, en ce que cette bande est découpée en mem- branes filtrantes en forme de disque, de préférence après scellement d'une des surfaces de la bande sur l'une des par ties du récipient par la première liaison de soudage ( 34), et en ce que chacune des surfaces du bord de ces membranes fil- trantes est scellée de manière étanche à la pression et au vide à la partie du récipient qui lui est associée par des étapes distinctes de soudage. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9, caractérisé en ce que la première liaison de soudage ( 34) du bord externe ( 33) de la membrane filtrante ( 30) est réalisée avec la partie inférieure ( 12) du récipient. 11 Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9, caractérisé en ce que la première liaison de soudage ( 34) du bord externe ( 33) de la membrane filtrante ( 30) est réalisée avec la partie supérieure ( 11) du récipient.