Brevet FR2540119A1 — publié le 19840803

La présente invention concerne un procédé de fractionnement des phosphatides. L'émulsification d'huiles utilisées en alimentation, en der- matologie ou en cosmétologie utilise des agents émulsifiants synthétiques ou naturels Il semble admis actuellement que seuls les émulsifiants naturels aient une bonne tolérance biologique lors d'utilisations humaines Ces agents émulsi- fiants sont extraits par des procédés classiques à partir des fractions lipidiques, végétales (graines de soja, mais) ou animales (jaune d'oeuf par exemple). A l'aide de ces procédés, on extrait des composés phosphorés: phosphatides l phosphatidylcholine (PC); phosphatidyléthano- lamine (PE) l associés à des glycolipides, des stérols et des lipides neutres. Le but de l'invention est de séparer les phosphatides des glycolipides, des stérols et des lipides neutres; de frac- tionner ces phosphatides et éventuellement de recombiner les fractions obtenues pour avoir un agent émulsifiant fonction du type d'émulsion souhaitée. La séparation des phosphatides des stérols,lipides neutres et glycolipides est effectuée dans la littérature, selon plu- sieurs méthodes. 1 La séparation au moyen d'extractions par l'acétone et l'éthanol donne toujours des mélanges de phosphatides et de glycolipides (R Ajena and al Fette Seifen - Anstrichmittel N 10, 643-651 ( 1971); W Van Nieuwenhuyzen J Amer Oil Chemists' Soc Vol 53, 425-429 ( 1976)). 2 La séparation au moyen dadsorbant alumine, oxyde de ma- gnésium conduit à un enrichissement systématique en phos- phatidylcholine (brevet français Ajinomoto N 79 27081). 3 Le procédé de séparation par l'acide silicique utilisé en analytique, revient très cher et s'avère peu indus- trialisable (G Rouser and al J Amer Oil Chemists' Soc Vol 42 215-227 ( 1965); Techniques of Lipidology Lab Techn Biochem Mol Biol ( 1972);J Hirsch and al. J Biol Chem 233, N 2, 311-320 ( 1958). Le procédé de l'invention consiste à solubiliser les frac- tions lipidiques (d'origine animale ou végétale) obtenues à partir de procédés classiques à l'aide d'un solvant non po- laire ou peu polaire (acétate d'éthyle, chloroforme) afin de perfuser cette solution sur résine (cationique faiblement acide, anionique faiblement basique, adsorbante non ionique ou peu ionique) qui fixe préférentiellement les dérivés phos- phorés (phosphatides), et non les autres composants (glyco- lipides, stérols, lipides neutres). Après fixation les phosphatides sont élués par un solvant ou un mélange de solvants, tous deux à caractère polaire (al- cool par exemple). Le procédé de l'invention permet donc d'obtenir les phospha- tides après les avoir séparés des glycolipides, stérols et lipides neutres. De plus, selon le procédé de l'invention, on obtient des fractions de phosphatides dans lesquelles le rapport PE/PC est variable. Le procédé peut notamment s'appliquer au fractionnement des phosphatides de soja, de mals, de jaune d'oeuf Exemple On place 1 litre d'une résine Amberlite IRC 50 dans une co- lonne en verre On la lave à l'eau puis à l'alcool et enfin 3 2540119 par 1 litre d'acétate d'éthyle On dissout dans 400 ml d'acé- tate d'éthyle 5,15 g d'une fraction soluble dans l'alcool de l 6 cithine de soja brute. On perfuse la colonne avec cette solution puis avec 150 ml d'acétate d'éthyle. L'éluat obtenu contient les glycolipides, stérols et lipides neutres. Puis, on élue à l'alcool éthylique. Les fractions de tête obtenues sont éliminées et on recueille 7 fractions: 1 Fraction A: 5,8 g 2 Fraction B: 6,6 g 3 Fraction C 5,8 g 4 Fraction D 5,6 g 5 Fraction E 4,4 g 6 Fraction F: 3,0 g 7 Fraction G 3,7 g La composition analytique de ces fractions est la suivante A B C D E F G Glycolipides 19 5,7 2,3 2,7 O O O Phospholipides 80 93,4 97,7 97,2 99,9 99,9 100 Lipides neutres 1 0,86 O O O O O Rapport PE/PC 0,84 0,46 0,30 0, 29 0,18 0,18 0,09 Les différentes fractions de phosphatides ainsi obtenues peu- vent être utilisées seules ou recombinées comme émulsifiants pour l'émulsification d'huiles. Les émulsions ainsi obtenues peuvent être utilisées en ali- mentation parentérale ou entérale, en cosmétologie, en der- matologie et pour l'élaboration des liposomes. Deux exemples d'utilisation des fractions de phosphatides obtenues selon le procédé de l'invention pour l'&mulsifica- tion de l'huile de soja sont donnes ci-dessous Formule 1: huile de soja 20 g fraction E de phosphatides de soja (obtenue selon l'ex) 1,2 g glycérol 2,25 g eau distillée q s p 100 ml Formule 2: huile de soja 20 g fractions D + E de phosphatides de soja (obtenues selon l'ex) 1,2 g glycerol 2,25 g eau distillée q s p 100 ml Les huiles de soja ainsi émulsifi&es peuvent servir en ali- mentation parentérale. Revendications 1 Procédé de fractionnement des phosphatides, procédé carac- térisé en ce qu'on solubilise les fractions lipidiques à l'aide d'un solvant non polaire ou peu polaire, on perfu- se la solution ainsi obtenue sur une résine qui fixe pré- férentiellement les dérivés phosphorés, on élimine les constituants autres que les phosphatides par élution à l'aide d'un solvant non polaire ou peu polaire et on élue les phosphatides par un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. 2 Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que la solubilisation des fractions lipidiques est réalisée à l'aide d'acétate d'éthyle ou de chloro- forme. 3 Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé par le fait que la résine est une résine cationique faiblement acide, anionique faiblement basi- que, adsorbante non ionique ou peu ionique. 4 Procédé selon la revendication 1, 2, ou 3 caractérisé par le fait que l'on élimine les constituants autres que les phosphatides par un solvant tel que l'acétate d'éthyle. Procédé selon la revendication 1, 2, 3 ou 4, caractérisé par le fait que l'on élue les phosphatides à l'aide d'al- cool éthylique. 6 Fractions de phosphatides, seules ou combinaison, obte- nues selon le procédé de l'une quelconque des revendica- tions 1 à 5. 7 Application des fractions de phosphatides obtenues selon le procédé de l'une quelconque des revendications 1 à 5, seules ou en combinaison, comme agents émulsifiants pour l'émulsification d'huiles.