Brevet FR2542009A1 — publié le 19840907

La présente invention se rapporte à un dispositif permettant la mise en solution et la stérilisation de milieux de culture bactériologiques solides,gélosés ou liquides. Elle concerne plus particulièrement un dispositif du type four à micro-ondes,qui permet la dmssolution rapide de milieux de culture solides ou déshydratés,et leur stérilisation. A l'heure actuelle,ces opérations s'effectuent par mise au bain-marie ou par chauffage sur une flamme,et à l'autre clave pour la stérilisation. Il en résulte que la mise en solution s'effectue très lentement: trente minutes à une heure ou plus,parfois avec des surchauffes locales et surtout sans qu'il soit possible de garantir l'asepsie de leopéra- tion lors de transvasements, si ce n'est en opérant à proximité d'un bec Bunsen,ou de tout autre flamme.De telles opérations sont incommodes,et parfois dangereuses. Coest pourquoi il est apparu avantageux de concevoir un dispositif qui permettrait une redissolution très rapide,en général de quelques secondes,du milieux de culture et la stérilité de celui-ci en fin d'opération,sans faire intervenir le passage à l'autoclave A cet égard,la solution technique,objet de la présente invention,répond aux impératifs énoncés ci-dessus. Spécifiquement,l'invention peut être caractérisée en ce qu'elle comprend une enceinte disposée verticalement, fermée à sa partie inférieure par une plaque de forme concaveDet comportant un générateur de micro-ondes amenant les rayonne mentis par la partie supérieureeun plateau tournant disposé dans la portion inférieure de leenceinteEet portant un réci- pient en verre résistant à la chaleur et transparent aux rayons micro-ondes,ainsi qu'un variateur de puissance disposé extérieurement-à l'enceinte. Dans le dispositif selon l'invention,l'enceinte disposée verticalement est de forme cylindrique ou prismatique. La hauteur est déterminée de façon à ce que les micro-ondes soient focalisés sur la base du récipient transparentOEn pratique,la hauteur de l'enceinte verticale sera un multiple entier de 2 ou 3 fois la longueur d 9 onde des rayons émis, soit une hauteur utile d'environ 30cm,et de préférence comprise entre 35 et 40cm. Pour des raisons de commodité ou de sécurité l'enceinte est contenue dans un boisage formant cage de Faraday herme- tique aux rayonnements générés. Il met ainsi l'operateur à l'abri d'une exposition fortuite à ces rayons. De préférence, ce bocage sera de forme parallèlépipédique et comportera une ouverture permettant d'y introduire le récipient en verre et son contenu,ou de le retirer en fin d'opération. La section ou la largeur de l'enceinte peut varier dans de larges proportions. Elle sera de préférence comprise entre 20 et 40cm,et en pratique de l'ordre de 30cm. Dans un mode d'exécution préféré,l'enceinte est de forme cylindrique réalisée en un matériau réfléchissant les microondes comme par exemple l'acier inoxydable,ou tout autre métal poli. Elle comporte un dispositif d'ouverture constitué notamment par une porte munie d'un hublot,ou d'un couvercle s'articulant vers' haut ou selon un plan latEral,le hublot étant alors aménagé sur l'une des parois du dispositif, permettant.lintroduction du cristallisoir contenant les milieux bactériologiques à traiter et à l'en sortir sans difficulté,en fin d'opération. Le plateau tournant est monté sur un axe vertical,fixe à la partie inférieure de l'enceinte. I1 est relié par un système d'entrainement à un dispositif de temporisation qui lui assure un temps de rotation déterminé et constant. Le plateau tournant peut supporter un cristallisoir dans lequel sont disposés soit par l'intermédiaire dgun bti,soit par l'intermédiare d'un portoir,des récipients,boites ou tubes renfermant les milieux de culture à traiter,le tout étant perméable aux rayons micro-ondes. Les rayonnements produits par le générateur sont canalisés de façon à arriver par la partie supérieure de l'appareil qui comporte un système dispersif des dits rayons,de façon à obtenir leur répartition homogène au-dessus de la surface du plateau tournant. I1 peut être avantageux de munir l'enceinte d'un dispositif d'éclairage, soit par une lampe à filament, soit par une lampe à décharge dans un gaz inerte, afin de rendre visible 1'opération en cours. La commande de l'éclairage se fait à l'extérieur de l'enceinte par un boîtier disposé de préférence sur le bossage externe. L'entraînement du plateau peut se faire par des moyens mécaniques, élastiques, ou magnétiques. I1 peut être avantageux de pourvoir le dit plateau à sa partie périphérique d'un moyen d'engrenage qui viendra s'articuler à l'extérieur de l'enceinte sur un autre engrenage commandé par un dispositif d'entraînement, transmettant son mouvement par leintermédiair d'un axe ou d'une courroie. A cette fin, l'enceinte pourra comporter au niveau du plateau tournant un evidement laissant le passage à un engrenage denté, monté verticalement sur un support fixe. Le dispositif d'entraînement est assujetti à l'engrenage décrit ci-dessus, par l'intermédiaire d'un support ou de tout moyen de suspension. L'engrenage ou le dispositif d'entrain ment pourront être reliés à un réducteur de vitesse permettan de faire varier la vitesse de rotation entre les limites nécessaires pour la bonne mise en oeuvre du procédé. Le dispositif selon 1'invention comporte un système de commande qui permet de modifier la puissance du générateur de micro-ondes. De préférence,il sera possible d'établir trois paliers de puissance,permettant de délivrer une puissance faible (300 à 350 W),une puissance moyenne (400 à 450 W),et une puissance forte (600 à 700 W). Le dispositif de temporisation relié au dispositif d'entraînement permet de régler le temps pendant lequel le plateau tourne, et avantageusement de définir, au préalable, le temps maximum pendant lequel le générateur de micro-ondes devra fonctionner. Pour des raisons de bon fonctionnement, la durée maximale de fonctionnement sera limitée à quinze minutes. Elle peut néanmoins varier de une seconde à 10 minutes. Le cristallisoir peut également être clos. I1 comportera un dispositif d'étanchéité assurant l'herméticité du récipient et éventuellement une soupape de sécurité. Il sera réalisé en matière perméable aux micro-ondes,résistant à la chaleur et à la pression,de préférence en verre ou en matière plastique transparente aux micro-ondes. D'une manière préféré,le dispositif selon l'invention est pourvu d'un ou de plusieurs systèmes de sécurité interdisant l'ouverture du dispositif ou empêchant l'exposition du manipulateur aux rayonnemnt micro-ondes pendant le fonctionnement du générateur. La figurez ci-jointe,montre le dispositif selon ltin- ventionreprésenté selon un premier mode d'exécution repré venté de face. Elle montre le boîtage externe (2),comportant le générateur de micro-ondes (3),le conduit (4)pour canaliser les rayons générés et le dispositif de dispersion 5) des micro-ondes. Elle montre aussi l'enceinte de forme cylindrique (1) à l'intérieure du boîtage (2),le plateau tournant(6) disposé à la partie inférieure de l'enceinte (1) engrenant par par une partie dentée (7) et monté sur un axe vertical(8) reposant sur le fond de l'enceinte cylindrique (1).Le fond concave de l'enceinte (1) est épacé du boîtage externe par des pieds isolants(10). Le plateau tournant (6) porte un cristallisoir transparent (9)dont le contenu est soumis au rayonnement. Le bornage externe (2),de forme prismatique, comporte sur le devant,montée verticalement par deux charnières,une porte (11) comportant un hublot transparent (12) et fermant par un loquet automatique (13). Le hublot (12) est blindé d'un grillage métallique (12s) qui lui assure l'étanchéité aux micro-ondes. Le cheminement des rayons micro-ondes est figuré en (15). La figure 2,ci-jointe,montre le dispositif selon l'inven tion représenté selon un autre mode d'exécution figuré de face. Elle représente l'enceinte cylindrique (1) figure à l'intérieur du boitage externe (2)de forme prallèlépipèdique surmonté d'un couvercle (17) de forme hémisphérique,sVou- vrant selon un plan létéral. Le couvercle (17) est relié au générateur (3)par le conduit métallique (4) articulé en(4') Le couvercle est muni d'un moyen de préhension (18) qui facilite l'ouverture. Le boîtage externe (2) comporte un bloc d-e commande (20) permettant les opérations suivantes: - section du palier de puissance à mettre en oeuvres - fixer la durée de fonctionnement du générateur pour une opération donnée; - mettre en route le dispositif d'entrainement (14) du plateau tournant; - faire fonctionner une lampe (19) éclairant lintérieur du dispositif; - actionner la mise en marche du générateur à micro-ondes(3). Le plateau tournant (6) porte un cristallisoir (9) en matériau transparentgrésistant à la chaleur et perméable aux micro--ondes,destiné à reçevoir les tubes ou les fioles dont le contenu sera traité. Le fonctionnement du dispositif selon l'invention est assuré après fermeture de la porte ou du couverclegpar mise en route du dispositif dDentrsinement du plateau tournant, commande du dispositif de temporisation puis allumage du générateur de micro-ondes. Exemples d'utilisation du dispositif selon l'invention. A) Régénération de milieux gélosés. Le milieu à régénérer est fourni dans des récipients en verre ou en matière plastique. On ouvre donc le récipient, on le place dans le cristallisoir, puis on ferme la porte du dispositif. On actionne ensuite la mise en marche du gEnEra- teur de micro-ondes après avoir programmé sur le dispositif de temporisation le temps nécessaire pendant lequel le reci- pient sera exposé aux rayonnements par micro-ondes. La durée d'exposition est fonction de la nature,surtout du volume de produit manipule ,ainsi que de la puissance mise en jeu du générateur. C'est ainsi,par exemple,qu1un flacon contenant 10 ml de gélose est remis en solution et stérilisé après une exposition aux micro-ondes d'environ 10 secondes. On répartira ce milieu de culture en boîtes de Pétrî,ou dans des tubes à essai sans précautions particulières d'asepsie. Apres rEpartition,les milieux sont exposés à nouveau à l'action des micro ondes de maniere à assurer leur stérilité Les tubes à essai auront été au préalable bouchés au coton cardé; Les bottes de Pétri seront maintenues closes en laissant les couvercles en place. Le rayonnement est focalise au-dessus du plateau tournant et de ce fait,le maximum-de leur efficacité se situera donc à un tel niveau. I1 sera alors recommandé de ne pas superposer les récipients contenant les milieux à traiter. Il sera pré- férable de les étaler sur le fond du cristallisoir. La chaleur produite par action des micro-ondes étant obtenue par suite de l'agitation molEculaire,les milieux solides ou objets non métalliques à stériliser doivent être humectés au préalable soit par de l'eau soit par tout autre liquide polaire. L'eau étant le solvantle plus approprié pour la bonne marche de l'opération. B) Sacrifice des petits animaux de laboratoire. En exposant,par exemple,des souris de laboratoire pendant une durée d'action de 1 à 2 secondes,dans une cellule,on provoque la mort des animaux d'une manière pratiquement instantannée. Cette méthode a 1avantage par rapport aux méthodes classiques (assomoir,injection de produits anesthésiques ou toxiques à forte doses...) que l'animal reste strictement intact,sans altération des tissus. Cette méthode est donc particulièrement recommandée pour l'étude pharmacologique du système nerveux central. REVENDICATIONS 1) Dispositif de mise en solution et de stérilisation des milieux de culture caractérisé en ce qu'il comprend une enceinte de forme cylindrique ou prismatique,disposée verticalement,fermée à sa partie inférieure par une plaque de forme concave,-comportant un générateur de micro-ondes,un plateau tournant en matière perméable aux micro-ondes disposé à sa partie inférieure et portant un récipient en verre transparent,résistant à la chaleur et également perméable aux rayonnements micro-ondes. 2) Un dispositif selon la revendication 1) dans lequel l'enceinte est contenue dans un boîtage formant cage de Faraday hermétique aux rayonnements micro-ondes. 3)Un dispositif selon l'une des revendications 1) ou 2) caractérisé en ce que le boîtage externe comporte un hublot en verre grillagé permettant la visualisation de l'opération en cours. 4) Un dispositif selon la revendication l)caractérisé en ce qu'il est muni d'un système de temporisation permettant la mise en action du générateur de micro-ondes pendant des temps très courts. 5) Un dispositif selon la revendication 1) caractérisé en ce que le dispositif d'ouverture est constitué par un couvercle s'ouvrant selon un plan vertical ou horizontal. 6) Un-dispositif selon l'une des revendications 1) et 5) caractérisé en ce que le conduit métallique guidant les micro-ondes,pénètre dans le couvercle par un système d'articulation à emboitement ou à rotation. 7) Un dispositif selon la revendication 1) caractérisé en ce que le récipient en verre destiné à reçevoir les milieux à traiter peut être résistant à la pression et rendu hermétique par un moyen d'étanchéité. 8) Utilisation du dispositif selon l'une des revendications 1-) à 7) pour la dissolution,la régénération et la stérilisation des milieux solides,gelosés ou liquides.