Brevet FR2543157A1 — publié le 19840928

La présente invention concerne un distributeur de supports solides pour études microbiologiques, notamment pour la détermination de la sensibilité aux antibiotiques et l'identification de micro-organismes, sous forme d'une petite unité compacte comprenant une boîte formant fond, pourvue d'un milieu de culture solide, laquelle boite est destinée à recevoir des supports solides après application d'un couvercle plan s'adaptant étroitement sur celle-ci. Il est bien connu des spécialistes que pour effectuer des antibiogrammes, on dispose de distributeurs de disques d'antibiotiques. Ces distributeurs sont généralement onéreux, volumineux et ne permettent pas une bonne conserva.tion des disques dans les cartouches. Plus particulièrement, on connaît différents distributeurs de supports solides, destinés à la mise en place de ces derniers, imprégnés de différents antibiotiques dont on désire évaluer l'activité vis-à-vis d'un germe déterminé. De tels distributeurs automatiques comportent habituellement plusieurs cartouches renfermant chacune un empilage de disques préalablement imprégnés d'un antibiotique déterminé. Dans la demande de brevet FR 72 18 905 publiée sous le n" 2 185 683 on a indiqué que pour la confection d'un antibiogramme, la surface d'une mince couche de milieu gélosé stérile est ensemencée avec le germe étudié ; après dessication convenable, les disques en papier buvard d'un diamètre voisin de 6 mm, d'épaisseur 0,8 mm environ, préalablement imprégnés des différents antibiotiques dont on veut évaluer l'activité, sont disposés régulièrement à la surface du milieu ensemencé ; l'ensemble est ensuite maintenu en étuve pendant 18 heures environ aux alentours de 37"C pour permettre la multiplication du germe et la diffusion des antibiotiques dans le milieu ; la lecture de l'antibiogramme consiste en la mesure du diamètre de la zone d'inhibition de croissance du germe, zone centrée sur chaque disque. Les disques, dont le nombre est habituellement inférieur à 20, sont disposés individuellement, à l'aide d'une pince, ou simultanément à l'aide d'un distributeur automatique. Comme décrit dans cette demande de brevet FR précitée, on rencontre l'inconvénient de ne pas assurer un placage satisfaisant des disques sur le milieu, ce qui peut entraîner un déplacement des disques au cours des manipulations ultérieures ou une diffusion irrégulière ou partielle de l'antibiotique;pour y remédier,l'opérateur est obligé d'appuyer soigneusement sur chaque disque,de manière à obtenir un contact intime entre le disque et le milieu;il arrive fréquemment aussi que le disque se retourne en tombant,ce qui en complique l'identification ultérieure dans le cas des disques imprimés sur une seule face, ou même qu'il roule à la surface du milieu en se déchargeant partiellement,ce qui fausse les résultats de l'antibiogramme . En outre si les distributeurs conviennent bien dans les laboratoires d'analyses médicales où de nombreux antibiogrammes doivent être réalisés, il n'en est pas de meme lorsqu'un nombre restreint d'antibiogrammes doit etre effectué par exemple à l'unité. On sait qu'il est très important aux fins d'analyse,en particulier dans la mise en oeuvre d'antibiogrammes,de mettre en place d'une façon sure et précise des supports solides tels que des disques ou des billes d'antibiotiques dans un milieu de culture solide. Ainsi,ces disques ou billes d'antibiotiques doivent etre insérés et déposés à plat,en étant légèrement enfoncés dans le milieu récepteur c'est-à-dire le milieu de culture solide. Il convient donc d'appliquer les supports solides sous un effort contrôlé et par conséquent d'assurer leur placage final à la surface du milieu de culture sous un effort déterminé. Un moyen approprié consiste à mettre en place lesdits supports à l'aide de poussoirs susceptibles de les accompagner jusqu'à la surface du milieu de culture. Un tel milieu de culture solide est, par exemple,un milieu gélosé. Le dispositif selon la présente invention sert à déterminer la sensibilité d'un germe aux antibiotiques, notamment en médecine humaine. I1 est également utile en laboratoire : bactériologies humaine, vétérinaire, alimentaire et de l'environnementbactériologies de l'air, de la terre, des mers- et, en laboratoire de recherche, notamment génétique. La présente invention propose un dispositif d'une très grande simplicité permettant d'obtenir les objets précités et de remédier aux inconvénients de l'art antérieur. Gracie au dispositif selon la présente invention, il est possible de choisir à volonté le nombre de support s solides à distribuer dans une boite formant fond selon le nombre requis de déterminations à effectuer. Confo-rmément à la présente invention, on prévoit un distributeur de supports solides, pour études micr.obiologi- ques,notamment pour la détermination de la sensibilité aux antibiotiques et l'identification de micro-organismes, sous forme d'une petite unité compacte comprenant une boite formant fond pourvue d'un milieu de culture solide, laquelle boîte est destinée à recevoir des supports solides apurés application d'un couvercle s'adaptant étroitement sur celle-ci, le distributeur étant caractérise en ce qu'il comporte entre ladite botte formant fond et ledit couvercle un exemple intermédiaire en une ou plusieurs parties qui est constitue d'une plaque rigide perforée, associée à une matière aisément perforable, dans laquelle sont emprisonnés les supports solides à distribuer. Ladite matiere peut être perforée à volonté, pour déposer les supports solides à la surface du milieu de culture de la boîte, par des poussoirs prévus sur le couvercle et dirigés vers le bas en direction de ladite bote. L'invention se rapporte aussi à un procédé pour déterminer la sensibilité aux antibiotiques et effectuer une identification bactérienne qui consiste à utiliser un distributeur comme indiqué dans la présente invention. La présente invention concerne également les caractéristiques ci-après,. considérées isolément ou selon toutes leurs combinaisons techniquement possibles - les supports solides sont des disques ou des billes imprégnés d'antibiotiques ou de toute substance pouvant diffu ser dans le milieu de culture et concourant à la détermination d'un caractère du microorganisme étudié - le milieu de culture est solide et permet la croissance des micro-organismes étudiés, il s'agit, par exemple, d'un milieu gélosé - la matière aisément perforable est choisie parmi des dérivés plastiques ou métalliques notamment d'aluminium - la plaque rigide perforée est une grille recevant sur sa face supérieure la matière aisément perforable, laquelle est constituée d'un double feuillet avec une face supérieure lisse et une face inférieure munie d'alvéoles, où sont logés les supports solides, en nombre correspondant à celui des perforations de la grille - la plaque rigide perforee est recouverte tant sur sa partie supérieure que sur sa partie inférieure d'un feuillet de manière aisément perforable, les supports solides étant disposés sur les orifices de ladite plaque - les substances constitutives de chaque feuillet sont analogues ou différentes - les poussoirs du couvercle dirigés vers le bas présentent une forme géométrique capable d'assurer la perforation des feuillets et l'application des supports solides à la surface du milieu solide coule dans la boite formant fond - la boite, le couvercle et la plaque sont des pièces moulées en matière plastique. La présente invention trouve une application préférée dans les antibiogrammes et dans l'identification de microorganismes. Ainsi le dispositif de l'invention permet de déposer des disques imprégnés d'antibiotiques, mais également des supports imprégnés de substances permettant une étude microbiologique, telle que l'identification de micro-organismes à partir de réactions biochimiques réalisés in situ, dans le milieu gélosé. A titre d'exemple, l'orthonitrophényl 5 D-galactoside lorsqu'il est scindé par laRgalactosidase (enzyme présente chez certaines bactéries seulement) donne une coloration jaune autour du disque alors que le produit est incolore normalement. L'invention sera encore illustrée sans etre aucunement limitée en référence au dessin annexé sur lequel Fig.l est une vue de face éclatée d'un premier mode de réalisation du distributeur de supports solides selon la présente invention; Fig.2 est une vue de face d'un deuxième mode de réalisation du distributeur de supports solides montrant un support appliqué dans le milieu de culture; Fig.3 est une vue de dessus de la botte du distributeur selon la figure 1 renfermant à titre d'exemple 16 antibiotiques différents. -Au dessin annexé les mêmes chiffres de référence désignent des parties analogues. Sur la figure l,la référence 1 désigne une botte formant fond,de toute forme appropriée,dans laquelle est déposé un milieu de culture solide 2 qui est, par exemple,de la gélose. Cette bolte 1 est avantageusement une pièce moulée en matière plastique transparente ou non. Dans l'état assemblé du distributeur selon le mode de réalisation de la figure 1, la botte 1 reçoit à sa partie supérieure une plaque rigide 5 pourvue de perforations ou d'orifices 9.La plaque rigide 5 présente la structure d'une grille dont les perforations sont choisies à volonté. La plaque rigide 5 est également avantageusement une pièce moulée en matière plastique. Sur la face supérieure 8 de cette plaque 5 est déposé un double feuillet 6 d'une matière aisément perforable,par exemple en aluminium.Le double feuillet 6 est muni d'une face supérieure lisse tandis que sa face inférieure comporte des alvéoles en nombre correspondant à celui des perforations 9 de la plaque 5. Les supports solides 3 sont logés dans les alvéoles qui traversent les perforations de la plaque 5.Pour terminer l'assemblage du distributeur,on prévoit un couvercle 4 comprenant des poussoirs 7 dirigés vers le -bas. Le nombre des poussoirs 7 du couvercle 4 correspond au nombre d'alvéoles du double feuillet 6 ainsi qu'au nombre de perforations 9 de la plaque 5. On comprend facilement que lors de l'application du couvercle 4,les poussoirs 7 perforent la face supérieure lisse du premier feuillet et appuient sur les supports 3 qui quittent leurs alvéoles,traversent les perforations 9 de la plaque 5 et se déposent convenablement à la surface du milieu de culture solide 2. Les supports solides 3 peuvent être des disques ou des billes qui ont été préalablement impre- gnées d'une quantité déterminée d'une substance,telle qu'un antibiotique, qui va diffuser dans le milieu solide. Le couvercle 4 est,de préférence,une pièce moulée en matière plastique. I1 convient de remarquer que le diamètre des perforations ou orifices 9 de la plaque rigide 5 doit être seulement suffisant pour laisser passer les supports solides 3 contenus dans les alvéoles du double feuillet 6. Les poussoirs 7 peuvent présenter toute forme géométrique appropriée. Le mode de réalisation selon la figure 2 est légèrement différent de celui de la figure 1 en ce qui concerne l'ensemble intermédiaire constitué de la plaque rigide et du double feuillet en matière aisément perforable. Dans ce mode de réalisation,la boîte formant fond 1 et le couvercle 4 pourvu d'un poussoir 7 dirigé vers le bas sont analoguès au mode de réalisation selon la figure 1. Conformément à la figure 2,la plaque rigide perforée 5 est recouverte tant sur sa partie supérieure que sur sa partie inférieure d'un feuillet de matière aisément perforable 6. Dans cette réalisation le support solide 3 est disposé dans un orifice de la plaque rigide 5 et est maintenu en place par les deux feuillets. Lors de l'application du poussoir 7 du couvercle 4,les deux feuillets 6 sont perforés et le support solide 3 est déposé convenablement sur le milieu de culture 2 contenu dans la bote 1 formant fond. Selon les deux modes de mise en oeuvre de la présente invention,il est possible de construire un distributeur de toute dimension appropriée. On peut distribuer à l'unité les supports solides 3, ce qui est très avantageux pour des laboratoires d'analyses médicales ayant peu d'examens à effectuer. Du fait de sa simplicité, le distributeur selon la présente invention est d'un prix de revient extrêmement faible, le coût des matieres plastiques moulées étant en effet peu élevé. De plus, il assure une excellente conservation des substances imprégnant -les supports 3, très supérieure aux systemes existant actuellement. Bien entendu, la présente invention englobe les équivalents techniques et variantes, a la portée de l'homme du métier concernant l'objet de l'invention, tel qu'il a été décrit ci-dessus. REVENDICATIONS 1. Distributeur de supports solides, pour études microbiologiques, notamment pour la détermination de la sensibilité aux antibiotiques et l'identification de micro-organismes, sous forme d'une petite unité compacte comprenant une boîte formant fond (1) pourvue d'un milieu de culture (2) solide, laquelle boîte (1) est destinée à recevoir des supports solides (3) après application d'un couvercle (4) s'adaptant étroitement sur celle-ci, caractérisé en ce qu'il comporte entre ladite boîte formant fond (1) et ledit couvercle (4) un ensemble intermédiaire en une ou plusieurs parties qui est constitué d'une plaque rigide perforée (5) associée à une matière aisément perforable (6) dans laquelle sont emprisonnes les supports solides (3) à distribuer, ladite matière (6) pouvant être perforée, à volonté, pour déposer les supports solides (3) à la surface du milieu de culture (2) de la boîte (1), par des poussoirs (7) prévus dans le couvercle (4) et dirigés vers le bas en direction de ladite boite (1). 2. Distributeur selon la revendication 1, caractérisé en ce que les supports solides (3) sont des disques ou des billes imprégnées d'antibiotiques ou de toute substance pouvant diffuser dans le milieu de culture (2) et concourant à la détermination d'un caractère du micro-organisme étudie. 3. Distributeur selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que le milieu de culture (2) est solide et permet la croissance des micro-organismes étudiés et est notamment un milieu gélosé. 4. Distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la matière aisément perforable (6) est choisie parmi des dérivés plastiques ou métalliques, notamment l'aluminium. 5. Distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la plaque rigide perforée (5) est une grille recevant sur sa face supérieure (8) la matière aisément perforable (6) laquelle est constitué d'un double feuillet avec une face supérieure lisse et une face inférieure munie d'alvéoles où sont logés les supports solides (3), en nombre correspondant à celui des perforations (9) de la grille. 6. Distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la plaque rigide perforée (5) est recouverte tant sur sa partie supérieure que sur sa partie inférieure d'un feuillet de matière aisément perforable (6), les supports solides (3) étant disposés dans les orifices de ladite plaque (5). 7. Distributeur selon la revendication 6, caractérisé en ce que les substances constitutives de chaque feuillet (6)- sont analogues ou différentes. 8. Distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que les poussoirs (7) du couvercle (4) dirigés vers le bas présentent une forme géométrique capable d'assurer la perforation des feuillets (6) et l'application des supports solides (3) à la surface du milieu solide (2) coulé dans la boîte formant fond (1). 9. A titre de moyen mis en oeuvre dans le distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, une plaque rigide perforée (5) associée à une matière aisément perforable (6) dans laquelle sont emprisonnés les supports solides (3) à distribuer, notamment des disques d'antibiotiques. 10. A titre de moyen mis en oeuvre dans le distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, une plaque rigide perforée (5) sous forme d'une grille recevant sur sa face supérieue (8) un double feuillet de matière aisément perforable (6) à face supérieure lisse et à face inférieure munie d'alvéoles où sont logés les supports solides (3). 11. A titre de moyen mis en oeuvre dans le distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, une plaque rigide perforée (5) recouverte sur sa partie supérieure et sur.sa partie inférieure d'un feuillet de matière-aisément perforable (6), les supports solides (3) étant disposés dans les orifices de ladite plaque (5). 12. A titre de moyen mis en oeuvre dans le distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, un couvercle (4) comportant des saillies (7) dirigeesvers le bas et capa bles de faire fonction de perforateurs lorsque le couvercle (4) est enfoncé sur une boîte-(l) contenant un milieu de culture (2). 13. Procédé pour déterminer la sensibilité aux antibiotiques et effectuer une identification bactérienne, caractérisé en ce qu'il consiste à utiliser un distributeur selon l'une quelconque des revendications 1 à 8.