Brevet FR2540853A1 — publié le 19840817

Le dichlorure de platine-diammine-(II)-cis, quiest connu sous la désignation USAN (United States Adopted Name) de cisplatine, est utilisé largement en tant que substance à activité antitumo- rale Toutefois, le cisplatine obtenu suivant les procédés de préparation connus est très impur et il ne convient pour une utilisation médicale qu'après avoir subi des traitements de purification qui sont compliqués, fastidieux et sont la source de pertes importantes. La meilleure méthode de purification connue -jusqu'à mainte- nant consiste en une recristallisation du cisplatine à partir de diméthylacétamide, en présence de H Ol C,1 N (J D Hoeschele, T A. Butler, J A Roberts, C E Guyer, Radiochim Acta, 31, 27 ( 1982)). Mais cette recristallisation s'accompagne de pertes considérables de cisplatine ( 15 à 20 %) En outre, le cisplatine ainsi obtenu ne répond pas encore aux critères de pureté qui sont imposés à un médicament. Un autre procédé connu, décrit dans la demande de brevet européen N 2 O 030 782, consiste à recristalliser le cisplatine à partir de diméthylformamide en présence de HC 1 0,1 N à la tempé- rature ambiante Mais dans ces conditions, il ne se forme pas de produit d'addition du cisplatine avec le diméthylformamide, comme dans le cas du procédé de l'invention En outre, le rende- ment est plus faible qu'avec le procédé de l'invention. Le but de l'invention est la préparation de cisplatine purifié qui puisse 8 tre utilisé directement comme constituant actif de médicament. En particulier, l'utilisation du cisplatine purifié suivant l'invention peut être envisagea dans la lutte contre le cancer. L'invention concerne un procédé pour la préparation de dichlorure de platine-(II)-diam Lie-cis pur, caractérisé en ce qu'on convertit un dichlorure de platine-diammine-(II)-cis cbtenu par des méthodes connues de préparation, par réaction avec le N,N-dimé- thylformamide, en un produit d'addition de cet amide, puis on élimine le IN,N-diméthylformamide. Le procédé suivant l'invention donne, de manière simple-, un cisplatine extrêmement pur. Le cisplatine obtenu suivant le procédé de l'invention pré- sente par exemple, dans le spectre d'absorption dans l'ultra- violet, un maximum à 301 nm, ainsi qu'à 360 nm, et un minimum à -1 -1 246 nm Le coefficient d'extinction E à 301 nm est 132 M cm, à 360 nm il est égal à 24,8 et à 246 nm il est égal à 27,1 Le spectre d'absorption dans l'ultraviolet a été obtenu avec un spectrophotomètre Cary 17 D, avec utilisation de cellules de 1 cm Le spectre d'absorption dans l'ultraviolet est reproduit sur les fig la et lb Chaque fois, 50 mg du cisplatine suivant l'invention ont été dissous dans 50 ml de H Ol O,1 N Dans le cas du produit auquel se rapporte la fig la, le diméthylformamide a été éliminé sous vide poussé ( 1 ebar) à 202 C (durée, 20 heures). Dans le cas du produit auquel se rapporte la fig lb, le diméthyl- formamide a été éliminé par simple abandon à l'air, respective- ment à 20 C et à 40-C (pendant 65 heures chaque fois). Par exemple, pour le cisplatine obtenu suivant l'invention, le rapport du maximum d'absorption à 301 nm au minimum d'absorp- tion à 246 nm est de 4,9 ( 4,86); celui du maximum de 301 nm au maximum de 360 nm est de 5,3 ( 5,31) L'élimination du diméthyl- formamide a été effectuée dans ce cas sous 1 (bar à 200 C pendant heures. Le spectre d'absorption dans l'infrarouge du cisplatine obtenu d'après l'invention (dans le nujol) est reproduit sur la fig 2. En tant que substance de départ pour le traitement de puri- fication suivant l'invention, on peut utiliser un cisplatine obtenu par des méthodes classiques On peut par exemple envisa- ger, comme procédés de préparation pour le cisplatine, les méthodes suivantes: méthode de G B Kauffman, D O Cowan, Inor& Synth, 7, 239 ( 1963) ; de S C Dhara, Indian J Chem i 8, 193 ( 1970); de V V Lebedinskii, G A Golovnya, Chem Abstr, 44, 5257 ( 1950). La transformation du cisplatine impur en produit d'addition avec le N,NTdiméthylformamide est effectuée par dissolution du cisplatine dans le N,N-diméthylformamide à une température com- prise entre 12 et 300 C, de préférence entre 15 et 25-20 et notam- ment entre 18 et 22 20. On dissout par exemple 2 g de cisplatine dans 85 à 120 ml, de préférence 85 à 90 ml de N,N-diméthylformamide La dissolution est effectuée opportunément sous agitation Les cristaux de cis- platine peuvent être par exemple broyés au préalable sous la forme d'une poudre; mais on peut également utiliser des cristaux de cisplatine non broyés La solution ainsi obtenue est filtrée (taille du filtre G 4) et le filtrat est abandonnéen récipient fermé pendant une période prolongée ( 10 à 120, de préférence 10 à 40 heures) à une température de -102 à + 52, de préférence O à 3 O Le produit d'addition se dépose sous forme de cristaux jaune citron transparents Les cristaux sont séparés par filtra- tion ou prélevés par aspiration et ils sont lavés avec un peu de N,Ndiméthylformamide ( 3 à 10 ml, de préférence 5 ml pour 2 g de cisplatine). A partir du produit d'addition ainsi obtenu, le diméthyl- formamide est éliminé, de préférence par vaporisation Par exemple, le produit d'addition est abandonné pendant une période prolongée (par exemple 10 à 70 heures, en particulier 10 à 30 heures) à une température comprise entre 15 et 4020, de préfé- rence entre 18 et 25, notamment entre 20 et 227 d, sous vide ( 130 mbar à 1 nbar, de préférence 20 mbar à 1 ybar) On envisa- gera en particulier l'application d'un vide poussé (par exemple 1 Pbar à 1 nbar) Pour l'élimination complète du diméthylforma- mide, on a par exemple besoin, en cas d'application de vide poussé, de 10 ' 30 heures a 1 a température ambiante ( 200 C) Au cas oh l'on opère sous une dépression plus faible que le vide poussé (par exemple sous un vide moyen de 133 à 1,33 mbar), on a besoin le cas échéant de plus de 30 heures pour l'élimination complète du diméthylformamidë Il en va de màme lorsque l'éli- mination du diméthylformamide est effectuée à la pression nor- male ( 1013 mbar), ce qui est également possible L'élimination totale du diméthylformamide est donc possible aussi entre la pression normale et 130 mbar par exemple En cas de simple élimination du diméthylformamide par abandon à l'air sous la pression normale, il convient de veiller à ce que la teneur en humidité de l'air ne soit pas trop élevée; par exemple, d'air doit avoir une humidité relative comprise entre 40 et 50 % ou inférieure à 40 % Au cas o l'on procède à l'élimination du diméthylformamide sous la pression normale à 20 O ou m 8 me à 40 C 0, on obtient par exemple un cisplatine dont le spectre d'absorption dans l'ultraviolet présente un rapport d'absorption 301 (ou 299) nm/246 nm = 4, 63 et un rapport d'absorption 301 (ou 299) nm/355 nm = 5,75 (le second maximum, très aplati, est quelque peu dépla- cé cette fois et se situe à 355 nm; voir fig lb). Le cisplatine obtenu suivant l'invention est homogène à_ la chromatographie sur papier, c'est-à-dire qu'il apparait tou- jours une seule tache homogène sur le chromatogramme sur papier (indépendamment du fait que l'élimination du diméthylformamide est effectuée sous vide ou à la pression normale) Conditions expérimentales: Papier 2043 b de la firme Schleicher und Schttll, Allemagne de l'Ouest; le cisplatine est dissous dans un peu de diméthylformamide; phase mobile, acétone/H 0 ( 9: 1); température, C; développement au moyen de vapeurs d'iode;, 0,4 environ (voir aussi F Basolo et al, J Chromatogr 10 ( 1963), page 262). Pour déterminer s'il reste encore du N,N-diméthylformamide dans le cisplatine, on peut prélever des échantillons et recher- cher la présence d'amide résiduel, par exemple au moyen du spec- tre d'absorption dans l'infrarouge (nujol) Au cas o il reste du diméthylformamide, l'abandon sous pression normale ou le traitement par le vide est poursuivi, et cela jusqu'à ce qu'on ne puisse plus déceler de traces de N,N-diméthylformamide dans le spectre d'absorption dans l'infrarouge Si à cet instant, le spectre d'absorption dans l'ultraviolet donne un rapport A 301 nm: A 246 nm > 4,7, le traitement est achevé (A = absorp- tion) Une autre preuve de l'absence de diméthylformamide est fournie par le' chromatogrammé en phase liquide sous haute pres- sion (UV 220 nm) d'une suspension du produit dans une solution aqueuse 0,1 l de Na Cl Si l'on met en suspension un cisplatine qui contient du N,Ndiméthylformamide dans le maximum possible d'une solution 0,1 l M de Na Ol, tout le diméthylformamide présent se dissout dans l'eau, tandis que le cisplatine reste en partie non dissous La crête de diméthylforrnamide peut être alors déterminée quantitativement Le chromatogramme en phase liquide sous haute pression peut être relevé par exemple avec un appareil couramment utilisé à cet effet (par exemple Philips Pye Unicam; colonne Li Chrosorb RP 18; éluant: eau distillée; vitesse d'écou- lement, 1,2 ml/mn; pression, 220 bar; détecteur, UV 220 nm; enregistreur: sensibilité 0,64, vitesse 3 cm/mn; êchantillons, -20 mg de cisplatine x diméthylformamide (x = 1 à 0) en sus- pension dans 1 ml de solution 0,1 de chlorure de sodium). L'identification de la crête de diméthylformamide s'effec- tue par comparaison avec du diméthylformamide pur en solution 0,11 M de chlorure de sodium. Exemple 2 g de cisplatine, qui a été préparé par la méthode de S C. Dhara, Indian J Chem, 8, 193 ( 1972 ), sont dissous dans 90 ml de N,Ndiméthylformamide à la température ambiante ( 2020 C par exemple) et la solution est filtrée Le filtrat jaune est aban- donné pendant 15 heures à 30 C dans un flacon fermé et, dans ces conditions, il se dépose des cristaux jaune citron clair, trans- parents Après filtration, les cristaux sont lavés avec une petite quantité de diméthylformamide ( 5 ml), puis séchés briève- ment à l'air sur un papier-filtre On obtient 1,5 g ( 60 % par rapport à la teneur en platine) du produit d'addition du cispla- tine avec le N,N-diméthylformamide, Pt(NH 3)2012 C 3 H 7 N O Abandon- nés à l'air, les cristaux perdent progressivement leur transpa- rance et donnent le cisplatine jaune (sans diméthylformamide). Une élimination quantitative du diméthylformamide est obtenue, à 202 C sous vide poussé (par'exemple de i ubar), en l'espace de heures (le vide poussé est créé par une pompe à diffusion de mercure). R 3 V 3 IDICATIOINS 1 Procédé pour la préparation de dichlorure de platine-(II)-diamdi- ne-cis pur, caractérisé en ce qu'on convertit un dichlorure de platine(II)-diammnine-cis obtenu suivant des méthodes de préparation connues, par rraction avec le T,N-diméthylformamide, en un pro- duit d'addition de cet amide, puis on élimine le N,r-diméthyl- formamide. 2 Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la préparation du produit d'addition est effectuée par dissolution du dichlorure de platine-(II)-diamnuine-cisdans le N,T-diméthylforma- mide à une température comprise entre 12 et 302 C, puis par aban- don de la solution à une température comprise entre -10 C et + 5 C. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'élimination du N,IN-diméthylformamide est effectuée sous vide. 4 Dichlorure de platine-(II)-diam Line-cisselon l'une quelconque des revendications 1 à 3. NMédicament, caractérisé en ce qu'il contient, en tant que constituant actif, du dichlorure de platine-(II)-diamine-cis selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, avec un excipient et/ou un diluant pharmacologique usuel. 6 Procédé pour la préparation d'un médicament, caractérisé en ce qu'un dichlorure de platine-4 II)-diammine-cis selon l'une quel- conque des revendications 1 à 4 est transformé, avec des exci- pients ou diluants pharmaceutiques usuels ou avec d'autres substances auxiliaires, en préparations pharmaceutiques, ou est mis sous une forme utilisable. 7 Utilisation de dichlorure de olatine-(II)-diamunine-cis selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 pour la préparation de médicaments. S Utillisation de dichiorure de platine (II)-diainrnioe selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 comme constituant actif d'-un rnédicament.