Brevet FR2536998A1 — publié le 19840608

La présente invention concerne la stabilisation de composés marqués par la radioactivité, tels que des amino-acides et des nucléosides et notamment certaines amines thiocarbonylées utiles pour la stabilisation de ces composés marqués par la radioactivité. Les composés marqués par un isotope radioactif sont utilisés en nombre croissant dans la recherche du diagnostic médical et dans divers autres domaines Toute- fois, la décomposition radiolytique de ces composés a toujours constitué un problème En l'absence d'addition d'un certain type d'agent stabilisant, une solution d'un tel composé peut devenir inutilisable par décomposition en quelques semaines ou même moins La décomposition radio- lytique de ces composés a fait l'objet d'études poussées. Par exemple, la radiochimie des aminoacides est passée en revue dans un article de J Liebster et J Kopeldova paru dans Radiation Biol, 1, 157 ( 1964) et l'autodécompo- sition de composés à marquage radioactif est commentée dans Atomic Energy Review, 10, 3-66 ( 1972). Bien que certains composés particuliers aient été suggérés en vue de la stabilisation, il existe encore des problèmes Le second article mentionné examine les causes et les mécanismes de l'autodécomposition, "qui sont très complexes et qui, dans quelques cas, ne sont pas bien expliqués" (page 3) Après discussion des princi- paux mécanismes selon lesquels la décomposition a lieu, cet article mentionne d'une façon générale, à la page 36, que des tampons tels que le bicarbonate d'ammonium aident à la stabilisation de composés marqués par la radioactivité mais que des précautions doivent être prises afin de s'assurer que le tampon choisi n'interfère pas avec l'utilisation subséquente du composé marqué Par exemple, des tampons au phosphate interféreraient avec des réactions de phosphorylation D'autres composés dont l'utilisation a été suggérée plusieurs fois sont énumérés à la page 35 et comprennent l'alcool benzylique, le glycérol, la cystéamine et le formiate de sodium Toutefois, il est mentionné que chacun de ces composés présente des difficult d'élimination Un autre composé mentionné est l'éthanol, qui est considéré comme fonctionnant avec de nombreux composés Mais l'éthanol a parfois pour effet de sensibiliser réellement certains nucléosides à la décomposition par irradiation et on a donc trouvé qu'ils ne constituaient pas une panacée universelle En outre, s'ils interfèrent avec la réaction dans laquelle le composé marqué par la radioactivité doit être utilisé, l'éthanol doit être éliminé par évaporation, ce qui peut favoriser sa décomiposi- tion Divers composés sont suggérés dans l'Atomic Energy Review ci-dessus pour la stabilisation de composés marqués par la radioactivité susceptibles d'une oxydation, comprenant des anti-oxydants tels que il'hydroxytoluène butylé, l'hydroxyanisole butylé et le mercapto-éthanol. Bien que son application à des amasés marqués par la radioactivité ne soit pas mentionnée, l'inhibition de l'auto-oxydation d'une manière générale par certaines amines a aussi été décrite dans l'art antérieur Des publi- cations récentes portant sur l'inhibition de l'auto- oxydation comprennent les suivantes: "Autoxidation", par R Stroh, page 1049, dans Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), ed E Muller et O Bayer, volume IV/Ib Oxidation II, Georg Thieme Verlag, 1975, et Encyclopedia of Chemical Technology, Kirk Othmer, Interscience Publishers, New York L'utilité de dialkylamines secondaires portant une substitution alpha totale (c'est-à-dire qu'elles ne portent pas d'atomes d'hydrogène sur les atomes de carbone adjacents à l'azote) et de diarylamines secondaires (éga- lement dépourvues d'atomes d'hydrogène en alpha) comme anti-oxydants est connue Toutefois, l'utilisation d'amines primaires, secondaires et tertiaires portant des atomes d'hydrogène en alpha n'est pas connue sous ce rapport, et en fait, il a été suggéré que de telles amines n'étaient pas efficaces à cette fin Ces anti-oxydants posent beaucoup de problèmes qui sont les mires quepour d'autres composés mentionnés ci-dessus, auxquels s'ajoute le fait qu'ils sont générale- ment insolubles dans les solvants utilisés pour dissoudre et conserver des composés marqués par la radioactivité en vue de leur utilisation dans des études biologiques. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique N 3 876 55 décrit des compositions lubrifiantes utilisées pour améliox les propriétés anti-oxydantes et les propriétés inhibitrice de rouille de ces compositions lubrifiantes L'association d'additifs comprend un alkylènedithiocarbamate, mais rien ne suggère l'utilisation de tels composés comme agents stabilisants pour des composés marqués par la radioactivité V S Etlis et collaborateurs décrivent dans "Synthesis and Anti-Radiation Properties of Polymeric Dithiocarbamates", Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal, page 10, n 4, pages 33-35 (avril 1976), la synthèse et la préparation de dithiocarbamates de sodium et d'ammonium polymériques hydrosolubles, indiquent qu'on peut les utilis comme agents de protection contre les radiations et rappor- tent des essais effectués chez la souris avec ces composés, en vue de la protection contre l'irradiation par le cobalt Co ( 1000 R, intensité de 26-30 R/s) Toutefois, aucune activité de stabilisation de composés marqués par la radioactivité n'est attribuée aux composés en question. J Barnes et collaborateurs décrivent dans Eur J Med Chem Chimica Therapeutica, novembre- décembre ( 1975), 10, n 6, pages 619-622, des sels de sodium d'alcènebisdithiocarbamates et d'acides amino- alkyldithiocarbamiques, destinés à être utilisés comme agents de protection contre les radiations Ces composés ont été testés chez la souris en vue de leur utilisation comme agents de protection contre les radiations L'atten- tion est attirée en particulier sur le composé n 11 du tableau I, page 620, dont la préparation est décrite à la page 621 dans les paragraphes qui font immédiatement suite au tableau II On considère que la structure du comp Qsé 11 a été identifiée de façon incorrecte Rien n'indique ni ne suggère dans la publication de Barnes et collaborateurs que l'un quelconque des composés en question puisse être utilisé pour stabiliser des composés et des solutions de composés marqués par la radioactivité. Les demandes de brevets des Etats-Unis d'Amérique N 105 272 et N 178 609 déposées respectivement le 19 décembre 1979 et le 15 août 1980 font connaître - la stabilisation de composés marqués par la radioactivité par l'addition à des solutions de ces composés, d'un composé à squelette pratiquement insoluble, de préférence une résine telle qu'une résine d'échange ionique, composé auquel un groupe ammonium quaternaire a été lié; ou une amine aliphatique primaire, secondaire ou tertiaire-hydrosoluble qui n'interfère pas avec l'utilisation envisagée pour le composé particulier, marqué par la radioactivité, qu'il s'agit de stabiliser. La présente invention concerne un procédé pour stabiliser une solution d'un composé marqué par la radio- activité, procédé qui consiste à ajouter à ladite solu- tion une diéthylènetriamine thiocarbonylée telle que, par exemple, l'acide N,N-bis-( 2-aminoéthyl)dithiocarbamique ou la di( 2dithiocarbamyléthyl)amine, et leurs sels La présente invention concerne également une solution d'un composé marqué par la radio-activité, maintenue en contact avec un tel composé, et à titre d'article manufacture, une fiole scellée contenant cette solution. Les diéthylènetriamines thiocarbonylées sont utiles pour la stabilisation de solutions d'une grande variété de composés marqués comprenant par exemples des aminoacides, des nucléotides, des nucléosides, des glucides, des médicaments, des lipides, des stéroides, etc, marqués au tritium, au carbone-14, au soufre-35, au phosphore-32, à l'iode-125, à l'iode-131, etc. Conformément à la présente invention, des composés marqués par la radioactivité peuvent être stabi- lisés par des solutions diluées d'un dérivé d'acide diéthylènetriaminedithiocarbamique ou d'un sel soluble de ce dérivé Le dérivé d'acide diéthylènetriaminedithio- carbamique peut être aisément préparé par réaction de diéthylènetriamine avec le sulfure de carbone Des agents stabilisants particulièrement appréciés, conformément à l'invention, sont l'acide N,N-bis( 2-aminoéthyl) dithiocarbamique la di( 2-dithiocarbamyléthyl)amine et leurs sels, par exemple les sels de sodium, potassium et ammonium. Toute quantité des composés stabilisants de l'invention est bénéfique pour prévenir la décomposition de composés marqués par la radioactivité Il est toute- fois appréciable que le composé stabilisant soit présent à des concentrations comprises dans l'intervalle d'environ 0,1 à environ 100 m M selon l'activité spécifique du composé marqué par la radioactivité, la concentration dudit composé en solution et le radio- isotope particulier qui est utilisé comme indicateur En général, il est préférable que la concentration de l'agent stabilisant soit comprise entre 102 et 5 x 103 fois la concentration du composé marqué. Par exemple, un composé tritié d'activité spécifique égale à 100 Ci/mmole à une concentration de 1 m Ci/ml contien- drait avantageusement l'agent stabilisant à une concentra- tion comprise dans l'intervalle d'environ 10 à 20 m M (excès d'un facteur 103) De même, si l'indicateur utilisé est le phosphore-32, qui pourrait produire une activité spécifique de l OOO Ci/mmole à la concentration de m Cï/ml, une concentration de 10 à 20 m M d'agents stabi- lisants serait appréciée, c'est-à-dire un excès de 10 Le procédé de la présente invention peut être utilisé avec l'un quelconque des solvants normalement utilisés pour conserver des composés marqués par la radio- activité, comme l'eau, l'éthanol, des mélanges d'eau et d'éthanol en toute proportion, des acides minéraux et organiques dilués et d'autres solvants de ce genre utilisés dans l'art antérieur Toutefois, certains des dérivés de diéthylènetriamine qui peuvent être utilisés conformément à l'invention n'offrent pas la stabilité à un p H bas. Ainsi, par exemple, l'utilisation de l'acide N,N-bis( 2- aminoéthylène)dithiocarbamique et de la di( 2-thiocarbamyl- éthyl)amine est limitée par l'instabilité au-dessous de p H 6 Par conséquent, en général, on donne la préférence à un p H égal ou supérieur à 6. La présente invention peut être utilisée pour prévenir la décomposition de composés marqués par la radio- activité, qui ont été marqués avec l'un quelconque des radio-isotopes utilisés à de telles fins, par exemple le tritium, le carbone-14, le phosphore-32, le phosphore-33, le soufre-35, et les divers radio-isotopes de l'iode, y compris l'iode-125 et l'iode-131. Le composé marqué par la radioactivité peut être l'un quelconque des composés susceptibles d'une décomposition radiolytique, tels que des aminoacides, des catécholamines, des nucléotides-triphosphates, des nucléosides, une protéine, des peptides, des glucides, des -médicaments, des lipidest des acides gras, des stéroldes et autres composés marqués par la radioactivité. Des exemples représentatifs de composés du type entrant dans la catégorie des 1 "médicaments" compren- nent les suivants: acide abscisique, (+) cis, trans- /-2-14 C/; acétaminophène; acétyl-2-aminofluorène, N-/ 9 14 C 7; acétyle concavanaline A; acétyl-5-méthoxy- tryptamine, N-/ 2-aminoéthyl-2-3 H 7; acide acétylsalicy- lique, -carboxy-14 C 7; a-glycoprotéine acide, /-125 17; ACTH; hormone adrénocorticotrope, /-125 17-(humaine); ADTN; albumine (de sérum de boeuf), /-12517; allyl- normétazocine; alprénolol;"Améthoptérine"; amino- clonidine, p-_/3,5-3 H 7; amino-6,7-dihydroxy-1,2,3,4- 3- tétrahydronaphtalène, 2-:-/-5,8-3 H 7; aminopyrine, /-diméthylamine-14 C 7; amino-12,4-triazole, 3-/ 5-14 C 7; sulfate d'amphétamine, D-/ -3 H(G) 7; angiotensine 111 ( 4-L-isoleucine), I tyrosyl-3,5-3 H(N)7; angiotensine 11 ( 5-L-isoleucine), / tyrosyl-3,5-3 H(N)7; angiotensine 11 - ( 5-L-isoleucine), _ -tyrosyl-125 I/-(monoiodé); angio- tensine 1 ( 5-L-isoleucine), /-tyrosyl-125 II/-(monoiodd l; antipyrine, /N-méthyl-14 C 7; apomorphine, L-(-)-/ 8,9- 3 Hi; acide ascorbique, L-/ 1-14 C 7; hexachlorure de benzène,Y -/-14 C(U)7; benzidine, /-14 c(U)7; benzo-/-a 7- pyrène, /-1,3,6-3 H 7; sérum-albumine de boeuf; bradyki- nine, /2,3-prolyl-3,4 H(N)7; ( 8-tyrosine)-triacétate de bradykinine, /-8tyrosyl-12517; a-bungarotoxine, /-125 I/; cafféine, /-1-méthyl-14 C 7; capsalcine; 3 carazolol, DL-/3,6-H(N); chloramphnicol, carazolol, DL-/ 3, 6 H(N)7; chloramphénicol, 1 4 dichloracétyl-1,2 C 7 chloroquinesel di-pú-phospho- rique 7, /-noyau-3 14 C 7 chlorhydrate de chlorpromazine, ú-noyau benzénique H 7 chlorhydrate de clonidine, /-4 3 H 7; cocaîne, leyo-/benzoyl-3,4 3 H(N)7; coenzyme 3 14 - A, /_ H(G)7; colchicine, / noyau C, méthoxy C/- 3 - colchicine, / noyau C, méthoxy- H/; concanavaline A, /_ 3 H(G)7; concanavaline A, /_ 175 T 7; concanavaline A acétylée, N-/-acétyl H/; acide cyclohexényl-3,5- 14 CI_ diméthylbarbiturique, 5-/-2 cyclohexyladénosine, 8 3 14 N / adénine-2,8 " H 7; cyclophosphamide, / noyau-4 c 7- cytochalasine B, /-4 3 -/_; daunomycine, /-3 H(G)7- daunorubicine; désipramine chlorhydrate de desméthyl- imipramine, /-2,4,6,8 31 FI_ diazepam; 2-(/-2,6-dichloro- 4-amino 7 phénylimino) -imidazoline diéthyl-8-phénylxanthine, 1,3-/phényl-4 H/; chlorhydrate de dihydroalprénolol, lévo ropyl-1,2,3 3 H 7 _; chlorhydratede dihydroalprénolol, CP - lévo-/ noyau, propyl H(N)/; dihydroalprénoloi, /-nona- namide-6,7,9 3 H(N)7; dihydro-a-ergocryptine, 9,10-3 H(N)7- dihydromorphine, /-N-méthyl 3 H 7; dihydropicrotoxinine, a-/-8,10 3 H 7; dihydrostrychnine, /-21,22 H 7;II Dilantine II ú-2,6- diméthoxyphénoxyéthy 17 aminométhyl-1,4-benzodioxanne, 2-ú-phénoxy-3 3 H(N)7 (WB 4101); diméthylbenz/ -a 7 anthracène, 1,12-/ diméthyl C/ acide ( 1,3-diméthylbutyl)-5-éthyl- barbiturique, (-)-5-/ butyl-2,3,4 dichlorhydrate de diméthylhydrazine, NN-1 méthyl C 7; dinitrosopipé- razine, NN-/_ 14 C(U)7; dioxolane, L(-)-cis, /-2-méthyl 3 H 7 diphény 1 hydantoine, 5-,5-/-4 14 C 7; diphény 1 hydantoine, , 5-/ phényl-4 H (N) DMBB et (+) -OEMB; dompéridone, 3 3 ú-noyau benzénique H/ doxépine, /-Méthyl H 7- encéphalinamide ( 2-D-alanine-5 L-méthionine), / tyrosyl- 3,5 31 j/-_; encéphaline ( 2-D-alanine-5-D-leucine), ú-tyrosyl-3,5 H(N)/; encéphaline ( 5-L-leucine), 3 125 tyrosyl-3,5 H(N)/; encéphaline ( 5-L-leucine), / i 7; encéphaline ( 5-Lméthionine), tyrosyl-3,5 3 Hj N)_/-; encéphaline ( 5-L-méthionine), I/; facteur de crois- sance épidermique, /-125 17; -carboline-3-carboxylate d'éthyle, /-éthyl-2 H 7 éthylcéto- cyclazocine, 9 11/ acide éthyl-5-(l-méthylbutyl)- 2536998. barbiturique, 5-/Fnoyau 2 C/-; éthyl-N-nitrosourée, N-I éthyl-1 14 C 7; acide éthyl-5-phénylbarbiturique, L 5 foyau -2 _ /_; acide éthyl-5phénylbarbiturique, 5- _ (G 7 f ibroneçtine, /F 125,7-'; f lunitrazepam, 3 14 Iméthyl 117; fluorouracile, 5-/ 6 C 7;f lurazepam, 3 125 - Féthylène 11/; gélatine, I 1/; gibbérelline A 1, 3,4 3 H(N)7; glucagon, I2 17-(inoniodé); hormone libérant la gonadotrophine;halopéridol, _ H_)7 halothane,,Pi 14 C 7 _; sel de sodium de l'héparine, I 311 (G)1; hexabromobiphényle, 2,4,5,2 I,41,5 I-/-14 > -1 4 (u 7 hexachlorobenzène, I-1 C-(U)7; hexachlorobiphényle, 2,4,5,2 ',4 ',5 '-/-1 C(U) 1; hippuryl-Lhistidyl-L-leucine, c glvcine-1-14 Cj; dichlorhydrate d'histamine, únoyau, méthylène 3 H(N)7; gonadotrophine chorionique humaine, -125 -125 I I 7; hormone humaine de croissance,I i 7 hydroxyacétanilide, p-I 3 H(G) 7; hydroxybenzylisoprotérénol, p-I 7 3 H 7;hydroxybenzylpindolol, /-125 7 1221; chlorhydrate d'imipramine, /2,4,6,8 117;chlorhydrate d'imipramnine, / N-méthyl-31 H/ insuline (porcine) /-125 7 monoiodée); iodanitipyr J$e, 4-/ N-méthyl 14 c 7 iodan- tipyrine, 4/-12517; iodantipyrine, 4-I 1317; iodo- hydroxybenzylpindolol, / -125 I 7; chlorhydr ate d'isoguvacine -3 14 C IH 17; dinitrate d'isosorbide, F c 7 chlorhydrate de lidocaine, /carbonyl? 10/C; lindane; LSD; hormone libérant l'hormone lutéinisante, F pyroglutamyl-3,4-H 7 hormone libérant l'hormone lutéinisante, / 2 i 7 3diéthylamide d'acide lysergique, / N-mèthyl 11/ yhormone inhibant la libération de la mélanotropine, /-L-proline- 2,3,4,5 H-;mélatonine, m 6 pyramine; bromhydrate de méthadone, lévo-/1 1-;méthotrexate, /L-glutamyl-3,4- 3 H_ methscopolamine e -carboline-3-carboxylate-de méthyle, Fméthyl 3 H 7-; méthylcholanthrène, 3 6 14 c 7- acide méthyl-D-aspartique, N-/ méthyl 117; chlorure de méthyl -mercure, / f 203 Hi/7; méthyl-N'-nitro-N-nitrosoguani- 14 -/ dine, N-/ méthyl _I_; méthyl-N'-nitroso-p-toluène- sulfamide, N-I méthyl 14 C 7; méthyl-N-nitrosourée, N- 14 3 /méthyl C 47; mnéthyl-N-nitrosourée, N-I méthyl 117- méthyl-2-phényléthyladénosine, L-N 6 -1 -/adénine-2,8 H, 3- éthyl-2 H/-; méthyl-N-vanillyl-nonanamide; iodure de 2-méthyl-4triméthylammoniumméthyl-1,3-dioxolane chlorhydrate de miansérine, P/Nméthyl 3 H 7; MIF; morphine 3 3 - /-N-méthyl HI; MTX; muscimol, / méthylène H(N)/ naloxone, /N-allyl-2,3 3 HI; neurotensine, I 3,11- tyrosyl-3,5 3 H(N)7; nicotine, /Fpyrrolidine-2 14 c 7 nicotine, DL-/ pyfrolidinyl H(N)7-; acide nipécotique, 3 3 I noyau H 7-; nitrendipine, I 5-méthyl-H 7; nitroso- diéthylamine, N-1 éthyl-1 C 7; nitrosodiméthylamine, N-F-méthyl Cl; nitrosoéthylméthylamine, N-I éthyl-1- 14 C 7;nitrosométhylurée; nitrosonornicotine, N'/-pyrro- lidine-2-14 C 7; nitrosopipéridine, N-/-2,6-14 C-/; nitroso- 14 - pyrrolidine, N-I 2,5, C/; N-méthylscopolamine; acétate d'oxotrémorine-M, I méthyl H 7; sel de sodium de 1 acide,-', pantothénique, D-/ 1 1 c 7; paracétamol; parathion, 14- Zfphényl CI; chlorhydrate de pargyline, I phényl-3, benzyl 3 H 7; pentobarbital; phéncyclidine, Z 7 pipéridyl- 3,4-3 H benzamine, ú 7 phénoxy HR(N)7; phénylisopropyladénosine phénytoine; 12,13-dibutyrate de phorbol, 120 H 12-,myristate-13-acétate de phorbol, P 20-3 H 3 -1 fturoyl-5 Hi; prolactine (humaine), I-1 7 i; pro- lactine (rat), F 12 7; pr Qlyl-leucyl-glycinamide propanolol, L-/ 4 H 7; e-carboline-3-carboxylate de propyle, / 3 3- /-N-propyl H(N)7 pyrilamine, /pyridinyl-5 HI- benzilate de quinuclidinyle, L-/ benzïlique-4,43 H(N)7- 3 3 rauwolscine, / méthyl H 7; réserpine, Fbenzoyl H(G)7- T 3 inverse; R 05-4864, / N-mnéthyl-H 7; acide salicylique, /-7 î méthylchlorure de scopolamine, / N-méthyl H 7- SXF-10 047, I-N-allyl-2,3 3 Ii; somnatostatine, 1-tyrosine, _ 7 monoiodée; spipérone, ú noyau benzénique H 7-; "Spiropéridol"; substance P ( 8-Ltyrosine), /F 125 i 7 N-L-propionate-2,3-3 H 7;acide sulfanilique, I-3 si; taurine, Z/-36; tétracycline, -7 H(N)7-(base libre); tétrahydroisoxazolo( 5,4-c)pyridine-3-ol,4,5,6,7-/P 5,7 3 HI- (THIP); théophylline, pa-814 c 7; hormone stimulant la thyroide (humaine), /-125 17; hormone libérant la thyrotropine,Zf L-proline-2,3,4,5-3 H(N) 7; hormone libérant la thyrotropine, ( 3-méthyl-histidine 2); / L-histidyl-4- 3 3 3 H(N), L-prolyl-3,4-3 H(N)7; hormone libérant la thyro- -125 2 tropine, / 125 I 7-(monoiodée); thyroxine, L-/ -125 i 7; 3 3 -"- "Tiotidine, /-méthyl H-(C 125 211); trifluoro-2-bromo- chloréthane; triiodothyronine, L-3,5,3 '-/ 1257; tri- iodothyronine, L-3,3 ',5 '-/_ 12517-(T 3 inverse); chlorure de tubocurarine, dextro-/ 13 -3 H(N)_ 7;'"Valium"l(marque déposée de la firme Hoffmann-La Roche); vasopressine, 8- arginine, I/25 I; vitamine A 1 (entièrement trans), / 1 H(N)7; WB-4101;"Xylocaine"; yohimbine, /-méthyl H/- Les composés stabilisants conformes à la présente invention sont particulièrement efficaces avec, par exemple, la méthionine, le triphosphate de déoxygua- nidine et l'encéphaline marqués par un radio-isotope. Les composés marqués par un radio-isotope sont normalement commercialisés dans des fioles bouchées contenant une solution du composé marqué particulier Le composé stabilisant est simplement ajouté à une solution du composé marqué par la radioactivité qui est normalement expédiée en fiole bouchée stérilisée de laquelle le composé stabilisé est retiré à l'aide d'une seringue. D'autres détails de la présente invention ressortent des exemples suivants donnés à titre non limi- tatif. Exemple 1 Art antérieur De la 35 S-méthionine a été conservée avec divers agents stabilisants connus et la pureté radio- chimique a été mesurée au cors du temps La méthionine provenait de lots normaux de NEN G-009 H à la dose de m Ci/ml, dans du 2-mercaptoéthanol aqueux 10-m M, avec une activité spécifique supérieure à 1000 Ci/m M La pureté radiochimique a été déterminée par une séparation des impuretés par chromatographie en phase liquide sous haute pression, suivie d'une détermination quantitative de la radioactivité sur colonne Les valeurs de pureté indiquées représentent une moyenne de déterminations de "Tiotidine (Mléthyl H)" est une marque déposée d'ICI 253699 E la pureté portant sur trois emballages Les tableaux I à III illustrent la stabilisation offerte par des agents stabilisants de l'art antérieur, aux températures indiquéel TABLEAU I Conservation à -20 C Echan- tillon Témoin Chlorhy- drate de tris, p H 7 ( 1 M) TABLEAU II Echan- tillon Témoin Pureté initiale Nombre de jours 3 3 Pureté initial Conservation à Nombre de Le jours Pureté moyen- ne (%) 4 C Pureté moyen- ne (%) Variation moyenne de pureté (%) 0 o Variation moyenne de pureté (%) Polyéthy- lèneimine 92 (poids molé- culaire moyen 000; 75 m M dans l'azote) TABLEAU III Témoin Conservation à -200 C 7 80 29 71 Chlorhydrate 92 7 88 5 de tris (p H 29 29 12 7; 50 m M) EXEMPLE 2 Préparation de la diéthylènetriamine thiocarbonylée Du sulfure de carbone ( 2 ml, 33 m 14, a été ajouté sous agitation à une solution de diéthylènetriamine DETA ( 1,8 ml, 18 m M) dans une solution aqueuse de NH 40 H ( 1,5 %, 20 ml) La suspension de deux phases résultante a été agitée pendant 4 heures puis diluée avec de leau ( 10 ml) et filtrée en donnant la diéthylènetriamine thiocarbonylée brute sous la forme d'une substance solide blanche La matière brute a été lavée à l'isopropanol ( 2 x 100 ml) et séchée pendant environ 16 heures sous vide ( 40 C/2,67 k Pa), en donnant ainsi la diéthylènetriamine thiocarbonylée ( 1,83 g; P F = 120121 C) La matière a été caractérisée par son spectre infrarouge (K Br), 1460-1470 (large, s) cm 1, caractérisant la présence du dithiocarbamate Le spectre RMN des noyaux de carbone-13 (abondance naturelle) (d 6-DMSO) présentait des résonances à 203,3, 182,9, 182,6 ppm par rapport au tétraméthylsilane utilisé comme étalon de référence, ces résonances étant caractéristiques du dithiocarbamate Le spectre ultra- violet (H 20) a confirmé les attributions ci-dessus. Valeurs trouvées à l'analyse, C = 29,24; H = 6,48; N = 18,34; S = 41,42. La matière consiste en un mélange de dérivés d'acide diéthylènetriaminedithiocarbamique formés par addition à 1:1 et à 2:1 de sulfure de carbone à la DETA, ce qui donne un poids moléculaire moyen de 217 Une formu- lation à 4,5 mg/ml représente donc une dose de 20 m M. La substance est, peu soluble dans l'eau et à p H acide. -35 De la 35 S-méthionine a été conservée en solu- tion avec la diéthylènetriamine thiocarbonylée et la pureté radiochimique a été mesurée en fonction du temps, comme dans l'exemple 1 Les tableaux IV et V illustrent l'effi- cacité de stabilisation du composé de l'invention. TABLEAU IV Conservation à -20 C Echan- tillon Témoin Pureté initiale Tricine (p H 7; m M) Diéthylène- triamine thiocarbonylée ( 4,5 mg/ml; p H 7) Nombre de jours *89 6 88 6 Pureté moyenne (%) Variation moyenne de pureté (%) 1 il TABLEAU V Echan- tillon Témoin Diéthylène- triamine thiocarbonylée (p H 7) Tricine (p H 7; m M) Conservation à 4 C Pureté initiale Nombre de Pureté jours moyenne (%) 2 77 4 64 7 48 2 94 4 93 7 91 Variation moyenne de pureté (%) Les tableaux IV et V illustrent l'utilisation de diéthylènetriamines thiocarbonylées pour une stabilisa- tion efficace de composés marqués par la radioactivité. Du fait que la décomposition rapide de la 35 S-méthionine représente un modèle accéléré de décomposition radiolyti- que de composés à marquage radioactif en solution, la diéthylènetriamine thiocarbonylée est utile pour stabiliser d'autres composés à marquage radioactif tels que ceux qui sont énumérés ci-dessus. - Exemple 3 Préparation de N,N-bis-( 2-aminoéthyl)dithiocarbamate de sodium On a ajouté du sulfure de carbone ( 10 ml, 167 m M) goutte à goutte en agitant, sous atmosphère d'azote, à une solution de DETA ( 9 ml, 88 m M) dans de l'hydroxyde de sodium éthanolique à 15 % ( 50 ml), à une température de 5 C La solution a pris une teinte jaune et de l'éthanol ( 50 ml) a été ajouté sans interrompre l'agitation à -5 C jusqu'à l'apparition d'un précipité. On a laissé le mélange réactionnel se réchauffer à 25 C en agitant sans interruption pendant 16 heures Le préci- pité a été recueilli, lavé à l'isopropanol et séché à l'étuve à vide à 40 C pendant 22 minutes en donnant 3,6 g ( 20 %) de composé ayant un point de fusion de 122-124 C. Spectre infrarouge (K Br) 1480 cm-1. Résonance magnétique des protons (Na OD/D 20) ppm 8 4,09 (t, 1, J = 7 Hz); 2,95 (t, 1, J = 7 Hz) Résonance magnétique des noyaux de 13 C (Na OD/D 20) ppm 6 211,63 (c = s); 57,12; 38,84; Spectre UV (p H 8) max 293,258 nm Analyse: C (%) H(%) N(%) S(%) Calculé pour C 5 H 13 N 352 Na 29,70 6,44 20,79 31,68 Trouvé: 30,13 6,61 20,09 34,67. Exemple 4 La diéthylènetriamine thiocarbonylée et le N,N-bis-( 2-aminoéthyl) dithiocarbamate de sodium ont été utilisés à diverses concentrations pour stabiliser des solutions d'un peptide, à savoir l'encéphaline ( 5-L- méthionine) / 3 H/, d'un nucléotide-triphosphate, à savoir le triphosphate de déoxyguanidine / 35 P) et d'un amino- acide, à savoir la méthionine / 3557 Les puretés radio- chimiques ont été déterminées comme dans l'exemple 1 par chromatographieen phase liquide sous haute pression, l'expression quantitative étant effectuée au moyen d'un contrôleur d'écoulement mesurant la radioactivité, placé en arrière de la colonne Les valeurs de pureté énumérées représentent une moyenne de trois échantillons et des déterminations individuelles de pureté Les tableaux VI VIII illustrent l'efficacité de stabilisation des composés de l'invention TABLEAU VI Conservation du triphosphate de déoxyguanidine -32 p_ 7, -* 800 Ci/mole 12,8 m Ci/ml, à 4 C Pureté Pureté Variation Echan initiale Nombre de moyenne moyenne de tillon (%) jours (%) pureté (%) Témoin 90 1 9 81 3 81 9 O O 90 N,N-bis-2-amino- éthyl)dithio- carbamate de sodium m M 90 1 88 2 3 75 15 9 20 70 m M 90 1 88 2 3 84 6 9 53 37 m M 90 1 88 2 3 83 7 9 70 20 TABLEAU VII Conservation de la méthionine /-35 7 1004 Ci/m Mole, m Ci/ml, m Ci/ml à 4 C Pureté Nombre de Pureté Variation Echan initiale jours moyenne moyenne de tillon (%) (%) pureté (%) Témoin 88 3 72 16 64 24 47 41 14 39 49 Diéthylène 86 3 86 0 triamine thio 5 86 0 carbonylëe 10 85 1 ( 20 m M) 14 83 3 Diéthylène 83 3 82 1 - triamine thio 5 82 1 carbonylée 10 81 2 (l Onimm) 14 81 2 Diéthylène 81 3 80 1 triamine thio 5 80 1 carbonylée 10 77 4 ( 5 MM) 14 74 7 TABLEAU VIII -3 Conservation de l'encéphaline ( 5-L-méthionine) /3 H 7, Ci/mmole, à 100 C Pureté Nombre de Pureté Variation Echan initiale jours moyenne moyenne de tillon (%) (%) pureté (%) Témoin 99 27 92 7 46 87 12 67 84 15 113 75 24 DETA thio 99 27 98 1 carbonylée, 47 98 1 m M 68 98 1 113 96 3 La formule développée de l'acide N,N-bis-( 2- aminoéthyl)dithiocarbamique est la suivante: / SH N H 2 N NH 2 La formule développée de la di( 2-dithiocarbamyl- éthyl)amine est la suivante: H HS\ S Il va de soi que la présente invention n'a été décrite qu'à titre explicatif mais nullement limitatif, et que de nombreuses modifications peuvent y être apportées sans sortir de son cadre. REVENDICATIONS 1 Composition, caractérisée en ce qu'elle comprend un mélange d'un composé marqué par un radio- isotope et d'une diéthylènetriamine thiocarbonylée, comme agent stabilisant, -le composé marqué par un radio-isotope étant choisi de préférence dans le groupe consistant en aminoacides, peptides, protéines, nucloétide-triphosphates, nucléosides, glucides, médicaments, lipides, catéchol- amines, acides gras et stéroides. 2 Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce que le composé marqué par un radio- isotope est marqué avec le tritium, le carbone-14, le soufre-35, le phosphore-32, l'iode-125 ou l'iode-131. 3 Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce que l'agent stabilisant est présent en une quantité d'environ 102 à 5 x 103 fois la concentra- tion molaire du composé marqué par un radio-isotope, de préférence en quantité d'environ 0,1 à environ 100 m M. 4 Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce que l'agent stabilisant est l'acide N,N-bis( 2-aminoéthylène)dithiocarbamique ou la di( 2- thiocarbamyléthyl)amine. Composition suivant l'une des revendications 1 et 4, caractérisée en outre en ce qu'elle a un p H égal ou supérieur à 6 environ. 6 Un nécessaire comprenant un récipient qui renferme une composition suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5, ledit récipient étant de préférence une fiole scellée dont le contenu est stérilisé. 7 Procédé pour stabiliser un composé marqué par un radio-isotope, caractérisé en ce qu'il consiste à mélanger ledit composé et, à titre d'agent stabilisant, une diéthylènetriamine thiocarbonylée, ledit composé marqué par un radio-isotope étant de préférence choisi dans le groupe comprenant des aminoacides, un nucléotide. triphosphate, des nucléosides, une protéine, des peptides, des glucides, des médicaments, des lipides, la catéchol- amine, des acides gras et des stéroides. 8 Procédé suivant la revendication 7, caractérisé en ce que le composé marqué par un radio- isotope est marqué au tritium, au carbone-14, au soufre-35 au phosphore-32, à l'iode-125 ou à l'iode-131. 9 Procédé suivant la revendication 7, caracté risé en ce que l'agent stabilisant est présent en une quantité d'environ 102 à 5 x 103 fois la concentration molaire du composé marqué par un radio-isotope, la propor- tion d'agent stabilisant étant de préférence comprise entre environ 0,1 mmole et environ 0,1 mole. Procédé suivant la revendication 7, caract( risé en ce que l'agent stabilisant est l'acide N,N-bis- ( 2-aminoéthyl)dithiocarbamique ou la di( 2-thiocarbamyléthyl)- amine. 11 Procédé suivant l'une des revendications 7 et 10, caractérisé en ce que le p H a une valeur égale ou supérieure à environ 6.