Brevet FR2540491A1 — publié le 19840810

La présente invention concerne de nouvelles nitrosourées, leur procédé de préparation et leur application en thérapeutique. On sait que certaines halogéno-alkyl-nitrosourées, en particulier certaines 2-chloro-éthyl-nitrosourées, constituent une classe de composés particulièrement intéressants en raison de leur activité oncostatique sur des tumeurs malignes chez l'animal et chez l'hommne et que ces composés sont utiles pour la chimiothérapie du cancer. De nombreux efforts ont été mis en oeuvre pour développer de nouveaux composés de cette série pouvant présenter une plus grande efficacité antinéoplastique et/ou une toxicité plus faible. C'est ainsi que tout récemment de nouvelles nitrosourées, dérivées d'amino-acides libres côté C-terminal ou d'amides ont été proposées Ces dérivés ont montré une activité cytotoxique intéressante. La présente invention concerne de nouvelles nitrosourées, dérivées d'amino-acides, qui mettent à profit le caractère poly-fonctionnel des amino-acides qui, pour les plus simples, présentent au moins deux sites réactifs: une fonction amine et une fonction acide. Conformément à l'invention, la fonction amine permet le greffage d'une entité cytotoxique nitrosourée, tandis que la fonction acide permet le greffage d'une entité moutarde à l'azote. L'invention concerne plus particulièrement ces composés de formule Y N(R)-A-C 1 +X O -0 de séries L, D, DL, allo et thréo, dans lesquels 2540491 t A représente le fragment d'un amino-acide de formule HN(R)-A-COOH, o R représente un atome d'hydrogène, un radical organique en particulier un radical alkyle, ou bien forme avec l'atome d'azote et A un hétérocycle; Y représente un radical nitrosourée de formule O O Ili l I C 1-CH 2-CH 2-N-C ou CH -N-C; et NO NO X représente un radical moutarde à l'azote de formule Cl-CH 2-CH 2-NH-,(Cl-CH 2-CH 2) 2 N ou (Cl-CH 2-CH 2)2 N-C 6 H 4-NH- Ces composés portent ainsi deux entités cytotoxiques reconnues, à savoir au moins une nitrosourée Y sur le côté N-terminal de l'amino-acide et au moins une moutarde à l'azote X sur le côté C-terminal Dans le cas o l'acide aminé de base comporte deux fonctions acides (acide aspartique par exemple), le composé possède alors une nitrosourée et deux entités moutardes à l'azote. Dans le cas o l'acide aminé de base comporte deux fonctions amines (lysine par exemple), le composé possède alors deux entités nitrosourées et une entité moutarde à l'azote. Il s'agit par conséquent de composés polyfonc- tionnels qui se différentient fondamentalement des composés monofonctionnels connus comportant une entité nitrosourée greffée sur un amino-acide. Un premier-groupe de composés selon l'invention correspond à la formule Y NH-CH-C X (la) RI O R' O dans lesquels: R' est choisi parmi les radicaux H,-CH 3 -CH 2 OH, -CH-OH, -CH(CH 3)2, -CH 2-CH 3, -CH 2-CH(CH 3) 2 ' CH 3. CH -CH-CH 2-CH 3 t H -CH 2-SH, -CH 2:CH 2-S-CH 3, CH 2- -CH 2 I jCH2 OH -CH 2-CO-NH 2, -CH 2-CH 2-CONH 2, -(CH 2)n CO-XD -(CH 2)n -NH-Y, (CH 2) 3 NH-C-NH-Y O -CH 2-CH 2 SH, -CH 2-CH 2-OH, -(CH 2)2 CH-OH-CH 2-NHY; NH n représente un nombre entier de 1 'à 7; et X et Y ont la même signification que ci-dessus. Ce premier groupe comprend donc essentiellement les acides aminés naturels et leurs-dérivés. Un deuxième groupe de composés selon l'invention correspond à la formule 4 Y NH-(CH 2)n X (Ib) O dans lesquels n représente un nombre entier de 1 à 7; et X et Y ont la même signification que ci-dessus. Ce deuxième groupe comprend donc des amino-acides non naturels puisqu'ils ne peuvent être obtenus que par synthèse. Un troisième groupe de composés selon l'invention correspond à la formule R" (Ic) ou Y (Id) YA-x l o y dans lesquels ll R représente un radical organique en particulier un radical alkyle; et X et Y ont la même signification que ci-dessus. Parmi les composés préférés de l'invention, il faut citer ceux pour lesquels A dans la formule I représente le fragment d'un amino-acide choisi parmi Ala, 8 Ala, Asp, Asn, Gly, GABA, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Trp et Tyr. Le procédé de préparation des composés de formule I peut être représenté par le schéma suivant P N(R)-A-C O Act o P N (R) -A-C X o j' O H N N(R) -A-C X O Y N(-R)-A-C X O Le procédé de-l'invention comporte les étapes suivantes: On fait tout d'abord réagir un composé de formule P N(R)-A-C 4 O Act (II) o A a la signification ci-dessus, P représente un, groupement protecteur et Act un groupement activant, sur le chlorhydrate de l'amine de formule HX (III) o X a la signification ci-dessus, pour donner un composé de formule P N(R)-A X (IV) O On hydrogène ensuite le composé de formule IV pour donner un composé de formule H N(R)-A t X (v) On fait ensuite réagir le composé de formule V avec un nitrosocarbamate de formule y-O Act (VI) o Yet Act ont la signification ci-dessus. Dans le procédé ci-dessus, on a utilisé comme entités nitrosourées la 2chloroéthyl-hitrosourée et la méthyl-nitrosourée et comme entités moutarde à l'azote, la 2-chloroéthylamine, la bis-( 2-chloroéthyl) amine et la N-N-bis( 2-chloroéthyl) phénylène diamine. Le groupement N-protecteur P peut être indiffé- renment un groupement benzyloxy-carbonyle (Z) ou tert-butyloxy-carbonyle (Boc) Toutefoist dans le cas d'amino-acides contenant du soufre, on préfère utiliser le groupement Boc L'activationest de préférence réalisée par un ester activé Act représente avantageusement un radical paranitrophénol ou N-hydroxysuccinimide. L'introduction de la 2-chloroéthyl-nitrosourée et de la méthylnitrosourée s'effectue avantageusement à partir de N( 2-chloroéthyl)-Nnitrosocarbamates activés ou respectivement de N-méthyl-Nnitrosocarbamate activés. Dans le procédé ci-dessus, la réaction du composé de formule II avec le composé de formule III est effectuée en présence d'un solvant organique, par exemple le diméthylformamide (DMF) o On distille ensuite le solvant et on reprend le résidu dans l'acétate d'éthyle puis on sèche et concentre-la phase organique obtenue et on recristallise le résidu obtenu. L'hydrogénation du composé de formule IV est réalisée dans un solvant organique, par exemple dans de l'éthane, en présence de palladium sur charbon, sous pression normale et à température ambiante On élimine ensuite le catalyseur par filtation, puis on concentre à sec et sèche le filtrat obtenu. Le composé de formule V ainsi obtenu est dissout dans un solvant organique et on y ajoute le nitrosocar- bamate de formule VI On abandonne alorsle mélange réactionnel à la température ambiante puis on le concentre sous pression réduite On chromatographie alors le résidu obtenu puis on recristallise le composé pur de formule I ainsi obtenu. La préparation des nitrosourées de l'invention sera maintenant décrite avec plus de détails à l'aide des exemples non limitatifs suivants: Exemple 1 Mode opératoire général pour l'obtention d'un 2-chloro- éthylamine d'amino-acide N-Erotégé A une solution refroidie à O C de 2,32 g ( 0,02 mole) de chlorhydrate de 2-chloro-éthylamine et de 3,45 ml ( 0,02 mole) de diisopropyléthylamine dans 30 ml de DMF, on ajoute 0,01 mole d'ester activé (du paranitrophénol ou du N-hydroxysuccinimide) d'un amino acide Nprotégé Le mélange réactionnel est agité pendant une nuit à température ambiante. Le solvant est alors distillé sous pression réduite Le résidu est dissout dans 200 ml d'acétate d'éthyle Cette solution est lavée par 2 x 100 ml d'une solution aqueuse à 10 % d'acide citrique, 2 x 100 ml d'eau, 2 x 100 ml d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, 2 x 100 O ml d'eau La phase organique est séchée sur sulfate de sodium et concentrée sous pression réduite. Le résidu obtenu est, selon le cas, directement recristallisé, ou bien recristallisé après chromatographie sur colonne de silice. En suivant ce mode opératoire général, on prépare les composés des exemples 1 1 à 1 9 ci- dessous: Exemple 1 1. N-t-Butloxcarbon E 9 l fi_ alanine 2-chloro-1-éthylamide A partir'de l'ester de N-hydroxysuccinimide de la N-t-Butyloxycarbonyl e alanineo Recristallisation dans un mélange de-dichlorométhane et d'éther de pétrole ( 1/1) Rendement 65 % F = 25 87 C Analyse: C 1 H 19 N 203 C (C,HN) CCM-:-Rf = 0,40 (Acétate d'éthyle) Exemple 1 2 2-chloro-éth lamide de l'acide N-carbobenzoxy 4-amino-2- butanoique A partir de l'ester de N-hydroxysuccinimide de l'acide N-carbobenzoxy-4-amino butanoique. Recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole ( 1/1) Rendement 63 % F = 97 99 C Analyse C 14 H 19 N 203 Ci (C,HN) Y 14 19 2 3 CHN CCM: Rf = 0,35 (Acétate d'éthyle) Exemple 1 3 N-t-buty 1 oxycarbonyl-L-alanine-2-chloro-3-éthylamide A partir de l'ester paranitrophénylique de la N-t-Butyloxycarbonyl-L-alanineo Le résidu est chromatographié sur colonne de silice Eluant dichlorométhane/éther 1/1. Recristallisation dans un mélange d'éther et d'éther de pétrole ( 1/3) Rendement 76 % F = 101-103 C Analyse: Cl OH 19 N 203 C 1 (C,HN) CCM Rf = 0,68 (Dichlorométhane/Ethe r-2/1) = _ 8,10 (C= 1, DM?) D Exemple 1 4 N-carbobenzoxy-L isol eucine-2-chloro-4 -éthy lamide A partir de l'ester de N-hydroxysuccinimide de la N-carbobenzoxy-L-isoleucine. Recristailisation dans l'éthanol. Rendement 78 % F = 175 -177 C Analyse CH N O c (CH,N) CCM: Rf= 0,68 (acétate d'éthyle/dichloro- méthane-1/il (a) =+ 3,50 (C 1;DM?) D Exemple 1 5 N-carbobenzoxYl-L leucine-2-chloro 3-éth lamide A partir de-l'ester Nhydroxysuccinimide de la N-carbobenzoxy-L-leucine - Recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle e-t d'éther de pétrole CCM Rf 0,65 (acétate d'éthyle/dichloro- méthane 1/1) (a) = 8,8 O Exemple 1 6 N-t-Buty 1 xycarbonyl-L-méthionine-2-chloro-6-éthylnamide A partir de l'ester de N-hydroxysuccinimide de la N-t-Butyloxycarbonyl-L-méthionine. Obtenu sous forme d'huile et utilisé sans purification supplémentaire pour l'étape suivante. Exemple 1 7 N-tertio-butyioxycarbonyl sarcosine ( 2-chloro-éthyl)-7- amide A partir de l'ester de N-hydroxysuccinimide de la N-tertiobutyloxycarbonyl sarcosine. Recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'hexane ( 1/1) Rendement 80 % F = 119 C Analyse = C o H 19 N 203 Cl (C,H,N) 19 2 3 CCM Rf: 0,41 (Acétate d'Ethyle) Exemple 1 8 Na N -Dicarbobenzoxy-L-Lysine-2-chloro-8-éthylamide -1 1 _ _ __ _ __ __ A partir de l'ester de N-Hydroxysuccinimide de la Na, Ns -Dicarbobenzoxy-L-lysine. Recristallisation dans un mélange d'Acétate et d'Hexane ( 1/1). Rendement 88 % F = 123-125 C Analyse C 24 H 30 N 305 C 1 (C,H,N) CCM: Rf = 0,52 (Acétate d'Ethyle) () 20 = + 4,2 (c=l DMF) D Exemple 1 9 g L -dichloro-2 _éthylamide de l'acide N-carbobenzoxy-L- A une solution à O OC de 5,34 g ( 0,02 mole) d'acide N-carbobenzoxy-Laspartique dans 70 ml de DMF, on ajoute successivement 9,28 g ( 0,08 mole) de chlorhydrate de 2-chloro-éthylamine, 13,8 ml ( 0,08 mole) de diiso- propyléthylamine, et 8,24 g ( 0,04 mole) de N,N' dicyclo- hexylcarbodiimideo Aubout de 20 h à température ambiante, on filtre la N, N'-dicyclohexylurée formée, concentre le filtrat sous pression réduite, reprend le résidu par 200 ml d'acétate d'éthyle la solution obtenue est traitée comme décrit dans la méthode générale. Les cristaux blancs obtenus sont recristallisés dans de l'alcool isopropylique. Rendement 2,4 g soit 31 % F = 174 1760 C Analyse: C 16 H 21 N 304 C 12 (C,H,N) CCM: Rf = 0,43 (dichlorométhane/ méthanol 94/6) (a) =+ 2,6 (C = 1,DMF) D Exemple 2 Modes opératoires _génraux pour l'obtention des 2-chloro- thyl_nitrosocarbamoyl-aminoacides amides substitués ou non). Procédé A ( 0,01 mole) de N-carbobenzoxy amino acide amide est hydrogénée en solution dans 100 ml d'éthane en présence de palladium sur charbon a 10 % et d'un équi- valent d'une solution aqueuse à 10 % d'acide chlorhy- drique, sous pression normale et à température ambiante. Lorsqu'une CCM révèle l'absence de composé de départ, le catalyseur est éliminé par filtiation sur papier, le filtrat est concentré à sec sous pression réduite Le résidu est trituré dans de l'éther anhydre jusqu'à obtention d'une poudre qui est collectée, lavée à l'éther et séchée au dessicateur. Le dérivé N-déprotégé est alors dissout dans 20 ml de DMF Un équivalent ( 0,01 mole; 172 ml) de diéthylamine DIEA est ajouté à froid, puis 0,012 mole ( 3,98 g) de N-2-(chloro-éthyl)N-nitroso carbamate de 2,4,5trichloro-phényle. Le mélange réactionnel est abandonné pendant 3 h à température ambiante, puis concentré sous pression réduite Le résidu est chromatographié sur colonne de silice Le produit pur obtenu est recristallisé dans le solvant approprié. Le rendement est calculé à partir du dérivé N-protégé. Procédé B 0,01 mole de N-t-butyloxycarbonyl amino acide amide est dissoute dans 20 ml d'acide trifluoroacétique anhydre en présence de 2 % de thioanisole à température ambiante Au bout de 40 mn, la solution est concentrée sous pression réduite; le résidu est trituré dans de l'éther anhydre jusqu'à obtention d'une poudre. La suite des opérations s'effectue comme dans le procédé A. En suivant le procédé A ou le procédé B ci- dessus, on prépare les composés suivants. 254049 1 Exemple 2 1 :.12-chloro-éthyl)N-nitrosocarbamoyl_ alanine ( 2-chloro- éthyl)-10-amide Obtenu à partir du précurseur de l'exemple 1 1; Procédé B. Eluant de chromatographie: dichlorométhane / acétate d'éthyle ( 3/1). Recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole ( 1/1). Rendement: 66 % F = 84 85 C (déc) Analyse C 8 H 14 N 43 C 12 (CI H, N) CCM: Rf 0,58 (acétate d'éthyle) IR v = 1470 cm-1 (N-NO) Exemple 2 2 12-Chloro-éthyl)amide de l'acide 4-IN-( 2-chloro-éthyl) N-nitrosouréido Z11 butanogue Obtenu à partir du précurseur de l'exemple 1 2 Procédé A Eluant de chromatographie: acétate d'éthyle. Recristallisation dans un mélange d'éther et d'hexane ( 1/1)o Rendement: 79 % F = 63 64 C (déc) Analyse: C 9 H 16 N 403 C 1 2 (C,H,N) CCM: Rf = 0, 45 (acétate d'éthyle) IR: = 1485 cm 1 (N-NO) Exemple 2 3 N:j 22 ch 12 Or 2 éthyl)_ N-nitrosoca rbamoyl -L-alanine_ 12-chioro-: éthyl)-12 amide Obtenu à partir du précurseur de l'exemple 1 3 Procédé B Eluant de chromatographie:dichlorométhane / acétate d'éthyle ( 9/1) Recristallisation dans un mélange de dichiorométhane et d'hexane ( 1/1) Rendement z 60 % F = 112 -11400 20 Exemple 2 4 NZ 12 cqh 1 or:éthyl)N 4 lnitrosocarbamoyl L-isoleucine éthyl):13 &amide Obtenu à partir du précurseur de l'exemple 1 4 Procédé A Eluant de chromatographie zdichlorométhane / acétate d'éthyle Recristallisation dans l'éther. Rendement: 67 % F = 103 104 'C (déc) Ana lyse CH 2 N 403 C 1(C N) CCM Rf 0,58 (dichlorométhane/ acétate d'éthyle 1/1 > -1 IR v= 1480 cm (N-NO) (C) 20 = 37,2 (c = 1, DMF) Exemple 2 5 :12-óchloro-éthyl L)N-nitrosocarbamoy l-L-leucine ( 2-chloro- éthyl)-14-amide Obtenu à partir du précurseur de l'exemple 1 5 Procédé A Eluant de chromatographie: acetate d'éthyle / éther de pétrole 3/1 Recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole ( 1/10) Rendement: 71 % F = 117 118 C (déc) Analyse * C H 2 N 403 C 12 (CHN) CCM = Rf = O 52 (acetate d'éthyle / hexane 2/1) IR = V 1430 cm 1 (N-NO) Exemple 2 6 N.12-chloro-éthyl) N-nitrosocarbamoyl-L-méthionine ( 2-chloro-éthyll-15amide A partir du précurseur de l'exemple 1 o 6 Procédé B Eluant de chromatographie a éther Recristallisation dans un mélange d'éther et d'éther de pétrole ( 1/1) Rendement: 63 % F = 53-55 C Analyse: C 1 l H 18 N 403 S Cl(C,HN) CCM: Rf = 0,64 éther) IR = v = 1485 cm-1 (N-NO) ( 20 = + 95 ( c = DMF) (a) = + 9,5 ( c = 1, DMF) D Exemple 2 7 N:( 2-chloro-éthyl)N-nitrosocarbamoyl sarcosine ( 2-chloro- éthy D-16-amide A partir du précurseur de l'exemple 1 7 Procédé B Eluant de chromatographie: dichlorométhane / acetate d'éthyle ( 9-1) Recristallisation dans un mélange d'éther et d'hexane ( 1/1) Rendement 63 % F = 63 650 C Analyse C 8 H 14 N 403 C 12(C, H,N) IR: V(N-NO) = 1470 cm 1 Rf = 0,36 (acétate d'éthyle/dichloro- méthane 1/1) Exemple 2 8 &LN_-zdi ( 2-chloro-étht N, Nú dimitrosocarbamoy-L ysine_ 2-chloro-eéthyl) -17-amide A partir duprécurseur de l'exemple 1 8. Procédé A modifié, en ce sens que l'on introduit des quantités doubles de DIEA et de nitrosocarbamate "activé", puisque la lysine comporte deux fonctions amine. Eluant de chromatographie: dichlorométhane / acetate d'éthyle ( 9/1) Recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole ( 1/4) Rendement: 52 % F = 69 C (déc) Analyse: C 14 H 24 N 507 C 13 (CHN) CCM = Rf 0,40 (acétate d'éthyle / hexane 1/1) 254 C 49 1 -1 IR: V = 1470, 1480 cm 1 (N-NO) ()20 =+ 12,3 ( c= 1, DMF) D Exemple 2 9 z_g-di 1 Z 2-chloro-éthyl)amide/ de l'acide N-( 2-chloro- éthyl)N-nitrosocarbamoyl-L-18-as Rartigue A partir du précurseur de l'exemple 1 9 Procédé A Le produit brut de la réaction est trituré dans de l'eau, séché, trituré dans de l'éther, séchéo La poudre obtenue est recristallisge dans un mélange d'acétone et d'hexane ( 1/1). Rendement: 70 % - F = 156-157 C (déc) Analyse: Cll H 18 N 504 C 13 (C,H,N) CCM Rf = 0,29 (chloroforme /acétate d'éthyle 3/1) IR v = 1475 cm 1 (N-NO) (a) -+ 23,0 ( c = 1, DMF) D Les composés de l'invention présentent, comme les nitrosourées connues, une activité oncostatique, anti-néoplastique et antimitotique. Ces composés constituent par conséquent des médicaments anti-cancéreux pour le traitement des tumeurs malignes chez l'homme et l'animal. L'activité oncostatique de certains composés de l'invention par comparaison à d'autres nitrosourées connues a été déterminée en suivant le protocole expéri- mental suivant: Des souris F 1, (DBA/2 XC 57 B 1/6) sont inoculées avec 10 cellules de leucémie L 1210 par voie intrapéritonéale au jour O et divisées en 5 groupes. Le premier est le groupe de contrôle et les quatre autres sont traités avec les produits à tester à diffé- rentes concentrations, aux jours 1,5 et 9 Les composés sont injectés en suspension dans l'huile La mortalité des animaux est observée et l'autopsie indique si elle est due à la leucémie ou à l'action toxique de la drogue. Les résultats, pour chaque dose de produit, sont exprimés en T/C (%) (T représente la médiane de survie du groupe traité et C la médiane de survie du groupe témoin T/C = quand 50 % des animaux sont guéris T/C > 125 % signifie qu'une drogue est active. Ces essais ont été effectués à l'aide de composés de formule Cl-CH 2-CH 2N-C -N(R) -A-C X NO O pour différents amino-acides et différentes significa- tions du substituant X (substituant côté C terminal). Les significations de X sont les suivantes: 1) Composés de l'invention: X = -NH-CH 2-CH 2 Cl, -N(CH 2-CH 2-C 1)2 et -NH-C 6 H 4-N(CH 2-CH 2-Cl)2, 2) Composés en dehors de l'invention: X = -NH 2 et -NH-CH 3. Les résultats sont exprimés dans le tableau ci-après. 0,4 do, a 6 X/But à 5 X/Bur Xvm BX/Bur Osla = 1 G Temqdo esoa O le (le a ex D/m OS Icr Mifflai D 910 D z Kipm 1 1 X iauvraiidsans SCID-1, rl $ 1 1 09,11 BX/ 6 ur 09 'l T Osl oz 'l z 5 X/Bur OÉIT 09 'l z Ls 'l E OLIIZ Oooz CT os 'l c gelz SL'IT 09 _ O p/ Umm-prepi oi-OT OP-Oz OZ-OT 0 UMMXUN 09-ST L-,Oc os-oz 09-SE OZ-S Oú-OT osez os-oz or-OT TO ?:Ho ZHD-HN- ZHN- _PT- TD EHDZHD RN- úHo-HN 1 z RN- -PT- -PT-, E E *TO HD HD RN-' z (TO ?HO ZHD)N_ _PIF_ -PT- -PT- -PT- TD EHOEHD h N- alla ms Ari neu neu net 1 OTI y%" ATE) A-lO us 1 V dsv X VW 5 e W t 1 i ET ZT TT L s l z T OE: ZE SET CE OP 9 ÈET i SZT OTT sz 9 C. OET OOT SE oz v ' % 9 EZ oz Oc ST T 9 %TIZ SE os SE OP ZT oz LE SE oz Co W 01 r C> _r in tv o 1-1 Co O m oe W W W Co W W (-ïd'T) ol z 1 1 Vu RÉINOD gjj Aij Dvt a sivinfis 2 m saci rivainivi x Les dérives de Asp et Lys comportent respectivement 2 fonctions -NH CH 2 CH 2 C 1 et 2 fonctions-NH-C-N-CH 2 CH 2 Cl il NO O NO N ACIDE SUBSTITUANT X DL T/C M E D I Dose optimale I = DL 50 AMINE COTE C TERMINAL mgg mg/kg mg/kg D.Opt. 16 Phe -NH 2 55 Maximum T/C = a 40 mg/kg 17 Phe -NH-CH 3 38 15-30 22 1,70 18 Phe -NH-±N(CH 2 CH 2 Cl)270 Maximum T/C = 173 % à 20 mg/kg I 1 19 Pro -NH CH 2 CH 2 C 1 80 Maximum T/C = 194 % à 35 mg/kg Trp -id 65 2035 27 2,40 21 Tyr -id 40 Maximum T/C = 211 % à 25 mg/kg I l o Fi 3 n> p% %O Le tableau précédent rapporte les valeurs DL 50, T/C, M E D I (Maximum efficace dose internai = plateau d'activité maximum correspondant à T/C = a), dose optimale et Indice thérapeutique. Les résulats du tableau montrent que les composés 2-chloro-éthylamides de l'invention sont plus efficaces que les composés amides connues (-NH 2 côté C terminal). Ainsi les composés No 9, 13 et 15 sont beaucoup plus efficaces que les composés N 10, 14 et 16 comme le montre le tableau ci-dessous Dérivés de LEU N Substituant côté C terminal -9 -NH CHCH 2 Cl MEDI entre 15 et 50 mg/kg 2 C 2 mgk S 10 -NH 2 pas de plateau d'activité maximum Dérivés de MET 13 -NH CH 2 CHE 2 Cil MEDI entre 10 et 30 mg/kg 14 a ENH 2 pas de plateau d'activité maximum Dérivés de PHE 15 -NH CH 2 CH 2 C 1 MEDI entre 40 et 60 mg/kg 16 -NH 2 pas de plateau d'activité maximum I 1 faut noter également que les valeurs DL 50 montrent que les composés sont peu toxiques. L'invention concerne également les compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif un composé de formule I défini plus haut. REVENDICATIONS 1 Composés de formule Yf N(R)-A-C X (I) O de séries L, D, DL, allo et thréo, dans lesquels: A représente le fragment d'un amino-acide de formule HN(R)-A-COOH, o R représente un atome d'hydrogène, un radical organique en particulier un radical alkyle, ou bien forme avec l'atome d'azote et A un hétérocycle; Y représente un radical nitrosourée de formule O O Cl-CH 2-CH 2N-C ou CH -N-C; et 2 2, C 3-C;e NO NO X représente un radical moutarde à l'azote de formuale Cl-CH 2-CH 2-NH-, (Cl-CH 2-CH 2) 2 N ou (Cl-CH 2-C 2 -H 2 Composés selon la revendication 1 de foarmle Y-t-NH-CH-C i X {Ia} 1 il R' O dans lesquels: R' est choisi parmi les radicaux -H,CH 3,-CH 2 OH,- -CH-OH, -CH(CH 3) -CH 2-CH 3 -CH 2-CH (CH 3) 2 CH 3 CH -CH-u CH 2-CH,3 J H '-CH 2-SH, -CH 2-CH 2-S-CH 3, CH 2- -CH CH- H OH 2 O-N 2 2 -2 CONH 2(CH 2) CO-X-(CH)NU-Y, CH t 2 2 H -CH-CE-OH -(CH) CH OH-C 2 N -(CH 13-NH-C-NH-Y, -CH 2-CH SH, 2 2 H-C NH n représente un nombre entier de 1 à 7; et X et Y ont la même signification que dans la revendication 1. 3 Composés selon la revendication 1 de formule: Y { NH-(CH 2)-l x (Ib) o 2 -o dans lesquels n représente un nombre entier de 1 à 7; et X et Y ont la même signification que dans la revendication 1. 40 Composés selon la revendication 1 de formule N -X (Ic) ou (Id) Y, Y dans lesquels R représente un radical organique en particulier-un radical alkyle p X eêt Y ont la même signification que dans la revendication 1. Composés de formule I selon la revendication 1, dans lesquels A représente le fragment d'un amino-acide choisi parmi Ala, B Ala, Asp, Asn, Gly, GABA, Ileg Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Trp et Tyr - 6 Procédé de préparation d'un composé de formule Y N(R)-A-C X (I) dans lequel A, X et Y ont la signification donnée dans la revendication 1, caractérisé par le faitque l'on fait réagir un composé de formule P fN(R)-A-C I O Act (Il) o o A a la signification ci-dessus, P représente un groupement protecteur et Act un groupement activant, sur le chlorhydrate de-1 -'amine de formule HX (III) o X a la signification ci-dessus, pour donner un composé de formule P { N(R)-A-C x (IV) que l'on hydrogène le composé de formule IV pour donner un composé de formule N N(R) -A-f 3-j X(V 1 (V) que l'on fait réagir le composé de formule (V) avec un nitrosocarbamate de formule Y-O Act (VI) o Y et Act ont la signification ci-dessus. pour donner le composé de formule I. 7 Procédé selon la revendication 6, carac- térisé par le fait que P est un groupe benzyloxycarbonyle (Z) ou un groupe t-butyloxycarbonyle (Boc) et Act est un radical paranitrophénol ou N-hydroxysuccinimide. 8 Procédé selon l'une des revendications 6 et 7, caractérisé par le fait que l'on effectue la réaction du composé de formule II avec le composé de formule III en présence d'un solvant organique, que l'on distille ensuite le solvant, que l'on reprend le résidu dans l'acétate d'éthyle, qu'on sèche et concentre la phase organique obtenue, et que l'on recristallise le résidu obtenu. 9 Procédé selon la revendication 6, caractérisé par le fait que l'on hydrogène le composé de formule IV dans un solvant organique en présence de palladium sur charbon, que l'on élimine le catalyseur par filtration et que l'on concentre à sec et sèche le filtrat obtenu. Procédé selon l'une des revendications 2 C 6 et 9, caractérisé par le fait que l'on dissout le composé de formule V dans un solvant organique et qu'on y ajoute le nitrosocarbamate de formule VI, que l'on concentre le mélange réactionnel sous pression réduite après abandon à la température ambiante, que l'on chromatographie le résidu et que l'on recristallise le composé purde formule I ainsi obtenu. l 1 A titre de médicament convenant notamment au traitement des tumeurs, un composé selon l'une des revendications 1 à 5. 12 Composition pharmaceutique contenant comme principe actif un composé selon l'une des revendications 1 à 5.