Brevet FR2542613A1 — publié le 19840921

Emulsion liquide pour transfusion, La présente invention concerne une émulsion liquide améliorée pour transfusion. Plus particulièrement, elle concerne une émulsion liquide pour transfusion bien équilibrée dans sa compo- sition en graisses. L'émulsion liquide pour transfusion est administrée aux patients comme supplément nutritif Elle est introduite par voie intraveineuse habituellement par injection goutte à goutte. L'émulsion liquide pour transfusion est une émulsion constituée de graisse, d'un agent émulsifiant et d'eau Les émulsions liquides pour transfusion de l'art antérieur uti- lisent des huiles végétales telles que l'huile de soja purifiée Bien que les huiles végétales soient riches en acidesgras contenant 18 atomes de carbone ou moins tels que l'acide oléique, l'acide palmitique, l'acide linoléique, l'acide linolénique et l'acide stéarique, elles ne contiennent pas d'acidesgras ayant 20 atomes de carbone ou davantage. Dans le sang et les cellules humairscependant, il existe aussi des acides gras avant 20 atomes de carbone ou davantage tels que l'acide éicosapentènoique et l'acide docosahexènoique en quantitésconsidérablesde sorte que les émulsions liquides pour transfusion de l'art antérieur ne contenant que de 1 ' huile végétale comme constituant gras ne sont pas équilibrées au point de vue nutritif et ne sont pas satisfaisantes. Un objet de la présente invention est la fourniture d'une émulsion liquide améliorée (émulsion de graisse) pour transfusion bien équilibrée au point de vue nutritif. Un autre objet de la présente invention est la four- niture d'une émulsion liquide pour transfusion possédant une activité anticoagulante. Il résulte des études poussées faites par les auteurs de laprésente invention que ceux-ci ont réussi à préparer une émulsion liquide pour transfusion contenant un ou plusieurs acides gras ayant 20 à 22 atomes de carbone ou leurs esters, tels que l'acide eicosapentènoique et l'acide docosahexènoique ou leurs esters et ils ont découvert que ladite émulsion liquide pour transfusion avait une activité anticoagulante. Selon la présente invention, celle-ci fournit une émulsion liquide pour transfusion comprenant un acide gras ayant 20 à 22 atomes de carbone ou un de ses esters ou un mélange de deux acides gras ou davantage et de leurs esters, une huile végétale, un agent émulsifiant et de l'eau. En outre, selon la présente invention, celle-ci fournit une émulsion liquide pour transfusion,dans laquelle l'acide gras ou son ester mentionné ci-dessus est un acide gras insa- turé ou un de ses esters. De plus, selon la présente invention, celle-ci fournit une émulsion liquide pour transfusionsdans laquelle l'acide gras ou l'ester,mentionnésci-dessus,est l'acide éicosapentè- noique, l'acide docosahexènoique ou un de leurs esters. Encore, selon la présente invention, celle-ci fournit une émulsion liquide pour transfusion,dans laquelle,le mélange d'acidesgras ou de leurs esters,mentionné ci-dessus,est une huile de poisson purifiée. De plus, selon la présente invention, celle-ci fournit une émulsion liquide pour transfusion,dans laquelle l'huile de poisson purifiée mentionnée ci-dessus est l'huile de sardine purifiée. Encore selon la présente invention, celle-ci fournit une émulsion liquide pour transfusionsdans laquelle l'huile végétale mentionnée ci-dessus est de l'huile de soja et/ou de l'huile de carthame purifiées. Encore selon la présente invention, celle-ci fournit une émulsion liquide pour transfusion comprenant 5 à 20 %, poids/volume,de l'acide gras mentionné ci-dessus ou de son ester ou de leurs mélanges, 1 à 19 %, poids/volume, d'une huile végétale, 1 à 2 %,poids/volumed'un émulsifiant et de l'eau (le reste). La présente invention concerne une émulsion liquide pour transfusion comprenant un acide gras ayant 20 à 22 atomes de carbone ou un de ses esters ou un mélange d'au moins deux de ces acides gras et des esters, une huile végétale, un agent émulsifiant et de l'eau. L'émulsion liquide pour transfusion selon la présente invention est caractérisée par le fait qu'elle contient un acide gras ayant 20 à 22 atomes de carbone ou un ester de l'acide gras ou un mélange d'au moins deux de ces acides gras et de ses esters Comme acides gras préférés utilisés dans la présente invention, on peut mentionner les acides gras ayant 20 à 22 atomes de carbone, tels que l'acide éicosapentènoique et l'acide docosahexènoique Les esters préférés de ces acides gras sont les triglycérides ou les esters alkyliques inférieurs (par exemple l'ester éthylique) Les esters con- tenant 20 à 22 atomes-de carbone dans le motif acide gras. Comme glycérides'des acides gras, on peut utiliser ceux qui sont séparés des huiles de poisson et purifiés Les esters alkyliques inférieurs sont préparés en faisant réagir l'acide gras avec un alcool inférieur de façon classique ou par échange d'esters en faisant réagir des triglycérides de l'acide gras avec un alcool inférieur. Dans la présente invention, un mélange d'au moins deux des acides gras mentionnés ci-dessus ou de leurs esters peut également être utilisé Comme mélange on peut utiliser l'huile de poisson telle que l'huile de sardine, l'huile de morue, l'huile de calmar, l'huile de maquereau ou l'huile de Euphauciacea qui sont purifiées de préférence pour diminuer les réactions défavorabes Vis-à-vis des êtres vivants L'huile de sardine purifiée qui est riche en acide éicosapentènoique et en acide docosahexèno Ique et en esters de ces acides est particulièrement préférée comme constituant gras dans la présente invention D'une façon tout à fait inattendue d'après l'art antérieur et tout à fait surprenante, les auteurs de la présente invention ont découvert que l'huile de poisson telle que l'huile de sardine, peut être utilisée avec sécurité comme constituant de la composition destinée à l'administration intraveineuse. L'huile végétale et l'-agent émulsifiant à utiliser dans la présente invention peuvent être un quelconque de ces produits classiques. Par exemple, l'huile de soja purifiée, l'huile de carthame ou huile analogue ou un mélange de ces huiles, sont utilisés comme huile végétaleet la lécithine de jaune d'oeuf purifiée, la lécithine de soja purifiée ou produits analogues est utilisée comme agent émulsifiant. En outre, on peut ajouter à l'émulsion liquide pour transfusionde la présente invention, une quantité appropriée d'un stabilisant d'émulsion ou d'un amorceur d'émulsion tel que la glycérine ou l'acide oléique. Bien que les constituants de l'émulsion liquide pour transfusion selon la présente invention puissent être utilisés en proportion quelconque, il est préférable d'utiliser 5 à 20 % d'un acide gras ayant 20 à 22 atomes de carbone ou d'un ester de l'acide gras ou un mélange d'au moins deux de ces acides gras et de leurs esters, là 19 % p/v d'une huile végétale, 1 à 2 % p/v d'un émulsifiant et de l'eau(le reste). Le stabilisant d'émulsion ou l'amorceur d'émulsion est utilisé habituellement à raison de 1 à 5 % p/v. A l'émulsion de la présente invention on peut ajouter de la vitamine E afin d'empêcher l'oxydation des acides gras insaturés Les particules grasses dans l'émulsion ne sont pas brisées et restent très stables du fait de cette addition. L'émulsion liquide pour transfusion est préparée selon un procédé classique Les quantités prédéterminées des constituants sont mélangées Au mélange est ajouté un produit alcalin pour amorcer la dispersion et on réalise une dispersion homogène à l'aide d'un homogénéiseur A la dispersion, on ajoute de l'eau distillée injectable et on émulsionne le mélange à l'aide d'un émulseur à pulvérisation sous haute pression pour préparer l'émulsion liquide pour transfusion. L'émulsion est répartie dans des sacs de plastique qui sont stérilisés à la vapeur s QUS haute pression et enballés dans des pellicules sous vide pour donner le produit final. L'émulsion liquide pour transfusion qui contient les acides gras nécessaires au point de vue nutritif en proportion bien équilibrée, est un excellent supplément nutritif. Etant donné que l'émulsion liquide pour transfusion contient l'acide éicosapentènoique et/ou l'acide docosahéxènoîque ou leurs esters, elle possède une activité inhibitrice contre l'agglutination des plaquettes et par conséquent elle est utile également comme agent anticoagulant. En outre, étant donné que l'émulsion liquide pour transfusion contient des triglycérides d'acidesgras tels que ceux de l'acide éicosapentènoique et/ou de l'acide docosa- héxènolque, elle réduit le cholestérol sanguin et est utile pour prévenir l'artériosclérose ou dans la thérapie de celle-ci. La présente invention est illustrée par les exemples descriptifs et non limitatifs ci-après. Exemple 1. On disperse à l'aide d'un homogénéiseur un mélange constitué par 20 g de 5,8,11,14,17-éicosapentènoate d'éthyle, 380 g d'huile de soja purifiée,48 g de lécithine de jaune d'oeuf purifiée, 20 g d'acide oléique, 100 g de glycérine concentrépet 40 ml d'hydroxyde de sodium 0,1 N A la disper- sion on ajoute de l'eau distillée injectable jusqu'à ce qu'on ait un volume total de 4 litres On émulsionne la masse résultante à l'aide d'un émulseur à pulvérisation sous haute pression pour préparer une émulsion liquide On répartit l'émulsion liquide,par portionsde 200 mlidans des sacs en plastique que l'on stérilise à la vapeur sous haute pression à 1210 C,pendant 20 minutes pour préparer une émulsion liquide pour transfusion Après la stérilisation, le sac est emballé sous vide dans une pellicule en"V 7 inylon"(marque déposée d'un produit de UNITIKA Co, Ltd) orientée pour obtenir le produit final. Exemple 2. On prépare une émulsion liquide pour transfusion de la même façon que dans l'exemple 1, sauf que les 20 g d'éicosapenténoate d'éthyle et les 380 g d'huile de soja purifiée;utilisés dans l'exemplersont remplacésrespectivement, par 40 g de 4,7,10,13,16,19-docosahexénoate d'éthyle et 360 g d'huile de soja purifiée. Exemple 3. On disperse à l'aide d'un homogénéiseur un mélange constitué par 120 g d'huile de sardine extrêmement pure contenant 18 % d'acide 5,8,11,14,17éicosapentènoique et % d'acide 4,7,10,13,16,19-docosahexénoique,et par une composition grasse montrée dans le tableau 1 (qui est un exemple de composition grasse dans les huiles de sardine purifiées), 280 g d'huile de soja purifiée, 48 g de lécithine de jaune d'oeuf purifiée, 2 g d'acide oléique, 100 g de glycérine concentréeet 40 ml d'hydroxyde de sodium 0,1 N. A la dispersion, on ajoute de l'eau distillée injectable jusqu'à un volume total de 4 litres On émulsionne la masse résultante à l'aide d'un émulseur à pulvérisation sous haute pression pour préparer une émulsion liquide contenant 30 % p/v d'huile de poisson On répartit l'émulsion par portions de 200 ml dans des sacs en plastique qui sont stérilisés à la vapeur sous haute pression à 121 Cpendant 20 minutes,pour préparer une émulsion liquide pour transfusion Après la stérilisation, le sac est emballé sous vide dans une pellicule de"Vinylon"orientée (produit de UNITIKA Co, Ltd) pour préparer le produit final. Tableau 1 Composition grasse dans une huile de sardine purifiée Graisse Teneur (%> Hydrocarbure 3,61 Ester stérylique 6,84 Triglycéride 36,50 Acide gras libre 46,52 Stérol 6,53 Exemple d'essai. Activité inhibitrice contre l'agglomération des plaquettes Dans la veine jugulaire de seize rai mâles Wister pesant environ 310 g, on introduit un cathéter On soumet quotidiennement quatre des animaux à une perfusion pendant 3 heures pour introduire 12 ml d'une émulsion liquide du commerce contenant 10 % p/v d'huile de soja (témoin) dans la veine jugulaire, pendant 7 jours En outre, on administre aux animaux par voie orale 14 g d'un aliment solide en poudre (CE-2; fabriqué par Nihon Clea Co, Ltd) quotidiennement pendant 7 jours On divise les douze autres animaux en trois groupeslet on soumet chaque groupe d'animaux à une perfusion pour introduire 12 ml de l'émulsion liquide obtenue dans les exemples 1, 2 et 3 respectivement, de la même façon que ci- dessuslquotidiennement pendant 3 heures pendant 7 jours. Aux animaux, on administre également l'aliment solide en poudre,de la même façon que ci-dessus,à raison de 14 g par jour pendant 7 jours Environ 20 heures après l'administration intraveineuse jugulaire finale, on anesthésie chaque animal avec du Nembutol à 5 %, on prélève 4,5 ml de sang par l'aorte abdominale avec une aiguille 20 G dans une seringue contenant 0,5 ml de citrate de sodium à 3,8 % U In PRP (plasma riche en plaquettes de 500 000 plaquettes/1 l, est préparé pour chaque rat de façon classique Dans une curette, on place 225 I 1 du PRP provenant de chaque rat A la curette, après chauffage à 37 C pendant 5 minutes, on ajoute 25 de collagène ( 750 g/ ml), un amorceur d'agglutination, puis on mesure l'agrégation des plaquettes à l'aide d'un appareil dit " agrégomètre". Comme le montre le tableau 2, les rapports moyens d'agré- gationdans les groupes ayant reçu des émulsions liquides des exemples 1, 2 et 3, sont respectivement de 59,6 %, 54,3 % et 59,4 % Comparée au témoin dans lequel le rapport est de 68,3 %, l'agrégation des plaquettes est réduite d'une façon importante avec un niveau significatif de 5 % (essai t) Les résultats des essais de toxicité aiguë chez les rats (mâles) montrent que les émulsions liquides des exemples 1 2 et 3 sont tout à fait sures. Tableau 2 Emulsion liquide pour transfusion No du rat soumis Pourcentage. soumis X 1 'essai d'agrégation des plaquettes Pourcentage moyen d' agrégation Exemple 1 l 59,0 ,7 56,8 61,9 59,6 Exemple 2 5 57,5 6 50,7 54,3 7 52,0 8 56,8 Exemple 3 9 54,7 60,6 59,4 11 61,9 12 60,5 Témoin 13 74,6 14 63,9 68,3 70,6 16 63,9 25426, On administre aux rats mâles les émulsions liquides des exemples 1, 2 et 3,et l'émulsion témoin;respectivement, par la veine jugulaire à un taux de perfusion de 50 ml/kg/h. pour déterminer la toxicité aiguë Les résultats sont indiqués dans le tableau 3 Comme on peut le voir nettement sur ce tableau, les émulsions liquides pour transfusion selon la présente invention sont des préparations tout à fait sures. Tableau 3 Emulsion grasse pour transfusion Dose léthale (ml/kg) Exemple 1 375 " 2 362 " 3 382 Témoin 355 REVENDICATIONS 1 Emulsion liquide pour transfusion comprenant un acide gras ayant 20 à 22 atomes de carbone ou un ester de l'acide gras ou un mélange d'au moins deux des acides gras et des esters, une huile végétale, un agent émulsifiant et de l'eau. 2 Emulsion liquide pour transfusion selon la revendication 1, caractérisée par le fait que l'acide gras ou l'ester est un acide gras insaturé ou un ester de celui-ci. 3 Emulsion liquide pour transfusion selon la revendication 2, caractérisée par le fait que l'acide gras insaturé ou l'ester est l'acide éicosapentènioique, l'acide docosahéxénoique ou un ester de ces acides. 4 Emulsion liquide pour transfusion selon la revendication 1, caractérisée par le fait que le mélange des acides gras et/ou des esters est une huile de poisson purifiée. Emulsion liquide pour transfusion selon la revendication 4, caractérisée par le fait que l'huile de poisson purifiée est l'huile de sardine purifiée. 6 Emulsion liquide pour transfusion selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée par le fait crue l'huile végétale est l'huile de soja purifiée et/ou l'huile de carthame purifiée. 7 Emulsion liquide pour transfusion selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, comprenant 5 à 20 % p/v d'acide gras ou de l'ester ou du mélange, 1 à 19 % p/v de l'huile végétale, 1 à 2 % p/v de l'agent émulsifiant et de l'eau (le reste).