Brevet FR2526791A1 — publié le 19831118

-1 - La présente invention concerne de nouveaux peptides utiles notamment comme médicaments immuno- potentiateurs. Des rôles importants dans le développement et le maintien de la compétence immunologique chez l'homme et l'animal ont été attribués à plusieurs fac- teurs peptidiques présents dans le thymus L'importance du système immunitaire dans la défense contre le cancer et les cellules tumorales est maintenant bien établie. Ces dernières années quelques polypeptides qui se sont révélés capables de stimuler la maturation, la diffé- rencistion et la fonction des cellules T, ont été iso- lés du thymus bovin Parmi eux, le peptide acide qu'est la thymosine Ad, a été beaucoup étudié Sa structure et son activité ont été décrites par exemple dans le brevet US n 4 079 127. De plus Goldstein et coll (J of Reticulo- endothelial Society 23, 253 l 1978 l) ont décrit les thymosines N 3 et B 4 partiellement purifiées comme com- posants de la fraction 5 de la thymosine partiellement purifiée Low et Goldstein ont indiqué (Year in Hemato- logy 1978, Siber et coll ed lPlenum Publ Co 1978 l, p 281) que les thymosines B 3 et 04 partiellement puri- fiées induisent la formation de cellules Td T-positives (désoxynucléotidyle terminal-transférase-positives) dans les populations de cellules T On a également si- Gnalé que les thymosines F 3 et 4 accélèrent la réappa- rition des cellules Td T-positives dans le thymus après immunosuppression provoquée par des stéroides (Low et coll, PN-AS 78, 1162 l 1981 l; Hu et coll, 1 iol Cell. Biochem 41, 49 l 1951 l) et inhibent la migration des :racroph 7 iges (Thurman et coll, Lymphokines and Thymie Hor:,onrcs: Their Potential Utilization in Cancer Thera- peutics, eds Goldstein & Chirigos, Rnven Press, New York, 19 c 81, p 145). De plus au cours de la synthèse de la thymo- sine (l selon la technique en solution, Wang a utilisé les octa-, undéca et tétradécapeptides carboxy-termi- naux protégés de la thymosine c& 1 comme intermédiaires. Ces composés ont été également déprotégés par hydrogé- nolyse puis traitement avec l'acide fluorhydrique et on a indiqué que les peptides libres obtenus avaient une activité dans la régulation, la différenciation et la fonction des cellules T (brevet US n 4 148 788). Enfin, les peptides H-Ala-Gly-Glu-Sér-OH, Hi-Gln-Ala-Gly-Glu-Sér-OH et H-Ile-Glu-Gln-Glu-Lys-Gln- Ala-Gly-Glu-Sér-OH ont été obtenus par digestion de la thymosine 84 par la trypsine et la thermolysine (Low et coll, PNAS 78, 1162 l 1981 l). La présente invention concerne de nouveaux peptides de formule: R 1-GlyGlu-Sér-R 2 I dans laquelle R 1 représente Q, Q'-Ala-, Q'-Gln-Ala-, Q-LysGln-Ala-, Q-Glu-Lys-Gln-Ala-, Q-Gln-Glu-Lyvs-Gln-Ala-, Q-Glu-Gln-Glu-LysGln-Ala-, Q'-Ile-Glu-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-, Q-Thr-Ile-Glu-Gln-Glu-Lys-GlnAla-, Q-Glu-Thr-Ile-Glu-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-, ou Q-Gln-Sar-; Q représente un atome d'hydrogène ou un radical acyle; Q' représente un atome d'hydrogène ou un radi- cal acyle, sous réserve qu'il représente un radical acyle lorsque R 2 représente un radical hydroxy; R 2 représente -OH, -A-C ou -A-B-C; A représente Asp ou Asn; B représente Glu-Ile-Thr et C représente Ala-LysThr-OH; et leurs sels d'addition formés avec un acide ou une base acceptables en pharmacie. Les peptides de formule 1 comprennent les peptides ayant les séquences suivantes d'anino-acides: HI-Glu-Thr-le-Glu-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-Gly-GluSér-OH Il H-Thr-lle-"lu-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-Gly-Glu-56 r-OH H-Glu-Gln-GluLvs-Gln-Ala-Glv-Glu-Sér-O 01 1 I-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-Gly-Glu-56 ér-O Hi HGlu-Lys-Gln-Ala-Gly -Glu-Sér-OH 1 i-Lys-Gln-Ala-Gly-Glu-Sér-OH H-Gly-GluSér-OH H-Gln-Ala-Gly-Glu-Sér-Asp-Ala-Lys-i'hr-OH H-Gln-Ala-Gly-Glu-SérAsn-Ala-Lys-Thr-OH h 3 C-CO-Gln-Sar-Gly-Glu-Sér-Asp-Ala-Lys-Thr-OH H 3 CCO-Gln-Sar-Gly-Glu-Sér-Asn-Ala-Lys-Thr-0 H H-Gln-Ala-Gly-Glu-Sér-Asp-Glu-Ile-Thr-Ala-Lys- Ili IV V VI V Il VIII Vil I IX X xi XI II Thr-OH XIII Les peptides de l'invention sont utiles pour stimuler la production de prothymocytes Td T-positifs. Les nouveaux peptides de l'invention présen- tent une rela'tion avec la séquence carboxy-terminale des peptides thymiques immunostimulants connus que sont les thymosines 3 et R 4 ' Le terme "acyle" utilisé pour définir le substituant R 1 dans la formule I, représente des restes d'acides aliphatiques connus ayant I à 7 atomes de car- bone, de préférence un reste acétyle. Les composés de formule I peuvent être faci- lement synthétisés selon des procédés classiques con- nus de la synthèse des peptides, y compris les tech- niques en solution et en phase solide. Selon les techniques connues, on peut syn- thétiser en solution les composés de formule I soit selon un mode opératoire dans lequel on construit la séquence des amino-acides par des additions successives de chaque amino-acide dans l'ordre désiré, soit selon un mode opératoire dans lequel on synthétise tout d'a- bord certains fragments peptidiques que l'on condense ensuite pour obtenir le peptide désiré Le dernier stade classique d'une telle synthèse en solution, est -4- l'élimination par clivage du(des) groupe(s) protec- teur(s) du peptide synthétisé sous une forme protégée. On effectue la synthèse en phase solide se- lon les procédés classiques comme décrit par exemple par errifield, J Am Chem Soc 85, 2149-2154 ( 1963) ou par Barany et coll, The Peptides, Analysis, Synthe- sis and Biology, Vol 2, 1-284, ( 1980). Selon un aspect préféré de l'invention, on prépare les composés II à VIII définis ci-dessus par synthèse peptidique en phase solide On acyle une ré- sine de chlorométhylpolystyrène du commerce avec la Ne-Boc-O-benzyl-L-sérine en présence de dicyclohexyl- carbodiimide (DCC) pour obtenir la N-Boc-O-benzyl-L- séryl-résine On place ensuite la résine acylée dans le réacteur d'un appareil automatique de synthèse pep- tidique en phase solide On programme ensuite l'appa- reil pour qu'il effectue la synthèse en phase solide en incorporant successivement dans chaque cycle les aminoacides protégés suivants:- ( 1) Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 2) Boc-Gly-OH (fin de la synthèse du tripep- tide de formule VIII) ( 3) Boc-Ala-OH ( 4) Boc-Gln-O Np ( 5) Boc-Lys(Z)-OH (fin de la synthèse de l'hexa- peptide de formule VII) ( 6) Boc-Glu(O Bzl)-OH (fin de la synthèse de l'hepta- peptide de formule VI) ( 7) Boc-Gln-O Np (fin de la synthèse de l'octa- peptide de formule V) ( 8) Boc-Glu(O Bzl)-OH (fin de la synthèse du nona- peptide de formule IV) ( 9) Boc-Iie-OH ( 10) Boc-Thr(Bzl)-OH (fin de la synthèse de l'undéca- peptide de formule Ili) -5- ( 11) Boc-Glu(O Bzl)-CH (fin de la synthèse du dodéca- peptide de formule II). Boc représente tert-butoxycarbonyle, O Bzl re- présente le groupe ester benzylique O Np représente le groupe ester pnitrophénylique et Z représente benzyl- oxycarbonyle. Bien entendu des variantes connues peuvent être employées dans les stades ( 1) ( 11) ci-dessus. Par exemple on peut remplacer Boc-Gln-O Np (stades 4 et 7 ci-dessus) et Boc-Lys(Z)-OH (stade 5 ci-dessus) respectivement par Boc-Gln-OH et BocLys( 2-Cl Z)-OH, en employant un mode opératoire analogue à celui décrit par Wang et coll, Int J Peptide Protein Res 18, 413-415 ( 1981). Selon un autre aspect préféré de l'invention, on prépare les composés IXXIII par synthèse peptidique en phase solide Dans ce cas on acyle une résine de chlorométhylpolystyrène du commerce avec la N"-Boc-O- benzyl-L-thréonine en présence de DCC pour obtenir une Na-Boc-O-benzyl-Lthréonyl-résine On place la résine acylée dans le réacteur d'un appareil automatique de synthèse peptidique en phase solide On programme en- suite l'appareil pour effectuer la synthèse en phase solide avec incorporation successive des amino-acides protégés suivants dans chaque site comme indiqué dans les colonnes A-E ci-dessous: A Nonapeptide de B Ncnapeptide de formule IX: formule X: Boc-Lys(Z)-OH Boc-Lys(Z)-Oi 1 BocAla-OH Boc-hla-CH Boc-Asp(O Bzl)-OH Boc-Asn-O Np Boc-Sér(Bzl)-OH BocSér(Bzl)-OH Boc-Glu(O Bzl)-OH Boc-Glu(O Bzl)-OH Boc-Gly-OH Boc-Gly-OH n 5 Boc-Ala-OH Boc-Ala-OH oc-'1 n-Cp Boc-Gln-O Np C Nonal-eptide de D Ncnapeptide de forziule XI: formule XII Boc-Lys (Z)-OH Boc-Lys(Z)-OH BocAla-Oil Boc- A'la-OH Boc-Jisp U Bzl)-0 H Boc-Asn-Olip Boc-1 ér(B 3 zl)-CH Boc-Sér(Bzl)-O 11 i 3 oc-Glu(O Bzl)-Od Boc-Glu( 013 zl)-OH Boc-Gly-011 Boc-Gly-OH Boc-;ar-H isoc-Sar-OH fi C-UD-Gln-ONp il C-0 O-Glu-O Np 5 E Dodécapeptide de formule XIII: Boc-Lys (Z)-OH Boc -Ala -OH Boc-Thr(Bzl)OH Boc-Ile-OH Boc-Glu(O Bzl)-OH Boc-ksp (O Bzl)-OH Boc- Sér(Bzl)-OH BocGlu(O Bzl)-OH B 3 oc -Gly-OH Boc-lla-OH Boc -G'in-Ol Np On peut employer dans chaque réaction de coulpla-e ( 120 minutes) un excès quadruple de chaque Boc-amnino-acide et de DCC et on peut employer un trai- tement de 50 minutes avec de l'acide trif'luoroacétique à 55 /_ dans le chlorure de méthyl Une pour la déprotec- tior par élimination du groupe iloc On traite ensuite j O les résines à peptide protégé ainsi obtenues avec un m,;lrînie anhydre d'acide fluorhydrique et d'anisole pour éli ir er t Lous, les Croures protecteurs des chalnes lat é- raies et en m'C 7 e tenps'libérer le peptide non protégé de la résine On peut soumettre les pertides bruts à un trait': nt d'élimination des sels sur une colonne de -7- Lephadex G-10 puis les purifier par chromatographie sur une colonne, par exemple sur DEAE-Lephadex A-25. Bien que des groupes protecteurs particuliers aient été décrits relativement à la synthèse en phase solide, il convient de noter que chaque amino-acide peut être protégé par un groupe protecteur quelconque habituellement employé pour cet amino-acide dans la synthèse en solution Parmi ces groupes protecteurs, figurent par exemple les groupes protecteurs classiques des groupes carboxy et hydroxy choisis parmi les grou- pes aryles, en particulier phényle ou phényle substitué par des groupes alkyle inférieur, halogéno, nitro, mer- capto ou thio, par exemple alkylthio en C 17, et des groupes protecteurs des groupes amino, tels que butoxy- carbonyle (Boc) et benzyloxycarbonyle (Z). Les composés de formule I de l'invention pré- sentent une activité dans la régulation, la différen- ciation et la fonction des cellules T Les composés de formulq I sont des inducteurs de l'ADN-polymérase dé- pourvue de modèle, connue sous le nom de "désoxynueléo- tidyle terminal-transférase" (Td T) De plus les compo- sés de formule I agissent comme des antagonistes des glucocorticoides tels que l'acétate d'hydrocortisone (HCA) dont ils contrecarrent les effets; ils agissent sur le thymus et le système immunitaire par accélération de la reconstitution des populations de thymocytes dans le thymus et des thymocytes Td T-positifs Les composés de formule I sont également capables d'inhiber de façon non spécifique la migration des macrophages en l'ab- C sence d'antigènes spécifiques comme déterminé par un test in vitro du facteur inhibiteur de la migration des macrophages (MIF) De plus les composés de formule I sont capables de rétablir les réponses immunologicues chez des mammifères ayant subi une suppression stérol- dienne. -8- Activité biologique: Partie A Les effets in vivo de la thymosine 83, de la thymosine 84, de la fraction 5 de la thymosine, du com- posé de formule V (fragment C 8 synthétique de la f 4) et du composé de formule XIII (fragment C 12 synthétique de la F 3) sur l'activité de Td T des thymocytes de sou- ris c 57 BL/6 J traitées par l'acétate d'hydrocortisone (HCA) ont été étudiés et déterminés selon la méthode de Hu et coll, Fed Proc 38, 1079 ( 1979); Hu et coll, Mol Cell Biochem 41, 49 ( 1981) Une injection de 1,25 mg d'HCA par animal a été effectuée le jour zéro ( 0) Chaque injection a été suivie d'un traitement quo- tidien de l'animal avec les composés ci-dessus et té- moins (c'est-à-dire pas d'HCA et HCA-soluté salé) pen- dant onze ( 11) jours consécutifs L'accroissement de l'activité spécifique de la Td T (nmol de d GTP incorpo- rées pour 108 thymocytes par heure) par rapport aux - animaux traités par l'HCA-soluté salé a été déterminé. Les valeurs figurent dans les colonnes 1 à 4 du ta- bleau 1. Partie B Les effets in vivo de la thymosine M 5 de la thymocine 04, de la fraction 5 de la thymosine, du composé de formule Vet du composé de formule XIII sur le rétablissement des réponses mitogènes spléniques de souris c 57 BL/6 J ayant subi une suppression par -'HCA, ont été étudiés et déterminés selon la méthode décrite par Thurman et Goldstein dans "The biological Activity of Thymic Hormones", ed D W van Bekkum, Kooyker Scientific Publications, Rotterdam, p 261 ( 1975) Les résultats figurent dans les colonnes 5 et 6 du tableau 1. Le test standardisé du facteur inhibiteur de la migration des macrophages ( 1 IF) a été effectué pour -9la thymosine RM naturelle, la thymosine R 4 synthétique, les composés de formule XIII (fragment C 12 de F 3), de formule V (fragment C 8 de R 4, de formule VII (fragment C 6 de R 4) et le fragment C 10 connu de R 4, selon la mé- thode de Thurman et coll, Lymphokines and Thymic Hormones: Their Potential Utilization in Cancer The- rapeutics, eds Goldstein et Chirigos, Raven Press. New York, pp 145-157 ( 1981). Les valeurs du pourcentage d'inhibition non spécifique ont été calculées et figurent dans le ta- bleau 2. Tableau I Effets in vivo de la thymnosine n%, de la thymnosine N 4, de la fraction 5 de la th D 7 mosine, du composé V et du composé x III sur l'activité de Td T des thymocytes et sur le rétablis- sement des réponses mitogènes spléniques chez des souris c 57 BL/6 j ayant subi une suppres- sion par l'HCA Traitement,,)Quantité Activité de Td T iléponse mitogène Traitemennteté Atvié ccoss o A l I- spécifiquement Ho lcoups/minllcoups/minl T&émoin (pas d'ECA) 8,9 210 000 50 000 Témoin (HCA-soluté sale) 6,4 86 000 12 000 Fraction 5 de la thymosine1 O Opg 10,0 + 57 175 000 55 000 Thymosine RL 4 I 8,8 + 38 125 000 10 000 Composé XIII I O ug 9,6 + 19 140 000 il 000 Thymosine O pt 9,7 + 52 120000 27000 Composé V 3 O u 8,2 28 110 000 65 000 )6-8 souris/rroupe c Un 0 % -11 - Tableau 2 Effets de la thyvmosine A 4 et de fragments synthêti ques carboxyterrninaux de N et de O sur l'inhibition de la migration des macrophages. Composé de type thymnosine Concentration Inhibition (nmol/inl) Thymosine P 4 naturelle Thymnosine 04 > synthétique Fragment 012 de M 3 (XIII) Fragment 08 de N 4 (y) Fragment 010 de O Fragment C 6 de R 4 (VII) 0,5 0, 05 0,OOC 5 0,5 0,)05 0,005 0,5 0,05 0,005 0,0005 0,5 0,)05 0,)005 0,0005 0,5 0,05 0,005 0,0005 0,5 0,05 0, O C-'5 0,0005 non spéci- fique (Oi)_ 37,6 29,2 23,1 ,3 ,9 ,0 ,2 29,7 24,7 ,5 ,4 27,0 ,5 21,6 18,8 , 7 -5,5 11 E 3 , -5,1 3,1 -12- Les co,os S de formule 1 peuvent être ad- ministrés à des ramnifures pe:r application parentérale, par voie intraveineuse, sous-cutanée ou intramusculaire. Ces composés sont des agents im:nunopotentiateurs puis- sants pour une posologie journalière comprise dans la Cam e d'environ 0,1 à 50 mg/kg de poids corporel pour l'administration intraveineuse Bien entendu la poso- logie requise varie avec l'état particulier à traiter, la rravité de l'état et la duré e du traitement Une forme d'administration appropriée à l'emploi pharma- ceutique est constituée de 1 à 5 m E du composé lyophi- lisé de formule I à reconstituer avant l'emploi par addition d'eau ou de soluté salé stériles. Comme précédemment indiqué ci-dessus, les sels acceptables en pharmacie des composés de formule I entrent dans le cadre de l'invention Des sels appro- priés comprennent les sels de sodium ou de potassium ou les sels formés avec une base organique forte telle que la guanidine De plus les ions complémentaires de ces cations tels que les ions chlorure, bromure, sul- fate, phosphate, malate, ascorbate et similaires, peu- vent être compris dans la préparation. L'invention est illustrée par les exemples non limitatifs suivants. Exemple 1 On fait réagir une solution de 3,511 g ( 11,9 mmol) de h C-BocC-benzyl-L-sérine dans 1,50 ml ( 10,7 mmool) de triéthylanine et 25 nl d'éthanol absolu, avec ,0 ( 11,9 mmol) de copolymnère de styrène à I ': de R O divinylbenzène chlorométhylé ( 1,19 mmol de Cl/g de ré- sine) On agite le mélange réactionnel à reflux pendant 48 heures, on filtre et on lave trois fois avec de 1 'é- thanol, de l'eau, du méthanol et du chlorure de r A-thy- lène et on sgche sous vide On effectue la déprotection selon les stades (a)-(d) ci-dessous pour obtenir la -15- TFA Hi-S r(Bzl)-O-rrésine. On couple respectivement une portion de ,0 g de la TFA H-Sér(Bzl)-Orésine ( 2,71 mmol) avec 3,65 g ( 10,84 mmol, 4 équivalents) de Boc-Glu(O Bzl)-OH et 2,05 g ( 10,84 mmol, 4 équivalents) de Boc-Gly-OH pour obtenir la tripeptidyl-résine. Au cours d'un cycle de couplage, on fait réa- gir la résine acylée avec (a) du chlorure de méthylène (trois fois pendant 5 minutes); (b) de l'acide tri- fluoroacétique à 33 % dans le chlorure de méthylène ( 2 min); (c) de l'acide trifluoroac 6 tique à 33 % dans le chlorure de méthylène ( 30 min) ; (d) du chlorure de méthylène (trois fois pendant 5 min); (e) de la diiso- propyléthylamine à 5 % dans le chlorure de méthylène ( 2 min); (r) de la diisopropyléthylamine à 5 % dans le chlorure de méthylène ( 10 min); (g) du chlorure de mé- thylène (trois fois pendant 5 min); (h) du DMF (trois fois pendant 5 min); (i) du chlorure de méthylène (trois fois pendant 5 min); (j) l'aminoacide protégé ( 10 min); (k) du DCC ( 2 heures); ( 1) du chlorure de méthylène (trois fois pendant 5 min); (m) de l'iso- propanol (trois fois pendant 5 min) et (n) du DIF (trois fois pendant 5 min). On fait réagir une portion de 1,0 g ( 0,271 mmol) de la tripeptidyl-résine avec un mélange d'envi- ron 10 ml d'acide fluorhydrique et de 1,5 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhy- drique sous vide et on lave le résidu à l'éther, on extrait dans de l'acide acétique 0,1 l et on lyophilise pour obtenir la glycyl-L-glutamylL-sérine (VIII) sous forme d'un solide blanc. Exemple 2 On couple successivement 2,439 mmol de la tripeptidyl-résine de l'exemple I avec 4 équivalents de Boc-Ala-OH ( 1,85 g; 9,76 mmol) de Boc-Gln-O Np dans -14- ml de DMF ( 24 heures; on omet le stade (k) du cycle de couplage) et de N-Boc-Z -Z-L-Lys-OH pour obtenir 1 'hexapeptidyl-résine. On fait réagir une portion de 1,0 g ( 0,271 mmol) de l'hexapeptidylrésine avec un mélange d'envi- ron 10 ml d'acide fluorhydrique et de 1,5 ml d'anisole à O'C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhy- drique sous vide et on lave le résidu avec de l'éther, on extrait dans l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la L-lysyl-L-glutaminyl-L-alanyl-glycyl-L- glutamyl-L-sérine (VILI)-sous forme d'un solide blanc. Exemple 3 On couple 1,626 mmol de l'hexapeptidyl-résine de l'exemple 2 avec 2,92 g ( 8,67 mmol; 4 équivalents) de Boc-Glu(O Bzl)-OH pour obtenir l'heptapeptidyl-résine. On fait réagir une portion de 1,0 g ( 0,271 mmol) de l'heptapeptidyl-résine avec un mélange d'envi- ron 10 ml d'acide fluorhydrique et de 1,5 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhy- drique sous vide et on lave le résidu avec de l'éther, on extrait dans l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la L-glutamyl-Lylysyl-L-glutaminyl-L- alanyl-glycyl-L-glutamyl-L-sérine (VI) sous forme d'un solide blanc. Exemple 4 On couple 1,355 mmol de l'heptapeptidyl- résine de l'exemple 3 avec du Boc-Gln-O Np ( 1,99 g, ,42 mmol, 4 équivalents; on omet le stade (k) du cycle de couplage) dans 25 ml de DITF pendant 24 heures pour obtenir l'octapeptidyl-résine. On fait réagir une portion de 1,0 g ( 0,271 mmol) de l'octapeptidyl-résine avec un mélange d'envi- ron 10 ml d'acide fluorhydrique et de 1,5 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhy- * drique sous vide et on lave le résidu avec de l'éther, -15- on extrait dans de l'acide acétique 0,1 N et on lyo- philise pour obtenir la L-glutaminyl-L-glutamyl-L- lysyl-L-glutaminyl-L-alanyl-glycyl-L-glutamyl-L-sérine (V) sous forme d'un solide blanc. Exemple 5 On couple 1,084 mmol de l'octapeptidyl-résine de l'exemple 4 avec du Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 1,46 g, 4,336 mmol, 4 équivalents) pour obtenir la nonapeptidyl- résine. On fait réagir une portion de 1,0 g ( 0,271 mmol) de la nonapeptidyl-résine avec un mélange d'envi- ron 10 ml d'acide fluorhydrique contenant 1,5 ml d'ani- sole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluor- hydrique sous vide et on lave le résidu avec de l'é- ther, on extrait dans de l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la L-glutamyl-L-glutaminyl-L- glutamyl-L-lysyl-L-glutaminyl-L-alanyl-glycyl-L-gluta- myl-L-sérine (IV) sous forme d'un solide blanc. Exemple 6 On couple 0,813 mmol de la nonapeptidyl- résine de l'exemple 5 successivement avec 4 équivalents de Boc-Ile-OH et de Boc-Thr(Bzl)-OH pour obtenir l'un- décapeptidyl-résine. On clive une portion de 1,0 g ( 0,271 rmol) de l'undécapeptidyl-résine avec un mélange d'environ ml d'acide fluorhydrique contenant 1,5 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhy- drique sous vide et on lave le résidu avec de l'éther, on extrait dans de l'acide acétique 0,1 M et on lyophi- lise pour obtenir la L-thréonyl-L-isoleucy 1-L-glutamyl- L-glutam inyl-L-glutamyl-L-lysyl-L-glutaminyl-L-alanyl- glycyl-L-glutamyl-L-sérine (III) sous forme d'un so- lide blanc. Exemple 7 On couple 0,271 mmol de l'undécapeptidyl- -16- r 6 S ne de l'exer ple 6 avec du Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 365 mg, 1,0#4 remol, 4 équivalents) pour obtenir la dodécapep- tidyl-résine On fait rtagir cette natière avec un mé- lange d'environ 10 ml d'acide fluorhydrique contenant 1,5 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhydricue sous vide et on lave le résidu avec de l'éther, on extrait dans de l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la L-glutamyl-L- thréonyl-L-isoleucyl-L-glutamyl-L-glutamninyl-L-glutamyl- L-lysyl-L-glutam;niryl-L-alanyl-glycyl-L-glut ayl-L-sé- rine (II) sous forme d'un solide blanc). Exemple 8 On fait réagir une solution de 3,678 g ( 11,9 rmol) de 1 a-Boc-O-benzyl-Lthréonine dans 1,50 ml ( 10,7 mmol) de triéthylamine et 25 ml d'éthanol absolu avec 10,0 g ( 11,9 mmol) de copolymère de styrène à 1 % de divinylbenzène chlorométhylé ( 1,19 mmol de Cl/g de résine) On traite le mélange réactionnel comme décrit dans l'exemple 1. On effectue la synthèse peptidique en phase solide comme décrit dans l'exemple 1 On couple res- pectivement une portion de 10,0 g de la TFA H-Thr(Bzl)- O-résine ( 3,12 mmol) avec du Boc-Lys(Z)-OH ( 4,742 g, 12,48 mmol, 4 équivalents) et du Boc-Ala-OH ( 2,360 g, 12,48 mmol, 4 équivalents) pour obtenir la tripeptidyl- résine. On couple ensuite une portion de 1,0 g ( 0,312 mmol) de la tripeptidyl-résine successivement avec du Boc-Asp(O Bzl)-OH ( 403 mg, 1,248 mmol, 4 é uiva- lents), du Boc-Sér(Bzl)-OH ( 368 mg, 1,248 mmol, 4 équi- valents), du Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 421 mg, 1,248 mmol, 4 équivalents), du Boc-Gly-OH ( 218 rmg, 1,248 mrmol, 4 équivalents) et du Boc-Ala-OH ( 236 mig, 1,248 mmol, 4 équivalents) Un cycle de couplage final, sans le stade (k), avec Boc-Gln-O Np ( 458 mg, 1,248 mmol, 4 équi- -17- valelnts) dans 25 ml de IXIF ( 24 heures) fournit la nons- peptidyl-r 6 sine On fait réagir ce produit avec un mné- lange d'environ 10 ml d'acide fluorhydrique et de 1,72 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide rluorhydrique sous vide, on lave le résidu à l'éther, on extrait dans de l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la L-glutaminyl-L-alanyl- glycyl-L-glutamyl-L-séryl-L-aspartyl-L-a 1 anyl-L-lysyl- L-thréonine (IX) sous forme d'un solide blanc. Exemple 9 On couple une autre portion de 1,0 g ( 0,312 mmol) de la tripertidyl-résine de l'exemple 8 dans le stade (j) avec 441 mg de BocAsn-O Np ( 1,248 mmol, 4 équivalents) dans 25 nml de DJF ( 24 heures) en sup- primant le stade (k) du cycle de couplage On effectue ensuite des couplages avec 4 équivalents respectivement de Boc-Sér(Bzl)-OH ( 368 mg), de Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 218 mg), de Boc-Gly-OH ( 218 mg) et de Boc-Ala-OH ( 236 mg) Un cycle final, sans le stade (k) avec Boc-Gln-O Np ( 458 mg, 1, 248 mmol, 4 équivalents) dans ml de DHF ( 24 heures) fournit la nonapeptidyl-résine. On fait réagir ce produit avec un mélange de 210 ml d'acide fluorhydrique et de 1,72 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhydrique sous vide et on lave le résidu avec de l'éther, on ex- trait dans l'acide acétique 0,1 N et on lyophilise pour obtenir la L-glutaminyl-L-alanyl-glycyl-L-glutamyl-L- séryl-L-asparaginyl-L-alanyl-L-lysyl-L-thréonine (X) sous forme d'un solide blanc. Exemple 10 On couple une autre portion de 1,0 g ( 0,312 mmol) de la tripeptidyl-résine de l'exemple 8 avec 4 équivalents respectivement de Boc-Asp(O Bzl)-OH ( 405 mg), de Boc-Sér(Bzl)-LOH ( 568 mg), de Boc-Glu(O Bzl) -OH ( 421 mg), de Boc-Gly-OH ( 218 mg) et de Boc-Sar-OH -lb- ( 236 mng) Un cycle de couplage final dans lequel on omet le stade (k), avec de l'acétyl-Gln-O Np ( 386 mg, 1,248 mmol, 4 équivalents) dans 25 ml de DIIF ( 24 heu- res) fournit la nonapeptidyl-résine On fait réagir ce produit avec un mélange d'environ 10 ml d'acide fluor- hydrique et 1,72 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes. On chasse l'acide fluorhydrique sous vide et on lave le résidu à l'éther, on extrait dans l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la I-acêtyl-L- glutaminyl-sarcosyl-glycyl-L-glutamyl-L-séryl-L-aspar- tyl-L-alanyl-L-lysyl-L-thréonine (XI) sous forme d'un solide blanc. Exemple 11 - On couple une autre portion de 1,0 g ( 0,312 mmol) de la tripeptidylrésine de l'exemple 8 dans le stade (j) avec du Boc-Asn-O Np ( 441 mg, 1, 248 mmol, 4 équivalents) dans 25 ml de D Il F ( 24 heures) en suppri- mant le stade (k) du cycle de couplage On effectue en- suite des couplages avec 4 équivalents respectivement de Boc-Sér(Bzl)-OH ( 368 mg), de Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 421 mg), de Boc-Gly-OH ( 218 mg) et de Boc-Sar-OH ( 236 mg). Un cycle de couplage final dans lequel on supprime le stade (k), avec l'acétyl-Gln-O Np ( 386 mg, 1,248 mmol, 4 équivalents) dans 25 ml de DIF ( 24 heures fournit la nonapeptidyl-résine On fait réagir ce produit avec un mélange d'environ 10 ml d'acide fluorhydrique et de 1,72 ml d'anisole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluorhydrique sous vide et on lave le résidu avec de l'éther, on extrait dans de l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la N-acétyl-L- glutaminyl-sarco syl-glycyl-L-glutamyl-L-séryl-L-aspara- ginyl-L-alanyl-L-lysyl-L-thréonine (XII) sous forme d'un solide blanc. Exemple 12 On couple une autre portion de 1,0 g ( 0,312 -19- mmol) de la tripeptidylrésine de l'exemple 8 avec 4 équivalents de Boc-Thr(Bzl)-OH ( 386 mg), de Boc-Ile-OH ( 289 mg), de Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 421 mg), de Boc-Asp(O Bzl)OH ( 403 mg), de Boc-Sér(Bzl)-OH ( 368 mg), de Boc-Glu(O Bzl)-OH ( 421 mg) , de Boc-Gly-O O H ( 218 mg) et de Boc-Ala-OH ( 236 mg) Un cycle de cou- plage final dans lequel on supprime le stade (k), avec Boc-Gln-O Np ( 458 mg, 1,248 mmol, 4 équivalents) dans ml de DMF ( 24 heures), fournit la dodécapeptidyl- résine On fait réagir ce produit avec un mélange d'en- viron 10 ml d'acide fluorhydrique et de 1,72 ml d'ani- sole à O C pendant 45 minutes On chasse l'acide fluor- hydrique sous vide et on lave le résidu à l'éther, on extrait dans l'acide acétique 0,1 M et on lyophilise pour obtenir la L-glutaminyl-L-alanyl-glycyl-L-glutamyl- L-séryl-L-aspartyl-L-glutamyl-L-isoleucyl-L-thréonyl- L-alanyl-L-lysyl-L-thréonine (XIII) sous forme d'un solide blanc. -20- EEVENDICATIONS I Nouveaux peptides répondant à la formule: R -Gly-Glu-Sé r-R 1 dans laquelle R 1 représente Q, Q'- Ala-, Q'-Gln Ala-, Q-Lys-Gin-Ais-, Q-GluLys-Gln-Ala-, 0 Q-Gln-Glu-lys-Gln-Ala-, Q-Glu-Gin-Glu -Lys -Gln-lila-, Q 1 -Ile-Glu-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-, Q-Thr-Ile-Glu-Gln-Glu-Lys-Gln-Alal-, QGlu-Thr-Ile-Glu-Gln-Glu-L-ys-Gln-Ala,, ou Q-Gln-Sar-; Q représente un atome d'hydrogène ou un radical acyle; QI représente un atome d'hydrogène ou un ra- dical acyle, sous réserve qu'il représente un radi- cal acyle lorsque représente un radical hydroxy; R 2 représente -OH, -A-C ou -A-B-C; A représente Asp ou Asn, B représente Glu-Ile-Thr et C représente Ala-Lys-Thr-OH, et leurs sels formés par addition d'acide ou de base acceptables en pharmacie. 2 Peptide selon la revendication 1 qui est H-Glu-Thr-l le -Glu-Gln-Glu-Lys-Gln-Ala-Gly-Glu-Sér-OH. 3 Peptide selon la revendication I qui est H-Gin-Glu-Lys -Gin-Aila-Gly-Glu-Sé r-OH. 4 Peptide selon la revendication I qui est H-Gly-Glu-Sé r-OH. Peptide selon la revendication I qui est H-Gln-Ala -Gly-Glu-Sé r-Asp- Al a-Lys-Thr-OH. 6 Peptide selon la revendication I oui est II-Gln-Lla-Gly-Glu-Sér-A Isn-Al a-L'js-Thr-OH. 7 Peptide selon la revendication 1 qui est H C-CO-Gln-Sar-Gl y-Glu-S'é r-Asp-Alne-Lys -Thr-OH. 8 Pepti de selon la revendication 1 qui est H C-CO-Gln-Lar-Gly-Glu-Oé r-hsn-Ala-Lys-Thr-Ol H. 9 Pep Dtide selon la revendication I qui est H-Gln-A'fla-Gly-Glu -Sê-r-Asp-Glu-Jile-Thr-Ala-Lys-Thr-011. -21- Nouveaux médicaments consistant en les peptides selon l'une quelconque des revendications 1 à 10., I 1 Nouveaux médicaments actifs dans la ré- gulation de la différenciation et la fonction des cel- lules T, consistant en les peptides selon l'une quel- connue des revendications 1 à 9. 12 Nouveaux médicaments utilisés comme aients stimulants la production de prothymocytes Td T- pos;itifs, inhibant la migration des macrophages ou rétablissant les réponses immunitaires de mammifères ayant subi une suppression stéroîdienne consistant en les peptides selon l'une quelconque des revendications 1 à 9. 13 Compositions pharmaceutiques contenant comme composant actif un peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 9 et un support compatible.