Brevet FR2529785A1 — publié le 19840113

- La présente invention a pour objet une composi- tion pharmaceutique contenant une association de deux subs- tances actives, l'indapamide et le 8-( 3-tert-butylamino- 2-hydroxypropoxy)-thiachromanne. L'indapamide, ou N-( 3-sulfamoyl 4chloro benza- mido) 2-methylindoline, ou encore 4-chloro N-( 2-méthyl 1- indolinyl) 3-sulfamoyl-benzamide, a été décrit dans l'exemple 1 du brevet français N 69 06023 (publié sous le N 2 003 311), comme diurétique utilisable en particulier dans le traitement de l'hypertension artérielle. Le 8-( 3-tert-butylamino-2-hydroxypropoxy)-thia- chromanne (ou ses sels d'addition) est décrit dans l'exem- ple 2 du brevet français N , 71 11445 (publié sous le N 2 092 004) qui indique des propriétés cardio- vasculaires, en particulier bêta-bloquantes. Or, nous avons maintenant trouvé que les deux composés précédents associés ont des propriétés sy- nergétiques inattendues, permettant de prévoir leur uti- lisation thérapeutique simultanée. L'invention concerne donc une composition phar- maceutique contenant une association d'indapamide et de 8- ( 3-tert-butylamino 2-hydroxypropoxy)-thiachromanne ou un de ses sels d'addition pharmaceutiquement acceptables, chacun de ces deux composés pouvant se trouver sous forme racémique ou d'isomère optique, ainsi qu'un excipient ou véhicule thérapeutiquement compatible. 2 - Pour la commodité, le 8-( 3-tert-butylamino 2-hydroxypropoxy)-thiachromanne sera désigné "THPT" ci- apres. Etude pharmacologique Les composés étudiés selon l'invention ont été testés sur l'inhibition fonctionnelle de l'adény- late cyclase menbranaire seuls et en association. Le globule rouge de pigeon est connu pour sa grande activité adénylate cyclase depuis les travaux de SUTHERLAND et coll (Adenyl cyclase 1 Distribution, pre- paration and properties, J Biol Chem ( 1962) 237: 1220- 1227) Les expériences ont été réalisées sur des fantômes d'érythrocytes (cellules ouvertes) préparés à partir de sang de pigeons Strasser selon la technique de SALESSE R et GARNIER J, "Effects of drugs on pigeon ery- throcyte membrane and asymetric control of adenylate cyclase by the lipid bilayer" (Biochem Biophys Acta ( 1979) 554: 102-103). Les suspensions obtenues ont été incubées vingt minutes en tampon hypotonique avec un volume de pro- duit testé à la concentration finale désirée Les dosages de l'activité adénylate cyclase ont été ef- fectuées selon la méthode de BIRNBAUMER L et coll (J. Biol Chem ( 1969) 244: 2468-3476) et de RAMACHANDRAN J; LEE V (Biochem Biophys Res Commun ( 1970) 41: 358-366). Les concentrations finales de réactifs étaient ATP 2 m M dont 1 t Ci del 32 Jp ATP, théophylline 4 m M, phosphocréatine 10 m M, créatine kinase 0, 5 g/l, Mg Cl 2 7,5 m M, trométhamine, H Cl ("TRIS", HCI) 10 m M, p H = 7, 4 3- Le volume total était de 75 microlitres et le nombre de cellules par tube environ 108. La production d'AMP cyclique (AM Pc) était stimulée soit par l'isoprotérénol 0,05 m M en présence de 0,1 m M de GTP, soit par le fluorure de sodium 10 m M On ajoutait le composé à la concentration finale requise. La réaction était arrêtée après 15 minutes à 37 C par l'ajout de 300 microlitres d'acide chlorhy- drique 0,5 N et un passage de 3 minutes au bain marie bouillant On retirait ensuite les tubes du bain marie en neutralisant le contenu par 3090 microlitres d'imidazole 1,65 N. O Après centrifugation ( 10 mn, 4000 g) 500 micro- litres du surnageant étaient versés sur une colonne d'alumine neutre activée et élués par 2,6 ml d'imidazole m M, p H = 7,5 Ces colonnes ont un rendement en AM Pc de %. La radio-activité des échantillons était me- surée dans un compteur à scintillations "Packard Tricarb", en utilisant l'effet Cerenkov après addition à l'éluat de 10 ml d'une solution aqueuse à 10/0 o d'acide 7-amino 1,3 naphtalène disulfonique (rendement de comp- tage 65 %. Nous avons établi, selon une échelle loga- rithmique, trois concentrations au-dessus et trois concentrations audessous de la concentration pour laquelle on observe in vitro, sur l'artère mésentérique de rat, une inhibition de moitié de la vasoconstriction -4- induite par la noradrénaline. Les résultats sont donnés comme la moyenne de trois essais en picomoles d'AMP cyclique produites par mi- nute et par milligramme de phospholipides membranaires. On constate que l'indapamide et le THPT soumis à ce test inhibent l'activation de l'adénylate cyclase sti- mulée par l'isoprotérénol ou par le fluorure de sodium: la quantité d'AM Pc produit décroît La nature de l'effet observé sur la production de i'AM Pc dépend de la concentration du composé utilisé On a déterminé graphiquement la concentration active de chaque composé produisant une inhibition de 25 % (CA 25) et 50 % (CA 50) puis celle de leurs mélanges à ces concentrations: Indapamide (P M = 365,89): CA 25 = 9 x 10-5 mole/1 CA 50 = 3 x 10 mole/1 THPT, H Cl (P M = 331,90): CA 25 = 1,2 x 10-5 mole/1 CA 50 = 7 x 10-5 mole/1 On a rassemblé dans le tableau suivant les pourcentages d'inhibition obtenue avec chacun des 4 mélanges des deux composés à ces concentrations: TABLEAU Indapamide 25 % Indapamide 50 % THPT 25 % 45 % 62 % THPT 50 % 62 % 75 % i - On constate que l'inhibition obtenue avec le mélange des deux composés est nettement supérieure à celle obtenue avec chacun séparément Par exemple, avec un mélange aux concentrations de 9 x 10-5 mole/l d'indapamide et de 1,2 x 10-5 mole/l de THPT, on obtient 45 % d'inhibition, qui n'est atteint que par 2,5 x 10-4 mole/1 d'indapamide ou par 5 x 10-5 mole/1 de THPT, c'est à dire environ 3 à 4 fois la quantité nécessaire de chacun des composés pris séparement Les deux effets correspondant à 25 % d'inhibition se multiplient donc au niveau de l'effet global et aboutissent à une inhibition de 45 % de l'activité de l'enzyme. Discussion: Le THPT étant connu comme béta-bloquant, son acti- vité inhibitrice sur l'adényl cyclase associée à un récepteur bêta extracellulaire était prévisible Par contre, il était inattendu qu'un diurétique antihyper- tenseur tel que l'indapamide possède une activité simi- laire et surtout que l'activité de ces deux composés soit conjuguée: en effet, la courbe dose/activité de ces composés et en particulier leurs CA 25 et CA 50 montrent qu'ils agissent en synergie multiplicatrice. L'AM Pc est un second messager intracellulaire déclanchant la mise en route des fonctions cellulaires En inhibant l'adényl cyclase, on freine donc tous les états d'hyperactivité cellulaire tels qu'ils existent dans l'hyperthyroîdie, l'hypertension, l'hypersensibilité, etc En conséquence, l'association des deux composés agissant en synergie selon l'invention est particulièrement indiquée pour le traitement des hyper-activités bétadépendantes telles qu'on en rencontre dans l'hypertension, en particulier dans les cas -6- d'hypertension artérielle rénale, ou bien dans l'hyperthyroidie. sévère avec des maladies insuffisance telle que Les compositions pharmaceutiques selon l'invention sont de -préférence administrées par voie orale, et peuvent être sous forme de comprimés, comprimés enrobés, gelules, suspensions, etc Elles peuvent con- tenir en particulier de 0,8 à 3 mg d'indapamide, et de 3 à 12 mg de THPT ou un de ses sels d'addition pharmaceu- tiquement acceptables, ainsi que les excipients ou véhicules usuels pour la forme orale, et peuvent être administrés en une ou deux prises journalières. EXEMPLE: COMPRIME DE 90 mg. Indapamide 1,25 mg Chlorhydrate de 8-( 3-tert-butylamino 2-hydroxypropoxy)- thiachromanne 5,00 mg Acide stéarique 0,90 mg Carboxymethyl-amidon sodique 3,00 mg Cellulose microcristalline 33,38 mg Lactose 35,75 mg Hydrogénophosphate de calcium 10,00 mg Silice colloîdale 0,27 mg Stéarate de magnésium 0,45 mg Ce comprimé peut être enrobé. 7- REVENDICATIONS 1 Composition pharmaceutique contenant une associa- tion d'indapamide et de 8-( 3-tert-butylamino-2-hydroxy- propoxy)-thiachromanne ou un de ses sels d'addition phar- maceutiquement acceptables, chacun de ces deux composés pouvant se trouver sous forme racémique ou d'isomère op- tique, ainsi qu'un excipient ou véhicule thérapeuti- quement compatible. 2 Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée par le fait qu'elle contient de 0,8 à 3 mg d'indapamide et de 3 à 12 mg de: 8-( 3-tert-buty- lamino-2-hydroxypropoxy)-thiachromanne ou un de ses sels d'addition. 3 Composition pharmaceutique destinée pour l'admi- nistration par voie orale selon la revendication 2, carac- térisée par le fait qu'elle contient 1,25 mg d'indapamide et 5 mg de chlorhydrate de 8-( 3-tert-butylamino-2-hydroxy- propoxy)-thiachromanne.