Brevet FR2532308A1 — publié le 19840302

La présente invention a pour objet de nouveaux polypeptides, leur préparation et leur appli- cation en thérapeutique, à titre de principes actifs de médicaments. L'invention concerne plus particulièrement des polypeptides à chaine droite ou monocycliques comprenant un fragment heptapeptidique, ledit fragment comportant en position 1 (N-terminal) un reste phényl- alanine a-N-phénylalky 1 é,éventuellement substitué dans o O l'un ou les deux noyaux, en position 2 un reste cystéine, en p-osition 3 un reste phénylalanine éventuellement substitué dans le noyau, en position 4 un reste tryptophane éventuellement substitué dans le noyau benzénique, en position 5 un reste lysine éventuellement E-N-alkylé et en position 7 ( Cterminal) un reste cystéine ou cystéinol, les atomes de soufre du reste cystéine en position 2 et du reste cystéine ou cystéinol en position 7 étant liés ensemble dans le cas des polypeptides monocycliques pour former un pont -S-S-, les restes situés aux positions 1,2, 4, 6 et 7 dudit fragment heptapeptidique pouvant chacun avoir la configuration (L) ou (D) et les restes situés aux positions 4, 5 et 6 dudit fragment heptapeptidique pouvant chacun être éventuellement a-N-alkylé, ledit peptide étant sous forme libre ou sous forme protégée, ainsi que leurs sels et leurs complexes. Les polypeptides préférés selon l'invention sont ceux correspondant à la formule I A 1 A Z CH 2-S-Y, Y 2-S-CH 2 A 1 1 i ,\ Q -N-CH-CO-NH-CH-CO-B-C-D-E-NH-CH-F 12 3 4 5 6 7 (I) A 2 A 3 dans laquelle A est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 ou le reste acyle d'un acide minéral ou organique, A 1 est l'hydrogène, un halogène, alkyle en C 1-C 3, alcoxy en C 1-C 3, OH, NO 2, un groupe carboxy esté- rifié ou amidé ou un groupe amide, A 2 est l'hy drogêne, un halogène, alkyle en C 1-C 3, al 1 oxy en C 1-C 3, OH ou NO 2, A 3 est l'hydrogène, un halogène, alkyle en C 1-C 3 ou alcoxy en C 1-C 3, Q est a-lkylène en CC 4, >N-CH(Z)-CO est un reste (L) ou (D)-phénylalanine éventuellement substitué dans le noyau par un ou plusieurs substituants choisis parmi les halo- gènes et les groupes NO 2, NH 2, OH, alkyle en C-C 3 et alcoxy en C 1-C 3, B est -Phe éventuellement substitué dans le noyau par un ou plusieurs substituants choisis parmi les halogènes et les groupes NO 2,NH 2, OH, alkyle en C 1-C 3 et alcoxy en C 1-C 3, C est -Trp ou -(D)-Trp éventuellement a-N-mâthylé et éventuellement substitué dans le noyau benzénique par un ou plusieurs substituants choisis parmi les halogènes et les groupes NO 2, NH 2, OH, alkyle en Cl-C 3 et alcoxy en C 1-C 3, D est -Lys éventuellement a-N-méthylé et éventuelle- ment ú-N-substitué par un groupe alkyle en C 1 C 3, E est le reste d'un aoamino-acide naturel ou d'un (D)-amino-acide correspondant, ledit reste étant éventuellement a-N-méthylé, F est un groupe de formule R -COOR 1, -CH 20 R 2, -CO-N? 3 R 4 ou CO-N X dans lesquelles R 1 est l'hydrogène ou alkyle en C 1-C 3 D R 2 est l'hydrogène ou le reste d'un ester physio- logiquement acceptable et physiologiquement hydrolysable, -R est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 phényle-ou 3 cl-3, phénylalkyle en C 7 C la, R 4 est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 ou, lorsque R signifie l'hydrogène ou méthyle, également un groupe de formule -CH(R 5)-X o R est l'hydrogène, -(CH 2)2-OH ou -(CH 2 J 3-OH, ou représente le substituant fixé sur l'atome de carbone a d'un a-amino-acide naturel et X est un groupe de formule -COOR 1, -CH 20 R 2 ou -CON(R 6)R dans lesquelles R 1 et R 2 ont les significations données précé- demment, R 6 est l'hydrogène ou alkyle en C 1 IC 3, et R 7 est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 phényle ou phénylalkyle en C 7-C, le groupe '-CH(R 5)-X ayant la configuration (D) ou (L), et Y 1 et Y 2 sont chacun l'hydrogène ou représentent ensemble une liaison directe, les restes situés aux positions 2 et 7 ayant chacun, indépendamment l'un de l'autre, la configuration (L) ou (D), les restes (L) et/ou (D)-cystéine étant présents uniquement aux position 2 et 7, lesdits polypeptides de formule I étant sous forme libre ou sous forme protégée, ainsi que leurs sels et leurs complexes. Par halogène, on entend dans la présente description le fluor, le chlore ou le brome Conformé- ment à la pratique adoptée dans la chimie des peptides, les restes d'amino-acides désignés par une abréviation, par exemple -Phe-, -Cys-, etc, sont compris comme ayant la configuration (L), sauf indication contraire. Les restes acyle représentés par A dans la formule I comprennent, en particulier, les restes acyle d'acides carboxyliques organiques (y compris par exemple d'amino-acides et de di et d'oligopeptides comportant un groupe carboxy terminal),d'acides sulfo- niques, d'acidessulfaminiques et de l'acide carbonique, et leurs dérivés Les restes acyle appropriés sont, par exemple, les groupes: 1 R Ico o RI est un groupe aliphatique, cyclo- aliphatique, aromatique ou hétéro- cyclique, en particulier un groupe alkyle en C 1-C 20, alcényle en C 3-C 20, alcynyle en C 3-C 20, phényle, naphtyle ou phénylalkyle en C 7-C 0, 2 R 502 o R est alkyle en C 1-Co 10, phényle ou phénylalkyle en C 7-C 1 o, 3 RIII-Co o R est aikyle en C 1-Co ou phényl- alkyle en C 7-C 10, et I IV RM IV N 4 R N-CO-, N-C NS V i R Nlou RV/ 2 R R NH R o RIV est l'hydrogène, alkyle en-C -C 10, phényle ou phénylalkyle en C 7C 10 et RV est l'hydrogène ou alkyle en Cl-Clo. Lorsque RI signifie un groupe aliphatique, celui-ci peut être saturé ou insaturé, linéaire ou v ramifié Lorsque les symboles RI à R représentent des groupes alkyle, alcényle ou alcynyle, ceux-ci peuvent être linéaires ou ramifiés; il en est de même des restes alkyle des groupes phénylalkyle, lorsque RI à RV signifient de tels groupes Tous les groupes mentionnés pour R à R peuvent éventuellement porter d'autres substituants Avantageusement, ces groupes sont non substitués. Le cycle phénylique du groupe phénylalkyle fixé sur l'atome d'azote a du reste situé en position 1 du fragment heptapeptidique des polypeptides de l'invention, peut être substitué, par exemple comme dans le cas des polypeptides de formule I o un ou plusieurs des substituants A 1, A 2 et A 3 a ou ont une signification autre que l'hydrogène, ou être non substi- tué Par ailleurs, le reste alkylàne de tels groupes phénylalkyle, par exemple le groupe Q dans la formule 1, peut être linéaire ou ramifié. Dans les polypeptides de formule I, les significations suivantes, prises isolément ou en combinaison, sont préférées. A est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 ou un groupe R Co ou R I 502 telsque définissous 1 et 2 ci-dessus Plus préférablement, A est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 ou R Co-, 1 3 I spécialement l'hydrogène ou R Co-. 5.1 Lorsque A signifie un groupe RIC 0-,RI est de pré- férence alkyle en C 1-C 5, phényle ou phényl- alkyle en C 7-C 10, plus spécialement alkyle en C 1-C 15, en particulier alkyle en C 1-Clo, par exemple CH 3 (CH 2)8 I 5.2 Lorsque-A signifie un groupe RII 502-, RII est de préférence alkyle en C 1-Co 10 ou phényle éventuellement substitué par un ou plu- sieurs groupes alkyle en C 1-C 3, spéciale- ment phényle ou phényle mono-ou disubstitué par des groupes alkyle en C 1C 3 RII est plus préférablement alkyle en C 1-Cl O. 6 A 1 est l'hydrogène, un groupe carboxy estérifié ou amidé de formule R 80-CO ou R 8-NH-CO- respectivement, o R 8 est alkyle en C 1-C 16, ou un groupe amide de formule R 9-CO-NH- o R 9 est alkyle en C 1-C 15 Plus préféra- blement, A 1 est l'hydrogène ou un groupe R 8-NH-CO-,o R 8 est alkyle en C 1-C 16, spécialement alkyle en Cl-Cl, par exemple CH 3 (CH 2)9- Plus préférablement A 1 est l'hydrogène. 7 A 2 est l'hydrogène. 8 A 3 est l'hydrogène. 9 Q est méthylène. >N-CH(Z)-CO est un reste (D)-phénylalanine (Z signifiant benzyle). 11 B est -Phe ou -Tyr-. 12 C est -(D)-Trp-. 13 D est -Lys ou -Me Lys-, spécialement -Lys-. 14 E est le reste d'un a-amino-acide naturel, spécialement -Thr-. F est un groupe de formule -CO-N(R 3)R, spé- cialement Un groupe de formule -CO-N(R 3)-CH(R 5)-X (auquel cas R = H ou CH 3) Dans le dernier cas, le reste -CH(R 5)-X possède de préférence la configuration (L). 15 1 R 3 est de préférence l'hydrogène. ,2 Comme substituant fixé sur l'atome de carbone a d'un amino-acide naturel, c'est-à-dire de formule NH 2-CH(R 5)-COOH, R 5 est de préférence -CH 20 H, -CH(OH)-CH 3, isobutyle ou benzyle, ou bien un groupe CH 2)20 H ôu -(CH 2)30 H R 5 est spé- cialement un groupe -CH 20 OH ou -CH(OH)-CH 3. 15.3 X est de préference un groupe de formule -CO-N(R 6)R 7 ou -CH 2-OR 2, spécialement de formule -CH 20 R 2, R 2 étant de préférence l'hydrogène ou ayant la signi- fication donnée ci-dessous sous 16 Plus préféra- blement, R 2 signifie l'hydrogène. 16 Par l'expression "ester physiologiquement acceptable et physiologiquement hydrolysable" telle qu'appli- quée à la définition des restes R 2, on entend des esters qui sont hydrolysables sous des conditions physiologiques p'our donner des acides qui sont eux-mêmes physiologiquement acceptables aux doses utilisées Comme reste d'un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable, R est de préférence H CO, alkylcarbonyle en C 2-C 12, phénylalkylcarbonyle en CC ou benzoyle. 17 Les restes situés aux positions 2 et 7 ont de préférence la configuration (L). 18 De préférence, Y 1 et Y 2 représentent ensemble une liaison directe. Un groupe particulièrement intéressant de polypeptides de formule I comprend ceux o A représente un reste acyle comportant un fragment ali- phatique (parexemple comme RI, RII, RII ou RIV des groupes définis plus haut sous 1 à 4) ayant au moins 7 atomes de carbone, ou bien A 1 est un groupe Rg-CONH- tel que défini plus haut sous 6 et dans lequel R 9 possède au moins 7 atomes de carbone, les composés de ce type, désignés par la suite "polypeptides de type T", se signalant par une plus longue durée d'action lorsqu'ils sont administrés par voie sous-cutanée Des polypeptides de type T préférés sont ceux dans lesquels A est un groupe RICO o RI est alkyle en C 7-C 15, de préférence alkyle en C 7-C 10 Les polypeptides de type T spéciale- ment préférés sont ceux dans lesquels les autres restes dans la formule I ont les significations mentionnées plus haut sous 6 à 18. Les polypeptides de l'invention, par exemple les polypeptides de formule I, peuvent exister s-ous forme libre, c'est-à-dire non protégée, ou sous forme protégée, c'est-à-dire sous forme de composés dans lesquels un ou plusieurs groupes ou atomes réactifs, par exemple les groupes amino Nterminaux, les groupes carboxy C-terminaux ou les groupes -SH, sont protégés par un groupe protecteur Des groupes protecteurs appropriés, par exemple de l'atome d'azote,du groupe carboxy et de l'atome de soufre, peuvent être l'un quelconque des groupes protecteurs connus et couramment 9. utilisés dans la chimie des peptides, y compris-de tels groupes protecteurs utilisés dans les exemples décrits ci-après Généralement, les formes protégées sont utilisées principalement comme intermédiaires, par exemple pour obtenir les polypeptides non protégés de l'invention Cependant, lorsque de telles formes protégées sont elles-mêmes pharmacologiquement actives, c'est-à-dire utilisables en thérapeutique comme décrit ci-après, et physiologiquement acceptables aux doses utilisées, comme dans le cas par exemple o des groupes protecteurs présents sont scindés sous les conditions physiologiques pour donner les polypeptides libres de l'invention, par exemple les composés de formule I sous forme libre, et o le-produit ou produits de scission ainsi obtenus sont eux-mêmes physiologiquement acceptables aux doses utilisées, de telles formes protégées sont elles-hiémes utilisables comme médicaments, par exemple comme pro-drugs (précurseurs chimiques de médicaments) De telles formes protégées sont définies ci-après comme "pharmaceutiquement utilisables". Les polypeptides de l'invention, aussi bien sous forme libre que sous forme protégée, peuvent se présenter sous forme de sels ou de complexes Les sels d'addition d'acides peuvent être ceux dérivant par exemple d'acides organiques, d'acides polymères et d'acides minéraux De tels sels d'addition d'acides comprennent par exemple les chlorhydrates et les acétates. Par complexes, on entend -des composés de type connu,- formés à partir des polypeptiîdes de l'invention par addition de substances minérales, par exemple des sels ou hydroxydes minéraux tels que lesselsde calcium et de zinc, et/ou par addition de substances organiques polymères. L'invention comprend également un procédé de préparation des polypeptides de l'invention Ces composés peuvent être préparés selon des méthodes généralement connues dans la chimie des peptides. C'est ainsi qu'on peut préparer les polypeptides de l'invention, en particulier les polypeptides de formule I, sous forme libre ou sous forme protégée, ainsi que leurs sels et leurs complexes, selon un procédé caractérisé en ce que a) on élimine au moins un groupe protecteur dans un polypeptide protégé à chaîne droite ou monocyclique tel que défini précédemment, par exemple un poly- peptide protégé de formule I tel que défini précé- demment,ce qui donne le polypeptide correspondant sous forme libre, b) on relie ensemble, par une liaison amide, deux unités peptidiques contenant chacune au moins un reste d'amino-acide ou d'amino-alcool sous forme libre ou protégée, lesdites unités peptidiques étant telles qu'on obtient un polypeptide à chaîne droite, ou monocyclique tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, par exemple un poly- peptide de formule I tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, et, si nécessaire, on effectue le procédé a), c) on transforme un groupe fonctionnel C-terminal d'un polypeptide à chaîne droite ou monocyclique tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, par exemple le groupe F d'un poly- peptide de formule I tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, en un autre groupe fonctionnel C-terminal, par exemple en un autre groupe F, et, si nécessaire, on effectue le procédé a), 1 1 d) on oxyde un polypeptide à chaîne droite-tel que dé- fini précédemment sous forme libre ou protégée, par exemple un polypeptide de formule I tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée et dans lequel Y et Y 2 signi fient chacun l'hydrogène, ce qui donne un polypep- tide monocyclique tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, par exemple un polypeptide de formule I tel que défini précé- demment sous forme libre ou protégée et dans lequel Y et Y 2 forment ensemble une liaison directe, et, si nécessaire, on-effectue lue procédé a), et on récupère le polypeptide sous forme libre ou protégée ainsi obtenu, comme tel ou sous forme de sel ou de complexe. On opère selonles méthodes donnues dans la chimie des peptides; on peut par exemple opérer de manière analogue aux procédés décrits dans les exemples qui suivent Lorsque la préparation des produits de départ n'est pas spécialement décrite, ceux-ci sont connus ou peuvent être préparés et purifiés selon des méthodes connues. Les exemples suivants illustrent la présente invention sans-aucunement en limiter la portée. Les valeurs lal 20 sont indiquées non corrigées Les abréviations suivantes sont utilisées: BOC = tert- -butoxycarbonyl BTFA = tris- trifluoroacétate de bore DMF = N,N-diméthylformamide M Bzl = p- métoxybenzyl ONP = 4-nitrophénoxy TFA = acide trifluoroacétique Thr-ol = le re ste thréoninol CH-3-CH(OH)-C NH CH 20 H Z = benzyloxycarbonyl. Exemple 1 Of 1 Benzyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol On dissout à O 0,95 g de benzyl-(D)-Phe- Cys(M Bzl)-Phe-(D)-Trp-Lys(Z)-Thr-Cys(M Bzl)-Thr-ol et 3,5 ml de thioanisole dans 5 ml de TFA On refroidit la solution à -10 , on ajoute 15 ml d'une solution d'environ 2 moles de BTFA dans TFA et on agite le tout' pendant 1 heure et demie à -5 Tout en agitant, on ajoute 50 ml d'un méthanol absolu refroidi à -60 et on agite le tout avec un mélange de 12 ml d'acide chlorhydrique dans de l'éther (environ 5 N) dans 3 litres d'éther anhydre On filtre le précipité qui s'est formé, on le lave avec de l'éther et on le dissout immédiatement dans 3,51 itresd'un mélange 7:3 de dioxanne et d'eau On règle le p H à 7,5-8,0 par addition de NH 40 H 1 N et on agite le mélange à la température ambiante dans un récipient ouvert jusqu'à preuve négative des groupes -SH (par exemple selon la méthode de Ellman). On règle le p H à environ 4,0 par addition de HC 1 dilué, on concentre le tout sous pression réduite et on lyophilise Le produit lyophilisé est purifié par chro- matographie sur gel de silice en utilisant un mélange de chloroforme,de méthanol,d'acide acétique glacial et d'eau comme éluant On réunit les fractions conte- nant le produit, on concentre sous pression réduite avec addition de H 20 et on lyophilise On obtient ainsi 2 20 le composé du titre; lal 20 = _ 31 (c = 0,50 dans l'acide ac Dtique à 95 %). l'acide acétique à 95 %). Le produit de départ peut être préparé de la manière suivante: a) BOC-Cs M Bzl Phe-Dr Ls Z Thr-Cs Mzlhrol A 3,6 g de chlorhydrate de H-Phe-(D)-Trp- Lys(Z)-Thr-Cys(M Bzl)-Thr-ol (obtenu d'une manière analogue à celle décrite aux exemples la à lj de la demande de brevet britannique n 2 095 261 A), on ajoute 0,44 ml de triéthylamine et 1,6 g de BOC-Cys(M Bzl)-ONP et on agite le tout pendant 15 heures à la température ambiante. Apres avoir concentré le mélange sous pres- sion réduite, on le dilue avec du méthanol et on ajoute un peu d'eau pour provoquer la précipita- tion On sépare le précipité par filtration, on T 5 le lave avec du méthanol et on le sèche On obtient ainsi le composé du titre;lal 20 -15,5 (c = 1,0 D' dans le DMF); F = 175 . b) H-Cs M Bzl lh e:r= k s=Cys Y On dissout à O 3,5 g du produit obtenu sous a) dans 25 ml d'un mélange 9:1 de TFA et d'eau et on agite pendant 45 minutes à 00 On agite le mélange obtenu dans un mélange de 500 mi d'éther et de 5 ml de HC 1 environ 5 N dans de l'éther On lave avec de l'éther le peptide qui -a précipité et on le sèche, ce qui donne le composé du titre. Le produit se décompose à 1200; ll 20 = -16 (c = 1,0 dans l'acide acetique à 95 %). c) Benz 1-i D) Phe:_:-NH BOC H Cl A 1 g de H-(D)Phe-NH-NH-BOC 'dissous dans 50 ml de méthanol, on ajoute 0,36 ml de benzaldehyde et 4 g d'un tamis moléculaire de 3 A et on agite le tout pendant environ 15 heures à la température ambiante On ajoute ensuite par portion, sous atmosphère d'azote et en l'espace de 20 heures, un total de 650 mg de Na CNBH 3, le p H étant maintenu à chaque addition à environ 6 par addition de H Cl dans de l'éther On filtre le produit obtenu, on lave le filtrat avec du méthanol, on le concentre sous pression réduite et on le dilue avec de l'éther. On lave la phase éthérée à l'eau, on la sèche sur Na 2504 et on ajoute 0,8 ml de HC 1 5 N dans de l'éther. On filtre le produit qui a précipité, on le lave à l'éther et on le sèche, ce qui donne le composé du titre Le produit se décompose à 180 ; lalD= 30,5 (c = 1,0 dans le DMF). d) 8 enzyl-{D)Phe-NH-NH, HC 1 On dissout 0,5 g de chlorhydrate de benzyl- (D)-Phe-NH-NH-BOC dans 5 ml de TFA, on laisse reposer pendant 15 minutes à la température ambiante et on ajoute environ 100 ml d'éther et 1 ml de HC 1 environ N dans de l'éther Après avoir agité, on sépare par filtration le précipité qui s'est formé, on le lave à l'éther et on le sèche, ce qui donne le composé du titre Il se décompose à 130 ; l 20 -31 (c = 1,0 dans le DMF). e) e) Benzyl,DPhem Cys(M Bzl -Phe-DTre-kyslZ-Thr-Cys M Bzl -Thr-o 1 On refroidit à -20 0,35 de chlorhydrate de benzyl -(D)-Phe-NH-NH 2 dans 20 ml de DMF et on ajoute, sous agitation, 0,8 ml de HC 1 environ 5 N dans de l'éther puis 1,3 ml de nitrite de tert - butyle On agite le mélange pendant 10 minutes à -15 , on le refroidit à environ -25 et on ajoute 0,58 ml de triéthylamine puis une solution refroidie à -10 et constituée de 0,86 g du produit obtenu sous b) et de 0,12 ml de triéthylamine dans 10 ml de DMF On agite le mélange réactionnel pendant 20 heures à -10 puis pendant environ 16 heures à une température comprise entre -5 et O , le p H étant maintenu entre 8,5 et 9,0 par addition de triéthylamine. On concentre le mélange réactionnel sous pression réduite, on le dilue avec du méth-anol et on fait précipiter le produit par addition d'eau On sépare par filtration le précipité qui s'est formé, on le lave avec un mélange à parts égales de m thanol et d'eau et on le sèche, ce qui donne le composé du titre F = 173 ; Ea 20 =-1 lalD O = 17,3 (c = 1,0 dans le DMF). Les composés suivants peuvent être obtenus de manière analogue: Exemples 2 à 4 2 Ph-Cy-Tyr(D)Tr Ly T CYT lal D pour l'acétate = 22,7 (c = 0,48 dans D l'acide acétique à 95 %) 3. CB 6k U CE 3 CH 2) C C H-CO S-Tyr (D)Tz Ly-T Ts-T (D) lalD pour l'acétate=+ 6,20 (c = 0,5 dans l'acide acétique à 95 %) 4 C Hi 3 acétique à 95 %). Exemples 5 à 8 En procédant de manière analogue à celle décrite aux exemples 1 à 4, mais sans effectuer l'étape finale d'oxydation, on obtient les polypeptides à chaîne droite correspondant à chacun des polypeptides monocycliques mentionnés, c'est-à-dire les polypeptides o les restes -Cys ne sont pas liés entre eux. Les polypeptides de l'invention, par exemple de formule I, sous forme libre ou sous forme protégée pharmaceutiquement utilisable, ainsi que leurs sels et complexes pharmaceutiquement acceptables, n'ont pas été décrits jusqu'à présent dans la littérature Dans les essais effectués sur les animaux de laboratoire, ils se signalent par d'intéressantes propriétés pharmacologiques et peuvent par conséquent être utilisés en thérapeutique comme médicaments. En particulier, les polypeptides de l'inven- tion exercent une action inhibitrice sur la sécrétion de l'hormone de croissance comme il ressort par exemple chez le rat de l'abaissement des taux d'hormone de croissance dans le sérum L'essai est effectué avec des rats mâles sous narcose au nembutal On administre la substance à essayer à des doses variables graduées de façon logarithmique, en utilisant au moins 4 rats par dose Une heure après administration de la substance à essayer, on décapite les animaux, on recueille le sang et on détermine le taux d'hormone de croissance dans le sérum selon la méthode radio- immunologique de dosage Dans cet essai, les polypep- tides de l'invention provoquent une baisse du taux d'hormone de croissance dans le sérum lorsqu'ils sont administrés par voie sous- cutanée à une dose comprise entre 0,01 et 50 pg/kg. On peut adapter l'essai ci-dessus pour dé- terminer l'efficacité des composés de l'invention sur des périodes de temps prolongé, par exemple en décapitant les animaux 6 ou 18 heures après administra- tion de la substance'à essayer Dans l'essai décrit ci-dessus, les polypeptides de type T tels que définis plus haut se révèlent être actifs sur une période de temps prolongé, par exemple allant jusqu'à 18 heures, après administration aux doses indiquées. Grâce à cette propriété, les polypeptide s de' l'invention, sous forme libre ou sous forme protégée, ainsi que leurs sels et leurs complexes, peuvent être utilisés en thérapeutique pour le traitement des troubles avec une étiologie comprenant ou associée à un excès de sécrétion d'hormone de croissance, par exemple pour le traitement du diabète et de l'angio- pathie ainsi que de l'acromégalie. Les polypeptides de l'invention, sous forme libre ou sous forme protégée, ainsi que leurs sels et leurs complexes, inhibent également la sécrétion gastrique et pancréatique, comme cela a été mis en évidence dans des essais standard effectués sur des animaux de laboratoire, par exemple selon la méthode décrite par W Doepfner et coll dans Triangle 16 ( 2), 105 1 1977) et par S J Konturek et coll dans Scand. J Gastroent 6, 423 ( 1971). Dans ces essais, les polypeptides de l'invention sont actifs lorsqu'ils sont administrés à une dose comprise entre 0,01 et 50 pg/kg. Grâce à cette propriété, les polypeptides de l'invention, sous forme libre ou sous forme protégée, ainsi que leurs sels et leurs complexes, peuvent être utilisés en thérapeutique pour le traitement des troubles gastro-intestinaux, par exemple pour le trai- tement de l'ulcère gastrique, l'hémorragie gastro- intestinale et la pancréatite aiguë. Pour les indications citées, la dose quo- tidienne à administrer est comprise entre environ 2,0 ug et environ 10 mg de polypeptide, avantageusement administrée en doses fractionnées 2 à 4 fois par jour sous forme de doses unitaires,ou sous une forme à libé- ration retardée Les doses unitaires appropriées con- tiennent entre environ 0,5 pg et environ 5 mg d'un polypeptide selon l'invention sous forme libre ou une quantité équivalente d'une forme protégée pharma- ceutiquement utilisable,ou d'un sel ou complexe pharma- ceutiquement acceptable, en association avec un diluant ou véhicule pharmaceutique,solide ou liquide. L'invention comprend donc un polypeptide selon l'invention, par exemple un polypeptide de formule I, sous forme libre ou sous forme protégée pharmaceutiquement utilisable, ou un sel ou complexe pharmaceutiquement acceptable d'un tel polypeptide, pour l'utilisation comme médicament, par exemple pour l'utilisation comme inhibiteur de la sécrétion de l'hormone de croissance pour le traitement des troubles dont l'étiologie comprend ou est associée à un excès de sécrétion d'hormone de croissance comme le diabète, l'angiopathie et l'acromégalie, ou comme inhibiteur de la sécrétion gastrique ou pancréatique pour le trai- tement de troubles gastro-intestinaux tels que l'ulcère gastrique, l'hémorragie gastro-intestinaleet la pan- créatite aiguë. L'invention comprend également un médicament contenant, comme principe actif, un polypeptide selon l'invention, par exemple un polypeptide de formule I, sous forme libre ou sous une forme protégée pharmaceu- tiquement utilisable, ou l'un de ses sels ou complexes acceptables du point de vue pharmaceutique. L'invention concerne en outre les composi- tions pharmaceutiques comprenant un polypeptide selon l'invention, par exemple un polypeptide de formule 1, sous forme libre ou so'us une forme protégée pharmaceu- tiquement utilisable, ou l'un de ses sels ou complexes acceptables du point de vue pharmaceutique, en associa- tion avec un diluant ou véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique. REVENDICATIONS 1 Les polypeptides à chaîne droite ou monocycliques comprenant un fragment heptapeptidique, ledit fragment comportant en position 1 (N-terminal) un reste phényl- alanine a-N-phénylalkylé,eventuellement substitue dans l'un ou les deux noyaux, en position 2 un reste cystéine, en position 3 un:reste phénylalanine éventuellement substitué dans le noyau, en position 4 un reste tryptophane éventuellement substitué dans le noyau benzénique, en position 5 un reste lysine éventuellement E-N-alkylé et en position 7 ( C-terminal) un reste. cystéine ou cystéinol, les atomes de soufre du reste cystéine en position 2 et du reste cystéine ou cystéinol en position 7 étant liés ensemble dans le cas des polypeptides monocycliques pour former un pont -S-S-j les restes situés aux positions 1,2, 4, 6 et 7 dudit fragment heptapeptidique pouvant chacun avoir la configuration (L) ou (D) et les restes situés aux positions 4, 5 et 6 dudit fragment heptapeptidique pouvant chacun être éventuellement a-N-alkylé, ledit peptide étant sous forme l Tibre ou sous forme protégée, ainsi-que leurs sels et leurs complexes. 2. Les polypeptides de formule I A A CH'2-S-Yl y 2-S-CH 2 Q -N-CH-CO-NH-CH-CO-B-C-O-E-NH-CH-F ( 33456 7 A 2 A 3 - dans laquelle A est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 ou le reste acyle d'un acide minéral ou organique, 2532308 ' A 1 est l'hydrogène, un halogène, alkyle en C -C 3, alcoxy en C 1-C 3, OH, NO 2, un groupe carboxy esté- rifié ou amidé-ou un groupe amide, A 2 est l'hydrogène, un halogène, alkyle en C 1-C 3, al 1 oxy en C 1-C 3, OH-ou NO 2, 9 A 3 est l'hydrogène, un halogène, alkyle en C 1-C 3 ou a-lcoxy en Cl-C 3, Q est alkylène en CiC 4, >N-CH(Z)-CO est un reste (L) ou (D)-phénylalanine éventuellement substitué dans le noyau par un ou plusieurs substituants choisis parmi les halo- gènes et les groupes NO 2, NH 2, OH, alkyle en C 1-C 3 et alcoxy en C 1-C 3 2 B est -Phe éventuellement substitué dans le noyau par un ou plusieurs substi;tuants choisis parmi les halogenes et les groupes NO 2,NH 2, OH, alkyie en C 1 -C 3 et alcoxy en C 1-C 3, C est -Trp ou -(D)-Trp éventuellement a-N-méthylé et éventuellement substitué dans le noyau benzénique par un ou plusieurs substituants choisis parmi les halogènes et les groupes N 029 NH 2, OH, alkyle en C 1-C 3 et alcoxy en C 1-C 35 D est -Lys éventuellement a-N-méthyl-é et éventuelle- ment E-N-substitué par un groupe alkyle en Cl C 3 E est le reste d'un aamino-acide naturel ou d'un (D)-amino-acide correspondant, ledit reste étant éventuellement a-N-méthylé, F est un groupe de formule À COOR 1, '-CH 2 OR 2, -CO N R 4 ou -CO-Nr X dans lesquelles R 1 est l'hydrogène ou alkyle en C 1-C 3, R 2 est l'hydrogène ou le reste d'un ester physio- logiquement acceptable et physiologiquement hydrolysable, R 3 est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3, phényle ou phénylalkyle en C 7-C 1 o, R 4 est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 ou, lorsque R 3 signifie l'hydrogène ou méthyle, également un groupe de formule -CH(Rs)-X-o O R 5 est l'hydrogène, -(CH 2)2-OH ou -(CH 273-OH, ou représente le substituant fixé sur l'atome de carbone a d'un a-amino-acide naturel et X est un groupe de formule -COOR 1, -CH 20 R 2 ou -CON(R 6)R 7 dans lesquelles R 1 et R 2 ont les significations données précé- demment, R 6 est l'hydrogène ou alkyle en C 1-C 3, et R 7 est l'hydrogène, alkyle en C 1-C 3 phényle ou phénylalkyle en C 7-Cio, le groupe -CH(R 5)X ayant la configuration (D) ou (L), et Y 1 et Y 2 sont chacun l'hydrogène ou représentent ensemble une liaison directe, les restes situés aux positions 2 et 7 ayant chacun, indépendamment l'un de l'autre, la configuration (L) ou (D), les restes (L) et/ou (D)-cystéine étant présents uniquement aux position 2 et 7, lesdits polypeptides de formule I étant sous forme libre ou sous forme protégée, ainsi que leurs sels et leurs complexes. 3. Un polypeptide: selon l-a revendication 2, de fornule I I i) Q -CH 2(D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr=-ol (D) i ii) CH 3 (CCH 2)CON-CH-COCys-Tyr-(D)Trp Lys-Thr-Cys-Thr-ol; ou CH 2 óH 2 __S t CH 3 (CH 2)9 NHCO X C 2 (D)Phe-Cyso Tyr-(D)Trp- -Lys-Thr-Cys Thr-ol' sous forme libre ou protégée, ainsi que ses sels et ses complexes. 4. Un polypeptide de formule d, CH 2 -(D)Phe-Cys Phe (D)Trpo Lyso Thr Cyso Throel sous forme libre ou protégée, ainsi que ses sels et ses complexes. 5. Un polypeptide selon l'une quelconque des revendications -l à 4, caractérisé en ce qu'il se présente sous forme libre. 6. Un polypeptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il se présente sous une forme protégée pharmaceutiquement utilisable. 7. Un procédé de préparation des polypep- tides spécifiés à la revendication 1 ou 2 sous forme libre ou protégée, et de leurs sels et complexes, caractérisé en ce que a) on élimine au moins un groupe protecteur dans un polypeptide protégé à chaîne droite ou monocyclique tel que défini précédemment, par exemple un poly- peptide protégé de formule I tel que défini précé- demment,ce qui donne le polypeptide correspondant sous forme libre, b) on relie ensemble, par une liaison amide, deux unités peptidiques contenant chacune au moins un reste d'amino-acide-ou d'amino-alcool sous forme libre ou protégée, lesdites unités peptidiques étant telles qu'on obtieût un polypeptide à chaîne droite-ou monocyclique tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, par exemple un poly- peptide de formule I tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, et, si nécessaire, on effectue le procédé a), c) on transforme un groupe fonctionnel C-terminal d'un polypeptide à chaîne droite ou monocyclique tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, par exemple le groupe F d'un poly- peptide de formule I tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée, en un autre groupe fonctionnel C-terminal, par exemple en un autre groupe F et, si nécessaire, on effectue le procédé a), d) on oxyde un polypeptide à chaîne droite tel que dé- fini précédemment sous forme libre ouprotégée, par exemple un polypeptide de formule I tel que défini précédemment sous forme libre ou protégée et dans lequel Y et Y 2 signi- fient chacun l'hydrogène, ce qui donne un polypep- tide monocyclique tel que défini précédemment sous 2532308 ' forme libre ou protégée, par exemple un polypeptide de formule I tel que défini précé- demment sous forme libre ou protégée et dans lequel Y 1 et Y 2 forment ensemble une liaison directe, et, si nécessaire, on effectue le procédé a) , et on récupère le polypeptide sous forme libre ou protégée ainsi obtenu, comme tel ou sous forme de sel ou de complexe. 8 Les polypeptides spécifiés à l'une quelconque des revendications 1 à 4, sous forme libre ou sous forme protégée pharmaceutiquement utilisable, et leurs sels et complexes acceptables du point de vue pharmaceutique, pour l'utilisation comme médicaments. 9 Les polypeptides spécifiés à l'une quelconque des revendications 1 à 4, sous forme libre ou sous forme protégée pharmaceutiquement utilisable, et leurs sels et complexes acceptables du point de vue pharmaceutique, pour l'utilisation comme inhibiteurs de la sécrétion de l'hormone de croissance ou comme ' inhibiteurs de la sécrétion gastrique ou pancréatique - 10. Un médicament, caractérisé en ce qu'il contient, comme principe actif, un polypeptide spécifié- à l'une quelconque des revendications 1 à 4, sous forme libre ou sous forme protégée pharmaceutiquement utili- sable, ou un sel ou un complexe acceptable du point de vue pharmaceutique d'un tel polypeptide. 11. Une composition pharmaceutique, caracté- risée en ce qu'elle contient un polypeptide spécifié à l'une quelconque des revendications 1 à 4 sous forme libre ou sous forme protégée pharmaceutiquement utili- sable, ou un sel ou complexe acceptable du point de vue pharmaceutique d'un tel polypeptide, en association avec un diluant ou véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique.