Brevet FR2523978A1 — publié le 19830930

La présente invention concerne une nouvelle nitrosourée stéroide à propriété oncostatique, un procédé pour sa préparation et l'utilisation de cette nitrosourée à titre de médicament. Parmi les substances antitumorales connues actuellement, les agents alkylants et les hormones stéroldes constituent deux classes de droguesde grande importance dont les activités cytotoxiques sont largement exploitées. Il était donc logique de tester un nouveau type de composés anticancéreux actifs contre des tumeurs hormono-dépendantes mettant à profit une possible combinaison dans un même produit d'une partie alkylante cytotoxique et d'un support lipophilique ayant une activité hormonale qui présenterait ainsi une grande sélectivité à l'égard du récepteur correspondant On pense que dans une telle association l'agent alkylant peut être amené sur un tissu cible particulier ou peut désactiver le récepteur stéroidien. Le composé selon la présente invention est un produit de ce type mais il présente la caractéristique tout à fait exceptionnelle d'avoir la meilleure activité oncostatique sur la leucémie L 1210 parmi tous les produits testés jusqu'à présent. Le composé selon la présente invention est le 17 e-(N-2-chloroéthyl-N'-nitr 6 souréyl)-5-androsten- 3 e-ol de formule: NO NH-C-N-CH 2 CH 2 C 1 l O HO ainsi que les esters et éthers correspondants en position 3 et le N-2-chloroêthyl-N-nitrosocarbamate en position 3 correspondant. Le composé selon la présente invention peut être préparé par réaction du 17 -amino-5-androsten- 38-ol sous forme libre, activé et/ou protégé, avec un N-2-chloroéthyl-Nnitrosocarbamate active, en particulier le carbamate de p-nitrophényle, ou bien un autre nitrosocarbamate activé décrit notamment dans le brevet français n 80 16453 du 25 juillet 1980, selon la réaction suivante: NH 2 HO Cl CH CH -N-C-O-Ph-NO 2 21 il 2 NO O NO I NH-C-N-CH CH C 1 I 2 HO L'androsténol de départ est un produit connu et décrit dans G R PETTIT, R L SMITH, A K DAS GUPTA et J L OCCOLOWITHZ,-Can J Chem 1967 N 45, 501-507. Les éthers et/ou esters correspondants peuvent être préparés par des procédés connus et ils correspondent plus particulièrement à des esters ou éthers comportant des chaînes alkyles, aralkyles ou aryles substituées ou non, en particulier par des radicaux lipophiles ou par des radicaux hydrophiles tels que des radicaux hydroxy ou amino. Parmi les éthers ou esters, il faut citer également ceux comportant ljtrlcture d'un ose ou des structures apparentées. Ces éthers permettent de modifier la balance hydrophile-lipophile du composé et ainsi de modifier son activité Le composé selon la présente invention est utile comme médicament présentant une activité oncostatique. Le composé selon la présente invention est donc utilisable pour le traitement des tumeurs liquides ou solides, en particulier les leucémies. Il est évident pour l'homme de métier que les doses thérapeutiques à appliquer dépendent considéra- blement de la nature et de l'état d'évolution de la tumeur à traiter et de l'état général du patient. Toutefois, dans le cas particulier du composé selon l'invention, l'index thérapeutique étant très élevé, les dosages utilisables peuvent donc varier dans de larges limites. Ainsi, les doses journalières pourront varier par exemple de 50 à 200 mg/kg/jour sans que cela soit limitatif. La présente invention sera mieux comprise à la lecture des exemples ci-après qui illustrent certains aspects particuliers de l'invention. EXEMPLE 1 -(N-2-chloroéthyl-N'-nitrosouréyl)-5-androsten-35-ol A 0,21 g ( 0,715 mmole) de 17 e-amino-5-androsten- 3 e-ol dans 5 ml de pyridine anhydre à -10 C est ajouté 0,226 g ( 0,828 mmole) de N-2-chloroéthyl-N-nitroso- carbamate de p-nitrophényle L'agitation est maintenue pendant 3 heures à cette température puis le mélange réactionnel est évaporé sous vide puis coévaporé trois fois avec 20 ml du mélange toluène-alcool ( 1/1). L'huile résiduelle est cristallisée dans l'éthanol ( 5 ml) pour donner le cômposé du titre sous forme de cristaux jaunes ( 0,29 g, 93 %). F = 139-141 C; c c m: R = 0,36 (chloroforme-éthanol 9,5/0,5); (a) D 40 (cl, CH C 13). IR (CHC 13), 3600, 3420, 2940-2860, 1720 (C=O), 1460 (N-NO), 1345, 1330, 1300, 1165, 1085, 970, 900, 1 H NMR (CD C 13): 0,74 (s, 3 H, 18-H), 1,00 (s, 3 H, 19-H), 1,62 (s, OH), 3,47 (t, 2 H, CH 2-N-NO, J = 6,5 Hz), 4,16 (t, 2 H, CH 2-C 1), 3,96 (m, 1 H, 17 a-H), 5,34 (m, 1 H, 6-H), 6,79 (d, 1 H, N-H, J = 9 Hz) Masse: m/e/I, 316/27 (M-Cl CH 2 CH 2 N = NOH), 299/31 M-(H 20 + Cl CH 2 CH 2-N-NO), 298/100 (M-Cl CH 2 CH 2-N = NOH) H 20, 283/84 ( 298-CH 3) Anal calc pour C 22 H 34 N 303 Cl: C 62,32; H 8,08; N 9,91; trouvé C 62,11; H 8,10; N 9,77. Le point de fusion est pris en capillaire et n'est pas corrigé Les chromatographies sur couche mince ont été réalisées sur feuilles d'aluminium recouvertes dé gel de silice 60 F 254 Merck Le spectre IR a été enregistré sur un spectrographe Perkin Elmer 450 Le pouvoir rotatoire a été pris sur un appareil Roussel-Jouan. Le spectre de masse a été obtenu avec un instrument Jeol JMS D 100 Le spectre de RMN du 1 H a été enregistré sur un spectrographe Varian HA 100 avec le TMS comme référence interne (d = doublet, t = triplet, m = multiplet). EXEMPLE 2 Etude de l'activité du composé selon la présente invention sur la leucémie L _ 1210 Le composé selon la présente invention a été étudié sur la leucémie L 1210 en comparaison avec d'autres nitrosourées présentant également des propriétés oncostatiques I 1 s'agit essentiellement de la BCNU, la CCNU, la Me CCNU, la RFCNU, la RPCNU et la Chlorozotocine. Ces composés, ainsi que le X Ii;U, sont bien connus et décrits par exemple dans Biomedicine Express, vol 23, N O 10 du 10 décembre 1975, pages 410-413. Leucémie L 1210 Pour chaque composé, 10 cellules leucémiques ont été inoculées à 80 souris (DBA 2 C 57 BL 100), par voie intrapéritonéale. Les traitements ont débuté un jour après la transplantation et ont été poursuivis les cinquième et neuvième jours Les dérivés devant être testés sont administrés en suspension dans l'huile d'olive à 70 souris Les doses injectées sont variables, chaque souris étant pesée individuellement Les 10 souris restantes constituent le groupe témoin et reçoivent, en placébo, des volumes équivalents d'huile d'olive. Le premier jour, les nitrosourées testées sont administrées, en doses variables, aux souris traitées. Les cinquième et neuvième jours, les injections sont renouvelées sans signe macroscopique de toxicité. Pour chaque composé, les activités oncostatiques ont été déterminées pour une dose spécifique et varient en fonction de la quantité administrée Lorsque l'activité oncostatique est supérieure à 125 et si la différence des groupes témoins et traités à une signification statistique (test de WILCOXON), le composé est considéré comme étant actif à la dose utilisée. Les résultats obtenus sont rassemblés dans la figure ci-annexée. La figure ci-annexée indique en fonction des doses de principe actif appliquées en milligramme par kilogramme le rapport T/C défini comme suit: T/C = moyenne de survie des groupes traités / moyenne de survie des groupes témoins x $ 00 La mention indique que plus de 50 % des animaux traités sont guéris. Il ressort de l'étude de la figure ci-annexée que le produit selon l'invention présente très nettement la meilleure activité oncostatique sur la leucémie L 1210 parmi tous les produits testés jusqu'à présent. On a, en outre, indiqué ci-après dans le tableau pour les composés connus et pour le composé selon la présente invention les MEDI, c'est-à-dire les doses médianes, les doses optimums les DL 50 et par là l'index thérapeutique de ces composés. NITROSOUREES AYANT UN MEDI SUR LA L 1210 Nom MEDI Dose DL Index optmale /) thérapeutique (mg g (g/g) (mg/kg) RFCNU 15-30 20 90 4,5 RPCNU 10-15 15 50 3,3 XPCNU 10-15 15 CZT 10-20 15 35 2,33 Composé 50-200 125 -700 5,6 ex 1 On constate qu'à l'activité déterminée précédemment s'ajoute la dose médiane la plus grande jamais observée et une DL 50 aiguë de 700 mg/kg qui est la plus avantageuse parmi toutes les autres nitrosourées, ce qui conduit à l'indice thérapeutique le plus élevé jamais obtenu jusqu'à présent pour ce type de composé oncostatique. 2523978. REVENDICATIONS 1) le 17 e-(N-2-chloroéthyl-N'-nitrosouréyl)- -androsten-3 e-ol, les éthers ou esters en position 3 correspondants ainsi que le N-2-chloroéthyl-N-nitroso- carbamate en position 3. 2) Procédé de préparation du composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir le 17 e -amino-5-androsten-30-ol sous forme libre,activé et/ ou protégé avec un N-2-chloroéthyl-N- nitrosocarbamate activé. 3) Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on fait réagir le 17 e-amino-5-androsten-3 e-ol avec le N-2-chloroéthyl-N-nitrosocarbamate de p-nitro- phényle. 4) A titre de médicament nouveau, un composé selon la revendication 1. ) Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comporte à titre de principe actif au moins un composé selon la revendication 1.