Brevet FR2528311A1 — publié le 19831216

I La présente invention concerne des compositions pharmaceutiques à base de xylosides et lyxosides de bases puriques et pyrimi- diques. Les médicaments de l'invention sont actifs notamment à l'égard des virus à AN(acide désoxyribonucléique) tels que herpès, vaccine et adénovirus. Les xylosides et lyxosides de bases utilisés selon l'invention sont les puriques et pyrimidiques suivants: les S-D-xylofurannosyl-9 3-Dxylofurannosyl-1 3-D-xylofurannosyl-l c-D-xylofurannosyl-9 a-Dxylofurannosyl-9 a-D-xylofurannosyl-1 a-D-xylofurannosyl-l 8-Dlyxofurannosyl-9 B-D-lyxofurannosyl-9 -D-lyxofurannosyl-l 8-Dlyxofurannosyl-1 a-D-lyxofurannosyl-9 a-D-lyxofurannosyl-9 a-Dlyxofurannosyl-1 a-D-lyxofurannosyl-l La plupart de ces composés sont des décrites dans la littérature. substances connues et déjà Les S-D-xylofurannosyl-bases répondent à la formule générale suivante HOH-C Base guanine cytosine thymine adénine guanine cytosine thymine adénine guanine cytosine thymine adénine guanine cytosine thymine Les c L-D-xylofurannosyl-bases répondent à la formule générale suivante HOH 2 f O IỈase OH Les 3-D-lyxofurannosyl-bases répondent à la formule générale suivante HOH C Base -15 Les a-Dlyxofurannosyl-bases répondent à la formule générale suivante HON 2 C Base La 3-D-xylofurannosyl-9 guanine de formule H N HOH 2 j OH est une substance déjà connue et décrite par Suzaki et coll. (Chem Pharm Bull 18, p 172,( 1970) W W Lee et coll. (J Méd Chem 14, 819,( 197 D; J Org Chem 37, 2923, ( 1972); J Org Chem 36, 842 ( 1971)) La 3-D-xylofurannosyl-1 cytosine de formule HOH 2 ( N 2 1 N 0-S OH est une substance déjà connue et décrite par J J Fox et coll. (JACS 79, p 5060, 1957), et V Brodbeck et coll (J Org. Chem 35, 3552, 1970)) La B-D-xylofurannosyl-1 thymine de formule O CH 3 HOH 2 C a été décrite par J J Fox et coll (JACS, 78, 2117, ( 1956); JACS, 80 5155, ( 1958)) et E M Kaz'mina et coll (Chem Abs. 80., 121250 s( 1974); Chem Abst 89, 180287 t,( 1978)) L'"-Dxylofurannosyl-9 adénine a été décrite par A Magnani et coll (Carbohyd Res 28, 158,( 1973) W W Lee et coll. (Chem Ind London, 2007, 1963 ", et M Ikehara et coll. (Tetrahedron Lett, 4707, ( 1968)); Chem Pharm Bull 19 538,( 1971)) L'a-D-xylofurannosyl-9 guanine a été décrite par Suzaki et coll (Chem Pharm Bull 1970, 18, 172) et W W Lee et coll. (J Org Chem 36, 842, ( 1971)) L'a-D-xylofurannosyl-1 cytosine a été décrite par Post et coll. dans Can J Chem 59 ( 2), 238, ( 1981) et I Ekiel et coll (J Carbohyd Nucleosides Nucleotides, 8, 279, ( 1981) L'a-D-xylofurannosyl-1 thymine non décrite dans la littérature a un point de fusion de 196-197 C et est obtenue a partir de l'a-D-xylofurannosyl-l uracile, ce dernier ayant été décrit par A Hols (Collect Czech Chem Comm, 38, 428, ( 1973)) La B-Dlyxofurannosyl-9 adénine de formule NH 2 N HOH 2 C O l a été décrite par E J Reist, (Chemistry and Industry p 1561 ( 1965); J Org Chem 32, 169 ( 1967 ". La 3-D-lyxofurannosyl-9 guanine de formule O H 2 N H H 2 q,o I n'a à ce jour jamais été décrite dans la littérature. La a-D-lyxofurannosyl-1 cytosine de formule o a été décrite 1848, J Org Chem. par T Karnai et coll (Chemu Pharm Bull 16, ( 9) et J J Fox et coll (JACS, 83, 1889 ( 196)); 27, 1477 La e-D-lyxofurannosyl -1 thymine de formule o HN C 3 HOH C 2 o OHO O " H a été décrite par J J Fox et coll (JACS, 80, 5155 ( 1958)) et T Nishimura et coll L'ca-D lyxofurannosyl- adénine a ét décrite par P Kohn et coll. (J Org Chem, 32, 4076 fonction de la réactivité de l'aglycone. Les a-D-xylosides ont été synthétisés selon deux approches stéréospécifiques de synthèse totale. Les e-D-lyxosides ont été préparés par transformation chimique des $-D-xylosides correspondants. La préparation de deux des composés utilisés selon l'invention est décrite dans les deux exemples suivants. Les analyses et les spectres UV, de masse et de RMN ont confirmé la structure des composés. EXEMPLE 1 e-D-xylofurannosyl-9 guanine On fait réagir un équivalent d'amino-2 chloro-6 purine avec un équivalent d'O-acétyl-l tri-O-benzoyl-2,3,5 i-D-xylofuranno- se, dans de l'acétonitrile, en présence de triméthylchlorosilane ( 0,8 eq) , d'hexaméthyldisilazane ( 0,8 eq) et de tétrachlorure d'étain ( 1,2 eq). On porte à reflux le mélange réactionnel durant quinze minutes. On évapore à sec la solution résultante, la dilue avec du dichlorométhane, la neutralise avec une solution saturée de bicarbonate de sodium, la filtre sur célite et l'extrait. Les phases organiques sont séchées sur du sulfate de sodium, filtrées et évaporées à sec. L'analyse par chromatographie sur couche mince de la mousse résultante montre principalement deux taches distinctes, correspondant à deux dérivés nucléosidiques; ces derniers ont été isolés et caractérisés après chromatographie sur colonne de silice; ils correspondent respectivement suivant leur ordre d'élution aux: tri-O-benzoyl-2 ', 3 ', 5 ' 8-Dxylofurannosyl-9 amino-2 chloro-6 purine tri-O-benzoyl-2 ', 3 ', 5 ' S-Dxylofurannosyl-7 amino-2 chloro-6 purine On porte à la température du reflux une solution dans le méthanol de tri-O-benzoyl-2 ', 3 ', 5 ' B-Dxylofurannosyl-9 amino-2 chloro-6 purine durant 3 h 30, en présence de mercapto-2 éthanol et de méthylate de sodium Après refroidissement on filtre le sel de sodium du nucléoside obtenu, le met en suspension dans du méthanol et l'on ajoute, goutte à goutte, de l'acide acétique sous agitation En laissant reposer, on obtient un gel blanc, que l'on fait recristalliser dans de l'eau On obtient la 3-D-xylofurannosyl-9 guanine. F = 236-2400 C (dec) EXEMPLE 2 3-D-xylofurannosyl-l cytosine On condense un équivalent de la cytosine avec un équivalent d'O-acétyl-1 l tri-Obenzoyl-2,3,5 a-D-xylofurannose, à la température ambiante, dans de l'acétonitrile anhydre, en présence de tétrachlorure d'étain Sn Cl 4 ( 2 eq); on purifie le composé obtenu par chromatographie sur colonne de silice et on débenzoyle à l'aide d'une solution de méthanol saturée d'ammoniac. On obtient la 3-D-xylofurannosyl-l cytosine. F = 240-242 WC (dec) Les composés utilisés selon l'invention possèdent des proprié- tés virostatiques et ont été étudiés in vitro dans les condi- tions suivantes: on opère sur des cellules He La cultivées dans un milieu constitué par du liquide de Earle additionné de 0,5 % d'hydre- lysat de lactalbumine, 0,1 % d'extrait de levure, 5 % de sérum de veau filtré et inactivé trente minutes à 561 C On réalise la culture dans des tubes stationnaires contenant 1 ml de ce milieu Les nappes cellulaires étant bien développées, on élimine le milieu de culture et-introduit danschaque tube 0,1 ml d'une suspension de virus herpétique dans du liquide de Hanks à une concentration suffisante pour contenir de 10 à 50 D I C T 50 (dose infectieuse en culture de tissu 50 %) par cellule On laisse absorber à 370 C pendant deux heures On élimine le surnageant, lave la couche cellulaire à l'aide d'un soluté isotonique tamponné Puis on introduit 1 ml du milieu de maintien (milieu analogue) mais renfermant 2, 5 % de sérum) auquel on ajoute préalablement la substance à tester à la concentration de 3,3 x 10 4 M On fait également des cultures témoins ne contenant pas de composé actif et inoculées par le virus de l'herpès dans les mêmes conditions Tous les tubes sont incubés à 350 C à l'étuve Lorsque les témoins montrent un effet cytopathogène complet, on titre le virus infectieux dans tous les tubes par la méthode de l'établissement de la dilution limite 50 % On constate une différence de 3 à 5 unités logarithmiques de base 10 entre les titres infectieux des tubes traités et des tubes témoins, ce qui révèle un blocage complet de la production de virus dans les tubes traités. Trois des composés cités à la page i la a-D-xylofurannosyl-9 guanine, la S-D-xylofurannosyl-l cytosine et l'a-D-lyxofurannosyl-9 adénine, ont été plus particulièrement étudiés dans la recherche de l'activité sur le virus de l'herpès (H hominis type 1) dans des cultures de cellules He La Dans le lot témoin le titre du virus est d'environ î 06,5 (DICT /ml). Lorsque l'on introduit la substance à tester le titre du virus diminue et est respectivement de î 02 '8, 103,6 et 102,5 (DICT 50/ml). La toxicité des composés à l'égard des cellules normales en culture est très faible. En raison de leurs propriétés virostatiques et de leur faible toxicité à l'égard des cellules, les xylosides et lyxosides puriques et pyrimidiques cités à la page 1 sont des substances utiles en thérapeutiques pour le traitement de diverses viroses telles la kératite herpétique, l'herpès cutané, le zona ainsi que les maladies causées parles poxvirus etles adénovirus. Les compositions pharmaceutiques de l'invention peuvent être liquides ou solides et se présenter sous la forme de solutions, collyres, onguents, pommades Elles sont préparées selon les méthodes usuelles Le principe actif peut y être incorporé à des excipients pharmaceutiques habituellement utilisés dans de telles compositions et choisis en fonction de la forme galénique à réaliser Ces excipients peuvent être constituéspar des solvants aqueux ou non, des stabilisants, des mouillants, des vaselines, des lanolines, des polyéthylène -glycols, des esters d'acides gras du sorbitanne, polyhydroxyéthylés ou non. La concentration en principe actif des préparations pharma- ceutiques ainsi réalisées est variable selon la gravita des cas et le mode d'utilisation envisagé-: elle peut être par exemple comprise entre 0, 1 % et 5 %. il REVENDICATIONS 1 Composition pharmaceutique caractérisée par le fait qu'elle contient un xyloside ou un lyxoside d'une base purique ou pyrimidique choisi parmi les composés suivants: les 3-D-xylofurannosyl-9 S-D-xylofurannosyl-1 3-Dxylofurannosyl-l a-D-xylofurannosyl-9 a-D-xylofurannosyl-9 a-Dxylofurannosyl-l a-D-xylofurannosyl-l B-D-lyxofurannosyl-9 B-Dlyxofurannosyl-9 B-D-lyxofurannosyl-l 3-D-lyxofurannosyl-l c-Dlyxofurannosyl-9 a-D-lyxofurannosyl-9 a-D-lyxofurannosyl-l a-Dlyxofurannosyl-1 guanine cytosine thymine adénine guanine cytosine thymine adénine guanine cytosine thymine adénine guanine cytosine thymine. 2 Composition pharmaceutique ayant une activité à l'égard des virus à acide désoxyribonucléique, caractérisée par le fait qu'elle contient un des composés spécifiés dans la revendication 1. 3 Composition pharmaceutique à activité antiherpétique caractérisée par le fait qu'elle contient des composés spécifiés dans la revendication 1. 4 Composition pharmaceutique à activité antiherpétique caractérisée par le fait qu'elle contient la -D-xylofurannosyl-9 guanine. Composition pharmaceutique à activité antiherpétique caractérisée par le fait qu'elle contient la 3-D-xylofuran- nosyl-1 cytosine. 6 Composition pharmaceutique à activité antiherpétique caractérisée par le fait qu'elle contient la a-D-lyxofuran- nosyl-9 adénine.