Brevet FR2531715A1 — publié le 19840217

La présente invention, réalisée dans les laboratoires du CERES - Centre Européen de Recherche Scientifique - concerne de nouveaux amino-14 sté roides, leur application en thérapeutique, ainsi qu'un procédé pour leur préparation. La demande de brevet français 2.464.27Q décrit des composés du type amino-14 stéroïdes, et notamment des dérivés hydroxylés de l'amino-14 androstane et de l'amino-14 nor-21 pregnane. On connait également des alcaloïdes stéroidiques de la série du pregnane et de l'androstane substitués en position 14 par un groupe amino, et par exemple l'amino-14 ss pregnanediol-3ss,20a est décrit par A. Astier et al, Bull. Soc. Chim. nO 9-10, p.158l-1582 (1976); d'autres amino-14 ss -pregnanes et amino-14 ss androstanes sont également décrits par A. Astier et al., Tetrahedron vol.34, p.l481-1486, (1978).Toutefois aucune propriété pharmacologique ni aucune application thérapeutique de ces dérivés-nea été décrite. La demande de brevet français 2.494.697 décrit des amino-3 (5x) pregna nediol-17o,20 et amino-3 (5a) nor-19 pregnanol-20, présentés comme possédant des propriétés immunothérapeutiques permettant leur application à titre de médicaments pour le traitement des maladies autoimmunes résultant d'une déficience en certains lymphocytes. Les travaux réalisés par la demanderesse ont permis de constater de manière surprenante que des amino-14 stéroides, et plus particulièrement des dérivés du type amino-14 pregnanediol-3,20 ou amino-14 nor-21 pregna nediol-3,20 possédent des propriétés inotropes positives. La présente invention a donc pour objet de nouveaux médicaments à base d'amino-14 stéroïdes, présentant notamment une activité inotrope positive permettant leur application comme médicaments cardiotoniques pour le traitement des insuffisances cardiaques. L'invention a également pour objet, à titre de produits nouveaux, des amino-14 stéroïdes de la série de l'amino-14 pregnanediol-3,20s ainsi qu'un procédé pour leur préparation. Les nouveaux médicaments suivant la présente invention contiennent, à titre de principe actif, un amino-14 stéroïde représenté par la formule générale (I) ci-après: dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur, comportant 1 à 4 atomes de carbone, et par exemple un groupe méthyle, un groupe éthyle ou un groupe isopropyle. L'invention concerne aussi les sels pharmaceutiquement acceptables des amino-14 stéroïdes de formule générale (I) obtenus par action d'un acide minéral ou organique, suivant les méthodes usuelles de la technique. L'acide utilisé peut être choisi parmi l'acide chlorhydrique, l'acide oxalique, l'acide tartrique, l'acide fumarique, l'acide lactique, l'acide phosphorique, l'acide p-toluènesulfonique, l'acide formique, l'acide bromhydrique, l'acide maléique, l'acide sulfamique, etc. L'invention concerne également les nouveaux amino-14 stéroldes, de la série de l'amino-14 pregnanediol-3,20, représentés par la formule générale (I) ci-dessus dans laquelle R représente un groupe alkyle inférieur de 1 à 4 atomes carbone, ainsi que leurs sels d'acides. Les amino-14 stéroldes de formule générale (I) comportent dans leur molécule plusieurs atomes de carbone asymétriques, en particulier les carbones en positions 3, 5, 14, 17 et 21, et peuvent donc exister sous diverses formes stéréoisomères, étant entendu que les nouveaux composés suivant l'invention sont ceux pour lesquels, lorsque le -groupe OH en position 3 et le groupe NH2 en position 14 ont la configuration , et lorsque l'atome d'hydrogène en position 17 possède la configuration a, quelle que soit la configuration a ou ss de l'atome d'hydrogène en position 5, le groupe OH en position 20 a la configuration ss. L'invention concerne plus particulièrement les amino-14 pregnanediol-3,20 représentés par la formule générale (I) ci-dessus dans laquelle R est un groupe méthyle. Dans cette formule, le groupe -.H2 en position 14 et l'atome d'hydrogène en position 5 peuvent entre en a ou en ss. De même, le groupe -CHROH en position 17 peut avoir la configuration 17 a ou 17ss, le groupe -OH possèdent la configuration 20ss, R étant un groupe méthyle. L'invention concerne bien entendu ces divers isomères, isolément ou en mélange. Suivant la nomenclature usuelle, dans les exemples ci-après les atomes d'hydrogène en 5 et en 17 occupent la configuration a sauf indication contraire. Les composés de formule générale (I) peuvent êere préparés à partir des -dihydroxy-3,14 stéroides de formule générale (II) ci-après: dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur de 1 à 4 atomes de carbone9 par réaction de réduction suivie d'une acétylation pour former les tri-hydroxy-3, 14, 20 stéroïdes O-acétylés en 3 et 20, de formule générale (III) ci-après: dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou un groupe aryle inférieur de 1 à 4 atomes de carbone et Ac est un groupe acétyle, et en faisant agir un complexe acide azothydrique-trifluorure de bore, puis en effectuant une réduction par un hydrure métallique ou par hydrogénation catalytique. La première étape, consistant à effectuer une réduction suivie d'une acétylation, pour former un acétyl-triol, peut s'effectuer par exemple au moyen d'un hydrure suivant la technique décrite par J. Fried et J.A. Edwards, "Organic Reactions in Steroid Chemistry" Ed. Van Nostrand Reinhold (1972). On peut utiliser par exemple des hydrures mixtes d'aluminium ou de bore, tels que l'hydrure mixte de sodium et de bore ou l'hydrure mixte de lithium et d'aluminium, ou encore d'autres réducteurs tels que l'hydrogène en présence de catalyseurs. Les cétones de départ, représentées par la formule générale (Il) peuvent tre -préparées suivant la méthode décrite par N. Danielli et al. Tetrahadron 22 p.3189 (1966). Par exemple, on peut traiter un acide acétoxy-3 hydroxy-14 ssétianique par un organométallique tel que le méthyl-lithium. Les amino-14 stéroïdes de formule générale (I) dans laquelle R représente un atome d'hydrogène peuvent également tre préparés par le procédé décrit au brevet français 2.464.270. De mêmes on peut appliquer la méthode de préparation décrite par Astier et al. Bull. Soc. Chim. n 9-10, p.1581-15B2 (1976) pour obtenir les amino-14 stéroldes de formule générale (I) ob R est un groupe alkyle inférieur et plus précisément un groupe méthyle. Les exemples décrits ci-après illustrent l'invention sans en limiter la portée; Les structures des produits obtens ont été vérifiées par spectre infra-rouge, spectre de-RNM et spectre de masse. EXEMPLE 1 a) Préparation du di-O-acétyl-3,20 pregnan-(5ss)triol-3ss,14sss20 On dissout 6g droxo-20 pregnan-(5)-diol-3,l4f3 obtenu par la méthode de N. Danielli et al. (précité) dans 30ml de méthanol, puis on ajoute l,5g de borohydrure de potassium par fractions , et on laisse réagir pendant 30mn environ. On élimine le méthanol par évaporation, on extrait à l'acétate d'éthyle et on lave. Le résidu est traité par 16,5ml d'anhydride acétique dans 35ml de pyridine pendant une nuit. Après hydrolyse, lavage à I'acide citrique et à l'eau, on obtient un résidu (79 soit un rendement de 95%) comprenant les deux isomères 20a et 20ss que l'on. sépare par chromatographie sur colonne de silice. b) Préparation de l'amino-14ss pregnan-(5ss) diol-3ss,20&alpha; On dissout 210mg d'isomère 20a du diacétyltriol obtenu comme indiqué ci-dessus dans 16,5 ml d'acide azothydrique en solution benzénique, et on maintient sous agitation pendant 5mn, puis on ajoute 0,4 ml de réactif éthérate de trifluorure de bore fraichement distillé. Après lOmn de réaction, le mélange réactionnel est versé sur un mélange de glace pilée et d'ammoniaque. On extrait au benzène, on lave, on sèche, -puis on dissout le résidu de 20 ml de tétrahydrofuranne et on ajoute 54mg d'hydrure mixte de lithium et d'aluminium. Après chauffage à reflux pendant 1 heure, on hydrolyse et on extrait une fraction neutre de 80mg et une fraction basique de 77mg d'aminopregnanediol (rendement 49). Point de fusion F = 2580C EXEMPLE 2 amino-14 pregnan-(5 diol-36,20ss On dissout 9g de l'isomère 20a du diacétyltriol préparé comme indiqué dans l'exemple 1 a), dans 600ml d'une solution benzénique d'acide azothydrique, puis on ajoute, après 5mn de réaction, l'éthérate de trifluorure de bore, en effectuant le même traitement que dans exemple l b). On obtient ainsi 2,39 d'amino-14 pregnan-(5ss) diol-3ss,20ss (rendement 32Yó) La cristallisation est'effectuée dans l'acétate d'éthyle. Point de fusion F = 1960C Spectre IR (Nujol) 9 = 3600 à 2100, 1585, 1030 cm- EXEMPLE 3 amino-14a pregnan-(5ss) diol-3(3,20a On procède comme indiqué dans l'exemple 1. Le produit recherché est isolé de son isomère amino-14(3 pregnan-(5(3)diol-3(3,20a par chromatographie sur colonne de silice des eaux-mères.de cristallisation du produit principal. La cristallisation est effectuée dans un mélange d'acétate d'éthyle et de méthanol. Point de fusion F = 1880C EXEMPLE 4 Amino-14a pregnan-(5ss )diol-3(3,20 ss On procède comme dans l'exemple 2. Le produit recherché est isolé par chromatographie sur colonne de silice des eaux-mères de cristallisation de l'isomère amino-14(3 pregnan-(5ss) diol-3ss,20ss. Le produit est cristallisé dans l'isopropanol. Point de fusion F = 216 CC EXEMPLE 5 Amino-14ss pregnan-(58, 17 ssH) diol-3ss,20a On réduit 0,59 d'oxo-20 pregnan-(5ss, 17 ssH) diol-3ss,14ss par 120 mg de borohydrure de potassium dans ml de méthanol. Après réaction, on effectue une acétylation par l'anhydride acétique dans la pyridine suivant la technique usuelle, pour obtenir avec un rendement de 95% le di-O-acétyl pregnan-(5ss, 17ssH) triol-3ss, 14ss, 20a. On dissout 0,49 du diacétyltriol obtenu comme indiqué ci-dessus dans 30m1 d'une solution benzénique d'acide azothydrique, puis on ajoute 0,6ml d'éthérate de trifluorure de bore. Après traitement comme dans l'exemple 1, on fait agir 0,1g d'hydrure mixte de lithium et d'aluminium sur le résidu dans 10ml de tétrahydrofuranne. Après hydrolyse, extraction et cristallisation dans l'acétate méthyle on obtient O,25g (rendement 80%) d 'amino-14 (sspregnan-(5ss, 17(3H)diol-3(3 ,2Oa. Point de fusion F = 200-2010C. EXEMPLE 6 Amino-14ss pregnan-(5a)diol-3(3,20a On procède comme dans l'exemple 1 avec l'isomère Sa- en laissant agir l'éthérate de trifluorure de bore environ 5 heures Après traitement et réduction par l'hydrure mixte de lithium et d;alu minium comme dans l'exemple 1, le résidu est repris dans l'acétate d1é- thyle puis lavé par une solution d'acide chlorhydrique à 10%. L'acétate d'éthyle est éliminé par évaporation et les phases acides sont neutralisées par du carbonate de sodium et extraites au chloroforme.Après filtration, le filtrat est séché et fournit après cristallisation dans l'acétate d'éthyle, l'amino-14 ss pregnan-(5&alpha;)diol-3ss,20&alpha; avec un rendement supérieur à 50%. Point de fusion F = 246 C. EXEMPLE 7 Amino-14ss nor-21 pregnan-(5ss) diol-3ss,20. Ce composé est préparé comme indiqué dans l'exemple 6 du brevet français 2.464.270 au nom de la-demanderesse Les amino-14 stéroïdes conformes -'a l'invention, représentés par la formule générale (I) ci-dessus, possèdent d'intéréssantes propriétés pharmacologiques, et plus particulièrement, ils possèdent une activité inotrope positive. Ces propriétés, illustrées ci-après, montrent que les amino-14 stéroïdes de formule générale (I) ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables, peuvent être utilisés en thérapeutique humaine et vétérinaire pour le traitement de l'insuffisance cardiaque. Les expérimentations toxicologiques effectuées ont montré que la toxicité aigüe des amino-14 stéroïdes suivant l'invention est relativement faible, et en particulier nettement plus faible que celle des composés digitaliques usuels tels que la digitoxine et la digoxine. La mise en évidence de l'effet inotrope in vitro á été faite sur le coeur isolé de cobaye selon la méthode de Langendorff et sur l'oreillette isolée de cobaye. Les résultats montrent un profil d'activité de type digitalique, confirmant ainsi la possibilité d'application pour le traitement de l'insuffisance cardiaque De plus, leurs caractéristiques structurales qui les distinguent profondément des digitaliques, sont à l'origine de différences intéressantes de leurs propriétés pharmacocinétiques, en particulier dans la durée et la réversibilit de leur action. A titre d'exemple, dans le cas de l'amino-14 ss nor-21 pregnan-(53) diol - 3ssg20 le test du coeur isolé perfusé selon Langendorff fait apparavtre une augmentation du débit cardiaque de 30 à 40% pour des doses de 1 à-3O' & ml Dans le test sur l'oreillette isolée du cabane, pour une concentration de 10-5g/l on constate une augmentation de la force de contraction de 150% environ, ctest d dire comparable à celle produite par la digitoxine dans les mEmes- conditions. Ces résultats sont confirmés en faisant varier les conditions expérimentales, après administration de propranolol, apportant la preuve de l'action myocardique directe du composé et en éliminant une médiation adrénergique. Les dérivés de formule générale (I) et leurs sels pharmaceutiquement acceptables peuvent être administrés sous les formes usuelles, le principe actif étant dilué dans un support pharmaceutiquement acceptable convenablement choisi, par exemple sous forme de comprimé, gélule, dragée, suppositoire, soluté injectable ou sirop. A titre d'exemple, les comprimés peuvent être préparés en mélangeant le dérivé de formule générale (I) ou un de ses sels, avec un ou plusieurs diluants solides tels que le lactose, le mannitol, l'amidon,-la polyvinyl- pyrrolidone, le stéarate de magnésium, le talc, etc. Le cas échéant, les comprimés peuvent comporter plusieurs couches superposées autour d'un noyau, suivant les techniques usuelles, pour assurer une libération progressive ou un effet retardé du principe actif. L'enrobage peut par exemple être constitué d'une ou plusieurs couches d'acétate de polyvinyle, de carboxyméthylcellulose ou d'acétophtalate de cellulosé. On peut également administrer le dérivé suivant l'invention sous forme d'un sirop ou d'un soluté buvable obtenu en dissolvant le dérivé de formule (I) ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, dans de l'eau ou du glycérol, par exemple, et en ajoutant le cas échéant un additif usuel tel qu'un édulcorant et un antioxydant. Des solutions injectables peuvent être préparées suivant les techniques bien connues et sont constitituées par exemple par un soluté contenant un dérivé de formule (I) au un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, dissous dans de l'eau bidistillée, une solution hydroalcoolique, du propy lèneglycol, etc., ou un mélange de ces solvants. Le cas échéant, un additif approprié tel qu'un conservateur peut être ajouté. Les doses administrées sont determinées par le médecin en fonction du mode d'administration choisi, le niveau de l'affection traitée, la durée du traitement, etc. REVENDICATIONS 1. Médicaments caractérisés en ce qu'ils contiennent un amino-14 stérolde représenté par la formule générale (I): dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur comportantl à 4 atomes de carbone, ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 2. Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que R est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle. 3. Médicament selon la revendication 2, caractérisé en ce que le groupe -NH2 en position 14 possède la configuratipn a. 4. Médicament selon la revendication 2, caractérisé en ce que le groupe -NH2 en position 14 possède la configuration3. 5. Amino-14 stéroïdes, caractérisés en ce qu'ils sont représentés par la formule générale (I): dans laquelle R est un groupe alkyle inférieur comportant 1 à 4 atomes de carbone, étant- entendu que le groupe -OH en position 20 a la configuration sslorsque le groupe -OH en position 3 et le groupe -NH2 en tion 14 ont la configuration ss, et lorsque l'atome d'hydrogène en position 17 possède la configuration gr. 6. Amino-14 stérides selon la revendication--S, caractérisés en ce que R est un groupe méthyle. 7. Procédé de préparation d'amino-14 stéroïdes de formule générale (I)o dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur de 1 à 4 atomes de carbone, caractérisé an ce qu'on effectue une réduction puis une acétylation des dihydroxy-3,l4 stéroïdes de formule (II) dans laquelle R a la même définition que ci-dessus, pour former les tri hydroxy-3, 14, 20 steroides O-acétylés de formule (III): dans laquelle R a la même signification que ci-dessus et Ac est un groupe acétyle, sur lesquels on fait agir un complexe acide azothydrique-tri fluorure de bore, puis on effectue une réduction par un hydrure métallique ou par hydrogénation catalytique.