Brevet FR2527334A1 — publié le 19831125

L'invention concerne l'électrophorèse, plus particulierement l'électrophorèse en milieu liquide. On connait déja des appareils d'électrophorese qui effectuent une mesure laser Doppler de la mobilité de particules chargées placées en milieu liquide, sous l'effet d'un champ électrique (demande de brevet européenne NO 12 396 ; brevet américain NO 3 732 014).Ces appareils comportent - un dispositif mécanique qui supporte une cuve d'électro phorèse, laquelle définit, entre deux électrodes, une veine de liquide susceptible de contenir des particu- les, et - un banc optique comprenant une source laser, des moyens pour séparer le rayonnement laser en deux faisceaux, l'un de référence, l'autre de travail, le faisceau de travail étant dirigé sur la veine de liquide, des moyens pour reprendre un faisceau diffusé par la veine de liquide en réponse au faisceau de travail, des moyens pour recombiner le faisceau de référence et le faisceau diffusé, et un organe détecteur de lumière recevant le faisceau recombiné, le signal recueilli sur ce détecteur de lumière comportant une composante de battements basse-fréquence représentative de mouvements de particules contenues dans la veine de liquide. Toutefois, les appareils de la technique antérieure présentent le double inconvénient d'utiliser des lentilles de focalisation, et de faire intervenir des faisceaux incident et diffusé qui sont loin d'être en lumière parallèle. I1 en résulte de réels inconvénients au niveau de la qualité et de la précision des mesures. La présente invention a pour objet un appareil perfectionné. Selon l'invention, le banc optique est agencé en montage interférométrique de Mach-Zehnder, dont l'un des bras passe par la veine de liquide, le faisceau de travail qui arrive en lumière parallèle sur la veine de liquide étant incliné sur la direction du faisceau diffusé repris pour être combiné avec le faisceau de référence. De préférence, le faisceau diffusé est un faisceau de lumière parallèle, pris perpendiculairement à la veine de liquide. Très avantageusement, le banc optique comporte des moyens pour modifier l'angle d'incidence du faisceau de travail sur la veine de liquide, sans déplacer la zone d'incidence dans la veine de liquide à l'égard du banc optique. Dans un mode de réalisation, les moyens pour modifier l'angle d'incidence comprennent un miroir recevant le faisceau de travail, en direction fixe, ce miroir étant mobile de manière couplée à la fois en translation dans la direction d'incidence du faisceau de travail, et en rotation pour renvoyer le faisceau de travail en une zone fixe à l'égard du banc optique, et située dans la veine de liquide. I1 est souhaitable que, de son coté, le dispositif mécanique comporte des moyens pour déplacer la cuve d'électrophorèse à l'égard du banc optique, la veine de liquide se déplaçant sur elle-même selon sa direction principale. I1 est avantageux que l'appareil comporte en outre une unité centrale de traitement, des moyens de transmission du signal du détecteur à cette unité centrale, des moyens pour échantillonner le signal détecté et le convertir sous forme numérique, ainsi que des moyens aptes à inverser de façon-commandée la polarité de la tension continue appliquée entre les deux electrodes de la cuve d'électrophorèse ; l'unité centrale de traitement est alors agenceepour synchroniser l'échantillonnage du signal détecté avec l'inversion de polarité, ainsi que pour calculer la transformée de Fourier discrète du signal détecté sur un nombre choisi d'échantillons numérisés consécutifs. D'un autre côté, les deux bras de l'interféromètre comportent chacun un interrupteur optique, le bras traversé par le faisceau de référence comporte un atténuateur de lumière commandé, les moyens de transmission du signal détecté comportent un filtre passe-bas, et l'unité centrale de traitement est apte à fermer successivement les deux interrupteurs optiques, à déterminer successivement les niveaux lumineux transmis par chacun des bras, tels que définis par la sortie du filtre passebas, et à ajuster en conséquence l'atténuation de lumière commandée dans le bras de référence. Par ailleurs, l'unité centrale peut aussi commander un déplacement de la cuve d'électrophorèse à vitesse prédéterminée, et déterminer par là le coefficient vitesse de déplacement/fréquence de battements. Elle peut encore commander un petit déplacement de la cuve d'électrophorèse, afin de déterminer le signe de la charge des particules. L'unité centrale de traitement peut même opérer sur des signaux détectés correspondant à des incidences différentes du faisceau de travail sur la veine de liquide, ce qui permet d'accéder à des informations sur la taille des particules. Dans un mode de réalisation particulier, le dispositif mécanique comporte deux embouts percés d'un canal de même section que la veine de liquide, et placés de part et d'autre en communication avec celle-ci, chaque embout comportant un renflement intermédiaire qui loge l'une des électrodes, les extrémités libres des deux embouts étant reliées à des conduites souples respectives, et l'ensemble étant porté par un bâti commun muni d'un dispositif de double serrage apte à presser sur commande les deux conduites souples, ce qui permet la mise et le maintien en pression de la veine de liquide et de ses deux embouts de manière étanche et sans gaz emprisonné. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée qui va suivre, ainsi que dans les dessins annexés, sur lesquels - la figure 1 est un schéma symbolique d'ensemble d'un appareil d'électrophorèse selon la présente invention - la figure 2 est une vue schématique en perspective i-llustrant le dispositif mécanique associé à la cuve d'électrophorèse - la figure 3 est une vue en coupe montrant de manière plus détaillée certains des éléments de la figure 2 - la figure 4 montre sous la forme d'une vue détaillée en perspective le mécanisme d'entrainement du miroir 210 de la figure 1 ; et - la figure 5 est un diagramme montrant un spectre obtenu avec l'appareil selon la présente invention. Sur la figure 1, la référence numérique 100 désigne l'ensemble du dispositif mécanique qui supporte la cuve d'électrophorèse avec ses électrodes, tandis que la référence numérique 200 désigne l'ensemble des 6 ments du banc optique qui va permettre la vélocimétrie laser Doppler sur ladite cuve d'électrophorèse. On reconnaît donc tout d'abord a l'intérieur du cadre 100 en trait tireté la cuve d'électrophorèse illustrée schématiquement et désignée dans son ensemble par 110, les deux électrodes d'extrémité étant désignes respectivement par 125 et 145. En se référant brièvement aux figures 2 et 3, on notera que la partie active de la cuve d'électrophorèse est une veine de liquide 111 de section rectangulaire, et agencée entre les deux électrodes 125 et 145. Sur la figure 1 à nouveau, la référence 201 désigne un laser par exemple un laser à hélium-néon, de puissance 6 milliwatts. Le rayonnement laser 202 est appliqué à un prisme à réflexion totale 203, dont le faisceau de sortie va sur une lame séparatrice 204. A partir de la lame séparatrice 204, on va distinguer un faisceau de référence, noté Fr, et un faisceau de travail noté F . Le faisceau de référence traverse tout d'aobrd un interrupteur optique 205, commandé par l'unité centrale de traitement 269. Cet interrupteur va permettre de manière connue en soi de laisser passer ou non le rayonnement lumineux. Ensuite, on trouve en 206 un polariseur tournant, sous l'effet d'un mécanisme d'entraînement 268. Après un nouveau renvoi à angle droit par le prisme 207, on trouve l'analyseur 208 associé au polariseur 206. Enfin, le faisceau de référence arrive sur la lame de recombinaison 260, qui peut être semblable a la lame 204. On notera d'ores et déjà que la partie du faisceau de référence qui traverse directement la lame 260 est appliquée à un étouffoir de faisceau 209. Si l'on revient maintenant à la lame séparatrice 204, le rayonnement qui la traverse directement et constitue le faisceau de travail est appliqué à un autre interrupteur optique 248 également commandé par l'unité centrale de traitement 269, pour arriver ensuite sur un miroir mobile 210, que l'on décrira plus loin en détail. Pour le moment, on remarque que ce miroir 210 renvoie le faisceau de travail Fo dans la partie centrale de la veine 111 de la cuve d'électrophorèse. La partie du rayonnement qui traversera directement la cuve peut être absorbée par un étouffoir de faisceau 249. Les particules contenues dans la veine de liquide 211 vont pouvoir diffuser une partie de l'énergie lumineuse arrivant par le faisceau de travail Fo.Ce rayonnement diffusé est repris dans une direction donnée, qui est ici la direction perpendiculaire au plan de la cuve d'électrophorèse 110, et qui est défini par un diaphragme 250. Le faisceau diffusé, noté Fd, est dirigé vers la lame de recombinaison 260, où il va donc se mélanger avec le faisceau de référence, et après avoir traversé deux autres diaphragmes 261 et 262, venir frapper une diode 263 de détection. Les différents éléments du banc optique sont montés fixes les uns par rapport aux autres, à l'exception du miroir 210. Par contre, la cuve d'électrophoràse 100 est dans son ensemble mobile sous l'effet d'un dispositif d'entraînement micrométrique 180, commandé par l'unité centrale 269. Cet entraînement est réalisé de telle sorte que la veine 111 de la cuve d'électrophorèse se déplace sur elle-même, parallelement à sa direction générale. Au niveau du banc optique, la partie utile pour la diffusion est définie par l'intersection de la direction du faisceau renvoyé par le miroir 210 et de l'axe optique AO matérialisé par les diaphragmes 250, 251 et 262. On voit immédiatement que cette intersection se situera toujours à l'intérieur de la veine de liquide 111. Les électrodes 125 et 145 sont alimentées en courant continu à partir d'un dispositif 266, qui est de manière connue apte à réaliser une inversion de polarité d'alimentation entre les deux électrodes. Cette inversion de polarité est utile notamment pour éviter les phénomènes de polarisation des électrodes. Ici, 1'inversion de polarité est sous la commande de l'unité centrale de traitement 269. On considère maintenant à nouveau la diode 263. La sortie de cette diode est appliquée d'une part d un filtre passe-bas 264, capahle d'extraire un signal continu, représentatif de l'éclairement moyen reçu par la diode, ainsi qu'à des filtres passe-bande commutables 265. Ces filtres sont par exemple au nombre de 4, et sont constitués de filtres du sixième ordre, dont les bandes vont de 0,1 à 32, 64, 128 ou 256 Hertz respectivement. Les sorties de ces deux dispositifs de filtrage 264 et 265 sont appliquées à l'unité centrale 269, qui peut enfin exciter un dispositif de visualisation et/ou d'impression 270. On remarquera que le banc optique de la figure 1 est agencé en montage interférométrique de Mach-Zehnder. Contrairement aux enseignements de la technique antérieure, ce dispositif est entièrement dépourvu de focalisation des faisceaux lumineux. Le bras supérieur de l'interféromètre passe par le prisme 207, et est ici équipé d'un atténuateur variable, réalisé par le polariseur 206 et l'analyseur 208. Le bras inférieur de l'interféromètre passe par la veine de liquide 111. Une différence avec la structure classique de l'interféromètre en question est que normalement la lumière se propage directement sur le bras inférieur. Ici, on a au contraire intervention d'un phénomène de diffusion au niveau de la veine de liquide 111.De la sorte, le faisceau de travail Fo qui arrive en lumière parallèle sur la veine de liquide est inclinée sur la direction du faisceau diffusé Fd qui est repris pour être combiné avec le faisceau de référence Fr Ici, la direction du faisceau diffusé est perpendiculaire à la veine d'électrophorèse. Bien entendu, on pourrait prendre toute autre direction de faisceau diffusé, pourvu que ce faisceau demeure un faisceau de lumière parallèle utilisable dans l'interféromètre. D'un autre côté, le faisceau incident sur l'interféromètre peut avoir une inclinaison ajustable, par une commande convenable du déplacement du miroir 210, commande que l'on décrira maintenant en référence à la figure 4. Sur la figure 4, on voit en 211 un rail, qui est solidaire mécaniquement du reste du banc optique de la figure 1. Ce rail 211 porte une glissière 212, sur laquelle coulisse un chariot 213 muni de galets 214. La direction de coulissement est une translation, qui est rigoureusement dans l'axe du faisceau de travail Fo, tel qu'il provient de la lame 204 de l'interrupteur commandé 248. Le chariot 213 possède une forme générale de U, les deux branches s'ouvrant latéralement pour contenir deux axes 215 et 216. Sur l'axe 215 est monté, au-dessus du chariot, un support 217 équipé du miroir proprement dit 218. On voit donc que le miroir peut ainsi tourner. En partie basse, la branche inférieur du U 213 reçoit un dispositif de losange déformable. Ce dispositif est constitué d'un bras 221 articulé à pivotement sur l'axe 215, et muni à son autre extrémité d'un doigt pouvant buter sur un organe 227. Sur cette pièce 221 vient s'articuler à nouveau à pivotement un autre bras 222 qui à son tour s'articule à pivotement autour d'un axe 224 sur un troisième bras 223 lequel pivote autour de l'autre axe 216. Les bras 221, 222 et 223 définissent avec la partie inférieure du U un losage déformable. Enfin, sur l'axe 215 est monté fixé un bras 225, qui est rappelé élastiquement d'une manière illustrée sehé- matiquement en 226 sur un prolongement vers le haut de l'axe 224. L'axe du pion 227 qui touche le bras 221 se situe mécaniquement sur l'axe optique AO de la figure 1, celui-ci étant naturellement perpendiculaire à la direction de la glissière 212. Si l'on observe par ailleurs que les pièces 221, 222 et 223 definissent un losange, on voit immédiatement que lorsque le bras 221 est lui aussi perpendiculaire à la glissiere 212, le miroir 218 va se situer suivant un angle à 450. Cette position correspond au cas où, sur la figure 1, le miroir 210 serait incliné 450, et placé juste à l'intersection de l'axe optique AO et du faisceau incident venant de la lame 215. Cette position n'est pas utilisée, car la lumière incidente serait dans ce cas transmise quasi intégralement vers la diode 263. En fait, le miroir proprement dit 218 va se déplacer le long d'un segment de droite, qui est situé d'un coté ou de l'autre de l'axe optique AO, et colinéaire auxfaisceauxlumineux provenant du prisme 203. Dans le mode de réalisation préférentiel représenté, le miroir 210 est situé du côté de l'axe optique qui est à l'opposé du prisme 203, ce qui permet une réflexion à angle aigu de la lumière. Si l'on retourne à la figure 4, on voit que le ressort 226 va rappeler constamment le bras 225 sur le point 224, d'où il résulte le fait que ce bras 225 va se situer en permanence comme une diagonale du losange articulé. S'agissant d'un losange, la diagonale représente la bissectrice, et l'on voit immédiatement que le miroir 218 va prendre une inclinaison égale à la moitié de l'angle formé par l'axe de la glissière 212 et le bras 221. On obtient donc bien ainsi la condition de réflexion du faisceau lumineux vers un point qui sera toujours le même, sur l'axe optique AO. L'avantage de la disposition illustrée sur la figure 4 est de permettre de faire varier l'angle d'incidence du faisceau de travail Fo en ce point. Dans ce qui précède, conformément aux habitudes de l'optique géométrique, on a parlé de point. En fait, l'un des avantages du dispositif proposé réside en ce que la partie utilement explorée dans la veine liquide n'est pas un point, mais une zone, définie par l'intersection du mince faisceau de rayon parallèle d'entrée avec la cuve, ainsi que par l'ouverture du faisceau de rayon parallèle diffusé qui sera repris pour être appliqué à la diode. De surcroit, on notera que la direction du faisceau incident, aussi bien que celle du faisceau diffusé sont très biendéfinies. I1 en était tout autrement dans la technique antérieure, où l'utilisation de dispositifs à focalisation tels que des lentilles entrainait d'une part le fait que la zone utile au niveau de la cuve d'electrophorèse était petite, et moins bien définie, de même que l'orientation des faisceaux arrivant sur la cuve et en repartant. On se référera maintenant aux figures 2 et 3, pour la description du dispositif mécanique supportant la cuve d'électrophorèse. Comme précédemment indique, la veine de liquide 111 qui réalise l'électrophorèse proprement dite est définie par deux lames de verre verticales, qui prennent en sandwich deux autres lames de verre délimitant en haut et en bas la veine de liquide Celle-ci possède alors une section droite rectangulaire, mesurant par exemple 1,5 mm de haut pour 1,25 mm de large, sa longueur étant de 30 mm. Les parois de cette veine de verre sont traitées contre ltelectro-osmose, d'une manière connue. Comme le montre la figure 3, l'ensemble est porté par une structure 112, solidaire du bati du dispositif mécanique 100. Deux embouts notés respectivement 120 et 140 sont placés de part et d'autre de la veine 111. Ces embouts sont percés chacun d'un canal de même section que la veine de liquide, et communiquant avec celle-ci. Les deux embouts possèdent la même structure générale, et seul l'embout 120 est illustré en coupe sur la figure On la décrira maintenant. Cet embout s'appuie sur la cuve avec interposition d'un joint d'étanchéité torique 129. Il comporte un renflement intermédiaire désigne généralement par 122. Le renflement 122 est defini par une paroi cylindrique qui se raccorde de part et d'autre au canal précité par deux parois tronconiques. Celle qui fait faoe à la cuve 111 reçoit l'électrode 125j également tronconique. On notera que l'6lectrode 125 a tous ses points sensiblement à la meme distance de la cuve, ce qui permet une bonne utilisation, en termes de densité de courant. En mEme temps, une grande surface d'échange est prévue entre l'électrode et le liquide, de façon à éviter des perturbations dans l'électrophorèse en raison notamment des phénomènes de polarisation de l'électrode.En pratique, la pièce 120 est en deux parties 121 et 124, qui s'emboitent l'une dans l'autre avec interposition d'une étanchéité, et contribuent toutes les deux à la définition du renflement 122. De l'autre cté de la cuve par rapport au renflement, on trouve à nouveau un canal de même section que la veine de liquide, et la pièce 124 comporte une saillie de diamètre plus faible qui vient s'encastrer dans le bloc 130, pour servir de presse-étoupe afin de permettre la fixation d-'une conduite souple 131 en coopération avec son canal intérieur. Le corps 130 qui s'appuie sur le bâti par sa partie inférieure 135 définit également un organe de serrage pour la conduite souple 131. A cet effet, dans le corps 135 est prévue une rainure recevant la conduite souple 131, tandis qu'est ménagé transversalement le logement d'une tige 134. Au-dessus du corps 135 est montée une autre tige 132 solidaire d'un bloc d'extrémité 133 qui est mobile à pivotement autour d'un axe 136 sur le corps 135. On voit immédiatement que le serrage des deux tiges 132 et 134 l'une contre l'autre va fermer complètement la conduite souple 131, permettant ainsi d'isoler la cuve d'électrophorèse de la conduite. Le dispositif 140 place de l'autre côté de la cuve d'électrophorèse possède la même structure que le dispositif 120. Il vient s'encastrer dans un corps 162, qui est lui-même mobile en translation à l'intérieur d'un évidement 161 du corps 160, à l'encontre du rappel élastique défini par le ressort 163. Dans un alésage axial, défini dans le prolongement 164 de la pièce 162 va pouvoir passer l'autre conduite souple 151 qui vient se connecter au corps 140. Enfin, un levier 165 permet une mise en position précise du corps 162, de façon à assurer une excellente étanchéité des liaisons vers la cuve d 'électrophorèse. Finalement, à l'autre extrémité, on retrouve un dispositif de serrage de la conduite souple 151, par une tige inférieure 154 et une tige supérieure 152 montées sur un bloc 153 qui pivote sur le corps 155. La figure 2 montre comment les corps 155 et 135 sont fixés rigidement au bâti par l'intermédiaire de dispositifs de fixation 138 et 158 avec des appuis respectifs 139 et 159. Toujours solidaire du même b ti, la figure 2 montre deux montants verticaux 175 et 176 qui forment appui à pivotement pour un levier 174, lequel va par sa rotation abaisser la tige 173, qui pivote dans des relais 171 et 172 afin de permettre l'abaissement ou le relèvement des pièces 132 et 152, et par îà le serrage ou le desserrage des conduites souples qui assurent la communication entre la veine de liquide 1I1 et le circuit d'amenée du liquide. On rappelle enfin que l'ensemble du dispositif de la figure 2 est mobile en translation sous l'effet de l'entraînement micrométrique 180, dans la direction générale de la veine de liquide 111, celle-ci se déplagant alors sur elle-même, perpendiculairement à l'axe optique AO, et parallèlement à sa propre direction géné- rale. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, pour lequel la taille de la veine liquide a déjà été indiquée, la distance équivalente entre électrodes est d'environ 35mm, pour un volume minimum. de l'échantillon de 0,6 millilitres. I1 est adjoint à la cuve d'électrophorèse une régulation thermique comprenant une thermistance, une résistance de chauffage, et un élément de refroidissement à effet Petier- L'alimentation de la cuve, avec inversion de polarité, est effectuée sous intensité constante, qui peut aller jusqu' & 100 milllampères,pour tension d'alimentation qui peut aller jusqu'a 300 Volts. On utilise un laser hélium-néon de 5 ou 6 milliwatts, des prismes a réflexion totale 203 et 207 de structure classique. Les deux lames semi-réfléchissantes 204 et 260 peuvent très simplement être réalisées sous la forme d'une lame de verre ayant subi un traitement anti-refletssur l'une de ses faces. En effet, l'intensité du faisceau de référence, quoi qu'elle soit au moins 20 fois supérieure à celle du faisceau diffusé, demeure néanmoins très faible par rapport à l'intensité du rayonnement laser initial. Le miroir orientable 210 permet de régler l'angle d'incidence d-'une valeur légèrement supérieure a Oc jusqu'à 450. On obtient dans ces conditions, a l'intérieur de la veine de liquide, un volume diffusant de 0,6 mn. Bien entendu, l'ensemble banc-optique est monté sur une platine en fonte suspendue sur des amortisseurs coupant les vibrations au-dessus de 10 Hertz, ou sur des moyens amortisseurs équivalents. Enfin, l'unité centrale de traitement 269 peut comporter un micro-ordinateur par exemple du type APPLE II, avec une capacité de mémoire de 48 kilomots, et associé a une carte de conversion analogiquenumérique capable d'obtenir 13 bits en 25 microsecondes. Le dispositif de visualisation 270 peut comporter un moniteur de télévision, associé a une imprimante. Enfin, une mémoire additionnelle par exemple sur disque magnétique peut être ajoutée, ainsi qu'une carte de chronométrie programmable, pour définir la séquence des opérations effectuées. Les électrodes 125 et 145, de forme générale tronconique, sont de leur côté en argent platinisé. En fonctionnement, la première opération a effectuer sous le contrôle de l'unité centrale est normalement un étalonnage. Pour cela, la veine de liquide 111 est remplie d'un liquide avec des Darticules quelconques, les conditions étant pour le reste les mêmes que les conditions de travail en électrophorèse. L'unité centrale 269 va alors agir sur l'interrupteur optique 205 de façon à occulter le faisceau de référence. La photodiode 263 ne reçoit alors que le fasceau diffusé provenant du faisceau de travail, et à travers le filtre passe-bas 264, elle fournit alors a l'unité centrale 269 un signal représentant l'intensité moyenne de ce faisceau. Ensuite, l'unité centrale commande inversement l'occultation par l'interrupteur 248 du faisceau de travail, tout en laissant passer le faisceau de référence, et à nouveau la photodiode 263 va délivrer à travers le filtre 264 un signal represen- tatif de l'intensité du faisceau de référence.Connaissant les intensités des deux faisceaux, l'unité centrale 269 agit sur le dispositif 268 de façon à faire tourner le polariseur 206 pour obtenir une intensité de faisceau référence qui soit 10 à 20 fois supérieure à celle du faisceau diffusé. Après cela, les intensités respectives des deux faisceaux étant convenablement calibrées, l'unité centrale 269 agit sur le dispositif 180 de façon à produire un déplacement lent de l'ensemble du dispositif mécanique 100 à une vitesse connue. La photodiode 263 fournit alors un signal de battements, qui est représentatif de l'effet Doppler obtenu pour cette vitesse connue. Ce signal de battements est transféré à travers l'un des filtres 265 à l'unité centrale 269, qui s'en sert alors pour établir le coefficient de proportionnalité entre la fréquence Doppler ainsi établie et la vitesse effectivement imprimée au dispositif mécanique. Cela permettra par la suite d'établir la vitesse de déplacement ou la mobilité des particules présentes dans la veine de liquide. A ce niveau d'explication, on peut remarquer régalement que en présence de particules dans la veine de liquide 111, il se produira un déplacement de ces particules à une vitesse qui dépend du champ électrique et de la charge des particules. Cependant, le signal Doppler délivré par la photodiode 263 ne représente que la vitesse finalement acquise par lesparticules, mais ne permet pas de distinguer quel est le signe de la charge des particules. Cela est possible, selon un autre aspect de la présente invention, par le fait que l'unité centrale peut commander un petit déplacement de la cuve d'électrophorèse à travers le dispositif 180, et observer les modifications qui en résultent sur le spectre de vitesse ou de fréquence de battements.On peut alors déterminer le signe de la charge des particules, du moins d'une manière statistique, c'est-à-dire le signe dominant sur l'ensemble des particules concernées dans le volume de mesure, pour une vitesse de déplacement donnée de ces particules. Dans le détail, le fonctionnement du dispositif est le suivant : le faisceau de référence se mélange avec le faisceau diffusé au niveau de la photodiode 263, la partie utile du signal résultant étant un signal de battements, de basse fréquence, représentatif de l'effet Doppler exercé sur le faisceau diffusé Fd, en raison des mouvements des particules. Ce signal de basse fréquence délivré par la photodiode 263 va donc comporter un spectre de fréquence dont les valeurs de fréquence et les amplitudes correspondantes sont représentatives des différentes vitesses de déplacement de particules présentes dans la veine liquide, ainsi que de leur importance, liée à la-fois au nombre de particules possédant chaque vitesse, ainsi qu'à leur surface diffusante dans la direction intéressée. Ce signal de basse fréquence traverse donc les filtres passe-bande commutables 265, la bande passante étant plus ou moins large suivant la commutation choisie. On a déjà donné plus haut un certain nombre de bandes passantes possibles, d'autres bandes passantes étant envisageables, pour une largeur de bande comprise entre 0,01 Hz et 1 kHz environ. L'unité centrale 269 comporte tout d'abord une unité de conversion analogique numérique en basse fréquence, qui va numériser en temps réel le signal de sortie de la photodiode. Selon un aspect important de l'invention, l'échantillonnage du signal analogique en sortie de la photodiode 263 et des filtres 265 est réalisé temporellement d'une maniere synchrone de l'inversion de polarité dans l'alimentation par le dispositif 266. Cela évite des difficultés sérieuses provenant d'interférences entre le changement de sens de l'alimentation de la cuve et les battements de basse fréquence eux-mêmes. Après cela, l'unité centrale 269 dispose d'un ensemble de signaux numériques représentant le signal de sortie de la photodiode en amplitude et en fréquence sur la bande découpée par le filtre 265 concerné. D'une manière connue, l'unité centrale 269 va alors calculer la transformée de Fourier discrète du signal détecté, sur un nombre choisi d'échantillons numérisés consécutifs, nombre qui correspond normalement à l'ensemble du signal sur toute la bande choisie. Ce calcul peut s'effectuer par la méthode numérique connue sous le nom de transformée de Fourier rapide (Fast Fourier Transform). On obtient alors un signal de la forme illustrée sur la figure 5, où l'axe des abcisses représente des basses fréquences, tandis que l'axe des ordonnées représente des amplitudes. I1 s'agit en fait de la décomposition spectrale du signal fourni par la photodiode 263 pour un echantillon donné de liquide enfermant des particules contenues dans la veine 111 de la cuve d 'électrophorèse. Bien entendu, l'unité centrale de traitement 269 va pouvoir gérer l'ensemble de l'expérience, à savoir réaliser également la régulation en température précitée, ainsi que la mesure du champ électrique de l'intensité appliquée à la veine de liquide, ainsi que les étalonnages de vitesse et les équilibrages des intensités lumineuses des deux faisceaux, déjà cités. L'analyse spectrale par la transformée de Fourier peut être réalisée sur 128 canaux en 4 secondes, avec bien entendu la possibilité d'effectuer une moyenne sur plusieurs spectres, correspondant à plusieurs signaux de basse fréquence successifs pris en sortie de la photodiode 263. Après cela, la conversion du spectre de fréquence en histogramme de mobilité peut être effectuée compte tenu de l'étalonnage de vitesse. Enfin, il est possible de mettre en mémoire les spectres en entier les uns après les autres, afin d'étudier des cinétiques de réaction qui se passent dans la veine de liquide, ou au contraire de ne conserver que les valeurs maximales de chaque spectre. A côté de cela, de nombreuses operations statistiques sont possibles, dont la décomposition des histogrammes en sous-population correspondant à différents maxima du spectre, ainsi que des calculs de pourcentages, de maxima et d'écarts types pour chacune des populations reconnues. Les résultats peuvent être affichés sous diverses formes, courbes, tableaux, sur l'écran cathodique ou sur l'imprimante déjà citée. Un exemple particulier d'application permettra de mieux comprendre l'intérêt du dispositif selon l'invention. Des hématies ont été placées dans la veine liouide, suspendues dans une solution tampon de faible force ionique (5.10 ). Ces hémathies étaient les unes normales, et les autres traitées par de la neuraminidase, cette substance réalisant un traitement enzymatique qui ote certains groupements ionisés de la membrane cellulaire, et provoque ainsi une diminution de sa charge électrique. La figure 5 illustre le spectre de fréquence obtenu selon l'invention pour un tel mélange d'hématies normales et hématies traitées. On remarquera que malgré la petite différence entre les deux types de particules présentes dans la cuve d'électrophorèse, le dispositif proposé permet de les distinguer très bien : on reconnaît non seulement l'existence de deux populations différentes d'hématies, mais aussi les caractéristiques de chacune de ces populations. Un autre aspect important de l'invention réside dans le dispositif de mouvement du miroir 210. Ce dispositif permet a priori de choisir l'incidence du faisceau de travail sur la cuve d'électrophorèse, et après avoir utilise plusieurs incidences, de retenir celle qui donne les meilleurs résultats dans la réponse spectrale. Pour cela, un-ajustement mécanique à commande manuelle de la position du miroir 210 suffira, en utilisant bien entendu le montage de la figure 4 qui assure systématiquement le renvoi du faisceau de travail au même point du banc optique (et de ia veine de liquide, dans la mesure où celle-ci n'est pas déplacée) Dans une réalisation plus élaborée, le mouvement du miroir 210 peut être placé sous le contrôle de l'unité centrale de traitement 269, ce qui permet alors d'acquérir tout un jeu de réponses spectrales au niveau de la photodiode qui correspondent respectivement à des angles d'incidence échelonnés convenablement du faisceau de travail sur la cuve d'électrophorèse. Par un traitement convenable de ces différents spectres, on peut alors acquérir des informations sur la taille des particules, c'est-à-dire résoudre, dans un spectre tel que celui de la figure 5, l'ambiguîté qui résulte du fait que l'amplitude est liée à la fois à la taille des charges individuelles, ou plus exactement leur surface de diffusion, ainsi qu'à leur nombre. Bien entendu, la présente invention n'est pas limitée au mode de réalisation décrit, mais s'étend à toute variante comprise à l'intérieur du cadre des revendications ci-après. REENDICATIONS 1. Appareil d'électrophorèse, comprenant - un dispositif mécanique (100) qui supporte une cuve d'électrophorèse (110), laquelle définit, entre deux électrodes (125, 145), une veine de liquide (111) sus ceptible de contenir des particules, et - un banc optique (200) comprenant une source laser (201) des moyens (203, 204) pour séparer le rayonnement laser en deux faisceaux, l'un de référence (fur), l'autre de travail (Fo), le faisceau de travail (Fo) étant dirigé sur la veine de liquide, des moyens (250) pour repren dre un faisceau diffusé (Fd) par la veine de liquide en réponse au faisceau de travail, des moyens (260) pour recombiner le faisceau de référence et le faisceau diffusé, et un organe détecteur de lumière (263) rece vant le faisceau recombiné, le signal recueilli sur ce détecteur de lumière comportant une composante de bat tements basse-fréquence représentative de mouvements de particules contenues dans la veine de liquide, caractérisé par le fait que le banc optique (200 à 260) est agencé en montage interférométrique de Mach-Zehnder, dont l'un des bras passe par la veine de liquide, le faisceau de travail (Fo) qui arrive en lumière parallèle sur la veine de liquide étant incliné sur la direction du faisceau diffusé (Fd) repris pour être combiné avec le faisceau de référence (fur) 2. Appareil d'électrophorèse selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le faisceau diffusé (Fd) est un faisceau de lumière parallèle, pris perpendiculairement à la veine de liquide. 3. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait que le banc optique (200) comporte des moyens (210) pour modifier l'angle d'incidence du faisceau de travail (Fo) sur la veine de liquide, sans déplacer la zone d'incidence dans la veine de liquide (111) à l'égard du banc optique. 4. Appareil d'électrophorèse selon la revendication 3, caractérisé par le fait que les moyens (210) pour modifier l'angle d'incidence comprennent un miroir (218) recevant le faisceau de travail, en direction fixe, ce miroir étant mobile de manière couplée à la fois en translation (213) dans la direction d'incidence du faisceau de travail, et en rotation (215, 221 à 226) pour renvoyer le faisceau de travail en une zone fixe à l'égard du banc optique, et située dans la veine de liquide (111). 5. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que le dispositif mécanique comporte des moyens (180) pour déplacer la cuve d'électrophorèse à l'égard du banc optique (200), la veine de liquide (111) se déplaçant sur ellemême selon sa direction principale. 6. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé par le fait que l'appareil comporte en outre une unité centrale de traitement (269), des moyens de transmission du signal du détecteur (264, 265) à cette unité centrale, des moyens pour échantillonner le signal détecté et le convertir sous forme numérique, ainsi que des moyens aptes à inverser de façon commandée (266) la polarité de la tension continue appliquée entre les deux électrodes (125, 145) de la cuve d'électrophorèse, et par le fait que l'unité centrale de traitement (269) est agencée pour synchroniser l'échan- tillonnage du signal détecté avec l'inversion de polarité, ainsi que pour calculer la transformée de Fourier discrète du signal détecté sur un nombre choisi d'échantillons numérises consécutifs. 7. Appareil d'électrophorèse selon la revendication 6, caractérisé par le fait que les deux bras de l'interféromètre comportent chacun un interrupteur optique (205, 248), que le bras traversé. par le faisceau de référence comporte un atténuateur de lumière commandé (206, 208, 268), que les moyens de transmission du signal détecté comportent un filtre passe-bas (264), et que l'unité centrale de traitement (269) est apte à fermer successivement les deux interrupteurs optiques (205, 248), à déterminer successivement les niveaux lumineux transmis par chacun des bras, tels que définis par la sortie du filtre passe-bas, et à ajuster en conséquence (68) l'at ténuation de lumière commandée dans le bras de référence. 8. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 6 et 7, prise en combinaison avec la revendication 5, caractérisé par le fait que l'unité centrale (269) est apte à commander un déplacement (180) de la cuve d'électrophorèse à vitesse prédéterminée, et a déterminer par là le coefficient vitesse de déplacement/ fréquence de battements. 9. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 6 à 8, prise en combinaison avec la revendication 5, caractérisé par le fait que l'unité centrale (269) est apte à commander un petit déplacement (180) de la cuve d'électrophorèse, afin de déterminer le signe de la charge des particules. 10. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 6 à 9, caractérisé par le fait que les moyens de transmission du signal détecté comprennent au moins un filtre passe-bande (265), de bande passante comprise entre 0,01 Hz et 1 kHz. 11. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 6 à 10, caractérisé par le fait que l'unité centrale de traitement (26-9) est agencée pour opérer sur des signaux détectés correspondant à des incidences dif férentes (210) du faisceau de travail sur la veine de liquide, ce qui permet d'accéder à des informations sur la taille des particules. 12. Appareil d'électrophorese selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisé par le fait que le dispositif mécanique (100) comporte deux embouts (120 140) percés d'un canal de même section que la veine de liquide, et placés de part et d'autre en communication avec celle-ci, chaque embout comportant un renflement intermédiaire (122) logeant l'une des électrodes (125), les extrémités libres des deux embouts (120 ; 140) étant reliées à des conduites souples respectives (131, 151), et l'ensemble étant porté par un bati commun muni d'un dispositif de double serrage (132, 152) apte à presser sur commande les deux conduites souples, ce qui permet la mise et le maintien en pression de la veine de liquide et de ses deux embouts de manière étanche et sans gaz emprisonné. 13. Appareil d'électrophorèse selon la revendication 12, caractérisé par le fait que les électrodes (125, 145) de forme générale cylindrique, sont en argent platinisé. 14. Appareil d'électrophorèse selon l'une des revendications 12 et 13, caractérisé par le fait que la veine de liquide (111), de section rectangulaire, est délimitée entre des plaques de verres munies intérieurement d'un revêtement contre l'electro-osmose.