Brevet FR2526023A1 — publié le 19831104

L'invention concerne de nouvelles 2-isopropyl pyrido(2-1-b)quinazolines et leurs sels non toxiques, un procédé de fabrication decelles-ci et des compositions pharmaceutiques les contenant. La découverte du chromoglycolate disodique à la fin des années soixante-dix fut un apport notable dans le traitement de l'asthme comme prophylactique, meme stil est inefficace dans les attaques de l'asthme aigu. Le chromoglycolate agit au niveau du mastocyte, en évitant la libération des médiateurs de la réaction d'hypersensibilité immédiate (SRS-A, histamine, etc) qui se produit comme conséquence de l'interaction de l'Antigène avec l'anticorps uni au mastocyte et de ce fait il est nécessaire qu'il soit présent au moment où se produit 1'interaction et soit inefficace ou inactif si celle-ci a déjà eu lieu. Un autre inconvénient du chromoglycolate disodique est qu'il ne s'absorbe pratiquement pas dans le tube digestif de sorte qu'il doit s'administrer par inhalation avec les inconvénients d'inexactitude dans le dosage, l'intolérance, la difficulté d'administration, spécialement chez les enfants, etc. Tous ces inconvénients ont nécessité des recherches vers la découverte de nouvelles molécules ayant des propriétés similaires au chromoglycolate disodique mais pouvant s'absorber par voie orale. Selon la présente invention on a trouvé de telles nouvelles molécules qui sont constituées par les 2-isopropyl pyrido(2-1-b)quinazolines ainsi que leurs sels non toxiques ayant la formule générale dans laquelle R peut être un groupe carboxyle, carboxamido, cyano ou tétrazolyle. La présente invention concerne également un procédé pour la fabrication de ces nouvelles quinazolines ainsi que des compositions pharmaceutiques les contentant. Le procédé de fabrication des nouvelles quina zolines précédemment mentionnées est essntiellement caractérisé en ce que dans une première étape, on fait réagir l'acide 5-isopropylanthranilique ou son ester éthylique avec des quantités équimolaires de l'acide 6-chloronicotinique ou son ester éthylique dans un milieu mono ou polyhydroxylé ou un éther à point d'ébullition élevé pendant 2 jours à des températures qui oscillent entre 60 et 1800C. Dans le cas de l'utilisation d'un milieu hydroxylé comme l'éthanol, on obtient un mélange de la pyrido quinazoline acide et de son éther éthylique de sorte que pour obtenir la forme acide on procede à l'hydrolyse du produit brut de réaction avec de la soude 2N en contrôlant soigneusement les temps et les températures pour éviter la rupture de la liaison amidique du cycle et en acidifiant ultérieurement la masse de réaction à pH égal à 2 de sorte qu'on isole le chlorhydrate de l'isopropyl pyrido quinazoline carboxylique qui se transforme en la base libre par recristallisation dans la pyridine. A A partir de la forme acide on obtient l'amide en faisant réagir le chlorure d'acide obtenu par ébullition avec le chlorure de thyonile en présence de diméthyl formamide et la réaction avec l'hydroxyde ammoniacal à la température ambiante. L'amide se purifie par recristalli sation dans la pyridine et on déshydrate le nitrile par chauffage important avec du chlorure de thyonile dans le diméthylformamide. Au refroidissement de la masse réac tionnelle le nitrile précipite que lion peut recristalliser dans la pyridine. Pour l'obtentLondu dérivé tétrazolique on utilise l'acide sodique et le chlorure ammoniacal dans le diméthylformamide qui par réaction avec le nitrile à 1150C pendant 20 heures et refroidissement ultérieur à OOC produit le dérivé désiré comme produit cristallin que l'on met en suspension dans l'eau et que l'on porte à pH égal à 2 pour obtenir le chlorhydrate qui par recristallisation dans la pyridine produit la base libre. Les composés obtenus par le procédé selon la présente invention et qui répondent à la formule indiquée précédemment, réduisent la réponse allergique due à la confrontation avec l'antigène par inhibition des réactions antigène-anticorps chez les rats ou souris. Les composés objet de la présente invention ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables inhibent l'anaphylaxie passive cutanée chez le rat, de sorte qu'ils sont efficaces dans les réactions allergiques et dans le traitement prophylactique de l'asthme des bronches. Pour cette raison, ils constituent les ingrédients actifs de compositions pharmaceutiques. La demanderesse a étudié'l'activité antianaphylactique, en employant l'essai d'anaphylaxie passive cutanée chez le rat, qui est le modèle pharmacologique expérimental qui se rapproche le plus de l'hypersensibilité immédiate humaine du type réaginique (Rosenthale 1975). Le sérum de rat contenant des anticorps reaginiques se prépare suivant la technique de Mota (1964) en immunisant des rats Sprague-Dawley ayant un poids de 180 + 20 g par voie intramusculaire avec 1,5 g d'albumine d'oeuf (degré sigma VI) dissoute dans un adjuvant incomplet de Freund et par voie intrapéritonéale 1 ml de vaccin Bordetella pertussis contenant approximativement 1010 micro-organismes par millilitre. Treize jours plus tard, on saigne les rats pour récupérer le sérum. On a démontré que l'activité réaginique du sérum est due principalement à la IgE, étant donné qu'en chauffant le sérum à 560C pendant 1 heure, on perd sa capacité réaginique. On injecte par voie intradermique en quatre endroits de l'épaule des rats précédemment huilée, des dilutions appropriées de l'antisérum précédemment indiqué. Quarante-huit heures plus tard on confronte par voie intraveineuse avec l'antigène (1 mg d'albumine d'oeuf dissous dans 1 mî de solution saline d'Evans bleu à 0,25%). Après 30 minutes les animaux sont sacrifiés et la peau de l'épaule retirée en mesurant la demi-somme des diamètres des taches bleues produites au lieu d'injection de l'antisérum. Les composés à étudier sont administrés par voie intraveineuse et orale et à différents intervalles de temps avant la confrontation avec l'antigène, en vue de déterminer les doses DI50 et la durée de l'essai. Les résultats s'expriment en pourcentage d'inhibition de la réponse comparée avec celle que produit le groupe desanimaLz de contrôle qui ne reçoivent aucun traitement. - = 1 - ba x 100 a = valeur moyenne de la demi-somme des diamètres obtenus pour le groupe d'animaux de contrôle. b = valeur moyenne de la demi-somme des diamètres obtenus pour le groupe des animaux traités. Le traitement statistique des données se réalise en employant l'essai de signification de Student. Les paramètres de DI50 et de T. Max (temps maximum de durée de l'effet pour l'inhibition de 50%), ont été réalisés en suivant la méthode de Lichtfiel (1948), modifiée ultérieurement par Lehman (1980). Les composés administrés par voie intraveineuse à une dose de 0,1 mg/kg de poids pour l'essai d'anaphylaxie passive cutanée chez le rat produisent une inhibition supérieure à 8osa. En outre ces composés offrent l'avantage de posséder une excellente absorption par voie orale à la différence du chromoglyconate disodique, inefficace par cette voie d'administration. Au tableau I, on a indiqué les résultats obtenus pour les DI50 par voie orale et intraveineuse. TABLEAU I Inhibition relativement à l'anaphylaxie passive cutanée Dose inhibitrice cinquante + les limites de confiance à 95% exprimée en milligrammes par kilogramme. Composé VOIE R1 R2 Intraveineuse1 Orale2 -i- C3H7 -COOH 0,02 + 0,13 0,13 + 0,22 - 1c3N7 -5-tétrazolyle 0,006 + 0,004 0,04 + 0,05 Chromoglycolate disodique 0,95 > 100 Kétotiiène3 0,3 5,1 1. Administration intraveineuse 5 minutes avant la confrontation avec l'antigène. 2. Administration morale 10 minutes avant la confrontation avec l'antigène. 3.. Administration orale 60 minutes avant la confrontation avec l'antigène. On a étudié le temps de durée de l'effet face à l'anaphylaxie passive cutanée en administrant par voie intraveineuse une dosse de 2,5 mg/kg de poids et par voie orale une dose de 5 mg/kg de poids, en déterminant le temps maximum pour lequel existe une inhibition de 50%, les résultats étant répertoriés au tableau II. TABLEAU II, Durée de l'effet dinhibition relativement à l'anaphylaxie passive cutanée. Composé o T (Max) minutes R1 R2 Intraveineuse Orale - i-C3H7 -COOH 36,3 28,5 - i ^ H -5-tétrazolyle 49,3 66 chromoglycolate disodique 16,1 - T. Max (temps maximum pour lequel existe une inhibition à 5096). * La dose administrée par voie intraveineuse a été de 2,5 mg/kg de poids et par voie orale 5 mg/kg de poids. Le mécanisme d'action des composés objet de la présente invention paraît être quedemanièreidentique au chromoglycolate ils agissent dans une étape antérieure à la libération du médiateur étant donné qu'on n'a pas rencontré d'antagonisme direct face à l'hystamine, la sérotonine, le composé 48/90 et la hyaluronidase, dans le modèle "in vivo" chez la souris de l'augmentation de perméabilité vasculaire que produisent ces substances autacoldes (les résultats sont répertoriés au tableau III. TABLEAU III Effet sur les substances qui accroissent la perméabilité vasculaire. Administration par voie intraveineuse d'une dose de 10 mg/kg de poids. Diamètre de la zone en millimètres. Inhibition en pourcentage. COMPOSE 3 R1 R2 R1 R2 -i43H7 -COOH C 3H7 -5-tétrazoline Diamètre 14,5+0,66 15,1+ 0,67 13,7+ 0,93 Hista mine inhibition O 3,5 (p Diamètre 16,9+2,05 16,6+ 1,03 16,1+ 1,03 Sero- tonine Inhibition 1,8(p Diamètre 20,7+1,85 17,8+ 3,4 19,6+ 2,17 Composé 48/80 Inhibition 14(p 5,3(p diamètre 16 +1,1 14,5+ 1,27 1 7,5+3,2 Hyaluro nidase inhibition 9,4(p O La toxicité aiguë des composés est répertoriée au tableau IV, après l'administration d'une dose unique chez une souris Swiss, ayant un poids de 20+ 2 grammes et chez un rat Wistar ayant un poids de 90+10 grammes, on a observé la mortalité pendant une période de 14 Souris après l'administration. TABLEAU IV Toxicité aiguë en milligrammes par kilogramme. COMPOSE ESPECE VOIE R1 R2 intra- intra veineu- périto- orale se néale -i-C3H7 -COOH Souris 271,4 246,3 804, 9 Rat -- 408,9 1000 - i-C3H -5-tétra- Souris 223 354,6 1000 Rat Rat Rat -- 431,9 1000 Les résultats pharmacologiques et toxicologiques obtenus démontrent que les nouveaux composés objet de la présente invention ont un excellent indice thérapeutique et que leur bonne absorption par voie orale rend possible leur application clinique dans des réactions allergiques dermatologiques, gastro-intestinales et pulmonaires spécialement comme agent de prophylaxie dans des procédés aussi importants que l'asthme des bronches. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à l'aide de la description explicative qui va suivre relativementàquelques exemples de l'invention donnés simplement à titre d'illustration et qui ne saurait donc en aucune façon limiter la portée de l'invention. EXEMPLE 1. Dans un matras de 100 ml de capacité pourvu d'une agitation, d'un bain extérieur de chauffage et de réfrigérant de reflux, on place 1,79 g d'acide 5-isopro pyl-anthrranilique et 1,56g d'acide 6iloronicotinique dans 60 ml d'ethanol qui contiennent 1,5 ml d'acide chlor,hydrique concentré. On chauffe le mélange au reflux 40 heures, on concentre à sec et on dissout le résidu dans 21 ml de soude 2N. On chauffe la solution à 600C pendant une heure, on laisse refroidir et on porte à pli=2 avec de l'acide chlorydrique 6N. On filtre le précité qui se forme, on le sèche et le recritallise dans la pyridine. On obtient un produit jaune cristallin de point de fusion = 314-316 C dont les caractéristiques physiques et spectrales correspondent aux 2-isopropyl-11-oxo- 11K-pyrido (2-1-b) quinazoline-8-carboxylique. EXEMPLE 2. On met en suspension 2,8 g du produit obtenu sekn 1'exemple 1, dans 10 ml de chlorure de thyonile, on ajoute 3 gouttes de dymétrylformamide comme catalyseur et on chauffe au reflux 3 heures. On distille l'excès de chlorure de thyonile et on met en suspension le résidu dans 25 ml de toluène sec et on distille à nouveau jusqu'à obtenir un résidu jaune solide sur lequel on ajoute sous agitation 50 ml d'hydrox amoniacal. On agite une demi-heure à la température ambiante et on filtre le solide rémanent, on lave avec de l'eau et on sèche. On peut le recristalliser dans la pyridine en obtenant un produit jaune cristallin de point de fusion = 2880C dont les caractéristiques physiques et spectrales correspondent à la 2-isopropyl-11-oxo-11H-pyrido (2-1-b) quinazoline-8-carboxamide. EXEMPLE 3. On met en suspension 6 g du produit obtenu selon l'exemple 2 d-ns 60 ml de dyméylformamide sec. On ajoute à la suspension par goutte rapidement et sous agitation 2,75 ml de chlorure de thyonile et on chauffe le mélange à 600C pendant 42 heures. On refroidit à 60 C et on filtre le solide qui précipite et on le recristallise dans la pyridine. On obtient un solide jaune cristallin de point fusion = 207 C dont les caractéristiques physiques et spectrales correspondent à la 8-cyano-2 isopropyl-1 1 -oxo-1 1 H-pyrido (2-1-b) quinazoline. EXEMPLE 4. On met en suspension 3 g du produit obtenu selon l'exemple 3 dans 50 ml de diméhylformamide anhydre. On ajoute 1,38 g de chlorure amoniacal et 1,66 g d'azide sodique et on chauffe le mélange à 1150C pendant 20 heures. On laisse refroidir la solution, on l'ajoute sur 100 ml d'sau, on l'acidifie à pM=2 avec l'acide chlorhydrique 5N et on filtre le solide qui précipite, on le sèche et le recristallise dans la pyridine. On obtient un solide jaune cristallin de point de fusion = 2750C dont les caractéristiques physiques et spectrales correspondent à la 2-isopropyl-I1-oxo-îîH- 8-(1H-tétrazol-5-yl) pyrido (2-1-b) quinazoline. EXEMPLE 5. On agite 2,7 g de 2-isopropyl-11-oxo-11H-pyrido- (2-1-b) quinazoline-8-carboxylique obtenu selon l'exemple 1 à la température ambiante dans 10 ml d'eau, tandis qu'on ajoute 10 ml de soude N. On agite le mélange résultant quelque 30 mn jusqu'à ce que la majorité de la substance solide soit dissoute. On filtre la solution au vide pour éliminer la partie insoluble et la solution se lyophylise en obtenant ainsi une poudre jaune qui correspond au sel sodique de la 2-isoproyl-11-oxo-11H- 8- (1H-tétrazol-5-yl) pyrido- (2-1-b) quinazoline. EXEMPLE 6. On dissout 2 g du composé obtenu selon l'exmple 5 dans 10 ml d'eau distillée, on amène la solution à pH=1 au moyen d'addition d'acide chlodxydrique 6N. On filtre le produit jaune qui précipite et on le sèche à 1000C sous vide. On obtient le chlorhydrate de 2-isopropyl-11-oxo-11H-pyrido (2-1-b) quinazoline-P,- carboxylique. Naturellement, l'invention comprend tous les moyens constituant des équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs diverses combinaisons. REVENDICATIONS- 1.- Nouvelles 2-isopropyl-pyrido(2-1-b) quinazolines et leurs sels non toxiques, ou pharmaceutiquement acceptables, caractérisées en ce qu'elles répondent à la formule générale suivante dans laquelle R est choisi parmi un groupe carboxyle, carboxamido, cyano ou tétrazolyle. 2.- Procédé de fabrication des nouvelles 2-isopropyl-pyrido(2-1-b) quinazolines et de leurs sels non toxiques ou pharmaceutiquement acceptables de formule générale dlns laquelle R peut représenter un goupe carboxyle, carboxamido, cyano ou tétrazolyle, caractérisé en ce qu'on obtient lesdites quinazolines à partir de quantités équimolaires de l'acide 5-isopropylanthranilique ou d'un dérivé actif de celui-ci, tel que l'ester éthylique, et de l'acide 6-chloronicotinique ou d'un dérivé actif de celui-ci, tel que l'ester éthylique, par chauffage à des températures comprises entre 60 et 2500C et en présence d'un catalyseur acide, comme l'acide chiydrique,l' acide p-tolvmesulfonique , et. ;; avèc éventuellemrnt comme solvant un alcool mono ou poly-hydroxylé ou un éther à point d'ébullition élevé comme le diphényl éther et on isole l'acide 2-isopropyle~11-oxo-11H-pyrido- (2-1 -b)- quinazoline-8-carboxylique parhydrolise de la masse réactionelle dans un milieu de soude ou de potasse aqueuse en excès, àtempératures entre 40 et 800C et des temps compris entre une demie et trois heures et par acidification ultérieure de la solution 3.- Procédé selon la revendication 2 pour l'obtention des quinazolines dKs lesquelles le groupe R est un groupe carboxamide , caractérisé en ce qu'on fait réagir la-quinazoline acide obtenue selon la revendication 2 avec un agent chlorant iI.que le chlorure de thyonileen en présence de diméthylformamide comme catalyseurà des températures de reflux, pendant des durées qui oscillent entre une et cinq heures ; le chlorure d'acide obtenu par réaction avec l'hydroxyde amoniacal en excès à la température ambiante produit la 2-isopropyl-8 carboxamido-11-oxo-11H-pyrido (2-1-b) quinazoline. 4.- Procédé selon la revendication 2, pour la préparation de quinazolinesdans lesquelles R est un groupe cyano, caractérisé en ce qu'on fait réagir la carboxamide obtenu selon la revendication 3 avec un agent déshydratant tel que le chlorure de thyonile,dans un solvant à point d'ébullition élevé, comme la diméthyl formamide,à des températurescomprisesentre 80 et 600C et pendant des durées comprises entre 20 et 60 heures. 5.- Procédé de fabrication des quinazolines selon la revendication 2, pour lesquelles le groupe R représente un groupe tétrazolyle, caractérisé en ce qu'on fait réagir le nitrile obtenu selon la revendication 4 avec l'azide sodique et le chlorure amoniacal, au sein d'un solvant à point d'ébullition élevé comme la dyméthylSormamide pendant des durées comprises entre 15 et 30 heures. 6.- Procédé de fabrication des quinazolines selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on obtient les sels de métaux alcalins, ou alcalinotérreux par neutralisation des formes acides obtenues sein l'une quelconque des revendications 2 à 5, avec l'alcoxyde de métal alcalin ou alcalinoterreux correspondant, au sein d'un solvant approprié à des températures comprises entre 20 et 100 C et des temps ou durées comprises entre 5 et 15 minutes ; on peut obtenir les sels de type acide par traitement du sel basique obtenu comme précédemment indiqué dissous dans l'eau et par acidification de la solution jusqu'à pH=1 avec un acide adéquat , tel que l'acide chlorhydrique. 7.- Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre d' ingréient actif une quantité thérapeutiquement efficace d'unie 2-isopropylpyrido (2-1-b) quinazolines ou l'un de ses sels non toxiques pharmaceutiquement acceptable de formule générale dans laquelle R peut représenter un groupe carboxyle, carboxamido, cyano ou tétrazolyle.