Brevet FR2531087A1 — publié le 19840203

La présente invention concerne une nouvelle for- me amorphe de l'ester l-acétoxyéthylique de céfuroxime (dit ci-après cefuroxime-asxétil), une procédé pour sa préparation, une composition la contenant et son utilisation en médecine. L'acide ( 6 R, 7 R)-3-carbamoyloxyméthyl-7(Z)-2- (fur-2-yl)-2méthoxyiminoacétamidc 7 céph-3 ème-4-carboxylique porte le nom reconnu de "céfuroximne" Ce composé est un anti- biotique de valeur caractérisé par un très large spectre d'activité contre les microorganismes Gram-positifs et Gram- négatifs, cette propriété étant améliorée par la très grande stabilité du composé vis-a-vis des ?-lactamases produites par une gamme de microorganismes Gram-positifs et Gram-néga- tifs Il est très bien toléré par les mammifères et on l'uti- lige largement comme antibiotique dans la pratique clinique. La céfuroxime et ses sels sont principalement intéressants en tant qu'antibiotiques injectables car ils sont peu absorbés A partir du tractus gastro-intestinal et ils sont donc pré- sents dans les sérums et dans l'urine uniquement en faibles concentrations après une administration orale On avait donc besoin d'une forme de céfuroxime qui soit capable d'être absorbée à partir du tractus gastro-intestinal après une administration orale La Demanderesse à découvert qu une estérification appropriée du groupe carboxyle de la céfuroxime améliorait l'efficacité par administration orale La présence d'un tel groupe approprié d'estérification a pour résultat une absor- ption appréciable du composé à partir du tractus gastro- intestinal, après quoi le groupe estérifiant est hydrolysé par les enzymes présentes par exemple, dans le sérum et les tissus corporels en donnant l'acide apparenté à action anti- biotique Pour avoir une efficacité par administration orale,. l'ester doit être suffisamment stable pour atteindre le site d'absorption sans dégradation importante, il doit être suf- fisamment absorbé lorsqu'il atteint le site approprié, et il doit être suffisamment susceptible d'une hydrolyse par les estérases systémiques pour que l'acide apparenté soit li- béré peu après l'absorption de l'ester Le brevet britan- nique N 1 571 683 décrit et revendique un certain nombre d'esters de céfuroxime comme ayant des propriétés qui les rendent d'un intérêt potentiel notable comme antibiotiques pouvant être administrés oralement. Il est important que les composés de cépha- losporine destinés à une administration orale soient sous une forme qui offre une grande biodisponibilité de manière que l'absorption de l'antibiotique dans le courant sanguin soit rendu maximale et que la quantité de l'antibiotique restant dans le tractus gastro-intestinal soit réduite au minimum Tout antibiotique qui n'est pas absorbé est inefficace du point de vue thérapeutique et également, par le fait qu'il reste dans le tractus gastro-intestinal, il peut provoquer des réactions, secondaires D'autres facteurs, en plus de la biodisponibilité, ont également une importance, en particulier le fait que le composé de céphalosporine soit sous une forme sensiblement pure, stable ou magasinage. En général, on a constaté jusqu'à présent que les composés decéphalosporine sous une forme cristalline très pure fournissaient le meilleur équilibre de propriétés, ces matières ayant une bonne stabilité au magasinage ainsi qu'une bonne biodisponibilité après administration. Parmi les esters décrits dans le brevet britannique No 1 571 683 précité, la Demanderesse a cons- taté que le céfuroxime-axétil était d'un intérêt particulier. Les procédés de préparation de l'ester ci-dessus, donnés en exemples dans le brevet britannique N O 1 571 683 précité produisent la matière sous forme amorphe relativement impure ou sous la forme de matière cristalline plus pure. En considération de l'expérience passée dans le domaine des céphalosporines, la Demanderessea préparé le céfuroxime-axétil en vue d'une estimation commerciale sous forme cristalline pratiquement pure Cependant, elle a constaté de façon surprenante que le céfuroxime-axétil cristallin pratiquement ne présentait pas le meilleur équilibre de propriétés pour une application commerciale et que, contrairement à l'expérience antérieure dans le domaine des céphalosporines, le céfuroxime-axétil était avantageusement utilisé sous une forme pratiquement amorphe à haute pureté La Demanderesse a donc conclu que le céfuroxime-axétil à haute pureté, lorsqu'il est sous une forme pratiquement amorphe, présente une plus grande bio- disponibilité lors de l'administration orale que lorqu'il est sous forme cristalline et qu'en outre, la forme amorphe du céfuroxime-axétil présente une stabilité chimique con- venable pendant le stockage Ceci malgré la tendance. connue des matières amorphes à présenter une stabilité chimique inerieure par raport aux matières cristallines et égalerment la tendance connue des matières amorphes très pure à la cristallisation Ainsi, contrairement aux composés de cé- phalosporine antérieurs qui ont été mis au point en vue d'une commercialisationg le céfuroxime-axétil est avanta- geusement obtenu et utilisé sous forme amorphe très pure au lieu d'une forme cristalline. Selon l'un de ses aspects, la présente inven- tion fournit du céfuroxime-axétil sous une forme pratique- ment amorphe à haute pureté Le céfuroxime-axétil selon l'invention contient de préférence moins de 5 % en poids/poids (p/p), avanta- geusement moins de 3 % p/p, d'impur etéso Il est à remarquer que les références aux "impuretés" doivent être considérées conmmne excluant les solvants résiduels provenant du procédé utilisé pour la préparation du céfuroxime-axétil de l'in- vention Tout solvant résiduel présent n'est avantageusement présent qu'en une quantité inférieure à 6 % p/p, et de préférence inférieure à 2 % p/p. Des exemples d'impuretés pouvant être présentes sont les isomères 2 de céfuroxime-waétil et les isomères E correspondants de céfuroxime-ax,étil. L'ester de cé:furoxime-axétil selon l'invention est de préférence essentiellement exempt de matière cristal- line. Le céfuroxime-axétil possède un atome de carbone asymétrique à la position 1 du groupe 1-aétoxyéthyle et peut donc exister sous la forme des isomères R et S et de leurs mélanges L'ester de céfuroxime-létil amorphe selon l'invention est de préférence sous la forme d'un mélange de ses isomères R et S, un tel mélange ayant une solubi- lité -sensiblement améliorée comparativement à l U'isomère R amorphe ou à l'isomère S amorphe seulso Le rapport molaire de l'isomère R à l'isomère S peut être par exemple compris dans la plage de 3:2 à 2 3, des valeurs de 141:1 à 0,9:1 et tout particulièrement d'environ 1:1 étant préférables. Le céfuroxime-axétil de l'invention présente avantageusement une valeur E à' à son >max dans le méthanol, _ cm ma lorsqu'on corrige le résultat pour tenir compte de la teneur en solvant, comprise entre environ 395 et 415 En outre, le céfuroxime-axétil de l'invention ayant un rap- port des isomères R à S compris entre 0, 9:1 et 1, 1:1, en particulier d'environ 1: 1, présente avantageusement une valeur &JD dans le dioxanne d'environ + 35 à:* 41 l là encore en tenant compte de la teneur en solvant Les figures 1 et 2 des dessins annexés représentent respec- tivement les spectres infrarouges et de résonance ma- gnétique nucléaire pour des échantillons de céfuroxime-axétil très pur pratiquement amorphe selon l'invention. Après absorption, le céfuroxime-axétil est converti en le céfuroxime acide antibiotique apparenté qui est connu pour, présenter une grande activité antibactérien- ne contre une large gamme d'organismes Gram-positifs et Gram-négatifs Le céfuroxime-axétil est ainsi utile dans le traitement par voie orale ou rectale de diverses mala- dies ou infections dues à des bactéries pathogènes. Le -céfuroxime-axétil selon l'invention est commodément préparé par un procédé qui constitue une autre caractéristique de la présente invention et qui consiste à récupérer le céfuroxime-axétil de sa solution dans des conditions dans-lesquelles on obtient un produit très pur pratiquement amorphe. Las techniques pouvant être utilisées pour récupérer le céfuroxime-axétil pratiquement amorphe de sa solution comprennent celles dans lesquelles un solvant est séparé de la solution, de préférence rapidement, et le produit déposé, et celles dans lesquelles le produit précipite dans la solution Des procédés impliquant l'uti- lisation de ces processus et qui sont montrés satisfai- sants comprennent le séchage par pulvérisation, le sé- chage au rouleau, la précipitation au moyen d'un solvant et la lyophilisation. Des solvants du céfuroxime-axétil sont choisis selon la technique et les conditions que l'on utilise Des solvants appropriés pour dissoudre le céfuroxime-axétil pour former des solutions à partir desquelles une récupération est possible comprennent des solvants organiques, par exemple des cétones" telles que l'acétone; des alcools, par exemple le méthanol ou l'éthanol, si on le désire sous la forme d'alcool dénaturé (par exemple IMS); l'acétonitrile; le tétrahydrofu- ranne, le dioxanne, des esters, par exemple l'acétate de mé- thyle ou d'éthyle, des solvants chlorés, par exemple le dichlo- rométhane ou le chloroforme, et des mélanges de ceux-ci, si on le désire avec d'autre solvants, par exemple l'eaupermettant, d'obtenir une phase homogène. La concentration de céfuroxime-axétil dans le solvant est avantageusement aussi élevée que possible, et est fonction du produit pratiquement amorphe que l'on veut obtenir, des concentrations préférées étant supérieures à 1 % p/p, de préférence supérieures à 10 P p/p La concen- tration maximale de céfuroxime-axétil dans le solvant dé- pend du solvant utilisé et en général elle est inférieure à 30 % p/p Par exemple, la concentration de céfuroxime- axétil dans l'acétone est commodément comprise dans la plage de 10 à 20 % p/p Les solvants peuvent éventuelle- ment être chauffés pour favoriser la solubilité et l'éli- mination du solvant La demanderesse a constaté qu'en général le cêfuroxime-axétil est suffisamment stable à la chaleur pour résister au séchage par pulvérisation et, en consé- quence, le séchage par pulvérisation est un procédé préfé- ré pour effectuer la'récupérationo Les systèmes de séchage par pulvérisation peuvent être mis en oeuvre d'une manière connue de manière à obtenir un produit amorphe essentiel- lement exempt de matière cristalline et exempt d'impuretés particulaires Les systèmes de séchage par pulvérisation en cycle fermé dans lesquels le milieu de séchage est re- cyclé sont particulièrement surs et économiques à utiliser pour obtenir le produit de la présente invention. Lorsqu'on utilise le séchage par pulvérisation, des solvants appropriés pour dissoudre le céfuroxime-axé- til avant le séchage par pulvérisation comprennent des solvants organiques, par exemple des cétones telles que l'acetone; des alcools par exemple le méthanol ou l'étha- nol, si on le désire sous la forme d'alcool dénaturé (par exemple IMS); l'acétonitrile; le tétrahydrofuranne; des esters, par exemple l'acétate de méthyle ou d'éthyle; des solvants chlorés, par exemple le dichlorométhane ou le chloroforme; et des mélanges de ceux-ci, si on le désire avec d'autres solvants, par exemple l'eau, permettant d'obtenir une phase homogène. Le gaz de séchage peut être'lair, mais celui- ci est indésirable avec des solvants inflammables, des gaz inertes tels que l'azote, l'argon et l'anhydride car- bonique étant préférés dans ce cas La température d'ad- mission du gaz dans le sécheur par pulvérisation est choi- sie selon le solvant utilisé, mais elle peut être par exemple comprise dans la plage de 50-140 C, de préférence -125 Co La température de sortie du gaz est, de même, fonction du solvant, mais elle peut être par exemple com- prise dans la plage de 45-100 C, de préférence de 50-80 Co L'utilisation de techniques d'évaporation ra- pide, en particulier l'utilisation d'un séchage par pulvé- risation, conduit également à la formation particulière- ment rapide, dans des conditions appropriées de produits ayant une gamme constante de dimensions particulaires Le produit obtenu par séchage par pulvérisation a la forme de microsphères creuses que l'on peut commodément formuler en compositions pharmaceutiques. Lorsqu'on utilise un séchage au rouleau, des solvants appropriés pour dissoudre le céfuroxime-axétil avant le séchage comprennent des cétones, par exemple liacétone; des alcools, par exemple le méthanol ou l Détha- nol,1 si on le désire sous la forme d'alcool dénaturé (par exemple IMS) lacétonitrile D le tétrahydrofuranne; le dioxanne; des esters, par exemple l'acétate de méthyle ou déthyle e des solvants chlorés, par exemple le dichlo- rométhane ou le chloroforme; et des mélanges de ceux-ci, si on le désire avec d'autres solvants, par exemple 1 eau D quand cela permet d'obtenir une phase homogèneo Pour mettre en oeuvre les techniques de séchage par pulvérisation ou au rouleau, il est très avantageux que le point d'ébullition du solvant utilisé soit infé- rieur au point de coagulation du produit de l'invention dans les conditions utilisées En général, le point d'uébul- lition du solvant est de préférence inférieur à 80 C à moins d'utiliser une pression réduite qui permet d'utili- ser des solvants de points d'ébullition supérieurs. Lorsqu'on utilise une précipitation au moyen d'un solvant, des solvants appropriés à partir desquels le céfuroxime-axétil peut précipiter comprennent des cé- tones, par exemple l'acétone; des alcools, par exemple le méthanol ou l'éthanol, si on le désire sous la forme d'alcool dénaturé (par exemple IMS) e l'acétonitrile; le tétrahydrofuranne; le dioxanne v des esters, par exemple l'acétate de méthyle ou d'éthyle des solvants chlorés, par exemple le dichlorométhane ou le chloroforme; et des mélanges de ceux-ci, si on le désire avec d'autres sol- vants, par exemple l'eau quand cela permet d'obtenir une phase homogène La précipitation peut être effectuée par l'addition de quantités appropriées d'un non-solvant du céfuroxime-axétil Des non-solvants appropriés comprennent l'eau, des alcanes et des mélanges dgalcanes, par exemple l'hexane ou de l'essence de gamme moyenne d'ébullition (par exemple 60-80 C), des éthers, par exemple l'éther d'isopropyle, ou des hydrocarbures aromatiques, par exem- ple le benzène ou le toluèneo Le solvant et le non-solvant doivent être compatibles, ci-est-à-dire qu'ils doivent au moins être partiellement miscibles et de préférence tota- lement miscibles Des exemples de combinaisons de solvant et de nonsolvant sont les suivants: dichlorométhane/éther d'isopropyle, acétate d'éthyle/essence et acétone/eau La matière solide doit être enlevée de la solution aussi ra- pidement que possible et séchée aussi rapidement que pos- sible afin d'éviter la formation de matière cristalline. Pour favoriser une récupération rapide: on peut faire bar- boter un gaz d'entraînement, par exemple l'air, dans la solution. La technique de précipitation au moyen d'un solvant peut être utilement appliquée au mélange réaction- nel restant après une réaction d'estérification dans la- quelle le céfuroxime-axétil s'est formé afin d Oobtenir directement le céfuroxime-axétil amorphe On peut y par- venir en ajoutant un solvant, par exemple un ester tel que l'acétate d'éthyle, au mélange réactionnel suivi du non- solvant approprié, par exemple l'essence. Lorsqu'on utilise la lyophilisation, des sol- vants appropriés pour dissoudre le céfuroxime-axétil avant le séchage comprennent le dioxanne et le t-butanol La température à laquelle la récupération est effectuée dé- pend du point de congélation du solvant utilisé par exem- ple O dans le cas du dioxanne, la récupération est effectuée à une température d'environ 12 C, Pour obtenir l'ester de céfuroxime-axétil sous forme très pure par les techniques ci-dessus, il faut uti- liser une matière de départ de pureté appropriée c'est-à- dire au moins aussi pure que le produit final Une telle matière de départ peut être obtenue par tout procédé commo- de, par exerm Dle par cristallisationo La solution à partir de laquelle le céfuroxime- axétil est récupéré contient de préférence un mélange des isomères R et S, de manière à obtenir le produit sous forme d'un mélange d'isomères R et S En-général, le rapport des isomères R/S du produit en solution se retrouve exactement dans le produit final obtenu, par exemple par séchage par pulvérisation, et ce rapport dans le produit final peut donc être réglé si on le désire par réglage du rapport des isomères R/S dans la solution. Du solvant résiduel peut être présent dans le produit final en diverses quantités immédiatement après évaporation ou précipitationo Ce solvant peut éventuelle- ment être éliminé par un traitement supplémentaire, par exemple par séchage sous-vide. L'ester de céfuroxime-axétil selon l'invention peut être formulé en vue d'une administration orale (com- prenant la vole buccale) ou rectale. Les compositions destinées à une administration orale sont préférables car on peut utiliser la meilleure absorption de l'ester par-le tractus gastro-intestinal. Ces compositions pharmaceutiques peuvent revêtir la forme, par exemple, de comprimés ou de gélules préparés par des techniques classiques avec des excipients pharmaceutique- ment acceptables tels que des liants, par exemple l'amidon de mais prégélatinisé, la polyvinyl-pyrrolidone ou l'hy- droxypropyl-méthylcellulose g des charges, par exemple l'amidon, le lactose, la cellulose microcristalline ou des phosphates de calcium; des lubrifiants, par exemple le stéarate de magnésium, des huiles végétales hydrogénées, le talc, la silice, des polyéthylèneglycols; des agents de désagrégation, par exemple la lécule de pomme de terre ou l'amidonglycolate de sodium; ou des agents mouillants, par exemple le laurylsulfate de sodium Des agents favori- sant l'écoulement, par exemple la silice, peuvent égale- ment être utilisés si on le désire Les comprimés peuvent être enrobés par des procédés bien connus dans la pratique. La préparation d'une composition convenant pour former des comprimés, des gélules ou des granulés peut également être réalisée par séchage par pulvérisation ou séchage au rouleau d'une suspension de céfuroxime-axétil pur amorphe avec les excipients appropriés pour lesdits comprimés, gélules ou granulés. Les préparations liquides pour administration orale peuvent revêtir la forme 9 par exemple, de solutions, sirops ou suspensions, ou bien elles peuvent se présenter sous forme d'un produit sec, soit pour être reconstitué avec de l'eau, ou autre véhicule convenable avant utili- sation pour une administration sous forme de liquide, ou pour une administration directe, puis entraînés avec de l'eau ou autre liquide approprié Ces préparations liqui- des peuvent être préparées par des moyens classiques avec des additifs pharmaceutiquement acceptables tels que des agents de mise en suspension, par exemple un sirop de sor- bitol, la méthylcellulose ou des graisses et huiles comes- tibles hydrogénées telles que l'huile de ricin hydtogénée; des émulsifiants ou des épaississants, par exemple la lé- cithine, les stéarates d'aluminium ou la gomme arabique; des véhicules non aqueux, par exemple l'huile d'amande, l'huile de noix de coco fractionnée, des'esters huileux ou l'alcool éthylique; et des conservateurs par exemple les p-hydroxybenzoates de méthyle ou de butyle ou l'acide sorbique; et des agents aromatisants ou édulcorants appro- priéso Le céfuroxime-axétil de 1 'invention peut égale- ment être formulé en compositions pour la voie rectale telles que des suppositoires ou des énémas de rétention, contenant par exemple des bases de suppositoires classi- ques telles que le beurre de cacao ou autres glycérides. Les compositions peuvent contenir de 0,1 à 99 % d'ingrédient actif, de manière appropriée de 30 à 90 % pour des comprimés et des gélules et 3 à 50 % pour des mé- dications liquideso Les compositions sous forme de dose unitaire contiennent de manière appropriée 50 à 500 mg d'ingrédient actif Les doses utilisées pour le traitement d'un être humain vont de 100 à 3000 mg par jour, par exem- ple 1000 à 1500 mg par jour pour des adultes et de 250 à 1000 mg par jour pour des enfants, bien que la posologie exacte dépende, entre autres, de la fréquence d'adminis- trationo Selon un autre de ses aspects, l'invention fournit donc une composition pharmaceutique comprenant le céfuroxime-axétil sous forme pratiquement amorphe à haute pureté, en mélange avec un ou plusieurs véhiculés et/ou excipients-pharmaceutiqueso Ces compositions sont de pré- férence destinées à être absorbées par l'intermédiaire du tractus gastrointestinal, par exemple par administration orale Dans une forme de réalisation préférée, ces compo- sitions contiennent avantageusement la forme ester de cé- furoxime de l'invention essentiellement exempte de matière cristalline. Selon encore un autre aspect, l'invention four- nit un procédé pour combattre les infections bactériennes chez les êtres humains et les animaux, qui' consiste à ad- ministrer à l'être humain ou à l'animal, par voie orale ou rectale, une quantité efficace d'une forme pratiquement amorphe à haute pureté de céfuroxime-axétil. Les exemples non limitatifs suivants illustrent l'invention, Dans tous ces exemples, les matières de départ constituées par le céfuroxime-axêtil utilisées sont sous forme cristalline très pure Ces matières de départ peuvent par exemple être obtenues par des procédés décrits dans le brevet britannique N 1 571 683, ou en variante, elles peuvent être préparées par cristallisation de céfurox Lme- axétil très pur dans un solvant organique, par exemple un ester tel que l'acétate d'éthyle en mélange avec un éther tel que l'éther isopropylique ou un hydrocarbure aromatique tel que le toluene; ou un alcool aqueux tel que l'alcool dénaturé industriel La cristallisation peut commodément être effectuée entre O 10 et 30 C. La céfuroxime sodique très pure que l'on peut utiliser comme matière de départ pour le procédé d'estéri- fication ci-dessus peut: entre autres: être obtenue par réaction de l'acide ( 6 R,7 R)-3-hydroxyméthyl-7-l(Z)-2-(fur- 2-yl)-2-méthoxyimino-acétamido 7-céph-3-ème-4-carboxylique avec l'isocyanate de chlorosulfonyle dans un acétate d'al- kyle comme solvant à une température comprise entre -25 C et ±10 C, puis hydrolyse in situ à une température comprise entre + 10 et + 30 C et cristallisation par addition de 2- éthylhexanoate de sodium dans l'acétone ou l'acétate de méthyle comme solvant. La préparation de ces matières est illustrée dans les préparations suivanteso Toutes les températures sont exprimées en Co Préparation 1. Céfuroxime sodiqueo On ajoute 226 ml d'isocyanate de chlorosulfonyle à une solution de 10 ml de triéthylamine dans 3,8 1 d'acé- tate de méthyle On refroidit la solution limpide résul- tante à -15 et on ajoute en 10 minutes une suspension de 763 g d'acide ( 6 R,7 R)-3-hydroxyméthyl-7-(Z) -2-(fur-2-yl)- 2-mêthoxyimino-acétamidolcéph-3-ème-4-carboxylique-dans 2,3 1 d'acétate de méthyle, refroidi au préalable à -150 o On rince le solide résiduel avec 700 ml d'acétate de mé- thyleo On agite le mélange à -5 pendant 30 minutes' pour obtenir au bout de 10 minutes une solution limpide On ajoute rapidement 1,2 1 d'eau à 18 au mélange réactionnel', la température S uélevant rapidement à 10 puis lentement à 17 o On agite le mélange pendant 60 minutes à 15 pour ob- tenir une suspension blanche épaisse On ajoute 3,6 1 d'a- cêtate de méthyle, ce qui est suivi d'une addition réguliè- re d'une solution de 288 g d'hydroxyde de sodium dans 5,2 1 d'eau On obtient ainsi un mélange limpide à deux phases à 26 ayant un p H de 2, 35 On-sépare les phases et on lave la phase organique supérieure avec une solution de 600 g de chlorure de sodium dans 2 1 d'eau On lave successive- ment les deux phases aqueuses avec 'de l'acétate de méthyle ( 2 1) o On réunit les phases organiques, on les agite avec 76 g de charbon Norit SX Plus pendant 30 minutes et on les filtre sur un lit de Hyflo Supercel, le lit étant lavé avec 1,5 1 d'acétate de méthyle On combine le filtrat et les liqueurs de lavage et on agite à 20 tout'en ajoutant en 20 minutes une solution de 338 g de 2-éthylhexanoate de sodium dans un mélange de 2 1 d'acétate de méthyle et de ml d'eau pour obtenir une suspension blanche ayant un p H de 5,50 On agite la suspension pendant 10 minutes et on la filtre, et on lave le gàteau avec 5 x 1 litre dlacétate de méthyle, on le sèche par aspiration puis à 30 sous vide pendant 24 heures pour obtenir 851,9 g de céfuroxime sodique; O 7 D 2 + 60 , (c 0,5; tampon 0,1 M p H 4, 5); kmax * (i 20) 273 nm (Ecm 387); impuretés par CLHP (chromatogra- phie en phase liquide sous haute pression) 2,0 %. Préparation 2. Céfuroxime-axétil cristallin. On ajoute 12,5 g de bromure de (RS)-l-acétoxy- éthyle à un mélange sous agitation de 20 g de céfuroxime sodique dans 110 ml de diméthylacétamide à O C On agite le mélange à + 1 pendant 90 minutes et on ajoute 0,5 g de carbonate de potassium On poursuit l'agitation pendant encore 2 heures à 1-30 et on ajoute le mélange réactionnel à un mélange sous agitation rapide de 200 ml d'acétate d'éthyle et de 200 ml de solution aqueuse à 3 % de bicar- bonate de sodium pour détruire tout excès de bromure de l-acétoxyéthyle Au bout de 1 heure, on sépare la phase organique ( 1,5 % d'isomère A 2 par CLHP), on la lave avec ml d'acide chlorhydrique N et 30 ml de solution aqueuse à 20 % de chlorure de sodium contenant 2 % de bicarbonate de sodium On lave successivement les trois phases aqueuses avec 100 mi d'acétate d'éthyle On agite les extraits orga- niques réunis pendant 30 minutes avec 2 g de charbon (Norit SX Plus), on filtre à travers un lit de kieselguhr qu'on lave avec 2 fois 25 ml d'acétate d'éthyle -On évapore sous vide le filtrat et les liqueurs delavage réunis jusqu à g et on agite à la température ambiante pendant 1 heu- re jusqu'à ce que la cristallisation se soit bien établie. On ajoute 250 ml d'éther diisopropylique en 45 minutes pour achever la cristallisation et on continue d'agiter pendant encore 1 heure On recueille le produit par fil- tration, on le lave avec 159 Oml d'un mélange à 2:1 d'éther diisopropylique et d'acétate d'éthyle et on laisse sécher pendant une fin de semaine sous vide à 50 pour obtenir 19,3 g de céfuroxime-axétil cristallin. Teneur en solvant (CGL lchromatographie de par- tage gaz/liquidel): 0,2 % p/p, Impuretés par CLHP 1 18 %, Rapport entre les isomères (CLHP) 1109:1 la 7 D ( 1 % dans 1 % le dioxanne) + 370 Elcm ( 278, Me OH) 389 Les isomères R et S individuels de l'ester 1- acétoxyéthylique de céfuroxime sont désignés par commodité par les lettres A et B, ces lettres étant utilisées pour désigner les isomères respectifs comme dans le brevet bri- tannique N 1 571 683 précitoé L'identité des isomères A et B n'a pas été attribuée Les rapports entre les iso- mères donnés dans les exemples suivants sont exprimés par A:Bo Les températures sont exprimées en Co Les valeurs don e por 1 % données pour Eicm et le-D ne sont pas corrigées en tenant compte de la teneur en solvant. Exemple 1. On place une solution acêtonique à 10 % en poids/volume d'un mélange d'isomères R et S de céfuroxime- axétil dans un sécheur Niro Mobile Minor Spray, vendu par Niro Copenhagen, Danemark, en utilisant l'air comme gaz de séchage et un atomiseur rotatif fonctionnant à-environ 35 000 tr/mino Les températures d'entrée et de sortie du gaz sont de 124 et 70 respectivement On obtient une récupération de 75 % p/p de produit séché par pulvérisa- tion L'aspect microscopique est typique pour un produit séché par pulvérisation (sphères creuses) Le titrage ef- fectué par CLHP est de 97 % p/p et les impuretés détermi- nées par CLHP sont de 2,0 % p/p, ces deux valeurs étant calculées à sec à partir d'une teneur mesurée en solvant de 0,15 % p/p (CGL) et la teneur en eau de O 08 % p/p (Karl Fischer) Le rapport entre les isomères est de 1,04:1 (CLHP) Le spectre infrarouge (Nujol), vmax 3480-3210 (complexe NHNH 2), 1782 (e-lactame), 1760 (acetate), 1720 (groupe 4-ester), 1720 et 1594 (carbamate) et 1676 1 % et 1534 cm 1 ( 7-amido) f#f D (dioxanne) + 38 ; Elcm (Me OH) 398 L'analyse de poudre par diffraction de rayons X dans un capillaire d'un diamètre de 0,3 mm par la mé- thode de Debye Scherrer dans un appareil photographique d'un diamètre de 114,6 mm par exposition pendant 3 heures à un rayonnement Cu K donne un halo simple (absence de cristaux, confirmant la nature amorphe du produit). Exemple 2. On dissout un mélange d'isomères R et S de céfuroxime-axétil ( 20,25 g) dans 200 mi d'acétone à la température ambiante On clarifie la solution à travers du verre fritté et on la pompe à travers une buse d'ato- miseur à deux fluides, en utilisant de l'azote sous 1 x 105 Pa comme fluide d'atomisation, dans la chambre de séchage en verre d'un appareil de séchage par pulvérisa- tion Mini Spray HO en utilisant un mélange à environ 50:50 d'air et d'azote comme gaz de séchageo Les températures d'entrée et de sortie du gaz sont respectivement de 75 et La récupération est de 14,1 g ( 70,5 %) de matière amorphe contenant 1 % p/p dvacétone (CGL) Les impuretés (par CLHP) représentent 1,7 % p/p y compris 0,2 % p/p de composé céph-2-em Le rapport des isomères est de 1,03:1. 9 max (Nujol) analogue à celui de la figure 1 f/7 D (dio- xanne) + 35 ; Elc (Me OH) 386. Exemple 3. On place une solution acétonique à 15 % de cé- furoxime-axétil (mélange à environ 1:1 des isomères R et S) dans un sécheur par pulvérisation en cycle fermé en utili- sant l'azote comme gaz de recyclage et un atomiseur à roue rotative fonctionnant à 24 000 tr/min Les températures d'entrée et de sortie de gaz sont respectivement de 105 et 700 Le gaz de recyclage est refroidi pour éliminer la plus grande partie de l'acétone évaporée La récupération de produit amorphe est de 90 % avec une teneur en acetone de 1,0 % p/p (CGL), eau 0,7 p/p (Ka-arl Fischer), taux d'im- puretés par CLHP 1,3 p/p Spectres infrarouges (Nujol) (plaques de K Br) et RMN (DMSO-d 6) sont indiqués sur les figures 1 et 2 respectivement lm JD (dioxanne) + 38 ; E 11 (Me OH) 398. E '- 1 cm D'autres exemples 4 à 17 illustrant la prépa- ration de céfuroxime-axétil amorphe sont donnés sur le tableau suivant Le procédé utilisé dans ces exemples est analogue à celui de l'exemple 2 Le spectre infrarouge (Nujol) de chacun des produits est analogue à celui indi- qué sur la figure 1. Ex Solvant Tempé Tempé Rapport des Impuretés 7 D Elc% d'en de N rature rature isomères (% p/p) (dioxanne) (Mde OH) trée sortie produits Oc Oc 4 Acétone/eau 62 55 1,05:1 1,8 + 35 390 Alcool dénaturé industriel 80 70 1,05:1 1,9 + 36 386 6 Acétonitrile 72 63 1,00:1 1,6 + 35 389 7 Tétrahydrofuranne 75 65 1,04:1 2,0 + 34 384 8 Acétate de méthyle 63 55 0,94:1 1,3 + 35 387 9 Chloroforme (fixé à l'eau) 64 58 1,02:1 1,5 Acétone/eau 70 50 1,05:1 1,2 11 Acétate d'éthyle/eau 72 64 1,02:1 1,4 12 Acétate de méthyle/eau 64 57 0,98:1 1,2 13 Méthanol/eau 67-70 55-59 1, 04:1 1,9 14 Méthanol/acétone 63 54 1,03:1 1,4 Ethanol/acétone 83 65 1, 02:1 1,6 16 Acétone/acétate de méthyle 63 54 1,02:1 1,6 17 Acétone 85-90 75 B pur 0,9 + 9 387 : 2531-087 Exemple 18 o Une solution de 77 g d'ester 1-acétoxyéthylique de céfuroxime cristallin purifié (isomère A) dans 1,8 litre d'acétone est-séchée par pulvérisation comme dans l'exemple 2 à travers un ajutage d'atomiseur à deux fluides sous une pression d'azote d'atomisation de 50 k Pa La température d'entrée du gaz est de 85-90 C et la température de sortie d'environ 75 ' Le produit ( 39 g) a une teneur en acétone de 015 % p/p et une teneur en impuretés, déterminée par CLHP, de 208 % p/p Le spectre infrarouge (Nujol) confirme la nature amorphe du produit Une analyse de poudre par diffraction de rayons X révèle quelques raies faibles pou- vant suggérer la présence de quelques cristaux la D (dio- xanne) + 64 E 1 (Me OH) 386 1 cm Exemple 19 o Un mélange des isomères R et S de céfuroxime- axétil ( 10 g) est dissous dans 70 ml d'acétone chaude et évaporé sous vide pour former une mousse Celle-ci est cas- sée et séchée pendant 16 heures environ sous vide à 40 en donnant 9,8 g de céfuroxime-axétil qui est révélé amorphe par spectroscopie infrarouge (Nujol)' (qui est analogue à celui de la figure l) et-examen microscopiqueo La teneur en acétone (CGL) est de 2,9 % La teneur en impuretés dé- terminée par CLHP est de 3,4 % p/p et le rapport entre isomères est de 1, 14:lo En suivant le processus ci-dessus, on obtient également le céfuroxime-axétil en utilisant de l'alcool dénaturé industriel (IMS), le méthanol et l'acétate dé- thyle comme solvantso Exemple 20 Un mélange à environ 1:1 des isomères R et S de céfuroxime-axétil ( 5 g) est dissous dans 200 mi d'acétate d'éthyle bouillant et concentré à la pression atmosphéri-. que jusqu'à 70 mlo La solution est maintenue à l'état chaud et ajoutée goutte à goutte en 27 minutes à de l'éther - 2531087 de pétrole sous agitation rapide (point d'ébullition 60- ; 560 ml) maintenu au-dessous de 3 Après l'addition, on agite la suspension pendant encore 10 minutes, on la filtre, on la lave par déplacements avec de l'éther de pétrole (point d'ébullition 60-80 ) et la sèche sous vide à 50 pour obtenir 4,5 g de céfuroxime-axétil amorphe. Teneur en solvant (CGL) 0,25 % p/p; fc D ( 1 % dans le dioxanne) + 390 E 1 cm (Me OH) 388 L'examen microscopique confirme la nature amorphe du produit. Exemple 21. On dissout un mélange à environ 1:1 des isomè- res R et S de cé-furoxime-axétil ( 6 g) dans 240 ml de di- chlorométhane bouillant, puis on laisse refroidir et on filtre On distille le filtrat jusqu' un volume de 55 ml à la pression atmosphérique et on l'ajoute goutte à goutte, en 42 minutes, à de llëther diisopropylique sous agitation rapide ( 195 ml) refroidi au-dessous de 3 C Après l'addi- tion, on agite la suspension pendant encore 15 minutes, on la filtre, on la lave avec 100 ml d'éther diisopropyli- que et on la sèche pendant 16 heures environ sous vide à pour obtenir 5,5 g de céfuroxime-axétil amorphe L'exa- men microscopique suggère moins de 1 % de matière cristal- line É/D ( 1 O dans le dioxanne) + 36 , E 1 % 387 (Me OH). lcm Teneur en solvant (CGL), 1 %. Exemple 22. On introduit de l'eau froide à un débit de 750 ml min-1 dans un bécher en matière plastique d'une conte- nance de 5 litres équipé d'une ouverture horizontale immé- diatement au-dessous de son bord supérieur L'eau est agi- tée au moyen d'un agitateur à palettes ( 600 tours/minute) pendant que l'on y fait barboter un courant d'azote à rai- son de 12 1 min Une solution d'un mélange des isomères R et S de céfuroxime-axétil ( 200 g) dissous dans un mé- lange chaud ( 45 ) de 600 ml d'acétone et de 66 ml d'eau est ensuite ajouté au moyen d'une pompe péristaltique à un débit constant en 13 minutes dans le tourbillon de l'eau. Le céfuroxime-axétil amorphe précipité est véhiculé à tra- vers l'ouverture horizontale sous forme d'une mousse et recueilli Le céfuroxime-axétil amorphe obtenu est récolté immédiatement et séché jusqu'a un poids constant sous vide à 55 en donnant 170 g de produit Teneur en solvant (CGL) avec une faible teneur en matière cristalline. Exemple 23, On dissout un mélange à environ 1:1 des isomères R et S de céfuroximeaxétil ( 100 g) par agitation dans 1 litre d'acétone bouillant et en chauffant à 40 Les rou- leaux d'un sécheur sont chauffés à 75 , de la vapeur d'eau (sous pression de 2 bar) est introduite dans la chemise et on applique un vide de 737 mm à l'appareil En utilisant une vitesse des rouleaux de 1,75 tr/min, la solution pré- parée de céfuroxime-axétil est aspirée à raison d'environ ml/mino Le produit est séparé des rouleaux avec un couteau et recueilli avec un rendement de 94 % p/p o Le taux d'impuretés (CLHP) est de 1 % p/po La teneur en solvant (CGL) est de 1,6 % p/p La cristallographie aux rayons X et le spectre infrarouge (Nujol) montrent que la matière est amorphe Le spectre infrarouge (Nujol) est analogue à celui indiqué sur la figure 1. Exemple 24. On lyophilise une solution d'un mélange à envi- ron 1:1 des isomères R et S de céfuroxime-axétil ( 10 g) dans 100 ml de dioxanne pour obtenir 10,7 g du produit qui contient 5,5 % p/p de dioxanne après avoir été passé au tamis de 0,40 mm d'ouverture de maille et séché en étuve sous vide à 50 pendant 20 heureso Le spectre infra- rouge (Nujol) est analogue à celui montré sur la figure 1. Le spectre infrarouge (Nujol) et l'examen microscopique confirment la nature amorphe du produit fa 7 D ( 1 % dans 1 % le dioxanne) + 37 ; Elcm (Me OH) 388. 1 cm Exemple 25. On refroidit à 14 une suspension de 20 g de céfuroxime sodique dans 100 ml de diméthylacétamide et on ajoute 10 ml de bromure de (RS)-lacétoxyéthyle On agite le mélange à 14 pendant 45 minutes avant d'ajouter 0,5 g de carbonate de potassium anhydre Après une agitation supplémentaire de 45 minutes, on ajoute 200 ml d'acétate déthyle et 200 ml d'une solution à 3 % de bicarbonate de sodium On agite le mélange à la temperature ambiante pen- dant 1 heure et on laisse les deux phases se séparer On lave la phase aqueuse avec 100 ml d'acétate d'éthyle et on lave ensuite les deux phases organiques successivement avec 100 ml d'acide chlorhydrique M et 30 ml de solution à 20 % de chlorure de sodium On agite les phases organi- ques réunies avec du charbon ( 2 g) pendant 30 minutes avant la filtration On concentre le filtrat sous vide jusqu'à 176 ml On ajoute 1,9 ml d'eau au concentré qui est introduit en 15 minutes dans l,76 ml d'essence (Eb. -80 ) sous agitation On sépare par filtration le pro- duit précipité et on le lave avec un mélange de 105 ml d'essence et 12 ml d'acétate d'éthyle, puis 118 ml d'es- sence Par séchage à 40 sous vide, on obtient 17,9 g de céfuroximeaxétil: Solvants (CGL), acétate d'éthyle 1,6 %, essence 1,5 %, impuretés (CLHP) 4,1 % p/p, rapport entre isomères 1,06:1; Ecm% (Me OH) 364 Le spectre infrarouge isore 1,6:1; lcm dans le Nujol est typique de la matière amorphe. Exemple 26. On introduit 2000 ml d'acétone, 324 ml d'eau et 36 ml d'alcool dénaturé industriel (IMS) dans un ballon sous agitation, puis on ajoute un mélange à environ 1:1 des isomères R et S de céfuroxime-axétil ( 600 g) Le con- tenu du ballon est chauffé à 42 et agité jusqu'à dissolu- tion du solide Immédiatement avant utilisation, la solu- tion est refroidie à 20 O On ajoute 2000 ml d'eau dans le récipient de précipitation et on agite à 800 tours/minute On introduit de l'azote dans la solution au centre du tourbillon provo- qué par l'hélice à raison de 10 1 min On ajoute simultanément 850 ml/min d'eau et ml/min de solution de céfuroxime-axétil dans la zone turbulente du récipient de précipitation Le trop-plein de cet appareil est dirigé sur un tamis à ouverture de mailles de 125 micromètres sur-lequelle produit précipité, sous ia forme d'une bouillie aérée, est retenu et les liqueurs lim- pides passentpour être jetées. Le produit précipité recueilli sur le tamis est transporté sur un filtre muni d'un papier-filtre en vue d'une déshydratation supplémentaire Le produit débarrassé de l'eau est séché sous vide à 45 jusqu'à ce que la teneur en humidité soit réduite à moins de 1 % en donnant 410 g de céfuroxime-axétilo Le spectre infrarouge (Nujol) confirme la nature pratiquement amorphe du produit. Exemples de préparations pharmaceutiques 1 Comprimé Composition mg/comprimé Céfuroxime-axétil selon l'invention 300,00 (équivalent à 250 mg de céfuroxime) Amidon 1500 (Colorcon, Inc) (amidon prégélatinisé) Amidon-glycolate de sodium Laurylsulfate de sodium Polyéthylène-glycol 6000 (micronisé) Silice 161, 5 ,0 ,0 7,5 1,0 - Poids total 500,0 Procédé de préparation Le polyéthylèneglycol, le laurylsulfate de sodium, l'amidon-glycolate de sodium et la silice sont passés au tamis de 0,250 mm d'ouverture de maille et mé- langés avec une petite quantité de l'ingrédient actif. On mélange ensuite le tout avec l'amidon et le reste des ingrédients et on prépare des magdaléons par compression directe Les magdaléons sont désagrégés par passage au tamis de 0,84 mm d'ouverture de maille et les granulés résultants sont comprimés en utilisant des poinçons con- caves normaux jusqu'à obtention d'un poids de comprimé de 500 mg - On peut appliquer sur le comprimé une pellicule de dérivés de cellulose avec des plastifiants, des colo- rants et des conservateurs si nécessaire, en utilisant des procédés faisant appel à des solvants aqueux ou orga- niques. A titre de variante à l'étape préliminaire de formation de magdaléons, le méllange peut être densifié par compactage au rouleau ou bien il peut être comprimé direc- tement en comprimés. 2 Gélule Composition mg/gélule Céfuroxime-axétil selon l'invention 300,00 (équivalent 250 mg de céfuroxime) Cellulose microcristalline 24,75 Huile végétale hydrogénée 4,0 Laurylsulfate de sodium 9,0 Silice 1,25 Procédé de préparation L'ingrédient actif est densifié par compactage au rouleau, puis passé successivement sur un tamis à mailles de 0,84 mm, de 0,59 m et de 0,250 mm d'ouverture de maille Les ingrédients restants sont passés au tamis de 0,250 mm d'ouverture de maille avec une petite quantité de l'ingrédient actif puis mélangés avec le reste de l'in- grédient actif. à Le mélange est ensuite introduit dans des gélu- les de gélatine dure de dimension O jusqu'à un poids de 339 mgo 3 Poudre pour suspension orale (en sachets) Composition (par sachet) Céfuroximeaxétil selon l'invention 300 mg Laurylsulfate de sodium 25 mg Hydroxypropyl-méthyl-cellulose 90 mg Arôme d'orange séché par pulvérisation 150 mg Sucre en poudre, qos 2220 mg Procédé de préparation Le'laurylsulfate de sodium, l hydroxypropyl- méthyl-cellulose et l'arôme sont triturés avec l Vingré- dient actif Ce mélange est ensuite encore mélange avec le sucre en poudre, l'addition de ce dernier s'effectuant en deux étapes Le poids correct peut ensuite être intro- duit dans un récipient approprié, par exemple un sachet de feuille stratifiée appropriée qui est scellé par la chaleur Avant utilisation, la poudre est reconstituée par addition d'environ 15 ml d'eau peu avant l'adminis- tration - 4 Suspension huileuse Composition (pour une ddse de 5-ml) - Céfuroxime-axétil selon l'invention 300 mg Lécithine 35 mg Hydroxybenzoate de butyle 2 mg Monostéarate d aluminium 25 mg Distéarate d'aluminium 25 mg Huile de ricin hydrogénée 17,5 mg Arôme liquide 25 mg Sucre glace 1500 mg Chlorure de sodium 2,5 mg Huile de'noix de coco fractionnée, jusqu à 5 ml Procédé de préparation On'chauffe une partie de l'huile de noix de coco, puis on ajoute à l'huile, en mélangeant, la lécithine, l'hydroxybenzoate de butyle, les stéarates d'aluminium l'huile de ricin hydrogénée, le sucre glace et le chlorure de sodium. On refroidit le-mélange et on ajoute le céfuro- xime-axétil et l'arome On ajoute ensuite le reste de l'huile de noix de coco et on mélange-la préparation et on la raffine. Essai d'activité biologique Dans des essais d'absorption par voie orale sur des volontaires humains, on a administré 250 mg de céfuroxime- axétil de haute pureté, pratiquement amorphe à 12 volontaires et on a déterminé les concentrations dans le sérum et le taux de récupération dans l'urine La concentration dans le sérum atteint un pic de 6,0 mg/l après deux heures et un taux de récupération dans l'urine de 49,2 % de céfuroxime indiquent clairement l'absorption et l'hydrolyse in vivo du céfuroxime- *axétil L'hydrolyse in vivo du céfuroxime-axétil fournit du céfuroxime et fournit ainsi l'activité du céfuroxime lui- même. Les valeurs de CIM pour le céfuroxime, exprimées en-moyennes géométriques, vis-à-vis d'une gamme d'organismes sont données ci-dessous en micrograimmes/ml O ORGANISME îqb Essayé CIM STAPH AUREUX 152 0,2 STREP AGALACTIAE 250 0,1 E COLI 100 4,5 PR MIRABILIS 106 1,6 K PNEUMONIAE 99 8,3 SALMONELLA SPP 25 4,7 SHIGELLA SPP 21 3,3 Hlo INFLUENZAE 42 0, 7 N GONORRHOEAE 222 0,002-2 -2531087 Toxicité Le céfuroxime-axétil de l'invention a été admi- nistré par voie orale à des souris ( 10 de chaque sexe) à une dose de 6 g/kg de poids corporel Tous les animaux ont survécu, ce qui indique une DL 50 supérieure à 6 g/Kg REVENDICATIONS 1 Céfuroxime-axétil, caractérisé en ce qu'il est sous forme pratiquement amorphe, à haute pureté. 2 Produit selon la revendication 1, caracté- risé en ce qu'il contient moins de 5 % p/p d'impuretés. 3 Produit selon la revendication 1 ou 2, ca- ractérisé en ce qu'il est essentiellement exempt de matiè- re cristalline. 4 O Produit selon lune quelconque des revendi- cations i à 3, caractérisé en ce qu'il est sous la forme d'un mélange d'isomères R et S, le rapport des isomères R à S étant compris entre 3:1 et 2:3 o Produit selon la revendication 4, caractéri- sé en ce que le rapport des isomères R à S est compris entre 0,9:1 et 1,1:1. 6 Produit selon l'une quelconque des revendi- cations 1 à 5, caractérisé en ce qu'il est sous la forme de microsphères creuses. 7 Procédé de préparation d'une forme pratique- ment amorphe à haute pureté de céfuroxime-axétil, caracté- risé en ce qu'il consiste à séparer le céfuroxime-axétil de sa solution dans des conditions permettant l'obtention d'un produit pratiquement amorphe à haute pureté. 8 Procédé selon la revendication 7, caractéri- sé en ce que la solution contient un solvant organique choisi parmi les cétones, les alcools, l'acétonitrile, le tétrahydrofuranne, le dioxanne, les esters, les solvants chlorés, les mélanges homogènes d'au moins deux des sol- vants précités et les mélanges homogènes d'au moins un des solvants précités et d'eau. 9 Procédé selon la revendication 7 ou 8, ca- ractérisé en ce que la concentration de céfuroxime-axétil dans la solution avant la récupération est d'au moins 1 % p/p o Procédé selon la revendication 7 ou 8, ca- ractérisé en ce que la concentration de céfuroxime-axétil dans la solution avant la séparation est d'au moins 10 % p/p. 11 Procédé selon l'une quelconque des revendi- cations 7 à 150, caractérisé en ce que la séparation est effectuée rapidement par séchage par pulvérisation, éven- tuellement en Drésence d'un gaz de séchage inerte. 12 Procédé selon l'une quelconque des revendi- cations 7 à 10, caractérisé en ce que la séparation est effectuée par séchage au rouleau, précipitation à l'aide d'un solvant ou lyophilisation. 13 Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient du céfuroxime-axétil sous forme prati- quement amorphe à haute pureté en mélange avec un ou plu- sieurs véhicules et/ou excipients pharmaceutiques, et elle est sous une forme destinée à l'absorption par le tractus gastro-intestinal.