Brevet FR2526163A1 — publié le 19831104

DISPOSITIF POUR COLORER UN ECHANTILLON Bl OLOGIQUE La présente invention se rapporte généralement à l'examen au microscope d'échantillons biologiques montés sur des lamelles en verre, et elle concerne plus particulièrement la coloration de tels échantillons biologiques en vue de l'examen au microscope La coloration et l'examen d'échan- tillons biologiques se produisent quotidiennement dans un grand nombre de laboratoires d'hôpitaux, salles d'urgence, cliniques, départements biologiques, banques du sang, et de nombreux cabinets médicaux, cabinets de vétérinaires et hôpitaux Les lamelles utilisées sont en verre et ont généra- lement une dimension frontale de 25,4 mm x 76,2 mm ( 1 pouce X 3 pouces) et une épaisseur de 1 mm Certaines lamelles ont une dimension frontale légèrement différente de 25 mm x 75 mm ou une épaisseur différente de 1,2 nm Les échantillons à colorer et à examiner peuvent, par exemple, être des tissus, du crachat de sang ou de l'urine Les échantillons biologi- ques sont usuellement étendus sur la lamelle en verre, et on les laisse sécher à l'air, souvent avec fixation à la chaleur ou parun réactif. Pour colorer un échantillon biologique fixé sur une lamelle en verre, il est nécessaire d'amener un liquide ou réactif de coloration en contact avec l'échantillon sur la lamelle Dans le cas présent, on comprendra que le terme coloration comprend l'application à l'échantillon de l'un des divers liquides ou réactifs pendant un processus de coloration, même si un liquide particulier ne produit pas lui-même la coloration réelle. Dans un procédé de coloration selon l'art antérieur qui est largement utilisé, la lamelle est placée horizontale- ment, l'échantillon dessus, sur un support suspendu dans une cuve On verse ou on fait s'écouler goutte à goutte le liqui- de de coloration contenu dans une bouteille, sur la lamelle pour inonder l'échantillon Cette technique provoque le gaspillage du liquide coiteux de coloration, car on exprime ou on fait s'égoutter en général bien plus de liquide qu'il n'est réellement nécessaire pour la coloration De même, la cuve se trouve colorée et peu agréable à voir après un cer- tain temps, du fait du liquide qui déborde Les doigts de l'opération se trouvent colorés lorsque l'échantillon est repris Lorsque les réactifs de la bouteille restent dans la zone de la cuve pendant un temps prolongé, le fluide peut se détériorer ou être contaminé, intentionnellement ou acciden- tellement. Il faut gé%néralement de 6 cm 3 à 8 cm 3 de chaque réactif potr accomplir un examen spécifique avec la techni- que ci-dessus. Un autre procédé selon l'art antérieur, qui est moins courant, consiste à placer la lamelle ou les lamelles verticalement dans un support, puis à plonger le support avec la lamelle dans un récipient d'un liquide de coloration. Cela utilise également une quantité de colorant qui est bien supérieure à celle réellement nécessaire pour la coloration, et, si le réactif est utilisé pour plus d'une lamelle, il se produit souvent une contamination De même, cette technique implique que l'on verse dans des récipients du liquide conte- nu dans des bouteilles et que l'on verse dans des cuves le liquide de coloration contenu dans des récipients. Un troisième processus, qui est encore moins cou- rant, consiste à utiliser un dispositif automatique de colo- ration Les grands h 6 pitaux ayant des capacités importantes sont plus enclins à utiliser ce procédé Les machines qu'im- plique un tel procédé automatisé sont extrêmement conteuses et ne peuvent être justifiées que si la quantité de colora- tion est extrêmement importante Le prix de telles machines empêche leur utilisation dans la plupart des opérations de coloration En outre, les dispositifs automatisés de colora- tion ne sont disponibles que pour une ou deux couleurs. Selon l'invention, une lamelle avec un échantillon qui y est fixé, est insérée verticalement, dans le sens de la longueur, dans une chambre délimitée formée à l'intérieur d'un récipient La lamelle est, de préférence, guidée et placée à l'intérieur de la chambre sur des guidages Une pellicule mince d'un liquide de coloration se forme sur chaque face de la lamelle, lorsque celle-ci déplace une masse au fond de la chambre dans les espaces délimités adja- cents aux faces de la lamelle Le volume du liquide de colo- ration utilisé est à peu près équivalent à la quantité de liquide nécessaire pour former la pellicule mince sur chaque face de la lamelle Cette quantitépeut être aussi faible que 1 cm 3. Lorsqu'il est obturé, le récipient est rendu invio- lable de sorte que son contenu ne peut être adultéré avant utilisation, empêchant ainsi une fausse lecture de la lamelle colorée. Lorsque la lamelle colorée est retirée verticale- ment de la chambre, le liquide de coloration s'égoutte de la lamelle et retourne à la masse au fond de la chambre Le récipient et le liquide utilisé peuvent alors être jetés La lamelle peut être insérée et retirée de la chambre, et subsé- quemment manipulée, par une partie de la lamelle qui s'étend de manière contenue au-dessus de la chambre - Il faut sensiblement moins de liquide de coloration que dans l'art antérieur; un lot frais du réactif est prévu pour chaque échantillon; les cuves ne sont pas colorées puisque le liquide reste à l'intérieur de la chambre; les doigts de l'opérateur ne se trouvent pas colorés, puisque le liquide de coloration reste à l'intérieur de la chambre; et comme la couleur est pré-emballée, le procédé est plus rapide et plus efficace. Le récipient est un récipient jetable destiné à un seul usage, et il a un couvercle ou bouchon qui obture la chambre et le liquide jusqu'à cet usage Le récipient est rendu inviolable, ce qui donne l'assurance que le processus de coloration donnera un résultat vrai Quand la coloration -2526163 est terminée, la chambre peut facilement être de nouveau ob- turée avant de s'en débarasser pour éviter toute éclaboussure ou fuite subséquente de la couleur hors de la chambre. Le mode de réalisation ci-dessus se rapporte à une seule lamelle, tandis que le mode de réalisation qui sera décrit maintenant se rapporte à la coloration simultanée d'une multiplicité de lamelles. Le concept inventif de l'utilisation d'une pellicu- le mince d'un liquide de coloration sur chaque face de la lamelle, o la pellicule estformée à partir d'une masse limitée du liquide de coloration qui est déplacée par l'immer- sion de la lamelle elle-même dans le récipient, reste le même que cidessus, mais le présent mode de réalisation permet d'utiliser le concept de base avec une multiplicité de lamel- les. La présente invention utilise un support qui posi- tionne, espace et fixe les lamelles les unes par rapport aux autres. L'espacement et le positionnement des lamelles dans le support sont critiques pour obtenir l'effet recherché dans la présente invention, à savoir une pellicule mince sur la face de chaque lamelle qui est formée par les lamelles elles- mêmes en coopération avec le récipient lorsque les lamelles sont immergées dans une masse limitée qui n'occupe qu'une partie du récipient lorsque les lamelles n'y sont pas immer- gées Les lamelles, tandis qu'elles sont espacées, position- nées et fixées dans le support, sont insérées dans un réci- pient spécial et correspondant contenant une masse limitée du liquide de coloration Les lamelles déplacent le liquide de la masse, à la façon indiquée ci-dessus, de sorte qu'une pellicule mince se forme sur les faces des lamelles. Lorsque les lamelles, au moyen du support, sont retirées du récipient, les pellicules du fluide de coloration retournent dans le récipient et reforment sensiblement la même masse que celle formée à l'origine. Les lamelles sont alors retirées du support pour un traitement ultérieur. Le support, le récipient et la masse sont particu- lièrement conçus pour un nombre désigné de lamelles, et il est prévu que, dans l'usage préféré du système, on utilise ni plus ni moins que le nombre désigné de lamelles dans et avec ce récipient, ce support et cette masse particuliers. Comme avec le mode de réalisation à une seule lamelle, le récipient est de préférence initialement obturé avec le fluide dé coloration qu'il contient, et il est de nouveau obturé après usage et avant d'être jeté Le support est avantageusement fixé de façon amovible-au récipient avant utilisation, de façon que les éléments de l'invention soient présentés ensemble pour une utilisation en combinai- son. Bien entendu, un récipient, un support et une masse du liquide de coloration en coopération peuvent être produits pour toute quantité de lamelles dans des limites raisonnables, mais il est envisagé que l'usage le plus popu- laire soit un mode de réalisation à cinq lamelles. Pour mieux faire comprendre l'objet de la présente invention, on va en décrire ci-après, à titre d'exemples purement indicatifs et non limitatifs, plusieurs modes de réalisation représentés sur le dessin annexé. Sur ce dessin: la figure 1 est une vue en perspective d'un dis- positif de coloration d'une lamelle; la figure 2 est une vue en perspective d'une lamelle conventionnelle en verre de dimensions soit métriques ou anglaises; la figure 3 est une vue en perspective semblable à la figure 1, montrant le dispositif de coloration d'une lamelle avec le couvercle retiré et une lamelle insérée; la figure 4 est une vue d'une lamelle convention- nelle telle que celle représentée sur la figure 2, ayant été colorée dans le dispositif de la figure 1 les figures 5 à 8 sont des vues en élévation et en coupe montrant une lamelle aux stades successifs de son insertion dans le dispositif de la figure 1 selon l'inven- tion; la figure 9 est un graphique illustrant un princi- pe impliqué dans les étapes des figures 5 à 8; la figure 10 est une vue en élévation et en cou- pe agrandie, faite suivant la ligne 10-10 de la figure 1, montrant en plus en dlta l la conception intérieure du dis- positif de coloration de la figure 1; la figure 11 est une vue en coupe transversale, faite suivant la ligne 11-11 de la figure 10, montrant encore d'autres détails de construction; la figure 12 est une vue en plan du dispositif de coloration directement en-dessous du couvercle en feuille, faite suivant la ligne 12-12 de la figure 10, montrant des détails de l'ouverture d'entrée de la lamelle sur la face supérieure du dispositif de coloration; - la figure 13 est une vue en plan et en coupe faite suivant la ligne 13-13 de la figure 10, montrant le profil et les proportions de la chambre intérieure et des fentes de guidage de la lamelle du dispositif de coloration; la figure 14 est une vue en élévation et en coupe agrandie semblable à la figure 10, mais montrant une lamelle totalement insérée dans le dispositif de coloration, comme ce qui est montré à la figure 3, et montrant les pro- portions combinées ainsi que les positions de la lamelle et du dispositif de coloration de la lamelle en cours d'utilisa- tion; la figure 15 est une vue en élévation en coupe transversale, faite suivant la ligne 15-15 de la figure 14, montrant le positionnement central d'une lamelle portée dans des fentes et montrant des-chambres de déplacement du liquide qui sont formées sur les faces avant et arrière de la lamelle; la figure 16 est une vue en coupe et en plan, faite suivant la ligne 16-16 de la figure 14, montrant les proportions et les positions relatives de la lamelle et du dispositif de coloration de la lamelle, ainsi que des chambri de déplacement de liquide formées sur les cdtés avant et arrière de la lamelle; la figure 17 est une vue en perspective du réser- voir de coloration de lamelles multiples suivant l'invention, avec le couvercle d'obturation partiellement enlevé; la figure 18 est une vue en perspective éclatée montrant à la fois le support des lamelles et le réservoir de coloration de l'invention; la figure 19 est une vue en perspective à la fois du support des lamelles et du réservoir de coloration en condition de coopération selon l'invention; la figure 20 est une vue en perspective du sup- port vide des lamelles selon-l'invention, avant chargement; la figure 21 est une vue en perspective éclatée du support des lamelles de la figure 20, montrant tous les éléments coopérants du support des lamelles selon l'inven- tion; la figure 22 est une vue en perspective du sup- port des lamelles des figures 20 et 21 qui est chargé de cinq lamelles à colorer; la figure 23 est une vue en coupe et en élévation, faite suivant la ligne 23-23 de la figure 22, montrant les cinq lamelles chargées dans le support, avant de les y blo- quer; la figure 24 est une vue en coupe et en plan, faite suivant la ligne 24-24 de la figure 23, montrant des détails supplémentaires des cinq lamelles chargées maintenues sans serrage par le support des lamelles; la figure 25 est une vue en élévation et en coupe semblable à la figure 23 et montrant les cinq lamelles blo- quées en relation très serrée, avec les cinq lamelles s'étendant dans des plans perpendiculaires aux faces supé- rieure et inférieure du support des lamelles; la figure 26 est une vue semblable à la figure 24, mais montrant les lamelles en position bloquée; la figure 27 est une vue en élévation et en coupe latérale du réservoir de coloration des lamelles, faite suivant la ligne 27-27 de la figure 17, montrant des détails intérieurs du réservoir; la figure 28 est une vue en élévation et en coupe avant du réservoir de coloration des lamelles, faite suivant la ligne 28-28 de la figure 17, montrant des détails supplémentaires de l'intérieur du réservoir; la figure 29 est une vue en élévation et en coupe latérale, faite suivant la ligne 29-29 de la figure 19, montrant des détails de l'intérieur du réservoir lorsqu'il est en engagement avec-le support de lamelles chargé; et la figure 30 est une vue en élévation et en coupe avant, faite suivant la ligne 30-30 de la figure 29, montrant des détails supplémentaires de l'intérieur du réservoir lors- qu'il est en engagement avec le support de lamelles chargé, et montrant le déplacement résultant vers le haut d'un fluide de coloration autour des lamelles. Une lamelle conventionnelle 20 est illustrée parti- culièrement sur les figures 2 et 4 La lamelle 20 est simple- ment une pièce rectangulaire de verre 21, sur lequel est monté un échantillon 22 pour un examen au microscope La lamelle a des surfaces plates et opposées ou faces 23 et 25, des bords longs et opposés 26 et 27, et des bords courts crû opposés 28. La lamelle la plus couramment utilisée a une lon- gueur (Ls) d'environ 76,2 mm ( 3 pouces), une largeur (Ws) d'environ 25,4 mm ( 1 pouce) et une épaisseur (Ts) d'environ 1 mm Dans certains cas, la lamelle peut avoir une Ls de mm et une Ws de 25 mm, ou bien une TS de 1,2 mm. Ces dimensions peuvent légèrement varier avec différents fabricants Par exemple, les épaisseurs peuvent varier de 1,333 mm ( 0,0525 pouce) à 0, 825 mm ( 0,0325 pouce) et la largeur peut varier de 25,80 mm ( 1,016 pouce) à 24,49 mm ( 0,964 pouce). L'échantillon 22 est préparé puis est fixé à une face de la lamelle, de toute façon bien connue, par exemple en utilisant un séchage à l'air, une fixation à la chaleur ou au réactif L'échantillon 22 est généralement placé au centre de l'une des faces de la lamelle, avec une zone claire, sans échantillon, à chaque extrémité de la face L'échantil- lon est virtuellement invisible en ce point, avant coloration. La lamelle 20, avec l'échantillon 22 non coloré, est destinée à être insérée dans un dispositif 30 jetable de coloration de lamelles Le dispositif 30 est avantageuse- ment formé en une matière plastique transparente ou translu- cide, dans une configuration généralement allongée et rectan-. gulaire, ayant des proportions se conformant généralement aux proportions de la lamelle 20 Le dispositif est destiné à être utilisé verticalement, et il a un sommet 31, un fond 32, des bords 33 et des c 6 tés 35 et 36 Un collier ou bride 29 entoure le sommet 30 et a une surface plate. Une cavité interne ou chambre 40, a de même une configuration rectangulaire et, de nouveau se conforme géné- ralement aux proportions de la lamelle 20 La cavité interne 40 ades guidages verticaux opposés et effilés en section transversale 41 et 42, le long des bords verticaux 43 et 45 de la cavité s'étendant du sommet 46 de la cavité jusqu'au fond 47 La cavité a également des c 6 tés opposés 48 et 49. La cavité 40 a, à son extrémité supérieure, une partie 51 en pente et convergente vers le bas, ayant des bords 52 et c 6 tés 53 en biseau. Un couvercle ou joint 55 est fixé au sommet 31 sur le collier ou bride 29 par un moyen approprié, comme un thermo-scellement ou un adhésif Le couvercle est destiné à être enlevé par "pelage" en saisissant et en tirant sur une patte 56 avant l'utilisation, afin que la cavité 40 soit exposée. Une masse d'un liquide de coloration 60 est conte- nue dans la cavité, et elle s'étend à peu près jusqu'à mi- hauteur de la-cavité, comme on peur le voir sur les figures 1 et 10. Le dispositif est destiné à être fabriqué à une installation centrale o il est obturé avec le liquide de coloration qui y est contenu, comme on peut le voir sur la figure 1. Comme on peut le voir sur les figures 5 à 8, on peut voir, en séquence, le S vues d'une lamelle 20 qui est insérée dans la cavité 40 Sur la figure 5, la lamelle 20 avec un échantillon biologique 22 à colorer qui y est fixé, est illustrée dans la position o elle entre dans la cavité , sur les guidages 41 et 42 La lamelle 20 est espacée des c 8 tés opposés 48 et 49, comme on peut mieux le voir sur les figures 15 et 16 La lamelle de la figure 5 est sur le point d'entrer en contact avec la surface supérieure de la masse 60, qui est le niveau statique du liquide Le niveau statique du liquide est à une hauteur de H 1 au dessus du fond de la cavité. Sur les figures 6 et 7, la lamelle descend progres- sivement dans la cavité au-dessous de la masse, le liquide de la masse est déplacé et monte jusqu'à ce que le niveau dyna- mique du fluide atteigne H 2, comme on peut le voir sur la figure 8, quand la lamelle est totalement insérée A ce point, le liquide de coloration couvre totalement l'échantil- lon 22 La valeur de l 11 est à peu près égale à la moitié de - H 2 H 2 représente également la hauteur de la cavité, comme on peut mieux le voir sur la figure 14. Sur la figure 9, le principe décrit et illustré sur les figures 5 et 8 est montré sous forme graphique Au fur et à mesure que la lamelle est submergée en-dessous du niveau statique du liquide, il y a une montée correspondante du niveau dynamique du liquide de coloration en relation vir- tuellement de ligne droite. Au fur et à mesure que la lamelle est retirée du liquide de coloration, après y avoir été laissée pendant un temps approprié pour accomplir la coloration, la lamelle est retirée et la séquence inverse se produit Le niveau du li- quide tombe de façon correspondante tandis que le liquide s'é- goutte du côté de la lamelle dans la masse Il y a du liqui- de résiduel de coloration qui adhère à l'échantillon et à la lamelle, et bien entendu la hauteur de la masse à la fin de la coloration baisse de façon correspondante en-dessous du niveau statique du liquide, lorsque la lamelle est retirée du dispositif La lamelle, quand elle est retirée du disposi- tif 30, présente l'échantillon coloré 54, comme on peut le voir sur la figure 4 Comme le dispositif est destiné à une seule utilisation, cette baisse de la hauteur de la masse et de son volume n'est pas gênante. La partie effilée ou de guidage 51 avec les bords en biseau 52 et les côtés en biseau 53 permet une insertion facile de la lamelle dans les guidages Elle fait également fonction de puits pour recevoir tout débordement du liquide de coloration, comprenant toute éclaboussure si on fait tom- ber la lamelle rapidement dans la cavité Un collier ou par- tie de guidage 29 s'étend autour de l'extrémité supérieure ou sommet du dispositif et fait corps avec lui La bride 29 a, avantageusement, une partie supérieure plate 63 qui permet à une feuille ou couvercle 55 d'y être fixé de façon appro- priée, par exemple, par un adhésif ou par une technique appropriée de thermo-scellement La feuille peut être en une matière métallique ou plastique pouvant être "pelée" pour la retirer de la partie supérieure du dispositif 30, en saisis- sant une partie formant patte 56 et en tirant jusqu'à une position totalement ouverte, comme on peut le voir sur la figure 3 La partie de capuchon en position d'obturation ou de recouvrement est illustrée sur les figures 10 et 11, La largeur et l'épaisseur des lamelles peuvent varier, même celles ayant des dimensions spécifiques En effilant les guidages, le dispositif peut recevoir une lamel- le d'une épaisseur variable et d'une largeur variable tout en maintenant la lamelle au loin de la paroi intérieure de la cavité De plus, les guidages effilés garantissent que seul le bord de la lamelle touchera le guidage et non pas-la surface qui contient l'échantillon. La lamelle 20, quand elle est insérée dans la cavi- tée 40 sur les guidages 41 et 42, prend une position et une posture très définies à l'intérieur de la cavité et par rapport aux câtés ou parois 48 et 49 de la cavité 40. Comme on peut le voir sur les figures 14 à 16 comprise, la lamelle 20, quand elle est insérée à sa posi- tion la plus basse, a une partie supérieure 61 qui-s'étend au dessus de la cavité 40 et du sommet 31 du dispositif 30. La partie supérieure 61 de la lamelle 20 est dépourvue de tout échantillon 22, puisque la zone de l'échantillon est conventionnellement au milieu de la lamelle, comme cela est montré sur la figure 14 en traits mixtes La partie 61 de la lamelle 20, qui reste au-dessus du dispositif 30, est utili- sée pour saisir la lamelle en vue de l'insérer dans le dis- positif et de retirer la lamelle du dispositif La lamelle est également saisie par cette partie pendant le rinçage sub- séquent à la coloration De cette façon, les doigts de l'opé- rateur n'ont aucun contact avec la solution de coloration, ni avec le colorant Il y a environ 1/6 de la longueur de la lamelle LS qui s'étend au dessus du dispositif 30. L'échantillon 22 est coloré quand la lamelle est totalement insérée, comme cela est particulièrement montré sur les figures 14 à 16 comprise La lamelle, comme on peut le voir particulièrement sur les figures 15 et 16, est placée au centre de la cavité 40 et est espacée des parois ou côtés 48 et 49 La lamelle 20 a, à proximité de chacune de ses faces, des espaces 65 et 66 qui contiennent le liquide de coloration La lamelle peut être insérée avec l'échantillon 22 tourné dans l'une ou l'autre direction, tandis que la lamelle 20 entre dans la cavité La face de la lamelle 20 et l'échantillon 22 s'y trouvant sont placés de façon que l'é- chantillon 22 ne puisse Etre en contact avec les c 6 tés de la cavité, mais au contraire l'échantillon est maintenu d'une façon l'exposant au liquide de coloration dans l'espace 65 ou 66 qui est formé par la lamelle et le côté de la cavité Une quantité minimale du liquide de coloration est nécessaire pour colorer l'échantillon, lorsque la lamelle est ainsi placée Cela est clairement représenté par les vues en coupe des figures 15 et 16. On peut voir à la lecture de la description ci- dessus, que l'espace 65 et 66 à proximité de chaque face de la lamelle, lorsque celle-ci est totalement insérée dans la cavité, est un espace mince et plat qui contient une quantité appropriée de liquide de coloration pour bien colorer l'échan- tïllon, sans usage excessif de ce liquide En outre, la lamelle elle-même est utilisée pour placer ce liquide à proximité des faces de la lamelle, et l'échantillon sur l'une des faces On peut voir que la direction dans laquelle est tourné l'échantillon, lors de l'insertion dans la cavité, nia pas d'importance, puisqu'il y a une pellicule sur les deux faces de la lamelle. La lamelle elle-même, en coopération avec le réci- pient, crée la pellicule adjacente aux faces de la lamelle pour la coloration, puis permet au liquide dans ces espaces de s'égoutter dans le fond de la cavité et dans la masse qui est formée, lorsque la lamelle est retirée. Sur les figures 10 à 16 incluse, est illustré en détail l'intérieur du dispositif de la figure 1 Ws est la largeur de la lamelle 20, LS est sa longueur et TS est son épaisseur H 2, qui est la hauteur de la cavité, ainsi que la hauteur du niveau dynamique de liquide ci-dessus décrit, représente à peu près les 3/4 de la longueur L de la lamelle. Les guidages 41 et 42 comprennent des parois effilées dans les bords de la cavité, comme on peut le voir. La largeur entre les guidages, W, comme on peut le voir sur la figure 13, est légèrement supérieure, par exemple supérieure de 0,51 mm ( 0,02 pouce) , àla largeur de la lamelle (fig 14),de telle sorte qu'il y ait un jeu approprié pour que la lamelle se déplace dans le guidage T Ts l'épaisseur du guidage à son extrémité effilée, est légèrement plus faible,- par exemple de 0,41 mm ( 0,016 pouce) quel'épaisseurdela Xamel le TS (fig Z 5)1 Y, l'épaisseur de la cavité,est à peu près le double de l'épaisseur de la lamelle TS En vertu des gui- dages effilés 41 et 42, la lamelle, quand elle est insérée dans les guidages, est centralement espacée entre les parois latérales de la cavité, 48 et 49 Si l'épaisseur de la cavi- té est le double de-celle de lamelle, l'épaisseur des espa- ces formés sur chaque face de la lamelle, quand celle-ci est insérée, est à peu près égale à la moitié de l'épaisseur de la lamelle. En vertu des guidages effilés 41 et 42, des lamel- les à des dimensions légèrement variables comme on l'a indi- qué ci-dessus, peuvent être espacées de façon appropriée dans la cavité 40 Les parois effilées des guidages 41 et 42 compensent ces légères variations en guidant la lamelle par ses bords, tout en la positionnant encore Même avec une lamelle ayant la plus petite largeur et/ou épaisseur à l'intérieur des dimensions variables, la lamelle est encore espacée des côtés de la cavité, bien que tous les bords de la lamelle puissent ne pas être en contact ferme avec les guida- ges Même si cette relativement petite lamelle peut avoir plxu de liberté pour se déplacer à l'intérieur de la cavité qu'une lamelle relativementgrande, la retenue imposée sur les coins de la lamelle par les parois effilées des guidages maintient la lamelle espacée des parois de la cavité, de telle sorte qu'une pellicule du fluide de coloration peut se former à proximité des faces de la lamelle. -26163 On comprendra que les dimensions données ci-des- sus sont simplement à titre d'exemple pour indiquer un réci- pient dimensionné de façon appropriée pour la mise en oeuvre de l'invention. En se référant maintenant au mode de réalisation préféré de l'invention pour la coloration simultanée d'une multiplicité de lamelles, et en se référant plus particuliè- rement aux figures 17-30, les lamelles 120 sont de la nature, de la dimension et de la conception ci-dessus décrites pour la lamelle 20. Le récipient 130 peut être généralement semblable au récipient 30 cidessus décrit, par sa forme, sa hauteur et sa largeur, à l'exception de la profondeur horizontale du récipient qui est étendue pour recevoir une pluralité de lamelles plut 6 t qu'une seule, comme on le décrira Le récipient 130 a un sommet ouvert 131, un fond 132, des bords 133, 134, des-c 8 tés 135 et 136, et un collier ou bride 129. * La cavité interne ou chambre principale 140 du récipient 130 a quatre guidages comme 141 et 142 dans ses quatre coins verticaux, des bords verticaux 143 et 145, un fond 147 et des côtés opposés 148 et 150. Dans la version représentée, la chambre principale a, en son sommet, une chambre de débordement 160 qui est formée dans la partie de bride 129 qui a des parois latérales 168, 170 formées par les cdtés de la chambre principale 140, des parois extrêmes 172, 174 et des saillies inférieures comme au 180. Un couvercle d'obturation 186, semblable au joint décrit ci-dessus, est fixé au sommet 131 du récipient. Les lamelles sont espacées, mises en place et main- tenant solidement dans un support 200, qui comprend essen- tiellement un tiroir 202, un bottier 204 et des pièces d'espa- cement comme 206 Les pièces d'espacement sont suspendues coulissantes et pivotantes dans le bottier 204 sur des tou- rillons pivotants comme 210 qui se déplacent dans des guida- ges 212 et 214 sur l'intérieur des parois latérales opposées 215, 216 du bottier Le tiroir 202 glisse dans le bottier 204, de telle sorte que, lorsqu'il est déplacé vers l'inté- rieur, il pousse contre au moins la pièce d'espacement 217 la plus en avant. Le bottier 204 a une paroi supérieure fermée 218 et un fond ouvert (Le bottier est illustré inversé, en posi- tion de chargement, sur les figures 20, 21, 22, 23 et 25). Les parois latérales 215, 216 contiennent des fentes respec- tivement 224 et 226, un avant ouvert et une paroi arrière fermée 230. Les guidages 212 et 214 du bottier 204 sont formés chacun par des crêtes parallèles qui définissent des gorges 232, 234 pour recevoir les tourillons 210 des pièces d'espa- cement. Les pièces d'espacement sont des rectangles minces et plats qui ont, de préférence, sur leur bord long le plus près des tourillons, un bord à section décroissante ou poin- tu pour faciliter l'insertion entre eux d'une extrémité des lamelles Les tourillons sont près des bords des pièces d'es- pacement, de façon que les pièces d'espacement pendent libre- ment et de façon lâche dans les guidages avant chargement des lamelles De préférence, ces pièces d'espacement sont toutes identiques. Le tiroir 202 a une paroi avant 300, des boutons de poussée et de traction ou anses 302, 304 sur les côtés oppo- sés de la paroi avant, des côtés 306, 308 et des contrefiches intérieures en diagonale 311, 312 qui s'étendent entre 1 * paroi avant et les parois latérales du tiroir Les parois latérales 306, 308 ont chacune une dent de came comme 314 destinée à se déplacer dans une fente correspondante telle que 226 dans la paroi latérale du bottier lorsque le tiroir est inséré dans le bottier Les parois latérales du tiroir s'adaptent à l'intérieur des parois latérales du bottier er en engagement coulissant avec elles Chacune des dents de came 314 a une surface en pente comme 320 qui permet au tircir d'être inséré dans le bottier jusqu'à ce que les dents s'en- gagent dans les fentes correspondantes 224 et 226, après quoi la surface extrême plate 322 de la dent empêche le tiroir d'être inintentionnellement tiré hors du boîtier. Le tiroir est avantageusement fait en une matière plastique relativement flexible comme du polyéthylène, o il y a un certain degré de jeu, en particulier vers les côtés au-delà des contrefiches, dans des buts qui seront expliqués ci-après Les pièces d'espacement sont de même avantageuse- ment faites en une telle matière flexible. Contrairement au tiroir et aux pièces d'espacement, le boîtier est en un matériau relativement rigide comme du nylon chargé de verre, de telle sorte que le tiroir et les pièces d'espacement relativement flexibles, en combinaison avec le bottier relativement rigide, permettent au tiroir de verrouiller les pièces d'espacement sur le bottier comme on le décrira ci-après. Il est prévu que le récipient 130 contienne une masse délimitée ou limitée du fluide de coloration 360 Comme on peut mieux le voir sur les figures 27 et 28, cette masse s'étend jusqu'à une hauteur H, qui est de préférence quelque peu supérieure à la moitié de la hauteur de la chambre 140. Comme avec le mode de réalisation à une seule lamelle représenté sur les figures 1 à 16, il est prévu que les lamelles 120 soient insérées vers le bas dans cette masse 360, ce par quoi le liquide de coloration de la masse soit déplacé vers le haut dans la chambre principale, sensi- blement jusqu'à son sommet, sans déborder dans la chambre de débordement, et dans le cas d'un écoulement en excès vers le haut du liquide déplacé, celui-ci peut-être reçu dans la chambre de débordement 160 Dans une conception préférée, la proportion des pièces et la profondeur de la masse sont teles qu'il n'y ait sensiblement pas de débordement, et dans un tel cas, la grande chambre de débordement peut être éliminée et le sommet du récipient peut être formé comme dans la version à une seule lamelle des figures 1 à 16. Les lamelles sont maintenues en relation exacte- ment espacée les unes avec les autres et le récipient, de façon qu'une pellicule mince soit formée des deux côtés des lamelles, L'espace entre les lamelles se conforme à l'épais- seur des pièces d'espacement Avantageusement, cette épais- seur est à peu près égale à l'épaisseur des lamelles elles- mêmes, qui, comne on l Va indiqué ci-dessus, peut être d'en- viron 1 mm L'espace est tel que lorsque les lamelles espa 6 es sont fixées dans le support, et que les lamelles sont immer- gées dans la masse limit 4 e dans' le récipient, sensiblement jusqu'à son fond, la masse est déplacée de façon que le liqui- dedeco 13 ration remonte en pellicules minces qui atteignent et couvrent sensiblement toute la partie de la lamelle qui s'étend à l'intérieur de la chambre principale du récipient, et en particulier les parties auxquelles sont fixés les échantillons. La mise en place et l'espacement des lamelles sont accomplis dans le support, qui initialement est placé sur son sommet, en position inversée Les pièces d'espacement peuvent pendre librement sur leurs tourillons dans les guidages 212, 214, comme on peut le voir sur les figures 22, 23 et 24 A ce moment, le tiroir 202 est ouvert et les parois latérales 306 et 308 du tiroir sont parallèles et en position détendue, le tiroir pouvant ainsi glisser librement dans le bottier, à l'exception que le tiroir ne peut être retiré totalement du fait de l'action d'interférence des dents de came 314. Comme on peut le voir sur la figure 22, les lamel- les 120 sont alors insérées entre les pièces d'espacement comme 206, les bords en biseau des pièces d'espacement aidant à l'entrée des lamelles entre les pièces d'espacement Les pièces d'espacement et les lamelles sont, de préférence, de la même largeur La largeur du boîtier entre ses parois laté- rales est égale à la largeur des lamelles plus une légère dimension de jeu Pendant l'assemblage, les lamelles tombent jusqu'au "fond" du bottier inversé, de telle sorte que les bords droits des extrémités des lamelles reposent sur l'inté- rieur de la paroi supérieure du bottier Quand le nombre nécessaire de lamelles a été inséré dans le support, qui est de cinq pour le mode de réalisation du support et du réci- pient à cinq lamelles qui est illustré, le tiroir est poussé pour être fermé à partir de la position représentée sur les figures 23 et 24 à la position représentée sur les figures 25 et 26. Les parois latérales 306 et 308 du tiroir 202 se terminent à leurs extrémités avant par des-cales respective- ment 370 et 372, ayant des surfaces de coincement effilées respectives face à face 374, 316 adaptées à entrer dans les jeux ci-dessus mentionnés entre les pièces d'espacement et les parois latérales lorsque le tiroir est fermé De même, quand le tiroir est fermé, les extrémités externes des parois latérales 306 et 308 s'étendent vers l'extérieur, du fait des actions de coincement des surfaces 374, 376 contre les extrémités des pièces d'espacement Les cales sont formées dans les parois latérales au delà des contrefiches 310, 312, de telle sorte que les parois latérales sont maintenues relativement parallèles jusqu'à l'extrémité des contrefiches, tandis que les parties-extrêmes externes restantes des parois latérales sont relativement libres de se fléchir vers l'exté- rieur sous l'influence des pièces d'espacement, et contre l'intérieur des parois latérales du bottier La résistance des pièces d'espacement et des lamelles contre les cales sert par conséquent à coincer les cales contre les parois latérales du tiroir, de façon quele tiroir, les lamelles et les pièces d'espacement soient verrouillés en position, avec les lamelles serrées entre les pièces d'espacement Les piè- ces d'espacement, qui sont relativement flexibles, se défor- ment légèrement contre le verre dur des lamelles et servent alors à maintenir, avec amortissement les lamelles Les lamelles sont alors maintenues parallèles les unes aux autres, et régulièrement espacées les unes des autres à des distances prédéterminées. S'il y a un léger défaut d'alignement des lamelles parce que les extrémités des lamelles ne touchent pas l'inté- rieur du sommet du bottier, ou parce que les extrémités des lamelles ne sont pas totalement à angle droit avec les c 6 tés des lamelles, on peut remédier à tout léger défaut d'aligne- ment de ce type en forçant les lamelles à leur position correcte, à la main, au moyen des doigts. Les dimensions extérieures du groupe de cinq lamel- les s'étendant à partir du support se conforment précisément à la chambre conçue pour les opérations de coloration de cinq lamelles Ces dimensions sont telles que, lorsque le support est inversé à partir de la position de chargement et les par- ties exposées des lamelles sont insérées à l'intérieur du récipient, les bords des lamelles externes touchent les càtés des guidages comme 141, 142 dans le récipient, sur quoi quand les lamelles, au moyen du support, sont insérées à l'inté- rieur du récipient, il se forme un espace mince adjacent à chacune des faces externes des lamelles externes Les guida- ges comme 141, 142, peuvent être moulés en faisant corps avec le restant du récipient, et ils peuvent avoir des chan- freins d'entrée à leurs extrémités d'entrée pour faciliter l'insertion de l'ensemble des lamelles. Au fur et à mesure que les lamelles sont immergées dans la masse, le liquide est déplacé vers le haut, le long des faces des lamelles La dimension de la partie des lamel- les qui s'étend à l'intérieur du support est, de préférence, telle que, quand le support vient en contact avec le sommet du récipient, les lamelles touchent presque le fond du récipient, ou sont légèrement au-dessus du fond du récipient. Ainsi, essentiellement tout le liquide de coloration s'étend, à ce moment, en pellicules minces à travers les faces des lamelles, et à travers les échantillons sur les lamelles. Le liquide monte jusqu'au sommet de la chambre, et il peut entrer à l'intérieur de la chambre de débordement si une ou plusieurs des lamelles est (sont) légèrement plus épaisse(s) qu'une lamelle généralement standard. Quand les échantillons ont ainsi été colorés, les lamelles sont retirées du récipient au moyen du support Le fluide de coloration s'égoutte des lamelles, retourne dans une masse ayant à peu près la même taille que la masse du début moins la quantité qui adhère aux lamelles Le récipient peut éventuellement être refermé avec son bouchon d'origine, puis être jeté de façon propre Le support et les lamelles sont alors inversés et les lamelles déchargées du support dans une opération qui est essentiellement l'inverse de celle du chargement ci-dessus décrite. Afin de retirer le tiroir du bottier et de libérer le serrage des pièces d'espacement sur les lamelles, il est nécessaire de rompre l'action de coincement des côtés du tiroir Pour cela, le tiroir est saisi à ses anses 302 et 304 entre les doigts, et un mouvement basculant alterné est exercé sur le tiroir, tandis que celui-ci est retiré du bot- tier, qui est ancré au moyen des doigts de l'autre main de l'opérateur Le bottier repose avantageusement sur une table pendant l'opération de déchargement Quand l'action de cala- ge et de coincement du tiroir est ainsi rompue, le tiroir est retiré pour libérer les pièces d'espacement et les lamel- les à leur position représentée sur les figures 23 et 24 Les lamelles peuvent alors être délicatement retirées du support et traitées subséquemment par rinçage et analogue, à la façon usuelle. Le support peut éventuellement être lavé et rincé, puis être utilisé avec un nouveau récipient et une nouvelle masse, ou bien le support peut être jeté. Il est prévu que le récipient et i support soient produits en masse en matière plastique, par exemple, par moulage par extrusion, afin que le prix unitaire soit relati- vement faible. Le mode de réalisation ci-dessus est illustré avec un groupe de cinq lamelles On comprendra que le même princi- pe peut être utilisé avec tout groupe souhaité, par exemple, de deux à dix lamelles et plus, chaque groupe ayant son réci- pient, son support et sa masse de dimensions spécifiques. Cependant, il est envisagé que les agencements à cinq lamel- les soient les plus prédominants. Deux de ces supports à cinq lamelles peuvent éga- lement être attachées à a dos pour créer un support à dix lamelles Une telle combinaison à dix lamelles peut alors être insérée dans un récipierL pour dix lamelles, conçu selon l'invention pour recevoir les dix tamelles. Le récipient montré cît-dssus a un compartiment de débordement tel que décrit Cela est généralement souhaitable lorsque l'on pense que les lamelles utilisées varieront quelque peu en épaisseur Comme une lamelle plus épaisse déplace plus de liquide, la chambre de débordement sert à recevoir et à contenir ce débordement pendant l'opération de coloration Lorsque les lamelles ont une épaisseur relative- ment uniforme, il n'est pas nécessaire de prévoir une chambre de débordement, puisque le déplacement est mieux contrôlé. Dans cette condition, la chambre de débordement peut avoir une dimension réduite, ou être éliminée, comme on peut le voir dans le mode de réalisation des figures 1 à 16. Comme aide à la conception, les relations-ci-dessos peuvent être notées La distance H dont le niveau du sommet de la masse du liquide de coloration s'élëve par immersion des lamelles est égale au volume du liquide déplacé vers le haut par le verre des lamelles, divisé par la surface de la section transversale moyenne de l'espace de la chambre sans verre dans laquelle le liquide est déplacé En désignant la distance sur laquelle les lamelles sont immergées en-dessous du sommet de la masse d'origine par Hi, la surface de la sec- tion transversale moyenne de la chambre au-dessus de la surface de la masse d'origine avec les lamelles retirées par Achi et la surface de la section transversale moyenne du verre de lamelle dans le liquide par Agît alors on a H) 2 Ach/Agl - Dans le cas simple d'une chambre purement rectangu- laire, de cinq lamelles de 1 mm d'épaisseur, espacées les unes des autres et des parois de la chambre de 1 mm, et de l'immersion des lamelles jusqu'à la pleine profondeur de 1 J de la masse d'origine, la formule donne une remontée du niveau du liquide. H) H 08, 2 11/5 1 1,2 0,83 > Dans la pratique, la hauteur f est réduite en- dessous de cette valeur par tout espace supplémentaire dans la chambre aux bords des lamelles insérées, et augmente du fait des réductions de l'espace dans la chambre provoquées par les guidages dans la chambre. Il est bien entendu queles modes de réalisation ci- dessus décrits ne sont aucunement limitatifs et pourront donner lieu à toutes modifications désirables sans sortir pour cela du cadre de l'invention. REVENDICATIONS 1 Dispositif pour la coloration d'un échantillon biologique, comprenant un récipient ayant une cavité ouverte à une extrémité pour recevoir au moins une lamelle standard de microscope, à l'une des grandes surfaces de laquelle est fixé l'échantillon, et un remplissage d'un liquide de colo- ration à mettre en contact avec ledit échantillon dans ladi- te cavité, caractérisé par des guidages ( 41, 42; 141, 142) sur des parois opposées ( 43, 45; 143, 145) de la cavité ( 40, 140) pour recevoir et guider la (ou les) lamelle(s) ( 20; 120) sans contact avec les autres parois ( 48, 49; 148, ) de la cavité ( 40; 140), mais permettant l'accumulation d'une pellicule de liquide entre elles par un volume ( 60; - 360) du remplissage du liquide de coloration qui, quand il est déplacé par la (ou les) lamelle(s) insérée(s) ( 20; 120) s'étend entre les parois ( 43, 45; 143, 145; 48, 49; 148, ) de la cavité ( 40; 140) et les surfaces de la lamelle ( 20; 120) jusqu'à un niveau au-dessus de l'emplacement de. l'échantillon ( 22) sur la (ou les) lamelle(s) ( 20; 120), et par une longueur de la cavité ( 40; 140) qui est plus faible que la longueur de la (ou des) lamelle(s) ( 20; 120) à insé- rer. 2 Dispositif selon la revendication 1, caractéri- sé par le fait que la cavité ( 40; 140) a une section trans- versale rectangulaire et que les guidages ( 41, 42; 141, 142) font corps avec les parois ( 43, 45; 143, 145) de la cavité ( 40, 140) correspondant aux plus petits cotés opposés de la section transversale rectangulaire de façon que la distance entre chaque grande surface ( 23, 25) de la (ou des) lamelle(s) ( 20; 120) et la paroi opposée ( 48, 49; 148, 149) de la cavi- té ( 40; 140) soit sensiblement égale. 3 Dispositif selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait que les guidages ( 41, 42; 141, 142) de chaque côté sont effilés en section transversale. 4 Dispositif selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que la largeur de la cavité ( 40; ) entre les guidages ( 41, 42; 141, 142) des parois opposées ( 43, 45; 143, 145) est à peu près égale à la lar- geur de la (ou des) lamelle(s) ( 20; 120) avec une tolérance de largeur maximum, et que les guidages ( 41, 42; 141, 142) s'étendent au point que la (ou les) lamelle(s) ( 20; 120) avec des tolérances de largeur et d'épaisseur minimum soient reçue(s) et guidée(s) sans contact avec les autres parois ( 48, 49; 148, 150) de la cavité ( 40; 140). 5 Dispositif selon l'une des revendications I à 4, caractérisé par le fait que la cavité ( 40; 140) est évasée vers l'extérieur ( 51; 160) à son extrémité ouverte ( 31 131). 6 Dispositif selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé par un joint amoiible ( 55, 186) recouvrant l'ex- trémité ouverte ( 51; 160) de la cavité ( 40; 140). 7 Dispositif selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé par le fait que la longueur de la cavité ( 40; ) est à peu près égale aux cinq sixièmes de la longueur de la (ou des) lamelle(s) ( 20; 120). 8 Dispositif selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé par le fait que l'épaisseur de la cavité ( 40) est à peu près égale au double de l'épaisseur de la lamelle ( 20). 9 Dispositif selon l'une des revendications 1 à 7, dans la cavité dé laquelle doit être reçue plus d'une lamel- le standard de microscope, caractérisé par le fait que les guidages ( 141, 142) sont agencés dans chaque coin de la cavité ( 140) pour recevoir et guider la surface respective de la lamelle opposée aux grandes parois ( 148, 150) de la cavité ( 140), tandis que des pièces d'espacement ( 206) sont insérées entre les sections extrêmes des lamelles ( 120) qui s'étendent au-delà de l'extrémité ouverte ( 131) de la cavité ( 140) jusqu'à un support ( 200) pour un engagement de blocage des pièces d'espacement ( 206) et des lamelles ( 120), de façon que la distance parallèle entre les lamelles ( 120) et les grandes parois ( 148, 150) permette la formation d'une pellicule du liquide déplacé de coloration jusqu'au niveau au-dessus de l'emplacement des échantillons ( 22) sur les lamelles ( 120), lors de leur inser- tion dans la cavité ( 140) au moyen du support ( 200). Dispositif selon la revendication 9, caractéri- sé par le fait que le support ( 200) comprend un bottier ( 204) ayant une paroi zrrière fermée ( 230) et une paroi supérieure fermée ( 218) et des parois latérales et opposées ( 215, 216) qui sont espacées d'une distance supérieure aux largeurs des lamelles ( 120) et des pièces d'espacement ( 206), un fond ouvert, un avant ouvert et des rails de-guidage ( 212, 214) qui s'étendent le long des c Otes internes des parois latéra- les ( 215, 216) a proximité du fond ouvert et définissant des gorges ( 232, 234) recevant de façon coulissante des touril- lons ( 210) attachés aux petits côtés opposés des pièces d'espacement ( 206). 11 Dispositif selon l'une des revendications 9 et 10, caractérisé par le fait que le support ( 200) comprend un tiroir ( 202) ayant des parois latérales ( 306, 308) mobi- les en coulissant à proximité du côté interne des parois latérales ( 215, 216) du support ( 200) et avec des cales ( 370, 372) s'effilant jusqu'à leurs extrémités internes et qui s'étendent dans l'espace libre entre les pices d'espacement ( 206) et les parois latérales ( 215, 216) du support ( 200) pour l'engagement de blocage des pièces d'espacement ( 206) et des lamelles ( 210) les unes avec les autres contre la paroi arrière ( 230) du support ( 200). 12 Dispositif selon l'une des revendications 9 à 11, caractérisé par le fait que le tiroir ( 202) comprend des contrefiches ( 310, 312) qui s'étendent entre la paroi avant ( 300) du tiroir ( 202) et des positions sur les parois laté- rales ( 306, 308) à une courte distance des cales ( 370, 372), ce par quoi des parties des parois latérales à une courte distance des cales ( 370, 372) sont maintenues rigidement tandis que les cales ( 370, 372) peuvent se courber vers l'extérieur pendant l'action de blocage.