Brevet FR2527441A1 — publié le 19831202

La présente invention concerne un agent pour accroître l'effet thérapeutique d'un agent antitumoral, qui comprend comme ingrédient actif du diltiazem ou l'un de ses sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie. On sait que le diltiazem,dont le nom chimique est la d-3-acétoxy-cis-2,3-dihydro-5-l 2-(diméthylamino)éthyll-2-(p-méthoxy- phényl)-1,5-benzothiazépine-4 ( 5 H)-one, a une activité vasodilata- trice coronarienne puissante et est intéressant comme stimulant de la circulation coronarienne, mais on n'a jamais su que ce composé présente un effet d'augmentation de l'activité antitumorale d'un agent antitumoral. En général, lorsque l'on utilise seuls les agents chimiothérapeutiques pour traiter diverses tumeurs, telles que leu- cémie, lymphome, tumeur solide, il est difficile de guérir complè- tement les tumeurs à cause des sensibilités différentes des cellules tumorales à chacun des agents antitumoraux, c'est-à-dire l'hétéro- généité De plus, lorsque l'on utilise continuellement un agent anti- tumoral, les cellules tumorales deviennent plus résistantes (résis- e tance aqueuse) A l'agent antitumoral Par exemple, on sait que les vincaalcaloldes, tels que la vincristine et la vinblastine isolées à partir de Vinca Rosea, Apocynacées, ou la doxorubicine isolée de cultures d'un mutant Streptomyces peucetius, présentent une acti- vité antitumorale puissante contre la leucémie lymphatique, la leucémie myélogène, la maladie de Hodgkin, mais les cellules tumo- rales deviennent résistantes à ces agents lorsqu'ils sont utilisés continuellement pendant une longue durée L'un des problèmes sérieux dans le traitement thérapeutique d'une tumeur ou de la leucémie est que la résistance croisée induite entre des agents antitumoraux de structure semblable rend difficile d'obtenir l'effet thérapeutique attendu de l'agent antitumoral. A la suite de recherches approfondies, la demanderesse a découvert de façon surprenante selon l'invention que, lorsque le diltiazem, vasodilatateur coronarien connu, est utilisé avec un agent antitumoral, il peut accroître remarquablement l'effet théra- peutique de l'agent antitumoral. 2527441. Un objet de l'invention est de proposer un agent pour accroître l'effet thérapeutique d'un agent antitumoral, comprenant comme ingrédient actif le diltiazem ou un de ses sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie Un autre objet de l'invention est de proposer une composition antitumorale comprenant comme ingrédient actif le diltiazem ou un de sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie et un agent antitumoral Un autre objet de l'invention est de proposer un procédé pour le traitement des tumeurs par administration du diltiazem ou d'un de ses sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie avec un agent anti- tumoral classique à un animal à sang chaud souffrant de diverses tumeurs Ces objets et avantages de l'invention et d'autres appa- raitront à l'homme de l'art à la lecture de la description qui va suivre. L'agent selon l'invention pour accroître l'activité antitumorale d'un agent antitumoral comprend comme ingrédient actif le diltiazem ou un de ses sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie L'agent selon l'invention peut accroître la sensibi- lité non seulement des cellules tumorales n'ayant pas de résistance aux agents antitumoraux, dites cellules vierges, mais également des cellules tumorales douées de résistance aux agents antitumoraux. En conséquence, lorsque cet agent est utilisé conjointement avec un agent antitumoral, la croissance des cellules tumorales peut être presque complètement inhibée, que les cellules tumorales aient ou non une résistance à l'agent antitumoral Autrement dit, lorsque l'on utilise l'agent antitumoral seul, les cellules tumorales douées de résistance à l'agent restent ordinairement vivantes et croissent à nouveau en donnant une récidive de la croissance de cellules tumo- rales Cependant, lorsque le diltiazem est utilisé conjointement avec l'agent antitumoral, les cellules tumorales douées de résistance à l'agent antitumoral présentent une sensibilité fortement accrue à l'agent antitumoral et leur résistance disparaît, ce qui conduit à une inhibition efficace de la croissance des cellules tumorales et donc à une guérison complète de la tumeur et une inhibition totale de la récidive. En outre, les agents antitumoraux sont ordinairement utilisés à une dose maximale pour s'attendre à l'effet thérapeutique 2527441. le plus élevé, mais la dose de l'agent antitumoral peut être réduite lorsqu'on l'utilise conjointement avec l'agent selon l'invention, parce que l'agent selon l'invention peut accroître la sensibilité des cellules tumorales à l'agent antitumoral Donc, lorsque l'agent antitumoral est utilisé conjointement avec l'agent de l'invention, il peut présenter l'activité antitumorale désirée à une dose plus faible avec une moindre toxicité Par exemple, dans une expérience o l'on utilise des cellules de leucémie P 388 douées de résistance à la vincristine, lorsqu'on utilise la vincristine seule, elle doit être administrée à une dose de 60 ng/ml pour présenter une inhibi- tion à 50 % des cellules tumorales, mais, par contre, lorsque la vincristine est utilisée conjointement avec le diltiazem (chlor- hydrate) à une concentration de 35 p M ou 1001 M, elle peut présenter une inhibition de 50 % des cellules résistantes à une concentration de vincristine de 1 ng/ml ou moins Dans une expérience o l'on utilise des cellules de leucémie P 388 douées de résistance à la doxorubicine, lorsque la doxornbicine est utilisée seule, elle doit tre administrée à une dose de 592 ng/ml pour donner une inhibition de 50 % des cellules tumorales, mais, par contre, lorsque la doxo- rubicine est utilisée conjointement avec le diltiazem 100 ?M, elle peut présenter une inhibition de 50 % des cellules à une concentration d'environ 30 ng/ml. Le composé actif, le diltiazem, peut être utilisé sous la forme de base libre ou d'un de ses sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie Les sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie comprennent les sels d'acides organiques, tels qu'acé- tate, oxalate, malonate, tartrate, citrate, lactate ou aspartate, et les sels d'acides inorganiques, tels que chlorhydrate, brom- hydrate, sulfate, nitrate ou perchlorate. Le diltiazem ou son sel d'addition d'acides peut être utilisé conjointement avec divers agents antitumoraux, par exemple, les agents antitumoraux antimétaboliques, tels que métho- trexate, 6-mercaptopurine, 5-fluoro uracile, Ft 207 ou 1-( 2-tétra- hydrofuryl)-5-fluorouracile, cytosinearabinoside, ou cyclocytisine; les antibiotiques antitumoraux, tels que mitomycine C,bléomycine, Aclacinomycine A, daunorubicine, doxorubicine, chromomycine A 3, 4 '-Otétrahydropyrannyladriamycine, ou actinomycine D; les alcaloides végétaux antitumoraux, tels que vincristine, vinblastine ou vin- désine; et les dérivés de podophyllotoxine tels que 4-déméthyl- épipodophyllotoxine-P-D-éthylidène-glycoside, parmi lesquels, on préfère en particulier utiliser avec l'agent de l'invention la dauno- rubicine, la doxorubicine, la vincristine, la vinblastine, la 4 '-0- tétrahydropyrannyladriamycine, la vindésine, le 4 '-déméthylépipodo- phyllotoxine-P-D-éthylidène-glucoside et l'Aclacinomycine A. La dose de diltiazem ou de son sel d'addition d'acide peut varier selon les voies d'administration, l'âge des patients, la gravité des maladies et également les types d'agents antitumoraux utilisés simultanément, mais elle est ordinairement dans l'intervalle de 1 mg/kg à 20 mg/kg, de préférence de 5 mg/kg à 15 mg/kg, par jour. La dose de l'agent antitumoral à utiliser simultané- ment avec le diltiazem ou son sel d'addition d'acide n'est pas essentielle, mais elle est comprise dans la gamme ordinairement utilisée, c'est-à-dire de l Ong à 30 mg, de préférence de 0,005 à mg, plus particulièrement de 0,01 à 10 mg, mieux encore de 0,01 à 3 mg Par exemple, on administre le méthotrexate par voie orale ou intraveineuse à une dose d'environ 0,05 à 0,3 mg/kg; la 6-mercapto- purine par voie orale ou intraveineuse à une dose d'environ 2,5 mg/kg; le 5-fluorouracile et le Ft 205 à une dose d'environ à 20 mg/kg par voie intraveineuse et d'environ 2 à 5 mg/kg ou d'environ 5 à 30 mg/kg, respectivement, par voie orale; le cytosine- arabinoside ou la cyclocytisine par voie intraveineuse, à une dose d'environ 0,8 à 1,6 mg/kg ou d'environ 8 à 20 mg/kg, respectivement; la mitomycine C, les bléomycines ou la chromomycine A 3 par voie intraveineuse, à une dose d'environ 0,02 à 0,05 mg/kg, d'environ 0,2 à 0, 4 mg/kg ou d'environ 0,005 à 0,02 mg/kg, respectivement; l'actinomycine D par voie intraveineuse à une dose d'environ 101 g/kg; la daunorubicine ou la doxorubicine par voie intraveineuse à une dose d'environ 0,2 à 3 mg/kg; et la vincristine ou la vin- blastine à une dose de 0,01 à 0,2 mg/kg. Le diltiazem ou son sel d'addition d'acide acceptable en pharmacie est donc intéressant pour le traitement ou la prévention de diverses tumeurs malignes par administration simultanée avec un agent antitumoral classique, à un animal à sang chaud ou à l'homme 2527441. atteint desdites tumeurs malignes. Le diltiazem ou son sel d'addition d'acide et l'agent antitumoral peuvent être administrés de n'importe quelle manière et sous la forme de n'importe quelles préparations phar- maceutiques Par exemple, les deux agents peuvent être administrés par les voies orale et parentérale Ils peuvent être administrés sa S la forme d'une préparation combinée ou séparément Dans ce dernier cas, c'est-àdire lorsqu'on les administre séparément, ils peuvent être utilisés sous la même forme de dosage ou sous des formes de dosage différentes Par exemple, avec certains types d'agents antitumoraux, le diltiazem ou son sel d'addition d'acide et l'agent antitumoral peuvent être administrés oralement, ou bien l'agent antitumoral peut être administré par voie parentérale et le diltiazem ou son sel d'addition d'acide par voie orale Les agents antitumoraux sont ordinairement administrés par voie inter- mittente ou continue en tenant compte de leur effet et de leur toxicité et, dans tous les cas, l'agent selon l'invention peut accroître l'activité antitumorale de l'agent antitumoral. Le diltiazem ou son sel d'addition d'acide et les agents antitumoraux peuvent être utilisés sous la forme de prépara- tions classiques en mélange avec un support ou diluant acceptable en pharmacie classique Les supports ou diluants acceptables en pharmacie pour les préparations de diltiazem ou de son sel et pour les préparations orales des agents antitumoraux comprennent, par exemple, les agents liants (par exemple sirop, gomme arabique, géla- tine, sorbitol, gomme adragante, polyvinylpyrrolidone, etc), les excipients (par exemple lactose, saccharose,amidon de mais, phosphate de potassium, sorbitol, glycine, etc), les lubrifiants (par exemple stéarate de magnésium, talc, polyéthylèneglycol, silice, etc), les agents désagrégeants (par exemple amidon de pomme de terre, etc), les agents mouillants (par exemple laurylsulfate de sodium, etc). Les préparations comprennent des préparations pharmaceutiques clas- siques, telles que tablettes, pilules, poudres, capsules et granulée. Pour l'administration parentérale, on peut les uti- liser sous la forme d'injection et de perfusion en goutte à goutte en mélange avec l'eau distillée pour injection, le sérum physiolo- gique ou la solution aqueuse de glucose, ou sous forme de suspension, 2527 4 41 dispersion ou émulsion, en mélange avec le glycérol, le propylène- glycol, le sirop simple, l'éthanol, les huiles grasses, l'éthylène- glycol, le sorbitol, etc. Dans la préparation pharmaceutique de diltiazem ou de son sel d'addition d'acide acceptable en pharmacie à utiliser pour accroître l'activité antitumorale d'un agent antitumoral, le diltiazem ou son sel est incorporé en quantité de 10 à 120 mg, de préférence de 20 à100 mg,par dose unitaire Dans la préparation de diltiazem ou de son sel d'addition d'acide acceptable en pharma- cie et d'un agent antitumoral, c'est-à-dire une composition anti- tumorale, le diltiazem ou son sel est incorporé en quantité de à 120 mg, de préférence de 20 à 100 mg et l'agent antitumoral en quantité de 31 g à 30 mg, de préférence de 0 005 à 15 mg, plus particulièrement de 0,003 à 3 mg par dose unitaire. L'agent selon l'invention pour accroître l'effet thérapeutique d'un agent antitumoral peut être utilisé avec divers agents antitumoraux pour traiter diverses tumeurs malignes Les tumeurs à traiter, qui dépendent de l'agent antitumoral sont, par exemple, la maladie de Hodgkin, le réticulosarcome, la leucémie aiguë, la leucémie lymphatique chronique, la leucémie myélogène chronique, le myélome multiple, le sarcome déciduocellulaire, la tumeur de Wilms, le neuroblastome, le rhabdomyosarcome, le carcinome planoépithélial, le cancer du poumon, le cancer du sein, le cancer de l'ovaire, le cancer de l'utérus, le cancer de l'estomac, le cancer du colon, le cancer du foie, le cancer du pancréas, le cancer de la peau, le cancer de la vessie, etc. Le diltiazem ou son sel d'addition d'acide peut accroître l'activité de divers agents antitumoraux sur des cellules antitumorales résistantes aux agents et il est également efficace pour diminuer la dose des agents antitumoraux à la fois dans le cas des cellules tumorales résistantes et non résistantes, et, par conséquent,peut réduire la toxicité et les effets secondaires de l'agent antitumoral lors de son administration aux patients En outre, le diltiazem utilisé selon l'invention peut accroître l'acti- vité antitumorale des agents antitumoraux, même sur des cellules tumorales douées de résistance croisée aux agents et, par conséquent, l'agent antitumoral peut être utilisé sans tenir compte de la résistance croisée des cellules tumorales aux agents antitumoraux pour autant qu'il soit administré au patient simultanément avec le diltiazem. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée. EXEMPLE 1 Effets sur des cellules de leucémie P 388 résistantes à la vin- cristine. On fait incuber dans un tube de culture 2 ml d'un milieu contenant 3,0 104 cellules de leucémie P 388 résistantes à la vincristine (ci-après dénommée"VCR") à 370 C dans une atmosphère humide contenant 5 % de dioxyde de carbone Après culture pendant 24 h, on ajoute au bouillon de culture une solution de chlorhydrate de diltiazem et la VCR en solution dans le sérum physiologique et on poursuit la culture. A titre de témoin, on répète le mode opératoire ci-dessus, sauf que l'on ajoute la VCR seule au bouillon de culture. Après culture pendant 48 h, on compte le nombre de cellules dans le bouillon de culture au moyen d'un compteur Coulter On mesure l'effet inhibiteur-de croissance en portant sur un graphique la concentration de l'agent et le taux de croissance (rapport de la vitesse de croissance des cellules traitées avec l'agent à celle des cellules témoins) et en lisant la concentration (CI 50) de l'agent à laquelle la croissance des cellules est inhibée à 50 % Les résultats obtenus sont représentés sur la figure unique du dessin annexé dans laquelle la courbe ( 1) représente le taux de croissance des cellules traitées par la VCR seule, la courbe ( 2) eelle des cellules traitées par la combinaison de VCR et de diltiazem (l Or), la courbe ( 3) celle des cellules traitées par la combinaison de VCR et de diltiazem ( 35 >i M) et la courbe 4 celle des cellules trai- tées par la combinaison de VCR et de diltiazem ( 100 JM). EXEMPLE 2 Effet d'accroissement de l'activité antitumorale chez les souris inoculées avec des cellules de leucémie P 388 résistantes à la VCR. On inocule des souris femelles CDF pesant 20-23 g (un groupe: 5 souris) par voie intrapéritonéale avec un liquide d'ascite dilué contenant 106 cellules de leucémie P 388 résistantes à la VCR On prépare séparément deux solutions de VCR et de chlorhydrate de diltiazem dans le sérum physiologique aqueux à 0,9 % et on les mélange On administre le mélange par voie intra- péritonéale aux souris à une dose de 0,01 ml/g de poids corporel pendant 10 jours après l'inoculation des cellules de leucémie. On évalue l'accroissement de l'activité antitumorale par les rapports T/C et T/V exprimés par les équations suivantes: T =Durée moyenne de survie (jours) du groupe traité x 100 C Durée moyenne de survie (jours) du groupe non traitéx 100 Durée moyenne de survie (jours) du groupe traité T par l'agent antitumoral et par le diltiazem x 110 V Durée moyenne de survie (jours) du groupe traité par la VCR seule Les résultats obtenus sont indiqués dans le tableau I ci-après. EXEMPLE 3 Effet de l'accroissement de l'activité antitumorale chez les souris inoculées avec des cellules de leucémie P 388 résistantes à V'ADM. On inocule par voie intrapéritonéale à des souris femelles CDF 1 pesant 20-23 g (un groupe: 5 souris) un liquide d'ascite dilué contenant 10 cellules de leucémie P 388 résistantes à la doxorubicine (ci-après dénommée "ADM") On prépare séparément deux solutions d'ADM et de chlorhydrate de diltiazem dans le sérum physiologique aqueux à 0,9 % et on les mélange On traite les souris de la même manière que décrit à l'exemple 2 et on évalue de manière analogue l'effet d'accroissement par le diltiazem de l'activité antitumorale de i'ADM. Les résultats obtenus sont indiqués dans le tableau II ci-après. EXEMPLE 4 Effet d'accroissement de l'activité antitumorale par le diltiazem chez les cellules tumorales résistantes et non résistantes. On procède comme décrit à l'exemple 1, sauf que l'on utilise comme cellules tumorales des cellules de leucémie P 388 résistantes ou non à la VCR et à V'ADM et des cellules de leucémie humaine K 562 et on utilise la VCR ou l'ADM seuls ou avec le chlor- hydrate de diltiazem comme agent, et on mesure de la même manière la CI 50 des agents. Les résultats obtenus sont indiquées dans le tableau III (données concernant l'ADM) et le tableau IV (données concernant la VCR), respectivement Comme on le voit dans ces tableaux, le diltiazem augmente l'activité antitumorale des agents, que les cellules tumorales soient sensibles (non résistantes) ou résistantes. EXEMPLE 5 Effet d'accroissement par le diltiazem de l'activité antitumorale sur les cellules de tumeur solide. On évalue les effets d'accroissement par le diltiazem de l'activité antitumorale de la VCR sur des lignées de cellules tumorales de mélanome B 16 (mélange B 16, F 10, F 1, B 2 et BL-6) et de lignées de cellules de tumeur 26 du côlon (mélange C 26, NL-33, N-1, N-5 et KL-2). L'expérience est effectuée de la même manière que décrit à l'exemple 2, on cultive les cellules tumorales pendant 24 h et, après traitement par les agents, on effectue la culture pendant 72 h et on mesure de manière analogue la CI 50. Les résultats obtenus sont indiqués dans le tableau V ci-après. Essai clinique 1 Le patient est un homme âgé de 36 ans présentant les symptômes subjectifs de lymphadénome de l'aisselle gauche et chez qui on a diagnostiqué par biopsie la maladie de Hodgkin (sclérose nodulaire) et qui a été hospitalisé On le soumet a la thérapie MOPP (voir Ann Intern Med,, pages 881-895, 1970) comme "Stade Clinique II Ia" (voir Cancer Research, volume 33 ( 1971), pages 1860-1861) Le premier jour, on injecte au patient, par voie intraveineuse, du sulfate de vincristine ( 1,4 mg/m) et de la 2,2 '-dichloro-N-méthyldiéthylamine ou moutarde azotée ( 6 mg/m) et ensuite on lui administre oralement du chlorhydrate de pro- 2 2 carbazine ( 100 mg/m) et de la prednisone ( 40 mg/m 2), ledit chlorhydrate de procarbazine et ladite prednisone étant administrés chaque Jour et l'administration poursuivie pendant 14 jours, et ledit sulfate de vincristine et ladite moutarde azotée étant admi- nistrés le premier jour et le huitième jour à la même dose Du 2527441: quatorzième au vingt-huitième jour, on n'administre pas de médica- ment On répète le cycle de traitement ci-dessus pendant environ 6 mois (total 6 cycles), mais on n'observe pas de réduction du lymphadénome Environ un mois après la thérapie MOPP ci-dessus, on administre au patient en plus de la thérapie MOPP du chlorhydrate de diltiazem ( 90 mg). Il en résulte temporairement une réduction remarquable du lymphadénome Bien que le lymphadénome augmente encore après environ un mois, il est réduit par l'administration de diltiazem ( 180 mg/jour, que l'on divise et l'on administre en trois prises par jour) pendant quatre jours. On n'observe pas d'effet secondaire pendant le trai- tement. Essai clinique 2 La patiente est une femme âgée de 36 ans qui a d'abord présenté une augmentation des leucocytes ( 9200/11) à 6 semaines de grossesse et chez qui on a diagnostiqué par examen détaillé un myéloplaste chronique On lui administre d'abord du Busulfan (diméthanesulfonate de l,4-butanediol) pendant environ 1 an Elle présente ensuite les symptômes d'arthralgie géniculaire droite, de pyrexie, d'augmentation du splénome et d'augmentation des leucocytes, qui sont douteux d'une crise blastique, et elle est donc hospita- lisée A l'hopital, on lui administre de la vincristine ( 1 mg par semaine) et de la prednisolone ( 60 mg/jour) Il en résulte une certaine récupération temporaire du nombre de leucocytes et du splénome, mais, même après la troisième administration de vincristine, ( 1 mg par semaine) , le nombre de leucocytes et le splénome augmentent encore et l'on administre donc du chlorhydrate de diltiazem à une dose de 180 mg/jour, divisée et administrée en trois prises par % jours, pendant 4 jours en plus de l'administration de vincristine ( 1 mg/semaine) Il en résulte une nette amélioration des deux symptômes et l'effet se poursuit pendant environ deux semaines. On n'observe pas d'effet secondaire pendant le traitement. Il est entendu que l'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation préférés décrits ci-dessus à titre d'illustration et que l'homme de l'art peut y apporter diverses modifications et divers changements sans toutefois s'écarter du cadre et de l'esprit de l'invention. TABLEAU I Agent administré l Accroissement de loactivité antitumorale VCR Diltiazem Durée de survie T/C T/VI (.uglkg) H C 11 jus (mg/kg)(ou) ____ ____ ___ 11,8 0, 4 104 , 6 2, 1 93 I ioo l 60 11 8 1 q 104 T 111 j 80 13,8 2,3 121 I 1301 12 2 1,3 107 ____ 115 J 3,6 1,9 119 15 ,8 1,3 95 i 100 13,8 1,7 121 128 80 14,4 1,5 J 126 133 15-,0 Oq 132 I 139 15,0 1,5 132 139 12, 4 1,0 109 100 I 14,8 1,2 T 130 119 14,8 0,7 T 130 i 119 1 ______t____ J 15,8 0 7 139 127 12517, 1,2 1 9 1 3 17, O 1,2 -27441 TABLEAU Il Agent administré Accroissement de l'activité antitumorale VCR Diltiazem Durée de survie T/C T/v (mg/kg) HC 1 (jours) (% M% (mg/kg) 12,6 0,5 100- 13,0 O 103 - 13,6 0,8 108 100 16,2 2,4 129 119 0,5 15,2 0,4 121 112 15,6 0,8 124 115 14, 8 0,7 117 100 15,8 0,4 125 107 16,0 0,6 127 108 I 125 17,6 1,7 '140 119 14,6 1,2 116 100 16,2 1,2 129 1 16,2 0,7 129 1 17,8 1,8 141 121 252 _ 7441 TABLEAU III Accroissement de l'activité de l'ADM Di 1 tiazexx P 388 P 388/ADM ci 50 (ng/mnl) Effet d'ac ci C 50 (nglrnl) Effet d'ac- croisemntcroissement 0 10, 0 2,1 i 592 76, 8 1 7,7 3,6 1,3 133 18,4 4,5 j 6, 0,7 1,4 53,7 3,1 11,0 6,0 0,4 1,7 30,7 4,1 1913 TABLEAUT IV Accroissement de l'activité de la VCR Diltiazem P 388 P 388/VCR ci 50 (ng/mnl) Effet d'ac ci 50 (ng/zni) Effet d'ac- croissement croissement O 1,88 0413 1 29,7 2,87 1 1,43 0,12 1,3 3,07 0,09 9,7 0, 56 0,06 3,4 1,03 0,06 28,8 0,45 0,02 4,2 0,55 0,17 54,0 Diltiazen K 562 K 562/VCR (Pm) ci O (ng/znl) Effet d'ac ci (ng/ml> Effet d'ac- croissement 50 croissement O 2,33 0,24 1 200 16,3 i 1,52 0,09 1,5 23 2,16 8,7 1,00 0,17 2,3 4,1 0,36 48,8 0,69 0,10 3,4 2,57 0,41 77,8 TABLEAU V Diltiazem Cellules de mélanome B 16 (#a M) mdlanome B 16 mélaage B 16 F F B, BL-6 16 ___ _ __ _ 10 1 2 0 2,6 + 0,87 7,4 0,6 8,6 + 3,8 5,15 + 0,64 5,4 + 0,2 ( 1,0) ( 1,0 o) ( 1,0) ( 1,0) ( 1,0) 1,75 + O 3,0 + 0,61 2,07 + 0,29 3,37 + 0,76 2,22 + 0,35 ( 1,5) ( 2,5) ( 4,2) ( 1,5) ( 2,5) 1,21 + 0,51 1,63 + 0,12 0,67 + 0,11 1,62 + 0,28 1,68 + 0,18 ( 2,1) ( 4,5) ( 12,8) ( 3,2) ( 3,2) Diltiazcm Cellules de tumeur 26 du côlon |(Pt M) mélange C 26 NL-33 N-1 N5 KL-2 0 17,8 + 2,6 35,8 + 2,6 25,4 2,3 15,8 + 0,3 11,0 + 0,3 ( 1,0) ( 1,0) ( 1,0) ( 1,0) ( 1,0) t, 2,65 + 0,50 16 1 + 6,3 4,96 + 0,56 5,78 + 0,45 2,47 + 0,02 ( 6,7) ( 2,2) ( 551) ( 2,7) ( 4,5) 1,56 + 0,19 5,77 + 0,33 2,04 + 0,25 2,03 + O 35 1,72 + 0,04 ( 11,4) ( 6,2) ( 12,5) ( 7,8) ( 6,4) *) La valeur dans le tableau est la CI 50 (mg/ml) de la VCR et la valeur entre parenthèses est le rapport de la CI 50 dans le groupe traité par la VCR et le diltiazem à la CI 50 dans le groupe traité par la VCR seule (c'est-a-dire l'effet d'accroissement d'activité par le diltiazem). r' -1 2527441 " R E V E N D I C A T I O N S 1 Composition pour accroître l'effet thérapeutique d'un agent antitumoral, caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif une quantité efficace de diltiazem ou d'un de ses sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie, en mélange avec un support ou diluant classique acceptable en pharmacie. 2 Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le diltiazem ou son sel d'addition d'acide acceptable en pharmacie est incorporé en quantité de 10 à 120 mg dans une dose unitaire. 3 Composition antitumorale utile notamment pour le traitement ou la prévention des tumeurs, caractérisée en ce qu'elle contient une quantité efficace de diltiazem ou d'un de ses sels d'addition d'acides acceptables en pharmacie et une quantité efficace d'un agent antitumoral, en mélange avec un support ou diluant classique acceptable en'pharmacie. 4 Composition antitumorale selon la revendication 3, caractériséeen ce que le diltiazem ou son sel d'addition d'acide acceptable en pharmacie est incorporé en quantité de 10 à 120 mg et l'agent antitumoral en quantité de 3 pg à 30 mg dans une dose unitaire. Composition antitumorale selon la revendication 3, caractérisée en ce que l'agent antitumoral est choisi parmi les agents antitumoraux antimétaboliques, les antibiotiques antitumoraux et les alcaloïdes végétaux antitumoraux. 6 Composition antitumorale selon la revendication 3, caractérisée en ce que l'agent antitumoral est choisi parmi la vin- cristine, la vinblastine, la doxorubicine, l'acrasinomycine A, le 4 '-déméthylépipodophyllotoxine-i-D-éthylidène-glucoside, la 4 '-0- tétrahydropyrannyladriamycine et la vindésine. 7 Composition antitumorale selon la revendication 3, caractérisée en ce que l'agent antitumoral est choisi parmi la vin- cristine, la vinblastine, la doxorubicine, le 4 '-déméthylépipodo- phyllotoxine-P-D-éthylidène-glucoside et la 4 '-0-tétrahydropyrannyl- adriamycine. 8 Composition antitumorale selon la revendica- tion 3, caractérisée en ce que l'agent antitumoral est choisi parmi la vincristine, la vinblastine, la doxorubicine.