Brevet FR2523127A1 — publié le 19830916

La présente invention concerne la N, S-diacétylcysteine de formule développée suivante L'invention concerne également la preparation de ce compose et ses applications thérapeutiques. Pour obtenir la N,S-diacétylcystéine, on part de la cystéine, sous forme soit de base libre, soit de chlorhydrate dont on acetyle le groupe amino et le groupe thiol en milieu alcalin par l'anhydride acetique. La réaction a lieu à une température qui peut varier entre -50C et +5"C, pendant une duree de 2 à 3 h, puis au repos pendant une nuit à là même temperature, après quoi on l'acidifie par l'acide chlorhydrique concentre ; on maintient en agitation pendant 3 h. On extrait le melange de réaction par l'acétate d'ethyle. On sèche l'extrait organique sur sulfate de sodium anhydre et on l'évapore à siccite sous vide ; on lave le résidu solide plusieurs fois à l'éther méthylique. Le produit obtenu, la N, S-diacétylcystéine, est seche sous vide à 50-600C. L'exemple suivant illustre l'invention sans toutefois en limiter la portee. EXEMPLE Dans un réacteur de 10 litres, muni d'un agitateur, d'un bain réfrigérant, d'un thermomètre et d'une ampoule à brome, on dissout 725 g d'hydroxyde de sodium (18,1 mol) dans 4000 ml d'eau. On laisse refroidir et, lorsque la température est de 50C, on ajoute par petites portions 1000 g de chlorhydrate de cysteine (6,3 mol), de telle sorte que la température ne dépasse pas 150C. On ajoute en refroidissant, par l'ampoule à brome, 1225 ml d'anhydride acetique, de façon à maintenir la temperature entre -5 C et +5 CC. On maintient en agitant à la temperature indiquee pendant 3 h et ensuite au repos pendant une nuit. On ajoute 1200 ml d'acide chlorhydrique concentre à une température de -50C +5"C et on agite pendant 3 h.On extrait le mélange de reaction 3 fois par 1500 ml d'acétate d'ethyle. On sèche l'extrait organique sur Na2S04 anhydre et on ltevapore à siccité sous vide et on lave le résidu 3 fois avec 2000 ml d'éther éthylique On filtre le solide résultant, en suspension dans l'éther, et on le sèche sous vide à 50-600C. Rendement : 84,7 % Analyse élémentaire : C (%) H (%) N (%) S (%) Trouvé 40,8 5,6 6,7 15,4 Calcule 40,97 5,40 6,82 15,62 Point de fusion : 1180C. Spectre infrarouge Le spectre IR du produit Cen pastille de KBr) présente des bandes d'absorption à 3350, 1715, 1690, 1625, 1550, 1240 et 650 cm Spectre de RMN : Le spectre de RMN à 60 NHz d'une solution du produit dans le DMSO deutérie présente les signaux suivants Signal Multiplicité Integration (pprn échelle chez 1,7 singulet 3H 2,2 singulet 3H 3,1 doublet 2H 4,2 sextuplet IH 8,1 doublet 1H Pharmacologie Les études toxicologiques, pharmacodynamiques et pharmacocinetiques realisees avec le produit selon l'invention sont indiquees ci-dessous. Les essais de toxicite aiguë ont prouve que la DL50 par voie orale du produit de l'invention est très superieure à 5000 mg/kg ( cette dose, aucun decès ne s'est produit), le produit etant considéré comme non toxique, suivant le critère de Hodge et Steamer. Les essais de toxicite chronique ont ete réalisés sur des chiens beagles eut des rats Sprague-Dawley, avec administration quotidienne pendant 6 et 3 mois, respectivement, aux doses suivantes : chiens, 20 et 100 mg/kg ; rats, 100, 300 et 900 mg/kg. Dans aucune des experiences, on n'a trouve de différences significatives entre les animaux traités et les animaux temoins. Le produit selon l'invention a démontré son activité pharmacologique, aussi bien "in vitro" que "in vivo", à la différence des produits de référence. La N-acetyl-cysteine est active "in vitro", ne l'étant pas "in vivo" du fait que ses groupes actifs sont inactivés par les mucines digestives. La carboxyméthylcystéine, au contraire, ne présente pas d'activité pharmacologique "in vivo", ses groupes actifs étant protégés, ce qui, d'autre part, lui permet de passer la barrière digestive sans être inactivée. Les études pharmacodynamiques ont été réa- lisées aussi bien "in vitro" que "in vivo". L'étude de l'action "in vitro" sur la viscosite de la secretion bronchiale d'origine hospitalière a été definie à l'aide d'un microviscosimètre Well Brookfield. Le produit, objet de l'invention,a démontre un effet mucolytique de 87,10 % à une concentration de 0,05M, tandis qu'à cette meme concentration l'action de la carboxymethylcysteine était pratiquement nulle. L'activité pharmacologique "in vivo" a été démontrée sur le bronchospasme histaminique, induit sur le cobaye, selon la technique de Konsett-Rossler. La methode se base sur la mesure de la dilatation pulmonaire sur des animaux soumis à respiration constante. Le produit selon l'invention a donné les résultats suivants Dose mg/kg Voie Inhibition > %, # # 1 p.o. 7,4 + 1,5 1 i.d. 14,9 + 3,7 1 i.v. 8,9 t:2,2 La sécrétion bronchopulmonaire du rat "in vivo" a également ete étudiée selon la technique de Dalham4 en induisant la sécrétion bronchiale par injection sous-cutanee de pilocarpine (0,2 mg/kg). On a mesuré les volumes sécrétés pendant 3 h, tant chez les animaux traités avec le produit selon l'invention que chez les animaux témoins traites avec le serum physiologique. L'administration orale du produit à 50 mg/kg produit une augmentation moyenne de la sécrétion de 35,7 %, cette augmentation étant de 25 % pour la carboxyméthylcystéine et nulle pour la N-acétylcystéine. L'étude pharmacocinetique du compose selon l'invention a ete déterminée après administration orale2 en doses uniques de 500 mg/kg, à differents groupes de rats. On a determine la concentration du produit dans le sérum à differents moments, après son administration orale, par chromatographie en phase gazeuse, après avoir transforme au prealable le compose en son derivé triméthyl-s;lyîé. Les résultats obtenus indiquent que le composé selon l'invention est stable dans le suc gastrique (il y a seulement hydrolyse de 10 X après 7 ou 8 h), il est rapidement absorbé, atteignant les teneurs sanguines maxinales 2-3 h après son administration orale. Il reste plus longtemps dans l'organisme que la S-carboxyméthylcystéine, ayant été détecté dans des échantillons de sérum prélevées 15 h après son administration. Exemple de capsules (quantités par capsule) Produit selon l'invention 200 mg Amidon 100 mg Lactose 81 mg "Âéros il" 10 mg Polyvinylpyrrolidone 8 mg Stéarate de magnesium 6 mg Exemple de sachets (quantites par sachet) Produit selon l'invention 100 mg Saccharose 250 mg Polyvinylpyrrolidone 10 mg Colorant 1 mg Arme 20 mg Saccharine 5 mg Il est entendu que l'invention n'est pas limitée aux modes de realisation préférées décrits ci-dessus à titre d'illustration et que l'homme de l'art peut y apporter diverses modifications et divers changements sans toutefois s'écarter du cadre et de l'esprit de l'invention. REVENDICATIONS 1. Nouveau compose caractérisé en ce qu'il correspond à la N S-diacetylcysteine dont la formule est la suivante 2. Procédé de préparation du compose selon la revendication 1, caracterise en ce que l'on dissout le chlorhydrate de cys téine ou la base libre dans l'hydroxyde de sodium à une température qui ne depasse pas 15 C, on ajoute lentement de l'anhydride acétique à cette solution en maintenant la temperature entre -50C et 50C, on fait reagir en agitant pendant 2 à 3 h à une température comprise entre -50C et 50C et puis, au repos, pendant une nuit à une temperature inferieure à OOC, on ajoute lentement de l'acide chlorhydrique concentre en agitant et en maintenant la temperature entre -50C et 50C, on maintient l'agitation dans ce même intervalle de tem perature pendant 3 h, on extrait par l'acétate d'ethyle, on sèche extrait organique sur Na2SO4 anhydre et on amène à siccité, on lave le residu solide 3 fois par l'éther éthylique, on filtre la suspension et on sèche le solide sous vide. 3. Nouveau medicament, utile notamment comme agent mucolytique et antihistaminique, caractérisé en ce qu'il consiste en N, S-dlacétylcysteine selon la revendication 1. 4. Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles contiennent comme ingrédient actif le médicament selon la revendication 3, en association avec des excipients et vehicules acceptables en pharmacie. 5. Forme d'administration des compositions selon la revendication 4.