Brevet FR2514646A1 — publié le 19830422

La présente invention a pour objet titre de médicament protégeant ou restaurant la formule sanguine blanche1 notamment la lignée l'ymphocytaire, le désoxyribonucléinate de magnésium et son association avec la fraction antitoxique du foie. Le désoxyribonucléinate de magnésium est appelé également désoxyribonucléate de magnésium. La fraction antitoxique du foie est connue en tant que médicament de protection hépatique. Or, il a été découvert, suivant la présente invention, que le désoxyribonucléinate de magnésium, seul ou en association avec la fraction antitoxique du foie, est sans effet sur une formule sanguine blanche normale (il' n'y a donc pas de contreindication, par exemple en cas de leucémie), alors qu'il maintient et par conséquent restaure la formule banche, lorsque celle-ci est affectée, par exemple sous l'effet de certains médicaments (tels que le chloramphénicol et les corticoldes par exemple, surtout lorsqu'ils sont, comme ces derniers, adminis trés pendant de longues périodes), ou lorsqu'elle est affectée par suite d'un infection virale; la fraction antitoxique du foie renforce cette action du désoxyribonucléate de magnésium en l'accélérant.On sait qu'il n'y a pas de remède direct contre les virus ; il faut attendre environ 3 semaines l'apparition des anticorps spécifiques, mais on ne peut les attendre valablement que si la formule blanche (notamment la lignée lymphocytaire) reste normale ; c'est pourquoi on administre des médicaments, notamment des antibiotiques, non pas pour lutter contre le virus, que ça n'atteint pas, mais pour s'opposer a des affections secondaires. Le présent médicament remplace ces antibiotiques en restaurant la formule sanguine blanche. Il doit ainsi être considéré comme un anti-viral vrai, au même titre que les-vaccins. La preuve de l'absence d'effet sur une formule blanche normale du désoxyribonucléate de magnésium et de son association avec la fraction antitoxique du foie a été apportée par une recherche de 11 action stimulante éventuelle sur le système réticulo-endothélial de ces deux substances, étudiées séparément. La méthode employée derive de celle de BIOZZI (Brit. J. Exp. Pathol. 34 pp. 441-457 - 1953), oA l'on détermine la cinétique de disparition du carbone colloïdal chez la souris. Le mode opératoire est le suivant Des souris femelles de 18 a 20 g sont sensibilisées par injection intrapéritonéale de 0,5 ml du produit à étudier - lot témoin : eau distillée, - lot 1 : fraction antitoxique du foie : 10 mg/kg, - lot 2 : désoxyribonucléate de magnésium : 10 mg/kg. 2 jours après, les animaux sont pesés et on injecte, par voie intraveineuse, 0,25 ml d'eau gélatinée å l % contenant 80 mg de carbone par millilitre. 2 animaux par lot et par temps sont sacrifiés : 2, 5, 10, 15 et 20 minutes après l'injection de carbone. Le sang recueilli sur héparine est dilué dans une solution de carbonate de sodium à 1 % et la densité optique (DO) est lue au spectrophotomètre a 675 nm. On calcule pour chaque lot - la droite de régression (Log DO : Log DOe + Kt) et le coefficient de corrélation. - l'index colloldopexique (K) qui représente la vitesse de décroissance de la carbonémie et qui est la pente de la droite de régression. On teste le parallélisme des deux droites de regres- sion (du lot témoin et du lot 1 ou 2) par une analyse de variance. Si les deux droites sont statistiquement significativement non parallèles, le produit est sti mulant, si la pente est supérieure à celle du témoin, tandis qu'il est dépresseur, si la pente est inférieu re a celle du témoin à 1 et (n1 + n2 - 4) degrés de liberté (n1 et n2 étant le nombre de paires de valeurs). Les résultats sont rassemblés dans le tableau ci-apres. Densité Optique TENPS ANINAT LDT TENOIN LDT : LDT 2 : (monutms) moyenno moyenne moyenne 2 1 0,458 0,296 0,3 2 0,572 0,575 0,35 0,323 0,265 0,232 5 1 0,190 0,229 0,172 2 0,304 0,247 0,205 0,217 0,15 0,161 10 1 0,110 0,1 0,107 2 0,094 0,102 0,095 0,097 0,085 0,093 15 1 0,07 0,072 0,04 2 0,065 0,067 0,052 0,062 0,03 0,035 20 1 0,032 0,024 0,015 2 0,028 0,030 0,035 0,028 0,012 0,013 a b Coefficient de P erreur corrélation standard TEMDIN - 0,063 0,238 0,9888 LOT 2 - 0,0733 - 0,373 0,993 Comparaison : test de parallélisme des droites de régression. Ces droites sont représentées sur le dessin annexé. TEST rapport des pentes ddl F différence TEMDIN/LDT 1 0,825 1 - 6 1,641 non significative droites parallèle TEMOIN/LOT 2 1,163 1 - 6 1,141 non significative droites parallèle En conciusion, dans les conditions expérinentales décrites ciessus, la fraction antitoxique du foie et le désoxyribonucléate de magnésium ne présentent pas d'effet stimulant vis à vis du système réticulo-endothélial. L'action protectrice du désoxyribonucléate de magnésium a été étudiée chez le porc, soumis à un traitement par le chloramphénicol, administré å raison de 1 g jkg/j. On constate lé rétablissement de la formule leucocytaire dans un delai de trois semaines à un mois, avec une administration de 20 mg/kg/j de désoxyribonucléate de magnésium, seul ou associé à la fraction antitoxique du foie, à raison de 1 à 20 mg/kg/j de cette dernière, dont la présence a pour effet d'accélérer l'obtention du résultat recherché. La théorie de l'action du désoxyribonucléate de magne- sium est la suivante : la régénération de la formule blanche est basée sur un apport en magnésium, noyau des cellules inté rèssées. A titre de comparaison, en cas d'anémie ferriprive, on procède à un apport de fer ferreux, mais assorti d'un élément dit "de fixation" : hématoporphyrine, acide folique, par exemple. Dans le présent cas, c'est l'acide désoxyribonucléique, qui est l'élément de fixation indispensable ; pourquoi ? dans son ouvrage "Les effets secondaires des médicaments", Monsieur L. MEYER (Groninghe, EXCERTA MEDICA FOUNDATION, Amsterdam- New-York Londres, 1964) donne les preuves statistiques, cliniques de la démolition de la formule blanche : par des antibiotiques (tel le chloramphénicol), par tous les corticoides, par l'aspirine, etc. ....; c'est un constat de clinicien ; mais quelest le mécanisme de cette démolition ? L'hypothèse (vérifiée) est la suivante c'est l'acide ribonucléique, en chaînes spécifiques de programmation, qui présidè a la réaction de l'organisme. Les instructions sont communiquées à l'acide désoxyribonucléique ouvrier, pour la fabrication de nouvelles cellules. Ces chaînes vont utiliser le magnésium d'apport et elles comportent le ribose, ou le désoxyribose, et les combinaisons multiples, presque à l'infini, des 21 amino-acides, qui sont apportés au patient par l'alimentation. Si, cependant, l'aspirine ou la cortisone démolissent par action chimique, ou même dénaturent simplement, une seule des bases pyrimidiques, alors certains organismes résistent, qui en ont conservé, et d'autres ne resistent pas, même si ce qui manque n'est nécessaire qu'en quantité infinitésimale; c'est alors qu'intervient le présent médicament, qui comble ledit manque. On a également mis en évidence l'action protectrice de l'association vis a vis de la formule sanguine blanche dans un essai sur le rat faisant aussi intervenir le chloramphénicol. On sait que le chloramphénicol possède des propriétés aplasiantes médullaires, qui se traduisent par une baisse des leucocytes circulants t les conditions et les résultats de l'essai sont rapportés ci-apres. a) Traitement Les doses administrées par voie orale ont été les suivantes - LOT 1 : lot témoin ne recevant que l'excipient, gomme arabique à 10 %. - LOT 2 : lot traité au chloramphénicol recevant 1 g/kg/j de chloramphénicol. - LOT 3 : lot traité au chloramphénicol + l'associa tion recevant 1 g/kg/j de chloramphénicol et l'association à la dose de 400 mg/kg/j de magnésium (DNAMg) et 20 mg/kg/j de fraction antitoxique du foie. Le traitement a été effectué pendant 9 semaines. b) Animaux Des rats SPRAGUE DAWLEY OFA males de 200 g environ, d'origine IFFA CREDO, ont été utilisés pour cette étude. c) Examens Une numération leucotytaire a été effectuée 14, 23, 30, 49, 56 et 63 jours apres le début du traitement. d) Résultats Les résultats sont résumés d & s le tableau ci-après LDT NUMRATION LEUCOCRTES # ECART TYPE après "n" jours J.14 J.23 J.30 J.49 J.56 J.63 TEMDIN 14801 # 3320 12880 # 3180 11440 # 1618 10050 # 1617 9970 # 593 9684 # 1400 CRIORAM- 14715 # 3710 13650 # 1638 10775 # 1867 8316 # 1378 9315 # 2433 7761 # 2797 PHENICOL 1 g/kg/j t = 0,05 t = 0,68 t = 0,85 t = 2,58 t = 0,55 t = 1,93 n.s. n.s. n.s. p n.s. n.s. CHLORVI- 14015 # 3126 14128 # 3098 13689 # 2850 10488 # 1436 3825 # 2433 9307 # 2018 PHENIOCL t = 0,5 t = 0,8 t = 2,17 t = 0,64 t = 0,08 t = 0,48 tion DNAMg 400 mg/kg/j n.s. n.s p n.s. n.s. n.s. + fraction anitoxique du foie 20 mg/kg/j a) Discussion Dans les conditions décrites ci-avant, on a pu provoquer une baisse significative des leucocytes sanguins après un traitement par le chlorapphénicol. Cette baisse s'est avérée significative après un traitement prolongé- (49 jours) ; toutefois, elle n'a pas été observée chez les animaux recevant, avec le chloramphenicol, un traitement oral par l'association suivant l'invention. f) Conclusion Dans les conditions expérimentales décrites ci-dessus, on a mis en évidence une action protectrice de l'association (désoxyribonucléate de magnésium et fraction antitoxique du foie) vis à vis de la baisse des leucocytes sanguins observée après un traitement prolongé par le chloramphénicol, chez le rat, pour lequel il faut une dose nettement plus forte que pour le porc ou méme pour l'homme, dont l'organisme est comparable a celui du porc et réagit de façon similaire. D'autres études plus approfondies ont montré que la lignée lymphocytaire est maintenue et méme stimulée en cas de traitement des animaux conjointement par le chloramphénicol et le présent médicament. Les défenses naturelles de l'organisme sont donc conservées ou méme stimulées en cas d'agression et il est de ce fait possible que la formation d'anticorps soit également augmentée sous l'influence du présent médicament, dans le cas d'une maladie virale ; on a vu plus haut que seul le maintien en état, ou la restauration, de la lignée lymphocytaire permet l'apparition normale des anticorps spécifiques. Bien entendu, l'association est dépourvue de toxicité, compte tenu de la présence de la fraction antitoxique du foie. Quant au désoxyribonucléate de magnésium, il est luiméme sans toxicité. Les applications thérapeutiques sont la protection contre les intoxications de toutes natures, médicamenteuses ou autres, le traitement de ces intoxications, et la lutte antivirus, dans laquelle le présent médicament peut être substitué ou adjoint aux antibiotiques habituellement utilisés. La dose efficace de désoxyribonucléate de magnésium est habituellement d'environ 20 à 400 mg/kg de poids corporel/jour. L'association contient préférablement environ 5 à 100 mg de fraction antitoxique du foie pour 100 mg de désoxyribonucléate de magnésium. La dose efficace de cette association à administrer correspond en général à une quantité renfermant environ 20 à 400 mg/kg de poids corporel /jour de désoxyribonucléate de magnésium. Dans un cas particulier, les deux composants de llasso- ciation présentent les caractéristiques suivantes Extrait de foie en poudre atomisé : Poudre beige clair soluble dans l'eau. Analyse : azote total 8,1 % en poids, azote aminé 3,8 % en poids, histamine 150 microgrammes/gramme. Désoxyribonucléate de magnésium : Poudre beige rosé, assez soluble dans l'eau, insoluble dans l'alcool éthylique, l'éther, le chloroforme. Essais : pH 6,4 en solution aqueuse à 2,5 % en poids ; perte, à 1000C pendant 6 heures, 6,8 % en poids ; plomb et métaux lourds néant ; arsenic néant. Dosages sur produit sec: azote total 15,2 % en poids, phosphore 9,3 % en poids, magnésium 4,1 % en poids. Le présent médicament est utile en médecine humaine comme en médecine vétérinaire, à titre de médicament préventif ou curatif, maintenant ou restaurant la formule sanguine blanche. I1 est administré par voie orale ou parentérale, plus spécialement par voie orale, sous toutes les formes pharmaceutiques usuelles. On peut citer, à titre d'exemples, pour l'homme les comprimés et, pour l'animal, le bétail entre autres, les doses de poudre, qui seront mêlées à la nourriture de la même façon qu'un supplément alimentaire. Les comprimés sont dosés en substance active et les doses de poudre sont déterminées conformément aux doses efficaces journalières susindiquées. Pour le médicament employé préventivement, on choisit les valeurs basses de la gamme de doses efficaces, tandis que pour soigner un état pathologique on choisit les valeurs hautes de cette gamme, en tenant compte, en outre, du fait que la dose optimale varie avec la race d'être vivants traitée et avec le degré de détérioration de la formule blanche à restaurer. REVENDICATIONS 1. A titre de médicament protégeant ou restaurant la formule sanguine blanche, notamment la lignée lymphocytaire, le désoxyribonucléinate de magnésium. 2. Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le désoxyribonucléinate de magnésium est associé avec la fraction antitoxique du foie. 3. Médicament suivant la revendication 2 caractérisé en ce qu'il contient environ 5 à 100 mg de fraction antitoxique du foie pour 100 mg de désoxyribonucléate de magnésium. 4. Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que la dose efficace est d'environ 20 a 400 mg/kg de poids corporel/jourde désoxyribonucléinate de magnésium. 5. Médicament suivant la revendication 2, caractérisé en ce que la dose efficace de l'association à administrer correspond a environ 20 a 400 mg/kg de poids corporel/jour de désoxyribonucléate de magnésium. 6. Médicament suivant l'une quelconque des revendications 1 a s, caractérisé en ce que, pour l'administration par la voie orale, les formes pharmaceutiques sont les comprimés pour l'homme et, pour l'animal, les doses de poudre destinées à être mêlées à la nourriture.