Brevet FR2514366A1 — publié le 19830415

Appareil multicouches pour l'examen de cultures de micro- organismes. L'invention a pour objet un appareil à utiliser dans des examns d'échantillons liquides de cultures de micro-organismes contenant certains micro-organismes et plus particulièrement un appareil capable de cultiver des micro-organismes tels que les bactéries et les eumycetes isolés d'un échantillon liquide, de façon simple, môme si l'échantillon contient des antibiotiques. L'isolerent des cultures est connu dans la technique Les procédés de cultures varient selon le type d'échantillon à examine Par exemple,uàv examen de bactéries dans le sang était effectué en mélangeant un échantillon de sang avec un milieu de culture liquide Une culture isolée fut ensuite mise en oeuvre dans un milieu de culture isolé telle qu'une plaque d'agar pour le sang et une plaque d'agarau chocolat Etant donné qu'il était impossible d'isoler directement les micro-organismes des échan- tillons et qdun stade d'incubation supplémentaire était néces- saire, les procédés de culture de l'art antérieur étaient plutôt compliqués et nécessitaient beaucoup de temps La détec- tion était quelque fois impossible lorsque les échantillons contenaient peu de micro-organisme. En outre,l Ors des exnoens ce culture d'échantillons de sang provenant d'un malade atteint de septivém Xe, par exemple, les échantillons contiennent des antibiotiques qui ont été administrés au malade Ces antibiotiques inhibent de façon signi- ficative la croissance des micro-organismes dans les cultures et ont une influence défavorable sur les résultats des examens Un appareil d'examen tel que décrit dans le brevet US no 3 741 877 n'a pas réussi à fournir des résultats d'examen précis lorsque les échantillons contenaient des antibiotiques Il y a par conséquent besoin d'un appareil d'examen capable de fournir des résultats d'examen précis pour des échantillons contenant des antibiotiques. L'invention a par conséquent pour objet un appareil multicouches pourl'examen de cultures de micro-organismes, capable de recueillir directement les micro-organismes d'un échantillon par filtration pour permettre leur culture isolée sans qu'il y est besoin d'un stade d'incubation supplémentaire. L'invention a également pour objet un appareil d'examen de cultures d'un micro-organisme,capable d'un examen précisqui n'est pas influencé par les antibiotiques dans les échantillons. Un premier aspect de l'invention concerne un assemblage de tampon de culture multicouches perfectionnés pour micro- organismes 1 à utiliser dans l'examen d'échantillons liquides îo contenant des micro-organismes Un tampon absorbant de l'eau est imprégné avec un milieu de culture pour la culture des micro- organismes et est ensuite séché Un filtre ayant des pores inférieurs à un micron et de dimension capable d'empêcher sensiblement le passage de ces micro-organismes est lié par laminage au tampon absorbant l'eau, dans des conditions stériles Un agent désactivant les antibiotiques est appliqué, dans des conditions stériles, à la surface du filtre éloigné du tampon absorbant l'eau et/ou à la surface commune entre le filtre et le tampon absorbant l'eau pour y former un revêtement, ac Mi 6 tant l'assemblage De façon préférable, le tampon absorbant l'eau a une capacité d'absorption d'eau sensiblement égale à la quantité d'échantillon liquide à appliquer à l'assemblage de tampon pour examen Le milieu de culture imprégné et séché dans le tampon absorbant l'eau est de préférence présent en une quantité capable de former un milieu de culture liquide d'une concentration acceptable lorsqu'il est dissout dans un échantillon liquide qui a pénétré dans le tampon,à travers ledit filtreaprês son application contre 1 'assemblage de tampon Les pores du filtre ont des dimensions permettant le passage du liquide mais empêchant le passage des micro-organismes et de préférence les pores ont un diamètre de 0,22 à 0, 75 microns Le filtre est laminé ou lié au tampon absorbant l'eau et de préférence, cette liaison est réalisée au moyen d'un adhésif hydrophile à - haut poids moléculaire pour assurer le passage du liquide du filtre au tampon absorbant. Par agent désactivant les antibiotiques, on entend un agent capable de désactiver des antibiotiques pouvant être présents dans l'échantillon en éliminant ainsi toute inhibition pour la croissance des micro-organismes dans l'échantillon par les antibiotiques Les agents désactivant les antibiotiques comprennent les agents capables d'adsorber les antibiotiques physiquement, les aqents capables de former une liaison chimique avec les antibiotiques et les agents capables de décomposer les anti- biotiques. Les objetssus-indiqués et d'autres objets, caractéristiques et avantages de l'invention seront mieux compris dans la descrip- tion ci-après, en combinaison avec les dessins annexés. La figure 1 est une vue schématique en coupe montrant avec exagération un assemblage de tampon multicouches pour la culture d'un micro-organisme; les figures 2 et 3 sont des vues schématiques en coupe de différents modes de réalisation de l'assemblage de tampon multicouches pour la culture d'un micro-organisme selon l'invention; la figure 4 est une vue en coupe similaire de l'assemblage de tampon de culture selon la présente invention, montrant des colonies en croissance pendant la culture; la figure 5 est une vue schématique en coupe d'un appareil d'examen multicouches pour la culture des micro-organismes selon la présente invention; la figure 6 est une vue en perspective de l'appareil de la figure 5, et la figure 7 est une vue schématique en coupe des sections supérieure et inférieure du récipient 1 relispar la technique de scellement ultrasonique. L'assemblage de tampon multicouches pour la culture d'un micro-organisme et l'appareil contenant ledit tampon seront illustrés en liaison avec un exemple caractéristique de culture de sang en se référant au mode de réalisation préféré indiqué par les dessins. L'assemblage de tampon multicouches pour la culture d'un micro-organisme selon la présente invention comprend un tampon absorbant l'eau 1 stratifié qui est au préalable imprégné avec un milieu de culture pour cultiver des micro-organismes donnés, puis séché, et un filtre 3 laminé ou lié au tampon absorbant de l'eau layant des pores 2 inférieurs au micron et d'une dimension capable d'empêcher sensiblement le passage d'un micro-organisme, comme indiaué sur la figure 1 Le stratifié formé à partir du tampon absorbant l'eau 1 et le filtre 3 est stérilisé par n'importe quel procédé classique Ce type de stratifié est connu dans la technique et est décrit dans le brevet US sus-irentionné Cet assemblage de tampon du type stratifié n'a pas donné satisfaction pour la culture des échan- tillons de sang pris d'un malade atteint de septicémie car de tels échantillons contenaient souvant des antibiotiques Dans le but d'éliminer toute influence par antibiotiques sur la crois- sance des micro-organismes, un agent désactivant les antibio- tiques est appliqué à la surface supérieure du filtre 3, comme indiqué sur la figure 2 ou à la surface commune entre le filtre 3 et le tampon absorbant l'eau 1,comme indiqué sur la figure 3, pour y former un revêtement 4 complétant l'assemblage de tampon selon la présente invention Sur les dessins annexés,le revêtement 4 est illustré d'une façon schématique et exagérée. Les matières dont est fait le tampon absorbant l'eau 1 ne sont pas particulièrement limitées,à condition qu'elles puissent absorber les solutions aqueuses Les matières préférées sont formées par le papierfiltre cellulosique, les non tissés cellulosiques, les fibres de verre et matières similaires. Les matières formant le filtre 3 ne sont pas particu- lièrement limitées à condition qu'elles soient inertes aux échantillons examinés Comme exemples caractéristiques de matière de filtre, on peut citer les polycarbonates, les polyamides, les esters cellulosiques et les matières similaires comme exemples commercialement disponibles, on peut citer les membranes filtres vendues sous la marque "Millipore "par Millipore Corporation, sous la marque "Metricell" par une compagnie d'instruments allemande, les membranes de filtres vendues sous la marque "Saltrius" par Karl Zeiss Corporation, et les membranes vendues sous la marque "Toyo"par Toyo Filter K.K pores inférieurs au micron. des Le filtre a S'il est important que le filtre isole tout microorganisme d'un échantillon, alors un diamètre de pore de 0,22 micron est désirable, lesdits pores permettant la rétention même de Serratia marcescens,qui est le micro-organisme le plus petit. Cependant, dans la pratique, tous les micro-organismes examinés ne passent pas à travers le filtre même si le diamètre des pores du filtre est quelque peu supérieur à la dimension des micro- organismes les plus petits à examiner Les diamètres de pores de 0,75 micron ou moins et plus particulièrement de 0,45 micron ou moins sont préférés, car le filtre ayant des pores de cette dimension inférieure au micron peut retenir ou isoler essentiel- lement tous les micro-organismes tout en permettant le passage rapide de l'échantillon fluide dans le tampon sous-jacent. Habituellement, les échantillons de sang des malades atteintsde septicémie contiennent des antibiotiques Comme indiqué ci-dessus, des résultats plus sars peuvent être obtenus à partir de culturesde sang en désactivant les antibiotiques y existant De façon caractéristique, les agents désactivant les antibiotiques englobent les suivants: ( 1) Agents adsorbant les antibiotiques (fabriqués et vendus par Marion Laboratories) (a) Résineréchangeusesde cation D Sulfonate de polystyrène, sulfonate de ph 6 nolméthylène# et autres types sont disponibles Ces résines adsorbent les antibiotiques cationiques pour inhiber leur activité. (b) Résine$êchangeuserd'anion 5 Polystyrène amine, phénol formaldehyde polyamine/et d'autres types sont disponibles Ces résines adsorbent des antibiotiques anioniques pour inhiber leur activité. ( 2) Agents de liaison chimique Amylosulfate de sodium (SAS, Searle Diagnostics Inc) Il permet de réaliser des liaisons chimiques avec divers antibiotiques d'aminoglucosides, etc tels que strepto- mycine, kanamycine, et polymyxine B pour les désactiver. ( 3) Agents de décomposition (a) Penicillinase C'est une enzyme spécifique qui décompose la pénicilline, (b) Cephalosporinase C'est une enzyme spécifique qui décompose la cephalosporineet des antibiotiques similaires. Le milieu de culture avec lequel est imprégné le tampon absorbant l'eau n'est pas particulièrement limité à condition qu'il soit compatible avec les échantillons à examiner On préfère les milieux permettant une croissance anaérobie et aérobie des bactéries et une propagation dans des conditions de culture aérobie et anaérobie respectivement Une composition caractéristique du milieu de culture adaptée pour les cultures du sang dans des conditions aérobie et anaérobie figurent sur le tableau 1 On peut réaliser avantageusement un examen en préparant deux assemblages de tampon multicouches pour culture de micro-organismes imprégnés d'un tel milieu de culture et en appliquant un échantillon à chaque assemblage de tampon Un échantillon peut être maintenu dans des conditions de culture anaérobie et l'autre dans des conditions de culture aérobie. Tableau 1 Composition caractéristique d'un milieu de culture pour le sang (pour filtration d'un échantillon de 5 ml) Ingrédient Quantité (mg) Trypton (oxolde) 50 Peptone de soja (oxolde) 15 Extrait de viande (oxoide) 15 Extrait de levure (oxolde) 25 Extrait de foie (oxolde) 5 Glucose 12,5 K 2 HPO 4 0,75 Na Cl 20 Na HCO 3 10 Chlorhydrate de L-Cystéine 2,25 Acide paminobenzolque 0,25 Hemine 0,025 Le tampon absorbant l'eau contenant un milieu de culture imprégné séché peut être lié de façon adhésive au filtre, de préférence en utilisant un adhésif hydrophile de haut poids moléculaire tel que la polyvinylpyrrolidone. L'assemblage de tampon multicouches pour culture d'un micro-organisme selon la présente invention n'est pas particu- lièrement limité en ce qui concerne sa configuration De préférence, l'assemblage de tampon est circulaire pour prendre la forme de nombreux accessoires habituellement utilisés dans îO le travail de laboratoire, par exemple les bottes de Petri. La dimension de l'assemblage de tampon n'est pas non plus parti- culièrement limitée Lorsqu'on applique sur l'assemblage ae tampon, goutte à goutte, des échantillons de sang de 5 ml, l'assemblage a de préférence un diamètre de 60 mm, le tampon ayant une épaisseur de 2 à 3 mm. Pour faciliter l'examen, l'assemblage de tampon sus- mentionné peut être disposé dans un récipient ayant une confi- guration et une dimension appropriée Un exemple caractéristique d'un tel récipient est représente sur les figures 5,6 et 7. Comme'on peut voir de la vue en coupe de la figure 5, le récipient est constitué d'un récipient cylindrique 6 dans lequel est disposé l'assemblage de tampon 1 et d'un couvercle qui couvre le récipient de façon non serrée Il est nécessaire pour une culture efficace qu'un intervalle 9 soit laissé entre le récipient 6 et le couvercle 8 pour permettre le passage de l'air. Le récipient 6 contient sur sa circonférence une cavité 7 qui se trouve à une hauteur prédéterminée à partir du fond;de façon que l'assemblage de tampon est maintenu fermement dans la cavité à une hauteur prédéterminée L'assemblage de tampon peut être monté dans le récipient en le plaçant dans la cavité par enboltage par pression De préférence, le récipient 6 est divisé en des sections supérieure et inférieure i O et 11 qui définissent la cavité à leur intersection lorsqu'elles sont réunies Dans ce cas, le récipient peut être assemblé en plaçant la section supérieure 10 sur la section inférieure 11, l'as- semblage de tampon étant posé entre eux et en fixant la section supérieure à la section inférieure L'assemblage de tampon est alors rigidement fixé entre la section supérieure et la section inférieure La'hauteur de la cavité 7 dans le récipient peut être déterminée de façon telle que lorsqu'un volume donné d'échantillon fluide est appliqué à l'assemblage de tampon et qu'un excès de fluide s'égoutte de cet assemblage, l'excès de fluide qui s'accumule dans le bas du récipient ne s'élève pas jusqu'au niveau de l'assemblage de tampon. La fixation ou la liaison des sections supérieure et inférieure 10 et ll avec l'assemblage de tampon fixé entre elles peut être mise en oeuvre par des techniques variées Par exemple, les sections supérieure et inférieure peuvent être liées l'une à l'autre par scellement par ultra-sons ou par la chaleur après que l'assemblage de tampon ait été interposé entre elles/sans effet adverse aux échantillons à examiner. Selon un autre mode de réalisation, on peut relier les sections l'une à l'autre en appliquant un solvant capable de dissoudre la matière dont le récipient est fait ou bien un adhésif comprenant un solvant qui dissolve la matière dont le récipient est fait aux bords d'appareillement des sections supérieure et inférieure 1 en dissolvant ainsi partiellement la matière du récipient et en formant éventuellement une liaison intégrale Bien entendu, le solvant ne doit pas inhiber ou retarder la croissance des micro-organismes Les exemples préférés comprennent le chlorure de méthylène et le xylène. Iesmatièresdont sont faits le récipient 6 et le couvercle 8 peuvent être identiques ou différentes, elles peuvent être semi-transparentes ou de préférence transparentes pour permettre l'observation visuelle de l'extérieur D'autres exi- gences sont une dureté satisfaisante,une facilité de moulage et un prix de revient bas Comme exemple)caractéristiquesles matières formant le récipient et le couvercle comprennent le polystyrène, le polyéthylêne, le chlorure de polyvinyle dur, le polycarbonate, les résines méthacryliques et les résines similaires. Dans hs cas o les sections supérieure et inférieure et ll sont reliées par une technique de scellement par ultrasons, les sections supérieure et inférieure 10 et 1 l sont pourvues de saillies d'appareillement circonférentielles 13 et 14 respectivement jcomme indiqué sur la figure 7. La section inférieure 11 du récipient peut être pourvue a'au moins un orifice 12 pour laisser échapper l'air de l'i:ntérieur de la section inférieure 11 lorsque l'échantillon fluide est appliqué à l'assemblage de tampon (voir figure 5). Cependant, l'orifice 12 ne doit pas nécessairement être formé en considération de l'espace inférieur adéquat sous l'assemblage de tampon. L'appareil multicouches d'examen pour la culture de micro-organismesselon l'invention>représenté sur les figures 5 et 6,peut être utilisé comme indiqué ci-après, lorsqu'il est appliqué, par exemple,à une culture du sang Avant de démarrer la culture, on rend un échantillon liquide par exemple i L sang anticoagulant en y ajoutant un anticoagulant Un agent hémolytique tel que la saponine,est ajouté de façon aseptique à l'échantillon pour produire l'hémolyse complète des erythro- cytes L'échantillon ainsi traité est appliqué,goutte à goutte/ à l'assemblage du tampon 1 dans l'appareil d'examen de culture. Les micro-organismes dans l'échantillon de sang sont isolés ou retenus par le filtre 3,pendant que le fluide restant passe à travers les pores du filtre 3 à l'assemblage de tampon absorbant l'eau 1 o il dissolve le milieu de culture imprégné séché pour former un milieu de culture liquide Comme indiqué ci-dessus pour un volume donné d'un échantillon de fluide appliqué, le tampon absorbant l'eau 1 a une capacité d'absorb- tion d'eau adéquate et le milieu de culture est présent en une quantité capable de former un milieu de culture liquide ayant une concentration pratiquement acceptable Ainsi, selon la présente invention, les microorganismes retenus au-dessus des pores du filtre vont donner un milieu de culture optimal. La culture est mise en oeuvre dans des conditions appropriées. Un examen de culture peut être mis en oeuvre avantageusement en utilisant deux jeux d'appareils d'examen, chacun recevant un volume donné d'échantillon de sang# l'un étant maintenu dans des conditions aérobie et l'autre dans des conditions anaérobie Les micro-organismes ainsi cultivés forment des colonies 5 sur le fitre 3, comme indiqué sur la figure 4. L'utilisation d'un assemblage de tampon selon l'invention, représenté sur les figures 2 ou 3, élimine touteinfluence défavorable par des antibiotiques sur la culture des micro- organismes, car le revêtement désativant les antibiotiques adsorbe et élimine les antibiotiques se trouvant dans le sang. Lorsque l'échantillon fluide est appliqué à l'assemblage de tampon, l'excès de fluide s'écoule du tampon aufond du récipient. Ceci empêche le tampon de tomber 1 pendant que l'air purgé peut échapper à travers l'orifice 12, s'il existe. Comme il est clair de ce qui précède, l'assemblage de tampon multicouches pour la culture d'un micro-organisme et làppareil d'examen contenant ce dernier, présentent les avantages suivants: ( 1) L'isolation directe de la culture est réalisable sans qu'il soit nécessaire d'effectuer un stade supplémentaire d'incubation comme cela est nécessaire pour les cultures selon l'art antérieur; et le procédé de culture est considérablement simplifié. ( 2) Etant donné que le milieu de culture d'imprégnation est présent/dans le tampon absorbant l'eau sous forme sèche, il est très stable La conversion du milieu de culture de l'état sec à l'état liquide ordinairepeut être contrôlée par l'ajustement de la capacité d'absorption d'eau du tampon et par la quantité de milieu de culture d'imprégnation Le milieu de culture redevient à l'état liquide 1 auquel état il est habituellement utilisé/après avoir reçu le volume nécessaire de fluide pour assurer des conditions de culture consistantes. ( 3) Les micro-organismes sont détectables même à de faibles concentrations. ( 4) Pas de stade supplémentaire est nécessaire,même lorsque les échantillons contiennent des antibiotiques. REVENDICATIONS 1 Assernblaae de tampon multicouches pour la culture de micro-organismes, à utiliser dans l'examen d'un échantillon liquide contenant certains micro-organismes, comprenant, dans des conditions stériles: ( 1) un tampon absorbant l'eau qui est imprégnée avec un milieu de culture pour la culture des micro- organismes et qui est séchée-, ( 2) un filtre lié audit tampon absorbant l'eau et qui a des pores d'une dimension capable d'empêcher sensiblement le passage des micro-organismes, et ( 3) un agent désactivant les antibiotiques appliqué à la - surface dudit filtre éloigné du tampon absorbant l'eau ou bien à la surface commune entre ledit filtre et ledit tampon absorbant l'eau. 2 Assemblage de tampons multicouches pour la culture d'un micro-organisme, selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le tampon absorbant l'eau a une capacité d'absorption d'eau sensiblement égale à la quantité d'échantillon liquide à appliquer à l'assemblage de tampon pour l'examen. 3 Assemblage de tampon multicouches pour la culture d'un micro-organisme selon la revendication 2, caractérisé par le fait que le tampon absorbant l'eau a été imprégné par le milieu de culturel puis séché, en une quantité capable de former un milieu de culture liquide ayant une concentration acceptable lorsqu'il est dissousdans un échantillon pénétré dans ledit tampon à travers ledit filtre après mise en oeuvre de l'assemblage 4 Assemblage de tampon multicouches pour culture de micro-organisme selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que le tampon absorbant l'eau imprégné par le milieu de culture, est lié de façon adhésive audit filtre par un adhésif hydrophile de haut poids moléculaire. Assemblage de tapon multicouches pour culture de micro-organismes selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que les pores dudit filtre ont un diamètre de 0,22 à 0,75 microns. 6 Assemblage de tampon multicouches pour culture de micro-organismes selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que 1 ' agent désactivant l'antibiotique est choisi parmi les aaents adsorbant l'anti- biotique, les agents liant chimiquement l'antibiotique et les agents décomposant l'antibiotique. 7 Assemiblage de tampon multicouches pour culture de micro-organismes selon la revendication 6, caractérisé par le fait que les agents adsorbant l'antibiotique sont des résines échangeuses d' anioneou de cation% 8 Assemblage de tampon multicouches pour culture de micro- organismes selon la revendication 6, caractérisé par le fait que les agents liant chimiquement l'antibiotique sont des amino-glucosides. 9 Assemblage de tampon multicouches pour culture de micro-organismes selon la revendication 6, caractérisé par le fait que les agents décomposant l'antibiotique sont des enzymes décomposant l'antibiotique. Appareil à utiliser dans un examen de culture d'un micro-organisme d'un échantillon liquide contenant certains micro-organismes, comprenant: (a) un assemblage de tampons d'examen comprenant ( 1) un tampon absorbant l'eau qui est imprégné avec un milieu de culture pour cultiver les microorganismes puis séché, ( 2) un filtre lié audit tampon absorbant l'eau et ayant des pores d'une dimension capable d'empêcher sensi- blement le passage des micro-organismes, et ( 3) un agent désactivant l'antibiotique, appliqué à la surface dudit filtre éloigné du tampon absorbant l'eau ou bien appliqué à la surface-commune entre le filtre et le tampon absorbant l'eau, et (b) un récipient d'examen comprenant un récipient ayant une forme correspondant à la forme de l'assemblage de tampon et adapté pour maintenir ledit assemblage de tampon dans le récipient à une hauteur donnée du fond de ce dernier, et un couvercle placé sur ledit récipient. 11 Appareil d'examen pour culture d'un micro-organisme selon la revendication 10, caractérisé par le fait que le récipient comprend une section supérieure et une section infé- rieure formant une cavité lorsque les deux sont réunies, ledit assemblage de tampon étant fixé entre la section supérieure et la section inférieure. 12 Appareil d'examen pour culture d'un micro-organisme selon la revendication 11, caractérisé par le fait que l'assemblage de tampon est lié au récipientjpar fusion de la matière du récipient par scellement à l'ultra-son Sou à la chaleur. 13 Appareil d'examen pour culture d'un micro-organisme selon la revendication 11, caractérisé par le fait que l'assem- blage de tampon est lié au récipient par liaison de la matière dudit récipientutilisant un solvant capable de dissoudre la matière du récipient et n'ayant pas d'influence notable sur les micro-orcanismesou par un adhésif d'un solvant dans lequel la matière du récipient se dissout. 14 Appareil d'examen de culture de micro-organisme selon l'une quelconque des revendications 10 à 13, caractérisé par le fait que le récipient d'examen est transparent ou semi-trans- parent. Appareil d'exnien de culture d'un micro-organisme selon l'une quelconque des revendications précédentes, carac- térisé par le fait que le tampon absorbant l'eau a une capacité d'absorption d'eau sensiblement égale à la quantité d'échantillons liquides à appliquer à l'assemblage de tampon en vue de l'examen. 16 Appareil d'examen de culture d'un micro-organisme selon l'une quelconque des revendications précédentes, carac- térisé par le fait que le tampon absorbant l'eau est imprégné par le milieu de culture 1 puis séché, en une quantité capable de former un milieu de culture liquide ayant une concentration acceptable lorsqu'il est dissous dans un échantillon qui a pénétré dans ledit tampon à travers ledit filtre après l'avoir appliqué à l'assemblage de tampon. 17 Appareil d'examen de culture d'un micro-organisme selon l'une quelconque des revendications précédentes, carac- térisé par le fait que le tampon absorbant l'eau imprégné par le milieu de culture est lié adhésivement au filtre par un adhésif hydrophile à haut poids moléculaire. 18 Appareil d'examen de culture d'un micro-organisme selon l'une quelconque des revendications précédentes, carac- térisé par le fait aue les pores du filtre ont un diamètre de 0,22 à 0,75 micron. 19 Appareil d'examen de culture d'un micro-organisme selon l'une quelconque des revendications précédentes, carac- térisé par le fait que l'agent désactivanttantibiotique est choisi parmi les agents adsorbant l'antibiotique, des agents liant chimiquement l'antibiotique et des agents décomposant l'antibiotique. Appareil d'examen de culture d'un micro-organisme selon la revendication 19, caractérisé par le fait que les agents adsorbant l'antibiotique sont des résines échangeuses d'anionsou de cationr 21 Appareil d'examen de culture d'un micro-organisme selon la revendication 19, caractérisé par le fait que les agents liant-chimiquement l'antibiotique sont des amino- glucosides. 22 Appareil d'examen de culture d'un micro-organisme selon la revendication 19, caractérisé par le fait que les agents décomposant l'antibiotique sont des enzymes décomposant l'antibiotique.