Brevet FR2515174A1 — publié le 19830429

La présente invention concerne de nouveaux triglycérides, un procédé pour leur préparation et leur application en diété- tique et en thérapeutique La présente invention a pour objet les produits de formule générale I: 1 CH 2-0-CO-(CH 2) n-CH 3 2 CHOR () 3 k H 2-0-CO-(CH 2)n-CH 3 dans laquelle R représente le fragment acyle d'un acide gras polyinsaturé renfermant de 18 à 22 atomes de carbone, ledit fragment acyle pouvant être oxydé, R ne pouvant toutefois représenter le fragment acyle de l'acide eicosatétrayn -5,8, 11,14 olque, et dans laquelle N représente un nombre entier pouvant varier de 2 à 16. Des triglycérides d'acides gras à chaîne moyenne renfermant de 2 à 12 atomes de carbone sont mentionnés dans le Brevet Spécial de Médicament no 3 598 à titre de substances permettant d'améliorer l'absorption des matières grasses Par ailleurs, des triglycérides d'acides gras polyinsattrés sont décrits dans d'autres brevets En particulier, dans le brevet français n 2 426 461, le triglycéride de l'acide eicosapentaène-5, 8,11,14,17 o Ique est indiqué pour le traitement des troubles thrombo-em- boliques Mais le triglycéride d'un acide gras polyinsaturé n'est pas une forme assurant une bonne absorption dans l'orga- nisme de l'acide gras polyinsaturé. En particulier, étant donné que les triglycérides de l'acide eicosapentaénoique en position ( 1) sont mal hydrolysés par les lipases pancréatiques, les triglycérides de synthèse de l'acide eicosapentaénoique ou de l'acide docosahexanoique ne permettent pas obligatoirement d'aboutir à un monoglycéride en position ( 2), /r TESTOR R BOTTINO, LIPIDS 1967,2 j ( 6)/ Or, il est bien connu que les monoglycérides en ( 2) constituent la forme la m-eux absorbée par l'organisme humain. Il était donc très intéressant de pouvoir disposer de pro- duits susceptibles d'apporter à l'organisme de tels monoglycé- rides Il a été trouvé que certains triglycérides de structure déterminée, notamment ceux hydrolysés facilement en position 1 - 1 et 3 par les enzymes du tractus digestif répondaient à cet objectif C'est pourquoi l'invention a pour objet les trigly- cérides de formule I qui ont la propriété de libérer facilement le monoglycéride en ( 2) par action de la lipase pancréatique. En effet, cet enzyme hydrolyse les acides gras de chaîne moyenne estérifiant les positions 1 et 3 du glycérol et libère donc le monoglycéride en ( 2) L'homme n'ayant pas de monogly- céride lipase intestinale active sur la position ( 2), l'acide gras polyinsaturé fixé sur la position ( 2) d'un glycérol se trouve ainsi beaucoup mieux protégé dans la lumière intestinale et n'est jamais libéré à ce stade Ainsi, les triglycérides tels qu'ils sont définis à la formule 1, assument une très botieabsorption du monoglycéride en ( 2) et de cette façon permettent à l'organisme d'utiliser l'acide gras polyinsatluré porté par le monoglycéride dans les meilleurs conditions. En outre du fait de la bonne absorption du morioglycéride en ( 2) qu'ils libèrent, les triglycérides de l'invent Lon peuvent être utilisés à des doses thérapeutiques plus faibles que les triglycérides banals de synthèse Par ailleurs, sur le plan galénique, les triglycérides de formule I présentent un autre avantage En effet, les acides gras polyinsaturés se dégradent facilement et de ce fait deviennent malodorants et donc diffi- cilement utilisables Les triglycérides de l'invention présen- tent une stabilité permettant de pallier à cet inconvénient et ils constituent donc une forme bien appropriée pour l'adminis- tration d'un acide gras polyinsaturé. Parmi les triglycérides objet de l'invention, on retient plus particulièrement les produits de formule'I, tels que définis ci-dessus, caractérisés en ce que, les fragments acyles oxydés sont les fragments acyles hydroxylés, époxydés, hydro- péroxydés, hydroxy époxydés. Les fragments acylés oxydés peuvent être par exemple, les fragments des acides gras hydroxylés, tels que les acides -OH-eicosatétraèn -5,8,11,13oique, 12-OH-eicosatétraèn -5,8,10,14-oîque, 11-OH-eicosatétraèn -5,8,12, 14-orque, 8-OH-eicosatétraèn -5,9,11,14-oique, 9-OH-eicosatétraèn -5,7,11, 14-oique, -OH-eicosatétraèn -6,8,11,14-oique, 12-OH-eicosapentan-5,8,10, 14,17-oique, -OH-eicosapentaèn-5,8,11,13,17-otque. 2 - On peut citer également les triglycérides répondant à la formule I ci-dessus, caractérisés en ce que dans la formule I, n représente un nombre entier pouvant varier de 2 à 10, et tout particulièrement les triglycéridescaractérisés en ce qule N est égal à 2, à 4, à 6 ou à 10. Les valeurs de N correspondent respectivement aux radicaux butyryle, héxanoyle, octanoyle, dodécanoyle. On peut citer aussi notamment les triglycérides caractéri- sés en ce que dans la formule I, R représente un fragment acyle d'un acide gras polyinsaturé non oxydé R étant essentiel- lement le fragment acyle d'un des acides gras polyinsaturés sui- vants: l'acide a linolénique C 18: 3, 3 l'acide e linolénique C 18: 3,u 6 l'acide stéaridonique C 18: 4,3 l'acide dehomo e linolénique C 20: 3,u 6 l'acide dihomo " linolénique C 20: 3,D 3 l'acide eicosatétraéno Ique C 20: 4, 3 l'aclde arachidonique C 20: 4,t 6 l'acide eicosapentaénoique C 20: 5,b 3 l'acide docosatetraénoique C 22: 4, 6 l'acide docosapentaénoique C 22: 5,Q 6 l'acide docosahéxaénoique C 22: 6,û 3 l'acide docosapentaénoique C 22: 5,$ 3 et tout particulièrement on peut citer le triglycéride suivant: le 1-3 dioctanoyl eicosapentaénoyl glycérol de formule: 1 CH 2 0-( CH 2)6-CH 3 2 Ht 0-(CH 2)3-(CH = CH-CH 2)5-CH 3 3 H 20 g-(CH 2)6-CH 3 La présente invention a également pour objet un procédé de préparationcaractérisé en ce que l'on estérifie la dihydro- xyacétone avec 2 équivalents molaires d'un dérivé fonctionnel d'un acide de formule II: CH 3-(CH 2) N dans laquelle N représente un nombre entier pouvant varier de 2 à 16, obtient un produit de formule III 3 - 1 H 2-0-o (CH 2)n-CH 3 2 =O (III) 3 H 2-0-g-(CH 2)n-CH que l'on traite par un agent réducteur ne provoquant pas la saponification des groupements esters, obtient un produit de formule IV I CH 2-0-k-(CH 2) n-CH 3 2 HOH (Iv) 32 H 2 o 3 H 2-0-g (CH 2)nCH 3 que l'on estérifie avec un dérivé foi Cionnel d'un acide gras polyinsaturé-, ledit acide ayant pour formule ROH, R ayant la même signification que celle indiquée ci-dessus, pour obtenir un triglycéride de formule I, que l'on peut éventuellement oxyder, dans le cas o R est un fragment acyle non oxydé, par action de lipoxygénases ou par simple oxydation, pour obtenir le produit de formule I dans laquelle R est un fragment acyle oxydé. Dans les conditions préférentielles de mise en oeuvre de l'invention, le procédé ci-dessus décrit est réalisé de la manière suivante: Le dérivé fontionnel de l'acide de formule II est'de préfé- rence le chlorure d'acide On peut également utiliser l'anhy- dride, un anhydride mixte, un ester actif. L'estérifi cationl est effectuée commodément en présence d'une base tertiaire telle que la pyridine ou la triéthylamine La réaction est réalisée au sein d'un solvant chloré tels que le dichlorométhane, le dichloroéthane, le chloroforme, le tétra- chlorure de carbone Des solvants tels que le diméthyl formamitde ou le diméthyl acétamide peuvent être aussi utilisés. La réduction de la fonction cétonique en 2 du produit de formule III est caractérisée en ce que l'agent réducteur ne provoquant pas la saponification des groupements esters est un 4 - borohydrure de métal alcalin, tels que le borohydrure de sodium ou le borohydrure de potassium agissant en milieu alcoolique, l'alcool étant le méthanol, l'éthanol ou propanol. La réduction est effectuée à p H contrôlé, notamment à p H maintenu entre 6,5 et 7,5. Le dérivé fonctionnel de l'acide gras polyinsaturé de formule R-OH est de préférence le chlorure d'acide; l'anhydre, un anhydride mixte, un ester actif, peuvent également convenir. L'estérification du produit de formule IV s'effectue dans des conditions préférentielles identiques à celles mentionnées plus haut lors de l'estérification de la dihydroxyacétoneo L'oxydation chimique des triglycérides de formule I dans laquelle R est un fragment acyle non oxydé peut être, par exemple, l'auto-oxydation par simple vieillissement, ou l'oxy- dation obtenue par action d'oxygène hyperbare, d'eau oxygénée ou d'acides oxydants tels que l'acide métachloroperbenzoique. L'oxydation biochimique peut être réalisée par exemple à l'aide d'enzymes telles que les lipoxygénases ou les enzymes d'a-,de B ou d'o-oxydation des acides gras. Les dérivés fontionnels des acides de formule II et des acides gras polyinsaturés de formule R-OH sont préparés par des méthodes connues en elles-mêmes. Les acides gras polyinsaturés oxydés peuvent être obtenus. par oxydation chimique ou biochimique, telle que mentionnée ci-dessus, à partir des acides gras polyinsaturés non oxydés. Les produits de l'invention manifestent d'intéressantes propriétés pharmacologiques Tout d'abord, ils possèdent notam- ment l'activité propre de l'acide gras polyinsaturé fixé en position 2 C'est ainsi que les produits de l'invention mani- festent les propriétés suivantes: activité de précurseur de dérivés de type prostaglandiniques, activité de précurseur d'acides gras hydroxylés, activité de précurseur de substances de type leucotriènes. Ces propriétés sont plus ou moins marquées selon l'acide gras polyinsaturé considéré. Les triglycérides de formule I porteurs d'un dérivé acyle d'un acide gras polyinsaturé hydroxyle, époxydé, hydropéroxydé ou hydroxy époxydé on en outre: des propriétés anti-agrégantes par effet direct ou indirect (par inhibition de la synthèse de prostaglandines de la famille 2); - -6 - des propriétés immuno-modulantes. Par rapport à l'acide gras polyinsaturé lui-même, les pro- duits selon l'invention présentent les avantages essentiels d'une meilleure stabilité et d'une excellente absorption au niveau du tractus digestif. Les produits, objet de la présente demande, trouvent leur emploi chaque fois que l'on désire fournir à l'organisme un acide gras polyinsaturé dans les situations de déficience de l'organisme en acides gras polyinsaturés, comme par exemple dans le cas de troubles de la digestion des lipides, de maladies métaboliques, ou dans le cas du vieillissement Dans ce type de situations, on observe très souvent un besoin accru de l'organis- me en un acide gras polyinsaturé spécifique et l'administration des produits de l'invention répond à ce besoin. La présente invention a ainsi pour objet l'application des triglycérides définis ci-dessus, comme aliments ou suppléments alimentaires répondant à des besoins spécifiques nutritionnels. Par exemple, parmi les acides gras polyinsaturés que les trigly- cérides selon l'invention permettent d'apporter à l'organisme du dénutri, on peut citer notamment les acides gras polyinsaturés suivants: l'acide k linolénique C 18: 3,6 l'acide stéaridonique C 18: 4,3 l'acide dihomo ' linolénique C 20: 3,6 l'acide arachidonique C 20: 4,D 6 l'acide eicosapentanoique C 20: 5,03 l'acide docosahexanoique C 22: 6,3 Généralement dans de telles situations, l'administration par la voie intraveineuse des acides gras ne permet pas de pallier à la diminution de leur taux, et ceci plus particulièrement chez le dénutri alcoolique et le cirrhotique. La présente invention a de ce fait pour objet les produits de nutrition thérapeutique contenant un des triglycérides tels que définis ci-dessus, en association éventuelle avec un véhicule neutre convenant à l'administration orale ou parentérale. La présente inventio a également pour objet l'application à titre de médicaments des triglycérides tels que définis précé- demment. L'invention a tout spécialement pour objet à titre de médi- cament-: le 1-3-dioctanoyl-2-eicosapentaènoyl glycérol. 7 - Les produits ci-dessus définis constituent, selon l'inven- tion, des médicaments très utiles en thérapeutique humaine, notamment pour le traitement des troubles de digestion des lipi- des, des maladies métaboliques, des cas de dénutrition chez le dénutri alcoolique et le cirrhotique, de l'arthérosclérose, de l'hypertension, de l'hyperagrégation plaquettaire, de la sénes- cence cérébrale, et des états o une immunomodulation est souhaitée Dans ce dernier cas, les produits de l'invention sont utilisés par exemple dans le traitement des maladies autoimmunes telles que la polyarthrite rhumatoide, le lupus érythémateux, le pemphigus ou l'anémie hémolytique, ou dans la prévention du rejet des organes transplantés ou des greffes, ou dans le traitement de certaines réactions du type hyperinflammatoire ou allergique, des syndromes bronchiques inflammatoires, ou des bronchopathies constrictrices telles que l'asthme. La dose usuelle, variable selon le produit utilisé et l'affection en cause, peut s'échelonner par exemple entre 50 mg et 6 g par jour chez l'adulte par voie orale, et de préférence pour le 1-3-dioctanoyl eicosapentaénoyl glycérol, entre 140 mg et 300 mg par jour. La présente invention a également pour objet les composi- tions pharmaceutiques renfermant à titre de principe actif un médicament précité Ces compositions sont réalisées de façon à pouvoir être administrées par voie digestive ou parentérale. Elles peuvent être solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en méde- cine humaine, comme par exemple, les comprimés simples ou dra- géifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables; elles sont préparées selon les métho- des usuelles. Le ou les principes actifs, peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les vé- hicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou vé- gétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs. Les exemples donnés ci-après illustrent l'invention sans toutefois la limiter. EXEMPLE 1: 1-3 dioctanoyl eicosapentaénoyl glycérol. -8 - Stade A: 1-3 dioctanoyl dihydroxvacétone. On mélange sous agitation 22,125 g de dihydroxyacétone et 187,5 cm 3 de dichloroéthane et porte au reflux pendant 10 minutes. On ajoute 60,5 cm 3 de pyridine; on ajoute alors goutteà goutte 119,75 g de chlorure d'octanoyle et 187,5 cm 3 de dichloroéthane, on revient à température ambiante sous agitation pendant 2 heures. On élimine par filtration le chlorhydrate de pyridine formé, lave le filtrat à l'eau distillée, puis avec une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 5 % puis de nouveau à l'eau distillée jusqu'à obtention d'un p H final de 5,2, puis sèche la solution organique On élimine le solvant sous pression réduite, obtient un résidu visqueux que l'on recristallise dans l'acétate d'éthyle et obtient 60,16 g de produit attendu (F = 60 C) Analyse: C 19 H 3405 Calculé: C % 66,63 H % 10,01 Trouvé: 66,9 10,1 Stade B: le 1-3 dioctanoyl glycérol. On dissout sous agitation à 250 C 30 g de produit obtenu au stade précédent dans 1500 cm 3 d'alcool éthylique On amène le p H de la solution à 5,4 par addition de 0,6 cm 3 d'une solu- tion aqueuse d'acide acétique au i Puis on ajoute en 15 minutes 8,55 g de borohydrure de sodium, le p H étant maintenu inférieur ou égal à 7,5 par l'addition d'acide acétique dilué au i On élimine le solvant sous pression réduite, reprend le résidu à l'aide de dichloroéthane et d'eau distillée On sépare la phase organique par décantation, la lave à l'eau distillée, la sèche et élimine le solvant sous pression réduite et obtient 30,19 g de produit attendu (F = 26 C) Analyse: C 19 H 3605 Calculé: C % 66,24 H % 10,53 Trouvé: 66,2 10,6 Stade C: 1-3-dioctano Vl _icosarentaénoyl _lycérol. On dissout 1,35 g de produit obtenu au stade précédent dans 1,8 cm 3 de dichloroéthane, et 0,256 cm 3 de pyridine, puis ajoute goutte à goutte, à température ambiante, 1 g de chlorure d'eicosapentaénoyle et 1,8 cm 3 de dichloroéthane On agite 20 minutes à température ambiante, conserve une nuit à + 5 O C, éli- mine par filtration le chlorhydrate de pyridine formé et évapore le filtrat sous pression réduite On reprend le résidu par 14,9 cm 3 de cyclohéxanelave avec 2,98 cm 3 de mélange soude 0,1 N éthanol ( 1-1), sépare la phase organique, la lave jusqu'à p H = 7,3 avec 2,98 cm 3 d'un mélange soude 0,1 N-éthanol-eau ( 1-5-5), puis avec 2,98 cm 3 d'un mélange eau éthanol ( 1-1), jusqu'à p H = 5,4, évapore le solvant de la phase organique sous pression réduite et obtient 2,07 g de produit que l'on chroma- tographie sur silice, et obtient 669 mg de produit attendu. Analyse: C 39 H 6406 Calculé: C % Trouvé: Spectre RMN 74,48 73,0 H % 10,26 ,00 o Le spectre RMN a été effectué dans le deutérochloroforme; il confirme la structure du produit. EXEMPLE 2: On a réalisé des gélules de formule suivante: 1-3 dioctanoyl eicosapentaénoyl glycérol 100 mg Excipient q s p 300 mg (détail de l'excipient: kaolin, amidon de mals, avicel, stéarate de magnésium, talc, aérosil). EXEMPLE: On a réalisé des capsules molles de formule suivante: 1-3 dioctanoyl eicosapentaénoyl glycérol 200 mg Excipient pour une capsule molle q s p I capsule. EXEMPLE 4: On a réalisé une émulsion à usage intraveineux de formule suivante: 1-3 dioctanoyl eicosapentaénoyl glycérol 10 _g Acétate de D Lx tocophérol 0,3 g Lécithine de soja 1,2 g Glycérine N 1,8 g Eau distillée q s p 100 ml Etude clinique: 11 sujets dont 6 hyper-agrégants plaquettaires et 5 normo- agrégants plaquettaires ont reçu quotidiennement et par voie orale 160 mg de 1-3 dioctanoyl-2-eicopentaénoyl glycérol pendant 1 mois. Les coefficients d'agragation plaquettaire ont été calculés 9 - 2515174 avant et après traitement selon la technique du Ph DARCET parue dans les ANN NUTR ALIM 1980, 34, 277-290. Au bout d'un mois de traitement, il apparait que les modifications de l'agrégation-plaquettaire chez les normo-agré- gants plaquettaires sont rès faibles alors que l'amplitude de variation est très grande chez les hyper-agrégants plaquettaires. Après le traitement, on constate que quatre des six sujets hyperagrégants plaquettaires ont des coefficients d'agrégation plaquettaire normaux, un sujet présente un coefficient d'agré- gation plaquettaire presque normal, et un seul sujet ne présente pas un coefficient d'agrégation plaquettaire satisfaisant. -I 11 2515174 REVENDICATIONS 1 ) Triglycérides de formule générale I: 1 CH 2-0-CO-(CH 2)n -CH 3 2 CHOR (I) 3 IH 2-0-CO (CH 2)n-CH 3 dans laquelle R représente le fragment acyle d'un acide gras polyinsaturé renfermant de 18 à 22 atomes de carbone, ledit fragment acyle pouvant être oxydé, R ne pouvant toutefois représenter le fragment acyle de l'acide eicosatétrayn -5,8, 11,14 olque, et dans laquelle N représente un nombre entier pouvant varier de 2 à 16. 2 ) Triglycérides tels que définis par la formule I de la revendication 1, caractérisés en ce que les fragments acyles oxydés sont les fragments acyles hydroxylés, époxydés, hydro- péroxydés, hydroxy époxydés. 3 ) Triglycérides tels que définis par la formule I de la revendication 1 ou 2, caractérisés en ce que dans la formule I N représente un nombre entier pouvant varier de 2 à 10. ) Triglycérides selon la revendication I ou 3, caracté- risés en ce que dans la formule I, R représente un fragment acyle d'un acide gras polyinsaturé non oxydé. ) Triglycérides selon la revendication 1, caractérisés en ce que dans la formule I, R représente un fragment acyle d'un des acides gras polyinsaturés suivants: l'acide x-linolénique C 18 3,3 l'acide Y linolénique C 18 3,6 l'acide stéaridonique C 18,3 l'acide dihomo N linolénique C 20 3,; 6 l'acide dihomo " linolénique C 20: 3,,D 3 l'acide eicosatétraénolque C O 4 3 C 20:, l'acide arachidonique C 2 46 C 20:, l'acide eicosapentaénoique C 20 5,3 l'acide docosatetraénolque C 22 4,6 l'acide docosapentaénoique C 22 5,6 l'acide docosahéxaénoique C 22 6,3 l'acide docosapentaénoique C 22 5,3 12 - 6 ) Le 1-3 dioctanoyl eicosapentaénoyl glycérol de formule: 1 CH 2 -O (CH 2)6-CH 3 2 Ht -(CH 2)3-(CH = CH-CH 2 -CH O -(C 2)3 =C 2 '5 3 3 H 20-(CH 2) 6-CH 3 7 ) Procédé de préparation des triglycérides de formule I tels que définis à la revendication 1, caractérisé en ce que l'on estérifie la dihydroxy acétone avec deux équivalents molaires d'un dérivé fonctionnel d'un acide de formule II: CH 3-(CH 2)n- 2 (III) 3 H 2-0-9-(CH) n-CH 3 que l'on traite par un agent réducteur ne provoquant pas la saponification des groupements esters, obtient un produit de formule IV: 1 f H 2-0 (CH 2) n-CH 3 2 t HOH (IV) 3 H 2-0 (CH 2) n-CH que l'on estérifie avec un dérivé foitionnel d'un acide gras polyinsaturé, ledit acide ayant pour formule ROH, R ayant la même signification que celle indiquée à la revendication 1, pour obtenir un triglycéride de formule I, que l'on peut 13 - éventaellement oxyder, dans le cas o R est un fragment acyle nor oxydé, par action de lipoxygénases ou par simple oxydation, pour obtenir le produit de formule I dans laquelle R est un fragment acyle oxydé. 80) Procédé de préparation selon la revendicat-on 7, carac- térisé en ce que l'agent réducteur ne provoquant pas la saponi- fication des groupements esters est un borohydrure de métal alcalin. ) Application des triglycérides définis à l'une quelconqu E des revendications 1 à 6 comme aliments ou suppléments alimen- taires répondant à des besoins spécifiques nutritionnels. ) Produits de nutrition thérapeutique contenant un des triglycérides tels que définis à l'une quelconque des revendi- cations 1 à 6 en association éventuelle avec un véhicule neutre convenant à l'administration orale ou parentérale. ) Application à titre de médicaments des triglycérides tels que définis à l'une quelconque des revendications 1 à 5. ) Application à titre de médicament du triglycéride tel que définis à la revendication 6. 130) Les compositions pharmaceutiques renfermant à titre de principe actif un médicament selon l'une quelconque des reven- dications 11 ou 12.