Brevet FR2516085A1 — publié le 19830513

La présente invention concerne le domaine de la chimie et de la médecine et a notamment pour objet des sels quaternaires de N,N 3 -di ( 3 bromopropionyl)-N 1, N 2 -dispirotripipérazinium, un procédé de préparation de ceux- ci et un médicament à action antitumorale à base d'un tel sel. On connatt à l'heure actuelle des dérivés du dispiro- tripipérazinium, dont les atomes terminaux de l'azote contiennent des groupes A -hydroxy I-chloro-propyles, époxypropyles, alcoylhalogènes, benzoyles, nitro-, arylsul- foniques et d'autres groupes Ces dérivés connus du dispirotripipérazinium peuvent se présenter sous l'aspect de la formule générale suivante I a-f: t R -N -R Y 2 CI I a-f J dans laquelle: Ia R=CH 2 CHCH 2 Cl; Ib R=CH 2 CH 2 Cl; OH Ic R=CH 2 CH-CH 2; Id R=COC 6 H 5; Ie R=NO; If R=SO 2 C 6 H 4 NE O (Recueil des travaux de VNISHFI "Nouvel agent antitumoral - Prospidine", fas III, Moscou, 1973, pp 6-14). Parmi les substances de ce groupe, les composés Ia, Ib et Ic présentent une activité antitumorale considérable. Cependant, les composés Ib et Ic se sont avérés instables, et c'est pourquoi, pour les applications thérapeutiques, il a été recommandé d'utiliser le dichlorure de 3,12-diaza- 6,9-diazanium dispiro-( 5,2,5,2 -hexadécane -3,12-bis ( 3-chloro-2hydroxy-propyle) (Ia), dénommé Prospidine (la prospidine est enregistrée sous le numéro NSC-166100 à l'Institut National du Cancer des EUA). On utilise actuellement la prospidine pour le traitement des malades atteints du cancer du larynx et de certaines autres néoformations maligneso Toutefois, la prospidine n'est pas efficace dans le traitement des néoformations malignes du système hématopoiétique. Le procédé de préparation de la prospidine est basé sur la réaction entre le dichlorure de dispirotripipérazi- nium et l'épichlrhydrine de glycérine dans un milieu aqueux (Recueil des travaux de VNICHFI "Nouvel agent antitumoral - Prospidine", fas III, Moscou, 1973, pp 14-17). A l'heure actuelle, on utilise pour le traitement des néoformations malignes un grand nombre de médicaments dont le principe actif se rapporte à des composés chimiques différents (Antineoplastic and Immunosuppressive Agents Springer-Vertag, Berlin-Heidelberg New-York, 1974, v II, r 1 i; Chemotherapy of solid tumors, World Health Organisa- tion, Geneva, 1977, l 2 l. Tels sont les composés chimiques suivants: composés alcoylants, contenant des groupes 2-chloro- éthylamines (médicaments: embichine, melfalane, cyclophos- phamide, leukéran, etc l 21, pp 89-90; des groupes éthylène-imines (médicaments: Thio-Teph et ses analogues) l 2 l, p 89; groupes méthanesulfoniques (médicaments: milérane, etc l 2 l, p 90; dérivés de nitroso alcoylurée (médicaments CCNU, BCNU, méthylnitroso-urée, etc t 1 i, pp 65-84; 2, p.97; antimétabolites du métabolisme nucléinique et protéique l 2 l, pp 90-92; analogues des bases pyrimidiques (médicaments: -fluoro-uracile, arabinoside de cytosine, etc l 1 pp.193-271; analogues des bases puriques ( 6-mercaptopurine, thioguanine, etc l 1 l, pp 384-403; antagonistes de 1 'acide folique (médicaments: méthotrexate et ses analogues) l 1 l, pp 468-483; antibiotiques (médicaments: adriamycine, rubomycine, bléomycine, actinomycine D, etc l 1 i, pp 593-614, 850-876, 582-592; l 2 j, pp 93-95; substances extraites à partir de plantes (médicaments: colchicine, vinblastine, vincristine et autres) l 1 l pp 670- 694; l 23, pp 92-93; autres groupes de composés antitumoraux (médicament: prospidine (Recueil des travaux de VNICHFI "Nouvel agent antitumoral Prospidine", fas III, Moscou, 1973, pp 6-16), procarbosine l 1 l, pp 747765; l 21, p 96; des composés complexes du platinelIl, ppo 829-840; l 2 l, p 98 o On arrive à l'aide des médicaments antitumoraux existants (surtout dans le cas de leur application combinée) à une amélioration sensible de l'état des malades, et pour certaines formes de néoformations malignes (chlorio-épithéliome de l'utérus, tumeur de Berquitte, leucémie aiguë lymphoblastiq Ue chez les enfants, cancer de la peau, séminome du testicule, etc) à une guérison complète (N I Perevodchikova, V I Borisov, Zhurnal Vsesojuznogo Chimicheskogo Obschestva, v XVIII, N 6, 1973, pp 687-692 l 3 l) Cependant, en cas d'utilisation desdits médicaments antitumoraux, l'effet thérapeutique est temporaire dans la majorité des cas et n'est généralement atteint que par prescription de doses provoquant le développement d'incidents secondaires, à savoir l'inhibition de l'hématopoèse,le trouble de la fonction du tractus gastro- intestinal, des reins, etc l 2 j, l 3 l En outre, en cas d'applications répétées des agents antitumoraux, on observe un développement de la résistance médicamentaire à l'action de la préparation utilisée. Le but de l'invention est de rechercher des substances nouvelles, possédant une activité biologique élevée, de mettre au point un procédé de préparation de celles-ci, ainsi que de créer notamment un médicament antitumoral particulièrement efficace pour le traitement des leucémies. Ce problème est résolu grâce à des composés nouveaux, à savoir, les sels quaternaires de N,N 3-di (j 3-bromopropio- nyl)-N 1, N 2-dispirotripipérazinium répondant à la formule générale I: Br CH CH CO-N N N N-COCH 2 CH 2 Brl o 2 X(I) 2 2 % _v_ 2 2 o X désigne un anion d'acide. Les composésde formule générale I sont des poudres cristallines blanches, n'ayant pas de température de fusion caractéristique, solubles à divers degrésdans l'eau, pratiquement insolubles dans les solvants organiques. L'invention vise en outre un procédé de préparation des substances de formule générale I conformes à l'invention. Suivant l'invention, ce procédé consiste en ce qu'on soumet un sel quaternaire de N 1,N 2-dispirotripipérazinium répondant à la formule générale II IHN N X NH) 2 X (II) o X = anion d'acide, à une interaction avec l'anhydride halogéné,$ bromopropionique répondant à la formule générale III: Br CH 2 CH 2 CO Hal (III) au sein d'un solvant et en présence d'un accepteur d'hydrogène halogéné, et en cas de nécessité, à effectuer un traitement ultérieur du produit visé par un composé répondant à la formule générale IV Me X (IV) o Me est un métal du groupe I ou du groupe II; X est un anion d'acide - Suivant l'invention, il est souhaitable d'utiliser l'anhydride halogéné A bromopropionique de formule générale III, en excès de 10 à 40 %. Suivant l'invention, on peut utiliser en qualité de solvant de l'eau ou un mélange d'eau et d'un solvant organique inerte non miscible avec l'eau. A titre d'accepteur d'hydrogène halogéné on peut employer des sels de métaux alcalins ou alcalino-terreux, de préférence le bicarbonate de sodium, l'hydroxyde de lithium. A titre de composé de formule générale IV, il est rationnel d'utiliser le bromure de sodium, le nitrate d'argent. Suivant l'invention, on conduit généralement-le processus dans un intervalle de températures de 00 C à la température ambiante. L'invention a en outre pour objet un médicament à action antitumorale, contenant à titre de principe actif le dichlorure de N,N 3 -di ( A -bromopropi:nyl) -N 1,N 2- -dispirotripipérazinium, à savoir le dichlorure de 3,12- bis ( 2-bromopropionyl) -3,2,-diaza-6,9-diazanium dispiro- l 5,2,5,2,l hexadécane, et un excipient pharmaceutiquement convenable. Suivant l'invention, on utilise ledit principe actif sous forme d'une poudre (forme lyophilisée). Suivant l'invention, le médicament pour injections contient de 2 à 5 % de principe actif. Suivant l'invention, à titre d'excipient pharmaceuti- quement convenable on utilise une solution isotonique de chlorure de sodium, de l'eau distillée ou une solution à ou 20 % de glucose. L'invention sera mieux comprise et d'autres buts, détails et avantages de celle-ci apparaîtront mieux à la lumière de la description explicative qui va suivre de différents modes de réalisation donnés uniquement à titre d'exemples non limitatifs. Les auteurs de l'invention ont trouvé que les sels quaternaires de N,N 3 di ( A -bromopropionyl) -N 1,N 2 -dispirotripipérazinium de formule générale I manifestent une activité biologique et peuvent présenter un intérêt en qualité de substances possédant une action antitumorale. Pour établir les propriétés antitumorales et la toxicité des composés indiqués, on a étudié: 1) l'influence des composés sur la croissance de tumeurs greffables des rats blancs sans race et des souris; 2) l'activité des composés vis-à-vis des leucémies des souris de lignée; 3) la toxicité aiguë des composés après une administra- tion unique et après des administrations réitérées chez les souris blanches sans race placées dans des cages standards, à raison de 8 animaux par cage. Les propriétés biologiques des composés proposés ont été étudiées en les essayant sur des rats et des souris. L'activité antitumorale a été étudiée chez des rats blancs pesant de 110 à 130 g, ainsi que chez les souris blanches sans race et de lignée, pesant de 17 à 21 g, avec des tumeurs greffables Le traitement commence 5- 7 jours après le greffage des tumeurs solides et le jour suivant après le greffage des souches leucémiques Les souches de tumeurs greffables suivantes ont été utilisées: 1) rats: le sarcome de Janssen, le sarcome 45, le sarcome M-1, le sarcome 536; 2) souris blanches sans race: le sarcome 180, le sarcome AK, le sarcome 37, le carcinome NK; 3) souris de lignée: la leucémie La, les leucémies L 1210 et P-388. Les composés de formule générale I, dans laquelle X désigne Cl (composé 1) , Br (composé 2), sont bien solubles dans une solution isotonique de chlorure de sodium et sont administrés par voie intrapéritonéale Les doses de composés sont calculées en mg par kg de poids de l'animal. Etant donné que le composé de formule générale I, dans laquelle X désigne n-CH 3 C 6 H 4503 (composé 3), est difficile- ment soluble dans l'eau, il a été introduit sous forme d'une suspension dans la colle d'amidon, et les doses ont aussi été calculées en mg par kg de poids de l'animal. Comme il ressort de l'étude, les composés sont doués d'une activité antitumorale marquée sur les tumeurs greffables des rats Les résultats sont résumés dans le tableau 1. Comme il ressort du tableau 1, on observe une inhibition considérable de la croissance du sarcome de Janssen (à 98 et à 100 %), du sarcome M-1 (à 99 et à 95 %), du sarcome 45 (à 99 et à 100 %), du sarcome 536 (à 78 et à 74 %) après l'administrabon, respectivement, des composés 1 et 2 aux doses maximums tolérées (DMT) Une diminution notable de cette dose pour les rats avec le sarcome de Janssen ne se répercute pas sensiblement sur le changement de l'activité antitumorale des composés 1 et 2 En effet, après l'administration aux rats avec le sarcome de Janssen du composé 1 à une dose de 80 fois inférieure à sa TMT (c'est-à-dire 2 mg/kg) et du composé 2 à une dose de 20 fas inférieure à sa E 1 T ( 8 mg/kg), on observe une inhibition respectivement à 69 et à 43 % de la croissance de la tumeur. Une haute activité antitumorale a été également obser- vée après l'administration des composés proposés aux souris blanches sans race, avec &es tumeurs greffables Les données sont résumées dans le tableau 2. Comme il ressort du tableau 2, après l'introduction des composés 1 et 2 aux doses maximums tolérées, on observe une inhibition de la croissance du sarcome 180 (-à 66 et à 52 %), du sarcome 37 (à 88 et à 60 %), du sarcome AK (à 87 et à 81 %), respectivement. On juge de l'activité des composés à l'égard des leucémies d'après le temps de survie (Jt) des animaux traités par comparaison avec les animaux témoins Jt l'in- dice d'inhibition de l'évolution des leucémies a été calculé suivant la formule: J= survie moyenne des animaux traités x 100 survie moyenne des animaux témoins x 100 Les composés 1 et 2 manifestent une action antileucé- mique marquée Les données sont résumées dans le tableau 3. Le tableau 3 montre que l'administration des DMT des composés 1 et 2 aux souris avec la leucémie greffable La augmente de 3 et 2 fois, respectivement, la survie des souris traitées, comparativement aux animaux témoins De plus, le composé 1 augmente de 1,03 fois la survie des souris avec la leucémie L 1210 et de 2 fois celle des souris avec la leucémie P-388 par comparaison avec les animaux témoins. Le composé 3 a été étudié sur des rats et des souris avec des tumeurs greffables, par voie interne Après l'administration du composé 3 aux doses maximums tolérées, on observe une inhibition de la croissance du sarcome de Janssen (à 50 %), du sarcome M-1 (à 49 %) et du sarcome 180 (à 35 %) (voir les tableaux 1 et 2). Lors de l'étude des propriétés toxiques des composés revendiqués ont été déterminées la dose absolument léthale (DL 95), la dose léthale moyenne (DL 50) et la dose maximum tolérée (DMT) Pour les composés 1 et 2 ont été déterminées DL 95 et DL 50 sur les souris blanches saines, pesant de 18 à 21 g, par administration unique ou réitérée (une fois par jour, quotidiennement, pendant 7 Jours) par voie intrapé- ritonéale. Il a été constaté qu'après l'administration unique par voie intrapéritonéale du composé 1, la DL 50 constitue 1924 mg/kg, celle du composé 2 dans les mêmes conditions est de 1150 mg/kg; les DL 95 des composés 1 et 2 sont de 2272 mg/kg et de 1250 mg/kg respectivement Les résultats sont présentés dans le tableau 4. Les DL 95 et DL 50 pour le composé I sont égales 577 mgkg et 4 L 4 mg/kg respectivement, après administration réitérée; pour le composé 2, elles sont de 340 mg/kg et 150 mg/kg. respectivement. Les DMT des composés 1, 2 et 3 sont égales à 149 mg/kg, mg/kg et 83 mg/kg respectivement (voir le tableau 4). Les EMT pour les composés 1, 2 et 3 ont été étudiées dans les essais thérapeutiques sur les animaux avec des tumeurs greffables, après administration multiple (voir les tableaux 1 et 2). Dans une série spéciale d'essais, on a réalisé des études des composés proposés en comparaison avec le médicament antitumoral connu, à savoir la prospidine de formule Ia. Quant à la toxicité, les composés revendiqués sont moins toxiques que la prospidine (voir le tableau 4). Les composés proposés sont actifscontre les leucémies greffables des souris, alors que la prospidine n'exerce pas d'influence sur l'évolution des leucémies (voir les tableaux 3 et 5). Comme il ressort du tableau 5, un avantage majeur des composés proposés, comparativement à la prospidine, esto son large spectre d'action thérapeutique Ainsi, si l'in- dex chimiothérapeutique (ch/t) de la prospidine sur le sarcome de Janssen est égal à 27, pour les composés 1 et 2 il constitue 60 et 50 respectivement, c'est-à-dire qu'il est 2 fois plus élevé que celui de la prospidine. Le composé le plus actif parmi ceux indiqués plus haut, est le dichlorure de N,N 3 -di (j 3 -bromopropionyl)- N 1,N 2 -dispirotripipérazinium, proposé, suivant la présente invention, en qualité de principe actif d'un médicament antitumoral nouveau. L'étude de l'activité pharmacologique du médicament en question sur des animaux (rats et souris) a été effedcuée en comparaison avec la prospidine. Le médicament, objet de l'invention, est doté d'une action antitumorale considérable, non seulement par voie intrapéritonéale, mais aussi par voie subcutanée et intra- musculaire Les données sont résumées dans le tableau 6. De plus, le médicament proposé est plus efficace que la prospidine lors de l'administration per os chez les rats avec le sarcome de Janssen Les résultats sont donnés dans le tableau 7. Le médicament, objet de l'invention, possède une action antileucénique marquée, alors que la prospidine n'exerce aucune influence sur l'évolution des leucénies greffables chez les souris (voir le tableau 5). Le médicament proposé est doué d'une large action thérapeutique, qui est de 2,5 fois plus grande que celle de la prospidine (voir le tableau 5)0 L'étude comparative de la toxicité du médicament en question et de la prospidine a montré qu'il est de 2 fois moins toxique que la prospidine (la DL 50 du médicament proposé après administration unique chez les souris pesant de 20 à 21 g constitue 1924 mg/kg, et la DL 50 de la prospidine dans les mêmes conditions, 1000 mg/kg) (voir le tableau 4). Le médicament proposé possède un effet cumulatif de l'action toxique plus marqué que la prospidine (voir le tableau 4). En outre, il convient de signaler des particularités de répartition caractéristiques du médicament proposé dans les organes et les tissus Les données sont présentées dans les tableaux 8 et 9. Après l'introduction du médicament proposé marqué à C 14, il convient de noter le niveau de radioactivité dans le sang plus élevé que celui de la prospidine marquée à C 14 Une accumulation plus grande du médicament proposé a été notée, comparativement à la prospidine, dans le larynx, la trachée, les bronches, la moelle, la tumeur et le pancréas Le médicament marqué à C 14 proposé est éliminé dans l'organisme pendant 24 heures après l'administration interne, de préférence avec l'urée, alors que la prospidine marquée à C 14 est retenue plus longtemps dans l'organisme. Les données sont présentées dans le tableau 10. Le médicament proposé renferme un principe actif et un excipient pharmaceutiquement acceptable. Le médicament peut être utilisé tant pour l'introduc- tion parentérale que pour l'administration externe. On utilise le médicament pour l'introduction parenté- rale sous forme d'une solution pour injections intraveineuses, intramusculaires et intracavitaires, et pour l'administration interne sous forme de comprimés et de capsules. Le médicament pour injections est une solution, contenant le principe actif sous forme d'une poudre (forme lyophilisée) dans un solvant pharmaceutiquement acceptable. A titre de solvant pharmaceutiquement approprié on peut utiliser une solution de chlorure de sodium, l'eau distillée, une solution à 5 ou 20 % de glucose. Il est recommandé d'utiliser la solution du principe actif à une concentration de 2 à 5 % dans un solvant pharmaceutiquement acceptable, On prépare la solution pour injections immédiatement avant l'emploi, par dissolution de la poudre stérile (forme lyophilisée) dans une solution isotonique de chlorure de sodium, dans de l'eau ou dans une solution à 5 ou à 20 % de glucose. Le médicament sous forme de comprimés est une composition pharmaceutique contenant le principe actif et un excipient solide. L'excipient pharmaceutique pour comprimés peut être choisi dans le groupe constitué par la saccharose, le lactose, le chlorure de sodium, l'amidon, le talc; l'excipient pour capsul E peut être la gélatine. La composition pharmaceutique sous forme de comprimés et de capsules contient le principe actif à raison de -500 mg. Le médicament pour administration externe est employé sous forme d'onguent. Le médicament sous forme d'onguent est une composition contenant le principe actif et une base d'onguent pharmaceutiquement acceptable. La base d'onguent pharmaceutiquement acceptable peut être choisie dans le groupe comprenant la vaseline, la lanoline, une huile végétale. Il est recommandé d'utiliser un onguent contenant le principe actif à une concentration de 1 à 40 % dans une base d'onguent pharmaceutiquement acceptable. Le médicament'proposé a été étudié dans deux cliniques sur des malades avec diverses localisations du processus tumoral Sa faible toxicité a ainsi été confirmée. De plus, il a été constaté que le médicament proposé, après introduction intraveineuse en doses uniques de 500-600 mg quotidiennement (au total jusqu'à 10 g, 20 jours), était bien toléré par les malades. On a étudié l'efficacité du médicament proposé pour la leucémie aiguë 54 malades ont été sous observation clinique, parmi lesquels 20 sujets avec des affections malignes du sang Chez tous les malades, avant et après le traitement au médicament proposé, a été avalué l'état clinique (état général, présence de nodules lymphatiques, du foie et de la rate agrandis) On a réalisé un examen du sang périphérique, de la moelle, de l'urée, ainsi que des indices biochimiques du sang et des données de 1 'électrocardiogramme (ECG) Il a été constaté que l'introduction intraveineuse du médicament proposé à une dose de 100 à 1000 mg provoquait une action positive chez % des malades, une rémission clinicohématologique complète chez 20 % des malades atteints de leucnémie lympholde et myéloblastique aiguë. Les nouveaux composés proposés, c'està-dire les sels quaternaires de N,N 3 -di( h -bromopropionyl)-N 1, N 2-dispirotripipérazinium, peuvent être préparés, confor- mément à l'invention, suivant deux versions. La première version du procédé de préparation des composés revendiqués consiste en ce qu'on utilise à titre de composés de départ les sels quaternaires de N 1,N 2 -dispirotripipérazinium de formule générale II, et on les soumet à l'interaction avec l'anhydride halogéné de formule générale III indiquée plus haut, au sein d'un solvant, en présence d'un accepteur d'hydrogène halogéné. Les composés de départ II et III utilisés dans ce procédé sont décrits dans la littérature et sont obtenus par un procédé connu (Recueil des travaux de VNICHFI, "Nouvel agent antitumoral Prospidine', fas III, Moscou, 1973, pp 14-15). A titre d'anhydride halogéné p -bromopropionique, il est avantageux d'utiliser le chlorure d'acideô-bromopro- pioniqueo On utilise les composés de formule générale III en excès de 10-40 %, de préférence 15-20 %. A titre de solvant on peut utiliser de l'eau ou'un mélange d'eau et d'un solvant organique inerte, non miscible à l'eau. A titre de solvant organique inerte non miscible à l'eau, on utilise des éthers, par exemple l'éther de pétrole; des hydrocarbures halogénés, par exemple le chloroforme; des hydrocarbures aromatiques, par exemple le benzène. A titre d'accepteur d'halogénure, on peut utiliser des sels de métaux alcalins et alcalino-terreuxo Il est préférable d'utiliser à titre d'accepteur d'halogénure le bicarbonate de sodium, de potassium, d'hydroxyde de lithium. On conduit le processus d'acylation dans un intervalle de températures pouvant aller de O C à la température ambiante. Le processus terminé, il est avantageux d'isoler les produits de réaction bien solubles dans l'eau, par exemple le dichlorure de N,N 3-di( ?-bromopropionyl)-N 1,N 2-dispirotripipé- razinium, en le faisant précipiter avec un alcool inférieur refroidi, par exemple le méthanol, dans la masse réactionneleo. La deuxième version du procédé de préparation des composés de formule générale I consiste en ce qu'à titre de composés de départ on utilise les produits visés obtenus suivant la version I, qu'on soumet au traitement par le composé de formule générale IV: Me X (IV) dans laquelle Me est un métal du 1 er ou du 2 e groupe; X désigne un anion d'acide. Ainsi, pour préparer le dibromure ou le dinitrate de N,N 3-di( f bromopropionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium, on utilise à titre de composé de départ le dichlorure de N,N 3- di (P -bromopropionyl) -N 1, N 2-dispirotripipérazinium, obtenu suivant la version I. A titre de composé de formule générale IV, on utilise des sels de métaux des groupes I et II, par exemple le bromure de sodium, le nitrate d'argent. L'interaction des composés de départ mentionnés est réalisée généralement dans un milieu aqueux, à la température ambiante. La réaction terminée, on isole les produits visés par des méthodes connues. Pour une meilleure compréhension de l'invention, on donne ci-après des exemples illustrant le procédé revendiqué de préparation de nouveaux sels quaternaires de N,N 3-di ( -bromopropionyl) -N 1, N 2-dispirotripipérazinium. Exemple 1. Préparation de dichlorure de N,N 3-di(f -bromopropionyl) -N 1,N 2-dispirotripipérazinium. A un mélange de 3 g de dichlorure de N 1,N 2-dispiro- tripipérazinium, 1,5 g d'hydroxyde de lithium, 1 ml d'eau et 10 ml d'éther, on ajoute sous agitation énergique et à température de 5-10 C, une solution de 5,2 g de chlorure d'acide f -bromopropionique dans 5 ml d'éther On agite la masse réactionnelle à la température de 15 C pendant 2 heures On sépare le précipité par filtration, on dissout dans 10 ml d'eau, on verse la solution aqueuse obtenue dans ( 100 ml) de méthanol On refroidit le mélange obtenu jusqu'à O C, on sépare le précipité formé par filtration, on lave à l'alcool et on sèche On obtient 2 g de dichlorure de N,N 3 -di(, -bromopropionyl)-N 1,N$ -dispirotripipérazinium sous forme d'une substance cristal- line, n'ayant pas de température de fusion caractéristiqie, bien soluble dans l'eau, pratiquement insoluble dans les solvants organiques. Trouvé, %: C 37,8; H 5,78; N 9,85; C 12,21 C 18 H 32 Br 2 C 12 N 4 2 Calculé, %: C 38,10; H 5,65; N 9,89; Cl 12,53. Exemple 2. Préparation de dibromure de N,N 3 -di(, -bromopropio- nyl)-N 1, N 2-dispirotripipéraziniumo Version I: A une suspension de 15 g de dibromure de N 1, N 2- dispirotripipérazinium dans 40 ml d'eau, on ajoute une solution de 7,5 g de bicarbonate de sodium dans 40 ml d'eau, on additiomnne, sous agitation intense, 8 ml de chlorure d'acide f-bromopropionique On brasse la masse réaction- nelle à la température ambiante pendant 2 heures On filtre le précipité formé, on lave à l'eau et l'alcool, on sèche. On obtient 20 g de dibromure de N,N 3-di( 5 -bromopro- pionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium La substance n'a pas de température de fusion caractéristique, elle est modéré- ment soluble dans l'eau, pratiquement insoluble dans les alcools et autres solvants organiques. Trouvé, %: C 33,21; H 4,94; N 8,81; Br 48,78 C 18 H 32 Br 2 N 402 Calculé, %: C 32,95; H 4,92; N 8,54; Br 48,71. Version II: A une solution de 0,6 g de dichlorure de N,N 3-di ( / bromopropionyl)-N 1,N 2 -dispirotripipérazinium (obtenue suivant l'exemple I) dans 3 ml d'eau, on ajoute une solution de 0,25 g de bromure de sodium dans 5 ml d'eau. On filtre le précipité formé, on lave à l'eau froide, au méthanol, on sèche. On obtient 0,45 g de dibromure de N,N 3-di( ( -bromo- propionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium, identique à celui obtenu selon la version I. Exemple 3. Préparation de dinitrate de N,N 3-di (P -bromoprqi Lonyl) -N 1,N 2 -dispirotripipérazinium. Version I: A une solution de 3,5 g de dinitrate de N 1, N 2-dispi- rotripipérazinium dans 15 ml d'eau, on ajoute simultanément, à unetempérature de O à 5 C, 2,0 ml de chlorure d'acide / -bromopropionique et 0,48 g d'hydroxyde de lithium dans 6 ml d'eau, et on conduit ensuite la réaction en opérant comme dans l'exemple I On filtre le précipité formé, on lave à l'eau froide, au méthanol et on sèche. On obtient 3,9 g de dinitrate de N,N 3-di( ? -bromopro- pionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium La substance n'a pas de température de fusion caractéristique, elle est modérément soluble dans l'eau froide, pratiquement insoluble dans les solvants organiques. Trouvé, %: Br 25,91 C H Br NO 18 H 32 Br 2 N 68 Calculé, %: Br 25,77. * Variante II: A une solution de 0,6 g de dichlorure de N;N 3-di ( % bromopropionyl) -N 1,N 2-dispirotripipérazinium (obtenue suivant l'exemple I) dans 6 ml d'eau, on ajoute une solution de 0,34 g de nitrate d'argent dans 4 ml d'eau. On filtre rapidement le précipité de chlorure d'argent, on ajoute au filtrat un volume égal de méthanol On filtre le précipité de dinitrate, on lave à l'eau froide, au méthanol et on sèche. On obtient 0,41 g de dinitrate de N,N 3-di( P -bromopro- pionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium, identique à celui obtenu selon la variante I. Exemple 4. Préparation de di(para-toluènesulfonate) -N,N 3-di ( -bromopropionyl) -N', N 2-dispirotripipéraziniumo A une suspension de 5,68 g de di(paratoluènesulfonate) -N 1,N -dispirotripipérazinium dans 10 ml d'eau, on ajoute simultanément, sous agitation vigoureuse etàune température de 5 à 10 C, par portions (à une telle vitesse que la température ne dépasse pas celle indiquée plus haut), une solution de I g d'hydroxyde de lithium dans 5 ml d'eau et 4,3 g de chlorure d'acide P -bromopropionique On brasse le mélange réactionnel à une température de 15-18 C pendant 2,5 heures On filtre le précipité, on lave à l'eau, à l'alcool, on sèche. On obtient 4,2 g de di(para-toluènesulfonate)-N,N 3 -di( t bromopropionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium sous forme d'une substance cristalline blanche, n'ayant pas de température de fusion caractéristique, difficilement soluble dans 1 'eau, pratiquement insoluble dans les solvants organiques. Trouvé, %: Br 19,19; 19,05 C 32 H 46 Br 2 N 4852 Calculé, %: Br 19,10. Dans aes conditions analogues à celles de l'exemple 4: en partant du diiodure de N 1,N 2-dispirotripipéra- zinium et du chlorure d'acide y -bromopropionique, on obtient 3,7 g de diiodure de N,N 3-di( e -bromopropionyl) -N 1,N 2-dispirotripipérazinium sous forme de cristaux blancs, n'ayant pas de température de fusion caractéristique, modérément solubles dans l'eau, pratiquement insolubles dans les solvants organiques; en partant du dibenzène-sulfonate de N 1,N 2-dispiro- tripipérazinium et du chlorure d'acide e -bromopropionique on obtient 4,5 g de dibenzène-sulfonate de N,N 3-di(e -bromo- propionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium sous forme de cristaux blancs, n'ayant pas de température de fusion caractéristique, difficilement solubles dans l'eau, pratiquement insolubles dans les solvants organiques; en partant du diméthylsulfonate de N 1,N 2-dispirotri- pipérazinium et du chlorure d'acide A -bromopropionique, on obtient 3,9 g de diméthylsulfonate de N,N 3-di(( -bromopro- pionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium sous forme de cristaux blancs n'ayant pas de température de fusion caractéristique, modérément solubles dans l'eau et pratiquement insolubles dans les solvants organiques; en partant du dibenzoate de 1,N 2-dispirotripipéra- zinium et du chlorure d'acide 9-bromopropionique, on obtient 4,5 g de dibenzoate de N,N 3-di( r -bromopropionyl) -N,N 2-dispirotripipérazinium sous forme de cristaux blancs,pratiquement insolubles dans l'eau et dans les solvants organiques. TABLEAU 1. Influence des composés revendiqués sur la croissance des tumeurs greffables chez les rats. Tumeur Composé 1 Composé 2. Dose, Nombre IT, Changement Dose, Nombre IT, Changement mg/kg d'in de poids des mg/kg d'in de poids des (intra jec % animaux, g (intra Jec % animaux, g périto tions essai con périto tions essai con- néal) tr Ole néal) trle Sarcome 160 * 7 + 98 -12 + 25 149 * 5 + 100 -30 + 3 de 125 7 + 89 + 4 -16 86 4 + 99 + 1 + 3 Janssen 90 7 + 86 + 6 -16 88 5 + 99 + 1 -2 5 + 85 + 20 + 17 39 5 + 99 + 14 + 3 7 + 98 + 30 + 25 21 4 + 90 + 34 + 3 7 + 93 + 4 + 25 8 7 + 43 + 21 -12 6 6 + 80 + 10 + 5 4,2 7 + 35 + 6 -12 4 6 + 81 O + 5 2,1 7 + 46 + 5 -12 2 6 + 69 -1 + 5 1 7 O -2 Sarcome 125 * 5 + 99 -3 + 3 95 * 6 + 100 -6 -19 80 5 + 99 -9 -12 83 7 + 96 + 6 -4 7 + 61 -8 -12 44 7 + 96 + 4 -4 7 O -12 -12 20 7 + 66 -12 -4 Sarcome 140 * 6 + 78 -32 + 13 133 * 5 + 74 -14 -4 536 70 6 + 55 -22 + 13 81 6 + 52 -15 -4 7 + 45 -15 -14 Sarcome 111 * 5 + 99 + 4 + 14 95 * 6 + 97 + 8 + 21 M-1 90 5 + 96 + 7 + 8 * Dose maximum tolérée (MTD) IT, % indice d'inhibition de la croissance de la tumeur - Co Ln co Ln TABLEAU I (suite). Influence des composés revendiqués sur la croissance des tumeurs greffables chez les rats. Tumeur Composé 3. Dose, Nombre IT, Changement mg/kg d'in de poids des (intra jec % animaux, g périto tions essais con- néal) trôle Sarcome 83 ** 7 + 50 -7 + 3 de Janssen n'est pas étudié Sarcome n'est pas étudié Sarcome 536 n'est pas étudié Sarcome 85 ** 6 + 49 + 1 -3 M-1 ** Un seul essai IT, % indice d'inhibition de la croissance de la tumeur. TABLEAU 20 Influence des composés revendiqués sur la croissance des tumeurs greffables chez lessouris. Tumeur Composé 1 Composé 2. Dose, Nombre IT, Changement Dose, Nombre IT, Changement mg/kg d'in de poids des mg/kg d'in de poids des (intra jec % animaux g (intra jec % animaux, g périto tions essai con périto tions essai con- néal) trôle néal) trôle Sarcome 262 * 6 + 66 -6 -2 303 * 4 + 52 -3 -1 75 6 + 74 -4 -5 276 4 + 72 -6 -4 6 + 42 À 156 4 + 63 -3 -2 3 + 23 -2 -2 Sarcome 277 * 6 + 88 -4 -3 194 * 6 + 60 -5 -9 37 150 5 + 53 124 6 + 65 -3 -9 7 + 74 -2 -2 Sarcome 250 * 6 + 87 -3 -3 184 * 4 + 81 -4 + 0,5 AK 200 5 + 64 142 4 + 75 -5 + 0,5 6 + 62 -1 -3 104 3 + 70 -2 + 0,5 8 + 81 -3 -3 Carcino 250 * 6 + 86 -4 -2 me NK 125 6 + 42 -3 -2 maximum tolérée (MTD) indice d'inhibition de la croissance de la tumeur - tn U 1 Ln r O O *Dose IT, % 251608 '5 TABLEAU 2 (suite). Influence des composés revendiqués sur la croissance des tumeurs greffables chez les souris. Tumeur _Composé 3 o Dose, Nombre IT, Changement mg/kg d'in de poids des (intra jec % animaux, g périto tions essai con- néal) trôle Sarcome 250 ** 6 + 35 + 3 -2 ** On a réalisé un seul essai IT, % indice d'inhibition de la croissance de la tumeur. TABLEAU 3. La survie des souris avec aes leucémies greffables L 1210, La et P-388 après traitement par les composés 1 et 2 en comparaison avec le traitement par la prospidine en DMT. Préparation L 1210 La P-388 jours IT, % jours IT,% jours IT' % Composé 1 10,6 + 2 38 21,2 + 0,1 218 19,7 + 0,2103 Composé 2 n'a pas 11,2 + 0,4 69 n'a pas été été étudié étudié Prospidine 8,1 + 0,1O 6,6 + O O 14,8 + 0,3 50 Contrôle 7,7 + 0 6,7 + 0 9,7 + 0,1 TABLEAU 4. Données comparatives sur la toxicité des composés 1, 2, 3 et de la prospidine (introduction intrapéritonéale aux souris)0 Composé Introduction unique Introduction multiple Ik* DL 9 D 5 DL 95 DL MTD DL 95 DL 9 DL 50 mg/kg mg/kg Composé 1 I2272 1924 577 444 149 82 Composé 2 1250 1150 340 150 125 Composé 3 83 ** Prospidine 1200 1000 250 58 indice de cumulation introduction per os de l'effet toxique * Ik ** Spectre de Tableau 5. l'action antitumorale des composés 1 et 2 en comparaison de celui de la prospidine I Rats Souris Composé Sarcome Sarcome Sarcome Sarcome: Sarcome Leucémie Leucémie Leucémie X/T** Janssen 45 M-1 536: 180 La L 1210 P-388 I Composé: 1 ++++ ++++ ++++ ++: ++ 218 * 38 * 103 60 Com osé +++ ++++ ++++ ++ * + 69 * 50 Pros pi- dine ++++++ ++++ ++: ++ O * O * 50 * 27 inhibition de la il Il Ilnl Il i il Il effet nul In îl croissance de la tumeur Il tl l I I N il l l l l l Il l ll nl N ll l à 95-100 %. à 80-95 %- à 60-80 %o à 30-60 %. indice d'inhibition de la croissance de la tumeur X/T indice chimiothérapeutique (rapport de la dose maximum tolérée (IMT) à la dose minimum efficace (ED) o rla Ln o oo on Note : +*++ +++ ++ + * ** TABLEAU 6 o Influence du composé I sur la croissance du Sarcome Janssen greffable, après introduction subcutanée et intramusculaireo Mode'Dose de Nombre IT' Changement de poids Mode d'intro composé d'in- duction 1, mg/kg troduc_% des animaux, g tions essai contrôle Subcutanée 68,6 5 + 86 -6 -14 Intramusculaire 55,5 6 + 78 -11 -2 TABLEAU 7. Données comparatives sur l'action du composé 1 et de la prospidine sur la croissance du Sarcome Janssen chez les rats, après introduction per os. Dose de Nombre d'in IT, Changement de poids Préparation préparâlantroductions des animaux, g mg/kg % essai contrôle Composé 1 142 7 + 55 -15 -4 Prospidine 145 7 + 30 -9 -4 TABLEAU 8. Distribution du composé I C 14 * dans les organes et les tissus de rats présentant le sarcome M-1, après introduction intra- veineuse. Organe 15 min 30 min 60 min 24 heures Larynx 4,15 ** 3,43 ** 2, 00 ** 0,58 ** Reins 10,4 5,4 2,6 0,53 Bronches 3,4 2,83 1,7 0,24 Trachée 7,29 4,62 4,64 0,6 Hypophyse 6,3 6,67 5,13 4,12 Thyrolde 3,5 2,73 1,43 0, 48 Moelle 3,84 6,67 3,78 0,76 Thymus 1,67 0,71 0,54 0,2 Tumeur 1,76 0,91 0,57 0,26 Sang 1,43 0,91 0,47 0,05 Foie 0,94 0,69 0,76 0,32 Rate 0,66 0, 33 0,32 0,11 Poumons 0,95 0,71 0,86 0,26 Noeuds lymphatiques 0,69 0,11 0, 69 -0,2 * Le composé 1 est marqué en partie dispirotripipérazi- nium de la molécule. ** Coefficients d'accumulation différentielle. TABLEAU 9 o Distribution de la prospidine marquée en C 14 dans les organes et les tissus des rats pré- sentant le sarcome M-1, après introduction intraveineuse. Organe 15 min 30 min 60 min 24 heures Larynx 0,42 ** 0,32 ** 0,14 ** 0,05 ** Reins 3,34 0,67 0,56 0,15 Bronches 2,16 0,82 0,5 0,25 Trachée 0,38 0,21 0,1 0,07 Hypophyse 2,4 1,65 1,47 0,555 Thyroïde 1,2 1,06 0,75 0,22 Moelle 0,8 0,6 0,52 0,18 Thymus 0,16 0,06 0,05 0,02 Tumeur 0,65 0,37 0,3 0,07 Sang 0,4 0, 1 0,07 0,01 Foie 1,43 0,75 0,67 0,13 Rate 0,43 0,21 0,11 0,06 Poumons 1, 54 0,45 0,2 0,06 Noeuds lymphatiques 0,57 0,48 0,14 0,04 * Prospidine marquée de la molécule. en partie dispirotripipérazinium ** Coefficients d'accumulation différentielle. TABLEAU 10 o Elimination de la radioactivité de l'organisme des rats 24 heures après l'introduction intraveineuse du com- pos I C 14 et de la prospidine C 14 posé I C 4 et de la prospidine C Préparation Urée Fécal Total Composé 1 98,3 %* 1,6 % 99,9 % Prospidine 68, 0 % 7,0 % 75,0 % * 80,7 % éliminés en 3 heureso REVENDICATI O N S 1. Produits chimiques nouveaux, utiles notamment pour leur action antitumorale, caractérisés en ce qu'ils consistent en des sels quaternaires de N,N 3-di(f -bromo- propionyl)-N 1,N 2-dispirotripipérazinium répondant à la formule générale I: t Br CH 2 CH 2 C 0-N_-'*:N-C O CH 2 CH 2 Br2 X (I) o X désigne un anion d'acide. 2. Procédé de préparation des sels quaternaires faisant l'objet de la revendication 1, caractérisé en ce qu' un sel quaternaire de dispirotripipérazinium de formule générale (II)+: + t HN N N r-NH J 2 X (II) v, ' o X est un anion d'acide, est soumis à une interaction avec un anhydride halogéné > -bromopropionique de formule générale (III): Br CH 2 CH 2 CO Hal (III) au sein d'un solvant, en présence d'un accepteur d'halogénure, ladite interaction étant suivie, si nécessaire, d'un traitement du produit visé par un composé de formule générale (IV): Me X (IV) o Me désigne un métal du Ier ou IIème groupe; X est un anion d'acide. 3. Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que l'anhydride halogéné fi -bromopropionique de formule générale (III) est utilisée en excès. 4. Procédé suivant l'une des revendications 2 et 3, caractérisé en ce que l'excès d'anhydride halogéné ( 3-bromopropionique est de 10 à 40 %. 5 Procédé suivant l'une des revendications 2, 3 et 4, caractérisé en ce qu'à titre de solvant on utilise de l'eau ouumm&ange d'eau et d'un solvant organique non miscible à l'eau. 6.-Procédé suivant l'une des revendications 2 à 5, caractérisé en ce qu'à titre d'accepteur d'halogénure on utilise un sel de métal alcalin ou alcalino-terreux. 7. Procédé suivant l'une des revendications 2 à 6, caractérisé en ce qu'à titre de composé de formule générale IV on utilise le bromure de sodium, le nitrate d'argent. 8. Procédé suivant l'une des revendications 2 à 7, caractérisé en ce qu'on conduit le processus dans un intervalle de températures pouvant aller de 0 C à la température ambiante. 9 Médicament à action antitumorale, caractérisé en ce qu'à titre de principe actif il contient du dichlorure de N,N 3-di( P -bromopropionyl)-N 1, N 2-dispirotri- pipérazinium et un excipient pharmaceutiquement acceptable' 10. Médicament suivant la revendication 9, caractériséencequeences d'administration par injections, ledit principe actif est utilisé sous forme d'une poudre lyophilisée. 11. Médicament suivant l'une des revendications 9 et 10, caractérisé en ce que la teneur en principe actif du médicament pour injections constitue 2 à 5 %. 12. Médicament suivant l'une des revendications 9 et 10, caractérisé en ce qu'à titre d'excipient pharmaceutique on utilise une solution isotonique de chlorure de sodium, de l'eau distillée, une solution à 5 ou 20 % de glucose.