Brevet FR2515186A1 — publié le 19830429

% 6 La présente invention concerne un procédé de production d'isomaltose de grande pureté,à partir d'une solution sucrée en renfermant, et avec un bon rendement. Il est bien connu que l'isomaltose est un disac- charide faiblement sucré, présent à l'état de traces dans quelques produits alimentaires, par exemple des aliments fermentés, que l'on peut obtenir en quantité marquée al- lant jusqu'à 10 à 25 % en poids sur la base du produit solide (dans la présente description, sauf indication con- traire, tous les pourcentages sont des pourcentages pondé- raux sur la base du produit solide), par réaction réver- sible à l'aide d'un catalyseur acide ou de glucoamylase, par réaction de transfert de glucose de maltose ou de mal- todextrine à l'aide d' O ou par hydrolyse partielle du dextrane. L'obtention à l'échelle industrielle et à faible coût d'i- somaltose de pureté la plus grande possible, est très at- tendue du fait de la découverte récente que l'isomaltitol, un produit d'hydrogénation de llisomaltose,pouvait être utilisé comme édulcorant de bas pouvoir calorifique, et faiblement cariogène. La présente invention est basée sur la constata- tion que l'on peut obtenir facilement un isomaltose très pur, à l'échelle industrielle, par application d'une solu- tion sucrée contenant de l'isomaltose, sur une colonne chargée avec une résine échangeuse de cation fortement acide, de la forme métal alcalin ou alcalino-terreux, sui- vie d'un fractionnement, par addition d'eau, de cette solu- tion. Le nouveau procédé selon l'invention, consiste à faire passer une solution sucrée contenant de l'isomal- tose sur une colonne chargée avec une résine échangeuse de cation fortement acide, de la forme métal alcalin ou al- calino-terreux, à fractionner cette solution, par addition d'eau à la colonne, dans l'ordre, en fraction à teneur 255 i 5 '86 élevée en isomaltodextrine, fraction à teneur élevée en isomaltodextrine-isomaltose, fraction à teneur élevée en isomaltose, fraction à teneur élevée en isomaltose-glucose et fraction à teneur élevée en glucose, puis à récupérer la fraction à teneur élevée en isomaltose, dont la teneur en isomaltose est égale ou supérieure à 40 % Dans une forme de réalisation préférée de l'invention, la solution sucrée est appliquée sur la colonne conjointement avec la fraction à teneur élevée en isomaltodextrineisomaltose et/ou la fraction à teneur élevée en isomaltose-glucose, obtenues au cours d'une opération antérieure, lesdites fractions résultant de la présente opération étant recy- clées et appliquées conjointement avec une solution sucrée fraîche au cours d'un stade de fractionnement ultérieur. Ce mode opératoire permet d'obtenir avec un faible coût à l'échelle industrielle, de l'isomaltose très pur. Dans la présente description, le terme "Isomal- todextrine" représentent des isomaltodextrines à degré de polymérisation supérieur à celui de l'isomaltose Les ter- mes "fraction à teneur élevée en "A" et "fraction à teneur élevée en A-B", signifient que les fractions éluées ont respectivement pour constituants principaux A, ou A et B. La solution sucrée utilisable conformément à l'invention, peut être toute solution contenant de l'iso- maltose, et donnant avec un fort rendement lors du frac- tionnement, une fraction à teneur élevée en isomaltose, (teneur égale ou supérieure à 40 %) Par exemple, la solu- tion sucrée peut être, de préférence, un produit de réac- tion réversible du glucose, obtenu à l'aide d'un cataly- seur acide ou de glucoamylase (EC 3 2 1 3); un produit de transfert du glucose obtenu à l'aide d' la teneur en isomaltose doit être au moins égale à 7 %. Lorsque l'on prépare la solution sucrée à l'aide de gluco- amylase, on peut utiliser au lieu d'une solution aqueuse c ai fe 2 5 i 86 de glucose une solution aqueuse de certains hydrolysats partiels d'amidon, par exemple maltose, maltodextrine, sirop de mais, dextrine, ou leurs mélanges, généralement à une concentration de l'ordre de 40 à 80 % en poids/poids. Lorsque la solution sucrée est préparée à l'aide d' o-glu- cosidase, une solution aqueuse d'hydrolysat partiel d'a- midon, par exemple maltose, maltodextrine, sirop de mais, dextrine, ou leurs mélanges, généralement à une concen- tration de l'ordre de 50 % poids/poids, est soumise à l'ac- tion d'un catalyseur acide et neutralisation subséquente; éventuellement on soumet la solution de dextrine à l'hydro- lyse enzymatique d'une dextranase (EC 3 2 1 11) ou d'une isomaltodextranase (EC 3 2 1 94). La résine échangeuse de cations, fortement acide, de la forme métal alcalin ou alcalino-terreux, utilisable conformément à l'invention, peut être constituée par un ou plusieurs membres de la famille des résines copolymères de styrène et de divinylbenzène, par exemple portant des groupements sulfonyle, de la forme métal alcalin ou alca- lino-terreux, comme Na, K+, Ca 2 ou Mg 2: des résines du commerce convenables comprennent par exemple "Dowex WX 2 ", "Dowex 50 WX 4, et "Dowex 50 WX 8 ", fabriqués par Dow Chemical Company, "Amberlite CG-120 " fabriqué par Rohm & Haas Company, "XT-1022 E" fabriqué par Tokyo Chemi- cal Industries, et "Diaion SK l B", "Diaion SK 102 " et "Diaion SK 104 " fabriqués par Mitsubishi Chemical Indus- tries Toutes ces résines possèdent un excellent pouvoir de fractionnement pour donner la fraction à teneur élevée en isomaltose, et sont fortement résistantes à la chaleur et à l'abrasion, ce qui les rend aptes à la production à l'échelle industrielle, d'isomaltose de grande pureté. Au cours du procédé selon l'invention, la résine ayant une dimension de particule de l'ordre de 0,01 à 0,5 mm, en suspension aqueuse, est chargée dans une ou plu- sieurs colonnes L'épaisseur préférée de la couche est égale ou supérieure à 7 m Lorsqu'on utilise deux colon- nes ou plus, elles sont disposées en cascade pour donner une épaisseur totale de couche égale ou supérieure à 7 m. Si la colonne utilisée a une épaisseur de couche infé- rieure à 7 m, les fractions peuvent être réappliquées sur la colonne dans l'ordre d'élution, et y être refraction- nées, de manière que l'épaisseur totale de la couche de contact de la résine avec la solution sucrée, atteigne 7 m ou plus, jusqu'à ce que la fraction à teneur élevée en isomaltose soit recueillie. En ce qui concerne les colonnes utilisables pour l'invention, conviennent sans distinction de matériau, de dimension, et de forme, toutes les colonnes pourvu qu' elles permettent d'atteindre les objets de la présente invention; par exemple, elles peuvent être en verre, en matière plastique ou en acier inoxydable; et de forme cylindrique ou-de section carrée; mais elles doivent être élaborées de manière à donner, lorsqu'on leur applique la' solution sucrée, l'écoulement lamellaire efficace possi- ble. Les descriptions suivantes expliquent concrète- ment le procédé détaillé selon l'invention. Après avoir chargé la résine échangeuse de cations, forte- ment acide, de la forme métal alcalin ou alcalino-terreux, en solution aqueuse, dans une ou plusieurs colonnes, de façon à avoir une épaisseur totale de couche égale ou su- périeure à 7 m, on y applique la solution sucrée, à une concentration de l'ordre de 10 à 70 % poids/poids, à raison de 1 à 60 volumes pour 100 volumes de couche, puis l'on charge vers le haut et vers le bas avec de l'eau à une vitesse d'écoulement de l'ordre de 0,1 à 2 SV vitesse spatiale, afin de réaliser le fractionnement de la solu- tion sucrée, dans l'ordre suivant, en une fraction à teneur élevée en isomaltodextrine, une fraction à teneur élevée en isomaltodextrine-isomaltose, une fraction à teneur éle- 15186 vée en isomaltose, une fraction à teneur élevée en iso- maltose-glucose et une fraction à teneur élevée en gluco- se; la température dans la colonne est maintenue pendant ce temps à 450850 C; ensuite on recueille la fraction à teneur élevée en isomaltose (teneur égale ou supérieu- re à 40 %) Bien que les éluats puissent être recueillis périodiquement tous les 1 à 20 % v/v par rapport au volume de base, ils peuvent être distribués automatiquement par fractions. Que la solution sucrée soit appliquée sur la colonne, avant, après, ou conjointement à l'application de la frac- tion à teneur élevée en isomaltodextrine-isomaltose et/ou de la fraction à teneur élevée en isomaltose-glucose, an- térieurement obtenues, la quantité d'eau nécessaire pour son fractionnement poussé peut être extrêmement réduite, et le constituant isomaltose de cette solution peut être recueilli à l'état très pur, à concentration élevée, et avec un rendement supérieur De préférence, la fraction antérieurement obtenue à teneur élevée en isomaltodextrine- isomaltose, la solution sucrée, et la fraction antérieure- ment obtenue à teneur élevée en isomaltose-glucose, peuvent être appliquée successivement à la colonne, dans cet or- dre. Bien que la fraction ainsi obtenue d'isomaltose, puisse être utilisée sans traitements ultérieurs, elle peut être éventuellement utilisée comme suit: on la sou- met à des stades de purification classiques, comme fil- tration, décoloration, et/ou désionisation, et le produit purifié peut être concentré pour obtenir un sirop qui peut être séché par pulvérisation en donnant une poudre. La fraction à teneur élevée en isomaltose (te- neur égale ou supérieure à 40 %) peut être avantageusement utilisée comme édulcorant, charge, agent de rétention de l'humidité, ou véhicule pour différents produits alimentai- res, cosmétiques ou produits pharmaceutiques; ou bien pour 2:15186 leur communiquer une consistance, une viscosité et/ou un éclat approprié; ou pour empêcher la rétrogradation de leurs constituants amylacés; ainsi que comme matière première pour la production d'isomaltitol. L'expérimentation suivante explique plus en détail la pré- sente invention. EXPERIMENTATION Solution sucrée Une solution aqueuse de glucose à 60 % poids/poids, est soumise à l'action d'une glucoamylase immobilisée, pré- parée selon le procédé décrit dans la demande japonaise N O 124 494/80, à 50 'C et p H 4,8,afin de réaliser la réac- tion réversible du glucose Au cours de cette réaction, on prélève périodiquement de petites portions du mélange réactionnel, on les dilue à une concentration de 45 % poids/poids, et on les utilise comme solutions sucrées pour l'expérimentation suivante La composition en sucre de ces différentes solutions sucrées est reportée dans le tableau I. On charge dans une colonne chemisée en acier inoxydable, de 5,4 cm de diamètre interne, "Dowex 50 WX 4 (Na)" (résine échangeuse de cation fortement acide, de forme métal alca- lin, fabriquée par Dow Chemical Company) en suspension aqueuse, de manière à obtenir une épaisseur de couche de 10 m. On applique à cette colonne, tout en maintenant sa tempé- rature à 750 C, chacune des solutions sucrées énumérées dans le tableau II, à raison de 5 % en volume du volume de la couche, puis l'on fractionne en y ajoutant de l'eau chaude à 750 C à une vitesse d'écoulement de 0,2 SV, et l'on récolte ensuite la fraction à teneur élevée en isomal- tose (teneur égale ou supérieure à 40 %) Les résultats sont indiquées dans le tableau II. TABLEAU I Composition en sucres (%) Solution sucrée (N ) 3 e Glucose Isomaltose Isomaltotriosel et isomalto- dextrines l supérieures i 98,6 1,1 0,3 ,7 3,6 0,7 91,1 7,1 1,8 83,3 12,7 4,2 I 63,0 25,5 1 11,5 TABLEAU II Note: Dans ce tableau, la colonne A représente le numéro de la solution sucrée; la colonne B la teneur % d'isomaltose dans la solution sucrée; la colonne C le rendement en grammes d'isomaltose dans la fraction à teneur élevée en isomaltose; la colonne D le rendement % d'isomaltose rapporté à sa quanti- té présente dans la solution sucrée; et le terme "impossible" signifie que l'on n'obtient pas de fraction à teneur élevée en isomaltose, c'est-à- dire égale ou supérieure à 40 %. Les résultats du tableau II confirment que lorsque la te- neur en isomaltose de la solution sucrée est égale ou i I A B C D 1 1 1,1 impossible impossible 2 3,6 9,9 45,2 3 i 7,1 32,5 75,3 4 12,7 62,2 80,6 25,5 126,2 81,4 _________________________________________ _______ _ t, 1 D supérieure à 7 %, on obtient facilement une fraction à teneur élevée en isomaltose, c'est-à-dire supérieure à %, avec un fort rendement, c'est-à-dire 70 % ou plus, par rapport à l'isomaltose présent dans la solution su- crée. Plusieurs formes de réalisation de l'invention sont décrites ci-après. EXEMPLE 1 Dans cet exemple, on utilise comme solution sucrée une solution aqueuse à 45 % poids/poids d'un produit de ré- action réversible, ayant une teneur en isomaltose de ,5 %, et obtenue comme décrit plus haut dans l'expéri- mentation. On charge dans 4 colonnes chemisées, en acier inoxydable, de diamètre interne de 5,4 cm, "XT-1022 E (Na)", une ré- sine échangeuse de cations fortement acide, de la forme métal alcalin, fabriquée par Tokyo Chemical Industries, en suspension aqueuse, de manière à obtenir des épais- seurs de couche respectives de 5 m, et l'on dispose ces colonnes en cascade pour obtenir une épaisseur totale de couche de 20 m. Tout en maintenant la température dans les colonnes à 750 C, on y applique la solution sucrée à raison de 5 % en volume du volume de la couche, puis l'on fractionne par addi- tion d'eau chaude à 750 C introduite à une vitesse d'écou- lement de 0,13 SV (vitesse spatiale) et ensuite on recueil- le la fraction à teneur élevée en isomaltose (teneur éga- le ou supérieure à 40 %). Cette fraction contient 233 g d'isomaltose, et le taux de récupération est très élevé, c'est-à-dire 75,1 %,rap- porté à la quantité d'isomaltose présent dans la solution sucrée. On décolore et désionise de manière habituelle cette frac- tion, pour obtenir 580 g d'un sirop contenant 15 % d'humi- dité Le sirop ainsi obtenu conteint 46,4 % d'isomaltose et 43 % d'isomaltodextrines, comprenant de l'isomaltotrio- se et de l'isomaltotétraose. EXEMPLE 2 On dissout du dextrane dans de l'acide sulfurique N à la concentration de 20 % poids/poids, et l'on maintient cette solution à 100 C pendant 1 heure, avant de la neu- traliser avec une solution de soude 6 N La solution ré- sultante est alors purifiée à l'aide de résines échan- geuses d'ions de forme-H et -OH, et l'on concentre pour obtenir une solution aqueuse sucrée à 60 % poids/poids à teneur en isomaltose de 12,2 %. La résine utilisée dans l'exemple 1, est convertie de manière habituelle en forme-K+, et on la charge dans une colonne chemisée, en acier inoxydable, de diamètre interne 6,2 cm, de manière à avoir une épaisseur de couche de 10 m. Tout en maintenant la température dans la colonne à 60 C, on y applique la solution sucrée à raison de 3 % en volume du volume de la couche, puis l'on fractionne par addi- tion d'eau chaude à 60 C à une vitesse d'écoulement de 0,2 VS (vitesse spatiale), et ensuite on recueille la frac- tion à teneur élevée en isomaltose (égale ou supérieure à %). Cette fraction contient 66 g d'isomaltose, et le taux de récupération est très élevé, c'est-à-dire de 79,1 %, rap- porté à la quantité d'isomaltose présent dans la solution sucrée On purifie ensuite cette fraction, et la concentre comme dans l'exemple 1, ce qui donne 170 g de sirop à te- neur de 15 % en humidité. Le sirop ainsi obtenu renferme 43,2 % d'isomaltose et 48,6 % d'isomaltodextrines comprenant de l'isomaltotriose et de l'isomaltotétraose. EXEMPLE 3 Une solution aqueuse à 45 % poids/poids de sirop de mais est additionnée avec une glucoamylase immobilisée, préparée comme indiqué plus haut dans le paragraphe Expérimentation, 2515 186 et le mélange est mis à incuber à 500 C et p H 4,8, afin de réaliser la réaction réversible du glucose, ce qui donne une solution sucrée à teneur en isomaltose de 16,5 %. On charge du "Dowex 50 WX 4 (Na)", une résine échangeuse de cation fortement acide, de forme métal alcalin, fabri- quée par Dow Chemical Company, en suspension aqueuse, dans des colonnes fraîches en même matériau et de mêmes dimensions que celles qui sont utilisées dans l'exemple 1, de manière à avoir une épaisseur totale de couche de 15 m. Tout en maintenant la température dans les colonnes à 550 C, on y applique la solution sucrée à raison de 6,6 % en volume du volume de la couche, puis l'on fractionne par addition d'eau chaude à 550 C à une vitesse d'écoule- ment de 0,13 SV (vitesse spatiale), et on recueille en- suite la fraction à teneur élevée en isomaltose (égale ou supérieure à 40 %). Cette fraction renferme 156 g d'isomaltose, et le taux de récupération est très élevé, c'est-à-dire de 78,1 % rapporté à la quantité d'isomaltose contenue dans la so- lution sucrée. On purifie ensuite cette fraction, et la concentre comme dans l'exemple 1 Le concentré résultant est séché sous vide, et séché par atomisation, pour donner 320 g d'une poudre à teneur en humidité inférieure à 1 %. La poudre ainsi obtenue renferme 47,7 % d'isomaltose et ,3 % d'isomaltodextrines comprenant de l'isomaltotriose et de l'isomaltotétraose. EXEMPLE 4 On utilise comme solution sucrée une solution aqueuse à % poids/poids d'un produit de réaction réversible, à teneur en isomaltose de 25,5 %, obtenue comme plus haut au paragraphe Expérimentation. Dans cet exemple, on réalise un fractionnement en deux stades Le premier stade se déroule comme suit: comme 1 1 dans l'exemple 1, la solution sucrée est appliquée à la colonne, puis l'on fractionne,mais la solution est appli- quée à raison de 20 % en volume du volume de la couche Le diagramme d'élution est représenté dans la figure 1, A, B, C, D, E y représentant respectivement et dans l'ordre d' élution, la fraction à teneur élevée en isomaltodextrine, la fraction à teneur élevée en isomaltodextrineisomaltose, la fraction à teneur élevée en isomaltose, la fraction à teneur élevée en isomaltose-glucose et la fraction à te- neur élevée en glucose La fraction C, à teneur élevée en isomaltose, est recueillie,et les fractions A et E sont enlevées du système de fractionnement. Le fractionnement supplémentaire s'effectue comme suit: on applique successivement sur la colonne, et dans l'or- dre, la fraction B, de la solution sucrée à raison d'en- viron 10 % en volume du volume de la couche, et la fraction D; ensuite on ajoute, comme dans l'exemple 1, de l'eau chaude à 75 C afin d'effectuer le fractionnement, et après on recueille la fraction à teneur élevée en isomaltose (te- neur égale ou supérieure à 50 %) Ce fractionnement supplé- mentaire est répété jusqu'à 50 fois au total, et l'on cal- cule la moyenne des résultats par opération: en moyenne, la fraction à teneur élevée en isomaltose renferme 519 g d'isomaltose, et le taux de récupération est très élevé, de 83,7 % rapporté à la quantité d'isomaltose présent dans la solution sucrée On rassemble les 50 fractions à teneur élevée en isomaltose, et on les traite comme dans l'exem- ple 3 pour obtenir 43 kg de poudre Cette poudre renferme 58,4 % d'isomaltose et 29,3 % d'isomaltodextrines comprenant de l'isomaltotriose et de l'isomaltotétraose. Les fractions A et E, qui ont été enlevées du système de fractionnement, sont concentrées à environ 60 % poids/poids et le concentré résultant est soumis à l'action enzymatique de la glucoamylase immobilisée,pour donner une composition de sucres similaire à celle de la solution sucrée de dé- part, prouvant que le mélange réactionnel peut être uti- * lisé dans la présente invention, comme solution sucrée. Il se confirme également que l'utilisation du mélange réactionnel aboutit à une conversion pratiquement complè- te du glucose en isomaltose souhaité. EXEMPLE 5 On utilise comme solution sucrée,une solution aqueuse à 60 % poids/poids d'un produit de réaction réversible, à teneur en isomaltose de 25,5 %, obtenue comme plus haut au paragraphe Expérimentation On charge de l"'Amberlite CG-120 (Ca)", une résine échangeuse de cation fortement acide, de forme métal alcalino-terreux, fabriquée par Rohm & Haas Company, en suspension aqueuse, dans des colonnes fraîches, en même matériau et de dimensions iden- tiques à celles de l'exemple 1, afin d'obtenir une épais- seur totale de couche de 10 m Egalement dans cet exemple on opère le fractionnement en deux stades Le premier fractionnement s'effectue comme suit:tbut en maintenant la température à 800 C dans les colonnes, on y applique la solution sucrée à raison de 15 % en volume du volume de la couche, puis l'on fractionne par addition d'eau chaude à 80 'C, à une vitesse d'écoulement de 0,6 VS (vitesse spatiale), afin d'obtenir un diagramme d'élution similaire à celui de la figure 1. La fraction C, à teneur élevée en isomaltose, est recueil- lie, tandis que les fractions A et E sont rassemblées et concentrées à environ 60 % poids/poids Le concentré résul- tant est alors soumis à l'action enzymatique de la glucoamy- lase immobilisée,pour donner une composition de sucres si- milaire à celle de la solution sucrée de départ, et le pro- duit de réaction résultant est utilisé comme solution su- crée. Le fractionnement supplémentaire s'effectue comme suit: on applique sur la colonne, successivement et dans l'ordre, la fraction B, la solution sucrée àOraison d'environ 7 % en volume du volume de la couche, et la fraction D, puis on ajoute de l'eau chaude à 80 C à une vitesse d'écoulement de 0,6 SV, pour fractionner, et l'on recueille ensuite la fraction à teneur élevée en isomaltose (égale ou supérieu- re à 60 %). La figure 2 représente le schéma de déroulement du procédé du présent exemple, dans lequel les fractions A à E pré- sentent des diagrammes d'élution similaires à ceux de la figure 1 Dans cette figure 2, G est glucose, GA le stade de réaction enzymatique avec la glucoamylase, S est la so- lution sucrée, R le stade de fractionnement par la résine, V le stade de concentration, et P l'isomaltose de grande pureté. Le fractionnement supplémentaire est répété jusqu'à 200 fois au total, et on calcule les résultats moyens par opé- ration: en moyenne, une fraction à teneur élevée en iso- maltose en renferme 256 g, et le taux de récupération est très élevé, 83, 4 % rapporté à la quantité d'isomaltose présent dans la solution sucrée Les 200 fractions à te- neur élevée en isomaltose sont rassemblées et traitées comme dans l'exemple 3 pour donner 77 kg de poudre Cette poudre renferme 65,3 % d'isomaltose et 22,7 % d'isomaltodex- trines comprenant de l'isomaltotriose et de l'isomaltoté- traose. Revendications 1 Procédé pour la production d'isomaltose très pur, caractérisé en ce qu'on applique une solution sucrée ren- fermant de l'isomaltose, à une colonne d'une résine échan- geuse de cation fortement acide, de la forme métal alcalin ou alcalinoterreux, puis on fractionne cette solution par addition d'eau, et finalement on recueille la frac- tion à teneur élevée en isomaltose. 2 Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution sucrée renferme au moins 7 % d'isomal- tose, et la fraction recueillie a une teneur en isomaltose au moins égale à 40 %. 3 Procédé selon une des revendications 1 ou 2, carac- térisé en ce que lors du fractionnement on obtient dans l'ordre, une fraction à teneur élevée en isomaltodextri- nes (fraction A), une fraction à teneur élevée en isomal- todextrine-isomaltose (fraction B), une fraction à teneur élevée en isomaltose (fraction C), une fraction à teneur élevée en isomaltose-glucose (fraction D), et une frac- tion à teneur élevée en glucose (fraction E). 4 Procédé selon une des revendications 1 à 3, carac- térisé en ce que la solution sucrée est un produit de ré- action réversible du glucose, obtenu à l'aide de glucoamy- lase, un produit de transfert de glucose obtenu à l'aide d' -glucosidase, ou un hydrolysat partiel de dextrane. 5 Procédé selon la réaction 4, caractérisé en ce que la glucoamylase est immobilisée. 6 Procédé selon une des revendications 1 à 5, carac- térisé en ce que l'épaisseur de la couche de résine dans la colonne est au moins égale à 7 m. 7 Procédé selon une des revendications 1 à 6, carac- térisé en ce qu'au cours du fractionnement, la température de la colonne est maintenue dans l'intervalle de 45 à 85 C. 8 Procédé selon une des revendications 1 à 7, carac- 15186 térisé en ce que la solution sucrée est appliquée à la- colonne conjointement avec la fraction B et/ou la frac- tion D, obtenues au cours d'une opération antérieure. 9 Procédé selon une des revendications 1 à 7, ca- ractérisé en ce que l'on applique successivement à la colonne, et dans l'ordre, la fraction B, obtenue antérieu- rement, la solution sucrée, et la fraction D, obtenue an- térieurement. Procédé selon une des revendications 1 à 9, ca- ractérisé en ce qu'on utilise en tant que solution sucrée contenant de l'isomaltose une solution aqueuse obtenue en soumettant à l'action de la glucoamylase, la fraction A et/ou la fraction E, obtenues antérieurement. 11 Procédé selon une des revendications 1 à 10, ca- ractérisé en ce que la résine échangeuse de cations for- tement acide, de forme métal alcalin ou alcalino-terreux, porte des groupes sulfonyle. 12 Procédé selon une des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que le métal alcalin ou alcalino-terreux de la résine est Na+, K, Ca ou Mg 13 Isomaltose de grande pureté obtenu par le procédé selon une des revendications 1 à 12.