Brevet FR2522154A1 — publié le 19830826

Dispositif de chromatographie et procédé de mise en oeuvre. La présente invention est relative à un dispositif de chromatographie et à un procédé de mise en oeuvre de ce dispo- sitif. L'invention est relative plus particulièrement à un dispositif complet de chromatographie préparative en phase liquide sous pression qui permet d'aborder la chromatographie d'un mélange quelconque solide ou liquide depuis le remplis- sage de la colonne jusqu'à la collecte des produits séparés et î O quelque soit le type de chromatographie à faire intervenir adsorption, partage, échange d'ions ou exclusion moléculaire. La chromatographie préparative présente comme on sait des problèmes particuliers du fait de l'utilisation de colonne présentant un diamètre nettement plus élevé que les autres dispositifs de chromatographie. On rencontre essentiellement des problèmes au niveau de l'efficacité de la colonne elle-même, du mode d'injection du solvant et du soluté et au niveau de la circulation du solvant dans la colonne. La présente invention apporte une solution à ces pro- blèmes et permet d'améliorer les performances de la colonne et son efficacité. L'invention apporte également une nouvelle solution aux problèmes de détection et de collecte posés par ce type de chromatographie. Les colonnes étaient à leur origine remplies avec une phase stationnaire sèche et on cherchait à diminuer le volume interstitiel entre les grains de la phase stationnaire en tapotant ou en vibrant la colonne On cherchait ainsi à ré- duire le volume interstitiel entre les grains. On a ensuite pensé à remplir les colonnes avec une phase stationnaire humide L'utilisation d'une phase stationnaire humide présente cependant l'inconvénient résultant de la décantation sélective des particules en fonction de leur granulométrie ce qui a conduit les utilisateurs à pousser la phase stationnaire humide avec un liquide sous pression. L'utilisation d'un liquide sous pression présente toutefois l'inconvénient d'être tributaire des manipulateurs et elle donne des résultats satis:aisants uniquement pour des colonnes de petit diamètre, On a également proposé d'utiliser une compression axiale ou radiale O oit centrifuge soit centripète pour améliorer l'effi- cacité des colonnes C'est ainsi que l'on a proposé la coi- pression axiale qui doit être maintenue pendant la chromato- graphie elle-même Un tel dispositif comprend notamment un corps coulissant perméable aux gaz ou aux liquides qui appli- que une pression sur la phase stationnaire présente dans un tube qui comporte à l'autre extrémité un couvercle perméable aux liquides et aux gaz et communiquant avec l'extérieur tout comme le corps coulissant luimême Ce type de dispositif présente cependant l'inconvénient d'assécher la phase sta- tionnaire au niveau de l'application de la pression par le corps coulissant Par ailleurs, l'utilisation d'un tel corps coulissant présente des problèmes de fuite de solvants, qui sont souvent très corrosifs et dangereux. Ce type de dispositif est enfin appliqué tout au long de la chromatographie ce qui entraîne des dépenses d'énergie et peut avoir tendance à modifier la compacité de la phase sta- tionnaire au cours de la chromatographie elle-même à la suite de l'introduction du solvant ou du soluté dans la colonne en vue de la séparation, Les inventeurs ont découvert maintenant un moyen permet- tant de remédier aux inconvénients antérieurs par l'utili- sation d'un poste de remplissage comparable au poste de rem- plissage des colonnes analytiques sous pression à la diffé- rence fondamentale près que la phase stationnaire est compri- mée dans le tube de la colonne par un corps solide non poreux à la place d'un liquide. Grâce à ce moyen il est possible d'améliorer les perfor- mances des colonnes de façon considérable en évitant les -5 inconvénients mentionnés pour les procédés antérieurs On évite ainsi notamment les gradients de granulométrie, l'écou- lement des éluats à travers le piston et on améliore de façon considérable l'efficacité de la colonne qui est un critère très important, étant donné que la finesse de la séparation est tributaire de l'efficacité et de la possibilité de séparer des produits suivant leurs temps de rétention variables dans la colonne. Pour ce gui concerne l'injection des liquides, les procé- dés antérieurs présentaient essentiellement des problèmes de répartition non homogènes sur toute la surface de la colonne résultant d'un gradient de vitesse linéaire du soluté et du solvant à l'intérieur de la colonne et d'autre part des effets de paroi qui font que le soluté qui migre dans la colonne avance plus vite le long de la paroi que le soluté qui migre à l'intérieur de la phase stationnaire. La présente invention vise également à remédier à ce problème qui est résolu d'une part par l'utilisation d'une colonne qui a été remplie par le poste de remplissage défini ci-dessus et par ailleurs par l'utilisation d'une tête d'in- jection comportant des moyens permettant de former un tube de solvant le long de la paroi et des moyens permettant d'injec- ter le soluté latéralement de façon à ce que les jets se bri- sent les uns sur les autres de façon radiale et diffusent à travers la tête de façon uniforme. Au niveau de la circulation du solvant le problème le plus important a été celui de la pulsation de la pompe Les inventeurs ont résolu ce problème en mettant en oeuvre une pompe à quatre pistons à 90 actionnée par des carnes ou des bielles donnant un débit parfaitement linéaire et totalement écrêté pour une vitesse de rotation uniforme de l'arbre à came. Les différents moyens en combinaison permettent d'amé- liorer de façon considérable l'efficacité et la précision de la séparation de la colonne chromatographique. En plus des moyens énumérés ci-dessus, la demanderesse a également mis au point des moyens permettant d'améliorer la détection ainsi que la collection des fractions. La présente invention a donc pour objet un dispositif de chromatographie d'une efficacité améliorée. Un autre objet de l'invention est constitué par un procé- dé de mise en oeuvre de ce dispositif au cours d'une chromato- graphie préparative en phase liquide sous pression. D'autres objets de l'invention apparaîtront à la lecture de la description qui suivent. Le dispositif conforme à la présente invention est essen- tiellement caractérisé par le fait qu'il comprend au moins un dispositif de remplissage comprenant la colonne, sous forme d'un tube cylindrique munie à sa partie inférieure d'un cou- vercle comportant un disque permettant le passage des liquides ou des gaz et arrêtant les particules solides, reliée à une buse de compression dont la hauteur minimale est égale au tiers de la hauteur de la colonne et d'un vérin actionnant un corps solide non poreux qui comprime la phase stationnaire par l'intermédiaire de la buse de compression. Le corps solide non poreux peut être actionné par exemple par un vérin hydraulique, pneumatique, à vis ou tout autre système connu dans l'état de la technique. La colonne est fixée au vérin par l'intermédiaire de la buse de compression, elle est de préférence en acier inoxy- dable ou en tout autre matériau utilisable dans ce domaine. Une fois la colonne comprimée celle-ci est désolidarisée de la buse de compression pour être intégrée au système de chromatographie. Le dispositif de chromatographie ainsi défini est de préférence associé, après avoir passé au poste de remplissage, à une tête d'injection située dans le couvercle supérieur que l'on fixe sur le haut de la colonne après l'avoir désolidarisé de la buse de compression, La tête d'injection est essentiellement caractérisée par le fait qu'elle comprend une paroi inférieure constituée par une plaque percée d'alvéoles jointives ou non, associée à un disque de billes frittées en acier inoxydable ou autre, disposé sous la plaque alvéolaire et un bottier d'injection d'un diamètre inférieur à la tête d'injection muni de plusieurs arrivées latérales de soluté entraînant une dispersion radiale du soluté dans le bottier d'injection ladite tête d'injection comportant sur la face supérieure une arrivée centrale de solvant et des moyens permettant au solvant de contourner le boîtier d'injection pour permettre au solvant de former un flux le long de la paroi intérieure de la colonne. Selon une réalisation préférentielle, le boîtier d'in- jection comporte au moins six arrivées latérales. La tête d'injection a de préférence un rapport de la surface de diamètre de l'arrivée centrale sur la surface de diamètre des arrivées latérales proportionnelle à la surface de l'anneau compris entre le diamètre de la colonne et le diamètre du boîtier d'injection sur le diamètre du boîtier d'injection. La tête d'injection est reliée conformément à l'invention à une pompe caractérisée par le fait qu'elle comprend quatre pistons actionnés par des cames ou des bielles disposées à 900, les unes par rapport aux autres et dont le support n'est pas solidaire du bloc comprenant les quatre têtes de pompe - -un bloc comportant quatre têtes de pompe munies chacune d'un clapet d'aspiration et d'un clapet de refoulement non soli- daire du support moteur-arbre à came. Ledit bloc est disposé de façon préférentielle sur des glissières et peut être translaté d'une longueur égale à la profondeur d'une chambre de tête de pompe au moyen d'un vernier gradué en millilitre par exemple. Conformément à l'invention chacune des quatre chambreàdes têtes de pompe est comprimée successivement ce qui a pour effet de donner un débit parfaitement linéaire totalement écrêté pour une vitesse de rotation de l'arbre à came qui peut être par exemple égale à 1 tour/sec. Le dispositif de détection qui permet encore d'améliorer les performances de la colonne de chromatographie est essen- tiellement caractérisé par le fait qu'il s'agit d'un montage en double détection par absorptiométrie et réfractrométrie sur une cuve unique comprenant une cuve de détection soumise à des rayonnements infrarouges et ultraviolets perpendiculaires l'un par rapport à l'autre dans un plan différent ou non. La cuve de détection comprend quatre faces polies dont deux sont en quartz qualité infrarouge, les deux autres étant en quartz qualité ultraviolet un bloc de double détection basse tension, la haute tension de la lampe source des rayon- nements U V étant renvoyée à l'extérieur au moyen de fibres optiques, Les inventeurs ont en effet constat que la double détec- tion présente souvent des problèmes du fait que le solvant qui a été comprimé par la pompe circule dans la colonne sous haute pression pour atteindre la cuve du détecteur ultraviolet A la sortie de la cuve le solvant s'expanse et l'on constate la formation de bulles qui vont perturber la détection réfracto- métrique Si l'on inverse l'ordre du détecteur, le dégazage dans la cuve ultraviolet ne gene pas la détection mais les variations de pression qu'entraîne ce dégazage perturbent la détection réfractométrique placée en amont et l'on a l'appari- tion d'un bruit de fond important, Le montage en double détection susdéfini réalisé à partir d'une cuve unique consiste donc essentiellement à mesurer la différence d'indice de réfraction à partir d'une source infra- rouge basse tension sur un appareil réfractométrique courant possédant une cuve à double circulation (échantillon et réfé- rence) Le montage conforme à l'invention a été effectué à partir des sources ultraviolettes soit en direct sur la sortie d'un monochromateur à réseau holographique par exemple On capte le rayonnement dans une fibre UV 200 QSF d'une longueur d'environ 2 m ou plus, et on dirige ce rayonnement perpendicu- lairement au rayonnement infrarouge dans la cuve et dans un plan différent En utilisant par exemple une fibre qui possède -5 O une ouverture numérique de 0,4 au moyen d'un système de len- tille dont les distances focales sont de 2,3 mm par exemple on rend au travers de la cuve le rayonnement parallèle puis on le fait reconverger vers une fibre UV 1000 QSF par exemple pour acheminer le rayonnement vers un photomultiplicateur classique. Les inventeurs ont enfin amélioré au point de vue effica- cité et sécurité la collecte des fractions En effet, il n'existe aucun collecteur de fraction dont le mécanisme ne serait pas électrifié De la pompe jusqu'au collecteur de fraction passant par l'injection, la colonne et la détection, le solvant est enfermé dans des tubulures ou des chambres étanches alors qu'au niveau du collecteur il est versé dans des récipients et peut s'expanser et dégazer provoquant ainsi une atmosphère déflagrante, En plus, en cas de panne du méca- nisme, les récipients peuvent déborder et inonder les ccomparti- ments électriques, très souvent situés en dessous du récipient. L'objet de l'invention est donc un collecteur de fraction totalement pneumatique simple d'emploi, peu onéreux Ce collec- teur est essentiellement caractérisé par le fait qu'il comprend deux compartiments Dans le compartiment inférieur un vérin actionne par un mouvement de va-et-vient un axe dans lequel on a placé deux cliquets en opposition de rotation en vue de l'entraînement d'une poulie munie d'une courroie d'un angle de rotation fixe dans un seul sens de rotation Le compartiment supérieur est équipé de préférence en son centre d'un axe creux entraîné par la courroie définie ci-dessus et muni d'un raccord tournant d'alimentation pneumatique Cette alimenta- tion permet au vérin disposé à la partie superieure de l 'axe creux et perpendiculairement à celui-ci, de présenter le capillaire du solvant devant les récipients de collecte ou devant un bac d'évacuation. Un exemple de réalisation schématisé d'un dispositif de chromatographie conforme à l'invention sera décrit ci-dessous. La fig 10 représente une représentation schématique du procédé permettant la mise en oeuvre du dispositif de chrominato- graphie susdéfini Après avoir confectionné la colonne C dans le poste de remplissage PR, le solvant va Ctre véhiculé à partir de la pompe P à travers la colonr De Cr passe dans la cuve de détection D et s'écoule dans le collecteur de frac- tions CF. D'autres particularités de l'invention apparaîtront dans la description qui va suivre d'un mode de réalisation pris comme exemple et représenté sur le dessin annexé, sur lequel: la fig 1 est une vue schématique en coupe du poste de remplissage de la colonne de chromatographie en phase liquide préparative; la fig 2 est une vue schématique en coupe de la colonne préparative après avoir été désolidarisée du poste de remplis- sage et munie de la tête d'injection. la fig 3 est une vue schématique en projection de la plaque alvéolaire, la fig 4 est une vue schématique en projection du boî- tier d'iniection et des arrivées latérales. la fig 5 est une vue schématique en coupe et en projec- tion de la pompe à quatre pistons pour chromatographie en phase liquide. les fig 6, 7 et 8 sont des vues schématiques de la cuve unique à double détection absorptiométrie et réfractométrie vue de face 6, vue de côté 7 et vue de dessus 8. la fig 9 est une vue schématique en coupe et en projec- tion du collecteur de fraction pneumatique antidéflagrant. Sur la fig 1, le vérin 1 pneumatique, hydraulique, à vis ou autre est fixé à la buse de remplissage 4 par un étrier 2. Le vérin 1 actionne le corps solide non poreux 3 à l'intérieur de la buse de remplissage 4. La course du vérin 1 est égale à la longueur de la buse de remplissage 4 ou inférieure La colonne à remplir de phase stationnaire 5 est munie d'un couvercle inférieur 8 (muni d'une plaque alvéolaire 7 de récupération des solutés et surmontée immédiatement d'un disque de billes frittées 6 de préférence en acier inoxydable L'étanchéité au niveau du raccordement de la buse de remplissage 4 à la colonne et au niveau du raccordement de la colonne 5 au couvercle 6 est réalisée au moyen de joints plats par exemple en téflon. Sur la fig 2, la colonne 5 qui a été désolidarisée de la 0 o buse d'injection 4 représentée sur la fig 1 comporte à sa place le couvercle supérieur 12 muni du bottier d'injection il. à l'intérieur duquel se trouve la plaque alvéolaire de distri- bution 10 située immédiatement au-dessus du disque de billes frittées 9 L'étanchéité au niveau du raccordement du couvercle supérieur 12 au boîtier d'injection Il et au niveau du raccor- dement du bottier d'injection il à la colonne 5 est réalisée au moyen de joints plats par exemple en téflon. Sur la fig 3, la plaque alvéolaire 10 est un ensemble de trous à double conicité de façon à former des alvéoles join- tives ou non. Sur la fig 4, le boîtier d'injection Il est représenté sans sa plaque alvéolaire, les six trous en pointillé repré- sentent les six arrivées latérales qui irrigent la plaque alvéolaire entre ces six trous sont représentées les six zones en forme de haricots qui sont irriguées par l'arrivée centrale du solvant situé sur le couvercle supérieur 12 afin de former un tube de solvant qui gaine la colonne intérieurement. La fig 5 représente la pompe de chromatographie à quatre pistons réglables en débit pendant le fonctionnement. Un moteur 13 qui peut être électrique ou pneumatique entraîne par la courroie 14 l'arbre à came 15 fixé sur des paliers 16. Les pistons d'entraînement 17 ne sont pas solidaires des cames ce qui permet de régler leur course par rapport au bâti. Les pistons de compression 19 sont solidaires des pistons d'entraînement 17 et sont munis d'un ressort de rappel 18. Le solvant est comprimé dans la chambre de compression 21 par le piston de compression 19 Le solvant entre et sort de la chambre de compression 21 par l'intermédiaire du double clapet d'aspiration-refoulement 20 La partie hachurée de la fig 5 qui représente le bloc pistons et têtes de pompe peut être translatée par rapport à la partie non hacrhuree qui représente le bloc moteur et arbre à camle d'une longueur égale à la profondeur de la chambre de compression 21 au moyen du vernier 22 Une vis de blocage 23 des glissières du bloc permet à l'ensemble d'assurer une rigidité au système de réglage. Sur les fig 6, 7 et 8, 24 représente la face avant de la cuve de détection, 27 la face de côté 25 représente le chemin optique du rayonnement infrarouge pour la détection réfracto- métrioue 26 est le chemin optique du rayonnement ultraviolet pour la détection absortiométrique 28 représente la source infrarouge et 30 les cellules de détection 29 est la source ultraviolette et 31 le photomultiplicateur de détection Le rayonnement ultraviolet chemine à travers une fibre optique 32 de 200 microns par exemple de diamètre ou plus et traverse la cuve en un rayonnement parallèle à partir d'un système de lentille 34 pour reconverger vers une fibre optique 33 ayant un diamètre par exemple de 1000 microns ou plus. La fig, 9 représente le collecteur de fraction entière- ment pneumatique et antideflagrant Le vérin pneumatique 37 simple effet actionne dans un mouvement de va-et-vient l'ergot 48 suivant un angle de rotation réglable à partir de la course du vérin 37 Ce mouvement de va-et-vient de l'ergot 48 situé sur l'axe fixé au bâti par des roulements à billes 42, provo- que un simple balancement du premier cliquet 36, mais une rotation point par point et dans un seul sens du deuxième cliquet 35 placé en opposition Cette rotation est transmise à la poulie 39 puis à la poulie 40 par l'intermédiaire de la courroie 41. La poulie 40 va entraîner en rotation un axe creux fixé au bâti par des roulements à billes 42 Cet axe creux est alimenté en pression par un raccord tournant 38 afin d'action- ner le vérin 43 qui positionne l'écoulement du solvant 44 au-dessus des récipients de collecte 45 ou du bac d'évacuation 46 Le bac d'évacuation 46 est muni d'un tube d'évacuation 47. On décrira par la suite un procédé de mise en oeuvre du dispositif de chromatographie objet de l'invention Sur la colonne 5 on a fixé le couvercle inférieur 8 et on fixe à la partie supérieure la buse d'injection 4 cet ensemble est alors rempli de la phase stationnaire mise en suspension par exemple dans le solvant d'élution. Le vérin 1 muni de son étrier 2 est fixé sur la buse d'injection 4 Le corps solide non poreux 3 est alors en position haute Le vérin 1 actionne le corps solide non poreux 3 qui descend dans la buse d'injection 4 et comprime la phase stationnaire Le corps solide non poreux 3 est alors en posi- tion basse, cette position basse est toujours à l'intérieur du corps de la buse d'injection elle n'est jamais située à l'in- -5 térieur de la colonne 5 puisque sa limite inférieure est située à la base de la buse d'injection 4 c'est-à-dire à la partie supérieure de la colonne 5 La compression de la phase stationnaire est fonction du diamètre des particules mais aussi des caractères spécifiques et physiques des diffé- rentes phases stationnaires En effet, on ne peut comprimer une cellulose de la même façon que l'on comprime une silice. Une fois la compression réalisée, la pression exercée par le vérin 1 est stoppée, la colonne 5 est désolidarisée de la buse d'injection 4, la tête d'injection 12 et 11 est fixée sur la colonne 5 La colonne C est alors intégrée dans le système de chromatographie. Les quatre têtes de pompe 20 de la pompe P sont reliées à la tête d'injection par une combinaison de vannes en acier inoxydable à trois ou quatre voies pour permettre soit le changement de solvant, soit l'élution ascendante de la colonne Une des quatre têtes de pompe est reliée à l'arrivée centrale du couvercle 12 alors que les trois autres têtes de pompe sont reliées aux arrivées latérales. C 6 té aspiration, ces trois têtes de pompes sont munies chacune d'une vanne trois vcies qui permet d'aspirer soit du solvant, soit du soluté à injecter Pendant l'élution les quatre têtes de pompe débitent du solvant sur la tete d'in- jection à travers l'arrivée centrale et les arrivées laté- rales Pendant l'injection l'arrivée centrale est toujours alimentée en solvant alors que les arrivées latérales sont allimentées en soluté Il n'y a donc pas pendant l'injection de variation de débit, et surtout l'injection n 'est pas realise en "Stop-flow" ce qui a pour effet d'ijminer:otalement les à-coups de pression néfastes au moment de l'injection, Naturellement dans une version automatisée, l'exploi- TQ tation d'un tel système est extrêmement simple puisqu'elle se limite à tourner des vannes à trois voies au lieu de gérer un arrêt de pompe, suivre l'injection puis remiettre en route la pompe. Un tel mode d'application met clairement en évidence l'économie réalisée par rapport aux systèmes existant En effet, au lieu d'avoir un système pour l'élution et un système pour l'injection, on a un système qui combine les deux grâce aux quatre têtes de pompe. Après avoir traversé la colonne C, l'éluant est dirigé vers la cuve de double détection D, puis vers le collecteur de fractions CF On dispose de façon avantageuse entre D et CF des vannes qui permettent soit le recyclage du soluté, soit le recyclage du solvant vers le réservoir de pompage Ces vannes seront actionnées en fonction des indications que donnera la cuve de détection Par exemple, si les solutés sont parfaite- ment séparés, les vannes ne sont pas actionnées, l'éluant va dans le collecteur Si les solutés sont mal séparés, la vanne de recyclage du soluté est actionnée et l'éluant repart vers la tête de colonne Enfin, si la cuve de détection ne donne aucune indication, la vanne de recyclage du solvant est ac- tionnée, l'éluant est renvoyé vers le réservoir de pompage. Dans le cas o la séparation des solutés est jugée satis- faisante, l'éluant est envoyé vers le collecteur qui distribue au moyen du vérin 37 le soluté dans les différents récipients de collecte Les zones situées entre deux solutés ou les fins de solutés sont dirigés vers le bac d'évacuation 46 au moyen du vérin 43. REVENDICATIONS 1 Dispositif de chromatographie préparative en phase liquide caractérisé par le fait qu'il comprend au moins un dispositif de remplissage comprenant une colonne ( 5) sous forme d'un tube cylindrique muni à sa partie inférieure d'un couvercle ( 8) comportant un disque permettant le passage des liquides ou des gaz et arrêtant les particules solides, relié à une buse de compression ( 4) dont la hauteur minimale est égale au tiers de la hauteur de la colonne et un vérin ( 1) actionnant un corps solide non poreux ( 3) qui comprime la phase stationnaire par l'intermédiaire de la buse de compres- sion ( 4). 2 Dispositif selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le corps solide non poreux est actionné par un vérin hydraulique, pneumatique, à vis ou autre. 3 Dispositif de chromatographie selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisé par le fait que la colonne désolidarisée de la buse de compression comprend une tête d'injection située dans le couvercle supérieur ( 12)fixé à la place de la buse de compression, ladite tête d'injection étant caractérisée par le fait qu'elle comprend une paroi inférieure constituée par une plaque percée d'alvéoles ( 10) associée à un disque de billes frittées ( 9) disposé sous la plaque alvéolaire et un boîtier d'injection ( 11) d'un diamètre inférieur à la tête d'injection muni de plusieurs arrivées latérales de soluté entraînant une dispersion radiale du soluté dans le boîtier d'injection situé au-dessus de la plaque alvéolaire, ladite tête d'injection comportant sur la face supérieure une arrivée centrale de solvant et des moyens permettant au solvant de contourner le boîtier d'injection pour que le solvant forme un film le long de la paroi inté- rieure de la colonne. 4 Dispositif selon la revendication 3, caractérisé par le fait que la tête d'injection a de préférence un rapport de s 5 la surface de diamètre d'arrivée centrale sur la surface de diamètre d'arrivée latérale proportionnelle à la surface compris entre le diamètre de la colonne et le diamètre du boîtier d'injection sur le diamètre du boîtier d'injection. 14 2522154 Dispositif de chromatographie selon l'une quelconque des revendications 3 et 4, caractérisé par le fait que la tête d'injection est reliée à une pompe comprenant quatre pistons ( 19) actionnés par des cames ou ues bielles ( 15) dispose-es à 900 les unes par rapport aux autres dont le support n'est pas solidaire du bloc comprenant les quatre têtes de pompes ( 19) et un bloc comportant quatre têtes de pompe munies chacune d'un clapet d'aspiration et d'un clapet de refoulement ( 20) non solidaire du support moteur-arbre à came. 6 Dispositif de chromatographie selon la revendication , caractérisé par le fait que le bloc est disposé sur des glissières et peut être translaté d'une longueur égale à la profondeur d'une chambre de tête de pompe au moyen d'un vernier ( 22). 7 Dispositif de chromatographie selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé par le fait qu'il comprend un dispositif de détection qui consiste en un montage en double détection par absorptionmétrie et réfractométrie sur une cuve unique comprenant une cuve de détection soumise à des rayonnements infrarouge et ultraviolet perpendiculaires l'un par rapport à l'autre. 8 Dispositif de chromatographie selon la revendication 7, caractérisé par le fait que la cuve de détection comprend quatre faces polies dont deux sont en quartz de qualité infrarouge et les deux autres sont en quartz qualité ultraviolet, et un bloc de double détection basse tension, la haute tension de la lampe source des rayonnements ultraviolets étant renvoyée à l'extérieur au moyen de fibres optiques. 9 Dispositif de chromatographie selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé par le fait qu'il comprend un collecteur de fractions relié au détecteur de fraction comprenant deux compartiments superposés, le compartiment infé- rieur comporte un vérin actionnant par un mouvement de va-et- vient un axe comportant deux cliquets en opposition de rotation et communiquant à une poulie munie d'une courroie un entraine- ment suivant un angle fixe dans un seul sens de rotation le compartiment supérieur comporte un axe relié par l'intermédiaire de la courroie précitée à la poulie celle-ci étant munie d'un 2522154 raccord tournant d'alimentation pneumatique. 1 o.Dispositif de chromatographie selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, comprenant une colonne ( 5) sous forme d'un tube cylindrique muni à sa partie inférieure d'un couvercle ( 8) comportant un disque permettant le passage des liquides ou des gaz et arrêtant les particules solides, carac- térisé par le fait qu'il comprend (a) un dispositif de remplissage destiné à être relié à la colonne par une buse de compression ( 4) dont la hauteur mini- male est égale au tiers de la hauteur de la colonne et compre- nant un vérin ( 1) actionnant un corps solide non poreux ( 3) permettant de comprimer la phase stationnaire remplissant ladite colonne par l'intermédiaire de la buse de compression ( 4), (b) une tête d'injection destinée à être fixée sur la colonne après son remplissage, ladite tête d'injection comprenant une paroi inférieure constituée par une plaque percée d'alvéoles ( 10) associée à un disque de billes frittées ( 9) disposé sous la plaque alvéolaire et un bottier d'injection ( 11) d'un diamètre inférieur à la tête d'injection muni de plusieurs arrivées latérales de soluté entraînant une dispersion radiale du soluté dans le bottier d'injection situé au-dessus de la plaque alvéolaire, ladite tête d'injection comportant sur la face supérieure une arrivée centrale de solvant et des moyens permettant au solvant de contourner le boîtier d'injection pour que le solvant forme un film le long de la paroi inté- rieure de la colonne, (c) une pompe reliée à ladite tête d'injection comprenant quatre pistons ( 19) actionnés par des cames ou des bielles ( 15) disposées a 90 les unes par rapport aux autres dont le support n'est pas solidaire du bloc comportant quatre têtes de pompe munies chacune d'un clapet d'aspiration et d'un clapet de refoulement ( 20) non solidaire du support moteur-arbre à c ame, (d) un dispositif de détection consistant en un montage en double détection par absorptiométrie et réfractométrie sur une cuve unique comprenant une cuve de détection soumise à des rayonnements infrarouge et ultraviolet perpendiculaires l'un par rapport à l'autre, (e.) un collecteur de fractions relié au dispositif de détec- tion comprenant deux compartiments superposés, le compartiment inférieur comporte un vérin actionnant par un mouvement de va-et-vient un axe comportant deux cliquets en opposition de rotation et communiquant à une poulie munie d'une courroie un entraînement suivant un angle fixe dans un seul sens de rota- tion le compartiment supérieur comporte un axe relié par l'intermédiaire de la courroie précitée à la poulie celle-ci étant munie d'un raccord tournant d'alimentation pneumatique. il. Procédé de mise en oeuvre d'une chromatographie préparative en phase liquide, caractérisé par le fait que dans un premier temps on fixe sur une colonne ( 5) sous forme d'un tube cylindrique muni à sa partie inférieure d'un couvercle comportant un disque permettant le passage des liquides des gaz et arrêtant les particules solides sur un poste de rem- plissage comportant une buse de compression ( 4) dont la hau- teur minimale est égale au tiers de la hauteur de colonne et d'un vérin actionnant un corps solide non poreux ( 3) que l'on comprime la phase stationnaire par l'intermédiaire de la buse de compression de telle façon à ce que le corps solide non poreux se trouve, en position basse, toujours à l'intérieur du corps de la buse d'injection, que la pression exercée est stoppée et la colonne ( 5) désolidarisée de la buse d'injection et que l'on fixe une tête d'injection ( 12) sur ladite colonne, ladite tête d'injection comprenant une paroi inférieure cons- tituée par une plaque percée d'alvéoles ( 10) associée à un disque de billes frittées ( 9) disposé sous la plaque alvéo- laire et un boîtier d'injection ( 11) d'un diamètre inférieur à la tête d'injection muni de plusieurs arrivées latérales de soluté et comportant sur la face supérieure une arrivée cen- trale de solvant et des moyens permettant au solvant de con- tourner le boîtier d'injection, que l'on relie à la tête d'injection une pompe comprenant quatre pistons ( 19) actionnés par des cames ou des bielles ( 14) à 90 les unes par rapport aux autres, l'une des quatre têtes de pompe étant reliée à l'arrivée centrale de la tête d'injection et les trois autres têtes de pompe étant reliées aux arrivées latérales, que l'on injecte au moyen de ladite pompe le solvant par l'arrivée centrale située sur la face supérieure de la tete d'injection le solvant contournant le bottier d'injection et formant un tube de solvant le long de la paroi intérieure de la colonne et que l'on injecte par les arrivées latérales le soluté se dispersant de façon radiale dans le boîtier d'injection et se répartissant de façon uniforme sur la plaque alvéolaire pour diffuser à travers le disque de billes frittees. 12-Procédé selon la revendication 1 t, caractérisé par le fait qu'après avoir traversé la colonne l'éluant est dirigé sur la cuve de détection puis vers un collecteur de fractions. 13 Procédé selon la revendication 12, caractérisé par le fait que la cuve de détection est une cuve à double détection définie dans la revendication 7 ou 8 et que le collecteur de fractions est tel que défini dans la revendication 9