Brevet FR2516793A1 — publié le 19830527

La présente invention concerne de nouveaux médicaments utiles comme immunomodulateurs contenant un dérivé de trithiazole- pentaméthylidène-cyanine comme ingrédient actif, qui sont utiles pour la prévention et le traitement de divers types de maladies immunitaires, en particulier de la polyarthrite rhumatolde. Récemment, on a mis au point divers immunomodulateurs tels que le Lévamisole, la D-pénicillamine et le CCA lsel de disodium de l'acide N-(carboxy-2-phényl chloro-4anthraniliquel Cependant, ces immunomodulateurs ne sont pas nécessairement satisfaisants par suite de défauts tels que des toxicités importantes L'invention a pour objet de nouveaux médicaments immuno- modulateurs qui possèdent une excellente action immunomodulatrice et qui n'ont ni toxicité, ni effet secondaire important. L'invention concerne de nouveaux médicaments utiles comme immunomodulateurs comprenant une quantité efficace d'un dérivé de trithiazole-pentaméthylidène-cyanine répondant à la formule générale (I) suivante: CH 3 S N-R S S A O CH=CH-C=CH-CH H C N CH 3 ' 3 R R dans laquelle R est un radical alkyle ayant 1 à 15 atomes de carbone et X est un atome d'halogène ou un radical résiduel de l'acide perchlorique, de l'acide nitrique ou d'un acide organique. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention seront mieux compris à la lecture de la description qui va suivre, de plusieurs exemples de réalisation et en se référant aux dessins annexes sur lesquels: Les figures 1 et 2 sont des graphiques montrant l'effet préventif desnouveaux médicaments immunomodulateurs de l'invention sur l'arthrite à l'adjuvant du rat. La figure 3 est un graphique montrant l'effet préventif de la Dpénicillamine et du Lévamisole sur l'arthrite à l'adjuvant du rat. Les figures 4 et 5 sont des graphiques montrant l'effet thérapeutique des médicaments immunomodulateurs de l'invention et de l'hydrocortisone sur l'arthrite à l'adjuvant du rat. La figure 6 est un graphique montrant l'effet des médicaments immunomodulateurs de l'invention sur le poids corporel du rat atteint d'arthrite à l'adjuvant. La figure-7 est un graphique montrant l'effet de la D-pénicillamine et du Lévamisole sur le poids corporel du rat atteint d'arthrite à l'adjuvant. La figure 8 est un graphique montrant l'effet des médi- caments immunomodulateurs de l'invention sur l'oedème au carragéénane du rat. La figure 9 est un graphique-montrant l'effet des médi- caments immunomodulateurs de l'invention sur la réaction des cellules formatrices de plaques de lyse sur des splénocytes de souris Balb/c La figure 10 est un graphique montrant l'effet des médi- caments immunomodulateurs de l'invention sur la blastogenèse des splénocytes des souris Balb/c. Parmi les composés répondant à la formule générale (I), le composé o R est le radical n-heptyle-et X est l'iode est un composé connu qui est le colorant de cyanine photosensible appelé "Platonin". La demanderesse a découvert que le Platonin présente une excellente action immunomodulatrice, en particulier par adminis- tration orale. Selon l'invention, on a découvert que le Platonin possède les propriétés pharmacologiques utiles et excellentes suivantes: le Platonin possède une action immunomodulatrice typique qui se manifeste par un effet d'activation immunologique lorsque la fonction immunologique est réduite, et par un effet immunosuppresseur lorsque la fonction immunologique est accrue, et il n'a pas d'effet sur la fonction immunologique normale D'autre part, le Platonin n'a pas d'effets secondaires tels qu'une cytotoxicité (par exemple une granulocytopénie), des vomissements, des nausées, une pyrexie,- une éruption et une myasthénie, qui sont des défauts courants des immunomodulateurs classiques et, tout au contraire, il présente la caractéristique souhaitable de maintenir la fonction normale des cellules Le Platonin est donc un immunomodulateur idéal On peut l'administrer pendant une période prolongée et, pat conséquent, le Platonin est extrêmement efficace dans le traitement des maladies auto-immunes, en particulier la polyarthrite rhumatoide et la néphrite De plus, la demanderesse a découvert que le Platonin présente une excellente activité pharmacologique à une dose étonnamment faible par administration orale, égale par exemple A 1/1000 à 1/10000 de celle des immunomodulateurs classiques. Les avantages précités font du Platonin un médicament facile à manier par rapport aux immunomodulateurs classiques Géné- ralement, l'administration orale est souhaitable dans le cas de la polyarthrite rhumatolde par'rapport aux autres maladies, car il est difficile au patient atteint de polyarthrite rhumatolde de se rendre régulièrement à l'hôpital. Donc, un médicament immunomodulateur contenant du Platonin comme ingrédient actif contribue beaucoup à la prévention et au traitement de toutes les maladies immunitaires,-en particulier au traitement de la polyarthrite rhumato Tde. De plus, selon la présente invention, on a découvert que les homologues du Platonin dans lesquels le groupe n-heptyle du Platonin est remplacé par d'autres groupes alkyles ayant 1 a 15 atomes de carbone possèdent un excellent pouvoir immunomodulateur égal à celui du Platonin. Le symbole R dans la formule générale (I) est un radical alkyle droit ou ramifié ayant 1 a 15 atomes de carbone Des exemples de radicaux représentés par R comprennent les radicaux méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, sec- butyle, tert-butyle, n-pentyle, isopentyle, sec-pentyle, néopentyle, tert-pentyle, n-hexyle, isohexyle, sec-hexyle, néohexyle, tert- hexyle, n-heptyle, méthyl-5 hexyle, octyle, nonyle, décyle, undécyla, dodécyle, tridécyle, tétradécyle et pentadécyle Des exemples du symbole X dans la formule générale (I) comprennent les atomes d'halogène tels que le chlore, le brome et l'iode, et les radicaux résiduels de l'acide perchlorique, de l'acide nitrique et d'acides organiques tels que l'acide p-toluènesulfonique, l'acide nicotinique et l'acide orotique. Les composés préférés sont ceux répondant à la formule générale (I) o R représente un radical heptyle ou octyle, en parti- culier n-heptyle ou n-octyle, et X est l'iode. Les indications préférées des composés de formule générale (I) sont les maladies auto-immunes, y compris la poly- arthrite rhumatoide, le lupus érythémateux aigu disséminé, la néphrite et l'anémie hémolytique auto-immune; les allergies de type immédiat ou retardé; et les maladies à déficience immunologique, y compris les tumeurs malignes et les maladies infectieuses graves. Les indications que l'on préfère particulièrement sont la poly- arthrite rhumatolde et la néphrite. Les compositions pharmaceutiques contenant les composés de formule générale ( 1) comme ingrédients actifs présentent une excellente action inmmunomodulatrice pour une posologie pour l'adulte extrêmement faible, d'environ 10 à environ 500/ug d'ingrédient actif par prise La posologie préférée est de 50 à 100/ug par 1 ou 2 Jours. Pour qu'elles aient une activité suffisante, on admi- nistre de préférence les compositions pharmaceutiques de l'invention par voie orale Dans ce cas, on peut utiliser diverses présentations telles que des comprimés, des capsules, des poudres, des granulés et des liquides De plus, on utilise également les compositions pharmaceutiques de l'invention sous d'autres présentations, telles- qu'une préparation pour installation nasale et un suppositoire. On peut préparer les compositions pharmaceutiques de l'invention de façon habituelle en utilisant les véhicules accep- tables en pharmacie classiques sans limitation particulière Des exemples de tels véhicules comprennent les liants, les diluants solides, les diluants liquides, les charges et similaires, par exemple le lactose, l'amidon, un ester d'acide gras du saccharose la cellulose microcristalline, l'hydroxypropylméthylcellulose, le phtalate d'hydroxypropylméthylcellulose, la glycérine, un triglycéride, un diglycéride, un monoglycéride, le-sucre, le citrate de sodium, le benzoate de sodium, le stéarate de magnésium, le bioxyde de silicium, le talc, une solution salée physiologique et l'eau distillée. On prépare les composés de formule générale (I) de la façon suivante: On chauffe à environ 70 C avec un iodure d'alkyle ayant 1 à 15 atomes de carbone le diméthyl-2,4 thiazone (E 146 à 147 C) que l'on prépare facilement à partir de la monochloroacétone et du thioacétamide, pour obtenir un iodure d'alkyl-3 dimethyl-2,4 thiazolium On chauffe ce composé entre 140 et 145 C avec de l'orthoformiate d'éthyle et de l'anhydride acétique, et on recris- tallise le produit brut obtenu dans un solvant approprié, par exemple l'éthanol, pour obtenir le composé désiré qui est le diiodure de diméthyl4,4 ' dialkyl-3,3 ' l(méthyl-4 alkyl-3 thiazole)-2 yll-8 dicarbo-2,2 ' cyanine. On transforme le diiodure ainsi obtenu en le dichlo- rure, dibromure et di-p-toluènesulfonate par traitement respecti- vement avec des solutions de chlorure d'argent, de bromure d'argent et d'acide p-toluènesulfonique On obtient les disels de l'acide perchlorique, de l'acide nitrique et d'un acide organique en traitant le ptoluènesulfonate respectivement avec des solutions d'acide perchlorique, d'acide nitrique et d'acide organique, Les points de fusion de certains de ces composés de formule (I) figurent dans le tableau 1. TABLEAU 1 Composé n Formule (I) F (C) R X 1 méthyle I 264 à 266 2 n-butyle I 219 à 222 3 n-heptyle I 202,b 204 4 nheptyle C 1 150 à 155 Composé N Formule ( F ( C) mpR n-heptyle Br 118 à 120 6 n-heptyle Cl O 4 210 à 213 COO 7 n-heptyle 132 à 133 8 n-heptyle 125 à 126 00-N o H 9 n-octyle I 203 à 205 10 n-dodécyle I 198 à 200 La présente invention est illustrée par les exemples non limitatifs 'suivants. EXEMPLE 1 Inhibition de l'arthrite à l'adjuvant. On utilise par groupe 5 rats SD agés de 7 à 8 semaines pesant environ 150 g On injecte par voie intracutanée dans le cous- sinet plantaire de la patte arrière droite une dispersion de Mycobacterium butyricum dans la paraffine liquide à la concentration de 12 mg/ml_ à la dose de 0,05 ml/rat pour provoquer une arthrite à l'adjuvant Trente jours après l'injection de l'adjuvant on mesure le volume des deux pattes arrière avec un pléthysmographe à mercure et on évalue l'arthrite è l'adjuvant à partir des mesures obtenues. ( 1) Effet préventif On a examine l'effet préventif sur l'arthrite à l'adjuvant des composés n 1, 3 et 10 L'administration orale du composé à étudier -a commencé en mtme temps que l'administration de 16793 l'adjuvant et a été poursuivie pendant 30 jours à raison d'une fois par jour Les résultats sont illustrés par les figures 1 et 2 Le même test a été effectué avec la D-pdnicillamine et le Lévamisole Les résultats sont illustrés par la figure 3. Les résultats des figures 1, 2 et 3 révèlent que les composés (I) de l'invention (composés n 1, 3 et 10) inhibent l'arthrite à l'adjuvant à une dose faible de 0,05/ug/animnal, 'tandis que la D-pdnicillamine et le Lévamisole n'inhibent pas l'arthrite à l'adjuvant, même à une dose plus élevée de 1,5 mg/animal En parti- culier, le composé n 3 (Platonin) inhibe l'arthrite à l Ladjuvant à une dose bien inférieure de 0,005/ug/animal> comme le montre la figure 1. ( 2) Effet thérapeutique L'effet thérapeutique sur l'arthrite à l'adjuvant des composés n 1, 3 et 10 a été examind L'administration orale du composé à étudier a commencé le 14 e jour après l'administration de l'adjuvant et s'est poursuivie pendant 40 jours à raison d'une fois par jour Les résultats sont illustrés par les figures 4 et 5, Le même test a été effectué avec l'hydrocortisone Les résultats sont également illustrés par la figure 4. Les résultats des figures 4 et 5 montrent que les composés (I) de l'invention inhibent l'arthrite à l'adjuvant à une dose faible de 0,05 ug/animal mais qu'ils n'inhibent pas l'arthrite à l'adjuvant à une dose supérieure à environ 1 /ug/animal Ces faits montrent que les composés (I) de l'invention ont une posologie opti- male. ( 3) Variation du poids corporel Pendant le test de détermination de l'effet préventif sur l'arthrite à l'adjuvant, comme décrit en ( 1) cidessus, le poids corporel de chaque rat a été déterminé le ler, 1 Oe, 20 e et 30 e jour. Les résultats sont illustrés par les figures 6 et 7. Comme le montrent les figures 6 et 7, il n'y a pas eu de différence significative entre la variation du poids corporel pour l'administration de la D-pénicillamine ou du Lévamisole par rapport au témoin Au contraire, dans le cas de l'administration des composés ( 1) de l'invention, à la dose de 0,05/ug/animal, on a nettement observé un accroissement du poids corporel par rapport au témoin, avec une diminution du gonflement de la patte et, de plus, on a observé une régression générale remarquable des maladies. EXEMPLE 2 Effet sur l'oedème au carragéénane On a utilisé par groupe 5 rats,SD de 7 à 8 semaines pesant environ 150 g Une dispersion à 1 % de carragéénane a été injectée par voie intracutanée dans le coussinet plantaire de lapatte arrière droite, à la dose de 0,1 l ml/rat 6 h après l'injection, on a mesuré le volume de la patte soumise à l'injection avec un pléthysmographe à mercure, et l'oedème provoqué par le carragéénane a été évalué à partir des mesures obtenues Le composé n 3 a été administré par voie orale 30 min avant l'injection de la dispersion de carragéénane Les résultats sont illustrés par la figure 8. Comme le montre-la figure 8, le composé n 3 n'a pas présenté d'action anti-inflammatoire sur l'oedème au carragéénane, à la dose de 0,005 à O, 05/ug/animal Ce fait permet de penser que la propriété pharmacologique des composés (I) de l'invention se manifeste par une action immunomodulatrice plutôt que par une action anti- inflammatoire EXEMPLE 3 Effet sur la réaction des 'cellules formatrices de plaques de lyse sur des splénocytes de souris En employant des splénocytes de souris Balb/c, on a examiné les effets des composés n 1, 2, 3, 9 et 10 sur là réaction des cellules formatrices de plaques de lyse, en réponse aux hématies de mouton. On a incubé 1 x 10 splénocytes de souris Balb/c, avec des hématies de mouton, et le composé à étudier dans du milieu RPMI-1640 contenant 10 % de sérum foetal de veau, dans un incubateur à CO maintenu A 37 C pendant 4 jours, selon la méthode de Mlrbrook. Le nombre des cellules formatrices de plaques de lyse directes a été mesuré selon la méthode de Jerne (voir Science, Vol 140, page 405, 1963) Les résultats sont illustrés par la figure 9 En ce qui concerne la réaction des cellules formatrices de plaques de lyse, en réponse aux hématies de mouton, les composés (I) de l'invention présentaient une action biphasique, c'est-à-dire une activation à faible dose, et une inhibition à dose élevée. EXEMPLE 4 Effet sur la blastogenèse des splénocytes de souris En utilisant des splénocytes de souris Balb/c, on a examiné les effets des composés n 1, 2, 3, 9 et 10 sur la blastogenèse stimulée par le LPS comme mitogène. On a incubé 1 x 105 splénocytes de souris Balb/c avec le mitogène et le composé à étudier dans du milieu RPMI-1640 contenant % de sérum foetal de veau, sur une boîte de microculture dans un incubateur à C O 02 pendant 48 h On a ajouté 0,5/u Ci de 3 H 11-thymidine ( H-Td R) Après 18 h additionnelles d'incubation, les cellules ont été recueillies avec un dispositif de récolte automatique des cellules (Lab Mesh: marque déposée) et la radio-activité de la 3 H-Td R incor- porée aux cellules a été mesurée Les résultats sont illustrés par la figure 10 Les composés (I) ont inhibé de façon remarquable la blastogenèse stimulée par le LPS qui est un mitogène des cellules B. à la concentration de 20/ug/ml. EXEMPLE 5 Toxicité aigut On a utilisé des groupes de 8 souris males dd Y de 5 à 6 semaines pesant 25 à 30 g Une suspension à 5 % du composé a étudier dans la gomme arabique a été administrée par voie intrapéritonéale, intraveineuse ou orale (avec une sonde gastrique) Les animaux ont été maintenus en observation pendant 7 jours On a déterminé le nombre des animaux morts et on a calculé les DL 50 selon la méthode de Van der Wrden Les rsu 50 tats figurent dans le tableau 2. de Van der Wârden Les résultats figurent dans le tableau 2. TABLEAU 2 DL.0 (mg/kg de poids corporel) Composé n DO i p i v p 0. 1 23,4 6,25 > 1 400 2 51,0 8,50 > 1 400 3 100 12,0 > 1 400 9 120 13,5 > 1 400 300 45,2 > 1 400 Les DL 50 des composés (I) de l'invention ont été de 23,4 à 300 mg/kg par voie intrapéritonéale et supérieures à 1,4 g/kg per os On considère que les composés (I) de l'invention sont efficaces à la dose de 0, 05/ug/animal pour inhiber l'arthrite à l'adjuvant comme indiqué dans l'exemple 1, et il est évident que les composés (I) de l'invention sont des immunomodulateurs ayant une marge de sécurité très large. EXEMPLE 6 Essai clinique ( 1) Cas 1 Un patient de 47 ans a été traité avec le composé n 3. Il était atteint de polyarthrite rhumatolde depuis 3 ans et se plai- gnait d'une douleur violente de l'articulation de la hanche droite. Son état n'était pas amélioré, même par injection de 25 mg de Shiozol (marque déposée) deux fois par semaine. On a-administré à ce patient, par vole orale,-le composé n 3 à la dose de 50/ug une fois par jour avant un repas Apres jours, la rigidité matinale et le malaise général ont été soulages et l'inflammation de l'articulation-de la hanche droite et la douleur violente ont presque disparu Le matin du 7 e jour, le patient pouvait se lever de son lit et descendre facilement les escaliers Donc, cet immunomodulateur a présenté un excellent effet thérapeutique sans effet secondaire. t il ( 2) Cas 2 Un patient &gé de 57 ans a été traité avec le composé n 3. Il était atteint de polyarthrite rhumatolde depuis 8 ans Son état avait empiré malgré un traitement par des suppositoires de Shiozol et d'Indométacine (marque déposée) Il présentait un ulcère gastrique, une urticaire et une diarrhée dues aux effets secondaires des médica- ments utilisés Il se plaignait d'une douleur constante et était cloué au lit, ou il ne pouvait marcher qu'avec des béquilles. On a administré à ce patient le composé n 3 par voie orale, à la dose de l OO/ug par jour avant un repas Après 3 jours- le malaise général et la rigidité matinale étaient soulagés Après jours, l'inflammation des articulations était réduite et il n'était plus nécessaire d'administrer les suppositoires d'Indométacine et le patient dormait bien Après 7 jours, le composé n 3 'a été administré 2 fois par semaine par voie orale, Après 3 semaines, le gonflement (épanchement) des articulations était réduit et le patient pouvait marcher Aucun effet secondaire n'a été observé. EXEMPLE 7 En utilisant les composés n 1 à 10 comme ingrédients 'actifs, on a préparé diverses présentations suivantes d'immunomodu- lateurs: ( 1) Comprimés On a préparé de façon habituelle des comprimes ayant la composition suivante: Composants mg/comprimé Ingrédient actif O > 05 Lactose 79,95 Amidon de mais 62,50 Ester d'acide gras du saccharose 7, 50 Total 150 Dans le cas des comprimés à enrobage gastro-résistant, les comprimés ci-dessus ont été de plus enrobés avec 5 % en poids de Tc-5 (hydroxypropylméthylcellulose fabriquée par Shin-Etsu Chemical Co., Ltd) puis enrobés de sucre Dans le cas des comprimés à revê- tement entéro-soluble, les comprimés ci-dessus ont été de plus soumis à un revêtement-avec 10 % en poids de HP-55 (phtalate d'hydroxy- propylméthylcellulose fabriqué par Shin-Etsu Chemical Co, Ltd), puis enrobés de sucre. ( 2) Capsules On a préparé de façon habituelle des capsules ayant la composition suivante: Composants mg/capsule Ingrédient actif 0,05 Lactose 146,95 Ester d'acide gras de saccharose 3,00 Total ( 3) Poudre On a préparé-de façon habituelle une composition suivante: poudre ayant la Composants mg/emballage Ingrédient actif 0,05 Lactose 499,95 Total 500 ( 4) Suppositoires On a préparé de façon habituelle deux types de-suppo-' sitoires ayant les compositions suivantes: Suppositoire A Composants mg/suppositoire Ingrédient actif 0,05 Polyéthylèneglycol (n 1 000) I 440 Polyéthylèneglycol (n 4000) 59,95 Toa 50 Total 1 500 Suppositoire B Composants mg/suppositoire Ingrédient actif 0,05 Witepsol 1 I-15 * 1 280 Witepsol H 1 I-80 * 319,95 Total 1 600 * Mélange de triglycérideet de monoglycéride fabriqué par Dynamit Novel, Chemicals, Witepsol: marque déposée ( 5) Sirop On a préparé de façon habituelle un sirop (dose/prise: /ug/5 ml) ayant la composition suivant: Composants Quantité/100 O ml Ingrédient actif 1 mg Sucre 60 g Glycérine 10 g Citrate de sodium 0,1 g Benzoate de sodium 0,3 g Saccharine sodique 0,1 g Eau distillée q s. Bien entendu, diverses modifications peuvent être apportées par l'homme de l'art aux dispositifs ou procédés qui viennent d'ttre décrits uniquement à titre d'exemples non limitatifs sans sortir du cadre de l'invention R E V E N D IC A T I O N S 1 Nouveaux médicaments utiles notamment comme immunomodula- teurs et en particulier pour le traitement de la polyarthrite rhumatoide, caractérisés en ce qu'ils contiennent comme produit actif au moins un des dérivés de trithiazole-pentamâthylidène-cyanine répondant à la formule générale (I) suivante: CH 3 S N-R 0/ H-CH-C=CH-CH 2 (I H, CH 3 I 3 R R o R représente un radical alkyle ayant 1 à 15 atomes de carbone et X représente un atome d'halogène, ou un radical résiduel d'acide perchlorique, d'acide nitrique ou d'un acide organique. 2 Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que le produit actif est un composé de formule (I) o R représente un radical heptyle. 3 Médicaments selon la revendication 2, caractérisés en ce que le radical heptyle est le radical n-heptyle. 4 Médicaments selon l'une des revendications 2 ou 3, caractérisés en ce que X représente un atome d'iode. Médicaments selon la revendication 1 l caractérisés en ce que le produit actif est un composé de formule (I) o R représente un radical octyle e 6 Médicaments selon la revendication 5, caractérisés en ce que le radical octyle est le radical n-octyle. 7 Médicaments selon l'une des revendications 5 ou 6, caractérisés en ce que X représente un atome d'iode. 8 Médicaments selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce qu'ils sont conditionnés en vue de l'administration par voie orale.