Brevet FR2502172A3 — publié le 19820924

FR 2502172 A3 19820924 FR 8105480 A 19810319 L'invention a pour objet, notamment à titre de produit industriel nouveau, un élément permettant de constituer une collection de cultures, d'une part de champignons saprophytes microscopiques (moisissures, levures), d'autre part de bactéries susceptibles d'être repiqués. Ces champignons sont ceux que l'on peut recueillir sur des matières organiques en décomposition. On sait jusqu'à présent cultiver ces champignons sur un milieu approprié selon des méthodes mycologiques connues, à l'intérieur de tubes à essais en verre. Ces cultures commencent par un ensemencement du milieu, et, après une évolution continue plus ou moins rapide entraînant un appauvrissement et des modifications physiques du milieu, ainsi que des manifestations de pléc- morphisme, on doit à nouveau réensemencer un tube sur un milieu neuf et stérile. Il est cependant d'un très grand intérêt, et le besoin en est ressenti depuis longtemps, de posséder des collections de souches pures et viables dont l'évolution très ralentie permettrait un repiquage après une longue période d'attente. Ces collections devraient conserver un taux de germination élevé, être facilement stockables, d'un encombrement réduit, sans risques de contamination par les insectes, constituant ainsi de véritables mycothèques de souches. Elles permettraient également une grande commodité pour l'envoi et la livraison aux divers utilisateurs. L'une des difficultés à surmonter pour réaliser de telles collecticns est d'etre capable de limiter très fortement le développement des champignons et de les conserver ainsi viables pendant une longue durée. On doit pouvoir également facilement identifier visuellement le chiilp pignon sur son milieu de culture. Pour ce faire, on se servira de l'élément décrit dans le brevet LAUNEY nO 72 37979, constitué par une nacelle 1 fig. 1 et un couvercle 2 fig. 1 en matière plastique transparente, après lui avoir fait subir une modification. Cette modification porte sur le couvercle qui sera percé d'une ouvrez ture quelconque, 3 fig. 1, par exemple circulaire permettant l'ensemencement et le prélèvement ultérieur de spores restant viables et susceptibles de repiquage. On procède de la manière suivante Dans une enceinte stérile, on coule dans la nacelle 1 fig. 1 en poly styrène cristal la quantité nécessaire d'un milieu nutritif (CZAPEK, MALT, etc...). Après gélification, et toujours dans l'enceinte stérile, on met con place le couvercle 2 fig. 1 également en polystyrène, dont l'ouverture 3 fig. 1 a été obturée par un ruban plastique auto-collant, par exemple. Puis, on scelle à l'aide des ultra-sons, le couvercle sur la nacelle. On peut stocker les élements ainsi preparés en attendant les erjseznencemnts ul trieurs. Pour l'utilisation on dispose le nombre voulu d'éléments vierges dans une boite à gants. On stérilise cet ensemble à l'aide de lampes germicides U.V., par exemple. On démasque l'ouverture de la face superieure du couvercle et on ensemence le milieu, à l'aiguille, par cette ouverture. Les élements sont disposés dans des boites de culture steriles et on laisse se développer le champignon en étuve pendant le temps nécessaire a sa croissance caractéristique. Ensuite, on place l'élément dans une enceinte à vide, puis on y injecte de l'azote gazeux au travers d'un filtre absolu. Le trou du couvercle est alors à nouveau oblitéré par un ruban auto-collant Pour un repiquage, il suffit de - par exemple dans l'environnement d'une source de chaleur tel un bec BUNSEN - démasquer l'ouverture, en soulevant la tirette du ruban, prévue à cet usage, prélever a l'aiguille quelques spores et recoller immédiatement le ruban. On peut ainsi procéder à plusieurs prélèvements, soit successifs, soit etalés dans le temps, avant de remplacer cet élément dans la mycothe- que par une culture neuve, quand cela sera nécessaire. REVENDICATIONS 1. Dispositif pour le stockage aisé de collections de cultures pouvant être ultérieurement repiquées, meme après un long délai d'attente, caractérisé par une nacelle en matière plastique transparente et un couvercle en même matière comportant une ouverture facilement obturable, qui peut etre scellé à la nacelle à l'aide des ultra-sons. 2. Utilisation de l'élément selon la revendication 1 pour constituer une collection de cultures de champignons saprophytes, levures, moisissures, bactéries, susceptibles d'être repiqués. 3. Utilisation de l'élément selon la revendication 2, caractérisé en ce sens que - on obture l'ouverture du couvercle par un ruban auto-collant, par exemple - on stérilise nacelle et couvercle - on coule dans la nacelle de l'élément un milieu nutritif - après gélification, on scelle nacelle et couvercle par une méthode connue en soi, telle le soudage - on démasque le trou ménagé dans la paroi supérieure du couvercle - on ensemence par cette ouverture, à l'aiguille, le milieu de culture - on laisse se développer le champignon saprophyte jusqu'à l'aspect qui lui est caractéristique - on place alors l'élément dans une enceinte à vide - on fait le vide, qu'on casse avec de l'azote gazeux injecté à travers un filtre absolu - on remasque le trou du couvercle avec le ruban auto-collant prévu à cet usage. 4. Utilisation selon les revendications 2 et 3, pour constituer une collection importante de divers champignons saprophytes.