Brevet FR2508443A1 — publié le 19821231

L'invention a trait à un nouveau procédé de préparation du gamma-éthyl -ester de l'acide L-glutamique pour usage pharmaceutique, selon lequel on chauffe l'acide L-glutamique avec de l'iodure d'éthyle, en présence de méthylate de sodium, avant de procéder à la recristallisation en atmosphère stérile. La transformation de l'acide L-glutamique en t -noncester éthylique a été décrite dans de nombreux brevets et publications. Elle présente une difficulté particulière due à la présence, dans la molé- cule de l'acide, de deux groupes carboxyles pouvant donner lieu à la formation d'un diester. C'est pourquoi cette réaction fait encore l'objet d'études, ainsi qu'en témoignent des travaux récents C.W.WALLER et J.C. PATERSON - Brevet USA 2 561 323 du 17 juillet 1951, Z. PRAVAD - Chem. Listy 52, 1193-4 (1958), Z. PRAVAD - Coll. Czechoslov. Chem. Communs. 24, 2083 (1959), Y. SAITO et T. NAGOYA - Japan Kokai 77.128.321 du 27.10.1977. las procédés décrits dans ces documents reposent, soit sur une estérificatison directe de l'acide L-glutamique avec l'éthanol en présence d'un catalyseur acide, soit sur la décomposition du diester éthylique, catalysée par le cuivre. Avec ces deux rodes de préparation, le produit obtenu contient toutefois toujours des petites quantités de diester éthylique ou d'acide libre, dont il est pratiquement impossible de le débarasser, car toutes ces substances sont largement solubles dans l'eau et une cristallisation fractionnée ne donne pas de résultats positifs. Par conséquent, pour préparer un produit-de très haute pureté, tel que le requiert son utilisation en pharmacie, il a fallu élaborer un procédé original dans lequel l'acide L-glutamique en solution dans l'éthanol anhydre est monoestérifié quantitativement au carboxyle non engagé dans la liaison saline interne (amphionique) avec de l'iodure d'éthyle, en utilisant comme agent de condensation le méthylate de sodium. La réaction se déroule selon l'équation suivante La condensation fournit, avec un rendement élevé, le produit de monoestérification, exempt de toute impureté. La séparation du produit d'avec les sels inorganiques est obtenue par mise en suspension dans de l'éthanol dilué, et aboutit à un produit apte à l'utilisa tion therapeutique avec des rendements voisins de 73-75 %. Enfin, pour préparer un produit injectable, y compris par voie intraveineuse, il est nécessaire de procéder à une cristallisation ultérieure dans l'éthanol dilué selon une tech- nique apyrogène. La pureté du # -éthylester de l'acide L-glutamique ainsi obtenue est contrôlée par chromatographie sur papier en utilisant comme éluant un mélange de nbutanol, d'acide acétique et d'eau (4 : 1 : 1) et comme agent révélateur des taches une solution éthanolique de ninhydrine à la dose de 0,2 %. Cette technique permet de revéler une teneur de 0,2 # de diacide Lrglutamique ou de 0,25 de diester diéthylique de l'acide G-glutamique. En déposant sur la bande de papier une quantité de 200 r de # éthyle ester, on n'a pas mis en évidence de traces d'acide libre ou d'ester diéthylique. Exemple 1 Préparation du r -éthylester de l'acide L-glutamique pour utilisation pharmaceutique par voie orale. On charge dans un réacteur 500 litres d'éthanol anhydre. On actionne l'agitateur à faible vitesse et on fait descendre en environ 30 minutes 100 kg d'acide L-glutamioue bien sec et pulvérisé, en augmentant peu à peu la vitesse d'agitation. Ure fois obtenue la dissoluticn, on ajoute du charbon adsorbant et de la celite active, on agite pendant 30 minutes et on filtre. On ajoute à la solution limpide ainsi obtenue, maintenue en agitation sous at:itoephère d'azote, 36,7 kg de nethylate de sodium. On transfère la masse, en l'agitant fortement, dans un second réacteur dans lequel, après refroidissement à 25-30 , on introduit, en environ 3 heures, 142,5 kg d'iodure d'éthyle, en faisant attention que la température de la masse ne dépasse pas 35-40 . Après refroidissement par circulation externe d'eau, on laisse au repos pendant 12 heures. On ajoute ensuite, en agitent fortement, 7,500 kg d'eau distillée puis on refroidit à +3 OC au moyen d'une circulation externe de saumure et en agitant lentement. Après un repos de 24 heures, on filtre la suspension au moyen d'un filtre-presse, on élimine le plus possible la solution-mère d'alcool et d'eau, en ocmprimant les panneau avec de l'azote à 3 atm. Dans un réacteur muni d'un mélangeur inox, on met le précipité en suspension avec 265 kg d'alcool éthylique et on agite en ajoutant 22 kg d'eau. On refroidit à -3 C et on laisse au repos pendant 12 heures. On sépare par centrifugation et on lave avec un total de 250 kg d'alcool absolu, à plusieurs reprises, puis 3 fois avec de l'éther éthylique exempt de peroxydes. Les solvants à récupérer sont dirigés respectivement vers les réservoirs collecteurs appropriés. On porte le produit obtenu dans un dessiccateur Nautamix ou il est séché sous vide poussé. le rendement est de 75,6 kg. Exemple 2 g -éthyl ester de l'acide L-glutamique pour utilisation pharmaceutique intraveineuse. Dans un réacteur en acier inoxydable avec agitateur, préalablement stérilisé à la vapeur, d'une capacité de 3000 litres, on dissout 100 kg de Y -éthyl ester de l'acide L-glutamique dans 600 litres d'eau distillée apyrogine. On ajoute du charbon adsorbant dépyrogénant et de la celite active, on agite pendant 30 minutes, on laisse reposer pendant une heure, on filtre sur des cartons dépyrogénantset successivement sur des membranes stérilisantes. On recueille le filtrat dans un autre réacteur stérile muni d'un système efficace d'agitation. On ajoute sous agitation 1150 kg d'alcool éthylique préalablement filtré sur membrane et on continue l'agitation pendant 4 heures en refroidis- sant par circulation de saumure de telle sorte que la tespérature de la masse se maintienne vers +3 C (+ 1 C). Après 12 heures de repos, on filtre le précipité sur un filtre à pression approprié, en acier fritté, préalablement lavé et stérilisé. On lave plusieurs fois avec de ''alcool éthylique, puis 2 zois avec de l'éther éthylique exempt de peroxydes, on sèche sous vide à une température inférieure à 400, on pulvérise et on tamise en atmosphère conditionnée stérile. le produit est recueilli en sacs de polyéthylène steriles qui sont successivement fermés hermétiquement puis stérilisés aux rayons gamma. On obtient ainsi 73 kg de # -éthyl ester de l'acide L-glutamique propre à être utilisé par voie intraveineuse. REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation du # -éthyl ester de l'acide L-glutamique propre à être utilisé pharmaceutiquement par voie orale, exempt d'impuretés telles que l'ester diéthylique ou d'acide libre, caractérisé en ce qu'on traite une solution éthanolique d1 acide L-glutamique par le méthylate de sodium pour former le sel monosodique avec carboxyle en position # , avant de traiter ce sel monosodique par l'iodure d'éthyle jusqu'à formation de l'ester, et en ce qu'an purifie l'ester ainsi obtenu en le mettant en suspension dans de l'éthanol dilué. 2. Procédé de préparation du t-éthyl ester de l'acide L-glutamique propre à être utilisé pharmaceutiquement par voie intraveineuse, caractérisé en ce on part du produit pharmaceutique approprié à l'utilisation par voie orale pour recristallises ce produit au moyen d'éthanol dilué d'eau, et qu'on filtre ce produit dans des conditions stériles. 3. Procédé selon la revendication 1, dans lequel, pendant l'introduction de l'iodure d'éthyle, on maintient la température entre 200 et 500C, de préférence entre 350 et IGOC. 4. Procédé selon la revendication 2, dans lequel le pourcentace d'méthanol dans la solution aqueuse utilisés comme solvant pour la recristallisation varie entre 40 et 80 %, et est de préférence proche de 65 %.