Brevet FR2505183A1 — publié le 19821112

l La présente invention concerne une nouvelle composition anti-allergique et plus particulièrement une composition anti- allergique comprenant, à titre de principe actif, un composé représenté par la'formule COOH dans laquelle R est un groupe n-butyle ou n-pentyle. Jusqu'ici, des glucocorticostéroides ont largement été utilisés en médecine pour le traitement des maladies allergiques telles quel'endocrinose allergique, le rhumatisme articulaire, la maladie du collagène, la néphrite allergique, l'hémopathie allergique, les maladies digestives allergiques, les troubles hépatiques allergiques, la dermatite et l'asthme bronchique. Cependant, de telles compositions stéroidiques présentent de sérieux inconvénients du fait que, lorsqu'elles sont habituellement administrées pendant de longues durées, elles présentent des effets secondaires, à savoir l'apparition ou l'aggravation de maladies infectieuses, l'apparition de diverses maladies dues à l'anasarque et aux insuffisances surrénales et également l'apparition de troubles gastro-intes- tinaux, de l'ostéoporose et analogues De ce fait, l'utilisation habituelle des compositions stéroidiques est maintenant considérée comme indésirable et tend à être évitée. Au cours de tentatives,en vue de développer des substances antiallergiques du type non stéroidique et efficaces dans le traitement desmaladies diverses énumérées ci- dessus, la Demanderesse a synthétisé un certain nombre de composés-et étudié leurs activités pharmacologiques. Les composés représentés par la formule générale (I) manifestent les effets pharmacologiques suivants: amélioration de la fonction hépatique, action anti-fibrinolytique, action anti-ulcérative, hypo-réaction àleffet immunitaire, action de normalisation et ces composés sont utiles comme agent améliorant la fonction hépatique, agent anti-fibrinolytique et agent anti- ulcératif Ces composés sont également utiles comme médicaments pour le traitement des maladies allergiques causées par une fonction immunitaire anormale, maladies telles que le rhumatisme articulaire, les désordres auto-immunitaires, l'asthme, la néphrite allergique, la rhinite allergique, la dermatite atopique, l'allergie gastro-entérique et l'anaphylaxie. Comme cela ressort de ce qui précède, les compositions anti-allergiques selon la présente invention, n'englobent pas seulement les médicaments ayant des actions anti-allergiques dans le sens étroit du terme, mais également les médicaments ayant des actions anti-allergiquesdans le sens large du terme et comprenant entre autres, les diverses actions mentionnées ci-dessus. Les composés qui constituent b principe actif des compositions anti-allergiques selon la présente invention, et qui sont représentés par la formule générale (I) ci-dessus, sont cristallins par nature et peuvent être préparés par mise en oeuvre des méthodes usuelles, en vue d'obtenir des capsules, granules, pilules, poudres, comprimés, sirops, teintures, injections, suppositoires, onguents, emplatres, cataplasmes, compositions déposées sur bande et analogues Ces préparations peuvent être utilisées par voie interne (orale) et externe. Les supports pharmaceutiquement acceptables pouvant être utilisés pour ces compositions, comprennent le glucose, le saccharose, le lactose, la gelée de millet et le miel;des matériaux cellulosiques ou amylacés, tels que la méthyl cellulose, la cellulose cristalline, la carboxyméthylcellulose, l'hydroxypro- pylcellulose, l'amidon de mais et l'amidon de pomme de terre et les résines de gomme naturelle végétale telle que la gomme arabique et la gomme adragante A titre de support, on peut égalementciter laglycyrrhiza pulvérisée, l'extrait brut de gly- cyrrhiza, la gentiane pulvérisée, l'extrait de gentiane, la levure sèche, l'extrait de levure, la gélatine, l'agar-agar pulvérisé, le propylène glycol, la glycérine, le polyvinylpyrro- lidone, le sorbitol, l'eau, les alcools, les agents de mise en suspension, les agents émulsifiants, les agents tensio- actifs,lestéarate de calcium, le stéarate de magnésium, le p- oxybenzoate de méthyle, du silicone et du talc Les supports énumérés cidessus peuvent être utilisés seuls ou en combinaison selon l'état et la forme des compositions que l'on désire obtenir, en utilisant les méthodes usuelles pharmaceutiquement acceptables. Les composés de formule (I) à action anti-allergique peuvent être administrés chez l'homme à des doses de 50 à 900 mg/jour. Les composés de formule (I) qui constituent le principe actif des compositions antiallergiques selon la présente invention et comme indiqué dans le tableau I ci-après, ont été décrits comme étant utiles pour certains usages autres que les usages médicinaux dans "Z Chem 219 ( 1972)" En outre, ces composés de formule (I)peuvent être aisément synthé- tisés par le procédé décrit dans la revue ci-dessus. TABLEAU I COOH Principe actif de la oamposition selon l'invention, représenté par la (I) formule générale: R Composé n Type d'isomère R Littérature existante géométrique Les actiors anti-allergiques manifestées par les compositions anti-allergiques selon la présente invention, sont établies par l'expérimentation pharmacologique ci-après. A Anaphylaxie cutanée passive homologue (PCA homologue) chez le rat Conformément aux protocoles de Tada, T et al (J Immunol, 106, 1002, 1971), on procède au test de réaction à l'anaphylaxie cutanée passive homologue (PCA homologue) sur des rats mâles de la souche Wistar, chacun de ces rats pesant de 160 à 170 grammes Dans ce test, le DNP-As (Dinitrophénol couplé avec un extrait de Ascaris suum) obtenu par réaction du dinitro- phénol (DNP) avec une protéine extraite de Ascaris suum et il est utilisé en tant qu'antigène Par ailleurs, on prépare un 1 1 Trans (CH 2)3 CH 3 Z Chem 219 ( 1972) 2 " (CH 2)4 CH 3 sérum de rat anti-DNP-As en utilisant ledit antigène et il est utilisé comme anti-corps Ce dernier ayant un titre suffisant est injecté par voie intradermique dans trois sites, à raison de 0,1 ml par site, situés d'un côté du dos rasé de chaque rat; en outre, la même dose d'une solution saline (solution de sel physiologique) est injectée de manière similaire dans trois sites de l'autre côté du dos et ce, aux fins de comparaison ou de correctiond'éventuelles erreurs expérimentales Après un laps de temps de 48 heures, on administre par injection intraveineuse à chaque animal de test 1,0 ml d'une solution d'antigène (quantité de protéine: 2,0 mg) contenant 0,25 % de bleu Evans 30 minutes plus tard, on sacrifie les rats en les rendant exangu Es et on prélève leur peau afin de mesurer la surface de la lésion bleuissante due à la PCA Les quantités de colorant extravasé sont ensuite mesurées, conformément au procédé proposé par Harada, M et col (J Pharm Pharmacol, 23, 218, 1971). Les composés de formule (I) sont administrés oralement chez les rats à des doses de 200 mg/kg 2 heures avant l'adminis- tration de l'antigène. Les résultats obtenus sont répertoriés dans le tableau II ci-après. TABLEAU II Compose surface Taux Quantité de coloTaux d'inhibi- testé n occupée par le dinhi rant extravasé tion colorant extra ini vasé (mm 2) bition (,uglsite) _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (%) Témoin 99,11 + 3,54 14,36 + 0,83 - 1 76,87 + 2,68 22,4 5,17 + 0,32 64,0 2 67,20 + 2,57 32,2 2,49 + 0,29 82,7 B Test chez le rat de l'anaphylaxie cutanée inversée Conformément au protocole de Yamazaki (Folia Pharmacol Jap. , 65, 1964) mis au point en améliorant le protocole de Ungar et coll (Arch intern Pharmacodyn 123, 71, 1959), on teste, com- me indiqué ci-après, des rats mâles de souche Wistar pesant chacun environ 100 g. Tout d'abord, le sérum de lapin anti-rat est dissous dans une solution à 0,5 % de bleu Evans de manière à obtenir une solution de sérum à 15 % Cette dernière est injectée par voie intradermique dans deux sites, à raison de 0,05 ml par site, situés d'un côté du dos de chacun des rats, tandis qu'une solution à 0,5 % de bleu Evans dans une solution saline est injectée de manière similaire dans deux sites, à raison de 0,05 ml par site, situés de l'autre côté du dos des rats. 2 heures plus tard, les animaux de test sont sacrifiés et leur peau prélevée Les tâches marquées au bleu Evans sont découpées pour pouvoir séparer les parties oedèmateuses(enflées)dont on détermine ensuite le poids. L'intensité de l'intumescence est calculée d'après la formule suivante: W W I (%) = l x 100 Ws dans laquelle Wi désigne le poic de la partie enflammée et Ws désigne le poids de la partie témoin. Les compos ésanti-allergiques de formule (I) selon la présente invention, sont administrés chez le rat par voie orale à une dose de 100 mg/kg 1 heure avant l'injection du sérum de lapin anti-rat Les résultats obtenus sont répertoriés dans le tableau III ci-après. TABLEAU III C Libération d'histamine par un fragment de poumon de cobaye Les poumons de cobayes sensibilisés activement par de l'ovalbumine sont totalement irrigés par une solution de Tyrode puis découpés de manière à obtenir des échantillons d'une épaisseur de 1 à 2 mm 200 mg de fragments ainsi obtenus sont pesés très exactement, immergés dans une solution de Tyrode et pré-incubés à 37 C pendant 5 minutes Ensuite, la solution d'immersion est ajoutée au composé anti-allergique de formule I, mis en suspension dans une solution saline contenant 0,5 % de gomme adragante, le tout étant incubé à 37 C pendant 20 minutes et induit par 10-6 g/ml d'ovalbumine. Après 20 minutes d'incubation, la solution est refroidie dans la glace et on détermine la quantité d'histamine libérée dans le milieu et restant dans les tissus, par dosage fluorométrique, conformément au protocole de Shore et coll (J Pharmacol Exp Ther 127, 182, 1959) Les résultats obtenus sont répertoriés dans le tableau IV ci-après. i Composé testé n Taux d'intumescence Taux d'inhibition (%) (%) Témoin 42,58 + 4,10 - 1 29,81 + 7,17 30,0 2 25,00 + 2,77 41,3 TABLEAU IV D.Test de dégranulation de cellule mésentérique chez le rat Des rats sont sensibilisés passivement au niveau de leur cavité abdominale par un sérum de rat anti-DNP-As; 24 heures après,le mésentère de rats est extirpé Ensuite, on pèse très exactement 100 mg de mésentère que l'on immerge dans la solution de Tyrode et pré-incube à 37 C pendant 5 minutes Puis, la solution d'immersion résultante est ajoutée au composé anti-allergique de formule (I) mis en suspension dans une solution saline contenant 0,5 % de gomme adragante, le tout étant incubé à 37 C pendant 20 minutes puis induit par 5 x 10 i 6 g/ml de DNP-As Après 20 minutes d'incubation, la solution est refroidie dans la glace et le mésentère ainsi traité est coloré par utilisation de formaline ( 10 % de formaldéhyde) et de 0,1 % d'une solution de bleu de toluidine contenant 0,1 % d'acide acétique, traité par de l'éthanol et du xylène puis étudié sur le plandeladégranulation par inspection au miroir (x 4 400) Les résultats obtenus sont répertoriés dans le tableau V ci-après. Composé testé N O Taux d'inhibition (%) (sel de sodium) 4 Conc: 10 g/ml Conc: 105 g/ml 1 83,9 9,2 2 92,2 83,4 TABLEAU V Composé Conc Taux de Taux testé N O (g/mt) dégranulation d'inhibition Témoin 97,11 + 0,67 î 10 '4 71,45 + 5,85 22,4 2 10-4 74,96 + 2,91 18,6 E Test de toxicité aig e Les composés de formule (I) à tester sont chaucun mis en suspension dansune solution saline contenant 0,5 % de gomme adragante, puis administrés oralement à un groupe de 6 souris de souche dd Y, chaque souris pesant de 20 à 25 g Les doses létales 50 (DL 50) sont calculées à partir du nombre de décès de souris durantles trois semaines qui suivent l'administration. Les résultats obtenus sont répertoriés dans le tableau VI ci-après. TABLEAU VI Composé testé no Valeurs de la DL 50 (mg/kg) 1 > 2000 2 > 2000 Les composés de formule (I) selon l'invention, n'ont jamais été décrits comme médicament et c'est la Demanderesse qui a constaté que ces composés possédaient une remarquable action pharmacologique et une remarquable sureté d'utilisation, comme cela ressort des résultats d testspharmacologiqueset du test de toxicité ci-dessus Enfin, ces composés constituent des médicaments particulièrement utiles en tant qu'agent antiallergiques. La présente invention sera mieux comprise à la lumière des exemples suivantsqui illustret lapréparation des compositions antiallergiques contenant les composés de formule (I) en tant que principe actif Dans ces exemples, toutes les parties sont en poids, sauf stipulation contraire. EXEMPLE 1 100 parties d'acide trans-n-butyl-4 cyclohexane carboxylique constituant le principe actif, 70 parties de lactose granulaire, 30 parties d'amidon de mais (pharmacopée japonaise), 40 parties de cellulose cristalline (pharmacopée japonaise) et 1,2 partie de stéarate de magnésium (pharmacopée japonaise) sont mélangées dans un mélangeur à usages multiples du type Shinagawa, ce dont il résulte une composition anti- allergique Cette dernière est introduite dans des capsules rigides n O 2 pour obtenir des capsules contenant chacune 100 mg deprincipeactif Le principe actif contenu dans ces capsules manifeste de remarquables actions anti-allergiques comme cela ressort des expérimentations ci-dessus développées. EXEMPLE 2 41,9 parties d'acide trans-n-pentyl-4 cyclohexane carboxylique constituant le principe actif, 40,8 parties de lactose, 15,7 parties d'amidon de pomme de terre et 1,6 partie d'hydroxypropylcellulose sont mélangées dans un mélangeur de 10 litres-sous agitation Il en résulte un mélange auquel on ajoute de l'éthanol à 50 % et on pétrit le tout Le mélange résultant est pastillé dans une machine à pastiller du type à extrusion, après quoi, les pastilles obtenues sont séchées, pulvérisées et transformées en granules A 95,5 parties de granule ainsi obtenues, on ajoute 4 parties d'alginate de sodium et 0,5 partie de stéarate de magnésium, on mélange le tout dans ledit mélangeur, ce dont il résulte un produit que l'on transforme en comprimés contenant chacun 40 mg d'acide trans-n-pentyl-4 cyclohexane carboxylique. Ces comprimés sont administrés à un patient asthmatique; les patients ainsi traités constatent une amélioration remarquable de leurs symptômes subjectifs Il y a, en outre, une amélioration médicale objective. Comme cela ressort de l'expérimentation et des exemples ci-dessus, le principe actif descompositions anti-allergiques selon l'invention, manifeste des actions inhibitrices sur l'anaphylaxie cutanée passive homologue (PCA homologue), sur la dégranulation des cellules mésentérique; chez le rat et sur la libération d'histamine dans les fragments de poumon de cobaye. Ce principe actif constitue, de ce fait, un médicament utile pour la prophylaxie et le traitement de maladies allergiques et peut être utilisé, en particulier, pour des maladies allergiques telles que l'asthme bronchique, la rhinite aller- gique,la dermite allergique, la dermite de contact,l'allergie gastrointestinale et l'anaphylaxie En outre, on pense que ce principe actif manifeste une action anti-complémentaire en raison de son actioninhibitriesur l'anaphylaxie cutanée inversée (abréviation anglosaxonne: RCA) Enfin il est également utile en tant que médicament pour la prophylaxie et le traitement des maladies du type cytolyse, tel que l'ané- mie hémolytique allergique, l'hypoleucocytose, la thrombocytopé- nie et autres hémopathies allergiques, ainsi que pour la prophylaxie et le traitement de troubles angiopathiques tels que le rhumatisme, la néphrite allergique et l'angéite. 1 1 REVENDICATIONS 1 Composition anti-allergique, caractérisée en ce qu'elle comprend, à titre de principe actif,un composé représenté par la formule générale: 000 H R dans laquelle R représente le groupe n-butyle ou n-pentye. 2 Composition anti-allergique selon la revendication 1, caractérisée en ce que le principe actif est associé à un support pharmaceutiquement acceptable.