Brevet FR2509299A1 — publié le 19830114

ANTIBIOTIQUES A NOYAU B-LACTAME, ET PROCEDE POUR LES PREPARER La Drésente invention concerne une nouvelle famille d'antibiotiques à noyau e-lactame, ainsi que l'utilisation de ces composés comme agents antibactériens Il a été découvert que le noyau e-lactame pouvait être biologiquement activé par un substituant formé par un sel d'acide sulfoni- que, fixé à l'atome d'azote du noyau. Les e-lactames comportant un substituant formé par un sel d'acide sulfonique (y compris un "sel interne") en posi- tion 1, et un substituant acylamine en position 3 se montrent actifs contre une gamme de bactéries à Gram négatif et à Gram positif. Les membres préférés de cette nouvelle famille d'antibiotiques à noyau elactame selon l'invention sont ceux qui sont définis par la formule: R R I 2:4 R 1-NH-C-CR 3 Rl C-NC-R 3 N-SOé 3 Mé Outre les e-lactames décrits ci-dessus comportant un substituant sel d'acide sulfonique en position 1 et un substituant acylamine en position 3, l'invention englobe également les e-lactames ayant un substituant sel d'acide sulfonique (y compris un "sel interne") en position 1, et un substituant amine en position 3 Les composés préférés de ce type ont pour formule: Ia R 2 R 4 NH 2-C-C-R 3 -C-N-SO 3 M Ces composés sont des intermédiaires utiles pour la prépara- tion des composés 3-acylaminés correspondants. Tels qu'ils sont utilisés dans les formules I et Ia \ 2- 2 et dans l'ensemble du mémoire descriptif, les symboles ont les définitions ci-dessous: R 1 est un radical acyle; R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone; R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cycloalkyle, phényle ou phényle substitué, ou bien l'un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène et l'autre est un radical alcoxy- carbonyle, alcén-i-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle ou 2-phényléthynyle. M est un ion hydrogène ou un cation. Les termes "alkyle" et "alcoxy" désignent des radicaux à chaine droite ou à chaine ramifiée On préfère les radi- caux ayant de 1 à 10 atomes de carbone. Les termes "cycloalkyle" et "cycloalcényle" désignent des radicaux cycloalkyle et cycloalcényle ayant de 3 à 7 atomes de carbone. Le terme "alcényle" désigne un radical à chaîne droite ou à chaîne ramifiée On préfère les radicaux alcényle ayant de 2 à 10 atomes de carbone. Le terme "halogène" désigne un atome de fluor, de chlore, de brome ou d'iode Le terme "phényle substitué" désigne un radical phényle substitué par 1, 2 ou 3 groupements amine, atanomes d'halogène, groupements hydro- xyle, radicaux trifluorcméthyle et/ou radicaux alkyle ou alcoxy inférieurs. Le terme "carboxyle protégé" désigne un radical carboxyle qui a été estérifié par un groupement protecteur ester classi- que Ces groupements sont bien connus dans la technique; voir, par exemple, le brevet U S N 4 144 333 Les radicaux carbo- xyle protégé préférés sont les radicaux ester benzylique, benzhydrylique et t-butylique. Le terme "acyle" comprend tous les radicaux organi- ques dérivant d'un acide organique (c'est-à-dire d'un acide carboxylique) par élimination du groupement hydroxyle On préfère, bien entendu, certains radicaux acyle, mais cette préférence ne doit pas être regardée comme une limitation du champ d'application de l'invention Des radicaux acyle exemplaires sont ceux qui ont été utilisés dans le passé pour acyler les antibiotiques à noyau e-lactame, y compris l'acide 6-aminopénicillanique et ses dérivés et l'acide 7- aminocéphalosporanique et ses dérivés; voir, par exemple, Cephalosporins and Penicillins, édité par Flynn, Academic Press 11972), la demande de brevet allemand publiée sous le N 2 716 677, le brevet belge N 867 994, le brevet U S. N 4 152 432, le brevet U S N 3 971 778, le brevet U S. N 4 172 199, et le brevet britannique N 1 348 894 Les parties de ces références qui décrivent divers radicaux acyle sont incorporées ici à titre de référence La liste suivante de radicaux alcyle est présentée pour donner d'autres exemples du terme "acyle"; elle ne doit pas être considérée comme limitant ce terme Des radicaux acyle exemplaires sont: - (a) les radicaux aliphatiques ayant pour formule: O o I R 5-C- dans laquelle R 5 est un radical alkyle; cycloalkyle; alcoxy; alcényle; cycloalcényle; cyclohexadiényle; ou alkyle ou alcényle respectivement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, par un ou plusieurs groupements cyano ou nitro, ou par un ou plusieurs radicaux amine, mercapto, alkylthio ou cyanométhylthio. (b) les radicaux aromatiques carbocycliques ayant pour formule: 7 o II (C 2) C- o CH-C- R 9 R 7 o 7 O R 6 8 Il 6 -'-CH 2 -C-, ou 6: S-CH 2-C O R R 6 n CH 2 SCH 2 C Ou' R 7 - _ CH 2-S-C- o N est égal à 0,'1, 2 ou 3; R 6, R 7 et R 8 sont chacun indépendamment un atome d'hydrogène ou d'halogène, un grou pement hydroxyle ou nitro, un radical amine, cyano, trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone ou aminométhyle; et R est un radical amine, une fonction hydroxyle, un sel carboxylique, un radical carboxyle protégé, un radical formyloxy, un sel sulfonique, un sel de sulfoamine, un radical azide, un atome d'halogène, un radical hydrazine, alkylhydrazine, phénylhydrazine, ou l(alkylthio)thioxométhyllthio - Les radicaux acyle aromatiques carbocycliques préférés comprennent ceux qui ont pour formule: O- CH 2-C- O 2 H 2 NH 2 ' HO O t CH-C- R 9 (R 9 est de préférence un sel carboxvliaue ou un sel sulfo- nique) ou CH-C R 9 (R 9 est de préférence un sel carboxylique ou un sel sulfo- nique). (c) Les radicaux hétéro-aromatiques ayant pour formule: o lo (CH 2) n-C-, O Rjy CH-c- R 9 O R 1-O-CH 2-C I R 10-S-CII 2-C, ou O) O II Il Rld-C-C, o N est égal à 0, 1, 2 ou 3; R 9 a la même définition aue ci-dessus; et R O IO est un noyau hétérocyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, conte- nant 1, 2, 3 ou 4 (de préférence 1 ou 2) atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre Des noyaux hétérocycliques exemplai- res sont les noyaux thiényle, furyle, pyrrolyle, pyridinyle, pyrazinyle, thiazolyle, morpholinyle, pyrimidinyle et tétrazolyle Des substituants exemplaires sont les atomes d'halogène, les groupements hydroxyle et nitro, les radicaux amine, cyano, trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, ou alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone. Les radicaux acyle hétéro-aromatiques préférés comprennent les radicaux ayant les formules ci-dessus dans lesquelles R 10 est un radical 2-amino-4-thiazolyle, 2-amino- -halo-4-thiazolyle, 4-aminopyrimidin-2 yle, 5-amino-1,2,4- thiadiazol-5-yle, 2-thiényle ou 2-furanyle. (d) Les radicaux ll( 4-substitué-2,3-dioxo-1- pipérazinyl)carbcnyllaminolarylacétyle ayant pour formule: o o Il Il -C-CH-NHI-C-N N-R 12 k 1 1 Rll dans laquelle Rll est un radical aromatique (y compris les radicaux aromatiques carbocycliques tels que ceux qui ont pour formule: R 7 R 6 R 8 ainsi que les radicaux hétéro-aromatiques tels qu'ils sont compris dans la définition de R 10); et R 12 est un radical alkyle, alkyle substitué (o le radical alkyle est substitué par un ou plusieurs atomes d"halogène, ou par un ou plusieurs groupements cyano, nitro, amine ou mercapto), arylméthylène- amine (c'est-a-dire: -N=CH 7 Rll o R Rll a la même définition O o que cidessus), arylcarbonylamine (c'est-à-dire: -NH-C-Rl o Rll a la même définition que ci-dessus), ou alkyl - carbonylamine. Les radicaux ll( 4-substitué-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)- carbonyllaminolarylacétyle préférés comprennent ceux dans lesquels R 12 est un radical éthyle, phénylméthylèneamine ou 2-furylméthylèneamine. (e) Les radicaux (oxyimino substitué)arylacétyle ayant pour formule: I C=N-O-R 13 Rll dans laquelle Rll a la même définition que ci-dessus et R 13 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle, cycloalkyle, i alkylaminocarbonyle, arylaminocarbonyle (c'est-à-dire O I -C-NH-Rll o Rll a la même définition que ci-dessus) ou un radical alkyle substitué (dans lequel le radical alkyle est substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupe- ments cyano, nitro, amine, mercapto, alkylthio, ou aromati- ques (selon la définition de Rll), carboxyle (y compris ses sels), amide, alcoxycarbonyle, phénylméthoxycarbonyle, diphénylméthoxycarbonyle, hydroxyalcoxyphosphinyle, dihydroxyphosphinyle, hydroxy(phénylméthoxy) phosphinyle, ou dialcoxyphosphinyle Les radicaux (oxyimino substitué) arylacétyle préférés comprennent ceux dans lesquels Rll est un radical 2-amino-4- thiazolyle On préfère également les radicaux dans lesquels R 13 est un radical méthyle, éthyle, carboxyméthyle, ou 2- carboxyisopropyle. (f) Les radicaux (acylamino)arylacétyle ayant pour formule: O O Il Il -C-CH-NH-C-R 14 Rll dans laquelle Rll a la même définition que ci-dessus et R 14 est un radical R 7 R (CH 2)n, amine, alkylamine, (cyanoalkyl)amine (CH)-o-, amide, alkylamide, (cyanoalkyl)amide, 2 o amide, alkylamide, (cyanoalkyl) amide, NH N Hi O -CH 2-NH-C è N, -CH-CH 2-C-NH-CH 3, /\ \ 502-N(CH 2-CH 2-OH)2, CH 3, OH OH 01 O " O NNN -Cil N,ou \ gt Les radicaux (acylamino)arylacétyle préférés selon la formule ci-dessus comprennent les radicaux dans lesquels R 14 est un radical amine, ou amide On préfère également les radicaux dans lesquels Ril est un radical phényle ou '2-thiényle. (g) Les radicaux lll 3-substitué-2-oxo-1-imidazoli- dinyllcarbonyllaminojarylacétyle ayant pour formule: O II O O C il i -l ' -C-CH-NH-C-N N-R 1 15 CH 2-CH 2 dans laquelle R 1 a la même définition que ci-dessus et R 15 est un atome d'hydrogène ou un radical alkylsulfonyle, 1 U arylméthylèneamine (c'est-àdire: -N=CH-Ril o Rl a la il même définition que ci-dessus), -C-R 16 (o R 16 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou alkyle substitué par un atome d'halogène), un radical aromatique (selon la défini- tion de Ril ci-dessus), alkyle ou alkyle substitué (dans lequel le radical alkyle est substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine ou mercapto). Les radicaux lll 3-substitué-2-oxo-1-imidazolidinyll- carbonyllaminolarylacétyle préférés selon la formule ci- dessus comprennent ceux dans lesquels R 1 est un radical phényle ou 2thiényle On préfère également les radicaux dans lequels R 15 est un atome d'hydrogène ou un radical méthylsulfonyle, phénylméthylèneamine ou 2-furylméthylène- amine. Le terme "cation", tel qu'il est utilisé dans l'ensemble du présent mémoire descriptif, désigne n'importe quel atome-ou groupe d'atomes portant une charge positive. Le substituant "S Oe M$" porté par l'atome d'azote des 8- lactames selon l'invention englobe tous les sels d'acide sulfonique On préfère, bien entendu, les sels pharmaceu- tiquement acceptables, encore que d'autres sels soient également utilisables pour purifier les produits de l'inven- tion ou bien comme intermédiaires pour la préparation des sels pharmaceutiquement acceptables On peut obtenir la partie cationique des sels d'acide sulfonique selon l'inven- tion à partir de bases organiques ou minérales Une telle partie cationique comprend, mais ne se limite pas aux ions suivants: ammonium; ammonium substitué, par exemple alkylammonium (par exemple tétra-n-butylammonium, appelé ci- après tétrabutylammonium); métaux alcalins, tels que le lithium, le sodium et le potassium; métaux alcalino-terreux, tels que le calcium et le magnésium; pyridinium; dicyclo- hexylammonium; hydrabaminium; benzathinium; N-méthyl-D- glucaminium. Comme indiqué dans la formule I et dans les défini- tions suivant la formule I, Me peut être un ion hydrogène. Ainsi que cela sera décrit ci-après, on peut préparer par synthèse les B-lactames selon l'invention On peut pré- parer les 8-lactames de formule I non substitués en position 4 et non alcoxylés, c'est-à-dire les composés de formule I dans lesquels R 2, R 3 et R 4 sont des atomes d'hydrogène, en utilisant comme produit de départ l'acide 6-aminopénicilla- nique ou l'acide 6-acylaminopénicillanique On peut préparer les $lactames de formule I dans lesquels R 2 est un radical alcoxy à partir du e-lactame non alcoxylé correspondant On peut faire cristalliser ou recristalliser certains des composés selon l'invention dans des solvants contenant de l'eau Dans ces cas, il peut se former de l'eau d'hydrata- tion La présente invention n'exclut pas les hydrates stoechiométriques ainsi que les composés contenant des proportions variables d'eau qui peuvent être obtenus par des procédés tels que la lyophilisation. Certains des $-lactames de formule I ont également été préparés par des moyens biologiques La culture d'une souche du micro-organisme Chromobacterium violaceum SC 11378 donne un sel d'acide (R)-3-(acétylamino)-3-méthoxy-2-oxo-1- azétidinesulfonique La culture de diverses bactéries de l'acide acétique, par exemple de Gluconobacter espèce SC 11435 donne un sel d'acide (R)-3-llN-(D-y-glutamyl)-D- alanyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique. Les C-lactames portant un substituant sel d'acide sulfonique en position 1 et un substituant amine ou acyl- amine en position 3 contiennent au moins un centre chiral l'atome de carbone (en position 3 du noyau 0-lactame) auquel est fixé le substituant amine ou acylamine L'inven- tion a pour objet les e-lactames qui ont été décrits ci- dessus, dont la stéréochimie sur le centre chiral occupant la position 3 du noyau B-lactame est la même que la configu- ration sur l'atome de carbone occupant la position 6 des pénicillines d'origine naturelle (la pénicilline G par exemple), et que la configuration sur l'atome de carbone occupant la position 7 des céphamycines d'origine naturelle. (la céphamycine C par exemple). En ce qui concerne les e-lactames préférés dè formules i et Ia, les formules développées ont été dessinées de façon à faire apparaître la stéréochimie sur le centre chiral occupant la position 3 Pour des raisons de convention de nomenclature, les composés de formules I et Ia dans lesquelles R 2 est un atome d'hydrogène possèdent la configu- ration S, et les composés de formules I et Ia dans lesquelles R 2 est un radical alcoxy possèdent la configuration R. Sont également compris dans le champ d'application de l'invention les mélanges racémiques qui contiennent les e-lactames décrits ci-dessus. Les e-lactames ayant un substituant sel d'acide sulfonique en position 1 du noyau e-lactâme et un substituant amine ou acylamine en position 3 du noyau e-lactame sont actifs contre une gamme d'organismes à Gram négatif et à Gram positif Le substituant sel d'acide sulfonique est essentiel à l'activité des composés selon l'invention Les composés dans lesquels R 3 et/ou R 4 sont un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, notamment le radical méthyle, font preuve d'une activité particulièrement utile. On peut utiliser les composés selon l'invention comme agents pour combattre les infections bactériennes (y compris les infections de l'appareil urinaire et les infections res- piratoires) chez les espèces mammifères telles que les animaux domestiques (par exemple les chiens, les chats, les vaches, les chevaux, etc) et les êtres humains. Pour combattre les infections bactériennes chez les mammifères, on peut administrer un composé selon l'invention à un mammifère à traiter, à raison d'environ 1,4 mg/kg/jour à environ 350 mg/kg/jour, de préférence à raison d'environ 14 mg/kg/jour à environ 100 mg/kg/jour Tous les modes d'administration qui ont été utilisés dans le passé pour faire atteindre le site de l'infection par les pénicillines et les céphalosporines sont également envisages avec la nouvelle famille de e-lactames selon l'invention Ces modes d'administration comprennent les voies orale, intraveineuse, intramusculaire, et la forme suppositoires. On prépare généralement les 0-lactames selon l'inven- tion en introduisant un substituant acide sulfonique (un groupement sulfonique -SO 3-) sur l'atome d'azote occupant la position 1 du noyau 0lactame On réalise facilement cette réaction de sulfonation en traitant le 0-lactame par un - complexe du trioxyde de soufre ou par un réactif de sulfona- tion équivalent tel qu'un chlorosulfonate. Les complexes du trioxyde de soufre qui sont utilisés le plus couramment sont les complexes pyridine-trioxyde de soufre, lutidine-trioxyde de soufre, diméthylformamide- trioxyde de soufre, et picoline-trioxyde de soufre Au lieu d'utiliser un complexe formé d'avance, on peut former le complexe in situ, en utilisant par exemple comme réactifs l'ester chlorosulfonyltriméthylsilylique et la pyridine Ou bien, on peut réaliser la sulfonation au moyen d'un composé intermédiaire, comme par exemple en silylant d'abord l'atome d'azote du noyau e-lactame, puis en faisant subir au composé silylé une réaction d'échange du radical silyle avec le triméthylsilylchlorosulfonate ou un réactif similai 2 re Des agents de silylation exemplaires sont le monosilyl- trifluoracétamide, la combinaison chlorure de triméthyl- silyle/triéthylamine et le bis-triméthylsilyltrifluor- acétamide. En général, on mène la réaction de sulfonation en présence d'un solvant organique tel que la pyridine, ou d'un mélange de solvants organiques, de préférence un mélange d'un solvant polaire tel que le diméthylformamide et d'un hydrocarbure halogéné tel que le dichlorométhane. Le produit initialement formé dans la réaction de sulfonation est un sel du 0-lactame sulfoné Quand le complexe de sulfonation est le complexe pyridine-trioxyde de soufre, le produit initialement formé est le sel de pyridinium du e-lactame sulfoné, M+ étant l'ion pyridinium dans la formule ci-dessous: /YIIIT-SO 3 M O On peut transformer ces complexes en d'autres sels d'acide sulfonique en utilisant des techniques classiques (par exemple des résines d'échange d'ions, la cristallisation ou l'extraction de paires d'ions) Ces techniques de transfor- mation sont également utilisables pour purifier les produits. Sont particulièrement utiles la transformation du sel de pyridine en sel de potassium à l'aide de phosphate de potassium ou d'éthyl-hexanoate de potassium; la transforma- tion en sel de tétrabutylammonium à l'aide d'hydrogéno- sulfate de tétrabutyl ammonium; ou la transformation en un zwitterion (M = hydrogène) à l'aide d'acide formique; Il faut se rendre compte que la réaction de sulfona- tion gui introduit le groupement sulfonique sur l'atome d'azote du noyau e-lactame peut se faire à divers stades de la synthèse, y compris introduction avant la formation d'un noyau e-lactame, dans les cas o un tel mode opératoire est suivi comme résumé ci-dessous La réaction de sulfona- tion se fait en présence des solvants déjà décrits et habituellement à la température ambiante Dans les cas o la fonction amine est présente, on la conduit de préférence après avoir protégé la fonction amine. Quand on utilise par exemple un groupement protecteur benzyloxycarbonyle, la réaction de sulfonation peut être représentée comme suit: 2 4 R R C 6 H 5 CH 2 OCO-NH R 3 H 2 N 1) sulfonation M+ NH 2 élimination 3 dl II de la protection III On peut utiliser d'autres groupements protecteurs pour proté- ger la fonction amine, par exemple un groupement t-butyloxy- carbonyle, un simple radical acyle tel que le radical acétyle ou benzoyle ou phénylacétyle, un radical triphényl- méthyle, ou bien mettre la fonction amine sous la forme d'une fonction azide On peut ensuite fixer le radical acyle voulu (R 1) par une réaction d'acylation classique. Des techniques d'acylation exemplaires permettant de transformer un composé de formule III en un produit de formule I comprennent la réaction avec un acide carboxylique (R 1-OH), ou avec un haloaénure d'acide carboxvliaue ou un anhydride d'acide carboxylique correspondant -Lorsque R 2 est un radical alcoxy, l'acylation se fait le mieux à l'aide d'un chlorure d'acide ou d'un bromure d'acide La réaction avec un acide carboxylique se fait le plus facilement en présence d'un carbodiimide tel que le dicyclohexylcarbodiimide, et d'une substance capable de former in situ un ester actif, telle que le N-hydroxybenzotriazole Dans ces cas là, lorsque le radical acyle (R 1) contient des fonctions réac- tives (par exemple des radicaux amine ou carboxyle), il peut être nécessaire de protéger tout d'abord ces radicaux fonc- tionnels, puis de procéder à la réaction d'acylation, et enfin de supprimer la protection du produit résultant Ou bien, on peut procéder à la réaction de sulfonation avec le radical acyle déjà en place, c'est-àdire faire la réaction suivante: 2 R 4R 2 R 4 R 1-NH R 3 R 1-NH R 3 À 6-st fonation -S M IV V Dans le cas o R 2 est un radical alcoxy inférieur, il peut y avoir une variation supplémentaire en ce sens que l'on peut introduire le radical R 2-alcoxy inférieur après la sulfonation aussi bien qu'avant la sulfonation en-utili- sant le mode opératoire classique consistant à chlorurer l'atome d'azote acylé qui occupe la position 3, puis à faire réagir le produit résultant avec un alcoolate inférieur, selon la réaction: C H R 4 (R 2)alcoolate R R 2 4 R acyl-N-R acyl-NH j Oi II-SO 3 M+ OZ Z 1 IO 35 M o o VI V Dans la réaction ci-dessus, les radicaux acyle comprennent également des radicaux faciles à éliminer qui jouent le rôle de groupements protecteurs et que l'on peut éliminer après la réaction pour obtenir le produit "désacylé" (-NH 2). En outre, on peut former le noyau B-lactame par une réaction de cyclisation, et on peut procéder à la réaction de sulfonation aussi bien avant cyclisation qu'après cycli- sation, c'est-à-dire faire la réaction: V R 4 R 4 acyl-NH Cclisation acyl-NH y o ESO 3 M - VII Dans cette réaction, le radical acyle peut également être un groupement facile à éliminer qui joue le rôle de groupe- ment protecteur et qui, après élimination, permet d'obtenir le produit à substituant -NH 2. 2509-299 On peut également préparer les azétidinones de départ dans lesquelles R 2 est un atome d'hydrogène et au moins l'un des substituants R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène, à partir des amino-acides ayant pour formule: NH OH R XII H C _ R 3 z C OH (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène) On * protège tout d'abord le radical amine à l'aide d'un groupe- ment protecteur classique, par exemple le radical t-butoxy- carbonyle (désigné ci-après par l'abréviation "Boc") On fait ensuite réagir la fonction carboxyle de l'amino-acide protégé avec un sel d'amine ayant pour formule: XIII Y-O-NH+Cl- dans laquelle Y est un radical alkyle ou benzyle, enprésence d'un carbodiimide, pour obtenir un composé ayant pour formule: H /R 4 BOC-NH-CH C XIVR 3 O"C _-NH-O=Y o C (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène) On transforme le groupement hydroxyle d'un composé de formule XIV en un groupement labile (V) à l'aide d'un réactif clas- sique, par exemple le chlorure de méthanesulfonyle (le radical méthanesulfonyle est désigné ci-après par l'abrévia- tion "Ms") D'autres substituants labiles (V) que l'on peut utiliser sont les radicaux benzènesulfonyle et toluène- sulfonyle et les atomes de chlore, de brome et d'iode. On cyclise le composé totalement protégé, ayant pour formule: :- - 6 2509299 1 G V BOC-NH _H____ 1 R_ O"-C NH-O-Y (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène) en le traitant par une base, le carbonate depotassium, par exemple. On mène de préférence la réaction dans un solvant organique tel que l'acétone, dans les conditions de reflux, et on obtient un composé ayant pour formule: R 4 r 4 -VI BOC-NH lR 3 XVI' C N-O-Y (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène) - Ou bien, on peut réaliser la cyclisation d'un composé de formule XIV sans transformer d'abord le groupement hydroxyle en un groupement labile Le traitement d'un composé de formule XIV par la triphénylphosphine et le diéthylazodicarboxylate, donne un composé de formule XVI dans laquelle au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène. On peut réaliser l'élimination du groupement protec- teur de la position 1 d'une azétidinone de formule XVI en ayant recours à une réduction par le sodium lorsque Y est un radical alkyle, et cela donne un intermédiaire de formule: R 4 BOC-NH 3 XVII NB O<> NH (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène) Si Y est le radical benzyle, l'hydrogénation catalytique (à l'aide de palladium sur charbon par exemple) donnera ini- tialement le composé N-hydroxylé correspondant qui, par traitement à l'aide du trichlorure de titane, donnera un intermédiaire de formule XVII dans laquelle au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène. La synthèse mettant en jeu la fermeture de cycle du type décrit ci-dessus conduit à une inversion de la configu- ration stéréochimique des substituants R 3 et R 4. Comme déjà mentionné, on peut sulfoner l'azétidinone ci-dessus pour former un composé de formule: R XVIII BOC-NH R 3 Ce N-503-M+ (au moins un de R 3 et R 4 est'un atome d'hydrogène). Un autre mode opératoire permettant de préparer un composé de formule I dans laquelle R 2 est un atome d'hydro- gène et au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène, utilise comme produit de départ un amide d'amino-acide ayant pour formule: OH 1 R 4 NH 2-CH R XIX 1 3 9 c N H 2 (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène). La protection du groupement amine par un groupement protec- teur classique, le radical benzyloxycarbonyle par exemple (désigné ci-après par la lettre Z) ou par Boc, et la trans- formation du groupement hydroxyle en un groupement labile (V) tel que Ms, donne un composé de formule: O Ms XX ANH-CH R 4 1 R o C, NH 2 3 (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène), A étant un groupement protecteur. La sulfonation d'un composé de formule XX donne un composé de formule: çMs /R 4 ANH-CH C XXI | 3 0 ' NHSO 3 M (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène). On réalise la cyclisation d'un composé de formule XXI à l'aide d'une base, le carbonate de potassium par exemple. On mène de préférence la réaction dans un mélange d'eau et d'un solvant organique (par exemple un hydrocarbure halogéné tel que le 1,2dichloréthane), dans les conditions de reflux, et on obtient un composé deformule: R 4 xx I ANHI = R XXII l ISO 3 (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène). L'élimination du groupement protecteur d'une azétidi- none sulfonée de formule XXII, dans laquelle A est un grou- pement protecteur, ainsi que des composés équivalents déjà décrits comportant un radical R 2-alcoxy, par hydrogénation catalytique,-donne un composé de formule: R 2 R 4 H 2 N R 2 R 3 XXIII N-S N-503-M+ O 3 (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène), formule dans laquelle R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy, et ce composé peut être transformé en le zwitterion correspondant, ayant pour formule: R. XXIV 19 25092-99 (au moins un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène), par traitement avec un acide tel que l'acide formique. L'élimination du groupement protecteur d'une azétidi- none sulfonée de formule XXII dans laquelle A est un grou- pement protecteur Boc en utilisant des conditions acides (en utilisant par exemple l'acide formique) donne le zwitterion correspondant de formule XIV. Une source excellente des p-lactames de départ sont les acides 6-aminopénicillaniques et les acides 7-amino- céphalosporaniques qui peuvent porter respectivement un substituant 6alcoxy ou 7-alcoxy facultatif Ces composés ont respectivement pour formules: o 2 / / CH 3 R 1-NH XX Va C-COOH et R. XX Vb R 1-NH N CH 3 COOH o R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy et R est un atome d'hydrogène ou un radical acyle En adaptant les modes opératoires décrits dans la littérature, on peut préparer les 3-amino-2-azétidinones; voir par exemple Chem Soc Special Publication, N 28, page 288 ( 1977); The Chemistry of Penicillins, Princeton Univ Press, page 257, et Synthesis, 494 ( 1977). On commence par désulfuriser l'acide 6-amino- pénicillanique ou l'acide 7-amino-céphalosporanique, par réduction à l'aide de nickel de Raney On peut réaliser la réaction dans de l'eau dans les conditions de reflux; le composé résultant a la formule développée suivante: R 2 R -NH- XXVI N-CH-CH (CH 3) COOH Le remplacement du groupement carboxyle du composé de formule XXVI par un groupement acétate, suivi d'une hydrolyse, donne une 3-amino-3alcoxy-2-azétidinone de formule I dans laquelle R 1 est un atcme d'hydrogène ou un radical acyle; R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy inférieur, et R 3 et R 4 sont des ataomes d'hydrogène Le traitement d'un composé de formule XXVI par l'acétate cuivrique et le tétra-acétate de plomb dans un solvant organique (l'acétonitrile par exemple) permet de rèemplacer le groupement carboxyle par un groupe- ment acétate On peut réaliser l'hydrolyse du composé résul- tant en utilisant du carbonate de potassium en présence de borohydrure de sodium On peut réaliser l'introduction d'un groupement sul- fonique en position 1 de la 3-amino-3-alcoxy-2-azétidinone ci-dessus en faisant réagir l'intermédiaire avec un complexe de diméthylformamide et de trioxyde de soufre. On peut préparer une 3-azido-2-aétidinone de départ en faisant d'abord réagir une oléfine de formule: R 4 XXVII 2 =C-R 3 avec un halosulfonylisocyanate (de préférence le chloro- sulfonylisocyanate) ayant pour formule: XXVIII O= C=N-SO 2-halogène pour obtenir une azétidinone de formule: R 4 R 3 XXIX | 02 halogène 2509299- L'hydrolyse réductrice d'une azétidinone de formule XXIX donne un elactame non substitué sur l'azote, ayant pour formule: R 4 | I R 3 XXX Z R O" NH Pour avoir une description plus détaillée de la séquence réactionnelle décrite ci-dessus, on peut se reporter à la littérature; voir, par exemple, Chem Soc Rev, 5, 181 ( 1976) et J Org Chem, 35, 2043 ( 1970). On peut introduire un' groupement azide en position 3 d'une azétidinone de formule XXX (ou de son équivalent sulfoné) par réaction du composé avec un arylsulfonylazide (tel que le toluènesulfonylazide) pour obtenir une azétidi- none de départ ayant pour formule: R 4 No NH La réaction se fait le mieux si l'on protège d'abord l'azote La réaction se fait le mieux si l'on protège d'abord l'azote de l'azétidinone par un reste silyle (par exemple le t- butyldiméthylsilyle, ou le t-butyldiphénylsilyle), puis en donnant naissance à l'anion en position 3 du noyau à l'aide d'une base organique forte (la lithium diisopropylamine par exemple) à basse température, puis en traitant cet anion par le toluènesulfonylazide On stabilise l'intermédiaire résultant à l'aide de chlorure de triméthylsilyle, et ensuite l'hydrolyse acide ou la solvolyse par un fluorure du groupe- ment protecteur de l'azote donne le composé de formule XXXI. Ou bien, on peut obtenir le composé de formule XXXI en faisant d'abord réagir une amine primaire de formule: H 2 N-CH, O-alkyle ou H 2 N -Oalkyle O-alkyle avec un aldéhyde de formule R 3 CH= 0, pour obtenir la base de Schiff correspondante Une cycloaddition l 2 + 2 l avec une forme activée de l'acide 3-azido-acétique donne une 3-azido- 2-azétidinone ayant pour formule: R 4 Ni3 R 3 N-Q dans laquelle Q est un radical de formule: -CH O 0-alkyle 2 ou 0-alkou 0-alkyle L'élimination du substituant Q par oxydation donne lecomposé de formule XXXI. On peut obtenir les 3-acylamino-2-azétidinones en réduisant d'abord une 3azido-2-azétidinone de formule XXXI pour obtenir la 3-amino-2-azétidinone correspondante, puis en acylant la 3-amino-2-azétidinone. Comme déjà mentionné dans le cas o R 2 est un radical alcoxy inférieur, on peut préparer le produit à partir du produit équivalent dans lequel R 2 est un atome d'hydrogène. La chloruration de l'azote amide d'un composé non alcoxylé donne un intermédiaire de formule: R 4 XXXII 3 N-SO 3 M+ Les réactifs et les modes opératoires permettant de chloru- rer les amides sur l'atome d'azote sont connus dans la technique Des réactifs exemplaires sont l'hypochlorite de tert -butyle; l'hypochlorite de sodium, et le chlore On peut mener la réaction dans un solvant organique (par exemple un alcanol inférieur tel que le méthanol) ou bien dans un solvant mixte à deux phases (par exemple un mélange d'eau et de chlorure de méthylène) en présence d'une base telle que le borate de sodium décahydraté On mène de pré- férence la réaction à température réduite. La réaction d'un intermédiaire de formule XXXI avec un agent d'alcoxylation, par exemple avec un alcoolate de métal alcalin, donne un produit de formule I dans laquelle R 2 est un radical alcoxy, en combinaison avec son énantiomère. On peut mener la réaction dans un solvant organique, par exemple dans un solvant organique polaire tel que le diméthylformamide, à une température réduite. Un autre mode de synthèse permettant de préparer les composés de formule I dans laquelle R 2 est un radical alcoxy consiste à alcoxyler d'abord un intermédiaire de formule VI dans laquelle R 1 NH est un carbamate (R 1 est, par exemple, le radical benzyloxycarbonyle) et R 2 est un atome d'hydrogène, puis à introduire un groupement sulfonique en position 1 du composé résultant La chloruration d'un composé de formule VI à l'aide du mode opératoire décrit ci-dessus (pour la chloruration d'un composé non alcoxylé de formule I afin d'obtenir un composé de formule XXXII) donne un intermédiai- re de formule: Cl R XXXIII C H -CH 2-O-CO-N R 3 XXXIII 6 5 2 3 Ov l N-C 1 En utilisant le mode opératoire d'alcoxylation décrit ci- dessus (permettant de transformer un composé de formule XXXII en un produit de formule I), et en ajoutant ensuite un agent réducteur tel que le triméthylphosphite, on peut transformer le composé de formule XXXIII en un intermédiaire de formule: -alkyle R 4 XX-V C 6 H 50-CO-NH R 3 XXXIV 6 5 | NH xxx v en combinaison avec son énantiomère. Les modes opératoires ci-dessus donnent les produits de formule I dans laquelle R est un radical alcoxy, sous la forme d'un mélange racémique Le cas échéant, on peut isoler de ce mélange racémique l'énantiomère ayant la confi- guration R, en utilisant des techniques classiques telles que la cristallisation fractionnée d'un sel approprié avec une amine organique optiquement active, ou bien par chroma- tographie à paires d'ions, en utilisant un cation optique- ment actif. Production biologique de l'antibiotique EM 5117 On peut également préparer les sels de l'acide (R)-3- (acétylamino)-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique (formule I, R 1 est un radical acétyle et R 2 est un radical méthoxy; désigné ci-après par le code EM 5117) par culture d'une souche du micro-organisme Chromobacterium violaceum SC 11 378 quiza été déposée dans la American Type Culture Collection (A T C C) sous le N 31 532. Le micro-organisme Le micro-organisme utilisé pour la production de EM 5117 est une souche de Chromobacterium violaceum SC 11 378. On peut obtenir une sous-culture de ce micro-organisme de la collection permanente de l'A T C C, à Rockville, Maryland, Etats-Unis d'Amérique Son numéro d'accés dans la collection est A T C C N 31 532 Outre le microorganisme spécifique décrit et caractérisé ici, il faut comprendre que des espèces mutantes du micro-organisme (par exemple les espèces mutantes produites à l'aide de rayons X, d'un rayonnement ultraviolet ou de "moutarde à l'azote") peuvent également être cultivées pour produire EM 5117. On peut isoler Chromobacterium violaceum SC 11 378, A.T C C N 31 532, d'un échantillon de terre humide conte- nant le micro-organisme, en appliquant d'abord l'échantillon de terre sur un milieu contenant: Extrait de terre 400 ml Eau distillée 600 ml Extrait de levure 5,0 g Glucose 10,0 g Gélose 17,5 g On ajuste ce milieu à p H 6, 0 et on le stérilise dans un autoclave à 121 C pendant 20 minutes Après 24 à 72 heures d'incubation à 25 C, on isole de la terre appliquée sur lame des colonies du Chromobacterium violaceum SC 11 378. On fait ensuite croître ces colonies isolées sur un milieu contenant: Extrait de levure 1 g Extrait de boeuf 1 g NZ amine A 2 g Glucose 10 g Gélose 15 g Eau distillée pour faire 1 litre - On ajuste ce milieu à p H 7,3 et on le traite en autoclave à 121 C pendant 30 minutes. Chromobacterium violaceum SC 11 378 est un bâtonnet à Gram négatif faisant souvent apparaître des "barres", une coloration bipolaire et des inclusions lipidiques Il peut se déplacer à l'aide d'un seul flagelle polaire avec, parfois, des flagelles latéraux qui sont plus petits. Sur de la gélose nutritive, Chromobacterium violaceum SC 11 378 produit des colonies violettes La pigmentation est augmentée sur des milieux riches en tryptophane et en extrait de levure Dans un bouillon nutritif, le micro- organisme produit un anneau violet sur la paroi du tube mais pas de pellicule confluente Le pigment violet est soluble dans l'éthanol mais insoluble dans l'eau et le chloroforme. Chromobacterium violaceum SC 11 378 est mésophile, croissant sur un intervalle de 15 à 37 C; aucune croissance ne se produit à 4 C ou au-dessus de 37 C La caséine est fortement hydrolysée par le micro-organisme, qui est positif à l'oxydase En présence de Chromobacterium violaceum SC 11 378, le glucose, le fructose et le tréhalose fermentent (méthode de Hugh & Leifson, 1953) Le L-arabinose n'est pas utilisé par le micro-organisme, que ce soit par fermentation ou par oxydation De l'acide cyanhydrique est produit par le micro-organisme, et l'hydrolyse par l'esculoside est négative. Les caractéristiques fondamentales décrites ci-dessus forment la base de l'identification du micro-organisme comme étant Chromobacterium violaceum et non Chromobacterfum lividum, la seule autre espèce du genre Chromobacterium qui ait été identifiée dans la 8 ème édition du "Manual of Determinative Bacteriology" de Bergey. On peut également cultiver des souches supplémentai- res de Chromobacterium violaceum pour produire EM 5117. L'antibiotique Pour obtenir l'antibiotique EM 5117, on fait crottre Chromobacterium violaceum SC 11 378, A T C C N 6 31 532, à- C ou aux alentours de 25 C, dans des conditions aérobies immergées, sur un milieu nutritif aqueux contenant une source de carbone et d'azote assimilables On procède à la fermen- tation jusqu'à ce qu'une activité antibiotique substantielle ait été conférée au milieu, c'est-à-dire habituellement pendant 18 à 24 heures environ, de préférence pendant 20 heures environ. En utilisant le mode opératoire suivant, on peut séparer EM 5117 du milieu de fermentation et le purifier Une fois la fermentation terminée, on peut centrifuger le bouillon pour éliminer le mycélium, ou bien on peut avoir recours à une filtration pour séparer le mycélium du bouillon Apres avoir séparé le mycélium du bouillon, on peut extraire EM 5117 du bouillon On extrait de préférence le bouillon à p H 5 parextraction de paires d'ions à l'aide de chlorure de cétyldiméthylbenzylammonium dans du chlorure de méthylène, et on le réextrait dans de l'iodure de sodium aqueux (ajusté à p H 5 avec de l'acide acétique) Apres con- centration sous vide de l'extrait iodure de sodium, on peut laver une solution aqueuse du résidu avec du butanol La concentration de la solution aqueuse résultante à siccité donne un résidu que l'on dissout, dans la mesure du possible, dans du méthanol On peut utiliser une centrifugation pour séparer les matières insolubles, que l'on lave avec du méthanol et que l'on jette. On peut réaliser la purification de l'antibiotique en dissolvant le concentré de méthanol dans un mélange 1:1 de méthanol et d'eau et en le faisant passer dans une colonne de chromatographie, par exemple dans une colonne comprenant du "Sephadex G-1 O" dans le même mélange de solvants, Après élution avec ce même mélange, on réunit les fractions actives et on les concentre à siccité On mélange le résidu avec du méthanol et on filtre lamatière insoluble puis on la jette. On réalise une nouvelle purification en faisant passer la matière soluble dans le méthanol dans une colonne de DEAE-cellulose On peut éluer cette colonne avec un gradient linéaire préparé à partir d'un tampon de phosphate de sodium 0,0 M de p H 5 et d'un tampon de phosphate de sodium 0,1 M de p H 5 On réunit les fractions actives, on les concentre et on sépare et jette les substances insolubles dans le méthanol. Onréalise encore une autre purification de EM 5117 en dissolvant cette substance dans de l'eau et en faisant passer la solution dans une colonne de "Sephadex LH-20 ", et en éluant cette colonne avec de l'eau On réunit et on concen- tre les fractions actives On réalise ensuite une nouvelle purification de EM 5117 en dissolvant la substance dans de l'eau, en faisant passer la solution dans une colonne de "Diaion HP-20 AG" et en éluant avec de l'eau On réunit et on concentre les fractions actives On dissout le concentré dans de l'eau et on le fait passer dans une colonne de "Dowex 50 W-X 2 ", sous la forme potassium, en lavant avec de l'eau On peut concentrer l'effluent pour obtenir une subs- tance cristalline qui est un sel de potassium relativement pur de EM 5117. Le procédé décrit ci-dessus d'isolement et de purifi- cation donne donc le sel de potassium de EM 5117 On peut préparer d'autres sels correspondant à la forme de la résine d'échange d'ions utilisée dans l'étape de purification finale. Production biologique de l'antibiotique EM 5210 On peut également préparer des sels de l'acide (R)-3- llN-(D-Y-glutamyl)-D-alanyljaminol-3-méthoxy-2-ox O-1- azétidinesulfonique (formule I, R 1 est le radical D-y- glutamyl-D-alanyle et R 2 est le radical méthoxy; désignés ci-après par le code "EM 5210 ") par culture de diverses bactéries de l'acide acétique. Le micro-organisme On peut utiliser le micro-organisme Gluconobacter espèce SC 11 435 pour la production de EM 5210 On peut obtenir une sous-culture de ce micro-organisme de la collec- tion permanente de l'A T C C, à Rockville, Maryland, Etats- Unis d'Amérique Son numéro d'accès dans la collection est A.T C C No 31 581 Outre le micro-organisme spécifique qui est décrit et caractérisé ici, il faut comprendre que l'on peut également cultiver des espèces mutantes du micro- organisme (par exemple les espèces mutantes produites à l'aide de rayons X, d'un rayonnement ultraviolet ou de "moutarde à l'azote") pour produire EM 5210. On peut isoler Gluconobacter espèce SC 11 435, A.T C C No 31 581, de mousse broyée contenant le micro- organisme, en faisant d'abord incuber la mousse broyée dans une solution de pectine aqueuse à 10 % (p H 2,5) pendant 7 jours à 250 C On peut ensuite isoler le micro-organisme en l'appliquant sur un milieu contenant: *Extrait d'herbe Spartina patens 400 ml Eau distillée 600 ml Extrait de levure 5 g Glucose 10 g Gélose brute en paillettes 17,5 g *On prépare l'extrait d'herbe Spartina patens en ajoutant 500 g d'herbe sèche hachée à 3 litres d'eau du robinet, en portant à ébullition et en faisant cuire pendant minutes. On ajuste le p H du milieu à 6,0 et on stérilise le milieu dans un autoclave à 121 'C-pendant 20 minutes Après environ 18 heures d'incubation à 250 C, on isole de la solution d'enrichissement de pectine sur lame des colonies de Gluconobacter espèce SC 11 435 On fait ensuite croître ces colonies isolées sur un milieu contenant Extrait de levure 1 g Extrait de boeuf 1 g NZ amine A, 2 g Glucose -10 g Gélose 15 g Eau distillée pour faire 1 litre. On ajuste le milieu à p H 7,3 et on le traite en autoclave à 121 C pendant 30 minutes. Gluconobacter espèce SC 11 435 est un bâtonnet à Gram négatif pléomorphe qui peut se déplacer au moyen de 1 à 3 flagelles polaires Il est obligatoirement aérobie, positif à la catalase et oxydant Il se différencie de Pseudomonas en ce qu'il est négatif à la cytochromeoxydase et qu'il peut supporter des conditions extrêmement acides Ces caracté- ristiques indiquent que le micro-organisme est plus étroite- ment apparenté aux bactéries de l'acide acétique qu'auxvéri- tables Pseudomonas. Sur gélose de soja trypticase BBL, Gluconobacter, espèce SC 11 435, croit sous la forme d'un mélange de colo- nies de type rugueux et de type lisse Le type rugueux est associé à un pigment soluble jaune pâle, tandis que le type lisse est mucoide et sans pigment La dissociation des deux types est influencée par les conditions de milieu, de tempé- rature et de conservation L'activité de EM 5210 tend à décroître dans les cultures dans lesquelles c'est le compo- sant rugueux qui prédomine. Sur gélose de Wart BBL (p H 4,8), Gluconobacter, espèce SC 11 435, croît de manière luxuriante sous la forme de colonies fangeuses mucoides entassées On obtient une crois- sance similaire sur une gélose de malt -extrait de levure ( 1 % chacun) ajustée à p H 4,5. Sur un milieu contenant 1 % d'extrait de levure, 10 % de glucose, 3 % de carbonate de calcium et 2,5 % de gélose, une quantité suffisante est produite à partir du glucose pour former une zone de disparition du carbonate de calcium autour du point de croissance Cela est une particularité caracté- ristique d'Acetobacter et de Gluconobacter. En présence de Gluconobacter, espèce SC 11 435: (i) un pigment soluble brun est produit sur des lames de gélose d'extrait de levure-glycérol et extrait de levure- lactate de calcium, (ii) de l'acide est produit sur le glu- * cose, le fructose, le galactose, le mannose, le xylose, le mannitol et l'arabinose, mais aucune croissance ou production d'acide ne se produit sur le rhamnose, le lactose, le saccharose ou le maltose, lorsque ces sucres sont incorporés à un milieu de Hugh & Leifson. La production biologique de EM 5210 ne se limite pas à Gluconobacter, espèce SC 11 435, mais est largement répartie dans l'ensemble des bactéries de l'acide acétique On peut utiliser chacune des cultures suivantes pour la production de EM 5210: Acetobacter pasteurianus subsp pasteurianum A.T C C 6033 Acetobacter aceti subsp aceti A T C C 15973. Gluconobacter oxydans subsp oxydans A;T C C 19357. Gluconobacter oxydans subsp suboxydans A.T C C 23773 Gluconobacter oxydans subsp oxydans A T C C 15178 Acetobacter aceti subsp liquefaciens A T C C 23751 Acetobacter peroxydans A T C C 12874 Gluconobacter oxydans subsp suboxydans A.T C C 19441 Acetobacter sp A T C C 21780 Gluconobacter oxydans subsp industralis A T C C 11894 L'antibiotique Pour obtenir l'antibiotique EM 5210, on peut faire croître Gluconobacter, espèce SC 11 435, A T C C N 31581, ou bien l'un des microorganismes énumérés ci-dessus, à une température égale ou voisine de 25 C, dans des conditions aérobies immergées, sur un milieu nutritif aqueux contenant une source assimilable de carbone et d'azote On procède à la fermentation jusqu'à ce qu'une activité antibiotique substantielle ait été conferée au milieu, c'est-à-dire habi- tuellement pendant 16 à 24 heures environ, de préférence pendant 20 heures environ. En utilisant le mode opératoire suivant, on peut séparer EM 5210 du milieu de fermentation et le purifier Une fois la fermentation terminée, on centrifuge le bouillon pour éliminer les bactéries et on sépare l'antibiotique du surnageant du bouillon, à p H 3,7, par absorption sur une résine d'échange d'anions, par exemple sur "Dowex 1-X 2 ". On élue l'antibiotique de la résine à l'aide de chlorure de sodium à environ p H 4, et on concentre l'éluat, puis on le fait passer dans une colonne de charbon On élue ensuite EM 5210 du charbon avec un mélange 1:1 de méthanol et d'eau. On rassemble et on sèche les fractions actives, puis on les place sur une colonne d'échange d'anions, par exemple "Dowex 1-X 2 ", et on élue avec un gradient de chlorure de sodium tamponné à p H 4 On concentre les fractions actives et on les dessale sur une colonne de résine de copolymère styrène-divinylbenzène macroréticulaire ("Diaion HP 20 AG"). On concentre les fractions actives éluées avec de l'eau et on leur fait subir une cryodessication, et cette substance représente le sel de sodium de EM 5210. La méthode de purification décrite ci-dessus donne donc le sel de sodium de EM 5210 On peut obtenir d'autres sels en changeant le sel utilisé pour éluer EM 5210 dans la chromatographie d'échange d'ions décrite ci-dessus, en utilisant, par exemple, du chlorure de potassium pour obtenir le sel de potassium. Les exemples suivants sont des formes de réalisation spécifiques de l'invention. Exemple 1 Sel de potassium du (S)-N-( 2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)-2- phénylacétamide Méthode I: A) 1-l( 1 R)-carboxy-2-méthyl(propyl)l 1-2-oxo-( 3 S)-lphényl- lacétyl(amino)llazétidine On lave du nickel Raney avec de l'eau par décantation pendant plusieurs heures jusqu'à ce que le p H de l'eau ( 5 à 6 fois le volume du nickel Raney) soit de 7,6. A une solution de 9,0 g de pénicilline G (Na+) dans 500 ml d'eau, on ajoute 54 g ( 90 ml) de nickel Raney On plonge le ballon, équipé d'un réfrigérant à reflux, dans un bain à 155 C Quand le reflux commence, on le continue pendant 15 minutes On refroidit immédiatement le ballon dans un-bain d'eau glacée, puis on élimine le nickel Raney par filtration sur de la "Celite" On ajuste le p H à 3 en utilisant de l'acide chlorhydrique dilué, et on concentre la solution aqueuse à 150 ml environ, puis on la refroidit. La couche huileuse cristallise lorsqu'on gratte les parois du récipient Apres lavage à l'eau et séchage sous vide pendant 3 heures à 50 C, on obtient 3,83 g du composé du titre. B) 1-lacétyioxy-2-méthyl(propyl)l-2-oxo-( 3 S>-lphényl- lacetyl (amino)l lazétidine On fait barboter de l'azote pendant 15 minutes dans une suspension agitée de 608 mg ( 2 mmoles) du composé ci- dessus dans 20 ml d'acétonitrile sec On utilise un bain- marie à 40 45 C pendant plusieurs minutes pour dissoudre la totalité de l'acide On retire le bain-marie, et on ajoute de l'acétate cuivrique monohydraté en poudre ( 182 mg, 1 mmole), puis, après une minute d'agitation, 886 mg ( 2 mmoles) de têtra-acétate de plomb On agite le mélange à la température ambiante pendant 20 minutes On fait décan- ter du précipité la solution d'acétonitrile, et on lave les matières sclides avec de l'acétate d'éthyle On fait évapo- rer la solution combinée d'acétonitrile et d'acétate d'éthyle en un résidu que l'on reprend dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'eau On lave la couche acétate d'éthyle successivement à l'eau ( 3 fois), avec du bicarbonate de sodium aqueux (p H 7), et avec de l'eau On sèche la couche acétate d'éthyle sur du sulfate de sodium et on la concentre en un résidu ( 515 mg) que l'on utilise sans autre purification dans la réaction suivante. C) 2-oxo-( 3 S)-lphényllacétyl(amino)llazétidine A une solution de 911 mg ( 2,86 mmoles) du composé ci- dessus dans 21 ml de méthanol, on ajoute 3,5 ml d'eau, puis 383 mg ( 2,86 mmoles) de carbonate de potassium On agite le mélange sous azote pendant une minute, puis on ajoute 160 mg ( 4,30 mmoles) de borohydrure de sodium On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 20 minutes On chasse le méthanol sous vide, et on reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle et une petite quantité d'eau Puis on ajuste le p H à 2, 5 On lave la couche acétate d'éthyle à p H 7,0 avec du bicarbonate de sodium aqueux puis avec un petit volume d'eau, et enfin, on la sèche sur du sulfate de sodium et on la fait évaporer pour obtenir le produit brut ( 493 mg) L'addition d'une petite quantité d'acétate d'éthyle donne 250 mg (rendement 43 %) du produit cristallin voulu On peut obtenir des quantités supplémentaires de produit par cristallisation ou chromatographie. D) Sel de potassium du (S)-N-( 2-oxo-1-sulfo 3-azétidinyl)- 2-phénylacétamide On ajoute un complexe de pyridine-SO 3 ( 215 mg; 1,35 mmole) à une solution agitée de 251 mg ( 1,23 mmole) du produit ci-dessus dans 2 ml de diméthylformamide sec et 2 ml de chlorure de méthylène sec, sous azote à la température ambiante On agite le mélange pendant 3 heures On chasse les solvants sous vide, et on reprend le résidu dans un mélange de chlorure de méthylène et d'eau On ajuste le p H à 6,5 à l'aide de potasse 2 N On lave la couche aqueuse avec du chlorure de méthylène ( 3 fois), on la filtre et on concentre en un résidu On agite ce résidu avec 20 ml de méthanol, et on sépare par filtration le sulfate de potassium On concentre le filtrat en un résidu que l'on agite avec 10 à 15 ml de méthanol On recueille les matières solides pour obtenir 49 ml du composé du titre, point de fusion 189 C, décomposition. Analyse pour Cll Hl N 2055 K: Calculé: C, 40,99; H, 3,44; N, 8,69; S, 9, 93 Trouvé: C, 45,96; H, 3,83; N, 9,86; S, 8,99. Le composé a des caractéristiques spectrales identiques à celles du produit obtenu dans la méthode II ci-dessous. Méthode II: - On agite dans une atmosphère d'hydrogène, pendant 2 heures, une solutionde 660 mg de sel de potassium d'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidine- sulfonique (voir l'Exemple 3) dans 13 ml d'eau, avec 200 mg de palladium à 10 % sur charbon On filtre le catalyseur et on dilue le filtrat avec un égal volume d'acétone puis on refroidit dans un bain de glace En 30 minutes, on ajoute du chlorure de phénylacétyle (huit fractions de 40 pi) et une solution de bicarbonate de potassium à 10 % (p H maintenu entre 5, 2 et 5,8) Au bout de 40 minutes, on concentre la solution sous vide pour éliminer l'acétone et on l'applique sur une colonne de 200 ml de "HP-20 " L'élution avec de l'eau, puis avec un mélange 9:1 d'eau et d'acétone, donne mg de produit brut après examen par chromatographie en couche mince des fractions positives au test de Rydon, puis par rassemblement et évaporation La cristallisation dans un mélange de méthanol et d'éther donne 101 mg du composé du titre, point de fusion 210 C, décomposition. Analyse pour C Hl N 25 SK /2 H 20 il il 2 S K /21 Calculé: C, 39,86; H, 3, 65; N, 8,45;S, 9,68; K, 11,80 Trouvé: C, 40,01; H, 3,37;N, 8,59;S, 9,59; K, 11,98 RMN(D 20) 3,66 (s,3), 3,67 (d de d,)= 6,4), 3,90 (t,j=j), 4,90 (d de d, j= 6,4), 7,36 ppm (m 5). Méthode III: A une solution de sel de tétrabutylammonium d'acide -(S)-3amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 121 mg; voir l'Exemple 6 A) dans 3 ml de chlorure de méthylène sec, on ajoute 40 mg d'acide phénylacétique et 61 mg de dicyclo- hexylcarbodiimide On agite le mélange pendant 48 heures à la température ambiante et on le filtre pour éliminer la dicyclohexylurée On chasse le solvant sous vide et on reprend dans l'acétone le composé résiduel, on filtre et on fait précipiter le composé du titre par addition de 5 ml d'acétone saturée d'iodure de potassium On fait décanter le surnageant, on lave le résidu 3 fois avec de l'acétone et, après séchage, on obtient 48 mg de produit, dont les caractéristiques spectrales sont en accord avec celles des produits des Méthodes I et II ci-dessus. Méthode IV: On agite dans une atmosphère d'hydrogène une solution de 2,83 g de sel de pyridine d'acide (S)-2-oxo-3-Ul(phényl - méthoxy)carbonyllamino-l-1-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 2) dans 36 ml dleau, avec 707,5 mg de palladium à % sur charbon ( 175 ml d'hydrogène sont absorbés) Au bout de 2 heures, on filtre la suspension et on refroidit le filtrat à O C puis on le dilue avec 46 ml d'acétone (p H ini- tial = 4,25 ajusté à p H 6,7 avec une solution froide de bicarbonate de potassium à 10 %) On ajoute goutte à goutte, en 15 minutes, une solution de 2,4 ml de chlorure de phényl- acétyle dans 10 ml d'acétone On maintient le p H entre 5,2 et 5,8 par addition simultanée d'une solution froide de bicarbonate de potassium à 10 % Au bout de 45 minutes, on dilue la suspension avec 93 ml de phosphate de potassium 0,5 M (p H = 4,2) et on concentre pour éliminer l'acétone On filtre la suspension et on la lave à l'eau On réunit le filtrat et les eaux de lavage etlon les fait passer dans une colonne de "HP-20 " de 450 ml L'élution avec un litre de phosphate de potassium 0,5 M (p H = 4,2), un litre d'eau, puis 2,5 litres d'un mélange 9:1 d'eau et d'acétone, donne 1,285 g du composé du titre dans les fractions 14 à 19 (les fractions 1 à 15 étaient de 200 ml, les fractions 16 à 21 étaient de 100 ml) Les données spectrales sont en accord avec celles obtenues dans les méthodes précédentes. Exemple 2 Sel de pyridine ( 1:1) de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfoniaue Méthode I: A) 1-l( 1 R)-carboxy-2-méthylb(propyl)l-2-oxo-( 3 S)-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminolazétidine On ajoute, en une seule fois, une suspension d'acide 6-aminopénicillanique ( 12,98 g; 0,06 mole) dans 140 ml d'eau contenant 5,18 g de bicarbonate de sodium (agitée pendant 10 minutes environ sans dissolution complète), à une suspension bien agitée (agitateur mécanique) de nickel Raney (lavée avec de l'eau à p H 8,0, 260 ml de suspension = 130 g) dans un bain d'huile à 70 C Au bout de 15 minutes, on refroidit la suspension, on la filtre, et on traite le - filtrat par 5,18 g de bicarbonate de sodium et par une solu- tion de 11,94 g ( 0,07 mole) de chloroformiate de benzyle dans 12 ml d'acétone Au bout de 30 minutes, on acidifie la solution à-p H 2,5 et on l'extrait au chlorure de méthylène. On sèche la couche organique, on la concentre, et on la triture avec un mélange d'éther et d'hexane pour obtenir un total de 6,83 g du composé du titre. B) 1-l(acétyloxy)-2-méthyl(propyl)l-2-oxo-( 3 S)-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminolazétidine On traite une solution de 6,83 g ( 0, 0213 mole) de l'acide ci-dessus dans 213 ml d'acétonitrile par 1,95 g ( 0, 0107 mole) d'acétate cuivrique monohydraté et par 9,5 g ( 0,0213 mole) de tétraacétate de plomb On plonge la sus- pension dans un bain d'huile à 65 C et on l'agite en faisant barboter un courant d'azote dans la suspension jusqu'à ce que le produit de départ soit consommé On filtre la suspen- sion et on lave les matières solides avec de l'acétate d'éthyle On concentre sous vide le filtrat et les eaux de lavage réunis et on reprend le résidu dans 100 ml d'acétate d'éthyle et 100 ml d'eau et on ajuste le p H à 7 On sépare la couche acétate d'éthyle, on la sèche et on la fait éva- porer pour obtenir 6,235 g du composé du titre. C) Ester phénylméthylique de l'acide (S)-( 2-oxo-3- azétidinyl)carbamique On refroidit à -15 C une solution de 3,12 g ( 0, 0093 mole) de l'acétate ci-dessus dans 70 ml de méthanol et 7 ml d'eau, et on ajoute 1,33 g de carbonate de potassium et 349 mg de borohydrure de sodium On agite le mélange réac- tionnel à une température de -15 C à O C Une fois la réaction complète ( 2 heures environ), on neutralise le mélange à p H 7 avec de l'acide chlorhydrique 2 N et on le concentre sous vide On ajuste le concentré à p H 5,8, on le sature de sel et on l'extrait à l'acétate d'éthyle ( 3 fois) On sèche la couche organique et on la fait évapo- rer sous vide On réunit le résidu avec la substance prove- nant d'une expérience similaire et on triture le tout avec de l'éther pour obtenir 3,30 g du composé du titre. D) Sel de pyridine de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique Méthode I: On agite pendant 2 heures sous azote une solution de 440 mg ( 0,002 mole) de l'azétidinone ci-dessus dans 2 ml de chlorure de méthylène sec et 2 ml de diméthylformamide sec, avec 350 mg ( 0,0022 mole) d'un complexe de pyridine et de trioxyde de-soufre On chasse ensuite sous vide la majeure partie du solvant et on triturée le résidu avec de l'acétate d'éthyle pour obtenir 758 mg de solide, qui est constitué principalement du composé du titre. RMN(D 20-CD 3 OD) 3,63 ( 1 H, d de d, J= 6,4), 3,90 ( 1 H, t, 1 = 6), 4, 85 ( 1 H, d de d, j= 6,4), 5,10 ( 2 H,S), 7,27 ( 5 H,S) 8,0-9,0 ppm (m's 5 H). Méthode II:l On ajoute goutte à goutte, à -20 C, 18,87 g d'ester chlorosulfonyltriméthylsilylique à 7,9 g de pyridine anhydre, en agitant sous une atmosphère d'azote Une fois l'addition terminée, on continue l'agitation pendant 30 minutes à la température ambiante, puis on chasse le triméthylchloro- silane sous vide On ajoute une solution de 20 g de l'azétidinone cidessus (Méthode I, partie C) dans 120 ml de diméthylformamide et 120 ml de chlorure de méthylène, et on continue l'agitation à température ambiante pendant trois heures et demie On chasse le solvant par distillation sous vide et on fait cristalliser le résidu huileux en lui ajou- tant de l'acétate d'éthyle, ce qui donne 31 g du composé du titre Les données RMN sont identiques à celles du produit obtenu par la Méthode I. Exemple 3 Sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)- carbonyllamino-l-1-azétidinesulfonique Méthode I: On dissout du sel de pyridine d'acide (S)-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique ( 135 mg; voir l'Exemple 2) dans 2 ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M (ajusté à p H 5,5 avec de la soude 2 N), et on fait passer la solution dans une colonne de 25 ml de "HP-20 AG" On élue cette colonne avec 100 ml d'un tampon, 200 ml d'eau et 100 ml d'un mélange 1:1 d'acétone et d'eau Les fractions 14 et 15 ( 25 ml) sont extrêmement positives au test de Rydon L'évaporation donne 80 mg de substance qui est constituée principalement par le composé du titre (données spectrales identiques à celles du composé obtenu par la méthode ci-dessous). Méthode II: On dissout du sel de pyridine d'acide (S)-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique ( 600 mg; voir l'Exemple 2) dans 2 ml d'eau et on mélange la solution avec 15 ml d'un tampon de phosphate de potassium monobasique à p H 5,5 Il se forme un solide, et on refroi- dit la suspension à O C, on la filtre, on la lave avec un tampon froid, de l'éthanol à 50 % froid, de l'éthanol et de l'éther, pour obtenir 370 mg du composé du titre (contenant un excès d'ion potassium d'après l'analyse) On fait passer une solution de 280 mg de ce sel dissous dans 10 ml d eau, dans une colonne de 100 ml de "HP-20 " On élue cettecolonne avec 200 ml d'eau puis avec un mélange 9:1 d'eau et d'acétone On rassemble les fractions ( 50 ml); l'évapora- tion de la fraction 7 donne un solide La trituration avec de l'acétone, la filtration et le séchage sous vide donnent 164 mg du composé du titre, point de fusion 193-196 C. Analyse pour Cll Hll N 206 SK 1/2 H 20: Calculé: C, 38,02; H, 3,48; N, 8, 06; S, 9,23; K, 11,25 Trouvé: C, 38,19; H, 3,24; N, 8,15; S, 9,12; K, 11,53. RMN(D 20) 3,69 ( 1 H, d de d, j= 6,4), 3,91 ( 1 H, t, J= 6), 4,76 ( 1 H, m), 5,16 ( 2 H,S), 7,43 ppm ( 5 H,S). Méthode III: On met en suspension dans 200 ml d'acétonitrile de l'ester phénylméthyiique d'acide (S)-( 2-oxo-3-azétidinyl)- carbamique ( 20,0 g, voir l'Exemple 2 C), on ajoute 21,6 ml ( 25,3 g) de monotriméthylsilyltrifluoracétamide, et on chauffe le mélange à 50 C en agitant pendant une heure. Après refroidissement dans un bain de glace à O C, on ajoute goutte à goutte 17,2 g de chlorosulfonate de triméthylsilyle et on agite la solution à la température ambiante pendant 6 heures On a joute à la solution 24,2 g d'éthylhexanoate de potassium dans 100 ml de butanol et on continue l'agita- tion pendant encore une heure On verse la suspension dans un litre d'éther diéthylique sec et on sépare le précipité par filtration puis on'le sèche sous vide On dissout le composé dans 500 ml d'eau, on ajuste le p H à 5,0 avec du carbonate de potassium, on sépare par filtration la matière insoluble et on fait subir à la liqueur mère une cryodessi- cation Le rendement du composé brut est de 19,4 g Le composé contient de petites proportions de chlorure de potassium que l'on élimine par chromatographie, les données spectrales étant identiques à celles du produit obtenu par la méthode II. Exemple 4 Sel de tétrabutylammonium ( 1:1) de l'acide (S)-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique Méthode I: On dissout dans 800 ml d'eau le sel de pyridine ( 1:1) de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1- azétidinesulfonique ( 34,3 g; voir l'Exemple 2) On éclair- cit la solution avec du charbon, on ajoute 30,7 g d'hydrogénosulfate de tétrabutylammonium dans 80 ml d'eau, et on ajuste le p H à 5,5 avec de la potasse i N On chasse le solvant sous vide jusqu'à ce que le volume ne soit plus que de 200 ml environ On sépare par filtration le sel de tétrabutylammonium précipité et on le sèche sous vide On peut recristalliser le composé dans de l'eau ou le dissoudre dans du chlorure de méthylène, puis le filtrer et le faire précipiter par addition d'éther Rendement 34,3 g, point de fusion 108-110 C. Méthode II On dissout le sel de potassium ( 1:1) de l'acide (S)- 2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfoni- que ( 20,2 g; voir l'Exemple 3) dans 500 ml d'eau, on filtre et on ajoute 20,3 g d'hydrogénosulfate de tétrabutylammonium dans 100 ml d'eau On porte le p H à 5,5 avec de la potasse 1 N On réduit sous vide le volume à 100 ml environ et on sépare par filtration le sel de tétrabutylammonium précipité. On dissout le composé dans 30 ml de chlorure de méthylène, on le filtre et on le fait précipiter par addition d'éther, ce qui donne 21 g du composé du titre, point de fusion 109-1110 C. Exemple 5 Sel de potassium ( 1:1) de l'ester phénylméthylique de l'acide ( 3 S)-a-ll( 2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)aminolcarbonyll- benzèneacétique A) (S)-3-amino-2-azétidinone On hydrogène l'ester phénylméthylique de l'acide (S)-( 2-oxo-3-azétidinyl)carbamique ( 3 g; voir l'Exemple 2 C) dans 100 ml de méthanol, en présence de 1 g de palladium sur charbon servant de catalyseur Une fois que la quantité théorique d'hydrogène a été absorbée, on sépare le catalyseur par filtration et on concentre le filtrat à siccité Au repos, 1,1 g du composé du titre cristallise. B) Ester phénylméthylique de l'acide ( 3 S)-a-ll( 2-oxo-3- azétidinyl)aminolcarbonyllbenzèneacétique On dissout l'azétidinone cidessus ( 3,0 g) dans 100 ml de diméthylformamide On refroidit la solution à O C et on ajoute 4,5 g de N-méthylmorpholine, puis (goutte à goutte) ,8 g d'ester phénylméthylique d'acide a-(chlorocarbonyl)- benzèneacétique dans 50 ml d'acétonitrile, en agitant On agite le mélange pendant 16 heures environ à 5 C On chasse le solvant par distillation sous vide et on ajoute 100 ml d'eau au résidu On extrait la suspension aqueuse deux fois avec des fractions de 100 ml de chlorure de méthylène On réunit les couches organiques, on les lave avec du bicarbo- nate de sodium, de l'acide phosphorique 2 N et de l'eau, on les sèche sur du sulfate de sodium, on les filtre et on les fait évaporer à siccité On fait cristalliser le résidu avec de l'acétate d'éthyle et de l'éther de pétrole, ce qui donne 8,7 g du composé du titre, point de fusion 164-166 C. C) Sel de potassium ( 1:1) de l'ester phénylméthylique de l'acide ( 3 S)-a-ll( 2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)aminolcarbonyll- benzèneacétique On met en suspension dans 150 ml d'acétonitrile 6,9 g du composé ci-dessus On ajoute 5,7 g de monotriméthyl _ silyltrifluoracétamide et on chauffe la solution pendant 30 minutes à 50 C en agitant On refroidit la solution à 00 C _. et on ajoute goutte à goutte 3,9 g de chlorosulfonate de triméthylsilyle Une fois l'addition terminée, on chauffe le mélange à 50 C pendant 5 heures Aprè's refroidissement à C, on ajoute 7,6 g d'éthylhexanoate de potassium dans ml de butanol et on continue l'agitation pendant 30 minu- tes Par addition de 300 ml d'éther, le composé du titre précipite, et on le sépare par filtration On agite le produit brut avec 100 ml d'acétonitrile sec pendant 30 minu- tes et on sépare par filtration, ce qui donne 4,5 g du composé du titre, point de fusion 118-120 C Une nouvelle purification du produit brut par chromatographie sur "HP-20 ", suivie d'une cryodessication, donne une substance pure dont le point de fusion est de:-i 88-190 C. Exemple 6 Sel de potassium de l'acide (S)-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- acétyilaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo- 1-azétidinesulfonique On dissout dans 100 ml de diméthylformamide le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique ( 2 g; voir o;, Z 509299 l'exemple 4), et on l'hydrogène pendant 30 minutes environ en utilisant comme catalyseur 1 g de palladium sur charbon ( 10 %) On sépare le catalyseur par'filtration et on chasse le diméthylformamide, ce qui laisse subsister le composé du titre sous la forme d'une huile. RMN (CDC 13) 3,82 ( 1 H, t, j= 5,5),4,05 (d 1 H, d de d, j= 5,5, 2,5 cps). B) Sel de potassium de l'acide (S)-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite à O C dans 100 ml de diméthylformamide sec 2 g du composé ci-dessus, 0,5 g d'acide aminothiazole acéti- que et 0,4 g d'hydroxybenzotriazole, en même temps que l'on ajoute goutte à goutte une solution de 0,7 g de dicyclo- hexylcarbodiimide dans 10 ml de diméthylformamide Une fois l'addition terminée, on continue l'agitation pendant 12 heures à 20 C On sépare par filtration l'urée insoluble et on fait évaporer le solvant sous vide On traite le résidu huileux par une solution de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 20 ml d'acétone à la température ambiante pendant 15 minutes Après addition de 200 ml d'éther di- méthylique, le composé du titre précipite, on le sépare par filtration, on le sèche et on le purifie sur une colonne de chromatographie contenant 300 ml de "HP-20 ", en utilisant l'eau comme éluant Le rendement est de 850 mg du composé du titre, point de fusion> 300 C. Exemple 7 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-ll(formyloxy)phényl- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On refroidit a O C le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 1, 5 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide et 2 ml d'oxyde de propylène On ajoute goutte à goutte, en agitant, une solution de chlorure d'acide O-formylmandélique dans ml d'acétonitrile On maintient la température pendant 1 heure puis on chasse le solvant par distillation sous vide. On traite le résidu huileux par une solution de 2 g de perfluorohutane sulfonate de potassium dans 15 ml d'acétone. Après addition de 200 ml d'éther, le composé du titre cris- tallise, on le filtre, ce qui donne 1,5 g de produit On purifie le produit par chromatographie sur "HP-20 ", p f. -185 C, avec décomposition. Exemple 8 Sel de potassium de l'acide l 3 S(+)l-3-ll(formyloxy)phényl- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 7, mais en remplaçant le chlorure d'acide O-formylmandélique par le chlorure d'acide D-O-formylmandélique, on obtient le composé du titre, point de fusion 120-125 C après cryodessication. Exemple 9 Sel de potassium de l'acide l 3 S(-)l-3-ll(formyloxy)phényl- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 7 mais en remplaçant le chlorure d'acide O-formylmandélique par le chlorure d'acide L-O-formylmandélique, on obtient le composé du titre, contenant 1 mole d'eau, point de fusion 203-205 C. Apres séchage soigneux, le produit fond à 228-2300 C. Exemple 10 Sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-l( 1-oxo-octyl)aminol- 1-azétidinesulfonique On refroidit à O C le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo l-azétidinesulfonique ( 1,5 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide et 2 ml d'oxyde de propylène A cette température, on ajoute goutte à goutte une solution de 0,8 g de chlorure d'acide capryli- que dans 20 ml d'acétone sèche, et on continue l'agitation pendant 30 minutes On fait évaporer le solvant sous vide et on traite le résidu huileux par 2 g de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 15 ml d'acétone On chasse l'acétone par distillation sous vide On dissout le résidu dans 5 ml d'eau et on lui fait subir une chromatographie sur 300 ml de résine "HP-20 " en utilisant comme éluant un mélan- ge 9:1 d'eau et d'acétone, ce qui donne 0,9 g du composé du titre, point de fusion 173-180 C, après cryodessication. Exemple 11 Sel de potassium de l'acide l 3 S (Z)l -3-l ( 2-amino-4-thiazolyl)- lllhydroxy(phénylméthoxy)phosphinyllméthoxylliminolacétyll- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite pendant 24 heures à la température ambiante le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo- 1-azétidinesulfonique ( 0,8 g; Voir l'Exemple 6 A) dans ml de diméthylformamide, 0,9 g d'acide (Z)-2-amino-a- lllhydroxy(phénylméthoxy)phosphinyllméthoxyliminol-4- thiazoleacétique, 0,3 g d'hydroxybenzotriazole et 0,7 g de dicyclohexylcarbodiimide On sépare par filtration l'urée précipitée et on chasse le solvant sous vide On traite l'huile restante par une quantité équivalente de perfluoro- butane sulfonate de potassium dans 10 ml d'acétone On sépare par filtration le composé du titre et on le purifie sur résine "HP-20 " en utilisant l'eau comme éluant, ce qui donne 500 mg de produit, point de fusion 210-215 C, avec décomposition. Exemple 12 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- (éthoxyimino)acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite à la température ambiante pendant 24 heures le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo- 1-azétidinesulfonique ( 1,5 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide, 0,6 g d'hydroxybenzotriazole, 1 g de dicyclohexylcarbodiimide et 0,8 g d'acide (Z)-2- amino-a-(éthoxyimino)-4-thiazoleacétique On chasse le solvant par distillation et on dissout le résidu dans 30 ml d'acétone On sépare l'urée par filtration et on traite la liqueur mère par une solution de 2 g de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 20 ml d'acétone Après addition de 200 ml d'éther, le composé du titre précipite, on le sépare par filtration et on le sèche On réalise la purifi- cation par chromatographie sur colonne de "HP-20 " en utili- sant l'eau comme éluant, ce qui donne 1,1 g du composé-du titre, point de fusion 180-185 C, avec décomposition. *Exemple 13 Sel de potassium de l'acide l 3 S(E)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(éthoxyimino)acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfo- nique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 12, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-(éthoxyimino)-4- thiazoleacétique par l'acide (E)-2-amino-c-(éthoxyimino)-4- thiazoleacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 160-170 C après cryodessication. Exemple 14 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- ( 2,2,2-trifluoréthoxy)iminolacétyllaminol-2-oxo-1-azétidine- sulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 12, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-(éthoxyimino)-4- thiazoleacétique par l'acide (Z)-2-amino-a-l( 2,2,2-trifluor- éthoxy)iminol-4-thiazoleacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 160-170 C après cryodessication. Exemple 15 Sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-l( 1-oxopropyl)aminol- 1-azétidinesulfonique Méthode I: On refroidit à O C en agitant le sel de tétrabutyl- ammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 1,5 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide sec et 4 ml d'oxyde de propylène A cette température, on ajoute goutte à goutte 0,5 g de chlorure d'acide propionique dans 10 ml d'acétonitrile et on agite le mélange pendant 2 heures On chasse le solvant par distillation sous vide et on traite le résidu huileux par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 5 ml d'acé- tone Par addition d'éther, le composé du titre cristallise on le filtre, ce qui donne 0,8 g de produit, point de fusion 140 C après cryodessication. Méthode II: On hydrogène le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidine- sulfonique ( 4 g; voir l'Exemple 4) dans 100 ml de diglyme avec 1 g de palladium sur charbon cbmme catalyseur L'hydro- génation est complète au bout de 2 heures et demie On sépare le catalyseur par filtration et on ajoute 2 ml d'oxyde de propylène Après refroidissement -à O C, on ajoute en agi- tant 0,5 g de chlorure d'acide propionique dans 10 ml de diglyme sec Au bout de 30 minutes, on chasse le solvant sous vide et on traite le résidu huileux par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans ml d'acétone Après addition d'éther, le composé du titre cristallise, on le filtre et on le recristallise dans un mélange d'eau et d'acétone, ce qui donne 0,9 g de produit, point de fusion 156 -160 C (décomposition). Exemple 16 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-l(hydroxyphénylacétyl)- aminoli-2oxo-1-azétidinesulfonique On agite le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 1,5 g; voir l'exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide sec pendant 16 heures environ avec 1, 5 g de dicyclohexylcarbodiimide, 0,5 g d'hydroxybenzotriazole et 0,6 g d'acide mandélique. On chasse le solvant sous vide et on dissout le résidu dans ml d'acétone On sépare par filtration l'urée précipitée et on traite la liqueur mère par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium Après addition d'éther, le composé du titre précipite, on le sépare par filtration, ce qui donne 1,4 g de produit brut Après recris- tallisation dans l'eau, le produit a un point de fusion de 138 -140 C. Exemple 17 Sel de potassium de l'acide (S)-3-lll(cyanométhyl)thiol- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout dans 70 ml d'acétonitrile le sel de tétra- butylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfo- nique ( 1,5 g; voir l'Exemple 6 A) et 0,72 g d'acide l(cyanométhyl) thiolacetique, et on ajoute goutte à goutte une solution de 1,04 g de dicyclohexylcarbodiimide dans de l'acétonitrile On agite le mélange pendant 16 heures envi- ron à O C et on sépare par filtration la dicyclohexylurée précipitée, on fait évaporer le filtrat et on dissout le résidu huileux dans de l'acétone Par addition d'une solu- tion saturée d'iodure de potassium dans de l'acétone, on fait précipiter le composé du titre, ce qui donne 1,1 g de produit, point de fusion 150-155 C. Exemple 18 Sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-l( 1 H-tétrazol-l-yl- acétyl)aminol-l-azétidinesulfonique A une solution de 0,005 mole de sel de tétrabutyl- ammonium d'acide (S)-3-amino-2-oxo-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A) dans 70 ml de diméthylformamide, on ajoute 0,77 g d'acide 1 H-tétrazole-l-acétique et une solu- tion de 1,13 g de dicyclohexylcarbodiimide dans 5 ml de diméthylformamide On agite le mélange pendant 16 heures environ à la température ambiante et on chasse le solvant sous-vide On dissout l'huile restante dans 20 ml d'acétone et on la traite par 0,006 mole d'une solution de perfluoro- butane sulfonate de potassium dans de l'acétone, ce qui donne 1,5 g du composé du titre, point de fusion 170 -1750 C, avec décomposition. Exemple 19 Sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-l( 2 H-tétrazol-2-yl- acétyl)aminol-l-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 18, mais en remplaçant l'acide 1 H-tétrazole-l-acétique par l'acide 2 H-tétrazole-2-acétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 175 177 C avec décomposition. Exemple 20 Sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-l( 2-thiénylacétyl) aminol-l-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 18, mais en remplaçant l'acide 1 H-tétrazole-l-acétique par l'acide 2thiophêneacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 180 -190 C avec décomposition. Exemple 21 - Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- (méthoxyimino)acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On refroidit à O C le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1azétidinesulfonique (préparé comme décrit dans l'Exemple 6 A à partir de 7,9 g de sel de tétrabutylammonium d'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)- carbonyllaminol-1-azétidinesulfonique, et on ajoute 3,53 g d'acide (Z)-2amino-a-(méthoxyimino)-4-thiazoleacétique, puis une solution de 3,27 g de dicyclohexylcarbodiimide dans 10 ml de diméthylformamide On agite le mélange pendant 16 heures à 5 C, on le filtre et on chasse le solvant sous vide On dissout le résidu dans de l'acétone et on filtre. Par addition de 60 ml d'une solution à 10 % de perfluoro- butane sulfonate de potassium dans l'acétone, on fait cristalliser 4,7 g de produit brut On purifie ce produit brut par chromatographie sur "HP-20 ", de granulométrie 74 à 149 y, pour obtenir 3,0 g du composé du titre, point de fusion 235 C. Exemple 22 Sel dipotassique de l'acide ( 3 S)-a-ll( 2-oxo-1-sulfo-3- azétidinyl)aminolcarbonyllbenzèneacétique On dissout dans 20 ml de méthanol anhydre le sel de potassium de l'ester phénylméthylique de l'acide ( 35)-a- ll( 2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)aminolcarbonyllbenzèneacétique ( 100 mg; voir l'Exemple 5) On ajoute du palladium sur charbon ( 10 mg, 10 %), et on traite le mélange par l'hydro- gène pendant 15 minutes On sépare le catalyseur par fil- tration, et on fait évaporer le méthanol sous vide On dissout le résidu dans 5 ml d'eau et on ajuste le p H à 6 avec de la soude 1 N Après cryodessication, on obtient un produit brut On fait subir à cette matière brute une chro- matographie sur résine "HP-20 " (en utilisant l'eau comme éluant), ce qui donne 60 mg du composé du titre, point de fusion 80 -85 C. Exemple 23 Sel de potassium de l'acide (S)-3-(acétylamino)-2-oxo-1- azétidinesulfonique Méthode I: A) Sel de potassium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1- azétidinesulfonique On dissout le sel de potassium de l'acide (S)-3- (benzyloxycarbonylamino)-2-oxo-1-azétidinesulfoniqcue ( 169 mg; voir l'Exemple 3) dans 4,0 ml d'eau, et on l'hydrogène sur 37 mg de palladium à 10 % sur charbon pendant 1 heure 40 mi- nutes On sépare le catalyseur par filtration et on le lave avec 1 ml d'acétone aqueuse à 50 %. B) Sel de potassium de l'acide (S)-3-acétylamino)-2-oxo-1- azétidinesulfonique On dilue la solution ci-dessus de l'amine libre avec 3,5 ml d'acétone et on l'agite dans un bain de glace On ajoute 320 pl de chlorure d'acétyle, en 15 minutes environ, par petites fractions, en faisant alterner l'addition de bicarbonate de potassium solide pour maintenir le p H entre 6,5 et 7,2 Au bout de 30 minutes, une chromatographie en couche mince sur gel de silice dans un mélange ( 19:1) d'acétone et d'acide acétique et le test de Rydon indiquent que la réaction est pratiquement terminée On ajoute alors 6 ml de tampon phosphate de potassium monobasique 0,5 M de p H 5,5, et on acidifie la solution à p H 4,8 avec de l'acide chlorhydrique 2 N On chasse l'acétone sous vide et on fait passer la solution aqueuse ainsi obtenue dans une colonne de 50 ml de "HP-20 AG" pour obtenir 2,197 g d'un solide. On fait digérer ce-solide par du méthanol pour obtenir 282 mg d'une substance extractible qui contient encore un peu de sel On fait subir au produit une nouvelle purifica- tion par passage dans une colonne "IRC-50 ", puis par acidi- fication à p H 3,8 avec concentration ultérieure à siccité sous vide La trituration avec de l'acétone donne 64 mg du produit voulu contenant environ 0,5 équivalent de sels de potassium minéraux Le passage final dans une colonne de ml de "HP-20 AG", suivi d'une lyophilisation à partir de 0,5 ml d'eau, donne 22 mg de produit sous la forme d'une poudre amorphe que l'on sèche sous vide pendant 2 heures à C, point de fusion 170-180 C après ramollissement à C. Analyse pour C 5 H 705 N 25 K, C 5 H 7 5 2 Calculé: C, 24,38; H, 2,87; N, 11,37; K, 15,9 Trouvé: C, 26,06; H, 3,14; N, 9,96; K, 18,04. Méthode II: On hydrogène une solution de 2,0 g de sel depyridine d'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1- azétidinesulfonique (voir l'Exemple 2) dans 25 ml d'eau, sur 500 mg de palladium à 10 % sur charbon Au bout de 2 heures, on filtre la solution, on la refroidit à O C et on ajoute 40 ml d'acétone On maintient le p H de la solu- tion entre 5,2 et 5,8 par addition simultanée de chlorure d'acétyle et d'une solution froide de bicarbonate de potassium-à 10 % On ajuste le p H de la solution à 4,2 avec du chlorure d'acétyle et on concentre la solution dans un évaporateur rotatif pour éliminer l'acétone La chroma- tographie sur une colonne de 300 ml de "HP-20 AG" (en uti- lisant l'eau comme éluant et en prenant des fractions de 25092 '99 ml) donne 900 mg du composé du titre dans les fractions 13 et 14, contaminé par un peu d'acétate de potassium Une nouvelle chromatographie sur "HP-20 AG" donne un échantillon analytique, point de fusion 205-210 C. Analyse pour C 5 H 7 N 2055 K: Calculé: C, 24,38; H, 2,86; N, 11,38; S, 13,02; K, 15,88 Trouvé: C, 24,23; H, 2,81; N, 11,25; S, 12,86; K, 15,74 Exemple 24 Sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-l(phénoxyacétyl)- aminol-l-azétidinesulfonique On refroidit à O C le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 1, 5 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide sec On ajoute 2 ml d'oxyde de propylène, puis, goutte à goutte, 1 g de chlorure de phénoxyacétyle, en agitant La réaction est terminée au bout d'une heure On chasse le solvant sous vide et on traite le résidu par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 20 ml d'acétone. Par addition d'éther, on fait cristalliser le composé du titre ( 1 g) que l'on sépare par filtration et que l'on sèche Après recristallisation dans l'eau bouillante, le composé du titre a un point de fusion de 176 -180 C. Exemple 25 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 3-l( 2-furanyl- méthylène)aminol-2-oxo-1-imidazolidinyllcarbonyllaminol- phénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On hydrogène le sel de tétrabutylammoniumde l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidine- sulfonique ( 3 g; voir l'Exemple 4) dans 100 ml de diméthyl- formamide avec 1,5 g de palladium sur charbon comme cataly- seur Au bout d'une demi-heure, on sépare le catalyseur par filtration et on ajoute 1,8 g de dicyclohexylcarbodiimide, 2 g d'acide (R)-a-lll 3-l( 2-furanylméthylène)aminol-2-oxo-1- imidazolidinylicarbonyllaminolbenzèneacétique et 0,9 g d'hydroxybenzotriale Au bout de 3 heures, on concentre le mélange réactionnel à siccité, on le dissout dans 50 ml d'acétone sèche et on sépare par filtration l'urée précipi- tée On ajoute une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 20 ml d'acétone, ce qui fait précipiter le composé du titre On complète la cristallisa- tion par addition de 200 ml d'éther Après filtration, on recristallise dans l'eau le composé du titre, ce qui donne un rendement de 2 g, point de fusion 220-225 C, avec décomposition. Exemple 26 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-2-oxo-3-llll( 2-oxo-1- imidazolidinyl)carbonyllaminolphénylacétyllaminol-l- azétidinesulfonique On hydrogène le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidine- sulfonique ( 3 g; voir l'Exemple 4) dans 100 ml de diméthyl- formamide sec avec 1,5 g de palladium sur charbon comme catalyseur; on sépare le catalyseur par filtration au bout de 30 minutes On ajoute 1,8 g d'acide (R)-a-ll( 2-oxo-1- imidazolidinyl)carbonyllaminolbenzèneacétique, 1,3 g de dicyclohexylcarbodiimide et 0,9 g d'hydroxybenzotriazole, et on agite la solution pendant 2 heures et demie On chasse le solvant sous vide et on dissout le résidu dans 50 ml d'acétone On sépare par filtration l'urée précipitée et on traite la liqueur mère par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 20 ml d'acétone. Le composé du titre cristallise et on le sépare par filtra- tion après avoir ajouté 200 ml d'éther, ce qui donne 1,8 g de produit, point de fusion 210 -215 C après recristallisa- tion dans un mélange d'eau et d'acétone. Exemple 27 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll(méthoxyimino)- phénylacétyllaminoll-2-oxo-1-azétidinesulfonique A) l 3 S(Z)l-3-ll(méthoxyimino)phénylacétyllaminol-2- azétidinone On dissout 3,58 g d'acide (Z)-a-(méthoxyimino)- benzèneacétique dans du chlorure de méthylène, on refroidit à 5 C et on traite par une solution de 4,53 g de dicylo- hexylcarbodiimide dans 50 ml de chlorure de méthylène On agite le mélange pendant 30 minutes à 5 C et on ajoute une solution de 1,72 g de 3-amino2-azétidinone (voir l'Exemple A) dans 100 ml de chlorure de méthylène On maintient le mélange réactionnel à 5 C pendant une heure et pendant deux heures à la température ambiante Après avoir éliminé la dicyclohexylurée par filtration, on fait évaporer le filtrat, ce qui donne 6,6 g de produit brut On purifie cette substance par chromatographie sur 750 g de gel de silice, en utilisant comme éluant un mélange ( 7:3) de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle, ce qui donne 2,9 de produit. B) Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll(méthoxyimino)- phénylacétyllaminol-2-oxo-l-azétidinesulfonique On dissout 0,5 ml de pyridine dans 5 ml de chlorure de méthylène absolu, on refroidit à -30 C et on ajoute une solution de 0,93 ml de chlorosulfonate de triméthylsilyle dans 5 ml de chlorure de méthylène On agite le mélange à la température ambiante pendant 30 minutes et on le concen- tre sous vide à siccité On dissout le résidu dans 10 ml de diméthylformamide et on le traite à la température ambiante par une solution de 1,23 g de l'azétidinone ci- dessus dans 10 ml de diméthylformamide Apres avoir agité pendant 2 heures à la température ambiante, on fait évapo- rer la solution à siccité pour obtenir 2,1 g de sel de pyridine brut de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll(méthoxyimino)phényl- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique. Le traitement de ce sel de pyridine par l'hydrogéno- sulfate de tétrabutylammonium donne le sel de tétrabutyl- ammonium correspondant, que l'on extrait avec du chlorure de méthylène et qui subsiste sous la forme d'une huile après évaporation. Le traitement du sel de tétrabutylammonium par une quantité équimolaire de perfluorobutane sulfonate de potassium dans l'acétone, l'évaporation, et le traitement du résidu par l'éther donnent 1,6 g du sel de potassium du titre, que l'on purifie par chromatographie sur "HP-20 ". On procède à l'élution avec un mélange 90:10 d'eau et d'acétone, ce qui donne un produit dont le point de fusion est égal à 220 C, avec décomposition. Exemple 28 Sel de potassium ( 1:1) de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)ll 2-(diphénylméthoxy)-l,1-diméthyl-2-oxo-éthoxyl- iminolaceétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On traite une solution de 0,005 mole de sel de tétra- butylammonium d'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinonesulfo- nique (voir l'Exemple 6 A) et de 0,006 'mole d'acide (Z)-2- amino-a-ll 2-(diphénylméthoxy)-1, 1-diméthyl-2-oxo-éthoxyl- iminol-4-thiazoleacétique dans 60 ml de diméthylformamide, par 0,7 g d'hydroxybenzotriazole et 1,13 g de dicyclohexyl- carbodiimide On agite le mélange pendant 16 heures environ à la température ambiante, on filtre et on fait évaporer le filtrat On dissout le résidu dans 30 ml d'acétone, on le filtre et on le traite par 20 ml d'une solution de per- fluorobutane sulfonate de potassium à 10 % dans l'acétone. Apres addition d'éther de pétrole, le composé du titre précipite et on le traite parl'éther puis on le filtre pour obtenir 3,8 g de produit, point de fusion 190 C, avec décomposition. Exemple 29 Sel dipotassique de l'acide l 3 S(z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l-1-carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-2- oxo-l-azétidinesulfonique On met en suspension dans 5 ml d'anisole le sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)ll 2- (diphénylméthoxy)-l,l-diméthyl-2-oxo-éthoxyliminolacétyll- aminol-2-oxo-l-azétidinesulfoniaue ( 2 g; voir l'Exemple 28), et on ajoute 25 ml d'acide trifluoracétique à -10 C On agite le mélange pendant 10 minutes à -10 C On ajoute lentement 100 ml d'éther à -10 C, puis 50 ml d'éther de pétrole On filtre le précipité pour obtenir 1,6 g du sel d'acide trifluoracétique On met ce sel en suspension dans ml d'eau à O C, on ajuste le p H à 5,5 avec de la potasse diluée et on purifie sur une colonne de "HP-20 " On élue le composé du titre avec de l'eau, et il a un point de fusion de 225 C, avec décomposition. Exemple 30 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)ll 2-(diphénylméthoxy)-2-oxo-éthoxyliminolacétyll- amino 3-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 28, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-ll 2-(diphényl- méthoxy)-1,1 l-diméthyl-2-oxo-éthoxyliminol-4-thiazoleacéti- que par l'acide (Z)-2-amino-a-ll 2-(diphênylméthoxy)-2-oxo- éthoxyliminol-4-thiazoleacétique, on obtient le composé 'du titre, point de fusion 180 C, avec décomposition. Exemple 31 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-l(azidophénylacétyl)- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique Méthode I: A) ( ,S)-a-azido-N-( 2-oxo3-azétidinyl)benzèneacétamide On dissout la (S)-3-amino-2-azétidinone ( 2, 15 g; voir l'Exemple 5 A) et 2,1 g de bicarbonate de sodium dans ml d'un mélange ( 2:1) d'acétone et d'eau On ajoute goutte a goutte 5 g de chlorure de ( )-a-azidobenzène- acétyle dissous dans 10 ml d'acétone, tout en maintenant la température entre O et 5 C et le p H à 6,8 avec du bicarbo- nate de sodium Après avoir agité pendant une heure, on chasse l'acétone par distillation et on ajuste la solution aqueuse restante à p H 8 avec du carbonate de sodium, puis on l'extrait avec trois fractions de 50 ml de chlorure de méthylène L'évaporation des couches organiques séchées sur sulfate de sodium donne 3,6 g du composé du titre, sous la forme d'une huile qui cristallise après trituration avec de l'éther La recristallisation dans un mélange de chlorure de méthylène et d'éther donne le composé du titre, point de fusion 97 -100 C. B) Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-l(azidiophényl- acétyl)aminôl-2-oxo-l-azétidinesulfonique On maintient pendant une heure à 40 C une solution de 2,45 g de l'azétidinone ci-dessus et de 3 g de monosilyl- trifluoracétamide dans 20 ml d'acétonitrile Après avoir refroidi t O C, on traite la solution par 1,88 g de chloro- sulfonate de triméthylsilyle et on agite pendant 5 heures sous argon Enfin, on ajoute 6,12 ml d'une solution 2 N de 2-éthylhexanoate de potassium dans du n-butanol et on continue l'agitation pendant 45 minutes On verse la solution dans 300 ml d'éther et on sépare le précipité par filtration On fait subir à une solution filtrée de 1,2 g de précipité dans un tampon de phosphate (p H 5,5) une chromatographie sur 100 ml de "HP-20 " On réalise l'élution avec: 1) 20 ml de tampon; 2) 200 ml d'eau; 3) 200 ml d'un mélange ( 9:1) d'eau et d'acétone; 4) 200 ml d'un mélange ( 3:1) d'eau et d'acétone On contrôle l'élution par chromatographie en couche mince (test de Rydon sur silice) On prend des fractions de 25 ml et, à partir des fractions 15 et 16, on obtient 280 mg du composé du titre Une seconde chromato- graphie sur colonne de cette substance donne 120 ml du composé du titre, point de fusion 148 C, avec décomposition. Méthode II: On dissout dans 30 ml d'acétonitrile le sel de tétra- butylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidine- sulfonique ( 2,03 g; voir l'Exemple 6 A) et 0,9 g d'acide ( )-aazidobenzèneacétique, et on ajoute une solution de 1,03 g de dicyclohexylcarbodiimide dans 10 ml d'acétonitrile. On maintient la température à O C pendant une heure et à la température ambiante pendant 10 heures Après avoir séparé par filtration le précipité résultant, on chasse le solvant par distillation sous vide et on dissout le résidu huileux dans 20 ml d'acétone puis on le traite par 1,70 g de per- -fluorobutane sulfonate de potassium dans l'acétone L'addi- tion de 10 ml d'éther fait cristalliser le composé du titre, point de fusion 149 C, avec décomposition. Méthode III: On ajoute 2,5 g de chlorure d'"-azidiophénylacétyle à une solution de 4,06 g de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-2-oxo-1azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A) et de 5 g d'oxyde de propylène dans 30 ml d'acétonitrile. Apres agitation pendant deux heures, on chasse le solvant par distillation sous vide et on traite le résidu huileux par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans l'acétone Apres addition d'éther, le composé du titre cristallise et on le filtre, point de fusion 148 149 C, avec décomposition. Exemple 32 Sel de potassium de l'acide l 3 S(D)l-3-lllll( 4-méthoxy- phényl)méthoxylcarbonyllaminolphénylacétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique A une solution de 2,03 g de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique (voir * l'Exemple 6 A) et de 1,58 g d'acide D-a-lll( 4-méthoxy- phényl)méthoxylcarbonyllaminolbenzèneacétique dans 50 ml d'acétonitrile, on ajoute goutte à goutte une solution de 1,03 g de dicyclohexylcarbodiimide dans 10 ml d'acéto- nitrile On maintient la température à 5 C pendant une heure et à la température ambiante pendant 6 heures La séparation de la dicyclohexylurée formée et la distillation du solvant permettent d'obtenir le composé dutitre sous la forme d'un résidu huileux Le traitement de cette huile dans l'acétone par du perfluorobutane sulfonate de potassium et de l'éther donne 2,4 g de produit, point de fusion 108 111 C, avec décomposition. Exemples 33 à 37 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 32, mais en remplaçant l'acide (D)-a-lll( 4-méthoxyphényl)méthoxyl- carbonyllaminolbenzèneacétique par le composé indiqué dans la colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la colonne II ci-après. Exemple Colonne I 33 Acide 34 Acide ( )-2-amino-ca-lIlll( 4-méthoxy- phényl) méthoxylcarbonyllaminol-4- thiazoleacêtinue Acide ( ) -ce ll l( 4-méthoxyphényl) - mé thoxyl Jcarbonyll Jaminol J 2-' furanacétique 36 Acide (L)-ct-l l l( 4-méthoxyphényl)- méthoxylJclarbonyl Jamino Jbenzène- acétique 37 Acide (L)-a lll ( 4-méthoxyphényl)- méthoxyl carbonyllJaminol -2- thiophêneacétique Colonne -II Sel de potassium' de l'acide l 3 S(D)1-3-' IIllll ( 4-méthoxyphényl)méthoxyîcarbonyll- arminol -2-thié,nylacétyllarminol -2-oxo-1 - azétidinesulfonique Point de fusion 144-146 ', décomposition Sel de potassium de l'acide l 3 S( )1-3- ll( 2-amino-4-thiazolyl) -llt ( 4-méthoxyphényl) - méthoxy Jcarbonyl Jamino JacétyllJaminol -2 -oxo- 1 azétidinesulfonique Point de fusion 232-2340 C Se 11 de potassium de l'acide l 3 S( )J-3- ll 2-furanyl lll( 4-méthoxyphényl)méthoxyl- carbonyl) amino JacétyllJamino-2-oxo 1- azétidinesulfonique Point de fusion 124-126 o C, décomposition Sel de potassium de l'acide l 3 S(L)1-3- llllL ( 4-méthoxyphényl)méthoxylcarbonyl l- aminoiphénylacétyl) aminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique Point de fusion 172-1750 C, décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(L)J-3- lfl lll( 4-méthoxyphényl)méthoxylcarbonyll-. aminojl-2-thiénylacétyl Jaminol -2-oxo-1- azétidinesulfonique Point de fusion 146-1480 C. ru %O 57 ' Exemple 38 Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( 3 S)-3-llll(méthoxy- thio)thioxométhyllthiolphénylacétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique On traite une solution de 1,03 g d'acide ( )-all(méthylthio)thioxométhyllthiolbenzèneacétique et de 1,63 g de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-2-oxo-1- azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A) dans 30 ml d'acéto- nitrile, par 0,8 g de dicylcohexylcarbodiimide dissous dans 10 ml d'acétonitrile à -5 C Après avoir agité pendant 16 heures environ, on sépare par filtration la dicyclo- hexylurée formée et on fait évaporer la liqueur mère On fait subir au résidu huileux résultant une chromatographie sur une colonne de 400 g de silice en utilisant comme éluant un mélange ( 8,5:1:0,5) d'acétate d'éthyle, de méthanol et d'eau, ce qui donne 1,3 g du composé du titre. Exemple 39 Sel de potassium de l'acide 3 (S)-3-llll(méthylthio)thioxo- méthyllthiolphénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout dans de l'acétone le sel de tétrabutyl- ammonium de l'acide ( 3 S)-3-llll(méthylthio)'thioxométhyll- thiolphénylacétyllamino-2-oxo-l-azétidinesulfonique ( 1,3 g; voir l'Exemple 38), et on traite la solution par une quan- tité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium. L'addition d'éther fait cristalliser le composé du titre, que l'on sépare par filtration, ce qui donne 0,18 g de produit, point de fusion 157 C, avec décomposition. Exemple 40 Sel de potassium de l'acide l 3 S(D)l-3-llll( 4-éthyl-2,3- dioxo-1-pipérazinyl)carbonyllaminol-2-thiénylacétyllaminol- 2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout dans 25 ml d'acétonitrile 3,25 g d'acide (D)-a-ll( 4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyllaminol- 2-thiophèneacétique, 4,20 g du sel de tétrabutylammonium de l'acide 3amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A) et 1,3 g de Nhydroxybenzotriazole L'addition goutte à goutte de 2,06 g de dicyclohexylcarbodiimide dissous dans ml d'acétonitrile à -100 C prend 10 minutes et on conti- nue l'agitation pendant 16 heures environ On sépare par À. filtration l'urée formée, et on fait évaporer le solvant sous vide On dissout l'huile restante dans 50 ml d'acéto- ne et, après traitement par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfate de potassium, le composé du titre cristallise, point de fusion 185-187 C, avec décomposition. Exemple 41 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-l(bromophénylacétyl)- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On ajoute goutte à goutte 1,4 g de chlorure d'a- bromophénylacétyle dans 10 ml d'acétonitrile à une solution de 5 mmoles de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-2- oxo-l-azétidinesulfonique, et de 3 g d'oxyde de propylène dans de l'acétonitrile à O C Apres avoir agité pendant trois heures, on chasse le solvant par distillation et on dissout le résidu huileux restant dans 30 ml d'acétone On ajoute la quantité équivalente de perfluorobutanesulfonate de potassium dans de l'acétone L'addition d'éther fait cristalliser le composé du titre, point de fusion 135-137 C, avec décomposition. Exemple 42 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-lll(aminocarbonyl)- aminol-2-thiénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique Méthode I: A une solution de 2 g de sel de tétrabutylammonium d'acide (S)-3-amino-2oxo-1-azétidinesulfonique et de 1,5 g d'oxyde de propylène dans de l'acétonitrile, on ajoute 1,1 g de chlorhydrate de ( )-2-amino-4-( 2-thiényl)-5 ( 4 H)- oxazolone Apres avoir agité pendant trois heures à O C et pendant une heure à la température ambiante, on chasse le solvant par distillation et on dissout le résidu huileux dans 30 ml d'acétone En ajoutant la quantité éauivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans de l'acétone, on fait cristalliser le composé du titre La purification par chromatographie sur colonne de "HP-20 ", en utilisant l'eau comme éluant, donne le composé du titre, point de fusion 218-222 C, avec décomposition. Méthode II: A une suspension de 2 g d'acide ( )-a-l(amino- carbonyl)aminol-2-thiophèneacétique, de 10 mmoles de sel de tétrabutylammonium d'acide (S)-3-amino-2-oxo-1- azétidinesulfonique et de 100 imoles de N-hydroxybenzotriazole dans 50 ml d'acétonitrile à O C, on ajoute (en agitant) 10 mmoles de dicyclohexylcarbodiimide dissous dans 15 ml d'acétoni- trile On continue l'agitation pendant une heure à -15 C et pendant 16 heures environ à la température ambiante. Après avoir séparé par filtration la dicyclohexylurée, on fait évaporer le solvant et on dissout le résidu huileux dans 50 ml d'acétone L'addition de la quantité équiva- lente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans l'acétone donne un produit cristallin La purification par chromatographie sur colonne de "HP20 ", en utilisant l'eau comme éluant, donne le composé du titre, point de fusion 220-223 C. Exemple 43 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-llll(méthylamino)- carbonylllaminol-2-thiénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On dissout dans 20 ml d'acétonitrile 0,54 g d'acide ( )-all(méthylamino)carbonyllaminol-2-thiophèneacétique et 1,00 g de sel de tétrabutylammonium d'acide (S)-3-amino- 2-oxo-1-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A), et on ajoute 0,5 g de dicyclohexylcarbodiimide à une température de O C Apres avoir agité pendant 8 heures, on sépare par filtration la dicyclohexylurée et, après avoir chassé le solvant par distillation, on dissout le résidu huileux dans ml d'acétone et on ajoute la quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium On sépare le produit cristallin par filtration et on réalise une purifi- cation sur "HP-20 " en utilisant l'eau comme éluant, point de fusion 205 C, avec décomposition. Exemple 44 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-lll(amino-oxoacétyl)- aminol-2-thiénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 42, méthode II, mais en remplaçant l'acide ( )-c l(amino- carbonyl)aminol-2-thiophèneacétique par l'acide ( )-a- l(amino-oxoacétyl)aminol-2-thiophèneacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 218-222 C. Exemple 45 Sel de potassium de l'acide -l 3 S(R*)l-3-llll( 4-éthyl-2,3- dioxo-l-pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacétyllaminol-2- oxo-l-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 40, mais en remplaçant l'acide (D)-a-ll( 4-éthyl-2,3-dioxo-1- pipérazinyl)carbonyllaminol-2-thiophèneacétique par l'acide (R)-et-ll( 4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyllaminol- benzèneacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 155-157 C, avec décomposition. Exemple 46 Sel de potassium de l'acide 3-(acétylamino)-3-méthoxy-2- oxo-l-azétidinesulfonique Méthode I: A) Sel mixte de sodium et de potassium de l'acide 3-l(N- acétyl-N-chloro)aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique - A une solution de sel de potassium d'acide 3- (acétylamino)-2-oxo-1-azétidinesul-fonique ( 172 mg, voir l'Exemple 23) dans 17 ml de méthanol contenant 4 % de borate de sodium décahydraté refroidi entre -15 et -10 C, on ajoute 110 pl d'hypochlorite de tertbutyle On agite le mélange à froid pendant une heure et 45 minutes, on le verse dans 50 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M, et on abaisse le p H à 5,5 On chasse le solvant sous vide et on dissout le résidu dans une quantité minimale d'eau, puis on lui fait subir une chromatographie sur "HP-20 AG", dé granulométrie 74 à 149 p ( 140 ml). L'élution avec de l'eau donne une huile ( 63 mg) qui cris- tallise au repos La trituration avec un mélange de méthanol et d'éther, puis avec de l'éther seul donne un solide ( 53 mg), point de fusion 124 C, lente décomposition. B) Sel de potassium de l'acide 3-(acétylamino)-3-méthoxy- 2-oxo-l-azétidinesulfonique On dissout dans 1,5 ml de diméthylformamide sec 37 mg du sel mixte de l'acide 3-l(N-acétyl-N-chloro)aminol- 2-oxo-1-azétidinesulfonique et on ajoute la solution à une solution de 50 mg de méthylate de lithium dans 1 ml de méthanol à -78 C Apres avoir agité pendant 15 minutes à -78 C, on ajoute 10 ml d'une solution 0,5 M de phosphate de potassium monobasique, puis on acidifie la solution à p H 4 avec de l'acide chlorhydrique 1 N A cette solution, on ajoute 70 mg d'hydrogénosulfate de tétrabutylammonium et on extrait la solution quatre fois avec du chlorure de méthylène On sèche les extraits réunis sur sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide pour obtenir 55 mg d'une huile La chromatographie sur 5,5 g de gel de silice donne le produit huileux ( 41 mg) sous la forme du sel de tétrabutylammonium (par élution avec un mélange de 8 % de méthanol et de 92 % de chlorure de méthylène On dissout l'huile ( 31 mg) dans de l'eau et on la fait passer dans une colonne d'échange d'ions ( 5 ml de "AG 50 W-X 2 ", forme K$, granulométrie 37 à 74 p, 0,6 méq/ml) L'élimination de l'eau sous vide donne une huile que l'on fait cristalliser dans un mélange de méthanol et d'éther En triturant deux fois avec de l'éther, on obtient le produit sous la forme d'une poudre incolore ( 11 mg); point de fusion 182-183 C, décomposition. Méthode II: A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-amino-3-méthoxy- 2-oxo-1-azétidinesulfonique On ajoute une solution à 4 % de borate de sodium décahydraté dans 100 p 1 de méthanol à une suspension de mg de palladium à 10 % sur charbon dans 2 ml de méthanol, et on agite le mélange sous une atmosphère d'hydrogène pendant 15 minutes On ajoute du sel de tétrabutylammonium d'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol- 1-azétidinesulfonique ( 60 mg; voir l'Exemple 49) dans 2 ml de méthanol, et on agite énergiquement le mélange pendant 15 minutes sous atmosphère d'hydrogène On sépare le cata- lyseur par filtration sur de la "Celite" sur un filtre "Millipore" ( 0,5 mi), et on chasse le solvant du filtrat sous vide, puis on extrait le résidu au chlorure de méthylène L'élimination du solvant sous pression réduite donne 35 mg du composé du titre, sous la forme d'une huile. B) Sel de potassium de l'acide 3-(acétylamino)-3-méthoxy- 2-c=o-l-azétidinesulfonique A une solution de 35 mg de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique dans ml de chlorure de méthylène à O C, on ajoute 2 ml d'oxyde de propylène et 74 pl de chlorure d'acétyle Au bout de 2 heures, on chasse le solvant sous pression rédui- te et on fait subir à l'huile résiduelle une chromatogra- phie sur 4 g de'gel de silice L'élution avec 6 à 8 % de méthanol dans du chlorure de méthylène donne 18 mg d'une huile que l'on dissout dans de l'eau et que l'on fait passer dans une résine d'échange d'ions ( 3 mlde "AG 50 W-X 2 ", forme K 6, 0,6 méq/ml) L'élimination de l'eau de l'éluat sous vide donne le produit voulu ( 10 mg). Exemple 47 Sel de tétrabutylammonium du N-( 3-méthoxy-2-oxo-1-sulfo-3- azétidinyl)-2-phénylacétamide A) Sel de potassium du N-chloro-N-( 2-oxo-1-sulfo-3- azétidinyl)-2-phénylacétamide A une solution de sel de potassium de (S)-N-( 2-oxo- 1-sulfo-3-azétidinyl)-2-phénylacétamide ( 50 mg; voir l'Exemple i) dans du méthanol contenant 4 % de borate de sodium décahydraté ( 5 ml) refroidi dans un bain à -5 C, on ajoute 30 pl d'hypochlorite de tert- butyle Après avoir agité pendant 32 minutes, on verse le mélange dans un tampon de phosphate de potassium 0,5 M à p H 5,5, à O C. On ajuste le p H de la solution résultante ( 5,9) à 4,5, on la concentre sous vide pour chasser le méthanol, et on lui fait subir une chromatographie sur "HP-20 AG", 74 à 149/ ( 100 ml) Après avoir lavé la colonne avec 100 ml d'un tampon de p H 5,5 0,5 M et de l'eau, on élue le produit voulu avec un mélange 9:1 d'eau et d'acétone Une concen- tration sous vide donne 50 mg du composé du titre. B) Sel de tétrabutylammonium du N-( 3-méthoxy-2-oxo-1- sulfo-3-azétidinyl)-2-phénylacétamide A une solution agitée de 160 mg de méthylate de lithium dans 5 ml de méthanol refroidi à -78 C, on ajoute une solution de 149 mg de sel de potassium de N-chloro-N- ( 2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)-2-phénylacétamide dans 10 ml de diméthylformamide sec Une fois l'addition terminée, on agite le mélange pendant 15-minutes à -78 C, on le verse dans 100 ml d'une solution de phosphate de potassium mono- basique 0,5 M, et on le lave trois fois avec du chlorure de méthylène On ajoute 213 mg de bisulfate de tétrabutyl- ammonium à la couche aqueuse, que l'on extrait ensuite trois fois avec du chlorure de méthylène On sèche sur sulfate de sodium les extraits réunis, et on chasse le solvant sous vide, ce qui donne 271 mg d'une huile = Une chromatographie de cette huile sur 25 g de gel de silice et une élution avec un mélange de 4 % de méthanol et de 96 % de chlorure de méthylène donnent 149 mg du produit sous la forme d'une huile. Exemple 48 Sel de potassium du N-( 3-méthoxy-2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)- 2-phénylacétamide On dissout dans de l'eau le sel de tétrabutylammonium du N-( 3-méthoxy-2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)-2-phényl- acétamide ( 91 mg; voir l'Exemple 47), et on fait passer la solution dans une colonne d'échange d'ions ( 10 ml de "AG 50 W-X 2 ", forme K On concentre l'éluat sous vide et, en grattant les parois du récipient, on fait solidifier l'huile résiduelle dans un mélange de méthanol, d'acétone et d'éther Après avoir trituré deux fois avec de l'éther, on obtient le produit sous la forme d'un solide ( 53 mg): v max 1762, 1665 cm-1; RMN (CD 3 OD) 6 3,41 (S, 3 H, OCH 3), max 33 3,59 (S, 2 H, CH 2), 3,84 (A Bq, J= 6,3 Hz, 2 H, H 4), 7,30 (m, 5 H, aromatique). Analyse pour C 12 H 3 N 20 6,5 H 20: 12 13 2 2 Calculé: C, 39,88; H, 3,62; N, 7,75 Trouvé: C, 39,62; H, 3,65; N, 7,60. Exemple 49 Sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidinesulfonique Méthode I: A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide 2-oxo-3-lN-chloro- N-l(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidinesulfonique On ajoute le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidine- sulfonique ( 0,9 g; voir l'Exemple 4) dissous dans 80 ml de chlorure de méthylène, à un mélange (refroidi à O 5 C) de 3,17 g de borate de sodium décahydraté et de 11,8 ml d'une solution d'hypochlorite de sodium à 5,25 % dans 70 ml d'eau On agite énergiquement le mélange réactionnel pendant 55 minutes tout en refroidissant dans un bain de glace Apres avoir dilué le mélange avec une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M, on extrait le produit avec trois fractions de 150 ml de chlorure de méthylène Le groupement des extraits, le séchage sur sulfate de sodium et l'élimination du solvant sous vide donnent le composé du titre sous la forme d'une huile ( 0,94 g). B) Sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique A une solution agitée de 667 mg de méthylate de lithium dans 10 ml de méthanol anhydre à -78 C, on ajoute une solution de 0,94 g de sel de tétrabutylammonium d'acide 2-oxo-3-lN-chloro-N-l(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l- azétidinesulfonique dans 10 ml de diméthylformamide sec. Apres avoir agité le mélange à -78 C pendant une heure, on le verse dans une solution de phosphate de potassium mono- basique 0,5 M et on l'extrait avec trois fractions de 150 ml de chlorure de méthylène On sèche sur sulfate de sodium les extraits réunis et on chasse le solvant sous vide pour obtenir 0,83 g d'une huile On obtient le produit voulu en faisant subir à cette huile une chromatographie sur 100 g de gel de silice et en éluant avec du méthanol à 4 5 % dans du chlorure de méthylène pour obtenir 513 mg d'une huile: v ma(net) 1767, 1720 cm-1; RMN (CDC 13) 6 3,40 (S,OCH 3), max 33 3,03 (A Bq, J= 6,5 Hz, H 4), 5,08 (S,CH 2), 6,00 (S,NH), 7,27 (S, aromatique). Méthode II: A une solution de 400 mg de sel de potassium d'acide 3-benzyloxycarbonylamino-3-méthoxy-2-oxo- 11-azétidinesulfoni- que dans de l'eau, on ajoute une solution de bisulfate de tétrabutylammonium 0,1 M ( 10,9 ml, ajustée à p H 4,3 avec de la potasse) On extrait le mélange trois fois avec du chlorure de méthylène, on réunit les extraits, on les sèche sur sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide pour obtenir 625 mg d'une mousse dont les caractéristiques spectrales sont à peu près celles du produit obtenu par la méthode I. Exemple 50 Sel de potassium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-t C(phényl- méthoxy)carbonyl)amino 3-l-azétidinesulfonique Méthode I: A) Sel de potassium de l'acide 2-oxo-3-lN-chloro-N- l(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique A une solution du sel de potassium de l'acide (S)-2- oxo-3-tll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidinesulfonique ( 1,00 g; voir l'Exemple 3) dans 90 ml de méthanol conte- nant 4 % de borate de sodium décahydraté à -10 C, on ajoute 420 p 1 d'hypochlorite de tert-butyle Apres avoir agité pendant 2 heures à -10 C, on' ajoute 100 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0, 5 M et on ajuste le p H à 6 avec de l'acide chlorhydrique 1 N Après avoir concentré la solution sous vide à 30 ml, on fait subir à la solution aqueuse une chromatographie sur "HP-20 AG", 74 à 149 p ( 200 ml) Apres passage d'une solution de 50 g de phosphate de potassium monobasique dans 1000 ml d'eau, puis de 2000 ml d'eau, on élue le produit avec un mélange de 10 % d'acétone et de 90 % d'eau On chasse le solvant sous vide et on fait cristalliser le composé du titre dans l'eau pour obtenir 530 mg d'un solide, point de fusion 173-175 C. B) Sel de potassium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique A une solution de 874 mg de méthylate de lithium dans ml de méthanol sec à -78 C, on ajoute 857 mg de sel de potassium d'acide 2-oxo-3-lN-chloro-N-l(phénylméthoxy)- carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique dans 13 ml de diméthylformamide sec Après 15 minutes à -78 C, on verse le mélange dans 200 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M et on ajuste le p H à 5,5 avec de l'acide chlorhydrique 1 N On lave le mélange aqueux avec trois fractions de 100 ml de chlorure de méthylène, et on ajoute 1,169 g de bisulfate de tétrabutylammonium On extrait le produit avec trois fractions de 200 ml de chlorure de méthylène, on sèche sur sulfate de sodium, on filtre et on concentre sous vide On fait subir à l'huile résiduelle une chromatographie sur 150 g de gel de silice et on élue le produit avec 2 à 4 % de méthanol dans du chlorure de méthylène, ce qui donne le sel de tétrabutyl- ammonium du produit sous la forme d'une huile ( 701 mg). On dissout une partie de cette huile ( 51 mg) dans de l'eau et on fait passer cette solution dans une colonne d'échange d'ions ( 3 ml de "AG 50 W-X 2 ", 37 à 74 p, forme K, 0,6 méq/ ml) La concentration de l'éluat sous vide donne 30 mg d'une huile que l'on fait cristalliser en grattant les parois du récipient avec de l'acétone: -1 v max(K Br) 1760, 1725 cm; RMN (D 20) 6 3,48 (S, 3 H, OCH 3), max 23 3,92 (S, 2 H, H 4); 5,20 (S, 2 H, CH 2), 7,42 (S, 5 H, aromati- que; point de fusion 196-198 C. Méthode II: A) 1-chloro-3-lN-chloro-N-l(phénylméthoxy)carbonyll- 2-azétidinone On refroidit à O C une solution de 3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-2-azétidinone ( 440 mg; voir l'Exemple 2 C) dans 40 ml de borax méthanolique à 4 %, et on ajoute 0,5 ml d'hypochlorite de t-butyle Au bout de 30 minutes à O C, on verse la solution dans 200 ml'd'eau froide et on l'extrait avec deux fractions de 100 ml d'acétate d'éthyle On lave à l'eau la couche acétate d'éthyle rassemblée, on la sèche, et on la concentre sous vide pour obtenir 546 mg du composé du titre sous la forme d'une huile. B) 3-méthoxy-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-2- azétidinone On refroidit à -78 C une solution de 730 mg ( 0,0025 mole) de 1-chloro-3-lN-chloro-N-l(phénylméthoxy)carbonyll- aminol-2-azétidinone dans 5 ml de tétrahydrofuranne, et on ajoute 4 ml de méthanol contenant 285 mg de méthylate de lithium Au bout de 20 minutes à -78 C, on ajoute 0,6 ml d'acide acétique et 0,6 ml de triméthylphosphite On agite la solution pendant 5 minutes à -78 C, on la laisse se réchauffer à la température ambiante et on l'agite pendant 30 minutes On dilue la solution résultante avec de l'acétate d'éthyle, on la lave avec du bicarbonate de sodium à 5 %, de l'eau, du bisulfate de potassium à 5 %, de l'eau, une solution saline saturée, et on la sèche. L'élimination du solvant donne une huile que l'on applique sur quatre plaques de gel de silice de 20 x 20 cm x 1 m M. Le développement avec un mélange ( 1:1) de benzène et d'acé- tate d'éthyle et l'isolement de la principale bande active dans l'ultraviolet, de Rf= 0,25, donnent 91 mg d'une huile que l'on fait cristalliser dans l'éther pour obtenir un solide La recristallisation dans l'éther donne le composé du titre, point de fusion 112-114 C. C) Sel de potassium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique On agite pendant 24 heures une solution de 25 mg de 3-méthoxy-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-2azétidinone dans 0,175 ml de dichlorométhane et 0,175 ml de diméthyl- formamide, avec 55,4 mg d'un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre On dilue la suspension résultante avec ml de phosphate de potassium monobasioue 0,5 M froid (ajusté à p H 4,5) et on l'extrait à l'acétate d'éthyle On fait passer la couche aqueuse dans une colonne de 40 ml de "HP-20 AG" L'élution avec un tampon supplémentaire, de l'eau et un mélange ( 9:1) d'eau et d'acétone donne 32 mg du composé du titre sous la forme d'une huile qui se soli- difie lentement La cristallisation dans l'acétone donne le composé du titre, point de fusion 196 -198 C, avec décomposition. Exemple 51 sel de potassium de l'acide 3-ll 1,3-dioxo-2-phényl-3- (phénylméthoxy)propyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidine- sulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-ll 1,3-dioxo-2- phényl-3-(phénylméthoxy)propyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1- azétidinesulfonique On dissout dans 30 ml d'acétonitrile sec le sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-1- * azétidine sulfonique brut ( 431 mg, voir l'Exemple 74), contenant du borax On ajoute 317 pl de pyridine sèche et on agite soigneusement la solution à -100 C sous azote sec. On ajoute goutte à goutte 568 mg de chlorure d'a-(benzyloxy- carbonyl)phénylacétyle dans 3 ml d'acétonitrile sec La chromatographie en couche mince indique que la réaction est terminée au bout de 15 minutes On ajoute un tampon de phosphate de potassium ( 0,5 M; p H 5,5; 17 ml) et on chasse sous vide la plus grande partie de l'acétonitrile. On dilue le résidu avec de l'eau et on l'extrait trois fois avec des volumes égaux de chlorure de méthylène On sèche l'extrait sur'sulfate de sodium anhydre et on le concentre sous vide pour obtenir 1,032 g de produit brut, que l'on dissout dans 3 ml de chlorure de méthylène et auquel on fait subir une chromatographie sur une colonne de silice en utilisant comme éluant un mélange de chlorure de méthylène et de méthanol, pour obtenir 470 mg du composé du titre. B) Sel de potassium de l'acide 3-ll 1,3-dioxo-2-phényl-3- (phénylméthoxy)propyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidine- sulfonique - On dissout dans 15 ml d'un mélange de 30 % d'acétone et d'eau 470 mg de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-ll 1,3- dioxo-2-phényl-3-(phénylméthoxy)propyllaminol-3-méthoxy-2- oxo-l-azétidinesulfonique, et on fait passer la solution dans une colonne de "Dowex 50 WX 2 " (forme K), en utilisant le même solvant -comme éluant On fait évaporer l'ensemble de l'éluat sous vide pour obtenir 345 mg d'un solide amor- phe que l'on lyophilise en une poudre amorphe, point de fusion 100 120 C. Analyse pour C 20 H 1908 N 25 K: Calculé C, 49,37; H, 3,94; N, 5,76; S, 6, 59 Trouvé: C, 49,08; H, 4,00; N, 5,58; S, 6,29 Exemple 52 Sel de potassium de l'acide ( )-3-lll(cyanométhyl)thiol- acétyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique A une solution de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-lazétidinesulfonique ( 414 mg, voir l'Exemple 74) dans 50 ml d'acétonitrile sec à -20 C, on ajoute 210 e 1 de diéthylaniline et 169 mg de chlorure de cyanométhylthioacétyle Au bout de 10 minutes, on chasse le solvant sous pression réduite et on ajoute une solution 0,1 M ( 22,8 ml) de sulfate de tétrabutylammonium ajustée à p H 4,3 avec de la potasse, pui S on extrait le produit avec trois fractions de 50 ml de chlorure de méthylène, on 69 2509299 sèche, on filtre et on concentre sous pression réduite On purifie le résidu huileux sur 60 g de gel de silice et on élue le produit ( 294 mg) avec un mélange de 4 % de méthanol dans du chlorure de méthylène On fait passer le produit purifié dans une résine d'échange d'ions ( 16 ml de "AG 50 W-X 2 " (forme K+), 0,6 méquiv /ml, 37 74 p L'élimi- nation de l'eau donne 164 mg d'un produit partiellement purifié On fait subir à ce produit une nouvelle purifica- tion sur 100 ml de résine "Diaion AG HP 20 " en utilisant l'eau comme éluant On chasse le solvant sous pression réduite pour obtenir 126 mg d'un produit que l'on triture avec de l'éther pour obtenir 76 mg du composé du titre, point de fusion 110 120 C. Analyse pour C 8 H 10 N 3520 K Calculé: C, 27,66; H, 2,88; N, 12,10; S, 18,44 Trouvé: C, 27,25; H, 3,00; N, 10,84; S, 17,53. Exemples 53 à 56 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 42, Méthode II, mais en remplaçant l'acide ( )-a-l(amino- carbonyl)aminol-2-thiophèneacétique par le composé indiqué dans la Colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la Colonne II ci-après. Exemp 2-eColonne IColonne -11 53 Acide ( ) -a r(aminooxoacétyl) - aminolJ 2 furanacétigue 54 Acide ( )-a-rrr(cyanouiéthyl)- amnino Joxoacétyll Jaminol-2- thiophèneacétique Acide (R)-ct-l (amino-oxoacétyl)" amino lbenzêneacétique 56 Acide (R)-ct-lUaminocarbonyl)- amino Jbenzèneacétique Sel de'potassiuxn de l'acide l 3 S( )l-3- llf (amino-oxoacétyl) amino) -2-furanylacétyl J- amninol -2-oxo-1-azétidinesulfonique Point-de fusion 212-215 'C, décomposition Sel de potassium de l'acide l 35 ( )-3- llllrl r(cyanométhyl) aminoloxoacétylllaminol-2- thiénylacétyl JaminolJ-2-oxo-1-azétidine- sulfoniaue Point de fusion 195-197 o C, décomposition sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3- rlrlr amino-oxoacétyl) aminoiphénylacétyl l- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique Point de fusion 207 2090 C. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)i I-3- rlrlr(aminocarbonyl) aminojphénylacétyl J- amino J-2-oxo-1-azêtidinesulfonique Point de fusion 2250 C, dêcomposition. -J CD w L Ml C> NO M O O Colonne 1 Exempl e 250 '9299 Exemple 57 Sel de potassium de l'acide l 3 S( )l-3-ll( 2-méthylthio)-1- oxopropyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 31, Méthode II, mais en remplaçant l'acide ( )-aazido-benzène- acétique par l'acide ( )-2-(méthylthio)propanolque, on obtient le composé du titre, point de fusion 173 C, avec décomposition. Exemple 58 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 2,3-dioxo-4- l(phénylméthylène)aminol-1-pipérazinyllcarbonyllaminol- phénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout dans 20 ml d'acétonitrile 0,7 g de l'acide (R)-"-lll 2,3-dioxo-4-l(phénylméthylène)aminol-1-pipérazinyll- carbonyllaminolbenzèneacétique et le sel de têtrabutyl- ammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,8 g; voir l'Exemple 6 A) Tout en agitant, on ajoute goutte à goutte 0,4 g de dicylohexylcarbodiimide à O C On continue l'agitation pendant 18 heures et, après filtration, on chasse le solvant par distillation, ce qui laisse un résidu huileux On dissout ce résidu dans de l'acétone et one le traite par du perfluorobutane sulfonate de potassium pour faire précipiter le composé du titre La purification par chromatographie sur colonne de "HP-20 " en utilisant l'eau comme éluant donne le composé du titre, point de fusion 193-194 C. Exemple 59 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-lF( 2-amino-4-thiazolyl) l( 2-méthoxy-2-oxo-éthoxy)iminolacétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique On dissout dans 50 ml d'acétonitrile 1,3 g d'acide (Z)-2-amino-a-l( 2-méthoxy-2-oxo-éthoxy)iminol-4-thiazole- acétique et le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3- amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 2,03 g; voir l'Exemple 6 A), et on ajoutte goutte à goutte à O C 1,03 g de dicyclo- hexylcarbodiimide dissous dans 5 ml d'acétonitrile Après avoir agité pendant 15 heures et séparé par filtration la dicyclohexylurée, on chasse le solvant par distillation On dissout le résidu huileux restant dans de l'acétone et on le traite par la quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium On isole le composé du titre et on le purifie par chromatographie sur colonne de "HP-20 " en utilisant l'eau comme éluant, ce qui donne le composé du titre, point de fusion 195-198 C. Exempte 60 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 3-ll( 4-chloro- phényl)méthylènelaminol-2-oxo-1-imidazolidinyllcarbonyll- aminolphénylacétyllaminol-l-azétidinesulfonique On agite ensemble pendant 12 heures le sel de tétra- butylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidine- sulfonique ( 1,5 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diglyme absolu (éther diméthylique de diéthylèneglycol), 1,5 g d'acide (R)-a-lll 3-ll( 4-chorophényl)méthylènelaminol- 2-oxo-l-imidazolidinyllcarbonyllaminolbenzèneacétique, une quantité équivalente de dicyclohexylcarbodiimide et 0,5 g d'hydroxybenzotriazole On chasse le solvant sous vide et on dissout le résidu dans 50 ml d'acétone, puis on filtre. On chasse l'acétone par distillation et on dissout le résidu dans 200 ml de chlorure de méthylène On lave la solution avec du bicarbonate de sodium aqueux puis avec une solution aqueuse de chlorure de sodium On sèche la couche chlorure de méthylène sur du sulfate de sodium, on la fait évaporer à siccité et on la fait cristalliser par addition d'éther. On recristallise le composé dans un mélange d'acétone et d'éther On dissout la poudre cristalline blanche résul- tante dans de l'acétone et on traite la solution par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans de l'acétone Le composé du titre précipite et on le sépare par filtration, ce qui donne 1,4 g de produit, point de fusion 217 -222 C. Exemple 61 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 2-oxo-l(phényl- méthylène)aminol-l-imidazolidinyllcarbonylllaminolphényl- acétyllaminol-l-azétidinesulfonique On agite ensemble à la température ambiante pendant 12 heures le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3- amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 2,25 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide sec (DMF), une quantité équivalente de dicyclohexylcarbodiimide, 2,5 gd'acide (R)- a-lll 2-oxo-3-l(phénylméthylène)aminol-1-imidazolidinyll- carbonyllaminolbenzèneacétique et 0,85 g d'hydroxybenzo- triazole Au bout des 12 heures, on chasse le DMF sous vide et on dissout le résidu dans 50 ml d'acétone On sépare par filtration l'urée précipitée et on traite la liqueur mère par une quantité équivalente de perfluoro- butane sulfonate de potassium dans 20 ml d'acétone Apres addition de 100 ml d'éther, le composé du titre précipite et on le sépare par filtration On réalise la purification en dissolvant le composé dans un mélange de DMF et d'acé- tone et en le faisant précipiter avec de l'eau, ce qui donne 1,5 g de produit, point de fusion 224-226 C, avec décomposition. Exemple 62 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 3-méthyl- sulfonyl)-2-oxo-1-imidazolidinyllcarbonyllaminolphénvl- acétyllaminol-2-oxo-1 l-azétidinesulfonique On agite pendant 12 heures le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1azétidinesulfonique ( 2,25 g; voir l'Exemple 6 A) dans 60 ml de diméthylformamide, avec 1,9 g d'acide (R)-a-lll 3-(méthylsulfonyl)-2-oxo-1- imidazolidinyllcarbonyllaminolbenzèneacétique, 0,75 g d'hydroxybenzotriazole et 2,3 gde dicyclohexylcarbodiimide. On chasse le solvant sous vide et on dissout le résidu dans ml d'acétone, puis on filtre On traite la liqueur mère par 1,87 g de perfluorobutane sulfonate de potassium dans ml d'acétone Après addition d'éther, le composé du titre précipite, donnant 2,0 g de substance On purifie le composé par recristallisation dans l'eau, et il a alors un point de fusion de 240-245 C, avec décomposition. Exemple 63 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)1-3-l(hydroxyphényl- acétyl)aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite lesel de tétrabutylammonium de l'acide (S)- amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 1,5 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide sec, pendant 16 heures environ avec 1,5 g de dicyclohexylcarbodiimide, 0,5 g d'hydroxybenzotriazole et 0,6 g d'acide Ra-hydroxybenzène acétique On chasse le solvant sous vide et on dissout lerésidu dans 20 ml d'acétone On sépare par filtration l'urée précipitée et on traite la liqueur mère par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium En ajoutant de l'éther, on fait précipiter le composé du titre, et on le sépare par filtration, ce qui donne 1,3 g de produit brut On purifie ce produit par chromatographie sur colonne de "HP20 " en utilisant comme éluant un mélange ( 9:1) d'eau et d'acétone, et le produit a alors un point de fusion de 145-150 C, avec décomposi- tion. Exemple 64 Sel de potassium de l'acide l 3 S(S*)l-3-l(hydroxyphényl- acétyl)aminol-2-oxo-l-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 63, mais en remplaçant l'acide (R)-a-hydroxybenzèneacétique par l'acide (S)-a-hydroxybenzèneacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 195-197 C. Exemple 65 Sel de potassium ( 1:2) de l'acide l 3 S( )l-2-oxo-3-l(phényl- sulfoacétyl)aminol-l az-étidinesulfonique On refroidit à O C le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 2, 25 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diglyme sec, 2,4 g de triéthylamine et 0,3 g de diméthylaminopyridine On ajoute goutte à goutte 1,8 g d'acide (R)-a-(chlrocarbonyl)benzène- méthanesulfonique dans 20 ml de diglyme On maintient la température pendant 2 heures, on chasse le solvant par distillation sous vide et on dissout le résidu dans de l'acétone On sépare par filtration le précipité insoluble et on traite la liqueur mère par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium En ajoutant de l'éther, on fait précipiter le composé du titre, que l'on sépare par filtration, ce qui donne 1,4 g de produit brut; point de fusion 240 -245 C avec décomposition, après recristallisation dans un mélange d'eau et d'acétone. Exemple 66 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl) lF (diéthoxyphosphinyl)méthoxyliminolacétyll- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On traite le sel de tétrabutylammoniumdel'acide (S)- 3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 2, 25 g; voir l'Exemple 6 A) dans 100 ml de diméthylformamide sec, par 1,87 gd'acide (Z)-2-amino-a-ll(diéthoxyphosphinyl)méthoxyliminol-4- thiazoleacétique, 0,75 g d'hydroxybenzotriazole et 2,29 g de dicyclohexylcarbodiimide, pendant 12 heures en agitant. On sépare par filtration l'urée précipitée et on chasse le solvant sous vide On traite l'huile restante par une quan- tité équivalente de perfludrobutane sulfonate de potassium dans 20 ml d'acétone En ajoutant de l'éther, on fait précipiter le composé du titre, que l'on sépare par filtra- tion, ce qui donne 2,77 g de produit brut La purification de ce produit brut par chromatographie sur colonne de "HP-20 " en utilisant comme éluant un mélange ( 9:1) d'eau et d'acétone, donne le composé du titre, point de fusion 155 -160 C, avec décomposition. Exemple 67 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl) l l 2-( 1,1-diméthyléthoxy)-2-oxo-1-phényléthoxyl- iminolacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite à la température ambiante le sel de tétra- butylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidine- sulfonique ( 2,25 g; voir l'Exemple 6 A) dans 60 ml de diméthylformamide, avec 2,4 g d'acide (Z)-2-amino-a-ll 2- ( 1,1-diméthyléthoxy)-2-oxo-1-phényléthoxyliminol-4- thiazoleacétique, 1 g d'hydroxybenzotriazole et 1,5 g de dicyclohexylcarbodiimide, pendant 12 heures On chasse le solvant sous vide et on dissout le résidu dans 50 ml d'acétone On sépare par filtration l'urée précipitée et on traite la liqueur mère par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium En ajoutant de l'éther, on fait cristalliser le composé du titre, que l'on sépare par filtration On réalise la purification de ce composé par chromatographie sur colonne de "HP-20 " en uti- lisant comme gluant un mélange ( 7:3) d'eau et d'acétone, ce qui donne 1 g de produit, point de fusion > 250 C, avec décomposition. Exemple 68 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1 H-tétrazol-5-ylméthoxy)iminolacétylllaminol-2- oxo-lazétidinesulfonique On traite le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 1,9 g; voir l'Exemple 6 A) dans 60 ml de diméthylformamide, par 1,4 g d'acide (Z)-2-amino-a-l(l H-tétrazol-5-ylméthoxy)iminol-4- thiazoleacétique, 0,7 g d'hydroxybenzotriazole et 1,4 g de dicyclohexylcarbodiimide, en agitant, pendant 24 heures. Après avoir chassé le solvant sous vide, on dissout le résidu dans de l'acétone et on sépare par filtration l'urée précipitée On traite la liqueur mère par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans ml d'acétone On fait précipiter le composé du titre en ajoutant 200 ml d'éther On réalise la purification par chromatographie sur colonne de "HP-20 " en utilisant l'eau comme éluant, et on obtient 1, 05 g de produit, point de fusion 250 C, avec décomposition. Exemple 69 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l(phénylméthoxy)iminolacétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique On agite le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)3-amino-2-oxo-l-azétidinesulfonique ( 1,5 g; voir l'Exemple 6 A), 1,23 g d'acide (Z)-2-amino-a-l(phényl- méthoxy)iminol-4-thiazoleacétique, 0,57 g d'hydroxybenzo- triaole et 1,14 g de dicyclohexylcarbodiimide, dans 60 ml de diméthylformamide à la température ambiante pendant 24 heures On sépare par filtration l'urée précipitée, on chasse le solvant et on traite le résidu par une quantité équivalente de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 10 ml d'acétone En ajoutant 200 ml d'éther, on fait pré- cipiter le composé du titre, que l'on sépare par filtration et que l'on purifie par chromatographie sur colonne de "HP 20 " en utilisant comme éluant un mélange ( 9:1) d'eau et d'acétone, ce qui donne 1 g de substance, point de fusion C, avec décomposition. Exemple 70 Sel de potassium ( 1:1) de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l(carboxyméthoxry)iminolacétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique On mélange avec 5 ml d'anisole le sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)ll 2-(diphényl- méthoxy)-2-oxo-éthoxyliminolacétyllaminol-2-oxo-1-azétidine- sulfonique ( 1:1) ( 1,3 g; voir l'Exemple 30) A -15 C, on ajoute 25 ml d'acide trifluoracétique et on agite le mélan- ge pendant 10 minutes On ajoute lentement 100 ml d'éther à -10 C, puis 50 ml d'éther de pétrole On met le préci- pité en suspension, en refroidissant, dans 20 ml d'eau et on ajuste à p H 5,0 avec de la potasse diluée On purifie le produit par chromatographie sur une colonne de "HP-20 ", ce qui donne 3,0 g du composé du titre, point de fusion 230-235 C, avec décomposition. Exemple 71 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)ll 2-oxo-2-(phénylméth Qxy)éthoxyliminolacétyll- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 28, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a ll 2-(diphénylméthoxy)- 1,1-diméthyl-2-oxo-éthoxyliminol-4-thiazoleacétique par l'acide (Z)-2-amino-a-ll 2-oxo-2-(phénylméthoxy)éthoxyl- iminol-4-thiazoleacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 170 C environ, avec décomposition. Exemple 72 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-lll( 2-amino-2-oxo- éthoxy)iminol( 2-amino-4-thiazolyl)acétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 28, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-ll 2-(diphénylméthoxy)- 1,1-diméthyl-2-oxo-éthoxyliminol-4-thiazoleacétique par l'acide (Z)-2-amino-a-l( 2-amino-2-oxo-éthoxy)iminol-4- thiazoleacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 205-210 C, avec décomposition. Exemple 73 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(hydroxyimino)acétyllaminol-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On agite pendant une heure, avec 10 g d'un tamis moléculaire 4 A, une solution de 0,6 g d'hydroxybenzo- triazole à 90 % dans 100 ml de diméthylformamide, on filtre, et on ajoute le filtrat à une solution de 0,004 mole de sel de tétrabutylammonium d'acide (S)-3-amino-2-oxo-1- azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A) dans du diméthyl- formamide On ajoute 0,89 g d'acide (Z)-2-amino-a- (hydroxyimino)-4-thiazoleacétique, puis 0,91 g de dicyclo- hexylcarbodiimide On agite ce mélange pendant 16 heures environ, on le fait évaporer sous vide et on dissout le résidu dans 20 ml d'acétone, puis on filtre L'addition d'une solution de perfluorobutane sulfonate de potassium fait précipiter le composé du titre Une chromatographie sur résine "HP-20 " donne 0,44 g de produit, point de fusion > 240 C. Exemple 74 Sel de potassium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-l( 2-thiényl- acétyl)aminol-l-azétidinesulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-amino-3-méthoxy- 2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout dans 15 ml de méthanol sec le sel de tétrabutylammonium de l'acide ( )-3-méthoxy-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 143 mg, voir l'Exemple 49) On ajoute 12 mg ( 0,1 équiv) de Na 2 B 407 10 H 20, puis 72 mg de palladium à 10 % sur charbon. On hydrogène ce mélange sous une pression de une atmosphère pendant 15 minutes On sépare le catalyseur par filtration et on fait évaporer le filtrat sous vide, ce qui donne 114 mg du composé du titre. B) Sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3- l( 2-thiénylacétyl)aminol-1-azétidinesulfonique On dissout dans 10 ml d'acétonitrile sec 102 mg du sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-méthoxy 3-amino-2- oxo-1-azétidinesulfonique On ajoute 56,5 p 1 de pyridine sèche et on agite soigneusement la solution à -10 C sous azote sec On ajoute goutte à goutte 44 pi de chlorure de thiénylacétyle dans 1 ml d'acétonitrile sec La réaction est terminée au bout de 15 minutes,comme le montre une chromatographie en couche mince On ajoute un tampon de phosphate de potassium ( 0,5 M; p H 5,5; 4,2 ml) et 8,5 mg de sulfate de tétrabutylammonium ( 0,1 équiv), puis on élimine sous vide la plus grande partie de l'acétonitrile. On dilue le résidu avec de l'eau et on l'extrait avec trois fractions de 20 ml de chlorure de méthylène On sèche l'extrait sur du sulfate de sodium anhydre et on le fait évaporer sous vide pour obtenir 107 mg d'une gomme On purifie le produit brut par chromatographie sur gel de silice en utilisant comme éluant un mélange de chlorure de méthylène et de méthanol, ce qui donne 66 mg du composé du titre. C) Sel de potassium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-l( 2- thiénylacétyl)amino-l azétidinesulfonique On dissout 154 mg du sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-l( 2-thiénylacétyl)aminol-1- azétidinesulfonique dans 3 ml d'acétone aqueuse à 30 %, on fait passer la solution dans une colonne de "Dowex 50 W-X 2 " (forme K+) et on élue avec le même solvant On fait évapo- rer l'éluat total sous vide pour obtenir 95 mg de produit, que l'on lyophilise pour obtenir une poudre amorphe, point de fusion 120 135 C. Analyse pour C 10 Hil N 20652 K n ly p 10 il 2 6 2 Calculé: C, 33,51; H, 3,09; N, 7,82; S, 17,89 Trouvé: C, 33,46; H, 3,08; N, 7,92; S, 17,64. Exemple 75 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l(carboxyméthoxy)iminolacétyllaminol-2-oxo-1- *azétidinesulfonique On dissout le sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3- ll( 2-amino-4-thiazolyl) ll 2-oxo-2-(phénylméthoxy)éthoxyl- iminolacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,1 g; voir l'Exemple 71) dans un mélange de 5 ml d'éthanol et de ml d'eau, et on hydrogène la solution à la température ambiante en présence de 0,2 g de palladium à 10 % sur charbon Au bout de 2 heures, on sépare le catalyseur par filtration et on fait subir à la solution restante une cryodessication, ce qui donne le composé du titre, p f. 235 C avec décomposition. Exemple 76 S$el de potassium de l'acide 3-ll(S)-l(aminocarbonyl)aminol- 2-thiénylacétyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfoni- que, isomère A A une solution de sel de tétrabutylammonium d'acide 3amino-3-méthoxy-2-oxo-1 azétidinesulfonique ( 277 mg; voir l'Exemple 46, méthode II, partie A) dans 15 ml d'acétonitrile sec, à -20 C, on ajoute 71 p 1 ( 0,888 mmole) de pyridine et 166 mg de chlorhydrate de (D)-2-amino-4-( 2- thiényl)-5-( 4 H)-oxazoline On agite ce mélange pendant minutes et on ajoute une seconde fraction de 71 p 1 de pyridine et de 166 mg d'oxazoline Au bout de 10 autres minutes, on chasse le solvant sous pression réduite et on dissout le résidu dans un mélange d'eau et d'acétone, puis on fait passer la solution dans une résine d'échange d'ions ( 20 ml de "AG 50 W-X 2 ", forme K, 37 74 p) L'élimination de l'eau des fractions 2 et 3 donne un mélange de diastéréo- isomères ( 248 mg). On purifie ce produit et on sépare les diastéréo- isomères sur "Diaion AG HP 20 " ( 130 ml) en éluant avec de l'eau On élue l'isomère A dans les fractions 23 à 28 ( 30 mg) et l'isomère B dans les fractions 35 à 45 ( 30 mg) (fractions de 8 ml) On réunit les fractions intermédiaires ( 10 mg) aux fractions provenant d'autres passages et on isole un total de 35 mg de l'isomère A et de 50 mg de l'isomère B. Analyse pour i'isomère A, p f 158-165 C pour Cll H 3 N 40752 K 1/2 H 20 Calculé: C, 31,05; H, 3,29; N, 13,18 Trouvé: C, 30,95; H, 2,97; N, 12,98 Analyse pour l'isomère B, p f 160-170 C (décomposition) pour Cll H 13 N 40752 K 1/2 H 20 Calculé: C, 31,05; H, 3,29; N, 13,18; S, 15,05 Trouvé: C, 31,17; H, 3,09; N, 13,13; S, 15,09. 81 2509299 Exemple 77 Sel dipotassique de l'acide 3-méthoxy-2-oxo-3-l(phényl- sulfoacétyl)amino-l azétidinesulfonique A une solution agitée de sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-1azétidinesulfonique brut ( 366 mg; voir l'Exemple 74 A) et de 38 mg de borax dans 35 ml d'acétonitrile sec à -10 C, sous azote, on ajoute 0,53 ml de pyridine sèche, puis, en deux minutes, une solution de monoéthérat de chlorure d'a-sulfophényl- acétyle ( 348 mg) dans 8 ml d'acétonitrile Au bout de 20 minutes, on chasse le solvant sous vide et on traite le résidu par 35 ml d'un tampon de phosphate de potassium 0,5 M à p H 5,5 On ajoute 383 mg d'hydrogéno-sulfate de tétra- butylammonium et on extrait le mélange trois fois avec du chlorure de méthylène On sèche la couche chlorure de méthylène sur du sulfate de sodium et on fait évaporer pour obtenir 685 mg de produit brut On réunit ce produit brut à 115 mg du produit brut provenant d'un second essai, et on purifie la substance totale sur une colonne de "Sili CAR CC-4 " en utilisant comme éluant du chlorure de méthylène, puis du méthanol à 2, 4, 6, 8 et 10 % dans du chlorure de méthylène On transforme le produit, formé d'un mélange ( 6:1 environ) de diastéréo- isomères racémiques sous la forme du sel de tétrabutyl- ammonium, en sel de potassium en le faisant passer à travers une résine "Dowex 50 W-X 2 " (forme K), en utilisant comme solvant de l'acétone à 20 % dans l'eau On'lyophilise le produit, ce qui donne 171 mg du composé du titre, point de fusion 205-210 C, avec décomposition. Analyse pour C 12 H 12 N 20952 K 2 H 20: Calculé: C, 29,51; H, 2,89; N, 5, 74; S, 13,10 Trouvé: C, 29,45; H, 2,74; N, 5,51; S, 12,82. Exemple 78 Sel dipotassique de l'acide 3-l(carboxyphénylacétyl)aminol- 3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout dans 5 ml de méthanol le sel de potassium do l'acide 3 l 1,3-dioxo-2-phényl-3-(phénylméthoxy)propyll- aminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 39 mg; voir l'Exemple 51) On ajoute 3,9 mg de carbonate de potassium anhydre et 19 mg de palladium à 10 % sur charbon et on hydrogène le mélange sous la pression atmosphérique pendant minutes On sépare le catalyseur par filtration et on fait évaporer le filtrat sous vide pour obtenir un résidu vitreux ( 34 mg) que l'on lyophilise en une poudre amorphe, point de fusion 178-190 C, avec décomposition. Analyse pour C 13 H 208 N 2 S K 0,5 H 20 13 12 8 2 S 12 *, 120 Calculé: C, 35,20; H, 3,18; N, 6,32; S, 7,23 Trouvé: C, 35-,51; H, 2,96; N, 6,29; S, 6,92. Exemple 79 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 2-( 1,1-diméthyléthoxy)-1-(méthylthio)-2-oxo- éthoxyliminolacétyllamino -2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 73, mais en rempiaçant l'acide (Z)-2-amino-a-(hydroxyimino)-4- thiazoleacétique par l'acide (Z)-2-amino-a-,ll 2-( 1,1- diméthyléthoxy)-l-(méthylthio)-2-oxo-éthoxyliminol-4- thiazoleacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 130 C, avec décomposition. Exemple 80 Sel de potassium de l'acide ( )-3-butoxy-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On refroidit à -78 C une solution de 185 mg de sel de tétrabutylammonium d'acide 2-oxo-3-lN-chloro-N-l(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 49 A) dans 1 ml de diméthylformamide, et-on ajoute 3,8 ml de n-butylate de lithium 0, 73 M dans du n-butanol Au bout de 15 minutes, on ajoute un tampon de phosphate de potassium monobasique 0,5 M et on extrait le produit dans trois fractions de 40 ml de dichlorométhane, on sèche sur sulfate de sodium, on filtre et on concentre sous vide pour obtenir 179 mg du sel de tétrabutylammonium correspondant du composé du titre. A une solution de 109 mg de ce sel de tétrabutyl- ammonium dans de l'acétone, on ajoute 60 mg de sel de potassium d'acide perfluorobutylsulfonique dans de l'acétone. On chasse le solvant sous vide et on ajoute de l'acétate d'éthyle le produit cristallise, et on le recueille et on le sèche pour obtenir 66 mg du composé du titre, point de fusion 186,5 187,5 C, avec décomposition. Exemple 81 Sel de potassium de l'acide l 3 (E)l-3-méthoxy-3-ll(méthoxy- imino)l 2-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-4-thiazolyll- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfoniaue On traite une suspension de sel de tétrabutyl- ammonium d'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfo- nique (Exemple 46, Méthode II, Partie A) ( 0,175 mmole) et de 0,0175 mmole de borate de sodium dans 2 ml de dichloro- méthane à O C, par 28 pl de pyridine et 0,175 mmole de chlorure de (E)-a-(méthoxyimino)-2-ll(phénylméthoxy)- carbonyllaminol-4-thiazolylacétyle Au bout d'une heure, on dilue le mélange avec du dichlorométhane et on le stabi- lise avec de l'eau On lave la couche organique avec del'eau, avec une solution saline saturée, on sèche, et on fait évapo- rer sous vide On purifie le résidu sur gel de silice. Mallinckrodt "Silic AR CC-4 " ( 20 g) pour obtenir 43 mg du sel de tétrabutylammonium correspondant du composé du titre. On dissout ce sel de tétrabutylammonium ( 43 mg) dans 0,5 ml d'acétone et on ajoute 20 mg de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 0,5 ml d'acétone Après avoir ajouté 3 ml d'éther, on recueille le solide et on le sèche sous vide pour obtenir 28 mg du composé du titre, point de fusion 144-146 C, avec décomposition. Exemple 82 Sel de potassium de l'acide l 3 (Z)l-3-méthoxy-3-ll(méthoxy- imino)l 2-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-4-thiazolylll- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 81, mais en remplaçant le chlorure de (E)-a-(méthoxyimino)-2 ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-4-thiazolylacétyle par le chlorure de (Z)-a-(méthoxyimino)-2-ll(phénylméthoxy)- carbonyllaminol-4-thiazolylacétyle, on obtient le composé du titre, point de fusion 168 -172 C, avec décomposition. Exemple 83 Sel de potassium de l'acide 3-ll(R)-a-ll( 4-éthyl-2,3-dioxo- 1-pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacétyllaminol-3- méthoxy-2-oxo-l-azétidinesulfonique A une solution agitée de 0,69 mmole de sel de tétra- butylammonium d'acide, 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidine- sulfonique (Exemple 46, Méthode II, Partie A) dans 30 ml d'acétonitrile sec à -20 C, sous azote, on ajoute 242 p 1 de pyridine sèche, puis une solution de 352 mg de chlorure de (R)-a-ll( 4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyllaminol- phénylacétyle dans 4 ml d'acétonitrile Au bout d'une heure, on ajoute 84 pi de pyridine, puis encore 117 mg du chlorure d'acide indiqué ci-dessus dans 1 ml d'acétonitrile. On agite le mélange réactionnel pendant 20 minutes, on le dilue avec 24 ml de tampon de phosphate de potassium mono- basique 0,5 M à p H 5,5, et on le concentre sous vide pour éliminer l'acétonitrile On extrait le restant aqueux trois fois avec du chlorure de méthylène et on sèche les extraits réunis sur du sulfate de sodium puis on les fait évaporer, ce qui laisse 546 mg de résidu Le passage de ce résidu dans une colonne de gel de silice en utilisant comme éluant du chlorure de méthylène, puis du méthanol à 2 %, 4 % et 6 % dans du chlorure de méthylène, donne deux frac- tions ( 285 mg et 173 mg) du sel de tétrabutylammonium correspondant du composé du titre. Le passage de la fraction de 173 mg à travers 4,5 g de résine "Dowex 50-X 2 " (K) en utilisant un mélange d'acétone et d'eau comme éluant donne 119 mg du composé du titre On fait passer une fraction de 104 mg de cette substance dans une colonne de résine "HP 20-AG" dans de l'eau L'élution successive avec de l'eau, de l'acétone à % dans l'eau et de l'acétone à 10 % dans l'eau donne 60 mg de produit sous la forme d'un mélange ( 1:1 environ) de diastéréo-isomères La lyophilisation de la fraction de mg donne un solide, point de fusion 171-172 C avec décomposition. Exemple 84 Sel de tétrabutylammonium du N-( 3-butoxy-2-oxo-1-sulfo-3- azétidinyl)-2-phénylacétamide En suivant le mode opératoire de l'Exemple 80, mais en remplaçant le sel de tétrabutylammonium de l'acide 2- oxo-3-lN-chloro-N-l(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l- azétidinesulfonique par le sel de tétrabutylammonium du N-chloro-N-( 2oxo- 11-sulfo-3-azétidinyl)-2-phénylacétamide (voir l'Exemple 47 A pour la préparation du sel depotassium correspondant), on obtient le composé du titre sous la forme d'une huile: RMN (CDC 13) 3,62 (s,2 H,C 6 H 5 CH 2) , 4,03 (A Bq,2 H, V= 7 cps, C-4 CH 2), 6,98 (s,l H,NH) et 7,30 ppm (S,5 H,C 6 H 5). Exemple 85 Sel de potassium de l'acide (R)-3-méthoxy-2-oxo-3-l(phényl- acétyl)aminol-l-azétidinesulfonique On prépare une solution 1 M de complexe de diméthyl- formamide-trioxyde de soufre en ajoutant lentement du chlorosulfonate de triméthylsilyle à du diméthylformamide à O C, puis en faisant évaporer sous 0,1 mm pendant 30 mi- nutes à O -25 C Sous atmosphère d'argon, on dissout 50 mg de (R)-N-( 3méthoxy-2-oxo-1-azétidinyl)phénylacétamide dans 0,2 ml de diméthylformamide anhydre et on refroidit à O C. On ajoute une solution froide de complexe de diméthyl- formamide-trioxyde de soufre 1 M ( 0,428 ml), on agite le mélange pendant 2 heures et on le verse dans 15 ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M On extrait la solution deux fois avec du dichlorométhane (jeté) et on ajoute 73 mg de bisulfate de tétrabutylammonium L'extrac- tion au dichlorométhane (trois fractions de 10 ml) donne une huile visqueuse, après séchage et évaporation sous vide. Une chromatographie sur gel de silice de Mallinckrodt"CC-4 " ( 50:1) en utilisant comme éluant du méthanol à 2 % dans le dichlorométhane, donne 34 mg de sel de tétrabutylammonium d'acide (R)-3-méthoxy-2-oxo-3-l(phénylacétvy)aminol-1- azétidinesulfonique Un échange d'ions sur "Dowex 50 W-X 2 " (K, 10 équivalents) donne le sel de potassium du titre après lyophilisation de l'éluat aqueux: point de fusion C, avec décomposition, lalD= + 52 (C= 0,5, dans l'eau). Exemple 86 Sel de potassium de l'acide (S)-3-llll( 1-éthyl-4-hydroxy- 3-méthyl-l H-pyrazolol 3,4-blpyridin-5-yl)carbonylllaminol- phénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 73, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-4-(hydroxyimino)-4- thiazoleacétique par l'acide a l ( 1-éthyl-4-hydroxy-3- méthyl-l H-pyrazolol 3,4-blpyridin-5-yl)carbonyllaminol- behzaneacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 233-236 C, avec décomposition. Exemple 87 Sel de potassium de l'acide (R)-3-acétylamino-3-méthoxy-2- oxo-lazétidinesulfonique A) 3-acétylamino-l-l 1-carboxy-2-méthyl(propyl)l-( 3 R)-3- méthoxy-2-oxoazétidine A une solution de 650 mg d'acide ( 6 R-cis)-7-acétyl- amino-7-méthoxy-3-méthyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclol 4 2 0 l- oct-2-ène-2-carboxylique et de 191 mg de bicarbonate de sodium dans l'eau, on ajoute 11 ml d'une suspension de nickel de Raney du commerce ( 0,6 g/ml), que l'on a rendue neutre par lavage à l'eau On fait descendre le mélange dans un bain d'huile préchauffé à 170 C et on met au reflux en 2 à 3 minutes, tout en maintenant la température du bain à 150 -170 C Après 15 minutes de reflux, on stabilise la réaction par refroidissement dans un bain de glace On sépare le catalyseur par filtration sur "celite" et on ajuste le p H du filtrat ( 11) à p H 2 avec de l'acide chlorhydrique 1 N Après avoir extrait la solution aqueuse cinq fois avec de l'acétate d'éthyle, on sèche sur sulfate de sodium les extraits réunis et on chasse le solvant sous vide pour obtenir 487 mg d'une huile Une chromatographie sur gel de silice donne le produit (élué dans du chloro- forme) sous la forme d'une huile ( 381 mg). B) 3-acétylamino-1-l 1 (acétyloxy)-2-méthyl(propyl)l-( 3 R)- 3-méthoxy-2-oxoazétidine On dissout l'azétidinone précédente ( 464 mg) dans 15 ml d'acétonitrile sec et on purge la solution à l'argon pendant 15 minutes On ajoute 359 mg d'acétate de cuivre, on agite pendant une minute pour dissoudre le sel, et on ajoute 797 mg de tétraacétate de plomb Tandis que l'argon continue à barboter dans le mélange, on élève la tempéra- ture de la réaction en faisant descendre le ballon dans un bain d'huile, préchauffé et maintenu à 55 -65 C pendant minutes On laisse le mélange se refroidir à la tempé- rature ambiante, on le filtre sur "Celite" et on lave soigneusement le tampon filtrant avec de l'acétonitrile. 250 o 299 On chasse le solvant sous vide du filtrat et des eaux de lavage réunis On reprend le résidu dans l'eau, et on l'extrait quatre fois à l'acétate d'éthyle On sèche les extraits réunis sur du sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide pour obtenir le produit voulu sous la forme d'une huile ( 382 mg). C) (R)-N-( 3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinyl)acétamide On dissout l'huileprécédente dans un mélange de ml de méthanol et de 1 ml d'eau, on refroidit dans un bain de glace et de méthanol à -10 à -15 C, et on ajoute 194 mg de carbonate de potassium, puis 53 mg de borohydrure de sodium Apres avoir agité à une température de -15 à 8 C pendant 110 minutes, bn chasse le solvant sous vide, on reprend le résidu dans l'eau et on ajuste le p H de la solution à 6 avec de l'acide chlorhydrique 1 N Une extrac- tion exhaustive à l'acétate d'éthyle, un séchage sur sulfa- te de sodium et une élimination du solvant sous vide per- mettent d'obtenir 224 mg d'une huile Une chromatographie de cette huile sur gel de silice, en éluant avec un mélange de 5 % de méthanol et de 95 % de chlorure de méthylène, donne 169 mg d'une huile Le composé du titre cristallise à partir d'un mélange d'éther et de pentane en donnant 131 mg de substance, point de fusion 106 -112 C (frittage à 103,5 C). D) Sel de potassium de l'acide (R)-3-acétylamino-3-méthoxy- 2-oxo-1-azétidinesulfonique Sous atmosphère d'argon, on place dans un ballon et on refroidit à O C 50 mg de (R)-3-acétylamino-3-méthoxy-2- oxo-l-azétidine On ajoute ensuite une solution 1 M de complexe diméthylformamide-trioxyde de soufre dans 0,95 ml de diméthylformamide, et on agite la solution pendant 15 minutes On verse ensuite le contenu du ballon dans 40 ml d'une solution de K 2 HPO 4 0,5 M, et on l'extrait deux fois avec 10 ml de chlorure de méthylène On ajoute 1,2 équi- valent de sulfate de tétrabutylammonium à la solution aqueuse et on extrait le mélange résultant avec quatre fractions de 10 ml de chlorure de méthylène On sèche ensuite les extraits sur du sulfate de sodium et on les concentre pour obtenir 39 mg de produit On transforme le sel de tétrabutylammonium en le sel de potassium du titre en le faisant passer dans une colonne de "Dowex 50-X 2 " (K+). La concentration de la fraction aqueuse donne 19 mg du sel de potassium, avec un spectre RMN identique à celui du produit préparé dans l'Exemple 46, Méthode I, partie B, et de celui obtenu par isolement à partir de sources natu- relles (Exemple 165). Exemple 88 Sel de potassium de l'acide ( )-3-l(azidophénylacétyl)- aminol-3-méthoxy-2-oxo-l-azétidinesulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( )-3-l(azido- phénylacétyl)aminol-3-méthoxy-2-oxo-l-azétidinesulfonique On dissout dans 20 ml d'acétonitrile sec le sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-1- azétidinesulfonique ( 202 mg; voir l'Exemple 74 A) A la solution bien agitée, à -20 C, sous azote sec, on ajoute 167 pl de pyridine sèche et 96 pl d'a-azidophénylacétyle. Au bout de 20 minutes, on ajoute 12 ml d'un tampon de phosphate de potassium monobasique 0,5 M à p H 5,5, et on chasse l'acétonitrile sous vide On extrait le résidu aqueux trois fois avec du chlorure de méthylène On sèche l'extrait sur du sulfate de sodium anhydre et on le fait évaporer sous vide pour obtenir 281 mg de produit brut sous la forme d'une gomme On purifie cette gomme par chromatographie dans une colonne de gel de silice ( 30 g) en utilisant comme éluant du chlorure de méthylène et des mélanges de chorure de méthylène et de méthanol contenant jusqu'à 6 % de méthanol, ce qui donne 231 mg du composé du titre. B) Sel de potassium de l'acide ( )-3-l(azidophénylacétyl)- aminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique On fait passer 231 mg de sel de tétrabutylammonium d'acide ( )-3-l(azidophénylacétyl)aminol-3-méthoxy-2-oxo-1- azétidinesulfonique dans 15 ml d'acétone aqueuse à 30 %, dans une colonne de "Dowex 50 W-X 2 " (forme K; 3 ml), et on élue à l'eau On fait évaporer l'éluat total sous vide pour obtenir un verre incolore ( 168 mg) sous la forme d'un mélange 1:1 de diastéréo-isomères Le passage de ce mélange dans une colonne de 60 ml de "HP 20-AG" en utilisant l'eau et de l'acétone aqueuse à 10 % comme éluant donne 71 mg d'un mélange 1:1 de diastéréo-isomères racémiques et 70 mg d'un mélange 1:3 de diastéréoisomères racémiques On lyophilise le mélange 1:1 et on le sèche sous vide à 40 C pour obtenir le produit sec sous la forme d'un hémihydrate, point de fusion 130 C, avec décomposition. Analyse pour C 12 H 12 N 506 K 0,5 H 2 O: Calculé: C, 35,90; H, 3,26; N, 17,45; S, 7,98 Trouvé: C, 35,94; H, 3,07; N, 17,24; S, 8,02 Exemple 89 Sel de potassium de l'acide 3-l(azidophénylacétyl)aminol- 3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique, isomère A On laisse reposer dans de l'eau deutérée à la tempé- rature ambiante le mélange 1:3 de diastéréo-isomères racé- miques obtenu dans l'Exemple 88 B, et l'isomère A cristalli- se Après réfrigération, on sépare la liqueur mère et on sèche les cristaux ( 28 mg) sous vide à 40 C, point de fusion 130 C, avec décomposition, sous la forme d'un mono- deutérate. Exemple 90 Sel de potassium de l'acide l 3 (R*)l-3-llll( 4-éthyl-2,3- dioxo-l-pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacétyllaminol-3- méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique A une solution agitée de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,69 mmole; voir l'Exemple 74 A) dans 30 ml d'acétonitrile sec à -20 C, sous azote, on ajoute 242 p 1 de pyridine sèche, puis une solution de 352 mg de chlorure de (R)-a-ll( 4-éthyl- 2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacétyle dans 4 ml d'acétonitrile Au bout d'une heure, on ajoute 84 p 1 de pyridine, puis encore 117 mg du chlorure d'acide dans 1 ml d'acétonitrile On agite le mélange réactionnel pendant 20 minutes, on le dilue avec 24 ml d'un tampon de phosphate de potassium monobasique 0,5 M à p H 5,5, et on le concentre sous vide pour éliminer l'acétonitrile On extrait le reste aqueux trois fois avec du chlorure de méthylène et on sèche les extraits réunis de chlorure de méthylène sur du sulfate de sodium et on fait évaporer pour obtenir 546 mg d'un résidu Le passage de cette substance dans une colonne de "Silic AR CC-4 ", en utilisant comme éluant du chlorure de méthylène puis du méthanol à 2 %, à 4 %, et enfin à 6 % dans du chlorure de méthylène, donne deux fractions ( 285 mg et 173 mg) de produit purifié, sous la forme du sel de tétrabutylammonium. Le passage de la fraction de 173 mg à travers 4,5 g de résine "Dowex 50-X 2 " (K+) en utilisant comme éluant un mélange d'acétone et d'eau donne 119 mg de sel depotassium. On fait passer une fraction de 104 mg de cette substance dans une colonne de résine "HP 20-AG" dans de l'eau L'élu- tion successive avec de l'eau, de l'acétone à 5 % dans l'eau et enfin de l'acétone à 10 % dans l'eau fournit 60 mg de produit sous la forme d'un mélange ( 1:1 environ) de diastéréo-isomères et 21 mg de produit sous la forme d'un mélange ( 9:1 environ) de diastéréo-isomères La lyophili- sation de la fraction de 60 mg donne le composé du titre, point de fusion 171-172 C avec décomposition. Analyse pour C 19 H 22 N 509 SK H 20: Calculé: C, 41,23; H, 4,37; N, 12, 65; S, 5,78 Trouvé: C, 41,39; H, 4,12; N, 12,58; S, 5,63. La lyophilisation de la fraction de 21 mg donne le composé du titre, point de fusion 171-172 C, avec décomposition. Analyse pour C 19 H 22 N 509 SK H 2 : Calculé: C, 41,23; H, 4,37; N, 12, 65 Trouvé: C, 41,43; H, 4,11; N, 12,28 Le traitement de la fraction de 285 mg du sel de tétrabutylammonium par la résine "Dowex 50-X 2 " (K +) donne mg de sel de potassium, que l'on réunit aux 15 mg res- tants de la fraction susmentionnée de 119 mg de sel de potassium obtenus par traitement par la résine "Dowex" Le passage de cette substance à travers une résine "HP 20-AG", comme déjà décrit, fournit 31 mg supplémentaires de produit sous la forme d'un mélange ( 1:1 environ) de diastéréo- isomères et 42 mg supplémentaires de produit sous la forme d'un mélange ( 9:1 environ) de diastéréo-isomères La quan- tité totale du mélange ( 1:1) de diastéréo-isomères est de 91 mg, et la quantité totale du mélange ( 9:1) de diastéréo- isomères est de 63 mg. Exemple 91 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-l(méthoxyimino)l 2- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-4-thiazolyllacétyllamino - 2-oxo-1-azétidinesulfonique A une solution de sel de tétrabutylammonium d'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,170 mmole; voir l'Exemple 6 A) et de 0,170 mmole de borate de sodium dans 2 ml de chlorure de méthylène à O C, on ajoute 62 p 1 de pyridine et 0; 51 mmole de chlorure de (Z)-a-(méthoxyimino)- 2-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-4-thiazoleacétyle On dilue le mélange réactionnel, au bout de 40 minutes, avec du chlorure de méthylène et de l'eau, puis avec du sulfate de tétrabutylammonium 0,1 M'tamponné à p H 4 ( 5,1 ml) On sépare la couche organique et on la lave avec de l'eau ajus- tée à p H 2, de l'eau ajustée à p H 7, de l'eau saturée de chlorure de sodium, on sèche sur sulfate de sodium, on filtre, et on concentre sous vide On purifie le résidu sur 10 g de gel de silice "Silic AR CC-4 " et on élue le produit avec un mélange de 10 % de méthanol et de chlorure de méthylène. On fait passer le sel de tétrabutylammonium, après dissolution dans un mélange d'acétone et d'eau, dans une résine d'échange d'ions ( 8 ml, "AG 50 W-X 2 ", forme K+, 74 à 149 P) L'élimination de l'eau sous vide à partir des fractions 1 et 2 donne 40 mg du composé du titre, point de fusion 172 -174 C, avec décomposition. Analyse pour C 17 H 16 N 50852 K H 20: Calculé: C, 37,84; H, 3,33; N, 12, 99; S, 11,87 Trouvé: C, 37,95; H, 3,30; N, 12,73; S, 11,53 Exemple 92 Sel de potassium de l'acide ( )-3-butoxy-2-oxo-3-l(phényl- acétyl)aminol-l-azétidinesulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-lchloro(phényl- acétyl)aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On ajoute une solution de sel de tétrabutylammonium d'acide (S)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1- azétidinesulfonique ( 350 mg; voir l'Exemple 4) dans 3 ml de chlorure de méthylène à une suspension de 1,27 g de borate de sodium dans une solution à 5,25 % de 4,72 ml d'hypochlorite de sodium et de 20 ml d'eau, à O C Au bout d'une heure, on ajoute 25 ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M et on extrait le mélange trois fois avec des fractions de 50 ml de chlorure de méthylène On sèche les extraits organiques sur du sulfate de sodium, on les filtre et on les concentre sous vide pour obtenir 344 mg du composé du titre. B) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( )-3-butoxy-2- oxo-3-l(phénylacétyl)aminol-1-azétidinesulfonique On ajoute une solution de 344 mg de sel de tétra- butylammonium d'acide 3-llchloro(phénylméthoxy)carbonyll- amino-l azétidinesulfonique dans 5 ml de diméthylformamide à du n-butylate de lithium 0,73 M dans 6 ml de n- * butanol,dans 1 ml de diméthylformamide à -78 C sous atmos- phère inerte Au bout de 10 minutes, on dilue le mélange avec 175 ml d'une solution de phosphate de potassium mono- basique 0,5 M Apres triple extraction avec du chlorure de méthylène, on sèche l'extrait organique sur du sulfate de sodium,' on filtre et on chasse le solvant sous vide On purifie le résidu sur 80 g de gel de silice (Silic AR CC-4 " et on élue-le composé du titre ( 130 mg) avec 4 à 8 % de méthanol dans du chlorure de méthylène. C) Sel de potassium de l'acide ( )-3-butoxy-2-oxo-3- l(phénylacétyl)aminol-l-azétidinesulfonique On dissout 43 mg du sel de tétrabutylammonium de l'acide ( )-3-butoxy-2-oxo-3-l(phénylacétyl)aminol-1- azétidinesulfonique dans un mélange ( 9:1) d'eau et d'acéto- ne et on place la solution dans une colonne d'échange de cations ("Dowex AGMP 50 W-X 2 ", 74 à 149 p, 5 g, forme K +). On élue le produit avec de l'eau et on concentre l'éluat sous vide pour obtenir 20 mg du composé du titre, point de fusion 122 125 C. Analyse pour C 15 H 9 N 2 6 SK 1/2 H 20: Calculé: C, 44,66; H, 4,96; N, 6, 95; S, 7,94 Trouvé: C, 44,77; H, 4,76; N, 6,76; S, 7,75 Exemple 93 Sel de potassium de l'acide ( )-3-éthoxy-2-oxo-3-l(phényl- acétyl)aminol-l-azétidúnesulfonique On ajoute le sel de tétrabutylammonium de l'acide 3-lchloro(phénylacétyl)aminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique ( 200 mg; voir l'Exemple 92 A) dans 4 ml de diméthylformami- de, à de l'éthylate de lithium 0,5 M dans 12,20 ml d'éthanol, à -78 C sous atmosphère inerte Au bout de 10 minutes, on dilue le mélange avec 15 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M Apres triple extraction avec du chlorure de méthylène, on sèche la couche organique sur du sulfate de sodium, on filtre et on chasse le solvant sous vide On purifie le résidu sur 20 g de gel de silice "Silic AR CC-4 " et on élue le sel de tétrabutylammonium du produit ( 40 mg) avec du méthanol à 2 % dans du chlorure de méthylène. On dissout le sel de'tétrabutylammonium dans un mélange ( 9:1) d'eau et d'acétone et on le fait passer dans une colonne d'échange de cations ("Dowex AGMP 50 W-X 2 ", 74 à 149 p, 5 g, forme K+) On élue ce produit avec de l'eau et on concentre l'éluat sous vide pour obtenir 25 mg du composé du titre, point de fusion 94 -96 C. Analyse pour C 13 H 15 2065 K: Calculé: C, 42,62; H, 4,10; N, 7,65; S, 8, 74 Trouvé: C, 40,36; H, 3,66; N, 6,77; S, 8,44 Exemple 94 Sel de potassium de l'acide l 3 (Z)1-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-3-méthôxy-2-oxo-1- azétidinesulfonique On dissout le sel de tétrabutylammonium de l'acide 3amino-3-méthoxy-2-oxo-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 46, Méthode II, Partie A) dans 20 ml d'acéto- nitrile et on ajoute 1 ml de pyridine à une suspension énergiquement agitée de chlorure de (Z)-a-(méthoxyimino)-2- amino-4-thiazoleacétyle dans 20 ml d'acétonitrile refroidi à O 5 C Apres avoir agité à froid pendant une heure, on dilue le mélange avec 100 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M (le p H du mélange est de 4,8) et on chasse le solvant sous vide On reprend le résidu dans une quantité minimale d'eau contenant une nptite ruantité d'acétone Une chromatoqraphie sur résine d'échange d'ions ("AG 50 W-X 2 ", 74 -149 li, forme K+, 200 ml) donne le produit brut sous la forme du sel de potassium, après élution avec de l'eau Une nouvelle purification sur résine "HP-20 " ( 200 ml) en utilisant l'eau comme éluant, donne 59 mg du produit sous la forme d'une poudre après trituration avec un mélange d'acétoninitrile et d'éther puis deux fois avec de l'éther Le produit est une poudre amorphe qui fond lentement et se décompose au-dessus de C. Analyse pour C 10 H 12 N 5075 K Calculé: C, 28,77; H, 2,90; N, 16,78;S, 15,36; K, 9,37 Trouvé: C, 27,77; H, 2,82; N, 15,87;S, 13,63; K, 10,11. Exemple 95 Sel de potassium de l'acide l 3 R(R*) et 3 S(S*)l-3-lll(amino- carbonyl)aminolphénylacétyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1 azétidinesulfonique A) Sel interne de l'acide ( )-3- l(aminophénylacétyl)- aminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfoniaue On dissout dans 60 ml de méthanol sec le sel de potassium de l'acide ( )-3-l(azidophénylacétyl)aminol-3- méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 209 mg; voir l'Exem- ple 88) On ajoute 0,6 ml d'acide trifluoracétique anhydre et 105 mg de palladium à 10 % sur charbon et on hydrogène le mélange pendant une heure On sépare le catalyseur par filtration et on fait évaporer le filtrat sous vide pour obtenir 271 mg de produit brut. B) Sel de potassium de l'acide l 3 R(R*) et 3 S(S*)l-3- lll(aminocarbonyl)aminolphénylacétyllaminol-3:-méthoxy-2- oxo-l-azétidinesulfonique On dissout dans 6,5 ml d'eau 271 mg du sel de potassium de i'acide ( )-3-l(aminophénylacétyl)aminol-3- méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique On ajoute 87 mg de cyanate de potassium et on agite le mélange à la températu- re ambiante pendant 3 heures On concentre la solution sous vide à environ 2 ml et on lui fait subir une chromato- graphie dans une colonne de 100 ml de "HP 20-AG" en utili- sant l'eau comme éluant On isole l'isomère A ( 29 mg) après lyophilisation, point de fusion 160 C, avec décomposition. Analyse pour C 13 H 15 N 407 SK monohydraté: Calculé: C, 36,44; H, 3,99; N, 13,07; S, 7,48 Trouvé: C, 36,35; H, 3,79; N, 12,81; S, 7,32. Exemple 96 Sel de potassium de l'acide l 3 R(S*) et 3 S(R*)l-3-rlll(amino- carbonyl)aminolphénylacétyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1- azétidinesulfonique Avec le sel de potassium de l'acide l 3 R(R*) et 3 S(S*)l-3-lll(aminocarbonyl)aminolphénylacétyllaminol-3- méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique produit dans l'Exemple , il est également produit 21 mg de sel de potassium de l'acide l 3 R(S*) et 3 S(R*)l-3-lll(aminocarbonyl)aminol- phénylacétyllaminol-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique, sous la forme d'un lyophilisat, point de fusion 160 C, avec décomposition. Analyse pour C 13 H 15 N 407 SK sesquihydraté: Calculé: C, 35,69; H, 4,14; N, 12,81; S, 7,33. Trouvé: C, 35,98; H, 3,87; N, 12,50; S, 7,32. Exemple 97 Sel de potassium de l'acide l 3 t( 54)l-3-méthoxy-3-lllll 2- oxo-3-l(phénylméthylène)aminol-1-imidazolidinyllcarbonyll- aminol-2-thiénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique A une solution agitée de sel de tétrabutylammonium d'acide 3-amino-3-méthoxy-2-oxoazétidinesulfonique ( 306 mg de substance brute supposés contenir 274 mg de substance organique, préparée comme décrit dans l'Exemple 74) dans 20 ml d'acétonitrile sec à -20 C, sous azote, on ajoute 0,30 ml de pyridine sèche ( 3,72 mmoles), suis 484 mg de chlorure de (S)-llll( 2-oxo-3-phénylméthylène)aminol-l- imidazolidinyllcarbonyllaminol-2-thiénylacétyle, partielle- ment dissous et en suspension dans 10 ml d'acétonitrile sec On agite le mélange réactionnel et on le laisse se réchauffer à O C en une heure. On dilue le mélange réactionnel avec un grand v 3 olume de chlorure de méthylène, puis on traite par 22 ml d'un tampon de phosphate de potassium monobasique 0,5 M à p H 5,5. On lave la couche aqueuse avec du chlorure de méthylène et on lave l'extrait chlorure de méthylène avec de l'eau, on sèche sur sulfate de sodium et on fait évaporer en un résidu ( 508 mg) On fait subir à ce résidu une chromatogra- phie sur 50 g de "Silic AR CC-4 ", en utilisant comme éluant du chlorure de méthylène puis du méthanol à 2 % et à 4 % dans du chlorure de méthylène, pour obtenir 251 mg du sel de tétrabutylammonium du composé du titre. A 251 mg de ce sel dans de l'acétone, on ajoute une solution de 107 mg de sel de potassium d'acide perfluoro- butanesulfonique dans plusieurs millilitres d'acétone on ajoute de l'acétate d'éthyle et on lave le précipité trois fois avec de l'acétate d'éthyle par centrifugation, puis on sèche sous vide à 40 C sous 1 mm pendant 2 heures pour obtenir 95 mg du sel de potassium voulu sous la forme d'un mélange ( 1:2 environ) de diastéréo-isomères ayant un point de fusion de 200 C, avec décomposition. Analyse pour C 21 H 21 N 60852 K: Calculé: C, 42,85; H, 3,60; N, 14,28; S, 10,87 Trouvé: C, 43,02; H, 3,74; N, 13,94; S, 10,7-1. Exemple 98 Sel de potassium de l'acide ( -cis)-4-méthyl -2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonylllaminol-l-azétidinesulfonique A) Amide de Nbenzyloxy-t-boc*-allothreonine On traite une solution de 6,9 g de d,l-t-boc- allothréonine et de l'amine libre de 5,3 g de chlorhydrate d'obenzylhydroxylamine ( 0,033 mole environ, libération d'acétate d'éthyle et de bicarbonate de sodium) dans 80 ml de tétrahydrofuranne par 4,82 g de N-hydroxybenzotriazole et 6,5 g de dicyclohexylcarbodiimide dans 20 ml de tétra- hydrofuranne Apres avoir agité pendant 16 heures environ à la température ambiante, on filtre la suspension, on la concentre sous vide et on lui fait subir une chromatographie sur une colonne de 400 ml de gel de silice L'élution avec de l'acétate d'éthyle à 5 10 % dans du chloroforme donne 6, 8 g du composé du titre dans les fractions 7 à 22 ( 200 ml chacune). B) ( -cis)-N-benzyloxy-3-t-butoxycarbonylamino-4-méthyl- azétidinone On agite une solution de 6,8 g de l'amide de N- benzyloxy-t-boc-allothréonine dans 200 ml de tétrahydro- furanne, pendant 16 heures environ,'avec 5,24 g de tri- phénylphosphine et 3,2 ml d'azodicarboxylate de diéthyle. On fait évaporer les solvants sous vide et on fait subir au * "boc" est une abréviation pour "butoxycarbonyle". résidu une chromatographie sur une colonne de 500 ml de gel de silice L'élution au chlorure de méthylène, suivie d'une cristallisation dans l'éther, donne un total de 2,65 g d'azétidinone Une nouvelle chromatographie des liqueurs mères et des fractions mixtes donne 0,6 g supplé- mentaire La cristallisation d'une fraction deux fois dans l'éther (-20 C) donne l'échantillon analytique du composé du titre, point de fusion 140 -142 C. C) ( -cis)-3-t-butoxycarbonylamino-1-hydroxy-4-méthyl- azétidinone On agite une solution de 3,2 g de cis-N-benzyloxy- 3-t-butoxycarbonylamino-4-méthylazétidinone dans 200 ml d'éthanol à 95 %, sous atmosphère d'hydrogène, avec 0,7 g de palladium à 10 % sur charbon Au bout de 40 minutes, on filtre la suspension (absorption 249 ml) et on fait évaporer le filtrat puis on le triture avec de l'éther pour obtenir, en deux récoltes, 2,05 g d'un solide fondant à 134 136 C. D) ( -cis-3-t-butoxycarbonylamino-4-méthylazétidinone On traite une solution de 2,05 g de cis-3-t-butyl- oxycarbonylamino-l-hydroxy-4-méthylazétidinone dans 60 ml de méthanol par un total de 90 ml d'acétate d'ammonium 4,5 M (fractions de 40, 20 et 30 ml respectivement) et par ml de trichlorure de titane 1,5 M (fractions respecti- ves de 20, 10 et 15 ml), la deuxième et la troisième addi- tion étant faitesau bout de 15 et 120 minutes respective- ment Au bout de 135 minutes, on dilue la solution avec un volume égal de chlorure de sodium à 8 % et on l'extrait avec trois fractions de 300 ml d'acétate d'éthyle On lave les couches organiques réunies avec un mélange de 100 ml de bicarbonate de sodium à 5 % et de 100 ml de solution saturée de sel, on sèche et on fait évaporer La tritura- tion avec de l'éther donne, en deux récoltes, 1,65 g de solide On recristallise une partie de la première récolte dans l'éther pour obtenir l'échantillon analytique, point de fusion 176-178,5 C. F) ( -cis)-3-benzyloxycarbonylamino-4-méthylazétidinone On refroidit à O C une solution de 1,55 g de cis-3- t-butoxycarbonylamino-4-méthylazétidinone dans 4 ml de chlorure de méthylène et 4 ml d'anisole, et on ajoute 50 ml d'acide trifluoracétique froid Au bout de 90 minutes, on fait évaporer les solvants sous vide (on ajoute du benzène et on fait évaporer trois fois) On dissout le résidu dans 25 ml d'acétone, on élève le p H initial ( 2,5) à 7 avec du bicarbonate de sodium à 5 %, et on ajoute 2 ml de chloro- formiate de benzyle On maintient la solution à O C et le p H à 7 pendant 4 heures et on chasse l'acétone sous vide pour obtenir une suspension que l'on filtre On sature le filtrat de sel et on l'extrait au chlorure de méthylène. On dissout le solide dans du chlorure de méthylène et on sèche On réunit les couches organiques, on les concentre, et on fait subir au résidu une chromatographie sur une colonne de 200 ml de gel de silice L'élution avec un mélange 3:1 de chloroforme et d'acétate d'éthyle donne 850 mg du composé du titre dans les fractions 4 à Il ( 100 ml chacune) La cristallisation d'un petit échantil- lon dans l'éther donne l'échantillon analytique, point de fusion 165-166 C. F) Sel de potassium de l'acide ( -cis)-4-méthyl-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique A une suspension de cis-3-benzyloxycarbonylamino-4- méthylazétidinone ( 0,75 g) dans 7 ml de diméthylformamide (séché avec un tamis moléculaire 4 A activé à 320 C pendant 15 heures sous courant d'argon) et 7 ml de chlorure de méthylène (séché sur alumine basique), on ajoute 1,66 g d'un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre Apres avoir agité pendant 3 heures à la température ambiante sous azote, on ajoute une quantité supplémentaire de complexe de pyridine et de trioxyde de soufre ( 1,66 g) On agite ensuite le mélange réactionnel à la température ambiante sous azote pendant 16 heures environ On chasse le diméthylformamide sous vide pour obtenir 4,6 g d'un résidu que l'on dissout dans 300 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 ( 40 C pendant 10 à 15 minutes). On refroidit la solution, on la fait passer dans une colonne de résine "HP 20 " ( 3 cm x 60 cm) avec 400 ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M, 1 litre d'eau distillée et un mélange ( 14:1) d'eau et d'acétone, pour obtenir 280 mg de produit dans les fractions 13 à 26 ( 100 ml chacune) La cristallisation dans un mélange de méthanol et d'éther de pétrole donne 757,5 mg d'un échan- tillon analytique, point de fusion 214 -215,5 C avec decom- position. Analyse pour C 12 H 13 N 25 06 K: Calculé: Trouvé: C, 40,43; H, 3,60; N, 7,89; S, 8,69; K, 10,82. Exemple 99 Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)-4-méthyl-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllamino-l-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 98 mais en remplaçant la d,l-t-boc-allothréonine par la l-t-boc- thréonine, on obtient le composé du titre, point de fusion 133 -135 C. Analyse pour C 12 H 13 N 2065 K: Calculé: C, 40,90; H, 3,72; N, 7,95; S, 9,10; K, 11,10 Trouvé: C, 40,72; H, 3,60; N, 7,99; S, 8,80; K, 10,82. Exemple 100 Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)-4-méthyl-2-oxo-3- l(phénylacétyl)aminol-l-azétidinesulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( 3 S)-3-amino-4- méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout le sel de potassium de l'acide ( 4 S-trans)- 4-méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1- azétidinesulfonique ( 352,4 mg; voir l'Exemple 99) dans ml d'eau distillée, et on traite la solution par 373,5 mg ( 1 mmole) d'hydrogénosulfate de tétrabutylammonium Apres avoir agité pendant 10 minutes à la température ambiante, on extrait la solution trois fois avec des fractions de ml de chlorure de méthylène, après saturation avec du chlorure de sodium On sèche la couche chlorure de méthylène sur du sulfate de sodium et on la fait évaporer sous vide pour obtenir 536 mg du sel de tétrabutylammonium, que l'on hydrogène avec 270 mg de palladium à 10 % sur charbon dans ml de diméthylformamide On filtre le mélange sur ae la "Celite", et on le lave deux fois avec des fractions de 2,5 ml de diméthylformamide pour obtenir le composé du titre en solution. 25092 -9 B) Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)-4-méthyl-2-oxo- 3-l(phénylacétyl)aminol-1-azétidinesulfonique On traite le sel de tétrabutylammonium brut de l'acide ( 3 S)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1azétidinesulfonique obtenu dans la partie A (le filtrat et les eaux delavage réunis), à O C, par 206 mg de dicyclohexylcarbodiimide, 153 mg de N-hydroxybenzotriazole et 138 mg d'acide phényl- acétique On agite le mélange réactionnel à O C pendant une heure, puis à la température ambiante pendant 2 heures. On filtre le précipité résultant, on fait évaporer le filtrat sous vide, on dissout le résidu dans 10 ml d'acétone et on filtre On traite le filtrat par 25 ml d'acétone saturée d'iodure de potassium, puis par 200 ml d'éther Le solide résultant ( 752,7 mg) est un mélange du sel de potassium et du sel de tétrabutylammonium du composé du titre On dissout le solide dans 50 ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M et on le fait passer dans une colonne de résine "HP 20 " L'élution avec de l'eau puis avec un mélange d'eau et d'acétone donne plusieurs frac- tions que l'on réunit et que l'on fait évaporer pour obtenir le sel de tétrabutylammonium purifié On fait passer une solution aqueuse de cette substance à travers une colonne de résine "Dowe A 50 W-X 2 " (forme K+) pour obtenir le sel de potassium du titre ( 121,4 mg) La trituration avec un mélange d'acétone et d'hexane donne 104,6 mg du composé du titre, point de fusion 211 -213 C. Analyse pour C 12 Hi 3 N 205 SK 1/2 H 20 O Calculé: C, 41,72; H, 4,09; N, 8,11; S, 9,28; K, 11,32. Trouvé: C, 41,70; H, 4,01; N, 8,07; S, 9,01;K, 11,02. Exemple 101 Sel de potassium de l'acide (cis)-4-méthyl-2-oxo-3- l(phénylacétyl)aminol-l-azétidinesulfonique On prépare une solution de 320 mg de sel depotassium d'acide ( -cis)-4-méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyll- aminol-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 98) dans 20 ml d'eau contenant 483 mg d'hydrogéno-sulfate de tétrabutyl- ammonium, et on ajuste la solution à p H 5,5 L'extraction avec six fractions de 25 ml de chlorure de méthylène donne 517,3 mg d'une huile On agite une solution de cette substance dans 15 ml de diméthylformamide avec 400 mg de palladium à 10 % sur charbon, dans une atmosphère d'hydrogène, pendant 90 minutes On filtre le catalyseur et on'agite lé filtrat avec 150 mg d'acide phénylacétique, 169 mg de N- hydroxybenzotriazole et 247 mg de dicyclohexyl- carbodiimide, pendant 7 heures et demie On chasse le solvant sous vide et on dissout le résidu dans 20 ml d'acétone, puis on filtre On traite le filtrat par 25 mml d'iodure de potassium 0,044 M dans de l'acétone La dilu- tion avec un égal volume d'éther donne 330 mg d'un solide que l'on fait passer dans une colonne de 50 ml de résine "HP 20 " dans 20 ml de phosphate de potassium monobasique 0,05 M L'élution avec 200 ml d'eau, puis avec un mélange 1:9 d'acétone et d'eau, donne une substance positive au test de Rydon dans les fractions 6 à 10 ( 50 ml) L'évapora- tion des fractions 7 à 9 donne 81 mg d'un solide La recristallisation dans un mélange d'acétonitrile et d'eau donne 46 mg du composé du titre, qui se décompose à plus de 205 C On obtient une seconde récolte ( 6 mg) à partir du filtrat On obtient 5 mg supplémentaires à partir des fractions 6 et 10, par évaporation et recristallisation. Analyse pour C 12 H 13 N 2055 K; Calculé: C, 42,84; H, 3,89; N, 8,33; S, 9,53; K, 11,62 Trouvé: C, 42,75; H, 3,82; N, 8,32; S, 9,26; K, 11,63 Exemple 102 Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 o(Z),4 fll-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( 3 S-trans)-4- méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidine- sulfonique On dissout le sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)- 4-méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1- azétidinesulfonique ( 352,4 mg; voir l'Exemple 99) dans 20 ml d'eau, et on ajoute 373,5 mg d'hydrogéno-sulfate de tétrabutylammonium On extrait la solution aqueuse trois Cois avec du chlorure de méthylène et on sèche les extraits réunis sur du sulfate de sodium Après avoir éliminé le solvant, on obtient 534,6 mg du composé du titre. B) Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 c(Z),4 ell-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-4-méthyl-2- oxo-l-azétidinesulfonique On hydrogène une solution de 534,6 mg de sel de tétrabutylammonium d'acide ( 3 S-trans)-4-méthyl-2-oxo-3ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidinesulfonique dans ml de diméthylformamide, avec 220 mg de palladium à 10 % sur charbon, sous la pression atmosphérique, pendant 2 heures 45 minutes; l'absorption d'hydrogène est de 26,3 ml. On filtre le mélange et on le lave deux fois avec 2,5 ml de diméthylformamide On agite le filtrat et les eaux de lavage (total 25 ml environ) sous azote avec 161 mg d'acide (Z-)--(méthoxyimino)-2-amino-4thiazoleacétique, 136 mg de N-hydroxybenzotriazole et 164,8 mgde dicyclohexylcarbo- diimide On agite le mélange sous azote pendant 16 heures environ On chasse le diméthylformamide sous vide et on dissout le résidu caoutchouteux dans de l'acétone, puis on filtre pour éliminer l'urée Au filtrat, on ajoute une solution contenant 272 mg ( 0,8 mmole) de sel de potassium d'acide perfluorobutanesulfonique dans 0,8 ml d'acétone. On dilue la suspension avec un égal volume d'éther et on filtre pour obtenir 325,5 mg d'un produit brut que l'on purifie par chromatographie sur 75 ml de "HP-20 AG" L'élu- tion avec 400 ml d'eau et 400 ml d'un mélange 9:1 d'eau et d'acétone (fractions de 50 ml) donne 335 mg dans les fractions 3 à 10 Après trituration avec un mélange d'acétone et d'hexane, on obtient 97,3 mg d'un échantillon analytique à partir des fractions 3 à 5 De même, la tri- turation des fractions 6 à 10 donne 90,4 mg supplémentaires de produit sous la forme d'un solide. Analyse pour C 10 12 N 50652 K: Calculé: C, 29,92; H, 3,01;N, 17,45;S, 15, 97;K, 9,74 Trouvé: C, 30,32; H, 3,49;N, 15,82;S, 13,95; K, 10,45. RMN (D 20) 1,57 ( 3 H, d, 3 = 7), 3,97 ( 3 H,S), 4,30 ( 1 H, d de q, j= 7,3), 4,70 (l H, d j= 7), 6,95 ppm ( 1 H,S). Exemple 103 Sel dipotassique de l'acide l 3 S-l 3 c(Z),45 ll-3-ll( 2-amino- 4-thiazolyl)l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol- 4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique A) Amide de N-benzyloxy-t-bocthréonine On traite une solution de 8,76 g de t-boc-thréonine et de l'amine libre de 6,4 g de chlorhydrate d'O-benzyl- hydroxylamine (libération d'acétate d'éthyle et de bicarbo- nate de sodium), dans 100 ml de tétrahydrofuranne, par 6,12 g de N-hydroxybenzotriazole et 8,24 g de dicyclohexyl- carbodiimide dans 20 ml de tétrahydrofuranne On agite le mélange sous azote pendant 26 heures, on filtre, et on fait évaporer sous vide On fait subir au résidu une chromato- graphie sur une colonne de 300 g de gel de silice (élution avec du chloroforme puis avec un mélange 3:1 de chloroforme et d'acétate d'éthyle, ce qui donne 7,2 g de composé La cristallisation dans un mélange d'éther et d'hexane donne 4,18 g du composé du titre. B) ( 3 S-trans)-N-benzyloxy-3-t-butoxycarbonylamino-4- méthylazétidinone On agite sous azote pendant 16 heures environ une solution de 12,67 g d'amide de N-benzyloxy-t-boc-thréonine, 11,5 g de triphénylphosphine et 6,23 ml d'azodicarboxy- late de diéthyle dans 380 ml de tétrahydrofuranne On fait évaporer la solution et on lui fait subir une chromatogra- phie sur une colonne de 900 g de gel de silice L'élution avec un mélange 3:1 de chloroforme et d'acétate d'éthyle donne 13,69 g d'un composé que l'on fait cristalliser dans un mélange d'éther et d'hexane pour obtenir 9, 18 g du composé du titre. C) ( 3 S-trans)-3-t-butoxycarbonylamino-1-hydroxy-4-méthyl- azétidinone On agite une solution de 9,18 g de ( 3 S-trans)-N- benzyloxy-3-t-butoxycarbonylamino-4-méthylazétidinone dans 300 ml d'éthanol à 95 %, dans une atmosphère d'hydrogène, avec 1,85 g de palladium à 10 % sur charbon Au bout de 141 minutes, on filtre la suspension et on la fait évaporer sous vide On recristallise le résidu dans un mélange d'éther et d'hexane pour obtenir 5,12 g du composé du titre. D) ( 3 S-trans)-3-t-butoxycarbonylamino-4-méthylazétidinone On traite une solution de 4,98 g de ( 3 S-trans)-3-t- butoxycarbonylamino-l-hydroxy-4-méthylazetidinone dans ml de méthanol par 132 ml d'acétate d'ammonium 4,5 M, puis par 66 ml de trichlorure de titane 1,5 M, et on agite pendant 4 heures et demie On dilue la solution aqueuse avec un égal volume de chlorure de sodium à 8 % et on extrait à l'acétate d'éthyle pour obtenir 3,48 g de produit brut La recristallisation dans un mélange d'éther et d'hexane donne 3,3 g du composé du titre. E) ( 3 S-trans)-3-benzyloxycarbonylamino-4-méthylazétidinone On refroidit à O C une solution de 3,3 g de ( 35- trans)-3-t-butoxycarbonylamino-4-méthylazétidinone dans 10 ml de dichlorométhane et 10 ml d'anisole, et on ajoute 112 ml d'acide trifluoracétique On agite la solution pendant 90 minutes et on la fait évaporer sous vide (on ajoute du benzene et on fait évaporer trois fois) On dissout le résidu dans 70 ml d'acétone et on ajuste la solution à p H 7 avec une solution de bicarbonate de sodium à 5 % On ajoute en une heure un total de 5,33 g de chloroformiate de benzyle, à p H 6,5 -7,5 On agite le mélange pendant 30 minutes à p H 7, on le dilue avec 100 ml de sel saturé, et on l'extrait à l'acétate d'éthyle (trois fractions de 400 ml) On fait subir au résidu obtenu par évaporation une chromatographie sur une colonne de 1 litre de gel de silice L'élution avec un mélange 4:1 de chloro- forme et d'acétate d'éthyle donne 2,19 g de composé La cristallisation dans un mélange d'éther et d'hexane donne 1,125 g du composé du titre. F) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( 3 S-trans)-4- méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1- *azétidinesulfonique On refroidit à O C une solution de 600 mg de ( 35- trans)-3-benzyloxycarbonylamino-4-méthylazétidinone dans 2 ml de diméthylformamide, et on ajoute 4 ml de trioxyde de soufre 0,8 M dans du diméthylformamide On agite la solution à la température ambiante sous azote pendant Une heure et on la verse dans 80 ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M froid (ajusté à p H 5,5) On extrait la solution avec trois fractions de 50 ml de chlorure de méthylène (jeté) et on ajoute 868 mg de bisulfate de tétrabutylammonium On extrait la solution résultante avec quatre fractions de 75 ml de chlorure de méthylène. On lave les couches organiques réunies avec du chlorure de sodium aqueux à 8 %, on sèche, et on fait évaporer sous vide, ce qui donne 1,54 g du composé du titre. G) Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 Bl 1-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl)-l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-1-méthyl- éthoxy)iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On agite une solution de 1,54 g de sel de tétrabutyl- ammonium d'acide ( 3 S-trans)-4-méthyl-2-oxo-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllamino-l azétidinesulfonique dans 45 ml de diméthylformamide, dans une atmosphère d'hydrogène, avec 800 mg de palladium à 10 % sur charbon, pendant 2 heures. On filtre le catalyseur et ôn agite le filtrat pendant 16 heures environ avec 1,24 g d'acide (Z)-2-amino-a-l( 1- diphénylméthoxycarbonyl-1-méthyléthoxy)iminol-4-thiazole- acétique, 0,4 g de N-hydroxybenzotriazole, et 580 mg de dicyclohexylcarbodiimide On fait évaporer la suspension sous vide et on triture le résidu avec 20 ml d'acétone, puis on filtre On traite le filtrat (plus 2 ml d'eaux de lavage) par 868 mg de perfluorobutane sulfonate de potassium dans 3 ml d'acétone La dilution avec 75 ml d'éther donne un solide que l'on isole par décantation de la liqueur mère, trituration avec de l'éther, et filtration, pour obtenir 0,91 g du composé du titre On dilue la liqueur mère avec 100 ml supplémentaires d'éther pour obtenir une seconde récolte ( 0,45 g) du composé du titre. H) Sel dipotassique de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 Bll-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl)l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétyll- aminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite à -12 C sous azote une suspension de 140 mg de sel de potassium d'acide l 3 S-l 3 a(Z),41 ll-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)- iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azetidinesulfonique (première récolte) dans 0,5 ml d'anisole, et on ajoute 2,5 ml d'acide trifluoracétique froid (-10 C) Au bout de minutes, on ajoute 10 ml d'éther et 5 ml d'hexane et on agite la suspension résultante pendant 5 minutes à -12 C, puis on la laisse se réchauffer à la température ambiante. On isole le solide par centrifugation et on le lave deux fois à l'éther On ajuste immédiatement à p H 5,5, avec de la potasse 0,4 N, une solution de ce solide dans 5 ml d'eau froide, puis on fait passer la solution dans une colonne de ml de "HP-20 AG" L'élution avec de l'eau donne 72 mg du composé du titre dans les fractions 7 à 11 ( 10 ml) après évaporation (on ajoute de l'acétonitrile et on fait évapo- rer trois fois) et trituration avec de l'éther, p f 250 C environ avec décomposition. Analyse pour C 13 H 15 N 50852 K 2; Calculé: C, 30,51; H, 2,95; N, 13,69; S, 12,53; K, 15,28 Trouvé: C, 29,63; H 3,20; N, 12,96; S, 11,94; K, 12,78. RMN (D 20) 1,46 (S, 6 H), 1,58 ( 1 H, d, = 7) 4,28 ( 1 H, d de q, 3 = 7, 2,5), 4,67 ( 1 H, d, j-2), 6,95 ppm (S, 1 H). On traite comme ci-dessus le 1,22 g restant de sel de potassium d'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 Bll-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)iminol- acétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique (récol- tes 1 et 2) ( 4,2 ml d'anisole, 16 ml d'acide trifluoracéti- que, 13 minutes à -15 C) La chromatographie sur une colonne de 300 ml de "HP-20 AG" donne 694 mg du composé du titre dans les fractions 6 à 9 ( 60 ml), après traitement comme ci-dessus. Exemples 104 à 133 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 11, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-lllhydroxy(phényl méthoxy) phosphinyllméthoxyliminol-4-thiazoleacétique par l'acide indiqué dans la colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la colonne II ci-après. Exemple Colonne I 104 Acide 2-amino-ct-ll 2-( 1,1-diméthyl- éthoxy) -l-méthyl-2-oxo éthoxy 3- iminolj-4 -thiazoleacétique Acide (R)-a-l l( 4-éthyl-2,3-dioxo- 1-pipérazinyl) carbonyllaminoj-4- hydroxybenz éneacétique 106 Acide ( )-ax-ll 1-pipérazinyl) carbonyll aminol-2- furanacétique 107 Acide (R) -cx lr( 4-éthyl-2, 3-dioxo- 1-pipérazinyl> carbonyl jaminol- 1, 4-cyclohexadièneacétique 108 Acide (R)-ca-lll 2,3-dioxo-4- l pipéraz inyl jcarbonylljaminol -4 - hydroxybenzèneacét ique Colonne II Hydrate l 3 S(Z)l-3-lll( 2 amino-4-thiazolyl)l 2-( 1; 1- diméthyléthoxy) -l-méthyl-2-oxo-éthoxyl iminol- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 280 'C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-llll( 4- éthyl-2, 3-dioxo-4-pipérazinyl) carbonyll- aminol ( 4-hydroxyphényl) acétyl lamninol-2-oxo- 1-azétidinesulfoniqrue point de fusion 1970 C, avec décomposition Sel de potassium de l'acide l 3 S( )j-3-llll( 4- éthyl-2, 3-dioxo-4-pipérazinyl) carbonyllj- aminoj-2-furanylacétyl jaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique point de fusion 169-171 a C. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l 3-ll 1,4- cyclohexadién-1-yllrlr( 4-éthyl-2,3-dioxo-1- pipérazinyl) carbonyllaminolacétyllaminol-2- oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 1850 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)1-3- llll'l 2,3-dioxo-4-l (phénylméthylène) aminol-l- pipérazinyl Icarbonyll aminol( acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 194-1 197 a C, avec décomposition. -J 1 %O Exemple Colonne I 109 Acide (Z)-2-amino_,_l ( 1-méthyl- éthoxy) iminol -4-thiazoleacétique 1110 Acide (Z>-2-amino-a-(phénoxy imhino) -4-thiazoleacétique 111 Acide phényl) méthylènel amino J-2-oxo- 1-imidazolidinyl Icarbonyl Jaminol - benzèneacêtique 112 Acide (R)-a-lll 2-oxo-3-l( 4- pyridinylméthylène) aminol-1- imidazolidinylc J arbonyl Jaminol J- benzèneacétique 113 Acide (Z)-2-amino-c*-lll-méthyl- 2-oxo-2 iminol -4 -thiazoleacétiaue 114 Acide (Z)-2-amîno-ct-l(cyclo- pentyloxy) iminol J-4-thiazole- acétique Colonne Il Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z>l-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl) l(l-méthyléthoxy) iminol- acétyllaminol-2-oxo-1-azétid inesulfonique point de fusion 1950 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z>l-3-ll( 2- amino-4-thiazàlyl) (phénoxyixnino) acétyllaminol- 2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 1650 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S lllrll 3-l l( 4-hydroxyphényl)mnéthylènejamino J- 2-oxo-1 imidazolidinyll carbonyll amino Iphényl- acétyll aminol -2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 2360 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'àcide l 3 S(R*)l-2-oxo-3- lllll 2-oxo-3 l( 4-pyridinylméthylène) aminol - 1-imidazolidinyllJcarbonyll amino Jphénylacétyl J- amiinoj-l-azétidinesulfonique point de fusion 230 'C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl) lll-méthyl-2-oxo- 2 (phényl- méthoxy) éthoxyllimino Jacétyllaminoj-2-oxo-1- azétidinesulfonique point de fusion 110-115 'C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(z)l-3 ll( 2- amino-4-thiazolyl) l(cyclopentyloxy) iminol- acétyllaminol-2-oxo 1-azétidinesulfonique point de fusion 200 'C, avec décomposition. CD r>) -n NO ra Exemple Colonne I Acide (R)-"-ll 1-oxo-2-llf(phényl- méthoxy) carbonyl Iamino Iéthyl I- amino) benzèneacétique 116 Acide 2-furanacétique 117 Acide (R)-ao-fll( 2-oxo-3-phényl-1- imidazolidinyl) carbonyl laminol - benzèneacétique 118 Acide (R) -ci-fll 2-oxo-3 (phényl-. méthyl) -l-imidazolidinyli- carbonyll Iamino lbenzèneacétique 119 Acide "-f ll 3-f aminol-2-oxo-1-imidazolidinyl 1- carbonyl Jamino 1-4 -hydroxybenzène- acétique Acide (R)-a-lll 3-ll 3-( 2-furanyl)-' 2-propénylidènelaminol -2-oxo-1- jimidazolidinyl Icarbonyll amino) - benz èneacétique Colonne II Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*>j-2-oxo- 3-l lphénylillll(phénylmréthoxy)carbonyllaminol- acétyllaminolacétyl laminoil-1-azétidine-' sulfonique point de fusion 260 'C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide (S)-3- l( 2-furanyl- acétyl) aminoj-2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 1100 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide ( 3 S)-2-oxo-3- llllf( 2-oxo-3-phényl-1-imidazolidinyl) - carbonyl Iaminol Iphénylacétyll Iamnino l -1- azétidinesulfonique point de fusion 217-2220 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)I-2-oxo-3- Ilffllll 2-oxo-3-phénylmnéthyl) -1-imidazolidinyl 1- carbonyl Iaminoljphénylacétyl Iaminol -1-azétidine- sulfonique point de fusion 195-2000 C. Sel de potassium de l'acide ( 3 S)3-llLll 3-Ii( 2 furanylméthylène) aminol 1-2-oxo-1-imidazolidinyl 1- carbonyl laminol ( 4-hydroxyphényl) acétyl lamino J- 2-oxo-1-azétidines'ulfonique point de fusion 2440 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 3 - ll 3 1-imnidazolidinyll carbonyl l aminol phénylacétyl I- aminol -2-oxo-J -azétidinesulfonique. Point de fusion 1950 C, avec décomposition. 1-' CD LM %O MU o O Exemple Colonne I 121 Acide carbonyllJoxylJimino 1-4 -thiazole-. acétique 122 Acide (phénylméthyl) -1-pipérazinyll- carbonyl l aminolbenzèneacétique 123 Acide 2, 3-dioxo-1-pi-pérazinyilcarbonyll- aminollbenz éneacétique 124 Acide (Z)-"-(méthoxyimnino)-2- furanacétique Acide (R) -c-l ll 3-l l(diméthvlamino)- méthylènel amino J-2-oxo 1- imridazolidinylj carbonyll amino) - benzèneacétique 126 Acide (R) -a-l l 3-éthyl-2-oxo-1- ixnidazolidinyl) carbonyllaminol - benzèneacétique 127 Acide (R)-a-lllll phényl)mxéthoxyl Jcarbonyl Jaminol J- acétyl Jamino lbenzèneacétique Colonne II Sel de pot'assium de l'acide l 3 S amino-4-thiazol'1) llr (éthylamino) carbonylloxyl- iminol acétyl Jaminol -2-oxo-1-azétidinesulfonigue; point de fusion 230 'C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)J-3-IIllll 2,3- dioxo-4 (phénylméthyl) -1-pipérazinyllcarbonyll- aminoîphénylacétyl Jamninol -2-oxo-1-azétidine- sulfonique; point de fusion 158-1590 C, avec déc. Sel de potassium de l'acide l 3 s(R*)J-3-lllll 4- ( 1-méthyléthyl) -2, 3-dioxo-l'-pipérazinyllcarbonyll- aminolphénylacétyl Jaminoj -2-oxo-1-azétidine- sulfonique; point de fusion 185-1870 C. Sel de' potassium de l'acide l,3 S(Z)l-3-ll( 2- furanyl) (méthoxyimino) acé'tyllam'inolJ-2-oxo-1 - azétidinesulfonique point de fusion 160 'C, avec décomposition. Sel depotassiumn de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 3- ll imidazolidinyllJcarbonyll aminol phénylacétyl J- amino J-2 -oxo-1 -azétidinesulf onique point de fusion 1950 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'1 acide l 3 S (R*) 1-3-ll l l( 3- éthyl-2-oxo 1-imidazolidinyllJcarbonyll aminol - phénylacétyllaminol -2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 185-1900 C, avec décomposition. Sel de potassium del'1 acide l 3 S (R*)J 1-3-l ll Ell ll( 4 - méthoxyphényl) méthoxy Jcarbonyl Jamino Jacéty J Il- aminolphénylacétyl Jamino J-2-oxo-1-azétidine- sulfonique; point de fusion 2680 C, avec déc. o. r>N L Ml CD Exemple Colonne I 128 Acide méthoxy) carbonyl laminol-l- imidazolidinyl jcarbonyl jaminoj- benzèneacétique 129 Acide (Z)-2-amino-a-l ( 2-amino-1,1- diméthyl-2-oxo-éthoxy) iminol-4- thiazoleacétique Acide (R)-a-lll 4-(l-méthyléthyl)- 2, 3-dioxo-1-pipérazinyl lcarbonylll- amino l-4 -hydroxybenzêneacé tique 131 Acide (R)-a-lll 3-(l-mnéthyléthyl)- 2-oxo 1-imidazolidinyllIcarbonyllj- aminoljbenz èneacétique 132 Acide (Z) -2-amino-L ll 2 méthoxy) -l-méthyl-2-oxo-éthoxyl - iminolJ-4-thiazoleacé tique 133 Acide 5-méthyl-3-phényl-4-. i soxazol ecarboxylique Colonne II Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*fl-2-oxo-3- I I I l 2-oxo-3-Ii I(phénylméthoxy)carbonyllaminol- 1-imnidazolidinyl icarbonyl lamino Jphénylac'étyllj- aminol-l-azétidinesulfonique * point de fusion 1750 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-lll( 2- amino-1,1-diméthyl-2-oxo éthoxy) iminol( 4-thiazolyl) acétyllaminol-2-oxo-1-azétidine- sulfonique point de fusion 210 'C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 4- ( 1-méthyléthyl) -2,3-dioxo-1-pipérazinyll- carbonyllIarninol ( 4-hydroxyphényl) acétylljaminol - 2-oxo-1-azétidinesulfonique Point de fusion 201-203 'C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllll 3- ( 1-méthyléthyl) -2-oxo-l-imidazolidinyllcarbonyll aminolphénylacétyllatminol -2-oxo-1-azétidine- sulfonique; point de fusion 195-100 'C (déc). Sel de Potassium de l'acide l 3 S(Zfl-3 ll( 2-amino- 4-thiazolyl,) ll 2 (diphénylméthoxy) -1-méthyl-2- oxo-éthoxyliiminolacétyllaminol-2 oxo-1-azétidine- sulfonique; point de fusion 145-150 'C Sel de potassium de l'acide 3-phényl-4 -isoxazolyl) carbonyll aminol -2 -oxo 1-azétidinesulfonique Point de fusion 230-232 'C, avec décomposition. F 1- r> 1 % 1 %a %O Exemples 134 et 135 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 70, mais en remplaçant le sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3- ll( 2-amino-4-thiazolyl)ll 2-(diphénylméthoxy)-2-oxo-éthoxyl- iminolacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique par le composé indiqué dans la colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la colonne II ci-après. Exemple Colonne I 134 Sel de potassium de-1 'acide 13 S(Z)l-3- ll( 2-amino-4-thiazolyl) ll 2 ( 1,1-diméthvl- éthoxy) -1-(méthylthio) -2-oxo-éthoxyl - iminolacétyl Jaminol -2-oxo-1 -azétidine sulfonique (Voir l'Exemple 79) Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)J-2- oxo-3-l flll 2-oxo-3-IL l(phénylméthoxy) - carbonyl Iarninol-1-imridazolidinyll - carbonyl Jamino I ohénylacétyl Iaminol - 1-azétidinesulfoniçque (Voir l'Exemple 128) Colonne II Seldepotassiuxndel'acide l 3 S(Z)l -3-ll( 2- amino-4 thiazolyl) llcarboxy (mithylthio) - méthoxyl imino Jacétylllaminol -2-oxo-1- azétidinesulÈonique( 1:2) Point de fusion 1650 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide 3 (S)-3- llll( 3-amino 2-oxo-1-imidazolidinyl) - carbonyl laminoiphénylacétyl Iaminc>l -2-oxo- 1-azétidinesulfonique Point de fusion 250 'C, avec décomposition. a -n 0 'o g 509299 Exemple 136 Sel de potassium de l'acide l 3 a(Z),43 l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique On extrait avec du chlorure de méthylène (quatre fractions de 10 ml) une solution de 51,8 mg de sel de potassium d'acide (cis)-4-méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)- carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique et de 51 mg de bisulfate de tétra-nbutyl-ammonium dans 5 ml d'eau, pour obtenir 81 mg d'une huile On agite cette huile dans une atmosphère d'hydrogène pendant 2 heures avec 40 mg de - palladium à 10 % sur charbon dans 4 ml de diméthylformamide. On filtre le catalyseur et on le lave avec 1 ml de diméthyl- formamide On réunit le filtrat et les eaux de lavage et on agite pendant 16 heures environ avec 31 mg d'acide (Z)-2-amino-a-(méthoxyimino)-4thiazoleacétique, 27 mg de N-hydroxybenzotriazole et 31,5 mg de dicyclohexylcarbo- diimide On fait évaporer la solution sous vide et on triture le résidu avec 3 ml d'acétone On centrifuge la suspension résultante et on traite le liquide par 51 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium La dilution avec ml d'éther puis la filtration donnent un solide La chromatographie sur 40 ml de "HP-20 AG" donne une substance positive au test de Rydon dansles fractions 3 à 5 ( 20 ml) (élution avec de l'eau) L'évaporation et la trituration avec de l'éther donnent 23 mg de produit sous la forme d'un solide hygroscopique. Analyse pour C 10 H 12 N 50652 Calculé: C, 29,91; H, 3,01; N, 17,44 Trouvé: C, 29,30; H, 3,31; N, 16,66. RMN (D 20) 1,40 ( 3 H, d, 3 = 7), 3,97 ( 3 H,S), 4,46 ( 1 H, pentet apparent, j= 7), 5,37 ( 1 H, d, j= 7), 6,97 ppm ( 1 H,S). Exemple 137 Acide ( 3 S-cis)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1-azetidinesulfonique A) t-boc-lallothréonine On traite une suspension de 6,72 g de 1-allothréonine dans 70 ml de dioxanne aqueux à 50 %, par 9,45 ml de tri- éthylamine et 18,1 g de pyrocarbonate de t-butyle On agite le mélange résultant à la température ambiante pendant 4 * 115 heures, puis on le dilue avec 70 ml d'eau et 140 ml d'acétate d'éthyle Après avoir agité soigneusement, on sépare les couches et on lave la couche organique avec ml d'un mélange 2:1 d'eau et de saumure On réextrait ensuite les couches aqueuses réunies avec 70 ml d'acétate d'éthyle On refroidit la couche aqueuse dans un bain de glace et on ajoute une solution de bisulfite de potassium à 10 % jusqu'à p H 2,3 On extrait la solution acidifiée avec quatre fractions de 150 ml d'acétate d'éthyle On sèche les couches organiques réunies sur du sulfate de sodium anhydre et on les débarrasse du solvant pour obtenir 9,13 g du composé du titre. B) Amide de N-méthoxy-t-bdc-l-allothréonine On dissout 9,13 g de t-boc-lallothréonine dans 85 ml d'eau et 41 ml de solution de potasse 1 N On ajoute ,22 g de chlorhydrate de méthoxyamine et 8,67 g de chlorhydrate de 1-éthyl-3,3-(diméthylaminopropyl)carbo- diimide On agite le mélange à la température ambiante pendant 4 heures puis on le sature de tartrate de sodium et de potassium On extrait le mélange résultant à l'acétate d'éthyle (quatre fractions de 150 ml) et on sèche la couche organique sur du sulfate de sodium anhydre et on la débarrasse du solvant pour obtenir 7,38 g du composé du titre, sous la forme d'un solide. C) Amide de O-méthanesulfonyl-N-méthoxy-t-boc-l- allothréonine On dissout 7,32 g d'amide de N-méthoxy-t-boc-l- allothréonine dans 40 ml de pyridine et on refroidit la solution à -20 C sous azote On ajoute goutte à goutte, à l'aide d'une seringue, 3 ml de chlorure de méthanesulfonyle, en 5 minutes On réchauffe lentement le mélange résultant à O C et on l'agite à cette température pendant 3 heures. On ajoute 500 ml d'acétate d'éthyle et on lave la solution avec 250 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 3 N refroi- die dans la glace, puis avec 100 ml d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 % On sèche la couche acétate d'éthyle sur du sulfate de sodium anhydre et on la débar- rasse du solvant pour obtenir 8,64 g du composé du titre sous la forme d'un solide blanc. D) ( 3 S-cis)-3-t-butoxycarbonylamino-1-minéthoxy-4-méthyl- azétidinone On dissout 8,64 g d'amide de O-méthanesulfonyl-N- méthoxy-t-boc-l-allothréonine dans 530 ml d'acétone et on ajoute 11 g de carbonate de potassium solide On chauffe lentement le mélange à 65 C sous azote et on l'agite à cette température On filtre ensuite le mélange réactionnel sur de la "Celite" et on lave le qgateau de filtration à l'acétate d'éthyle On concentre le filtrat et on reprend le résidu dans 250 ml d'acétate d'éthyle On lave la solution dans l'acétate d'éthyle avec 100 ml d'une solution d'acide chlorhydrique IN et avec 100 ml d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 % On sèche la couche acétate d'éthyle sur du sulfate de sodium anhydre et on la débarras- se du solvant pour obtenir 6,63 g de produit brut. E) ( 3 S-cis)-3-t-butoxycarbonylamino-4-méthylazétidinone On dissout 1,35 g de sodium dans environ 300 ml d'ammoniac liquide à -50 C et on ajoute goutte à goutte, à l'aide d'une seringue, 5,87 g de ( 3 S-cis)-3-t-butoxy- carbonylamino-1-méthoxy-4-méthylazétidinone dans 35 ml de tétrahydrofuranne On utilise pour le rinçage 10 ml supplé- mentaires de tétrahydrofuranne Un peu avant la fin de l'addition, on ajoute environ 100 mg de sodium supplémen- taires On agitele mélange pendant 5 minutes de plus, puis on le stabilise en lui ajoutant en une seule fois 3,35 g de chlorure d'ammonium solide On purge l'ammoniac à l'aide d'un courant d'azote et on ajoute au résidu 250 ml d'acétate d'éthyle Après filtration et lavage du solide à l'acétate d'éthyle, on débarrasse le filtrat réuni du solvant pour obtenir 4,82 g du composé du titre. F) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( 3 S-cis)-3-t- butoxycarbonylamino-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout 4,98 g de l 3 S,4 Rl-3-t-butoxycarbonyl- amino-4-méthylazétidinone dans 30 ml de diméthylformamide. On ajoute 11,9 g d'un complexe pyridine-trioxyde de soufre et on agite le mélange à température ambiante sous azote. Après avoir agité pendant 14 heures, on ajoute 1,8 g sup- plémentaire de complexe pyridine-trioxyde de soufre et on continue l'agitation pendant 80 heures On verse le mélange réactionnel dans 700 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M et on le lave avec trois fractions de 300 ml de chlorure de méthylène On ajoute 8,45 g de bisulfate de tétra-n-butylammonium à la solution aqueuse et on extrait le mélange avec quatre fractions de 300 ml de chlorure de méthylène On sèche les couches chlorure de méthylène réunies sur du sulfate de sodium anhydre et on les débarrasse du solvant pour obtenir 10,76 g du composé du titre sous la forme d'une gomme. G) Acide ( 3 S-cis)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On dissout 10,76 g de sel de tétrabutylammonium d'acide ( 3 S-cis)-3-t-butoxyoarbonylamino-4-méthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique dans 50 ml d'acide formique à 95 -97 %, et on agite pendant 4 heures sous azote On ajoute comme amorce une petite quantité de produit provenant d'une réaction précédente, et on agite le mélange pendant encore une heure On range le mélange dans un congélateur pendant 16 heures environ puis on réchauffe le mélange congelé à la température ambiante et on l'agite pendant encore une heure On filtre le solide formé et on le lave avec du chlorure de méthylène pour obtenir 982 mg du composé du titre On dilue le filtrat avec un litre de chlorure de méthylène et on le maintient à -20 C pendant 4 heures On recristallise le précipité qui se ferme dans un mélange d'eau, de méthanol et d'acétone pour obtenir 167 mg supplé- mentaires du composé du titre. -1 RMN (D 20) 1,63 ( 3 H, d, j= 6,5 cps), 1 R(nujol)1775 cm Exemple 138 sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z'),4 cll-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)méthoxyiminolacétyllamino-4-méthyl-2-oxo-1-l azétidinesulfonique On traite une solution de 201 mg d'acide (Z)-2-amino- a-(méthoxyimino)-4-thiazoleacétique et de 153 mg de N- hydroxy-benzotriazole monohydraté dans 3 ml de diméthyl- formamide, par 206 mg de dicyclohexylcarbodiimide On agite le mélange à la température ambiante pendant 20 minutes sous azote et on ajoute une solution de 180 mg d'acide ( 35-cis)- 3-amino-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique et de 0, 14 ml de triéthylamine dans 2 ml de diméthylformamide (on utilise 1 ml supplémentaire de diméthylformamide pour le rinçage), et on agite le mélange pendant 16 heures environ On fait évaporer la suspension sous vide, on la triture avec 12 ml d'acétone, on centrifuge et on traite le liquide par 338 mg de perfluorobutane sulfonate de potassium Une dilution avec 10 ml d'éther et une filtration donnent un produit solide auquel on fait subir une chromatographie sur 200 ml de résine "HP-20 ", en éluant avec de l'eau On réunit les fractions 18 à 30 ( 20 ml chacune) et on les lyophilise pour obtenir 274 mg du composé du titre, sous la forme d'un solide hygroscopique. Analyse pour C 10 H 12 N 50652 K Calculé: C, 29,91; H, 3,01; N, 17,44 Trouvé: C, 30,03; H, 3,21; N, 17,06. RMN (D 20) 1,40 ï 3 H, d, j= 6,5), 3,98 ( 3 H,S), 4,48 ( 1 H, d de t, J= 6,4, 5,5), 5,36 ( 1 H, d, j= 5,5), 6,97 ( 1 H,S). Exemple 139 Acide ( 3 S-trans)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique A) Chlorhydrate d'ester méthylique de thréonine Sous une atmosphère d'azote, on refroidit à -5 C (glace/saumure) un ballon contenant 500 ml de méthanol, et on ajoute 130 ml (excès) de chlorure de thionyle, à une cadence propre à maintenir la température de réaction entre 0 et 10 C -Après avoir à nouveau refroidi à -5 C, on ajoute 59, 5 g de l-thréonine et on laisse le mélange atteindre la température ambiante, puis on l'agite pendant 16 heures On concentre le mélange et on le met sous vide à 10-1 torr pendant 2 heures pour obtenir une huile vis- queuse On utilise cette substance directement dans l'étape suivante. B) Amide de thréonine On dissout le produit brut de la partie A dans 2,5 1 de méthanol et on refroidit à -5 C (glace-saumure) On sature la solution d'ammoniac gazeux, on retire le bain de refroidissement et on laisse reposer pendant 3 jours le récipient fermé hermétiquement Après avoir éliminé la plus grande partie de l'ammoniac qui n'a pas réagi, par aspiration, on ajoute 100 g de bicarbonate de sodium et ml d'eau et on réduit le mélange en une huile visqueuse. C) Amide de benzyloxycarbonylthréonine On dilue à un volume de 1 litre, avec de l'eau, le produit brut de la partie B (contenant déjà la quantité requise de bicarbonate de sodium) A cette solution rapi- dement agitée, on ajoute 94 g ( 88 ml de substance pure à %) de chlorure de benzyloxycarbonyle, sous la forme d'une solution dans 80 ml de tétrahydrofuranne, en 1 heure On agite ensuite le mélange réactionnel pendant 16 heures supplémentaires et on l'extrait à l'acétate d'éthyle (une fraction de 500 ml et deux fractions de 250 ml) On sèche les extraits réunis sur du sulfate de magnésium et on concentre On dissout ensuite le résidu cristallin dans 250 ml d'acétate d'éthyle chaud et on ajoute 300 ml d'hexane, puis on fait bouillir jusqu'à obtenir une solu- tion limpide Le refroidissement et la filtration de la masse cristalline donnent, après séchage, 104 g du composé du titre. D) O-mésylate d'amide de benzyloxycarbonylthréonine Sous une atmosphère d'argon, on dissout 100 g d'amide de benzyloxycarbonylthréonine dans 400 ml de pyridine anhydre et on refroidit dans un bain de glace et de sel A cette solution agitée, on ajoute, en 15 minutes, 36,8 ml ( 54,5 g) de chlorure de méthanesulfonyle Après 2 heures d'agitation, on ajoute 0,3 équivalent supplémen- taire de chlorure de méthanesulfonyle On agite ensuite le mélange réactionnel pendant 1 heure et on le verse dans un mélange de 1,5 1 de glace et 2 1 d'eau On agite la suspension résultante pendant 30 minutes environ, puis on filtre Le séchage du produit brut à 60 C pendant 16 heures environ dans une étuve à vide donne 109 g du composé du titre. E) Sel de tétrabutylammonium de O-mésylate d'amide de N- sulfonyl benzyloxycarbonylthréonine On refroidit à -5 C (glace-saumure) une solution de 17,8 ml de 2-picoline dans 90 ml de chlorure de méthylène, et on ajoute 5,97 ml d'acide chlorosulfonique à une cadence propre à maintenir la température de réaction interne 12 2509299 en-deçà de 5 C On ajoute la solution résultante, à l'aide d'une canule, à une suspension de 7,56 g de O- mésylate d'amide de benzyloxycarbonylthréonine dans 120 ml de chlorure de méthylène On met au reflux pendant 16 heures environ le mélange hétérogène résultant, ce nui donne une solution limpide On verse la solution dans 500 ml d'un tampon de phosphate à p H 4,5 ( 0,5 M) et on la dilue encore avec 120 ml de chlorure de méthylène On lave ensuite la couche organique séparée, une fois avec 100 ml d'une solution tampon, et on traite les phases aqueuses réunies par 10,2 g d'hydrogéno-sulfate de tétra-n-butyl- ammonium, puis on extrait au chlorure de méthylène (une fraction de 300 ml et deux fractions de 150 ml) Après avoir séché les extraits organiques réunis sur du sulfate de sodium, on concentre la solution pour obtenir 12, 7 g d'une mousse. F) Acide ( 3 S)trans)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On porte au reflux un mélange composé de 5,52 g de carbonate de potassium dans 20 ml d'eau et de 160 ml de 1,2-dichloréthane, et on ajoute 15,5 mmoles de sel de tétrabutylammonium de O-mésylate d'amide de N-sulfonyl benzyloxycarbonylthréonine dans 20 ml de 1,2-dichloréthane (on utilise 20 ml de ce dernier pour le rinçage) Après avoir maintenu au reflux pendant 30 minutes, on verse le mélange dans une ampoule à décanter, on dilue avec 50 ml d'eau et 100 ml de chlorure de méthylène et on sépare les phases On sèche la phase organique résultante -sur du,',. sulfate de sodium et on la concentre pour obtenir le sel de tétrabutylammonium brut de l'acide ( 3 S-trans)-3-benzyloxy- carbonylamino-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On traite l'azétidinone brute, dans 250 ml d'éthanol, par 0,8 g de palladium à 5 % sur charbon servant de catalyseur, et on fait barboter de l'hydrogène dans la solution, Au bout de 90 minutes, on filtre le mélange sur de la "Celite" avec 50 ml d'éthanol utilisé pour le rinçage L'addition de 1,2 ml d'acide formique à cette solution provoque une précipitation immédiate du zwitterion du titre, que l'on filtre après agitation pendant une heure pour obtenir, après séchage sous 10-1 torr pendant 1 heure, 1,1 g de produit. On obtient une seconde récolte de produit par concentration du filtrat et addition d'une nouvelle quantité d'acide formique pour obtenir 1,3 g du zwitterion du titre. P f > 218 C, avec décomposition. lElD = -41,1 (C= 1, H 20) RMN (D 20) 1,58 ( 3 H, d, j= 7), 4,80 ( 2 H,M). Exemples 140 à 143 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 138, mais en remplaçant l'acide ( 3 S-cis)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique par l'acide ( 3 S-trans)-3-amino-4-méthyl- 2-oxo-1-azétidinesulfonique et l'acide (Z)-2-amino-"- (méthoxyimino)-4-thiazoleacétique par l'acide indiqué dans la colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la colonne II ci-après. emple Colonne I Acide (R)-a-lll 3-l( 2-furanylméthylêne)- aminol-2-oxo-1-imidazolidinyllcarbonyllh aminc>lbenzèneacétique 141 Acide (R)-a-l l( 4-éthyl-2,3-dioxo-1- pipérazinyl) carbonyllaminolbenzine- acétique 142 Acide (Z) -2-amino-a (hydroxyimino) -4- thiazoleacétique 43 Acide ( ) -a-E (amino-oxoacétyl) aminol- 2-thio-phèneacétique Colonne II Sel de potassium de l'acide l 3 S -L 3 c(R*), 4 $l 1-3-Lllll 3-l( 2-furanylméthylène)aminol- 2-oxo-1-imidazolidinyllcarbonyl Iamino I- phénylacétyll IamninolI-4 méthyl-2-oxo-1- az 6 tidinesulfonique point de fusion 21300, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S-L 3 a(R*),, 4 e JI-3-llll( 4-éthyl- 2,3-dioxo-1-pipérazinyl)- carbonyll aminol phénylacétyl Jaminol -4 -méthyl-. 2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 1770 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z), 4 e J J-3-l El( 2-amino-4-thiazolyl)( acétyll aminol -4-méthyl-2-oxo-1-azétidine sulfonicque point de fusion 230 'C. Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a( ), 4 ll 3-3-l ll (amino-oxoacétyl) aminol-2-thiényl- acétyll aminol -4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique - point de fusion 1350 C, Avec décomposition. Ex 1-' Ni LM NO ri o Exemple 144 Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),41 ll-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)lll,l-diméthyl-2-l( 4-nitrophényl)méthoxyl-2-oxo- éthoxyliminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique A une suspension d'acide ( 3 S-trans)-3-amino-4- méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,36 g; voir l'Exemple 139) dans 30 ml de diméthylformamide sec, sous azote à 26 C, on ajoute 309 pl de triéthylamine Au bout de 5 minutes environ, on obtient une solution limpide et on ajoute 0,816 g d'acide (Z)-2-amino-a-ll 1,1-diméthyl-2-l( 4-nitro- phényl)méthoxyl-2-oxo-éthoxyliminol-4-thiazoleacétique, puis 0,334 g de Nhydroxybenzotriazole et 0,453 g de dicyclohexylcarbodiimide On agite le mélange pendant douze heures à 26 C, après quoi on chasse le solvant sous vide et on triture le résidu avec 30 ml d'acétone Après avoir agité pendant cinq minutes, on sépare les solides et on traite le filtrat par 3 i 680 g de perfluorobutane sulfo- nate de potassium dans 5 ml d'acétone L'addition d'envi- ron 40 ml d'éther donne un précipité que l'on recueille et que l'on sèche sous vide ( 1,073 g; seconde récolte 0,066 g; total 1,14 g). Analyse pour C 20 H 21 N 601052 K 1 H 20 Calculé: C, 38,33; H, 3,70; N, 13,41;S, 10,23; K, 6,24 Trouvé: C, 38,30; H, 3,63; N, 13,41;S, 9,88;K, 5,98. Exemple 145 Sel de potassium ( 1:2) de l'acide l 3 c(Z),4 al-3-ll( 2-amino- 4-thiazolyl)l(l-carboxy -1-méthyléthoxy) iminolacétyll- aminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique A) Sel de potassium de l'acide l 3 a(Z),4 ul-3-ll 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)- iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite une solution de sel de tétrabutylammonium d'acide (cis)-4-méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyll- amino-l-1-azétidinesulfonique ( 201 mg; préparé à partir du sel de potassium correspondant de l'Exemple 98 comme décrit dans l'Exemple 136), dans 5 ml de diméthylformamide, avec mg de palladium à 10 % sur carbonate de calcium dans une atmosphère d'hydrogène, pendant 2 heures On filtre la suspension et on agite le filtrat pendant 16 heures environ avec 146 mg d'acide (Z)-2-amino-a-l 1-diphénylméthoxy- carbonyl-l-méthyléthoxy)iminol-4-thiazoleacétique, 73 mg de dicyclohexylcarbodiimide et 51 mg de N-hydroxybenzo- triazole, sous azote On fait évaporer la suspension sous vide et on la triture avec 4 ml d'acétone On filtre la suspension et on lave le solide deux fois avec des frac- tions de 2 ml d'acétone On réunit le filtrat et les eaux de lavage et on les traite par 113 mg de perfluorobutane- sulfonate de potassium Une dilution avec 24 ml d'éther donne un solide que l'on isole par centrifugation, et que l'on lave trois fois avec de l'éther, ce qui donne 186 mg du composé du titre. B) Sel de potassium ( 1:2) de l'acide l 3 c(Z),4 al-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl) l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétyll- aminol-2-méthyl-4-oxo-1-azétidinesulfonique On refroidit à -12 C une suspension de 186 mg de sel de potassium d'acide l 3 a(Z),4 al-3-ll 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)- iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-l-azétidinesulfonique dans 0,6 ml d'anisole distillée, et on ajoute 3,0 ml d'acide trifluoracétique distillé (à -10 C) On agite la solution pendant 10 minutes et on ajoute 12 ml d'éther, puis 6 ml d'hexane Après 5 minutes à -10 C et 15 minutes d'agitation à la température ambiante, on isole le solide par centrifugation et on le lave quatre fois avec de l'éther pour obtenir 141 mg de substance On sèche cette substance sous vide, on la pulvérise, on la disssout dans ml d'eau froide et on l'ajuste immédiatement à p H 5,6 avec de la potasse 0,4 N On fait passer la solution dans une colonne de 100 ml de "HP-20 AG" et on élue à l'eau. On réunit les fractions 8 à 12 ( 10 ml) et on les fait évaporer sous vide (on ajoute trois fois de l'acétonitrile et on fait évaporer) On triture le résidu avec de l'éther pour obtenir 101,7 mg de produit sous la forme d'un solide hygroscopique. Analyse pour C 13 H 15 N 508522 K Calculé: C, 30,51; H, 2,95; N, 13,69; S, 12,53; K, 15,28 -Trouve: C, 30,11; H, -3,26; N, 13,35;S, 12,12; K, 15,02. Exemple 146 * Acide l 3 S-l 3 a(Z),48 ll-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)-l( 1- carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo- 1-azétidinesulfonique On dissout dans 1,38 ml d'eau le sel dipotassique de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 Hll-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)-l( 1- carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo- 1-azétidinesulfonique ( 87,3 mg; voir l'Exemple 103), on refroidit à O C, on traite par 0,34 ml d'acide chlorhydri- que 1 N et on sépare les cristaux résultants par centrifu- gation On dissout le solide humide dans du méthanol, on filtre, on concentre à 0,5 ml environ et on mélange avec 1 ml d'eau, ce qui donne 55; 9 mg du composé du titre. Exemple 147 Sel de sodium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 ell-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol- 4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On mélange un échantillon de 99,7 mg d'acide l 35- l 3 a (Z),4 Bl 1-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)l( 1-carboxy-l-méthyl- éthoxy)iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique avec 0,207 ml de soude 1 N, et on réchauffe douce- ment le mélange résultant pour dissoudre le solide restant. On élimine l'eau par distillation azéotropique avec de l'acétonitrile et on fait cristalliser le résidu à partir d'un mélange de 0,5 ml de méthanol (pour dissoudre le rési- du) et de 1 ml d'acétonitrile, ce qui donne 81,8 mg de solide Une seconde recristallisation dans 0,8 ml de méthanol donne 47,9 mg, une troisième dans 0,24 ml de méthanol et 0,24 ml d'éthanol absolu donne 44,8 mg, et pne quatrième dans 0,225 ml de méthanol et 0,225 ml d'éthanol absolu donne 38,8 mg On sèche le solide à 20 C et sous 0,01 mm de Hg, pendant 18 heures, puis on équilibre avec l'humidité atmosphérique pendant 24 heures, ce qui donne ,9 mg du composé du titre. Exemple 148 Sel disodique de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),411 l-3-ll( 2-amino-4- thidzolyl)l(i-carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol- 4-méthyl-2-oxo-l-azétidinesulfonique On met en suspension dans 30 ml d'eau un échantillon de 3,00 g d'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 Bll-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-4-méthyl-2- oxo-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 146), et on trai- te la suspension par de la soude 1 N, et on en utilise 12,0 ml pour obtenir le sel disodique du titre On réduit le p H à 6,5 par addition d'un peu de "Dowex 50 W-X 2 " (H+). On filtre le mélange et on dilue le filtrat à 66,3 g avec de l'eau On sépare une fraction de 6,63 g pour d'autres usages On lyophilise le filtrat restant, ce qui donne 2,38 g de solide Un équilibrage partiel ( 24 heures) avec l'humidité atmosphérique donne 2,54 g du composé du titre. Exemples 149 à 151 - En suivant le mode opératoire de l'Exemple 138, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-(méthoxyimino)-4- thiazoleacétique par le composé indiqué dans la colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la colonne II ci après. Exemple Colonne I 149 Acide (R)-c L-lll 2,3-dioxo-4-lr (phényl'- méthoxy) carbonyl laminol-1-pipérazinyll- carbonyl laminolbenzèneacétiçue Acide (R)-x-rllr ( 2-furanylméthylènel-' aminol 2-oxo-1-imidazolidinyljcarbonyl) - amino benzèneacétique 151 Acide (R)-ac-rl( 4-éthyl-2,3-dioxo-1- pipérazinyl) carbonyli aminolbenzène- acétique. Colonne Il Sel de potassium de l'ester phénylméthylique de l'acide l 3-3 (*,all-l 2 l 4 mnéthyl-2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)aminol-2- oxo-1-phényléthyl laminolIcarbonyl l-2,3-dioxo- i 1-pipéraz inyl Icarbamique Point de fusion 1910 C, ave c décomposition. Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(R*),4 alJ- 3-l ll ll 3-l imidazolidinyllcarbonyllaminoîphénylacétyl 1- aminol-4-méthvl-2-oxo-1-azétidinesulfonique. Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(R*),4 all- 3 llll ( 4-éthyl-2, 3-dioxo-1-pipérazinyl) - carbonyllJaminoiphénylacétyl laminol-4-méthyl- 2-oxo 1-azétidinesulfon ique F- M, tn c O cà 25092-99 Exemple 152 Sel de potassium ( 1:2) de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 all-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl)l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétyll- aminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique A) Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 a 11 ll-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl)l(l-diphénylméthoxycarbonyl-1-méthyl- éthoxy)iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On traite une solution de 440 mg d'acide (Z)-2- amino-a-l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminol-4-thiazole- acétique et de 153 mg de N-hydroxybenzotriazole mono- hydraté dans 3 ml de diméthylformamide, par 206 mg de dicyclohexylcarbodiimide On agite le mélange à la tempé- rature ambiante pendant 30 minutes, sous azote, et on ajoute une solution de 180 mg d'acide ( 3 S-cis)-3-amino-4- méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 137) et de 0,14 ml de triéthylamine dans 2 ml de diméthytformamide (on utilise pour le rinçage 1 ml supplémentaire de diméthyl- formamide), puis on agite le mélange pendant 16 heures environ On fait évaporer la suspension sous vide et-on la triture avec 12 mi d'acétone On filtre la suspension et on lave le solide avec deux fractions de 3 rml d'acétone. On traite le filtrat et les eaux de lavage réunis par 338 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium Une dilu- tion avec 30 ml d'éther donne un solide caoutchouteux qui se solidifie lentement On filtre ce solide et on le lave à l'éther pour obtenir 656 mg du composé du titre. B) Sel de potassium ( 1:2) de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 all-3- ll( 2-amino-4-thiazolyl)l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminol- acétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On refroidit à -12 C une suspension de 656 mg de sel de potassium d'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 cll-3-ll( 2-amino-4- thiazolvl)l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)- iminolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique dans 2,3 ml d'anisole distillé, et on ajoute 11,5 ml d'acide trifluoracétique (refroidi au préalable à -10 C). On agite la solution pendant 15 minutes et on ajoute 45 ml d'éther, puis 23 ml d'hexane Apres 5 minutes à -10 C et 15 minutes d'agitation à la température ambiante, on filtre le solide et on le lave à l'éther pour obtenir 457 mg d'une gomme très hygroscopique On dissout cette gomme dans 6 ml d'eau froide et on ajuste immédiatement la solution à p H 5,6 avec une solution de potasse 0,4 N. On fait passer cette solution sur 200 ml de résine "HP-20 " et on élue à l'eau On réunit les fractions 7 à 11 ( 50 ml chacune) et on les lyophilise pour obtenir 239 mg du composé du titre sous la forme d'un solide. Analyse pour C 13 H 1508 N 552 K 2 1/2 H 20: Calculé: C, 29,99; H, 3,10; N, 13,45; S, 12,32 Trouvé: C, 29,94; H, 3,30; N, 13,30; S, 11,93. RMN (D 20) 1,44 ( 3 H, d, j= 75), 1,46 ( 6 H,S), 4,48 ( 1 H,d de t )= 75, 5,5), 5,34 ( 1 H, d,;= 5,5)j 6,96 ppm (IH,S). Exemple 153 Acide ( )-3-amino-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique A) ( )-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidine-tert-butyl- diphénylsilane On refroidit à O C une solution de 40,5 ml de t- butylchlorodiphénylsilane dans 112 ml de diméthylformamide. A cette solution, on ajoute 22 ml de triéthylamine On ajoute ensuite goutte à goutte, en 10 minutes, à la solu- tion de triéthylamine refroidie une solution de 12,87 g de 4,4-diméthyl-2-azétidinone dans 25 ml de diméthylformamide. On agite la solution trouble résultante pendant 18 heures à 5 C sous argon On verse ce mélange dans 400 ml d'eau glacée et on l'extrait avec trois fractions de 150 ml d'un mélange 2:1 d'éther et d'acétate d'éthyle On lave les extraits réunis avec quatre fractions de 100 ml de tampon phosphate de potassium monobasique 0,5 M, une fraction de 150 ml de solution de bicarbonate de sodium, deux fractions de 150 ml d'eau et une fraction de 150 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium On sèche la solution sur du sulfate de sodium et on la concentre sous vide pour obtenir 33,03 g du composé du titre sous la forme d'un solide. B) ( )-3-azido-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidine-tert-butyl- diphénvlsi ane On prépare à -50 C sous argon, dans un ballon à trois cols de 100 ml, une solution de 4,25 ml de n-butyl- lithium 1,6 M (dans l'hexane) et de 11 ml de tétrahydro- furanne sec On ajoute une solution de 0,083 g de triphénylméthane dans 1 ml de tétrahydrofuranne On refroi- dit à -60 C la solution résultante, et on ajoute goutte à goutte, à l'aide d'une seringue, 1,0 ml de diisopropylamine. On agite le tout pendant 15 minutes, puis on refroidit à -78 C On ajoute lentement, à l'aide d'une seringue, une solution de 2,3 g de ( )-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidine- tert-butyldiphénylsilane dans 8 ml de tétrahydrofuranne. On agite la solution résultante pendant 20 minutes à -78 C, temps pendant lequel une importante précipitation se pro- duit et une agitation uniforme devient difficile On ajoute goutte à goutte une solution de 1,33 g d'azide de p-toluènesulfonyle dans 5 ml de tétrahydrofuranne On laisse remuer le mélange résultant à -78 C pendant 20 minu- tes, et onajoute goutte à goutte 2 ml de chlorure de triméthylsilyle On réchauffe le mélange réactionnel à la température ambiante et on l'agite pendant 1 heure Puis on refroidit le mélange à O C et on le verse dans 150 ml d'acétate d'éthyle à O C On ajoute une quantité suffi- sante de tampon de phosphate de potassium monobasique 0,5 M pour rendre limpides la couche aqueuse et la couche orga- nique On sépare les deux couches et on lave la couche organique avec trois fractions de 150 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M, une fraction de ml de solution de chlorure de sodium, une fraction de ml d'une solution saturée de chlorure de sodium, et on sèche sur sulfate de sodium On concentre la solution sous vide pour obtenir 2,83 g d'une huile qui, après trituration avec de l'hexane, donne 1,67 g du composé du titre sous la forme d'un solide. C) ( )-3-azido-4,4-diméthyl-2-oxo-l-azétidine Dans un ballon à trois cols de 50 ml, on dissout 1-,52 g de ( )-3-azido-4,4-diméthyl-2-oxo-l-azétidine-tert- butyldinhénylsilane dans 25 ml d'acétonitrile A cette solution agitée, on ajoute 0,25 ml d'acide fluorhydrique à 48 % On agite le tout à la température ambiante, et on ajoute toutes les 60 minutes des fractions de 0,5 ml d'acide fluorhydrique à 48 % juscqu'à ce que, au bout de 6 heures et demi, un total de 3,25 ml d'acide fluorhydrique à 48 % ait été ajouté On refroidit ensuite le mélange réactionnel à O C, on le neutralise avec du bicarbonate de sodium saturé, et on l'extrait avec 120 ml d'acétate d'éthyle On lave ensuite la couche organique avec 100 ml d'eau, 100 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium, et on sèche sur sulfate de sodium On concentre sous vide la solution sèche pour obtenir 1,34 g d'huile On fait subir à cette huile impure une chromatographie sur 27 g de gel de silice avec de l'hexane, puis avec 33 % d'acétate d'éthyle dans de l'hexane, pour obtenir 0,358 g du composé du titre sous la forme d'un' solide. D) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( )-3-azido-4,4- diméthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique A 0,100 g de ( )-3-azido-4,4-diméthyl-2-oxo-1- azétidine à O C, on ajoute, sous argon, 2,8 ml d'un com Dlexe diméthylformamide-trioxyde de soufre 0,5 M On laisse ce mélange se réchauffer à la température ambiante et on l'agite pendant 45 minutes On verse ensuite la solution dans 20 ml d'un tampon de phosphate de potassium monobasique 0,5 M à p H 5,5 On lave le tout avec trois fractions de 20 ml de chlorure de méthylène (jeté) et on ajoute à la solution aqueuse 0,237 g d'hydrogéno-sulfate de tétrabutylammonium On extrait le mélange résultant avec quatre fractions de 20 ml de chlorure de méthylène et on lave les extraits organiques réunis avec 20 ml d'une solution de chlorure de sodium à 8 % On sèche la solution dans le chlorure de méthylène (sur du sulfate de sodium) et on la concentre sous vide pour obtenir 0,31 g d'une huile qui, d'après le spectre RMN, se compose de 50 % de diméthylformamide et de 50 % du composé du titre. E) Acide ( )-3-amino-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On hydrogène une solution de 0,155 g de sel de tétrabutylammonium d'acide ( )-3-azido-4,4-diméthyl-2-oxo- 1-azétidinesulfonique dans 0,6 ml de méthanol, sur du palladium à 10 % sur charbon, pendant 20 minutes sous une atmosphère On sépare le catalyseur par filtration et on le rince au chlorure de méthylène, et on réunit les eaux de rinçage à la solution méthanolique On traite cette solu- tion limpide par 0,123 ml d'acide formique à 97 % Lorsqu'on ajoute l'acide, la solution devient immédiatement trouble. Apres repos pendant-1 heure à 5 C, on sépare le solide par filtration pour obtenir 0,0664 g du composé du titre, p.f 200-202 C, avec décomposition. RMN (D 20) 1,64 ( 3 H,S), 1,68 ( 3 H,S), 4,42 ( 1 H,S) -1 IR(K Br) 1765 cm Exemple 154 Sel de potassium de l'acide l 3 (Z)l-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- (méthoxyimino)acétyllaminol-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidine sulfonique On traite une solution de 50 mg d'hydrate de N- hydroxybenzotriazole et de 0,323 mmole d'acide (Z)-2-amino- a-(méthoxyimino)-4-thiazoleacétique dans 0,q ml de diméthyl- formamide, par 67 mg de dicyclohexylcarbodiimide, sous argon, à la température ambiante On agite le mélange résul- tant pendant 1 heure, temps au bout duquel on ajoute de l'acide ( )-3amino-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 57 mg; voir l'Exemple 153), sous forme de solide, puis on ajoute goutte à goutte 0,05 ml de triéthylamine On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 16 heures On chasse le diméthylformamide sous vide poussé à 30 C, et on délaie le résidu dans 4 ml d'acétone, puis on filtre On lave le gâteau de filtration avec 4 ml supplé- mentaires d'acétone, et on ajoute au filtrat 85 mg de perfluorobutane sulfonate de potassium, puis de l'éther La trituration de la gomme résultante avec de l'éther donne mg d'un solide couleur chamois auquel on fait subir une chromatographie sur une colonne de 70 ml de "HP-20 AG". L-'élution avec de l'eau donne 20 mg du composé du titre dans les fractions 16 à 40 ( 5 ml) après évaporation, tritu- ration avec un mélange 1:1 d'acétone et d'hexane et séchage. p.f 225 C, avec décomposition. Analyse pour Cll H 14 N 50652 K: Calculé: C, 31,80; H, 3,40; N, 16,86; S, 15,43 Trouvé: C, 29,47; H, 3,48; N, 14,98; S, 13,35. Exemple 155 Sel de potassium de l'acide ( )-4,4-diméthyl-2-oxo-3- l(phénylacétyl)aminol-l-azétidinesulfonique On traite une solution de 45 mg d'hydrate de N- hydroxybenzotriazole et de 40 mg d'acide phénylacétique dans 0,5 ml de diméthylformamide, par 61 mg de dicyclo- hexylcarbodiimide sous argon à la température ambiante. On agite le mélange résultant pendant 1 heure et on ajoute de l'acide ( )-3-amino-4,4-diméthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique ( 52 mg; voir l'Exemple 153), sous forme de solide, puis on ajoute goutte à goutte 0,04 ml de triéthylamine On agite le mélange réactionnel à la tempé- rature ambiante pendant 24 heures On chasse le diméthyl- formamide sous vide poussé à 30 C et on délaie le résidu dans de l'acétone, puis on filtre On ajoute au filtrat du perfluorobutane de potassium, puis de l'éther, et on refroidit le mélange On lave le solide résultant avec de l'acétone, de l'hexane et on le sèche, ce qui donne le composé du titre sous la forme d'une poudre. Analyse pour C 13 H 15 N 2055 K: Calculé: C, 44,55; H, 4,32; N, 8,00; S, 9,15; K, 11,16 Trouvé: C, 43,83; H, 4,16; N, 7,96; S, 8,76; K, 11,43. RMN (D 20) 1,33 (S,3 H), 1,58 (S,3 H), 3,68 (S,3 H), 4,70 (S,1 H), 7,56 ppm (large S, 5 H). Exemple 156 Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans-3-ll( 2-amino- 4- thiazolyl)oxo-acétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique A une solution de 1,85 g de chlorure de diphényl- phosphinyle dans 15 ml de diméthylformamide sec, refroidie dans un bain de glace et de méthanol (-15 à -20 C), on ajoute 2,14 g de sel de triéthylamine d'acide ( 2-amino)-4- thiazolyl)glyoxylique Après avoir agité pendant une demi- heure, on ajoute à la solution froide d'anhydride mixte une solution d'acide ( 3 S-trans)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique ( 1,08 g; voir l'Exemple 139) et de 1,92 ml de triéthylamine dans 5 ml de diméthylformamide sec, puis on agite le mélange réactionnel à 5 C pendant 24 heures. On chasse le solvant sous vide, on dissout dans l'eau l'huile foncée résiduelle, et on chromatographie sur résine "Dowex 50 X 2-400 " (forme K, 200 ml) Apres élution avec de l'eau (fractions de 15 ml), on recueille le produit brut dans les fractions 13 à 27 ( 3,37 g) La chromatographie sur 200 ml de résine "HP-20 ", en éluant avec de l'eau (fractions de 15 ml), donne le produit voulu dans les fractions 18 à 26 L'élimination de l'eau sous vide donne le composé du titre sous la forme d'une poudre amorphe. Analyse pour C 9 H 9 N 40652 K ( 372,42): Calculé: C, 29,02; H, 2,44; N, 15,04; S, 17,22; K, 10,50 Trouvé: C, 28,87; H, 2,62; N, 14,85; S, 15,09;K, 10,81. Exemple 157 Trifluoracétate ( 1:1) du sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lll(aminoacétyl)aminolphénylacétyllaminol-2-oxo- 1-azétidinesulfonique L'élimination du groupement protecteur du sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-lllllll( 4-méthoxyphényl)- méthoxylcarbonyllaminolacétyllaminolphénylacétyllaminol-2- oxo-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 127), à l'aide d'acide trifluoracétique et d'anisole, donne le composé du titre, point de fusion 165 C, avec décomposition. Exemple 158 Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)-3-méthoxy-4-méthyl- 2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-1-azétidine- sulfonique A) ( 3 S-trans)-4-méthyl-3-méthoxy-2-oxo-4-ll(phénylméthoxy)- carbonyl-laminolazétidine On refroidit à O C une solution de 2,5 g ( 0, 0106 mole) de ( 3 R trans)-4-méthyl-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)- carbonyllaminolazétidine (préparée à partir de la d-thréo- nine avec un rendement de 12,6 %, essentiellement comme décrit pour l'isomère cis racémique dans l'Exemple 98 C), dans 112 ml de borax à 4 % dans du méthanol, et on ajoute 3,5 ml d'hypochlorite de t-butyle Au bout de 20 minutes, on verse la solution dans 1 litre d'eau froide et on extrait avec deux fractions de 750 ml d'acétate d'éthyle froid On lave la couche organique avec deux fractions de 750 ml d'eau froide, avec une solution saturée de sel puis on sèche et on fait évaporer pour obtenir 3,05 g de N,N'- dichloramide brut. On refroidit à -78 C une solution de 426 mg de méthylate de lithium dans 20 ml de méthanol sec, et on la dilue avec 40 ml de tétrahydrofuranne sec On ajoute en 30 secondes, à l'aide d'une seringue, une solution du chloramide ci-dessus dans 20 ml de tétrahydrofuranne (-78 C) Après 20 minutes à -78 C, on ajoute 2 ml d'acide acétique et 2 ml de triméthylphosphite Après 40 minutes à la température ambiante, on verse la solution dans 500 ml d'eau et on l'extrait avec deux fractions de 300 ml d'acétate d'éthyle On lave la couche organique avec de l'eau, on la sèche, et on la fait évaporer pour obtenir une huile Une chromatographie sur une colonne de gel de silice de 200 ml, en éluant avec un mélange 3; 1 de chloroforme et d'acétate d'éthyle, donne un total de 1,25 g du composé du titre. B) Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)-3-méthoxy-4- méthyl-2-oxo-3-l l(phénylméthoxy)carbonyll aminol-1-azétidine sulfonique On refroidit à O C une solution de 800 mg ( 0,00303 mole) de ( 3 S-trans)-4-méthyl-3-méthoxy-2-oxo-4-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminolazétidine dans 2 ml de diméthyl- formamide, et on ajoute 4 ml d'un complexe diméthyl- formamide-trioxyde de soufre Après une heure à O C et 4 heures à la température ambiante, on verse la solution dans ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M (ajusté à p H 5,5) et on l'extrait avec deux fractions de 50 ml de chlorure de méthylène (à jeter) On traite la couche aqueuse par 1,04 g de sulfate de tétrabutylammonium et on l'extrait au dichlorométhane pour obtenir 1,42 g d'huile. On dissout cette huile dans de l'acétone et on la traite par 1,04 g de perfluorobutane sulfonate de potassium dans ml d'acétone Une dilution avec 250 ml d'éther et une trituration poussée du solide huileux donnent 584 mg de produit brut Une chromatographie sur 200 ml de résine "HP-20 AG" donne 418 mg de produit purifié dans les frac- tions 13 à 16 ( 100 ml) (élution avec 1 litre d'eau, puis avec un mélange 9:1 d'eau et d'acétone) La trituration de 114 mg de cette substance avec de l'éther donne 104 mg d'un échantilion analytique. Analyse pour C 13 H 14 N 207 SK H 2 O: Calculé: C, 39,06; H, 4,04; N, 7, 01; S, 8,03; K, 9,78 Trouvé: C, 38,91; H, 3,62; N, 6,91; S, 8,06; K, 9,51. RMN (D 20) 1,33 ( 3 H, d, j= 7), 3,46 ( 3 H,S), 4,22 ( 2 H, d de d, j= 6), 5,18 ( 2 H,S), 7,43 ppm ( 5 H,S). Exemple 159 Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)-3-méthoxy-4-méthyl 2-oxo-3l(phénylacétyl)aminol-1-azétidinesulfonique On prépare le sel de tétrabutylammonium de l'acide ( 3 S-trans)-3-amino-3 méthoxy-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique par hydrogénation catalytique du sel depotassium de l'acide ( 3 S-trans)-3-méthoxy-4-méthyl-2-oxo-3-ll(phényl- méthoxy)carbonyllaminol-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 158) après transformation en sel de tétrabutyl- ammonium En suivant le mode opératoire de l'Exemple 88, mais en utilisant le sel de tétrabutylammonium de l'acide ( 3 S-trans)-3-amino-3-méthoxy-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique et le chlorure de phénylacétyle, on obtient le composé du titre. Analyse pour C 13 H 15 N 2065 K *Y P 13 15 2 6- Calculé: C, 42,61; H, 4,31; N, 7,65 Trouvé: C, 39,67; H, 4,09; N, 7,30. RMN D 20) 1,29 (BH, d, j=?), 3,45 ( 3 H,S), 3,73 ( 2 H,S), 4,36 ( 2 H, d de d, j= 6), 7,38 ppm ( 5 H,S). Exemple 160 Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),41 ll-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)ll 2-(diphénylméthoxy)-2-oxo-éthoxyliminolacétyll- aminol-2-méthyl-4-oxo-1-azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 138, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-(méthoxyimino)-4- thiazoleacétique par l'acide (Z)-2-amino-a-ll 2-(diphényl- méthoxy)-2-oxo-éthoxyliminol-4-thiazoleacétique, et en traitant d'abord l'acide ( 3 S-cis)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique par la triéthylamine, on obtient le composé du titre, point de fusion 155-160 C, avec décomposi- tion. Exemple 161 Sel dipotassique de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 ell-3-lll(carboxy- méthoxy)iminol( 2-amino-4-thiazolvl)acétyllaminol-4-méthyl- 2-oxo-1-azétidinesulfonique L'élimination du groupement protecteur du sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 ll-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)ll 2-(diphénylméthoxy)-2-oxo-éthoxyliminolacétyll- aminol-2-méthyl-4-oxo-1-azétidinesulfonique (voir l'Exemple ), à l'aide de l'acide trifluoracétique et de l'anisole, donne le composé du titre, qui se décompose à > 250 C. Exemple 162 Sel de potassium de l'acide (S)-3-lll( 2,6-dichloro-4- pyridinyl)thiolacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique L'acylation du sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3 amino-2-oxo-1azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A) par l'ester 4-nitrophénylique de l'acide l( 2,6-dichloro-4- pyridinyl)thiolacétique, suivie d'un traitement au perfluorobutanesulfonate de potassium, donne le composé du titre, point de fusion 212-214 C - Exemple 163 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-llll( 4-amino-2,3- dioxo-l-pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacetyllaminol-4- méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On hydrogène le sel de potassium de l'ester phénylméthylique de l'acide l 3 S(R)l-14 ll 2 l( 4-méthyl-2-oxo-1-sulfo-3-azétidinyl)aminol- 2-oxo-1-phénylthyll amino carbonyll-2 3-dioxo 1 -pipéra z inyll - carbamique (voir l'Exemple 149) à l'aide d'hydrogène gazeux et de palladium à 10 % sur charbon servant de catalyseur, ce qui donne le composé du titre, point de fusion 165 C, avec décomposition. Exemple 164 Sel de sodium ( 1:2) de l'acide l 3 S(Z) l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl) ll( 1-carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol- 2-oxo-1-azètidinesulfonique On élimine le groupement protecteur du sel de tétra- butylammonium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- ll 2-(diphénylméthoxy)-1,1-diméthyl-2-oxo-éthoxyliminol- acétyllaminol-2-oxo-l-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 28) à l'aide d'acide trifluoracétique et l'anisole, pour obtenir le composé du titre, point de fusion 185 C, avec décomposition, après transformation en sel disodique à l'aide de soude aqueuse, et purification sur "HP-20 ". Exemples 165 à 168 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 11, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-lllhydroxy(phényl- méthoxy)phosphinyllméthoxyliminol-4-thiazoleacétique par l'acide indiqué dans la Colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la Colonne II ci-après. E Xe Mple Colonne I Acide 2,6-dirméthoxybenzoique 166 Acide (Z)-2-amino-cx-ll 4-(diphényl- méthoxy) -4-oxobutoxyl iminoll-4- thiazoleacétique 167 Acide 2-Vll (phényilméthoxy)carbonyll- aminolJméthyllIbenzoique 168 Acide a-l ll 5-hydroxy-2 ( 4-formyl- 1-pipérazinyl) pyridor 2,3-d 1- pyrimidin-6-yllJcarbonyll amino J benz èneacé tique Colonne II Sel de potassium de l'acide (S)-3-l( 2,6- diméthoxybenzoyl>aminol -2-oxo-1-azétidine- sulfonique point de fusion 1800 C, avec décomposition Sel de potassium de'l'acide l 3 S(Z)1-2-ll( 2- amino-4-thiazolyl) ll 4 (diphénylméthoxy) -4- oxobutoxyl imino Jacétyll Jaminol 1-2 -oxo-1 - azétidinesulfonique point de fusion 125-130 'C, avec décomposition Sel de potassium de l'acide lll(phénylméthoxi) carbonyl Jaminolméthyll - benzoyl Jaminol -l-azétidinesulfonique point de fusion 234,50 C, avec décomposition. Sel de potassium de l'acide ( 3 S)-3-llll 5- hydroxy-2 ( 4-formyl-l-pipérazinyl) pyrido- l 2,3-dlpyrimidin 6-yllcarbonyllaminolphényl- acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique; point de fusion 265-270 'C, avec décomposition. w %.0 FM J' C> %O ra Exemple 169 Acide (trans)-3-amino-4-éthyl-2-oxo 1-azétidinesulfonique A) t-boc-Nméthoxy-e-thréo-éthyls érinamide On dissout 1,33 g de thréo-D,L éthylsérine dans 10 ml de potasse 2 N et 5 ml de t-butanol Après avoir ajou- té 2,46 g de pyrocarbonate de di-t-butyle, on agite le. mélange à deux phases pendant 4 heures à la température ambiante On ajoute 1,25 g de O-méthylhydroxylammonium et on ajuste le p H à 4 avec de l'acide chlorhydrique i N On ajoute 1,92 g de chlorhydrate de 1-éthyl-3-( 3-diméthylamino- propyl)carbodiimide et on ajuste à nouveau le p H à 4 Apres avoir agité pendant une heure, on sature le mélange réac- tionnel de chlorure de sodium et on l'extrait avec quatre fractions de 50 ml d'acétate d'éthyle On réunit les extraits acétate d'éthyle et on les sèche sur sulfate de magnésium L'élimination du solvant sous vide donne 1 g du composé du titre - B) t-boc-O-méthanesulfonyl-N-méthoxy-e-thréo-propionamide On dissout 10,5 g de t-boc-N-méthoxy-e-thréo-éthyl- sérinamide dans 65 ml de pyridine On ajoute goutte à goutte, à O C, 4,65 ml de chlorure de méthanesulfonyle. Après avoir agité pendant 3 heures à la température ambiante, on verse le mélange réactionnel dans 200 g de glace et 300 ml d'acide chlorhydrique 1 N On ajuste le p H à 4 avec de l'acide chlorhydrique concentré Après avoir extrait avec trois fractions de 85 ml d'acétate d'éthyle, on sèche les extraits réunis sur du sulfate de magnésium et on les concentre sous vide On traite le résidu par du tétra- chlorure de carbone et on concentre à nouveau En agitant avec de l'éther, puis en filtrant, on obtient 6,9 g du composé du titre. C) (trans)-3-t-butoxycarbonylamino-4-éthyl-1-méthoxy-2- azétidinone On porte au reflux 4,15 g de carbonate de potassium anhydre et 125 ml d'acétone sèche et on ajoute 3,4 g de t- boc-O-méthanesulfonyl-N-méthoxy-a-thréo-propionamide dans ml d'acétone Au bout d'une heure, on refroidit le mélange réactionnel et on filtre, et on concentre le filtrat sous vide On agite le résidu huileux avec de l'hexane pour obtenir 2,2 g du composé du titre. D) (trans)-3-t-butoxycarbonylamino-4-éthyl-2-azétidinone On ajoute 3 g de (trans)-3-t-butoxycarbonylamino-4- éthyl-l-méthoxy-2-azétidinone à 170 ml d'ammoniac liquide, à -78 C sous azote, et on ajoute en cinq fois 1,68 g de sodium, en agitant, en 5 minutes On continue l'agitation pendant 30 minutes On ajoute ensuite lentement duchlorure d'ammonium jusqu'à ce que la couleur bleue du mélange réactionnel disparaisse Après avoir chassé l'ammoniac sous azote, on extrait le solide avec deux fractions de ml d'acétate d'éthyle L'élimination du solvant, suivie d'un séchage sous vide, donne 2,7 g du composé du titre. E) Sel de tétrabutylammonium de l'acide (trans)-3-t- butoxycarbonylamino-4-éthyl-2-oxo-l-azétidinesulfonique A une solution de 2 ml de pyridine absolue dans ml de dichlorométhane sec, on ajoute 3,7 ml de chlorure de triméthylsilylsulfonyle dans 5 ml de dichlorométhane sec L'addition se fait à -30 C, sous azote, enl O minutes. Après avoir agité à la température ambiante pendant 30 minutes, on met le ballon sous vide pour obtenir un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre On ajoute dans le ballon 2,67 g de (trans)-3-t-butoxycarbonylamino-4-éthyl-2- azétidinone et 20 ml de pyridine sèche, puis on place le ballon dans un bain d'huile préchauffé à 90 C Au bout de minutes, on obtient une solution limpide que l'on verse dans 200 ml d'une solution 1 M de phosphate de potassium dibasique Après avoir ajouté 27 g de phosphate de potassium dibasique et 100 ml d'eau, on obtient une solution limpide On extrait cette solution avec deux fractions de ml d'acétate d'éthyle On ajoute à la couche aqueuse de l'hydrogéno-sulfate de tétrabutylammonium, et on extrait la solution aqueuse avec trois fractions de 100 ml de dichlorométhane, puis on sèche les couches organiques réunies sur du sulfate de magnésium Une concentration sous vide donne 6,9 g du composé du titre. F) Acide (trans)-3-amino-4-éthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On agite pendant 3 heures à la température ambiante - -2509299 6,75 g de sel de tétrabutylammonium d'acide (trans)-3-t- butoxycarbonylamino-4-éthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique dans 40 ml d'acide formique à 98 % On ajoute 60 mi de dichlorométhane et on refroidit le mélange pendant 16 heures environ On sépare le précipité résultant par filtration puis on le sèche sous vide pour obtenir 0,85 g du composé du titre, point de fusion 185 C, avec décomposition. Exemple 170 Sel dipotassique de l'acide (trans,Z)-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-4- éthyl-2-oxo-1-aétidinesulfonique A) Sel dipotassique de l'acide (trans,Z)-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)iminol- acétyllaminol-4-éthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout 0,55 g d'acide (trans)-3-amino-4-éthyl-2- oxo-l-azétidinesulfonique et 335 mg de triéthylamine dans ml de diméthylformamide sec On ajoute 1,14 g d'acide (Z)-2-amino-a-l( 11-diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)- iminol-4-thiazoleacétique, en agitant à 00 C, puis on ajoute 450 mg d'hydroxybenzotriazole et 0,69 g de dicyclohexyl- carbodiimide Après avoir agité pendant 16 heures environ à O C, on met le ballon sous vide On ajoute au solide ml d'acétone sèche, en agitant On filtre le mélange et on ajoute au filtrat 0,94 g de perfluorobutanesulfonate de potassium, puis 100 ml-d'éther Après repos pendant 1 heure à O C, on filtre le solide, on le lave à l'éther et on le sèche sous vide, ce qui donne 1,58 g du composé du titre. B) Sel dipotassique de l'acide (trans,Z)-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy)iminolacétylllaminol-4- éthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique A une solution de 1,31 g de sel dipotassique d'acide (trans,Z)-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl) l(l-diphénylméthoxy- carbonyl-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-4-éthyl-2-oxo- 1-azétidinesulfonique dans 10 ml d'anisole, on ajoute 5 ml d'acide trifluoracétique, en 10 minutes, à -150 C Après avoir agité pendant 2 heures à -10 C, on obtient une solu- tion limpide A -30 C, on ajoute 80 ml d'éther sec et on filtre le précipité résultant puis on le traite par 5 ml d'eau On ajuste le p H à 5, 5 avec de la potasse 1 N à O C, et on filtre le mélange pour éliminer le produit de départ non transformé On fait subir au filtrat une chromatogra- phie sur "HP-20 " avec de l'eau comme éluant Une lyophili- sation donne 185 mg du composé du titre, point de fusion C, avec décomposition. Exemple 171 Sel de potassium de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amino-4- thiazol 1 y)l( 4-hydroxy-4-oxobutoxy)iminolacétyllaminol-2- oxo-l-azétidinesulfonique L'élimination du groupement protecteur du sel de potassium de l'acide l 3 S(z)l-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl) ll 4- (diphénylméthoxy)-4-oxobutoxyliminolacétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique (voir l'Exemple 166), à l'aide d'acide trifluoracétique et d'anisole, donne le composé du titre, point de fusion > 200 C. Exemple 172 Sel interne de l'acide (S)-3-ll 2-(aminométhyl)benzoyll- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique L'élimination du groupement protecteur du sel de potassium de l'acide (S)-2-oxo-3-ll 2-lll(phénylméthoxy)- carbonyllaminolméthyllbenzoyllaminol-l-azétidinesulfonique en utilisant de l'hydrogène gazeux, du palladium sur char- bon et de l'acide chlorhydrique, donne le composé du titre, point de fusion 162-165 C. Exemple 173 Sel de potassium de l'acide (S)-3-lll 2-( 4-formyl-1- pipérazinyl)-5-hydroxypyridol 2,3-dlpyrimidin-6-yllcarbonyll- aminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On condense le sel de tétrabutylammonium de l'acide (S)-3-amino-2-oxo-1-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 6 A) avec la 2-( 4-formyl-l-pipérazinyl)-5-hydroxy-6-l( 4-nitro- phénoxy)carbonyllpyridol 2,3-dlpyrimidine, et on traite le composé résultant par du perfluorobutanesulfonate de potassium dans l'acétone, pour obtenir le composé du titre, point de fusion 290 C, avec décomposition. Exemple 174 Sel dipotassiaue de l'acide ( 3 S-trans)-a-ll( 4-méthyl-2-oxo- 1-sulfo-3-azétidinyl)aminolcarbonyllbenzèneacétique On condense l'acide ( 3 S-trans)-3-amino-4-méthyl-2- oxo-1-azétidinesulfonique (voir l'Exemple 139) avec le chlorure d'a(carboxyl)benzèneacétyle, et on traite le composé résultant par la triéthylamine et le perfluoro- butane de potassium pour obtenir le composé du titre, point de fusion 147 C, avec décomposition. Exemple 175 Acide l 3 S-transl-3-amino-4-cyclohexyl-2-oxo-1-azétidine- sulfo Rique A) Acide a-(t-butoxycarbonylamino)-e-cyclohexyl-e-hydroxy- thréo-propionique On met en suspension 15 g d'acide g-cyclohexyl-c- amino hydroxy-thréo-propionique dans 150 ml d'acéto- nitrile et 70 ml d'eau On ajoute 17,8 g de triéthylamine et on chauffe le mélange, en agitant, à 60 C A cette température, on obtient une solution limpide et on ajoute 21,0 g de pyrocarbonate de di-t-butyle, et on continue l'agitation à 60 C pendant une heure et demie On chasse le solvant sous vide et on ajoute 50 ml d'eau On extrait la couche aqueuse avec de l'acétate d'éthyle à un p H de 2, que l'on ajuste par addition d'acide chlorhydrique 3 N On sépare la couche orqaniaue, on la sèche sur sulfate de sodium et on la fait évaporer à siccité On filtre la substance cristalline restante avec de l'éther de pétrole, ce qui donne 20,4 g du composé du titre, point de fusion 113-115 C - B) a-(t-butoxycarbonylamino)-e-cyclohexyl-e-hydroxy-N- méthoxy-thréo-propionamide On met en suspension 20,2 g d'acide a-(t-butoxy- carbonylamino)-8-cyclohexyl-e-hydroxy-thréo-propionique et 7,6 g de chlorhydrate de O-méthylhydroxylamine dans 350 ml d'eau et 175 ml de tbutanol On ajuste le mélange à p H 4 avec du carbonate de potassium On ajoute 16,4 g de 1-éthyl-3-( 3-diméthylaminopropyl)carbodiimide et on main- tient le p H à 4, en agitant, pendant une heure et demie On- chasse le t-butanol sous vide et on sature la solution aqueuse restante avec du chlorure de sodium puis on l'extrait deux fois avec des fractions de 100 ml d'acétate d'éthyle On réunit les couches organiques, on les sèche sur sulfate de sodium et on les fait évaporer à siccité. On sépare les cristaux restants par filtration avec de l'éther de pétrole, ce qui donne 18,6 g du composé du titre, point de fusion 125-127 C. C) a-(t-butoxycarbonylamino)--cyclohexyl 1 (méthane- sulfonyloxy)-N-méthoxy-thréo-propionamide On dissout 18,3 g d'a-(t-butoxycarbonylamino)-- cyclohexyl-e-hydroxy-N-méthoxy-thréo-propionamide, en agitant, dans 100 ml de pyridine sèche On refroidit la solution, en agitant, à O C, et on ajoute goutte à goutte 9,3 g de chlorure de méthanesulfonyle Après une heure à O C, on ajoute 3,3 g supplémentaires de chlorure de méthanesulfonyle et on continue l'agitation pendant encore une heure On verse la solution dans 300 ml d'eau glacée, on ajoute 200 ml d'acétate d'éthyle et on ajuste le p H à 3 avec de l'acide sulfurique dilué On sépare la couche organique, on la sèche avec du sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide On recueille le solide restant avec de l'éther de pétrole, ce qui donne 19,0 g du composé du titre, point de fusion 150-152 C. D) l 3 S-transl-3-(t-butoxycarbonylamino)-4-cyclohexyl-1- méthoxy-2-azétidinone On dissout 18,7 g d e-(t-butoxycarbonylamino)-(-cyclohexyl-- (méthanesulfonyloxy)-N-méthoxy-thréo-propionamide dans 500 ml d'acétone sèche On ajoute 9,8 g de carbonate de potassium et on chauffe la suspension à la température de reflux, en agitant, pendant 5 heures On sépare par filtra- tion la substance minérale insoluble et on chasse le sol- vant sous vide, puis on dissout l'huile restante dans 30 ml d'acétate d'éthyle En ajoutant de l'éther de pétrole, on fait précipiter le composé du titre, que l'on sépare par filtration ( 12,9 g), point de fusion 110-112 C. E) l 3 S-transl-3-(t-butoxycarbonylamino)-4-cyclohexyl-2- azétidinone On ajoute 1 g de l 3 S-transl-3-(t-butoxycarbonyl- amino)-4-cyclohexyl-1-méthoxy-2-aétidinone à 50 ml d'ammoniac liquide, en agitant On ajoute 0,154 g de sodium, en 5 à 6 fractions, en 5 minutes Au bout de ce temps, on ajoute une quantité supplémentaire de 0,025 g de sodium et on continue l'agitation pendant 5 minutes On ajoute 0,89 g de chlorure d'ammoniuma et on chasse l'ammoniac On extrait le résidu avec de l'acétate d'éthyle chaud On fait évaporer l'extrait organique à siccité et on filtre les cristaux restants du composé du titre avec de l'éther de pétrole, ce qui donne 0,5 g de produit, point de fusion 130-132 C. F) Sel de pyridine de l'acide l 3 S-transl-3-(t-butoxy- carbonylamino)-4-cyclohexyl-2-oxo-l-azétidinesulfonique On dissout 5,3 g de l 3 S-transl-3-(t-butoxycarbonyl- amino)-4-cyclohexyl-2-azétidinone dans 20 ml de chlorure de méthylène et 80 ml de diméthylformamide Apres avoir ajou- té 60 mmoles d'un complexe pyridine-trioxyde de soufre, on agite la solution pendant 6 heures à la température ambian- te L'élimination du solvant sous vide donne 11,3 g du composé du titre sous la forme d'une huile. G) Sel de tétrabutylammonium de l'acide l 3 S-transl-3-(t- butoxycarbonylamino)-4-cyclohexyl-2-oxo-1-azétidinesulfoni- que On dissout dans 250 ml d'eau 11,3 g de sel de pyri- dine d'acide l 3 S-transl-3-(t-butoxycarbonylamino)-4-cyclo- hexyl-2-oxo-l-azétidinesulfonique On ajoute en agitant 9,0 g d'hydrogénosulfate de tétrabutylammonium, et on ajuste le p H à 6,5 avec de la potasse 1 N On extrait la solution aqueuse deux fois avec des fractions de 200 ml de chlorure de méthylène On sèche les fractions organiques avec du sulfate de sodium, on filtre et on chasse le sol- vant par distillation, ce qui donne 8 g du composé du titre, point de fusion 135-138 C. H) Acide l 3 S-transl-3-amino-4-cyclohexyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On agite 3,8 g de sel de tétrabutylammonium d'acide l 3 S-transl-3-(t-butoxycarbonylamino)-4-cyclohexyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique dans 20 ml d'acide formique, pendant 3 heures, puis on ajoute 20 ml de chlorure de méthylène On sépare par filtration le composé du titre précipité ( 1,0 g), point de fusion 217-219 C. Exemple 176 Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 c(Z),411-3-fl( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-4-cyclohexyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique On dissout 0,25 g d'acide l 3 S-transl-3-amino-4cyclo- hexyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique dans 30 ml de diméthyl- formamide sec et 0,12 g de triéthylamine, en agitant Quand on a obtenu une solution limpide, on ajoute 0,2 g d'acide (Z)-2-amino-a-(méthoxyimino) -4-thiazoleacétique, 0,16 g d'hydroxybenzotriazole et 0,42 g de dicyclohexylcarbodiimi- de On continue l'agitation pendant 48 heures à la tempé- rature ambiante On sépare par filtration l'urée précipitée et on chasse le solvant sous vide On dissout le résidu dans 10 ml d'acétone et on ajoute 0,41 g de perfluorobutane- sulfonate de potassium Après avoir ajouté 50 ml d'éther, le composé du titre précipite, et on le filtre Une chro- matographie sur colonne en utilisant la résine "HP-20 " et un mélange 9:1 d'eau et d'acétone comme éluant, donne 0,36 g de produit, point de fusion 200-205 C (après lyophilisa- tion). Exemple 177 * Sel dipotassique de l'acide l 3 S-l 3 c(Z),4 ell-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)l( 1-carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-4- cyclohexyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique A) Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 ell-3-ll( 2- amino-4-thiazolyl)l( 11-diphénylméthoxycarbonyl-1-méthyl-; éthoxy)iminolacétyllaminol-4-cyclohexyl-2-oxo-l-azétidine- sulfonique On dissout l'acide l 3 S-transl-3-amino-4-cyclohexyl- 2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,2 g; voir l'Exemple 175) dans 30 ml de diméthylformamide et 0,09 g de triéthylamine, en agitant On ajoute 0,12 g d'hydroxybenzotriazole, 0,30 g d'acide (Z)-2-amino-a-l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-1-méthyl- éthoxy)iminol-4-thiazoleacétique et 0,33 g de dicyclohexyl- carbodiimide, et on continue l'agitation à la température ambiante pendant 12 heures On sépare par filtration l'urée précipitée et on fait évaporer la liqueur mère à siccité. On dissout l'huile restante dans 5 ml d'acétone, on traite la solution par 0,3 g de perfluorobutanesulfonate de potassium et on verse dans 100 ml d'éther, en agitant Le sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),41 ll-3-ll( 2-amino- 4-thiazolyl)l( 1-diphénylméthoxycarbonyl-1-méthyléthoxy)- iminolacétyllaminol-4-cyclohexyl-2-oxo-1-azétidinesulfoni- que ( 0,61 g) précipite et on le sépare par filtration. B) Sel dipotassique de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),43 ll-3-ll( 2- amino-4-thiazoiyl)l( 1-carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyll- aminol-4-cyclohexyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique On met en suspension 0,61 g de sel de potassium d'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 ell-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)l( 1- diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol- 4-cyclohexyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique dans 6 ml d'anisole, on refroidit à -15 C, et on ajoute goutte à goutte 5 ml d'acide trifluoracétique, en agitant On maintient la température pendant une heure puis on l'abaisse à -30 C. On ajoute environ 100 ml d'éther sec, à une cadence telle que la température ne dépasse pas -10 C On sépare par filtration le composé précipité et on lui fait subir une chromatographie sur résine "HP-20 ", en utilisant comme éluant un mélange 9:1 d'eau et d'acétone, ce qui donne 0,3 g du composé du titre, point de fusion 119-120 C, avec décompo- sition (après lyophilisation). Exemple 178 Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a,4 Bll-4-cyclohexyl-3- lllll 3-l( 2-furanylméthylène)aminol-2-oxo-1-imidazolidinyll- carbonyllaminolphénylacétyllaminol-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On dissout l'acide l 3 S-transl-3-amino-4-cyclohexyl- 2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,1 g; voir l'Exemple 175) dans un mélange de 30 ml de diméthylformamide sec et de 0,05 g de triéthylamine, en agitant On ajoute 0,14 g d'acide llll( 2-furanylméthylène)aminol-2-oxo-1-imidazoli- dinyllcarbonyllaminolphénylacétique, 0,06 g d'hydroxy- benzotriazole et 0,17 g de dicyclohexylcarbodiimide, et on agite la solution pendant 5 jours à la température ambiante. On chasse le solvant sous vide, on dissout le résidu dans ml d'acétone et on sépare par filtration l'urée précipi- tée On agite la liqueur mère avec 0; 15 g de perfluoro- butanesulfonate de potassium et on dilue avec 50 ml d'éther. On filtre le précipité et on lui fait subir une chromatogra- phie avec de la résine "HP-20 " en utilisant comme éluant un mélange 9:1 d'eau et d'acétone, ce qui donne 0,14 g de produit, point de fusion 195200 C, avec décomposition (après lyophilisation). Exemple 179 Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(R*),4 ll-4-cyclohexyl- 3-ll 3-( 4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)-1,3-dioxo-2- phénylpropyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout l'acide l 3 S-transl-3-amino-4-cyclohexyl- 2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 0,1 g; voir l'Exemple 175) dans 30 ml de diméthylformamide et 0,5 g de triéthylamine, en agitant On ajoute l'acide (R)-O-ll( 4-éthyl-2,3-dioxo- 1-pipérazinyl)carbonyllaminolbenzèneacétique, 0,06 g d'hydroxybenzotriazole et 0,17 g de dicyclohexylcarbodiimide et on agite le mélange pendant 16 heures environ à la tempé- rature ambiante On chasse le solvant par distillation sous vide et on dissout l'huile restante dans 10 ml d'acétone. On sépare par filtration l'urée précipitée et on agite la liqueur mère avec 0,15 g de perfluorobutanesulfonate de potassium, puis on dilue avec 50 ml d'éther On sépare le précipité par filtration et on lui fait subir une chromato- graphie sur résine "HP-20 't, en utilisant comme éluant un mélange 9:1 d'eau et d'acétone, ce qui donne 0,15 g du composé du titre, point de fusion 175-180 C (après lyophili- sation). Exemple 180 Sel de potassium de l'acide (trans,Z)-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-2 r 4-éthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 170, partie A, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-l( 1- diphénylméthoxycarbonyl-l-méthyléthoxy)iminol-4-thiazole- acétique par l'acide (Z)-2-amino-a-(méthoxyimino)-4- thiazoleacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 190 C, avec décomposition. Exemple 181 Acide ( )-(trans)-3-amino-2-oxo-4-phényl-1-azétidine- sulfonique I 50 A) ( )-(trans)-2-oxo-4-phényl-1-azétidine-tert-butyl- diphénylsilane On refroidit à O C sous argon une solution de 20,56 g de tert-butylchlorodiphénylsilane dans 45 ml de diméthyl- formamide, et on la traite par 10,4 ml de triéthylamine, puis par la ( )2-oxo-4-phényl-1-azétidine Après plusieurs heures à O C, on traite le mélange résultant par 1 ml sup- plémentaire de triéthylamine et par 2,11 g de tert-butyl- chlorodiphénylsilane et on laisse remuer pendant 65 heures à 5 C On verse le mélange réactionnel dans 300 ml d'eau glacée et on l'extrait avec trois fractions de 125 ml d'un mélange 3:1 d'éther et d'acétate d'éthyle On lave les extraits organiques avec un tampon de phosphate à p H 4,5 (trois fractions de 50 ml), avec 50 ml d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, avec deux fractions de ml d'eau, avec une solution saturée de chlorure de sodium, et on sèche sur sulfate de sodium Une filtration et une concentration sous vide donnent un solide que l'on lave avec de l'hexane pour obtenir, après séchage sous vide poussé, 15 g du composé du titre sous la forme d'un solide. B) ( )-(trans)-3-azido-2-oxo-4-phényl-1-azétidine-tert- butyldiphénylsilane On sèche au chalumeau sous argon un ballon de 50 ml équipé d'un barreau d'agitation, d'une arrivée de gaz et d'une cloison de séparation, et on le charge de n-butyl lithium ( 0,65 ml d'une solution 1, 6 M dans l'hexane) que l'on refroidit à -40 C et que l'on dissout dans 2 ml de tétrahydrofuranne On ajoute goutte à goutte 0,16 ml de diisopropylamine, on agite le mélange résultant pendant 30 minutes et on le refroidit à -78 C On ajoute goutte à goutte, en 5 minutes environ, une solution de ( )-(trans)- 2-oxo-4-phényl-1-azétidine-tert-butyldiphénylsilane ( 400 mg) dans 1,5 ml de tétrahydrofuranne Après avoir agité pendant encore 20 minutes, on traite la solution par 204 mg d'azide de p-toluènesulfonyle dans 0,5 ml de tétrahydro- furanne On agite le mélange résultant pendant 10 minutes à -78 C et on le traite goutte à goutte par 0,4 ml de chlorotriméthylsilane Après avoir agité pendant encore minutes,on retire le bain de refroidissement et on agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 2 heures et demie Puis, tout en refroidissant à O C, on ajoute 20 ml d'acétate d'éthyle, puis 8 ml d'un tampon de phosphate à p H 4,5 On lave la couche organique avec deux fractions supplémentaires de 8 ml du tampon, avec trois fractions de 10 ml d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 %, avec 10 ml d'une solution de chlorure de sodium à %, avec 10 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium, puis on sèche sur sulfate de sodium Une filtration et une concentration sous vide donnent 500 mg d'une huile, à laquelle on fait subir une chromatographie éclair avec un mélange de 5 % d'acétate d'éthyle et d'hexane, ce qui donne 253 mg du composé du titre. C) ( )-(trans)-3-azido-2-oxo-4-phényl-1-azétidine On dissout dans 240 ml de méthanol une solution de 17 g de ( )-(trans)-3-azido-2-oxo-4-phényl-l-azétidine- tert-butyldiphénylsilane brut, puis on traite la solution goutte à goutte à O C par 35 ml d'acide chlorhydrique con- centré On retire le bain de refroidissement, on agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant une heure, puis on refroidit de nouveau à O C, après quoi on ajoute une solution saturée de bicarbonate de sodium jusqu'à' neutralité On extrait le mélange résultant avec de l'acétate d'éthyle (une fraction de 300 ml et quatre frac- tions de 100 ml) et on lave les extraits organiques avec un mélange 1:1 de bicarbonate de sodium à 5 % et de chlorure de sodium à 50 %, puis avec une solution sature de chlorure de sodium, et on sèche sur sulfate de sodium Une filtra- tion et une concentration sous vide donnent 15 g d'une huile épaisse à laquelle on fait subir une chromatographie sur 100 g de gel de silice avec un mélange de 20 %d'acétate d'éthyle et d'hexane, ce qui donne 460 mg du composé du titre. D) el de tétrabutylammonium de l'acide ( -)(trans)-3-azido-4- phényl-l-azétidinesulfonique On refroidit à O C sous argon une solution de 300 mg de ( )-(trans)-3-azido-2-oxo-4-phényl-1-azétidine dans 3 ml dediméthylformamide, et on la traite goutte à goutte par un complexe de diméthylformamide et de trioxyde de soufre I 52 ( 4,78 m I d'une solution 0,5 M dans le diméthylformamide). On retire le bain de refroidissement, on agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 2 heures et on le verse dans 80 ml de phosphate de potassium mono- basique 0,5 M à p H 5,5 On extrait la solution avec du dichlorométhane (à jeter) et on ajoute 541 mg de bisulfate de tétrabutylammonium On extrait le mélange résultant avec du dichlorométhane et on lave les extraits organiques avec une solution de chlorure de sodium à 10 %, puis on sèche sur sulfate de sodium Une filtration et une concen- tration sous vide donnent 800 mg d'une huile, comprenant environ 40 % du produit voulu, le reste étant formé par du diméthylformamide On utilise ce mélange sans purification dans l'étape suivante. E) Acide ( )-(trans)-3-amino-4-phényl-1-azétidine- sulfonique On hydrogène une solution de sel de tétrabutyl- ammonium d'acide ( )-(trans)-3-amino-4-phényl-1-azétidine- sulfonique dans 4 ml de méthanol, sur 30 mg d'oxyde de platine, sous 1 atmosphère et à la température ambiante. Au bout de 15 minutes, on met l'appareil sous vide et on introduit de l'hydrogène frais Au bout de 45 minutes supplémentaires, la réaction est terminée, et on purge l'appareil à l'azote Après plusieurs jours à la tempéra- ture ambiante dans 200 ml d'un mélange 4:1 de dichloro- méthane et de méthanol, l'agrégation du catalyseur est complète et on procède à la filtration Puis on concentre le filtrat sous vide à 18 ml et on ajoute 0,2 ml d'acide formique à 97 % Après avoir refroidi à 5 C pendant plusieurs heures, on filtre le solide résultant et on le lave avec du dichlorométhane pour obtenir, après séchage, mg du composé du titre sous la forme d'un solide. Analyse pour C 9 H 19 N 2045: Calculé: C, 44,62; H, 4,17; N, 11,57; S, 13, 23 Trouvé: C, 43,36; H, 4,31; N, 11,09; S, 13,02. Exemple 182 Sel de potassium de l'acide ( )-(trans)-2-oxo-4-phényl-3- l(phénylacétyl)aminol-l-azétidinesulfonique A) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( )-trans-2-oxo- 4-phényl-3-l(phénylacétyl)aminol-l-azétidinesulfonique On traite une solution de 52 mg de N-hydroxybenzo- triazole monohydraté et de 46 mg d'acide phénylacétique dans 0,3 ml de diméthylformamide, par 70 mg de dicyclohexyl- carbodiimide solide sous argon à O C On retire le bain de refroidissement et on agite le mélange résultant à la tempé- rature ambiante pendant une heure Après avoir dilué avec 0,3 ml supplémentaire de diméthylformamide, on ajoute de l'acide ( )-(trans)-3-amino-2-oxo-4-phényl-1-azétidine- sulfonique sous la forme d'un solide ( 75 mg, voir l'Exemple 181), puis on ajoute goutte à goutte 0,05 ml de triéthyl- amine On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 23 heures, on filtre et on lave le gâteau de filtration avec du diméthylformamide On ajoute le filtrat à 20 ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M (p H 4,5), on lave le mélange avec trois fractions de 8 ml d'acétate d'éthyle (à jeter), et on ajoute 105 mg ( 0,31 mmole) de bisulfate de tétrabutylammonium On extrait le mélange résultant avec trois fractions de 15 ml de dichlorométhane. On lave les extraits avec deux fractions de 15 ml de solu- tion de chlorure de sodium à 10 %, puis avec 10 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium, et on sèche sur sulfate de sodium Une filtration et une concentration sous vide donnent (après chauffage à 32 C sous vide poussé) 165 mg d'une huile, comprenant environ 40 % du composé voulu, et 60 % de diméthylformamide. B) Sel de potassium de l'acide ( )-trans-2-oxo-4-phényl-3- l(phénylacétyl)aminol-l-azétidinesulfonique On traite une solution de sel de tétrabutylammonium d'acide ( )-trans-2-oxo-4-phényl-3-l(phénylacétyl)aminol-1- azétidinesulfonique dans 1,5 ml d'acétone, par 41 mg ( 0,121 mmole) de perfluorobutanesulfonate de potassium Une dilution avec 12 ml d'éther'donne un verre qui, après tritu- ration avec de l'éther, fournit 43 mg d'un solide qui con- tient environ 20 % d'une impureté contenant elle-même une partie tétrabutylammonium On dissout le solide dans de l'acétone aqueuse à 50 % et on fait passer la solution dans 1 ml d'une résine d'échange d'ions "Dowex 50 W-X 2 " (K). L'élimination du solvant donne un solide que l'on lave avec de l'acétone, puis avec de l'hexane, et que l'on sèche à C sous vide poussé Le rendement du composé du titre est de 15 mg. Analyse pour C 1 H N 1055 K: C 17 15 2 5 Calculé:C, 51,23; H, 3,80; N, 7,03; S, 8,05; K, 9,81 Trouvé:C, 50,44; H, 4,20; N, 7,01; S, 7,59; K, 9,40. Exemple 183 Sel de potassium de l'acide ( )-(trans,Z)-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-2-oxo-4-phényl-1- azétidinesulfonique On traite une solution de 52 mg d'hydrate de N- hydroxybenzotriazole et de 69 mg d'acide (Z)-2-amino-a- (méthoxyimino)-4-thiazoleacétique dans 0,3 ml de diméthyl- formamide, par 70 mg de dicyclohexylcarbodiimide solide, sous argon, à la température ambiante On agite le mélange résultant pendant une heure, on ajoute de l'acide ( )- (trans)-3-amino-2-oxo-4-phényl-1-azétidinesulfonique ( 75 mg; voir l'Exemple 181) sous la forme d'un solide, puis on ajoute goutte à goutte 0,05 ml de triéthylamine On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 23 heures On chasse le diméthylformamide sous vide poussé à 30 C, et on triture le résidu avec 2 ml d'acétone, puis on filtre On lave le gâteau de filtration avec deux fractions de 3 ml d'acétone supplémentaires et on ajoute au filtrat 86 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium Une dilution avec 10 ml d'éther donne un solide caoutchouteux que l'on triture, que l'on lave avec de l'acétone et de l'hexane pour obtenir, après séchage, 82 mg du composé du titre sous la forme d'un solide. Analyse pour C 15 H 14 N 50652 K: Calculé:C, 40,26; H, 3,16; N, 15,65; S, 14,33; K, 8,74 Trouvé:C, 38,60; H, 3,19; N, 15,07; S, 13,87; K, 7,5. Exemple 184 Sel de potassium de l'acide (cis)-2-oxo-4-phényl-3-l(phényl- acétyl)aminol-l-azétidinesulfonique A) N-benzylidène-2,4diméthoxybenzylamine On ajoute 12,0 g de chlorhydrate de 2,4-diméthoxy- benzylamine à 100 ml d'une solution de soude 1 N et on extrait le mélange avec 125 ml d'acétate d'éthyle On sèche la couche organique sur du sulfate de sodium anhydre et on la débarrasse du solvant pour obtenir 10,2 g de 2,4- diméthoxybenzylamine sous la forme d'une huile On dissout cette amine dans 150 ml de benzène; on ajoute 6,47 g de benzaidéhyde et 0,6 g d'acide p-toluènesulfonique mono- hydraté On chauffe le mélange au reflux, en éliminant l'eau à l'aide d'un séparateur de Dean-Stark, et en deux heures la quantité calculée d'eau ( 1,1 ml) s'est séparée. On refroidit le mélange à la température ambiante Lorsqu'on refroidit davantage, la solution benzénique dépose un peu de précipité On chasse le benzène sous pression réduite et on ajoute au résidu 60 ml d'éther de pétrole Une couche huileuse se sépare avec un peu plus de précipité On ajoute 10 ml de benzène pour rendre les couches homogènes et on filtre le précipité restant On débarrasse le filtrat du solvant pour obtenir 14,2 g du composé du titre sous la forme d'une huile. B) ( )-(cis)-4-phényl-1-( 2,4-diméthoxybenzyl)-2-oxo-3- azidoazétidine On dissout 1,62 g d'acide a-azidoacétique dans 25 ml de chlorure de méthylène, sous azote A cette solution, on ajoute 3,24 g de triéthylamine et 1,02 g ( 4,0 mmoles) de l'imine de la N-benzylidène-2,4diméthoxybenzylamine en solution dans 10 ml de chlorure de méthylène On refroidit le mélange dans un bain de glace et on ajoute lentement 3,36 g d'anhydride trifluoracétique; la solution prend une couleur foncée Après avoir agité pendant une heure dans un bain de glace, on réchauffe le mélange à la température ambiante et on l'agite pendant encore 15 minutes On lave ensuite la solution avec 60 ml d'eau, avec deux fractions de 50 ml d'une solution de bicarbonate de sodium à 5 %, et avec 60 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 1 N On sèche la couche organique sur du sulfate de sodium anhydre et on la débarrasse du solvant pour obtenir 1, 72 g de produit brut sous la forme d'une gomme foncée On traite cette gomme par du charbon à plusieurs reprises et on fait subir au mélange brun résultant une chromatographie sur g de gel de silice, en éluant avec un mélange 1:1 d'éther de pétrole et d'acétate d'éthyle Les fractions réunies donnent des cristaux par refroidissement rapide dans un bain de glace sèche et d'acétone En utilisant ces cristaux comme amorce, on fait recristalliser le produit dans un mélange d'éther de pétrole et d'acétate d'éthyle pour obtenir 817 mg du composé du titre sous la forme d'aiguilles qui fondent par réchauffement à la température ambiante. C) ( ) (cis) -4-phényl-2-oxo-3-azidoazétidine On dissout 737 mg de ( )-(cis)-4-phényl-l-( 2,4- diméthoxybenzyl)-2-oxo-3-azidoazétidine dans 25 ml d'acétonitrile et on chauffe à 80 83 C sous azote A la solution résultante, on ajoute, en uneheure, 943 mg de persulfate de potassium et 570 mg de phosphate monoacide de potassium, tous deux dissous dans 25 ml d'eau Après l'addition, on chauffe encore le mélange à 80 -83 C pendant 7 heures On refroidit le mélange et on ajuste le p H à 6-7 en ajoutant du phosphate monoacide de potassium solide On chasse la plus grande partie de l'acétonitrile sous pres- sion réduite et on extrait le mélange résultant avec 60 ml de chloroforme On lave la couche chloroformique avec ml d'eau, on sèche sur sulfate de sodium anhydre et on chasse le solvant pour obtenir un produit brut sous la forme d'une huile On fait subir au produit brut une chromato- graphie sur 40 g de gel de silice, en éluant avec unmélange 1:1 d'éther de pétrole et d'acétate d'éthyle Les fractions réunies donnent des cristaux, et on recristallise le pro- duit dans un mélange d'éther de pétrole et d'acétate d'éthyle pour obtenir 267 mg du composé du titre. D) Sel de tétrabutylammonium de l'acide ( )-(cis)-4- phényl-2-oxo-3-azido-l-azétidinesulfonique On refroidit à O C sous azote 162 mg de ( )-(cis)-4- phényl-2-oxo-3-azidoazétidine, et on ajoute goutte à goutte, à l'aide d'une seringue, 3,5 ml d'une solution environ 0,5 M d'un complexe de diméthylformamide et de trioxyde de soufre. On agite la solution limpide résultante à O C pendant 15 minutes On verse ensuite le mélange dans 50 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M et on lave avec trois fractions de 50 ml de chlorure de méthylène. On ajoute 292 mg de bisulfate de tétra-n-butylammonium à la solution aqueuse et on extrait le mélange avec six frac- tions de 50 ml de chlorure de méthylène On sèche les couches réunies de chlorure de méthylène sur du sulfate de sodium anhydre et on les débarrasse du solvant pour obtenir 272 mg du composé du titre sous la forme d'une gomme. E) Sel de potassium de l'acide ( )-(cis)-2-oxo-4-phényl-3- l(phénylacétyl)amino-l azétidinesulfonique On dissout 293 mg de sel de tétrabutylammonium d'acide ( )-(cis)-4-phényl-2-oxo-3-azido-1-azétidinesulfo- nique dans 4 ml d'éthanol, et on hydrogène la solution avec mg d'oxyde de platine servant de catalyseur, sous 1 atmosphère Après avoir agité pendant une heure, on filtre le catalyseur sur un filtre '"Millipore" avec de la "Celite"; certaines particules de catalyseur passent à travers le filtre donnant un filtrat noir On chasse l'éthanol sous pression réduite et on dissout le résidu dans 4 ml de diméthylformamide On ajoute 81 mg de N-hydroxybenzo- triazole monohydraté, 78 mg d'acide phénylacétique et 117 mg de dicyclohexylcarbodiimide, et on agite le mélange pendant 16 heures environ sous azote On fait évaporer la suspen- sion sous vide et on la triture avec 10 ml d'acétone On filtre la suspension résultante sur un filtre "Millipore" avec une partie supérieure de "Celite" et on traite le filtrat brun par 193 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium Lorsqu'on ajoute 20 ml d'éther, une gomme se sépare On élimine le liquide et on lave la gomme avec de l'éther On dissout la gomme dans 10 ml de méthanol. Lorsqu'on ajoute de l'éther, il se forme unepetite quantité de précipité On filtre le mélange et on traite le filtrat coloré avec une nouvelle quantité d'éther On filtre le précipité formé et on le recristallise deux fois dans un mélange d'éther et de méthanol pour obtenir 26 mg du composé du titre. Analyse pour C 17 H 1505 N 2 SK 2 H 2: Calculé: C, 46,99; H, 4,41; N, 6,45. Trouvé: C, 47,24; H, 4,19; N, 6,34. Exemple 185 Sel de potassium de l'acide (cis,Z)-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)ac t 1 laminol-2-oxo-4-phénvl-1- azêtidinesulfonique On dissout le sel de potassium de l'acide (cis)-2- oxo-4-phényl-3-l(phénylacétyl)aminol-1 l-azétidinesulfonique ( 560 mg; voir l'Exemple 184, partie D) dans 5 ml d'éthanol, et on hydrogène la solution avec 110 mg d'oxyde de platine servant de catalyseur, sous 1 atmosphère. Après avoir agité pendant une heure, on filtre le cataly- seur sur filtre "Millipore" avec de la "Celite"; des particules du catalyseur traversent le filtre en donnant un filtrat noir On chasse l'éthanol sous pression réduite et on dissout le résidu dans 4 ml de diméthyl- formamide On ajoute 168 mg de N-hydroxybenzotriazole monohydraté, 221 mg de l'acide (Z)-2-amino-u-(méthoxyimino)- 4-thiazoleacétique et 227 mg de dicyclohexylcarbodiimide, et on agite le mélange pendant 16 heures environ sous azote. On fait évaporer la suspension sous vide et on la triture avec 15 ml d'acétone On filtre la suspension résultante sur filtre "Millipore" avec de la "Celite", et on traite le filtrat par 372 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium. Lorsqu'on ajoute 15 ml d'éther, une gomme se sépare On élimine le liquide et on lave la gomme avec de l'éther On dissout la gomme dans 5 ml d'eau et on la fait passer sur ml de résine "HP-20 ", en éluant avec de l'eau On réunit les fractions 16 à 34 ( 30 ml chacune) et on les lyophilise pour obtenir 201 mg du composé du titre sous la forme d'un solide. Analyse pour C 15 H 14 06 N 552 K 1,5 H 20: Calculé: C, 36,73; H, 3,49; N, 14,28;S, 13,07; K, 7,97 Trouvé: C, 36,65; H, 3,00; N, 13,99; S, 13,48; K, 8,30. Exemple 186 Acide (cis)-3-amino-2-oxo-4-( 2-phényléténhyl)-1-azétidine sulfonique A) N-( 3-phényl-2-propénylidène)-4-méthoxyaniline On dissout 12,32 g de panisidine dans 160 ml de chlorure de méthylène et on ajoute 20 g de sulfate de magnésium anhydre On refroidit le mélange dans un bain de glace et on ajoute 13,22 g de trans-cinnamaldéhyde On agite le mélange sous azote pendant 2 heures puis on filtre. On fait évaporer le filtra t pour obtenir un solide. On recristallise le produit brut dans un mélange de chlo- rure de méthylène et d'éther de pétrole pour obtenir ,96 g du composé du titre sous la forme d'un solide. B) ( )-(cis)-3-azido-1-( 4-méthoxyphényl)-2-oxo-4-( 2- phényléthényl)azétidine On dissout 24,26 g d'acide 2-azidoacétique dans ml de chlorure de méthylène et on refroidit la solu- tion dans un bain de glace A la solution, on ajoute 48,57 g de triéthylamine et 14,24 g de N-( 3-phényl-2- propénylidène)-4-méthoxyaniline dissous dans 250 ml de chlorure de méthylène A la solution résultante, on ajoute 50,41 g d'anhydride trifluoracétique, goutte à goutte, en une heure Après avoir agité pendant une heure dans un bain de glace, on réchauffe le mélange à la température ambiante et on l'agite pendant 16 heures environ On dilue ensuite le mélange avec 250 ml de chlorure de méthylène et on lave avec 750 ml d'eau, deux fractions de 750 ml d'une solution de bicarbonate de * sodium à 5 %, et 750 ml d'une solution d'acide chlorhydri- que 1 N On sèche la couche organique sur sulfate de sodium anhydre et on la débarrasse du solvant pour obtenir un solide On recristallise le produit brut dans l'acétate d'éthyle pour obtenir 11,39 g du composé du titre sous la forme d'un solide. C) ( )-(cis)-3-azido-2-oxo-4-( 2-phényléthényl)azétidine A une solution de 10,22 g de nitrate d'ammonium cérique dans 13 ml d'eau à O C, on ajoute 1,99 g de ( )- (cis)-3-azido-1-( 4-méthoxyphényl)-2-oxo-4-( 2-phényléthényl)- azétidine dissoute dans 65 ml d'acétonitrile, en 15 minutes (on utilise 10 ml supplémentaires d'acétonitrile pour le rinçage) On agite le mélange pendant encore 15 minutes à O C, on le dilue avec 750 ml d'acétate d'éthyle, on le lave avec six fractions de 600 ml d'eau, on le sèche sur du sulfate de sodium anhydre, et on le débarrasse du solvant pour obtenir une huile On fait subir au produit brut une chromatographie sur 90 g de gel de silice, en éluant d'abord avec 250 ml d'un mélange de 30 % d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole, puis un mélange de 50 % d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole On réunit les fractions 2509 Z 99 11 à 16 ( 50 ml chacune) et on les fait évaporer pour obte- nir 802 mg du composé du titre sous la forme d'une huile. D) Sel de tétra-n-butyvlammonium de l'acide ( )-(cis)-3- azido-2-oxo-4-( 2-phényléthényl)-1-azétidinesulfonique On dissout 334 mg de ( )-(cis)-3-azido-2-oxo-4-( 2- phényléthényl)azétidine dans 3 ml de diméthylformamide et on ajoute 868 mg d'un complexe de pyridine et de trioxyde de soufre On agite le mélange à la température ambiante pendant 40 heures sous azote, puis on le verse dans 200 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 0,5 M, puis on lave avec 30 ml de chlorure de méthylène On ajoute à la solution aqueuse 530 mg de bisulfate de tétra-n-butyl- ammonium et on extrait le mélange avec quatre fractions de ml de chlorure de méthylène On relave les couches orga- niques réunies avec deux fractions de 100 ml d'eau, on sèche sur sulfate de magnésium anhydre et on élimine le solvant pour obtenir 824 mg du composé du titre sous la forme d'une gomme. E) Acide ( )-(cis)-3-azido-2-oxo-4-( 2-phényléthényl)-1- azétidinesulfonique On dissout 300 mg du sel de tétra-n-butylammonium de l'acide ( )-(cis)-3-azido-2-oxo-4-( 2-phényléthényl)-1- azétidinesulfonique dans 4 ml de tétrahydrofuranne, et on agite rapidement A ce mélange, on ajoute 600 mg de poudre de zinc, puis 0,8 ml d'une solution de phosphate de potassium monobasique 1 M On chauffe le mélange à 45 C et on l'agite à cette température pendant 3 heures On filtre ensuite le mélange et on le reprend dans 40 ml de chlorure de méthylène et-10 ml d'eau On extrait encore la couche aqueuse avec trois fractions de 40 ml de chlorure de méthylène et on débarrasse les couches réunies de chlorure de méthylène de leur solvant pour obtenir 256 mg d'une mousse On dissout ce produit brut dans une petite quanti- té d'un mélange d'environ 30 % d'acétone et d'eau et on le fait passer sur 7,5 ml de résine "Dowex" (K) ( 0,7 méq /ml) en éluant avec 40 ml d'eau On fait évaporer l'éluant pour obtenir 151 mg de mousse, que l'on dissout dans 2 ml d'eau et que l'on acidifie à p H 2 avec une solution d'acide chlorhydrique IN On ajoute une petite quantité d'acéto- nitrile pour dissoudre le précipité et on fait passer la solution résultante sur 15 ml de résine "HP-20 ", en éluant d'abord avec 150 ml d'eau, puis avec un mélange de % d'acétone et d'eau On réunit les fractions 2 à 13 ( 15 ml chacune) et on les fait évaporer pour obtenir 101 mg du composé du titre sous la forme d'une mousse. Exemple 187 Sel de potassium de l'acide ( )-(cis,Z)-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllarninoll-2-oxo-4-( 2 _-phényl- éthényl)-l-azétidinesulfonique On traite une solution de 68 mg d'acide (Z)-2- amino-a-(méthoxyimino)-4-thiazoleacétique et de 51 mg de N-hydroxybenzotriazole monohydraté dans 2 ml de diméthyl- formamide, par 69 mg de dicyclohexylcarbodiimide On agite le mélange à la température ambiante pendant 30 minutes sous azote On ajoute de l'acide (cis)-3-amino-2- oxo-4-( 2-phényléthényl)-1-azétidinesulfonique ( 90 mg; voir l'Exemple 186) et 34 mg de triéthylamine et on agite le mélange pendant 20 heures sous azote On fait évaporer la suspension sous vide et on la triture avec 10 ml d'acétone On filtre la suspension et on traite le filtrat par 113 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium Une dilution avec 30 ml d'éther et une filtration donnent 169 mg d'un produit solide, que l'on dissout dans une petite quantité d'un mélange d'environ 10 % d'acétonitrile et d'eau et que l'on fait passer sur 34 ml de résine "HP- 20 ", en éluant d'abord avec 150 ml d'eau, puis avec un mélange de 10 % d'acétone et d'eau On réunit les fractions 16 à 19 ( 15 ml chacune) et on les débarrasse du solvant pour obtenir 110 mg du composé du titre sous la forme d'un solide. Analyse pour C 17 H 1606 N 552 K H 2 Calculé: C, 40,23; H, 3,57; N, 13,80; S, 12,63; K, 7,70 Trouvé: C, 40,03; H, 3,05; N, 13,61; S, 12,31; K, 7,56 Exemple 188 Acide (cis)-3-amino-4-(méthoxycarbonyl)-2-oxo-1-azétidine- sulfonique A) Ester méthylique de l'acide l( 4-méthoxyphényl)iminol- acétique On charge un ballon de 1 litre à trois cols, sec, équipé d'une arrivée d'azote et d'un barreau d'agitation, avec 56,88 g de sulfate de magnésium, puis avec une solu- tion de 19,43 g d'anisidine recristallisée dans 250 ml de dichlorométhane Après avoir refroidi à O C, on ajoute, en une heure et demie,une solution de 19,92 g d'hémiacétal de glyoxylate de méthyle dans 250 ml de dichlorométhane. Après avoir agité pendant encore 20 minutes à O C, on filtre sous aspiration le mélange réactionnel, on le sèche sur sulfate de sodium, on le filtre et on le concen- tre sous vide à un quart de son volume On ajoute 300 ml d'hexane et on concentre la solution en une huile qui se soli- difie à moitié après repos sous vide poussé à 5 C. B) (cis)-3-( 1,3-dihydro-1,3-dioxo-2 H-iso-indol-2-yl)-4- méthoxycarbonyl-2-oxo-1-( 4-méthoxyphényl)azétidine On charge un ballon de 500 ml à trois cols, sec, équipé d'un barreau d'agitation, d'une ampoule à robinet, d'une cloison de séparation et d'une arrivée d'azote, avec une solution de 21,09 g d'ester méthylique d'acide l( 4- méthoxyphényl)iminolacétique dans 150 ml de dichlorométhane, et on refroidit à O C On ajoute goutte à goutte 19,2 ml ( 0,14 mole) de triéthylamine, puis une solution de 28,4 g de chlorure de (N-phtalimido) acétyle dans 150 ml de dichlorométhane, en une heure On agite le mélange résul- tant pendant une heure et demie, à O C,puis on le dilue avec 2,5 1 de dichlorométhane On lave la solution organique avec deux fractions de 500 ml de phosphate de potassium monobasique à p H 4,5, deux fractions de 500 ml de bicarbo- nate de sodium à 5 %, 500 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium, puis on sèche sur sulfate de sodium. Une filtration et une concentration sous vide donnent un solide que l'on lave avec de l'acétate d'éthyle, avec de l'acétone froide et avec de l'hexane pour obtenir 18,65 g de produit. C) (cis)-4-(méthoxycarbonyl)-1-( 4-méthoxyphényl)-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminolazétidine On charge un ballon de 500 ml sec équipé d'une arrivée d'azote, d'un barreau d'agitation et d'une cloison de séparation, avec 18,65 g de (cis)-3-( 1,3-dioxo-2 H-iso- indol-2-yl)-4-méthoxycarbonyl-2-oxo-1-( 4-méthoxyphényl)- azétidine et 325 ml de dichlorométhane On refroidit à -30 C la suspension résultante, et on ajoute goutte à goutte 3,52 ml de méthyl hydrazine On réchauffe le mé- lange réactionnel à O C et on l'agite pendant une heure. On ajoute 0,4 ml supplémentaire de méthyl hydrazine et on agite le mélange pendant 10 minutes On répète cette suite d'opérations jusqu'à ce qu'un total de 2,9 équiva- lents ( 7,7 ml) de méthyl hydrazine aient été ajoutés On chasse le solvant sous vide; on ajoute 200 ml de dichloro- méthane frais, et on concentre à nouveau le mélange On répète cette suite d'opérations encore deux fois, on sèche la mousse résultante sous vide poussé pendant 20 minutes, on redissout dans 225 mlîde dichlorométhane, et on laisse reposer à la température ambiante pendant 16 heures environ, temps pendant lequel une quantité considérable de solide précipite On filtre le mélange sous azote, on refroidit le filtrat à O C (atmosphère d'azote) et on le traite par 17 ml de diisopropyléthylamine, puis par 7 ml de chloro- formiate de benzyle, goutte à goutte On agite le mélange réactionnel à O C pendant 30 minutes, puis à la température ambiante pendant 1 heure et demie On lave le mélange avec deux fractions de 300 ml d'un tampon de phosphate de potassium monobasique à p H 4,5, avec deux fractions de 300 ml de bicarbonate de sodium à 5 %, avec 300 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium, puis on sèche sur sulfate de sodium et on filtre Une concentration sous vide donne une mousse qui, après trituration avec de l'éther, donne 9,9 g du composé du titre sous la forme d'un solide. D) (cis)-4-(méthoxycarbonyl)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)- carbonyllamino-l-1-azétidine On traite une solution de 8,59 g de nitrate d'ammo- nium cérique dans 60 ml d'un mélange 1:1 d'acétonitrile et d'eau par une suspension de 2 g de (cis)-4-(méthoxy- carbonyl)-1-( 4-méthoxyphényl)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)- carbonyllaminolazétidine dans 50 ml d'acétonitrile, en minutes On agite le mélange réactionnel pendant encore minutes à la température ambiante et on le dilue avec ml d'acétate d'éthyle On lave la couche aqueuse séparée avec trois fractions de 40 ml d'acétate d'éthyle et on lave les extraits organiques réunis avec trois frac tions de 70 ml de bicarbonate de sodium à 50 % On relave les eaux de lavage basiques avec 50 ml d'acétate d'éthyle et on lave les extraits organiques réunis avec du sulfite de sodium aqueux, 100 ml de carbonate de sodium aqueux à %, deux fractions de 100 ml d'une solution de chlorure de sodium à 5 %, deux fractions de 50 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium, puis on agite sur charbon "Darco G-60 " pendant 30 minutes On ajoute du sulfate de sodium, puis on filtre le mélange et on le concentre sous vide pour obtenir une huile qui, après trituration avec de:l'éther, donne 685 mg du composé du titre sous la forme d'un solide. E) Sel de tétrabutylammonium de l'acide (cis)-4-(méthoxy- carbonyl)-2-oxo-3-ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l- azétidinesulfonique On agite sous argon pendant trois heures à 80 C un mélange de 100 mg de (cis)-4-(méthoxycarbonyl)-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllaminol-l-azétidine et de 172 mg d'un commlexe de pyridine et de trioxyde de soufre dans 1 ml de pyridine On verse le mélange réactionnel dans ml de phosphate de potassium monobasique 0,5 M (p H 5,5) et on l'extrait avec quatre fractions de 30 ml de dichloro- méthane (à jeter) On ajoute 122 mg d'hydrogéno-sulfate de tétrabutylammonium à la couche aqueuse, que l'on extrait ensuite avec quatre fractions de 30 ml de dichlorométhane. On lave les extraits organiques avec une solution de chlorure de sodium à8 %, on sèche sur sulfate de sodium et on filtre Une concentration sous vide donne 186 mg du composé du titre sous la forme d'une huile visqueuse. F) Acide (cis)-3-amino-4-(méthoxycarbonyl)-2-oxo-1- azétidinesulfonique On hydrogène une solution de 186 mg de sel de tétra- butylammonium d'acide (cis)-4-(méthoxycarbonyl)-2-oxo-3- ll(phénylméthoxy)carbonyllamino-l-1-azétidinesulfonique dans 2 mlde méthanol, sur 95 mg de palladium à 10 % sur charbon, pendant une heure et demie sous 1 atmosphère On sépare le catalyseur par filtration et on le rince avec du dichlorométhane, puis on traite le filtrat par de l'acide formique à 97 % et on le refroidit à -50 C (la présence d'un cristal amorce à ce stade est nécessaire pour induire la cristallisation) Une fois que la cristallisation a commence, on laisse le mélange reposer pendant 16 heures environ à 10 C On lave le solide résultant avec du dichlorométhane, de l'hexane, et on le sèche sous vide, ce nui donne 50 mg du composé du titre. Exemple 189 Sel de potassium de l'acide (cis)-3-ll 2-amino-4-thiazolyl)- l( 1-diphénylméthoxycarbonyl)-l-méthyléthoxyliminolacétyll- amino -4-(méthoxycarbonyl)-2-oxo-1-azétidinesulfonique On traite une solution de 34 mg d'hydrate de N- hydroxybenzotriazole et de 101 mg d'acide 2-amino-a-ll 1- (diphénylméthoxycarbonyl)-1-méthyléthoxyliminol-4-thiazole- acétique dans 0,5 ml de diméthylformamide, par 45 mg de dicyclohexylcarbodiimide solide, et on agite le mélange sous argon pendant 45 minutes à la température ambiante. On ajoute ensuite de l'acide (cis)-3-amino-4-(méthoxy- carbonyl)-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 45 mg; voir l'Exemple 188) sous la forme d'un solide, puis on ajoute goutte à goutte 0,03 ml de triéthylamine On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 16 heures environ On chasse le diméthylformamide sous vide poussé à 30 C et on triture le résidu avec de l'acétone. On traite le surnageant par 67 mg de perfluorobutanesulfo- nate de potassium Une dilution à l'éther donne un solide que l'on lave à l'éther et que l'on sèche sous vide pour obtenir 93 mg du composé du titre. Exemple 190 Sel dipotassique de l'acide (cis)-3-ll( 2-amino-4-thiazolyl)- l( 1-carboxy-l-méthyléthoxy)iminolacétyllaminol-4-(méthoxy- carbonyl)-2-oxo-1-azétidinesulfonique On agite à -12 C sous argon une suspension de sel de potassium d'acide (cis)-3-ll 2-amino-4-thiazolyl)-ll 1- diphénylméthoxycarbonyl)-l-méthyléthoxyliminolacétyllaminol- 4-(méthoxycarbonyl)-2-oxo-1-azétidinesulfonique dans 0,4 ml d'anisole, et on ajoute 0,9 ml d'acide trifluoroacétique froid (-10 C) Au bout d'une heure et demie, on ajoute 4 ml d'éther et 2 ml d'hexane et on agite la suspension résul- tante pendant 15 minutes à -10 C, puis pendant 15 minutes à la température ambiante On isole le solide par centri- fugation et on le lave à l'éther On ajuste le p H d'une suspension de cette substance dans 0,5 ml d'eau froide à 6 avec de la potasse IN, puis on la fait passer sur une colonne de 30 ml de "HP-20 AG" L'élution à l'eau donne mg du composé du titre après évaporation (on ajoute de l'acétonitrile et on fait évaporer deux fois). Analyse pour: C 14 H 15 K 2 N 50952: Calculé: C, 31,15; H, 2,81; N, 12,98 Trouvé: C, 29,08; H, 3,03; N, 12,19. Exemple 191 Acide (S)-(trans)-3-amino-4-éthynyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique A) Bromure de 2-(triméthylsilyl)éthynylmagnésium Dans un ballon de 50 ml séché au chalumeau et main- tenu sous une pression positive d'azote, on introduit 20 ml de tétrahydrofuranne sec; 2,20 ml de triméthylsilylacétylène et 5,05 ml d'une solution 3,06 M de bromure de méthyl- magnésium dans l'éther On agite le mélange pendant 140 minutes, ce qui donne le composé du titre. B) (S)-(trans) 4-l 2-(triméthylsilyl)éthynyll-2-oxo-3- l(triphénylméthyl)aminolazetidine A un ballon à trois cols de 250 ml séché au chalu- meau, on ajoute 6,00 g de (S)-(cis)-4-(méthylsulfonyl)-2- oxo-3-l(triphénylméthyl)aminolazétidine On purge le ballon à l'azote puis on le maintient sous une pression positive d'azote Apres avoir refroidi le mélange réactionnel dans un bain de glace sèche et d'isopropanol, on ajoute goutte à goutte, à l'aide d'une seringue, 4,65 ml d'une solution 3,06 M de bromure de méthylmagnésium dans l'éther, en agi- tant rapidement On ajoute la solution de bromure de 2- (triméthylsilyl)éthynylmagnésium préparée dans la partie A, à l'aide d'un tube de "Teflon", sous pression positive d'azote (on rince le ballon contenant le réactif avec 7 ml de tétrahydrofuranne) Une fois l'addition terminée, onretire le bain de refroidissement Au bout de 45 minutes, on ajoute une solution de 3,5 g de bisulfate de potassium dans 20 ml d'eau On élimine la plus grande partie du tétrahydro- furanne sur un évaporateur rotatif On transfère le résidu dans une ampoule à décanter avec de l'éther et de l'eau On sépare la couche aqueuse et on l'extrait deux fois à l'éther On lave les couches éthérées réunies une fois avec une solution saturée de chlorure de sodium, puis on sèche sur sulfate de sodium et on filtre L'élimination du solvant donne une mousse à laquelle on fait subir une chro- matographie sur une colonne de silice L'élution avec 2 litres de dichlorométhane, 1 litre d'un mélange d'1 % d'éther et de dichlorométhane, 2 litres d'un mélange de 2 % d'éther et de dichlorométhane et 1,5 litre d'un mélange de 10 % d'éther et de dichlorométhane (fraction 1 = 1000 ml; fractions 2 et 3 = 500 ml; fraction 4-terminale = 250 ml) donne 1,30 g du composé du titre dans les fractions 2 à 8 et 1,80 g de l'isomère trans correspondant dans les frac- tions 12 à 19 Les fractions 9 à 11 contiennent 1,19 g d'un mélange des isomères cis et trans. C) (S)-(trans)-4-éthynyl-2-oxo-3-l(triphénylméthyl)aminol- azétidine On dissout 2,97 g de (S)-(trans)-4-l 2-(triméthyl- silyl)éthynyll-2-oxo-3-l(triphénylméthyl)aminolazétidine dans 30 ml de dichlorométhane et on ajoute 330 mg de fluorure de tétrabutylammonium (contenant 20 à 25 % d'eau). Au bout de 20 minutes, on chasse le solvant sous vide On reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle et de l'eau. On sépare la couche organique, on la lave une fois avec de l'eau et une fois avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, on sèche sur sulfate de sodium et on filtre L'élimination du solvant donne une huile que l'on agite pendant 15 minutes avec 60 ml de pentane pour obtenir 2,35 g du composé du titre sous la forme d'une poudre (après séchage sous vide). D) Acide (S)-(trans)-3-amino-4-éthynyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On ajoute dans un ballon de 25 ml 404 mg de (S)- (trans)-4-éthynyl-2-oxo-3-l(triphénylméthyl)aminolazétidine et 560 mg d'un complexe de pyridine et de trioxyde desoufre. Après avoir purgé le ballon à l'azote, on ajoute 4,0 ml de 2509 t 99 pyridine sèche et on chauffe le mélange à 80-85 C pendant 3 heures On ajoute le mélange à un mélange rapidement agité de 4,0 ml d'acide chlorhydrique concentré, 50 ml d'eau et 50 ml d'acétate d'éthyle On ajuste le p H à 3,15 avec du carbonate de sodium On sépare la couche aqueuse et on l'extrait une fois avec de l'acétate d'éthyle On lave les couches organiques réunies une fois avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, on sèche sur sulfate de sodium et on filtre L'élimination du sol- vant sous vide donne une mousse que l'on reprend dans 10 ml de dichlorométhane On ajoute de l'acide formique ( 98 %, 8 ml), et au bout de 15 minutes, on concentre le mélange à 4 ml et on ajoute 10 ml de dichlorométhane pour obtenir un solide en suspension dans la solution Une filtration donne 100 ml du composé du titre sous la forme d'un solide (décoloration évidente avec fusion à > 180 QC). Exemple 192 Sel de potassium de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 ell-3-ll( 2-amino- 4-thiazolyl)(méthoxyimino)acétyllaminol-4-éthynyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique On pèse dans un ballon de 10 ml 100 mg d'acide (Z)- 2-amino-a-(méthoxyimino)-4-thiazoleacétique, 85 mg de N- hydroxybenzotriazole monohydraté et 113 mg de dicyclohexyl- carbodiimide On purge le ballon à l'azote et on le refroi- dit dans un bain d'eau glacée Puis on ajoute 0,6 ml de diméthylformamide et on agite le mélange pendant 10 minutes, après quoi on ajoute 0,6 ml supplémentaire de diméthyl- formamide On ajoute de l'acide (S)-(trans)-3-amino-4- éthynyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique ( 95 mg; voir l'Exemple 191) sous la forme d'un solide avec 1,0 ml de diméthyl- formamide et 56 p 1 de triéthylamine On retire le bain de refroidissement et on agite le mélange pendant 22 heures. On ajoute 3 ml d'acétone et on sépare par filtration les solides présents,puis on lave avec 4 ml supplémentaires d'acétone On élimine tous les solvants sous-vide et on reprend le résidu dans 5 ml de méthanol, puis on ajoute et on dissout 162 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium. Apres repos, il se dépose un solide que l'on isole par centrifugation pour obtenir 68 mg du composé du titre, point de fusion > 230 C. Exemple 193 Sel de potassium de l'acide (S)-3-lll( 2,5-dichlorophényl)- thiolacétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonique On dissout 100 mg de l'acide 3-amino-2-oxo-1- azétidinesulfonique dans 2 ml de diméthylformamide sec avec 0,083 ml de triéthylamine On ajoute 123 mg ( 0, 602 mmole) d'acide 2,5-dichlorophénylthioacétique, 81 mg d'hydrate de N-hydroxybenzotriazole et 124 mg de dicyclo- hexylcarbodiimide, on agite le mélange pendant 2 heures à la température ambiante, puis pendant 2 jours à 5 C On chasse le solvant sous vide, on reprend le résidu dans l'eau, on le filtre sur de la "Celite", et on lave le filtrat avec de l'acétate d'éthyle On combine la couche aqueuse avec du dichlorométhane, on ajoute 612 mg de bisulfate de tétrabutylammonium, on élève le p H à 3 avec une solution de potasse 1 N, et après avoir extrait un total de trois fois avec du dichlorométhane, on sèche sur sulfate de sodium des extraits réunis et on chasse le solvant sous vide, ce qui donne une huile On ajoute une solution de cette huile dans de l'acétone à une solution de 612 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium dans de l'acétone, ce qui fait précipiter le produit Après avoir ajouté une petite quantité d'éther, on recueille le solide par filtration, on le lave plusieurs fois avec de l'acétone et on le sèche pour obtenir 206 mg d'une poudre. Analyse pour C 11 H 9 N 205 C 12 K: Calculé: C, 31,21; H, 2,14; N, 6,62; Cl, 16,75 Trouvé: C, 27,90; H, 2,11; N, 5,84; Cl, 18,04. Exemple 194 Sel de potassium de l'acide ( 3 S-trans)-3-lll( 2,5-dichloro- phényl)thiolacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique On dissout l'acide ( 3 S-trans)-3-amino-4-méthyl-2-oxo- 1-azétidinesulfonique ( 250 mg; voir l'Exemple 139) dans 2 ml de diméthylformamide avec 193 pl de triéthylamine On ajoute 285 mg d'acide 2, 5-dichlorophénylthioacétique, 213 mg d'hydrate de N-hydroxybenzotriazole et 287 mg de dicyclo- hexylcarbodiimide Après avoir agité pendant 16 heures 2509299 environ à la température ambiante, on filtre le mélange et chasse le solvant sous vide On reprend le résidu dans l'eau et on filtre On lave le filtrat avec de l'acétate d'éthyle, on le fait décanter avec du dichlorométhane et on ajoute 4,2 mmoles de bisulfate de tétrabutylammonium. Après un total de trois extractions avec du dichlorométhane, on sèche sur sulfate de sodium les extraits réunis et on chasse le solvant sous vide, ce qui donne 920 mg d'unej huile A une solution de cette huile dans de l'acétone, on ajoute 946 mg de perfluorobutanesulfonate de potassium dissous dans de l'acétone Un solide précipite lentement, on le recueille, on le lave deux fois avec de l'éther, et on le sèche pour obtenir 306 mg d'une poudre Une chroma- tographie sur une colonne de 100 ml de résine "HP-20 ", en éluant avec un mélange de 20 % d'acétonitrile et de 80 % d'eau, donne le produit voulu, qui cristallise par évapora- tion à partir d'un mélange d'eau et de méthanol La tritu- ration du résidu avec de l'acétone donne 233 mg d'une poudre, point de fusion 212-213 (avec décomposition). Analyse pour C 12 Hll N 205 C 1252 K Calculé: C, 32,95; H, 2,54; N, 6,41; Cl, 16,21; S, 14,66 Trouvé: C, 32,91; H, 2,60; N, 6,42; C 1, 16,50; S, 13,77. Exemples 195 et 196 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 138, mais en remplaçant l'acide ( 3 S-cis)-3-amino-4-méthyl-2-oxo-1- azétidinesulfonique par l'acide ( 3 S-trans)-3-amino-4-méthyl- 2-oxo-l-azétidinesulfonique et l'acide (Z)-2-amino-a- (méthoxyimino)-4-thiazoleacétique par l'acide indiqué dans la colonne I ci-après, on obtient le composé indiqué dans la colonne II ci-après. Exemple Acide (R)-l (amino-oxo-acétyl)- aminoj ( 4-hydroxyphényl) acétique 196 Acide (R) -l (amino-oxoacétyl>- amino Iphénylacétique Sel de potassium de l'acide r 3 S-l 3 a(R*),4 ll- 3-rlrlr(amino-oxoacétyl)amino J ( 4-hydroxyphényl)- acétyll aminol -4-méthyl-2-oxo-1-a:étidine- sulfonique Sel de potassium de l'acide r 3 S-l 3 c(R*),4 ll- 3-rlll amino J -4-né'thyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique point de fusion 1870 C, avec décomposition. -., -J L Al r C>. %O, Mo 17 2509299 Exemple 197 Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)'l-3-lll(amino-oxoacétyl)- aminol( 4-hydroxyphényl)acétyllaminol-2-oxo-1-azétidine- sulfonique En suivant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 28, mais en remplaçant l'acide (Z)-2-amino-a-ll 2-(diphényl- méthoxy)-l,l-diméthyl-2-oxo-éthoxyliminol-4-thiazole- acétique par l'acide (R)-l(amino-oxoacétyl)aminol( 4- hydroxyphényl)acétique, on obtient le composé du titre, point de fusion 128 C, avec décomposition. Exemple 198 * Sel de potassium de l'acide l 3 S(R*)l-3-ll( 2-amino-4- thiazolyl)lll 3-l( 2-furanylméthylène)aminol-2-oxo-1- imidazolidinyllcarbonyllaminolacétyllaminol-2-oxo-1 - azétidinesulfonique En suivant le mode opératoire de l'Exemple 6, mais en remplaçant l'acide aminothiazoleacétique par l'acide (R)-2-amino-a-lll 3-l( 2-furanylméthylène)aminol-2-oxo-1- imidazolidinyllcarbonyllaminol-4-thiazoleacétique, on obtient le composé du titre, point de fusion > 250 C; Exemple 195 Production biologique de EM 5117 Fermentation de 9 litres On maintient Chromobacterium violaceum SC 11 378, A T C C N 31532 sur le milieu de gélose stérilisé suivant (A): Grammes Extrait de levure 1 Extrait de boeuf 1 NZ Amine A 2 Glucose 10 Gélose 15 Eau distillée pour faire 1 litre, On ajuste le p H à 7,3 avant stérilisation à 121 C pendant 30 minutes. On utilise le contenu d'une "loupe" de croissance superficielle du microorganisme pour inoculer chacun de trois flacons d'Erlenmeyer de 500 ml, contenant chacun IQQ 00 ml du milieu stérilisé suivant (B): Grammes Farine d'avoine 20 Crème de tomate 20 Eau du robinet pour faire 1 litre. On ajuste le p H à 7,0 avant de stériliser à 1210 C pendant minutes. On fait ensuite incuber les flacons à 251 C sur un disposi- tif d'agitation tournant ( 300 t/mn; course de 5 cm) pendant 24 heures environ. Après l'incubation appropriée telle qu'elle est décrite ci-dessus, on procède à des transferts de 1 % (volume/volume) à partir des flacons de culture de crois- sance, dans cent flacons d'Erlenmeyer de 500 ml contenant chacun 100 ml du milieu stérilisé suivant (C) Grammes Farine d'avoine 20 Crème de tomate 20 Glucose 30 Eau du robinet pour faire 1 litre. On ajuste le p H à 7,0 avant de stériliser à 1210 C pendant minutes. Après inoculation, on fait incuber les flacons à 250 C sur un dispositif d'agitation tournant ( 300 t/mn, course de cm) pendant 18 à 24 heures environ Au bout de ce temps, on rassemble le contenu des flacons et on centrifuge le bouillon, ce qui donne environ 9 litres de bouillon sur- nageant. Fermentation de 250 litres On utilise une "loupe" de croissance superficielle d'une culture inclinée de gélose (milieu A) de Chromo- bacterium violaceum SC 11 378, A T C C No 31532, pour inoculer chacun de cinq flacons d'Erlenmeyer de 500 ml contenant chacun 100 ml du milieu stérilisé (B) On fait ensuite incuber ces flacons à 250 C sur un dispositif d'agi- tation tournant ( 300 t/mn; course de 5 cm) pendant 24 heures environ Après l'incubation appropriée telle qu'elle est décrite ci-dessus, on procède à des transferts de 1 % (volume/volume) à partir des flacons de culture développée, dans cinq flacons d'Erlenmeyer de 4 litres contenant chacun 1,5 litre du milieu stérilisé (B) Après inoculation, on fait incuber les flacons à 25 C sur un dispositif d'agitation tournant ( 300 t/mn; course de 5 cm) pendant 24 heures environ Après l'incubation appropriée telle qu'elle est décrite ci-dessus, on procède à un transfert de 1 % (volume/volume) dans une cuve de fermentation équipée d'un agitateur contenant 250 litres du milieu stérilisé (C) Apres inoculation, on continue la fermenta- tion dans les conditions suivantes: température 25 C; pression 0,7 atmosphère manométrique; aération 0,28 m 3/mn; agitation 155 t/mn On ajoute de l"'Ucon" dans la mesure du nécessaire comme agent anti-mousse Au bout de 18 à 24 heures environ, la fermentation est terminée On ajuste alors le bouillon de fermentation à p H 5,0 en utilisant de l'acide chlorhydrique et on centrifuge le contenu du bouillon de la cuve, ce qui donne environ 230 litres de bouillon surnageant. Isolement et purification On ajuste le bouillon surnageant de la fermentation de 250 litres à p H 5 en utilisant de l'acide sulfurique et on filtre en utilisant de la terre de diatomées à 3 -5 % ("Celite") On extrait le filtrat du bouillon avec deux fractions de 30 litres de chlorure de cétyldiméthylbenzyl- anmmonium 0,005 M dans du chlorure de méthylène. On extrait la phase inférieure combinée avec 6 litres d'iodure de sodium 0,05 M que l'on a, au préalable, ajusté à p H 5 avec de l'acide acétique On jette la phase infé- rieure et on concentre la phase supérieure sous vide à 500 ml. On extrait la substance concentrée avec 400 ml de n-butanol On jette la phase supérieure et on concentre la phase inférieure à siccité sous vide On dissout le résidu (dans la mesure du possible) dans 150 ml de méthanol On jette la substance insoluble et on concentre la solution méthanolique à siccité sous vide, ce qui donne 38,6 g d'antibiotique brut. On dissout le produit brut dans 10 ml d'un mélange ( 1:1) de méthanol et d'eau et on lui fait subir une chroma- tographie sur une colonne de 500 ml de gel de dextranne réticulé ("Sephadex G-10 ") dans le même mélange de solvants, en éluant à 2 ml/minute et en recueillant des fractions de ml On réunit les fractions actives ( 19 à 26) et on les concentre sous vide On mélange le résidu ( 5, 23 g) avec 50 ml de méthanol On filtre et on jette la matière insoluble On concentre le filtrat sous vide. On dissout le résidu, comprenant 5,0 g de matière, dans 10 ml d'un tampon de phosphate de sodium 0,01 M à p H 5 et on le fait passer dans une colonne de DEAE- cellulose (cellulose "Whatman DE 52 ") tassée et équilibrée dans le même tampon On élue la colonne à 5 ml/minute avec un gradient linéaire préparé à partir de 4 litres d'un tampon de phosphate de-sodium 0,01 M à p H 5 et de 4 litres d'un tampon de phosphate de sodium 0,1 M à p H 5, en recueillant des fractions de 20 ml On rassemble et on concentre sous vide les fractions actives ( 192 à 222), et on élimine la matière insoluble dans le méthanol, en lavant soigneusement avec du méthanol L'élimination du solvant laisse 576 mg de substance. On dissout ces 576 mg de résidu dans 4 ml d'eau et on ajuste le-p H à 5 avec environ 1 ml de soude 0,1 N On fait subir à la solution une chromatographie sur une colonne de gel de dextranne réticulé et alkylé ("Sephadex LH-20 ") dans l'eau, en éluant à 1 ml/minute et en recueil- lant des fractions de 10 ml On réunit les fractions actives ( 38 à 44) et on les concentre, ce qui donne 459 mg de résidu. On dissout 348 mg de ce résidu dans de l'eau et on fait passer la solution dans une colonne de résine de copolymère styrène-divinylbenzène macroréticulaire ("Diaion HP 20 AG"); on a, au préalable, préparé la colonne en la lavant avec de la potasse méthanolique, du méthanol, de l'acide chlorhydrique méthanolique, du méthanol et de l'eau, puis en la tassant dans de l'eau On élue la colonne avec de l'eau à i ml par minute, en recueillant des fractions de 10 ml On réunit les fractions actives ( 36 à 43) et on les concentre, ce qui donne 186,4 mg de substance. Une chromatographie (de la même façon) de 100 autres mg des 459 mg de résidu provenant de l'opération précédente donne 51,5 mg de substance A ce stade, les 186,4 mg de substan- ce et les 51,5 mg de substance sont constitués de EM 5117 presque pur, comme le montrent la chromatographie en couche mince et les spectres de résonance magnétique nucléaire. On dissout dans de l'eau la fraction de 186,4 mg de EM 5117 provenant de l'opération précédente et on la fait passer dans une colonne de résine d'échange d'ions ("Dowex 50 W-X 2 ", 74 -149 p), forme potassium), en lavant avec un volume d'eau égal à deux fois le volume de la résine La concentration de l'effluent donne 189,0 mg d'un solide cristallin On procède à la recristallisation de cette substance en la dissolvant dans 0, 38 ml d'eau et en lui ajoutant 3,42 ml de méthanol On refroidit le mélange résultant sur de la glace et on le filtre, ce qui donne 145 mg de cristaux Deux autres recristallisations effec- tuées de cette manière dans un mélange 1:9 d'eau et de méthanol donnent 95,9 mg de sel de potassium de EM 5117, p.f 194 C avec décomposition. Rotation optique dans l'eau à 21 C (c=l) X (nm) lal 589 + 94,3 579 + 98,6 546 + 113,1 436 + 203 365 + 348 Les milieux-de fermentation suivants sont efficaces pour la production de EM 5117, et peuvent être substitués aux milieux (B) et (C) de l'exemple précédent. MILIEU D Grammes Farine "Nutrisoy" 30 (soja nutritif) Glucose 5 "Yeastamine" (levure) Ca Co 3 Eau distillée pour faire un litre. 2,5 MILIEU E Grammes Extrait de levure 4 Extrait de malt 10 Glucose 30 Glycérol 2 Eau distillée pour faire 1 litre. Ajuster le p H à 7,3 avant stérilisation. MILIEU F Grammes Glycérol 10 L-asparagine 5 KH 2 PO 4 1 Na 2 HPO 4 2 Glucose 50 Mg SO 4 7 H 20 0,2 Extrait de levure 2,5 Eau du robinet pour faire 1 litre. MILIEU G Grammes (NH 4) 2 SO 4 2 L-asparagine 5 Glucose 50 Glycérol 10 KH PO 4 3 K 2 PO 4 7 Mg SO 4 7 H 20 0,2 Extrait de levure 2,5 Eau distillée pour faire 1 litre. Ajuster le p H à 7,0. MILIEU H Grammes K 2 HPO 4 7 KH 2 PO 4 3 Citrate de Na 0,5 Mg SO 4 0,1 (NH 4)2 SO 4 1 Glucose 30 Extrait de levure 2,5 Eau distillée pour faire 1 litre. MILIEU I Grammes Farine "Nutrisoy" 10 (NH 4)2504 5 Glucose 50 Extrait de levure 2,5 Ca CO 3 5 Eau distillée pour faire 1 litre. MILIEU J Grammes Farine d'avoine pour bébés "Gerber" 20 Crème de tomate "Contadina" 5 Glucose 20 Eau du robinet pour faire 1 litre. Ajuster le p H à 7,0 MILIEU K Grammes Farine d'avoine pour bébés "Gerber" 5 Crème de tomage "Contadina" 20 Glucose 20 Eau du robinet pour faire 1 litre. Ajuster le p H à 7,0 MILIEU L Grammes Extrait de levure 4 Extrait de malt 10 Glucose 34 MILIEU M Grammes "Amberex" ( 1003) 5 Glucose 30 Eau du:robinet pour faire 1 litre. MILIEU N Grammes "Amberex" 5 "Cerelose 33 Eau du robinet pour faire 1 litre. Exemple 196 Production biologique de EM 5210 On maintient Gluconobacter, espèce SC 11 435, A.T C C N 31581 sur le milieu de gélose stérilisé suivant (A): Grammes Extrait de levure 1 Extrait de boeuf 1 NZ amine A 2 Glucose 10 Gélose 15 Eau distillée pour faire 1 litre. On ajuste le p H à 7,3 avant stérilisation à 121 C pendant minutes. On utilise une "boucle" de croissance superficielle de la culture inclinée de gélose (milieu A) de Glucono- bacter, espèce SC 11 435, pour inoculer chacun de trois flacons d'Erlenmeyer de 500 ml contenant chacun 100 ml du milieu stérilisé suivant (B): Grammes Extrait de levure 4 Extrait de malte 10 Dextrose 4 Eau distillée pour faire 1 litre. On ajuste le p H à 7,3 avant stérilisation à 121 C pendant minutes. Après inoculation, on fait incuber les flacons à C sur un dispositif d'agitation tournant ( 300 t/mn; course de 5 cm) pendant 24 heures environ Après l'incuba- tion appropriée telle qu'elle est décrite ci-dessus, on procède à des transferts de 1 % (volume/voiume) à partir des flacons de culture développée dans cent flacons d'Erlenmeyer de 500 ml contenant chacun 100 ml du milieu stérilisé suivant (C): Grammes Extrait de levure 5 Glucose 10 Eau distillée pour faire 1 litre. On stérilise ce milieu à 121 C pendant 15 minutes. Après inoculation, on fait incuber les flacons à C sur un dispositif d'agitation tournant ( 300 t/mn; course de 5 cm) pendant 18 heures Apres quoi, on rassem- ble le contenu des flacons et on centrifuge le bouillon, ce qui donne environ 9 litres de bouillon surnageant. Isolement et purification (petite échelle) On fait absorber la substance active du bouillon surnageant ( 10 litres) par une colonne de 500 g d'une résine d'échange d'anions fortement basique comportant des groupements ammonium quaternaire fixés à un réseau de copolymère styrène-divinylbenzène l"Do Wex AG 1-X 2 " (CI -l, on lave à l'eau et on élue avec du chlorure de sodium à % dans Na H 2 PO 4 aqueux 0,01 M On concentre l'éluat sous vide. On fait adsorber le résidu par 250 g de charbon que l'on lave à l'eau On élue le EM 5210 avec un mélange I 11 de méthanol et d'eau On réunit les fractions actives et on les concentre sous vide, ce qui donne EM 5210 brut. On fait subir à l'EM 5210 brut une chromatographie sur une colonne de 280 ml d'une résine d'échange d'anions fortement basique l"Bio Rad AG 1-X 2 " (Cl)l en utilisant un gradient linéaire préparé à partir d'un litre d'eau et d'un litre d'acétate de pyridinium 2 M (p H 4,5) On réunit les fractions actives et on les concentre sous-vide. On concentre encore le EM 5210 partiellement purifié par filtration du rsidu sur une colonne de 500 ml de gel de dextranne réticulé ("Sephadex G10 "), en éluant avec de l'eau On réunit les fractions actives et on les concentre, ce qui donne 26 mg de EM 5210 On prépare le sel de potassium de EM 5210 en faisant passer EM 5210 dans une colonne de résine d'échange de cations ("Dowex 50-X 2 ") sous la forme potassium. Isolement et purification (grande -échelle) On fait absorber le filtrat de bouillon d'une fer- mentation de 250 litres (p H 3,7) de Gluconobacter, espèce SC 11 435;,par 10,8 kg d'une résine d'échange d'anions fortement basique l"Dowex 1-X 8 " (C 1)l On lave cette résine vec de l'eau et on élue avec du chlorurie de sodium à 5 % dns du phosphate diacide de sodium 0,01 M On réunit 1: ll l les fractions actives et on les concentre à un petit volume On élimine le sel précipité et on dessale filtrat en le faisant passer dans une colonne de charbon ( 1,1 kg de "Darco" de 420 à 840 p) dans de l'eau On lave la colonne avec de l'eau et on élue le EM 5210 avec un mélange 1:1 de méthanol et d'eau On combine et on concentre les fractions actives On dissout le résidu ( 16 g) dans de l'eau et on lui fait subir une chromato- graphie sur une colonne ( 600 ml) d'une résine d'échange d'ions fortement basique l"Bio Rad AG 1-X 2 " (Cl), 37 - 74 pl, en éluant avec un gradient linéaire préparé à partir d'un litre d'eau et d'un litre de chlorure de sodium à 10 % dans du phosphate diacide de sodium 0,01 M. On réunit les fractions actives, on les concentre sous vide à un petit volume, et on sépare par filtration les sels précipités On fait passer le filtrat dans une colonne de résine de copolymère styrène-divinylbenzène macroréticulaire On élue la colonne avec de l'eau On réunit les fractions actives, on les concentre à un petit volume et on leur fait subir une cryodessication, ce qui donne 120 mg du sel de sodium de EM 5210. Pour transformer ce sel de sodium en sel de lithium, on utilise une colonne de résine d'échange d'ions ("Dowex 50 W-X 2 ", forme lithium) On dissout le sel de sodium ( 100 mg) dans 0,5 ml d'eau, on le fait passer dans la colonne et on élue à l'eau On réunit les fractions actives et on leur fait subir directement -une cryodessica- tion, ce qui donne 95 mg du sel de lithium de EM 5210 sous la forme d'un solide amorphe. On prépare l'acide libre (sel interne) de EM 5210 en faisant passer un sel de base de EM 5210 dans une colonne de résine d'échange d'ions faiblement acide sous la forme H On peut, par exemple, faire passer environ 2,5 mg du sel de lithium dans une colonne de "Bio Rad Bio Rex 70 " (Hf) et éluer à l'eau pour obtenir 1,45 mg de l'acide libre (sel interne). Propriétés chimiques de EM 5210 1) Test de la "Ninhydrine" positif (la Ninhydrine est le réactif analytique des amino-acides). 2} L'hydrolyse acide (acide chlorhydrique 6 N à 115 C pendant 16 heures) donne deux taches majeures positives à la Ninhydrine par chromatographie sur papier ("Whatman" N 1, mélange ( 5:1:4) de butanol, d'acide acétique et d'eau), et une tache faible positive à la Ninhydrine qui éteint la fluorescence excitée par les rayons ultraviolets. Les deux taches majeures positives à la Ninhydrine sont l'acide D-glutamique et la D-alamine. Caractéristiques physiques de EM 5210 1) Spectre UV du sel de sodium dans l'eau: absorption finale. 2) IR Pics majeurs du sel de lithium dans le bromure de potassium: 1770, 1640, 1530, 1384, 1242 et 1051 cm 1 3) RMN Décalages chimiques du sel de lithium dans de l'eau deutérée, ppm de champ descendant du TSP: 1,40 (d,J= 7 Hz), ca 2,14 (m), ca 2,44 (m), 3,49 (s), 3,73 (t,J= 6 Hz), 3,94 (s), 4,28 (m). Rotation optique de l'acide libre (sel interne) dans l'eau à 24 C (C= 0, 15 %) (p H 2,7); X (nm) lal 589 + 73 578 + 79 546 + 91 436 + 159 365 + 263 Les milieux de fermentation suivants se sont révélés efficaces pour La production de EM 5210 et peuvent être substitués aux milieux (B) et (C) dans le texte. MILIEU D Grammes Farine d'avoine 20 Crème de tomate 20 Eau du robinet pour faire 1 litre. Ajuster le p H à 7,0 avant stérilisation à 121 C pendant 15 minutes. MILIEU E Grammes "Yeastamine" 5 "Cerelose" 11 Eau du robinet pour faire 1 litre. Stérilisation à 121 C pendant 15 minutes. MILIEU F Grammes Glucose 5 Acide tartrique 2 Extrait de levure 0,5 (NH 4)2 PO 4 1 (NH 4)2 SO 4 2 K 2 HPO 4 0,5 2 4, Na H 2 PO 4 0,5 Mg SO 47 H 20 0,2 Ca CO 3 1 Eau distillée pour faire 1 litre. Ajuster le p H à 6,0 avant stérilisation à 121 C pendant 15 minutes. MILIEU G Grammes Farine "Nutrisoy" 30 Glucose 50 "Yeastamine" 2,5 Ca CO 3 7 Eau distillée pour faire 1 litre. Stérilisation à 121 C pendant 30 minutes. MILIEU H Grammes NZ Amine A 10 "Cerelose" 33 "Yeastamine" 2,5 Eau du robinet pour faire 1 litre - Stérilisation à 121 C pendant 15 minutes. 184- 2509299 i 84 MILIEU r Grammes Faorine "Nutrisoy" 15 Amidon soluble 15 Glucose 50 COC 12 6 H 20 0,005 Ca Co 3 10 Eau distillée pour faire 1 litre. Stérilisation à 1210 C pendant 30 minutes. Activité biologique On utilise la méthodologie suivante pour déterminer la concentration inhibitrice minimale (ci-après désignée par les initiales CIM) des 0-lactames selon l'invention. On fait se développer les micro-organismes d'essai dans environ 15 à 20 ml de bouillon d'essai d'antibiotiques ("Difco") en inoculant (dans des tubes) le bouillon avec une "loupe" du micro-organisme provenant d'une culture inclinée de gélose BHI ("Difco") On fait incuber ces tubes inoculés à 35 C pendant 18 à 20 heures On suppose que ces cultures contiennent 109:unités de formation de colonies (ci-après désignées par les initiales UFC) par millilitre On dilue les-cultures au 1:100 pour obtenir un niveau d'inoculum final de 104 UFC; on fait les dilutions avec du bouillon K-10 *. On dissout les composés dans le diluant approprié à une concentration de 1000 pg/ml On procède à des dilu- tions doubles dans du bouillon K-10, ce qui permet d'obte- nir une gamme de 1000 pg/ml à 0,5 pg/ml On place 1,5 ml de chaque dilution dans des boites de Petri carrées indi- viduelles auxquelles on ajoute 13,5 ml de gélose K-10 **. La concentration finale de l'antibiotique dans la gélose s'échelonne entre 100 pg/ml et 0,05 pg/ml On prépare des plaques de commande de croissance de micro-organismes ne contenant que de la gélose et on les inocule avant et après les plaques d'essai On applique les micro- organismes sur la surface de gélose de chaque plaque avec l'inocula- teur Multipoint Denley (qui délivre environ 0,001 ml de chaque microorganisme), ce qui permet d'obtenir un niveau 4 d'inoculum final de O UFC la surface de la glose. -d'inoculum'final de 10 UFC à'la surface de la gélose. On fait incuber les plaques à 379 C pendant 18 heures et on détermine les CIM La CIM est la concentration minimale de composé inhibant la croissance du micro- organisme. *Le bouillon K-10 est un bouillon de boeuf et de levure contenant: Extrait de boeuf 1,5 g Extrait de levure 3,0 g Peptone 6,0 g Dextrose 1,0 g Eau distillée en q s pour faire 1 litre **Gélose K-10 Extrait de boeuf 1,5 g Extrait de levure 3,0 g Peptone 6,0 g Dextrose 1,0 g Gélose 15,0 g Eau distillée en q s pour faire 1 litre. Les tableaux qui suivent sont les résultats obtenus quand on essaie l'efficacité des a-lactames selon l'inven- tion vis-à-vis de divers micro-organismes Le nombre qui suit chaque microorganisme désigne le nombre qui suit chaque micro-organisme désigne le numéro du micro-organisme dans la collection de E R Squibb & Sons, Inc, Princeton, New Jersey, Etats-Unis d'Amérique Un tiret (-) dans les tableaux signifie que le composé essayé n' a présenté aucune activité visà-vis du micro-organisme particulier à pg/ml Les initiales "N E " signifient que le composé n'a pas été essayé. C.I M (ug/ml) Oraanisme Produit de l'Exemple 1 3 5 6 7 8 9 10 Staphy Zoooccus aurcus, 127 6 1 6 6 3 1 6 12 5 3 'l 6 3 3 1 3 1 Staphytococcus aurcus, 2399 1 1 6 6 13 C) 8 6 3 3 11 3 1 6 33 3 11 Staphyloaccous autreus, 2400 311 3 1 1 6 12 5 6 3 6 3 6 3 6)3 Staphytococcus aur Ous, 101 65 12 5 3 1 6 3 2 12 '5 12 5 2 12 5 Streptococcus faccazia, 90 il 100 1 H Streptococcus agatactiae, 9287 3 1 25 018 6 3 1 16 6 33 3 1 3 11 ?,,Iicricoccite tuteuso 2495 6 3 50 1)6 58 613 12 5 3 1 6 3 Escherichia coli, 8294 5 6 y y Esclierichia co Zi, 1 O 8 57 100 25 lou '100 100 Escherichia coli, 10 89 6 25 100 100 100 100 Escherichia coli, 10909 25 50 100 100 50 nebsiella aerojenes, 10440 100 100 Co K Zebsielta pneumoniae 9 5 2 7 100 100 Proteus mirabil is, 38 55 100 100 50 Proteus rettgeri, 8479 25 100 12 5 100 50 50 Proteus vulgarisa 9 41 6 25 100 i O o 100 Salmonella typhosa, 1195 50 100 100 50 - Shigelta sonnet 8449 50 100 100 Enterobacter cloacae, 8236 Enterobacter aerogenes,, 10078 Cilrobactey, freundii, 9518 Serratîa marcescens, 9 78 3 100 50 100 50 - Pseudomonas aeruginosa, 9545 100 25 100 25 100 Pseudomonas aeruginosa 8329 Acinatobactcr calcoacetieus, 8 3 3 3 100 % O C.I M 12 13 14 15 16 17 18 Sta-phylococcus aureus, 1276 12 P,5 25 12,5 100 3,1 12 5 50 Staphyiococcus au reus, 2399 63 2 3 5 25 5 Staphylococcus aureus, 2400 6 > 312 5 613 5012 3 12 5 250 Staphyiococcuc aureuc, 10165 50 12,5 12 >)5 50 str'eptococcus faccatis, 9011 100 100 Streptococcus agaiactiae, 9287 6 125 i 6 125 63 6 3 50 1.hicrococcus lutcus, 2495 > 12 5 1 5 5 O Es- cherichzia coli, 8294 0 > 4 25 0 4 Eschcrichia co Zi, 10857 J 085 Escherichia coli, 10896 O > 8 50 3 8 l O - Escherichia cc Zi, 10909 0 > 4 25 0,2 100 100 - Kiebsi elia aerogenes, 10440 0 4 25 O 4 Kiebsiella pneuironiae, 9527 O 1 12 "5 O 2 Proteus mirabi lis, 3855 0 2 12,$ 5 0,1 l 100 Proteus rettgeri, 8479 112 5 05 100 Shigelia sonnei, 8449 0 4 2 O 8 Enterobacter cloacae, 8236 0,4 0 4 Ente robacter aerogcncs, 10078 0) 8 100 0,8 Citrobacter frzeu Mdîi, 9518 3,1 3 1 Serratia marcescens, 9783 12 5 3 1 25 100 6 3 100 Pscudomonas aéruginosà, 9545 018 50 0 > 4 50 25 53 50 Pseudomonas acruginosa, 8329 12 5 12 5 100 Acinetobacter caicoaceticus, 8333 2 108 50 6 3 - %O Lf O C.I M (lig/ml) organisme Produit de l'Exemple 19 20 21 22 23 24 25 26 Staphy Zococcue aureus; 1276 25 3,,I 12 5 50 50 6 3 1 6 1 6 )6 staphylococcun, aureuc, 2399 12 5 3 112 5 100 50 6 3 16 1 Staphy Zocccaus aureus, 2400 12 15 311 12 5 100 50 3 jl 16 3 1 staphylococcus aureus, 10165 1215 6)3 1 H 100 iod 6 P 2 2 Streptococcus faecalis, 9011 100 50 50 S' 1 i 16 12 5 50 311 O 1 O 8 treptococcus aga Zactiae, 9287 12 5 3) Micrococcus Zuteus, 24 9 5 56 613 613 58 12)5 038 3)1 Escherich L'a coli, 8294 25 0)8 O y 4 6)3 Eacherichia coli, 108 57 25 O)s 100 *10909 63 O 8 100 N E 100 Escherichia col, 1 1 Klebsiella aerogenes, 1 04 4 O 50 oi 8 014 613 Klebsiella pnewioniae, 9 527 25 018 8479 12 5 Proteus rettgeri, 1 Proteus vittgarîs, 9 4 1 6 50 1 8 100 8 0)8 2 9518 50 6 3 100 O 4 215 Citrobactcr freundit, 9 7 8 3 25 50 5 100 100 100 08 50 Serratia marcescents, Pseudomonas ae-ruginosa, 9545 2 25 3 1 6 p 3 50 04 014 Pseudomonas aeruoirosa, 8329 50 2 100 311 12 5 Acinetobacter calcoaceticus, 8333 50 50 25 215 58 C.I M (lig/ml) Orqanisme Produit de l'Exemple 27 28 29 30 31 32 33 35 12 5 1 6 1 6 1 6 3 'l 1276 6 1 Stmhgloccccus aureus, 2 39 9 12 5 25 12 5 3 1 O 8 1 6 3 1 S, I 6 '3 -1 1 6 3 11 aph 1 Iocccuo aurcuz, 24 00 2 25 2 > 1) Staphylococcus aureus 101 65 100 100 100 673 12 5 3) 1 12)5 Streptococcus faecalis, 9011 25 ioa Streptococcus agalactiae, 9287 3, 1 0)4 12 5 0)4 1 > 6 O 4 0)2 0)4 micvococcus luteus, 24 9 5 12 5 3 1 2 12 5 6 3 l' 6 O 8 1 6 Escherichia Coli, 8294 10 12 5 0)4 12 5 'y 1 Escherichia Coli, 108 57 25 1 6 O 2 6 3 50 311 3 1 12 5 Escherichia coli,, 1089 6 25 3)1 0)8 12)5 50 idû 50 - Escheric'ia Coli, 10909 50 1 6 O 1 3 1 50 50 50 1 00 Co 10440 2 O 4 12 5 - Klebsiella aerogencs, F Lebsiella pnewroniaej 9527 50 176 Proteus mirabilis, 38 55 12 5 1)6 Shigetla connei, 8449 100 3 1 O 2 6 3 100 - Enterobacter cloacae, 8236 6)3 078 6 P Entercibacter aerogenes, 10078 50 078 12)5 -Citrobactcr freundii, 9 518 100 25 -1) 6 - Serratia marcescens, 9 78 3 1215 O)s 50 Pseudcmonas acrugiresa, 9545 1215 3 1 O)S 12 5 25 12 5 1 '2, 5 25 Pseudc-monas aeruginosa, 8 3 29 50 3 1 5 Acinetobacter calcoaceticus, 8333 106 - LM M % O % O c-:1-m (li /mi) organisme Produit de l'Exemple 36 37 39 4 O 41 4 2 4 3 4 4 Staphy Zoooccus auré-us, 1276 613 6 > 3 -O 8 1 6 3 25 3 1 Staphy Zococcus aureus, 2399 6 3 6 3 O 8 331 i 6 6 3 12 5 3 1 Staph Ulococcus aureus, 2400 3 1 1 6 O 8 31 16 125 12 y 5 6 3 Staphylococcus azaeus, 10165 56 100 3 > 1 6 3 3)1 1 H 1 H H Streptococcus faeca Zis, 901 1 50 la 100 Strevtococcus agalactiae, 9287 0)4 0)4 o; 14 0)8 1)6 1 6 3 1 1 6 Micrococcus Zut'éus, 249 5 6 3 le 6 O 8 1 6 3 1 6)3 t 12 75 3 1 9 scherichia cozi, 8294 1 1)6 H 3 1 Escherichia coli, 108 57 50 12 5 O 2 50 100 25 Escherichia cdli, 10 89 6 10 O 16 50 25 6 3 Escherichia coli, 10909 -1 Klebsiella aerogenes, 012 100 50 25 le 6 O K Zebsiella pneumoniae, 10440 018 50 6)3 C> 9527 04 2 3 1 Proteus mirabilis, 3 85 5 il 2 100 - Acinetobactar ca Zooace 4-icus, 8333 w %O C.I M (lig/ml)- Organisme Produit de l'Exemple 46 48 50 51 52 '53 54 Staphytococcus aureus, 1276 i/ 6 1 O O 12 5 12 5 12 5 50 12 5 1 3 1 Staphylococcus aureus, 2399 1 "Y 6100 12 15 H 2 5 È 12)5 3)1 Staphylococcus aureuc, 2400 116 100 12 5 25 50 100 12 ? 5 613 Stâphylococcus aureus, 10165 25 100 2 25 50 100 JO& 106 Streptococcus faecalis 9 01 1 100 Streptococcus agalact-iae,9 287 1)6 50 6 y 312 5 6 13 25 3 1 16 1-ficoccccus luteus, 2495 1)6 50 311 6 3 1 6 12 5 6 3 16 Escherichia coli, 8294 O 8 50 106 12 5 63 Escj',z& 2echia coli, 10857 N 4 50 100 lob 100 12 5 63 Escher chia coli, 10 8 96 O 8 100 25 25 121 5 63 Eschemchia coli, 1 09 O 9 0)2 12 5 100 25 12 15 31 Klebs-'ella aerogenes, 104 4 O 1 6 10 100 H 6 3 Klebsiella pneumoniae, 9527 O O 5 50 50 12 5 63 Proteus mirabilis, 3855 O 1 Proteus rettgeri, 8479 O 1 100 12) 5 311 100 100 12 5 3 1 Proteus vutgaris, 941 6 1 00 12 En Ierobactar cloacac, 8236 O 8 100 50 H 2 Entcrcbacter acrogenes, 10078 1 6 100 50 12 1 5 Ci trobacter freundii, 9518 1 6 100 100 50 50 25 Serra ôî'a marcescens, 9 7 8 3 3 1 100 100 50 25 25 Pseud monas acruginoca, 9 5 4 5 O 4 1 2/ 5 50 100 50 12 5 6 3 Pseudomonas aeruginosa, 8329 3, 1 l U Acinetobacter calcoacéticus, 8333 1275 100 100 C.I M (lig/ml) Organisme Produit de l'Exemple 56 57 58 59 60 '61 62 Stcvhiilococcus crureus, 1276 6 J 31 2 5 25 O 8 12 5 1 6 3 1 3 1 Staphg Zococcus aureus, 2 39 9 673 12 5 '25 O r 8 6 13 1 6 1 1 6 1 6 Staplzylococcur, aureus, 2400 1 '2 512 '5 50 1 6 6 3 3 1 311 3 1 Staphylococcus au 6 100 12 Y 5 2 58 50 56 Streptococcus faecal"', qui 100 50 100 100 50 Streptococcus agatactiae, 9 287 3 1 12 5 613 O 18 116 012 O 1 2 O j 4 Wcrccoccus Tutus, 2495 12 '5 6 3 25 1 Y 6 3 11 O y 4 O / 8 il 6 Escherichia Co Zi, 82 4 56 Oe B 1 6 O18 176 6 3 Escherichia coli, 108 57 25 018 3 1 O J 8 1 1 6 12 5 Xlebsielta pneumoniae, 9527 50 011 O 18 O 12 O 12 1 6 Proteus mirabilis, 3855 25 100 Oil 1)6 116 10 la O la Proteus rettgeri, 8479 25 50 100 O 1 0 > 1 3 1 1 1 6 O)8 Proteus vulgarisa 9416 25 Acinetobacter ca 4 coaceticus, 8333 100 2 100 6 3 25 - Ln hi C-I-M (ug/ml) Produit de l'Exemple Orqanisme 63 64 65 66 67 68 69 70 6 , 3 6 p 3 12 1 5 1 2 y 5 6., 3 1 10 O 3 p 1 6 p 3 1 2 y 5 1 2 1 5 6 y 3 1 2 1 5 1.0 O 1 00 1 00 1 2 1 5 2 5 1 2)5 12 5 3 1 3 1 0 8 1 0 2 3 1 1215 i D 12 5 1 25 2 i 127 5 12 rs 1 > 6 0) 4 12.1 5 1 16 6 3 i 16 0 14 0 12 0 2 0 2 6 y 3 y 3 12 15 6 3 6 1 3 6 3 ' 12 5 1 16 1 i 6 6 7 3 0 IX 8 1 6 0 4 0 a 0 2 1 6 0) s 1 6 H 3 1 1 00 O 6, 3 3 1 y. 3 1 0) 1 121 5 12 15 1 6 2 1 6 0; 2 6 13 12 5 2 12 5 1 6 1.0 6 2 5 1 y 6 1 16 3 r 1 0 4 1 16 1 i 6 0 y 8 0 f 4 0 8 1 If 6- 6; 3 y 1) 6 1 2) 5 Sta-phylococcus aureus, 1276 Stahy Lococcuc aureus, 2399 Staphylococcus aurcus, 2400 Staphylococcus aurcus, 1016 5 Streptococcus faecalis, 9011 Streptococcus agalactiae, 928 7 fjcrococcus luteus, 2495 Escharichia coli, 8294 Escherichia co Zi, 108 57 Eschcrichia coli, 10896 Escherichia coli, 10909 Klebsiella aerogenes, 10440 Klebsie Zla pneumoniae, 9527 Proteus mirabilis, 3855 Proteus rettgeri, 8479 Proteus vulgaris, 941 6 Salmonella typhosa, 119 5 Shigella sonnei, 8 44 9 E),t:,rni,act-er cloarac, 8236 Entéerobact-?r 10078 Ci trobacter freu)2 ii, 95 18 Serratia marcescens, 9 18 3 Pseudomonas aeruginosa, 9545 Pseudomonas aeruginosa, 8329 Acinetobacter ca' 'coacceticus, 8333 w tu Ln C> 1 %O ru %O %O C.I M (lig/ml) organisme Produit de l'Exemple 71 72 73 74 76 77 78 79 Staphi,Zocccuo aureus, 1276 311 12 P 5 61113 1 5 6 25 Stmhylococcuc aureus, 2399 3 l 112/5 6 '3 25 6 P 3 25 staphylococcus aureus, 2400 3 f 1 12 5 1 2/ 5 25 6,, 3 12,, 5 Staphylococcus aurcus, 10165 50 5 12 1 , 5 50 2,, Strcptococcus faecolie, 9011 50 100 100 Strertoccoctis agatacti'ac,9287 1/16 3/1 3 e 1 1 2 e 5 3,1 3,, 1 Miciccoccus luteus, 2495 3 1 6 le 3 6/3 3, 1 8 50 1 ' 6 Escherichia co Zi, 8294 Y 5 O 8 25 25 O 1 '50 25 1 3 r op 1 1 6 25 25 3 12 Escherichia coli, 10 8 57 3/, 100 , 5 0/14 Escherichia coli, 10 89 6 25 3/1 12 5 25 l', 6 25 6 3 1/1 6 Escherichia coli, 109 09 12 5 8 1 Y -9 1 2, 5 0/1 8 25 ' 3 0,4 1 04 4 O 50 1 6 Y 5 50 3 1 3,,l Klebsiella aerogenes, , 1 00 5 K Zebsiella pnewnoniae, 9527 1 2/15 8 25 25 1,, 6 50 25 O ', 8 L' ' 385 5 12 5 1/ 6 12 25 0, 2 Pro,-etti mirabitic, 5 50 3 1 25 Prctcus rettgem, 8479 1 6 Y 1 1 6 50 Y 1 50 25 94 1 6 3/ 1 50 mone Zla typhcoa, 1195 O 8 25 sai', 1 ? 5 25 25 1,, 6 50 r,12 Shigella sonnei, 8449 25 O/ 8 12 5 25 0,, 8 25 12,, 5 1,0, 6 E;;-erob 7 ctei, clcccap, 8 23 6 50 O 8 Y 5 100 12,, 5 25 1 2,, 5 1, 6 78 100 6 25 100 6,3 100 2 5 6 3 Citrobacter freun-lii, l 2 5 25 50 25 25 12 i Serratia marceccons, 97 83 100 25 25 50 6,3 50 25 3,, 1 Pseudcricnas acruginosa, 9545 12/5 6 3 25 50 1 2,, 5 6,,, 3 6 3 3,, 1 P.- czidcmonns aerujimcce, 8329 'o loo 100 50 MS 25 Acinctobacter catcoacetîcus, 8333 100 50 1 2,, C> C.I M (kig/ml) organisme Produit de l'Exemple 88 89 90 91 92 93 94 Staphylococcus aureus, 1276 12 Ip 5 25 12 5 Ir 50 100 Staphy Zococcus aureus, 2399 12 e 5 25 Y 5 3 1 50 100 Staphy Zococcus aureus, 2400 12 5 50 25 i' 3 50 100 Stophylococcus aureus, 1 O 16 5 56 50 100 Y 5 50 - Streptococcus faecalis, 9011 100 Streptococcus agalactiaej 9 287 1 2,p 5 12,p 5 12 5 Oe a 25 3, 1 2495 O 8 O 4 1 Z 5 1,4 6 100 25 3 1 Micrococcus luteus, -1 Escherichia coli, 8294 1 Z 5 1 ïo Eécherichia co Zi, 10 8 57 12 5 12 5 O 8 50 25 Escherichia coti, 10 89 6 e O 50 6 3 25 Récherichia coti, 10909 100 50 1 6 25 Ln K Zeboiella aerogencs, 10440 l Z 5 100 Klebaietla pneumoniae, 95 27 100 100 1 6 100 Proteus mirabilis, 3855 100 100 ' 25 25 Proteus rettgeri, 8479 50 50 Y i 100 3 1 Ip 50 O 1 100 ro Proteus vulgarisa 94 1 6 1 00 50 l 6 50 Satmone Zla typhosa, 1195 311,1 Shigella sonnei, 8449 50 Enterobacter cloacae, 8236 3 l Z 5 Diterobactet, aerogenes, 10078 i 5 Citrobacter freundii, 951 8 6 3 100 Serratia marcescens, 9783 Poeudomonas aeruginosa, 9 54 5 25 25 à' i 100 25 Pseudomonas aeruginosa, 8 329 50 Àoinetôbacter calcoacetieus, 8333 Ln C.I M (lig/ml) Organisme Produit de l'Exemple 96 9 7 98 99 100 101 Staphy Zococcus aureus, 1276 50 6 3 100 100 50 25 Staphytococcus aureust 2399 50 6 IP 3 50 100 50 25 Staphy Zococcue aureus, 2400 50 12 le 5 50 100 50 50 Staphytococcus aureusi 10165 100 2/5 100 100 100 Streptacoccus faecatis, 9011 5 Streptococcus aga Zactiae, 9 287 613 12 t 5 1/16 100 100 25 121 p Microccoccus luteus, 2495 6 3 6/ 3 1 6 100 25 50 Eacheridhia coli, 8294 215 3 100, 100 Esche richia coli, 10 857 25 100 O 2 50 50 12 1/6 50 100 Eacherichia coti, 10 89 6 5 O Escherichia coli, 10909 6 3 50 O 8 5 K Zeboie Z Za aerogenes, 104 40 5 3 100 - K Zeboie Z Za pnewnoniae, 95 27 50 6 100 100 Prcteu 9 mirabi Zis, 3855 50 100 3 1 100 - Proteus rettgeri, 8479 25 100 e 3 50 100 Proteue vulgarisa 94 16 50 1195 50 1 6 50 100 Salmone Zla typhosa, 8449 12 5 50 3/ 1 50 100 Shi qe Zta sonnei, O 50 3 Enterobacter elcacae 9 8236 50 100 - Elnterobacter aerogenes, 10078 50 1 2 5 Citrobacter freundii, 9 51 8 50 100 50 50 Sermtia màcescens, 9 78 3 5 PÈreudomonas aeruginosa, 9 54 5 50 50 6 3 50 Poeudomonas aeruginosa, 8329 1 KO - Acinetobacter calcoac ticus, 8 333 50 50 %O C-I M-(Ijg/ml) Orqu nisme Produit de l'Exemple I-02 103 104 105 106 107 108 Staphy Zococcus aureus, 1276 100 12,15 3 le 1 1-2 y, 5 1,,6 Staphylococcus aureus, 2399 100 6 f 3 3/11 6,3 6 3/11 Staphy Zococcus aureus, 2400 50 6, 3 3 1 12,,, 5 r 6 3 le 1 Staphy Zococcus aureus, 1016 5 50 50 50 50 25 Streptococcus faecalis, 90 il 50 100, 50 Streptococcus agalactiae, 9 2 8 7 3 ri 50 if 6 1/16 civ8 û/* 8 O ", 8 Micrococcus luteus, 2495 311 12 f 5 1 6 3,, 1 12,p 5 31 * 1 O ', 8 Escherichia coli, 8294 O 1 O 4 Z 3 O 4 O 8 3 O/A IPOS Proteus vulgaris, 94 16 4 5 10, Péeud,omonasaerugincsa, 9545 os 8 0/8 1 0,11 2 01 $ 8 OP 2 8 Poeudomonas aeruginosa, 8329 1 00 3 / 1 50 3 , 1 12 , 5 12 1 12 Acinetobacter catcoaceticus, 8333 12 5 1 11-1 5 Ip 5 00 25 50 25 50 Ln % O %O c.i m '(ijg/ml) Organisme Produit de l'Exemple 109 110 lil 112 113 114 115 5.tmhy Zococcus aureus, 1276 12 5 1 6 6 1 6 3 1 12,5 e 2 39 9 1 1 16 atg hy Zoooccus aureus, 1215 ?, / 6 1/6 3 -111 12 5 O 8 2 4 O O 6 3 1 6 3 1 3 1 6 3 O atgphy Zococcus aureus, 11 f, 1 16 Il f 8 6 t 4 10165 O 1 5 25 50 6 p 3 25 3 1 phylococcus aureusp 2/ $t,,reptococctis faecalie, 90 il 50 25 50 100 50 5 Q 10 Otreptococcus agalactiae, 9 2 8 7 if 6 014 012 0111 O,/ 4 Q 18 011 8 Hia Of 8 014 0/8 0/8 O 8 O p 2 3 rococcus luteus, 24 9 5 111 rppherichia coli, 8294 O 8 1 2 2.Y'5 6/3 0/8 O l, apaherichia coti, 10 857 O 2 Of 2 2 3 1 K 116 M 6 j 3 if 1 Ubaietla aerogenes, 10440 glebaie Zla pnewnoniae, 9527 O 2 6 r 3 1 6 O ', 2 6,P 3, 6 loû 1 1 6 3 a 4 Proteus mirabitis, 3 8 5 5 Of 2 116 1116 O, 4 p 1 Proteus rettgeri, 8479 Sa Zmonella typhosa, 1195 Of 1 6 P 3 3 , 1 4 O,$ 4 - Shige Zla sonnei, 8449 0,,8 0, 4 1 lop 6 Enterobacter cloacae, 8236 l', 6 2 i 6# 3 l, 6 F 5 3, 1 - Enterobacter aerogenes, 10078 3,,l 25 12/5 3/1 25 6, 3 - Citrobacter freundiio 9 51 8 1 " 6 12/1 5 3,,l O ', 8 25 6 ', 3 - Serratia marcescens, 9783 12,, 5 25 6,3 3/ 1 25 6 3 - Peeudomonae aeruginosa, 9545 O 4 O 8 3,, 1 G,8 12 1 10 Q 25 Ppeudomonas aeruginosa, 8329 25 1 2 " 15 2 5,, Apinetobact-r catcoaceticus,' 8333 100 25 25 - C.I M (lig/ml) Organisme Produit de l'Exemple 116 117 118 119 120 121 122 Staphylpcoccus aureus, 1276 6 ? 3 3,1 ij 6 61 3 3,1 25 Of 8 Staphylococcus aureus, 2399 613 3 ri 1/6 6/3 3 Il 25 1 /* 6 Staphytococcus aureus, 2400 613 673 3/1 3 1 3,,l 121 ps 31 1 Staphylococcus aureus, '10165 1215 25 12 f 5 106 100 100 6, 3 Streptococcis faecalis, 9011 50 100 100 100 Streptococcus agatactiae, 9287 311 Of 2 014 13 31 $ 1 O P 2 O 8 Proteus vulgarisa 94 16 100 6/3 OJ 2 1/6 3 P Enterobacter cloacae, 8236 100 3 1 6 3 O 8 3 1 6/3 3,, 1 Enterobacter aerogenes, 10078 6/3 25 O Y 8 6/3 12 P 5 1 2,, 5 Citrobacter freundii, 9518 1/6 6,3 0/4 il 6 50 3 Serratia marcescens, 9 78 3 12 ? 5 l'a 6 1 21 p 5 O Op 1 Poeudomonas aerginosa, OP 8 6,,3 25 6,3 9 54 5 12/ 5 6 3 i/ 6 O 4 G,2 6 3 3,,l Pseudomonas aeruginosa, 8 329 106 5 6 f 3 3, l iû 25 Acinetobacter calcoaceticus, 8333 50 100 25 50 6,3 100 25 C.T M _(Iig/ml) organisme Produit de l'Exem-le 123 124 125 126 127 128 129 Staphy Zococcueaureus, 1276 3 fi 12/ 5 6/3 3 1 3 'l 0,8 50 Staphytococcus aureus, 2399 3,p 1 12,5 6,p 3 Y, 1 31,11 3 1 25 Staphy Zococcus aureus, 2400 6/3 1 2 , 56 , 3 3 , 1 3 1 3 12, 5 2 5 25 50 50 Staphytococcus aureus, 10 1 6 5 25 50 25 atreptococcus faecalis, 9011 100 100 100 5 Q 50 Streptocôccus agalactiae, 9 287 111 6 0/8 0/4 O, 8 l', 6 0, 8 lo 6 Micrococcus luteus, 2495 1401 6 3/ 1 31 % 1 3/ 1 6,3 3 l Qe 8 eacherichia coli, 8294 1 6 25 6 3 1 2,, 5 25 0110 4 Eacherichia coli, 10 857 el 4 Ip 2 Eacherichia coli, 10 8 9 6 04,P 4 1 2 O l 5 6 3 3 O 8 Q ascherichia coti, 10905 O 6 CD e,$ 6 gtebsie Ua aerogenes, 104 40 1/6 25 12 / 5 25 soi e K Zebaietta pnewnoniae, 9 5 27 os 2 25 O-8 6,, 3 3 1 O/ 2 0 2 ' 6 4 3 ly 5 Proteus vulgarisa 94 16 0 4 I ' 5 3 6 3 12 Shige Z Za sonnai, 8449 1-1 'Pl, 1 > 1 5 Olp 4 0 a 100 12 5 12 12 5 O 4 Enterobacter cloacae, 8236 11 ,5 - 3;,G 50 - Enterobacter acrogènesi 10078 O 11 100 12 5 25 1 2 , 5 1 citrobacter freundii, 9518 8 100 11 6 Serratia marcescens, 9 78 3 1/1 6 25 12 3 25 25 Peeudomonas aeruginosa, 9545 O> 8 25 1 5 1 6 25 3, l O 4 Poeudomonagaeruginosa, 8329 6,, 3 1 2 1 p 525 100 l -9 Acinetobacter calcoaceticus, 8333 50 50 - VI C.I M (Ijg/ml) organisme Produit de l'Exemple 131 1 3 2 1 3 3 134 135 136 Staphytococcus aureus, 1276 25 6 e 3 12,, 5 6 3 3 _,, 1100 Staphylococcus aureus, 2399 25 6 3 12 i 3 1 100 Staphytococcus aureus, 2400 25 611 12 / 5 - 113 6, 3 m 3,, 1 50 Staphytococcus aureus, 10165 100 50 50 1 2 , 5 50 - Streptococcus faecalis, 9011 100 50 50 - Streptococcus agalactiae, 9 287 1 21,15 O l 4 0,, 4 12 50. 3, micrococcus luteus, 2495 25 3,, 1 3,,l l, 6 1 D O 6,, 3 6,, 3 Escherichia coti, 8294 1,,, 6 25 3,,l 41 6 Escherichia coli, 10857 0, 2 O, 2 O ', 8 50 a,, 8 G, Escherichia coti, 10896 1 1 1 2 ,' 85O ',"02 5 Ip 6 6,, 3 3, 1 100 Escherichia co Zi, 10909 4 1, 6 0, 8 8 O, a O ', 1 Kleboie Zta 10440 6 O i 6 50 3 J'l aerogenes 1 184 K Zeboie Zta pnewnoniae, 9 5 27 0/2 3,,l 11, 6 8 8 O 1 Proteus mirabilis, 3855 O 8 6, 3 1 0,4 O 1 4 014 8 3 O / 4 Citrobacter freundii 9518 6 1 y5 3,,1 12 5 O> 2 J /13 25 el se 9 78 3 6 25 1 2,, 5 5 rratia marcescens,, 3 6,* 3,4 Pseudomoncw aertiginosa, 9545 O ', 8 25 3/1 100 6 3 O,, 8 Pseudomonas aeruginosa, 8329 12, 5 25 25 50 1 2, 5 Acinetobacter calcoaceticus, 8333 50 100 25 SQ Ln % O ri C.I M) organisme Produit de l'Exemple 13 8 1 4 O 141 1 4 2 1 4 -1 1 4 4 14 C; Staphy Zococcus aureus, 1276 100 25 25 25 50 6/0 3 Staphy Zooccus aureus, 2399 50 25 50 N E 50 6 3 atciphy Zococcue aureua, 2400 50 25 50 12 5 100 1215 phy Zococcus aureus, 1 O 1 6 5 50 Streptococcus faeca Zis, 9011 - Streptococcus agalactiae, 9 2 8 7 1 y 6 0114 6, 3 25 3 P 1 0/1 '8 50 Hjerococcus luteus, 2495 6 3 6 3 6/3 3/11 1 211 5 6 25 Zscherichia coli, 8294 G/1 116 1/6 1, 6 1, 6 50 0/4 go 10 857 149 150 151 152 154 155 156 Staphy Zococcus aureus, 1 276 613 6 Staphytococcus aureus, 2399 613 3111 61 ? 3 Staphytococcus aureus, 2400 25 6,3 25 Staphytococcus aureus, 1016 5 100 100 St-reptococcus faecalis, 9011 Streptococcus agalactiae, 9 287 311 O 14 613 12,r 5 12 5 Micrococcus luteus, 24 9 5 3 ti 3,1 6 13 12 t 5 106 Escherichia coli, 8294 311 1/6 311 0/2 50 6 3 Escherichia coli, 10 8 57 Eecherichia coli, 10 8 9 6 O 8 O 4 1 6 O 2 25 - Escherîchia coli, 1 1 1 r 3/1 10909 014 0/2 0,4 N E 25 -7 i, 6 Kteboie Zta aerogenes, 104 4 O 12/5 1/6 12 t 5 O IP 4 100 6 Kteboie Zla pneumoniae, 95 27 O,/ 4 0112 0,1 O PO 5 6, 3 Proteus mirabilis, 3855 116 Of 8 014 Oe O 5 1215 3 el Proteus rettgeri, 8479 1/6 1, 6 0,, 2 O l O 5Olp 8 100 014 Proteus vulgaris, 9416 Pseudomonas aeruginosa, 8 329 100 12 5 12/5 1 6 - Acinetobacter calcoaceticus, 8333 50 56 1 2, 5 25 Ln C> %O % O %O C I M (Ji g/ml) Produit de l'E Xe Mple organisme 157 159 1 61 1 62 163 1 64 Staphy Zococcus au reus, 1276 Staphylococcus aureuàj ? 399 Staphylococcie aureus, 24 O O Staphy Zococcus aureus, 1 O 1,'6 5 Streptococcus faecalis, 9011 Streptococcus agalactiae, 9297 mî,crococcus luteus, 24 9 5 L Eâcheiichia col', 8294 Eircherichia coli, 10 857 Eacherichia coli, 10 89 6 Escherichia coli, 1090 9 K Zeboie Zla aerogenes, 10440 Klebaie Z Za pnewnoniae, 9 5 27 Proteus mirabilis, 3855 Proteus rettgeri,, 8479 Proteus vu Zgaris, 9 4 1 6 Salmonella typhosa, 1195 Shigel Za sonnei, 8449 Enterobacter cloacae, 8236 Enterobacter aerogenes, 10078 Citrobacter freundii, 9 51 8 Sex=tia marcescens, 9 78 3 Pseudomonas aeruginosa, 9545 Pséudomônas aeruginosa, 8329 Acinetobacter calcoaceticus, 8333 12 t 5 121 5 1 2 p 5 6 y 3 1 y 6 2 5 -10 O 1 2 f 5 0 il 0 e 1 0 12 0 1 4 0 4 0,4 1 00 2 5 1 2 ? 5 6 r 3 6 e 3 3 j 1 O., 4 12., 5 O.? 8 il 6 01 2 0 14 of 4 01 2 0,, 2 6, 3 6, 3 61 3 3,, l' 3 ri 6., 3 O O iôO 0 4 OI 2 0 1 1 0 il, 0 1 8 O/ 2 0 / 2 O.P O 5 O/ 2 O/ 2 O.P 4 0.1 2 O/ 4 Of 2 O P 4 O; 121 r 5 0 Ip 4 0 1 1 0 1 8 O f 2, 0 r 1 O., 1 Of 8 0 14 0 p 8 0 IP 4 1 P 6 N$ 1 Q N %A NO N %O %O REVENDICATIONS 1 e-lactame, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -SO 3 Me, dans lequel Me est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, et un substituant amine -NH 2 ou une forme protégée de celui-ci en position 3. 2 g-lactame, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -SO 3 Me, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, et un substituant azide-N 3 en position 3. 3 e-lactame selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique- -SO 3 Me, dans lequel Me est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, un substituant amine -NH 2 en position 3, et un substituant alkyle en position 4. 4 0-lactame selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -S Oe Me, dans lequel Me est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, un substituant amine -NH en position 3, et un substituant cycloalkyle, phényle ou phényle substi- tué, en position 4. g-lactame selon la revendication 1, caractérisé en qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -SO 3 M, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, un substituant amine -NH 2 en position 3, et un substituant alcoxycarbonyle, alcén-1-yle, alcyn-1- yle, 2-phényléthényle ou 2-phényléthynyle, en position 4. 6 0-lactame selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -SO Me, dans lequel Me est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, un substituant azide-N 3 en position 3, et un substituant alkyle en position 4. 7 -lactame selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -503 M, dans lequel Me est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, un substituant azide-N 3 en position 3, et un substituant cycloalkyle, phényle ou phényle substitué, en position 4. 8 f-lactame selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -SO 3 M, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou un cation, en position, un substituant azide-N en position 3, et un substituant alcoxycarbonyle, alcén-l-yle, alcyn-l-yle, 2- phényléthényle ou 2-phényléthynyle, en position 4. 9 B-lactame selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique e -SO 3 M, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, un substituant amine -NH 2 en position 3, et un substituant méthyle en position 4. e-lactame selon la revendication 1, ayant pour formule: R -2 F 4 : NH 2-C C-R -N-SO 3 M dans laquelle R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone; R 3 et R 4 sont identi- ques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cycloalkyle, phényle ou phényle substi- tué, ou bien l'un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène et l'autre est un radical alcoxycarbonyle, alcén-l-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle ou 2-phényléthynyle; et M est un atome d'hydrogène ou un cation. 11 A-lactame selon la revendication 1, ayant pour formule: = 2 54 N -C-C-R 3 1 'e -N- SO 3 dans laquelle R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical- alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone; R 3 et R 4 sont identi- ques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cycloalkyle, phényle ou phényle substi- tué, ou bien l'un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène et l'autre est un radical alcoxycarbonyle, alcén-l-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle ou 2-phényléthynyle; et MI est un atome d'hydrogène ou un cation. 12 e-lactame selon la revendication 10 ou 11, dans lequel R 2 est un atome d'hydrogène. 13 3-lactame selon la revendication 10 ou 11, dans lequel R et R sont des radicaux méthyle. 14 e-lactame selon la revendication 10 ou 11, dans lequel R 3 et R 4 sont des atomes d'hydrogène. B-lactame selon la revendication 10 ou 11, dans lequel R 3 est un atome d'hydrogène et R 4 est un radical méthyle. 16 e-lactame selon la revendication 10 ou 11, dans lequel R est un radical méthyle et R 4 est un atome d'hvdroqène. 17 g-lactame selon l'une des revendications 10 à 16, dans lequel le substituant amine (NH 2-) en position 3 est protégé. 18 3-lactame selon la revendication 17, dans lequel le substituant amine est sous la forme d'un groupement azide. 19 1-lactame selon la revendication 18, ayant pour formule: R 4 N 3-CH C-R o 3 0,C N-S 53 M- dans laquelle R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, et + M est un atome d'hydrogène ou un cation. B-lactame selon la revendication 19, dans lequel R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical méthyle. 21 e-lactame, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -S Oe Me, dans lequel Mo 3, est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, et in un substituant acylamine en position 3. 22 8-lactame selon la revendication 21, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -SO M, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, un substituant acylamine en position 3, et un substituant alkyle en position 4. 23 -lactame selon la revendication 21, caractérisé en ce qu'il porte un substituant sel d'acide sulfonique -S Oe M, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou un cation, en Position 1, un substituant acylamine en position 3, et un substituant méthyle en position 4. 250929 '9 24 B-Iactame selon la revendication 21, ayant pour formule: R R -2 g 4 R -NH C R 3 Àf 1 N-53 M eç-N-SO 3 M O C dans laquelle R est un radical acyle; R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone; R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cycloalkyle ou phényle; et, en outre, lorsque l'un de R et R est un atome d'hydrogène, l'autre peut être un radical alcényle, styryle, alcynyle, alcoxy,-alkylthio, carboxyle ou un ester alkylique de ce dernier, hydroxyméthyle, alkylsulfonyl- méthyle inférieur, phénylsulfonylméthyle, dans lequel le radical phényle peut être substitué par un radical méthyle ou un atome d'halogène, halométhyle, mercaptométhyle ou un dérivé benzylique ou triphénylméthyl- thio de ce dernier, azidométhyle ou aminométhyle; et M est un atome d'hydrogène ou un cation. e-lactame selon la revendication 24, R 2 est un atome d'hydrogène. 26 -lactame selon la revendication 25, R 3 et R 4 sont des radicaux méthyle. 27 e-lactame selon la revendication 25, c R et R sont des atomes d'hydrogène. 3 4 28 B-lactame selon la revendication 25, c R est un atome d'hydrogène et R est un radical 3 4 29. R 3 est un 30. lequel R 1 dans lequel dans lequel dans lequel dans lequel méthyle. e-lactame selon la revendication 25, dane lecuel radical méthyle et R 4 est un atome d'hydrogène. e-lactame selon l'une cdes revendications 24 à 29, dans est un groupement aliphatique ayant pour formule: R 5-C- dans laquelle R 5 est un radical alkyle; cycloalkyle; alcoxy; alcényle; cycloalcényle; cyclohexadiényle; ou alkyle ou alcényle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine, mercapto, alkylthio ou cyanométhylthio. 31 À -lactame selon l'une des reverylications 24 à 29, dans lequel R 1 est un groupement aromatique carbocyclique ayant pour formule: R 7 O R 70 R 69 R 7 f /-CH 2-Co- R 92 R 6. O 0 I O-CH 2-C- ou R O 8 H 2 l -CH 2-5-c- o N est égal à 0, 1, 2 ou 3; R 6, R 7 et R 8-sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupement hydroxyle, nitro, amine, cyano, trifluoro- méthyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle; et R 9 est un groupe- ment amine, hydroxyle, un sel carboxylique, un radical carboxyle protégé, formyloxy, un sel sulfonique, un sel de sulfoamine, un groupement azide, un atome d'halogène, un radical hydrazine, aikylhydrazine, phénylhydrazine ou l(alkylthio)thioxométhyllthio. 32 -lactame selon l'une des revendications 24 à 29, dans lequel R 1 est un groupement hétéroaromatique ayant pour formule: R 10 (CH 2)n-C-, o II R 10-CH-C-, R 9 O II R 10 -0-CH 2-C-, O I R o-S-CH 2-C-, ou O O- Il Il R -C-C- o N est égal à 0, 1, 2 ou 3-; R 9 est un groupement amine, hydroxyle, un sel carboxylique, un groupement carboxyle protege, formyloxy, un sel sulfonique, un sel de sulfoamine, un groupement azide, un atome d'halogène, ou un radical hydrazine, alkylhydrazine, phénylhydrazine ou l(alkylthio)- thioxométhyllthio; et R 10 est un noyau aromatique hétéro- cyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre. 33 B-lactame selon l'une des revendications 24 à 29, dans lequel R 1 est un groupement de formule: 0 O Il I -C-CH-NH-C-N N-R 12 1 -12 dans laquelle Rll est ( 1) un groupement de formule: R 7 À dans laquelle R 6, R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un. atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxyle, nitro, amine, ou cyano, un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle; ou ( 2) un noyau hêtérocyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène, ou de soufre; et R 12 est un groupement de formule o I -N=CH-Rll ou -NH-C-Ril, un radical alkylcarbonylamine, alkyle ou alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupementscyano, nitro, amine ou mercapto. 34 3-lactame selon l'une des revendications 24 à 29, dans lequel R 1 est un groupement de formule: -C-C=N-O-R 13 Rl 11 dans laquelle Rll est ( 1) un groupement de formule: R 7 R 6 8 dans laquelle R 6, R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène,un groupement hydroxyle, nitro, amine ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle, ou ( 2) un noyau hétérocyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de sbufre; et R 13 est un atome d'hydrogène, un radical O alkyle, cycloalkyle, alkylaminocarbonyle, -C-NH-Rll, ou alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine, mercapto, alkylthio, Rll, carboxyle, sel carboxylique, amide, alcoxycarbonyle, phénylméthoxycarbonyle, diphénylméthoxycarbonyle, hydroxy- alcoxyphosphinyle, dihydroxyphosphinyle, hydroxy (phényl méthoxy)phosphinyle ou dialcoxyphosphinyle. e-lactame selon l'une des revendications 24 à 29, dans lequel R 1 est un groupement de formule: -C-CH-NH-9-R 14 dans laquelle Rll est ( 1) un groupement de formule: R 7 R 6 8 dans laquelle R 6, R 7 et R sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxy, nitro, amine ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle, ou bien ( 2) un noyau hétéro- cyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal substitué ou non substitué contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre; et R 14 est un groupement de formule: R 7 R 6 e (CH 2)n-0- dans laquelle N est égal à 0, 1, 2 ou 3, ou un radical amine, alkylamine, (cyanoalyl)amine, amide, alkylamide, (cyanoalkyl)amide, ou un groupement de formule: NH -CH 2-NH-C / N NH O -CH-CH 2-C-NH-CH 3, HO a 502-SO-N(CH-CH OH) 2 ' CH OH N OH OH O ou lequel R 1 OH -CH B-lactame selon l'une des revendications 24 à 29, dans est un groupement de formule: O o Il o O O C il Il Z 1 1 -C-CH-NH-C-N R I ll CH 2 N-R, CH 2 dans laquelle Rll est ( 1) un groupement de formule: R 7 R e dans laquelle R 6, R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxyle, nitro, amine ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle, ou bien ( 2) un noyau hétéro- cyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre; et R 15 est un atome d'hydrogène ou un radical alkylsulfonyle, -N=CH-Rll, -C-R 16 (dans lequel R 16 est un atome d'hydrogène, ou un radical alkyle, ou 1.D alkyle substitué par un atome d'halogène, R 2 ll, -alkyle, ou alkyle substitué par un ou plusieu rs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine ou mnercapto. 3.7 0-lactame selon la revendication 34, dans lequel Ril est le radical 2amnino-4-thiazolyle. 38 e-lactame selon la revendication 37, qui est un sel de l'acide l 3 S( imino) acétyllaminol-2-oxo-1-azétidinesulfonicrue. 39 e-lactame selon la revendication 37, qui est un , sel de l'acide l 3 S(Z)l-3-ll( 2-amnino-4 thiazolyl)l(carboxy- méthoxy) iminolacétyljaminoll-2-oxo-1-azétidinesulfonique. 0-lactame selon la revendication 37, qui est un sel de l'acide l 3 S carboxy-1-méthyléthoxyiliininolacétyl lamino-2 oxo-1- azétidinesulfônique. 41 e-lactame selon la revendication 37, qui est un sel de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 el 1-3-ll( 2-amino-4 th-iazolyl)- méthoxyimino) acétylljaminol-4-miéthyl 2-oxo-1-azétidine- sulfonique. 42 e-lactame selon la revendication 37, qui est un sel de l'acide l 3 S-l 3 at(Z),4 gll-3-lll iminol- ( 2-amino-4-:thiazolyl) acét-yllaminol -4-méthyl-2-oxo-1- azétinesulfonique. 43 5-lactamne selon la revendication 37, qui est un sel de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 e 3 f-3-ll l( 1-carboxy-1-méthyléthoxy) iminolacétyll aminol-4-méthyl-2- oxo-1-azétidinesulfonique. 44 lactame selon la revendication 37, qui est le sel dipotassique de-l'acide l 3 S-l 3 a(z),4 f 311-3-ll( 2-amino- 4-thiazolyl) l 4-méthvll-2-oxo-1-az-étidinesulfonique. 0-lactame selon la revendication 37, qui est un sel de l'acide l 3 S-l 3 a(Z),4 cll-3 tl 2-amnin o-4-thiazol-yl)- mnéthoxyimino) acétyllaminol -4-méthyl-2-oxo-1-azétidine- sulfonique. 46 f 3 -1 actame selon la revendication 37, qui est un sel de l'acide l 3 S-113 ca Z),4 dl 1-3-ll( 2-amiino-4-thiazolyl)- l( 1-carboxy-1-méthoxyéthoxy) iminolacétyllamninol-4-méthyl-2- oxo-1 -azétidinesulfonique. 47 lactame selon la revendication 36, dans lequel R 1 est un groupement de formule ii o -C CH-NH-C-N N-R 15 C Hn 2-CH 2 48 e-lactame selon la revendication 47, dans lequel R est un groupement de formule * O -C-CH-NH-C-N NNC Ulm 2-c Hu 2 49 e-lactame selon la revendication 47, qui est un sel de l'acide l 3 S(R*) l-3-llIill 3-l( 2-furanylméthylêne) aminol-2-oxo-1-imidazolidinyllcarbonyllaminolphénylacétyll- aminol -2-oxo-1-azétidinesulfonique. e-lactame selon la revendication 47, qui est un sel de l'acide l 3 S-l 3 a(R*>,4 e 3 H-3-lllll 3-l( 2-furanyl- méthylène) aminol-2-oxo-1-imnidazolidinyllcarbonyllaminol- phénylacétylllaminol -4 méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique. 51 e-lactame selon la revendication 47, qui est un sel de l'acide l 3-3 (*," 13 lll 3 l 2 frnl méthylène) aminoj-2-oxo 1-imidazolidinyllcarbonyllaminol- phénylacétyllaminol-4-méthyl-2-oxo-1-azétidinesulfonique. 52 B-lactame selon la revendication 33, dans lequel R est un groupement de formule i o o -C-CH-NH-C-N N-CH 2 CH 3 Oe d I 23 53 -lactame selon la revendication 52, qui est un sel de l'acide l 3 S(R*)l-3-llll( 4-éthyl-2,3-dioxo-1- pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacétyllaminol-2-oxo-1- azétidinesulfonique. 54 e-lactame selon la revendication 52, qui est un sel de l'acide l 3 S-l 3 a(R*),45 ll-3-llll( 4-éthyl-2,3-dioxo- 1-pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacétyllaminol-4-méthyl- 2-oxo-1-azétidinesulfonique. e-lactame selon la revendication 52, qui est un sel de l'acide l 3 S-l 3 a(R*),4 all-3-llll( 4-éthyl-2,3-dioxo- 1-pipérazinyl)carbonyllaminolphénylacétyllaminol-4-méthyl- 2-oxo-1-azétidinesulfonique. 56 Composition comprenant une quantité efficace d'un e-lactame ayant pour formule: R 2 R 4 Rl-NH-C CR 3 o/C N-SO 3 ME o. dans laquelle R est un radical acyle; R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone; R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cycloalkyle ou phényle; et, en outre, dans le cas o l'un de R 3 ou-R 4 est un atome d'hydrogène, l'autre peut être un radical alcényle, styryle, alcynyle, aicoxy, alkylthio, carboxyle ou un ester alkylique de ce dernier, hydroxyméthyle, alkylsulfonyl- méthyle inférieur, phénylsulfonylméthyle dans lequel le radical phényle peut être substitué par un radical méthyle ou un atome d'halogène, halométhyle, mercaptométhyle ou un dérivé benzylique ou triphénylméthylthio de ce dernier, azidométhyle ou aminométhyle; et Mff est un atome d'hydro- gène-ou un cation, ainsi qu'un porteur pharmaceutiquement acceptable pour le f -lactame. 57 Procédé de préparation d'un e-lactame portant un substituant sel d'acide sulfonique -SO 3 M+, dans lequel M+ est un atome d'hydrogène ou un cation, en position 1, et un substituant amine -NH 2,ou une forme protégée de celui-ci, en position 3, caractérisé en ce qu'on sulfone un e- lactame correspondant portant un substituant hydrogène en position 1 et un subs- tituant amine protégé en position 3, et en ce qu'on élimine ledit groupement protecteur de la fonction amine. 58 Procédé selon la revendication 57, caractérisé en ce qu'on acyle le substituant amine en position 3, et en ce qu'on procède à ladite acylation soit avant, soit après la réaction de sulfonation. 59 Procédé selon la revendication 57 ou 58, caractérisé en ce que le produit contient un substituant alkyle en position 4. Procédé selon l'une des revendications 57 à 59, caractérisé en ce que le produit obtenu a pour formule: R 2 R 4 R -NH-C C R 1 '431 C N -SO M O/ 3. * dans laquelle R 1 est un atome d'hydrogène ou un groupement acyle ou bien le groupement R 1-NH est un groupement amine protégé; R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy en C 1-C 4; R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cyclo- alkyle, phényle ou phényle substitué, ou bien l'un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène et l'autre est un radical alcoxycarbonyle, alcén-l-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle ou 2-phényléthynyle; et M est un atome d'hydrogène ou un cation, et en ce qu'on procède à ladite sulfonation sur un composé de formule: 218 2509299 R 2 R 4 Rl NH-C 3 -R 4 3 12 il o ___/R 4 R 1-NH-C CH I ___ _____ R 3 C NH 2 que l'on cyclise, ladite réaction de sulfonation étant effectuée soit avant, soit après ladite cyclisation, le groupement R 1-NH des réactifs étant un groupement amine protégé ou bien R 1 étant un radical acyle; V étant un groupement labile tel que le radical méthanesulfonayle, benzènesulfonyle ou toluènesulfonyle, ou un atome de chlore, de brome ou d'iode; et R 2 et R et R 4 ayant les mêmes définitions que précédemment. 61 Procédé selon la revendication 60, caractérisé en ce que R 1 est un atome d'hydrogène ou bien le groupement R 1-NH est un groupement amine protégé. 62 Procédé selon la revendication 60, caractérisé en ce que R 1 est un radical acyle. 63 Procédé selon la revendication 62, caractérisé en ce que le radical acyle est choisi dans le groupe comprenant: (a) un groupement aliphatique ayant pour formule: o Il R 5-C- dans laquelle R 5 est un radical alkyle; cycloalkyle; alcoxy; alcényle; cycloalcényle; ou cyclohexadiényle; ou bien un radical alkyle ou alcényle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine, mercapto, alkylthio ou cyanométhylthio; (b) un groupement aromatique carbocyclique ayant pour formule: R 7 o 2)n C, (CH 2)n-C-, o il l 2-O-C- o It O-CH 2-C- ou o i 12-S-C- l 2-S-c- dans lesquelles N est égal à 0, 1, 2 ou 3; R 6, R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxyle, nitro, amine ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de l à 4 atomes de carbone, ouaminométhyle; et R 9 est un groupement amine ou hydroxyle, un sel carboxylique, un radical carboxyle protégé, formyloxy, - 220 2509299 220. un sel sulfonique, un sel de sulfoamine, un groupement azide, un atome d'halogène, ou un radical hydrazine, alkylhydrazine, phénylhydrazine ou l(alkylthio)thioxo- méthyllthio; (c) un groupement hétéroaromatique de formule: R 10 (CH 2)n, o R 10-CH-C-, s R R 9 R 1 -0-CH 2-C-, * ? S-CH 2 C-, ou dans lesquelles N est égal à 0, 1, 2 ou 3; R 9 est un groupement amine, hydroxyle, un sel carboxylique, un radical carboxyle protégé ou formyloxy, un-sel sulfonique,-un-sel de sulfoamine, un radical azide, un atome d'halogène ou un radical hydrazine, alkylhydrazine, phénylhydrazine ou l(alkylthio)thioxométhyllthio; et Ri O est un-noyau aroma- tique hétérocyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre; (d) un groupement de formule: -NHR N -C-CH-NH-C-N -R 12 Rl O dans-laquelle Rll est ( 1) un groupement de formule: R 7 R 68 22 1 dans laquelle R 6, R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxy, nitro, amine ou cyano, un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle, ou bien ( 2) un noyau hétérocyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre; et R 12 est un groupement de o formule -N=CH-Rl ou-NH C-Ril, ou un radical alkylcarbonyl- amine, alkyle, ou alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine ou mercapto; (e) un groupement de formule: O Il -C-C=N-O-R 13 R Rll dans laquelle Rll est ( 1) un groupement de formule: R B R 6 R 8 dans laquelle R 6, R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxyle, nitro, amine, ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle, ou bien t 2) un noyau hétéro- cyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre; et R 13 est un atome d'hydrogène, ou un radical alkyle, cycloalkyle, alkylaminocarbonyle, O -C-NH-Rll, ou alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine, mercapto, alkylthio, Rll, carboxyle, sel carboxylique, amide, alcoxycarbonyle, phénylméthoxycarbonyle, diphénylméthoxy- carbonyle, hydroxyalcoxyphosphinyle, dihydroxyphosphinyle, hydroxy(phénylméthoxy)phosphinyle ou dialcoxyphosphinyle; (f) un groupement de formule: -C CH -NH C 14 R 11 dans laquelle Rll est ( 1) un groupement de formule: R 6 dans laquelle R 6 ' R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'hal ogène, un groupement hydroxyle, nitro, amine ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle, ou ( 2) un noyau hétérocyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre; et R 14 est un groupement de formule: R R 6 ( 2) A-O- dans laquelle N est égal à 0, 1, 2 ou 3,'ou bien R 14 est un radical amine, alkylamine, (cyanoalkyl)amine, amide, alkylamide, (cyanoalkyl) amide, ou un groupement de formule: NH NH 2 O Il I 2 Il -CH-NH-CI C N, -CH-CH 2-C-NH-CH 3, HO S -( 2-2 OH)NC C O)CH OH OH OH OH -CH (g) un groupement de formule: o 1 Xo O O C -C-CH-NH-C-N N-R 15 1 15 -R Ril l l C 2 CH 2 CH 2 dans laquelle Rll est ( 1) uh groupement de formule: R 7 R 6 R 8 dans laquelle R 6, R 7 et R 8 sont chacun, indépendamment, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupement hydroxyle, nitro, amine ou cyano, ou un radical trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou aminométhyle, ou bien ( 2) un noyau hétéro- cyclique pentagonal, hexagonal ou heptagonal, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre; et R 15 est un atome d'hydrogène, O Il ou un radical alkylsulfonyle, -N=CH-Rll, - C-R 16, dans lequel R 16 est un atome d'hydrogène, ou un radical alkyle. ou alkyle substitué par un atome d'halogène, Rll, alkyle, ou alkyle substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène ou groupements cyano, nitro, amine ou mercapto. 64 Procédé selon la revendication 63, dans lequel Rll est un radial 2-amino-4-thiazolyle. Procédé de préparation d'un sel d'acide (R)-3- (acétylamino)-3-méthoxy-2-oxo-1-azétidinesulfonique, caractérisé en ce qu'on cultive une souche du micro- organisme Chromobacterium violaceum, A T C C 31532, dans un milieu aqueux comprenant de l'extrait de levure, de l'extrait de boeuf, de la NZ amine A, du glucose et de la gélose. 66 Procédé de préparation d'un sel de l'acide (R)-3-l'lN-(D-'-glutamyl)-D-alanyllaminol-3-méthoxy-2-oxo- azétidinesulfonique, caractérisé en ce qu'on cultive une souche du microorganisme Gluconobacter, A T T C 31581 dans un milieu aqueux comprenant de l'extrait de levure, de l'extrait de boeuf, de la NZ amine A, du glucose et de la gélose. 67 Composé de formule: V FR 4 R -NH é" N-SO 3 M+ O dans laquelle'Rl est un atome d'hydrogène ou un groupement acyle ou bien le groupement R 1-NH est un groupement amine protégé; R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cyclo- alkyle, phényle ou phényle substitué, ou bien l'un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène et l'autre est un radical alcoxycarbonyle, alcén-l-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle M+ ou 2-phényléthynyle; M+ est un atome d'hydrogène ou un cation; et V est un groupement labile tel que le radical méthanesulfonyle,'benzènesulfonyle ou toluènesulfonyle, ou un atome de chlore, de brome ou d'iode. 68 Composé de formule: R RR 2 4 NH 3 -R 3 O-' N-SO 3 dans laquelle R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy en C 1-C 4; R 3 et R sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cyclo- alkyle, phényle ou phényle substitué, ou bien l'un de R 3 et R est un atome d'hydrogène et l'autre est un radical alcoxy- carbonyle, alcên-l-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle ou 2- phénylêthynyle. 69 Composé de formule: Cl' R 4 Ri-N = R 3 1 7 3 d( N-SO 3 M+ dans laquelle R 1 est un atome d'hydrogène ou un groupement acyle; R 3 et R 4 sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, cyclo- alkyle, phényle ou phényle substitué, ou bien l'un de R 3 et R 4 est un atome d'hydrogène et l'autre est un radical alcoxycarbonyle, alcén-l-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle ou 2-phényléthynyle; et M+ est un atome d'hydrogène ou un cation. 70 Procédé selon la revendication 57, caractérisé en ce qu'il consiste 3 sulfoner un composé de formule: V R 4 ANH CH C 4 | R OCNH 2 3 dans laquelle au moins l'un de R 3 et R 4 est un atome d'hydro- gène et l'autre, éventuellement, est un radical alcoxycarbo- nyle, alcén-l-yle, alcyn-l-yle, 2-phényléthényle ou 2- phényléthynyle; A est un groupement protecteur de la fonc- tion amine; et V est un groupement labile tel que le radical méthanesulfonyle, benzènesulfonyle ou toluènesulfonyle, ou un atome de chlore, de brome ou d'iode, pour obtenir un com- posé de formule: V ANH-CH R 3 o_C " NHSO 3 M dans laquelle M+ est un atome d'hydrogène ou un cation.