Brevet FR2505869A1 — publié le 19821119

Support de milieu de culture préfabriqué. L'invention concerne un support de milieu de culture préfabriqué, pour la détermination qualitative et quantitative de microorganismes, de préférence pa- thogènes. Les supports de milieux de culture préfabriqués sont connus et sont constitués en général par (a) un porte-objet recouvert par un ou différents milieux de culture, qui (b) sont fixés rigidement sur un cou- vercle à vis et, pendant le stockage durant l'incuba- tion, se trouvent dans un récipient à vis transparent sur lequel le couvercle est vissé Ils sont utilisés dans des buts de diagnostic et pour contrôler la teneur en germes dans le cas de processus industriels, ainsi que dans le cas d'un contrôle d'hygiène, en tant que milieux de culture immergés ou passés à la brosse. Les supports de milieux de culture préfabriqués utilisés le plus fréquemment comportent un support rectangulaire en matière plastique en tant que porte- objet, qui est recouvert la plupart du temps, et même des deux côtés, d'un ou de différents milieux de cul- ture. Un inconvénient essentiel des supports de milieux de culture préfabriqués connus est leur mauvaise stabi- lité Etant donné que les milieux de culture contien- nent beaucoup d'eau, il est difficile d'éviter, même dans le cas d'un stockage coûteux et ennuyeux, qu'une partie-de l'eau se condense et se dépose sous la forme de condensat sur la paroi du récipient ou respective- ment du couvercle Des milieux de culture desséchés sont totalement inutilisables Lorsque l'eau de con- densation rassemblée coule de nouveau ou est de nouveau projetée sur la surface du support de milieu de culture lors d'un mouvement accidentel ou lors du transport, ceci conduit à des hétérogénéités de la surface Notam- ment lorsqu'il y a différents milieux de culture les uns à côté des autres, il peut apparaître des dépla- cements non souhaités de fractions solubles spécifiques des milieux, à la suite de quoi ils perdent leur spé- cificité et par conséquent sont inutilisables en pra- tique. La fabrication des supports de milieux de culture préfabriqués connus jusqu'ici est très coûteuse du point de vue technologique et du prix Notamment dans le cas de porte-objets avec différents milieux de cul- ture, ceux-ci doivent être déposés les uns après les autres et refroidis individuellement Ces processus de travail doivent se dérouler dans des conditions absolument stériles, et ce jusqu'à la fabrication fi- nale de tout le support de milieu de culture préfa- briqué. L'invention se propose d'éliminer les erreurs et les pertes dues à l'évaporation et à la condensa- tion de l'eau dans le milieu de culture En outre, elle se propose de perfectionner du point de vue tech- nologique et par conséquent également du point de vue coût, le procédé pour fabriquer le porte-objet. Ce problème est résolu du fait que pendant le stockage, on entoure le porte-objet revêtu (A) d'une enveloppe (D) pouvant facilement être enlevée avant l'ensencement Grâce à cette enveloppe, aucun ou seu- lement un volume relativement faible est laissé libre entre le porteobjet revêtu et l'enveloppe, de sorte qu'aucun ou seulement un volume relativement faible par rapport au volume global du récipient peut rece- voir de la vapeur d'eau en provenance du milieu de culture Le volume de gaz entre l'enveloppe et le récipient agit comme un isolant thermique et empêche dans une large mesure la formation d'eau de condensa- tion sur la paroi intérieure de l'enveloppe Les sup- ports de milieux de culture préfabriqués suivant l'in- vention n'ont tendance par conséquent ni à se dessé- cher ni à se détériorer prématurément par suite d'eau de condensation qui s'écoule ou est projetée. Dans le cas le plus simple, l'enveloppe peut être constituée par une feuille de matière-plastique imperméable à la vapeur d'eau, qui est collée ou sou- dée au niveau de l'extrémité supérieure sur le couver- cle à vis, et est fermée à l'autre extrémité également par collage ou soudage Dans une forme de réalisation préférée de l'invention, l'enveloppe (d) est constituée par un manchon rigide qui ne laisse également libre qu'un volume relativement faible-entre lui-même et le porte-objet revêtu De tels manchons sont enfilés sur le porte-objet après son revêtement et sont pressés de façon étanche contre le couvercle. Notamment dans le cas d'enveloppes rigides ou possédant une forme relativement stable, en principe il est également possible d'enfiler celle-ci sur le porte-objet déjà avant de le revêtir du ou dès milieux de culture, et de remplir alors complètement les espa- ces intermédiaires avec le ou lesdits milieux Dans ce cas, le volume entre le manchon et le porte-objet est inexistant Dans cette forme de réalisation, il faut faire attention à ce que le milieu de culture adhère'mal à l'enveloppe et adhère particulièrement bien au porte-objet, de manière que l'enveloppe puisse être enlevée sans endommager ledit milieu Grâce à un choix approprié des matériaux, on peut obtenir une adhérence différente de l'enveloppe et du porte-objet vis-à-vis du milieu de culture En outre, la fixation sur le porte-objet peut être renforcée par des nervu- res ou des protubérances Dans ce mode de réalisation, ce n'est qu'après l'introduction du ou des milieux de culture que le couvercle est associé au porte-objet. Ceci peut à vrai dire être réalisé par collage, mais de préférence le couvercle est associé au porte-objet au moyen d'une fermeture à déclic (figure 12). Quelques formes de réalisation typiques du sup- port de milieux de culture suivant l'invention sont représentées sur les figures 1 à 5. La figure 1 représente une coupe longitudinale d'un tel support de milieu de culture, tandis que les figures 2 à 5 représentent des coupes transversales du porte-objet revêtu (a) et de l'enveloppe (d) La figure 12 représente un porte-objet qui est associé au couvercle au moyen d'une fermeture à déclic Sur ces figures: 1) désigne le récipient à vis transparent vissé rigidement sur le couvercle; 2) un couvercle à vis; 34 le porte-objet; 4) un milieu de culture; ) l 'enveloppe; -6) un élément d'étanchéité élastique; 7) un renflement sur le fond de l'enveloppe, par l'intermédiaire duquel l'enveloppe est appuyée rigidement contre l'élément d'étanchéité ( 6). La figure 2 représente un porte-objet dans le- quel on peut introduire jusqu'à quatre milieux de culture différents Dans ce cas, l'enveloppe est rigide et ronde et peut, comme sur la figure 1, être appuyée contre l'élément d'étanchéité par un renfle- ment sur le fond. La figure 3 représente une autre configuration habituelle du porte-objet, sur lequel peuvent être déposés deux milieux de culture différents Dans ce cas, l'enveloppe est rectangulaire et rigide et peut également être appuyée contre l'élément d'étanchéité dans le couvercle à vis au moyen d'un renflement sur le fond. Les figures 4 et 5 représentent un porte-objet sur lequel on peut de nouveau déposer jusqu'à quatre milieux de culture différents Ici, l'enveloppe se présente sous une forme ronde ou carrée et peut égale- ment être utilisée comme moule de coulée. Le porte-objet peut naturellement comporter trois, cinq ou plus de branches L'enveloppe peut alors également être ronde ou de préférence triangulaire, pentagonale ou polygonale (figures 6 à 11). Au lieu des récipients à vis avec un couvercle à vis utilisés la plupart du temps jusqu'ici, suivant l'invention on peut également utiliser un récipient sur lequel est enfoncé un couvercle avec un élément d'étanchéité à déclic. Comme milieu de culture, il s'agit principalement de tous les milieux de culture connus, par exemple du milieu de culture CLED pour déterminer le nombre global de germes d'échantillons d'urine Dans le cas de porte- objets avec deux milieux de culture différents, on dépose de préférence d'un côté de nouveau l'agar CLED, et de l'autre côté de nouveau un agar de Mac CONKEY qui permet de déceler sélectivement uniquement les bactéries Gram- Dans le cas d'un milieu de culture comportant quatre milieux de culture différents, on peut combiner par exemple un milieu CLED, un milieu de Mac CONKEY, un agar cétrimide et un milieu de Nickerson L'agar cétrimide permet de déceler le groupe pseudomonas, tandis que le milieu de Nickerson laisse se développer les champignons et les levures. Naturellement, un tel milieu de culture subdivi- sé en quatre peut encore être subdivisé en une partie supérieure et en une partie inférieure, de sorte qu'au total, on peut déposer huit milieux de culture diffé- rents sur un porte-objet Le porte-milieu de culture est utilisé en dévissant le récipient à vis transpa- rent et en retirant et en jetant l'enveloppe Ensuite, on peut immerger tout le porte-objet dans un échantil- lon de liquide à étudier, comme de l'urine, et après égouttage le replacer dans le récipient à vis transpa- rent et le laisser incuber Naturellement, il est éga- lement possible, au lieu de l'immersion dans l'échan- tillon d'urine ou l'échantillon de liquide, d'en dépo- ser des parties ou des cultures sur les zones respec- tives, par exemple à l'aide d'une pipette ou d'un oeillet formé dans un fil Notamment dans le cas de milieux de culture qui font saillie par rapport au porte-objet, comme sur les figures 3 et 4, l'ensemence- ment peut également avoir lieu par application à la brosse et passage d'un rouleau avec l'échantillon à étudier. Après l'incubation, - l'évaluation a lieu de façon habituelle. Pour une évaluation plus facile, il est tout à fait possible de colorer complètement ou partiellement le porte-objet, pour obtenir de ce fait un meilleur contraste de couleurs. REVENDICATIONS 1 Porte-milieu de culture préfabriqué pour la détermination qualitative et quantitative de micro- organismes, constitué par: a) un porte-objet revêtu d'un ou plusieurs milieux de culture, qui b) est couplé rigidement à un couvercle, et c) se trouve dans un récipient transparent, pouvant être fermé rigidement par le couvercle, pen- dant le stockage et pendant l'incubation, caractérisé en ce que le porteobjet revêtu (a) est entouré par une enveloppe (d), pouvant être enlevée facilement avant l'ensemencement, pendant le stockage. 2 Porte-milieu de culture suivant la revendica- tion 1, caractérisé en ce que l'enveloppe (d) est un manchon rigide et en ce qu'aucun ou seulement un fai- ble volume par rapport au volume total du récipient est laissé libre entre celui-ci et le porte-objet revêtu. 3 Milieu de culture suivant les revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que la section transversale de l'enveloppe (d) est ronde ou polygonale. 4 Milieu de culture suivant l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le porte-objet (a) possède une section transversale poly- gonale ou rectangulaire ou respectivement à plusieurs segments ou en forme de croix.