Brevet FR2499855A1 — publié le 19820820

La présente invention concerne un procédé de production de substances nouvelles à action carcinostatique et immuno-stimulante, qui consiste à cultiver, dans des conditions anaérobies, des bactéries productrices de substances dites "TF-2", appartenant au genre Fusobacte- rium, et à obtenir les substances TF-2 à partir de cette culture ou de son fluide surnageant (ladite substance nouvelle étant appelée ci-après "substance TF-2"). L'inven- tion concerne également les substances TF-2 obtenues (incluant ci-après les substances TF-210, 220, 230, 240, 250, 300 (310, 320, 330), 340 et 350), ainsi qu'un agent carcinostatique contenant de telles substances). Au cours des dernières années, on a commencé à utiliser d'une manière extensive, comme remède pour les patients atteints de divers types de cancer, une substance permettant d'améliorer la fonction immunologique du sujet et d'obtenir un effet carcinostatique avec l'aide de cette fonction immunologique. Comme agents antitumoraux utilisés pour un tel traitement, il existe des composants connus obtenus à partir d'organismes de diverses bactéries ou par cultures de divers bactéries ou de polysaccharides obtenus à partir d'organismes de fruits du genre Basidiomycetes ou à partir d'organismes de champignons de culture de ces derniers. Les auteurs de la présente invention ont étudié l'activité pharmacologique d'un fluide surnageant obtenu par culture de bactéries appartenant au genre Fusobacterium, et en éliminant les organismes de la culture, et ont découvert qu'un composant spécifique obtenu à partir de ce fluide surnageant avait une action carcinostatique; que ledit composant avait une action carcinostatique indirecte en augmentant l'activité antitumorale induite par le sujet ou bien l'immunité du sujet, et en utilisant cette immunité à titre complémentaire; et que ledit composant avait une très faible toxicité et pouvait être obtenu également par traitement de la culture. C'est un objectif de la présente invention de procurer un procédé consistant à cultiver des bactéries appartenant au genre Fusobacterium dans des conditions anaérobies, et à recueillir les nouvelles substances TF-2 à action carcinostatique et immuno-stimulante à partir de la culture résultante ou de son fluide surnageant. Un autre objectif de la présente invention est de procurer lesdites substances TF-2. Encore un autre objectif de la présente invention est de procurer un agent carcinostatique contenant lesdites substances TF-2. D'autres objectifs et avantages de la présente invention ressortiront de la description qui va suivre. Dans la présente invention, on peut utiliser comme bactéries n'importe quelle bactérie productrice de substances TF-2 appartenant au genre Fusobacterium, et à titre d'exemple, on utilise de préférence Fusobacterium nucleatum. Concrètement, on utilise Fusobacterium nucleatum TF-031 (FERM 5077; ATCC 31647) et des souches qui sont considérées comme ayant lesdites propriétés dans l'état actuel de nos connaissances en microbiologie, à savoir des espèces mutantes spontanées ou des souches artificielle- ment modifiées. Les propriétés bactériologiques de Fusobacterium nucleatum TF-031 sont les suivantes: (I) Forme (1) Forme des cellules: fuselée (Figure 1) (2) Polymorphisme des cellules: absence (3) Motilité: absence (4) Spores: absence (5) Coloration gramme: Gram-négatifs (6) Résistance aux acides: négative (II) Conditions de croissance dans un milieu de culture (1) TF-a plaque de gélose et milieu de culture incliné Forme externe: ronde Taille: 1 mm environ Protubérance: forme hémisphérique Structure: du type "goutte" Surface: lisse Bords: lisse Couleurs: blanc laiteux jaunâtre Transparence: opaque (2) TF-a milieu de culture liquide Degré de croissance: vigoureux Turbidité: coagulim Précipité: néant Croissance de surface: néant, pas de croissance sur une profondeur de 5 mm environ Gaz: néant (III) Propriétés physiologiques (1) Production d'acide sulfhydrique: + (2) Réduction des nitrates: - (3) Production d'acide butyrique: + (4) Production d'indole: + (5) Uréase: - (6) Catalase: - (7) Hydrolyse de l'amidon: - (8) Comportement à l'oxygène: anaérobie (9) Production d'ammoniac: + (10) Production de gaz carbonique: + (11) Domaine de croissance: pH 5,0 - 8,5, température 300 - 45oC (12) Production de gaz à partir des saccharides: Larabinose (-), D-xylose (-), D-glucose (-), D-mannose (-), D-fructose (-), D-galactose (-), sucre de malt (-), sucre (-), tréhalose t-), sorbitol (), mannitol (-), inositol (-), glycérol (-), amidon (-) On prépare les nouvelles substances TF-2 selon l'invention, par exemple, de la manière suivante. Culture de bactéries productrices de substances TF-2 appartenant à Fusobacterium nucleatum Culture ou son fluide surnageant Solvant organique hydrophile - Fraction soluble ó Séparation Précipité Eau 4 Fractionnement en fonction du pH Récupération d'une fraction insoluble dans l'eau au voisinage de pH 4 - TF-210 Récupération d'une fraction insoluble dans l'eau au voisinage de pH 6- TF-220 Récupération d'une fraction soluble dans l'eau au voisinage de pH 6 mais insoluble dans l'eau au voisinage de pH 4.> TF-230 Récupération d'une fraction soluble dans l'eau au voisinage de pH 4 mais insoluble dans l'eau au voisinage de pH 2 > TF-240 Récupération d'une fraction soluble dans l'eau au voisinage de pH 2 - > TF-250 TF-210 TF-220 TF-230 TF-240 TF-250 TF-300 TF-340 TF-350 NO To TF-310 TF-320 TF-330 %A Ln a Elimination des protéines Le procédé de préparation sus-mentionné est illustré ci-dessous de la façon suivante (1) Culture de bactéries On procède à la culture de bactéries appartenant au genre Fusobacterium par un procédé classique de culture des bactéries anaérobies. Autrement dit, on ajuste à un pH de 6 à 8,5, de préférence de 6,5 à 7,5, un milieu de culture contenant une source d'azote formée par exemple par des extraits de cervelles et de coeurs de bovin diverses peptones, ou une source similaire; une source de vitamines telles qu'un extrait de levure ou une source similaire; un sel minéral tel que le chlorure de sodium ou un sel similaire; une source de carbone telle que le glucose, le lactose ou une source similaire; un agent réducteur tel que la L-cystine le sulfite de sodium, le thioglycolate ou un agent similaire, et on inocule les bactéries au milieu de culture, après quoi on procè- de à la culture en régime permanent dans des conditions anaérobies à 30420C, de préférence à 32-371C, pendant 1 à 5 jours, de préférence pendant 24 à 96 heures. En particulier, il est souhaitable d'utiliser le milieu de culture décrit au Tableau 1 (ci-après appelé 'milieu de culture TF"). Cependant, l'infusion de coeur et de cervelle, qui est un extrait de cervelle et de coeur de bovin n'est pas toujours nécessaire comme source de carbone et peut éventuellement être remplacée par une infusion de coeur qui est un extrait de coeur de bovin, un extrait de boeuf, un extrait de poisson, une liqueur de macération de mais, ou un produit similaire. Parmi les diverses peptones, la peptone de protéose et la peptone de phytone ne sont pas toujours nécessaires, et la peptone de trypticase peut éventuellement être remplacée par une polypeptone. Lorsque que l'on n'utilise pas de gélose, il est souhaitable de procéder en agitant la culture. Tableau 1 Constituants du milieu de culture TF-a (g/l) Peptone de trypticase 17 Peptone de phytone 3 Peptone de protéose 10 Infusion de coeur et de 35 cervelle Infusion de coeur - Extrait de levure 3 Chlorure de sodium 7,5 Glucose 6 Lactose 5 L-Cystine 0,25 Sulfite de 0,1 sodium Thioglycolate 0,5 TF-b TF-c TF-d TF-e TF-f 17 17 17 -17 17 3 1.5 - 5 - - - 17,5 - - - - 25 20 10 15 3 3 7,5 0,5 0,1 7,5 0,5 0,1 7,5 0,1 0,5 0,5 0,5 7,5 0,1 7,5 0,1 0,5 0,5 0 ou 0 ou 0,7 0,7 0 ou 0 ou 0 ou 0 ou 0,7 0,7 0,7 0,7 Gélose (2) Rcupération d'un fluide surnageant à partir de la culture (élimination des organismes) On élimine les organismes de la culture obtenus ci-dessus pour obtenir un fluide surnageant. Pour éliminer les organismes, on peut utiliser un procédé classique, par exemple une centrifugation et une filtration à l'aide d'un adjuvant de filtration, tel que le "Hyflo-Super- Cel", et en particulier, un procédé de centrifugation est préférable du point de vue du mode opératoire, du degré d'élimination des organismes, et du rendement en fluide surnageant. (3) Récupération de la substance carcinostatique TF-2 (i)(a) On ajoute un solvant organique hydrophile au fluide surnageant obtenu ci-dessus ou à la culture elle- même, et on recueille le précipité formé. A ce moment là, on ajuste de préférence le fluide surnageant ou la culture à un pH de 1,5 à 7, de préférence au voisinage de pH 2 (pH 1,5 à 2,5). Le solvant organique hydrophile peut être, par exemple, un alcool tel que l'éthanol, le méthanol ou un alcool similaire, une cétone telle que l'acétone ou une cétone similaire, encore que les alcools, en particulier l'éthanol, donnent les meilleurs résultats. Il convient d'ajouter le solvant organique hydrophile de telle sorte que sa concentration soit de 30 à 80 %, en particulier de 50 à 80 %, en volume. Après avoir ajouté le solvant organique hydrophile, on laisse reposer le mélange résultant à basse température, de préférence à 51C environ, pendant une période de quelques heures à plusieurs jours, de façon à compléter la formation du précipité. On sépare le précipité ainsi formé par des modes opératoires classiques tels que décantation, centrifugation, filtration, etc. (b) Au précipité séparé ci-dessus, on ajoute de l'eau, généralement dans une quantité représentant de 5 à 20 fois celle du précipité, et on fractionne le précipité en fonction du pH. Plus précisément, on réalise cette opération de la façon suivante: (b-l) On ajuste à un pH de 7,5 à 8 le mélange précédent du précipité et de l'eau. Après élimination, le cas échéant, de la partie insoluble, on ajuste le mélange au voisinage de pH 4 (3,5 à 4,5) . On sépare l'une de l'autre la fraction insoluble dans l'eau et la fraction soluble dans l'eau résultantes, à l'aide d'un procédé classique tel que centrifugation, filtration, etc. La fraction insoluble dans l'eau ainsi obtenue (TF-210) possède les propriétés indiquées au Tableau 2. (b-2) Séparément, au précipité obtenu au paragraphe (a) ci-dessus, on ajoute de l'eau, généralement dans une quantité représentant de 5 à 20 fois celle du précipité. On ajuste le mélange à un pH de 7,5 à 8. Après élimination, le cas échéant, de la fraction insoluble, on ajuste le mélange au voisinage de pH 6 (5,5 à 6,5). On sépare l'une de l'autre la fraction insoluble dans l'eau et la fraction soluble dans l'eau résultantes, par un procédé classique tel que centrifugation, filtration, etc. La fraction insoluble dans l'eau ainsi obtenue (TF-220) possède les propriétés indiquées au Tableau 2. (b-3) On ajuste au voisinage de pH 4 (3,5 à 4,5) la fraction soluble dans l'eau séparée au paragraphe (b- 2) ci-dessus. On sépare l'un de l'autre le précipité et la fraction soluble dans l'eau obtenus, par un procédé classique tel que centrifugation, filtration, etc. Le précipité ainsi obtenu (TF-230) possède les propriétés indiquées au Tableau 2. (b-4) On ajuste au voisinage de pH 2 (1,5 à 2,5) la fraction soluble dans l'eau séparée au paragraphe (b- 1) ou (b-3) ci-dessus, et il se forme alors un précipité. On sépare ce précipité de sa fraction soluble dans l'eau par un procédé classique tel que centrifugation, filtration, etc. Le précipité ainsi obtenu (TF-240) possède les propriétés indiquées au Tableau 2. (b-5) Au précipité obtenu dans le paragraphe (a) ci- dessus, on ajoute de l'eau, généralement dans une quantité représentant de 5 à 20 fois celle du précipité, et on ajuste le pH du mélange à une valeur de 7,5 à 8 par exemple. On réajuste ensuite le pH au voisinage de pH 2 (1,5 à 2,5). A la fraction soluble dans l'eau ainsi obtenue ou à la fraction soluble dans l'eau séparée au paragraphe (b-4) ci-dessus, on ajoute, le cas échéant après avoir concentré la quantité de la fraction soluble dans l'eau au tiers ou au septième, un solvant organique * hydrophile, de préférence un alcool, de telle sorte que sa concentration devienne égale à 20 à 80 %, de préférence 20 à 60 %, en volume. La récupération du précipité résultant donne la substance TF-250. La substance carcinosta- tique TF-250 ainsi obtenue possède les propriétés indiquées au Tableau 2. On peut faire subir à chacune des substances carcinostatiques TF-210, TF-220, TF-230, TF-240 et TF- 250 ainsi obtenues le même fractionnement répété à plusieurs reprises, suivant le pH nécessaire à la purification. On peut transformer chacune des substances carcinostatiques ainsi obtenues, par un procédé classique, en des sels pharmaceutiquement acceptables tels que les sels de métaux alcalins, par exemple les sels de sodium, les sels de potassium et les sels similaires, et en sels de métaux alcalino-terreux, par exemple en sels de magné- sium, de calcium, et en sels similaires. (ii) On fait subir un traitement d'élimination des protéines à chacune des fractions à action carcinostatique obtenues comme mentionné au paragraphe (i) ci-dessus, à savoir TF-210, TF-220, TF-230, TF-240 et TF- 250, selon un procédé classique, pour obtenir les substances TF- 300 (TF-310, TF-320 et TF-330), TF-340 et TF-350. Pour ce traitement d'élimination des protéines, on peut avoir recours à des procédés connus dans la technique, et l'un de ceci que l'on préfère particulièrement est un procédé de décomposition par des enzymes protéolytiques. Quand on veut procéder à l'élimination des protéines par un traitement par une enzyme protéolytique, il suffit de dissoudre ou de mettre en suspension dans de l'eau ou dans une solution tampon chacune des fractions à action carcinostatique obtenues dans la section (i) ci-dessus, d'ajouter une enzyme de décomposition des protéines à la solution ou suspension résultante, et de procéder au traitement par l'enzyme d'une manière classique. Comme enzymes protéolytiques, on peut mentionner la pronase, la papaine, la trypsine, la chiitiotrypsine, etc. On préfère la pronase et la tryspine. Il est préférable que, avant ou pendant le traitement par l'enzyme, la solution acqueuse soit ajustée et maintenue à un pH de 7 à 8. Pour cela on peut utiliser de la soude, de la potasse, du carbonate de sodium, du bicarbonate de sodium ou une base similaire. Afin d'empêcher la putréfac- tion du mélange réactionnel pendant le traitement par l'enzyme, il est souhaitable d'ajouter une petite quantité d'un solvant organique tel que le chloroforme, le toluène ou un solvant similaire. On utilise habituellement l'enzyme dans une proportion de 1 à 2 % environ en poids par rapport au poids de la poudre (solide) à laquelle on veut faire subir le traitement par l'enzyme. On mène habituellement le traitement par l'enzyme décrit ci-dessus à une température de 30 à 400C pendant 1 à 72 heures, de préférence pendant 24 à 48 heures. On peut également le mener en ajoutant d'abord, par exemple, 1 % environ en poids d'une enzyme à une poudre (solide), et en faisant subir à cette poudre (solide) un traitement par l'enzyme pendant 1 à 24 heures, et en ajoutant ensuite à nouveau 1 % environ en poids de l'enzyme pour poursuivre le traitement. A la fin du traitement par l'enzyme décrit ci- dessus, on élimine les insolubles, s'il y a lieu, par un mode opératoire tel que centrifugation, filtration, etc, après quoi on recueille de la fraction soluble dans l'eau ainsi obtenue des fractions respectives de substances carcinostatiques TF-300 (TF-310, TF-320, TF-330), TF-340 et TF350. De la sorte, on peut obtenir TF-310 à partir de TF-210, TF-320 à partir de TF-220, TF-330 à partir de TF-230, TF-340 à partir de TF-240 et TF-350 à partir de TF-250. On peut procéder à l'isolement des fractions de ces substances TF-300 (TF-310, TF-320, TF-330), TF-340 et TF-350 par au moins un fractionnement en fonction du pH, précipitation séparée à partir d'un solvant organique hydrophile, fractionnement avec un échangeur d'ions, ultrafiltration, etc. Ou bien, on peut répéter plusieurs fois une ou plusieurs de ces opérations. Plus précisément, on obtient les substances carcinostatiques selon la présente invention TF- 300 (TF-310, TF-320, TF-330), TF-340 et TF-350 en ajustant le pH de la fraction soluble dans l'eau ci-dessus à un pH qui de préférence n'est pas supérieur à 2,5 (le cas échéant, on peut ajouter de l'acide trichloracétique), en éliminant le précipité résultant, en ajoutant à la fraction soluble un solvant organique hydrophile tel qu'un alcool de telle sorte que sa concentration passe à 30- 80 %, de préférence 60 - 80 %, en volume, en recueillant le précipité résultant qui est la fraction de la substance recherchée, en traitant, s'il y a lieu, ce précipité par une puissante résine d'échange d'anions telle que le type "Dowex 1" (marque déposée), 'Amberlite IRA-400" (marque déposée), ou bien une résine similaire (on peut répéter ce traitement plusieurs fois) pour recueillir les fractions non adsorbées, en faisant subir, s'il y a lieu, à ces fractions une ultra-filtration (par exemple sur "Ultrafilter UK-50" de Toyo (seuil de coupure nominal de poids moléculaire: 50.000) ou sur "Ultrafilter UK-2000 de Toyo (seuil de coupure de poids moléculaire noainal 200.000)), puis en leur faisant subir un traitement de concentration, d'élimination des sels, de séchage ou de précipitation à partir d'un solvant organique hydrophile, ou bien un traitement similaire. Les substances carcinostatiques ainsi obtenues TF-300 (TF-310, TF-320, TF-330), TF-340 et TF-350 possèdent les propriétés indiquées au Tableau 2. Les substances carcinostatiques TF-300 (TF-310, TF-320, TF-330), TF-340 et TF-350 peuvent éventuellement être transformées en sels pharmaceutiquement acceptables selon un procédé classique. Plus précisément, on peut mentionner, à titre d'exemple, les sels des métaux alcalins tels que les sels de sodium, le sel de potassium et les sels similaires, et les sels des métaux alcalino- terreux tels que les sels de magnésium, les sels de calcium, et les similaires, en tant que sels pharmaceutique- ment acceptables en question. Tableau 2 Propr ié- s Apparence Action pharmacologique Solubilité Fraction TF-210 Poudre blanc Cette fraction inhibait la proliféra- Insoluble dans le mé- brunâtre - tion de la tumeur ascitique d'Ehrlich, thanol,l'éthanol, de la tumeur solide d'Ehrlich, du l'acétone, le benzène, brun clair Sarcome 180 et du Mélanome B-16 chez le chloroforme, la souris, et possédait une action l'acétate d'éthyle et immuno-stimulante l'éther diéthylique TF-220 TF-230 n "._ TF-240 " TF-250 " Soluble dans l'eau et insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique TF-300 Cette fraction inhibait la proliféra- tion de la tumeur ascitique d'Ehrlich, de la tumeur solide d'Ehrlich, du Sarcome 180 et du Mélanome B-16 chez la souris, et possédait une action immuno-stimulante w ré) o no tn us Tableau 2 (suite) Proprié- tés Apparence Action pharmacologique Solubilité Fraction TF-310 Poudre blanc Cette fraction inhibait la proliféra- Soluble dans l'eau et brunâtre - tion de la tumeur ascitique d'Ehrlich, insoluble dans le brun clair de la tumeur solide d'Ehrlich, du méthanol, l'éthanol, Sarcome 180 et du Mélanome B-16 chez l'acétone, le ben- la souris, et possédait une action zène, le chloroforme immuno-stimulante l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique TF-320.. Cette fraction inhibait la proliféra- tion de la tumeur ascitique d'Ehrlich, et du sarcome 180 chez la souris, et possédait une action immuno-stimulante TF-330 - Cette fraction inhibait la proliféra- tion de la tumeur ascitique d'Ehrlich chez la souris et possédait une action immuno-stimulante TF-340 TF-350 " ri No oe au Ln Tableau 2 (suite) \Proprié- Spectres d'absorption Analyse élémentaire tés Point de décompo- d'infra-rouge Pro sition (méthode1 KBr) Fraction (cm) C(%) H(%) N(%) TF-210 Cette fraction ne pré- Le spectre possède des bandes 40-43 5-7 9-10 sentait pas de point de d'absorption au voisinage de fusion net et se décom- 3600-3200, 2950-2920, 1680- posait à 160-235 C 1620, 1550-1510, 1440, 1389, 1240-1220 et 1120-1020 cm TF-220 Cette fraction ne pré- " 40-42 5-7 7-9 sentait pas de point de fusion net et se décom- posait à 160-240 C TF-230 Cette fraction ne pré- 42-45 5-7 10-11 sentait pas de point de fusion net et se décom- posait à 185-225 C TF-240 Cette fraction ne pré- Le spectre possède des bandes 35-38 4-5 12-14 sentait pas de point de d'absorption au voisinage de fusion net et se décom- 3600-3200, 2950-2920, 1680- posait à 200-215 C 1620, 1550-1520, 1410- 1360, 1280-1510, 1060, 960 et 820 cm TF-250 Cette fraction ne pré- Le spectre possède des bandes 30-33 3-5 3-5 sentait pas de point de d'absorption au voisinage de fusion net et se décom- 3600-3200, 2950-2920, 1680- posait à 165-210 C 1620, 1550-1510, 1410- 1380, 1240-1210,1150-1120Lc1080- 1020, 980 et 810 cm Ln ri NO C- o no n M Tableau 2 (suite) ropriéSpectres d'absorption Analyse élémentaire tés Point de décompo- d'infrarouge sition (méthodt KBr) Fraction (cm) C(%) H(%) N(%) TF-300 Cette fraction commen- Le spectre possède des bandes 38-47 5-7 1-4 gait a se décomposer d'absorption au voisinage de a 180 C environ et se 3500-3300, 2920, 2850, 1660- décomposait remarqua- 1620, 1580-1540, 1460-1400, blement au dessus de 1380-1360, 1120, 180-1020, 1950C 970 et 820-800 cm TF-310 " 38-47 5-7 1-4 TF-320 " " 38-47 5-7 1-4 TF-330 " " 38-47 5-7 1-4 TF-340 Cette fraction commen- Le spectre possède des bandes 32-34 4-6 3-5 gait à se décomposer d'absorption au voisinage de a 140 C environ et se 3500-3300, 2920, 2850, 1660- décomposait remarqua- 1640, 1580-1520, 1460-1440, blement au dessus de 1410-1340, 1250-12201 1120- oC 1030, 970 et 835 cm TF-350 Cette fraction commen- Le spectre possède des bandes 34-37 5-6 1-2 gait à se décomposer d'absorption au voisinage de a 110 C environ et se 3500-3300, 2920-2900, 1660- décomposait remarqua- 1630, 1580-1520, 1460-1340, blement au dessus de 1140-1100, 1080-1020, 970 et 1800C 820-800 cm ,. ". _ m - _ _,a,,m, m,, NO co %A Ln Tableau 2 (suite) Proprié- Réaction colorée tés Réaction à Réaction Réaction Réaction Réaction Réaction de Fraction la Ninhydrine de Molisch Phénol-aci- Anthrone-aci- Indole-HC1 Lowry-Folin de sulfurique de sulfurique TF-210 + + + + + TF-220 + + + + + TF-230 + + + + + TF-240 + + + + TF-250 + + + + + TF-300 - + + + + TF-310 - + + + + + TF-320 - + + + + + TF-330 - + + + + + TF-340 - + + + + + TF-350 - + + + + + 1-. ot Lo cw Tableau 2 (suite) Proprié- Spectre d'absorption Teneur en saccharides Teneur en protéines >tés ultraviolet exprimée en glucose et exprimée en albumine de si'um (solution aqueuse de pH7,0) mesurée par la méthode de bovin mesurée par la max (nm) Phénol-acide sulfurique méthode de Lowry-Folin Fraction (%) (%) En limite de spectre TF-210 et au voisinage de 248- env. 5 -env. 25 env. 20 -env. 50 265 nm En limite de spectre TF-220 et au voisinage de 248- env. 5 - env. 20 env, 10 266 nm En limite de spectre TF-230 et au voisinage de 249- en>. 5 - env. 25 env. 30 -env. 60 264 nm En limite de spectre TF-240 et au voisinage de 250- env. 15 - env.35 env. 20 -env. 30 265 nm En limite de spectre TF-250 et au voisinage de 248- env. 60 -env. 80 env. 5 - env. 20 269 nm . En limite de spectre TF-300 et au voisinage de 246- env. 16 -env. 60 env. 10 280 nm . _,. TF-310 " TF-320 j, _, _. Co do c. Ut ln Tableau 2 (suite) Proprié- Spectre d'absorption Teneur en saccharides Teneur en protéines \tés ultraviolet exprimée en glucose et exprimée en albumine de sérum (solution aqueusede pH70) mesurée par la méthode de bovin, mesurée par la max (nm) Phénol-acide sulfurique méthode de Lowry-Folin Fraction (%) (%) En limite de spectre TF-330 et au voisinage de 246- env. 16 - env 60 env.l0 280 nm En limite de spectre TF340 et au voisinage de 250- env. 20 -env. 50 env. 10 265 nm En limite de spectre TF-350 et au voisinage de 245- env.80 -env. 95 env. 10 264 nm Note: * On a procédé aux mesures sur des fractions solubles dans l'eau. h) c. ru Ln ta -20 L'action pharmacologique des substances carcinostati- ques selon la présente invention TF-210, TF-220, TF- 230, TF-240, TF-250, TF-300 (TF-310, TF-320, TF-330), TF-340 et TF-350 est décrite ci-dessous. Dans les essais pharmacologiques suivants, la utilisée était celle obtenue TF-220 était celle obtenue à TF230 était celle utilisée à TF-240 était celle obtenue à TF-250 était celle obtenue à TF-310-1 était celle obtenue substance d'essai TF-210 à l'Exemple 1, la substance l'exemple 3, la substance i l'exemple 5, la substance l'exemple 7, la substance l'exemple 9, la substance à l'exemple 11 (1), la substance TF-310-2 était celle obtenue à l'exemple 18, la substance TF-320 était celle obtenue à l'exemple 12, la substance TF-330 était celle obtenue à l'exemple 13, la substance TF-340 était celle obtenue à l'exemple 19, la substance TF-350 était celle obtenue à l'exemple 24, et la substance TF-300 était celle obtenue aux exemples 11 à 18. (1) Action immuno-stimulante On a utilisé pour chaque groupe trois souris de race ICR (femelles âgées de 6 semaines). On a dissous chacune des substances d'essai dans une solution solide physiologique, et on a administré par voie intrapéritonéale aux souris 0,2 ml de chacune des solutions résultantes. Vingt quatre heures après l'administration, on a injecté par voie intraveineuse dans la queue de chaque souris 0,2 ml d'une suspension de carbone préparée en mélangeant 1 ml d'encre noire pour écriture no 17 de Perikan (fabri- quée par GOnther-Wagner Co.n Ltd.) avec 2 ml d'une solution saline physiologique contenant 3 % en poids de gélatine, et 1 minute, 5 minutes, 10 minutes et 15 minutes après l'injection, on a recueilli de la fosse orbitaire 0,02 ml du sang en utilisant un capillaire d'hématocrite revêtu d'héparine, et on a immédiatement dilué et hémolysé chaque échantillon avec 1,6 mldnesolution aqueuse de carbonate de sodium à 0,1 % en poids. On a fait subir à cette solution une colorimétrie à 675 nm, et on a déterminé l'indice phagocytotique (valeur K) à partir de l'équation de Halpern et al: log C0 - log C = - t - to C0 étant la teneur du sang en poudre de carbone à l'instant t0 et C étant la teneur du sang en poudre de carbone à l'instant t. Aux souris des groupes témoins on a administré 0,2 ml d'une solution saline physiologique. Les résultats sont donnés dans les Tableaux 3 à 5. Tableau 3 Posologie Valeur moyenne Substance (mg/kg) de K TF-210 3 0,1155 + 0,0273 6 0,1198 T 0,0231 TF-220 1,5 0,1087 + 0,0346 3 0,1292 + 0,0289 TF-230 5 0,1028 + 0,0175 0,1194 + 0,0334 TF-240 5 0,1109 + 0,02500,1127 + 0,0496 TF-250 5 0,0865 + 0,0131 0,1120 + 0,0329 -..., Témoin - 0,0348 + 0,0037 Tableau 4 Posologie Valeur moyenne Substance (mg/kg) de K 0,1 0,0580 + 0,0088 TF-310-1 1 0,0776 + 0,0168 TF-320 0,1 0,0468 + 0,0123 _1 0,0715 + 0,0040 TF-330 0,1 0,0601 + 0,0098 1 0,0965 + 0,0102 Témoin - 0,0295 + 0,0007 Note: * On a procédé à l'essai sur un groupe composé de quatre souris Tableau 5 On a procédé à l'essai sur un groupe composé de quatre souris Posologie Valeur moyenne Substance (mg/kg) de K TF-340* 15 0,1292 + 0,0229 0,1001 i 0,0295 TF-350 5 0,0817 + 0,0002 ___ __ 10 0,1453 + 0,0229 Témoins - 0,0408 + 0,0016 Note: * (2) Action carcinostatique (i) Action antitumorale sur la tumeur ascitique d'Ehrlich On a inoculé par voie intrapéritonéale à des souris de race ICR (femelles âgées de 6 semaines) des cellules tumorales ascitiques d'Ehrlich (à raison de 1 x 105 cellules par souris). Ensuite, on a dissous chacune des substances d'essai dans une solution saline physiologique et on a administré par voie intrapéritonéale aux souris 0,2 ml de chacune des solutions résultantes, une fois par jour pendant 7 jours consécutifs à partir du premier jour suivant l'inoculation des cellules tumora- les. Aux groupes témoins, on a administré 0,2 ml d'une solution saline physiologique, de la même manière que ci-dessus. Les résultats sont donnés dans les Tableaux 6 et 7, Nombre de jours de survie des souris dans un groupe auquel on a administré la substance d'essai T/C x 100 du groupe témoin - TABLEAU 6 Substance Posologie Nombre moyen de jours T/C Proportion de Taux de guérison (mg/kg x nombre de survie (%) survivants au bout complète d'administrations) de 30 jours TF-2101 0,7 x 7 >27 2 5,7 >161 8/10 7/10 3,5 x 7 >26>8 + 4,9 >159 7/10 6/10 TF-220 0,3 x 7 >22,8 + 6,1 >135 2/8 1/8 1,5 x 7 >29,1 + 23 >173 7/8 5/8 1 x 7 >29,9 0,3 >177 7/8 7/8 TF230 5 x 7 >28,3 + 4 6 >168 7/8 7/8 TF-1 x 7 >23,2 5,6 >138 3/8 2/8 x 7 > 24,5 + 7,5 >146 5/8 5/8 1 x 7 >20,3 6,4 >121 2/8 2/8 TF-250 5 x 7 >26,6 + 5,5 >158 5/8 5/8 ITémoin -16 8 2 6 100 0/8 0/8 u1 f %O CO Ln TABLEAU 7 ! Substance Posologie Nombre moyen de jours T/C Proportion de Taux de guérison (mg/kg x nombre de survie (%) survivants au complète d'administrations) bout de 30 jours TF-3 1 0,O1 x 7 >27,9 + 4,5 >166 4/8 4/8 TF-310-1 48 11x 7 >28,6 2,3 >170 6/8 6/8 TF-320 0,5 x 7 >29,0 + 2,6 >172 7/8 7/8 _1 x 7 >28,1 + 4,9 >167 7/8 7/8 .,,..,...,..DTD: TF-330 0/5 x 7 >29,8 + 0,6 >177 7/8 7/8 1 x 7 >29/6 + 09 >176 7/8 7/8 TF-3140 1 x 7 >28,3 + 4 5 >168 7/8 5/8 x7 >24,0+ 9,14 >143 5/8 5/8 TF- 350 1x 7 19>6 + 4,1 117 0/8 0/8 -5 X7 ?>30,0 + 0,0 >179 8/8 8/8 Témoin 16,8 2,3 100 o/8 0/8 _ I 16, + -.t b. Co nA tN 4w (ii) Action antitumorale contre les cellules de Sarcome-180 (a) On a transplanté par voie intrapéritonéale des cellules de Sarcome-180 à des souris de race ICR (femelles âgées de 6 semaines) à une dose de 1 x 105 cellules par souris. Ensuite, on a dissous chacune des substances d'essai dans une solution saline physiologique, et on a administré par voie intrapéritonéale aux souris 0,2 ml de chacune des solutions résultantes, une fois par jour pendant sept jours consécutifs à partir du premier jour suivant la transplantation des cellules de carcinome. Au groupe témoin, on a administré 0,2 ml d'une solution saline physiologique de la même manière que précédemment. Les résultats sont donnés dans le Tableau 8. TABLEAU 8 Substance Posologie Nombre moyens de jQurs T/C Proportion de Taux de guérison (mg/kg x nombre de survie (%) survivants au complète bout de 30 jours d'administrations) ,,,,,,..., ,- TF-210 3,5 x 7 >27,2 ' 5,6>183 4/5 4/5 TF_210 7 x 7 >30,0 0,0 >203 5/5 5/5 ,, ,,,,,,,,,,,,,,.,,.,., T-220 0,3 x 7 >26,3 + 6 0 >177 2/5 2/5 TF-220 1,5 x 7 >30>0 + 00 >203 5/5 5/5 _ _.0,0 _______ _ _,. * TF-230 1 x 7 >29,2 + 1,6 >197 1l/54/5 x 7 >24,8 9,9 >168 3/5 2/5 TF240 1x7 >21y4 7,3 >145 2/5 1/5 x 7 >30,0 00 >203 5/5 5/5 1 x 7 >29,0 2,0 >196 11/5 4/5 TF-250 5 x 7 >28 4+ 3/2 >192 4/5 2/5 Témo i, ,,1,, ,.. ......, Témoin 14,8 + 2/3 100.. f __5 ru do Co VI tn (b) On a transplanté par voie sous-cutanée des cellules de Sarcome 180 au niveau de l'aisselle de souris de race ICR (femelles âgées de 6 semaines) à une dose de 1 x 107 cellules par souris. On a ensuite dissous chacune des substances d'essai dans une solution saline physiologique ou une solution aqueuse de glucose à 5 %, et on a administré, par voie intraveineuse ou intramusculaire, 0,2 ml de chacune des solutions résultantes, aux souris, une fois par jour pendant 7 jours consécutifs à partir du premier jour suivant la transplantation des cellules de carcinome. Aux groupes témoins, on a administré 0,2 ml d'une solution aqueuse de glucose à 5 % ou d'une solution saline physiologique, de la même manière que précédemment. Les résultats sont donnés..DTD: dans le Tableau 8-(2). TABLEAU 8-(2) q 1 I Substance Posologie (mg/kg Liquide dans lequel la Poids de la tumeur (g) -\- Nombre d'ad- substance a été dissoute T/C (%) d'adm. ministrat.) _ _ iV 01 X 7 Solution saline' 0,29 + 0115 20 TF-310-1 physiologique im 0 1 x 7 ". 0/ 86 0 10 60 Témoin _ _,1t 45 0, 31 100 iv 0 1 x 7. 1,54 + 0 77 31 im 0/1 x 7 " 3,50+ 0145 71 TF-320 _ T.2 Solution aqueuse de iV 0!1 X 7 glucose a 5 % 1/ 67 + 0158 34 im 0/1 x 7 2) 38 + 0;112 118 Témoin _ _" 1.1'4/94 + 2/ 42 100 0, 001X7 " 2)67 0120 51 0,005x7 " 2J39 0,56 _16 TF-310-2 iv 0 01 x7 " 2 33 0 26 44 0o05 x7 " 1,31 0,26 25 0,1 x 7 k 1,05 0 21 t 20 T'-mojirl _ fi " 5/24 + 04 49 I4 100 _ _____.____ I = ___________________ _ _, _______-_______-__________ _L_ _ 0 w C> ru co VI Ln TABLEAU 8-(2) (suite Les résultats précédents concernant la substance TF-310-1 montrent les résultats obtenus le septième jour suivant la transplantation des cellules de Sarcome 180. Les résultats concernant les substances. TF-320 et TF-310-2 montrent les résultats au quatorzième jour suivant la transplantation des cellules de Sarcome 180. Nà r'> Co Un (iii) Action antitumorale contre la tumeur solide d'Ehrlich. On a transplanté par voie sous-cutanée des cellules tumorales d'Ehrlich dans l'aisselle de souris de race ICR (femelles âgées de six semaines) à une dose de 4 x 106 cellules par souris. On a ensuite dissous chacune des substances d'essai dans une solution saline physiologique ou dans une solution aqueuse de glucose à 5 À, et on a administré 0,2 ml de chacune des solutions résultantes, par voie intrapéritonéale, aux souris, une fois par jour pendant sept jours consécutifs à partir du premier jour suivant la transplantation des cellules tumorales, ou bien une fois tous les deux jours pendant dix jours à partir du huitième jour suivant la transplantation des cellules tumorales. Aux groupes témoins, on a administré 0,2 ml d'une solution saline physiologique ou d'une solution aqueuse de glucose à 5 %, de la même manière que précédemment. On a déterminé le poids de chaque tumeur. On procédait à la détermination du poids de la tumeur en mesurant le grand diamètre (a mm) et le petit diamètre (b mm) au moyen de compas, et en remplaçant a et b par les valeurs obtenues dans l'équation suivante a x b2-Mg Poids de la tumeur = 2 (mg2 Les résultats sont donnés dans les Tableaux 9-(1) et 9-(2). ep TABLEAU 9-(1) w w ru CO Co 6n Substance Posologie Jour de Jour 14 * (mg/kg x nombre l'administration d'administrations) Poids de la T/C tumeur (g)(%) TF-210 35 x 7 1,96 + 0,7 29 TF-210 7 x 7 2,62 + 1,9 38 3 X 7 Jour 1, 2, 3, 4; 30 + 2,1 62 TF- 220 TF-220 4, 53, 6, 7 6 x 7 ' 6 2,89 + 1,2 42 x 7 2/63 + 1 22 38 TF-230 x 7 2,04 + 0,66 29 x 7 I,07 + 0,75 59 TF-240 x 7 4/02 + 166 59 x 7 3,10 + 1,01 46 TF-250 x 7 319 1,26 47 Témoin 6 82 + 1 1 100 TABLEAU 9-(2) T Substance Posologie Jour de Jour 15 ** (mg/kg x nombre l'administra- d'administra- tion Poids de la tumeur (g)T/C (%) tions) TF-310-t 1 x 5 jour 8, 10, 4;78 + 2,01 55 12, 14, 16 Témoin 8, 70 + 2) 03 100 w Note: On a utilisé les substances TF-210 à TF250 après les avoir dissoutes dans une solution saline physiologique. On a utilisé la substance TF-310-1 en solution dans une solution aqueuse de glucose à 5 %. *,** Jour o on a déterminé le poids de la tumeur. N a oe en (iv) Action antitumorale contre les cellules de mélanome B-16 (a) On a transplanté par voie sous-cutanée des cellules de mélanome B-16 dans l'aisselle de souris de race BDF1 (mâles âgés de 7 semaines) à une dose de 1 x 106 cellules par souris. On a ensuite dissous chacune des substances d'essai dans une solution saline physiologique, et on a administré par voie intrapéritonéale 0,2 ml de chacune des solutions résultantes aux souris une fois par jour pendant sept jours consécutifs à partir du premier jour suivant la transplantation des cellules tumorales. Aux groupes témoins, on a administré 0,2 ml d'une solution saline physiologique, de la même manière que précédemment. On a déterminé les poids des tumeurs au 17ème ou au 23ème jour suivant la transplantation des cellules tumorales. La méthode de détermination était la même que dans la section (iii) ci- dessus. Les résultats sont donnés dans le Tableau 10. TABLEAU 10 Note: les poids moyens des tumeurs correspondant aux substances TF-210 à TF-250 étaient déterminés au 17ème jour suivant la transplanta- tion des cellules tumorales. Le poids moyen de la tumeur correspondant à la substance TF-310-1 était déterminé le 23ème jour après la transplantation des cellules tumorales. Substance Posologie (mg/kg Poids moyen de la x nombre d'adminis-tumeur (g) T/C (%) trations) TF-210 7 x 7 3,07 0,7 64 TF-220 1,5 x 7 3,92 + 2,29 82 3 x 7 3,69 0181 77 TF-230 5 x 7 3121 0,64 67 x 7 3,71 1;08 77 TF2110 5 x 7 3,78 1,26 79 x 7 4,00 1,36 84 .. ,.,..DTD: TF-250 5 x 7 2>97 + 0,73 62 x 7 2t75 + 0;67 58 Témoin - 4,76 + 0,68 100 TF-310-1 3 x 7 253 1,61 63 Témoin 4- 0 85 100 __________...... __ _ _ _ _ _ _ _,,, 1 0 - 085 __ _ __ _ _ M o o oe tn (b) On a transplanté par vois sous-cutanée des cellules de mélanome B-16 dans l'aisselle de souris de race BDF1 (mâles âgés de six semaines) à une dose de 1 x 106 cellules par souris. On a ensuite dissous la substance d'essai dans une solution aqueuse de glucose à 5 %, et on a administré 0,2 ml de la solution résultante, simultanément par voie intratumorale et par voie intrapéritonéale, une fois tous les deux jours pendant douze jours à partir du treizième jour suivant la transplantation des cellules tumorales. A chaque groupe témoin, on a administré 0,2 ml d'une solution aqueuse de glucose à 5 %, de la même manière que précédemment. Les résultats sont donnés dans le Tableau 10-(2). TABLEAU 10-(2) Co Le poids de la tumeur était mesuré le 23ème jour. o 1J> o %U1 %;9 (3) Toxicité aiguë Les valeurs de la DL50 pour les souris (race ICR, femelles âgées de 6 semaines, administration intraveineuse) sont indiquées dans le Tableau 12 ci-dessous. TABLEAU 12 Substance _DL50 (mg/kg) TF-210 >100 J TF-220 >200 X TF-230 >100 TF-240 >200 TF-250 >200 TF-300 > 10 TF-340 >200 TF-350 >200 Comme le mettent en évidence les expériences pharmacologiques susmentionnées, les substances TF-2 selon la présente invention sont utilisables comme agents carcinostatiques, on peut s'attendre à ce qu'elles possèdent une action contre diverses affections cancéreuses, et on peut s'attendre à ce qu'elles possèdent une activité remarquable en particulier contre les cancers "solides". Toutes les substances TF-2 selon l'invention ont un effet excellent. On peut utiliser les substances TF-2 selon l'invention après les avoir mises sous diverses formes pharmaceutiques telles que médicaments oraux, injections, suppositoires, ou formes similaires, mais on les utilise de préférence sous la forme pharmaceutique d'une injection. Lorsqu'on les utilise comme médicaments oraux, ces médicaments peuvent éventuellement contenir divers excipients, et peuvent éventuellement être mis sous la forme de capsules, de comprimés, de poudres, ou de granulés. Lorsqu'on les utilise sous forme d'injections, ces injections peuvent être, au choix, des injections sous-cutanées, des injections intra- musculaires, et des injections intraveineuses, et on les utilise sous la forme d'une suspension, d'une solution, ou d'une poudre que l'on dissout dans une solution saline ou dans une solution contenant du glucose ou un anesthésique local au moment de l'emploi. On choisit de manière appropriée la posologie des substances TF-2 (TF-210, 220, 230, 240, 250, 300 intraveineuse ou par injection dans la partie malade. On va expliquer l'invention plus en détail ci- dessous en se référant aux exemples et aux dessins ci-joints, dessins sur lesquels la Figure 1 représente une photographie prise au microscope indiquant la forme de Fusobacterium nucleatum TF-031 utilisée dans cette invention; la Figure 2 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-210 obtenue à l'Exemple 1, que l'on trouvera ci-dessous; La Figure 3 représente un spectre d'absorption ultra- violette de ladite substance; la Figure 4 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique obtenue à l'Exemple 3, que l'on trouvera plus loin; la Figure 5 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; la Figure 6 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-230 obtenue à l'Exemple 5, que l'on trouvera plus loin; la Figure 7 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; la Figure 8 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-240 obtenue à l'Exemple 7, que l'on trouvera plus loin; la Figure 9 représente un spectre d'absorption ultra- violette de ladite substance; la Figure représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-250 obtenue à l'Exemple 9, que l'on trouvera plus loin; la Figure 11 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; la Figure 12 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-310 obtenue à l'Exemple 11, que l'on trouvera plus loin; la Figure 13 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; la Figure 14 représente un chromatogramme en phase liquide à haute performance de ladite substance; La Figure 15 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcino- statique TF-320 obtenue à l'Exemple 12, que l'on trouvera plus loin; la Figure 16 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; la Figure 17 représente un chromatogramme en phase liquide à haute performance de ladite substance; la Figure 18 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-330 obtenue à l'Exemple 13, que l'on trouvera plus loin; la Figure 19 représente un spectre d'absorption ultra- violette de ladite substance; la Figure 20 représente un chromatogramme en phase liquide à haute performance de ladite substance; la Figure 21 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-330 (purifiée) obtenue à l'Exemple 13, que l'on trouvera plus loin; la Figure 22 représente un spectre d'absorption ultra- violette de ladite substance; la Figure 23 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcino- statique TF-310 (purifiée) obtenue à l'Exemple 18, que l'on trouvera plus loin; la Figure 24 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; la Figure représente un chromatogramme en phase liquide à haute performance de ladite substance; la Figure 26 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcinostatique TF-340 obtenue à l'Exemple 19, que l'on trouvera plus loin; la Figure 27 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; la Figure 28 représente un chromatogramme en phase liquide à haute performance de ladite substance; la Figure 29 représente un spectre d'absorption infrarouge de la substance carcino- statique TF-350 obtenue à l'Exemple 24, que l'on trouvera plus loin; la Figure 30 représente un spectre d'absorption ultra-violette de ladite substance; et la Figure 31 représente un chromatogramme en phase liquide à haute performance de ladite substance. EXEMPLE 1 (1) Dans un fermenteur de 10 litres (fabriqué par Marubishi Rika Kenkyusho), on a placé 8 litres d'un milieu de culture TF-e renfermant 17 g de peptone de trypticase, 10 g d'infusion de coeur, 3 g d'extrait de levure, 7,5 g de chlorure de sodium, 12 g de glucose, 10 g de lactose, 0, 1 g de sulfite de sodium et 0,5 g de thioglycolate de sodium, par litre d'eau distillée. On a stérilisé ce milieu de culture pendant 30 minutes à 120'C. Après avoir refroidi le milieu de culture, on y a fait passer de l'azote gazeux à un débit de 100 ml/mn pendant une heure. Dans ce milieu de culture on a inoculé un litre d'une solution de pré-culture de Fusobacterium nucleatum TF-031 (FERM-5077, ATCC-31647) préparée au préalable par culture de celle-ci dans un milieu de culture TF-e ayant la même composition que ci-dessus. On a cultivé les cellules pendant trois jours à 370C en agitant (30 tours par minute) tout en introduisant de l'azote gazeux à un débit de 65 ml/mn. A la fin de la culture, on a ajouté à la culture 160 g de "Celite" et 80 g de poudre de cellulose, et on a agité et filtré le mélange sous pression réduite pour obtenir 7,8 litres d'un fluide surnageant, dépourvu de bactéries, de la culture. (2) A 7,8 litres du liquide surnageant ci-dessus, on a ajouté 117 ml d'acide chlorhydrique concentré pour ajuster le pH du liquide surnageant à 2,0, après quoi on lui a ajouté 11,7 litres d'éthanol pour former une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, que l'on a ensuite laissé reposer pendant 24 heures à 40C. On a ensuite éliminé le liquide surnageant par décantation, et on a fait subir à la fraction restante une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 5 minutes) à 40C pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec 400 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 60 % ayant un pH de 2,0, 400 ml d'éthanol, 200 ml d'acétone et 200 ml d'éther diéthylique, dans cet ordre, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 3,9 g d'une poudre. (3) On a mis en suspension dans 25 ml d'eau la poudre obtenue dans le paragraphe (2) ci-dessus. On a ajusté le pH de la solution résultante entre 7,5 et 8,0 en lui ajoutant une solution aqueuse de soude 1 N, et après avoir ajouté pendant 30 minutes à la température ambiante, on lui a ajouté de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster son pH à 4,0. Ensuite, après avoir agité pendant deux heures en refroidissant dans la glace, on a fait subir au mélange une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 10 ml d'eau ayant un pH de 4,0, et on a sé- paré le précipité de l'eau de lavage par centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes). On a réuni les eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, et on leur a fait subir le traitement décrit à l'Exemple 9. On a lavé le précipité avec 10 ml d'éthanol et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 1,5 g de la substance carcinostatique TF-210. La substance carcinostatique TF-210 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette sont représentés sur les Figures 2 et 3 respectivement. EXEMPLE 2 (1) Dans un fermenteur de 1-0 litres, on a placé 8 litres d'un milieu de culture TF-d contenant 17 g de peptone de trypticase, 20 g d'infusion de coeur, 3 g d'extrait de levure, 7,5 g de chlorure de sodium, 12 g de glucose, 10 g de lactose, 0,1 g de sulfite de sodium et 0,5 g de thioglycolate de sodium, par litre d'eau distillée. On a stérilisé ce milieu de culture pendant 30 minutes à 120'C. Après avoir refroidi le milieu de culture, on y a fait passer de l'azote gazeux pendant une heure à un débit de 100 ml/mn. A ce milieu de culture on a inoculé un litre d'une solution de pré-culture de Fusobacterium nucleatum TF-031 (FERM5077, ATCC-31647) préparée au préalable par culture de celle-ci dans un milieu de culture TF-d ayant la même composition que ci-dessus. On a cultivé les cellules pendant trois jours à 370C en agitant (30 tours par minute) tout en introduisant de l'azote gazeux à un débit de 65 ml/mn. A la fin du processus de culture, on a ajouté à la solution de culture 160 g de "Celite" et g de poudre de cellulose, et on a agité le mélange résultant et on l'a filtré sous pression réduite pour obtenir - 7,8 litres d'un liquide surnageant, dépourvu de bactéries, de la culture. (2) A 7,8 litres du liquide surnageant obtenu au paragraphe 1) ci-dessus, on a ajouté 117 ml d'acide chlorhydrique concentré pour ajuster le pH du liquide surnageant à-2,0. On a ensuite ajouté au liquide surnageant 11,7 litres d'éthanol pour former une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, que l'on a ensuite laissé reposer pendant 24 heures à40C. On a ensuite séparé par décantation le liquide surnageant, et on a fait subir à la fraction restante une centrifugation -(6 x 103 tours par minute, 5 minutes) à C pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec 400 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 60 % ayant un pH de 2,0, 400 ml d'éthanol, 200 ml d'acétone et 200 ml d'éther diéthylique, dans cet ordre, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 4,5 g d'une poudre. (3) On a fait subir à cette poudre le même traitement qu'à l'Exemple 1 (3) , pour obtenir 1,6 g de la substance carcinostatique TF-210. La substance carcinostatique TF-210 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus à l'Exemple 1. EXEMPLE 3 (1) Dans un fermenteur de 10 litres, on a placé 8 litres d'un milieu de culture TF-e ayant la même composition que dans l'Exemple 1. On a stérilisé ce milieu de culture pendant 30 minutes à 1200C. Après avoir refroidi le milieu de culture, on y a fait passer de l'azote gazeux pendant une heure à un débit de 100 ml/mn. A ce milieu de culture, on a inoculé un litre d'une solution de pré-culture de Fusobacterium nucleatumx TF-031 (FERM-5077, ATCC-31647) préparée au préalable par culture de celle-ci dans un milieu de culture TF-e ayant la même composition que ci-dessus. On a cultivé les cellules pendant cinq jours à 370C en agitant (30 tours par minute) tout en introduisant de l'azote gazeux à un débit de 65 ml/mn. A la fin du processus de culture, on a ajouté au milieu de culture 160 g de "Celite" et 80 g de poudre de cellulose, et on a agité le mélange résultant puis on l'a filtré sous pression réduite pour obtenir 7,8 litres d'un liquide surnageant, dépourvu de bactéries, de la solution de culture. (2) A 7,8 litres du liquide surnageant obtenu en (1) ci-dessus, on a ajouté 117 ml d'acide chlorhydrique concentré pour ajuster à 2,0 le pH du liquide surnageant. On a ensuite ajouté au liquide surnageant 11,7 litres d'éthanol pour former une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, que l'on a ensuite laissé reposer à 40C pendant 24 heures. On a ensuite séparé par décantation le liquide surnageant, et on a fait subir à la fraction restante une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 5 minutes) à 40C pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec 400 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 60 % ayant un pH de 2,0, avec 400 ml d'éthanol, avec 200 ml d'acétone, et avec 200 ml d'éther diéthylique, dans cet ordre, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 4,9 g d'une poudre. (3) On a mis en suspension dans 49 ml d'eau la poudre obtenue au paragraphe (2) ci-dessus. On a ajusté à 7,5-8,0 le pH de la suspension résultante en lui ajoutant une solution de soude aqueuse 1 N, et après avoir agité pendant minutes à la température ambiante, on a ajusté le pH de la suspension à 6,0 en lui ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. On a ensuite agité la suspension en la refroidissant dans la glace pendant deux heures, après quoi on a fait subir au mélange une centrifugation (1 x 104 tours par minute, minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 5 ml d'eau ayant un pH de 6,0, et on a séparé le précipité des eaux de lavage par centrifu- gation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes). On a lavé le précipité avec 10 ml d'éthanol et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 1, 8 g de la substance carcinostatique TF-220. La substance carcinostatique TF-220 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge- et son spectre d'absorption ultra- violette sont représentés sur les Figures 4 et 5 respectivement. EXEMPLE 4 (1) Dans un fermenteur de 10 litres, on a placé 8 litres d'un milieu de culture TF-d ayant la même composition qu'à l'Exemple 2. On a stérilisé ce milieu de culture pendant 30 minutes à 1200C. Après avoir refroidi le milieu de culture, on y a fait passer de l'azote gazeux pendant une heure à un débit de 100 ml/mn. A ce milieu de culture, on a inoculé un litre d'une solution de pré-culture de Fusobacterium nucleatum TF-031 (FERM5077, ATCC-31647) préparée au préalable par culture de celle-ci dans un milieu de culture TF-d ayant la même composition que ci-dessus. On acultivé les cellules pendant cinq jours à 370C en agitant (30 tours par minute) tout en introduisant de l'azote gazeux à un débit de 65 ml/mn. A la fin du processus de culture, on a ajouté à la solution de culture 160 g de "Celite" et 80 g de poudre de cellulose, et on a agité le mélange résultant, puis on l'a filtré sous pression réduite pour obtenir 7,8 litres d'un liquide surnageant, dépourvu de bactéries, de la culture. (2) A 7,8 litres du liquide surnageant ci-dessus, on a ajouté 117 ml d'acide chlorhydrique concentré pour ajuster le pH du liquide surnageant à 2,0. On a ensuite ajouté 11,7 litres d'éthanol au liquide surnageant pour former une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, que l'on a ensuite laissé reposer à 40C pendant 24 heures. On a ensuite séparé par décantation la fraction solution, et on a fait subir à la fraction restante une centrifugation (6x 103 tours par minute, 5 minutes) à 40C pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec 400 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 60 % ayant un pH de 2,0, avec 400 ml d'éthanol, avec 200 ml d'acétone et avec 200 ml d'éther diéthylique, dans cet ordre, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 5,07 g d'une poudre. (3) On a traité la poudre ainsi obtenue de la même manière qu'à l'Exemple3 (3), pour obtenir 1,9 g de la substance carcinostatique TF-220. La substance carcinostatique TF-220 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus à l'Exemple 3. EXEMPLE 5 (1) Dans un fermenteur de 10 litres, on a placé 8 litres d'un milieu de culture TF-e ayant la même composition qu'à l'Exemple 1. On a stérilisé ce milieu de culture pendant 30 minutes à 1200C. Après avoir refroidi le milieu de culture, on y a fait passer de l'azote gazeux pendant une heure à un débit de 100 ml/mn. A ce milieu de culture, on a inoculé un litre d'une solution de pré-culture de Fusobacterium nucleatum TF-031 (FERM5077, ATCC-31647) préparée au préalable par culture de celle-ci dans un milieu de culture TF-e ayant la même composition que ci-dessus. On a cultivé les cellules pendant deux jours à 370C en agitant (30 tours par minute) tout en introduisant de l'azote gazeux à un débit de 65 ml/mn. A la fin du processus de culture, on a ajouté à la solution de culture 160 g de "Celite" et g de poudre de cellulose, et on a agité le mélange résultant, puis on l'a filtre sous pression réduite pour obtenir 7,8 litres d'un liquide surnageant, dépourvu de bactéries, de la culture. - (2) A 7,8 litres du liquide surnageant obtenu en (1) ci-dessus, on a ajouté 117 ml d'acide chlorhydrique concentré pour ajuster son pH A 2,0. On a ensuite ajouté 11,7 litres d'éthanol au liquide surnageant pour forer une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, que l'on a ensuite laissé reposer à 40C pendant 24 heures jusqu'à ce que tout le précipité se soit déposé. On a ensuite séparé par décantation le liquide surnageant, et on a fait subir à la fraction restante une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 5 minutes) à 40C pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec 400 ml d'une solution -aqueuse d'éthanol à 60 % ayant un pH de 2,0, avec 400 ml d'éthanol, avec 200 ml d'acétone et avec 200 ml d'éther diéthylique, dans cet ordre, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 2,73 g d'une poudre. - (3) On a mis en suspension dans 25 ml d'eau la poudre obtenue au paragraphe-(2) ci-dessus. On a ajusté le pH de la suspension résultante à 7,5-SAe en lui ajoutant une solution aqueuse de soude 1 N, et on a agité la suspension à la température ambiante pendant 30 minutes, après quoi on lui a ajouté de l'acide chlorhydrique 1 1 pour ajuster son pH à 6,0. On a ensuite agité la suspension en la refroidissant dans la glace pendant deux heures, puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 5 ml daeau ayant un pH de 6,0, et on a séparé le précipité des eaux de lavage par centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes). On a rassemblé les eaux de lavage et le liquide surnageant précédent, et on a laissé reposer la solution résultante, après avoir ajusté son pH à 4,0 en lui ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N, à une température de pas plus de 50C pendant 12 heures, puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 15 ml d'eau ayant un pH de 4,0, et on a séparé le précipité des eaux de lavage par centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes), et on a lavé le précipité avec 10 ml d'éthanol puis on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 0,58 g de la substance carcinostatique TF-230. La substance carcinostatique TF-230 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette sont représentée sur les Figures 6 et 7 respective- ment. EXEMPLE 6 (1) Dans un fermenteur de 10 litres, on a placé 8 litres d'un milieu de culture TF-d ayant la même composition qu'à l'Exemple 2. On a stérilisé ce milieu de culture pendant minutes à 1200C. Après avoir refroidi le milieu de culture, on y a fait passer de l'azote gazeux pendant une heure à un débit de 100 ml/mn. A ce milieu de culture, on a inoculé un litre d'une solution de pré-culture de Fusobacterium nucleatum TF-031 (FERM- 5077, ATCC-31647) préparée au préalable par culture de celle-ci dans un milieu de culture ayant la même composition que ci-dessus. On a cultivé les cellules pendant deux jours à 370C en agitant (30 tours par minute) tout en introduisant de l'azote gazeux à un débit de 65 ml/mn. A la fin du processus de culture, on a ajouté à la solution de culture 160 g de "Celite" et 80 g de poudre de cellulose, et on a agité le mélange résultant, puis on l'a filtré sous pression réduite pour obtenir 7,8 litres d'un liquide surnageant, dépourvu de bactéries, de la culture. (2) A 7,8 litres du liquide surnageant obtenu au paragraphe (1) ci-dessus, on a ajouté 117 ml d'acide chlorhydrique concentré pour ajuster le pH du liquide surnageant à 2,0. On a ensuite ajouté au liquide surnageant 11,7 litres d'éthanol pour former une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, que l'on a ensuite laissé reposer à 40C pendant 24 heures. On a ensuite séparé le liquide surnageant par décantation et on a fait subir à la fraction restante une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 5 minutes) à C pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec 400 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 60 % ayant un pH de 2,0, avec 400 ml d'éthanol, avec 200 ml d'acétone et avec 200 ml d'éther diéthylique, dans cet ordre, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 3,15 g d'une poudre. (3) On a traité la poudre obtenue au paragraphe (2) ci- dessus de la même manière que dans l'Exemple 5 (3) pour obtenir 0,8 g de la substance carcinostatique TF-230. La substance carcinostatique TF-230 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 5. EXEMPLE 7 (1) Dans 25 ml d'eau, on a mis en suspension 3,9 g de la poudre obtenue de la même manière que dans l'Exemple 1 (1) et (2). En ajoutant une solution de soude aqueuse 1 N, on a ajusté le pH de la suspension résultante entre 7,5 et 8,0, et après avoir agité la suspension à la température ambiante pendant 30 minutes, on a à nouveau ajusté le pH à 6, 0 en ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. Après avoir agité pendant deux heures en refroidissant dans la glace, on a fait subir à la suspension une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 5 ml d'eau ayant un pH de 6,0, et on a séparé le précipité des eaux de lavage par centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes). On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci- dessus, et on leur a fait subir le traitement décrit au paragraphe (2) cidessous. On a-lavé le précipité avec 10 ml d'éthanol et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 1,06 g de la substance carcinostatique TF-220. La substance carcinostatique TF-220 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus à l'Exemple 3. (2) A la solution combinée composée du liquide surnageant et des eaux de lavage obtenus au paragraphe (1) ci-dessus, on a ajouté de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster le pH à 4,0, puis on a laissé reposer le mélange pendant 12 heures à pas plus de 50C. On a ensuite fait subir au mélange une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 5 ml d'eau ayant un pH de 4,0, et on a fait subir au précipité et aux eaux de lavage une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes). On a réuni les eaux de lavage au liquide surnageant ci-dessus et on a fait subir à la solution combinée le traitement décrit au paragraphe (3) cidessous. On a lavé le précipité avec 5 ml d'éthanol et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 0,48 g de la substance carcinostatique TF-230. La substance carcinostatique TF-230 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus à l'Exemple 5. (3) A la solution combinée composée du liquide surnageant et des eaux de lavage obtenus au paragraphe (2) ci-dessus, on a ajouté de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster le pH à 2,0, et on a laissé reposer le mélange pendant deux heures en le refroidissant dans la glace. On a fait subir au mélange une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 3 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir au précipité et aux eaux de lavage une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 10 minues). On a réuni les eaux de lavage au liquide surnageant ci-dessus et on a fait subir à la solution résultante le traitement décrit au paragraphe (4) ci-dessous. On a lavé le précipité avec 5 ml d'éthanol et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 0,10 g de la substance carcinostatique TF-240. La substance carcinostatique TF-240 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette sont représentés sur les Figures 8 et 9 respectivement. (4) On a ajouté de l'éthanol à la solution combinée composée du liquide surnageant et des eaux de lavage obtenus au paragraphe (3) ci-dessus pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %, et on a laissé reposer cette solution à pas plus de 5 C pendant 12 heures. On a séparé par centrifugation la substance qui s'était déposée (6 x 103 tours par minute, minutes) et on a lavé le dépôt avec 10 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 % et avec 10 ml d'éthanol, dans cet ordre, puis on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 2,08 g de la substance carcinostatique TF-250. La substance carcinostatique TF-250 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 9 ci-après. EXEMPLE 8 Dans 45 ml d'eau, on a mis en suspension 4,5 g d'une poudre obtenue de la même manière que dans l'Exemple 2 (1) et (2). En ajoutant une solution de soude aqueuse 1 N, on a ajusté le pH de la suspension résultante entre 7, 5 et 8,0, et après avoir agité à la température ambiante pendant minutes, on a de nouveau ajusté le pH à 4,0 en ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. On a fait sbbir à la suspension une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 5 ml d'eau ayant un pH de 4,0, et on a fait subir au précipité et aux eaux de lavage une centrifugation (1 x 10 tours par minute, 10 minutes). On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, et on a ajusté le pH de la solution résultante à 2, 0 en lui ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N, après quoi on a laissé reposer la solution pendant deux heures tout en la refroidissant avec de l'eau glacée, puis on lui a fait subir une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité résultant du liquide surnageant. On a lavé le précipité ainsi préparé avec 3 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir au précipité et aux eaux de lavage une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 10 minutes). On a lavé le précipité obtenu avec 5 ml d'éthanol et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 0,12 g de la substance carcinostatique TF-240. La substance carcinostatique TF-240 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 7. EXEMPLE 9 (1) A la solution combinée composée du liquide surnageant et des eaux de lavage obtenus à l'Exemple 1 (3), on a ajouté de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster le pH à 2,0, puis on a laissé reposer le mélange pendant deux heures en le refroidissant dans la glace. On a fait ensuite subir au mélange une centrifugation (6 x 103 tours par minute, minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 3 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir au précipité et aux eaux de lavage une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 10 minutes). On a réuni les eaux de lavage au liquide surnageant ci-dessus, et on a fait subir à la solution résultante un traitement décrit dans le paragraphe (2) ci-dessous. On a lavé le précipité avec 5 ml d'éthanol et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 0,11 g de la substance carcinostatique TF-240. La substance carcinostatique TF-240 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 7. (2) On a ajouté de l'éthanol à la solution combinée composée du liquide surnageant et des eaux de lavage obtenus au paragraphe (1) ci-dessus pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %, et on a laissé reposer cette solution pendant 12 heures à pas plus de 50C. On a séparé la substance déposée par centrifugation (6 x 10 tours par minute, 10 minutes) et on a lavé le dépôt avec 10 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 % et avec 10 ml d'éthanol, dans cet ordre, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 2,1 g de la substance carcinostatique TF-250. La substance carcinostatique TF-250 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette sont représentés sur les Figures 10 et 11 respectivement. EXEMPLE 10 Dans 45 ml d'eau, on a mis en suspension 4,5 g d'une poudre obtenue de la même manière que dans l'Exemple 2 (1) et (2). En ajoutant une solution aqueuse de soude 1 N, on a ajusté le pH de la suspension résultante entre 7,5 et 8,0, et après avoir agité à la température ambiante pendant 30 minutes, on a de nouveau ajusté le pH à 2,0 en ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. On a fait subir au mélange une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 10 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir au précipité et aux eaux de lavage une centrifugation (6 x 10 tours par minute, 10 minutes). On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, et on a ajouté de l'éthanol à cette solution pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a laissé reposer cette solution pendant 12 heures à pas plus de 50C, puis on lui a fait subir une centrifugation (6 x 10 tours par minute, 10 minutes) pour obtenir un dépôt. On a lavé le dépôt ainsi séparé avec 10 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 %, puis avec 10 ml d'éthanol, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 2,68 g de la substance carcinostatique TF-250. La substance carcinostatique TF-250 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra- violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 9. EXEMPLE 11 (1) Dans 15 ml d'eau, on a mis en suspension 1,5 g de la substance carcinostatique TF-210 obtenue à l'Exemple 1. A la suspension résultante, on a ajouté une solution aqueuse de soude 1 N. en agitant, pour ajuster le pH de la suspension à 7,8. On a chauffé la suspension à 370C et on lui a ajouté mg de "Pronase E" (marque déposée de Kaken Kagaku; 1.000.000 d'unités tyrosine/g)et plusieurs gouttes de toluène. On a fait subir au mélange, en le secouant, un traitement enzymatique à un pH de 7,8 à 8,0 et à une température de 370 à 40'C pendant 24 heures. A la fin de ce traitement, on a fait subir au mélange une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 8,0 et on a fait subir au mélange une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus et on a ajouté à l'ensemble de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster le pH à 2,0, et il s'est alors formé un précipité. On a laissé reposer ce mélange à 50C pendant 12 heures puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir au mélange une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, et on a ajouté de l'éthanol à cette solution pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a agité la solution aqueuse d'éthanol pendant deux heures en la refroidissant dans la glace puis on lui a fait subir une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé le précipité avec 5 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 % puis avec 5 ml d'éthanol, puis on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 327 mg de la fraction correspondant à la substance carcinostatique TF-310. Dans 5 ml d'eau, on a dissous 327 mg de la poudre précédente, et on a ajusté la pH de la solution résultante à 7,0 en lui ajoutant une solution aqueuse de soude 1 N. On a versé la solution ainsi préparée dans une colonne garnie de 45 ml d' "Amberlite IRA 400" (marque déposée de Rohm and Haas) ajustée au préalable au type OH avec une solution aqueuse de soude 1 N. On a ensuite fait passer ml d'eau dans la colonne. On a réuni tous les éluats et on a ajusté leur pH à 7,0 en leur ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. On a concentré cette solution sous pression réduite puis on l'a filtré sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,3 j (Millipore est une marque déposée de Japan Millipore Limited) et finalement on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 210 mg de la substance carcinostatique TF-310 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-310 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et sa teneur en saccharides était généralement de 20 à 60 % environ, exprimée en glucose. Le spectre d'absorption infrarouge, le spectre d'absorption ultra-violette et le chromatogramme en phase liquide à haute performance d'une substance typique sont représentés sur les Figures 12, 13 et 14 respectivement. (2) Dans 50 ml d'eau, on a dissous 140 mg de la substance carcinostatique TF-310 obtenue ci-dessus, et on a concentré la solution résultante à une concentration égale à 100 fois la concentration initiale, à l'aide d'un filtre "Ultrafilter UK-50" (marqué déposée d'une membrane d'ultra- filtration fabriquée par Toyo Roshi Kabushiki Kaisha,seuil de coupure de poids moléculaire ncinadl: 50 000).On a filtré ce concentré sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,2 y, puis on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 88 mg de la substance carcinostatique TF-310 à l'état purifié et lyophilisé. La substance carcinostatique TF310 purifiée ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et sa teneur en saccharides était généralement de 16 à 30 % environ, exprimée en glucose. EXEMPLE 12 * (1) Dans 10 ml d'eau, on a mis en suspension 1 g de la substance carcinostatique TF-220 obtenue de la même manière que dans l'Exemple 7 (1) . A la suspension résultante on a ajouté une solution aqueuse de soude 1 N, en agitant, pour ajuster son pH à 7,8. On a chauffé le mélange à 370C et on lui a ajouté 15 mg de "Pronase E" et plusieurs gouttes de toluène. On a fait subir à ce mélange, en le secouant, un traitement enzymatique à un pH de 7,8 à 8,0 et à une température de 370 à 40'C pendant 24 heures. A la fin de ce traitement, on a fait subir au mélange une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 8,0, et on a fait subir au mélange une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus et on a ajouté à la solution résultante de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster son pH à 2,0, et il s'est alors formé un précipité. On a laissé reposer ce mélange à 5 C pendant 12 heures puis on lui a fait subir une contrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir au mélange une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes), pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus et on a ajouté de l'éthanol à cette solution pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a agité cette solution pendant deux heures en la refroidissant dans la glace puis on lui a fait subir une centrifugation (4.000 tours par minutes, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé le précipité avec 5 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 %, puis avec 5 ml d'éthanol, puis on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 163 mg de la fraction correspondant à la substance carcinostatique TF-320. Dans 5 ml d'eau, on a dissous 150 mg de la poudre précédente, et on a ajusté la solution résultante à un pH de 7,0 en lui ajoutant une solution aqueuse de soude 1 N. On a versé la solution ainsi préparée dans une colonne garnie de 25 ml d' "Amberlite IRA 400" ajustée au préalable au type OH avec une solution aqueuse de soude 1 N. On a ensuite fait passer 100 ml d'eau dans la colonne. On a réuni tous les éluats, et on leur a ajouté de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster leur pH à 7,0. On a concentré la solution résultante sous pression réduite, puis on l'a filtrée sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,3 y, et finalement on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 110 mg de la substance carcinostatique TF-320 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-320 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et sa teneur en saccharides était généralement de 20 à 60 % environ, exprimée en glucose. Le spectre d'absorption infrarouge, le spectre d'absorption ultra-violette et le chromatogramme en phase liquide à haute performance d'une substance typique sont représentés sur les Figures 15, 16 et 17 respectivement. (2) Dans 50 ml d'eau, on a dissous 100 mg de la substance carcinostatique TF-320 obtenue ci-dessus, et on a concentré la solution résultante à une concentration égale à fois la concentration initiale, à l'aide d'un filtre "Ultrafilter UK-50". On a filtré ce concentré sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,2 A, puis on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 72 mg de la substance carcinostatique TF-320 à l'état purifié et lyophilisé. La substance carcinostatique TF- 320 purifiée ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et sa teneur en saccharides était généralement de 16 à 30 % environ, exprimée en glucose. EXEMPLE 13 (1) Dans 5 ml d'eau, on a mis en suspension 0,48 g de la substance carcinostatique TF-230 obtenue de la même manière que dans l'Exemple 7 (2) . A la suspension résultante, on a ajouté une solution aqueuse de soude 1 N, en agitant, pour ajuster le pH à 7,8. On a chauffé le mélange à 37 C et on lui a ajouté 5,0 mg de "Pronase E", et plusieurs gouttes de toluène. On a fait subir au mélange, en le secouant, un traitement enzymatique à un pH de 7,8 à 8,0 et à une température de 370 à 400C pendant 24 heures. A la fin de ce traitement, on a fait subir au mélange une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 8,0, et on a fait subir au mélange une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus et à la solution on a ajouté de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster le pH à 2,0, et il s'est alors formé un précipité. On a laissé reposer ce mélange à 50C pendant 12 heures, puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir au mélange une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus et on a ajouté de l'éthanol à cette solution pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a agité cette dernière pendant deux heures en la refroidissant dans la glace puis on lui a fait subir une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé le précipité avec 5 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 % puis avec 5 ml d'éthanol, puis on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 100 mg de la fraction correspondant à la substance carcinostatique TF-330. Dans 5 ml d'eau, on a dissou 100 mg de la poudre précédente, et on a ajusté le pH de la solution résultante à 7,0 en lui ajoutant une solution aqueuse de soude 1 N. On a versé la solution ainsi préparée dans une colonne garnie de 15 ml d' "Amberlite IRA 400" ajustée au préalable au type OH avec une solution aqueuse de soude 1 N. On a ensuite fait passer 60 ml d'eau dans la colonne. On a réuni tous les éluats et on les a ajustés à un pH de 7,0 en leur ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. On a concentré cette solution sous pression réduite puis on l'a filtrée sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,3 a, et enfin on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 70 mg de la substance carcinostatique TF-330 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-330 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2. Le spectre d'absorption infrarouge, le spectre d'absorption ultra- violette et le chromatogramme en phase liquide à haute performance d'une substance typique sont représentés sur les Figures 18, 19 et 20 respectivement. (2) Dans 50 ml d'eau on a dissous 70 mg de la substance carcinostatique TF-330 obtenue ci-dessus, et on a concentré la solution résultante à une concentration égale à fois la concentration initiale, d l'aide d'un filtre "Ultrafilter UK-50". On a filtré ce concentré sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,2 g, puis on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 49 mg de la substance carcinostatique TF-330à l'état purifié et lyophilisé. La substance careinostatique TF- 330 purifiée ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et sa teneur en saccharides était généralement de 16 à 30 % environ, exprimée en glucose. Le spectre d'absorption infrarouge et le spectre d'absorption ultra-violette d'une substance TF-330 type sont représentés respectivement sur les Figures 21 et 22. EXEMPLE 14 (1) De la même manière que dans l'Exemple 2 (3), 7 (1) ou 7 (2), on a traité 4,5 g de la substance obtenue de la même manière que dans l'Exemple 2 (1) et (2), pour obtenir respectivement la substance carcinostatique TF-210, TF-220 et TF-230. (2) On a traité les substances carcinostatiques TF-210, TF-220 et TF-230 obtenues paragraphe (1) ci-dessus, de la même manière que dans l'Exemple 11 (1), dans l'Exemple 12 (1) ou dans l'Exemple 13 (1), pour obtenir la substance carcinostatique TF-310, TF-320 ou TF-330, à l'état lyophilisé, en quantités de 220 mg, 120 mg et 75 mg, respectivement. Les substances carcinostatiques TF-310, TF-320 et TF-330 ainsi obtenues possédaient les propriétés indiquées au Tableau 2, et leurs spectres d'absorption infrarouge, spectres d'absorption ultra-violette et chromatogrammes en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus respectivement dans les Exemples 11, 12 et 13. EXEMPLE 15 De la même manière que dans l'Exemple 11, on a traité 1,5 g de la substance carcinostatique TF-210 obtenue à l'Exemple 1, excepté que (a) on a utilisé 15 mg de trypsine (fabriquée par Difco) à la place de la "Pronase E" dans le traitement enzymatique et (b) on a préparé une solution aqueuse d'éthanol à 60 % à la place de la solution aqueuse d'éthanol à 80 % quand on a recueilli le précipité provenant de la partie soluble dans l'eau ayant un pH de 2 après le traitement enzymatique. On a ainsi obtenu 200 mg de la substance carcinostatique TF-310 à l'état lyophilisé. De même, on a obtenu des substances carcinostatiques TF-320 et TF-330 à l'état lyophilisé suivantes. Substance Trypsine Substance carcino- carcinostatique statique à l'état lyophilisé TF-220 1 g 15 mg TF-320 100 mg TF-230 0,48 g 5 mg TF-330 65 mg Les substances carcinostatiques TF-310, TF-320 et TF-330 obtenues ci-dessus possédaient les propriétés indiquées au Tableau 2, et leurs spectres d'absorption infrarouge, spectres d'absorption ultra-violette et chromatogrammes en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans les Exemples 11, 12 et 13 (1), respectivement. EXEMPLE 16 On a traité les substances carcinostatiques TF-210, TF-220 et TF-230 obtenues respectivement dans l'Exemple 1, dans l'Exemple 7 (1) et dans l'Exemple 7 (2), de la même manière que dans l'Exemple 11 (1), dans l'Exemple 12 (1) et dans l'Exemple 13 (1), respectivement, excepté que, après le traitement enzymatique, on a préparé une solution aqueuse d'éthanol à 60 % à la place de la solution aqueuse d'éthanol à 80 % quand on a recueilli le précipité de la fraction soluble dans l'eau ayant un pH égal à 2,0. On a ainsi obtenu les substances carcinostatiques TF-310, TF320 et TF-330 à l'état lyophilisé, en quantités respectives de 190 mg, 98 mg et 66 mg. Les substances carcinostatiques TF-310, TF-320 et TF-330 ainsi obtenues possédaient les propriétés indiquées au Tableau 2, et leurs spectres d'absorption infrarouge, spectres d'absorption ultra-violette et chromatogranmmes en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus respectivement dans les Exemr.ples 11, 12 et 13 (1). EXEMPLE 17 On a traité les substances carcinostatiques TF-210, TF-220 et TF-230 obtenues respectivement dans l'Exemple 1, dans l'Exemple 7 (1) et dans l'Exemple 7 (2), de la même manière que dans l'Exemple I1l (1), dans l'Exemple 12 (1) et dans l'Exemple 13 (1), respectivement, eccepté que, après le traitement enzymatique, quand on a recueilli le précipité provenant de la fraction soluble dans l'eau ayant un pH égal à 2,0, on a formé une solution aqueuse d'éthanol à 60 % à la place de la solution aqueuse d'éthanol à 80 %, et on lui a fait subir le même traitement ultérieur que dans les Exemples respectifs, pour obtenir respectivement 192 mg, 102 mg et mg de la substance carcinostatique TF-310, TF-320 et TF330, respectivement. Les substances carcinostatiques TF-310, TF-320 et TF330 ainsi obtenues possédaient les propriétés indiquées au Tableau 2, et leurs spectres d'absorption infrarouge, spectres d'absorption ultraviolette et chromatogrammes en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans les Exemples 11, 12 et 13 (1), respectivement. EXEMPLE 18 Dans un fermenteur de 90 litres (type MSJ-U2, fabriqué par Marubishi Rika Kenkyusho) on a placé un milieu de culture TF-f préparé en ajoutant à 70 litres d'eau distillée 1.190 g depeptone de trypticase, 1.050 g d'infusion de coeur, 210 g d'extrait de levure, 525 g de chlorure de sodium, 840 g de glucose, 700 g de lactose, 7 g de sulfite de socium, 35 g de thioglycolate de sodium et 175 g de phosphate de potassium secondaire. On a stérilisé ce milieu de culture à 1180C pendant 15 minutes. Après l'avoir refroidi, on a fait passer de l'azote gazeux à travers ce milieu à un débit de 250 ml par minute pendant une heure. A ce milieu de culture on a inoculé 900 ml environ d'une solution cultivée au préalable de Fusobacterium nucleatum TF-031 (FERM-5077, ATCC- 31647) préparée au préalable par pré-culture dans une culture TF-f ayant la même composition que ci-dessus. On a cultivé les cellules pendant quatre jours à 330C environ en agitant (90 tours par minute) tout en introduisant de l'azote gazeux à un débit de 250 ml par minute. A la fin du processus de culture, on a ajouté à la solution de culturelOg/litre de "Celite" et g/litre de poudre de cellulose, et on a agité le mélange puis on l'a filtré sous pression réduite pour obtenir 65 l environ d'un liquide surnageant, dépourvu de bactéries, de la culture. (2) A 7,5 litres du liquide surnageant ci-dessus, on a ajouté 113 ml d'acide chlorhydrique concentré pour ajuster le pH du liquide surnageant à 2,0. Puis on a ajouté 11,4 litres d'éthanol au liquide surnageant pour former une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, que l'on a ensuite laissée reposer à 40C pendant 24 heures. Ensuite, on a séparé la partie dissoute par décantation et on a fait subir à la fraction restante une centrifugation (4 x 10 tours par minute, 10 minutes) à 40C pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec deux fractions de 100 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 60 % ayant un pH égal à 2,0, avec une fraction de 150 ml d'éthanol, avec une fraction de 150 ml de méthanol, et enfin avec une fraction de 150 ml d'acétone, dans cet ordre, puis on l'a séché à l'air pour obtenir 3,0 g d'une poudre. (3) On a mis en suspension dans 30 ml d'eau la poudre obtenue au paragraphe (2) ci-dessus. on a ajusté le pH de la suspension résultante entre 7,5 et 8,0 en lui ajoutant une solution aqueuse de soude 4 N, et après avoir agité à la température ambiante pendant 15 minutes, on a à nouveau ajusté le pH à 4,0 en ajoutant de l'acide chlorhydrique 4 N. On a ensuite laissé reposer la suspension en la refroidissant dans la glace pendant deux heures, on a fait subir au mélange une centrifugation (1 x 10 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant, Au précipité ainsi séparé on a ajouté 6 ml d'eau de lavage, ce qui a provoqué la formation d'une suspension, à laquelle on a ajouté une solution aqueuse de soude 4 N pour ajuster le pH entre 7,5 et 8,0. On a agité la suspension à la température ambiante pendant 15 minutes, après quoi on a ajouté à la suspension de l'acide chlorhydrique 4 N pour ajuster le pH à 4,0, et on a laissé reposer la suspension pendant deux heures en la refroidissant dans la glace. On a ensuite fait subir à la suspension une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour rassembler le précipité. On a lavé ce précipité avec 4 ml d'eau ayant un pH de 4,0 et on lui a fait subir une centrifugation (1 x 10 tours par minute, 10 mninutes> pour obtenir 6,2 g (poids humide) d'un précipité (TF-210). La substance carcinostatique TF-210 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra-violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 1. (4) On a mis en suspension dans 6 ml d'eau le précipité (6,2 g (poids humide)) obtenu au paragraphe (3) ci-dessus. A la suspension résultante on a ajouté, en agitant, une solution aqueuse saturée de carbonate d'ammonium pour ajuster le pH de la suspension à 7,8. On a a chauffé la suspension à 370C et on lui a ajouté 21 mg de "Pronase E" puis plusieurs gouttes de toluène. On a fait subir au mélange r4sultant, en le secouant, un traitement enzymatique à un pH de 7,8 à 8,0 et à une température de 370 à 40'C pendant 24 heures. On a ajusté le pH du mélange ainsi traité à 1,0 en lui ajoutant de l'acide chlorhydrique 4 N. et il s'est alors forai un précipité. On a laissé reposer cette suspension pendant deux heures en la refroidissant dans la glace, puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 10 tours par minute, 10 minutes) pour rassembler le liquide surnageant. A ce liquide surnageant on a ajouté 29 ml d'éthanol pour former une solution aqueuse d'éthanol à 60 %, et il s'est alors formé un précipité. On a laissé reposer cette suspension pendant deux heures en la refroidissant dans la glace puis on lui a fait subir une centrifugation (6 x 103 tours par minute, 10 minutes) pour rassembler le précipité. On a lavé le précipité ainsi rassemble avec 5 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à %, avec 10 ml d'éthanol et avec 10 ml d'acétone, dans cet ordre, et on l'a séché à l'air pour obtenir 315 mg de cristaux bruts de la substance carcinostatique TF-310. On a dissous les cristaux bruts (315 mg) dans 30 ml d'eau, et on leur a ajouté une solution aqueuse de soude 4 N pour ajuster le pH à 8,0. On a versé la solution résultante dans une colonne garnie de 30 ml de "Dowex" 1 x 4 (marque déposée de Dow Chemical) du type Cl. On a ensuite fait passer 100 ml d'eau dans la colonne et on a réuni tous les éluats, on les a ajustés à un pH de 6,5 à 7,0, et on les a filtrés sur "Ultrafilter UK50", après quoi on a concentré le filtrat à une concentration égale à 100 fois la concentration initiale. On a filtré ce concentré sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,3 y, puis on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 230 mg de la substance carcinostatique TF-310 purifiée et lyophilisée. La substance carcinostatique TF-310 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et sa teneur en saccharides était généralement de 16 à 30 % environ, exprimée en glucose. Le spectre d'absorption infrarouge, le spectre d'absorption ultra-violette et le chromatogramme en phase liquide à haute performance d'une substance type sont représentés sur les Figures 23, 24 et 25, respectivement. EXEMPLE 19 Dans 10 ml d'eau on a mis en suspension 0,9 g de la substance carcinostatique TF-240 obtenue de la même manière que dans l'Exemple 7 (3) , et on a ajouté à la suspension résultante, en agitant, une solution aqueuse de soude 1 N pour ajuster le pH à 7,8. Après avoir chauffé à 370C, on a ajouté à la suspension 9 mg de "Pronase E" et plusieurs gouttes de toluène, dans cet ordre. On a fait subir au mélange résultant, en le secouant, un traitement enzymatique à une température de 37 à 40'C et à un pH de 7,8 à 8,0 pendant 24 heures. On a fait subir au mélange ainsi traité une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 8,0, et on a fait subir à la suspension résultante une centrifugation (4.DO0 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, puis on a ajouté à la solution combinée de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster le pH à 2,0, et il s'est alors formé un précipité. On a laissé reposer la suspension résultante à 50C pendant 12 heures, puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 5 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir à la suspension résultante une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, puis on a ajouté de l'éthanol à la solution combinée pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a agité cette dernière pendant deux heures en la refroidissant dans la glace puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 5 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 % puis avec 5 ml d'éthanol, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 170 mg de la fraction cor- respondant à la substance carcinostatique TF-340. Dans 5 ml d'eau on a dissous 150 mg de cette poudre, et on a ajusté le pH de la solution résultante à 7,0 en lui ajoutant une solution aqueuse de soude 1 N. On a versé cette solution dans une colonne garnie de 25 ml d' "Amberlite IRA 400" ajustée au préalable au type OH à l'aide d'une solution aqueuse de soude 1 N. On a ensuite fait passer 100 ml d'eau dans la colonne, puis on a réuni tous les éluats et on les a ajustés à un pH de 7,0 en leur ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. On a concentré sous pression réduite la solution obtenue et on l'a filtrée sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,3 y, puis on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 110 mg de la substance carcinostatique TF-340 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-340 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance sont représentés sur les Figures 26, 27 et 28, respectivement. EXEMPLE 20 De la même manière que dans l'Exemple 19, on a traité 0,9 g de la substance carcinostatique TF-240 obtenue de la même manière que dans l'Exemple 8, pour obtenir 115 mg de la substance carcinostatique TF-340 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-340 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge) son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 19. EXEMPLE 21 De la même manière que dans l'Exemple 19, on a traité 0,9 g de la substance carcinostatique TF-240 obtenue dans l'Exemple 7 (3), excepté que (a) on a procédé au traitement enzymatique en utilisant 9 mg de trypsine (fabriquée par Difco) à la place de la "Pronase E" et (b), à la fin du traitement enzymatique, quand on a rassemblé le précipité provenant de la partie soluble dans l'eau ayant un pH de 2,0, on a formé une solution aqueuse d'éthanol à 60 % à la place de la solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a ainsi obtenu 105 mg de la substance carcinostatique TF-340 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-340 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge et son spectre d'absorption ultra-violette étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 19. EXEMPLE 22 On a traité la substance carcinostatique TF-240 obtenue dans l'Exemple 7 (3) de la même manière que dans l'Exemple 19, excepté que, après le traitement enzymatique, quand on a rassemblé le précipité provenant de la partie soluble dans l'eau ayant un pH égal à 2,0, on a formé une solution aqueuse d'éthanol à 60 % à la place de la solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a ainsi obtenu 101 mg de la substance carcinostatique TF-340 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-340 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramne en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 19. EXEMPLE 23 On a fait subir à la substance carcinostatique TF-240 obtenue dans l'Exemple 7 (3) le même traitement enzymatique que dans l'Exemple 19, après quoi, au lieu de recueillir le précipité provenant de la partie soluble dans l'eau ayant un pH égal à 2,0, on a recueilli le précipité en ajoutant de l'acide trichloracétique à 40 % jusqu'à obtenir une concentration de 10 % d'acide trichloracétique, et en formant la partie soluble dans l'eau ainsi obtenue dans une solution aqueuse d'éthanol à 80 %, et on a ensuite procédé aux mêmes traitements que dans l'Exemple 19 pour obtenir 99 mg de la substance carcinostatique TF-340 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-340 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 19. EXEMPLE 24 Dans 10 ml d'eau on a mis en suspension 0,82 g de la substance carcinostatique TF-250 obtenue de la même manière que dans l'Exemple 7 (4) , et on a ajouté à la suspension résultante, en agitant, une solution aqueuse de soude 1 N pour ajuster le pH à 7,8. Après avoir chauffé à 370C, on a ajouté à la suspension 8 mg de "Pronase E" et plusieurs gouttes de toluène, dans cet ordre. On a fait subir au mélange résultant, en le secouant, le traitement enzymatique à un pH de 7,8 à 8,0 et à une température de 37 à 40'C pendant 24 heures. On a fait subir au mélange ainsi traité une centrifugation (4.000 tours par minutes, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 3 ml d'eau ayant un pH de 8,0, et on a fait subir à la suspension résultante une centrifugation (4.000 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, on a ajouté à la solution combinée de l'acide chlorhydrique 1 N pour ajuster le pH à 2,0, et il s'est alors formé un précipité. On a laissé reposer la suspension résultante à 50C pendant 12 heures puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 104 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. Au précipité on a ajouté 5 ml d'eau ayant un pH de 2,0, et on a fait subir à la suspension résultante une centrifugation (1 x 10 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité des eaux de lavage. On a réuni ces eaux de lavage et le liquide surnageant ci-dessus, et on a ajouté de l'éthanol à la solution combinée pour former une solution aqueuse d'éthanol à 80 %. On a agité cette dernière pendant deux heures en la refroidissant dans la glace puis on lui a fait subir une centrifugation (1 x 10 tours par minute, 10 minutes) pour séparer le précipité du liquide surnageant. On a lavé ce précipité avec 5 ml d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 % puis avec 5 ml d'éthanol, et on l'a séché sous pression réduite pour obtenir 430 mg de la fraction correspondant à la substance carcinostatique TF-350. Dans 5 ml d'eau on a dissous 300 mg de cette poudre, et on a ajouté à la solution résultante une solution aqueuse de soude 1 N pour ajuster le pH à 7,0. On a versé cette solution dans une colonne garnie de 45 ml d' "Amberlite IRA 400" ajustée au préalable au type OH à l'aide d'une solution aqueuse de soude 1 N. On a ensuite fait passer ml d'eau dans la colonne, puis on a réuni tous les éluats et on les a ajustés à un pH de 7, 0 en leur ajoutant de l'acide chlorhydrique 1 N. On a concentré sous pression réduite la solution obtenue et on l'a filtrée sur un filtre "Millipore" ayant un diamètre de pore de 0,3 p, puis on lui a fait subir une cryodessiccation pour obtenir 260 mg de la substance carcinostatique TF-350 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-350 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance sont représentés sur les Figures 29, 30 et 31, respectivement. EXEMPLE 25 De la même manière que dans l'Exemple 24, on a fait subir à 0,85 g de la substance carcinostatique TF-250 obtenue dans l'Exemple 9 un traitement enzymatique à l'aide de 8 mg de "Pronase E", pour obtenir 265 mg de la substance carcinostatique TF-350 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-350 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 24. EXEMPLE 26 De la même manière que dans l'Exemple 24, on a fait subir à 0,80 g de la substance carcinostatique TF-250 obtenue dans l'Exemple 10 un traitement enzymatique par 8 mg de "Pronase E", pour obtenir 253 mg de la substance carcinostatique TF-350 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-350 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 24. EXEMPLE 27 De la même manière que dans l'Exemple 24, on a traité 0,85 g de la substance carcinostatique TF-250 obtenue dans l'Exemple 7 (4) excepté que (a) on a procédé au traitement enzymatique en utilisant 8 mg de trypsine (fabriquée par Difco) à la place de la "Pronase E" et (b), après le traitement enzymatique, quand on a rassemblé le précipité provenant de la partie soluble dans l'eau ayant un pH égal à 2,0, on a préparé une solution aqueuse d'éthanol à 60 % à la place de la solution aqueuse d'éthanol à 80 %, pour obtenir 247 mg de la substance carcinostatique TF350 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-350 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 24. EXEMPLE 28 On a traité 0,85 g de la substance carcinostatique TF-250 obtenue de la même manière que dans l'Exemple 7 (4), de la même manière que dans l'Exemple 24, excepté que, après le traitement enzymatique, pour rassembler le précipité provenant de la fraction soluble dans l'eau ayant un pH égal à 2,0, on a préparé une solution aqueuse d'éthanol à % à la place de la solution aqueuse d'éthanol à 80 %, pour obtenir 242 mg de la substance carcinostatique TF-350 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-350 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 24. EXEMPLE 29 On a fait subir à 0,8 g de la substance carcinostatique TF-250 obtenue de la même manière que dans l'Exemple 7 (4), le même traitement enzymatique que dans l'Exemple 24, après quoi, au lieu de rassembler le précipité provenant de la partie soluble dans l'eau ayant un pH à 2,0, on a rassemblé le précipité en ajoutant de l'acide trichloracétique à 40 % à concurrence d'une concentration d'acide trichloracétique de 10 %, et en mettant la partie soluble dans l'eau obtenue sous la forme d'une solution aqueuse d'éthanol à 80 %, et on a ensuite procédé aux mêmes posttraitements que dans l'Exemple 24 pour obtenir 238 mg de la substance carcinostatique TF-350 à l'état lyophilisé. La substance carcinostatique TF-350 ainsi obtenue possédait les propriétés indiquées au Tableau 2, et son spectre d'absorption infrarouge, son spectre d'absorption ultra-violette et son chromatogramme en phase liquide à haute performance étaient pratiquement identiques à ceux obtenus dans l'Exemple 24. EXEMPLE DE PREPARATION 1 On a ajouté une solution aqueuse diluée de soude à 3 à 4 mg de la poudre de substance carcinostatique TF-210 pour former une solution ayant un pH de 7,0 à 7,5. On a introduit dans une fiole la fraction soluble dans l'eau de la solution résultante, et on a procédé à une cryodessiccation. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, une solution de lidocaine à 0,5 %, une solution aqueuse de glucose à 5 %, ou une solution similaire, et on utilise la solution résultante sous forme d'injection. EXEMPLE DE PREPARATION 2 On a ajouté une solution aqueuse diluée de soude à 2 à 3 mg de la poudre de substance carcinostatique TF-220 pour former une solution ayant un pH de 7,0 à 7,5. On a introduit dans une ampoule la fraction soluble dans l'eau de la solution résultante et on a procédé à une cryodessiccation. On dissout ce produit, au moment de son utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, une solution de lidocaine à 0,5 %, une solution aqueuse de glucose à 5 % ou une solution similaire, et on utilise la solution résultante sous forme d'injection. EXEMPLE DE PREPARATION 3 On a ajouté une solution aqueuse diluée de soude à 1 mg de la poudre de substance carcinostatique TF-230 pour former une solution ayant un pH de 7,0 à 7,5. On a introduit cette solution dans une ampoule et on l'a lyophilisée. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, une solution de lidocaine à 0,5 %, une solution aqueuse de glucose à 5 % ou une solution similaire, et on utilise la solution résultante sous forme d'injection. EXEMPLE DE PREPARATION 4 On a ajouté une solution aqueuse diluée de soude à 1 mg de la poudre de substance carcinostatique TF-240 pour former une solution ayant un pH de 7,0 à 7,5, et on a introduit cette solution dans une ampoule et on l'a lyophilisée. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, une solution de lidocaine à 0,5 %, une solution aqueuse de glucose à 5 % ou une solution similaire, et on utilise la solution résultante sous forme d'injection. EXEMPLE DE PREPARATION 5 On a ajouté une solution aqueuse diluée de soude à 1 mg de la poudre de substance carcinostatique TF-250 pour former une solution ayant un pH de 7,0 à 7,5, puis on a introduit cette solution dans une ampoule et on l'a lyophilisée. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, une solution de lidocaine à 0,5 %, une solution aqueuse de glucose à 5 % ou une solution similaire, et on utilise la solution résultante sous forme d'injection. EXEMPLE DE PREPARATION 6 On a introduit dans une ampoule une solution aqueuse ayant un pH de 7,0 à7,5 et renfermant la substance carcinostatique TF-310-1, et on l'a lyophilisée pour obtenir une préparation lyophilisée de substance carcinostatique TF-310 sous forme d'unités de 0,5 ou d'1 mg. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, une solution de lidocaine à 0,5 %, une solution aqueuse de glucose à 5 %, ou une solution similaire, et on utilise la solution résultante sous forme d'injection. EXEMPLE DE PREPARATION 7 On a introduit dans une ampoule une solution aqueuse ayant un pH de 7,0 à 7,5 et renfermant la substance carcinostatique TF-310-2, et on l'a lyophilisée pour obtenir une préparation lyophilisée de substance carcinostatique TF-310 sous forme d'unités de 0,5 ou 1 mg. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, dans une solution de lidocaine à 0,5 %, dans une solution aqueuse de glucose à 5 % ou dans une solution similaire, et on utilise la solution résultante sous forme d'injection. EXEMPLE DE PREPARATION 8 on a introduit dans une ampoule une solution aqueuse ayant un pH de 7,0 à 7,5 et renfermant la substance carcinostatique TF-320, et on l'a lyophilisée pour obtenir une préparation lyophilisée de substance carcinostatique TF-320 sous forme d'unités de 0,5 ou 1 mg. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, dans une solution de lidocaine à 0,5 %, dans une solution aqueuse de glucose à 5 % ou dans une solution similaire, et on utilise la solution résultante en injection. EXEMPLE DE PREPARATION 9 On a introduit dans une ampoule une solution aqueuse ayant un pH de 7,0 à 7,5et renfermant la substance carcinostatique TF-330, et on l'a lyophilisée pour obtenir une préparation lyophilisée de substance carcinostatique TF-330 sous forme d'unités de 0,5 ou 1 mg. On dissout ce produit, au moment de l'utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, dans une solution de lidocaine à 0,5 %, dans une solution aqueuse de glucose à 5 % ou dans une solution similaire, et on utilise la solution résultante en injection. EXEMPLE DE PREPARATION 10 On a introduit dans une ampoule une solution aqueuse ayant un pH de 7,0 à 7,5 et renfermant la substance carcinostatique TF-340, et on l'a lyophilisée pour obtenir une préparation lyophilisée de substance carcinostatique TF-340 sous forme d'unités de 0,5 ou 1 mg. On dissout ce produit, lors de son utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, dans une solution de lidocaine à 0,5 %, dans une solution aqueuse de glucose à 5 % ou dans une solution similaire, et on utilise la solution résultante en injection. EXEMPLE DE PREPARATION 11 on a introduit dans une ampoule une solution aqueuse ayant un pH de 7,0 à 7,5 et renfermant la substance carcinostatique TF-350, et on l'a lyophilisée pour obtenir une préparation lyophilisée de substance carcinostatique TF-350 sous forme d'unités de 0,5 ou 1 mg. On dissout ce produit, lors de son utilisation, dans une solution saline physiologique stérilisée, dans une solution de lidocaine à 0,5 %, dans une solution aqueuse de glucose à 5 % ou dans une solution similaire, et on utilise la solution résultante en injection. REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation d'une substance carcinostatique TF-2, caractérisé en ce qu'il consiste à cultiver des bactéries productrices de TF-2, appartenant au genre Fusobacterium, et à recueillir ladite substance TF-2 de la culture ou de son liquide surnageant. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on cultive des bactéries productrices de TF-2 appartenant au genre Fusobacterium, on ajoute un solvant organique hydrophile au liquide surnageant résultant, et on obtient la substance carcinostatique TF-2 à partir du précipité résultant. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on cultive les bactéries productrices de TF-2 appartenant au genre Fusobacterium, on ajoute un solvant organique hydrophile au liquide surnageant résultant, on recueille le précipité résultant, on le fractionne en fonction du pH, et on recueille les substances carcinostatiques ainsi obtenues. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant, on fractionne le précipité résultant en fonction du pH, et on recueille une fraction insoluble dans l'eau à un pH de 3,5 à 4,5. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'on fractionne le précipité en fonction du pH en ajoutant de l'eau au précipité et en ajustant son pH entre 3,5 et 4,5, et en recueillant la partie insoluble dans l'eau résultante. 6. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant, on fractionne le précipité résultant en fonction du pH, et on recueille une fraction insoluble dans l'eau à un pH de 5,5 à 6,5. 7. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant, on fractionne le précipité résultant en fonction du pH, et on recueille une fraction soluble dans l'eau à un pH de 5,5 à 6,5 mais insoluble dans l'eau à un pH de 3,5 à 4,5. 8. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant, on fractionne le précipité résultant en fonction du pH, et on recueille une fraction soluble dans l'eau à un pH de 3,5 à 4,5 mais insoluble dans l'eau à un pH de 1,5 à 2,5. 9. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant, on fractionne le précipité résultant en fonction du pH, et on recueille une fraction soluble dans l'eau à un pH de 1,5 à 2,5. 10. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait subir un traitement d'élimination des protéines à la fraction à action carcinostatique obtenue à partir de la culture ou de son liquide surnageant obtenu par culture des bactéries productrices de la substance carcinostatique TF-2et appartenant au genre Fusobacterium. 11. Procédé selon la revendication 2 ou 10, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant obtenu en cultivant les bactéries productrices de TF-2 qui appartiennent au genre Fusobacterium, et en ce qu'on fait subir un traitement d'élimination des protéines au précipité résultant ou bien à une fraction à action carcinostatique obtenue à partir de celui-ci. 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que ledit traitement d'élimination des protéines est un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique. 13. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant obtenu en cultivant les bactéries productrices de TF-2 qui appartiennent au genre Fusobacterium, et en ce qu'on fait subir un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique à une fraction à action carcinostatique obtenue. à partir du précipité résultant. 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce qu'on cultive les bactéries productrices de TF-2 appartenant au genre Fusobacterium, on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant résultant, on fractionne le précipité résultant en fonction du pH, on fait subir à une fraction à action carcinostatique un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique, et on recueille ensuite la fraction contenant la substance carcinostatique. 15. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que la fraction à action carcinostatique à laquelle on fait subir un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique est une fraction insoluble dans l'eau à un pH de 3,5 à 4,5. 16. Procédé selon la revendication 15, caractérisé en ce que la fraction à action carcinostatique obtenue en ajoutant le solvant organique hydrophile au liquide surnageant puis en fractionnant le précipité résultant en fonction du pH est une fraction insoluble dans l'eau obtenue en ajoutant de l'eau au précipité et en ajustant son pH entre 3,5 et 4,5. 17. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que la fraction à action carcinostatique à laquelle on fait subir un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique est une fraction insoluble dans l'eau à un pH de 5,5 à 6,5. 18. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que la fraction à action carcinostatique à laquelle on fait subir un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique est une fraction soluble dans l'eau à un pH de ,5 à 6,5 mais insoluble dans l'eau à un pH de 3,5 à 4,5. 19. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que la fraction à action carcinostatique à laquelle on fait subir un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique est une fraction soluble dans l'eau à un pH de 3,5 à 4,5 mais insoluble dans l'eau à un pH de 1,5 à 2,5. 20. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que la fraction à action carcinostatique à laquelle on fait subir un traitement enzymatique par une enzyme protéolytique est une fraction soluble dans l'eau à un pIl de 1,5 à 2,5. 21. Procédé selon l'une quelconque des revendications 12 à 20, caractérisé en ce que l'enzyme protéolytique est une pronase ou la trypsine. 22. Procédé selon l'une quelconque des revendications 12 à 21, caractérisé en ce qu'on recueille les fractions contenant la substance carcinostatique après le traitement enzymatique, en traitant les fractions par au moins une des techniques suivantes: fractionnMemnt en fonction du pH, précipitation séparée à partir d'un solvant organique hydrophile, ultrafiltration, fractionnement à l'aide d'un échangeur d'ions, puisen recueillant les fractions contenant la substance carcinostatique. 23. Procédé selon la revendication 22, caractérisé en ce qu'on recueille les fractions contenant la substance carcinostatique, après le traitement enzymatique, en fractionnant la partie soluble dans l'eau après le traitement enzymatique par une enzyme protéolytique, en ajustant le pH de la partie soluble dans l'eau à 2,5 ou moins, en ajoutant le solvant organique hydrophile à la partie soluble dans l'eau ainsi obtenue, en traitant le précipité résultant par un échangeur d'ions et en recueillant la fraction non- adsorbée. 24. Procédé selon la revendication 22, caractérisé en ce qu'on recueille la fraction contenant la substance carcinostatique, après le traitement enzymatique, en fractionnant la partie soluble dans l'eau à la fin du traitement enzymatique en fonction du pH, en ajustant le pH à 2,5 ou moins, en ajoutant le solvant organique hydrophile à la partie utile de la partie soluble dans l'eau ainsi obtenue, en traitant le précipité résultant par un échangeur d'ions et en faisant subir à la fraction nonadsorbée une ultrafiltration. 25. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 24, caractérisé en ce qu'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant de la culture après l'avoir ajusté à un pH de 1,5 à 2,5. 26. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 25, caractérisé en ce que le solvant organique hydrophile que l'on ajoute au liquide surnageant de la culture est un alcool. 27. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 26, caractérisé en ce que l'on ajoute le solvant organique hydrophile au liquide surnageant de la culture de telle sorte que la concentration du solvant dans la solution résultante devienne égale à 30 - 80 % en volume. 28. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 27, caractérisé en ce que le milieu de culture que l'on utilise pour cultiver la bactérie renferme des sources d'azote, des sources de carbone, des sources de vitamines, des agents réducteurs et des sels minéraux, et éventuellement de la gélose. 29. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 27, caractérisé en ce que le milieu de culture que l'on utilise pour cultiver la bactérie comprend de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou bien les huit composants ci- dessus plus de la gélose, ou bien les huit composants ci- dessus plus de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la L-cystine ou encore les huit composants ci-dessus plus de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose. 30. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 29, caractérisé en ce qu'on procède à la culture à une température de 300 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture ayant un pH de 6,0 à 8,5. 31. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 30, caractérisé en ce qu'on procède à la culture à une température de 32 à 37 C pendant un à quatre jours dans un milieu de culture ayant un pH de 6,5 à 7,5. 32. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 31, caractérisé en ce que les bactéries appartenant au genre Fusobacterium sont des bactéries Fusobacterium nucleatum. 33. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'on cultive les bactéries Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 30 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou bien un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou bien un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la L-cystine., ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L- cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à à 70 % en volume; et on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8, 0; puis on ajuste son pH entre 3,5 et 4,5; et on recueille le précipité formé (s'il y a lieu, on peut répéter ce fractionnement fonction du pH) pour obtenir la substance carcinostatique. 34. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 300 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou bien un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, un milieu de culture comprenant les huit composants ci- dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la L- cystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; et on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8, 0; puis on ajuste son pH entre 5,5 et 6,5; et on recueille le précipité formé (s'il y a lieu, on peut répéter ce fractionnement fonction du pl) pour obtenir la substance carcinostatique. & 35. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 30'C à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou bien un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci- dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la Lcystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine at de la gélose; et on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0; puis on ajuste son pH entre 5,5 et 6,5; on recueille le liquide surnageant; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 3,5 et 4,5; et on recueille le précipité formé (s'il y a lieu, on peut répéter ce fractionnement fonction du pH) pour obtenir la substance carcinostatique. 36. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 30 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la L-cystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose, et on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0; puis on ajuste son pH entre 3,5 et 4,5; on prélève le liquide surnageant; on ajuste son pH entre 1,5 et 2,5; et on recueille le précipité formé (s'il y a lieu, on peut répéter ce fractionnement fonction du pH) pour obtenir la substance carcinostatique. 37. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 300 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou bien un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci- dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la Lcystine ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0; puis on ajuste son pH entre 1,5 et 2,5; on prélève le liquide surnageant; on ajoute un alcool à ce liquide surnageant de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 20 à 80 % en volume; et on recueille le précipité formé pour obtenir la substance carcinostatique. 38. Procédé selon la revendication 16, caractérise en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie & une température de 30 à 42 C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou bien un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la L-cystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protëose, de la L-cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0; puis on ajuste son pH entre 3,5 et 4,5; on recueille le précipité formé (s'il y a lieu, on peut répéter ce fractionnement fonction du pH); on ajoute de l'eau au précipité obtenu; on ajuste le pH entre 7 et 8; puis on ajoute de la pronase ou de la trypsine; on fait subir au mélange un traitement enzymatique à une température de 30 à 40'C pendant une à 72 heures; on ajuste le pH du mélange ainsi traité à 2,5 ou moins, et on sépare le liquide surnageant ainsi obtenu; on ajoute un alcool à ce liquide surnageant de telle sorte que la concentration d'alcool dans la solution combinée résultante devienne égale à 30 à 80 % en volume; et on recueille le précipité formé ou bien, s'il y a lieu, on traite le précipité ci-dessus par une forte résine d'échange d'anions, et on fait subir à sa fraction non-adsorbée une ultrafiltration (que l'on peut répéter s'il y a lieu), puis on filtre sur un filtre "Millipore" et on fait subir une cryodessiccation pour obtenir la substance carcinostatique. 39. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 300 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la L- cystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0 puis on ajuste son pH entre 5,5 et 6,5; on recueille le précipité formé (s'il y a lieu,.on peut répéter ce fractionnement fonction du pH); on ajoute de l'eau au précipité obtenu; on ajuste son pH entre 7 et 8; on ajoute de la pronase ou de la trypsine; on fait subir au mélange un traitement enzymatique à une température de 30 à 40'C pendant une à 72 heures; on ajuste le pH du mélange ainsi traité à 2,5 ou moins; on sépare le liquide surnageant ainsi obtenu; on ajoute un alcool à ce liquide surnageant de telle sorte que la concentration d'alcool dans la solution combinée devienne égale à 30 à 80 % en volume; et on recueille le précipité formé; ou bien, s'il y a lieu, on traite le précipité ci-dessus par une forte résine d'échange d'anions; et on fait subir à sa fraction non- adsorbée une ultrafiltration (que l'on peut répéter s'il y a lieu), puis on la filtre sur un Filtre "Millipore" et on lui fait subir une cryodessiccation pour obtenir la substance carcinostatique. 40. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 30 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou bien un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci- dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la Lcystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0; puis on ajuste son pH entre 5,5 et 6,5; on recueille le liquide surnageant; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 3,5 et 4,5; on recueille le précipité formé (s'il y a lieu, on peut répéter ce fractionnement fonction du pH); on ajoute de l'eau au précipité obtenu; on ajuste son pH entre 7 et 8; on ajoute de la pronase ou de la trypsine; on fait subir au mélange un traitement enzymatique pendant une à 72 heures à une température de 300 à 400C; on ajuste le mélange ainsi traité à un pH de 2,5 ou moins et on sépare le liquide surnageant ainsi obtenu; on ajoute un alcool à ce liquide surnageant de telle sorte que la concentration d'alcool dans la solution combinée devienne égale à 30 à % en volume; on recueille le précipité formé; ou bien, s'il y a lieu, on traite le précipité ci-dessus par une forte résine d'échange d'anions; et on fait subir à sa fraction non-adsorbée une ultrafiltration (que l'on peut répéter s'il y a lieu), puis on la filtre sur un filtre "Millipore" et on lui fait subir une cryodessiccation pour obtenir la substance carcinostatique. 41. Procédé selon la revendication 19, caractérisé en ce qu'on cultive Fusobacterium nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 30 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la L- cystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la peptone de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration.dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0 puis on ajuste son pH entre 3,5 et 4,5; on recueille le liquide surnageant; on ajuste le pH de ce liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on recueille le précipité formé (s'il y a lieu, on peut répéter ce fractionnement fonction du pH) on ajoute de l'eau au précipité obtenu; on ajuste son pH entre 7 et 8; puis on ajoute de la pronase ou de la trypsine; on fait subir au mélange un traitement enzymatique à une température de 30'C à 400C pendant une à 72 heures; on ajuste le mélange ainsi traité à un pH de 2,5 ou moins; on sépare le liquide surnageant ainsi obtenu; on ajoute un alcool à ce liquide surnageant de telle sorte que la concentration d'alcool dans la solution combinée devienne égale à 30 à 80 % en volume; on recueille le précipité formé; ou bien, s'il y a lieu, on traite le précipité ci- dessus par une forte résine d'échange d'anions; et on fait subir à sa fraction non-adsorbée une ultrafiltration (que l'on peut répéter s'il y a lieu), puis on la filtre sur un filtre "Millipore" et on lui fait subir une cryodessiccation pour obtenir une substance carcinostatique. 42. Procédé selon la revendication 20, caractérise en ce qu'on cultive Fusobacteriuia nucleatum dans des conditions anaérobie à une température de 300 à 420C pendant un à cinq jours dans un milieu de culture comprenant de la peptone de trypticase, une infusion de cervelle et de coeur (ou une infusion de coeur), de l'extrait de levure, du chlorure de sodium, du glucose, du lactose, du sulfite de sodium et du thioglycolate, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus et de la gélose, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci- dessus, de la peptone de phytone, de la peptone de protéose et de la Lcystine, ou un milieu de culture comprenant les huit composants ci-dessus, de la pepto-ne de phytone, de la peptone de protéose, de la L-cystine et de la gélose; on prélève le liquide surnageant de la culture; on ajuste le pH du liquide surnageant entre 1,5 et 2,5; on ajoute un alcool de telle sorte que sa concentration dans la solution résultante devienne égale à 50 à 70 % en volume; on recueille le précipité formé; on ajoute de l'eau à ce précipité; on ajuste le pH du mélange entre 7,5 et 8,0; puis on ajuste son pH entre 1,5 ez 2,5; on prélève le liquide surnageant; on ajoute un alcool à ce liquide surnageant de telle sorte que la concentration d'alcool dans la solution résultante devienne égale à 20 à 80 % en volume; on recueille le précipité formé une cryodessiccation pour obtenir la substance carcinostatique. 43. Substance carcinostatique TF-210 possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous forme de sel (a) poudre brun clair - blanc grisatre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich, de la tumeur solide d'Ehrlich, du Sarcome 180 et du mélanome B-16 chez la souris, et elle possède une action immunostimulante. (c) Elle est insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas de point de fusion net et se décompose entre 160 et 2350C. (e) Son spectre d'absorption infrarouge obtenu par la méthode de la pastile de KBr présente des bandes d'absorption au voisinage de 3600-3200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1440, 1380, 1240-1220 et 1120-1020 - 1 cm (f) Le spectre d'absorption ultra-violette d'une solution aqueuse de la fraction soluble dans l'eau à un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 248- 265 nm. (g) Elle est positive à la réaction de Molisch, à la réaction phénol-acide sulfurique, à la réaction anthrone- acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Folin. (h) Son analyse élémentaire est la suivante: C: 40 - 43 % H: 5 - 7 % N: 9 - 10 %. (i) La teneur en saccharides de la fraction soluble dans l'eau à un pH de 7, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 5 à 25 % en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, déterminée par la méthode de Lowry-Folin, est de 20 à 50 % en poids environ, exprimée en albumine de sérum de bovin. 44. Substance carcinostatique TF-220 possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous forme de sel: (a) poudre brun clair - blanc grisâtre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich, de la tumeur solide d'Ehrlich, du Sarcome 180 et du mélanome B-16 chez la souris, et elle possède une action immunostimulante. (c) Elle est insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas de point de fusion net et se décompose entre 160 et 240 C. (e) Son spectre d'absorption infrarouge obtenu par la méthode de la pastille de KBr présente des bandes d'absorption au voisinage de 36003200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1440, 1380, 1240-1220 et 1120-1020 cm 1. (f) Le spectre d'absorption ultra-violette d'une solution aqueuse de la fraction soluble dans l'eau à un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 248-266 nm. (g) Elle est positive à la réaction de Molisch, à la réaction phénolacide sulfurique, à la réaction anthrone-acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Frolin. (h) Son analyse élémentaire est la suivante: C: 40 - 42 % H: 5 - 7 % N: 7 - 9 %. (i) La teneur en saccharides de la fraction soluble dans l'eau à un pH de 7, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 5 à 20 %0 en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, déterminée par la méthode de Lowry-Folin, est de 10 % en poids environ, ou moins, exprimée en albumine de sérum de bovin. 45. Substance carcinostatique TF-230 possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous forme d'un sel (a) poudre brun clair - blanc grisâtre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich, de la tumeur solide d'Ehrlich, du Sarcome 180 et du mélanome B-16 chez la souris, et elle possède une action immunostimulante. (c) Elle est insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas de point de fusion net et se décompose entre 1850 et 2250C. (e) Son spectre d'absorption infrarouge obtenu par la méthode de la pastile de KBr présente des bandes d'absorption au voisinage de 3600-3200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1440, 1380, 1240-1220 et 1120-1020 cm 1 (f) Le spectre d'absorption ultra-violette de sa solution aqueuse ayant un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 249-264 nm. (g) Elle est positive à la réaction de Molisch, à la réaction phénol-acide sulfurique, à la réaction anthrone- acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Folin. (h) Son analyse élémentaire est la suivante C: 42 - 45 % H: 5 - 7 % N: 10 - 11 %. (i) La teneur en saccharides de la fraction soluble dans l'eau à un pH de 7, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 5 à 25 % en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, mesurée par la méthode de Lowry-Folin, est de 30 à 60 % en poids environ, exprimée en albumine de sérum de bovin. 46. Substance carcinostatique TF-240 possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous forme d'un sel: (a) poudre brun clair - blanc grisâtre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich, de la tumeur solide d'Ehrlich, du Sarcome 180 et du mélanome B-16 chez la souris, et elle possède une action immunostimulante. (c) Elle est insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas dz point de fusion net et se décompose entre 2000 et 215 C. (e) Son spectre d'absorption infrarouge, obtenu par la méthode de la pastille de KBr, présente des bandes d'absorption au voisinage de 36003200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1520, 1410-1360, 1280-1210, 1060, 960 et 820 cm-1. (f) Le spectre d'absorption ultra-violette de sa solution aqueuse ayant un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 250-265 nm. (g) Elle est positive à la râaction de Molisch, à la réaction phénol-acide sulfurique, à la réaction anthrone- acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Folin. (h) Son analyse élémentaire est la suivante: C: 35 - 38 % H: 4 - 5 % N: 12 - 14 %. (i) La teneur en saccharides, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 15 d 35 % en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, déterminée par la méthode de Lowry-Folin est de 20 à 30 % en poids environ, exprimée en albumine de sérum de bovin. 47. Substance carcinostatique TF-250 possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous forme d'un sel: (a) poudre brun clair - blanc grisâtre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich, de la tumeur solide d'Ehrlich, du Sarcome 180 et du mélanome B-16 chez la souris, et elle possède une action immunostimulante. (c) Elle est soluble dans l'eau mais insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas de point de fusion net et se décompose entre 165 et 210 C. (e) Son spectre d'absorption infrarouge, obtenu par la méthode de la pastille de KBr, présente des bandes d'absorption au voisinage de 36003200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1410-1380, 1240-1210, 1150-1120, 1080- 1020 et 810 cm1. (f) Le spectre d'absorption ultra-violette de sa solution aqueuse ayant un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 248-269 nm. (g) Elle est positive à la réaction deMolisch, à la réaction phénol-acide sulfurique, à la réaction anthrone- acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Folin. (h) Son analyse élémentaire est la suivante: C: 30 - 33 % H: 3 - 5 % N: 3 - 5 %. (i) Sa teneur en saccharides, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 60 à 80 % en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, déterminée par la méthode de Lowry-Folin, est de 5 à 20 % en poids environ, exprimée en albumine de sérum bovin. 48. Substance carcinostatique TF-300 (TF-310, TF-320 et TF-330) possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous la forme d'un sel: (a) poudre brun clair - blanc grisâtre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich, de la tumeur solide d'Ehrlich, du Sarcome 180 et du mélanome B-16 chez la souris, et elle possède une action immunostimulante. (c) Elle est soluble dans l'eau mais insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas de point de fusion net, et commence à se décomposer à 180 C environ et se décompose remarquablement à pas moins de 195 C. (e) Son spectre d'absorption infrarouge, obtenue par la méthode de la pastille de KBr, présente des bandes d'absorption au voisinage de 35003300, 2920, 2850, 1660-1620, 1580-1540, 1460-1400, 1380-1360, 1120, 1080-1020, 970 et 820-800 cm1. (f) Le spectre d'absorption ultra-violette de sa solution aqueuse ayant un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 246-280 nm. (g) Elle est positive à la réaction de Molisch, à la réaction phénol-acide sulfurique, à la réaction anthrone- acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Folin, mais négative à la réaction de la Ninhydrine. (h) Son analyse élémentaire est la suivante: C: 38 - 47 % H: 5 - 7 % N: 1 - 4 %. (i) Sa teneur en saccharides, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 16 à 60 % en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, déterminée par la méthode de Lowry-Folin, est de 10 % en poids environ ou moins, exprimée en albumine de sérum bovin. 49. Substance carcinostatique TF-300 (TF-310, TF-320, TF-330), éventuellement sous la forme d'un sel, selon la revendication 48, caractérisée en ce que sa teneur en saccharides, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 16 à 30 % en poids environ, exprimée en glucose. 50. Substance carcinostatique TF-300 (TF-310, TF-310, TF-330), éventuellement sous la forme d'un sel, selon la revendication 48, caractérisée en ce que sa teneur en saccharides, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 20 à 60 % en poids environ, exprimée en glucose. 51. Substance carcinostatique TF-340 possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous la forme d'un sel: (a) poudre brun clair - blanc grisâtre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich chez les souris et possède une action immunostimulante. (c) Elle est soluble dans l'eau mais insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas de point de fusion net et commence à se décomposer à 1400C environ, et se décompose remarquablement à 200'C ou plus. (e) Son spectre d'absorption infrarouge, obtenu par la méthode de la pastille de KBr, présente des bandes d'absorption au voisinage de 35003300, 2920, 2850, 1660-1640, 1580-1520, 1460-1440, 1410-1340, 1250-1220, 1120-1030, 970 et 835 cm1. (f) Le spectre d'absorption ultra-violette de sa solution aqueuse ayant un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 250-265 nm. * (g) Elle est positive à la réaction deMolisch, à la réaction phénol-acide sulfurique, à la réaction anthrone- acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Folin, mais négative à la réaction de la Ninhydrine. (h) Son analyse élémentaire est la suivante C: 32 - 34 % H: 4 - 6 % N: 3 - 5 %. (i) Sa teneur en saccharide, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 20 à 50 % en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, déterminée par la méthode de Lowry-Folin, est de 10 % en poids environ ou moins, exprimée en albumine de sérum bovin. 52. Substance carcinostatique TF-350 possédant les propriétés suivantes, éventuellement sous la forme d'un sel (a) poudre brun clair - blanc grisâtre. (b) Elle empêche la prolifération de la tumeur ascitique d'Ehrlich chez la souris, et elle possède une action immunostimulante. (c) Elle est soluble dans l'eau mais insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, le benzène, le chloroforme, l'acétate d'éthyle et l'éther diéthylique. (d) Elle n'a pas de point de fusion net et commence à se décomposer à 110 C environ, et se décompose remarquablement à 180 C ou plus. (e) Son spectre d'absorption infrarouge, obtenu par la méthode de la pastille de KBr, présente des bandes d'absorption au voisinage de 35003300, 2920-2900, 1660-1630, 1580-1520, 1460-1340, 1140-1100, 1080-1020, 970 et 820-800 cm1. (f) Le spectre d'absorption ultra-violette de sa solution aqueuse ayant un pH de 7,0 présente une forte absorption en limite de spectre et un pic d'absorption au voisinage de 245-264 nm. (g) Elle est positive à la réaction de Molisch, à la réaction phénol-acide sulfurique, à la réaction anthrone- acide sulfurique, à la réaction indole-acide chlorhydrique et à la réaction de Lowry-Folin, mais négative à la réaction de la Ninhydrine. (h) Son analyse élémentaire est la suivante: C: 34 - 37 % H: 5 - 6 % N: 1 - 2 % (i) Sa teneur en saccharides, déterminée par la méthode phénol-acide sulfurique, est de 80 à 95 % en poids environ, exprimée en glucose, et sa teneur en protéines, déterminée par la méthode de Lowry-Folin, est de % en poids environ ou moins, exprimée en albumine de sérum bovin. 53. Agent carcinostatique comprenant une substance carcinostatique TF-2 (TF-210, TF-220, TF-230, TF-240, TF-250, TF-300 (TF-310, TF-320 ou TF-330) , TF-340 ou TF-350), ou bien un sel de cet agent, selon l'une quelconque des revendications 43 à 52. 54. Agent carcinostatique selon la revendication 53, caractérisé en ce qu'il comprend une substance carcinostatique TF-300 (TF-310, TF-320 ou TF330) ou un sel de celle-ci.