Brevet FR2509179A1 — publié le 19830114

i "Perfectionnements aux dispositifs et procédés pour la purification du sang". L'invention concerne un dispositif pour la purifica- tion du sang utilisable dans le traitement de maladies rela- tives à l'immunité, de maladies cancéreuses, de l'hypercho- lestérolémie héréditaire, de maladies hépatiques et de mala- dies rénales, entre autres. Récemment, une grande attention a été concentrée sur la thérapie par échange de plasma qui peut réellement produire un effet significatif au cours de maladies immunitaires, de maladies cancéreuses, de l'hypercholestérolémie héréditaire, de maladies hépatiques, de maladies rénales, etc, y com- pris des maladies de l'autoimmunité et des phénomènes de rejet de greffes On suppose que l'effet peut être d M à l'élimination, à partir du sang, de substances susceptibles de causer ces différents troubles, substances telles que des anticorps, des facteurs immunosuppresseurs, des lipoprotéi- nes de faible densité, des protéines liées à des métaboli- tes, des substances hépatotoxiques et néphrotoxiques et qui se trouvent associées au plasma Toutefois, dans la thérapie par échange de plasma, il est nécessaire de procéder à un apport de plasma humain normal ou de sérum-albumine humaine normale pour remplacer le plasma des patients que l'on a dû rejeter, et par conséquent une telle thérapie est difficile- ment applicable au traitement d'un grand nombre de patients. Une telle thérapie coppespond aussi à un gaspillage parce que d'intéressants composants se trouvent aussi éliminés conjointement avec des substances pathogènes inutiles. Par contre, un procédé de purification du sang utili- sant un adsorbant est avantageux parce que l'apport d'un fluide est rarement nécessaire en raison du fait que des composants inutiles sont seule éliminés Toutefois, quand 1 on utilise comme adsorbant du charbon activé ou une rf'esiie poreuse, des substances de bas poids moléculaire telles que de la créatinine et de l'acide urique peuvent être adsor- bées, cependant que des substances pathogènes qui possèdent un haut poids moléculaire sont difficilement éliminables, de sorte qu'il se révèle impossible de produire un effet thérapeutique satisfaisant Bien que quelques résines poreu- ses (par exemple, la résine poreuse vendue par Robm & Haas sous la marque déposée "Amberlite XAD-7 ") puisse adsorber des protéines possédant un poids moléculaire moyen ou même plus élevé, elles présentent l'inconvénient d'adsorber aussi des composants utiles tels que des vitamines et des saccha- tides; il est possible aussi que des impuretés provenant du procédé de préparation de ces résines se trouvent extraites par lixiviation, et on peut constater fréquemment une forma- tion de minuscules particules, et ces inconvénients restrei- gnent les possibilités d'utilisation de tels adsorbants. A la suite de recherches tenacement poursuivies en vue d'apporter une solution à ces problèmes, la demanderesse a trouvé qu'un matériau poreux ayant un diamètre moyen des po- res de 30 à 3 000 Aongstrdms avec une étroite répartition de la dimension des pores et comportant de préférence des radi- caux silahol sur la surface peut adsorber sélectivement des protéines; cette découverte a fait l'objet du dépôt d'une demande de brevet (FR NO 8107714) Toutefois, il a été découvert ultérieurement qu'un matériau poreux tel que du verre poreux s'obtient généralement sous une forme broyée ou concassée dont chaque particule possède des arêtes vives de sorte que, lorsqu'on l'utilise pour le traitement direct du sang, un tel matériau provoque une diminution du nombre des leucocytes ou des plaquettes par unité de volume du sang. De plus, lorsque des particules concassées sont tassées dans une colonne et quand on fait passer du sang ou du plasma au travers de la masse de particules, la perte de pression à l'intérieur de la colonne augmente au fur et à mesure que l'opération se prolonge, ce qui est défavorable pour un traitement dusang de longue durée A la suite de nouvelles recherches en vue de remédier à ce dernier inconvénient, il a été découvert que l'utilisation de granules poreux de for- me sphérique-permet de supprimer les ennuis susmentionnée, et c'est cette découverte qui a conduit à la présente inven- tion. L'invention a pour objet un dispositif pour la purifi- cation du sang comprenant une couche adsorbante de granules poreux tassés, sensiblement sphériques, possédant au moins 0,1,umole/m 2 de radical silanol sur leur surface, une entrée de sang et une sortie de sang Un but de l'invention est de réaliser un dispositif pour la purification du sang dans lequel une diminution du nombre de leucocytes ou de plaquet- tes par unité de volume, des dommages causés aux cellules du sang pendant le traitement du sang, ou une augmentation de la perte de pression au fur et à mesure que la durée de l'o- pération s'accroît n'interviennent que dans une faible mesu- re Le terme "sang" tel qu'il est utilisé ici doit être com- pris comme englobant dans sa portée le plasma et le sérum aussi bien que le sang entier. On donne ci-après une description détaillée de l'inven- tion en se référant aux dessins ci-annexés dans lesquels la fig 1 est une microphotographie, au microscope électronique, de granules de verre poreux concassés; la fig 2 est une microphotographie, au microscope électronique, de granules de verre poreux sphériques la fig 3 montre en coupe un dispositif pour la purifi- cation du sang réalisé conformément à l'invention, et la fig 4 représente schématiquement un mode de purifi- cation du sang utilisant un dispositif pour la purification du sang établi conformément à l'invention. Il est nécessaire que les granules poreux à utiliser en vue de la mise en oeuvre de l'invention possèdent au moins 0,1/,imole/m 2, de préférence pas moins de 0,3 Ogmole/m 2, et plus avantageusement encore pas moins de Oe 5 pmole/m 2 de radical silanol sur leur surface Quand la teneur en sila- nol sur la surface est inférieure à 0,1 pmole/m 2, l'adsor- bant possède une faible capacité d'adsorption à l'égard des protéines et ne convient pas en vue des buts que se propose l'invention Le radical "silanol" possède la formule 35 i -OH et sa concentration sur la surface est mesurée par absorp*- tiométrie de rouge de méthyle La "surface" comprend i)nrn seulement la surface apparente des granules, mais aussi la surface à l'intérieur des micropores Comme granules sus- spécifiés, poreux et comportant des radicaux silanol sur leur surface, on peut mentionner des granules de verre po- reux, de silice poreuse, de silice-alumine poreuse et de matériaux analogues et des granules de ces substances et d'autres matériaux poreux sur-la surface desquels les radi- caux silanol ont été introduits à la suite d'un traitement avec une solution de silicate de sodium, un revêtement avec un polymère ou par liaison chimique, par exemple, On produit un verre poreux en fondant et en mettant en forme un verre du type borosilicate alcalin, en faisant su- bir au verre mis en forme un traitement thermique à une température comprise dans la région de la température de transition, et en faisant subir au verre résultant un trai- tement par un acide, ledit verre résultant ayant été le siège d'une séparation de phases fines Des granules de verre poreux disponibles dans le commerce sont généralement produits en concassant un verre, servant de matière premiè- re, jusqu'à obtention de particules d'une grosseur appro- priée qui ont par conséquent une forme telle que celle des particules représentées sur la fig 1 Des granules de verre poreux sphériques peuvent être produits en soufflant un verre-fondu, du type borosilicate alcalin, contre une plaque-métallique au travers d'un ajutage, en faisant subir au matériau ainsi mis en forme un traitement thermique à une température comprise dans la région de la température de transition, puis en traitant le produit par un acide On peut aussi produire lesdits granules en traitant des granu- les concassés, en verre du type borosilicate alcalin, à une température légèrement supérieure à la région de température de transition, en faisant subir encore un autre traitement thermique aux granules résultants, qui sont désormais sphé- riques, à une température comprise dans la région de la tem- pérature de transition, puis en traitant le produit par un acide Une microphotographie,prise au microscope électroni- que, de granules en verre poreux sphériques est représentée sur la fig 2 On produit une silice poreuse en traitnnt une solution de silicate de sodium avec un acide tel que de l'acide sulfurique puis en séchant l'hydrogel résultant puis en faisant éventuellement subir au produit, si cela apparait nécessaire, un traitement thermique terminal On prépare une silice-alumine poreuse en déposant de l'alumine sur un hydrogel de silice, puis en effectuant le même traitement que celui spécifié ci-dessus On peut produire des granules sphériques, par exemple, en faisant tomber une solution de silicate de sodium au travers d'un ajutage jusque dans un liquide à deux couches composé d'un milieu insoluble dans l'eau et d'une solution acide aqueuse de façon à former un hydrogel dans lequel se trouvent dispersés des granules sphériques L'introduction de radicaux silanol par traite- ment avec une solution de silicate de sodium peut être ef- fectué, par exemple, en plongeant des granules poreux dans une solution de silicate de sodium, en recueillant les gra- nules par filtration, en les séchant, puis en les plongeant, par exemple, dans de l'acide chlorhydrique, puis en les sé- chant par chauffage L'introduction de radicaux silanol par application d'un revêtement de polymère peut être effectué en revêtant des granules poreux avec un polymère contenant des radicaux silanol et tel, par exemple, que du poly(métha- crylate de triméthoxysilylpropyle) ou un polymère d'acrylate ou de méthacrylate contenant du méthacrylate de triméthoxy- silylpropyle comme comonomère On peut réaliser l'opération d'application de revêtement, par exemple, en revêtant des granules poreux avec une solution contenant le(s) monomère(s) et, si nécessaire, un initiateur de polymérisation puis en polymérisant le(s) monomère(s) par chauffage, par exemple. L'introduction de radicaux silanol par liaison chimique est réalisable en faisant réagir des granules poreux directement avec un agent de couplage de silane. Parmi les granules poreux susmentionnés contenant des radicaux silanol, on accorde la préférence à des granules de verre poreux en raison de leur grande résistance physique et de leur haute concentration en radicaux silanol. Il est nécessaire que les granules poreux à utili Eer pour mettre en oeuvre l'invention soient sensiblement sp}lé- riques Quand les granules ne sont pas sphériques, ce qui est le cas de granules poreux pour l'usage général et tels que ceux qui sont produits en broyant ou concassant une mas- se de verre poreux, ils conservent des artes vives même après l'opération d'application de revêtement et, quand ils sont en contact avec le sang, ils peuvent agir défavorable- ment en provoquant une diminution du nombre de leucocytes ou de plaquettes par unité de volume ou en endommageant des cellules du sang, ou bien ils peuvent provoquer la formation de thrombus En outre, quand les granules ne sont pas sphé- riques, la perte de pression peut s'accroître et, par consé- quent, de tels granules sont défavorables pour réaliser un traitement du sang continuellement pendant de nombreuses heures L'expression "sensiblement sphérique" telle qu'elle est utilisée ici signifie que, pour chaque granule, le rap- port du diamètre maximum au diamètre minimum n'est pas supé- rieur à 1,5 et que le granule ne comporte pas d'arêtes vives mais possède apparemment une surface lisse, autrement dit que chaque granule possède une surface sphérique lisse La, couche adsorbante qui constitue le dispositif pour la puri- fication du sang conformément à' l'invention est formée seu- lement avec des granules sensiblement sphériques. Les granules sphériques destinés à être utilisés con- formément à l'invention possèdent de préférence un diamètre compris entre 0,1 mm et 5 minm, plus avantageusement entre 0,5 mm et 1 mm Quand le diamètre des granules est inféri- eur à 0,1 mm, la perte de pression dans la couche adsorbante devient importante et, en outre, il surgit un risque d'hémo- lyse Quand le diamètre des granules est supérieur à 5 mm, l'accroissement des espaces intergranulaires diminue défavo- rablement l'efficacité d'adsorption. De plus, les granules poreux ont de préférence un volu- me de pores compris entre 0,3 cm 3/g et 2,0 cm 3/g Quand le volume de pores est inférieur à 0,3 cm O/g, la capacité d'ad- sorption à l'égard des protéines est faible et les granules ne conviennent pas en vue d'assurer l'obtention des buts que se propose l'invention Quand le volume de pores est supé- rieur à 2,0 cm 3/g, la structure du squelette vitreux revient fragile et la possibilité de la formation de minuscules frai. ments se trouve accrue En outre, il est désirable que les granules poreux possèdent un diamètre de pores compris entre A et 3 000 A Quand le diamètre des pores est inférieur à 20 A, des protéines ne peuvent pas pénétrer à l'intérieur des micropores et, par conséquent, ne peuvent pas être adsor- bées efficacement Quand le diamètre des pores est supérieur à 3 000 A, la surface développée diminue et la structure du squelette vitreux devient défavorablement fragile. En outre, il est préférable que la répartition des dia- mètres de pores soit uniforme parce qu'une répartition des diamètres de pores s'échelonnant dans un large intervalle a pour résultat de diminuer la sélectivité d'adsorption des protéines en fonction de la grosseur des molécules de protéi- nes Par conséquent, il est préférable que, lorsque le dia- mètre moyen des pores est D, le rapport du volume des pores ayant des diamètres compris entre 0,8 D et 1,2 D au volume total des pores soit au moins égal à 80 % Quand les granu-. les possèdent une telle étroite répartition du diamètre des pores, l'utilisation de granules poreux possédant un diamè- tre de pores adéquat selon le poids moléculaire de la proté- ine qu'il s'agit d'adsorber peut avoir pour résultat une adsorption et une élimination sélectives des protéines en question. Il existe une étroite relation entre le diamètre moyen des pores et l'espèce de protéine adsorbée Par exemple, pour l'adsorption de protéines possédant un poids moléculai- re de 500 à 20 000, te-Mesque des facteurs d'immunité solu bles,lpar exemple facteur immunosuppresseur dérivé de cellu- les cancéreuses:IRA ("-globuline régulatrice de l'immunité), facteurs d'immunité solubles dérivés de lymphocytes T:TCGF (facteur de croissance de cellules T), GSF (facteur de crois- sance soluble), SSF (facteur suppresseur soluble), TRF (fac- teur de remplacement de cellules T) et EHF (facteur destruc- teur d'aide aux cellules), facteurs solubles dérivés du thy- mus:LSF (facteur de stimulation des lymphocytes) et CIF (facteur inducteur de compétence), et facteurs dérivés de macrophages:TDF (facteur de différentiation de thymocyten:) interleukine Il, lysozyme, cytochrome C et des protéines to- xiques secrétées par des serpents venimeux, des scorpions, des oursins venimeux, des araignées venimeuses, des crapauds, des guêpes, des abeilles, etc, les granules possèdent de préférence un diamètre moyen de pores compris entre 20 et A Plus spécialement pour le GSF susmentionné, les granules possèdent de préférence une surface chargée négati- vement et, pour le SSF, une surface chargée positivement - La surface chargée négativement et la surface chargée posi- tivement peuvent être obtenues en introduisant des radicaux chargés négativement tels que des radicaux carboxyle ou sulfo et des radicaux chargés positivement tels que des radi- caux amino, respectivement, sur la surface Pour des proté- ines ayant un poids moléculaire de 20 000 à 200 000, telles que yglobuline, albumine et des facteurs immunosuppresseurs, y compris 1antitrypsine (c 1 AT), protéine C-réactive (CRP), a 1-glycoprotéine acide (AAG), protéine acide immunosuppres- sive (l AP) et a-fétoprotéine (AFP), les granules possèdent de préférence un diamètre moyen de pores compris entre 150 O et 1 000 A Les yglobulines sont un groupe de protéines possédant un poids moléculaire d'environ 160 000 Parmi elles, l'immunoglobuline G est le principal facteur respon- sables de maladies de l'autoimmunité L'élimination d'un tel facteur responsable à partir du sang peut contribuer au traitement des maladies provoquées Pour l'adsorption de y-globuline, l'utilisation de granules poreux possédant un diamètre moyen de pores de 350 à 900 A (plus avantageusement de 400 à 700 A) est spécialement préférable étant donné que des granules poreux ayant un diamètre moyen de pores compris dans l'intervalle susmentionné peuvent absorber une y-globu- line efficacement et sélectivement Pour LDL ayant un poids moléculaire de plusieurs millions, l'utilisation de granules poreux ayant un diamètre moyen de pores compris entre 900 et 1 600 A est préférable, et, pour des protéines ayant un poids moléculaire de 200 000 à 1 000 000, y compris des com- plexes dits immuno-complexes, fibrinogène, microfibrine et des compléments, le diamètre moyen des pores,st de pr'fë- O rence compris entre 1 000 et 2 500 A. Les granules poreux peuvent être tassés tels quels dans une colonne Pour en accroître la compatibilité avec le sang, toutefois, il est aussi possible de les revêtir avec un polymère hydrophile Le procédé permettant de les revê- tir avec un polymère hydrophile comprend de préférence leur immersion dans une solution de polymère hydrophile, après quoi on les sort du solvant Dans un mode de réalisation plus avantageux, on utilise un polymère contenant un agent de réticulation transversale et, après l'opération d'applica- tion du revêtement, on effectue une réticulation transversa- le par chauffage Lors de la mise en oeuvre d'un tel procé- dé, le polymère hydrophile pénètre légèrement dans les micro- pores des granules poreux et, par conséquent, le risque d'u- ne diminution des propriétés de comportement due à un recou- vrement des radicaux silanol sur la surface intérieure ou paroi des pores est faible Comme exemples de polymère hy- drophile utilisable, on peut citer des polymères à base d'es ter d'acide acrylique, des polymères à base d'ester d'acide méthacrylique, des polymères à base d'acrylamide, des poly- mères à base d'alcool vinylique, la polyvinylpyrrolidone, un nitrate de cellulose et la gélatine. La colonne remplie avec les granules poreux comprend de préférence un corps principal équipé d'une entrée de sang et d'une sortie de sang pouvant être chacune facilement raccor- dée à un circuit de sang, la couche de granules poreux s'é- tendant entre ladite entrée et ladite sortie, et le corps de colonne est en outre équipé de filtres constitués par des tamis à mailles de n O 80 à n O 180 (à ouvertures carrées me- surant respectivement 0,177 mm et 0,083 mm de côté, environ) agencés de part et d'autre de la couche adsorbante (c'est-à- dire entre la couche et l'orifice d'entrée et entre la couche et l'orifice de sortie) On peut aussi utiliser des colonnes de n'importe quelle autre forme mais capables de fonctionner sensiblement de la même manière et en vue des mêmes fins. La portion de colonne dans laquelle la couche adsorbante se trouve contenue possède généralement une forme cylindrique. Le rapport L/D de la longueur L du cylindre au diamètre D dis cylindre est de préférence compris entre I et 5 Quand 1/1) est inférieur à 1, le sang ne s'écoule pas uniformément au travers de la couche adsorbante et, par conséquent, l'adsor- ption devient inefficace Quand L/D est supérieur à 5, la perte de pression s'accroit jusqu'à un point tel qu'une hé- molyse peut intervenir Quand le rapport L/D est compris entre 1 et 5, la purification du sang peut s'effectuer de la manière la plus efficace Le matériau constitutif de la co- lonne est, par exemple, du verre, du polyéthylène, du poly- propylène, du polycarbonate, du polystyrène ou du poly(mé- thacrylate de méthyle) Parmi ces matériaux, un polypropy- lène et un polycarbonate, par exemple, qui sont capables de supporter une stérilisation par la vapeur d'eau, sont plus particulièrement préférés Le matériau constitutif des fil- tres peut être en n'importe quelle substance physiologique- ment inerte et mécaniquement résistante; un polyester et un polypropylène sont considérés comme étant les plus avanta- geux. La colonne contenant les granules poreux qui y sont tassés est généralement stérilisée avant utilisation, de préférence par stérilisation à la vapeur d'eau ou par stéri- lisation à l'aide de rayons y. En se référant aux dessins, on décrit ci-après plus en détail le dispositif pour la purification du sang réalisé conformément à l'invention La fig 3 montre en coupe un exemple de réalisation d'un tel dispositif pour la purifica- tion du sang Le corps principal 1 comporte une entrée de sang 2 et une sortie de sang 3, et il contient des filtres 4 et une couche adsorbante 5 Le sang est introduit dans le dispositif par l'entrée 2, les protéines qu'il s'agit d'éli- miner sont adsorbées dans la couche adsorbante 5, et le sang traité sort de la colonne par la sortie 5 La fig 4 montre de quelle manière le sang est traité par circulation extra- corporelle-en utilisant le dispositif pour la purification du sang selon l'invention Le sang prélevé à une artère est introduit dans le dispositif pour la purification du sang au moyen d'une pompe 6 et, après élimination, par adsorption, des protéines qu'il s'agit d'éliminer, le sang est réintro- duit dans une veine De cette manière, des maladies peuvent être traitées par élimination, par adsorption, de protéines spécifiques à partir du sang. Parmi les maladies qu'il est possible de traiter en 1 1 utilisant un tel dispositif pour la purification du sang, on peut citer, entre autres, des maladies de l'immunité, des maladies cancéreuses, l'hypercholestérolémie héréditaire, des maladies hépatiques et des maladies rénales, y compris érythématose du type lupus généralisé, arthrite rhumatoide chronique, glomérulonéphrite chronique, myasthénie grave, sclérose multiple, polymyosite, maladie de Behçet, syndrome de Sj 5 gren, sclérodermie, granulome éosinophile, syndrome de Heerfordt, granulomatose de Wegener, asthme bronchique, pneu- monie éosinophile, hépatite agressive chronique, cirrhose hépatique biliaire primaire, spondylarthrite ankylosante, diabète, polyartérite, anémie aplastique, anémie hémolytique avec autoimmunité, syndrome de Flety, purpura thrombocytopé- nique idiopathique, et rejet de greffes. Le dispositif pour la purification du sang selon l'in- vention permet de traiter non seulement le sang entier, tel quel, mais aussi le plasma seul après une séparation préli- minaire du sang en composants cellulaires et plasma au moyen d'une membrane sélectivement perméable ou d'une centrifugeu- se, par exemple. On donne ci-après différents exemples, bien entendu non limitatifs, pour illustrer des modalités de mise en oeuvre de l'invention. Exemple 1 et exemple comparatif 1 On remplit une colonne en polypropylène avec 50 cm 3 de granules en verre poreux sphériques, des filtres en tamis à maille n O 135 (à ouvertures carrées mesurant 0,110 mm de côté) étant disposés entre l'entrée de sang et la couche adsorbante et entre la sortie de sang et la couche adsorban- te Les granules en verre poreux possèdent sur leur surface une concentration de radicaux silanol de 0,85 jmoles/m 2, un diamètre moyen (D) des pores de 450 A, un volume de pores de 0,8 cm 3/g et un intervalle de diamètres des granules setér- dant entre 0,5 et 1,0 mm, et le rapport du volulme occoli; 4 Par des pores ayant des diamètres de 0,8 D à 1,2 D au volume o- tal des pores est égal à 90 % (Exemple 1) A titre de com- paraison, on remplit la même colonne avec 50 cm 3 de granules en verre poreux concassé "CPG-10-350 " (Electro Nucleonics; concentration de radicaux silanol 0,67/tmoles/m 2; diamètre moyen (D) des pores 380 A; rapport du volume occupé par des pores ayant des diamètres de 0,8 D à 1,2 D au volume total des pores égal à 86 %; grosseur des granules de 0,125 à 0,177 mm)(Exemple comparatif 1). On fait circuler du sang entier de lapins (mâles pesant de 3,5 à 4,0 kg) au travers de chaque colonne à un débit d'- environ 5 ml/minute pendant 4 heures, et on suit les varia- tions, en fonction du temps, du nombre de cellules sanguines par unité de volume et la concentration de protéines du sang * ainsi mis en circulation Les valeurs du pourcentage d'éli- mination pour l'albumine et la y-globuline sont calculées à partir des rapports des hauteurs des maximums respectifs obtenus à l'aide d'un chromatographe de haute performance opérant sur des liquides (appareil: Waters modèle ALC/GPC 244; colonne Toyo Soda G-3000 SW ayant un diamètre inté- rieur de 7,5 mm et une longueur de 600 mm; éluant constitué par un tampon au phosphate 1/15 M contenant 0,15 M de Na Cl, p H 6,0; débit d'écoulement 1,0 ml/minute; détection dans l'ultraviolet de 280 ni On effectue la numération des cel- lules sanguines en utilisant un compteur de plaquettes et un compteur de cellules sanguines Toa Medical Electronics. Tableau 1 Variations de la concentration de protéines et du nombre de cellules sanguines par unité de volume avant et après circulation extracorpo- relie. Exemple Exemple 1 comparatif 1 Après Après Avant 4 h Avant 4 h Elimination d'albumine % 22 24 Elimination de y-globuline % 81 77 Nombre d'hématies (x 104/mm 3) 643 621 686 575 Nb de leucocytes (x 103/mm 3) 12,5 11,8 21,1 7,1 Nb de plaquettes (x 103/mm 3) 413 368 458 87 Dans l'exemple comparatif 1, dnus leqluel des grlnulis poreux concassés sont tassés dans la colomnne, le nombre de leucocytes (globules blancs du sang) se trouve diminué jus- qu'à moins de la moitié et le nombre de plaquettes jusqu'à un cinquième, et par conséquent l'influence sur des compo- sants du sang est grande D'autre part, dans l'exemple 1, pour lequel desgranules poreux sphériques remplissent la colonne, les variations dans le nombre des cellules sangui- nes par unité de volume sont faibles, et l'effet de l'in- vention est évident. Exemple comparatif 2 On effectue la même expérience que celle décrite dans l'exemple 1, mais en utilisant une alumine poreuse, commer- cialisée par Mizusawa Chemical Industries sous la marque déposée "Neobead MSC-3 ", après chauffage pendant 3 heures (diamètre des globules compris entre 0,3 et 0,8 mm; concen- tration de radicaux silanol égale à environ 0 ? mole/m 2; diamètre moyen des pores 540 A; volume de pores 0,285 cm 3/g). Après avoir fait circuler du sang pendant 4 heures, le pour- centage d'élimination d'albumine est de 5 % et le pourcenta- ge d'élimination de y-globuline est de O %, et le but de l'invention n'a pas été atteint. Exemple 2 ml de sang de lapin contenant 120 mg de lysozyme (poids moléculaire 14 600) sont admis à circuler in vitro à 370 C à un débit d'environ 3 ml/minute au travers d'une co- lonne en polypropylène (avec des filtres,à ouvertures car- rées de 0,083 mm de côté, en polyester agencés à l'entrée et à la sortie) remplie avec 2 g de granules en verre poreux sphériques (concentration superficielle de radicaux silanol égale à 0,93 "moles/m 2; diamètre moyen des pores D = 95 A rapport en volumes des pores de 0,8 D à 1,2 D 93 %; volume de pores 0,6 cm 3/g; diamètre des granules de 0,5 à 1,0 mm). On suit, de la même manière que celle décrite dans l'exemple 1, les variations des concentrations de lysozyme, d'albumine et de Y-globuline en fonction du temps Les valeurs de pourcentages d'élimination ainsi trouvées pour chaque protéine sont présentées ci-après dans le Tableau 2. Ainsi que cela ressort clairement de l'examen de ce Tableau 2, l'élimination du lysozyme est à peu près complète en 3 heures, mais les concentrations d'albumine et de y-globuline n'ont pas diminué du tout au cours de l'expérience Ces ré- sultats indiquent que, dans le dispositif pour la purifica- 14- tion du sang réalisé conformément à l'invention, des protéi- nes désirées peuvent être éliminées sélectivement en choi- sissant d'une manière adéquate le diamètre moyen des pores des granules poreux à utiliser. Tableau 2 Elimination de protéines à partir de sang de lapin Temps en Lysozyme Albumine Y-globuline heures (P M 14600) (P M env 60000) (P M env 160000) 1 93 O % O % 2 98 O O 3 99 O O (P.M = poids moléculaire) Exemple 3 et exemple comparatif 3 On remplit une colonne de 30 cm 3 avec des granules en verre poreux sphériques ayant un diamètre moyen de pores (D) de 450 A (concentration de radicaux silanol 0,75 umoles/ m'; rapport en volumes des pores de 0,8 D à 1,2 D = 80 %; volume de pores 0,60 cm 3/g; diamètre moyen des granules 1,0 mm) de la même manière que celle décrite dans l'exemple 1 (exemple 3) A titre de comparaison, on remplit la même co- lonne que celle spécifiée ci-dessus avec des granules en verre poreux concassé ayant un diamètre moyen de pores (D) de 470 A (concentration de radicaux silanol 0,63 "pmoles/m 2 rapport en volumes des pores de 0,8 D à 1,2 D = 83 %; volume de pores 0,81 c J 3/g; diamètre moyen des granules 1,0 mm) (Exemple comparatif 3). On fait circuler environ 60 ml de sang entier-de lapin à 370 C au travers de chaque colonne, et on-examine la rela- tion possible entre le débit d'écoulement et la perte de pression. Les résultats, présentés dans le Tableau 3 ci-après, indiquent que, dans l'intervalle des débits compris entre 8,3 et 17,9 ml/minute,-la perte de pression que l'on conuta- te entre la valeur de la pression en amont de la colone et la valeur de la pression en aval de la colonne est toujours plus petite d'environ 5 mm de Hg dans la colonne de l'exem- ple 3 que dans la colonne de l'exemple comparatif 3 Ceci confirme la supériorité de la colonne de l'exemple 3 Dans chaque cas, on n'observe pas d'hémolyse. Tableau 3 Relation entre le débit d'écoulement du sang entier et la perte de pression au travers de la colonne. Perte de pression (mm de Hg) Débit (ml/minute) Exemple 3 Exemple comparatif 3 8,3 15 20 11,0 20 25 13,0 25 30 17,9 30 35 Exemple 4 On remplit la même colonne que celle utilisée dans l'exemple 3 avec des granules en verre poreux sphériques ayant un diamètre moyen (D) de pores de 1 020 A (concentra- tion de radicaux silanol 0,47 pmoles/m 2; rapport en volumes de pores de 0,8 D à 1,2 D = 86 %; volume de pores 0,65 cm 3/g; diamètre moyen des granules 1,0 mm). On fait circuler 80 ml de sang entier de lapin à 57 O C au travers de la colonne à un débit de 10 ml/min pendant 3 heures La majeure partie du cholestérol présent dans le sang y existe sous la forme liée aux lipoprotéines de faible densité (LFD) et on estime que le pourcentage d'élimination du cholestérol est sensiblement égal au pourcentage d'élimi- cation de LFD On détermine donc les concentrations de cholestérol dans le sang avant et après l'opération d'ad- sorption par la méthode à l'orthophtalaldéhyde, et on calcu- le le pourcentage d'élimination du cholestérol, c'est-à-dire le pourcentage d'élimination de LFD. Le pourcentage d'élimination de cholestérol (ou pourcen- tage d'élimination de LFD) est égal à 80 %, et la quantité totale de cholestérol éliminé est égale à 64 mrag La perte de pression provoquée par la colonne est égale à environ 20 mm de Hg et est constante On n'observe aucune hfmolyse. 2509-179 REVENDICATIONS 1 Dispositif pour la purification du sang qui com- prend une couche adsorbante de granules poreux tassés, sen- siblement sphériques, possédant sur leur surface au moins 0,1 lpmole/m 2 de radicaux silanol, et possédant une entrée de sang et une sortie de sang. 2 Dispositif pour la purification du sang selon la revendicatioh 1, caractérisé en ce que la majorité des gra- nules poreux sphériques possèdent un diamètre compris entre 0,1 mm et 5 mm. 3 Dispositif pour la purification du sang selon la revendication 1, caractérisé en ce que la majorité des gra- nules poreux sphériques possèdent un diamètre compris entre 0,5 mm et 1 mm. 4 Dispositif pour la purification du sang selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les granules poreux sphériques possèdent un volume de pores compris entre 0,3 cm 3/g et 2,0 cm 3/g. Dispositif pour la purification du sang selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les granules poreux sphériques possèdent un diamètre des o o pores compris entre 20 A et 3 000 A. 6 Dispositif pour la purification du- sang selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le rapport du volume occupé par des pores ayant des dia- mètres compris entre 0,8 D et 1,2 D au volume total des po- res est égal à au moins 80 %, D étant le diamètre moyen des pores 7 Dispositif pour la purification du sang selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la substance constitutive des granules poreux sphériques est un matériau choisi parmi le groupe constitué par du ver- re poreux, de la silice, poreuse et une silice-alumine poreu- se - 8 Utilisation de granules poreux, sensiblement sr-h L riques, possédant sur leur surface au moins 0,1 JJ Lmole/m 2 de radicaux silanol, pour la réalisation d'un dispositif pour la purification du sang comprenant une entrée de sang et une 1 7 sortie de sang, et contenant un adsorbant. 9 Utilisation de granules poreux, sensiblement sphé- riques, selon la revendication 8, caractérisée en ce que la majorité des granules poreux sphériques possèdent un diamè- tre compris entre 0,1 mm et 5 mm. Utilisation de granules poreux, sensiblement sphé- riques, selon la revendication 8, caractérisée en ce que la majorité des granules poreux sphériques poss èdent un diamè- tre compris entre 0,5 mm et 1 mm. 11 Utilisation de granules poreux, sensiblement sphé- riques, selon l'une des revendications 8 à 10, caractérisée en ce que les granules poreux sphériques possèdent un volume de pores compris entre 0,3 cm 3/g et 1,0 cm 3/g. 12 Utilisation de granules poreux, sensiblement sphé- riques, selon l'une des revendications 8 à 11, caractérisée en ce que les granules poreux sphériques possèdent un diamè- o tes des pores compris entre 20 A et 3 000 A. 13 Utilisation de granules poreux, sensiblement sphe- riques, selon l'une des revendications 8 à 12, caractérisée en ce que le rapport du volume occupé par des pores ayant des diamètres compris entre 0,8 D et 1,2 D au volume total des pores est égal à au moins 80 %, D étant le diamètre moyen des pores. 14 Utilisation de granules poreux, sensiblement sphé- riques, selon l'une des revendications 8 à 13, caractérisée en ce que la substance constitutive des granules sphériques est un matériau choisi parmi le groupe constitué par du verre poreux, de la silice poreuse et une silice-alumine poreuse.