Brevet FR2510567A1 — publié le 19830204

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de 16-méthoxy-16- méthyl-prostaglandine EJ, leurs procédés de préparation et leur utilisation comme agents gastroprotecteurs, le terme "utili- sation" s'entendant pour désigner tous les aspects et actes de cette utilisation applicables industriellement, y compris l'incorporation des nouveaux composés dans des compositions pharmaceutiques qui re- présentent donc un aspect particulier de l'invention. Les nouveaux composés formant le premier objet de l'in- vention sont des dérivés de 16-méthoxy-16-méthyl-prostaglandine E 1 de formule générale suivante: 2 OCH 3 2 2 011 _j 4 163 18 20 1 13 CH 15 -\CH 2 19 /CH 3 14 ? 17 CH CH 3 OH I dans laquelle R représente un groupe alkyle en C 1-C 4 ou un cation non toxique acceptable en pharmacie tel que Na+ K+, le cation ammonium et ses dérivés organiques. Dans la formule ci-dessus les lignes en pointillé sont utilisées pour indiquer qu'un constituant particulier se trouve au- dessous du plan de la molécule telle qu'elle est représentée (con- figuration a) tandis qu'une ligne en trait plein large s'utilise pour un substituant qui se trouve au-dessus du plan de la molécule telle qu'elle est représentée (configuration A). Les composés du type prostaglandine de formule ci-dessus possèdent deux centres chiraux sur la chatne inférieure c'est-à-dire les carbones 15 et 16 On peut donc préparer quatre isomères dif- férents de formule I, caractérisés par les combinaisons suivantes de configurations attribuées aux carbones 15 et 16: ( 15-R, 16-S) -S> 16-R), ( 15-R, 16-R) et 15-S, 16-S). Les composés de l'invention possèdent une activité anti- sécrétoire remarquable, en particulier lorsqu'on les administre par la voie orale et exercent, même à de très faibles doses orales,des Z$ 10567 effets cytoprotecteurs excellents. Les prostaglandines constituent une classe de substances naturelles qui sont étudiées en profondeur parce qu'elles possèdent des actions pharmacologiques différentes (abortive, antisécrétoire, hypotensive, bronchodilatatrice) et également parce qu'elles inter- viennent de nombreux processus biologiques (W Losert et collabora- teurs Arzneip Forsch Drug Res, 25, n 2, page 135, 1875) Il existe donc une vaste littérature dans ce domaine et il y a égale- ment un certain nombre de brevets et de demandes de brevets concer- nant des classes de prostaglandines "synthétiques" qui diffèrent des prostaglandines naturelles par la structure du noyau cyclopen- tane et/ou de l'une ou des deux chaînes latérales (voir par exemple brevetsbritanniquesn 1 409 841, 1 506 816 et 1 345 934, brevet belge 827 529 et brevet des Etats-Unis d'Amérique 4 029 698). Les mêmes prostaglandines de formule I ci-dessus qui font l'objet de l'invention bien qu'elles soient totalement nouvel- les, entrent dans le cadre des formules générales du brevet belge 837 865 et du brevet britannique 1 495 152 Cependantdans le brevet belge cidessus, les dérivés 16-méthyl-16-méthoxy-prostaglandine E 1 ayant une liaison saturée en C 5 ne sont jamais décrits,tandis que dans le brevet britannique 1 495 152 seulement deux 16, 16-diméthyl- prostaglandines E sont préparées,dans lesquelles en outre le groupe méthylène en position 17 est remplacé par un atome d'oxygène,qui à son tour porte un groupe propyle ou pentyle, et il y a toujours une double liaison cis-5. Les composés de l'invention sont préparés selon des techniq u e S qui sont couramment utilisées dans ce domaine et sont totalement décrites dans le brevet belge 837 865 Le composé de départ est un cyclopentanealdéhyde de formule: OR R CH CH CH COOR * CCH 2 C O CH 2 x CH 22 I op, CHO dans laquelle R est tel que défini ci-dessus et R et R 2, chacun- indpendamment, repr 1 sentent un atome d'hydrogne ou un groupement indépendamment> 1 représentent un atome d'hydrogène-ou un groupement protecteur de la fonction hydroxy De préférence, selon l'invention, R 1 représente un groupe acyle aliphatique en C 2-C 4 et R 2 est un atome d'hydrogène ou un radical tétrahydro-pyranne-2-yle. On peut préparer le cyclopentanealdéhyde de départ par des méthodes décrites dans la littérature (voir par exemple les brevets belges 807 161 et 837 855). Le procédé pour préparer les prostaglandines de l'inven- tion comprend comme première étape la condensation entre l'aldéhyde et la formule II ci-dessus et un phosphonate de formule générale: R O OCH CR R 3 00 P-CH 2-CO CH -CH -CH 2 -CH 2 2 2 2 3 R 03 CH 3 Ii R 3 03 dans laquelle R 3 est un groupe alkyle en C 1-C 4, pour donner un inter- médiaire de formule O, CH 2 CH 2/ CH/ CH 2 COOR CH 2 2 2 OCH 3 0 CH H CHH CH / CX CH 3 J CH \ / CH 2 / CH / IV OR il 3 2 2 O dans laquelle R est tel que défini ci-dessus, R 1 et R 2 sont chacun indépendamment l'hydrogène ou des groupes protecteurs des fonctions hydroxy et de préférence R 1 est un radical acyle aliphatique en C 2-C 4 et R 2 est l'hydrogène ou le radical tétrahydro-l H-pyranne-2-yle. La condensation est effectuée sensiblement dans les mêmes conditions que celles décrites dans la littérature chimique concernant la synthèse des prostaglandines à partir de cyclopentanealdéhydes précurseurs et de réactifs phosphorés En pratique,on la met en oeuvre en présence d'un solvant organique inerte,par exemple tétrahydro- furanne, diméthoxyéthane, benzène, dioxanne, etc à une température comprise entre O et 80 C. 2510 '67- 4 -: Pour mettre en oeuvre la condensation> le phosphonate doit être transformé en anion correspondant et à cet effet on utilise environ une proportion équimolaire (calculée sur le phosphonate de formule III) d'un hydrure de métal alcalin -Le phosphonate de for- mule III possède un centre chiral (qui est indiqué dans la formule III cidessus par un astérisque) et il peut être utilisé sous une forme optiquement active ou d'un mélange des deux isomères possibles. La condensation entre l 'aldéhyde de formule II et un mélange des deux isomères du phosphonate de formule III donne donc un mélange des deux isomères possibles de formule IV ayant les configurations absolues opposées (R et S) sur le carbone 1 6 tandis que l'utilisa- tion d'une forme optiquement active du phosphonate III donne un com- posé de formule IV ayant une configuration donnée sur le carbone 16 (R ou S) Si l'on obtient un mélange des deux isomères possibles sur le carbone 16, il peut être séparé en les deux formes isomères au moyen de techniques connues, par exemple par des méthodes chro- matographiques En tout cas, même si cela n'est pas absolument néces- saire, il est conseillé d'effectuer la séparation en les isomères individuels avant le traitement ultérieur des intermédiaires IV. Ainsi donc, la seconde étape du trajet réactionnel comprend la réduction du composé 15-céto en dérivé 15-hydroxy correspondant au moyen des agents réducteurs couramment utilisés tels que borohydrure de sodium, borohydrure de zinc, hydrure de diphénylétain ou trialkyl- borohydrures de lithium. En considérant que la réduction du groupe oxo sur le carbone 15 introduit un centre chiral supplémentaire et que, comme indiqué ci-dessus, il est plus avantageux d'effectuer la réduction séparément sur les deux isomères possibles de formule IV, on obtient à partir de chacun des isomères sur le carbone 1 6 un mélange de deux produits de formule V ayant la même configuration sur le car- bone 16 (R ou S) et des configurations opposées (R et S) sur le carbone 15 ICH 'c H CH 2 2/ 2 H/ 22 O / CH \ CH 3OH 2 \ O 03 CH CH 3 O'' CH-C-CH ci CH ÈR 2 Il? 2 2 OH CH 3 10567 Le mélange des deux isomères de formule V ainsi obtenu peut être utilisé tel quel dans les étapes réactionnelles suivantes, ou bien on peut le séparer en les deux isomères individuels qui sont ensuite soumis séparément aux mêmes réactions Ainsi donc, dans le premier cas,on obtient un mélange de produits de formule I qui peut si on le désire être séparé en ses composants tandis que,dans le second cas, l'utilisation d'un seul isomère ayant des configurations absolues données sur les carbones 15 et 16 conduit & un seul des isomères possibles de formule I. On a remarqué que, lorsque la réduction est effectuée sur un composé de formule IV dans lequel R 2 est l'hydrogène et de préfé- rence l'atome de carbone en position 16 à l'une des deux configura- tions absolues possibles, on obtient les deux isomères en 15 en quan- tités très différentes. Parfois, l'un des isomèresen, et généralement le plus polaire,est obtenu en très faibles quantités La demanderesse a dé- couvert de façon surprenante que si la réduction est effectuée sur un composé de formule IV dans laquelle R 2 est un groupement protec- teur de la fonction hydroxy,et de préférence le radical tétrahydro- 1 H-pyranne-2-yle, les deux isomères sont obtenus sensiblement dans les mêmes proportions Dans ce cas, la séparation ultérieure selon des méthodes connues telles que,par exemple,chromatographie sur colonne de gel de silice ou chromatographie préparative sur couche mince,en utilisant des plaques de gel de silice, donne les deux produits individuels de formule V dans laquelle le groupe hydroxy en position 11 est protégé,de préférence, sous forme d'éther de tétra- hydro-l H-pyranne-2-yle Cependant,selon la configuration sur ie carbone 16, il peut être nécessaire,avant de soumettre le mélange à la séparation chromatographique,de rétablir la fonction hydroxy libre en position 11. Selon un mode de mise en oeuvre préféré de l'invention, on fait réagir une proportion molaire du composé de formule IV dans laquelle R 1 représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy et de préférence un groupe acyle aliphatique en C 2-C 4 et R est l'hydrogène, ayant une configuration absolue donnée du car- bone C 16, avec environ 2 à 3 proportions équimolaires de 2,3-dihydro- furanne en présence d'un solvant organique inerte anhydre tel que 6- le benzène et d'une quantité catalytique d'acide p-toluènesulfonique. La réaction a lieu à la température ambiante et dure environ 5 a minutes On obtient ainsi un composé de formule IV dans laquelle R est tel que défini ci-dessus, R 1 est un groupement protecteur de la fonction hydroxy et de préférence un groupe acyle aliphatique en C 2-C 4 et R 2 est le radical tétrahydro-l H-pyranne-2-yle. La réduction ultérieure du groupe oxo sur le carbone C 15 donne le composé correspondant de formule V (mélange des deux iso- mères possibles sur-le carbone 15) dans laquelle R 2 est le radical tétrahydro-l H-pyranne-2-yle Si on le désire, le mélange ainsi obtenu peut être séparé en les isomèresen 5 individuels selon les techniques décrites ci-dessus Le mélange ou les isomères individuels sont ensuite traités ultérieurement pour donner les produits recherchés de formule I Les étapes réactionnelles qui, a partir d'un composé de formule V, conduisent au composé final I, comprennent la protection des groupes hydroxy en positionsll et 15 des composés de formule V ci-dessus par réaction avec un agent protecteur approprié,de préférence le 3,4-di- hydro-2 H-pyranne, l'hydrolyse du composé 11, 15-protégé obtenu de formule V en conditions douces par exemple par le carbonate de sodium ou de potassium si R est un groupe acyle aliphatique en C 2-C 4, pour rétablir un groupe hydroxy libre en position 9, puis l'oxydation dudit groupe hydroxy en oxo par des techniques courantes d'oxydation (par exemple par le réactif de Collins c'est-à-dire le complexe pyridine-oxyde de chrome) et enfin l'élimination des groupements protecteurs en position 11 et 15. Lorsque les groupements protecteurs des fonctions hydroxy en positionsll et 15 sont des radicaux tétrahydro-l H-pyranne-2-yle, leur élimination s'effectue de préférence par hydrolyse acide avec un mélange acide acétique: eau: tétrahydrofuranne 19: 11: 3 en volume à une température de 40-45 C. Si ces réactions sont effectuées sur un mélange de com- posés de formule V ayant la même configuration absolue sur le car- bone 16 et des configurations opposées sur le carbone 1 5, on obtient un mélange de deux composés de formule I, isomères en 15 Si on le désire, ce mélange peut être séparé entre les isomères individuels au moyen des techniques chromatographiques habituelles illustrées ci-dessus. Les réactifs phosphorés de départ de formule III sont préparés par condensation d'un méthylphosphonate de dialkyle inférieur de formule VI (R 30 XN, P-CH 3 VI (R 3 OX / dans laquelle R 3 représente un groupe alkyle en C 1-C 4 avec un a-mé- thyl-a-méthoxy-hexanoate d'alkyle inférieur ou le chlorure d'acyle correspondant de formule VII OCH - XOC-C-CH 2-CH 2-CH 2-CH 3 VII CH 3 dans laquelle X représente -OR 3 ou -CI. Ce mode opératoire comprend d'abord la transformation du méthylphosphonate de formule VI en l'anion correspondant par ad- dition de butyllithium & -78 C dans le tétrahydrofuranne et ensuite sa mise en contact avec le composé de formule VII pendant environ 1 heure toujours à la même température Lorsque l'on désire une forme optiquement active du phosphonate de formule III, le racémate de l'acide a-méthyl-améthoxy-hexanotque est d'abord résolu en les deux antipodes par des techniques classiques telles que l'utilisation d'une base optiquement active comme l'éphédrine, l'atropine ou l'am- phétamine, pour former les sels correspondants qui sont séparés par cristallisation fractionnée. Les antipodes séparés sont ensuite transformés en esters ou chlorures d'acides optiquement actifs correspondants de formule VII, qui à leur tour sont condensés avec le méthylphosphonate de formule VI. Les composés de l'invention sont de puissants inhibiteurs de la sécrétion gastrique,également lorsqu'ils sont administrés à des animaux de laboratoire par voie orale Le degré de cette activité biologique ne pouvait pas être prévu par l'homme de l'art, considé- rant que les composés correspondants ayant une double liaison en position 5 qui sont décrits dans le brevet belge n 837 865, aont beaucoup moins actifs lorsqu'on les administre par voie-orale. 2 g 50567 Autrement dit, la demanderesse a trouvé qu'une légère modification de la structure de ces composés a produit des variations remarquables et favorables de llactivité biologique Les propriétés antisécrétoires gastriques de ces composés administrés par voie orale ont été évaluées sur la base de leur efficacité & inhiber l'hyperaciditë induite par lthistamine chez les chiens L'histamine,qui est un puissant stimu- lateur de la sécrétion gastrique aeide (voir Bertaccini et Coll. Eur Journ Pharmacol, 28 page 360, 1974),est administrée en per- fusion intraveineuse continue pendant les expériences. On utilise en expérience un groupe de cinq chiens bâtards. Les chiens subissent l'opération chirurgicale 'de l'estomac selon la méthode décrite par Bertaccini et Coll (voir ci-dessus) pour obtenir chez chaque animal un estomac principal innervé ou fistule gastrique (EG) et un estomac ou poche de Haidenhain (P H) dénervé L'estomac principal et la poche de Haidenhain sont munis chacun d'une canule pour permettre l'écoulement du suc gastrique à l'extérieur par gra- vité. Ces sucs gastriques sont ensuite titrés séparément par Na OH O,l N au moyen d'un appareil de titrage automatique (Radiometer, Copenhague) Les cinq chiens, après une période de 4 à 5 semaines pour récupérer, sont d'abord traités avec le sécrétagogue seul (on augmente progressivement les doses d'histamine toutes les 30 minutes d'un minimum de 40 à un maximum de 320 Ty/kg h) pour stimuler la sécrétion gastrique a la fois dans la F G et dans la P H Toutes les 30 minuteson recueille l'acide produit à la fois dans la F G. et dans la P H et on les titre comme décrit ci-dessus Les valeurs ainsi obtenues (chacune comme moyenne de cinq chiens) sont consi- dérées comme les "valeurs témoins" ou "ltémoins"l Pour évaluer l'ac- tivité orale antisécrétoire gastrique des composés de l'invention, on les administre par gavage dans l'estomac principal à une dose donnée exprimée en TY/kg h, dissous dans 1 ml de sérum physiologique, minutes avant le sécrétagogue L'agent stimulant l'hypersécrétion gastrique est administré par perfusion intraveineuse continue aux doses indiquées ci-dessus, et toutes -les 30 minutes on recueille et on titre les sucs gastriques de la F G et de la P H Il est possible,ce faisant,d'établir par des calculs simples le pourcentage d'inhibition de la sécrétion gastrique acide à des doses données d'histamine et du composé actif. Les résultats obtenus avec le composé de l'exemple 1 F, lalO = -44,7 , montrent que de très faibles doses, de 25 à 100 y/kg h, inhibent l'hyperacidité gastrique induite par des doses d'histamine variant de 40 à 160 y/kg h d'environ 95 à 35 % (par rapport aux témoins) dans la F G et d'environ 60 à 30 % dans la P H Dans les mêmes conditions expérimentales, les composés correspondants portant une double liaison en C-5 sont presque inactifs Une autre expérience s'effectue dans les mêmes conditions que ci-dessus, mais en adminis- trant l'histamine à une dose fixe de 160 y/kg h au lieu de doses croissantes, montre que le composé de l'exemple IF,l O= 2 44 '7 bloque la sécrétion d'acide gastrique d'environ 60 % tandis que les composés correspondantsayant une double liaison en C-5 sont inactifs. Les composés de l'invention sont de puissants inhibiteurs de l'hyper- sécrétion gastrique,également lorsqu'on les administre par voie intra- veineuse Ceci a été confirmé par évaluation des effets sur l'hyper- sécrétion gastrique induite par l'histamine, produits par des admi- nistrations intraveineuses uniques des composés de l'invention à des rats anesthésiés Les expériences sont effectuées sensiblement selon la méthodologie décrite par Ghosh et Schild dans Brit J. Pharm ( 1958), 13 p 54-61 Selon cette techniquele rat est anesthé- sié par un uréthanne et reçoit dans l'estomac une perfusion d'une solu- tion diluée d'hydroxyde de sodium (Na OH N/4000 à un débit d'environ 1 ml/min) par l'oesophage et on enregistre en continu le p H du liquide sortant par une canule dans le pylore au moyen d'une élec- trode de verre reliée à un p H mètre à lecture directe et de là a un enregistreur Dans le passage a travers l'estomac, le produit perfusé recueille suffisamment de tampon pour agir comme un système tampon sensiblement linéaire sur la gamme indiquée de sorte que la variation de p H devient une mesure de la sécrétion d'acide. Lorsque l'on recueille la solution de Na OH N/4000 après passage dans l'estomac non stimulé, elle donne une valeur initiale PH S (estomac non stimulé) de 6-6,5 On administre alors par perfusion intraveineuse continue unstimulant sécrétoire, dans le cas présent llhistamine, à une dose de 1,5 mg/kg h Après quelques minutes, le p H commence à baisser et, après environ 10 à 20 minutes,l'effet ZS 1 t 5657 sécrétoire atteint son maximum et le p H sa valeur la plus faible P S S (estomac stimulé par l'histamine), qui en raison de la perfusion continue d'histamine, reste constante Les composés essayer sont ensuite administrés parvoieintraveinieuse et l'on enregistre le p H en continu En considérant la valeur de p H la plus élevée enregistrée, PHM A E, qui met en évidence l'effet antisécrétoire maximal atteint avec le -composé essayé et en utilisant l'équation suivante: P"M A B S; - x 100 PES -P s -s s. on peut facilement calculer le pourcentage d'inhibition de sécrétion d'acide gastrique Un effet de 100 % signifie que le composé essayé, & la dose essayée, amène le-p H de l'estomac stimulé par l'histamine à la valeur initiale de l'estomac non stimulé 3 tandis qu'un effet de 0 % indique que l'administration ne modifie pas la sécrétion gas- trique induite par l'histamine. Dans des expériences représentatives avec le composé de lexemp-le F, llr D = -44,7 ", on obtient-les résultats suivants: Dose ( 7/kg) % inhibition de la sécrétion gastrique d'acide. 2,5 15 63 90 100 On effectue d'autres expériences qui montrent que les composés de l'invention possèdent également une activité cytoprotec- trice remarquable qui appara Ut à de très faibles doses orales Plus particulièrement, l'activité cytoprotectrice des composés de l'inven- tion a été évaluée sur la base de leur efficacité a inhiber la -for- mation et à réduire la gravité des ulcères gastriques provoqués chez les rats par l'administration d'une dose élevée d'acide l-(p-chloro- benzoyl)-5-méthoxy-2-méthyl-3-indoly 1-acétique ou "indométhacine", des doses orales qui sont très inférieures à celles qui provoquent une inhibition de la sécrétion gastrique d'acide Dans ces expériences, les rats sont privés de nourriture le jour avant le début des expé- riences,mais on leur donne de l'eau à volonté Les composés a essayer sont administrés par la voie orale en suspension à 0,5 % dans une solution aqueuse de "Méthocel" ( 5 animaux par dose), tandis que l'indométhacine est administrée par voie intrapéritonéale à 000 mg/kg dans le même véhicule Un autre groupe de rats (témoins) reçoit seulement l'agent ulcérogène Les propriétés cytoprotectrices des composés de l'invention sont alors exprimées en"pourcentage d'inhibition des ulcères par rapport aux témoins", que l'on peut facilement calculer par la formule suivante: A.U D (témoins) A U Danimaux traités) x 100 A.U D. dans laquelle A U D (témoins) est le degré moyen d'ulcération des estomacs des témoins et A UD D (animaux traités) est le degré moyen d'ulcération des estomacs-des animaux qui ont reçus à la fois l'indométhacine et le composé à essayer. Les valeurs A U D sont calculées selon la méthode décrite par Thuillier et Coll dans Chim Ther 3, 53, 1968 en examinant dans les estomacs des animaux de laboratoire les ulcérations pos- sibles et en leur attribuant une note de O à 4 qui dépend du nombre de la gravité des ulcérations observées: O signifie l'absence d'ul- cération sur la paroi gastrique, 4 signifie des ulcérations perfo- rantes On calcule ensuite le degré d'ulcération individuel (S U D) pour chaque estomac individuel La somme des S U D divisée par le nombre d'animaux donne 1 A U D des estomacs de chaque groupe d'ani- maux. Dans ces expériences, le composé de l'exemple 1 F, lalD =-44,7 se révèle très actif même à de très faibles doses En effet à une dose de 3 7/kg (la plus faible dose essayée dans ces exépriences) le pourcentage d'inhibition des ulcères par rapport aux témoins est d'environ 43, tandis que la DE 50 (c'est-à-dire la dose qui provoque l'inhibition des ulcères de 50 % par rapport aux témoins), calculée par extrapolation est de 6 y/kg. :510567 Il est donc clair que l'action protectrice majeure sur la muqueuse gastrique exercée par ces composés est produite par un ou plusieurs mécanismes qui sont indépendants de l'inhibition de la sécrétion d'acide puisque, comme il ressort des résultats de cette dernière expérience, ce composé protège à des doses qui sont beau- coup trop faibles pour inhiber considérablement la sécrétion gas- trique. Il découle des résultats ci-dessus que les dérivés de prostaglandine-de-l'invention sont utiies chez les mammifères pour réduire et limiter la sécrétion gastrique excessive d'acide et égale- ment pour exercer même à de très faibles doses une action protectrice sur la muqueuse gastrique, réduisant ainsi et évitant la formation d'ulcères gastro-intestinals Ainsi donc, selon une autre caractéris- tique, l'invention concerne des compositions pharmaceutiques ou vété- rinaires et comprenant comme ingrédient actif un dérivé de prosta- glandine de formule I. Dans l'exploitation de l'invention, la voie d'administra- tion préférée desnouveauccomposésest la voie orale sous forme de capsules, tablettes revêtues ou sirops Si on le désire, on peut également préparer des formes de dosage pour l'administration paren- térale telles que des ampoules injectables Ces formes de dosage pharmaceutiques sont préparées de manière connue (voir par exemple Remington's Pharmaceutical Sciences, 13 è édition, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvanie, E U A) et on les prépare par des techni- ques courantes Elles peuvent contenir d'environ 5 à 100,et de préférence d'environ 10 à 60 y,d'ingrédient actif Outre le principe thérapeutique, les capsules et les tablettes revêtues peuvent contenir les excipients habituels acceptables en pharmacie,tels que des di - luants inertes, lubrifiants et agents désagrégeants Les sirops peuvent contenir les-agents de suspension, agents mouillants, agents tampons, parfums et conservateurs classiques La posologie pour les prostaglandines de l'invention en accord avec un traitement gastro- protecteur dépend de divers facteurs comprenant le type> l'âge et le poids du mammifère On peut obtenir de bons résultats cependant en administrant les prostaglandines de l'invention à une dose jour- nalière comprise entre environ 10 et 300 Y de préférence en plusieurs prises Il est cependant clair qu'une dose journalière située au- 10567 delà de la gamme indiquée ci-dessus peut aussi être utilisée, selon * les conditions individuelles du sujet à traiter. Les exemples suivants illustrent l'inventions sans toute- fois en limiter la portée. Exemple 1 lla 115-dihydroxy-16-méthoxy-16-méthyl-9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle ( 15-R, 16 R) et ( 15 S, 16-R) ou ( 15-R, 16-S) et ( 15-S, 16-S) A) A un mélange de 770 mg d'une suspension à 81,8 % d'hydrure de sodium dans l'huile minérale ( 0,026 mole) et 30 ml de diméthoxyéthane anhydre, on ajoute goutte à goutte une solution de 8 g ( 0,030 mole) de 3-méthoxy3-méthyl-2-oxo-heptylphosphonate de diméthyle optiquement actif, lalD = + 41,2 (C= 1 % dans CHC 13) dans D 3 ml de diméthoxyéthane On laisse reposer le mélange résultant à la température ambiante pendant 15 minutes, puis on ajoute progres- sivement une solution de 4,08 g ( 0,013 mole) de 7-( 5 a-acétoxy-2 p- fromyl-3 a-hydroxy-cyclopentane-la-yl)heptanoate de méthyle dans 50 ml de diméthoxyéthane anhydre. Après repos à la température ambiante pendant 6 heures, on verse le mélange de réaction dans une solution aqueuse saturée de Na H 2 PO 4 que l'on extrait ensuite par l'éther éthylique On sèche l'extrait organique sur Mg SO 4 et on concentre à siccité Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par le mélange éther éthylique éther de pétrole 1:1 en volume Rendement 3,9 g de 9 a-acétoxy-lla-hydroxy-16-méthoxy-16- méthyl-15-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle dans lequel le carbone C 16 a la configuration absolue R ou S Lal 20 = + 53 e 8 o (C= 0,81 % dans CHC 13) Spectre de RMN dans CDC 13 (): 0,89; 1,1-2,1; 1,29; 2,08; 2,30; 2,4-2,6; 3,21, 3,68; 4,11; 5,23; 6,87. B) On prépare à une température de 5 à 10 C un mélange consistant en 5 g ( 0,0113 mole) de 9 c-acétoxy-lla-hydrxy-16-méthoxy- 16-méthyl-15-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle (préparé comme décrit en A) ci-dessus) dissous dans 150 ml de benzène anhydre, 2,6 ml ( 0,0285 mole) de 2,3-dihydropyranne et 70 mg d'acide p-toluène- sulfonique dans 50 ml de benzène anhydre et on le maintient ensuite à la température ambiante pendant environ 10 minutes On lavelle mélange de réaction d'abord par une solution aqueuse saturée de 10567 bicarbonate de sodium,et ensuite par l'eau L'évaporation du solvant donne un résidu que l'on purifie par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par le mélange éther de pétrole-éther éthylique 7:3 en volume Rendement 5 g de 9 a-acétoxy-16-méthoxy-16-méthyl-15- oxo-llc-(tétrahydro-l H-pyranne-2-yl-oxy)-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle dans lequel le -carbone en position 16 a la configuration absolue R ou S Spectre de RMN dans CDC 13 ($):0,88; 1,1-3,0; 1,25; 2,06; 3,23; 3,3-4,8; 3,72; 5,20; 6,8-7,1. C) A une solution de 13,5 g de borohydrure de sodium dans 400 ml de méthanol, refroidie à -20 C, on ajoute goutte à goutte une solution de 5 g ( 0,0093 mole) de 9 a-acétoxy-16-méthoxy-16-méthyl- -oxo-lla-(têtrahydro-l H-pyranne-2-yl-oxy)-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle (préparé comme illustré en B) ci-dessus) On maintient la solution résultante à -20 C pendant environ 2 heures, puis on la verse dans une solution aqueuse saturée de Na H 2 PO 4 qui est ensuite extraite par l'éther éthylique L'extrait organique séché sur Na 2504 est évaporé à siccité pour donner un résidu qui est un mélange des deux isomères possibles en position 15 du 9 a-acétoxy-15-hydroxy-16-méthoxy-16-méthyl-lla-(tétrahydro-l H- pyranne-2-yl-oxy)-prosta-13 (g)-ène-l-oate de méthyle Ces isomères sont séparés en éluant d'abord par le mélange éther de pétrole-éther éthylique 8:2 en volumepour purifier le produit brut,et ensuite par le mélangé éther de pétrole-éther éthylique 6:4 en volume On élue d'abord l'isomère moins polaire et on obtient 2,05 g du produit pur ayant le spectre de RMN suivant: principaux pics d'absorption dans CDC 13 aux fréquences suivantes, exprimées en unités: O 90; 1,13; 1-2,9; 2,07; 3,28; 2,5-4,3; 3,73; 4,67; 5,20; 5,7-5,9. Le second produit élué est l'isomère plus polaire et onsiste en 2,1 g de produit pur ayant le spectre de RMN suivant: 0,93; 1,07; 1,1-2,9; 2,07; 3,28; 3,2-2,4; 3,72; 4,67; 5,20; 5,7-5,9. Les deux produits ainsi obtenus ont la même configuration absolue au carbone 16 (R ou S) et des configurations opposées au carbone 15 Ils représentent donc le couple d'isomères ayant les configurations absolues suivantes aux carbones 15 et 16: ( 15-R, 16-R) et ( 15-S, 16-R) ou ( 15-R, 16-S) et ( 15-S, 16-S). Les modifications chimiques ultérieures qui conduisent aux produits recherchés de formule I ne modifient pas la stéréochimie des carbones 15 et 16. D) On dissout 2,1 g de l'isomère plus polaire de 9 a- acétoxy-15-hydroxy-16-méthoxy-16-méthyl-11 a-(tétrahydro-l H-pyranne- 2yl-oxy)-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle préparé comme décrit en C) cidessus, dans 150 ml de benzène anhydre Après refroidissement on ajoute 1, 3 ml ( 0,0142 mole) de 2,3-dihydropyranne et une solution de 75 mg d'acide p-toluènesulfonique dans 40 ml de benzène anhydre et après 15 minutes on verse la solution dans le bicarbonate de so- dium aqueux On sépare la couche organique, on sèche sur Na 25 04 et on l'amène à siccité On purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par le mélange éther de pétrole- éther éthylique 7:3 en volume pour donner 2,1 g de 9 a-acétoxy-16- méthoxy-16-méthyl-lla,15-bis-(tétrahydro-l H-pyranne-2-yl-oxy)-prosta- 13 (E)-ène-l-oate de méthyle dans lequel la combinaison des configura- tions absolues des carbones 15 et 16 est l'une des quatre possibles. Spectre de RMN (CDC 13): 0,92; 1,12; 1,15; 1,1-3,0; 2,07; 3,25; 3,32; 3,24,2; 3,70; 4,5-5,2; 5,3-5,6 (unités%) Le composé ainsi obtenu' est dissous dans 200 ml de méthanol anhydre et on ajoute à la solution- résultante 2,1 g de carbonate de potassium anhydre. Après agitation à la température ambiante pendant 24 h, on verse le mélange dans une solution aqueuse saturée de Na H 2 PO 4 que l'on extrait ensuite dans l'éther éthylique On sépare la phase orga- nique, on sèche sur Na 2 SO 4 et on concentre à siccité On obtient. 1,95 g de 9 a-hydroxy-16-méthoxy-16-méthyl-lla,15-bis-(tétrahydro-l H- pyranne-2 yl-oxy)-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle pur. Spectre de RMN dans CDC 13 (): 0,92; 1,0-2,9; 1,10; 1,13; 3,25; 3,22; 3,2-4,4; 4,6-5,0; 5,4-5,9. E) On agite à la température ambiante pendant environ 1 h un mélange consistant en 6,38 g de "Celite", 7,25 g de réactif de Collins (Py 2,Cr O 3) et 1,95 g de 9 a-hydroxy-16-méthoxy-I 6-méthyl- lla,15-bis-(tétrahydro-l H-pyranne-2 yl-oxy)-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle dans 180 ml de chlorure de méthylène On verse le mélange de réaction dans 1200 ml d'éther éthylique et on filtre sur Celite. On décolore le filtrat par le charbon actif et on concentre aà'siccité. t O 567 Rendement: 1,77 g de 16-méthoxy-16-méthyl-9-oxo-lla,15-bis(tétrahydro- l H-pyranne-2-yl-oxy)-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle. Spectre de RMN dans CDC 13 (unités&: 0,93; 1,0-2,9; 1,12; 1,15; 3,1-4,9; 3,25; 3,32; 3,70; 5,4-5,8. F) On met en suspension le produit ainsi obtenu ( 1,77 g) dans 100 ml d'une solution d'acide acétique-eau-tétrahydrofuranne 19:11:3 en volume Après agitation à 45 C pendant deux heures, on dilue le mélange par l'eau et on amène t-e p H à 7,2 par addition de bicarbonate de sodium. On extrait le mélange par l'éther éthylique,que l'on chasse ensuite par ébullition pour donner 1,19 g d'un produit brut que l'on purifie par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par l'éther éthylique. On obtient 780 mg de lla,15-dihydroxy-16-méthoxy-16- méthyl-9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle pur dans lequel les atomes de carbone en positions 15 et 16 possèdent l'une des quatre combinaisons possibles de configurations absolues, c'est-à-dire ( 15-R, 16-R) ou ( 15-R,; I 6-S) ou ( 15-S, 16-R) ou ( 15-S, 16-S) Le composé a les caractéristiques suivantes: lalD =-44,7 (C:098 L% dans CC-13 l Spectre de RMN dans CDC 13 (): 0,92; 1,1-1,7; 1,11; 1,9-2,8; 2,29; 3,1-3,3; 3,24; 3,63; 4,07; 4,12; 5,69 - Le composé est un produit unique, ce que met en évi- dence la calorimétrie différentielle à balayage, et fond aà 40-48 C. -25 G) A partir de l'isomère moins polaire du 9 a-acétoxy- -hydroxy-16-m'thoxy-16-méthyl-lla-(tétrahydro-l H-pyranne-2-yl-oxy)- prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle, préparé comme décrit dans le paragraphe C) et en opérant exactement comme décrit dans les para- graphes D), E) et'F), on obtient 380 mg de lla 15-dihydroxy-16-méthoxy- 16-méthyl-9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle ayant au carbone 1 6 la même configuration absolue que le composé obtenu dans le para- graphe F), mais la configuration absolue opposée au carbone 15 Le composé a les carctéristiques suivantes: la 20 = -79,6 (C= 1 % CHC 13) Spectre de RMN dans CDC 13 (z): 0,92; 1,1-1,7; 1,17; 1,9-2,8;:'2,29; 3,26; 3,69; 4,10; 4,17; 5,75 Exemple 2 lla,15-dihydroxy-16-méthoxy-16-méthyl-9-oxo-prosta-13 (E)-ène l-oate de méthyle ( 15-R, 16-S) et ( 15-S, 16-S) ou ( 15-R, 16-R) et ( 15-S, 16-R). En opérant sensiblement comme décrit à l'exemple 1 mais en partant de l'antipode optique du phosphona-te utilisé au paragraphe A de l'exemple 1 lIlO = -41,3 (C= 1 % dans CHC 13), on prépare les deux autres isomères possibles du lla,15-dihydroxy-16-méthoxy-16- méthyl-9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle de formule I Ces deux isomères possibles ont la même configuration absolue du carbone 1 6 qui est opposée à celle du carbone 1 6 des deux isomères de l'exemple 1, et des configurations opposées du carbone 15. A) En condensant 5 g ( 0,0188 mole) de 3-méthoxy-3-méthyl- 2-oxo-heptylphosphonate de diméthyle lal 20 -41,3 (C= 1 % dans CHG 13) avec 2,5 g ( 0,0080 mole) de 7-( 5 a-acétoxy-2 P-formyl-3 a-hydroxy-cyclo- pent-la-yl)-heptanoate de méthyle comme décrit au paragraphe A) de l'exemple 1 et en opérant ensuite comme décrit dans les paragraphes B) et C) du même exemple, on obtient un mélange ( 2,65 g de produit brut) et deux isomères au carbone 15 du 9 a-acétoxy-15-hydroxy-16- méthoxy-16-méthyl-lla-(tétrahydro-l H-pyranne-2-yl- oxy)-prosta-13 (E)- ène-l-oate de méthyle. Spectre de RMN dans CDC 13 (t): 0,91; 1,0-2,6; 1 > 06; 1,07; 1413; 1,14; 2,06; 2,29; 3,22; 3,24; 3,3-4,2; 3,68; 4,5-4,6; 5,13; 5,5-5,7. B) On hydrolyse le mélange des deux isomères au carbone 1 5 obtenu cidessus ( 2,65 g) par traitement avec 78 ml d'une solution acide acétiqueeau-tétrahydrofuranne 19:11:3 en volume à 45 C pendant minutes On neutralise le mélange de réaction par le bicarbonate de sodium et on extrait par l'éther Par évaporation à siccité de l'extrait organique, on obtient 2,55 g d'un produit brut qui est un mélange des deux isomères au carbone 15 du 9 a-acétoxy-lla,15-di- hydroxy-16-méthoxy-16-méthyl-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle On sépare les isomères purs par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant par l'éther éthylique Le premier produit élué ( 860 mg) est l'isomère moins polaire ayant les caractéristiques sui- vantes: lal 2 =+ 17,3 (C= 0,95 % dans CHC 13) Spectre de RMN dans CDC 13 (): 0,92; 1,05; 1,1-2,6; 2,07; 2,29; 3,23; 3,68; 3,93; 4,15; 5,19; 5,63. Le second produit élué ( 870 mg) est l'isomère plus polaire ayant les caractéristiques suivantes: lal= + 45,3 (C= 0,76 % dans CH C 13). Spectre de RMN dans CDC 13 (): 091; 1,0-1,7; 1,13; 2,07; 2,2-3,0; 2,29; 3,25; 3,68; 3 > 89; 4,15; 5,17; 5,53;-5,71. C) On maintient a 15 C pendant 15 minutes un mélange de 870 mg ( 0,00191 mole) de l'isomère plus polairepréparé comme décrit au paragraphe B), dans 130 ml de benzène anhydre, 30 mg d'acide p-toluènesulfonique dans 30 ml-de benzène anhydre et 2,5 ml ( 0,0273 mole) de 2,3-dihydropyranne, puis on le verse dans une solu- tion aqueuse saturée de Na HCO 3 et on sépare la phase organique Apres lavage a l'eau,on sèche la phase organique sur Na 2 SO 4 et on évapore A siccité. On purifie le résidu obtenu par chromatographie en utili- sant une colonne de gel de silice et en éluant par le mélange éther - de pétrole-éther éthylique 7:3 Rendement 1,09 g de 9 a-acétoxy-16- méthoxy-16-méthyl-lla,15-bis(têtrahydro-l H-pyranne-2-yl-oxy -prosta- 13 (E)-ène-l-oate de méthyle ayant la configuration absolue au carbone 1 6 opposée à celle du produit préparé au paragraphe E) de l'exemple 1, et l'une des deux configurations possibles au carbone 15. Spectre de RNN dans CDC 13 (): 0,92; 1,0-2,7; 1,11; 1 J 15; 2,05; 2,29; 3,22; 3,29; 3,3-4,2; 3,68; 4,6-4,9; 5,13; 5,4-5,8. D) En opérant sensiblement comme décrit dans les para- graphes D) (dernière partie), F) et G) de l'exemple 1,mais en par- tant du composé obtenu au paragraphe C) ci-dessus, on obtient 250 mg de lla,15-dihydroxy-16-méthoxy-16-méthyl-9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l- oate de méthyle. Ce produit a les caractéristiques suivantes. lalO= -51,4 (C= 0,52 % dans CHC 13) Spectre de RMN dans CDC 13 (S): 0,91; 1,1-3,2; 1,14; 2,30; 3,25; 3,68; 4,07; 4,10; 5,6-6,0. E) En opérant comme décrit dans les paragraphes C) et D) de cet exemple, mais en partant de l'isomère moins polaire obtenu au paragraphe B) ( 860 mg), on obtient 320 mg de 11 a,15-dihydroxy-16- méthoxy-16-méthyl-9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle Ce com- posé,qui a la même configuration absolue qu'au carbone 16 que l'iso- mère correspondant préparé au paragraphe D) et la configuration opposée au carbone 15, présente les caractéristiques suivantes lalD 20 = -82,4 (C= 0,95 % dans CHC 13) Spectre de RMN dans CDC 13 (î); O a 94; 1,1-1,8; 1,06; 2,0-2,9; 2,30; 3,24; 3,69; 4,11; 4,19; 5,6-5,9. Exemple 3 On prépare une capsule contenant les ingrédients suivants: l 11 a 15-dihydroxy-16-mêthoxy-16-méthyl- 9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle 40 y Talc 3 mg Lactose 3 mg Carboxyméthylcellulose de sodium 3 mg Amidon q s p 90 mg Exemple 4 On prépare une tablette revêtue avec llc,15-dihydroxy-16-méthoxy-16-méthyl- 9-oxo-prosta-13 (E)-ène-l-oate de méthyle 60 y Carboxyméthylcellulose de sodium 4 mg Stéarate de magnésium 4 mg Gélatine 7 mg Amidon 7 mg Saccharose 20 mg gomme arabique, lactose, dioxyde de titane, lac d'aluminium selon les méthodes classiques. Il est entendu que l'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation préférés décrits ci-dessus à titre d'illustration et que l'homme de l'art peut y apporter diverses modifications et di- vers changements sans toutefois s'écarter du cadre et de l'esprit de l'invention. 2510567 - - REVENDICATIONS Isomère optique du I 11-, I 5-dihydroxy-1 6-mé thoxy-I 6-méthiyl-9-ox-o- 13 (E)-ène-1-oate de méthyle répondant à la formule 7 5 3 i C C H -H, H COOCH 3 8 " CH 2 2 Y C H C CH 13 OH CH 3 2 18 20 HC CH 2 et ayant les caractéristiques suivantes intervalle de fusion 40480 C spectre de RMN dans CD C 13 ( 5) 0,92; 1,1-1,7; 1,j 1 l 1,9-2,8 2,29; 3,1-3,3; 3,24; 3,63; 4,07, 4,12; 3,69. 2 Procédé de préparation d'un isomère optique du llo C,15- dihydroxy-I 16-méthoxy-16-méthyl-9-oxo-prosta-13 (E) -ène-1 -oate de méthyle, caractérisé en ce que a) on fait réagir un cyclopentanealdéhyde de formule générale OR 1 I OR 2 -CH 2 S CH CH 2 CH OC C Hi * 2 2 2 I C :110 dnslaii le R 1 e 2 rprésentent chacun indépendamment l'hydro- -gène ou un groupement protecteur de la fonction hydroxy avec un phosphonate optiquemnent actif de formule générale H CO OCH 01 3 i f2 31 3 H 3 CO OP W 2-CO- ;Gk -C 1 T 2 CH2 CH 3 aya t @ 2510567, OR 17 5 3 :CH 6 CH 4-CH COOCH 3 7 2 CH 2 3 1ll 14 16 3 18 20 C C C il Il Cil j O > C 3 / OR 1' 7 5 3 1 CH 2 CH 4 CXH ' O 2 \ OCH 3 8 ' 2 CH 2 Ci 12 14 OCH 3 V Ci H/ CH C -Cil CH 2 I Cit C 12 \18 20 - 2 2 2 OR 2 OH c 3 CH 2 CI 3 dans laquelle R et R sont tels que définis cidessus, 1 2 et on récupère l'isomère le plus polaire du composé V c) on protège les groupes hydroxy en positions Il et 15 de cet isomère optique au moyen d'un agent protecteur convenable des fonc- tions hydroxy; d) on libère la fonction hydroxy sur le carbone C 9 en éliminant le groupement protecteur R 1; e) on oxyde le groupe hydroxy du carbone Cg 9 en oxo, et enfin f) on rétablit les fonctions hydroxy des carbones Il et 15 par hydrolyse douce; 3 Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que dans l'étape a) on fait réagir le 7-( 5 cd-acétoxy-2 p- formyl-3 *-hydroxycyclopentane-1-" -yl)heptanoate de méthyle avec le 3-méthoxy-3-méthyl-2-oxo heptyl phosphonate de diméthyle optique- /20 ment actif ayant un a/ t= + 410,2 (C= 1 % dans CHC 13) pour obtenir le 9 c à la réduction du groupe 15-oxo. 4 Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'on protège le groupehydroxy en position 11 groupe 11 c -(tétrahydro IH-pyranne 2-yl oxy). 5 Procédé selon la revendication 2, 3 ou 4, caractérisé en ce que dans l'étape b), on réduit le groupe 15-oxo en 15-hydroxy par traitement avec un hydrure métallique mixte, pour obtenir un mélange de 2 stéréoisomères possibles en position 15 du composé V, on sépare ces stéréoisomères par chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant séquentiellement comme éluant, d'abord un mélange éther de pétrole-éther éthylique 8:2 en volume pour éluer l'isomère le moins polaire, ensuite un mélange éther de pétrole-éther éthylique 6: 4 en volume pour éluer l'isomère le plus polaire du composé V que l'on récupère, de saorte que l'isomère optique 11 l du phosphonate optiquement actif de départ. 6 Isomère optique du 11 c, 15-dihydroxy-16-méthoxy 16-méthyl- 9-oxo-prosta-13 (E)-ène-1-oate de méthyle obtenu par le procédé selon l'une des revendications 2 à 5. 7 Isomère optique du 11 9-oxo-prosta 13 (E)-ène-1-oate de méthyle obtenu à l'exemple 1 F. 8 Nouveau médicament utile notamment pour la protection de la muqueuse gastrique, caractérisé en ce qu'il consiste en un composé selon la revendication 1, 6 ou 7. 9 Composition pharmaceutique ou vétérinaire, caractérisée en ce qu'elle contient comme ingrédient actif un médicament selon 251056-7 la revendication 8, associé à un support non-toxique, pharmaceutique- ment acceptable. Composition pharmaceutique ou vétérinaire selon la revén- dication 9, caractérisée en ce qu'elle contient comme ingrédient actif 5 à 100 y du médicament selon la revendication 8,-de préférence à 60 y d'ingrédient actif. 11 Formes d'administration des compositions selon la reven- dication 9 ou 10. 12 Isomère optique du 11,x, 15-dihydroxy-16-méthoxy-16-méthyl- 9-oxo-prosta 13 (E)-ène-l-oate de méthyle ayant la même configuration sur l'atome de carbone en position 16 que celle sur l'atome de carbone en position 3 du 3-méthoxy-3-méthyl-2-oxo heptyl phosphonate de diméthyle optiquement actif ayant un 2 d O = + 41,2 (C= 1 % dans CHC 13), et la même configuration sur l'atome de carbone en position 15 que celle sur l'atome de carbone en position 15 de l'isomère le plus polaire du 9-acétoxy-15-hydroxy-16-méthoxy-i 6-méthyl-11 o -l(titra- hydro-l H-pyranne-2-yl)oxy 7 prosta-13 (E)-ène-1-oate de méthyle qui est le second produit élue dans une séparation chromatographique des stéréoisomères sur colonne de silice, utilisant séquentiellement comme éluant, d'abord un mélange éther de pétrole-éther éthylique 8:2 en volume, puis un mélange éther de pétrole-éther éthylique 6:4 en volume.