Brevet FR2491927A1 — publié le 19820416

Dérivés de céphalexine solubles dans l'eau, et procédé pour leur préparation. La présente invention concerne des dérivés nouveaux de céphalexine solubles dans l'eau et de ce fait utiles en tant que formulations injectables, ainsi qu'un procédé pour leur préparation. L'utilité de la céphalexine en tant qu'antibiotique à spectre étendu et ses relations avec les antibiotiques du groupe de la céphalosporine sont bien connues. La céphalexine est le nom générique donné à l'acide 7-(D- 2-amino-phénylacétamido)-3-méthyle- 434-carboxylique, de formule: NH2 NH2 C6H5-1H-CONH S (I) 0 H3 C02H Ainsi que cela est bien connu, la céphalexine en tant que telle est insoluble dans l'eau et ne peut donc être adminis- trée par injection directe. D'un autre c8té les dérivés de la céphalexine qui sont solubles dans l'eau et connus à ce jour présentent, en solu- tion dans l'eau, un pH nettement alcalin. L'objet principal de la présente invention est donc de procurer des dérivés de la céphalexine qui non seulement conservent la gamme étendue de l'activité antibactérienne de la céphalexine, mais sont solubles dans l'eau et permettent d'obtenir des solutions aqueuses essentiellement neutres. Un autre objet de la présente invention est de proposer un procédé de préparation des dérivés nouveaux de la cépha- lexine qui sont mentionnés ci-dessus. Ces buts sont atteints au moyen de dérivés de la céphale- xine selon l'invention qui consistent en un dérivé méthylol de la céphalexine se présentant selon la formule générale suivante: C6H5-CHCONH s NH NH (II) CH20H N c Ox CH3 o X est un métal alcalin, ou le cation contenant de l'azote organique d'un aminoacide basique générique. Des exemples préférés mais non limitatifs de ces cations comprennent du sodium et les cations de le lysine et de l'arginine. On a constaté de façon surprenante que les dérivés méthy- lols de la céphalexine, tels que définis ci-dessus, ont non seulement l'acivité antibiotique de spectre étendu de la céphalexine même contre des germes gram- négatifs et en outre ne sont pas inactivés par la penicillinase staphilococ- cique, mais, contrairement à la céphalexine, sont parfaitement solubles dans l'eau et en outre, contrairement aux dérivés de la céphalexine connus à ce jour, permettent d'obtenir des solutions pratiquement neutres et injectables. Les dérivés méthylols de la céphalexine tels que repré- sentés par la formule structurelle (II) sont préparés par un procédé comprenant essentiellement les étapes suivantes: (a) une suspension aqueuse de céphalexine est mise en contact sous brassage intensif et à une température comprise entre environ 5 C et 10 C avec une solution de formaldehyde, don- nant une phase comprenant un dérivé méthylol de formule générale: C6H5-CH-CONH CH10H /C(III) NH I 2 / CH20H /H. (b) le mélange de la réaction obtenu à l'étape (a) est mis en contact avec une solution aqueuse d'une base inorganique de formule XOH, o X est un cation choisi parmi les cations de métaux alcalins, ou avec une solution d'un aminoacide basique, donnant une solution du dérivé méthylol. La solution ainsi obtenue au cours de la précédente étape (b) peut être traitée au cours d'une étape de lyophilisation de manière à obtenir un produit soluble de formule II, éga- lement parfaitement soluble dans l'eau. Les exemples suivants illustrent la préparation de deux dérivés de méthylol selon la présente invention. EXEMPLE 1 Sel de lysine de 2-N-méthylol-céphalexine On met en suspension 18 g de monohydrate de céphalexine dans 100 ml d'eau distillée à la température de 5 à 100C. En maintenant la température de la suspension dans les limites indiquées ci-dessus, on ajoute 3,8 ml d'une solution à 40% de formaldéhyde, goutte à goutte et avec un brassage intensif. Simultanément, on fait passer un courant d'azote pur dans le mélange de la réaction sous forme de bulles. Après un brassage d'environ 10 minutes dans les condi- tions ci-dessus, on ajoute lentement une solution à 50% de 14g de base lysine. Le mélange de la réaction est solubilisé peu à peu et la valeur finale du pH de la solution obtenue est de 7,5. Le volume de la solution obtenue est amené à la valeur finale de 150 ml en ajoutant de l'eau distillée froide. Ensuite, elle est filtrée en conditions stériles et congelée dans un pré-congélateur à -700C et finalement lyophilisée. On obtient une poudre dont la couleur tend vers le jaune et présentant les propriétés chimiques et physiques sui- vantes: Apparence: poudre microcristalline de couleur tendant vers le jaune; Solubilité: soluble à froid dans l'eau et peu soluble dans les alcools absolus; Titre microbiologique de la -éphalexine: de 99% à 100% de la valeur théorique. Le spectre de la résonance magnétique nucléaire est celle représentée à la figure 1 en annexe. EXEMPLE 2 Sel de sodium de 2-N-méthylol-céphalexine On a répété le procédé de l'Exemple 1 avec cette excep- tion qu'au lieu de la solution de lysine, on a ajouté 46 ml d'une solution de 1N NaOH. La solution ainsi obtenu a un pH final de 7,1. Propriétés physiques et chimiques: Apparence: poudre microcristalline légèrement jaune; Solubilité: fortement soluble dans l'eau, peu soluble dans l'éthanol et les alcools absolus; Titre microbiologique de la céphalexine: de 99% à 102% de la valeur théorique. Le spectre de la résonance magnétique nucléaire est celui représenté à la figure 2 en annexe. On a effectué des essais pharmacologiques et cliniques avec les composés de l'invention et les résultats concernant le sel de lysine de 2-Nméthylol-céphalexine sont indiqués ci-après à titre illustratif. A) Toxicité. Pour la souris: - par administration intrapéritonéale: DL50=3,1 g/kg - par administration orale: DL50 supérieur à 4 g/kg Pour le rat et par voie orale, la DL50 est également supérieure à 4 g/kg. B) Niveaux hématiques. On a contr8lé les concentrations de sel de lysine et de méthylol céphalexine (substance A) dans le sang (après admi- nistration orale) du corps humain, par comparaison avec un composé de référence, à savoir la céphalexine monohydratée (substance B), les résultats étant le suivants: après 1 heure A = 1,3 B après 3 heures A = 3, 5 B après 6 heures A = 24,0 B L'élimination par l'urine dans les 24 heures est de 87% pour la substance A et de 90,5% pour la substance B. Les données pharmacocinétiques permettent de conclure que: 1) la substance A présente pendant la durée de pic des niveaux qui sont 3,5 fois plus importants que ceux de la substance B; 2) la présence dans le courant sanguin est plus forte pour la substance B et des concentrations actives sont détec- tées plus de 6 heures après l'administration; 3) la surface située sous la courbe (SSC) pour la subs- tance A est d'environ 2 fois celle de la substance B. REVENDICATIONS 1. Dérivé méthylol de céphalexine de formule générale suivante: C6H5-CkICONH NH CH20H /CH C00X o X est un métal alcalin ou le cation contenant de l'azote organique d'un aminoacide basique. 2. Dérivé méthylol selon la revendication 1, caractérisé en ce que le cation X est du sodium. 3. Dérivé méthylol selon la revendication 1, caractérisé en ce que le cation X est le cation d'un aminoacide basique choisi dans le groupe comprenant la lysine et l'arginine. 4. Procédé de préparation de dérivé méthylol de céphale- xine de formule générale suivante: C6H5-CH-CONH NH N (X CH20H lo CH2H CH3 00X o X est un métal alcalin ou le cation contenant de l'azote organique d'un aminoacide basique, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: (a) une suspension aqueuse de céphalexine est mise en contact sous brassage intensif et à une température comprise entre environ 5 C et 10'C avec une solution de formaldéhyde, don- nant une phase comprenant un dérivé méthylol de formule générale: C6H5-CH-CONH S ( III) O CH3 COOH (b) le mélange de la réaction obtenu à l'étape (a) est mis en contact avec une solution aqueuse d'une base inorganique de formule XOH, o X est un cation choisi parmi les cations de métaux alcalins, ou avec une solution d'un aminoacide basi- que, donnant une solution du dérivé méthylol. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il comprend la phase supplémentaire consistant à soumettre la solution de l'étape (b) à une lyophilisation, obtenant ainsi un produit soluble de formule (II). 6. Procédé selon l'une des revendications 4 ou 5, carac- térisé en ce que ladite base est de l'hydroxyde de sodium. 7. Procédé selon l'une des revendications 4 ou 5, carac- térisé en ce que ledit aminoacide basique est choisi dans le groupe comprenant la lysine et l'arginine. 8. Composition thérapeutique antibiotique consistant en une solution injectable d'un dérivé methylol de la cephalexine défini dans les revendications 1 à 3.