Brevet FR2494698A1 — publié le 19820528

La présentq invention concerne de nouveaux dérivés sté- roides 3-amino substitués ainsi que leurs sels, le procédé de préparation, l'application à titre de médicaments de ces nou- veaux dérivés et les compositions les renfermant. L'invention a pour objet de nouveaux dérivés stéroXdes 3- amino substitués, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répon- dent à la formule générale I: dans laquelle W représente un atome d'hydrogène ou hydroxyle ou ensemble avec X représente un radical X représente un radical éthyl, ou un groupement CH3 fH3 ou CH ou, ensemble avec W, un rad, /OH un radical éthylidène, ical éthylidè- ne, les traits ondulés signifient que le radical correspondant se trouve dans l'une ou l'autre des configurations i et, R1. représente un atome d'hydrogène ou un radical méthyl, R2 repré- sente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et R3 représente un atome d'hydrogène, un ra- dical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxyalcoyl ren- fermant de 2 à 5 atames de carbone, un radical acyl ou alcoxycarbonyl ren- fermant de 2 à 8 atomes de carbone, ou un radical dérivé d'un acide "aminé ou d'un peptide carmprenant de 2 ou 3 acides d-aminés, étant entendu que: - d'une part l'un au moins de R2, et R3 ne représente pas un a- tome d'hydrogène, - d'autre part: i) lorsque à la fois R1 représente un radical méthyl, 14 et R2 représentent un atome d'hydrogène et X représente le radical CH3 1 3 /C<>, dans ce cas R3 ne peut pas représenter un radical o méthyl, acétyl, ou un reste dérivé d'un acide amino carboxyli- que, ii) lorsque à la fois R1 représente un radical méthyl, W repré- sente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical méthyl et W 2 2494698 CH et X représente le radical C, dans ce cas, R3 ne peut pas représenter un radical méthyl ou acétyl, iii) lorsque à la fois R1 représente un radical méthyl, R2 et W représentent un atome d'hydrogène, X représente un groupement CH3 H %. dont l'hydroxyle est de configuration (S) et le OH radical amino est en position 3 W, dans ce cas, R3 ne peut pas représenter un radical méthyl, iiii) lorsque à la fois, R2 et W représentent un atome d'hydro- CH 1 3 gène, X représente un groupement CH et le radical amino âOH est en position 3", dans ce cas, l'un au moins des substituants R1, R2 et R3 ne représente pas un radical méthyl et) iiiii) lorsque à la fois, R2 et W représentent un atome d'hydro- gène, R1 représente un radical méthyl, X représente un groupement CH3 CH dont l'hydroxyle est de configuration(R)et le radi- / OH cal amino est en position 3", dans ce cas, R3 ne représente pas un radical éthoxycarbonyle. Dans la formule générale I, et dans ce qui suit, le terme radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical méthyl, éthyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl ou pentyl; le terme radical hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical hy- droxyéthyl ou hydroxypropyl; le terme radical acyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical acé- tyl, propionyl, n-butyryl, isobutyryl, benzoyl ou nicotinoyl, le terme radical alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de car- bone désigne, par exemple, un radical méthoxy, éthoxy ou pro- poxycarbonyl; le reste dérivé d'un acide amino carboxylique peut être choisi dans le groupe constitué par Ala, Val, Ival, Leu, Ile, Asp, Asn, Glu, Gln, Ser, Thr, Cys, Met, Lys, Arg, Phe, Tyr, Trp, His, et Pro, Nva, Nle, Hyp, Orn, ces acides étant sous la forme D ou L, ainsi que par Sar et Gly; lorsque R3 représente un radical dérivé d'une peptide comprenant 2 ou 3 acides c-ami- 3 2494698 nés, ceux-ci sont choisis dans le groupe constitué par les a- cides (-aminés ci-dessus. On admettra par convention que les symboles des acides o- amino carboxyliques représentent ces acides sous leur configu- ration D ou L (par exemple, le terme Ala signifie Alanine sous forme D ou sous forme L). Sauf convention contraire, la nomenclature utilisée dans la présente demande est la nomenclature IUPAC, dont les règles sont publiées notamment dans Biochem. J. (1972) 126, 773-780. Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques peuvent être, par exemple, les sels formés avec les acides chlo- rhydrique, bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, propionique, benzoique, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspar- tique, alcane sulfoniques tels que les acides méthane ou éthane sulfoniques, arylsulfoniques,tels que les acides benzène ou pa- ratoluène sulfoniques et arylcarboxyliques. Parmi les produits, objet de l'invention, on peut citer notamment les dérivés répondant à la formule I ci-dessus, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que, dans ladite formule I, X représente un CH3 groupement OH Parmi ceux-ci, on peut citer plus particulièrement les dé- rivés caractérisés en ce que, dans ladite formule I, X repré- CH sente un groupement CH et R2 représente un atome d'hydro- "H gène ou un radical méthyl, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques et tout particulièrement: - le 2-amino N-/(2OS) - 20-hydroxy (5")-pregnan-3"-yl/ propana- mide, - le (2S) 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy (5U)-pregnan-3a-yl/ 1H- indol 3-propanamide, - le 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy-19-nor(5o -pregnan-3d-yl/acé- tamide, - le 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy (5o)-pregnan-3"-yl/ N-méthyl acétamide, ainsi que leurs sels; on retient aussi tout particulièrement les 4 2494698 dérivés décrits dans les exemples. L'invention a également pour objet un procédé de prépara- tion des dérivés, tels que définis par la formule I ci-dessus, ainsi que de leurs sels, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule II CH R dans laquelle le trait ondulé> W, X et R ont la signification déjà indiquée, - soit avec un halogénure de formule III Hal- R'3 III dans laquelle Hal représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, et R'3 représente un radical acyl ou alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R2 représente un atome d'hydrogène, R3 représente un radical acyl ou alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que l'on iso- le et salifie si désiré, - soit avec un "-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine est protégée par un grou- pement facilement clivable notamment par hydrolyse acide, puis traite de façon à éliminer le groupement protecteur, pour ob- tenir un produit de formule I dans laquelle R2 représente un atome d'hydrogène, R3 représente un radical dérivé d'un acide d-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides "-aminés, et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, - soit avec un halogénure d'alcoyle C1-C5 ou d'hydroxyalcoyle ren- fermant de 2 à 5 atomes de carbone et dont l'halogène est un atome de chlore, de brome ou d'iode, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R2 et R3 représentent un atome d'hydro- gène ou un radical alcoyl renfermant de l à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que ou bien l'on isole et salifie si dé- siré, ou bien, dans le cas o R3 représente un atome d'hydrogène, 2494698 l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un halogénure de formule IV: Hal-R"3 IV dans laquelle R"3 représente un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone ou acyl ou alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone et Hal a la signification déjà indiquée, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R2 représente un radical alcoyl C1-C5 ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R3 représente un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone ou acyl ou acyloxy renfermant de 2 à 8 atomes de car- bone et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, ou bien encore dans le cas o R3 représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un 0 par hydrolyse acide, puis traite de façon à éliminer le groupe- ment protecteur pour obtenir un produit de formule I dans la- quelle R2 représente un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R3 représente un radical dérivé d'un acide i isole et salifie si désiré. Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre de l'invention, le procédé de préparation ci-dessus qécrit, est caractérisé en ce que: - la réaction de l'amine de formule II avec l'halogénure de formule III est effectuée en présence d'un agent fixateur d'a- cides, en particulier des hydroxydes alcalins, des carbonates alcalins (carbonate de potassium), des bicarbonates alcalins, les acétates alcalins, des carbonates alcalino-terreux, des amines tertiaires (par exemple des trialcoylamines, la pyridine) ou des alcoolates alcalins (éthylate de sodium). La réaction peut s'effectuer par exemple dans des solvants ou milieux de suspension inertes tels que des cétones aliphati- ques inférieures, le dioxanne, le diméthylformamide, le benzène ou le toluène. Dans le cas de l'acylation, on peut également 6 2494698 utiliser l'acide libre, ou alors un autre dérivé fonctionnel tel qu'un anhydride d'acide. Une autre manière de greffer le radical R'3 consiste à transformer tout d'abord, dans le composé de formule II, le groupe amino pour obtenir le composé alcalin correspondant, en faisant réagir ce dernier dans un solvant inerte tel que le dioxanne, le diméthylformamide, le benzène ou le toluène, avec un métal alcalin, des hydrures alcalins ou des amidures alca- lins (en particulier le sodium ou des composés du sodium) à une température comprise entre 0 et 150 C, puis à ajouter l'agent acylant/chlorure ou anhydride d'acide). Dans le cas ou l'on utilise l'acide libre, il est néces- saire de l'activer par la présence d'agents de condensation tels qu'un carbodiimide ou des amides bis-alcoyliques d'acide sulfu- reux. - La réaction de l'amine de formule II ou du produit de formule I dans laquelle R3 représente un atome d'hydrogène et R2 repré- sente un radical alcoyl ou hydroxy alcoyl avec l'acide "-aminé ou le peptide dont-la fonction aminée est protégée par un groupement protecteur facilement clivable a lieu en présence d'un agent de condensation. L'agent de condensation a dans ce cas pour but d'activer la fonction acide de l'amino acide. Comme agent de condensation, on peut utiliser un carbodii- mide de formule: A-N=C=N-B dans laquelle A et B représentent un radical alcoyl renfermant de 1 à 8 atomes de carbone éventuellement porteurs d'un radical dialcoylamino ou représentent un radical cycloalcoyl. On peut citer, par exemple, le dicyclohexylcarbodiimide ou le 1-éthyl 3-(3-diméthylaminopropyl) carbodiimide, de préféren- ce, ce dernier. On peut aussi utiliser un chloroformiate d'alcoyle comme, par exemple, le chloroformiate de méthyle, d'éthyle ou d'isobu- tyle; on peut aussi utiliser un pyrophosphite d'alcoyle, comme par exemple le pyrophosphite d'éthyle. Comme groupement portecteur facilement clivable, on peut utiliser, par exemple, le groupement carbobenzyloxyl ou le grou- pement carboterbutyloxyl. L'invention a notamment pour objet un procédé caractérisé 7 2494698 en ce que le groupement protecteur est le radical carboterbu- tyloxyl. Pour éliminer le groupement protecteur facilement clivable cidessus on utilise comme agent de clivage de préférence un acide tel que l'acide chlorhydrique; on opère par exemple à l'aide d'une solution alcanolique d'acide chlorhydrique, ou à l'aide d'acide chlorhydrique anhydre par barbotage dans le ni- trométhane. On peut aussi utiliser des acides tels que l'acide paratoluène sulfonique, l'acide formique ou l'acide trifluoro- acétique. On peut utiliser également l'hydrogène en présence de palladium. - La réaction de l'amine de formule II avec l'halogénure d'al- coyle ou d'hydroxyalcoyle se fait en présence des mêmes agents fixateurs d'acides et solvants que dans le cas de la réaction avec l'halogénure de formule III. - La réaction du produit de formule I dans laquelle R3 repré- sente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical alcoyl C1-C5 ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée avec l'ha- logénure de formule IV est effectuée selon la nature de R"3, dans les conditions précédemment décrites pour la réaction de l'amine de formule Il avec l'halogénure de formule III ou avec 1'halogénure d'alcoyle. Pour la préparation des produits de formule I N-alcoylés, il peut être intéressant dans certains cas d'opérer de façon particulière: - pour préparer un produit de formule I N-mono-éthylé on peut préparer le dérivé N-acétylé correspondant puis le réduire. Pour préparer le dérivé N-diéthylé, il suffit de répéter l'opé- ration pour préparer un produit de formule I N-mono-ou di-iso- propylé on peut faire réagir un produit de formule II avec l'a- cétone en présence d'un réducteur tel que le cyanoborohydrure de sodium. Les dérivés de formule I à l'exception de ceux pour les- quels R3 représente un radical acyl ou acyloxy présentent un caractère basique. On peut avantageusement préparer les sels d'addition des dérivés de formule I, en faisant réagir, en pro- portions sensiblement stoechiométriques, un acide minéral ou organique avec ledit dérivé de formule I. Les sels peuvent être préparés sans isoler les bases correspondantes. Les dérivés, objet de la présente invention, possèdent de très intéressantes propriétés pharmacologiques; ils sont doués notamment de remarquables propriétés immunothérapeutiques. Ils sont en particulier capables de stimuler les réactions immuni- taires. Ces propriétés sont illustrées plus loin dans la partie expérimentale. Ces propriétés justifient l'utilisation des dérivés sté- roides 3-amino substitués, ainsi que de leurs sels, à titre de médicaments. La présente demande a ainsi également pour objet l'appli- cation, à titre de médicaments, des dérivés stéroides 3-amino substitués, tels que définis par la formule I, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement accep- tables. Parmi les médicaments, objet de l'invention, on retient, de préférence, les médicaments caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux dérivés stéroides 3-amino substitués répondant à la formule I, dans laquelle X représente un groupe- CH3 ment H ainsi que par leurs sels d'addition avec les H acides pharmaceutiquement acceptables. Parmi ceux-ci, on retient notamment ceux répondant à la formule I, dans laquelle X représente un groupement fH3 CH, et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical bH méthyl, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharma- ceutiquement acceptables. Parmi ces derniers, on retient tout particulièrement, les dérivés dont les noms suivent: - le 2-amino N-/(20S) -20-hydroxy (5e)-pregnan-3"-yl/ propana- mide, - le (2S) 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy (5")-pregnan-3U-yl/ 1H- indole 3-propanamide, - le 2-amino N-/(20S)-2o-hydroxy-19-nor (5m)-pregnan-30-yl/acé- tamide, - le 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy (5e)-pregnan-3oc-yl/ N-méthyl acétamide, 9 2494698 ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutique- ment acceptables. Les médicaments selon l'invention trouvent leur emploi, par exemple, dans le traitement des maladies autoimmunes résul- tant d'une déficience en certains lymphocytes, qu'il s'agisse de maladies du tissu conjonctif non spécifiques d'un organe comme par exemple l'arthrite rhumatoide, le lupus érythémateux systémique ou qu'il s'agisse de maladies spécifiques d'un or- gane comme la thyroidite, le pemphigus ou l'anémie hémolytique. Les produits de l'invention peuvent être ainsi utilisés comme traitement adjuvant de l'antibiothérapie et de la chimio- thérapie anti-cancéreuse. La dose usuelle, variable selon le dérivé utilisé, le su- jet traité et l'affection en cause peut être, par exemple, de 10 mg à l g par jour, par voie orale chez l'homme du dérivé de l'exemple 14 comme adjuvant d'antibiothérapie. L'invention a enfin pour objet les compositions pharmaceu- tiques qui renferment au moins un dérivé précité ou l'un de ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, à titre de principe actif. A titre de médicaments, les dérivés répondant à la formule I et leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables peuvent être incorporés dans des compositions phar- maceutiques destinées à la voie digestive ou parentérale. Ces compositions pharmaceutiques peuvent être, par exemple, solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceu- tiques couramment utilisées en médecine humaine, comme par exemple, les comprimés, simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magné- sium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émul- sifiants, les conservateurs. Les produits de départ de formule II, lorsqu'ils ne sont pas connus, peuvent être préparés comme suit On fait réagir un produit de formule V: V HO' dans laquelle R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, avec un excès de bromure d'éthyl triphénylphosphonlum et de tertbutylate de potassium pour obtenir un produit de formule VI: R 1 VI dans laquelle R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on transforme, par exemple, par passage au to- sylate puis action d'azotine de sodium, ou directement par ré- action avec l'azidophosphate de diphényle ou l'azodicarboxylate d'éthyle en l'azide de formule VII: VII N3 dans laquelle R1 et le trait ondulé ont la signification déjà- indiquée, que l'on réduit, par exemple à l'aide d'hydrure d'a- luminium-lithiumn, pour obtenir une amine de formule VIII: R1 gf R s sVIII H NJ- dans laquelle R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que - soit l'on hydrate par exemple à l'aide de diborane pour obte- nir un produit de formule IIA: H3 A IIA m il 2494698 dans laquelle R1 et les traits ondulés ont la signification déjà indiquée, que ou bien l'on isole, ou bien l'on soumet à une oxydation par exemple à l'aide d'acide chromique, pour ob- tenir un produit de formule IlB: "B 2 3 dans laquelle R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, - soit l'on soumet le produit de formule VII à une cis-dihydro- xylation, par exemple à l'aide de triméthyloxamine, de préfé- rence après protection de l'amine par un groupement facilement hydrolysable tel qu'un groupement trifluoroacétyl pour obtenir un produit de formule II CH R1 OH II- R dans laquelle R représente le groupement protecteur défini ci- dessus ou un atome d'hydrogène, et Rl et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que ou bien, lorsque R représente un atome d'hydrogène, l'on isole, ou bien, lorsque R représen- te un groupement protecteur, l'on soumet à un agent de clivage dudit groupement protecteur, par exemple une hydrolyse alcaline dans le cas d'un groupement trifluoroacétyl, puis isole, ou bien l'on soumet ledit produit de formule IIc à une oxydation, par exemple à l'aide d'acide chromique, pour obtenir un produit de formule IID CH3 RoN D dans laquelle R, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée que, ou bien lorsque R représente un atome d'hy- drogène,l'on isole, ou bien, lorsque R représente un groupement protecteurl'on soumet à un agent de clivage dudit groupement =12 2494698 protecteur, puis isole l'amine libre obtenue, ou bien l'on ré- duit, par exemple à l'aide de borohydrure de sodium, pour ob- tenir un produit de formule IIE:CH3 iH3 R1, oOOH HI IE H R dans laquelle R, R1 et les traits ondulés ont la signification déjà indiquée, que, ou bien lorsque R représente un atome d'hy- drogène l'on isole et salifie si désiré, ou bien lorsque R re- présente un groupement protecteur, l'on soumet à un agent de clivage dudit groupement protecteur, puis isole l'amine libre obtenue. Un exemple d'une telle préparation figure ci-après dans la partie expérimentale. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois *la limiter. Exemple 1: (2S) 2-amino N-/(20S)-20-hvdroxy 5o-preqnan-3%-vl/ Dropanamide (chlorhydrate et base) Stade A: 2-/1,1-diméthyl éthoxy carbonylamino/ N-/(20S)-20- hydroxy (5")-pregnan-3,-yl/ propanamide On dissout 1,92 g de (205) 3camino 5o-pregnan-20-ol et 2,27 g de tertbutyloxycarbonyl-L-Alanine (BOC-LAlanine) dans cm3 de chloroforme et 12 cm3 de pyridine. On agite la solu- tion à 0 C/+5 C sous atmosphère inerte et ajoute 1,14 g de chlo- rhydrate de 1-éthyl 3-(3-diméthylaminopropyl) carbodiimide. Au bout d'une heure 15, on ajoute à nouveau 1,15 g de chlorhydra- te de 1-éthyl 3-(3-diméthylaminopropyl) carbodiimide, maintient l'agitation pendant 50 minutes à 0 C/+5 C, amène à sec, reprend avec une solution aqueuse de carbonate acide de sodium, extrait à l'acétate d'éthyle, lave avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium puis avec une solution aqueuse normale d'a- cide chlorhydrique et à nouveau avec une solution aqueuse satu- rée en chlorure de sodium, sèche, amène à sec, cristallise dans l'éther isopropylique, essore, lave à l'éther isopropylique, sèche à 60 C sous pression réduite et obtient le produit atten- du. PF = 171 C. Stade B: chlorhydrate et base de (2S) 2-amino N-/(20S)-20- hydroxy 5o-pregnan-3-yl/ propanamide n úf00Q 13 Lt7 variante 1: On met en suspension, sous atmosphère inerte, 1,55 g du produit obtenu au stade A, dans 100 cm3 de nitromé- thane, fait barboter de l'acide chlorhydrique pendant 10 minu- tes, agite à 20 -25 C pendant 35 minutes, élimine l'excès d'a- cide chlorhydrique, essore, lave à l'éther éthylique, sèche à C sous pression réduite, recristallise dans le méthanol et obtient 990 mg de chlorhydrate attendu. PFO -' 220 C. variante 2: On dissout sous atmosphère inerte 2,7 g du produit obtenu au stade B dans 10 cm3 d'éthanol, ajoute 40 cm3 d'étha- nol chlorhydrique (3,5N), agite pendant 8 heures, amène à sec, reprend à l'acétate d'éthyle, glace, essore, lave à l'acétate d'éthyle, sèche à 60 C sous pression réduite, recristallise dans le méthanol et obtient 2,2 g du chlorhydrate attendu. PFO - 2200C. Préparation de la base: On dissout 1,74 g de chlorhydrate dans 100 cm3 de tétrahy- drofuranne à 30% d'eau, ajoute 4 cm3 de soude 2N, amène à sec, reprend par 100 cm3 de chloroforme, lave à l'eau, sèche, amène à sec, recristallise dans l'acétate d'éthyle et obtient 1,27 g de la base attendue. PF = 224 C. En opérant selon un procédé analogue à celui décrit ci- dessus, on a préparé les dérivés décrits dans le tableau ci- dessous. I (s) N de Acide Aminé de R PF l'exemple Variante départ 3 2 1 + Acide BOC-L- OHCH--C 2-COOH(S) 220 C remarque Glutamique NH2 (chlorhydrate) 3 1 BOC-L-Serine 0 H-CH2OH (S) 2100C 2 (chlorhydrate) 4 1 BOC-L-Phényl- CH-CH (S) 240 C alanine NH2 (chlorhydrate) 1 BOC-L-Trypto-) CH-CH (s) 135C phan NH2 Nv(base) _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ H _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 14 2494698 Remarque pour l'exemple n 2: La seconde fonction acide de l'acide LGlutamique est bloquée sous forme d'ester benzylique; on la libère par hydrogénation catalytique dans l'acide acétique en présence de palladium, avant le clivage du BOC. Exemple 8: N-/(2OS)-20-hYdroxy 5d-preanan-30o-yl/ 3-pvridine carboxamide On dissout sous atmosphère inerte 960 mg de (20S) 3o-amino 5e-pregnan-20ol et 813 mg d'acide nicotinique dans 30 cm3 de chloroforme et 6 cm3 de pyridine, ajoute 582 mg de chlorhydra- te de 1-éthyl 3-(3-diméthylaminopropyl) carbodiimide. Après 3 heures 30, on ajoute 291 mg de chlorhydrate de 1-éthyl 3-(3- diméthylaminopropyl) carbodiimide, agite pendant 16 heures, amène à sec, reprend par 30 cm3 d'eau, glace, essore, lave à l'eau, sèche à 80 C sous pression réduite, recristallise dans le méthanol et obtient 920 mg du produit attendu. PF = 258 C. /"/D = +14,5 + 1 (c = 1% pyridine). Exemple 9: chlorhydrate de 2-amino N-/(20S) 17o,20-dihydroxy 5o-pregnan 3o-vl/ acétamide En opérant selon un procédé analogue à celui décrit dans l'exemple 1 (variante 2) à partir de BOC-Glycine et de (20S) 3U-amino 5o-pregnan 17o,20-diol, on obtient le produit attendu. PFo _ 2000C. /M/D = +4 + 1 (c=1,5% Ethanol 95 ). Le (20S) 3c-amino 5c-pregnan-17&,20-diol de départ peut être préparé comme suit: Stade 1: (Z) (5x) pregn-17 (20)-èn 35-ol On ajoute 59,4g de bromure de triphényléthylphosphonium à 16,1 g de tert-butylate de potassium en solution dans 160 cm3 de tétrahydrofuranne, agite pendant 30 minutes, ajoute 23,2 g d'épiandrostérone, agite pendant 15 heures, verse dans l'eau N de Acide Aminé de R PF l'exemple Variante départ R3 6 2 BOC- L-Proline H (S) 2750C Un 0Àë (chlorhydrate) &H 2400C 7 CF3COOH BOC-Glycyl O CH -NCO-CEH - N -Glycine 2_NC0-CH2N chlorhydrate Glycine '200 puis 252 base 2494698 glacée, extrait à l'acétate d'éthyle, lave, sèche, distille à sec, purifie par chromatographie sur colonne de silice (éluant: cyclohexane- acétate d'éthyle 7-3), distille à sec, reprend au méthanol, glace, essore, sèche à l'air et obtient 23,1 g du produit attendu. PF = 160 C. Stade 2: (Z) 3"-azido (5i -pregn.. -.17(20)-ène On ajoute 1,92 g d'azodicarboxylate d'éthyle et 3,02 g d'azidophosphate de diphényle à une solution de 1,66 g du pro- duit ci-dessus dans 30 cm3 de benzène et 5 cm3 de tétrahydro- furanne, agite au bain de glace, ajoute en 20 minutes une solu- tion de triphénylphosphine dans 30 cm3 de benzène, agite en- core pendant 40 minutes à 10 C, lave, sèche et distille à sec les phases organiques, purifie par chromatographie sur silice (éluant: heptane puis heptane-acétone 1-1), distille et ob- tient 1,67 g de cristaux - PF = 106 C - du produit attendu. PF = 114 C après recristallisation dans le méthanol. Stade 3: (Z) 5"-pregn 17(20)-ène-3t--amine (et chlorhydrate) On dissout dans 290 cm3 de tétrahydrofuranne 14,5 g du (Z) 3a-azido (54)-pregn 17(20)-ène tel qu'obtenu ci-dessus, agite en chauffant à 25-27 C, ajoute en 1 heure au bain d'eau 800 mg d'hydrure d'aluminium-lithium, agite encore 1 heure, élimine l'excès d'hydrure par du méthanol, filtre, lave, sèche, distille à sec et obtient 13,1 g de cristaux de l'amine atten- due. PF p- 90 C. On dissout la base dans 150 cm3 d'acétate d'éthyle et cm3 de chlorure de méthylène, ajoute 27 cm3 d'acétate d'é- thyle chlorhydrique 1,7N, essore, lave et sèche sous pression réduite les cristaux obtenus et obtient 13,2 g de cristaux du chlorhydrate du produit attendu. PFO 300 C. /à/D à 1% dans pyridine, à 10% d'eau = +38,5 + 1,5 . Stade 4: N-/(Z,5c)-pregn 17(20)-èn 3"-yl/ trifluoroacétamide On met en suspension sous atmosphère inerte 16,5 g du chlo- rhydrate obtenu au Stade 3 ci-dessus, dans 165 cm3 de chlo- rure de méthylène et 16,5 cm3 de pyridine, refroidit à environ 5 C, introduit 16,5 cm3 d'anhydride trifluoroacétique en 5 mi- nutes, agite 15 minutes à température ambiante, distille à sec sous pression réduite, ajoute 200 cm3 d'eau, essore, lave à l'eau, sèche sous pression réduite et obtient 18,1 g de cristaux. PFo = 204 C. Stade 5: N-/(20S) 17o,20-dihydroxy (5 roacétamide On dissout sous atmosphère inerte 18,1 g du produit obtenu ci-dessus dans 100 cm3 de méthyléthylcétone, ajoute 9 g de N- oxyde de triméthylamine dihydratée ainsi qu'une solution de 360 mg de tétroxyde d'osmium dans 71 cm3 de méthyléthylcétone, agite 2 heures au reflux, laisse refroidir, ajoute 200 cm3 de solution de thiosulfate de sodium à 10% dans l'eau, agite 30 minutes à température ambiante, décante, lave à l'eau, sèche sur sulfate de magnésium, filtre, distille à sec sous pression ré- duite, purifie l'huile obtenue par chromatographie sur silice (éluant: benzène-acétate d'éthyle 7-3), et obtient 14 g du produit attendu; PF = 172 C puis 192 C. Stade 6: (20S) 3o-amino 5oc-pregnan-17o,20 diol On dissout sous atmosphère inerte 4 g du produit obtenu ci- dessus dans 20 cm3 de méthanol, ajoute 8 cm3 de lessive de sou- de, agite pendant 1 heure 30, ajoute 50 cm3 d'eau, agite pen- dant 10 minutes, essore, lave, sèche sous pression réduite à C et obtient 3 g de base du produit cherché. PF = 210 C. Exemple 10: chlorhydrate de 2-amino N-/(2OS)-20-hydroxy 19-nor (5")pregnan-3"- l/ acétamide En opérant selon un procédé analogue à celui décrit dans l'exemple 1 (variante 1) à partir de BOC-Glycine et de (20S) 3"-amino-19-nor (5")-pregnan-20-ol, on obtient le produit atten- du. PFF 270 C avec sublimation. / Le (20S) 3wamino-19-nor (5o l'exemple 9 (stades 1,2,3) pour la préparation du (Z) 5"-preg- 3017(20)-èn-3 drostérone la (Z) 5 On met en suspension sous azote 156 mg de borohydrure de sodium dans 5 ml de tétrahydrofuranne, ajoute goutte à goutte à +5 C une solution de 0,5 ml d'éthérate de trifluorure de bore dans 2,5 ml de tétrahydrofuranne, agite 1 heure au bain de gla- ce, ajoute 296 mg de (Z) 5o-19 nor-pregn 17(20)-èn-3o-amine en solution dans 3 ml de tétrahydrofuranne, agite pendant 1 heure à température ambiante, refroidit au bain de glace, ajoute lentement 2 ml de soude 6N, agite pendant 5 minutes à tempéra- ture ambiante, décante, extrait la phase aqueuse au tétrahydro- 17 2494698 furanne, lave la phase organique, ajoute 4 ml de soude 5N, 2 ml d'eau oxygénée à 110 volumes, agite pendant 45 minutes, extrait à l'acétate d'éthyle, lave, sèche et distille à sec la phase or- ganique sous pression réduite, reprend l'extrait sec dans 10 ml de méthanol avec 5 ml d'acide chlorhydrique N, chauffe 30 minu- tes au bainmarie à 50 C, verse dans une solution saturée de bicarbonate de sodium, extrait au chlorure de méthylène, lave, sèche, évapore sous pression réduite et obtient 257 mg de cris- taux du produit attendu. PF - 190 C. Exemple 11: chlorhydrate de 2-amino N-/17c-hvdroxy 20-oxo 5"- pregnan-3o- l/ acétamide En opérant selon un procédé analogue à celui décrit dans l'exemple 1 (variante 2) à partir de BOC-Glycine et de 3aamino 17 PF > 300 C. /"/D = +50 + 1 (c-=1%Ethanol 95 ). La 3"-amino 17c-hydroxy 5o-pregnan-20-one de départ peut être préparée comme suit: Par oxydation perchromique du produit obtenu au stade 5 de l'exemple 9, on prépare le N-(17c-hydroxy-20-oxo-5-pregnan-3 yl) trifluoroacétamide (PF = 178 C puis 186 C), que l'on trai- te comme indiqué au stade 6 de l'exemple 9 pour obtenir la 34- amino 17o-hydroxy 5oc-pregnan-20-one. PF = 216 C par cristal- lisation dans l'eau. Exemple 12: chlorhydrate de 2-amino N-/(20R)-20-hydroxy 5o- preqnan-3"-yl/ acétamide En opérant selon un procédé analogue à celui décrit dans l'exemple 1 (variante 1) à partir de BOC-Glycine et du (20R) 3o PF = 2100C puis 260 C. / Exemple 13: N-/(20S)-20-hydroxy (5c minutes, ajoute 20 cm3 de soude N, agite encore pendant 30 mi- nutes, décante, extrait au chlorure de méthylène, lave à l'eau, sèche, filtre, évapore à sec sous pression réduite, reprend à l'éther éthylique, essore et obtient 5,7 g du produit attendu. PFo 198oC. />/D = +25 + 1,5 (c = 1% chlorure de méthylène). Exemple 14: chlorhydrate de 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy 5"- preqnan-3o-Yl/ N-méthyl acétamide Par réduction du produit de l'exemple 13, on a préparé le (20S) 3o-méthylamino 5x-pregnan-20-ol (PF = 170 C) décrit par Vetter et Coll dans Bull. Soc. (1963) 1324, que l'on fait réagir avec le BOC-Glycine selon un procédé analogue à celui décrit à l'exemple 1 (variante 2) pour obtenir le chlorhydrate attendu. PFo " 2500C. Exemple 15: On a préparé des comprimés répondant à la formule: - chlorhydrate de 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy 5o-pregnan- 3"-yl/ propanamide.................................... 20 mg; - excipient q. s. pour un comprimé terminé à............100 mg. (Détail de l'excipient; lactose, amidon; talc, stéarate de magnésium). Exemple 16: On a préparé des comprimés répondant à la formule: - chlorhydrate de 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy 5e-pregnan- 3a-yl/ N-méthyl acétamide............................. 15 mg; - Excipient q. s. pour un comprimé terminé a............100 mg. (Détail de l'excipient: lactose, amidon, talc, stéarate de magnésium). Etude pharmacoloqiaue 1. - Adjuvant du choc anaphylactique Principe: L'administration à des animaux d'un produit capable de stimuler l'activité des systèmes immunitaires se traduit par une augmentation du choc en réponse à l'administration d'un antigène auquel l'animal était sensibilisé. Des souris mâles pesant 30 à 35 g sont sensibilisées par voie intraplantaire avec l'albumine sérique de boeuf. 8jours plus tard, elles reçoivent cet antigène par voie intra-veineuse. Dans des conditions de sensibilisation minimum les animaux té- moins ne font pas de choc mortel lors de cette dernière admi- nistration. Le produit à tester est injecté par voie intra-plantaire, mélangé avec l'antigène: si ce produit est adjuvant, il va 19 2494698 augmenter la sensibilisation et il en résultera un choc mortel lors d'une administration par voie intraveineuse. On retient comme dose active la dose qui provoque une mortalité égale ou supérieure à 50% des animaux. Résultats: 2. - Test des rosettes aux globules rouges de mouton Principe: L'administration à des animaux d'un produit capable de stimuler l'activité des systèmes immunitaires se traduit par une augmentation de leur capacité de réaction à l'injection d'un produit immunogène. Des rats mâles âgés de 3 mois sont sensibilisés par voie intraperitonéaleavec des érythrocytes de mouton (jour 0) 7 jours plus tard (Jour 7) leur rate est prélevée et les spléno- cytes sont mis en contact avec des érythrocytes de mouton: on compte ensuite le pourcentage de leucocytes autour desquels les érythrocytes ont formé des rosettes. Le produit à étudier est administré per os quotidiennement du jour -1 au jour 1. On considère comme dose immunostimulante la dose de pro- duit qui multiplie environ par 2 le pourcentage de rosettes observé chez les animaux témoins. Produit de l'exemple Dose par animal en mg 1 0,5 2 g 1 4 5 5 6 2 7 1 8 5 9 1 0,5 13 5 14 0,5 Résultats: 3. - Etude de la toxicité aiaie On a évalué les doses létales DL0 des différents composés testés après administration par voie orale chez la souris. On appelle DLO la dose maximale ne provoquant aucune morta- lité au bout de 8 jours. Les résultats sont les suivants: Produit de l'exemple Dose par animal en mg/kg per os 1 1 2 6 >5 8 5 5 il 5 14 10 Produit de l'exemple DLO en mg/Kg 1 200 2 >400 3 >400 4 >, 400 >1000 6 > 800 7 >, 400 9 > 600 > 400 il > 1000 12 > 400 13 > 400 14 > 200 REVENDICATIONS 1. - Nouveaux dérivés stéroldes 3-amino substitués, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale I: x R R2 R3 dans laquelle W représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle ou ensemble avec X, représente un radical éthylidène, IH3 CH3 X représente un radical éthyl ou un groupement ou CH" O NOH ou, ensemble avec W, un radical éthylidène, les traits ondulés signifient que le radical correspondant se trouve dans l'une ou l'autre des configurations i et (, R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical méthyl, R2 représente un atome d'hy- drogène ou un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxy alcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et R3 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoylrenfer- mant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 atromes de carbone, un radical acyl ou alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, ou un radical dérivé d'un acide oc-aminé ou d'un peptide caprenant 2 ou 3 acides e-aminés étant entendu que: - d'une part l'un au moins de R2, et R3 ne représente pas un a- tome d'hydrogène, - d'autre part: i) lorsque à la fois R1 représente un radical méthyl, W et R2 représentent un atome d'hydrogène et X représente le radical CH3 %O, dans ce cas, R3 ne peut pas représenter un ra- dical méthyl, ou acétyl, ou un reste dérivé d'un acide amino carboxylique, ii) lorsque à la fois R1 représente un radical méthyl, W repré- sente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical méthyl et CH X représente le radical /C 22 2494698 iii) lorsque, à la fois, R1 représente un radical méthyl, R et W représentent un atome d'hydrogène, X représente un groupement CH3 CH dont l'hydroxyle est de configuration (S), et le OH radical amino est en position 3o, dans ce cas, R3 ne peut pas représenter un radical méthyl, iiii) lorsque, à la fois, R2 et W représentent un atome d'hy=- CH drogène, X représente un groupement CH et le radical OH amino est en position 34, dans ce cas, l'un au moins des subs- tituants R1, R2 et R3 ne représente pas un radical méthyl, et, iiiii) lorsque, à la fois, R2 et W représentent un atome d'hy- drogène, R1 représente un radical méthyl, X représente un grou- CH3 pement 6 dont l'hydroxyle est de configuration (R) et OH le radical amino est en position 3c,dans ce cas, R3 ne repré- sente pas un radical éthoxycarbonyle. 2. - Nouveaux dérivés stéroides 3-mino substitués selon la revendication 1, ainsi que leurs sels d'addition avec les aci- des minéraux ou organiques, caractérisés en ce que X représente un groupement OH 3. - Nouveaux dérivés stéroïdes 3-amino substitués selon la revendication 2, ainsi que leurs sels d'addition avec les aci- des minéraux ou organiques, caractérisés en ce que X représente CH3 un groupement CH et R2 représente un atome d'hydrogène OH ou un radical méthyl. 4. - L'un quelconque des dérivés de formule I dont les noms suivent: - le 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy (5")-pregnan-3"-yl/ propana- mide, - le (2S) 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy (5c)-pregnan-3c-yl/ 1H- indole 3-propanamide, - le 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy-19 nor (5o)-pregnan-3,--yl/ acé- tamide, - le 2-amino N-/(20S)-20-hydroxy (5 ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou or- ganiques. 5. - Procédé de préparation des dérivés de formule I, tels que définis à la revendication 1, ainsi que de leurs sels, carac- térisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule II: B3 R 1 X II H2 dans laquelle le trait ondulé,W, X et R1 ont la signification déjà indiquée, - soit avec un halogènure de formule III Hal-R'3 III dans laquelle Hal représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, et R'3 représente un radical acyl ou alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R2 représente un atome d'hydrogène, R3 représente un radical acyl ou alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que l'on iso- le et salifie si désiré, - soit avec un "-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine est protégée par un grou- pement facilement clivable notamment par hydrolyse acide, puis traite de façon à éliminer le groupement protecteur, pour ob- tenir un produit de formule I dans laquelle R2 représente un atome d'hydrogène, R3 représente un radical dérivé d'un acide "-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides "-aminés, et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, - soit avec un halogénure d'alcoyle C1-C5 ou d'hydroxyalcoyle renfer- mant de 2 à 5 atomes de carbone et dont l'halogène est un atome de chlore, de brome ou d'iode, pour obtenir un produit de for- mule I, dans laquelle R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène ou un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, pro- duit de formule I que ou bien l'on isole et salifie si désiré, ou bien, dans le cas o R3 représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un halogénure de formule IV: Hal-R"3 IV dans laquelle R"3 représente un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 ato- mes de carbone ou acyl ou alcoxycarbonyl renfermant de 2 à 8 atomes de carbone et Hal a la signification déjà indiquée, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R2 représente un radical alcoyl C1-C5 ou hydroxyalcoylrenfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R3 représente un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, ou acyl ou acyloxy renfermant de 2 à 8 atomes de carbone et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré, ou bien en- core dans le cas o R3 représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un "-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine est protégée par un groupement facilement clivable notam- ment par hydrolyse acide, puis traite de façon à éliminer le groupement protecteur, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R2 représente un radical alcoyl renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou hydroxyalcoyl renfermant de 2 à 5 ato- mes de carbone, R3 représente un radical dérivé d'un acide o(- aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides o-aminés et W, X, R1 et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie si désiré. 6. - Médicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux dérivés stéroides 3-amino substitués, tels que dé- finis par la formule I de la renvedication 1, ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement accep- tables. 7. - Médicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux dérivés stéroïdes 3-amino substitués, tels que dé- finis dans l'une des revendications 2 ou 3, ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. 8. - Médicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les dérivés stéroides 3-amino substitués, tels que définis à la 2494698 revendication 4, ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables. 9. Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles renferment, à titre de principe actif, l'un au moins des médi- caments, tels que définis à l'une des revendications 6, 7 ou 8.