Brevet FR2490491A1 — publié le 19820326

La présente invention a pour objet un nouvel agent analgésique comprenant l'acide 3-amino-2-hydroxy-4-phénylbutanoiqu et ses dérivés, qui présente une activité inhibitrice de l'activi enzymatique de 1'encéphalinase et qui augmente l'activité analgési de la morphine lorsqu'il est administré en association avec celle-ci. Il est connu que l'encéphaline ou endorphine sont présents en tant que peptide analgésique dans le cerveau des mammifères et qu'en particulier l'encéphaline est présente à une teneur élevée dans les vésicules des cellules nerveuses à l'extrém de la fibre nerveuse dans le cerveau, et aussi que l'encéphalinase est présente également dans les mêmes zones o l'on trouve l'encéphaline. En outre la possibilité que l'encéphaline agisse comme neuro-transmetteur dans le système nerveux central des mammifères est suggérée par l'article de "Nature" Vol. 276, pages 523 à 526 (1980). En outre, il est connu que l'analgésie par acupuncture procède par production des peptides analgésiques telle que l'encé- phaline dans le cerveau quand l'efficacité de l'analgésie par acupuncture a été étudiée par mesure de la latence de réaction de la queue de rats dont la teneur en peptides analgésique dans le cerveau avait été mesurée (voir le journal médical japonais "Showa Igakukai Zasshi" Vo. 39, N 5, pages 537 à 542 (1979). Il est rapporté aussi que l'activité analgésique de la morphine est fondée sur le fait que la morphine permet à l'encéphaline d'être secrétée dans le système nerveux (voir "Life Science" n 25, pages 53 à 60 (1979). On a maintenant découvert que d'une façon générale un inhibiteur de l'encéphalinase présente une activité analgésique lorsqu'il est utilisé seul et que l'inhibiteur d'encéphalinase est hautement efficace dans l'élimination ou la diminution de la souffrance des patients qui ressentent des douleurs chroniques. Il a en outre été découvert qu'un inhibiteur de l'encé- phalinase est utile comme agent auxiliaire permettant d'augmenter l'analgésie par l'acupuncture et par la morphine et qu'un inhibite d'encéphalinase,même utilisé seul, permet de rendre réceptif à l'acupuncture un patient qui ne l'était pas. La présente invention repose sur l'étude extensive de nombreux composés connus en ce qui concerne l'activité inhibitrice de l'encéphalinase, enzyme qui dégrade l'encéphaline, dans le but d'obtenir un nouvel agent analgésique. Il a maintenant été découvert que l'acide 3-amino-2-hydroxy4-phénylbutanoique et certains de ses dérivés possèdent une activité inhibitrice de l'encéphalinase in vitro et possèdent une activité analgésique in vivo lorsqu'ils sont essayes sur des animaux. La présente invention à donc pour objet une nouvelle composition pharmaceutique utilisable comme agent analgésique ou antinociceptif lorsqu'il est utilisé seul et qui permet également d'augmenter l'activité analgésique de la morphine lorsqu'il est administré en association avec la morphine. Dans son aspect plus général, la présente invention a donc pour objet une composition pharmaceutique, utile comme agent analgésique, qui comprend comme ingrédient actif au moins un composé de formule I Rl CH2-CH- CH-X NH2 OH _ dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène en un groupement hydroxy, X représente un groupement -COR2 dans lequel R2 est un groupement hydroxy, alkoxy inférieur, benzyloxy, amino, ou un groupement amino mono- ou di-substitué par un alkyle inférieur, ou bien X représente un groupement -CH20H, un groupement -CONH-CH-Y ou un R3 groupement -CONH-CH-CONH-CH CH- Y i 1 1 R3 R4OH/n dans lesquels R3 et R4, identiques ou différents, représentent chacun un atome d'hydrogène, un groupement alkyle ou hydroalkyle ayant 1 à 7 atomes de carbone un groupement mercaptoalkyle contenant 1 à 7 atomes de carbone, un groupement carboxamidoalkyle contenant 2 à 8 atomes de carbone, un groupement aminoalkyle contenant 1 à 7 atomes de carbone, un groupement guanidyl-N- alkyle contenant 2 à 4 atomes de carbone, un groupement alkylmercaptoalkyle contenant 2 à 8 atomes de carbone, un groupement carboxyalkyle contenant 2 à 8 atomes de carbone, un groupement aryle en particulier phényle, un groupement aralkyle en particulier phényl-(C1 C4)alkyle, ou un groupement aralkyle substitué, et Y est un groupement -CH2OH, un groupement -COR2 ou un groupement - CH2COR2 dans lequel R2 est défini comme précédemment, n représente le nombre zéro ou 1, et les atomes de carbone asymétriques présents dans le composé peuvent avoir la configuration R et/ou S, en quantité efficace pour produire une action analgésique, en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable Les composés de formule I, comme on peut le voir d'après leurs structures, sont apparentés à la bestatine, c'est-àdire à la (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phényl-butanoyl-(S)-leucine (voir brevets US n 4 029 547 et 4 189 604). On trouvera ci-après, à titre d'exemples une liste de composés de formule I utilisable selon l'invention. TABLEAU 1 u Conmos n Nom du Cmposé 1 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl-(S) -leucine 2 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl-(R)-leucine 3 Acide (2S,3PR)-3-amino-2-hydroxy-4-phénylbutanoyl-(R)-glutanmique 4 (2S,3R)-3amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl-(R)-alanine (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4phenylbutanoyl-(R)-arginine 6 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl(R)-methionine 7 i" "i -(S)-methionine 8 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-p-hydroxyphenylbutanoyl-(S)- leucine 9 " "-(R)-leucine 0 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-p-hydroxyphenylbutanoyl-(R)- phenylalanine L1 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl-(S)-leucyl- (R)-leucine L2 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl-e-alanine L3 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl-(R)-asparagine [4 (2S,3R)-3amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl-glycine [5 Acide (2S,3R)-3-amino-2hydroxy-4-phénylbutanoique [6 Amide " 7 (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4phénylbutanoate de méthyle Abréviation AHPA-L-Leu (= Bestatin) AHPA-D-Leu AHPA-D-Glu AHPA-D-Ala AHPA-D-Arg AHPA-D-Met AHPA-L-Met p-OH-AHPA-L-Leu pOH-AHPA-D-Leu p-OH-AHPA-D-Phe AHPA-L-Leu-D-Leu AHPA-e-Ala AHPA-D-Asp AHPAGly AHPA AHPA-Amide AHPA-Me-Ester (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenyl-lbutanol 9.83 PV la C> AHPA-l-ol Parmi les composés mentionnés dans le tableau 1 les composés n 1 à 10, 12, 13 et 14 sont sous la forme de dipeptide. Parmi les composés préférés de l'invention, on situera en particulier les composés n 2 à 10 et 12 à 14. Selon un mode de réalisation préféré l'invention à pour objet une composition pharmaceutique utilisable comme agent analgésique, comprenant comme ingrédient actif au moins un dipeptide de formule Ia 1l0 9 CH2-CH CH - COR5 - I i NH2 OH dans laquelle R5 représente un reste de D-leucine, d'acide D- glutamique,de D-alanine, de D-arginine, de D-méthionine, de L- méthionine, de e-alanine, d'acide D-aspartique ou un reste de glycine, en quantité efficace pour produire un effet analgésique, en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable pour la matière active. Ces restes de peptides sont représentés par les formules suivantes: (R) Reste D-Leucine - NH - CH - COOH CH2CH(CH3)2 (R) Reste acide D-glutafmique - NH - CH - COOH CH2CH2COOH 2'490491 Reste D-Alanine Reste D-Arginine Reste D-Methionine Reste L-Methionine Reste e-Alanine (R) - NH - CH - COOH I CH3 (R) - NH - CH - COOH (CH2)3 - NH - C - NH2 NH (R) - - NH - CH - COOH I CH2CH2SCH3 (S) - NH - CH - COOH I CH2CH2SCH3 - Nh - CH2CH2COOH (R) Reste d'acide D-Aspartique - NH - CH - COOH CH2 H CH2C00H - NH - CH2 - COOH Reste Glycine 7 2490491 Parmi les composés de formule Ia on peut citer notamment les composés n 2 à 7, 12, 13 et 14 du tableau 1 ci-dessus. Selon un second mode de réalisation préféré, l'invention à pour objet une composition pharmaceutique utile comme agent analgésique comprenant comme ingrédient actif au moins un composé de formule lb HO CH2 - CH - CH - COR6 I I NH2 OH dans laquelle R6 représente un reste de D-leucine dont la formule a été donnée précédemment, un reste de L-leucine de formule (s) - NH - CH - COOH 1 CH2CH(CH3)2 ou un reste de D-phénylalanine de formule (R) - NH - CH - COOH CH2C6H5 en quantité suffisante pour produire un effet analgésique, en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable pour l'ingrédient actif. Parmi les composés de formule Ib on peut citer notamment les composés n 8, 9 et 10 mentionnés dans le tableau 1 ci- dessus. La présente invention a également pour objet une méthode de traitement thérapeutique d'un animal, y compris l'homme, ressentant des douleurs, caractérisé par le fait que 8. l'on administre audit un composé de formule I, y compris un composé de formule Ia ou lb, en quantité non toxique suffisante pour diminuer ou éliminer la douleur. L'invention a également pour objet une méthode pour augmenter l'activité analgésique de la morphine lorsque celle-ci est administrée à un animal y compris l'homme ressentant des douleurs, caractérisée par le fait que l'on administre une quantité efficace et non toxique d'un composé de formule 1, y compris un composé de formule Ia ou Ib, à l'animal soit immédiatement avant soit en même temps que l'on administre la morphine à cet animal dans un but d'analgésie. La composition pharmaceutique de l'invention, en raison de son activité analgésique, peut être utilisée dans le traitement analgésique ou antinociceptif de la douleur chez les animaux y compris l'homme. La composition de l'invention peut être administree par voie orale, parentérale ou intrarectale ou même intramédullaire ou intraspinale, par exemple par injection intralombaire, et peut être présentée sous une forme appropriée au mode d'administration utilisé. Une composition sous forme de solution injectable peut contenir de 0,1 % à 10,0% en poids du composé 1 comme ingrédient actif, ainsi qu'un ou plusieurs ingrédients tels qu'un modificateur de pH, un tampon, un stabilisant, un anesthésique local et un additif pour rendre la solution isotonique. La solution injectable peut être préparée pour être adaptée à une injection sous- cutanée intramusculaire ou intraveineuse selon les techniques pharmaceutiques habituelles. Une composition solide pour l'administration par voie orale peut être réalisée sous forme de tablettes, de tablettes enrobées, de granulés, de poudres et de capsules et peut contenir des excipients pour l'ingrédient actif ainsi que, si nécessaire, d'autres additifs, y compris des agents désintégrateurs, lubrifiants, colorants, aromatisants et similaires. La proportion d'ingrédient actif par rapport au véhicule peut être dans le rapport de 1: 1 à 1: 100 en poids et peut être habituellement choisie de façon appropriée selon la formulation administrible par voie orale préparée. La posologie optimale du composé de formule I varie bien entendu selon le mode d'administration,-le sexe, le poids corporel, l'âge, la maladie des patients et aussi selon le traitement recherché. A titre indicatif, pour l'homme, la posologie varie généralement de 20 mg à 2g de composé I pouvant être donnée à une personne adulte en une ou plusieurs prises par jour. Presque tous les composés de formule I utilisés selon l'invention sont connus et décrits dans littérature chimique et dans la littérature de brevets. La substance qui présente la structure fondamentale des composés de formule I est l'acide (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phénylbutanoique (en abrégé AHPA ou (2S, 3R)-AHPA) représenté par la formule / \ CH2 -CH - CH - COOH NH2 OH ainsi que ses isomères. On sait que 1'AHPA est ohtenu par hydrolysE de la bestatine avec l'acide chlorhydrique (voir brevet US n 4 189 604 ou demande de brevet japonais publiée "Kokai" n 51-7187) et que des esters d'alkyle inférieur et de benzyle de 1'AHPA ainsi que des dérivés d'amide de 1'AHPA ont été préparés par les présents inventeurs et par d'autres. Le (2S,3R)-AHPA et ses trois stéréo isomères, c'est-à- dire le (2R,3S)-AHPA, le (2S,3S)-AHPA et le (2R,3R)-AHPA ont été synthétisées par acidolyse du 3-N-benzyloxycarbonylamino-2- hydroxy-4-phénylbutyronitrile, suivie d'une technique de séparatior telle que décrite dans le brevet US n 4 189 604 ou dans la demande de brevet japonais "Kokai" n 52-136118. De façon générale les composés de formule I comprennent notamment les produits suivants: AHPA; p-hydroxy-AHPA (c'est-à-dire l'acide (2S,3R)-3- amino-2-hydroxy-4-p-hydroxyphénylbutanoique décrit dans le brevet US 4 189 604 ou dans la demande de brevet japonais "Kokai" n 54- 79248); des esters et amides de l'AHPA et du p-hydroxy-AHPA, respectivement; les dérivés hydroxyméthylés obtenus par réduction du groupement carboxylique terminal de l'AHPA et du p-hydroxy- AHPA, respectivement, les dipeptides et tripeptides obtenus par condensation d'un amino acide ou d'un dipeptide avec 1'AHPA ou avec le phydroxy-AHPA; ainsi que les esters, amides et dérivés hydroxyméthylés dérivés desdits dipeptides et tripeptides. Les méthodes de préparation des composés de formules I sont décrites ciaprès. Les composés de formule I du type dipeptidE sont obtenus par condensation d'un réactif aminoacide avec 1'AHPA ou le p-hydroxy-AHPA et peuvent être préparés selon une méthode telle que celle décrite dans le "Journal of Medicinal Chemistry'" Vol. 20, 510-515 (1977) ou "Journal of Antibiotics" Vol. 29, n 5; 600-601 (1976). La condensation de l'amino acide avec i'AHPA est effectuée à une température de -20 C a 25 C de façon connue, selon la technique usuelle de synthèse des peptides de façon que le substituant fonctionnel tel que le groupement amino, le groupement hydroxy, le groupement carboxy, le groupement guanidyle et le groupement mercapto, qui ne doivent pas participer à la réaction de condensation, puissent, si nécessaire, être protégés par un groupement protecteur connu. La réaction de condensation est effectuée selon la méthode au carbodiimide en utilisant le dicyclohexylcarbodiimide comme agent de condensation; selon la méthode à l'ester actif en utilisant par exemple l'ester d'hydroxysuccinimide, selon la méthode e l'amide actif en utilisant l'imidazole et similaires, selon la méthode à l'azothydrure actif en utilisant par exemple l'hydrazine- ou selon la méthode à l'anhydride mixte en utilisant par exemple le chroloformiate d'éthyle. Le solvant organique dans lequel est effectuée la condensation peut être choisi parmi 'ceux utilisé dans la synthèse des peptides et comprend par exemple des éthers tels que le tétrahydrofuranne et le dioxane; des esters tels que l'acétate d'éthyle; des cétonestelle que l'acétone; des hydrocarbures halogénés tels que le chlorure de méthylène; des amides tel que le diméthylformamide; et des nitriles tel que l'acétonitrile. Le dérivé protégé du réactif amino-acide peut être de préférence sous la forme d'un sel d'addition acide, par exemple le p-toluène- sulfonate ou le chlorhydrate d'un ester d'alkyle inférieur ou de benzyle de l'amino-acide. Quand l'AHIPA ou le p-hydroxy-AHPA est condensé avec le réactif amino-acide ayant ses groupements fonctionnels bloqués, par exemple par la méthode au carbodiimide, la condensation est effectuée de préférence en présence d'une amide tertiaire organique telle que la Nméthylmorpholine, la triéthylamine et similaires. L'élimination du groupement amino- protecteur résiduel du produit de condensation peut être ef- fectuée par une technique de déprotection connue dans la chimie des peptides. Par exemple, le groupement amino-protecteur aralkyloxy- carbonyle, en particulier benzyloxycarbonyle, peut être éliminé par hydrogenolyse catalytique en présence de palladium comme catalyseur, et le groupement alkoxycarbonyle tel que le groupement tert-butoxycarbonyle peut être éliminé par acidolyse douce il avec l'acide bromhydrique dans l'acide acétique, avec l'acide trifluoroacétique ou avec l'acide chlorhydrique dans un solvant organique tel que le dioxane, le tétrahydrofuranne et l'acétate d'éthyle. Les composésde formules I qui appartiennent à la classe des tripeptide sont obtenus par condensation d'un dipeptide avec l'AHPA ou le p-hydroxy-AHPA ou par condensation d'un l'amino acide avec la bestatine d'une façon connue pour la synthèse classique des peptides, de façon similaire à celle qui vient d'être mentionnée ci-dessus et comme décrit dans la demande de brevet japonais du demandeur no 91691/80 (ou dans la demande de brevet français nh 81 13332). Les composés de formule I qui se trouvent sous forme d'ester sont obtenus par estérification du groupement carboxylique terminal de l'amino-acide du dipeptide ou du tripeptide corres- pondant de façon classique. En particulier un ester d'alkyle ou un ester de benzyle de 1'AHPA ainsi que le dérivé amide de l'AHPA peuvent être préparés à partir de l'AHPA selon un procédé chimique tel que décrit dans le "Journal of Antibiotics" vol. 29, n0 5, 600-601 (1976), par exemple. Dans ce but, l'estérification peut être réalisée selon une méthode consistant à faire réagir le groupement carboxylique avec un diazoalkane tel que le diazomé- thane. Selon un autre procédé on peut faire réagir le groupement carboxylique avec un alcool approprié en présente d'un acide minéral tel que l'acide sulfurique ou l'acide chlorhydrique comme catalyseur ou en présence d'un acide organique tel que l'acide p- toluènesulfonique comme catalyseur; ou bien on peut convertir le groupement carboxylique en sel de métal alcalin ou en sel d'amine et faire réagir ce dernier avec un halogénure d'alkyle un halogénure d'aryle, un halogénure d'aralkyle ou un halogénure d'aralkyle substitué, tel que par exemple le bromure de benzyle ou l'iodure d'éthyle, et similaires. Dans ce procédé d'estérification les groupements fonctionnels qui sont présent dans le produit brut ou dans le réactif utilisé, en plus du groupement carboxylique à estérifier, peuvent avoir été bloqués avec un groupement protec- teur connu, de façon usuelle si nécessaire. De tels groupements fonctionnels qui doivent être bloqués sont le groupement amino, le groupement guanidyle et le groupement carboxylique (autre que le groupement carboxylique à estérifier) lorsque l'on utilise la méthode d'estérification au diazoalkane; ou le groupement amino, le groupement guanidyle, le groupement carboxylique (autre que le groupement carboxylique à estérifier) et le groupement thiol lorsque l'on utilise l'estérification avec un alcool en présence d'un acide comme catalyseur (voir E. Schrôder et al: "The Peptide" Vol. 1 (1965) and vol. 2 (1966), Academic Press). En général les composés de formule I qui sont sous la forme de dérivés amides peuvent être préparés par deux méthodes. La première méthode consiste à convertir le composé de formule Iî sous forme d'acide carboxylique, en ester adalkyle correspondant puis à faire réagir l'ester d'alkyle résultant avec une amine ou l'ammoniac, et la seconde méthode consiste à condenser le composé de formule I sous la forme d'un acide carboxylique avec une amine appropriée de façon connue pour la synthèse classique des peptides, tandis qu'on effectue une déshydratation pendant la réaction de condensation. Cette réaction de condensation avec déshydratation peut être effectuée par la méthode utilisant le dicyclohexyl- carbodiimide comme agent déshydratant; par la méthode à l'amide actif en utilisant l'imidazole, par la méthode à l'amide activée en utilisant l'imidazole;par la méthode à l'azothydrure actif en utilisant par exemple l'hydrazine; ou par la méthode à l'anhydride mixte en utilisant le chloroformiate d'éthyle (voir M. Bondansky et al: "Peptide Synthesis" (1976), John Wiley & Sons). Les composés de formule I qui sont sous la forme de dérivés hydroxyméthylés peuvent être obtenus par réduction du groupement carboxylique terminal d'un composé de formule I ayant un groupement carboxylique terminal et peuvent être préparés selon la méthode décrite dans la demande de brevet japonais no 91690/80 (ou dans la demande de brevet français no 81 13332). L'activité analgésique des composés de formule I de l'invention est maintenant décrite en faisant référence aux expériences qui suivent. Dans ce but on a testé les composés représentés par la-formule générale I' R7 CH2 -CH -CH - COR8 NH2 OH dans laquelle R7 et R8 ont la définition donnée dans le tableau 2 ci-dessous. TABLEAU 2 Composé N Abréviation AHPA-L-Leu AHPA-D-Leu AHPA-D-Glu AHPA-D-Ala AHPA-DArg AHPA-D-Met AHPA-L-Met p-OH-AHPA-L-Leu p-OH-AHPA-D-Leu p-OH-AHPA-D-Phe AHPA-L-Leu-D-Leu AHPA-B-Ala AHPA-D-Asp AHPA-Gly AHPA AHPA-Amide AHPA-MeEster R7 H H H H H H H OH OH OH H H H H H H H R8 Reste L-leucine Reste Dleucine Reste acide D-glutamique Reste D-alanine Reste D-arginine Reste Dméthionine Reste L-méthionine Reste L-leucine Reste D-leucine Reste Dphénylalanine Reste L-leucyl-D-leucine Reste a-alanine Reste acide DasDartique Reste glycine OH NH2 OCH3 Note: Le reste L-leucyl-D-leucine dans le tableau II à la formule suivante: (s) (R) - NH - CH - CO - NH - CH - COOH CH2CH(0H3)2 CH2CH(CH3)2 Les autres restes d'amino-acides indiqués dans le tableau 2 sont ceux déjà donnés en faisant référence aux formules Ia et Ib précédentes. Les propriétés pharmacologiques du composé de formule I ont été déterminées comme suit: Test 1 Action inhibitrice de l'encéphalinase. Méthode: Une préparation d'encéphalinase est obtenue en homogénéisant le corpus striatum d'un cerveau de rat et par purification partielle de l'homogénéisat de cerveau selon la méthode de Gorestein et al (voir "Life Science"' Vol. 25, 2065- 2070 (1979) Pergamon Press. U.S.AI) Le composé étudié est dissous dans un mélange d'une tampon Tris-chlorhyrate (pH 7,7) et d'une solution à 1 % de Triton X100 (un tensio actif) jusqu'à une concentration telle que la quantité de composé testé ajouté s'élève à 1/10ème du volume dudit mélange. On ajoute à la solution ainsi préparée du composé testé de l'encéphalinase puis on laisse incuber pendant 5 mn à température ambiante et ensuite on ajoute de la méthionine- encëphaline comme substrat. On laisse incuber le mélange à 37 C pendant une heure puis on le soumet à une chromatographie liquide haute performance de manière telle que le fragment Tyr-Gly-GLy (un fragment de la méthionine-encéphaline) formé par dégradation enzymatique de la méthionine-encéphaline soit isolé dans certaines fractions de l'éluat et la quantité de Tyr-Gly-Gly est déterminée par un détecteur d'analyse électro-chimique. De cette façon la valeur ID50 du composé testé, c'est-àdire la dose de composé testé nécessaire pour obtenir 50% d'inhibition de l'encéphalinase est calculée Les résultats sont résumés dans le tableau 3 ci- dessous. TABLEAU 3 Activité inhibitrice des composés de formule I' vis-à-vis de l'encéphalinase Composé N Abréviation AHPA-L-Leu AHPA-D-Leu AHPA-D-Glu AHPA-D-Ala AHPA-D-Arg AHPA-D-Met AHPA-L-Met p-OH-AHPA-L-Leu p-OH-AHPA-DLeu p-OH-AHPA-D-Phe AHPA-L-Leu-D-Leu AHPA-D-Asp AHPA-B-Ala AHPA-Gly AHPA AHPA-Amide AHPA-Ester méthylique Activité inhibitrice de l'encéphalinase ID50 (milimol) 0.62 2.40 30.86 5.98 0.063 2.54 2.78 0.37 20.68 2.32 0.95 >32.24 3.12 13.17 14.00 20.50 22.80 Test 2 Effet potientialisateur de l'analgésie morphinique. Méthode: On administre à des rats Wistar (agés de 10 semaines, mâles, poids corporel 250 - 300 g) par voie intra- péritonéale de la morphine à une dose de 0,5 mg/kg, et les rats ainsi traités sont placés soit dans le groupe des rats sensibles à l'effet analgésique de la morphine soit dans le groupe des rats non sensibles à l'effet analgésique de la morphine, selon la méthode de classification décrite dans "Showa Igakukai Zasshi" Vol. 39, N0 5, pages 537-542 (1979). Les rats classés dans le groupe sensible à l'effet analgésique de la morphine sont utilisés comme animaux d'expérience dans ce test destiné à rechercher l'activité potentialisatrice de l'effet analgésique de la morphi- ne. Au bout d'une semaine après cette opération de classification on conduit le test proprement dit en administrant par voie intra- péritonéale 250 mg/kg du composé étudié en suspension dans l'eau contenant 5 % de gomme arabique et 1 % de Tween 80 (tensio actif) aux rats restés, cette administration étant immédiatement suivie d'une administration par voie intrapéritonéale de 0,5 mg/kg de morphine. L'effet analgésique est évalué selon la méthode de latence de réaction de la queue des rats décrite dans "Showa Igakukai Zasshilr Vol. 39, no 5, pages 537 - 542 (1979). L'évalua- tion du seuil de douleur des rats selon cette méthode est effectuée de la façon suivante * un stimulus de chaleur irradiante est appliqué à la région de la queue du rat située à un centimètre de l'extrémité de la queue et qui a été coloréen noir avec un colorant et l'on mesure le temps de latence dans la réaction de la queue, c'est-à-dire le temps s'écoulant entre le moment de l'application du stimulus de chaleur et le moment du mouvement réflexe de la queue. La quantité de chaleur appliquée est controlée de façon que le temps moyen de latence de la réponse par mouvement de la queue dans le groupe des rats témoins (recevant la morphine mais non le composé testé) soit d'environ 2,0 secondes. La chaleur est appliquée pendant un temps maximum de 7,0 secondes ou moins car autrement la peau de la queue du rat pourrait être endommagée. En d'autres ternmes, si le temps de latence est supérieure à 7,0 secondés l'essai est arrêté pour éviter d'endommager la queue du rat. Le stimulus de chaleur irradiante est répété 5 fois pour chaque rat à un intervalle de 15 minutes et on calcule la moyenne des temps de latence. Pour chaque essai on utilise 5 rats. La différence entre le temps de latence observé pour les rats testés recevant 250 mg/kg du composé étudié plus 0,5 mg/kg de morphine et les rats témoins (recevant 0,5 mg/kg de morphine seulement) est calculée, et l'effet potentialisateur de l'analgésie morphinique est exprimé sous la forme d'un pourcentage calculé par l'équation suivante: - Pourcentage d'augmentation = (rat testé) - (rat témoin) x 100 (rat témoin) Les résultats sont résumés dans le tableau 4 suivant TABLEAU 4 Effet sur l'augmentation de l'analgésie à la morphine. Composé N Composé étudié (250 mg/kg + 0.5 mg/kg morphine) AHPA-L-Leu % d'augmentation de l'effet analgésique 19.5 AHA-D-Leu AHPA-D-Met AHPA-LMet p-0H-AHPA-L-Leu p-OH-AHPA-D-Leu p-OH.AHPA-D-Phe AHPA-Gly AHPA AHPA-DArg AHPA-L-Leu-D-Leu AHPA-l-ol Morphine (0.5 mg/kg) Morphine (2 mg/kg) Morphine (3 mg/kg) 24.9 14.7 10.5 34.5 23.1 27.0 19.1 14.1 13.6 5.2 12.0 o0 28.4 35.1 Témoins l Tt Test 3 L'activité analgésique des composés de l'invention a été étudiée lorsqu'ils sont administrés par injection intracister- nale dans le cerveau de rats. Méthode: L'administration du composé étudié dans le cerveau est effectuée par injection intracisternale selon la méthode de Takagi et al décrite dans le "European Journal of Pharmacology" Vol. 55, 109 - 111 (1979) defaçon qu'une aiguille d'injection en forme de J soit insérée chirurgicalement dans le cerveau de sorte que l'extrémité de ladite aiguille soit à proximi- té de la cisterna magna et une solution du composé étudié dans le sérum physiologique est administré à une dose maximum de 30 microlitres au moyen de ladite aiguille en forme de J dans la cisterna magna de rats non anesthésiés après que lesdits rats se sont remis de cette opération chirurgicale. L'activité analgésique est estimée de façon similaire à celle indiquée dans le test 2 décrit ci-dessus selon la méthode de la latence du mouvement réponse de la queue mais sans donner de morphine aux rats étudiés et aux rats témoins. L'activité analgésique est exprimée en pourcentage d'accroissement de la latence de réponse de la queue des rats testés recevant le composé étudié, comparativement aux rats témoins ne recevant aucun composé. Les résultats sont résumés dans le tableau 5 TABLEAU 5 Activité analgésique des composés étudiés administrés seuls dans le cerveau de rat par voie intracisternale Activité Comnosé N Abréviation Dose (mg) analgésique (%) AHPA-D-Arg 60 134.0 8 p-OH-AHPA-L-Leu(p- 500 47. 0 hydroxybestatin) Le test ci-dessus a été répété en administrant par voie intrapéritonéale simultanément à l'administration intracisternale du composé étudié, 2 mcg/kg de naloxone (un antagoniste spécifique de la morphine). Dans ce dernier test l'activité analgésique des 5. composés étudiés disparaissait. Comme démontré ci-dessus les composés de formule I de l'invention présentent une activité-inhibitrice de l'encépha- linase et augmentent l'activité analgésique de la morphine. Certains composés de formule I n'ont pas une activité potentialisa- trice significative de l'activité analgésique de la morphine mais ils possèdent eux-mêmes une activité analgésique élevée lorsqu'ils sont administrés dans le cerveau par voie intracisternale, de même qu'ils ont une activité élevée d'inhibition de l'encéphalinase in vitro, comme c'est le cas avec l'AHPA-D-Arg, par exemple. Pour estimer la toxicité aigue des composés de formule 1, l'AHPA-D-Ala, par exemple a été injecté par voie intrapéritonale à des souris de souche ICR (mâle agées de 5 semaines, poids corporel 20 g, 6 souris dans chaque groupe) et toutes les souris recevant 2 g/kg de AHPA-D-Ala ont survécu, ce qui montre que les composés de formule I n'ont au plus qu'une faible toxicité. Il résulte de ce qui précède que les composés de formule - I utilisés dans l'invention sont des agents analgésiques ou antinociceptifs d'un type nouveau. L'invention va être maintenant décrite à titre illus- tratif en faisant référence aux exemples suivants dans lesquels la préparation des divers composés de formule I est indiquée. Ces exemples ne sont pas limitatifs. EXEMPLE 1 On dissout 10 g de AHPA-D-Arg et 5g de mannitol dans l'eau distillée pour obtenir un volume de 1000 ml et la solution aqueuse résultante est stérilisée de façon usuelle. Une aliquote de 2 ml de la solution stérilisée est placée dans une fiole de verre et lyophilisée. Pour l'utilisation, cette préparation est dissoute dans de l'eau distillée stérilisée pour réaliser une solution injectable. EXEMPLE 2 Une partie en poids de p-OH-AHPA-L-Leu et 4 parties en poids de lactose sont mélangées avec soin et passées à travers un tamis de 50 mesh. La poudre finement divisée passant à travers ce tamis constitue le médicament sous forme de poudre. EXEMPLE 3 Une partie de p-OH-AHPA-L-Leu, 2,7 parties de lactose, 0,8 parties d'amidon de mais et 0,05 parties de polyvinylpyrolidone (toutes les parties étant en poids) sont mélangées avec soin et ce mélange poudreux est granulé dans un granulateur conventionnel avec addition d'un volume d'éthanol, puis on sèche les granules résultants. Les granules sont mélangés avec 0,5 % de stérate de magnésium comme lubrifiant puis comprimés de façon connue en tablettes pesant chacune 100 mg. EXEMPLE 4 Une partie de AHPA-L-Leu est mélangée avec soin avec 4 parties de lactose et le mélange poudreux résultant est passé dans un tamis de 50 mesh. La poudre finement divisée passant à travers ce tamis constitue le médicament administrable sous forme de poudre. EXEMPLE 5 On mélange de l'amide d'AHPA avec du lactose, de l'amidon de mais et de la polyvinylpyrolidone puis on fabrique des tablettes pesant chacune 100 mg de façon analogue à celle décrite à l'exemple 3 ci-dessus. EXEMPLE 6 Le chlorhydrate d'ester méthylique d'AHPA est dissous avec du mannitol dans de l'eau distillée puis on procède comme décrit à l'exemple 1 de façon à réaliser une préparation lyophilisée qui est utilisable pour donner une solution injectable. Les exemples suivants 7 et 8 illustrent la préparation des nouveaux composés de formule I utilisés selon L'invention. EXEMPLE 7 (a) Synthèse de l'ester benzylique de la (2S,3R) -3-N-Benzyloxycarbonylamino-2-hydroxy-4-phénylbutanoyl-(S)- leucyl-(R)-leucine. (R) (S) (S) (R) CH2 -CH - CH - CONH-CH - CONH-CH - COOCH2 t I I NH OH CH2 CH2 I CO CH CH I I I O (CH3)2 (CH3)2 CH2 C On mélange 1,11 g de (2S,3R)-3-N-benzyloxycarbonylamino- 2-hydroxy-4-phénylbutanoyl-(S)-leucine et 983,3 mg de p-toluénesulf nate d'ester benzylique de (R)-leucine avec 3ml de tétrahydrofurann puis on ajoute 0,3 ml de N-méthylmorpholine et 330 mg de N- hydroxy-succinimide. La solution résultante est refroidie à la température de la glace puis mélangée avec 670 mg de dicyclo- hexylcarbodiimide, puis on agite pendant 4 heures à la même température. Le mélange réactionnel est filtré pour éliminer le dérivé d'urée produit et le filtrat est concentré à sec sous pression réduite. Le résidu solide est dissous dans 15 ml d'acétate d'éthyie et la solution obtenue est lavée avec 9 ml d'acide chlorydrique 1N, par 9 ml de soude aqueuse 1N et enfin avec 9 ml d'eau distillée. La phase des solvants organiques est mélangée avec du sulfate de magnésium anhydre pour séchage et ensuite le mélange est filtré pour éliminer l'hydrate de sulfate de magnésium. Le filtrat est concentré à sec sous pression réduite pour donner le produit du titre sous forme d'un solide brut. Ce produit recristallisé dans le mélange acétone-éther éthylique donne 1,39 g d'aiguilles incolores. La spectrométrie de masse de ce produit pur donne une valeur m/e 646 (M+1). (b) synthèse de (2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phényl- * butanoyl-(S)-leucyl-(R)-leucine (composé n 11). Le composé obtenu à l'étape (a) est repris dans un mélange de 70 ml de dioxane et 1,4 ml d'eau distillée, et la solution résultante est mélangée avec 420 mg de noir de palladium comme catalyseur d'hydrogénolyse. Le mélange est soumis à l'hy- drogénolyse à température ambiante avec du gaz hydrogène sous trois atmosphères pendant 48 heures pour effectuer l'élimination du groupement benzyloxycarbonyle aminoprotecteur et du groupement benzyle protecteur du groupe carboxylique. Le mélange réactionnel est filtré pour éliminer le catalyseur et le filtrat est concentré à sec sous pression réduite. La recristallisation de cette poudre dans le méthanol donne 510 mg du composé du titre (AHPA-L-Leu-D- Leu) sous forme de paillettes cristallisées incolores. P.F. 240- 243 C Spectrométrie de masse: m/e 422. Quand ce produit est soumis à une chromatographie sur couche mince de gel de silice avec une plaque de gel de silice Art. 5715, un produit de Merck Co., Allemagne et qu'on élue avec un solvant mixte acétate de butyle-n-butanol-acide acétique-eau (4:4:1:1 en volume), il possède un Rf de 0,33. Analyse élémentaire Trouvé C 63,10, H 8,09, N 9,70 % Calculé pour C22 Hil35N305: C 62,91, H 8,39, n 9,97 % EXEMPLE 8 (a) Synthèse de (2S,3R)-3-N-t-butoxycarbonylamino-2- hydroxy-4-phényl-1-butanol (R) (S) / \ CH2 -CH -CH- CH20H t I. NH OH OCOC(CH3)3 - On dissout 92,8 mg d'ester méthylique de l'acide N-t- butoxycarbonyl-(2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phénylbutanoique dans 0,44 ml d'éthanol et on ajoute goutte à goutte à la solution résultante à température ambiante 2,3 ml d'alcool éthylique contenant 46,6 mg de borohydrure de sodium. On agite ensuite pendant 2 heures à température ambiante pour effectuer la ré- duction du groupe carboxylate. Après la fin de la réaction le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite et le résidu solide est repris dans 3 ml d'acétate d'éthyle. La solution obtenue est lavée avec 2 ml d'une solution aqueuse à 1 % d'acide citrique puis avec 3 fois 2 ml d'une solution de aqueuse saturée de chlorure de sodium. La phase organique dans l'acétate d'éthyle est séchée sur sulfate de magnésium et on élimine par filtration l'hydrate de sulfate de magnésium. Le filtrat est concentré à sec pour donner 81 mg du produit du titre sous forme d'un produit brut solide. Celui-ci est recristallisé dans un mélange de 0,5 ml d'éther éthylique et de 0,5ml de n-hexane et on obtient 68 mg d'aiguilles incolores. P.F. 113 - 115 C. Analyse de spectrométrie de masse: m/e 282 (M+1). Analyse élémentaire Trouvé C 63,69, H 8,31, N 4,70 % Calculé pour C15H23NO4 (poids moléculaire 281,39) C 64,00, H 8,26, N 4,98 % (b) Synthèse du chlorhydrate de (2S,3R)-3-amino-2- hydroxy-4-phényl-1-butanol (composé n 18). Le composé obtenu à l'étape (a) (68 mg) est dissous dans 0,4 ml de méthanol sec contenant 20 % d'acide chlorhydrique et on refroidit à la température de la glace puis on laisse reposer pendant 30 minutes pour permettre l'élimination du groupemi t-butoxy-carbonyle. Le mélange réactionnel est ensuite concentré à sec et le résidu est recristallisé dans le mélange éthanol- étheréthylique pour donner 36 mg du composé du titre (AHPA-l-ol) sous forme de paillettes incolores (P.F. 123-125 C. [2 + 28,4 (c 1,0, 1N-HCl). D. Analyse de spectrométrie de masse: m/e 182. Analyse élémentaire Trouvé C 54,93, H 7,46, N 6,40, Cl 16,0 % Calculé pour C10H16NO2Cl (poids moléculaire 217,72) C 55, 30, H 7,42, N 6,44, Cl 16,3 % REVENDICATIONS 1. Composition pharmaceutique, caractérisée par le fait qu'elle comprend comme ingrédient actif un composé de formule (I) R 1 OCH2- CH - CH--X Ni2 01H dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène ou un groupement hydroxy, X représente un groupement -COR2 dans lequel R2 est un groupement hydroxy, alkoxy, benzyloxy, amino, ou un groupement amino mono- ou di-substitué par un alkyle inférieur, ou bien X représente un- groupement -CH2OH, un groupement -CONH- CH - Y ouungroupement I R3 -CONH - CH - CONH - CH CH Y I l R3 R4 OH dans lesquels R3 et R4, identiques ou différents, représentent chacun un atome d'hydrogène, un groupement alkyle ou hydroxyalkyle ayant 1 à 7 atomes de carbone, un groupement mercaptoalkyle contenant 1 à 7 atomes de carbone, un groupement carboxamidoalkyle contenant 2 à 8 atomes de carbone, un groupement aminoalkyle contenant 1 à 7 atomes de carbone, un groupement guanidyl-N- alkyle contenant 2 à 4 atomes de carbone, un groupement alkyl- mercaptoalkyle contenant 2 à 8 atomes de carbone, un groupement carboxyalkyle contenant 2 à 8 atomes de carbone, un groupement aryle en particulier phényle, un groupement aralkyle, en par- ticulier phényl-(C1 - C4)alkyle, ou un groupement aralkyle substitué, et Y est un groupement -CH20H, un groupement -COR2 ou un groupement - CH2COR2 dans lequel R2 est défini comme précédemment, n représente le nombre zéro ou 1, et les atomes de carbone asymétriques présents dans le composé peuvent avoir la configuration R et/ou S, en quantité efficace pour produire une action analgésique en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. 2. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée par le fait qu'elle comprend comme ingrédient actif un dipeptide de formule Ia CH2 - CH - CH - COR5 NH2 OH dans laquelle R5 représente un reste de D-leucine, d'acide D- glutamique, de D-alanine, de D-arginine, de D-méthionine, de L- méthionine, de $-alanine, d'acide D-aspartique ou de glycine, en quantité efficace pour produire un effet analgésique, en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable pour la matière active. 3. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée par le fait qu'elle contient comme ingrédient actif un composé de formule lb HO / CH2-CH - CH - COR6 I I NH2 OH dans laquelle R6 est choisi dans le groupe constitué par un reste de Dleucine, de L-leucine et de D-phénylalanine, en quantité -suffisante pour produire un effet analgésique, en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable pour l'ingrédient actif. 4. Méthode de traitement thérapeutique d'un animal y compris l'homme, éprouvant des douleurs, caractérisée par le fait qu'elle comprend l'étape consistant à administrer à l'animal un composé de formule I, Ia ou Ib tel que défini dans la revendication 1, 2 ou 3, en quantité non toxique suffisante pour réduire ou éliminer la douleur. 5. Méthode d'augmentation de l'activité analgésique de la morphine lorsquelle celle-ci est administrée à un animal éprouvant des douleurs, caractérisée par le fait qu'elle comprend l'administration audit animal d'une quantité non toxique efficace d'un composé de formule I, la ou lb tel que défini dans la revendication 1, 2 ou 3, audit animal juste avant ou en même temps que la morphine administrée à cet animal dans un but analgésiqu