Brevet FR2487675A1 — publié le 19820205

La présente invention a pour objet des compositions pharmaceutiques injectables à base d'une phénothiazine qui, après administration, entraine normalement une irritation locale au site d'injection. Il est bien connu que de nombreuses phéno- thiazines, désignées ci-après dans la description comme "phénothiazine irritant les tissus", présentent cet inconvénient et, de préférence, ne sont donc pas administrées par injection, en particulier par voie sous-cutanée. En poursuivant ses recherches, la Demanderesse a maintenant trouvé que cette irritation locale peut être réduite ou éliminée par administration d'une phénothiazine en présence d'un véhicule comprenant un glycéride d'un acide gras saturé ou insaturé. Ces esters sont connus comme véhiculespour des composi- tions liquides et ne possèdent pas eux-mêmes des pro- priétés irritantes sur les tissus. Ces composésn'ont pas été utilisés jusqu'à présent comme véhicules pour les phénothiazines irritant les tissus et le fait qu'ils réduisent l'irritation des tissus provoquée par les phénothiazines est surprenant. L'invention concerne donc plus particulièrement une composition pharmaceutique injectable à base d'une phénothiazine, caractérisée en ce qu'elle contient une nhéno- thiazine irritant les tissus en association avec un véhicule glycéridique liquide, acceptable du point de vue pharmaceutique, comprenant un glycéride d'un acide gras saturé ou insaturé. Comme véhicule glycéridique approprié selon l'invention, on peut utiliser des monoglycérides, des diglycérides ou des triglycérides d'acides gras ou des glycérides mixtes dans lesquelles l'une au moins des molécules de glycérol a été estérifiée par des acides gras de longueur de chaîne variable. Dé préférence, on utilise les triglycérides. Les acides gras préférés sont ceux contenant de 6 à 24 atomes de carbone coxe-par exale l'acide hexanofque (C6), l'acide octanoIque (C8), l'acide décanolque (Clo), l'acide laurique (C12), l'acide palmitique (C1o), l'acide oléique (C18), l'acide linoléique (C18), l'acide myris- tique (C14), l'acide stéarique (C18), l'acide arachidique (C26), l'acide béhénique (C22) et l'acide lignocérique (C24),et leurs mélanges. Les véhicules particulièrement préférés sont ceux comprenant, pour le moins d'une manière prédominante, des glycérides d'acides gras contenant de 6 à 20 atomes de carbone. Une classe de véhicule particulièrement préférée est celle constituée par les mélanges de glycérides d'acides gras d'origine végétale contenant, pour le moins d'une manière prédo- minante, de 8 à 12 atomes de carbone, plus particu- lièrement de 8 à 10 atomes de carbone, notamment les acides octanolque et décano!que.. Comme exemples de tels véhicules, on peut citer les produits disponibles dans le commerce sous la marque "Miglyol" (Dynamit Nobel AG), en particulier le Miglyol 810, 812, 818 et 840, dont les caractéristiques physiques et la réoartition des acides gras sont indiquées dans le tableau I suivant. (Tableau I voir page suivante) TABLEAU I Caractdristiques physiques MIGLYOL 810 MIGLYOL 812 MIGLYOL 818 MIGLYOL 840 Indice d'acide Indice de saponification Indice d'iode Insaponifiables (%) Indice de coloration à l'iode Point de trouble Teneur en humidité (%) Densité à 20 C Réfraction à 20 C Viscosité à 20 C(cp) 0, 1 max 340-360 1 max 0.,3 max 2,0 max 0 C max 0,15 max 0,94-0,96 1, 4490-1, 4510 27-30 0,1 max 325-345 1 max 0,3 max 2,0 max C max 0, 15 max 0,94-0,96 1,4480-1,4500 28-32 0,2 max - 315-320 max 0,2 max 3, 1 max C max 0,.15 max.. 0,93-0,95 1, 4490-1, 4510 -33 0,1 max 320-340 1 max 0, 3 max 2, 0 max -10 C max 0,. 15 max 0, 92-0, 94 1, 440-1,. 442 9-12 Rpartition des acides gras dans les glycérides Acides gras MIGLYOL 810 MIGLYOL 812 MIGLYOL 818 MIGLYOL 840 Acide heoMue(C6) 2% max 3% max 3% ax 3% max Acide hexanolque(C 6) -%ma Acide octanolque(C8) 65-75% 50-65% 45-60% 65-80% Acide d6canolque(C10) 25-35% 30-45% 25-40% 15-30% Acide laurique (C12) 2% max 5% max 2-5% 3% max Acide linoléique (C18) - 3-6% tO Co -4 Ln' Une autre classe préférée de véhicules glycéridiques appropriés pour les compositions de l'inven- tion, est constituée par les huiles naturelles,telles que l'huile de mals, l'huile de sésame et l'huile de coton. Les phénothiazines irritant les tissus, utilisées dans les compositions de l'invention,sont des composés connus qui, apres injection à des doses appropriées en présence des véhicules habituels, par exemple des véhicules aqueux, provoquent une irritation locale au site d'injection. Comme exemples de telles phénothiazines, on peut citer la thioridazine, la mésori- dazine, la chorpromazine, la perchlorpérazine, la pro- méthazine, la trifluoropérazine, la triméprazine et la thiéthylpérazine. De préférence, les compositions de l'invention contiennent les phénothiazines à l'état de base libre. Les phénothiazines préférées sont la chlorpromazine et, plus particulièrement,la thiofidazine, à l'état de-base libre. La concentration de phénothiazine irritant les tissus dans le véhicule glycéridique,peut varier et dépend de facteurs tels que la phénothiazine et le véhicule utilisésainsi que la dose désirée de médicament. Toutefois, d'une manière générale,la concentration est comprise entre 5 et 200 mg/ml, en particulier entre 10 et 100 mg/ml. Les compositions de l'invention peuvent être préparées par des méthodes connues, par dissolution ou mise en suspension de la phénothiazine dans le véhicule glycéridique. Les compositions de l'invention peuvent contenir d'autres excipients connus, acceptables du point de vue pharmaceutique,tels que des conservateurs ou des agents anti-oxydants. Pour préparer une suspension, il est avantageux de réduire la taille des particules de phénothiazine, par exemple par micronisation, à environ 3 à 100 microns, de manière à pouvoir injecter 2487C75 cette suspension avec les aiguilles hypodermiques standard, par exemple les aiguilles de'calibre n 18 à 22. Les phénothiazines sont des principes actifs connus qui sont utilisées oar exemple oame neuroleptiques. Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter la portée. Les températures sont toutes indiquées en degrés Celsius. Exemple 1 Afin de déterminer l'efficacité des composi- tions de l'invention en ce qui concerne la prévention de l'irritation des tissus, on injecte les substances suivantes dans les muscles de lapins, puis on examine les sites d'injection par voie macroscopique et micro- scopique 4, 7 et 14 jours après l'injection: A) de la thioridazine à l'état de base libre dans du Miglyol 812 comme véhicule à des concentrations de 22,52 mg/ml (A1); 11,26 mg/ml (A2); et 5,63 mg/ml(A3). B) du pamoate de di-thioridazine dans du Miglyol 812 comme véhicule à des concentrations de 22,24 mg/ml (B1); 11,12 mg/ml (B2) et 5,56 mg/ml (B3). C) de l'huile de sésame à 100% D) du Miglyol 812 à 100% E) du chlorure de sodium injectable ( Base libre du chlorhydrate de thioridazine, Melleril, Sandoz S.A. Chlorure de sodium injectable - Eli Lilly & Co. Méthode Pour cet essai, on utilise 45 lapins blancs de Nouvelle-Zélande pesant environ de 2 250 g aà 3 658 g. Les animaux reçoivent de la nourriture et de l'eau ad libitum et on les observe quotidiennement. Les compositions à essayer sont injectées à raison d'un volume de 1 ml et les injections sont effectuées avec des seringues de 3 ml comportant des aiguilles hypodermiques de calibre n 20. On injecte les substances dans les muscles dorsaux épais (groupe sacrospinal), à partir d'un épiderme rasé de près ou bien en écartant les poils avec des pinces, après avoir nettoyé le site avec de l'alcool à 70%. On injecte le produit à essayer à tous les lapins au jour O et on sacrifie 15 lapins (au moyen d'une injection intraveineuse depentobarbital de sodium)à chaque fois le 4ème, le 7ème et le 14ème jour après l'injection. Les sites d'injection sont répartis au hasard sur les animaux. Dans chaque groupe de 15 lapins, 1o on effectue 6 injections de chaque composition A et B et 8 injections de chaque composition C, D et E. Dissection, examen des lésions et transformation des tissus Après dissection (élimination) des muscles sacro-spinaux, on identifie le site de chaque injection (à moins qu'il ne soit apparent sous la forme d'une lésion) et on les immerge dans des tubes de formaline afin de les fixer. Après fixation, on dissèque les lésions et on mesure leur longueur, largeur et épaisseur en millimètres afin de calculer leur volume. Le volume moyen des lésions positives est calculé en divisant la somme des volumes des lésions par le nombre de lésions positives. Lorsqu'une dissection poussée ne permet pas de déterminer de lésions grossières, on prélève des échantillons de muscles dans les zones ou ont été effectuées les injections et on les soumet à un examen histologique. On dispose des échantillons de chaque lésion ou site d'injection dans de la paraffine, on forme des sections de 5 p et on les colore avec des colorants sélectionnés pour l'examen au microscope. Méthode de coloration pour l'examen histologique On procède selon les méthodes suivantes de coloration afin de mettre en évidence le degré de réaction aux produits injectés. 1) l'hématoxyline et l'éosine (H&E):sont généralement utilisées pour la détermination initiale du site d'injection. 2) Colorant trichrome de Gomori: utilisé si nécessaire pour différencier les tissus connectifs des fibres musculaires du squelette ainsi que pour distinguer plus facilement les fibres musculaires blessées du squgoelette, étant donné que les propriétés tincto- riales du sarcoplasme sont modifiées après une blessure. Afin de procéder objectivement, toutes les plaques sont examinées dans l'ignorance totale de l'iden- tité du spécimen. Par conséquent, la substance utilisée, la concentration injectée et l'heure de l'injection, ne sont pas connues. Résultats et discussion Observations macroscopiques (apparence et volume de la lésion) Volume de la lésion intramusculaire 4, 7 et 14 jours après l'injection. Compte tenu des différences considérables existant lors de la détermination du volume de la lésion au site d'injection, cette obDservation fournit une indication approximative du degré de développement de la lésion. Dans le tableau II suivant, on a rassemblé les volumes relatifs déterminés aux jours spécifiés, des lésions provoquées par les produits injectés. D Thompson, S.W., "Selected Histochemical and Histopa- - thological Methods",- C.C. Thomas 1966. T A B L E A'U - II * =nombre de sites positifs/nombre de sites examinés À ** = volume en mm3. D'après ces résultats, on constate l'absence de lésions importantes lors de l'injection des composi- tions de thioridazine à l'état de base libre et de Miglyol, alors que l'injection de pamoate de di-thio- ridazine dans le Miglyol provoque des lésions visibles régressant lentement dans le temps. On note peu d'irri- tations'évidentes suite à l'injection de Miglyol, d'huile de sésame et de chlorure de sodium. Examen microscopique Suite à l'injection de thioridazine dans du Miglyol, on observe l'absence totale de suppuration à toutes les- périodes de l'étude et ceci quelle que soit la concentration du produit injecté. On n'a noté aucune suppuration lors de l'injection de Miglyol, d'huile de sésame ou de chlorure de sodium. Une suppuration du type de la myosite a été déterminée le quatrième et le septième jour suite aux injections de pamoate de di-thioridazine dans le Miglyol, à toutes lesconcentrations. Substance jours 4 7 14 A1 3/6* 91** 0/6 0 0/6 0 A2 0/6 0 0/6 0 0/6 0 A3 2/6 55 0/6 0 0/6 0 B1 6/6 2250 6/6 1406 6/6 238 B2 5/6 1076 5/6 238 3/6 166 B3 5/6 212 4/6 152 0/6 0 C. 0/8 0 0/8 0 0/8 0 D 2/8 15 0/8 0 0/8 0 E 2/8 440 1/8 10 0/8 0 Exemple 2 En procédant comme décrit à l'exemple 1, on injecte les substances suivantes à 45 lapins blancs de Nouvelle-Zélande pesant environ de 2.370 g à 4.320 g afin de déterminer si ces substances provoquent une irritation des tissus; F) Thioridazine à l'état de base libre en solution aqueuse à 23,13 mg/ml (F1); 11,56 mg/ml (F2); et 5,7 mg/ml (F3). G) Pamoate de di-thioridazine dans une solution aqueuse à 22,78 mg/ml (G1) ; 11,39 mg/ml (G2); et 5,69 mg/ml (G3). H) Chlorpromazine à l'état de base libre (Thorazine-SKF) dans une solution aqueuse à 25 mg/ml (H1); et 6,3 mg/ml (H2). I) Solution aqueuse - véhicule J) Chlorure de sodium - solution saline physiologique Résultats et discussion Observations macroscopiques (Apparence et volume de la lésion) Volume des lésions intramusculaires les 4ème, 7ème et 14ème jours après l'injection. Dans le tableau III suivant, on a rassemblé les volumes relatifs déterminés aux jours spécifiés des lésions provoquées par les substances injectées. (Tableau Il voir page suivante) T A B L E A U III * fréquence d'une lésion manifeste (nombre de lésions positives/nombre de lésions examinées) 6 sites examinés aux jours spécifiés. ** Volume de la lésion en mm le jour de l'examen, On observe des lésions à tous les sites d'injection d'une solution aqueuse de thioridazine base. Le volume des lésions provenant des injections de thioridazine base dans une solution aqueuse aux concentrations F1, F2 et F3 ne change que très peu en apparence pendant la période d'observation les 4ème, 7ème et 14ème jours. Le pamoate de di-thioridazine injecté aux concentrations de G1, G2. et G3 provoque des lésions. Le type de lésion est légèrement différent de celui induit par la thioridazine base; le volume de la lésion induite par la concentration G1 reste constante les 4ème et 7ème jours mais a considérablement diminué le 14ème jour. On observe la même situation pour la concentration G2 et il semble que pour la concentration G3, Substance jour 4 7 14 F1 100% 6/6* 3283** 6/6 2666 6/6 3516 F2 50% 6/6 1117 1/5 100 4/6 1425 F3 25% 6/6 295 4/6 1200 5/6 170 3. __ _ _ _ _ _ _ ___ __. _ _ G1 100% 6/6 1600 6/6 1333 5/6 184 G2 50% 6/6 1100 6/6 866 5/6 282 G3 25% 5/6 1080 6/6 586 6/6 190 HI 100% 6/6 5650 5/5 2820 6/6 2350 H2 25% 6/6 3616 5/5 1140 4/6. 600 I 100% 1/6 100 0/5 0 0/6 0 J 100% 0/6.. 0.0/6.0 Z 100% 0/6..0.. 0/6... O/6..0 11' le volume de la lésion a diminué au 7ème jour et continue de décroître encore le 14èmé jour. Les lésions dues aux injections de chlorpro- mazine à la concentration H1 décroissent progressivement en volume relatif par rapport à cêlui le plus important noté le 4ème jour. Au 7ème et au 14ème jour le volume de la lésion a diminué environ de moitié par rapport à celui du 4ème jour. Avec la concentration H2, le volume de la lésion décroît en volume d'une manière analogue et est considérablement réduit le 14ème jour. Le 4ème jour après injection d'unme solution aqueuse I, on observe une lésion à peine perceptible au site d'injection. On ne constate aucune lésion en réponse à l'injection de la solution de chlorure de sodium J. Observations microscopiques Indépendamment de la concentration de la substance injectée, on observe une fréquence élevée de suppuration dans la zone d'inflammation le 4ème jour après l'in- jection de thioridazine base. On ne constate pas de suppuration lors de l'injection du véhicule aqueux. On observe une irritation du tissu connectif apparente le 7ème jour après l'injection de la thiori- dazine base, du pamoate de di-thioridazine et de la chlorpromazine; cette irritation devient plus fréquente et plus prononcée le 14ème jour. Il semble qu'il n'y ait pas de différence réelle pour chaque composition sur la fréquence de J'irritation du tissu connectif par rapport au temps et à la dose. Exemple 3 En procédant comme décrit à l'exemple 1, on injecte à 4 lapins blancs de Nouvelle-Zélande pesant entre environ 2 250 g et 3 650 g les substances suivantes afin de déterminer l'irritaticn u'elles provoc/uent sur les tissus. 2487C75 K) la thioridazine base dans de l'huile de sésame U.S.P. L) la thioridazine base dans de l'huile de mals U.S.P. M) la thioridazine base dans de l'huile de coton U.S.P. N) la chloropromazine base dans du Miglyol 812 comme véhicule O) la chloropromazine base dans de l'huile de sésame U.S.P. P) la thiéthylpérazine base dans du Xiglyol 812 comme véhicule Q) la thiéthylpérazine.base dans de l'huile de sésame U.S.P. R) la thiéthylpérazine base dans de l'huile de coton U.S.P. Toutes ces substances sont injectées à une dose de 25 mg/ml. On injecte ces substances à tous les lapins au jour O, puis on sacrifie ces animaux (au moyen d'une injection intraveineuse de pentobarbital de sodium) 7 jours après l'injection. Apres dissection (élimination) des muscles sacro-spinaux, on identifie le site de chaque injecticn (à moins qu'il ne soit apparent sous la forme d'une lésion) et on l'immerge dans de la formaline pour la fixation. Apres la fixation, on dissèque les lésions et on mesure leur longueur, leur largeur et leur épais- seur en millimètres afin de calculer leur volume. Le tableau IVsuivant indique les volumes des lésions provoquées par les produits injectés, 7 jours après l'injection. (Tableau IV voir page suivante) TABLEAU IV Substance 7ème jour Substance 7ème jour K 0 P 0 L 0,004 Q 0,02 M O R O N O O 0 * = volume en mm3 ** = insignifiant Les résultats des exemples 1, 2 et 3 mettent en évidence l'efficacité des compositions contenant un principe actif irritant les tissus et un véhicule selon l'invention, à prévenir l'irritation des tissus au site d'injection. Une composition particulièrement préférée selon l'invention est celle contenant la thioridazine à l'état de base libre dans de l'huile de sésame. Lorsqu'on formule une phénothiazine connue pour irriter les tissus, sons une forme corres;xndant celle de l'invention, on réduit ou on élimine l'irritation qui survient normalement lors de l'administration de cette phénothiazine. -REVENDICATIONS 1.- Nouvelles compositions pharmaceutiques injectables à base d'une phénothiazine, caractérisées en ce qu'elles contiennent une phénothiazine irritant les tissus en association avec un véhicule glycéridique liquide, acceptable du point de vue pharmaceutique, comprenant un glycéride d'un acide gras saturé ou insaturé. 2.- Une composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le véhicule glycéridique comprend un glycéride d'un acide gras contenant de 16 à 24 atomes de carbone. 3.- Une composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'acide gras est l'acide hexa- nolque, l'acide octano!que, l'acide décanolque, l'acide laurique, l'acide palmitique, l'acide oléique, l'acide linoléique, l'acide myristique, l'acide stéarique, l'acide arachidique, l'acide béhénique et l'acide lignocérique, et leurs mélanges. 4.- Une composition selon la revendication 3, caractérisée en ce que le véhicule glycéridique comprend essentiellement un mélange de glycérides des acides décanoIque et octanoIque. 5.- Une composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que le mélange a une teneur en acides gras comprenant de 45 à 80% d'acide octanoIque, de 25 à 45% d'acide décanolque, jusqu'à 3% d'acide hexanoIque, jusqu'à 5% d'acide laurique et jusqu'à 6% d'acide linoléique. 6.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le véhicule glycéridique est de l'huile de coton, de l'huile de sésame ou de l'huile de mals. 7.- Une composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que le véhicule glycéridique est l'huile de sésame. 8.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que la phénothiazine irritant les tissus est la thioridazine, la mésoridazine,. la chorpromazine, la perchlorpérazine, la prométhazine, la trifluoropérazine, la triméprazine et la thiéthylpérazine. 9.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que la phénothiazine irritant les tissus se trouve à l'état de base libre. 10.- Une composition selon la revendication 9, caractérisée en ce qu'elle contient, comme phéno- thiazine irritant les tissus, la thioridazine à l'état de base libre. 11.- Un procédé de préparation d'une composi- tion pharmaceutique injectable à base d'une phénothiazine, telle que spécifiée à l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé en ce qu'on dissout ou on met en suspension la phénothiazine dans le véhicule glycéri- dique. 3700/BW/JH