Brevet FR2496462A1 — publié le 19820625

"Composition pharmaceutique pour le traitement des affec tions dégénératives du cartilage articulaire" La présente invention est relative à une composition pharmaceutique pour le traitement d'affections dégénératives du cartilage articulaire, en particulier l'ostéoarthrite et la chondromalacie, et également de processus dégénératifs du cartilage articulaire résultant d'autres maladies, telles que le rhumatisme articulaire. Les maladies dégénératives du cartilage, en particulier au niveau des articulations, forment une pathologie pour laquelle il ntexiste aucun traitement spécifique actuellement. Le traitement de l'ostéoartbrite est principalement réalisé en administrant des agents analgésiques et éventuellement des agents anti-inflammatoires qui n'agissent que sur les symptômes de la maladie. De meme, la dégénérescence du cartilage dans le rhumatisme articulaire ne peut pas être directement traité et les agents thérapeutiques actuellement appliqués (agents stéroidiques ou non anti-inflammatoires, sels d'or, pénicillamine ou lévamisole) présentent de sérieux effets secondaires qui limitent leur utilisation à long terme. Le but essentiel de la présente invention consiste à prévoir une nouvelle composition pharmaceutique permettant un traitement spécifique des maladies susmentionnées, et d'éviter également les effets secondaires des traitements connus jusqu'à présent. A cet effet, la composition thérapeutique suivant l'invention comprend de la (+)-catéchine et/ou l'un de ses sels comme produit actif. La présente invention concerne également une méthode d'utilisation particulière de cette composition, caractérisée par le fait que l'on administre le produit actif à des doses journalières de 1 à 4 g par la voie orale ou à des doses journalières de 5 à 50 mg par la voie intra-articulaire. D'autres détails et caractéristiques de l'invention ressortiront de la description ci-après, donnée à titre d'exemple non limitatif, de quelques formes de réalisation spécifiques de la composition pharmaceutique suivant L'invention et de son utilisation. La (+)-catéchine est un produit naturel de la classe des flavonoides et répond à la formule La (+)-catéchine [trans-2-(3,4-dihydroxyphényl) 3,4-diydro-2-i-benzopyranne-3,5,7-trioîJ est principalement obtenue par extraction de diverses espèces végétales, notamment de l'Uncaria Gambir (Rubiaceae). La (+)-catéchine est connue depuis longtemps déjà en 1902 paraissent les premières publications sur son extraction. Sa structure chimique a été établie en 1925 et sa stéréochimie en 1955. Cette substance est utilisée actuellement comme agent hépatoprotecteur en raison de son effet sur des enzymes de la chaise respiratoire et de son effet stimulant sur la biosynthèse de 1'ATP. L'utilisation, suivant l'invention, de la (+)catéchine pour le traitement des maladies dégénératives du cartilage articulaire (ostéoarthrite, cbondromalacie, etc.) et des processus dégénératifs du cartilage articulaire résultant d'autres maladies, telles que le rhuma tisme articulaire,est une utilisation thérapeutique basée sur de nouvelles observations biochimiques et pharmacologiques. Suivant l'invention, des observations biochimiques (in vitro) ont permis de montrer que la (+)-catéchine ajoutée à une solution de collagène extrait de peau de rat, permet d'accélérer la formation de fibres de collagène : à 3,9 x 10 M, la (+)-catéchine accroît le taux de fibrillation de 50%. La technique consiste à mesurer en fonction du temps, la polymérisation du collagène à 370C en lisant à 540 nm la densité optique d'un milieu d'incubation contenant 0,75 mg/ml de collagène solubilisé dans un tampon phosphate (pH = 7,6). D'un autre coté, la dégradation des fibres de collagène due à la collagénase est inhibée de 50% avec 5,8 x 10 M de (+)-catéchine. La technique consiste à incuber pendant 24 heures dans un tampon de tris-HCl (pH de 7,2) des fibres de collagène insolubles de tendon d'Achilles d'origine bovine en présence de collagénase bactérienne. Les amino-acides qui sont libérés sont mesurés par une réaction colorimétrique avec de la ninhydrine. De plus, on a constaté que la (+)-catéchine à la concentration de 10 M inhibe la dégradation spontanée des protéoglycans du cartilage isolé à partir d'oreille de lapin. Des études effectuées sur des cultures de fibroblastes de peau d'embryon de rat ont permis de reproduire un effet lathyrogène par l'addition de p-amino- propionitrile. Les fibroblastes traités produisent du collagène contenant proportionnellement une plus grande quantité de channes d'a-monomère que de 03-dimère. La (+)-catéchine, à une concentration de 5.10-4 M dans les milieux de culture et en présence de ss-aminopropionitrile, augmente la proportion de collagène insoluble et rétablit un rapport normal entre les chaînes u et . L'effet de protection de la (+)-catéchine sur le collagène est expliqué par une augmentation du nombre de réticulations. A la concentration finale de 5.10 4M, la (+)catéchine ne modifie pas quantitativement la synthèse de protéines ou de collagène dans des cultures témoins qui n'ont pas été soumises au lathyrogène. D'autre part, on a constaté que la (+)-catéchine inhibe la synthèse de prostaglandine PGE2. A titre d'exemple, la (+)-catéchine inhibe de 50% la synthèse de PGE2 à une dose de 7,4 x l05M. L'indométhacine présente le meme effet à une concentration de 7.10 6M et la phénylbutazone à 4.l04M. Cette activité peut être considérée comme étant un effet anti-inflammatoire significatif de la (+)-catéchine. Ces observations biochimiques ont été confirmées dans un modèle animal de pathologie dégénérative du cartilage articulaire. Chez des rats rendus arthritiques par la méthode aux adjuvants, la (+)-cathéchine administrée à raison de 200 mg/kg/jour par la voie orale, diminue le développement de l'ostéoporose au niveau des articulations atteintes et empoche la dégradation du tissu conjonctif. Ces effets sont montrés par une suppression de l'augmentation d'excrétion urinaire d'hydroxyproline. Ces résultats sont représentés dans les Ta- bleaux 1 et 2 suivants. Tableau I Cotes radiographiques d'ostéoprose de la malléole externe du tibia Groupes Semaines I II III Non arthritique Arthritique Arthritique + catéchine 200 mg/kg. 1 2,00 # 0,00 2,00 # 0,00 2,00 # 0,00 2 2,00 # 0,00 2,00 # 0,00 2,05 # 0,05 3 2,05 # 0,04 2,15 # 0,11 2,37 # 0.24 4 2,03 # 0,003*** 3,29 # 0,40 2,39 # 0,16 5 2,03 # 0,03** 3,11 # 0,41 2,69 # 0,33 6 2,05 # 0,04 *** 2,92 # 0,24 2,68 # 0,25 7 2,03 # 0,03* 2,50 # 0,27 2,00 # 0,00 Une cote de 1 (normale) à 4 est attribuée à chaque membre postérieur en fonction de la densité de l'os au niveau de la malléole externe du tibia. Ces examens sont réalisés suivant une méthode en aveugle sur des radiographies codées. Les résultats donnés sont les valeurs moyennes (# S.E.M.) des sommes de cotes par animal. Les valeurs moyennes marquées *, **, *** sont sensiblement différentes decelles de témoins respectivment au seuil &alpha; = 0,05, 0,01 et 0,001, Tablezu II Hydroxybroline urinaire ( g/mg de créatine, valeure moyenges z8 S,D.) Groupes Semaines I II III Témoine non arthritiques Témoins arthritiques Arthritique + catéchine (n=6) (n=7) 200 mg/kg (n=7) -1 46,7 # 7,0 47,6 # 6,6 47,5 # 4,3 1 39.0 # 2.1* 47,6 # 6,8 40,2 # 4,4 2 33,0 # 6,4** 55,0 # 10,0 49.2 # 15,5 3 33,1 # 3,5** 60,4 # 18,5 40,6 # 4.9* 4 27,6 # 5,0** 61,3 # 21,4 36,1 # 5,3* 5 30,9 # 5,5** 65,6 # 21,2 39,5 # 7,3* 6 30,7 # 4,2*** 65,5 # 17,8 37,7 # 9,7** 7 33,0 # 6,1** 65,5 # 24,0 38,4 # 6,3* 8 22,8 # 7,8*** 66,1 # 18,5 42,6 # 9,7* 9 25,2 # 6,4* 48,8 # 19,5 34,7 # 9,8 Les valeurs moyennes différant sensiblement des valeurs des témoins arthritiques sont marquées *, ** ou *** respectivement pour &alpha;=0,05 ; 0,01 et 0,001, Les résultats obtenus sur des rats confirment que les propriétés de protection sur les protéoglycans et les fibres de collagène, rendues évidentes in vitro, mènent à un effet thérapeutique sur l'évolution radiologique et biochimique des lésions articulaires. Ceci permet une utilisation originale de la (+)-catéchine pour un traitement de base d'affections dégénératives du cartilage articulaire. A titre de conclusion, la (+)-catéchine exerce une action de protection de base sur le cartilage contre les phénomènes dégénératifs spontanés et contre les phénomènes dus à des processus inflammatoires chroniques. Les doses recommandées pour les modes d'administration préférés sont de 1 à 4 g, de préférence de 2 à 3 g/jour par la voie orale ou rectale ; ils sont de 5 à 50 mg/jour par la voie intra-articulaire ou intraveineuse. Si elle est administrée par la voie topique, les doses recommandées sont d'environ 100 mg à 2 g pour chaque application. La (+)-catéchine peut être administrée en association à divers excipients pharmaceutiques par la voie orale, parentérale, rectale, topique ou intra-articulaire. Pour une administration orale, on utilise des dragées, des granules, des pastilles, des capsules, des comprimés, des solutions, des sirops,- des émulsions, ou des comprimés enrobés d'une pellicule, avec des additifs ou excipients appropriés. Ces formulations galéniques peuvent libérer le principe actif d'une manière normale ou programmée en fonction du temps. Pour l'administration parentérale ou intra-articulaire, les sels de (+)catéchine peuvent etre dissous dans une solution aqueuse appropriée. Pour l'administration par la voie rectale, on utilise des suppositoires ou des capsules rectales. Pour l'administration topique, on prépare des crèmes, des pâters, des gels et des pommades. Ce composé actif peut etre administré seul ou en association à d'autres produits actifs ayant une activité similaire ou différente. La (+)-catéchine peut etre administrée sous différentes formes. Les exemples suivants sont donnés à titre non limitatif et se rapportent à des formulations galéniques contenant de la (+)-catéchine. Comprimés enduits d'une pellicule Hydrate de (+)-catéchine 575 mg Amidon soluble 57 mg Stéarate de magnésium 3 mg Methocel * 60 HG 50 cps 5,8 mg Glycérine 1,1 mg Opaspray *, blanc 3,0 mg Opaspray , orange K-1-3497 1,8 mg 646,7 mg marque déposée. Ce comprimé peut être obtenu par compression directe. Solution injectable, i.m. et l.v. (+)-catéchine 55 mg Ethanol 275 mg Sulfite de sodium 1 mg Alcool benzylique 75 mg Lysine jusque pH 7,0 Eau distillée désoxygénée ajouter 5 ml Solution injectable, intra-articulaire et i.v. (+) -catéchine 75 mg Lysine 37,5 mg Acide chlorhydrique jusqu'à pH 7,0 Alcool benzylique 100 mg Eau distillée désoxygénée ajouter 5 ml Crème (+)-catéchine 10 g glycérine 2 g perhydrosqualène 8 g Paraffine liquide 8 g Paraffine solide 6 g Alcool cétylstéarylique 4,5 g Cétylstéarylsulfate de sodium 0,5 g Emulgine B-3* 2g Stéarate d'aluminium 0,3 g Acide citrique 0,1 g Nipasept % 0,2 g Eau distillée ajouter 100 ml marque déposée. La signification de certains termes utilisés dans les formulations galéniques susmentionnées est donnée ci-après Opaspray, blanc : laque pour enduction, contenant de l'oxyde de titane et de l'hydroxypro pylméthyl cellulose. Opaspray, orange : laque pour enduction, contenant des oxydes de fer et de l'hydroxypropyl méthyl cellulose. Emulgine B-3 : alcool cétylstéarique contenant de l'oxyde d'éthylène. Nipasept : mélange d'esters méthylique, éthylique, et propylique d'acide p-hydroxybnzolque. L'exemple suivant, donné à titre purement indicatif, illustre la méthode d'extraction de la (+)-catéchine utilisée dans le cadre de l'invention. Dans un réacteur, on a chauffé, à 65-700C pendant 1 heure, 23,9 kg de Block Gambir et 190 1 d'acétate d'éthyle (AcOEt). On a ajouté ensuite 1,5 kg de noir animal et on a agité pendant 1 heure à 65-70 C. La solution ainsi obtenue a été filtrée sur un entonnoir filtrant avec un lit de Célite (1 kg de Célite) et le gâteau a été lavé avec 2 x 20 litres de AcOEt. Le filtrat a été concentré en chauffant sous vide (59-630C/70 mm de Hg). 148 litres d'eau permutée ont été ajoutés et l'AcOET a été éliminé par distillation azéotropique avec retour de l'eau dans le réacteur. 1,26 kg de noir animal ont été ajoutés à la solution aqueuse, qui a ensuite été chauffée, agitée et filtrée à chaud sur un filtre Büchner. Le filtrat a été refroidi sous azote jusqu'à 50C. La (+)-catéchine, précipitée sous forme d'une poudre jaunâtre, a été filtrée sur un entonnoir filtrant, et lavée avec de l'eau permutée glacée. be gâteau a été centrifugé et le produit a été séché sous vide à + 350C. Le poids de la (+)-catéchine obtenue était de 8,5 kg avec une humidité de + 15% (rendement par rapport au Block Gambir : 35,55%). La (+)-catéchine a été identifiée par spectrométrie infrarouge et la teneur en eau a été déterminée par la méthode de Karl-Fischer. REVENDICATIONS 1. Composition pharmaceutique pour le traitement de maladies dégénératives du cartilage articulaire, en particulier l'ostéoarthrite et la chondromalacie, et des processus dégénératifs du cartilage articulaire résultant d'autres maladies, telles que le rhumatisme articulaire, caractérisée en ce qu'elle contient comme ingrédient actif la (+)-catéchine ou un de ses sels. 2. Formes d'administration de la composition selon la revendication 1. 3. Composition pharmaceutique selon la revendication 2, caractérisée en ce qu'elle est conditionnée en vue d'une administration correspondant à 1 à 4 g de produit actif par voie orale ou rectale. 4. Composition pharmaceutique selon la revendication 2, caractérisée en ce qu'elle est conditionnée en vue d'une administration correspondant à 5 à 50 mg du produit actif par voie intra-articulaire ou intraveineuse. 5. Composition pharmaceutique selon la revendication 2, caractérisée en ce qu'elle est conditionnée en vue d'une administration correspondant à environ 100 mg b 2 g par voie topique.