Brevet FR2491761A1 — publié le 19820416

- La présente invention concerne des dérivés de l'adénosine à activité anti-inflammatoire, analgésique et antipyrétique, ainsi que les. compositions thérapeutiques qui les contiennent en tant que principe actif. Les composés à activité thérapeutique suivant la présente invention répondent à la formule générale NE-R1 (O)n C'H2-S-R O 02 2 dans laquelle: R est un radical alcoyle linéaire ou ramifié contenant 1 à 18 atomes de C ou un phénylalcoylène dans lequel la chAine alcoylène contient 1 à 6 atomes de C; R1 est H, un radical acyle aliphatique à 1-6 atomes de 0 ou un radical acyle aromatique; R2 est H, un radical acyle aliphatique à 1-6 atomes de 0 ou un radical acyle aromatique; éventuellement, les radicaux R2 forment ensemble une chaîne isopropylidène; n est égal à O ou 1. En outre, lorsque R est un atome d'hydrogène, l'inven- tion concerne également les sels d'addition acides des composés de formule (I). Les radicaux préférés représentés par R sont les suivants: r,,hle l éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, butyle sec., pentyle, hexyle, heptyle, octyle, décyle, dodécyle, hexa- décyle, octadécyle ou benzyle. Rla de préférence les significations suivantes: hydro- gène, acétyle, propionyle, butyryle, benzoyle ou tosyle. R2 a de préférence les significations suivantes: hydro- gène, acétyle, propionyle, butyryle, benzoyle ou tosyle. lO Les sels d'addition acides préférés des composés de for- mule (I) sont les chlorures, les sulfates, les phosphates, les formiates, les acétates, les citrates, les tartrates, les méthane-sulfonates.ou les p-toluène-sulfonates. Les composés de formule (I) sont en partie nouveaux. DLes composés de formule (I) sont préparés'par différentes méthodes suivant la signification des divers radicaux. Pour iréparer le groupe de composés de formule f (Ia) H2-S-R OH OH dans laquelle R a les significations données ci-dessus, on a suivi la méthode de Legraverand (Legraverand M., Ibanez S. et leurs collaborateurs (1977) Sur. J. Med. Chem. 12, 105-108), d'après laquelle l'adénosine est convertie en 5'-chloro-5'- désoxyadénosine par réaction avec le chlorure de thionyle dans 1 'hexaméthylphosphoramide. Puis la 5'-chloro-5'-désoxyadénosine est convertie en le thio-éther voulu par réaction avec le mercaptan correspondant dans une solution d'hydroxyde de sodium 2N à 802 0. Les thio-éthers obtenus sont purifiés par recristal2isa- tion-à partir d'eau ou à partir d'alcools aliphatiques inf- rieurs. Les composés (Ia) peuvent être alors salifiés avec la quantité stochiométriaue de l'acide requis. Les composés de formule générale : NH-R I (lb) CH2-S-R OR2 OR2 22 2 darns laquelle R, R et R2 ont les significations données ci- dessus, avec cette condition que Rl et R2 doivent être autres que H ou qu'une chaîne isopropylidène, ont été préparés par la méthode de Satom et Makino (Satom K, Makino K (1951) Nature 167, 258) en faisant réagir les composés de formule (Ia) cor- respondants avec le chlorure d'acyle voulu dans le pyridéne anhydre. De préférence, les produits sont recristallisés à partir d'un mélange 1:1 de chloroforme/éther de pétrole. les composés de formule H - i I (Ic) 2-. dans laquelle R et R1 ont les significations données ci-dessus, sont préparés, encore par la méthode de Satom et lMakino (dont il a été fait mention précédemment), par la mise en réaction des composés correspondants de formule (I), dans laquelle R2 est un hydrogène, avec l'acétone en présence de ZnC12. Les produits obtenus sont purifiés de préférence par cristallisa- tion à partir d'un nélange 1:1 de chloroforme/éther de pétrole. LO Les composés de formule (Id) CH2--R dans laquelle R, R1 et R2 sont tels que définis ci-dessus, sont préparés par oxydation des thio-éthers correspondants, obtenus p-ar les méthodes citées précédemment, au moyen de brome ou de peroxyde d'hydrogène en solution aqueuse (Green Stein J.P., Winitz M. (1961) Chemistry of the amino acids - John Wiley & Sons Inc. 2146). Les produits obtenus sont puri- fiés par recristallisation à partir d'eau. Parmi tous les produits préparés, celui qui s'est révélé particulièrement intéressant aux fins de la présente invention est la 5'-désoxy-5'méthylthioadénosine (MITA) de formule :r -2 (IM) / > 2--CH3,-' 2 3 H H qui est un composé physiologique déjà présent dans des orga- nismes vivants. On a découvert, pour la préparation de ce produit, un procédé qui est particulièrement simple et économique d'un point de vue industriel. Le nouveau procédé consiste essentiellement à effectuer l'hydrolyse de la Sadénosylm5thionine dénoEmiée ci-après: SAME dans des conditions d'importance décisive, contr1ôées rigoureu- sement, çli aboutissent à une hydrolyse pratiquement totale et à une cristallisation complète de la IPA: + 2 20 OE--C -CH C-COOH- > a2 -C 1 2 2 (a) OH OH i- 'NH_ | 2 À t2- 3 H 2 + HC- -CHE-.-CH-COOH + H 2 2 Le procédé d'hydrolyse contrôlée peut être appliqué à une SAME préparée de n'importe quelle manière. Toutefois, le procédé de préparation de la solution de SME est lui aussi un facteur important pour mener le nouveau procédé de manière adéquate économiquement. Les phases opératoires suivantes constituent le mode de réalisation le plus économique du procédé: a) Une levure de pain ordinaire est enrichie en SAIE par traitement par la méthionine suivant la méthode de Schlenk (Schlenk F. (1965) Enzymologie 29, 283); b) Les cellules de levure, mises en suspension dans l'eau, sont lysées par traitement par l'acétate d'éthyle ou de méthyle à la température ambiante (demande de brevet allemande P 23 36401.4). En réglant le pH à une valeur comprise entre 4 et 6 et en filtrant, on obtient une solution aqueuse qui contient pratiquement toute la SAME présente dans la levure de départ; c) La solution est concentrée sous vide à 35-402C jusqu'à 1/10 environ de son volume initial; d) Le concehtré est maintenu à l'ébullition sous reflux penidant 30 minutes environ et le pH est réglé à 7 avec du carbonate de sodium; e) On laisse la solution reposer à 0-5C20 et la MTA précipi- tée est recueillie pratiquement en totalité et avec une bonne lO pureté. Les phases c, d et e, qui sont considérées comme rigou- reusement nécessaires pour l'obtention d'une hydrolyse sélecti- ve complète de la SAME en MTA sans formation de produits secondaires, sont nouvelles. La préparation de quelques produits utilisés d'après la présente invention est décrite ci-après. Exemple 1 Préparation de la 5'-désoxy-5'-méthylthioadénosine (MTA) 11 litres d'acétate d'éthyle et ll litres d'eau à la température ambiante sont ajoutés à 90 kg d'une levure de pain qui a été enrichie en SAME par addition de méthionine jusqu'à ce que la teneur en SAME soit de 6,88 g/kg. Après agitation énergique pendant 30 minutes, le pH est réglé à 4,5 avec H2S04 dilué, le mélange est filtré et le résidu est lavé à l'eau pour donner 140 litres d'une solution ayant une teneur en SAME de 4,40 g/l, ce qui correspond à 99,5 % de la SAIE présente dans la substance de départ. Le lysat ainsi obtenu est concentré sous vide (30 mm Hg; -40 0) jusqu'à un volume d'environ 14 litres. La solution concentrée est maintenue à l'ébullition sous reflux à la pression normale pendant 30 minutes. Elle est refroidie à C0, le pH est réglé à 7 avec du carbonate de sodium à 40 % et la solution est abandonnée pendant une nuit dans une cuve de réfrigération (+32C). Il se forme un précipité blanc qui est filtré, dissous dans 10 litres d'eau distillée bouillante et cristallisé par refroidissement de la solution ainsi obtenue. On obtient 410 g de MTA cristalline de grande pureté, ce au- correspond à un rendement de 90 % sur la base de la SAME soumise à l'hydrolyse. Les caractéristiques du produit obtenu coincident avec celles de la M4TA pure préparée par d'autres moyens. Exemple 2 Préparation de 5'-désoxy-5'-éthylthioadénosine. 1 kg d'adénosine est dissous, sous atmosphère d'azote, dans 10 litres d'hexaméthylphosphoramide et on y ajoute sous refroidissement 7,5 litres de chlorure de thionyle. On laisse le mélange réagir à la température ambiante pendant 20 heures. On ajoute 10 litres d'eau et le mélange est neutralisé avec NaOH 2N. On laisse cristalliser pendant une nuit à 32C la 5'-désoxy- '-chloradénosine qui se forme dans ces conditions. On la sépare par filtration et on obtient 0,950 kg de 5'-désoxy-5'- chloradénosine (rendement 89 %). 0,950 kg de 5'-désoxy-5'- chloradénosine sont dissous dans 10 litres de NaOH 2N et 200 ml d'éthanethibol y sont ajoutés. Le mélange est chauffé à 80 20 et on le laisse réagir pendant 1 heure. On le neutralise avec de l'acide acétique cristallisable. On laisse précipiter peln- dant une nuit à 3 0 la 5'-désoxy-5'-éthylthioadénosine qui se forme dans ces conditions. Elle est séparée par filtration et recristallisée à partir d'eau. On obtient 0,830 kg de produit (rendement 80 % sur la base du stade précédent). Exemple 3 Préparation d'autres composés de la catégorie ia On opère suivant le procédé décrit dans l'exemple 2, mais en utilisant le propane-thiol, le butane-thiol, l'isobutane- thiol, le pentane-thiol, l'hexane-thiol et le benzyl-thiol respectivement, à la place de l'éthane-thiol. -9 2491761 Exemple 4 Préparation de N6, 2', 3' -triacétyl-5'-désoxy-5 '-thioadénosine. 1 kg de MTA est mis en suspension dans 10 litres de pyri- dine anhydre et on y ajoute 3 litres d'anhydride acétique. On laisse le mélange réagir pendant 4 heures. 20 litres d'eau y sont ajoutés et le mélange est concentré sous vide pour donner une-masse huileuse dépourvue de pyridine. Celle-ci est dissoute dans un mélange 1:1 chaud d'éther de pétrole/chloroforme (10 litres) et on laisse cristalliser. Le produit est recristallisé à partir d'un mélange 1:1 d'éther de pétrole/chloroforme. On obtient 1,140 kg de produit (rendement 80 %). Exemple 5 Préparation d'autres composés de la catégorie Ib. On opère suivant le procédé décrit dans l'exemple 4, mais en utilisant, à la place de MTA, d'autres thio-éthers ou l'anhy- dride propionique, l'anhydride butyrique, le chlorure de benzo- yle ou le chlorure de tosyle. Exemple 6 Préparation de la 5 '-désoxy-2', 3' -isopropylidène-5 '-méthylthio- adénosine. 1 kg de IPA est mis en suspension dans 25 litres d'acétone anhydre et 2,5 kg de ZnC12 fondu y sont ajoutés. La réaction est menée au reflux pendant 5 heures. Le mélange est alors concentré sous vide jusqu'à 1/3 de son volume initial et on y ajoute 7,5 kg d'octahydrate d'hydroxyde de baryum en suspension aqueuse. Puis on fait barboter de l'anhydride carbonique jusqu'à la neutralité. Le m6lange est filtré et le résidu est lavé à l'acétone. Le filtrat est concentre sous vide pour donner un résidu sirupeux. Il est repris dans un mélange 1:1 chaud de chloroforme/éther de pétrole (10 litres), filtré et on le laisse cristalliser. Le produit est recristallisé à partir de chloro- forme/éther de pétrole 1:1, pour donner 0,795 kg de produit (rendement 70 %). Exemple 7 3j Préparation d'autres composés de la catégorie Ic. On opère suivant le procédé décrit dans l'exemple 6, mais en partant des dérivés correspondants de l'adénosine, à la place de la I.A. Exemple 8 Préparation du sulfoxyde de IMTA. 1 kg de ITA est mis en suspension dans 10 litres d'eau et on y ajoute du brome sous refroidissement. La solution aqueuse contenant du brome se décolore immédiatement, du fait de la transformation de la MTA en sulfoxyde par oxydation. On pour- suit l'addition de brome jusqu'à ce que la solution ne se décolore plus. On décolore la solution en y ajoutant encore de petites quantités de MTA. La solution aqueuse est traitée par la résine Amberlite IRA 93 (marque déposée de Rohm und Haas pour une résine échan- geuse d'ions faiblement basique à matrice de polystyrène) jusqu'à ce que la réaction des ions brome disparaisse. Le mélange est filtré et le résidu est lavé à l'eau. La solution aqueuse est concentrée à 10 litres, traitée par le charbon actif (100 g) et lyophilisée. On obtient 0,950 kg de produit (rendement 90 %). Exemple 9 Préparation d'autres composés de la catégorie Id. On suit la méthode décrite dans l'exemple 8, mais en partant des dérivés correspondants de l'adénosine à la place de la MTA. Comme on l'a indiqué au début, il a été constaté que les composés de formule I possédaient une forte activité anti- inflammatoire, s'accompagnant d'une action analgésique et antipyrétique. On a initialement mis en évidence l'activité anti-inflam- matoire pour certains termes de la classe de produits, par le test de l'oedème expérimental produit chez le rat par la carragheenine, en déterminant le pourcentage de protection par la méthode de Winter (J. Pharm. exper. Therap. 141, 369, 1963). Les valeurs obtenues sont présentées dans le tableau 1. il Tableau i Dose administrée oralement (mg/kg) Composé de formule (I) n = 0, R-= -OH2, R1 = R2 = H n = 0, R = -CH 3, R1 = R2 = H n = 0, R = -CH2-C6H5, R1 R2 = H n= 0 R -, R1 =R2= H n = o, R '= -(cH2)lT-c.H3, R1 = n = o, R = -(0H2)14-0H3, R1 = R2 =H C n = 0, R = -C2-CH-H3, R1 = R2 = H CH3 n = 0, R = -(CH2)-C R1 = R2 = n =0, R =C-( -C H3 R1 2 = H CH3 n= 0, R=-(C 2) -C H3, R1 2 = R2H n = 0, R = -CH2COH3, R1 = R2 = H n = l, R = - H 3, 1 R = n = 0, R = -(CH2)2-C, R1 = Rs = H n = 1, R = -CH3, R = R2 = H - CH3 n = 0, R = -CH C, R1 = R2 = H n = 0, R = CH-CH3, R1 = R2 = -00-H CH 3 n =O0 R =-( %)7-0,' y R1 R2=H n = 0, R = -CH3, R1 = R2 = tosyle n = 0, R = -OH, R=R = isopropyle n =0, R -CH 3 RI R2 = CO C6"5 n = O, R =-CH, R = R = isopropyle 23 (a) 8,6 Pourcentage de protec- tion, calculé d'après le développement de l'oedème (a) nd ométhacine 9 50 (a) signifie que le produit a été administré par voie intra- musculaire. Cormme on peut le voir d'après ce tableau, la DE50 de la IMTA est de 37 mg/kg et c'est donc la plus faible dose, par administration orale, des composés soumis aux essais. Dans les mêmes conditions expérimentales, la DE50 de l'indométhacine est de 9 mg/kg. Avec ces doses, on voit apparaître de graves lésions gastriques, alors qu'à la DE50, la I4A ne donne lieu à aucun effet secondaire sur le système gastro-intestinal. Il convient de noter également que la DE de l'indométhacine chez le rat est de 12 mg/kg (Martelli A, Aspetti di farmacologia dell'infiamnmazione, page 73, édité par Tamburini, Milan 1973), alors que la DL50 de la ICA chez le rat est supérieure à mg/kg/voie orale. On obtient par conséquent les indices thérapeutiques suivants: Indométhacine, IT = 1,3 I1TA, IT = > 54,05. Les composés suivant l'invention ont été également soumis à une série de tests pharmacologiques visant à confirmer leur activité anti-inflammatoire et à mettre en évidence leur acti- vité analgésique et antipyrétique. Les résultats obtenus dans certains de ces essais avec la MTA sont donnés ci-après: la MTA est un produit qui, dans tous les cas, s'est révélé le plus actif per os et qui est certainement le plus inoffensif, car c'est un composé qui est physiologiquement présent dans l'organisme, comme on l'a vu précédemment. Du point de vue de la production industrielle, le procédé pour la préparation de MTA à partir de SAME suivant l'invention est, répétons-le, de loin le plus simple et le plus économique et il permet de commercialiser le produit à un prix particuliè- rement bas. Comme on peut le voir d'après les résultats du tableau l, le sulfoxyde dméthylthioadénosine est particulièrement actif lorsqu'il est administré par voie intra-musculaire. La plus grande activité de ce composé à l'administration intra-muscu- laire a été confirmée dans tous les essais effectués. On donne- ra encore quelques résultats significatifs concernant le s-ulfo- xyde de I.ZA, mais il convient de noter que tous les composés testés se sont révélés actifs dans tous les cas, bien qu'à des niveaux différents. A - Activité anti-inflammatoire Les produits ont été testés par pleurite provoquée chez le rat par la carragheenine, suivant la méthode de Velo (Velo G.P., Dunn C.J. et leurs collaborateurs (1973) J. Path. lll, 149). La MTA à la dose de 75 mg/kg per os a fourni une protection de 42,4 % calculée sur la base du volume de l'exsudat, et de 48,8 % calculée sut la base du nombre total de cellules pré- sentes dans l'exsudat. Une protection comparable a été obtenue avec lO mg/kg d'indométhacine, c'est-à-dire avec une dose beaucoup plus proche de la DL50. Dans les mêmes conditions expérimentales, le sulfoxyde de MITA assure une protection de 75,8 % calculée sur la base du volume d'exsudat, et de 76,4 % calculée sur la base du nombre total de cellules présentes dans l'exsudat, lorsqu'il est administré par voie intra-musculaire à la dose de 80 mg/kg. B - Activité anti-inflammatoire Dans le test du granulome chez le rat par boulettes de coton (Winter C.A., Riseley E.A. et leurs collaborateurs (1963) J. Pharm. Exper. Ther. 141, 369) qui est significatif en ce qui concerne l'inflammation chronique, la MITA a fourni une protec- tion de 30 % à la dose orale de 9 mg/kg, avec un IT de 222. C - L'activité analgésique des produits a été éprouvée par deux tests considérés comme très significatifs. - Dans le test de la plaque chaude chez la souris, suivant la méthode de Roberts (Roberts E., Simronsen D.G. (1966) Biochem. Pharmac. 15, 1875), la MTA fournit une protection de 50 % à la dose orale de 37 mg/kg. Une protection approximativement équivalente de 58 % est obtenue avec 100 mg/kg d'amidopyrine administrés par voie buccale. Dans les mêmes conditions expérimentales, le sulfoxyde de IMTA donne une protection de 50 % à la dose de 20 mg/kg par voie intramusculaire et à la dose de 100 mg/kg par voie buccale. - Dans le test de l'extension provoquée par la phénylquinone (Siegmund E., Cadmus R., Go-Lu (1957) Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 95, 729), la MTA fournit une protection de 51 % à la dose orale de 37 mg/kg. Dans les mêmes conditions expérimentales, le sulfoxyde de MTA a une DE50 de 10 mg/kg lorsqu'il est administré par voie intramusculaire. D Activité antipyrétique Elle a été mesurée pour les nouveaux produits en provo- quant une fièvre chez le rat par la levure de bière (Winder C.V. et ses collaborateurs (1961) J. Pharmacol. Ext. Ther. 133, 117). L'effet antipyrétique, évalué une heure après l'adminis- tration orale de MITA à la dose de 300 mg/kg, a donné une baisse de température de 4,59 % par rapport aux témoins qui n'étaient traités que par la levure. Ce pourcentage correspond à une baisse de température de 38,8 C à 37,40 C. A titre de comparaison, l'amidopyrine administrée orale- ment à la dose de 200 mg/kg a produit une réduction de tempé- rature de 4,69 % et l'administration intramusculaire de M'A à la dose de 80 mg/kg a donné une baisse de température de 2,35 %. 3 - Activité anti-agglomération des plaquettes Les composés de l'invention ont également été évalués en ce qui concerne leur éventuelle pouvoir anti-agglomération des plaquettes. Comme on le sait, l'agglomération des plaquettes est un phénomène complexe qui peut 8tre divisé en un stade primaire dû à l'action directe d'un stimulus (par exemple le diphosphate d'adénosine, c'est-à-dire i'ADP, ou l'épinéphrine) et un stade secondaire dû à l'agglomération provoquée par 1'ADP libéré par les plaquettes. A cet égard, lorsque les plaquettes entrent en contact avec le collagène sous-endothélial, ce dernier déclen- che une série complète de réactions qui aboutissent à la libération d'ADP par les plaquettes. C'est cet ADP qui provo- que la seconde vague d'agglomération des plaquettes. - On a exécuté les essais suivants afin d'évaluer l'effet anti-agglomérant des nouveaux composés: 1) Essais "in vitro" sur l'agglomération des plaquettes provo- quée par 1'ADP et le collagène, en-présence des nouveaux produits; 2) Essais "in vitro" sur l'agglomération des plaquettes provo- quée par l'acide arachidonique (AA); 3) Essais "in vivo" sur l'agglomération des plaquettes provo- quée par l'ADP t -le collagène chez des sujets traités par les nouveaux produits. Dans ce cas, les résultats les plus significatifs ont été encore obtenus avec la XTA et, pour cette raison, les résultats obtenus en utilisant ce produit sont donnés comme représenta- tifs du comportement de la classe entière de produits. 1) Essais "in vitro" Du sang a été prélevé sans stagnation et on y a ajouté un anticoagulant (citrate de sodium à 3,8 %) de façon à obtenir un rapport sang/citrate de 9:1. Un plasma riche en plaquettes et un plasma pauvre en plaquettes ont été obtenus par centri- fugation à la température ambiante. L'agglomération des pla- 25.uettes a été evaluée par la méthode de Born et Cross (G.V.R. Born et M.J. Cross, J. Physiol., Lond. 168, 178, 1963) sur la fraction de plasma riche en plaquettes. Les agents agglomérants ont été utilisés dans les concentrations suivantes: ADP (Signa) i pi; collagène (Horn) 5 pg/ml; acide arachidonique 4 x 10-4.L On a utilisé l'adénosine à une concentration de 1 x l0 -5 en tant que substance de référence de l'activité anti-agglor;érante. Les résultats obtenus avec l'ADP sont présentés graphique- ent sur la fig. 1, sur laquelle on a porté en abscisses le temus en minutes et en ordonnées le pourcentage d'agglomération. La courbe 1 se rapporte aux témoins, la courbe 2 aux échantil- ions traités avec 1 x lO 5 M d'adénosine et la courbe 3 aux échantillons traités avec 5 x lO-4 M de MTA. Du tracé des courbes, il ressort que la IMTA diminue forte- ment l'agglomération primaire des plaquettes due à l'ADP et, en conséquence, inhibe la seconde vague d'agglor2ération. Les mêmes essais menés avec le collagène ont donné des résultats négatifs, c'est-à-dire que la MTA n'a manifesté aucune capacité inhibitrice méritant d'être signalée à l'égard de l'agglomération des plaquettes provoquée par le collagène. lO 2) La fig. 2 montre les effets de différentes concentrations de MTA sur l'agglomération des plaquettes provoquée par l'AA à une concentration de 4 x lO-4 M. La courbe 1 se rapporte aux témoins, la courbe 2 à la 1,TA à une concentration de 2,5 x lO-4 ii, la courbe 3 à la MITA à une concentration de 5 x lO-4.I et la courbe 4 à la MTA à une concentration de lO -3 Mi. Comme on le voit, l'effet inhibiteur de la M TA sur l'agglomération des plaquettes est proportionnel à sa concentration. On a égale- ment étudié l'aptitude de la I;A à renforcer l'effet inhibiteur de la prostacycline (PGI2) dans l'agglomération produite par l'AA. Sur la fig. 3, la courbe 1 se rapporte aux témoins, la courbe 2 à la MTA à une concentration de 5 x lO-4 M, la courbe 3 à la PGI2 à une concentration de 5 x O1-9 M et la courbe 4 à un mélange composé de 5 x lO-4 M de MTA et de 5 x l0-9 M de PGI2. Il est visible sur la fig. 3 qu'en cas d'utilisation en mélange, on observe une forte augmentation de l'action anti- agglomérante à des concentrations qui sont inefficaces par elles-mêmes. 3) Essais "in vivo" Trois sujets volontaires, apparemment en bonne santé, âgés respectivement de 35, 42 et 48 ans et qui n'avaient pris aucune drogue depuis 15 jours au moins, ont été soumis à des essais d'agglomération avant et après avoir consommé les nouveaux produits à la dose de 100 mg toutes les 8 heures pendant 3 jours, puis ces essais ont été analysés. L'échantillon de sang pcur la détermination de l'agglomération des plaquettes était prélevé 2 heures avant l'absorption de la dernière dose de produit faisant l'objet de l'essai. La fig. 4 présente les résultats obtenus avec la tCA. * Plus précisément, les courbes en trait plein se rapportent aux valeurs obtenues avec des échantillons de sang prélevés sur les patients non traités, tandis que les courbes en traits discontinus se rapportent aux valeurs obtenues avec les mêmes patients traités par la MTTA. Il est visible que la MTA inhibe fortement l'agglomération des plaquettes provoquée par l'ADP (1 -) in vivo". Les mêmes essais, répétés avec addition de 5 Eg/ml de collagène au sang, ont montré que la MTA n'est pas capable d'inhiber l'agglomération des plaquettes provoquée par le col- lagène, mais qu'elle prolonge seulement le temps de latence du phénomène. Le fait que la ITA (et, dans une mesure plus ou moins comparable, les autres produits de la même classe) inhibe fortement l'agglomération des plaquettes provoquée par l'ADP, alors qu'elle n'a pratiquement aucun effet sur l'agglomération due au collagène, indique que la MTA inhibe la première vague d'agglomération, tandis qu'elle a un effet direct négligeable sur la seconde vague d'agglomération. Son emploi en associa- tion avec d'autres drogues anti-agglomérantes connues, qui sont généralement actives à l'égard de la seconde vague, tan- dis qu'elles ne sont guère efficaces à l'égard de la première vague, est donc particulièrement intéressant. L'activité mise en évidence suggère l'utilisation de la MTA (et des autres composés de la série, même s'ils sont moins efficaces), non seulement comme drogue anti-agglomération des plaquettes, nais aussi en tant que drogue anti-thrombotique et anti-athérosclérotique, du fait qu'outre qu'elle est la base des mécanismes de thrombogénèse, la relation altérée entre plaquettes et parois vasculaires joue également un r8le pri- mordial dans la maladie athérosclérotique. F - Activité somnifère On a utilisé le test de iMorris (Morris R.W. (1966) Arch. int. Pharmacodyn. 161, n- 2, 380). Lors de cet essai, la IRA a aug:enté de 87 % la durée du sommeil provoqué par le pento- barbital chez la souris, à une dose intramusculaire de 20 mg/kg. G Toxicité aiguë Administrés oralement, les composés de la présente inven- tion sont pratiquement dépourvus de toxicité aiguë, Ils sont pratiquement exempts de toxicité aux doses thérapeutiques, l0 quelle que soit la voie d'administration. Des valeurs suivantes ont été obtenues pour la MA et le sulfoxyde de ITA: IA - DL50 chez la souris: per os > 2000 mg/kg i.v. 360 mg/kg Sulfoxyde de I1TA - DL50 chez la souris: per os > 2000 mg/kg i.v. 400 mg/kg. Les dérivés de l'adénosine de formule (I) peuvent être administrés, à l'état dilué avec des excipients acceptables pharmacologiquement, sous n'importe quelle forme thérapeuti- quement utile, par voie orale, parentérale, veineuse ou recta- le. Ils peuvent être également utilisés dans des produits à usage externe pour application topique. Quelques exemples de compositions pharmaceutiques typi- quss, contenant la MITA, sont donnés ci-après à titre d'exemple. - Carsules de 100 mg IIA 100,2 mg IMIannitol 195,0 mg Stéarate de magnésium 5,0 mg 300,2 mg - Capsules de 50 mg ITA Mannitol Stéarate de magnésium ,1 mg ,0 mg 3,0 mg 153,1 mg v - Comnrimés de 100 mg I7TA Amidon Stéarate de magnésium Lactose - Comprimés de 50 mg E3DA Amidon Stéarate de magnésium Lactose - Suppositoires de 100 mg MTA Pâte à suppositoires SupDositoires de 50 mg MTA Pâte à suppositoires - Ampoule injectable de 50 mg MTA. HOC1 (équivalent à la base de 56,15 mg) Lidocarne HCOi !Sau q.s. - Ampoule injectable de 25 m IMTA. HCl (équivalent à la base de 28,07 mg) Lidocaine HOl Eau q.s - Dose orale de 100 mg ITA. HC1 (équivalent à la base de 112,3 mg) Parfum citron Sucre Agent anti-fermentation Eau ,2 mg , 0 mg ,0 mg ,0 mg 300,2 mg ,1 mg ,0 mg ,0 mg ,0 mg 300,1 mg ,2 mg 1700,0 mg 1800,2 mg ,1 mg 1450,0 mg 1500,1 mg mg mg 3ml mg mg 2ml mg 0,025 mg lg mg p. 5 ml p. Dl p. q. s - Dose orale de 50 mg ISA. HC1 (équivalent à la base de 56,15 mg) Parfum citron Sucre Agent anti-fermentation Eau q.s - 0nguent à 100 g IMTA Base pour onguent hydro- soluble, q.s Anti-oxydant mg 0,015 mg 0,5 g mg p. 5 ml g p. 100 g 0,1 g REVE DICATIONS 1. Composition thérapeutique à activité anti-inflammatôire, analgésique et antipyrétique, caractérisée en ce qu'elle com- prend-,.en tant que principe actif, au moins un composé de fornmule générale NE-R LI> C EIR 2 2 dans laquelle R est un radical alcoyle à chalne linéaire ou ramifiée conte- nant 1 à 18 atomes de C ou un phénylalcoylène dont la chaine alcoylène contient 1 à 6 atomes de C; R1 est H, un. radical acyle aliphatique à 1-6 atomes de C ou un radical acyle aromatique; R2 est H, un radical acyle aliphatique à 1-6 atomes de C ou un radical acyle aromatique; éventuellement, les radicaux R2 forment ensemble une chaine isopropylidène; n est égal à O ou l1 2. Composition thérapeutique selon la revendication 1, carac- térisée en ce qu'elle comprend, en tant que principe actif, un composé de formule (I) dans laquelle R1 - R2 = H, R = CH3, n = O. 2- Composition thérapeutique selon la revendication 1, 22 22491761 caractérisée en ce qu'elle comprend, en-tant que principe actif, un composé de formule (I) dans laquelle R1 = R2 = He, R = CH3, n= l. 4. Composition thérapeutique selon la revendication l, caractérisée en ce qu'elle comprend, en tant que principe actif,.un composé de formule (I) dans laquelle R = R2 = HP R = alcoyle à chaîne linéaire ou ramifiée contenant 1 à 12 atomes de C, n = 0. 5. Composition thérapeutique selon la revendication l, caractérisée en ce qu'elle comprend, en tant que principe actif, un composé de formule (I) dans laquelle R1 = R2 = H, R = benzyle, n = 0. Composition thérapeutique selon la revendication l, caractérisée en ce qu'elle comprend, en tant que principe actif, un composé de formule (I) dans laquelle R1 = R2 = benzoyle, R = méthyle, n = 0. 7- Composition thérapeutique selon la revendication l, caractérisée en ce qu'elle comprend, en tant que principe actif, un composé de formule (I) dans laquelle R1 = R2 = tosyle, R = méthyle, n = 0. 8.' Composition thérapeutique selon la revendication l, caractérisée en ce qu'elle comprend, en temps que principe actif, un composé de formule (I) dans laquelle R2 - 2 = isopropylène, R = méthyle, n = 0. 9. Procédé pour la préparation de 5'-désoxy-5'-méthylthio- adénosine, caractérisé en ce qu'une S-adénosyl-méthionine, en solution aqueuse concentrée, est hydrolysée par chauffage au reflux et en ce que la 5'-désoxy-5'-méthylthioadénosine formée est séparée par refroidissement après neutralisation du mélan- ge réactionnel. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que la solution aqueuse de S-adénosyl-méthionine est concentrée par chauffage sous vide à 35-402 C. 11. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que la 5'-désoxy5'-méthylthioadénosine formée est précipitée par refroidissement M 0-5 C. 12. Utilisation d'un composé de formule générale , (O) oR OR dans laquelle R est un radical alcoyle à chaine linéaire ou ramifiée conte- nant 1 à 18 atomes de C ou un phénylalcoylène dont la chaîne alcoylène contient 1 à 6 atomes de C; R1 est H,.un radical acyle aliphatique à 1-6 atomes de C ou un radical acyle aromatique; R2 est H, un radical acyle aliphatique à 1-6 atomes de C ou un radical acyle aromatique; éventuellement, les radicauxR2 forment ensemble une chaîne isopropylidène, n est égal à O ou 1; pour la préparation de produits pharmaceutiques à activité anti-inflammatoire, analgésique et antipyrétique. 13. Utilisation du composé de formule (I) dans laquelle R1 = R2 = H, R = CH3, n = O pour la préparation de produits pharmaceutiques à activité anti-inflammatoire, analgésique et antipyrétique. 14. Utilisation du composé de formule (I) dans laquelle R1 = R2 = H, R = CH3, n = 1 pour la préparation de produits pharmaceutiques à activité anti-inflammatoire, analgésique et antipyrétique.