Brevet FR2482458A1 — publié le 19811120

COMPOSITIONS ANTITUMORALES. Les nouvelles compositions de la présente invention présentent les excel- lentes propriétés antitumorales de la base libre connue et, en outre, elles ont une haute hydrosolubilité - ou solubilité dans l'eau inattendue, ce qui permet de préparer des doses cliniques qui autorisent une administration par voie intraveineuse. Cain et al., dans la Revue "Europ. J. Cancer 10", p.539/549 (1974) ont signalé que le dérivé m-AMSA (4'-9-acridinylamino)-méthanesulfon-m-anisidine jouit d'une activité antitumorale importante sur les tumeurs de l'animal. Depuis, on a soumis ce composé à de nombreux essais dont les premiers résultats sont prometteurs. Quand on emploie un agent antitumoral comme le m-AMSA en clinique humaine, on admet que la solubilité de l'agent est souvent le facteur déterminant du choix de la voie d'administration et du dosage. Ainsi, par exemple, il est en général possible d'administrer une substance hydrosoluble par voie intra- veineuse tandis qu'avecune substance insoluble dans l'eau, on doit se conten- ter des autres formes d'administration parentérale, telles que les voies intra-musculaire et sous-cutanée. En outre, si l'agent thérapeutique est soluble dans l'eau, cela facilite la préparation de doses pour l'administra- tion à l'homme par voie orale ou parentérale non-intraveineuse. Il est donc très avantageux que l'agent thérapeutique soit hydrosoluble, en particulier si on considère que la voie la plus directe d'obtention de taux sanguins thérapeutique d'un médicament chez l'homme est l'administration intraveineuse. La base libre du m-AMSA présente une solubilité des plus restreintes dans l'eau et on ne peut donc pas l'utiliser pour la préparation de compositions administrables par voie intraveineuse. On a tenté de résoudre ce problème de solubilité en préparant des sels d'addition avec des acides, mais on a si- gnalé que le mono-chlorhydrate et le mono-méthane sulfonate avaient une hydrosolubilité insuffisante pour qu'on puisse les utiliser en clinique. La formulation actuellement employée en clinique est constituée de deux liquides stériles que l'on combine juste avant l'emploi. Une ampoule renferme une solution de m-AMSA dans le N,N-diméthylacetamide anhydre. Un autre récipient renferme une solution aqueuse d'acide L(+) lactique qui sert de diluant. Sitôt le mélange effectué, on administre la solution de m-AMSA ainsi obtenue par perfusion intraveineuse. Bien que cette formulation clinique constitue une forme administrable par voie intraveineuse, elle souffre de plusieurs inconvénients. Outre les dif- ficultés manifestes de préparation et d'administration, elle renferme du N,N-diméthylacétamide en tant que vehicule pharmaceutique. On asignalé que le diméthylacétamide induit divers symptômes de toxicité chez l'animal; il est donc impropre à cet usage. La présente invention a pour objet des formes du m-AMSA hydrosolubles, stables et thérapeutiquement acceptables, susceptibles d'être administrées par voie intraveineuse (ainsi que par d'autres voies) et qui ne renfermentni n'exigent de N,N-diméthylacetamide en tant que véhicule pharmaceutique. Les buts et avantages de la présente invention apparaîtront plus claire- ment à la lecture de la description suivante. La présente invention se rapporte à des compositions stables, solides, hydrosolubles qu'on reconstitue, à l'aide d'eau ou d'un véhicule aqueux, en une solution stable de m-AMSA; ces compositions sont formees d'un mélange de m-AMSA et d'acide lactique; le rapport molaire de l'acide lactique au m-AMSA est compris entre 1,5/1 et 4/1 environ. L'invention se rapporte en outre aux procédés de préparation des compo- sitions ci-dessus. De nombreux sels d'addition du m-AMSA avec des acides ne sont que légé- rement hydrosolubles et donc, inappropriés à la préparation de solutions aqueuses injectables par voie intraveineuse. Ceci apparaît clairement à la lecture des références de la littérature technique relative aux chlorhydrate et méthanesulfonate ainsi que d'après les essais de solubilité effectués par la Demanderesse sur d'autres sels tels que les levulinate, citrate et lacto- bionate (la solubilité de tous ces sels est inférieure à 5 mg/ml). Au cours des recherches sur la solubilité des sels de m-AMSA avec des acides, on a préparé le L(+)-monolactate de m-AMSA cristallisé (recristallisé dans l'éthanol) et on a constaté que sa solubilité dans l'eau est insuffi- sante, à la température ambiante, pour donner une solution aqueuse qui con- vient pour l'administration par voie intraveineuse. Mais on a constaté avec surprise qu'une composition solide constituée d'un mélange de 1 mole de m-AMSA pour 1,5 à 4 moles d'acide lactique jouit de la plus haute solubilité dans l'eau, de l'aptitude à la reconstitution et de la stabilité nécessaires à l'usage clinique. On peut utiliser la composition ci-dessus soit sous la forme d'une charge sèche (mélange de constituants secs), soit sous la forme d'un produit lyophi- lisé. On peut reconstituer commodément et rapidement cette composition solide à l'aide d'eau ou d'un véhicule aqueux stérile pour obtenir une solution vraie à au moins 5 mg/ml de m-AMSA, ayant une excellente stabilité. Pour préparer la composition de la présente invention sous la forme d'une charge sèche, il suffit de malaxer simplement ensemble les produits de départ en proportions convenables. On prépare donc la composition de m-AMSA/acide lactique en malaxant la m-AMSA base et l'acide L(+) ou D(-)lactique à raison de 1,5 à 4 moles d'acide lactique par mole de m-AMSA. De préférence, on mé- lange 1,5 à 2,5 moles d'acide lactique par mole de m-AMSA. Pour préparer les compositions hydrosolubles de l'invention sous forme lyophilisée, on soumet une solution aqueuse des produits de départ appropriés en proportions convenables à une opération classique de lyophilisation. On prépare ainsi le mélange lyophilisé de m-AMSA et d'acide lactique en for- mant une solution aqueuse de m-AMSA et d'acide lactique (D+), L(+) ou DL, dans un rapport molaire de 1,5 à 4, de préférence, 1,5 à 2,5 moles d'acide lactique par mole de m-AMSA base; on soumet ensuite la solution aqueuse à une lyophilisation pour obtenir la composition solide de l'invention. Il est préférable de filtrer la solution aqueuse avant lyophilisation afin de la débarrasser des impuretés insolubles. On peut aussi ajouter des exci- pients classiques tels que le mannitol pour faciliter la dissolution du produit lyophilisé. On peut effectuer la lyophilisation à l'aide de tout appareil classique, de laboratoire ou industriel, selon les méthodes connues. Pour préparer les doses unitaires de composition de la présente invention, on utilise la m-AMSA base en quantité thérapeutiquement efficace. La dose de m-AMSA présente dans une dose peut être comprise entre 20 et 200 mg. Les compositions de la présente invention, sous forme de charge sèche ou de lyophilisat, présentent à peu près les mêmes propriétés antitumorales que la m-AMSA sous les formes connues actuellement en usage. Cependant, du fait de leur grande hydrosolubilité, on peut les employer pour obtenir des doses cliniquement utilisables pour l'administration par voie intraveineuse, exemptes de véhicules indésirables comme le diméthylacétamide. On peut utiliser les compositions pour préparer une charge sèche en un seul flacon ou bien un produit lyophilisé, reconstituable à l'aide d'eau ou d'un véhicule aqueux stérile, en une forme destinée à la voie parentérale. On peut employer les compositions de la présente invention pour préparer des doses administrables per os OU par voie parentérale non intraveineuse, ou de préférence, des doses pour la voie intraveineuse. 248 2458 4 2482458 Les compositions jouissent d'une stabilité acceptable, à la fois sous forme solide et sous forme de solution aqueuse, ce qui permet l'administration - d'une dose efficace de m-AMSA sous un volume relativement faible de solution parentérale, donc, l'obtention de bol pour l'injection intraveineuse. Pour traiter les tumeurs chez les mammifères, on peut administrer les compositions de la présente invention par voie orale ou parentérale et, de préférence, parentérale, en dose exprimées en activité de m-AMSA et selon les posologies indiquées dans la littérature scientifique. On préfère tout particulièrement les doses reconstituées en solution aqueuse dont l'activité correspond à 5 mg/ml de m-AMSA. L'invention sera d'ailleurs mieux comprise à la lecture de la description des exemples suivants, donnés à titre illustratif mais nullement limitatif. EXEMPLE 1 * LyophiLisation du m-AMSA et de L'acide L(+) lactique - On dissout 100 mg de m-AMSA base et 50,33 mg d'acide L(+) lactique dans ml d'eau. On filtre la solution ainsi obtenue sur un filtre de 0,22P afin de clarifier. On introduit ensuite la solution dans des flacons de verre flint appropriés (5 ml de solution par flacon, par exemple). On obture incomplètement les fioles et on les soumet à une lyophilisation dans les conditions suivantes: * Pr6congélation. à -550C * Congélation à.. -50 C pendant 2 habres * Sublimation à. -40'C pendant environ 68h. sous une pression de 4.1o- torrs environ * Séchage à..... +300C pendant 48h environ. On bouche ensuite les fioles sous vide ou sous azote et on les scelle. On peut reconstituer une composition lyophilisée par addition d'eau pour obtenir (- la température ambiante) une solution dont l'activité correspond à 5 mg/ml de m-AMSA. La reconstitution demande environ 3 minutes. On a constaté que les flacons lyophilisés avaient une stabilité acceptable après 1 mois de stockage à 370C et à 560C. EXEMPLE 2 * LyophiLisation du m-AMSA et de L'acide L(+) lactique - On met en suspension 150 mg de m-AMSA dans 20 ml d'eau stérile. On ajoute ensuite 2 équivalents d'acide L(+) lactique (75 mg) et on obtient une solution vraie. On filtre cette solution sur un filtre Millipore de 0,22p. On lyophilise 3 portions de 5 ml de solution dans des flacons en flint de 17,5 ml de capacité, pendant 24 heures, à l'aide d'un lyophiliseur de la- boratoire, pour obtenir un produit solide. Par addition d'eau, on peut reconstituer des solutions dont l'activité correspond à 7,5 et 5 mg/ml de m-AMSA et qui restent limpides pendant 24 heures au moins. EXEMPLE 3 * MéLange de m-AMSA et d'acide L(+) lactique - On mélange intimement 100 mg de m-AMSA et 47 mg (2 équivalents) d'acide L(+)lactique dans un flacon en flint de 50 ml de capacité. On ajoute IO ml d'eau stérile à cette charge sèche, et on obtient une solution à 5 mg/ml de m-AMSA après avoir secoué le flacon pendant 1 à 3 min à une température de 16,5 C. La solution reste limpide pendant plus de 24h. EXEMPLE 4 * Lyophilisation du m-AMSA et de l'acide DL Lactique - On met en suspension 150 mg de m-AMSA base dans 16,5 ml d'eau stérile à 18 C. On ajoute ensuite 3,5 ml d'une solution à 20% d'acide DLlactique (70 mg d'acide DL lactique, soit 2 équivalents) sous agitation. On poursuit l'agitation pendant 10 min et on obtient une solution à pH 3, 9. On fait passer la solution sur un filtre Millipore de 0,22p. On introduit des portions del ml de solution dans des flacons en verre flint de 8,5 ml de capacité et on les lyophilise sur un appareil de laboratoire pendant 24 heures. On reconstitue le produit lyophilisé à l'aide d'eau stérile pour obtenir une solution à 7,5 mg/ml de m-AMSA qui reste limpide pendant 24h au moins àla température ambiante. On peut également employer un mélange de 35 mg d'acide L(+)lactique et de 35 mg d'acide D(-) lactique. EXEMPLE 5 * Mélange à sec de m-AMSA et d'acide D(-) lactique - On prépare un mélange à partir de 100 mg de m-AMSA base et 35 mg (1,5 équivalent) d'acide D(-)lactique. EXEMPLE 6 * Lyophilisation du m-AMSA et de L'acide D(-) lactique - On prépare un produit lyophilisé selon la méthode générale de l'Exemple 2, à partir d'une composition renfermant 150 mg de m-AMSA base et 75 mg (2 équi- valents) d'acide D(-)lactique. REVENDICATIONS 1.- Composition pharmaceutique, caractérisee en ce qu'elle renferme du mAMSA (4'-9-acridinylamino-méthanesulfon-m-anisidine) en mélange avec de l'acide lactique, le rapport molaire de l'acide lactique au m-AMSA étant compris entre 1,5/1 et 4/1 environ.. 2.- Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le rapport molaire de l'acide lactique au m-AMSA est compris entre 1,5 et 2,5 environ. 3.- Composition selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que l'acide lactique est l'acide D(-.) lactique. 4.- Composition selon la revendication 1 ou 2, caractériséeence que l'acide lactique est l'acide L(+)lactique. 5.- Composition selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que l'acide lactique est l'acide DLlactique. 6.- Composition pharmaceutique sous la forme de doses unitaires renfer- mant un mélange d'environ 20 à 200 mg de m-AMSA avec 1,5 à 4 equivalents molaires d'acide lactique. 7.- Composition selon la revendication 6, caractériséeence que l'acide lactique est l'acide L(+) lactique. 8.- Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que l'acide lactique est l'acide D(-) lactique. 9.- Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que l'acide lactique est l'acide DL lactique. 10.- Procédé de préparation dtune composition stable, solide, hydrosoluble, reconstituable, par l'eau ou un véhicule aqueux, en une solution stable de m-AMSA, caractérisé en ce qu'on mélange intimement le m-AMSA avec de l'acide D(-) lactique ou L(+)lactique à raison de 1,5 à 4, 0 moles environ d'acide lactique par mole de m-AMSA. 11.- Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le rapport molaire de l'acide lactique au m-AMSA est compris entre 1,5/1 et 2,5/1 environ. 12.- Procédé selon la revendication 10 ou 11, caractérisé en ce que l'acide lactique est l'acide L(+)lactique. 13.- Procédé de préparation d'une composition solide stable et hydrosoluble, qu'on peut reconstituer en une solution aqueuse stable de mAMSA par addition d'eau ou d'un véhicule aqueux, caractérisé en ce que: 7- 2482458 1) on prépare une solution aqueuse de m-AMSA et d'acide lactique, le rapport molaire de l'acide lactique au m-AMSA étant compris entre 1,5 et 4/1 environ; 2) on lyophilise la solution aqueuse ainsi obtenue. 14.- Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que le rapport molaire de l'acide lactique au m-AMSA est compris entre 1,5 et 2,5/1 environ. 15.- Procédé selon la revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que l'acide lactique est l'acide DL-lactique. 16.- Procédé selon la revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que l'acide lactique est l'acide L(+) lactique. 17.- Procédé selon la revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que la solution aqueuse de l'etape (1) est filtrée avant lyophilisation.