Brevet FR2480605A1 — publié le 19811023

SOLUTIONS CONCENTREES STABLES DE CISPLASTINE DANS UN SOLVANT ET LEUR APPLICATION PHARMACOLOGIQUE. La presente invention concerne des solutions stables et concentrées de cisplastine dans du polyethylene glycol, du méthoxy polyéthylene glycol aqueux ou leurs mélanges, contenant une source d'ion chlorure. Les composes du platine constituent un groupe unique de composés dans le groupe d'un genre antinéoplasique.Rosenberg et al. en 1965 [Rosenberg, B. et al. Nature (Londres), 205, p. 698-699 (1965)] ont d'abord remarqué qu'ils présentent un effet antibiotique, puis qu'ils constituent de puissants agents antitumoraux chez les animaux [Rosenberg, B. et al., Nature (Londres), 222, p. 385-386 (1969)] Du point de vue structure, ce sont des complexes formés par un atome cen- tral de platine, entourés de divers arrangements d'atomes de chlore ou de groupes ammoniac en position soit cis soit trans par rapport au plan. Deux des composés du platine les plus couramment étudiés sont représentés par les diagrammes suivants: Ci C NH3 CI NH3 CINH Pt t CI NH3 CI H3 cI Cl Cis-platine (II) Cis-platine (IV) Diaminedichloro-platine (II) Diaminetétrachloro-platihe (IV) Ainsi qu'on peut le constater, le composé cis-diaminedichloro-platine (II) présente tous ces groupes chloro et amino dans un seul plan. Ce composé, connu maintenant sous le nom de cisplatine selon la terminologie des "United States Adopted Name"(USAN), a été synthétisé selon la réaction suivante: NH, Cl K2 [PtCI41 + 2NH3 acis-[Pt(N1t3) CI2] + 2KCI [Voir Kauffmari, G.B. et al., dans "Inorganic Synthesis, J. Kleinberg (Ed.), p. 239-245, McGraw-H-lill Book Co., inc., New York, 1963]. 2 2480605 Y.G. Breusova-BaidaLa et aL., dans "Akademia Nauk", U.R.S.S., No. 6, pages 1239-1242 (Juin 1974) décrivent la lente isomérisation en milieu aqueux du cis- diaminedichloro-platine (II) en forme trans. J.W. Reishus et D.S. Martin, dans le "Journal of the American Chemical Society", 83, p. 2457-1462 (1961), indiquent l'hydrolyse acide du cisplatine à 25 C et à 35 C. Ces études sont conduites en solutions aqueuses aux concen- trations de 1,5 x 10-3M, 2,5 x 10-3M et 5,0 x 10-3M, ce qui correspond à 0,45 0,75 et 1,5 mg/ml, respectivement. Les auteurs indiquent qu'il y a une certaine ambiguité dans la localisation de l'origine (c'est-à-dire le "point zéro"), pour les courbes d'hydrolyse, parce qu'il faut 10 à 30 minutes'pour que l'échantillon se dissolve complètement, même à ces faibles concentrations. M. Rozencweig et ali., dans "Annals of Internal Medicine", 86, p.803-812 (1977) passent en revue les résultats des diverses études précliniques et cli- niques mettant en oeuvre l'utilisation de cisplatine dans les tumeurs expéri- mentales chez les animaux, ainsi que chez divers types de tumeurs de l'homme. Il faut remarquer que le médicament d'étude, disponible pour les chercheurs qualifiés par l'intermédiaire du "Investigational Drug Branch of the Cancer Therapy Evaluation Program of the National Cancer Institute", est fourni sous forme de poudre lyophilisée blanche dans des flacons contenant 10 mg de cisplatine, 90 mg de chlorure de sodium, 100 mg de mannitol (U.S.P.) et de l'acide chlorhydrique pour ajuster le pH. Lorsque le produit est recons- titué avec 10 ml d'eau stérile pour injection (U.S.P.), chaque ml de la solution résultante devrait contenir 1 mg de cisplatine, 10 mg de mannitol et 9 mg de NaCl. R.W. Talley et ali., dans "Cancer Chemotherapy Reports", 57, p.465-471 (1973), décrivent les résultats obtenus dans la Phase I de leur étude clinique concernant l'utilisation de cisplatine dans le traitement de 65 malades humains ayant toute une variété de néoplasmes. De même que dans la publication précé- dente, le médicament leur est fourni par le "National Cancer Institute" dans des flacons contenant 10 mg de cisplatine, 90 mg de chlorure de sodium et mg de mannitol, de façon à pouvoir reconstituer le produit avec 10 ml d'eau stérile. A.H. Rossof et aL., dans "Cancer", 30, p. 1451-1456 (1972), décrivent les résultats obtenus en utilisant le cisplatine pour traiter 31 malades humains ayant toute une gamme de tumeurs. Ils notent que le médicament fourni par le "National Cancer Institute" est fabriqué par "Ben Venue Laboratories, Inc." et contient, par fiole, 10 mg de cisplatine, 10 mg (sic) de mannitol et 9 mg (sic) de NaCl, et que la poudre blanc-jaunàtre se dissout facilement dans 8 à 10 ml d'eau stérile. Certaines informations concernant la chimie et la formulation pharma- ceutique de la cisplatine sont fournies dans les pages 1 à 5 et 31 à 32 de la publication intitulée: "CLINICAL BROCHURE, CIS-PLATINUM (II) DIAMINE- DICHLORURE (NSC-119875)", H. Haldelsman et al., "Investigational Drug Branch, Cancer Chemotherapy Evaluation Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute (Revised August 1974). Aux pages 31 et 32 de celle-ci concernant la formulation de la cisplatine fournie gratis par le N.C.I. aux cliniciens pour qu'ils effectuent leur évaluation clinique en chimiothérapie du cancer, on note les indications suivantes: FEUILLE DE DONNEES PHARMACEUTIQUES. NSC-119875 - Cis-diaminedichloroplatine (11). Formulation de la dose mg/fiole Préparation de la solui mg/fiole Stockage Stabilité : Le contenu de chaque fiole de verre au plomb de 20ml ressemble à un gâteau lyophilisé blanc Chaque fiole contient 10 mg de NSC- 119875, 90 mg de chlorure de sodium, 100 mg de mannitol et de l'acide chlorhydrique pour ajuster le ph. tion : Lorsque le produit est reconstitué avec 10 mg d'eau stérile pour injection, USP, chaque ml de la solu- tion resultante contient 1 mg de NSC-119875, mg de mannitol et 9 mg de chlorure de sodium ayant un pH compris entre 3,5 et 4,5. : Les fioles seches non ouvertes doivent être stockées à des températures de réfrigération (4 à 8 C). : Les fioles intactes ont une stabilité provisoire d'une année lorsqu'elles sont stockées à une tem- pérature de réfrigération (4 à 8 C). Des recommandations de stabilité peuvent être ajus- tées en attendant l'achèvement d'une étude d'une durée de conservation de deux ans. La reconstitution réalisée de la façon indiquée fournit une solution jaune pâle qui est stable durant 1 heure au maximum à la température ambiante (22 C) lorsqu'elle est exposée à un éclairage am- biant normal et à un maximum de 8 heures à la température ambiante (22 C) lorsqu'elle est protégée de la lumière. Les solutions reconstituées peuvent former un précipité, après 1 heure, à la température de réfrigération (4 à 80C). Précaution Les formulations de doses lyophilisées ne contiennent aucun conservateur et il est donc souhaitable de rejeter les solutions 8 heures après les avoir reconstituées. La demande de brevet britannique publiée No. 2021946A décrit des solutions aqueuses stables de cisplatine ayant une concentration de cisplatine com- prise entre environ 0,1 et 1,0 mg/ml et un pH compris entre 2,0 et 3,0. Les solutions peuvent également contenir une source d'ions chlorure minéral, acceptable du point de vue pharmaceutique et non-toxique, telle que du chlorure de sodium, et un excipient tel que du mannitol. La présente invention se rapporte à des solutions stables concentrées de cisplatine ayant des concentrations comprises entre environ 2,5 et 25 mg/ml. Plus particulièrement, la présente invention concerne dessolutions concentrées stables de cisplatine dans un milieu solvant comprenant environ 30 à 95% de polyéthylène glycol, ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ et 9000, ou bien un méthoxy polyéthylène glycol ayant un poids molécu- laire moyen compris entre environ 300 et 6000, ou un mélange de ceux-ci, et environ 5 à 70% d'eau, ces solutions contenant également au moins une 2O source d'ion chlorure acceptable du point de vue pharmaceutique et non- toxique, en une quantité qui est au moins, environ équivalente à la quantité de cisplatine présente dans la solution, et ces solutions ayant une concen- tration en cisplatine comprise entre environ 2,5 et 25 mg/ml. Des solutions aqueuses stables de cisplatine ont été décrites dans la publication de brevet britannique No. 2021946A. Bien que des solutions stables contenant des concentrations de cisplatine atteignant environ 1 mg/ml puissent être obtenues dans un tel milieu aqueux à la température ambiante,il peut se produire une cristallisation de la cisplatine à froid, pour des concentrations de cisplatine nettement supérieures à environ 0,5 mg/ml. Il n'est pas facile de redissoudre cette cisplatine cristallisée en secouant le système à la température ambiante, bien que l'on puisse obtenir à nouveau une solution en chauffant à environ 37 C. Comme les températures de transport et de stockage après vente ne peuvent pas être contrôlées, et qu'une cris- tallisation de cisplatine dans les fioles susciterait des problèmes indésirables pour le médecin qui l'utilise, la concentration pratique maxi- male de cisplatine dans de tels milieux aqueux est d'environ 0,5 mg/ml. Les solutions de cisplatine selon l'invention peuvent contenir jus- qu'à environ 25 mg de cisplatine par ml, bien que le maximum préféré soit d'environ 15 mg/ml. Les solutions selon l'invention contenant 15 mg de cisplatine par ml ont été maintenues à une température de 40C pendant 12 mois sans que l'on observe une cristallisation de cisplatine. De telles solutions ont également été gelées à -60'C, puis dégelées à température ambiante sans que l'on observe de précipitation de cisplatine. Ainsi, des solutions pratiques préparées selon l'invention peuvent offrir- des concentrations en cisplatine au moins 30 fois supérieures à celles que peuvent avoir des solutions aqueuses pratiques préparées selon l'art anté- rieur. On notera que les solutions concentrées de cisplatine fournies selon la présente invention nécessitent d'es coûts de transport de stockage et autres inférieurs par dose unitaire à ceux qui sont impliquéspour les solutions aqueuses connues. Bien que la forme solide lyophilisée connue requiert des coûts de transport et de stockage inférieurs, cette économie est plus que compensée par le temps et les dépenses impliqués par la lyo- philisation. Selon un aspect préféré de la présente invention, le milieu solvant comprend environ 80 à 95% (et de préférence encore, environ 85 à 90%) en polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 250 et 1600 (et plus particulièrement entre environ 250 et 650) et environ 5 à 20% (et de façon plus préférable, environ 10 à 15%) d'eau. Selon un aspect encore plus avantageux de l'invention, le milieu solvant comprend environ 90% de polyéthylène glycol, ayant un poids moléculaire moyen compris entre 350 et 450, et environ 10% d'eau. Il est préférable que la solution contienne environ 5 à 20 mg de cisplatine par ml, et de façon plus avantageuse encore, environ 10 à 15 mg/ml. La source d'ion chlorure acceptable du point de vue pharmaceutique et non- toxique est de préférence présente à la concentration d'au moins environ 2 équivalents par équivalent de cisplatine dans la solution. Des concen- trations aussi élevées que 50 équivalents ou davantage d'ion chlorure par équivalent de cisplatine peuvent être utilisées, en fonction de la concen- tration de cisplatine, le pourcentage d'eau présent et de la source parti- culière d'ion chlorure, mais des concentrations aussi élevées en ion chlo- rure sont généralement ni nécessaires ni désirables. Il sera noté par les spécialistes de l'art, que, dans le cas d'une forte con- centration en cisplatine et d'une faible teneur en eau, il ne serait pas possible de dissoudre une quantité suffisante de source d'ion chlorure telle que de chlorure de sodium, pour fournir 50 équivalents d'ion chlorure par équivalent de cisplatine. De plus, une solution saturée ou pratiquement sa- turée d'un chlorure minéral serait indésirable étant donné qu'elle risque de se cristalliser dans la solution lorsqu'elle se trouve à froid. Dans la situation décrite plus haut, 50 équivalents d'ion chlorure par équiva- lent de cisplatine pourraient être obtenus à l'aide d'acide chlorhydrique en tant que source d'ion chlorure, mais cela pourrait donner une solution ayant une acidité beaucoup trop élevée, c'est-à-dire un faible pH. La Demanderesse a constaté que des solutions excessivement acides sont quelque peu moins stables que des solutions plus modérément acides. La gamme de pH des solutions est comprise de préférence entre environ 1,5 et 4,5. La Demanderesse préfère utiliser environ 2 à 10 équivalents d'ion chlorure par équivalent de cisplatine, et de préférence encore environ 3 à 7 équivalents d'ion chlorure par équivalent de cisplatine. L'ion chlorure peut être fourni par l'addition d'acide chlorhydrique, d'un halogénure métallique non-toxique du point de vue pharmaceutique tel que du chlorure de sodium,.de potassium, de calcium ou de magnésium, ou un sel d'addition d'acide chlorhydrique d'une amine tertiaire acceptable du point de vue pharmaceutique et non-toxique, telle que la triéthylamine, ou par des mélanges de ceux-ci. La source préférée d'ion chlorure est fournie par de l'acide chlorhydrique, du chlorure de sodium ou un mélange de ceux-ci. Les polyéthylène glycols et des méthoxy polyéthyléne glycols présentent les formules générales suivantes: H (OCH2CH2)nOH et CH3 (OCH2CH2)nOCH3 respectivement, et sont disponibles industriellement sous les dénominations de Polyéthylène glycols CARBOWAe et de méthoxy polyéthylène glycols CARBOWA)È. La Demanderesse préfère utiliser les qualités SENTRY de polyéthyléne glycols CARBOWAX, qui sont produites de façon à satisfaire aux spécifications U.S.P., N.F. et F.C.C. concernant les applications alimentaires et médicamenteuses. Les gammes de poids moléculaire typique pour une variété de polyéthylène glycols CARBOWAX et de méthoxy polyéthylène glycols CARBOWAX sont fournies dansles TableauxI et II, ci-après. TABLEAU I Polyéthylène Gamme typique Glycols CARBOWAX de Poids moléculaire 190 à 210 300 285 à 315 400 380 à 420 600 570 à 630 1000 950 à 1050 1540 1300 à 1600 4000 3000 à 3700 6000 7000 à 9000 TABLEAU II Méthoxy Polyéthylène Gamme typique Glycols de poids moléculaire CARBOWAX 350 335 à 365 550 525 à 575 750 715 à 785 2000 1850 à 2150 R On sait que les polyéthylène glycols forment des complexes avec certains sels minéraux. Ainsi, la réaction des polyéthylène glycols avec du cobalt thiocyanate d'ammonium formant un complexe bleu constitue la base d'une méthode colorimétrique de détermination de la concentration de polyethylene glycols dans divers mélanges. La Demanderesse pense que la stabilité unique du cisplatine dans les solutions selon l'invention peut être due à un complexe formé entre le cisplatine et le polyéthylène glycol, mais ceci relève de la théorie et ne constitue pas un élément de l'invention. La preuve de la formation d'un complexe n'a pas été notée dans les chroma- tographies en couches minces réalisées par la Demanderesse. En utilisant les techniques décrites ci-après, le cisplatine aqueux produit une tache pour une valeur de Rf d'environ 0,65. Cependant, une solution de cisplatine dans 90% de polyethylene glycol 400 - 10% d'eau Cou 10% de HC1 à 0,5N) fournit une tache pour un Rf d'environ 0,3 qui s'étale jusqu'à un Rfd'environ0,65. Ladilution avec des quanitités impor- tantes d'eau semble briser immédiatement le complexe, puisque la dilution de la solution ci-dessus de PEG-H20 (ou HC1) avec cinq volumes d'eau montre alors seulement une tache correspondant au cisplatine pour un Rf d'environ 0,65. Chromatographie en couche mince (CCM) Appareillage et réactifs - (a) Plaques de CCM: 60 plaques de gel de silice des Laboratoires EM, Catalogue No. 5753, ou équivalent. (b) Eluent - acétone:> Acide nitrique normal (9/1). Préparé franchement tous les jours. (c) Révélateur: Dissoudre 5,6g de chlorure stanneux dans 10 ml d'acide chlorhydrique concentré. Ajouter 90 ml d'eau distillée et 0,29 d'iodure de potassium. Bien agiter. Préparer un produit frais tous les jours. (d) Four de laboratoire réglé à 100 C. Procédure - (a) On dilue l'échantillon avec 5 volumes de diméthylformamide (DMF) [provenant de Burdick et Jackson, et distillé dans du verre]. (b) On tache une plaque de CCM avec 5 microlitres de l'échantillon et microlitres d'une solution standard contenant du cisplatine (et du transplatine et du platine B, si cela convient), à une concentration environ égale à celle qui est attendue dans l'échantillon à analyser. On révèle une hauteur de 10 cm dans le réservoir de CCM prééquilibré avec l'éluent. On pulvérisera plaque séchée avec la solution révélatrice fraîchement préparée et on l'introduit dans un four à 1000C pendant 10 minutes. On observe les zones jaunes/pourpre. (c) Valeurs Rf approximatives: 5. 0,65 : cisplatine; * 0,76: transplatine, * 0,90: platine B. Les titrages par CLHP des solutions selon l'invention tendant à déter- miner la teneur en cisplatine peuvent être réalisés selon la procédure dé- crite dans le brevet britannique No. 2021946A. La phase mobile préférée est constituée par un mélange d'acétate d'éthyle/méthanol/diméthylformamide/ eau distillée (25/26/5/5). Le standard est de préférence constitué par du cisplatine dissous dans du diméthylformamide à une concentration de 1 mg/ml. Les échantillons à analyser sont dilués avec du diméthylformamide jusqu'à une concentration approximative en cisplatine de 1 mg/ml. Bien que leur présence ne confère aucun avantage particulier, les solutions selon l'invention peuvent éventuellement contenir un excipient classique acceptableduipoint de vue physiologique tel que le mannitol. A partir des études de stabilité menées à l'heure actuelle, on prévoit que la stabilité des solutions selon l'invention (comme étant une perte de % de puissance) est supérieure à deux années à la température ambiante. Selon un aspect préféré de l'invention, les solutions sont stériles et dépourvues de substance pyrogène; elles sont conditionnées dans des récipients stériles et dépourvuesde substance pyrogène. De telles solutions peuvent être ensuite diluées avec, par exemple, de l'eau stérile pour injec- tion, de qualité U.S.P., ou une solution saline normale stérile, de qualité U.S.P., et administrée par voie intramusculaire ou intraveineuse. Les moyens pour stériliser de telles solutions sont bien connus dans l'art. La Demanderesse préfère faire passer les solutions à travers un filtre - millipore de 0,22 micron, stérile et dépourvu de substance pyrogène, en utilisant des techniques aseptiques, sous une pression d'azote stérile. Millipore est une dénomination commerciale de la Millipore Corporation pour les filtres à membrane. Le filtrat stérile est recueilli dans des récipients stériles et dépourvus de substance pyrogène, puis introduit finalement en quantité désirée, dans des récipients stériles convenables, dépourvus de substance pyrogène, bouchés avec des bouchons stériles et dépourvus de substance pyrogène (de préférence revêtus de Teflon) et fermés hermétiquement avec des capsules d'aluminium stérile. Pour les utiliser dans le traitement du cancer, les solutions concentrées sont diluées à la concentration recherchée (généralement 1 mg de cisplatine par ml) avec par exemple de l'eau stérile pour injection, de qualité U.S.P., une solution saline normale stérile, de qualité U.S.P., ou une solution de glucose stérile, utilisées par injection intraveineuse ou intramusculaire, ou par perfusion intraveineuse, de la façon connue jusqu'à maintenant pour l'administration des préparations de cisplatine. Des doses utilisées couramment, ayant une toxicité douce acceptable à modé- rément acceptable, sont comprises entre 60 et 100 mg/m2 par voie intraveineuse, administrées en une dose unique, ou réparties sur 3 à 5 jours, cette dose devant réadministrée à des intervalles de 4 semaines. Une dose de 60 mg/m2 est à peu près équivalente à une dose de 1,5 mg/kg qui, à son tour, est à peu prés équivalente à une dose de 105 mg pour un malade pesant 70 kg. On prescrit fréquemment une thérapie concurrente avec d'autres agents chimio- thérapiques afin d'obtenir les meilleurs résultats. Ainsi que cela est utilisé ici dans les revendications, des références à des "équivalents" d'ion chlorure par "équivalent" de cisplatine, signifient des équivalents molaires. Ainsi, par exemple, lorsqu'on utilise la gamme préférée comprise entre environ 3 et 7 équivalents d'ion chlorure par équivalent de cisplatine, on utiliserait environ 3 à 7 moles de NaCI par mole de cisplatine mais environ 1,5 à environ 3,5 moles de CaCl2 par mole de cisplatine, etc. - Platine B est une désignation arbitraire utilisée ici pour le produit de réaction acide de cisplatine qui est la moitié du complexe rouge de Magnus connu et auquel on a essayer d'attribuer la structure suivante: e - CLe F \ Pt/l LH3N / \ Cette invention est illustrée mais ne saurait être limitée par les Exemples suivants. EXEMPLE 1 SoLution concentrée stable de cispLatine (10 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 400 - 10% de HCl normal - On fait une bouillie avec 500 mg de cisplatine dans une solution de 5 ml d'acide chlorhydrique normal et de 45 ml de polyéthylène glycol 400. Après 2 jours ' d'agitation à température ambiante (le récipient étant protégé de la lumière à l'aide d'une feuille d'aluminium), on obtient une solution jaune claire. 2480605S Les aliquotes de cette solution sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, fermées hermétiquement avec des bouchons enduits de téflon, scellées avec des capsules d'aluminium et soumises à des tests de stabilité au stockage à diverses températures. Après un stockage de deux semaines à 56%C, la chromatographie en couche mince (CCM) indique la présence d'une trace de transplatine et environ 1% de platine B. Après un stockage de deux semaines à 560C, la CCM indique la présence de moins de 1% de transplatine et environ 3% de platine B. Les échantillons stockés pendant deux semaines à 560C, sont dilués avec, respectivement, 4, 9 et 19 volumes d'eau, et fournissent des solutions transparentes contenant, respectivement, 2, 1 et 0,5 mg/ml de cisplatine. Il apparaît un léger trouble dans chacun des échantillons dilués après un repos d'environ 18 heures à la température ambiante. EXEMPLE 2 * SoLution concentrée stable de cisplatine (10 mg/ml) dans 90% de polyéthyléne glycol 400 - 10% de HCL 0,5N- ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et 5,0 ml de HCl normal sont mélangés et additionnés de 90,0 ml de polyéthylène glycol 400. A 50 ml de la solution ci-dessus sont ajoutés 500 mg de cisplatine et le mélange est protégé de la lumière à l'aide d'une feuille d'aluminium et agité à tempé- rature ambiante, durant 24 heures, de façon à produire une solution claire. La CCM d'une solution fraîchement préparée ne montre qu'une zone de cisplatine avec une trace possible de transplatine. Deux aliquotes de 2 ml de la solution sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, fermées avec des bouchons enduits de téflon et scellées avec des capsules d'aluminium, puis soumises à des tests de stabilité au stockage à diverses températures. Une fiole d'échantillon est lyophilisée dans un bain de glace carbonique- acétone, durant 1 heure, puis laissée se réchauffer à la température ambiante. On obtient une solution claire, et on ne constate pas la présence de précipité. Après des stockages de 3 mois à 37%C et à 45%C, la CCM indique la présence de 1 à 2% de platine B et d'une trace possible de transplatine. Après 1 mois de stockage à 56%C, la CCM indique la présence de plus de 5% mais moins de 10% de platine B et d'une trace de transplatine. Les échantillons stockés à 37 et à 450C pendant 3 mois, et à 560C pendant 1 mois, sont dilués avec quatre volumes d'eau purifiée de qualité U.S.P. pour donner des solutions claires contenant 2 mg/ml de cisplatine. Les solutions diluées restent limpides après un repos de 24h à la température ambiante. EXEMPLE 3 iSolution concentrée stable de cisplatine (10 mg/ml) + CaCl2 (20 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 400 - 10% de HCl 0,5N - On dissout 2g de chlorure de calcium anhydre de qualité réactive dans un mélange de 5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et 5 ml de HCl normal. On ajoute 89 ml de polyéthylène glycol 400 pour amener le volume à 100 ml. A 50 ml de cette solution, on ajoute 550 mg de cisplatine, et l'on protège le mélange de la lumière à l'aide d'une feuille d'aluminium; on agite le système à température ambiante durant 24 heures pour obtenir une solution claire. La CCM d'une solution fraîchement préparée indique uniquement la présence d'une zone de cisplatine avec une trace possible de transplatine. Des aliquotes de 2 ml de la solution sont placées dans des fioles d'ambre de 17 ml, fermées avec des bouchons revêtus de téflon, scellées avec des capsules d'aluminium et soumises à des tests de stabilité au stockage à diverses températures. Une fiole échantillon est placée dans un bain de glace carbonique-acétone pendant 0,5 heure et lyophilisée en un gel transparent. On laisse celui-ci se réchauffer à température ambiante et on recueille une solution limpide. * Apres un stockage de 3 mois à 37 C, la CCM indique la présence de 1 à 2% de platine B et d'une trace possible de transplatine. Apres un stockage de 3 mois à 45 C, la CCM indique la présence d'environ 5% de platine B et d'une trace possible de transplatine. Après un stockage de 1 mois à 56 C, la CCM indique la présence de 8 à 10% de platine B et d'une trace de transplatine. Les échantillons stockés à 37 C et 45 C pendant 3 mois, et à 56 C pendant i mois, sont dilués avec 4 volumes d'eau purifiée de qualité U.S.P. pour donner des solutions claires contenant 2 mg/ml de cisplatine. Les solutions diluées restent claires après un repos de 24 heures à la température ambiante. EXEMPLE 4 * Solution concentrée stable de cisplatine (environ 22 mg/ml) + CaCL2 (25 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 400 - 10% de HCl 0,5N - 3 ml d'une solution de 90% de polyéthylène glycol 400 et de 10% de HCl 0, 5N sont additionnés de 45 mg de cisplatine, et le mélange est agité pendant 1 heure à température ambiante pour donner lieu à une solution limpide. 13 2480605 On introduit une dose supplémentaire de 30 mg de cisplatine (faisant untotal de 25 mg/ml) et on agite le mélange à environ 45 C pendant 1 heure, puis à la température ambiante pendant 16 heures, pour produire une solution pratique- ment complète. La petite quantité de matières insolubles est éliminée par filtration. La CCM du filtrat indique uniquement une zone de cisplatine avec une trace possible de transplatine. Le restant du filtrat est introduit dans une fiole d'ambre de 17 ml, fermée avec un bouchon revêtu de téflon, scellée avec une capsule d'aluminium et maintenue à 45 C pendant 3 mois. Après un vieillissement de 3 mois à 45 C, la CCM indique qu'il y a 1 à 2% de platine B et pas de transplatine dans la solution. Une dilution de la solution vieillie avec de l'eau purifiée de qualité U. S.P. à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions limpides, qui le restent après un repos à la température ambiante pendant 24 heures. EXEMPLE 5 * Solution concentrée stable de cisplatine (12 mg/ml) + NaCl (10 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 400 - 10% de HCl 0,5N- On dissout 100 mg de chlorure de sodium dans une solution de 5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et 5 ml d'acide chlorhydrique normal. Cette solution est additionnée de 90 ml de polyethylène glycol 400 et le mélange est agité pendant 15 minutes. 50 ml de la solution obtenue sont additionnés de 500 mg de cisplatine, et le mélange est agité dans l'obscurité à-la tem- pérature ambiante pendant 3 jours, pour produire une solution claire. La CCM de la solution fraîchement préparée ne montre qu'une tache corres- pondant au cisplatine. Un titrage par chromatographie liquide à haute perfor- mance (CLHP) de la solution fraîchement préparée indique que celle-ci renferme 12 mg de cisplatine par ml. Des aliquotes sont introduites dans des fioles d'ambres de 17 ml, ces dernières étant scellées de la façon décrite dans l'Exempte 3, et soumises auxtestsde stabilité au stockage à diverses températures. Après un stockage à 37 C pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a moins de 1% de platine B et pas de transplatine. Après un stockage à 56 C pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 1 à 2% de platine B et pas de transplatine. La dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée U.S.P. jusqu'à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions limpides qui le restent après un repos à la température ambiante pendant 24 heures. Des titrages par CLHP d'échantillons stockés pendant 3 mois à 45 C, 6 mois à 37 C et 8 mois à la température ambiante indiquent des pertes de puissance de 6,6%, 6,1% et 2,3%, respectivement. 14 2480605 EXEMPLE 6 Solution concentrée stable de cisplatine (11,4 mg/ml) + NaCl (10 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 400'- 10% d'eau - Une solution de 50 mg de NaCl dans 5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et de 45 ml de polyéthylène glycol 400, est additionnée de 500 mg de cisplatine, et le mélange est agité, dans l'obscurité, à température ambiante, durant 6h pour fournir une solution limpide. La CCM de la solution fraichement préparée ne révèle la présence que de la tache correspondant au cisplatine; un titrage par CLHP indique que cette solution contient 11,4 mg de cisplatine par ml. Des aliquotes sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml et cellesci sont scellées de la façon décrite dans l'Exemple 3, puis soumisesaux testsde stabilité au stockage à diverses températures. Apres un stockage à 37 C et 45 C pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 1% de platine B et pas de transplatine. Apres un stockage à 56 C pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 2 à 3% de platine B et pas de transplatine. Une dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée de qualité U.S.P. à une concentration de 2 mg par ml de cisplatine fournit des solutions claires qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 heures. Des titrages par CLHP d'échantillons stockés 3 mois à 45 C, 6 mois à 37 C et 7 mois à température ambiante révèlent des pertes de puissance de 6,1%, 7,0 et 0,9%, respectivement. EXEMPLE 7 * Solution concentrée stable de cisplatine (10 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 600 - 10% de HCL 0,5N - Une solution de 2,5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P., 2,5 ml de HC1 normal et 45 ml de polyéthylène glycol 600 est additionnée de 500 mg de cisplatine et le mélange est agité dans l'obscurité à température ambiante, pendant 5 heures, pour fournir une solution claire. La CCM de la solution franchement préparée n'indique qu'une tache correspondant au cisplatine. Des échantillons de la solution fraîchement préparée sont dilués avec l, 2, 3, 4, 5 et 9 volumes d'eau purifiée U.S.P., respectivement; ces solutions diluées ne présentent aucune cristallisation, après un repos de 16 heures à température ambiante ou à 4 C. Les aliquotes de la solution franchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans 15.2480605 l'ExempLe 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses tem- pératures. Après un stockage à 37 C et 45 C, pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 1% de platine B et pas de transplatine. Après un stockage à 56 C pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 3,4% de platine B et pas de transplatine. La dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée de qualité U. S.P. à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions claires, qui le restent après repos à la température ambiante pendant 24 heures. EXEMPLE 8 Solution concentréestable de cisplatine (10 mg/ml) + NaC[ (10 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 400 - 10% de HCL 0,2N - Une solution de 0,5g de NaCl dans 4 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P., i ml d'acide chlorhydrique normal et 45 ml de polyéthylène glycol 400 est additionnée de 250 mg de cisplatine, et le mélange est agité dans l'obscurité à la température ambiante, pendant 4 heures, de façon à fournir une solution jaune claire. La CCM de la solution fraîchement préparée n'indique qu'une tache correspondant au cisplatine. Des dilutions de la solution fraîchement préparée avec 1, 2, 3, 4, 5 et 9 volumes d'eau purifiée fournissent des solutions claires, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 heures. Les dilutions avec 1, 2, 3, 4 et 5 volumes ne présentent aucune cristallisations lorsqu'on les maintient à 4 C pendant 24 heures. Des aliquotes de la solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'ExempLe 3, et soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses températures. Après un stockage à 37 C, pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 1% de platine B et une trace possible de transplatine. Apres un stockage à 45 C, pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 5% de platine B et une trace possible de transplatine. Après un stockage à 56 C, pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 2 à 3% de platine B et pas de transplatine. La dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée de qualité U. S.P. à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine, fournit des solutions limpides, qui le restent après un repos pendant 24 heures à température ambiante. 16 2480605 EXEMPLE 9 * Solution concentrée stable de cisplatine (2,5 mg/ml), NaCl (9 mg/ml) et mannitol (12,5 mg/ml) dans 31% (poids/volume) de polyéthylène glycol 6000 aqueux acidifié - On dissout 0,9g de chlorure de sodium, 1,25g de mannitol et 31,3g de polyétnyl1ne glycol dans suffisamment d'eau purifiée de qualité U.S.P. pour disposer de 100 ml d'une solution, laquelle est acidifiée à un pH de 2,2 à l'aide d'acide chlorhydrique normal (0,7 ml). On ajoute 255 mg de cispla- tine et l'on agite le mélange dans l'obscurité pendant 3 jours à température ambiante pour obtenir une solution limpide. La CCM de la solution fraîchement préparée ne présente que la zone correspon- dant au cisplatine. Des aliquotes de la solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'Exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à 45 C et 56 C. Apres 2 mois de stockage à 45 C et-56 C, la CCM indique qu'il y a moins de 1% de platine B et pas de transplatine. La dilution des échantillons vieillis avec un volume égal d'eau purifiée de qualité U.S.P. fournit des solutions limpides, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 heures. EXEMPLE 10 * Solution concentrée stable de cisplatine (15,8 mg/ml) + NaCl (10 mg/ml) dans '90% de polyethylène glycol 400 aqueux - On dissout 90 ml de polyethylene glycol 400 dans une solution de 1,Og de NaCl dans 10 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. 60 ml de la solution obtenue sont additionnés de 900 mg de cisplatine, et le mélange est agité dans l'obscurité pendant 5 heures à température ambiante pour obtenir une solution claire. La CCM de la solution fraîchement préparée n'indique que la présence de la zone correspondant au cisplatine; un titrage par CLHP indique que celle-ci contient 15,8 mg de cisplatine par ml. La dilution de la solution fraîchement préparée avec 4 volumes d'eau purifiée de qualité U.S.P. fournit une solution limpide, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 heures. Des aliquotes de la solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'Exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses températures. Apres 2 mois de stockage à 45 C, la CCM indique qu'il y a 1,5% de platine B et pas de transplatine. Apres 1 mois de stockage à 56 C, la CCM indique qu'il y a 2% de platine B et pas de transplatine. Un échantillon vieilli à 56 C est dilué à une concentration de 2 mg par ml avec de l'eau stérile pour injection et l'échantillon vieilli à 45 C est dilué à une concentration de 2,5 et 5,0 mg/ml de cisplatine avec de l'eau stérile pour injection. Ils fournissent chacun des solutions claires, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 heures. Des titrages par CLHP d'échantillons stockés 3 mois à 45 C, 6 mois à 37 C et 8 mois à température ambiante indiquent des pertes de puissance de 7,6%, 7,6% et 0%, respectivement. EXEMPLE 11 * Solution concentrée stable de cisplatine (15 mg/m) + CaCl (25 mg/ml) dans 90% de polyéthylène glycol 400 aqueux - Une solution de 2,5g de CaCi2 dans 10 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. est additionnée de 90 ml de polyéthylène glycol 400 et la solution résultante est agitée pendant 10 min. A 50 ml de la solution ci-dessus, on ajoute 750 mg de cisplatine et l'on agite le mélange pendant 5 heures dans l'obscurité, à température ambiante, pour obtenir une solution claire. La CCM de la solution fraîchement préparée indique uniquement une zone cor- respondant au cisplatine. Des dilutions de la solution fraîchement préparée avec 1, 2, 5 et 10 volumes, respectivement, d'eau purifiée de qualité U.S. P. fournissent une solution limpide. Des aliquotes de solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'Exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à 45 C et 56 C. Après un stockage de 2 mois à 45 C, la CCM indique qu'il y a 1,5% de platine B et pas de transplatine. Apres un stockage de 1 mois à 56 C, la CCM indique qu'il y a 2,5 à 5% de platine B et pas de transplatine. Un échantillon vieilli à 56 C est dilué à une concentration de 2 mg/ml et l'échantillon vieilli à 45 C est dilué à des concentrations de 2,5 et 5,0 mg/ml de cisplatine, avec de l'eau stérile pour injection. Ils forment tous deux des solutions claires, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 heures. EXEMPLE 12 * Solution concentrée stable stérile de cispLatine dans 90% de poLyéthyLéne gLycol 400 - 10% de HCL 0,5N (L'étiquette indique 15 mg/ml d'activité cisplatine) - NOTE: Le cisplatine est un agent carcinogéne possible. Il faut porter des vêtements, gants, masque, lunettes et bonnet de protection pendant toute la procédure. Toutes les zones de travail et tout l'équipement doivent être soigneusement nettoyés pour éviter toute contamination future. FORMULE par ml par 10,0 ml Cisplatine........... 0,015 g 0,150 g Chlorure de sodium..... 0,015 g 0,150 g Acide chlorhydrique 0,5N 2)........... 0,10 ml 1,0 ml Polyéthylène glycol 400 (qualité SENTRY)... q.s.p. 1,0 ml q.s.p. 10,0 ml 1) Ce poids de cisplatine assure une puissance de 1000 microgrammes/mg. Pour déterminer la quantité de cisplatine requise, on utilise la formule suivante: 1000 x 0,015g = Grammes de cisplatine requis puissance du cisplatine en mcg/mg 2) 1 litre d'acide chlorhydrique 0,5N est préparé de la façon suivante: 1. On introduit 957,25 ml d'eau stérile pour injection, de qualité U.S.P. dans un Erlenmeyer d'lZ. 2. En agitant rapidement, on introduit lentement et avec précaution 42,75 ml d'acide chlorhydrique concentré. On agite encore pendant min. On ferme avec un bouchon de caoutchouc de butyle propre. q INSTRUCTIONS DE FABRICATION POUR PREPARER UN LITRE DE SOLUTION STERILE. 1- On place 100 ml d'acide chlorhydrique 0,5N dans un Erlenmeyer propre calibré de 1U, contenant un agitateur convenable tel qu'une barre d'agitateur magnétique de 6 cm, enduite de téflon. 2 On ajoute, en agitant modérément, 15,Og de chlorure de sodium. On poursuit l'agitation jusqu'à dissolution complète. 3 - En agitant rapidement, on introduit 750 ml de polyéthylène glycol 400 (qualité SENTRY) et l'on poursuit l'agitation pendant 5 min. 4 - On enlève le barreau magnétique et on égoutte celui-ci pour que le fluide en excès retombe dans le falcon. s - On ajoute avec précaution 15,Og d'activité cisplatine. b - On ajoute du polyéthylène glycol 400 (qualité SENTRY) jusqu'à la marque 1k (Il faut au total 880 ml de polyéthylène glycol 400). 7 - On remet l'agitateur de téflon dans le mélange et on ferme le système avec un bouchon propre de caoutchouc butyle. a - On enveloppe le récipient d'une feuille d'aluminium pour le protéger de la lumière. q - On agite rapidement pendant 24à.48 heures à température ambiante. On doit obtenir une solution limpide. Si l'on n'obtient pas une'-solution claire en 48 heures, on peut chauffer le mélange à 37-400C pendant 2 à 6h, en l'absence d'air et de lumière, pour faciliter la mise en solution rapide du cisplatine restant. On refroidit à 23-270C. 10 - En utilisant une technique aseptique, on fait passer la solution jaune sombre sous une pression d'azote stérile convenable, à travers un filtre Millipore convenable de 0,22 micron, stérile et dépourvu de substance pyrogène. On recueille le filtrat stérile dans un Erlenmeyer stérile et dépourvu de substance pyrogène. On ferme la fiole avec un bouchon stérile, dépourvu de substance pyrogène, en caoutchouc butyle. La solution doit être conservée dans l'obscurité. l- On introduit la quantité nécessaire de solution stérile dans des fioles d'ambre stériles dépourvues de substance pyrogène. Ces fioles sont fermées avec un bouchon en téflon stérile et dépourvu de substance pyrogène. On ferme hermétiquement ces fioles avec des capsules d'aluminium stérile. 12 - Les fioles doivent contenir l'étiquette suivante de mise en garde: PRODUIT NE DEVANT PAS ETRE UTILISE DIRECTEMENT PAR VOIE INTRAMUSCULAIRE OU INTRAVEINEUSE * * La solution de PEG li400 peut être diluée avec 14 parts d'eau stérile pour injection de qualité U.S.P. ou de solution saline normale stérile de qualité U.S.P. pour fournir une solution de 1 mg/ml de cisplatine. S'il faut des concentrations supérieures, on peut utiliser des quan- tités proportionnellement moindre d'eau stérile ou de solution saline. Les solutions diluées peuvent être utilisées par voie intraveineuse et elles sont stables à température ambiante (22 à 26 C) pendant au moins 48heures. Ne pas mettre de solutions diluées au réfrigérateur car des cristaux peuvent apparaître. 13 - Conserver les fioles dans l'obscurité. EXEMPLE 13 e Solution concentrée stable de cisplatine (2,5 mg/ml), NaCl (9 mg/ml), CaCL2 (15 mg/m) et mannitol (10 mg/ml) dans 31% de polyéthylene glycol 400 aqueux acidifié - On dissout 0,9g de chlorure de sodium, 1,5g de CaCl2 et 1,Og de mannitol dans un mélange de 31,25 ml de polyéthylène glycol 400 et de 40 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. On acidifie la solution à un pH de 2,2 à l'aide d'acide chlorhydrique normal (0,4 ml), puis on ajoute 255 mg de cisplatine et porte le volume à 100 ml avec de l'eau purifiée de qualité U.S.P.; on agite le mélange dans l'obscurité pendant 5 heures, à température ambiante, pour obtenir une solution limpide. La CCM de la solution fraÂchement préparée n'indique qu'une zone correspon- dant au cisplatine. EXEMPLE 14 On répète la procédure générale décrite dans l'Exemple 5, si ce n'est que le chlorure de sodium est remplacé par une quantité équivalente de chlorure de magnésium; on obtient ainsi une solution concentrée stable de cisplatine. EXEMPLE 15 On répète la procédure générale décrite dans l'Exemple 5, si ce n'est que l'on remplace le chlorure de sodium par une quantité équivalente de chlorhydrate de triéthylamine; on obtient ainsi une solution concentrée stable de cisplatine. EXEMPLE 16 On répète la procédure générale décrite dans l'Exempte 5, si ce n'est que l'on remplace le polyéthylène glycol 400 par un volume égal de polyéthylène glycols 200 et 300, respectivement. On obtient des solutions concentrées sta- bles de cisplatine. EXEMPLE 17 On répète la procédure générale décrite danse 'Exempte 9, si'ce n'est que l'on remplace le polyéthylène glycol 6000 par un poids égal de polyéthy- lègne glycols 1000 et 4000 respectivement. On obtient des solutions concen- trées stables de cisplatine. Bien entendu, la présente invention n'est nullement limitée aux exemples et modes de mise en oeuvre mentionnés ci-dessus; elle est susceptible de nom- breuses variantes accessibles à l'homme de l'art, suivant les applications envisagées et sans que l'on ne s'écarte de l'esprit de l'invention. REVENDICATIONS 1.- Solution concentrée stable de cisplatine dans un milieu solvant, caractérisée en ce qu'elle comprend environ 30 à 95% de polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 150 et 9000, ou un méthoxy polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 300 et 6000, ou bien un mélange de ceux-ci, et environ 5 à 70% d'eau, et de plus également au moins une source d'ion chlorure non-toxique et acceptable du point de vue pharmaceutique, en une quantité qui est au moins environ équivalente à la quantité de cisplatine présente dans la solution, cette solution ayant une concentration en cisplatine comprise entre environ 2,5 et 25 mg/ml. 2.- Solution concentrée stable de cisplatine dans un milieu solvant, caractérisée en ce qu'elle comprend environ 80 à 95% de polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 250 et 1600, ou un méthoxy polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 300 et 800, ou bien un mélange de ceux-ci, et environ 5 à 20% d'eau, ainsi que au moins une source d'ion chlorure non- toxique et acceptable du point de vue pharmaceutique, en une quantité qui est comprise entre environ un équivalent et dix équivalents par équivalent de cisplatine à la solution, cette solution contenant environ 5 à 20 mg de cisplatine par ml. 3.- Solution de cisplatine selon la revendication 2, caractérisée en ce que la source d'ion chlorure non-toxique et acceptable du point de vue pharmaceutique est constituée par l'acide chlorhydrique, le chlorure de sodium, de calcium, de magnésium, ou le chlorhydrate de triéthylamine, ou bien un mélange de ceux-ci. 4.- Solution concentrée stable de cisplatine dans un milieu solvant, caractérisée en ce qu'elle comprend environ 85 à 90% de polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 250 et 650, et environ 10 à 15% d'eau, ainsi que de plus une source d'ion chlorure choisie dans le groupe formé par l'acide chlorhydrique, le chlorure de sodium ou leurs mélanges, en une quantité qui est comprise entre environ 2 et 7 équivalents par équivalent de cisplatine dans la solution, cette solution ayant une concentration en cisplatine comprise entre environ 10 et 15 mlg/ml. 5.- Solution de cisplatine selon la revendication 4, caractérisée en ce que la solution est stérile et se trouve dans un récipient fermé hermétiquement, tel qu'une fiole. 23 2480605 6.- Solution concentrée stable stérile de cisplatine dans un récipient fermé hermétiquement tel qu'une fiole, caractérisée en ce qu'elle renferme environ 10 à 15 mg de cisplatine par ml, et environ 10 à 15 mg de NaC1 par mi dans un milieu solvant comprenant environ 90% d'un polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 350 et 450, et environ % d'eau. 7.- Solution concentrée stable stérile de cisplatine dans un récipient scellé tel qu'une fiole, caractérisée en ce qu'elle contient environ 10 à mg de cisplatine par ml, et environ 10 à 15 mg de NaC1 par ml dans un milieu solvant constitué par environ 90% d'un polyéthylène glycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre environ 350 et 450, et environ % d'acide chlorhydrique dilué, dont la concentration peut aller jusqu'à 0, 5N. 8.- Application pharmacologique des solutions concentrées stables selon une quelconque des revendications 1 à 7, notamment pour la thérapie du cancer. @