Brevet FR2480747A1 — publié le 19811023

1. La présente invention est relative à de nouveaux dérivés d'amino- acides, à leurs procédés de préparation et leur application thérapeutique. Les dérivés selon la présente invention sont des inhibiteurs de 1'enképhalinase qui est une enzyme dégra- dant les enképhalines. La méthionine-enképhaline, f7Met-E (Tyr-gly-gly-Phe- Met), et la leucine enképhaline, Leu-E (Tyr-gly-gly-Phe-Leu) sont des peptides découverts dans le cerveau et qui-sont les ligands endogènes du récepteur morphinique (J. Hughes et al., Nature, 258, 577 (1975).7. Leur action est multiple tant au-niveau de la tians- mission des influx nociceptifs qu'au niveau du comporte- ment ou de la sécrétion hormonale. Ils sont considérés comme des neuromédiateurs à action inhibitrice sur la li- bération d'autres neurotransmetteurs ZJ. Hughes, Nature, 278, 394 (1979); S.H. Snyder, Nature, 2_8, 13 (19797.o Il a été démontré que les enképhalines sont rapidement dégra- dées dans le cerveau par une carboxydipeptidase qui libere les restes Tyrgly-gly et Phe-Met (B. Malfroy et al, Nature, 276, 523 (1978). Les composés susceptibles d'inhiber lVenképhalinase - peuvent donc prolonger les effets des enképhalines endo- gènes ou potentialiser l'action d'analogues synthétiques administrés de façon exogène. Ces composés sont donc sus- ceptibles de remplacer les agents morphiniques dans toutes leurs propriétés sans en avoir les graves inconvénients, en particulier au niveau des phénomènes d'accoutumance et de dépendance. Les dérivés selon l'invention répondent à la for- mule générale: il X - Y - CH -A -B - CH - C - OR (I) I I - (CH2)n R2 R1 2. dans laquelle A est un groupe carbonyle, méthylène, méthirm ou amino; B est un groupe méthine; amnino éventuellement substitué par un groupe alkyle en C1 à C4; carbonyle ou thio; R1 est un atome d'hy- drogène; un groupe alkyle éventuellement mono- ou polysub- stitué par un atome d'halogène; un groupe phényle éventuel- lement mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène, un groupe trifluorométhyle ou hydroxy; un groupe cyclohexyle ou un groupe thiényle; n est 0 ou 1; R2 est un atome d'hy- drogène, un groupe alkyle en C1 à C6 linéaire ou ramifié; un groupe phényle; un groupe benzyle éventuellement mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène; un groupe hydro- xyalkyle; un groupe alcoxyalkyle éventuellement substitué sur la fraction alcoxy par un groupe phényle, benzhydryle ou pyridyle N-substitué par un groupe phénylalkyle dont le noyau phényle est éventuellement substitué par un ou plu- sieurs atomes d'halogène; un groupe phénoxyalkyle; un groupe mercaptoalkyle éventuellement substitué sur le soufre par un groupe alkyle simple ou ramifié, phényle ou benzyle; R3 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle linéaire ou ramifié en C1-C8; phényle ou phénylalkyle dont la fraction alkyle est en C1 à C8, ces deux derniers radicaux étant éventuellement mono- ou polysubstitués sur le noyau phényle par un atome d'halogène; Y est un groupe -S-; -NH- ou -CH2-; et X est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C1 ou C2 substitué par un groupe alcoxycarbonyle, carboxy, mercapto, alkylthio éventuellement mono- ou poly- substitué par un atome d'halogène, benzylthio éventuellement mono- ou polysubstitué par un radical choisi parmi un atome d'halogène et un groupe mono- ou polyhaloalkyle en C1 à C4, benzhydryl thio éventuellement monoou polysubstitué par un atome d'halogène, acyle aliphatique (C1l4) thio éven- tuellement mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène, benzoylthio éventuellement mono- ou polysubstitué par un radical choisi parmi un atome d'halogène et un groupe mono- ou polyhaloalkyle en C1 à C4, benzhydryle carbonylthio éventuellement mono- ou polysubstitué par un atome 3. d'halogène; un groupe acyle aliphatique en C1 à C4 ou ben- zoyle; un groupe alcoxy-carbonyle; un groupe mercapto; acyle aliphatique (C1_4) thio ou benzoylthio; et leurs sels d'ad- dition avec des acides ou des bases pharmaceutiquement ac- ceptables. Parmi les composés de formule I définis ci-dessus, une classe préférée de composés comprend les dérivés dans lesquels: A est un groupe carbonyle, méthylène ou amino; B est un groupe amino éventuellement substitué par un groupe al- kyle en C1 à C4; carbonyle ou thio; R1 est un atome d'hydro- gène; un groupe phényle éventuellement mono- ou polysubs- titué par un atome d'halogène; n est O ou 1; R2 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C1 à C6 linéaire ou ramifié; un groupe benzyle; un groupe benzyloxyalkyle; R3 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle linéaire ou ramifié en C1 à C8; Y est un groupe -S-; -NH- ou -CH2-; et X est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C1 ou C2 substitué par un groupe alcoxycarbonyle, carboxy, mer- capto, acyle aliphatique (C1i4) thio, benzoylthio; un groupe acyle aliphatique en C1 à C4 ou benzoyle; un groupe alcoxy (C1i4) carbonyle; un groupe mercapto; acyle alipha- tique (Ci_4) thio ou benzoyl thio, A titre d'atome d'halogène on préfère particulière- ment le fluor. Comme groupe acyle aliphatique on peut men- tionner les groupes acétyle, propionyle et butyryle, le groupe acétyle étant préféré. On préfère parmi les composés de formule I ceux qui décrivent les structures amino-acides suivantes: leucine, phénylalanine, glycine et sérine. L'invention envisage, à titre de composés spécifiques les dérivés suivants (dans les formules données, on désigne par Et un radical éthyle et par un groupe phényle): 4. 1) EtO 2C-CH2-L-Phe-L-Leu-OCH3 2 23 2) H02C-CH2-L-rhe-L-Leu OH 3) H 02C-CH2-L-Phe-(CH3)-L-Leu OH 4) HO 2C-CH2L-Phe-D Leu OH ) H02C-CH2-D-Phe-L-Leu OH 6) H02C-CH2-D-Phe-D-Leu OH 7) EtO2C-CH2-CH2-L-Phe-L-Leu OCH3 8) H02C-CH2-CH2-L-Phe-L-Leu OH 9) EtO2CCH2-L-Phe-L. Ala-OCH3 ) H02C-CH2-L-Phe-L. Ala-OH 11) HS-CH2-CH2-L-Phe Otbu 12) -COS-CH 2-CH2-L. Phe Otbu 13))-COS-CH2-CH2-L. Phe OH 14) 4-COSCH2-CH2-L-Phe-L-Leu OCH3 ) HS-CH2-CH2-L-Phe-L-Leu OH 16) HS-CH2-CH2-L-PheL-Ala OH 17) CH3-COS-CH -CH - CO-L-Leu OCH3 3 2. 18)- HS-CH-cH - CO-L-Leu OH CH2 4 19) CH.-COS-CH 2-CH - CO-Gly OCH3 CH2-A ) HSCH2-CH - CO-Gly OH 21) CH -COS-CH 2-CH -CO - L.Ala OC'H3 CH2-t 22) HSC -CH -CO-L-Ala OH CH2-f (R,S et S,S) (R,S et S,S) ( R et S) (R et S') (R,S et S,S) (R,S et S,S) 5. 23) {-COS-CH2-CH -CO-L-Ser OCH3 CH2-4 (0CH2-4) 24) HS-CH2-CH -CO-L-Ser OH CH2-4 (0CH2-4) ) CH3-COS-CH2-CH -CO-L-Leu OCH3 - CH2--F 26) HS-CH2-CH -CO-L-Leu OH CH2-0-F CHA-+ 27) - H-COS-CH -CO-L-Leu OH( S,S) CH2-4 28) HS-CH -CO-L-Leu-OH (S,S) 3CHA-- 29) CH 3-COS-CH -CO-L-Leu OCH3 gSIs) ) HSCH- C-L,-LUeu OCH3 (SI S) 31) CH3-COS-CH -CO-L-Leu OH (SS) CH2- (R,S et S,S) (R,S et S,S) (R,S et S,S) (RS et S,S) 32) HS-CH - COL. Ala OH (S,S) CH2- 33) CH3-COS-CH2S-CH -CO-LLeu-OH (S,S) 2 H2 34) 4-COS-CH2-CH2-S-CH -CO-L-Leu-OH (s,s)- CH2_4 ) HS-CH2-CH2-S-IH -CO-L-Leu-O0 (;sS) CH2- 36) HS-CH2-CH2-S-CH -CO-LAla OH (S,S) 6. CH2-$ CHz 37) tbDc-NH-CH -NH-CO-CH -C02-Et (SR + SS) - 38) tboc-NH-CH -N1H-CO-CH -CO02H (SR + SS) CH2- CH3 39) H2N-CH -NH-CO-CH -CO2H (RR + RS) CH2-4 CH3 ) HO2C-CH2-NH-CH -NH-CO-CH -C02H (RR + RS) CH2 ACH3 f t3 41) HS-CH2-CH2-NH-CH -INHI-CO-CH -C02H (RR + RS) ICH2- 42) tbDc-NH-CH -CH2-S-CH2-COOH (S) CH2 4 43) TFA de H2N-CH -CH2 - SCH2-COOH (S) CH 2i' 44) HO2C-CH2-NH-CH -CH2-S-CH2-COOH (S) CH2-4 ) HS-CH 2-CH2-NH-CH -CH2-S-CH2-C02H (S) CHA 46) tboc-NH-CH -CH2-L-Leu-OCH3 (S,S) CH2- 47) HO2C-CH2-NH-CH -CH2-L Leu OH (S,S) f2- CH 8 48) HS--CH2-CH -CH2-L-Leu OH (S,S) Les composés de formule I ont un ou deux atomes de carbone asymétriques. Ils existent donc sous forme de mé- lange racémique ou sous des formes diastéréoisomères. Tous ces composés entrent dans le cadre de la présente inven- tion. Les synthèses décrites ci-après peuvent utiliser le 7. racémique ou l'un des énantiomères comme substance de départ. Quand on utilise dans le mode opératoire de synthèse la substance de départ racémique, on peut séparer les stéréo- isomères obtenus dans le produit par des procédés classiques de chromatographie ou de cristallisation fractionnée. En général, l'isomère L par rapport à l'atome de carbone de l'amino-acide constitue la forme isomère préférée. Les composés de formule I forment des sels qui font également partie de cette invention. Les sels- comprennent les sels d'addition d'acide que l'on forme par réaction avec divers acides minéraux et organiques fournissant des sels d'addition d'acide, comprenant, par exemple, les halohydrates (en particulier le chlorhydrate et le bromhydrate), le sul- fate, le nitrate, le borate, le phosphate, l'oxalate, le tartrate, le maléate, le citrate, l'acétate, l'ascorbate, le succinate, le benzènesulfonate, le méthanesulfonate, le cyclohexane sulfonate et le toluènesulfonate. On forme les sels d'addition de base par réaction avec des bases telles que NaOH ou par réaction d'échange d'ions. On forme les sels d'une manière classique en faisant réagir la forme libre du produit avec un ou plusieurs équi- valents de la base ou de l'acide approprié fournissant l'a- nion ou le cation désiré dans un solvant ou un milieu dans lequel le sel est insoluble ou dans l'eau et en éliminant l'eau par lyophilisation. En neutralisant le sel par un acide insoluble comme une résine échangeuse de cations sous forme hydrogène Kpar exemple la résine polystyrène-acide sulfonique-Dowex 50 (Mikes, Laboratory Handbook of Chroma- tographic Methods (Van Nostrand, 1961) page 259, en éluant avec un tampon volatil (par exemple pyridine/acide acétique) et en extrayant avec un solvant organique, on peut obtenir la formule libre et si on le désire on peut former un autre sel. Les composés de la présente invention sont préparés par les divers procédés définis ci-après. Les composés de formule I peuvent être préparés par 8. une réaction de condensation peptidique classique entre deux restes acides aminés convenablement protégés. Par exemple, le ou les groupes fonctionnels (c'est- à-dire les groupes amino, carboxy, hydroxy) qui ne sont pas impliqués dans la réaction de formation de la liaison peptide (c'est-à-dire -CONH) lors de la réaction de con- densation peuvent être protégés par un ou des groupes pro- tecteurs avant la réaction de condensation. Comme groupes protecteurs intermédiaires des grou- pes amino, on emploie des groupes usuels tels que t.buto- xycarbonyle (Boc), benzyloxycarbonyle (Z), isobornyloxy- carbonyle (IBOC), etc. Les groupes carboxyliques peuvent également être protégés, si nécessaire, par estérification (par exemple esters méthyliques, éthyliques, benzyliques, etc.). On réalise la réaction de condensation en utilisant de préférence le couplage des azotures sans racémisation ou le procédé au dicyclohexyl carbodiimide/1-hydroxy-benzo- triazole dit ci-après DCC/HOBt ou DCC/3-hydroxy-4-oxo-3,4- dihydro-l,2,3-benzotriazine (OOBt). On peut utiliser en variante les esters activés des fragments. La réaction de condensation peut être effectuée en présence d'un solvant. Le solvant peut être choisi parmi ceux qui sont connus pour être utilisables dans les réac- tions de condensation de peptides. Ainsi, on peut mention- ner à titre d'exemples les sdovants anhydres ou aqueux ci- après: diméthylformamide, diméthylsulfoxyde, pyridine, chloroforme, dioxane, dichlorométhane, tétrahydrofurane, ainsi que des mélanges appropriés de tels solvants. La température réactionnelle est choisie dans la gamme connue pour les réactions conduisant à la formation des liaisons peptides, par exemple normalement dans la gamme d'environ -20 C à environ 30 C, De plus, les matières pré- curseurs (peptides protégés) des composés recherchés selon la présente invention peuvent également être facilement préparés par des procédés de synthèse en phase solide. Après la fin de la réaction de condensation recherchée, si le produit porte des groupes protecteurs, ils peuvent être éliminés par des procédés habituels. Parmi de tels procédés habituels, on peut citer: la réduction catalytique en présence d'un catalyseur tel que le noir de palladium, le carbone sur palladium, le platine, etc., la solvolyse au moyen d'acide fluorhydrique, d'acide trifluo- roacétique, etc. et la réduction avec le sodium métallique dans l'ammoniac liquide. On utilise notamment l'acide trifluoroacétique (TFA) pour éliminer les groupes Boc (amino protecteurs) et une saponification pour éliminer les groupes esters protecteurs des groupes carboxyliques. On peut également préparer les composés de formule I par condensation entre une fraction d'un dérivé halogéné et la fraction correspondante d'un dérivé amino ou mercapto. Selon un premier mode de réalisation, les composés de formule I dans lesquels A = CO, B = NH, Y = NH, X est un groupe alkylène en C1 ou C2 substitué par un groupe al- coxycarbonyle ou carboxy et R1, R2, R3 et n sont tels que définis cidessus, sont préparés par réaction d'un dérivé de formule ROOC - (CH2)m Br (II) dans laquelle R est H ou un groupe alkyle et m est 1 ou 2, avec un dérivé de formule 1! H2N - CH A - A B - CH - C - OR3 (III) 2 l (CH2)n R2 R1 dans laquelle R1, R2 et R sont-tels que définis cidessus et A = CO; B = NH. Les composés de formule III sont obtenus par les voies classiques de la synthèse peptidique, c'est-à-dire par couplage d'un dérivé protégé Boc-NHCH-COOH avec l'ester (CiH2 (R2) R1 10. H2N-1H-CO2R3, par utilisation des différentes méthodes R2 connues précédemment indiquées telles que HOBT/DCC, anhy- dride mixte, ester activé. Le groupe protecteur Boc est ensuite éliminé par exemple à l'aide d'acide trifluoro- acétique (TFA). Selon un autre mode de réalisation, les composés de formule I dans lesquels A = CH2, B = NH, Y = S, X est un atome d'hydrogène ou un groupe benzoyle, R1 est H, n = 0, R2 et R3 sont tels que définis ci-dessus, sont préparés a) par réaction de thiiranne de formule C 2H4S sur un ester d'amino-acide de formule Il H2N - H-C-OR3 (III) et R2 b) éventuellement réaction du produit obtenu à l'é- tape (a) avec un composé de formule R - CO - Br dans laquelle R est un groupe alkyle inférieur ou phényle et élimination des groupes protecteurs. Selon un autre mode de réalisation de la présente invention, les composés de formule I dans lesquels A = CO, B = NH, Y = NH ou CH2, X est un groupe alkyle en C1 ou C2 substitué par un groupe mercapto, acyle aliphatique thio ou benzoylthio, R1, R2, R3 et n sont tels que définis ci- dessus, sont préparés par une réaction de condensation pep- tidique entre un composé de formule X - Y - CH - C - OH (IV) et (CH) R1 Il un ester d'amino-acide de formule H2N - CH - C - OR3 ! R2 Lorsque le composé de formule IV comporte un groupe 11. y qui est un groupe -NH-, on le prépare comme au mode de réalisation précédent. Lorsque le composé de formule IV comporte un groupe Y qui est un groupe CH2-, il est obtenu par réaction d'un S-acide thiocarboxylique de formule R-COSH, dans laquelle R est un radical alkyle ou phényle, sur un dérivé d'acide acrylique de formule CH2 = C - COOH (préparé (CH2)n R1 selon C. Mannich et K. Ritsert, 1924, Ber 57, 1116), pour obtenir un composé de formule R - COS - CH - CH -COOH 2 i (CH2)n (IVa) R1 Selon un autre mode de réalisation de la présente invention, les composés de formule I dans lesquels A = CO, B = NH, Y = S, X est un atome d'hydrogène, un groupe acyle aliphatique en C1 à C4 ou benzoyle et Ri, R2, R3 et n sont tels que définis ci-dessus, sont préparés par réaction d'un S-acide thiocarboxylique de formule R-COSH, dans laquelle R est un radical alkyle ou phényle, sur un dérivé halogéné de formule o0 Il Hal - CH -A - B - CH COR3 (V) i I (CH2)n R2 R1 dans laquelle Hal est un atome d'halogène en particulier de brome. Les composés de formule (V) sont obtenus par une réaction de couplage analogue à la synthèse peptidique entre un bromo-acide de formule Br - CH - COOH () H2 n R1 2 '% P nb 747 12. et un ester d'amino-acide de formule H2 -, T CH -0R "2 23 R2 Selon une variante de ce mode de réalisation il est possible de faire tout d'abord réagir le bromo-acide avec le S-thioacide carboxylique, puis de coupler l'acide ob- tenu avec l'ester d'amino-acide. Selon encore un autre mode de réalisation de la présente invention, les composés de formule I dans lesquels A = CO, B = IEI, Y = S, X est un groupe alkyle en C ou C2 substitué par un groupe mercapto, acyle aliphatique thio ou benzoylthio et R1, R2, R3 et n sont tels que définis ci-dessus, sont préparés par réaction d'un composé halogéné de formule R-CO-S-(CH2)m-Hal, dans laquelle Hal est un atome d'halogène tel que le brome, R est un groupe alkyle ou phényle et m est 1 ou 2, avec un dérivé de formule HS - CH -CO - NH - CH - - OR 1-5 I i (CR (H2)n R2 R1 ce dernier composé étant obtenu à partir d'un composé de formule I dont la synthèse a été précédemment décrite, par libération du groupe mercapto terminal. L'obtention des dérivés de formule I à terminaison mercapto est obtenue par saponification à l'aide de soude des dérivés à terminaison acyle (aliphatique ou aromatique) thio. Cette saponification conduit à une prépondérance des composés de duplication à liaison disulfure, cette réaction d'oxydation s'effectuant ma4oritairement même en employant des solvants dégazés et en opérant sous atmosphère pro- tectrice d'azote. Les composés de formule (I) à terminaison mercapto sont donc obtenus purs en effectuant une réduction in situ à l'hydrogène naissant au terme de la réaction de saponification. Selon un autre mode de réalisation, les composés de formule I dans lesquels A = NH, B = CO, Y = NH, X est un 13. atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué par un groupe carboxy ou mercapto,ou un groupe alcoxycarbonyle et R1, R2 et R3 sont tels que définis ci-dessus, sont préparés par une réaction de condensation peptidique entre une diamine N-protégée de formule Boc-NH CH - NH2 i 2 (CH2)n (VI) et R1 un monoester malonique de formule H02C - CH - C02R R2 La diamine de formule (VI) est obtenue par une réac- tion de Curtius selon Mo Chorev et alo /J. Amer. Chemo Soco, 99, 8075 (19777 sur un amino-acide N-protégé selon le schéma réactionnel suivant Boo-NH-?H-CCO2Me N2H4 Boc-NH-CH-CO-NHNH2 (CH2)n (CH2)n R1 R1 (C2)n (CH2)n (CH kY R1 R1 OCH20H Boc-NH-CH-NH-Z H Boc-NH-CH-NH2 (CH) (CH2)n ( C2)n ( i2)n R1 R1 Selon un autre mode de réalisation, les composés de formule I dans lesquels A = CH2, B = S, Y = NH, X est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué par un groupe carboxy ou mercapto,ou un groupe alcoxycarbonyle et R1, R2, et R3 sont tels que définis ci-dessus, sont préparés par une réaction de condensation entre un dérivé tosylé N-pro- tégé d'aminfio-acide de formule 14. Boc - HN - ?H - CH2 OTs (CH) (H2)n (VII) et R1 un ester de l'acide thioglycolique de formule HS - CH - C0 2R3 I (VIII) R2 d'après la méthode de H. Gilman et al., J. Amer. Chem. Soc. 47, 1449 (1925). Les composés de formule VII sont obtenus par réduc- tion au borohydrure de sodium (selon la méthode de H. Seki et al., Chem. Pharm. Bull. 13, 995 - VII - 1965) d'un es- ter N-protégé d'amino-acide de formule Boc - NH - CH - C02R ! 2 (CH2)n 2)n R1 dans lequel R est un groupe alkyle, puis transformation de l'alcool obtenu en dérivé tosylé de formule VII par action de l'acide p-toluènesulfonique. Les composés de formule VIII sont obtenus par la méthode de E. Fischer et al. Annalen. 357, i (1907) ou décrite dans la DOS 2 349 707 selon le schéma réactionnel suivant O NaNO2 C-SH H2N - CH - C0% R) Br - CH - CR3 R2 H Br 2 II - c-s-CH-CCR3 KC C - S - tCH-CO R K C3 HS - CH - C02R3 Me OH I 23 R2 R2 Selon un dernier mode de réalisation, les composés de formule I dans lesquels A = -CH2-, B = -NH-, Y = NH, X est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué par un groupe carboxy ou mercapto,ou un groupe alcoxycarbonyle 15. et R1, R2 et R3 sont tels que définis ci-dessus, sont préparés par une réaction de condensation entre un dérivé tosylé N-protégé d'amino-acide de formule VII (décrit ci- dessus) et un ester d'amino-acide de formule H2N - CH - C02R3 2, R2 d'après la technique de V.C. Sekera et al., J. Amer. Chem. Soc. 55, 345 (1933). Les exemples ci-après sont donnés à titre d'illus- tration des procédés de préparation des composés selon la présente invention. EXEMPLE 1 Ester méthylique de la N(éthoxycarbonyl-méthyl)-L. phényl- alanine-L. leucine On ajoute lentement à froid et sous azote 3 ml de triéthylamine à une suspension de 10 g de trifluoroacétate de dipeptideester: L. Phe-L. Leu OCH3 dans 50 ml de benzène anhydre. A la fin de l'addition, la suspension devient limpide. On ajoute alors 3,34 g de bromoacétate d'éthyle et la solution est portée au reflux pendant 12 heures. Après refroidissement, on ajoute goutte à goutte, sur un bain de glace, de la soude 0,25 N, jusqu'à pH = 6. La phase aqueuse est rapidement décantée, puis ex- traite trois fois (25 ml) à l'éther. Les phases organiques (éther et benzène) sont réunies, lavées deux fois avec 50 ml d'eau, puis séchées et évaporées à sec, On obtient 2,6 g de N-(éthoxycarbonyl-méthyl)-L. Phe.-L. Leu OCH3 sous forme d'huile jaune pale. Rf = 0,77 dans CHC13/MeOH/H20/ 9/1/Sat. EXEMPLE 2 N-(carboxy-méthyl) L. phénylalanine-L. leucine 2,5 g de l'ester méthylique du N-(éthoxycarbonyl- méthyl)-L. Phe. L. Leu sont mis en solution dans un mé- lange de 20 ml de méthanol et 10 ml d'eau. On ajoute à 0 C, 13 ml de NaOH 1N et on agite 1 heure à 0 C, puis 2 x6747 16. 2 heures à 25 C. On évapore le méthanol et additionne HC1 iN, goutte à goutte, à 0 C, jusqu'à pH = 2. Le précipité est filtré et recristallisé dans le mélange éther/MeOH: /50; on obtient 1,35 g de N(carboxyméthyl)-L. Phe-L. Leu. F = 196-200 C. Rf: (BuOH/AcOH/H20: 4/1/1) = 0,6. EXEMPLE 3 N-(carboxyméthyl) L. phénylalanine-N (CH-) L. leucine En remplaçant l'ester méthylique de la L. leucine par l'ester méthylique de la N(CH3) L. leucine dans le procédé décrit à l'exemple 1, puis en traitant le produit obtenu selon l'exemple 2, on obtient successivement, l'es- ter méthylique du N(6thoxycarbonyl-méthyl)-L. Phe-N (CH3) L. Leu, puis le N (carboxy - m thyl)-L. Phe-N (CH3) L. Leu. Lors de cette synthèse le composé de départ le TFA de L. Phe-N (CH3) L. Leu OCH3 est obtenu par condensation en présence de DCC et HOBt de la Boc Phe avec l'ester méthylique de la N(CH3) L. Leu, suivie de déprotection par le TFA. EXEMPLE 4 N-(carboxy-méthyl)-L. phénylalanine-D. leucine Obtenue comme dans l'exemple 1 en substituant la D. leucine à la forme L dans le composé de départ. * On obtient successivement l'ester méthylique du N- (éthoxycarbonyl-méthyl)-L-Phe-D. leu, puis le (carboxy- méthyl)-L-Phe-D. Leu. F = 240 C. EXEMPLE 5 N-(carboxy-méthyl)-D. phénylalanine-L-leucine Obtenue comme dans l'exemple 1 en substituant la D. phénylalanine à la forme L dans le composé de départ. On obtient successivement l'ester méthylique de la N-(éthoxy- carbonyl méthyl)-D. Phe-L. Leu, puis le N-(carboxy-méthyl)- D-Phe-L-Leu. F = 234 C. EXEMPLE 6 N-(carboxy-méthyl)-D. phénylalanine-D. leucine 17. Obtenue comme dans l'exemple 1 en remplaçant la L. leucine et 1e L. phénylalanine par leurs isomères D. On obtient successivement l'ester méthylique de la N-(éthoxy- carbonyl-méthyl)-D-Phe-D. Leu, puis la N-ZTcarboxy) méthyl7 D. Phe-D-Leu. F = 227 C. EXEMPLE 7 Ester méthylique du N-(éthoxycarbonyl-2 éthyl) L. Phe-L. Leu 8,80 g de Phe-Leu 0OCH3 (obtenu sous forme de base à partir du TFA de Phe-Leu OCH3 par action de la triéthyl- amine) sont mis en solution dans 200 ml de benzène anhydre sous atmosphère d'azote. On ajoute goutte à goutte à 0 C, ,8 ml de bromopropionate d'éthyle et 2,07 g de K2C03o On chauffe à 80 C durant 4 heures. Après refroidissement, la phase benzénique est rapidement séparée. On ajoute alors ml d'H20 et goutte à goutte HC1 1N jusqu'à pH = 2o La phase benzénique est séparée, puis la phase aqueuse acide est extraite trois fois avec 50 ml d'acétate d'éthyle, Les phases organiques réunies sont séchées, puis évaporées à sec. On obtient 2,94 g d'huile jaune pailles qui est pu- rifiée par chromatographie sur une colonne de gel de silice avec un mélange Et20/MleOH, 9/1 comme éluant. On obtient 1,10 g de l'ester méthylique de N(éthoxycarbonyl 2 éthyl) L-Phe-L. Leu, huile incolore. Rf = 0o81, CHC13/MleOH/H20, O/l/Sat. EXEMPLE 8 N-(carboxy-2 éthyl) L. Phe-L. Leu On introduit 720 mg de l'ester méthylique du N- (éthoxycarbonyl-2 éthyl) L-Phe-L-Leu dans 10 ml de MeOH. On ajoute à 0 C, 7,2 ml de NaOH 1N. On agite 12 heures à température ordinaire. On acidifie par HC1 jusqu'à pH 3 et on extrait la phase aqueuse avec trois fois 20 ml d'a- cétate d'éthyle. Les phases organiques séchées et évaporées donnent 510 mg de N(carboxy-2 éthyl) L-Phe-L. Leu sous forme de solide blanc. F = 161 C. Rf = 0,51. BuOH/ AcOH/H20. 18. EXEMPLE 9 Ester méthylique de N-(éthoxycarbonyl-méthyl) L. Phe-L. Ala. Ce composé est obtenu comme à l'exemple 1 en rempla- çant le TFA de L-Phe-L-Leu OCH3 par le TFA de L. Phe-L. Ala OCH3 (5 g). On obtient 1,10 g de l'ester méthylique du N-(éthoxycarbonyl-méthyl) L. Phe-L. Ala sous forme d'huile. Rf = 0,71 dans CHC13/MeOH/H20,8/1/Sat. EXEMPLE 10 N-(carboxy-méthyl) L. Phe-L. Ala La réaction est effectuée comme à l'exemple 2 en utilisant l'ester méthylique du N-(éthoxycarbonyl-méthyl) L. Phe-L. Ala (1 g). On obtient après saponification et acidification 88 mg de N-(carboxy-méthyl) L-Phe-L. Ala. Rf = 0,37 BuOH/MeOH/H20 4/1/1. EXEMPLE ll Ester t-butylique de la N-(mercapto-2 éthyl) L. Phe On ajoute en ampoule 0,9 ml de thiiranne C2H4S, franchement distillé, à 8,7 g de L. Phe OtBu huileux ob- tenu sous forme de base à partir de son chlorhydrate. Le tube est scellé puis chauffé 5 heures à 100 C. Après re- froidissement, le tube est ouvert et le liquide sirupeux est distillé. On obtient 3,62 g de l'ester t. butylique de la N (mercapto-2 éthyl) L. Phe. Eb0,5 = 130-134 C. EXEMPLE 12 Ester t-butylicue de la N(benzoyl t h'i o-2 éthyl)-L-Phe 3,62 g de l'ester t-butylique du N(mercapto-2 éthyl) L-Phe, sont mis en solution dans 15 ml de H20 additionné de 628 mg de K2C03. On ajoute lentement 1,51 ml de bromure de benzoyle dissous dans 15 ml d'éther. On agite 1 heure à température ambiante. Le solide formé est essoré, lavé à l'éther froid,puis à l'eau acide (pH 3-4). On obtient 1,6 g de l'ester t-butylique du N(benzoyl t h i o -2 éthyl)-L-Phe. F = 170-172 C. 19. EMEMPLE 13 N-(benzoyl t h i O0-2 éthyl)-L-Phe On mélange 850 mg de l'ester t-butylique de la N- (benzoyl t h i o -2 éthyl)-L-Phe avec 3,31 ml de TFA au bain de glace et on agite pendant 12 heures à température ordinaire. On filtre le précipité blanc et on le lave à l'éther jusqu'à pH 5. On obtient 620 mg de N-(benzcylt h.i o -2 éthyl)- L-Phe. F = 260 C EXEMPLE 14 Ester méthylique du N-(benzovlt hi o-2 éthyl)-L-Phe-L-Leu On ajoute 0,40 ml de triéthylamine à une solution de 620 mg de N-(benzoyl t h i o-2 éthyl)-L-Phe, tel que pré- paré à l'exemple 13, et de 254 mg de chlorhydrate de L-Leu OCH3 dans un mélange de 40 ml de CHC1 et 10 ml de THF. Après 5 minutes, on ajoute 214 mg de HOBT et 288 mg de DCC. Après agitation pendant 48 heures, on filtre le DCU et après traitement on obtient 250 mg de l'ester méthylique de la N-(benzoyl t h i 0-2 éthyl)-LPhe-L-Leuo Rf = 0,42 dans CHC13/Et20 8/2. EXEMPLE 15 N-(mercaoto-2 éthyl)-L-Phe-L-Leuo Méthode A 250 mg de l'ester méthylique du N-(benzoyl tc h i o 2 éthyl)-L-Phe-L-Leu sont dissous dans 15 ml de MeOHo On ajoute 1,1 ml de NaOH 1N, on laisse agiter une nuit à 25 C sous azote. On évapore le méthanol, on ajoute 10 ml H20 et on acidifie à pH 2-3. On obtient 65 mg de cristaux blancs de N-(mercapto- 2 éthyl)-L-Phe-L-Leu. Rf = 0,9 dans Bu0H/AcOH/H20,4/l/l Méthode B g de l'ester méthylique de la L-Phe-L-Leu, sous forme de base sont mis en solution dans 50 ml de benzène anhydre dans une ampoule en verre. On ajoute 5 ml de thi- iranne, C2H4S, frachement préparé et on scelle l'ampoule. 2-'0 747 20. On chauffe à l'étuve a 80 C pendant 2 heures. Après re- froidissement et ouverture de l'ampoule,on élimine par filtration de la solution un précipité gélatineux, puis on concentre le fitrat sous vide jusqu'à obtention d'une huile jaune qui fournit par chromatographie sur colonne d'alumine 2,2 g de l'ester méthylique du N-(mercapto-2 éthyl)-L-Phe-L-Leu. Ce dernier est saponifié sous atmos- phère d'azote dans une solution de MeOH et de NaOH iN. Après acidification et extraction à l'acétate d'éthyle, on obtient 1,19 g de N-(mercapto-2 éthyl)-L-Phe-L-Leu identique au composé obtenu par la méthode A. EXEMPLE 16 N-(mercapto-2 éthyl)-L-Phe-L-Ala Obtenu comme à l'exemple 15 (méthode B) en rempla- gant L-Leu par L-Ala dans l'ester méthylique de départ, on obtient en partant de 3 g d'ester méthylique 720 mg de N-(mercapto-2 êthyl)-L-Phe-L-Ala. F = 61 C Rf = 0,80 BuOH/MeOH/H20, 4/1/1 EXEMPLE 17 Ester méthylique de la N/(RS)-acétvlthio-3, benzyl-2 propionyl 7-Lleucine On ajoute successivement à une solution refroidie à 0 C de 1,4 g d'acide acétyl thio-3 benzyl-2 propionique obtenu par addition de l'acide thioacétique sur l'acide benzylacrylique obtenu selon C. Mannich et K. Ritsert, 1924, Ber 57, 1116 dans 20 ml de TI-F anhydre, une solution de 1, 09 g de chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-leucine et de 0,84 ml de triéthylamine dans 20 ml de chloroforme sec, puis une solution de 920 mg d'HOBT dans 20 ml de THF et enfin une solution de 1,22 g de DCC dans 20 ml de CHC13. On agite 4 heures à 0 C, puis 5 heures à 20 C. Après filtration du DCU formé, on évapore à sec, re- prend le résidu par 40 ml d'acétate d'éthyle. On lave par deux fois avec 20 ml d'eau, une fois avec 20 ml d'une solu- tion saturée de NaCl, deux fois 20 ml d'une solution à lOg d'acide citrique, trois fois avec 20 ml d'une solution sa- turée de NaHC03, deux fois avec 20 ml d'eau, une fois avec Z480747 21. ml d'une solution saturée de NaCl et on sèche sur Na2S04. On évapore à sec. On obtient 1,9 g d'une huile jaune foncé. Rendement = 87 %; Rf: 0, 86 dans CHC13/ MeOH/H20 = 9/1/sat. HPLC - Vr = 28,3 ml dans tampon sulfate 10-2M(pH = 4,3)/ CH3CN = 55/45. EXEMPLE 18 N/R,S)mercapto-3 benzyl-2 propionylL-leucine 1,5 g du composé 17 est mis en solution dans 20 ml de méthanol dégazé. On ajoute à 0 C et sous courant d'a- zote 8,5 ml d'une solution de soude MN. On agite i heure à 0 C. On évapore le méthanol sous vide et reprend par ml d'eau dégazée et on extrait au chloroforme. La phase aqueuse est ensuite acidifiée à pH = 1 par une solution d'HCl 2N. Il se forme un précipité blanc qui se dissout après addition de 20 ml de méthanol. On ajoute 500 mg de Zn en poudre et on agite I heure à 20 Co On filtre le zinc et on le lave avec deux fois 5 ml de MeOH dégazé. On réunit les phases méthanol-eau et on évapore le méthanol sous vide. La phase aqueuse res- tante est extraite au chloroforme. Après évaporation à sec, on obtient 1 g de N(R,S mercapto-3 benzyl-2propionyl)L-leucine sous forme d'un produit solide blanc. F = 50 C; Rdt: 79 %. HPLC Vr = 10,56 ml dans tampon acétate 10-2M (pH 4,3)/ CH3CN = 60/40. Analyse élémentaire pour C16H23N03S: % calculé: C: 62,1; H: 7,49; N: 4,53; S: 10,36 X trouvé: C: 61,98; H: 7,53; N: 4,46; S: 10,51 RMN(DMSOd6). On observe des signaux séparés pour les deux diastéréoisomères. HS = 2,03 et 2,15 ppm (disparaissent par addition de D20). (HS)CH2 = 2 multiples centrés sur 2,37 et 2,56 ppm. CH-CH2 (,) = massif complexe centré sur 2,61 ppmo H,(Leu): 4,06 et 4,17 ppm. 22. CH 2PLeu = 1,30 et 1,44 ppm. CHyLeu = 1,13 et 1,58 ppm. CH3 = 0,65 et 0,80 ppm. NH = 8,07 et 8,18 ppm. H aromatique = 7,13 ppm. EXEMPLE 19 Ester méthylique de la N/JRS) acétyl thio-3 benzyl-2 pro- pionylj glycine. A une solution de 2,34 g d'acide acétylthio-3 benzyl- 2 propionique dans 20 ml de THF refroidie à 0 C, sont ajoutées successivement une solution de 1,23 g de chlorhy- drate de l'ester méthylique de la glycine et de 1,37 ml de triéthylamine dans 25 ml de chloroforme, une solution de 1,50 g d'HOBT dans 15 ml de THF et une solution de 2,22 g de DCC dans 10 ml de CHC13. On agite 1 heure à 0OC, puis 3. heures à 20 C. Après filtration du DCU formé on traite par le processus décrit pour le composé 17. On obtient 2,6 g de l'ester méthylique de la N/TR,S) acétyl thio-3 benzyl2 propionyi7 glycine sous forme d'une huile jaune pCle. Rdt = 87 X; Rf = 0,76 dans CHC13/leOH/H20 = 9/1/sat. HPLC = Vr = 9,12 ml dans tampon acétate 10 2M(pH: 4,3)/ CH3CN - 55/45. EXEMPLE 20 N-Z1R,S) mercapto-3 benzyl-2 propionyg glycine 960 mg du composé de l'exemple 19 sont mis en solu- tion dans 20 ml de MeOH dégazé. On ajoute à 0 C et sous atmosphère d'azote 6,6 ml d'une solution de soude 1N, et on agite 1 heure à 0 C. On évapore sous vide le méthanol, reprend le résidu par 15 ml d'eau. On extrait deux fois par 5 ml de CHC13. La phase aqueuse est acidifiée par une solution d'HCl 2N jusqu'à pH: 1. On ajoute 20 ml de MeOH dégazé, puis 300 mg de Zn en poudre et on agite i heure à 20 C. On filtre le zinc et on le lave avec deux fois 5 ml de Me OH. Les phases méthanol-eau sont réunies et le 24P 747 23. méthanol est évaporé sous vide. La phase aqueuse est alors extraite par trois fois 10 ml de CHC13. On évapore à sec et on obtient 500 mg de (R,S-mercapto-3 benzyl-2 propio- nyl) glycine sous forme d'un solide blanc. F: 138 C; Rdt: 64. HPLC, Vr = 6,48 ml dans tampon acétate 10-2M (pH = 4,3) / CH3CN = 70/30. Analyse pour C12H15NO3S % calculé: C: 56,9; H = 5,97; N: 5, 53; S: 12,66 o trouvé: C: 56,6; H: 6,01; N = 5,62; S = 12,48 RMN(DMSOd6) une seule série de signaux pour les deux énan- tiomères. HS = 2,20 ppm (disparaît par addition de D20)o (HS)CH2 = 2,34 et 2,57 ppm. CH-CH2 multiplet centré sur 2,64 ppm. CH2(Gly) = 3,66 ppm. H aromatiques = 7,17 ppm. NH = 8,28 ppm. EXEMPLE 21 Ester méthylique de la NLTRS) acétyl thio-3 benzyl-2 propionyl7-L alanine A une solution refroidie à 0 C de 1,600 g d'acide acétyl thio-3 benzyl-2 propionique dans 20 ml de THF anhydre on ajoute successivement une solution de 940 mg de chlo- rhydrate de l'ester méthylique de la L-alanine et de 1 ml de triéthylamine dans 20 ml de CHC13, une solution de 1,03 g de HOBT dans 10 ml de TIF et 1,4 g de DCC dans 10 ml de CHCl. On agite 1 heure à 0 C, puis 5 heures à 20 Co On traite comme dans les exemples précédents et on obtient 1,75 g d'ester méthylique de la N-[TR,S) acétyl thio-3 benzyl-2 propionyl-L alanine sous forme d'une huile jaune. Rdt: 80 %, Rf = 0,77 dans CHCl3/MeOH/eau: 9/1/sat, HPLC, Vr = 10,32 dans tampon acétate lO-2M(pH = 4,3)/ CH3CN = 55/45. Z4 - 747 24. SYE,?Tv 22 N-/TRS) mercapto-3 benzyl-2 propionyl7L alanine 1,54 g du composé de l'exemple 21 sont mis en solu- tion dans 20 ml de méthanol dégazé, on ajoute à OC et sous azote 10 ml d'une solution de soude iN. On agite 2 heures à 0 C. On évapore le méthanol sous vide et on reprend par ml d'eau. On extrait deux fois la phase aqueuse alca- line par 5 ml de chloroforme. La phase aqueuse est acidi- fiée par HC1 2N jusqu'à pH - 1. On ajoute alors 20 ml de MeOH dégazé et 300 mg de poudre de Zn. On agite 1 heure à 20 C. On filtre la poudre de zinc et on la lave deux fois avec du méthanol. Les phases aqueuses et méthanolique sont réunies. Le méthanol est évaporé sous vide et la phase aqueuse restante est extraite au chloroforme. On évapore à sec. On obtient 1,07 g de N-LTR,S) mercapto-3 benzyl-2 propionylL alanine sous forme d'un solide blanc. F 50 C; Rdt: 84 5. HPLC, Vr = 5,4 ml dans tampon acétate 10 2M (pH = 4,3)/ CH3CN = 65/35. Analyse pour C13H17NO3S: calculé: C: 58,40; H: 6,41; N: 5,24; S: 11,99 0 trouvé: C: 58,23; H: 6,60; N: 5,31; S: 11,64 RIMN(DMSOd6) on observe 1 jeu de signaux pour chaque diasté- réoisomère. HS = 2,06 et 2,12 ppm (disparaissent par addition de D2C). (HS)CH2 multiplets centrés sur 2,34 et 2,58 ppm. (HS)CH2 (1) massif complexe centré sur 2,75 ppm. DH = 8,17 et 8,27 ppm. H2Ala: 4,08 et 4,15 ppm. CH.Ala: 1,05 et 1,20 ppm. H aromatiques: 7,17 ppm. E-MPTIE 23 Ester méthylique de la O-benzyl -/s) benzoylthio-3 benzyl-2 propionyl7Lsérine A une solution refroidie à O C de 500 mg d'acide 25. benzoylthio-3 benzyl-2 propionique dans 10 ml de THF anhydre, sont ajoutées successivement une solution de 408 mg de chlorhydrate de l'ester méthylique de la 0- benzyl-L-sérine et de 0,24 ml de triéthylamine dans 6 ml de CHC13, une solution de 250 mg de HOBT dans 5 ml de THF anhydre et enfin une solution de 376 mg de DCC dans ml de CHC13. On agite 1 heure à 0 C et 5 heures à 20 C. Après filtration du DCU formé, on traite comme dans les exemples précédents et on obtient 720 mg d'ester méthyli- que de la 0-benzyl N-/TRS)benzoylthio-3 benzyl-2 propio- ny_7L-sérine sous forme d'un solide blanc. Rdt: 88 $; F = 62-64 C; Rf = 0,84 dans CHC13/MveOH/eau = 9/1/sat. HPLC, Vr = 9,84 ml dans tampon acétate 10-2M(pH: 4,3)/ CH3CN = 30/70. EXEMPLE 24 O-benzyl, N-/TR,S)mercapto-3 benzyl=2 propionyl7L-sérine 660 mg du composé de l'exemple 23 sont mis en so- lution dans 10 ml de MeOH dégazé. On ajoute à 0 C et sous azote, 3 ml d'une solution de soude 1No On agite 1 heure à O C. On évappre le méthanol sous vide et reprend par ml d'eau. On extrait deux fois au chloroforme. La phase aqueuse est acidifiée par HC1 2 N jusqu'à pH: 1. On ajoute 10 ml de méthanol et 150 mg de poudre de Zn. On agite 1 heure à 20 C. On filtre le zinc, on le lave, avec deux fois 5 ml de MeOH. Les phases aqueuse et mé- thanolique sont réunies et le méthanol est évaporé sous vide. La phase aqueuse est extraite au chloroforme. Après évaporation, on obtient 350 mg de la O-benzyl, N-/TRS) mercapto-3 benzyl-2 propionyl7 L-sérine sous forme d'une huile jaune très pâle. Rdt: 70 $. HPLC, Vr: 6,96 ml dans tampon acétate 10-2M(pH: 4,3)/ CH3CN = 55/45. RMN (DMSO-d6): HS = 2,02 et 2,12 ppm (disparaissent par addition D20) (HS)CH2 = 2,33 et 2,56 ppm. 26. CHCH2 (>) = massifs centrés sur 2,70 ppm. H CH2p Ser = 3,46 et 3,62 ppm. OCH2 = 4,32 et 4,42 ppm. H aromatiques = 7,17 ppm. NH = 8,25 et 8,33 ppm. Analyse pour C20H23N04S % calculé: C: 64,32; H: 6,21; N: 3,75; S: 8,58 trouvé: C: 64,30; H: 6,31; N: 3,87; S: 8,66 EXEMPLE 25 Ester méthylique de la NZTR,S) acétyl thio-3 p.fluoro ben- zyl-2 propionyg7L-leucine On ajoute successivement à une solution refroidie à 0 C de 1,54 g d'acide acétyl thio-3 p.fluorobenzyl-2 propionique dans 20 ml de THF anhydre, une solution de 1,15 g de chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-leucine et de 0,85 ml de triéthylamine dans 20 ml de chloroforme sec, puis une solution de 930 mg d'HOBT dans 20 ml de THF et enfin une solution de 1,24 g de DCC dans 20 ml de CHC13. On agite 1 heure à 0 C, puis 5 heures à 20 C. Apres filtra- tion du DCU formé et traitement comme dans l'exemple 17, on obtient 1,95 g d'huile jaune foncée. Rdt 88 %, Rf: 0,87 CHC13/MeOH/H20 = O/l/sat. 3 -2 HPLC, Vr = 30 ml dans tampon acétate 10 M(pH = 4,3)/ CH3CN = 55/45. EXEMPLE 26 N-ZTR,S) mercapto-2 p.fluorobenzyl-3 propionyl7 L-leucine 1,8 g du composé 25 est mis en solution dans 20 ml de méthanol dégazé. On ajoute à 0 C et sous courant d'azote 9,8 ml d'une solution de soude 1N. On agite 1 heure à 0 C. On évapore le méthanol sous vide et on reprend par 20 ml d'eau dégazée et on extrait au chloroforme. La phase aqueuse est ensuite acidifiée à pH = 1 par une solution d'HCl 2N. Il se forme un précipité blanc qui se dissout après addition de 20 ml de méthanol. On ajoute 500 mg de Zn en poudre et on agite 1 heure à 20 C. On filtre Z480747 27. le zinc et on le lave avec deux fois 5 ml de MeOH dégazé. Les phases méthanoliques et aqueusessont réunies et le méthanol est évaporé sous vide. La phase aqueuse est alors extraite par trois fois 10 ml de CHCl3. On évapore à sec et on obtient 1,08 g du compo- sé indiqué dans le titre sous forme d'un solide blanc. Rdt: 68 %; F HPLC, Vr: 11 ml dans tampon acétate 10-2 (pH = 4,3)/ CHDCN - 60/40. RIN(DMSO-d6). HS = 2,04 et 2,12 ppm (disparaissent par addition de D20) (HS)CH2 = 2 multiplets centrés sur 2,40 et 2,58 ppmo CHCH2 () massif complexe centré sur 2,63 ppm. H "Leu = 4,06 et 4,17 ppm. CH2w Leu = 1,31 et 1,44 ppm. *CHyLeu = 1,13 et 1,58 ppm. CH3 = 0,65 et 0,81 ppm. NH = 8,08 et 8,19 ppm. H aromatiques = 2 massifs centrés sur 7,28 et 7,95 ppm. Analyse pour C16îH22 03 N F S X calculé: C: 58,70; H: 6,78; N = 4,28; S: 9,78 v trouvé: C : 58,55; H: 6,60; N 4,32; S: 9,98 EXEMPL 7 NZIS) benzoylthio-2 phénylo3 propionyl7-L-leucine On ajoute à une solution de 11,2 g d'acide R, bromo- 2 phényl-3 propionique dans 30 ml de THF,8,9 g de chlorhy- drate de l'ester méthylique de la L-leucine dissous dans un mélange de 100 ml de CHC13 et 6,86 ml de NEtyoA la so- lution obtenue on ajoute 7,5 g d'HOBT et 10,1 g de DCCo Après agitation 1 heure à 0 C, puis 12 heures à 25 C, on filtre le DCU formé et traite par le processus habituel. On obtient par évaporation de l'acétate d'éthyle, 12,5 g de cristaux blancs d'ester méthylique de la N/(R)bromo- 2 phényl-3 propiony!7-L-leucine. F = 121 C. On ajoute à 0 C,30 ml de NaOH iN à une solution de ,5 g du composé précédent dans 100 ml de MeOH. Après Z40747 28, agitation 1 heure à 0 C, puis 4 heures à 25 C, on acidi- fie par HCl. Le précipité est recueilli, puis cristallisé dans l'acétate d'éthyle. On obtient 9,07 g de N/R)bromo- 2 phényl-3 propionyl7-L-leucine. F = 158 C. 1,76 g d'acide thiobenzoique dissous dans 40 ml d'eau, en présence de 2, 17 g de K2CO3 sont ajoutés à un mélange de 7,i g de N/.)bromo-2 phényl-3 propionyl7-L- leucine dans 30 ml d'eau et 1,74 g de bicarbonate de Na. On agite 12 heures à 25 C. On acidifie par HC1 6N, ce qui fournit une huile jaune pâle qui est extraite par de l'a- cétate d'éthyle. Après lavage à l'eau, on sèche la phase organique, évapore à sec. On obtient 7,9 g de NIS)benzoyl- thio-2 phényl-3 propionyl7-L-leucinesous forme d'huile qui cristallise lentement. F = 74 C-78 C; Rf = 0,80 dans BuOH/MeOH/H20, 4/1/1. EXEMPLE 28 l/IS)mercapto-2 phényl-3 propionyl7-L-leucine 2 g de N(S,benzoylthio-2 phényl-3 propionyl)-L-leu- cine en solution dans 10 ml de MeOH sont agités à 0 C pen- dant 1 heure avec 10 ml de NaOH IN, puis 4 heures à 25 C sous azote. On évapore le méthanol, reprend par l'eau et acidifie à pH = 1 par HC1 iN. Il se forme un précipité gommeux que l'on extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est séchée, évaporée sous vide. On obtient 1,45 g de N/S)mercapto-2 phényl-3 propionyl7-L-leucine qui cristallise lentement. F = 67-71 C. EXEMPLE 29 Ester méthylique de la N/TS)acétylthio-2 phényl-3 propio- nyl7-L-leucine 3 g de l'acide S, acétylthio-2 phényl-3 propionique (obtenu par action de l'acide thioacétique sur l'acide R, bromo-2 phényl- 3 propionique) en solution dans 30 ml de CHC13 sont ajoutés à une solution de 2,5 g de chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-leucine. On ajoute 5 ml de NEt3, puis 2 g de HOBT et 2,8 g de DCC. Après agitation 1 heure à 0 C, puis 12 heures à 25 C, on filtre le DCU Z4eC747 29. formé et traite par le processus habituel. On obtient 4,1 g de l'ester méthylique de la N-ZS)acéthylthio-2 phényl-3 propionyl/-L-leucine sous forme d'huile. Rf: 0,85 sans CHC13/MeOH/H20, 9/1/Sat. EXEMPLE 30 Ester méthylique de la N/_S)mercapto-2 phényl-3 propionyl7- L-leucine 2 g du composé de l'exemple 29 sont agités 12 heures dans une solution de méthanol saturée d'HCl, sous azote. On évapore à sec, reprend par l'eau et extrait à l'éther. On sèche la phase organique, évapore à sec. On obtient 750 mg de l'ester méthylique de la Nf(s)mercapto-2 phényl- 3 propionyl7-L-leucine sous forme d'huile, Rf: 0,70 dans CHC13/Et20, 5/5. EXEMPLE 31 NJS) acétylthio-2 phényl-3 propionyl_-L=leucine Ce composé est obtenu comme à l'exemple 27 en rem- plaçant l'acide thiobenzolque par l'acide thioacétiqueo On obtient une huile jaune pâle qui cristallise lentement. F 50 C; Rdt: 84 %; Rf = 0,80 dans BuOH/MeOH/H20= 4/1/1. EXEMPLE 32 N_S)me pto-2_ phényl3 pro-2-y3_ 7.L-Alanine Obtenu en suivant les méthodes successivement ap- pliquées dans les exemples 27 et 28 en remplaçant l'ester méthylique de la L-leucine par l'ester méthylique de la L-alanine. On obtient ainsi le NóT)mercapto-2 phényl-3 propionyl7-L-Ala, cristaux blancs. F = 42 Co EXEMPLE 33 N7Ts)acétylthiométhylthio-2 phényl-3 propionyl -L-leucine On ajoute 0,42 ml d'acétylthio chlorométhane en solution dans MIeOH à un mélange de 1,1 g de N/S)mercapto- 2 phényl-3 propiony2Y-L-leucine obtenue selon l'exemple 28 et de 552 mg de K2C0O3 dans l'eau. On agite 20 heures à température ordinaire, évapore à sec et reprend par 30. l'acétate d'éthyle. On sèche, évapore. On obtient 252 mg de N(acétylthiométhylthio-2 phényl-3 propionyl)-L-leucine sous forme d'huile après purification par chromatographie sur colonne d'alumine dans le mélange CHC13/MeOH, 7/3. Rf = 0,77 CHC13/MeOH, 5/3. EXEMPLE 34 N/Ss)benzoylthio éthylthio-2 phényl-3 propionyl/-L-leucine 1,33 g de N/tS)mercapto-2 phényl-3 propionyl7-L- leucine obtenue selon l'exemple 28 sont dissous dans 30 ml d'eau en présence de 685 mg de K2C0O3. On ajoute à 00C, 1,32 g de benzoylthio-l bromo-2 éthane (obtenu par action directe du bromure de benzoyle sur le thiiranne selon B. HANSEN, Acta. Chem. Scand 11, 537 (1957) en solution dans 10 ml de MeOH. On agite 48 heures à 250C. On filtre d'un léger précipité cotonneux et on acidifie à pH=2 par HC1 6N. On extrait trois fois avec 20 ml d'acétate d'é- thyle, sèche et évapore à sec. On obtient 1,50 g du compo- sé attendu à l'état d'huile qui cristallise lentement. F = 62-68 C. EXEMPLE 35 N/ZS)mercapto éthylthio-2 phényl-3 propionyl7-L-leucine On dissout 800 mg du composé de l'exemple 34 dans ml de MeOH et on ajoute sous azote 3,4 ml de NaOH 1N en 30 minutes. On laisse 4 heures à 25 C, toujours sous azote. On ajoute 20 ml d'H20, évapore MeOH, filtre et aci- difie par HC1 1N jusqu'à pH = 1. On extrait avec trois fois 20 ml d'éther, sèche et évapore à sec. On obtient 544 mg d'une huile incolore. Rf = 0, 92 dans BuOH/AcOH/ H20, 4/1/1, correspondant à N/S)mercapto éthylthio-2 phényl-3 propiony.7-L-leucine. EXEMPLE 36 N/TS)mercapto éthylthio-2 phényl-3 propionyl7-L-alanine En remplaçant dans lTexemple 34 la NL/S)mercapto-2 phényl-3 propionyl7-L-leucine par la NLTS)mercapto-2 phé- nyl-3 propiony7_-L-alanine obtenue selon l'exemple 32, on obtient la NS)benzoylthio éthylthio-2 phényl-3 propio- nyl7-L-a.lanine. Ce dérivé, traité comme dans l'exemple 35, fournit la NZTS)mercapto éthylthio-2 phényl-3 propionyl7- L-alanine. Huile épaisse qui cristallise lentement. F = 34 C. EXEMPLE 37 Préparation de N- Boc, N'-(éthoxycarbonyl-2 propionyl) diamino-l,l phényl2 éthane a) N-t butoxycarbonyl, N-benzyloxycarbonyl diamino- 1,l-phényl-2 éthane 1,5 g de Boc L-Phe-azide sont portés à 80 C pen- dant 1 heure dans 10 ml de toluène anhydreo Il se forme un isocyanate qui n'est pas isolé. Après refroidissement de la solution, on ajoute 0,55 ml d'alcool benzylique, puis on chauffe à nouveau à 80 C pendant 1 heure. Après re- froidissement, la solution laisse cristalliser 099 g de N-Boc, N'-Z diamino-l,l phényl-2 éthane. F = 165 Co b) N-Boc diamino-ll phényl-2 éthane 0,4 g de N-Boc, N'-Z diamino-ll phényl-2 éthane sont mis en solution dans 10 ml de méthanol en présence de mg de Pd/C. L'hydrogénation à pression ordinaire fournit après filtration et évaporation à sec 0,3 g de N-Boc dia- mino-ll phényl=2 éthane, Solide jaune pâle. F = 40-50 C. c) Produit énoncé dans le titre 270 mg de monoester méthylique de l'acide méthyle malonique (R,S) en solution dans 10 ml de THF sont ajoutés à une solution de 436 mg de N-Boc diamino-ll phényl-2 éthane, 283 mg HOBT et 381 mg DCC dans 10 ml CHC13o Après 4 heures à température ambiante, on filtre le DCU formé et traite la solution dans les conditions habituelles du cou- plage peptidique. On obtient ainsi 544 mg de solide jaune pâle. Rf = 0,80 dans CHC13/MeOH/H20,9/1/Sat, de N- 3Boc, N'-(éthoxycarbonyl-2 propionyl) diamino-ll phényl-2 éthane (sR + SS). EXEMPLE 38 N-Boc. N'(carboxy-2 propionyl) diamino-ll phényl-2 éthane 24 C747 32. mg du composé obtenu à l'exemple 37 sont mis en solution dans 10 ml de MVeOH. On ajoute 1,5 ml NaOH 111, agite 4 heures à température ambiante, évapore MeOH, re- prend par H20 et acidifie à pH = 2. On extrait par l'acé- tate d'éthyle, sèche et évapore à sec. On obtient 130 mg de cristaux blancs de N-Boc, N'(carboxy-2 propionyl) di- amino-l,1 phényl-2 éthane (SR + SS). F = 170-171 C. EXEMPLE 39 N-(carboxy-2 propionyl) diamino-ll phényl-2 éthane mg du composé obtenu à l'exemple 38 sont agités avec 0,4 ml de TFA pendant 1 heure à 25 C. Après évapora- tion à sec et reprise par l'éther éthylique, on obtient mg de N-(carboxy2 propionyl) diamino-l,l phényl-2 éthane (RR + ES). Rf = 0,35 dans BuOH/AcOH/H20, 4/1/1. EXEMPLE 40 N-carboxyméthyl, N'(c a r b o xy -2 propionyl) diamino- 1,1 phényl-2 éthane 300 mg du composé obtenu dans l'exemple 37 sont agités 1 heure à O C avec 1 ml de TFA. Après évaporation à sec et addition d'éther, le solide blanc obtenu est sé- ché sous vide, puis mis en suspension dans du benzène anhydre et chauffé à reflux 12 heures avec 0,1 ml de bromo- acétate d'éthyle. Après filtration, on recueille une huile jaune pâle de Niéthoxycarbonylméthyl, N'(éthoxycarbonyl-2 propionyl) diamino-l,l phényl-2 éthane, q u i e s t s a p o nifié sans purification pour conduire à 52 mg de N-carboxy- méthyl, N'(c a r b o x y -2 propionyl) diamino-l,l phé- nyl-2 éthane (RR + RS). Rf = 0,42 dans BuOH-/AcH/H20, 4/1/1. EXEMPLE 41 N-(mercapto-2 éthyl), Il' (carboxy-2 propionyl) diamino- 1,1 phényl-2 éthane (R, RS) 33. Obtenu par action directe du thiiranne en tube scellé sur 50 mg du composé de l'exemple 39 en suivant la méthode décrite dans l'exemple 15 (méthode B). F=180-190 C. EXEMPLE 42 Boc amino-2 phényl-3 carboxyméthylthio-l propane On ajoute 2,3 g de l'ester p.toluène sulfonique du Boc-L phénylalaninol (obtenu par réduction de la t- Boc-L Phe en alcool, puis action du chlorure de tosyle) dissous dans 50 ml de MeOH, à une solution aqueuse du sel disodique de l'acide thioglycolique. Après reflux pendant 12 heures, on filtre, acidifie la solution et extrait à l'acétate d'éthyle. On obtient 700 mg d'une huile épaisse qui est chromatographiée sur colonne d'alumine avec un mélange Et20/MeOH, 7/3. On recueille 550 mg de B3oc amino-2 phényl-3 car- boxy méthylthio-1l propane. F = 95 C. Rf = 0,63 dans CHC13/MeOH 7/3. EXEMPLE 43 Trifluoroacétate de (amino-2 phényl-3 carboxyméthylthio 1) proane 400 mg du composé décrit à l'exemple 42 sont agités 1 heure à 25 C avec 1 ml de TFAo Après évaporation à sec et reprise par l'éther, on obtient 300 mg du trifluoroacétate de (amino-2 phényl-3 carboxyméthylthio-l) propane sous forme de poudre blanche. Rf = 0,41 dans BuOH/MeOH/H20 4/1/1. EXEMPLE 44 Carboxyméthylamino-2 phényl-3 carboxyméthylthio-1 propane 250 mg du composé décrit à l'exemple 43 sont mis en suspension dans 10 ml de benzène anhydre. On ajoute 0,15 ml de triéthylamine et 0,21 ml de bromoacétate d'é- thyle. La solution obtenue est mise au reflux pendant 10 heures. On filtre, sèche et évapore à sec. L'huile obte- nue est chromatographiée sur colonne de gel de silice dans le mélange Et20/lIeOH,8/2. 354. On obtient 125 mg de carboxyméthyl amino-2 phényl- 3 carboxyméthyl-l propane. Rf=0,57 dans CHC13/MeOH, 8/2. EXEMPLE 45 (mercapto-2 éthylamino)-2 phényl-3 carboxyméthylthio-1 propane mg du composé décrit à l'exemple 43 sont trai- tés comme à l'exemple 15 (méthode B) pour conduire à 42 mg de (mercapto-2 éthyl amino)-2 phényl-3 carboxyméthyl thio-l propane. F = 201 C. EXEMPLE 46 Ester méthylique de laN-(Boc amino-2 phényl-3 propyl-l) L-leucine On ajoute 2 g de l'ester p.toluène sulfonique du Boc-L Phe-alaninol à une solution de 1,4 g de l'ester mé- thylique de la L-leucine (sous forme base) dans 10 ml de dioxanne. On porte au reflux pendant 10 heures. On éva- pore la solution à sec et reprend par de l'éther. Un pré- cipité se forme qui est filtré, puis séché. On obtient ainsi 1,1 g de l'ester méthylique N-( Boc amino-2 phényl-3 propyl-l) L-leucine. F = 61 C. EXEMPLE 47 N(carboxyméthylamino-2 phényl-3 propyl-l) L-leucine 500 mg du composé décrit à l'exemple 46, sont agi- tés 1 heure avec 2 ml de TFA. Après évaporation à sec, et addition d'éther, on recueille un solide blanc qui est séché sous vide. On place ce produit sans purification en suspension dans 20 ml de benzène anhydre et on ajoute 0,2 ml de triéthylamine et 0,15 ml de bromoacétate d'éthyle. Après reflux pendant 15 heures, la solution est filtrée, puis évaporée à sec. L'huile obtenue est purifiée par chromatographie sur colonne d'alumine avec un mélange Et20/IMeO0H, 9/1. On obtient 120 mg de l'ester méthylique de la N(carboxyméthylamino-2 phényl-3 propyl-l)L-leucine. F = 40-50 C. On dissout 100 mg de ce produit dans 20 ml de métha- nol et ajoute NaOH jusqu'à pH = 9. Après agitation pendant 24O0747 35. 2 heures, on acidifie par HC1 (pH = 4), puis extrait à l'acétate d'éthyle et évapore à sec. On obtient 23 mg de N-(carboxyméthylamino-2 phé- nyl-3 propyl-l)-L-leucine. F = 1147-151 C. EXEMPLE 48 Ngtmercapto-2 éthylamino)-2 phényl-3 propyl-7L-leucine Obtenu comme à l'exemple 15 (méthode B), en rem- plaçant l'ester méthylique de la L-Phe-L-Leu par 200 mg de l'ester méthylique de la N(amino-2 phényl-3 propyl-l) L-leucine obtenue à partir du composé de l'exemple 46 par action du TFA. Après action du thiranne et saponification sous azote, on obtient 32 mg de N/Tmercapto-2 éthylamino)-2 phényl-3 propyl-lL-leueine. F = 480Co Les résultats des études biologiques et pharmaco- logiques rapportées ci-après mettent en évidence les in- téressantes propriétés inhibitrices de l'enképhalinase, antalgique et hypotensive. La présente invention a donc encore pour objet un médicament ayant notamment des propriétés inhibitrices de l'enképhalinase, antalgique et hypotensive, caracté- risée en ce qu'il contient à titre de principe actif un composé de formule I ou un sel d'addition avec un acide ou une base pharmaceutiquement acceptable de ce composé. A) Etude biologique Dosage de l'activité "enképhalinasique" (enké- phaline dipeptidylcarboxypeptidasique) et détermination de l'effet des inhibiteurs. La préparation enzymatique utilisée est une frac- tion membranaire provenant du striatum de rat ou de sou- ris. Cette fraction est obtenue par homogénéisation à 4 C dans 20 volumes de tampon Tris-HC1 0,05 M (pH 7,4) suivie de deux centrifugations successives (1000 g x min. et 200.000 g x min.) au terme desquelles le culot de la deuxième centrifugation est retenu. Il est lavé par remise 2Q0747 3o. en suspension dans 10 ml du tampon suivie de centrifuga- tion (200.000 g x min.) et le culot obtenu est lui-même lavésuperficiellement afin de compléter l'élimination des enzymes solubles. La fraction membranaire ainsi ob- tenue est reprise dans le tampon à 4 C de manière à ob- tenir une suspension comportant environ 1,5 mg de pro- téines par ml. Une prise aliquote de 50 il de la suspension mem- branaire est alors incubée dans un volume final de 100 pl à 25 C en présence de 10 nM de leucine-enképhaline 3H (39 Ci/mmole), préalablement purifiée par chromatographie sur une colonne de Porapak Q (100-120 mesh, Waters Assoc.) et de 0,1 mi de puromycine, in inhibiteur d'aminopepti- dases. La durée des incubations est généralement fixée à 15 mn. de manière à mesurer la vitesse initiale de forma- tion du tripeptide Tyr-Gly-Gly-3H caractéristique de l'ac- tivité enképhaline dipeptidylcarboxypeptidasique (enké- phalinasique). La réaction est arrêtée par addition de 1 d'HCl 0,2 N et le tripeptide est isolé par chroma- tographie sur colonne de Porapak Q ou sur une couche mince de silice suivant des méthodes décrites par Malfroy et al. (B. Malfroy, J.P. Swerts, C. Llorens et J.C. Schwartz, Neuro-Science Letters, 11, 329, 1979). Les résultats obtenus par chacune de ces deux mé- thodes ont toujours été en bon accord. La mesure de la radioactivité du tripeptide est effectuée par spectrométrie en scintillation liquide. L'effet des inhibiteurs est établi en pratiquant des expériences en présence de concentrations croissantes de ces produits, ce qui conduit à la détermination des concentrations inhibitrices 50 5 calculées au moyen de l'analyse des données par la méthode de Parker et Waud (J. Pharmacol. exper. Ther. 177, 1, 1971). Dans certains cas la nature compétitive de l'inhibition a été établie par des expériences d'incubation en présence de l'inhibi- teur en concentration fixe et du substrat en concentra- tiorscroissantes. Z49747 37. Composés N Concentration inhibitrice 50 2 1,5 x 10-6 M 2 x 10-5 M 27 5 x 10-6 M 28 2 x 10-7 M 32 1 x l0-7 M 4 x l0-7 M 33 1 x 10-6 M 18 5 x 109 M 20 5 x l0-9 M 22 7 x 10-9 M 24 4 x 10-9 M B) Etude pharmacologique L'étude pharmacologique des produits décrits ci-dessus a permis de mettre en évidence un effet antal- gique et un effet hypotenseur propre et une action poten- tialisatrice des effets d'une enképhaline, laD Ala2Met Enképhaline (notamment antalgique et hypotenseur). Les épreuves pharmacologiques réalisées ont été les suivantes: I Toxicité aiguë La détermination de la mortalité chez la souris est observée à la suite de l'administration unique par voie intra-veineuse de doses croissantes des composés à tester. La DL50, pour tous les composés étudiés,est supérieure à 100 mg/kg/i.v. II - Activité antalgicue 1) Test de la plaque chauffante: Réflexe de lèchement de la souris sur une plaque chauffée à 55 C selon la méthode de Jacob et coll. (Arch. Int. Pharmacodyn. 122, 287-300, 1959: 133, 296-300, 1961). * Potentialisation de l'effet antalgique de la D Ala2Met Enképhaline: 24e, 747 38. a) Par voie intra-ventriculaire (ivt) Le tableau I ci-après montre que l'ef- fet d'une dose subactive (0,3 Y) de D Ala2Met Enképhaline administrée par voie intra-ventriculaire est significa- tivement potentialisée (p 40,05) par les composés 2, 28 29 et 35, et que cet effet est antagonisé par la Naloxone. b) Par voie intraveineuse Par voie intraveineuse, le n 35 à la dose de 100 mg/kg entraîne une augmentation de 100 %' du temps de lâchement par rapport aux animaux traités avec la D Ala2Met Enképhaline (0,3 X intra-ventriculaire). TABLEAU I Plaque chaude Potentialisation de l'effet antalgique de la D Ala2Met Enképhaline et antagonisme par la Naloxone i Dose Augmentation du temps Produit ',/ Nbre de lèchement % par souris de rapport aux traités ivt souris DAla2Met enképha- _ ivt sourline (1) n 2 (1) 10 6 274 +DAla2Met Enképhaline n 29 (1) 10 6 207 +DAla2Met Enképhaline n 28 (1) 10 6 400 +DAla2Met Enképhaline n 35 (1) 10 10 240 X +DAla2Met Enképhaline n 35 () 10 10 18 +DAla2Met Enképhaline -Naloxone (lOmg/kg ss. cut.) (1) la dose de D Ala Met Enképhaline est de 0,3 /souris, dose inactive pa elle-meme, P 4%80747 39. 2) Test chez la souris du retrait de la queue trempée dans l'eau chauffée à 48 C selon la méthode de Sewell et Spencer (Neuropharmacology - 1976 - 15, p. 683-688). Le tableau II montre que les composés 18 et 20 administrés par voie intraveineuse à la dose de 100 mg/kg: - présentent un effet antalgique propre, - potentialisent très significativement la D Ala2Met Enképhaline administrée 15 minutes après par vaie intra-ventriculaire, à des doses subactives variant de 10 à f/souris. Cet effet est durable et supérieur à 2 heures; il est également observé à la dose de 30 mg/kg pour le n 20 o TABIEAU II Queue de la souris Effet antalgique propre Potentialisation de l'effet antalgique de la D Ala2Met Enképhaline Nbre Pourcentage d'augmentation Nbre du temps de réaction Produits et dose Voie de du teps de r action mn mn 0mnnm souris 20m 5 60mn g90mn 120mn N 18- 100 mg/kg i.v. 6 38 80 120* 61* 90 _ _, _..... . N 20_ 100 mg/kg i.v. 6 59 196 150 88* 85 N 18- 100 mg/kg + D Ala2Met Enképhaline (30ïivt) i.v. 6 O 280* 166$ 87x 17)4 N 20 - 100 mg/kg + D Ala2Met Enképhaline (20yivt) i.v. 6 239 528 3212* 382* 322* N 20 mg/kg + D Ala2Met Enképhaline (15Yivt) i.v. 6 24'T 353 283 210 203* X (0,02 x 24B 0747 41. c) Activité hypotensive - propre - potentialisatrice de l'enképhaline, (LAUBIE M., SCHMITT H., VINCENT M., REMON D. Central car- diovascular effects of Morphinometic peptids in dogs. Euro- pean Journal of Pharmacology, Vol. 46, 67-71, 19771. Par la voie intraveineuse, les composés 18 et 24 ont entraîné une diminution de la pression artérielle dès la dose de 0,3 mg/kg. Les résultats de ces études mettent en évidence la faible toxicité et les intéressantes propriétés inhibi- trice de l'enképhalinase, antalgique et hypotensive des dérivés de l'invention qui les rendent utiles en médecine humaine et vétérinaire. Le médicament de l'invention est administrable à l'homme par voie orale, parentérale ou rectale. Chaque dose unitaire contient avantageusement de 0,5 à 100 mg de principe actif, les doses adminlstrables jour- nellement pouvant varier de 0,5 à 200 mg de principe actif. 42. REVEIDICATIONS 1. Dérivés d'amino-acides répondant à la formule générale suivante II X - Y - CH -A - B - OR3 (I) (H2)n R 1n R1 dans laquelle A est un groupe carbonyle, méthylène, méthine ou amino; B est un groupe amino éventuellement substitué par un groupe alkyle en C1 à C4; carbonyle, m-thine ou thio; R1 est un atome m hydrogène; un groupe alkyle éventuellement mono- ou polysubstitué par un atome d'ha- logène; un groupe phényle éventuellement mono- ou poly- substitué par un radical choisi parmi un atome d'halogène, un radical trifluorométhyle ou hydroxy; un groupe cyclo- hexyle ou un groupe thiényle; n est O ou 1; R2 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C1 à C6 linéaire ou ramifié; un groupe phényle; un groupe benzyle éventuellement mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène; un groupe hydroxyalkyle; un groupe alcoxyalkyle éventuellement substitué sur la fraction alcoxy par un radical choisi parmi un radical phényle, benzhydryle ou pyridyle N-substitué par un groupe phényl- alkyle dont le noyau phényle est éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène; un groupe phénoxy- alkyle; un groupe mercaptoalkyle éventuellement substitué sur le soufre par un radical choisi parmi un radical al- kyle simple ou ramifié, phényle ou benzyle; R3 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle linéaire ou ramifié en C1-C8; un groupe phényle ou phényl- alkyle dont la fraction alkyle est en C1 à C8, ces deux derniers radicaux étant éventuellement mono- ou poly- 2 ^747 43. substitués sur le noyau phényle par un atome d'halogène; Y est un groupe -S-; -NH- ou -CH2-; et X est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C1 ou C2 substitué par un radical choisi parmi un ra- dical alcoxycarbonyle, un radical carboxy, un radical mer- capto, un radical alkylthio éventuellement mono- ou poly- substitué par un atome d'halogène, un radical benzylthio éventuellement mono- ou polysubstitué par un groupe choisi parmi un atome d'halogène et un groupe mono- ou polyhalo- alkyle en C1 à C4, un radical benzhydrylthio éventuelle- ment mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène, un radical acyle aliphatique (Ci14) thio éventuellement mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène, un radical ben- zoylthio éventuellement mono- ou polysubstitué par un groupe choisi parmi un atome d'halogène et un groupe mono- ou polyhaloalkyle en C1 à C4, ou un radical benzhydryl carbonylthio éventuellement mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène; un groupe acyle aliphatique en C1 à C4 ou benzoyle; un groupe alcoxy-carbonyle; un groupe mer- capto; un groupe acyle aliphatique (C14) thio ou benzoyl- thio; et leurs sels d'addition avec des acides ou des bases pharmaceutiquement acceptables. 2. Dérivés selon la revendication 1l caracté- risés en ce que A est un groupe carbonyle, méthylène ou amino; B est un groupe amino éventuellement subs- titué par un groupe alkyle en C1 à C4; carbonyle ou thio; R1 est un atome d'hydrogène; un groupe phé- nyle éventuellement mono- ou polysubstitué par un atome d'halogène; L K & 747 n est O ou 1; R2 est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C1 à C6 linéaire ou ramifié; un groupe benzyle; un groupe benzyloxyalkyle; R est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle -3 linéaire ou ramifié en C1 à C8; Y est un groupe -S-; -NH- ou -CH2-; et X est un atome d'hydrogène; un groupe alkyle en C1 ou C2 substitué par un groupe alcoxycarbonyle, carboxy, mercapto, acyle aliphatique (C1_4) thio, ou benzoylthio; un groupe acyle aliphatique en C1 à C4 ou benzoyle; un groupe alcoxy (C1!4) carbonyle; un groupe mercapto; un groupe acyle aliphatique (C1!4) thio ou benzoylthio. 3. Dérivés choisis parmi les suivants: NI'R,S) mercapto-3 benzyl-2 propionyl7 L-leucine; NtiRS) mercapto-7 beazyl-2 propionyl7 glycine; N/tR, S) mercapto-3 benzyl-2 propiony17 L-alanine; O-benzyl, N-/Z7,S) mercapto-3 benzyl-2 propiony_7 L- sérine. 4. Procédé de préparation de dérivés de formrule I dans lesquels A = CO, B = NE, Y = NH, X est un groupe alkylène en C1 ou C2 substitué par un groupe alcoxycar- bonyle ou carboxy et Ri, R2, R3 et n sont tels que dé- finis à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir un dérivé de formule ROOC - (CH2) Br (II) dans laquelle R est H ou un groupe alkyle et m est 1 ou 2, avec un dérivé de formule EJI-CE il HNi - CH - A - B - CH - C - OR3 (CE2)n R2 12n 2 R1 (III) dans laquelle R1, R2 et R3 sont tels que définis ci- dessus et A = CO; B = Mi. 5. Procédé de préparation de dérivés de formule I, 24P0747 45. dans lesquels A = CH2, B = NH, Y = S, X est un atome d'hy- drogène ou un groupe benzoyle, R1 est H, n = O, R2 et R3 sont tels que définis à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir a) un thiiranne de formule C2H4S sur un ester d'amino-acide de formule H2N - CH - 3 - R (III) et 2 13 R2 b) éventuellement on fait réagir le produit obtenu à l'étape (a) avec un composé de formule R - CO - Br dans laquelle R est un groupe alkyle inférieur ou phényle et on élimine des groupes protecteurs. 6. Procédé de préparation de dérivés de formule I, dans lesquels A = CO, B = NH, Y = NH ou CH29 X est un groupe alkyle en C1 ou C2 substitué par un groupe mercap- to, acyle aliphatique thio ou benzoylthio, Rl, R2, R3 et n sont tels que définis à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on réalise une réaction de condensation pepti- dique entre un composé de formule O If X - Y - CH - C - OH (IV) et (CH2)n 1 0 If un ester d'amino-acide de formule H2N - CH - C - OR3. R2 7. Procédé de préparation de dérivés de formule I, dans lesquels A = CO, B = NH, Y = S, X est un atome d'hy- drogène, un groupe acyle aliphatique en C1 à C4 ou ben- zoyle et R1, R2, R3 et n sont tels que définis à la re- vendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir un S- acide thiocarboxylique de formule R-COSH, dans laquelle R est un radical alkyle ou phényle, sur un dérivé halogé- né de formule 2C.C747 L'6. I6 Hal - CH -A - B - CH - COR3 (V) (CH2) R2 Rén 2 R1 dans laquelle Hal est un atome d'halogène en particulier de brome. 8. Procédé de préparation de dérivés de formule I, dans lesquels A = CO, B = NH, Y = S, X est un groupe al- kyle en C1 ou C substitué par un groupe mercapto, acyle 1 2 aliphatique thio ou benzoylthio et R1, R2, R3 et n sont tels que définis à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir un composé halogéné de formule R - CO - S - (CH2)m - Hal dans laquelle Hal est un atome d'halogène telque le brome, R est un groupe alkyle ou phényle et m est 1 ou 2, avec un dérivé de formule o0 Il HS - CH -CO - NH - CH - C - OR I t 3 R2 12 n2 R1 9. Procédé de préparation de dérivés de formule I, dans lesquels A = NH, B = CO, Y = NH, X est un atome d'hy- drogène, un groupe alkyle substitué par un groupe carboxy ou mercapto, ou un groupe alcoxycarbonyle et R1, R2 et R3 sont tels que définis à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on réalise une réaction de condensation pepti- dique entre une diamine N-protégée de formule Boc - NH - CH - mH2 CH 2 (VI) et (0H2)n R1 un monoester malonique de formule H2O C - CH - C 02R3 2 2R2 R2 47. 10. Procédé de préparation de dérivés de formule I, dans lesquels A = CH2, B = S, Y = NH, X est un atome d'hy- drogène, un groupe alkyle substitué par un groupe carboxy ou mercapto, ou un groupe alcoxycarbonyle et R1, R2, et R3 sont tels que définis à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on réalise une réaction de condensation entre un dérivé tosylé N-protégé d'amino-acide de formule Boc - HN - CH - CH2 OTs I2) 2(VII) et (!H2)n Ri R1 un ester de l'acide thioglycolique de formule HS - CH - Co2R (R) 2 3 (VIII) R2 11. Procédé de préparation de dérivés de formule I, dans lesquels A = CH2- * B = -NH-, Y = NH, X est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué par un grou- pe carboxy ou mercapto, ou un groupe alcoxycarbonyle et Ri, R2 et R3 sont tels que définis à la revendication 1, carac- térisé en ce qu'on réalise une réaction de condensation entre un dérivé tosylé N-protégé d'amino-acide de formule Boc - HN - CH -CH OTs t 2 (CH2) n R1 et un ester d'amino-acide de formule H2N - CH - C02R3 R2 12. Médicament ayant notamment des activités inhibi- trice de l'enképhalinase antalgique et hypotensive, carac- térisé en ce qu'il contient à titre de principe actif un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3. 13. Médicament selon la revendication 12, caracté- risé en ce qu'il est présenté sous une forme appropriée pour l'administration orale, parentérale ou rectale, le principe actif étant associé à un véhicule thérapeutique convenable. 0é747 48. '.'$747 14. Médicament selon l'une quelconque des revendica- tions 12 et 13, caractérisé en ce qu'il est présenté sous forme de doses unitaires contenant de 0,5 à 100 mg de prin- cipe actif.