Brevet FR2475042A1 — publié le 19810807

Les antibiotiques aminoglycosidiques constituent une classe bien connue d'antibiotiques utiles. On doit remarquer parmi ces antibiotiques la gentamicine, la néomycine, la sisomicine, etc. La production de gentamicine par fermentation et sa séparation sont décrites dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique NI 3 091 572. La production de néomycine par fermentation et sa séparation sont décrites dans le brevet des Etats- Unis d'Amérique NO 2 799 620. La préparation de la sisomicine est décrite dans J. Antibiotics, volume 23, 555 (1970). Les antibiotiques aminoglycosidiques sont généralement transformés en un sel désiré au cours des opérations de séparation et de purification. Par exemple, la gentamicine est avantageusement convertie en son sulfate. Un procédé connu de préparation du sulfate de gentamicine est décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique NO 3 091 572. Une étape clé de ce procédé est la précipitation du sulfate de gentamicine dans une solution aqueuse qui le contient. Le rendement de cette opération de précipitation, qui est en relation directe avec un certain diamètre désiré des particules, a une grande portée sur le rendement de l'opération de purification. Dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique NO 3 091 572 précité, une solution aqueuse de sulfate de gentamicine à un pH de 4,5 est ajoutée à du méthanol. Le procédé décrit dans ce brevet ne reconnaît aucun facteur déterminant au cours de l'opération clé de précipita- tion. Ainsi, le mémoire descriptif de ce brevet enseigne qu'une concentration aqueuse en sulfate de gentamicine de g de matières solides par litre et 10 volumes de méthanol par volume de milieu aqueux sont utilisés dans l'étape de précipitation. Des conditions similaires ont été utilisées pour la précipitation du sulfate de gentamicine dans une publication subséquente (voir J. P. Rosselet et collabora- teurs, "Isolation, Purification and Characterization of Gentamicin", Antimicrob. Agents Chemother., 14-16 (1963). Le procédé décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique NI 3 651 042 opère lui aussi dans les conditions ci-dessus et utilise une concentration aqueuse en complexe de gentamicine de 250 mg de matières solides par ml. Ces mémoires représentent ce que l'on connait de mieux dans l'art antérieur. Dans aucun de ces mémoires, on ne trouve un enseignement, encore moins la reconnaissance, de facteurs déterminants en ce qui concerne les diamètres de particules dans l'opération clé de précipitation. Dans l'ignorance de tels facteurs, il est facile de comprendre pourquoi la littérature antérieure ne laisse pas même entrevoir le procédé de la présente invention. On a trouvé le fait surprenant qu'un diamètre de particules très avantageux peut être obtenu par des opérations qui sont en contradiction avec les enseignements de l'art antérieur. Ainsi, on a découvert que des solutions aqueuses très concentrées d'un sel d'aminoglycoside ajoutées à un alcool sous agitation donnent des particules très appréciées qui sont aisément filtrées. Ce procédé permet d'obtenir des particules qui peuvent être filtrées à une vitesse au moins quatre fois égale à la vitesse de filtration de particules obtenues par le meilleur des procédés connus. En ajoutant une solution aqueuse très concentrée d'un sel aminoglycosidique antibiotique à un alcool convenable sous agitation, on obtient des particules d'un sel aminoglycosidique antibiotique qui sont filtrées facilement. Par exemple, en ajoutant une solution aqueuse de sulfate de gentamicine ayant une concentration en matières solides d'environ 400 à environ 960 mg/ml à du méthanol sous agitation dans un rapport d'environ 4 à environ 10 volumes de méthanol par volume de milieu aqueux, on obtient le précipité de sulfate de gentamicine en particules de diamètre désiré. Comme indiqué ci-dessus, la concentration en matières solides du concentré de gentamicine peut aller d'environ 400 à environ 960 mg/ml. Comme le comprendra aisément l'homme de l'art, le niveau inférieur est beaucoup plus haut que celui qui est révélé dans les procédés de l'art antérieur. De plus, il y a lieu de remarquer que la limite supérieure de la plage est la limite de solubilité du sulfate de gentamicine. Par conséquent, d'après ce résultat, on peut aisément apprécier le fait que d'autres antibiotiques amino- glycosidiques peuvent de même être utilisés à de fortes concentrations s'approchant de leur limite de solubilité. Bien que le méthanol ait été choisi comme exemple ci-dessus, il est évident que tout alcool aliphatique inférieur miscible à l'eau, par exemple l'éthanol et le propanol, peut aussi être utilisé. Les sels aminoglycosidiques antibiotiques qui entrent dans le cadre de la présente invention comprennent les sulfates, les chlorhydrates et les nitrates. Le procédé de l'invention est illustré par les exemples suivants, donnés à titre non limitatif. Exemple 1 Sulfate de gentamicine Le concentré aqueux de sulfate de gentamicine ci- dessus peut être obtenu, par exemple, par les opérations décrites dans l'exemple 4 du brevet des Etats-Unis d'Amérique NI 3 091 572 précité. On fait varier la concentration en matières solides de la solution aqueuse de sulfate de gentamicine par concentration ou par dilution avec de l'eau pour obtenir une concentration en matières solides d'environ 600 mg/ml. Ce concentré aqueux est ensuite ajouté à 5 volumes de méthanol sous agitation par volume de milieu aqueux. L'addition s'étend sur une période d'environ 30 minutes à la température ambiante. Le précipité amorphe de sulfate de gentamicine qui se forme est facilement filtré au moyen d'un filtre classique à disque de verre fritté. Exemple 2 Sulfate de néomycine Le concentré aqueux de néomycine ci-dessus peut être obtenu, par exemple, par les opérations décrites dans le brevet des EtatsUnis d'Amérique NI 2 799 620 précité. On fait varier la concentration en matières solides de la solution aqueuse de sulfate de néomycine en concentrant ou en diluant avec de l'eau pour obtenir une concentration en matières solides d'environ 600 mg/ml. Ce concentré aqueux est ajouté ensuite à 5 volumes de méthanol sous agitation, par volume de milieu aqueux, en une période de 30 minutes à la température ambiante. Le précipité amorphe de sulfate de néomycine qui se forme est- aisément filtré au moyen d'un filtre classique à disque de verre fritté. Exemple 3 En suivant le mode opératoire des exemples 1 et 2, on peut faire varier la concentration en matières solides du milieu aqueux d'environ 400 mg/ml au point de solubilité de l'antibiotique aminoglycosidique; l'alcool peut être remplacé par de l'éthanol ou du propanol, le rapport en volume de l'alcool peut varier entre environ 4 et environ 10 (volumes d'alcool par volume de milieu aqueux); et on peut faire varier la durée d'addition d'environ 30 minutes à environ 4 heures pour obtenir des particules aisément filtrables du sulfate d'antibiotique aminoglycosidique désiré. Exemple 4 En utilisant l'antibiotique aminoglycosidique appelé sisomicine à la place de ceux des exemples précédents, on obtient un précipité de ce sel d'antibiotique qui a des diamètres avantageux de particules en vue d'une filtration subséquente. Comme indiqué précédemment, la forme sel peut être choisie dans le groupe de sulfates, chlorhydrates et nitrates, pour l'un quelconque des antibiotiques amino- glycosidiques. On utilise donc l'acide correspondant, chlorhydrique ou nitrique, lorsqu'on prépare les sels respectifs. REVENDICATIONS 1. Procédé de précipitation d'un sel amorphe d'antibiotique aminoglycosidique dans une solution aqueuse contenant ce sel, caractérisé en ce qu'il consiste: (a) à concentrer ladite solution aqueuse jusqu'à une concentration en matières solides allant d'environ 400 mg/ml à la limite de solubilité de l'antibiotique amino- glycosidique pour obtenir un concentré aqueux; et (b) à ajouter ledit concentré aqueux à un alcool aliphatique inférieur miscible à l'eau sous agitation dans un rapport d'environ 4 à environ 10 volumes d'alcool par volume de milieu aqueux pour obtenir un précipité amorphe du sel d'antibiotique 2. caractérisé en est le sulfate 3. caractérisé en est le sulfate 4. caractérisé en est le sulfate 5. caractérisé en aminoglycosidique. Procédé suivant la revendication 1, ce que le sel d'antibiotique aminoglycosidique de gentamicine. Procédé suivant la revendication 1, ce que le sel d'antibiotique aminoglycosidique de néomycine. Procédé suivant la revendication 1, ce que le sel d'antibiotique aminoglycosidique de sisomicine. Procédé suivant la revendication 1, ce que l'alcool aliphatique inférieur miscible est le méthanol. 6. Procédé de précipitation de sulfate amorphe de gentamicine dans une solution aqueuse contenant ce sulfate, caractérisé en ce qu'il consiste: (a) à concentrer ladite solution aqueuse jusqu'à une concentration en matières solides d'environ 400 à environ 960 mg/ml pour obtenir un concentré aqueux de sulfate de gentamicine; et (b) à ajouter ledit concentré aqueux à un alcool aliphatique inférieur miscible à l'eau sous agitation dans un rapport d'environ 4 à environ 10 volumes d'alcool par volume de milieu aqueux pour obtenir un précipité amorphe de sulfate de gentamicine. 7. Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce que l'alcool est le méthanol. 8. Procédé suivant la revendication 7, caractérisé en ce que le méthanol est utilisé dans un rapport d'environ 5 volumes par volume de concentré aqueux. 9. Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce que la concentration en matières solides est égale à environ 600 mg/ml, l'alcool étant le méthanol utilisé dans un rapport d'environ 5 volumes par volume de concentré aqueux.