Brevet FR2472384A1 — publié le 19810703

Toutes les cellules ont besoin d'énergie, et en particulier les cellules de la peau. Cette énergie provient de la dégradation (ou catabolisme) des substances nutritives. Dans les systèmes aérobies, le catabolisme cellulaire se fait par les processus oxydatifs du cycle de Krebs, qui aboutissent finalement à la formation de C02 et H20. Les électrons issus de ces oxydations sont transférés à un système oxydoréducteur positif, l'oxygène, à l'aide d'un ensemble de transporteurs appelé chaîne respiratoire. Cette chaîne respiratoire a pour but de transférer les électrons issus des processus de catabolisme vers l'oxygène, ainsi que de récupérer et stocker l'énergie libérée au cours de ce transfert d'électrons.Cette récupération d'énergie se fait par la transformation de l'adénosine diphosphate (ADP) en adénosine triphosphate (ATP). Cette chaîne respiratoire comporte quatre complexes enzymatiques NADH - Coenzyme Q réductase Succinate - Coenzyme Q réductase Coenzyme Q - Cytochrome C réductase Cytochrome C oxydase Ainsi, l'ubiquinone a un rôle fondamental dans cette chaine puisqu'elle intervient dans les trois premiers complexes enzymatiques comme élement essentiel. A l'encontre du cytochrome C, de nature protéique, et qui intervient également dans cette chaîne respiratoire, l'ubiquinone est une quinone avec une chaîne latérale isoprénique.Cette molécule est liposoluble, et capable de pénétrer les membranes cellulaires. Ces caractéristiques rendent cette molécule particulièrement intéressante en Cosmétologie. (n = 6 à 10) L'ubiquinone-10 est l'homologue naturel chez l'homme et, chez la plupart des mammifères. Cependant, il a été démontré que les homologues inférieurs, ubiquinone-8 et -9 avaient une activité restoratrice de la respiration sur les mitochondries de mammiferes. Il est donc également possible d'utiliser les ubiquinones-8, -9 et -10 en Cosmétologie. Nous utiliserons dans ce texte la nomenclature de l'IUP0C-IUB tBiochem. Biophys. Acta, 5, 107 (1965)j pour désigner les ubiquinones. BISHOP D.H.L., PANDYA K.P. et KING H.K. Biochem. J., 83, 606 (1962) ont démontré que les bactéries à gram négatif contiennent de l'ubiquinone, alors que les bacteries à gram positif contiennent de la ménaquinone ou vitamine K2. De nombreux auteurs ont mis en évidence l'ubiquinone-8 chez Escherichîa Coli. Achromobacter et Serratia ; l'ubiquinone-9 chez Pseudomonas-, Acinetobacter : BISHOP D.H.l. et al. déjà cité ; LESTER R.L., J. Biol. Chez. 234, 2169 (1959) ; PAGE A.C., Arch. Biochem. Biophys., 89, 318 (1960) CRANE CRANE F.L., Biochemistry: 11, 279 (1963) ; WITTAKER P.A., Microbios, 4, 13 (1971) ; TAKEKA I., Appl. Microbiol., 16, 1806 (1968). Les Pseudomonacées présentent le plus d'intérêt : P. denitrificans pour l'ubiquinone-9 (PAGE, déjà cité), P. aeruginosa produisant l.'ubiquinone-10 en grande quantité (CRANE, déjà cité). L'extraction de l'ubiquinone peut se faire d'après des procédés décrits dans la littérature, spécialement par : CRANE F.L., BARR R., dans Methods in Enzymology, Mc CORMICK et WRIGHT éds., Academic Press, N.Y., 1971, vol 18 C, pp 137. Les techniques d'extraction courantes sont : saponification par la potasse alcoolique ou extraction directe par solvants : acne, éthanol, mélange éthanol-éther. L'extraction par solvant peut se faire à la température ambiante (CRANE F.L. t cité cidessus), ou à chaud, ce qui donne de meilleurs rendements d'extraction (TAKEDA CHEMICAL INDUSTRIES, Brevet Français NO 1536814). Une des caractéristiques intéressantes des procédés d'extraction par solvants à la température ambiante ou à chaud est d'extraire à la fois les phospholipides bactériens et l'ubiquinone. Les extraits bactériens sont ensuite repris par l'hexane. Après évaporation, on obtient un résidu sec qui est repris par l'éthanol pur. A ce stade, on dispose du mélange phospholipides-ubiquinone. Pour obtenir l'ubiquinone pure, il convient de précipiter ensuite les phospholipides dans l'acétone a basse température, et de purifier I'ubiquinone restant en solution par chromatographie sur colonne ou par cristallisation. La demanderesse a découvert que l'ubiquinone à l'état pur pouvait avantageusement être utilisée en Cosmétologie. De même, la demanderesse a constaté qu'il était préférable d'utiliser le mélange obtenu par extraction au solvant, contenant les phospholipides et l'ubiquinone. Ce mélange peut être incorporé dans les divers véhicules lipidiques utilisés en Cosmétologie. A cet effet, il peut être dissous dans des huiles minérales ou végétales. Il peut également être mis en émulsion "huile dans eau". Cependant, la demanderesse a pu constater que ce mélange peut être "solubilisé" directement dans l'eau grâce à l'utilisation de moyens physiques énergiques de dispersion, tels que les ultra-sons. Dans ce cas la pseudo -solution se présente sous forme de micro-émulsion, ou de liposomes.Cette dernière formulation (pseudo-solubilisation dans l'eau) semble présenter la meilleure activité en ce qui concerne la restauration de la respiration mitochondriale. Elle est supérieure aux formulations obtenues grâce à des agents tensio-actifs comme les Tween (ATLAS) ou les Cremophor (BASF), ou encore grâce à des solvants organiques. Les deux constituants, ubiquinone et phospholipides présentent probablement un effet synergique, lorsqu'ils sont mis en pseudo--solution de type liposomes. Afin de bénéficier de cet effet de synergie- le complexe peut être directement extrait de bactéries à gram négatif cultivées industriellement. tel qu'il est décrit dans la littérature. Toutefois, ce complexe peut aussi être reconstitué en mélangeant des phospholipides et de l'ubiquinone purifiée. En effet, il est connu que l'ubiquinone peut également être obtenue par synthèse. A titre d'exemples non limitatifs, quelques formulations cosmétiques contenant de l'ubiquinone-8, -9 ou -10 sont présentées ci-dessous. Exemple NO 1 Un extrait phospholipides-ubiquinone provenant de Pseudomonas est dispersé dans l'eau. à raison de 3 à 5 g d'extrait pour 100 ml d'eau. Après dispersion prolongée à l'agitateur, le mélange est soumis à l'action des ultra--sons jusqu'à obtention d'une pseudo-solution translucide, filtrable sur membranes de porosité 0,2 Exemple NO 2 Un lait très fluide est obtenu de la façon suivante Lécithine de soja purifiée 6 Tween 20 0,5 Solution alcoolique d'ubiquinone 2 Eau q.s.p. 100 g La solution alcoolique d'ubiquinone contient 50 à 200 umole d'ubiquinone par ml, dans l'éthanol à 950 . On obtient par ailleurs un lait d'apparence identique à partir du complexe naturel phospholipides bacteriens-ubiquinone. Exemple NO 3 Le complexe phospholipides-ubiquinone.. naturel ou reconstitue, est dissous dans de l'huile minérale. Cette solution est utilisée dans des formulations classiques de produits cométiques, tels que la crème suivante Blanc de baleine 1 Stéarine 3 Alcool cétylique 2 Huile minérale 9 Myristate d'isopropyle 7 Aminométhylpropanol 0,8 Conservateur 0,3 Parfum 0,3 Solution huileuse d'ubiquinone 2 Eau q.s.p. 100 g Le complexe phospholipides-ubiquinone dissous dans l'huile minérale est très stable, moyennant des précautions élémentaires de stockage. La formule de crème citée ci-dessus comme exemple, est également très stable. L'activité de l'ubiquinone peut être retrouvée et dosée facilement après plusieurs mois, ce qui n'est souvent pas le cas des principes actifs incorporés dans les préparations cosmétiques. REVENDICATIONS 1. Utilisation en cosmétologie en tant que matière active d'un complexe phospholipides-ubiquinone, tel qu'il est obtenu par les procédés d'extraction par solvants. 2. Utilisation en cosmétologie, en tant que matière active d'un complexe phospholipides-ubiquinone obtenu par reconstitution 3. Preparations selon les revendications 1 et 2 contenant de l'ubiquinone à chaîne isoprènique 8 - 9 ou 10. 4. Complexe phospholipides-ubiquinone selon les revendications 1, 2, 3 solubilisé dans l'eau à l'aide d'agents physiques de dispersions énergiques, tels que les ultra-sons. 5. Compositions cosmétiques, notamment émulsions, caractérisées en ce qu'elles contiennent de 50à 500 micromoles d'ubiquinone, sous forme de complexe selon les revendications 1, 2 et 3, par 100g de produit fini.