Brevet FR2460962A1 — publié le 19810130

246096Z La présente invention concerne un procédé pour la puri- fication de l'acide chénodésoxycholique brut. L'acide chénodéso- xycholique est connu depuis longtemps, mais ce n'est que récem- ment qu'on l'a utilisé en médecine humaine, eu égard à son acti- vité de dissolution des calculs biliaires. L'acide chénodésoxycholique peut être produit sans difficultés par voie synthétique, mais sa purification est très difficile. En effet, quelle que soit la méthode de synthèse adop- tée, il contient un certain nombre de sous-produits qui ne peu- vent être éliminés qu'au prix de grandes difficultés. Une impure- té typique est l'acide lithocholique dont la structure est très voisine de celle de l'acide chénodésoxycholique, la seule diffé- rence étant l'absence du groupe 7-hydroxy dans l'acide lithocho- lique. Or, il est nécessaire que l'acide lithocholique soit absent, en raison de sa toxicité. On connaît quelques méthodes pour la purification de l'acide chénodésoxycholique, mais aucune d'entre elles ne permet d'atteindre des résultats satisfaisants. D'après la demande de brevet allemand publiée avant examen DOS n 2 302 774, on procède à la purification en traitant une solution méthanolique d'acide chénodésoxycholique brut par un sel inorganique de calcium ou de strontium et en séparant le sel calcique ou strontique d'acide chénodésoxycholique. L'acide chénodésoxycholique est alors obtenu par acidification, extrac- tion avec un solvant organique et élimination du solvant orga- nique par distillation. Ce procédé à plusieurs phases ne permet pas d'obtenir toujours les mêmes résultats, là encore parce que certaines quantités d'impuretés restent incorporées dans le sel qui précipite et ne sont donc pas extraites par le solvant. Une variante du procédé décrit ci-dessus fait inter- venir la formation du sel sodique ou potassique de l'acide chéno- désoxycholique, d'après le brevet des Etats-Unis n 3 965 131. Etant donné que ces sels sont insolubles dans l'eau, leur solu- tion aqueuse est soumise à une extraction liquide-liquide conti- nue par un solvant organique non miscible à l'eau, afin d'élimi- ner les impuretés contenues dans l'acide chénodésoxycholique brut. Puis la solution aqueuse du sel est traitée de la manière habi- tuelle par acidification avec un acide inorganique pour former l'acide chénodésoxycholique libre et par extraction de l'acide chénodésoxycholique avec un solvant non miscible à l'eau, le solvant au moins étant éliminé par distillation. Ce procédé, qui est très difficile à réaliser, permet d'éliminer des impuretés de différentes sortes, mais il ne con- vient pas pour éliminer l'acide lithocholique, car cet acide est aisément salifié, formant des sels alcalins qui sont solubles dans l'eau et dont les propriétés sont pratiquement les mêmes que celles de l'acide chénodésoxycholique. D'après la présente invention, un acide chénodésoxy- cholique brut qui contient, entre autres impuretés, de l'acide lithocholique est soumis à une cristallisation à l'aide d'un solvant choisi dans le groupe constitué par des hydrocarbures aliphatiques monoet poly-halogénés contenant 1 à 5 atomes de carbone. Conviennent, en tant que solvants utilisables d'après l'invention, le chloroforme, le chlorure de méthylène, le dichlo- réthane, le tétrachlorure de carbone, le tétrachloréthane ou des mélanges de ces solvants. Selon un mode de réalisation préféré, on utilise le dichloréthane. Un procédé pour la purification d'acide chénodésoxy- cholique par cristallisation, mais non à partir de solvants halo- génés, est déjà connu dans l'état antérieur de la technique. La demande de brevet français publiée n 2 346 370 enseigne comment purifier l'acide chénodésoxycholique par cristallisation à partir d'acétonitrile. Mais ce solvant n'élimine pas l'acide lithocholi- que avec efficacité; en outre, il forme un produit de solvata- tion avec les cristaux d'acide chénodésoxycholique et il ne peut pas être éliminé complètement par évaporation. De plus, on 3. ne peut préparer, en utilisant l'acétonitrile, que la forme cris- talline ayant un point de fusion à 168 -170 C. L'acide chénodésoxycholique pur obtenu d'après la pré- sente invention, par cristallisation à partir d'un hydrocarbure aliphatique halogéné, a une teneur en solvant inférieure à 0,3 et son point de fusion se situe à 118-120 C. Si on le désire, les traces de solvants peuvent être éliminées et la forme polymor- phique peut être transformée en celle qui fond à 143 -145 C par dissolution dans un acide organique de bas poids moléculaire et miscible à l'eau, comme l'acide acétique ou propionique. Cette solution est filtrée, si nécessaire, et versée dans une grande quantité d'eau désionisée, maintenue à la température ambiante et sous agitation continue. Le précipité est alors recueilli par filtration, lavé plusieurs fois à l'eau et séché dans un four sous vide. Le produit cristallin ainsi obtenu fond à 143 -145 C et il est pratiquement exempt d'impuretés, ainsi que de solvants. Les exemples qui suivent ne sont destinés qu'à illus- trer la présente invention, sans la limiter. Exemple 1 g d'acide chénodésoxycholique contenant 1 % d'acide lithocholique sont dissous dans 500 ml de chloroforme sous chauffage. Après filtration, la solution est refroidie à 0 C et maintenue sous agitation pendant 2 h encore. Le précipité est recueilli par filtration, lavé au chloroforme froid et séché dans un four. Rendement: 48 g d'acide chénodésoxycholique fon- dant à 118 -120 C et contenant moins de 0,1 % d'acide lithocho- lique. Exemple 2 50 g d'acide chénodésoxycholique ayant une teneur en acide lithocholique de 0,1 % sont dissous dans 500 ml de dichlo- réthane sous chauffage. Après filtration, la solution est refroi- die à 0 C et maintenue sous agitation pendant 2 h encore. Le pré- cipité cristallin est recueilli par filtration, lavé au dichlo- réthane froid et séché dans un four. Rendement: 45 g d'acide chénodésoxycholique qui, comme le montre l'analyse par chromato- graphie en couche mince, est exempt d'acide lithocholique. 4- Exemple 3 g d'acide chénodésoxycholique de forme polymorphique quel- conque sont dissous dans 200 ml d'acide acétique; la solution limpide est versée dans 2000 ml d'eau désionisée sous agitation. Après l'achèvement de l'addition, le mélange est maintenu sous agitation pendant quelques heures, jusqu'à ce qu'il soit aussi homogène que possible. La matière solide est recueillie par filtration et lavée avec 500 ml d'eau; après filtration, la matière solide ainsi recueillie est lavée encore avec 2000 ml d'eau désionisée et séchée dans un four à 80 C sous vide, jus- qu'à ce que sa teneur en eau, déterminée par la méthode de Karl Fischer, soit inférieure à 0,5 %. Rendement: 99,5 g d'acide chénodésoxycholique fondant à 143-145 'C et, comme le montre la chromatographie en phase gazeuse, pratiquement exempt de solvants. REVENDICATIONS 1. Procédé pour la préparation d'acide chénodésoxy- cholique pratiquement exempt d'impuretés et de solvants, carac- térisé en ce que l'acide chénodésoxycholique brut est soumis à une cristallisation dans un solvant choisi dans le groupe consti- tué par des hydrocarbures aliphatiques mono- et poly-halogénés contenant 1 à 5 atomes de carbone, et en ce que, si on le désire, le produit ainsi obtenu est dissous dans un acide organique miscible à l'eau ayant un bas poids moléculaire, la solution ain- si obtenue est versée dans l'eau, et le précipité formé est re- cueilli par filtration, lavé à l'eau et séché. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le solvant halogéné est le dichloréthane. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'acide organique miscible à l'eau est l'acide acétique.