Brevet FR2473310A1 — publié le 19810717

La présente invention réalisée au Centre de Recherches PIERRE FABRE concerne un nouvel extrait de Lawsonia inermis conservant son pouvoir colorant pendant des durées très longues de l'ordre de plusieurs années. En outre, l'extrait peut être avantageusement ajusté à un titre standard en lawsone, ce qui permet une excellente fiabilité d'utilisation, par exemple dans les préparations cosmétiques. I1 est bien connu que les feuilles de Lawsonia inermis renferment un colorant déjà utilisé par les habitants de l'Afrique du Nord, en particulier pour se teindre les cheveux. Les feuilles broyées mélangées à de la chaux étaient appliquées en cataplasme sur la chevelure et laissées ainsi plusieurs heures. Cette façon de procéder est évidemment peu aisée, et c'est pourquoi on trouve actuellement dans le commerce des extraits à base de henné, mais il est curieux de constater que ces extraits ne contiennent généralement plus de lawsone (2-hydroxy-naphtoquinone) qui est le principe actif colorant de Lawsonia inermis. Cette observation a été vérifiée à l'aide de diverses techniques analytiques décrites ci-après plus en détail. Il a été en cutre été constaté que les extraits classiques réalisés avec des solvants polaires sont ins tables. Leur titre diminue progressivement et la lawsone disparaît totalement au bout de quelques mois, en même temps que le pouvoir colorant s'annule. De façon générale, des extractions réalisées suivant les techniques courantes avec des solvants tels que l'eau, l'alcool, les mélanges hydroalcooliques, hydroglycoliques, etc. ne permettent pas d'obtenir un extrait de henné au pouvoir colorant stable ; même une quantité de lawsone pure additionnée à de tels extraits disparaît très rapidement. Pour contrôler la qualité des extraits, trois méthodes d'analyses distinctes ont été mises en oeuvre, a savoir un test de coloration sur laine, un dosage chimique de la lawsone, et un dosage par chromatographie liquide haute performance (HPLC). 1. Test de coloration L'extrait à analyser est diluE au dixième avec de l'eau. Un brin de laine vierge est trempé pendant 5 minutes, puis rincé abondamment à l'eau. La coloration obtenue est comparée à une gamme témoin. 2. Dosage chimique Cette technique de dosage repose sur la réaction de la lawsone avec l'aminothiophénol. Par chauffage au bain-maie d'une solution diluée de réactif dans l'acide sulfurique 10 N, des traces de lawsone forment un précipité rouge violacé extractible au chloroforme. La lecture spectrophotométrique de la solution organique permet le dosage qui s'avère reproductible et précis lorsqu'il est appliqué aux extraits. 3. Dosage par HPLC Après dilution convenable de l'extrait, 10 p1 sont injectés en tête d'une colonne de chromatographie haute pression dans les conditions suivantes - phase stationnaire - Bondapak C18 - solvant d'élution eau-méthanol (7-3) tamponné à 0,05 % d'acétate d'ammonium - débit : 1,5 ml/min. - pression 2000 psi détecteur : UV 254 nm. Dans ces conditions la lawsone est parfaitement séparée. Le temps de rétention est de 4 minutes. Le dosage des extraits est fait comparativement à une courbe étalon obtenue avec de la lawsone pure. Apres mise en oeuvre répétée de ces divers procédés de contrôle des extraits, il a été constaté que l'instabilité des extraits était essentiellement liée à la présence de substances azotées entrainées avec le principe colorant au cours de l'extraction. Cette observation a permis d'expliquer pourquoi tous les extraits obtenus par simple macération de la plante-avec un solvant polaire, sans autre traitement destiné à éliminer les substances azotées, se révèlent instables. Selon le procédé objet de la présente invention, on élimine toutes les substances azotées, telles que les aminoacides et les protéines, susceptibles d'être entraînées avec le principe colorant au cours de l'opération d ' extraction. Ce~procédé de l'invention comprend deux variantes principales, dans la première le solvant d'extraction est choisi de telle sorte que les substances aminées indésirables ne soient pas extraites, alors que dans la seconde variante l'épuisement de la plante est réalisé avec un solvant polaire, un traitement secondaire se révélant alors nécessaire afin d'éliminer lesdite-s substances aminées. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture de la description detaillée faite ci-après, notamment à propos de quelques exemples de mise en oeuvre donnés à titre de simple illustration. Selon une première variante du procédé de la présente invention, on effectue les diverses opérations successives suivantes a) on procède à l'extraction en milieu acide d'un broyat de feuilles de Lawsonia inermis par un solvant peu polaire ne dissolvant pas les aminoacides, protéines et toutes autres substances azotées b) extraction de la solution organique résultant de l'étape a) par de l'eau alcaline c) extraction en milieu acide de la phase aqueuse résultant de l'étape b) par un solvant peu polaire ne dissolvant pas les aminoacides, protéines et toutes autres substances azotées, et d) séparation de l'extrait colorant à partir de la phase organique résultant de l'étape c). Selon une seconde variante le procédé de la présente invention se caractérise par les diverses opérations successives suivantes a) extraction d'un broyat de feuilles de Lawsonia inermisar un solvant polaire b) extraction en milieu acide de la solution résultant des'étape a) par un solvant peu polaire ne dissolvant pas les aminoacides, protéines et toutes autres substances azotées, et c) séparation de l'extrait colorant à partir de la phase organique résultant de l'étape b). Au cours de la mise en oeuvre du procédé, le milieu d'extraction est acidifié à l'aide de n'importe quel acide fort, tel que l'acide phosphorique, I'acidc sulfurique et l'acide chlorhydrique. A l'échelle industrielle, il apparalt toutefois préférable d'utiliser de l'acide phosphorique. Pour la mise en oeuvre de ce procédé, le milieu acide est amené à une valeur de pH sensiblement égale à 1. Selon une caractéristique de la présente invention, le solvant peu polaire ne dissolvant pas les aminoacides, protéines et toutes autres substances azotées peut être choisi de façon avantageuse parmi les cétones en C3 à C10 telles que l'éthyl-méthyl-cétone et la méthyl-isobutylcétone, les solvants chlorés en C1 à C3 tels que le dichloroéthane et le trichloroéthylène, les hydrocarbures aromatiques, les esters et les éthers en C3 a C10 ainsi que leurs mélanges. Selon une autre caractéristique de la présente invention, le solvant polaire utilisé peut être avantageusement choisi parmi l'eau, éventuellement alcaline, les alcools en C1 à C4, leurs mélanges et les mélanges hydroalcooliques à base d'alcools en C1 à C4. La séparation proprement dite de l'extrait colorant est obtenue par lavage de la phase organique obtenue, puis évaporation sur un solvant non volatil, jusqu'à élimination complète du solvant, ou encore par évaporation jusqu'à siccité, ou précipitation par un non solvant. L'extrait colorant peut être solubilisé dans un solvant compatible avec les préparations cosmétologique, dermo-cosmétique ou thérapeutique, selon des procédés en soi connus. Le principe colorant peut également être obtenu sous la forme de poudre, par exemple par évaporation d'un solvant par précipitation ou par atomisation. EXEF?LES Exemple 1 1 kg de feuilles de henné broyées est extrait par 3 litres d'éthyl-méthyl-cétone saturée d'acide phosphorique N. Après filtration et essorage, le filtrat cétonique est extrait par une solution de soude N. Après neutralisation de la solution sodique à l'acide phosphorique, le principe colorant est purifié par extraction au dichloroéthane. Par évaporation sur 2 litres de propanediol de la dernière phase organique, on obtient un extrait glycolique stable qui, après dosage et standardisation, constituera par exemple la matière colorante d'un shampooing au hennie. Exemple 2 1 kg de feuilles de henné broyées est extrait par agitation dans 5 litres d'eau à 200C. Après filtration, le filtrat est acidifié à pH 2 à l'aide d'acide sulfurique. I1 est extrait par 3 fois 1 litre de dichloréthane. Les phases organiques réunies sont lavées à l'eau et évaporées sur 1 litre de propanediol jusqu'à élimination complète du solvant. Le dosage réalisé comme décrit plus haut permet l. standardisation à un titre constant. S Exemple 3 1 kg de feuilles de henné broyées est extrait par 5 litres de lait de chaux à 10 %, à une température de 200C. Après séparation du marc et essorage, le filtrat est acidifié à pH 1 à l'aide d'acide phosphorique. I1 est extrait à plusieurs reprises par 3 fois 1 litre de trichloréthylène, lequel après un lavage à l'eau est évaporé à sec. La poudre brun rougeâtre obtenue constitue la matière colorante stable par exemple utile à la réalisation d'un shampooing au henné. Bien entendu, la présente invention ne se limite pas aux modes particuliers de mise en oeuvre du procédé décrits ; en revanche, il est parfaitement possible, sans pour autant sortir du cadre de la présente invention, d'en imaginer un certain nombre de variantes de détail. REVENDICArl'IONS 1. Extrait stable de Lawsonia inermis,caractérisé en ce qu'il est exempt de toutes substances azotées, telles que les amino-acides et les protéines. 2.Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est titré et standardisé en lawsone. 3. Procédé pour la préparation d'un extrait selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'on élimine toutes les substances azotées, telles que les amino-acides et les protéines, susceptibles d'être entraînées avec le principe colorant au cours de l'opération d'extraction. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'on effectue les diverses opérations successives suivantes a) extraction en milieu acide d'un broyat de feuil-les de Lawsonia inermis par un solvant peu polaire ne dissolvant pas les amino-acides, protéines et toutes autres substances azotées b) extraction de la solution organique résultant de I'étapel l'étape c) extraction en'milieu acide de la phase aqueuse résultant de l'étape b) par un solvant peu polaire ne dissolvant pas les amino-acides, protéines et toutes autres substances azotées, et d) séparation de l'extrait colorant à partir de la phase organique résultant de l'étape c). 5. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'on effectue les diverses opérations successives suivantes a) extraction d'un broyat de feuilles de Lawsonia inermis par un solvant polaire b) extraction en milieu acide de la solution résultant de l'étape a) par un solvant peu polaire ne dissolvant pas les amino-acides, protéines et toutes autres substances azotées, et c) séparation de l'extrait colorant à partir de la phase organique résultant de l'étape b). 6. Procédé selon l'une des revendications 4 et 5, caractérisé en ce que le milieu acide est amené à une valeur de pH voisine de 1. 7. Procédé selon l'une des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que ledit solvant peu polaire est choisi parmi les cétones en C3 à C10 telles que l'éthylméthyl-cétone et la méthyl-isobutylacétone, les solvants chlorés en C1 à C3 tels que le dichloroéthane et le trichloréthylène, les hydrocarbures aromatiques, les esters et les éthers en C3 à C10, ainsi que leurs mélanges. 8. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le solvant polaire est choisi parmi l'eau éventuellement alcaline, les alcools en C1 à C4, leurs mélanges et les mélanges hydroalcooliques à base d'alcools en C1 à C4. 9. Procédé selon l'une des revendications 4 à 8, caractérise en ce que la séparation de l'extrait colorant est obtenue par lavage de la phase organique obtenue, puis évaporation sur un solvant non volatil jusqu 'à élimination complète du solvant, ou évaporation jusqu'à siccité, ou précipitation par un non solvant. 10. Extrait stable de Lawsonia inermis caractérisé en ce qu'il est obtenu par la mise en oeuvre du procédé selon l'une des revendications 3 à 9. 11. Composition cosmétologique, dermo-cosmétologique ou thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle contient à titre de principe actif un extrait selon l'une des revendications 1,2 et 10. 12. Composition selon la revendication 11, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un shampooing colorant.