Brevet FR2465743A1 — publié le 19810327

La présente invention concerne de nouveaux dérivés 2-substitués de désoxy- 2 fortimicines A et B utiles notamment comme médicaments antibiotiques. Récemment, on a identifié une nouvelle famille d'anti- biotiques aminoglycosidiques, les fortimicines. Les brevets des EtatsUnis d'Amérique n 3 976 768 et n 3 931 400 décrivent les antibiotiques parents, la fortimicine A et la fortimicine B. On sait que, dès qu'un antibiotique aminoglycosidique a reçu un emploi clinique pendant un certain temps, des micro-organismes résistants apparaissent. Dans de nombreux cas, la résistance est liée au fac- teur R et on l'attribue à la capacité que présentent les bactéries à modifier par voie enzymatique les radicaux amino ou hydroxy de l'antibiotique aminoglycosidique. On sait que, dans les antibiotiques aminoglycosidiques que sont les fortimicines naturelles, le blocage du radical hydroxy-2 inactive l'antibiotique. La demande de brevet français 78 36 000 du 21/12/78 et le brevet belge n 872 912 du /6/1979 décrivent respectivement la désoxy-2 fortimicine A et la désoxy-2 fortimicine B. L'invention concerne de nouveaux dérivés 2-substitués de désoxy-2 fortimicines A et B ainsi que leurs sels, utiles notam- ment comme médicaments antibiotiques, des intermédiaires et des pro- cédés pour préparer ces composés et des compositions thérapeutiques et formes pharmaceutiques les contenant. On administre les composés de l'invention par voie parentérale à des doses journalières d'environ 10 à environ 200 mg/kg de poids corporel. Plus particulièrement, l'invention concerne des dérivés 2-substitués de désoxy-2 fortimicines A et B répondant à la formule: CH C.iH2 N2 1R2 %z)------()--OG / \ Y--o HO N-R CH3 o R représente un atome d'hydrogène, oa un radical glycyle, -alanyle, acétyle ou r-aminoalkyle inférieur, R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical amino, azido, halogéno, glycylamido, -alanylamido ou Ométhanesulfonyl-2 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical halogéno, et leurs sels convenant en pharmacie. On entend par "radical alkyle inférieur", un radical alkyle droit ou ramifié comportant 1 à 6 atomes de carbone, tel qu'un radical méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, sec- butyle, tert-butyle, pentyle, hexyle et similaires. On entend par "sels convenant en pharmacie", les sels d'addition d'acides non toxiques préparés par réaction de la base avec un acide organique ou minéral approprié. On peut citer comme exemples caractéristiques de sels, les chlorhydrates, bromhydrates, sulfates, bisulfates, acétates, oxalates, valérates, oléates, palmi- tates, stéarates, laurates, borates, benzoates, lactates, phos- phates, tosylates, citrates, maléates, fumarates, succinates, tar- trates, napsylates et similaires. L'invention concerne en particulier les désoxy-2 for- timicines 2-substituées, les désoxy-2 fortimicines 2-épi-substituées et les N-alkyl-2 désoxy-2 fortimicines 2- substituées à activité anti- bactérienne. Les désoxy-2 chloro-2 fortimicines, les désoxy-2 épi- chloro-2 fortimicines, les désoxy-2 amino-2 fortimicines, les désoxy-2 azido-2 fortimicines, les N-alkyl-2 désoxy-2 amino-2 forti- micines et leurs sels d'addition d'acides non toxiques convenant en pharmacie possédant une activité antibactérienne présentent un intérêt particulier. L'invention concerne également des composés chimiques utiles comme intermédiaires pour la préparation des désoxy-2 fortimicines 2substituées, ces intermédiaires ayant une structure pseudo-diglycosidique. Parmi eux figurent les dérivés de type O-hydro- carburesulfonyl-2 ainsi que les dérivés de type O-hydrocarbure- sulfonyl-2 dont tous les radicaux amino primaires sont protégés par un radical alcanoyle inférieur, carbobenzyloxy, thioalcanoyle infé- rieur, thioaroyle, ou alkylthiocarbamoyle inférieur. Le radical méthylamino secondaire et le groupe voisin dans la série de la fortimicine B peuvent également être protégés par un aldéhyde pour former un cycle oxazolidine. Les procédés de l'invention concernent de façon géné- rale le remplacement du radical hydroxy en C2 du fragment fortamine des fortimicines par un radical halogéno, azido ou amino ayant ou non la configuration naturelle en C2 pour obtenir un nouveau dérivé de fortimicine ayant une activité antibactérienne. En résumé, selon un procédé, on transforme le radical hydroxy en C2 de la fortimicine en un ester hydrocarbure sulfonique en C2 que l'on transforme en une fonction azido ou épi-halogéno. On transforme facilement la fonction azido en radical amino par réduc- tion catalytique. Plus particulièrement, selon ce procédé, on fait réagir une fortimicine B ayant une fonction hydroxy en C2, dont les radicaux amino primaires sont protégés par un radical carbDbenzyloxy, alcanoyle inférieur, thioalcanoyle inférieur, thioaroyle ou alkyl- thiocarbamoyle inférieur et le radical méthylamino secondaire en C4 et le radical hydroxy voisin sont protégés par un cycle oxazolidine avec un halogénure ou anhydride d'hydrocarburesulfonyle comportant jusqu'à 16 atomes de carbone pour former un intermédiaire de type Ohydrocarburesulfonyl-2 fortimicine que l'on traite ensuite avec un acide minéral pour hydrolyser le cycle oxazolidine et former une O-hydrocarburesulfonyl-2 fortimicine B 1,2',6'-tri-N-protégée. Selon un procédé, on élimine les groupes N-protecteurs de l'0hydrocarburesulfonyl-2 fortimicine B 1,2',6'-tri-N-protégée selon des procédés classiques pour former ainsi une O-hydrocarbure- sulfonyl-2 fortimicine B que l'on réarrange en conditions basiques pour former une désoxy-2 épimino-1,2 fortimicine B. On traite la désoxy-2 épimino-1,2 fortimicine B avec une solution aqueuse saturée acide d'azide de sodium ou avec de l'acide chlorhydrique dans un mélange de méthanol et d'eau pour former respectivement une azido-2 désoxy-2 fortimicine B ou une chloro-2 désoxy-2 fortimicine B. Pour transformer le dérivé de fortimicine B en un dérivé de fortimicine A, on protège sélectivement les radicaux amino primaires du dérivé de désoxy-2 fortimicine B 2-substitué par transformation en fonctions N-carboxybenzyloxy. On acyle la fonction méthylamino libre en C4 avec un ester actif ou selon un autre procédé classique connu dans l'art. L'hydrogénolyse catalytique des groupes N-protecteurs dans un milieu acide forme les désoxy-2 N-acyl-4 fortimicines B 2-substituées, Selon un autre procédé, on fait réagir une N-acyl-4 O-hydrocarburesulfonyl-2 fortimicine per-N-protégée avec un agent nucléophile tel qu'un ion chlorure ou azide dans un solvant approprié. Lorsque l'agent nucléophile est l'ion chlorure, on obtient une épi- chloro-2 désoxy-2 N-acyl-4 fortimicine per-N-protégée. Lorsque l'agent nucléophile est l'ion azide, on isole l'azido-2 désoxy-2 N-acyl-4 fortimicine per-N-protégée. On élimine,selon des procédés appropriés, les groupes N-protecteurs des désoxy-2 N-acyl-4 fortimicines 2-substi- tuées per-N-protégées, de préférence dans un milieu acide pour obtenir les désoxy-2 N-acyl-4 fortimicines 2-substituées. On prépare également de façon pratique les désoxy-2 chloro-2 ou les désoxy-2 azido-2 N-acyl-4 fortimicines à partir des désoxy-2 épimino-1,2 N-acyl-4 fortimicines appropriées par traitement avec l'acide chlorhydrique dans un mélange de méthanol et d'eau ou avec une solution aqueuse saturée acide d'azide de sodium, pour former respectivement une chloro-2 désoxy-2 N-acyl-4 fortimicine ou une azido-2 désoxy-2 N-acyl-4 fortimicine. On prépare la désoxy-2 épimino- 1,2 N-acyl-4 fortimicine par élimination catalytique des groupes Nprotecteurs d'une O-hydrocarburesulfonyl-2 N-acyl-4 fortimicine per-Nprotégée et on laisse le dérivé de fortimicine débarrassé des groupes N-protecteurs séjourner à un pH basique pour produire la fonc- tion épimino-l,2. On prépare de façon pratique les désoxy-2 amino-2 di-N-acyl-2,4fortimicines par réduction sélective en radical amino de la fonction azido-2 de l'azido-2 désoxy-2 N-acyl-4 fortimicine per-N-protégée correspondante. On effectue de façon pratique cette dernière réduction par voie catalytique avec du charbon palladié. On acyle ensuite la fonction amino-2 selon des procédés classiques et on élimine les groupes N-protecteurs dans un milieu acide comme précédemment. Les composés de l'invention sont utiles comme anti- biotiques à action générale lorsqu'on les injecte par voie parenté- rale,c'est-à-dire par voie intramusculaire, intraveineuse, intra- 5. péritonéale ou sous-cutanée. On peut également administrer les compo- sés par voie orale lorsqu'il est souhaitable de désinfecter les voies intestinales et on peut, de plus,les administrer localement ou par voie rectale. Parmi les formes solides convenant à l'administration orale figurent les capsules, les comprimés, les pilules, les poudres et les granules. Dans ces formes solides d'administration, le composé actif est mélangé à au moins un diluant inerte tel que le saccharose, le lactose ou l'amidon. Ces formes d'administration peuvent également contenir, comme il est habituel, des substances additionnelles autres que des diluants inertes, par exemple des lubrifiants comme le stéarate de magnésium. Dans le cas des capsules, des comprimés et des pilules, les formes d'administration peuvent également contenir des tampons. On peut de plus préparer des comprimés ou des pilules à délitage intestinal. Parmi les formes liquides d'administration orale, figurent les émulsions, solutions, suspensions, sirops et élixirs, convenant en pharmacie, contenant des diluants inertes couramment utilisés dans l'art, tels que l'eau. En plus de ces diluants inertes, ces compositions peuvent également contenir des adjuvants tels que des agents mouillants, des émulsifiants, des agents de mise en suspension, des édulcorants, des arômes et des parfums. Parmi les préparations de l'invention convenant à l'administration parentérale, figurent les solutions, suspensions ou émulsions stériles aqueuses ou non aqueuses. On peut citer comme exemples de solvants ou véhicules non aqueux, le propylèneglycol, le polyéthylèneglycol, les huiles végétales, telles que l'huile d'olive, et les esters organiques injectables, tels que l'oléate d'éthyle. Ces formes d'administration peuvent contenir aussi des adjuvants tels que des conservateurs, des agents mouillants, des émulsifiants et des agents dispersifs. On peut les stériliser par exemple par filtration sur un filtre retenant les bactéries ou par incorporation d'agents stérilisants. On peut également les préparer sous forme de compositions solides stériles que l'on peut dissoudre immédiatement avant l'emploi dans de l'eau stérile ou dans un autre milieu injectable stérile. Les compositions convenant à l'administration rectale sont, de préférence, des suppositoires qui peuvent contenir, en plus de la substance active, des excipients tels que le beurre de cacao ou une cire pour suppositoire. La quantité d'ingrédient actif que contiennent les compositions de l'invention peut varier; cependant, il est néces- saire que la quantité d'ingrédient actif soit telle qu'on obtienne une forme d'administration appropriée. La posologie choisie dépend de l'effet thérapeutique désiré, de la voie d'administration et de la durée du traitement. Généralement, on administre à un mammi- fère,atteint d'une infection provoquée par un micro-organisme sen- sible, une dose journalière comprise entre 10 et 200 mg/kg de poids corporel. On prépare de façon appropriée les dérivés 2-substi- tués de désoxy-2 N-alkyl-4 fortimicine B par traitement d'une désoxy-2 N-acyl-4 fortimicine 2-substituée per-N-protégée, préparée comme pré- cédemment, avec un agent réducteur de type hydrure de bore, puis élimination des groupes N-protecteurs. L'invention est illustrée par les exemples non limi- tatifs suivants. EXEMPLE 1 Tri-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6' fortimicine B (1) A une solution agitée de 2,0 g de fortimicine B. 30 ml d'eau et 60 ml de méthanol, refroidie au bain-marie glacé, on ajoute 4,44 g de N-(benzyloxycarbonyloxy)succinimide. On poursuit l'agita- tion à 0 C pendant 3 h, puis à la température ordinaire pendant 22 h. On évapore sous pression réduite la majeure partie du méthanol et on agite le résidu avec un mélange de chloroforme et d'eau. On lave la solution chloroformique à l'eau et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On évapore le chloroforme et on chromatographie le résidu sur gel de silice. On élue avec un système solvant constitué d'un mélange chloroformeméthanol-hydroxyde d'ammonium concentré (23,4/1,4/0,1 en volumes) pour obtenir 1,05 g de tri-N-benzyloxy- carbonyl-1,2',6' fortimicine B. 255- [a]5 +16,5O(c = 1,0, CH3OH); IR (CDC13) 1712 et 1507 cm; D 3 RMN (CDC13) 6: 1,03 (C6,-CH3, J6'1 7' = 6,0 Hz), 2,32 (C4-NCH3), 3,41 (C3-0CH3). Analyse théorique pour C39H50N40ll: C 62,39; H 6,71; N 7,46% trouvée: C 62,16; H 6,76; N 7,43% EXEMPLE 2 Tri-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6' salicylaldéhyde-oxazolidino-4 5 fortimicine B (2) On traite une solution de 22 g de tri-N-benzyloxy- carbonyl-l,2',6' fortimicine B dans 396 ml de méthanol avec 3,96 ml de salicylaldéhyde et on porte à reflux pendant 1 h. On évapore le mélange réactionnel sous pression réduite pour obtenir 26 g de tri- N-benzyloxycarbonyl-1,2 ',6' salicylaldéhyde-oxazolidino-4,5 forti- micine B sous forme d'un solide jaune brunâtre: RIIN (CDC13) 6: 0,94 (C6,CH3, J6'7' = 7,0 Hz), 2,34 (C4-NCH3), 3,49 (C3-OH3), 7,31 (Cbz-aromatique). EXEMPLE 3 Tri-N-benzyloxycarbonyl-1 2',6' (O-méthanesulfonyl-2 salicylaldéhyde)- oxazolidino-4,5 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine B (3) On traite une solution agitée de 26 g de tri-N-benzyl- oxycarbonyl-1,2',6' salicylaldéhyde-oxazolidino-4,5 fortimicine B dans 154 ml de pyridine anhydre avec 12,26 ml de chlorure de méthane- sulfonyle fraichement distillé. Après 20 h d'agitation, on verse le mélange réactionnel dans 2 000 ml d'une solution à 5% de bicarbonate de sodium et on extrait deux fois avec des portions de 1 000 ml de chloroforme. On lave les extraits chloroformiques combinés avec 1 000 ml de bicarbonate de sodium h 5%, puis deux fois avec des por- tions de 1 000 ml d'eau. On évapore le chloroforme sous pression réduite et on chasse la pyridine par codistillation répétée avec du benzène pour obtenir 31,2 g de tri-N-benzyloxycarbonyl-l,2',6' (O-méthanesulfonyl-2 salicylaldéhyde) oxazolidino-4,5 0-méthanesul- fonyl-2 fortimicine B: RMN (CDC13) &: 1,0 (C6,-CH3 J6' 7 = 7,0 Hz), 2,19 (C4-NCH3) 2,94 (C2-OS02CH3), 3,15 (Ar-OS02CH3), 3,60 (C3-OCH3), 7,33 (Cbz- aromatique. EXEMPLE 4 Tri-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6' O-méthanesulfonyl-2 fortimicine B (4) On traite une solution agitée de 31,2 g de tri-N- benzyloxycarbonyl-l1,2',6' (0-méthanesulfonyl-2 salicylaldéhyde)oxazo- lidino-4,5 0-méthanesulfonyl-? fortimicine B dans 1 000 ml de tétra- hydrofuranne avec 262 ml d'acide chlorhydrique 0,4 N. Après 4 h d'agitation, on verse le mélange réactionnel dans 5 700 ml d'une solution 6 N d!hydroxyde d'ammonium et on extrait deux fois avec des portions de 1 400 ml de chloroforme. On lave les extraits chloro- formiques combinés avec 5 700 ml d'une solution à 7% de bisulfite de sodium, puis deux fois avec des portions de 1 180 ml d'eau. On chasse le chloroforme sous pression réduite pour obtenir 27,35 g de tri-Nbenzyloxycarbonyl-1,2',6' 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine B brute. On chromatographie le produit brut sur une colonne (6,0 x80 cm) de gel Sephadex LH-20 préparée et éluée avec de l'éthanol à 95%. On combine les fractions contenant la matière désirée et on concentre à sec sous pression réduite pour obtenir la tri-N-benzyloxycarbonyl- 1,2',6' 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine B sous forme d'un produit vitreux: [a]D + 18,5 (c = 1,0; CH3OH); IR (CDC13) 3436, 3350, 1703, 1502, 1354 et 1173 cm l; RMN (CDC13) $: 1,07 (C6,-CH3, J6' 71= 7,0 Hz), 2,34 (C4-NCH3), 2,87 (OSO2CH3), 3,48 (C3-OCH3). Analyse théorique pour C40H52N4013S: C 57,96; H 6,32; N 6,76% trouvée: C 57,65; H 6,52; N 6,62% EXEMPLE 5 Tétra-N-benzyloxycarbonyl 0- méthanesulfonyl-2 fortimicine A (5) On traite pendant 20 h avec 1,005 g d'ester N-hydroxy- succinimidique de la N-benzyloxycarbonylglycine, une solution agitée de 2, 267 g de tri-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6' 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine B dans 14 ml de tétrahydrofuranne anhydre. On évapore le tétrahydrofuranne sous pression réduite pour obtenir un solide jaune citron. On chromatographie le solide sur une colonne (3,0 x 74 cm) de gel de silice préparée et éluée avec un système solvant constitué d'un mélange benzène-méthanol-éthanol à 95%-hydroxyde d'ammonium concentré (23, 5/1,4/2,0/0,2 en volumes). On évapore à sec les éluats ne contenant que le pr>duit principal pour obtenir 1,789 g de tétra- N-benzyloxycarbonyl O-méthanesulfonyl-2 fortimicine A: [a]24 + 40,7 (c = 1,0; méthanol); IR (CDC13) 3427, 1710, 1635 et 1495 cm l; RMN (CDC13): 1, 15 (d, C6,-CH3, J6',7 = 7,0 Hz), 2,81 (s, C4-NCH3), 3,02 (s, C2-OS02CH3), 3,50 (s, C3-OGH3), 7,25 (m, Cbz-aromatique). 246S743 Analyse théorique pour C50H61N5016S: C 58,87; H 6,03; N 6,87; S 3,14% trouvée: C 58,70; H 6,04; N 6,62; S 2,89% EXEMPLE 6 Tétrachlorhvdrate de O-méthanesulfonyl-2 fortimicine A (6) On hydrogénolyse pendant 4 h sous 3 bars d'hydrogène, en présence de 5,0 g de charbon palladié à 5%, une solution préparée à partir de 5,0 g de tétra-N-benzyloxycarbonyl-l1,2',6',2" O-méthane- sulfonyl-2 fortimicine A et 425 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On élimine le catalyseur par filtration et on évapore le méthanol sous pression réduite. On élimine l'eau résiduelle et l'excès d'acide par codistillation répétée sous pression réduite avec du méthanol pour obtenir 2,753 g de tétrachlorhydrate de O-méthane- sulfonyl-2 fortimicine A: 2 5 [a]D5 + 79,8 (c = 1,0; méthanol); IR (KBr) 3420, 2930, 1640, 1590, 1485, 1332 et 1143 cm1; RMN (D20, TES externe) ': 1,81 (d, C6,-CH3, J6',7' = 7,0 Hz), 3,61 (s, C4-NCH3), 3,83 (s, C2OSO2CH3), 4,07 (s, C3-OCH3), 5,81 (d, H1,, J1',2' = 3,0 Hz); spectre de masse (M- - SO2CH2) m/e 405. EXEMPLE 7 Dèsoxy-2 épimino-1,2 fortimicine A (7) On fait passer à travers une colonne d'une résine échangeuse d'anions de type ammonium quaternairestyrène, par exemple la résine AG2 X8 (0,30-0,15 mm), forme hydroxyle, vendue par Bio-Rad Laboratories, suffisante pour éliminer les ions chlorures, une solu- tion préparée à partir de 1,40 g de tétrachlorhydrate de O-méthane- sulfonyl-2 fortimicine A. On combine les éluats basiques et on les laisse reposer à la température ordinaire pendant 120 h. Après évaporation de la majeure partie de l'eau, on fait à nouveau passer la solution à travers une colonne de résine échangeuse d'anions du type précédemment décrit, suffisante pour éliminer l'acide méthanesulfonique produit par la formation du cycle épimino-l,2. On combine les éluats basiques et on les concentre à sec sous pres- sion réduite pour obtenir 1,121 g de désoxy-2 épimino-l,2 forti- micine A: RMN (D20, TMS externe): 1,12 (C6,-CH3, J6',7 = 7,0 Hz); 3,51 (s. C4-NCH3), 3,96 (s, C3-OCH3), 5,41 (d, H1" J1 2 = 3,0 Hz). EXEMPLE 8 Tétrachlorhydrate de chloro-2 désoxy-2 fortimicine A (8) On laisse séjourner pendant 0,5 h, une solution pré- parée à partir de 0,5 g de désoxy-2 épimino-l,2 fortimicine A et 100 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On évapore le méthanol sous pression réduite. On chasse l'eau résiduelle et l'excès d'acide par codistillation sous pression réduite avec du méthanol pour obtenir le tétrachlorhydrate de chloro-2 désoxy-2 fortimicine A: IR (KBr) 3420, 1640, 1595 et 1490 cm; RRMN (D20, TMS externe): 1,82 2' (d, C6,-CH3, J6' 7 = 7, 0 Hz), 3,61 (s, C4-NCH3), 3,98 (s, C3-OCH3), ,80 (d, H1,, J1'2 =2 3,0 Hz). EXEMPLE 9 Tétrachlorhydrate d'azido-2 désoxy-2 fortimicine A (25) On ajuste à 5,0 avec de l'acide chlorhydrique le pH d'une solution préparée à partir de 1, 160 g d'épimino-1,2 fortimicine A et 72 ml d'une solution aqueuse saturée d'azide de sodium. _Après séjour à la température ordinaire pendant 60 h, on concentre la solu- tion à sec sous pression réduite. On fait passer le résidu à travers une colonne (2,2 x 100 cm) de Sephadex G-15 (vendue par Pharmacia Fine Chemicals, Inc) préparée et éluée avec de l'acide acétique 0,1 N. On recueille les éluats contenant le composant principal et on les concentre à sec ?our obtenir 0,446 g d'un résidu. On chromatographie rapidement le résidu sur une colonne (1,8 x 41 cm) de gel de silice préparée et éluée avec un système solvant constitué de la phase infé- rieure d'un mélange de chloroforme-méthanol-hydroxyde d'ammonium concentré (1/1/1 en volumes). On concentre à sec les fractions ne contenant que le composant principal et on dissout le résidu dans ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On évapore la solution à sec et on chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codis- tillation répétée avec du méthanol pour obtenir 0,381 g de tétra- chlorhydrate d'azido-2 désoxy-2 fortimicine A. IR (KBr) 3425, 2920, 2105, 1630, 1585 et 1428 cm1; RMN (D20) &: 1,83 (d, C6,-CH3, J6'7 = 7,0 Hz), 3, 60 (s, C4-NCH3), 4,04 (s, C3-OCH3), ,79 (d, Hi,, J1 2' = 3,5 Hz). 2465?43 EXEMPLE 10 Tétrachlorhydrate d ' 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine B (9) On traite pendant 4 h avec 4,5 g de charbon palladié à 5% sous 3 bars d'hydrogène, une solution de 4,42 g de tri-N-benzyl- oxycarbonyl-l1,2',6' O-méthanesulfonyl-2 fortimicine B dans 310 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On sépare le catalyseur par filtration et on le lave à l'éthanol. On concentre le filtrat à sec sous pression réduite et on chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codistillation répétée avec du méthanol pour obtenir 2,79 g de tétrachlorhydrate d'O-méthanesulfonyl-2 fortimicine B sous forme d'un produit blanc vitreux: [a]D + 91,7 (c = 1,01, CH30H); IR (KBr) 3400, 2920, 1590, 1330 et 1165 cm; RMN (D20, TMS externe) 6: 1,82 (C6,-CH3, J6', 7 = 7,0 Hz), 3,31 (C4-NCH3),3,88 (C2-OS2CH3), 4,07 (C3-OCH3), 5,88 (Hl, Jl9 2 = 4,0 Hz). EXEMPLE 11 Epimino-1,2 fortimicine B (10) On fait passer à travers une colonne (2,2 x 20 cm) -d'une résine échangeuse d'anions de type ammonium quaternaire- styrène, par exemple la résine AG 2-X8 (0,30-0,15 mm), sous la forme OH, vendue par Bio-Rad Laboratories, suffisante pour éliminer les ions chlorures, une solution préparée à partir de 2,8 g de tétra- chlorhydrate d'O-méthanesulfonyl-2 fortimicine B dans 20 ml d'eau. On combine les éluats basiques et on les laisse reposer à la tempé- rature ordinaire pendant 72 h. On évapore l'eau sous pression réduite pour obtenir 3,0 g d'épimino-l,2 fortimicine B: RPN (D20, TMS externe) d: 1,55 (C6,-CH3, J6,71 = 7,0 Hz), 2,83 (C4-NCH3), 4,02 (C3-0CH3), 5,42 (H1,, J1, 2= 3,0 Hz). EXEMPLE 12 Tétrachlorhydrate de chloro-2 désoxy-2 fortimicine B (11) On laisse reposer à la température ordinaire pendant ,5 h, une solution préparée à partir de 2,90 g d'épimino-1:2 fortimicine B dans 200 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On concentre le mélange réactionnel à sec sous pression réduite et on chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codistillation répétée avec du méthanol pour obtenir 3,935 g de tétrachlorhydrate de chloro-2 désoxy-2 fortimicine B: -1 IR (KBr) 3400, 2940, 1590 et 1505 cm; spectre de masse, m/e: 366, 2057; théorique pour C15H31C1N404: 366,2033. EXEMPLE 13 Chloro-2 désoxy-2 fortimicine B (12) On applique une solution préparée A partir de 2,2 g de tétrachlorhydrate de chloro-2 désoxy-2 fortimicine B dans 10 ml d'eau à une colonne (2,2 x 11 cm) d'une résine échangeuse d'anions de type ammonium quaternaire-styrène, telle que la résine AG 2-X8 (0,30-0,15 mm), forme hydroxyle, vendue par Bio-Rad Laboratories. Après élution à l'eau, on concentre les éluats basiques à sec sous pression réduite pour obtenir 2,1 g de chloro-2 désoxy-2 fortimi- cine B: RMN (D20, TMS externe): 1,51 (d, C6,-CH3, J1, 2' = 7,0 Hz), 2,88 (s, C4-NCH3), 4,00 (s, C3-OCH3), 5,52 (d, H,1 J1',2' = 4,0 Hz). EXEMPLE 14 Tri-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6' chloro-2 désoxy-2 fortimicine B (13) On traite une solution agitée et refroidie au bain- marie glacé préparée à partir de 2,1 g de chloro-2 désoxy-2 forti- micine B, 23 ml d'eau et 46 ml de méthanol avec 3,45 g de N-(benzyl- oxycarbonyloxy)succinimide. On poursuit l'agitation à 0 C pendant 3 h, puis à la température ordinaire pendant 14 h. On évapore la majeure partie du méthanol sous pression réduite et on agite le résidu avec un mélange de 125 ml d'eau et 75 ml de chloroforme. On sépare le chloroforme et on agite à nouveau la portion aqueuse avec ml de chloroforme. On sèche les extraits chloroformiques combinés sur du sulfate de magnésium anhydre. Après évaporation du chloroforme, on chromatographie le résidu sur une colonne de gel de silice. On élue avec un système solvant constitué de benzène-méthanol-éthanol à 95%-hydroxyde d'ammonium concentré (23,5/1,4/2, 0/0,2 en volumes) pour obtenir 1,237 g de tri-N-benzyloxycarbonyl-l,2',6' chloro-2 désoxy-2 fortimicine B: RMN (CDC13) S: 1,07 (d, C6,-CH3, J6'7 = 6,5 Hz), 2,31 (s, C4-NCH3) 3,43 (s, C3-OCH3), 4,92 (d, H1" J' 2' 1 = 4,0 Hz), 7,33 (m, Cbz- aromatique). EXEMPLE 15 Tétra-N-benzyloxycarbonyl chloro-2 désoxy-2 fortimicine A (14) On traite une solution agitée préparée à partir de 0,635 g de tri-N-benzyloxycarbonyl-l,2',6'chloro-2 désoxy-2 forti- micine B et 11 ml de tétrahydrofuranne anhydre, avec 0,328 g de l'ester N-hydroxysuccinimidique de la N-benzyloxycarbonylglycine. Après 18 h d'agitation à la température ordinaire, on évapore le tétrahydrofuranne sous pression réduite pour obtenir un résidu qu'on applique à une colonne (2,0 x 65 cm) de gel de silice et on élue avec une système solvant constitué de benzène-méthanol-éthanol à %-hydroxyde d'ammonium concentré (23,5/1,4/2,0/0,2 en volumes). On évapore à sec les éluats ne contenant que le produit principal pour obtenir 0,610 g de tétra-N-benzyloxycarbonyl chloro-2 désoxy-2 fortimicine A. EXEMPLE 16 Tétrachlorhydrate de chloro-2 désoxy-2 fortimicine A (8) On traite pendant lk h une solution Rréparée à partir de 0,610 g de tétra-N-benzyloxycarbonyl chloro-2 désoxy-2 fortimi- cine A dans 75 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol avec 0,61 g de charbon palladié à 5%, sous 3 bars d'hydrogène. On recueille le catalyseur sur un filtre et on le lave au méthanol. On évapore le filtrat à sec sous pression réduite et on chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codistillation répétée avec du méthanol pour obtenir 0,384 g de tétrachlorhydrate de chloro-2 désoxy-2 fortimicine A:IR (KBr) 3420, 1640, 1595 et 1490 cm; RMN (D20 TMS externe) 4: 1,82 2 > (d, C6,-CH3, J6'7' = 7=,0 Hz), 3,61 (s, C4-NCH3), 3,98 (s. C3-OCH3), ,80 (d, HR, J1',2' = 3,0 Hz). EXEMPLE 17 Tri-N-benzyloxycarbonyl-1,2' 6' désoxy-2 épimino-2,4 fortimicine B A une solution agitée de 2,0 g de tri-N-benzyloxy- carbonyl-1,2',6' O-méthanesulfonyl-2 fortimicine B dans 111 ml de diméthylformamide anhydre chauffée à 93 C au bain d'huile, on ajoute 2,0 g d'azide de sodium en poudre. On poursuit l'agitation à 93 C pendant 18 h. Après refroidissement à la température ordinaire, on verse le mélange réactionnel dans 1 lUO ml d'eau et on extrait trois fois avec des portions de 360 ml de chloroforme. On lave deux fois les extraits chloroformiques combinés avec des portions de 360 ml d'eau et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On évapore le chloroforme sous pression réduite et on chasse le diméthylformamide par codistillation répétée avec du toluène. On chromatographie le résidu sur une colonne de gel de silice avec un système solvant constitué d'acétate d'éthyle-éthanol à 95%/- hydroxyde d'ammonium concentré (9,5/0,5/0,05 en volumes). On rejette les premières fractions éluées. On combine les fractions suivantes et on évapore à sec pour obtenir 0,381 g d'un composant principal constitué de tri-N-benzyloxycarbonyl-l,2',6' désoxy-2 épimino-2,4 fortimicine B: [a]D3 + 40,6 (c = 1,0; méthanol);IR (CDC13) 3439, 1710 et 1500 cm; }1N (CDC13) 6 1,05 (d, C6,-CH3, J6' 7' = 6,0 Hz) 2,54 (s, C4-NCH3), 3,23 (s, C3-OCH3), 7,31 (m, Cbz-aromatique). Analyse théorique pour C39H48N4010 C 63,92; H 6,60; N 7,65% trouvée: C 63, 91; H 6,55; N 7,90% EXEMPLE 18 Tétrachlorhydrate d'O-méthanesulfonyl-2 fortimicine A (6) On hydrQgénolyse sur 2,20 g de charbon palladié à 5%. pendant 4 h une solution de 2,236 g de tétra-N-benzyloxycarbonyl Ométhanesulfonyl-2 fortimicine A dans 200 mli d'acide chlorhydrique 0,2 N. On recueille le catalyseur sur un filtre et on lave au métha- nol. On concentre le filtrat à sec et on chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codistillation répétée avec du méthanol sous pression réduite pour obtenir 1,40 g de tétrachlorhydrate d'O-méthane- sulfonyl-2 fortimicine A: [a]25 + 79,8 (c = 1,0; méthanol); IR (KBr) 3420, 2930, 1640, 1590, 1485, 1332 et 1143 cm; RMN (D20, TMS externe) d: 1,81 (d, C6.,-CH3, J6, 7 = 7,0 Hz), 3,61 (s, C4-NCH3), 3,83 (s, C2-OSO 2CH3) 4,07 (s, C3-OCH3), 5,82 (di H1, J, =3,0 Hz). 2 EXEMPLE 19 Amino-2 désoxy-2 fortimicine A (19) On hydrogène sur 0,20 g de charbon palladié pendant 4 h une solution préparée à partir de 0,174 g d'azido-2 désoxy-2 fortimicine A et 40 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On recueille le catalyseur sur un filtre et on le lave au méthanol. * On concentre le filtrat à sec et on chasse l'excès d'acide chlor- hydrique par codistillation répétée avec du méthanol sous pression réduite pour obtenir 0,157 g d'amino-2 désoxy-2 fortimicine A sous forme du pentachlorhydrate: [c]25 + 80,1 (c = 1,03; méthanol); IR (KBr) 3410, 2940, 1645, 1590 D -1 et 1486 cm; spectre de masse m/e: 404,2744 (M+); théorique pour C17H36N605: 404,2747. EXEMPLE 20 Azido-2 tri-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6' désoxy-2 fortimicine B (17) On traite une solution agitée et refroidie au bain- marie glacé préparée à partir de 2,0 g d'azido-2 désoxy-2 forti- micine B, 20 ml d'eau et 40 ml de méthanol avec 3,30 g de N-(benzyl- oxycarbonyl)succinimide. On poursuit l'agitation à froid pendant 3 h, puis à la température ordinaire pendant 16 h. On évapore sous pression réduite la majeure partie du méthanol et on agite le résidu avec un mélange de 60 ml de chloroforme et 125 ml d'eau. On extrait la portion aqueuse avec 60 ml additionnels de chloroforme. On sèche les extraits chloroformiques combinés sur du sulfate de magnésium anhydre et on évapore. On chromatographie le résidu sur une colonne de gel de silice. On élue avec un système solvant constitué de benzène-méthanol-éthanol à 95%-hydroxyde d'ammonium concentré (23,5/1,4/2,0/0,2 en volumes) pour obtenir de l'azido-2 tri-N-benzyl- oxycarbonyl-l,2',6' désoxy-2 fortimicine B. EXEMPLE 21 Azido-2 désoxy-2 fortimicine B (16) On ajuste à 5,0 avec de l'acide chlorhydrique le pH d'une solution préparée à partir de 2,035 g de désoxy2 épimlino-l,2 fortimicine B et 120 ml d'une solution aqueuse saturée d'azide de sodium et on laisse séjourner à la température ordinaire pendant 48 h. On chasse l'eau sous pression réduite et on chromatographie le résidu sur une colonne (1,8 x 51 cm) de gel de silice préparée et éluée avec un système solvant constitué de la phase inférieure d'un mélange de chloroforme-méthanol-hydroxyde d'ammonium concentré (1/1/1 en volumes). On concentre les éluats à sec pour obtenir 1,71 g de résidu. On chromatographie le résidu sur une colonne (2,0 x 41 cm) de résine échangeuse de cations telle que la résine Bio-Rex 70 de Bio-Rad Laboratories (0,15-0,074 mm), forme NH4 et on élue avec un gradient allant de l'eau à l'hydroxyde d'ammonium 1 N. On concentre à sec ies fractions contenant le composé principal pour obtenir un résidu qu'on dissout dans l'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On évapore le méthanol et on chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codistillation répétée avec du méthanol sous pres- sion réduite, pour obtenir l'azido-2 désoxy-2 fortimicine B qu'on isole sous forme du tétrachlorhydrate: - IR (KBr) 2100, 1583 et 1490 cm; RMN (D20, TMS externe) 6: 1,84 (d, C6,-CH3, J6',7 = 6,5 Hz), 3,32 (s, C4-NCH3) , 4,07 (s, C3-OCH3), ,89 (d, H1, Jl' 2' = 3,5 Hz). EXEMPLE 22 Pentachlorhydrate d'amino-2 désoxy-2 N-glycyl-2 fortimicine A (24) On traite pendant 4 h,avec 0,080 g de charbon palla- dié à 5% sous 3 bars d'hydrogène,une solution préparée à partir de 0,081 g d'amino-2 penta-N-benzyloxycarbonyl désoxy-2 N-glycyl-2 fortimicine A, 10 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol et 20 ml de méthanol. On recueille le catalyseur sur un filtre et on le lave avec plusieurs petites portions de méthanol. On évapore le filtrat à sec sous pression réduite pour obtenir un solide blanc. On chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codistillation répétée avec du méthanol pour obtenir 0, 045 g de pentachlorhydrate d'amino-2 désoxy-2 N-glycyl-2 fortimicine A: [a]4 + 54 (c = 1,0; méthanol); IR (KBr) 3410, 2930, 1680, 1640, 1570 et 1480 cm; RM (D20, TMS externe): 1,78 (d, C6,-CH3, J6'7' =7,0 Hz), 3,57 (s, C4-NCH3), 3,87 (s, C3-OCH3), 5,80 (d, H1ii,, Jl',2 = 3,0 Hz); spectre de masse, m/e: 461, 2936; théorique pour C H39N706: 461,2962. EXEUPLE 23 Amino-2 penta-N-benzyloxycarbonyl désoxy-2 N-glycyl-2 fortimicine A (23) On traite pendant 18 h une solution agitée de 0,171 g d'amino-2 tétra-Nbenzyloxycarbonyl-l,2',6',2" désoxy-2 fortimicine A dans 3,0 ml de tétrahydrofuranne anhydre avec 0,067 g de l'ester N-hydroxysuccinimidique de la N-benzyloxycarbonylglycine. On évapore le tétrahydrofuranne sous pression réduite pour obtenir un résidu blanc qu'on chromatographie sur une colonne (1,3 x 57 cm) de gel de silice préparée et éluée avec un système solvant constitué de benzène-méthanol-éthanol à 95%-hydroxyde d'ammonium concentré (23,4/1,4/2,0/0,2 en volumes). On concentre à sec les fractions contenant le produit principal et on rechromatographie le résidu sur le même système que précédemment. On évapore les éluats contenant uniquement le produit principal pour obtenir 0,177 g d'amino-2 penta- N-benzyloxycarbonyl désoxy-2 N-glycyl-2 fortimicine A: [a]24 + 39 (c: 1, 0; méthanol); IR (CDC13) 3405, 3350, 1700, 1633 et 1497 cm; RMN (CDC13): 1,13 (C6,-CH3, J6',7' = 7,0 Hz), 2,70 (s, C4-NCH3), 3,26 (s, C3-OCH3), 7,34 (m, Cbz-aromatique). Analyse théorique pour C59H69N7016: C 62,59; H 6,14; N 8,66% Trouvée: C 62,19; H 6,15; N 8,42% EXEI1PLE 24 Tétrachlorhydrate de désoxy-2 épi-chloro-2 fortimicine A (21) On traite pendant 4 h une solution de 0,192 g de tétra-N-benzyloxycarbonyl désoxy-2 épi-chloro-2 fortimicine A dans ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol avec 0,20 g de charbon palladié à 5% sous 3 bars d'hydrogène. On recueille le catalyseur sur un filtre et on le lave au méthanol. On évapore le filtrat à sec sous pression réduite et on chasse l'excès d'acide chlorhydrique par codistillation répétée avec du méthanol pour obtenir 0,116 g de désoxy-2 épi-chloro-2 fortimizine A qu'on isole sous forme du tdtrachlorhydrate: [a]24 + 51 (c = 1,02; CH3OH); IR (KBr) 3410, 2950, 1635, 1585 et 1480 cm-1; RMN (D20, TMS externe): 1,86 (d, C6,-CH3, J6',7 = 7,5 Hz), 3,70 (s, C4-NCH3), 4,12 (s, C3-OCH3), 5,89 (d, H1, Jl', 2' = 4,0 Hz); spectre de masse (M+'): 423,2229;théorique pour C17H34ClN505: 423,2249. EXEMPLE 25 Tétra-N-benzyloxycarbonyl désoxy-2 épi-chloro-2 fortimicine A (20) On chauffe à 93 C une solution agitée préparée à par- tir de 3,093 g de tétra-N-benzyloxycarbonyl O-méthanesulfonyl-2 fortimicine A et 162 ml de diméthylformamide annydre et on la traite avec 3,092 g de chlorure de lithium en poudre fine. Après 52 h 246e743 d'agitation à 93 C, puis 20 h à la température ordinaire, on verse le mélange réactionnel dans 1 620 ml d'eau et on extrait trois fois avec des portions de 540 ml de chloroforme. On lave deux fois les extraits chloroformiques combinés avec des portions de 540 ml d'eau et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On évapore le chloro- forme sous pression réduite et on chasse le diméthylformamide par codistillation répétée avec du toluène pour obtenir 2,713 g d'un résidu. On chromatographie le résidu sur une colonne (2,1 x 75 cm) de gel de silice avec un système solvant constitué de benzène- méthanol-éthanol à 95%-hydroxyde d'ammonium concentré (23,5/1,4/2,0/0,2 en volumes). On évapore les éluats ne contenant que le produit principal pour obtenir 0,869 g de tétra-N-benzyl- oxycarbonyl désoxy-2 épi-chloro-2 fortimicine A: [a]4 + 37 (c: 1,04; méthanol); IR (COC13) 3440, 1710, 1638 et 1503 cm; RMN (CDC13) 3: 1,17 (d, C6,-CtH3, J6',7 = 7,0 Hz), 2,85 (s, C4-NCH3), 3,46 (s, C3-OCH3) 7,31 (m, Cbz-aromatique). Analyse théorique pour C49H58N5013 Cl C 61,28;H 6,09; N 7,29; C1 3,69% Trouvée:C 61,36;H6,21;N7,00; C1 3,977. EXEMPLE 26 Amino-2 tétra-N-benzyloxycarbonyl-1,2'.6',2" désoxy-2 fortimicine A (22) On traite pendant 17 h une solution de 3,619 g d'azido-2 tétra-N-benzyloxycarbonyl-l1,2',6',2" désoxy-2 fortimi- cine A dans 250 ml de méthanol avec 3,6 g de charbon palladié à 5% sous une pression d'hydrogène de 3 bars. On sépare le catalyseur par filtration et on le lave à l'éthanol. On concentre le filtrat à sec sous pression réduite pour obtenir 2,60 g d'un résidu. On chromatographie le résidu sur une colonne de gel de silice avec un système solvant constitué de dichloroéthane-éthanol à 95%-hydroxyde d'ammonium concentré (18/2,0/0, 04 en volumes) pour obtenir 1,345 g d'amino-2 tétra-N-benzyloxycarbonyl-l, 2',6',2" désoxy-2 fortimicine A: ra[ 4 + 52 (c = 1,02; méthanol); IR (CDC13) 3415, 1710,1635 et 1; -13 1495 cm; RMN (CDC13): 1,15 (d, C6,-CH3, J6',7' = 6,0 Hz), 2,84 (s, C4-NCH3), 3,26 (s, C3-OCH3), 7,29 (m, Cbz-aromatique). Analyse théorique pour C44H60N6013: C 62,54; H 6,43; N 8,93% Trouvée: C 62,20; H 6,53; N 8,68% EXEMPLE 27 Azido-2 têtra-N-benzyloxycarbonyl-1 2',6',2" désoxy-2 fortimicine A (18) A une solution agitée de 3,0 g de tétra-N-benzyloxy- carbonl-l,2',6',2" 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine A dans 167 ml de diméthylformamide chauffée à 93 C au bain d'huile, on ajoute 3,0 g d'azide de sodium finement divisé. On poursuit l'agitation à 9VC pendant 18 h. Après refroidissement à la température ordinaire, on verse le mélange réactionnel dans 1 665 ml d'eau et on extrait trois fois avec des portions de 555 ml de chloroforme, On lave l'extrait chloroformique avec trois portions de 555 ml d'eau et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On évapore le chloroforme sous pression réduite et on chasse le diméthylformamide par codistillation répétée avec du toluène. On chromatographie le résidu sur du gel de silice. On élue avec un système solvant constitué de benzène-méthanol-éthanol h 95%-hydroxyde d'ammonium concentré (23,5/1,4/2,0/0,2 en volumes) pour obtenir 1,712 g d'azido-2 tétra-N-benzyloxycarbonyl-l1,2',6',2" désoxy-2 fortimicine A: [a] D + 34 (c = 1,05; méthanol); IR (CDC13): 1,17 (d, C6,CH3, J6'7 = 6,0 Hz), 2,78 (s, C4-NCH3), 3,34 (s, C3-OCH3), 7,34 (m, Cbzaromatique). Analyse théorique pour C44H58N8013: C 60,86; H 6,05; N 11, 59% Trouvée: C 60,55; H 6,21; N 11,49% EXEMPLE 28 Tétra-N-benzyloxycarbonyl-1,2' 6',2" fortimicine A (27) On dissout 12,0 g (17 mjllimoles)de sulfate de for- timicine A brut dans 40 ml d'eau distillée et on traite avec 8,1 g (80 millimoles) de triéthylamine, puis 200 ml d'acétonitrile. Avec une bonne agitation, on ajoute 25 g (100 millimoles) de N-benzyloxy- carbonyloxysuccinimide et on agite le mélange pendant 6 h. On chasse le solvant sous vide pour obtenir un sirop qu'on dissout dans 150 ml de chlorure de méthylène et qu'on traite avec deux portions de 50 ml de carbonate de sodium aqueux à 5% et 50 ml d'eau, puis qu'on sèche sur sulfate de magnésium. On filtre et on chasse le solvant pour obtenir une mousse claire qu'on chromatographie sur du gel de silice avec un gradient étagé de chlorure d'éthylbne-éthanol (100/0 à 95/5). La concentration des fractions appropriées fournit 15,3 g (16,2 milli- moles; 95,55%) de tétra-N-benzyloxycarbonyl-l,2',6',2" fortimicine A: IR (CDCIl) 3460-3250, 2940, 1705, 1630, 1500, 1220, 1040 et 1015 cm; RPN (C5DN, 100 ) 1,12 (d, J = 6,5 Hz, C6,-CH3), 1,30-2,02 (m, C3,H2 -C4,H2j, 2,99 (s, N-CH3), 3,16 (s, OCH3), 4,98-5,10 (m, CH2 benzylique), et 7,04-7, 33 (m, CH aromatique); lUfC (CD3SOCD3, ) 17,36, 23,81, 26,67, 30,99, 42,74, 49,81, 50,17, 52,86, 55,59, ,31-65,78 (4 carbones), 68,45, 70,44, 71,72, 73,37, 76,47, 96,63, 127,44128,20 (plusieurs carbones), 136,97-137,43 (4 carbones), 155,14-156,03 (4 carbones) et 169,35 ppm. Analyse théorique pour C49H59N5014: C 62,48; H 6,31; N 7,43% Trouvée: C 62,30; H 6,34; N 7,48% EXEMPLE 29 Tétra-N-benzyloxycarbonyl-1 2' 6', 2" 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine A (5) On refroidit entre O et 5 C une solution de 7,0 g (7,7 millimoles) de tétra-N-benzyloxycarbonyl-l,2',6',2" fortimicine A dans 60 ml de pyridine anhydre et on introduit goutte à goutte, en 7 min, 1,41 g (12,3 millimoles) de chlorure de méthanesulfonyle. Après 5 h d'agitation entre O et 5 0C, on traite le mélange réactionnel avec une seconde portion (160 mg; 1,4 millimole) de chlorure de méthane- sulfonyle et on agite pendant encore 2 h. On arrête la réaction par addition d'un fragment de glace et on chasse le solvant sous vide pour obtenir un sirop qu'on reprend dans 80 ml de chlorure de méthy- lène et qu'on lave successivement avec deux portions de 20 ml d'acide chlorhydrique aqueux à 5%, deux portions de 20 ml de bicarbonate de sodium aqueux à 5% et 20 ml d'eau. On sèche la couche organique sur sulfate de magnésium, on filtre et on concentre pour obtenir l'O- méthanesulfonate-2 contenant comme impureté 10 à 15% de tétra-N- benzyloxycarbonyl-l,2',6',2" 0-diméthanesulfonyl-2,5 fortimicine A. On purifie le méthanesulfonate brut par chromatographie sur une colonne de gel de silice avec un gradient de toluène-isopropanol (98/2 à 97/3). Les propriétés de la tétra-N-benzyloxycarbonyl- 1,2',6',2" 0-méthanesulfonyl-2 fortimicine A sont les suivantes: IR (CDCI) : 3475-3300, 2952, 1717, 1640, 1502, 1365, 1222, 1175 et 1042 cm-; RD] (05D5N, 110 ) b: 1,27 (d, J * 6,6 Hz, C6,-CH3), 1,40-2,20 (m, C3,H2-C4,H2) , 3,13 (s, N-CH3), 3,18 (s, 02S- CH3), 3,40 (s, OCH3), 5,12-5,26 (m, CH2 benzylique), et 7,16-7,48 (m, CH aro- matique); RMC (CD3SOCD3, 100 ) 17,36, 23,62, 26,71, 31,51, 37,53, 38,35, 42,73, 49,80, 50,15, 52,84, 53,66, 56,87, 65,36-66,17 (4 carbones), 70,56, 71,19, 72,01, 75,57, 77,61, 96,57, 126,9-128,78 (plusieurs carbones), 136,67-137,41 (4 carbones), 155,08-156,01 (4 carbones) et 169,52 ppm. Analyse théorique pour C5oH61N5016S C58,87;H 6,03; N 6,86; S 3,14% Trouvée:C58,85;H 6,19; N 6,86; S 2,85% EXEMPLE 30 Azido-2 tétra-N-benzyloxycarbonyl-12',6',2" désoxy-2 fortimi- cine A (18) On dissout dans 250 ml de diméthylformamide 5,0 g (4,9 millimoles) de tétra-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6',2" O-méthane- sulfonyl-2 fortimicine A et on chauffe à 93 C. On ajoute, avec une bonne agitation, 5,0 g (76,9 millimoles) d'azide de sodium et on agite le mélange réactionnel à 93 C pendant 4 h. Après refroidisse- ment à 25 C, on traite la suspension avec 250 ml d'éther pour pré- cipiter l'excès d'azide de sodium. On filtre, puis on concentre le filtrat sous vide pour obtenir une masse semi-solide qu'on reprend dans 80 ml de chlorure de méthylène, qu'on lave avec 3 portions de ml d'eau, puis qu'on sèche sur sulfate de magnésium. On filtre et on concentre sous pression réduite pour obtenir un sirop par- tiellement solidifié qu'on chromatographie sur gel de silice avec un gradient étagé de toluène-isopropanol (98/2 à 97/3). Par concen- tration des fractions appropriées, on obtient 2,96 g (3,06 millimoles; 62%) d'azido-2 tétra-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6',2" désoxy-2 forti- micine A: IR (CDC13) 3480-3170, 2955, 2112, 1715, 1640, 1502, 1222 et 1040 cm 1 RMN (C5D5N, 110 ) 6: 1,27 (d, J = 7 Hz, C6,-CH3), 1,40-2,20 (m, C3,H2-C4,H2), 3,12 (s, N-CH3), 3,35 (s, OCH3), 5,18-5,30 (m, CH2 benzylique) et 7,18-7,48 (m, C-H aromatique); RMC (CD3SOCD3, 100 ) 17,20, 23,69, 26,48, 31,70, 42,79, 49,75, 50,27, 53,03, 53,67, 56,61, ,58, 65,36-66,00 (4 carbones), 70,51, 71,16, 74,13, 76,41, 96,57, 127,45128,78 (plusieurs carbones); 136,80-137,37 (4 carbones), ,15-156,02 (4 carbones) et 169,52 ppm. Analyse théorique pour C49H58N8013: C 60,86; H 6,05; N 11,59% Trouvée: C 61,14; H 6,32; N 11,62% EXEMPLE 31 Sulfate d'amino-2 désoxy-2 fortimicine A On traite sous 3 bars d'hydrogène, sur 2,54 g de charbon palladié à 5%7., pendant 5 h, une solution de 2,54 g - (2,63 millimoles) d'azido-2 tétra-N-benzyloxycarbonyl-1,2',6',2" désoxy-2 fortimicine A dans 263 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N dans le méthanol. On sépare le catalyseur par filtration et on le lave au méthanol. On concentre le filtrat à sec et on chasse l'acide chlorhydrique résiduel par distillation répétée sous vide avec du méthanol pour obtenir 1,6 g de pentachlorhydrate d'amino-2 désoxy-2 fortimicine A sous forme d'un hydrate. On fait passer une solution aqueuse du chlorhydrate sur une colonne de résine échangeuse d'ions AG 1X2 (sulfate) pour transformer le chlorhydrate en sulfate. Le sulfate d'amino-2 désoxy-2 fortimicine A a les propriétés suivantes: -1 IR (Kbr) 3660-3330, 2950, 2650, 1635, 1524 et 1120-960 cm; Pe (D20):1,47 (d, J = 6,5 Hz) (C6,-CH3), 1,56-2,31 (m, C3, H2-C4,H2), 3,27 (s, NCH3), 3,68 (s, OCH3) et 5,48 (d, J = 3 Hz, C1,-H); RMC (D20) 14,85, 21,45, 26,26, 31,74, 41,33, 49,35 (2 carbones), 51,26 (2 carbones), 51,85, 58,28, 69,97, 70,80, 71,14, 73,55, 96,27 et 168,94 ppm; spectre de masse, base libre, (m/e) 404 (M+'): 245, 143; [a]D23 + 690 (c: 1,02, eau). Analyse théorique pour C17H36N605.5/2 H2S04.3/2 H20: C 30,17; H 6,55; N 12,42; S 11,85% Trouvée: C 29,97; H 6,45; N 12,33; S 11,44%7 On détermine l'activité antibiotique in vitro des composés de l'invention salon une méthode de dilution de raison 2 sur gélose avec 10 ml de gélose de Mueller-Hinton par botte de Petri. On ensemence la gélose avec une anse (anse de 0,001 ml d'une dilution au 1/10 d'un bouillon de culture de 24 h du microorganisme d'étude indiqué et on incube à 37 C pendant 24 h. Les activités figurent dans le tableau ci-après. La concentration minimale inhibitrice (CMI) est exprimée en pg/ml. Bien entendu, diverses modifications peuvent être appor- tées par l'homme de l'art aux dispositifs ou procédés qui viennent d'être décrits uniquement à titre d'exemples non limitatifs sans sortir du cadre de l'invention. úHD HN HDODN HO 'I& ú z TDH- HDO OSO úHDZOSO/[ EHDOI t1 tl/ cHD OSi> I (9) (ú) loi (g) EHD ú110 2HZHM DOD0 X 911 Z11N X. \ HHOOsOH% ZHNHD úHD Z11 ZIMH /H \ HO ZH4 t úHDO 1 A fl0l ZHNHO [, HD (7) H úH-' \ OH ea HDOO1l l)lo,, 11O OSO ZHM HO (T) EúHD E- 10 úeHD m ge c0 ('4 ZHNHD ú ' HD -t cHO c' ZHNZHO'o Z zHzHiDODNOHHN, IOH''. es o / il CHoo Il ' -,/ l,,tOiI'l.. %,0 \... O4. úHà1HNHO HO Z Z (8) ú() RHRoo: NOHz zo oH zHN HDoiN X ONHN HDODR OH HU, IoHi7-ID \ HUK' ZHMHô H úHOll k 01HO ln %r to f%t (ú1) ú1D : MHZ HN r ' úHD NZNH Hi Il 0 1'Illà4 e c HDOOII HNH0 I - (0H) ú110HO(6 (FID IHa. 1H8- (Ol)*--úD(6) úI (v7) NHZ %1à011'l( 1 ZHNHD gHD -- EH MOI 1ll,,/ IDH1. HD w> %r ú HO HN úHO ilî ( lI (11) u5 CN OH 1! ú110 M I l 1 EN UH.D 1T Z1N Z I DH7. DHO f eHD ú 1 ZHNZH1D-- 0H ZHN 4úH9"11 11 '10 ll > e ZHM ZHNHO 7 HD (O. À0OH -e CHDO0 PLt, cHD úHD à úHuo (6) I i01 1I1 ú HD 91) úo11 (0) / cu? RNHm H M HXN :'1 Z 1 o11 t, X C ú HDO 11 'Il /i if"il X zR HNHD H HNHO úED úED tn oI tuJ (61) "0"ú ED úHDO 1 r- c.,'. úHD (LI) I & úHO (TZ-) ZHNxHDODN OH Z! EHDOI0 Il l l I,,IfO0,t Hm ZHU l1 úHDOtIII 1i ITO ZHN cHO (81) z ZHN HOQON OH ZHU - HDO1 I i I,0llo 1,11I ZNHD E:HD úHO à (oz) H ZHI' tllHllOii ZHNHD T lioH ( ) ZHR ZHNHD HO ut o 4- Co 0:'4 (61) OH Hi Ili I O lill OHO l HOO, illit lIN eHD l r' N.1 (7) gHa zHMJH00DHN H zHN úHM HDODH/ti /H4 I IN -. z z Z7 z 't' HU HIOOOHtHM (HZ) ZHNHD A OHo úHo gHMgHDOD IH IH IlDHi7 ID 1 HM AD 1H IDH . LHD CH3 CH j 3 CHNR NH QH CHg NHZ QH CHNR2 2 o 0.3iJ,,Oillli'bAlsh'#4loz3,3 - /0 N}2 OHCCH2H2 NHZ OH N-C-CH NHZ CH3 (26) (27) CH CH3 o 43 Ilu, N3 GHNHZ NHZ OSCH CHNZ H Z 3 >t 3 IliétilO foit __ \tOCH3ti, olisIl si 1so CH3 - \0 eo IitII Bi I ) H NHZ 2 o 2ir H Z i -CClH2. HZ CH2 CH3 CH3 (183 (5) 0% r to %0 -4. fhl (61) úHa H3O$' 'zIIIO à Hu iODT I" T A B L E A U Activité antibiotique in vitro de composés de 1 'invention Microorganismes Staph. aureus Smith Strep faecalis 1054; Enterobacter aerogenes 13048 E. coli Juhl E. coli BL 3676 (Res) Kleb. pneumoniae 10031 1leb. pneumoniae KY 4262 Providencia 1577 Pseudo. aeruginosa BMH n 10 Pseudo. aeruginosa KY 8512 Pseudo. aeruginosa KY 8516 Pseudo. aeruginosa 209 Pseudo. aeruginosa 27853 Sal. typhimurium Ed.n 9 Serratia marcescens 4003 Shigella sonnei 9290 Proteus rettgeri U6333 Proteus vulgaris JJ Proteus mirabilis Fin n 9 Forti- Forti- micine A micine A SOi HC1 témoin témoin 0,78 1,56 50 3,1 6,2 6,75 6,2 25 1,56 3,1 6,2 6,2 1,56 3,1 0,78 1,56 12,5 25 100 > 100 >100 12,5 12,5 1,56 3,1 1,56 3,1 12,5 12,5 12,5 25 6,2 6,2 6,2 12,5 > 100 > 100 > 100 ; 100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 >100 -100 >100 >100 12,5 > 100 > 100 12,5 > 100 >100 > 100 >100 ?100 3,1 3,1 > 100 > 100 6,2 12,5 1,56 6,2 12,5 3,1 12,5 6,2 1,56 > 100 6,2 3,1 12, 5 6,2 12,5 3,1 > 100 12,5 6,2 3,1 o > 100 > 100 12,5 > 100 1,56 12,5 t 1, 56 12,5 6,2 12,5 R E V E N DI C A T I ONS 1 - Nouveaux composés, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule: CH (O- ------OCH *. ,. . .,. NH HO N-R C-3 o R représente un atome d'hydrogène ou un radical glycyle, P-ala- nyle, acétyle ou P-aminoalkyle inférieur, R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical amino, azido, halogéno, glycylamido, Ir-alanylamido ou O-méthanesulfonyl-2, R2 représente un atome d'hydro- gène ou un radical halogéno et leurs sels convenant en pharmacie. 2 - Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que R représente un atome d'hydrogène ou un radical glycyle, R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical amino, azido, chloro, glycylamido ou Ométhanesulfonyl-2 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical chloro. 3 - Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R représente un radical glycyle, R1 représente un radical glycylamido et R2 représente un atome d'hydrogène. 4 - Composé selon la revendication 2> caractérisé en ce que R représente un radical glycyle, R1 représente un radical amino et R2 représente un atome d'hydrogène. - Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R représente un radical glycyle, R1 représente un atome d'hydrogène et R2 représente un radical chloro. 6 - Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R représente un radical glycyle, R1 représente un radical azido et R2 représente un atome d'hydrogène. 7 - Composé selon la revendication 2, caractérise en ce que R représente un atome d'hydrogène, R1 représente un radical azido et R2 représente un atome d'hydrogène. 8 - Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R représente un radical glycyle, R1 représente un radical chloro et R2 représente un atome d'hydrogène. 9 - Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R représente un atome d'hydrogène, R1 représente un radical chloro et R2 représente un atome d'hydrogène. 10 - Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R représente un radical glycyle, R1 représente un radical 0-méthanesulfonyl-2 et R2 représente un atome d'hydrogène. 11 - Procédé pour la préparation des composés selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir une fortimi- cine B ayant une fonction hydroxy en C2, dont les radicaux amino primaires sont protégés par un radical carbobenzyloxy, alcanoyle inférieur, thioalcanoyle inférieur, thioaroyle ou alkylthiocarba- moyle inférieur et le radical méthylamino secondaire en C4 et le radical hydroxy voisin sont protégés par un cycle oxazolidine, avec un halogénure ou anhydride d'hydrocarburesulfonyle comportant jusqu'à 16 atomes de carbone pour former un intermédiaire de type 0-hydrocarburesulfonyl-2 fortimicine que l'on traite ensuite avec un acide minéral pour hydrolyser le cycle oxazolidine et former une 0-hydrocarburesulfonyl-2 fortimicine B 1,2',6'-tri-N-protégée; on élimine les groupes N-protecteurs pour former une 0-hydrocarbure- sulfonyl-2 fortimicine B que l'on réarrange en conditions basiques en désoxy-2 épimino-l,2 fortimicine B et on traite cette dernière par l'azide de sodium aqueux saturé ou l'acide chlorhydrique hydro- méthanolique pour former l'azido-2 ou chloro-2 désoxy-2 fortimicine B; on transforme, si on le désire, le dérivé de fortimicine B en dérivé de fortimicine A en protégeant sélectivement les restes amino primaires sous la forme N-carbobenzoxy et en acylant la * fonction 4-méthylamino libre, puis on élimine les groupes N-protec- teurs par hydrogénolyse pour former les désoxy-2 N-acyl-4 fortimi- cines B 2-substituées. 12 - Procédé pour la préparation des composés N-acyl-4 selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir une N-acyl-4 0hydrocarburesulfonyl-2 fortimicine per-N-protégée avec un ion chlorure ou azide et on élimine les groupes N-protecteurs. 13 - Procédé pour la préparation des désoxy-2 chloro ou azido-2 N-acyl-4 fortimicines selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on traite les désoxy-2 épimino-l,2 N-acyl-4 fortimicines appropriées par l'acide chlorhydrique hydro-méthanolique ou l'azide de sodium aqueux saturé. 14 - Procédé pour la préparation des désoxy-2 amino-2 di-N-acyl-2,4 fortimicines selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on réduit sélectivement la fonction azido de l'azido-2 désoxy-2 N-acyl-4 fortimicine per-N-protégée correspondante sur charbon palladié, on acyle la fonction amino-2 et on élimine en milieu acide les groupes N-protecteurs. - Nouveaux composés à structure pseudo-diglucosi- dique utiles comme intermédiaires dans la préparation des désoxy-2 fortimicines 2-substituées selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils comportent un reste 0-hydrocarburesulfonyl-2. 16 - Composés selon la revendication 15, caractérisés en ce que tous les restes amino primaires sont protégés par un radical alcanoyle inférieur, carbobenzyloxy, thioalcanoyle inférieur, thioaroyle ou alkylthiocarbamoyle inférieur. 17 - Composés selon la revendication 15 ou 16, caractérisés en ce que le reste 4-méthylamino et le reste 5-hydroxy dans la série B sont protégés par un aldéhyde sous forme d'un cycle oxazolidine. 18 - Nouveaux médicaments utiles notamment comme anti- biotiques, caractérisés en ce qu'ils comportent comme ingrédient actif au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 10. 19 - Compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles sont conditionnées de façon à être administrées à un mammi- fère par voie parentérale, orale, locale ou rectale à des doses jour- nalières comprises entre environ 10 et 200 mg/kg de poids corporel.