Brevet FR2470114A1 — publié le 19810529

Le spectre théorique de la surpopulation et les exigences économiques modernes ont tous deux motivé la limitation du processus de reproduction de l'espèce humaine. Au cours des dernières années, un grand intérêt a été concentré sur les méthodes chimiques de limitation de la reproduction, telles que l'utilisation de stéroïdes, d'anti-stéroides, de polypetptides, d'anticorps et de pro tétines ains-i que de composés inhibant la libération ou la synthèse de l'hormone lutéinisante, également appelée lutro- pine (HL) Divers polypeptides sont connus pour leurs pro piétés contraceptives Par exemple, le brevet des Etatst Unis d'Amérique n a 016 259 fait connaître un tétrapeptide utile comme contraceptif basé sur la séquence suivante d'aminoacides, susceptible de modifications v Thr-Pro-Arg Lys Les brevets des Etats-Unis d9Amérique n 3 855 199S n 3 886 135, n 3 886 137, n 3 928307, n 3 937695, n 3 940 380 et n0 3 941 763 concernent en outre tous des polypeptides qui ou bien déploient une activité anti-ovu- latoire chez les mammifères ou bien inhibent la libération de 1 hormone HL (lutropine), et qui sont basés sur la séquence d' D Phe-Trp-Ser Tyr D-Ala-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2, avec des substitutions ou des suppressions dans les séquences respectives Enfin, le brevet des Etats-Unis d'Amé- rique n 3 915 947 enseigne un composé contraceptif de séquence L-Pyrog I u-L-TrpLSer=L-Tyr-D-Al a-L-Leu-L-Ârg-L- Pro-NHCH2CH3. Des recherches intensives se poursuivent en vue de trouver des composés plus efficaces exerçant des effets secondaires minimaux, qui puissent être produits en grandes quantités, à un prix raisonnable L'invention concerne une série de polypeptides dont la synthèse est effectuée par des procédés de formation de peptides en phase solide Ces polypeptides, qui diffè- rent par leur structure de tous les contraceptifs polypepti- diques de l'art antérieurs bloquent l'action de la gonadotro pine chorionique humaine (GCH) et de l'hormone HL dans les tout premiers jours de la grossesse chez les mammifères, par le succès de leur compétition avec des hormones naturelles dans les cellules réceptrices de l'ovaire.En outre, ces composés ont la capacité d'inhiber l'action de l'hormone GCH à tout moment au cours du premier trimestre de la grossesse chez la femme, et aussi d'inhiber l'action de l'hormone Ht sur les testicules. Par conséquent, les composés de l'invention, qui entrent en compétition avec les hormones naturelles, diffèrent par leur mécanisme des composés connus qui inhibent la libération ou la synthèse de l'hor rone HL. Du fait que les peptides synthétiques entrent en compétition avec succès avec les hormones naturelles HL et GCH dans les cellules réceptrices des ovaires et des testicules pour bloquer leur action stimulante, ils sont utiles aux fins de la contraception. Si, par exemple, un composé est administré à une femelle non gravide au cours de l'oestrus ou du cycle menstruel, il interrompt ce cycle en bloquant l'action de l'hormone HL. A titre de variante, si les composés sont administrés au début de la grossesse, ou à la fin du cycle menstruel, ils bloquent l'action de la gonodotrophine GCH en donnant des cellules chorioniques de l'oeuf fécondé, soit en empêchantl'implantation soit en interrompant la grossesse si l'oeuf s'est imparité dans l'utérus. L'invention propose les composés suivants qui se prêtent à la synthèse peptidique en phase solide et qui ont les qualités et les usages spécifiés ci-dessus, à savoir des composés de formule R1-R2-R3, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant D-Ser-Arg, Ser-Arg, et -Arg, R2 est choisi dans le groupe comprenant Tyr-Gly Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys, Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala- Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Lys-P-ro-Val-Gly-Lys-Lys-Lys, Tyr-Gly Lys-Pro-Val-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Pro, Tyr-Gly-Pro-Val-Gly, Val-Leu-Pro, Val-Leu-Val-Gly, Ala-Tyr-Pro, Leu-Pro-Gly Prot Val-Leu-Gln-Gly, Ala-Tyr-Pro-Arg-Leu-Pro-Gly, Ala Tyr-Pro-Arg-Val-Leu-Gln-Gly et Al a-Tyr-Pro-Arg-Val-Leu-Pro, et R3 est choisi dans le groupe comprenant Val-NH2, -Val, Lys-NH2, -Lys, -Thr, Thr-NH2, -Ser, Ser-NH2, -Pro et -Pro NH2. L'invention couvre au sens large les composés indiqués ci-apres, capables d'une synthèse peptidique en phase solide, qui ont les qualités et les usages spécifiés ci-dessus, à savoir des composés- de formule R1-Tyr-Gly Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-R4, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 a la définition donnée ci-dessus et R4 désigne -Val-NN2 et Val; des composés de formule R1-Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala Arg-Ser-Lys-Rs, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 a-la définition donnée ci-dessus et R5 représente Lys-NH2 et -Lys; des composés de formule R1-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys Lys-Lys-R5 et leurs sels acceptables du pointde vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 et R5 ont les définitions données ci-dessuss des composés de formule R1-Tyr Gly-Lys-Pro-Val-Arg-Ser-Lys-R5, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R et R5 ont les définitions données ci-dessus; des composés de formule R1-Tyr-Gly-R6, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 a la définition donnée ci-dessus et R6 est choisi entre Pro-R4 et Pro-Val-Gly-R4, où R4 a la définition donnée cidessus; des composés de formule R1-Val-Leu-Val-Gly-R4, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 et R4 ont les définitions- données ci-dessus; des composés de formule R 1-Leu-Pro-Gly-Pro-R7, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 a la définition donnée ci-dessus et R7 est un groupe Ser-NH2 ou -Ser; des composés de for mulé R1Val-Leu-Gln-Gly-R4, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle'R1 et. R4 ont les définitions données ci-dessus; des composés de formule R 1-Al a-Tyr-Pro-Arg-Leu-Pro-Gly-R8, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 a la définition donnée ci-dessus et R8 est choisi entre les groupes Pro-NH2 et -Pro; des composés de formule R1-Ala-Tyr-Pro-Arg-Val-Leu-Gln-Gly-R4, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique7 formule dans laquelle R1 et R4 ont les définitions données ci-dessus; des composés de formule R 1-Ala-Tyr-Pro-Arg-Val -Leu-Pro-R4, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique formule dans laquelle Rt et R4 ont les définitions données ci-dessus; et des composés de formule R1-Ala-Tyr-Pro-R9, et leurs sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 a la définition donnée ci-dessus et Rg est choisi entre -Thr et Thr-NH2. Plus particulièrement, on a fait la synthèse des composés suivants : D-Ser-Arg-Tyr-Gl y-Lys-Pro-Val -Gly Lys-Lys-Val-NH2; D-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala-Arg Ser-Lys-Lys-NH2; D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys Lys-Lys-NH2; D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Arg-Ser-Lys-Lys- NH2; D-Ser-Arg-Tyr-Gl y-Pro-Val-NH2; D-Ser-Arg-Tyr-Gl y-Pro- Val-Gly-Val-NH2; et D-Ser-Arg-Val-Leu-Pro-Val-NH2. Un avantage des peptides de l'invention réside dans le fait qu'on peut les utiliser sous la forme de sels acceptables du point de vue pharmacologique. Ces sels présentent l'avantage d'avoir une solubilité élevée dans l'eau et d'être particulièrement utiles pour l'administration parentérale. Des exemples de ces sels comprennent les sels de sodium, potassium, calcium, des acétates, et des chlorures. Ces exemples sont donnés à titre non limitatif. En raison du pliage inconnu des structures tridimensionnelles des modèles globulaires des hormones HL et GCH, le centre actif de ces hormones est indéterminé. De plus, on est en désaccord sur leur mécanisme d'action. On présume que la séquence structurale des composés de l'invention est semblable à une partie importante dU centre actif des hormones HL et GCH. Il en est-ainsi notamment en ce qui concerne le composé Ser-Arg-Leu-Pro-Gly-Pro-Ser qui correspond aux résidus AA 132-138 dans la sous-unité bêta de l"hormoneGCH, et'le le composé Arg-Val-Leu-Gln-Gly-Val- NH2 qui correspond aux résidus AA 43-48 dans la sous-unité bêta de l'hormone CH, et le composé Arg-Val-Leu-Pro-Val qui correspond aux résidus AA 43-47 dans la sous-unité bêta de l'hormone HL. La séquence Ser-Arg-Ala Tyr-Pro-Thr correspond à AA 38-43 dans la sous-unité alpha de lthor- mone HL. La séquence Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro correspond à AA 34-38 dans la sous-unité alpha de l'hormone GCH il semble de même que ces séquences dans les sous-unités alpha et bêta des hormones XL et GCH soient impliquées dans le centre actif des hormones En conséquence, on pense que les composés suivants ont également les qualités et les applications contracepti- ves décrites ci-dessus et entrent donc dans le cadre de l'invention : D Ser=Arg Val Leu-Gln-Gly-Val-NH2 et ses sels acceptables du point de vue pharmacologique, D-Ser-Arg-la-Tyr-Pro-Arg-Leu-Pro-Gly-Pro-NH2 et ses sels acceptables du point de vue pharmacologique, D-ser-Arg- Ala-Tyr-Pro-ArgVal-Leu-Gln-Gly-Val-NH2 et ses sels acceptables du point de vue pharmacologique, D-Ser-Arg-AlaTyr Pro-Arg-Val-Leu-Pro-Val-NX2 et ses sels acceptables du point de vue pharmacologique;D-Ser Arg-Leu D-Ser-Arg-Leu-Pro-Gly-Pro Ser NH2 et ses sels acceptables du point de vue pharmacologique, D-Ser-Arg-Val-Leu-Pro-Val-NH2 et ses sels accepta- bles du point de vue pharmacologique, et D-Ser-Arg-Ala- Tyr-Pro-Thr-NX et ses sels acceptables du point de vue pharmacologique On a utilisé par commodité les abréviations classiques suivantes pour les aminoacides Ala - Alanine Arg - Arginine Gly - Glycine Gln - Glutamine Leu Leucine Lys - Lysine Pro - Proline Ser - Sérine Thr - Thréonine Tyr - Tyrosine Val - Valine Tous les aminoacides dans les formules reproduites dans le présent mémoire ont la configuration na tourelle, excepté, dans quelques cas, la sérine qui est désignée dans ces cas par l'abréviation D-Ser. Dans les peptides dont on a fait la synthèse l'aminoacide terminal est de préférence un isomère de D Ser plutôt que d'avoir la configuration naturelle de la sérine, et-l'extrémité carboxylique revêt de préférence la forme d'un amide. Ces deux variantes structurales limitent la vitesse de dégradation par des enzymes protéolytiques, bien que ni l'une ni l'autre ne constitue une particularité essentielle de la structure. Le composé le plus efficace en rapport avec les applications contraceptives, parmi les composés découverts jusqu'à présent, est D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Pro-Val-Gly-Val NH2, désigné ci-après par le symbole E2. La spécificité de cette séquence d'aminoacides est illustrée par le fait que le peptide D-Ser-Pro-Val-Gly-Val-NH2, sans la séquence d'aminoacides Arg-Tyr-Gly, est relativement inefficace dans l'inhibition de l'action de l'hormone GCH ou HL. On pense que le composé D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Pro-Val-NH2 dont on a fait la synthèse est un inhibiteur des hormones GCH et HL parce qu'il contient la séquence d'aminoacides Arg-Tyr-Gly. De très nombreuses autres modifications et substitutions d'aminoacides entrent dans le cadre de l'invention. Du fait que les sites d'action de tous les enzymes protéolytiques sont bien connus, l'homme de l'art peut introduire d'autres aminoacides, D-isomères ou modifications des aminoacides pour résister au clivage enzymatique et pour prolonger la vie utile des composés. En particulier, on considère que le peptide D-Ser-Arg-Val-Leu-Val-Gly Val-NH2 entre dans le cadre de la présente invention. De plus, dans un composé du type R1-Tyr-Gly-R6 défini ci-dessus, Tyr peut être remplacé par un aminoacide choisi dans le groupe comprenant Ala, Val et Leu, l'aminoacide Gly peut être remplacé par un aminoacide choisi dans le groupe comprenant Tyr, Leu et Pro, et Val-NH2 peut être remplacé par un composé choisi dans le groupe comprenant Pro-NH2, Gly, -Thr et Thr-NH2. En particulier, l'un des composés peut être D-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr, et ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. I1 peut aussi s'agir de D-Ser-Arg-Val-Leu-Pro-Val-NH2 et de ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. L'invention concerne en outre un procédé pour prévenir ou interrompre la grossesse chez des mammifères, procédé qui consiste à introduire dans l'organisme d'un mammifère une quantité efficace d'un composé de formule R-R2-R3 ou de ses sels acceptables du point de vue pharmacologique, formule dans laquelle R1 représente D-Ser-Arg, Ser-Arg, ou -Arg, R2 est choisi entre Tyr-Gly Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys, AI a-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala-Arg-Ser- Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Lys,Tyr-Gly-Lys-Pro Val-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Pro, Tyr-Gly-Pro-Val-Glys Val Leu-Prog Val-Leu-Val-Gly, Ala-Tyr-Pro, Leu-Pro-Gly-Pro, Val-Leu-Gln-Glys Ala-Tyr-Pro-Arg-Leu-Pro-Gly, Ala-Tyr-Pro- Arg-Val-Leu-Gln-Gly e t et a-Tyr-Pro-Arg-Val -Leu-Pro, et R3 est choisi entre Val-NH2, -Val, Lys=NH27 -Lys, -Thr, Thr-NH2, -Ser, Ser-NX2, -Pro et -Pro-NH2 L'invention concerne également un procédé pour rendre des mammifères temporairement stériles, procédé qui consiste à introduire dans l'organisme récepteur une quantité efficace d'un composé de formule Ri R2-R3 ou un sel acceptable du point de vue pharmacologique de ce composé, formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant D-Ser-Arg, Ser-Arg, et Arg, R2 est choisi dans le groupe comprenant Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys7 Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val- Gly-Lys-Lys-Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly Pro, Tyr-Gly-Pro-Val-Gly, Val-Leu-Pro, Val-Leu-Val-Gly, Ala- Tyr-Pro, Leu-Pro-Gly"Pro, Val-Leu-Gln-Gly, Ala-Tyr-Pro-Arg Leu-Pro-Gly, Ala-Tyr-Pro-Arg-Val-Leu-Gln-Gly et Ala-Tyr Pro-Arg-Val-Leu-Pro et R3 est choisi dans le groupe comprenant Val-NH2, -Val, Lys-NH2, -Lys, -Thr, Thr-NH2, -Ser, Ser-NH2, -Pro et -Pro-NH2. On considère que les composés de l'invention sont utiles pour prévenir ou interrompre la grossesse chez les mammifères en engendrant des anticorps contre l'hormone HL ou GCH en vue d'inhiber soit l'ovulation déclenchée par l'hormone HL soit le maintien de l'état de grossesse par l'hormone GCH. Le potentiel existe pour engendrer des anticorps chez des êtres humains, spécifiques de l'hormone GCH de début de grossesse sans réaction avec l'hormone HL ni interférence avec le cycle menstruel normal. Ainsi, des femmes -pourraient être vaccinées contre la grossesse par administration des composés de l'invention dans un adjuvant convenable une fois tous les six mois ou une fois par an pour maintenir le niveau d'anticorps. Par conséquent, l'invention concerne également un procédé pour prévenir ou interrompre la grossesse par production d'anticorps chez les mammifères contre l'hormone HL ou GCH, procédé qui consiste à lier avec un adjuvant convenable un composé de formule R-R2-R3 ou un sel acceptable du point de vue pharmacologique de ce composé, formule dans laquelle R1 est choisi entre D-Ser-Arg, Ser-Arg et Arg, R2 est choisi dans le groupe comprenant Tyr-Gly-Lys-Pro Val-Gly-Lys-Lys, Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Lys , Tyr-Gl y-Lys-Pro-Val - Arg-Ser-Lys, Tyr-Gl y-Pro, Tyr-Gly-Pro-Val-Gly, Val Leu Pro, Val-Leu-Val-Gly, Ala-Tyr-Pro, Leu-Pro-Gly-Pro, Val Leu-Gln-Gly, Ala-Tyr-Pro-Arg-Leu-Pro-Gly, Al a-Tyr-Pro-Arg- Val-Leu-Gln-Gly et Ala-Tyr-Pro-Arg-Val-Leu-Pro et R3 est choisi dans le groupe comprenant Val-NH2, -Val, Lys-NH2, -Lys, -Thr, Thr-NH21 -Ser, Ser-NH2, -Pro et -Pro-NH2. Ce procédé de liaison-a été mis en évidence dans l'art antérieur par des chercheurs qui ont obtenu la production d'anticorps chez des singes rhésus contre l'hor- mone GCH et la toxine tétanique par injection d'une sousunité bêta de GCH couplée à la toxine tétanique, en utilisant le glutaraldéhyde comme réactif de couplage (voir 13, "Contraception" 153, (1976). Le composé E2 inhibe également la glucose-6 phosphate-déshydrogénase ovarienne et inhibe de ce fait les voies de synthèse se rapportant à-l'ARN, et les biosynthèses de protéines et de stérides En outre, du fait que les composés sont des inhibiteurs de l'effet de stimulation des hormones HL et GCH, l'invention concerne en outre un procédé de suppression de tumeurs cancéreuses humaines stimulées par des gonadotro- phines, ou sécrétant des gonadotrophines, procédé qui consiste à introduire dans l'organisme du patient une quant tité efficace d'un composé de formule R1-R2-R s ou d'un 3 sel acceptable du point de vue pharmacologique de ce com- posé2 formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant D-Ser-Arg, Ser-Arg et Arg, R2 est choisi dans le groupe comprenant Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys, Ala-Tyr-Pro-hr-Pro-Ala-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val- Gly-Lys-Lys-Lys, Tyr-Gly-LysPro Val-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly Pro, Tyr-Gly-Pro-Val-Gly, Val-Leu-Pro, Val-Leu-Val-Gly, Ala Tyr-Pro, Leu-Pro-Gly-Pro, Val-Leu-Gln-Gly, Ala-Tyr-Pro Arg-Leu-Pro-Gly2 Ala-Tyr-Pro-Arg-Val-Leu-Gln-Gly et Ala Tyr-Pro-Arg-Val-Leu-Pro et R3 est choisi dans le groupe comprenant Val-NH22 Val, Lys-NX2, -Lys, -Thr, Thr-NH2, -Ser, Ser-NHS, -Pro et -Pro-NH2 Ces tumeurs comprennent des tumeurs trophoblastiques, des carcinomes chorioniques et certaines tumeurs de l'utérus, du sein, de l'ovaire, du testicule et de la prostate. En outre, du fait que ces composés peuvent être utilisés pour engendrer des anticorps contre les gonadotropt nes chez des patients atteints de cancers, l'invention concerne en outre un procédé pour engendrer les anticorps contre des gonadotrophines chez de tels patients, procédé qui consiste à lier par covalence à un adjuvant convenable un composé de formule R1-R2-R3 ou un sel acceptable du point de vue pharmacologique de ce composé, formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant D-Ser-Arg, Ser-Arg, ou -Arg, R2 est choisi dans le groupe comprenant Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys, Al a-Tyr-Pro- Thr-Pro-Ala-Arg-SLr-Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys- Lys, Tyr-GlyLys-Pro-Val-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Pro-Tyr-Gly- Pro-Val-GlyX Val-Leu-Pro, Val-Leu-Val-Gly, Ala-Tyr-Pro, Leu-Pro-Gly-Pro, Val-Leu-Gl n-Gly, Ala-Tyr-Pro-Arg-Leu-Pro Gly, Ala-Tyr-Pro-Arg-Val-Leù-Gln-Gly et Ala-Tyr-Pro-Arg- Val-Leu-Pro et R3 est choisi dans le groupe comprenant Val-NH2, -Val, Lys-NH2, -Lys2 -Thr, Thr-NH2, -Ser, Ser-NH2 > -Pro et -Pro-NH2, et à introduire une quantité efficace du composé résultant dans l'organisme du patient. La' encore, ce procédé de liaison est convenablement décrit dans 13, "Contraception" 153 (1976). On dispose de très nombreux procédés pour la synthèse de polypeptides à partir d'aminoacides. La chimie et la méthodologie du procédé en phase solide pour la synthèse de polypeptides à partir d'aminoacides sont décrites dans diverses applications, par exemple Stuart & Young, "Solid Phase PePtide Synthesis" (1968). L'appareillage, les aminoacides et les autres substances chimiques nécessaires pour la conduite des synthèses, sont faciles à obtenir dans le commerce. Dans le présent mémoire, les abréviations classiques suivantes sont essentiellement celles que recommande la Commission IUPAC-IUB sur la Nomenclature Biochimique publiée dans 241 "J. Biol. Chez." 241 (1966) et 242, "J. Biol. Chem." 55, (1967). Aoc tertio-amyloxycarboxyle Boc tertio-butyloxycarboxyle Bzl benzyle CH2C12 chlorure de méthylène C1-Z chlorocarbobenzoxy DCC dicyclohexylcarbodiimide DCHA dicyclohexylamine DMF diméthylformamide MeOH méthanol TBA tertio-butylamine TEA triéthylamine TFA trifluoracétique (anhydre) Tos p-toluènesulfonyle Z carbobenzoxy En outre, le terme "aminoacide" a pour abréviation AA. L'exemple 1 illustre en détail la synthèse des composés de l'invention. L'exemple 1 et les autres ne doivent pas être interprétés comme étant limitatif s. Diverses autres modifications et divers autres équivalents peuvent y être apportés sans sortir du cadre de l'invention. Outre les abréviations déjà énumérées, diverses abréviations classiques.bien connues de l'homme de l'art seront utilisées dans ces exemples. Du fait qu'un groupe C-amide terminal doit résister au clivage enzymatique, on P utilisé pour la synthèse des peptides en phase solide une résine du type benzhydrylamine (BHA) vendue par le Beckman Bioproducts Department, Palo Alto, Californie, 93 3040 A titre de variante, si on désire un groupe carboxyle terminal libre, on peut utiliser une résine telle que la résine "Merrifieldt' facile à obtenir EXEMPLE 1 - Synthèse de D-Ser-Ara-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys- Mvs-Val-EF2-. A Coulage du Dremier Boc-AA à la résine BXA On place 3 g de résine BHA dans un récipient de réaction en polypropylène de 50 ml équipé d'un disque filtrant.Après addition de 75 ml de solution à 25 % en volume de triéthylamine (TEA) dans le chlorure de méthy lène, on agite la résine pendant 10 minutes pour former l'amine libre. On fait ensuite couler la solution de TEA et on lave la résine 4 fois avec des portions de 20 ml de chlorure de méthylène. On ajoute 571 mg ou 2,5 milliéquivalents par gramme de résine de Boc-Vaî dans une solution chlorométhylénique (5-ml), et on agite brièvement. L'agent de couplage DCC dans du chlorure de méthylène est ajouté en une quantité équimolaire au composé Boc-Val (2,5 mmoles par gramme de résine)et le mélange est agité pendant 2 heures. Après l'agitation, on soutire la solu tion et on lave la résine avec 3 fois 20 ml de solution chlorométhylénique. Pour éliminer les groupes amino restants sur la résine, on ajoute 75 ml de TEA à 25 % dans le chlorure de méthylène et on agite pendant 10 minutes. Ensuite, on soutire la solution dans la TEA et on ajoute 10 molessspar mole d'aminefd'anhydride acétique dans le chlorure de méthylène et on agite pendant 10 minutes. Cette opération est suivie de 3 lavages avec des portions de 20 ml de solution chlorométhylénique. Ces lavages sont suivis de trois lavages avec des portions de 20 ml de solution méthanolique. Après les opérations Je lavage, on soutire les solutions et on sèche la résine sous vide. Une portion aliquote de résine est ensuite hydrolysée à l'acide chlorhydrique. L'analyse des acides aminés montre le couplage de 0,35 milliéquivalent de Val à l'amine. B. Couplage du second aminoacide Lys obtenu sous la forme de Boc-Lys (Cl-Z).TBA. L'acide Boc-Lys (Cl-Z) est préparé à partir du sel de TBA du commerce avant couplage par mise en suspension de 2 g du sel de TBA en poudre dans 10 ml d'acétate d'.éthyle puis addition de 12 milliéquivalents (12 ml) de solution aqueuse d'acide sulfurique IN. La solution est ensuite agitée par secousses jusqu'à ce que le sel soit totalement dissous. Les deux phases résultantes sont séparées et la phase aqueuse est ré-extraite deux fois. avec de l'acétate d'éthyle frais. Les phases d'extraction à l'acétate d'éthyle sont rassemblées et lavées deux fois à l'eau et une fois avec une solution saturée de chlorure de sodium. Les extraits lavés sont déshydratés sur du sulfate anhydre de sodium.Par concentration de la solution anhydre, on obtientune substance huileuse, à savoir l'acide Boc-Lys libre qui est ensuite dissous dans du chlorure de méthylène. L'élimination du groupe protecteur et le couplage entre aminoacides de 3 g de résine-Val et de l'acide Boc Lys sont effectués par les opérations suivantes : (1) trois lavages avec des portions de 20 ml de chlorure de méthylène; (2) un prélavage pendant 2 minutes avec 20 ml de TFA à 25 % dans CH2Cl2; (3) un lavage avec 20 ml de TFA/CH2Cl2 pendant 30 minutes; (4) cinq lavages avec des portions de 20 ml de CH2Cl2 CH el (5) un prélavage de 2 minutes avec 20 ml de TEA à 10 % dans CH2Cl2; (6) un lavage pendant 10 minutes avec 20 mi de TEA/CH2Cl2; (7) cinq lavages avec des portions de 20 ml de CH2Cl2; (8) addition de 931 mg de la solution préparée de Boc-Lys (Cl-Z) dans environ 5 ml de CH2Cl2; (9) addition et mélange d'environ 2,5 meq (125 ml) de DCC 2M dans CH2Cl2 ; (10) agitation pendant 90 minutes; (11) trois lavages avec des portions de 20 ml de chlorure de méthylène; (12) trois lavages avec des portions de 20 ml de méthanol; (13) trois lavages avec des portions de 20 mi de chlorure de méthylène; (14) un prélavage de 2 minutes avec 20 mi de TEA à 10 % dans CH2Cl2s (15), un lavage pendant 10 minutes avec 20 ml de TEA/CH2Cl2s (16) cinq lavages avec des portions de 20 mi de CH2C12; (17) addition et mélange de 931 mg de la solution préparée de Boc-Lys (C1-ZE dans CH2Cl2S; (18) addition de 2,5 milliéquivalents de DCC dans CX2Cl2; (19) agitation pendant 90 minutes; (20) trois lavages avec des solutions de 20 ml de CH2Cl2S (21) trois lavages avec des solutions de 20 ml de MeOH ; et (22) trois lavages avec des portions de 20 ml de chlorure de méthylène Les 22 étapes ci-dessus sont répétées pour cha- cun des aminoacides du composé D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Lys-Pro- Val-Gly-Lys-Iys-Val-NH2, avec couplage de la séquence suivante de Boc- ou Aoc-aminoacides en quantités indiquées 931 mg de Boc-Lys (Z); 460 mg de Boc-Gly; 570 mg de Boc Val; 538 mg de Boc-Pro; 931 mg de Boc-Lys (C1-Z); 460 mg de Boc-Gly; 929 mg de Boc-Tyr(Bzl); 883 mg de Aoc-Arg; 738 mg de Boc-D-Ser (Bzl). Si le composé Boc-D-Ser(Bzl) est obtenu sous la forme d'un sel de DCHA, l'acide Boc-D-Ser(Bzl) doit être séparé du sel de DCXA avant le couplage On y parvient en suivant le mode opératoire décrit ci-dessus, utilisé pour séparer l'acide Boc-Lys(Cl-Z) du sel de TBA La forme finale de la résine portant le pepti de est lavée après l'étape 22 avec du méthanol, séchée et conservée au réfrigérateur, dans un dessiccateur en verrez Son poids est de 3,710 g Les groupes protecteurs sont éliminés et une portion aliquote de 1,85 g de la résine ci-dessus portant le peptide formé de 11 aminoacides est clivée par traitement avec environ 15 ml de fluorure d'hydrogène liquide contenant 5 ml d'anisole, pendant l heure à O"C. Le fluorure dthydrogène est chassé par distillation sous vide et l'anisole est éliminé par i'acétate d'éthyle, en utilisant un système de filtration. Pour enlever le peptide de la résine par filtration, on lave la résine plusieurs fois avec de petits volumes d'acide acétique à 50 %. Les filtrats rassemblés sont ensuite lyophilisés pour obtenir le peptide désiré. A des fins de purification, on dissout le peptide dans un volume minimal d'acide acétique 0,5M et on charge la solution sur une colonne de filtration sur gel de "Sephadex G-25F" de 1,6 cm de diamètre sur 190 cm de longueur,équilibrée avec de l'acide acétique 0,5 M. Le peptide est élué avec le même solvant et contrôlé par l'analyse ultraviolette. Les fractions correspondant au pic principal sont rassemblées et lyophilisées en donnant 200 mg d'une poudre blanche duveteuse. Pour parfaire la purification par chromatographie de partage sur colonne (voir Yomashiro, 201 "Naturel76 (1964)), on prépare une colonne de partage de "Sephadex G-25F" de 1,5 cm de diamètre sur 190 cm de longueur, par équilibrage avec la phase inférieure puis la phase supérieure d'un mélange de solvants formé de n-butanol, d'acide acétique et d'eau dans la proportion de 4:1:5, VH = 120 ml . Le peptide lyophilisé obtenu par filtration sur gel est appliqué dans 1,5 ml de la phase supérieure. L'élution avec la phase supérieure donne une zone peptidique principale localisée comme indiqué ci-dessus. Après rassemblement des fractions et lyophilisation, on obtient 90 mg-d'une poudre blanche duveteuse. La recherche des aminoacides au moyen d'un analyseur Beckman/Spinco sur les hydrolysats de cette substance donne des taux proches des valeurs attendues pour les aminoacides suivants ; Ser(1), Art(1), Tyr(1), Lys(3) Pro(1), Val(2), Gly(2), NH3(1). Des charges de 20 g du peptide sont homogènes dans des systèmes acides neutres et basiques de chromatographie sur couche mince lorsqu'on les examine en lumière ultraviolette, avec de la vapeur d'iode et avec le réactif de Pauly, par les méthodes décrites par Monahan et collaborateurs dans 47, "Biochem." Biophys. Res. Commun 552 (1972). La synthèse illustrée dans cet exemple peut être appliquée à tous les polypeptides de l1invention, en uti- lisant les Boc- et Aoc-aminoacides convenables, dans la séquence correcte. Par exemple, pour former le composé D-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala-Arg-Ser-Lys-Lys-NX2, on utilise en séquence les Boc-aminoacides suivants Boc-Lys(Cl-Z); Boc-Lys(Cl-Z); Boc-Ser(Bzl); Aoc-Arg(Tos); Boc-Ala; Boc-Pro; Boc-Thr(Bzl); Boc-Pro; Boc-Tyr(Bzl); Boc-Ala; Aoc-Arg(Tos);; Boc-D-Ser(Bzl). Dans toutes les étapes nécessitant l'addition d'un Boc- ou Aoc-AA, l'aminoo acide AA est ajouté en proportion de 2,5 milliéquivalents par gramme de résine EXEMPLE 2 L'activité inhibitrice des composés obtenus par synthèse sur l'ovulation induite par l'hormone XL a été testée sur des femelles de rat. Des femelles vierges de rat Sprague-Dawley, pesant 230 à 280 g et ayant deux cycles vaginaux consécutifs de 4 jours, sont logées dans un local à air conditionné avec éclairage de 5,00 à 19,00 heures. Au début de l'après-midi du proestrus, on injecte aux rats au moins 31,5 mg/kg de "Nembutal" pour les rendre inconscients.L'état d'inconscience bloque la, libération endogène d'hormone HL des rats. Entre 13 heures 30 et 14 heures, on injecte dans la veine jugulaire 10 g de lutropine,NIH-LHS17 procuréepar "TheNational Institute of Xelth", ou S g de gonadotrophine chorionique humaine, HCG CR 117, également procurée par The National Institute of Health. Une minute plus tard, l'un des polypeptides dont la synthèse a été effectuée conformément à l'invention, choisi dans le groupe comprenant D-Ser-Arg-Ala-Tyr Pro-Thr-Pro-Al a-Arg-Ser-Lys -Lys-NH2, D-Ser-Arg-Tyr-Gly Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Lys-Lys-NH21D-Ser-Pro-Val-Gly- Val-NH2 et D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Pro-Val-Gly-Val-NH2, est injecté en solution saline au rat.D'autres peptides obtenus par synthèse sont injectés 20 minutes et 40 minutes plus tard. Des rats témoins ne recevant que le "Nembutal" ne présentent pas d'ovulation. Toutefois, tous les rats recevant l'hormone HL ou GCH après l'administration de "Nembutal" produisent par ovulation 8 à 12 oeufs. Entre 10,00 et 11,00 heures le lendemain matin, on dissèque les rats et on compte les oeufs dans les trompes de Fallope en utilisant un microscope à faible puissance. La dose efficace minimale n'a pas été établie mais, par exemple, le composé E2 injecté à la dose de 50 à 200 Fg par rat, 1 minute, 20 minutes et 40 minutes après l'hormone HL, bloque totalement l'ovulation.. Les autres composés de l'invention ont été moins efficaces. Le tableau I suivant récapitule des résultats d'essais obtenus à titre d'exemple. Les abréviations des composés sont les suivants E2 D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Pro-Val-Gly-Val-NH2 I D-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Ala-Arg-Ser-Lys- Lys-NH2 III D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Lys- Lys-NH2 E1 D-Ser-Pro-Val-Gly-Val-NX2 TABLEAU I Effet de composés inhibiteurs sur l'ovulation induite par la lutropine chez le rat rendu inconscient par l'action de '9Nembutal 11 Nombre d'animaux Nombre moyen d'oeufs Composé Dose HL HL + composé HL HL + composé E, 208 g 6 8 1Q O E2 50 g 1 2 10 0 I 100 g 4 4 11 8 I 50 g 2 2 10 6 % 20 g 2 3 12 10 III 300 p9 1 3 12 5 III 200 g 1 3 12 10 III 100 pg 1 3 12 10 E1 100 9 3 2 12 8 EXEMPLE 3 On a effectué un essai in vitro pour déterminer l'effet produit par les composés de l'invention sur la stimulation par la lutropine de la synthèse de l'ARN dans la chromatine du corps jaune Le composé E2 et d'autres composés de l'invention inhibent la stimulation par la lutropine de la synthèse de l'ARN par des ARN-polymérases dépendant de l'ADN associées avec la chromatine préparée à partir des noyaux du corps jaune de l'ovaire La chro- matine contenant ltARN-polymérase dépendant de 1'ADN a été préparée à partir de noyaux purifiés isoles du corps jaune de boeuf par des moyens bien connus en pratique. Les méthodes et les matières utilisées pour évaluer la synthèse de L'ART in vitro sont décrites en détail par McKerns et Ryschkewitsch dans a78 "Biochim Biophys Acta" 68 (1977). Dans ces expériences, on a comparé a' un témoin l'effet de la lutropine, du composé E1, d'une association de lutropine et du composé E1, du composé E2, d'une association de lutropine et du composé E2, du composé IV et d'une association de lutropine et du composé IV sur la synthèse de l'ARN. On a utilisé du triphosphate d'adénosine radioactive 8- C) dans chaque mélange pour suivre l'effet produit sur la synthèse de l'ARN. Dans chaque cas particulier, on a utilisé un tampon d'incubation à grande force ionique du type décrit dans la publication de McKerns1 ce tampon favorisant la polymérase IIo Cette dernière est un composé qui fait la synthèse du mARN.L'incubation dure environ 5 minutes, à une température d'environ 25"C. Pendant l'incubation, le triphosphate d'adénosine radioactive est incorporé à L'ART de la chromatine in vitro. Après incubation, l'ARN est isolé de la chromatine et la quantité de radioactivité est mesurée dans un spectromètre à scintillations pour liquide. Les valeurs indiquées sur le tableau II représentent la moyenne de trois valeurs très proches. La lutropine et les composés de l'invention sont utilisés à une concentration finale de 10 M. Comme le font apparaitre les résultats, dans l'un des témoins, 230 picomoles d'ATP marqué à marquage radioactif sont incorporés à l'ARN. L'addition de lutropine accroit fortement cette incorporation en la portant à 1290 pmoles. Toutefois, l'incorporation en présence de lutropine et du composé E2 est ramenée à une valeur correspondant étroitement au niveau témoin. Comme le démontrent les résultats, les autres composés de l'invention sont moins efficaces que ne l'est le composé E2 TABLEAU Il Effet de composés inhibiteurs sur la stimulation par la lutropine de la synthèse de l'ARN dans la chromatine du corps jaune pmoles de [8-14C]ATP incorporées Témoin 230 Lutropine 1290 E1 420 Lutropine + E1 1190 2 220 Lutropine + E2 260 Témoin 1790 Lutropine 3100 Composé IV 2070 Lutropine + composé IV 2400 Les composés E1 et E2 sont les mêmes que dans l'exemple 2. Le composé IV correspond à la séquence D- Ser-Arg-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-ArgSer-Lys-Lys-NH2 REVENDICATIONS 1. Un composé de formule R1-R2-R3 ou un sel acceptable du point de vue pharmacologique de ce composé, formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant D-Ser-Arg, Ser-Arg et -Arg, R2 est choisi dans le groupe comprenant Tyr-Gly-Lys-Pro-Val -Gly-Lys-Lys, Ala-Tyr Pro-Thr-Pro-Ala-Arg-Ser-Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys Lys, Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Arg-Ser-Lysa Tyr-Gly-Pro, Tyr Gly-Pro-Val-Gly, Val-Leu-Pro, Val-Leu-Val -Gly, Ala-Tyr-Pro, Leu-Pro-Gly-Pro, Val-Leu-Gln-Gly, Ala-Tyr-Pro-Arg-Leu Pro-Gly, Al a-Tyr-Pro-Arg-Val -Leu-Gl n-Gl y et Al a-Tyr-Pro- Arg-Val-Leu-Pro et R3 est choisi dans le groupe comprenant Val-NH2, -Val, Lys-NH2, -Lys, -Thr, Thr-NH2, -Ser, Ser NH2, -Pro et -Pro-NX2. 2. Un composé suivant la revendication 1 de formule R1-Tyr-Gly-R6, ou un sel acceptable du point de vue pharmacologique de ce composé, formule dans laquelle R6 est choisi entre Pro-R4 et Pro-Val-Gly-R4 et R4 est choisi entre -Val-NH2 et -Val. 3. Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que Tyr peut être remplacé par un aminoacide choisi entre Ala, Val et Leu, Gly peut être remplacé par un aminoacide choisi entre Tyr, Leu et Projet Val-NH2 peut être remplacé par un composé choisi dans le groupe comprenant Pro-NH2, Gly, Thr et Thr-NH2. 4. Un composé suivant la revendication 3 de formule D-Ser-Arg-Val-Leu-Pro-Val-NH2 ou ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. 5. Un composé suivant la revendication 3 de formule D-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr ou ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. 6. Un composé suivant la revendication 3 de formule D-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr-NX2 ou ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. 7. Un composé suivant la revendication 2 de formule D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Pro-Val-Gly-Val-NH2 ou ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. 8. Un composé suivant la revendication 2 de formule D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Pro-Val-NH2 ou ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. 9. Un composé suivant la revendication- 1, de formule R1-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-R4 ou ses sels acceptables du point de vue pharmacologique, R4 étant choisi entre -Val-NH2 et -Val. 10. Un composé suivant la revendication 9 de formule D-Ser-Arg-Tyr-Gly-Lys-ProValGlyLysLys-Val-NH2 ou ses sels acceptables du point de vue pharmacologique. 11. Médicament caractérisé en ce qu'il est constitubé par,ou en ce qu'il contient,un composé suivant l'une quelconque des revendications précédentes.