Brevet FR2470121A1 — publié le 19810529

Dérivés de la décaprénylapineetleurs sels acides d'addition, et composition pharmaceutique contenant ces produits. La présente invention concerne de nouvelles décapré- nylamines et leurs sels acides d'addition qui sont utilisés pour la prévention des infections virales des animaux vertebrés. On connaît jusqu'ici diverses substances qui ont été marquees pour avoir l'effet préventif ou adoucissant sur les maladies dues à des virus dont l'hâte est un animal vertebré, ou qui ont été reconnues capables d'adoucir les symptômes de ces maladies en augmentant d'une façon significative l'ac- tivité anticorps chez l'animal. Les produits antiviraux mention- nés jusqu'ici comprennent l'interféron, les substances capables d'induire l'interféron, c'est-à-dire les inducteurs (inducteurs d'interféron) le chlorhydrate d'amantadine ou des'substances synthétiques, telles que la méthysazone, qui exercent directemernt un effet inhibiteur sur la propagation des virus. L'interféron est une glycoprotéine ayant une activité antivirale et anti- tumeur, ladite glycoprotéine étant produite in situ par les cellules d'un animal vertébré quand ces cellules sont infectées avec un virus et a été proposée pour la thérapie des maladies virales infectieuses et également pour la thérapie du cancer. Des inducteurs connus qui induisent l'interféron chez les animaux vertébrés par un processus autre que l'infection virale comprennent des substances naturelles à haut poids moléculaire telles que l'acide ribonucléique à chaîne double. de bacté- riophages d'une certaine espèce,ou des substances synthétiques à haut poids moléculaire telles que l'acide ribonucléique à chaîne doubledont le type est l'acide polyinosinique-acide polycytidylique, ou des inducteurs à bas poids moléculaire tels que la tyrolone. Toutefois dans la production de l'interféron, le problè] de la purification de celui-ci est soulevé et en fait aucun procédé économique pour la production de l'interféron n'a été réalisé jusqu'ici. Par ailleurs, les inducteurs classiques d'interféron n'ont pas reçu d'application pratique surtout à cause de leur toxicité. Les agents antiviraux synthétiques 2470121 - qui exercent directemeret un effet inhibiteur sur la propagation du virus, qui sont disponibles dans le commerce actuellement, ont une gamme plutôt étroite des maladies infectées par les virus qui sont guérissables par administration dudit agent et par conséquent la mise au point d'agents antiviraux syn- thétiques nouveaux est vivement souhaitée. En tenant compte de ces considérations, les-auteurs de la présente invention ont conduit des études poussées pour trouver des composés capables de produire l'interféron de grande activité et de plus, ayant une activité antivirale sur le niveau biologique, et il en est résulté que les inventeurs ont trouvé éventuel- lement que les composés représentés par la formule générale (I) suivante et leurs sels acidles d'addition montrent un excellent pouvoir inducteur de l'interféron et en même temps font preuve d'une excellente activité antivirale même dans l'essai biologique. Ainsi, la présente invention a pour objet de fournir une nouvelle classe de dérivés de la décaprénylamine représentée par la formule générale suivante - Cil3 -,-- --I +CSH2-C=CH-CHR-- Do N R (I) dans laquelle R est un eroupecapable de former en liaison avec l'atome d'azote adjacent un noyau hétérocyclique à 5 ou 6 chaînons qui peut contenir un autre hétéro-atome, ledit groupe R étant éventuellement substitué par un atome d'halogène, un radical alkyle inférieur ou décaprényle s'il contient un atome d'azote supplémentaire comme autre hétéro-atome, et elle a pour objet également les sels acides d'addition de ce dérivé. Pour la préparation de la décaprénylamine représentée par la formule générale (I) mentionnée ci-dessus, et de ses sels acides d'addition, on peut prendre un procédé dans lequel 3. les processus connus de synthèse des amines sont appliqués au décaprénol de départ représenté par la formule: CH H(CH 2C=CH-CH2 - _ OH (I) pour obtenir un dérivé aminé désiré. En outre, le dérivé aminé ainsi obtenu peut être trans- formé en un sel correspondant de façon classique. plus spéci- fiquement, une amine désirée peut être préparée selon un pro- cédé qui comprend la transformation d'un alcool décaprénylique approprié ayant la formule générale (II) ci-dessus en un halo- génure ou un ester d'acide sulfonique correspondant suivi de la réaction avec un composé hétérocyclique approprié ayant au moins un groupe amino primaire ou secondaire en présence ou en l'absence d'une base. Un sel acide d'addition du dérivé aminé ainsi obtenu peut être préparé en mélangeant ladite amine dans un solvant approprié avec un acide désiré pour former un sel et en faisant cristalliser le sel de la solution par évaporation ou autre moyen pour le récupérer. Les sels acides d'addition appropriés pour être utilisés comme médicaments comprennent par exemple ceux avec l'acide chlorhy- drique, l'acide acétique, l'acide citrique, l'acide fumarique et analogues. Les composés représentés par la formule générale (I) et leurs sels acides d'addition sont illustrés ci-dessous en se référant aux exemples préparatifs suivants: Exemple préparatif 1. Dichlorhydrate de N-décaprényl-N'-méthylpiperaine. CH H- CH -C=H-CH2- 10N N-CH '2HC1 A une solution de N-méthylpipérazine (10 g) dans l'éther isopropylique (20 ml), une solution de bromure de décaprényle (10 g) dans l'isopropyléther (20 ml) est ajoutée goutte à goutte à la température ordinaire pendant 2 heures avec agitation qui est continuée pendant encore 2 heures. Ensuite, le mélange réactionnel est laissé au repos toute la nuit. Le 2470121' mélange réactionnel obtenu est additionné de NaOH 2N (20 ml) tout en agitant puis extrait avec de l'éther isopropylique. L'extrait liquide est lavé avec l'eau et une solution saline saturée, séché sur du sulfate de sodium anhydre, puis concentré sous pression réduite. Le résidu (8,5 g) est purifié par chromatographie sur colonne en utijisant du gel de silice (85 g). La fraction éluée par l'hexane/acétone (6,8 g) obtenue est dissoute par l'acétone, additionnée d'un mélange HCl/éthanol pour la rendre faiblement acide puis refroidie. La masse cristallisée est séparée par filtration et recristallisée dans l'éthanol pour récupérer le dichlorhydrate de N-décaprényl- N'-méthylpipérazine (5,3 g), point de fusion 142-145 C. L'analyse élémentaire de C55H 92N2.2HC1.H20 donne les résultats suivants: C% H% N% Calculé: 75,73. 11,09 3,21 Trouvé: 75,48 10,95 3,19 Exemples préparatifs 2 à 7. Le même procédé que dans l'exemple 1 est répété pour la réaction du bromure de décaprényle avec un composé hétéro- cyclique contenant un groupe amino secondaire, donnant ainsi les composés indiqués ci-dessous, la formule structurelle, la formule moléculaire, le point de fusion et l'analyse. élémentaire de ce composésétant également indiqués dans le tableau 1. !-. cf r- Tablau 1 E xemple de préparation No. Structure 1-'' 2 H 4C CHC-C-C2- 2 - 2 -- '-2s, CH 3 C3 -N ---\ 1 H --f---r I'.l-,', --.". Fonl].e moléculaire E.F. (0c) C55H91N.HC! H20 100-10235;43 C545902HC 2H20118-1 1 74 01 C5/$9Cn\,i 2HC- 2H2 0118-121 7C Mnalyse élérenrtaire Calculé ' Q/) Trouv". C'- H - H.--- -= - c H M 11) 54 il o4 11,-04 II 1.71 80;,j73 11/421,71 3 20 73;63 10/ 972/98 CH 43, z-- c Il x-'l ± -2'-N C54H90ON 39-41 845 43 11;77 1,82 84155 118 r',- ' H + CF,.---C=IH 3 H+o C3H NSTS HC -HC 99- 02751 05 53 37 - 2--2 ,93 1/72 77,86 il ,87 o,73 -CH5 - 2 IC5LCH- 7 L' -'=2 C -it r, ç.'-M-/2 810O 61-3 84 5 0 11,3û C2 -l 2 37-9079 281159 H1 '20 S 3,74 4,50 11,2..4 -.,Y.] CI i,7; 7 75. 94 I L1 24701 2.1 Les effets physiologiques des composés de la présente invention sont illustrés ci-dessous en détail. (1) Essai de l'activité induisant l'interféron. Chaque composé d'essai mis en suspension dans l'eau avec un tensio-actif est administré par voie intrapéritonéale à chaque groupe constitué par 5 souris femelles ICR pesant environ 25 g. 20 heures après l'administration, on recueille le sang des souris et le sérum en est séparé pour obtenir un interféron sérique. Les stades suivants sont réalisés afin de déterminer l'activité de l'interféron sériqoeainsi induit. Des cellules L- 929 provenant de souris et incubées au préalable en une monocouche sont amenées en contact avec la solution de sérum d'essai diluée 10 fois, mis en incubation toute une nuit à 370C dans un incubateur placé dans une atmosphère de gaz carbonique, et la solution de sérum d'essai diluée en est retirée. Ensuite, les cellules sont inoculées avec le virus vésiculaire stomatitis et placées sur un milieu de culture tissulaire contenant 1% d'agar. Après l'incubation à 370C pendant 24 heures, les cellules sont colorées avec une solution de rouge neutre,diluées à une concentration appropriée pour compter le nombre de plaques qui y est formé et ainsi pour calculer le taux d'inhibition des plaques dans chacun des groupes d'essai par rapport à un groupe auquel aucun composé d'essai n'a été administré. Le taux d'inhibition des plaques de chaque composé d' essai est montré sur le tableau2 (2) Effet sur des souris infectées avec le virus vaccinal. Des groupes constitués chacun par 10 souris femelles ICR reçoivent une injection intraveineuse de virus vaccinal (souche DIE) dans la veine de la queue. Le huitième jour après l'inoculation, le nombre de lésions en forme de pustules sur la surface de la queue est compté après avoir coloré la queue avec une solution d'éthanol contenant 1% de f luorescéine et 0,5% de bleu de méthylènè. Dans cet essai, chaque composé d'essai est administré par voie intrapéritonéale aux sourisjuste le jour précédent l'inoculation du virus, ce qui fait que. l'activité gntivirus du composé d'essai est évaluée en terme-, d'inhibition des lésions de la queue tdeTsque calculées dans chaque groupe d'essai par rapport à un groupe auquel un composé d'essai a été administré. Le taux d'inhibition des lésions de la queue de chaque- composé d'essai est indiqué sur le tableau 2. (3) Effet sur des souris infectées avec le virus de la grippe. Des groupes constitués chacun par 10 souris femelles ICR pesant environ 25 g, sont infectés par inhalation du virus de la grippe nébulisé A/PR-8. Une solution de chaque composé d'essai en solution aqueuse contenant un tensio-actif est administrée par voie intrapéritonéale aux souris 24 heures et 3 heures avant l'infection du virus et 5 fois par jour à partir du second jour qui suit l'infection. Les souris qui survivent 21 joursaprès l'infection sont considérées comme des survivantes et le taux de survie est obtenu selon l'équation suivante - Nombre de survivantes x 100 = taux de survie. Nombre de souris traitées c- o Q Tableau 2 Composé d'essai Dose intrapé- ritonéale mg/kg Inhibition de la lésion de la queue (prévention contre l'infection due au virus vaccinal) Taux de survie (prévention contre l'infection due au virus de la grippe) % Inhibition des plaques (interféron sérique) Dichlorhydrate de N-décaprénylpipérazine Dichlorhydrate de N-décaprényl-N'- méthylpipérazine; Chlorhydrate d' amantadine (Témin) ,0 73,3 67,0 ,1 (4) Toxicité. Afin de rechercher la toxicité aigUe des composés de la présente invention, la dose léthale 50% de chaque composé est obtenue en utilisant des souris mâles ddY pesant 20 à 25 g. D'après les résultats montrés sur le tableau 3, on voit aue les composés ont une marge de sécurité élevée par administration par voie intrapéritonéale. Tableau 3 Dose léthale 50% (mg/kg) administrée par voie Administrée par voie Composé d'essai intraveineuse intrapéritonéale Dichlorhydrate de N-décaprényl- pipérazine 35,7 > 500 Dichlorhydrate de N-décaprényl-N'- méthylpipérazine 42,0 > 500 Comme on peut le voir d'après les résultats d'essais précédents, les ingrédients actifs de la présente invention ont une activité inductrice sur l'interféron in vivo et ont une faible toxicité en manifestant une excellente activité antivirale. A la lumière du fait qu'une stricte corrélation de l'activité interféron avec les activités antivirales Io individuelles n'est pas toujours observé pour les ingrédients de la présente invention, on considère également une éventua- lité cue les activités antivirales desdits ingrédients au niveau biologique sont concernées non seulement dans l'interféron, mais également dans d'autres mécanismes de défense de l'hôte. Par conséquent, quand les ingrédients actifs de la présente invention sont utilisés-pour le traitement de maladies infectées par les virus, ils sont administrés aux malades par des procédés tels impliquant l'administration orale, 1' inhalation, ou analogueainsi que par injection sous-cutanée, intramusculaire et intraveineuse. Selon l'état du malade, tel que l'âge, les symptômes et la voie par laquelle l'ingrédient est administré, l'ingrédient actif de la présente invention est utilisé en une dose de 0, 5 à 20 mg/kg, de préférence de 3 à 5 mg/kg plusieurs fois par jour (2 à 4 fois). Les ingrédients actifs de la présente invention peuvent être formulés dans des compositions pour médicaments, par exemple comprimés,cachets, granulés, poudres, préparation liquide pour usage oral, lotiorsocculaire, suppositoires, pommades, injections et analogues. Ouand les ingrédients actifs de la présente invention sont administrés par voie orale, ils peuvent être formulés en comprimés, cachets, granulés, ou poudres. Ces préparations solides pour usage oral peuvent contenir des excipients utilisés classiquement, par exemple l'anhydride silicique, l'acide métasilicique, l'alginate de magnésium, le silicate d'aluminium synthétique, le lactose, le sucre de canne, l'amidon de mais, la cellulose microcristallisée, l'amidon hydroxypropylé ou la glycine, et analogues; des liants,par exemple la gomme arabique, la gélatine, la gomme adragante, l'hydroxypropyl- cellulose, ou la polyvinylpyrolidone; des lubrifiants, par exemple le stearate de magnésium, le talc ou la silice; des agents de désagrégation, par exemple l'amidon de pomme de terre, et la carboxyméthylcellulose; ou des agents mouillants, par exemple polyéthylèneglycol, mono-oléate de sorbitannre, huile de ricin hydrogénée, laurylsulfate de sodium. Dans la préparation de cachets moun;, en particulier1les ingrédients actifs de la présente invention, peuvent être formulés en les dissolvant ou en les mettant en suspension dans des substrats huileux communément utilisés tels que l'huile de sésame, l'huile d'arachides,l'huile de germe, l'huile de coprahfractionnée telle que "Miglyol ', ou analogue. Des préparations en comprimés ou en granulés peuvent être enrobées selon les procédés classiques. La préparation liquide pour usage oral peut être sous la forme d'émulsion aqueuse ou huileuse ou de sirop, ou par ailleurs sous la forme de produit sec qui peut être redissous avant usage à l'aide d'un véhicule approprié. A ces préparations liquides, on peut ajouter des produits additifs communément utilisés, par exemple des auxiliaires émulsifiants tels que sirop de sorbitol, méthylcellulose, gélatine, hydroxyéthyl- cellulose, et analogues; ou des émulsifiants, par exemple lécithine, monooléate de sorbitanne, huile ricin hydrogénée, excipient non aqueux, par exemple huile de coprah fractionnée, huile d'amande; huile d'arachideset analogues; ou des antisep- tiques, par exemple parahydroxybenzoate de méthyle, parahydroxy- benzoate de propyle ou acide sorbique.Fh outre, ces préparations pour usage oral peuvent contenir;si nécessairedes agents de conservation, des stabilisants et les additifs analogues. Dans le cas o les ingrédients actifs de la présente invention sont administrés sous forme de suppositioires, ils peuvent être formulés selon les procédés classiques utilisant des substrats oléophiles tels que huile de cacao ou Witepsol , o ils peuvent être utilisés sous la forme de capsules rectales obtenues en enrobant un mélange de polyéthylèneglycol, d'huile de sésame, d'huile de germe, d'huile de coprah fractionné et analogues dans une feuille de gélatine. La capsule rectale peut être revêtue si nécessaire de matièrescireuses. Quand les ingrédients actifs de la présente invention sont utilisés sous la forme d'injection, ils peuvent être formulés en préparationsde solution huileuse, solution émulsifiée ou solution aqueuse, et ces solutions peuvent contenir des émulsifiants. stabilisants ou additifs analogues communément utilisés. Selon le procédé d'administration, les compositions mentionnéesci-dessus peuvent contenir les ingrédients actifs de la présente invention à raison d'au moins 1% et de préférence de 5 à 50%. 2470121 1 Le procédé pour formuler les ingrédients actifs de la présente invention en diverses préparations est illustré ci- dessous en se référant à des exemples pharmaceutiques. Exemple pharmaceutique 1 - Préparation de cachets durs pour usage oral. Un mélange de 25 g de dichlorhydrate de N-décaprényl- pipérazine et de 7,5 g d' huile de ricin polyoxyéthylée dans l'acétone est mélangé avec 25 g d'anhydride silicique. Après évaporation de l'acétone, le mélange est malaxé encore avec 5 g de calcium carboxyméthylcellulose, 5 a d'amidon de mais, 7,5 g d'hydroxypropylcellulose et 20 g de cellulose micro- cristallisée et 30 ml d'eau sont ajoutés et malaxés pour obtenir une masse granulaire. La masse est granulée au moyen d'un granulateur (Granylateur ECK de Fuji Paudal CO., Japon) équipé avec un tamis (B.S.) à mailles n 24 pour obtenir des granulés. Les granulés sont séchés jusqu'à ce que la teneur en humidité soit inférieure à 5% et tamisés avec le tamis (B.S.) à mailles n 16. Les granulés tamisés sont mis en cachets au moyen d'une machine à remplir les cachets à raison de 190 mg/cachet. Exemple pharmaceutique 2 - Préparation de cachets mous pour usage oral. Une solution homogène est préparée en mélangeant 50 g de dichlorhydrate de N-décaprénylpipérazine avec 130 g de polyéthylèneglycol ( de glycérine, 10 g de D-sorbitol, 0,4 g de parahydroxy- benzoate d'éthyle, 0,2 a de parahydroxybenzoate de propyle et 0,4 g d'oxyde de titane et qui est utilisée sous forme d'un agent filmogène pour cachets. La solution obtenue précédemment en même temps que l'agent filmogène pour cachets sont traités avec un emporte-pièce plat du type manuel pour obtenir des cachets contenant chacun 180 mg. Exemple pharmaceutique 3 - Injections. Un mélange de 5 g de dichlorhydrate de N-décaprényl-N'- méthylpipérazine, une quantité appropriée d'huile d'arachides et 1 g d'alcool benzylique sont complétés à un total de 100 cm par addition d'huile d'arachides. La solution est versée par 247012T portions à raison de 1 cm3 dans des conditions aseptiques dans une ampoule qui est ensuite scellée. Exemple pharmaceutique 4 - Injections. Un mélange de 1 g de dichlorhydrate de N-décaprényl- N'-méthylpipérazine, 5 g de "Nikkol HCO 60" (marque commer- ciale) (huile de ricin hydrogénée éthérifiée avec 60 moles de polyoxyéthylène), 20 g de propylèneglycol, 10 g de glycérol et 5 g d'alcool éthylique sont mélangés avec 100 ml d'eau distillée et agités. Dans des conditions aseptiques, la solution est versée par portions à raison de 1, 4 ml dans une ampoule qui est ensuite scellée. 24701.2t i - REVENDICATIONS 1. Composé correspondant à la formule générale: CH3 H-1 CH2.C=CHi-CH2 Y N R dans laquelle R est un groupe capable de former en liaison avec l'atome d'azote adjacent un noyau hétérocyclique à 5 ou 6 chaînons qui peut contenir un autre hétéro-atome, ledit groupe R étant éventuellement substitué par un atome d'hydrogène, un groupe alkyle inférieur ou un groupe déca- prényle s'il contient un atome d'azote supplémentaire comme autre hétéro-atome, et les sels acides d'addition de ce composé. 2. Le dichlorhydrate de N-décaprényl-N'-méthylpipérazine. 3. Le dichlorhydrate de N-décaprénylpipéridine. 4. Le N-décaprénylimidazo3-. 5. Médicament caractérisé par le fait qu'il est un composé tel que défini dans la revendication 1. 6. Composition pharmaceutique caractérisée par le fait qu'elle comprend au moins un composé tel que défini dans la revendication 1 en même temps que des excipients et/ou des matières auxiliaires pharmaceutiquement acceptables.