Brevet FR2463620A1 — publié le 19810227

La présente invention concerne essentiellement des extraits de Marsdenia cundurango Reichenbach fil, des procédés de préparation de ceux-ci, des agents anti-tumeur les comprenant, et des compositions pharmaceutiques les contenant. En outre, l'invention concerne des procédés de traitement de tumeur avec ceux-ci. Le Marsdenia cundurango Reichenbach fil appartenant à la famille Asclepiadaceae est un arbrisseau ou arbuste d'un type quelque peu sinueux croissant naturellement sur et entre les montagnes du nord-ouest de l'Amérique du Sud. Son écorce est employée comme aromate mais amère à l'esDmac lors de désordre digestif et/ou d'anorexie, habituellement sous la forme d'extrait fluide (commentaire pour la neuvième Pharmacopée japonaise). Les composants de l'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil incluetla condurangogenine-A, la condurangogenine-C et de nombreux autres composés de type prégnane et leurs esters et glycosides, et l'extraction, la séparation, les structures,etc de ceux-ci ont été rapportés par exemple dans les documents suivants. Mais, leurs détails ne sont toujours pas clairs en ce qui concerne de nombreux points. R.Tschesche et al., Tetrahedron, 21, p. 1777 (1965); 21, p. 1797 (1965); 23, p. 1461 (1967); et 24, p. 4359 (1968). M. Pailer et al., Monatshefte fur chemie,106, p. 37 (1975). Hiroshi Mitsuhashi et al., Chem. Pharm. Bull., 16, p 2522 (1968). Comme résultat de leur étude, les inventeurs de la présente invention ont découvert que certains extraits de Marsdenia cundurango Reichenbach fil et certaines fractions d'élution obtenues en soumettant les extraits à une chromatographie liquide à pression élevée (ci-après référencée comme HPLC) ont une activité anti-tumeur. Ainsi, la présente invention a été réalisée. La présente invention sera maintenant présentée en détail. Selon la présente invention, on préfère l'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil. Cette écorce peut être disponible commercialement, mais on préfère une écorce bien séchée et finement divisée aussit8t après sa collecte. Au vu de la nature de la préparation des extraits, l'ordre de l'emploi des solvants n'est pas critique également dans la réalisation de la présente invention et il peut être changé à convenance. Un mode de réalisation préféré d'un procédé de la présente invention est le suivant: (Première opération) Du Marsdenia cundurango Reichenbach fil, par exemple son écorce, est finement divisé et extrait avec un solvant organique, et l'extrait est concentré à sec sous pression réduite. Comme solvant organique, on peut employer le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol ou tout autre alcool inférieur, mais on préfère le méthanol. Ici, avant l'extraction, le Marsdenia cundurango Reichenbach fil peut être dégraissé avec un hydrocarbure aliphatique tel que le pentane, l'hexane, l'heptane, la ligroine, ou l'éther de pétrole. On désire effectuer ce pré-traitement en employant de l'hexane en une quantité de 4 à 7 fois (volume/poids) par rapport à celui du Marsdenia cundurango Reichenbach fil. Dans un mode de réalisation de cette opération d'extraction, l'extraction est effectuée en laissant le mélange de solvant-matériau de départ rester à la tempéra- ture ambiante pendant plusieurs heures à plusieurs dizaines d'heures. Ensuite, le mélange est filtré pour obtenir un filtrat. Le résidu est soumis-à la même extraction- filtration de manière répétée, et tous les filtrats sont combinés et concentrés à sec sous pression réduite pour obtenir un extrait. L'extrait est habituellement effectué à des températures normales, mais peut être effectué tout en chauffant de façon à raccourcir le temps d'extraction. Cette extraction sous chauffage est de préférence réalisée au bain-marie avec de l'eau à une température de bain d'eau de 35-551C pendant 4-6 heures en employant un condenseur de reflux. Elle peut être effectuée selon la méthode de percolation. La quantité du solvant employé est de 2 à 5 fois (volume/poids) celle de l'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil. Le résidu d'extraction est de préférence soumis à l'extraction dans les mêmes conditions au moins trois fois en employant le solvant en une quantité allant de 0,4 à 0,8 fois (volume/volume) celle du solvant tout d'abord employé. La séparation peut être conduite par filtration sur papier, centrifugation ou analogues. De meilleurs résultats sont obtenus en réalisant la séparation par filtration par succion en employant des additifs de filtration disponibles commercialement, par exemple, les additifs dénommés "Radiolite" (Showa Chemical Industrye Co, Ltd Japon), "Celite" (Wako Junyaku Industry Co, Ltd Japon), "Fibra Cel" (Johns Manville Co, Ltd U.S.A.), etc. La réduction de la pression est réalisée d'une manière habituelle, par exemple, en employant un appareil d'aspiration, une pompe à vide ou analogues. Comme récipient d'extraction, un récipient à surface interne vitrée ou émaillée,satinée ou vernie ou glacée ou un réalisé en acier inoxydable est employé. (Seconde opération) A l'extrait obtenu par la première opération, on ajoute un hydrocarbure chloré autre que le tétrachlorure de carbone tel que du chloroforme ou du dichlorométhane suivi par une vigoureuse agitation pour enlever la portion insoluble. La portion insoluble est soumise à la même opération de manière répétée. Toutes les solutions restantes sont combinées et concentrées à sec sous pression réduite directement ou après une filtration par succion. La quantité du solvant employé est de 2 à 6 fois (volume/poids) celle de l'extrait obtenu par la première opération. Les résidus respectifs sont de préférence soumis à la même opération 4 à 5 fois, mais en employant le solvant en une quantité allant de 0,2 à 0,4 fois (volume/volume) celle du solvant tout d'abord employé. La filtration par succion peut être réalisée de la même manière que la première opération. (Troisième opération) L'extrait obtenu par la seconde opération est dissous dans un hydrocarbure chloré autre que du tétra- chlorure de carbone tel que du chloroforme ou du dichloro- méthane dans la quantité minimum nécessaire pour dissoudre l'extrait complètement. A la solution résultante, on ajoute un hydrocarbure aliphatique tel que du pentane, du n-hexane ou de l'heptane à une quantité 2 à 4 fois (volume/ volume) celle de la solution suivi par une bonne agitation et on laisse rester pendant plusieurs heures à plusieurs dizaines d'heures pour recueillir la portion insoluble. Alternativement, le tétrachlorure de carbone ou un hydrocarbure aromatique tel que du toluène ou du benzène peuvent être ajoutés à l'extrait directement en une quantité égale ou jusqu'à 3 fois (volume/poids) celle de ce dernier et ensuite travaillés comme dans ce qui précède pour recueillir la portion insoluble. La portion insoluble est soumise à la même opération de manière répétée. Cette opération est de préférence réalisée 2 ou 3 fois, chaque fois en employant un solvant en une quantité égale à 0,4-0,6 fois (volume! volume) celle du solvant premièrement employé. La portion insoluble ainsi obtenue est bien séchée à une température de 500C ou inférieure sous pression réduite et ensuite broyée pour obtenir un extrait brun semblable à une poudre (ci-après référencé comme extrait A). La collection de la portion insoluble peut être réalisée par décantation, filtration par succion ou centrifugation de manière avantageuse. De façon à diminuer le coût total du procédé de la présente invention et pour rendre l'opération plus facile à suivre, du Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé, par exemple son écorce, peut tout d'abord être extrait avec une cétone aliphatique telle que l'acétone ou de la méthyléthylcétone, un ester aliphatique inférieur tel que de l'acétate de méthyle, de l'acétate d'éthyle ou de l'acétate de butyle, un éther tel que du di6thyléther, du tétrahydrofuranne ou du dioxane ou de l'eau chaude ou être traité thermiquement (110-130oC pendant 30 minutes ou davantage) directement suivi par l'extraction avec de l'eau ou un alcool inférieur aqueux, et ensuite l'extrait peut être soumis aux trois opérations mentionnées ci-dessus. Ici, l'extraction peut être réalisée de la même manière que dans la première opération précitée. Habituellement, une P -glycosidase capable de rompre les liaisons glucose des glycosides est présente dans les extraits des plantes, et cet enzyme est activé en présence d'eau. Pour cette raison, le traitement thermique est requis lorsqu'on emploie de l'eau ou un alcool inférieur aqueux. L'extrait A ainsi obtenu est un mélange de six composants montrant des pics caractéristiques dans les diagrammes montrés aux figures 1-17 des dessins annexés lorsqu'ils sont soumis à une HPLC analytique, et possède une activité anti-tumeur. (Quatrième opération) De façon à obtenir une portion plus active de l'extrait A, celui-ci est dissous dans du chloroforme dans la quantité minimale nécessaire pour la dissolution complète de celui-ci, et à la solution résultante on ajoute du n-hexane en une quantité telle que la solution ne devient pas turbide. La solution d'échantillon obtenue est soumise à une HPLC à phase normale pour la collection de masse[ éluant: un mélange de n-hexane/chloroforme/ méthanol (rapport volumétrique = 6:3:1) J. Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, deux fractions choisies sur la base des pics correspondant aux fractions Fr-2 et Fr-3 montrées dans le diagramme (figure 18 des dessins annexés) obtenues auparavant par des essais préliminaires sont recueillies, respectivement, et esnuite chacurnest concentrée sec pour obtenir des extraits. Alternativement, l'extrait A obtenu-par la troi- sième opération peut être soumis à l'élution par méthode à colonne ouverte successivement avec du chloroforme et un mélange de chloroforme et de méthanol (rapport volumé- trique: 97:3-95:5) pour enlever la portion la moins polaire, et ensuite en éluant avec un mélange de chloroforme et de méthanol (rapport volumétrique = 93:7) pour obtenir deux fractions-correspondant aux fractions Fr-2 et Fr-3 mentionnées précédemment. Ici, habituellement la première moitié de l'éluant correspond à la fraction Fr-2, et la dernière moitié, à la fraction Fr-3, mais on désire que le rapport volumétrique des deux fractions soit de 60:40. Ensuite, l'extrait correspondant à la fraction Fr-2 est, comme mentionné précédemment, soumis à une HPLC à phase normale pour la collection de masse Léluant: un mélange de n-hexane/chloroforme/méthanol (rapport volu- métrique = 6:1:1). Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, des fractions choisies sur la base des pics correspondant aux fractions Fr-2-1 et Fr-2-2 montrées dans les diagrammes (figure 19 des dessins annexés) obtenues au préalable par des essais préliminaires sont recueillies, respectivement et chacune est concentrée à sec pour obtenir des extraits blancs semblables à une poudre (ci-après référencés comme extrait B-1 et extrait B-2). Par ailleurs, l'extrait correspondant à la fraction Fr-3 est soumis à une HPLC à phase inversée pour la collection de masse (éluant: une solution de méthanol aqueux 65-75% (volume/volume). Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, des fractions choisies sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-3-1 montrée dans le diagramme (figure 22 des dessins annexés) obtenue au préalable par des essais préliminaires sont recueillies et concentrées à sec pour obtenir un extrait blanc semblable à une poudre (ci-après référencé comme extrait B-3). Les extraits ainsi obtenus de la présente invention ont les aspects caractéristiques suivants: 1.- Propriétés (1) L'extrait A est une poudre brune tandis que les extraits B-1, B-2 et B-3 sont des poudres blanches. Tous ont un goût amer et donnent une odeur analogue à l'acide cmnamique lorsqu'on y ajoute une solution de soude caustique suivie par un chauffage. (2) Solubilité (extraits A, B-1, B-2 et B-3) Ils sont solubles dans des alcools inférieurs et dans des hydrocarbures chlorés autres que le tétrachlorure de carbone. Ils sont insolubles dans des hydrocarbures aliphatiques, le tétrachlorure de carbone ou des hydro- carbures aromatiques. 2.- Spectre U.V. (extraits A, B-1, B-2 et B-3) ) max = 280 nm (dans le méthanol) 3.- Spectre de masse (extraits A, B-1, B-2 et B-3) Ils montrent un pic de base du cation cinnamyle à m/e = 131 et un pic d'ion de cation acétyle à m/e = 43. Ainsi, la présence des esterscinnamique et acétique dans les extraits est suggérée. 4.- Chromatographie liquide (conditions) Charge: gel de silice (Wako-gel LC-5H-du type broyé totalement poreux, 5 microns, dénomination commer- ciale d'un gel fabriqué par Wako Junyaku Co, Ltd Japon) Colonne: d.i. x 1. = 4 mm x 200 mm Eluant: un mélange de n-hexane/chloroforme/ méthanol (rapport volumétrique = 7:2:1) Vitesse d'écoulement: 1,5 ml/mn. Pression: 29,4 bars Détection: à U.V. 280 nm (0,64 AUFS) Dans les conditions précitées, on soumet 20 mg de 24M3620 chacun des extraits A, B-1, B-2 et B-3 dissous dans 10 ml de chloroforme à une chromatographie liquide. Les diagrammes caractéristiques obtenus sont répertoriés dans les figures 1, 20-21 et 23 des dessins annexés (ils reflètent les résultats obtenus sur l'extrait A préparé dans l'exemple 1, les extraits B-1 et B-2 préparés à l'exemple 18 et l'extrait B-3 préparé à l'exemple 19, respectivement). 5.- Réaction colorée (extraits 1, B-1, B-2 et B-3) Réaction de Keller Kiliani (Helvetica Chimica Acta, 31, page 883 (1948)): positive (brune verdâtre) Réaction de Liebermann Burchard (Dictionnaire de Physique et Chimie de Iwanami, 3ème édition, page 1411 (1977)): positive (verte bleuâtre) Ainsi, on suppose que les extraits consistent principalement des glycosides stérofdes ayant des 2,6-désoxysucres. L'activité anti- tumeur des extraits de la présente invention a été confirmée par l'essai d'écran mentionné ci-dessous. Deux types de tumeurs, le Sarcoma-180 et l'Ehrlich carcinoma, sont employées dans l'évaluation des propriétés anti- tumeur, et la tumeur testée est du type tubercule sous-cutanée. Le groupe auquel les extraits de la présente invention sont administrés consiste de sept souris tandis que le groupe de contrôle consiste de dix souris. Méthode d'essai (1) Sarcoma-180 Les animaux d'expérience consistent de souris mâles ICR agrées de six semaines (poids du corps: 30-32 g). Les tumeurs sont transplantées intrapéritonialement dans la souris. Le septième jour après la transplantation, on prend les cellules des tumeurs de bonne croissance, et on transplante 4 x 106 cellules d'entre elles de manière sous-cutanée dans la région inguinale de la souris pour former des tumeurs solides. A partir de, et après, 24 heures après la transplantation, les extraits de la présente invention dissous dans des solutions salines physiologiques sont administrées aux souris intrapéritonialement. Le volume des solutions respectives administrées est de 0,2 ml par souris en une fois, et l'administration est continuée pendant 10 jours à un taux d'une fois par jour. On donne seulement des solutions salines physiolo- giques aux souris du groupe de contrôle. Le trentième jour après la transplantation, on prend les tumeurs pour mesurer le poids moyen des tumeurs des souris du groupe auquel les extraits de la présente invention ont été administrés (T) et celle du groupe de contrôle (C) pour calculer le rapport T/C (%). (2) Ehrlich carcinoma Les animaux d'expérience sont des souris mâles ddY agées de six semaines (poids du corps: 28-30 g). On transplante des tumeurs intrapéritonialement dans les souris. Le dixième jour après la transplantation, les cellules de bonne croissance des tumeurs sont prises, et on transplante 1,5 x 106 cellules parmi celles-ci de manière sous-cutanée dans la région inguinale de la souris pour former des tumeurs solides, et ensuite on procède comme dans le cas du Sarcoma-180 pour calculer le rapport T/C (%). Les résultats sont répertoriés au tableau suivant. TABLEAU Extrait Dose T/C (%) (mg/kg x nbre de Ehrlich Sarcoma- fois) 1carcinoma_ 180 Extr. A de Ex. 1 40 x 10 34,1 15,2 Extr. A de Ex. 3 39,0 23,5 Extr. A de Ex. 4 32,3 35,2 Extr. A de Ex. 5 44,7 31,0 Extr. A de Ex. 6 40,1 39,3 Extr. A de Ex. 7 38,5 41,3 Extr. A de Ex. 8 13,5 19,8 Extr. A de Ex. 9 15,0 39,8 Extr. A de Ex.10 22,8 26,6 Extr. A de Ex.11 32, 1 40,0 Extr. A de Ex.12 30,5 32,7 Extr. A de Ex.13 40,3 28,4 Extr. A de Ex.15 30,0 22,2 Extr. A de Ex.17 n 23,1 19,0 Extr.B-1 de Ex.18 15 x 10 24, 3 13,6 Extr.B-2 de Ex.18 n 29,8 5,0 Extr.B-3 de Ex.19 n 31,0 20,0 Extr.B1 de Ex.20 n 18,0 9,2 Extr.B-2 de Ex.20 21,0 4,7 Extr.B-3 de Ex.21 30,3 15,2 Ensuite, les extraits de la présente invention sont administrés à des souris mâles ddY agées de 5 semaines ( poids du corps: 21- 25 g) intrapéritonialement pour déterminer les valeurs de toxicité aiguë (LD50). Résultats Les extraits de la présente invention peuvent être administrés au corps humain de manière orale, par injection (de manière intraveineuse, sous-cutanée ou intramusculaire) ou de toute autre manière. Lorsque les extraits de la présente invention sont employés sous la forme de préparations solides pour l'administration orale, les préparations peuvent être des comprimés, granules, poudres, capsules ou analogues. Les préparations peuvent contenir des additifs, par exemple, un excipient tel qu'une préparation de saccharide ou de cellulose, un liant tel qu'une pâte d'amidon ou de la méthylcellulose, une charge, un désintégrateur et analogues, tous étant habituellement employés dans la fabrication de préparations médicales. Dans le cas o les extraits de la présente invention sont employés comme préparations liquides orales, elles peuvent être sous n'importe quelle forme choisie parmi des préparations aqueuses à emploi interne, des suspensions, des émulsions, des sirops, etc et en outre elles peuvent être sous la forme de produits Extrait LD50 (mg/kg) Extr. A de l'Ex. 1 400 Extr. A de l'Ex. 8 415 Extr. A de l'Ex. 12 398 Extr. B-1 de l'Ex. 18 610 Extr. B-2 de l'Ex. 18 78 Extr. B-3 de l'Ex. 19 382 Extr. B-1 de l'Ex. 20 608 Extr. B-2 de l'Ex. 20 80 Extr. B-3 de l'Ex. 21 370 secs qui sont dissous avant l'emploi. Lorsque les extraits de la présente invention sont administrés oralement à des adultes, ils peuvent être employés en une dose allant de 3,0-30,0 mg/kg (extrait A), 1,2-48,0 mg/kg (extrait B-1), 1,2-6,0 mg/kg (extrait B2) ou 1,2-30,0 mg/kg (extrait B-3) par jour. Ici, naturellement, la dose peut être augmentée ou diminuée de manière appropriée selon les conditions de la maladie, l'âge du patient, la forme de la préparation, etc. Les extraits de la présente invention peuvent être injectés sous la forme de solutions aqueuses, de suspensions ou émulsions huileuses ou aqueuses, mais habituellement les injections sont préparées en les dissolvant ou les mettant en suspension dans un milieu liquide aqueux tel que de l'eau stérile de solutions salines et physiologiques. Si nécessaire, des agents dissolvants habituellement employés, des stabilisants, des agents de conservation, des additifs habituellement employés pour la préparation de solutions isotoniques, etc. peuvent être ajoutés aux injections. Les préparations d'injection ainsi obtenues sont administrées de manière intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée ou de toute autre manière appropriée. Lorsque les injections sont administrées à des adultes de manière parentérale, elles peuvent contenir de 1,0-10,0 mg/kg d'extrait A, 0,4-16,0 mg/kg d'extrait B-1, 0,4-2,0 mg/kg d'extrait B-2 ou 0,4-10,0 mg/kg d'extrait B-3 par jour. Naturellement, ce niveau de dose est augmenté ou diminué de manière appropriée selon les conditions de la maladie, l'âge du patient, la forme de la préparation, le mode d'administration et analogues. La présente invention sera expliquée en détail ci-après en référence aux exemples suivants donnés simple- ment à titre d'illustration et qui ne sauraient donc en aucune façon limiter la portée de la présente invention. Exemple 1 I On ajoute 1 litre de méthanol à 500 g d'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé, et on laisse le mélange rester toute la nuit à la température ambiante. Ensuite, on filtre le mélange, et on traite en outre le résidu trois fois de la même manière, chaque fois en employant 0,75 1 de méthanol. On combine tous les filtrats, et ensuite on concentre à sec à 450C sous pression réduite pour obtenir 69 g d'un extrait. A cet extrait transféré dans un entonnoir de séparation, on ajoute 150 ml de chloroforme suivi par une vigoureuse agitation, et ensuite on obtient la couche de chloroforme. Au résidu, on ajoute 50 ml de chloroforme pour répéter la même opération que précédemment trois fois. Tous les extraits de chloroforme sont combinés et ensuite on soumet à une filtration par succion en employant du Fibra Cel BH-40 dénomination commerciale d'un produit vendu par Johns Manville Co, Ltd, comme aide de filtration. Le filtrat résultant est concentré à sec à 40 C sous pression réduite pour obtenir 40 g d'un extrait. Cet extrait est dissous dans 50 ml de chloroforme suivi par l'addition de ml de n-hexane. Le mélange résultant est bien agité et laissé rester pendant 12 heures. Ensuite, on soumet à la décantation pour obtenir la portion insoluble ^ Cette portion est dissoute dans 25 ml de chloroforme suivi par l'addition de 50 ml de nhexane, et la solution est bien agitée et laissée rester pendant 2 heures. On soumet la solution à une décantation pour obtenir la portion insoluble et ensuite on traite de la même manière que précédemment trois fois. La portion insoluble finalement obtenue est séchée à 450C sous pression réduite pendant 6 heures et broyée pour obtenir 18 g d'extrait A brun sous forme de poudre. On dissout 20 mg de l'extrait A ainsi préparé dans ml de chloroforme, et on soumet la solution résultante à une HPLC analytique C charge: gel de silice (Wako-gel LC-5H, fabriqué par Wako Junyako Industry Co, Ltd, de type broyé totalement poreux, 5 /4v); colonne: d.i. x 1 = 4 mm x 200 mm; éluant: un mélange de n-hexane/chloroforme/ éthanol (rapport volumétrique = 7:2:1); vitesse d'écoulement: 1,5 ml/mn; pression: 29,4 bars et détection: à U.V. 280 nm(O,64 AUFS)). Les résultats obtenus sont répertoriés dans le diagramme de la figure 1 des dessins annexés. Exemple 2 De la même manière qu'à la première opération de l'exemple 1, on extrait 500 g d'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé avec du chloroforme. Tous les filtrats sont combinés et concentrés à sec à 400C sous pression réduite pour obtenir 46 g d'un extrait. A cet extrait, on ajoute 100 ml de méthanol, et on agite bien le mélange et ensuite on filtre. On traite le résidu avec 30 ml de méthanol de la même manière que précédemment quatre fois. Tous les filtrats sont combinés et concentrés à sec à 451C sous pression réduite pour obtenir 24 g d'un extrait. On dissout cet extrait dans 50 ml de chloroforme, et ensuite on traite comme dans l'exemple 1 pour obtenir 13 g d'un extrait A brun sous forme de poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions que dans l'exemple 1 sont répertoriés dans le diagramme de la figure 2 des dessins annexés. Exemple 3 De la même manière qu'à l'exemple 1, mais en employant de l'éthanol au lieu du méthanol dans la première opération, on produit 14,1 g d'un extrait A brun sous forme de poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont répertoriés dans le diagramme de la figure 3 des dessins annexés. Exemple 4 De la même manière qu'à l'exemple 1, mais en employant l'isopropanol au lieu du méthanol dans la première opération, on produit 13,7 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont répertoriés dans le diagramme de la figure 4 des dessins annexés. Exemple 5 De la même manière qu'à l'exemple 1,mais en employant du dichlorométhane au lieu de chloroforme dans la seconde opération, on produit 16 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont répertoriés dans le diagramme de la figure 5 des dessins annexés. Exemple 6 De la même manière qu'à l'exemple 1, mais en employant du pentane au lieu de n-hexane dans la troisième opération, on produit 15,9 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont répertoriés dans le diagramme de la figure 6 des dessins annexés. Exemple 7 De la même manière qu'à l'exemple 1, mais en employant l'heptane au lieu du n-hexane dans la troisième opération, on produit 16,8 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont répertoriés dans le diagramme de la figure 7 des dessins annexés. Exemple 8 A 40 g de l'extrait obtenu en réalisant les première et seconde opérations de l'exemple 1, on ajoute 50 ml de tétrachlorure de carbone, et on agite bien le mélange et on laisse rester pendant 12 heures. Ensuite, on soumet le mélange à une décantation pour obtenir la portion insoluble. A cette portion insoluble, on ajoute 25 ml de tétrachlorure de carbone, et on agite bien le mélange et on laisse rester pendant 5 heures. On soumet le mélange à une décantation pour obtenir la portion insoluble qui est ensuite traitée de la même manière que précédemment deux fois supplémentaires La portion insoluble finalement obtenue est séchée à 450C sous pression réduite pendant 6 heures et on broie pour obtenir 17,4 g d'un extrait A brun sous forme de poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont répertoriés dans le diagramme de la figure 8 des dessins annexés. Exemple 9 De la même manière qu'à l'exemple 8, mais en utilisant du toluène au lieu du tétrachlorure de carbone dans la troisième opération, on produit 12,3 g d'un extrait A brun sous forme de poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 9 des dessins annexés. Exemple 10 De la même manière qu'à l'exemple 8, mais en employant du benzène au lieu du tétrachlorure de carbone dans la troisième opération, on produit 16,4 g d'un extrait A brun sous forme de poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés au diagramme de la figure 10 des dessins annexés. Exemple 11 De la même manière qu'à la première opération de l'exemple 1, on extrait 500 g d'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé avec de l'acé- tone. Tous les filtrats sont combinés et concentrés à sec à 400C sous pression réduite pour obtenir 43 g d'un extrait. A cet extrait, on ajoute 100 ml de méthanol, et on agite bien le mélange et on filtre. On traite le résidu avec 30 ml de méthanolque l'on y ajoute de la même manière que précédemment quatre fois. Tous les filtrats sont combinés et oncxzontre à sec à 450C sous pression réduite pour obtenir 22 g d'un extrait. A cet extrait, on ajoute 150 ml de chloroforme, et on agite bien le mélange et on filtre. Le résidu avec 50 ml de chloroforme que l'on y ajoute est traité de la même manière que précédemment trois fois. On combine tous les filtrats et on soumet à une filtration par succion en employant du Fibra Cel BH-40 (produit commercialisé par Johns Manville Co, Ltd U.S.A.) comme aide de filtration, et on concentre le filtrat résultant à sec à 40WC sous pression réduite pour obtenir g d'un extrait. On dissout cet extrait dans 50 ml de chloroforme que l'on y ajoute et ensuite on travaille comme dans l'exemple 1 pour obtenir 11,3 g d'un extrait A brun sous forme de poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 11 des dessins annexés. Exemple 12 De la même manière qu'à la première opération de l'exemple 1, on extrait 500 g d'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé avec de l'acétate d'éthyle. On combine tous les filtrats et on concentre à sec à 451C sous pression réduite pour obtenir 38 g d'un extrait. On traite cet extrait avec 100 ml de méthanol que l'on y ajoute de la même manière qu'à l'exemple 11 pour obtenir 15,8 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 12 des dessins annexés. Exemple 13 De la même manière qu'à la première opération de l'exemple 1, on extrait 500 g d'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé avec du dioxane. On combine tous les filtrats et on concentre à sec à 500C sous pression réduite pour obtenir-60 g d'un extrait. A cet extrait, on ajoute 100 ml de méthanol,et ensuite on traite le mélange comme dans l'exemple 11 pour obtenir 16 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 13 des dessins annexés. Exemple 14 A 500 g d'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé, on ajoute 1 1 de méthanol, et on soumet au reflux le mélange sur un bain d'eau à 500C en employant un condenseur de reflux pendant 5 heures pour l'extraction. On conduit la filtration tandis que le mélange est chaud, et on traite le résidu avec 0,75 ml de méthanol que l'on y ajoute de la même manière que précédemment trois fois. Ensuite, on travaille le mélange comme dans l'exempleI pour obtenir 21,5 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 14 des dessins annexés. Exemple 15 A 500 g d'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé, on ajoute 2,5 1 d'eau chaude suivi par une bonne agitation. On laisse le mélange rester à la température ambiante toute la nuit. On filtre le mélange, et on traite le résidu de la même manière que précédemment quatre fois, mais à chaque fois en employant 1 1 d'eau chaude. On combine tous les filtrats et on concentre à sec à 500C sous pression réduite pour obtenir 94 g d'un extrait. A cet extrait, on ajoute 300 ml de méthanol et on agite bien le mélange et on filtre. On traite le résidu avec 100 ml de méthanol que l'on y ajoute de la même manière que précédemment quatre fois. Tous les filtrats sont combinés et concentrés à sec à 450C sous pression réduite pour obtenir 53 g d'un extrait. A cet extrait transféré dans un entonnoir de séparation, on ajoute 150 ml de chloroforme, et ensuite on traite le mélange de la même nanière qu'à l'exemple 1 pour obtenir 5,6 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant l'extrait A à une HPLC dans les mêmes Conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 15 des dessins annexés. Exem2le 16 On chauffe de l'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé (500 g) dans un autoclave à 1200C pendant 30 minutes suivi par l'addition de 2 1 d'eau, et ensuite on laisse le mélange rester à la température ambiante toute la nuit. Ensuite, on filtre le mélange et le résidu avec 1 i d'eau que l'on y ajoute est ensuite traité de la même manière que précédemment quatre fois. On combine tous les filtrats et on concentre à sec à 500C sous pression réduite pour obtenir 96 g d'un extrait. Ensuite, on traite le mélange de la même manière qu'à l'exemple 15 pour obtenir 6,8 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant l'extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés au diagramme de la figure 16 des dessins annexés. Exemple 17 De l'écorce de Marsdenia cundurango Reichenbach fil finement divisé (500 g) est chauffée dans un autoclave à 1200C pendant 30 minutes suivi par l'addition de 1,5 1 d'une solution de méthanol aqueux à 50% (volume/volume), et on laisse le mélange rester à la température ambiante toute la nuit. Ensuite, on filtre le mélange, et on traite le résidu avec 0,75 1 d'une solution de méthanol aqueux à % (volume/volume) que l'on y ajoute de la même manière que précédemment quatre fois. On combine tous les filtrats et on concentre à sec à 50 C sous pression réduite pour obtenir 103 g d'un extrait. Ensuite, on travaille le mélange de la même manière qu'à l'exemple 15 pour obtenir 9 g d'un extrait A brun analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant cet extrait A à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 17 des dessins annexés. Exemple 18 On dissout 6 g d'extrait A obtenu à l'exemple 1 dans 50 ml de chloroforme. Ensuite, on ajoute du nhexane au mélange résultant dans la quantité maximale mais ne provoquant pas de turbidité, et on soumet la solution résultante à une HPLC pour une collection de masse (système 500 fabriqué par Waters Co, Ltd, charge: Preppak 500-silice (dénomination commerciale d'un produit fabriqué par Waters Co, Ltd, gel de silice totalement poreux, sphérique, aire spécifique = 320 m2/g); colonne: d.i. x 1. = 57 mm x 300 mm; chacune contient 325 g de charge; éluant: un mélange de n-hexane/chloroforme/ méthanol (rapport volumétrique = 6:3:1); vitesse d'écoule- ment: 150 ml/mn; et détection'à RI (1/20 x 10-4RIUFS)). Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, un éluat choisi sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2 montré à la figure 18 des dessins annexés est recueilli pendant 12 minutes. On répète l'opération précédente deux fois supplémentaires, chaque fois en employant 6 g d'extrait A obtenu dans l'exemple 1. On combine tous les éluats, et on concentre à sec à 400C pour obtenir 5,54 g d'un extrait. On dissout cet extrait dans ml de chloroforme suivi par l'addition de n- hexane dans la quantité maximale mais ne causant pas de turbidité. On soumet ensuite la solution résultante à une HPLC dans les mêmes conditions que précédemment sauf qu'on emploie un mélange de nhexane/chloroforme/méthanol (rapport volumétrique = 6:1:1) comme éluant. Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, un éluat choisi sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2-1 montrée à la figure 19 des dessins annexésest recueilli pendant 6 minutes et 30 secondes, et on recueille pendant 8 minutes séparément un autre éluat choisi sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2-2 montrée dans le même diagramme. On concentre les fractions respectives à sec à 400c pour obtenir 1,98 g d'un extrait B-1 blanc semblable à une poudre ( correspondant à la fraction Fr-2-1) et 0,91 g d'un extrait B-2 blanc analogue à une poudre (correspondant à la fraction Fr-2-2). Les résultats obtenus en soumettantle extraitsB-1 et B-2 ainsi obtenusà une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1, respectivement, sont montrés aux figures et 21 des dessins annexés, respectivement. Exemple 19 On concentre un éluat à partir de la première HPLC pour la collection de masse de l'exemple 18 recueilli pendant 13 minutes sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-3 de la figure 18 des dessins annexés à sec pour obtenir 2,88 g d'un extrait. On dissout cet extrait dans une solution de méthanol aqueux à 170% (volume/volume), et ensuite on soumet à une HPLC pour la collection de masse (système 500 fabriqué par Waters Co, Ltd, charge: Preppak 500-C18 (dénomination commerciale d'un produit fabriqué par Waters Co, Ltd, du type chimiquement lié C-18); colonne: d.i. x 1. = 57 mm x 300 mm; éluant: une solution de méthanol aqueux à 170% (volume/volume); vitesse d'écoulement: 100 ml/mn; et détection: à RI (1/50 x 10-4 RIUFS)). Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, un éluat choisi sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-3-1 de la figure 22 des dessins annexés est collecté pendant 12 minutes et concentré à sec à 40 C pour obtenir 0,88 g d'un extrait B-3 blanc analogue à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant l'extrait B-3 ainsi obtenu à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 23 des dessins annexés. Exemple 20 On dissout l'extrait A obtenu dans l'exemple 2 (13 g) dans 30 ml de chloroforme et on adsorbe sur 80 g de gel de silice (Wako-gel C-200 produit commercial fabriqué par Wako Junyaku Co, Ltd de granulométrie corres- pondant à un tamis standard ayant 200 mailles/2,54 cm) avec lequel une colonne est remplie (d.i. x 1. = 3 cm x22cm) par le procédé sec. Tout d'abord, les éluats obtenus par l'élution avec ml de chloroforme, 200 ml d'un mélange de chloroforme et de méthanol (rapport volumétrique = 97:3) et ensuite 200 ml d'un mélange de chloroforme et de méthanol (rapport volumétrique = 95:5) sont mis de cOté.et ensuite un éluat obtenu par l'élution avec 11 d'un mélange de chloroforme et de méthanol (rapport volumétrique = 93:7) est divisé en une première fraction de 600 ml et une fraction restante de 400 ml. La première fraction de 600 ml est concentrée et ensuite séchée à 45 C sous pression réduite pendant 6 heures et broyée pour obtenir 4,21 g d'un extrait. Cet extrait est dissous dans 40 ml de chloroforme suivi par l'addition de n-hexane dans la quantité maximale mais ne provoquant pas de turbidité. On soumet la solution résultante à une HPLC pour collection de masse 1 système 500 fabriqué par Waters Co, Ltd; charge: Preppak 500-silice (gel de silice totalement poreux fabriqué par Waters Co, Ltd, sphérique, aire spécifique: 320 m2/g); colonne: d.i. x 1. = 57 mm x 300 mm, chacune contient 325 g de charge; éluant: un mélange de n-hexane/chloroforme/ méthanol (rapport volumétrique = 6:1:1); vitesse d'écoule- ment: 150 ml/mn; et détection: à RI (1/20 x 10-4 RIUFS)7. Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, on collecte un éluat choisi sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2-1 montrée à la figure 19 des dessins annexés pendant 6 minutes et 30 secondes et on collecte un autre éluat choisi sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2-2 montrée dans le même dessin. Les fractions respectives sont concentrées à sec pour obtenir 0,85 g d'un extrait B-1 blanc analogue à une poudre (correspondant à la fraction Fr-2- 1) et 0,72 g d'un extrait B-2 blanc analogue à une poudre (correspondant à la fraction (r-2-2). Les résultats obtenus en soumettant les extraits B-1 et B-2 ainsi obtenus à une HPLC dans les mêmes conditions que dans l'exemple 1 sont montrés dans les diagrammes des figures 24 et 25 des dessins annexés, respectivement. Exemple 21 400 ml de la dernière moitié de l'éluat obtenu en éluant la teneur de la colonne de gel de silice avec le mélange de chloroforme et de méthanol (rapport volumétrique = 93:7) dans l'exemple 20 est concentré et ensuite séché à 450C sous pression réduite pendant 6 heures et broyé pour donner 1,76 g d'un extrait. On dissout cet extrait dans 30 ml d'une solution de méthanol aqueux à 170% (volume/volume) et on soumet ensuite à une HPLC pour la collection de masse | système 500 fabriqué par Waters Co, Ltd; charge: Preppak 500- C18 (fabriqué par Waters Co, Ltd, du type C-18 chimiquement lié); colonne: d.i. x 1. = 57 mm x 300 mm); éluant: une solution de méthanol aqueux à 1.70% (volume/volume); vitesse d'écoule- ment: 100 ml/mn; et détection: à RI (1/50 x 10-4 RIUFS)]. Tout en observant les pics d'élution avec un détecteur, on collecte un éluat choisi sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-3-1 montrée à la figure 22 des dessins annexés pendant 10 minutes et ensuite on concentre à sec pour obtenir 0,48 g d'un extrait B-3 blanc semblable à une poudre. Les résultats obtenus en soumettant l'extrait B-3 ainsi obtenu à une HPLC dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1 sont montrés dans le diagramme de la figure 26 *des dessins annexés. Ainsi, dans les dessins annexés - les figures 1 à 17 représentent un diagramme obtenu en soumettant l'extrait-A de la présente invention obtenu respectivement dans les exemples 1 à 17 à une HPLC analytique; - la figure 18 représente un diagramme obtenu en soumettant l'extrait A de la présente invention obtenu dans l'exemple 1 à une HPLC pour collection de masse; la figure 19 représente un diagramme obtenu en soumettant la fraction Fr-2 représentée à la figure 18 à une HPLC pour collection de masse; - la figure 20 représente un diagramme obtenu en soumettant l'extrait B-1 de la présente invention obtenu à l'exemple 18 à une HPLC analytique; - la figure 21 représente un diagramme obtenu en soumettant l'extrait B-2 de la présente invention obtenu à l'exemple 18 à une HPLC analytique; - la figure 22 représente un diagramme obtenu en soumettant la fraction Fr-3 représentée à la figure 18 à une HPLC pour collection de masse; - la figure 23 représente un diagramme obtenu en soumettant l'extrait B-3 de la présente invention obtenu à l'exemple 19 à une HPLC analytique; - la figure 24 représente un diagramme obtenu en soumettant l'extrait B-1 de la présente invention obtenu à ltKemple 20 à une HPLC analytique; - la figure 25 représente un diagramme obtenu en soumettant l'extrait B-2 de la présente invention obtenu à l'exemple 20 à une HPLC analytique; et - la figure 26 représente un diagramme Obtenu en soumettant l'extrait B-3 de la présente invention obtenu à l'exemple 21 à une HPLC analytique. Bien entendu,-l'invention n'est nullement limitée aux modes de réalisation décrits et représentés qui n'ont été donnés qu'à titre d'exemple. En particulier, elle- comprend tous les moyens constituant des équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs combinaisons si celles-ci sont exécutées suivant son esprit et mises en oeuvre dans le cadre de la protection comme revendiquée, Il est à noter que les dessins annexés font partie intégrante de l'invention notamment par le fait qu'ils servent à caractériser les extraits de Marsdenia Cundurango Reichenbach fil. R E V E N D I C A T I 0 N S REVENDICATIONS 1.- Extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil, caractérisé en ce qu'il est soluble dans des alcools inférieurs et dans des hydrocarbures chlorés autres que le tétrachlorure de carbone et insoluble dans des hydrocarbures aliphatiques, le tétrachlorure de carbone ou des hydro- carbures aromatiques, et présente un diagramme représenté à la figure 20 des dessins annexés lorsqu'il est soumis à une HPLC analytique [charge: gel de silice (type broyé totalement poreux, 5,L); colone: d.i. x 1. = 4 mm x 200 mm éluant: un mélange de n-hexane/chloroforme/méthanol (rapport volumétrique = 7:2:1); vitesse d'écoulement: 1,5 ml/mn; pression: 29,4bs; et détection: à U.V. - 280 nm (0,64 AUFS) J. 2.- Extrait de Marsdenta cundurango Reichenbach fil, caractérisé en ce qu'il et soluble dans les alcools inférieurs et dans des hydrocarbures chlorés autres que le tétrachlorure de carbone et insoluble dans des hydro- carbures aliphatiques, le tétrachlorure de carbone ou des hydrocarbures aromatiques et en ce qu'il présente un diagramme représenté à la figure 21 des dessins annexes lorsqu'il est soumis à une HPLC analytique conforme à celle indiquée à la revendication 1. 3.- Extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil, caractériséence qu'il est soluble dans des alcools inférieurs et dans des hydrocarbures chlorés autres que le tétra- chlorure de carbone et insoluble dans des hydrocarbures aliphatiques, le tétrachlorure de carbone ou des hydro- carbures aromatiques, et en ce qu'il présente un diagramme représenté à la figure 23 des dessins annexés lorsqu'il est soumis à une HPLC analytique conforme à celle indiquée à la revendication 1. 4.- Extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil, caractérisé en ce qu'il est soluble dans des alcools inférieurs et dans des hydrocarbures chlorés autres que le tétrachlorure de carbone et insoluble dans les hydrocarbures aliphatiques, le tétrachlorure de carbone ou des hydro- carbures aromatiques,ence qu'il présente un diagramme représenté à la figure 1 des dessins annexés lorsqu'il est soumis à une HPLC analytique conforme à celle de la revendication 1. 5.- Procédé de préparation de l'extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend la soumission d'un extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil obtenu en le traitant avec les trois types suivants de solvants dans l'ordre éventuel: 1 ) un alcoolinférieur pour collecter la portion qui est soluble dans celui-ci; 2 ) un hydrocarbure chloré autre que le tétrachlorure de carbone pour recueillir la portion qui est soluble dans celui-ci; et 3 ) un hydrocarbure aliphatique, du tétra- chlorure de carbone ou un hydrocarbure aromatique pour enlever la portion qui est soluble dans celui-ci; à une HPLC de préférence en employant l'appareil Système 500 fabriqué par Waters Co, Ltd; charge: Preppak 500silice (dénomination commerciale d'un produit fabriqué par Waters Co, Ltd, gel de silice totalement poreux, sphérique, aire spécifique: 320 m2/g); colonne:d.i. x 1. = 57 mm x 300 mm; éluant: un mélange de nhexane/chloroforme/méthanol (rapport volumétrique = 6:3:1); vitesse d'écoulement: 150 ml/mn; et détection: à RI (1/20 x 10-4 RIUFS) pour recueillir ou collecter la fraction d'élution choisie sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2 représentée à la figure 18 des dessins annexés, et ensuite la soumission dela fraction à une HPLC dans les mêmes conditions que précédemment sauf que l'on emploie un autre mélange de nhexane/chloroforme/méthanol ayant un rapport volumétrique de 6:1:1 au lieu du rapport de 6:3:1 comme éluant pour recueillir la fraction d'élution choisie sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2 représentée à la figure 19 des dessins annexés. 6.- Procédé de préparation de l'extrait selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'il comprend la soumission d'un extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil obtenu en le traitant avec les trois types de solvants suivants dans l'ordre éventuel: 1 ) un alcool inférieur pour recueillir la portion qui et soluble dans celui-ci; 2 ) un hydrocarbure chloré autre que le tétrachlorure de carbone; et 30) un hydrocarbure aliphatique, du tétrachlorure de carbone ou un hydrocarbure aromatique pour enlever la portion qui est soluble dans celui-ci; à une HPLC de préférence telle que définie à la revendication 5, pour recueillir la fraction d'élution choisie sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2 représentée à la figure 18 des dessins annexés, et ensuite la soumission de la fraction à une HPLC dans les mêmes conditions que précédemment sauf qu'un autre mélange de n-hexane/ chloroforme/méthanol ayant un rapport volumétrique de 6:1:1 au lieu de 6:3:1 est employé comme éluant pour recueillir la fraction d'élution choisie sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-2-2 représentée à la figure 19 des dessins annexés. 7.- Procédé de préparation de l'extrait selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'il comprend la soumission d'un extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil obtenu en le traitant avec les trois types de solvants suivants dans l'ordre éventuel: 10) un alcool inférieur pour recueillir la portion qui est soluble dans celui-ci; ) un hydrocarbure chloré autre que le tétrachlorure de carbone pour recueillir la portion qui est soluble dans celui-ci; et 30) un hydrocarbure aliphatique, du tétra- chlorure de carbone ou un hydrocarbure aromatique pour enlever la portion qui est soluble dans celui -ci; à une HPLC de préférence dans les conditions définies à la revendication 5, pour recueillir la fraction d'élution choisie sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-3 représentée à la figure 18 des dessins annexés, et ensuite la soumission de la fraction à une autre-HPLC (de préférence sur l'appareil Système 500 fabriqué par Waters Co, Ltd; charge: Preppak 500-C18 (fabriqué par Waters Co, Ltd, du type C-18 chimiquement lié); colonne d.i. x 1. = 57 mm x 300 mm; éluant: une solution de méthanol aqueux à 170% (volume/volume); vitesse d'écoulement: 100 ml/mn; et détection à RI (1/50 x 10-4 RIUFS) pour collecter la fraction d'élution choisie sur la base du pic correspondant à la fraction Fr-3-1 représentée à la figure 22 des dessins annexés. 8.- Procédé selon la revendication 5 ou 6, caractérisé en ce que l'extrait est soumis à, au lieu de la première HPLC, une méthode à colonne ouverte dans une colonne à gel de silice en éluant avec du chloroforme et ensuite des mélanges du chloroforme/méthanol (rapport volumétrique = 97:3 et 95:5), et ensuite avec un mélange de chloroforme/méthanol (rapport volumétrique = 93:7) pour collecter la première moitié de la fraction d'élution. 9.- Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'extrait est soumis à, au lieu de la première HPLC, une méthode de colonne ouverte dans une colonne à gel de silice en éluant avec du chloroforme et ensuite des mélanges de chloroforme/méthanol ( rapport volumétrique = 97:3 et 95:5), et ensuite avec un mélange de chloroforme/ méthanol (rapport volumétrique = 93:7) pour recueillir la dernière moitié de la fraction de l'élution. 10.- Procédé de préparation de l'extrait selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il comprend le traitement de Marsdenia cundurango Reichenbach fil avec les trois types de solvants suivants dans un ordre éventuel: 1 ) un alcool inférieur pour collecter la fraction qui est soluble dans celui-ci; 2 ) un hydrocarbure chloré autre que le tétrachlorure de carbone pour collecter la portion qui est soluble dans celui-ci; et 30) un hydrocarbure aliphatique, du tétrachlorure de carbone ou un hydrocarbure aromatique pour enlever la portion qui est soluble dans celui-ci. 11.- Procédé selon l'une quelconque des revendica- tions 5 à 10, caractérisé en ce que l'extrait obtenu en extrayant le Marsdenia cundurango Reichenbach fil avec une cétone aliphatique, un ester ou éther aliphatique inférieur ou de l'eau chaude ou avec de l'eau ou un alcool inférieur aqueux après le traitement direct à la chaleur (110-130 C pendant 30 minutes) est employé comme matériau de départ. 12.- Agent anti-tumeur caractérisé en ce qu'il comprend l'extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil selon l'une quelconque des revendications 1 à 4. 13.- Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif l'extrait de Marsdenia cundurango Reichenbach fil selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 notamment comme agent anti-tumeur en mélange avec un support ou excipient pharmaceutiquement acceptable.