Brevet FR2460953A1 — publié le 19810130

La présente invention concerne des anomères de certains nouveaux analogues de spectinomycine ainsi que leurs mélanges astériques. L'invention concerne également de nouveaux composés intermédiaires permettant d'obtenir -des analogues de spectinomycine. Des procédés de production d'analogues de spectinomycine entrent également dans le cadre de l'invention. La spectinomycine est un antibiotique connu qui répond à la formule: OH /CH3 H 0CH3 "N 0t0 X CH3 N / \ H OH Jusqu'à présent, la spectinomycine a été préparée par un procédé microbiologique (voir brevet des Etats-Unis d'Amérique N 3 234 092). Certains analogues de spectinomycine ont été décrits par Rosenbrook Jr. et collaborateurs dans "J. Antibiotics", 28, pages 953 et 960 (1975) et "J. Antibiotics", 31, page 451 (1978). En outre, Carney et collaborateurs décrivent des dérivés chlorodéoxy de la spectinomycine dans "J. Antibiotics", 30, 960 (1977). La 9- épi-4(R)-dihydrospectinomycine a en outre été décrite par Foley et collaborateurs dans "J. Org. Chem.", 43, 22, pages 4355-4359 (1978). Toutefois, contrairement à la présente inven- tion, aucune activité biologique n'a été mentionnée à propos de l'un quelconque des analogues et dérivés de spectinomycine décrits dans les références précitées. Les procédés chimiques de l'art antérieur qui se rapprochent le plus du procédé de l'invention enseignent une réaction préférentielle au niveau du groupe 5-hydroxyle de la 2 2460953 2-déoxystreptamine (1) avec le chlorure de tri-O0-acétyl-2- déoxy-2-nitroso-a-D-glycopyrannosyle (2) pour former un a- pseudodisaccharide (3) d'après le schéma suivant (voir Lemieux, "Can. J. Chem.", 51, page 53 (1973)): OH HCBz H H + 2 ON Ac i OH OAc NH CBz (2) (1) OH H -N 0 X ---OAc / NHO OAc -,HON, ' OAc OH H-NX OAc CBz (3) o CBz est un groupe carbobenzyloxy. Mallams et collabora- teurs, "J. Chem. Soc." Perkin I, page 1118 (1976), étendent la réaction de Lemieux à la synthèse de disaccharides et trisaccharides. L'élimination d'oximes a été enseignée par Lemieux et collaborateurs dans "Can. J. Chem." 51, page 19 (1973) et par Mallams et collaborateurs dans "J. Chem. Soc." Perkin I, page 1097 (1976). Les composés de l'invention sont des anomères et des mélanges astériques de composés qui répondent à la formule: 3 2460953 R? R B1 R6 R Re _, R10 R:14 OHO N R1 Ri, R12 dans laquelle R est un groupe de formule: R3 4 R4 ou R1 à R4 peuvent être égaux ou différents et sont choisis entre de l'hydrogène, un radical alkyle inférieur, un radical alcényle inférieur, un radical halogénalkyle inférieur, un radical amino-alkyle inférieur, un radical alcynyle infé- rieur, un radical -OX et un radical -(CH2)n-OX, à condition que R1 et R2 ne soient pas des radicaux hydroxy et que l'un des symboles R3 et R4 représente un atome d'hydrogène, X est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur, alcényle inférieur ou alcynyle inférieur, n est un nombre entier ayant une valeur de 1 à 4, R5 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur, les variables R6 à R14 sont choisies entre de l'hydrogène, un radical alkyle inférieur, un radical alcényle inférieur et un radical alcynyle inférieur, à condition que l'une des variables R7 et R8 soit toujours un atome d'hydro- gène et que l'une des variables R11 et R12 soit toujours un atome d'hydrogène, et B et B1 sont égaux ou différents et sont choisis entre de l'hydrogène et un radical hydroxy, alkoxy, o-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio-alcényle inférieur; et A est un atome d'oxygène ou de soufre; à condition que lorsque le composé répond à la formule: 4 2460953 OH H H CHN{ 0H CH I OH NCH3 -0 H B1 ne puisse pas être un groupe hydroxy. Le numérotage des atomes de carbone indiqué dans le composé de formule I sera utilisé dans les commentaires concernant ce composé dans le présent mémoire. Les composés de l'invention comprennent les formes hydratées des composés de formule I. Ces composés sont hydratés en position 3' et répondent à la formule: R7 R - 2 B1 2 R10 OH 0N HO OH R, R12 I dans laquelle A, B, B1, R et R6 à R14 ont les définitions données cidessus. L'invention concerne également les sels acceptables du point de vue pharmaceutique des composés de formules I et I'. Dans la désignation des variables dont il est question dans le présent mémoire, le groupe "-(CH2)n" com- prend des groupes alkyle inférieurs à chaîne droite et leurs isomères. L'expression "alkyle inférieur" désigne les groupes méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle, hexyle, heptyle, octyle et leurs formes isomères. L'expressioa "a1lcényle inférieur" désigne les groupes éthylidène, propylidène, butylidène, pentylidène, hexylidéne, heptylidène, octylidène et leurs formes isomères. 2460953 L'expression "alcynyle inférieur" désigne les groupes éthynyle, propynyle, butynyle, pentynyle, hexynyle, heptynyle, octynyle et leurs formes isomères. L'expression "alkoxy inférieur" désigne les groupes méthoxy, éthoxy, propoxy, butoxy, pentoxy, hexoxy, heptoxy, octoxy et leurs formes isomères. Le terme "acyle" désigne les groupes formyle, acétyle, propionyle, butyryle et pentionyle et leurs formes isomères. Le terme "aralkyle" désigne les groupes benzyle, phénéthyle, phénpropyle, phénbutyle, phénpentyle, diphényl- méthyle, diphényloctyle et leurs formes isomères et le groupe fluorénylméthyle. L'expression "halogénaikyle inférieur" désigne un groupe -(CH2)n-halogéno-et ses formes isomères. Ce groupe renferme un à trois substituants halogéno. L'expression "amino-alkyle inférieur" désigne un groupe de formule: alkyle inférieur (ou H) (CH2)n-N \ (alkyle inférieur (ou H) et ses formes isomères. Le terme "aroyle" désigne le groupe benzoyle, un groupe benzoyle substitué, le groupe naphtoyle et un groupe naphtoyle substitué. Les groupes benzoyle et naphtoyle substitués peuvent porter un à trois substituants choisis entre des radicaux alkyle inférieurs, alkoxy inférieurs, nitro et halogéno. L'expression "alkoxycarbonyle halogéné" désigne des groupes mono-, di-, tri-halogénométhoxycarbonyle; mono-, di-, tri-halogénéthoxycarbonyle; mono-, di-,tri-halogéno- propoxycarbonyle; mono-, di-, tri-halogénobutoxycarbonyle; mono-, di-, tri-halogénopentoxycarbonyle; et leurs formes lsomeres. Le terme "halogéno" désigne un radical fluoro, chloro, bromo ou iodo. Le terme "aralkoxycarbonyle" désigne les groupes benzyloxycarbonyle, phénéthoxycarbonyle, phénpropoxycarbo- nyle, phénbutoxycarbonyle, phénpentoxycarbonyle, diphényl- méthoxycarbonyle, diphényloctoxycarbonyle et leurs formes isomères et le groupe fluorénylméthoxycarbonyle. Le terme "alkoxycarbonyle" désigne les groupes isopropyloxycarbonyle, tertio-butyloxycarbonyle et tertio-- pentyloxycarbonyle. Il y a lieu de remarquer que, au sens du présent mémoire, lorsqu'il y a plus d'un groupe hydroxy ou alkoxy sur la portion sucre, ces groupes peuvent être égaux ou diffé- rents. L'invention concerne également un procédé chimique de production de composés analogues à la spectino- mycine. Le procédé de l'invention fait ainsi ressortir l'importance de la stéréochimie de la liaison glycosidique, c'est-à-dire la liaison en position 1' de composés de formule I. Le terme "a-anomère" désigne un substituant en position 1' au-dessous du plan du noyau et le terme "B- anomère" désigne un substituant en position 1' au-dessus du plan du noyau. Le terme "g-anomère" désigne principalement des anomères qui ont la configuration en C-1' correspondant à la spectinomycine. Des composés de l'invention qui sont doués d'activité biologique désirable sont des e-anomères du composé I. Cette configuration glycosidique se rencontre dans la spectinomycine représentée sur la page 1. En consé- quence, une sélectivité est convenable en position 1' est désirable pour obtenir des analogues biologiquement actifs de la spectinomycine. Les actinamines et dérivés d'actinamines com- prennent les aminocyclitols représentés par la formule VI ci- apres. Le terme "sucres" désigne des pyrannes substi- tués, des sucres naturels et synthétiques, de nature chirale et achirale. Le procédé de l'invention est avantageux en ce qu'il offre cette sélectivité dans une synthèse chimique totale de composés antibactériens qui sont des analogues de la spectinomycine. Jusqu'à présent, l'art antérieur n'a pas réalisé la possibilité d'obtenir une grande variété d'analo- gues de spectinomycine dans un procédé qui produit un hémi- cétal hexagonal de structure analogue à celle de la spectino- mycine, doué d'activité biologique, par transformation de delta-hydroxy-oximes en delta-hydroxy-cétones. Un autre avantage du procédé de l'invention réside dans le fait qu'une actinamine réactionnelle initiale portant des groupes amino protégés se montre capable de réagir au niveau du groupe hydroxyle en position C-5 sans protection additionnelle d'autres groupes hydroxyle y ou a en positions C-2, C-4 ou C-6 pour produire la configuration du type spectinomycine. Ainsi, il est surprenant de constater qu'une protection difficile et gênante de groupes hydroxyle ne se trouvant pas en position C-5 sur l'actinamine réaction- nelle est inutile dans le procédé décrit dans le présent mémoire. Un autre avantage du procédé de l'invention réside dans la production sélective d'un groupe carbonyle en C-3', tel quel ou sous une forme masquée ou latente, par une réac- tion d'élimination. Le groupe carbonyle en C-3' est une par- ticularité très importante, mais difficile à obtenir des analogues de spectinomycine. Le nouveau procédé de l'invention peut être illustré par le schéma réactionnel suivant: R'? " B R? Ré I VI N t Ris RR OH O II R6 R1, N 'R R11 R12 I dans lequel R est un groupe de formule: R1 R, R1 o les variables R1 à R4 peuvent être égales ou différentes et sont choisies entre l'hydrogène ou un groupe alkyle. inférieur, alcényle inférieur, alcynyle inférieur, halogénalkyle inférieur, amino-alkyle inférieur, -OX et -(CH2)n-OX, à condition que R1 et R2 ne soient pas des groupes hydroxy et que l'une des variables R3 et R4 soit un atome d'hydrogène, X est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur, alcényle inférieur ou alcynyle inférieur, n est un nombre entier ayant une valeur de 1 à 4; R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur; R6 à R14 sont choisis entre l'hydrogène et un radical alkyle inférieur, alcényle inférieur et alcynyle inférieur; R5 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur; R'7, R'8, R'11 et R'12 sont choisis entre un radical alkyle inférieur, alcé- nyle inférieur, alcynyle inférieur et un groupe protecteur choisi entre des groupes aralkoxycarbonyle, alkoxycarbonyle halogéné et alkoxycarbonyle; à condition que l'une des variables R7 et R8 soit toujours un atome d'hydrogène et que l'une des variables R11 et R12 soit toujours un atome d'hydrogène, et à condition en outre que l'une des variables R'7 et R'8 soit toujours un groupe protecteur et que l'une des variables R'11 et R'12 soit toujours un groupe protec- teur; R16 est un groupe alkyle ou aralkyle ou aroyle; A est un atome d'oxygène ou de soufre, et B et B1 sont égaux ou différents et sont choisis entre l'hydrogène et un groupe hydroxy, alkoxy, o-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio-alcényle inférieur. Certains des composés intermédiaires et des procédés entre les composés VI et II sont décrits dans la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique N 020.073 du 13 mars 1979. Un exemple illustrant plus précisément le procédé est donné par le schéma suivant: n A p An M. -9 CBz OH MeN OH NMe Via; CBz l' CBz B OH H CH*N la H'Hj.}{ H ' NCH3 OH H Bien que les deux anomères a et f puissent être formés dans l'étape 1 du procédé ci-dessus, les anomères 8 peuvent être obtenus préférentiellement par séparation des anomères f des a à la suite de toute étape du procédé. De même, l'utilisation d'un sucre énantiomérique disponible dans la réaction initiale de couplage pour former une forte proportion de l'anomère 3, ou l'épimérisation de tout produit intermédiaire ou final, peut accroître la quantité obtenue d'anomère S. En outre, des mélanges astériques peuvent eux- mêmes être utilisés comme agents antibactériens dans la mesure o ils renferment une activité biologique comme consé- quence de la présence d'un anomère actif. L'expression "anomères et mélanges astériques d'un composé" couvre les analogues de la spectinomycine de l'invention doués d'une activité antibactérienne. Bien que la configuration $ constitue l'anomère actif de l'invention, l'expression "anomères et mélanges astériques" n'a aucun sens limitatif, attendu que de nouveaux anomères a peuvent aussi être présents sans que l'activité d'un mélange astérique en soit altérée. De même, des anomères a de l'analogue de spectinomycine peuvent dans quelques cas être avantageu- sement anomérisés en la forme active de l'analogue. Par conséquent, la configuration a n'est pas exclue à un stade quelconque du procédé de l'invention. Par ailleurs, les composés utilisés conformément à l'invention sont des produits de formule I qui ont la configuration S parce que ces anomères sont doués de propriétés antibactériennes. La séparation des anomères peut être effectuée à la suite de toute étape du procédé. Des anomères e appréciés conformes à l'invention sont des composés portant des groupes hydroxyle en positions C-2 et C- 6 et répondant à la formule suivante: R7 OH H Ré R N OH O Ri4 % R,2 dans laquelle tous les substituants ont les définitions déjà données. Un autre aspect de l'invention réside dans des composés intermédiaires nouveaux utilisés dans le procédé. Ces composés intermédiaires comprennent: (1) des anomères et mélanges astériques de composés de formule: t1 12 2460953 R'7 R N R3 R'a R9 X A RI, 1 R'12 _Il (dans laquelle R est un groupe de formule: R. Ri R2 o les variables R1 à R4 peuvent être égales ou différentes et sont choisies entre l'hydrogène et un groupe alkyle infé- rieur, halogénalkyle inférieur, amino-alkyle inférieur, alcényle inférieur, alcynyle inférieur, -OX et -(CH2)n-OX, à condition que R1 et R2 ne soient pas des groupes OH et que l'une des variables R3 et R4 soit obligatoirement un atome d'hydrogène, X est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur, alcényle inférieur ou alcynyle inférieur, n est un nombre entier ayant une valeur de 1 à 4, R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle inférieur; R6, R9, R10, R13 et R14 sont choisis entre l'hydrogène et un radical alkyle inférieur, alcényle infé- rieur et alcynyle inférieur; R5 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur; R'7, R R'11 et R'12 sont choisis entre un radical alkyle inférieur, alcényle infé- rieur, alcynyle inférieur et un groupe protecteur choisi entre des groupes aralkoxycarbonyle, alkoxycarbonyle halo- génés et alkoxycarbonyle; à condition que l'une des variables R'7 et R' soit toujours un groupe protecteur et que l'une des variables R'1l et R'12 soit toujours un groupe protecteur; R15 est un atome d'hydrogène ou un groupe acyle; R16 est un groupe alkyle inférieur, aralkyle ou aroyle; A est un atome d'oxygène ou de soufre, et B et B1 sont choisis entre l'hydrogène et un groupe hydroxy, alkoxy, o-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio- alcényle inférieur; à condition que lorsque le composé répond à la formule: CBz N CHK OH CH3 B1' NCH3 CBz (dans laquelle CBz est un groupe carbobenzyloxy), B1 ne puisse pas être un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy. (2) des anomères et des mélanges astériques de composés qui répondent à la formule: R's ' R '. B R6 R5 R1 R23 Bi/ A 0R1 B'l 1' A -' R1 RR IIIb (dans laquelle A, B, B1, R1 à R3, R6, R' 7, R8 R, R19 R' 11, R'12 R13 et R14 ont les définitions données ci-dessus et R16 est un radical alkyle inférieur, aralkyle ou aroyle, à condi- tion que R1, R2 et R3 ne soient pas des groupes hydroxy). Dans des composés de formule IIIb, l'hémicétal peut être entièrement ou partiellement sous la forme céto- nique ouverte. Ces deux formes peuvent exister en équilibre comme suit: MI" '% 1à un i N 1 ORl oOH OR16 *,%% 0R1316 R R'10 R'12 R'1R R'12 11 12 IIIb' IIIb" De nouveaux analogues de spectinomycine et de nouveaux composés intermédiaires nécessaires pour leur pré- paration peuvent être obtenus conformément au procédé indiqué ci-dessus. Ce procédé constitue également un procédé général de préparation de spectinomycine et d'une grande variété d'analogues de spectinomycine. La spectinomycine est un anti- biotique du type aminocyclitol à structure remarquable en ce qu'il y a un seul sucre condensé à une actinamine, à la fois par une liaison eglycosidique et une liaison hémicétal. Le procédé conforme à l'invention pour la préparation des ana- logues présentant cette fusion remarquable est une synthèse qui combine un dérivé de sucre et une actinamine protégée. Le sucre peut être un dérivé naturel ou peut être synthétique, chiral ou achiral. Le procédé comprend deux étapes fondamentales, comme l'indique le schéma ci-dessus. L'étape 1 comprend les étapes secondaires suivantes: CBz OH MeN OH HO - OH NMe i. CBz VT2 + 3 zrQ#\ CHO X CH3OAc CBz Illa Sid CBZ i O H CHN- X VCH3 O CBz D'autres exemples indiqués ci-après: C]i ^,OAc ONe__ OAc ON = II OCH3 VIlb jla CBz OH I, H CH3N -OAc 0 OAc HO 4:Ix OH OAc NCH3 H OCH3 i Vb CBz Ib HC1 _.i, C %.C.L IIa illustrant l'étape 1 sont VIIc VIa CB z OH I 1 H HO 0OAc NCH3 OH OAc I CBz Vc HCl I lb CH3CHO CBz OH I 1 CH3N HO NCH: CBz KF CBz OH I I CH3N4,.k OAc OAc IVb HCO3 Ic -'-OAc HO NCH3 CBz HCI/THF H20, IIIb' ld OH CBz 1- H CH3N $7 H HO -0O NBCzH3 IIb CB z i H pH H CH3N 'X-OH NCH3 H CBz OH I i H CH3N 4o HO O QA NCH3 OAc CBz IVc KHCO3 lc fi / CBz OH H CH3N O0 HO yCH3 OAc CBz IIIc K2HPO4 ld CH30H N / CBz OH I H CH3N HO -CI lic NCH3 CBz | IIC H OH H CH3 &O.] HO" HO NCH3 H à i 18 2460953 Avant l'étape la, les deux groupes amino du dérivé d'actinamine VIa sont protégés par blocage chacun à l'aide d'un groupe protecteur tel qu'un groupe aralkoxy- carbonyle, halogénalkyloxycarbonyle, aryloxycarbonyle ou alkoxycarbonyle, ces groupes étant bien connus à cet usage dans la pratique. Par exemple, on trouvera des informations générales sur la préparation et l'élimination du groupe protecteur des dérivés carbobenzyloxy et carbotertio-butyl- oxy d'amino-acides dans l'article de R. A. Boissonas, chapitre intitulé "Selectively Removable Amino Protective Group used in the Synthesis of Peptides", In: "Advances in Organic Chemistry", 3:159:190 (1963). Des détails sur l'uti- lisation du groupe tertio-butyloxycarbonyle pour bloquer une amine sont également donnés dans le bulletin d'information technique ALDRICH intitulé BOC-OH (Septembre 1976). Des informations sur l'utilisation du groupe trichloréthoxy- carbonyle pour protéger les amines sont données par Windholz et collaborateurs dans "Tetrahedron Letters", 2555 (1967). Les actinamines peuvent être préparées par des procédés bien connus dans l'art antérieur (voir, par exemple, Suami et collaborateurs, "Bull. Chem. Soc. Jap." 43, 1843 (1970). Les sucres sont disponibles dans le commerce ou peuvent être préparés par des procédés connus dans la pratique; un procédé de ce genre est décrit, par exemple, par Mochalin et collaborateurs dans "Chem. Het. Comp." 699 (1977) (traduction en langue anglaise de KHIM Geterotsiklsoedin, 867 (1977)). L'étape la implique une réaction de couplage entre l'actinamine VI et le sucre VIIa, VIIb ou VIIc. Cette étape a lieu dans une solution dans le N, N-diméthylformamide * ou dans un solvant similaire, par exemple l'éther diéthyli- que, le tétrahydrofuranne ou le diméthoxyméthane, parfois en présence d'une base. La réaction est conduite très effica- cement sous atmosphère d'azote aux températures et aux pressions ambiantes comme décrit pour une réaction similaire par Lemieux et collaborateurs dans "Can. J. Chem." 51, 53 (1973). La plage de températures de la réaction va généra- lement de 0 à 45 C avec des rapports molaires du sucre activé à une concentration de 0,01 M à 0,5 M dans un solvant à l'actinamine dans une solution à une concentration de 0,01 à 0,5 M, dans le mélange réactionnel, de 0,2 à 4. De préfé- rence, les conditions réactionnelles impliquent une tempé- rature de 20 à 30'C lorsqu'on utilise le diméthylformamide comme solvant, le rapport du sucre à l'actinamine étant compris entre 3:2 et 2:3. La durée de réaction peut aller de 4 heures à une semaine, mais elle est de préférence comprise entre 24 et 48 heures. L'oxime Va, Vb ou Vc produite est en général isolée du mélange réactionnel par concentration ou par concentration et agitation énergique avec de l'eau en excès. La matière solide résultante est reprise dans du chloroforme, puis la solution est évaporée à sec en donnant l'oxime inter- médiaire brute. Les anomères a et S peuvent encore être séparés en fractions par chromatographie sur une colonne de gel de silice éluée avec du méthanol dans le chloroforme dans un rapport de 1:99 à 2:98. Toutefois, l'utilisation de moyens classiques de séparation, par exemple extraction, cristalli- sation et/ou chromatographie, entrent dans le cadre du procédé de l'invention. L'étape lb implique l'élimination du groupe oxime du composé V pour former un hémicétal cyclique qui est le composé IV ci-dessus. La réaction de l'étape lb est conduite selon des procédés de désoximation semblables à ceux qui sont décrits par Lemieux et collaborateurs dans "Can. J. Chem. " 51, 19 (1973) et par Mallams et collaborateurs dans "J. Chem. Soc." Perkins I 1097 (1976). Par exemple, on conduit la réaction de désoximation en dissolvant ou bien l'oxime brute ou bien les oximes a et e séparées du composé V dans un solvant avec addition subséquente d'acétaldéhyde et d'acide chlorhydrique. La concentration initiale de l'oxime dans le solvant va de 0,01 M à 1,5 M, mais elle se situe de préférence entre 0,1 et 0,3 M et le rapport molaire de l'aldéhyde à l'oxime va de 1:1 à 80:1. De l'acide chlorhy- drique 1N est ajouté dans un rapport avec l'oxime d'environ 2:3. Le mélange réactionnel est agité à la température ambiante pendant une période de 3,75 heures à 5 jours et, à 2460953 ce stade, du bicarbonate de sodium peut être ajouté, l'addi- tion étant suivie d'une période d'agitation de 15 minutes. A titre de variante, le concentré peut être chromatographié directement en sorte que le gel de silice élimine l'acide chlorhydrique pendant la purification. Le composé intermédiaire IV est recueilli par des opérations classiques, comme décrit ci-dessus. Un procédé suggéré de séparation consiste à préparer un filtrat que l'on évapore à sec sous vide pour obtenir le produit brut. Là encore, ce produit peut être soumis à des fractionnements répétés sur un chromatographe à gel de silice en utilisant comme éluant un mélange de chloroforme et de méthanol dans un rapport d'environ 95:5. En rassemblant les fractions simi- laires, d'après l'analyse chromatographique sur couche mince et en les évaporant ensuite à sec sous vide, on obtient les anomères a et S individuels de l'hémicétal, couverts par la formule structurale IV. Des bases autres que le bicarbonate de sodium peuvent être utilisées dans la désoximation de l'étape lb; toutefois, l'absence de conditions hydrolytiques est déter- minante à ce stade afin d'empêcher qu'il y ait un écart par rapport aux composés intermédiaires cyclisés qui sont stables et utiles à la préparation d'analogues entrant dans le cadre de l'invention. Par conséquent, les bases utilisées doivent être des bases qui n'attaquent pas les acétates, c'est-à-dire que des hydroxydes ne peuvent pas être utilisés en excès. Des exemples utiles comprennent des benzoates ou le monohydro- génophosphate de potassium. Des solvants que ''on peut utiliser comprennent l'acétonitrile, le tétrahydrofuranne, l'éther ou le di- méthylformamide. Le solvant de choix est l'acétonitrile. L'étape lc élimine un ou deux substituants de la portion sucre du composé IV et engendre un groupe carbonyle en C-3' par $-élimination de la position C-4' pour donner le composé de formule III. Une seconde élimination peut porter sur l'atome C-6' en donnant l'oléfine C-4', C-S'. Cette opération est conduite en présence d'une base à des tempéra- tures d'environ 0 à 80C pendant une période d'environ 21 2460953 2 heures à une semaine. Des bases que l'on peut utiliser comprennent le bicarbonate de potassium, la triéthylamine, la pyridine et un alcoolate. Un système basique apprécié est le système bicarbonate de potassium/acétonitrile. On peut utiliser 1 à 20 équivalents molaires de base, mais on préfère en utiliser 1 à 10. Le mode de conduite de l'étape lc dépend égale- ment des groupes protecteurs particuliers portés par la portion sucre de même que par la portion actinamine du composé intermédiaire IV. En général, les groupes protec- teurs portés par la portion sucre sont moins difficiles à éliminer que ne le sont les groupes portés par la portion actinamine. L'étape lc constitue un procédé nouveau permet- tant d'engendrer dans des conditions douces et sélectives le groupe carbonyle C-3' important tel quel ou sous une forme latente, par élimination. Les dérivés C-4' et C-6' qui peuvent subir une élimination sont décrits dans la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique NO 020.073 du 13 mars 1979. Par exemple, des acétates éliminent l'acide acétique, un benzoate élimine l'acide benzoique, des éthers de benzyle éliminent l'alcool benzylique, des halogénures éliminent un halogénure d'hydrogène. Il s'agit d'exemples non limitatifs d'élimination ayant lieu dans l'étape lc. Les composés intermédiaires de l'invention, notamment les produits de l'étape lc, sont des composés utiles pour la synthèse de divers analogues. On effectue cette synthèse en changeant des groupes fonctionnels des composés intermédiaires par des procédés connus tels que des procédésd'halogénation, réduction, oxydation, allongement de chaîne, etc. Dans certains cas de l'invention, l'étape lc d'élimination est accompagnée de la migration du substituant de C-3' sur l'atome d'oxygène vers l'atome d'oxygène de C-2' avec production d'un groupe carbonyle en C-3'. Ce compor- tement est illustré par la transformation du composé IVa en composé IIIa et du composé IVc en composé IIIc. Dans d'autres cas, le substituant en position C-3' sur l'atome d'oxygène ne migre pas, en sorte qu'un groupe carbonyle en C-3' masqué ou latent est formé; il s'agit de dérivés énoliques. On mentionne à titre d'exemple la transformation du composé IVb *en composé IIIb. Les dérivés énoliques peuvent exister à l'état d'hémicétals ou d'isomères cétoniques ouverts ou comme mélanges de ces formes. Les deux versions ci-dessus constituent des procédés sélectifs utiles nouveaux donnant finalement des analogues de spectinomycine portant des groupes carbonyle en C-3'. Les composés intermédiaires portant un groupe carbonyle masqué ou latent en position C-3' ont des propriétés chimi- ques remarquables qui les rendent intéressants à utiliser en vue d'une modification par des opérations connues, par exemple halogénation, alkylation, acylation, oxydation, etc. Enfin, le groupe carbonyle masqué ou latent en C-3' est bien plus stable notamment envers les bases, en sorte qu'il constitue une partie des composés intermédiaires plus versa- tiles et isolés plus aisément. Le composé de formule III est séparé du mélange réactionnel par des opérations classiques, par exemple préci- pitation, cristallisation ou concentration suivie d'une chromatographie. L'étape id implique l'élimination des groupes protecteurs en une ou plusieurs des positions du noyau de sucre. Habituellement, il s'agit des positions C-2', C-3' ou C-6' et, selon la nature des groupes protecteurs, on peut utiliser un acide et/ou une base. Lorsqu'on utilise une base comme dans le cas de la transformation du composé IIIa en composé IIa ou du composé IIIc en composé IIc, l'hydrolyse est conduite entre -10 et 500 pendant une période de minutes à 40 heures. Les conditions que l'on préfère comprennent une température de 20 à 300C pour une durée de 1 à 20 heures. Les alcools que l'on peut utiliser comprennent le méthanol, l'éthanol et l'isopropanol, le méthanol étant préférable. On peut utiliser toute base qui n'altère pas le produit. Il s'agit du bicarbonate de sodium, du bicarbonate de potassium, de la pyridine, du monohydrogénophosphate de 23 2460953 potassium, de la triéthylamine, du tartrate double de sodium et de potassium, mais le catalyseur de choix est le mono- hydrogénophosphate de potassium. Dans la première étape d'un procédé à deux étapes pour la transformation du composé I1Ib' en composé IIb, le groupe acétyle en C-6' est éliminé sélec- tivement par les conditions d'alcoolyse basique ci-dessus, tandis que le groupe méthoxy en position C-3' reste intact. Une catalyse acide peut aussi être utilisée pour éliminer les groupes protecteurs du noyau de sucre. Par exemple, après que le groupe acétyle en C-6' a été éliminé du composé IIIb' par l'utilisation d'une base comme décrit ci- dessus, la protection restante en C-3' peut être éliminée par traitement subséquent avec un acide pour former le composé IIb. A titre de variante, le composé IIIb' peut être converti en composé IIb en une seule étape en utilisant une catalyse acide. L'élimination du ou des groupes protecteurs sous l'action d'un acide est habituellement conduite à une tempé- rature de 0 à 800 et, de préférence, de 20 à 300 pendant une période de 1 heure à 3 jours, de préférence de 2 heures à 2 jours. On peut choisir des acides utilisés dans la pratique, tels que les acides chlorhydrique, para-toluène- sulfurique et phosphorique; on utilise de préférence l'acide chlorhydrique. Les solvants peuvent être le tétrahydro- furanne aqueux, le diméthoxyéthane aqueux, le méthanol ou l'éthanol. On utilise de préférence le méthanol ou le tétra- hydrofuranne aqueux. Dans quelques cas, il est avantageux de combiner l'étape ld avec l'étape 2 en utilisant un milieu réactionnel pour l'étape 2 qui satisfait aux conditions d'élimination du ou des groupes protecteurs spécifiées pour l'étape id ci- dessus. Par exemple, lorsque l'étape 2 est conduite dans l'isopropanol avec addition de pyridine, le composé intermé- diaire lIla est converti en l'antibiotique appelé spectino- mycine. Cela montre qu'en plus de l'élimination de la protec- tion de l'azote (et de la saturation en C-4', C-5') qui a lieu sous l'influence de la présence d'un catalyseur au palladium et d'hydrogène, le groupe acétyle en C-2' est éliminé par alcoolyse, à cause du système basique de solvant. 24 2460953 Dans quelques cas particuliers, il est avanta- geux d'omettre l'étape id ou une partie de l'étape id de manière que l'élimination de la protection ait lieu dans le système biologique pour libérer l'analogue actif. Les conditions particulières de l'étape 2 d'élimination de la protection de la portion actinamine dépendent des groupes particuliers, c'est-à-dire du groupe R'7 ou R'8 et du groupe R'11 ou R'12 qui protègent l'amine du noyau d'actinamine. De même, par le choix convenable de R'7, R'8, R'11 et R'12 et par le choix convenable des conditions d'élimination du ou des groupes protecteurs connues dans la pratique, une oléfine en C-4', C-5' peut rester intacte ou peut être réduite au cours de l'élimination de la protection. Lorsque ce groupe est un groupe benzyloxycarbonyle ou aralkoxycarbonyle, l'élimination de la protection peut être conduite sous une pression d'hydrogène allant de -0,7 bar à +14 bars par passage sur un catalyseur classique tel que le noir de palladium, le palladium fixé sur du carbone, le palladium fixé sur du sulfate de baryum ou le palladium fixé sur du carbonate de baryum, en suspension dans un solvant, par exemple l'isopropanol, l'éthanol absolu, l'acétate d'éthyle, le toluène ou le tétrahydrofuranne. A titre de variante, l'élimination de la protec- tion de composés dans lesquels R'7 ou R'8 et R'11 ou R'12 sont des groupes alkoxycarbonyle ou aryloxycarbonyle peut être conduite en présence d'un acide dans un solvant tel que le nitrométhane et le chlorure de méthylène. Lorsque R'7 ou R'8 et R'11 ou R 12 sont des groupes halogénalkoxycarbonyle, l'élimination de la protec- tion est de préférence conduite en présence de zinc. Toute opération convenable peut être utilisée pour isoler un analogue ou un mélange astérique d'un composé de formule I et les opérations décrites dans le présent mémoire ne sont nullement limitatives. Si l'isolement est conduit dans des conditions anhydres, on obtient des composés portant un groupe carbonyle en- position III' (formule I). S'il est conduit dans des conditions aqueuses, on obtient des composés hydratés en position 3' (formule I'). Une opéra- tion de ce genre implique l'évaporation du solvant en excès et la formation d'un sel cristallin du composé. On peut former ces sels en utilisant une solution d'un acide tel que l'acide toluènesulfonique, l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide iodhydrique ou d'autres acides dans un solvant tel que l'eau, le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, l'éther, le 1,2-diméthoxyéthane et le p-dioxanne. Le sel est isolé par filtration et cristallisation directe ou par évapo- ration du solvant, suivie d'une recristallisation dans un solvant convenable. A titre de variante, les analogues bruts peuvent être purifiés par adsorption sur une colonne d'une résine d'échange ionique faiblement acide telle que la résine "Amberlite IRC-50" ou "CG-501", suivie d'une élution avec un solvant tel que l'eau, le méthanol, l'éthanol, l'éther, le tétrahydrofuranne, le 1,2-diméthoxyéthane ou le p-dioxanne contenant de l'acide chlorhydrique, de l'acide bromhydrique, de l'acide iodhydrique et de l'acide sulfurique. De même, les sels d'analogues hydroxylés peuvent être retransformés en l'analogue libre par passage d'une solution du sel dans un solvant tel que l'eau, le méthanol, l'éthanol, le tétrahydrofuranne ou le 1,2diméthoxyéthane sur une résine échangeuse d'ions basique telle que "Dowex 1- X8" (forme OH-) et évaporation de l'éluat contenant les analogues porteurs de substituants base libre. Chaque étape du procédé ci-dessus peut être conduite sur des mélanges astériques de divers anomères ou sur l'anomère B désiré lui-même, obtenu par dédoublement ou par séparation à un stade quelconque du procédé. Les étapes restantes peuvent être conduites sur des intermédiaires B, ce qui donne les anomères biologiquement actifs désirés. Le procédé de choix consiste à séparer des anomères f du mélange résultant de l'étape 1 de combinaison d'un sucre et de l'actinamine et à conduire l'étape 2 du procédé sur les anomères B pour ne produire que des analogues de spectinomycine qui sont biologiquement actifs. La séparation des anomères de mélanges asté- riques peut être accomplie avec des modifications évidentes pour l'homme de l'art en utilisant des opérations classiques de dédoublement. Par exemple, le composé IV peut être séparé de manière à obtenir un composant e désiré, par chromato- graphie sur une colonne de gel de silice éluée avec un mélange de méthanol dans le chloroforme, dans un rapport de 1:99 à 2:98. De même, la séparation des anomères e peut être effectuée sur un mélange astérique du composé V par rassem- blement des fractions e obtenues sur un chromatographe à gel de silice avec comme éluant un mélange de chloroforme et de méthanol. L'évaporation subséquente à sec sous vide donne un hémicétal séparé ayant la structure 6. Un autre procédé particulièrement efficace dans le cadre de l'invention, et que l'on apprécie par conséquent, consiste à obtenir une concentration relativement élevée en un anomère e dans l'étape 1, c'est-à-dire la réaction de couplage, en utilisant un sucre énantiomérique qui favorise la formation de la structure À. Par exemple, le D-arabinose donne des oximes 5 et a dans un rapport d'environ 4:1. De plus, pour éviter des opérations longues et coûteuses de séparation portant sur des composés intermédiaires ou sur les produits résultants pour obtenir la configuration B, l'énan- tiomère peut aussi être disponible en quantités qui sont peu coûteuses. Ainsi, l'utilisation de cet énantiomère permet de recueillir un mélange sensiblement enrichi en l'anomère 5 désiré qui peut être purifié par une opération du type décrit ci-dessus ou que l'on peut utiliser sans autre purification. Des sels d'acides peuvent être formés par neutra- lisation des composés de formule I avec l'acide convena- blement choisi jusqu'à un pH inférieur à environ 7,0 et avantageusement à un pH d'environ 2 à 6. Les acides avanta- geux à utiliser à cette fin comprennent les acides chlor- hydrique, sulfurique, phosphorique, sulfamique, bromhy- drique, etc. Les sels d'acides et de bases des composés peuvent être utilisés aux mêmes fins biologiques que le composé proprement dit. Les composés de formule I inhibent la croissance de micro-organismes dans divers milieux. Par exemple, les composés de formule I qui ont la configuration S sont actifs 27 2460953 contre Escherichia coM et peuvent être utilisés pour réduire, arrêter et supprimer la production de mucilage dans les circuits de fabriques de papier sous l'effet de leur activité antibactérienne contre ce microorganisme. Ces anomères 0 peuvent aussi être utilisés pour prolonger la vie de cultures de Trichomonas foetus, Trichomonas hominis et Trichomonas vaginalis en les protégeant d'une contamination par Escherichia coli. En outre, les anomères 5 sont actifs contre Bacillus subtilis, en sorte qu'on peut les utiliser pour minimiser ou prévenir l'odeur du poisson ou des caisses à poisson due à cet organisme. De même, les anomères peuvent être utilisés pour nettoyer les paillasses et l'appareillage dans un laboratoire de mycologie. Les 0-anomères sont égale- ment efficaces contre Klebsiella pneumoniae. Les composés de formule I sont aussi efficaces pour le traitement d'infections bactériennes telles que la gonorrhée et des tumeurs chez les mammifères, y compris les êtres humains. Les composés de la présente invention sont présentés en vue de l'administration à des êtres humains et à des animaux sous des formes posologiques unitaires telles que comprimés, capsules, pilules, poudres, granulés, solutions ou suspensions parentérales stériles, gouttes pour les yeux, solutions ou suspensions orales et émulsions du type eau- dans-huile renfermant des quantités convenables du composé de formule I. Pour l'administration orale, on peut préparer des formes posologiques unitaires solides ou liquides. Pour la préparation de compositions solides telles que des compri- més, on mélange le composé de formule I avec des ingrédients classiques tels que le talc, le stéarate de magnésium, le phosphate dicalcique, le silicate double de magnésium et d'aluminium, le sulfate de calcium, l'amidon, le lactose, la gomme arabique, la méthylcellulose et des substances simi- laires du point de vue fonctionnel, utilisées comme diluants ou supports pharmaceutiques. On prépare des capsules en mélangeant le composé avec un diluant pharmaceutique inerte et en chargeant le mélange dans une capsule en gélatine dure 28 2460953 de diamètre convenable. On prépare des capsules en gélatine molle par encapsulage à la machine d'une suspension du composé dans une huile végétale acceptable, de la vaseline liquide légère ou une autre huile inerte. On peut préparer des formes posologiques uni- taires liquides pour l'administration orale, telles que des sirops, des élixirs et des suspensions. Les formes hydro- solubles peuvent être dissoutes dans un véhicule aqueux contenant également un sucre, des arômes et des préservateurs pour former un sirop. On prépare un élixir en utilisant un véhicule hydro-alcoolique (éthanol) renfermant des édul- corants convenables tels que sucre et saccharine en associa- tion avec un arôme. On peut préparer des suspensions avec un véhicule aqueux additionné d'un agent de mise en suspension tel que la gomme arabique, la gomme adragante, la méthylcellulose, etc. Pour l'administration parentérale, on prépare des formes posologiques unitaires liquides en utilisant le composé et un véhicule stérile, l'eau étant préférable. Le composé, selon le véhicule et la concentration que l'on utilise, peut être en suspension ou en solution dans le véhicule. Dans la préparation de solutions, le composé peut être dissous dans de l'eau pour injectables et la solution peut être stérilisée par filtration avant d'être chargée dans une fiole ou ampoule convenable qu'on ferme ensuite. On peut avantageusement dissoudre dans le véhicule des adjuvants tels qu'un anesthésique local, un préservateur et des agents tampons. Pour améliorer la stabilité, on peut lyophiliser la omDosition après l'avoir chargée dans l'ampoule et éliminer l'eau sous vide. La poudre lyophilisée est ensuite scellée dans l'ampoule et une ampoule d'accompagnement contenant de l'eau pour injectables est fournie en vue de la reconsti- tution du liquide avant l'usage. On peut préparer des suspen- sions parentérales en suivant sensiblement le même mode opératoire, à la différence que le composé est en suspension dans le véhicule au lieu d'être dissous et qu'une stérili- sation ne peut pas être effectuée par filtration. Le composé Deut être stérilisé par exposition à l'oxyde d'éthylène avant 2460 53 la mise en suspension dans le véhicule stérile. Un surfactant ou agent mouillant est avantageusement inclus dans la compo- sition pour faciliter une distribution uniforme du composé. En outre, un suppositoire rectal peut être utilisé pour délivrer le composé actif. Cette forme posolo- gique offre un intérêt particulier lorsque le mammifère ne peut pas être traité convenablement au moyen d'autres formes posologiques, par exemple par voie orale ou par insufflation comme dans le cas de jeunes enfants ou de personnes handi- capées. Le composé actif peut être incorporé à l'une quelconque des bases connues pour suppositoires par des procédés connus dans la pratique. Des exemples de ces bases comprennent le beurre de cacao, des polyéthylèneglycols ("Carbowaxes"), le monostéarate de polyéthylènesorbitanne et des mélanges de ces bases avec d'autres matières compatibles pour modifier le point de fusion ou la vitesse de dissolu- tion. Ces suppositoires à usage rectal peuvent peser environ 1 à 2,5 g. L'expression "forme posologique unitaire" utilisée dans le présent mémoire désigne des unités physique- ment distinctes qui conviennent comme doses unitaires pour des sujets humains et des animaux, chaque unité contenant une quantité prédéterminée de substance active calculée pour produire l'effet thérapeutique désiré en association avec le diluant, support ou véhicule pharmaceutique nécessaire. Les spécifications concernant les nouvelles formes posologiques unitaires de l'invention sont dictées par des facteurs dont elles dépendent directement, à savoir (a) les caracté- ristiques remarquables de la substance active et l'effet particulier que l'on recherche et (b) les limitations inhé- rentes à la technique de la formulation d'une substance active de ce genre en vue de son utilisation chez des êtres humains et des animaux, comme décrit en détail dans le présent mémoire et conformément à la présente invention. Les exemples de formes posologiques unitaires convenables, conformément à l'invention, comprennent des comprimés, capsules, pilules, suppositoires, sachets de poudre, pastilles, granulés, cachets, cuillerées à café, cuillerées à soupe, gouttes, ampoules, fioles, aérosols à décharges dosées, multiples groupés de l'une quelconque des formes ci- dessus, ainsi que d'autres formes décrites dans le présent mémoire. On utilise dans le traitement une quantité efficace du composé. La dose du composé pour le traitement dépend de nombreux facteurs comme cela est bien connu de l'homme de l'art. Ces facteurs sont, par exemple, la voie d'administration et la puissance du composé particulier. Une posologie pour des êtres humains d'environ 2 à environ 4000 mg de composé en une seule dose, administrée par voie parentérale ou dans les compositions de l'invention, est efficace pour le traitement de tumeurs et d'infections bacté- riennes. Plus particulèrement, la dose unique va de 5 à environ 200 mg de composé. La dose orale et rectale va d'environ 5 à environ 5000 mg, en une seule dose. Plus parti- culièrement, la dose va d'environ 10 à environ 2500 mg de composé. Les "Préparations' décrites ci-après d'analogues de spectinomycine et de composés intermédiaires permettant de les obtenir illustrent la présente invention à titre non limitatif. L'homme de l'art verra apparaître spontanément des variantes des modes opératoires tant dans les analogues que dans leurs précurseurs dans le cadre des nouveaux composés décrits ainsi que dans les conditions réactionnelles et les techniques de mise en oeuvre du procédé de l'invention. Par exemple, pour chacune des Préparations et pour chacun des Exemples décrits ci-après, des stéréo- isomères correspondant à chaque composé nommé sont envisagés dans le cadre de la présente invention. O A. An CO 2 31 c Jq Préparation 1 -0-(3',4'-di-O-acétyl-2 '-déoxy-2 'oximino-D-arabinopyran- nosyl)-N,N'-dicarbobenzyloxyactinamine CBz OH CBz OH 1 aI I s H MeN H C - DMF MeN HO OH ON f Ac HO X 0H OAc nMe OAc NMe OH OAc À I I CBz CBz On ajoute une solution de 11,86 g (25,0 mmoles) de N,N'-bis-carbobenzyloxyactinamine dans 50 ml de diméthyl- formamide à une solution de 7,20 g (27,10 mmoles) de chlorure de 3,4-di-Oacétyl-2-déoxy-2-nitroso-e-D-arabinopyrannosyle dans 75 ml de diméthylformamide. On agite le mélange réac- tionnel pendant 19,5 heures à la température ambiante sous une atmosphère d'azote. On verse le mélange dans un litre d'eau en agitant énergiquement. On décante la phase aqueuse et on reprend la matière solide dans 300 ml de chloroforme, on sépare la petite quantité d'eau et on chasse le solvant sous vide pour obtenir 12,6 g d'une mousse blanche cassante. La phase aqueuse totale est extraite trois fois avec des portions de 100 ml de chloroforme. Les phases organiques rassemblées sont lavées avec 50 ml d'eau et 50 ml de saumure et déshydratées sur du sulfate de sodium. Le volume de sol- vant est réduit à 40 ml et cette solution est ajoutée à 300 ml d'eau sous agitation. La phase chloroformique de faible volume est séparée et le solvant est chassé sous vide en donnant 6,18 g de mousse blanche qui est réunie avec l'autre portion. L'analyse du produit brut par résonance magnétique des protons montre que la majeure partie du DMF a été éliminée par ce procédé. Par chromatographie sur 1,25 kg de gel de silice (gradient de méthanol et chloroforme), on obtient 1,33 g (1,89 mmole, 7,6 %) de l'a-anomère pur de la 5-0-(3',41'-di-O-acétyl-2'-déoxy-2'-oximino-D-arabinopyrannosyl)- N,N'-dicarbobenzyloxyactinamine, puis 2,86 g de B-anomire pur de 5-O-(3',4'-di-O-actyl-2'-déoxy-2'-oximino-D-arabino- pyrannosyl)-N,N'-dicarbobenzyloxyactinamine et une autre 32 2460953 portion de 3,17 g de l'anomère $ de pureté égale à environ %. a-anomère: Spectre infrarouge (CHC13) 3550, 3400, 3070, 2980, 1745, 1686, 1675 (ép.), 1484, 1449, 1364, 1333, 1235, 1167, 1026, 669 cm'; résonance magnétique des protons (CDCl3) 6 7,40 (s, 10, aromatique), 6,07 (s, 1, H1'), ,95 (d, J=3 Hz, 1, H3') 5,20 (m, 7), 3,3-4,6 (m, 10), 3,12 et 3,08 (singulets, 6, NCH3), 2,12 et 2,03 (singulets, 6, CH3); spectre de masse (pour le dérivé tétra-triméthyl- silylique) 991 (M+), 689, 673; résonance magnétique des noyaux de carbone (d6-acétone) 6 170,1, 169,8, 157,8, 156,5, ,1, 138,1, 129,1, 128,8, 128,4, 91,7, 86,9, 79,1, 74,4, 69,1, 68,6, 68,3, 67,8, 67,3, 60,3, 57,7, 31,5, 31,4, 20,8, ,5; point de fusion 130-140 , décomposition. Spectre de masse à forte résolution (tétra-triméthyl- silyle): C45H73N3014Si4 nécessite 991,4169; trouvé: 991,4190. B-anomère: Spectre infrarouge (CHCl3) 3500, 3100, 2970, 1748, 1686, 1672 (ép.), 1486, 1449, 1370, 1337, 1235, 1167, 1107, 1024, 700 cm 1; résonance magnétique des protons (CDC13) 6 7,40 (s, 10, aromatique), 6,40 (s, 1, H1') 6,05 (d, J=3 Hz, 1, H3'), 5,0-5,5 (m, 6), 3,4-3,8 (m, 11), 3, 07 et 3,04 (singulets, 6, NCH3), 2,08, 2,05 (singulets, 6, CH3); spectre de masse (pour le dérivé de tétra-triméthyl- silyle), 991 (M) 990, 976, 975, 689, 673; résonance magnétique des noyaux de carbone (d6-acétone) 6170,7, 169,9, 157,7, 157,1, 149,1, 137,9, 129,1, 128,7, 128,3, 92,3, 85,3, 74,7, 70,8, 69,4, 67,3, 62,0, 60,2, 31,4, 20,8, 20,5; point de fusion 140155 (décomposition). Spectre de masse à forte résolution (tétra-TMS), C45H73N3014Si4 nécessite 991,4169; trouvé: 991,4229. Préparation la -O-(3',4',6'-tri-O-acétyl-2'-oximino-2'-déoxy-a-Lglucopyran- nosyl)-N,N'-dicarbobenzyloxyactinamine OH CBz OH Ci CH3N OH OAc HO OH ON A xOAc NCH3 OAc CBz OH H CBzH Une solution de 7,09 g (21 mmoles) de chlorure de 3,4,6-tri-Oacétyl-2-nitroso-2-déoxy-a-L-glucopyrannosyle CH325 dans 150 ml de dimthylformamide et 14,22 g (30 mmoles) de N,N-dicarbobenzyloxyactinamine est agitée pendant 19 heures, après quoi il ne reste plus de chlorure de pyrannosyle. On concentre la solution à 45 et on dissout le résidu dans du chloroforme contenant 1,5 % de méthanol. On place ce résidu sur une colonne de gel de silice (3 kg) garnie par voie humide. On élue la colonne avec un solvant formé de 1,5 % de méthanol dans le chloroforme. Après l'utilisation d'environ M NOAc litres de solant, le produit principal est Hlu comme CH OAc NCH3 CBZ pUne solution de l'apprci7,09 g (21 mmoles) dela chromatographie sur couche mince (méthanol à 5 % dans le chloroforme). Les fractions qui contiennent le produit pur sont rassemblées et concentrées en dormant 7,86 g (48 %) de 5-O-(3',4',6'-tri-O-acétyl-2'- 3,4,-tri--acétyl-2-nitroso-2-d-déoxy-e-L-glucopyrannosyl)-NNdicarbobenzyloy- dans 150 m de diméthylformamide et 14,22 g (30 mmoles) de N,Ndicarbobenzyloxyactinamine est agitée pendant 19 heures, après quoi il ne reste plus de chlorure de pyrannosyle. on concentre la solution à 450 et on dissout le résidu dans du chloroforme contenant 1,5 % de méthanol. On place ce résidu sur une colonne de gel de silice (3 kg) garnie par voie humide. on élue la colonne avec un solvant formé de 1,5 % de miéthanol dans le chloroforme. Après l'utilisation d'environ litres de solvant, le produit principal est élué comme permet de l'apprécier la chromatographie sur couche mince (méthanol à 5 % dans le chloroforme). Les fractions qui contiennent le produit pur sont rassemblées et concentrées en donnant 7,86 g (48 %) de 5-0-(3',4'.,6'-tri-O0-acétyl-2'- oximino-2 '-déoxy-at-L-glucopyrannosyl)--N,N'-dicarbobenzyloxy- actinamine. 34 2460953 DC (CH3OH) [()926 mp + 18 900 + 1300 (a)25-53 (C, acétone 0,9) Résonance magnétique des protons (CDC13): 2,02 (9H, s), 3,03 (6.H, s), 5,04 (4H, s), 6,20 (1H, s), 7,32 6 (10H, s) Résonance magnétique- des noyaux de carbone (CD3COCD3): 170,8, 170,0, 169,8, 157,7, 157,0, 149,5, 137,9, 129,1, 128,7, 128,3, 92,0, 85,8, 74,4, 70,4, 69,8, 69,4, 68,6, 67,3, 62,5, 60,6, 60,2, 31,4, 31,1, 20,6 ppm. * Spectre de masse, m/e (tétra-TMS): 1063 (M+), 1048, 793, 792, 689, 674, 645. Préparation lb -0-(4',6'-di-O-acétyl-3'-0-méthyl-2'-déoxy-2'-oximino-B-Dglucopyrannosyl)-N,N'-dicarbobenzyloxyactinamine OH CH3 i O C1 + oAi H OH OAc NCH3 / 0 OCH3 CBz / OH / DMF CHN O O CAc HO ' I v OAc OH OCH3 ICH3 CBz On ajoute 97,7 g (201 mmoles) de N,N'-bis-carbo- benzyloxyactinamine à une solution de 60,8 9 (196 mmoles) de chlorure de 4,6-di-O-acétyl-3-O-méthyl-2-nitroso-a-D-glucop- yrannosyle (2) dans 1,1 litre de diméthylformamide. On agite le mélange réactionnel pendant 45 heures à la température ambiante sous une atmosphère d'azote, puis on le concentre à C sous vide poussé pour obtenir un sirop épais. On verse c 2460953 ce sirop par portions dans un volume total de 3 litres d'eau glacée, sous agitation énergique. La substance solide blanche résultante est filtrée, redissoute dans 3 litres de chloro- forme, débarrassée de l'eau résiduelle et déshydratée sur du sulfate de sodium. Par concentration de la phase chloro- formique, on obtient 143 g d'une mousse blanche poisseuse contenant environ 7 % de diméthylformamide d'après les rapports d'intégration de résonance magnétique nucléaire. Par chromatographie sur 3,5 kg de gel de silice, effectuée en utilisantcomme éluant un gradient de méthanol et de chloroforme, on obtient une séparation grossière des produits. La fraction contenant l'anomère B est cristallisée dans l'acétone en donnant 4,4 g de l'isomère $ pur. La chromatographie des liqueurs-mères donne encore 1,5 g de l'anomère 3. Spectre infrarouge: 3500, 3310, 2920, 1750, 1690, 1459, 1240, 1175, 1105, 1403, 735, 711 cm-1. Résonance magnétique des protons (CDCl3): 732s, ,41s, 5,11s, 3,5-4,5m, 3, 33s, 3,04s, 2,02s. Résonance magnétique des noyaux de carbone (CDCl3): 170,6, 169,6, 157,7, 156,5, 150,1, 136,5, 128,5, 127,8, 95,7, 92,7, 77,1, 73,2, 70,1, 67,54, 64,09, 56,8, 29,7, 20,8, 20,5 ppm. Spectre de masse (dérivé de tétra-triméthyl- silyle) M+ 1035. Point de fusion: 214-216 . En suivant un mode opératoire semblable aux Préparations 1, la et lb, mais en utilisant l'actinamine et le sucre convenablement substitués, on obtient les oximes des tableaux I et II. TABLEAU I B H CBzt H Ri CH / -R N R' cz'C:-%'u., c HO. R,! B, OH t R CBz CH, OR,5 B, R, " Rv HO- H- CH2CO0 HO- H- CH2CO{ CH,30- HO- HS- CH3 S- CzR S- HO- " CH c'- CH: R,3_ CHCO- ClHCo- Rv, R,_5 H CH.0{- a N C1ICH2- BrCH2- c C1CH2- N BrCH2 "C1 CY2- " O CH:OCH2- cDCH2o- CH=O- " CHM?-OCH2- zOZH4- H O20CH2- H- H- C':C- -CH2- OCH:O- CHC-O- H CH:C-O- CH,O-o_ O H- GCH.- " CH:C- I CHUCH2- H OCH2 - H CH;- À CH,- HO- HO- HO- HO- HO- HO- H- B HO- CH30- C2H50- HS- CH3S- C2H5S- H- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- nu- HO- nO- HO- HO- HO- HO- HO- 0- CH=- # m *H H OtH) -O-?eH) -3Il - -O- H) O -Hi m0H en H -3OcHO d 1,v neH 'nCeg H -H H -rHOOCH93 H zH)Oc H) -2IID30-CHI -OeHi - rHO:HO -eH30eHD'O -zHDO3CH3 0O {::]{ H - -OH -OH -SrHpe -sCHD " -SH -OH " -OCH3 m -H -OH -OH -OH u -OH -H -OH O -OH -H -OH NH3 Z3 N II nVsqeVi úS609M _0.H) -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -H _SsHer -SCH3 -SH -OH3 -OCH3 -OH # -iH -:o LE m -"H. m M eHDJE _ZH3 D a m a a 38 2460953 Préparation 2 N,N'-dicarbobenzyloxy-5'-déméthyl-3'-O-acétyl-4'-(R)-acétoxy- 3"(R)-dihydrospectinomycine CBz OH CBz OH :. H À ClinCH0 M MeN t:H HOtoh OAc CH3CN e Ot Ac NMe OH 0Ac HMe OAc CBz CBz On dissout 2,32 g (3,30 mmoles) de 5-O-(3',4'di- O-acétyl-2'-déoxy-2'-oximino-D-arabinopyrannosyl)-N,N'-dicarbo- benzyloxyactinamine dans 30 ml de méthylnitrile et on ajoute ,0 ml (89,4 mmoles) d'acétaldéhyde et 2,5 ml (2,50 moles) d'acide chlorhydrique 1N. On agite le mélange réactionnel pendant 3,75 heures à la température ambiante, on ajoute du sulfate de sodium et on continue d'agiter pendant 15 minutes. On filtre le mélange et on chasse le solvant sous vide pour obtenir 2,6 g d'une substance solide blanche. Par chromato- graphie sur 200 g de gel de silice (méthanol:chloroforme), on obtient 1,45 g (2,11 mmoles, 64 %) de N,N'-dicarbobenzyloxy- '-déméthyl-3'-O-acétyl-4'-(R)-acétoxy-3'(R)-dihydrospectino- mycine sous la forme d'une substance solide blanche: Point de fusion: 135,0-142,9 Spectre infrarouge (CHC13): 3450, 3050, 1748, 1684, 1881, 1447, 1362, 1333, 1238, 1160, 1050, 1020,680 cm-1 Résonance magnétique des protons (CDCl3) 67,4 (s, 10, aromatique), 3,4-5,4 (m), 3,05 (s, 6, NCH3), 2,10 (s, 3, COCH3), 1,95 (s, 3, COCY3); Résonance magnétique des noyaux de carbone (d6- acétone) 6 170,2, 169,8, 157,5, 156,9, 138,0, 129,1, 128,3, 94,6, 91,5, 74,7, 72,4, 67,3, 67,0, 66,3, 65,6, 61,7, 61,2, 57,5, 31,6, 20,6 Spectre de masse (pour le dérivé de tris-méthyl- silyle) 904 (M+). 39 2460953 Préparation 2a z OH CBz OH H? ÉCN H t OAc CBz,7 -CBz On agite à la température ambiante pendant 5 heures une solution de 7,00 g (9,03 mmoles) de 5-O- (3',41,6'-tri-O-acétyl-2'-oximino-2'-déoxy-a-L-glucopyran- nosyl)-N,N'-dicarbobenzyloxyactinamine, 7 ml d'acétonitrile, 14,2 ml d'acétaldéhyde et 17,0 ml de HC1 1N. On ajoute 60 ml de sulfate de sodium anhydre et on agite pendant 10 minutes. On filtre la matière solide et on la lave à l'acétonitrile. On concentre le filtrat, on le reprend avec 15 ml de mélange de chloroforme et d'acétate d'éthyle à 1:1 et on chromato- graphie la solution sur 150 g de gel de silice en utilisant le même solvant. L'éluat est analysé par chromatographie sur couche mince (méthanol à 5 % dans le chloroforme) et les fractions pures sont rassemblées et concentrées en donnant ,96 g (87 %) du triacétate d'hémicétal. (a)27-52o (C 0,7, chloroforme) Résonance magnétique des protons (CDC1 3): 2,06 (9H, s), 2,88 (3H, s),n 3,08 (3H, s,) 4,90 (s), 5, 13 (4H, s), 7,38 6 (10H, s) Résonance magnétique des noyaux de carbone (CD3CO CD3): 170,1, 169,4, 137,5, 137,4, 128,6, 127,9, 99,2, 94,0, 82,2, 73,9, 70,6, 68,4,68,0, 66,8, 65,6, 62,3, 60,4, 57,3, 30,0, 20,0 ppm. Préparation 2b N,N'-dicarbobenzyloxy-3'-O-méthyl-4'-(R)-6'-diacétoxy-3'-(S)- dihydrospectinomycine CBz OH CBz OH Il: H tN 0 Ac CH1JN' F{AC CH'CH0 CH.N H0'Yb oMAc CHCt(aq) C B CCNH Bz OH! rRz CBz 2460953 On ajoute 1,2 ml d'acétaldéhyde et 0,18 ml d'acide chlorhydrique 1,0N à une suspension de 300 mg (0,40 mmole) de 5-O-(4',6'-di-O-acétyl-3'-O-méthyl-2'-déoxy- 2'-oximino-B-D-glucopyrannosyl)-N,N'-dicarbobenzyloxyactinamine dans 12 ml d'acétonitrile et on agite pendant 60 heures. La solution homogène est agitée avec du sulfate de sodium pendant 20 minutes et filtrée. Par chromatographie du produit sur 10 g de gel de silice dans un mélange de chloroforme à % et d'acétate d'éthyle, on obtient 150 mg de N,N'-di- carbobenzyloxy-3'-O-méthyl-4'-(R)-6'-diacétoxy-3'-(S)-dihydro- spectinomycine. Résonance magnétique des protons (CDC13): 7,32 s, 5,1 s, 4,68 s, 3,5 s, 3,1, 2,1 6 Résonance magnétique des noyaux de carbone (d6- acétone) 171,0, 170,3, 157,8, 138,2, 129,2, 128,5, 95,8, 93,8, 84,5, 75,2, 73,1, 69,8, 67,4, 66,4, 65,2, 63,7, 61,2, 57,9, 57,5, 30,8, 29,8, 2,10, 20,7 ppm. Spectre de masse (dérivé de tri-triméthylsilyle) m/e (M+) 948 (M-15) 933. En utilisant un mode opératoire semblable à celui de la Préparation 2 ou 2a, mais en choisissant l'oxime précurseur convenablement substitué sur les tableaux I et II, on obtient les analogues protégés de spectinomycine des tableaux III et IV suivants. H " H E.tOOIH30 UH. _ H -cHDO:H3'( =H30cH3ry Dn;li{ -0-'io -?H iî,O- fic O H _%s -0O-H -0 t3 -H -O Hi) -tHDOeHo3 H -01eH3 7 -O -OH -SrHe: -SCH3) -SH U -OCH3 m -H n -OH - OH n -OH n -OH -OH N -OH -H -OH lu _. Oi -rHDODCHD CHD Zci n N lu e0 vf " lH 9s l III fixz t-is úS609 Z H -fl-J # -3CH) IH3 O -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -H -sf.Ht -SCHeD -SH -OCH3 -OH - -=Ii -n-j UE u Ug a # # N n # N Àl ZHDG; -0HD 0 - rH;eR5H)i H _rHzo.H3 O m H JJ3r - _O-DcH).OCH) OOH -H -Oeinc 3 HDu-H. -s -0 H H -03CHO t "-' -=H3OJCHD 0O -H -OH - - 0-H -OH -OH -OH -OH -OH -OH OH -OH Ht) -OH H3 -OH -SH -OH He3 -OH OcHi -OH -H -OH -OH -H -OH -SH:) -OH -ScHi -0H -SH -OH -OrHe: -OH -ocrH -OH -OH i. cid z83 CH/ - H i AI fnvsZ' r, úS6O9Z H s-rH=' -3CH m -j'H: À -- H. d S78 # m # - m 2plèi953 Préparation 2c Ether de N,N'-dicarbobenzyloxy-6'-acétoxyspectinomycine-3'- méthylénol CBz CBz OH [ I H ! 1 I H CH3N, CH'3 A KHCO3 Xl OAc H 'NO. Ac CdH 3 CN HO H tCHNCH- OH NCH i3 (ICz CBz On agite une solution de 101,3 mg (0,136 mmole) de N,N'-dicarbobenzyloxy-3 '-O-méthyl-4 '-(R)-6-diacétoxy-3 '- (S)-dihydrospectinomycine dans 5,5 ml d'acétonitrile avec 350 mg de bicarbonate de potassium pendant 6 jours à la température ambiante. On filtre le mélange sur "Celite" et on lave le bicarbonate avec un volume supplémentaire d'acéto- nitrile. Par concentration du filtrat, on obtient 80,5 mg d'éther de N,N'-dicarbobenzyloxy-6 '-acétoxyspectinomycine- 2'-méthylénol. Résonance magnétique des protons (d6-acétone) 7,4 s, 5,1 s, 4,8 s, 4,75 s, 4,6-4 m, 3,9 s, 3,5 s, 2,0 s Résonance magnétique des noyaux de carbone (d6- acétone) 171,1, 158,0, 154,2, 138,2, 129,2, 128,5, 95,7, 95,5, 89,3, 75,3, 71,7, 67,4, 66,9, 66,5, 66,2, 60,8, 60,7, 57,8, 55,6, 30,8, 20,75 ppm Spectre de masse (dérivé de tritriméthylsilyle) m/e M+ = 888, M-15 = 873. En utilisant un mode opératoire semblable à celui de la Préparation 2c, mais en choisissant les hémicétals convenablement substitués, on obtient les analogues protégés de spectinomycine des tableaux V et VI suivants. --oN -c R _-'E...--J O --gD- 03 " # i, H riHDo2) G O -r F)O- cHi OHY2) H -H30OCH) 9iH3 CED ZED N t k I L. ). H d A flVggV.l úS6099Z -OH -OH -OH -OH -OH -O0 -OH -0 -O:n -OH -ou -OH -OH -H -ScH3 -OH -OH -SCH) -SH -OH -OH -$HC3 -StH3 -SH -SHe -OCH3 -H -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH II # li II U Ill {I a -H o H -0cH3 - OrRDH) - t H --H:)OD'H3 H TA flV 21 rsv St, CFeD - I emDG2.I O -OH -OH -OH -09 -OH -OH -OH -OH -OH -OH * 0H -OH -011 -OH -OH OH -0u -SçHr:3 -0CH3 -SH ]OsHr) -OCH) -OH 8i -OH -SOeiHe -seH3 -SH -OCH3 OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH ru -l:.L # # Je # II # m N IW U 4.. -H 1i m # - 46 2460953 Préparation 3 N,N'-dicarbobenzyloxy-5'-déméthylspectinomycine CBz OH CBz OH MeN v1) K2CO3 lMeN 2 CH 3CN H0t *U X OA2 K.PO4 H HO'YO Y1\ OAc HH3NO NMe OAc 2)CH30H NMe I CH!3H e CBr CBz On dissout 1,32 g (1,92 mmole) de N,N'-dicarbo- benzyloxy-5-déméthyl-3'-O-acétyl-4'-R-acétoxy-3'-(R)-dihydro- spectinomycine dans 20 ml d'acétonitrile et on ajoute 1,00 g (7,24 mmoles) de carbonate de potassium anhydre. Après agita- tion pendant 20 heures à la température ambiante, on filtre le mélange et on lave la matière solide avec encore 20 ml d'acétonitrile. On chasse le solvant sous vide, on ajoute ml de méthanol et on traite la solution par addition de 1,40 g (8,04 mmoles) d'hydrogénophosphate de potassium. On agite le mélange pendant 22 heures à la température ambiante, on le filtre et on lave correctement le résidu solide avec du méthanol. En chassant le solvant sous vide, on obtient 1,37 g d'une substance solide à consistance de gomme, de couleur orangée. Une filtration rapide sur 40 g de gel de silice (acétate d'éthyle) donne 950 mg d'une substance solide blanche. Une nouvelle purification sur des plaques prépa- ratives de gel de silice de 2000 pm (acétate d'éthyle) donne la N,N'dicarbobenzyloxy-5'-déméthylspectinomycine pure: Spectre infrarouge (CHCi3) 3600, 3100, 1748, 1695, 1443, 1333, 1156, 1111, 700 cm 1 Résonance magnétique des protons (CDCl3) 6 7,40 (s, 10, aromatique), 5,13 (s, 4), 3,1-5,0 (m), 3,05 et 2,95 (singulets, 6,NCH3) Résonance magnétique des noyaux de carbone (d6- acétone) (par rapport à CD3COCD3) 6 201,5, 157,1, 156,8, 137,5, 128,5, 128,2, 127,8, 97,7, 92,4, 74,4, 74,1, 66,6, ,8, 65,0, 60,8, 56,7, 38,2, 30,8. En suivant des modes opératoires semblables à ceux de la Préparation 3, mais en utilisant l'hémicétal pré- curseur convenablement substitué pour la N,N-bis-carbo- benzoxy-3'-O-acétyl-4'-(R)-acétoxydihydrospectinomycine, on obtient, respectivement, les analogues protégés de spectino- mycine des tableaux VII et VIII. H -H H -e:r.;;:OrH3 H -r,:i20H? H _-Hr3 H -OcHR " -O:H3> -OrHJ O -OF^HDC 2Q a a l H H H -eH3O0CHD r m -H -ON -SCHD -SH -OcH) -H OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH e a IIA nvsIgvi. úS609t' -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -ScH3) -SH -OCHD OH N M M m O a a a a N. N *H 3 ir _( evDo -nHDOrH)aj N a M M N H H gw, &U -eHODOcH3 -rmoCH:) N #H a N -OH -SZHC3 -SCHD N -SH -OCH) 0 -H a -OH * -OH N -OH a -OH a -OH - -OH -H -OH, , 'a CID 23 N IIIA flVMSqVL ús6099Z H H i' -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH - -OH -OH OH -OH -H -SUH=3 -SCH3 $H -OeHe: -OeH3 -OH 6t h Il # a II II Préparation 3a N,Ndicarbobenzyloxy-6-hydroxyspectinomycine NCH3 OCH3 NH CBz CBZOH Cz On ajoute 0,5 m d'acide chlorhydrique aqueux 4 N à une solution de 25 mg (0,04 mmole) d'éther de N,N-di- carbobenzyloxy-6 '-acétoxyspectinomycine-3 '-méthylénol dans 0,65 m de tétrahydrofuranne. On agite la solution pendant3N, 28 heures à la température ambiante. On dilue le mélange réactionnel avec 25 ml de choroforme et on le lave avec 4 ml C de bicarbonate de sodium saturé et 4 ml d'eau. On recueille la phase organique, on la déshydrate sur du sulfate de sodium, on la filtre et on la concentre pour obtenir 22 mg de NN'-dicarbobenzyloxy-6'-hydroxyspectinomyHFine. NCH3 H:0 O CH3 CBz CBz Résonanjoute0,5 magnétiquechlorhydriqueaqueuxprotons (CDCl3) :7,25 s, 5,1 s, 4,75 s, 4,5-3,5 m, 3,0, 5s 4 N Ré une solutionanc de 25 magnétique des noyauxd'ther de carboneNN-di- (CDCl3):157,5, 156,5, 136,3, 128,5, 128,1, 127,8, 96,8, 91,0, 77,0, 74,3, 74,0, 72,1, 67,6, 67,5, 65,8, 65,2, 64,4, 61,7, 57,1, 39,0, 29,7 ppm. Préparation 3b NN-dcar bobenzyloxy-6-act oxyspectinomyine-3-mthylnol dans 0,65 ml de têtrahydrofuranne. On agite la solution pendant 28 heures à la température ambiante. On dilue le mélange CBz qH HH It H O HO V 0 (CDC1 3): 157,5, 156,5, 136,3, 128,5, 128,1, 127,8, 96,8, 91,0, 77,0, 74,3, 74,0, 72,1, 67,6, 67,5, 65,8, 65,2, 64,4, 61,7, 57,1, 39,0, 29,7 ppm. Préparation 3b N,N-dicarbobenzyloxy-6-hydroxyspectinomycine CBÈ OH CBz qH C113N -, -OH '-O OH3 NCl1: H:3 NCH, ! t CBiz CBz On ajoute 1,6 ml d'acide chlorhydrique aqueux 4N àune solution de 90 mg (0,143 mmole) d'éther de N,N'-dicar- bobenzyloxy-6-hydroxy-6-spectino.mycine-3'-méthylénol dans 2,2 ml de tétrahydrofuranne. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 24 heures et on le traite de la manière décrite dans la Préparation 3a. La N,N'-dicar- bobenzyloxy-6-hydroxyspectinomycine a la même mobilité, dans l'analyse par chromatographie sur couche mince, et les mêmes propriétés que le produit de la Préparation 3a. Les produits sont rassemblés et chromatographiés sur du gel de silice en utilisant comme éluant un mélange d'acétate d'éthyle et de chloroforme 1:1. En utilisant des modes opératoires semblables à ceux des Préparations 3a et 3b, mais en choisissant les éthers de e-énols convenablement substitués, à la place des éthers de P-énols utilisés dans les Préparations 3a et 3b, on obtient les analogues protégés de spectinomycine des tableaux IX et X. H..tFDO1D -OH -OH -OH -OH -OH -OH - - -OHr -OH -OH S -SeHZ.-OH -ScHD - -OH -SH -OH À -SH'r -OH -OCHO -OH -H -OH -OH -H -OH -SH=3 -OH -ScH5 -OH -SH -OH -OçH" r -OH -OCHD -H -OH -OH CHD Z93 N H àd XI nVsiovi úS609tZ H Fr:) H ZI -cHDOH H Oc3 -0 CH) -"HDO"H) c r -Hf -t0O.: O tHDOH ri, - 7 II . -r..:HDO. -OR H -rHMDOh) D OH -OH g H -OH -OK4 s O:H)D _ -=HDOH-- -OH -sr ". -OH -MDO cnS " " -OH - -OH -.OH - -zA3OH3O " -OH -OH .. -$cHD -OHw .H .: -SH -OH - --H3 -OH " - -OCH -O H . u -H -OH " ". -OH -H - -OH1r -OCH -. -OH -5OH: . 4 -OH -SCH1 4 4 -OH -SH 4 À 4 -OH -OH3 . . -OH -OCH3 HO 'HDOH H -tHDOH -H -OH -OH cH3 Z83 O O N H d x esaV ú56MZú ES úS609îZ Préparation 3c N,N'-dicarbobenzyloxy-2'-O-acétyl-4',5'didéhydrospectinomycine - OH CBz OH CH H KHCO3 CH3N CH3 HlOAc CH3CN HO NCH.T.OHAc HNCN3 c CBz CBz C-Bz On chauffe 14,58 g (146 milli-équivalents) de bicarbonate de potassium anhydre et 384 ml d'acétonitrile dans un ballon équipé d'une fiole de distillation. Lorsque ml de solvant ont distillé, on laisse refroidir à la tem- pérature ambiante sous atmosphère d'azote la suspension restante, puis on ajoute le triacétate d'hémicétal de la Préparation 2a. On agite le mélange à la température ambiante pendant 41 heures; après cette période, la matière de départ est absente comme on peut l'apprécier par la chromatographie sur couche mince (méthanol à 5 % dans le chloroforme). La substance solide est filtrée, lavée, et le filtrat est concentré. Le résidu est repris dans 40 ml de chloroforme et les substances inorganiques sont filtrées. Le filtrat est concentré en donnant 14,51 g d'une mousse. Après dissolution de la mousse dans du chloroforme et refroidissement, il se forme une masse (7,55 g) qui est recristallisée dans 20 ml de chloroforme en donnant 3,42 g de N,N'-dicarbobenzyloxy-2'-O- acétyl-4',5'-didéhydrospectinomycine fondant à 149-152 . Une chromatographie des liqueurs-mères rassemblées sur 800 g de gel de silice, avec un mélange de méthanol et de chloroforme 1:4, donne encore 3,37 g de produit (rendement total de 55 %). Spectre ultraviolet (C2H50H): 204,5 nm (20 950), 206, épaulement (20 650), 267 (11 550). DC (CH30H) LJ3ma10 -22 000, 1)max +33 500, ()7D -43 (C, 1, acétone). Résonance magnétique des protons (CDCl3): 2,07 (3H, s), 2,15 (3H, s), 3, 08 (6H, s), 5,12 (4H), 5,40 (1H, s), ,95 (1H, s), 7,32 (10H, s). Résonance magnétique des noyaux de carbone (CD3COCD3): 182,5, 172,9, 169,5, 137,6, 137,5, 128,6, 127,8, 102,7, 95,5, 93,1, 75,0, 74,0, 66,8, 65,6, 60,3, 59,6, 56,7, 31,1, 20,4 ppm. Masse exacte: 784,3097; la formule C38H52N2012 nécessite une masse de 784,3059. En utilisant un mode opératoire semblable à celui qui a été décrit dans la Préparation 3, mais en remplaçant l'hémicétal obtenu dans la Préparation 2a par l'hémicétal convenablement substitué, on obtient des analogues protégés de didéhydrospectinomycine des tableaux XI et XII. [,;.3nq -a s a[XuotidoJdos.t O * PtHD cHi C H3 D'H:) O -cX3 n -; O -X 3CHO {1 0oH i. zgD DCH lN1. lI à ZtH a Ix nvsqglS úS609tZ -OH -OH -CH -OH -OH -OH -OH SS - rX3 -0H -OH -OH -OH -OH -OH -0H -OH -OH -oG -OH -OH -OH OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -H -SH3 -5H -SOLO -SM -OrHX -OCHD -OH 'pc3 HC 3 CH 3 s n3 -IH.OO-H3 -cmlO - H3 -el. -CH3 -CH3 -eH3 -CHM -cH3 -CHD H TABLEAU XII CH3- CH3- CH3- CH3- CH3-' CH3- CH,- CH3- CH,- CHe- CH3- CH3- CH3- CH:- C2H,_- CH3 CH, C_2H? C n), o CH3- II CH3C- o CHj- CHC- CH3C- CH3.- CHIC o CH3C- o CH3,- CHC2- CH3O- CH:CO- o CH2CH2. CH.C.q:C CH3(CH2):t CH:(CH2):C CH3(CH2):C isorropionyle sec-butyryl. tarti o-butyryle B B., HO- CH:O- C2H50- HS- CHjS- C2H4S- 11- HO- HO- HO- HO- ÀHO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- HOHO- HO- HO- HO- HO- HO- HO- H- Ho- CHS- C:HsS- H- HO- HO- HO- HO- HO- HO- Préparation 4 N,N'-biscarbobenzyloxy-4',5'didéhydrospectinomycine CBzOH. CBz H CH3NMeOH CHs K2HP04 ' NCH NCH 0 ÈN-CH3 0H OCCH3 Cz CBz i-CBz o On ajoute 1,0 g de N,N'-biscarbobenzyloxy-2'-O- acétyl-4,5 '-didéhydrospectinomycine à une suspension de monohydrogénophosphate de potassium (0,40 g) dans 20 ml de méthanol anhydre et on agite à la température ambiante pendant 1 heure et demie. On chasse le solvant sous pression réduite et on dissout la matière organique dans du méthanol à 1,5 % dans le chloroforme, puis on effectue la chromato- graphie sur 225 g de gel de silice en utilisant du méthanol à 1,5 % dans le chloroforme. Les fractions contenant le produit sont rassemblées et concentrées en 0,51 g (55 % de N,N'-bis- carbobenzyloxy-4',5 '-didéhydrospectinomycine. DC (CH3OH): (3ma4 -8300 + 2100, ([)26a6 + 10 500 + 2100 (aoD -56 (C, 1,0, CH30H) Résonance magnétique des noyaux de carbone (CD3COCD3): 187,6, 175,8, 157,2, 138,1, 128,4, 101,7, 99,3, 87,7, 76,3, 64,6, 63,8, 67,3, 66,7, 66,3, 65,3, 60,8, 60,0, 31,5, 21,3 ppm. Spectre de masse: m/e (tri-TMS); 814 (M +), 799 (M-15). En utilisant un mode opératoire semblable à celui de la Préparation 4, mais en remplaçant la N,N'-biscarbo- benzyloxy-2 '-O-acétyl-4',5 '-didéhydrospectinomycine par le dérivé de didéhydrospectinomycine convenablement substitué, on obtient les analogues protégés de didéhydrospectinomycine des tableaux XIII et XIV. -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -S,;Hei -S=H3 -tH -QeHe: -OCH) -OH -OH -OH OH -OH -OH -OH OH CED 293 mXj z La Y-s,CH a zai IIIX nVsqsVl ús6o9z %'n -He3 -tHJO'HD -Chi CHD -OH3 -ry. -CH0 -tHD -"HD CHD -CHD RCH3 -cHD -oH3 -CHD -cHD -cxO -OH -09 -OH OH -OH -OH -OH -OH -OH -.0, -OH -OH -OH -OH -H -S{r;HC -ScH) -SH -O';Hr3 OCH3 -OH *i H 4lici -Ou -OH CHO --OH -H HZ -OH -OH 11c3z -OH -OH oH3, c--0 -OH -OH -OH -OH -OH c -XScH) -OH -O-' -HO -S'HO -0 -cH 0 -CH3 -'Hz -rH -dei -CHD -ç'H" -OH -CHD -oCHO OH8 -C'Hzi -H -OH -cH3 -OH -H -C'Hm -OH -SHD -eHi - -OH 'H -oc -OH -SH -OHD -OH -sHr -Cid -OH -OcHO -CH3 -OH -OH HN2 CHH SH0 ZE AIX nlVS'IsE. úS6099 Préparation 5 N,N'-dicarbobenzyloxy-6 '-hydroxyspectinomycine-3 'méthylénol CBz OH CBz OH I 1i H I I CH3N @'>Ac CH:3N O- ' --OH 3 HO HO ' 10dHCH: MeOH HO NHtCH3H H OCH3 I NCH3 CBz I CBz On dissout 103,9 mg (0,154 mmole) d'éther de 3'- méthylénol de N,N'-dicarbobenzyloxy-5'-acétoxyspectinomycine dans 6,8 ml de méthanol et on agite la solution avec 115 mg de bicarbonate de potassium pendant 24 heures à la tempé- rature ambiante. On concentre le mélange, on le redissout dans du chloroforme, on filtre la solution et on la concentre à nouveau pour obtenir 90 mg d'éther de 3'-méthylénol de N,N'-dicarbobenzyloxy-6'hydroxyspectinomycine. On n'observe pas de groupes méthyle de l'acétate dans le spectre de résonance magnétique des protons ou le spectre de résonance magnétique des noyaux de carbone. Résonance magnétique des protons (CDC13) 7,31 s, 5,10 s, 5-3,75 m, 3,5 s, 3,1 6s. Résonance magnétique des noyaux de carbone (CDCl3): 158, 152,5, 136,5, 128,2, 95,1, 94,9, 88,7, 77,2, 67,5, 67,2, 55,0, 34,1, 29,72 ppm. Spectre de masse (dérivé de tétra-triméthyl- silyle) m/e (M+) 918, (M-15) 903. En utilisant un mode opératoire semblable à celui de la Préparation 5, mais en choisissant les éthers d'énols convenablement substitués, on obtient les analogues protégés de spectinomycine des tableaux XV et XVI. -e:HDOH ZS HDR30. -SCH:3 -SH -5H3 -OcH3l -H -0OH -OH -0OH -OH -OH -OH -0H 1-S -0s- H3 Z83 \N AX NVsyT, úS609MZ I. It I os il I OR i. -OH -OH -OH -OH -OH -OH -H -SsHz3 -S:H3 -SH -0CH3 OH lI Il I. et Il Ia -H Z:dIl 1 ! ! úS609tz se te - S'--4e -oH -SúH: -OH ,, -$SH3 -OH -SH -OH -s '. -sHt1 _0S -OcH) -OH -H -OH..DTD: ", " - OH4 -OH -H ", , -OH -SOHZD ",," -OH -StH3 ",., -OH -SH . -OH -05HZ3 ",,*"-OH -OcH) -=HDOH -H -OH -OH - O O HD zyOa END O H fo u 0. IAX fnV.Lss T ú9 Exemple 1 Spectinomycine H CBZ OH H i OH H CH3 I 11 0 CH3N w. CH3.N Pd/BaSO 2 H NCH3 -H0 NCH3 OH0 I I CBz H Spectinomycine On ajoute 480 mg de palladium à 10 % fixé sur du sulfate de baryum et 0,48 ml (5,9 mmoles) de pyridine à une solution de 480 mg (0,80 mmole) de N,N'-biscarbobenzyloxy- 4',5'-didéhydrospectinomycine dans 40 ml d'alcool isopro- pylique. On hydrogène le mélange à la pression atmosphérique pendant 5 heures, on le filtre et on concentre le filtrat sous vide. On redissout le résidu dans de l'alcool isopro- pylique et on traite la solution avec 2,0 ml (2,0 mmoles) d'une solution 1 N de chlorure d'hydrogène dans de l'alcool isopropylique. En éliminant le solvant sous vide, on obtient 440 mg de substance solide blanche. Par recristallisation dans de l'acétone aqueuse, on obtient 164 mg (0,33 mmole, 41 %) de dichlorhydrate de spectinomycine pentahydraté ayant les mêmes propriétés physiques et biologiques que le produit naturel. En appliquant le même mode opératoire à l'acétate d'énone obtenu dans la Préparation 3c, on obtient le dichlo- rure de spectinomycine pentahydraté cristallin, en un rende- ment de 35 %. Exemple 2 -desméthylspectinomycine CBz OH H H OH H t i HHH MeN Ht t MeN 0O H0 t Pd/C H0O NMe NMe OH0 I H CBz On ajoute une solution de 333 mg (0,57 mmole) de N,N'dicarbobenzyloxy-5'-desméthylspectinomycine dans 5 ml d'alcool isopropylique à 300 mg de palladium à 10 % fixé sur du carbone dans 45 ml d'isopropanol, dans une bombe de Parr. On traite la solution avec 1,36 ml (1,36 mmole) de solution de chlorure d'hydrogène 1N dans l'alcool isopropylique et on effectue l'hydrogénation pendant 16 heures sous pression de 0,28 MPa à la température ambiante. On filtre la matière et on lave le catalyseur avec de l'isopropanol. En lavant le catalyseur avec un volume supplémentaire d'eau, on obtient davantage de produit. On concentre la matière à sec sous vide et on sépare la portion hydrosoluble. Par élimination du solvant sous vide, on obtient un résidu blanc qu'on recris- tallise dans de l'acétone aqueuse pour obtenir 112 mg de 5'- desméthylspectinomycine sous la forme d'une substance solide blanche: point de fusion 196-205 (décomposition); spectre de masse m/e (dérivé de penta-TMS) 678,3378; la formule C28H62N207Si5 nécessite 678,3403; résonance magné- tique des noyaux de carbone (D30) (par rapport à TMS externe) 6 95,3, 94,9, 93,6, 71,1, 67,4, 67,0, 62,9, 62,5, 61,0, 59,9, ,9, 32,2, 31,7. Exemple 3 6 '-hydroxyspectinomycine CBz OH H H OH H IBZ HI ' H tCH3N 'OH CHN isooDroDan lV HO)CHa Noir de v HO CH3 OH CBz H On agite par secousses 36 mg de N,N'-dicarbo- benzyloxy-6-hydroxyspectinomycine avec 20 mg de noir de palladium dans 35 ml d'isopropanol sous pression d'hydrogène de 0,28 MPa pendant 2,25 heures. On filtre le catalyseur et on le lave à l'alcool isopropylique. On concentre le filtrat à un volume total de 10 ml et on y ajoute 0,12 ml d'acide chlorhydrique 1,0 N dans l'alcool isopropylique. Par concen- tration de la solution, on obtient un résidu blanc que l'on redissout dans D20 pour la mesure du spectre de résonance des noyaux de 13C. En récupérant l'échantillon utilisé dans cette mesure, on obtient 14 mg de matière après lyophilisation. Cette matière est cristallisée dans l'eau et l'acétone en donnant la 6'-hydroxyspectinomycine. Point de fusion 201-205 (décomposition) Résonance magnétique des noyaux de carbone (D20) * 94,9, 93,2, 73,6, 70,7, 67,2, 64,6, 62,7, 60,8, 59,6, 37,0, 31,9, 31,4 ppm Rf de la spectinomycine, 0,5 Rf de la 6'hydroxyspectinomycine, 0,25 L'épreuve sur disques immergés de la 6'-hydroxy- spectinomycine brute montre une activité antibactérienne. En utilisant des modes opératoires semblables ceux des exemples 1, 2 et 3, mais en remplaçant la N,N'-bis- carbobenzyloxy-4',5'-didéhydrospectinomycine, la N,N'-bis- carbobenzyloxy-2'-O-acétyl-4',5'-didéhydrospectinomycine, la N,N'-dicarbobenzyloxy-5'-desméthylspectinomycine et la N,N'- dicarbobenzyloxy-6'-hydroxyspectinomycine par la spectino- mycine protégée convenablement substituée, on obtient des analogues de spectinomycines indiqués sur les tableaux XVII et XVIII. -H3 -H -H -tH30H -H -:H30:H3 -H3DOH -H -tHDQH -H HD -H - HDOH -H -HDOH 'H =H30H -H cHDOH iH -H30H -H -HDOH 'H -tHDOH -H -CHD0H -H -CH30H -H -=HDOH -H -H:)OH -H Àt HOH - -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -s"$Hc3 -OH -ScH:3 -OH -H -OH -CHei -OH PCHD -OH -H -OH -OH -H -OH -S.H:D -OH -SCH3 -OH -SH -OH -OH-3 -OH -OCH:3 -OH -OH iS H 3'H HO s, H N ú9 IIAX nlvsqIevl L9 úS60M9 -H -H ' HDOH -H -e3H -cHO -HDOH -H -H rH3Gn -,HeOH -H -th'05 -H -cX30 -N -ZH3OH -H -H chDOH -H 2:.0H -H -.th:OH -H -tHDOH -H -'H=OH -H -rHAOH -H -=fOOH -H =HOXH -H -=H3OH -H -cNOOH -H CXIOH -H --r- -b -OH -OH -OH -H -OH -OH -OH -OH -OH -OH -0H -Ou -OH -OH - Sr-=D -OH ch -OH HXS -OH -Ocho -OH - -OH -OH -H -OH -SeHrO -OH -SeHr -OH -SH -OH -OrHC3 -0H - -OcHD -OH -OH -i-s 8 ItIIAX lMIYS . úú609yz- Exemple 4 Dichlorhydrate de 4',5'-didéhydrospectinomycine OH OH OH CBz H, H OH CH3N 2 H o H2 OH0.2HC1 HO HCl HO NCH3 NCH3 CBz H On hydrogène sous pression de 0,21 MPa pendant 1 heure et demie un mélange contenant 93 mg de N,N'-biscar- bobenzyloxy-4',5'-didéhydrospectinomycine, 70 mg de palla- dium à 10 % fixé sur du carbone, 30 ml d'alcool isopropylique et de l'acide chlorhydrique 0,1 N dans 2 ml d'alcool isopro- pylique. A ce stade, on ajoute encore 30 mg de catalyseur et 1,0 ml d'acide chlorhydrique 0,1 N dans l'alcool isopro- pylique et on renouvelle l'hydrogénation pendant 2 heures et demie. La substance solide est ensuite filtrée et le filtrat est concentré en donnant 50 mg de dichlorhydrate de 4',5'-di- déhydrospectinomycine sous la forme d'une matière solide. Ce produit est actif contre E. coli et ne contient pas de spectinomycine ou de dihydrospectinomycine, comme le font apparaître divers systèmes de chromatographie sur couche mince (CHCl3:CH3OH:NH4OH-3:4:2) (NH4OH à 3 % dans l'acé- tone). Dans ce système, il présente une tache active po) qui correspond à un étalon de référence de 4',5'-déhydrospectino- mycine énantiomérique présentant les caractéristiques ci- après: Spectre de masse (tri-TMS): m/e 546 (M+), 531 (H-15), 492, 426, 401, 361, 271, 199. Résonance magnétique des noyaux de carbone (D20, TMS externe): 189,6, 179, 3, 102,8, 98,5, 72,6, 69,9, 67,0, 66,5, 62,6, 61,5, 59,7, 32, 32,1, 22,0 ppm. En suivant un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 4, mais en remplaçant la N,N'-biscarbobenzyloxy- 4',5'-didéhydrospectinomycine par la 4',5'-didéhydrospecti- nomycine convenablement substituée, on obtient les 4',5'-di- déhydrospectinomycines des tableaux XIX et XX suivants. úS609Z -COH - -OH CHCO -OH -CH -icHc -OH -OH -OH -OH -gii'i -cHDOH -OH -OH -rSs0e -rt O -CHD -OH -OH -OH -0H -OH _-CHDs-H -CH -OH -OH -CH3 -OH -OH -cH:D-cH O -'HD -l0H -HUi -CH3 -OH -H -CHD -OH,SCH2 cHD -OH -OH -OH - 0Hi c -OH " " SCH -CHO -OH -OH _cHD -oit-O t H RHO O L; r O D H H i H t{ XIX n'1s.va,, oL- C.=CHeH -OH -H HcH -OH -OH :HDOH -H -OH -'hIOH-OH -OH H'=D OH-H H _s-OH -OH -OH -eH= OSCH -OH -OH -_c3Hj -OH -OH _CH3 -OCH -OH -.Hi -H -OH -CHO O -OH-OH -sHz * -OHSH -'HD -OH-SH -'HD. -OHçt -CH -OH -OH _c-' -OH -OH -OH '8H 8C CHH "H-H oH3 -O 'CH3 xx ndsqúv TL úS60otZ 72. REVENDICATIONS 1. - Procédé de production d'anomères et de mélanges astériques d'un composé de formule: \ B Ba -R-B caractérisé en ce qu'il consiste: (a) à convertir un composé de formule: R'7 B R6 VI en un composé de formule: P I R' 8I et (b) à éliminer la protection du composé formé dans l'étape (a); dans ces formules, R est un groupe: 73. R, .R, R2 R3 R4 o les variables R1 à R4 peuvent être égales ou différentes et sont cónoisies entre l'hydrogène et un radical alkyle inférieur, halogénalkyle inférieur, amino-alkyle inférieur, alcényle inférieur, alcynyle inférieur, -OX et-(CH2)n-OX et leurs iso- mères, à condition que R1 et R2 ne soient pas des radicaux hydroxy et que l'une des variables R3 et R4 représente obli- gatoirement un atome d'hydrogène, X est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur, alcényle inférieur ou alcynyle inférieur, n est un nombre entier ayant une valeur de 1 à 4; R5 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur; les variables R6 à R14 sont choisies entre l'hydrogène et un radical alkyle inférieur, alcényle inférieur et alcynyle inférieur; R5 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur; R'7, R'8, R'11 et R'12 sont choisis entre un radical alkyle infé- rieur, alcényle inférieur, alcynyle inférieur et un groupe protecteur choisi entre un groupe aralkoxycarbonyle, alkoxy- carbonyle halogéné et alkoxycarbonyle; à condition que l'une des variables R7 et R8 soit toujours un atome d'hydrogène et que l'une des variables R11 et R12 soit toujours un atome d'hydrogène; et à condition en outre que l'une des variables R'7 et R'8 soit toujours un groupe protecteur et que l'une des variables R'11 et R'12 soit toujours un groupe protec- teur; A est choisi entre un atome d'oxygène et un atome de soufre; et B et B1 sont égaux ou différents et sont choisis entre l'hydrogène et un radical hydroxy, alkoxy, o-alcényle inférieur, thio, thio-alkyle inférieur et thio-alcényle inférieur. 2. - Procédé selon la revendication 1, caracté- risé en ce que le composé préparé est la 3,5'-desméthyl- spectinomycine, la 4,5'-didéhydrospectinomycine ou le dichlorhydrate de la 4,5'-didéhydrospectinomycine.