Brevet FR2465749A2 — publié le 19810327

FR 2465749 A2 19810327 FR 7923546 A 19790921 Dans sa demande de brevet principal déposée en France le 16 Mars I976, sous le numéro 76 07476, la société demanderesse a décrit et revendiTlé de nouveaux dérivés 17-spirosultines, les Y- hydroxyacides correspondants, leur procédé de préparation et leur application comme médicaments. La demande de brevet principal a décrit les composés de formule I dans laquelle : - ou bien A et B forment ensemble un pont méthylénique en position 6&alpha;,7&alpha; ou en position 6?i7?, - ou bien A représente un atome d'hydrogène et 3 représente un radical alcoyle renfermant de 1 a 4 atomes de carbone en position 7 ou en position 7 ss et, - ou bien X et Y représentent un groupement : - ou bien X représente un groupement OH et Y un groupement - CH2-CH2-SO-OM dans lequel M représente un atome d'hydrogène ou un atome de métal alcalin ou un groupement NH4. Les 17 spirosultines ci-dessus existent sous forme de deux diastéréoisomères au niveau de l'atome de soufre, éventuellement séparables l'un de l'autre et dénommés isomère A et isomère B par convention. L'isomère A étant l'isomère dont le point de fusion est le plus elevé. Les composés de formule I présentent d'intéressantes propriétés pharmacologiques, ils sont en particulier des antagonistes de l'aldostérone et augmentent la diurèse hydrosodée avec conservation du potassium organique. Ils peuvent donc être utilisés pour lutter notamment contre l?hypertensIon artérielle et les insuffisances cardiaques. La demande de brevet principal a également décrit les composés de formule I a titre de médicaments. Le brevet principal a également décrit un procédé de préparation des produits de formule I, ainsi qu'une variante de ce procéaé de préparation. La présente demande de certificat d'addition à la réalisation de laquelle ont participé Mademoiselle ROUSSEAU Geneviève et Monsieur TORELLI Vesperto, a pour objet d'illustrer par de nouveaux exemples, la formule I du brevet principal. C'est ainsi que la présente demande a pour objet, les produits diastéréolsomères, de formule I du brevet principal suivants - Les (l7R)7n-propyl 2' oxydospiro (androst 4ene-17,5'-(1',2') oxathiolane)3-one. I1 s'agit de composés diastéréoisomères au niveau de l'atome de soufre, séparables l'un de l'autre, et que l'on dénomme isomère A et isomère B , par convention l'isomère A étant -l'isomère dont le point de fusion est le plus élevé. La présente demande a notammen. pour objet - Un isomère de (17R)7g-n-pro?yl 2' oxydosplro (androst 4ene- 17,5'-(1',2')oxathiolane)3-one,cr(2== +2,50 + 2 (C=18 chloroforme). D - Le produit tel que pouvant être obtenu selon le procédé de l'exemple 1. Les (17R)70c-n-propyl 2'-oxydospiro (androst 4-ène-17,5'-(1',2') oxathiolane)3 one présentent, comme les produits de formule I du brevet principal d'intéressantes propriétés pharmacologiques, ils sont en particulier des antagon'1stes de l'aldostérone et augmentent la diurèse hydrosodée avec conservation du potassium organique. Il est intéressant de noter que l'ensemble des produits de formule I ont l'avantage de ne présenter, à la différence d'autres médicaments à activité antialdostérone, qu'une affinité relative négligeable ou nulle pour les récepteurs androgènes, ce qui permet de prévoir pour ces produits une absence d'effets secondaires où ces récepteurs sont impliqués, c'est-à-dire d'effets secondaires du type androgène ou anti-androgene. Les résultats de l'étude de l'affinité de produits de formule I pour les récepteurs androgènes sont donnés plus loin. Les produits de l'addition comme l'ensemble des produits de formule I peuvent être utilisés pour lutter notnment contre l'hypertension artérielle et les insuffisances cardiaques. La présente demande ae certificat d'addition a donc également pour objet à titre de médicaments, les produits diastréoisomères de formule I tels que définis ci-dessus. La posologie utile varie en fonction de l'affection à traiter et de la voie d'administration ; elle peut varier par exemple de 100 mg à 1 g par jour chez l'adulte par voie orale. Les composés ci-dessus sont utilisés par voie bucale, rectale, transcutanée ou intraveineuse. Ils peuvent être prescrits sous forme de comprimes, de comprimés enrobés, de cachets, de capsules, de granulés, d'émulsions, de sirops, de suppositoires, de solutés et de suspensions injectables. La demande de certificat d'addition a également pour objet les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un médicament tel que défini ci-dessus. Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersant ou émulsifiants, les conservateurs. La présente demande a enfin pour objet une variante du procédé de préparation décrit dans le brevet principal, ladite variante concernant la préparation des produits de formule I'A, correspondant rades produits de formule IA de la demande principale dans laquelle A représente un atome d'hydrogène et B un radical alcoyle renfer inant de 1 à 4 atomes de carbone. ladite formule I' étant donc la suivante alc2 représentant un radical alcoyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone. Ladite variante consiste à soumettre un composé de formule II dans laquelle alc représente un radical alcoyle renfermant de 1 4 atomes de carbone à l'action du méthyl terbutyl sulfoxyde en présence de n-butyllithium pour obtenir un composé de formule III sous forme d'un mélange de diastéréoisomères A et B au niveau de l'atome de soufre, à séparer, si désiré, les diastéréoisomères, puis à scumettre soit le mélange des diastéréoisomères, soit chacun d'eux séparement à l'action d'un agent de deshydrogénation pour obtenir le composé de formule IV sous forme d'un mélange de diastéréoisomères A et B ou d'un diastéréoisomère et séparer éventuellement chacun des diastéréoisomères ainsi obtenus, et ladite variante est caractérisée en ce que l'on soumet ledit composé de formule IV à l'action d'un halogénure d'alcoyl magnésium de formule (alc2) MgX, dans laquelle alc2 représente un radical alcoyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone et X représente un atome d'halogène, en présence d'un sel cuivreux pour obtenir le composé formé de formule VI sous forme d'un mélange d'isomères 7 set 7ss, et sépare, si désiré, les isomères ainsi obtenus, puis soumet le produit de formule(VI)à l'action d'un réactif choisi dans le groupe constitué par le N-chloro succinimide et le N-bromosuccinrnide pour obtenir le composé de formule I'A recherché. Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé qui vient d'être décrit : - l'halogénure d'alcoyl magnésium est un chlorure, un iodure, un bromure. On peut citer par exemple le bromure de n-propyl magnésium. Le sel cuivreux est par exemple le chlorure cuivreux, le bromure cuivreux, l'iodure cuivreux. Lorsque l'on utilise un halogénure d'alcoyl magnésium, on réalise de préférence le blocage préalable du radical 17-hydroxy du produit de formule IV. Le blocage est réalisé de façon usuelle comme par exem.- ple à l'aide du dihydropyran. Pour séparer les diastéréoisomères, on utilise les méthodes classiques de chromatographie ou de cristallisation. Un exemple de préparation selon ce procédé est donné plus loin à l'exemple 1 de la partie expérimentale. Les produits de l'addition peuvent également être préparés par le procéaé décrit dans le brevet principal, ainsi que par la variante de ce procédé également décrite dans le brevet principal. C'est ainsi que l'on peut préparer selon ladite variante, la (17R) 74-n-propyle 2'-oxydospiro (androst 4-ène-17,5'-(1',2')oxathio- lane)3-one (isomère B), a par tir de la 3-éthoxy 7X-n-propyl androsta 3,5-dièn- 17-one, (en opérant comme indiqué à l'exemple 2 du brevet principal). La 3-éthoxy 7"-n-propyl androsta 3,5-dièn 17 one a été préparée de la façon suivante On oxyde la 17s-hydroxy 7g-n-propyl andrcst 4-èn 3-one(décrite dans Stéroïds 27, p. 759 (1976)) au moyen du réactif d'Heilbron (acide chromique 270 g, acide sulfurique 36 N, eau q.s. 1 litre). On obtient le 7 Les exemples donnés ci-après illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Exemple 1 : (17R) 7K-n-sropyl 2'-oxvdospiro- (androst 4-ène-17,5'- (1',2')oxathiolane)3-one (isomère B). Stade A : 17-tétrahydropyrannyloxy 21-terbutyl sulfinyl (17&alpha;) pregna 4 6-dien 3-one (isomère A) On mélange 5 g de 17-hydroxy 21-terbutyl sulfunyl (17 pregna 4,6-dien 3-one (isomère A) préparé suivant le stade B de l'exemple 1, du brevet principal, 150 ml de tétrahydrofuranne, 50 ml de 3,4dihydro (2H) pyranne, puis ajoute 0,25 g d'acide paratoluènesulfonique monohydraté et agite 16 heures à la température ambiante, lave à l'aide d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, sèche la phase organique, et amène à sec. On purifie le produit obtenu par chromatographie sur gel de silice en éluant au mélange chloroforme -acétate d'éthyle (4-1) et obtient 5,13 g de produit attendu, sous forme amorphe. Stade B :17-hydroxy 7&alpha;-n-propyl 21-terbutyl sulfinyl (17&alpha;)pregn 4=en 3 one (isomère A et 17-hydroxy 7&alpha;-n-propyl 21-terbutyl sulfunyl (17&alpha;) prégn 4-èn-3one (isomère A). On mélange 33,5 ml d'une solution de bromure de n-propyl magnésium 0,92 M dans l'éther éthylique avec 33,5 ml d'éther éthylique et et 33,5 ml de tétrahydrofuranne, refroidit jusqu'à -30 C, ajoute 0,25 g de chlorure cuivreux, agite 30 minutes, puis ajoute en 30 minutes, une solution de 5,13 g du produit obtenu au stade précédent dans 30 ml de tétrahydrofuranne, ajoute ensuite 30 Pil d'une solution d'acide chlorhydrique 6 N et agite le mélange réactionnel 30 minutes à température ambiante, sépare la phase organique que l'on sèche et amène à sec.On purifie le produit obtenu par chromatographie sur sel de silice en éluant au mélange chloroforme-acétone (4-1) et sépare d'une part 1,01 g de 17-hydroxy 7-n-propyl 21-terbutyl sulfinyl (174 prégn 4-èn 3-one (isomère A). F= 2400C, et d'autre part, 2,47 g de 17-hydroxy 7p-n-propyl 21 terbutyl sulfinyl (174 preg 4-èn 3 one (isomère A). F = 2320C. Stade C : (17R)7 -n-crosyl 2'-oxvdosoiro (androst 4-ène-17,5'-(1'-2') oxathiolane) 3-one (isomère B). A partir de la 17-hydroxy 7-n-propyl 21-terbutyl sulfinyl (17&alpha;) prég: 4-èn 3-one (isomère A), par action de N-chlorosuccinimide, en opéran au sein d'un mélange de tétrahydrofuranne et d'eau, (en opérant comme indiqué au stade C de l'exemple 2 du brevet principal), on obtieni 20 le produit attendu. F = 1900C (Kofler) /&alpha;/D = + 2,50 + 005 (c =1%, chloroforme). Le produit utilisé au départ du stade A ci-dessus, été préparé com me suit Stade A : 3-éthox 17-hydroxy 21-terbutyl sulfinyl (17&alpha;) prégna 3,5- diène (isomère A et isomère B). A un mélange ae 34,8 g de terbutylméthyl sulfoxyde et 500 cm3 de tétrahydrofuranne refroidi à + 50C sous courant d'azote, on introduit en 45 mn 145 cm3 de solution 2M de n-butyllithium dans le cyclo- hexane. On ajoute ensuite 38 g de 3-ethoxyspiro 17ss-oxiranyl androstc 3,5-diène. Après 15 heures de réaction à la température ordinaire, on dilue à l'eau et extrait avec de l'acétate d'éthyle. On sèche la phase organique et élimine le solvant par distillation sous vide.On obtient ainsi 52,3 g d'extrait sec qui sont chromatographiés sous pression sur une colonne de 1,6 kg de Kieselgel H. L'élution avec le mélange benzène-acétone (8:2), fournit ainsi 18,05 g de 3-éthoxy 17hydroxy 21-terbutyl sulfinyl (17S prégna 3,5-diène (isomère A) fondant à 200-2050C. Analyse : C27H44O3S = 448714 Calculé : C % 72,27 H % 9,88 S % 7,14 Trouvé : 72,2 9,9 7,1 La poursuite de l'élution avec le mélange benzène-acétone (5:5) fournit 20,35 g d'isomère B présentant un double point de fusion à 140 puis 1800 C. Analyse Trouvé : C % 71,9 H % 9,7 S % 7,0 Stade B : 17-hydroxy 21-terbutyl sulfinyl (17prégna 4,6-dièn 3-one (isomère A). On introduit 8,2 g du produit préparé au stade A fondant à 200-205C dans 320 cm3 d'une solution d'acétone à 10 % d'eau. On ajoute ensuite .5,3 g de chloranile à la solution ainsi obtenue. On agite la suspen sion ainsi obtenue pendant 4 heures 30 à la température ambiante. On verse la solution obtenue dans l'eau, extrait à l'acétate d'ethylf On lave, sèche la phase organique et la distille à sec. On obtient 3,1 g d'un résidu. On réunit les eaux mères et eaux de lavage, ajouté du chlorure de sodium et extrait au chloroforme. On récupère ainsi à nouveau 4,3 g de résidu. On chromatographie les 7,4 g de résidu ainsi obtenus sur silice (éluant benzène-acétone 6-4). On isole ainsi 6,7 g de 17-hydroxy 21-terbutylsulfunyl (1702 prégna 4,6-dièn 3-one (isomère A). L'échantillon fond à 2600C après recristallisation dans l'isopropanol. Exemple 2 : Composition pharmaceutique. On a préparé des comprimés à 50 mg du produit de l'exemple 1, comme principe actif, répondant à la formule - Composé de l'exemple 1 ..................................... 50 mg - Excipient (talc, amidon, stéarate de magnésium) q.s. pour un comprimé. Etude pharmacologique Affinité oour les ré ceteurs androenes L'affinité pour les récepteurs-androgènes des produits suivants -(17R)7&alpha;-méthyl 2'-oxydospiro (androst 4-ène-17,5'-(1',2')oxathiolane) 3-one, isomère B (produit 1 ; produit de l'exemple 2 du brevet principal). -(17R) 6ss, 7ss-méthylène 2'-oxydospiro (androst 4-ène-17,5 '-(1' ,2'/ oxathiolane) 3-one, isomère B, (produit II ; produit de l'exemple 1 du brevet principal). - (17R)7&alpha;-propyl 2'-oxydospiro (andros-t 4-ène-17,5'-(1',2')oxathiolane) 3-one, isomère B (produit III ; produit de l'exemple 1 de la présente demande de certificat d'addition), a été étudiée par la méthode des récepteurs hormonaux décrite par J.P. RAYNAUD et coll. dans "J.Ster. BIOCHEM" 1975,6, 615-622. La technique est la suivante La prostate prélevée sur des rats mâles castrés 24 heures auparavant, est homogénéisée dans un tampon trométhamine 10 millimoles saccharose 0,25 M, HC1 pH 7,4. L'homogénat est centrifugé à 105 000 g pendant une heure. Le liquide surnageant ou "cytosol" est alors ajusté de façon à avoir une dilution 1/5 (poids/volume). On incube à 0 C pendant deux heures, le cytosol avec une concentration fixe de 17P-hydroxy 17X-methyl estra 4,9,11-triène 3-one tritié, désigné ci-après par produit R tritié, en présence ou non de concentrations croissantes de ce même produit froid, désigné ciaprès produit R froid, de testoseérone ou des produits à tester. On détermine au bout de deux heures la radioactivité du produit tritié lié au recepteur par la technique d'adsorption au charbondextran (1,25 % - 0,625 %!. On trace ensuite - Les courbes représentant les pourcentages de produit R tritié lié en fonction du log de la concentration, du produit R froid, de la testostérone ou des produits à tester ajoutés. - Et la droite I50 parallèle à l'axe des abcisses et d'ordonnée B = B/T Max. + B/T Min. T 2 B/T Max. est le pourcentage de produit R tritié lié quand aucun produit n'est ajouté. B/T Min. est le pourcentage de produit R tritié lié quand la quantité maximale de produit R froid est ajoutée. Les intersections de cette droite I50 et des courbes permettent de déterminer les valeurs CT et CX. CT : concentration de la testostérone froide qui inhibe de 50 t la fixation du produit R tritié. CX : concentration du produit testé qui inhibe de 50 % la fixation du produit R tritié. L'affinité relative de chaque produit testé ou ARL est donnée par la formule ARL = 100 X CT CX Les résultats obtenus sont les suivants PRODUIT : ARL ( Testostérone 100 -( Produit I 3,6 6 ( Produit II O ( Produit III 0,7 ( : ) Les produits I, II et III présentent peu ou pas d'affinité pour les récepteurs androgènes. Etude de l'actIvité anti-aldostérone chez l'animal des produits I et III. On surrenalectomise des rats mâles de souche SPRAGUE DAWLEY pesant 180 g. A partir de ce moment, les rats reçoivent comme eau de boisson du sérum physiologique. Au bout de 31 heures, les animaux sont mis à jeun. Ils reçoivent alors comme eau de boisson de l'eau glucosée à 5 Au bout de 47 heures les produits sont administrés par voie orale sous forme de suspension ou de solution dans le carboxy-méthylcellulose à 0,25 %. Au bout de 48 heures, soit une heure après l'administration des produits, les animaux reçoivent d'une .part une surcharge hydrosaline par voie intra-péritonéale à raison de 5 ml par 100 g de poids corporel de sérum physiologique à 9 h^, et d'autre part 1 g/kg de monoacétate d'aldostérone en solution alcoolique à 2,5 % par voie sous cutanée.Les animaux sont placés dans des cages à diurèse sans nourriture ni boisson pendant 4 heures. Au bout de ce temps, on réalise une miction forcée par pression sur la vessie. On ramène le volume d'urine ainsi recueillie à 50 ml. On ef f ectue le dosage du sodium et du potassium sur autoanalyseur; Les résultats obtenus exprimés en pourcentage d'inhibition de l'activité de 1 fg/kg de monoacétate d'aldostérone injecté par voie sous cutanée sur le rapport concentration en sodium i concentration en potassium du rat surrénalectomisé, sont les suivants ; r Dose de produit : Pourcentage ; administré par : d'inhibition ( : voie orale Produit I 5 mg/kg 22 % 10 mg/kg 20 % ) 20 mg/kg 70 % 2 2 mg/kg 56 % ) Produit III 10 mg/kg 64 % ( ) REVENDICATION Procédé de préparation de produits tels que définis à la revendication 1 de la demande de brevet principal, répondant à la formule I'A dans laquelle alc2 représente un radical alcoyle contenant de I à 4 atomes de carbone, caractérisé en ce que l'on soumet un produit de formule IV sous forme d'un mélange de diastéréoisomères A et B ou d'un seul diastéréoisomère, à l'action d'un halogénure d'alcoyle magnésium de formule (alc2) MgX, dans laquelle alc2 représente un radical alcoyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone et X représente un atome d'halogène, en présence drun sel cuivreux, pour obtenir le composé formé de formule VI sous forme d'un mélange d'isomères 7a et 7 et sépare, si désiré, les isomères ainsi obtenus, puis soumet le produit de formule VI à l'action d'un réactif choisi dans le groupe constitué par le N-chlorosuccinimide et le N-bromosuccinimide pour obtenir le composé de formule I'A recherché.