Brevet FR2470110A1 — publié le 19810529

Dérivés de la décaprénylupinrie, leurs sels acides d'addition et comrp>sition phariaceutique utilisant ces produits. La présente invention concerne de nouvelles décapré- nylamines et leurs sels acides d'addition qui sont utilisés pour la prévention des infections virales des animaux vertebrés. On connaît jusqu'ici diverses substances qui ont été marquées pour avoir l'effet préventif ou adoucissant sur les maladies dues à des virus dont l'hôte est un animal vertebréa ou qui ont été reconnues capables d'adoucir les symptômes de ces maladies en augmentant d'une façon significative l'ac- tivité anticorps chez l'animal. Les produits antiviraux mention nés jusqu'ici comprennent l'interféron, les substances capable d'induire l'interféron, c'est-à-dire les inducteurs (inducteur d'interféron) le chlorhydrate d'amantadine ou des substances synthétiques, telles que la méthysazone,qui exercent directement un effet inhibiteur sur la propagation des virus. L'interféro est une glycoprotéine ayant une activité antivirale et anti- tumeur, ladite glycoprotéine étant produite in situ par les cellules d'un animal vertébré quand ces cellules sont infectée avec un virus et a été proposée pour la thérapie des maladies virales infectieuses et également pour la thérapie du cancer. Des inducteurs connus qui induisent l'interféron chez les animaux vertébrés par un processus autre que l'infection vira comprennent des substances naturelles à haut poids moléculair telles que l'acide ribonucléique à chaine double. de bacté- riophages d'une certaine espèce,ou des substances synthétique à haut poids moléculaire telles que l'acide ribonucléique à chaîne doubledont le type est l'acide polyinosinique-acide polycytidylique, ou des inducteurs à bas poids moléculaire tels que la tyrolone. Toutefois dans la production de l'interféron, le prob' de la purification de celui-ci est soulevé et en fait aucun procédé économique pour la production de l'interféron n'a ét réalist jusqu'ici. Par ailleurs, les inducteurs classiques d'interféron n'ont pas reçu d'application pratique surtout à cause de leur toxicité. Les agents antiviraux synthétiques qui exercent directement un effet inhibiteur sur la propaga- tion du virus, qui sont disponibles dans le commerce actuel- lement, ont une gamme plutôt étroite des maladies infectées par les virus qui sont guérissables par administration dudit agent et par conséquent la mise au point d'agents antiviraux syn- thétiques nouveaux est vivement souhaitée. En tenant compte de ces considérations, les auteurs de la présente invention ont conduit des études poussées pour trouver des composés capables de produire l'interféron de grande activité et de plus, ayant une activité antivirale sur le niveau biologique, et il en est résulté que les inventeurs ont trouvé éventuel- lement Que les composés représentés par la formule générale (I) suivante et leurs sels acides d'addition montrent un excellent pouvoir inducteur pour l'interféron et en même temps font preuve d'une excellente activité antivirale même dans l'essai biologique. Ainsi, la présente invention a pour but de fournir une nouvelle classe de dérivés de la décaprénylamine représentés par la formule générale suivante CH R I 3 / R - - - dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène, un groupe décaprényle, un groupe alkyle inférieur ou un groupe hydroxy- alkyle inférieur et R2 représente un groupe alkyle ou alcényle inférieur, éventuellement substitué avec au moins un radical hydroxyle, amino ou alkylamino,-ou bien un groupe cyclo-alkyle, et elle a pour objet également de fournir les sels acides d'addition de ces dérivés. Les groupes alkyle inférieur appro- priés comme R1 dans la présente invention comprennent des groupes alkyle à chaîne droite ou ramifiée ayant jusqu'à 4 atomes de carbone. TI en est de même pour la partie alkyle inférieur du groupe hydroxyalkyle inférieur de R1. De plus, des groupes alkyle ou albényle inférieur appropriés pour R2 ont également jusqu'à 4 atomes de carbone. Ces groupes peuvent être encore 24701 10 mono- ou polysubstitués avec des radicaux hydroxyle, amino ou (mono ou di)alkylamino. La substitution avec une combinaison quelconque de ces radicaux est également possible comme le connaît l'homme de métier. Pour la préparation de la décaprénylamine représentée par la formule générale (I) mentionnée ci-dessus, et de ses seL acides d'addition, on peut adopter un procédé dans lequel les processus connus de la synthèse des amines sont appliqués au décaprénol de départ représenté par la formule CH H H-t-- C2-OCH-CH2) 0 I (II) pour obtenir un dérivé aminé désiré. En outre, le dérivé aminé ainsi obtenu peut être trans formé en un sel correspondant de façon classique. Plus spéci- fiquement, une amine désirée peut être préparée selon un procédé qui comprend la transformation d'un alcool décapré- nylique approprié ayant la formule générale (II) ci-dessus en un halogénure ou un ester d'acide sulfonique correspondant suivi de la réaction avec un composé aminé primaire ou secon- daire approprié correspondant au produit final désiré en pré- sence ou en l'absence d'une base. Par ailleurs, l'amine désirée peut être préparée par oxydation d'un décaprénol en un aldéhyde correspondant qui est ensuite condensé avec un composé aminé primaire approprié, avec départ d'eau, pour former un composé imino correspondant qui à son tour est réduit avec un agent réducteur approprié (par exemple borohydrure de sodium). Un sel acide d'addition du dérivé aminé ainsi obtenu peut être préparé en mélangeant ladite amine dans un solvant approprié avec un acide désiré pour former un sel et en faisant cristal- liser le sel de la solution par évaporation, ou autre moyen, pour le récupérer.Les sels acides d'addition appropriés pour être utilisés comme médicaments comprennent par exemple ceux avec l'acide chlorhydrique, l'acidé acétique, l'acide citrique, l'acide fumarique et analogues. Les composés représentés par la formule générale (I) et leurs sels acides d'addition sont illustrés ci-dessous en se référant aux exemples préparatifs ci-après. Exemple préparatif 1. Chlorhydrate de N-méthyldidéeaprénylamine. CH.CH= -O.' 'CHH 1 H+CH21C=CH--_CH2}.O CH=C.,C,. -H CH2CH=C. CH2o10 A un mélange d'une solution dans le méthanol (25 g)de méthylamine à 40% avec du benzène (400 ml), une solution de bromure de décaprényle (33 a) dans le benzène (100 ml) est ajoutée goutte à goutte à la température ordinaire pendant une heure avec agitation. qui est continuée pendant encore 16 heures. Le mélange réactionnel obtenu est lavé successi- vement avec NaOH 2N (100 ml), de l'eau et une saline saturée, séché sur du sulfate de sodium anhydre puis concentré sous pression réduite. Le résidu (28 g) est purifié par chromato- graphie sur colonne en utilisant le gel de silice (280 g). L'élution est effectuée avec un mélange benzene-acétate d'éthyle-méthanol. La fraction éluée au départ (7,5 g) est dissoute dans l'acétate d'éthyle, additionnée d'éther con- tenant HCl pourla rendre faiblement acide, puis refroidie. La masse cristallisée est séparée par filtration pour récupérer le chlorhydrate de N-méthyldidécaprénylamine (3,5 g), point de fusion 69 -72 C. L'analyse élémentaire de Clo H165N.HCl.H20 donne les résultats suivants: - C% H% N% Calculé: 83,78 11,70 0,97 Trouvé: 83,90 11,91 1,08 Exemple préparatif 2. - hlorhydrate de N-méthyldécaprénylamine. Chlorhydrate de N-méthyldécaprénylamine. j Fi H--CT12.C= -CH2 - H La fraction éluée en dernier (13,1 g) obtenue dans l'exemple préparatif 1 est dissoute dans l'acétone puis additionnée d'éther contenant HC1. Le mélange est travaillé de la même façon que dans l'exemple 1, ce qui permet d'obteni: le chlorhydrate de N-méthyldécaprénylamine (6,5 g), point de fusion 68 -70 C. L'analyse élémentaire de C51F85N.FCl.3/2 H20 donne les résultats ci-après: C% El% N% Calculé: 78,g6 11,56 1,81 Trouvé: 78,60 11,38 l168 Fxemples préparatifs 3 à 13. Les mêmes procédés que dans l'exemple 1 sont répétés 2O pour la réaction du bromure de décaprényle avec un composé amino primaire ou secondaire donnant ainsi les composés men- tionnés ci-après, la formule structurelle,la formule molécu- laire, le point de fusion et l'analyse élémentaire de ces composés sont également mentionnés dans le tableau 1. Ci 1-f. CD r-. s.' Tableau 1 Cnri2 H-L^'-5I' i. 1. - - -- -2 Exenmple de préparation - m H 4 H H 6 4 7 H a Zr Stracture Formrule mléculaire p2 -i -C 7 - 7 -0 -I.12CM=H2HC>.. 2 -2 Il -C -*[2 -c-NM2 RCH,{. OH -CH2CHCd 2T.(C 25)2 -89. o j 6 9&..,C 1* 9. -'-l 53 8.7 C H OiT -2C1.H2 O 57H98 2 2 2.F.( C)ou indice de réfraction 79 - e2 72 - 74 71 - 75 68 - 69 Anal.yse él&'entaire Calculé. Trouvé C _L JL JL. _-- 81/ 01ll?7 lf7 8070;0 lj80 s435 llE.C t 71 l- 7l/62 1)C7 /71 135 3/15 75/11i16 2_97 E8217 i 45 *]1 O)l il a38 1 72 1 r 'y -' 66 - 67 75.91 10>56 29 7459 10 7 3599 48 - 51 73,11 11i20 2)99 72 75 1o0739 2,85 Fxemple de _tructure rxéparation R No. _ _ _ _ 9 CH CH 5 i0 OH3 il -C. CF:OH'C22 CH "2. CH 3 *'l 12 J-q- CH=-CH-A---H "2....2'10 z22 CHEZ OH 13 5-c P= -C 0 -Cc -CcO 5) -2.... -C22CHCóT(?)2 Tableau 1 (suite) Analyse 2ormule Tro1lcu] aireP.F.( C) ouCalculé () indice de - réfraction C H 72 - 7 C52- 't1 3/ 2H72 - 74 79708 -161 1/77 C57 H 95HC1H 2 75 - 78 80765 11i64 i165 574952-5 82 - 83 7 C5H910 HC 82 - 83 78783 11i27 1170 =O '1021 2H2 l102-'l17I 2 - 72 8594 118 1 0)96 G717802.2HC13Sr2 5119 -) 010751780N 2..2Ht32 n=!5!19 78.57'.11 4 1)7 élémentaire Trouvé (ô) C H N 79726 1161 1/74 )80 l 1-?47 1762 78)60 1l 28 1.65 840o3 11?73 07o9 78122 11 37 1'4 1v- o % rN 24701,10 Les effets physiologiques des composés de la présente invention sont illustrés ci-dessous en détail. (1) Essai de l'activité induisant l'interféron. Chaque composé d'essai mis en suspension dans l'eau avec un tensio-actif est administré par voie intrapéritonéale à chaque groupe constitué par 5 souris femelles ICR pesant environ 25 g. 20 heures après l'administration, on recueille le sang des souris et le sérum en est séparé pour obtenir un interféron sér.ique. Les stades suivants sont réalisés afin de déterminer l'activité de l'interféron sérique ainsi induit. Des cellules L-929 provenant de souris et incubées -au préalable en une monocouche sont amenées en contact avec la solution de sérum d'essài diluée 10 fois, mis en incubation toute une nuit à 370C dans un incubateur placé dans une atmosphère de gaz carbonique, et la solution de sérum d'essai diluée en est retirée. Ensuite, les cellules sont inoculées avec le virus vésiculaire stomatitis et placées sur un milieu de culture tissulaire contenant 1% d'agar. Après l'incubation à 370C pendant 24 heures, les cellules sont colorées avec une solution de rouge neutre, diluées à une concentration ap- propriée pour compter le nombre de plaques qui y est formé et ainsi pour calculer le taux d'inhibition des plaques dans chacun des groupes d'essai par rapport à un groupe auquel aucun composé d'essai n'a été administré. Le taux d'inhibition des plaques de chaque 'composé d'essai est montré sur le - tableau 2. (2) Effet sur des souris infectées avec le virus vaccinal. Des groupes constitués chacun par 10 souris femelles ICR reçoivent une injection intraveineuse de virus vaccinal (souche DIE) dans la veine de la queue. Le huitième jour après l'inoculation, le nombre de lésions en forme de pustules sur la surface de la queue est compté après avoir coloré la queue avec une solution d'éthanol contenant 1% defluo:tscéoe et 0,5% de bleu de méthylène. Dans cet essai, chaque composé d'essai est administré par voie intrapéritonéale aux souris le jour précédent l'inoculation du virus, ce qui fait que l'activité antivirus du composé d'essai est évaluée en terme d'inhibition des lésions de la queue telles que calculées dans chaque groupe d'essai par rapport à un groupe auquel un composé d'essai a été administré. Le taux d'inhibition des lésions de la queue de chaque composé d'essai est indiqué sur le tableau 2. (3) Effet sur des souris infectées avec le virus de la grippe Des groupes constitués chacun par 10 souris femelles ICR pesant environ 25 g, sont infectés par inhalation de viruE de la grippe nébulisé A/PR-8. Une solution de chaque composé d'essai en solution aqueuse contenant un tensio-actif est administrée par voie intrapéritonéale aux souris 24 heures et 3 heures avant l'infection du virus et 5 fois par jour à parti du second jour qui suit l'infection. Les souris qui survivent 21 jours après l'infection sont considérées comme des survi- vantes et le taux de survie est obtenu selon l'équation suivante: Nombre de survivantes x 100 = taux de survie. Nombre de souris traitées Tableau 2 Composé d'essai Dose intrapéri- tonéale mg/kg Inhibition de la lésion de la queue (prévention contre l'infection due au virus vaccinal) Taux de survie (prévention contre l'infec- tion due au virus de la grippe) Inhibition des plaques (interféron sérique) Chlorhydrate de N-allyl-décaprénylamine Chlorhydrate de N-(N',N'- diéthylamino-éthyl)- décaprenylamine Chlorhydrate de N-cyclohexyl-décaprényl- amine Chlorhydrate de N-cyclohexyl-N-méthyl- décaprénylamine Chlorhydrate d' amantadine (Témoin) 51,0 93,8 38,7% 86,0 81,3 ,3 O-j o 93,5 43,5 l'Io -l 1-4 C O C. il (4) Toxicité. Afin de rechercher la toxicité aigUe des composés de la présente invention, la dose létale 50% de chaque composé est obtenue en utilisant des souris mâles ddY pesant 20 à 25 g. D'après les résultats montrés sur le tableau 3, on voit que les composés ont une marge de sécurité élevée par administration par voie intrapéritonéale. Tableau 3 Dose léthale 50% (mg/kg) Admibistrée par voie Administrée par voie COmposé d'essai intraveineuse intrapéritonéale Chlorhydrate de N-allyl- décaprénylamine 10,0 500 Chlorhydrate de N-(N',N'- diéthylamino-éthyl) - décaprénylamine 30,6 > 500 Chlorhydrate de N-cyclohéxyl- décaprénylamine 21,0 230 Chlorhydrate de N-cyclohéxyl- Ni-méthyl- décaprénylamine 82,0 > 500 Comme on peut le voir d'après les résultats d'essais précédents, les ingrédients actifs de la présente invention ont une activité inductrice sur l'interféron in vivo et ont une faible toxicité en manifestant une excellente activité antivirale. A la lumière du fait qu'une stricte corrélation - de l'activité interféron avec les activités antivirales individuelles n'est pas toujours observée pour les ingrédients -de la présente invention, on considère également une éventua- lité que les activités antivirales desdits ingrédients au niveau biologique sont concernées non seulement dans l'interféron, mais également dans d'autres mécanismes de défense: de l'hôte. Par conséquent, quand les ingrédients actifs de la présente invention sont utilisés pour le traitement de maladies infectées par les virus, ils sont administrés aux malades par des procédés tels impliquant l'administration orale, l'inhalation, ou analogueainsi que par injection sousrcutanée, intramusculaire et intraveineuse. Selon l'état du malade, tel que l'âge, les symptômes et la voie par laquelle l'ingrédient est administré, l'ingrédient actif de la présente invention est utilisé en une dose de 0, 5 à 20 mg/kg, de préférence de 3 à 5 mg/kg plusieurs fois par jour (2-à 4 fois). Les ingrédients actifs de la présente invention peuvent être formulés dans des compositions pour médicaments, par exemple comprimés,cachets, granulés, poudres, préparation liquide pour usage oral, lotiorsocculaire, suppositoires, pommades, injections et analogues. Quand les ingrédients actifs de la présente invention sont administrés par voie orale, ils peuvent être formulés en comprimés, cachets, granulés, ou poudres. Ces préparations solides pour usage oral peuvent contenir des excipients utilisés classiquement, par exemple l'anhydride silicique, l'acide métasilicique, l'alginate de magnésium, le silicate d'aluminium synthétique, le lactose, le sucre de canne, l'amidon de mais, la cellulose microcristallisée, l'amidon hydroxypropylé ou la glycine, et analogues; des liants,par exemple la gomme arabique, la gélatine, la gomme adragante, l'hydroxypropyl- cellulose, ou la polyvinylpyrolidone; des lubrifiants, par exemple le stéarate de magnésium, le talc ou la silice; des agents de désagrégation, par exemple l'amidon de pomme de terre, et la carboxyméthylcellulose; ou des agents mouillants, par exemple polyéthylèneglycol, mono-oléate de sorbitanne, huile de ricin hydrogénée, laurylsulfate de sodium. Dans la préparation de cachets mous, en particulier/les ingrédients actifs de la présente invention, peuvent être formulés en les dissolvant ou en les mettant en suspension dans des substrats 24701ÈC huileux communément utilisés tels que l'huile de sésame, l'huilE d'arachides,l'huile de germe, l'huile de coprahfractionnée tell( que "Miglyol O, ou analogue. Les préparations en comprimés ou en granulés peuvent être enrobées selon les procédés classiques. La préparation liquide pour usage oral peut être sous la forme d'émulsion aqueuse ou huileuse ou de sirop, ou par ailleurs sous la forme de produit sec qui peut être redissous avant usage à l'aide d'un véhicule approprié. A ces préparation liquides, on peut ajouter des produits additifs communément utilisés, par exemple des auxiliaires émulsifiants tels que sirop de sorbitol, méthylcellulose, gélatine, hydroxyéthyl- cellulose, et analogues; ou des émulsifiants, par exemple lécithine, monooléate de sorbitanne, huile ricin hydrogénée, excipient non aqueux, par exemple huile de coprah fractionnée, huile d'amande} huile d'arachideset analogues; ou des antisep- tiques, par exemple parahydroxybenzoate de méthyle, parahydrox, benzoate de propyle ou acide sorbique.Fn outre, ces préparation pour usage oral peuvent contenir.si nécessairedes agents de conservation, des stabilisants et les additifs analogues. Dans le cas o les ingrédients actifs de la présente invention sont administrés sous forme de suppositioires, ils peuvent être formulés selon les procédés classiques utilisant des substrats oléophiles tels que huile de cacao oueWitepsol o ils peuvent être utilisés sous la forme de capsules rectale obtenues en enrobant un mélange de polyéthylèneglycol, d'huile de sésame, d'huile de germe, d'huile de coprah fractionné et analogues dans une feuille de gélatine. La capsule rectale peut être revêtue si nécessaire de matièrescireuses. Quand les ingrédients actifs de la présente invention sont utilisés sous la forme d'injection, ils peuvent être formulés en préparationsde solution huileuse, solution émulsi: ou solution aqueuse, et ces solutions peuvent contenir des émulsifiants. stabilisants ou additifs analogues communément utilisés. Selon le procédé d'administration, les compositions mentionnéesci-dessus peuvent contenir les ingrédients actifs de la présente invention à raison d'au moins 1% et de préfére de 5 à 50%. Le procédé pour formuler les ingrédients actifs de la présente invention en diverses préparations est illustré ci- dessous en se référant à des exemples pharmaceutiques. Exemple pharmaceutique 1 - Préparation de cachets durs pour usage oral. Un mélange de 25 g de chlorhydrate de N-allyldécaprényl- amine et de 7,5 g d'huile de ricin polyoxyéthylée dans l'acétone est mélangé avec 25 g d'anhydride silicique. Après évaporation de l'acétone, le mélange est malaxé encore avec g de calcium carboxyméthylcellulose, 5 g d'amidon de mais, 7,5 g d'hydroxypropylcellulose et 20 g de cellulose micro- cristallisée et 30 ml d'eau sont ajoutés et malaxes pour obtenir une masse granulaire. La masse est granulée au moyen d'un granulateur (Granulateur ECK de Fuji Paudal CO., Japon) équipé avec un tamis(B.S) à mailles n 24 pour obtenir des granulés. Les granules sont séchésjusqu'à ce lque la teneur en humidité soit inférieure à 5% et tamisés avec le tamnis(B.S) à mailles n 16. Lesgranuléstamiséssontmis en cachets au moyen d'une machine à remplir les cachets à raison de 190 mg/cachet. Exemple pharmaceutique 2 - Préparation de cachets mous pour usage oral. Une solution homogène est préparée en mélangeant 50 g de N-(N',N'cliéthylamino-éthyl)-décaprénylamine avec 130 g de polyéthylèneglycol (Macrogol 400). Séparément, une solution de gélatine est préparée qui contient 93 g de gélatine, - 19 g de glycérine, 10 g de D-sorbitol; 0,4 g de parahydroxy- benzoate d'éthyle, 0,2 g de parahydroxybenzoate de propyle et 0,4 g d'oxyde de titane et qui est utiliséesous forme d'un agent filmogène pour cachets. La solution obtenue précédemment en même temps que l'agent filmogène pour cachets sont traités avec un emporte-pièce plat du type manuel pour obtenir des cachets contenant chacun 180 mg. Exemple pharmaceutique 3 - Injections. Un mélange de 5 g de chlorhydrate de N-méthyl-N-cyclohexyl- décaprénylamine, une quantité appropriée d'huile d'arachid et 1 g d'alcool benzylique sont complétés à un total de 100 cm par addition d'huile d'arachides.La solution est versée par 247011.0 1 portionsà raison de 1 cm dans des conditions aseptiques dans une ampoule qui est ensuite scelIée. Exemple pharmaceutique 4 - Injections. Un mélange de 1 g de chlorhydrate de N-cyclohexyldécaprényl- amine, 5 g de "Nikkol HCO 60" (marque commerciale) (huile de ricin hydrogénée éthérifiée avec 60 moles de polyoxy- éthylène), 20 g de propylèneglycol, 10 g de glycérol et 5 g d'alcool éthylique sont mélangés avec 100 ml d'eau distillée. et agités. Dans des conditions aseptiques, la solution est versée par portionsà raison de 1,4 ml dans une ampoule qui est ensuite scellée. -REVENDICATIONS 1. Composé de formule générale: CH5 R1 N/ H- -CH2-C=CH-CH2 10 N 2 R2 dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène ou un groupe décapré- nyle,un groupe alky inférieur ou un groupe hydroxyalkyle inférieur et R2 représente un groupe alkyle ou alcényle inférieur. éventuellement substitué avec au moins un radical hydroxle-amino ou alkylamino, ou bien un groupe cyclo-alkyle, et les sels acides d'addition de ce composé. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R1 est de l'hydrogène et R2 est un groupe alcényle inférieur. 3. La Nallyldécaprénylamine et ses sels acides d'addition selon la revendication 2. 4. Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R1 est de l'hydrogène et R2 est un groupe cyclo- alkyle. 5. La N-cyclohexyldécaprénylamine et ses sels acides d'addition selon la revendication 4. 6. Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R1 est un hydrogène et R2 est un groupe dialkylamino- alkyle ou dialkylaminohydroxyalkyle. 7. La N-(N',N'-diéthylamino-éthyl)-décaprénylamine et ses sels acides d'addition selon la revendication 6. 8. La N-(N',N'-diéthylaminohydroxyéthyl)-décaprénylamine et ses sels acides d'addition selon la revendication 6. 9. Médicament caractérisé par le fait que c'est un composé tel que défini dans la revendication 1. 10. Composition pharmaceutique caractérisée par le fait qu'elle comprend au moins un composé tel que défini dans la revendication 1 en même temps que des excipients et/ou des matières auxiliaires pharmaceutiquement acceptables.