Brevet FR2472391A1 — publié le 19810703

Au cours d'une expérimentation. clinique et biologique de l'oeuf de caille cru ayant porté sur plus de 3.000 malades et présentant actuellement onze ans de recul (expérimentation résumée dans "LA CLINIQUE" du 15 mars 1978), il s'est posé les problèmes suivants: 1) - Refus d'absorption par certains malades; 2) - difficultés d'approvisionnement et de conservation en France mais surtout dans les pays chauds. On a donc étudié la possiblité d'utiliser, à la place de l'oeuf cru, un lyophilisat d'oeufs de caille de la même souche (souche MINA B élevée à LE VERGEROUX -Charente Maritime- croisement de caille sauvage Coturnix-coturnix-coturnix et de caille japonaise Coturnix- coturnix-japonica), les oeufs de-cette souche ayant été utilisés dans l'expérimentation animale et humaine. Les oeufs ont été lyophilisés selon les méthodes classiques de lyophilisation. Les lyophilisats obtenus ont donné lieu à: a) - une étude comparative: hommes ou animaux ayant déjà été traités à l'oeuf cru au cours des mois ou des années ptécédentes, ont reçu, lors d'une rechute, des oeufs lyophilisés à la place d'oeufs crus, et subissaient un bilan biologique; b) - une étude thérapeutique initiale: malades ou animaux ont été traités dès le départ avec des oeufs lyophilisés et à la même dose que celle expérimentée avec les oeufs crus. Procédé de préparation: Les lots d'oeufs ont été trempés dans une solution antiseptique, cassés en masse, filtrés, centrifugés, congelés et - lyophilisés de façon connue. On obtenait, avec trois oeufs, 6 g de poudre lyophilisée. Contr6les bactériologiques du lyophilisat: - Mésophiles: Recherche sur bouillon nutritif et reensemencement sur gélose nutritive. - Entérobactéries: recherche sur bouillon au vert brillant, bouillon Drigalsky - repiquage en gélose de Mac. Conkey. - Staphylocoques pathogènes: recherche sur bouillon Giolitti-Cantoni. Repiquage sur Baird-Parker. - Salmonelles: recherche sur bouillon S B G sulfapyridine avec repiquage sur gélose D C L S. Recherche sur bouillon G N Hajna, repiquage sur gélose Hektoen. Résultat: Absence dans 25 g. Expérimentation chez l'homme et chez l'animal Les oeufs lyophilisés ont été absorbés dans un peu de lait froid le matin à jeun aux doses suivantes 1) - Chez l'animal (chien) 4 oeufs lyophilisés, soit 8 g de lyophilisat par jour, pendant 9 jours, arrêt 9 jours, reprise pendant 9 jours, puis, à la rechute, une nouvelle cure de 9 jours. 2) - Chez l'homme Première cure standard -. 8 g de poudre d'oeuf lyophilisé par jour, pendant 3 jours - 10 g de poudre d'oeuf lyophilisé par jour, pendant 3 jours - 12 g de poudre d'oeuf lyophilisé par jour, pendant 3 jours puis, après 9 jours d'arrêt, une cure identique ou avec augmentation d'l ou 2 oeufs par jour pour la deuxième cure, suivie d'une mini-cure de: - 8 g de poudre d'oeuf lyophilisé par jour, pendant 2 jours, - 10 g de poudre d'oeuf lyophilisé par jour, pendant 2 jours, - 12 g de poudre d'oeuf lyophilisé par jour, pendant 2 jours, avec reprise d'une cure à la rechute. Là aussi, les oeufs en poudre ont été absorbés addition- - nés à un peu de lait froid ou à une yogourth, voire purée ou jus de fruit, le tout sans alcool, ni traitement à la chaleur. Au cours de l'expérimentation humaine, parallèlement à la clinique, on a effectué avant tout traitement - Numération et formule sanguine, - dosage I G E globales et spécifiques, - test de dégranulation des basophiles (méthode de Benvéniste) à l'oeuf de caille et aux allergènes responsables des manifestations cliniques, - test cutané, - bilan fonctionnel. Il a été parallèlement effectué une étude toxicologique chez le rat albinos Wistar comparativement à une étude toxicologique de l'oeuf cru (immédiate et chronique). Enfin, on a étudié l'effet antihistaminique du lyophilisat d'oeufs de caille et son action sur la production des I G E chez les souris et les rats sensibilisés à l'ovalbumine. Résultats de l'expérimentation pharmacologique et clinique I. Toxicologie AigUe La toxicologie aigUe ne montre aucun effet toxicologique aigie chez le rat albinos aux doses préconisées de 5 oeufs (soit 10 g de lyophili- sat) par jour, contrairement à l'oeuf cru (problème purement mécanique). On ne note pas l'apparition de selles molles au deuxième jour, alors qu'on notait cette apparition avec l'emploi d'oeufs crus par doses fractionnées (50 % des rats traités comparativement aux témoins). Chronique On ne notait pas de toxicité chronique mise en évidence en surveillant le comportement, les selles, le poil. II. Résultats de l'étude pharmacologique chez l'animal a) Recherche effet antihistaminique On ne notait pas d'effet antihistaminique. Toutefois, sur l'animal traité préventivement on notait un effet protecteur variable sur l'hypotension et le bronchospasme histaminique (rats, souris, lapins, cobayes). b) Etude sur la production d'I G E Il y a une modification importante de la courbe de production d'I G E chez l'animal sensibilisé à l'ovalbumine, entre les rats témoins et les rats traités. En général, après l'administration du lyophilisat d'oeufs de cailles, on note une rupture brutale de la montée des I G E après un temps de latence de quelques jours (3 à 5 jours) III. Etude clinique A) Etude clinique sur le chien eczémateux avec pelade 1) Etude comparée avec l'oeuf cru et l'oeuf lyophilisé Exemple: Chien berger allemand atteint d'eczéma depuis deux ans, couvert de croûtes à la base du crâne, les reins, les flancs, la racine de la queue; le poil est complètement tombé, la peau est à vif. Un premier traitement est entrepris à base d'oeufs crus (4 oeufs/jour pendant 9 jours). Dès le 4e jour on observe une modification du comportement. Vers le 15e jour, il y a cicatrisation, début de repousse du poil, amélioration de la vitalité, de l'entrain. Une rechute se produit deux mois après. On administre la même quantité d'oeufs lyophilisés (soit 8 g/jour pendant 9 jours). Dans les jours qui suivent, on observe la chute des croates, une vitalité entièrement retrouvée et un très bel aspect du poil. Ce résultat est durable plusieurs mois (âge du chien il ans). 2) Traitement immédiat avec le lyophilisat Exemples a) Chien braque 10 ans - Eczéma généralisé, larges plaques, peau à vif depuis plusieurs mois. Animal abattu, sans vitalité, sans - appétit. Il reçoit 8 g de lyophilisat par jour pendant 8 jours arrêt du traitement 8 jours, puis reprise du même traitement pendant 8 jours. Dès le quatrième jour, on observe l'arrêt des démangeaisons avec reprise de l'appétit, puis progressivement la chute des croûtes et la repousse du poil. b) Epagneul 4 ans-asthme, toux, rhinite On commence le traitement avec 8 g de lyophilisat par jour, pendant 8 jours. Au 3e jour, on note l'aggravation des symptômes, suivie d'une atténuation progressive, avec rechute pendant la deuxième cure toujours au 4e jour, on observe la disparition des symptômes dès la fin de la deuxième cure. B) Etude clinique chez l'homme 1) Posologie Le lyophilisat fut administré aux doses indiquées ci-dessus et par cures de plusieurs jours interrompues par des périodes d'arrêt du traitement. 2) Indications thérapeutiques Allergies type I - Asthme allergique; rhinite non saisonnière et laryngite - pollinose; - urticaire aigu piqûre d'hyménoptères - troubes digestifs (oedème de Quincke-vomissements) - allergies médicamenteuses. Allergies Types III et IV (Eczéma) Affections non-allergiques - Sequelles hépatites et cirrhose - pelade; - ulcus gastro-duodénal - maladies auto immunes (P C E, lupus érithémateux) - baisse de la libido, impuissance altération de l'état général - diabète, céphalées. On note dans 80 % des cas (Maladies allergiques type I), une recrudescence de l'affection initiale entre le 3e et le 6e jour (ou parfois transformation asthme en eczéma par exemple) avec un résultat clinique (amélioration de 30 % à 100 % parfois), obtenu entre le 30e et 90e jour ayant suivi le début du traitement. Il est indispensable que le patient allergique reste en contact avec les allergies responsables pendant la durée du traitement. Dans l'asthme (60 % des cas traités), il est à noter que l'infection, l'état psychique, les composantes hormonales ne sont pas influencés par la prise d'oeufs de cailles lyophilisés, de même que les accès dus aux composantes asthmatiques(humidité, baisse de la pression atmosphérique). Effets secondaires - diarrhées vers le 3e, 4e jour, - céphalées, expectoration abondante mais ces phénomènes sont moins marqués qu'avec l'emploi d'oeufs crus. C) Résultats biologiques 1) Action sur les tests cutanés On note dans un premier temps une exacerbation des tests cutanés, puis lorsqu'ils sont répétés, un retour aux tests de départ. 2) Action sur les éosinophiles On note des variations du taux des éosinophiles avant et après traitement, avec parfois une augmentation initiale, suivie d'une chute quelques mois après le début du-traitement. 3) Action sur les I G E globales * Comme dans la thérapeutique par oeufs crus, il y*a de profondes modifications des I G E globales, mais dans un sens (augmentation parfois brutale coefficient 10) ou dans-l'autre (chute surtout lorsqu'elles sont pratiquées à intervalle lointain de la cure et lorsqu'elles sont très élevées au départ). Il semble qu'il y ait hausse initiale, puis chute du taux d'I G E. 4) Action sur les I G E spécifiques L'ensemble des résultats n'est pas significatif. Il a toutefois été noté des baisses du taux des-I G E spécifiques, mais de façon très lente et très progressive. ) Action sur le test de dégranulation des basophiles humains (méthode Benveniste) Dans plus de 75 % des cas on note la négativation ou l'amélioration d'un test de dégranulation des basophiles positif au départ, et ceci quelqu'en soit l'allergène (poussière de maison, poussières et moisissures, pollens de graminées, poils de chiens, chats, souris, plumes, candida albicans, lait, farine, nylon, tabac et nicotine). On a noté, dans de rares cas, une augmentation de la dégranulation lorsque le test est pratiqué trop t6t après le traitement. Des tests pratiqués au moment de la rechute clinique chez des malades pour lesquels les tests étaient négatifs après un premier traitement, deviennent de nouveau positifs, puis négatifs après une nouvelle cure. On peut donc conclure à une action immunologique de l'oeuf de caille lyophilisé qui modifie, dans des proportions importantes, le test de dégranulation des basophiles. 6) Action sur les autres constantes humorales On a noté des baisses du taux de la glycémie chez les diabétiques, de l'azotémie et de l'uricémie lorsqu'elles sont trop élevées et une augmentation nette des hématies. On a noté aussi la disparition de certaines glycosuries et de certaines albuminuries. Mode d'action: Nous retrouvons avec l'oeuf de caille lyophilisé à peu prés les mêmes résultats cliniques et biologiques constatés avec l'oeuf cru dans différentes affections, dont la maladie allergique. L'amélioration, peut être moins nette, est compensée par une meilleure tolérance et moins d'effets secondaires et permet d'augmenter la posologie. On retrouve 1) Nécessité de la présence de l'allergène ou des allergènes durant le traitement 2) effet semi-retard avec exacerbation des signes cliniques pendant la cure (3e au 5e jour dans la majorité des cas); 3) pas de guérison définitive; le traitement nécessite des apports nouveaux en oeufs lyophilisés à la rechute; 4) aucune action antihistaminique directe tant chez l'homme que chez l'animal ) aucune action préventive contrairement à ce qui se passe avec les allerglobulines ou les corticoides 6) la possibilité de vivre avec le ou les allergènes responsables après le traitement pendant des périodes plus ou moins longues, sans manifestation clinique ou des manifestations diminuées (rhinite à la place d'asthme par exemple). L'ensemble des observations cliniques et biologiques nous amènent à la conclusion qu'est présent,.dans l'oeuf Lyophilisé, un principe du type "adjuvant" capable de modifier la réponse immunitaire. Nous avons constaté (clinique, tests cutanés, éosinophiles, I G E globales, voire test de dégranulation effectué trop tôt après le traitement) une immunostimulation suivie, le mois suivant, d'une immunodépression spécifique (clinique, test de dégranulation des basophiles, voire RAST) induisant une pseudotolérance (ou paralysie immunitaire) ou une tolérance partielle spécifique aux allergènes présents pendant le traitement. Le déficit immunitaire parait comblé provisoirement par l'apport d'oeufs lyophilisés, déficit qui se creuse de nouveau, mais que l'on peut combler indéfiniment. Le mode d'action consisterait donc en 1) Stimulation des lymphocytes T suppresseurs: Résultats cliniques obtenus dans des affections aussi différentes que l'asthme, l'eczéma atopique, la pelade, le psoriasis, dont le point commun serait un déficit en lymphocytes T suppresseurs. 2) Inhibition de la production des IGE par la présence au sein de l'oeuf de caille lyophilisé de-trois anti-protéases à activité anti-trypsine humaine, tout au moins pour l'ovomucolde et l'ovo- inhibiteur. 3) Action antigène atopique provoquant dans un premier temps un conflit antigène-anticorps, puis un blocage - inhibition des anticorps préexistants (effet tachyphylaxique). En conclusion, aprè.s expérimentation humaine et animale l'oeuf de caille lyophilisé, qui présente un mode d'action immunolo- gique, peut être utilisé comme médicament chez l'homme comme chez l'animal, dans des affections bien déterminées, telles qu'allergies des types 1,, III et V et également de certaines affections non- allergiques. Les préparations pharmaceutiques se présentent sous toutes formes destinées à la voie orale, et contiennent, par dose unitaire, de 2 à 10 g de lyophilisat, qui correspondent à 1 à 5 oeufs lyophilisés. En outre, il est possible d'ajouter au lyophilisat d'oeuf de caille certaines substances lipotropes telles que la méthionine, destinées à favoriser la tolérance hépatique, ou des vitamines destinées à faciliter le traitement de certaines carences. Sont à l'étude actuellement l'adjonction d'antihistaminique& et de corti- cordes, destinés à réduire les effets secondaires. D'autre part, la présence de l'allergène étant indispen- sable à la réussite du traitement, il sera possible d'incorporer, à dose non toxique, les allergènes dans la poudre d'oeuf, dans la mesure oỉ ces allergènes seront identifiés chez le malade. REVENDICATIONS 1. A titre de médicament,'notamment pour le traitement des maladies allergiques, le lyophilisat d'oeufs de cailles de la souche MINA B élevée à Le Vergeroux (Charente Maritime) et provenant d'un croisement de Coturnix-coturnix-coturnix et de Coturnix-coturnix- japonica. 2. Les compositions pharmaceutiques, destinées à l'admiinis- tration par voie orale, caractérisées en ce qu'elles contiennent le lyophilisat selon la revendication 1 à la dose unitaire de 2 h 10 g, qui correspond à une dose de 1 à 5 oeufs lyophilisés. 3. Les compositions pharmaceutiques contenant le lyophilisat selon la revendication 1, associé à un agent lipotrope tel que la méthionine, ou à des agents antihistaminiques, ou à des corticoldes.