Brevet FR2458540A1 — publié le 19810102

La présente invention est relative à de nouveaux dérivés de l'encéphaline, à leurs sels et à un procédé de préparation de ces dérivés. Les nouveaux composés répondent à la formule géné- rale (I) ci-après: H2N-C(NH)-tyr-A-gly-phe-B (I) dans laquelle: tyr, gly et phe représentent des groupes L-tyrosine, glycine, et L-phénylalanine respectivement, A représente un groupe alkyle comportant de 1 à 4 atomes de carbone ou un groupe thio- alkyl-D-oCd-aminoacide comportant de I à 4 atomes de carbone et, B représente un groupe amine ou un groupe L- proline-amine. Les notations tyr, gly et phe sont usuelles dans la Littérature en la matière [par exemple J. Biol. Chem. 247, 977 (1972)] pour désigner les aminoacides. Il est connu que l'activité du type de la morphine, c'est-à-dire l'activité d'opiates de la méthionine- encéphaline et de la leucine-encéphaline qui existent dans la nature (cf. [Hughes entre autres: Nature 258, 577 (1975)] qui sont des peptides qui présentent la structure tyr -gy- gy-p4he- m5et ou tyr- gy - gly - pe 15eu) peut être augmentée par une substitution appropriée des résidus aminoacides en 2-gly et en 5-met ou en 5-leu respectivement. En introduisant le groupe D-méthionine en position 2 et le groupe Lproline-amide en position 5,l'on obtient l'un des analogues de l'encéphaline le plus actif, à savoir le penta- peptide-amide de structure tyr-D-met-gly-phe-pro-NH2 (cf. le Brevet Belge n 858 453). La présente invention a pour but de préparer de nouveaux dérivés de l'encéphaline, dont l'activité d'opiates est plus grande que celle des substances connues à ce jour. La Demanderesse a trouvé, à présent, que l'activi- té d'opiates des analogues de l'encéphaline très actifs - 2 - obtenus par échange de l'aminoacide, peut encore être aug- mentée si l'on incorpore au groupe amine terminal un groupe amidino-, c'est-à-dire si l'on prépare des analogues de peptides qui comportent un groupe guanidine terminal. L'ac- tivité opiacée plus grande des composés obtenus de cette ma- nière, qui répondent à la formule générale (I), peut être démontrée à l'aide de tous les tests usuels à cet effet, par exemple sur l'iléon du cobaye (guinea pig ileum, GPI) [Kosterlitz et Watt: Br. J. Pharmacol. 33, 266 (1968); Kosterlitzet Alia: Br. J. Pharmacol. 39, 398 (1970)] et sur une préparation de canaux d'émission de sperme de la souris [cf. Hughes et Alia: Br. J. Pharmacol. 53, 371 (1975]. Le Tableau 1 qui va suivre indique les activités d'opiates de quatre analogues comportant un groupe guani- dine terminal et de leurs analogues comportant un groupe -NH2 terminal. Les valeurs représentent des activités rela- tives rapportées à la normorphine (activité de la normorphine = 1). Pour plus de clarté on a indiqué chaque fois sous le composé conforme à l'invention, le peptide non substitué. - TABLEAU 1 Composé H2N-C(NH)-tyr-D-met-gly-phe-pro-NH2 H-tyr-D-met-g ly-phe-pro-NH2 H2N-C(NH) -tyr-D-met-gly-phe-NH2 H-tyr-D-met-g ly-phe-NH2 H2N-C(NH) -tyrD-Nle-gly-phe-NH2 H-tyr-D-Nle-gly-phe-NH2 H2N-C(NH)-tyr-D-Nle-gly-phe-proNH2 H-tyr-D-Nle-gly-phe-pro-NH2 Activité GPIa GPIb GPIab MVDc 823 173 211 79 126 79 79 21 8 8 17 4 22 8 12 10 GPIa: selon Kosterlitz et Watt [Br. (1968)] b GPI: selon Kosterlitz et Alia 39, 398 (1970)] MVDC : selon Hughes et Alia 371 (1975)]. J. Pharmacol. 33, 266 : [Br. J. Pharmacol. Br. J. Pharmacol. 53, : [ -3Le résultat obtenu par introduction d'un groupe guanidine sur le N-terminal est surprenant, car c'est juste- ment cette partie de la molécule d'encéphaline qui est la plus fragile et toute intervention sur le groupe amine terminal (par exemple son élimination, son acylation ou sa dialkylation entrainent généralement un abaissement ou la perte de l'activité morphinique [cf. par exemple, à ce su- jet Morgan et Alia: Communications, J. Pharm. Pharmac. 28, 660 (1976)]. Les composés de formule générale (I) dans les- quels B représente un groupe amine, exercent, lorsqu'ils sont administrés par voie systémique dans le test d'Amour- Smith [J. Pharm. Ther. 72, 74 (1941)],une action calmante plus puissante que la morphine. Au cours de ses propres recherches, la Demanderes- se a pu établir que les composés de formule générale (I) modifient la teneur en catécholamine du noyau de l'Amygdala centralis de façon sélective. Comme ce groupe nucléique pré- sente une teneur élevée en encéphaline et une densité élevée de récepteurs d'opiates,et qu'ils ne constituent pas une par- tie du système qui exerce une influence spécifique sur la sensation de douleur, l'on peut s'attendre à ce que les com- posés de formule générale (I) exercent une influence spéci- fique sur les fonctions suivantes: absorption de nourriture, émotionnalité, comportement social, processus d'acquisition de connaissances,mémorisation. La présente invention a en conséquence pour objet un procédé de préparation de nouveaux dérivés de l'encépha- line qui répondent à la formule générale (I) dans laquelle la signification de tyr, gly, phe, A et B est la même que ci-dessus, à partir des peptides qui contiennent un groupe amine terminal, de la série correspondante d'amino- acides. Ce procédé est caractérisé en ce que l'on transfor- me d'une manière connue en elle-même le groupe amine termi- nal en un groupe guanidine et en ce que, le cas échéant, l'on ferme un sel à partir du produit obtenu. Selon un mode de réalisation préféré du procédé qui fait l'objet de la présente invention, l'on fait réagir -4 - les peptides de départ à une température comprise entre et 80 C, avec 1,1-2,0 équivalents d'acétate de 1-amidino- 3,5-diméthylpyrazole, en présence de 1,1-2,0 équivalents d'une trialkylamine, le milieu réactionnel étant un alcool inférieur anhydre ou un alcool inférieur en solution aqueu- se, et en ce que la concentration dans le milieu réactionnel est de 1-1,1 mmole/ml. L'on évapore ensuite la solution, on sépare le peptide qui comporte un groupe guanidine sur le Nterminal et on le transforme, le cas échéant, en un sel. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre. L'invention sera mieux comprise à l'aide du com- plément de description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la présente invention. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples de mise en oeuvre, sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne cons- tituent en aucune manière une limitation. Dans les exemples qui vont suivre, les valeurs Rf qui sont indiquées, ont été obtenues sur du gel de silice de Marque "KIESELGEL G" (produit par Reanal, Budapest) par chromatographie en couche mince, en utilisant les mélan- ges de solvants suivants-: I. Acétate d' éthyle-pyridine-acide acétiqueeau 480:20:6:11 2.Acétate d'éthyle-pyridine-acide acétique-eau 240:20:6:11 3 Acétate d'éthyle-pyridine-acide acétique-eau 60:20:6:11 4. Chloroforme-méthanol 9: 1 5. Chlorure de méthylène-solution aqueuse à 25% d'amoniaque-méthanol 12:3: 8 -5 - Exemple I Amidino-L-tyrosyl-D-méthionyl-glycyl-L-phényl- alanyl-L-proline-amide (Composé de formule générale (I) dans laquelle A = résidu D-méthionine et B = résidu L-proline- amide). 1ère étape: acétate de 1-amidino-3,5-diméthyl- pyrazole. L'on dissout, sous agitation, 1,1 g (100 mmoles) de nitrate de 1-amidino-3,5-diméthyl-pyrazole [Thiele et Dralle: Ann. 302, 294 (1898)], dans un mélange de 110 ml de lessive de soude N et 200 ml de chlorure de méthylène. On sépare la phase organique, on la sèche sur du sulfate de sodium, on lui ajoute 6 ml d'acide acétique, puis on l'éva- pore sous pression réduite. Le résidu cristallin est mis en sus. pension dans du diéthyléther, séparé par filtration, lavé au diéthyléther, puis séché. On obtient 18,25 g (92 %) d'un produit qui fond 114-116 C. Analyse pour C8012024 (M = 198,2) Calculé: C = 48,47 % H = 7,12 % N = 28, 27 % Trouvé: C = 48,6 % H = 7,1 % N = 28,5 %. 2ème étape: Acétate d'amidino-L-tyrosyl-D-méthionyl- glycyl-L-phénylalanyl-L-proline-amide hydraté On dissout 1,45 g (2 mmoles) d'acétate de L- tyrosyl-D-méthionyl-glycyl-L-phénylalanyl-L-proline-amide trihydraté (cf. le Brevet Belge n 858 453) et 0,5 g (2,52 mmoles) d'acétate d'1-amidino3,5-diméthyl-pyrazole (obtenu dans l'Exemple 1, première étape), dans 2 ml d'étha- nol. L'on ajoute 0,4 ml (2,86 mmoles) de triéthylamine à cette solution et on la maintient pendant quatre heures à 60-70 C. On dilue ensuite le mélange réactionnel par 30 ml d'acétate d'éthyle, on sépare par filtration le précipité qui s'est déposé, on le lave à l'acétate d'éthyle et on le sèche sous vide. On obtient 0,58 g (80 %) du produit re- cherché,qui présente les caractéristiques suivantes: R5: 0,63-0,68; [OC] 20 = +4 (c = i; acide acétique N) 033H4898S 732,844 - 6- Exemple 2 Amidino-L-tyrosyl-D-méthionyl-glycyl-L-phényl- alanine-amide (composé de formule générale (I) dans laquel- le A = un résidu D-méthienine et B = un groupe amine). 1ère étape: tert.-butyloxycarbonyl-D-méthionyl- glycyl-L-phénylalanineamide On dissout 5,35 g (15 mmoles) de benzyloxycarbonyl- glycyl-L-phénylalanine-amide [Fruton et Bermann: J. Biol. Chem. 145, 253 (1942)] dans 100 ml de méthanol et l'on pro- cède à leur hydrogénation en présence de charbon actif palladié. Une fois la réaction terminée, le catalyseur est séparé par filtration, lavé au méthanol, puis le méthanol de lavage est réuni au filtrat et ce dernier est évaporé sous pression réduite. Le glycyl-L-phénylalanineamide obtenu en tant que résidu d'évaporation (Rf: 0,19-0,29) est dissous en même temps que 6,43 g (15 mmoles) de 2,4,5-trichlorophénylester de tert.-butyloxycarbonyl-D-méthionine [Broadbent, et Alia: J: Chem. Soc., 1967, 2632], dans 30 ml de pyridine. On laisse reposer la solution pendant une nuit, puis on l'é- vapore sous pression réduite. Le résidu est trituré avec % de mercaptoéthanol, puis séparé par filtration, lavé par du diéthyléther et séché. On obtient 5,1 g (75 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: Rf: 0,70-0,77. C21H3205N4S = 452,564. 2ème étape: Chlorhydrate de D-méthionyl-glycyl- L-phénylalanine-amide. On met 4,52 g (10 mmoles) du tripeptide-amide protégé (de la 1ère étape) en suspension dans 20 ml d'acétate d'éthyle et l'on ajoute,sous agitation et sous refroidis- sement à l'aide de glace, 40 ml d'acétate d'éthyle conte- nant 11 à 15 % d'acide chlorhydrique, à cette suspension. L'on agite pendant une heure le mélange réactionnel, puis on le dilue par 60 ml d'acétate d'éthyle, on sépare par filtration le précipité qui s'est déposé, on le lave à l'acétate d'éthyle, et on le sèche sous vide, sur de l'hydroxyde de potassium. On obtient 3,7 g (95 %) d'un pro- duit qui présente les caractéristiques suivantes: -7- Rf: 0,50-0,55. C16H2503N4SCl = 388,915. 3ème étape: tert.-butyloxycarbonyl-L-tyrosyl- D-méthionyl-g lycyl-L-phérnylalanine-amide On dissout 1,4 g (5 mmoles) de tert.-butyl- oxycarbonyl-L-tyrosine [Anderson et Me Gregor: J. Am. Chem. Soc. 79, 6180 (1957)] dans 10 ml de diméthylformamide. On refroidit la solution à -15 C. A cette température on ajoute, sous agitation, 0,6 ml (5 mmoles) de N-méthyl- morpholine et 0,7 ml (5 mmoles) d'isobutylester de l'acide chlorocarbonique. Après avoir agité pendant 10 minutes, on ajoute au mélange réactionnelUne suspension refroidie à -15 C, d'1,95 g (5 mmoles) de chlorhydrate de tripeptide- amide (de la 2ème étape) et de 0,7 ml (5 mmoles) de triéthyl- amine dans 10 ml de diméthylformamide. Le mélange réaction- nel est agité à -15 C pendant deux heures, à 0 C pendant une heure, puis évaporé sous pression réduite. Le résidu d'évaporation est trituré avec de l'eau, filtré, lavé à l'eau, séché, puis recristallis6 dans 30 ml d'acétate d'éthyle bouillant. On obtient 2,15 g (70 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: Rf: 0,64-0,68. C30H41O7 5S = 615,734. C30 4107N5S' 4ème étape: acétate de L-tyrosyl-D-méthionyl- glycyl-L-phénylalianine-amide hydraté. On met 1,85 g (3 mmoles) du tétrapeptide-amide (obtenu lors de la 3ème étape de l'Exemple 2) en suspen- sion dans 5 ml d'acétate d'éthyle et on lui ajoute, sous agitation et refroidissement à l'aide de glace, 15 ml d'acétate d'éthyle contenant 11 à 15 % d'acide chlorhydrique. Le mélange réactionnel est soumis à agitation pendant une heure, puis dilué par 20 ml d'acétate d'étyle. On sépare par filtration le précipité qui s'est déposé, on le lave à l'acétate d'éthyle, puis on le sèche. Le produit obtenu est dissous dans 10 ml d'eau et la solution est placée sur ml de résined'échangeuse d'anions acétate(AG 1-X2, Bio- Rad, Richmond, Californie). La résine est lavée avec 80 ml d'eau, puis on lyophilise les solutions aqueuses. On obtient - 8 - 1,07 g (60 %) d'un produit qui présente les caractéristi- ques suivantes: Rf: 0,55-0,60; Rf: 0,89-0,97 []0 = + 82 (c=1; acide acétique). C27H390N5S = 593,688. 27 39 8 5 ème étape: acétate d'amidino-L-tyrosyl-D- méthionyl-glycyl-Lphénylalanine-amide hydraté On dissout 0,6 g (1 mmole) de tétrapeptideamide hydraté (obtenu dans la 4ème étape de l'Exemple 2) et 0,24 g (1,2 mmole) de dérivé du pyrazole (obtenu au cours de la 1ère étape de l'Exemple 1) dans 2 ml d'éthanol. On ajoute 0,2 ml (1,2 mmole) de triéthylamine à la solution,puis on la maintient pendant cinq heuresà 60 C. On concentre ensuite la solution sous pression réduite, après quoi on la dilue par environ 20 ml d'acétate d'éthyle. On sépare par filtration le produit qui s'est déposé, on le lave à l'acétate d'éthyle, on le sèche, puis on le dissout dans 10 ml d'eau et on lyophilise la solution. On obtient 0,51 g (80 %) d'un pro- duit qui présente les caractéristiques suivantes: R3: 0,54-0,59; 5: 0,650,70; [OC]20 = 40,5 (c=l; Kf- - fi D- acide acétique N). C28H41o8 7S 635,730. Exemple 3 Amidino-L-tyrosyl-D-norleucyl-glycyl-L-phényl- alanine-amide (composé de formule générale I dans laquel- le A = résidu D-norleucyle et B = groupe amine) 1ère étape: benzyloxycarbonyl-D-norleucyl-glycyl- L-phénylalanine-amide On dissout 3,98 g (15 mmoles) de benzyloxy- carbonyl-D-norleucine [Izumiya, et Alia: J. Chem. Soc. Japan 79, 420 (1958)] dans 15 ml de diméthylformamide. On refroidit la solution à -15 C. On ajoute à cette solu- tion, sous agitation et à cette température, 1,7 ml (15 mmoles) de Nméthylmorpholine et 2,0 ml (15 mmoles) d'isobutylester de l'acide chlorocarbonique.Après agitation pendant 10 minutes, on ajoute au mélange réactionnel une solution préparée comme suit: on hydrogène 5,35 g (15 mmoles) de benzyloxycarbonyl- - 9 - glycyl-L-phénylalanine-amide [Fruton et Bergmann: J. Biol. Chem. 145, 253 (1942)] dans 100 ml de méthanol, en présence de charbon actif palladié, puis on sépare le catalyseur par filtration, on évapore le méthanol sous pression réduite et on dissout le résidu dans 15 ml de diméthylformamide. Le mélange réactionneladditionné de cette solution est refroidi à -15 C et soumis à agitation à cette tempéra- ture pendant deux heures, puis à OC pendant une heure, après quoi il est évaporé sous pression réduite. Le résidu est ensuite trituré avec de l'eau, filtré et séché. Le pro- duit est recristallisé dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole. Le rendement est de 5,0 g (70 %). Rf: 0,75-0,80. C25H3205N4 = 468,538. 2ème étape: chlorhydrate de D-norleucyl-glycyl- L-phénylalanine-amide On dissout 4,7 g (10 mmoles) du tripeptide-amide protégé (obtenu au cours de la 1ère étape) dans un mélange de 50 ml d'éthanol et de 50 ml de diméthylformamide. On ajou- te 10 ml d'acide chlorhydrique normal à cette solution et on l'hydrogène en présence de charbon actif palladié. Une fois la réaction terminée, le catalyseur est séparé par fil- tration et lavé à l'aide de diméthylformamide. Le filtrat est réuni au liquide de lavage et il est évaporé. Le résidu d'évaporation est trituré avec de l'acétate d'éthyle, filtré et lavé à l'acétate d'éthyle. On obtient 3,05 g (82 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: R3: 0,45-0,55. C17H2703N4C1 = 370,875. 3ème étape: Tert.-butyloxycarbonyl-L-tyrosyl- D-norleucyl-glycyl-L-phénylalanine-amide On condense 1,4 g (5 mmoles) de tert.-butyloxy- carbonyl-L-tyrosine et 1,85 g (5 mmoles) de chlorhydrate de tripeptideamide (obtenu au cours de la 2ème étape) comme décrit dans la 3ème étape de l'Exemple 2. On obtient 1,94 g (65 %) d'un produit qui présente les caractéristiques sui- vantes: - 10 - Rf: 0,70-0,75. C31H4307N5 = 597,694. 4ème étape: acétate de L-tyrosyl-D-norleucyl- glycyl-L-phénylalanine-am'ide hydraté On fait réagir 1,8 g (3 mmoles) du tétrapeptide protégé (obtenu au cours de la 3ème étape) comme décrit dans la 4ème étape de l'Exemple 2. On obtient 1,12 g (65 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: 3 5 [O]20 Rf: 0,60-0,65; Rf: 0,9-0,95; D = 80,5 (c = 1; acide acétique N) C28H41o8 5 575,648. ème étape: acétate d'amidino-L-tyrosyl-D- norleucyl-glycyl-Lphénylalanine-amide hydraté On fait réagir comme décrit dans la 5ème étape de l'Exemple 2, 0,58 g (1 mmole) de l'acétate de tétrapeptide- amide hydraté obtenu dans la 4ème étape. On obtient 1,39 g (75 %) d'un produit qui présente les caractéristiques sui- vantes: R5: 0,62-0,70; [C] = +40,5 (c = 1; acide acétique N) f D C29e4308N7 =-617,690. Exemple 4 Amidino-L-tyrosyl-D-norleucyl-glycyl-L-phényl- alanyl-L-proline-amide (composé de formule générale I dans laquelle A = groupe D-norleucyle et B = groupe L-proline- amide) lère étape: Benzyloxycarbonyl-D-norleucyl-glycyl- L-phénylalanyl-L-proline On dissout 7,95 g (30 mmoles) de benzyloxycarbonyl- D-norleucine [Izumiya, et Alia: J. Chem. Soc. Japan 79, 420 (1958)] et 5, 95 g (30 mmoles) de 2,4,5-trichlorophénol, dans 60 ml d'acétate d'éthyle, et on refroidit dans de l'eau glacée. On ajoute à la solution refroidie, 5,8 g (28 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide. Au bout de deux heures, on sépare par filtration le dicyclohexylcarbamide qui s'est déposé et on évapore la solution sous pression réduite. Le résidu est recristallisé dans du n-hexane, sé- paré par filtration, lavé à l'aide de n-hexane et séché à l'air. L'ester actif obtenu de cette manière (9,35 g = 75 %; - 11 - R4: 0,82-0,92) est dissous dans 40 ml de pyridine. On ajou- te à cette solution, 6,4 g (20 mmoles) de glycyl-L-phényl- alanyl-L-proline (cf. Brevet Belge n 858 453) et 2,8 ml (20 mmoles) de triéthylamine. L'on soumet le mélange réac- tionnel à agitation pendant une nuit à la température am- biante. On évapore ensuite le mélange et on dissout le rési- du dans un mélange de 50 ml de diéthyléther etde 50 ml d'une solution à 5 % de carbonate acide de sodium. La phase aqueu- se est lavée à deux reprises par 30 ml de diéthyléther, puis acidifiée à pH 3 à l'aide d'acide sulfurique normal. Le pro- duit qui se sépare est secoué à trois reprises avec 50 ml * d'acétate d'éthyle. Les phases organiques réunies sont la- vées à deux reprises par 20 ml d'eau, séchées sur du sulfate de sodium, puis évaporées sous pression réduite. Le résidu est trituré avec du cyclohexane, filtré, lavé avec du cyclo- hexane, puis séché. On obtient 9,97 g (88 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: R2f: 0,28-0,38. C30oH3807N4= 566,636 2ème étape: Benzyloxycarbonyl-D-norleucyl-glycyl- L-phénylalanyl-L-proline-amide On dissout 8,5 g (15 mmoles) du tétrapeptide pro- tégé obtenu au cours de la 1ère étape, dans 30 ml de tétra- hydrofurane. On refroidit la solution à -15 C. A cette tem- pérature, on ajoute, sous agitation, 1,7 g (15 mmoles) de Nméthylmorpholine et 2,0 ml (15 mmoles) d'isobutylester de l'acide chlorocarbonique, puis, après 10 minutes d'agi- tation, encore 8 ml d'une solution aqueuse d'anpfniaque à 20-25 %, refroidie à 5 C. Le mélange réactionnel est agité pendant une heure en- core à des taepératures inférieures a 0 C, puis le tétrahydrofurane est éliminé du mélange réactionnel par distillation sous pression réduite. On ajoute au résidu, 20 nl d ' e a u et ml d'acétate d'éthyle et l'on sépare les phases l'une de l'autre. La phase aqueuse est lavée avec 20 ml d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont réunies et lavées à trois reprises par 20 ml d'eau. Après séchage sur du sul- fate de sodium, la solution est évaporée sous pression ré- duite. Le résidu est trituré à l'aide de diéthyléther, fil- tré, lavé avec du diéthyléther,puis séché. On obtient 9,3 g - 12 - (91 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: Rf: 0,40,5 C H O N5 565,5 H9065- 565,652 3ème étape: D-norleucyl-glycyl-L-phénylalanyl- L-proline-amide On dissout 5,66 g (10 mmoles) du tétrapeptide- amide obtenu conformément à la 2ème étape,dans 100 ml de méthanol et on hydrogène en présence de charbon actif palladié. Une fois la réaction terminée, le catalyseur est séparé par filtration, lavé au méthanol et le liquide de la- vage est réuni au filtrat. La solution méthanolique est éva- porée sous pression réduite. Le résidu est trituré avec du diéthyléther, puis filtré, lavé avec du diéthyléther et fi- nalement séché. On obtient 3,7 g (85 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: R3: 0,38-0,48. C22H3304N5 = 431,524 4ème étape: tert.-butyloxycarbonyl-L-tyrosyl-D- norleucyl-glycyl-L-phénylalanyl-L-proline-amide On-condense comme décrit dans la 3ème étape de l'Exemple 2, 1,4 g (5 mmoles) de tert.-butyloxycarbonyl-L- tyrosine et 2,16 g (5 mmoles) du tétrapeptide-amide obtenu conformément à la 3ème étape, à la différence près que l'on n'ajoute pas de triéthylamine à la solution de l'amine pré- parée avec du diéthylformamide. On obtient 3,0 g (86 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: Rf: 0,4-0,5. C3 6H50 8N6 = 694,808 5ème étape: acétate de L-tyrosyl-D-norleucyl- glycyl-L-phénylalanyl-L-proline-amide hydraté L'on fait réagir 2,1 g (3 mmoles) du penta- peptide-amide protégé obtenu conformément à la 4ème étape, en procédant comme décrit dans la 4ème étape de l'Exemple 2. On obtient 1,45 g (72 %) d'un produit qui présente les caractéristiques suivantes: R3f: 0,47-0,52; Rf: 0,92-0,98; [d2= +26 (c=1; acide acétique N) - 13 - C33H48O9N6 = 672,762 6ème étape: acétate d'amidino-L-tyrosyl-D- norleucyl-glycyl-L-phénylalanyl-L-proline-amide hydraté On fait réagir-O, 7 g (1 mmole) de l'acétate de pentapeptide-amide hydraté obtenu au cours de la 5ème étape, en procédant comme décrit à la 5ème étape de l'Exemple 2. On obtient 0,57 g (80 %) d'un produit qui présente les ca- ractéristiques suivantes: 3 5 2c Rf: 0,33-0,43; Rf: 0,65-0,75; D= + (c = i; acide acétique N). C34 5009 8 714,804. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'inven- tion ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite; elle en embrasse, au con- traire, toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. - 14 - REVENDICATIONS 1o) Dérivés de l'encéphaline caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale (I) ci-après: H2N-C(NH) -tyr-A-gly-phe-B (I) dans laquelle tyr, gly et phe représentent des groupes L-tyrosine, glycine et L-phénylalanine respectivement, A représente un groupe alkyle comportant de 1 à 4 atomes de carbone ou un groupe thio- alkyle-D-C-aminoacide comportant de 1 à 4 atomes de carbone,et B représente un groupe amine ou un groupe L-proline-amide, ainsi que les sels de ces composés. 20) Dérivé de l'encéphaline selon la Revendica- tion1,caractérisé ence qu'il est constitué par l'amidino-L- tyrosyl-D-méthionyl-glycyl-L-phénylalanyl-L-proline-amide et ses sels. 3 ) Dérivé de l'encéphaline selon la Revendica- tion 1, caractérisé en ce qu'il est constitué par l'amidino- L-tyrosyl-D-méthionyl-glycyl-L-phénylalanine-amide et ses sels. 4 ) Dérivé de l'encéphaline selon la Revendica- tion 1, caractérisé en ce qu'il est constitué par l'amidino- L-tyrosyl-D-norleucyl-glycyl-L-phénylalanine-amide et ses sels. ) Dérivé de l'encéphaline selon la Revendica- tion 1, caractérisé en ce qu'il est constitué par l'amidino- L-tyrosyl-D-norleucyl-glycyl-L-phénylalanyl-L-proline- amide et ses sels. 6 ) Procédé de préparation des nouveaux dérivés de l'encéphaline de formule générale (I) selon la Revendi- cation 1 et de leurs sels, à partir des peptides de la sé- rie des aminoacides correspondants, qui contiennent un groupe amine terminal, lequel procédé est caractérisé en ce que l'on transforme le groupe amine terminal du peptide en un groupe guanidine, d'une manière connue en elle-même, et en ce que l'on forme, le cas échéant, un sel à partir du produit obtenu. - 15 - ) Médicaments caractérisés en ce qu'ils contien- nent des dérivés de l'encéphaline de formule générale (I) selon la Revendication 1, ou leurs sels. ) Procédé de préparation de médicaments selon la Revendication 7, notamment de médicaments actifs à l'é- gard du système nerveux central, caractérisé en ce que l'on mélange un ou plusieurs composés de formule générale (1) se- lon la Revendication 1, avec des supports et/ou des adjuvants usuels en pharmacie, et en ce que l'on met ce mélange, d'une manière connue, sous forme de médicaments, et notamment de solutions pour injections, de comprimés, de dragées, de cap- sules.