Brevet FR2437833A1 — publié le 19800430

La présente invention concerne le traitement des affections fongiques de l'homme et d 'autres mammiferes provoquées par des champignons tels que Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Torulopsis, Candida tropicalis, Penicillium et d'autres champignons pathogènes notamment pour l'homme. On sait que les champignons ont besoin d'ions zinc pour effectuer le processus métabolique secondaire nécessaire à leur croissance et on a observe que certains états physiologiques et pathologiques chez l'homme sont caractérisés par des accroissements localises particuliers des ions zinc disponibles sous diverses formes; voir Eugène 0. Weinberg, "Infectious diseases influenced by trace element environment", Annal ouf té New York Academy of Sciences,/ol.199,p.274-284, 28 juin 1972. La demanderesse a découvert que l'åpplication de sels solubles dans l'eau de l'acide éthylènediaminetétracétique (EOIA à des cultures de champignons ou à des tissus infectes par les champignons, inhibe le développement des champignons. Sien que toutes les formes non toxiques solubles dans l'eau des agents chélatants aient des propriétés fongistatiques lorsqu'on les utilise à la concentration appropriée, la forme cationique préférée de l'agent chélatant utilisée chez l'homme est le complexe formé avec le cation calcium. La demanderesse a découvert que les sels d'EDTA présentent une bonne activité fongistatique dans la gamme de 5 à 10 % et plus, bien que la limite de la- concentration dépende de la sensibilité des tissus aux concentrations plus élevées. Des agents chélatants particuliers, ayant des constantes de sta bilié Ccette valeur indique la force de la liaison au métal) supérieures à celle de l'acide éthylènediaminetétracétique, tels que l'acide ci l'acide diéthylènetriaminepenta-acétique et l'acide diamine 1,2 cyclohexane N,N'-tétra-acétique, présentent également une bonne activite fongistatique à une concentration de l'ordre de 2% ou plus. L'agent antifongique doit avoir une constante de stabilité- vis-à-vis des ions zinc comprise dans la gamme de 14,5 à 18,7. La "constante de stabilit" exprime la résistance de la liaison particulière formée dans le complexe métallique entre l'agent sequestrant et l'ion métallique.Elle dérive de certains resultats établis au laboratoire et on la calcule à partir d'une formule mathématique et on peut à cet égard consulter S. Chaberek A.D. Martell, "Organic Sequestering Agents", New York, Wiley.1959 où figure dans un tableau une liste très importante d'agents séquestrants et de leurs constantes de stabilité vis-à-vis de divers métaux, y compris le zinc. Les agents chelatants indiqués particulièrement dans la présente description figurent dans le tableau de l'ouvrage de Chaberek et coll. et présentent des constantes de stabilité comprises entre 14,5 et 18,7. Le pouvoir chélatant de l'agent sequestrant s'accroit lorsqu'on maintient un pH alcalin compris dans la gamme de 7 à 10. Cependant on peut egalement utiliser un pH acide, par exemple un pH compris entre 4,5 et 7.Des agents chélatants appropriés, en plus de ceux précités, sont l'acide éthylène bisN,N'(amino-2 méthyl)pyridine N,N'-diacétique, l'acide F -mercaptoéthyliminodiacétique, la tétrakis tamino-2 éthyl)éthylènediamine, la ss,ss'ss"-triatinotriéthylamine, l'acide N-hydroxyéthyléthylènediaminetriacétique, l'acide éthylènediamine N,N-dipropionique N,N'-diacétique et les acides aminocarboxyliques ayant une constante de stabilité de 14,5 ou plus vis-à-vis des ions zinc. On utilise normalement les composés sous forme de leurs sels non toxiques, par exemple les sels de métaux alcalins et alcalino-terreux tels que le sodium ou le potassium ou les sels de calcium. On peut également utiliser des sels-mixtes. Le sel que l'on préfère actuellement est le sel de calcium et de disodium de 1'EDTA. Ce sel est également connu sous le nom d'édétate de calcium et de disodium. L'édétate de calcium et de disodium est présent dans trois spécialités pharmaceutiques Soyle Company de Los Angeles (a) Poudre "Triva" : chaque dose renferme 0,33 % d 'édétate de disodium et de calcium dans 3 g de poudre à diluer avant l'emploi dans environ 1 litre d'eau. (b) "Triva Jel" : la dose de 5 000 mg de gelée appliquée con tient 2,5 mg d'édétate de disodium et de calcium. Schmidt Laboratories de Little Falls, New Jersey (a) "Vagisec" liquide : la quantité d'édétate de disodium et de calcium ne figure pas dans le "Physicians Desk Refe rence" (POR), mais chaque dose correspond à 5 cm3 de li quide à diluer dans environ 1 litre d'eau. (b)Ovules "Vagisec plus" : chaque dose continent o,n22 % d'é- détate de disodium et de calcium par ovule de 3 000 mg. Reed et Carnlsck de Kenilworth, New Jersey : Liquide antiseptique pour irrigation -vaginale "Trichotine" : la quantité d'édétate de disodium et de calcium ne figure pas dans le PDR. Pour l'emploi, on dilue le contenu de deux bouchons dans environ 1 litre d'eau. Aucun de ces médicaments, comme l'indique le Physicians Desk Reference, ne revendique un effe-t antifongigue quelconque dû à l'édétate de disodium et de calcium. De plus ces préparations thérapeutiques contiennent de l'édétate de disodium et de calcium en des quantités si faibles qu'on ne peut pas mettre en évidence d'activité antifongique. Riker Laboratories commercialisent également une solution d'édétate de disodium et de calcium à 20 % pour l'injection intraveineuse lente, l'injection sous-cutanée ou l'injection intramusculaire pour abaisser les teneurs sanguines on plomb ldrs d'une intoxication par le plomb ou d'une encéphalopathie due-au plomb et indiquent que cette solution peut être utile pour chélater des produits radio-actifs et des produits de fission nucléaire ainsi que pour le traitement de l'intoxication provoquée par des métaux lourds dont l'affinité pour l'agent chélatant est supérieure à celle. du calcium. Pour 1 'administration intraveineuse, on dilue 5 ml de la solution avec 250 à 500 ml de chlorure de sodium isotonique ou une solution aqueuse de dextrose à 5 %. Une activité antifongique n'est ni indiquée ni revendiquée. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique n0 3 05Z 604 indique qu'une combinaison d'édétate tétrasodique et de certains polyoxyéthylène-alkylphénols constitue un bactéricide efficace pour une concentration de l'édétate d'environ 5,5 %. Ce brevet n'indique pas l'emploi de 1' édétate de sodium seul. Dans aucun des essais figurant dans ce brevet, on n'observe d'activité antibactérienne par emploi d'état de disodium et de calcium. La possibilité d'utiliser les agents chêlatants à une concentration d'au moins 5 % pour traiter les infections provoquées par les champignons qui ont besoin d'ions zinc pour le processus métabolique secondaire nécessaire- à leur croissance est inattendue. Il est particulièrement surprenant que les agents chélatants soient efficaces pour traiter. des infections vaginales provoquées par des champignons tels que. Candida albicans. On applique normalement l'agent chélatant avec un support non toxique inerte qui par exemple peut être constitué en partie ou en totalité par de l'eau. Ces supports sont par exemple, en plus de l'eau, une gelée aqueuse, des capsules de gélatine, des crèmes solubles dans l'eau et des comprimés à délitage entérique, par exemple des comprimés enrobés d'acétatephtalate de cellulo'se. On utilise de préférence 1 'agent chélatant à une concen tration de 5 à 10 %. Cependant des concentrations plus élevées, par exemple de 20 % ou même jusqu'à 100 %, ont également un effet antifongique. Pour les applications cliniques, on préfère une concentration en agent chélatant d'eau moins 5 %; bien que des concentrations plus faibles, par exemple de 3,5 %, aient une certaine activité antifongique. L'invention est illustrée par les exemples non limitatifs suivants dans lesquels, sauf indications contraires, les parties et pourcentages sont exprimés en poids. Exemples 1. Etudes in vitro Pour déterminer l'effet des agents chélatants sur la crois sance des divers champignons pathogènes précités, on effectue des études de sensibilité sur disques selon la méthode de Kirby-Bauer, dans laquelle on applique des concentrations aqueuses diverses des agents chélatants à de la gélose de Sabouraud ensemencée avec des champignons. On observe des zones importantes d'inhibi tion du développement des champignons lorsqu'-on utilise une con centration d'agent chélatant comprise entre 5 et 10 % et plus, par exemple de jusqu'à 20 %. Le degré d'inhibition de la croissance des champignons est en relation directe avec la constante de sta milité de l'agent chélatant, l'accroissement de la constante de stabilité correspondant à des zones plus grandes d'inhibition de la croissance.On effectue donc les essais caractéristiques à des concentrations de 5 % et 10 %. On lit les résultats après 24 et 48 heures. Les résultats montrent que la zone d'inhibition est com prise entre 18 mm et plus de 35 mm, le diamètre variant avec la concentration de l'agent actif. D'autres études montrent que l'addition d'un petit excès d'ions zinc (sous forme de ZnSO4) neutralise l'effet tongistatique de l'agent chélatant. Le résultat de cette étude particulière est conforme à l'explication du rôle joué par les ions zinc dans l'interaction entre les agents chélatants et la croissance des champignons. 2. Etudes in vive On a effectue des études cliniques avec des concentra tions de 5 et 6 % en acide éthylènediaminetêtracétique tsous forme d'édétate de sodium et- de calcium dans un véhicule constitué d'une gelée aqueuse tK-Y jelly) pour déterminer l'efficacité qli- nique des agents chéla-tants dans le traitement des infections vaginales provoquées par Candida aibicans. Les essais de culture du Candida sur milieu de Nickerson après le traitement ont montré une guérison supérieure à 90 %. Plus particulièrement, pour déterminer ltePffet de 1'EDTA sur les candidiases vaginales avec de l'édétate de sodium et de calcium comme source d'EDTA, on a effectué une étude clinique pilote portant sur 45 patientes. Dans tous les cas on avait diagnostiqué une candidiase vaginale par culture positive sur milieu de Nickerson avant le traitement. On a remis à chaque patiente un tube de 50 g de gelée contenant l'agent chélatant et un appli 3 cateur vaginal. Chaque patiente a in-stillé 4 à 5 cm de gelée par voie intravaginale pendant 8 à 10 nuits au moment du coucher. Deux à 4 semaines après l'achèvement du traitement, on a répété les cultures sur milieu de Nickerson. Sur les 45 patientes traitées avec la gelée contenant 1 'agent chélatant, 40 présentaient une culture négative sur milieu de Nickerson, ce qui correspond à un taux de guérison de 88 % après le premier traitement. Cette valeur de 88 % dépasse SQ % lorsqu'on ajoute les guérisons après un second traitement. Pour préparer la gelée contenant l'agent ohé- latant, on ajoute à la gelée une quantité d'édétate de disodium et de calcium suffisante pour obt-enir une concentration de 5 %. La gelée utilisée comme véhicule est une gelée soluble dans l'eau de type "K-Y" contenant comme ingrédient principal de la carboxyméthylcellulose sodique. Avec un nombre moindre de patientes, on a étudié les effets d'une concentration en édétate de sodium et de calcium de 6 % et les résultats ont montré que la gelée à 8 % de sel d'EDTA est aussi efficace que celle contenant 5 % de ce sel. On peut étendre les applications cliniques de l'effet fongistatique à d'autres systèmes de l'organisme par modification du véhicule d'administration. Par exemple 1) On peut les utiliser pour traiter des affections fongiques cutanées par application des agents chélatants à la peau sous forme d'une crème soluble dans 1 eau, d'une lotion ou d'une poudre semblable à du t-alc, à la concentration appropriée et à un pH alcalin, c'est-à-dire de 7 à 10. 2) On peut les utiliser pour traiter une prolifération de Candida dans le gros intestin par administration orale de comprimés à délitage entérique. 3) On peut les préparer sous forme d'une solution pour l'irrigation vaginale à la concentration appropriée, par exemple de 5 % et au pH alcalin optimal, par exemple de 8, comme constituants d'un ensemble de traitement des candidiases vaginales. 4) On peut préparer des ovules solubles dans l'eau utiles pour lutter contre les infections vaginales provoquées par les Candida à une concentration appropriée par exemple de 6 % en agent chélatant, à un pH alcalin, par exemple de 8,5. Bien que l'invention concerne essentiellement le traitement des infections fongiques chez l'homme, on peut également l'utiliser pour traiter les infections fpngiques chez d'autres mammifères couramment atteints d'infections fongiques tels que les souris, les chiens, les chats, les chevaux, les bovins et les moutons par exemple. Les compositions peuvent être constituées en partie ou en totalité des constituants précités. REVENDICATIONS 1. Procédé pour détruire les cha-mpignons ayant besoin d'ions zinc pour le processus métabolique secondaire nécessaire à leur croissance, caractérisé en ce qu'il consiste à administrer à mammifère atteint d'une infection provoquée par un tel champignon, un composé capable de chélater les ions zinc à une concentration d au moins 3,5 % et à un pH d'environ 4,5 à 10, en une quantité efficace pour lutter contre ces champignons. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on administre le chélate par voie orale, locale ou vaginale et à une concentration d'au moins 5 %. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé-en ce que l'agent chélatant est un acide aminocarbexylique ou un sel soluble dans l'eau non toxique d'un tel acide. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que 1 agent chélatant a une constante de stabilité vis-à-vis des ions zinc d'au moins 14,5. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la constante de stabilité est compri-se entre 14,5 et 18,7. 6. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'agent chélatant est l'acide éthylènediaminetétra-acétique, l'acide diéthylènetriaminepenta-acétique; l'acide diamino-1,2 cyclo- hexane N,N'-tétra-acétique, l'acide éthylene- bis-N,N'-(amino-2 méthyl)pyridine N,N'-diacétique, l'acide R-merqaptoéthyliminp- diacétique, la tétrakis-Camino-2 éthyl)ét.hylènediamine, la fl,' ]3"-triaminotriéthylamine l'acide N-hydroxyéthyléthylène- diaminetria-acétique ou l'acide éthylènediamine -N,N-dipropionique N, N' -diacétique ou un de leurs sels non toxiques solubles dans l'eau. 7. Procédé selon la revendication 6, c-aractérisé en ce que l'agent chélatant est un sel de calcium. 8. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que l'agent chélatant est l'acide éthylènediaminetétra-acétique, l'acide diéthylènetriaminopenta-acétique, l'acide diamino-1,2 cyclohexane N,N' -tétra-acétique- ou un de leurs sels non toxiques solubles dans l'eau. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'agent chélatant est l'acide éthy.lènediaminetét-ra-acétique ou un de ses sels non toxiques solubles dans l'eau. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'agent chélatant est un sel de-calcium. 11. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le sel est l'édétate de sodium et de calcium. 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que le pH est compris entre 7 et 14. 13. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la concentration est comprise entre 5 et 20 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que la concentration est comprise entre 5 et lu'%. 15. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce qu'on administre l'agent chélatant par voie vaginale, pour lutter contre une infection fongique vaginale. 16. Procédé selon la revendication 15, caractérisé en ce que l'agent chélatant est l'acide éthylènediaminotétra-acétique ou un de ses sels non toxiques solubles dans l'eau. 17. Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce que l'agent chélatant est l'édétate de sodium et de calcium. 18. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que l'infection fongique est une infection provoquée pnr Candida albicans. 19. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'on applique l'agent chélatant sous forme d'une gelée aqueuse à 5 %. 20. Procédé selon la revendication 18, caractérisée en ce qu'on applique l'agent chélatant sous forme d'une gelée aqueuse à 6 %. 21. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'on applique l'agent chélatant sous forme d'une solution pour -irrigation vaginale à 5 à 10 %. 22. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'on applique l'agent chélatant sous forme d'un ovule soluble dans l'eau contenant 5 à 10 % de l'agent chélatant. 23. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'on administre l'agent chélatant par voie vaginale pour lutter contre une infection fongique vaginale. 24. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'on administre l'agent chélatant par voie vaginale pour lutter contre une infection fongique vaginale. 25. Procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que l'infection fongique est provoquée par Candida alhicans. 26. Procédé sel-on la revendication 25, caractérisé en ce que la composition administrée est constituée essentiellement de l'agent chélatant et d'un support- inerte non- toxique. 27. Procédé selon la revendication 1; caractérisé en ce que le pH est compris entre 7 et 10.28. Procédé pour détruire les champignons-ayant besoin d'ions zinc pour le processus métabolique secondaire nécessaire à leur croissance, caractérisé en ce qu'il consiste à administrer à un mammifère atteint d'une infection provoqué-e par un tel champignon, un composé capable de chélater les ions zinc à une concentration d'au moins- 3,5 % et à un pH d'environ 4,5 à 10, en une quantité efficace pour lutter contre ces champignons, ce composé étant choisi parmi les sels non toxiques solubles dans l'eau de l'acide éthylènediaminotétra-acétique, de l'acide diéthylènetriaminopenta-acétique, de l'acide diamino-l,2 cyclohexane N,N' -tétra-acétique, dè -l'acide g3-mercapto- éthyliminodia-cétique, de la tétrakis-tamino-2 éthy.l)éthylène- diamine, de la ss,ss', ss"-triaminotriéthylamine, de l'acide N- hydroxyéthyléthylènediàminetriacétique et de l'acide éthylènediamine N,N-dipropienique N,N'-diacétique. 29. Procéde selon la revendication 28, caractérisé en ce que l'agent chélatant est choisi parmi les sels non toxiques solubles dans l'eau de l'acide éthylènediaminetétra-acétique, de l'acide diéthylènetriaminepenta-acé-tique et de L'acide diamino1,2 cyclohexane N,N' -tétra-acétique.