Brevet FR2448351A1 — publié le 19800905

L'objet de l'invention concerne un produit destiné à détacher de leurs supports tissulaires et de toute surface solide, les bactéries fixées par les fibres polysaccharidiques. Il a pour fonction après leur libération de les rendre plus accessibles d l'action des antiseptiques et des antibiotiquesou autres. L'expérience a démontré que les bactéries ne se fixent sur les surfaces solides inertes et vivantes (tissus), que grace à la production de substances polysaccharidiques de structure complexe qui leur permet de coloniser ces surfaces, de s'y fixer solidement, d'y survivre et même de s'y développer. Elles forment aussi des couches qui constituent de véritables films ou enduits qui recouvrent tissus et solides de toutes sortes. Ces films microbiens sont-très difficiles à dissocier. Ils mettent en outre les germes à l'abri des antagonistes chimiques, biologiques, (antibiotiquesà des antiseptiques et des anticorps spécifiques. Les polysaccharides protègent les bactéries. L'objet du brevet supprime ces difficultés et permet de détruire en partie les systèmes de fixation et d'ancrage des bactéries, afin que les germes ainsi libérés redeviennent vulnérables et accessibles aux agents de traitement et ceci aussi bien sur les tissus humains que sur toute autre surface. Il se caractérise par l'application nouvelle Ides enzymes lytiques du type désigné suivant le code international des momenclatures par - Chitinases ............................... 3.2.1.4. - Chitinodextrinase ...................... ....... 3.2.1. - Chitobiase 3.2.1.29. - Pectinase 3.2.1.15. - Exopoly-xgalacturonidase . 3.2.1.82. - Hyaluronidase 3.2.1.35. - Deitrine-glucosidase . 3.2.1.33. - Pectate Lyase ew 4.2.2.22. - Pectine Lyase 4.2.2.10. - Polygalacturonique Lyase 4.2.99.5. il va de soi que toutes ces enzymes ne seront pas systématiquement mélangées dans une préparation à usage unique, mais chacune d'elles, soit seule, soit en association avec une autre pourra faire l'objet d'une formulation plus ou moins spécifique. Parmi les applications courantes, ce produit pourra constituer des pates gingivales destinées à désorber et libérer les bactéries. fixées solidement sur les gencives et responsables des caries dentaires. Dans ces conditions il est possible d'envisager une association d'enzymes et d'un antibiotique à usage local. Les germes libérés par l'enzyme seront alors accessibles à l'action de l'antagoniste et des antiseptiques. Dans cette application thérapeutiques., il est constitué par un mélange de polysaccharases sélectionnées en fonction des usages envisagés. C'est ainsi que pour une pate gingivale on utilise : - Hyaluronidase de testicule bovin à 300 unités mg.. 15 mg - Pectinase purifiée d'Aspergillus niger 100 mg - Bacitracine 2 gr - Excipient .100 gr Pour une solution gingivale - Hyaluronidase de testicule bovin à 300 unitçs/mg. 20 mg - Pectinase purifiée d'Aspergillus niger 100 m > g - Bacitracine 2 gr - Eau aromatisée (Menthe) 100 ml Comprimés sublinguaux - Hyaluronidase de testicule bovin à 300 unités/mg. 2,5 mg - Pectinase d'Aspergillus niger 15 mg - Bacitracine 5 mg - Excipient aromatisé qsq - un comprimé. Dans des préparations industrielles pour analyses bactériologiques on utilise une poudre contenant - Hyaluronidase 25 mg - Pectinase 200 mg à dissoudre dans 5 ml d'eau tamponnée à pH=6,5, à laquelle on ajoute 20 à 50 ml de produit à traiter. Tous les composants de ces préparations peuvent être facilement identifier et dosés par les procédés les plus classiques. Les enzymes par leurtréactionsspécifiques en présence de leurs substrats : Hyaluronidase : substrat : mucopolysaccharide : Acide hyaluronique, chondroitine-sulfate, héparine par exemple en solution tampon de pH=5 à 7,4 selon les cas. - Pectinolyse : Pectine méthyl-estérase sur pectine de pomme de terre-Acidification du mélange sous l'action de l'enzyme-Titrage à la soude 0,OIM. Pectinolyse sur gel de pectine viscosimétrie. Pectine lyase : dosage des uronides-recherche des acides uroniques. - Bacitracine : poudre fine, blanche soluble dans l'eau, 1' alcool, l'acide acétique. insoluble dans l'acétone, le chloroforme, l'éther. Réactions : à 5 ml de solution, ajouter 5 ml d'eau et 5 ml de Na0h à 20 % - Ebullition 15' - Refroidir - Ajouter 11 gouttes de nitropnussiate de a dans méthanol - Coloration violette. - ou encore quelques gouttes de sulfate de Cu à 0,5 X au lieu de nitroprussiate : Coloration violette. - Une solution de bacitracine donne un précipité blanc en présence de chlorure de baryum. Tous les composants entrant dans la préparation de ces mixtures sont parfaitement identifiables. En tout état de cause on obtient avec cette composition la désorption et la libération des bactéries par les enzymes polysaccharolytiques pour leur traitement subsquant par tel agent curatif. Toutefois les quantité'et qualités des agents utilisés pourront varier dans la limite des équivalents, sans changer pour cela la conception générale de l'invention qui vient d autre décrite. REVENDICATIONS 10 Composition destinée à détacher de leurs supports tissulaires les bactéries fixées par les fibres polysaccharidiques afin de les rendre après leur libération plus accessibles à l'action des produits curatifs, antiseptiques, antibiotiques et autres, se caractérisant par un mélange de polysaccharases sélectionnées, formé par de l'hyaluronidase de testicule bovin à 300 unités, de pectinase purifiée d'Aspergillus niger et de bacitracine. 20,Composition suivant la revendication 1 onstitué pour les usages thérapeutiques gingivales, constituée par 15 mg de hyaluronidase de testicule bovin à 300 unités mg ; 100 mg de pectinase purifiée d'Aspergillus niger ; 2 gr de bacitracine ; 100 gr excipient. 3 Composition suivant la revendication 1 sercaractérsiant par le fait qu'une solution gingivale est obtenue par 20 mg d' hyaluronidade de testicule bovin à300 unités/mg ; 100 mg de pectinase purifiée d'Aspergillus niger ; 2 gr de bacitracine et 100 ml d'eau aromatisée. 4" Composition suivant la revendication 1 se caractérisant par le fait que des comprimés sublingaux sont obtenus par 2,5 mg d'hyaluronidase de testicule bovin à 300 unités/mg ; 15 mg de pectinase d'Aspergillus niger et 5 mg de bacitracine et un comprimé excipient aromatisé.