Brevet FR2450109A1 — publié le 19800926

La présente invention, à la réalisation de laquelle ont participé Madame Geneviève AZADIAN, Messieurs Fernand LABRIE et Jean Pierre RAYNAUD concerne une nouvelle méthode de traitement utilisant la LH - RH ou des agonistes, et plus précisément, une méthode de contrôle du cycle menstruel et de la grossesse chez la femme, par administration de 1H - RH ou d'un agoniste de 1H - RH de formule I définie ci-après. Le facteur de libération de l'hormone lutéinisante ou EH - RH de formule (pyro) Glu - His - Trp - Ser - Tyr - Gly - Leu - Arg - Pro Gly - NH2. a été décrit par Schally et al, dans Biochem. Biophys. Res. Commun. 43, 393 et 1334 (1971). Des procédés de synthèse de ce produit ont été décrits dans la littérature, notamment dans J. Med. Chem. 1972, 15, 222. le nombreux agonistes de 1H - RH sont également décrits, ainsi que des procédés pour leur préparation. La 1H - RH est secrétée par 1'hypothalamus et transportée à l'adénohypophyse, où elle stimule la libération de 11 hormone de lutéinisation et de l'hormone folliculostimulante. La LH- RH est décrite - à titre d'inducteur de l'ovulation dans les stérilités anovulatoires (Fertility and Sterility, September 1972, vol 23, p 672) ( NILLIUS, S.J. (1976) " therapeutic use of LH - RH in the human female" dans "Hypothalamus and Endocrine Functions" F, Labrie, J. Meites and G.Pelletier, eds : Plenum Press, PP 93-112) - à titre thérapeutique dans le traitement de l'oligospermie chez l'homme notamment Schwartztein L. (1976) -"Diagnostic and therapeutic use of 1H - RH in the infertile man". dans "Hypothalamus and endocrine functions". P.Labrie, J.Meites and G.Pelletierveds; Plenum Press, pages 73-91, - à titre de produit diagnostique dans l'exploration des anomalies hypophyso-gonadiques de l'enfant et de l'adolescent (La Nouvelle Presse Médicale, Juin 1972, n024, p 1633). Plus récemment ont été décrits les effets anti-fertilité de la 1H - RH, ou d'agonistes de LH - RH chez l'animal. Humphray et al dans Contraception 14, 625, 1976, et Corbinet al notamment dans End. Res. Com. Z (6) 359 - 376 (1976), indiquent que la 1H - RH et des agonistes de LH - RH, administrés chez le rat en état de gestation provoquent une interruption de la grossesse chez cet animal. Hilliard et al dans Am. Vert. Soc 27, 421, 1976, décrit le même effet chez le lapin. Le brevet US 3971 737 décrit l'administration de (2-méthyl Ala ) LH - RH, à titre d'agent claudogène ou interceptif chez le rat, et indique que ce produit peut être utilisé comme agent claudogène, interceptif, chez les mammifères présentant des menstruations. Cependant, aucune indication concernant les modalités d'administration de LH - RH ou d'agonistes, chez la femme, dans un but claudogène, ou interceptif, n'est fournie dans ce brevet. Par ailleurs, le brevet US 3947 569 et le brevet belge 842 857, indiquent, à propos de LH - RH et d'agonistes de 1H RH : "lorsque le peptide est administré vers la fin du cycle, l'endomètre est rompu, et les régles se produisent". En fait, aucune donnée n'illustre cette proposition, et aucune indication propre à l'administration de 1H - RH, ou d'agonistes, au cours de la phase lutéale chez la femme, n'est fournie dans ces brevets. La demanderesse, quant à elle, a mis en évidence l'activité lutéolytique du 1H - RH, chez la femme, activité lutéolytique qui ntavait jamais été établie chez la femme jusqu'alors. La présente demande a ainsi pour objet une méthode de contrôle du cycle menstruel et de la grossesse, chez la femme, caractérisée en ce que l'on administre, après l'ovulation, à titre lutéolytique, une quantité lutéolytiquement active de 1H - RH, ou d'un agoniste de 1H - RH, de formule I p - Glu - His - Trp - Ser - Tyr - X - Y - Arg - Pro - Z. (I) dans laquelle a) Z = Gly - NH2 Y = Leu X = D N Leu, D N Val, D Abu, ( acide &alpha;;-amino butyrique) D Phe, D Ser, D Thr, D Met, D Pgl, D lys, Leu, Ile, Nle, Val, N Val, Met, Phe, D Leu, D Arg, D Ser (tbu) D Thr (tbu), D Cys (tbu), D Asp (Otbu) D Glu (Obtu), D Orn (boc), D Lys (boc), D Trp, Trp, 2-méthyl-Ala, D Tyr, D Met, - Lauryl -D Lys, $#-dextran - D Lys ou bien b) z = NH-alcoyle dans lequel le radical alcoyle contient de 1 à 3 atomes de carbone ou Z = NH-cyclopropyl. Y = Leu X = D Ser (tbu), D Thr (tbu), D Asp (Otbu), D Glu (Otbu), D Orn (boc), D Lys (boc). ou bien c) X = Gly Y = Leu Z = -NH-CH3, -NH - CH2-CH3 , -NH-CH2 - CH2 - CH3, -NH - CH2 CH2 OH ou bien d) X = D Trp, D leu, D Ala, D Ser (but), D Tyr, D Lys, Ala Y = Leu Z = NH - C2 H5 ou bien e) X = Gly Y = N Me Leu Z = Gly NH2 ou NH-C2 H5 ou bien f) x = D Leu Y = Leu Z = NH -cyclopropyl ou bien g) X = Gly Y = Ser (but), Cys (but), Asp (Obut), Glu (Obut), Orn (boc) Lys (boc) Z = Gly - NH2 ou Z = NH -alcoyle dans lequel le radical alcoyle contient de X à 3 atomes de carbone ou Z = NH -cyclopropyl. les produits de formule I sont décrits, ainsi que des procédés pour leur préparation. Ils sont notamment décrits dans les brevets ou publications suivants - COy D.H. LABRIE F, SAVARY M., COY E.J. et SCHALLY A.Y. (1975) LH - releasing activity of potent LH - RH analogs in vitro BBRC 67, 576 --582. - WYLIE VALE et al (1976) in "Hypothalamus and endocrine functions" (F. LABRIE, J. MEITES and G. PELLETIER, eds; PLENUM PRESS); pages 397 - 429. - FUJINO, BBRC vol 49, n 3, 1972, page 863. - Brevet allemand DT 2 509 783 - Brevet US 3 901 872 - Brevet US 3 896 104 - Brevet japonais J 4 9100-081 - Brevet US 3 971 737 - Brevet belge BE 842 857 - Brevet belge BE 832 310 - Brevet belge BE 832 311 - Brevet US 4 003 884 La nomenclature utilisée pour les peptides de formule I est celle utilisée dans les brevets et publications cités ci-dessus. La méthode de contrôle du cycle menstruel et de la grossesse chez la femme, objet de l'invention, trouve son utilisation notamment dans la synchronisation des régles et dans la prévention de la reproduction, en dépit de l'ovulation et de la fécondation. C'est ainsi que l'invention a notamment pour objet une méthode de raccourcissement du cycle menstruel, caractérisé en ce que le LH - RH, ou le produit de formule I est administré au cours d'un intervalle de temps allant du moment de l'ovulation au 24 èm jour du cycle. Cette méthode trouve son utilisation lorsque l'on souhaite avancer la date d'apparition des régles, dans des circonstances telles que, par exemple, la pratique de sports, les voyages etc.. L'invention a également pour objet en particulier une méthode de prévention de la grossesse, caractérisée en ce que le 1H - tH, ou le produit de formule I est administré au cours d'un intervalle de temps allant du moment de l'ovulation au 21 èm jour du cycle. Une telle méthode est destinée à prévenir l'implantation de l'oeuf et donc la grossesse. En ce cas, le 1H - RH, ou le produit de formule I peut être administré à titre contraceptif, par exemple, le lendemain suivant un rapport sexuel. L'invention a également pour objet une méthode d'interruption de la grossesse, caractérisée en ce que le 1H - RH ou le produit de formule I est administré au cours d'un intervalle de temps allant du 21 èm jour du cycle åusquld au maximum 16 semaines après l'ovulation. Chez la femme, les 16 premières semaines de la gestation constituent la période au cours de laquelle un avortement médical licite par expulsion de l'embryon peut être réalisé. Dans l'utilisation des méthodes de l'invention, des variations concernant le moment d'administration, la fréquence et la dose d'administration sont possibles pourvu qu'une quantité lutéolytiquement efficace de 1H - RH ou de produit de formule I soit administrée. On estime qu'une quantité lutéolytiquement efficace est administrée, notamment, lorsque cette quantité de 1H - RH ou d'agoniste de 1H - RH de formule I permet l'élévation du taux plasmatique de l'hormone lutéinisante NH pendant une période minimale de 12 heures à un taux d'au moins deux fois le niveau de base de 1H au cours de la phase lutéale. Cette élévation du taux plasmatique de 1H pendant une période minimale de 12 heures est notamment obtenue lorsque la LH - RH ou le produit de formule I est administré de façon répétée à quelques heures d'intervalle au cours d'une période minimale de 12 heures. L'administration répétée, à quelques heures d'intervalle est destinée à maintenir le taux plasmatique de 1H à un niveau suffisamment élevé pendant la période du traitement. C'est pourquoi l'on administre de préférence la LE - RH ou le produit de formule I à des intervalles de temps allant par exemple de 2 à 8 heures. Cet intervalle de temps peut être notamment de 3 à 5 heures lorsque l'on administre le 1H - RH. Il peut étre plus long en particulier si l'on administre un produit de formule I à effet prolongé. L'effet lutéolytique est obtenu, sans qu'il soit nécessaire de poursuivre le traitement au delà d'une période de 24 à 96 heures, qui peut varier notamment selon le laps de temps écoulé entre le moment de l'ovulation et la période du traitement, et 1' indication du traitement. A titre d'exemple d'un tel traitement, on peut citer l'administration en 3 à 6 fois de 1H - RH en l'espace de 12 à 24 heures. Des variations entre les doses utilisées d'une administration à l'autre, et les intervalles de temps séparant les diverses administrations peuvent exister. Il peut titre avantageux cependant, et pr ailleurs plus commode, d'administrer à des intervalles de temps réguliers, une méme dose de produit Selon la méthode de l'invention, on utilise indifféremment la LH - RH ou un agoniste de formule I. Selon l'invention, la LH - RH ou ses agonistes de formule I peuvent être administrés de préférence par voie parentérale, endonasale, vaginale ou orale. La dose totale de produit administré, qui varie notamment selon le produit administré, et la voie d'adninistration, va de préférence de 5 1g à 200 000 g L'invention a ainsi notamment pour objet l'une quelconque des méthodes définies ci-dessus dans laquelle la LH - RH ou le produit de formule I est administré par voie parentérale à une dose totale allant de 5 à 20 000 g ou dans laquelle la 1H - RH ou le produit de formule I est administré par voie endonasale à une dose totale de 50 à 200 000 g, De façon préférée la 1H - RH peut être administrée par voie parentérale à une dose totale de 100 à 20 000 g et notamment de 400 à 10 000 g. La dose unitaire de LH - RH administrée par voie parentérale peut être par exemple de 100 à i 000 pg. La 1H - RH peut titre administrée par voie endonasale, de façon préférentielle à une dose de 5 000 à 200 000 g et notamment de 20 000 à 100 000 g. La dose unitaire par voie endonasale peut être par exemple de 5 000 g à 50 000 g. Lorsque l'on administre un agoniste de formule I, les doses administrées sont réduites proportionnellement à l'activité comparée de cet agoniste et de la LH - RH. De façon préférée, le produit de formule I peut être administré par voie parentérale à une dose totale de 5 à 10 000 g et notamment de 5 à 1 000 g. 6 A titre d'exemple, si l'on administrait le D Trp 6 NH -RH éthylamide (COY et al référence citée plus haut), la dose totale de produit administrée, par voie parentérale pourrait être de façon tout spécialement préférée de 20 g à 500 pg. Détermination de l'activité lutéolytique de la 1H - RH. La LH - RH a été administrée à quatre femmes de 30 à 40 ans présentant des cycles menstruels réguliers de 28 à 30 jours, sans antécédents gynécologiques particuliers. les quatre sujets traités ont notamment présenté une huitaine de cycles menstruels normaux avant traitement. La 1H - RH a été injectée par voie sous cutanée, à 8 heures, 12 heures, t6 heures et 20 heures, à la dose de 250 Fg pour chaque injection, à une journée se situant entre le 3 ém et le 5 èm jour après l'ovulation présumée, du cycle de traitement. On a déterminé pendant le cycle précédent le cycle de traitement et pendant le cycle de traitement, pour chaque femme, les taux sériques de progestérone, par une prise de sang quotidienne entre 17 heures et 18 heures. les résultats obtenus sont indiqués dans les quatre tableaux suivants, dans lesquels le jour zéro est le jour de ltovulation, et la lettre M indique l'apparition des menstruations. : ) : Progestérone plasmatique ) : (ng/ml) ) : : ) Jour du Cycle: Contrôle :expérimental) -16 : 0 : 15,0 ) : : ) : : ) -15 o . 3,1 -14 : 0 : 1,1 -13 : 0 : 1,6 -12 : 0 : 1,1 -11 : 0 : 1,1 -10 : 0 : 2,1 -9 : 0 : 12,0 -8 : 0 : 4,6 -7 : 0 : 1,2 -6 : 0 : 1,1 - 5 : 0 : o,gg -4 : 0 : 1,6 -3 : 0 : 1,3 -2 : 0 : 1.6 -1 : 0 : 3,1 o 0 : 8,7 : 3,1 1 : 6,7 : 7,7 2 : 18,0 : 13,0 3 : 24,0 : - 4 : 32,0 , . 23,0 5 : -- : 30,0 injections de LH - RH 6 : 15,0 : * 45,0 7 9,4 14,0 8 : 7,7 : - 9 : 7,1 : 6,1 10 : 10,7 : 6,0 11 : 5,7 : M 12 : 2,0 : 0 13 : 8,1 : 0 14 : M . * Injections de LH-RH - M - Menstruation, 0 -jour de l'ovu- lation. : Progestérone plasmatique : (ng/ml) Jour du Cycle : Contrôle expérimental -12 0 1,7 -11 : 0 : 1,7 -10 : 0 : 0,7 -9 : 1,9 : 0,78 -8 : 0 : 0,86 -7 : 2,6 : 1,2 -6 0 0,94 -5 : 0 : 1,0 -4 : 1,2 : 1,0 -3 : 1,3 : 0,81 -2 : 1,3 : 1,4 -1 : 1,3 : 1,4 0 : 2,0 : 2,4 1 : 2,5 : 4,5 : 3,5 : 4,6 injections : de LH-RH 3 : 6,7 : * 13,0 4 10,0 14,0 5 . 15,0 . 17,0 6 6 : 12,0 : 17,0 7 . 16,0 : 16,0 8 8 13,0 14,0 . . 9 : 8,5 : 8,1 10 : 10,0 : 9,8 11 : 5,2 : : : 12 : 3,9 : M 13 : 3,2 : 0 14 : M : 0 * Injections de LH-RH - M - Menstruation 0 = Jour de l'ovulation. ( : Progestérone plasmatique (ng/ml) ( ( Jour du Cycle : Contrôle : expérimental ( : : ( -17 : 0 : 1,7 ( -16 : 0 : 0,91 ( -15 : 0 : 0,85 ( -14 : 0 : 0,61 ( -13 : 0 : 0,71 ( -12 : 0 : 0,78 ( -11 : 0 : 0,92 ( -10 : 0 : 0,90 - - 9 2,6 0,89 -8 2,3 1,0 -7 1,4 1,1 -6 : 2,7 0,82 - 5 : 1,4 : 1,6 - 4 : 1,6 : 1,5 - 3 : 1,2 : 1,0 - 2 : 0,92 : 1,8 - 1 2,3 : 2,4 - : 2,5 : 3,0 1 : . 4,5 : 4,5 2 : 11,7 : 8,3 injections de LH-RH 3: 9,0 : * 16,0 4: 18,0 : 14,0 5 : 20,0 : 12,0 6 : 25,0 : 25,0 7 : 28,0 : 20,0 8 : -- : 14,0 9 : 24,0 : - 10 : 21,0 : 2,6 11 : 15,0 : M 12 : 5,6 : 0 13 : M : 0 * Injections de LH-RH - M = Menstruation 0 = Jour de l'ovulation. : : Proestérone plasmatique : (ng/ml) Jour du Cycle : Contrôle : expérimental : : -14 : 4,0 : 1,4 -13 : 2,2 : 1,8 -12 : 1,8 : 2,1 ( -11 : 1,1 : 2,2 ( -10 : 2.1 : 2,6 ( - 9 : 0,89 : 2,2 ( - 8 : 1,2 : 3,7 - 7 o o,86 : 1,6 -6 : 0,79 : 2,3 -5 : 1,6 : 1,9 -4 : 1,2 : 1.9 -3 : 1,4 : 1,6 -2 : 1,1 : 2.1 -1 1 1,6 t 3,3 0 . 3,4 : 4,3 1 5,7 . 7,0 ( 2 . 8,7 : 10,0 ( 3 : 13,0 : 18,0 (Injections) 4 : 8,9 : *23,0 ( de LH-RH) : : ( 5 : 14,0 : 13,0 ( 6 : -- : 16,0 7 7 : 20,0 : 16,0 8 : : 15,0 9 : 19,0 t 12,0 10 : 17,0 : 9,3 11 : 13,0 : 3.3 12 : 9,5 : 2,0 13 : 5, : 14 : 2,2 : 0 : : 15 : M : 0 * Injections de LH-RH - M = Menstruation 0 = Jour de l'ovulation. Chez les quatre femmes traitées, qui avaient auparavant présenté 8 cycles menstruels normaux, l'administration de 1H RH, a conduit à un avancement de 2 jours (3 cas), ou de 3 jours (1 cas) des menstruations. La comparaison des niveaux de progestérone plasmatique au cours du cycle de traitement (taux "expérimental") et au cours du cycle antérieur au traitement (taux de "contrôle"), met en évidence l'abaissement des taux de progestérone plasmatiques induit par l'administration de 1H - RH, selon le protocole indiqué plus haut, cette diminution des taux de progestrone étant suivie d'une apparition plus précoce des menstruations. Ceci manifeste l'effet lutéolytique de l'administration de 1H - RH au cours de la phase lutéale, selon le protocole indiqué plus haut. Par contre, l'administration de 1H - RH à la dose de 250 g en une seule injection ou en deux injections espacées de 4 heures n'a pas entrainé de modification de la longueur du cycle menstruel, ni modifié de façon significative les niveaux de progestérone plasmatiques. REVENDICATIONS 1) Méthode de contrôle du cycle menstruel et de la grossesse, chez la femme, caractérisée en ce que l'on administre, après 11 ovulation, à titre lutéolytique, une quantité lutéolytiquement active de LH-RH, ou d'un agoniste de LH-RH, de formule I p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-X-Y-Arg-Pro-Z (I) dans laquelle a) Z = Gly Y = Leu X = D N Leu, D N Val, D Abu, (acide &alpha;-amino butyrique), D Phe, D Ser, D Thr, D Met, D Pgl, D Lys, Leu, Ile, Nle, Val, N Val, Met, Phe, D Leu, D Arg, D Ser (tbu) D Thr (tbu), D Cys (tbu) , D Asp (Otbu) D Glu (Otbu) D Orn (boc), D Lys (boc), D Trp, Trp, 2-méthyl Ala, D Tyr.D Met, 6-lauryl-D Lys. #-dextran - D Lys ou bien b) Z = NE alcoyle dans lequel le radical alcoyle contient de 1 à 3 atomes de carbone ou Z = NH cyclopropyle, Y = Leu, X = D Ser (tbu), D Thr (tbu), D Asp (Otbu) D Glu (Otbu) D Orn (boc), I) Lys (boc), ou bien c) X = Gly Y = Leu Z = -NH-CH3 ; -NU-CH2-CH3, -NH-CH2-CH2-CH3, -NH-CH2-CH2-OH, d) X = D Trp, D Leu, D Ala, D Ser (but) D Tyr, D Lys, Ala, Y = Leu Z = NH-C2H5 Ou bien e) X = Gly Y = NxMe Leu Z = Gly NH2 ou NH - C2H5 ou bien f) X = D Leu, Y = Leu Z = NH cyclopropyle, ou bien g) X = Gly Y = Ser (but), Cys (but) Asp (Obut), Glu (Obut) Orn (boc) Lys (boc), Z = Gly-NH2 ou Z = NH-alcoyle dans lequel le radical alcoyle contient de 1 à 3 atomes de carbone ou Z = NK-cyclopropyle. 2) Méthode selon la revendication 1, de raccourcissement du cycle menstruel, caractérisée en ce que le LH-RH ou le produit de formule I est administré au cours d'un intervalle de temps allant du moment de ltovulation au 24ème jour du cycle. 3) Méthode selon la revendication 1, de prévention de la grosses se, caractérisée en ce que le LH-RH ou le produit de formule I est administré au cours dtun intervalle de temps allant du mo ment de l'ovulation du 21ème jour du cycle. 4) Méthode selon la revendication 1, d'interruption de la grossesse, caractérisée en ce que le LH-RH ou le produit de formule I est administré au cours d'un intervalle de temps allant du 21ème jour du cycle jusqu'à maximum 16 semaines après l'ovulation. 5) Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la LH-RH ou le produit de formule I est administré en une quantité suffisante pour permettre l'élévation du taux plasmatique de l'hormone lutéinisante LH pendant une période minimale de 12 heures, à un taux d'au moins deux fois le niveau de base de LH au cours de la phase lutéale. 6) Méthode selon la revendication 1 ou 5, caractérisée en ce que la LH-RH ou le produit de formule I est administré de façon répétée à quelques heures d'intervalle au cours d'une période minimale de 12 heures. 7) Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que le produit administré est la LH-RH. 8) Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que le produit administré est un agoniste de formule I. 9) Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 6; dans laquelle la LH-RH ou le produit de formule I est administré par voie parentérale à une dose totale allant de 5 à 20 000 hg. 10) Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle la LH-RH ou le produit de formule I est administré par voie endonasale à une dose totale allant de 50 à 200 000 g.