Brevet FR2459247A1 — publié le 19810109

La présente invention concerne des com- plexes ascorbate de platine(II) coordonnés avec des ligands amine monodentés ou bidentés dans une configu- ration cis qui sont caractérisés par une activité pro- noncée contre les tumeurs et une faible toxicité pour les animaux. - La figure 1 est une reproduction du spec- tre infrarouge du complexe cis-ascorbate de diamminepla- tine(II) de l'Exemple I. - la figure 2 est une reproduction du spec- tre ultraviolet du complexe cis-ascorbate de diammine- platine(II de l'Exemple I. - la figure 3 est une reproduction du spec- tre de résonance magnétique nucléaire du complexe oie- ascorbate de diammine-platine(II) de l'Exemple I. - la figure 4 est une reproduction du spec- tre infrarouge du complexe cis-ascorbate de bis(méthyl- amine)platine(II) de l'Exemple IV. - la figure 5 est une reproduction du spec- tre de résonance magnétique nucléaire du complexe cis- ascorbate de bis(méthylamine)platine(II) de l'Exemple IV. - la figure 6 est une reproduction du spec- tre infrarouge du complexe ascorbate d'éthylènediamine- platine(II) de l'Exemple V. p - la figure 7 est une reproduction du spectre de résonance magnétique nucléaire du complexe ascorbate d'éthylènediamineplatine(II) de l'Exemple V. - la figure 8 est une reproduction du spectre infrarouge de l'ascorbate de diaminocyclohexa- neplatine(II) de l'Exemple VI. En 1968, Rosenberg et Van Camp ont décou- vert que le composé cis-Ot(NiH3)2C12_7 présentait une excellente activité anti-tumorale contre le Sarcome 180 solide (S180s) chez la souris blanche suisse. (Rosenberg et Van Camp, Nature, 222, 385 (1969). Cette découverte a conduit à des essais extensifs avec des composés du platine et d'autres métaux de transition en ce qui concerne l'activité contre les tumeurs chez des animaux (par exemple, Cleare, Coordination Chemis- try Reviews, 12, 349 (1974); et Connors et Roberts, éd., Platinum Coordination Complexes in Cancer Chemo- theran, Springer, New York (1974). Des espèces neutres cis-tA2X2_7 qui se sont révélées particulièrement actives contre les tumeurs d'animaux ne sont pas, dans l'ensemble, très solubles dans l'eau. (J.L. Marx, Science, 192, 774 (1976)). Cleare et Hoeschele indiquent des solubilités dans l'eau ou dans une solution saline à 37 C comprise entre 0,04 g/100 cm3 pour Lt(NH)2(ma- lonate7 et 1,38 g/100 cm3 pour LOt(CH3NH2)2C12_. (Cleare et Hoeschele, Bioinorganic Chemistry, 2, 187 (1973)). Les solubilités assez faibles réduisent beau- coup l'utilité pour l'administration orale ou intra- veineuse. Selon la présente invention, on prévoit de nouveaux composés ascorbate de platine(II) amine qui présentent une excellente activité contre la tumeur à ascite Sarcoma 180 (S180a) chez la souris. De plus, ils ont une faible toxicité pour les mammifères. Il en ré- sulte que les composés selon la présente invention ont des indices thérapeutiques avantageux. De plus, à l'exception des ascorbates de diaminocyclohexane pla- tine(II), ils sont très solubles dans l'eau, leur so- lubilité étant supérieure à 10 g/100 cm3 d'eau. Les ascorbates d'amine platine(II) selon la présente invention peuvent être représentés par la formule générale cis-T >(II)A2(Xa(0H4_7 (I) dans laquelle A est de l'ammoniac (Nm3) ou un ligand amine monodenté représenté par la formule RNH2; R est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur; A2 est un ligand diaminde bidenté; X est la portion ascorbate; m est un nombre ayant une valeur de I à 2; n est un nombre ayant une valeur de 0 à 1 et la somme de n + m n'est pas supérieure à 2. Des indices m et n peuvent avoir des valeurs fractionnaires entre leurs limites respectives, auquel cas la formule (I) repré- sentera un mélange des complexes individuels. Chaque fois qu'on utilise le terme composé ou complexe pour désigner le produit de la présente invention, cela en- globe les complexes individuels aussi bien que leurs mélanges. Les ligands amine monodentés représentés par la formule RNE3 comprennent l'ammoniac (NH3) aussi bien que des monoalcoyl amines ayant jusqu'à 6 atomes de carbone dans le groupe alcoyle, comme la méthylami- ne, l'éthylamine, la propylamine, l'isopropylamine, l'hexylamine, etc.. Parmi les alcoyl amines, on préfère celles ayant jusqu'à 3 atomes de carbone. Les ligands amine bidentés représentés par A2 peuvent être représentés encore par la formule R1 R2 Xo-8H-8E-M2 (II) dans laquelle R et R2, quand ils sont pris séparément, sont chacun de l'hydrogène ou un groupe alcoyle infé- rieur; et RI et R2, quand ils sont pris ensembles for- ment le radical divalent: R3 R4R5 R6 * I /I I! -CO-OE-OH-O- o chacun des R3 à R6, quand ils sont pris séparément, est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur, don- nant un ligand 1,2-diaminocyclohexane tel que représen- té par la formule 4 5 15. R3-CH C R6 - yH- H2N NH2 Par l'expression "groupe alcoyle inférieur", telle qu'utilisée ici, on désigne un groupe alcoyle linéaire ou à chafne ramifiée ayant de 1 à environ 6 atomes de carbone, et de préférence de 1 à environ 3 atomes de carbone, tel que les groupes méthyle, éthyle, propyle. On préfère des diamines dans lesquelles au moins l'un des groupes R1 et R2 est de l'hydrogène, comme l'éthy- lènediamine et la propylène-1,2-diamine. On préfère aussi les diamines dans lesquelles R1 et R2, quand ils sont pris ensemble, sont remplacés par le radical: R3 R4 R5 R6 1 1 i. -CH-CH-OH-îH- o leS groupes R3 à R6 sont chacun de l'hydrogène, c 'est-à-dire le 1,2-diaminocyclohexane. Z459247 La portion ascorbate est dérivée de l'aci- de ascorbique, qui peut être représenté par la formule: 6 5 HOH2C-{CH S (IV) HO OH dans laquelle les atomes de carbone portant les numé- ros 4 et 5 sont optiquement actifs. Il y a donc quatre isomères actifs d'acide ascorbique. La portion ascor- bate du complexe selon la présente invention peut être dérivée de l'un quelconque des isomères individuels, ou d'un mélange de deux quelconques ou d'un plus grand nombre d'entre eux. Quand m dans la formule (1) ci-dessus est 1 et n est O, la portion ascorbate est une portion di- valente qui est formée par élimination d'un hydrogène de chacun des groupes hydroxyle aux positions 0-2 et 0-3 du noyau de furanone. Quand m est 1 ou 2 et n est 1 ou 0, la portion ascorbate est une portion monova- lente qui est probablement formée par enlèvement d'un hydrogène du groupe hydroxyle lié à 0-3. Comme résul- tat, le platine est très probablement lié à la portion ascorbate en 0-3. On prépare les composés selon la présente invention en mettant en contact en milieu aqueux un sel ascorbate avec un sel "diaquo" d'amine platine(II) re- présenté par la formule: o30 cis-ztA2(20)2 7+2(Z-(2-u)) dans laquelle A et A2 sont tels que définis ci-dessus, Z est un anion inorganique et u est un nombre ayant une valeur de 0 ou 1. Des anions utilisables sont ceux qui sont stables dans des milieux acides; ils com- prennent les anions sulfate, nitrate et perchlorate, mais le nitrate est préféré. Des anions ayant une plus grande capacité de complexation que l'eau ou le lactate, comme les anions chlorure, bromure et iodure ne sont pas utilisables. Le sel "diaquo" est formé par la réaction stoechiométrique d'un dichlorure de cis-diamineplatine (II) avec un sel d'argent, de préférence le nitrate d'argent, dans un milieu aqueux à la température am- biante. Bien que la température ambiante soit préfé- rée pour la réaction, on peut utiliser des températu- res plus élevées ou plus basses, par exemple comprises entre 000 C environ et 50 0 environ. Le sel "diaquo" est instable en solution, et ainsi on doit utiliser des solutions fraîchement préparées. En variante, le sel "diaquo" peut être transformé en cis-JtA2(0H272(N03)2 solide stable par réaction avec une mole de base par atome-gramme de platine. Le complexe dimère peut être retransformé en un monomère avec de l'acide ou utilisé directement dans la préparation d'ascorbates. Les ascorbates qui sont utilisés sont des sels solubles dans l'eau, de préférence des ascorbates de métaux alcalins comme l'ascorbate de sodium ou de potassium. L'ascorbate est présent dans le mélange réactionnel de départ en excès molaire, c'est-&-dire que le rapport molaire de l'ascorbate au sel "diaquo" est supérieur à 1:1, et ordinairement est compris en- tre 1:1 et 3:1 environ, et il y a de préférence environ 2 moles d'ascorbate par atome-gramme de platine. La proportion préférée peut varier, toutefois, entre envi- ron 1,8 et environ 2,2 moles d'ascorbate par atome- gramme de platine. La concentration des corps en réac- tion dans le milieu aqueux ne présente pas une gran- de importance; toutefois, il est préféré que la mo- larité du milieu de réaction soit d'environ 0,2, c'est-à-dire comprise entre 0,1 environ et 0,3 envi- ron, en ce qui concerne le platine. Le mélange aqueux du sel diaquo d'amine et de l'ascorbate est agité à la température ambiante pendant un laps de temps suffisant pour former les composés selon la présente invention. Si on le désire, on peut utiliser des températures au-dessus ou au- dessous de la température ambiante, par exemple com- prises entre 0 0 environ et 30C environ. La période de réaction peut varier de quelques minutes à plu- sieurs heures. A la température ambiante, la solution devient d'un jaune brillant après 15 minutes environ, et ensuite elle s'assombrit lentement, devenant brun- jaune après 8 heures environ et noire après 24 heures environ. La solution est constamment acide, le pH étant de 4,9 environ au début et tombant à un niveau d'envi- ron 4,0 à environ 4,1, après une heure environ, après quoi il reste sensiblement constant. Le rapport de la portion ascorbate au platine (après précipitation par 9 volumes de méthanol) semble augmenter jusqu'à un maximum d'environ 2,1:1 en 2 heures environ, après quoi le rapport diminue. Si on utilise des temps de réaction de plus de 7 heures environ, une décomposi- tion des mailles PtA2 semble commencer. L'ascorbate selon la présente invention est recueilli à partir du milieu de réaction par une technique appropriée quelconque, de préférence par précipitation à partir de la solution au moyen d'un non-solvant pour le complexe, suivie d'une filtration et d'un séchage du précipité. On préfère des alcools tels que l'éthanol. Quand on utilise l'éthanol, la composition du produit est influencée par la quantité d'éthanol utilisée. Ainsi, le rapport de l'ascorbate au platine augmente quand la quantité d'éthanol aug- mente d'environ 3 fois à environ 6 fois le volume du mélange de réaction. Des augmentations supplémentai- res de la quantité d'éthanol au-dessus de 6 volumes de réaction conduisent à une réduction du rapport de la portion ascorbate à la portion platine. La structure exacte des complexes ascor- bate d'amine platine(II) selon la présente invention n'a pas été établie avec certitude. Toutefois, on pen- se que les produits obtenus comme décrit ci-dessus comprennent un mélange d'au moins deux des trois es- pèces représentées par les foxmules: ! CH20H. -H2011 Hu OCHOH H 0PtA2 tA2 CH OH 4NPFOH tA La séparation des espèces individuelles n'est pas possible parce que les composés se décomposent assez rapidement en solution aqueuse. Les mélanges ont typi- quement un rapport de l'ascorbate au platine compris a459247 entre 1,2:1 environ et 1,5:1 environ. Les spectres infrarouges des composés se- lon la présente invention possèdent les caractéristi- ques communes suivantes: 30 m11) Bandes larges et épaulements à >3000 cm-1, duesà A NEet 0H. 2) Une bande intense à 1720-1730 cm, due à 'O=O de l'ascorbate. (Cette bande est présente à 1700 cm-1 dans l'ascorbate de sodium). 3) Une bande large intense à 1600 cm 1, due à l'incurvation de NH2. 4) Bandes à 1140, 1100, 1030, 960 et 930 cm 1, que l'on pense être dues à des bandes C^-0 et 7-_0 d'ascorbate. Les composés selon la présente invention sont d'une utilité particulière dans la chimiothérapie des tumeurs chez les mammifères, s'étant révélés actifs contre S180a et L1210 chez les souris. Les com- posés sont administrés sous la forme de solutions aqueuses ou de bouillies aqueuses. En général, ils sont actifs à des doses comprises entre environ mg/kg et environ 200 mg/kg. L'activité maximale va- rie pour les composés différents, et va d'environ 30 mg/kg pour le dérivé d'éthylène-diamine à des doses aussi fortes que320 mg/kg pour la diammine. BDans les cas o une dose toxique a été atteinte, avec l'éthylè- nediamine, la dose efficace maximale était environ un quart ou moins de la dose toxique. Cela représente une amélioration nette par rapport à cisgt(IaH3)2012_7, qui, avec la même méthode de détermination, présente un activité maximale à 8-10 mg/kg avec une dose toxi- que de 16 mg/kg. Une plus grande différence entre la dose efficace et la dose toxique est préférée par les E459247 cliniciens parce qu'elle donne une plus grande marge de sécurité. Les exemples suivants illustrent la pré- sente invention. E XZMPhE I - Synthèse du cis-ascorbate de diammineplatine(II) On prépare une solution 0,6 M de cis- Zt(IE3)2(H20)2_7(N03)2 par la réaction stoechiomé- trique de ois-it(lNH3)2C12 7 avec du nitrate d'argent en milieu aqueux à la température ambiante. On ajoute cm3 de la solution fralchement préparée à une so- lution de 2,37 g d'ascorbate de sodium dans 10 cm3 d'eau. On agite le mélange résultant pendant 2 heures à la température ambiante, une couleur jaune se dé- veloppant progressivement. On ajoute 200 cm3 d'étha- nol et on agite le mélange pendant 2 heures supplé- mentaires dans l'air et il est ensuite réfrigéré toute une nuit. Le produit solide brun-jaune brut qui s'est formé est séparé par filtration et lavé à l'éthanol. On le dissout dans 20 cm3 d'eau et on ajoute lentement la solution à 200 cm3 d'éthanol, en agitant. Après maintien toute une nuit dans un réfrigérateur, le pro- duit jaune est séparé par filtration, lavé à l'éthanol et séché sous vide à la température ambiante pour don- ner 1,06 g du complexe cis-ascorbate de diammineplati- ne(II). On répète trois fois ce mode opératoire pour obtenir des échantillons supplémentaires du cis- ascorbate de diammineplatine (II). Analyse: %a)ç N 5w N/Pt C/Pt Trouvé: Echantil- on 1 18,73 2,74 5,44 " 2 19,00 2,63 5,27 33,99 2,16 9,08 " 3 19,21 2,78 5,81 37,75 2,14 8,26 n 4 20,37 2,81 5,54 39,45 1,96 8,40 Calculé: 18,95 2,65 4,91 34,21 2 9 Pt(NO3)2C99O14* *Déterminé en utilisant les rapports en nombres en- tiers du carbone au platine correspondant le mieux aux résultats observés. Le spectre infrarouge du complexe cis- ascorbate de diammineplatine(II) ainsi préparé, qui est reproduit sur la figure 1, est caractérisé par les bandes d'absorption suivantes. Bande d'absorption, Identification pâte au Nuiol 3450 sh( N shI E 3300 brç 1730 m 1660 m O=0 1610 s J 1310 sh 2 1100 sh 1070 s C-C *1030 a 1't-o 960 m 930 w 860 w 820 w 760 sh 610 m Pt-N ah = épaulement; s = forte; m moyenne; w = faible; br = large. Le spectre ultraviolet d'une solution aqueuse du complexe (molarité 2 x 10-4 en platine) est reproduit sur la figure 2 et le spectre de résonance magnétique nucléaire est reproduit sur la figure 3. - EXEMPLE II - On répète le mode opératoire de l'Exemple I, à ceci près que la quantité d'éthanol utilisée com- me précipitant est modifiée et qu'on en utilise de 2 à 9 fois le volume de la solution de réaction. Des analyses des cis-ascorbates de diammineplatine(II) ré- sultants sont résumées comme suit: Echan- tillon II-A II-B II-O II-D II-E Volumes d'éthanol par volume de mélange de réaction Analyse du produit * 38,02 ,85 34,50 39,45 Ascorbate/Pt 1,12 1,26 1,55 1,20 * Quantité insignifiante de précipitation. - EXEMtPLE III - On répète le mode opératoire décrit dans l'Exemple I, à ceci près qu'on fait varier la durée de réaction de I à 7 heures et qu'on utilise 9 volumes d'éthanol pour précipiter le cis-ascorbate de diammine- platine(II). Les analyses des produits sont résumées comme suit: ú459247 Temps de réaction, Analyse du produit heures %t Ascorbate/Pt N/Pt C/Pt I 40,44 1,14 1,99 8,40 2 39,45 1,20 1,96 8,40 4 40,27 -* 1988 8,22 7 42,99 1,02 1,82 7,38 *Echantillon trop petit pour détermination. - - Synthèse du cis-ascorbate de bis(méthylamine)platine(II) On met en suspension 1,065 g de cis-Zt(OH3NE2)2Cl02_7 dans 40 cm3 d'eau et on ajoute directement 1,10 g de AgNO3 solide (Ag:Pt = 2:1). On agite le mélange à la température ambiante pendant 3 heures, à l'abri de la lumière. Après avoir séparé par filtration l'AgOl et vérifié à l'aide de KOl qu'il n'y avait plus d'argent, on ajoute 1,29 g d'ascorbate de sodium (ascorbate:Pt = 2:1) au filtrat et on agite pendant 2 heures à la température ambiante. Quand il ne se produit plus de précipité lors de l'addition d'éthanol, tous les solvants sont éliminés sous vide à 30 C. La matière solide jaune résultante est mise en bouillie dans de l'éthanol, séparée par filtration et lavée à l'éthanol et ensuite dissoute dans 5 cm3 d'eau. On ajoute la solution aqueuse à 200 cm3 d'éthanol, en agitant. Après agitation pendant 30 minutes à la tem- pérature ambiante et réfrigération toute une nuit, le produit solide jaune pâle est séparé par filtration, lavé à l'éthanol et séché sous vide pour donner 0,42 g de cis-ascorbate de bis(métbylamine)platine(II). Le produit est hydroscopique et se décompose quand il est exposé à la lumière. ú459247 Analyse: Calculé: Pt(CH3MH2)2(SH8011)*C, 22,35%; H 3,37%; N 5,21% Trouvé C 23,11%; H 3,4(/o; N 5,08% *Formule empirique Le spectre infrarouge de ce produit est reproduit sur la figure 4. Les identifications des ban- des majeures sont les suivantes: Bande d'absorption Pâte au Nujol 3400 shi 3240 br> 3150 sh 1720 s Identific ation -?m eC 1600 s E2 1350 sh 1140 11m 1100 m 1030 s 970 m 920 w 3C-C C -0 860 w 820 w 750 w Le spectre de résonance magnétique nu- cléaire du complexe cis-ascorbate de bis(méthylamine)- platine(II) est reproduit sur la figure 5. - EXkLE 5 - Synthèse de l 'ascorbate d' étkylènediamineplatine(II) Une solution 0,25 M de Jt(en)(H20)2_7 (NO3)2 est préparée par la réaction stoechiométrique ú459247 de Jt(en)C012_ avec du nitrate d'argent en milieu aqueux à la température ambiante. On ajoute 48 cm3 de la solution franchement préparée à une solution de 4,74 g d'ascorbate de sodium dans 12 cm3 d'eau. Le mélange vire au vert pâle très rapidement, puis pro- gressivement au jaune après agitation pendant 2 heures à la température ambiante- On ajoute 400 cm3 d'éthanol et on agite le mélange pendant 2 heures supplémentai- res, puis il est mis au réfrigérateur toute une nuit. * Le produit jaune pâle est séparé par filtration, lavé à l'éthanol et redissous dans 40 cm3 d'eau. Après filtration pour élimination de la matière blanche in- soluble, on ajoute la solution à 400 cm3 d'athanol, on l'agite pendant 2 heures et on la laisse au réfri- gérateur toute une nuit. Le produit de couleur crème est séparé par filtration, lavé à l'éthanol et séché sous vide pour donner 1,12 g d'ascorbate d'éthylène- diamineplatine(II) solide. Analyse: Calculé: Pt(en)C0O9011)*C, 24,09%; H 3,12eo; N 5,11%; Pt 35,57% Trouvé: 0, 23,59%; H 3,02%; N 5,38%; Pt 35,44% *Formule empirique (en=éthylènediamine) Le spectre infrarouge du cis-ascorbate d'éthbylènediamineplatine(II) est reproduit sur la figu- re 6. Les identifications des bandes majeures sont ré- sumées comme suit: a459247 Bande d'absorption, pâte au Nulol 5400 sh 3230 br 3140 sh J 1720 s 1610 br 1300 sh 1040 s 960 w 920 w 870 m 810 w 750 sh 650w l 520 w J Le spectre de résonance plexe est reproduit sur - EXJELE VI - Synthèse de l'ascorbate Ident ificati on 9EH -JO 9C=0 ô RH2 a%- O-2 ko-O magnétique nucléaire du com- la figure 7. de diaminocyclohexaneplatine(II) On prépare une solution 0,2 M de X t(DACHXN)(H20)2_7(N03)2 par la réaction stoechiomé- trique de gt(DACnN)c12_ avec du nitrate d'argent en milieu aqueux à la température ambiante. On ajoute directement 1,58 g d'ascorbate de sodium à 20 cm3 de la solution fraîchement préparée. Une petite quantité de matière noire insoluble est séparée par filtration et on ajoute 200 cm3 d'éthanol. Après agitation pen- dant une heure supplémentaire et maintien au réfrigé- rateur toute une nuit, le produit jaune est séparé par filtration, lavé à l'éthanol et séché sous vide pour &459247 donner 0,18 g d'ascorbate de diaminocyclohexanepla- tine(II). Calculé: Pt(DACHXN) (C7H809)* C, 28,62%; E, 4,06%; N, 5,13% Trouvé: C, 28,63%; H, 3,72%; N, 4,98%. *Formule empirique (DACIN = 1,2diaminocyclohexane) Le spectre infrarouge du complexe est reproduit sur la figure 8. Les identifications des bandes majeures sont résumées comme suit: Bande d'absorption, paâte au Nujol Identification 3400 ehi H 3240 br NH, 0OH 3130 sh 1720 s '=C0 1610 a 1350 sh 1150 m 1100 m 1060 m 1030 m 970 sh 920 sh 860 w 820 w 750 sh ô N2 ô 2 NE2 C-C C-0 - EXEMPLE VII - Evaluation des composés en anti-tumeurs contre S180a ce aui concerne l'activité Les composés sont évalués comme suit en ce qui concerne l'activité anti-tumorale contre l'asci- te S180 chez des souris suisses CFW femelles. Des souris CFW, pesant en moyenne 20 g, sont soumises à un examen immédiat et placées dans des cages nouvellement préparées. Le jour zéro, on inocule aux souris 0,2 cm3 d'une suspension saline fraîchement préparée (0,15 M NaCl) contenant I x 107 cellules de tumeur par cm3, ou un total de 2 x 106 cellules. Cet inoculum est franchement préparé en utilisant des sou- ris de "transfert" aiuxquelles on a injecté des cellu- les de tumeur la semaine précédente. Cet inoculum est le produit final d'une série d'étapes comprenant (1) le prélèvement des cellules à partir de la cavité péri- tonéale de la souris de transfert sacrifiée, (2) des opérations alternées de centrifugation et de lavage (2-3 fois avec une solution saline froide) pour éli- miner le sang et d'autres constituants indésirables éven- tuellement présents et finalement (3) la dilution (1:3) de la masse de cellules tassées avec une solution saline (la centrifugation finale étant effectuée à 1000 tpm pendant 2 minutes). On effectue un comptage de cellules sur un échantillon dilué au coefficient 2000 de cette suspension 1:3 au moyen d'un Coulter Counter. On effectue une dilution finale à 1 x 107 cellules par cm3 d' après le résultat moyen du comptage. De jour 1, des solutions des composés essayés sont pré- parées et injectées aux souris, chaque souris d'un grou- pe de quatre recevant le même composé au même niveau de dosage. De plus, ce môme jour, on utilise deux types de témoins (6 souris par groupe): (1) témoins normaux (1 groupe): 0,5 cm3 du milieu utilisé comme solvant pour le composé essayé, et (2) Témoins positifs (1 groupe): un agent anti-tumeurs connu cis-/Pt(NH3)2 C12_7 en solution saline à 8 mg/kg, utilisé pour déter- miner la réponse du système biologique. L'efficacité d'un composé est mesurée par l'accroissement de la durée de survie des animaux soumis à l'expérimentation par rapport aux témoins (à partir du jour de l'inoculation de la tumeur (jour zéro). Pour normaliser les résultats des essais et permettre d'effectuer des comparaisons entre eux, le jour de l'évaluation est choisi arbitrairement comme étant le jour correspondant au double de la durée moyenne de survie (ou du nombre moyen de jours avant la mort) des témoins normaux. Cela entraîne une limite supérieure pratique de 10IPo pour les % ILS pouvant être obtenus. Pour le calcul, les souris survivantes le jour de l'évaluation sont considérées comme mourant ce jour-là. Le % ILS est la quantité suivante: d'expéri- % ILS durée moyenne de survie des souris mentation-1) % durée moyenne de survie des souris témoin x10% Des valeurs d'ILS de plus de 50% repré- sentent une activité notable; celles au-dessus de % représentent une excellente activité. Les comolexes solubles d'ammine, de mé- thylamine et d'éthylène-diamine sont administrés sous la forme de solutions aqueuses. Le complexe de diamino- cyclohexane insoluble dans l'eau est administré sous la forme d'une bouillie aqueuse. La concentration pour une dose donnée peut être calculée comme suit Concentration pour une dose donnée (en mg/cm3) - 0,04 x (Dose en mg/kg). Des résultats d'essais de présélection concernant l'activité antitumorale des composés cis-gtA2(ascorbate)_7 sont résumés comme suit: Résultats d'essais de ois-T4A,(ascorbate)7 présélection anti-tumorale pour des composés contre le système de tumeur d'Ascite S180 Composé Milieu Exemple I H20 (A=NH3) Do sea (mg/kg) :LS Souris survivantes le Jour 30 1/4 4/4 3/4 2/4 % ILS Témoins positiúsb Souris survivantes le jour30 2/6 Exemple I (répété) (A=EH3) Ex. II-D H20 (ANE3) Ex. IV (A=CH3NE2 Ex. V 3/6 0/6 2/6 H20 2/4 4/4 4/4 3/4 0/4 0/4 3/4 4/4 3/4 3/4 0/4 0/4 1/4 1/4. 3/4 H20 H20 3/6 /...... tu *b V'I Résultats dessais de pr6sélectio_ anti-tumorale pour des gomposé. Ais-{asc0rbate)7 contre le systèEM de tumeur d'Ascite S18 (Suite) Cornpos6 Lllieu Dosea ouris srvivantes Témoins Postiitab /k''..--L (a&/kg) LS le jour 30,souris survtvantes ( 2=en) 60 76 3/4 49 1/4 Exemple VI H20 25 72 2/4 69 3/6 (A2=DACEXN) bouil- 50 99 2/4 lie 100 91 3/4 100 4/4 r) -à% a 4 souris par dose pour les cis-ascorbates de diamineplatine(II). b Témoins positifs: 8 mg/kg de cis-Pt(NH3)2C12 en solution saline. au %A Ainsi qu'il est évident d'après ce qui précède, tous les composés présentent une excellente activité contre le système de tumeur S180a chez les souris, et tous sont efficaces dans une plage de do- sage d'environ 25 à environ 200 mg/kg; seul le com- plexe d'éthylènediamine se révèle être toxique dans les intervalles essayés, et seulement quand on atteint une dose de 240 mg/kg. - EXEMPLE VIII - Evaluation de l'activité anti-tumorale du dérivé de diammine selon la présente invention contre le systè- me L1210 chez la souris. On détermine aussi l'activité du dérivé de diammine selon la présente invention (Exemple I) contre la leucémie lymphoide L1210 chez la souris, en déterminant la durée moyenne de survie par rapport à des souris témoin (T/C). La quantité T/0* est calculée comme suit /C* Durée moyenne de survie (essai)) 100 Durée moyenne de survie (témoin) x Des valeurs de T/C de 125 ou plus repré- sentent une activité notable. Les résultats de ces essais sont résumés ci-dessous. * T/C est en relation avec % ILS comme suit: T/C-100= %ILS. Détermination de l'activité anti-tumorale du composé cis-asoorbate de diammineplatine(II) (Exemple I) contre le système de tumeur L1210 Dosea o/C Toxicité (m g/kg) Souris survivantes (,g/kg) le,jour Tb 3/6 168 6/6 127 6/6 20 108 6/6 103 6/6 108 6/6 a Régime de dosage - Doses les jours 1, 5 et 9 b T = toxique selon les critères NOI (Geran et autres, "Protocols for Screening Chemical Agents and Natural Products against Tumors and Other Bio- logical Systems" (3ème édition), Cancer Chemo- therapy Reports, Part 3, été 1972). Une excellente activité (T/C - 168) est observée à un niveau de 80 mg/kg et une activité mar- ginale (T/O - 127) est observée à 40 mg/kg. On trouve une activité maximale dans la même plage de dosage qu'avec le système de tumeur S180a. Ces résultats se comparent avantageusement à ceux obtenus avec cis-Ot(NH3) 2012_7, qui donne un T/C maximal de 152 à mg/kg en utilisant le même régime de dosage les jours 1, 5 et 9. REVENDICATIONS 1) Un composé cis-ascorbate de diaminepla- tine(II) représenté par la formule générale; cis/t (II)A2(x)m(OH) y dans laquelle Pt se trouve dans l'état de valence II et est coordonné avec A dans une configuration cis; A est de l'ammoniac ou un ligand alcoylamine monodenté; A2 est un ligand amine bidenté; I est la portion as- corbate; m est un nombre ayant une valeur de 1 à 2; n est un nombre ayant une valeur de O & 1, et la som- me de m + n n'est pas supérieure & 2. 2) Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que A a la formule RNH2 et R est choisi parmi l'hydrogène et un groupe alcoyle inférieur. 3) Un composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R est de l'hydrogène. 4) Un composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que R est un groupe alcoyle infé- rieur. 5) Un composé selon la revendication 4, caractérisé en ce que R est un groupe méthyle. 6) Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que A2 est représenté par la for- mule: R1 R2 H2N - - CH - NH2 dans laquelle R1 et R2, quand ils sont pris séparément, sont choisis chacun parmi l'hydrogène et un groupe al- coyle inférieur; et R1 et R2, quand ils sont pris en- semble, forment le radical divalent: R3 R4 R5 R6 I! i l - CH - cH - CH - cH - o chacun des R3 R6, quand ils sont pris séparément, est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur, donnant un 1,2-diaminocyclohexane représenté par la formule: R3-CH 1CH-R6 H-CH H2N NH2 67) Un composé selon la revendication 6, caractérisé en ce que R et R sont chacun de l 'hydrogène. 8) Un composé selon la revendication 6, caractérisé en ce que les groupes R3 à R6 sont chacun de l'hydrogène. 9) A titre de médicament utile notamment au traitement des tumeurs malignes chez un mammifère qui en est atteint, un composé selon l'une des reven- dications 1 & 8. 10) Une composition pharmaceutique conte- nant à titre de principe actif un composé selon l'une des revendications 1 à 8.