Brevet FR2439017A1 — publié le 19800516

La présente invention est relative a un liquide céphalorachidien artificiel. Le liquide céphalo-rachidien (L.C.R.) qui est sécrété par les plexus choroides situés dans les ventricules cérébraux et qui baigne les cavités ventriculaires et les espaces sous arachnoldiens qui gainent le cerveau et la moelle, joue,dans le processus biologique, un rôle important et notamment un rôle mécanique de soutien et de protection, une sorte de matelas liquide. I1 est, médicalement parlant, très important de pouvoir disposer en quantités voulues d'un L.C.R. artificiel dont les caractères physiologiques soient aussi proches que possible du L.C.R. humain, et ceci en particulier - pour éviter la dessiccation du tissu nerveux lors d'interven tions chirurgicales ;; - pour avoir un excellent véhicule de différents médicaments (anticancéreux, antibiotiques,corticoldes,etc...) destinés à agir in situ soit au niveau du cortex, soit au niveau de la moelle - pour pouvoir l'injecter dans le canal rachidien au niveau des ventricules, afin de pouvoir mesurer- lapressionintracranienne au niveau des différentes cellules - pour disposer en quantités voulues d1un liquide de dialyse du L.C.R. humain et notamment pour les maladies autoimmunes - pour injecter des produits de contraste lors des radiographies craniennes, et - pour disposer d'un excellent solvant pour des protéines injec tables. On utilisait jusqu'd maintenant comme liquide de remplacement du L.C.R. humain,le soluté physiologique de chlorure de sodium. Quoique bon marché et facile à préparer, ce liquide ne peut pas être utilisé dans tous les cas : il dessèche en effet les cellules nerveuses et il peut même provoquer en cas d'utilisation prolongée (pendant des interventions chirurgicales par exemple) un endommagement irréversible des cellules. On a essayé également d'autres solutions de sels minéraux qui se sont avérées instables, se troublent et précipitent. La présente invention s'est en conséquence donné pour but de pourvoir a un L.C.R. artificiel très proche par ses qualités physiques, chimiques et physiologiques du L.C.R. humain, facile à préparer, stable et de longue conservation et sans aucune action néfaste sur les cellules nerveuses. La présente invention a pour objet un liquide artificiel céphalo-rachidien caractérisé en ce qu'il est constitué de 0,3 à 0,9 g/l d'hexose et de sels minéraux en quantité voulue pour obtenir un abaissement du point de congélation, ou At cryoscopique, compris entre - 0,5 et - 0,70C. Suivant un mode de réalisation avantageux de l'objet de l'invention, l'hexose est du glucose et/ou du lévulose. Suivant un autre mode de réalisation avantageux de l'objet de l'invention, les sels minéraux,dont le poids total est compris entre 6 et 12 g/l, sont constitués par des cations alcalins et/ou alcalino-terreux et par des anions pris dans le groupe qui comprend les chlorures, les sulfates, les bicarbonates et les phosphates. Suivant un autre mode de réalisation particulièrement avantageux de l'objet de l'invention, le pH du L.C.R. artificiel est compris entre 6,5 et 7,5. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre. La présente invention vise plus particulièrement le L.C.R. artificiel conforme aux dispositions qui précèdent, ainsi que les procédés de préparation de ce L.C.R. artificiel et les moyens propres à la mise en oeuvre de ce procédé, de même que les médicaments et préparations pharmaceutiques contenant ce L.C.R. artificiel soit en tant que constituant actif, soit en tant que véhicule. La présente invention pourra être mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, dans lequel on trouvera un exemple de préparation du L.C.R. conforme à la présente invention ainsi qu'un compte-rendu d'expérimentations pharmacologiques. Il doit être bien entendu, toutefois, que cet exemple de mise en oeuvre et ce coepterendu d'expérimentations phzmacologiques,sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMPLE DE PREPARATION On dissout 60 g de glucose anhydre (qualité CODEX) apyrogène dans 80 1 d'eau distillée (qualité pour préparations injectables) portée à 800C. On mélange jusqu'à dissolution complète. On ajoute ensuite, dans l'ordre, sous bonne agitation - MgS04, 7H20 6,16 g K2H P04 9,48 g - KC1 10,50 g CaC12, 6H20 13,88 g - Mg Cl2, 6H2O 15,43 g - NaCl 670,00 g - NaHC03 222,60 g Tous les produits sont purs, de qualité "CODEX". On maintient la température à 800C et on ajuste le pH, si besoin est, à 7,2 + 0,1 soit avec de la soude N, soit avec du HC1 h. On complète alors la solution à 100 litres, puis on filtre stérilement à 800C en répartissant dans des flacons en verre ou en plastique neutres. L'analyse de cette solution fait apparaître la composition qualitative et quantitative suivante - Sodium 141,0 mEq/l ou i41 mmoles - Potassium 2,5 " " 2,5 - Calcium 2,5 " 1,25 - Magnésium 2,0 " " 1 - Chlorures 126,5 n " 126,5 - Bicarbonates 26,5 " " 26,5 - Sulfates 0,5 n 'I 0,25 - Phosphates 1,09 n 0,545" - Glucose 0,6 g/l Indice de réfraction : 1,3350 pH : 7,1 Le L.C.R. artificiel conforme à la présente invention peut également être transporté ou stocké soit à l'état concentré, soit à l'état lyophilisé. I1 est alors dilué avant l'emploi par de l'eau distillée stérile apyrogène en quantités voulues pour obtenir le L.C.R. de qualité recherchée. COMPTE-RENDU D'EXPERIMENTATIONSPHARMACOLOGIQUEs A/ Toxicité aigüe 1.- Technique des essais : l'étude de la toxicité aigüe a été réalisée sur la souris blanche adulte d'un poids moyen de 20 g,par la voie d'administration intraveineuse. Les injections ont été faites dans la veine de la queue en utilisant la solution produit conforme à l'invention, la vitesse de l'injection étant toujours de 0,1 ml pour 10 secondes.Quatre séries de 10 animaux de même sexe ont reçu des doses croissantes de la préparation conforme & l'invention, la mortalité dans chaque lot a été relevée après 24 heures, 3 jours et 5 jours. 2.- Résultats s ces résultats sont résumes dans le Tableau I ct-après TABLEAU I Dose de la solu- Série Mortalité talon conforme à d'animaux l'invention après 24h après 3 après 5 jours jours 5 ml/kg animal 1 0 O 0 10 ml/kg animal 2 0 0 0 25 ml/kg animal 3 0 0 0 50 ml/kg animal 4 0 0 0 La toxicité aigre de la préparation conforme a l'inven- tion doit donc Autre considérée comme faible. B/ Utilisatlon de la prparation conforme a l'lnventlon en tant que véhicule pour les médicaments L'étude a été réalisée sur 15 lapins (dont 5 témoins) et sur 15 chiens (dont 5 témoins). On a injecté toutes les 30 minutes 0,5 mi du L.C.R. con forme à l'invention -aux animaux d'expérience et 0,5 ml de solu té isotonique de NaCl aux 10 témoins. Après chaque injection, on a mesuré : - la variation de la pression intracranienne - l'électroencéphalogramme. On On n'a constaté aucune différence significative ni de la pression intracranienne ni du rythme de l'encéphalogramme pour les animaux traités. Par contre,trois des animaux témoins présentaient des modifications sensibles de leur rythme de l'encéphalogramme. C/ Etude histologique L'étude histologique a été effectuée aussi bien en microscopie optique qu'en microscopie électronique et elle a porté sur des prélèvements effectués au niveau de trois structures : le cortex, l'épendyme ventriculaire et les plexus choroïdes. Animaux utilisés : 20 lapins auxquels on a appliqué directement au niveau de ces trois structures - du soluté isotonique à l'hémisphère gauche, - de la solution conforme à l'invention à l'hémisphère droit. On constate une bien meilleure tolérance au niveau de l'hémisphère droit. D/ Essais de culture de tissu nerveux Trois séries d'essais ont été effectuées - une étude en double aveugle à l'aide de culture sur milieu au soluté isotonique de chlorure de sodium et au soluté conforme à la présente invention ; - une étude sur milieu de culture usuel (milieu de HANKS) et sur milieu au soluté conforme à l'invention ; - une étude comparative des cultures après durée d'exposition variable. Ces études ont démontré pour toutes les expériences et sans aucune exception une parfaite compatibilité entre la cellule nerveuse et le L.C.R. artificiel conforme à l'invention. Par contre, toutes les cultures contenant le soluté injectable isotonique au chlorure de sodium présentaient une proportion importante de cellules déformées et rétrécies. Les résultats de l'expérimentation dont il est rendu compte dans ce qui précède, permettent de situer le L.C.R. artificiel conforme à l'invention sans équivoque comme un excellent produit de remplacement du L.C.R. humain, pouvant, entre autres, parfaitement convenir en tant que véhicule de différents médicaments introduits par la voie céphalo-rachidienne, laquelle constitue parfois une voie idéale d'accès pour certains médicaments agissant sur les centres du névraxe. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de façon plus explicite ; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. REVENDICATIONS 1 - Liquide artificiel céphalo-rachidien (L.C.R.), caractérisé en ce qu'il est constitué de 0,3 à 0,9 g/l d'hexose et de sels minéraux en quantité voulue pour obtenir un abaissement du point de congélation, ou dt cryoscopique, compris entre - 0,5 et - 0,70C. 2 - L.C.R. artificiel selon la Revendication 1, caractérisé en ce que l'hexose est du glucose et/ou du lévulose. 3 - L.C.R. artificiel selon la Revendication 1, caractérisé en ce que les sels minéraux, dont le poids total est compris entre 6 et 12 g/l,sont constitués par des cations alcalins et/ou alcalino-terreux et par des anions pris dans le groupe qui comprend les chlorures, les sulfates, les bicarbonates et les phosphates. 40- L.C.R. artificiel selon l'une quelconque des Revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le pH du L.C.R. artificiel est compris entre 6,5 et 7,5. 5 - L.C.R. artificiel selon l'une quelconque des Revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il contient - de 0,3 à 0,9 et de préférence de 0,5 à 0,7 g/l de glucose - de 130 à 160 " de 134 à 145 mEq/l d'ions Na+ - de 2,2 à 2,8 " de 2,3 à 2,7 " " K+ - de 2,2 à 2,8 n de 2,3 à 2,7 " " Ca++ - de 1,6 à 2,3 " de 1,8 à 2,2 " " Mg ++ - de 110 à 150 " de 120 à 140 " " Cl -de 20 à 35 " de 25 à 30 '1 " CO H - de 0,40 à 0,60 " de 0,45 à 0,55 " " S04 - - de 0,8 à 1,4 " de 0,9 à 1,3 " " HPO4 60- Composition thérapeutique caractérisée en ce qu'elle contient le L.C.R. artificiel selon l'une quelconque des Revendications 1 à 5 en tant que principe actif. 70- Composition thérapeutique caractérisée en ce qu'elle contient le L.C.R. artificiel selon l'une quelconque des Revendications 1 à 5 en tant que véhicule pharmaceutique. 80- Application du L.C.R. artificiel selon l'une quelconque des Revendications 1 à 5 ,à des mesures biochimiques et/ou biophysiques.