Brevet FR2434171A1 — publié le 19800321

La présente invention concerne de nouveaux composés bis-indoliques et un procédé de préparation de ces composés ainsi que-leur application en tant que médicaments. Il est connu depuis un certain temps que des alcaloïdes naturels, tels que la vinblastine ou la vincristine qui répondent à la formule R = CH3 : vinblastine, R = CH0 : vincristine) et qui peuvent être isolés de plusieurs espèces de Catharanthus, en particulier de C. roseus présentent des propriétés anti- tumorales. Compte tenu du fait que ces alcaloïdes ne sont présent qu'en très faible quantité dans la plante, on a cherché à préparer des dérivés plus actifs de ces composés, voir ainsi les BSM 5487 M, 6668 M, le brevet français 22218 095. On a également proposé, voir les brevets français 74 43221 et 77 11081, des procédés de synthèse ouvrant la voie à de nouveaux composés de structure identique mais diversement substitués. Néanmoins dans l'ensemble de la technique antérieure les composes proposés conservaient toujours le squelette de base. de la vinblastine0 a presente invention a pour objet des composés chimiques nouveaux possédant notamment une activité antitumorale et présentant un squelette de base différent de celui de la vinblastine. Il s'agit de composés de formule : dans laquelle : R'1 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy, acyle, formyle ou halogénoacyle, R'2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyles R'3 et R"3 identiques ou différents, représentent un atome d'hy drogène ou un radical hydroxyle, alcanoyloxyle, ou bien R'3 et Rn3 forment ensemble un groupement carbo nyle, ou bien R'3 et R'5 forment ensemble un pont époxy ou une double liaison, R'4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyl oxycarbonyle, hydroxyméthyle, alcanoyloxyméthyle ou acétamido, R'5 et Rn5 identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle, alcanoyloxyle, éthyle ou hydroxy-2 éthyle, R'6 représente un atome d'hydrogène ou un radical éthy le, hydroxy-2 éthyle ou acétyle, R1 représente un atome d'-hZdrogène ou un radical alcoy le, formyle ou acyle, R2 représente un atome d'hydrogône ou un radical alcoxy, R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle ou alcanoyloxyle ou bien, R3 et R4 forment ensemble un pont époxy ou une double liaison, R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle, alcanoyloxyle ou bien, R4 et R5 forment ensemble un pont époxy, R6 représente un radical alcoyloxycarbonyle, hydrazido acétamido, hydroxyméthyle ou alcanoyloxyméthyie, R5 et 37 représentent un atome d'hydrogène ou un radical hydro acyle ou alcanoyloxyle, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides et leurs sels d'ammonium quaternaires. Les radicaux alcoyles mentionnés dans la présente description sont de préférence des radicaux alcoyles inférieNrg droits ou ramifiés ayant de 1 à 5 atomes de carbone, comme les radicaux méthyl et éthyle Les radicaux alcoxy mentionnés dans la présente description sont de préférence des radicaux alcoxy inférieurs correspondant aux radicaux alcoyles précédents, c'est-à-dire par exemple les radicaux méthoxy et éthoxy. Les radicaux acyles cités dans la présente description sont par exemple les radicaux acyles provenant des acides carboxyliques inférieurs, saturés ou non saturés, tels que les radicaux acétyl ou propionyl. De même, les radicaux alcanoyloxy sont de préférence des radicaux correspondant aux radicaux acyles précédents, comme le radical acétyloxy. Les radicaux alcoyloxycarbonyle sont de préférence des radicaux dans lesquels la partie alcoyle correspond à la définition préférée donnée précédemment, par exemple le radical méthoxycarbonyle. Parmi les sels d'addition et les sels d'ammonium quaternaires, on préparera de préférence les sels nonstoslques pharmaceutiquement acceptables tels que les sels d'acide inorganique comme l'acide chlorhydrique, ou d'acide organiques comme l'acide acétique, l'acide propionique, l'acide succinique ou l'acide tartrique. L'invention concerne plus particulièrement les composés de formule Ia dans laquelle R'3 représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy, et R'5 représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy, ou R'3 et R'5 représentent ensemble un pont époxy ou une double liaison R"5 représente un atome d'hydrogène ou un radical éthyle, Ri représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle, formyle ou acyle R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical métho xy, R7 représente un radical alcanoyloxyle, la ligne pointillée représente une double liaison éventuelle ainsi que les sels correspondants. La présente invention concerne également un procédé de préparation de composé de formule I, caractérisé én ce que a) l'on fait réagir un composé de formule Il dans laquelle les substituants ont la signification donnée précédemment, en présence dtun réactif formateur d'ion immonium,et b) en'ce que l'on traite le produit obtenu par de l'eau, et sépare le composé de formule I. Parmi les agents formateurs d'ion immonium, on utilise de préférence les halogénures, anhydrides ou sels d'acides organiques ou inorganiques en particulier d'acides carboxyliques halogénés (en particulier fluorés) ou non Les réactifs formateurs d'ion immonium sont par exemple l'anhydride d'acide acétique ou trifluoroacétique. L'étape a) est conduite de préférence dans un solvant organique anhydre tel qu'un solvant chloré, chlorure de méthylène, dichloroéthane ou chloroforme. La réaction a) est conduite de préférence à une température comprise entre -50C et +50C par exemple OOC. L'étape b) est mise en oeuvre de préférence à l'aide d'un ou plusieurs solvants organiques non nucléophiles contenant de l'eau, comme solvant non nucléophile on utilise de préférence le tétrahydrofuranne ou le dioxanne. L'étape b) peut être conduite à température ambiante. Lorsque lton utilise un solvant différent dans l'étape a) et dans l'étape b), il est nécessaire de chasser le solvant du mélange réactionnel de l'étape a) avant la mise en oeuvre de l'étape b), on peut par exemple le distiller. il est possible également de conduire l'étape a) et l'étape b) dans un même solvant, dans ce cas l'étape a) est conduite dans le solvant anhydre et on rajoute de l'eau pour la mise en oeuvre de l'étape b). la séparation de I peut être conduite par tout moyen connu de séparation, par exemple on peut extraire le produit de formule I par un solvant chloré tel que le chloroforme, puis séparer le composé de formule I de la phase chlo roformique par chromatographIe préparative. La séparation conduit en général à l'obtention d'un sous-produit qui, par réduction, donne un composé de formule III mentionné ci-dessous qui peut être recyclé. Les composés de formule II sont connus (voir les brevets cités précédemment) ou peuvent être obtenus à partir de composés deformule III par des procédés connus dans ce.domaine en particulier par oxydation par exemple à l'aide d'acides porbenzoïques dans un solvant notamment l'acide m-chloroperbenzoïque dans le chioro- forme: ou dans le chlorure de méthylène.. Les composés de formule' III sont connus ou peuvent être préparés par des procédés décrits dans les brevets précédemment cités. D'autres caractéristiques de mise en oeuvre du procédé selon la présente invention pourront être déduites des. exemples-suivants : - EXEMPLE (schéma page 8). a) Préparation du Nb' oxyde de #15' deshydroxy-20' vincaleucoblastine (II') A une solution de #15' deshydroxy-20' vincaleucoblastine (III') (748 mg ; 0,94 mmole) dans 10 ml de chlorure de méthylène à 0 G sous agitation et sous argon, on ajoute en une seule fois 180 mg (1,04 mmole) d'acide méta chloro-perbenzoïque. On laisse en contact 30 mm à 0 C. Puis on reprend le milieu réactionnel par 100 ml de chloroforme et on- lave la phase organique 4 fois avec 3 mi d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 40 g/i. La phase organique est ensuite lavée à neutralité par de l'eau saturée de chlorure de sodium (3 fois 10 ml), séchée par du sulfate de sodium, filtrée et évaporée sous vide pour fournir 712 mg de Bb' oxyde de # 15' deshydroxy -20' vincaleucoblastine (Rdt : 93%). U.V. (#nm, #) : 213, 268, 289, 293, 310.RMNH (400 MHZ ; # = OPPM.TMS ; J : Hz) 9,50 (#, 1H)C16-OH ; 8,19 (#,1H)Na'-H ; 7,70 (d,1H, J#7,5)C9, H ou C12,H ; 7,19 et 7,14C10,H et C11,H ; 7,07 (d,J#7,5)C12,H ou C9,H ; 6,43 (#,1H)C9H ; 6,11 (#,1H)C12H ; 5,84 (dd,1H,J14,15#10Hz et J3,14# 4,5C14H ; 5,44 (1H)C15,H, 5,41 (#,1H)C17-H ; 5,27(d,1H, J14,15#10Hz)C15H ; 4,51 (m, 2H) 4,32 (d,1H) et 3,98 (d,1H) :Nb'CH ; 3,84 (#,3H), 3,78(#,3H) et 3,69 (#,3H)C11OCH3, C16CO2CH3 et C16,CO2CH3 S,62 (#,3H)NaCH3; 2,09(#,3H)OCOCH3 ; 1,06 (t,3H,J18',19' : 7Hz)C18,H et 0,64 (t,3H,J18,19#7C18H - S.M. : 808, 806, 792 (M-16), 777,761,733, 669,633,631,612,611,610,510,469,282,222,200,193,144,136,135, 122,121 (pic de base), 108,107. b) Préparation de la nor-6' #15' deshydroxy-20' vincaleucoblastine (I') - À une solution du Nb' oxyde précédent (345 mg ; 0,43 mmole) dans 2 ml de chlorure de méthylène sec à 00C sous agitation et sous argon, on ajoute 276 l d'anhydride trifluoroacétique (1,89 mmole). On laisse en contact 2 h à 0 C. Le milieu réactionnel est évaporé à sec à la pompe électrique et repris par 8 ml de tétrahydrofuranne et 30 mi d'eau, agité à température ambiante pendant I heure, repris par 50 ml de chloroforme et lavé avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. La phase organique est ensuite séchée et évaporée.Le produit brut ainsi obtenu est purifié par chromatographie sur plaque épaisse de silice (éluant CHCl3 . MeOH 90 : 10). Le produit le moins polaire (90 mg ; 27%) correspond au composé I'. [&alpha;D] = +52,4 (c=3,24)OHCl3 u.v. (#nm, #) : 215 (36.700), 268 (11.000), 282 (9,500), 293 (7.600), 310 (4.400). D.C. (#nm, ##) : 312(+3,4), 305 (+3,2), 258 (+13,3), 230 (+31,6) 210 (-44,3). RMNH (400MHZ ; # = OPPM.TMS ; J:Hz) ; 8,50 (#, 1H) OH ou NE ; 7,77 (d, 1H,J=8) NE ou aromatique ; 7,15 (m, 4H)aro- matiques ; 6,34 (#, 1H)C9H ; 6,08 (#,1H)C12-H ; 5,83 (dd, 1H, J=3,5 et 9,5)C14H ; 5,76 (m,1H)C15,-H ; 5,37 (#,1H)C17H ; 5,25 (d,1H, J=9,5)C15H ; 4,58 (m,1H) et 4,41 (d,1H)C6,H et C6,H' ; 3,83 (#,3H) ; 3,13 (#,3H) ; 3,68 (#,4H)C16CO2CH3,C11 OCH3, C16,CO2CH3 et C21H ; 2,69 (3,3H)Na-CH3 ; 2,57 (#,1H) C2H ; 2,06 (#,3H)OCOCH3 ; 1,07 (t,3H,J=7) ; 0,70 (T,3H,J = 7) C18,H et C18 H. S.M. : 794,792,748,656,598,522,480,450,436, 331,282,240,222,210,165,152,144,136,135,122.I.R. (#cm-1) : 174, 3420. Le produit le plus polaire (275 mg) repris par du MeOH (3 ml) ; réduit par un- excès de borohydrure de sodium, extrait et purifié comme plus haut fournit 200 mg de #15 deshydroxy-20' vincaleucoblastine (III) qui peut être recyclé. Les composés de formule I selon la présente inven- tion, présentent des propriétés anti-tumorales et peuvent donc être utilisés dans le traitement de diverses affections tumo rales telles que les leucémie. La présente invention concerne donc également à titre de médicaments nouveaux les composés de formule I ainsi que les compositions pharmaceutiques les contenant. On donne ci-après les résultats des études pharmacologiques in-vitro et in vivo conduites sur le composé de l'Exemple 1) Inhibition de la polymérisation de la tubulîne Le récepteur des alcaloïdes indoliques antitumoraux de type vinblastine est la tubuline. Elle est facilement extraite du cerveau de porc où elle représente 10% des protéines solubles. La polymérisation de la tubuline en microtubules peut etre facilement suivie au moyen d'un spectrophomètre W en observant à 350 nm. La vitesse maximale de polymérisation est ainsi déterminée ; celle-ci est. diminuée par l'addition d'inhibiteurs du type de la vinblastine et une concentration, 15o, diminuant de moitié la vitesse est obtenue pour chaque substance essayée. Un deuxième effet de ces produits est pris en considération : à des doses plus élevées, après inhibition totale de la polymérisation, une spiralisation de la tubuline est observée (vérifié par. microscopie électronique) et une nouvelle concentration, S50, correspondant à l'apparition de 50% du phénomène est déterminée. Les résultats de chaque produit sont toujours comparés à ceux de la vinblastine utilisée comme référence. Tableau I RESULTATS I50 mole/1 S50 mole/l omposé de "Exemple 13 x 10-6 inactif vinblastine 1,7 x 10-6 9 x Le produit de l'Exemple n'a pas d'activité "spira- lisante" bien qu'il ait une activité semblable à la vinblas- tine en ce qui concerne l'inhibition de la polymérisation. 2) Activité sur le test de la leucémie P388 de la souris À titre d'exemple on présente dans le Tableau Il les résultats obtenus avec le composé de l'Exemple sous forme de tartrate dans le traitement de la leucémie P 388 Tableau II Sérum physiolo- 5 mg/kg 10 mg/kg 25 mg/kg (témoin) ombre de souris 10 10 10 10 emps moyen de @@@@@@@ @@@@@@@@@@@@@ @@@@@@@@ @@@@@ survie (jours) 10,5+0,4 13,6+0,8 17,9+0,9 > 24,3 I.L.S. #=T - C/C x 100 29,5 70,5 # 131,4 a = T/C x 100 129,5 170,5 # 231,4 T = vie moyenne (en jours) des souris du lot traité C = vie moyenne (en jours) des souris du lot témoin souris :- DBA/2 9 Greffe : P388 (106 cell./souris ip.) traitement : i.p. Délai greffe traitement : 24 h. 3) Activité sur le test de la leucémie L1210 de la souris. Le tableau III résume les résultats obtenus avec le composé de l'exemple sous forme de tartrate dans le traitement de la leucémie L1210. Tableau III Sérum physiolo @ mg/kg 10 mg/kg @@ mg/kg Nombre de souris 10 10 10 10 Temps moyen ae 8,6+0,4 13,5+0,9 14,2+0,7 survie (jours) 8,6#0,7 12,0#0,9 12,9#1,3 13,5#0,7 I.L.S. 57 65 T-C x 100 40 50 57 C 157 165 T/C x 100 140 150 157 Souris : DBA/2 9 Greffe : L1210 Traitement : i.p. Délai greffe traitement : 24 h. Conc 0,5 et l mg/ml dans du sérum physiologique. 4) Toxicité du produit de l'exemple sous forme de tartrate. Des souris DBA/2 9 reçoivent par voie intrapéritonéale en une fois une dose de produit en expérimentation et on étudie la mortalité sur 35 jours. On obtient les résultats suivants Tableau IV Dose Nombre Etalement de la mortalité (J) Mortalité (mg/kg) de en souris 3 4 6 9 35 j 25 5 0 50 5 1 1 1 1 4/5 75 5 3 1 1 5/5 100 3 3 3/3 On observe donc une DLo = 25 mg/kg qui est à comparer avec une DL10 = 3 mg/kg pour la vincristine, DL50 = 2 mg/kg pour la vincristine (i.v.), DL50 = 17 mg/kg pour la vinblastine (i.v.). De l'ensemble de ces expériences, il résulte que le composé de l'exemple est plus actif que la vincristine et la vinblastine sur les leucémies étudiées, tout en étant beaucoup moins toxique. La présente invention concerne également les compositions pharmaceutiques contenant un nouveau composé de formule I ou un de ses sels, eventuellement en association avec tout autre produit pharmaceutique compatible, pouvant être inerte ou physiologiquement actif. Ces compositions peuvent être présentées sous toute forme appropriée à la voie d'administration prévue. La voie parentale est la voie d'administration préférentielle, notamment la voie intraveineuse. Les compositions selon l'invention pour administraparentérale peuvent être des solutions stériles aqueuses ou non aqueuse, des suspensions ou des émulsions. Comme solvant ou véhicule, on peut employer le propylène glycol, le polyéthy lène glycol, les huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, les esters organiques injectables, en particulier l'oléate d'éthyle'. Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants en particulier des agents mouillants, émulsifiants et dispersants. La stérilisation peut se faire de plusieurs façons par exemple à l'aide d'un filtre bactériologique, en incorporant à la composition des agents stérilisants, par irradiation ou par chauffage.Elles peuvent eAtre également préparées sous forme de compositions solides stériles qui peuvent être dissoutes ou dispersées au moment de l'emploi dans de l'eau stérile ou tout autre milieu stérile injectable. Les composés nouveaux ou leurs sels sont actifs dans le traitement des tumeurs solides ou liquides et plus particulièrement des cancers humains à des doses journalières comprises entre 10 et 20 mg par jour pour un adulte. L'exemple suivant illustre une composition selon l'invention. EXEMPLE On prépare une solution contenant 10 mg/cm3 de matière active en dissolvant lg du produit I' de l'Exemple dans 100 cm3 de soluté physiologique apyrogène. La solution obtenue est répartie aseptiquement en ampoules de 2 cm3 â raison de l cm3 par ampoule. Les ampoules sont scellées et contiennent chacune 10 mg de principe actif. REVENDICATIONS 1) Composés de formule générale dans laquelle : R'1 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy, acyle, formyle ou halogénc-acyle. R'2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alco R'3 et R"3 identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle, alcanoyloxyle ou bien R'3 et R"3 forment ensemble un groupement carbonyle, ou bien R'3 et R'5 forment ensemble un pont époxy ou une double liaison R'4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyl oxycarbonyle, hydroxyméthyle, alcancyloxyméthyle ou acétamido, R'5 et R"5 identiques ou aifférents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle, alcanoyloxyle, éthyle ou hydroxy-2-éthyle, R'6 représente un atome d'hydrogène ou un radical éthyle, hydroxy-2 éthyle ou acétyle, R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoy- le, formyle on acyle, R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy, R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle ou alcanoyloxyle ou bien R3 et R4 forment ensemble un pont époxy ou une double liaison, R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle, alcanoyloxyle ou bien R4 et R5 forment ensemble un pont époxy, R6 représente un radical alcoyloxycarbonyle, hydrazidoj acétamido, hydroxyméthyle ou alcanoyloxyméthyle, R5 et R7 représentent un atome d'hydrogène ou un radical hydro oxyde ou alcanoyloxyle, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides et leurs sels d ' ammonium quaternaire. 2) Composés selon la revendication 1 de formule Ia dans laquelle R') représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy, R'5 représente un atome dthydrogène ou un radical hydroxy; R' et R'5 représentent ensemble un pont époxy ou une double liaison R"5 représente un atome dthydrogène ou un radical éthyle, R1 représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle, formyle ou acyle R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical méthoxy; R7 représente un radical alcanoyloxyle la ligne pointillée représente une double liaison éventuelle ainsi que les sels correspondants. 3) La nor-6'#15' deshydroxy-20' vincaleucoblastine. 4) Un procédé de préparation des composés selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que a) l'on fait réagir un composé de formule II dans laquelle les substituants ont la signification donnée précédemment, en présence d'un réactif formateur d'ion immonium, b) en ce que lton traite le produit obtenu par de l'eau, et sépare le composé de formule I. -5) Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le réactif formateur d'ion immonium est un halogénure, anhydride ou sel d'acide organique ou inorganique. 6) Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le réactif formateur d'ion immonium est un halogénure, anhydride ou sel d'acide carboxylique halogé-né. 7) Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que le réactif formateur d'ion immonium est l'anhydride trifluoroacétique 8) Procédé selon l'une des revendications 4 à 7, caractérisé en ce que l'étape a) est conduite dans un solvant anhydre. 9) Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que le solvant 'anhydre est un solvant chloré. 10) Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que le solvant chloré est le chlorure de méthylène, le dichloroéthane ou le chloroforme. 11) Procédé selon l'une des revendications 4 à 10, caractérisé en ce que l'étape a) est conduite à une température comprise entre -50C et +50C. 12) Procédé selon l'une des revendications 4 à 10, caractérisé en ce que l'étape b) est effectuée en traitant le produit de l'étape a) par un mélange de solvant organique non nucléophile et d'eau. 13) Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que le solvant organique non nucléophile est le tétrahydrofuranne ou le dioxanne. 14) Procédé selon l'une des revendications 4 à 13, caractérisé en ce que le mélange réactionnel de l'étape a) est amené à sec avant l'étape b). 15) Procédé selon l'une des revendications 4 à 14, caractérisé en ce que le composé de formule I est séparé du mélange réactionnel de l'étape b) par extraction par un solvant chloré et chromatographie. 16) À titre de médicament nouveau un composé selon l'une des revendications 1 à 4. 17) Composition pharmaceutique contenant à titre de principe actif, au moins un composé selon l'une des revendications 1 à 4.