Brevet FR2435947A1 — publié le 19800411

La présente invention concerne un nouveau produit à propriétés thérapeutiques extrait de la moelle osseuse d'animaux et, en particulier, un produit à propriétés cicatrisantes et anti-infectieux. On sait que la moelle osseuse renferme trois classes de substances: une classe de substance inhibitrice de la croissance des cellules, une classe de substance accélératrice de la croissance des cellules et une classe de substances oncogènes. Dans le brevet spécial de médicament français 4 070 M, on a développé les propriétés thérapeutiques des substances inhibitrices et on a simplement signalé que les substances accélératrices peuvent être utilisées par exemple en vae de la guérison de plaies externes. Toutefois, on n'y a considéré que ltextraction des trois substances en vue d'obtenir celles-ci sous forme de poudres injectables ou administrées par voie perorale. Dans la demande de brevet français déposée par le demandeur le 3 Mai 1978, portant le numéro d'enregistrement national 78 13780 et intitulée "Produit cicatrisant extrait de la moelle osseuse d'animaux", on a décrit un produit cicatrisant administrable sous la forme d'un gel renfermant les substances accélératrices de la croissance des cellules que l'on trouve dans la moelle. On y a notamment montre qu'en utilisant ce gel on obtenait une accélération importante de la cicatrisation des plaies saines. Un objet de la présente invention consiste à prévoir un produit à base des substances accélératrices de la croissance des cellules, extrait de la moelle osseuse, qui soit directement appliqué sur des plaies saines ou meme infectées, comme dans la demande de brevet 78 13780 susmentionnée, mais sous forme de poudre au lieu de gel. On sait que, pour isoler les substances accélératrices, on peut ajouter à la moelle complète de l'eau en quantité suffisante, puis homogénéiser le mélange et extraire par solvant soit un gel, soit après évaporation du solvant une poudre blanche ou blanc grisâtre. Il suffit pour obtenir la poudre d'une simple dessiccation, et non une lyophilisation comme cela devient nécessaire quand on désire obtenir un produit injectable (ou pouvant Aetre administrée par voie perorale). Suivant une caractéristique de la présente invention, il est prévu une méthode d'utilisation des substances accélératrices de la croissance des cellules extraites de la moelle consistant: à appliquer lesdites substances sous forme de poudre sèche sur les plaies pour cicatriser ces dernières. Suivant une autre caractéristique, il est prévu, pour l'application, de mélanger la poudre avec du talc. Suivant une autre caractéristique, il est prévu pour l'application, de mélanger à la poudre, éventuellement additionnée de talc, un corps gras, compatible avec la poudre, pour protéger la plaie d'une oxydation possible de ltair. Suivant une autre caractéristique, il est prévu d'ajouter à la poudre, éventuellement déjà additionnée de talc et/ou d'un corps, un produit anti-inflammatoire. Suivant une autre caractéristique, il est prévu une préparation de la poudre formée par les substances accélératrices de la croissance des cellules dans laquelle à la moelle extraite des os on ajoute de l'eau en quantité appropriée, on homogénéise le mélange ainsi obtenu, on extrait lesdites substances accélératrices par un solvant, ces opérations étant connues, et on effectue une simple dessiccation desdites substances. Suivant une autre caractéristique, pour la préparation ci-dessus, on chauffe les os jusqu'à 5O environ pour en extraire la moelle. Afin de faire apparaître plus clairement les caractéristiques mentionnées ci-dessus et de mettre en évidence les propriétés cicatrisantes du produit utilisé dans la méthode de l'invention, ainsi qu'éventuellement d'autres propriétés, on a procédé à des expériences dont on va décrire maintenant les modalités d'exécution et les résultats, après avoir précisé plus en détail un exemple de préparation de la poudre cicatrisante. Préparation du produit utilisé dans les expériences On chauffe des os de boeuf dans de l'eau, par exemple aux environs de 500 C, puis on les coupe pour en extraire la moelle. Il faut noter que l'extraction de la moelle est alors beaucoup plus facile que si l'on utilise des os à la température ordinaire dont la moelle est difficile à décoller. L'élévation de température de la moelle ne détruit pas, ni n'altère les substances accélératrices de la croissance des cellules, car ces substances sont des albumines qui conservent leurs propriétés à température relativement élevée. On ajoute à la moelle osseuse de l'eau en quantité suffisante et on homogénéise le mélange en utilisant un mixeur de manière à séparer la phase aqueuse. On termine cette séparation de la phase aqueuse en utilisant une élévation de pression. Puis on ajoute à la phase aqueuse restante de l'éther en quantité égale et on agite le mélange pendant 30 minutes. Ensuite, on passe le mélange dans une centrifugeuse afin d'obtenir, en suspension entre la phase aqueuse et la phase du solvant, le produit que l'on recueille et qui est rapidement lavé pour en éliminer les restes de la phase non soluble dans l'éther.Les opérations de lavage, de séparation de la phase aqueuse et d'extraction à l'éther peuvent être répétées sur ce qui reste une fois une partie recueillie pour épuiser la moelle. Enfin, tout le produit recueilli est déshydraté jusqu'à obtenir une poudre qui constitue le produit cicatrisant. Modalités d'exécution des exp0riences Les expériences ont été menées sur des rtts WISTAR. On pratique, juste derrière la tête de chaque rat, une incision pour extraire un morceau de peau de 1 cm2. En pratique, on enlève toute la peau, y compris l'aponévrose attenante, en laissant l'aponévrose inférieure. Le produit est appliqué tous les jours, ainsi que les autres médications utilisées pour établir des comparaisons. Le produit expérimenté est de la poudre extraite de la moelle, comme on l'a indiqué ci-dessus, mélangée avec du talc pur, dans les proportions suivantes: 0,7 g de poudre pour 27 g de talc. On aurait pu utiliser de la poudre seule, mais, en réalité, il suffit de très peu de produit sec pour obtenir l'effet cicatrisant avec une bonne efficacité, la quantité étant alors trop faible pour dessécher la plaie. Par contre, en ajoutant du talc, comme excipient, on obtient cet effet de dessèchement de la plaie. Premières séries d'expériences On utilise 20 rats de 250 g, âgés de 8 mois. Sur cinq rats, on a appliqué le mélange poudre active et talc que l'on a défini ci-dessus. Sur cinq autres rats, on a appliqué un gel formé également des substances accélératrices de la croissance des cellules, tel qu'il a été défini dans la demande de brevet 78 13780 déjà mentionnée, et que l'on retrouve dans la préparation mentionnée ci-dessus avant l'opération de dessiczation. Encore sur cinq rats, on a appliqué uniquement du talc. Enfin, sur les cinq derniers rats on n'a appliqué aucune médication. Après deux jours, pour les rats traités avec le produit en poudre, les plaies sont nettement desséchées et plus petites que pour les autres rats. Pour les rats traités au gel, les plaies sont un peu moins grandes que celles des témoins. Pour les rats traités au talc, les plaies sont identiques à celles des témoins. Après quatre jours, pour les rats traités avec le produit en poudre, les plaies sont nettement plus petites que celles des autres rats. Pour les plaies traitées par le gel, elles ont également diminuées, mais moins vite. Pour les rats traités au talc et les rats témoins, les plaies ont à peine diminué depuis l'incision et présentent un peu de sérosité. Après sept jours, les plaies des rats traités par le produit en poudre sont complètement guéries. Après huit jours, les plaies des rats traités par le gel sont complètement guéries. Ce n'est qu'après quatorze jours que les plaies traitées au talc et celles qui ntont reçu aucune médication sont guéries. Secondes séries d'expériences Au cours des expériences ci-dessus, il est apparu que certains rats témoins avaient leurs plaies qui s'infectaient. Pour réduire ces plaies, on y a appliqué le produit en poudre et on a constaté que les plaies infectées guérissaient. A noter encore qu'aucune des plaies traitées avec le produit ne s'est infectée, aucune plaie traitée avec du gel ne s'est non plus infectée. On peut donc en conclure que le produit formé par les substances accélératrices de la croissance des cellules, que l'on extrait de la moelle, ont des propriétés anti-infectieuses. Il s'agit là d'une découverte car, si on savait déjà qu'une albumine contenue dans le sang avait des propriétés anti-infectieuses, cela n'avait pas encore été mis en évidence pour des albumines de la moelle. Troisièmes séries d'expériences Dans cette série d'expériences, on utilise 20 rats agés de 36 mois, c'est à dire des rats très agés. Sur cinq rats, on a appliqué le mélange poudre active et talc, déjà défini ci-dessus. Sur cinq autres rats, on a utilisé du gel, également déjà défini. Sur cinq autres rats, on a utilisé du talc seul. Les cinq derniers rats servent de témoins. Les résultats ont été les suivants: les rats traités à la poudre ont leurs plaies guéries en 10 jours, ceux qui ont été traités au gel ont leurs plaies guéries en 14 jours, tandis que les rats traités au talc et les rats témoins ont leurs plaies qui s'infectent. Il faut noter que ces expériences sur des plaies de rats agés revêtent une particulière importance, car les plaies de vieux rats représentent un modèle expérimental des escarres. A noter encore que les plaies infectées des rats traités au talc et des témoins ont toutes été guéries par la suite après application de la poudre active extraite de la moelle, ce qui met encore en évidence les propriétés anti-infectieuses de cette poudre. Conclusions De ce qui précède, il résulte que l'utilisation desdites substances accélératrices de la croissance des cellules sous forme de poudre, seule ou mélangée avec du talc ou un -produit équivalent, permet de cicatriser très rapidement des plaies en y évitant toute infection. Il résulte également que les substances accélératrices de la croissance des cellules, qui sont tirées de la moelle osseuse, contiennent un composant anti-infectieux ou mieux anti-bactérien et que donc ces substances peuvent être utilisées comme tel, notamment sous forme de poudre. Il faut encore noter que, si l'efficacité de la poudre par rapport à celle du gel est plus grande pour les jeunes rats, l'amélioration apportée par la poudre par rapport au gel est encore plus sensible sur les vieux rats. En plus du talc, on peut ajouter à la poudre un corps gras approprié dont la fonction est alors de maintenir la plaie à l'abri de l'air. Toutefois, certains corps gras sont à proscrire, tels que la vaseline ou le solucire. On a, en effet, noté que la poudre se diffuse mal dans la vaseline, ce qui peut I'empêcher d'atteindre des portions de plaie à traiter. On peut aussi ajouter à la poudre un produit anti-inflammatoire. On peut également aider à la conservation de la poudre en lui ajoutant un produit conservateur approprié, si nécessaire. Il doit etre bien entendu que l'on n'a décrit une méthode de préparation de la poudre qu'à titre d'exemple, mais que d'autres méthodes d'extraction sont également utilisables, dont notamment celles qui sont exposées dans le brevet français 4 070 M. En particulier, la préparation peut être effectuée en utilisant une séquence de chauffage. REVENDICATIONS 1) Méthode d'utilisation des substances accélératrices de la croissance des cellules extraites de la moelle,caractérisée en ce que lesdites substances sont appliquées sous forme de poudre sèche sur les plaies à cicatriser. 2) Méthode suivant la revendication 1, caractérisée en ce que pour l'application, ladite poudre est mélangée avec du talc. 3) Méthode suivant la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que pour l'application, ladite poudre est mélangée avec un corps gras, compatible avec la poudre, pour proteger la plaie d'une oxydation possible de l'air. 4) Méthode suivant l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'ou ajoute à ladite poudre, un produit anti-inflammatoire. 5) Préparation de la poudre utilisée dans la méthode suivant l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle, à la moelle extraite des os, on ajoute de l'eau en quantité appropriée, on homogénéise le mélange ainsi obtenu, on extrait lesdites substances accélératrices par un solvant, caractérisa-m en ce que le produit ainsi extrait est simplement séché. 6) Préparation suivant là revendication 5, caractérisée en ce que l'on chauffe les os jusqu'a environ 500 pour en extraire la moelle. 7) Méthode d'utilisation des substances accélératrices de la croissance des cellules extraites de-la moelle, caractérisée en ce que lesdites substances sont utilisées comme produit anti-infectieux ou anti-bactérien.