Brevet FR2403079A1 — publié le 19790413

La présente invention concerne un procédé de traitement de néoplasmes et elle se rapporte également a des agents cytostatiques nouveaux et intéressants. Pendant de nombreuses années, des études concernant des essais de détermination de la sensibilité des leucémies aux agents cytostatiques ont été effectuées avec succès et ont été utilisées cliniquement. Cependant, des recherches analogues portant sur les tumeurs solides ont été moins efficaces. Ou bien il fallait traiter le tissu de la tumeur et produire des cultures a couches monocellulaires qui ne permettent jamais des conclusions certaines quant au métabolisme des tissus originaux, ou bien les paramètres métaboliques et leurs réactions aux agents cytostatiques sont déterminés sur des particules de tissus, ce qui n'est pas applicable a la question de sensibilité aux agents cytostatiques.On doit également tenir compte du fait que, pour des essais in vitro, il est essentiel en principe que les mécanismes cytostatiques de l'action des agents chimiothérapeutiques testés soient largement connus. Les actions inhibitrices avec l'effet cytostatique d'un médicament en se référant aux paramètres métaboliques sous essai doivent avoir été étudites au préalable. Une découverte particulière réside dans le fait que lorsque le métabolisme de l'acide nucléique du tissu de la tumeur est étudié en utilisant des précurseurs radioactifs, il est possible d'incorporer un seul précurseur, ce qui est d'une importance capitale pour tous les résultats d'essai in vitro avec différents agents cytostatiques. Des recherches ont été effectuées pour déterminer in vitro les taux d'incorporation de divers précurseurs marqués avec H3 de l'acide désoxyribonucléique (DNA) dans l'acide nucléique de tumeurs malignes solides et pour déterminer l'effet d'inhibition de différents agents cytostatiques sur les paramètres étudiés. Les expériences ont été réalisées dans le but de déterminer s'il est possible, avec ces déterminations du métabolisme de l'acide nucléique des particules de tissus, de déterminer la sensibilité des tumeurs solides aux agents cytostatiques et, ainsi, d'obtenir une voie d'orientation vers un traitement efficace combiné, chirurgical et chimiothérapeutique, des tumeurs malignes. A la suite de ses recherches, la Demanderesse a maintenant découvert que l'acide glycyrrhétinique qui est estérifié en position 3 avec un mono-, di- ou polyacide exerce une remarquable activité dans l'inhibition de la croissance néoplastique et qu'il constitue donc un agent cytostatique intéressant. Les composés actifs en question peuvent être représentés par la formule générale dans laquelle R est un radical aliphatique ou cycloaliphatique pouvant porter un ou plusieurs groupes carboxyliques, ces composés pouvant également se présenter sous la forme de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. Les composés de formule générale (I) sont connus et plusieurs d'entre eux ont déjà été utilisés par voie topique, rectale et parentérale pour le traitement de maladies inflammatoires ou à caractère ulcératif. Des composés de formule générale (I) et leurs sels ont été décrits par exemple dans les brevets britanniques de la Demanderesse N 843 133, N0 950777, N 1 022 968, N 1032710 et N 1 387 499. Les composés utilisés selon la présente invention peuvent être mélangés de la manière habituelle avec des diluants ou véhicules pharmaceutiques convenables, des aromatisants, des agents donnant du gout et des colorants, et l'on peut par exemple leur donner la forme de comprimés ou de dragées ou bien, par addition d'adjuvants appropriés, ils peuvent être mis en suspension ou dissous dans l'eau ou dans une huile, par exemple l'huile d'olive. Les composés peuvent également être sous forme lyophilisée ou micronisée et être mélangés avec un véhicule ou diluant liquide convenable, immédiatement avant leur administration. Les composés utilisés selon la présente invention peuvent être administrés par voie orale ou parentérale en mélange avec des diluants ou véhicules pharmaceutiques solides ou liquides. Comme milieu d'injection, on prés père utiliser l'eau qui contient les agents stLli-: sants, les agents solubilisants et/ou les tapons couramment utilisés dans les solutions pour injections. Les solutionspour injection doivent naturellement être stériles. Des additifs de ce type comprennent par exemple des tartrates, citrates et borates tampons, l'éthanol, le diméthyl sulfoxyde, des agents de formation de complexes (par exemple l'acide éthylènediaminetétracétique) et des polymères de haut poids moléculaire (par exemple un oxyde de polyéthylène liquide) pour régler la viscosité. Des-véhicules solides comprennent par exemple l'amidon, le lactose, le mannitol, la méthylcellulose, l'acide silicique fortement dispersé, la gélatine, la gélose, le phosphate de calcium, le stéarate de magnésium, des graisses animales et végétales et des polirmères solides de haut poids moléculaire (par exemple des polyéthylèneglycols). Des compositions convenant à une administration orale peuvent éventuellement renfermer des agents aromatisants et/ou édulcorants. Pour le traitement des néoplasmes, et en particulier de diverses formes de cancer, les composés actifs peuvent etre administrés par voie orale ou rectale dans le traitement des maladies néoplastiques du tractus gastro-intestinal, ou par voie vaginale dans le traitement des maladies néoplastiques du vagin ou de l'utérus, ou par injection dans le traitement, par exemple, des maladies néoplastiques des glandes mammaires. Un grand nombre d'agents antinéoplastiques déjà utilisés présentent l'inconvénient de provoquer des effets secondaires pénibles, par exemple des troubles du tractus gastro-intestinal, une stomatite, des vomissements, des réactions cutanées, une alopécie, une diminution hématopoïétique et une neuropathie. Les matières actives utilisées selon la présente invention ne donnent pas lieu a ces effets secondaires tout à fait indésirables ; en effet, certaines de ces matières actives ont déjà été utilisées de façon étendue en pratique clinique pour le traitement de troubles gastro-intestinaux, etc. Afin de montrer l'efficacité des matières actives à utiliser selon la présente invention, l'une d'entre elles, à savoir le sel disodique de lthémisuccinate de l'acide glycyrrhétinique (5 = HOOC. CH2.CH2-) (également connu sous le nom de "carbénoxolonesodium), a été testé in vitro contre diverses tumeurs malignes soli- des et a été comparé avec trois agents antinéoplastiques connus, a savoir la vincristine, le méthotrexate et le 5-fluoruracile L' efficacité des composés d'essai est déterminée à partir des taux d'incorporation de thymidine marquée par H3 (mesurés sous forme d'impulsions par minute (imp)) dans les tumeurs malignes solides. Le processus d'essai utilisé est le suivant Une suspension de cellules préparée à partir de tumeurs immédiatement après ablation chirurgicale est passée dans un appareil de filtration et mise en suspension dans une solution de glucose tamponnée (phosphate tampon Krebs-Ringer ; pH 7,36 ; glucose 300 mg %) à 00C ; la liqueur surnageante est évacuée par déversement. Les cellules sont ensuite mises en suspension dans un milieu dtin- cubation. Après coloration à la nigrosine, la proportion des particules de tissu mort est déterminée au microscope ; on introduit à la pipette des quantités de 1 ml de cette suspension dans des tubes de centrifugation contenant, à l'exception des témoins, les agents cytostatiques à tester, dissous dans 0,1 ml de tampon (quantité calculée pour obtenir la concentration finale). L'incubation préliminaire des particules de tissu avec les différents agents cytostatiques est de 30 minutes à 370C dans un bain-marie agité par secousses. La substance de marquage, par exemple la thymidine marquée par H3 (6,2 C/millimole), est ensuite ajoutée dans un bain de glace en une quantité de 1 ZC par tube et par essai.Chaque tube d'un essai ne reçoit qu'une substance de marquage afin de déterminer le taux d'incorporation de cette substance. Le marquage s'effectue dans un bain-marie agité par secousses à 37"C pendant 60 minutes. Le pH des échantillons est vérifié pendant l'incubation et maintenu à 7,3. A un pH constant, les particules de tissu révèlent des taux d'in- corporation linéaires des substances marquées pendant 2 heures dans ces conditions expérimentales. Les taux d'incorporation des échantillons traités par les agents cytostatiques sont rapportés à des témoins non traités, l'incorporation dans ces derniers étant considérée comme égale à 100 %. Les résultats obtenus sont indiqués sur le Tableau suivant, et sont obtenus sur 3 essais portant sur une ligne de cellules de carcinome de la cavité orale humaine. Ces essais montrent clairement que le carbénoxolone-sodium réduit la synthèse de DNA dans une mesure d'au moins 70 %, en comparaison des témoins. La figure unique du dessin annexé montre les résultats obtenus avec le carbénoxolonesodium sur quatre tumeurs différentes. TABLEAU Taux d'incorporation de thymidine -H dans une culture de cellules HEPm et effet des agents cytostatiques et de la carbénoxolone sur cette incorporation Agents Essai 1 Essai 2 Essai 3 cytostatgues N=3 N = 3 N = 3 % de va DPM+ SD % de va- DPM+ SD % de varia DPM + SD riation riation tion Témoin 58 400 # 100 100 24 020 # 1 900 100 38 790 # 7 400 100 Vinoristine 15 160 # 2 690 26 16 670 # 2 090 69 9 080 # 380 23 Méthotrexate 19 400 # 4 440 33 24 450 # 3 540 102 32 810 # 1 610 82 5-fluoruracile 31 300 # 6 382 54 19 680 # 190 82 17 420 # 10 440 44 Carbénoxolone- 2 340 # 910 4 8 760 # 1 304 36 2 930 # 1 800 7 sodium Ces résultats montrent clairement que le carbénoxolonesodium est beaucoup plus efficace que le méthotrexate, la vincristine et le 5-fluoruracile et ils montrent également que le carbénoxolone-sodium est très efficace dans les cancers du rectum et de l'utérus et est moyennement efficace dans les cancers des glandes mammaires et de la vessie. Des essais cliniques récents ont démontré l'efficacité des composants actifs de formule générale (I) sur la prolongation de la vie de malades atteints d'un cancer terminal. Dans quelques cas, la vie a été prolongée de plusieurs mois avec une régression considérable des effets secondaires associés au cancer terminal, comprenant l'anorexie et la dyspepsie. En outre, la qualité de la vie des malades traites s'est considerablement améliorée. -REVENDICATIONS 1. Composition pour le traitement, ie soulagement ou l'amélioration d'un cancer, caractérisée en ce qu'elle contient un composé de formule générale (I) dans laquelle R est un radical aliphatique ou cycloaliphatique pouvant porter un ou plusieurs groupes carboxyliques, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci, un mélange avec un diluant ou véhicule pharmaceutique. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé est sous forme lyophilisée ou micronisée. 3. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est sous la forme d'une solution stérile injectable. 4. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est sous la forme d'une dose unitaire contenant une quantité efficace dudit composé. 5. Application des composés de formule générale (I) suivant la revendication 1 au traitement, au soulagement et à l'amélioration de cancers.