Brevet FR2410042A1 — publié le 19790622

La presente invention se rapporte à des dispositifs d'essai utilisables en recherche microbiologique, telle que la recherche de la résistance d'agents pathogènes ou de bactéries aux antibiotiques ou autres substances actives. L'essai de la résistance des bactéries à des agents antimicrobiens, tels que les antibiotiques comportent généralement l'application de l'échantillon de bactéries sur un milieu d'agar-agar disposé par exemple sur une plaque de Pétri et l'application de petits disques individuels de papier filtre sur ce milieu, chaque disque de papier filtre ayant été imprégné avec des quantités mesurées de différents agents antimicrobiens. Pendant 10 incubation, une culture bactérienne se développe sur le milieu d' agar-agar et recouvre sa surface à l'exception de zones d'inhibition situées autour de ces disques de papier filtre imprégnés des agents antimicrobiens qui sont actifs contre les bactéries. L'étendue de ces zones constitue une mesure de l'efficacité des agents antimicrobiens utilisés. Un inconvénient des disques connus est le temps nécessaire à l'utilisateur pour placer un nombre suffisant de ces disques sur le milieu d'agar-agar. De plus, il est fréquent que ces disques ne soient pas appliqués sur la surface de l'agar-agar bien à plat, avec pour conséquence une diffusion inadéquate de l'antibiotique dans l'agar-agar et des résultats incorrects du test correspondant. Un autre inconvénient consiste dans la difficulté de disposer les disques avec précision sur le milieu d'agar-agar quand ils sont utilisés en vue d'essais de sensibilité selon le procédé de la plaque rotative où les disques doivent être situés exactement en travers de la ligne de séparation entre deux cultures différentes sur le milieu d' agar-agar. La présente invention vise un dispositif d'essai amélioré. En conséquence, la présente invention a pour objet un dispositif utilisable pour effectuer des essais microbiologiques, dispositif comprenant une partie non continue allongée, et une pluralité de parties destinées aux essais, susceptibles d'être imprégnées avec un produit à tester, et supportées par la partie non continue allongée par l'intermédiaire de cols respectifs dont chacun est capable d'empêcher le passage dudit produit à tester de la partie destinée~xux essais vers la partie non continue allongée. Dans un mode de réalisation préféré, la partie non continue allongée présente des projections destinées à positionner avec précision les parties destinées aux essais en des emplacements sélectionnés sur le milieu d'agar-agar. Les parties destinées aux essais et les pointes des projections sont situées sur des arcs de cercles concentriques choisis de manière que, lorsque le disposi tif est placé sur une plaque de Pétri avec les pointes des projec tions touchant les côtés de la plaque, les parties destinées aux essais sont disposées avec précision en travers de la ligne de séparation ou des lignes de séparation entre différentes cultures, telles qu'elles sont utilisées dans le procédé de la plaque rotative. I1 est avantageux que le dispositif soit réalisé en un matériau poreux, par exemple en papier filtre et que les cols, ou ponts, soient imprégnés d'une substance qui inhibe l'action capillaire du matériau poreux. De manière appropriée, la substance est de la cire, de la paraffine, de la résine, du silicone ou une matière plastique qui empêche le produit à essayer et qui est appliqué, de s'infil trer dans la partie en ligne droite par le système capillaire du matériau poreux. I1 peut être prévu une quantité quelconque de disques sur chaque dispositif bien que le nombre préféré soit de trois à cinq disques. Des disques additionnels peuvent être prévus en utilisant deux de ces parties droites interconnectées par une liaison de manière qu'elles soient pratiquement parallèles. Lorsqu'il est prévu cinq disques ou plus, il est bon que ceux ci soient situés sur trois arcs. Les produits à essayer tels que des sucres ou des aminoacides peuvent être utilisés pour formuler divers diagnostics. La présente invention sera maintenant décrite plus en détail à titre d'exemple et en se référant au dessin annexé dans lequel - les figures 1 à 3 représentent trois modes de réalisation des dispositifs d'essai selon l'invention ; et - la figure 4 représente deux dispositifs selon la figure 2 reliés l'un à l'autre pour constituer une série de huit disques, - la figure 1 représente un dispositif d'essai 10 réalisé en papier filtre ou en un matériau poreux similaire et pourvu de trois parties en forme de disques 12 dont chacun est supportée par une partie droite 14 (dont la largeur est de préférence comprise entre 2 et 3 mm), par l'intermédiaire de cols ou ponts, respectifs 16 chacun des disques a un diamètre de 6 mm qui est la dimension normalisée internationale pour les disques de recherche bactériologique.Une partie 18 de chacun des cols, de préférence celle qui est adjacente au disque, est imprégnée d'une substance, par exemple de la paraffine, qui supprime les propriétés capillaires du papier filtre. Selon une autre solution, l'ensemble des cols est imprégné avec une substance de ce type. Chaque extrémité de la partie droite 14 présente une projection 19 disposée par rapport aux disques 12 de façon à permettre à ces derniers d'être situés avec précision sur une couche d'agaragar appliquée par exemple sur une plaque de Pétri comme décrit plus en détail ci-dessous. Bien qu'on ait figuré deux projections, une à chaque extrémité de la partie 14, on peut n'en prévoir qu'une seule, ou bien encore plus de deux, et il n'est pas nécessaire qu'elles soient situées aux extrémités de la partie 14. les disques 12 peuvent etre soit préimprégnés avec différents agents anti-microbiens ou autres matières nécessaires pour les essais dès leur fabrication, et convenablement stockés jusqu'à ce qu'on en ait besoin, ou bien encore ils peuvent être produits sous forme de "flans" que l'on imprègne lorsqu'on les utilise pour un essai particulier. En service, le dispositif d'essais est placé sur une plaque de culture telle qu'une plaque de Pétri (non représentée) contenant un échantillon de bactéries ou de tout autre organisme, et après une période d'une certaine durée, les agents microbiens produisent des zones d'inhibition qui sont pratiquement circulaires et concentriques aux disques imprégnés 12. tes dimensions des zones d'inhibition donnent la mesure de l'activité des agents antimicrobiens contre les micro-organismes et peuvent être mesurées par tout moyen connu. Dans le procédé de la plaque rotative qui est utilisé en vue d'essais de sensibilité, par exemple, on applique une première culture sur la couche d'agar-agar disposée sur la plaque de Pétri, grâce à des moyens appropriés tels qu'un tampon que lton déplace vers i1 extérieur à partir du centre de la plaque alors que cette dernière est mise en rotation. Le résultat est un cercle (tel que le cercle 22) de la culture d'essai qui est concentrique à la plaque de Pétri dont le bord est représenté par le cercle 26. Une seconde culture différente est alors déposée de la même manière pour former une couronne 24 autour et contre la première culture. La première culture est normalement une culture test dont la réaction à l'agent antlmncrobien est connue avec précision et est incluse en tant que moyen de comparaison in situ à c8té de la seconde culture qui est la culture dont la réaction à l'agent doit être mesurée. Il est extrèmement important que les disques 12 soient placés exactement sur la ligne de séparation 23 entre les deux cultures, cette ligne passant par chaque centre des disques. Jusqu'ici il s'est avéré impossible de positionner avec précision les disques connus d'une manière tant soit peu uniforme, en partie parce que la ligne de séparation entre les deux cultures est difficile à discerner, et en partie parce que, pour des raisons évidentes, il n'est pas possible de modifier la position d'un disque une fois qu'il a été déposé sur la couche d'agar-agar. Cependant, avec la présente invention, les extrémités des projections 19 sont espacées des disques 12 d'une distance telle que lorsque le dispositif d'essai est placé sur la couche d'agar-agar avec les pointes en contact avec les bords de la plaque de Pétri, les disques 12 sont automatiquement placés sur la ligne de séparation entre les deux cultures avec une exactitude parfaite. Les trois disques 12 du dispositif d'essai 10 de la figure 1 sont naturellement disposés de manière à être situés sur un arc de cercle de même diamètre tel qu'en 23, les extrémités des projections 19 étant situées sur l'arc d'un cercle concentrique dont le rayon est le même que celui de la plaque de Pétri. Les valeurs typiques des diamètres de la plaque de Pétri sont de 8,5 et de 15 cm avec une ligne de séparation typique 23 entre cultures d'un diamètre de 5,25 cm. Ainsi, un dispositif d'essais utilisable avec une telle plaque de Pétri et des cultures aurait des disques 12 situés sur un arc de cercle de 5,25 cm de diamètre avec les extrémités des projections 19 situées sur un arc d'un cercle concentrique de 8,5 ou 15 cm de diamètre. Naturellement, on peut créer plus de deux cultures différentes sur une plaque de Pétri avec leurs lignes de séparation formant des cercles concentriques, et les disques 12 d'un dispositif d'essai approprié seraient situés sur les arcs d'un certain nombre de cercles correspondants. Les disques 12 sont de préférence espacés pour permettre la formation de zones d'inhibition d'environ 39 mm de diamètre. Les figures 2 et 3 représentent des dispositifs similaires à celui de la figure 1 et comportant respectivement quatre et cinq disques, La figure 4 montre comment il est possible de relier deux de ces dispositifs d'essai, tels qu'ils sont représentés à la figure 2 par une section en pont 20 en vue d'augmenter le nombre de disques 12 disponibles et de faciliter le positionnement du dispositif sur la couche dtagaragar. A la figure 4, les cols 16 ont une longueur de 2 mm et la partie droite 14 a une longueur de 44 mm approximativement. A cette figure 4, tous les disques 12 sont situés de manière appropriée sur le même cercle. Bien que la figure 4 représente des dispositifs d'essai comportant chacun quatre disques 12, il est évident que des ensembles à essai comprenant deux, trois, cinq disques 12, ou plus encorespeuvent être reliés par des sections en pont 20. I1 est bon qu'un ou plusieurs disques du dispositif d'essai selon l'invention soit agencé de manière à être situé complètement à l'intérieur d'une surface de culture. Bien que la partie 14 soit décrite et illustrée sous une forme préférentielle droite, elle peut également prendre toute autre forme appropriée allongée et non continue. Fiaalement, lorsqu'on n'utilise qu'unie seule projection 19, celleci peut être située sur ou adjacente à l'une ou l'autre des extrémités de la partie 14. - REVENDICATIONS - 1. Dispositif pour essais microbiologiques, comprenant une série de parties nécessaires aux essais susceptibles d'être imprégnées avec un produit d'essai, caractérisé par le fait que lesdites parties nécessaires aux essais (12) sont portées par une partie allongée non continue (14) par l'intermédiaire de cols ou ponta respectifs (16) dont chacun est aménagé pour inhiber le passage dudit produit d'essai de la partie réservée aux essais (12) vers la partie allongée non continue (14). 2.- Dispositif selon la revendication 1, dans lequel la partie allongée non continue (14) comprend des moyens (19) servant & fixer à l'avance la position des parties destinées aux essais (12) par rapport à une plaque de culture quand le dispositif est nonté sur la plaque. 3.- Dispositif selon la revendication 2, dans lequel lesdits moyens (19) sont aménagés pour positionner au moins deux partie. (12) du dispositif réservées aux essais sur un cercle (23) concentrique à la plaque. 4.- Dispositif selon l'une des revendications 2 ou 3, dans lequel lesdits moyens comprennent une projection (19) située sur ladite partie allongée non continue (14). 5. Dispositif selon l'une des revendications 2 ou 3, dans lequel lesdits moyens comprennent au moins deux projections (19) sur ladite partie allongée non continue(14). 6.- Dispositif selon la revendication 5, dans lequel lesdites deux projections (19) sont situées chacune contre ou adjacente à chaque extrémité de ladite partie allongée non continue (14). 7.- Dispositif selon la revendication 4 et L'une des revendications 5 ou 6 dans lequel ledit cercle (23) est concentrique à un cercle (26) passant par les extrémités des projections (19). 8.- Dispositif selon l'une des revendications 5 à 7, dans lequel au moins trois parties réservées aux essais (12) sont situées sur un arc de cercle (23) concentrique au cercle (26) passant par les extrémités desdites projections (19). 9. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 8, dans lequel la partie allongée non continue (14) est sensiblement droite. 10.- Dispositif selon l'une des revendications 1 à 9, dans lequel le nombre de parties (12) réservées aux essais est compris entre trois et cinq. 11.- Dispositif selon l'une des revendications 1 à 10, et réalisé en matériau poreux. 12.- Dispositif selon la revendication 1, dans lequel les cols ou ponts (16) sont imprégnés avec une barrière (18) hydrophobe. la.- Dispositif selon la revendication 12, dans lequel ladite barrière (18) est en un matériau tel que de la cire, de la paraffine, de la résine ou une matière plastique. 14.- Dispositif selon l'une des revendications 1 à 13, dans lequel les parties (L2) réservées aux essais sont en forme de disquels 15.- Dispositif selon l'une des revendications 1 à 14, dans lequel la partie allongée non continue (14) est reliée, en lui étant pratiquement parallèle, et par l'intermédiaire d'une partie formant pont (20), à une partie allongée non continue (14) d'un autre dispositif selon l'une des revendications 1 à 14.