Brevet FR2423769A1 — publié le 19791116

L'invention se rapporte à une plaquette d'agglutination pour examens biologiques, notamment en immunologie, comportant une pluralité d'alvéoles en matière non opaque avec une paroi latérale sensiblement cylindrique à axe vertical et un fond concave. En immunologie, on utilise souvent pour un diagnostic médical des réactions d'agglutination d'hématies (ou d'autres particules agglutinables). On détermine "un facteur d'agglutination" représentatif des quantités respectives de deux agents antagonistes spécifiques (un agglutinant et un inhibiteur) en présence d'hématies agglutinables. Pour cette détermination on utilise des plaquettes d'agglutination, de forme souvent rectangulaire , avec des pluralités d'alvéoles disposés en rangées de lignes et colonnes. Ces alvéoles ont une forme en doigt de gant, avec une surface latérale sensiblement cylindrique et un fond concave. On dépose dans chaque alvéole un échantillon de sérum convenablement préparé avec addition d'hématies et d'un agent dosé-antagoniste de l'agent recherché, et on laisse sédimenter les hématies.En fin de sédimentation on observe l'étendue du dép8t des hématies sur le fond concave, et de cette étendue on tire des enseignements sur le facteur d'agglutination. Les plaquettes sont généralement constituées d' une matière transparente, pour faciliter l'observation. L'agglutination des hématies est une manifestation d'une force de cohésion dans le dépit Suivant l'intensité de cette force, il existe une pente limite correspondante du fond concave de l'alvéole en deçà de laquelle les hématies sédimentées restent stables, tandis que pour une pente supérieure les hématies dévalent la pente. Cette pente limite sera dite ci-après pente limite de stabilité. Les plaquettes d'agglutination courantes se présentent sous deux formes, les plaquettes dites en "V" et les plaquettes dites en "U". Les plaquettes en "V" ont des alvéoles dont le fond est conique, avec une pente de génératrice de cbne un peu inférieure à la pente limite de stabilité. La réponse de ce type de plaquettes est sans nuance, positive ou négative, selon que les hématies sédimentées couvrent tout le fond (agglutination normale) ou sont rassemblées à la pointe du cône (agglutination déficiente). Les plaquettes en "U" comportent des alvéoles dont le fond est sensiblement hémisphérique. En principe, les hématies qui sédimentent glissent sur les parties périphériques du fond, dont la pente est supérieure à la pente limite de stabilité correspondant à l'échantillon de sang considéré, et restent stables sur les parties centrales dont la pente est inférieure à la pente limite de stabilité, en sorte que le diamètre de la tache formée par les hématies sur le fond est représentatif du facteur d'agglutination. Toutefois on constate que les hématies qui glissent sur les parties périphériques du fond viennent s'accumuler en un anneau aux bords de la tache centrale, en rendant flous ces bords. En outre cet anneau est instable et l'on constate fréquemment qu'il s'écroule plus ou moins complètement, en formant de petites avalanches qui se rassemblent au centre. On peut essayer de réduire l'accumulation en anneau en réglant soigneusement les conditions de sédimentation, mais il n'est pas rare que ce phénomène cause des erreurs d'interprétation. En outre, les matières plastiques utilisées pour réaliser les plaquettes daggîutination sont choisies pour leur non opacité à la lumière, leur résistance aux agents chimiques et leurs facilités de moulage ; ces matières ont généralement une résistivité électrique très élevée, et sont de ce fait sujettes à se charger électro- statiquement. La présence de charges électriques sur les parois d'alvéoles perturbe la sédimentation des hématies. On constate parfais la formation d'amas instables, qui parant liée à la présence de charges localisées. L'invention a pour objet une plaquette d'agglutination qui permet une détermination fiable du facteur d'agglutination, et propose à cet effet une plaquette d'agglutination pour examens biologiques, comportant une pluralité d'alvéoles en matière non opaque avec une paroi latérale sensiblement cylindrique à axe vertical et un fond concave, caractérisée en ce que ce fond comprend une partie centrale en forme de calotte sphérique se raccordant sans discontinuité angulaire à une partie annulaire en forme de tronc de conte, la pente suivant une génératrice de la partie annulaire correspondant sensiblement à la pente limite d'agglutination normale. d ' agglutination Avec cette disposition, si le facteur/ est en quantité suffisante dans la réaction, la tache de sédimentation occupe pratiquement tout le fond de l'alvéole. S'il est en quantité insuffisante,la ta che n'occupe qu'une partie de la calotte sphérique centrale et k d Stit- mètre de la tache est représentatif du facteur d'agglutination de l'échantillon. La pente constante suivant une génératrice de la partie annulaire prévient la formation d'un anneau instable en bordure de la tache d'agglutination. Ceci était d'aillaurs imprévisible car l'on pouvait s'attendre à ce que les hématies qui sédimentaient vers les parties du fond à pente supérieure à la pente limite de stabilité se rassemblent en anneau sur les bords de la tache, quelle que soit la pente au-delà de ces bords.Or, lorsque la pente de la partie annulaire est convenablement choisie, il ne se forme pas d'anneau. On choisira de préférence un demi-angle au sommet de la partie tronconique voisine de 600. Le rayon de la sphère de la partie centrale de fond sera de préférence d'environ 0,6 fois le rayon du cylindre de paroi latérale. Pour éviter des charges électrostatiques gênantes qui perturberaient la sédimentation, la plaquette sera réalisée de préférence en une matière moulée de résistivité inférieure à 10 ohms.mètres, et notamment en acétate de cellulose. Les caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront d'ailleurs de la description qui va suivre, à titre d'exemple, en référence aux dessins annexés dans lesquels la figure 1 est une vue en coupe à grande échelle d'un alvéole de plaquette selon l'invention la figure 2 est une vue perspective d'une plaquette d'agglutination. Selon la forme de réalisation choisie et représentée figure 1, la plaquette 1 se présente sous la forme d'une plaque 2, munie de bords rabattus 3 permettant de poser la plaquette sur une surface horizontale ; dans la plaque 2 sont ménagés des alvéoles 4 en doigts de gant, disposés en rangées, douze par ligne et huit par colonne. Cette disposition est d'ailleurs classique en soi, et l'originalité réside dans la forme des alvéoles, comme présenté en figure 2. L'alvéole 10 comporte une paroi latérale de révolution autour d'un axe vertical, avec une partie supérieure 11 légèrement tronconique s'évasant vers le haut, et une partie inférieure 12, cylindrique. Le fond 13 d'alvéole comprend une partie annulaire 14, tronconique avec un demi-angle au sommet de 60 , et une partie centrale 15, en forme de calotte sphérique, et qui se raccorde sans-discontinuité angulaire-sur la partie tronconique 14.L'alvéole 10 et formé en acétate de cellulose transparent de résistivité inférieure à 10 ohms.mètres, et a les dimensions suivantes - partie tronconique 11 : diamètre de grande base 7 mm, diamètre de petite base 6 mn, hauteur 5,7 mm - partie cylindrique 12 : diamètre 6 mm, hauteur 2,3 mm ; - partie tronconique 14 : demi-angle au sommet 600, rayon de grande base 3 mm, rayon de petite base 0,9 mm ; - partie en calotte sphérique 15 : rayon de la sphère 1,8 mm, rayon de la calotte 0,9 mm. Bien entendu l'invention nrest pas limitée à l'exemple décrit, mais en embrasse toutes les variantes d'exécution. REVEsDICATIONS 1. Plaquette d'agglutination pour examens biologiques compor -tant une pluralité d'alvéoles en matière non opaque avec une paroi latérale sensiblement cylindrique à axe vertical et un fond concave, caractérisée en ce que ce fond comprend une partie centrale en forme de calotte sphérique se raccordant sans discontinuité angulaire à une partie annulaire en forme de tronc de cône, la pente suivant une génératrice de la partie annulaire correspondant sensiblement à la pente limite d'agglutination normale. 2. Plaquette selon la revendication 1, caractérisée en ce que le demi-angle au sommet de la partie annulaire est d'environ 600. 3. Plaquette selon la revendication 2, caractérisée en ce que le rayon de sphère de la partie centrale de fond est égal à environ 0,6 fois le rayon du cylindre de paro-i latérale. 4. Plaquette selon la revendication 3, caractérisée en ce que le rayon du cylindre de paroi latérale est d'environ 3 mm. 5. Plaquette selon une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'elle est réalisée en une matière moulée présentant une résistivité inférieure à 1O11 ohms.mètres. 6. Plaquette selon la revendication 5, caractérisée en ce que la matière moulée est un acétate de cellulose.