Brevet FR2394548A1 — publié le 19790112

La présente invention concerne certains 0dérivés du nouvel antibiotique thiénamycine. Par "G-dérivé", on désigne des dérivés tels que des esters et éthers de la fonction alcoolique secondaire de la thiénamycine. Ces dérivés sont utiles comme antibiotiques. La présente invention concerne aussi des procédés pour la préparation de ces composés, des compositions pharmaceutiques comprenant ces composés et des procédés de traitement comprenant l'administration de ces composés et de ces compositions quand un effet antibiotique est indiqué. La thiénamycine peut servir de matière de départ pour la préparation des composés selon la présente invention. Elle est décrite et revendiquée dans le brevet US 3 950 357 délivré le 13 avril 1976, qui est incorpor ici par référence pour ce qu'il contient à propos de la préparation et de l'isolement de la thiénamycine.La thiananycine est connue comme ayant la formule développée suivante 'les O-dérivés de thiénamycine selon la présente invention peuvent être représentés par la formule développée générale suivante (II) : ou plus commodément par le symbole (II) où"Th" représente le noyau bicyclique ae thiénamycine et les groupes OH, amino et carboxyle de la thiénamycine sont illustrés;M est de l'hydrogène, un cation de sel choisi parmi les sels de métaux&num; alcalins ou alcalino-terreux ou un sel d'amine; et R est 1) un groupe acyle (génénquement le groupe OR peut être classé comme un ester); ou 2) R est choisi parmi des groupes alcoyle, aryle, aralcoyle, etc (de manière que le groupe OR puisse être classé génériquement comme un éther). Be terme "acyle" englobe par définition les groupes alcanoylet y compris leurs dérivés et analogues tels que les analogues thio dans lesquels l'oxygène du groupe carbonyle est remplacé par du soufre; ainsi que des analogues sulfurés et phosphorés des groupes acyle comme des radicaux sulfonyle, sulfinyle et sulfényle substitués et des radicaux dérivés du phosphore (III et V) substitués comme des radicaux phosphoreux, phosphoriques, phosphoneux et phosphonicues substitués, respectivement. Ces radicaux acyle selon la présente invention sont encore définis ciaprès, de même que les radicaux (2, ci-dessus) qui constituent les autres modes de réalisation de la présente invention. On a continuellement besoin de nouveaux antibiotiques. En effet, malheureusement, il n'y a pas d'efficacité statique d'un antibiotique donné car l'utilisation prolongée de l'un quelconque des antibiotiques donne sélectivement naissance à des souches résistantes d'agents pathogènes. De plus, les antibiotiques connus présentent l'inconvénient d'être efficaces seulement contre certains types de microorganismes. En conséquence, la recherche de nouveaux antibiotiques continue. D'une manière inattendue, on a trouvé que les composés selon la présente invention sont des antibiotiques à large spectre, qui sont utiles pour le traitement des animaux et des êtres humains et dans des systèmes inanimés. Ainsi, la présente invention a pour but de fournir une nouvelle classe d'antibiotiques qui possèdent la structure nucléaire fondamentale de la thiénanycine antibiotique, mais qui sont caractérisés comme étant des Dérivés de la thiénamycine. Ces ant-bioticues sont actifs contre un large éventail d'agents pathogènes qui comprennent représentativement des bactéries tant Gram-positives comme S. aureus, S. pognes et S. subtilis que Gran-négatives comme E. coli, Proteus morganii et Klebsiella et peuvent donc être utilisés pour le traitement des maladies dont ces bactéries sont les agents.D'autres buts de la présente invention sont de fournir des procédés chimiques pour la préparation de ces antibiotiques et de leurs sels nontoxiques pharmaceutiquement acceptables; des compositions pharmaceutiques comprenant ces antibiotiques; et de fournir des procédés de traitement comprenant l'administration de ces antibiotiques et de ces compositions quand un effet antibiotique est indiqué. Dans la représentation générale des composés selon la présente invention (II, ci-dessus), le radical acyle représenté par R peut, notamment, être un radical d'acide carboxylique aliphatique, aromatique ou hétérocyclique, araliphatique ou hétérocycloaliphatique substitué ou non, un radical carbamyle substitué ou non ou un radical d'acide carbothioique. Un groupe de radicaux acyle peut etre représenté par la formule générale dans laquelle X est O ou S et R" représente de l'hydrogène; un groupe amino; amino substitué tel que alcoyl- et dialcoylamino où le radical alcoyle comprend de 1 à 6 atomes de carbone environ; les radicaux suivants substitués ou non : alcoyle à chaîne droite ou ramifiée comprenant de 1 à 6 atomes de carbone environ; mercapto, comme alcoylthio, comprenant typiquement de 1 à 6 atomes de carbone; arylthio, comprenant typiquement de 6 à 10 atomes de carbone; hydroxy, comme alcoxy, comprenant typiquement de 1 à 6 atomes de carbone; aryloxy, comprenant typiquement de 6 à 10 atomes de carbone; groupes alcényle ou alcynyle comprenant typiquement de 2 à 6 atomes de carbone; aryle comme phényle; aralcoyle comme benzyle, cycloalcoyle, comprenant typiquement de 3 à 6 atomes de carbone; ou un groupe hétéroaryle ou hétéroaralcoyle (mono- et bicyclique) dans lequel la portion alcoyle comprend typiquement 1 à 3 atomes de carbone et le noyau hétérocyclique comprenant typiquement 4 à 10 atomes et le ou les hétéro-atomes sont choisis parmi 0, N et S; les groupes énumérés ci-dessuspeuvent être non-substitués ou ils peuvent être substitués par des radicaux tels que OH, SH, SR (R est un groupe alcoyle inférieur ou aryle tel que phényle), des groupes alcoyle ou alcoxy ayant 1 à 6 atomes de carbone environ, halogéno, comme Cl, Br, F et I, cyano, carboxy, sulfamino, carbamoyle, sulfonyle, azido, amino, amino substitué comme alcoylamino, y compris ammonium quaternaire où le groupe alcoyle comprend 1 à 6 atomes de carbone, hàlogénoalcoyle comme trifluorométhyle, carboxyalcoyle, carbamoylalcoyle, carbamoylalcoyle N-substitué, où la portion alcoyle des quatre radicaux précédents comprend 1 à 6 atomes de carbone environ, amidino, guanidino, guanidino N-substitué, guanidino alcoyle inférieur, etc.Des exemples représentatifs de tels groupes acyle qui pourraient être mentionnés sont ceux dans lesquels R" est un groupe benzyle, p-hydroxybenzyle, 4-amino-4-carboxybutyle, méthyle, cyanométhyle, 2-pentényle, , ss,ss-diphényléthyle, méthyldiphénylméthyle, triphény- méthyle, 2-méthoxyphényle, 2,6-diméthoxyphényle, 2,4,6-triméthoxyphényle, 3,5-diméthyl-isoxazolyle, 3-butyl-5-méthyl-4-isoxzolyle, 5-méthyl-3-phényl-4-isoxazolyle, 3-(2-chlorophényl)-5méthyl-4-isoxazolyle, 3-(2,6-dichlorophényl)-5-méthyl-4-isoxazolyle, D-4-amino-4-carboxybutyle, D-4-N-benzoylamino-4-carboxy-nbutyle, p-aminobenzyle, o-aminobenzyle, m-aminobenzyle, p-diméthylaminobenzyle, (3-pyridyl)méthyle, 2-éthoxy-I -naphtyle, 3-carboxy2-quinoxalinyle, 3-(2,6-dichlorophényl)-5-(2-furyl)-4-isoxazolyle, 3-phényl-4-isoxazolyle, 5-méthyl-3-(4-guanidinophényl)-4-isoxazolyle, 4-guanidinométhylphényle, 4-guanidinométhylbenzyle, 4-guanidinobenzyle, 4-guanidinophényle, 2,6-diméthoxy-4-guanidino, o-sulfobenzyle, p-carboxyméthylbenzyle, p-carbamoylméthylbenzyle, m-fluorobenzyle, m-bromobenzyle, p-chlorobenzyle, p-méthoxybenzyle, 1-naphtylméthyle, 3-isothiazolylméthyle, 4-isothiazolyl- méthyle, 5-isothiazolylméthyle, guanylthiométhyle, 4-pyridylméthyle, 5-isoxazolylméthyle, 4-méthoxy-5-isoxazolylméthyle, 4-méthyl-5-isoxazolylméthyle, 1-imidazolylméthyle, 2-benzofuranyl méthyle, 2-indolylméthyle, 2-phénylvinyle, 2-phényléthynyle, 1-amino-cyclohexyle, 2- et 3-thiénylaminométhyle, 2-(5-nitrofuranyl)vinyle, phényle, o-méthoxyphényle, o-chlorophényle, o-phénylphényle, p-aminométhylbenzyle, 1-(5-cyanotrizolyl) méthyle, difluorométhyle, dichlorométhyle, dibromométhyle, 1-(3-méthyl- imidazolyl)méthyle, 2- ou 3-(5-carboxyméthylthiényl)méthyle, 2- ou 3-(4-carbamoylthiényl)méthyle, 2- ou 3-(5-méthylthiényl)méthyle, 2- ou 3-(méthoxythiényl)méthyle, c- ou 3-(4-chlorothiényl)-méthyle, 2- ou 3-(5-sulfothiényl)méthyle, 2- ou carboxythiényl)méthyle, 3-(1,2,5-thiadiazolyl)-méthyle, 3-(4méthoxy-1,2,5-thiadiazolyl)méthyle, 2-furylméthyle, 2-(5-nitro furyl)mêthyle, 3-furylméthyle, 2-thinylméthyle, 3-thiénylmethyle, tétrazolylméthyle, benzamidinométhyle et cyclohexylamidinométhyle. Le groupe acyle peut aussi être un radical de la formule dans laquelle X est 0 ou S et n va de G à 4, Z représente de l'oxygène, du soufre, un groupe carbonyle ou de l'azote et R" est tel que défini ci-dessus. Des exemples représentatifs du substituant -(CH2)nZR" qui pourraient être mentionnés sont les groupes allylthiométhyle, phénylthiométhyle, butylmercaptométhyle, o'-chlorocrotylmercapto- méthyle, phénoxyméthyle, phénoxyéthyle, ph noxybutyle, phénoxybenzyle, diphénoxyméthyle, diméthylméthoxyméthyle, diméthylbutoxyméthyle, diméthylphénoxyméthyle, 4-guanidinophénoxyméthyle, 4-pyridylthiométhyle, p-(carboxyméthyl)phénoxyméthyle, p-(carboxy méthyl)phénylthiométhyle, 2-thiazolylthiométhyle, p-(sulfo)phénoxyméthyle, p-(carboxyméthyl)phénylthiométhyle, 2-pyrimidinylthiométhyle, phénéthylthiométhyle, 1-(5,6,7,8-tétrahydronaphtyl)oxométhyle, N-méthyl-4-pyridylthio, benzyloxy, méthoxy, éthoxy, phénoxy, phénylthio, amino, méthylamino, diméthylamino, pyridinium méthyle, triméthylammonium-méthyle, cyanométhylthiométhyle, trifluorométhylthiométhyle, 4-pyridyléthyle, 4-pyridylpropyle, 4-pyridylbutyle, 3-imidazolyléthyle, 3-imidazolylpropyle, 3imidazolylbutyle, 1-pyrroloéthyle, 1-pyrrolopropyle et 1-pyrrolo- butyle. En variante, le groupe acyle peut être un radical de la formule dans laquelle R" est tel que défini ci-dessus et R"' est un radical tel que amino, hydroxy, azido, carbamoyle, guanidino, amidino, acyloxy, halogéno, comme Cl, F, Br, I, sulfamino, tétrazolyle, sulfo, carboxy, carbalcoxy, phosphono, etc.Des exemples représentatifs du substituant qui pourraient être mentionnés sont les groupes a-aminobenzyle, a-amino-(2-thinyl)mthyle, a-(méthylamino)benzyle, a-amino méthylmercaptopropyle, a-amino-3- ou 4-chlorobenzyle, a-amino-3ou 4-hydroxybenzyie, a-amino-2 ,4-dichlorobenzyle, a-amino-3,4dichlorobenzyle, D(-)-&alpha;-hydroxybenzyle, &alpha;-carboxybenzyle, &alpha;-amino-(3-thiényl)méthyl D-(-)-&alpha;-amino-3-cloro-4-hydroxy benzyle, a-amlno(cyclohexyl)méthyle, a-(5-tétrazolyl)-benzyle, 2-thiényl-carboxyméthyle, 3-thiényl-carboxyméthyle, 2-furylcarboxyméthyle, 3-furyl-carboxyméthyle, &alpha;-sulfaminobenzyle, 3-thiényl-sulfaminométhyle, &alpha;;-(N-méthylsulfamino)-benzyle, D(-)-2-thiényl-guanidinométhyle, D(-)-a-guanidinobenzyle, - guanyluréidobenzyle, a-hydroxybenzyle, a-azidobenzyle, a-fluorobenzyle, 4-(5-méthoxy-1,3-oxadiazolyl)-aminométhyle, 4-(5-méthoxy 1,3-oxadiazolyl)-hydroxyméthyle, 4-(5-méthoxy-1,3-sulfadiazolyl)hydroxyméthyle, 4-(5-chlorothiényl)-aminométhyle, 2-(5-chlorothiényl)-hydroxyméthyle, 2-(5-chlorothiényl)-carboxy-méthyle, 3-(1,2-thiazolyl)-aminométhyle, 3-(1,2-thiazolyl)-hydroxyméthyle, 3-(1,2-thiazolyl)-carboxyméthyle, 2-(1,4-thiazolyl)-aminométhyle, 2-(1,4-thiazolyl)-hydroxyméthyle, 2-(1,4-thiazolyl)-carboxyméthyle, 2-benzothiénylaminométhyle, 2-benzothiénylhydroxyméthyle, 2-benzothiénylcarboxyméthyle, a-sulfobenzyle, a-phosphonobenzyle, a-diéthylphosphonc et a-monoéthylphosphono. D'autres radicaux acyle intéressants de cette classe quand X = oxygène sont où R3 et R4 sont tels que définis ci-dessus. R3 représente de l'hydrogène, un halogène, comme du chlore, du fluor, du brome, de diode, un groupe amino, guanidino, phosphono, hydroxy, tétrazolyle, carboxy, sulfo ou sulfamino et R4 représente un groupe phényle, phényle substitué, un groupe hétérocyclyle mono- ou bicyclique contenant un ou plusieurs atomes d'oxygène, de soufre ou d'azote dans le noyau, comme furyle, quinoxalyle, thiényle, quinolyle, quinazolyle, thiazolyle, isothiazolyle, tétrazolyle, oxadiazolyle, thiadiazolyle et les hétérocycles substitués du même genre, phénylthio, phényloxy, alcoyle inférieur de 1 à 6 atomes de carbone, groupes hétérocycliques-thio ou hétrocyclî- ques-thio substitués; ou cyano. 'les substituants sur les portions R3 et R4 peuvent être des substituants halogéno, carboxy méthyle, guanidino, guanidinométhyle, carboxamidométhyle, aminoéthyle, méthoxy ou méthyle. Quand R3 est choisi dans le groupe constitué par l'hydrogène et les groupes hydroxy, amino et carboxy et que R4 est choisi dans le groupe constitué par le radical phényle et les noyaux hétérocycliques pentagonaux ou hexagonaux ayant un ou deux hétéro-atomes de soufre, d'oxygène ou d'azote comme les radicaux tétrazolyle, thiényle, furyle et phényle, les radicaux acyle suivants sont représentatifs :: phénylacétyle, 3-bromophénylacétyle, p-aminométhylphénylacétyle, 4-carboxyméthylphénylacétyle, 4-carboxyamidométhylphénylacétyle, 2-furylacétyle, 5-nltro-2-furylacetyle, 3-furylacétyle, 2-thiénylacétyle, 5-chloro-2-thiénylacétyle, 5-méthoxy-2-thiénylacétyle, a-guanidino-2-thiénylacétyle, 3-thiénylacétyle, 2-(4-méthylthié- nyl)acétyle, 3-isothiazolylacétyle, 4-méthoxy-3-isothiazolylacétyle, 4-isothiazolylacétyle, 3-méthyl-4-isothiazolylacétyle, 5-isothiazolylacétyle, 3-chloro-5-isothiazolylacétyle, 3-méthyl1,2,5-oxdiazolylacétyle, 1,2,5-thiadiazolyl-4-acétyle, 3-méthyl1,2,5-thiadiazolylacétyle, 3-chloro-1,2,5-thiadiazolylacétyle, 3-méthoxy-1,2,5-thiadiazolylacétyle, phénylthioacétyle, 4-pyridylthioacétyle, cyanoacétyle, 1-tétrazolylacétyle, a-fluorophénylacétyle, D-phénylglycyle, 4-hydroxy-D-phénylglycyle, 2-thiényl- glycyle, 3-thiénylglycyle, phénylmalonyle, 3-chlorophénylmalonyle, 2-thiénylmalonyle, 3-thiénylmalonyle, &alpha;-phosphonophénylacétyle, a-amino cyclohexadiénylacétyle, a-sulfaminophénylacétyle, a-hydroxyphénylacétyle, a-tétrazolylphénylacétyle et &alpha;-sulfo- phénylacétyle. Be substituant acyle peut aussi être choisi parmi des radicaux dérivés du soufre t1) et du phosphore (2) où, dans le cas de (1), m et n sont des nombres entiers choisis parmi 0 et 1 et Y = O# M#, -N(R") et R" ; où M# est choisi parmi l'hydrogène, les cations de métaux alcalins et les bases organiques; et R" est tel que défini ci-dessus, par exemple un groupe alcoyle, alcényle, aryle ou hétéroaryle.Dans le cas de (2), X = O ou S ; n = O ou 1 ; et Y' et Y" sont choisis parmi O 0M0+ , -N(R")2, R" et ZR" , où tous les symboles sont tels que définis ci-dessus, par exemple R" et ZR" sont représentative ment des groupes alcoyle, alcényle, aryle, hétéroaryloxy; Y' et Y", y compris les portions R", peuvent être reliés ensemble pour former des fonctions cycliques d'ester, ester-amide et amide. Des exemples illustratifs de C) sont les suivants : O-(méthylsulfonyl)thiénamycine, o-(o-nitrophénylsulfonyl)thiénamycine, o-(p-chlorophénylsulfinyl)thiénamycine, o-(o-nitrophénylsulfényl) thiénamycine, O-sulfamoylthiénamycine, O-diméthylsulfamoylthiénamycine et sel de sodium d'acide thiénamycine O-sulfonique. Des exemples illustratifs de (2) sont les suivants : O-(diméthoxyphosphino)thiénamycine, O-(dibenzyloxyphosphino)thiénamycine, sel disodique d'O-(dihydroxyphosphino)thiénamycine, O-(diméthoxyphosphinyl) thiénamycine, O-(diméthoxyphosphinothioyl)thiénamycine, O-(dibenzyloxyphosphinyl)thiénamycine, et sel disodique d'O (dihydroxyphospbinyl) thiénamycine. Une classe de substituants acyle particulièrement intéressante est celle des radicaux acyle qui sont choisis dans le groupe constitué par les groupes de blocage ou protecteurs connus de manière classique tels que des groupes carbobenzyloxy, carbobenzyloxy substitués au noyau comme o- et p-nitrocarbobenzyloxy, p-méthoxycarbobenzyloxy, ckloroacétyle, bromoacétyle, phénylacétyle, t-butoxycarbonyle, trifluoroacétyle, bromoéthoxycarbonyle, 9-fluorénylméthoxyearbony1e, dichloroacétyle, 0-nitrophénylsulfényle, 2,2,2-trichloroéthoxycarbonyle, bromo-t-butoxycarbonyle, phénoxyacétyle, des groupes protecteurs non-acyle tels que des groupes trikalcoyl inférieur)silyle, par exemple triméthylsilyle et t-butyldimétlylsilyle sont intéressants aussi. 'les radicaux suivants, conformément à la définition précédente des groupes acyle, sont préférés : formyle, propionyle, butyryle, chloroacétyle, méthoxyacétyle, aminoacétyle, méthoxycarbonyle, éthoxycarbonyle, méthylcarbamoyle, éthylcarba- moyle, phénylthiocarbonyle, 3-aminopropionyle, 4-aminobutyryle, N-méthylaminoacétyle, N,N-diméthylaminoacétyle, N,N,N-triméthylaminoacétyle, 3-(N,N-diméthyl)aminopropionyle, 3-(N,N,N-triméthyl)aminopropionyle, N,N,N-triéthylaminoacétyle, pyridiniumacétyle, guanylthioacétyle, guanidinoacétyle, 3-guanidinopropionyle, N3-m-thylguanidinopropionyle, hydroxyacétyle, 3-hydroxypropionyle, acryloylW propynoyle, malonyle, phénoxycarbonyle, amidinoacétyle, acétamidinoacétyle, amidinopropionyle, acétamidinopropionyle, guanyluréidoacétyle, guanylcarbamoyle, carboyméthyla?inoacétyle, sulfoacétylaminoacétyle, sulf o, phosphono, phosphonoacétylaminoacétyle, N -diméthylaminoacétamidinopropionyle, uréidocarbonyle, diméthylaminoguanylthioacétyle, 3-(1-méthyl-4-pyridinium)propionyle, 3-(5-aminoimidazol-1-yl)propionyle, 3-méthyl-1-imidazoliumacétyle, 3-sydnonylacétyle, o-aminométhylbenzoyle, o-aminobenzoyle, Une classe spécialement préférée de radicaux acyle est celle des radicaux acyle substitués en position terminale dans lesquels le substituant est un groupe basique comme les groupes suivants, substitués ou non : amino, amidino, guanidino, guanyle et hétèrocycles mono- et bicycliques contenant de l'azote (aromatiques et non-aromatiques) dans lesquels le ou les hétéro-atomes, en plus de l'azote, sont choisis parmi l'oxygène et le soufre. De tels radicaux acyle substitué préférés peuvent être représentés par la formule suivante dans laquelle m et n sont des nombres entiers de O à 5 ; A est 0, IE' (R' est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone), S ou A représente une liaison simple; et Y est choisi dans le groupe suivant 1) amino ou amino substitué -N(R)2 et où les significations de R sont choisies indépendamment parmi l'hydrogène;N(R')2 (R' est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone); alcoyle inférieur ou alcoxyle inférieur ayant de l à 6 atomes de carbone; alcoxy inférieur-alcoyle inférieur où la portion alcoxyle comprend I à 6 atomes de carbone et la portion alcoyle comprend 2 à 6 atomes de carbone; cycloalcoyle et cycloalcoylalcoyle, où la portion cycloalcoyle comprend 3 à 6 atomes-de carbone et la portion alcoyle comprend 1 à 3 atomes de carbone; deux groupes R peuvent être reliés ensemble pour former avec l'atome d'azote sur lequel ils sont fixés un noyau ayant 3 à 6 atomes de carbone. 2) amidino et amidino substitué où la signification de R est choisie indépendamment parmi l'hydrogène; N(R')2 (R' est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur ayant de I à 6 atomes de carbone); des groupes alcoyle inférieur et alcoxyle inférieur ayant de I à 6 atomes de carbone; alcoxy inférieur-alcoyle inférieur, où la portion alcoxyle comprend 1 à 6 atomes de carbone et la portion alcoyle inférieur comprend 2 à 6 atomes de carbone (quand le radical alcoxy inférieur alcoyle inférieur est fixé sur du carbone, la portion alcoyle comprend 1 à 6 atomes de carbone); cycloalcoyle et cycloalcoyl-alcoyle où la portion alcoyle comprend I à 3 atomes de carbone; deux groupes R peuvent être reliés ensemble pour former avec les atomes sur lesquels ils sont fixés un noyau ayant 3 à 5 atomes 3) quanidino et guanidino substitué où R est tel que défini dans 2 (ci-dessus). 4) guanyle et guanyle substitué où R est tel que défini dans 2 (ci-dessus). 5) hétérocycles mono- et bicycliques contenant de l'azote (aromatiques et non-aromatiques) ayant de 4 à 10 atomes dans le ou les cycles, où le ou les hétéro-atomes, en plus de l'azote, sont choisis parmi l'oxygène et le soufre. De tels hétérocycles sont illustrés de manière représentative par 1alise suivante de radicaux (R' est H ou un groupe alcoyle inférieur ayant 1 à 6 atomes de carbone) Les radicaux acyle particuliers suivants compris dans cette classe sont représentatifs aussi et sont préférés toutefois, il y a lieu de comprendre que n'importe quel radical acyle peut être utilisé dans la mise en oeuvre de l'invention et doit être considéré comme compris dans le cadre général de l'invention. Dans les modes de réalisation dits éthers (2)de la présente invention (II, ci-dessus), R est choisi parmi les radicaux acyle identifiés ci-dessus dans lesquels la portion carbonyle, ou plus généralement est supprimée; ainsi, R est choisi parmi les radicaux suivants, où tous les symboles sont tels que définis précédemment -R" (CH2)nZR" -CHR R4 -(CH2)m-A-(CH2)n-Y Pour les modes de réalisation éthers (2) aussi bien que dans les modes de réalisation esters (1), les radicaux particulièrement préférés sont (Structure II ci-dessus) ceux ayant une masse moléculaire relativement basse et-qui sont hydrophiles. Ainsi, par exemple dans le cas des modes due réalisation éthers (2), les radicaux suivants sont spécialement préférés et représentatifs : méthoxyméthyle, hydroxyméthyle, méthoxyéthyle, diméthylaminométhyle, diméthylaminoéthyle, méthylthioéthyle, amidinoéthyle, guanidinoéthyle, etc. Pour les modes de réalisation esters (1), les radicaux suivants sont représentatifs et préférés sulfo, phosphono, carbamoyle, méthylsulfonyle, sulfamoyle, diméthylsulfonoyle, N-méthylcarbamoyle, bromoacétyle, hydroxyacétyle, aminoacétyle, diméthylaminoacétyle, mêthoxyacétyle, guanylacétyle, guanylthioacétyle, phospha moyle, phosphonothioyle, thiocarbamoyle, etc. En général, on prépare les antibiotiques selon la présente invention en agissant sur un noyau de thiénamycine complètement protégé ou toqué (III) et en effectuant ensuite un déblocage où R1 et R2 sont des groupes classiques de blocage sur l'azote (habituellement R ou R2 est de l'hydrogène) et R3 est un groupe classique de blocage de carboxyle. La préparation du compos à azote et à carboxyle bloqués, III, est décrite complètement ci-après et dans les Exemples.La seule exigence concernant les groupes de blocage R1, R2 et R3 (ou le radical XR3, fixé sur le carbone du groupe carbonyle, où X est de oxygène ou du soufre) est qu'ils ne doivent pas gêner la réaction désirée et qu'ils doivent être finalement éliminables facilement pour donner II. Ainsi, l'expression "groupe de blocage" telle qu'utilisée ici est utilisée de la même manière que dans le brevet US 3 697 515 et conformément aux enseignements de ce brevet, qui est incorporé ici par rcftrence. Les groupes préférés de blocage sur l'azote pour la matière de départ III sont : des groupes carbobenzyloxy, carbobenzyloxy substitués au noyau comme o- et p-nitrocarbobenzyloxy, p-méthoxycarbobenzyloxy, chloroactyle, bromoacétyle, phényl- acétyle, t-butoxycarbonyle, trifluoroacétyle, bromoéthoxycarbo- nyle, 9-fluorénylméthoxycarbonyle, dichloroacétyle, o-nitrophénylsulfényle, 2,2,2-trichloroéthoxycarbonyle, bromo-t-butoxycarbonyle, phénoxyacétyle ; des groupes protecteurs non-acyle tels que des groupes alcoylidène, par exemple benzylidène, salicylidène, etc, sont intéressants aussi. Des esters de blocage appropriés, R3, pour la matière de départ III, comprennent ceux choisis dans la liste suivante qui est représentative et ne doit pas etre considérée comme étant une liste exhaustive des groupes ester possibles, où X est de l'oxygène et R3 est indiqué (1) R3 = CRaRbRc où au moins un des radicaux RA, Rb et R c est un donneur d'électrons, par exemple un groupe p-méthoxy- phényle, 2,4,6-triméthylphényle, 9-anthryl ,mèthoxy, CH2SCH3, tétrahydrofur-2-yle, tétrahydropyran-2-yle, ou fur-2-yle. 'les autres groupes Ra, RD et R c peuvent être de l'hydrogène ou des groupes substituants organiques.Des groupes ester utilisables de ce type sont par exemple les groupes p-méthoxybenzyloxycarbo- nyle et 2,4,6-triméthylbenzyloxycarbonyle. (2) R3 = CRaRbRc où au moins un des groupes Ra, R b et R c est un groupe attirant les électrons, par exemple benzoyle, p-nitrophényle, 4-pyridyle, trichlorométhyle, tribromométhyle, iodométhyle, cyanométhyle, éthoxycarbonylméthyle, arylsulfonylméthyle, 2-diméthylsulfoniuméthyle, o-nitrophényle ou cyano. Des groupes ester utilisables de ce type sont par exemple les groupes benzoylméthoxycarbonyle, p-nitrobenzyloxycarbonyle, 4-pyridylméthoxycarbonyle, 2,2,2-trichloroéthoxycarbonyle et 2,2,2-tribromoéthoxycarbonyle. (3) R = CRaRbRc où au moins deux des groupes Ra, Rb et R c sont des radicaux d'hydrocarbures tels que alcoyle, par exemple méthyle ou éthyle, ou aryle, par exemple phényle, et le groupe Ra, b ou Re restant, s'il y en a un, est de l'hydro- gène. Des groupes ester utilisables de ce type sont, par exemple, les groupes t-butyloxycarbonyle, t-amyloxycarbonyle, diphénylméthoxycarbonyle et triphénylméthoxycarbonyle. (4) R3 = Rd où Rd est un groupe adamantyle, 2-benzyloxyphényle, 4-méthylthiophényle ou tétrahydropyran-2-yle. Des silyl esters, dans cette catégorie de groupes de blocage, peuvent être préparés commodément à partir d'un halogénoisilane ou d'un silazane de la formule R43SiX' ; R42SiX'2 ; R43 Si.NR42 ; R43Si.NH.COR4 ; R43Si.NH.CO.NH.SiR43 ; R4NH.CO.NR4.SiR43 ; ou R4C(OSiR43) ; HN(SiR43)2 où X' est un halogène comme du chlore ou du brome et les divers groupes R4, qui peuvent être identiques ou différents, représentent des atomes d'hydrogène ou des groupes al- coyle, par exemple méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle; aryle, par exemple phényle; ou aralcoyle, par exemple benzyle. ce propos, il y a lieu de noter que les groupes de blocage" R3 préférés comprennent les sous-groupes définis cidessus comme groupes aralcoyle, halogénoalcoyle, alcanoyloxyalcoyle, alcoxyalcoyle, alcényle, alcoyle substitué ou aralcoxyalcoyle, et comprenant aussi les groupes alccylsilyle, où le radical alcoyle a de 1 à 10 atomes de carbone. Par exemple, les "groupes de blocage" R3 utilisables comprennent les groupes benzyle, phénacyle, p-nitrobenzyle, mêthoxyméthyle, trichloroéthyle, trimêthylsilyle, tributyltin , p-méthoxybenzyle, benzhydryle. Ces groupes de blocage sont préférés parce qu'ils sont généralement bien connus comme étant des groupes de blocage facilement éliminables dans la technique des céphalosporines et des pénicillines. En général, le produit de réaction intermédiaire III à azote et carboxyle bloqués est préparé en effectuant d'abord une N-acylation et en transformant ensuite en un dérivé la fonction carboxyle; toutefois, la réaction de blocage peut établir R L'établissement des groupes de blocage peut être effectué en opérant sur la thiénamycine libre, I, ou sur un dérivé protégé de cette thiénamycine, comme la tris-silylate thiénamycine où, pourtaus de commodité, on utilise le symbolisme indiqué précédemment pour la thiénamycine et TMS est un groupe triorganosilyle tel que triméthylsilyle par exemple; la préparation de tels composés est décrite complètement dans l'Exemple 21, ciaprès. Les groupes préférés R1 et R2 de blocage de l'azote sont ceux dans lesquels 0 est de l'hydrogène et i est un radical carbobenzyloxy substitué ou non : où n va de O à 2 (n = O, R' = hydrogène) et R' est un groupe alcoxy inférieur ou nitro. Un autre groupe spécialement prêfêré de blocage de l'azote est le groupe bromo-t-butoxycarbonyle. Le groupe préféré de blocage du carboxyle, R3, est un groupe benzyle ou benzyle substitué, comme p-nitrobenzyle où n va de O à 2 (n = O, R' = H) et R' est un groupe alcoxyle inférieur ou nitro. Ainsi, la matière de départ préférée, III, peut être représentée comme suit En général, on prépare III en traitant la thiénamycine dans de l'eau ou dans un mélange d'eau et d'un solvant organique polaire comme du dioxane en présence d'une base avec un halogénure d'acyle comme du carbobenzyloxy chlorure. Le dérivé N-acylthiénamycine résultant est isolé par des techniques classiques. Le groupe de blocage du carboxyle est établi commodément comme deuxième tape; dans laquelle la thiénamycine à azote bloqué est traite avec un halogénure activé comme du bromure de benzyle dans un solvant comme de l'hexaméthylphosphoramide ou un solvant du mên,e genre à une température comprise entre 0 et 600C pendant une période allant de quelques minutes à 4 heures. Le composé résultant à azote et carboxyle bloqués, III, est ensuite tran=-formé en composé intermédiaire IIIa par le procédé décrit ci-dessous.Le composé intermédiaire IIIa est débloqué pour donner les composés selon la présente invention, II, par l'une quelconque de plusieurs techniques bien connues qui comprennent l'hydrolyse et l'hydrogénation. Quand on utilise les groupes préférés de blocage de l'azote et du carboxyle, la technique préférée de déblocage est l'hydrogénation, dans laquelle le composé intermédiaire IIIa, dans un solvant tel qu'un alcanol inférieur, est hydrogéné en présence de catalyseurs d'hydrogénation tels -ue Pt, Pd ou leurs oxydes. Dans la préparation de II, le compose à azote protégé (1) peut être préparé d'abord En général, le composé à azote protégé 1 (ci-dessus) dans lequel R1 et R2 sont choisis parmi H ou des groupes acyle est préparé en traitant la thiénamycine (I) avec un agent d'acylation, par exemple un halogénure d'acyle ou un anhydride d'acyle comme un halogénure ou anhydride d'acide carboxylique aliphatique, aromatique, hétérocyclique, araliphatique ou hétérocycliquealiphatique.D'autres agents d'acylation peuvent aussi être utilisés, par exemple des anhydrides d'acides carboxyliques mixtes et en particulier des esters d'alcoyle d'anhydrides mixtes carboxylique-carbonique ; également, des acides carbocycliques en présence d'un carbodiimide comme le 1,3-dicyclohexylcarbodiimide et un ester activé d'un acide carboxylique comme les esters de p-nitrophényle. La réaction d'acylation peut être conduite à une température comprise entre 2000 environ et 100C environ; mais elle est conduite de préférence à une température comprise entre -SOC et 250C.N'importe quel solvant dans lequel les corps en réaction sont solubles et sensiblement inertes peut être utilisé, par exemple des solvants polaires comme l'eau, des alcools et des solvants organiques polaires en général comme le diméthylformamide (DMP), l'hexaméthyl phosphoramide (-fiMPA), l'acétone, le dioxanne, le tétrKlydrofuranne (THF), l'acétonitrile, des amines hétérocycliques comme la pyridine, l'acétate d'éthyle, un mélange aqueux des solvants ci-dessus, ainsi que des solvants halogénés comme le chlorure de méthylène et le chloroforme.La réaction est conduite pendant une période comprise entre cinq minutes environ et un maximum de trois heures, mais en général un temps de réaction compris entre une deml-heure et une heure environ est suffisant. L'équation suivante illustre ce procédé utilisant un halogénure d'acide carboxylique; toutefois, il y a lieu de comprendre qu'en substituant un anhydride d'acide carboxylique ou un autre agent d'acylation fonctionnellement équivalent, on peut obtenir des produits similaires. Généralement, quand la réaction d'acylation décrite ci-dessus utilise un halogénure d'acyle (des halogénures utilisables sont les chlorures, iodures ou bromures) ou un anhydride, la réaction est conduite dans de l'eau ou dans un mélange aqueux d'un solvant organique polaire comme l'acétone, le dioxanne, THF, DMF, l'acétonitrile, etc, en présence d'une base acceptrice appropriée comme NaHCO3, MgO, NaOR, KS P04, etc. Dans les cas où l'agent d'acylation est excessivement sensible à l'eau, il est quelquefois avantageux qu'on conduise l'acylation dans un solvant non-aqueux. Des dérivés de triorgano silyle (ou d'étain) de thiénamycine sont utilisables à cet effet. La silylation de la thiénamycine s'effectue rapidement pour donner le dérivé tris-triorganosilyle, par exemple la tris-triméthylsilyl thiénamycine, h(TMS)3 Ces dérivés, qui sont facilement solubles dans des solvants organiques, sont préparés commodément en traitant la thiénamycine avec un excès d'hexaméthyldisilazane et une quantité stoechiométrique de triméthylchlorosilane à 250C, avec agitation énergique sous une atmosphère de N2. Be NE4Cl résultant est éliminé par centrifugation et le solvant est éliminé par évaporation pour donner lessérivé silylé désiré. En général, la matière de départ intermédiaire III est préparée à partir du composé à azote protégé 1 conformément au schéma suivant où tous les symboles sont tels que définis précédemment. En général, la transformation 1 # III est effectuée par des tech- niques classiques connues de l'homme de l'art. De telles techniques comprennent les suivantes : 1) Réaction de n avec un diazoalcane comme le diazométhane, le phényldiazométhane, le diphényldiazométhane, etc, dans un solvant comme le dioxanne, l'acétate d'éthyle, l'acétonitrile, etc, à une température comprise entre OOC et la température de reflux pendant une période comprise entre quelques minutes et 2 heures. 2) Réaction d'un sel de métal alcalin de 1 avec un halogénure d'alcoyle activé comme l'iodure de méthyle, le bromure de benzyle, le bromure de m-phénoxybenzyle, le bromure de -t-butylbenzyle, le chlorure de pivaloyloxyméthyle, etc. Les conditions de réaction utilisables comprennent des solvants comme l'hexamèthylphosphoramide et les solvants du même genre une température corprise entre 00C et GOOC, pendant une pe- riode comprise entre quelques minutes et 4 heures. 3) Réaction de 1 avec un alcool comme le méthanol, l'éthanol, l'alcool benzylique, etc. Cette réaction peut être conduite en présence d'un agent de condensation carbodiimide comme le dicyclohexylcarbodiimide ou les agents du même genre. Les solvants utilisables, à une température comprise entre 0 C et la température de reflux pendant 15 minutes à 18 heures, comprennent CHCl3, CH3CH, CH2Cl2, etc. 4) Réaction d'un anhydride d'acide N-acylè de a préparé en faisant réagir l'acide libre III avec un chlorure d'acide comme du chloroformiate d'éthyle, du chloroformiate de benzyle, etc, avec un alcool comme ceux indiqués en 3) dans les mêmes conditions de réaction n'indiquées ci-dessus pour 3). On prépare l'anhydride en faisant réagir III et le chlorure d'acide dans un solvant comme le tétrahydrofuranne (THF), CH2Cl2 et les solvants du même genre à une température comprise entre 256C et la température de reflux pendant 15 minutes à 10 heures. 5) Réaction d'esters labiles de thiénamycine (II) comme l'ester de triméthylsilyle, lester de diméthyl-t-butylsilyle, etc, avec RX', où X' est un halogene comme du brome ou du chlore et R est tel que défini, dans un solvant comme r2HF, CH2Cl2, etc, à une teirpêrature comprise entre G C et la température de reflux pendant une période de 15 minutes à 16 heures. Par exemple, conformÉ ment au schéma suivant : où TMS est un groupe triorganosilyle tel que triméthylsilylsilyle et tous les autres symboles sont tels que définis précédemment. Les schéma d'estérification spécifiés ci-dessus sont bien connus dans la technique apparentée des antibiotiques ss-lactames bicycliques et en fait dans toute la synthèse orgatique en gÉnéral et il y a lieu de noter que les paramètres de action ne présentent pas un caractère particulièrement critique. dans la préparation des N-acyl et carboxyl-thiénamycines (matières de départ III) de la pressente invention. En général, les composés selon la présente invention sont préparés par l'une quelconque de diverses réactions d'esté rification ou d'éthérification bien connues (III # IIIa) sur le groupe alcoolleue secondaire de la thiénamycine dans sa forme protégée, lii. (La technique de déblocage (IIIa > II) pour donner les composés selon la présente invention a été examinée ci-dessus).Ces techniques (III # IIIa) comprennent 1) Pour la préparation de modes de réalisation éther de la présente invention, la réaction catalysée par un acide de III avec un diazoalcane comme le diazométhane, le phényldiazométhane, le diphényldiazométhane, le tétrahydrofuranne (THF), des halogénohydrocarbures comme CH2Cl2, l'acétate d'éthyle, etc, en présence d'une quantité catalytique d'un acide fort ou d'un acide de Lewis comme l'acide toluène-sulfonique, l'acide trifluoroactique, l'acide fluoborique, le trifluorure de bore, etc, à une température comprise entre -78 C et 2500 pendant une période comprise entre quelques minutes et 2 heures. 2) Pour la préparation de modes de réalisation éther de la présente invention, la réaction de III avec un agent d'alcoylation comme des halogénures actifs, par exemple l'iodure de méthyle, le bromure de benzyle, le bromure de m-phénoxybenzyle, etc, des alcoyl sulfonates comme le sulfate de diméthyle, le sulfate de diéthyle, le fluorosulfonate de méthyle, etc, en présence d'une base forte capable de former l'anion alcoolate de III.Les bases utilisables comprennent des oxydes ou oxydes hydratés de métaux alcalins et de métaux alcalino-terreux, des alcoolates de métaux alcalins comme ie tert-butylate de potassium, des amines tertiaires comme latriéthylamine, des dérivés alcoylés et arylés de métaux alcalins comme le phényl-lithium et des adures de --ta alcalins comme l'amide de sodium. Les solvants utilisables comprennent n'importe quel solvant anhydre inerte comme le t-butanol, le diméthylformamido (DMF), THF, l'hexaméthylphosphoramide (HMPA), le dioxanne, etc, à une température comprise entre -78 C et 25 C, pendant une période comprise entre quelques minutes et 4 heures. 3) Pour la préparation de modes de réalisation ester de la présente invention, la réaction de III avec l'un quelconque des radicaux acyle indiqués ci-dessus dans leur forme acide. Cette réaction peut être conduite en présence d'un agent de Oon- densation carbdiimide comme le dicyclohexylcarbodiimide ou un composé ou même genre. Les solvants utilisables comprennent n'importe quel solvant inerte comme CHCl3, CH2Cl2, DMF, HMPA, l'acétone, le dioxanne, etc, à une température comprise entre G C et 6C C pendant une période comprise entre 15 minutes et 12 heures. 4) Pour la préparation de modes de réalisation ester de la présente invention, la réaction de TII avec un halogénure d'acyle ou un anhydride d'acide, où la portion acyle est décrite ci-dessus.Généralement, quand la réaction d'acylation décrite ci-dessus utilise un halogénure d'acide (des halogénures utilisables sont les chlorures, iodures ou bromures) ou un anhydride d'acide, la réaction est conduite dans un solvant organique anhydre comme l'acétone, le dioxanne, le chlorure de méthylène, le chloroforme, DMF, etc, en présence d'une base acceptrice appropriée comme NaHCO3, MgO, triéthylèneamine la pyridine, etc, à une température comprise entre 0 C et 40 C pendant 1 à 4 heures. Des halogénures et anhydrides d'acyle utilisables sont, par exemple, l'anhydride acétique, l'anhyddride bromoacétique, l'anhydride propionique, le chlorure de benzoyle, le chlorure de phénylacétyle, le chlorure d'azidoacétyle, la chlorure de 2-thiénylacétyle, le chlorure de 2-, 3- ou 4-nicotinyle, le chlorure de p-nntrobenzoyle le chlorure de 2,6-dimethoxy- benzoyle, le chlorhydrate de chlorure de 4-guanidinophénylacétyle, le chlorure de méthanesulfonyle, le dibenzylphosphorochlorurate, le diméthylthiophosphorochlorurate, l'anhydride 2-furoyl éthyl carbonique, le chloroformiate de méthyle, le bis(p-nitrobenzyl)- phosphorochlorurate, etc. 5) -our la préparation de modes de réalisation ester de la présente invention, la réaction de III avec un cétène ou un isocyanate substitués de manière appropriée comme l'acétone, la diméthylcétone, l'isocyanate de méthyle, l'isothiocyanate de méthyle, l'isocyanate de chlorosulfonyle, etc. Les solvants utilisables comprennent le dioxanne, le tétrahydrofuranne, le chloroforme, etc, à une température comprise entre -7C et 600C pendant une période de 15 minutes à 18 heures. Les produits selon la présente invention (III) forment une grande variété de sels pharmacologiquement acceptables avec des bases inorganicues et organiques; ces sels comprennent, par exemple, des sels de métaux dérivés d'hydroxydes, carbonates ou bicarbonates de métaux alcalins ou de métaux alcalino-terreux et des sels dérivés d'amines primaires, secondaires ou tertiaires comme des monoalcoylamines, des dialcoylamines, des trialcoylamines, des alcanolamines inférieures, des di(alcanol inférieur)amines, des (alcoylène inférieur)diamines, des N,N-diaralcoyl (alcoylène inférieur)diamines, des aralcoylamines, des alcanols inférieurs aminés, des alcanols inférieurs à substitution N,N- di(alcoyl inférieur)amino, des acides alcanoïques inférieurs substitués par des groupes amino, polyamino et guanidino et des amines hétérocyclicues contenant de l'azote. Les exemples représentatifs comprennent des sels dérivés de l'hydroxyde de sodium, du carbonate de sodium, du bicarbonate de sodium, du carbonate de potassium, de l'hydroxyde de potassium, du carbonate de calcium, de la triméthylamine, de la triéthylamine, de la pipéridine, de la morpholine, de la quinine, de la lysine, de la protamine, de l'arginine, de la procaïne, de l'éthanolamine, de la morphine, de la benzylamine, de l'éthylènediamine, de la N,N'-dibenzyléthylènediamine, de la diéthanolamine, de la pipérazine, du diméthylaminoéthanol, du 2-amino-2-méthyl-1-propanol, de la théophylline, de la N-méthylglucamine, etc. Des sels d'addition d'acide, par exemple avec les acides chlorhydrique, brom hydrique, sulfurique, nitrique, toluène-p-sulfonique et méthane sulfonique peuvent aussi être utilisés. Les sels peuvent être des sels monobasiques tels que le sel monosodique obtenu en traitant un équivalent d'hydroxyde de sodium avec un équivalent du produit (II); également, des sels dibasiques mixtes peuvent être obtenus en traitant un équivalent d'un sel monobasique avec un équivalent d'une base différente. En variante, on peut obtenir des sels en traitant un quivalent d'une base ayant un cation divalent, conte d'hydro- xyde de calcium, avec un équivalent du produit (II). De plus, des sels et esters mixtes comme ceux obtenus en traitant le produit (II) avec un équivalent d'hydroxyde de sodium et ensuite avec un équivalent d'acide lactique sont compris aussi dans le cadre général de la présente invention.Les sels de la présente invention sont des dérivés non-toxiques pharmacologiquement acceptables qui peuvent être utilisés comme ingrédient actif dans des formes pharmaceutiques en doses unitaires. Egalement, ils peuvent être combinés avec d'autres médicaments pour donner des compositions ayant un large spectre d'activité. De plus, les présents sels, et aussi les dérivés esters et amides correspondants, ont une utilité comme produits intermédiaires dans la préparation du produit acide carboxylique illustré par la formule II ci-dessus. 'les nouveaux dérivés de thiénamycine selon la présente invention sont des substances antimicrobiennes intéressantes qui sont actives contre divers agents pathogènes Gram-positifs et Gram-négatifs tels que Bacillus subtilis, Salmonella schottmuelleri et Proteus vulgaris. Ainsi, l'acide libre et spécialement ses sels comme les sels d'amines et les sels de métaux, en particulier les sels de métaux alcalins et de métaux alcalinoterreux, sont des bactéricides utiles et peuvent être utilisés pour éliminer les agents pathogènes sensibles de matériel dentaire et médical, pour séparer des microorganismes et à des fins thérapeutiques chez des êtres humains et des animaux. Pour cette dernière application, des sels pharmacologiquement acceptables avec des bases inorganiques et organiques comme celles connues dans la technique et utilisées pour l'administration des pénicillines et des céphalosporines peuvent être utilisés. Par exemple, des sels tels que des sels de métaux alcalins et de métaux alcalino-terreux et des sels d'amines primaires, secondaires et tertiaires peuvent être utilisns a cet effet. Ces sels peuvent être combines avec des véhicules liquides et solides pharmaceutiquement acceptables pour former des formes de dosage unitaire appropriées telles que des pilules, des comprimés, des capsules, des suppositoires, des sirops, des élixirs, etc, qui peuvent être préparés selon des techniques bien connues de l'homme de l'art. Les nouveaux composés sont des antibiotiques intéressants actifs contre diverses bactéries Gram-positives et Gram- négatives et trouvent donc une utilité en médecine humaine et vétérinaire. Les composés selon la présente invention peuvent donc être utilisés comme médicaments antibactériens pour traiter des infections causées par des bactéries Gram-positives ou Gram- négatives, par exemple contre Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Elebsiella Pneumoniae, Bacillus subtilis, Salmonella typhosa, Pseudomonas et Bacterium proteus. Les agents antibactériens selon l'invention peuvent aussi être utilisés comme additifs à des nourritures d'animaux, pour la conservation d'articles d'alimentation et comme désinfectants.Far exemple, ils peuvent être utilisés dans des compositions aqueuses à des concentrations comprises entre 0,1 et 100 parties d'antibiotique par million de parties de solution afin de détruire les bactéries nuisibles et d'empêcher leur développement sur du matériel médical et dentaire et comme bactéricides dans des applications industrielles, par exemple dans des peintures à base d'eau et dans l'eau blanche de papeteries pour empêcher le développement de bactéries nuisibles. Les produits selon la présente invention peuvent être utilisés isolément ou en combinaison comme ingrédient actif dans l'une quelconque de diverses compositions pharmaceutiques. Ces antibioti > -ues et leurs sels pharmaceutiquement acceptables correspondants peuvent être utilises sous la forme de capsules ou de comprims, de poudres, de solutions liquides, de suspensions ou d'élixirs. Ils peuvent être administrés par voie orale, intraveineuse ou intramusculaire. Les compositions sont de préférence présentées dans une forme appropriée pour absorption par le conduit gastrointestinal. Les comprimés et les capsules pour administration orale peuvent être présentés sous une forme en doses unitaires et peuvent contenir des excipients classiques tels que des liants, par exemple du sirop, de la gomme arabique, de la gélatine, du sorbitol, de la gomme adragante ou de la polyvinylpyrrolidone; des charges, par exemple du lactose, du sucre, de l'amidon de mais, du phosphate de calcium, du sorbitol ou de la glycine; des lubrifiants, par exemple du stéarate de magnésium, du talc, du polyéthylène-glycol, de la silice; des agents de désagrégation, par exemple de l'amidon de pomme de terre ou des agents mouillants acceptables comme du lauryl sulfate de sodium.Les comprimés peuvent être revêtus conformément à des techniques bien connues de l'homme de l'art. Des préparations liquides pour la voie buccale peuvent être sous la forme de suspensions aqueuses ou huileuses, de solutions, d'émulsions, de sirops, d'éli- xirs, etc, ou peuvent être présentées sous la forme d'un produit sec, pour reconstitution avec de l'eau ou d'autres véhicules appropriés avant utilisation.Ces preparations liquides peuvent contenir des additifs classiques tels que des agents de suspension, par exemple du sirop de sorbitol, de la méthyl cellulose, du sirop de glucose/sucre, de la gélatine, de l'hydroxyéthylcellu- lose, de la carboxyméthylcellulose, du gel de stéarate d'alumi- nium ou des huiles comestibles hydrogénées, par exemple de l'hui- le d'amande, de l'huile de noix de coco fractionnée, des esters huileux, du propylèneglycol ou de l'alcool éthylique; des préservateurs, par exemple des p-hydroxybenzoates de méthyle ou de propyle ou de l'acide sorbique. Des suppositoires contiendront des bases classiques pour suppositoires, par exemple du beurre de cacao ou un autre glycéride. Des compositions pour injection peuvent être présentées sous la forme de doses unitaires en ampoules ou dans des récipients à doses multiples avec un préservateur ajouté. Les compositions peuvent être sous des formes telles que des suspensions, des solutions, des émulsions dans des véhicules huileux ou aqueux et elles peuvent contenir des agents de composition tels que des agents de suspension, stabilisants et/ou dispersants.En variante, l'ingrédient actif peut être sous la forme de poudre pour reconstitution avec un véhicule approprié, par exemple de l'eau stérile exempte de pyrogènes, avant utilisa tione 'les compositions peuvent aussi être préparées dans des formes appropriées pour absorption à travers les membranes mu queuses du nez et de la gorge ou les tissus bronchiques et peuvent prendre commodément la forme de poudres ou de liquides à pulvériser ou d'inhalants, de pastilles, de badigeons pour la orge, etc. Pour traitement des yeux et des oreilles, les préparations peuvent être présentées sous la forme de capsules individuelles, dans un état liquide ou semi-solide, ou elles peuvent être utilises en gouttes.Des compositions pour application topiaue peuvent être préparées dans des bases hydrophobes ou hydrophiles telles que des pommades, des crèmes, des lotions, des badigeons ou des poudres. Egalement, en plu d'un véhicule, les présentes compositions peuvent comprendre d'autres ingrédients tels que des stabilisants, des liants, des anti-oxydants, des préservateurs, des lubrifiants, des agents de suspension, des agents de viscosité ou des aromatisants, etc. De plus, il peut y avoir aussi dans la composition d'autres ingrédients actifs pour fournir un plus large éventail d'activité antibiotique. Pour la médecine vétérinaire, la composition peut être présentée par exemple sous la forme d'une préparation intramammaire dans des bases pour action prolongée ou pour libération rapide. Les doses à administrer dépendent dans une large mesure de l'état du suet traité et du poids de l'h8te, de la voie et de la fréquence d'administration, la voie parentérale étant préférée pour des infections généralisées et la voie orale pour des infections intestinales. En général, les doses journalières par voie buccale sont d'environ 15 à environ 600 mg d'ingrédient actif par kg de poids du corps du sujet, en une seule ou plusieurs applications par jour. Une dose journalière préférée pour des êtres humains adultes est comprise entre environ 80 et 1cO mg d'ingrédient actif par kg de poids du corps. Les présentes compositions peuvent être administrées dans plusieurs formes de dosage unitaire, par exemple une forme de dosage solide ou liquide susceptible d'ingestion par voie buccale. Les compositions en doses unitaires, qu'elles soient liquides ou solides, peuvent contenir d'environ 0,1 à environ 99 % de matière active, l'intervalle préféré étant de 10 à 60 4/0 environ. Les compositions contiendront généralement d'environ 15 mg à environ 1500 mg de l'ingrédient actif; toutefois, en général, il est préférable d'utiliser une quantité de dosage comprise entre 250 mg et 1000 mg environ.Pour administration parentérale, la forme de dosage unitaire est habituellement le composé pur dans une solution aqueuse stérile légèrement acidifiée ou sous la forme d'une poudre soluble prévue pour dissolu- tion. Dans les Exemples suivants, qui illustrent encore, mais ne limitent pas les aspects produit, procédé, composition ou procédé de traitement de la présente invention, les composés selon la présente invention seront désignés par le symbole indiqué précédemment où les trois groupes fonctionnels sont illustrés. Exemple 1 Préparatior. de sel de sodium de N-(O-formyl)-D-mandéloylthiéna- mycine A de la thiénamycine (40 mg) dans 10 cm3 d'eau, on ajoute successivement, à OOC, 14 mg de NaHCO3, 8 cm3 de dioxanne et ensuite, en agitant, 1,2 équivalent de chlorure de N-(O-formylj- 1-mandéloyle en une période de 1 minute. Après un temps total de réaction de six minutes, le mélange est traité par extraction trois fois à l'oxyde d'éthyle froid.L'électrophorèse d'une portion aqueuse (C,05M, oH 7, tampon phosphate aqueux, 50 V/cm, 20 minutes) indique une conversion de 67 0 en produit désiré. Gn règle le pH à 2,2 avec une solution îLff de H3P04 et la solution est traitée par extraction trois fois à l'acétate d'éthyle. La solution à l'acétate d'éthyle (EtOAc) est séchée sur MgSO4 et traitée par extraction deux fois avec deux équivalents de solution de NaHCO3. L'extrait aqueux, lyophilisé, contient 164 unités de densité optique (ODU), à 302 nm par-analyse UV au pH 7,0, dont une proportion de 95 % est éteinte après traitement à l'hydroxylamine pendant une heure. Le rendement est de 53 ,. L'électrophorèse comme ci-dessus présente une tache par bioautographie, 4 cm vers l'anode. RMN (#D2O) 1,30 (d, J = 6 Hz, 2,8-3,7 (m, CH2), 4,0-4,5 (m, CH ss-lactame), 4,73, HDO; 5,97 (s, C6H5CHOCHO), 7,53 (s, C6115), 8,30 (s, C6H5CHOCHO). Exemple 2 Préparation de sel de sodium de N-D-mandéloylthiénamycine On prépare le composé du titre suivant le mode opéra- toire de exemple 1, mais avant l'extraction par EtOAc, l'extrait aqueux est abandonné à 250C pendant une heure. L'électrophorèse (5G V/cm, 20 min, pH 7, phosphate aqueux, 0,C5M) présente une seule tache par bioautographie, 4 cm vers l'anode, RMN (o, D2O) 1,50 (d, J=6 Hz, CH3CH) ; 2,8-3,8 (m, CH2), 4,2-4,6 (m, CH ss-lactame); 4,96 (s, HDO); 5,40 (s, C6H5CH). Exemple 3 Sel de sodium de N-propionylthiénamycine A de la thiénamycine (25 mg dans 6 cm3 d'eau à 0 C), on ajoute successivement 38,6 mg de NaHC03, 5 cm3 de dioxanne et ensuite, en agitant, un équivalent d'anhydride propionique en une période de 3 minutes. Après ,0 minutes, le mélange est traité par extraction trois fois à l'oxyde d'éthyle froid. L'élec trophorèse de l'extrait aqueux (0,05M, pH 7, tampon phosphate, 50 V/cm, 20 min) indue qu'il n'y a pas de thiénamycine libre présente. 'extrait aqueux est régl au pH 6,8 et contient 6CO ODU à 302 nm par analyse UV, dont une proportion de 95 % est éteinte après traitement à l'hydroxylamine pendant une heure. RMN (#, D2O) 1,42 (m, CH2CH3, CH3CH) ; 2,48 (q, CH2CH3) ; 2,86-2,90 (m, CH2), 4,30-4,70 (m, CH (3-lactame), 4,86 (HDO). Exemple 4 Sel de sodium de N-(méthoxyacétyl)thiénamycine A de la thiénamycine (55 mg dans 6 cm3 d'eau à 0 C, on ajoute successivement 68 mg de NaHCO3, 6 cm3 de dioxanne et, en agitant, 1,1 équivalent de chlorure de mêthoxyacétyle en une période de 1,5 minute. On agite le mélange pendant 10 minutes supplémentaires. Le mlange est traité par extraction trois fois avec de l'oxyde d'éthyle froie. L'électrophorèse de l'extrait aqueux (0,05M, tampon phosphate au pH 7, 50 V/cm, 20 min) indique qu'il n'y a pas de thiénamycine libre présente. L'extrait aqueux, réglé au pH 6,8, contient 105 ODU à 302 nm par analyse UV, dont une proportion de 95 % est éteinte après traitement à l'hy- droxylamine pendant unebeure.RMN (#, D20) 1,56 (m, CHCH3), 2,84-3,60 (CH2), 3,72 (s, OCH3), 4,29 (s, OCH2), 4,98 (s, HDO). Exemple 5 Sel de lithium de N-(p-nitrobenzyloxycarbonylthiénamycine A de la thiénamycine (220 mg dans 60 cm3 d'eau à OOC, on ajoute successivement 679 mg de NaHC03, 60 cm3 de dioxanne et ensuite, en agitant, 1,1 équivalent de p-nitrobenzylchloroformiate en une période de 1,5 minute. On laisse réagir le mélange pendant 10 minutes et ensuite il est traité par extraction trois fois avec de l'oxyde d'éthyle froid. L'électrophorèse (0,05 M, pH 7, tampon phosphate, 50 V/cm, 20 minutes) montre qu'il n'y a pas de thiénamycine libre présente. L'extrait aqueux est réglé au pH 2,2 avec une solution 1M de H3P04 et traité par extraction trois fois avec EtOAc. L'extrait à EtOAc est séché sur MgS04, filtré et extrait de nouveau avec une solution 0,1N de LiOH, au pH 8,2. Le pli final est réglé à 7,0 avec du H3PO4 1M et l'échantillon est lyophilisé. La production est de 205 mg (54 %) Exemple 6 Préparation d'ester de p-t-butyi benzyle de N-(p-nitrobenz-jl- oxycarbonyl ) -thiénamycine Du sel de Li de N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine, le produit de l'Exemple 5 (205 mg) dans 2 cm3 d'hexaméthylphosphoramide (HMPA) est traité pendant 2,5 heures avec 0,1625 cm3 de bromure de p-t-butylbenzyle. La matière de départ est insoluble dans HMPA, mais passe en solution après 30 minutes. Le mÉlange de réaction est dilué avec de acétate d'éthyle (EtOAc), lavé successivement à l'eau, avec du K2HPO4 aqueux, à l'eau, avec une solution aqueuse saturée de NaCl, séché sur MgSO4, filtré, évaporé et soumis à une chromatographie sur couches minces de préparation sur gel de silice, l'élution étant effectuée avec un mélange 1:2 CHCl3 : EtOAc. Production 16C mg (58 %), Rf 0,38, 1H (;u film) ,98 NH et OH 5,63, lactame; 5,86 large ester et uréthane; RMN (o, CDCl3), 1,24 (s, CHCH3, t-butyle) ; 2,59-3,27 (m, CH2) 3,84-4,47 (m, CH ss-lactame), 5,15 (s OCH2C6H4NO2), 5,22 (s OCH2C6H4 t-butyle (7,45 et 8,12 (AB cuartet, J=8 Hz C6H4NO2). Exemple 7 Préparation d'ester de m-phénoxybenzyle de N-(p-nitrobenzyloxy- carbonyl) thiénamycine Suivant le mode opératoire de l'Exemple 6, on prépare le composé du titre quand une quantité équivalente de bromure de m-phénoxybenzyle est substituée au bromure de p-t-butylbenzyle de l'Exemple 6, rendement Il %, IR ( film) 3,0 NH2, et OH 5,63 lactame; 5,86 pic large ester et uréthane; RMN (o CHC13) 1,33 (d CHCH3 J=6); 2,6-3,62 (m, CH2), 7,45 et 8,13 (AB quartet, J=8, C6H4N02); 7,26 (s C6H4OC6H5) M.S. m/e 589, 559, 547, 183. Exemple 8 Préparation de 1) Ester de p-t-butylbenzyle de N-(0-formyl-D-mandéloyl thiénamycine 2) Ester de m-phénoxybenzyle de N-(O-formyl)-D-mandé- loyl thiénamycine 3) Ester de p-t-butylbenzyle de N-D-mandéloyl thiénamycine 4) Ester de m-phénoxybenzyle de N-D-mandéloyl thiénamycine 5) Ester de p-t-butylbenzyle de N-propionyl thiénamycine 6) Ester de m-phénoxybenzyle de N-propionyl thiénamycine 7) Ester de p-t-butylbenzyle de N-méthoxyacétyl thiénamycine 8) Ester de m-phénoxybenzyle de N-méthoxyacétyl thiénamycine. Suivant le mode opératoire des Exemples 6 et 7, on prépare les composés du titre 1, 3, 5, 7 et 2, 4, 5, 8, respec- tivement, quand la matière de départ N-acyl thiénamycine appropriée des Exemples 1 à 4 remplace, en quantité équivalentes la matière de départ N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine des Exemples 6 et 7, respectivement. Exemple 9 Préparation d'ester de p-t-butylbenzyle de N-(p-méthoxybenzyl- oxycarbonyl)thiénamycine Etape A : Sel de sodium (I) et sel de lithium (11) de N-(p méthoxybenzyloxycarbonyl)thiénamycine A de la thiénamycine (20 mg) dans 5 cm3 d'eau à OOC, on ajoute 105 mg de NaHCO3 (2C équivalents), 5 cm3 de dioxanne et ensuite, goutte à goutte, en agitant, en 1 minute, 10 équivalents de chloroformiate de p-méthoxybenzyle. Après 15 minutes, le pH est réglé à 7,5 avec du H3P04 1M et la solution est traitée par extraction trois fois à l'éther. La portion aqueuse est ensuite réglée au pH 2,2 à 0 C et traitée par extraction trois fois à l'acétate d'éthyle (EtOAc).Le EtOAc est séché rapidement avec MgSO4, filtré et traité par extraction avec quelques cm3 d'eau contenant 6,3 mg de NaHCO3. L'extrait aqueux, lyophilisé, contient 172 ODU à 303 nm pan analyse UV dans H2O au pH 7,G, dont une proportion de 95 % est éteinte après traitement à l'hydroxylamine pendant une heure. La production est de 16 mg. L'électophorèse (50 V/cm, 20 min, phosphate aqueux au pH 7, 0,05M) présente une seule tache par bioautographie, 4 cm vers l'anode. RMN (o, D20) : 1,49 (d, J=6Hz CH CH); 2,8-3,7 (m,CH2); 3,99 (s, OMe) ; 4,0-4,6 (m, p-lactame CH); 4,92 (s, HDO ; 5,20 (s, OCH2); 7,13 (d, J=8Hz C6H4). Le sel de lithium II est préparé de la même manière, mais en extrayant la solution dans EtOAc avec du LiOH 0,1N au pH 7,8 (au lieu de NaRCO3 aqueux) et en lyophilisant. Les propriétés spectrales et électrophorétiques de II sont les mêmes que celles de I. Etape B : Ester de p-t-benzyle de N-(p-méthoxybenzyloxycarbonyl)- thiénamycine Le sel de lithium de l'Etape A (37 mg) dans C,4 cm d'hexamêthylphosphoramide (HMPA) est traité pendant 2 heures 1/5 avec 0,033 cm3 de bromure de p-t-butylbenzyle. Le sel de lithium est insoluble dans HMPA, mais passe en solution après un temps de rÉaction de 15 minutes. Le mélange de réaction est dilué avec EtOAc, lavé successivement à l'eau deux fois, avec du K2HPO4 aqueux, à l'eau et à la saumure, séché avec MgSO4, filtré, Évaporé et soumis à une chromatographie sur couches minces de préparation sur gel de silice, avec élution au moyen de 1:2 CHClj-EtCsc, donnant 47 mg de II pur, Rf = 0,3. IR ( film): 3,0, NH ; 5,63, lactame; 5,87 large, ester et uréthane. RMN (#, CDCl3) : 1,21 (s,Me et t-butle); 2,6 - 3,6 (m, CH2) ; 3,72 (s, OMe); 3,8 - 4,4 (m, ss- lactame CH); 4,97 6,84 et 7,20 (AB quartet, C6H4OMe) ; 7,32 (s, C6H4-t-Bu). MS : 582, 538, 496. Exemple 10 Préparation d'ester de benzhydryle de N-(p-méthoxybenzyloxycarbonyl) thiénamytine A de la thiénamycine (23,5 mg) dans 5 cm3 d'eau, on ajoute successivement 4 cm3 de dioxanne, 62 mg de NaHCO3 et ensuite, par portions à 0 C en agitant, 4 équivalents de chloroformiate de p-méthoxybenzyle en 4 minutes. Après un temps total de réaction de 10 minutes, on règle le pH à 7,0 avec du H3PO4 1M et le mélange est traité par extraction trois fois à l'éther. L'électrophorèse de la portion aqueuse (tampon phosphate aqueux 0,05 M au pH 7, 50 V/cm, 20 minutes) indique ure conversion de 50% EN N-(p-méthoxybenzyloxycarbonyl)thiénamycine. La solution aoueuse est portée au pH 2,2 avec du H3PO4 1M et traitée par extraction trois fois avec EtOAc. La solution dans EtOAc est traitée avec 50 mg de diphényldiazo- méthane, Êvapore et reprise dans CH3CN. Cn ajoute encore du diphényldiazométhane jusqu'à une couleur pourpre persistante. Après 0,5 heure, la solution est évaporée et chromatographiée sur du gel de silice, l'élution étant effectuée avec du 1:2 CHCl3-EtOAc, donnant 10 mg de composé du titre pur Rf C,25. IR ( , film) : 3,0, NH ; 5,63, ss-lactame ; 5,85, 5,89, ester et uréthane. RMN (#, CDCl3) ; 1,23 (s, OH) ; 1,30 (d, J=6Hz, CH3CH) ; 2,6-3,6 (m, CH2); 3,78 (s, OMe) ; 5,02 (s OCH2); 3,8 - 4,4 (m, ss-lactame CH) ; 6,9 et 7,35 (AB quartet, J=9Hz, C6H4), 7,3s CHPh2. Exemple Il Préparation d'ester de benzyle de N-(o-nitrobenzyloxycarbonyl)- thiénamycine Etape A : Sel de sodium de N-(o-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamy- cine A de la thiénamycine (43 mg) à OOC, on ajoute 10 cm3 de mélange 1:1 tétrahydrofuranne:eau. On agite rapidement le mélange tandis qu'on ajoute 102 mg de NaUCO3 (10 équivalents) et ensuite, goutte à goutte en agitant, en 2 minutes, on ajoute quatre équivalents de chloroformiate d'o-nitrobenzyle. Après 30 minutes, on règle le pH à 7 avec du F P04 aqueux à 25 % et la solution est traitée par extraction trois fois à l'éther.La couche aqueuse est évaporée à 25 C sous vide et est ensuite réglée au pH 2,2 à OOC. On ajoute du NaCl solide et la solution acide froide est traitée par extraction trois fois avec du EtOAc froid. Les extraits à EtOAc sont combinés et rapidement lavés en retour avec de la saumure froide, séchés avec MgSO4, filtrés et traités par extraction en retour avec 10 cm3 d'eau contenant 1,75 équivalent de NaHCO3 solide. L'extrait est lyophilisé sous vide à 250C pour donner le composé du titre. Etape B : Ester de benzyle de N-(o-nitrobenzyloxycarbovl)- thiénamycine Be produit de l'Etape A dans 7,5 cm3 de EtOAc (résul- tant de l'extraction au pH 2,2) est traité avec un excès de phényldiazométhane (4 cm3 de solution comprenant 20 mg/cm3 d'éther) à 4 C pendant 2,3 heures. Le mélange est concentré à un résidu humide à 20 C sous pression réduite. Le composé désiré est isolé par chromatographie sur couches minces, EtOAc : éther (9:1) pour donner 17,5 mg d'ester de benzyle de N.-(o-nitro- benzyloxycarbonyl)thiénamycine. Exemple 12 Préparation d'ester de benzyle de N-(o-nitrobenzyloxycarbonyl)- thiénamycine A de la N-(o-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine (70 mg) dans 8 cm3 de EtOAc, on ajoute 4 cm3 de p-méthoxyphényl diazométhane (9 mg/cm3 d'acétonitrile) à 4 C. Be mélange est agité pendant 1,5 heure à 4 C et est ensuite concentré à une pâte humide sous pression réduite à 20 C. Le composé du titre (42 mg) est isolé par chromatographie sur couches minces sur du gel de silice, l'élution étant effectuée avec un mélange EtOA:éther (9:1). Exemple 13 Préparation d'ester de p-bromo-phénacyle de N-(o-nitrobenzyloxy- carbonyl) thiénamycine (où TMS = triméthylsilyle) A du Th (TMS)3, I, (24 mg), qui est préparé conformément à l'exemple 17, dans 0,8 cm3 de THF anhydre, on ajoute 23 mg d'o-nitrocarbobenzyloxy chlorure, puis 0,15 cm3 de triéthyLAMINE. Après mélange par vibration pendant 30 minutes à 250C, le mélange est concentré à un résidu pâteux dans un courant d'azote sec et est lavé trois fois à l'éther de pétrole. Le résidu est mis en suspension dans 1 cm3 de THF anhydre et on ajoute du bromure de p-bromophénacyle (14 mg) et ensuite 0,03 cm3 de triéthylamine. Après mélange par vibration pendant 30 minutes à 250C, le mélange est évaporé à sec sous vide à 200C. Le résidu est dissous dans du EtOAc (2 cm3) et secoué avec 0,3 cm3 de tampon au pH 4 pendant 5 minutes. La couche organique est séchée sur MgSO4, filtrée, évaporée à un résidu pâteux et le produit désiré est isole (44 mg) par chromatographie sur couches minces de préparation sur gel de silice, l'élution étant effectuée avec un mélange EtOAc : CHCl3 (7:3). Exemple 14 Prdparation d'ester de benzyle de N-(trichloroCthoxycarbonyl)- thiénamycine Etape À : Sel de lithium de N-(trichloroéthoxycarbonyl)thiénamy- cine A de la thiénamycine (40 mg) dans 18 cm3 de 1:1 THF H2O à 0 C, on ajoute, en agitant, 225 mg (15,2 équivalents) de NaHCO3 et ensuite, goutte à goutte, en agitant, en 2 minutes, 1,8 équivalent de chloroformiate de trichloroéthyle dissous dans 0,6 cm3 de THF. Après 6 minutes, on règle le pH à 7,2 avec une solution aqueuse à 25 % de H3P04 et la solution est traitée par extraction à l'éther. La portion aqueuse après élimination sous vide de tout éther entrainé est portée au pH 2,5 à 0 C et traitée par extraction avec du 3tOAc froid.Les extraits à l'acétate d'éthyle sont combinés, rapidement lavés en retour avec de la saumure froide, séchés avec MgSO4 anhydre, filtrés et traités par extraction en retour avec du LiCH 0,01 m au pH 6,8, L'extrait aqueux est dépouillé sous vide de tout EtOAc et lyophilisé. Le produit résiduel contient 936 OCu (39,7 %) par analyse W à 302 nm, dont une proportion de 90 % est éteinte après traitement à l'hydroxylamine pendant une heure dans du tampon phosphate 0,05M (pH 7). La production est de 32 mg. L'électro- phorèse (50 volts.cm, 20 minutes, tampon phosphate aqueux au pH 7) présente une seule zone par bioautographie (D 108, staph. aureus), 2,4 cm vers l'anode. La chromatographie en phase liquide sur Bondapak C18 (Waters Association) dans du THF aqueux à 10 S- présente un seul pic principal exempt de toute thiénamycine n'ayant pas réagi. Etape B : Ester de benzyle de N-(trichloroéthoxycarbonyl)thiéna- mycine Le composé de l'Etape A (32 mg) dans 2 cm3 de DMF distillé sec contenant 7 % de HMPA (sec, pH 6,3) est traité avec 0,015 cm3 de bromure de benzyle pendant c heures à 1500 (on laisse réchauffer le mélange à 250C durant le cours de la réaction). On dilue le mélange de réaction avec du EtOAc, on le lave successivement à l'eau froide, avec une solution aqueuse à 1 % de NaHCO3, à l'eau et avec une solution aqueuse saturée froide de NaCl, on le sèche avec MgSO4, on le filtre, on l'évapore et on le soumet à une chromatographie sur couches minces de préparation sur gel de silice, en éluant avec 1 % de CH3CN dans EtOAc pour obtenir 10 mg du composé du titre, Rf = 0,63; IR ( CHCl3) 5,53, ss-lactame ; 5,78 et 5,88 large ester et uréthane. RN (o CDCl3) 1,35 (d, Me); 2,8-3,7 (m CH2) ; ,51 et 4,27 (dd, J=6Hz, lactame CH); 4,79 (s, OCH2CCl3) 5,42 s (OCH2C6H5) ; et 7,41 (m, C6H5). Exemple 15 Prénaration d'esters de méthyle et de benzyle de N-bromoacétyl thiénamycine Etape A : N-bromoacétyl thiénamycine A une solution refroidie de thiénamycine (28,8 mg) et de bicarbonate de sodium (0,3 g) dans 10 cm3 d'eau et 8 cm3 de dioxanne, on ajoute, en agitant, une solution de 0,25 g d'anhydride bromoacétique dans 2 cm3 de dioxanne en une période de 20 minutes. Cn maintient le pH à 8,0. On agite le mélange pendant 5 minutes supplémentaires, puis on le sépare en couches avec 10 cm3 d'éther et on règle le pH à 7 par l'addition d'acide phosphorique à 8 %. La couche éthérée est séparée et la couche aqueuse est traitée par extraction encore deux fois à l'éther. La couche aqueuse est évaporée sous pression réduite à 0,5 cm3, diluée à 2 cm3 avec de l'eau et placée sur 50 cm3 de résine XAD-2. La colonne est éluée avec de l'eau. On se débarrasse des 80 cm3 initiaux, puis on recueille les 100 cm3 suivants. Les éluats combinés sont réglés au pH 7, évaporés à 5 cm3 sous pression réduite, puis séchés par congélation pour donner le sel de sodium de N-bromoacétyl thiénamycine avec un rendement de 60 %. UV #max 302 m . Etape B : Esters de méthyle et de benzyle de N-bromoacêtyl thié namycine Une solution aqueuse du sel de sodium est partagée en couches avec de l'acétate d'éthyle à 0 C et réglée au pH 2. La phase d'acétate d'méthyle est séparée et la phase aqueuse est traitée par extraction à l'acétate d'éthyle. Les solutions à l'acÉtate d'éthyle combinées sont séchées sur MgSO4 et traitées ensuite avec une solution de diazométhane. On évaporée les solvants et on chromatographie le résidu sur une plaque de gel de silice. Rf 0,14 dans un mélange 2:1 acétate d'éthyle-chloroforme. Point de fusion 118-120 C. Le spectre de masse indique M+ à m/e 4C6 et des fragments importants à m/e 362, 320, 183 et 164. L'ester de benzyle correspondant est préparé d'une manière sinilaire à partir de phényldiazométhane, point de fusion 142-30C. Ir : 5,65 , 5,89 Z et 6,1?. Spectre de masse M+ m/e 48c également m/e 438, 316, 259 et 164. Exemple 16 Préparation d'ester de p-bromophenacyle de N-(bromo-t-butoxy carbonyl ) thiénamycine Etape A : Préparation d'ester de TMS de N-bromo-t-butoxy-carbonyl- O-TMS-thiénamycine On dissout de la TH(TMS)3 (16 mg) dans 0,4 cm3 de tétrahydrofuranne anhydre et on ajoute 20 l (28 mg, 0,13 mmole) de chloroformiate de bromo-t-butyle (point d'ébullition 350C/0,9 mm) et 8 l (5,67 mg, 0,057 mmole) de triéthylamine (redistillee à partir de BaO). On secoue le mélange à 250C pendant 20 minutes. L'évaporation du solvant et des réactifs en excès donne le produit désiré brut. UV #CH3CO2CH2CH3 320 nm (E9.000). Etape B : Préparation de N-(bromo-t-butoxycarbonyl)thiénamycine Le produit de l'Etape A (3 mg) est dissous dans 0,5 cm3 de tampon phosphate au pH 7 et C,1 cm3 de tétrahydrofuranne et la solution est abandonnée à 250C pendant 20 minutes. La solution est ensuite passée de haut en bas dans une colonne (5 cm3) de Dowex 50x8 (forme Na+) et les fractions d'éluat sont contrôlées par UV. 'les fractions correctes sont combinées et séchées par congélation pour donner le produit désiré. UV tampon 304 nm (t = 9.300); l'électrophorêse à 50 V/cm pendant 20 minutes dans un tampon au pH 7,0 présente une seule zone bioactive qui se déplace de 31,5 mm vers l'anode. Etape O : Préparation d'ester de p-bromophénacyle de N-(bromo- t-butoxycarbonyl)thiénamycine Le produit de l'Etape B (13 mg, 0,022 mmole) est dissous dans 0,4 cm3 de tétrahydrofuranne. A cette solution, on ajoute du bromure de p-bromophénacyle (9,6 mg, 0,035 mmole) et 20 l (14,4 mg, 0,14 mmole) de triéthylamine. Le mélange est secoué à 250C pendant 30 minutes et ensuite évaporé à sec. On ajoute 10 cm3 d'éther au résidu et le mélange est traité avec 0,2 cm) de tampon phosphate O,IM au pH 7,0. La couche organique est séparée, séchée sur du sulfate de sodium, concentrée à 0,5 cm3 et appliquée à deux plaques pour chromatographie sur couches minces en gel de silice GF de de 20 x 20 cm, qui sont développées avec 20 % d'acétate d'éthyle dans du chloroforme. (Rf = 0,65). Le produit désir (6,7 mg) est isolé avec un rendement de 42 %. Exemple 17 @réparation de N-benzyloxycarbonyl thiénamycine et d'anhydride d'acide N-benzyloxycarbonyl benzylcarbonique. Une solution de 16,6 mg de thiénamycine dans 4 cm3 de tampon phosphate O,C5M au pH 7 et 2 cm3 de dioxanne dans un ballon à trois tubulures équipé d'un agitateur, d'un thermomètre, d'une électrode à pH et de la pcinte de sortie d'un appareil de titrage automatique est refroidie à -80C dans un bain méthanolglace. Le pH est porté à 8,2 par l'addition d'hydroxyde de so- dium G,2N dans du dioxanne aqueux à 50 % et on ajoute une solution de 0,015 cm3 de carbobenzyloxy chlorure dans 2 cm3 de chloroforme. Le mélange est agité à -60C, pH 8,2, pendant dix minutes, puis partagé en couches avec de l'éther et le pH est réglé à 7 par l'addition d'acide chlorhydrique N. Les couches sont séparées par centrifugation et la phase aqueuse est traitée par extraction deux fois à ltéther.La phase aqueuse est partagée en couches avec de l'acétate d'éthyle et acidifiée au pH 2. On sépare l'acétate d'éthyle et la couche aqueuse est traitée de nouveau par extraction à l'acétate d'éthyle. La couche d'acétate d'éthyle combine est lavée avec une solution saturée de chlorure de sodium, séchée sur du sulfate de magnésium et filtrée. Le filtrat est agité avec de l'eau et le pH est porté à 7 par l'addition d'une solution dilue de bicarbonate de sodium. La phase aqueuse est sépare et sÉchÉe par congélation, donnant le sel de sodium de M-benzyloxycarbonyl Th. Poids 10 mg (46 %). Le spectre UV, A max 303 msu, E% 147 (E 6 290) indique une pureté de 8C % environ. L'électrophcrèse à 50 V/cm pendant 20 minutes au pH 7 suivie d'une bioautographie sur S. aureus donne une zone d'inhibition à +2,5 cm. Les extraits Éthérés du mélange de réaction contiennent le produit désiré anhydride d'acide benzyl carbonicue de benzyloxycarbonyl thiénamycine. UV #max 335 Exemple 18 Préparation d'ester de benzyle de N-benzyloxycarbonyl thiénanycine La N-benzyloxycarbonyl thiénamycine (Exemple 17) dans EtOAc est soumise au traitement de l'exemple 17, à ceci prés qu'une quantité équivalente de phényldiazométhane est ajoutée à la solution dans EtOAc séchée résultant de l'extraction au plI 2 et la solution est laissée à 4 C pendant z heures. L'évapo- ration à sec donne de 11 ester de beizyle de N-benzyloxycarbonyl- thiénamycine brut qui est isolé par chromatographie sur couches minces, Rf 0,24, 3:1 acétate d''thyle/chloroforme. Il cristallise à partir d'éther. IR 5,63 (carbonyle de lactame); épaulement 5,8 (ester) ; 5,88 (carbonyle d'uréthane). UV, dioxanne, #max 318 m , E% (# = 10.900) m/e M+ 496. Exemple 19 Préparation d'ester de p-pivaloyloxybenzyle de N-carbométhoxythiénamycine tape A : N-carbométhoxy thiénamycine On dissout de la thiénamycine (49 mg, 148 moles) dans du tampon phosphate 0,05M au pH 7 (14 cm ) et on refroidit la solution dans un bain de glace. En agitant, on règle le pH à 8,2 en utilisant une burette automatique. Une solution de chloroformiate de mÉthyle (46 l, 600 umoles) dans du p-dioxanne (580 l) est ajoutée immédiatement de manière C donner une solution homogène. Ensuite, on maintient le pH à 8,2 en utilisant la burette automatique. Après 10 minutes, on règle la solution au pH 7 en utilisant une solution diluée d'acide phosphorique et on la lave trois fois avec un volume égal d'oxyde d'éthyle. La solution aqueuse est ensuite concentrée à 4,5 cm) et chromatographiée sur une colonne de résine XAD-2. Le produit est élué (après solution à l'eau) avec une solution aqueuse à 5 % de tutra- hydrofuranne et il est séché par congélation pour donner 28,9 mg de produit. W (tampon phosphate 0,1N au pH 7). A max 303 nm (e 6 450). Electrophorèse (20 min, tampon phosphate 0,1N au ptt 7, 50 V/cm, mobilité 3,5 cm vers la cathode. Etape B : Ester de p-pivaloyloxybenzyle de N-carbométhoxy thiéna mycine suivant le rode opératoire de l'Exemple 16, Etape C, et en substituant en quantités écuivalentes : de la N-carbométhoxy thiénamycine (sous la forme de son sel de sodium) et du bromure de p-pivaloyloxybenzyle, on obtient de l'ester de p-pivaloyloxy benzyle de N-carbométhoxy thiénamycine. Exemple 20 Préparation d'ester de 2-méthyl-2-propen-1-yle de N-benzènesulfonyl thiénamycine Etape A : N-benzènesulfonyl thiénamycine On dissout de la thiénamycine (52 mg, 148 umoles) dans un tampon phosphate O,IN au pH 7 (r5 cm3) et on l'agite magnétiquement dans un bain de glace. On règle le pH à 8,c avec une solution 2,5N de NaOH en utilisant une burette de distribution automatique et du chlorure de benzènesulfonyle (227 l, 226 mole) dans 50C cm de p-dioxanne est ajouté immédiatement. On maintient le pH à 8,2 (en utilisant la burette automatique) pendant 30 minutes et ensuite on règle le pH à 7,C avec de lta- cide phosphorique aqueux dilué. La solution de réaction est concentrée à 15 cm3 et chromatographiée sur de la résine XAD-2 (50 cm3). La colonne est Tuée avec de l'eau, puis avec une solution aqueuse à 1C % de tÊtrahydrofuranne qui Qlue le produit. L'-luat au tétrahydrofuranne aqueux a 10 % est concentré à 1/3 de son volume et séché par congélation pour donner 28 mg de produit. La mobilité électrophorétique du produit (50 V/cm, 20 minutes), tampon phosphate 0,05N au pH 7) est de 3,5 cm vers la cathode. # max 303 (3, 650) dans du tampon phosphate 0,1N au pt-I 7. Etape B : Ester de 2-méthyl-2-propen-1-yle de N-benzènesulfonyl thiénamycine Suivant le mode opératoire de l'Exemple a4 et en substituant en quantités équivalentes de la N-benzènesulfonyl thiénamycine (sous la forme de son sel de sodium) et du chlorure de 2-méthyl-2-propen-1-yle au sel de sodium de N-azidoacétyl thiénamycine et au bromure de p-t-butylbenzyle, respectivement, on obtient le composé du titre. Exemple 21 TMS = triméthylsilyle Préparation de thiénamycine silylée De la thiénamycine (80,0 mg) est mise en suspension dans 40 cm3 de tétrahydrofuranne (THF) et sous une atmosphère de N2 et est concentrée à 10 cm3; on ajoute de l'hexaméthyldi- silazane (1,0 cm3) et du triméthylchlorosiîane (300 l). On fait réagir le mélange pendant 20 minutes à 250C en l'agitant énergiquement. La suspension est ensuite centrifugée pour élimination du chlorure d'ammonium. Le liquide décanté est évaporé à une huile sous un courant d'azote pour réaction ultérieure. Exemple 22 Préparation d'ester de p-nitrooenzyle de N-(p-nitrobenzyloxy- carbonyl)-thiénamycine Un mélange de sel de lithium de p-nitrobenzyloxycarbinyl-thiénamycine (295 mg) (provenant de l'Exemple 5) et de 0,4 g de bromure de p-nitrobenzyle dans 3 cm3 dthexaméthylphos- phoramide est agité pendant 3 heures à 250C. La solution est diluée avec 50 cm3 d'acétate d'éthyle et traitée par extraction successivement avec de l'eau (3 fois), un tampon phosphate au pH 7 et une solution saturée de chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée à 5 cm3, faisant cristalliser le produit.Les cristaux sont recueillis et lavés avec de l'acétate d'éthyle, donnant 160 mg d'ester de p-nitrobenzyle de N-p-nitrobenzyloxycarbonylthiénamycine, point de fusion 168-1700C. RMN (CECl3) 1,35 t(d), J=6 Hz], 4,0-4,3 et 2,8-3,5 (m), 5,16 [(s), (carbamate $OCH2)] ; 5,24 (AB quartet, J=14) 7,42(d), 7,56(d), 8,16(d) (J=9, aromatique) IR 5,65/u (lactame G=O). Exemple 22a Préparation de sel de sodium de N-bromo-t-butyloxycarbonyl thiénamycine Procédé A : De la thiénamycine (19G mg) dissoute dans 15 cm3 de tampon phosphate 0,1M au pH 7,0 et 15 cm3 de dioxanne est maintenue à 0 C. La solution est ajustée et maintenue à un pH compris entre 8,5 et 9,0 au moyen de NaGH 1N tandis qu'on ajoute 480 mg de chloroforniate de bromo-t-butyle durant une période de 5 minutes. Le mélange est agité pendant 30 minutes, puis il est neutralisé au pH 7,0 avec du HCl 1N et traité par extraction à l'éther.La couche aqueuse est séparée, concentrée à 10 cm3 et chromatographiée sur une colonne de Dowex-50x8 (forme Na) (3,8 cm x 25,4 cm) qui est éluée avec H,O pour donner 113 mg du produit désiré. La lyophilisation de la solution donne du produit solide. Procédé B : De la thiènamycine (95 mg) dans 10 cm3 de tampon phosphate 0,1M et 10 cm) de dioxanne est maintenue à 0 C, La solution est ajustée et maintenue à un pH compris entre 8,5 et 9,0 tandis qu'on ajoute 240 mg de chloroformiate de bromo-tbutyle. Le mélange est agité pendant 30 minutes, puis est acidifié au pH 2,0 avec H3PO4. La solution acidifiée est traitée par extraction avec 2 portions de 25 cm3 d'acétate d'éthyle. La couche organique est séparée et traitée par extraction en retour avec 10 cm3 de solution de RitaI1CO3 contenant 30 g de NaHCO3. La couche aqueuse contenant 30 mg du produit désiré est lyophilisÉe pour donner du produit solide.RMN (60 MHz D2O) : # 1,26 (d), 1,60 (s), 2,65-3,50 (m), 3,70(s), et 3,90-4,20(m). UV ## 303 nm. Préparation d'ester de p-nitrobenzyle de N-bromo-t-butyloxy carb onyl thiénamycine Le sel de sodium de N-bromo-t-butyloxycarbonyl-thié namycine lyophilisé (100 mg) est agité à 25 C avec du bromure de p-nitrobenzyle (300 mg) dans 2 cm3 d'hexaméthylphosphoramide pendant I heure. Le mélange est dilué avec 10 cm d'acétate d'éthyle, puis est soigneusement lavé à l'eau. La couche organique est séparée, séchée sur Na2SO4 et chromatographiée sur deux plaques pour chromatographie sur couches minces en gel de silice GF de 250/u en utilisant de l'acétate d'éthyle comme solvant (Rf 0,45) pour donner 50 mg du produit désiré.IR (CDCl3) 1777 (ss-lactame) et 1711 cm-1 (ester) ; UV ## 270 nm et 322 nm ; RMN (CDCl3, 60MHz) : # 1,38 (d), 1,58 (s), 2,60-3,80 (m), 3,78(s), 3,90-4,20(m), 5,30(s), 7,55(d) et 8,30 ppm (d). Exemple 23 Pr6paration d'O-méthyl thiénamycine Etape A Ester de p-nitrobenzyle d'O-méthyl-N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl) jhi énamycine A une solution de 135 mg d'ester de p-nitrobenzyle de N-p-nitrobenzyloxycarbonyl-thiénamycine dans 50 cm3 de chlorure de méthylène à 0 C, on ajoute en agitant énergiquement C,5 cm3 d'acide fluorhydrique 0,006M dans un mélange éther-chlorure de méthylène (3:1) et immédiatement après 10 cm) d'une solution refroidie de diazométhane 0,6 M dans du chlorure de méthylène. Le diazométhane est décoloré en 1 minute. La solution est traitée par extraction avec 10 cm3 de tampon phosphate 0,1N au p:i 7, séchée et évaporée a un petit volume. La solution est appliquée à deux plaques de 20,3 cm x 0,3 cm de gel de silice 1000 qui sont développées avec un mélange 3:1 acétate d'éthyle-chloroforme. La bande à 3-4,5 cm donne 12 mg de matière de départ récupérée. La bande à -8 cm donne 20 mg d'ester de p-nitrobenzyle d'O- méthyl-N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)-thiénamycine cristallin, point de fusion 172-174 C. MS m/e 600 (M+), 568, 542, 500, 447, 389, 304 et 59. Etape U O-méthyl-thiénamycine Une solution de 20 mg d'ester de p-nitrobenzyle d'O- méthyl-N-p-nitrobenzyloxycarobonyl-thiénamycine dans 2 cm de tétrahydrofuranne et 1 cm d'éthanol est hydrogénée à une pression relative de 3,5 kg/cm, 23 C, en présence de 20 mg d'oxyde de platine pendant 2 heures 1/2. Le catalyseur est éliminé par filtration et on ajoute au filtrat 1 cm3 de tampon phosphate 0,1N au pH 7. La solution est évaporée sous pression réduite à 2 cm3 et le mélange est repris dans 5 cm3 d'eau et 5 cm3 glacé tate d'éthyle et centrifugé. La couche d'acétate d'éthyle est séparée et la couche aqueuse est traitée par extraction de nouveau à l'acétate d'éthyle et à l'éther et ensuite filtrée à travers de la Celite.La solution aqueuse est appliquée à une colonne (20 cm ) de résine XAD-2. La colonne est d'abord éluée avec de l'eau et ensuite avec du tétrahydrofuranne à 10 %. L'éluat au tétrahydrofuranne est concentré et lyophilisé pour donner de l'O-méthyl-thiénamycine sensiblement pure. Exemple 24 Préparation d'ester O-phosphate de thiénamycine tape A A une solution d'ester de p-nitrobenzyle de N-(p-nitro- carbobenzyloxy)-thiénamycine (50 mg) dans 5 cm de THF à 3 C, on ajouta 9 e de phosphorochlourate de dibenzyle et ensuite l de triéthylamine. le mélange est agité à 25 C pendant 2 heures, après quoi le F est éliminé sous vide. L résidu est repris dans du chlorure de méthylène et lav- à l'eau. Lia solution au chlorure de méthylène est séchée sur du sulfate de magnésium et évaporée.Le résidu est chromatographié sur du gel de silice, donnant de l'ester de benzyle d'0-dibenzyl- phosphoryl-N-benzyloxycarbonyl-thiénamycine. Etape B Une solution du produit ci-dessus (20 mg) dans 10 cm' de dioxanne aqueux à 80 ,ó contenant 8 mg de NaHC03 est hydrogénée en présence de 20 mg de catalyseur à 5 c, de Pd sur charbon de bois pendant 6 heures. Le catalyseur est éliminé par filtration et le filtrat est évaporé à 2 cm3. La solution est traitée par extraction deux fois au chlorure de méthylène, puis concentrée et séchée par congélation, laissant le produit sel disodique d'O-phosphate de thiénamycine. Exemple 25 Préparation d'O-(méthylcarbamoyl)-thiénamycine Une solution d'ester de p-nitrobenzyle de N-(p-nitro benzyloxycarbonyl)-thiénamycine (20 mg) et d'isocyanate de méthyle (20 mg) dans du chlorure de méthylène (5 cm3) est agitée à 230C pendant 18 heures. Le solvant est évaporé et le résidu est traité par extraction à l'hexane. Le résidu insoluble dans l'hexane est chromatographié sur du gel de silice, donnant de l'ester de p-nitrobenzyle d'O-(méthylcarbamoyl)-N-p-nitrobenzyl- oxycarbonyl-thiénamycine sensiblement pur. Après l'opération d'hydrogénation de l'Exemple 4, Etape B, le produit est obtenu quand la substitution indiquée est effectuée. Exemple 26 Préparation d'O-(méthoxyméthyl)-thiénamycine Etape A Une solution de 58 mg d'ester de p-nitrobenzyle de pnitrobenzyloxycarbonyl-thiénamycine dans 5 cm) de THF et 1,0 cm3 de HMPA est refroidie à -780C. A cette solution, on ajoute, en agitant, une solution son de phényllithium (0,1 cm3) et, immé- diatement après, 0,2 cm d'oxyde de méthyle et de chlorométhyle. On laisse réchauffer le mélange à 250C pendant une période de 1 heure. On ajoute du chlorure de méthylène (25 cm3) et la solution est traitée par extraction avec un tampon phosphate 0,1N au pH 7 (25 cm3) et avec 4 portions de 25 cm3 d'eau. La solution au chlorure de méthylène est évaporée et le résidu est trituré avec de l'hexane. Le résidu insoluble dans l'hexane est chromatographié sur gel de silice, donnant de l'ester de p-nitrobenzyle d '0môthoxyméthyl-N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl-thiénamy- cine. Etape B En suivant le mode opératoire d'hydrogénation de l'Exemple 4, Etape B, on obtient le composé du titre quand la substitution indiquée est effectuée. Exemple 27 Préparation d '0-méthyl-thiénamycine Retape À Ester de benzyle d'O-méthyl-N-benzyloxycarbonyl-thiénamycine Une solution de 5 mg d'ester de benzyle de N-benzyloxycarbonyl thiénamycine (Exemple 18) dans 0,3 cm3 de chlorure de mÉthylène est refroidie à Q C et on ajoute 0,1 cm3 d'une solution 0,006M d'acide fluoroborique dans un mélange 5:1 étherchlorure de méthylène, et immédiatement après 0,5 cm3 de diazométhane 0,1M dans du chlorure de méthylène. La solution est décolorée en 1 minute. Le mélange est agité avec de éther et du tampon phosphate au ph 7 et la phase éthérée est évaporée. Le résidu est chromatographié sur des plaques de 5,1 cm x 20,3 cm de silice de 250 dans un mélange de 75 % d'acétate d'éthyle dans du chloroforme. La bande à Rf 0,5 est éluée avec de l'acé tate d'éthyle. La mesure de l'absorption U.V. à 318 m indique une récupération de 13 % de la densité optique initiale. L'analyse du spectre de masse indique m/e M+ 510 et des fragmentes à m/e 410, 59, 333 et 478 caractéristiques de l'ester de benzyle d'O-méthyl-N-benzyloxycarbonyl-thiénamycine. Variante pour l'EtaPe Â Ester de benzyle d' O-méthyl-N-benzyloxycarbonyl-thiénamycine Une solution d'ester de benzyle de N-benzyloxycarbonyl thiénamycine (5 mg) dans 0, cm3 de THF anhydre est refroidie à -780C. A cette solution, on ajoute 5/ul de solution de phényllithium (2N) et immédiatement après 1/ul de fluorosulfonate de méthyle. Le mélange est agité à -78 C pendant -O minutes et est ensuite dilué avec 2 cm3 d'éther et traité par extraction avec 2 cm3 de tampon phosphate 0,01N au pH 7. La couche éthérée est évaporée et le résidu est chromatographié sur une plaque de 5,1 cm x 20,3 cm de gel de silice en couche mince dans un mélange 1:1 acétate d'éthyle-chloroforme.La bande à Rf = 0,63 est isolée, donnant le produit désiré, l'ester de benzyle d'O- méthyl-N-benzyloxycarbonyl-thiénamycine. Etape B O-méthyl-thiénamycine Une solution de 0,2 mg du produit ci-dessus dans 0,5 cm3 de dioxanne contenant 0,3 % d'acide acétique est hydrogénée pendant 3 heures en présence de 2 mg de catalyseur oxyde de palladium à une pression relative de 3,1 kg/cm et à 25 C. Le mélange est secoué avec 4 cm3 d'éther et 1,4 cm3 d'eau. L'analyse U.V. de la couche éthérée (#max 318) indique une récupération de 50 % et celle de la couche aqueuse ( À max 285) une récupération de 10 só de l'absorption de départ. L'électro- phorèse d'un échantillon de 5 cal de la couche aqueuse au ph 7, 50 V/cm pendant 20 minutes suivie d'une bioautographie sur des plaques ensemencées de S. aureus présente deux zones d'inhibi- tion + 0,5 cm (19 mm de diamètre) et +4 cm (25 mmoles). La tache se déplaçant plus lentement est de l'0-méthyl thiénamycine; la tache se déplaçant plus rapidement est de l'O-méthyl-N-carbo- benzyloxy thiénamycine. De l'O-méthyl thiénamycine sensiblement pure est obtenue à partir de la phase aqueuse par chromatographie sur la résine XAD-2 en utilisant du THF aqueux à 10 % comme solvant d'élution. Exemple 28 Préparation d'O-acétyl-thiénamycine Etape A Ester de p-nitrobenzyle d'O-acétyl-N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl) thiénamycine A une solution de 50 mg d'ester de p-nitrobenzyle de N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)-thiénamycine dans 0,5 cm3 de pyridine, on ajoute 0,16 cm3 d'anhydride acétique. On laisse réagir le mélange à 250 C pendant 3 heures, puis il est évaporé à sec sous vide. Le résidu solide est dissous dans du chloroforme et chromatographié sur une plaque de gel de silice de 20,3 cm x 20,3 cm dans un mlange 3:1 acétate d'éthyle-chloroforme.La bande à Rf C,35 est isolée, donnant 36 mg d'ester de p-nitrobenzyle d'O-acétyl-N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)-thiénamycine, point de fusion 172-175 C. RrN (CDCl3) #, 1,41, (d J=6 HZ CH3); 2,G4 (s, COCH3), 2,7 - 3,6 (m); 4,14 (t de d) (J = 3 et 9 Hz); 5,17 (s, carbamyl CH2) ; 5,35 (AB quartet, J = 14 Hz), 7,45 (d), 7,60 (d), 8,18 (d) (J = 9 Hz, H aromatique) Us. M+ m/e 628. Etape B O-acétyl-thiénamycine Une solution d'ester de p-nitrobenzyle d'O-aeétyl-N-(p- nitrobeiizyloxycarbonyl) thiénamycine (2G mg) dans un mélange tétrahydrofuranne-éthanol (2,5:1) est hydrogénée à une pression relative de 2,8 kg/cm2 à 230C en présence de 20 mg d'oxyde de palladium pendant I heure. Le catalyseur est éliminé par filtration et le filtrat est dilué avec I cm3 de tampon phosphate 0,1N au pH 7 et évaporé au point de trouble. Le mélange est repris dans 5 cm3 d'acétate d'éthyle et 5 cm3 d'eau et séparé. La couche d'acétate d'éthyle est traitée par extraction avec un tampon phosphate au pli 3. Les extraits aqueux combinés sont réglés au pH 7 et traités par extraction à l'acétate d'éthyle et à l'éther. La phase aqueuse est concentrée et chromatographiée sur 4 cm3 de résine XAD-2. La colonne est éluée d'abord avec 40 cm3 d'eau et ensuite le produit est lué avec du tétrahydro- furanne à 10 %. Par chromatographie en phase liquide à haute pression sur du C18Porosil avec du THF à 10 %, on obtient un seul pic avec un temps de rétention de 8 minutes au lieu de 5 minutes pour la thiénamycine. L'éluat dans THF est évaporé à un petit volume (u.v. 1 max 297 ici et séché par congélation pour donner de l'O-acétyl-thiénamycine sous la forme d'une poudre blanche. Exemple 29 Préparation de thiénamycine O-méthanesulfonyle Etape Â Ester de p-nitrobenzyle de N-(p-nitrobenzloxycarbonyl) thiénamycine O-méthane sulfonyle Du chlorure de méthanesulfonyle (34 mg) dans CH2Cl2 (0,8 cm3) est ajouté goutte à goutte en 5 minutes à une solution glacée, agitée d'ester de p-nitrobenzyle de N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine (117 mg) et de triéthylamine (40 mg) dans CH2C12 anhydre (6 cm3). Après agitation pendant 1,5 heure encore, le mélange de réaction est dilué avec du CH,ClS froid (20 cm ), lavé à l'eau (30C, 10 cm3), du tampon phosphate 0,1M au pH 3 (30C, 5 cm3) et une solution aqueuse à 2 de NaHCO3 (3 C), séché avec MgSO4 et filtré.L'évaporation du solvant sous vide laisse du p-nitrobenzyl-6-(1-méthanesulfonyloxyéthyl)-3- [2-(p-nitrobenzyloxycarbonylamino)éthylthio]-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0]-hept-2-ène-2-carboxylate (appelé aussi ester de p-nitrobenzyle de N-(p-nitrobenzyl) thiénamycine O-méthanesulfonyle, pour plus de commodité) sous la forme d'une huile. Etape B Thiénamycine O-méthanesulfonyle Suivant le mode opératoire d'hydrogénation de l'Exemple 4, Etape B, on obtient le composé du titre quand la substitution indiquée est effectuée en quantités équivalentes. Exemple 30 O-sulfo-thiénamycine A une solution de 50 mg d'ester de p-nitrobenzyle de N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine dans 0,5 cm3 de pyridine, on ajoute 20 mg d'anhydride pyridine sulfurique. On laisse réagir le mélange à 250C pendant 4 heures, puis la pyridine en excès est élimine sous pression réduite. Le résidu est agité avec 20 cm3 de chlorure de méthylène et 20 cm3 de solution à 0,1 7 de bicarbonate de sodium pendant 30 minutes, puis la couche aqueuse est séparé e et séchée par congélation. Le résidu solide contenant du sel de sodium d'ester de p-nitrobenzyle d'Osulfo-N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine est dissous dans 20 cm3 de dioxanne aqueux 1:1 et hydrogéné pendant 4 heures en présence de 5,0 mg de catalyseur oxyde de platine à une pression relative de 2,8 kg/cm.Le catalyseur est éliminé par filtration et le filtrat est traité par extraction deux fois à l'acétate d'éthyle. La couche aqueuse est concentrée à 5 cm3 et chromatographiée sur 40 cm3 de résine XÂD-2. La colonne est Cluée avec de l'eau et la fraction contenant du sel de sodium d'G-sulfo thiénamycine est recueillie et séchée par congélation. Exemple 31 PrCparaticn de compositions pharmaceutiques On obtient une forme de dosage unitaire appropriée en mélangeant 120 mg-de sel disodique d'ester C-phosphate de thiénamycine avec 20 mg de lactose et 5 mg de stéarate de magnésium et en plaçant le mélange de 145 mg dans une capsule en gélatine N 3. De même, en utilisant une plus grande quantité de l'ingré- aient actif et moins de lactose, on peut préparer d'autres formes de dosage dans des capsules en gélatine N 3 et, s'il est nécessaire de mélanger plus de 145 mg d'ingrédients ensemble, on peut aussi préparer des capsules plus grosses, telles que des comprimés et des pilules.Les exemples suivants illustrent la préparer tion de compositions pharmaceutiques Comprimé Par comprimé Sel disodique d'ester O-phosphate de thi énamycine 125 mg Amidon de mais, U.S.P. 6 mg Phosphate dîcalcique 192 mg Lactose, U.S.P. 190 mg On mélange l'ingrédient actif avec le phosphate dicalcique, le lactose et environ la moitié de l'amidon de mais. Le mélange est ensuite granulé avec une pâte à 15 , Solution parentérale Ampoule Par conditionnement Sel disodique d'ester O-phosshate de thiénamycine 50G mg Diluant : Eau stérile pour injection 2 cm3 Solution ophtalmique Sel disodique d'ester O-phosphate de thiénamycine 100 mg Hydroxypropylméthyl cellulose 5 mg Eau stérile, complément à 1 cm) Solution otique Sel disodique d'ester O-phosphate de thiénamycine 100 mg Chlorure de benzalkonium 0,1 mg Eau stérile, complément à I cm Pommade topique Sol d sodique d'ester C-phosphate de thiénamycine 10 mg Polyéthylène-glycol 4000 U.S.P. 400 mg Polyéthylène-glyco 400 U.S.P. 1,0 g L'ingrédient actif dans les compositions ci-dessus peut être administre isolÉment ou en combinaison avec d'autres ingrédients biologiquement actifs, comme par exemple avec d'autres agents antibactriens tels que la lincomycine, une pénicilline, la streptomycine, la novobiocine, la gentamicine, la néomycine, la colistine et la kanamycine, ou avec d'autres agents thérapeutiques comme le brobénécide. Préparation d'autres matières de d part En plus de la thiÉnamycine, l'homme de l'art comprendra oue ses divers isomères, isolément ou en mélanges, peuvent servir de matières de départ dans la prÉparation des composés selon la présente invention. Certains de ces isomères peuvent être obtenus à partir de produits naturels de fermentation (voir ci-aDrès). Toutefois, par synthèse totale, tous les isomères peuvent être obtenus (ci-après) sous la forme d'un mélange de 4 diastéréomères qui possèdent une activité antibactérionne et qui peuvent être isolés par des techniques classiques. Les 4 diastéréoisomères (2 cis, 2 trans) sont séparables par chrcmatographie. Le dédoublement d'une paire d/l donnée quelconque avec des acides ou des base optiquement actifs s'effectue selon des techniques classiques. Il y a lieu de noter que la configu- ration absolue de la matière de départ (i) identifiée en premier lieu est 5R 6S 8R. Préparation de thiénamycine par synthèse totale Etape A Préparation de 4-(2-acétoxyvinyl)azétidine-2-one Une solution de 1,0 cm3 d'isocyanate de chlorosulfonyle distillé (1,65 g, 11,7 mmoles) dans 2,5 cm3 d'oxyde d'éthyle anhydre est refroidie sous N2 dans un bain à -20 C. Une solution de 2,5 g de 1-acétoxybutadiène (22 mmoles) dans 2,5 cm3 d'éther anhydre est refroidie de manière similaire sous N2 dans un bain à -2000. La solution d'isocyanate de chlorosulfonyle est ajoutée goutte à goutte à la solution d'acétoxybutadiène au moyen d'un tube de Qeflon plongé dans la solution de CSI et mis sous pression au moyen de N2. L'addition demande 10 minutes. On n'observe que peu ou pas du tout de couleur et on agite le mélange réaction nel à -20 C pendant 0,5 heure. La solution est claire et a une couleur jaune pâle. Une solution de 2 g de sulfite de sodium et de 5 g de K2HPO4 dans 20 cm3 de X20 est préparée durant le temps de réaction de 0,5 heure ci-dessus et est refroidie dans un bain de glace; on ajoute 20 cm3 d'éther et le mélange est agité énergiquement dans un bain de glace. A la fin du temps de réaction de 30 minutes, le mélange de réaction est transféré, en utilisant de nouveau une pression de N2 et le tube de téflon, du ballon à réaction maintenu dans le bain à -20 C, au mélange d'hydrolyse énergiquement agité. L'addition goutte à goutte rapide est temii- née en 5 minutes. On laisse continuer l'hydrolyse pendant 5 minutes supplÉmentaires. Le mélange d'hydrolyse a un pH de 5 à 8, de pré fronce le pH 8. On sépare les phases, laissant une gomme d'un orangé Jaunâtre avec la phase aqueuse. La phase d'éther est séchée directement avec MgSO4. La phase aqueuse/gomme est traitée par extraction trois fois encore avec des portions de 50 cm3 d'éther, chaque extrait étant ajout à la phase initiale d'éther/MgSO4. Les extraits séchés sont filtrés et concentrés sous un courant de N2 à 5 cm ; une portion du produit est cristalline à ce stade. On prépare une colonne de 10 g de gel de silice Baker, tassé dans de l'éther, et le concentré dans l'éther est appliqué au sommet de la colonne et introduit dans la colonne. Le ballon et les matières solides sont rincés trois fois avec des portions de 2 cm3 d'éther, qui sont chaque fois prélevées au moyen d'une pipette et introduites dans la colonne. L'élution est ensuite commencée avec de l'éther. Les 25 cm initiaux sont principalement un volume vide.On recueille les cinq fractions de 10 cm suivantes et ensuite trois fractions de 50 cm3 et on les réduit toutes en volume sous un courant de N2. le produit cristallise à partir des fractions 4 à 6, avec des traces dans les fractions 3 et 7. 'les fractions 1 à 3 contiennent une matière jaunâtre d'une odeur nette qui se résinifie par abandon. Production 100 mg sous la forme d'un mélange des isomères cis et trans. Etape B Préparation de 4-(2-acétoxyéthyl)-2-azétidinone Une solution de 4-(2-acétoxyvinyl)-2-azétidinone (1C,C g, 0,065 mole) dans 20 cm3 acétate d'éthyle contenant 100 mg de catalyseur à 10 - de Pd sur C est hydrogénée sur une secoueuse de Parr à 2500 sous 2,8 kg/cmt d'hydrogène pendant 15 minutes. Le me lange est filtré à travers un lit de et lavé avec de l'acétate d'éthyle supplémentaire. Le filtrat combiné est évaporé sous vide pour donner de la 4-(2-acetoxy- éthyl)-2-azétidinone (10,0 g) sous la forme d'une matière solide cristalline. La recristallisation à partir d'éther donne des cristaux blancs.Point de fusion 44-7 ; ir (CHCl3) 5,66, 5,74; RMN (CDCl3) # 3,44 (large s, 1, NH), 5,82 (m, 2, CH2OCOCH3), 6,29 (m, 1, C-4H), 6,87 (1/2 diagramme AB encore divisé en quatre par G-4H et NH, 1, Jgem = 12,8 Hz, J=4,5 H JNH = 1,9 Hz, 7,38 (1/2 diagramme AB encore divisé en quatre par C-4H et NH, 1, Jgem = 12,8 Hz, J = 2,3 Hz, JNH = 1,0Hz), 7,93 et 8,02 (s sur m, total 5, OCOCH3 et CH2CH2OCOCH3, respectivement). Etape C Préparation de 4-(2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone Sous azote à 0 C, une solution de 4-(2-acétoxyéthyl)2-azétidinone (2,24 g, 0,014 mole) dans 25 cm3 de méthanol anhydre est traitée avec une solution de méthylate de sodium (77 mg, 1,4 mmole) dans 5 cm3 de méthanol anhydre. Après agitation pendant 1 heure, la solution est neutralisée avec de l'acide acétique glacial. L'élimination du méthanol sous vide donne de la 4-(2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone brute sous la forme dune huile.Le produit est purifié par chromatographie sur gel de silice, en éluant avec 10 % MeOH/CHCl3, pour donner 1,55 g de l'alcool : point de fusion 500C ; ir (CHCl3) 5,67; RMN (CDCl3) r 3,20 (large s, 1, NH), 6,24 et 6,28 (m sur t, total 3, C-4H et CH20H respectivement), 6,90 (large s sur 1/2 diagramme AB encore divisé en quatre par C-4H et NH, total 2, OH et C-3H respectivement, Jgem = 13,OHz, Jvic = 4,2Hz, JNH = 1,6Hz), 7,42 (1/2 diagramme AB encore divisé en quatre par C-4H et Ifli, 1, C-3H, Jgem = 13,0Hz, Jvic = 2,2Hz, JNH = 1,1Hz), 8,16 (m, 2, CH2CH20H). Etape D Préparation de 8-oxo-2,2-diméthyl-3-oxa-1-azabicyclo [4.2.0] octane Une solution de 4-(2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone (1,87 g, 0,016 mole) et de 2,2-dimêthoxypropane (1,69 g, 0,016 mole) dans 25 cm3 de chlorure de méthylène anhydre est traitée avec de l'éthérat de trifluorure de bore (0,201 cm3, 0,002 mole) à 25 C. La solution résultante est agitée pendant dix minutes. L'élimination du solvant sous pression réduite donne une huile (2,5 g). La chromatographie du produit brut sur du gel de silice en utilisant un mélange 2:1 acétate d'éthyle; benzène comme solvant d'élution donne du 8-oxo-2,2-diméthyl-3-oxa1-azabicyclo [4.2.0] octane (1,59 g) sous la forme d'une matière solide cristalline. La recristallisation à partir d'éther/hexane donne un produit d'un point de fusion de 60-610C. ir (CHCl3) : 5,73 (ss-lactame) RMN (CDCl3)# : 6,02 - 6,28, m, PH, G-4 méthylène 6,22 - 6,62, m, 1H, C-6 méthine 6,90, dd, 1H, J7,7 = 14Hz, J6,7 5 4,5Hz C-7 proton cis par rapport à G-6H 7,47, dd, 1H, J7,7 = 14Hz, J6,7 = 2 Hz C-7 proton trans par rapport a C-6H 7,82 - 8,68, m, 2H, C-5 méthylène 8,23, s, 3H 8,57, s, 3H 0-2 méthyles Etape E Préparation de 8-oxo-2,2-diméthyl-7&alpha;; et ss-(1-hydroxyéthyl)-3-oxa1-azabicyclo [4.2.0] octane A une solution de 1,1 équivalent de lithium diisopropylamide fraîchement préparé dans du tétrahydrofuranne anhydre sous une atmosphère d'azote à -780C, on ajoute une solution de 8-oxo-2,2-diméthyl-3-oxa-1-azabicyclo [4.2.0] octane dans du tétra hydrofuranne anhydre qui a été refroidie à -78 C. Après deux minutes, l'énolate de lithium résultant est traité avec un excès d'acétaldéhyde. La solution est agitée pendant 30 minutes à -780C et ensuite versée dans de l'eau. La phase aqueuse est saturée de chlorure de sodium et traitée par extraction à l'acétate d'éthyle. 'les solutions à l'acétate d'éthyle combinées sont sé- chées sur du sulfate de magnésium et filtrées.Le filtrat est évaporé sous pression réduite pour donner le produit brut. La purification par chromatographie sur du gel de silice en utilisant un mélange acétate d'éthyle/benzène donne du 8-oxo-2,2- diméthyl-7&alpha; et ss-(1-hydroxyéthyl-3-oxa-1-azabicyclo [4.2.0] octane. Résultats pour le 8-oxo-2,2-diméthyl-7ss-(1-hydroxyéthyl)-3-oxa 1-azabicyclo [4.2.0] octane : ir (CH2Cl2) : 5,72 (ss-lactame) HMN (CDCl3) # : 5,53 - 6,43, m, 4H, C-4 méthylène + C-6 méthine + C-9 méthine 6,90, dd sur large s, 2H, J7 9 = 9He J6,7 = 5,5Hz, C-7 méthine + OH 7,70 - 8,83, m, 2H, C-5 méthylène 8,27, s, 3H 8,60, s, 3H 0-2 méthyle 8,78, d, 3H, J9,10 = 6,5Hz, C-10 méthyle Résultats pour le 8-oxo-2 ,2-diméthyl-7a-(1 -hydroxyéthyl)-3-oxa-I azabicyclo [4.2.0] octane ir (CHCl3) ; 2,9 large O-H 5,73 lactame RMN (acétone - d6) ô : 4,23 - 3,33, m, 0-9 méthine + C-4 méthylène + C-6 méthine 3,33, large s, OH 2,83, dd, J=2Hz, 6Hz 2,67, dd, J=2Hz, 8Hz C-7 méthine 1,93 - 1,63, m, C-5 méthylène 1,63, s 1,40, s 0-2 méthyles 1,23, d, J=6,5Ez, C-1O méthyle Etape F Préparation de 8-oxo-2,2-diméthyl-7&alpha;-(1-p-nitrobenzylcarbonyl- dioxyéthyl)-3-oxa-1-azabicyclor4.2.01octane Dans des conditions anhydres à OOC, une solution de 8-oxo-2,2-diméthyl-7&alpha;;-(1-hydroxyéthyl)-3-oxo-1-azabicyclo[4.2.0]- octane (60 mg, 0,302mmole) dans 0,6 cm3 d'éther est traitée avec de l'hydroxyde de potassium pulvérisé (19 mg, 0,332 mmole). Après une période de 15 minutes, du chloroformiate de p-nitrobenzyle (65 mg, 0,302 mmole) est ajouté au mélange de réaction. On continue l'agitation à 25 C pendant 15 heures supplémentaires. Be mélange est partagé entre du tampon phosphate 1M au pH 7 et de l'éther supplémentaire. La phase d'éther est lavée à l'eau et à la saumure, séchée sur du sulfate de magnésium et filtrée. L'évaporation du filtrat sous pression réduite donne 67 mg d'une huile incolore.La purification par chromatographie de préparation sur couche épaisse sur du gel de silice, avec développement au moyen de 1:9 acétate d'éthyle/benzène, donne du 8-oxo-2,2-diméthyl-7a-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl) -3-oxa-1 -azabicyclo [4.2.03 octane (40 mg) sous la forme d'un mélange de diastéréomères. ir (CH2Cl2)/u : 5,68 (ss-lactame et carbonate), 6,19 et 6,54 (nitro) RMN (CDCl3) : 1,67, d, 2H, ArH 2,37, d, 2H, ÂrH 4,67, s, 2H, ArCH2 4,67 - 5,22, m, CH3CH 5,98 - 6,25, m, 2H, C-4 méthylène 6,25 - 6,62, m, 1H, C-6 méthine 6,75 - 7,12, m, 1H, C-7 méthine 7,75 - 8,83, m, 2H, C-5 méthylène 8,22, s, 3H, 0-2 méthyle 8,50 - 8,58, m, 5H, 0-2 méthyle + CH3CH On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères 7ss ou le mélange de 7a et 13. Etape G Préparation de cis et trans-3-(1 -p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl) 4-(2-hydrdoxyéthyl)-2-azétidinone Du 8-oxo-3-oxa-2 ,2-diméthyl-7a-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)-1-azabicyclo[4.2.0] octane (1,0 g) est dissous dans 8 cm3 d'acide acétique et 2 cm3 d'eau et chauffé à 65 C pendant 1,25 heure. L'acide acétique et l'eau sont éliminés sous pression réduite et le résidu est repris dans du benzène et évaporé pour donner de la trans-3-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)-4- (2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone sous la forme d'un mélange de diastéréoisomères. ir (CH2Cl2) : 5,67 (ss-lactame), 5,72 épaulement, 6,20 et 6,57 (nitro) RMN (CDCl3) : 1,73, d, 2H, J=8,5 Hz, ArH 2,43, a, 2H, J=8,5 Hz, ArH 3,63, large s, 1H, NH 4,37 - 5,13, m, 1H, CH3CH 4,72, s, 2H, ArCH2 6,07 - 6,53, m, 1H, C-4 méthine 6,23, t, 2H, J=5,5 Hz, CH20H 6,73 - 6,93, m, 1H, C-3 méthine 7,63 - 8,97, m, 3H, CH2CH2OH 8,53, d, J=6,5 Hz, CH3CH On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères cis ou le mélange cis-trans. Etapes D', E', F' et G' comme variante aux Etapes D, E, F et G pour la préparation de 3-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)-4 (2-hydroxyéthyl) azétidionone Etapes b'. E', F' et G' Préparation de 1-(2-tétrahydropyranyl)-4-[2-(tétrahydropyranyl)oxyéthyl]-2-azétidinone Sous azote et à 25 C, une solution de 4-(2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone (62 mg, 0,539 mmole) dans 0,5 cm3 de p-dioxanne anhydre est traitée avec du 2,3-dihydropyranne (0,98 cm3, 1,08 mmole) et du monohydrate d'acide p-toluènesulfonique (19 mg, 0,10 mmole). La solution résultante est agitée pendant une période de 60 minutes et ensuite partagée entre 10 de tampon phosphate O,5M au pH 7 et 10 cm3 d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est traitée par extraction une deuxième fois à l'acétate d'éthyle. 'les solutions à l'acétate d'éthyle combinées sont lavées à la saumure, séchées sur du sulfate de magnésium et filtrées. Le filtrat est évaporé sous pression réduite pour donner 216 mg de produit brut. La purification par chromatographie de préparation sur couche épaisse, avec développement à l'acétate d'éthyle, donne 80 mg de 1-(2-tétrahydropyranyl)- 4-[2-(2-tétrahydropyranyl)oxyéthyl]-2-azétidinone sous la forme d'une huile. RMN (CDCl3) # : 5,13-5,60, m, OCH 5,83-6,85, m, C-4H + OCH2 6,95, dd, J = 5Hz et 15 Hz C-3 méthylène 7,35, dd, J = 3Hz et 15 Hz 7,62-8,95, m, CHCH2CH2CH2CH2 + CHCH2CH2O Préparation de cis et tans-1-(2-tétrahydropyranyl)-3-(1-hydroxyéthyl-4-[2-(2-tétrahydropyranyl)oxyéthyl]-2-azétidinone Suivant le mode opératoire décrit pour la préparation de 8-oxo-2 ,2-diméthyl-7a et ss-(1-hydroxyéthyl)-3-oxa-1-aza- bicyclo[4.2.0]octane à partir de 8-oxo-2,2-diméthyl-3-oxa-1- azabicyclo4.2.O]octane et en utilisant de la 1-(2-tétrahydro pyranyl]-4-E2-(2-tétrahydropyranylzoxyéthyl]-2-azétidinone, on obtient un mélange diastéréomère de cis et trans-1-(2-tétra hydropyranyl) 3-(I -hydroxyéthyl) -4-L2-(2-tétrahydropyranyl)- oxyéthyl3 -2-azétidinone. Préparation de cis et trans-1-(2-tétrahydropyranyl)-3-(1-p- nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl ) -4-F2-(2-tétrahydropyranyl ) Oxy- éthyl]-2-azétidinone Suivant le mode opératoire décrit pour la préparation de 8-oxo-2,2-diméthyl-7&alpha;-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl) 3-oxa-1-azabicyclo[4.2.0] octane à partir de 8-oxo-2,2-diméthyl 7&alpha;-(1-hydroxyéthyl)-3-oxa-1-azabicyclo[4.2.0]octane et en utilisant de la trans-1-(2-tétrahydropyranyl)-3-(1-hydroxyéthyl)- 4-[2-(2-tétrahydropyranyl)oxyéthyl]-2-azétidinone, on obtient de la trans-I (2-tétrahydropyranyl)-3-(1 -p-nitrobenzylcarbonyl- dioxyéthyl)-4-[2-(2-tétrahydropyranyl)oxyéthyl]-2-azétidinone. On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères cis. Préparation de cis et trans-3-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)- 4-(2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone Une solution de trans-l -(2-tétrahydropyrany1 )-3-(1-p- nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl) -4-[2-(2-tétrahydropyranyl) - oxyéthyl3-2-azétidinone dans du méthanol à 25 C est traitée avec 0,1 équivalent molaire de monohydrate d'acide p-toluènesulfonique. La solution est agitée pendant une période de 2 heures et ensuite neutralisée avec du tampon phosphate 1M au pH 7. le produit est extrait dans de l'acétate d'éthyle. La solution à l'acétate d'éthyle est lavée à la saumure, séchée sur du sulfate de magnésium et filtrée. Le filtrat est évaporé sous pression réduite pour donner de la trans-3-(I-p-nitro benzylcarbonyldioxyéthyl)-4-(2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone. On obtient les diastéréoisomères cis d'une manière analogue. Etape H Préparation de cis et trans-3-(1-p-nitrobenzylcarbonyl- dioxyéthyl)-4-[2,2-bis(2-hydroxyéthyl)thioéthyl]-2-azétidinone Sous azote, à 250C, un mélange de pyridine anhydre (0,146 cm3, 1,81 mmole) et de trioxyde de chrome pulvérisé anhydre (92 mg, 0,916 mmole) dans 8 cm3 d'acétonitrile anhydre est agité pendant une période de 30 minutes. A la solution brun foncé résultante, on ajoute 250 mg de Supercel sec et ensuite une solution de trans-3-(I-p-nitrobenzylcarbonyl dioxyéthyl)-4-(2-hydroxyéthyl)-2-azétidinone (186 mg , 0,550 mmole) dans 1 cm3 d'acétonitrile anhydre.Après agitation pendant une période de I heure, le mélange de réaction est filtré à travers un lit tassé mixte de 2 g de gel de silice et 2 g de sulfate de magnésium. Be lit est lavé plusieurs fois avec un total de 30 cm3 d'acétonitrile supplémentaire. Le filtrat est concentré sous pression réduite à 250C à un volume de 3 cm3. Par chromatographie sur couches minces (gel de silice; acétate d'éthyle/benzène 2:1), cette solution contient un produit (Rf = 0,38) moins polaire que la matière de départ (Rf = 0,21). La solution à l'acétonitrile de trans-3-(1-p-nitro- benzylcarbonyldioxyéthyl)-4-(2-oxoéthyl)-2-azétidinone préparée ci-dessus est, sous azote et à GOC, traitée avec du 2-mercapto éthanol (0,386 cm3, 5,5 moles) et immédiatement après avec de l'éthérat de trifluorure de bore (0,176 cm3, 1,43 mmole). Après agitation pendant une période de 15 minutes, cette solution est partagée entre du phosphate acide dipotassique aqueux (1,5 g dans 4 cm3 d'eau) et 12 cm3 d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est traitée par extraction une deuxième fois à l'acétate d'éthyle. Les solutions à l'acétate d'éthyle combinées -sont lavées à la saumure, séchées sur du sulfate de magnésium et filtrées. Le filtrat est évaporé sous pression réduite pour donner 229 mg d'une huile. he produit est purifié par chromatographie de préparation sur couche épaisse sur du gel de silice, avec développement à l'acétate d'éthyle, pour donner 118 mg de trans-3-(1- p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)-4-[2,2-bis(2-hydroxyéthyl)thioéthyl]-2-azétidinone sous la forme d'une huile incolore. ir CH2Cl2) : : 5,75 (5,79 épaulement) p-lactame et carbonate 6,20, 6,55 nitro RMN (acétone-d6) # : 1,70, d, J = 8,5 Hz, 2H, ArH 2,28, d, J = 8,5 Hz, 2H, ArH 2,48-2,88, m, 1H, NH 7,63-8,33, m, 2H, CE2CH 8,53, d, J = 6,5 Hz, 3H, CH3CH Les diastéréoisomères cis sont obtenus d'une manière analogue. En variante, on obtient les diastéréoisomères mélangés quand les matières de départ comprennent un mélange des diastéréoisomères. Etape I Préparation de trans-3-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)4-[2,2-bis(2-azidoéthyl)thioéthyl]-2-azé tidinone Â une solution de 211 mg (masse moléculaire = 474 0,445 mmole) de trans-3-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)- 4-[2,2-bis(2-hydroxyéthyl)thioéthyl]-2-azétidinone dans 5 cm3 de tétrahydrofuranne (THF) (distillé sur hydrure de lithium et d'aluminium) à OOC, on ajoute 1C3 mg de chlorure de mésyle (masse moléculaire = 114; 0,904 mmole) dans 1 cm3 de THF et, immédiatement après, 134 l de triéthylamine (masse moléculaire~= 101; e = 0,729; 0,967 mmole). Le mélange réactionnel est agité pendant 1 heure sous N2. Le chlorhydrate de triéthylamine est séparé par filtration sous N2 et lavé avec quelques cm3 de THF supplémentaire.Le filtrat incolore clair est concentré sous un courant de L et ensuite sous vide poussé pendant 10 minutes. Le dimésylate est immédiatement dissous dans 5 cm3 de DMSO (distillé sur CaH2 sous 8 mm et conservé sur des tamis moléculaires 4A de Linde) en présence de 347 mg de NaN3 (masse moléculaire = 65 ; 5,34 mmoles). Après agitation toute une nuit sous N2, on ajoute 10 cm3 de H20 et 20 cm3 d'acétate d'éthyle (EA). On sépare les couches et la couche aqueuse est lavée trois fois avec 10 cm3 de EA, chacue couche organique étant lavée en retour avec 10 cm) de H2O et 10 cm3 de saumure. 'les couches de EA combinées sont séchées sur du MgSO4 anhydre, filtrées et concentrées sous un courant de N2 pour donner le diazide brut. Par chromatographie de préparation sur couches minces sur du gel de silice, on obtient de la trans-3-(1-p-nitrobenzylcarbonyl- dioxyéthyl)-4[2,2-bis(2-azidoéthyl)thioéthyl]-2-az6tidinone. On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères cis ou le mélange cis-trans. Etape J Une solution fraîchement préparée (H. Davies et M. Schwarz, J.O.C., 30, 1242 (1965)) de p-nitrophényldiazométhane (29 mmoles) dans 150 cm3 d'éther est ajoutée, tandis qu'on agite, à une solution de 1,0 g d'acide oxomalonique, monohydrate (masse moléculaire = 136; 7,35 mmoles) dans 50 cm3 d'acétate d'éthyle (EA) à OOC. Après 2 heures 1/2, la solution jaune est concentrée sur un évaporateur rotatif avec chauffage modéré à environ la moitié de son volume, séchée sur du sulfate de sodium anhydre, filtrée et concentrée comme ci-dessus à une huile. A l'ester de p-nitrobenzyle brut dans 50 cm3 de toluène (Dol.), on ajoute 3,54 g de trans-3-(1-p-nitrobenzylcarbonyldioxyéthyl)-4- [2 ,2-bisC2-azidoéthyl)thioéthyl3-2-azétidînone (masse moléculaire = 524; 6,75 mmoles).En agitant, on chauffe le mélange réactionnel dans un bain d'huile en laissant partir par ébullition environ 1/3 du toluène. Du toluène (séché sur des tamis moléculaires 3A de Linde de 1,6 mm) est ajouté de manière à porter le volume de nouveau à 50 cm3 et on répète trois fois encore l'opération de séchage azéotropique. La solution est ensuite chauffée au reflux sous N2 pendant une heure, on répète une dernière fois l'opération de séchage azéotropique et on continue le chauffage au reflux pendant une heure supplémentaire. La concentration de la solution résultante sous un courant de N2 donne 1 brut. La matière brute est chromatographiée sur gel de silice pour donner 1. On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères cis ou le mélange cis-trans. Etape E A une solution de 2,80 g de 1 (masse moléculaire = 912; 3,07 mmoles) dans 35 cm3 de THF (distillé sur hydrure de lithium et d'aluminium) à -200C, on ajoute 0,3 cm3 de pyridine (masse moléculaire = 79 ; e = 0,982; 3,73 mmoles (distillée sur NaH et conservée sur des tamis moléculaires 4A de Linde). En agitant sous N2, on ajoute goutte à goutte 0,438 g de chlorure de thionyle (masse moléculaire = 119 ; 3,68 mmoles) dans 1 cm3 de THF. On agite le mélange réactionnel sous N2 pendant 5 minutes à -20 C, puis pendant 1/2 heure à OOC et finalement pendant 1 heure à 25 C. Le chlorhydrate de pyridine est séparé par filtration sous li et lavé deux fois au benzène (séché sur des tamis moléculaires 3A de Linde de 1,6 mm). Le filtrat et les liquides de lavage combinés sont concentrés sous un courant de N2, mis en bouillie dans un petit volume de benzène avec du MgSO4 anhydre, filtrés sous N2 et ensuite concentrés sous un courant de i. Par évaporation sous vide poussé pendant 1/2 heure, on obtient une huile.A ce composé chloré fralchement préparé, on ajoute, en agitant, 0,885 g de triphényl phosphine (masse moléculaire = 262 ; 3,38 mmoles) dans 66 cm3 de mélange 9:1 diméthylformamide (DMF)/eau et ensuite 550 mg de K2HP04 (masse moléculaire = 174 ; 3,16 mmoles). On agite le mélange réaction nel à 25 C pendant 35 minutes. Après dilution avec EA et de la saumure, on sépare les couches et la couche aqueuse est traitée par extraction trois fois avec EA. Tes couches de EA combinées sont lavées à la saumure, séchées sur du MgSO4 anhydre, filtrées et concentrées sous un courant de N2 pour donner 2 brut.La matière est chromatographiée sur du gel de silice pour dernier On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères cis ou le mélange cis-trans. Etape L A 7,8 cm3 de pentane (séché sur des tamis moléculaires 4A de Linde), on ajoute 0,2 cm3 de Br2 (masse moléculaire = 160; e = 3,12; 3,9 mmoles). A une solution de 950 mg de 2 (masse moléculaire = 896 ; 1,06 mmole) dans 15 cm3 de Et2O (séché sur des tamis moléculaires 3A, de Linde de 1,6 mm) à 0 C sous N2, en agitant, on ajoute goutte à goutte 2,3 cm3 de la solution 0,49 M de Br2 ci-dessus (1,13 mmole). Après agitation pendant 10 minutes à OOC, on ajoute 114 l de cyclohexène (masse moléculaire = 82, et = 0,81; 1,13 mmole).Après 5 minutes à 0 C, on ajoute au mé- lange réactionnel agité 53 mg de NaH à 57 % dans de l'huile minérale (57 % de 53 mg = 30,2 mg, masse moléculaire = 24, 1,26 mmole) Cela est suivi immédiatement de l'addition de 14 cm3 de DMF glacé (distillé sur CaSO4 anhydre sous 40 mm et conservé sur des tamis moléculaires 4A de Linde). On continue l'agitation à O C sous N2 pendant 3 heures.On verse le mélange de réaction dans un mélange glacé agité de 2,5 cm3 de KH2P04 1E, 40 cm3 de H20 et 75 cm3 de EA. Après séparation des couches, la couche aqueuse est saturée de NaCl et traitée de nouveau par extraction avec EA. 'les couches organiques combinées sont traitées par extraction une fois à la saumure, séchées sur du MgSO4 anhydre, filtrées et concentrées sous un courant de N2 et ensuite à l'aide d'une pompe à vide poussé pour donner z brut. Par chromatographie de préparation sur couches minces sur du gel de silice, on obtient 3. On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères cis ou le mélange cis-trans. Etape M À 9,16 cm3 de pentane (séché sur des tamis moléculaires 4A de Linde), on ajoute 0,2 cm3 de Br2 (masse moléculaire = 160, 3,9 mmoles). A 474 mg de 3 (masse moléculaire = 793 ; 0,598 mmole) dans 13 cm3 de EtO2 (séché sur des tamis moléculaires 5A de Linde de 1,6 mm) à 000, sous N2, en agitant, on ajoute goutte à goutte 1,52 cm de la solution 0,42 M de Br2 ci-dessus (0,63 mmole). Après 15 minutes à OOC, on ajoute 33 mg de NaH à 57 % (57 Etape N A 210 mg de 4 (masse moléculaire = 871 ; 0,241 mmole) dissous dans 0,5 cm3 de DMSO (distillé sur CaH2 sous 8 mm et conservé sur des tamis moléculaires 4A de Linde), on ajoute à 25 C, en agitant, 40 mg de 1,5-diazabicyclo[5.4.0] undéc-5-ène (distillé à 80 C sous 2 mm) masse moléculaire = 152 ; 0,263 mmole) dans 0,7 cm de diméthylsulfoxyde (DMSO). La solution est agitée sous N2 pendant 4 heures et ensuite ajoutée à un mélange glacé agité de 0,48 cm3 de ER2P04 IM, de 7 cm3 de H20 et de 10 cm3 de EA. Après séparation des couches, la couche aqueuse est traitée de nouveau par extraction par EA.Les couches organiques combinées sont lavées une fois à la saumure, séchées sur MgSO4 anhydride, filtrées et concentrées sous un courant de N2 et ensuite sous vide poussé, pour donner 5 brut. Par chromatographie de préparation sur couches minces sur du gel de silice, on obtient 5. On obtient d'une manière analogue les diastéréoisomères cis ou le mélange cis-trans. Etape O Une solution de 187 mg de 5 (masse moléculaire = 791) 0,236 mmole) dans 2,5 cm3 de s-collidine (distillée sur KOH pulvérisé à une pression de 30 mm) est ajoutée à 45 mg de LiI anhydre (séché pendant quelques heures à 100 C sur P205 sous vide) (masse moléculaire = 134 ; 0,336 mmole). Tandis qu'on agite sous N2, le mélange réactionnel est chauffé dans un bain d'huile à 120 C. Après un total de 24 minutes, le mélange de réaction est refroidi à 2500, dilué avec CH2Cl2 et transféré dans un ballon à fond rond pour concentration sous un courant de N2 et ensuite sous vide poussé.Le partage du résidu entre 1C cm3 de SA et 1,8 cm3 de KH2PO4 1M dans 10 cm3 de H20 est suivi d'une extraction de la couche aqueuse deux fois supplémentaires avec EA. les couches organique s combinées sont traitées par extraction à la saumure, séchées sur KgS04 anhydre, filtrées et concentrées sous un courant de N2 pour donner 6 brut. Par chromatographie de préparation sur couches minces sur du gel de silice, on obtient 6. On obtient d'une manière analogue les dia stéréoisomères cis ou le mélange cis-trans. Etape P A une solution des diastéréoisomères mélangés, 6, (34 mg; masse moléculaire = 612; 0,055 mmole) dans 0,2 cm3 de DMSO (distillé sur CaH2 sous 8 mm et conservé sur des tamis moléculaires 4A de Linde), en agitant, on ajoute 9,5 l de 1,5diazobicyclo[5.4.0] undéc-5-ène (distillé à environ 80 C/2 mm), niasse moléculaire = 152; e = 1 ; 0,0625 mole). La solution est agitée sous N2 pendant 15 minutes, diluée à un volume total de 1 cm3 avec CHCl) et appliquée immédiatement à deux plaques de gel de silice de 1000 . La bande de produit donne 7 sous la forme d'un mélange de diastéréoisomères cis et trans. Etape Q En présence de 61 mg de PtO2, 61 mg de 7 (masse moléculaire = 612; 0,1 mmole) dans 6 cm3 de dioxanne, 6 cm de IIIF, 3 cm3 de H20, sont hydrogénés sous 2,8 kg/cm2 de H2 pendant 4 heures. Be mélange de réaction est ensuite filtré à travers de la Celite, en lavant avec 2 cm3 de tampon phosphate 0,1N au pH 7. Après concentration sous vide au point de trouble, le mélange aqueux est traité par extraction à l'acétate d'éthyle. La couche aqueuse est concentrée à un petit volume et appliquée à une colonne de 100 g de résine XAD-2. Après élution avec H20 et élimination des fractions initiales, les fractions contenant le produit sont lyophilisées pour donner 8 sous la forme d'un mélange de diastéréoisomères cis et trans. Le procédé suivant de N-désacylation enzymatique de la thiénamycine est utilisable pour tous les isomères de la thiénamycine, en particulier pour les isomères N-acétyl distincts 890A1 et 890A3, qui sont décrits ci-après. Désacétylation de N-acétyl thiénamycine On prépare une suspension à 1 % (en poids/volume) de terre à gazon fertile en mettant en suspension 1 g de terre à gazon dans 100 cm3 de solution saline stérile de tampon phosphate, la solution saline de tampon phosphate ayant la composition suivante Solution saline de tampon phosphate NaCl 8,8 g Tampon phosphate IM, pH 7,5* 10 cm3 Eau distillée 1000 cm3 *Tampon phosphate 1M. pH 7 5 On mélange 16 cm3 de KH2PO4 1M avec 84 cm3 de K2HPO4 1M. On règle à 7,5 le pH du tampon phosphate en ajoutant de petites quantités de KH2PO4 IM ou de K2HPO4 1M. On utilise des portions aliquotes de cette suspension de réserve à 1 % de terre pour préparer des dilutions aux coeffi- cients 10, 100 et 1000. Des portions de I cm3 de la suspension de réserve ou des portions de 1 cm des dilutions aux coefficients 10, 100 et 1000 sont ajoutées à des portions de 2 cm3 de solutions stériles à 1,0 % de gélose, à 48 C. 'les mélanges sont versés rapidement sur la surface de boîtes de Pétri stériles de 85 mm de diamètre contenant 20 cm3 de milieu A. le milieu A a la composition suivante : Milieu A KH2POR 3,0 g K2HPO4 7,0 g MgSO4 0,1 g Eau distillée 1000 ml Solution de N-acétyléthanolamine* 8,5 ml * Solution de N-acétyléthanolamine De la N-acétyléthanolamine est diluée au coefficient 10 dans H20 et stérilisée à l'aide d'une membrane. Cette solution est ajoutée après passage à l'autoclave. Pour des milieux solides : on ajoute 20 g de gélose. 'les boîtes de Pétri sont mises à incuber pendant 18 jours à 28 C. Une colonie bien isolée est prélevée et appliquée en stries sur une boîte de Pétri contenant du milieu B. Le milieu B a la composition suivante Milieu B Pâte de tomate 40 g Farine d'avoine broyée 15 g Eau distillée 1000 cm3 Pour des milieux solides : on ajoute 20 g de gélose Un clone individuel est choisi et cultivé pendant 2 jours à 280C en culture inclinée sur milieu B. Une portion du développement obtenu sur ce milieu incliné est appliquée en stries sur la surface de six échantillons de milieu B pour culture sur milieu incliné.Ces cultures sur milieu incliné sont mises à incuber pendant 2 jours à 280 C. Cette culture a été iaentifiée comme Protaminobacter ruber et on lui a attribué le numéro MB-3528 dans la collection de cultures de Merck and Co, Inc, Tahway, New Jersey, Etats-Unis d'Amérique, et un échantillon a été déposé à l'Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, NO NRRL B-8143. Une portion du développement obtenu sur la culture inclinée de Protaminobacter ruber MB-3528 est utilisée pour inoculer un erlenmeyer de 250 cm3 contenant 50 cm3 de milieu 0. Le milieu C a la composition suivante Milieu C Dextrose 20 g Pharmamedi a 8g Liqueur de macération de maïs (état humide) 5 g Eau distillée 1000 cm3 pH : réglé à 7 avec NaOH ou HCl Solution de N-acétyléthanolamine 8,5 cm3 *Solution de N-acétyléthanolamjne De la N-acétyléthanolamine est diluée au coefficient 10 dans H20 et stérilisée à l'aide d'une membrane. Cette solution est ajoutée après passage à l'autoclave. Le ballon est secoué à 280C sur une secoueuse à 220 tpm (course 5,1 cm) pendant 4 jours. Une portion de 25 cm3 provenant du ballon est centrifugée pendant 15 minutes à 800C tpm. On enlève le liquide surnageant et les cellules sur la surface des matières solides du milieu sont enlevées par raclage et introduites dans 0,5 cm3 d'un tampon phosphate de potassium 0,05X, pH 7,4. La suspension résultante est soumise à une destruction par ultrasons en utilisant un Branson Instru ment Model LS-75 Sonifier avec une sonde de 1,27 cm à un réglage de 4 pour 4, intervalles de 15 secondes, tandis qu'on refroidit la suspension dans de l'eau glacée pendant et entre les périodes de destruction.Une portion de 10 l de la matière traitée aux ultrasons est mélangée avec 25 l d'une solution contenant 840/ug/cm3 de N-acétylthiénamycine dans du tampon phosphate de potassium IOmM, pH 7, et le mélange est mis à incuber toute une nuit à 28 C. On traite de la même manière des témoins contenant l'antibiotique et le tampon seulement; et des cellules traitées aux ultrasons et le tampon sans antibiotique. Après l'incubation toute une nuit à 28 C, des quantités de jll sont appliquées à des plaques pour chromatographie sur couche mince revêtues de cellulose, qui sont développées dans EtOH:H20, 70:30. Après séchage à l'air, la plaque de chromatographie sur couche mince est placée sur une plaque d'essai à Staphylococcus aureus ATCC 6538P pendant 5 minutes. 'les plaques d'essai sont préparées comme suit : Une culture vieille d'une nuit de l'organisme d'essai, Stapbylococcus aureus ATCO 6538P, dans du bouillon nutritif plus 0,2 % d'extrait de levures, est diluée avec du bouillon nutritif plus 0,2 go d'extrait de levures de manière à donner une suspension ayant une transmission de 60 % à une longueur d'onde de 660 nm.Cette suspension est ajoutée à de la gélose nutritive Difco additionnée de 2,0 g/l d'extrait de levures Difco entre 3700 et 4800, de manière à former une composition contenant 33,2 cm3 de la suspension par litre de gélose.On verse 40 cm3 de cette suspension dans des boîtes de Pétri de 22,5 cm x 22,5 cm et ces boîtes sont refroidies et maintenues à 4 C jusqu'à utilisation (5 jours au maximum). On enlève la plaque de chromatographie sur couche mince et la plaque d'essai est mise à incuber toute une nuit à 37 C. En plus de la tache de la N-acétyl thiénamycine bloactive n'ayant pas réagi à Rf 0,7-0,89, on observe une tache bioactive à Rf 0,44-0,47 due à la thiénanycine. Les mélanges-témoin soumis à l'incubation comprenant l'antibiotique et le tampon, les cellules traitées aux ultrasons et le tampon et l'antibiotique plus le tampon avec addition des cellules traitées aux ultrasons juste avant l'application de la chromatographie sur couche mince ne produisent pas de matière bioactive à Rf 0,44-0,47. Production de 890A1, un isomère distinct Un tube de culture lyophilisée de Streptomyces flavo grises MA-4434 (RRRL 8139) est ouvert aseptiquement et son contenu est mis en suspension dans un tube contenant 0,8 cm3 de sels de Davis stériles ayant la composition suivante Sels de Davis Citrate de sodium 0,5 g K2HPO4 7,0 g KH2P04 3,0 g (HN4)2SO4 1,0 g MgSO4. 7H20 0,1 g Eau distillée 1000 ml Cette suspension est utilisée pour inoculer quatre échantillons de milieu A pour culture inclinée ayant la composition suivante Milieu A Glycérol 20,0 g Levure primaire 5,0 g Farine de poisson 15,0 g Eau distillée 1000 ml Gélose 20,0 g pH : réglé à 7,2 en utilisant NaOH. Les cultures sur milieu incliné sont mises à incuber pendant une semaine à 27-28 C et ensuite conservées à 4-6 C jusqu'à utilisation. Une portion de 1/3 du développement obtenu dans les trois cultures sur milieu incliné est utilisée pour inoculer un Erlenneyer de 250 cm3 à chicanes contenant 50 cm3 de milieu B ayant la composition suivante Milieu B Autolysat de levures (*Ardamine) 10,0 g Glucose 10,0 g Tampon phosphate 2,0 ml MgSO4. 7H20 50 mg Eau distillée 1000 ml pH : réglé à 6,3 en utilisant HCl ou NaOH *Ardamine : Yeast Products Corporation *Solution de tampon phosphate KH2PO4 91,0 g Na2HPO4 95,0 g Eau distillée 1000 ml La fiole d'ensemencement est secouée pendant un jour à 27-28 C sur une secoueuse à 220 tpm (course 5,1 cm). La fiole et son contenu sont conservés au repos pendant un jour à 4 C. Trente-trois erlenmeyers de production de 2 litres contenant chacun 250 cm3 de milieu C sont inoculés avec 8 cm3 par fiole du développement obtenu dans la fiole d'ensemencement. Le milieu C a la composition suivante Milieu 0 Pate de tomate 20,0 g Levure primaire 10,0 g Dextrine (Amidex) 20,0 g CoCl2.6H20 5,0 mg Eau distillée 1000 ml pH : réglé à 7,2-7,4 en utilisant NaOH Après l'inoculation, les flacons de production sont mis à incuber à 24 C, avec agitation sur une secoueuse à 212 tpm (course 5,1 cm), pendant quatre jours. Les flacons sont récoltés et on effectue des essais d'activité en utilisant des plaques d'essai normales à Salmonella gallinarum MB1287 et à Vibrio percolans ATCC 8461 en utilisant des disques d'essai de 1,27 cm plongés dans des échantillons de bouillon centrifugé. Les echantillons sont dilués avec du tampon phosphate 0,02M, pH 7,0, quand c'est nécessaire. Les résultats sont donnés dans le tableau ci-dessous Age à la récolte, heures 96 pH 7,2 Salmonella gallinarum (zone en mm) 29,5 Vibrio percolans dil. 1/10 (zone en mm) 31 Unités d'essai de 890 40 Sept litres de bouillon de fermentation entier sont refroidis à 30C et centrifugés en portions de 200 cm3 à 9000 tpm pendant 15 minutes chacune Aux liquides surnageants combinés, on ajoute 7 cm3 de EDTA neutre 0,1M et l'échantillon entier est adsorbé sur une colonne de Dowex-1 x 2 (Cl ), particules de 0,149 à 0,297 mm, dimensions du lit 5,1 x 25 cm, à un débit de 40 cm3 par minute. La colonne est lavée avec 500 cm3 d'eau désionisée contenant 5 cm3 de tampon Tris-HCl 1M, pH 7,0, et 25 M d'EDTA neutre. L'antibiotique est élué avec 1 litre d'eau désionisée contenant 50 g de chlorure de sodium et la colonne est ensuite lavée avec 300 cm3 d'eau désionisée. On recueille des fractions de 100 cm3, à partir de la première apparition de sel à la sortie de la colonne. La bioactivité apparaît dans les fractions 1 à 10 avec un maximum à la fraction 2. On combine les fractions 2 à 5, contenant 17 % de l'activité appliquée. Les fractions combinées sont concentrées à 110 cm3 par évaporation rotative sous pression réduite et le pE est réglé à 5,8 par addition de 4,2 cm3 de HOl 1r. Le concentré à pH réglé est appliqué à une colonne de XAD-2, dimensions du lit 3,8 sur 55 cm, qui a été préalablement lavée avec 3 litres d'acétone aqueuse à 60 % (v/v), et ensuite avec 3 litres d'eau désionisée, 3 litres de chlorure de sodium à 5 % (poids/volume) et 1 litre de chlorure de sodium à 25 iGC (poids/volume) dans de l'eau désio nisée. On permet au concentré appliqué de descendre au niveau du lit. L'antibiotique est élué avec de l'eau désionisée à un débit de 15 cm3 par minute. On recueille 22 fractions de 100 cm3 chacune, en comptant à partir de la première application d'échantillon.La bioactivité apparaît dans les fractions 6 à 22, avec un pic aux fractions 9 et 10. On combine les fractions 9 à 20 pour traitement complémentaire. Les fractions préparées d'une manière similaire sont concentrées à 70 cm3 par évaporation rotative sous pression réduite. Le concentré est adsorbé sur une colonne de Dowex-1 x 4 (Cl-) en particules de moins de 0,037 mm avec des dimensions de lit de 2,2 x 27 cm. La colonne est lave avec 50 cm3 eau désionisée et l'antibiotique est élué avec 2 litres de 0,070M NaCl + 0,005M NH4Cl + 0,0001M NH3 dans de l'eau désionisée à un débit de 2 cm) par minute. On recueille des fractions de 9,5 cm . Le pic principal d'antibiotique est élué dans les fractions 142 à 163. Les fractions 146 à 157 contenues sont combinées pour traitement ultérieur. Les fractions 146-157 combinées sonu concentrées à 3 cm3 par évaporation rotative sous pression réduite et le concentré est porté au pli 6,5 par addition de 5 l de NH3 IM. Le concentré est appliqué sur une colonne (2,2 x 70 cm) de Bio-Gel P-2 (particules de C,037 à 0,074 mm), qui a été lavée avec 20 cm3 de NaCl 5M et 500 cm3 d'eau désionisée. Après qu'on a fait écouler le concentré au niveau du lit, on effectue deux rin çages avec 1 cm) d'eau désionise, qu'on laisse écouler au niveau du lit. La colonne est ensuite diluée avec de l'eau désionisée à un débit de 0,6 cm3 par minute. On recueille des fractions de 2,9 cm3. Le pic principal d'antibiotique est élué dans les fractions 63 à 70. Les fractions 64 et 65 sont combines pour traitement complémentaire. Les fractions 64 et 65 combinées sont évaporées à 2 cm3 sur un évaporateur rotatif sous pression réduite et sont ensuite congelées en coquille et lyophilisées dans une fiole de 14 cm3 à bouchon vissé pendant 8 heures pour donner 2,25 mg d'antibiotique 890A1 sensiblement pur, Le groupe N-acétyle est clivé comme décrit ci-dessus pour donner la base libre Production de 890A3! un isomère distinct Un tube de culture lyophilisée de Streptomyces flavogriseus MA-4434 (NRRL 8139) est ouvert aseptiquement et son contenu est mis en suspension dans un tube contenant 0,8 cm de sels de Davis stériles ayant la composition suivante Sels de Davis Citrate de sodium 0,5 g K2HPO4 7,0 g KH2P04 3,0 g (NH4)2S04 1,0 g rgS04.7H20 0,1 g Eau distillée 1000 ml On utilise cette suspension pour inoculer quatre échantillons de milieu A pour culture inclinée ayant la composition suivante Milieu A Glycérol 20,0 g Levure primaire 5,0 g Farine de poisson 15,0 g Eau distillée 1000 ml Gélose 20,0 g pH :: réglé à 7,2 en utilisant NaOH Les milieux inclinés inoculés sont mis à incuber pendant une semaine à 27-28 C et ensuite conservés à 4-6 C jusqu'à utilisation (pas plus de 21 jours). Une portion de 1/3 du développement obtenu dans les quatre cultures sur milieu incliné est utilisée pour inoculer 12 erlenmeyers de 250 cm3 à chicanes contenant 50 cm3 de milieu B ayant la composition suivante Milieu B Autolysat de levures (+Ardamine) 10,0 g Glucose 10,0 g Tampon phosphate* 2,0 ml MgS04.7HdO 50 mg Eau distillée 1000 ml pH : réglé à 6,5 en utilisant HCl ou NaOH +Ardamine : Yeast Products Corporation *Solution de tampon phosphate EH 04 91,0 g NaHPO4 95,0 g Eau distillée 1000 ml Le flacon d'ensemencement est secoué pendant un jour à 27-28 C sur une secoueuse à 220 tpm (course 5,1 cm). Le flacon et son contenu sont conservés au repos pendant un jour à 4 C. Quarante-quatre erlenmeyers de production de 2 litres, contenant chacun 200 cm de milieu C, sont inoculés avec 8 cm par flacon de la production du flacon d'ensemencement. Le milieu C a la composition suivante Milieu C Pâte de tomate 20,0 g Levure primaire 10,0 g Dextrine (Amidex) 20,0 g CoC12.6H20 5,0 mg Eau distillée 1000 ml pH : réglé à 7,2-7,4 en utilisant NaOH Après l'inoculation, les flacons de production sont mis à incuber à 2400, avec agitation sur une secoueuse à 212 tpm (course 5,1 cm) pendant quatre jours et cinq heures. Les flacons sont récoltés et on effectue des essais d'activité en utilisant des plaques d'essai normales à Salmonella gallinarum MB1287 et à Vibrio percolans ATCC 8461 en utilisant des disques d'essai de 1,27 cm plongés dans des échantillons de bouillon centrifugé. 'les échantillons sont dilués avec du tampon phosphate 0,02M, pH 7,0, quand c'est nécessaire. 'les résultats sont donnés dans le tableau ci-dessous Age à la récolte, heures 101 pH 7,2 Salmonella gallinarum (-zone en mm) 35 Vibrio percolans dil. 1,10 (zone en mm) 34 Unités d'essai de 890 121 Le total de 7,0 litres de bouillon entier obtenu par cette fermentation est refroidi à 3 C et centrifugé en portions de 200 cm3 à 9000 tpm pendant 15 minutes chacune. Au liquide surnageant combiné, on ajoute 1,7 cm3 de EDTA O,IM neutre et le lot est maintenu à 300. On répète la fermentation ci-dessus dans des conditions identiques, à ceci près que les 44 erlenmeyers de production de deux litres sont inocules avec 7 cm par flacon de la production du flacon d'ensemencement. Be pH et les résultats des essais sont indiqués dans le tableau ci-dessous Age à la récolte, heures 101 pH 7,3 Salmonella gallinarum (zone en mm) 38 Vibrio percolans, dil. 1/10 (zone en mm) 39 Unités d'essai de 890 92,8 Le total de 7,4 litres de bouillon entier obtenu par cette fermentation est refroidi à 3 C et centrifugé en portions de 200 cm3 à 9000 tpm pendant 15 minutes chacune. Au liquide surnageant combiné, on ajoute 1,8 cm3 de EDTA neutre G,1M. Le liquide surnageant provenant du bouillon centrifugé résultant des deux fermentations ci-dessus dans le présent Exemple est combiné pour donner un volume total de 13 litres. Le liquide surnageant combiné est passé à travers une colonne de Dowex-1 x 2 (Cl ), particules de 0,149 à 0,297 mm, avec des dimensions de lit de 4,7 cm x 50 cm, à un débit de 60 cm3 par minute. La colonne est lavée avec I litre d'eau désionisée et l'antibiotique est élué avec 5 litres de solution à 5 % (poids/volume) de NaCl contenant du tampon Tris-HOl 0,01M, pH 7,C, et 25 M d'EDTA neutre. Des fractions de 220 cm3 sont recueillies à un débit de 50 cm3 par minute et les fractions sont essayées sur des plaques à Salmonella gallinarum MB1287. L'activité antibiotique apparaît dans les fractions 3 à 26, avec un pic aux fractions 5 et 6. Les fractions 5 à 9 sont combinées par traitement ultérieur. Le pH des fractions combinées est de 7,8 et les fractions combinées contiennent 24 5 de la bioactivité initiale, comme mesuré sur des plaques a Salmonella gallinarum MBI 287. Les fractions 5 à 9 combinées sont concentrées à 150 cm3 par évaporation rotative sous pression réduite et appli- quées à une colonne (dimensions de lit 4,9 cm x 47 cm) de résine XAD-2 qui a été lavée avec 5 litres d'acétone aqueuse à 60 % (v/v) et ensuite avec 5 litres d'eau désionisée et 5 litres de solution à 50 g/l de NaCl dans de l'eau désionisée. 'échantillon est appliqué en portions de 20 cm avec chaque fois écoulement dans la colonne au niveau du lit. quand l'application est complète, on applique trois portions de 20 cm3 d'eau désionisée, en les faisant écouler chaque fois au niveau du lit. L'échantil- lon est élué avec de l'eau désionisée à un débit de 20 cm3 par minute.Toutes les opérations concernant la colonne de XAD sont conduites à la température ambiante (240 C) et les fractions qui sont éluées sont refroidies rapidement dans un bain de glace immédiatement après leur recueil. On recueille des fractions de 95 à 230 cm3. L'activité antibiotique apparat dans les fractions 2 à 24, comme mesuré par essai sur des plaques à Salmonella gallinarum MB1287, avec un pic aux fractions 5 à 7 (ctest-à- dire entre 510 et 895 cm3 de volume élué, en comptant à partir de la première application d'eau désionisée). On combine les fractions 6 à 21. Les fractions 6 à 21 combinées sont concentrées à 68 cm3 par évaporation rotative sous pression réduite et ensuite diluées à 112 cm3 par application d'eau désionisée. Le concentré est appliqué sur une colonne (dimensions du lit 2,2 cm x 21 cm) de Dowex-1 x 4 (Cl-) en particules de moins de 0,037 mm. La colonne est lavée avec 20 cm3 d'eau désionisée et les antibiotiques sont élués avec 2 litres de 0,07M NaCl + 0,OC5M NH4Cl3 + 0,0001lI NH3 dans de l'eau désionisée, à un débit de 1,6 cm par minute. On recueille des fractions de 1,6 cm3 chacune. Les fractions 157 à 179 ont la plus forte activité et sont combinées. Ces fractions combinées sont concentrées par évaporation rotative sous pression réduite à 7 cm3 et le pH est réglé à 7,5 par addition de 20 l de NaOH lM. La solution est concentrée encore à 5 cm3 et appliquée sur une colonne (2,2 x 75 cm) de Bio-Gel P-2, particules de C,Q37 à 0,074 mura. L'échantillon est lavé dans le lit de la colonne avec deux rinçages de 1 cm3 chacun d'eau désionisée et élué avec de l'eau désionisée à un débit de G,6 cm3 par minute. On recueille dix fractions de 3,3 cm3, suivies de soixante fractions de 2,65 cm3 et de dix fractions de ,O cm . es fractions sont réglées dans l'intervalle de pH de 7,5 à 8,0 par addition de 1,5 à 2,5 l de NaOH 0,1M. Les fractions 62, 63, 64 et 65 sont congelées et lyophilisées individuellement dans des fioles en verre de 14 cm3 et conservées à -20 C sous vide. Pour isoler l'antibiotique 89OA3 exempt de 890A1, on tire parti de la relativement plus grande résistance de l'antibiotique 890A3 à la dégradation par la pénicillinase, comme suit; La fraction 63 de la colonne de Bio-Gel est combinée avec les fractions 61, 66 et 67 de la colonne de Bio-Gel. A ces quatre fractions combinées, on ajoute C,2 cm3 de tampon Tris-HCl îM, pH 7,5, et 0,2 cm3 de pénicillinase (Bacto-Penase" de Difco). Après 113 minutes à 230 C, on ajoute une quantité supplémentaire de 0,2 cm3 de pénicillinase. Après encore 7 heures à la température ambiante, on ajoute encore C,2 cm3 de pénicillinase et après encore deux heures à la température ambiante le mélange de réaction est refroidi dans un bain de glace. Le mélange de réaction terminé est dilué à 15 cm3 par addition de 5 cm3 d'eau désionisée. Le mélange de réaction est adsorbé sur une colonne de Dowex-1 x 4 (Cl-) en particules de moins de C,037 mm, dimensions du lit 2,15 x 40 cm. L'antibiotique 890A3 est élué avec 0,07M NaCl + 0,005M NH4Cl + 0,0001M NH3 dans de l'eau désionisée, à un débit de 3 cm3 par minute. On recueille des fractions de 13,8 cm3 chacune. Cn combine les fractions 187 à 200. Les fractions combinées sont concentrées à 4 cm3 par évaporation rotative sous pression réduite et le concentré est appliqué sur une colonne (2,2 x 70 cm) de Bio-Gel P-2, particules de O,C37 à 0,074 mm. T'antibiotique 890A3 est élué avec de l'eau désionisée à un débit de 0,6 cm3 par minute. On re cueille trente fractions de 3,3 cm3 et ensuite cinquante fractions de 2,65 cm3. On combine les fractions 66 à 70 et les échantillons combinés sont concentrés à 1,5 cm3 par évaporation rotative sous pression réduite et le concentré est congelé et lyophilisé pour donner 5,4 mg de matières solides contenant l'antibiotique 890A3 plus des sels résiduels. Le groupe N-acétyle est clivé comme décrit ci-dessus pour donner la base libre - REVENDICATIONS I - Un composé ayant la formule développée et ses sels non-toxiques pharmaceutiquement acceptables, où R4 est choisi indépendamment parmi des groupes acyle, alcoyle, aryle, aralcoyle, alcényle et alcynyle. 2 - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le radical R4 est choisi parmi ceux de formule où X est O ou S; n est un nombre entier choisi parmi O et 1 R est de l'hydrogène ou un groupe amino, alcoylamino, dialcoylamino, alcoyle, alcoylthio, arylthio, alcoxy, aryloxy, alcényle, alcynyle, aryle, aralcoyle, cycloalcoyle, hétéroaryle ou hétéroaralcoyle. 3 - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le radical R4 est choisi parmi ceux de formule où X est O ou S; R est H ou un groupe amino, mercapto, hydroxy, alcoylamino, dialcoylamino, alcoyle, alcoylthio, arylthio, alcoxy, aryloxy, alcényle, alcynyle, aryle, aralcoyle, acylcycloalcoyle, hétéroaryle ou hétéroaralcoyle; n est un nombre entier choisi parmi 0, 1, 2, 3 et 4; m est un nombre entier choisi parmi O et 1; Z est 0, S-, N ou un groupe carbonyle; avec les conditions que quand Z est de 11 oxygène, R ne doit pas être un groupe mercapto ou hydroxy; quand Z est du soufre, R ne doit pas être un groupe amino ou hydroxy; et quand Z est de l'azote, R ne doit pas être un groupe mercapto. 4 - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le radical R4 est choisi parmi ceux de formule : où X est 0 ou S; n est un nombre entier choisi parmi O et 1; R est H, un groupe amino, mercapto, hydroxy, alcoylamino, dialcoylamino, alcoyle, alcoylthio, arylthio, alcoxy, aryloxy, alcényle, alcynyle, aryle, aralcoyle, cycloalcoyle, hétéroaryle ou hétéroaralcoyle; R' est groupe amino, hydroxy, azido, carbamoyle, guanidino, acyloxy, halogéno, sulfamino, tétrazolyle, sulfo, carboxy, carbalcoxy, phosphono, alcoxy ou arylthio; avec l'exception que R et R' ne peuvent pas être tous deux des groupes hydroxy, amino ou mercapto. 5 - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le radical R est choisi parmi ceux de formule où X est O ou S; R est H, un groupe amino, mercapto, hydroxy, alcoylamino, dialcoylamino, alcoyle, alcoylthio, arylthio, alcoxy, aralcoxy, alcényle, alcynyle, aryle, aralcoyle, cycloalcoyle, hétéroaryle ou hétéroaralcoyle; m et n sont des nombres entiers choisis indépendamment parmi O et 1; Y est O# M#, NR2 ou R; où M# est choisi parmi l'hydrogène, des cations de métaux alcalins et alcalino-terreux ou une base organique; Y' et Y" sont choisis indépendamment parmi 0 23 M g -NR2 ou R;Y' et yls peuvent être reliés ensemble pour former avec les atomes de phosphore sur lesquels ils sont fixés des esters et amides cycliques. O - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le radical R est choisi parmi ceux de formule où m et n sont des nombres entiers de G à 5; p est O ou 1 h est 0, NR' (R' est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone), S ou A représente une simple liaison; et Y est choisi parmi 1) des radicaux amino ou amino substitué -N(R)2 et -N(R)3 où les significations de R sont choisies indépendamment parmi : l'hydrogene; N(R')2 (R' est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone); des groupes alcoyle inférieur et alcoxyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone; alcoxy inférieur-alcoyle inférieur où la portion alcoyle comprend de 1 à 6 atomes de carbone et la portion alcoyle comprend de 2 à 6 atomes de carbone; cycloalcoyle et cycloalcoylalcoyle où la portion cycloalcoyle comprend 3 à 6 atomes de carbone et la portion alcoyle comprend 1 à 3 atomes de carbone; deux groupes R peuvent être reliés ensemble pour former avec l'atome d'azote sur lequel ils sont fixés un noyau ayant 3 à 6 atomes de carbone; 2) des radicaux amidino et amidino substitué où R est choisi indépendamment parmi l'hydrogène; N(R')2 (R' est de l'hydrogène ou un groupe alcoyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone); des groupes alcoyle inférieur et alcoxyle inférieur ayant de I à 6 atomes de carbone; alcoxy inférieuralcoyle inférieur où la portion alcoxyle comprend 1 à 6 atomes de carbone et la portion alcoyle comprend 2 à 6 atomes de carbone (quand le radical alcoxy inférieur-alcoyle inférieur est fixé sur du carbone, la portion alcoyle comprend 1 à 6 atomes de carbone; cycloalcoyle et cycloalcoylalcoyle où la portion alcoyle comprend 1 à 3 atomes de carbone; deux groupes R peuvent être reliés ensemble pour former avec les atomes sur lesquels ils sont fixés un noyau ayant 3 à 6 atomes; 3) des radicaux guanidino et guanidino substitué où R est tel que défini en 2. (ci-dessus); 4) des radicaux guanyle et guanyle substitué où R est tel que défini en 2. (cidessus); 5) des hétérocyclyles mono- et bicycliques contenant de l'azote (aromatiques et non-aromatiques) ayant de 4 à 10 atomes dans le ou les cycles, dans lesquels le ou les hétéroatomes, en plus de l'azote, sont choisis parmi l'oxygène et le soufre. 7 - Un composé. selon la revendication 2, caractérisé en ce que le radical R4 est où R est choisi parmi les radicaux benzyle, p-hydroxybenzyle, 4-amino-4-carboxybutyle, méthyle, cyanométhyle, 2-pentényle, n-amyle, n-heptyle, éthyle, 3- et 4-nitrobenzyle, phénéthyle, p , p-diphényléthyle, méthyldiphénylméthyle, triphénylméthyle, 2-méthoxyphényle, 2,6-diméthoxyphényle, 2,4,6-triméthoxyphényle, 3 ,5-diméthyl-4-isoxazolyle, 3-butyl-5-méthyl-4-isoxazolyle, 5-méthyl-3-phényl-4-isoxazolyle, 3-(2-chlorophényl)-5-méthyl-4- isoxazolyle, 3-(2,6-dichlorophényl)-5-méthyl-4-isoxazolyle, D-4-amino-4-carboxybutyle, D-4-N-benzoylamino-4-carboxy-n-butyle, p-aminobenzyle, o-aminobenzyle, m-aminobenzyle, p-diméthylaminobenzyle, (3-pyridyl)méthyle, 2-éthoxy-1 -naphtyle, 3-carboxy-2quinoxalinyle, 3-(2 ,6-dichlorophényl)-5-(2-furyl) 4-isoxazolyle, 3-phényl-4-isoxazolyle, 5-méthyl-3-(4-guanidinophényl)-4-isoxazolyle, 4-guanidinométhylphényle, 4-guanidinométhylbenzyle, 4-guanidinobenzyle, 4-guanidinophényle, 2,6-diméthoxy-4-guanidinophényle, o-sulfobenzyle, p-carboxyméthylbenzyle, p-carbamoylméthylbenzyle, m-fluorobenzyle, m-bromobenzyle, p-chlorobenzyle, p-méthoxybenzyle, 1-naphtylméthyle, 3-isothiazolylméthyle, 4-isothiazolylméthyle, 5-isothiazolylméthyle, guanylthiométhyle, 4-pyridylméthyle, 5-isoxazolylméthyle, 4-méthoxy-5-isoxazolyl- méthyle, 4-méthyl-5-isoxazolylméthyle, 1-imidazolylméthyle, 2-benzofuranylméthyle, 2-indolylmethyle, 2-phénylvinyle, 2phényléthynyle, 1-aminocyclohexyle, 2- et 3-thiénylaminométhyle, 2-(5-nitrofuranyl )vinyle, phényle, o-méthoxyphényle, o-chlorophényle, o-phénylphényle, p-aminométhylbenzyle, 1-(5-cyano- triazolyl)méthyle, difluorométhyle, dichlorométhyle, dibromométhyle, 1-(3-méthylimidazolyl)méthyle, 2- ou 3-(5-carboxyméthyl thiényl)méthyle, 2- ou 3-(4-carbamoylthiényl)-méthyle, 2- ou 3 (5-méthylthiényl )méthyle, 2- ou 3-(5-méthoxythiényl)méthyle, o- ou 3-(4-chlorothiényl)-méthyle, 2- ou 3-(5-sulfothiényl)méthyle, 2- ou 3-(5-carboxythiényl)méthyle, 3-(1,2,5-thiadiazo- lyl)méthyle, 3-(4-méthoxy-1,2,5-thiadiazolyl)méthyle, 2-furylméthyle, 2-(5-nitrofuryl)méthyle, 3-furylméthyle, 2-thiénylméthyle, 3-thiénylméthyle, tétrazolylméthyle, benzamidinométhyle et cyclohexylamidinométhyle. 8 - Un composé selon la revendication 3, caractérisé en ce que le radical R4 est : où la portion (GH2)nZR du radical acyle est choisie parmi les radicaux allylthiométhyle, phénylthiométhyle, butylmercaptométhyle, a-chlorocrotylmercaptométhyle, phénoxyméthyle, phénoxyéthyle, phénoxybutyle, phenoxybenzyle, diphénoxyméthyle, diméthylméthoxyméthyle, diméthylbutoxyméthyle, diméthylphénoxyméthyle, 4-guanidinophénoxyméthyle, 4-pyridylthiométhyle, p-(carboxyméthyl)phénoxyméthyle, p-(carboxyméthyl)phénylthiométhyle, 2-thiazolylthiométhyle, p-(sulfo)phénoxyméthyle, p-(carboxyméthyl)phénylthiométhyle, 2-pyrimidinylthiométhyle, phénéthylthiométhyle, 1-(5,6,7,8-tétrahydronaphtyl)oxyméthyle, N-méthyl-4-pyridîniumthio, benzyloxy, méthoxy, éthoxy, phénoxy, phénylthio, amino, méthylamino, diméthylamino, pyridinium méthyle, triméthylammonium-méthyle, cyanométhylthiométhyle, tri fluorométhylthiométhyle, 4-pyridyléthyle, 4-pyridylpropyle, 4-pyridylbutyle, 3-imidazolyléthyle, 3-imidazolylpropyle, 3-imidazolylbutyle, 1-pyrroloéthyle, 1-pyrrolopropyle et 1- pyrrolobutyle. 9 - Un composé selon revendication 4, caractérisé en ce que le radical R4 est où la portion -CHRR' du radical acyle est choisie parmi les groupes a-aminobenzyle, &alpha;-amino-(2-thiényl)méthyle, a-(méthylamino)benzyle, a-amino-méthylmercaptopropyle, a-amino-3- ou 4chlorobenzyle, a-amino-3 ou 4-hydroxybenzyle, a-amino-2,4 dichlorobenzyie, a-amino-3 ,4-dichlorobenzyle, D(-)-a-hydroxybenzyle, a-carbokybenzyle ,- a-amino-(3-thiényl)méthyle, D-(-) a-amino-3-chloro-4-hydroxybenzyle, a-amino(cyclohexyl)méthyle, a-(5-tétrazolyl)-benzyle, 2-thiényl-carboxyméthyle, 3-thiénylcarboxyméthyle, 2-furylcarboxyméthyle, 3-furyl-carboxyméthyle, a-sulfaminobenzyle 3-thiényl-sulfaminométhyle, a-(N-méthylsulfamino)-benzyle, D(-)-2-thiényl-guanidinométhyle, D(-)-&alpha;- guanidinobenzyle, a-guanyluréidobenzyle, a-hydroxybenzyle, a-azidobenzyle, a-fluorobenzyle, 4-(5-méthoxy-1,3-oxadiazolyl)- aminométhyle, 4- (5-méthoxy-1 ,3-oxadiazolyl) -hydroxyméthyle, 4-(5-méthoxy-1,3-sulfadiazolyl)-hydroxyméthyle, 4-(5-chlorothiényl)-aminométhyle, 2-(5-chlorothiényl)-hydroxyméthyle, 2-(5chlorothiényl)-carboxyméthyle, 3-(1,2-thiazolyl)-aminométhyle, 3-(1,2-thiazolyl)-hydroxyméthyle, 3-(1,2-thiazolyl)carboxyméthyle, 2-thiazolylaminométhyle, 2-thiazolylhydroxyméthyle, 2-thiazolyl carboxyméthyle, 2-benzothiénylcarboxyméthyle, 2-benzothiénylhydroxyméthyle, 2-benzothiénylcarboxyméthyle, &alpha;-sulfobenzyle, -a-phosphonobenzyle, a-diéthylphosphono et &alpha;-monoéthylphosphono. 10 - Un composé selon la revendication 6, caractérisé en ce que le radical R4 est choisi parmi les suivants : 11 - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que R est choisi parmi les radicaux formyle, propionyle, butyryle, chloroacétyle, méthoxyacétyle, aminoacétyle, méthoxycarbonyle, éthoxycarbonyle, méthylcarbamoyle, éthylcarbamoyle, phénylthiocarbonyle, 3-aminopropionyle, 4-aminobutyryle, N-méthylaminoacétyle, N,N-diméthylaminoacétyle, N,N,N-triméthylaminoacétyle, 3-(N,N-diméthyl)aminopropionyle, 3-(N,N,N-triméthyl)aminopropionyle, N,N,N-triéthylaminoacétyle, pyridiniumacétyle, guanylthioacétyle, guanidinoacétyle, 3-guanidinopropionyle, N3- méthylguanidinopropionyle, hydroxyacétyle, 3-hydroxypropionyle, acryloyle, propynoyle, malonyle, phénoxycarbonyle, amidinoacétyle, acétamidinoacétyle, amidinopropionyle, acétamidinopropionyle, guanyluréidoacétyle, guanylcarbamoyle, carboxyméthylaminoacétyle, sulfoacétylaminoacétyle, phosphonoacétylaminoacétyle, N3- dimêthylaminoacétamidinopropionyle, uréidocarbonyle, diméthyl aminoguanylthioacétyle, 3-(1-méthyl-4-pyridinium) propionyle, -(5-aminoimidazol-l-jrl)propionyle, 3-méthyl-1 -imidaz olium- acétyle, 3-sy.dnonylacétyle, o-aminométhylbenzoyle, o-aminobenzoyle, 12 - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que R4 est choisi parmi les radicaux sulfo, phosphono, carbamoyle, méthylsulfonylss sulfamoyle, diméthylsulfamoyle, N-méthylcarbamoyle, bromoacétyle, hydroxyacétyle, aminoacétyle, diméthylaminoacétyle, triméthylammoniumacétyle, amidinoacétyle, guanidinoacétyle, méthoxyacétyle, guanylacétyle, guanylthioacétyle, phosphamoyle, phosphonothioylS thiocarbamoyle, méthoxyméthyle, hydroxyéthyle, méthoxyéthyle, diméthylaminométhyle, diméthylaminoéthyle, méthylthiométhyle, amidinométhyle, et guanidinoéthyle. 13 - Un composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il a la formule développée dans laquelle M# est un cation d'hydrogène ou d'un métal alcalin, et les sels non-toxiques pharmaceutiquement acceptables de ce composé. 14 - Un procédé pour préparer un composé tel que défini dans la revendication 1, selon lequel on traite unkosposé de la structure dans laquelle R' et R2 sont des groupes de blocage facilement éliminables avec un agent d'alcoylation ou d'acylation choisi de manière à fournir le radical R4. 15 - Une composition pharmaceutique comprenant un composé selon l'une des revendications 1 à 13 et un véhicule pharmaceutique approprié. 16 - Une composition pharmaceutique comprenant, dans une forme de dosage unitaire, une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé selon l'une des revendications n à 13 et un véhicule pharmaceutique approprié.