Brevet FR2414506A1 — publié le 19790810

La présente invention concerne un nouveau dérivé de chromone ainsi que son application à la constitution d'un médicament qui peut être utile en particulier dans le traitement des hyperuricémies. Le dérivé selon l'invention répond à la formule suivante C'est un composé utile du point de vue pharmacologique, car il est doué de la double propriété de freiner la biosynthèse de l'acide urique et d'en augmenter l'excrétion urinaire. La présente invention a d'autre part pour objet les différentes compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif le composé de l'invention. Ces compositions pharmaceutiques, dosées au poids médicinal, constituent des médicaments utilisables en thérapeutique, dans diverses affections. Elles pourront être utilisées en particulier dans le traitement des états pathologiques s'accompagnant d'hyperuricémie et notamment de la goutte. Les doses quotidiennes, en thérapeutique humaine, peuvent être avantageusement de l'ordre de 50 à 500 mg. Elles peuvent être admi nistrées en mélange avec les additifs et excipients des différentes formes galéniques, par exemple sous forme de comprimés ou de gélules. Pour des unités dosées à 100 mg, la posologie peut être notammént de 1/2 à 5 comprimés ou de 1 à 5 gélules par jour. Le composé de l'invention peut être obtenu à partir de l'hydroxy-4' benzoyl-2 chromone (II) lui-même obtenu par réaction du chlorure de l'acide chromone 2carboxylique avec le phénol. La préparation du composé de l'invention consiste à faire réagir le brome, au sein d'un solvant polaire tel que l'acide acétique, sur le para hydroxy benzoyl-2 chromone. La réaction est effectùée de préférence à température ambiante. Le schéma réactionnel est le suivant Le procédé de préparation du composé selon l'invention est décrit de façon plus détaillée dans l'exemple suivant, tandis que les autres exemples illustrent l'étude des propriétés pharmacologiques du composé obtenu et ses applications thérapeutiques. EXEMPLE I (Dibromo-3,5 hydroxy-4-benzoyl)-2 chromone - Préparation A une solution de phénol dans le dichloréthane, on ajoute un catalyseur électrophyle tel que le chlorure d'aluminium. Après une heure d'agitation à la température ambiante, on refroidit la solution à OOC tandis qu'on y ajoute lentement une solution de chlorure d'acide chromone-carboxylique-2 dans un solvant neutre tel que le dichloréthane. On maintient l'agitation pendant 5 heures à OOC, puis pendant 4 jours à la température ambiante. La réaction fournit la para hydroxy benzoyl-2 chromone, soluble dans le dichloréthane, qui est recristallisée dans l'éthanol absolu. Le rendement est de 54 %. A une suspension de 26,6 g (0,1 mole) de para hydroxy benzoyl-2 chromone dans 100 me d'acide acétique pur, on ajoute goutte à goutte 32 g (0,2 mole) de brome. On maintient sous agitation à température ambiante pendant 4 heures. On verse ensuite la préparation dans 500 mi d'eau et on maintient l'agitation pendant une heure supplémentaire. On filtre, on lave à 11 eau et l'on sèche sous vide le produit. Après recristallisation dans le dioxane, on obtient 32,2 g de (dibromo-3,5 hydroxy-4 benzoyl)-2 chromone. Le rendement est de 76 %. Point de fusion : F = 2420C. Analyse élémentaire : Calculé Trouvé C % 45,32 45,49 H % 1,90 2,27 Br % 37,69 37,07 EXEMPLE II Expérimentation du composé dans la goutte expérimentale chez le poulet L'expérimentation est réalisée chez le poulet car, pour tre extrapolable à l'homme, les propriétés hypouricémiantes et Ùricosuriques d'une substance doivent être étudiées chez une es pèche animale présentant des caractéristiques d'uricosynthèse et d'élimination urique proches de celles de l'homme. C'est le cas pour les oiseaux qui -comme l'homme- appartiennent au groupe des "Uricotéliques". Le poulet est un animal d'expérience très utilisé pour l'étude des agents anti-goutteux. L'extrapolation à l'homme des résultats obtenus chez le poulet est possible pour certains médicaments anti-goutteux. Nous avons choisi, parmi les nombreux médicaments antigoutteux utilisés en thérapeutique, la Benzbromarone, produit com iercialisé par LABAZ sous la dénomination DESURIC. 1. Principe : Réf. DINTRANS J. : Les propriétés uricotéliques de la Benziodarone dans la gputte provoquée dés volailles. Thèse de Doctorat en Médecine Vétérinaire, 1967,Lyon. L'hyperuricémie ou n goutte expérimentale" est provoquée chez'le poulet par un régime alimentaire fortement hyperprotidique. La ration quotidienne est constituée de 115 grammes de viande de boeuf dégraissée et hachée, enrobée de 45 grammes de farine de mals blutée. 2. Matériel et méthode Deux groupes de 9 poulets ont été constitues. Les poulets du premier groupe ont reçu, pour alimentation, la ration carnée à laquelle on a intimement ajouté chaque jour, en mélangeant bien, 60 mg de Benzbromarone. Les poulets du deuxième groupe ont reçu une même ration quotidienne à laquelle ont été incorporés 60 mg du composé selon t'invention, préparé selon l'exemple I. Des dosages sanguins d'acide urique ont été effectués chez tous les poulets: - avant la mise en route du régime carné, puis - au bout de sept jours de régime carné additionné des substances à l'essai. Le sang a été prélevé chaque fois par ponction cardiaque directe ; pour doser l'acide urique dans le sang, on a fait appel à la méthode à l'uricase (sur analyseur fragmentaire Greiner). 3. Résultats TABLEAU I Taux sanguin d'acide urique (en mg/l) mesuré chez les deux groupes de poulets en expérience. Uricémie moyenne (mg/O Nombre de Uricémie après Groupes poulets Uricémie avant 7 jours de régime et avant 7 jours de traitement Groupe I Benzbromarone 9 58 274 Groupe Il Invention 9 50 188 Les résultats obtenus ont fait l'objet d'une interprétation statistique visant à établir - l'efficacité du régime carné pour augmenter l'uricémie des poulets ; - la supériorité éventuelle de l'un des deux traitements sur l'autre. L'augmentation de l'uricémie sous l'effet du régime carné est hautement significative dans les deux groupes de poulets (p Après 7 jours de régime, les poulets traités par le produit I ont une uricémie inférieure à celle des poulets traités par la Benzbromarone. La différence est significative (p Conclusion. Dans la goutte expérimentale chez le poulet, l'hyperuri cémie provoquée par un régime alimentaire est significativement moins élevée chez des poulets traités par le produit selon l'invention que chez des poulets traités par la Benzbromarone à la même dose et dans les mêmes conditions. EXEMPLE III Activité anti-xanthine oxydase Réf. D BASTIDE, P. BASTIDE, Clinica Chimica Acta, 1969, 25, 127-131. D'après KALCKAR (H.M.) : J. Biol. Chem., 1947, 167, 429 et BRAY (R.C.) dans BOYER (P.D.), LARDY (H.), MYRBACK (K.) : The Enzymes, Acad. Press N.Y. 1963, 7, page 533. La xanthine-oxydase est 11 enzyme qui transforme au cours du stade final du catabolisme des purines la xanthine ou l'hypoxanthine en acide urique. Il est souhaitable qu'un produit qui augmente l'élimination urinaire de l'acide urique soit doué aussi d'une activité anti-xanthine-oxydase. Nous avons mesuré l'effet du produit selon l'invention sur la xanthine-oxydase du foie de rat in vitro. Nous l'avons comparé à celui de la Benzbromarone. Ce produit possède en effet une activité anti-xanthine-oxydase in vitro. Nous avons utilisé la méthode décrite par P. BASTIDE pour mesurer l'activité de la xanthine-oxydase d'une préparation enzymatique obtenue à partir d'un homogénat de foie de rat (de 120140 g, âgé de six semaines environ). Les homogénats sont effectués au 1/5, à l'appareil de Potter, dans un tampon phosphate monopotassique 0,05 M, de pH 7,5, contenant 10 immoles d'E D T A Na2 par litre, maintenu à +50C. Ils sont centrifugés à +550C durant 30 minutes à 24.000 g. Le surnageant représente la préparation enzymatique utilisée. Technique enzymologique La technique mise en oeuvre est une adaptation de celle de KALCKAR. L'acide urique formé par oxydation enzymatique en aérobiose de la xanthine est décelé par l'élévation de la densité optique à 290 nm. On laisse incuber à 350C : 1,5 mt de tampon (phosphate monopotassique 0,05 M - soude 0,1 N) de pH 7,5, 0,5 mt de préparation enzymatique, 1,0 mE de xanthine 0,15 M. On porte dans la cuve de quartz d'un spectrophotomètre sous 1 cm d'épaisseur et on effectue la lecture à 290 nm. On réalise l'étalonnage à l'aide d'une solution d'acide urique 0,15 M. Les produits à étudier sont introduits en solution dans le D.M.F. à diverses concentrations, sous un volume de 50 t. On prépare chaque fois un blanc contenant 50 pt de D.M.F. (diméthylformamide). Le pourcentage d'inhibition de l'activité de la xanthine oxydasè par les produits à étudier est inversement proportionnel à llaugmentation de la densité optique à 290 nm de la préparation à tester, rapportée à celle d'un témoin ne contenant pas de xanthine. Résultats. Deux séries de mesures ont été effectuées avec des préparations enzymatiques provenant de foies d'animaux différents. Les pourcentages d'inhibition observés sont consignés dans le tableau ci-dessous (tableau II). TABLEAU II Substances Concentration % d'inhibition étudiées Première série Deuxième série 1,5 x 10-5 M 11 30 Composé de 3,0 x 10 M 21 52 l'invention 6,0 x 10 M 45 61 3,0 x 10 M 100 100 3,0 x 10 M 100 100 3,0 x 10 5 M 12 28 Benzbromarone -4 3,0 x 10 M 80 85 Conclusion. Dans les conditions expérimentales décrites ci-dessus, le composé de l'invention montre une activité anti-xanthine-oxydase importante. Cette activité est significativement plus élevée que celle de la Benzbromarone dans les mêmes conditions. EXEMPLE IV Estimation de la toxicité du composé de l'invention chez la souris et le rat La toxicité aiguë du composé selon l'invention a été étudiée par voie orale chez la souris des deux sexes, de race Swiss, pesant entre 18 et 20 g. Chez la souris femelle, la DL 50 est de 1167 mg/kg ; chez la souris mâle la DL 50 est de 1070 mg/kg. La toxicité aiguë du composé de l'invention a été étudiée par vote orale, chez le rat Sprague-Dawley. Chez le rat mâle, la DL 0 est > 2 g/kg. Chez le rat femelle, la DL 50 est de 1051 mg/kg. EXEMPLE V On peut utiliser en thérapeutique humaine des comprimés sécables présentant avantageusement la composition suivante - (dibromo-3,5 hydroxy-4-benzoyl)-2 chromone 100 mg - excipients q.s. pour 1 comprimé. Les doses quotidiennes sont de 50 à 500 mg. EXEMPLE VI On peut utiliser en thérapeutique humaine des gélules présentant avantageusement la composition suivante - (dibromo-3,5 hydroxy-4 benzoyl)-2 chromone 100 mg - excipients q.s. pour 1 gélule. Les doses quotidiennes sont avantageusement de 200 à 600 mg. Bien éntendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples donnés ci-dessus, elle est susceptible de nombreuses variantes, accessibles à l'homme de l'art, suivant les applications envisa géies, sans s'écarter pour cela de l'esprit de l'invention. -REVENDICATIONS 1. Nouveau composé caractérisé en ce qu'il possède la formule suivante 2. Procédé de préparation du composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir sur le para-hydroxy benzoyl-2 chromone, le brome au sein d'un solvant polaire tel que l'acide acétique, la température choisie étant avantageusement la température ambiante. 3. Médicaments, caractérisés en ce qu'ils contiennent à titre de substance active le (dibromo-3,5 hydroxy-4 benzoyl)-2 chromone selon la revendication 1. 4. Médicaments selon la revendication 3, caractérisés en qu'ils sont destinés au traitement des hyperuricémies. 5. Médicaments selon la revendication 3 ou 4, caractérisés en ce qu'ils sont sous la forme de comprimés sécables ou de gélules, la posologie étant avantageusement de 50 à 500 mg par jour.