Brevet FR2422664A1 — publié le 19791109

La présente invention concerne des dérivés de la tétrahydroalstonine, leurs sels d'addition aux acides pharmaceutiquement acceptables, leur préparation et leur application en thérapeutique. La tétrahydroalstonine, produit d'origine naturelle, isolable par exemple du Catharanthus lanceus et du Rauwolfia vomitoria, est connue. Son activité biologique a été décrite dans le brevet français 1 397 537 et dans le brevet belge 834 585. Les dérivés de la présente demande répondent a la formule suivante dans laquelle soit R1 = H et R2 est un radical hydroxyle, un radical alcoxy droit ou ramifie de 2 à 6 atomes de carbone et pouvant porter coinine substituants des halogènes, un radical cycloalkyl-alcoxy, un radical cycloalcoxy, un radical alcoxy portant un grouse pipéridino, morpholino, ipérazino ou pyrrolidino, un radical dialkylaino-alcoxy, un radical amino, un radical alkylamino, un radical dialkylamino, un radical cycloalkylamino ou un radical OMe(Me=métal alcalin ou alcalinoterreux), . soit R1 est un radical hydroxyalkyle, alkyle ou alcoxycarbonyle et R2 est le radical méthoxycarbonyle, Les radicaux alkyle et alcoxy ont de 1 à 6 atomes de carbone, les radicaux cycloalkyle et cycloalcoxy de 3 à 6 atomes de carbone. es sels d'addition des composés (I) aux acides pharmaceutiquement acceptables font partie de l'invention. Selon l'invention on prépare l'acide I (R1=H, R2=OH) à partir de la tétrahydroalstonine (R1=H, R2=CH3) ou THA par saponification. On peut obtenir les esters (I) selon des méthodes classiques, notam induit soit par estérification directe de l'acide, soit par réaction entre le chlorure d'acide et l'alcool R2E ou un de ses sels alcalins, soit par transestérification de la tétrahydroalstonine. On obtient les amides (i) à partir de l'acide (I) (R1=H, R2=OH) ou de l'un de ses dérivés fonctionnels par amidification classique. Les composés (I) portant un radical R1&num; E sont obtenus à partir de la tétrahydroalstonine par des réactions classiques - formylation de la tétrahydroalstonine, - réaction de la THA avec un halogènure d'alkyle, - réaction de la THA avec un halogènure d'alcoxycarbonyle. Les composés (I) sont actifs en thérapeutique, dans le domaine du système nerveux centrals comme antianoxiques et comme psychotropes, en particulier comme antidépresseurs. Les exemples suivants illustrent la présente invention. Les analyses et spectres IR, R"4N, UV et de masse ont confirmé la structure des composés. THA = tétrahydroalstonine. Exemple 1 Acide didéhydro-16,17 méthyl-19&alpha; oxayohimbane- carboxylique-16 et son chlorhydrate. [R1=H, R2=OH] On introduit 30 g de THA dans une solution aqueuse de potasse éthanolique (21 g de KOH, 600 ml d'eau et 600 ml d'éthanol). On porte à reflux pendant 2,5 h. On élimine l'éthanol par distillation sous pression réduite jusqu'à obtention d'un résidu formant environ le cinquième du volume initial. On dissout le résidu dans 1 litre d'eau, on neutralise la sclution à laide d'acide chlorhydrique 6N jusqu'à pH=7 et on extrait 6 par 500 ml de chloroforme. Les phases chloroformiques obtenues par décantation sont réunies, lavées à l'eau puis séchéees sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration, on élimine le chloroforme, au bain-marie à 400C sous pression réduite On recueille ainsi 25 g de l'acide (I). On prépare le chlorhydrate de l'acide en dissolvant ce dernier dans du chloroforme et en faisant passer un courant de gaz chlorhydrique dans cette solution. F=225 C avec décomposition, [&alpha;]# = -26,6 (c=0,6 ; EtOH). Exemple 2 Ester isobutylique de l'acide didéhydro-16,17- méthyl-19&alpha;oxayohimbane-carboxylique-16 et son chlorhydrate. On dissout 9 g de l'acide de l'exemple 1 dans 300 ml de chloroforme anhydre et exempt d'alcool. On ajoute en une seule fois 2,35 ml de pyridine fraîchement distil ee sur potasse. On ajoute 2,5 ml de chlorure d'oxalyle en solution dans 10 ml de chloroforme anhydre. On abandonne ensuite le mélange réactionnel 3 heures tout en agi- tant et à la température ambiante. . a solution du chlorure d'acide ainsi formée on ajoute 30 ml d'alcool isobutylique fraîchement distillé. L'agitation à la température ambiante est maintenue pendant une heure On ajoute 300 ml d'eau distillée et on évapore presque a sec. On ajoute alors au résidu huileux 100Q ml d'eau, on alcalinise rar ne solution d'ammoniaque à 808 et on extrait quatre fois par 400 ml de chloroforme. Les phases chloroformiques obtenues par décantation sont réunies, lavées à l'eau puis séchées sur sulfate de sodium anhydre, Après filtration on élimine le chloroforme, au bain-marie à 40 C sous pression réduite. Le résidu obtenu est solubilisé dans 300 ml de chloroforme et agité à 50 C eu présence de 2 g de noir végétal activé. Après filtration on évapore à sec et on reprend dans le minimum d'isobutanol et l'on ajoute une solution anhydre d'éther chlorhydrique jusqu'à pH 1. On essore les cristaux formés. On recueille ainsi 6 g du chlorhydrate de l'ester isobutylique. F=250 C avec décomposition, [&alpha;]# = -3,8 (c=1 ; CHCl3). Exemple 3 Ester morpholino-éthylique de l'acide didéhydro-16,17 méthyl-19&num;oxayohimbane -carboxylique-16 et son chlor hydrate. On dissout 10,56 g de THA dans 400 ml de benzène anhydre distillé sur chlorure de calcium. On ajoute 690 mg de sodium métallique préalablement lavé dans du benzène anhydre tout en agitant et sous argon. On laisse réagir le mélange réactionnel une dizaine de minutes et on ajoute,en 15 minutes, 4,3 g de morpholino-éthanol préalablement dissous dans 20 ml de benzène anhydre.On porte au reflux pendant 5h30 sous argon , en présence de tamis moléulaire. Après avoir enlevé l'excés de sodium par filtration on ajoute 1 litre d'eau et on extrait avec du benzène. On lave avec 100 ml d'eau, seche sur sulfate de sodium puis évapore à sec. On solubilise le produit obtenu dans du méthanol puis on ajoute de l'éther chlorhydrique, Le chlorhydrate cristallise. F=305 C , pi D25 = -12,6 (c=o,54;H2G) Exemple 4 Cyclopropylamide de l'acide didéhydro-16,17 méthyl 19&alpha;oxayohimbane -carboxylique-16 et son chlorhydra te. On dissout 10,Sgdel"acide de l'exemple 1 dans 350 ml de chloroforme anhydre et exempt d'alcool. On ajoute en une seule fois 2!8 ml de pyridine fralchement distillée sur potasse puis on ajoute 3 ml de chlorure d'oxalyle préalablement dissous dans 12 ml de chloroforme anhydre. On abandonne ensuite le mélange réactionnel 3 heures à la tempéra- ture ambiante tout en agitant. A la solution de chlorure d'acide ainsi formée on ajoute 20 ml de cyclopropylamine en 15 minutes et on maintient l'agitation encore 30 minutes après la fin de l'addition. On ajoute 1 litre d'eau. On décante la couche organique et on extrait 3 fois la phase aqueuse restante par 500 ml de chloroforme. Les quatres phases organiques sont réunies, lavées à l'eau puis séchées sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration on élimine le chloroforme au bain-marie à 400C sous pression réduite. On dissout le résidu dans le minimum de méthanol (environ 20 ml) et on ajoute de l'éther chlorhydrique anhydre jusqu'à pH=l. On essore le précipité formé et on le sèche. On obtient le chlorhydrate de l'amide. F=225-228 C, [&alpha;]# = -59,7 (c=1 ; DMF). Exemple 5 Ester méthylique de 1'acide hydroxyméthyl-l didéhy dro-16,17 méthyl-19&alpha;oxayohimbane -carboxylique-16. [R1=CH2OH, R2=OCH3] A 5g de THA solubilisés dans 50 ml de chloroforme, on ajoute 200 ml d'une solution aqueuse d'aldéhyde formique à 30% en présence d'l ml d'acide acétique. On tiédit à 500C tout en agitant pendant 2 heures, puis on abandonne le mélange réactionnel à la température ambiante pendant environ 15 h. On verse environ 300 ml d'eau distillee sur le mélange réactionnel. On extrait 4 fois au chlorure de méthylène, puis on lave à l'eau ; on sèche sur sulfate de sodium puis on evapore à sec. On chromatographie le mélange sur une colonne de gel de silice à l'aide de chloroforme pur, puis à l'aide d'un mélange chloroforme/ méthanol (99/1) on élue 3 g du produit recherché. On fait cristalliser le produit dans un mélange chlorure de méthy1ène/éther après traitement au noir végétal. r - 25 F=171 C, [&alpha;]# = -186 (c=1 ; CHCl3) Exemple 6 Ester méthylique de l'acide méthoxycarbonyl-1 didéhy dro-16,17 méthyl-19&alpha;oxayohimbane-carboxylique-16. [R1=COOCH3, R2=OCH3] A 14 g de tétrahydroalstonine solubilisés dans 120 ml de diméthyl sulfoxyde,on ajoute 3,84 g d'hydrure de sodium tout en agitant et sous argon On ajoute ensuite 7,52 g de chloroformiate de méthyle à l'aide d'une ampoule à brome, tout en agitant et en refroidissant à une tempéra- ture proche de + 5 C. On laisse le mélange réactionnel sous agitation pendant 1h et on ajoute lentement de l'eau (environ 1 litre). On extrait à l'éther 4 fois, on lave à l'eau, on sèche sur sulfate de sodium puis on évapore à sec. Le produit cristallise dans un mélange chlorure de méthylène / méthanol (1/1). F=183 C, [&alpha;]# = -276,8 (c=1,17 ; CHCl3) Les composés de l'invention préparés à titre d'exemples sont représentés dans le tableau suivant (I). SC1 = chlorhydrate. TABLEAU I Composé R R2 F r DC 25 n0 1 ( C) L D HC1 1 (exil) H OH 225 HCI 2 H OC H 260 - 32,7 c 5 c = 0,835 DMF HCl - 20,2 3 H OCH2-CF3 268 c = 1,025 EtOH 4 OCfl c - HCl - 3,8 (ex2) H Oca2C 2 CH3 250 c = 1 CHC13 HC1 HCI 21,6 5 H OCHZ - 268 c=1,39 EtOH H H HCl - 15,7 7 O(CH2)2 305 c =1,5 EtOH 8 (ex3) H O (CH2) L-N - 245 245 - c 0,54 H20 H HC1 - 31,5 10 H C H 230 c = 1 EtOH H I ~ ~ . H 225-228 H N 225-2Z8 c = 1 TABLEAU I (suite) Composé n R1 R2 F ( C) [&alpha;]# HCl - 131,8 13 H N(CH3)2 280 c = 0,92 EtOH Base - 186 14 (ex5) CH2OH OCH3 171 c = 1 CHCl3 - 171,8 15 (ex6) CH3 OCH3 183 c = 1,06 CHCl3 Base - 276,8 CHCl3 16 COOCH3 OCH3 174 c = 1,17 Les composés de l'invention ont été testés en pharmacologie. La toxicité a été déterminée par voie intrapéritonéle, chez la souris. Elle est de l'ordre de 200 à 800 mg/kg. Anoxie hypobare Des souris de souche CDI sont maintenues dans une atmosphère appauvrie en oxygène, par réalisation d'un vide partiel (190mm de mercure correspondant à 5,25% d'oxygène). Le temps de survie des animaux est noté. Ce temps est augmenté par les agents capables de favoriser l'oxygénation tissulaire et en particulier cérébrale. Les composés étudiés sont administrés, à plusieurs doses, par voie intrapéritonéale, 10 minutes avant l'essai. Les pourcentages d'augmentation du temps de survie par rapport aux valeurs obtenues chez les animaux témoins sont calculés. La dose active moyenne (DAM), dose qui augmente le temps de survie de 100% est déterminée graphiquement. La DAM des composés de l'invention varie de 10 à 60 mg/kg. Action sur la durée du" sommeil" induit par le 4-hydroxy-butyrate de sodium Cette action a été déterminée par l'influence des composés sur la durée du "sommeil" induit par le 4-hydroxy-butyrate de sodium (G H B) chez le rat curarisé. Les animaux utilisés sont des rats mâles de souche Charles River de 200 - 20 g. Les animaux curarisés par l'alloférine à raison de 1 mg/kg par voie i.p. sont placés sous respiration artificielle à l'aide d'un masque appliqué sur le museau (fréquence respiratoire 50/minute : volume respiratoire : 14 cc). L'oesophage est préalablement ligaturé afin d'éviter l'entrée de l'air dans l'estomac. Des électrodes corticales front-pariétales et occipitales permettent l'enregistrement de l'activité électrocorticographique sur un polygraph Grass modèle 79 P à la vitesse de 6 mm/sec. La préparation de l'animal est effectuée sous anesthésie locale (xylocalne à 2%). Les rats sont maintenus tout au long de l'expérience à température constante (3705C). Dix minutes après la fin de la préparation du rat, une dose de 200 mg/kg de 4-hydroxy-butyrate de Na est injectée par voie intraveineuse au niveau de la queue. Des doses de 10 et 30 mg/kg des composés à étudier sont administrées par voie intrapéritonéale 3 minutes après l'administration du 4hydroxy-butyrate de sodium. L'évaluation des traces s'effectue par période de 15 minutes durant 75 minutes après l'injection de "G H B". Durant cette période d'analyse, la durée totale du "sommeil" est déterminée. Une série de 15 témoins permet de préciser la durée du "sommeil G H B". L'analyse statistique des résultats est réalisée à l'aide du test U de Mann-Whitney. nes compensés de l'invention se sont révélés être actifs dans ce test et diminuent la durée du sommeil induit par le G H B de 20 à 40% par rapport aux témoins. L'étude pharmacologique des composés de l'invention montre qu'ils sont actifs dans I'éreuve d'anoxie hypobare chez la souris tout en n'étant que peu toxiques et qu'ils exercent une action significative éveillante dans le test du "sommeil" induit par le 4-hydroxybutyrate de sodium. Les composés de l'invention, possédant à la fois une activité antianoxique et une activité psychotrope, peuvent être utilisés en thérapeutique pour le traitement des troubles de la vigilance, en particulier pour lutter contre les troubles du comportement imputables à des dommages vasculaires cérébraux et à la sclérose cérébrale en gériatrie, ainsi que pour le traitement des absences dues à des traumatismes crâniens, et le traitement des états dépressifs. L'invention comprend par conséquent, toutes compositions pharmaceutiques renfermant les composés et/ou leurs sels comme principes actifs, en association avec tous excipients appropriés à leur administration, en particulier par voie orale ou parentérale. Les voies d'administration peuvent être les voies orale et parentérale. La posologie quotidienne peut aller de 10 à 200 mg Revendications 1. Composés répondant à la formule (I > dans laquelle soit R1 = H et R2 est un radical hydroxyle, un radical alcoxy droit ou ramifié de 2 à 6 atomes de carbone et oouvant porter comme substituants des halogènes, un radical cycloalkyl-alcoxy, un radical cycloalcoxy, un radical alcoxy portant un groupe pipéridino, morpholino, pipérazino ou pyrrolidino, un radical dialkylamino-alcoxy, un radical amino, un radical alkylamino, un radical dialkylamino, un radical cycloalkylamino, ou un radical OMe (Me = métal alcalin ou alcalinoterreux), . soit R1 est un radical hydroxyalkyle, alkyle ou alcoxycarbonyle et R2 est le radical méthoxycarbonyle, les radicaux alkyle ou alcoxy ayant de 1 à 6 atomes de carbone, les radicaux cycloalkyle et cycloaicoxy de 3 à 6 atomes de carbone, ainsi que leurs sels d'addition aux acides pharmaceutiquement acceptables 2. Procédé de préparation des composés selon la revendication 1, procédé caractérisé en ce qu'on obtient l'acide (I) gR1=H, R2= OH] par saponification de la tétrahydroalstonine, on obtient les esters (I) selon des méthodes classiques notamment par estérification de l'acide ou d'un de ses dérivés fonctionnels ou par transestérification de la tétrahydroalstonine, on obtient les amides (I) par amidification de l'acide ou d'un de ses drivés fonctionnels, on obtient les dérivés (I) portant un substituant en position 1, par formylation de la tetrahydroalstonine ou par réaction de la tétrahydroalstonine avec un ha logène d'alkyle ou d'alcoxycarbonyle. 3. Médicament caractérisé en ce qu'il contient un composé tel que spécifié dans la revendication 1.