Brevet FR2420973A1 — publié le 19791026

La présente invention a trait à une nouvelle composition pharmaceutique à action anti-agrégeante plaquettaire, vaso-dilatatrice et anti-oxydante. La présente invention concerne une composition qui ne tend pas à se substituer aux mécanismes de défense naturels mais, bien au contraire, à s'y ajouter. I1 est évident, en effet, que certains organismes risquent, par exemple après un usage prolongé des principes actifs classiques, de perdre totalement leurs moyens de défense naturels. Pour cette raison, la présente inven- tion a recours à des molécules présentant à la fois des radicaux à action anti-agrégeante plaquettaire et vaso-dilatatrice coronarienne et à action anti-oxydante. L'expérience a montré, en effet, que la colncidence de ces deux types de radicaux présentait un effet nouveau imprévisible. Les molécules conformes à la présente invention renferment de préférence, comme radicaux anti-agrégeants et vaso-dilatateurs, les pyrimido-pyrimidines et en particulier le dipyridamole et leurs substitués et, comme radicaux anti-oxydants, le tocol ou ses divers dérivés,les tocophérols et leurs substitués. Il semble, selon l'état actuel de la technique, que la synthèse intra-pariétale des lipides soudanophiles par les cellules musculaires lisses soft induite par divers facteurs, dont le plus important est l'anoxémie cellulaire, génératrice d'acidose et de troubles enzymatiques. Ceci serait donc dû essentiellement à des troubles du métabolisme oxydant des inclusions intra-cellulaires, mitochondries en particulier, qui aboutiraient à la dégénérescence graisseuse de cellules pariétales et contribueraient à la formation de la plaque athéromateuse et il semble qu'au point de vue physio-pathologique, la participation des plaquettes à ces phénomènes soit généralement admise. Expérimentalement, II injection de substances agrégeantes, comme par exemple 1'ADP, entraîne la formation de thromboses et, cliniquement, on a constaté qu'auprès mort subite existaient des thrombi fibrino plaquettaires dans la circulation coronarienne, ce qui met en évidence un apport actif plaquettaire aux artères et veines coronaires. L'utilisation d'anti-coagulants dans la prévention d1acci- dents thrombo-emboliques a été décevante. En effet, ces accidents se retrouvent chez les malades dont la coagulabilité sanguine est ramenée à des degrés très inférieurs à la normale. La recherche de thérapeutiquesanti-agrégean- tes plaquettaires trouvait dès lors tout son intérêt. Plusieurs substances réputées douées de propriétés antiagrégeantes plaquettaires tel l'Aspirine, le Dipyridamole, le Clofibrate, certains anti-inflammatoires non stéroldiens et antiuricémiques, agissent à des degrés divers et surtout à des stades différents de l'agrégation plaquettaire. Physiologiquement, les phénomènes d'agrégation et d'antiagrégation plaquettaire endogène sont constants sous l'action d'une enzyme, la thromboxane synthétase plaquettaire; la Prostaglandine G2 est transformée en une substance, la thromboxane A2, dont la demi-vie est brève et évaluée à environ 30 secondes. La thromboxane A2, douée d'une puissante action vaso-constrictrice et agrégeante plaquettaire, est dégradée en thrombo xane B2 inactive. Parallèlement, les parois vasculaires libèrent une enzyme, la Prostacycline synthétase, qui transforme la Prostaglandine G2 en Prostacycline ou Prostaglandine GX, dont la durée de vie est également brève. La Prostacycline ainsi formée est douée de propriétés vasodilatatrices et anti-agrégeantes plaquettaires, protégeant les vaisseaux contre l'adhésion des plaquettes. L'action anti-agrégeante de 1'Aspirine et divers produits, en inhibant la formation des endoperoxydes, inhibent tant la prostacycline dont l'effet est recherché que la thromboxane A2 dont effet est indésirable. Lsun des buts de cette invention est donc de protéger la synthèse de la prostacycline. Or l'étude de ce mécanisme physiologique cellulaire permet de penser que certains produits anti-oxydants pourraient être utilisés dans ce but. Biologiquement, les phénomènes d'oxydation sont essentiels au niveau cellulaire. Les lipides polyinsaturés jouent un rôle prépondérant dans la composition des membranes cellulaires, du réticulum endoplasmique et des mitochondries, qui contiennent l'ensemble des transporteurs de la chaste respiratoire. La peroxydation constitue le processus d'oxydation qui détériore les lipides insaturés, les radicaux libres ainsi produits entrainent des lésions des membranes, des éléments intracellulaires, des protéines et des enzymes qui subissent des scissions ou des polymérisations. En résumé, il existe au niveau cellulaire dans la plupart des tissus. des anti-oxydants naturels qui veillent à l'équilibre cellulaire, établi entre la lipoperoxydation et ltantioxydation. I1 pouvait donc apparattre logique de faire appel à des molécules du type tocol ou dérivés, dont les propriétés antioxydantes sont reconnues. Ces différents corps ont notamment la propriété de pouvoir pénétrer dans les cellules et participer à la régulation de ces processus. CXest le cas notamment des tocophérols Mais, de façon surprenante, on a constaté que de tels radicaux, tout en inhibant la peroxydation des lipides et en protégeant la prostacycline synthétase, n'entravent pas la synthèse de la prostacycline, tout en permettant une activité anti-agrégeante plaquettaire, agissant ainsi simultanément tant au niveau de la lipidogénèse cellulaire qu'au niveau de l'agrégation plaquettaire. En conséquence, les molécules prévues suivant l'invention dans le but recherché renferment, d'une part, des radicaux à ca ractère anti-oxydant et en particulier le tocol, ses dérivés et notamment les tocophérols et leurs substitués et, d'autre part, des radicaux à caractère anti-agrégeant plaquettaire et vaso-dilatateur du type pyrimido-pyrimidine et notamment le dipyridamole et leurs substitués (Voir le tableau annexé de formules développées et axasses moléculaires). En particulier, conformément à la présente invention, la composition peut être constituée par des sels de tocol ou de ses dérivés et substitués ou de pyrimido-pyrimidine et de leurs dérivés ou substitués; de préférence, ces esters-sels seront ceux d'un di-acide organique tel que, par exemple, l'acide succinique, La molécule diacide peut être estérifiée en deux positions, d'une part avec la pyrimido-pyrimidine ou équivalentsdtautre part avec le tocol ou équivalents. Comme, par ailleurs, le dipyriaamole et ses dérivés présentent généralement quatre groupements hydroxyles, il est possible de relier une molécule de ce type à uge, deux, trois ou quatre molécules de tocol ou équivalents, par l'intermédiaire d'autant de molécules de di-acide, Pour obtenir de tels corps, on traite généralement le tocol ou équivalents avec l'anhydride de l'acide, par exemple dans la pyrimidine, ce qui bloque l'un des deux groupements acides. On fait ensuite réagir le mono-ester ainsi obtenu avec la pyrimido-pyrimidine ou équivalents. Selon les quantités de réactif mises en présence du radical acide non estérifié, des molécules dessers réagiront avec un, deux, trois ou quatre groupements hydroxyles. Ceci permet en particulier, selon les nécessités et les cas à traiter, de recourir à des molécules dans lesquelles le roule anti-oxydant est plus ou moins important par rapport au rôle vaso-dilatateur et anti-agrégeant plaquettaire. Sans sortir du cadre de l'invention, on peut évidemment utiliser des acides organiques à plus de deux groupements acides et des molécules d'un ou plusieurs types pourvu qu'elles renferment individuellement ou ensemble les memes radicaux. Ainsi, selon un des modes préférés de réalisation de lin- vention, la composition se présente sous forme de gélules correspondant à 75 à 100 mg de pyrimido-pyrimidine et 20 à 200 mg de tocol. La posologie est généralement de 1 à 10 gélules par jour durant le traitement. La composition selon l'invention est administrable par voie buccale ou parentérale sous forme de solution, comprimés, gélules, ampoules injectables, suppositoires. Les indications de la composition se situent aux plans - vasculaire périphérique : angor - coronarites - séquelles din- farctus du myocarde - ischémies myocardiques - artérites maladie thrombo-embolique artérielle, veineuse et capillaire acrosyndromes - troubles trophiques - athérosclérose. - central : ramollissement cérébral - ictus - hémiplégie - insuf fisance cérébrale progressive et accidents vasculaires céré braux en général. - otorhinolaryngologique : vertiges - troubles co6hléo-vesttbu- laires-surdités brusques - hypoacousie - sclérosesetc. - ophtalmologique : rétinopathies d'origine vasculaire et diabé tique. En fait, on aura recours au radical dipyridamole et à des radicaux du type vitamine E, c'est-à-dire un ester dt -to- cophérol, mais selon la présente invention on utilisera de préférence un ester de di-acide et notamment de l'acide succinique. En ce qui concerne le radical dipyridamole, sur le plan de la pharmacocinétique, il s'élimine généralement dans la bile sous une forme sulfo et glycurono conjuguée. Sa demi-vie est d'environ 2 heures. Sur le plan pharmacologique, il inhibe l'agrégation primaire et le "release", mais ne diminue pas ltadhésivité (au verre, au collagène et à 1ADP). ce ce qui concerne les affections cardiaques, l'on considère l'extension actuelle de l'infarctus du myocarde sous tant gle d'un déséquilibre entre les acides gras insaturés et la ration alimentaire en anti-oxydants. Le radical tocophérol, grâce à ses propriétés anti-oxydantes, son action fibrinolytique et sa propriété d'empêcher la coagulation intra-vasculaire anormale, est un médicament intéressant pour le traitement des affections cardiovasculaires. Le dipyridamole augmente le débit des organes coronaires par diminution des résistances vasculaires coronariennes, il augmente la consommation myocardique d'oxygène avec une diminution du travail ventriculaire. Cette propriété paradoxale pourrait être expliquée par une activité métabolique cellulaire oxydo réductrice de ce principe actif. En fait, on savait déjà que le tocophérol et le dipyridamole possèdent des propriétés pharmacologiques agissant favorablement sur le système cardiovasculaire. Par contre, on a découvert que d'une façon inattendue la composition pharmaceutique suivant la présente invention présente une action importante sur les différents stades de l'agrégation plaquettaire ainsi que sur la dilatation coronarienne et qu'il existe une véritable synergie des propriétés des principes actifs constitutifs de la composition, aboutissant à un renforcement de leur action et à une extension de leur activité thérapeutique sur une plus large part des différents stades de l'agrégation plaquettaire et des altérations pariétales vasculaires. L'activité thérapeutique de cette nouvelle composition, en particulier sur l'agrégation plaquettaire, s'explique notamment par l'action protectrice de la vitamine E vis-à-vis de la prostacycline synthétase et la synthèse de prostacycline endogène, un des plus puissants anti-agrégeants plaquettaires connus. ESSAIS PHARMACOLOGIQUES Les essais pharmacologiques des composés selon la présente invention ont porté sur les points suivants donnés à titre d'exemple pour le succinate de dipyridamole et dt-tocophérol. 1 - Augmentation de l'inhibition de l'agrégation plaquettaire par rapport à la fraction pyrido-pyrimidique et la fraction tocophérol prises séparément. 2 - Mise en évidence d'une augmentation de l'activité anti-agré geante en fonction de la concentration. Inducteur d'agrégation Succinate de dipyridamole et d'&alpha;- ADP Arachidonate de tocophérol dans sérum physiol. #T sodium #T ( og/ml) Pente (*) (%) Pente (%) (*) 0 22 60 18 97 50 17 46 6 6 250 16 36 . 2 2 500 9 25 1 1 L'inducteur est utilisé à la dose minimale provoquant le maximum d'agrégation. MODE OPERATOIRE On introduit 0,45 ml de plasma riche en plaquettes dans une cuvette que l'on place dans un agrégomètre muni d'un dispositif enregistreur du coefficient de transmission optique portant le coefficient T en % en redonnées le temps t en minutes en abscisses. On ajuste la transmission, puis on introduit le produit en solution dans du sérum physiologique. On attend une minute, puis on ajoute un même volume d'inducteur d'agrégation et on mesure à nouveau la transmission. Plus l'effet anti-agrégeant plaquettaire est grand, plus la transmission est faible. Le tracé des courbes de transmission (voir figure unique) obtenues en utilisant l'adrénaline comme inducteur montre deux phases dont la première correspond au moment où l'inducteur d'agrégation est ajouté et la seconde à l'action de 1ADP endogène. Ces courbes montrent également laugmentation de effet anti agrégeant en fonction de la concentration. Les courbes énumérées ci-dessous correspondent à des doses croissantes de succinate de dipyridamole et d'&alpha;-tocophérol (ou l'équivalent de chaque fraction). Courbe 1 = O y/ml (témoin) " 2 = 50 y/ml 3 = 100 y/ml 4 4 = oo y/ml Les courbes mentionnées ci-après correspondent à des doses croissantes de mélange de dipyridamole et dta-tocophérol on leur équivalent Courbe 3' = 100 y/ml 4' =300 &gamma;/ml L'agrégation est induite par adjonction d'adrénaline (concentration finale 100 y/ml) au bout de la 1ère minute. Un certain nombre de malades ont été traités à titre exrimental, en clinique, par la composition suivant l'invention et les résultats de ces essais sont indiqués ci-après OBSERVATION N 1 Malade de 57 ans, présentant des crises angineuses typiques en cas d'effort. Traitement par le dipyridamole 3 doses de 75 mg toutes les 24 heures l'adhésivité au verre avant traitement en ffi 34 après traitement " 27 L'agrégation plaquettaire in vitro appréciée par la méthode turbidimétrique de Born donne les résultats suivants déviation optique maximale (DOM) avant traitement : 46 après traitement : 32 différence : 14 déviation bptique en 1 minute(D0)avant traitement : 31 après traitement : 15 différence : 16 indice d'agrégation DO/60 avant traitement : 0,51 après traitement : 0,23 durée de vie des plaquettes avant traitement : 5 j1oXrs après traitement : 7 jours Ce même malade est soumis, quelques mois après cessation de l'administration de dipyridamole,à un traitement au succinate de dipyridamole et d' -tocophérol, dans lequel le-rapport radi caux dipyridamole/radicaux a-tocophérol est de 70/30. Le traitement s'effectue à raison de trois doses toutes les 24 heures, correspondant chacune sensiblement à jO mg de radicaux dipyridamole et 30 mg de radicaux -tocophérol. L'adhésivité plaquettaire est ramenée par le traitement de 36 à 16 *. L'agrégation plaquettaire in vitro (selon la méthode de Born) donne DOM avant traitement : 49 après traitement : 12 différence : 37 DO/1 minute avant traitement : 30 après traitement : 9 différence : 21 indice d'agrégation D0/60 avant traitement : 0,50 après traitement : 0,15 durée de vie des plaquettes avant traitement : 5 jours 1/2 après traitement : 8 jours 3/4 OBSERVATION NO 2 Malade de 62 ans, coronarien, hyperlipidémique et diabétique. Traitement par le dipyridamole à raison de trois doses de 75 mg toutes les 24 heures adhésivité plaquettaire in vitro : avant traitement : 42 * après traitement 35 * L'agrégation plaquettaire (selon la méthode de Born) donne: DOM avant traitement : 51 après traitement : 22 différence : 11 DO en 1 minute avant traitement : 36 après traitement : 22 différence : 14 indice d'agrégation Do/60 avant traitement : 0,60 après traitement : 0,36 Ce malade est soumis, 3 mois après lXarrêt du traitement, à un nouveau traitement associant cette fois dipyridamole 3 doses de 75 mg toutes les 24 heures vitamine E 1 dose de 100 mg toutes les 24 heures Cette étude montre alors une adhésivité plaquettaire au verre de : 36 * avant traitement 15 % après traitement une agrégation plaquettaire (méthode de BORN) DOM avant traitement : 47 Z après traitement : 16 * différence : 31 DO en 1 minute avant traitement : 33 après traitement : 11 différence : 22 Do/60 avant traitement : 0,55 après traitement : 0,18 une durée de vie des plaquettes avant traitement : 4 jours 3/4 + 12 h après traitement : 8,75 + 12 h Selon une forme préférée de l'invention, on présente la composition pharmaceutique sous forme de gélules dosées à 200 mg de succinate de l-dipyridamole et d'a-tocophérol. Selon une autre forme préférée de l'invention, les gélules sont dosées à 75 mg de dipyridamole et 100 mg d'acétate dra- tocophérol. Ces gélules peuvent être administrées par voie orale pour le traitement des troubles cardio-vasculaires et les atteintes artérielles, veineuses et capillaires, périphériques et centrales. TABLEAU DES FORMULES DEVELOPPEES ET DES MASSES MOLECULAIRES 2-méthyl-2-(4,8,12-triméthyltridécyl)-6-chromanol ou tocol MM=388 2,5,7,8-tétraméthyl-2-(4,8,12-triméthyltridécyl)-6-chromanol ou &alpha;-tocophérol MM=430 2,5,8-triméthyl-2-(4,8,12-triméthyltridécyl)-6-chromanol ou ss-tocophérol MM=416 2,7,8-triméthyl-2-(4,8,12-triméthyltridécyl)-6-chromanol ou &gamma;-tocophérol 2,8-dimethyl-2-(4,8,12-trimethyltridécyl)-6-chromanol ou #-tocophérol MM=402 acétate d'&alpha;-tocophérol ou vitamine E MM=472 succinate acide d'&alpha; ;-tocophérol MM=530 pyrimido-(5,4-d)pyrimidine MM=132 2,6-bis(diéthanolamine)-4,8-dipiéridino-pyrimido[5,4-d] pyrimidine ou dipyridamol MM=504 succinates d'&alpha;-tocophérol et de dipyridamol X=OH ou, àl'état substitué, X=OOC-CH2-CH2-COO-&alpha;-tocophérol; si 3X en -OH et 1X substitué, MM=1016; si 2X en -OH et 2X substitués, MM=1528; si 1X en -OH et 3X substitués, si 4X substitués, MM=2552. REVENDICATIONS 1 - Composition pharmaceutique anti-agrégeante plaquettai re.vaso-dilatatrice et anti-oxydante, caractérisée en ce que les molécules constitutives présentent des radicaux du type pyrimidopyrimidine et du type tocol. 2 - Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que les radicaux du type tocol sont des radicaux tocophérol. 3 - Composition pharmaceutique selon la revendication 2, caractérisée en ee quelle comprend des radicaux du type toco phénol. 4 - Composition pharmaceutique selon lune des revendications 2 ou 3, caractérisée en ce qu'elle comprend des radicaux du type a-tocophérol. 5 - Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que les radicaux du type tocol sont des dérivés ou des substitués. 6 - Composition pharmaceutique selon lune des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que les radicaux du type pyrimidopyrimidine sont du type dipyridamole. 7 - Composition pharmaceutique selon l'une des revendications I à ó, caractérisée en ce qu'elle est constituée par des esters. 8 - Composition pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce que les esters sont des esters d'acide présentant au moins un groupement fonctionnel. 9 - Composition pharmaceutique selon lune des revendications 7 ou 8, caractérisée en ce que l'un des esters est un acétate. 10 - Composition pharmaceutique selon une des revendications 7 à 9, caractérisée en ce que l'un au moins des esters est un succinate. 11 - Composition pharmaceutique selon lune des revendications 1 à 10, caractérisée en ce que les quantités de radicaux par dose sont de 75 à 100 mg d'équivalent de pyrimido-pyrimidine et de 20 à 200 mg d'équivalent de tocol. 12 - Composition pharmaceutique selon la revendication 11, caractérisée en ce quelle est constituée sous forme de gélules dosées à 200 mg de succinate de l-dipyridamole et d -tocophérol 13 - Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisée en ce quelle est constituée sous forme de gélules dosées à 75 mg de dipyridamole et 100 mg d'acétate d'a-tocophérol. 14 - Composition pharmaceutique selon les revendications 12 ou 13, caractérisée en ce qutelle est administrable par voie orale pour le traitement des troubles cardio-vasculaires et les atteintes artérielles, veineuses et capillaires, périphériques et centrales.