Brevet FR2387451A1 — publié le 19781110

La présente invention est relative a un nouvel étalon d'urine pour analyses médicales et a son procédé de préparation. Les laboratoires d'analyses médicales utilisent pour la réalisation d'analyses d'urines, et notamment pour analyser les urines de femmes enceintes, des étalons de référence qui doivent, par définition, présenter uns grands fiabilité et une grande stabilité dans le temps. Actuellement, les seuls étalons d'urines disponibles dans le commerce, utilisés par les laboratoires d'analyses sont des étalons lyophilisés, donc en poudre, qui sont, du fait même de leur présentation sous forme de-poudreJ d'un usage peu pratique et d'une fiabilité toute relative en ralson de la nécessité de leur mise en solution au moment de leur utilisation et de lueur absence de stabilité dans le temps une fois mis en solution. La présente invention s'ests par conséquent, donné pour but de pourvoir a un étalon d1urine- pour analyses médicales qui répond mieux aux nécessités de la pratique que les étalons d'urines proposés conformément à l'Art antérieur, -notamment en ce qu'il présente une grande fiabilité et une excellente stabilité dans le temps. La présente invention a pour objet un étalon dourine pour analyses médicales caractérisé en ce qu4il est constitué par de l'urine stabilisée par traitement thermique et débarrassée des sels (urates, phosphates, notamment) que contient initialement l'urine, par précipitation de ces derniers. Conformément à l'invention, le traitement thermique de stabilisation est réalisé par chauffage de l'urine pendant Oh10 à 2 heures à 11o-1500c. Selon un mode de réalisation avantageux dudit étalon d'urine, celui-ci est constitué par un concentré d'urine réduit jusqu a environ 1/10 à 1/90 du volume initial, stabilisé par traitement thermique pendant Oh10 à 2 heures environ, à 110-150 C environ et préalablement débarrassé- des sels initialement contenus dans l'urine, par précipitation de ceux-ci. Selon un autre mode de réalisation avantageux dudit éta- lon d'urine, le concentré, débarrassé de ses sels et stabilisé thermiquement, est séché par tous moyens appropriés tels que lyophilisation ou atomisation notamment, pour donner lieu à un produit pulvérulent avantageusement conditionné en pastilles. La présente invention a également pour objet un procédé de préparation de 11 étalon d'urine pour analyses médicales conforme à l'invention. Ce procédé est caractérisé en ce qu'une charge d'urines collectées est débarrassée des sels qu'elle contient par précipitation et est soumise à un traitement thermique de stabilisation à 110-150 C environ, pendant 10 minutes à 2 heures environ. Selon un mode de réalisation avantageux du procédé objet de l'invention, préalablement au traitement thermique de stabilisation; la charge d'urine est concentrée jusqu'à environ 1/10 à 1/90 de son volume initial. Selon un mode de réalisation avantageux du procédé de préparation de l'étalon d'urine conforme à la présente invention, une charge d'urines est soumise à plusieurs opérations de précipitation des sels et de concentration successives, avant d'étire soumise à un traitement final de stabilisation thermique à 110-150 C environ. Selon un autre mode de réalisation avantageux du procédé objet de l'invention, les sels initialement présents dans la charge d'urines traitée, notamment les urates et les phosphates, sont précipités en une seule opération ou en deux opérations successives séparées par un traitement de concentration. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions, qui ressortiront de la description qui va suivre. L'invention vise plus particulièrement les nouveaux étalons d'urines pour analyses médicales obtenus en mettant en oeuvre le procédé objet de la présente invention, ainsi que les moyens utilisés pour la mise en oeuvre de ce procédé et les moyens de conditionnement dudit étalon d'urine. L'invention sera mieux comprise à l'aide du complément de description qui va suivre, qui se réfere à des exemples de préparation du concentré stabilisé d'urines conforme à l'invention, ainsi qu'à des résultats analytiques obtenus sur des échantillons d'urines de femmes enceintes, et à des essais de stabilité dans le temps du concentré stabilisé d'urines conforme à l'invention. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples sont donnés uniquement-à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMPLE S EXEMPLE I - Préparation du concentré stabilisé d'urines utili sable en tant qu'étalon pour analyses médicales. 1.- Précipitation des sels initialement contenus dans --------------------------------------------------------l'urine : Une charge d'urines représentant au total 200 litres, est traitée pour provoquer la précipitation des urates et des phosphates présents dans la charge d'urines. Dans ce but, la charge est abandonnée pendant une nuit à une température de l'ordre de 4 à 10 C , les sels qui ont précipité sont éliminés au bout de ce temps par centrifugation. 2.- Concentratidn Après élimination des sels précipités, la charge est concentrée, de préférence sous vide, jusqu'à un-volume V1 qui est de 5 à 10 fois inférieur à son volume initial ; Ie concentré obtenu est maintenu à une température de 4 à ioOC pendant 12 à 24 heures au bout desquelles le nouveau précipité qui s'est formé est éliminé par centrifugation. Le surnageant est à nouveau concentré jusqu'à un volume V2 qui est de 2 à 4 fois inférieur au volume vi. Le concentré V2 obtenu est à nouveau abandonné à une température de l'ordre de 4 à 10 C environ pendant 12 à 24 heures au bout desquelles- il est filtré sous vide, sur des moyens de filtration appropriés, tels que laine de verre ou filtre de type C2. 3.- Conditionnement Le concentré obtenu de la sorte est conditionné en ampoules dont la contenance-réelle est de 1,2 ml, de manière à pouvoir prélever, au moment des analyses, très exactement 1 ml à l'aide d'une seringue graduée. Les ampoules remplies de concentré d'urines sont scellées. 4.- Stabilisation Les ampoules scellées sont soumises à un traitement thermique de stérilisation pendant 1 heure environ, à 1IO-1500C. EXEMPLE 2 Une charge d'urines représentant 200 litres, est tout d'abord concentrée comme décrit à l'Exemple 1.20, puis le concentré obtenu est soumis à un traitement thermique de stabilisation pendant 1 heure à 110-150 C, après quoi le concentré stabilisé est abandonné pendant 12 à 24 heures à 4 à 100C, puis il est centrifuge pour en éliminer les urates et les phosphates qui ont précipité. Le concentré stabilisé, débarrassé des sels qu'il contenait initialement, est ensuite séché par lyophilisation et conditionné en pastilles de 1 g - qui correspondent chacune à environ 20 ml de la charge d'urines initiale. EXEMPLE 3 - Une charge d'urines représentant 400 litres, est concentrée comme décrit à l'Exemple 1.20, puis l'on précipite les sels, urates et phosphates en particulier, contenus dans l'urine traitée, après quoi l'on sèche le concentré obtenu par atomisation à 200-2200C et l'on recueille à la sortie de l'atomiseur une poudre dont la température est de 70 à 90 C, pour une température d'entrée de l'air de l'ordre de 200 à 2200c Le produit pulvérulent obtenu est conditionné en pastilles de 1 g. ANALYSTE DU CONCENTRE STABILISE D'URINES OBTENU CONFORMEMENT A L'INVENTION : Les analyses ont été effectuées aux différents stades de fabrication, sur le produit de l'Exemple 1 Les résultats obtenus ont été réunis dans le Tableau I ci-après TABLEAU I Produits dosés Teneur dans la charge Teneur dans le Teneur dans le initiale d'urine concentré V1 concentré V2 (1,8 fois) (2,3 fois) %destruc- % destruction tion * Créatinine 0,66 g/1 1,14 4,2 1,41 7,6 Prégnandiol 11,3 16,9 20,3 21,10 23,2 Folliculine 1,550 /1 1,750 59,4 2,350 51,7 17 Ceto stéroïde 5,4 mg/1 7,5 29,6 9,60 29,4 17 OH coritcoïdes 1,8 mg/1 2,6 24,6 3,20 29,4 Précision # 10 % * % destruction = coefficient de concentration x concentration initials - concentration finale x 100 concetrationd finale La destruction a lieu à la première concentration mais est négigeable à la deuxième STABILITE DANS LE TEMPS DU CONCENTRE STABILISE D'URINES CONFORME A L'INVENTION Le concentré stabilisé obtenu à l'Exemple 1 a été testé pendant six semaines pour contrôler sa stabilité dans le temps. Les résultats des essais de stabilité ont-été réunis dans le Tableau II ci-après TABLEAU II % destruction Produits dosés J 10 jours après J + 5 jours J + 11 jours J + 18 jours J + 31 jours J + 37 jours la fabrication Créatinine 0 3,6 3,6 4,8 7,1 9,5 Pregnandiol 0 3,6 4,6 7,5 5,4 8,9 Folliculine 0 0 4,7 7,3 8,2 8,9 17 ceto stéroïdes 0 3,7 2,5 6,2 3,7 1,2 17 OH corticoïdes 0 0 0 2,4 0 0 % destruction = (concentration à J) - (concentration à + N) (concentration à J) précision des mesures : # 10 % Les résultats qui figurent dans le Tableau II font apparaitre la remarquable stabilité dans le temps du concentré stabilisé d'urines conforme à l'invention, laquelle permet de disposer d'un étalon d'une grande fiabilité pour la réalisation d'analyses biologiques dans les laboratoires médicaux. Il résulte de la description qui précède que, quels que soient les modes de mise en oeuvre, de réalisation et dtapplica- tion adoptés, llon obtient un étalon d'urine pour analyses médicales et son procédé de préparation qui présentent, par rapport aux étalons visant au même but antérieurement connus, des avantages importants dont certains ont été mentionnés dans ce qui précède et dont d'autres avantages ressortiront de l'utilisation dudit étalon d'urine et de son procédé de préparation. Ainsi que cela ressort de ce qui précède, 1'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, -de réalisation et d'application qui viennent d'être décrits de fa çon plus explicite ; elle en embrasse au contraire toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la portée, de la présente invention. REVENDICATIONS 1 - Etalon d'urine pour analyses medicales caractérisé en ce qu'il est constitué de l'urine stabilisée par traitement thermique et débarrassée des sels (urates, phosphates, notamment) qu'elle contient initialement par précipitation de ces derniers. 20- Etalon d'urine selon la Revendication 1, caractérisé en ce que le traitement thermique de stabilisation est réalisé par chauffage pendant Oh10 à 2 heures à 110-1500C. 30- Etalon d'urine selon la Revendication 1, caractérisé en ce qu'il est constitue par un concentré d'urine réduit jusqu'à environ 1/10 à 1/90 volume initial de l'urine traitée et stabilisé par traitement thermique à 110-1500C. 4 - Etalon d'urine selon la Revendication 3, caractérisé en ce que le concentré d'urine obtenu est stabilisé par traitement thermique pendant Oh10=à 2 heures à 110-1500C environ. 5 - Etalon d'urine selon l'une quelconque des Revendicatons 1 à 4, caractérisé en ce que l'urine débarrassée de ses sels et stabilisée thermiquement et éventuellement concentrée, est soumise à un processus de séchage. 60- Etalon d'urine selon la Revendication 5, caractérisé en ce que l'urine stabilisée est séchée par lyophilisation. 7 - Etalon d'urine selon la Revendication 5, caractérisé en ce que l'urine stabilisée est séchée par atomisation. 80- Etalon d'urine selon l'une quelconque des Revendications 5 à 7, caractérisé en ce qu'il est conditionné en pastilles. 9 - Procédé de préparation de l'étalon d'urine stabilisé, selon l'une quelconque des Revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'une charge d'urines collectées est traitée pour en éliminer les sels qu'elle contient,par précipitation, et est soumise à un traitement thermique de stabilisation à 110-150 C environ, pendant Oh10 à 2 heures environ. 10 - Procédé selon la Revendication 9, caractérisé en ce que, préalablement au traitement de stabilisation thermique, la charge d'urines est concentrée jusqu'à environ -1/10 à 1/90 de son volume initial. 11 - Procédé selon la Revendication 10, caractérisé en ce que la charge d'urines collectées est soumise à plusieurs opérations de précipitation des sels et de concentration succes sives, avant d'@tre soumise à un traitement final de stabilisation thermique à 11O-1500C. environ. 120 Procédé selon l'une quelconque des Revendications 10 ou 11, caractérisé en ce qu'une charge d'urines est tout d'abord concentrée jusqu'a environ 1/20 de son volume initial, puis soumise à un traitement de stabilisation thermique pendant 1 heure à 110-150 C environ,puis les sels qu'elle contient, tels qu'urates et phosphates,en sont éliminés par précipitation après quoi elle est séchée par lyophilisation et éventuellement conditionnée en pastilles. 134- Procédé selon l'une quelconque des Revendications 10 ou 11, caractérisé en ce qu'une charge d'urines est concentrée jusqu'à environ 1/10 de son volume, puis les sels qu'elle contient en sont éliminés par précipitation, après quoi elle est séchée par atomisation, en suite de quoi le produit pulvérulent obtenu est éventuellement -conditionné en pastilles.