Brevet FR2367494A1 — publié le 19780512

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de nitrosourée présentant une forte actvite' contre la leucémie et les tumeurs et une faible toxicité et qu. sont par conséquent utiles dans le traitement therapeutique des affections précitées. Elle concerne aussi un procédé de préparation de ces dérivés et leur utilisation â des fins therapeutiques. De nombreux produits chimiques présentant une activité inhibitrice à ltegard de la leucémie et des tumeurs ont déjà été proposés et sont connus, mais ils ne donnent pas satisfaction, soit parce qu'ils manquent d'efficacité, soit à cause de leur degré de toxicité, soit pour ces deux raisons à la fois. Or, il a e' été constaté dans le cadre de l'invention que certains dérivés nouveaux de la nitrosourée présentent une activité inhibitrice très forte contre la leucémie et les tumeurs tout en ayant une faible toxicite, ainsi que le démontrent, par exemple, des essais effectués in vivo. Suivant un de ses aspects1 ltinvention consiste donc en de nouveaux dérivés de nitrosouree ayant pour formule dans laquelle A représente un résidu tétravalent de ribostamycine iont on a enlevé quatre groupes amino, n est 4 et R représente un groupe alkyle inférieur ou un groupe alkyle inférieur halo-substitué. Un groupe de composés préférés de formule I est représenté par la formule dans laquelle A représente un résidu tétravalent de ribostamycine ayant pour formule et R2 représente un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone ou un groupe alkyle halo-substitué ayant de 1 à 4 atomes de carbone. Comme exemples typiques des composés de cette formule, on peut citer tétra-N-(N'-méthyl-N'-nitroso) carbamoyl-ribostamycine et tétra-N-lN'-(chloro-2 éthyl)-N'-nitrosog carbamoyl-ribostamycine. Il a e' été de' démontré que les nouveaux dérivés de nitrosourée de formule (I) selon l'invention présentent une forte activité inhibitrice à L'égard de la leucémie et de tumeurs tout en ayant une faible toxicité. Sous un autre de ses aspects, l'invention consiste en une composition pharmaceutique contenant un dérivé de nitrosourée de formule (I) associe à un support ou diluant pharmaceutique. La composition pharmaceutique peut se présenter sous n'importe quelle forme connue en pharmacie. Ainsi, la nature de la composition et du support ou diluant pharmaceutique dépendra évidemment du mode d'administration, par exemple, suivant qu'elle est orale ou parentérale. En général, la composition peut se présenter sous une forme convenant à l'injection ou à l'administration orale, par exemple sous forme d'ampoules, de capsules, de comprimés, de poudre, de granules et autres formes convenables. Loinvention embrasse aussi une méthode pour le traitement thérapeutique d'affections leucémiques et de tumeurs chez l'home et les animaux, qui consiste à administrer aux patients, a' intervalles appropriés, une quantité thérapeutiquement efficace d'un dérivé de nitroso-urée de la formule (I). On comprendra que la quantité réellement administrée des dérivés de nitrosourée varie suivant le composé utilisé, la composition préparée pour l'administration, le mode d'application, celui de l'administration etc...De nombreux facteurs modifiant l'action du medicament seront pris en considération par l'homme de l'art, par exemple, l'åge, le poids, le sexe, le régime alimentaire, la durée d'administration, le mode d'administration, le taux de métabolisme ou d'excrétions, la combinaison de médicaments, les sensibilités, la gravité ou l'état de la maladie. La dose optimale pour une série donnée de conditions peut être déterminée par l'homme de l'art en utilisant les épreuves traditionnelles de détermination du dosage en tenant compte des lignes générales ci-dessus. Les nouveaux dérivés de nitrosourée selon l'invention augmentent considérablement l'espérance de vie dans le traitement thérapeutique de la leucémie lorsqu'on les compare à la daunomycine qui a été utilisée cliniquement pour le traitement de cette maladie, et que l'accumulation d'ascite est nulle ou très faible. Les nouveaux dérivés de nitrosourée selon l'invention se distinguent en outre par leur faible toxicité, ce qui permet leur application pratique au traitement des affections leucémiques et des tumeurs. Les nouveaux dérivés de nitrosourée selon l'invention se préparent simplement en nitrosant les dérivés d'urée correspondants, d'une manière connue en soi. Sous un autre de ses aspects, l'invention consiste donc en un procédé pour la préparation de dérivés de nitrosourée de formule dans laquelle A représente un résidu tétravalent de ribostamycine dont les quatre groupes amino ont été enlevés, n est égal à 4, et R représente un groupe alkyle inférieur ou un groupe alkyle inférieur halo-substitué, procédé qui consiste à traiter un composé de formule dans laquelle A, R et n ont les mêmes définitions qu'a' la formule précédente, avec un agent nitrosant. Dans le procédé selon l'invention, la réaction de nitrosation peut s'effectuer de façon connue en soi en utilisant comme agent nitrosant un nitrite de métal alcalin, l'anhydride azoteux, le peroxyde d'azote et autres similaires. Le nitrite de métal alcalin est de préférence un nitrite de sodium ou de potassium. La réaction peut s'effectuer habituellement à une température comprise se entre -10-C et 300C environ et, de préférence, dans des conditions acides, par exemple à une valeur de pH comprise entre 1 et 3. Dans ces conditions, le temps de réaction convenable est compris antre i et 12 heures environ.On peut avantageusement utiliser comme milieu réactionnel de 1'eau, un acide alcanolque inférieur comme l'acide formique, l'acide acétique ou l'acide propionique ou un mélange de ces acides. Une fois terminée, la réaction de nitrosation, le produit de la réaction peut, Si on le désire, être purifié d'une manière traditionnelle, par exemple en utilisant une résine cationique, puis lyophilisé et ensuite recristallisé avec un solvant approprié pour obtenir le produit désiré à l'état très pur. Les composés de formule (II) devant astre utilisés comme substances de départ dans le procédé selon l'invention sont euxmimes des composés nouveaux et ils peuvent astre préparés général en ment en faisant réagir un composé de formule A - NH2 (III) dans laquelle A a la même définition que plus haut, avec un isocyanate d'alkyle inférieur ou-d'alkyle inférieur halo-substitué de forirnila R - N = C = O (fiv) dans laquelle R a la même définition que plus haut. Avant la réaction, les groupes hydroxy alcooliques contenus dans le groupe A peuvent, si cela est nécessaire, être protégés par une variété de groupes hydroxy-protecteurs connus en soi, par exemple le groupe acétyle Comme composés de formule IV, on peut utiliser une grande variété d'isocyanates. Comme exemples typiques des isocyanates de formule (il}, on peut citer les isocyanates de méthyle, d'éthyle, de n-propyle, d'isobutyle, de n-butyle, d'iso-propyle, de secbutyle, de tert-butyle, de chlorométhyle, de 2-chloréthyle, de -chloropropyle, de 8-chloropropyle, de & -chlorobutyle et de 0-brométhyle. Les composés de départ de formule (II) devant être utilisés pour la préparation des composés d fornule (i) peuvent être préparés en faisant simplement réagir la ribostamycine avec un isocyanate de formule tIV' dans un solvant organique comme le rnthanoZ, Les nouveaux dérivés de nitrosourée selon l'invention sont également utiles comme produits intermédiaires dans la préparation de certains autres produits chimiques à usages thérapeutiques. Les dérivés nouveaux de nitrosourée représentés par la formule (Iì peuvent être aisément transformés en dérivés acétyles correspondants en les traitant avec un mélange de pyridine et d'anhydride acétique. L'invention sera mieux comprise en se référant aux exemples suivants, qui n'ont aucun caractère limitatif Exemple 1 Tétra-N-(N'-méthyl-N'-nitroso)carbamoyl-ribostamycine. On fait dissoudre 1,0 g de tétra-N-(N'-méthyl)carbamoyl-ribos- tamycine dans 30 ml d'eau refroidie avec de la glace et on mélange a solution obtenue à 0,6 g de nitrite de sodium. Au mélange ainsi obtenu sous la forme d'une solution, on ajoute goutte à goutte 2,0 ml d'acide acétique glacial en refroidissant avec de la glace et en agitant. On agite le mélange constamment pendant 2 heures environ, puis on le maintient a 0 C toute une nuit pour que 'opère la nitrosation. On fait évaporer la solution réactionnelle sous vide au-dessous de 25eC On place le résidu dans un petit volume de méthanol et on fait évaporer de nouveau à siccité la solution méthanolique qui en résulte.On place le résidu ainsi obtenu dans environ 20 ml de méthanol anhydre et on sépare par filtration la petite quantité de matière insoluble. On concentre le filtrat jusqu'au quart environ du volume initial par évaporation du solvant sous pression réduite. On refroidit la solution concentrée à -200C et il se dépose un produit amorphe de couleur jaune pâle. On sépare les cristaux par filtration et on mélange la liqueur mère â deux fois son volume d'ether ordinaire, après quoi on refroidit pour provoquer le dépot d'une nouvelle quantité de matière amorphe. On recueille le produit déposé par filtration et l'on obtient 0,68 g du composé désiré sous la forme d'un solide amorphe et hygroscopique de couleur jaune pale. Point de fusion : 880C (se décompose en moussant). Activité optique : [&alpha;]D23 + 35 ( c 1,0,méthanol). - REVENDICATIONS 1 - Nouveaux dérivés, caractérisés en ce qu'ils ont pour formule commune dans laquelle A représente un résidu tétravalent de ribostamycine ayant pour formule et R2 représente un groupe alkyle de l a 4 atomes de carbone ou un groupe alkyle halo-substitué ayant de l à 4 atomes de carbone. 2 - Nouveaux dérivés selon la revendication l, caractérisés en ce qu'ils sont-choisis dans le groupe comprenant la tétra-N (N' -méthyl-N' -nitroso) carbamoyl-ribostamycine et la tétra-N- EN' - (chioro-éthyl) -N' -nitroso carbamoyl-ribostamycine. 3 - Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un dérivé de nitrosourée selon la revendication 1, associé a un support ou un diluant pharmaceutique. 4 - Procédé nour le traitement thérapeutique d'affections leucémiques et de tumeurs chez-l'homme et les animaux, caractérisé en ce qui consiste à administrer aux patients, à intervalles appropriés, une quantité thérapeutiquement efficace d'un dérivé de nitrosourée selon la revendication t. 5-Procédé de préparation des dérivés de-nitrosourée selon Analyse élémentaire Calculé pour C25H42N12O18 : C 37,59 H 5,30 N 21,05 % Trouvé : C 36,61 H 5,40 N 19,87 % Exemple 2 etra-N-N' -(chloro-2 éthyl)-N'-nitroso-carbamoylribostamycine On fait dissoudre 1,9 g de tétra-N-N'-(chloro-2 éthyl) carbamoyl-ribostamycine dans 30 ml d'eau froide et on mélange la solution ainsi obtenue au même volume (30 ml) d'acide acétique glacial. On ajoute graduellement au mélange 1,1 g de nitrite de sodium en refroidissant avec de la glace et en agitant. On agite pendant 2 heures le mélange ainsi obtenu en refroidissant avec de la glace pour que s'effectue la nitrosation complète. On traite le mélange réactionnel avec Amberlite IR-120 (forme H+) pour en éliminer l'ion sodium.On le filtre ensuite et on fait évaporer le filtrat sous pression réduite au-dessous de 250C. On fait dissoudre le filtrat dans méthanol et on concentre de nouveau la solution de la même manière que précédemment. On place le résidu ainsi obtenu dans un petit volume d'éthanol et, à la solution ainsi formée, on ajoute un petit volume d'éther ordinaire de façon à précipiter le produit désiré. On recueille le précipité par filtration et on sèche ensuite dans un dessicateur, après l'avoir lavé a l'éther ordinaire. On obtient alors 0,9 g du composé désiré. Point de fusion : 105 C (se décompose en moussant). Activité optique : [&alpha;]D24 + 30,7 (c 1,0,méthanol). la revendication l, caractérisé en ce qu'il consiste à traiter un composé de formule dans laquelle A, R2 ont les mêmes définitions qu'à la formule de la revendication i, avec un agent nitrosant. 6 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que l'agent nitrosant est un nitrite de métal alcalin. 7 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que l'agent nitrosant est l'anhydride azoteux ou le peroxyde d'azote. 8 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la nitrosation s'effectue à une température comprise entre - iOOC et 309C. 9 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la nitrosation a lieu à un pH compris entre i et 3. 10 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la nitrosation a lieu dans un solvant inerte. Il - Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le solvant inerte est l'eau, un acide alcanorque inférieur ou un mélange de ceux-ci. 12 - Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que l'acide alcanoique inférieur est l'acide formiquewacétique ou propionique.