Brevet FR2362855A1 — publié le 19780324

L'invention se rapporte à un nouveau composé appelé "Cordìfene", à un procédé pour sa fabrication et à son emploi comme agent anti-alimentaire pour les insectes. L'herbe Erlangia Cordifolia (Oliv.), S. MOORE, Compositae, jusqu'à.présent désignée sous le nom de E. Cordifoliase rencontre couramment dans la région du Gikuyuland du Kenya en tant que mauvaise herbe. Elle y est connue sous le nom de "Gathuna". Cette herbe a été utilisée largement par les indigènes du Kenya pour augmenter la contraction myométriale. Jusqu'ici, toutefois, aucun compose actif de cette herbe n'a été isole ou identifie. Le composé actif de l'invention, le "Cordifène", est extrait des feuilles de la plante E. Cordiflia, en utilisant les techniques d'extraction par solvant que l'on decrira dans la suite. Le Cordifené purifié et isolé semble avoir la formule structurelle suivante et la formule moléculaire C20H2407. On a trouvé qu'en micro-doses ce composé agit comme agent anti alimtentaire vis à vis des larves d'insectes telles que les larves de chenilles de la Leucanie. Il peut donc servir de protecteur des récoltes, par exemple, en pulverisant une solution de "Cordifene" sur les feuilles de la recolte à protéger. Les feuilles soumises à l'attaque des larves de chenilles de la Leucanie,-quand elles sont recouvertes par une solution de "Cordifène", ne seront pas mangées par ces larves jusqu'à ce que le "Cordifène" ait éte éliminé. Si un fermier arrose sa récolte avec du "Cordifène", ces insectes ne la mangeront pas et s'attaqueront à d'autres plantes de la même zone. Ainsi l'objectif que le fermier rechercherait à atteindre en utilisant un insecticide est rempli avec sans pour cela que l'insecte soit detruit et, par conséquent, sans perturber l'écologie. Dès concentrations allant de 70 à 100 ppm de "Cordifene" dans un suport acceptable du point de vue agricole ou domestique se sont révêlées efficaces. L'invention sera mieux comprise à l'aide de la description ci-aprês. Au dessin annexé La figure 1 est un spectre infratrouge du "Cordifène" dans le chloroforme, La figure 2 est un spectre ultra-vtlet du "Cordifene" dans l'alcool, Lacfigure 3 illustre le spectre NMR en utilisant le carbone 13 et l'hydrogene 1 La figure 4 est une representation graphique de l'effet du "Cordifène" sur le comportement alimentaire des larves de la chenilles de la Leucanie. On va maintenant décrire les conditions d'extraction du "Cordifene" de la plante E. Cordifolia et les résultats de tests utilises poùr identifier la structure de cette substance, son activité pharmacologique et anti-alimentaire, PROCEDE D'EXTRACTION. Une quantité pesee de feuilles franches de E. Cordifolia est mise dans l'alcool méthylique- (qualite- de réactif de laboratoire), on la fait macérer dans un melangeur jusqu'à obtenir de tres petites particules. Un autre solvant quelconque approprié, pris dans le groupe de l'alcool éthylique, du n-propanol, de l'alcool isopropylique, du méthyle propanol, de l'hexane, du toluène de chloroforme, de l'éther diéthyle, des esprits de petrole et du dichlorométhane, peut encore être utilise. La masse est alors laissée à la température ambiante pen- dant deux ou trois jours, apres quoi l'extrait est filtré. Le filtrat est concentré sous vide en utilisant un filtre rotatif à vapeur.Le concentré est mélan- gé avec du benzène (qLEilité de réactif de laboratoire) pour extraire les fractions soluble dans le benzène. En variante, un solvant tel que l'éther diethyle, le chloroforme, le n-propanol, l'alcool isopropylique ou l'acétone peut être utile~ sé. L'extrait au benzène est séché en utilisant le sulfate de soude anhydre et concentré sous vide. PROCEDES DE CARACTERISATID'N. 1/- Chromatographie en couche mince Pour la chromatographie en couche mince, les- plaques sont pré-enduites avec une peinture fluorescente. Les spots sont visualises à la lumière ultraviolette et pulvérises avec 10 % d'acide sulfurique dans l'alcool éthylique avant de chauffer les plaques dans le four. La disparition des spots au chauffage confirme la nature organique des composés. Le "Cordifene" apparait comme le capot le. plus grand-sur les plaques chromatographiques. 2/- Chromatographie en colonne Le concentré au benzène est introduit sur une colonne florisil. Un mélange de benzène et d'éther diéthyle (tous deux de qualité analytique) dans le rapport de 4 à1 est utilisé pour l'élution et ceci permet l'élution du "Cordifène" crystallin. 3/- Point de fusion du'Cordifene" En utilisant un tube capillaire scelle, on trouve que le point de fusion du Cordifène" est compris entre 200 et 2010 C. 4/ - Spectroscopie infra-rouge On dissout le "Cordifène" dans le chloroforme (de qualité spectroscopique) et ceci fournit un spectre (figure 1) dont les caractéristiques principales sont V max. Groupements chimiques caractéristiques 1.780 Cm -1 C = O du lactone 1.720 cm -1 C=0 5/ - Spectroscopie à l'ultra-violet On dissout le "Cordifene" dans de l'alcool éthylique absolu (qualité analytique) et un spectre ultra-violet est obtenu (figure 2), dont les caractéristiques sont maux. = 213 nM = 18.310 L'absorption d'ultra-violet confirme la conjugaison. 6/ - Spectrométrie de masse. Un ion moléculaire stable a eté entièrement accéléré et enregistre à sa valeur m/e correspondante de 376 en utilisant la spectrometrie de masse par ionisation chimique. Aucun ion moléculaire correspondant n'a ete obtenu en .utilisant la spectrométrie de masse par ionisation électronique. 7/ - Résonance magnétique nucléaire. En utilisant du carbone 13 et de l'hydrogène 1, un spectre NMR a été obtenu (figure 3) et l'analyse des fragments confirme la structure moléculaire du "Cordifène". ACTIVITE DU CGRDIFENE COMME AGENT ANTI-ALIMENTAIRE POUR LES INSECTES. La figure 4 représen-'l'effet du "Cordifene" sur le comportement alimentaire des larves de la chenille de la leucanie. L'instant de commencement de l'alimentation de ces larves sur les feuilles pulvérisées avec une solution de "Cordifène" a été indiqué en fonction de la concentration en "Cordifene" (ppm.). Lorsque les feuilles sont pulvérisées avec une solution à 70 % de méthanol contenant 74 parties par million de cordifene, les feuilles sont completement proté géies de l'attaque par les larves. On a trouve que 70 à 100 parties par million de "Cordifene" empêchent les larves de la chenille de la leucanie d'attaquer les feuilles qui leur servent de nutriment. Ces feuilles, lorsqu'elles ne sont pas pulvérisées avec du "Cordi fène", sont mangées par les larves. Une solution de méthanol à 70 % constitue un solvant préferé pour le "Cordifene", utilisé avant de pulvériser les feuilles avec la substance. D'autres solvants appropries comprennent l'alcool éthylique, le n-propanol, I'alcool isopropylique, le méthyle propanol, l'hexane, le toluène, de chloroforme, l'éther diethyle, les esprits de pétrole et le dichlorométhane. En variante, le "Cordifène" peut être mélangé avec un véhicule solide acceptable du point due vue agricole ou domestique, un support liquéfié normale ment gazeux ou support liquide comprenant un agent tensio-actif. REVENDICATIONS. 1. Procédé pour isoler d'une substance, le "Cordifène", ayant des carac teristiques anti-alimentaireb à partir de la plante Erlangia Cordifolia, carac terisé en ce que les feuilles d'Erlangia Cordifolia sont extraites avec un solvant pris dans le groupe comprenant l'alcool éthylique, l'alcool méthylique, le n-propanol, l'alcool isopropylique, le méthyle propanol, l'hexane, le toluène de chforoforme, l'éther diéthyle, les esprits de pétrole et le dîchiorométhane et une solution de "Cordifène" dans le benzene.est recueillie. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite subis tance est isolée par séparation chromatographique à partir de la solution dans le benzène. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé par les opérations qui consistent à cueillir les feuilles d'Erlangia Cordifolia, à-les fairemacé- rer, à laisser séjourner les feuilles macérées dans le solvant d'extraction pendant deux ou trois jours, à filtrer les feuilles macerees et le solvant et à concentrer le filtrat sous vide, à melanger le filtrat concentre avec du ben zende, à extraire la solution dans le benzene et à concentrer cette solution sous vide pour obtenir une solution de "Cordifène" dans le benzène. 4. Substance "Cordifène" obtenue au moyen du procédé selon l'une des revendications 1 à 3, et ayant la formule structurelle suivante 5. Composé "Cordifene", caractérisé par les constantes suivantes composition : carbone, hydrogène, oxygène, formule moléculaire : C20H2407 point de fusion : 200 a 2010 C IR Maximum (dans le chloroforme) 1.780 Cml et 1,720 Cm"1 UV Maximum (dans l'alcool éthylique absolu) 1,: A maux = 213 nM = 18,310 6. Composition anti-alimentaire comprenant une quantité de "Cordifene" susceptible d'inhiber le comportement alimentaire, tel qu'il est défini à la revendication 5 et contenu dans un vehicule propre à des fins agricoles ou domestiques. 7. Composition selon la revendication 6, dans laquelle sont présentes 70 à 100 parties par million de "Cordifène". 8. Composition selon la revendication 7, dans laquelle ledit "Cordifene" est présent dans une solution de méthanol à 70 %.