Brevet FR2387244A1 — publié le 19781110

L'invention est relative à des nouveaux dérivés de la 5'-déoxy-adénosine et à des compositions associant ces dérivés à des véhicules pharmaceutiques, ces dérivés et compositions ayant notamment des propriétés antivirales et antitumoraies. On rappellera tout d'abord que la méthylation des protéines, des acides nucléiques et de nombreux métabolites est une réaction bien connue, au cours de laquelle des enzymes spécifiques7 dites méthylases ou méthyl-transferases, effectuent le transfert'un groupement méthyle fourni par la S-adénosylméthionine en certains points précis du substrat, notamment des bases azotées ou des sucres intervenant dans la constitution des acides nucléiques. Il a été montré que les tissus tumoraux contiennent des proportions de bases nucléiques méthylées plus importantes que les tissus normaux. En particulier, il a été constaté qu'il existe une relation entre l'hyperméthylation des acides nucléiques et la transformation descallules normales en cellules malignes. En corrélation avec ce phénomène, on sait depuis peu que le RNA messager de certains virus tumorigènes contient des bases méthylées. I1 a déjà été constaté qu'un certain nombre de substances synthétiques, notamment des 5'-thioéthers de l'adénosine, sont capables d'inhiber la transformation oncogène de cellules, des infections virales et notamment celles causées par des virus oncogènes, des divisions cellulaires par des mitogènes, toutes propriétés qui paraissent dues à leur capacité d'exercer une action inhibitrice à l'égard des méthyl-transférases in vivo. L'invention découle de la découverte d'une autre classe de dérivés de la 5'-déoxy-adénosine qui possèdent également des propriétés analogues. Les dérivés selon l'invention sont plus particulièrement caractérisés par la formule générale dans laquelle X est un atome dthydrogene ou un groupe contenant de 1 à 4 atomes de carbone, notamment un groupe alcoyle et R est un groupe amine secondaire dans lequel Ri peut être un H ou un méthyle et R2 un groupe alcoyle comprenant respectivement de 1 à 4 atomes de carbone ; R1 et R2 peuvent également former ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle, du type de ceux de la morpholine, pyrrolidine ou analogue. -Des produits représentatifs de la classe de dérivés selon l'invention sont ceux dans lesquels X et R ont les significations indiquées dans le tableau qui suit PC R H CH3 - - CH3 " I CH3 H 6 CH3 3o H-CH -N- 5 '-déoxy-5 1-(N-isobutyl) amino-N -méthyl CH3 2 adénosine 3 H H CH3NCHCH 5'-déoxy-5 '-(N-isobutyl, N-méthyl)amino CH3 CH3 / adénosine 3 CH3 CH3 CH3,CH-CH3-N- 5 '-déoxy-5 '- )-amino CH 2 N 3 CH3 6-méthyladénosine H CH3 CH-N- 5'-déoxy-5'-(N-isopropyl-N-méthyl)amino adénosine CH3 H C '-déoxy-5 '-N-pyrrolidinoadénosine CH3 5' -de-oxy-5' -N-pyrrol idino-N6 ad' - nosine -méthyl e H 5 - 5'-déoxy-5'-N-morpholinoadénosine CH3 O 5 \- '-déoxy-5 '-N-morpholino-N6-méthyladé nosine Les produits en question, et plus particulièrement ceux dans lesquels le groupe X est un atome d'hydrogène, peuvent être préparés par un procédé qui consiste à faire réagir la 5'-0-tosyl-adénosine de formule avec l'amine correspondante, notamment selon la méthode de MURAYAMA et autres auteurs (J. Org. Chem., 1971, 36, 3029), ce qui permet d'obtenir le p-toluène sulfonate de l'aminonucléoside correspondant de formule I, d'où l'aminonucléoside peut, si on le désire, être libéré à l'état de base libre, par exemple par une réaction d'échange d'ions. Pour la fabrication de ceux des produits de l'invention dans lesquels X est un groupe alcoyle, on peut avoir recours au procédé qui consiste à réaliser l'alcoylation de fa çon en soi connue de l'isopropylidène-2', 3'adénosine par llio- dure d'alcoyle RI correspondant, au sein d'un solvant aprotique, tel que le diméthylformamide ou analogue, à soumettre la méthyl1 isopropylidène-2', 3'adénosine obtenue à un traitement au sein d'une solution aqueuse basique, notamment de soude, pour produire une transposition du groupe de substitution alcoyle en position N-6, à acidifier le milieu et à récupérer la N-6-alcoyl- adénosine, laquelle est ensuite transformée de façon en soi connue en 5'-0-p-toluène N-6-alcoyl-adénosine, laquelle peut enfin être mise à réagir avec l'amine de formule dans les conditions déja indiquées pour les produits de l'invention, dans lesquels X est un atome d'hydrogène. On décrit ci-après, à titre d'exemple, la fabrication du p-toluène-sulfonate de 5'-déoxy-5'-(N-isobutyl)-amino- adénosine. On dissout 1 g (2,36 mmoles) de 5'-0-tosyl-adénosine dans 10 ml dtisobutylamine. Le mélange est laissé au spots à la température ambiante pendant 8 jours, puis évaporée sous pression réduite. Le produit est purifié par chromatographie en couche mince sur un gel de silice, en ayant recours à un mélange n-propanol, ammoniaque à 37 %, eau dans des proportions 7 = 2 = 1. On obtient avec un rendement de 80 % le 5'-déoxy-5'(N-isobutyl) aminoadénosine p-toluène sulfonate (PF = 86-900 C ; R f = 0,56 avec le même système de solvants). Llaminonucleoside libre est obtenu par passage du susdit p-toluène sulfonate sur une résine acide échangeuse de cations, telle que celle commercialisée sous la marque DOWEX 50. L'acide p-toluène sulfonique libéré peut être éliminé par lavage de la résine et l'aminonucléoside libre est élué de façon quansi quantitative avec de l'hydroxyde d'ammonium i N. L'activité inhibitrice des susdites substances se traduit par une prévention de la transformation de cellules normales en cellules malignes ou, lorsque celles-ci se sont déjà développées, en une interruption de leur multiplication. On observe certes que les agents selon l'invention peuvent également induire un ralentissement de la multiplication des cellules normales. Les effets sont cependant reversibles en ce qui concerne le développement des cellules normales, mais irréversibles en ce qui concerne les cellules malignes. Ces effets se manifestent notamment dans le test consistant dans l'étude de l'effet inhibiteur des substances selon l'invention ou la transformation oncogène induite dans des cellules par le virus du Sarcome de Rous (RSV). On indique ci-après les résultats obtenus avec la 5'-déoxy-5'-(N-isobutyl)-adénosine, ns une culture de fibroblastes d'embryons de poulets infectés par le RSV sur un milieu HAM F-10 contenant 5 % de sérum de veau dans les conditions suivantes On a ensemencé des cellules de fibroblastes d'embryons de poulets dans le milieu sus-indiqué, dans des boîtes de Falcon de 35 mm de diamètre, à raison 106 cellules par boîte. On a infecté ces cultures par une suspension de virus diluée permettant l'obtention de 60 à 100 foyers de cellules transformées par boîte. L'inhibiteur a été ajouté au milieu pour obtenir une concentration finale 0,1 mM en inhibiteur. Après 48 heures de contact, on a changé de milieu pour éliminer l'inhibiteur et l'on a compté les foyers formés 7 jours plus tard. Pendant ce temps, le milieu a été renouvelé périodiquement. On a constaté qu'à une dose d'inhibiteur aussi faible que 0,1 mM, il a été possible d'obtenir une inhibition de rO % du nombre des foyers oncogènes, par rapport à une culture témoin. La légère inhibition remarquée vis-à-vis des cellules normales s'est cependant révélée comme étant tout à fait réversible. Ce résultat est significatif, même si à une concentration de 0,5 mM on observe une certaine toxicité du principe actif vis-à-vis des cellules. Cependant, surtout si l'on prend en considération le caractère particulièrement grave des affections que l'invention vise à traiter, l'activité importante des substances à la concentration de 0,1 mM sont indicatives d'un index thérapeutique encourageant. Les nouveaux dérivés selon l'invention de l'adénosine constituent des principes actifs de valeur pour la constitution de compositions'pharmaceutiques, utilisables à titre de médicaments, pour la prévention ou le traitement de tumeurs malignes et des infections virales. Ils sont appliqués aussi au traitement ou à la prévention des leucémies. Ils sont administrables notamment par voie injectable, par exemple par voie intramusculaire ou intraveineuse. Ils se présentent notamment sous la forme de compositions dans lesquelles ils sont associés à des véhicules pharmaceutiques liquides, injectables et stériles. Comme il va de soi et comme il résulte d'ailleurs déjà de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes d'application-et de réalisation qui ont été plus spécialement envisagés ; elle en embrasse au contraire toutes les variantes. REVENDICATIONS 1 - Médicament caractérisé en ce que son principe actif est constitué par au moins un dérivé de la 5'-deoxy-adnosine de formule générale dans laquelle X est un atome d'hydrogène ou un groupe contenant de à à 4 atomes de carbone, notamment un groupe alcoyle, et R est un groupe amine - NRR1 R1. d un groupe alcoyle ans lequel R1 peut être un H ou un méthyle et R2 comprenant respectivement de 1 à 4 atomes de carbone ; R1 et R2 pouvant également former ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle. du type de ceux de la morpholine, pyrrolidine ou analogue. 2 - Médicament selon la revendication 1. caractérisé en ce qu'il se présente sous la forme d'une composition injectable. 3 - Médicament selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce que que dans le drivé 5'-déoxy-adénosine, X est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle et R2 est un groupe isobutyle ou isopropyle. 4 - Médicament selon la revendication 1, dans lequel le principe actif est constitué par la 5'-déoxy-5'-tN-isobutyl)- aminoadénosine. 5 - Médicament selon la revendication 1, dans lequel le principe actif est constitué par la 5'-déoxy-5'-tN-isobutyl, N méthyl3-aminoadénosine. 6 - Dérivés dela 5'-déoxy-adénosine caractérisés par la formule générale dans laquelle X est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, R est un groupe aminé -NCR1 e méthyle et2R2 dans lequel R1 est un atome d'hydrogène ou un group est un groupe isopropyle ou isobutyle ; R1 et R2 pouvant également former ensemble avec l'atome d'azote un groupe morpholine ou pyrrolidine. 7 - La 5'-déoxy-5'-(N-isobutyll-aminoadénosine. 8 - La 5'-déoxy-5'-(N-isobutyl, N-méthyl)-aminoadénosine.