Brevet FR2353638A1 — publié le 19771230

La présente invention concerne un fermenteur basculant comportant un dispositif mélangeur à mouvement pendulaire. Les fermenteurs connus comportent un dispositif mélangeur muni d'un entraînement par le fond ou par le haut. Les arbres d'entraînement doivent être rendus étanches dans l'enveloppe du fermenteur. Du fait de l'usure des joints d'étanchéité, le contenu du fermenteur est souillé, ce qui peut conduire à sa perte. On connaît également des dispositifs mélangeurs sans presse étoupe, par exemple des mélangeurs à mouvement pendulaire à couplage magnétique, ou excités électriquement. Ces dispositifs suppriment effectivement les inconvénients des étoupa9es, mais leur capacité est limitée. Le problème qui est a' la base de l'invention est de réaliser un fermenteur basculant de forte capacité, comportant un dispositif mélangeur sans presse-étoupe. Pour résoudre ce problème, l'invention;propose un fermenteur basculant qui se compose d'une enveloppe cylindrique avec un dispositif mélangeur et un couvercle fixé par brides, caractérisé en ce que le dispositif mélangeur est fixé sur le couvercle tout en étant mobile en ce que l'enveloppe est montée à rotation sur un bâti et est reliée à un mécanisme d'entraînement par une tringlerie. Le dispositif mélangeur est relié par un tube souple à une tubulure traversant le couvercle. Il constitue un agitateur à pales croisées. Les Figures I et 2 représentent un mode de réalisation donné à titre d'exemple du fermenteur basculant avec sa tringlerie. Le fermenteur (1) est muni de tourillons (6) et est monté à rotation sur le bâti (7). La référence (8) désigne les coussinets des tourillons (6). Le tringlerie (9a, b, c) relie le fermenteur & un mécanisme d'entraînement composé d'un moteur (11) et d'un dispositif de transmission (10). Une partie (9a) de la tringlerie est solidarisée avec l'arbre de sortie (12) du dispositif de transmission (10) et une autre partie (9b) est solidarisée avec l'un des tourillons (6). Les parties (9a et 9b) sont articulées sur la partie (9c). Les parties (9a et 9b) présentent encore des moyens (13) permettant de modifier la longueur des bras de levier donc i' ampli- tude du mouvement angulaire du fermenteur. La fréquence des oscillations est réglée au moyen du dispositif de transmission (10), qui est à vitesse variable.Le couvercle (2) du fermenteur (1) présente une tubulure (3) pénétrant à travers le couvercle à l'intérieur du fermenteur. Le dispositif mélangeur (5)(mélangeur å pales croisées) est relié par un tube souple (4) à la tubulure (3). Compte-tenu des forces agissant sur le mélangeur, il se produit pendant le mouvement (basculement) du fermenteur un mouvement relatif entre ltenve- loppe du fermenteur et le dispositif mélangeur. Le mélangeur subit un mouvement pendulaire. L'armature (5a) est avantageusement exécutée sous la forme dtun tube, de sorte que le fermenteur peut être rempli, vidé et recevoir un gaz par la tubulure (3), le tube (4)(par exemple un tube de silicone), et l'armature (5a). On peut également prélever des échantillons de cette façon.La tubulure (14) sert à ltévacuation de l'air. Dans le couvercle, on peut disposer d'autres tubulures (non représentées). L'enveloppe et le mélangeur peuvent être en acier au chrome-nickel. Le fermenteur se preste en particulier à la culture de virus et de cellules, par exemple de cellules de mammifères dans des cultures en suspension. L'exemple suivant est donné à titre d'illustration de l'invention. EXEMPLE Dans un fermenteur basculant d'une capacité de 210 1, on introduit 100 1 d'une suspension cellulaire contenant 200 000 cellules de BHK-21 par ml (BHK=Baby Hamster Kidney). Dans la suspension cellulaire, on envoie 100 1 d'air par heure. Le pH est maintenu à 7,0 avec NaOH 1N. La fréquence d'oscillation est de 14 mouvements de bascule parminute. La culture de la suspension cellulaire dure 48h à 37 OC. On obtient comme résultat une suspension contenant environ 2 millions de cellules/ml. On infecte cette suspension avec des virus de la fièvre aphteuse. A cet effet, on dilue la suspension cellulaire avec une solution nutritive selon Eagle, jusqu'à ce qu'on ait environ 1 million de cellules par ml de suspension, et on lui ajoute, pour 10 000 cellules, environ 1 000 virus de la fièvre aphteuse.On cultive ce mélange pendant 28-31 heures à 37 C. Les résultats sont résumés dans le tableau suivant Essai Type Nombre de Moment de Nombre de Titre en Titre en RLC N de cellules par ml la récolte cellules par virus in- 1:2 1:4 1:8 1::16 virus lors de l'in- (heures après ml lors de la par ml changé fection l'infection) récolte 1 O1 0,9 Mio 22 0,1 Mio 107,7 ++++ ++++ ++++ ++ + 2 A5 1,05 Mio 30 0,5 Mio 107,9 ++++ ++++ ++++ ++ + 3 C 0,9 Mio 31 0,56 Mio 108,1 ++++ ++++ ++++ ++ + Comme le montrent les titres en virus du tableau, on peut préparer avec le fermenteur de l'invention des vaccins contre la fiévre aphteuse dont la teneur en antigènes est supérieure â celle exigée par la réglementation (107,3/ml). Le titre en virus est déterminé par titrage sur tissu cellulaire ou sur des souris. L'abréviation RLC signifie "réaction de liaison du complément". REVENDICATIONS 1 - Fermenteur basculant constitué d'une enveloppe cylindrique avec un dispositif mélangeur et un couvercle fixé par brides, caractérisé en ce que le dispositif mélangeur est fixé sur le couvercle tout en étant mobile, en ce que 11 enveloppe est montée à rotation sur un bâti et est relié par une tringlerie à un mécanisme d'entraînement. 2 - Fermenteur suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le dispositif mélangeur est relié par un tube souple à une tubulure traversant le couvercle. 3 - Fermenteur suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le dispositif mélangeur est un agitateur pales croisées.