Brevet FR2334367A1 — publié le 19770708

L'invention concerne un procédé permettant d'isoler des pépins de raisin une substance ayant une activité anti-inflammatoire supérieure à celle de l'huile de pépins de raisin commerciale. L'invention concerne aussi des compositions cosmétiques et pharmaceutiques contenant la substance anti-inflammatoire ainsi isolée ; en particulier, l'invention propose des compositions anti-inflammatoires pour le traitement des cheveux, de la peau et de la cavité buccale. On comprend que les états de la peau qui conduisent à l'inflammation et souvent aussi à ltoedème des tissus superficiels se rencontrent fréquersment. Des exemples de ces états de la peau sont la gingivite qui peut être causée par une infection, l'éry- thème cutané comme celui qui résulte d'une exposition prolongée au soleil, ainsi que lteczéma et d'autres formes de lésion cutanée qui peuvent résulter d'une irritation consécutive à un contact avec des agents chimiques. On peut atténuer certains de ces inconvénients grâce à un traitement par des compositions cosmétiques ou pharmaceutiques contenant des substances synthétiques qui ont un effet anti-inflammatoire, par exemple la cortisone, la phénylbutazone, les salicylés, l'indométhacine et les dérivés de l'acide anthranilique, mais elles peuvent donner lieu à des effets secondaires indésirables et en tout cas, on ne les utilise habituellement que sous une surveillance médicale stricte. Les pépins de raisin contiennent normalement environ 12 à 20 % en poids d'huile. I1 a été démontré que cette huile, que l'on peut séparer en pressant les pépins ou plus habituellement par extraction à ithexane selon un procédé industriel connu, présente une légère activité anti-inflammatoire. Toutefois, il apparait que cette activité est insuffisante pour permettre d'utiliser lthuile comme constituant actif d'un cosmétique anti-inflammatoire. On a découvert maintenant un procédé permettant d'isoler des pépins de raisin une substance ayant des propriétés anti-inflaF matoires accrues et on a aussi mis au point avec succès des compositions cosmétiques et pharmaceutiques contenant cette substance anti-inflammatoire et pouvant servir dans le traitement des états de la peau qui s'accompagnent d'une inflammation et/ou d'un oedème. Plus particulièrement, on a démontré que la substance anti-inflammatoire est soluble dans certains solvants polaires à une température inférieure à -600C, tandis que les triglycérides qui sont aussi présents dans les pépins de raisin servant de matière première cristallisent au-dessus de cette température et sont donc faciles à séparer. En conséquence, l'invention propose un-procédé permettant d'isoler de l'huile de pépins de raisin une substance ayant une activité anti-inflammatoire, caractérisé par le fait que l'on dissout l'huile de pépins de raisin dans un solvant polaire ayant un point de fusion qui ne dépasse pas -600C et qu'on en sépare une substance dont la valeur anti-inflammatoire, telle qu'elle est définie ci-après, est inférieure à 5. Il y a lieu d'expliquer que l'on peut démontrer et mesurer l'activité anti-inflammatoire d'une substance en déterminant son effet sur l'oedème engendré sur la patte du rat à la suite d'une injection sous-cutanée d'un agent phlogogène comme la carraghénine. On peut exécuter cet essai comme suit On administre par voie buccale une quantiticonnue de substance anti-inflammatoire à un groupe de rats et on administre à un deuxième groupe de rats un placebo tel que le glucose ou l'huile de vaseline. Une heure après l'ingestion, tous les rats reçoivent dans la patte droite de derrière une injection souscutanée de 0,15 ml -d'une solution de carraghénine à 1 % dans le sérum physiologique.Quatre heures plus tard, on mesure par pléthysmographie l'accroissement de volume de la patte droite de derrière en comparaison de la gauche. Cette méthode pléthysmographique est décrite plus compo tement par C.A. Winter, E.A. Risley et G.W. Nuss dans "Proc. Ex. Biol. Med.", 111, 544 (1962). On calcule l'accroissement moyen dé volume (bv) pour les deux groupes de rats et le pourcentage d'inhibition de la formation d'oedème ( inhibition) après l'administration de la substance anti-inflammatoire, d'après l'éxpression : #v(témoin) - A v (traité) > inhibition = . x 100 #v (temoin) D'après ces résultats, il est possible de déterminer la valeur anti-inflammatoire de la substance, qui est par défini tion la quantité minimale de l'échantillon contenant la substance anti-inflammatoire, exprimée en g/kg de rat qui, administré par voie buccale, cause une diminution statistiquement significative de l'oedème. La matière première du procédé selon l'invention est l'huile de pepins de raisin, c'est-à-dire l'huile obtenue par pressage ou extraction des pépins de raisin (Vitis vinifera). La matière première préférentielle est l'huile que l'on a extraite des pépins de raisin selon un procédé industriel courant utili sant l'hexane. L'étape du procédé selon l'invention consiste à dissou dre l'huile de pépins de raisin dans un solvant polaire ayant un point de fusion -600C au maximum. De préférence, le solvant polaire a un point de fusion inférieur à -60sC, idéalement infé rieur à -70QC. Un solvant polaire approprié est l'acétone. On prépare habituellement la solution à une température élevée, qui est le point d'ébullition du solvant polaire ou une température proche de ce point. Selon un procédé préférentiel, on prépare la solution xà une température de 30 à 700C, idéalement à environ 500 C, puis on refroidit la solution à une température de -600C, au-dessus de laquelle les triglycérides cristallisent. Idéalement, on re froidit la solution entre -70 et -sOOC. Après extraction par le solvant polaire et élimination du triglycéride cristallisé, on soumet la solution obtenue à une évaporation par distillation ou à un autre processus de concen tration pour éliminer le solvant et obtenir ainsi un résidu hui leux qui contient une substance anti-inflammatoire. Il est préfé rable d'éliminer le solvant à une température ne depassant pas son point d'ébullition pour obtenir un rendement optimal. On peut -par exemple éliminer avantageusement le solvant par distillation sous vide. Le résidu huileux ainsi obtenu a normalement une- valeur anti-inflammatoire inférieure à 5 et, plus habituellement, cette valeur sera inférieure à 2. En conséquence, il est possible d'uti liser ce résidu huileux sans autre purification dans la fabrica tion de compositions cosmétiques ou pharmaceutiques. Toutefois, si l'on veut une plus grande activité (donc une moindre valeur numérique), on peut avoir recours à-une nouvelle purification, par exemple par le procédé décrit ci-après. Il est entendu qu'il existe d'autres procédés de purification et que l'invention n'est pas limitée à ceuxque l'on va décrire. Selon le procédé préférentiel de purification de la substance anti-inflammatoire contenue dans le résidu huileux ayant une valeur anti-inflammatoire inférieure à 5, on extrait le résidu huileuxpar une solution de soude puis on acidifie pour convertir la substance anti-inflammatoire à la forme acide. On peut obtenir une substance anti-inflammatoire ayant une pureté qui doit être d'au moins 90 96 en séparant la substance des impuretés sur une colonne de silice avec élution par étapes, d'abord au moyen d'un mélange 80:20 d'hexane et d'éther, puis au moyen d'un mélange 50:50 d'hexane et d'éther et finalement au moyen de méthanol. Pour obtenir une pureté d'au moins 99 %, il est possible de cristalliser la substance anti-inflammatoire dans un solvant mon polaire comme l'hexane. Pour mieux illustrer, uniquement à titre d'exemple, l'isolement et la purification d'une substance anti-inflammatoire provenant de l'huile de pépins de raisin, on donne ci-après une description détaillée du procédé que l'on peut utiliser. Il est entendu que l'invention n'est pas seulement limitée à ce schéma particulier. - Procédé d'extraction de substance anti-inflammatoire On commence par dissoudre dans l'acétone à 500C de l'huile de pépins de raisin telle qu'on l'extrait commercialement des pépins de raisin par l'hexane, puis on refroidit à -700C pendant 4 heures. On élimine la matière solide par filtration et on soumet le filtrat à la distillation sous vide pour éliminer le solvant ; il reste un résidu huileux. On détermine l'activité anti-inflammatoire de ce résidu par l'essai sur la patte du rat, décrit plus haut. On trouve que la valeur anti-inflammatoire de ce résidu huileux (appelé Fraction A) est de 0,50. On purifie alors à nouveau la substance anti-inflamma toire présente dans ce résidu huileux en l'extrayant par la soude 1N dans ltalcool aqueux, puis on acidifie l'extrait par l'acide chlorhydrique 1N pour convertir la substance anti-inflammatoire à la forme acide. On conduit alors une nouvèlle purification en séparant la substance anti-inflammatoire des impuretés sur une colonne de silice, par la technique d'élution par étapes décrite plus haut. Finalement, on obtient par cristallisation dans lthexane une substance anti-inflammatoire sous la forme d'un solide cristallin blànc fondant entre 306 et 3080C et dont la pureté estimée est d'au moins 99 %. On trouve que la valeur anti-inflammatoire de la substance anti-inflammatoire pure est inférieure à 0,05. L'invention est illustrée davantage à propos du dessin qui est un organigramme indiquant sous forme schématique les étapes préférentielles de procédé que l'on peut utiliser pour isoler et purifier la substance anti-inflammatoire tirée de l'huile de pépins de raisin. La substance aflti-inflammatoire pure ou un produit isolé de l'huile de pépins de raisin et ayant une valeur anti-inflammatoire inférieure à 5 peuvent entre incorporés à des compositions cosmétiques et pharmaceutiques à usage externe ou interne En conséquence, l'invention a aussi pour objet une composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant au moins 0,1 % en poids de la substance anti-inflammatoire préparée selon le procédé décrit ci-dessus, ainsi qu'un véhicule acceptable cosmétiquement ou pharmaceutiquement, autre que l'eau. Ces compositions comprennent au moins 0,1 oX en poids de la substance anti-inflammatoire ou de l'extrait qui la contient; de préférencei les compositions comprennent 1 à 50 %, idéalement 2 à 20 % en poids de la substance anti-inflammatoire. Des exemples de compositions cosmétiques selon l'invention sont des crèmes pour la peau comme celles qui servent à soulager les coups de soleil et d'autres crèmes destinées à être appliquées principalement sur les mains et le visage. D'autres exemples sont la- crème à raser, les dentifrices, les bains de bouche, les lotions contre la transpiration, les désodorisants et les produits de traitement des cheveux. On comprend que la nature de la composition cosmétique ou pharmaceutique influence te choix du ou des véhicules appropriés. Les véhicules appropriés peuvent être classés comme indi qué ci-après. Il faut expliquer que les véhicules sont des substances qui peuvent jouer le rôle de diluants, agents de dispersion ou excipients de ia substance anti-inflammatoire et qui assurent donc que l'on puisse l'appliquer et la distribuer uniformément sur la peau à une concentration appropriée ; dans cetains cas, le véhicule peut faciliter sa pénétration dans l'épiderme à travers la couche cornée, augmentant ainsi l'efficacité de la substance anti-inflammatoire appliquée. Il n'est pas exclu d'utiliser l'eau qui peut jouer le rale de véhicule ; l'eau peut certainement être présente dans beaucoup des compositions selon l'invention mais il est prévu qu'elles doivent contenir au moins un véhicule autre que l'eau. ~Les véhicules qui peuvent servir dans les compositions selon l'invention peuvent comprendre des absorbants pulvérulents, liants et excipients, des liquides tels que des émollients, propulseurs, solvants, humidifiants et épaississants. Voici des exemples de chacun de ces types de véhicule Absorbants pulvérulents -: silicate de magnésium, base d'absorption de-lanoline, poudre de silice amorphe. Liants et excipients Pulvérulents : cellulose microcristalline, néopentanoate d'isostéaryle, polyacrylamide, lactate de lauryle, silice précipitée, talc, craie. Emollients alcool stéarylique, monoricinoléate de glycéryle, monostéarate de glycéryle, suif sulfaté, propylèneglycol, huile i vison, alcool cétylique, stéarate de stéaryle, isostéarate d'isopropyle, brassylate de diméthyle, acide stéarique, palmitate d'isobutyle, Stéc rate d'isocétyle, alcool oléylique, laurate d'isopropyle, laurate d'hexyle, oléate de décyle, adipate de diisopropyle, octadodécanol (2), alcool isocétylique, éthoxymyristate de myristyle, palmitate de cétyle, diméthylpolysiloxane, sébaçate de dibutyle(n), séba çate de diisopropyle, sébaçate de bis-(2-éthylhexyle), palmitate de 2-éthylhexyle, isononanoate d'isononyle, isononanoate d'isodécyle, isononanoate d'isotridécyle, stéarate de 2-éthylhexyle, adi pate de bis-(2-éthylhexyle), succinate de bis-(2-éthylhexyle), myristate d'isopropyle, palmitate d'isopropyle, stéarate d'isopropyle, stéarate de butyle, monostéarate de glycéryle, polyéthylèneglycol , propyleneglycol, triéthylèneglycol, lanoline, huile de ricin, alcools de lanoline acétylés, lanoline acétylée, pétrolatum , ester d'iopropyle d'acides gras de lanoline, huiles minérales, myristate de butyle, acide isostéarique,-acide palmitique, linoléate dtxDpropyle, lactate de cétyle, lactate de,lauryle, lactate de myristyle, aminogluconate d'hydroxyalcoyle quaternisé, oléate de décyle, oléate d'isodécyle, néopentanoate d'isostéaryle, myristate de myristyle, éthoxymyristate d'oléyle, stéarate de diglycol, stéarate de 2-éthoxyéthyle, stéarate myristyle, lanolate dtisopropyle. Propulsifs trichlorofluorométhane, dichlorodifluorométhane, dichlorotétrafluoréthane, monochlorodifluorométhane, trichlorotrifluoréthane, propane, butane, isobutane (utilisés isolément ou en mélange). Solvants : alcool éthylique, 2-éthylhexanol, carbonate d'éthylène, carbonate de propylène, huile de ricin, polymère linéaire éthoxylé de me- thanoi, 2-éthoxyéthanol, éthers monobutylique et monoéthylique du diéthylèneglycol, butanol propoxylé, alcool oléylique propoxy lé, stéarate de butyle, myristate de butyle. Humidifiants : glycérol, sorbitol, 2-pyrrolidone-5-carboxylate de sodium, collagène soluble, phtalate de dibutyle, gélatine, polyglycérogène, glucose éthoxylé (10 à 20 moles), glucose propoxylé (10 à 20 mo ~les) EVaississants : gommes, amidon, silice colloIdale, polyacrylate de sodium, smectites de tétraalcoylammonium et/ou de trialco9-arylammonium, silicate de magnésium et d'aluminium modifié chimiquement, montmorillonite modifiée organiquement, silicate d'aluminium hydraté, silice fumée, polymères carboxyvinyliques, sodium carboxyméthylcellulose, amide du stéarate d'hydroxyéthyle, stéarate de 2-éthoxyéthyle. Le véhicule utilisé peut constituer tout le reste du produit ou une moindre proportion, à condition que le véhicule scit capable, le cas échéant en mélange avec d'autres véhicules, de jouer son rôle ici défini. Les exemples suivants illustrent les compositions de produits cosmétiques contenant une substance anti-inflarmatoire selon l'invention, extraite des pépins de raisin. En se référant à l'organigramme, on pourra identifier les diverses huiles et fractions contenant la substance anti-inflammatoire et mentionnées dans ces exemples. Exemple 1 Lotion astringente antiseptique % en poids sulfate de potassium et d'aluminium t,O glycérol 5,0 chlorure de benzalkonium 0,5 alcool , 5,0 Fraction A 0,3 eau pour faire 100 Exemple 2 Bain de bouche % en poids Fraction B 0,100 chlorure de cétylpyridinium 0,100 solution de sorbitol à 70 % 20,000 essence de cannelle 0,050 essence de menthe poivrée 0,100 acide citrique 0,100 "FD & C Red nO 2" 0,0ou "Tween 60" 0,300 alcool éthylique 10,000 eau 69,249 Ce bain de bouche doit être dilué avec 3 à 4 parties d'eau lorsqu'on veut l'utiliser. Exemple 3 Rouge à lèvres % en poids cire de carnauba 10,0 cire d'abeille 15,0 lanoline 5,0 alcool cétylique 5,0 huile de ricin 64,8 Fraction A 0,2 Exemple 4 Lotion contre la transpiration 56 en poids hydroxychlorure d'aluminium 20,0 propylèneglycol 5,0 alcool 10,0 germicide 0,2 Fraction C 0,5 parfum q.s. eau pour faire 100 REVENDICATIONS 1. Procédé permettant d'xDler de l'huile de pépins de raisin une substance ayant une activité anti-inflammatoire, caractérisé par le fait que l'on dissout l'huile de pépins de raisin dans un solvant polaire ayant un point de fusion qui ne dépasse pas -600C et qu'on n sépare une substance dont la valeur anti-inflammatoire telle que définie de la ligne 16 de la page 2 à la ligne 6 de la page 3 de la description, est inférieure à 5o 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le solvant polaire est l'acétone. 3. Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait que l'on conduit la séparation à une température inférieure à -600C, de préférence ne dépassant pas -70 C. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que l'on purifie en outre la substance active anti-inflammatoire par les étapes suivantes (a) extraire par une solution d'un alcali, de préférence de sou de, (b) acidifier l'extrait ainsi obtenu, et (c) séparer la substance anti-inflammatoire sous la forme acide. 5. Composition cosmétique ou pharmaceutique caractérisée par le fait qu'elle comprend au moins 0,1 56 en poids de la substance anti-inflammatoire préparée selon l'une des revendications 1 à 4, avec un-véhicule acceptable cosmétiquement ou pharmaceutiquement, autre que l'eau.