Brevet FR2346312A1 — publié le 19771028

La présente invention concerne un procédé pour la fabrication de composés exerçant une action antimicrobienneet tolérés par l'épiderme à partir de sous-produits de la synthèse du chloro-4 métbyl-2 phénol. Le chloro-4 méthyl-2 phénol trouve de multiples applications techniques. Il est utilisé en particulier comme produit intermédiaire destiné à la synthèque d'agents protecteurs de plantes. Pour la fabrication de chloro-4 méthyl-2 phénol, du méthyl-2 phénol est chloruré par différents procédés, en particulier par réaction avec du chlorure de sulfuryle. On obtient ainsi un mélange constitué essentiellement par du méthyl-2 phénol, du chloro-2 méthyl-6 phénol et du chloro-4 méthyl-2 phénol. Par distillation de ce mélange réactionnel, on obtient un produit préliminaire composé principalement de chloro-2 méthyl-6 phénol ainsi que de plus faibles quantités de méthyl-2 phénol et de chloro-4 méthyl-2 phénol, et ensuite le chloro-4 méthyl-2 phénol désiré. Lors de la synthèse- du chloro-4 méthyl-2 phénol devant être obtenue en de fortes quantités, il se forme évidemment une quantité considérable du produit préliminaire dont la mise en valeur profitable s impose de façon urgente. Jusqu a présent l'él; m; tation du produit préliminaire s 'effectuait par combustion. Or, d'une part, cette manière de procéder n'est pas justifiable du point de vue économique puisqu'elle entraîne la destruction d'une matière première valorisable. D'autre part, il se forme, lors de la cosbustion, de l'acide chlorhydrique gazeux qui non seulement tend à causer des dégâts aux installations par suite de son action corrosive mais est également extr8mement discutable du point de vue de la pollution du milieu environnant. Or, la présente invention a pour objet, afin d'éviter les inconvénients économiques et techniques précités, de valoriser le produit préliminaire d'une manière profitable. Dans ce but, il-est proposé suivant la présente invention un procédé permettant d'obtenir, à partir du produit préliminaire cité, des composés capables d'exercer une action antimicrobienne et tolérés par la peau. Suivant la présente invention, des composés répondant a' la formule générale dans laquelle 21 représente C h et CECH3 , , et 22 et R3 représentent E et Cl, sont obtenus en faisant réagir le produit préliminaire cité, constitué essentiellement par du chloro-2 méthyl-6 phénol ainsi que de plus faibles quantités de méthyl-2 phénol et de chloro-4 méthyl-2 phénol, avec du chlorure de benzyle, des chlorures de benzyle substitués, des alcools benzyliques substitués ou non, du styrène ou des styrènes substitués. Si le produit préliminaire contient des proportions relativement fortes de méthyl-2 phénol et de chloro-4 méthyl-2 phénol il convient, pour des raisons de pureté et de rendement en composés de la formule générale I, de réduire les teneurs en méthyl-2 phénol et chloro-4 méthyl-2 phénol Cela peut se faire, par exemple, en séparant par distillation le chloro-4 méthyl-2 phénol et en chlorurant le méthyl-2 phénol contenu dans le mélange de chloro-2 méthyl-6 phénol, de chloro-2 méthyl-4 phénol et de méthyl-2 phénol ainsi qu'en épurant le produit par distillation subséquente. La synthèse des composés répondant à la formule générale I se réalise dans les conditions usuelles de l'alcoylation par réaction de Friedel et Crafts. Au cours de cette synthèse, l'agent d'aralcoylation peut être utilisé en une quantité inférieure à celle équivalente, ou en excès. En tant que catalyseurs peuvent être utilisés de manière appropriée, du chlorure d' aluminium, du chlorure d'antimoine-V, du trifluorure de bore, du chlorure de fer-III, du chlorure de titane-IV, du chlorure d'étain-IV et, en particulier, du chlorure de zinc. Exercent en outre une action catalytique des métaux comme par exemple le zing et le titane. En outre, peuvent être utilisés, en particulier en cas de mise en oeuvre d'alcools benzyliques, de l'acide fluorhydrique, de l'acide sulfurique, de l'acide phosphorique et du pentoxyde de phosphore. En cas d'utilisation de chlorures de benzyle et de styrènes les caralyseurs sont avantageusement employés en quantité inférieure à celle équimolaire. En cas d'utilisation d'alcools benzyliques, il est également possible d'employer un excès de catalyseur. Les composés à action antimicrobienne suivant la présente invention sont obtenus, de la manière décrite ci-dessus, par réaction effectuée en présence ou en l'absence de solvants. En tant que solvants peuvent être utilisés de manière appropriée, par exemple, de l'éther de pétrole, du sulfure de carbone, du chloroforme et de l'acide acétique. La réaction avec des chlorures de benzyle, des alcools benzyliques ou des styrènes peut avoir lieu dans un intervalle de température compris entre 20 et 200 C. En l'absence de soli vants la réaction est avantageusement effectuée en chauffant à une température comprise entre 60 et 20000, de préférence entre 100 et 1600C, pendant quelques heures. Pour effectuer la réaction dans des solvants à point d'ébullition bas, il faut des temps de réaction plus longs. L'isolement des produits à partir du mélange réactionnel et leur épuration s'effectuent-par les procédés-usuels de distillation et de cristallisation. Les composés suivant la présente invention se distinguent par leur action efficace contre des bactéries pathogènes pour les animaux et le humains ainsi que contre des champignons et moisissures. Les composés se distinguent, en particulier, par leur excellente action contre des dermatophytes et présentent, à cet égard, le double avantage de n'avoir qu'une faible toxici té aiguë et de ne provoquer absolument aucune sensibilisation de la peau. C'est pourquoi les composés suivant l'invention sont utilisés de préférence dans le domaine du traitement de l'épiderme qu'il s'agisse de produits pharmaceutiques ou cosmétiques , de savons ou d'autres produits. Ainsi, il est possible non seulement de valoriser de manière profitable une matière première normalement sans valeur qui présente une charge pour l'environnement mais en outre d'obtenir un agent antimicrobien de haute qualité. L'invention est expliquée plus en détail ci-dessous à l'aide d'exemples de réalisation. t EXEMPLE 1 500 g d'un produit préliminaire, qui contient 70,9% de chloro-2 méthyl-6 phénol, 10,4% de méthyl-2 phénol, 14,4% de chloro-4 méthyl-2 phénol, 0,9% de dichloro-2,4 méthyl-6 phénol, 3,3% de divers phénols chlorés et 0,1% d'eau, et 11 g de chlorure de zinc anhydre, sont portés à 1000C en agitant et en excluant toute humidité. 535 g de chlorure de benzyle sont ajoutés goutte à goutte en l'espace de deux heures. Le produitest ensuite chauffé pendant une heure à une température comprise entre 150 et 1550C et agité pendant cinq heures à cette température. Après refroidissement, le produit est lavé avec de l'eau et distillé. On obtient 214 g de chloro-2 méthyl-6 benzyl-4 phénol pur qui présente les caractéristiques suivantes : Point d'ébullition 128 à 129 C sous 0,2 torr; nD20 1,5944. Teneur en C1 calculée 15,24% Teneur en C1 constatée 14,79% EXEMPLE 2 500 g d'un produit préliminaire présentant la composition indiquée à l'exemple I et 11 g de chlorure de zinc anhydre sont chauffés à 1000C en agitant et en excluant toute l'humidité. 682 g de chlorure de chloro-4 benzyle sont ajoutés goutte à goutte en l'espace de deux heures. Pendant une heure le produit est chauffé à une température comprise entre 150 et 155 C et agité pendant cinq heures à cette température. Après s refroidissement, le produit est lavé avec de lteau et distillé. On obtient 158g de chloro-2 méthyl-6-(chloro-4'benzyl)-4 phénol pur présentant les caractéristiques suivantes Point d'ébullition 144 à 150 C sous 0,1 torr; nD20 1,6029. Teneur en C1 calculée 26,54 ffi Teneur en C1 trouvée 26,18% EXEMPLE 3 500 g d'un produit préliminaire présentant la composition mentionnée dans l'exemple 1 et 13 g de chlorure de zinc anhydre sont chauffés à 1000C en agitant et en excluant toute humidité. 828 g de chlorure de dichloro-3,4 benzyle sont ajou- tés goutte à goutte en l'espace de deux heures. Pendant une heure le produit est chauffé à une température comprise: entre 150 et 155 C et agité pendant cinq heures à cette température. Après refroidissement, le produit est lavé à l'eau, distillé et recristallisé à partir d'essence (point d'ébullition compris entre 60 et 70 C). On obtient ainsi 188 g de chloro-2 méthyl-6-(dichloro3', 4' benzyl) phénol pur présentant les caractéristiques suivantes Point de ramollissement compris entre 106 et 107 C Teneur en C1 calculée 35,27% Teneur en Cl trouvée 35,08% E X E M P L E 4 A 494 g d'un distillat de chloro-2 méthyl-6 phénol technique contenant 84,8* de chloro-2 méthyl-6 phénol et 15,2% de méthyl-2 phénol sont ajoutés, en l'espace d'une heure, 25g de chlore à une température de 35 C. Le produit est agitépendant une heure à 35 C, lavé à l'eau et distillé. On obtient ainsi 434 g de chloro-2 méthyl-6 phénol. Point d'ébullition : 72 C sous 7 torrs Teneur en Cl calculée 24,9% Teneur en Cl trouvée 24,1% A un mélange de 356,4 g de chloro-2 méthyl-6 phénol, 800 ml de chloroforme et 60 g de chlorure de zinc anhydre sont ajoutés goutte à goutte, en l'espace de 25 minutes, 126,6 g de chlorure de benzyle en agitant fortement. Pendant douze heures le produit est agité à reflux, lavé a' à l'eau et ensuite, après évaporation du solvant, distillé. On récupère ainsi 204,0 g de chloro-2 méthyl-6 phénol. Sont obtenus 163,2 g de chloro-2 méthyl-6 benzyl-4 phénol. Point d'ébullition : 127,5 C sous 0,2 torr; nD20 1,5935. Teneur en C1 calculée 15,24 % Teneur en C1 trouvée 15,07 % Ci-dessous sont examinées l'activité antiseptique et la toxicité du chloro-2 méthyl-benzyl-4 phénol (CMB). ACTIVISTE BÂCTERIOSTATIQUE ET FONGISTATIQUE Le CMB est soumis à des essais en comparaison avec des antiseptiques du commerce. Afin d'établir les possibilités d'utilisation pratiques du CMB, son action en tant que produit incorporé dans un savon antiseptique contenant un mélange d'agents tensio-actifs et destiné à soigner la peau a fait l'objet de tests et a été comparé avec l'action propre de ce savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs (tableau 1). Dans les test de bactériostase ou de fongistase, les substances d'essai sont incorporées à des concentrations géométriquement échelonnées dans des milieux nutritifs solides. Dans le test de bactériostase sont utilisés, en tant que germes expérimentaux, du Staph. aureus, des entérocoques, des F.coli, du Prot. mirabilis et de la Pseud. aeruginosa, tandis que dans le test de fongistase sont utilisées les souches de champignons suivantes :: Trics. mentagrophytes croissant de manière pléomorphe et typique, Trics. rubrum, Trich.tonsurans, Trich. schon- leinii, Nicrosporon audouinii, Microsporon canis, Trichosporon cutaneum et deux souches de Candida-albicans. L'appréciation des résultats d'essai s'effectue dans son ensemble au moyen de l'indice de l'activité bactériostatique (IAb5) et fongistatique (IAf10), en utilisant chaque fois une moyenne pondérée des valeurs limites pour 1' "inhibition absolue" et la "croissance réduite" des cultures de germes expérimentaux, exprimées en 2 tant que - log de la dilution/effective de la substance (W.Weuffen, D. Martin et W.Schade, Pharmazie 18, 420 (1963) W.Weuffen et B. Herrmann, Z. med. Labortechnik 8, 301 (1967) Les résultats montrent que le produit CMB présente une bonne activité antibactérienne et est très efficace contre des champignons, Une bactériostase peut être constatée jusqu'à un taux de dilution de 1 : 10 000. Jusqu'à un taux de dilution de 1 : 1000 la croissance b-actérienne se trouve corplètement supprimée. La fongistase peut entre constatée en moyenne jusqu'à un taùx de dilution de 1 : 50 000. Une inhibition absolut de la croissance se produit jusqu 'a' un taux de dilution de 1 : 32 000. L'activité du Cfl3 dépasse celle de l'hexaméthylènetétramine tant du point de vue bactériostatique que fongistatique et est également nettement supérieure à celle du disulfure de tétraméthylthiurame du point de vue fongistatique. Lorsque le produit est utilisé en combinaison avec un savon antiseptique contenant des agents tensio-actifs et destiné à soigner la peau, il s'avère de manière surprenante que l'action bactériostatique reste non seulement conservée mais se trouve fortement améliorée (plus que sextuplée). De même, l'activité fongistatique du savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs se trouve augmentée par l'ad- dition de CMB. Activité antimycotique sur la candidose expérimentale de crête de coq. Le CMB est, à nouveau, testé en tant què produit incorporé dans le savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs ainsi que dans du propylèneglycol, lequel est un salvant présentant de lui-m8me une action fongistatique. À titre de comparaison le savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs et le propylèneglycol servant de véhicules sont testés seuls, de même que le borate de sodium qui a donné satisfaction dans le traitement de la candidose chez les humains. Un morceau de culture de champignon Candica albicans de la grosseur d'un petit pois est placé sur la crête, préalablement rendue rugueuse, de coquelets âgés de cinq semaines (Kramer, R. Rödel, R. Krause, W. Weuffen et R. Kühne, Z. ges. Hyg. Grenzgeb. 20, 509 (1974). La crête de coq est aspergée journellement deux fois d'une solution à 20% de dextrose. Du cinquième au septième jour après l'infection, les préparations sont testées sur les foyers de mycose. L'évaluation de la mycose se réalise en cinq phases Phase 1 : diamètre du foyer de mycose 5-1 Phase 2 : z " n n 5 à 10mm Phase 3 : fi 10 à 20nm Phase 4 : diamètre du foyer de mycose 20mm (plus de 2/3 de la crête) Phase 5 : diamètre du foyer de mycose toute la crête. Comme il ressort de la figure unique qui représente le processus de guérison (échelle en ordonnée) en fonction du temps (abscisse), le CMB utilisé à une concentration de 3% dans un savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs provoque un processus de guérison très sensiblement aussi rapide que celui. obtenu avec du borate de sodium. Tant le propylèneglycol que le savon antiseptique contenant un mélange d'agents tensio-actifs voient leur activité améliorée nettement par l'addition de CMB. Le coefficient de réussite, qui indique combien de fois la guérison se réalise plus rapidement avec le groupe de produits de traitement qu'avec le groupe de témoins, est de 3,5 pour le borate de sodium à 20% dans de la glycérine, de 2,4 pour le C3 à 3% dans du propylèneglycol, de 1,9 pour le propyl èneglFcol, de 2,6 pour le C3 à 3% dans du savon contenant un mélange d'agents tensio-actif et de 2,4 pour ce savon seul. Activité antiseDtique et degré de tolérance sur des brsslures expérimentales du troisième degré chez le cochon d'inde Le CMB est testé à une concentration de 1% en solution dans du propylèneglycol. A titre de comparaison sont testées une solution aqueuse à 10% du savon antiseptique contenant un mélange d'agents tensio-actifs et destiné aux soins de la peau et une solution à 1% da chloro-4 éthyl-2 phénylester d'acide acétique dans du propylèneglycol. Chez des cochons d'Inde on provoque, au moyen d'une source de rayonnement infrarouge, des brûlures normalisées du troisième degré (diamètre d'environ 3 cm). Dans un mode d'essai A, la mise à l'épreuve des substances, effectuée après brûlure et dégagement de la croûte de brûlure, est commencée le douzième jour après que la brûlure a été provoquée. Dans un deuxième mode d'essai désigné par B le test thérapeutique est commencé aussitôt après la stabilisation des brûlures, afin d'éviter, par voie prophylactique,une infection des brd- lures, laquelle se produit normalement tout au moins dans le cas des animaux témoins non traités (en tant qu'excitateurs peuvent être isolés entre autres Staph. aureus et F. coli). Les substances sont appliquées par pulvérisation une fois par jour. Le produit C exerce dans les deux modes d'essai- A et B une excellente activité antiseptique favorisant la cicatrisation (tableau 2). Dès le deuxième jour de traitement les brtlures sont déjà sèches et exemptes de couches purulentes. Le savon destiné aux soins dé la peau et contenant un mélange d'agents tensioactifs favorise la cicatrisation beaucoup moins. Les plaies sont certes également déjà sèches et exemptes de couches purulentes le deuxième jour mais la granulation ne commence que lentement au troisième jour (tableau 3). L'excellente action du CNB est particulièrement évidente en comparaison avec le chloro-4 éthyl-2 phénolester d'acide acétique, lequel ester est très efficace dans les tests de bactériostase et de fongistase mais ne produit pas d'influence favorable sur la cicatrisation.Au cours d'essais effectués avec ce composé 40 à 50% des animaux meurent entre le troisième et le cinquième jour de traitement, comme dans le cas du groupe témoin (tableaux 4 et 5). Toxicité orale intraveineuse et sous-cutanée chez la souris Le CMB ne présente qu'une faible toxicité aiguë chez la souris blanche. La dose léthale 50% (LD50) est de 1700+ 180 mg/kg en cas d'application orale, de 1000 mg/kg en cas d'application sous-cutanée et de 96t2 mg/kg en cas d'application introveineuse. Effet toxique sur la peau et pouvoir sensibilisateur de-celle-ci chez le cochon d'inde. Du CMB est testé en comparaison avec l'isothiocyanate de bromo-4 phényle à haute activité antimicrobienne, le dibenzyl3,5 tétrahydro-1,3,5 thiadiazine 2-thou{Dibenzthion)connu comme antimycotique et le chloro-4 dinitro-1,3 benzène qui présente notoirement une forte action sensibilisatrice. Afin d'établir l'effet toxique sur la peau on rase électriquement le dos de cochons d'Inde blancs pesant environ 250 g . 24 heures plus tard le test de toxicité est effectué avec la substance active utilisée à des concentrations de 12, 8, 6,. 3, 2, 0,8%, 0,2% et 0,05% dans de l'Ungt. lanetti cum oleo. L'application s'effectue suivant les conditions du test de Gotha. Au bout d'une durée d'action de 48 heures les pansements d'essai sont enlevés. Trente minutes plus tard et ensuite journellement on évalue les réactions de la peau jusqu'à ce que celles-ci cessent. Si les résultats obtenus le justifient, on teste en outre chaque fois des concentrations quatre fois plus faibles (W. 8chwenke et W.Weuffen, Arch. exp. Veterinarmed.23, 705 (1969). Le potentiel sensibilisateur des substances d'essai est examiné chaque fois sur quarante animaux par un test épicutané. Les animaux sont à nouveau rasés sur le dos. Au bout de 24 heures 0,3 g de pommade d'essai est journellement massé une fois sous une légère pression avec la main pendant deux minutes. La sensibilisation se prolonge pendant dix jours. Au bout d'un intervalle de dix jours, on procède à un nouveau rasage et 24 heures plus tard on examine la réaction obtenue par un test épicutané avec un pansement d'essai placé sur l'autre côté du corps. Comme témoin négatif est utilis une pommade de base exempte de substance aetive.A titre de témoin positif on examine à l'issue du test ,sur chaque animal, la tendance à être sensibilisé par du chloro-4 dinitro-1,3 benzène (W.Schwenke et W. Weuffen, Arch. exp. Veterinarmed. 23 705 (5969). hême lorsqu'il est utilisé à la plus forte concentration envisagée dans le cadre de la présente invention, à savoir à une concentration de 12,8%, le produit CMB n'irrite pas la peau (tableau6). L'isothiocyanate étudié, par contre, produit déjà un effet irritant sur la peau à des concentrations extrêmement réduites (tableau 7). Bien que le Dibenzthion, utilisé en tant qu'agent antimycotique, se comporte d'une manière très favorable au cours du contrôle de l'effet toxique sur la peau, il est moins bon que le CNB en ce qui concerne l'action sensibilisatrice qui joue un rale important (tableau7). Dans le cas des préparations à base de Dibensthion la réaction de sensibilisation se manifeste an moyenne 24 heures après le test épicutané sous la forme d'un érythème qui se transforme les deuxième et troisième jours généralement en un oedème, lequel est suivi entre le quatrième et le septième jour d'épreuve d'une desquamation des foyers de réaction. Une réaction d'eczéma typique présentant des papules, bulles et le phénomène de nécrose ne se produit en aucun cas. Bien que toutes les préparations contiennent du Dibenzthion le taux de réactions positives stétale entre 0 et 84% (tableau 8). Probablement le véhicule joue à cet égard un rôle. Au total, le pouvoir de sensibilisation doit être considéré comme étant modéré. Examen de l'effet toxique sur la peau chez des patients souffrant de dermatose et des patients dont la peau est saine. Le C3 est testé à une concentration de 1% dans de l'Unguentum lanetti cum oleo ainsi que dans ledit savon antiseptique destiné aux soins de la peau et contenant un mélange d'agents tensio-actifs. Ce savon est utilisé aussi bien à l'état non dilué qu'en solution aqueuse à 5%. Le contrôle est effectué par 'un test épicutané chez trente-deux patients et ce chaque fois sur la cuisse droite. Parallèment aux deux préparations de la substance d'essai sont testés les véhicules seuls. Les pommades ou solutions sont appliquées sur la cuisse suivant les conditions du "test de Gotha" pendant 24 heures. Cinq minutes après enlèvement des pansements d'essai, les réactions sont contrôlées journellement jusqu'à une durée maximale de 96 heures ou jusqu 'a' ce que la réaction s'avère négative.Parmi les types d'affections cutanées étudiés figurent : eczéma (5 fois), exanthème (1 fois), asthme bronchique (1 fois), luétine (2fois), épidermophytie (1fois), Soor (2 fois), érhythématodes (1fois), Uleus cruris (7 fois), gonoF rhée (2 fois), verrue (1 fois), Basliom (Ifois), Herpès zoster (2fois), furoncle (Ifois), condylomes (1fois), épididymite (3fois), nécrose de tissu adipeux (Ifois). Le savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs provoque, lorsqu'il est utilisé à l'état non dilué, des irritations de la peau sous forme d'érythèmes chez trois sujets atteints d'eczéma et chez deux autres patients souffrant de dermatose. Ces irritations se poursuivent pendant un temps pouvant atteindre 72 heures et, dans un seul cas, jusqu'à 8 jours. Le CMB à 1% ainsi que la solution à 5% de savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs, par contre, sont supportés sans provoquer d'irritation de la peau. Ce résultat en ce qu concerne l'aptitude de la peau à tolérer le CMB, même chez les humains, est d'autant plus remarquable que ce contrôle s'effectue dans des conditions beaucoup plus rigoureuses que cellee généralement rencontrées dans la pratique. Contrôle de toxicité par test ophtalmique chez des cochons d'Inde Le CN3 est testé à une concentration de 1% dans du propylèneglycol et dans ledit savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs. A titre de comparaison du nitrofural et une pommade à base de nitrofural du commerce (contenant 0,2 de nitrofural et 5% de carbamide) à une concentration de 1% dans le propylèneglycol sont testés. Dans l'oeil gauche de respectivement 5 et 10 cochons d'inde (aux yeux noirs) pesant environ 250 g est chaque fois introduite une goutte de la solution de substance d'essai tandis que dans l'oeil droit est introduite, en tant qu'agent irritant normalisé, chaque fois une goutte de solution à 1,6% de nitrate d'argent.Pendant une durée de Six heures, les réactions sont contrôlées chaque heure, puis journellement jusqu'a ce qu'elles cessent. Sur la conjonctive, on distingue les phénomènes d'hyperémie, sécrétion, chémosis et nécrose et sur la cornée les phénomènes d'opacification et de nécrose. Chaque complexe de symptomes est divisé en trois degrés de gravité clinique. Du CN3 utilisé à une concentration de 1% dans du propylèneglycol ou dans le savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs ne provoque pas de lésions cornéennes et est, par conséquent, toléré exactement aussi bien que le nitrofural (tableau 9). Sur la conjonctive les deux composés ne provoquent que de légères irritations qui se trouvent déjà neutralisées au bout de trois ou quatre heures.Sous l'action du C utilise à une concentration de 1% dans le propylèneglycol, on ne constate au bout de 60 minutes qu'une seule fois une nécross ponctuelle qui n'est cependant plus décelable au bout de deux heures. Les véhicules sont supportés sans provoquer d'irritation. Les résultats donnés ci-dessus montrent que le CN3 est apte à être utilisé en tant qu'agent antiseptique présentant une activité particulière contre les champignons ainsi que les bactéries. Incorporé dans des savons contenant un mélange d'agents tensio-actifs, le CMB produit une action sensiblement aussi bonne contre les bactéries et champignons ou moisissures. Dé plus, le CMB convient particulièrement en tant qu'agent antiseptique pour des applications prophylactiques, par exemple dans des produits de nettoyage du corps. Le test sur la crête de coqs illustre l'action prophylactique du composé contre des infections dues à des blastomycètes. Des cicatrisations sont favorisées de façon excellente par le CMB. Utilisé à-des concentrations appropriées, il ne provoque ni irritation ni sensibilisation de la peau chez les animaux et chez les humains. Chez les cochons d'Inde, il ne provoque pas de lésions irréversibles de l'oeil pourtant sensible. Ces résultats soulignent l'aptitude du C à être toléré.Au total,- le comportement du EB en cas d'application sur l'épiderme s'avère extrêmement satisfaisante. T A B L E A U 1 Action bactériostatique et fongistatique du CMB en comparaison avec d'autres agents Activité Substance d'essai IAb IAf CMB 9,7 14,6 Hexaméthylènetétramine 5,6 8,2 Sulfure de tétraméthylthiurame 9,3 8,5 Savon contenant un mélange d'agents tensio-actifs 5,4 9,0 CMB à 3% (bactériostase) dans du savon contenant un 11,9 9,6 1% (fongistase) mélange # d'agents tensio-actifs T A B L E A U 2 Effet du C sur des brûlures expérimentales du 3ème degré chez des cochons d'Inde Processus de cicatrisation après décollement Cicatrisation des zones nécrosées Mode d'essai A Mode d'essai B Epithélisation Début au bout de 24 h sur au bout de 24h sur I/2 du pourtour de la tout le pourtour de plaie la plaie Progression 1 à 2 mm en 3 j sur 7 à 2 mm en 3j sur tout le pourtour de tout le pourtour de la plaie la plaie Granulation plaie propre et sèche plaie propre et sèche Nécrose des des restes de nécroses plus de parties né plaies au bout de 10 j crosées au bout de 10 jours. infection des maîtrisée maîtrisée plaies Cicatrisation au bout de 36 jours au bout de 30 jours complète Taux de mortalité 20% 0% TABLEAU 3 Effet d'un savon antiseptique contenant un mélange d'agents tensio-actifs, pour soins de la peau, sur des brûlures expéri- mentales du 3ème degré chez des cochons d'Inde Evolution de la cicatrisation après décolle ment des zones nécrosées Cicatrisation Mode d'essai A Mode d'essai B Epithélisation Début au bout de 24 h sur au bout de 24 h sur 1/2 1/4 du pourtour de du pourtour de la plaie la- plaie Progression à partir du 7ème j à partir du 4ème j 0,5 0,5 mm en 3 j sur à 1 mm en 3 j sur tout l'ensemble du pour- le pourtour de la plaie tour de la plaie Granulation pas propre jusqu'à pas propre jusqu'à la la cicatrisation cicatrisation complète complète Nécrose de la en partie repoussée non encore repoussée au plaie au bout de 10 j bout de 10 j infection des non encore maitrisée non encore maîtrisée plaies Cicatrisation au bout de 72 å au bout de 66 j complète Taux de mortalité 40 % 50% TABLEAU 4 Effet du chloro-4 éthyl-2 phénylester d'acide acétique sur des brûlures expérimentales du 3ème degré chez des cochons d'inde Déroulement de la cicatrisation après décolle ment des zones nécrosées Cicatrisation Mode d'essai A Mode d'essai B Epithélisation Début au bout de 24 h sur au bout de 24 h 1/4 à 1/2 du pourtour sur 1/2 à 3/4 du de la brûlure pourtour de la brûlure. Progression à partir du 3ème j à partir du 7ème 0,5 mm en 3 j sur j 0,5 mm en 3 j tout le pourtour de sur tout le pourtour la brûlure de la brûlure Granulation manque de netteté . manque de netteté jusqu'à l'achèvement jusqu'à achèvement de la cicatrisation de la cicatrisation Nécrose des non encore repoussée non encore repousplaies au bout de 10-j sée au bout de 10 j Infection des non maîtrisée non maîtrisée plaies Cicatrisation au bout de 60 j au bout de 72 j complète Taux de mortalité TABLEAU 5 Processus de cicatrisation de brûlures expérimentales du 3ème degré dans le groupe d'agents témoins Déroulement de la cicatrisation après décollement des zones nécrosées Cicatrisation Node d'essai A Mode d'essai B Epithélisation Début au bout de 24h sur au bout de 24h sur 1/2 du pourtour des 1/2 du pourtour des brûlures brûlures Progression partir du 7ème j à partir du 7ème j 0,5 en 3 j sur tout 1 mm en 3 j sur tout le pourtour des brQ- le pourtour des brd- lures lures Granulation Manque de netteté nette au bout de 135 Jusqu'à achèvement de la cicatrisation Nécrose des non encore repoussée partiellement repousbrûlures au bout de 10 j sée au bout de 10 j infection des non maîtrisée maîtrisée en partie brûlures Cicatrisation au bout de 48 j au bout de 39 ;; complète Taux de mortalité 40% 30 % TABLEAU 6 Effet toxique produit par le CMB sur la peau de cochons d'Inde Jour de contrôle R é a c t i o n c o n s t a t é e *) après 48 h après 72 h après 96 h Concentration% 12,8 6,4 3,2 0,8 0,2 0,05 12,8 6,4 3,2 0,8 0,2 0,05 12,8 6,4 3,2 0,8 0,2 0,05 N (Test sur animaux) 1 - - - - - - - - - - - - - - - - - 2 - - - - # - - - - - # - - - - - - 3 - - # - - - - - - - - - - - - - - 4 - - - - - - - - - - - - - - - - - 5 - # - - - # - - - - - - - - - - - 6 - - - - - - - - - - - - - - - - - 7 # - - - - - - - - - - - - - - - - 8 - # - # - - - - - - - - - - - - - 9 - - - # # # - - - # # # - - - - - *) - = négative # = incertaine (faible rougeur) TABLEAU 7 CMB comparé à d'autres substances en ce qui concerne leur effet toxique sur la peau et leur pouvoir sensibilisateur de celle-ci Substance d'essai Concentration de Concentration de Pouvoir sensibilisateur seuil de tonicité (%) sensibilisation (%) CMB 12,8 0,32 et 0,11 non accru Isothiocyanante de bromo-4 phényle 0,0008 0,05 non accru Dibenzthion 50 3 faible Dinitro-1,3 chloro-4 0,12 0,08 élevé (99%) benzol TABLEAU 8 Pouvoir sensibilisateur du Dibenzthion Substance d'essai Nombre de réactions positives (en %) Nbre Dibenzthion à "Liquide "Pommade "Pommade "Poudre d'animaux 3% dans du Afungin" Afungin F" Afungin W" Afungin" propylèneglycol Dibenzthion à 3% dans du propylène glycol 50 29 28 0 13 0 Dibenzthion à 3% dans alcool benzylique/cétiolan 50 32 62 0 24 5 Dibenzthion à 3%, Methenamin à 2% dans 50 39 57 9 9 0 une émulsion de pommade à base de vasénol Dibenzthion à 3% Methenamin à 2%, Acide adipique à 0,5%, Zincate à 4%, Silipur à 3%; Silipur concentré à 2% dans du talc en solu- 50 0 0 0 0 0 tion aqueuse idem testé dans du propylèneglycol 50 74 84 26 58 16 TABLEAU 9 Résultats ophtalamiques chez le cochon d'Inde. R é a c t i o n Substance Nbre 60 mn 120 mn 180 mn 240 mn d'essai. Ani- Conjonctive Cornée Conjonctive Cornée Conjonctive Cornée Conjonctive Cornée maux Hx) S C N T N H S C N T N H S C N T N H S C N T N CMB à 1% dans du propylène- 5 2xIxx) 3xI - 1xI - - 2xI - - - - - 2xI - - - - - - - - - - glycol. 1xIII 1xIII 1xIII CMB à 1% dans du savon contenant 5 3xI 2xI - - - - 3xI - - - - - 3xI - - - - - - - - - - un mélange d'agents tensio-actifs Nitrofural à 1% dans du 5 1xI 2xI - - - - 1xI - - - - - 1xI - - - - - - - - - - propylène1xII glycol. Pommade à base de 5 1xI 4xI 1xI - - - 1xII - - - - - - - - - - - - - - - - Nitrofuranal x) H = Hyperémie, S = Sécrétion, C = Chémosis, N = Nécrose T = Opacification xx) I, II et II = Degrés de gravité de phénomènes cliniques (III représentant la réaction la plus forte) REVENDICATIONS I - Chloro-2 méthyl-6 benzyl-4 phénol. 2 - Chloro-2 méthyl-6-(chloro-4' benzyl)-4 phénol. 3 - Chloro-2 méthyl-6-(dichloro-3' -4' benzyl)-4 phénol. 4 - Procédé pour la fabrication de composés doués d'activité antimicrobienne et tolérés par l'épiderme à partir de sous-produits de la synthèse du chloro-4 méthyl-2 phénol, c & ractérisé en ce que le produit préliminaire obtenu par distillation du mélange réactionnel de la chloruration de méthyl-2 phénol et constitué principalement par du chloro-2 méthyl-6 phénol ainsi que de plus faibles quantités de méthyl-2 phénol et de chloro-4 méthyl-2 phénol est aralcoylé, éventuellement après diminution de la proportion de méthyl-2 phénol et de chloro-4 méthyl-2 phénol et en ce que, par distillation et/ou cristallisation, sont obtenus des chloro-2 méthyl-6 aralcoyl-4 phénols répondant à la formule générale suivantes dans laquelle RI représente un groupe CH2 ou CHCH3 et R2 et R3 représentent H et C1.