Brevet FR2329289A1 — publié le 19770527

La présente invention a pour objet un procédé pour la préparation d'un sel soluble d'arginine, et plus précisément de désoxyribonucléate d'arginine à caractéristiques physico-chimiques bien définies et particulièrement efficace par son action thérapeutique sûre et étendue et par les formes diverses de son administration. L'invention a également pour objet le sel d'arginine soluble dans l'eau obtenu avec ce procédé. Comme il est connu, les composants de base du sel faisant l'objet de la présente invention, ctest-à-dire l'acide désoxyribonucléique (ADN) et la base L-arginine sont universellement utilisés dans la thérapeutique quotidienne pour diverses indications. En effet, 1'ADN, qu'on trouve dans le commerce sous forme de sel sodique, est particulièrement indiqué dans la thérapeutique de l'asthénie, des retards dans la consolidation des fractures osseuses, des ostéoporoses, etc. > cependant quel'arginine, que l'on trouve dans le commerce sous la forme de base L-arginine, chlorhydrate, glutamate, etc., est généralement employée contre l'asthénie de l'insuffisance hépatique, le coma hépatique, etc. C'est, par conséquent, un but de la présente invention de fournir un procédé permettant de préparer un sel composé d'ADN etd'arginine à caractéristiques physico-chimiques bien définies et propre à constituer une amélioration certaine dans l'action et dans la posologie en plus de celle apportée par la forme de son administration par rapport aux deux médicaments de départ pris isolément. C'est un autre but de l'invention de fournir un sel qui, en plus d'offrir une synergie d'action sûre, ait la possibilité de pouvoir être administré en compresse, solution pour voie orale et aussi en ampoule pour piqûre intramusculaire. Ces buts sont atteints, conformément à l'invention, par un procédé de préparation d'un sel d'arginine à caractéristiques physico-chimiques bien définies, procédé dans lequel on fait réagir une solution aqueuse du sel sodique de l'acide désoxyribonucléique (ADN-sel sodique) avec la base L-arginine, et plus précisément avec une résine saturée de base arginine > on corrige le pH du précipité ainsi obtenu avec de l'eau de façon à l'amener au voisinage de la neutralité, on traite le précipité sous agitation avec de l'acétone et on le conditionne pendant environ 24 heures à basse température, on filtre puis on lave le précipité avec de l'acétone et de l'éther et enfin on le sèche dans un courant d'air à environ 35"cl de façon à obtenir un sel d'arginine sous la forme de poudre soluble dans l'eau. Plus particulièrement, la résine utilisée pour l'absorbtion de la base arginine est constituée par une résine connue dans le commerce sous le nom d'Amberlite CG120 laquelle après purification et traitement successif par l'eau jusqu'à la neutralité est traitée par une solution à 8 % de base arginine. Le sel ainsi obtenu est sensiblement du désoxyribonucléate d'arginine, il est produit sous forme de poudre jaunâtre, soluble dans l'eau à 10 % environ, et insoluble dans les solvants organiques. Ce sel, en solution aqueuse à 1 % devient opalescent, avec un pH supérieur à 6 et avec un contenu en cendres inférieur à 0,2 %. Toutes les opérations inhérentes au procédé de préparation de ce sel doivent être conduites à basse température, environ 5"C ceci est surtout requis du fait de l'utilisation d'ADN. L'invention sera bien comprise par l'exemple suivant, exemple donné seulement à titre indicatif et non limitatif. Exemple 20 gr d'ADN-sel sodique sont dissous dans 200 ml d'eau la solution obtenue est centrifugée afin que soient pratiquement éliminées toutes les substances insolubles présentes. On fait ensuite passer le surnageant dans une colonne contenant 20 grammes de résine Amberlite CG120 saturée de base arginine. La colonne est préparée en traitant 20 gr d'Amberlite CG120 avec 100 ml de HCL 2N sous agitation pendant 1 heure ; on laisse sédimenter la résine et on élimine le surnageant ; on effectue un autre traitement avec 100 ml de HCL 2N sous agitation vendant 1 heure. on filtre sur Buchner. et on lave à l'eau. On - I'eau - - - - - - - a l'eau reporte ensuite la résine dans un récipient et on la traite/jusqua neutralité. La résine est ensuite traitée avec 400 ml de solution aqueuse à 8 % de base arginine. On laisse le tout sous agitation pendant 1 heure, on filtre sur Buchner en contrôlant que le filtrat soit alcalin, on lave la résine saturée d'arginine avec de l'eau jusqu'à neutralité.On obtient de cette façon la résine en suspension dans l'eau et saturée d'arginine, prête pour être chargée en colonne et recevoir la solution d'ADN-sel sodique. Le liquide obtenu après passage dans la colonne, qui doit nécessairement avoir un pH compris entre 6 et 6,5, est traité sous agitation avec 4 000 ml d'acétone et on laisse le tout au réfrigérateur (à environ 50C) pendant 24 heures. On filtre ensuite le précipité, on le lave avec de l'acétone froide et avec de l'éther et enfin on le sèche dans un courant d'air à 350cl De cette façon on obtient environ 18 gr de sel d'arginine sous forme de poudre, stable dans le temps. Comme déjà dit, ce sel d ' arginine, en plus de présenter des caractéristiques physico-chimiques bien définies, est d'administration plus sûre que 1 t administration séparée des composants particuliers ; on a en effet constaté que ce sel permet d'obtenir de meilleurs résultats avec un dosage plus faible des composants particuliers et donc avec une toxicité réduite ; pour ce motif, ce sel peut ainsi être administré en injections étant donné qu'il est soluble dans l'eau à 10 ffi environ. Les propriétés pharmacologiques du sel d'arginine selon l'invention sont les suivantes Action synergétique anti-asthénique combinée par double action, la première au niveau des cellules organiques comme stimulant général, la seconde au niveau hépatique, en particulier. La stimulation au niveau endocellulaire due au D.N.A. accélère le métabolisme cellulaire lui-même, favorisant d'une part la reproduction cellulaire et d'autre part l'action d'augmenter la quantité de scorie au niveau organique. L'arginine, par l'action indiquée désintoxicante au niveau hépatique et par son importance primordiale dans le cycle de Krebs, favorise directement la désintoxication de l'organisme et simultanément stimule l'action du D.N.A. au niveau hépatique. Partant de ce qui est pré-supposé, le D.N.A. présente une activité endocellulaire puis, admettant la scission des deux composants au niveau gastrique, il faut envisager la possibilité que le D.N.A., favorisé par les enzymes naturels présents dans l'orga- nisme humain, porte avec lui une part d'arginine qui tend à augmenter l'apport d'arginine préexistant dans les cellules ellesmêmes. Au procédé de préparation d'un sel décrit ci-dessus à titre d'exemple, peuvent facilement être apportées en pratique des modifications et variantes techniquement équivalentes. sans s'écarter de l'objet de l'invention. REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation d'un sel d 'arginine de propriétés thérapeutiques élevées, caractérisé en ce qu'on fait réagir dans une colonne une solution aqueuse du sel sodique de l'acide désoxyribonucléique (ADN-sel sodique) avec une solution de base L-arginine absorbée sur une résine en suspension dans l'eau, en ce qu'on porte le pH du liquide obtenu après passage dans la colonne à une valeur voisine de la neutralité avec de l'eau, en ce qu'après traitement sous agitation avec de l'acétone et conditionnement à basse température, on filtre et on lave le précipité obtenu à l'acétone et à l'éther et en ce qu'on le sèche dans un courant d'air chaud afin d'obtenir un sel d'arginine sous forme de poudre. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution d'ADN-sel sodique est de préférence centrifugée avant la réaction avec la solution d'arginine. 3. Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce que la résine pour l'absorption de la solution d'arginine est de préférence la résine canue dans le commerce sous le nom d'Amberlite CG120 pré-traitée de façon appropriée avec de l'acide chlorhydrique, filtrée et portée à un pi sensiblement neutre par addition d'eau. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la résine ainsi préparée est traitée, avant de la verser dans la colonne, avec une solution à 8 % environ de base arginine et ensuite lavée avec de l'eau jusqu'à ce qu'elle soit rendue neutre. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que toutes les opérations relatives à l'emploi et aux traitements du sel sodique d'ADN sont exécutées à basse température, de préférence autour de 50C. 6. Sel d'arginine, particulièrement désoxyribonucleate d'arginine, caractérisé en ce qu'il est obtenu à partir de sel sodique d'ADN et de base arginine, et en ce qu'il est constitué par une poudre sensiblement neutre, soluble dans l'eau à environ 10 % et avec contenu en cendres inférieur à 0,2 %. 7. Sel d'arginine obtenu à partir de sel sodique d'ADN et de base L-arginine, caractérisé en ce qu'il est particulièrement indiqué dans la thérapeutique de l'asthénie en général et en ce qu'il peut être utilisé avec une meilleure efficacité, dans tous les cas où les deux composants (sel sodique d'ADN et base L-arginine) sont utilisés séparément, ce sel d'arginine étant administrable en compresse, en solution par voie orale et aussi en ampoule pour injection intramusculaire. 8. Sel d'arginine, caractérisé en ce qu'il est obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes.