Brevet FR2285889A1 — publié le 19760423

La présente invention à laquelle ont participé MM. Christian BERGER. Daniel FARGE. Georges GROS. Mayer Maoum MESSER et Claude MOUTOMNIER. concerne de nouveaux dérivés de la céphalosporine de formule générale: leurs sels, leur préparation et les cotpositions médicinales qui les contiennent. Dans la formule générale (I), @ représente un atone d'oxygène ou de soufre, R représente un atome d'hydrogène ou un radical acétoxy. Il est entendu que les produits de formule générale (I) peuvent exister sous des formes optiquement actives et que de telles formes ainsi que leurs mélanges entrent dans le cadre de la présente invention. Selon l'invention. les nouveaux produits de formule générale (I) peuvent être obtenus par action d'un acide de formule générale : sous forme racémique ou optiquement active, dans laquelle A est défini comme précédemment et dont la fonction amine a été préalablement protégée, ou d'un dérivé actif de cet acide, sur une céphalosporine de formule générale dans laquelle R est défini comme précédemment. a) Lorsque l'on utilise l'acide de formule générale (il), la protection du groupe amino s'effectue par toute méthode connue en soi pour le blocage d'une fonction amine sans toucher au reste de la molécule. Il est nécessaire de protéger la fonction amine par un groupement facilement éliminable. Il est particulièrement avantageux d'utiliser le groupement tertiobutyloxycarbonyle qui peut être introduit par action de l'azidoformiate de tertiobutyle, du chloroformiate de tertiobutyle ou d'un carbonate mixte de tertiobutyle et p.nitrophényle sur l'acide de formule générale (II). Généralement, on effectue la condensation de l'acide de formule générale (II) dont la fonction amine est protégée sur le dérivé de la céphalosporine de formule générale (III) dont la fonction acide a été prealablement protégée par un groupement facilement éliminable tel que le radical tertiobutyle ou le radical trichloro-2,2.2 éthyle. GénéraIement on effectue la condensation dans un solvant organique tel que le dimkthylformamide ou le chloroforme, en présence d'un agent de condensation tel que le dicyclohexylcarbodiimide à une température comprise entre 0 et 40C puis élimine les groupements protecteurs des fonctions amine et acide. Selon la nature des groupements protecteurs, cette élimination peut être effectuée en une seule étape ou en deux étapes, Lorsque la réaction s'effectue en deux étapes il est préférable d'éliminer d'abord le groupement protecteur de la fonction acide puis celui de la fonction amine. Lorsque le groupement protecteur de la fonction amine représente le radical tertiobutyloxycarbonyle et celui de la fonction acide représente le radical tertiobutyle, leur remplacement par un atome d'hydrogène s'effectue en une seule phase par traitement en milieu acide. De préférence, on utilise l'acide trifluoracétique en opérant à une température voisine de 200C. Dans ces conditions, le produit de formule générale (I) est obtenu sous forme de trifluoracétate dont on peut libérer la fonction amine par toute méthode connue en soi pour l'obtention d'une amine à partir de l'un de ses sels sans toucher au reste de la molécule. Lorsque le groupement protecteur de la fonction amine représente le radical tertiobutyloxycarbonyle et celui de la fonction acide représente le radical trichloro-2,2,2 éthyle, on remplace tout d'abord ce dernier par un atome d'hydrogène par traitement par le zinc dans l'acide acétique, puis on remplace le radical tertiobutyloxycarbonyle par un atome d'hydroge'ne par traitement en milieu acide. de préférence par action de l'acide trifluoracétique. Dans ces conditions le produit de formule générale (I) est obtenu sous forme de trifluoroacétate et l'amine libre peut être libérée de son sel dans les conditions décrites précédemment. b) Lorsqu l'on utilise l'acide de formule générale (II) sous forme d'un dérivé réactif il est particulièrement avantageux de mettre en oeuvre le chlorure d'acide. Dans ces conditions, on fait réagir le chlorhydrate du chlorure de l'acide de formule générale (II) sur un dérivé de la céphalosporine de formule générale (III) dont il n'est plus nécessaire de protéger la fonction acide. Généralement, on effectue la condensation dans un solvant organique tel que le chloroforme en présence d'un accepteur d'acide tel qu'une base organique azotée comme la pyridine ou la triéthylamine, ou dans un milieu hydroorganique en présence d'un agent alcalin de condensation tel que le bicarbonate de sodium. L'acide de formule générale (II) peut être obtenu par saponification de l'ester correspondant de formule générale dans laquelle R1 représente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone, en opérant dans les conditions habituelles de saponification d'un ester en I 'acide correspondant. Généralement, on traite l'ester à saponifier par un hydroxyde alcalin en milieu hydro-alcoolique et à une température comprise entre 0 et 50-C. De préférence on utilise Zester méthylique ou éthylique et effectue la saponification en milieu hydro-méthanolique à une température voisine de Soc. L'ester de formule générale (TV) peut être obtenu par réduction d'un oxime de formule générale : dans laquelle A et R1 sont définis comme précédemment. Généralement, on utilise le zinc dans un milieu hydroorganique tel qu'un mélange méthanol-acide for ique-eau à une température comprise entre O et 25 C. L'oxime de formule générale (V) peut être obtenue par action d'un produit de formule générale : - CH2CH2 - SH (VI) dans laquelle A est défini comme précédemment. sur un ester de formule générale dans laquelle R1 est défini couse précédemment et X représente un atome d'halogène de préférence un atome de chlore. en passant intermédiairement par un produit de formule générale dans laquelle A et R1 sont définis comme précédemment. La condensation du produit de formule générale (VI) sur l'ester de formule générale (VII) s'effectue généralement dans un solvant organique tel que le chloroforme en présence d'un accepteur d'acide tel que la triéthylamine et en opérant à une température voisine de 20 C. La cyclisation de l'ester de formule générale (VIII) en oxime de formule générale (V) s'effectue généralement par chauffage dans un solvant organique tel que le benzène ou le toluène en présence d'un agent de déshydratation tel que l'acide p.toluènesulfonique et en éliminant l'eau formée au fur et à mesure de sa formation. Les formes optiquement actives de l'acide de formule générale (II) peuvent être obtenues soit par application de méthodes chimiques, soit par voie enzymatique. Par exemple, on peut obtenir la forme D de l'acide de formule générale (II) en traitant la forme racémique par l'acide (+) camphosulfonique dans un solvant organique tel qu'un alcool comme le méthanol ou l'éthanol, en purifiant le sel obtenu de forme D par recristallisation et en libérant l'acide libre à partir de ce sel. Par exemple, la forme L de l'acide de formule générale (II) peut être obtenue par désacétylation enzymatique sélective d'un acide de formule générale : dans laquelle A est défini comme précédemment. Le traitement de la forme racémique de 1 'acide de formule gbné- rale (IX) par une amino-acylase conduit å la forme L de l'acide de formule générale (II) et à la forme D de l'acide de formule générale (IX). De préférence la désacétylation sélective est effectuée par une amino-acylase d'Aspergillus en opérant à un pH voisin de 8 et à une température voisine de 37 0C. L'acide de formule générale (IX) peut être obtenu selon l'un des procédés suivants a) par acétylation de l'acide de formule générale (II) au moyen par exemple de chlorure d'acétyle ou d'anhydride acétique b) par saponification de l'ester correspondant. De préférence on utilise l'ester éthylique ou éthylique. L'ester éthylique ou éthylique de l'acide de formule générale (IX) peut être obtenu par action d'un produit de formule générale (VI) sur un ester de formule générale dans laquelle Y represente u,n atone d'halogène, de préférence un atone de broie et B2 représente le radical méthyle ou éthyle, en passant intermédiai- ruent par un produit de formule générale dans laquelle A et R2 sont définis comme précédemment. Généralement, la condensation du produit de formule générale (VI) sur l'ester de formule générale (X) s'effectue dans un solvant organique tel que le chloroforme en présence d'un accepteur d'acide tel que la triéthylamine à une température voisine de 20 C. La cyclisation du produit de formule générale (XI) en ester de l'acide de formule générale (IX) s'effectue généralement par chauffage dans un solvant organique tel que le benzène ou le toluène en présence d'un agent de déshydratation tel que l'acide p.toluènesulfonique et en éliaiant l'eau formée ée au fur et à mesure de sa foriation. L'ester de formule générale (X) peut eAtre obtenu selon la nethode de M. Hatanaka et T. Ishinaru, J. lad. Ch@m., 16, 978 (1973). Le produit de formule générale (III) dans laquelle R représente un atome d'hydrogène est l'acide amino-7 désacétoxy-3 céphalosporanique (ou 7-ADCA) qui peut Étre obtenu, soit à partir d'une pénicilline selon le procédé qui fait l'objet du brevet belge 747 382. sott par désacétoxylation d'un produit de formule générale (III) dans laquelle R représente un radical acétoxy selon le procédé qui fait l'objet du brevet beige 779 034. Le produit de formule générale (III) dans laquelle R représente un radical acétoxy est l'acide s ino-7 céphalosporanique (ou 7-ACA) qui peut être obtenu selon le procédé qui fait l'objet du brevet belge 615 955 ou du brevet américain 3 239 394. Les nouveaux dérivs de la céphalosporine selon la présente invention peuvent être éventuellement purifiés par des méthodes physiques telles que la cristallisation ou la chrosatographie. Les nouveaux produits selon l'invention peuvent être transformés en sels d'addition avec les acides. Selon les procédés de la présente invention, les produits sont généralement obtenus sous forme de trifluoracétate. Les produits de formule générale (I) obtenus sous forme de ce sel peuvent etre libérés et transformés en autres sels selon les méthodes habituelles. Les produits de formule générale (I) peuvent aussi être transformés en sels métalliques ou en sels d'addition avec les bases azotées selon les méthodes connues en soi. Ces sels peuvent etre obtenus par action d'une base alcaline ou alcalino-terreuse, de l'ammoniaque ou d'une amine sur un produit de formule générale (Z) dans un solvant approprié tel qu'un alcool, un éther ou l'eau ou par réaction d'échange avec un sel d'un acide organique. Le sel formé précipite, après concentration éventuelle de sa solution, il est séparé par filtration ou décantation. Les nouveaux dérivés de la céphalosporine de formule générale (I) et leurs sels présentent des propriétés antibactériennes particulièrement intéressantes. Ils manifestent une activité remarquable in vitro et in vivo sur les germes Crampositifs et Grai-négatifs. In vitro, les produits se sont montrés actifs à des concentrations comprises entre 1 et 25 g/cm3 sur des souches de staphylocoques sensibles à la pénicilline G (Staphylococcus aureus 209 P, Staphylococcus aureus Smith) ou à des concentrations comprises entre 1 et 50 pg/cm3 sur des souches de staphylocoques résistantes à la pénicilline G (Staphylococcus aureus MB 9) ou à des concentrations comprises entre 1 et 100 Fg/cm3 sur Escherichia coli, souche Mono. In vivo, les produits se sont montrés actifs sur les infections expérimentales de la souris à Staphylococcus aureus Smith (sensible à la pénicilline G) à des doses comprises entre 0,1 et 5 mg/kg par jour par voie sous-cutanée ou entre 0, 1 et 30 ug/kg par jour par voie orale, ou à Escherichia coli, à des doses comprises entre 1 et 50 mgkg par jour par voie sous cutanée, ou comprises entre 10 et 500 mg/kg par jour par voie orale. Les exemples suivants, donnés à titre non limitatif, montrent comment l'invention peut être nise en pratique. Exemple 1 A une solution de 11,5 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithinne-1,4 yl-2) acétique et de 12,9 g d'acétoxy-3 amino-7 tert-butoxycarbonyl-2 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 dans 100 cm3 de diméthylformamide anhydre, on ajoute 9,20 g de dicyclohexylcarbodiimide. Le milieu réactionnel est agité pendant 30 minutes à une température voisine de 200C puis on sépare le précipité par filtration, ajoute 300 cm3 d'acétate d'éthyle au filtrat, lave la phase organique deux fois par 1000 cm3 d'eau, 500 cm3 d'une solution à 1 % d'acide citrique, puis 300 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin 500 cm3 d'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, traitée au noir décolorant, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 26 g d'un résidu que l'on chromatographie sur 300 g de gel de silice.On élue avec 2000 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (35-65 en volumes) et obtient, après concentration du solvant, 19 g d'acétoxyméthyl-3 [DL-a-tertbutoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2)-acétamioJ-7 tert-butoxycarbonyl-2 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2. Ce produit (19 g) est dissous dans 100 cm3 d'acide trifluoroacétique et la solution est laissée 15 minutes à une température voisine de 20 C; l'acide trifluoroacétique est ensuite chassé sous pression réduite (1 mm de mèrcure). On dissout le résidu dans 75 cm3 d'acétate d'éthyle puis on ajoute 100 cm3 d'oxyde d'isopropyle. Un précipité apparait que l'on sépare par filtration. On obtient ainsi 14,6 g de trifluoroacétate d'acétoxyméthyl-3 [DL-&alpha;-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4yl-2) acétamidoj-7 carboxy-2 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2, sous forme d'un solide crème. 20 = +29,2 + 0,9' (c = 1, diméthylforsamide) taud L'acétoxyméthyl-3 amino-7 tert-butoxycarbonyl-2 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 peut être préparé selon R.J. STEDMAN, J. Med. Chem., 9, 444 (1966). L'acide DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique peut être préparé de la façon suivante A une suspension de 9,55 g d'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 dithtinne-1,4 yl-2) acétique dans 150 cm3 de diméthylformamide et 17,6 cm3 de Lriéthylamine, on ajoute 14,3 g de tert-butoxycarbonylazide. Cette suspen- sion est agitée à 35 C pendant trois jours. Le mélange réactionnel est alors Venu homogène. On y ajoute 1000 cm3 d'eau et 100 cm3 d'une solution saturée @icarbonate de sodium et lave deux fois par 300 cm3 d'éther éthylique. La phase aqueuse est amenée à pH 3 par addition d'acide citrique. Le précipité formé est séparé par filtration, lavé à l'eau et recristallisé dans 400 cm3 d'acétonitrile. On obtient ainsi 12 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4yl-2) acétique sous forme de cristaux blancs fondant vers 205oC en se décomposant. Le tert-butoxycarbonylazide peut être prépare selon L.A. CARPINO, B.A. CARPINO, P.J. CROWLEY, C.A. GIZA et P.H. TERRY, Org. Synth., 44, 15 (1964). L'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-i,4 yl-2) acétique peut être préparé de la façon suivante A une solution de 150 g de DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle dans 1500 cm3 de méthanol, on ajoute 820 cm3 de soude normale. Le mélange réactionnel est laissé 16 heures à une température voisine de 5.0 puis concentré à sec sous pression réduite C2O mm de mercure). Au résidu obtenu on ajoute 500 cm3 d'eau et filtre sur "supercel". Le filtrat jaune obtenu est refroidi dans un bain de glace et acidifié par addition de 600 cm3 d'acide chlorhydrique 4 N. La solution acide est traitée au noir décolorant, filtrée puis amenée à pH 4,5 par addition de soude concentrée. Le précipité apparu est séparé par filtration. On obtient ainsi 99 g d'acide DL-a-amino (dihydro-S,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique sous forme de cristaux blancs fondant vers 260.0 avec décomposition. Le DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4y1-2) acétate d'ethyle peut être préparé de la façon suivante : A une solution de 171 g d'a-hydroxyimino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2)acétate d'éthyle dans 800 cm3 de méthanol, on ajoute 1600 cm3 d'acide formique à 50 % . On refroidit à 5.0 puis ajoute 135 g de poudre de zinc par petites portions de façon que la température ne masse pas 28-C. On laisse ensuite sous agitation à 5.0 pendant 30 minutes puis filtre et concentre le filtrat sous pression réduite (20 mn de mercure) jusqu'à un volume de 1000 cm3 environ.On lave ce résidu par deux fois 200 cm3 de chlorure de méthylène, ajoute 1500 cm3 d'eau à la phase aqueuse et neutralise par addition de carbonate de sodium jusqu'à pH 8,9 en présence de 500 cm3 de chlorure de methyline. On sépare la phase organique, lave la phase aqueuse avec 500 cm3 de chlorure de méthylène, réunit les extraits organiques, traite avec du noir décolorant et filtre. Après concentration à sec sous pression réduite (20 mn de mercure) on obtient 150 g de DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle sous forme d'huile jaune pale. L'&alpha;-hydroxyimino (dihydro-5,6 oxathiine-1,4 yl-2) acétate d'éthyle peut être préparé de la façon suivante On met en suspension 655 g d'hydroxyimino-2 (mercapto-2 éthylthio)-4 oxo-3 butyrate d'éthyle dans 3500 cm3 de toluène en présence de 22 g d'acide p.toluènesulfonique monohydraté. On chauffe le mélange aù reflux (l'eau étant séparée au fur et à mesure de sa formation dans un appareil de Dean-Stark) pendant 40 minutes puis on refroidit à 60 C et concentre à sec sous pression réduite (20 mm mm de mercure).Le résidu est dissous dans 200 ca3 d'acétate d'éthyle et la solution obtenue est lavée deux fois par 700 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, par deux fois 700 cm3 d'eau puis séchée sur du sulfate de magnésium et enfin traitée par du noir décolorant. La solution est filtrée et le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (20 mm de mercure). Le résidu obtenu est dissous à chaud dans 450 cm3 de chloroforme et 800 cm3 de tétrachlorure de carbone. Le mélange est refroidi à OC pendant 16 heures et les cristaux obtenus sont filtrés. On obtient ainsi 173 g d'&alpha;-hydro- xyimino (dihydro-5,6 dithiine-1, 4 yl-2) acétate d'éthyle sous forme de cristaux blancs fondant à 142-C. L'hydroxyimino-2 (mercapto-2 éthylthio)-4 oxo-3 butyrate d'éthyle peut être préparé de la façon suivante A une solution de 900 cm3 d'éthanedithiol et de 765 cm3 de triéthyl amine dans 2500 cm3 de chloroforme, on ajoute, en maintenant la température à 20.0, une solution de 1050 g de chloro-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle dans 2500 cm3 de chloroforme. On laisse le mélange à 20.0 pendant 1 heure puis on ajoute 2000 cm3 d'acide chlorhydrique normal, sépare la phase organique, la lave 2 fois par 2000 cm3 d'eau puis la sèche sur sulfate de magnésius. Après filtration, le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (20 - de mercure). Au résidu partiellement cristallisé, on ajoute 500 cm3 de chlorure de méthyle ne puis refroidit à -10 C. On filtre et obtient 655 g d'hydroxyimino-2 (mercapto-2 éthylthio)-4 oxo-3 butyrate d'éthyle sous forme de cristaux blancs fondant à 110 C. Le chloro-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle peut être préparé selon M. Hatahaka et T. Ishimaru, J. Med. Chem., 16, 978 (1973). Exemple 2 A une solution d'acide DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-I,4y1-2) acétique et de 9,55 g d'amino-7 méthyl-3 oxo-8 (trichlo- ro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo [4.2*03 octène-2 dans 120 cm3 de diméthylformamide, on ajoute 6,2 g de dicyclohexylcarbodiimide et laisse 2 heures sous agitation. Le mélange est filtré ; le filtrat est dilué par 150 cm3 d'acétate d'éthyle, lavé par 600 c13 d'eau, 250 ca3 d'acide chlorhydrique 4 N, 250 cm3 de bicarbonate de sodiu et 250 ca3 d'eau distillée. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, traitée au noir décolorant, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite C2o n de mercure). On obtient 17,4 g d'un résidu qui est chromatographié sur 250 g de gel de silice. On élue 11,8 g de [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1, 4 yl-2) acétamido]-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxy carbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0) octène-2, avec 2000 ca3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane 30-70 (volumes), sous forme de laque jaune pâle. A la solution de 11,8 g de [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamidoj-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo [4.2.0) octène-2 dans un mélange de 60 cm3 de diméthylformamide et de 30 cm3 d'acide acetique glacial refroidi au bain de glace, on ajoute 11,1 g de poudre de zinc et laisse agiter pendant 3 heures. Le mélange réactionnel est filtré ; on ajoute 200 cm3 d'acétate d'éthyle au filtrat et lave avec 500 cm3 d'eau. La phase aqueuse est extraite avec 200 cm3 d'acétate d'éthyle ; on réunit les phases organiques, les lave avec 200 cm3 d'eau, puis extrait deux fois par 200 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium.La solution alcaline est acidifiée à pH 2,5 par addition d'acide chlorhydrique 4 N en présence de 200 cm3 d'acétate d'éthyle et les fractions organiques sont réunies, lavées avec 200 cm3 d'eau, séchées sur sulfate de magnésium, traitées par du noir décolorant et filtrées. Le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (20 n de mercure). On obtient ainsi 8,5 g de [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 carbozy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 sous forme de laque incolore. On dissout 8,5 g de [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0) octne-2 dans 80 cm3 d'acide trifluoroacétique. La solution obtenue est laissée au repos pendant 10 minutes, puis l'acide trifluoroacétique est chassé sous pression réduite (1 n de mercure). On dissout le résidu obtenu dans 10 cm3 d'acétate d'éthyle et ajoute 120 cm3 d'éther éthylique. Un produit précipite que l'on sépare par filtration. On obtient ainsi 6,8 g de trifluoracétate de [DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1, 4 yl-2) acétamido]-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2, sous forme d'une poudre blanche. [&alpha;]@20 = + 88,6 + 1,4 (c 5 1 , diméthylformamide). L'amino-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 peut être préparé selon : R.R. CHAUVETTE, P.A. PENNINGTON, C.W. RYAN, R.D.G. COOPER, F.L. JOSE, I.G. WRIGHT, E.M. VAN HEYNINOEN et G.W. HUFFMAN, J. Org. Chem. 36, 1259 (1971). Exemple 3 En opérant comme à l'exemple 2 mais à partir de 5,2 g d'acide D-a-tert- butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique et de 6,1 g d'amino-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 dans 120 cm3 de dimethylformamide et en présence de 4,02 g de dicyclohexylcarbodiimide, on obtient 5,2 g de [D-&alpha;-tert-butoxy- carbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2. 20 = + 45,6 + 10 (c = 1, chloroforme) lard En traitant 5,2 g de [D-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4yl-2) acetamido]-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 par 5,05 g de poudre de zinc dans 30 cm3 de diméthylformamide et 15 cm3 d'acide acétique glacial on obtient 3,8 g de [D-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4yl-2) acétamido]-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo [4.2.0] octène-2 sous forme d'une laque incolore. On dissout 3,7 g de [D-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 dans 35 cm3 d'acide trifluoracétique et laisse cette solution sous agitation-pendant 10 minutes à 20.0 environ. On concentre à sec sous pression réduite (1 mm de mercure), dissout le résidu dans 6 cm3 d'acétate éthyle et ajoute 70 cm3 d'éther éthylique. Il se forme un précipité que l'on sépare par filtration. Os obtient ainsi 1,8 g de trifluoracétate de [D-&alpha;-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo [4.2.0) octène-2, sous forme d'une poudre blanche. 20 = + 119,2- + 1,80 (c = 1, diméthylformamide) [&alpha;]D - @ @@@,@ @ En opérant comme à l'exemple 1, on obtient 5,4 g d'acide D-a-tertbutoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1, 4 yl-2) acétique 20 [&alpha;]D - @@@@ @ @@ @@ - @ , dimethyl@ormam@@e) par action de 8,6 g de tert - butoxycarbonylazide sur 5,5 g d'acide D-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique dans 100 cm3 de diméthylformamide contenant 10,5 cm3 de triéthylamine. L'acide D-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique peut être préparé de la façon suivante A une suspension de 28,7 g d'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4yl-2) acétique dans 150 cm3 de méthanol, on ajoute 34,8 g d'acide (+) camphosulfonique. On chauffe progressivement jusqu'à dissolution puis concentre à sec sous pression réduite C20'mm de mercure). Après.cinq recristallisations du résidu dans un mélange acétonitrile-eau (90-10 en volumes), on obtient 5,5 g de sel de l'acide (+) camphosulfonique et de l'acide D-a-amino (dihydro-5, 6 dithiinne-i, 4 yl-2) acétique sous forme de cristaux blancs. 20 @@@D = - 39,3* + 1 Cc = 1, eau) On dissout 3,5 g de ce sel dans 50 cm3 d'eau distillée et amène à pH 4 par addition de bicarbonate de sodium. La solution est concentrée sous pression réduite (20 mm de mercure) jusqu'à un volume de 20 cm3 et laissée pendant 20 heures à 4 C. Le précipité forme est sépare par filtration. On obtient ainsi 1,3 g d'acide D-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4yl-2) acetique sous forme de cristaux blancs. 20 = - 138- + 1,60 (c = 1 , acide chlorhydrique N) D Exemple 4 A une solution de 14 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétique dans 120 cm3 de chloroforme, on ajoute 17,6 g d'amino-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 et 11,5 g de dicyclohexylcarbodiimide et laisse pendant 12 heures sous agitation à une température voisine de 200C. Le me lange réactionnel est filtré et le filtrat est concentré sous pression réduite (20 mm de mercure).On obtient un résidu gommeux que lton dissout dans 250 cm3 d'acétate d'éthyle ; la solution est lavée deux fois avec au total 200 cm3 d'acide chlorhydrique 2 N puis deux fois avec au total 200 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin deux fois avec au total 200 cm3 d'eau. On sèche la phase organique sur sulfate de magnésium, traite au noir décolorant, filtre puis concentre sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 35 g d'un résidu que l'on chromatographie sur 350 g de silice. On élue successivement par 400 cm3 d'un mélange acétate d'éthylecyclohexane (1-9 en volumes) puis par 800 cm3 d'un mélange acétate d'éthylecyclohexane (15-85 en volumes). Les éluats correspondants sont rejetés. On élue ensuite par 1400 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (15-85 en volumes). Ces éluats sont concentrés à sec sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient ainsi 23,5 g de me-thyl-3 oxo-8 [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonyl- amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 (trichloro-2,2,2 éthoxy carbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2, sous forme d'une poudre amorphe blanche. On dissout 23,4 g de méthyl-3 oxo-8 [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 dans 135 cm3 de diméthylformamide et 40 ca3 d'acide acétique. A cette solution on ajoute 22 g de zinc en poudre et on agite 3 heures à 20 C environ. On filtre sur supercel, puis on concentre la solution sous pression réduite (0,1 mm de mercure). On obtient une huile qui est reprise par 800 ca3 d'eau et extraite deux fois par au total 400 cm3 d'ac- tate d'éthyle.La phase organique est traitée deux fois par au total 400 cm3 d'une solution saturee de bicarbonate de sodium et la fraction aqueuse est acidifiée en présence de 200 ca3 d'acétate d'éthyle par addition d'acide chlorhydrique 4 N jusqu'à pH - 2,5. La phase organique est décantée, lavée par 100 ca3 d'eau, séchée sur sulfate de magnésiu@, traitée au noir décolorant, filtrée et concentrée sous pression réduite (20 us de mercure). On obtient 13,9 g de carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2, sous forte d'une poudre amorphe blanche. On dissout 13,8 g de carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 [DL-&alpha;-tert-butoxy- carbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 dans 139 cm3 d'acide trifluoracétique. On laisse en contact 15 minutes, sous agitation, à une température voisine de O'C. On concentre à sec sous pression réduite (1 - de mercure) reprend le résidu par 100 cm3 d'acétate d'éthyle et concentre à nouveau à sec, sous pression réduite (1 mm de mercure). On dissout le résidu obtenu dans 100 cm3 d'acétate d'éthyle puis coule cette solution dons 300 cm3 d'éther anesthésique ; un produit précipite. On lave le précipité deux fois par décantation avec au total 600 cm3 d'éther anesthésique puis on l'isole par filtration.On obtient ainsi 11,4 8 de trifluoracétate de [DL-&alpha;-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 carboxy-2 =thyl-3 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2. [&alpha;]D20 = + 114,2 # 1,7 (c = 1,3 , diméthylformamide). L'acide DL-a-tert -butoxycarbonylamino (dihydro-5, 6 oxathiinne-1, 4 yl-2) acétique de départ peut être préparé de la façon suivante On dissout 25,4 g d'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétique dans 435 cm3 de diméthylformamide ; on ajoute 41,5 g de tertbutoxycarbonylazide et 51 cm3 de triéthylamine. On laisse en contact 48 heures sous agitation à une température de 35 C. On concentre la solution sous pression réduite (1 n de mercure), reprend le résidu par 300 cm3 d'eau et ajuste le pH à 8,5 par addition d'une solution sature de bicarbonate de sodium. On extrait deux fois la phase aqueuse, avec au total 500 cm3 d'éther anesthésique que l'on élimine puis on l'acidifie jusqu'à pH = 3, par addition d'acide chlorhydrique 4 N.Un produit précipite que l'on sépare par filtration puis dissout dans 600 cm3 de chlorure de méthylène. La solution obtenue est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (20 mn de mercure). On obtient ainsi 26,2 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétique fondant à 160.0. L'acide DL"a-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétique peut être préparé de la façon suivante On dissout 37 g de DL-&alpha;-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle dans 350 cm3 de méthanol puis on ajoute 182 cm3 de soude N. On laisse en contact 3 heures à une température voisine de 4iC, puis concentre la solution sous pression réduite (20 n de mercure) jusqu environ 1/3 du volune initial. On acidifie à température voisine de s.c jusqu'à pH 4,5 par addition d'acide chlorhydrique 4 N. Un produit cristaliise. On laisse agiter 15 minutes puis on sépare le précipité par filtration ; on obtient ainsi 19,4 g d'acide DLa-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1, 4 yl-2) acétique, sous forme de cristaux blancs fondant vers 270 C. Le DL-a-aaino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle peut être préparé de la façon suivante On dissout 295 g d'a-hydroxyimino (dihydro-5,6 oxathiinne-1, 4 yl-2) acétate éthyle dans 1,5 litre de méthanol puis on ajoute 1,5 litre d'acide fornique et 1,5 litre d'eau. On refroidit par un bain glace-eau et on additionne par 250 g de zinc en poudre par petites fractions, en 30 Minutes. On laisse en contact pendant 2 heures sous agitation à température voisine de 206C, puis on filtre et concentre la solution sous pression réduite (20 n de mercure) jusqu un volume de 1 litre. On ajoute 1,5 litre d'eau et extrait deux fois avec au total 3 litres d'acétate d'éthyle. Les extraits organiques sont éliminés et la phase aqueuse est amenée à pH 10 par addition de soude puis extraite trois fois avec au total 1,5 litre de chlorure de méthylène. On réunit les extraits organiques, sèche sur sulfate de sodium, traite au noir décolorant, filtre et concentre sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient ainsi 150 g de DL-&alpha;-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle, sous forme d'huile. L'a-hydroxySmino (dShydro-5,6 oxathiinne-1, 4 yl-2) acétate d 'éthyle peut être préparé de la façon suivante On dissout 321 g d'(hydroxy-2 éthylthio)-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle dans 3,2 litres de toluène bouillant puis on ajoute 26 g d'acide paratoluènesulfonique monohydraté. Une vive ébullition se produit avec libération d'eau qui est éliminée dans un appareil de DEAN-STARCK. Le chauffage au reflux du mélange réactionnel est poursuivi pendant 15 minutes. Après refroidissement, la solution toluénique est filtrée, lavée trois fois avec au total 1,5 litre d'eau puis avec 200 cm3 d'une solution saturée de bAcar- bonate de sodium et enfin par 500 cm3 d'eau. On sèche sur sulfate de magnésium, traite au noir décolorant, filtre et concentre à sec sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 273 g d'a-hydroxyimino Cdihydro-5,6 oxathiine-1,4 yl-2) acétate d'éthyle sous forme d'une huile qui se prend lentement en masse. L'(hydroxy-2 éthylthio)-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle peut être préparé de la façon suivante On dissout 340 g de chloro-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle dans 1,5 litre de chloroforme puis on ajoute 126 cm3 de mercapto-2 éthanol. A la solution obtenue, on ajoute à 2O environ et en 30 minutes, 248 cm3 de triéthylamine en solution dans 1 litre de chloroforme. On laisse en contact 15 heures sous agitation à 206C environ. Le mélange réactionnel est alors lavé par 200 d d'eau puis par 200 cm3 d'acide chlorhydrique 2 N et enfin quatre eis par au total 1 litre d'eau. On sèche la phase organique sur sulfate de sodium, traite au noir décolorant, filtre et concentre à sec sous pression réduite (20 '(n de mercure'). On obtient ainsi 321 g d'(hydroxy-2 éthylthio)-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle sous forme d'une huile qui se prend lentement en masse. Exemple 5 A une solution de 9,4 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétique dans 85 cm3 de chloroforme, on ajoute 11,2 g d'acétoxymetthyl-3 amino-7 oxo-8 tert-butoxycarbonyl-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2 et 7,7 g de dicyclohexylcarbodiimide. On laisse en contact pendant 12 heures sous agitation à une température voisine de 20 C, puis on sépare le solide formé par filtration. On concentre le filtrat sous pression réduite (20 mm de mercure) et dissout le résidu dans 200 cm3 d'acétate d'éthyle. On lave deux fois avec au total 150 cm3 d'acide chlorhydrique 2 N puis deux fois avec au total 150 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin deux fois avec au total 200 cm3 d'eau.On sèche la base organique sur sulfate de sodium, traite au noir décolorant, filtre puis concentre sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 25 g d'un résidu que l'on chromatographie sur 250 g de silice. On élue successivement par 120 cm3 d'un mélange acétate dIéthyle-cyclohexane (1-9 en volumes) puis par 360 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (15-85 en volumes). Les éluats correspondants sont rejetés. On élue ensuite par 360 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (35-65 en volumes). Ces éluats sont concentrés à sec sous pression réduite (20 mm de mercure).On obtient 12,8 g d'acétoxyméthyl-3 oxo-8 [DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1, 4 yl-2) acétamidoj-7 tert-butoxycarbonyl-2 thia-5 aza-1 bicyclo [2.O] octène-2, sous forme d'une poudre amorphe blanche. On dissout 12,7 g d'acétoxyméthyl-3 oxo-8 [DL-&alpha;-tert-butoxycarbonyl- amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido]-7 tert-butoxycarbonyl-2 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.Oj octène-2 dans 120 cm3 d'acide trifluoracétique. On laisse en contact pendant 15 minutes sous agitation, à une température voisine de 20 C On concentre à sec sous pression réduite (1 mn de mercure), on reprend le résidu par 100 cm3 acétate éthyle et on concentre à nouveau à sec sous pression réduite (1 iin de mercure). On dissout le résidu obtenu dans 25 cm3 d'acétate d'éthyle puis on coule cette solution dans 100 cm3 d'éther anesthésique ; un produit précipite. On lave le précipité deux fois par décantation avec au total 500 cm3 d'éther anesthésique puis on le sépare par filtration.On obtient ainsi 9,7 g de trifluoracétate d'acétoxyméthyl-3 [DL-&alpha;-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamidoj-7 carboxy-2 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo L4.2.Oj octène-2. .20 = + 24,0 + 0,8 (c = 1, diméthylformamide) La présente invention concerne également des compositions pharma- ceutiques utilisables en thérapeutique qui contiennent comme produit actif au moins un produit de formule générale (I) en association avec un ou plusieurs diluants ou adjuvants pharmaceutiquement acceptables. Ces compositions peuvent être utilisées par voie orale, parentérale ou rectale. Comme compositions solides pour administration orale peuvent entre utilisés des comprimés, des pilules, des poudres ou des granulés. Dans ces compositions, le produit actif selon l'invention est mélangé à un ou plusieurs diluants ou adjuvants inertes, tels que saccharose, lactose ou amidon. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que les diluants, par exemple un lubrifiant tel que le stéarate de magnésium. Comme compositions liquides pour administration orale, on peut utiliser des émulsions pharmaceutiqu-ent acceptables, des solutions, des suspensions, des sirops et des élixirs contenant des diluants inertes tels que l'eau ou l'huile de paraffine. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que les diluants, par exemple des produits mouillants, édulcorants ou aromatisants. Les compositions pour administration parentérale peuvent être des solutions stériles aqueuses ou non aqueuses, des suspensions ou des émulsions. Commue solvant ou véhicule on peut employer le propylèneglycol, le polyéthylèneglycol, les huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, et les esters organiques injectables, par exemple l'oléate d'éthyle. Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, émulsifiants ou dispersants. La stérilisation peut se faire de plusieurs façons, par exemple å l'aide d'un filtre bactériologique, en incorporant à la composition des agents stérilisants, per irradiation ou par chauffage.Elles peint entre également préparées sous forme de compositions solides stériles qui peuvent être dissoutes au noient de l'emploi dans de l'eau stérile ou tout autre milieu stérile injectable. Les compositions pour administration rectale sont des suppositoires qui peuvent contenir, outre le produit actif, des excipients tels que le beurre de cacao ou la suppo-cire. En thérapeutiq @e @u aine, les cowpositions selon l'invention sont particulièrement utiles dans le traitement des infections d'origine bactérienne. D'une façon générale, le médecin déterminera la posologie qu'il estime la plus appropriée en fonction de l'age, du poids, du degré de l'infection et des autres facteurs propres au sujet à traiter. Genéralement, les doses sont comprises entre t à 12 g par jour de produit actif par voie orale, intramusculaire ou intravdneuse pour un adulte. L'exemple suivant, donné à titre non limitatif, illustre une composition selon l'invention. EXEMPLE On prépare une solution injectable ayant la composition suivante - [D-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétauidoj-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo [4.2.0] octène-2, trifluoracétate ... 323,8 mg - chlorure de sodium ... 1,5 mg - soluté injectable ... 2 cm3 REVENDICATIONS 1 - Un nouveau dérivé de la céphalosporine caractérisé en ce qutil répond à la formule générale dans laquelle A représente un atome d'oxygène ou de soufre et R représente un atome d'hydrogène ou un radical acétoxy, ses formes optiquement actives et leurs mélanges, ses sels métalliques, ses sels d'addition avec les bases azotées et ses sels d'addition avec les acides. 2 - Un procédé de préparation dtun produit selon la revendication 1, carac térisé en ce que l'on fait réagir un acide de formule générale : sous forme racémique ou optiquement active, dans laquelle A est défini coure dans la revendication 1 et dont la fonction ad ne a été préalableoent protégée, ou un dérivé réactif de cet acide, sur une céphalosporine de formule générale : dans laquelle R est défini comme dans la revendication 1, et dont la fonction acide est éventuellement protégée, puis élimine les groupes protecteurs et transforme éventuellement le produit obtenu en sel métallique, en sel d'addition avec une base azotée, ou en sel d'addition avec un acide. ; - Un procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir us acide de formule générale sous forme racémique ou optiquement active, dans laquelle A est défini comme dans la revendication 1 et dont la fonction amine est protégée par le groupement tert-butyloxycarbonyle, sur une céphalosporine de formule générale : dans laquelle R est défini comme dans la revendication 1, et dont la fonction acide est bloquée par le groupement tert-butyle, puis élimine simultanément les groupements protecteurs par action de l'acide trifluoracétique, libère la base de son sel et transforme éventuellement le produit obtenu en sel métallique, en sel d'addition avec une base azotée ou en sel d'addition avec un acide. 4 - Un procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que lton fait réagir un acide de formule générale sous forme racémique ou optiquement active, dans laquelle A est défini comme dans la revendication 1, et dont la fonction amine est protégée par le groupement tert-butylocycarbonyle, sur une céphalosporine de formule générale dans laquelle R est défini comme dans la revendication 1, et dont la fonction acide est protégée par le groupement trichloro-2,2,2 éthyle, puis libère successivement la fonction. acide par traitement par le zinc dans l'acide acétique et la fonction amine par action de l'acide trifluoracétique, libère la base de son sel et transforme éventuello"ont le produit obtenu en sel métallique, en sel d'addition avec une base azotée ou en sel d'addition avec un acide. 5 - Un procédé selon la revendication 2 caractérisé en ce que l'on fait réagir, en tant de dérivé réactif d'un acide de formule générale sous forme racémique ou optiquement active, dans laquelle A est défini comme dans la revendication 1, le chlorhydrate du chlorure d'acide correspondant, sur un céphalosporine de formule générale dans laquelle R est défini conne dans la revendication 1. 6 - Composition pharmaceutique caractérisée en ce quelle contient au moins un produit selon la revendication 1, en association avec un ou plusieurs diluants et adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables.