Brevet FR2295741A1 — publié le 19760723

La présente invention concerne les sels pouvant entre administrés par voie entéralè et parentérale du 5'-phosphate (ester) de la pyridoxine avec des amino-acides de formule générale (I) : dans laquelle R désigne le groupe hydroxyméthyle (-CH20H), aminométhyle (-CH2-MH2) ou formole (-CHO) et A est un méthylène (-CH2-) ou un éthylène (-CH2-CH2-), le groupement -A-COOH pouvant toutefois être également remplacé par un méthyle (-CH3), ainsi que leurs sels de sodium, de magnésium et de calcium, la préparation de ces composés et l'utilisation de ceux-ci pour la prophylaxie et le traitement de dérangements métaboliques, en particulier pour influencer le métabolisme des lipides et du cholestérol. Depuis 25 ans, on note dans les pays industrialisés occidentaux un accroissement rapide des déséquilibres métaboli- ques, en particulier des dérangements ou déséquilibres du mdta- bolisme des graisses, dont l'origine principale est la surnutrition associée à un manque de mouvements ou d'activité corporelle. I1 s'établit progressivement des taux sanguins plus élevés en lipides déterminés, qui augmentent le risque d'affections cardiaques dues à l'artériosclérose et d'affections vasculaires périphériques.Les graisses sont alors entraînées dans le système circulatoire sous forme de très fines gouttelettes (chylomicrones) qui sont stabilisés par un film de protéine (alpha- ou bêta-globuline) Par suite de la consommation importante de viande, il se crée souvent une hyperdisponibilité en cholestérol, étant donné que ce stéroSde est déjà biosynthétisé en quantité suffisante dans le foie du corps humain. Le mécanisme de la régulation naturelle du taux de cholestérol est perturbé par une nourriture riche en graisses et il en résulte une augmentation per manente du taux de cholestérol du plasma. Le cholestérol diffi cilement soluble se dépose entre autres dans les couches des parois vasculaires de l'aorte, dans la cornée et dans le cristallin.Des taux accrus de cholestérol dans le sang sont responsables, au moins en partie, de l'apparition de sclérose vasculaire artérielle. L'hypercholestérolémie est un dérangement du métabolisme accompagnant toujours l'hyperlipémie, qui peut par exemple être très prononcé dans le cas de diabètes mellites. Les facteurs pathogènes, différentes dur le plan pathogénétique, mais analogues sur le plan symptomatique, de l'hypertriglycéridémie - hyperlipémie, c'est-à-dire la turbidité du sérum due à des chylomicrones (gouttelettes riches en graisses neutre ayant un diamètre allant jusqu'à 1 nm) et lthyper- cholestérolémie, ctest-à-dire l'élévation de la teneur en cholestérol dans le plasma du sang jusqu'à une valeur supérieure à 200 mg X, sont réunis sous les dénominations génériques d'hyperlipoprotéinémie ou d'hyperlipidémie. (Dictionnaire clinique Pschyrembel).Pour le traitement de l'hyperlipoprotéinémie, on utilise principalement jusqu'ici de l'alpha-(p-chlorophénoxy)- isobutyrate d'éthyle, des sels de l'acide al > ha-(p-chlorophéno- xy)-isobutyrique et de l'acide nicotinique, ainsi que des dérivés de l'acide nicotinique et de nombreuses préparations composites. L'acide alpha-(p-chlorophénoxy)-isobutyrique et ses dérivés sont considérés actuellement, du fait de leur activité et de leur tolérance pendant des périodes de temps prolongées, comme des agents thérapeutiques remarquables pour ces applications. Toutefois, on ne peut pas négliger le fait qu'il s'agit ici de composés chimiques synthétiques étrangers au corps humain, qui n'existent pas dans le métabolisme naturel. En outre, ils peuvent avec le temps libérer du p-chlorophénol, lequel est un composé renfermant du chlore sous une forme fixée aromatique stable. Il faut faire des réserves fondamentales à propos d'une large utilisation de ces substances artificielles pendant des laps de temps prolongés, d'autant plus que la posologie de 1500 à 2000 mg/jour est très élevée. L'utilisation de dérivés de l'acide alpha-(p-chlorophénoxy)-isobutyrique est contre-indiquée dans le cas d'affections hépatiques existantes, d'insuffisance rénale, de gravidité, d'absence de mouvement et chez les enfants. Elle peut être à l'origine de diarrhée, d'alopécie et de leucopénie, et elle peut aboutir à une élévation de la transaminase du sérum ou de la phosphokinase de la kératine, qui exigent l'arrêt de l'administration de ces médicaments. Eventuellement, il faut réduire, en cours de médication à l'aide de l'acide alpha-(p-chlorophénoxy)-isobutyrique, la posologie des anti-coagulants.Ces médicaments peuvent également conduire à des nausées, à une augoenta- tion de poids, à une diminution de la faculté génésique ou à des syndromes analogues à la myosite, ce qui exige de mime l'inter- ruption de l'administration de ces médicaments. L'acide nicotinique et les dérivés de l'acide nicotinique, qui étaient importants autrefois comme agents destinés à abaisser le taux de lipides, conduisent souvent à des rougeurs de la peau, à un fonctionnement anormal du foie et à un diabète durable allant en s'aggravant. Par opposition à ces médicaments synthétiques, la vitamine B6 : pyridoxol, pyridoxamine et pyridoxal et leurs dérivés appartiennent aux constituants alimentaires naturels et essentiels. La pyridoxine se rapproche étroitement du 5-phosphate de pyridoxamine et du 5-phosphate de pyridoxal, qui est un coenzyme important pour le métabolisme des amino-acides et des réactions de transamination. Le phosphate de pyridoxal est un constituant de l'alpha-glucanephosphorylase. On n'a pas pu définir si la vitamine B6 participe au métabolisme des graisses. On lui attribue une influence sur le métabolisme des graisses se produisant au niveau de la paroi des artères et ainsi un effet anti-artériosclérotique. A fortes doses, il semble toutefois qu'il en résulte chez le rat une légère augmentation du taux de triglycérides du sang, ce qui est en contradiction avec une action anti-artériosclérotique de la vitamine B6. Ce composé doit également favoriser l'utilisation et la fixation des graisses, il est d'une importance remarquable pour le métabolisme de l'albumine ou des amino-acides, et il présente une fonction importante pour la formation d'hydrates de carbone à partir d'albumine. Ces phénomènes sont également en contradiction avec une influence du métabolisme des graisses dans le sens d'un effet hypolipidémique ou hypocholestérolémique. Pour les amino-acides (acide glutamique et asparti que), on ne connait pas d'effet hypolipidémique ou hypocholesté polémique. Au cours de tests sur les animaux effectués sur le rat, les amino-acides n'ont d'influence ni sur le taux de triglycérides, ni sur le taux de cholestérol du sang. Par opposition à ce qui précède, les recherches ayant abouti à l'invention ont montré que des dérivés de la pyridoxine de formule générale I exercent chez l'homme une action hypolipi démique et hypocholestérolémique remarquablement rapide et très forte, à un degré qui ne pouvait être atteint jusqu'ici qu'avec les dérivés de l'acide alpha-(p-chlorophénoxy)-isobutyrique. Lors d'un traitement avec des dérivés de la pyridoxine de formule générale I, on n'a jamais observé d'effets secondaires indésirables. Ces composés représentent par conséquent un abaisseur idéal du taux des lipides. Ils peuvent etre utilisés sans réticence dans tous les cas dans lesquels les dérivés de l'acide alpha-(p-chlorophénoxy)-isobutyrique ou bien l'acide nicotinique ou ses dérivés ne peuvent pas être utilisés à cause de contreindications ou bien d'effets secondaires indésirables et de phénomènes associés, ou bien ne peuvent entre utilisés qu'avec des précautions sévères appropriées. Les composés de formule générale I peuvent entre administrés à la fois par voie entérale sous forme de comprimés, de capsules ou gélules, de dragées, de granulés, de sirops, de suspensions ou de suppositoires, et sous forme de solutions injectables. Pour le traitement et la prévention d'évolutions affectives de la biomorphose, en particulier du métabolisme des lipides, comme des déséquilibres du métabolisme et des modifications vasculaires dans le cas de l'artériosclérose, de mo1difica- tions vasculaires dues au diabète, de perturbations de kl'irriga- tion sanguine de la peau et d'inflammation des artères, on administre en moyenne de 80 à 500 mg de substance active par jour. Ces quantités sont absorbées au moment des principaux repas. TEST PHARMACOLOGIQUE Les glutamates et aspartates de 5'-phosphate (ester) de la pyridoxine peuvent être tolérés d'une façon extrêmement bonne. La dose DL50 par voie orale du glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal est égale à 6540 mg/kg chez la souris. Les autres composés importants présentent des tolérances aussi bonnes. Par suite de leurs parenté étroite ou de leur appartenance au groupe de la vitamine B6 dune part, et de la présence d'axino-acides essentiels naturels d'autre part, on a la certitude que ces composés sont sans danger. Par ailleurs, mme dans le cas de traitements de longues durées, on n'a en aucun cas à craindre d'effets secondaires ou !me de lésions. TEST CLINIQUE On a administré à 20 patients ayant des taux élevés de triglycérides ou de graisses neutres et un taux normal ou élevé de cholestérol dans le sérum du sang du glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal, selon des doses quotidiennes de 180 mg par voie orale, sous forme de comprimés. On a réparti les patients en deux groupes. Le premier groupe (1) de 7 patients a été traité pendant 21 jours, tandis que le second groupe (2) de 13 patients a été traité pendant 84 jours. Avant, pendant, ainsi qu'à la fin du traitement, on a déterminé le taux de triglycérides ou de graisses neutres et le taux de cholestérol du sang. Les résultats des déterminations ou mesures biochimiques effectuées sur le sang des patients sont groupés dans les tableaux 1 et 2. (voir tableaux 1 et 2 pages suivantes) RESULTATS GROUPE (t) : Voir tableau t. En 21 jours, on a obtenu avec 180 mg de substance active par jour une diminution du taux de triglycérides de 189,4 mg % ce qui correspond à une réduction en pourcentage de 46,6 %. Le taux de triglycérides précddem- ment élevé du sang a été réduit de façon significative (p La réduction n'est toutefois pas importante (0,10 > p > 0,-OS). GROUPE (2) : Voir le tableau 2. Dans ce groupe, on a obtenu en 84 jours une réduction du taux des graisses neutres de 57,02 X et du taux de cholestérol dans le sang de 11,83 X. La réduction du taux de graisses neutres a été importante à la fois après 8 et également après 12 semaines (p c 0,01). De même, la réduction du taux de cholestérol était importante à la fois après 8 semaines (p TABLEAU 1 Triglycérides Cholestérol avant après avant après traitement traitement traitement traitement Valeur moyenne mg% 406,57 217,14 281,14 229,71 Réduction en % 46,59 % 18,29 % S.D. 107,47 110,90 87,82 25,41 S.E.M. 40,62 41,91 33,19 9,60 Facteur significatif P 0,0001 n.s. 0,10 P 0,05 n = 7 S.D. = Variation standard S.E.M. = Erreur standard sur la valeur moyenne. TABLEAU 2 Graisses neutres Cholestérol avant après 8 après 12 avant après 8 après 12 traitement semaines semaines traitement semaines semaines Valeur moyenne mg%* 286,92 178,42 264,84 238,46 Réduction en % 37,81 % 9,96 % S.D. 168,38 81,67 54,24 51,28 S.E.M 46,70 22,65 15,04 14,22 Facteur significatif p p n = 13 n = 13 Valeur moyenne mg%* 179,06 123,55 237,50 232,75 Réduction en % 30,99 % 2,0 % S.D. 78,69 39,84 53,43 58,05 S.E.M 23,72 12,01 15,42 16,75 Facteur significatif p n.s. 0,10 > p > 0,05 n = 11 n = 12 (TABLEAU 2 suite) Graisses neutres Cholestérol avant après 8 après 12 avant après 8 après 12 traitement semaines semaines traitement semaines semaines Valeur moyenne mg%* 287,48 123,55 264,00 232,75 Réduction en % 57,02 % 11,83 % S.D. 177,33 39,84 54,24 58,05 S.E.M 53,46 12,01 16,33 16,75 Facteur significatif p p n = 11 n = 12 Des résultats analogues ont été obtenus avec le glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal et le glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxamine. Les aspartates correspondants assurent également une réduction du taux élevé des graisses et du cholestérol dans le plasma lors de tests effectués sur des rats. Le procédé de préparation des composés définis ciavant de formule générale I ainsi que de leurs sels de sodium, de magnésium et de calcium est caractérisé par le fait qu'on fait réagir un 5'-phosphate (ester) de pyridoxine de formule générale II : dans laquelle R est un groupe hydroxyméthyle, aminométhyle ou formule, ou bien un sel de sodium, de magnésium ou de calcium de ce composé, avec une quantité équimolaire ou sensiblement équimolaire d'acide glutamique ou d'acide aspartique. Cette formation d'un sel est habituellement effectuée dans l'eau ou bien dans un alcool ou encore dans un solvant aprotique. Selon la sensibilité relative des produits de départ et des produits terminaux, la formation des sels est effectuée à de basses températures, sensiblement dans une fourchette allant de O à 500C, et en principe à l'abri de la lumière. Les exemples donnés ci-après à titre non limitatif permettront de mieux comprendre encore l'invention. EXEMPLES / A7 Préparation des substances actives. EXEMPLE 1 Glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal. Poids moléculaire t 394.3. On introduit 26,52 g (0,1 mole) de 5'-phosphate de pyridoxal monohydraté, en opérant à l'abri de la lumière, dans une suspension chauffée à 40 - 50'C formée par 14,7 g d'acide glutamique dans un litre d'eau environ. On agite jusqu'à obtenir une dissolution complète. A ce moment, on concentre complètement la solution par distillation sous vide à basse température. On sèche le résidu sous vide. Rendement : 39,4 g de poudre de coloration jaune intense. Point de fusion : 1350C avec transsudation, puis décomposition progresive. Solubilité : Facilement soluble dans l'eau avec réaction légèrement acide, soluble dans le méthanol, peu soluble dans l'étha- nol, insoluble dans le chloroforme, le benzène et les éthers de pétrole. Spectre (dans H2O) : Large maximum à 290-295 nm. EXEMPLE 2 Aspartate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal. Poids moléculaire : 380 3. On introduit 26,52 g de 5'-phosphate de pyridoxal monohydraté dans une suspension chaude de 13,3 g d'acide aspartique dans 600 ml de méthanol et on agite jusqu'd dissolution complète. Par addition de 1,2 litre d'isopropanol, on précipite le produit, on filtre et on sèche sous vide. Rendement : 30 g, cest-d-dire 79 X de la théorie. Point de fusion : 135-C avec transsudation, puis décomposition progressive. Solubilité : Facilement soluble dans l'eau, soluble dans le méthanol, difficilement soluble dans méthanol et l'isopropanol, insoluble dans ltéther diéthylique. Spectre (dans H20) t Large maximum à 290-295 nm. Les sels de 51-phosphate de pyridoxal avec des aminoacides sont constitués par une poudre de coloration jaune intense. EXEMPLE 3 Glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxamine. Poids moléculaire : 395,3. On introduit 24,8 g (0,1 mole) de 5'-phosphate de pyridoxamine / Peterson et al, J.Amer.Chem.Soc.76(1954)170 7 dans une suspension de 14,7 g d'acide glutamique dans un litre d'eau, on agite jusqu'à dissolution complète, puis on concentre complètement sous vide à basse température. Rendement : 26,3 g de poudre hygroscopique. Solubilité : Facilement soluble dans l'eau, peu soluble dans les alcools supérieurs et dans la plupart des solvants organiques. On obtient d'une façon analogue : L'aspartate du 5'-phosphate (ester) de pyridoxamine. Poids moléculaire : 381,3. Les deux composés sont facilement solubles dans l'eau. Les solutions réagissent de façon presque neutre. EXEMPLE 4 Glutamate de 5'-phosphate (ester) de Pyridoxol Poids moléculaire : 396,3 On introduit 2,5 g de 5'-phosphate de pyridoxol (méthyl-phosphate de 2-méthyl-3-hydroxy-4-hydroxy-méthyl-5-py ridine) / Peterson et al, J.Amer.Chem.Soc.76(1954)172 7 dans une solution de 1,47 g d'acide glutamique dans de l'eau chauffée à 40-50"C, en l'absence de lumière, et on agite jusqu'à dissolution complète. On élimine ensuite l'eau par lyophilisation. Rendement : 4 g de poudre blanche. Solubilité : Facilement soluble dans l'eau, soluble dans le méthanol, peu soluble dans les alcools supérieurs et dans la plupart des solvants organiques. / B7 Exemples de présentations. Les substances actives décrites sous /'A7 sont présen tées sous forme de comprimés, capsules ou gélules, dragées, granulés, sirops, suspensions, suppositoires ou en solution pour injections. EXEMPLE 5 Comprimés contenant chacun 60 mq de glutamate.de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal. On empate 6000 g de glutamate de 5(-phosphate (ester) de pyridoxal avec 2 litres de colle d'amidon renfermant 100 g d'amidon de mais, dans un malaxeur. Quand la masse humide est collante, on y ajoute un peu d'amidon sec. Ensuite, on effectue une granulation dans un appareil de granulation et on sèche sous vide. On mélange ensuite les granules obtenus avec 0,5 kg d'amidon de maIs et 25 g de stéarate de magnésium, et on presse en comprimés ayant une teneur en substance active de 60 mg. Les comprimés peuvent ensuite etre encore dragéifiés. EXEMPLE 6 Capsules ou gélules renfermant chacun 80 mg de glutamate de 5'phosphate (ester) de pyridoxal. On mélange la substance active avec une petite quanti té d'amidon de maSs et de stéarate de magnésium et on en remplit les capsules ou gélules. EXEMPLE 7 Solution pour injections renfermant chaque fois 100 mg de glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal. On fait dissoudre 100 g de glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal dans 200 ml d'eau, on règle à un pH de 7,0 + 0,2 par addition d'une petite quantité de soude, on filtre à travers un filtre ayant un diamètre de pores de 0,22 microns pour réduire à un volume de 300 ml exactement, et on en remplit dans des conditions stériles des ampoules renfermant chacunes 3 ml de produit, puis on lyophilise. On ferme ensuite les ampoules par fusion. Avant l'emploi, on ajoute chaque fois 2,5 mi d'eau au produit de lyophilisation, on dissout en agitant, on prélève avec une seringue pour injections et on administre par voie intramusculaire. / C7 Exemples d'utilisation. On administre le glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal, de pyridoxamine ou de pyridoxol, ou bien les aspartates correspondants, pour le traitement ou la prévention dhyper- lipoprotéinémie, en doses de 80 à 500 mg par jour. Des doses plus élevées ne fournissent pas un effet plus intense et sont par conséquent inutiles. Habituellement, on en répartit environ 150 à 200 mg par jour en 2 à 3 administrations ou absorptions par voie orale aux repas, en capsules ou en dragées. L'effet du traitement à l'aide de ces substances est prouvé quantitativement ci-avant et est indiqué dans les tableaux 1 et 2. REVENDICATIONS 1. Sels de 5'-phosphate (ester) de pyridoxine avec des amino-acides de formule I :- dans laquelle R désigne le groupe hydroxyméthyle, aminométhyle ou formule, et A est un groupe méthylène ou éthylène, le groupement -A-COOH pouvant toutefois être remplacé par -CH3, ainsi que les sels de sodium, de magnésium et de calcium de cet ester d'acide phosphorique. 2.- Glutamate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxal ainsi que ses sels de sodium, de magnésium ou de calcium. 3.- Aspartate de i'-phosphate (ester) de pyridoxal. 4.- Glutamate ou aspartate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxamine. 5.- Glutamate ou aspartate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxol. 6.- Procédé pour la préparation des composés suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'on fait réagir un 5'-phosphate (ester) de pyridoxine ou bien un sel de sodium, de magnésium ou de calcium de celui-ci avec une quantité équimolaire ou sensiblement équimolaire d'acide glutamique ou d'acide aspartique. 7.- Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce qu'on effectue la réaction dans l'eau, dans un alcool ou dans un solvant aprotique à une température ne dépassant pas ou ne dépassant pas nettement SO'C. 8. Préparation pharmaceutique utilisable pour le traitement ou la prévention d'hyperlipoprotéinémie par administration entérale ou parentérale, caractérisée en ce qu'elle renferme, comme substance active, un glutamate ou un aspartate de 5'-phosphate (ester) de pyridoxine de formule I suivant la revendication 1, ou bien ses sels de sodium, de magnésium ou de calcium. 9.- Comprimés, capsules ou gélules ou suppositoires utilisables en vue d'un traitement thérapeutique de l'hyperlipoprotéinémie, caractérisés en ce qu'ils renferment environ 50 à 250 mg d'un sel de 5'-phosphate de pyridoxine avec de l'acide glutamique ou de l'acide aspartique et des liants ou véhicules (excipients) pharmaceutiquement acceptables.