Brevet FR2317301A1 — publié le 19770204

La présente invention concerne la 3-déazaguanine et les dérivés de celle-ci. Dans la dernière décennie il a été trouvé que plusieurs analogues de nucléosides ont une activité excellente contre les tumeurs et contre les virus. Parmi les nucléosides synthétiques pouvant entre utilisés comme agents contre les virus et les tumeurs les plus importants sont considérés être le 5-iodo-2'-ddoxyuridine (IDU), le 9-ss -D-arabinofuranosyladénine (ara-A) et le arabinofuranosylcytosine (ara- C). Comme agents antivireux ces composés sont cependant limités a certains virus qui ne comprennent pas ceux responsables des maladies des voies respiratires de l'homme (influenza, grippe).Le seul analogue nucléoside connu ayant une activité contre les virus de ces maladies des voies respiratoires est le 1-p -D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3- carboxamide décrit dans le brevet des E.U. 3 798 209. Certains dérivés de ce dernier composé ont aussi une activité antivireuse substantielle telles les bases triazoles par exemple 1,2,4-triazole-3-carboxamide et 1,2,4-triazole-3thiocarboxamide. Malgré ces composés et la decouverte de leur efficacité antivireuse il est nécessaire de trouver d'autres composés pouvant empecher des infections dues à des virus particulièrement des virus provoquant des maladies des voies respiratoires. Les nucléosides a activité antitumurale sont ou bien toxiques pour le malade ou ne couvrent qu'un spectre limité d'activité antitumurale. de De plus, si des analogues nucléosides sont utilisés afin d'empêcher une croissance de virus et de tumeurs les nucléosides sont métabolisés in vivo en leurs mono-ou polyphosphates correspondants qui sont les inhibiteurs véritables d'une telle croissance. Un majeur obstacle dans l'utilisation-is de en en chimiothérapie est constitué par la résistance cellulaire a de tels composés. Les cellules invasibles ont un niveau faible d'activité de kinase ou de pyrophosphorylase et ne produisent ainsi pas des inhibiteurs efficaces. Cependant que ce problème peut être évité par l'utilisation de phosphates de nucléosidesces dérivés ne passent souvent pas a travers les membranes cellulaires ou sont dégradés rapidement dans le liquide intercellulaire et sont ainsi inefficaces comme inhibiteurs. Ainsi il est nécessaire de trouver d'autres analogues capables d'empêcher effioacement le développement d'infections par virus et des néoplasmes et qui possèdentune solubilité meilleure par rapport aux agents antivireux et antitumural connus. La découverte d'un tel composé n'ayant pas seulement une activité acceptable mais pouvant aussi pénétrer à travers la membrane cellulaire et contacter l'infection par virus en concentration efficace est très difficile. La présente invention concerne de préparation et les composés ayant la formule générale: dans laquelle X est / NH, -NH2 ou -OCH3; Y est #CNHR, )CNR1 ou -C#N dans lesquels R est H ou acyle et R1 est =CH-N(CH3)2; Z est H; tel que tétrahydropyranyle, ss -D-ribofuranosyle, 5déoxy- ss -D-ribofuranosyle, ss -D-ribofuranosyl -5-phosphate, ss -D-ribofuranosyl-3,5-phosphate cyclique, C1-C18 acyle et isopropylidène p-D-ribofuranosyle, C1-C18 acyle et isopropylidène 5-de@soxy- 0-D-ribofuranosyle, C1-C18 acyle et isopropylidène ss -D-ribofuranosyl -5-phosphate ou C1-C18 acyle (3-D-ribofuranosyl3,5-phosphate cyclique; et les sels acceptables du point de vue physiologique de ceux-ci; sous la condition que X est # #NH et Y est # #CNHR ou#CNR seulement si Xet Y sont liés;X est -NH2 ou -OCH3 et Y est -C#N seulement si X et Y ne sont pas liés. Les composés de l'invention peuvent être utilisés comme agents antivireux, antitumural et antibactériologique. Les composés de l'invention peuvent être préparés selon la représentation schématique suivante et selon les exemples décrits ci-dessous dans lesquels les températures et les points de fusion sont donnés en degréscentigrades.Les points de fusion furent déterminés à l'aide d'un appareil de détermination du point de fusion capillaire Thomas-Hoover et n'ont pas été corrigés. Les rotations spécifiques furent mesurées dans un tube l-dm sur un modèle Perkin-Elmer 141 polarimètre automatique à indication numérique. Les spectres de résonance magnétique des protons (pmr) furent obtenus sur un spectromètre Varian A-60 et un spectromètre Hitachi R-20A dans du DMSO-d6 en utilisant du DSS comme référence interne. Les spectres ultraviolets furent obtenus sur un spectrophotomètre Cary Model 15 et les spectres à l'infrarouge obtenus sur un spectrophotomètre Perkin-Elmer 257 (KBr pellets). Les analyses élémentaires furent réalisées par Galbraith Laboratories Inc., Knoxville, Tennessee, Etats-Unis. Des évaporations furent réalisées sous pression réduite avec des températures de bain en-dessous de 400C. La détection des composants sur du gel de silice (ICN, Woelm F254) fut réalisée à l'aide de lumière ultraviolette et une atomisation d'une solution d'acide sulfurique à 10% dans du méthanol suivi d'un chauffage. Des sels d'addition acides acceptables des composés de base peuvent être choisis par exemple dans le groupe comprenant acide chlorhydrique, acide bromhydrique, acide iodhydrique, citrate, sulfate, sulfate substitué, phosphate, carbonate, bicarbonate et formate. Des sels acceptables du genre phosphate peuvent être choisis par exemple dans le groupe comprenant les sels des métaux alcalins et alcalino terreux, par exemple, sodium, potassium, calcium, magnesium, lithium; ammonium et ammonium substitué, trialcoolammonium, dialcoylammonium, alcoylammonium, par exemple, triéthylammonium, triméthylammonium, diéthylammonium, octylammonium, cétyltriméthylammonium, cétylpyridium. Les groupes hydroxyle du glycone et du groupe amino de l'hétérocycle peuvent être bloqués par des groupes tels que par exemple acyle, isopropylidine et diméthylaminométhylène. Le groupe acyle peut être choisi dans les groupes à channe droite, ramifiée, substituée, non-satuEe, saturée ou aromatique tels que par exemple acide acétique, trifluoroacétique, propionique, n-butyrique, isobutyrique, valérique, caproique, pélargonique, enanthique, caprylique, latique, acrylique, propargylique, palmitique, benzoique, phthalique, salicylique, cinnamique et naphthoique. Schéma I Schéma II Les composés selon l'invention peuvent ainsi être préparés de méthyl-4(5)-acetamide-2-imidazole-5(4)-carboxylate (composé 2) qui est fait réagir avec un agent de déshydratation tel que l'oxychlorure de phosphore, le chlorure d'oxalyle, le chlorure de thionyle etc. sous des conditions de reflux afin d'avoir le méthyi-4 (5)--cyanométhyl-2-imidazole-5 (4) -carboxylate (composé 3) qui est chauffé avec de l'ammoniaque liquide à une température entre 100 et 1500C afin d'avoir le 4(5)-cyanométhyl4-imidazole-5(4)-carboxamide (composé 4). Exemples I à III. Ce composé est fait réagir sous des conditions de reflux avec un carbonate de métal alcalin tel que le carbonate de sodium afin d'avoir la 3-déazaguanine (composé 5). Alternativement la 3déazaguanine peut être préparée directement de carboxylate de cyanométhyle par traitement avec du chlorure d'ammonium dans un alcool aliphatique tel que méthanol etc. en présence d'ammoniaque à une température entre 100 et environ 1500C, exemple IV. Les composés 9, 10, 11, 12, 13 et 14 peuvent être prerparés à partir du composé 3 par un procédé de fusion à température élevée avec une ribofuranose protégée ou une conversion aux dérivés silylatés et réaction avec une ribofuranose protégée en présence de chlorure stanneux suivi d'une amination et fermeture de l'anneau, ou alternativement, les composés 1 et 14 peuvent être préparés de 3-déazaguanine par glycosidation directe,exemples V - VII. Les dérivés de tétrahydropyranyle (composésl5 à 20) et les dérivés de 5'-débxy-ribofuranosyle (comPoses21 à 26) peuvent aussi être préparés d'une façon analogue, exemples VIII et IX, comme montré dans le schéma I. Les 5'-phesphates peuvent être préparés par une phosphorylation de deux précurseurs différents, schéma II. L'exemple X montre la phosphorylation de 5(4)cyanométhyl-1-ss -D- ribofuranosylimidazole-4(5)-carboxamide et l'exemple XI la phosphorylation des composés 11 et 14. Les 3', 5'-phosphates cycliques (composés 28 et 31) sont préparés, exemple XII, des composés 27 et 29 ou 31 est préparé à partir du composé 28, comme montré dans le schéma II. Les composés de l'invention peuvent être aussi bloqués comme montré dans le schéma II. L'exemple XIII montre le bloquage de la portion sucre (composés 32 et 33) bloquage de la génine (composé 34) ou bloquage du sucre et de la génine (composé 35). La 3-déazaguanosine (composé 11) peut aussi être préparée par une conversion enzymatique de 3-déazaguanine, comme montré dans l'exemple XIV suivant. Exemple I Méthyl-4(5)-acétamido-2-imidazole-5(4)-carboxylate (composé 2) Du diméthyl ester de 4-acide acétique-2-imidazole-5- carboxylique (composé 1)* (20,4 g, 0,013 moles) fut ajouté à 1800 ml de méthanol saturé à 00 avec de l'ammoniaque, et la solution de couleur ambre fut agitée pendant 16 heures à la température de laboratoire. La solution de couleur orange-claire fut évaporée sous vide à sec et le résidu trituré avec 50 ml de méthanol, recueilli et séché à l'air. 16,6 g (88%) du composé 2 furent obtenus ayant une température de fusion entre 230 et 232 C (température de fusion litérature 242-244 C). Exemple II Méthyl-4(5)-cyanométhylimidazole-5(4)-carboxylate (composé 3) 16,6 g, 0,097 moles du composé 2 furent maintenus sous reflux pendant 3 heures dans 800 ml d'oxychlorure de phoshpre. t'oxychlorure de phosphore en excès fut éliminé eous vide et le résidu hydrolysé avec 100 ml de glace à 0 C. La solution fut neutralisée à un pH de 6 en-dessous de 15 C. Après 16 heures le précipité fut filtré, lavé et séché. 12,4 g (77%) du composé 3 avec une température de fusion de 168 à 170 C furent obtenus. Un échantillon analytique fondait entre 170 et 171 C, # pH 1 222 nm, 10,700# pH 11 251 nm, 10,600 nmr (DMSO-d6) #3,89 (s. max 3H, CH3), &alpha;4,20 (s. 2H, CH2), 7,90 (s. 1H, H2), 13,3 (br, 1H, NH). Anal. Calc. pour C7H7O2N3: C 50,91; H 4,27; N 25,45 Trouvé: C 50,70; H 4,25; N 25,35 * R.K. Robins et al, J. Org. Chem. 28, 3041 (1963). Exemple III 4(5)-cyanométhylimidazole-5(4)-carboxamide (composé 4) Le composé 3 (5,0 g, 0,03 moles) fut chauffé avec 200 ml d'ammoniaque liquide pendant 48 heures. L'ammoniaque en excès fut évaporé et le résidu absorbé dans 20 ol d'eau, filtré et séché. 2,85 g (62,5%) du composé 4 avec une température de fusion entre 225 et 228 C furent obtenus. Un échantillon analytique audit une température de fusion entre 230 et 2320C. Anal. Calc. pour C6H6N40: C 48,00; H 4,03; N 37,32 Trouvé: C 48,14; H 3,97; N 37,51 Exemple IV 6-aminoimidazoL4,5-cJ pyridine-4-one- (3-déazaguanine) (composé 5) Procédé A: 1,5.g (0,01 moles) du composé 4 furent maintenus sous reflux dans 15 ml de Na2CO3 à 10% en poids pendant 4 heures, neutralisésà un pH de 6 avec de l'acide chlorhydrique concentrés et maintenuspèndant 16 heures à 40C. Le produit solide fut lavé et séché. 750 mg (50%) du composé 4 furent obtenus avec une température de fusion de 3000C. Anal. Calc. pour C6H60N4: C 48,00; H 4,03; N 37,32 Trouvé: C 47,99; H 4,10; N 37,19 Procédé B/ Le composé 3 (5,0 g, 0,0303 moles) fut chauffé dans 200 ml d'ammoniaque liquide à 100 C pendant 96 heures. L'ammoniaque fut évaporé, le résidu absorbé dans 60 ml de H20, filré et séché afin de fournir 2,85 g (56%) d'un produit avec une température de fusion de 3000C. Les constantes physiques étaient les mêmes que pour le produit obtenu avec le procédé A. Procédé C: Une solution de 0,50 g (3 mmoles) du composé 3 et 0,50 g de NH4C1 dans 20 ml de méthanol, a travers lequel du NH3 avait été dirigé pendant 2 minutes fut enfermée dans un récipient et chauffée dans un bain d'huile à l500C pendant 16 heures. Le contenu du récipient fut évaporé, absorbé dans 20 ml de H20 chaud et filtré. La 3-déazaguanine était le seul produit détectable et était obtenue dans un rendement de 33%. Exemple V Méthyl-5-cyanométhyl-1-(ss -D-2',3'-5'-tri-0-acétyl ou benzoyl ribouranosyl)-imidazole-4-carboxylate (composé 9) et méthyl-4 cyanométhyl-1- P -D-2' ,3'-5'-tri-0-acétyl ou benzoyl ribofuranosyl)- imidazole-5-carboxylate (composé 12). Procédé A: Du méthyl-4(5)-cyanométhylimidazole-4(5)carboxylate (composé 3) (1,86 g, 11mmoles) furent mélangés soigneusement avec 1,2,3,5-0-tétraacétylribose (composé 7a) (4,77 g, 15 mmoles), et le mélange fondu sur un bain d'huile à 170 C pendant 7 à 8 minutes. De l'acide chloracétique (200 mg) fut ajouté et un vide fut appliqué cependant que la tempér & ure du bain fut rapidement portée à 190 C. Le temps total après l'addition du catalyseur était de 25 minutes. Le produit fut extrait avec du benzene, filtré et lavé avec une solution saturée de Na2CO3 puis avec de l'eau. La solution de benzène fut séchée, filtre et évaporée. La gomme obtenue fut soumise à une chromatographie sur une colonne d'acide silicique à l'aide de CHCî3 avec des concentrations de plus en plus fortes de MeOH. Les fractions contenant le produit furent combinées, - évaporées et crystallisées de MeOH afin d'avoir le composé 12a (1,7 g),# pH 7 & 11 242 m , point de fusion 92 à 930, pmr (dans du CDtx3) # #6,45 (1,3 H1, JH1'-H2' = 2,5 Hz). Anal. Calc. C18H21N309: C 51,06; H 5,00; N 9,93' Trouvé: C 51,23; H 5,03; N 9,90. L'autre composé isomère (composé 9a) fut isolé dans un rendement de moins de 10%. Le même procédé de fusion fut utilisé arec 2,3,5tri-0-benzoyl-1-0-acétylribofuranose (composé 7b) et un mélange de deux isomères possibles (composés 9b et 12b) fut obtenu, et confirmé par les spectres pmr, le rendement total était de 47%. Procédé B: 1,65 g du composé 3 (10 mmoles) furent maintenus sous reflux pendant 18 heures avec de l'hexaméthyldisili- cane (25 ml) et 50 mg de (NH4)2S04. L'hexaméthyldisilicane en excès était enlevé et le produit (composé 6) dissous dans du dichloroéthane (200 ml). 3,18 g de tétraacétylribose (composé 7a) (10 mmoles) furent ajoutés suivi de SnC14 (0,08 ml) et le mélange de réaction agité à la température de laboratoire pendant 6 heures. Une solution saturée de Na2CO3 fut ajoutée et l'agitation continuée pendant une demi-heure. La phase organique fut lavée avec une solution de Na2CO3, pris avec de l'eau, séchée, filtrée et évaporée. La gomme obtenue fut purifiée comme décrit dans le procédé A afin d'avoir les composés 9a et 12a dans un rendement de 57%. Le rapport des composés 9a et 12a était de 2:1 (déterminé par absorption uv). Une répétition de ce procédé avec du 2,3,5-tri-0- benzoyl-l-O-acétylribofuranose (composé 7b) fournit un mélange isomère des produits 9b et 12b dans un rendement au dessus de 60% sous forme d'une mousse blanche. Le rapport de 9b à 12b était de 5:1. Procédé C: Le composé 6 (10 mmoles) fut dissous dans 100 ml de CH3CN et du bromure de 2,3,5-tri-0-acétylribofuranosyle (10 mmoles) dissous dans 25 ml de CH3CN furent ajoutés et le mélange agité pendant 3 jours à la température de laboratoire. Ensuite 10 ml de MeOH furent ajoutés et le mélange évaporé sous vide. La gomme résultante fut purifiée comme décrit dans le procédé A. Les composés 9a et 12a furent obtenus dans un rendement de 55% (rapport 1:8). Le procédé fut répété avec du bromure de 2,3,5tri-0- benzoyl-ribofuranosyle (composé 8b) afin d'avoir les produits 9b et 12b. Procédé D: 25,0 g du composé 3 furent maintenus sous reflux sous des conditions anhydres pendant 12 heures avec de l'hexaméthyldisilicane (300 ml) et du sulfate d'ammonium (0,5 g). L'hexaméthyldisilicane en excès fut enlevé par distillation. L'huile obtenue fut dissoute dans du 1,2-dichloroéthane sec (800 ml) et 76,5 g de 1-0-acétyl-2,3,5-tri-0-benzoyl-ss-D-ribo- furanose et 25,4 g de chlorure stanneux furent ajoutés.-Une conversion pratiquement complète au nucléoside fut obtenue après environ 15 minutes. Le mélange de réaction fut agité encore pendant 4 à 24 heures et versé dans 3 1 d'une solution à 5% bi de carbonate . Le mélange fut filtré a travers du célite, extrait avec du chloroforme (3 x 800 ml),les phases organiques combinées, séchés (MgS04) et évaporées sous pression réduite (500. Une mousse légèrement beige (92 g, 1008) fut obtenue (composé 9b).Un échantillon analytique fut obtenu en passant 1 g de la mousse dissoute dans un mélange benzène-acétate d'éthyle (1:1) à travers une colonne de gel de silice (10 g). Une mousse blanche fut obtenue pmr (DMSO-d6): #3,85, (s, 3, CH3) 4,52 (s, 2, CH2), 6,6 (d,l,J=5 Hz, H1), 8,38 (s, 1, C2H). Anal. Calc. pour C33H27N3N309: C 65,02, H 4,46, N 6,89; Trouvé: C 65,19; H 4,46; N 6,63 Procédé E: 1,65 g (10 mmoles) de méthyl-5(4)cyanométhylimidazole-4(5)-carboxylate (composé 3) furent mélangés avec 3,18 g (10 mmoles) -de 1,2,3,5-tétra-0-acétylribofuranose et chauffés à 1700C jusqu'à l'obtention d'une fondue (environ 1 minute). 20 mg de bis- (p-nitrophényl) -phosphate furent ajoutés et le tout chauffé à une température entre 170 et 175 c sous un vide poussé pendant 25 minutes.Le résidu fut dissous dans du chloroforme, extrait avec une solution à 5% de NaHCO3, séché (MgS04) et placé sur une colonne de gel de silice (120 g dans du CHC13). L'élution à l'aide de EtOAc fournit les nucléosides purs suivants: Méthyl-4-cyanométhyl-1-(2,3,5-tri-0-acétyl-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-5-carboxylate (12a) sous forme d'aiguilles blanches (2,0 g, 47%); point de fusion 92-93 (EtOH); # pH max 7 & 11 242m pmr (DMSO-d6): #2,13 (s, 9, acétyle CH3 's), 3,87(s, 3, ester CH3), 4,19 (s, 2, CH2), 6,48 (d, JH1'-H2' = 3Hz,H1), 8,33 (s, 1, C2H). Anal, Calc. pour C18H21N309: C 51,06; H 5,00; N 9,93; Trouvé: C 51,23, H 5,03; N 9,90 Méthyl-4-cyanométhyl-1-(2,3,5-tri-0-acétyl-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-5-carboxylate (12c) sous forme d'un sirop (0,5 g, 11,8%); pH 1 238m# (# 9,800); # pH max 7 & 11 247 (11,560); pmr (DMSO-d6 # 2,13 (s, 9, acétyle CH3 's), 3,86 (s, 3, ester CH3), 4,19 (s, 2, CH2), 6,48 (d,JH1-H , = 5 Hz, 1, H1,), 8,18 (s, 1, C2H). H1'-H2' Anal.Calc. pour C18H21N3O9 : C 51,06; H 5,00; N 9,93, Trouvé: C 51,32; H 4,98; N 9,84 Méthyl-5-cyanométhyl-1-(2,3,5-tri-0-acétyl-ss-D-ribofuranosyle)imidazole-4-carboxylate (9a) sous forme d'un sirop (0,8 g, 19%); ce matériau étant identique à l'isomère simple obtenu avec le procédé au chlorure stanneux. Méthyl-5-cyanométhyl-1-(2,3,5-tri-0-acéthyl-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-4-carboxylate (9c) sous forme d'un sirop (0,2 g, 4,7%) # pH max 1 226 (# 10 100); # pH max 7 236 (10 500);# pH max 11 238 (10 900); pmr (DMSO-d6); #1,93, 2,04 et 2,13 (singlets, 3 protons chacun, acétyle CH3 's), 3,84 (s, 3, ester CH3), 4,35 (s, 2,CH2), 6,49 (d, 1, JH1, - H2, = 6 Hz, 1, H1,), 8,03 (s, 1, C2H). Anal. Calc. pour C18H21N3O9: C 51,06; H 5,00; N 9,93. Trouvé: C 51,28; H 4,78; N 9,71. Exemple VI 5-cyanométhyl-1--ss -D-ribofuranosylimidazole-4-carboxamide (composé 10) Les composés 9a ou 9b (0,046 moles) et de l'ammoniaque liquide (150 ml) furent chauffés dans une bombe à la température d'un bain de vapeur pendant 3 heures. L'ammoniaque fut évaporé à la température de laboratoire et les dernières traces de NH3 enlevées sous vide. Le résidu fut purifié sur une colonne de sel de silice (25 g) par élution avec un mélange chloroforme-méthanol (4:1). Les fractions comprenant le composé 10 furent combinées et évaporées jusqu'à la crystallisation.Le rendement était de 10,5 g (818) du composé 10 ayant une température de fusion entre 90 et 91 C. [&alpha;]n25 ~ 46,90 (c 1,04, eau); IR cm- (KBr) 2250 (w) (C#N), 1666 (s) ((C=0); # pH max 1 217 nm (# 8,750), 231 (sh) (8 190); # pH max 7 219 (sh) (8 190), 232 (8 760); # pH max 234 (8 750); pmr (DMSO-d6); J 4,52 (s, 2, CH2), 5,71 (d, 1, J=6 Hz, H1,), 7,33 et 7,52 (s,1,NH), 8,12 (s,1,C2H). Anal. Calc. pour C11H14N405: C 46,81; H 5,00; N 19,85 Trouvé: C 46,61, H 5,28, N 19,49. Exemple VII 6-amino-1- ( Q -D-ribofuranosyl)imidazo(4,5-c)-pyridine-4-one (compesé 11) (3-déazaguanosine) et 6-amino-3-( ss-D-ribofuranosyl)- imidazo (4,5-c) pyridine-4-one (composé 14). Procédé A: 846 mg (2 mmoles) du composé 12a furent dissous dans du MeOH anhydre (200 ml) et la solution saturée avec de l'ammoniaque à 40C. Le mélange de réaction fut agité a la température de laboratoire dans un flacon bien scellé pendant 2 jours. Le mélange fut évaporé sous vide et évaporé ensuite ensemble avec EtOH/MeOH afin d'éliminer les dernières traces d'ammoniaque. Le résidu fut extrait avec du CHCl3 (4 x 20 ml) et le produit solide recrystallisé de H20. 310 mg (55%) du composé 14 furent obtenus. Le composé avait les caractéristiques suivantes: température de fusion 247- 250 C,# pH max 1 278 et 320, 259 et 325 et # pH Il 322. max max Anal. Calc. CllH14N405: C 46,81; H 5,00; N 19,85. Trouvé: C 47,03; H 4,06; N 19,84. Un produit identique fut obtenu dans un rendement de 52% avec le composé 12b sous des conditions de réaction semblables. Le produit 14 fut aussi obtenu en chauffant eu bien le composé 12a ou 12b dans de l'ammoniaque liquide entre 110 et 1200C pendant 10 à 12 heures dans une bombe en acier. De façon analogue le composé 9a ou 9b fut converti dans le composé 11 dans un rendement de 45 à 50% en utilisant ou bien un mélange MeOH/ammoniaque à la température de laboratoire ou de l'ammoniaque liquide entre 110 et 1200C. Le produit fut isolé par des préparations Tlc (plaques celluloses F dévébppées pH 1 dans @@3@@,H2O 7/3 @@@@@ absorption uv @ max 284 et 314 (sh), # pH max @ 270 et 305 (sh), # pH max 11 268 et 296 (sh), température de fusion 264 C. Anal. Calc. C11H14N4O5: C 46,81; H 5,00; N 19,85 Trouvé: C 46,68; H 5,12; N 19,61. Procédé B: 150 mg (1 mmole) de 6-aminoimidazo (4,5-c)pyridine-4-one (3-déazaguanine) (composé 5) furent chauffés sous reflux en présence d'hexaméthyldisilicane (10 ml) et de 10 mg de (NH4)2S04 pendant 18 heures. L'hexaméthyldisilicane en excès fut éliminé sous vide et le résidu absorbé dans 50 ml de CH3CN. 340 mg (1 mmole) du composé 8 dissous dans 10 ml de CH3CN furent ajoutés et le mélange de réaction agité pendant 3 heures à la température de laboratoire sous des conditions anhydres. 5 ml de MeOH furent ajoutés et le mélange encore agité pendant 10 minutes. L e mélange fut évaporé et redissous dans du MeOH saturé avec de l'ammoniaque et laisse pendant la nuit à la température de laboratoire. Par Tlc un nombre de produits à absorption uv furent obtenus dont deux correspondaient aux composés 11 et 14.Les spectres d'absorption uv de ces deux produits étaient identiques à ceux des composés 11 et 14. Procédé C: Un mélange de 4,64 g du composé 10 (20 mmoles), de 50ml de carbonate de sodium en solution (.5% ), et de 25 ml d'éthanol fut fait réagir sous reflux et sous agitation pendant 0,5 heures. La solution fut filtrée, refroidie et crystallisée. Les crystaux furent filtrés, lavés et séchés. De cette façon 4,0 g d'aiguilles furent obtenus. Une crystallisation subséquente de la liqueur fournit 0,8 g d'aiguilles de sorte que le rendement était de 4,8 g (85%); point de fusion 255-2570C: [&alpha;]25 D - 59,3 (C 0,97) . 1N NaOH); uv# pH max 284 nm (# 13 650), 309 (sh) (6 570); # pH max 7 270 (10 120), 28 (8 140); # pH max 11 272 (10 120), 295 (sh) (8 140); pmr (DMSO-d6): #5,51 (d, 1, J=6 Hz, H1,) 5,52 (s, 1, C7H), 5,68 (s, 2, NH2), 7,95 (s, 1, C2H), 10,5 (s, 1, NH). Exemple VIII Méthyl-4-cyanométhyl-1-(tétrahydropyran,-2-yl)-imidazole-5carboxylate (composé 18) et méthyl-5-cyanométhyl-l-(tétrahydro- pyran-2-yl)-imldazole-4-carboxylate (composé 15) Un mélange de méthyl-4(5)-cyanométhylimidazole-5(4)- carboxylate (12,4 g, 75,2 mmoles), du dihydropyrane fraichement distille (15 ml) du bis-(p-nitrophényl) phosphate (75 mg) et de l'acétate d'éthyle anhydre (250 ml) fut soumis au reflux pendant 10 heures. 10 ml de dihydropyrane additionnel et 25 mg de bis(pnitrophényl)-phosphate furent ajoutés et maintenus sous reflux pendant 5 heures.Le mélange fut évaporé sous vide et un sirop fut obtenu qui .fut purifié par chromatographie sur une colonne de gel de silice (500 g) par élution avec un mélange de chloroformeacétate d'éthyle (1:1). 11,1 g (59%) de méthyl-4-cyanométhyl-1- (tétrahydropyran-2-yl)-imidazole-5-carboxylate furent obtenus. Une recrystallisation de ligroine à 30 à 600C fournit des rosettes blanches ayant les caractéristiques suivantes: température de fusion 82-83 ; IR cm-1 (KBr): 1720 (s) (C=0), 2260 (m) (C#N); uv # pH max 1 222 nm (# 11 020), # pH max 5 242 nm (12 100), # pH max 11 242 nm (12 100); pmr (DMSO-d6): # 3,88 (s, 3, CH3), 4,14 (s,2,CH2), 5,90 (m,1,H2,), 8,22 (s,1,C2H). Anal. Calc. C12H15N303: C 57,82, H 6,07, N 16,86 Trouvé: C 57,78, H 6,26, N 16,70. L'élution fut continuée avec un mélange chloroformeacétone (1:1) et fournit 6,2 g (33%) de méthyl-5-cyanométhyl- 1-(tétrahydropyran-2-yl)imidazole-4-carboxylate. Par recrystallisation de ligroine entre 30 et 600C des aiguilles blanches ayant les caractéristiques suivantes furent obtenues: température de fusion 98 - 99 C; IR cm-1 (KBr): 1718 (s) (C=0), 2240 (w) (C#N) ; N pH 1 220 nm (11 080), # PHx7 240 nm (# 10 050), # pHxll 242 fln (# 9,820); pmr (DMSO-d6): 3,85 (s,3,CH3), 4,40 (s,2,CH2), 5,51 (m,l,H2,), 8,08 (s,1,C2H). Anal. Calc. pour C12H15N303: C 57,82, H 6,07, N 16,86 Trouvé: C 57,98, H 6,21,N 17,07. 5-cyanométhyl-l- (tétrahydropyran-2-yl) -imidazole-4-carboxamide (composé 16) 0,60 g (2,41 mmoles) de méthyl-5-cyanométhyl-l- (tétrahydropyran-2-yl)-imidazole-4-carboxylate et de 10 ml d'ammoniaque liquide furent placés dans une bombe en acier de 40 ml. La bombe fut submergée à 3/4 dans un bain de vapeur et chauffée pendant 3 heures. Une analyse Tlc (chloroforme-méthanol, 9:1, gel de silice) indiquait qu'il y avait eu une conversion complète des matériaux de base dans le carboxamide et des traces de 3-déaza9-(tétrahydropyran-2-yl)~ guanine furent révélées. L'ammoniaque fut évaporé à la température de laboratoire et le résidu maintenu pendant la nuit sous vide afin d'éliminer les dernières traces d'ammoniaque. Le résidu d'une couleur verte brunâtre fut recrtstallisé de méthanol (charbon) et 0,4 g (71%) du composé furent obtenus sous forme d'aiguilles d'une couleur jaune faible. Le composé avait les caractéristiques suivantes: température de fusion 198-199 après séchage à 1000 pendit 3 heures; IR cm 1 (KBr); 1685 (s) (C=O), 2250 (w) (cru) 3140 (s) et 3300 (s) (NH2); pmr (DMSO-d6): J4,50 (s,l,CH2), 5,45 (m,l,H2,), 7,35 (s,l. NH), 7,53 (s,l,NH), 8,03 (s,l,C2H) Anal. Calc. pour C11H14N402: C 56,39, H 6,02, N 23,91 Trouvé: C 56,59, H 6,28, N 23,91. 6-amino-1-(tétrahydropyran-2-yl)-imidazo(4,5-c) pyridine-4(5H)-one (composé 17) Un mélange de 702 mg (3 mmoles) de 5-cyanométhyl-l (tétrahydropyran-2-yl)-imidazole-4-carboxamide, 6ml d'une solution aqueuse de carbonate de sodium à 5% et 10 ml d'éthanol furent maintenus sous reflux pendant 20 minutes. Une dissolution complète fut obtenue au début du reflux. Le produit précipitait sous reflux. La suspension fut refroidie, filtrée et le résidu lavé soigneusement avec de l'eau et puis avec de l'éthanol. 690 mg (97%) du composé furent obtenus. Après recrystallisation d'une grande quantité d'un mélange éthanol-eau (1:1) des aiguilles blanches furent obtenues ayant les caractérisiques suivantes: température de fusion 268-269 C après séchage à 1000C pendant 5 heures; uv # pH max 1 285 nm (# 13 450), 313 nm (sh) (# 6 950); # pH 7 270 @@ (@ 12 600) 300 nm (# @ 350). # pH 11 272 nm max max ( L 12 400)295 nm (e 9 130); pmr (DMSO-d6-NaOD) : # 5,22 (m,1,H2@), 5,58 (s,l,C6H), 7,68 (S,1,C2H). Anal. Calc. pour C11H14N402: C 56,39; H 6,02; N 23,91 Trouvé: C 56,51; H 6,15; N 23,93 6-amino-3-(tétrahydropyran-2-yl)-imidazo (4,5-c) pyridine-4-(5H)-one (composé 20) 2,49 g (10 mmoles) de méthyl-4-cyanométhyl-1- (tétrahydropyran-2-yl)-imidazole-5-carboxylate et 20 ml d'ammoniaque liquide furent introduits dans une bombe en acier de 40 ml et chauffés à 100 C (bain à l'huile) pendant 5 heures. L'ammoniaque fut évaporé ensuite a la température de laboratoire et le résidu maintenu sous vide pendant la nuit. Par une recrystallisation de méthanol (charbon de) bois 1,1@, (47%) du composé furent obtenus sous forme d'aiguilles blanches ayant une température de fusion de 208 OC après séchage a 1000C pendant 2 heures.Les caractéristiques du composé étaient les suivantes@@@)pH 1 275 nm (# 12 300) 7 max 317 nm (# 6 140); # pH max @ 257 nm (#6 800), 315 nm (# 7 680), # pH 11 257 nm (#6 580) 315 nm @@ 7 450). @mr (DMSO-d). max #5,38 (s,2,NH2), 5,58 (s,l,C7H), 6,05 (m,l,H2,), 8,22 (s,l.C2H), 10,62 (s,l,NH). Anal. Calc. pour C11H14N402: C 56,39; H 6,02; N 23,91 Trouvé: C 56,21, H 5,96, N 23,77 Exemple IX Méthyl-5-cyanométhyl-1-(5-désoxy-2,3-di-0-acétyl-ss-D-ribofuranosyl) imidazole-4-carboxylate (composé 21) 2,22 g (13,4 mmoles) de méthyl-5(4)-cyanométhyl- imidazole-4-carboxylate furent maintenus sous reflux sous des conditions anhydres pendant 12 heures avec de l'hexaméthyldisilicane (25 ml) et du sulfate d'ammonium (50 mg). L'hexaméthyldisilicane en excès fut éliminé par distillation sous pression réduite et le dérivé de triméthylsilyle fut obtenu sous forme d'une huile ayant une colleur jaune brunâtre.Le composé fut dissous dans 35 ml de 1,2-dichloroéthane. 3,4 g de 5-désoxy-1,2,3- tri-O-acétyl- J -D-ribofuranose (13,4 mmoles) furent ajoutés à la solution suivi de l'addition de 2,25 ml (19,3 mmoles) de chlorure stanneux. La solution fut agitée à la température de laboratoire pendant 9 heures. 100 ml d'une solution de bicarbonate de soude (7%) et le tout soumis à deux extractions avec du chloroforme. La couche organique séchée fut évaporée sous vide et le résidu dissous dans le chloroforme et placé sur une colonne de gel de silice (200 g, remplie à l'aide de chloroforme). Par élution avec de l'acétate d'éthyle 2,2 g (45%) du nucléoside furent obtenus sous forme d'un sirop incolor. Le composé avait les caractéristiques suivantes: uv # pH max 1 225 nm (10 250), # pH max @ 235 nm (10 750), # #pH max 11 238 nm ( 10 250); pmr (DMSo-d6): J 1,45 (d,3, CH3), 2,08, 2,13 (s,3,COCH3), 3,85 (s,3,C02CH3), 4,45 (s,2,CH2), 6,05 (d,1,H1,), J=5Hz, 8,25 (s,1,C2H). Anal. Calc. pour C16H19N3O7: C 52, 60; H 5,24; N 11,50 Trouvé: C 52,40; H 5,31; N 11,26 5-cyanométhyl-1-(5-désoxy-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-4-carboxamide (composé 22) Un mélange de 2,20 g de méthyl-5-cyanomethyl-1-(5- désoxy-2,3-0-acétyl-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-4-carboxylate (6,03 mmoles) et 30 ml de l'ammoniaque liquide furent placés dans une bombe en acier de 40 ml et chauffés à 1000C pendant 7 heures. L'ammoniaque fut évaporé et le résidu maintenu sous vide pendant la nuit avant d'éliminer les dernières traces d'ammoniaque. Le résidu fut absorbé sur du gel de silice (5 g) et placé sur une colonne de gel de silice (60 g, rempli à l'aide de chloroforme). Par élution avec un mélange chloroforme-méthanol (4:1) le produit pur fut obtenu. Par une recrystallisation de méthanol des cubes incolors furent obtenus dans une quantité de 1,42 g (88%). Le composé avait les caractéristiques suivantes: température de fusion 173 à 1740C après séchage à 1000 pour 3 heures; [&alpha;]25 D - 47,8 (C=1, H2O); uv # pH max 1 218 nm (# 10 000), # pH max 7 233 nm (# 10 200), # pH max 11 234 nm (# 9 730); pmr (DMSO-d6): max f1,36 (d,3,CH3), 5,66 (d,l,H1,), J = 5Hz, 7,45 (d,2,NH2), 8,02 (s,l,C2H). Anal. Calc. pour C11H14N4O4: C 49,62, H 5,30 , N 21,04 Trouvé: C 49,44, H 5,20, N 20,92 6-amino-1-(5-désoxy- ss -D-ribofuranosyl)imidazo (4,5-c) pyridine4(5H)-one (composé 23) Un mélange de 1,1 g (4,13 mmoles)de 5-cyanométhyl1-(5-désoxy-ss -D-ribofuranosyl) imidazole-4-carboxamide, de 7 ml de carbonate de sodium aqueux (5%), et de 6 ml d'éthanol fut agité sous reflux pendant 0,75 heures, traité avec du charbon actif et filtré à travers de la celite. Les crystaux flocculants légèrement jaunâtres furent filtrés et lavés avec de l'eau puis avec de l'éthanol. Par séchage à 1000C pendant 5 heures 0,9 g (82%) du produit furent obenus.Les caractéristiques du produit étaient les suivantes: température de fusion > 310 C; [&alpha;]25 D ~ 65,6 (C=l, 0,1 N NaOH); uv # max 284 nm (# 13 000), 308 D 7 max nm (sh) (# 6 920), # pH max @ 272 nm (# 12 200), 299 nm (# 9150); pH 1l 272 nm (12 200) 295 nm (sh) (# 9150), pmr (DMSO-d6): max Jl,36 (d,3,CH3), J = 6Hz, 5,52 (s,l,C7H), 5,55 (d,1,H1,), J = 5Hz, 5,75 (brs, 2, NH2), 7,90 (s,l,C2H) Anal. Calc. pour C11H14N4O4: C 49,62, H 5,30, N 21,04 Trouvé: C 49,66, H. 5,37, N 21,20 Méthyl-4-cyanométhyl-1-(2,3-di-0-acétyl-5-désoxy-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-5-carboxylate (composé 24) et méthyl-5-cyanométhyl-1- (2,3-di-0-acéthyl-5-désoxy-ss-D-ribofuranosyl) imidazole-4carboxylate (composé 21) 3,0 g (18,2 mmoles) de méthyl-5(4)-cyanométhyl- imidazole-4(5)-carboxylate furent maintenus sous reflux sous condition anhydre pendant 12 heures avec 50 ml d'hexaméthyl disilicane et 25 mg de sulfate d'ammonium. L'hexaméthyldisilicane en excès fut éliminé par distillation sous pression réduite et le drivé de triméthylsilyle fut obtenu sous forme d'une huile jaune brunâtre.L'huile fut dissoute dans 100 ml de 1,2,3-di ehloroéthane anhydre. 4,73 g (18,2 mmoles) de 5-désoxy-1,2,3-tri-O- acétyl-D-ribofuranose furent ajoutés suivi d'une addition de 1,06 ml (9,1 mmoles) de chlorure stanneux. La solution de réaction fut agitée à la température de laboratoire pendant 48 heures et versée dans 200 ml d'une solution de bicarbonate de soude à 7%. Le mélange fut filtré à travers de la celite et soumis à une extraction avec du chloroforme (3 x 50 ml) et les solutions combinées séchées (MgSO4) furent évaporées sous pression réduite (500C). 6,6 g d'une huile incolore furent ainsi obtenus.Une chromatographie en colonne (250 g de gel de silice, colonne remplie à l'aide de chloroforme, soumise à une élution avec de l'acétate d'éthyle) fournit comme première fraction l'isomère méthyl-4-cyanométhyl-1- (2, 3-di-O-acétyl-5-déoxy- 15 -D-ribo furanosyl)imidazole-5-carboxylate (3,2 g, 48%). Par une recrystallisation d'éthanol des aiguilles incolores firent obtenues ayant les caractéristiques suivantes: température de fusion 123 à 124 C après séchage à 65 C pendant 5heures; uv# pH max 1 234 nm (# 8430), # pH max 7 et 11 242 nm (# 11 000); pmr (DMSO-d6) # 1,45 (d,3,C5,CH3) J = 6Hz, 2,12, 2,15 (s, 3, COCH3), 3,85 (s,3,C02CH3), 4,2 (s,2,CH2), 6,39 {d,l,Hl,), J = 3 Hz, 8,34 (s,l,C2H). Anal. Calc. pour C16Hl9N307: C 52,60, H 5,24, N 11,50 Trouvé: C 52,32, H 5,37, N 11,29 L'élution de la colonne fut continuée avec de l'acétate d'éthyle et 1,7 g de méthyl-5-cyanométhyl-1-(2,3-di.0- acétyl-5-désoxy-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-4-carboxylate (26%) furent obtenus. Ce matériau était identique au matériau préparé ci-dessus (Exemple III). 6-amino-3-(5-désoxy-ss-D-ribofuranosyl)-imidazo(4,5-c)pyridine-4(5H)one (composé 26) Un mélange de méthyl-4-cyanométhyl-1-(2,3-di-0-acétyl- 5-désoxy-ss-D-ribofuranosyl)imidazole-5-carboxylate (2,6 g, 7,13 mmoles) et de l'ammoniaque liquide (25 ml) fut chauffé dans une bombe d'acier de 40 ml pendant 2,5 heures à 1000C. L'ammoniaque fut évaporé à la température de laboratoire et les dernières traces éliminées en laissant le mélange sous vide pendant la nuit. Le résidu de couleur verte-brunâtre fut recrystallisé à partir de bois d'eau (charbon) et 1,3 g (68%) du nucléoside furent obtenus sous forme de microcrystaux légèrement jaunâtres ayant une température de fusion au-dessus de 2000C; et les caractéristiques suivantes: 25 25 + 29,3 (C=1,06, eau), uv X pH 1 277 nm (11 700), D max 317 nm (5 5 980); X pH 7 258 nm (6500) , 317 nm (# 7 530); max max 258 nm @@@@@@@@@@@, 317 nm (7280); pmr (DMSO-d6): g 1,35 (d,3,C5,CH3) J = 6Hz), 5,38 (s,2,NH2), 5,5 (s,l, C7H), 6,24 (d,l, H1,), J = 4 Hz, 10,62 (brs, 1, NE). Anal. Calc pour CllH14N404: C 49,62, H 5,30, N 21,04 Trouvé: C 49,42, H 5,28, N 20,86 Exemple X 5-cyanométhyl-1-ss D-ribofuranosylimidazole-4-carboxamide 5'phosphate (composé 27) A une solution de 4,9 g (32 mmoles) de chlorure de phosphoryl et de 40 ml de phosphate de triméthyl (refroidi à 0 C sur un bain de glace, furent ajoutés sous agitation- 2,26g de du composé 22 sous forme poudre (8 mmoles). La suspension fut agitée à OOC (sous l'exclusion de l'humidité) pendant 4 heures. Une dissolution complète fut obtenue en 0,5 heures. Une analyse Tlc (échantillon hydrolysé avec de l'eau, gel de silice, acétonitrile-chlorure d'ammonium 0,2M 3:1) montrait que le nucléoside avait été parfaitement et complètement converti dans le nucléotide. La solution légèrement beige fut ajoutée goutte à goutte à 500 ml d'éther anhydre maintenu dans un flacon vigoureusement agité. L'éther fut décanté et 250 ml d'éther additionnel furent ajoutés au sirop résiduel. Après une agitation pour 10 minutes l'éther fut de nouveau décanté. Ce procédé fut répété une fois de plus avec 250 ml d'éther. Le sirop obtenu fut dissous dans de la glace broyée (environ 50 g) et la solution soumise à une extraction avec du chloroforme (2 x 50 ml). La solution aqueuse fut laissée pendant la nuit a la température de laboratoire puis le pH fut ajusté à 8 avec une solution d'hydroxyde de sodium 1 N. La solution fut introduite dans une colonne de bio-rad-AG-lx8 (formate forr , 50-100 mesh, 50 ml). La colonne fut lavée tout d'abord avec de l'eau (250 ml) et puis avec de l'acide formique 0,2 à 0,5 M (chaque fois 1 1.) Le produit apparut après un passage d'environ 1 1. d'acide formique à travers la colonne. Les fractions obtenues comprenant du produit furent combinées et évaporées sous pression réduite à un faible volume. Une addition de 100 ml d'éthanol fournit le phosphate désiré sous forme d'une poudre blanche (1,61 g, 53%) après lavage successif avec de l'éthanol et de l'éther, et un séchage à 100 C pendant 5 heures. Le produit avait es caractéristiques suivantes: température de fusion 7 160 C; [&alpha;]25 D -27,5 (C 1,06, 0,1 N NaOH); pH 1 213 nm (# 10 100). # pH 7 235 (#8750). # pH 11 238 max max max (# 7410); mpr (DMSO-d6): # 5,72, (d, 1,J=4 Hz, H1,), 8,08 (s,l, C2H). Anal. Calc. pour C11H15N4O8P.H2O: C 34,74, H 4,50, N 14,73 Trouvé: C 35,21, H 4,39, N 14,98 6-amino-1-ss-D-ribofuranosylimidazo (4,5-o) pyridin-4(5H)-one-5'phosphate (acide-3-déaza- - 5' -guanylique, composé 29) Une solution de 1,09 g (3 mmoles) du composé 27 et 50 ml d'eau fut ajustée à un pH de lo,o avec du carbonate de sodium à 10% et maintenue sous reflux pendant 40 minutes. La solution légèrement jaunâtre fut ajustée à un pH de 6,5 avec du Dowex 50 (H+) et introduite dans une colonne de bio-rad AG-lx8 (formate forme 50-100 mesh, 40 ml). La colonne fut lavée tout d'abord avec de l'eau (250 ml) et puis avec un gradient d'acide formique de 0,2 M à 0,5M (1 1. chaque fois). Le produit apparut environ après 1 1. de gradient. Les fractions contenant le produit furent combinées et évaporées afin d'avoir un volume faible. Par l'addition d'éthanol (150 ml) une poudre de couleur beige fut précipitée qui fut filtrée et lavée successivement avec de l'éthanol et de l'éther. 0,49 g (45%) d'un composé 29 ayant les caractéristiques suivantes furent obtenues: température de fusion 2 1800C après séchage à 100 C pendant 12 heures; [&alpha;]25 D - 11,4 (C 1,06 eau); #pH max 1 287 nm (# 8400), 306 (sh) (4930); # pH max 7 272 (8400), 303 (6380); #pH max 11 272 (8 130), 303 (6090); pmr (D20): # # 5,89 (d, 1, J = 4 Hz H1,), 9,00 (l,s,C2H). Anal. Calc. pour C11H15N408P: C 36,47, H 4,17, N 15,47, Trouvé: C 36,22, H 4,29, N 15,21 Exemple XI 6-amino-l- P -D-ribofuranosylimidazo- (4,5-c)-pyridine-4 (5H) -one 5'.phosphate (acide-3-déaza-5'-guanylique) composé 29) A une solution de 2,82 g de chlorure de phosphoryl (18,44 mmoles) et de 11,5 ml de phosphate de triméthyl (refroidi à 0 C sur un bain de alace) furent ajoutés 1,3 g (4,61mmoles) du composé 11 sous forme poudreuse. La suspension fut agitée à 0 C (sous exclusion de l'humidité) pendant 10 heures. La solution de couleur ambre fut ajoutée goutte à goutte à 250 ml d'éther anhydre dans un flacon agité vigoureusement.L'éther fut décanté et 150 ml d'éther additionnel furent ajoutés au précipité beige Après agitation pendant 0,5 heures l'éther fut décanté et le procédé répété une fois de plus avec 150 ml d'éther. Le précipité fut filtré, lavé avec de l'éther et dissous dans de l'eau glacé (environ 30 g). La solution aqueuse fut laissée à la température de laboratoire pendant la nuitete pH fut ajusté à 8 avec une solution de NaOH 1 N. La solution obtenue fut introduite dans une colonne de bio-rad-AG-lx8 (formate form , 50-100 mesh, 15 ml). Après lavage avec 150 ml d'eau la colonne fut soumise à une élution avec un gradient d'acide formique allant de 0,2 M à 0,5M (500 ml chaque fois, des fractions de 15 ml furent recueillies). Les fractions 20 à 75 furent combinées et évaporées sous vide à un faible volume.Par une addition de 150 ml d'éthanol le composé 29 fut précipité. Le composé fut filtré, lavé avec de l'éthanol et de l'éther et séché sous un vide poussé à 1000C pendant 12 heures. 0,5 g (30%) du produit furent obtenus. Le matériau était identique au composé 29 préparé d'après le procédé de l'exemple X. 6-amino-3- ss-D-ribofuranosylimidazo(4,5-c)pyridine-4-(5H)-one -5'-phosphate (composé 30). Un mélange de 564 mg (2 mmoles) de 6-amino-3-ss-D- ribofuranosylimidazo(4,5-c)-pyridine-4(5H)-one sous forme poudreuse 612 g (4 mmoles) de chlorure de phosphoryl , et 10 ml de phosphate de triméthyle furent ajoutés à 0 C pendant 3 heuresPaine analyse Tlc (échantillon hydrolysé avec de l'eau, gel de silice, isopropanol /hydroxyde d'ammonium 28% / eau 7:1:2) il fut montré qu'une conversion parfaite et complète du nucléoside dans le nucléotide avait été obtenue. La solution froide légèrement beige fut ajoutée goutte à gouttedanyne bouteille vigoureusement agitée contenant 250 ml d'éther anhydre froid. Apres une agitation de minutes l'éther fut décanté. LepprocEdé fut répété une fois de plus avec 125 ml d'éther.Le précipité blanc fut filtré, lavé avec de l'éther puis dissous dans de l'eau glacé (environ 50 g) Le pH de la solution aqueuse fut ajusté à environ 8,5 avec une solution d'hydroxyde de sodium 1 N et le tout placé dans une colonne de bio-rad-AG-lx8 formate form , 50-100 mesh, 20 ml). Après lavage avec de l'eau (50 ml) la colonne fut soumise à une élution avec un gradient d'eau (300 ml) à acide formique 1,0 M (300 ml). Les fractions contenant le produit furent combinées et évaporées sous vide. Une crystallisation d'un mélange éthancl-eau fournit le phosphate sous forme de crystaux blancs. 400 mg du produit furent obtenus (55%).Le produit avait des caractéris tiques suivantes: température de fusion > 200 C après séchage à 100 C pendant 5 heures; [&alpha;]25 D + 92,2 (C=1,05, H2O); uv # pH max 1 277 nm (# 10 720), 316 nm (# 5370), # pH max 7 258 nm (# 5722), 316 nm (# 6700), # pH max 11 258 nm (# 5 722), 316 nm (# 6700); Rf (gel de silice, isopropanol/hydroxyde d'ammonium/eau 7:1:2) = 0,20;Rf (gel de silice, acétonitrile/chlorure d'ammonium 0,2 M 3:1) = 0,24 Exemple XII 5-cyanométhyl-1- ss -D-ribofuranosylimidazole-4-carboxamide-3',5'phosphate cyclique (composé 28) Un mélange de 1,5 g (4,15 mmoles) de 5-cyanomêthyl- 1- # -D-ribOfuranosylimidazole-4-carboxamide-5'-phosphate, de 1,22 g (4,15 mmoles) de 4-morpholine-N,N'-dicyclohexylcarboxamidine et 100 ml de pyridine anhydre furent évaporés sous vide. Le sirop obtenu fut absorbé plusieurs fois dans 75 ml de pyridine qui furent de nouveau évaporés.Le sirop fut ensuite dissous dans 150 ml de pyridine anhydre et ajouté goutte à goutte (en environ 1 heure) a travers un condenseur a reflux, dans une solution anhydre,maintenue sous rflux,de dicyclohexylcarbodiimide ( 4,28 g 20,75 mmoles) dans de la pyridine anhydre (300 ml). La solution fut maintenue encore sous reflux pendant 2 heures et 50 ml d'eau furent ajoutés. Après 8 heures la solution fut évaporée sous vide et 50 ml d'eau ainsi que 50 ml d'éther furent ajoutés au résidu. La couche aqueuse fut séparée, soumise à une extraction avec de l'éther 2x100 ml). Le pH de la solution fut ajusté à 8 avec de l'hydroxyde d'ammonium concentré et le tout placé dans une colonne bio-rad-AG-lx8 (50-100 mesh, formate 40 ml). La colonne fut tout d'abord lavée avec de l'eau (500ml) ensuite avec un gradient d'acide formique de 0,75 M à 1,50 M (1 1. chaque fois.) Le produit apparût après le passage d'environ 1 litre de gradient à travers la colonne. Les fractions contenant le produit furent combinées et évaporées sous vide afin d'avoir un petit volume. Par l'addition d'éthanol le phosphate cyclique fut précipité. Le produit fut filtré, lavé avec de l'éthanol puis avec due l'éther et séché sous vide à 1000C pendant 5 heures. Lempérature de fusion > 180 C; uv # pH max 1 215 nm, # pH max 7 234 nm # pH max 11 237 nm, Rf (gel de silice, isopropanol/hydroxyde d'ammonium/eau 7:1:2) = 0,57, Rf (gel de silice, acétonitrile/ chlorure ammonium 0,2 M , 3:1) = 0,56. 6-amino-1-ss-D-ribofuranosylimidazo(4,5-c)pyridine-4(5H)-one-3',5'phosphate cyclique (composé 31) Procédé A: Le pH d'une solution de 5-cyanométhyl-l-P -D-ribo- furanosylimidazole-4-carboxamide-3',5'-phosphate cyclique (28) (344 mg, 1 mmole) et d'eau (25 ml) fut ajusté à 10,0 avec une solution de carbonate de sodium à 10% et le mélange maintenu sous reflux pendant 40 minutes. Le pH de la solution jaune fut ajusté à 6,5 avec du Dowex 50 (H ) et la solution introduite dans une colonne Bio-Rad-AG-lx8 (formate form, 50-100 mesh, 25 ml). La colonne fut lavée avec de l'eau (250 ml) puis avec un gradient d'acide formique de 0,75 M à 1,5 M (1 1. chaque fois).Les fractions contenant le produit furent combinées et évaporées sous vide à un faible voltige. Par addition d'éthanol le phosphate cyclique fut précipité, filtre, lavé avec de l'éthanol et de l'éther et séché sous vide à 1000C pendant 12 heures. 150 mg du produit furent obtenus (44%), température de fusion > 2000C ; uv X pH max 1 285 nm, 306 nm; X # pH ma 7 271 nm, 302 ni max max max max 271 nm, 303 nm; Rf (gel de silice, isopropanol/ hydroxyde d'ammonium/eau, 7:1:2) = 0,44; Rf (gel de silice, acétonitrile/chlorure d'ammonium 0,2 M, 3:1) = 0,41. Procédé B: Un mélange de 1,04 mg (3,0 mmoles) de 6-amino1- ss -D-ribofuranosylimidazo (4,5-c)-pyridine-4(5H)-one-5'phosphate (composé 29), 8,79 g (3 mmoles) de 4-morpholin-N,N'dicyclohexylcarboxamidine, et 150 ml de diméthylformamide anhydre furent évaporés sous vide. Le sirop obtenu fut dissous plusieurs fois avec 100 ml de diméthylformamide qui furent évaporés chaque fois. Le sirop fut finalement dissous dans 150 ml de diméthylformamide et ajouté goutte à goute (en 1 heure environ) à travers un condenseur à reflux, dans une solution anhydre, maintenue sous reflux, de dicyclohexylcarbodiimide, (3,09, 15 mmoles) et de pyridine anhydre (250 ml). La solution fut maintenue sous reflux pendant 2 heures additionnelles et 100 ml d'eau furent ajoutés. Après 8 heures la solution fut évaporée sous vide et 50 ml d'eau ainsi que 50 ml d'éther furent ajoutés au résidu. La phase aqueuse fut éliminée, soumise à une extaction avec de l'éther et le pH ajusté à environ 8 avec une solution d'hydroxyde d'ammonium concentrée. Le tout fut introduit dans une colonne bio-rad AG-lx8 (50 à 100 mesh formate, 35 ml). La colonne fut laurée tout d'abord avec del'eau (500 ml) puis avec un gradient d'acide formique de 0,75 Mà 1,5 M (1 1. chaque fois). Les fractions comprenant le produit furent combinées et évaporées sous vide à un faible volume. Par l'addition d'éthanol le phosphate cyclique précipitait. (412 mg, 40%). Le matériau était identigue au phosphate cyclique préparé d'après le procédé A. Exemple XIII 5-cyanométhyl-1-(2,3,0-isopropylidène-ss-D-ribofuranosyl)imidazole4-carboxamide (composé 32) A Une solution de 1,41 g (5 mmoles) de 5-cyanométhyl1- ss-D-ribofuranosylimidazole-4-carboxamide (compose lO)de 20 ml d'acétone anhydre et de 10 ml de 2,2-diméthoxypropane refroidie sur un bain de glace et agitée furent ajoutés 280 mg d'acide perchlorique à 70%. Le bain de glace fut enlevé et la réaction continuée sous agitation à la température de laboratoire pendant 3 heures. Le pH de la solution d'une couleur orange-rougâtre fut ajusté à environ 7 avec une solution d'hydroxyde de potassium aqueuse à 10%. Le mélange fut évaporé sous vide à un sirop qui fut dissous dans du chloroforme, filtré et introduit dans une colonne de gel de silice (45 g).Par élution avec un mélange chloroforme-méthanol (20:1) le dérivé isopropylidène (1,35 g 84%) fut obtenu sous forme d'une mousse blanche; le produit avait les caractéristiques suivantes: pmr (DMSO-d6): d 1,39, 1,58 (s,3,CH3), 4,48 (s,2,Ch2), 6,00 (d,l.Hl,), J = 2Hz, 7,35, 7,53 (s,l, NH), 8,14 (s,l,C2H). Anal. Calc. pour C14H18N405: C 57,17, H 5,63, N 17,38 Trouvé: C 57,31, H 5,78, N 17,49. 5-cyanométhyl-1-(2,3,5-tri-0-acétyl- ss -D-ribofuranosyl)-imidazole4-carboxamide (composé 33) Une suspension de 1-,41 g (5 mmoles) de 5-cyanométhyl1- p -D-ribofuranosylimidazole-4-carboxamide, de 15 ml d'anhydride acétique et de 20 mg de p-diméthylaminopyridine fut agitée à la température de laboratoire pendant 8 heures. Une analyse Tlc (gel de silice, CHC13-MeOH, 4:1) indiquait qu'il y avait 3 produits. 20 mg additionnels de p-diméthylaminopyridine et 5 ml d'anhydride acétique furent ajoutés et l'agitation continuée à la température de laboratoire pendant 36 heures. La solution fut évaporée sous vide à un sirop qui fut dissous dans du chloroforme et introduit dans une colonne de gel de silice (60 g). Par une élution avec un mélange chloroforme-méthanol (20:1) le triacétate fut obtenu sous forme d'une mousse blanche (2,0 g, 95%). Le produit avait les caractéristiques suivantes: pmr (DMSO-d6): # 2,08, 2,10 2,16 (s,3,COCH3). 4,40 (s,2,CH2), 6,13 (d,1,H1,), J = 5Hz, 7,39, 7,58 (s,2,NH), 8,19 (s,l,C2H). Anal. Calc. pour C17H20N4O8: C 50,00, H 4,94, N 13,72 Trouvé: C 49,91, H 5,22, N 13,36. 6- (N ,N-diméthylaminométhylèneamino) -1- P D-ribofuranosyl imidazo (4,5-c) pyridine-4 (5H)-one (composé 34) Une suspension de 564 mg (2 mmoles) de 3-déazaguanosine, (composé 11), 1,19 g (10 mmoles) de diméthylformamide diméthylacétale, et 10 ml de diméthylformamide fut chauffée sous agitation à 80 C pendant 6 heures. La solution de couleur rougefoncée fut évaporée sous vide à un sirop épais et 15 ml d'éthanol furent ajoutés suivi d'éther jusqu'S ce que la solution devenait trouble. Un refroidissement pendant la nuit a 0 C fournit 450 mg de microcrys@eux bruns (lavé avec de l'éthanol froid). 200mg additionnels de microcrystaux bruns furent obtenus de la solution après évaporation. Le rendement total en dérive de diméthylaminométhylène de 3-déazaguianosine était de 650 mg (96%). Un échantillon analytique fut obtenu en dissolvant et une portion dans du diméthylformamide chaud en ajoutant de l'éther à la solution refroidie jusqu'à ce que la solution devenait trouble. Par un refroidissement à 0 C pendant la nuit le composé fut obtenu sous forme de microcrystaux jaunes ayant les caractéristiques suivantes: température de fusion 243-245 C (après sécha ge à 100 C pendant 5 heures); [&alpha;]25 D - 78,9 (c. 1, DMF); uv # pH max 1 275 nm (sh) (# 13100), 290 nm (# 14100); # pH max 7 230 nm (# 14 100) 312 nm (# 18650); # pH max 233 nm (# 1# 450), 312 nm (# 18650); pmr (DMSO-d6): J 2,98 (s,3, CH3), 3,08 (s, 3, CH3), 5,70 (d, 1, H1t), J = 6Hz, 6,15 (s, 1,C7H), 8,05 (s,l), 8,11 (s,l), 10,7 (brs, 1,NH). Anal. Calc. pour C14H19N505: C 49,84, H 5,68, N 20,76 Trouvé: C 49,74, H 5,72, N 20,73 6-acétamido-1-(2,3,5-tri-0-acétyl-ss-D-ribofuranosyl)-imidazo (4,5-c)-pyridine4(5H)-one (composé 35) Un melange de 1,4 g (4,97 mmoles) de 3-déazaguanosine de 13 ml d'anhydride acétique et de 20 ml de pyridine anhydre fut agité à la température de laboratoire pendant 3,5 heures. La solution fut évaporée sous vide et le résidu dissous 3 x dans de l'eau qui fut chaque fois évaporé. Une recrystallisation du résidu d'éthanol fournit des aiguilles beiges (1,5 g r 67%). Le composé avait les caractéristiques suivantes: température de fusion 241-242 C après séchage à 100 C pendant 5 heures; uv # pH max 1 277 nm (# 12700), 297 nm (#13400); # pH max 7 268 nm (# 13 200), 299 nm (# 12 300); # pH max 11 223 nm (# 13 700), 285 nm (#10 800); pmr (DMSO-d6) #1,15 (s,9,COCH3), 6,19 (d,l,Hl,), J = 5Hz, 6,58, (s,l,C7H), 8,25 (s,l, C2H ), 10,70 (brs.l, NH), 11,5 (brs, 1, NH). Anal. Calc. pour ClgH22N409: C 50,66, H 4,92, N 12,44 Trouvé: C 50,62; H 5,07, N 12,34 Exemple XIV Préparation enzymatique de 3-déazaguanosine (composé 11) Les échantillons d'incubation contenaient, dans un volume de 1,0 ml d'un tampon HCl 1M tris (pH 7,5, 0,5ml), une solution aqueuse 10 nM d'un sel dicyclohexylammonium ribose-lphosphate (0,125 ml), une solution aqueuse lmM de 3-déazaguanine (composé 5) (0,125 ml), une suspension 0,03 d'enzyme (nucléoside phosphorylase de la rate de veau de la Sigma Chemical Co. St. Louis, Missouri) et de l'eau distillée (0,22 ml). Les échantillons furent incubés à 250C. Les spectres uv enregistré sur un spectrophotomètre Cary 14, furent analysés toutes les 5 minutes afin de suivre le changement dans l'absorption. Après 20 minutes aucun changement ultérieur ne fut détecté. Le Q maxl (pH 7,5) changait de 262 nm à 270 nm, avec un accroissement du coefficient d'extinction, le sommet # max à 298 nm (pH 7,5) devenait plus large. Le niveau de conversion le plus élevé au nucléoside fut trouvé à une concentration de 3-déazaguanine (composé 5) de lxlO 4 M, une concentration de ribose-1-phosphate de @x10-4 à 1 x 10-3 M, une concentration de nucléoside phosphorylase de 60 à 90 g/ml dans le mélange de réaction. Afin de confirmer que le produit obtenu était effectivement la 3-deazaguanosine (composé 11) l'essai suivant fut réalisé. 4,5 mg de 3-déazaguanine (composé 5) (0,05mmoles) furent dissous dans 0,5 M Tris-HCl tampon pH = 7,5 (300 ml). Le sel dicyclohexylammonium de ribose l-phosphate (42,8 mg, 0,1 mmoles) et la nucléoside phosphorylase (6 mg, 24 unités/mg) fut ajouté. Le mélange fut agité pendant 2heures à 250C. Le pH de la solution fut ajusté à 4,5 avec de l'HCl et passé à travers de bois une colonne de charbon 1 x 3 cm (100 - 200 mesh). La colonne fut lavée avec 200 ml d'eau et par élution arec une solution étiahol- H20 NH40H concentré (45:45:10) (300 m2) le produt fut obtenu. Les fractions contenant le produit furent combinées et évaporées à sec sous vide. Un matériau amorphe de couleur verdâtre fut obtenu. Rendement: 8,1 mg (95%) il fut trouvé que ce produit était identique au 3-déazaguanosine (composé 11) synthétique par les spectres uv et une analyse Tlc En général la 3-déazaguanine (composé 5) peut être convertie enzymatiquement dans la 3-déazaguanosine composé 11) par la nucléoside phosphorylase à un pH d'environ 5 à environ 9, de préférence 7 à 8, à une concentration d'enzyme de 0,05 à environ 0,5 mg/ml, de préférence environ 0,05 à environ 0,1 mg/ml et une température entre 0 et environ 500C, de préférence entre environ 25 à environ 35 C.Des résultats satisfaisants sont obtenus si la 3-déazaguanine est présente dans une concentration au-dessus de 5 x 10 5 M, de préférence environ 1 x 10-4M, et si le ribose-l-phosphate est présent dans une concentration d'environ 3 x 10 à environ 1 x 10-3 M. Généralement environ 0,1 à environ 2 heures, de préférence environ 0,5 à 1 heure sont requises pour la réaction. L'enzyme peut être obtenu de source animale, de tissu ou de bactéries. Les principales sources bactériennes dans l'enzyme sont le E. Coli et la levure, tandis qu'il y a un certain nombre de sources animales , par exemple rate de boeuf, foie de rat, fois de veau, thymus de veau, foie de boeuf, cerveau de singe, foie de cheval, rate de veau, éryhthrocyte humain, peau de poisson et muscle de poisson. L'enzyme peut être de la protéine purifiée ou peut être présent dans des cellules bactériennes ou fongeux à métabolisme actif. Dans le cas où l'enzyme est contenu dans des cellules bactériennes ou fongnux à métabolisme actif on s'attend à ce que les procédés de fermentation utilisant ces cellules ou des mutants de ces cellules mènent à la production de 3-déazaguanosine à partir de 3-déazaguanine. Exemple XV Dans cet exemple les composés 4, 5, 10, 11, 20, 23, 29 furent soumis à des essais afin de déterminer leur efficacite antivireuse in vitro en utilisant le procédé d'inhibition de l'effet cytopathogénique par virus (CPE) de Sidwell et al (pplied Microbiology 22:797-801, 1971). Le procédé CPE comprend la suspension de l'agent antivireux dans un milieu de culture de cellulescomprenant des vitamines, des amino acides, du sérum, du tampon, de la péniciline, de la strptomycine et un colorant indicateur dans de l'eau. Le virus suspendu dans le milieu de culture des cellules fut ajouté en une monocouche de cellulesKB ou RK-13, et un volume égal de l'agent antivireux fut alors ajouté en 15 minutes. Les cellules traitées infectées furent évaluées après examination au microscope.Des contrôles pour chaque expérience comprennent des contrôles des cellules et du seul milieu de culture, des contrôles des virus (cellule et milieu de culture des cellules et ) et des contrôles de toxicité (cellules,milieu de culture des cellules et chimie). Le système d'évaluation des trus (VR) de Sidwell et al. décrit dans Applied Microbiology mentionné ci-dessus fut utilisé afin d'évaluer le degré de l'inhibition CPE. Un VR plus grand que 0,5 est une indication d'une activité antivireuse significative et un Vu de moins de 0,5 suggère une activité antivireuse faible. Des résultats de blessai in vitro sont montrés dans le tableau I et le Tableau II. Les composés 5 et 11 furent aussi soumis a des essais pour déterminer la cytotoxicité et compares au ribofuranosyl-1,2 ,4-triazole-3-carboxamide. Les résultats sont énumérés dans le Tableau III. Activité anti-DNA virus de 6-amino-imidazo (4,5-c) pyridine-4(5H)-one et des composés analogues. Composé No. Nom du composé Evaluation virus AV/3 HSV/1 HSV/2 VV HCMV MCMV PRV MV 5 6-amino-imidazo(4,5-c)pyridine- 1,1* (7)+ 1,3 (18) - 1,2 (4) 0,3(1) 0,6(1) 0,3(1) 0,9 (1) 4(5H)-one 11 6-amino-1-ss-D-ribofuranosyl imidazo(4,5-c)pyridine-4(5H)-one 0,8 (4) 0,9 (13) - 0,6 (7) 0,5 (1) - 0,3 (1) 1,0 (1) 29 6-amino-1-ss-D-ribofuranosyl- 0,9 (3) 1,0 (2) 0,7 (2) imidazo-(4,5-c)-pyridine-4(5H)-one 5'-phosphate 4 4(5)-cyanométhylimidazo-5(4)- 0,8 (2) 0,9 (6) carboxamide 10 5-cyanométhyl-1- ss-D-ribo- 0,6 (3) 1,3(1) furanosylimidazo-4-carboxamide 27 5-cyanométhyl-1- ss -D-ribofurano- 0,8 (2) 0,5 (2) 0,3 (2) sylimidazo-4carboxamide-5' phosphate 20 6-amino-3(tétrahydropyran-2-yl)- 0,8 (1) imidazo(4,5-c)-pyridine-4(5H)-one 23 6-amino-(5'-déoxy-ss-D-ribofuranosyl) 0,9 (2) imidazo(4,5-c)pyridine-4(5H)-one * évaluation virus + indique le nombre d'essais Identification des virus:AV/3: virus adénotrope, type 3; HSV/1: virus d'herpes simples type 1; HSV/2: virus herpes simples type 2; VV: virus vaccin; HCMV: vïrus cytomégalique de l'homme; MCMV: virus cytomégalique de la murine; PRV: virus paeudorabiques; MV: myxo virus Tableau II activité anti-DNA virus de 6-amino-imidazo (4,5-c) pyridine-4(5H)-one et des composés analogues. Composé Nom du composé Evaluation virus No. PIV/3 PIV/1 RV/1A RV/2 RV/8 RV/13 RV/30 RV/56 IV/A VSV 5 6-amino-imidazo(4,5-c-) 1,0* (9)+ 1,0 (1) 0,3(3) 1,3(3) 1,3(3) 1,2(10) 0,3(3) 1,1 (3) 0,5(7) 1,3(1) pyridine-4(5H)-one 11 6-amino-1-ss -D-ribofurano-0,6(6) 0,6(1) 0,1(2) 1,2(2) 1,2(2) 1,0(11) - 0,7 (2) 0,1 (5) 1,1(1) syl-imidazo(4,5-c)pyridine 4(5H)-one 29 6-amino-1-ss-D-ribofuranosyl-0,8(3) 0,3(1) 0,9 (3) imidazo(4,5-c)pyridine-4(5H)-one 5'-phosphate 4 4(5)-cyanométhylimidazole- 0,5(4) 0,6(4) 5(4)-carboxamide * évaluation virus + indique le nombre d'essais Identification des virus: PIV/3: virus parainfluenza type 3; PIV/1: virus parainfluenza, type 1; RV/1A: rhinovirus type 2; RV/8 rhinovirus, type 8; RV/13: rhinovirus, type 13, RV/30: rhinovirus, type 30, RV/56: rhinovirus, type 56, IV/Ao: virus d'influenza, type Ao ; VSV : virus de stomatite vésiculaire. Tableau III C ytotoxicité de 3-déazaguanine et de 3-déazaguanosine comparé au 1-ss-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazol-3-carboxamide. composé 5 composé il 1-ss-D-ribofuranosyl-1,2,4- triazol-3-carboxamide Cytotoxicité* - cellules 1,0 1,0 3,2 Cytotoxicité - cellulesRK-13 1,0 10,0 Cytotoxicité - cellules 3,2 3,2 d'embryon de poule * Cytotoxicité exprimée sous forme de la dose ne provoquant aucun changement visible aux cellules sous examination au microscope après 72 heures d'exposi tion au composé a 37 0C. Cellules KB : Adénocarcinome nasopharyniens de 1 'homme; cellules RK-13: Reins a passage continu de lapins. Cellules d'embryon de poule : cellules primaires dérivées d'embryonsde poules due 9 jours. Exemple XVI la L'efficacité de 3-déazaguanine par rapport au virus d'influenza A2fut aussi essayée dans une expérience animale. Pour cette étude 16 à 17 souris femelles suissesWebster furent Légèrement anesthétisées et infectées de façon intranasale avec 75 % de doselethale (LD75) du virus d'influenza A2 de la Japn 305. 15 minutes avant l'exposition au virus les souris furent traitées de façon intrapéritonéale avec du 3-déaza guanine ou du 1- p-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxamide par des doues diverses suspendues dans une solution saline stérile physiologique. Les souris de contrôle virus furent traitées seulement avec la solution saline et les animaux de contrôle de la toxicité furent traités avec des doses pertinentes de chaque médicament mais ne furent pas infectés . Les animaux furent observés pendant 21 jours et les morts furent enregistrés chaque jour.Les résultats de cette étude sont donnés dans le tableau II et indiquent que les deux composés sont efficaces contre le virus d'influenza. Effet d'une seule injection intrapéritonéale de 3-déazaguanine ou de 1-ss-D-ribofuranosyl-1,2,4triazole-3-carboxamide par rapport à une infection du au virus d'influenza A2 dans des souris. Médicament Dosage Contrôle surv.a/total accroissement temps moyen acroissement du (mg/kg) de toxicité de survie pb de survie temps moyen survie/total (jours)c de survie pd 3-déazaguanine 400 0/5 1/10 - 9,3 0,05 (composé 5) 200 3/5 2/10 - 9,7 0,05 100 5/5 5/10 0,1 9,0 0,05 1-ss-D-ribofur- 800 5/5 1/10 - 9,0 0,05 anosyl-1,2,4- 400 5/5 2/10 - 11,4 0,01 triazol-3-carbox- 200 5/5 4/10 0,2 9,3 0,05 amide Saline - - 4/20 - 7,8 a survie après 21 jours b probabilité (analyse chi carré) c animaux morts avant ou au 21ième jour d probabilité ( essai t) Exemple XVII Dans cet exemple le composé 5 fut soumis à un essai afin de déterminer son activité antitumurale dans des souris. Le composé 5 fut trouvé être cytotoxique à des cellules Hela et L1210 dans des cultures de tissu. Une concentration de 10 5 M du composé 5 apportait une inhibition de 50% dans l'incorporation de 3H-thymidine et 3H-uridine dans la fraction acide insoluble de cellules L1210 dans une culture de tissu. Le tableau 5 montre que dans un système de leucémie L1210, le composé 5 (LDlo 500 mg/kg) à un dosage (i.p. injection) de 20 mg/kg (qd, 1-9), 40 mg/kg (qd. 1-9), et 80 mg/kg (qd. 1-9) augmentait la durée de vie de souris femellesBDF1 de 32, 43 et 63 % respectivement. Ara C (cytosine arabinoside) fut incorporé comme standard. Un dosage (injection i.p.) de 40 mg/kg (qd. 1-7) du composé 5 provoquait aussi une inhibition de 75 à 93% de la croissance de greffes subcutanée d'adénocarcinoma 755 dans des souris femelles C57 Blk/6. Tableau V Activité du composé 5 contre la leucémie L1210 dans des souris femelles BDF1 Traitement Survie moyenne poids T/C (jours) (g) contrôle, saline 8,2 +2,2 composé 5 20 mg/kg qd 1-9 10,83 +2,0 1,32 (0/6) 40 mg/kg qd 1-9 12,00 +0,4 1,43 (1/6) 80 mg/kg qd 1-9 13,33 +1,7 1,63 (0/6) Ara C 40 mg/kg, qd 1-9 17,33 -0,2 2,11 (0/6) Tous les animaux furent inoculés (i.p.) avec 105 cellules leucémiques. Le traitement fut commencé 24 heures après la transplantation. Les figures en parenthèses donnent les survivants après 21 jours. Les exemples XV et XVI montrent que la 3-déazaguanine (composé 5) et la 3-déazaguanosine (composé 11) ont une activité antivireuse dans un spectre large et sont particulièrement efficaces contre des virus de maladies des voies respiratoires. La similitude structurale entre la 3-déazaguanine et la 3-déazaguanosine et la solubilité généralement accrue des sels des composés actifs de pyridine, laisse a prévoir que les sels d'addition acide aient aussi une activité antivireuse. I1 a été démontré que les composés 5 et 14 ont une activité antibactérienne in vitro contre E. Coli ( gramnégatif) et staphylococcus aureus ( grampositif) ainsi que le composé 23 contre le staphylococcus aureus (gramme positif). Les composés de la présente invention ont d'autres propriétés médicales. Bien entendu diverses modifications peuvent être apportées par l'homme de lErt aux dispositifs ou procédés qui viennent d'être décrits uniquement à titre d'exemples non limitatifs sans sortir du cadre de l'invention. R E v E N D I C A T I O N S. 1. Un composé caractérisé en ce qu'il a la structure suivante: dans laquelle Z est H, tétrahydropyranyle, -D-ribofuranosyle, 5-désoxy-ss-D-ribofuranosyle, ss-D-ribofuranosyl-5-phosphate ou -D-ribofuranosyl-3,5-phosphate cyclique; et les dérivés Cl-Cl8 acyle, isopropylidène et diméthylaminométhylène ainsi que les sels acceptables du point de vue physiologique de ceux-ci. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Z est ss-D-ribofuranosyl-5-phosphate 3. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Z est 5-désoxy-ss-D-ribofuranosyle. 4. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Z est ribofuranosyl-3,5-phosphate cyclique. 5. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Z est tétrapyranyle. 6. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Z est hydrogène. 7. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Z est p-D-ribofuranosyle. 8. Dérivé d'imidazole nécessaire comme produit intermédiaire dans la préparation des composés selon l'une quelconque des revendications I a 8, caractérisé en ce que ces produits inter dans laquelle X est -NH2 ou -OCH3; Z est H, tétrahydropyranyle, ss-D-ribofuranosyle, 5-désoxy- ss -D-ribofuranosyle,ss-D-ribofurano syl-5-phosphate, ss -D-ribofuranosyl-3 ,5-phosphate cyclique, C1-C18 acyle et isopropylidène 5-désoxy-3 -D-ribofuranosyl -5-phosphate et C1-C18 acyle ribofuranosyl-3,5-phosphate cyclique ainsi que les sels acceptables du point de vue physiologique de ceux-ci. 9. Composé selon la revendication 8, caractérisé en ce que X est-NH2 et Z tétrapyranyle. 10. Composé selon la revendication 8, caractérisé en ce que X est NH2 et Z hydrogène. 11. Composé selon la revendication 8, caractérisé en ce que X est NH2 et Z est-D-ribofuranosyle. 12. Composé selon la revendication 8, caractérisé en ce que X est NH2 et Z est p -D-ribofuranosyl-5-phosphate. 13. Composé selon la revendication 9, caractérisé en ce que X est NH2 et Z est p-D-ribofuranosyl-3,5-phosphate cyclique. 14. Composé selon la revendication 8, caractérisé en ce que X est NH2 et Z est 5-désoxy-B-D-ribofuranosyle. 15. Composé selon la revendication 8, caractérisé en ce que X est OCH3 et Z est tétrahydropyranyle,ss-D-ribofuranosyle, 0-D-ribofuranosyl-5-phosphate, ri -D-ribofuranosyl-3 , 5-phosphate cyclique, 5-désoxy-0-D-ribofuranosyle ainsi que les dérivés de C1-C18 acyle et isopropylidène ainsi que les sels acceptables du point de vue physiologique de ceux-ci. 16. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le 6-amino-3-(5-phosphoryl-ss-D-ribofuranosyl)- imidaio-(4,5-c)-pyridine-4 (5H)-one. 17. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le 6-amino-3-(ss-D-ribofuranosyl)-imidazo-(4,5-c) pyridine-4(5H)-one. 18. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le 6-amino-1-(5-phosphoryl-ss-D-ribofuranosyl) imidazo -(4,5-c)-pyridine-4 15H) -one. 19. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le 6-amino-1-(ss-D-ribofuranosyl)-imidazo-(4,5-c) pyridine-4(5H)-one. 20. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le 6-amino-l-(3 ,5-phosphoryl cyclique- J -D- ribofuranosyl)-imidazo(4,5-c)-pyridine -4(5H)-one. 21. Composé selon la revendication lt caractérisé en ce que le composé est le 6-aminoimidazo-(4,5-c)-pyridine-4(5H)-one.