Brevet FR2310144A1 — publié le 19761203

L'objet de l'invention concerne un appareil pour la dialyse à l'équilibre pour des échantillons de faible volume. Il est destiné à la mesure de la fixation des petites molécules diffusibles sur les macromolécules et s'utilise dans les nombreux domaines de la chimie des macromolécules, en biochinie et en medecine. Dans les dispositifs connus à ce jour, ce type de mesure est encore pratiqué de manière relativement grossière : la solution de macromolécule est enfermée dans-un boyau de cellulose immergé dans la solution contenant les solutés diffusibles. La précision et la reproductibilité des mesures sont brès médiocres de façon qu'on a essayé l'emploi de cellules démontables assez compliquées et incommodes. sans meilleur résultat. Les appareils faisant l'objet de l'invention suppriment ces inconvénients et permettent en même temps qu'un montage simplifié une facilité de manipulation accrue. Ils donnent enfin la possibilité de traiter plusieurs échantillons à la fois ainsi qu'une reproductibilité de mesures excellentes Ils sont constituoe1ar deux plaques percées dtalvéoles jointes avec une membrane médiane séparant les alvéoles se faisant vis à vis alors que chaque secteur d'alvéoles est percé de fins conduits pour le remplissagS et prélèvement. Sur les dessins annéxés donnés à titre d'exemple non limitatif d'une des formes de réalisation de l'objet de l'invention. La figure 1 est une vue en coupe le détail constructif de 1' app-areil dialyseur. La figure 2 entre une variante d'exécution du même objet. LesfiLures 3, 4, 5 sont des vues en plan d'appareils dialyseurs à alvéoles multiples. Le dialyseur figure 1 est constitué par de ux plaques i, 2 percées d'alvéoles 3, 3' ayant chacune ua volume d'nviron 200 microlitres. Ces plaques sont boulonnées l'une à l'autre de façon à immobiliser et positionner une membrane 4. Cette membrane étant dans l'axe et les alvéoles 3, 3' se faisant vis-à-vis. De fins conduits 5, 6 permettent le remplissage des alvéoles ainsi-que le prélèvement des échantillons au moyen d'une seringue. Dans les applications ordinaires en solution aqueuse, les plaques sont en matière acrylic,ue et la membrane en cellulose. Dans les applications spéciales les plaques sont en matière fluorée et deux plaques d'alliage dtaluminiun sont ajoutées a' l'intérieur pour saurer la rigidité. Il n'y a aucun joint , l'appareil doit être agité horizontalement, on peut placer une bille de verre dans chaque alvéole pour améliorer l'agitation. Suivant la variante d'exécution du même dispositif, le dialyseur comporte deux plaques 7, 8 de matière fluorée percées de trous, séparées par les membranes 9 et enserrées de plaques d'alliage d'aluminium 10, Il percées de trous concentriques aux précédents et plus grands. Les chambres d'incubation 12 sont orientées. La quantité du liquide est très faible de l'ordre de 20 son maintien microlitres est assurée par capillarité au contact de la membrane. L'agitation se fait par rotation lente, pour éviter l'évaporation des échantillons 13 , on place le dialyseur dans une chembre saturée d'eau. On peut obturer les chambres par des rubans adhésifs après les avoir remplies. les rainures fraisées dans les plaques extérieures, communiquant entre elles par des trous ménagés dans les plaques centrales assurent l'égalité des prçssions de part et d'autre. Ces dialyseurs 14, 15, 16 peuvent comporter suivant les figures dix trous figure 3, douze trous figure -- et la figure 5 repré-entant la plaque extérieure. bio C'est ainsi qu'en chimie l'application des dialyseurs est utile pour l'enzymologie afin de permettre l'étude facile de la fixation des petites molécules aux enzymes. Ces molécules étant celles sur lesquelles les enzymes exercent leur activité cataiytique et celles qui règlent cette activité catalytique tels les métaux, effecteurs,métaboliques ou autres.applicatiOns En biochimie concernent les acides nucleiques sur lesquels on peut étudier la fixation des métaux et celle des agents muta gènes. On Eut encore citer les récepteurs d'hormones ceux des antibiotiques et des agents inducteurs. les appa-eils dialyseur suivant l'invention donnent pour les applications médicales dans le domaine de l'immunologie, et plus spécialement la méthode de dosage appelée radiommunologie, la commodité de généralisation avec ltautomatisation des mesures. Cette méthode s'applique aux'hormones , aux médicaments et autres substances. On prépare un anticorps capable de fixer la molécule à doser et on met en équilibre la substance à doser, un analogue radioactif et l'anticorps qui les fixe, Toutefois les formes, dimensions et dispositions des différents éléments pourront varier dans la limite des équivalents comme d''ailleurs les matières utilisées- pour leur fabrication, sans changer pour cela, la conception générale de l'invention qui vient d'etre d'écrite. R E V E N D I C A T I O N S 10) Dispositif destine à la dialyse à l'équilibre pour les échantillons à faible volume permettant la mesure de a fixation des petites molécules diffusibles sur les macromolécules s'appliquant dans les domaines de la chimie des macromolécule@, te la biochimie et de la médecine se caractérisant par deux plaques per@ée. d'alvéoles boulonnées l'une à l'autre et enserrant une membrane néRiane entre les deux alvéoles se faisant vis-à-vis. 2 ) Dispositif suivant la revendication 1 @se caractérisant par le fait que des fins conduits sont percés po1 tteindre les deux secteurs des alvéoles séparés par la membrane, chaque appareil comportant un nombre variable de trous pour des opérations multiples 30) Dispositif suivant la revendication s se caractérisant par le crue l'appareil comporte suivant une variante d'éxécution deux plaques en matière fluorée percées de trous, séparées par les membranes et enserrées de plaques d'alliage d'aluminium percéés de trous concentriques aux précédente et plus grands de façon à former des chambres d'incubation ouvertes mais obturables par ruban adhésif