Brevet FR2292455A1 — publié le 19760625

La présente invention concerne les dispositifs de détection d'infections microbiennes et plus particulièrement les dispositifs utilisables pour détecter la présence d'une infection urinaire et sa gravité. La mise en oeuvre d'une thérapeutique rationnelle des infections urinaires exige à l'heure actuelle leur diagnostic précis, qui s'effectue généralement par culture et identification de l'agent pathogène et numération des germes dans un volume unitaire, puis recherche de la sensibilité de l'agent pathogène microbien aux anti-microbiens disponibles dans la pharmacopée. Pratiquement, chaque étape demande au moins dix-huit heures. Ce délai est très excessif dans de nombreux cas et conduit le clinicien à mettre en oeuvre, dès constatation de l'infection, une thérapeutique a priori qui peut se révéler totalement inadaptée. On a déjà proposé des dispositifs de numération de germes qui permettent uniquement de déceler, après un délai d'incubation pouvant atteindre vingt-quatre heures, l'existence d'une infection. I1 s'agit de simples lames ou bandelettes a jeter après un seul usage, portant un milieu de culture stérilisé, que l'on trempe dans l'urine suspecte et que l'on observe visuellement après incubation. L'information donnée par ces lames ou bandelettes se limite à l'existence ou non d'une contamination ou d'une infection avec, dans les meilleurs cas us indication sup plémentaire sx la obture desbactéries(GRAM + ou GRAn -). La présente invention vise à fournir un dispositif à usage unique susceptible d'être mis en oeuvre par un personnel peu qualifié médicalement, voire même par le malade, fournissant, au bout d'un délai ne dépassant pas celui de la première opération du processus habituel, une information directement exploitable. Dans ce but, l'invention propose un dispositif de détection d'infections microbiennes caractérisé en ce qu'il comprend un faisceau de trois ou quatre volets rectangulaires rayonnant à partir d'une âme prolongée par un organe de préhension et régulièrement répartis autour de l'âme, présentant sur leurs deux faces des alvéoles occupés par des plages d'un milieu de culture solide, une au moins de ces plages, destinée à la numération, étant démunie d'agent anti-microbien et les autres, d'étendue plus faible que la première, étant occupées par un milieu de culture dans lequel est réparti un agent anti-microbien spécifique, différent pour chaque plage, chaque plage comportant en outre un réactif de visualisation de croissance de germe. Grâce à la présence de trois ou quatre volets, on multiplie par trois demi ou par deux la surface disponible pour un diamètre de flacon donné, sans gêner l'observation ultérieure puisqu'il reste toujours possible de regarder chaque plage sous incidence normale. Il est possible de donner à chaque plage la dimension la plus appropriée et en particulier de donner une surface beaucoup plus grande aux plages destinées à la numération (où il est nécessaire de faire un comptage des colonies par unité de surface), qu'aux plages sur lesquelles on doit simplement constater la croissance ou l'absence de croissance des colonies. Il faut noter au passage que l'antibiogramme réalisé sur les plages de milieu de culture comportant un agent anti-microbien, basé sur le principe de la méthode de dilution en milieu solide, présente une fiabilité et une précision très supérieures aux antibiogrammes pratiqués en boites de Pétri par la méthode des disques dans les laboratoires utilisant les méthodes de routine. Dans la pratique, on utilisera en général une surface de l'ordre de 10 cm2 pour la numération et des plages de surface trois fois plus faible environ pour chaque agent anti-microbien. La plage affectée à chaque agent anti-microbien pourra elle-meme être fractionnée entre deux alvéoles correspondant à des concentrations différentes d'antibiotique (l'un correspondant à la posologie normale, l'autre à la posologie maximum admissible). L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui suit d'un dispositif qui en constitue un mode particulier de réalisation donné à titre d'exemple non limitatif. La description se réfère à la figure unique qui est un schéma de principe du dispositif, en élévation et en coupe avec arrachement partiel. Le dispositif comprend essentiellement trois éléments à savoir un ensemble support du milieu de culture et des agents antimicrobiens, un flacon de transport et enfin un flacon de recueil. Le système support du milieu de culture comprend essentiellement un faisceau de quatre volets rectangulaires rayonnant à partir d'une âme solidaire d'un bouchon. Le faisceau de quatre volets est constitué de deux lames 1 et 2 emboîtées à 90- et formant croisillon. Ces lames sont avantageusement constituées d'une matière plastique ; des alvéoles sont ménagés sur les deux faces de chaque lame. Dans les alvéoles sont coulés les milieux de culture solides additionnés d'un réactif révélateur de croissance de germe et,pour certains, d'agents antimicrobiens. Selon un mode préféré de réalisation les huit faces de lames du système support de réactif sont divisées en deux types de plages. D'une part, deux grandes plages (de 10 cm2 chacune par exemple) servent à la numération qui est un examen quantitatif exigeant de grandes surfaces de lecture. Ces plages sont dému nies d'agent antimicrobien et, sur l'une 1d'entre elles, la crois- sance des germes GRAM positif est inhibée ; naturellement, une seule grande plage, non sélective, pourrait être prévue. D'autre part, les six faces restantes portent en tout neuf petites plages 8 destinées à recevoir, conjointement au milieu de culture, des antimicrobiens en vue de l'obtention d'un antibiogramme, cet examen qualitatif ne nécessitant pas de grandes surfaces. Dans le cas présent, neuf antimicrobiens différents tels que l'ampicilline, l'acide nalidixique, les sulfamides, etc. peuvent être testés simultanément, chaque antimicrobien occupant deux alvéoles différents, l'un à la concentration normale d'utilisation en thérapeutique humaine, l'autre à la concentration maximum supportable. Enfin, chaque plage comporte un réactif de visualisation de croissance des germes. Chaque alvéole peut comporter un marquage en relief de son fond. La lame 1, qui sera appelée lame support est munie d'une fente verticale médiane et de deux encoches 9 sur lesquelles viennes s'emboiter des crans 10 de l'autre lame 2 constituant contrelame, les lames étant ainsi rendues solidaires. La lame support 1 est prolongée par une tige fixée sur un bouchon 3 qui est révisé de telle sorte qu'il puisse à la fois servir à la préhension du système support du milieu de culture et à la fermeture étanche, par vissage ou emboitage par exemple, d'un flacon cylindrique 4 de transport ayant des dimensions telles qu'il contienne juste ledit système. Ce flacon de transport 4 peut lui-même être placé dans un flacon 5 de recueil. Le flacon de recueil est constitué d'une matière transparente et il présente une partie supérieure évasée formant un entonnoir. Le flacon 5 est fermé de façon étanche par un bouchon 6. Pour la commercialisation, il est avantageux d'enfermer le dispositif ainsi décrit dans une pochette de matière plastique étanche qui contient également le mode d'emploi, des étiquettes d'identification, un guide d'interprétation des résultats et un feuillet de compte-rendu, l'ensemble étant stérilisé. La mise en oeuvre du dispositif sera maintenant donnée. Les différents éléments d'un ensemble tel que défini précédemment sont séparés. Les étiquettes, de préférence autoadhésives, sont complétées afin d'identifier d'une part le flacon de recueil de l'urine, et d'autre part le flacon de transport des lames. Le flacon de recueil est utilisé, en respectant les conditions habituelles, pour procéder au prélèvement urinaire. Le système est séparé du flacon de transport et les lames sont immergées dans l'urine fraîchement émise puis, après avoir pris soin de les laisser égoutter dans le flacon de recueil afin de les débarrasser de l'excès d'urine, elles sont de nouveau placées dans le flacon de transport qui est fermé puis expédié au laboratoire; on peut éventuellement expédier conjointement le flacon de recueil muni de son bouchon si d'autres examens d'urine sont nécessaires. Au laboratoire, le flacon de transport est placé dans un incubateur à 37- pendant au moins douze heures. Les lames sont ensuite examinées, les différentes plages étant identifiées gra- ce au marquage en relief du fond des alvéoles,visible par transparence. D'une part on effectue la numération par comparaison de la densité des colonies présentes sur les plages témoins à celles des images de référence fournies, d'autre part on détermine éventuellement le type d'antimicrobien à administrer et sa concentration par numérotation comparée de colonies microbiennes présentes sur les plages témoins et sur les diverses plages ad ditionnées des différentes concentrations d'antimicrobiens. L'ensemble des résultats est noté sur le feuillet de compte-rendu. Le dispositif est ensuite détruit par les moyens habituellement utilisés en bactériologie. il va sans dire que l'invention ne se limite pas au mode particulier de réalisation qui a été représenté et décrit à titre d'exemple et que la portée du présent brevet s'étend aux variantes restant dans le cadre des équivalences. REVENDICATIONS 1. Dispositif de détection d'infections microbiennes, caractérisé en ce qu'il comprend un faisceau de trois ou quatre volets rectangulaires rayonnant à partir d'une âme prolongée par un organe de préhension et régulièrement répartis autour de l'âme, présentant sur leurs deux faces des alvéoles occupés par des plages d'un milieu de culture solide, une au moins de ces plages, destinée à la numération, étant démunie d'agent antimicrobien et les autres, d'étendue plus faible que la première, étant occupées par un milieu de culture dans lequel est réparti un agent antimicrobien spécifique, différent pour chaque plage comportant un réactif de visualisation de croissance de germes. 2. Dispositif de détection d'infections microbiennes suivant la revendication i, caractérisé en ce que les volets sont au nombre de quatre et sont constitués par deux lames emboîtées à 900 formant croisillon. 3. Dispositif de détection d'infections microbiennes suivant la revendication l ou 2, caractérisé en ce que l'âme du support est solidaire d'un bouchon de fermeture étanche d'un flacon de transport. 4. Dispositif de détection d'infections microbiennes caractérisé en ce qu'il comprend au moins une lame en matière plastique prolongée par un organe de préhension et présentant sur ses deux faces des alvéoles occupés par des plages d'un ni- lieu de culture solide, une au moins de ces plages, destinée à la numération, étant démunie d'agent antimicrobien et les autres, d'étendue plus faible que la première, étant occupées par un milieu de culture dans lequel es réparti un agent antimicrobien spécifique, différent pour chaque plage, chaque plage comportant un réactif de visualisation de croissance de germes de façon à déterminer le ou les agents antimicrobiens efficaces. 5. Dispositif de détection d'infections microbiennes suivant la revendication 4, caractérisé en ce que l'organe de préhension est solidaire d'un bouchon de fermeture étanche d'un flacon de transport. 6. Dispositif de détection d'infections microbiennes suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que chacune des plages occupée par un milieu de culture additionné d'un agent antimicrobien comporte une partie dans laquelle ledit agent est à une concentration normale de traitement et une partie dans laquelle agent est à une concen tration correspondant à la posologie maximum admissible. 7. Dispositif de détection d'infections microbiennes suivant l'uns quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qutil comporte deux plages démunies d'agent antimicrobien dont l'une inhibe la croissance des germes GRAM positifs. 8. Dispositif de détection d'infections microbiennes suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé on ce que les plages destinéesà la numération ont une surface approximativement trois fois supérieure aux plages desti- nées à déterminer l'activité des agents antin-crobiens. 9. Dispositif de dXtection d'infections microbiennes suivant la revendication 3 ou 5, caractérisé en ce qu'il comporte également un flacon de recueil destiné à recevoir le flacon de transport muni de son bouchon, flacon de recueil muni de moyens de fermeture étanche. 10. Dispositif de détection d'infections microbiennes suivant la revendication l, tel qu'illustré sur la figure unique.