Brevet FR2293213A1 — publié le 19760702

La présente invention est relative à un médicament antitumoral à base de culture microbienne. On sait déjà que LISTERIA MONOCYTOGENES, parmi de multiples actions pathegbnes, prosoque chez la femme enceinte des avortements mortels pourlerfoetus, - alr's quela revêt souvent chez la mère des formes frustres, voire inapparentes. On a maintenant découvert que ce azyme microbe, uniquement connu pour son action pathogène, pouvait astre utilisé dans certaines conditions pour le traitement des tumeurs. L'invention a pour objet un médicament antitumoral, caractérisé en ce qutil contient, à titre de principe actif, une culture de LISTERIA MONOCYTOGENES. Suivant une autre caractéristique de l'invention, la culture est une culture obtenue par dissolution de LISTERIA MONOCYTOGENES lyophilisé dans du bouillon nutritif. A titre de bouillon nutritif, on utilisera avantageusement du bouillon nutritif Pasteur. La culture utilisée pourra contenir, par exemple, de 50 à 200 millions environ de bactéries pour 10 ml de solvant. A titre d'exemple, on citera une culture obtenue en dissolvant 0,1 ml de poudre lyophilisée de LISTERIA MONOCYTOGENES contenant environ 100 millions de bactéries dans 10 ml de bouillon nutritif, notamment du bouillon nutritif Pasteur(dite ci-après "culture 1"). LISTERIA MONOCYTOGENES peut entre prélevé sur un enfant mort-né et, en particulier, extrait du cerveau d'un enfant prématuré atteint de listériose. On peut cependant utiliser un microbe provenant d'autres sources. La poudre lyophilisée de LISTERIA MONOCYTOGENES, qui est utilisée avantageusement, contient environ 85 % de germes vivants d'une virulence atténuée. Dans certains cas, on peut envisager de remplacer le bouillon nutritif par du sérum physiologique ou un solvant analogue permettant 11 injection. On donnera maintenant ci-après quelques résultats d'essais pharmacologiques montrant l'efficacité du médicament de l'invention dans le traitement des tumeurs. Première série d'essais Après prélèvement de liquide d'ascite d'une souris atteinte de sarcome B.P.8., les cellules néoplasiques sont reprises soit par du bouillon nutritif Pasteur, soit par du bouillon nutritif Pasteur additionné deLEELZA(culture lprécitéehon effectue une injection souscutanée de 0,2 ml dans chaque cas. Chez IO souris témoins, la greffe prend et tue l'animal dans un délai de 39 à 68 jours.Par contre, I5 souris auxquelles on a injecté les cellules sarcomateuses reprises par la solution de LISTERIA en bouillon nutritif ont une atteinte passagère de l'état général pendant 2 à 3 semaines, mais aucune greffe n' apparaît. Dans un seul cas se produit une petite nodosité sous-cutanée qui n'augmente pas de volume; l'examen histologique montre des cellules tumorales avec mitoses peu nombreuses et, à leur contact, une importante réaction lymphoïde; par ailleurs, on note quelques zones de lyse, de nécrose, sans cellule tumorale et sans infection. On peut conclure des essais ci-dessus que le médicament de l'invention empêche la greffe de sarcome BP 8 à la souris Deuxième série d'essais 30 souris C3H reçoivent chacune 0,2 ml d'eau physiologique contenant des cellules de sarcome BP 8, la concentration étant la mme que dans les expériences précédentes; toutes les greffes prennent. IO souris, qui servent de témoins, meurent dans un délai de 37 à 53 jours. Aux 20 autres, on injecte dans la tumeur, 7 jours après la greffe, 0,1 ml de la culturelde LISTERIA en bouillon nutritif. 2 souris meurent dans les 8 jours, 3 autres dans un délai de 57 à 60 jours.Sur les 15 restantes, I4 ont une survie importante, de 75 à 101 jours, avec constitution dans la majorité des cas d'une très grande induration ligneuse, légèrement ulcérée et bourgeonnante au centre. L'examen histologique montre dans ces cas des cellules sarcomateuses très denses, avec mitoses peu nombreuses, des zones claires de résorption avec lyse, sans infection. La greffe de la trentième souris, qui avait atteint la taille d'une noisette, se résorbe progressivement et a totalement disparu un mois après l'injection. Cette série d'essais démontre qu'injecté par voie intratumorale, le médicament de l'invention retarde l'évolution du sarcome BP 8 greffé à la souris. Troisième série d'essais On prend 5 souris C3 H atteintes de tumeurs mammaires spontanées, dont le volume va d'une nodosité sphérique de 4 mm de diamètre à une tumeur ovotide de 20 mm sur I4 mm. Ce sont des épithé liomas de consistance très ferme, sans adhérence à la peau, sans ulcération, les souris ayant conservé un excellent état général et n On effectue une injection unique, intratumorale, avec une aiguille intradermique, de la culture 1 de LISTERIA en bouillon nutritif, à une dose variant de 0,3 ml à 0,7 ml. La petite tumeur, dont l'injection n'a pas été strictement intratumorale, disparait en 10 jours. 5 à 6 jours plus tard,l'état général de la souris s'altère profondément, mais elle redevient très vivace une semaine plus tard. L'évolution des 4 autres tumeurs est à peu près identique; ré- gression légère en IO jours; une semaine plus tard, la tumeur est scléreuse, excavée, et l'état général s'altère; puis la plus grande partie de la tumeur se détache, et la petite surface rose, granuleuse, qui persiste, laisse place à une cicatrice blanchâtre. La souris redevient normale et toute trace de tumeur a disparu 24 à 64 jours après l'inoculation. Pour trois des souris, il a été nécessaire de refaire une autre injection de la culture 1 35 jours après la première injection. Les essais ci-dessus démontrent que le médicament de l'invention est efficace dans le traitement d'bpthéliomas mammaires de la souris par injections intratumorales. I1 ressort des essais pharmacologiques ci-dessus que le médicament de l'invention est efficace dans le traitement des tumeurs malignes. I1 est donc utilisable en thérapeutique chez l'animal et chez l'homme pour le traitement de tumeurs diverses telles que épithéliomas et sarcome. Pour ces applications, il est administrable par voie intratumorale, sous-cutanée ou intramusculaire, la dose administrable variant suivant le cas à traiter. Si on le désire, on peut associer le traitement avec le médi- cament de l'invention à une légère antibiothérapie. REVENDICATIONS 1 - Médicament à activité antitumorale, caractérisé en ce qu'il contient, à titre de principe actif, une culture de LISTERIA MONOCYTOGENES. 2 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que ladite culture est une culture obtenue par dissolution de poudre lyophilisée de LISTERIA MONOCYTOGENES dans un bouillon nutritif. 3 - Médicament suivant la revendication 2, caractérisé en ce que la culture contient de 5C à 100 millions de bactéries pour 10 ml de bouillon nutritif.