Brevet FR2302097A1 — publié le 19760924

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de la céphamycine et leur procédé de préparation. Plus particulièrement, l'invention concerne de nouveaux acides (acylamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-métoxy p-acyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxyliques-4 représentés par la formule générale dans laquelle R représente un groupe alkyle en C1-C4 qui peut entre substitué par des atomes d'halogène, un groupe aryle, un groupe aryl(alkyle en C1-C4), un groupe alcoxy en C1-C4 qui peut etre substituE par des atomes d'halogbne, ou un groupe aryl(alcoxy en C1-C4), le reste aryle étant eventuellement substitué par des atomes d'halogène, et- leurs sels, ainsi que le procédé de préparation des composes de formule Ct). L'acide (amino-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hydroxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxyliques-4 de formule a été isolé comme produit de fermentation de certains types de Streptomyces par Stapley,comme decrit dans les brevets japonais publiés n 3286/1971 et 1876/1972. Cependant, comme décrit dans Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2, pages 132-135, 1972, il est très diffidie d'obtenir le composé de formule (II) à un degré de pureté élevé puisque le composé est relativement instable et il a été indiqué que le rendement est tres faible, c'est-à-dire d'environ 10 A 15 % au mieux. A la suite de diverses recherches en vue d'isoler facilement le composé de formule (II) du bouillon de fermentation ou d'un filtrat obtenu à partir du bouillon de fermentation, la demanderesse a decouvert selon l'invention que i'on peut isoler efficacement le Composé de formule (II) à l'état stable par une extraction par solvant, sous la orne de nouveaux dérivés acylés de formule générale (I), tout en conservant l'activité antimicrobienne du composé de formule (II),et que les dérivés N-acylés ainsi obtenus peuvent entre utilisés comme produits de départ pour la synthèse de divers agents antimicrobiens, par exemple la Céfoxitine, comme décrit plus en détail ci-aprbs. L'invention a donc principalement pour objet de nouveaux dérivés de la céphamycine qui sont des acides (acylamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-acyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxyliques-4 représentés par la formule générale (I) ci-dessus. L'invention a également pour objet un procédé pour préparer les nouveaux dérivés de céphamycine de formule (I) ci-dessus. L'invention a aussi pour objet un procédé pour isoler efficacement l'acide (amino-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hydroxy cinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 de formule (II) sous forme d'un dérivé acylé à partir du bouillon de fermentation par une extraction par solvant. On peut préparer les drivés de céphamycine selon l'invention, c'est-à-dire les acides (acylamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-acyloxycinnamoyloxymXthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxyliques-4 de formule (I) ci-dessus, par réaction de l'acide (amino-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hydroxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 de formule générale (II) ci-dessus avec un agent acylant de formule RCOX (III), dans laquelle R est tel que défini ci-dessus et X représente un atome d'halogène. Le terme "groupe alkyle inferieur" s'entend dans la présente description pour désigner un groupe alkyle à chaîne droite ou ramifiée en C1-C4 qui peut éventuellement Outre substitué par des atomes d'halogène, par exemple un groupe éthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, sec-butyle, tertiobutyle, trichlorométhyle et les analogues. Le terme "groupe alcoxy inférieur" désigne un groupe alcoxy à channe droite ou ramifiée en C1-C4 qui peut etre substitué éventuellement par des atomes d'halogène, par exemple un groupe méthoxy, éthoxy, butoxy, trichloropropoxy et analogues. Le terme "groupe aryle" désigne un groupe phényle, un groupe phényle halogéné, un groupe benzyle, un groupe pyridyle, un groupe thiényle et les analogues. Le terme "halogène" désigne un atome de chlore, de brome ou d'iode, de préférence un atome de chlore ou de brome. On peut facilement obtenir le produit de départ, l'acide (amino-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hydroxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 cépheme-3 carboxylique-4 de formule (II) ci-dessus,comme produit i fermentation en cultivant la souche Streptomyces grise us ronge décrit dans le brevet japonais publie n 1876/1972 ou en cultivant la souche Streptoyces viridochromogenes SF-1584 isolée par la demanderesse. L'échantillon de Streptomyces viridochromogenes SF-1584 a été déposé au Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science & technology au Japon, sous le n 2288 le 27 septembre 1973. Les caractéristiques microbiologiques de la souche Streptomyces viridochromogenes SF-1584 sont les suivantes (I) Caractéristiques morphologiques Le mycélium aérien pousse bien sur un milieu de gélose à l'amidon, un milieu de gélose-levure-malt et sur un milieu de gelose-farine d'avoine, etc. La formation de spores est abondante. On observe des ramifications monopodes, mais pas de vortex. La terminaison du mycélium aérien est sous forme de spirale ouverte. On n'observe pas de structure spéciale, telle que sclérotium. L'observation au microscope électronique montre que la surface des spores est épineuse. La forme des spores est ovale à ellipsoIdale, les dimensions de 0,5-0,8 x 0,8-1,0 /u. Les spores sont ordinairement disposées en enchatnements de plus de 10 spores. (II) Croissance sur divers milieux (culture à 28 C) Milieu Croissance (couleur Mycélium aérien Pigment de l'envers) soluble Gélose-saccharose- creme foncé à jaune blanc non nitrate grisâtre pâle Célose-glucose- brun jaunette pâle rare, blanc non asparagine Gélose-glycérol- faune grisâtre rare, vert jaunâtre non asparagine pile Gelose-amidon bonne, olive grisâtre abondant, bleu non à brun jaunâtre verditre Gélose-farine bonne, olive grisitre abondant, bleu à brun d'avoine (la couleur devient vert grisâtre pile légèrement rougeâtre par addition d'acide chlorhydrique 0,05 N) Milieu Croissance (couleur Mycélium aérien de lten9ers) soluble Gélose-levure- bonne) olive grfsstre abondant, bleu malt à brun grisitre Gélose nutritive faible, incolore non non Gélose-tyrosine brun pale à brun abondant, bleu brun verd tre à bleu pale grisâtre (III) Caractéristiques physiologiques (1) Camme de températures de croissance : la souche pousse à une température de 15 à 40 C sur un milieu gélose-amidon. (2) Liquéfaction de la gélatine : la gélatine est légèrement liquéfiée après culture pendant 30 jours a 200C. (3) Hydrolyse de l'amidon : positive à 28 C) (4) Coagulation du lait écrémé : négative (d 280C). Peptonisation du lait écrémé : positive (à 28 C) (5) Formation de pigment mélanotde : positive (douteux) h positive. (IV) Utilisation des sources de carbone (évaluée dans le milieu de gélose Pridham-Gottlieb) La souche utilise bien les sources suivantes de carbone : D-glucose, D-fructose, D-mannitol, D-xylose, L-arabinose, L-inositol, rhamnose, saccharose et raffinose. A la suite des études des caractéristiques de la souche SF-1584 en référence aux caractéristiques des souches bien connues selon le critère donné par S.A. Waksman, dans The Actinomyctes, volume 2, 1961 ; par R. Hutter dans Systematik der Streptomyceten, 1967 ; et dans International J. Systematic Bacteriology, volume 18, pages 69-189, pages 279-392, 1968 ; ibid, volume 19, pages 391-512, 1969 ; ibid, volume 22, pages 265-394, 1972, la souche SF-1584 a été identifiée comme souche de Streptomyces viridochromogenes. La souche SF-1584 de Streptomyces viridochromogenes peut etre cultivée de manière classique dans un milieu de culture contenant des sources ordinaires de carbone et d'azote qui sont assimilables par les micro-organismes habituels. Les sources nutritives qui peuvent etre utilisées selon l'invention sont celles bien connues dans la technique et qui sont couramment utilises dans la culture de souches de Streptoayces. A titre d'exemples de sources de carbone appropriées, on peut citer le glucose, le saccharose, l'amidon, la dextrine, le glycdrcl, le sirop de sucre, l'huile de soja et les analogues. A titre d'exemples de sources d'azote appropriées, on peut citer la farine de soja, l'embryon d'avoine, I'extrait de viande, la peptone, la levure séchée, la liqueur de trempage de mare, le sulfate d'ammonium et analogues. On peut également utiliser, si on le désire, des sels inorganiques, tels que carbonate de calcium, chlorure de sodium , chlorure de potassium, phosphates et analogues,dans le milieu conjointement avec d'autres substances organiques et inorganiques qui favorisent la croissance de la souche et la production du composé de formule (11). On peut effectuer la culture par des techniques classiques qui sont couramment utilisées dans la production d'antibiotiques par fermentation. I1 est avantageux, cependant, d'utiliser une technique de culture en milieu liquide, en particulier en culture submergée. On peut avantageusement mettre en oeuvre la culture en conditions aérobies à une température d'environ 25 à 35 C, de préférence à environ 28 C.La concentration du compose desiré de formule (II) dans le milieu de culture résultant atteint généralement son maximum au bout de 3 à 6 jours, tant en culture agitée qu-'en culture en cuve de fermentation On peut préparer les composes de formule (I) selon l'invention en ajoutant l'agent acylant de formule (III) à un bouillon de fermentation obtenu par culture de Streptomyces grisous ou de Streptomyces viridochromogenes de -souche SF-1584, ledit bouillon de fermentation étant partiellement purifié et concentré, ou à une solution du composé pur de formule (II) isole. La solution qui est utilisée dans l'acylation comprend de l'eau ou un mélange d'eau et d'un solvant organique, tel qu'acétone, dioxanne, diméthylformamide, diméthylsulfoxyde, pyridine et les analogues. la concentration de la solution du compos (II) dans le milieu ci-dessus n'est pas essentielle, mais elle est de préférence d'environ 0,5 à 50 ag/ml. A titre d'exemples d'agents acylants de formule (III), qu'on peut utilise r selon l'invention, on peut citer les chloroformiates d'alkyle tels que chloroformtate de méthyle, chloroformiate d'éthyle, chloroformiate de n-butyle, chioroformiate de trichloropropyle et les analogues, les chloroformiates d'aryle tels que chloroformiate de benzoyle et les analogues, les halogénures d'acyle tels que chlorure d'acétyle, bromure d'acétyle, chlorure de propionyle, chlorure de butyryle, chlorure de pivaloyle, chlorure de tricF.loreacdtvle et les analogues et les halogénures d'aryle aromatiques tels que chlorure d'isonicotinyle, chlorure de phénylacétyle, chlorure de phénoxyacétyle et les analogues, et les halogénures d'aroyle tels que chlorure de benzoyle, chlorure de p-chlorobenzoyle et les analogues. On utilise généralement l'agent acylant en quantité de 2 à 40 moles, de préférence de 4 a 20 moles, par mole du compose de formule (II) On peut mettre en oeuvre la réaction d'acylation entre une température de refroidissement et environ 500C, mais on opère avantageusement à la température ambiante (environ 20-300C) nu au-dessous, puisque le produit de départ de formule (II) et le produit de formule (I) sont relativement instables aux températures élevées. La durée de réaction varie généralement selon la température, le pH du système réactionnel et la quantité de réactifs utilisée, mais elle est ordinairement d'environ 3 à 15 h. On effectue ordinairement l'acylation A un pH d'environ 7 à 9, de préférence de 7,5 à 8.Pour maintenir le mélange de réaction dans la gamme de pH ci-dessus, on peut ajouter au mélange de réaction pendant l'acylation une substance basique telle qu'un hydroxyde de métal alcalin, par exemple hydroxyde de sodium, hydroxyde de potassium et les analogues, un carbonate ou bicarbonate de métal alcalin, par exemple le carbonate de sodium, le bicarbonate de sodium et les analogues, une amine tertiaire, par exemple la triéthylamine, la pyridine et les analogues ou un mélange de ces divers bases,pour neutraliser l'halogénure d'hydrogène formé dans la réaction d'acylation. On peut isoler le produit de formule (I) en tirant avantage de la solubilité du produit plus élevée dans les solvants hydrophobes que celle du produit de départ de formule (11). Par exemple, lorsque le mélange de réaction contient des solvants organiques, on sépare le solvant aussi complètement que possible, par exemple par évaporation, du mélange de réaction et on acidifie le mélange de réaction aqueux restant, puis on extrait par un solvant non miscible à l'eau, tel qu'acétate d'éthyle, acétate de butyle, chloroforme et les analogues, pour extraire le produit désiré dans le solvant organique. On peut également, si on le désire, précipiter le produit dans le mélange de réaction, selon le type de groupement acyle dans le produit, par exemple le groupe éthoxycarbonyle, et on peut donc l'isoler en utilisant une technique de précipitation en combinaison avec des techniques de filtration, décantation, etc. Le produit ainsi obtenu est un diacide caDable de former des sels métalliques ou des sels d'amines solubles dans l'eau et on peut le purifier avantageusement en utilisant cette preprfdt. Par exemple, on peut purifier le produit en extrayant l'extrait organique ci-dessus ou une solution dans un solvant organique du précipité ci-dessus avec une solution alcaline aqueuse et ensuite en extrayant à nouveau la solution aqueuse alcaline resultante en conditions acides avec un solvant non miscible à l'eau. On peut également utiliser pour purifier le produit de formule (I d'autres techniques de purification qui sont généralement utilisées pour la purification des composes organiques, par exemple distribution à contrecourant, chromatographie sur colonne,etc. Les composés de formule (I) ainsi obtenus sont des composés nouveaux qui n'ont pas été décrits précédemment dans la littérature. Ils sont peu solubles dans l'eau et l'éther de pétrole, mais solubles dans les solvants organiques, tels que méthanol, ethanol, butanol, acétone, acétate d'éthyle, acétate de butyle, chloroforme, etc., ou dans des solutions aqueuses d'alcali. Les produits dans lesquels R est un groupe alcoxy ou arylalcoxy ont une oléosolubilité plus élevée que les produits dans lesquels R est un groupe alkyle ou aryalalkyle. Comme décrit précédemment, les composés de formule (I) ci-dessus peuvent former des sels solubles dans l'eau de métaux alcalins tels que les sels de sodium, potassium et lithium ou d'amines telles que les sels de triethylamine, ou de pipéridine. L'invention concerne donc à la fois les acides carboxyliques libres et leurs sels. Les composés de formule (I) selon l'invention sont doués d'activité antinicrobienne contre Staphylococcus aureus 209P, Bacillus subtilis, Sarcina lutea, Bacillus stearothermophylis et les analogues, et sont donc utiles comme . antibiotiques. Par exemple, le composé O,N-di(4thoxycarbonyîé) de formule (I) ci-dessus, c'est-d-dire l'acide (éthoxycarbon an ido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (a-méthoxy p-éthoxycarbonyloxy- cinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4, présente les activités antibactériennes indiquées dans le tableau ci-aprEa. On détermine ces activités antibactériennes en plongeant un disque de papier de 18 mm de diamètre dans une solution méthanolique de l'acide libre ci-dessus A une concentration de 1000 y/ml, en séchant puis en plaçant le disque de papier séché sur un milieu de gélose contenant chacun des micro-organismes d'essai énumérés dans le tableau et en faisant incuber le milieu pendant une nuit A une température de 37 C. TABLEAU Organismes d'essai Zone d'inhibition (diamètre en mm) Bacillus subtilis 11,2 Sarcina lutea 12,0 Staphylococcus aureus 209P 10,9 Micrococcus lysodeikticus 8049 25,5 Bacillus stearothermophilus 23,8 Escherichia coli O Les composés de formule (I) sont également utiles comme produit de départ pour la préparation d'autres dérivés de céphamycine. Par exemple, le composé de formule (I) peut 8tre transformé en un dérivé de céphamycine, la Céfoxitine, dont les activités sont decrites dans British Medical Journal, volume 4, n 5893, pages 653-655, selon le sch6ma réactionnel suivant composé (I) Réaction avec une estérase enzymatique, ou par action de micro-organismes > K OC H0OC-CH-(CH2)3-CO-NH NHCOR H + CH20H COOH Diphdnyldiazomdthane/dioxanne, 3 h à 0 C T1 0 CH-(CH2)3'CO'NH NIlCOR CH0C-C1H- (CH2) 3-CO-NH 11;;É2/OH\ 8 C112C12, CH2C12, collidine et chlorure de carbamoyle, 1 h à OOC ;ISi C NhCOR ssa OCH ,--o I' \ / o 1) '-C1c"Cl SpCIw2CC1 N-tr iméthylsilyl trifluoro acétamide/C112C12, 16 h à 400C 2) Zn et acide acétique (j. Am. Chem. Soc., 1972, > / n 164, ORGN 69) Acide trifluoroacétique et antsole, à 0 C (J. Am. Chem.Soc., 1972, n 164, ORGN 69) Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée. Dans ces exemples, les parties, pourcentages et rapports s'entendent en poids,sauf indication contraire. EXEMPLE 1 On dissout 0,9 g d'acide (amino-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hydroxycinnamoyloxynéthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 dans 400 ml d'eau à pH 4,0 et on extrait la solution résultante avec deux portions de 200 ml d'acétate d'éthyle. On ajoute 30 ml d'acétone à la couche aqueuse et on ajuste ensuite celle-ci à pH 7,5 par l'hydroxyde de sodium 0,5 N. On ajoute goutte à goutte au mélange une solution de 10 ml de chloroformiate d'éthyle dans 30 ml d'acétone en maintenant le mélange de réaction à pH 7,5-8,0 par addition d'hydroxyde de sodium 0,5 N. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange de réaction pendant 1 h 30 mn à la température ambiante et on l'ajuste à pH 7 par l'acide chlorhydrique N.On isole le précipité formé par filtration et on le dissout dans 200 ml d'acétate d'éthyle. On sèche la solution résultante sur sulfate de sodium anhydre et on l'évapore à siccité pour obtenir 1,0 g d'acide (éthoxycarbonamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-éthoxy carbonyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 mé thoxy-7 céphème-3 carboxylique-4. Après isolement du précipité ci-dessus, on ajuste le filtrat obtenu à pH 2-3 par l'acide chlorhydrique N et on l'extrait avec 300 ml d'acétate d'éthyle. On extrait à nouveau par une solution aqueuse à 2 Z de bicarbonate de sodium et on ajuste l'extrait résultant à pH 2-3 par l'acide chlorhydrique 5N. On extrait à nouveau l'extrait ainsi obtenu avec 200 ml d'acétate d'éthyle et on sèche l'extrait d'acétate d'éthyle et on évapore à siccité pour obtenir encore 150 mg du produit ci-dessus. F. 126-1280C (décomposition). Analyse élémentaire pour C31H37N3O15S C H N S Calculé (%) 51,45 5,1 5,8 4,4 Trouvé (%) SO,1 5,5 5,3 3,9 EXEMPLE 2 On cultive en conditions aérobies Streptomyces viridochromogenes souche SF-1584 dans un milieu de culture contenant 1,5 7 de glycérol, 1,5 % de dextrine, 2,0 7 de farine de soja, et 0,15 % de carbonate de calcium à une température de 280C pendant 65 h. On lave 4,5 1 du filtrat obtenu par filtration du bouillon de culture résultant pour séparer le. mycélium à deux reprises avec 200 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute 300 ml d'acétone au filtrat.On ajoute ensuite goutte à goutte au mélange une solution de 300 ml de chloroformiate d'éthyle dissous dans 500 ml d'acétone en maintenant le pH à 7,5-8,0 par addition d'hydroxyde de sodium 5N. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange pendant 1 h 30 an et on l'ajuste à pH 2-3 par l'acide chlorhydrique 5N, puis on extrait avec trois fois avec 400 ml d'acétate d'éthyle. Ensuite, on extrait à nouveau cet extrait avec une solution aqueuse à 2 X de carbonate de sodium et on acidifie légèrement 11 extrait aqueux résultant par l'acide chlorhydrique 5N puis on extrait avec 1,5 1 d'acétate d'éthyle. On sèche l'extrait d'acétate d'éthyle ainsi obtenu sur sulfate de sodium anhydre et on évapore à siccité pour obtenir 570 mg d'acide (éthoxycarbonamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-éthoxycarbonyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 brut.On dissout ensuite ie compos ainsi obtenu dans 4 ml de méthanol et on fait passer la solution sur une colonne de 75 ml de Sephadex LH-20 fabrique par la société Pharmacia Fine Chemicals, et on élue par le méthanol On combine les effluents dans lesquels on trouve le produit desiré selon l'invention et on évapore le solvant pour obtenir 360 mg d'acide (éthoxycarbonamido-5 carboxy-5 valéramidoj-7 (a-méthoxy p-éthoxycarbonyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4. EXEMPLE 3 On dissout 0,59 g d'acide (amino-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hidroxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 dans 100 ml d'eau et on ajoute à la solution 20 mi d'acétone On ajoute ensuite goutte à goutte au mélange une solution de 0,55 g de chlorure de propionyle dans 20 ml d'acétone en maintenant le mélangede réaction à pH 7,5-8,0 par addition d'hydroxyde de sodium N. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange de réaction résultant à la température ambiante pendant 2 h, et on l'ajuste à pH 5,0.On élimine l'acétone du mélange réactionnel sous pression réduite et on ajuste le mélange à pH par l'acide chlorhydrique N et on extrait avec 200 ml d'acétate d'éthyle On extrait à nouveau l'extrait d'acétate d'éthyle avec une solution aqueuse à 2 % de bicarbonate de sodium et on extrait à pH 3 à nouveau par l'acétate d'éthyle. On sèche ensuite l'extrait ainsi obtenu sur sulfate de sodium anhydre3 pour obtenir 0,6 g d'acide (propionamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-propionyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 brut. F. 130-1350C (décomposition). Analyse élémentaire pour C33H41N3015S C H N S Calculé (%) 52,8 5,5 5,6 4,1 Trouvé (X) 53,1 5,7 5,1 4,0 EXEMPLE 4 On dissout 0,59 g d'acide (amino-5 carboxy-6 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hidroxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 dans 100 ml d'eau et on ajoute 50 ml d'acétone à la solution. On ajoute ensuite au melange 3,5 ml d'une solution à 30 % de chloroformiate de benzyle dans le toluène et on agite vigoureusement le melange pendant 3 h maintenu à pH 7,5-8,0.Lorsque la réaction est terminée, on élimine la presque totalité du toluène et de l'acétone et on traite le résidu de la même manière que décrit à l'exemple 3 pour obtenir 0,65 g d'acide (benzyloxycarbonamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-benzyloxycarbonyloxy cinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4. F. 155-160 C (décomposition). Analyse élémentaire pour C41H41N3O15S C H N S Calculé (%) 58,2 4,85 5,0 3,7 Trouvé (%) 58,4 4,9 4,5 3,5 EXEMPlE 5 On cultive Streptomyces viridochromogenes, souche SF-1584, en conditions aérobies dans un milieu de culture contenant 1,5 % de glycérol, 1,5 % de dextrine, 2,0 % de farinede soja et 0,15 % de carbonate de calcium à pH 7 et à 28 C pendant 65 h. On fait passer 1 litre du filtrat débarrassé du- mycélium obtenu dans la culture ci-dessus à travers une colonne contenant 100 ml de Dia ion HP-20, fabriqué par la société Mitsubishi Chemical industries Ltd. au Japon, et on lave la colonne avec de l'eau et on élue suivant un gradient de concentration avec des solutions de méthanol ayant des concentrations de. 20 A 60 % en volume.On combine puis on concentre les fractions contenant le composé désiré de formule (Il), qui sont principalement éluées avec une solution aqueuse à 40 % de méthanol (volume total 150 ml) On refroidit à 50C le concentrat ainsi obtenu et on ajoute goutte à goutte une solution de 3,0 g de chloroformiate d'éthyle dans 5 ml-d'aeétone en maintenant le pH à 7,5-8 par addition d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange pendant encore 3 h.On ajuste à pH 3,5 par HCl N le mélange de réaction résultant qui donne une réaction négative avec la ninhydrine et on extrait avec deux portions de 50 il d'acétate éthyle On extrait à nouveau les extraits combinés d'acétate d'éthyle avec 50 ml d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à pH 7,5 et on ajuste à nouveau A pH 3,0 par SC1 N, puis on extrait avec deux portions de 20 ml d'acétate d'éthyle. On déshydrate les extraits combinés sur sulfate de sodium anhydre et on sèche pour obtenir 210 mg d'acide (éthoxycarbanamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha; ;-méthoxy p-éthoxycarbonyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphène-3 carboxylique-4 brut. I1 est entendu que l'invention n'est pas limitée aux modes de mise en oeuvre préférés décrits ci-dessus à titre d'illustration et que l'homme de l'art peut y apporter diverses modifications sans toutefois s'écarter du cadre et de l'esprit de l'invention. R E V E N D I C A T I O N S 1. Nouveaux dérivés de céphamycine, caractérisés en ce qu'ils consistent en acides (acylamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (a-méthoxy p-acyloxy- cinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphEme-3 carboxyliques-4 de formule générale : dans laquelle R représente un groupe alkyle en C1-C4 qui peut être substitue par des atomes d'halogène, un groupe aryle, un groupe aryl(alkyle en C1-C4), un groupe alcoxy en C1-C4 qui peut être substitué par des atones d'halogèns, ou un groupe aryl(alcoxy en C1-C4), ledit groupe aryle étant éventuelîsient substitué par des atomes t'halogène, et leurs sels. 2. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que le groupe aryle est un groupe phényle, p-chlorophényle, benzyle, pyridyle ou thiényle. 3. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce q.1Us consistent en acide (éthoxycarbonamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-éthoxycarbonyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphène-3 carboxylique-4. 4, Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils consistent en acide (propionylamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-propionyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphène-3 carboxylique-4. 5. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils consistent en acide (benzyloxycarbonamido-5 carboxy-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-benzyloxycarbonyloxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphène-3 carboxylique-4. 6. Procédé pour la préparation des dérivés de céphamycine selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on acyle l'acide (amino-5 carboxy-5 va léramido) -7 (a-méthoxy p-hydroxycinnamoyloxyméthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 de formule générale avec un agentacylant de formule générale RCOX (III) dans laquelle R est tel que défini ci-dessus et X représente un atome d'halogène, dans un rapport molaire de 2 à 40 moles dudit agent acylant par mole du composé de formule (II) à une température inférieure à environ 50 C et à un pH dtenviron 7 à 9 en présence d'un milieu de réaction. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que ledit acide (amino-5 carboxa-5 valéramido)-7 (&alpha;-méthoxy p-hydroxycinnamoyloxy méthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 est un produit de fermentation obtenu par culture de Streptomyces viridochromogenes, souche SF-1584. 8. Procédé pour isoler d'un bouillon de culture un dérivé de céphamycine tel que défini à la revendication 1, caractérisé en ce que l'on cultive un micro-organisme capable de produire l'acide (amino-5 carboxy-5 valéramido)-7 (a-méthoxy p-hydroxycinnamoyloxymEthyl)-3 méthoxy-7 céphème-3 carboxylique-4 de formule (II) tel que défini ci-dessus dans un milieu de culture, on ajoute un agent acylant de formule RCOX (III), dans laquelle R et X sont tels que définis ci-dessus dans un rapport molaire de 2 à 40 moles dudit agentacylant par mole du composé de formule (II) à une température inférieure à environ 50 C et à un pH d'environ 7 à 9, et on extrait le produit d'acylation de formule (1) ainsi obtenu au moyen d'un solvant. 9. Nouveaux médicaments, utiles notamment comme antibiotiques, caractérisés en ce qu'ils consistent en acides (acylamido-5 carboxy-5 va léramido -7 (a-méthoxy p-a cyloxycinnamoyloxymé thyl) -3 méthoxy-7 céphème-3 carboxyliques-4 selon la revendication 1 et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.