Brevet FR2252354A1 — publié le 19750620

La présente invention a pour objet un procédé de préparation d'acide chondroitine sulfurique et de ses sels à partir de cartilages bruts. Lut acide chondroitine sulfurique est un mucopolysaccharide ayant une structure macromoléculaire par répétition d'unités disaccharides élémentaires. Lesdits mucopolysaccharides présentent en géntiral un caractère acide très marqué et sont toujours fixés solidement aux protéines. L'acide chondroitine sulfurique est une macromolecule dont l'unité disaccharidique élémentaire est la chondrosine correspondant à la formule HO HO 6 COOlI 410 NH-CO-CH3 X f NH-C0-CH3 OH H (N-acétyl-D-galactosamine? (acide D-glucuronique) dans laquelle un groupement -S03H estérifie la fonction alcoolique en position 4 pour ltisomère A et 6 pour 11 isomère C du radical de N-acétyl-D-galactosamine. On sait que 11 acide chondroitine sulfurique se trouve dans les cartilages, le collagène, dans les zones d'ossification et les os en voie de croissance où il est fortement associé aux glycoprotéines. Ces glycoprotéines sont des composés dans lesquels des molécules glucidiques sont reliées à la chaîne polypeptidique. Pour préparer. l'acide chondroitine sulfurique, il est donc nécessaire de libérer l'acide des chaî- nes protidiques. Il est connu de préparer l'acide chondroitine sulfurique soit par hydrolyse alcaline, soit par digestion enzymatique, en particulier par la papanne. On obtient par exemple 11 acide chondroitine sulfurique par hydrolyse al calife de cartilages de mammifères nettoyés et finement broyés, suivie après filtration d'une addition d'acide acétique. Le produit ainsi obtenu est additionné d'un oxyde, d'un hydroxyde ou d'un carbonate de magnésium. Ce procédé présente l'inconvénient de conduire à un mélange de chondroitine, d'acide chondroitine sulfurique et de sels de cet acide tels que les sels de magnésium. Le mélange ainsi obtenu contient également des protéines qui portaient l'acide chondroitine sulfurique, soit sous forme libre, soit encore rattachées à l'acide chondroitine sulfurique du fait que le broyage industriel conduit à une hydrolyse incomplète. D'autre part, le traitement industriel préalable consistant à nettoyer les cartilages et à les broyer finement rend ce procédé particulièrement onéreux, compliqué et peu rentable au point de vue industriel. On connaît également un traitement de l'acide chondroitine sulfurique obtenu suivant une des méthodes évoquées ci-dessus, ayant un poids moléculaire compris entre 20 000 et 50 000, par hydrolyse acide pour obtenir un produit ayant un poids moléculaire moyen compris entre 2000 et 6000. Ce procédé permettant d'obtenir une grande proportion d'acide chondroitine sulfurique à bas poids moléculaire n'entraîne pas l'élimination des matières protidiques, et fait apparaître de plus la présence de sulfate libres dans la solution. La demanderesse a découvert façon surprenante que l'on pouvait obtenir de l'acide chondroitine sulfurique par un procédé ne présentant pas les inconvénients sus-nonrmés. L'objet de la présente invention est en effet un procédé permettant d'obtenir de façon particulièrement économique et à rendement élevé à partir de cartilages bruts de l'acide chondroitine sulfurique, éventuellement utilisable sous forme de ses sels. Acide chondroitine sulfurique obtenu par le procéde objet de la présente invention présente un degré de pureté remarquable, caractérise notamment par ldabsence de protéines et d'ions sulfate . Ledit procédé permet également d'isoler sous une forme particulièrement pure, les différentes isomères A et C de 1 acide chondroitine sulfurique suivant les cartilages traités. Ledit procédé objet de l'invention comporte essentiellement une phase de traitement thermique des cartilages bruts3 une hydrolyse alcaline du produit résultant sous agitation adéquate et un traitement de finition. Le traitement de finition peut consister en une neutralisation et une précipitation ; ces deux étapes peuvent éventuellement être suivies d'un passage sur un échangeur de cations fortement acide. Ledit passage peut également se faire directement après l'hydrolyse, sans passer par la neutralisation et la preci- pitation On obtient ainsi une solution fortement acide d'acide chondroitine sulfurique d'un très haut degré de pureté, caractérisé notamment par une réaction négative au biuret et utilisable sous forme de ses sels, notamment son sel de sodium à de très fortes concentrations. On soumet dans un premier temps, suivant l'invention, des cartilages bruts à une cuisson dans l'eau. On entend par cartilages bruts des cartilages de mammifères ou de sélaciens récupérés après abattage et n'ayant subi aucun traitement préalable pour les débarrasser-de leurs graisses. La cuisson peut s'effectuer-soit sous pression atmosphérique, en portant le melange à ébullition pendant un temps compris entre environ 5 et 8 heures, soit dans un autoclave, auquel cas le mélange est soumis à une température comprise entre environ 110 et 1150C pendant une durée comprise entre 30 mn et 2 heures environ. Il est souhaitable, dans le cas d'une cuisson en autoclave, que la température ne dépasse pas sensiblement 1150C, car cela entrainerait une dégradation du produit, caractérispar une coloration du produit final et d'auto part que la température soit supérieure à environ 1100C, car une température inférieure diminue de façon sensible le rendement par llhydrolyse incomplète qui en résulte. La quantité d'eau présente dans les différentes variantes du traitement thermique doit être suffisante pour qu'après le traitement thermique et après retour du bain à température ordinaire, l'addition de soude à la concentration déterminée plus loin n'entraîne pas une température du bain supérieure à 40 - 50"C, même localement dans la masse. La cuisson se fait de préférence sans agitation pour éviter d'émulsionner les graisses provenant des cartilages bruts. Il est à noter que, selon la presente invention, il est essentiel de garder avec le cartilage traité, les eaux de traitement contenant les graisses3 les résidus ainsi que le collagène dissous qui contiennent une certaine quantité d'acide chondroitine sulfurique. En effet, le fait de conserver les eaux de traitement permet d'élever de façon sensible le rendement en acide chondroitine sulfurique. Le mélange ainsi obtenu après le traitement thermique est soumis à une hydrolyse à froid par adjonction d'une lessive de soude-. La quantité de lessive de soude ajoutée est telle qu'un poids P compté en kilos de cartilages bruts se trouve en présence d'un volume final P en litres de solution dthydro- xyde de sodium dont la concentration peut varier entre 8 et 10 %. Durant cette opération, la température ne doit pas dépasser 40 à 50"C même localement, pour éviter une dégradation du produit qui se traduirait par une coloration du produit final. L'hydrolyse se fait de préférence à la température ambiante pendant une durée d'environ 48 heures. En pratique, elle est arrêtée lorsque le liquide commence à se clarifier. On peut soumettre, si on le désire, le mélange à un test de fin d-hydrolyse consistant à prélever une certaine quantité de la solution hydrolysée qui, après neutralisation, filtration, précipitation, remise en solution du précipité et chauffage à 800C doit présenter au plus un léger louche. Pour que l'hydrolyse se fasse correctement, il est nécessaire d ! agiter la masse : cette agitation ne doit toutefois pas dépasser une certaine limite au-delà de laquelle elle entrainerait une émulsion de graisses qui se traduirait par un trouble de la masse qui s'épaissirait très rapidement. On procède de préférence à une agitation lente pendant 48 heures variant suivant le type d'agitateur utilisé. Cette hydrolyse entraîne une libération de l'2aci- de chondroitine sulfurique des chaînes protidiques auquel il est lié. On élimine de préférence, périodiquement au cours de l'hydrolyse les graisses surnageant en surface. I1 est important de ne pas continuer l'hydrolyse au-dela du stade indiqué par le test, si l'on veut obtenir des molécules d'acide chondroitine sulfurique de haut poids moléculaire et ayant une bonne définition. La solution ainsi obtenue débarrassée des graisses nageant en surface, est additionnée d'acide acétique qui amène le bain à un pH compris entre 5 et 7. Une fonction de cette neutralisation est de floculer certaines impuretés protidiques pour permettre leur élimination par filtration ultérieure. L'a- cide acétique est utilise préférentiellement aux autres acides carboxyliques, car il entraîne une bonne solubilisation des bi et tri-peptides et permet en fin de procédé du fait de la solubilité de l'acétate de sodium dans l'alcool, d'obtenir un acide chondroitine sulfurique d'une grande pureté.La solution ainsi neutralisée est filtrée avec adjonction éventuelle d'un agent de clarification et de filtration contribuant à accélerer et à parfaire la filtration. On- peut récupérer après filtration un acide chondroitine sulfurique à l'état de sel en précipitant le filtrat obtenu par adjonction d'méthanol sous agitation vive. On utilise de préférence environ 1,3 volume d'éthanol pour 1 volume de filtrat. Le mélange ainsi obtenu est abandonné dans une cuve à décantation, la phase claire surnageant est éliminée après le déport du précipité qui est isolé par réempatage par de l'éthanol, lavage et essorage sur buchner. I1 est possible de faire précéder la phase de precipitation décrite ci-dessus par une concentration du filtrat environ 2,5 fois à température voisine de 50 C, le concentrat ainsi obtenu étant soumis comme précédemment à la précipitation, décantation, réempatage, lavage et essorage. L'obtention de l'acide chondroitine sulfurique est réalisée par passage sur échangeur de cations fortement acide après mise en solution à environ 10 - 12 % de l'acide chondroitine sulfurique sous forme de sel obtenu ci-dessus. Ledit passage sur échangeur cationique a pour fonction essentielle de retenir les acides aminés. L'echangeur cationique appartient de préférence au groupe à noyau sulfonique. I1 peut parfois être intéressant de faire précéder ou suivre le traitement sur échangeur cationiquedr passage sur adsorbant.Ledts adsorbantspeuvent être à base de résines diverses, par exemple à base de silicones, d'alumine, de m@g@ésie ou de kaolin, ou de charbon actif. Une variante de ce procédé consiste à faire intervenir le passage sur résine cationique fortement acide après la phase d'hydrolyse sodique, les phases intermédiaires de neutralisation et de recupération du sel d'acide chondroitine sulfurique étant dans ce cas supprimées. Il est bien évident que selon l'état des matières premières employées et les conditions opératoires, il peut s'avérer utile de répeter l'une des opérations ci-dessus. Lracide chondroitine sulfurique obtenu en solution peut être isolé sous forme de sel, après neutralisation de la solution, par précipitation au moyen d'éthanol. Le sel ainsi obtenu présente des réactions négatives à l'acide trichloracétique et à la réaction de biuret qui indique l'absence de matières protidiques dans le produit. L'étude par la spectrographie infra-rouge (figure 1) du produit obtenu montre un spectre représentant d'une façon bien marquée, les bandes caractéristiques de l'acide chondroitine sulfurique. La mesure est faite pour une concentration 1,5 mg et dans 200 mg de KBr. Les exemples suivants permettront, sans toutefois limiter l'in venfion, de mieux comprendre le procédé objet de la présente demande. EXEMPLE I 1,3 kg de cartilages bruts de trachées de boeuf sont grossièrement broyés à l'aide d'un hachoir à viande monté sans grille, de manière à obtenir des éclats ayant 2 à 3 cm de long. Les cartilages broyés sont additionnés de 980 ml d'eau et portés pendant 1 h 10 à une température de 1120C en autocuiseur. Le mélange obtenu refroidi à 28 est transvasé dans un récipient cylindrique de 5 litres en polyéthylène de 190 mm de diamètre et de 230 mm de hauteur. On ajoute au mélange, sous agitation manuelle à l'aide d'une spatule, 320 ml de lessive de soude à 40 % (poids/volume). Le mélange est maintenu à température ordinaire, environ 25 C, est agité toutes les 15 mn à la spatule pendant 2 heures. Après ce délai, l'agitation manuelle est remplacée par une agitation constante mécanique et lente de 20 tours/mn. L'agitateur utilisé est constitué par deux palettes articulées ayant une longueur dépotée de I00 mm et une hauteur de 15 mm. L'hydrolyse sodique est poursuivie à température ordinaire sous ladite agitation lente et constante pendant 48 heures. On arrête après 24 heures l'agitation pendant quelques minutes, le temps de débarrasser le liquide des magmas de graisses jaunâtres surnageant. On preléve après 48 heures, 50 ml de solution hydrolysée qu' on neutralise par l'acide acétique, à un pH de 5,8 et qu'on filtre sur filtre plissez Le filtrat est additionné de 1,3 volume d'éthanol, le précipité est recueilli par décantation ou centrifugation. Le précipité est repris par un minimum d'eau. La solution obtenue est portée à 80 C et doit être pratiquement lim pide. Au cas où ladite solution présenterait un trouble important, il serait nécssaire de prolonger lthydrolyse pendant au moins 2 - 3 heures et soumettre à nouveau la- solution à ce test. Après élimination des graisses, à la fin de l'hydrolyse, on porte l'agitation à 120 tours/mn en additionnant de l'acide acétique pur jusqu'à ce que l'on obtienne un pH de 5,75 déterminé par méthode potentiométrique. La quantité d'acide acétique ajoutée dans ce cas est de 180 ml. On additionne au mélange ainsi neutralisé 100 g de Kieselguhr en maintenant l'agitation pendant 10 mn. Le mélange obtenu est filtré sur buchner ; on on obtient un filtrat parfaitement limpide, soit environ 1980 ml qu'on additionne de 2850 ml d'éthanol sous agitation vive pendant 5 mn. Le mélange est abandonné pendant 2 heures pour permettre le dépôt du précipité. On élimine le liquide surnageant par décantation ; le précipité est repris par 250 ml d'éthanol et recueilli sur buchner. Il est lavé en trois fois par 350 ml d'éthanol au total, puis essoré. Le produit ainsi obtenu est étalé sur un plateau sous faible épaisseur (1 à 2 cm) et abandonné à temperature ambiante à Labri de l'humidité, I1 est ensuite séché en étuve ventilée à 30-400C. On obtient un sel sodique d'acide chondroitine sulfurique avec un rendement de 3,90 %,qui a les caractéristiques suivantes azote.............................. 3,9 % soufre ..... 5,8 7 dosage acidimétrique............... 94 % (indiquant la pureté de l'acide obtenu) L'identification par spectroscopie infra-rouge donne un spectre présentant les bandes caractéristiques de l'isomère A de l'acide chondroitine sulfurique (figure 2). La mesure est effectuée à une concentration de 1,5 mg dans 200 mg de KBr. EXEMPLE II On fait cuire 40 kg de trachées de boeuf dans un réacteur du type Grignard, avec agitateur à ancre, pendant 1 h 20 à 110 C. A cet effet, on fait cuire successivement 10 kg desdits cartilages avec 15 1 d'eau qui sont conservés pour les quatres opérations. Le mélange ainsi obtenu est récupéré dans une cuve de 80 x 60 x 40 cm avec une agitation à l'aide dune palme d'une longueur de 350 mm et d'une hauteur de 50 mm. La vitesse de rotation est de 60-65 tourslmn. On y additionne 9,6 1 de lessive de soude à 50 7, la température de départ étant de 290C. On soumet le tout à une hydrolyse de 48 h à température ambiante d'environ 230C. Comme précédemment les graisses sont éliminées après 24 et 48 heures. On soumet comme dans l'exemple I le mélange hydrolysé au test de fin dthydroly- se. On obtient ainsi 70 1 de solution qu'on neutralise sous agitation par 6,2 1 d'acide acétique. Le mélange est porté à un pH de 5,70. La neutralisation est suivie d'une addition d'un agent clarifiant de préférence 1,6 kg de Kieselguhr. La solution ainsi clarifiée est agitée et filtrée sur buchner avec toile ; on récupère 55 1 de filtrat à un pH de 6,20. On prélève 49 1 de filtrat à un pH de 6,20 contenant 23 % d'extrait sec et on le fait passer en concentrateur maintenu à 50 C pour obtenir 25 1 de concentrat. Le pH après la concentration est de 6,20 ; le pourcentage d'extrait sec est de 39 %. Le pH est ramené à 5,60 par addition de 200 ml d'acide acétique, la solution ainsi obtenue est additionnée de 32,5 1 d'éthanol, le précipité récupéré par décantation est enrichi en alcool, lavé et essoré sur buchner. On obtient ainsi 1,354 kg d'acide chondroitine sulfurique sodique. Le rendement est de 3,80 %. On prélève 6 1 du filtrat en ramenant le pH à 5,80 par l'acide acétique et on additionne 7,8 1 d'alcool. Le précipité résultant est recueilli par décantation, lavé et essoré sur buchner. On constate un rendement de 3,42%. On récupère ainsi au total 1,503 kg d'acide chondroitine sulfurique sodique. Le rendement de cette opération est de 3,75 %. Le produit obtenu a les caractéristiques suivantes azote . . 3,16 7. soufre 5,80 % dosage acidimétrique................. 91 % Le spectre infra-rouge présente les bandes caractéristiques de l'isomère A de 11 acide chondroitine sulfurique. On met en solution 600 g du produit ainsi obtenu dans 4 1 d'eau désionisée. On ajoute 2 g/100 ml de charbon actif et 4 g/100 ml d'Attapulgite. L'Attapulgite utilisé est un adsorbant contenant essentiellement SiO2, A1203, MgO et F203. On abandonne le mélange obtenu pendant 3 heures sous agitation, puis on filtre sur buchner par un filtre épais en cellulose. Le filtrat ainsi obtenu est parfaitement limpide et on le fait passer sur une résine échangeuse d'ions appartenant à un groupe à noyau sulfonique. On utilise en particulier 1' "Amberlite" IR 120 de forme H +. L'éluat est additionné de kaolin à raison de 6g/100ml et de charbon actif à raison de3 R 0 ml. On poursuit l'agitation pendant deux heures ; on filtre et on fait repasser le filtrat une dernière fois sur ledit échangeur de cations forts. La solution est neutralisée par une lessive de soude à un pH de 6,5. la solution ainsi obtenue est additionnée de 1,1 g/100 ml de chlorure de sodium, puis précipitée par 1,3 volume d'alcool. Le produit obtenu est séché sous vide à température ordinaire ; on obtient après purification 498 g de sel sodique d'acide chondroitine sulfurique, soit un rendement de la purification de 83 %.Le produit ainsi obtenu est blanc, inodore, insipide, très soluble dans l'eau, insoluble dans l'acétone et le chloroforme et il a les caractéristiques suivantes - coloration de la solution aqueuse a 5 Z à 420 nm sous une épaisseur de 10 cm : 0,35 - pH de a solution aqueuse à 1 % : 6,5 - viscosité spécifique : par viscosimètre Ostwald temps témoins viscosité spécifique (200 C) . 11 secondes : 0,41 . 6,5 secondes : 0,38 @ 15 secondes : 0,43 @ 18 secondes : 0,44. La viscosité spécifique est obtenue par la formule : t - to to où t est le temps témoin d'écoulement de l'acide chondroitine sulfurique à 1 % dans le sérum physiologique, et to, le temps d'écoulement d'une solution de sérum physiologique à 0,9 % dans l'eau. - sucres réducteurs : Recherche : Négative - sulfates libres : Recherche : Négative - ions calcium : Recherche : Négative - métaux lourds : Recherche : Négative - protéines @ réaction à l'acide trichloracétique : Négative @ réaction au biuret : Négative - poids moléculaire moyen : 30 000 - azote : 2,7 7 - soufre : 6,35 % - pouvoir rotatoire :-31,50 Le spectre infra-rouge présente des bandes caractéristiques de l'acide chondroitine sulfurique A. (figure 1). EXEMPLE III 49,8 kg de larynx de boeuf sont portés à ébullition pendant 6 heures avec agitation manuelle à la rame. Après ébullition, les 63,4 kg du mélange cartilages plus eau sont additionnés de 64 1 de soude à 10 7. sous forme de paillettes d'une pureté de 85 %. La température de début d'hydrolyse est de 23 C. Le mélange est mis dans une cuve de polyéthylène rectangulaire de 80 x 60 x 40 cm. L'agitation est effectuée par un agitateur à palettes ayant une dimension de 350 mm de longueur et de 60 mm de hauteur, la vitesse étant de 60 tours/mn. On soumet le mélange au test de fin d'hydrolyse, après 48 heures les graisses n'étant pas enlevées. Le volume du mélange après hydrolyse est de 120 1. On y ajoute 9,6 kg de Kieselguhr après avoir ramené le pH à 5,70 avec 9,2 1 d'acide acétique. Le mélange ainsi obtenu est filtré sur buchner avec toile. On obtient 100 1 de liquide très légèrement trouble ayant un pli de 6,40 et 16 % d'extrait sec mesuré au réfractomètre. On concentre à 30 1 sous vide à 500C. Le pH du concentrat obtenu est de 6,80 et If extrait sec de 44 %. On ajoute 1 litre d'acide acétique pour amener le pH à 5,9 et on verse la solution dans 40 litres d'alcool. Le précipité est récupéré après decantation comme dans l'exemple 1 et 2. On constate un rendement de 1,91 %. Le produit obtenu a les caractéristiques suivantes azote .............................. 4,4 % soufre 5,5 % dosage acidimètrique 91 % Le spectre infra-rouge présente les bandes caractéristiques de l'isomère A de l'acide chondroitine sulfurique. EXEMPLE IV On fait cuire à l'autoclave 8 kg d'oreilles de porc pendant 1 h à 1120C. On refroidit à 250C ; on hydrolyse la solution par adjonction de lessive de soude à 50 % q. s., c'est-à-dire 8,3 1 de soude à 10 %. L'hydrolyse est réalisée dans un réacteur du type Grignard par un agitateur à ancre à 60 tours/mn. Après hydrolyse, vérifiée par le test décrit dans l'exemple I, on obtient 17 1 de mélange qu'on additionne de 1,360 kg de Kieselguhr, après avoir amené le pH à 5,70 par 1,2 1 d'acide acétique pur. On récupère après filtration 15 1 de solution à un pH de 5,85 et un extrait sec de 17,5 %. On précipite dans 20 1 d'alcool et on récupère comme dans l'exemple I, 112 g d'acide chondroitine sulfurique sodique. On constate donc un rendement de 1,40 % Le produit obtenu a les caractéristiques suivantes azote 4,10 soufre................................. 5,50 dosage acidimètrique 90 Le spectre infra-rouge indique les bandes caractéYistiques de l'iso- mère A de acide chondroitine sulfurique. EXEMPLE V On porte à ébullition pendant 6 heures, 75 kg de larynx de porc. Le mélange obtenu a un poids après ébullition de 136 kg. L'hydrolyse est effectuée dans une cuve de polyéthylène rectangulaire ayant les dimensions de 80 x 60 x 40 cm sous une@agitation par palettes ayant les dimensions 350x 60 mm et une vitesse de 60 tours/mn. La température de départ est de 32"C. On constate après hydrolyse un volume de 135 1 auquel on additionne 10,5 kg de Kieselguhr après avoir amené le pH à 5,70 par 10,5 1 d'acide acétique. On filtre sur buchner avec une toile filtrante ; le pH du filtrat est de 5,9 et extrait sec de 17,5 X mesuré au réfractomètre. On concentre à 43 1 dans un concentrateur à 50 C sous vide et on obtient un extrait sec de 34,5 % par mesure au réfractomètre.On amène le pH à 5,90 avec de l'acide acétique. La solution est ensuite additionnée de 57 1 d'éthanol et récu pér@e suivant les méthodes décrites dans l'exemple I. On obtient ainsi un produit avec un rendement de 1,75 Z qui a les caractéristiques suivantes azote............................ 4% soufre 5 5 % dosage acidimètrique............. 91 % Le produit presente un spectre infra-rouge caractéristique de l'i- somère A de l'acide chondroitine sulfurique. EXEMPLE VU On soumet 10 kg de larynx de boeuf à une cuisson sous agitation lente dans un réacteur du type Grignard pendant 1 h 10 à 115 C dans 8 1 dteau. Après refroidissement à 360C, on additionne 2 1 de soude à 50 % Le mélange est agité pendant 48 heures dans l'autoclave par un agitateur à ancre à 60 tours/mn. Le pH est ramené à 5,80 par 1,80 1 d'acide acétique. Le mélange ainsi neutralisé est additionné de 60 g/l de Kieselguhr. On filtre et on obtient 10,9 1 de filtrat à un pH de 5,80 présentant un extrait sec de 17,5 mesuré au réfractomètre. On précipite le filtrat dans 14 1 d'alcool et on récupère comme dans l'exemple I, 183 g de produit. On constate un rendement de 1,83 Z. Le produit obtenu a les caractéristiques suivantes azote....................... 3,80 % soufre...................... 5,80 % dosage acidimètrique........ 93 %. Le spectre infra-rouge présente les bandes caractéristiques de 1'iso mère A de l'acide chondroitine sulfurique. EXEMPLE VII 400 g d'acide chondroitine sulfurique sodique obtenus suivant l'exemple I sont mis en solution dans 4 1 d'eau désionisée et additionnée de 2 g/100 ml de charbon actif et de 5 g/100 ml de "Pharmasorb" contenant 67 Z de Si02, 12,5 % de A1203, 11 % de MgO, 4 % de Fe2O3, 2,5 Z de CaO et 3,0 Z divers. On laisse sous agitation pendant trois heures puis on filtre sur filtre épais en cellulose. Le filtrat est passé sur 50 W X 4 DOWEX ; le mélange est neutralisé par de la lessive de soude à un pH de 6,7 puis précipité en présence de 1,5 X de chlorure de sodium par 1,3 volume d'éthanol. Le précipité déposé, la phase surnageante est éliminée par décantation. Le précipité redissout dans 500 cm3 d'eau est reprécipité par 1,5 volume d'alcool. Le précipité ainsi obtenu est recueilli par décantation sur buchner, lavé, essoré et séché sous vide à température ambiante. La phase de purification a un rendement de 88 %. Le sel de sodium de l'acide chondroitine sulfurique ainsi obtenu présente un aspect banc, inodore, insipide, très soluble dans l'eau, insoluble dans l'acétone et le chloroforme.Les autres caractéristiques sont les suivantes : - coloration de la solution aqueuse à 5 % à 420 nm sous une épaisseur de 10 cm : 0,42 - p11 de la solution aqueuse à 1% : 6,5 - viscosité spécifique : par viscosimètre Ostwald temps témoin viscosité spécifique (à 20 C) . 11 secondes : 0,41 6,5 secondes @ 0,39 . 15 secondes : 0,42 . 18 secondes : 0,44 - sucres réducteurs : recherche : négative - sulfates libres : recherche : négative - ions calcium : recherche : négative - métaux lourds: recherche : négative. - protéines : réaction à l'acide trichloracétique ; négative , réaction de biuret : négative - poids moléculaire moyen ; 27 000 - azote : 2,54 Z - soufre : 6,42 Z - pouvoir rotatoire : -320 I1 est bien entendu que l'on peut apporter aux modes de réalisa- tion qui viennent d'être décrits, divers changements, perfectionnements ou additions, que l'on peut remplacer certains éléments equivalents sans altérer pour cela l'économie générale de l'invention. On pourra soumettre en particulier d'autres cartilages que ceux utilisés dans les exemples décrits ci-dessus au traitement objet de l'inven- tion pour obtenir des isomères différents, les différents traitements des exemples 1,3,4,5, 6 pouvant être suivis naturellement d'une phase de purification telle que décrite dans les exemples 2 et 7. REVENDICATIONS 1. Procédé pour la préparation d'acide chondroitine sulfurique et de ses sels, caractérisé par le fait qu'il consiste à traiter thermiquement en milieu aqueux des cartilages bruts, à hydrolyser le produit résultant, et à soumettre le bain à un traitement de finition. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le traitement de finition consiste à neutraliser le bain par addition d'acide acétique et à précipiter par un alcool. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérise par le fait que la précipitation par un alcool est suivie d'une phase de purification consistant à mettre le produit obtenu en solution'et à faire passer ladite solution sur un échangeur cationique fortement acide pour aboutir à un acide chondroitine sulfurique en solution. 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait-que le traitement de finition consiste à faire passer la solution hydrolysée sur un échangeur cationique fortement acide pour aboutir à un acide chondroitine sulfurique en solution. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que le traitement thermique est réalisé dans une quantité d'eau suffisante pour qu'après refroidissement, l'addition de soude en vue de l'hydroly- se ne conduise pas à une température du bain supérieure à 40-500C. 6. Procédé suivant l'une quelconque des revendication 1 à 5, caractérisé par le fait que le traitement thermique s'effectue sous pression atmosphérique en portant le mélange à ébullition. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé par le fait que le mélange est porté à ébullition pendant une durée comprise entre 5 et 8 heures. 8. Procédé selon les revendications 1 à 5, caractérisé par le fait que le traitement thermique s'effectue dans un autoclave à une température comprise entre 110 C et 115 C. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé par le fait que le traitement thermique est effectué pendant une durée comprise entre 30 mn et 2 heures. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérise. par le fait que l'on garde les eaux de traitement. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé par le fait que l'hydrolyse se fait par adjonction aux ea-x de traitement conte..nrt les cartilages, de lessive de soude à une concentration de 8 à 10 Z sous agita tio-.i lente de telle façon que la température du bain ne dépasse pas même localement 40 à 500C. 12. Procéda selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé par le fait que l'hydrolyse se fait à température ambiante. 13. Procédé selon l'une quelconque. des revendications 2, 3 et 5 à 12, carac frise par le fait que l'on porte le pH par addition d'acide acétique a une valeur comprise entre 5 et 7 sous agitation lente. 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé par le fait que le pH est porté à une valeur comprise entre 5,4 et 5,9. 15. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2, 3 et 5 à 12, caractérisé par le fait que la solution est neutralisée et filtrée en présence d'un agent clarifiant. 16. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 a 15, caractérisé par le fait que le passage sur l'échangeur à cations fortement acide est précédé etlou suivi d'un passage sur adsorbant, 17. Procédé selon la revendication 16, caractérisé par le fait que les adsorbants utilisés sont du kaolin ou du charbon actif. 18. Procédé selon la revendication 17, caractérisé par le fait que l'on utilise 4 à 10 % de kaolin et 2 à 5 % de charbon actif. 19. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 à 18, caractérisé par le fait que l'échangeur cationique appartient au groupe à noyau sulfonique. 20.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 à 19, caractérisé par le fait quton isole après neutralisation de l'acide chondroitine sulfurique, un sel d'acide chondroitine sulfurique par précipitation à raide d'éthanol 21. Produit obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 20, caractérisé par le fait qu'il ne contient pas de protéines, ni'de sulfates libres.