Brevet FR2284614A1 — publié le 19760409

Les flavones et flavonols sont des composés hydroxyaromatiques dérivés des chromones et le plus souvent présents dans les plantes sous forme de glucosides, le sucre pouvant être directement rattaché au carbone (C glucoside du lespécapitoside), ou plus souvent par une fonction éther sur les hydroxyles phénoliques (0 dérivé de la rutine par exemple). Ces corps ont des propriétés physiologiques intéressantes : certains diminuant la fragilité capillaire et présentant de ce fait une activité vitaminique P, ou bien ayant une action sur le rhume de cerveau, d'autres agissant directement sur le taux d'urée et de cholestérol (lespécapitoside). L'extraction de ces composés se heurte à un certain nombre de difficultés dues à leur instabilité en milieu très acide ou alcalin et à la grande variété de composés mal définis présents dans les végétaux, ce qui amène fréquemment des coprécipitations avec des produits indésirables. I1 faut normalement employer une cascade de solvants telse le butanol, l'éther, l'acétate d'éthyle, qui sont souvent diNiciles à éliminer, et plusieurs stades de purification sont nécessaires. Le rendement global de l'opération est faible, donc industriellement peu intéressant. Le procédé selon l'invention offre l'avantage de n1 employer que des corps atoxiques et facilement éliminables, d'8tre rapide et de donner un rendement global de l'ordre de 75%, tout en fournissant un produit sous un bon état de pureté. Ce procédé consiste en une adsorption sur une poudre de polyamide, suivie d'une éluion sélective utilisant l'méthanol à gO-99,9' comme agent d'extraction. Les polyamides peuvent titre - les polycaprolactames, - les polyhexaméthylènes adipamides, - les polyhexaméthylènes suc ci namides, - leurs mélanges ou interpolymères, mais cette liste n'est pas limitative, car il intervient comme critères d'activité le G.F. : R-CO-NH-R' et l'insolubilité de l'adsorbant dans les conditions habituelles d'emploi. I1 faut que ces polyamides soient présentés en poudre ou fibrilles aussi fines que possible, quitte à améliorer la porosité de la couche formée au moyen de 10 à 15% de poudre de diatomées. Ceci est très important car la surface d'adsorption conditionne le rendement de l'opération. On utilise ces polyamides sous forme de lit adsorbant plus ou moins épais, la meilleure méthode étant la colonne du genre échangeur d'ions, avec un rapport hauteur/diamètre voisin de 7. On disperse préalablement la poudre de polyamide dans de ltéthanol fort, en évitant la présence de bulles, puis on remplit soigneusement la colonne, en s'aidant éventuellement du vide et en éliminant l'alcool en excès. On lave ensuite le polyamide avec 5 à 10 parties d'éthanol fort (90-99,90) de façon à éliminer les particules colloidales et à activer les sites récepteurs. On fait ensuite passer la solution aqueuse ou hydroalcoolique faible de l'extrait de plantes, contenant les flavones, ceci après l'avoir filtrée et avoir vérifié que le pH est compris entre 3,5 et 6,5. On arrtte le passage lorsque la zone pigmentée qui se forme sur la colonne de polyamide atteint la moitié aux 2/3 environ de la hauteur totale. On lave éventuellement à l'eau pure en quantité suffisante. L'élution se fait au moyen d'aleool fort 90-99,9 , éventuellement chauffé. Cet alcool commence par refouler l'eau d'imbibition des polyamides, puis passe avec une coloration jaune orangée, le produit en solution donnant toutes les réactions caractéristiques des composés flavoniques. On arrête le passage de l'alcool lorsque la coloration jaune orangée s'affadit fortement et avant le passage des tanins qui présentent une coloration brun rouge. I1 su ffl t d'évaporer la solution alcoolique, de préférence sous pression réduite,pour obtenir les composés flavoniques dans un état de bonne pureté, et ceci avec un rendement de 75 à 85% par rapport aux doses existant dans l'extrait aqueux de départ. Les exemples qui vont suivre et qui n'ont aucun caractère limitatif, feront bien comprendre comment l'invention peut Xetre mise en pratique. Exemple I - Isolement des flavones et du lespécapitoside à partir de teinture de lespedeza capitata. 40 litres de teinture alcoolique sont évaporés sous pression réduite jusqu'à ce que la totalité de l'alcool soit chassée; il reste 5 à 6 litres de solution aqueuse que l'on dilue avec de l'eau de telle façon que le volume final de la solution soit de 40 litres. On oontrôle le pH de cette solution qui doit entre compris entre 4 et 6,5, mais de préférence autour de pH 6. Après un délai de ? heures nécessaire à la formation d'un précipité d'impuretés que l'on élimine par filtration, la solution est prête pour l'opération suivante, à savoir l'adsorption sur colonne. On met 4 kg de polyamide Macherey Nagel de granulo métrite inférieure à 160 dans 10 à 20 litres d'éthanol à 90-99,9 , sous bonne agitation mais en évitant la formation de bulles. On prépare une colonne genre échangeur d'ions de 1 g de hauteur sur 150 mm de diamètre à partir de cette supension, en éliminant l'excès d'alcool, au besoin en s'aidant du videz On lave la colonne de polyamide, qui doit être aussi homogène que possible, avec 20 à 40 litres d'éthanol fort à 90-99,9 pour éliminer les particules colloïdales de polyamide et activer les sites récepteurs. On fait alors passer sur la colonne la solution aqueuse de flavones précédemment préparée, enréglant le débit de 500 ml à 1 litre/minute. Normalement, la zone pigmentée s'étend à la moitié de la colonne lorsque toute la solution est passée. I1 suffit alors de faire passer dans les mêmes conditions 40 litres d'éthanol à 90-99,9 pour obtenir le récupérat des flavônes adsorbés en même temps que d'autres pigments qui, eux, restent fixés sur la colonne. L'éthanol passe coloré en jaune orangé, cette solution donnant toutes les réactions caractéristiques des composés flavoniques. Il suffit d'évaporer l'éthanol sous pression réduite, pour obtenir les composés flavoniques à l'état de grande pureté. Exemple Il- Isolement des dérivés C glucoses des flavones à partir d'un extrait aqueux concentré à l'état sec ou piteux, ou d'un résidu de filtration. A la température du laboratoire, on disperse 4 L de ptte épaisse contenant les flavones dans 20 litres d'acide acétique à 10%. On neutralise partiellement par un alcali, par exemple par 1 litre de lessive de soude, le pH de la solution étant de 4 environ. On filtre cette solution, puis on opère comme dans l'exemple I en faisant passer lentement le liquide sur une colonne de polyamide activée comme décrit et en arrêtant le passage lorsque la zone pigmentée s'étend de la moitié aux 2/3 de la colonne. On lave alors avec 20 litres d'eau pure jusqu'à élimination des dernières traces d'acide acétique, puis on élue avec de l'alcool fort : 20 à 40 litres, en arrêtant la récupération lorsque 1'alcool commence à se colorer en brun rouge, signalant la présence de pigments ou de tanins nuisibles. Il sufflt d'évaporer la fraction alcoolique contenant les flavones pour les obtenir à l'état pur. Ce dernier procédé s'applique particulièrement aux dérivés C glucosés (lespécapitoside, vitexine, scoparine) car ceux-ci sont très résistants à l'hydrolyse acide; b condition d'opérer rapidement et à température suffisamment basse, on peut espérer également des rendements intéressants à partir des dérivés 0 glucosés. REVENDICATIONS 1.- Procédé d'isolement des flavones et de leurs glucosides à partir d'extraits végétaux, consistant a) à solubiliser ces extraits végétaux en milieux aqueux en ajustant le pH final qui doit être compris entre 3,5 et 6,5 au moyen d'un agent alcalin; b) à faire passer cette solution sur une poudre fine de polymères répondant à la forme générale (R-CO-NH-R')n R et R' étant des radicaux aliphatiques ou aromatiques à nombre de carbone compris entre 2 et 10 et n étant suffisamment grand pour que soit assurée 1'insolubilité de ces polymères dans les solvants mis en oeuvre par le procédé; c) à récupérer les composés flavoniques dans le dernier temps par simple contact avec de l'alcool fort à 90-99,90 qui solubilise sélectivement ces composés. 2.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'on favorise la solubilisation des extraits végétaux à l'aide d'acide acétique. ).- Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé par le fait que la poudre de polymères est utilisée aussi fine que possible. 4. - Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que la poudre de polymères est préalablement activée par un lavage soigneux à l'alcool fort.