Brevet FR2274314A1 — publié le 19760109

I1 est parfois difficile d'obtenir une immunité vaccinale suffisante contre les maladies virales. Les vaccins viraux, purifiés ou non, sans adjuvant confèrent une faible protection. L'immunité est encore plus faible s'il s'agit d'un vaccin préparé à partir d'une souche hétérologue. C'est le cas du vaccin contre la myxomatose du lapin, préparé avec le virus du fibrome de Shope. La recherche d'un bon adjuvant de l'immunité nous a conduit à utiliser le BCG dans nos essais de mise au point de vaccins viraux à usage vétérinaire. Le bacille de PALMETTE et GUERIN, seul ou associé a déjà été expérimenté chez l'homme pour combattre la tuberculose. Lors d'associations avec divers vaccins viraux, le vaccin B.C.G. et ces vaccins étaient alors injectés séparément en des points différents du corps. Les résultats de nos recherches prouvent la grande activité du BCG lorsqu'on le mélange aux préparations destinées à la prévention de la myxomatose du lapin et d'autres viroses. Le bacille Calmette-Guérin adjuvé au virus du fibrome de Shope ou d'autres virus vivants ou tués augmente chez l'animal qui reçoit ces pré parations vaccinales, le taux d'anticorps, et le protège contre l'infection virulente. I. AUGMENTATION DU POUVOIR IMMUNISANT DU VIRUS DE SHOPE A L'REGARD DE LA MYXOMATOSE DU LAPIN. A lrissue de trois séries d'expérimentations, nous sommes arrivés à conclure à l'augmentation de pouvoir immunisant du virus de Shope par 12 adjuvant BCG. a) La première, révèle une augmentation importante de la réaction vaccinale par rapport aux témoins Six des six lapins ayant reçu par la voie intradermique, dans un seul point, un mélange de i 000 DI 50 de virus du fibrome de Shope (soit une dose de vaccin) et du BCG (9 x 106 germes) ont présenté des réactions locales nettement plus importantes que celles des témoins (tableau I) Vaccinés : nodules de 50/15 mm à 65/50 mm de diamètre. Témoins BCG : pas de nodules. Témoins fibrome de Shope (sans adjuvant) : nodules de 5/mm à io/io mm de diamètre. TABLEAU I REACTION LOCALE EN MM CHEZ LES LAPINS VACCINES PAR VOIE INTRA DERMIQUE Lapin Virus du fibrome de BCG Virus du fibrome de Shope 1000 DI 50+BCG I Shope 1000 DI 50 non adjuvé i 50/15 0 5/5 2 50/42 0 5/9 3 50/43 O 8/6 4 50/45 0 iO/8 5 60/50 O iO/9 6 65/50 0 b) La deuxième expérimentation, révèle, en dehors d'une forte réaction vaccinale locale, une augmentation de la résistance des animaux à l'action du virus virulent de Sanarelli. Alors que le virus de Shope utilisé sans adjuvant ne confère au lapin qutune faible protection (moins de 30% des animaux vaccinés à laide drune dose soit 1000 DI 50 résistent à l'inoculation infectante, par la voie intra-palpébrale, de 100 à 1000 DI 50 du virus de Sanarelli) l'association virus de Shope mélangé avec BCG confère une protection de 100% (six lapins sur six résistent à l'inoculation infectante par la voie intra - palpébrale de 1000 DI 50 du virus de Sanarelli) (tableau II) TABLEAU II Résultats dtinoculation d'épreuve, chez les lapins vaccinés avec le vaccin contre la myxomatose (1000 DI 50 virus du fibrome de Shope par dose) aduvé de BCG (9 x 106 germes Réac. locale Animaux (nodules) Mortalité Protection Lapins % Lapins % Lapins Vaccinés 2 33 0 0 6 100 Témoins 6 100 6 100 0 0 c) La troisième expérimentation, révèle une augmentation de la réactivité du virus de fibrome de Shope administré à faible dose (1OQ DI 50) en présence du BCG. Le virus du fibrome de Shope mélangé au BCG se multiplie plus facilement, le nodule vaccinal est plus grand et la résistance de l'animal à à l'égard du virus virulent est plus élevée. Réaction vaccinale Sept des dix lapins (70%) vaccinés avec du vaccin adjuvé de BCG ont présenté des réactions vaccinales importantes. Sept des dix lapins (70%) vaccinés avec du vaccin non adjuvé ont présenté des réactions post-vaccinales légères. Dix des dix lapins vaccinés avec BCG ntont présenté aucune réaction locale (tableau III). L'inoculation d2épreuve a été exécutée 21 jours après la vaccination, par la voie intra-palpébrale, avec 100 DI 50 du virus virulent de SanarelliO Résultat drinoculation d'épreuve Sur dix lapins vaccinés avec la préparation virus de Shope et BCG, quatre (40%) ont été atteints de myxomatose généralisée mais trois d'entre eux ont manifesté une régression de la maladie ainsi neuf des dix lapins (90%) ont survécu, Sur dix lapins vaccinés avec la préparation sans adjuvant, neuf (90%) ont été atteints de myxomatose généralisée et un seul d'entre eux (10%) a survécu. Tous les lapins témoins (dix sur dix) payant reçu que le BCG, ont succombé à l'inoculation d'épreuve ainsi que la totalité (dix sur dix) des lapins témoins non vaccinés (100 %) la mort est intervenue dans un délai de li à 13 jours après l'inoeulation d'épreuve (tableau III). L'inoculation d'épreuve a confirmé la grande activité de la préparation avec adjuvant par rapport à la préparation sans adjuvant. Des expérimentations similaires effectuées avec desvaccins viraux vivants destinés à combattre les maladies infectieuses chez lfhomme ont confirmé les résultats cités précédemment, TABLEAU III Résultat de la vaccination et de l'inoculation dpépreuve des lapins vaccinés avec (îoo DI ~60) virus du fibrome de Shope Réaction locale Resultat après l'épreuve vaccinale Résultant après e Vaccin Lapins Généralisation Survivants réagissants % de la maladie Lapins % Lapins % V.contre la myxomatose 7 70 4 40 9 90 adjuvé de BCG V.contre la maxymatose 7 70 9 90 1 10 non adjuvé BCG O O 10 100 O O Témoins - - 10 100 O O II. AUGMENTATION DU POUVOIR IMMUNISANT DES VACCINS TUES a) Le vaccin tué contre le coryza du chat, non adjuvé, confère une faible immunité. Ce vaccin associé au BCG possède un pouvoir immunisant supérieur. Chez les lapins vaccinés avec ce mélange les titres d'anticorps neutralisants sont toujours supérieurs à ceux que l'on constate chez les lapins auxquels on injecte du vaccin sans adjuvant. Ainsi, chez les lapins vaccinés à deux reprises à 12 jours dtintsrvalle avec i dose de vaccin inactivé, adjuvé, la séro-neutralisation est positive 21 jours après la 2ème inoculation, à la dilution de 1/32 si cette séroneutralisation est effectuée en présence de 100 DCT 50 de virus. Alors que chez les lapins vaccinés dans les mêmes conditions mais avec du vaccin sans adjuvant, la séro-neutralisation n'est positive qu'à la dilution de 1/8. b) Des expérimentations similaires effectuées avec du vaccin tué trivalent destiné à combattre les maladies infectieuses du chat (Leucopénie, Rhinotracheite et Corysa) ont confirmé les résultats mentionnés ci-dessus. Le taux d'anticorps neutralisants chez les lapins vaccinés avec du vaccin contenant le B.C.G. a triplé par rapport à celui des animaux vaccinés avec du vaccin sans adjuvant. Des expérimentations similaires effectuées avec des vaccins inactivés destinés à combattre les maladies infectieuses chez l'homme ont confirmé les résultats mentionnés ci-dessus. Les anticorps neutralisants ont triplé dans le cas de vaccins additionnés de B.C.G. par rapport aux vaccins non adjuvés. REVENDICATION vaccin constitué par un mélange de BCG germes vivants avec des vaccins viraux vivants, atténués ou inactivés et d'anatoxines. Les vaccins sont administrés en une seule fois en vue d'instaurer une prophylaxie efficace chez l'homme et chez l'animal.