Brevet FR2269350A1 — publié le 19751128

La présente invention concerne un produit nouveau, nptamment la 6 &alpha; - méthylcyclohexano (1', 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) prégn - 4- en - 3,20 - donne, son procédé de préparation et ses applications. Conformément à l'invention, la 66- méthylcyclohexano (1', 2' ; 16&alpha;, 17 17) prégn - 4 - en - 3,20 - dione répond à la formule suivante : CE3 CO I 13 0+ CH3 lie nouveau produit se présente sous forme d'une poudre blanche cristalline, inodore, à point de fusion dans l'acétate d'éthyle de 175 à 178 C. a solubilité dans le chloroforme, le chlorure de méthylène ou l'acétone est bonze; il est moyennement soluble dans l'alcool ou dans l'éther et insoluble dans les hydrocarbures ou l'eau. lie composé de l'invention possède une activité progestino- gène et trouve des applications dans la pratique médicinale en tant que principe actif de la préparation d'hormones à action contraceptive, ainsi que pour le traitement des cas d1insuf- fisance fonctionnelle du corps jaune (stérilité, foetus prématuré ou analogues, etc.). La préparation hormonale contraceptive contenant un composant oestrogène renferme, conformément à l'invention, la 6oG- méthylcyclohexano (1', 2'?; 16&alpha;, 17&alpha;) prégn - 4 - en - 3,20 dione en tant que principe actif. La préparation hormonale contraceptive proposée contient à titre de principe actif la 6t - méthylcyclohexano (1', 2' 16 &alpha;, 17 &alpha;) prégn - 4 - en - ),20 - dione, un composant oestrogène, à savoir le mestranol à un rapport de 50:1 en un excipient pharmaceutique pour comprimés. Une telle prépration présente une activité vontraceptive supérieure à celle des contraceptifs stéroïdiques connus et utilisables, tels qbe le mégestranol. Les essais sur 36 rats ont montré que la préparation proposée donne un effet contraceptif à 100 p. 100 (P Cn a étudié également l'activité progestinogène du principe actif selon l'invention en comparaison avec l'acétate de mégestrol. A l'aide du test de Clauberg et en tenant compte de l'indice de Mc. Phail, on a constaté que la préparation indiquée a une activité progestinogène plus élevée que celle de l'acétate de mégestrol lors de l'administration subcutanée. De ce fait, le poids de l'utérus chez les lapines impubères au cours de l'administration du composant progestinogène selon l'invention, par voie subcutanée à une dose de 0,5 mg/kg, était de 4570+ 493 mg/kg (indice de Mc. Phail était de 3,5 à 4,0) et il ne constituait que 2726+ 191 mg/kg (l'indice de Mc. Phail était de 3,9) pendant l'administration de l'acétate de mégestrol par la même voie et à une dose identique. La préparation dé l'invention exerce également une action progestinogene marquée lors de l'administration par voie orale. Le poids de l'utérus chez les lapines impubères traitées par cette préparation était de 2100 kg/kg (indice de Mc. Phail = 3,0), chez les témoins il était de 682 mg/kg, P0,05 (indice de Mc. Phail = 0). La préparation proposée peut être utilisée non seulement pour la contraception mais aussi pour le traitement de l'insuffisance fonctionnelle du corps jaune. La préparation proposée est douée d'une propriété supérieure à celle de l'acétate de mégestrol (d'après le test Corner-Allen) de conserver les blastocytes chez les lapines ovariectomisées. Au cours de l'administration de la préparation progestinogène nouvelle par voie subcutanée il se conserve 92% de blastocytes (P L'étude du mécanisme de l'action contraceptive de la préparation en question montre que la préparation prolonge d'une façon insignifiante le cycle oestral chez le rat (de 0,5 à 0,8 j) pour le compte de la phase de dioestrus en conservant toutes les phases et le caractère cyclique du poids de l'utérus ce qui la distingue avantageusement du mégestranol. La préparation proposée provoque l'inhibition de l'activité de l'ovaire comme en témoigne la diminution du poids de l'ovaire dans le stade de préoestrus (de 39+3,6 mg/100 g de poids à 27+1,9 mg/100 g P L'influence de la préparation proposée sur l'activité gonadotrope de l'hypophyse est illustrée sur le tableau cidessous. Phase de Hormone lutéinisante Lots de rats cycle g/hypo- g/100 ml de physe plasma Témoins dioestrus 5,3 26 préoestrus 27,8 18 oestrus 0,52 il Préparation dioestrus 4,28 32,3 proposée préoestrus # 4,9 P 0,05 oestrus # 5,4 P 0,05 # 2,5 P 0,05 1O,0 Il est certain que l'activité folliculostimulante de l'hypophyse n'a pas été modifiée. On a étudié l'influence de la préparation proposée sur le niveau de médiateur de la noradrénaline dans l'hypothalamus. Administrée par voie orale chez les rats-femelles à une dose contraceptive pendant 14 jours, la préparation provoque un abaissement du niveau de noradrénaline. De ce fait, la téneur en noradrénaline de l'hypothalamus chez les animaux intacts (12) était de 1,24+0,12 g/g de tissu tandis que chez les animaux (6) traités par la préparation de l'invention, elle était de C,89-0,08 ,u g/g (P=0,C!5). Les modifications révélées dans la quantité de noradrénaline de l'hypothalamus et l'inhibition passagère de la libération de l'hormone lutéinisante dans le préoestrus déterminent l'activité contraceptive de la préparation proposée. L'étude de toxicité de la préparation, montre, que son administration prolongée àdes doses contraceptives n'exerce aucune action défavorable sur l'état général des animaux, leur croissance pondérale, l'image sanguine ou analogue et autres indices. Aucune action anabolique, thymolytique et antiinflammatoire n'a été observée suite à l'administration de la préparation. Après l'arrêt de la préparation qui a été administrée chez le rat pendant 14 jours la fonction de reproduction se rétablit rapidement et l'accouplement des animaux s'effectue vers le 8e ~ 9 jour. La gestation se poursuit d'une façon analogue à celle des animaux intacts (témoins). Le nombre moyen de foetus par rat et l'évolution pondérale sont également en accord avec les valeurs normales. Aucune anomalie n'a été notée dans l'aspect des foetus nés de rats recevant la préparation pendant une longue période. La préparation n'exerce aucune influence importante sur le poids des surrénales en phase de dioestrus et de préoestrus on note seulement une augmentation insignifiante du poids des surrénales en phase d'oestrus. La dynamique des modifications de la teneur en acide ascorbique des surrénales et la détermination du nombre d'éosinophiles et de lymphocytes du sang montre que l'activité fonctionnelle du cortex surrénal n'est pas modifiée de façon notable. La préparation selon l'invention peut être administrée sous forme de comprimés contenant 2,5-5 mg de 6 g - méthylcyclohexano (1, 2' 1 16, 17 g) prégn - 4 - en - 3,2C - dione et 0,06 mg de mestranol avec un excipient, par voie orale pour la contraception selon le schéma de 21 jours (dès le 5e jour du cycle menstruel). La préparation peut être appliquée aussi pour le traitement de l'insuffisance fonctionnelle du corps jaune (stérilité, foetus prématuré, etc.). Le principe actif de la préparation proposée, à savoir la 6 - méthylcyclohexano (1', 2' ; 160C, 17&alpha;) prégn - 4 - en 3,2G - dione, est obtenu conformément à l'invention de la manière suivante. On fait agir l'acétate - 3 de (i', 2t ; 16o4, 17&alpha;) cyclohexano - prégn - 5 - en - 3 ss - ol - 20 - one sur un peracide dans un solvant organique polaire ; on traite l'acétate de (1', 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) cyclohexano - 5&alpha;, 6&alpha;- époxyprégnant 3 ss - ol - 20 - one obtenu par l'iodure de méthylmagnésium dans un solvant organique en chauffant jusqu'à une température de 100 C, puis on oxyde la 6 p - méthyl (1', 2' ; 16 i, 17&alpha;;) cyclohexanoprégnan - 3 #, 5 ss - diol - 20 - one formée par le trioxyde de chrome et l'acide sulfurique dans l'acétone, après quoi on déshydrate le dérivé de 3 - céto - 5 - hydroxy - 6 # méthyle ainsi obtenu par l'acide chlorhydrique au sein de l'acide acétique avec l'isolement successif du produit visé. Il est avantageux d'utiliser à titre de peracide l'acide monoperphtalique. il est rationnel d'employer à titre de solvant organique polaire le chloroforme. @Il est préférable d'utiliser à titre de solvant organique 2n mélange d'éther diéthylique et de toluol ou d'éther diéthylique et de Xylol. Le traitement de l'acétate de (î', 2' ; 16&alpha;, , 17o) cyclohexano - 5o4, 6&alpha;- époxyprégnan - 3 ss - ol - 20 - one obtenu par l'iodure de méthylmagnésium est réalisé de préférence à une température de 70 à 90 C. Le rendement en produit visé peut atteindre jusqu'à 50% du poids qui est prévu par la théorie. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention seront mieux compris à la lecture de la description qui va suivre de plusieurs exemples de réalisation du procédé de préparation de la 6 - méthylcyclohexano (1', 2' ; 16&alpha;, 17 X ) prégn - 4 - en - 3,20 - dione. Exemple 1. On laisse refroidir dans un réfrigérant 6 g d'acétate de (1', 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) cyclohexano prégn - 5 - en - 3 - ol - 20 one dans 145 ml de CHCL3 et 25,4 ml d'acide monoperphtalique à 10% pendant deux jours puis encore vingt-quatre heures à une température de 20 C. On traite le mélange réactionnel par une solution à 5% de NaHCC3, puis à l'eau et on sèche sur MgS04. Après élimination du solvant, on recristallise le résidu dans le méthanol. On obtient 5,59 g d'acétate de (1', 2'--; 1604, 17&alpha;) cyclohexano - 5&alpha;, 6 i- époxyprégnan - 3 ss - ol - 2C one dont le point de fusion est de 243 à 2470C (dans le méthanol). % en poids, trouvé : C 75,62 ; H 9,43. % en poids, calculé pour C C27H4004 : C 75,66 ; H 9,41. On ajoute une solutionde 5,59 gd'acétate de (1', 2' ; 1604, 17&alpha;) - cyclohexano - 5&alpha;, 60 - époxyprégnan - 3 ss - ol - 2C one dans 400 ml de toluol à une solution éthérée de réactif de Grignard préparée à partir de 2,58 g de Mg, 8 ml de CH3J et de 100 ml d'éther, et on fait bouillir à reflux pendant 4 heures sous atmosphère d'azote. Après le traitement du mélange réactionnel avec une solution saturée de NH4CL et à l'eau, on sèche la couche organique sur MgS04 et on évapore les solvants On recristallise le résidu cristallin dans le mélange acétonehexane.On obtient 4,41 g de 6 p - méthyl (1', 2' ; 160S, 17&alpha;) cyclohexano - prégnan - 3 ss, 504- diol - 20 - one à point de fusion égal à 198 à 2100C. Spectre IR (J cm-1, CHCL3) : 1690 (C=0), 3620 (OH). Spectre de RPM (Sp.p.m., CDCL3) : 0,58 (S,3H ; 18 - CH3), C,82 (S,3H ; 19 - CH3), 0,90 (d, 3H ; 6CH3,J4 hertz) ; 2,02 (S,3H ; 21 - CH3). On dissout 4,41 g de 6 ss - méthyl - (1', 2' ; 1604, 170;) cyclohexanoprégnan - 3 , 5&alpha;- diol - 20 - one dans 700 ml d'acétone, on ajoute 8 ml de mélange oxydant (préparé à partir de 26,7 g de CrO3 dans 23 ml de H2S04 concentré et H20 complément à 100 ml) et on agite à une température de 20 C pendant 10 minutes. Gn verse ensuite le mélange réactionnel dans l'eau, on extrait avec CHCL3, on lave la couche organique avec une solution à 5% de NaHCO3, puis à l'eau et on sèche sur MgS04. Le résidu cristallin (4,30 grammes) obtenu après évaporation du solvant est ensuite dissous dans 800 ml d'acide acétique glacial et on fait passer le courant de HCL sec à travers cette solution à une température ne dépassant pas +15 C pendant 2 heures. Après refroidissement pendant 16 heures dans un réfrigérant, on coule le mélange réactionnel dans l'eau glaciale. On extrait la couche organique à l'éther ; on lave avec une solution diluée de NaHCC3 puis à l'eau et on sèche sur MgS04. Après purification chromatographique sur gel de silice du produit de réaction semi-cristallin (élution par un mélange heptane-éther, 7:3) on obtient 2,78 g de 6&alpha;- méthylcyclohexano (1', 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) prégn - 4 - en - 3,20 - dione à point de fusion de 175 à 17800 (dans l'acétate d'éthyle). Spectre IR (# cm-1, CHCL3) : 1610 (C=C), 1670-1690 (C=O). Spectre de RPM (#, p.p.m. ; CDCL3) : 0,66 (S, 3H.; 18 - CH3), 1,01 (d, 3H 6 - CH3 ; I = 7 hertz), X,1G (S,3H ; 19 - CH3), 2,05 (S,3H 21 - CH3), 5,75 (m,o4H ; H-C-4) M+ cm/e 382,5. (Poids moléculaire pour C26H3802 = 382,5). ExemPle 3. Une solution de 1 g d'acétate de (1', 2' ; î6o4, 17d) cyclohexano - 5 OC 6 i- époxyprégnan - 3 - ol - 20 - one obtenue d'une façon analogue à celle décrite dans l'exemple 1, dans 80 ml de xylol est ajoutée à une solution éthérée de réactif de Grignard préparée à partir de 0,45 g de Mg et 1,5 ml de 0H31 dans 30 ml d'éther absolu, et on fait bouillir à reflux, pendant 3 heures sous atmosphère d'azote. Après traitement du mélange réactionnel par une solution de NH4CL et à l'eau, on sèche la couche organique sur MGSO4 et on évapore les solvants. Le résidu (1,12 g) est recristallisé dans un mélange acétone - hexane.On obtient 0,81 g de 6 ss - méthyl (1w, 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) cyclohexano prégnan - 3 ss, 5&alpha;- - diol - 20 - one à point de fusion de 198-211 C, dont l'oxydation par l'anhydride chromique dans l'acétone en présence d'acide sulfurique est réalisée d'une manière analogue à celle décrite dans l'-exemple 1. Cn obtient 0,76 g de 6 ss - méthyl (1', 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) cyclohexanoprégnan ol - 3,20 - dione, dont l'hydratation par l'acide chlorhydrique au sein de l'acide acétique est effectuée d'une façon analogue à celle décrite dans l'exemple 1. On obtient la 6&alpha;- méthylcyclohexano (1', 2' ; 160d, 1706) prégn - 4 - en - 3,20 - dione. Après recristallisation dans l'acétate d'éthyle, on obtient 0,51 g de produit désiré à point de fusion 175-178 C. Bien entendu, la présente invention n'est nullement limitée aux modes de réalisation décrits qui n'ont été donnés qu'à titre d'exemples. En particulier, elle comprend tous les moyens constituant des équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs combinaisons, si celles-ci sont exécutées suivant son esprit et mises en oeuvre dans le cadre des revendications qui suivent. R E V E N D I C A T I O N S 1. 6&alpha;- méthylcyclohexano (1', 2' ; 16&alpha; , 17&alpha;) pregn - 4 en - 3,20 - dione de la formule ci-dessous : 2. Procédé de préparation de 6 - méthylcyclohexano (1', 2' 16&alpha;, 17&alpha;) prégn - 4 - en - 3,20 - dione, caractérisé en ce que on fait agir l'acétate - 3 de (1i, 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) cyclo hexanoprégn - 5 -en-3 ss-@l-20-one sur un peracide dans un solvant organique polaire, on traite l'acétate de (1', 2' ; 16&alpha;, 17 17&alpha;) cyclohexano- 5 j- 6 o(- époxyprégnan - 3ss - ol - 20 - one obtenu par l'iodure de méthylmagnésium au sein d'un solvant organique en chauffant jusqu'à une température de 100 C, on oxyde la 6ss - méthyl (1', 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) cyclohexanoprégnan - 3ss, 5&alpha;- diol - 20 - one formée par le trioxyde de chrome et acide sulfurique dans l'acétone, et on déshydrate le dérivé de 3 - céto - 5&alpha;- - hydroxy - méthyl obtenu par l'acide chlorhydrique dans l'acide acétique, ladite 6&alpha; - méthylcyclohexano (1', 2' ; 16&alpha;, 17&alpha;) prégn - 4 - en - 3,20 - dione étant simultanément et progressivement isolée du milieu réac@ionnel. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'on utilise, en tant que peracide, l'acide monoperphtalique. 4. Procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé en ce que l'on utilise le chloroforme en tant que solvant organique polaire 5. Procédé selon l'une des revendicatione 2 2 à 4, caractérisé en ce que l'on utilise, en tant que solvant organique polaire, un mélange d'éther diéthylique et de toluol ou d'éther diéthylique et de xylol. 67Procédé selon l'une des revendications2 à 5, caractérisé en ce que l'on conduit le traitement par l'iodure de méthylmagnésium de l'acétate de (1', 2' ; 164, 17 4) cyclohexano 5&alpha;, 6&alpha;- époxyprégnan - 3 ss - ol - 20 - one précité à une température de 70-900C. 7. Préparation hormonale contraceptive contenant un composant oestrogène, caractérisé en ce qu'elle contient en tant que principe actif, la 6&alpha;- méthylcyclohexano (1', 2' ; 1604, 17&alpha;) prégn - 4 - en - 3,20 - dione selon la revendication 1. 8. Préparation hormonale contraceptive selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle contient un principe actif + la 6 ; méthylcyclohexano (1', 2' 16&alpha;, 17&alpha;) prégn - 4 - en - 3,20 - dione, un composant oestrogène : le mestranol, dans un rapport de 50:1 et un excipient pharmaceutique pour comprimés. 9. Préparation hormonale contraceptive selon la revendication 7 ou 8, caractérisée en ce qu'elle contient le principe actif précité à raison de 2,5-5 mg par comprimé.