Brevet FR2265403A1 — publié le 19751024

la présente invention a pour objet de nouvelles compositions aqueuses injectables à effet prolongé, utilisables comme inhibiteurs de la sécrétion de lthormone de croissance On sait que le tétradécapeptide de formule I H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr- Phe-Thr-Ser-Cys -OH (I) exerce en solution aqueuse une inhibition de l'hormone de croissance. Cependant, les solutions aqueuses connues contenant le tétradécapeptîde de formule I n'ont qu'une durée d'action relativement courte. La demanderesse a maintenant trouvé que la durée d'action des compositions injectables contenant le tétradéca- peptide de formule I est considérablement prolongée lorsque ledit polypeptide se trouve sous forme de complexe. L'invention concerne donc plus particulièrement une composition aqueuse injectable contenant un complexe formé par le tétradécapeptide de formule I avec un cation métallique et/ou un polymère organique acceptables du point de vue pharmaceutique. Comme métaux susceptibles de former des complexes avec le tétradécapeptide de formule I, on peut citer le calcium, le magnésium polyoxygélatine, la polyvinylpyrrolidone-, la carboxyméthylcellulose, dés sulfonates ou des phosphates de l'acide alginique, le dextrane, des polyphénols ou des polyalcools, de préférence un poly phlorétine-phosphate. L'invention comprend également un procédé de préparation des nouvelles compositions aqueuses injectables, procédé selon lequel on dissout ou on met en suspension dans de l'eau le tétradécapeptide de formule I, éventuellement sous forme de sel, avec un sel de métal soluble dans l'eau et/ou un polymère organique acceptables du point de vue pliarmaceutique, et cn règle ensuite le pH de lct solution ou de la suspension ainsi obtenue å une valeur comprise entre 5 et 8. Comme sels de métaux solubles dans 1'eau et acceptables du point de vue pharmaceutique, on utilise de préférence les halogénures, en particulier les chlorures, ou les phosphates, pyrophosphates ou polyphosphates des métaux mentionnés plus haut. Pour préparer les complexes formés avec des cations métalliques, comme par exemple les complexes formés avec le zinc, on fait réagir le tétradécapeptide de formule I avec des sels solubles de ces métaux, comme par exemple le chlorure de zinc, et on ajoute éventuellement un phosphate et/ou un hydroxyde de métal alcalin afin de diminuer la solu bilité du complexe ainsi obtenu. Les complexes formés avec des polymères organiques sont obtenus par mélange de-ces derniers avec le tétradécapeptide de formule I en solution aqueuse.Pour régler le pH à la valeur désirée, on ajoute ensuite à la solution ou S la suspension obtenue un hydroxyde de métal alcalin ou un tampon tel qu'un tampon au phosphate. Après stérilisation, les compositions ainsi obtenues peuvent être administrées par voie sous-cutanée ou intramusculaire. L'inhibition prolongée exercée par les nouvelles compositions injectables sur la sécrétion de l'hormone de croissance a été mise en évidence chez le rat. On a notamment déterminé l'action du tétradécapeptide de formule I seul, du complexe qu'il forme avec le chlorure de zinc et du complexe qu'il forme avec le polypnlorétine-phosphate, sur le taux sanguin de l'hormone de croissance du rat, 8 heures après l'injection de la composition correspondante. On utilise pour l'essai des groupes de 5 à 6 rats mâles pesant entre 180 et 250 g. La composition à étudier est administrée par voie sous-cutanée. 7 heures après l'injection, on anesthésie lesanimaux par aàministration intraveineuse d'une dose de 50 mg/kg de pentobarbital. Au bout d'une heure, on décapite les rats et on prélève du sêrur dont on détermine la teneur en hormone de croissance selon les méthodes connues.Les compositions de l'invention se signalent dans cet essai par une nette inhibition de la sécrétion de l'hormone de croissance; alors qu'après administration d'une solution physiologique à 9 mg/ml de chlorure de sodium contenant uniquement 1 mg/kg du tétradécapeptide de formule I, le t-aux sanguin de l'hormone de croissance est même augmenté de 20% par rapport aux animaux témoins, il est abaissé de plus de g6% par rapport aux contrôles lorsqu'on administre une solution contenant, outre le tétradécapeptide, 0,52 mg/ml de chlorure de zinc, et il est abaissé de 78% par rapport aux contrôles lorsqu'on administre une solution contenant, outre le tetradecapeptide, 40 mg/ml de polyphlorétinephosphate. En effectuant des essais analogues avec le tetra décapeptide seul à la dose de 1 mg/kg, on a constaté que déjà deux heures auprès l'injection, la sécrétion de l'hormone de croissance n'est pratiquement plus inhibée Par contre, 7'inhibition est nettement prolongée lorsqu'on administre, outre 0,5 mg/kg du tétradécapeptide, de 0,1 à 10 mg/ml de chlorure de zinc ou bien de 0,1 à 100 mg/ml de polyphlorétinephosphate. Grâce à cette propriété, les compositions injectables de l'invention peuvent etre utilisées en thérapeuti- que dans tous les domaines ot une diminution de la sécrétion de l'hormone de croissance est souhaitée, en particulier pour le traitement du diabète sucré, de l'acromégalie et de lian- giopathie, ou pour établir certains diagnostics. La dose quotidienne à administrer contiendra de 0,07 à 70 mg du tetra- décapeptide de formule I et, de préférence, de 0,2 à 200 parties du métal ou du polymère organique par partie du tétra décapeptîde. Elle sera administrée sous forme de solutions ou suspensions unitaires de 0,1 à 5 ml à injecter par voie intramusculaire ou sous-cutanée, à raison de 1 à 3 fois par jour ou 1 à plusieurs fois par semaine. Les exemples de compositions aqueuses injectables suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter a portée. Exemple 1 On dissout 100 à 2000 mg de H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn- Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OB dans 50 ml d'eau et on ajoute 630 mg de chlorure de zinc, 300 mg de phénol et 230 mg de chlorure de sodium. On ajuste le pH à 5-8 au moyen d'une solution aqueuse diluée d'hydroxyde de sodium et on ajoute de l'eau distillée jusqu'à 100 ml. Exemple 2 On procède comme décrit à l'exemple 1, mais au lieu d'utiliser 630 mg de chlorure de zinc, on emploie 460 mg de chlorure de calcium, ou 580 mg de chlorure de manganèse, ou encore 440 mg de chlorure de magnésium. Exemple 3 On procède comme décrit à l'exemple 1, mais on ajoute de plus 200 mg de NaH2PO4.H20. Exemple 4 On procède comme décrit à l'exemple 1, mais on ajoute de plus 200 mg de NaH2PO4. H20 et 230 mg de carboxyméthylcellulose. Exemple 5 On procède comme décrit à l'exemple 1, mais on ajoute de plus 200 à 5000 mg de polyphloretine-phosphate. Exemple 6 On procède comme décrit à l'exemple 1, mais à la place du chlorure de zinc, on ajoute de 100 à 5000 mg de polyphloretine-phosphate. Exemple 7 On prépare une solution ayant la composition suivante: Tétradécapeptide de formule I 0,5 - mg Polyphlorétine-phosphate de sodium (poids moléculaire 11000) 1,15 mg Acétate de sodium . 3H20 4 mg Mannite 45 mg Polyéthylèneglycol 400 200 mg NaOH 0,6 N q.s.p. pH 7 Eau distillée q.s.p. 1,0 ml Exemple 8 On prépare une suspensior ayant la composition suivante: Tétradécapeptide de formule I 1,0 mg ZnCl2 5,25 mg Na2HPO4.2H2O 1,05 mg NaCI 2,0 mg Alcool benzylique 10,0 mg SNaOR 0,6 N q.s.p. pH 8 Eau distillée q.s.p. 1,0 ml Exemple 9 On prépare une suspension ayant la composition suivante: Tétradécapeptide de formule I 0,5 mg Zncl2 5,25 mg Polyphosphate de sodium (longueur de chaîne moyenne : 26) 1,00 mg NaCl 2,00 mg Alcool benzylique 10,0 mg NaOH 0,5 N q.s.p. pH 8 Eau distillée q.s.p. 1,0 ml IEVENDCATIONS 1.- Nouvelle composition aqueuse injectable exerçant une inhibition durable de la sécrétion de l'hormone de croissance, caractérisée en ce qu'elle contient un complexe formé par le -tétradécapeptide de formule I H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr- Phe-Thr-Ser-Cys-OH (I) avec un cation métallique et/ou un polymère organique acceptables du point de vue pharmaceutique 2 Une composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que son pH est compris entre 5 et 8. 3.- Une composition selon i'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisée en ce qu'elle contient un complexe formé par le tétradecapeptide de formule I avec un cation d'un métal choisi parmi le calcium, le magnésium, le manganèse, l'aluminium, le cobalt et le zinc. 4.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'elle contient un complexe forme par le tétradécapeptide de formule I avec le zinc. 5.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisée en ce qu'elle contient un complexe formé par le tétradécapeptide de formule I avec un polymère organique choisi parmi la polyoxygélatine, la polyvinylpyrrolidone, la carboxyméthylcellulose, les sulfonates ou les phosphates de l'acide alginique, lé dextrane, les polyphénols et les polyalcools. 6.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisée en ce qu'elle contient un complexe forme par le tétradécapeptide de formule I avec un polyphloretine phosphate. 7.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle contient de 0,2 à 200 parties du métal ou du polymère organique par partie du tetradécapeptide ae formule I. 8.- Une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce qu'elle est présentée sous forme d'une solution ou suspension stérile à administrer par voie sous-cutanée ou intramusculaire. 9.- Un procédé de préparation d'une composition aqueuse injectable contenant un complexe formé par le tétra décapeptide de formule I H-AI a-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr- Phe-Thr-Ser-Cys-OH (I) avec un cation métallique et/ou un polymère organique acceptables du point de vue pharmaceutique, caractérisé en ce qu'on dissout ou on met en suspension dans de l'eau le tétradécapeptide de formule I, éventuellement sous forme de sel,- avec un sel de métal soluble dans l'eau et/ou un polymère organique acceptables du point de vue pharmaceutique, et on règle ensuite le pH de la solution ou de la suspension ainsi obtenue une valeur comprise entre 5 et B. 10.- Un procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce qu' on utilise, comme sel de métal soluble dans l'eau et acceptable du point de vue pharmaceutique, un halo génure, un phosphate, un pyrophosphate ou un polyphosphate de calcium, de magnésium, de manganèse, d'aluminium, de cobalt ou de zinc. 11.- Un procédé selon la revendication 9, carac térisé en ce qu'on utilise, comme sel de métal soluble dans liteau et acceptable du point de vue pharmaceutique, le chlorure de zinc. 12.- Un procédé selon l'une quelconque des revendications 9 à 11, caractérisé en ce qu'on ajoute un phosphate et/ou un hydroxyde de métal alcalin pour diminuer la solubilité du complexe formé. 13.- Un procédé selon la revendication 9, carac terse en ce qu'on utilise-, comme polymère organique acceptable du point de vue pharmaceutique, la polyoxygélatine, la polyvinylpyrrolidone, la carboxyméthylcellulose, un sulfonate ou un phosphate de l'acide alginique, le dextrane, un polyphénol ou un polyalcool. 14.- Un procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'on utilise, comme polymère organique acceptable du point de vue pharmaceutique, un polyphlorétine-phosphate. 15.- Un procéde selon l'une quelconque des revendications 9 à 14, caractérisé en ce qu'on règle le pH de la solution ou de la suspension à la valeur désirée à l'aide d'un hydroxyde de métal alcalin ou d'un tampon au phosphate.