Brevet FR2265406A1 — publié le 19751024

La présente invention concerne un vaccin contre l'hépatite B. L'antigène du sérum de l'hépatite Australia qui est également appelé antigène de l'hépatite B ou, encore antigène associé à l'hépatite B est immunologiquement associé au virus pathogène de l'hépatite virale ou de l'hépatite provoquée par transfusion. E. KRUGMANN a montré qu'on pouvait limiter-considérablement l'apparition de l'hépatite B, par immunisation passive au moyen d'anti corps actifs à l'égard de l'antigène du sérum de l'hépatite Australia (Krugmann, S., Giles, I.P. et Hammond, I., J. Am. med. Ass. 218 (1971). De plus, S. KRUGMANN a pu montrer qu'en faisant bouillir un sérum hautement infectieux de l'hépatite B on pouvait obtenir un produit pressentant une activité protectrice en tant que vaccin égale 'a 70% (Krugmann, S., Giles, I.P. et Hammond, I. J. Am. med. Ass. vol. 217, n 1, page 41 (1971). On a maintenant constaté de façon surprenante qu'un sérum hépati- tique conserve', dont le but premier est d'être un produit hépatique de substitution de l'albumine, pouvait être utilisé en tant que vaccin contre l'hépatite B lorsque le produit renferme en plus des constituants de lialbumines les alpha, béta et gamma-globulines de ltanti- gène du serum de l'hépatite Australia sous forme inactive mais immu nologîquement pleinement active. Suivant l'invention, le vaccin contre l'hépatite B est par con séquent caractérisé en ce qu'il est constitué par un sérum positif de l'hépatite Australia renfermant en plus de l'albumine, les alpha, béta, et gamma-globulines de l'antigène du sérum de l'hépatite Aus tralia, sous forme immunogène. Un tel vaccin contre l'hépatite B peut être préparé par exemple en traitant un mélange de sérums humains avec la béta-propiolactone, et des rayons ultra-violet, suivi par une adsorption sur de la silice colloldale ou tien par traitement par de la silice colloidale suivi par des rayons ultra-violet, les étapes individuelles du procédé étant destinées à l'inactivation et à la stabilisation du vaccin (Stephan, W., Vox Sang. 20 S. 442 (1971). L'efficacité en tant que vaccin d'une telle préparation a été vérifiée sur 20 donneurs de sang. L'administration de l'antigène du sérum de lthnpatite Australia à raison de 0,1 micro-ramme par ml sous la forme d'un sérum conservé préparé comme indiqué précédemment. 60 % de ces donneurs de sang ont réagi positivement en formant des anti-corps. La quantité de sérum conservé 'a utiliser dépend de sa concentration d'antigènes du sérum de l'hépatite Australia sous forme inactive. L'expérience a montré d'autre part que le sérum administré devait contenir au moins 0,1 g/ml d'antigène de l'hépatite Australia, soit 25 g ponr une injection intraveineuse de 25 ml. L'invention va maintenant être illustrée par l'exemple suivant - Exemple -. 100 l d'un mélange de sérums prélévés sur 1000 donneurs de sang ont été traités par 0,3 g/100 ml de béta-propiolactone à pH 7,5 pendant 1 heure à 5 C. Ce traitement a été suivi par l'action d'un rayonnement ultra violet à raison de 2mWatt/cm2 x minute et l'hydrolyse de la béta-propiolactone a été poursuivie pendant 12 heures. Ensuite on adsorbe sur de la silice colloldale (Aerosil de la firme DEGUSSA) à raison de 2g/100 ml pendant 4 heures à 450 C, on centrifuge et on filtre de façon stérile. Le produit stérile et apyrogène s1 est révélé être positif en antigenes de l'hépatite Australia selon le test radioimmunologique (test de la firme ABBOT Lab.),mais négatif selon la réaction de liaison complémentaire. A 20 donneurs de sang agés de 20 a 40 ans (5 femmes, 15 hommes) on a administré à chacun par oie intraveineuse 250 ml du sérum conservé décrit précédemment et teste a l'égard de l'antigène du sérum de 1'hépatite Australia selon le test radioimmunologique. Le sérum conservé administré répondait à la composition suivante Globulines Antigène du sérum de l'hépatite Albumine Australia (% relatif) &alpha;1 &alpha;2 ss &gamma; g/ml mg/injection 58,5 3,6 7,9 13,9 16,1 0,1 - 100 0,025 - 25 Le titre anti-Australia a été déterminé par hémoagglutination passive Les résultats sont indiques dans le tableau suivant :: Donneur n Réaction au test Hémoagglutination passive radioimmunologique Anticorps - Australia Antigène - Australia (titre réciproque) avant après avant après 2 mois 1 - - - 2 - - - 3 4 5 - - 100 6 - - 16000 32000 7 - - - 64 8 - - 5000 400000 9 - - - 2 10 - ~ 5000 100000 Il - - 64 12 13 - - - 50 500 14 15 - - 2 16 17 - - - 2 18 - - - 8 19 - - - 8 Selon les résultats indiqués dans ce tableau on voit que malgré des tests négatifs à l'antigène Australia 60% des donneurs de sang réagissent par formation dtanticorps contre 11 antigène du sérum de l'hépatite, Australia. 25% d'entre eux ont présenté une réaction de Booster positive qui conduit à llhyperimmunisation. REVENDICATIONS 1. Vaccin contre l'hépatite B, caractérisé en ce qu il est constitué par un sérum positif de l'hépatite Australia renfermant en plus de l'albumine, les alpha, béta, et gamma-globulines de l'antigène du sérum de l'hépatite Australia sous forme immunogène. 2-. Vaccin conforme à la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est préparé à partir d'un mélange de sérum humain renfermant des antigènes Australia. 3. Vaccin selon les revendications i et 2, caractérisé en ce que pour sa préparation, le sérum est traité avec de la béta-propio- lactone, des rayons ultra-violets et de la silicecolloïdale. 4. Vaccin conforme aux revendications 1 à 3, caractérisé-en ce qu'en vue de l'immunisation, on utilise un sérum renfermant au moins 0,1 g/ml d'antigènes Australia.