Brevet FR2281133A1 — publié le 19760305

la présente invention concerne des cyclopropylamides de peptide ayant une activité HL-HI/HL-HFS. Des analogues de l'hormone d'hypotalamus HI-HL de formule dans lesquels le glycinamide est remplacé par l'éthyl, le propyl ou l'isopropylamide, ont, selon J. Med. Chem. 16 (1973), page 1144, une activité biologique renforcée. L'activité de lthormone est renforcée d'une manière similaire lorsque la glycine est remplacée en position 6 par la D-alanine.En remplaçant Gly6 par D-valine, D-leucine ou D-froline, l'activité diminue par rapport à l'hormone naturelle (voir: Âbstr. of the Endocrine Society, 55th ânon. Meeting, 1973, pageA145). lorsque le remplacement de Gly6 par D-Ala est com- 10 biné avec celui de Glycinamide par les amides mentionnés ci-dessus, on trouve, selon Biochem. Biophys. Res. Commun. 57 (1974) page 335, une augmentation de l'activité biologique. La présente invention concerne des peptides de formule générale I dans laquelle éventuellement Tyr peut être remplacé par Phe et leu7 par Ser(Bút), Asp(Obut), Glu(OBut), Cys(But), lys(Boc) ou Orn (Boc). les peptides de formule générale I dans lesquels il n'y a pas d' échange de motifs d'acide aminé montrent, chose surprenante, dans l'essai d'ovulation chez le rat une forte activité biologique. Cet essai est le meilleur critère pour l'utilisation en pratique d'un tel peptide, parce qu'il illustre l'intégrale sur la courbe tempsactivité. Lorsqu'on poursuit la libération dans le temps de Hl, on trouve que cette forte activité n'est pas seulement due à l'intensité mais surtout en plus à la durée prolongée inattendue de l'activité. On obtient à peu près la même activité intégrale lorsqu'on remplace en plus Tyr5 par Phe et/ou leu7 par Ser(But ), Asp(But), Glu(OBut), Cys(But), Lys (Boc) ou Orn (Boc).L'échange en position 7 sur,tout entratne une prolongation importante additionnelle de l'activité de libération de 111 et HSF de ces composés. De plus, les peptides de formule I ont aussi une activité par voie orale. Cet effet surprenant que l'on n'a observé jusqu'à pré sent chez aucun peptide de cette longueur de chaîne, ouvre de nouvelles possibilités en thérapeutiques et donne aux composés de 1' invention une supériorité sur tous les analogues de HL-HL préparés jusqu'à présent. les composés de formule I dans lesquels leu 7 est remplacé par lys(Boc) ou Orn(Boc) ont seulément une activité parentérale parce que, dans ces deux dérivés d'acide aminé, le groupe Boc est suffisamment stable à l'égard de l'acide gastrique. Cependant, des analogues avec des dérivés d'acide aminé en position 7 qui contiennent de l'éther tertio-butylique et des groupes esters ont une activité par voie orale, bien que de tels groupes puissent aussi être éliminés en milieu acide. L'invention concerne de plus des préparations pharmaceutiques pour l'administration par voie pyrale, intranasale, intramusculaire, sous-cutanée ou intra-veineuse du peptide de formule I et des analogues mentionnés. L'invention concerne également un procédé de préparation des peptides précités, caractérisé en ce qu'on les prépare a) par une condensation fragmentaire, usuelle en chimie des peptides, de fragments de peptides selon le schéma de condensation t - 3 + 4 - 10 ou 1 - 2 + 3 - 10 ou b) par un mode de constitution progressive, dans lequel d'autres groupes fonctionnels sont bloqués intermédiairement par des groupes protecteurs éliminables par hydrogénation ou en milieu alcalin ou faiblement acide. Comme composés appropriés comprenant la modification additionnelle de l'invention aux positions 5 et 7 on peut citer, par exemples 2 2 3 4 5 6 LGiu-His-Trp-Ser-fyr-D-Leu - Ser(Bu ) Phe Ser(But) Cys(But) Asp(OBut) Glu(OBut) Phe Asp(OBut) Phe Glu(OBut) Phe Cys(But) Dans la synthèse des composés de formule I dans lesquels Beu n'est pas remplacé, l'utilisation de groupes protecteurs n'est pas critique.Comme groupes protecteurs intermédiaires de l' -amino convenables, on peut citer par exemple le radical benzyloxycarbonyl ou tertio-butyloxycarbonyl. La fonction guanido de l'arginine peut rester sans protection ou être bloquée par un groupe nitro qui est éliminé dans l'hydrogénation qui suit. Il en est de même pour le groupe benzyloxyearbonyle. De plus, on peut utiliser le radical tosyle comme groupe protecteur du guanido. Il peut être éliminé, éventuellement, avec d'autres groupes protecteurs éliminables en présence d'acides, une fois la synthèse terminée ou à une étape antérieure de la synthèse, par HF/anisol.Le groupe nitro est aussi éliminé par HF/anisol et peut, de ce fait, par exemple être utilisé en combinaison avec le radical tertio-butyloxy-carbonyle comme groupe protecteur de 1' lt-amino pendant toute la synthèse pour protéger la fonction guanido. Lorsque leu7 est remplacé par un dérivé d'acide aminé avec un radical tertio-butyle labile en milieu acide, l'élimination du groupe nitro ou tosyle doit déjà être effectuée à l'étape du dipeptide. Il en est de même pour le groupe protecteur intermédiaire de l'amide. Comme groupes intermédiaires protecteurs de 1' 9t -amino convien- nent dans ce cas des groupes éliminables par hydrogénation, par exemple le radical benzyloxycarbonyle ou des groupes éliminables par des acides faibles, par exemple 2-(p-diphényl)-isopropyloxycarbonyle ou 2- (3, 5-diméthoxyphényl) -isopropyloxycarbonyle. Dans la synthèse des composés contenant du soufre il faut éliminer les groupes protecteurs benzyloxycarbonyle par hydrogénation catalytique d'une manière connue en ajoutant une amine, par exemple la triéthylamine, la N-éthylmorpholine o la cyclohexylamine, parce que l'élimination hydrogénolytique du groupe protecteur en milieu neutre ou acide n'est pas avantageuse dans ce cas. Dans la condensation fragmentaire suivant le mode opératoire a) on utilise, de préférence, la copulation azidique s'effectuant sans racémisation ou la méthode au DCC/1-hydroxybenzotriazole ou DCC/3 hydroxy-4-oso-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazine. On peut aussi utiliser des esters activés de fragments. Pour la condensation progressive d'acides aminés suivant le mode opératoire b) conviennent en particulier des esters activés d' acides benzyloxycarbonylaminés, par exemple l'ester de N-hydroxy succinimide ou 2,4,5-trichlorophénylique et 4-nitrophénylique. L' aminolyse des deux esters activés mentionnés en dernier peut très bien être catalysée par des composés N-hydroxyliques qui ont à peu près l'acidité de l'acide acétique, par exemple le 1-hydroxybenzotriazole. Les composés suivant l'invention montrent par rapport aux analogues de 6-Gly, et aussi de 6-D-Ala une activité plus forte et plus durable dans l'essai d'ovulation et dans l'essai de déplétion d'acide ascorbique. L'activité par voie orale ouvre à ces médicaments un domaine d'application nouveau inaccessible au HL-HS seulement administrable par voie parentérale ou nasale. Ils constituent de nouveaux médicaments qui agissent dans les cas d'insuffisance de l'hypothalamus et de l'hypophyse en libérant l'hormone lutéinisante et l'hormone folliculostimulante du lobe antérieur de lthypophyse, et ils sont donc utilisables-pour le traitement de la stérilité féminine ou masculine, dans la mesure où cette stérilité est d'origine hypothalamique et hypophysaire. les produits de l'invention peuvent aussi être utilisés pour la détermination du moment de l'ovulation chez la femme. Immédiatement avant le moment d'ovulation attendu, on peut d'une façon certaine provoquer une ovulation par administration des nouveaux médicaments de l'invention. Ceci constitue un fait important pour le planning familial aussi bien selon la méthode de Knaus-Ogino que pour l'insémination artificielle. Les composés selon l'invention sont administrables à l'état dissous dans une solution de chlorure de sodium physiologique par voie intra-veineuse, intramusculaire ou sous-cutanée; ils peuvent également être utilisés par voie intranasale sous forme de gouttes ou de pulvérisations nasales, ou bien par voie buccale. Les doses utilisées de préférence pour les différents modes d' administration sont les suivantes voie intra-veineuse : 20 - 1 000 ng/kg voie sous-cutanée : 20 - 2 000 ng/kg voie intramusculaire : 20 - 10 000 ng/kg voie intranasale : 100 - 50 000 ng/kg voie perorale : 10000 - 200 000 ng/kg les exemples non limitatifs suivants illustrent la présente invention. La préparation des composés a pu être effectuée selon l'un des modes opératoires du procédé de l'invention. On a examiné les peptides par chromatographie en couche mince en ce qui concerne leur uniformité et on les a caractérisés par rotation optique, analyse d'acide aminé et détermination de OCH3. Les valeurs calculées et trouvées sont bien concordantes pour tous les peptides. Abréviations utilisées DCC = dicyclohexylcarbodiimide HOBt = 1-hydroxybensotriazole OOBt = ester de 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazine Exemple 1 LGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-1eu-Arg-Pro-cyclopropylamide a) Z-Pro-cyclopropylamide A une solution de 25 g (soit 0,1 mole) de Z-proline, 13,5 g (0,1 mole) de HOBt et 5,71 g (0,1 mole) de cyclopropylamine dans 200 ml de tétrahydrofuranne absolu on ajoute, à 0 C, 22 g de DCC, dissous dans 50 ml de tétrahydrofuranne absolu froid. On laisse sous agitation pendant 1 heure à 0 C et pendant 3 heures à la température ambiante, on essore le précipité et on concentre le filtrat. On dissout le résidu huileux dans de l'acétate d'éthyle et on secoue successivement avec une solution de NaIlCO3 saturé, du HCl 2 N, une solution de NaHCO3, et de l'eau, on sèche sur Na2SO4 et on concentre. On triture le résidu avec de l'éther de pétrole et on essore. Pour purifier, on recristallise dans un mélange acétate d'éthyle/ éther de pétrole. Rendement : 23 g ( = 80 %). Point de fusion : 120 - 123 C [&alpha;]D24 = -45,5 (c=1, méthanol) b) H-Pro-cyclopropylamide. HCl On dissout 19 g de Z-Pro-cyclopropylamide dans 200 ml de méthanol. On ajoute une pointe de spatule de Pd/BasO4 comme catalyseur et on hydrogène en faisant passer de l'hydrogène à travers la solution en agitant. On maintient le pH de la solution à 4,5 à l'aide d'un autotitreur par addition d'acide chlorhydrique méthanolique 1 N. essore le catalyseur après la fin de l'hydrogénation et on concentre le filtrat. On triture le résidu avec de l'éther et on essore. Rendement : 11 g ( = 88 %), point de fusion : 169 - 1730 c) Z-Arg- (z2 ) -Pro-cyclopropylamide A une solution de 28,85 g (50 mmoles) de Z-Arg-(Z2)-OH, 9,5 g (50 mmoles) de H-Pro-cyclopropylamide. HCl et 6,75 g (50 mmoles) de HOBt dans 100 ml de chlorure de méthylène et 25 ml de diméthylformamide, on ajoute 6,5 ml de N-éthylmorpholine et, à OO C, une solution de 11 g de DCC dans un peu de chlorure de méthylène. On laisse reposer pendant 1 heure à 0 C et pendant une nuit à température ambiante. On essore le précipité et on concentre le filtrat.On reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on lave avec de l'eau, une solution de NaHCO3, du HCl 1 N et une solution de NaHCO; on sèche avec du Na2S04 et on concentre. On recristallise le résidu dans un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole. On purifie la substance brute (26,3g) par chromatographie sur une colonne de 250 g de gel de silice dans un mélange chlorure de méthylène/acétone (9:1) et (8:2). Rendement : 22,2 g (62 %), point de fusion : 1710 C [&alpha;]D21 = -33,0 (c=1, méthanol) d) H-Arg-Bro-cyclopropylamide. 2HCl On hydrogène catalytiquement dans du méthanol comme en b) 22 g (30,9 mmoles) de Z -Arg(Z2 )-Pro-cyclopropylamide. On sèche le résidu sous vide élevé. On obtient 11 g (89 %) d' une substance amorphe sous forme de mousse. e) Z-D-Leu-Leu-Arg-Pro-cyclopropylamide A une solution de 3,83 g (10 mmoles) de H-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HCl dans 20 ml de diméthylformamide on ajoute à Oo C 2,6 ml de N-éthylmorpholine et 2,75 g de Z-Leu-ONsu. On laisse reposer une nuit à température ambiante, on concentre et on friture le résidu une fois avec de l'acétate d'éthyle et une fois avec de l'éther. On décante le solvant et on sèche l'huile sous vide élevé. On dissout le résidu dans du méthanol et on hydrogène catalytiquement comme en b). On triture le résidu avec de l'éther et on sèche sous vide élevé. On obtient 5,45 g de H-Leu-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HCl amorphe qui est contaminé par des sels (4,96 g = 100 %, par rapport au H-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HC1). On dissout l'ensemble de la substance avec 1 ,35 g de HOBt, 2,6 ml de N-éthylmorpholinè et 4,4 g de Z-D-leu-Otcp dans 20 ml de diméthylformamide. On laisse reposer pendant 2 heures, on concentre et on triture le résidu deux fois avec une solution de NaHCO3 satu rée, on dissout dans du chlorure de méthylène, on sèche sur Na2SO4, on concentre et on triture le résidu deux fois avec une solution de NaHC03 saturée, on dissout dans du chlorure de méthylène, on sèche sur Na2SO4, on concentre et on triture le résidu avec de l'éther. Rendement : 4,15 g (62 %, par rapport au H-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2 HCl). La substance est amorphe et est transformée sans autre purification. f) Z-Ser-Tyr (Bzl) -OH A une suspension de 5,52 g (20 mmoles) de H-Tyr-(Bzl)-OH dans 60 ml de diméthylacétamide on ajoute 7,68 g de Z-Ser-OOBt et on agite pendant 6 heures à température ambiante. On essore les substances non dissoutes et on ajoute 300 ml d'eau au filtrat refroidi à 0 C. On essore le précipité, on lave avec un mélange diméthylacétamide/ eau (1:10) et de l'eau et on agite avec H2SO4 1 N. On essore, on lave avec de 11 eau et on sèche. On recristallise dans un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole. Rendement : 7,35 g (75 %), point de fusion: 1660 C 1t & D20 = +20,90 (c=1, méthanol). g) H-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HCl On dissout 3,35 g (5 mmoles) de Z-D-Leu-Leu-Arg-Pro-cyclopro- pylamide dans du méthanol et on hydrogène catalytiquement comme en b). On triture le résidu avec de éther et on sèche sous vide élevé. Rendement : 2,9 g de substance amorphe (95 %). On met en suspension les 2,9 g (4,7 mmoles) de H-D-Leu-Leu-Arg Pro-cyclopropylamide. 2HCl avec 2,32 g (4,7 mmoles) de Z-Ser-Tyr(Bzl) -OH, 635 g de HOBt et 1,22 ml de N-éthylmorpholine dans 10 ml de diméthylformamide. A 04 C on ajoute 1,04 g de DCC et on laisse reposer 1 heure à 00 C une nuit à température ambiante. On essore le précipité le lendemain et on concentre le filtrat. On triture le résidu deux fois avec une solution de NaRCO3 saturée, on dissout dans du chlorure de méthylène; on sèche la solution sur Na2SO4 et on concen tre On triture le résidu avec de 11 éther et on essore.On obtient 3,5 g (71 %) de Z-Ser-Tyr(3zl)-D-Leu-Leu-Arg-Pro-cyclopropylamide amorphe et on hydrogène catalytiquement comme en b). On triture le résidu avec'due l'éther et on sèche sous vide élevé. Rendement 2,92 g (= 70 % par rapport au Z-Ser.Tyr(Bzl)-OH) . On purifie la substance brute sur la colonne de chromatographie de partage décrite ci-dessous. Remplissage de la colonne : 400 ml d'acide acétique glacial, 800 ml de n-butanol et 4 1 d'eau sont secoués. On agite 300 ml de la phase supérieure avec 240 g de Séphadex 1H 20(R). On absorbe la to- talité du solvant. On met en suspension ce remplissage de colonne prétraité dans une quantité correspondante de la phase inférieure. On laisse gonfler pendant 3 heures et on remplit la colonne (1 m x 4 cm). On élue avec la phase inférieure. Rendement: 1,3 g de substance pure à la chromatographie. l al22= -43,8 0 (c=1, méthanol). h) rGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-cycloproPylamide A une solution de 500 mg de LGlu-His-Trp-NH-NH2 dans 6 ml de diméthylformamide on ajoute à -30 C 0,66 ml d'une solution de HCl dioxanne 6,05 N et 1,2 ml d'une solution de nitrite de tertio-butyle à 10 % dans du dioxanne absolu. On agite pendant 20 minutes à -10 C et on ajoute à -400 C 860 mg de H-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HCl et 0,78 ml de N-éthylmorpholine. On laisse reposer une nuit à 40 C, on concentre et on triture le résidu avec de l'éther. On dissout la substance dans de l'eau et on chromatographie sur du Dowex(R) 1 x 2 (forme acétate). On concentre l'éluat et on purifie sur une colonne de carboxyméthylcellulose (90 x 1,5 cm) qui est équilibrée avec une solution d'acétate d'NH4 -0,002 N. On dissout la substance dans une solution d'acétate d'HN4 0,002 molaire. On élue avec la même solution à laquelle on applique un gradient d'une solu tion d'acétate d'NH 0,1 molaire. (Volume de mélange 250 ml). 4 On lyophilise deux fois les fractions qui contiennent le peptide voulu. Rendement : 405 mg de substance chromatographiquement pure. La teneur en peptide base est de 77 % selon le spectre W (rendement 26 %) [&alpha;]D20 = -39,9 (c=1, diméthylacétamide) Exemple 2 It .u-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Ser (But) -Àrg-Pro-cyclopropylamide a) H-Ser(But)-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HC1 À une solution de 2,3 g (6mmoles) de H-krg-Pro-cyclopropyla- mide. 2 HCl et 810 mg-de HOBt dans du diméthylformamide on ajoute 1,56 ml de N-éthyl-morpholine et 3,12 g de Z-Ser(But) OTcp et on agite 2 heures à température ambiante. On concentre sous vide. On dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on secoue la solution deux fois avec une solution de NaHCO3 saturée, on sèche sur Na2SO4 et on concentre.On triture le résidu avec de l'éther et on sèche sous vide élevé. On obtient 2,4 g d'une substance amorphe que l'on hydrogène catalytiquement selon Exemple 1b) dans du méthanol. Rendement : 2,9 g (88 %) de substance amorphe. Pas d'uniformité selon la chromatographie à couche mince (contaminé par environ 3 produits secondaires). b) H-D-leu-er (But)-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HCl A une solution de 2,62 g (immoles) de H-Ser(But)-Arg-Pro-cyclo- propylamide. 2HCl et 675 mg de HOBt dans 5 mi de diméthylformamide on ajoute à 00 C 1,3 ml de N-éthylmorpholine et 2,22 g de Z-D-leu- OTcp. On laisse reposer une nuit, on concentre et on dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle. On secoue deux fois avec une solution de NaRCO3 saturée, on sèche sur Na2SO4 et on concentre. On triture le résidu avec de l'éther et on sèche sous vide élevé. Rendement : 2,1 g de substance amorphe (66 %, par rapport au Z-D leu-OTcp). On transforme la substance sans autre purification. c) H-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Ser(But)-Arg-Pro-cycloproylamide. 2HCl On ajoute à une solution de 1,99 g (3,3 mmoles) de Z-Trp-Ser Tyr-HH-NH2 dans 25 ral de diméthylformamide à -30 C 2,18 ml d'une solution de HCl/dioxanne 6,05 N et 3,97 mi d'une solution de nitrite de tertio-butyle à 10 % dans du dioxanne absolu. On agite 20 minutes à -100 C et on ajoute à -40 C 2,6 ml d'N-éthylmorpholine et 2,1 g t (3,3 mmoles) de H-D-Leu-Ser(But)-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2H01. On laisse reposer une nuit à 40 C, on concentre et on triture le résidu avec de l'éther.On hydrogène comme à l'exemple 1 b) et on purifie chromatographiquement la substances brute comme à l'Exemple 1 g) sur du Séphadex EH 20. Rendement : 1,25 g (35 %) de substance amorphe pure. d) GLu-His-Trp-Ser-Tyr-D-leu-Ser-(But)-Arg-Pro-cyclopropylamide diacétate À une solution de 538 mg (0,5 mmole) de H-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Ser (But)-Arg-Pro-cyclopropylamide. 2HCl, 151 mg (0,5 mmole) de Lalu- His-OH et 135 if de HOBt dans 5 ml de diméthylformamide on ajoute à 0 C 0,13 ml de N-éthylmorpholine et 110 mg de DCC. On laisse repo- ser 1 heure à 00 C et une nuit à température ambiante, on essore le précipité, on concentre et on triture le résidu avec de l'éther. On dissout dans de l'eau, on filtre les substances non dissoutes et on purifie comme à l'Exemple 1 h) sur du Dowex 1 x 2 et de la carboy- méthylcellulose.Puis on purifie encore une fois sur du Séphadex EH 20 comme à l'Exemple 1 g). Rendement : 165 mg. La teneur en peptide est de 78 % selon le spectre UV. (Rendement 20,5 %). 721 23 = -28,90 (c= 1, dans du diméthylacétamide). Exemple 3 (préparation pour administration orale) On triture 10 g de Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-cyclopropylamide diacétate avec 542 g de lactose. On mélange le produit trituré avec 300 g d'amidon de pomme de terre, on humidifie avec une solution alcoolique de 8 g de gélatine et on granule. Après séchage on mélange 60 g d'amidon de pomme de terre, 10 g de stéarate de magnésium, 20 g d'oxyde de silicium fortement dispersé et 60 g de talc et on comprime le mélange en comprimés pesant 150 mg chacun. Chaque comprimé contient 1 mg de substance active. Exemple 4 (préparation pour administration intranasale) On dissout 4,0 g de Pro-cyclopropylamide diacétate dans 100 ml d'eau distillée. En même temps, on dissout 31,2 g de NaH,P04. 2H20, 66,29 g de Na2HPO4, 25 g de chlorure de sodium et 100 g d'alcool benzylique dans 8 1 d'eau distillée, et on ajoute 500 g d'alcool polyvinylique ayant une valeur E d'environ 90. On combine les deux solutions et on filtre. Une dose unitaire de 20 pg est contenue dans 0,05 ml. Exemple 5 (préparation pour administration intranasale) On fond 100 g de lanoline anhydre et 440 g de vaseline. On ajoute à la masse fondue refroidie une suspension de 800 mg de GIu-His-Trp-Ser-Phe-D-Leu-Ser(But)-Arg-Pro-cyclopropylamide diac- tate microfin dans 359,2 g de paraffine liquide. Enfin, on ajoute 10 g d'alcool benzylique et on homogénéise l'onguent. Une dose unitaire de 40 pg est contenue dans 0,05 g d'onguent. Exemple 6 (préparation pour injection) On dissout 2 mg de Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Procyclopropylamide diacétate dans 500 ml d'eau bidistillée et on ajoute 100 ml de tampon au phosphate 8 pH 4,5. Puis on ajoute encore 1 g de mannitol et la quantité calculée de NaCl pour obtenir l'iso tonicité et on remplit à un volume de 1 1 avec de l'eau. Après filtration dans des conditions stériles, on remplit dans des ampoules de 1 ou 2 mi et on lyophilise. Exemple 7 (préparation pour injection) On travaille comme à l'Exemple 6, mais on ajoute avant le remplissage avec de 11 eau 2,5 g de 4-hydro ybenzoate de méthyle. près filtration dans des conditions stériles, on remplit des ampoules de I ou 2 ml. Revendications dans laquelle Tyr peut être remplacé par Phe et Pieu7 par Ser(But), Asp(OBut), Glu(OBut), Cys(But), Lys(Boc)ou Orn(Boc). 2 - Procédé de préparation des peptides suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on les prépare a) par une condensation fragmentaire, usuelle en chimie des peptides, de fragments de peptides selon le schéma de condensation 1 - 3 + 4 - 10 ou 1 - 2 + 3 - 10, ou b) par un mode de constitution progressive, dans lequel d'autres groupes fonctionnels sont bloqués intermédiairement par des groupes protecteurs éliminables par hydrogénation ou en milieu alcalin ou faiblement acide. 3 - Préparation pharmaceutique pour l'administration orale, intranasale, intraanxsculaire, sous-cutanée ou intra-veineuse comprenant à titre de principe actii un composé selon la revendication 1. 4 - Préparation pharmaceutique suivant la revendication 3, sous une forme appropriée pour 1' administration orale. 5 - Préparation pharmaceutique suivant la revendication 3, caractérisée en ce que le principe actif est associé à des véhicules et/ou stabilisants appropriés.