Brevet FR2271560A1 — publié le 19751212

On-connait des dispositifs centrifuges destinés à répartir des spécimens de sang sur des surfaces d'examen. Le dispositif le mieux connu permet de positionner et de maintenir une lame microscopique sur laquelle on place un éehantillon de sang. On fait tourner la lame a grande vitesse pour répartir le sang. La présente invention concerne un procédé, et un appareil pour sa mise en oeuvre, permettant de répartir du sang par exemple sur une lame de verre afin de l'examiner au microscope. Cette répartition du sang est fréquemment désignée également "formation d'un film" par ceux travaillant dans les laboratoires médicaux. De nombreux problèmes sont soulevés lorsqu'on veut distribuer un échantillon de sang sur une lame de verre. Le plus évident d'entre-eux est le problème associe à l'obtention d'une distribution régulière sur toute la lame Le procédé habituel se fait à la main et consiste à placer une goutte de sang sur la lame et à étendre le sang sur la lame à l'aide d'une seconde lame. Cette technique a toutefois pour résultat une mauvaise distribution latérale et la traînée de sang excessivement étroite est constituée de zones excessivement épaisses et de zones excessivement minces.Pour surmonter de tels problèmes on a introduit des appareils centrifuges qui servent à répartir le sang par action centrifuge sur toute la longueur d'une lame qui tourne, l'accélération de la lame étant utilisée pour effectuer la distribution latérale du sang. Ce procédé centrifuge représente un progrès considérable par rapport à l'art antérieur. On ddcrit dans la présente demande un appareil dans lequel un dispositif, destiné à recevoir le sang proåeté par la lame, tourne avec la lame portant le spécimen de sang et ramasse le sang qui est projeté de la lame. Cet appareil représente un progrès considérable par rapport à l'art antérieur ; il permet de réduire de manière importante le danger de contaminer l'air par la projection de gouttelettes porteuses d'affection pendant le fonctionnement de l'appareil centrifuge.Néanmoins, lorsqu'on fixe un papier filtre sur le côté intérieur du couvercle supérieur d'un tel appareil, il est souvent possible de détecter quelques dépôts ponctuels de sang, ce qui indique qu'une certaine quantité de spécimen est portée par l'air, situation qui est peu souhaitable I1 convient toutefois de remarquer ici que cette quantité est de beaucoup inférieure à celle dégagée par les appareils classiques destinés à la formation d'un film de sang mais il y a lieu de réduire le plus possible cet "aérosol". On a essayé de résoudre le problème en modifiant les conditions de fonctionnement et les paramètres de construction de l'appareil, mais la contamination ponctuelle a persiste. On a donc effectué des recherches dans le but de réduire cette contamination et les résultats font l'objet de la présente demande. Un but principal de la présente invention est de réaliser un appareil centrifuge permettant la formation d'un film de sang, appareil qui permet de réduire remarquablement la formation d'un aérosol par le sang projeté. Un autre but de la présente invention est de réaliser un appareil perfectionne pour distribuer par action centrifuge des spécimens physiologiques sur une surface d'exposition. Encore un but de la présente invention est de réaliser un dispositif permettant de retenir une lame dans un centrifugeur de façon à empecher une quantité excessive du spécimen d'entre projetee de la surface de la lame. Un autre but de la présente invention est de réaliser un appareil qui comprend un dispositif destiné à recevoir le sang projeté, de façon à éliminer ou minimiser la dispersion de matière pathogène dans l'air. Encore un but de la présente invention est de réaliser un appareil dans lequel le dispositif, destiné à recevoir le sang non retenu, intercepte, immobilise et retient excédent du spécimen, protégeant ainsi les surfaces internes de l'appareil de contamination et réduisant l'entretien et le nettoyage de l'appareil. D'autres buts ressortiront de la description qui va suivre. Pour atteindre ces buts conformdment à la présente invention on a réali sé un nouveau support de la surface sur laquelle le spécimen est exposé, le trajet du sang projeté de la lame étant eontrlé. Un aspect important de ce contrôle se révèle du fait que l'appareil comprend un organe de réception d'excédent destiné à recevoir l'excédent de sang projeté et monté de façon à entourer la surface de la lame qui doit être entralnée en rotation. Cet organe est monté de façon à pouvoir tourner conjo-in-- tement avec la lame, éliminant ainsi tout mouvement relatif indésirable entre la lame et l'organe, mouvement qui pourrait occasionner la formation de quan tités importantes d'aérosol entre la lame et organe de réception. Ce contrôle est également assuré en prévoyant une surface de transport et de réception de l'exeédent-de sang le long de laquelle l'excédent du spéei- men s'achemine vers un dispositif destiné à la recevoir. Cette caractéristique de la présente invention résulte de la constatation que les appareils classiques comportent quelques éléments de construction qui èontribuent à la dispersion de l'excédent du sang projeté au cours de ltopération centrifuge. Premièrement les piliers utilises pour retenir la lame de verre sont excessivement grands du fait qu'ils doivent retenir la lame pendant les périodes a'acceléra- tion et déeélération rapides sans quelea lame saute de sa position.Par exemple, ces piliers sont aussi hauts, plus hauts ou presque aussi hauts que la surface d'exposition de la lame. On a pu constater que l'excédent de sang est projeté de cette surface contre les piliers et se décompose et se disperse en quittant la surface de la lame. En outre, le dispositif destiné à capter l'ex ced cnt est placé trop loin de la surface de la lame. Cet espacement est rendu nécessaire en raison du diamètre des piliers de retenue. De toute façon, cet espacement suffit pour permettre au sang de se décomposer après avoir quitté la surface de la lame et avant d'arriver au dispositif de réception monté sur l'appareil.Par le terme "se déeomposer" on entend le phénomène selon lequel l'échantillon de sang liquide qui tend à former des éléments fibreux relativement grands lorsqu'il quitte les surfaces de la lame sous l'action centrifuge, se désintègre pour former de nombreux fragments de sang dont beaucoup sont extrêmement petits. Dans cette demande "l'intégrité structurale" de excédent de sang désigne la condition où les éléments fibreux ne se décomposent pas pour former des aérosols ou des gouttelettes minuscules. Après avoir constate ces phénomènes concernant la fragmentation du sang projeté, on a construit un centrifugeur qui présente les caractéristiques suivantes en plus de la caractéristique principale de faire tourner le dispositif de réception conjointement avec la lame de verre. 1. La lame n'est pas séparée du dispositif de réception de excédent de sang par des pillie > de retenue celle elle est plut8t retenue par le périmètre continu d'une cavité destinée a retenir la lame. 2. La cavité de retenue est déli > Atée par un périmètre à l'intérieur duquel est placée la surface portant le spécimen et a l'extérieur duquel se trouve une partie en forme de pont qui sert de surface pour recevoir, guider et transporter l'excédent de sang sans dégradation sensible vers-le dispositif de réception de l'excédent de sang. 3. les éléments décrits ci-dessus sont disposés par rapport au plan de la surface d'exposition comme suint Le plan du pont de réception devrait être sensiblement aligné dans le même plan que la surface d'exposition de la lame. S'il est bien positionné par rapport à la lame, ctest- -dire espacé de 0,0625 cm de la lame, il peut être disposé de 0,012 cm au-dessus de la lame ou de 0,012 cm au-dessous de la lame. L'organe de réception de l'excédent de sang peut être constitué par n'importe quel réceptacle, monté à proximité de la périphérie de la surface de la lame de façon qu'il intercepte, immobilise et retient l'excédent de sang déposé sur cette surface par l'action centrifuge. L'excédent de sang immobilisé de cette façon peut être évacué sans venir en contact avec les mains de l'opéra- teur. On décrit également un dispositif poreux utilisé avec avantage dans cette application d'interception et d'immobilisation. Toutefois, il faut préciser que d'autres dispositifs mécaniques peuvent servir de moyen de réception de l'excé- dent de sang.D'autres modes de réalisation du dispositif de réception de l'excédent de sang peuvent être constitués par des dispositifs centrifuges en forme de simple cuvette solide sans aucun moyen pour retenir le sang, à l'exception d'une barriere permettant d'inverser le flux de l'excédent de sang. Dans une opération typique de formation de films à partir d'échantillons de sang avant un examen ou compte cytologique, on peut préparer entre 20 et 200 spécimens avant d'entre obligé de remplacer un élément poreux destiné à recevoir l'excédent de sang en fonction de divers paramètres de construction. On a constaté que Si au moins une partie du couvercle imperméable-aux liquides du dispositif de réception de l'excédent de sang est transparente, on peut en observer la contamination de l'élément poreux et on peut7tirer le maximum d'usage avant d'être obligé de le remplacer ou de le nettoyer. Selon une autre caractéristique avantageuse de la présente invention, caractéristique qui facilite l'élimination des tampons poreux, le tampon est imprégné d'un désinfectant qui est activé par l'excédent de liquide projeté par l'échantillon physiologique pendant son application sur la surface d'exposition. Un tampon ou éponge poreuse destiné à recevoir l'excédent de sang conformément à la présente invention est avantageux parce qu'il remplit plusieurs fonctions : Après que la force centrifuge ait fait que excédent de sang immobilisé rentre profondément dans 1'élément poreux, cet élément peut servir de moyen pour empêcher cet excédent de sang de stécouler avant qu'il soit complètement sec ou immobilise sur la surface de l'élément poreux. l'élément poreux peut également contenir un désinfectant. Il ressort de ce qui précède que l'élé- ment poreux ne sert pas principalement de filtre mais de moyen apte à recevoir l'excédent du spécimen dans une zone relativement calme et de le retenir dans cette zone.Toutefois, lorsquton utilise une masse poreuse comme élément filtrant, f1 sert également à filtrer l'air qui le traverse. Selon un mode de réalisation de la présente invention, on prévoit plusieurs lames montées les unes au-dessus des autres. Dans ce cas, le dispositif permettant d'immobiliser l'excédent de sang doit être assez profond pour qu'il puisse recevoir l'excédent de sang projeté depuis toutes les lames. Une forme d'exécutlon de la présente invention est décrite ci-dessous a titre d'exemple, en référence au dessin annexé dans lequel - la figure 1 est une vue latérale en élévation de l'appareil conforme à la présente invention, les éléments permettant de positionner la lame étant dégagés comme c'est le cas pendant que la lame tourne - la figure 2 est une vue en élévation analogue à celle de la figure 1, a la différence que l'appareil n1 est pas représenté avec ces éléments en prise, l'ensemble servant a supporter la lame étant par conséquent tourné- de 900 et le mécanisme destiné a faire incliner la lame étant positionné de façon a permettre d'incliner la lame pour en faciliter la dépose ; - la figure 3 est une vue éclatée de l'appareil conforme a la présente invention ; - la figure 4 est une vue schématique de l'appareil représenté sur les figures I et 2, mais tourné de 900.Cette figure représente l'actionnement manuel du dispositif de positionnement de la came la figure 5 est une vue schématique d'une lame de verre montée conformément a la présente invention ; - la figure 6 est une vue analogue à celle de la figure 5 mais prise a un angle de 900 par rapport a cette figure. Sur la figure 1 on voit un appareil 10 permettant la formation d'un film de sang, appareil qui comprend un boîtier inférieur 12 renfermant un moteur 14 et une tourelle supérieure 16 qui comporte un porte-lames 18. Te porte-lames 18 est apte à être entraîné en rotation par l'arbre 20 du moteur 14. Le porte-lames 18 comprend une paire de galets suiveurs 22 fixés a la plaque de support 21 par une goupille 24. Sur la plaque 21 est monté, au moyen de vis 30, un dispositif 28 destiné à recevoir l'excédent du spécimen. L'élément 28 étant remplaçable, il est monté tout en haut pour faciliter son remplacement. Un élément cylindrique a cames 32 est monté au-dessous du porte-lames 18 et est disposé autour de l'arbre 20 sans y être relié. L'élément 32 est représenté au mieux su r la figure 3 et on le décrit eiodessous en se référant à cette figure. Sur la figure 1 on voit également un ensemble de crémaillere et pignon 34 qui est actionné, par l'intermédiaire de l'arbre 36, par le levier 38. L'arbre 36 est monté sur un roulement 40 et pénetre dans la tourelle 16 à travers un autre roulement 42. Sur la figure 2 on voit que, lorsqu T une lame 78 est arrivée dans la bonne position, la crémaillère 46 peut être soulevée par le pignon 44 de façon à venir en contact avec l'extrémité 48 de la lame et à la dégager du dispositif de réception de l'excédent de sang 28, facilitant ainsi sa manipulation. Sur les figures 1 à 3, on voit que le diamètre de la came 32 est suffisant pour qu'elle ne vienne pas en contact avec l'arbre 20 et par conséquent elle ne tourne pas. La came 32 est maintenue par deux goupilles 50 chacune desquelles traverse des douilles 52 qui la relie à un collet 54. Le collet 54 est relié de façon à pouvoir pivoter par une barre d'ancrage 56 à un goujon d'ancrage 58. Une tige de commande 60 s'étend du côté opposé du collet, 1'extrémité extérieure 62 de cette tige étant disposée de façon à coopérer avec une tige 64 actionnée par le couvercle. Entre l'extrémité 62 et le collet 54 se trouve un pilier de support 66 comprenant une fente de guidage 68 dans laquelle la tige 60 peut se déplacer verticalement. Au-dessous de la fente 68 se trouve un moyen de sollicitation, par exemple un ressort 72, agissant ordinairement entre la base 70 de la tourelle 16 et la tige 60. L'appareil décrit fonctionne comme suit Lorsque le couvercle 80 est ouvert, la tige 64 occupe sa position de déclenchement et par conséquent le ressort 72 se détend pour lever la tige d'actionnement 60. (Dans le mode de réalisation représenté, la tige d'actionnement 60 fait partie d'une chape comprenant le collet 54). La tige d'actionnement 60 soulève le collet 54 et la came 32. La came 32 comprend sur sa surface supérieure deux creux sensiblement aemi-circulaires 84 espacés angulairement de 1800. Les galets suiveurs sont poussés par l'action du ressort 72 dans les creux 84, Au milieu de chaque creux 84 est prévue une fente 73 destinée à recevoir les galets suiveurs 22 et à les empêcher de tourner. (Les galets suiveurs sont représentés sur les figures 1 et 2). Ils sont maintenus de cette façon lorsque la came 32 est sollicitée vers le haut par le ressort 72 comme c'est le cas lorsque le couvercle 80 est ouvert, comme on l'a décrit ci-dessus. Une lame microscopique 78 est placée dans l'appareil. L'extrémité soulevée 88 de la lame prend appui sur la crémaillère 46. L'autre extrémité de la lame prend appui sur une surface inclinez 76 du support de lame de fond de l'ensemble 28 destiné à recevoir l'excédent de sang et bute contre une butée d'arrêt 75 du dispositif de réception 28. Corse on le voit au mieux sur la fiv gure 3, la crémailîàre 46 peut venir en contact avec la lame 78 à travers l'un quelconque des deux trous prévus dans le fond de 1 1élément 28 et à travers des trous prévus dans la plaque de support 21. Après que la lame ait été placée dans l'appareil, la crémaillère 46 est baissée par actionnement du levier 38, un spécimen de sang est placé sur la lame et le couvercle 80 est fermé. La fermeture du couvercle 80 actionne la tige 64 qui fait que la tige d'actionnement 60 se déplace vers le bas, comprimant ainsi le ressort 72 et permettant à la came 32 de se dégager de la crémail1ère 18, ce qui permet au galet suiveur 22 de tourner. Ensuite, le moteur 14 entre en action pour entratner en rotation la lame 78. Au fur et à mesure de la rotation de la lame, le sang est réparti uniformément sur sa surface. L'excé- dent de sang est projeté dans l'élément de réception 28 qui comprend avantageusement une éponge ou un autre matériau absorbant 29 et qui tourne conjointement avec la lame.Lorsque le moteur est coupé, la rotation de la lampe ralentit et elle s'arrente au hasard. On ne représente pas le dispositif de freinage sur le dessin parce qu'il est bien connu et ne fait pas partie de l'appareil conforme à la présente invention. Toutefois, il ne fonctionne pas de manière positive, ctesto W ire qu'il n'arrente pas la lame dans une seule position Lorsque le porte-lames s'arrête, l'opérateur soulève le couvercle 80, ce qui permet au ressort 72 de déplacer la tige 60 et la tige 64 vers le haut. La tige 60 à son tour pousse la came 32 contre les galets suiveurs 22, ce qui pousse les galets dans les fentes d'lignement 73. Sur la figure 5 on voit une lame 100 montée dans le fond d'un élément de réception de l'excédent de sang 28. Au voisinage immédiat de chaque périmètre de la lame se trouve une surface de transition 104. La surface 104 est disposée moins de 0,0625 cm de la surface de la lame, comme on le représente en 108. La surface 104 est disposée dans le sens vertical à moins de 0,012 cm du plan horizontal de la surface supérieure de la lame. Dans cette position, la surface 104 sert à recevoir l'excédent de sang quittant la surface de la lame et à le transférer à l'élément de réception, ordinairement un matériau poreux absorbant 106. On peut apporter diverses modifications à l'appareil décrit sans pour autant sortir du cadre de a présente invention. REVENDICATIONS 1. Appareil centrifuge comprenant un organe de support d'un échantillon, apte a recevoir un echantillon d'un liquide sur un élément de reception d'échantillons et à effectuer la distribution de l'échantillon de liquide sous forme de film sur ltélément de réception d'échantillons, caracterisé en ce qu'il comprend a) un organe de réception de 1'excédent de l'ecbantion os disposé autour. de la périphérie d'un organe de support d'échantillons et adapte à recevoir et à retenir excédent de liquide projeté de la surface de l'element de reception d'échantillons et des moyens destinés a entraîner en rotation l'organe de support de l'échantillon à sensiblement la même vitesse que l'element de réception d'échantillons. 2. Appareil selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'organe de réception de l'excédent de liquide est constitué par un matériau poreux. 3. Appareil selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'élément de réception d'échantillons et l'organe de réception d'excédent de liquide sont montés sur deux moyens de support différents et en ce qu'un dispositif de levage est prévu pour soulever ou baisser le moyen de support de l'organe de réception de l'excédent par rapport au support de l'élément de réception d'échantillons, le dispositif de levage constituant un moyen permettant de faciliter l'inspection et la manipulation de l'élément de réception d'échantillons. 4. Appareil selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend un moyen de sollicitation et un boltier muni d1un couvercle pivotant et renfermant ledit moyen de support, ledit moyen de sollicitation permettant de déplacer verticalement au moins un desdits moyens de support lorsque le couvercle pivote pour occuper une position d'ouverture ou de fermeture. 5. Appareil centrifuge permettant la formation d'un film de liquide selon la revendication 1, caractérisé en ce que la surface d'exposition est entourée par un pont espacé horizontalement jusqu'a 0,0625 cm du périmètre de ladite surface d'exposition et disposé entre 0,012 cm au-dessus de la surface d?expo- sition et 0,012 cm au-dessous de la surface d'exposition, ledit pont servant à guider l'excédent de liquide dans l'organe de réception de l'excédent. 6. Appareil centrifuge permettant la formation d1un filial de liquide selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend une surface de transport disposée entre ltélément de réception d'échantillons et l'organe de réception de l'excédent, ladite surface de transport étant adaptée pour rece- voir l'excédent de liquide lorsqu'il quitte l'élément de réception d'échantillons et en ce que ladite surface de transport constitue un moyen permettant de guider ledit excédent dans l'organe de réception de l'excédent et constitue également un moyen permettant de maintenir l'intégrité structurée de l'excédent pendant son passage à travers la surface de transport. 7. Procédé permettant de répartir un film mince d'un échantillon physiologique sur une surface d'exposition afin de faciliter l'examen de l'échantil- lon, la répartition étant effectuée par action centrifuge à l'intérieur d1un boîtier fermé, caractérisé en ce qu'il consiste à: a) disposer un organe de réception d'excédent autour de la périphérie de ladite surface, b) faire tourner l'élément de réception d'excédent à sensiblement la même vitesse de rotation que ladite surface, et c) capter et retenir l'excédent de 11 échantillon physiologique dans l'organe de réception d'excédent pendant ladite action de rotation. 8 Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce qu'il consiste à recevoir ledit excédent sur une surface de guidage rotative montée à proximité du périmètre de ladite surface d'exposition et à guider ledit excédent dans l'organe de réception d'excédent sur une surface de guidage, ladite surface de guidage constituant également un moyen permettant de maintenir l'intégrité structurale de l'excédent du spécimen évitant ainsi la dispersion physique de cet excédent. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'excédent de liquide tend à se former en masses fibreuses de forme allongée lorsqutun effort de traction y est appliqué. 10. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il consiste à: a) disposer la surface d'exposition dans une cavité entourée d'une sur face plate qui est espacée jusqu'à 0,0625 cm environ de la surface d'exposition du spécimen et qui est déplacée verticalement du plan de la surface d1expo- sition d'une distance inférieure à 0,012 cm, et b) faire tourner ladite surface dlexposition de façon que l'excédent du spécimen quitte la surface d'exposition et soit transporté sur la surface de guidage dans l'organe de réception d'excédent, ladite surface de guidage servant à maintenir l'intégrité structurale de l'excédent pendant son passage de la surface d'exposition à l'organe de réception de l'excédent.