Brevet FR2269353A1 — publié le 19751128

La pressente invention propose un melange composé de 10 9â de lectines naturelles et de 90 % de lectines complexées avec les sites récepteurs de cellules normales, pour son utilisation dans le traitement des cancers humains; les lectines ut- lisées sont la Concanavaline A et le lectine extraite du germe de blé ou toute autre pectine n1 agglutinant pas les globules rouges humains. Les lectines sont des substances glycoprotélques, extraites de plantes, qui ont la propriété d'augmenter la croissance des cellules normales et, par contre, d'arrêter celle des cellules tumorales. Ces lectines ont également la propriété d' agglutiner les globules rouges humains et ceux de diverses espèces animales, avec des affinités différentes selon les espèces. Les lectines proposées ici ntaggluti- nent pas les érythrocytes humains, ce qui permet de les injecter dans I' organisme sans danger d'érythroagglutination meme à des doses élevées. Pour agier sur la croissance des cellules1 lesleetines se fixent sur des sites récepteurs cellulaires et ces sites sont différents selon qu'ils se trouvent à la surface de cellules normales ou transformées. En complexant les lectineçavec les sites récepteurs de cellules normales, ces lectines perdent leur pouvoir d'augmenter la croissance de ces cellules normales car elles ne peuvent plus se fixer sur ce type de cellules. Par contre, elles conservent le pouvoir d'arrêter la croissance des cellules tumorales. En injectant dans un organisme présentant une tumeur maligne des lectines complexées, celles-ci ne se fixeront que sur les cellules tumorales et arrêteront leur croissance. Ces lectines n'auront aucun effet sur les cellules normales de l'orga- nisme. Ce résultat n'aurait pu être obtenu en injectant dans l'organisme la même quantité de lectines naturelles. En effet, celles-ci peuvent, aussi bien, se fixer sur les cellules normales que tumorales; or le pourcentage de cellules normales par rapport à celui des cellules tumorales est bien plus important. De ce fait les leetines naturelles se fixeront presqu'exclusivement sur les cellules normales et augmenteront leur coissance ce qui n'est pas le but recherché. La formule proposée est un mélange de 90 parties de lectines complexées qui se fixeront sur les cellules tumorales et 10 parties de lectines naturelles qui se fi- xeront sur les cellules normales et en particulier celles du système réticulo-endothélial stimulant ainsi les défenses lympho-immunitaires et maBrophagiques de ltor- ganisme contre les cellules tumorales. Le pourcentage de lectines naturelles peut-être modifié selon l'intensité de la réponse lymphostimulante demandée à l'organisme. Préparation des lectines complexées Les sites récepteurs des cellules normales sont isolés à partir d'hépatocytes normaux de rat, subissant soit l'action de la trypsine à o,o2 jojo, soit celle de la RNAse à o,5 / pendant trente minutes à T70C. Les hépatocytes normaux de rat sont utilisés pour leur très grande facilité d'obtention, mais d'autres types d'animaux ou de cellules normales peuvent entre utilisés. Les sites récepteurs de faible poids moléculaire sont séparés des autres constituants des surnageants d'hydrolyse par gel filtration sur une colonne de Séphadex G 75. Ces sites sont ensuite complexés à pH 7 avec l'une ou l'autre des lectines préconisées ajoutée à raison de 4 mg.de lectine pour la quantité de sites isolés de 1.109 hépatocytes normaux. La lectine complexée au site récepteur est séparée des glycopeptides inactifs par gel filtration sur colonne de Biogel P 60, la lectine de haut poids moléculaire est exclue de la colonne. L'élution de celle-ci se fait avec un tampon de chlorure de Na o,15 M et de bicarbonate de Na o,o1 M à pH 7. Préparation du mélange. Après dosage des protéines dans la fraction exclue de la colonne de Biogel P 60, on ajoute la quantité suffisante de lectine naturelle pour obtenir le pourcentage voulu. Le mélange est ensuite stérilisé par passage sur bougies filtrantes. REVENDICATIONS 1 - Mélange de lectines natruelles et complexées qui a pour effet d'arrêter la croissance des cellules tumorales d'un organisme et stimuler les réactions lympho-imm mitaires de celui-ci. 2 - Mélange de lectines selon la revendication 1, caractérisé par le fait que les lectines utilisées n'agglutinent pas les globules rouges humains. 3 - Mélange de lectines selon la revendication i, composé de 90 parties de lecti nes complexées et 10 parties de lectines naturelles. 4 - Mélange de lectines suivant revendication 1, pouvant avoir un pourcentage va- riable de lectines naturelles ou complexées selon l'effet lympho-stimulant el- compté. 5 - Mélange de lectines selon la revendication 3, caractérisé par le fait que les sites récepteurs servant à complexer les lectines naturelles sont obtenus par hydrolyse de cellules normales, soit par la trypsine, soit par la RNAse.