Brevet FR2230375A1 — publié le 19741220

La présente invention se rapporte d'une façon générale à l'exploration radiographique par scintillation, et elle concerne plus particulièrement une composition et un procédé de préparation d'un agent d'exploration osseuse à base de technétium-99m qui est hautement efficace. Depuis quelques temps, on s'est rendu compte que les techniques classiques d'exploration aux rayons X ne sont pas enfièrement satisfaisantes iflour détecter de nombreux types d'affecrions à un stade précoce, se qui aurait permis un traitement efficace. Un inconvénient marquant des examens aux rayons X est impossibilité de détecter par cette voie les métastases du système osseux à des stades tout à fait précoces. Les travaux récents concernant "l'exploration osseuse" pour détecter les métastases sont fondés sur l'utilisation d'isotopes radioactifs, surtout du fluor 18 (18F) qui migre sélectivement vers le squelette et surtout vers les sites "actifs" de ce dernier, tels que les articulations et les emplacements des tumeurs où il s'échange avec le groupe hydroxylique de l'hydroxyapatite calcique, Cependant, le 18F présente certaines limitatinns en raison de sa période très courte (110 minutes) ; en conséquence, cet isotope n'a qu'une trs brève durée de conservation et il possède un pouvoir émissif de grande énergie ce qui rend son usage peu convenable avec certains appareils de détection, en particulier avec l'appareil photographique à scintillations d'Anger. D'autre part, la prUparation de cet isotope exige un matériel très coûteux et ne convenant absolument pas à des techniques de préparation sur le lieu même d'utilisation. Le strontium 85 (85Sr) a également été utilisé pour l'exploration osseuse, en cherchant à provoquer im échange entre l'isotope et le calcium dans le phosphate de calcium, surtout sur les sites actifs. Le spectre de la période du strontium 85 est à l'extrémité opposée de l'intervalle des périodes par rapport au 18F, sa période étant de 65 jours. Alors que cette période beaucoup plus longue (par comparaison avec 1 18F) assure une plus longue durée de conservation, elle exige des durées d'exploration beaucoup plus longues pour obtenir une exploration valable en raison de la lenteur de l'émission des radiations. Depuis peu de temps et en raison des inconvénients dé ou lant des priodes respectivement treks courte du 18F et très longue du 85Sr,les chercheurs se sont intéressés au technétium 99m (99mTc)dont la période est de 6 heures. L'intérêt du 99mTc est d'autant plus grand que cet isotope peut être obtenu par des moyens industriels commodes, avec possibilité de le former au fur et à mesure des besoins. Des générateurs disponibles dans le commerce permettent de former une solution de 9mTc sous forme du pertechnétate oxydé (99mqtco4 ) en éluant ce produit avec une solution saline isotonique (0,9% en poids de chlorure de sodium). Un générateur industriel actuellement disponible permettant la production d'une solution de pertechnétate est vendu par E. R. Squibb Company sous la marque déposée "?echnetope Hieon. De même, un extrait de 9TcO4 en solution saline isotonique est également vendu sous le nom "Instant Te ch" par New England Ruclear, Boston, Massachusetts (E.U.A.) Le technétium 99 m diffère à la fois du 18F et du 85Sr en ce qu'il ne cherche pas spécifiquement à se loger sur le système osseux ou à réagir avec lui. Son usage dépend donc de la possibilité de former un composé ou an complexe de ce produit avec une matière "cherchant" le système osseux. Les premières tentatives d'exploration du squelette avec le 99mTc ont fait appel aux polyphosphonates à titre d'agent de formation d'une composition ou d'un complexe et les résultats ont été raisonnablement encourageants. Les tentatives ultérieures d'utilisation du 99mTc ont impliqué le mélange d'une solution aqueuse d'éthane-1-hydroxy- 1,1-diphosphonate distanneux avec une solution d'un phosphonate non stanneux. On mélange ensuite cette solution avec un pertechnétate et on obtient un complexe qui "cherche" le système osseux. Un tel système est décrit par Yano et col. dans Journal of Nuclear Medicine, vol. 14, N 2, pages 73-78 et par Subramanian et col. dans Journal of Nuclear Medicine, vol 13, N 12, pages 947-949. Alors qu'un tel procédé a permis des explorations du système osseux beaucoup plus efficaces qu'avec les produits connus, il n en reste pas moins qu'il existe encore certains inconvénients, en particulier la stabilité limitée de la solution d'éthane-1-hydroxy-1,1-diphosphonate distanneux. La préparation d'un système sec stable et soluble apte à être utilisé avec une solution de pertechnétate et permettant d'obtenir un agent d'exploration osseuse s'est heurtée à certaines difficultés. Par exemple, l'utilisation d'une technique traditionnelle, c'est-à-dire de la lyophilisation, pour former une matière solide appropriée à la fois stable et soluble en partant d'une solution instable, n'a donnez que des résultats modérément efficaces en raison des problèmes d'hydrolyse que ose l'ion stanneux. En consequence, l'invention a pour objet un produit stable et soluble qui, quand on lui ajoute une solution de pertechnétate, forme un agent efficace d'exploration osseuse. L'invention cherche également à résoudre tous les problèmes que pose l'exploration osseuse et, en particulier, elle a pour objet un produit possédant une forte sélectivité vis-àvis du squelette (c'est-à-dire un rapport élevé de l'absorption par le squelette à l'absorption par les tissus .mous). A cet effet, l'invention prévoIt une composition comprenant certains acides phosphoniques ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables et un sel stanneux, chromeux ou ferreux pharmaceutiquement acceptable. L'invention a aussi pour objet un procédé de préparation d'un agent d'exploration osseuse, qui consiste à dissoudre un mélange anhydre de l'un des composés phosphonique indiqués et d'un sel stanneux, ferreux ou chromeux non toxique et hydrosoluble dans une solution de pertechnétate. On a en ef et découvert qu'on peut former un complexe stable du 9 3mTc par addition directe d'une solution de pertechné- tate à un ion métallique réducteur sous forme d'un sel en combinaison avec certains composés mono-di- et polyphosphoniques désignés ci-après d'ante fanon générale par 1'expression "phosphonates" pour permettre ainsi une production simple d'un produit extrêmement stable pouvant être mis en vente sous forme d'une trousse. Le contenu d'une fiole du produit, quand on ajoute la solution de partechnétate, permet d'obtenir un agent très efficace d'exploration osseuse. En ce qui concerne les phosphonates, on sait actuellement qu'une grande variété d'acides mono-, di- et polyphosphoniques et de leurs sels pharmaceutiquement acceptables se concentrent sur le système osseux quand on injecte une solution d'un tel produit à des patients. Les espèces qui conviennent dans ce but sont les mono-, di- et polyphosphonates répondant à l'une des formules ci-après dans laquelle chaque R est un atome d'hydrogène ou un groupe CH2OH et n est un nombre entier de 3 à 10 dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle de 1 à 20 atomes de carbone, un radical acétyle d'environ 2 à 20 atomes dç bonze, un radical aryle (par exemple phényle ou naphtyle), phényléthényle, benzyle, halogène (par exemple chlore, brome ou fluor), hydroxyle, amino, amino substitué (par exemple diméthylamino, diéthylamino, N-hydroxy-N-éthylamino, acétylamino?, CH2COOH, -CH2PO3H2,-CH(PO3H2)(OH), ou -[CH2C(PO3H2)2]n-H, nétant un nombre de 1 d 15 ; R2 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle inférieur (par exemple méthyle, éthyle, propyle ou butyle), amino, benzyle, halogène (par exemple le chlore, le brome ou le fluor), hydroxyle, -CH2COOH, -CH2PO3H2, ou -CH2CH2PO3H2 ; dans laquelle n est un nombre entier de 3 à 9 les composés de formule dans laquelle chaque R3 est un atome d'hydrogène ou un radial allyle inférieur (par exemple méthyle, éthyle, propyle ou butyle) et les composés de formules dans laquelle n est un nombre entier de 2 à 4. dans lesquelles X et Y représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy ; et les sels non toxiques de tous les phosphonates indiqués qui, dans une solution aqueuse essentiellement neutre, réagiront avec les matières réductrices complexantes énumérées ci-après, à savoir les sels stanneux, ferreux ou chromeux, pour former les phosphonates stanneux, ferreux ou chromeux correspondants. Les phosphonates réactifs appropriés désignés ci-après par l'expression "sels pharmaceutiquement acceptables" qui conviennent aux fins de l'invention sont les sels de sodium, de potassium, d'ammonium, d'ammonium substitué à bas poids moléculaire (par exemple de mono- di- et triéthanolamine et d'ammonium quaternaire) des phosphonates énumérés ou de leurs mélanges. Parmi les polyphosphonates utilisables de formule I, on peut citer l'acide propane-1,2,3-triphosphonique, l'acide butane 1,2,3 ,4-tétraphosphonique , l'acide hexane-1,2,3,4,5,6-hexaphos- phonique, l'acide hexane-1-hydroxy-2,3,4,5,6-pentaphosphonique, l'acide hexana-1,6-dihydroxy-2,3,4,5-tétraphosphonique, l'acide pentana-1,2,3,4,5-pentaphosphonique, l'acide heptana-1,2,3,4,5,6 7-heptaphosphonique, l'acide octane-1,2,3,4,5,6,7,8-octaphospho- nique, l'acide nonane-1,2,3,4,5,6,7,8,9-nonaphosphonique,, l'acide décane-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10-décaphosphonique, et les sels part maceutiquement acceptables de ces acides, par exemple les sels de sodium, potassium, ammonium, triéthanolammonium, diéthanolammonium et monoéthanolammonium. On peut préparer l'acide propane-1,2,3-triphosphonique et ses sels par le procédé décrit dans le brevet U.S. 3 743 688, l'acide butane-1,2,5,4-tétraphosphonique et ses sels par le procédé décrit dans le brevet US 3 755 504 et les polyphosphonates vicinaux aliphatiques supérieurs et leurs sels par le procédé décrit dans le/US. 3 584 035. Parmi les polyphosphonates utilisables de formule II, on peut citer : l'acide éthane-1-hydroxy-1,1-diphosphonique l'acide mthanediphosphonique ; l'acide méthaneBydroxydiphospho- nique ; l'acide éthane-1,1,2-triphosphonique ; l'acide propane 1,1 ,3,3-tétraphosphonique ; l'acide éthane-2-phdnyl-1,1-diphos- phonique ; l'acide éthane-2-naphyl-1,1-diphosphonique ; l'acide methanephényldiphosphonique ; l'acide éthane-1-amino-1,1-diphosphonique ; l'acide méthanedichlorodiphosphonique ; l'acide nonane-5,5diphosphonique ; l'acide n-pentane-1,1-diphosphonique ; l'acide méthanedifluorodiphosphonique ; l'acide méthanedibromodiphospho- ique ; l'acide propane-2,2-diphosphonique ; l'acide ethane(2 -arboxy-1,1-diphosphonique ; l'acide éthane-2-hydroxy-1,1,2- triphosphonique ; l'acide éthane-1-hydroxy-1,1,2-triphosphonique l'acide propane-1,3-diphényl-2,2-diphosphonique ; l'acide nonane1,1-diphosphonique ; l t acide hexadecane-1,1-diphosphonique l'acide pent-4-ène-1-hydroxy-1,1-diphosphonique ; l'acide octadec 9-ène-1-hydroxy-1,1-diphosphonique ; le 3-phényl-1,1-diphosphono prop-2-ène ; l'acide octane-1,1-diphosphonique ; l'acide dodécane1,1-diphosphonique ; l'acide phenylaminométhanediphosphonique l'acide naphtylaminométhanediphosphonique ; l'acide N,N-diméthylaminométhanediphosphonique ; 1 'acide N-(2-dihydroxyethyl)-aminomé- thanediphosphonique ; l'acide N-acétylaminométhanediphosphonique l'acide aminomethanediphosphonique ; l'acide dihydroxyméthanediphosphonique ; et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, par exemple les sels de sodium, potassium, ammonium, triéthanolammonium, diéthanolammonium et monoéthanolammonium. Un polyphosphonfte particulièrement préféré, l'acide éthane-1-hydroxy-1,1-diphosphonique, répond d la formule molécu- laire CH3(OH)(PO3H2)2. (Selon la nomenclature par radicaux, on pourrait également appeler cet acide ; acide 1-hydroxyéthylidènediphosphonique). Bien qu'on puisse utiliser nu importe quel sel pharmaceu tiquement acceptable de l'acide éthane-1-hydroxy-1,1-diphosphoni- que pour la mise en oeuvre de l'invention, on préfère particulièrement un mélange des sels disodique et trisodique. On peut également utiliser les autres sels de sodium, potassium mono-, di- et triéthanolammonium, à la condition de prendre les précautions requises pour régler l'introduction totale du cation considéré dans la composition du el. Cn p-ut préparer ces composés par un procédé approprié quelconque mais on préfère particulièrement le procédé décrit dans le brevet U.S. 3 400 149. On peut préparer l'acide méthanehydroxydiphosphonique et les composés apparentés, utilisables aux fins de l'invention, par exemple en faisant réagir du pnosgène avec un dialkylphosphite de métal alcalin. Une description complète de ces composés et d'un de leurs procédés de préparation est donnée dans le brevet U.S. 3 42 137. L'acLde méthanedihydroxyphosphonique et ses sels utilisables aux fins de l'invention ainsi qu'un procédé de préparation sont décrits des le brevet U.S. 3 437 313. L'acide méthanediphosphonique et les composés apparentés utilisables aux fins de l'invention sont décrits en détail dans le brevet U.S. 3 213 030 et un procédé préféré de préparation de ces composés est décrit dans le brevet U.S. 3 251 907. L'acide éthane-1,1,2-triphosphonique et les composés apparentés utilisables aux fins de l'invention ainsi qu'un procédé de préparation sont décrits en détail dans le brevet U.S. 3 551 339. acide propane-1,1,3,3-tétraphosphonique, et les composés apparentés ainsi qu'un procédé de préparation sont décrits en détail dans le brevet U.S. 3 4oe 176. On peut préparer les polymères supérieurs de méthylène-disphosphanates, avec chaîne de méthylène interrompue, par polymérisation d'un éthylène-1,1- diphosphanate. On peut préparer l'acide pentane-2,2-diphosphonique et les composés apparentés par les procédés décrits par G.i. Kosolopoff dans J. Amer. Chem. Soc. 75, 1500 (1953). Parmi les phosphonates de formule III qui conviennent aux fins de l'invention, on citera les composés suivants : l'acide méthanecyclobutylhydroxydiphosphonique " " méthanecyclopentylhydroxydiphosphonique " " méthanecyclohaxyhydroxydiphosphonique n n méthanecycloheptylhydro y diphosphonique " " méthanecyclooctylhydroxydiphosphonique " " méthanecyclononylhydroxydiphosphonique " " méthanecyclodecylhydroxydiphosphonique Tous les sels de sodium, potassium, ammonium, mono-, di- et triéthanolammonium des acides máthanecycloalkylhydroxy- diphosphoniques énumérés ainsi que les autres aels pharmaceuti- quement acceptables de ces acides cherchent également sélective- ment le système osseux. On peut préparer les phosphonates de formule III par le procédé décrit en détail dans le brevet U.S. 3 584 125. Les phosphonates préférés de formule IV, aux fins de l'invention, sont la tris(phosphonométhyl)amine, la tris(1-phos- phonoéthy-l) amine, la tris(2-phosphono-2-propyl)-amine et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. On préfère tout particulièrement la tris(phosphonométhyl)amine. Les composées représentatifs utilisables sont (a) la bis (phosphonométhyl)-1-phosphonoéthylamine ; (b) la bis (phosphonométhyl)-2-phosphono-2-propylamina (c) la bis(1-phosphonoéthyl)phosphométhylamine ; (d) la bis(2-phosphono-2-propyl)phosphonométhylamine (e) la bis(1-phosphono-1-pentyl)amine ; (f) la bis(phosphonométhyl)2-phosphono-2-hexylamine et les sels pharmaceutiquement acceptables des acides (a) à (f) par exemple les sels de sodium, potassium, ammonium, mono diet triéthanolammonium. On peut préparer les tris(phosphonoalkyl)amines, pr exemple en préparant d!abord l'ester correspondant selon la dans laquelle R est un radical alkyle et R1 et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical akyle inférieur. On peut préparer les acides libres par hydrolyse de l'ester en utilisant des acides minéraux forts tels que l'acide chlor hydrique. Naturrellemont, on prépare les sels en neutralisant l'acide avec la base da cation désiré. La préparation des tris (phosphonoalkyl)amines est décrite en détail dans le brevet canadien 753.207. Parmi les phosphonates de formule V, on peut mentionner les suivantes : (1) le 3, 3,4,4,5,5-hexafluoro-1,2-diphosphonocyclopent -1-ène ; (2) le 3,3,4,4,5,5,6,6-tétrafluoro-1,2-diphosphonocyclobut-1ène ; et (3) le 3,3,4,4,5,5,6,6-octafluoro-1,2-diphosphonocyclohex-1-ème. On peut préparer les perfluoridiphosphonocycloalcénes, par exempl @ en faisant réagir des trialkil-phosphites avec des 1,2-dichloroperfluorocycloalc-1-ènes per les procédés décritsen détail par Frank dans J. Org. Chem., 31, TO 5, p. 1521. Le phosphonate de formule VI est appelé dans le présent mémoire acide tétera hospioaique cyclique. ive composé et ses sels pharmaceutiquement accelEbles peuvent être préparés par un procédé approprié quelconque, mais on préfèr particulièrement le procédé décrit dans le brevet U.S. 3 337 024. Les phosphonates utilisables de formule VII sont l'acide éthène-1,2-dicarboxy-1-phosphonique et ses sels pharmaceutiquement accèptables. par exemple les sels de sodium, potassium ammonium, mono-, di- et triéthanolamnonium. loris que la formule VII ci-dessus représente les isomères cis, on peut également utiliser les isomères trans correspondants. Sauf stipulation contraire, à chaque fois qu'il est question ci-après d'un acide éthène-1,2-dicarboxy-1-phosphonique ou d'un sel de cet acide, cette appellation englobe les isomères cis, trans et leurs mélanges. On peut préparer l'acide èthène-1,2-dicarboxy-1-phospho- nique et les composés apparentés en faisant réagir un ester d'acide acétylène-dicarboxylique et un dialkylphosphite, en faisant suivre cette opération d'une hydrolyse et d'une saponification. Ce procédé est décrit plus en détail dans le brevet U.S. 3 584 124. On peut préparer le sel sodique de formule VIII par une réaction de regroupement d'un acide 2-halogénoéthane-1- hydroxy-1,1-diphosphonique avec environ 3 équivalents l\ydroxyde de sodium, comme décrit dans le.brevet US. 3 641 126. On peut préparer le hosphonate de formule IX par le procédé décrit dans le brevetDr2 026 078. Parmi les carboxyphosphonates utilisables de formule X, on citera l'acide éthane-1,2-dicarboxy-1,2-diphosphonique, l'acide éthane-1,2-dicarboxy-1,2-dihydroxy-1,2-diphosphonique, l'acide éthane-1,2-dicarboxy-1-hydroxy-1,2-diphosphonique et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, par exemple les sels de sodlum, potassium, ammonium, triéthanolammonium, diéthanolammonium monoéthanolammonium. L'acide éthane-1,2-dicarboxy-1,2-diphosphonique, qui est l'un des carboxyphosphonates préférés, répond à la formule moléculaire CH(COOH) (P03H2) CH (COOH) (P03H2) . On obtient les sels cristallisables d'utilisation la plus commode a partir de cet acide quand on remplace trois, quatre ou cinq atomes d'hydrogène de l'acide par des atomes de sodium. Bien qu'on puisse utiliser tout sel pharmaceutiquement acceptable de l'äcide éthane-1,2-dicarboxy-1,2-diphosphonique pour la mise en oeuvre de l'invention, on préfère le sel dihydro génotétrasodique, le sel trihydrogéno-trisodique, le sel tétrahydrogénodisodique, le sel pentahydrogéno-monosodique et leurs mélanges. On peut également utiliser les autres sels (potassium, ammonium, mono-, di- et triéthanolammonium, etc, et leurs mélanges) à la condition de prendre les précautions nécessaires pour régler l'introduction totale du cation particulier dans la composition du sel. On peut préparer l'acide éthane-1,2-dicarboxy, 1,2 diphosphoniRue et les sels appropriés par une technique appropriée Xuelconque. Plr exemple on peut utiliser la réaction décrite par Pudovik dans "Soviet Research on Organo-Phosphorus Com-ounds", 1949-1356, Partie III, 547-85c, pour préparer l'ester de l'acide éthane-1,2-dicarboxy-1,2-diphosphonique qu'on peut ensuite convertir, par une réaction hydrolytique usuelle, en un acide libre. On peut utiliser la neutralisation par des composés alcalins tels que l'hydroxyde de sodium ou de potassium, un carbonate, etc, pour préparer le sel désiré de l'acide. Une description plus détaillée de la préparation de ces composés est donnée dans le brevet U.S. 3 562 166. On peut préparer l'acide éthane-1,2-dicarboxy-1,2 dihydroxy-1,2-diphosphonique et les composés apparentés utilisables par réaction d'un ester de l'acide éthane-1,2-dicarboxy-1,2diphosphonique avec un hypohalite d'un métal alcalin, qu'on fait suivre d'une hydrolyse at d'une saponification. Ce procédé est décrit plus en détail dans le brevet U.S. 3 579 570. On peut utiliser pour la mise en oeuvrede l'invention des mélanges des divers acides phosphoniques et/ou de leurs sels qui ont été énumérés. Dans un ode de mise en oeuvre particulièrement préféré de l'invention, on utilise des mélanges d'éthane-1-hydroxy-1?1- diphosphonates disodique et trisodique, le rapport molaire du sel disodique au sel trisodique étant compris -entre environ 4:1 et 1:1 et, de préférence, entre 3:1 et 1:1. Ces mélanges préférés de phosphonates permettent des explorations par scintillation d'une particulièrement bonne qualité (absorption excellente par le système osseux et faille absorption par les tissus mous). Pou les raisons qui seront indiquées ci-après, on préfère cependant limiter la proportion des-sels stanneux, chrom ux ou ferreux des polyphosphonates a une valeur ne dépassant pas 5' du total. Pour réduire la solution de pertechnétate (par exemple provenant du générateur précité), et pour complexer le technétium 99m, on utilise un sel stanneux, chromeux ou ferreux dans les compositions selon l'invention. Dans la technique antérieure, on a utilisé une solution aqueuse d'éth-ne-1-hylroxy-1,1-diphos~ pnonate distaneux comme agent réducteur et complexant. Cependant, une telle solution présente une instabilité à long terme, (c'esta-dire qu'elle subit une hydrolyse et/ou une oxy4ation) et, en conséquence, on doit l'utiliser assez peu de temps apures sa préparation.Lors des tentatives plus ou moins efficaces pour résoudre ce problème, les spécialistes de la technique antérieure avaient prévu un conditionnement élaboré permettant d'exclure l'oxygène (par exemple des ampoules en verre avec tous les risques que cela comporte d'une pénétration de fragments de verre dans le produit) ou bien on utilisait des excès portants d'ions métalliques réducteurs (par exemple d'ions stanneux) pour assurer, qu'en dépit d'une certaine oxydation, la capacité réductrice résiduelle reste suffisante.Avec ce dernier expédient, on risque d'introduire des proportions trop élevées de ces ions métalliques dams I' organisme du salade. Une autre maçon d'aborder ce problème, qui n'est pas entièrement satisfaisante, consiste à employer des solutions hautement acides pour tenter de réduire au minimum l'hydrolyse de l'ion stanneux. On a maintenant constaté que certains sels stanneur, chromeux et ferreux (et surtout les chlorures et les sulfates) en combinaison avec les phosphonates décrits (et surtout les mélanges préférés d'éthane-1-hydroxy-1,1-diphosphonates disodique et trisodique) conviennent sous forme snh-sdre pour l'addition d'une solution de pertechnétate en vue d'obtenir un agent d'exploration osseuse possédant une excellente sélectivité pour le systome osseux et assurant une faible incorporation de métaux. (Dans un but de simplification le terme "agent" est utilisé ci-après pour décrire le produit qu'on injecte dans l'animal dont on désire explorer le système osseux et an uti- lisera les expressions trousse" et 'mélange" pour désigner les ingrédients de l'agent nais à l'exclusion de la solution de technétium qu'on introduit ultérieurement pour former l'ageat). En outre, un tel mélange sous forme sèche est à peu près entièrement stable, en éliminant ainsi un problème laveur de la technique antérieure. L'efficacité de l'agent préparé à partir des trousses selon l'invention est surprenante si l'on considère les difeicultés éprouvées pour préparer une trousse convenable par lyophilisation de la solution de la technique antérieure, c' est-à-dire par la technique pharmaceutique, la plus courante de formation d'un produit sec et stable. On a maintenant établi qu'on peut préparer un agent d'exploration osseuse d'un type spécifique et hautement efficace en ajoutent une solution de pertechnétate préparée d'une façon usuelle à un mélange d'un "sel réducteur et complexant" (c'est-à-dire un sel anhydre non toxique des ions réducteurs et complexants choisis parai les ions stanneux, ferreux et chromeux) et d'un phosphonate choisi parmi ceux qui ont été énumérés . Les sels réducteurs et complexants spécialement préférés sont les chlorures et les sulfates en raison de leurs caractéristiques bien connues de sécurité ; leurs sels stanneux et surtout le chlorure stanneux anhydre sont spécialement recommandés (en raison du potentiel réducteur idél de l'ion stanneux en l'absence d'eau adsorbée). On a également constaté que les proportions du sel réducteur et complexant, par rapport au phosphonate dans le mélange, ont une répercussion sur l'efficacité de l'agent résultant. Far exemple, quand on utilise un mélange de chlorure stanneux et d'éthane 1-hydroxy-1,1-diphosphonate disodique, le complexe "actif" résultant dans l'agent comprend du technétium (réduit à partir du perthechnétate par l'ion stanneux) et l'éthane-1-hydroxy-1,1-diphosphonate distanneux. Un agent d'exploration pour un homme pesant 50 à 100 kg nécessite seulement 10 à 15 millicuries (mCi) d'activité 99mTc, ce qui correspond à des quantités minimes e 99mTc.L'invention utilise des proportions notablement plus faibles du produit réducteur et complexant (par exemple Sn++) que la technique antrieure. Cependant, la proportion préférée se situe notablement au-dessus de la valeur stoechiométrique et permet donc de tenir compte dins une certaine mesure de l'oxidation de l'agent réducteur avant son utilisation.Un très faible pourcentage seulement (par exemple 0.01%) d'ions stanneux ou autres ions réducteurs 1ui sont initialement présents au moment de l'addition du mélange à la solution de pertechnétate est nécessaire pour réduire le pertechnétate en 99Tc ; le restant forme des sels stanneux avec le phosphonate utilise. ûn pense que le .hosplionate stanneux ainsi obtenu forme un complexe avec le 99mTc. Il semble cependant que la formation et la stabilisation da complexe doivent être assures sar des proportions importantes d'excès de phosphonate si l'on veut éviter la perte de la stabi iit du complexe de 9ÙmTc et, par vole de conséquence, la perte de spécificité lors de l'exploration du sytème osseux. Un rapport mollir préféré de l'ion réducteur (par exemple Sn++) au phosphonate est compris entre environ 1:15 et 1:80 et, mieux encorne, entre 1:30 et 1:60. Bien que cela ne soit pas nécessaire pour la mise en oeuvre de l'invention, on préfère utiliser un diluant ou charge pharmaceutiquement acceptable pour diluer le sel réducteur et complexant en vue de simplifier le dosage des petites quantités nécessaires d'un tel sel. on préfère le chlorure de sodium et le glucose ; le chlorure de sodium est spécialement avantageux pour autant que son addition assure. que l'agent résultant sera au moins isotonique même si la solution de pertechnétate est hypotonique comme cela se produit quand on doit la diluer avec de l'eau stérile pour en réduire 1' activité. On mélange intimement les composants indiqués (par exemple dans les compositions qui seront décrites plus loin) et on conditionne sous protection d'azote dans des fioles de verre normalisées d'une contenance d'environ 5ml. Comme exemples de trousses appropriées selon l'invention, on peut mentionner des. fioles de verre contenant les ingPédientsindiqus d la page suivante (les proportions de chaque composant sont indiquées en mg) Quand on ajoute environ 5 ml d'une solution de per techtnétate 9)m, ayant une activité d'environ 50 à 75 mCi/ml à chacune des trousses indiquées et qu'on agite fortement, on obtient l'agent qu'on désire administrer, par exemple qu'on peut injecter par voie intraveineuse à un homme. De préférence, on utilise environ 1 ml de solution pour un adulte pesant de 50 à 100 kg et on effectue cette injection lentement, c'st--dir en plus de 30 secondes environ.On peut utiliser de doses plus faibles pour le traitement d'enfants, etc. On effectue avantageusement l'administration dans les trois heures qui suivent. la préparation. De toute évidence, une trousse peut contenir des multiples ou des fractions des doses indiquées pour permettre la préparation d'une quantité suffisante de l'agent en vue du nombre désiré d'explorations. Les agents préparés à partir du mélange A ont été utilisés sur des hommes avec d'excellents resultats. En outre, divers mélanges ont été utilisés au cours d'études en laboratpire sur des rats qui constituent d'excellents sujets pour des tests servant à déterminer l'action sur l'homme. Pour les rats, on a utilisé les moitiés des dosages pour l'homme et on a utilisé des doses allant de 0,001 à 1 mCi de 99mTc pour des études de distribution. Ces études de distribution chez l'homme indiquent que TROUSSES Composants A B C D E F G H I J Ethane-1-hydroxy-1,1 diphosphonat disodique 6 6 6 6 - - 6 3 4 3,5 Etane-1-hydroxy-1,1diphosphonate trisodique - - - - - - - - - 2,5 Méthane-diphosphate disodique - - - - - 4 - - - Méthane-diphosphate trisodique - - - - - 2 - - - Acide diclorométhanediphosphonique - - - - 6 - - 3 - Chlorure stanneux 0.16 0,16 - - 0.16 0,16 0,08 0,08 0,16 0,16 Sulfate ferreux - - 0,16 - - - - - - Chlorure chromeux - - - 0,16 - - 0,08 0,08 - Chlorure de sodium 27 - 27 - 7 27 - 27 27 27 Glucose - 27 - 27 - - - - - - l'agent formé avec la frousse A ayant une activité de 15 mCi, environ 3 heures après l'injection est normalement distribué dans l'organisme d'un homme pesant 70 kg, comme suit : 40 à 50% de la dose arrivent sur le système osseux ; 6% arrivent dans le sang et le complément est excrété dans l'urine. Il s'agit d'une distribution très satisfaisante pour dés explorations sûres et effi caches. Le moment optimal d'exploration osseuse est d'environ 3 heures au as l'injection, Si l'on veut détecter des régions calcifiées autres que le système osseux, le moment sera normalement différent. Par exemple, on peut détecter une athérosclérose calcique ou un infarctus du myocarde au bout de temps variables aFrès l'injection, selon le taux de circulation sanguine dans la région considérée. D'autre part, les phosphonates possèdent une certaine affinité pour diverses cellules proliférantes, par exemple les cellules associées aux ulcères de l'estomac. La distribution de ces agents d'exploration vers les sites de ce genre se produit normalement en une heure environ ; cependant le moisent optimal d'exploration varie naturellement selon la nature du site exploré. On conçoit qu'on peut apporter d'autres modifications aux modes de mise en oeuvre qui ont été décrits sans sortir pour cela du cadre de l'invention. REVENDICATIONS 1. Composition servant à la préparation d'un agent perfectionné d'exploration osseuse, caractérisée en ce qu'elle comprend un mélange sec de A. un compos phosphonique (dit "phosphonate") choisi Parmi les composés répondant aux formules ci-après ans laquelle chaque R est un atome d'hydrogène ou le groupe CH2OH et et n est un nombre entier de 3 à 10 dan. laquelle R1 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle en C1-C20, alcényle en C2-C20, aryle, phényléthényle, benzyle, halogène, hydroxyle, amino, amino substitué, -CH,COOH, CH2PO3H2, -CH2(PO3H)(OH), ou - [CH2C(PO3H2)2]n-H (dans laquelle n = 1 à 15), R0 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur, amino, benzyle, halogène, hydroxyle, -CH2COOH, -CH2PO3H2 ou -CH2CH2PO3H2 dans laquelle n est un nombre entier de 3 à 9 ; dans laquelle chaque R est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur dans laquelle n est un nombre entier de 2 à 4 dans lesquelles X et Y représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical hydroxy; et les sels pharmaceutiquement acceptables de chacun des acides indiqués ou de leurs mélanges; et 3. un sel d'acide chlorhydrique ou sulfurique anhydre d'un métal, choisi parmi les sels ferreux, chromeux, stanneux et leurs mélanges, en une quantité suffisante pour que le rapport molaire du métal au phosphonate soit compris entre environ 1:15 et 1:80. 2. Composition selon la revendication l,caractérisée en ce que l'ion métallique réducteur est l'ion stanneux, 3. Composition selon la revendication :1 ou 2, caractérisée en ce que le phosphonate est l'acide éthane-l-hydroxy-l,ldiphosphonique et ses sels pharmaceutiquement acceptables,notamment 1 'éthane-l-hydroxy-l, 1 -diphosphonate disodique. 4. Composition selon la revendication ),caractérisée en ce que le phosphonate est un mélange d' éthane-l-hydroxy-l, 1- diphosphonates disodique et trisodique,le rapport molaire du sel disodique au sel trisodique étant compris entre environ 4:1 et 1:1 et, de préférence, entre 3:1 et 1:1. 5.Composition selon la revendication 1 ou 2,caractérisêe en ce que le phosphonate est l'acide dichlorométhane-diphosphonique ou un sel pharmaceutiquement acceptable de cet acide. 6. Composition selon la revendication 1 ou 2,caractérisée en ce que le phosphonate est le sel sodique de l'acide méthane-di phosphonique. 7. Composition selon la revendication 2 caractérisée en ce que le sel stanneux est le chlorure stanneux. 8. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce qu'elle contient en outre de 1 à 50 parties de chlorure de sodium.