Brevet FR2210389A1 — publié le 19740712

La présente invention a pour objet de nouveaux sels des acides diacétoxy benzotques, répondant à la formule générale (I), ainsi que le procédé de préparation de ces composés et les médicaments qui les contiennent à titre de principe actif. Dans cette formule - un des groupes -O-CO-CH3 se trouvant obligatoirement en position 2 par rapport au radical carboxyle,- le second de ces groupes peut occuper la position 3, 4, 5 ou 6 du noyau benzènique, notamment la position 5 qui est particulià- rement favorable. - A représente un acide mono ou poly-aminé, pouvant porter d'autres substituants tels qu'un ou plusieurs radicaux hydroxyle, thiol ou guanidine. - et n est un nombre entier égal au moins à 1 et au plus à 5, les valeurs de 2 à 5 n'étant évidemment prévues, outre la valeur 1, que dans le cas où A représente un acide polyaminé. Parmi les acides- aminés désignés par le symbole A, on peut citer, par exemple, le glycocolle, l'alanine, la phényl-alanine, la lysine, l'acide aspartique, l'acide glutamique, la sérine, l'arginine, l'ornithine, la cystéine, utilisés sous leur forme lévogyre, dextrogyre ou racémique. Les composés de l'invention sont des médicaments utilisables en thérapeu -tique humaine et vétérinaire, notamment comme inhibiteurs de l'agrégation des thrombocytes. On peut les obtenir par application de méthodes connues de préparation des sels et, en particulier, par réaction de l'acide di-acétoxy-benzotque et de l'acide aminé, à température ambiante, au sein d'un solvant polaire, notamment hydroxylé, tel qu'un alcool ou un glycol. Selon que l'on veut obtenir un mono-(di-acétoxy-benzoate)[n = 1 dans la formule (I)S, ou, dans le cas des acides polyaminés, un poly-dacétoxy-benzoatel n = 2, 3, 4 ou 5 dans la formule (Ig, on utilise sensiblement une ou deux, ou trois, ou quatre, ou cinq molécules de l'acide diacétoxy-benzoSque par molécule de l'acide aminé. Les exemples non limitatifs qui vont suivre feront aisément comprendre comment l'invention peut être réalisée. EXEPIPLE 1. Mono-(di-acétyl-gentisate) de l-arginine Ç(i), le second -O-CO-CH 3 est en position 5, n = 1, A = l-arginineg Dans un ballon de 100 ml, on dissout 5 g (0,021 mole) d'acide diacétylgentisique et 3,65 g (0,021 mole) de 1-arginine dans 20 ml de méthanol. On agite cette solution pendant 15 minutes jusqu'à limpidité complète, on filtre et l'on évapore le solvant du filtrat au bain-marie, sous 20 mm de vide résiduel, à une température ne dépassant pas 30". On obtient un composé spongieux que l'on sèche finalement dans un dessicateur sous pression réduite, sur de l'anhydride phosphorique. On recueille ainsi 8,5 g (rendement : 98 %) du mono-(diacétyl-gentisate) de 1-arginine, sous forme d'un composé cristallisé blanc, non hygroscopique, très soluble dans l'eau. Analyse : C17H24N408 (412) *Calc. % C 48,70 H 5,91 N 13,36 Tr % C 48,67 H 6,32 N 13,37 48,42 6,26 13,57 *Calculées en tenant compte de la teneur en eau (Karl Fischer) de 1,6 %. Le di-(diacétyl-gentisate) de l-arginine s'obtient de façon similaire, en doublant la proportion d'acide di-acétyl gentisique par rapport à celle d'arginine. Ce sel est insoluble dans l'eau. EXENPLE 2. Bis-(diacétyl-gentisate) de l-lysine[(I), le second -O-CO-CH3 est en position 5, n = 1, A = 1-lysine] Dans un ballon de 100 ml, on dissout 10 g (0,042 mole) d'acide diacétylgentisique et 3,1 g (0,021 mole) de lysine dans 20 ml d'alcool méthylique. On agite ce mélange jusqu'a obtention d'une solution limpide, que l'on filtre, et dont on chasse le solvant sous un vide résiduel de 20 mm, en ne dépassant pas la température de 40 . On sèche le résidu dans un dessicateur sous vide, sur de l'anhydride phosphorique. On recueille ainsi 13 g (rendement = 100 7) de bis-(diacétyLgentisate)de l-lysine, sous forme d'un composé cristallisé blanc très soluble dans l'eau. Analyse : C28H34N2 14 (622) Calc. % C 54,02 H 5,47 N 4,50 Tr. 7 53,88 6,03 4,55 Les composés de l'invention ont été soumis à une série d'examens pharmacologiques et se sont révélés remarquables par l'activité antagoniste intense qu'ils exercent vis-a-vis de l'agrégation plaquettaire. Actuellement, il est généralement admis que l'acide acétylsalicylique est l'un des médicaments les plus précieux, sinon le plus précieux, dans ce domaine thérapeutique, bien qu'il exerce simultanément d'autres effets (activités analgésique, antipyrétique et anti-inflammatoire) et qu'il présente quelques inconvénients importants, notamment son action irritante pour les muqueuses digestives. oe, on a trouvé que, pour les composés de l'invention, les propriétés antagonistes vis-å-vis de l'agrégation des plaquettes se trouvaient dissociées de l'activité anti-inflammatoire, anti-pyrétique et analgésique, et que la toxicité était fortement diminuée et le pouvoir ulcérogène pratiquement supprimé. Les diverses substances de la série faisant ltobjet de l'invention ont des effets identiques,ou très voisins. On donnera donc, ci-après, à titre d'exemple, les résultats obtenus avec le mono-(diacétyl-gentisate) de l-arginine Composé (A)J et le bis-(diacétyl-gentisate) de lysine composé (B)en comparaison avec ceux fournis par l'acide acétyl-salicylique [composé (Cg . Sauf s'il en est précisé autrement, la posologie indiquée pour les composés (A) et (B) s'entend en poids d'acide diacétyl-gentisique renfermé dans le sel. Activi.té inhibitrice de l'agrégation des thrombocytes Cette activité est mise en évidence chez le Lapin de race fauve de Bourgogne d'un poids moyen de 3 kgs. Les animaux divisés en 4 lots reçoivent quotidiennement, par voie orale, pendant 3 jours consécutifs, 70 mg/kg de composé (A) (lot nO 1) ou de composé (B) (lot nO 2) ou de composé (C) (lot nO 3), en suspension dans une solution aqueuse de carboxyméthylcellulose (0,25 7) et de polysorbate 80 (0,20 %). Les témoins (lot nO 4) ne reçoivent que cet excipient. Vingt-quatre heures après ia troisième administration, on effectue un prélèvement sanguin par ponction cardiaque et l'on recueille le sang sur une solution aqueuse citratée sodique. Une centrifugation à très faible vitesse permet d'obtenir un plasma riche en plaquettes. On provoque leur agrégation par l'addition, in vitro, de 100 pg d'adrénaline par ml de plasma. Quinze minutes plus tard, on traite ce plasma suivant la méthode de K. Breddin (Die Thrombozyten Funktion, éditeur F.K. Schattaner-Verlag, Stuttgart-New York). Par obser vation au microscope des lames sanguines obtenues, on peut attribuer une note de 1 à 5, 1 représentant l'index d'un plasma à plaquettes bien individualisées, sans agrégation et 5 celui d'un plasma à agrégation maximale.Dans ces conditions expérimentales, les plasmas d'animaux ne recevant pas de-produits antagonistes de-l'agrégatíon des plaquettes, présentent tous un index hautement pathologique (4 ou 5). On estime que lés animaux sont protégés lorsque l'index est égal ou inférieur à 2. A la dose administrée, on a obtenu les résultats suivants Composé (A) protection de 70-75 % Composé (B) protection de 70-75 % Composé (C) protection de 40 à 50 7 Les composés de l'invention exercent donc une action inhibitrice de l'agrégation thrombocytaire supérieure à celle de l'acide acétyl-salicylique. Activités anti-inflammatoire et analgésique On a recherché si les composés de l'invention exercent un effet antiinflammatoire chez le Rat Sherman (oedème à la carragénine selon le protocole de C.A. Winter, Non-Steroidal Anti-inflammatory Drugs, Milan, 1964, p. 190) et une activité analgésique chez la Souris Swiss (contorsions provoquées par l'injection par voie intrapéritonéale d'acide acétique d'auprès R. Koster et Colt, Fed. Proc., 1954, 18, 412) et l'on a constaté que ces effets sont pratiquement nuls.Les doses efficaces 40 7, par voie orale, n'ont pas pu être calculées pour les composés (A) et (B), alors que celles du composé (C), substances de référence, sont de D E 40 = 100 mg/kg pour l'activité anti-inflammatoire D E 40 = 50 mg/kg pour l'activité analgésique-. Toxicité aiguë La DL 50 par voie orale a été calculée par essais sur des Souris Swiss des deux sexes, pesant en moyenne 20 + 1 g selon la méthode de J.T. Litchfield et J.R. et F. Wilcoxon (J. Pharmacol. Exp. Therap.1949, 96, 99) Les composés de l'invention sont nettement moins toxiques que l'acide acétyl-salicylique La DL 50 per os de ce dernier est 1,5 g/kg. Pour les composés (A) et (B), on a obtenu les résultats suivants Composé (A) DL 50 per os correspondant à 6,6 (4,81 - 9,04) g/kg d'acide diacétylgentisique. Composé (B) DL 50 per os correspondant à 4,5 (3,17 - 6,38) g/kg d'acide diacétylgentisique. Effet ulcérogène Les composés de l'invention ont la propriété remarquable d'être pratiquement dénués d'action ulcérogène. La présence des acides aminés exerce, en effet, une action tampon qui prévient tout pouvoir érosif sur la muqueuse gastrique. Alors que pour l'acide acétyl-salicylique recomposé (cilla DE ulcérogène 50 est de 170 mg/kg, pour les composés (A) et (B), cette DE 50 n'a pas pu être calculée. On a seulement observé qu'elle est supérieure à 500 mg/kg. Les résultats des expériences pharmacologiques qui viennent d'être exposés montrent que les composés de l'invention, très actifs comme inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire, pratiquement atoxiques et dépourvus d'effets secondaires nocifs (effet ulcérogène) ou parallèles (actions anti-inflammatoire, analgésique et antipyrétique), sont utilisables en médecine humaine et vétérinaire, dans le traitement préventif des thromboses. Ils seront administrés, en particulier, par voie orale, seuls ou associés entre eux, ou avec d'autres substances médicamenteuses avec lesquelles ils sont chimiquement, pharmaceutiquement, et thérapeutiquement compatibles, au sein des excipients usuels pour les diverses formes pharmaceutiques. La voie d'administration sera orale, endorectale ou parentérale. La dose orale par unité de prise pourra varier entre 1 et 1000 mg, la posologie quotidienne maximale étant de 5000 à 6000 mg, le médicament étant présenté sous toute forme pharmaceutique appropriée à cette voie, c'est-g-dire comprimés, dragées, gélules, capsules, cachets, solutés ou suspensions buvables en association avec les excipients usuels. La dose endorectale par unité de prise pourra varier entre 2 et 500 mg, la posologie maximale étant de 3000 mg par jour. Les principes actifs seront dispersés au sein d'une base de suppositoire telle que le beurre de cacao ou l'excipient dlImmhausen. Par voie parentérale réservée aux composés de l'invention solubles dans l'eau, la dose par unité de prise sera de 1 à 1000 mg , la posologie maximale quotidienne étant de 3000mg . La présentation sera faite sous forme de solution injectable tamponnée à pH physiologique. REVENDICATIONS 1) Nouveaux sels des acides diacétoxy-benzotques répondant à la formule générale (1) dans laquelle - un des groupes -O-CO-CH3 se trouvant -obligatoirement en position 2 par rapport au radical carboxyle, le second de ces groupes peut occuper la position 3,4,5 ou 6 du noyau benzènique. - A représente un acide mono-ou poly-aminé, pouvant porter d'autres substituants tels qu'un o plusieurs radicaux hydroxyle, thiol ou guanidine etse trouvant sous forme lévogyre, dextrogyre ou racémique. - et n est un nombre entier au moins égal à 1 et au plus égal à 5, les valeurs de 2 à 5 n'étant évidemment prévue, outre la valeur 1, que dans le cas où A représente un acide polyaminé. 2) Composés selon la revendication 1), dans lesquels acide aminé se trouve sous forme lévogyre, 3) Composés selon la revendication 1), dans lesquels l'acide di-acétoxy benzotque est l'acide diacétyl-gentisique. 4) Le monoAdiacétyl-gentisate) d'arginine 5) Le mono-(diacétyl-gentisateJ de l-arginine 6) Les mono- et bis-(diacétyl-gentisate) de lysine 71 Les mono- et b,is-(diacétyl-gentisate) de l-lysine 8) Médicament inhibiteur de l'agrégation plaquettaire renfermant parmi ces principes actifs l'un au moins des composés selon l'une quelconque des revendications lj à 7). 9) Méthode de préparation des composés selon lfune quelconque des revendications 1) ou 2), caractérisée par le fait que l'on fait réagir l'acide diacétoxy benzotque et l'acide aminé, à température ambiante, au sein d'un solvant polaire. 10) Méthode de préparation selon la revendication 9), caractérisée par le fait que le solvant polaire est hydroxylé. 11) Méthode de préparation selon la revendication 9), caractérisée par le fait que la proportion moléculaire d'acide diacétoxy-benzotque est de 1 ou 2 par molécule d'acide aminé selon que l'on veut obtenir un mono- ou un di-(diacétoxy- benzoate) d'acide aminé.