Brevet FR2224462A1 — publié le 19741031

L'invention a trait à un procédé perfectionné de préparation du sel résultant de la combinaison de l'acide ribonucléique avec les amino-acides et plus particulièrement la Lysine Ce produit peut être représenté par la formule dans laquelle la "base" est la guanine, la cytosine, l'adénine ou l'uracile, a proportion de chaque hase pouvant varier avec Troriginé biologique de l'acide. Le procédé selon l'invention permet en particulier 11 obtention de produit pur donnant des solutions limpides et stables. Il permet en outre d'obtenir des rendements particulièrement favorables. Le pt'océdé selon l'invention qui peut entre mis en oeuvre aussi bien avec de la DL Lysine qu'avec les isomères optiques de celle-ci, consiste essentiel lenlent à combiner llaciede- ribonucléique et la Lysine base dans les proportions nécessaires, compte tenu du poids moléculaire apparent de l'acide ribonucléique utilisés en ajustant le pH à une valeur comprise entre 6, 4 et 6,6 6 en opérant en milieu aqueux et, éventuellement en présence d'un solvant convenable, et de préférence à une concentration voisine de 10%. On obtient ainsi une solution colorée qui contien-t en suspension une petite proportion d'impuretés qui sont éliminées par centrifugation. Le respect cle la valeur indiquée pour le pH est particulièrement important car si on opère à des valeurs plus élevées, une certaine proportion d'impu retés passe en solution et on obtient aprcs les traitements un produit dont les solutions aqueuses ont tendance à précipiter. Il est également important d'opérer à une concentration inférieure à 15% La solution ainsi obtenue, éventuellement décolorée par passage sur du noir animal, tst concentrée partiellement sans dépasser 30 et on procède ensuite à une déshydratation azéotropique sous vide sans dépasser 30 , en utilisant un solvant ou un ensemble de solvants appropriés. Comme solvants, on peut utiliser en particulier la méthyl-éthyl-cétone, le butanol, l'alcool isobutylique ou un mélange de ceux-ci avec éventuellement addition de solvants tels que le benzène ou le toluène. Lorsque la plus grande partie de l'eau est entraidée, le produit commence à cristalliser et on poursuit l'entraînement jusqu'à ce que le mélange ne présente plus qu'une seule phase liquide. I1 suffit ensuite de séparer le produit par des techniques classiques. Pour expliciter la préparation du produit selon ltinvention, un exemple de réalisation est donné ci-après sans toutefois que les précisions apportées, en particulier en ce qui concerne les concentrations, Ia température des réactions et les autres détails opératoires, puissent être considérés comme ayant un effet restrictif. EXEMPLE 1 - PREPAEtATION DU RIBONUCLEATE DE DL LYSINE A 36, 5 gr. d'acide ribonucléique en suspension dans 270 ml d'eau distillée et correspondant à 0, 10 équivalent dracide par titration à la soude, on ajoute 44, 5 gr de solution aqueuse à 32 > 8 % de DL Lysine (soit 0,10 équivalent basique) en agitant. Lladdition terminée, on laisse agiter une demi-heure à température ordinaire et on vérifie que le pH d'une prise d'essai diluée 10 fois est bien compris entre 6,4 et 6,6. Sinon, on corrige par l'addition d'une petite quantité d'aci- de ribonucléique ou de DL Lysine en solution. Le pH ayant été ainsi vérifié et s'étant maintenu stable au moins une demiheure, on proeéde à la centrifugation de la solution au cours de laquelle est éliminée une petite quantité de matières visqueuses, rendant la filtration de la solution extremement difficile. On procède ensuite à un traitement avec du noir décolorant (2, 5 gr.), filtre la solution sur disque d'amiante et concentre ensuite sous un vide de 1 à 2m/m en maintenant la température entre 30 et 35 . Après élimination de 200 ml d'eau, la solution abtenue est additionnée de 500 ml dlisobutanol et de 100 ml de benzène et on procède à une déshydratation azéotropique dans un appareil du type Dean Strak en opérant sous un vide de 5 à l0m/m à une température comprise entre 30 et 35 . Lorsqu'il ne décante plus d'eau, on arrête le reflux dans ltappareil et poursuit la distillation pour retirer du mélange réactionnel la plus grande quantité du benzène. On refroidit ensuite à 0 et'essore le produit beige clair formé. I1 est ensuite séché sous vide à une température inférieure à 40 . Le produit ainsi obtenu qui pèse environ 41 gr., soit un rendement de 75%, est pulvérulent, légèrement coloré en beige et présente un point de décomposition voisin de 240 . Ce produit qui donne des solutions aqueuses, limpides et parfaitement stables, prés ente deux maxima d'absorption dans l'ultra-violet à environ 229 et 288m En solution aqueuse à 2, 5 % le pouvoir rotatoire spécifique est de 74 t + 2, 5 Les analyses élémentaires varient avec la qualité de l'acide ribonucléique de départ et son degré de polymérisation. On trouve généralement pour ltazote des valeurs comprises entre 15 et 18% et pour le phosphore, des valeurs comprises entre 6; 5 et 7. La densité optique à 229 m varie de 0, 34 à 0, 37, et à 288 my entre 0, 93 et 0, 97 pour une concentration de 50 mg/litre d'eau;le dosage du produit effectué par la méthode de Sôrensen de formol titration fait apparaître un poids moléculaire apparent compris entre 540 et 600. REVENDICATIONS 1 - Procédé perfectionné de préparation de sel résultant de la combinaison de l'acide ribonucléique avec la Lysine permettant d'obtenir des solu tions aqueuses stables caractérisé en ce que le pH delta solution est ajusté entre 6, 4 et 6, 6 lors de la combinaison. 2 - Procédé de préparation selon la revendication 1 caractérisé en ce que lson procède à une déshydratation azéotropique de la solution aqueuse obtenue lors de la combinaison. 3 - Procédé selon les revendications 1 et 2 caractérisé en ce que les sol vants utilisés pour la déshydratation azéotropique sont les alcools buty lique s ou isobutyliques, la méthyl- éthyl- cétone, éventuellement addition nés de benzène ou de toluène. 4 - Procédé selon les revendications 1, 2 et 3 dans lequel on utilise de la Dl Lysine. 5 - Procédé selon les revendications 1,2 et 3 dans lequel on utilise un iso mère optique de la Lysine.