Brevet FR2218090A1 — publié le 19740913

La présente invention se rapporte à un procédé de préparation dlun nouveau médicament contre les madies allergiques et obtenu à partir de l'urine recueillie chez des patients atteints de maladies allergiques de types divers. On a utilisé jusqutà maintenant, de façon classique, pour le traitement des maladies allergiques, des médicamentssymptomatiques c'est-à-dire, par exemple, des antShistamiques, des hormones adrénocorticostéroides et autres. Tous ces médicaments symptomatiques, bien qu'ils puissent inhiber temporairement la manifestation des maladies allergiqles, ntont pas d'effet pour obtenir une guérison complète des maladies, dont les symptomes peuvent quelques fois reprendre ou être aggravés lorsque la prescription est interrompue.On utilise également dans un petit nombre de cas, la désensibilisation et la stimulation non spécifique, comme thérapie pour ces maladies allergiques: mais leur effet thérapeutique ne peut être jugé comme satisfaisant. En ce qui concerne le mécanisme pathogénétique des maladies allergiques, on pense généralement que ces maladies sont provoquées par les substances chimiques, telles que llhistamine, la sérotonine, llacétylcholine et analogue, qui ont une telle activité pharmacologique et biologitue, étant produites et émises au cours de la réaction antigène- anticorps entre l'allergène et l'anticorps correspondant, pour donner lieu à des symptomes allergiques teS que Asthme, les rhinites allergiques, l'eczéma etc. Be présent inventeur, ayant eu l'idée deutiliser, dans des buts thérapeutiques, l'antigène produit en injectant un autoantigène, a antérieurement trouvé un nouveau procédé de traitement des maladies allergiques en utilisant l'autoantigène obtenu par un traitement chimique sur l'urine recueillie chez des patients atteins de maladies allergiques. (brevet japonais N 499.530). Cependant, comme un autoantigène y est impliqué, le procédé mentionné ci-dessus n'est pas approprié pour la production industrielle en masse, car, aussi bien du point de vue aspect matérielquedupSnt de vue application, l'urine doit correspondre à celle du patient atteint d'une certaine sorte de maladie allergique. Le présent inventeur fit d'autres recherches pour résoudre ce problème et, en utilisant non seulement l'urine recueillie chez des patients souffrant de maladies allergiquesd'un type fixé, mais également l'urine mélangée recueillie chez deux ou plusieurs groupes de patients souffrant de types de maladies allergiques variés, il obtint une substance par un certain traitement chimique, sans que l'urine des patients corresponde à un certain type de maladie allergique . Après des études cliniques répétées faites sur cette substance, le présent inventeur a découvert que ladite substance a un excellent effet thérapeutique sur toutessortesde patients souffrant de maladies allergiques de type varié sans spécifier le type de maladies allergiques. le présent inventeur a également trouvé que de nombreux sels métalliques bi-ou trivalents, parmi lesquels le chlorure de magnésium, le chlorure d'aluminium, l'acétate de plomb peuvent également être utilisés comme agents de précipitation, aussi bien que le chlorure de zinc, tandis que l'acide phosphongue et l'acide acétique et leurs sels de métal alcali, par exemple, le phosphate de potassium, l'acétate de sodium, l9acétate de potassium et analogue peuvent être utilisés comme réactifs d'extraction, aussi bien que le phosphate secondaire de sodium. La présente invention a été accomplie en se basant sur les connaissances mentionnées ci-dessus. Elle est caractérisée par le fait qu'unie solution aqueuse d'un sel métallique bi-ou trivalent est ajoutée, comme agent de précipitation, à l'urine mélangée recueillie chez plusieurs patients atteints de maladies allergiques, sans considération du type de maladie et sans spécifier le patient ; le précipité obtenu est séparé de la solution il est extrait avec un réactif d'extraction à un pH d'environ 6 à 9, de préférence pH égal 7,2 - 7,8 ; on ajoute à l'extrait un agent de précipitation fractionné, et le précipité obtenu est séparé et recueilli, tandis que ledit produit est dissout dans de liteau distillée et passé à travers un filtre de Seitz et stérilisé, si on le désire. On peut utiliser, comme agent de précipitation et d'extraction, les composés indiqués ci-dessus et, comme agent. de précipitation fractionnée, on peut utiliser du méthanol, de l'éthanol, de l'acétone et analogue qui sont employés habituellement dans ce but. En ce qui concerne les conditions de pH, en dessous de pH égal 6,le dégagement de l'ingrédient actif est impossible et, au-dessus de pH égal 9, l'ingrédient effectif peut être en danger d'être dénaturé, c'est pourquoi la gamme préférée de pH est entre pH égal 7,2 et pH égal 7,8. Du point de vue immurologique, l'effet thérapeutique de l'antigène sur la personne elle-meme (effet d'autoantfgène) et l'effet produit sur une quelconque personne (effet d'antigène obtenu à partir de -l'urine de différentes personnes) sont toutà fait différents dans leur mécann3me d'action dans le corps vivant. le traitement de-maladies basé sur l'idée d' auto-antigène a été essayé depuis de longues années, et son efficacité est acceptée. Cependant, onn'a pu trouver aucune publication indiquant que liutilisation de l'antigène de différentes personnes a été tentée pour utiliser les enseignements recueillis dans le passé. C'est probablement parce qu'on n'a pas pris en considération le danger provoqué par les chocs et autres, ou l'inefficacité, qui peuvent se produire lors de l'utilisation. le procédé selon la présente invention a permis un grand progrès dans le champs de la thérapeutie des maladies allergiques, en ce qui concerne l'utilisation effective, sure et variée des antigènes sur différentes-personnes. L'invention sera mieux comprise au cours de la description explicative qui va suivre en se reportant aux courbes annexées et dans lesquelles - la figure 1 illustre un spectre d'absorption ultraviolet, l'absorption étant représentée en fonction de la longueur d'onde (mN )i - la figure 2 illustre un spectre d'absorpticn infrarouge correspondant (méthode de plaquettes KBr) du médicament selon la présente invention. Sur cette figure, la transmission (en %) est représentée en fonction du nombre d'ondes (cm1). les propriétés physiques et chimiques du médicament pour maladies allergiques selon la présente invention sont décrites ci-dessous. (1) Apparence : Poudre amorphe brun pâle (produit lyophii- lisé) (2) pH : 7,0 - 8,0 (essai suivant le paragraphe 22 des méthodes générales d'essai dans la pharmacopée japonaise) (3) poids moléculaire : poids moléculaire moyen:1600 (déterminé par l'appareil Hitachi Modèle 115, de détermination du poids moléculaire par pression de vapeur différentielle) (4) Point de décomposition : 220 - 2800C (la couleur de la substance commence à changer à 2200C, et le même phénomène continuejusqu'à 280 C). (5) Spectre IR (voir figure 2) : les bandes d'absorption sont observées de façon apparente à 3050, 3000, 2950, 1650, 1550, 1450, 1380, 1250 et 650 cm-1. (6) Spectre W (voir figure 1) : J max = 280 (7) Analyse élémentaire : trouvé C : 43,80%, H : 6,51%, N : 12,60% S : confirmé qualitativement (8) Composition en amino-acides : 17 amino -acides nt été trouvés de façon sure : de la phosphosérine,'de l'acide aspartique, de la thréonine,de la sérine, du proline, de l'acide glutamique, de la glycine, de l'alanine, de la valine, de l'isoleucine, de la leucine, de la tyrosine, de la phényl alanine de la lysine, du 1-méthyl-histidine, d.e l'histidine, de l'arginine. (9) Réaction de couleur : réaction à la ninhydrine positive réaction au biuret : positive réaction sur le permanganate de potassium : négative réaction du miroir d'argent : négative (10) Solubilité dans les solvants : insoluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétone, l'éther, la pyridine, le benzène, le dioxane ; facilement soluble dans l'eau. le médicament préparé selon la présente invention a d'excellents effets thérapeutiques, efficaces pour tous les types de maladies- allergiques y compris les rhinites allergiques, l'asthme bronchique, l'eczéma, l'urticaire et autres dermatlques allergiques, les maladies gastrointestinales allergiques, les néphrites allergiques et les rhumatismes et arthrites rhumatismales et ainsi de suite aucune réaction opposée n'est reconnue et ce médicament peut empêcher en très grande partie une rechute. Ledit médicament selon la présente invention est admistré au malade souffrant de maladies allergiques par injections sous-cutanées ou intramusculaires, une à eux fois par jour, durant à peu près quinze jours, de vingt à soixante mg à la fois, après dissolution appropriée dans de 12 eau distillée ou du sérum physiologique, mais la fréquence d'administration peut être ajustée en fonction des symptomes. Aucun effet contraire nia été observé, meme après plus de -400 jours d'administration. La présente invention est mieux illustrée en détails par les exemples suivants. Cependant, la présente invention n'est pas limitée à ces exemples. Semple 1 On a ajouté à 600 ml dourine recueillie chez des patients atteints de rhinite allergique 70 ml de solution de chlorure de zinc à 50% ; le précipité résultant a été recueilli par séparation centrifuge, extrait avec 150 ml de phosphate secondaire de sodium ; le liquide surnageant ainsi obtenu a été extrait avec quatre volumes de méthanol froid pour un volume de liquide, le précipité résultant a été centrifugé, et dissout dans de l'eau distillée, puis le liquide surnageant futlyqtilwé: par filtration à travers un filtre de Seitz aseptique, et stérilisé, avant dgêtre mis dans des ampoules stérilisées de 20 mg. L'effet inhibiteur du phénomène d'Arthus du produit (sur des lapins) a été déterminé comme suit. On a administré à des lapins sensibilisés par de-l'-albumine de sérum bovin (appelé ci-après en abrégé BSA) à 100 mg/lapin en employant l'adjuvant de Freund, par injection péritonéale, à raison de 20 mg/lapin , ladite drogue témoin une fois par jour, tous les deux jours, dix fois. Le trentième jour, 5 mg/lapin de BSA furent injectés de façon sous-cutanée et l'effet inhibiteur du phénomène d'Arthus fut examiné, dont les résultats sont indiqués dans le tableau 1. :Lnhibition du phénomène :d'Arthus (4 semaines) Administré 10 fois * on a administré. au groupe témoin une solution de sérum physiologique Exemple 2 On a mélangé, à raison de 300 ml chaque, de l'urine recueillie chez deux patients atteints d'asthme bron'chique, d'un patient atteint d'urticaire, d'un patient atteint de dermatite atppique, et on a ajouté audit mélange 50 ml de solution de chlorure d'aluminium à 20% ; le précipité résultant a été centrifugé, puis extrait avec une solution d'acétate de sodium aqueux à pH 7,4 - 7,6.Le liquide surnageant ainsi obtenu a été précipité avec de l'éthanol à trois volumes pour un volume de liquide, et le précipité résultant a été recueilli par centrifugation, dissous dans de l'eau distillée, filtré à travers un filtre aseptique de Seitz ou un filtre milipore, et stérilisé . Chaque portion de 20 mg de la solution stérilisée fut mis dans 50 ampoules stérilisées et \nphiliEe' - L'effet inhibiteur du phénomène d'Arthus est examiné sur des lapins de la même façon que-celle décrite dans l'exemple 1. les résultats sont indiqués dans le tableau 2. Tableau 2 Tnhibition du phénomène d'Arthús : . (4 semaines) Administré 1 fois :Administré 5 fois + Administré 8 fois Administré 10 fois Administré 12 fois :Témoins* : * On a administré au groupe témoin une solution de sérum physiologique. Exemple 3 : On a ajouté à 30 1 d'urine recueillie auprès de 10 malades atteints d'asthme bronchique et de 10 malades atteint de rhinite allergique , 1,5 1 de solution de chlorure de - zinc à 50%, pour produire la précipitation, à laquelle on a ajouté une solution de phosphate secondaire disodique à 10%, le précipité résultant fut recueilli par centrifugation, et l'extraction fut accomplie à pH égal 7,4 à 7,6. le liquide surnageant résultant fut précipité avec de méthanol froid à quatre volumespour un volume de~liquide et le précipité fut recueilli par centrifugation, redissout dans trois litres d'eau distillée ; puis il fut filtré à - travers un filtre de Seitz aseptique ou un filtre milipore et stérilisé, la solution fut mise en ampoules stérilisées de 20 g etethilisée o On obtint 1500 ampoules de produit comme matériau témoin. la drogue témoin fut soumise à un- essai clinique sur 6 patients d'asthme bronchique, 7 patients de rhinite allergique et 5 patients d'eczéma, les résultats thérapeutiques obtenus furent pour l'asthme bronchique, trois cas éminemment efficaces, un cas efficace et deux cas inefficaces; pour la rhinite allergique, quatre cas éminemment efficaces, deux cas efficaces et un cas inefficace ; pour l'eczéma, cinq cas éminemment efficaces. Exemple 4 On a ajouté, à un litre d'urine recueillie au près de patients atteints de maladies allergiques de divers types (rhinites allergiques et urticaires), 70 ml de solution de chlorure de magnésium à 50% ; le précipité fut recueilli par centrifugation et extrait avec une solution de phosphate secondaire de sodium aqueux à pH égal 7,4 à 7,6 le liquide surnageant résultant fut de nouveau précipité avec de l'acétone à trois volumes pour un volume de liquide, le précipité résultant fut recueilli, après centrifugation, redissout dans de l'eau distillée et stérilisé comme auparavant. Chaque 20 mg fut placé dans une ampoule stérilisée, et lyophilisé. En utilisant le produit, l'effet inhibiteur du phénomène d'Arthus fut contrôlé de la même façon que décrite dans l'exemple 1. Les résultats sont illustrés sur le tableau 3. Tableau 3 Inhibition du phénomène : :d'Arthus (4 semaines) Administré 1 fois Administré 5 fois : ++ :Administré 8 fois + Administré 10 fois :Administré 12 fois :Témoins * : +++ * Solution de sérum physiologique administrée. Exemple 5 On a ajouté, à cinq litres d'urine mélangée recueillie auprès de patients souffrant de maladies allergiques (asthme bronchique, rhinites allergiques et urticaires), 300 nil de solution d'acétate de plomb à 30% ; le précipité résultant fut recueilli par centrifugation puis extrait avec de l'acétate de potassium aqueux à pH égal 7,4 à 7,6. On a ajouté, au liquide surnageant ainsi obtenu, du méthanol à quatre volumes pour un volume de liquide, et le précipité résultant fut recueilli par centrifugation, fut redissout dans 250 ml d'eau distillée. Chaque 20 mg de la solution stérilisée traitée comme dans l'exemple 2 fut mise dans une ampoule et lyophilisé. le produit fut controlé comme décrit dans l'exemple I pour l'effet inhibiteur du phénomène d'Arthus sur des lapins. (Tableau 4) Tableau 4 : :Inhibition du phénomène : :d'Arthus (4 semaines) : Administré 1 fois : ++ : Administré 5 fois : + Administré 8 fois Administré 10 fois : Administré 12 fois : Témoins* : +++ : * Solution de sérum physiologique administrée. Bien entendu, l'invention n1 est nullement limitée aux modes de réalisation décrits et représentés qui n'ont été donnés qu'à titre d'exemple. En particulier, eile comprend tous les moyens constituant des équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs combinaisons, si celles-ci sont exécutées selon l'esprit de l'invention et mises en oeuvre dans le cadre de la revendication qui suit. REVENDICATIONS 1- Procédé de préparation d'un médicament contre les maladies allergiques,utilisable pour traiter des patients,caractérisé en ce que l'on ajoute une solution de sel métallique bi ou trivalent à l'urine receuillie auprès de patients atteints de maladies allergiques d'un type ou de plus de deux types,on centrifuge les précipités résultants;on extrait avec une solution aqueuse d'acide phosphorique,d'acide acétique,ou de leurs sels métalliques alcalins,à un pH environ 6 à 9;puis,on ajoute l'agent précipitant fractionné à la solution extraite et finalement le précipité résultant est séparé et recueilli,ce médicament étant destiné à être utilisé pour traiter des patients quelconques souffrant d'un type quelconque de maladie allergique. 2- Médicament contre les maladies allergiques,utilisable pour traiter des patients quelconques souffrant d'un type quelconque de maladie allergique,caractérisé en ce qu'il est obtenu par le procédé de la revendication 1.