Brevet FR2209763A1 — publié le 19740705

Cette invention concerne un nouveau procédé de production d'une céphalosporine de type lactol ayant la formule développée suivante : dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupement alcoxy et R2 est un groupement acylamine ou imide, par oxydation d'une 3-hydroxyméthyl-4-carboxyl céphalosporine. Ces composés sont non seulement par eux-memes des agents antimicrobiens, mais ils sont également utiles pour permettre la synthèse ultérieure de dérivés de la céphalosporine. Quoique divers procédés aient été proposés pour produire des esters de l'acide 3-formyl-3-céphem-4-carboxylique, la plupart de ces procédés comportant une oxydation des esters 3-hydroxyméthyliques correspondants, comte le préconisent par exemple les brevets E.U.A. n 3.351.596, 3.682.903, la demande de brevet allemand publié n 2.128.605 et la revue "Journal of the Medicinal Chemistry"10, 966, (1967), on ne connait pas de procédé intéressant permettant de produire le composé (I) qui est une forme hydrolysée des esters mentionnés ci-dessus. Alors qu'on pourrait penser que l'hydrolyse des esters d'acide 3-formyl 3-céphem-carboxylique pourrait donner les composés (I), c'est en pratique peu intéressant, parce que, lorsqu' On a l'intention d'estérifier les acides 3-forNy1-3-céphem-4-carbo- xyliques sans provoquer la transition de la double liaison de a3 à #2, on ne peut lteffectuer qu'avec des composés diazoïques tels que le diazométhane, le diazoéthàne, le diphényldiazométhane, le phényldiazoéthane. Ce qui aggrave encore les choses, l'hydrolyse des esters nécessite des conditions si sévères que cette hydrolyse est accompagnée inévitablement par la dégradation des esters, d'où un mélange complexe. Même si l'on estérifie les acides 3-acétoxyméthyl-3-céphem 4-carboxyliques, estérification suivie par une hydrolyse sélective du groupement 3-acétoxy, une oxydation sélective du groupement 3-hydroxyméthyle et une hydrolyse de l'ester d'acide 4-carboxylique, on ne peut pas éviter les difficultés mentionnées ci-dessus. Une autre méthode possible est l'isomérisation d'un acide 7-phénylacétylamino-3-formyl-2-céphem-4-carboxylique (brevet E.U.A. N 3.682.903,mais cette méthode n'est pas intéressante, car le rendement du produit de départ à préparer & partir d'un composé disponible dans le commerce ainsi que le rendement de la réaction de transition sont tous deux très bas. Dans ces conditions, les présents inventeurs ont fait des recherches importantes et ont fini par découvrir que lorsqu'on oxyde un composé ayant la formule développée suivante dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis précédemment, ou lorsqu'on oxyde un sel de ce composé@à l laide d'un composé de chrome hexavalent, la réaction d'oxydation se produit faci lement et donne naissance aux composés prévus (I) avec des rendements excellents. Cette invention est l'aboutissement des découvertes mentionnées plus-haut. Dans la formule développée (II), R1 est un atome d'hydrogène ou un groupement alcoxy inférieur, tel qu'un groupement méthoxy, éthoxy, etc...; R2 est un groupement amine qui a été acylé par un groupement acyle qu'on peut trouver dans la partie correspondante des céphalosporines ou des pénicillines.Ainsi par exemple, les groupements amine peuvent etre protégés par des groupements acyle aliphatiquestels que les groupements hexanoyle, propionyle, heptanoyle, cyclopentanoyle, etc ..., des groupements acétyle monosubstitués tels que les groupements phénylacétyle, cyclohexylacétyle, thiénylacéthyle, tétrazolylacétyle, cyanoacétyle, phénoxyacétyle, nitrophénylacétyle, phénylthioacétyle, phénéthylthioacétyle, allylthioacétyle, benzylthiopropionyle, etc..., des groupements acétyle di-substitués tels que les groupements a-carboxyphénylacétyle, os-bromopropionyle, os-sulfothiénylacétyle, os-sulfophénylacétyle, os-hydroxyphénylacétyl, os-phénoxybutyloyle, phénylglycyle, cyclohexénylglycyle, thiénylglycyle, furylglycyle, phénylméthyl@lycyle, carbamoylphénylacétyle, 5-amino-5-carboxy va léryle, 5-benzpylamino-5-carboxyvaléryle, 5-isobornyloxycarbonylamino-5-carboxyvaléryle, &alpha;-(ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyle)-amino- phénylacétyle, 5(ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyl)amino-5-carboxyvaléryle, 5-(phénylacétyl)amino-5-carboxyvaléryle, 5-(p-(t-butyl) benzoylsulfonyl)amino-5-carboxyvaléryle, 5-tosylamino-5--arboxy- valéryle, 5-(p-(t-butyl)-benzoyl-5-carboxyvaléryle, etc..., un groupement acryle, des groupements acyle aromatiques tels que les groupements benzoyle, 2-6-diméthoxybenzoyle, etc..., des groupements acyle hétérocycliques tels que les groupements 5-méthyl-3-phényl-4-isoxazolylcarbonyle, 3-0-chlorophényl-5-méthyl4-isoxazolylcarbonyle, etc....R2 peut être également un groupement imide, par exemple un groupement phtalimide, succinimide, maléinimide, etc. Le composé de départ (II) à employer dans cette invention est soumis à l'oxydation soit sous la forme d'acide libre, soit sous la forme de son sel. Les sels des composés (II) sont généralement des sels de métaux alcalins, comme par exemple les sels de sodium ou de potassium, quoique le sel d'une base organique qui n'aurait pas d'influence nuisible sur la réaction d'oxydation, comme par exemple la triéthylamine, la pyridine etc..., conviendrait très bien. On met en oeuvre le procédé de cette invention en faisant agir un composé de chrome hexavalent sur un composé (II) en présence d'un solvant. Les solvants qu'on peut utiliser couramment com prennent entre autres, les solvants organiques tels que l'acétone, l'acétonitrile, le tétrahydrofuranne, g acétate d'éthyle, le chloroforme, le dichlorométhane, ltéther, le dioxanne, le diméthylformamide, le diméthylacétamide, 1' acide acétique et leurs mélanges. Il est souhaitable que ces solvants soient sensi b lement anhydres. Le composé de chrome hexavalent peut par exemple être l'anhydride chromique, le chromate de t-butyle, l'acétate de chromyle ou le chlorure de chromyle. Afin de favoriser la réaction d'oxydation, on emploie l'agent oxydant en combinais avec un acide tel que l'acide sulfurique, l'acide phosphorique ou l'acide acétique glacial. Toutefois, il faut noter que, étant donné que l'utilisation d'un acide en excès peut induire la lactonisation, il est souhaitable, lorsqu'on utilise le composé de départ (il) sous forme d'un sel, que l'acide employé ne dépasse pas la quantité nécessaire à la formation du sel, car il se formerait l'acide carboxylique libre.Ainsi, étant donné que la réaction dé lactonisation se produit rapidement à un pH voisin ou inférieur au pKa (approximativement 2,90) de l'acide 4-carboxylique, il est souhaitable de maintenir le pH du mélange réactionnel voisin du pKa de l'acide 4-carboxylique. Ainsi, lorsqu'on emploie un sel du composé de départ (II), par exemple, le rapport composé de chrome hexavalent (par équivalent d'oxydation) : acide (par mole) : composé à oxyder (II) (par mole) est de préférence 2:1:1 lorsque le composé à -oxyder (II) est un acide monocarboxylique, ou 2:2:1 lorsque ledit composé (II) est un diacide. Autrement dit, le rapport est généralement exprimé de la façon suivante 2:n:1, où n est le nombre de groupements acide mis en jeu dans le composé de départ (II).Ainsi, on obtient des résultants satisfaisants lorsqu'on laisse agir le composé de chrome hexavalent sur le sel du composé de départ (II), en présence d'une quantité suffisante d'acide pour transformer le sel en acide carboxylique libre. Lorsqu'on utilise le composé (il) sous forme d'acide carboxylique libre, il est nécessaire de faire réagir le composé de chrome hexavalent tandis qu on maintient le pH du mélange réactionnel à une valeur voisine du pKa de l'acide 4-carboxylique. A cet effet, le composé de chrome hexavalent (par équivalent dtoxydation) est utilisé à raison de deux fois le composé de départ (II) (par mole). En outre, on oxyde de préférence le composé (II) pour en former un sel de sodium ou de potassium, et cn met le sel en suspension dans le solvant choisi dans lequel il se trouve à l'état finement divisé. On dissout de préférence le composé de chrome hexavalent dans le solvant choisi qui contient une faible quantité d'eau c'est-à-dire la quantité nécessaire pour le dissoudre. L'humidité contenue dans le systeme de réaction, à savoir l'humidité qui se trouve par exemple dans l'acide, le solvant, le composé de chrome hexavalent etc, peut etre suffisante et il n'est dans ce cas pas besoin d'ajouter d'eau. D'une façon. générale,la réaction peut être conduite à la température anibiante, tout en refroidissant à l'aide de glace, la température étant de préférence comprise entre 0 et 300 C, et la réaction est généralement achevée en un laps de temps relativement court, disons approximativement 10 minutes. Le mélange réactionnel ainsi obtenu contient le composé prévu (I) qui, selon la polarité du solvant et le pH du milieu, peut exister soit sous la forme d'acide 3-formyl-4-carboxylique ayant la formule développée suivante (III) : dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis précédemment, cet acide étant un tautomère de la céphalosporine de type lactol (I), soit sous forme d'un mélange en équilibre des formes (I) et (III). Par exemple, dans l'eau, méthanol ou le méthanol à un pH supérieur à environ 3,0, les composés sont de préférence sous la forme d'acide 3-formylcarboxylique (III), tandis qu' àun pH environ 2,0 ou moins, ils se trouvent de préférence sous la forme lactol (I) dans les mêmes solvants. Le spectre de résonance magnétique nucléaire de l'acide libre des 3-formylcéphalosporines dans le diméthylsulfoxyde-d6 révèle que les composés se présentent sous la forme lactol (I) de façon prédominante, tandis que le spectre d'absorption ultraviolet des mes composés dans l'méthanol montre que ces composés existent principalement sous la forme d'acide 3-formylcarboxylique (III).C'est 1 la preuve qu'il existe une relation d'équilibre entre les formes (I) et (III). Lorsqu'un composé se trouve sous la forme d'acide 3-formylcarboxylique (IIIX, il est trop instable pour pouvoir être isolé par des modes opératoires courants, par suite de l'instabilité des groupements ss-lactame et formyle libres. Par ailleurs, lorsque le composé se trouve sous la forme lactol (I), il est suffisamment stable pour pouvoir etre séparé par des modes opératoires courants. Donc, en isolant le composé, on pourrait ajuster le pH du mélange réactionnel à 2-7 (de préférence environ 2,5-4) afin de maintenir le produit sous la forme lactol stable (I), puis on pourrait ensuite extraire le mélange réactionnel à l'aide d'un solvant organique tel que l'acétate d'éthyle, l'acétate de butyle, la méthylisobutylcétone, etc. On peut généralement purifier l'extrait par exemple par évaporation, recristallisation, etc. Outre les modes opératoires indiqués ci-dessus, on peut purifier le composé par des modes opératoires usuels tels que la chromatographie en phase liquide, la chromatographie en couche mince, etc. On traite le composé (I) par un alcool tel que le méthanol, méthanol, le propanol et le butanol, en présence d'un acide ou d'un agent d'acylation tel que le chlorure d'acétyle, le bromure d'acétyle et 1'anhydride acétique, gracie à quoi le groupement hydroxyle du lactol du composé (I) est substitué par un groupement alcoxy ou acyloxy. On peut préparer le composé de départ (II) ou son sel par élimination du groupement acétyle des composés ayant la foule développée suivante dans laquelle R1 et R2 sont tels que précédemment décrits, l'éli- mination du groupement acétyle étant effectuée par hydrolyse enzymatique ou chimique des composés ayant la formule développée ci-dessus. Parmi ces derniers, on peut obtenir directement la 3-désacétylcéphalosporine C par des procédés de fermentation et on peut l'utiliser comme matériau de départ dans la réaction d oxydation. Les composés (I) sont des antibiotiques vis-à-vis des souches de Micrococcus pyrogenes var. aureus, pneumobacillus et typhoid bacillus résistant à la pénicilline. On peut donc utiliser cescomposés par exemple comme médicaments ou bactéricides afin d'empêcher des infections des auxdits micro-organismes ou on peut encore les utiliser comme additifs de produits aiimentaires afin d'en préserver les qualités nutritives. Quelle que soit l'application, on peut facilement déterminer la forme posologique ou la forme de préparation grâce à un mode opératoire bien connu dans la technique des antibiotiques. En outre, le composé (I) ou ses dérivés alcoxy ou acyloxy peuvent être utilisés comme intermédiaires et permettre la produit tion d'autres céphalosporines. On peut par exemple les faire réagir avec des composés aminés, comme par exemple l'hydrazine non substituée, les hydrazines substituées par des groupements alkyle, aryle ou héterocycliques, telles que la méthylhydrazine, l'éthylhydrazine, l'isopropylhydrazine, la phénylhydrazine, la p-nitrophénylhydrazine, la 3-5-diméthylhydrazine, la pyridylhydrazine, la thiénylhydrazine, la l-amino-4-méthylhydrazine, etc; les acylhydrazines dont les groupements acyle sont aliphatiques, aromatiques ou hétérocycliques, tels que les groupements acétyle, propionyle, butylyle, valéryle, benzoyle, toluoyle, salicyloyle, cinnamoyle, picolyle, thiénylacétyle, phénylacétyle, phénylthioacétyle, phénylpropionyle, pyridylthioacétyle, cyanoacétyle, cyclohexylacétyle, &alpha;-hydroxyphénylacétyle, etc; le3 thiosemicarbazides telles que la thiasemicarbazide, la phénylthiosemicarbazide, l'éthylthiosemicarbazide, l'acétylthiosemicarbazide la chlorophénylthiosemicarbazide, etc; l'aminoguanidine et ses dérivés; les hydroxylamines telles que 7'hydroxylamirie, l'o-méthyl- hydroxylamine, l'o-acétylhydroxylamine, l'o-isopropoxyhydroxylamine, l'acide hydroxylamine-o-sulfonique, etc; les amines primaires telles que les amines hétérocycliques, les alkylamines, les allylamines, les arylamines, conaae par exemple l'éthylamine, la propylamine, l'allylamine, la cyclohexylamine, l'aniline, la pnitroaniline, l'o,p-dinitroaniline, l'o-chloroaniline, la naphtylamine, la pyridylamine, la thiénylamine, la 4-méthylpipérazylamine, la furylamine, etc; et les N-imines, comme par exemple la pyridine N-imine, la quinoline N-imine, etc; dans un solvant tel que l'eau, le méthanol, l'éthanol, etc, en présence d'un catalyseur acide, comme par exemple l'acide sulfurique, l'acide chlorhydrique, etc, de façon à obtenir l'iminométhylcéphalosporine substituée représentée par la formule développée suivante : dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis ci-dessus, R3 est un atome d'hydrogène, ou un groupement hydroxyle, amine, -OSO3H ou un résidu organique. Le composé (V) a d'excellentes caractéristiques comme antibiotique et présente par exemple une activité contre les bactéries Gram-positives, Gram-négatives et contre les bactéries résistant à la pénicilline, et on peut utiliser ce composé de la meme manière que le composé (I). On va maintenant illustrer la présente invention plus en détail avec référence aux exemples, mais il est bien entendu que les exemples sont simplement donnés à titre d'illustration et ne doivent pas entre considérés comme limitant l'invention, et qu'on peut procéder à de nombreuses variations sans pour autant s' écarter du cadre de l'invention. Dans ce mémoire descriptif, "g", "mg", "ml", "cm", "Hz", "MHz", "nm", "p.f." et "décomp" sont respectivement les abréviations de "gramme", "milligramme", "millilitre", "centimètre", "Hertz", "mégahertz", "nanomètre", "point de fusion" et "décomposé", toutes les températures données ne sont pas corrigées et les pourcentages sont tous rapportés au poids sauf spécification contraire. Les spectres RM & dans les exemples donnés ci-après ont été mesurés à laide d'un spectrcmètre Varian T60 ou d'un spectromètre NAIOO, avec le tétraméthylsilane comme référence interne. Les valeurs de # sont exprimées en p.p.m. Sauf spécification contraire, on a utilisé comme solvant le chloroforme deutéré. Le symbole "s" signifie un singlet, "d" un doublet, "t" un triplet, "qn un quartet, "q AB" un quartet de type AB, "m" un multiplet et "J" une constante de couplage en Hz. Exemple 1 (1) N-Isobornyloxycarbonyl-désacétylcéphalosporine C disodique A la céphalosporine C monosodique (47,4 g) on ajoute de l'eau (500 ml) et de l'acétone (150 ml) et on maintient le mélange résultant à 3 -4 C. Tout en agitant le mélange, on ajuste son pH à 9,0 en ajoutant du carbonate de sodium en poudre, puis on ajoute goutte à goutte le chlorocarbonate daisobornyle (43,3 g) pendant une période de 1,5 heure. Tout au cours de cette période, on ajoute le carbonate de sodium en poudre de temps en temps pour maintenir le pH du système à 9,0. On agite le mélange à 3 -4 C et on maintient le pH à 9,0 pendant encore 1-,5 heure. Puis, on amène le pH à 7,0 en ajoutant de l'acide phosphorique et on chasse par distillation une fraction importante de L'acétone sous pression réduite. On lave deux fois le concentré à l'acétate d'éthyle (400 ml) et on refroidit la couche aqueuse à oe C et on ajuste le pH à 2,5 à l'aide d'acide phosphorique, tout en agitant. Puis on extrait la couche à l'acétate d'éthyle (600 ml) trois fois. On sèche l'extrait sur sulfate de sodium anhydre, puis on le concentre jusqu'S siccité sous pression réduite. Ce mode opératoire permet d'obtenir la N-isobornyloxycarbonyl-céphalosporine C (55,4 g). (2) On transforme la N-isobornyloxycarbonyl-céphalosporine C (5,96 g) en sel disodique en ajoutant de l'eau (20 ml) et du carbonate de sodium (1,68 g.). A cette solution aqueuse, on ajoute un tampon de phosphate (pH 7,2, 100 ml) et une lipase produite par Rhizopus NR400, fabriquée par Osaka Saikin Kenkyusho sous la marque "Saiken 100" (9,54 g). A une température constante de 300 C et en maintenant le pH à environ 7,2, on agite le système pendant 16 heures. Puis on filtre le mélange réactionnel sous vide en utilisant de la terre à diatomées fabriquée par Johns-Manville Eales Corp. sous la marque "Hyflo-Super-Cel" comme adjuvant de filtration et on concentre le filtrat par lyophilisation. On fait passer le concentré sur une colonne de copolymère de polystyrène et de divinylbenzène fabriqué par Lorm & Hass sots la marque "Amberlite XAD-2". On irrigue d'abord la colonne avec de l'eau, puis Evec une solution aqueuse d'éthanol à 5 % (VOL/VOL). On réunit les fractions contenant le composé et on concentre sous pression réduite pour éliminer méthanol. Puis on lyophilise le concentré de façon à obtenir la N-isobornyloxycarbonyl-désacétylcéphalosporine C disodique (4,87 g), point de fusion : 1651700 C (décomposition). Spectre de résonance magnétique nucléaire (D2O) : # 4,43(2H,s, 3-CH2OH), 5,26(1H,d, J=5Hz, 6-H # 5,77(1H,d, J=5Hz, 7-H) Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1760 cm-1 (cycle de ss-lactame), 1599 cm-1 (-CO2Na) Spectre d'absorption ultraviolet @H2O 261-5 nm @ H2O 225@5nm max (3) Acide 7 -ss 7-13- (D-5-(isobornyloxycarbonyl)amino-5-carbowvaléramido) 3-formyl-3-céphem-4-carboxylique. On ajoute de l'acétone (80 ml) à la N-isobornyloxycarbonyl- désacétylcéphalosporine C disodique (2,99 g) et on agit la suspension résultante sous refroidissement à 50 C. Puis, on ajoute goutte à goutte 1,88 ml d'une solution (appelée ci-après plus brièvement réactif B) composée d'anhydride chromique (2,67 g qualité de choix), d'acide sulfurique concentré (5,52 ml, solution de H2S04 à 1,77 g/ml) et d'eau (pour complèter à 15,0 ml) pendant une durée de 3 minutes, puis on agite pendant encore 20 miputes à 50 C. Après achèvement de la réaction, on chasse par distillation une fraction importante de l'acétone, puis on ajoute de l'eau (30 ml). On extrait la solution trois fois avec de l'acétate d'éthyle (50 ml).On sèche la couche à l'acétate d'éthyle sur sulfate de sodium anhydre, puis on l'évapore jusqu'à siccité sous pression réduite. Le mode opératoire donne 2,06 g d'acide 7-ss-(D-5(isobornyloxycarbonyl)amino-5-carboxyvaléramido)-3-formyl3-céphem-4-carboxylique. Spectre de résonance magnétique nucléaire (diméthylsulfoxyde-d + D2O): # 5,07(1H,d, J=5Hz, 6-H), 5,75(1H,d, J=5Hz, 7=H), 6,23 (1H, s, H i OH / \ OH Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) :1797cm-1(cycle de ss-lactame). Spectre d'absorption ultraviolet #maxH2O 300 nm; #min.H2O 238 nm H2O-H2SO4 260 nm; #minH2O-H2SO4 233 nm. max min Le spectre de résonance magnétique nucléaire de ce produit dans le diméthylsulfoxyde-d6 révèle que ce produit prend la forme lactol qui est un tautomère de 1 l'acide 3-formyl-carboxylique, tandis que le spectre d'absorption ultraviolet du meme produit en solution aqueuse suggère qu'il prend la forme de l'acide 3-forngl- carboxylique . Le spectre d'absorption ultraviolet du même produit dans une solution diluée d'acide sulfurique indique qu'il existe sous la forme lactol. Exemple 2 (1) N-Phénylacétyl-désacétylcéphalosporine C disodique A) On dissout la céphalosporine C monosodique (4,20 g) dans de l'eau (50 ml) et on maintient la solution à 30 C, tout en agitant. On ajuste le pH de la solution à 8,5 avec du carbonate de sodium en poudre, puis on ajoute progressivement une solution de chlorure de phénylacétyle (1,60 g) dans de l'acétone (10 ml). Après avoir achevé l'addition goutte à goutte, en maintenaztle pH à 8,5, on agite encore le mélange dans les memes conditions pendant 2 heures. On ajuste le pH du mélange réactionnel à 7,20, à l'aide d'acide phosphorique et on concentre le mélange sous pression réduite à environ 30 ml. A ce concentré, on ajoute un tampon de phosphate pour amener le pH à -7,20 et pour amener le volume à 70 ml. On ajoute à cette solution la lipase "Saiken 100" (5,0 g) et tout en maintenant le tDmpérature du liquide à 300 C, on agite le système pendant 20 heures. Après la réaction, on élimine par filtration les insolubles et on concentre le filtrat sous pression réduite à environ 15 mi. Puis on fait passer le concentré sur une colonne chromatographique d'Amberlite XAD-2, qu'on irrigue avec de l'eau pour enleverlenzyme et le sel inorganique, puis avec une solution aqueuse à 1 % d'éthanol. On lyophilise 1'éluat afin de récolter une poudre blanche à 1 'état finement divisé de N-phénylacétyl-désacétylcéphalosporine C disodique (3,82 g). Spectre de résonance magnétique nucléaire (D2O) # 2,l-l,5(4H), 2,5-2,3(2H), 3,45 et 3,?2 (2H, J=18 Hz, 2-H), 3,74(2H), 4,28(1H, t), 4,38(2H, 3-CH2OH), 5,17 (1H, d, J=4Hz), 5168(1H, d, J=4Hz), 7,47 (5H). B) On dissout dans de l'eau (40 ml) la désacétylcéphalosporine C monosodique (3,72 g) et tandis qu'on agite la solution à une température constante de 30 C, on ajuste son pH à 8,5 à l'aide de carbonate de sodium. A cette solution on ajoute ensuite, goutte à goutte, une solution dechlorure d'acétyle (1,60 g) dans de l'acétone ( 10 ml). Après avoir achevé l'addition goutte à goutte, on agite encore le mélange dans les mêmes conditions pendant 2 heures. Après la réaction, on ajuste le pH du mélange à 7,0 à laide daacide phosphorique et on concentre le mélange sous pression réduite à 15 ml. On effectue la chromatographie du concentré sur une colonne de résine d'Amberlite XAD-2 (500 mis On irrigue la colonne avec de l'eau, puis avec une solution aqueuse à i % d'éthanol (Vol/Vol). On lyophilise l'éluat de façon à récolter une poudre blanche a l'état finement divisé de N-phénylacétyl-désacétylcépha- losporine C disodique (4,18 g).On identifie ce produit à laide de l'échantillon de N-phénylacétyl-désacétylcéphalosporine C disodique préparé par le procédé ci-dessus A en comparant leurs spectres d'absorption infrarouge (2) Acide 7-ss-(5-carboxy-5-phénylacétylaminobutyramido)-3formyl-3-céphem-4-carboxylique. Dans de l'acétone (10 ml) on met en suspension la N-phényl acétyl-désacétylcéphalosporine C disodique (510 mg) et on refroidit le mélange à 50 C avec de la glace sous agitation. A cette suspension, on ajoute le réactif B selon l'exemple 1 (0,375 ml) pendant un laps de temps de 10 minutes, puis on concentre le mélange réactionnel sous pression réduite. Au résidu on ajoute de l'eau (10 ml), puis on l'extrait avec trois fractions d'acétate d'éthyle (30 ml). On réunit les couches organiques, on les lave à l'eau, on les déshydrate (sur sulfate de sodium anhydre) et on les concentre.Le mode opératoire donne un échantillon presque pur d'acide 7-ss-(5-carboxy-5-phénylacétylaminobutyramido)-3-formyl-3-céphem4-carboxylique (312 mg) sous la forme lactol Spectre de résonance magnétique nucléaire (diméthylsulfoxyded6): #5,07(1H,d, J=5Hz), 5,76(1H, d, J=5Hz), 6,23(lH,s Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1794 cm (cycle de -lactame). EtOH Spectre d'absorption ultraviolet : #max@@@@ 299 nm Le spectre de résonance magnétique nucléaire de ce produit dans le diméthylsulfoxyde-d6 indique que le composé prend la forme lactol, tandis que le spectre d'absorption ultraviolet du même composé dans méthanol suggère que le composé prend la forme formyl. Exemple 3 (1) Dans un tampon de phosphate (pH 7,2, 200 ml) on dissout 10,12 g de sel de sodium d'acide 7-ss-(2-thiénylacétamido)-3-acétoxy- méthyl-3-céphem-4-carboxylique. A cette solution on ajoute la lipase "Saiken 100" (10 g) et on laisse réagir le système sur un bain d'eau à 300 C pendant 16 heures, tout en agitant de façon constante. Pendant toute cette période, on ajoute au système une solution aqueuse de bicarbonate de sodium pour que le pH ne descende pas au-dessous de 7,2. Après que la réaction a été achevée, on filtre le système en ajoutant un adjuvant de filtration, à savoir la terre à diatomées fabriquée par Johns-Manville Sale Corp sous la marque "Celite". On concentre le filtrat sous pression réduite à environ 50 ml et on fait passer le concentré sur une colonne d'Amberlite XD-2 (5x57cm). On irrigue la colonne tout d'abord avec 500 ml d'eau, puis avec une solution aqueuse à 10 % méthanol (Vol/Vol).On lyophilise l'éluat pour récolter une poudre blanche à l'état finement divisé de sel de sodiumd'acide 7-ss-(2-thiényl- acétamido)-3-hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique (7,8 g). Spectre de résonance magnétique nucléaire (D2O) : 3,48 et 3,72 (2H, J=18Hz), 4,00(2H, s), 4,39(2H, s), 5,17(1H, d, J=SHz), 5,72(1H, d, J=5Hz), 7,15(2H); 7,45(1H). Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 3270çm 1752cm-1, 1659cm-1, 1595cm-1, 1546cm-1. Spectre d'absorption ultraviolet #H2O 235 nm (# - 11 000) max (2) Acide 7-,8-(2-thiénylacétamido)-3-forlayl-3-céphem~4-carbowlique Dans 60 ml d'acétone, on met en suspension le sel de sodium d'acide 7-ss-(2-thiénylacétamido)-3-hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique (1,128 g). Puis, en refroidissant avec de la glace et en agitant on ajoute progressivement goutte à goutte à la suspension mentionnée ci-dessus 0,75 ml d'une solution (appelée ci-après "réactif A") composée d'anhydride chromique (2,67 g qualité de choix), de l'acide sulfurique concentré (2,26 ml; teneur en H2S04 1,77 g/ml) et de l'eau (pour compléter à 10,0 ml). Après avoir achevé l'addition goutte à goutte, on agite le mélange dans les mêmes conditions pendant encore 10 minutes. Puis on concentre le mélange réactionnel et on ajoute de l'eau au concentré. On extrait le mélange deux fois à l'acétate d'éthyle (70 ml) et on lave les couches organiques deux fois à l'eau (50 ml), on déshydrate sur sulfate de sodium anhydre et évapore sous pression réduite pour chasser l'acétate d'éthyle. Le mode opératoire permet d'obtenir 1'acide 7-ss-(2-thiénylacéta- mido)3-formyl-3-céphem-4-carboxylique (576 mg). Spectre de résonance magnétique nucléaire (DMSO-d6) # 3,68(2H), 3,74(2H, s), 3,80-4,60(1H,m.), 5,06 (1H, d, J=5Hz), 5,82(1H, q, J=5 et 8 Hz), 6,23(1H,s, H ),6E90(2H), OH: 7,29(1H), 9,15(1H, d, J=8Hz) Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1790 cm-1, 1770 cm 1, 1675 cm-1, 1535 cml. Spectre d'absorption ultraviolet #H2O 234 nm; #H2O 299,5 nm max max Le spectre d'absorption ultraviolet de ce produit révèle la structure de l'aldéhyde. Par ailleurs, les spectres infrarouge et de résonance magnétique nucléaire du même produit attestent la structure lactol qui est un tautomère de la structure aldéhyde. (3) Dans le méthanol (25 ml) on dissout de l'acide 7-ss-(2-thiényl- acétamide 3-formyl-3-céphem-4-carboxylique (1,00 g), et on ajoute une quantité catalytique d'acide chlorhydrique concentré. On laisse reposer la solution à la température ambiante pendant 20 minutes. Puis on concentre le mélange réactionnel sous pression réduite et on recristallise les cristaux résultants dans le méthanol. Le mode opératoire donne le composé (917 mg) ayant la formule générale suivante Point de fusion : 205 -209 C (décomposition). Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1795 cm@@ (cycle de ss-lactame), 1663 et 1566 cm-1 (liaison amide). Spectre d'absorption ultraviolet #CH3OH 236 nm (#=12000), 260 nm (#=6500) max Spectre de résonance magnétique nucléaire (diméthylsuîfoxyde-d'6 100MHZ) : # 3,50(3H, OCH3), 3,65(2H, q de type AB, J=lsHz, 2-proton), 3,78(2H, @-@ CH2-), 5,10(1H, d, J=5,OHz), 5,88(1H, q, J=5,0 et 8,0 Hz), 6,08 (1H, s, # , 6,90(2H), 7,27(1H), 9,20(1H, J=8,OHz,NH) Dans méthanol (25 ml) on dissout de l'acide 7-ss-(2 thiényl- acétamido)-3-formyl-3-céphem-4-carboxylique (1,00 g) et une quantité catalytique d'acide chlorhydrique concentré. On laisse reposer la solution à. la température ambiante pendant 30 minutes. Puis on concentre le mélange réactionnel sous pression réduite et on recristallise les cristaux résultants dans un mélange de dichlorométhane et d'éther. Le mode opératoire donne le composé (920 ng) ayant la formule développée suivante Point de fusion : 174 -175 C Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 3325 cm 1796 cm-1, 1780 cm-1, 1675 cm-1, 1535 cm-1. -Spectre d'absorption ultraviolet ? # EtOH 236,5 nm max (# =11400), 260 nm (# =6230) Spectre de résonance magnétique nucléaire (chloroforme deutéré, 100 MHz) :# 1,27(3H, t, -CH2CH3), 3,53(2H, s, 2-proton), 3,84(2H, s), 3,82 (2H, CH@CH@), 4,98(1H, d, J=5,0 Hz), 5,84(1H, 5,88(1H, q, J=5,0 et 9,OHz), 6,64(1H, J=9,OHz, NH) 6,96(2H), 7,20(1H) Analyse élémentaire: Trouvé : C = 50,47; H = 4,23; N = 7,13 % Calculé pour : C16H16N2O5S2: C = 50,51; H = 4,24; N = 7,34 % Exemple 4 (1) Sel de sodium de l'acide 7-ss-(D-&alpha;-(ss-Méthylsulfonyléthoxy- carbonyl)aminophénylacétamido)-3-hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique. A l'acide 7-ss-(D-&alpha;-aminophénylacétamido)-3-acétoxyméthyl -3céphem-4-carboxylique (8,10 g) on ajoute de l'eau (100 ml) et de l'acétone (20 ml). On refroidit cette solution à 3 -4 C et, sous agitation, on ajoute de la poudre de carbonate de potassium à la solution pour amener son pH à 8,5. Puis on ajoute goutte à goutte une solution de chlorure de ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyle (4,48 g) dans de L'acétone (20 ml ) pendant une durée de i héure. Durant cette période, on ajoute de temps, à autre de la poudre de carbonate de potassium pour maintenir le pH à 8,5. Puis, à une température constante de 3 4 C, on agite encore le mélange réactionnel pendant 1 heure. Puis on ajuste le pH à 7,0 avec de la acide phosphorique et on chasse par distillation une fraction importante de l'acétone sous pression réduite.On lave le concentré à l'acétate d'éthyle (100 ml) deux fois et, tout en agitant à 50 C, on amène son PH à 2,5 à l'aide d'acide phosphorique. On extrait le précipité résultant à l'acétate d'éthyle (150 ml) deux fois. On réunit les extraits et on les sèche sur sulfate de sodium anhydre, puis on les concentre jusqu'à siccité sous pression réduite. Le mode opératoire donne l'acide 7-ss-(D-&alpha;-(ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyl)- aminophénylacétamido)-3-acétoxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique (10,50 g). On transforme cet acide 7-ss-(D-&alpha;-(ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyl) amino-phénylacétamido)-3-acétoxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique (5,00 g) en son sel de sodium correspondant en ajoutant de l'eau (30 mi) et du bicarbonate de sodium (0,756 g). A cette solution aqueuse on ajoute un tampon de phosphate (pN 7,2; 100 ml) et la lipase "Saiken 100" (8,00 g), et à une température constante de 300 C, on agite le système pendant 13 heures, le pH étant réglé à environ 7,2. On fait passer le mélange réactionnel résultant sur une colonne d'Amberlite XD-2. On injecte dans la colonne tout d'abord de l'eau, puis une solution aqueuse d'éthanol à 10 % (Vol/Vol). On réunit les fractions contenant le produit prévu et on les concentre sous pression réduite pour chasser l'éthanol. On lyophilise le concentré de façon a récolter un sel de sodium de acide 7-ss-(D-&alpha;-(ss-méthyl- sulfonyléthoxycarbonyl)aminophénylacétamido)-3-hydroxyméthyl)-3céphem-4-carboxylique (3,73 g). Point de fusion :166 -169 C (décomposition). Spectre de résonance magnétique nucléaire (D2O) #3,11(3H, s, -SO2CH3), 4,34(2H, s, 3-CH2OH), 5,12(1H), 5,42(1H), 5,76 (1H), 7,36 (5H).: Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1764 cm-1. (cycle de ss lactame), 1602 cm-1(CO2Na) Spectre d'absorption ultraviolet #max.H2O 262 nm, #min.H2O 239 nm. (2) Acide 7-ss-(D-&alpha;-(ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyl)aminophényl- acétamido) -3'-formyl-3 -céphem-4-carboxylique On ajoute de l'acétone (16 ml) à du sel de sodium de l'acide 7-ss-(Dwa-(,-méthylsulfonyléthoxyearbonylXaminophényl- acétamido)-3-hydroryméthyl -3-céphem"4-carboxylique (535 mg) et on agite la suspension résultante sous refroidissement à 50 C. Puis, on ajoute goutte à goutte à la suspension le réactif oxydant A préparé selon l'exemple 3 (0,250 ml) pendant une durée de 3 minutes et on agite encore le mélange à 50 C pendant 20 minutes. Après que la réaction a été achevée, on élimine par distillation une fraction importante de l'acétone sous pression réduite et on ajoute de l'eau (40 ml). Puis on extrait deux fois le mélange à l'acétate d'éthyle (50 ml). On déshydrate la solution d'acétate d'éthyle sur sulfate de sodium anhydre, puis on l'évapore jusqu'à siccité sous pression réduite. Le mode opératoire donne l'acide 7-ss-(D-&alpha;-(ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyl)amino phénylacétamido)-3-formyl-3-céphem-4-carboxylique (266 mg). Spectre de résonance magnétique nucléaire (diméthylsulfoxyde-d6 + D.,O) : 5 3,04(3H, s, -SO,CH,), 5,04(1H, d, J=5Hz, 6-H), 5,83(1H, d, J=5Hz,7-H), 6,22(1H, Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1794 cm-1 (cycle de ss lactame) Spectre d'absorption ultraviolet H2O 299 nm ; #min.H2O 243 nm max. H2O-H2SO4 H2O-H2SO4 259 nm. # 239 nm. ) max tarin. Le spectre de résonance magnétique nucléaire de ce produit dans le diméthylsulfoxyde-ds révèle que le produit prend la forme lactol qui est un tautomère de la forme acide 3-formylcarboxylique, tandis que le spectre d'absorption ultraviolet du mEme produit en solution aqueuse montre qu'il existe sous la forme acide 3-formylcarboxylique. Le spectre d'absorption ultraviolet du meme produit dans l'acide sulfurique diluée révèle qu'il se présente sous la forme lactol. (3) Dans de l'anhydride acétique (2 ml) on dissout l'acide 7-ss-(D-&alpha;-(ss-méthylsulfonyléthoxycarbonyl)aminophénylacétamido)-3- formyl-3-céphem-4-carboxylique (204 mg) et tandis qu'on refroidit la solution résultante à 50 C, on ajoute une goutte de pyridine. On laisse reposer la solution à la température ambiante pendant 1,5 heure. Puis on extrait deux fois la solution à l'aide d'acétate d'éthyle (15 ml) et on lave avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. On réunit les couches organiques, on les déshydrate sur sulfate de sodium anhydre et on les concentre sous pression réduite. On fait passer le résidu sur une colonne de gel de silice et on l'élue à l'acétate éthyle. On réunit les fractiorset on les concentre jusqu'à siccité sous pression réduite, de façon à obtenir deux types distincts d'acétate. Spectres de résonance magnétique nucléaire (diméthylsulfoxyde-d6 + D20 ): O &alpha;-Acétate " 2,22(3H, s, -OCH3), 3,08(3H, s, -SO2CH3), 5,11(1H, d, J=5Hz, 6-H), 5,87(1H, d, J=5Hz, 7-H), 7,00(1H, s, ss-Acétate O " 2,20(3H, s, -CCH3), 3,08(3H, s, -SO2CH3), 5,08(1H, d, J=5Hz, 6-H), 5,86(1H, d, J=5Hz, 7-H), 7,05 (1H,' Exemple 5 (1) Sel disodique de l'acide 7-ss-(D-&alpha;-sulfophénylacétamido)3-hydroxy- méthyl -3 -céphbm-4 -carboxylique. Dans un tampon de phosphate (15 ml) on dissout le sel disodique de l'acide 7-ss-(D-&alpha;-sulfophénylacétamido)-3-acétoxyméthyl-3-céphem- 4-carboxylique (1,0 g). Après avoir ajusté le pH de la solution à 7,20, on ajoute la lipase USaiken 100" (1,0 g) à 300 C et on agite le mélange pendant 20 heures. On concentre le mélange réactionnel sous pression réduite à 5 mI et on fait passer le concentré sur une colone chromatographique de dextrane méthylé fabriqué par Pharmacia sous la marque "Sephadex LH-20". On injecte sur la colonne de l'eau pour enlever l'enzime et on lyophilise la fraction active pour obtenir une poudre blanche (2,53 g). Ce produit contient des matières inorganiques.Donc, on fait passer nouveau le produit sur une colonne chromatographique dlAmberlite XAD-2 (résine) et on élue soigneusement à l'eau. On lyophilise la fraction débarrassée de matières inorganiques de façon à récolter des cristaux blancs pulvérulents de sel disodique d'acide 7-ss-(D-&alpha;-sulfophénylacétamido) -3-hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique (512 mg). Spectre de résonance magnétique nucléaire (D20, 100 MHz;) 53,36 et 3,65 (2H; q, de type AB, J=18Hz), , 4,33(2H), 5,15 (1H, d, J=5,0Hz), 5,18(1H), 5,76(1H, d, J=5.OHz), 7,46-7,79(5H). Spectre d'absorption infrarouge (pastille de K 1755 cml (cycle de 13 lactame), 1220 et 1045 cm-1 (SO3-). (2) Sel monosodique d'acide 7-ss-(D-&alpha;-sulfophénylacétamido)-3- formyl-3-céphem-4-carboxylique Dans de l'acétone (5ml) on onset en suspension le sel disodique de l'acide 7-ss-(D-&alpha;-sulfophénylacétamido)-3-hydroxyméthyl-3-céphem- 4-carboxylique (225 mg) et on agite la suspension résultante sous refroidissement à 50 C. A cette suspension on ajoute le réactif B selon exemple 1 (0,187 ml) pendant une durée d'une minute. Après avoir achevé l'addition goutte à goutte, on agite le mélange pendant encore 10 minutes, puis on concentre ls mélange réactionnel sous pression réduite. Au résidu on ajoute de l'eau (2 ml), puis on ajoute du bicarbonate de sodium de façon à amener le pH à 2,5. Puis on fait passer la solution sur une colonne chromatographique de résine Amberlite SAD-2 tt cn procède à la désorption à 11 aide d'eau. A pareir de l'éluat qui ne contient pas d'ions inorganiques, on recueille les fractions contenant le produit prévu et on les lyophilise. Le mode opératoire donne des cristaux pulvérulents de sel monosodique d'acide 7-ss-(D-&alpha;-sulfophénylacétamido)-3-formyl-3- céphem-4-carboxylique (106 mg). Spectre de résonance magnétique nucléaire (D20, 100 MHz) # 3,68(2H), 5,06(1H, d, J=5Hz), 5,77(1H, d, J=5Hz), 5,18(1H), 6,22(1H, 7,46-7,79(5H) Exemple 6 (1) N-(p-(t-butyl)-benzènesulfonyl)-céphalosporine C. Dans le procédé de l'exemple 1 (1), on emploie le chlorure de p-(t-butyl)-benzènesulfonyle au lieu du chlorocarbonate d'isobornyle et on effectue la réaction à 15-20* C pour obtenir le composé recherché. Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr): 1770 cm r 1728 cml, 1710 cm"l, 1660 cml Spectre de résonance magnétique nucléaire (diméthylsulfoxyde-d6) : # 1,29(9H), 2,01(3H), 3,40 et 3,64, q de type AB, 4,70 et 5,02(2H, q de type AB, 5,06(1H, d), 5,64(1H, q), 7,50 et 7,68(4H, q de type AB), 7,94(1H,d), 8,72(1H,d). (2) 7ss-[5-(p-t-butylbenzènesulfonamido)-5-carboxyvaléramido]-3hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylate disodique. On fait réagir la N-[p-(t-butyl)-benzènesulfonyl]-céphalospo- rine C-(50 g) d'une manière similaire à célle de l'exemple 1 (2) et on refroidit le mélange réactionnel jusqu'à 5. C, puis on ajuste son pH à 2,90. On ajoute à la solution un litre d'acétate d'éthyle et on agite soigneusement le mélange, puis on procède à la filtration en utilisant comme adjuvant de filtration la Celite. On lave la Celite à l'acétate d'éthyle (500 ml) et on combine la solution de lavage avec le filtrat. On lave à l'eau (100 ml x 3) la couche à l'acétate d'éthyle après avoir séparé cette couche et on ajoute une solution aqueuse de bicarbonante de sodium à 3 % jusqu'd ce que le pH de la couche aqueuse devienne égale à 5,5, puis on sépare la couche aqueuse. On ajuste le pH de la couche aqueuse à 7,0 et on la lyophilise pour obtenir le composé recherché (35,6 g). Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1754 cm-1 1660 cm-1, 1595 cm-1, Spectre de résonance magnétique nucléaire (D20) # 1,30(9H), 4,36(2H), 5,15(1H,d), 5,68(1H,d), 7,60 et 7,86(4H, q de type AB). (3) 7ss-[5-(p-t-butylbenzènesulfonamido)-5-carboxyvaléramido] -9oxo-11-hydroxy-llH-furano[4,3-c]-3-céphem On traite le dérivé 7ss-[5-(p-t-butylbenzènesulfonamido)-5- carboxyvaléramido]-3-hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylate disodique obtenu ci-dessus d'une manière similaire à celle utilisée dans l'exemple I (3) de façon à obtenir le composé recherché. Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1788 cm-1, 1728 cm-1, 1665 cm-1, 1534 cm-1, 1323 cm-1, 1158 cm Spectre de résonance magnétique nucléaire (DMSO-d6) # 1,29(9H, s), 1,3-1,9(6H, m), 3,4-3,8 (2H,m), 5,06(1, d, J=5Hz), 5,80(1H, q, J=5 et 8Hz), 6,24 (1H, large s, 7,51(2H, d, J=8Hz), 7,69(2H, d, J=8Hz), 7,93(1H, d, J=8Hz), 8,80(1H, d, J=8Hz). Exemple 7 (1) N-benzoyl-3-désacétylcéphalosporine C disodique On traite la N-benzoylcéphalosporine C d'une manière similaire à celle utilisée dans exemple 1 (2) de façon à obtenir le composé recherché. Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1757 ~~1 1645 cm-1, 1600 cm-1, 1535 cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire (D20) # 1,90(4H,m), 2,50(2H,m), 3,30 et 3,65(2H, q de type AB), 4,33(2H), 5,15(1H, d), 5,68(1H, d), 7,63(3H), 7,90(2H), Spectre d'absorption ultraviolet #maxH2O 230, 260 nm. (2) 7ss-(5-benzamido-5-carboxyvaléramido)-9-oxo-ll-hydroxy11H-furano[4,3-c]-3-céphem On traite la N-benzoyl-3-désacétylcéphalosporine C disodique de la même manière que dans l'exemple 1 (3) pour obtenir le composé désiré. Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1790cm-1, 1730 cm-1, 1641 cm-1, 1535 cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire (DMSO-d@): # 1,40-1,90(4H, m), 2,00-2,40(2H, m), 3,45 et 3,76 (2H, q de type AB, J=18Hz), 4,37(1H, m), 5,05(1H, d, J=SHz), 5,82(1H, q, J=5 et 8Hz), 6,24(1H, 7,30-7,55(3H, m) 7,75-8,00(2H, m), 8,55(1H, d, J=8Hz), 8,90(1H, d, J=8Hz). Spectre d'absorption ultraviolet #maxH2O 302 nm. Exemple 8 (1) N-Tosyl-3-désacétylcéphalosporine C disodique On traite la N-tosylcéphalosporine C disodique d'une manière similaire à celle utilisée dans l'exemple 1 (2) pour obtenir le composé recherché. Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1760 cm-1, 1160 cm-1. Spectre d'absorption magnétique nucléaire (D20) : # 1,6-1,9(4H,m), 2.1-2,5(2H,m), 2,49(3H), 3,6(1H), 3,49 et 3,74(2H, ABq); 4,35(2H), 5,16(1H, d), 5,63 (1H, d), 7,47(2H, d), 7,80(2H, d). (2) 7ss-(5-to8ylamido-5 carboxyvaléramido)-9-oxo-11-hydroxy- 11H-furano[4,3-c]-3-céphem On traite la N-tosyl-3-désacétylcéphalosporine C disodique d'une manière similaire à cite utilisée dans l'exemple 1 (3) pour obtenir le composé recherché. Point de fusion : 157-160 C (décomposition) Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1800 cm-1, 1160 cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire (DMSO-d6, 100 MHz) : # 1,4-1,9(4H, m,-(CH2)2-), 1,9-2,3(2H,m,-CH2-), 2,34(3E, s, CH@), environ 3,65(3H, s, 2-CE,, et méthine), 5,04(1H, d, J=5,OHz), 5,20(1H, large 5,77(1H, q, J=9 et 5Hz). Analyse élémentaire Trouvé : C = 47,19; H = 4,32; N = 7,40 Calculé pour :C21H24N3O9S2 : C = 47,99; H = 4,41; N = 8,00 Exemple 9 (1) N-[p-(t-butyl)-benzoyl]-céphalosporine C Dans le procédé de l'exemple 1 (1), on emploie le chlorure de p-(t-butyl)-benzoyle au lieu du chlorocarbonate d'isobornyle et on fait réagir le mélange à 150 C pour obtenir le composé désiré. Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) 1778 cm 1730 cm-1, 1708 cm-1, 1680 cm-1, 1660 cm-1, 1540 cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire (diméthylsulfoxyde-d6) # 1,28(9H), environ 1,5-1,9(4H), 2,01(3H), 2,10-2,35 (2H), 3,36 et 3,61(2E, ABq), 4,37(1H), 4,68 et 4,99 (2H, q de type AB), 5,06 (1H), 5,67(1H), 7,46 et 7,82 (4E, q de type AB), 8,41 (1H), 8,79(1H). (2) 7ss-[5-(p-t-butylbenzamido)-5-carboxylvaléramido]-3-hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylate disodique On traite la N-[p-(t-butyl)-benzoyl]-céphalosporine C d'une manière similaire à celle utilisée dans 11 exemple 3 (1) pour obtenir le composé recherché. Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1760 cm-1, Spectre de résonance magnétique nucléaire (D20) # 1,25(9H) 3,27 et 3,57(2H, ABq), 4,30(2H), 5,07 (1H), 5,68(1H), 7,50 et 7,84(4H, q de type AB) (3) 7ss-[5-(p-t-butylbenzamido)-5-carboxybaléramido]-9-oxo-11hydroxy-11H-furano[4,3-c]-3-céphem On traite le 7ss-[5-(p-t-butylbenzamido)-5-carboxylvaléramido]3-hydroxyméthyl-3-céphem-4-carboxylate disodique d'une manière similaire à celle utilisée dans exemple 3 (2), pour obtenir le composé recherché. -l Spectre d'absorption infrarouge (pastille de KBr) : 1790 cm 1730 cm-1, 1640 cm-1, 1534 cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire (DMSO-d6) # 1,29(9H, s), 1,50-1,95(4H, m), 2,10-2,40(2H, m), 3,36 et 3,58(2H, q de type A-B), 4,36(1H, m), 5,06 (1H, d, J=5Hz), 5,60(1H, 5,81(1H, q, J=5 et 8 Hz), 7,45 et 7,83(4H, q de type AD, J=8Hz), 8,43(1H, d, J=8Hz), 8,86(1H, d, J=8Hz). REVENDICATIONS 1. Procédé de production d'un composé représenté par la formule générale suivante dans laquelle R1 est un atome d'hydrogène ou un groupement alcoxy, et R2 est un groupement acylamine ou imide, procédé qui consiste à faire réagir un composé représenté par la formule générale suivante dans laquelle R1 et 92 sont tels que définis ci-dessus, ou l'un de ses sels,avec un composé de chromehexavalent. 2. Procédé selon la revendication 1, dans lequel R1 représente un atome d' hydrogène ou un groupement méthoxy. 3. Procédé selon la revendication 1, dans lequel R1 représente un atome d'hydrogène. 4. Procédé selon la revendication 1, dans lequel R2 représente un groupement acylamine choisi entre un groupement acylamine aliphatique, un groupement (acétyl monosubstitué) amine, un groupement (acétyl disubstitué)amine, un groupement acylamine aromatique et un groupement acylamine hétérocyclique. 5. Procédé selon la revendication 1, dans lequel R2 représente un groupement 5- (amino à N protégé) -5-carboxyvalérylamine. 6. Procédé selon la revendication 5, dans lequel le groupement protecteur de l'azote du groupement 5-amino-5-carboxyvalérylamine est choisi dans le groupe comprenant 168 groupements benzoyle, isobornyloxyearbonyle, r -néthyls ul S-méthylsulfonyléthoxycarbonyle ,phénylacétyp p-(t-butyl)-benzènesulftnyîe, tosyle et p-(t-butyl )-benzoyle. 7. Procédé selon la revendication 1, dans lequel la réaction est conduite dans un solvant. 8. Procédé selon la revendication 7, dans lequel le solvant est un solvant organique. 9. Procédé selon la revendication 8, dans lequel le solvant organique est choisi dans le groupe comprenant l'acétone, l'acétonitrile, le tétrahydrofuranne, l'acétate d'éthyle, le chloroforme, le dichlorométhane, 1 éther, le dioxanne, le diméthylformamide, le dimOthylacétamide, et l'acide acétique ou un de leurs mélanges. 10. Procédé selon la revendication 8, dans lequel le solvant organique est pratiquement anhydre. 11. Procédé selon la revendication 1, dans lequel le composé de chrome hexavalent est choisi dans le groupe comprenant l'anhydride chromique, l'ester t-butylique de l'acide chromique, l'acétate de chrome et le chlorure de chromyle. 12. Procédé selon la revendication 1, dans lequel la réaction est conduite à un pH voisin de 2,90. 13 Procédé selon la revendication 1, dans lequel le composé de départ est utilisé sous forme d'un sel avec un métal alcalin ou avec une amine organique. 14. Procédé selon la revendication 13, dans lequel on fait réagir le composé de chrome hexavalent en présence d'un acide, le rapport composé de chrome hexavalent (par équivalent d'oxydation): acide (par mole) : composé de départ à oxyder & nt 2:n:1, où n est le nombre de groupements acide mis en jeu dans le composé de départ. 16. Procédé selon la revendication 1, dans lequel le composé de chrome hexavalent est l'anhydride chromique 17. Procédé selon la revendication 14, dans lequel l'acide est choisi dans le groupe comprenant l'acide sulfurique, l'acide phosphorique et l'acide acétique glacia3 18. Procédé selon la revendication 14, dans lequel l'acide est l'acide sulfurique concentré. 19. Composé obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 18, sous l'une des deux formes tautomères suivantes : 20. Composition antimicrobienne,caractérisée en ce qu'elle contient comme principe actif un composé de formule (I) selon la revendication 19.