Brevet FR2244541A1 — publié le 19750418

L'invention, réalisée au Centre de Recherche PIERRE FABRE, concerne de noweaux composés chimiques utiles notamment dans la prévention et le traitement de l'acné. Le rôle de la flore microbienne dans le developpement de l'acné a été confirmé par de nombreux auteurs. Les études pratiques sur la flore de la peau et des comédons montrent la présence d'une flore aérobie essentiellement formée de bactéries Gram-positives et une flore anaérobie dont l'élément principal est constitue par les Corynebactérium. Ces espèces et leur localisation sont maintenant bien étudies (IBMURA et Coll., 1969 ; IZUMI et Coll., 1970 ; BRPLES, 1969 ; MRPLES et Coll., 1971 ; MONTES et WILBORN, 1970 ; PILLSBURY et REBELL, 1952). Leur râle pathogène, au sens habituel, ne semble pas pouvoir être retenu sauf dans des complications particulières ; leur intervention dans l'acné vulgaire se ferait surtout par l'intermédiaire de leurs propriétés astérasiques. En effet le Corynebacterium acnès et les staphylocoques aérobies et anaérobies possèdent des propriétés lipasiques très prononcées qui en font les agents de la libera- tion des acides gras libres dans les comédons et à la surface de la peau. Ces propriétés lipasiques ont été bien étudiés in vitro et s'étandent à de nombreux triglycérides du sébum (FREINKEL, 1968 ; HOLT, 1971, REISNER et Coll., 1968 ; REISNER et PUHVEL, 1969). Les acides gras ainsi libérés participent aux phénomènes inflammatoires qui prennent une importance particulière puisqu'ils conduisent aux lésions complexes accompagnant les crises d'acné. Les Corynebactérium acnés secrètent en fait plusieurs enzymes à action estérasique, qui sont des phospholipases. L'objet de l'invention concerne de nouveaux composés chimiques susceptibles de neutraliser par inhibition compétitive l'action des phospholipases, par effet de bloquage das sites actifs de ces enzymes. Ces composés reponden R = hydrogène, méthoxy, alcoxy R'COOH représente les acides organiques tels que glutamique, aspartique, pyrrolidone carboxylique, les acyl glutamiques et aspartiques, N acétyl cystéIne, N acétyl methionine, N acétyl cystine, les N acyl cystéIne et méthionine. Ils peuvent être préparés selon le procéde suivant Une mol-e d'acide et une mole de cinchonidine par exemple sont maintenus sous agitation, à température ambiante dans 250 cm3 d'eau, jusqu'à dissolution totale. La solution ainsi obtenue est filtrée, l'eau est ensuite évaporée sous léger vide jusqu'à siccité. Le résidu est repris dans 4 fois son poids d'acétone, les cristaux ainsi obtenus sont essorés, lavés à l'acétone et séchés sous vide en présence de P205. L'méthanol peut aussi être utilisé comme solvant de cristallisation. Parmis les composes obtenus, il est possible de citer à titre -d'exemples non limitatifs: (L) PYRROLIDONE CARBOXYLATE DE CINCHONIDINE Formule brute: C24H29N3O4 Masse: 423 Point de fusion : 1820 Pouvoir rotatoire à 2% dans l'éthanol [&alpha;]D20 = -94,2 Rendement: 85% Spectr infra-rouge: bandes de salification de 2300 à 3400 cm-1 bandes d'absorption # C=0 à 1675 et 1590 cm-1 Caractères de solubilité : très soluble dans l'eau et l'éthanol (L) GLUTAMATE DE CINCIIONIDINE Formul brute:C24H31N Masse : 441,5 Point de fusion : 1550-C Pouvoir rotatoire à 2% dans l'eau [&alpha;]D20 = -92,3% Rendement: 95% Spectre infra-rouge: large bande de salification de 2300 à 3400 cm-1 Spectre infra-rouge: large bande de salification de 2300 à 3400 cm bande d'absorption # C=0 centrés à 1600 cm-1 Caractères de solubilité : insoluble dans l'éthanol, la méthyi pyrrolidone soluble à 15% dans l'eau. (L) ASPARTATE DE CINCHONIDINE Formule brute: C23H29N3O5 Masse: 427,5 Point de fusion : 1750C Pouvoir rotatoire à 2% dans l'eau: [&alpha;]D20 = -99,6 Rendement: 90% -i Spectre infra-rouge : bandes de salification de 2500 à 3400 cm absorption # centrée à 1600 cm-1 C=0 centree a' Caractères de solubilité : soluble à 15 % dans l'eau ; insoluble dans l'méthanol et la méthyl pyrrolidone. (L) N-ACETYL GLUTAMATE DE CINCHONIDINE Formule brute: C26H33N3O6 Masse: 483,6 Point de fusion : 1150 Pouvoir rotatoire à 2% dans l'éthanol: [&alpha;]D20 = -79,5 Rendement: 87% Spectre infra-rouge: bandes de salification avec 2 maxima centrées respectivement à 2550 et 3250 cm Absorption # C=0 à 1600 et 1720 cm Caractères de solubilité: très soluble dans l'eau, l'éthanol et la méthyl pyrrolidone. (L) PYRROLIDONE CARBOXYLATE DE QUININE Formule brute: C25H31N3O5 Masse: 453,5 Point de fusion: environ 213 Pouvoir rotatoire à 2% dans l'eau: [&alpha;]D20 = -130 Rendement: 92% Bandes de salification intense à # = 3240 cm-1 faible à # = 2550 cm-1 # CH à 2940 cm-1 # à 1590 et 1670 cm-1 a 1590 et 1670 cm Caractères de solubilité : Soluble à 30 Z dans l'eau, à 2,5% dans l'éthanol et à 2% dans la méthyl pyrrolidone. (L) GLUTAMATE DE QUININE Formule brute : C25 H33 6 N3 Masse : 471,5 Point de fusion : 1720 Rendement: 80% Caractères de solubilité : soluble à 15 % dans l'eau, insoluble (L) ASPARTÂTE DE QUININE Formule brute: C24H31O6N3 Masse: 457,5 Point de fusion : 1780 Rendement : 85 % Caractères de solubilité : Soluble à 10 % dans lteau, insoluble dans l'éthanol et la méthyl pyrrolidone. (L) PYRROLIDONE CARBOXYLATE DE CINCHONINE Formule brute : C24 H29 04 N3 Masse : 423,5 Point de fusion : 125 Rendement : 92 % Caractères de solubilité : très soluble dans l'eau, l'éthanol et la méthyl pyrrolidone. (L) ASPARTATE DE CINCHONINE Formule brute: C23 H29O5N3 Masse:427,5 Point de fusion : 2640 Rendement : 90 % Caractères de solubilité : insoluble dans l'eau, ltéthanol et la méthyl pyrrolidone. (L) PYRROLIDONE CARBOXYI.ATE DE QUINIDINE Formule brute: C25H31N3O5 Masse : 453,5 Point de fusion : environ 1280 Pouvoir rotatoire à 2% dans l'eau: [&alpha;]D20 = +153 Caractères de solubilité : très soluble dans l'eau, l'éthanol et la méthyl pyrrolidone. (L) GLUTAMATE DE QUINIDINE Formule brute: C25H33N3O6 Masse: 471,5 Point de fusion : voisin de 1400 Pouvoir rotatoire à 2% dans l'eau: [&alpha;]D20 = +150 Caractères de solubilité: soluble dans l'eau, insoluble dans l'éthanol et la méthyl pyrrolidone. Les résultats analytiques sont conformes aux normes traditionnellement exigées. Ont été obtenus également les dérivés suivants -(L) N-acétyl cystéinate de quinine -(L) N-acétyl aspartate de quinine -(L) Glutamate de quinidine -(L) N-acétyl méthioninate de quinidine -(L) aspartate de quinidine -(L) N-acétyl aspartate de quinidine -(L) N-acétyl glutamate de quinine -(L) Glutamate de cinchonine L'étude de l'inhibition de la lipase de Corynébactérium acnès par ces différents produits a été réalisée sur une préparation de lipase isolée à partir de cultures de Corynébactérium acnès en milieu EUGON. Le pouvoir inhibiteur de ces produits a été déterminé par titration potentiométrique de la lipase agissant sur un substrat émulsifié à base de tributyrine. (Substrat pour lequel l'enzyme présente la plus grande affinité). L'activité enzymatique étant mesurée en présence de quantités croissantes d'inhibiteurs -pour un rapport enzyme-substrat invariable. Dans ces conditions, tous les produits étudiés ont eu un comportement similaire: l'inhibition est proportionnelle à la quantité d'inhibiteur présente. Pour un rapport inhibiteur-enzyme de 20% le pourcentage d'inhibition obtenu a été de 65 %. Pour un-rapport inhibiteur-enzyme de 10% ce pourcentage a été de l'ordre de 50 %. La tolérance a été recherchée pour chaque dérivé sur cinq cobayes albinos adultes, l'application de produit sur le flanc préalablement tondu, trois fois par semaine pendant ~-2semaines ne provoque aucune réaction cutanée appréciable. La tolérance oculaire a été effectuée sur des lapins albinos et sur des souris. Après instillation dans le sac conjonctival de 2 gouttes de solutions (concentration variant de 2 à 5 %), on observe le comportement de l'animal pendant 3 minutes. Pour tous les composés testés, aucune différence n'a été observée avec un lot d'animaux animaux témoins. Les tests intradermiques ont été effectués par injection de 0,1 ml de solution à 2%, les injections sont répétées tous les jours sur les flancs de cobayes tondus. Après deux semaines de repos une injection semblable est faite au-dessus de la zone des injections précédentes : on compare la hauteur, le diamètre et la couleur des réactions. Toutes les observations effectuées montrent qu'il n'y a ni irritation primaire ni phénomène de sensibilisation. Les études de la sensibilisation cutanée, de la tolérance oculaire et des tests intradermiques ont permis d'objectiver la bonne tolérance de ces produits. La non-agressivité cutanée a pu permettre de tester ces produits sur des volontaires, selon la technique dite en double aveugle. Les meilleurs résultats ont été obtenus dans le traitement de l'acné et du pytiriasis capitis. Le traitement a consisté en application renouvelée de lotion contenant 2% de principe actif. Les dérivés de la quinine se sont averés plus actifs ; dans le cas de séborrhées grasses le cystéinate de quinine a été jugé le plus favorable. A titre d'exemples non limitatifs sont données les formules de compositions cosmétologiques conformes à l'invention et contenant l'un des dérivés repré sentés dans la formule générale, seul ou associe à d'autres principes actifs crème anti-sébsorrhéique Acétyl (L) Cystéinate de quinine 2 % Pantothénate de calcium 3 % Acide salycilique 1% Excipient q.s.p. 100 g crème anti-acné Pyrrolidone carboxylate de quinine 1,5 % p-amino phényl sulfonyl acétamide 10 % Vitamine B 6 1% Excipient q.s.p. 100 g Shampooing Pyrrolidone carboxylate de cinchonidine 2 Z Acide sorbique 0,2 % Phospholipides végétaux 0,3 % Excipient q.s.p. 100 ml -Lotion anti-pelliculaire (L) Aspartate de quinidine 1% Résorcine 0,2 X Extrait placentaire 0,001 X Excipient q.s.p. 100 ml REVENDICATIONS 1) Nouveaux composés chimiques ayant pour formule générale R = hydrogène, méthoxy, alcoxy R'COOH représente les acides organiques tels que glutamiques, aspartiques, pyrrolidone carboxylique, les acyl glutamiques et aspartiques, N acétyl cystéine, N acétyl méthionine, N acétyl cystine, les N acyl cystéine et méthionine, à l'exception du (L) glutamate de quinine et du (L) aspartate de quinine. 2) A titre de médicaments nouveaux utiles notamment dans le traitement de l'acné, les produits faisant l'objet de la revendication 1. 3) Les compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles contiennent au moins un composé selon l'une des revendications 1 et 2. 4) Les compositions pharmaceutiques caractérisées en ce qu'elles contiennent comme principes actif s au moins un composé choisi parmi --(L) Pyrrolidone carboxylate de cinchonidine - (L) glutamate de cinchonidine - (L) aspartate de cinchonidine - (L) N-acétyl glutamate de cinchonidine - (L) pyrrolidone carboxylate de quinine - (L) pyrrolidone carboxylate de cinchonine - (L) aspartate de cinchonine - {L) pyrrolidone carboxylate de quinidine - (L) glutamate de quinidine 5) L'application en cosmétologie des produits objets de la revendication 1. notamment dans les cas de séborrhée. 6) Les compositions cosmétologiques contenant les produits objets de la revendication 1, seuls ou associés à d'autres principes actifs.