Brevet FR2210382A1 — publié le 19740712

La présente invention se rapporte à un nouvel antibiotique dit A-l)O-A et à sa production. n particulier, la présente invention se rapporte à un nouvel antibiotique, A-l-fO-A, ayant des activités antibactériennes et anticoccidiose, et à un procédé pour sa production, caractérisé en ce qu'on cultive une souche de streptomyces productrice de l'antibiotique A-130-A dans un milieu nutritif aqueux, dans des conditions aérobies immergées, et en ce qu'on récupère l'antibiotique A-l30-A à partir du bouillon de culture. Au cours de recherches de nouveaux produits de fermentation,la demanderesse a récemment découvert qu'un microorganisme appartenant à l'espèce Streptomyces hygroscopicus, indexé par A-130 dans les collections des laboratoires de recherches de Shionogi, Shionogi & Co., Ltd., Osaka, Japon, et déposé dans les collections américaines de cultures types sous le numéro d'accès ATCC 21840, produit un nouvel antibiotique, dit A-13O-A, lorsqu'on le cultive dans un milieu nutritif aqueux, dans des conditions aérobies immergées. En outre, la demanderesse a découvert que l'antibiotique A130-A est utile comme agent anticoccidiose pour la volaille. La présente invention a été réalisée sur la base de ces découvertes. En conséquence, un objet fondamental de la présente invention est de prévoir un produit de fermentation dit A-l30-A. Un autre objet de la présente invention est de prévoir un procédé pour la préparation par fermentation de A-l30-A. Un autre objet de la présente invention est de prévoir une préparation anticoccidiose pour la volaille, qui comprend cet antibiotique A-130-A comme ingrédient actif. Un autre objet encore de la présente invention est de prévoir un procédé d'utilisation du A-l30-A comme agent anticoccidiose.Ces objets et d'autres encore qui apparattront aux personnes expérimentées dans la technique à laquelle la présente invention se rapporte d'après la description suivante sont atteints par a présente invention Le Streptomyces hygroscopicus A-l30 a été isolé dans un échantillon de sol rassemblé dans la ville de Ikeda, Préfecture Osaka, Japon, en 1967, et il présente les caractéristiques morphologiques suivantes CARACTERISTIQUES MORPHOLOGIQUES La morphologie de la structure a été étudiée après incubation à 280C pendant 2 semaines sur de l'agar-agar de Bennett. La colonie est couverte d'abondants mycéliums aériens en poudre ou du veteux. L'observation microscopique montre que le mycélium aérien est simplement ramifié et ne forme pas de branches latérales. Les hyphes portant les spores sont en spirale.La surface d'une spore a un aspect formant des épines ou des verrues, et les spores sont formées en chaîne mais sans segments. Le sporange et les spores flagellées ne sont pas observés, et l'on n'observe pas non plus de fragmentation ni de partie sclérotique dans le mycélium végétatif. CARACTERISTIQUES DE CULTURE L'observation a été réalisée pendant une période d'incubation de 14 jours à 280C. Les résultats sont présentés dans le tableau 1. CARACTERISTIQUES PHYSIOLOGIQUES Les observations ont été faites après incubation à 280C pendant 14 jours et les résultats sont présentés dans le tableau 2. Le microorganisme se développe dans des conditions aérobies et la gamme de pH optima pour la croissance est 6,0 à 8,0. Cependant, le microorganisme ne croit pas à des températures inférieures à 10 C ou supérieures à 500C. TABLEAU 1 Milieu Propriété Résultat Croissance Bonne Agar-agar de Czapek MV Jaune pâle à marron jaunâtre pâle MA Bon, blanc PS Aucun Croissance Bonne Glucose, asparagine, MV Jaune pâle à marron jaunâtre pâle agar-agar MA Bon, gris brunâtre PS Aucun Croissance Considérablement bonne Malate de Ca, MV Jaune pâle à marron jaunâtre pâle agar-agar MA Considérablement bon, blanc PS Aucun Croissance Considérablement bonne Glucose, milieu de MV Jaune pâle à marron jaunâtre pâle Czapek liquide MA Considérablement bon, gris brunâ tre clair PS Aucun Croissance Considérablement bonne Agar-agar nutritif MV Jaune pale MA Considérablement bon, blanc PS Aucun Glucose, bouillon, Croissance Bonne agar-agar MV Jaune pâle Glucose, bouillon, MA Bon, blanc agar-agar PS Aucun Croissance Bonne MV Jaune pâle à marron jaunâtre pâle Sérum de Loeffler MA Considérablement bon, gris brunâ- tre clair PS Aucun Croissance Bonne Tampon de MV Gris brunâtre pomme de terre MA Bon, blanc grisâtre PS Gris brunfttre Croissance Considérablement bonne Peptone, glucose, MA Marron jaunâtre bon, agar-agar MA Considérablement bon, blanc gri sâtre PS Aucun Croissance Considérablement bonne Oeu MV Marron jaunâtre pâle MA Considérablement bon, blanc PS Aucun Croissance Considérablement bonne MV Gris brunâtre Gélatine MA Considérablement bon, blanc à gris brunâtre clair PS Aucun Croissance Bonne Amidon, agar-agar MV Jaune MA Bon, gris à gris brunâtre clair PS Aucun Croissance Considérablement bonne MV Marron jaunâtre pâle Tyrosine, agar-agar MA Considérablement bon, blanc à blanc grisâtre PS Aucun Croissance Considérablement bonne Lait écrémé MV Marron jaunâtre pâle PS Aucun Croissance Mauvaise Cellulose, agar-agar MV Incolore MA Bon(*), gris brunâtre PS Aucun Croissance Bonne Agar-agar de Bennett MV Jaune à marron jaunâtre MA Bon, gris brunâtre PS Aucun Croissance Bonne Pomme de terre, pep- MV Marron jaunâtre pale tone, agar-agar MA Bon, blanc à gris brunâtre clair PS Aucun Croissance Bonne (**) Maltose, extrait de MV Jaune levure, agar-agar MA Bon, gris brunStre PS Aucun Croissance Bonne(X) Farine d'avoine, MV Jaune pale à marron jaunâtre pâle agar-agar MA Bon, gris brunâtre PS Aucun Croissance Bonne Glycérine, asparagi- MV Marron jaunâtre pale ne, agar-agar MA Bon, gris brunâtre PS Aucun NOTES : (*)La croissance est très mauvaise mais la formation du mycélium aérien est bonne dans les colonies formées. (**) La souche devient "hygroscopique" sur le milieu MV = mycélium végétatif MA - mycélium aérien PS w pigment soluble TABLEAU 2 Propriétés Résultat - Liquéfaction de la gélatine Positif - Hydrolyse de l'amidon Positif - Réaction de la tyrosinase Négatif - Peptonisation du lait Positif - Réduction du nitrate Positif - Décomposition de la cellulose Négatif - Production de pigment mélanoïde Négatif - Formation d'acides à partir du glucose Négatif - Liquéfaction sur le milieu de sérum de Loeffler Positif L'utilisation de sources de carbone sur le milieu de base de Pridham et Gottlieb par le microorganisme a été observée après incubation à 280C pendant 14 jours.Les résultats sont présentés dans le tableau 3, où la marque "+" indique une bonne croissance et une utilisation positive, la marque "+" indique une faible croissance et probablement une utilisation faible et la marque "-" indique qu'il n > y a pas de croissance et pas d'utilisation. TABLEAU 3 Source de carbone Résultat - Glucose + - D-fructose + - Mannose + - L-arabinose + - L-xylose + - Lactose + - Saccharose + - Inositol + - Rhamnose + - Raffinose + - Salicine + - D-mannitol + - Glycérine + - D-galactose + - Maltose + - Dextrine + - Inuline + - Sorbose t - Sorbitol - Dulcitol D'après les résultats indiqués ci-dessus, il apparat que la souche doit être classée-comme appartenant au genre Streptomyces. En outre, la comparaison des caractéristiques morphologiques, de culture et physiologiques parmi de nombreuses espèces de Streptomyces décrites dans "Manual of Determinative Bacteriologyt' de Bergey, "The Actinomyces" de Waksman et d'autres littératures montrent que, dans la plupart de ses propriétés, cette souche est très semblable au Streptomyces hygroscopicus Waksman et Henrici 1948. En conséquence, on en conclut que la souche de la présente invention et le Streptomyces hygroscopicus Waksman et Henrici 1948 sont de la même espèce et le microorganisme de la présente invention a été désigné par Streptomyces hygroscopicus A-l30. On doit comprendre que, pour la production du A-130-A, la présènte invention n'est pas limitée à l'utilisation de Streptomyces hygroscopicus A-130. On désire spécialement et on a spécialement l'intention d'inclure l'utilisation d'espèces mutantes ou variantes naturelles ou artificielles produites à partir des microorganismes décrits, pour autant qu'elles puissent produire l'antibiotique A-130-A. La production artificielle d'espèces mutantes ou variantes peut être réalisée par une opération classique, telle qu'une irradiation par des rayons X ou des rayons ultraviolets, des moutardes azotées, le N-oxyde de 4-nitroquinoléine et d'autres mutagènes. Dans la présente invention, le nouvel antibiotique dit A 130-A est produit durant la culture du microorganisme, par exemple le Streptomyces hygroscopicus A-130, dans un milieu nutritif aqueux, à une température d'environ 25 à environ 450C, de préférence 25 à 35 C, dans des conditions aérobies. La composition du milieu nutritif peut autre modifiée dans une très large gamme. Essentiellement, ce qui est exigé c'est une source de carbone, une source d'azote et des éléments minéraux à,1'état de traces. Des exemples de sources de carbone convenables sont le glucose, le saccharose, le xylose, le fructose, le galactose, l'innositol, le mannitol, la glycérine, la dextrine, l'amidon, des acides organiques, des mélasses et analogues.Des sources convenables d'azote pour le procédé de fermentation comprennent des extraits de viande, de la peptone, de'la farine de soja, de la liqueur de mats macérée, des extraits de levure, de la farine d'arachide, du gluten de blé, de la farine de graines de coton, du son de riz, le casaminoacide (hydrolysat acide de la caséine), l'amine dite NZ (hydrolysat enzymatique de la caséine), le sulfate d'ammonium, le carbonate d'ammonium, le chlorure d'ammonium et analogues. Des exemples de sources convenables d'éléments minéraux sont des sels minéraux, tels que le chlorure de sodium, le chlorure de potassium, le carbonate de calcium, le phosphate de potassium et analogues. Le milieu nutritif peut être ou non réglé à un pH d'environ 7,0 avant inoculation du microorganisme.Le pH tend à demeurer aux alentours de ce niveau durant la fermentation mais, si l'on rencontre des variations, on peut ajouter au milieu un agent tampon tel que le carbonate de calcium-. En outre, si on rencontre une formation excessive de mousse, on peut ajouter au milieu de fermentation des agents anti-mousses, tels que des huiles végétales, de l'huile de saindoux et du polypropylèneglycol avant ou au cours de la fermentation. Pour une production à échelle industrielle, on préfère réaliser la fermentaton dans des conditions aérobies immergées. Les rendements maxima en antibiotique A-130-A peuvent &commat;tre atteints au bout d'environ 20 à environ 100 heures, d'ordinaire environ 70 heures, de fermentation dans des conditions optima d'aération et de température. Après la croissance du microorganisme, l'antibiotique A130-A peut être récupéré à partir du bouillon de culture d'une manière classique en soi. Le mycélium peut autre retiré du bouillon de fermentation en utilisant un équipement standard, tel qu'une filtrepresse et une centrifugeuse, et puis l'antibiotique A-130-A peut être récupéré à partir du filtrat par un mode opératoire d'extrac tion par solvant. Comme l'antibiotique A-130-A est retenu par le mycélium en quantité appréciable, on utilise de préférence un mode opératoire d'extraction par solvant pour récupérer l'antibiotique à partir du mycélium, ou à partir dé tout le bouillon sans enlèvement du mycélium.Des solvants d'extraction convenables comprennent le méthanol, méthanol, l'acétone, le chloroforme, l'éther, le chlorure de méthylène, le benzène, le n-hexane, l'acétate d'éthyle et analogues. Pour l'extraction de l'antibiotique à partir d'un grand volume de bouillon, un mode opératoire par adsorption est cependant supérieur à un mode opératoire direct d'extraction par solvant. Par exemple, tout le bouillon peut etre filtré après l'addition d'un adsorbant, tel que le produit dit Hyflo Super Cel (terre de diatomées), et le gdteau résultant d'adsorbant et de mycélium peut être éluéavee un solvant organique convenable, tel que le chloroforme, l'méthanol ou le méthanol, pour extraire l'antibiotique.L'extrait peut autre concentré et un solvant convenable, tel que l'eau, ajouté pour précipiter le composant actif brut. Le composant actif brut ainsi obtenu peut Entre encore purifié, si on le désire, par des opérations convenables, telles que la recristallisation, la chromatographie et analogues. Par exemple, la recristallisation peut être réalisée en dissolvant la matière brute dans un solvant organique, tel que le méthanol ou méthanol, et puis en ajoutant de l'eau à la solution. Les adsorbants chromatographiques préférés sont le gel de silice, l'acide silicique et analogues. En outre, l'antibiotique A-130-A peut être transformé en un sel convenant à un mode opératoire de purification, tel qu'un sel d'ammonium, un sel de sodium, un sel de potassium, un sel de métotal lourd et analogues. L'antibiotique A-130-A sous sa forme d'acide libre est une poudre amorphe incolore, fondant entre 87 et 920C. I1 est très soluble dans le méthanol, l'éthanol, l'acétate d'éthyle, le chloroforme, le chlorure de méthylène, l'acétone, le benzène et l'éther il est soluble dans l'hexane mais insoluble dans l'eau. Les valeurs d'analyse élémentaire de l'antibiotique A-130-A séché à 1000C sous vide jusqu'à poids constant sont C, 66,47 % ; H, 9,15 % ; O, 24,07 . Le poids moléculaire de A-130-A est 850 par spectrométrie de masse. Ces valeurs suggèrent une formule moléculaire possible C47H78013 pour A-130-A.Le pouvoir rotatoire spécifique de A-130-A est [cc123 + 64,5 (c = 1,0 dans le chloroforme). Le spectre d'absorption dans Y'ultraviolet dans le méthanol est caractérisé par une absorp tion à 234,5 m 14.200). Le spectre d'absorption dans l'infrarouge de A-130-A, réalisé dans un-e solution de chloroforme, présente les fréquences suivantes : 3.535, 1.734, 1.671 et 1.642 cm'l (présenté sur la figure 1 des dessins ci-joints). Le spectre de résonance magnétique nucléaire de A-130-A dans le deutérochloroforme (CDCl3) à~60 MHz est présenté sur la figure 3 des dessins ci-joints. L'antibiotique A-130-A donne une réaction positive par le test de Dragendorff et une réaction négative par le test du chlorure ferrique et il décolore le permanganate de potassium. Le sel de sodium de l'antibiotique A-130-A existe sous forme de cristaux aciculaires insolubles fondant à 227-2310C. I1 est très soluble dans le méthanol, méthanol, l'acétate d'éthyle, le chloroforme et le chlorure de méthylène ; il est soluble dans l'éther, le benzène, l'acétone et le tétrachloréthane et il est insoluble dans l'eau et l'éther de pétrole. Les valeurs analytiques du sel de Na séché à 1000C sous vide jusqu'à poids constant sont C, 64,71 % ; H, 8,90 % ; Na, 2,92 S-et 0, 23,47 % ; poids moléculaire, 872 (par spectrométrie de masse), 854 (par osmométrie dans le chloroforme). Ces analyses suggèrent une formule moléculaire possible C47H77013Na pour le sel de Na-de A-130-A.Le pouvoir rotatoire spécifique du sel de Na de A-130-A est [a]23 + 97,9 (c - 1,0 dans le chloroforme). Le spectre dtabsorption dans l'ultraviolet dans le méthanol est caractérisé par une absorption à 235 m ( 14.700). Le- spectre d'absorption dans l'infrarouge du sel de Na de A-130-A, réalisé sur du Nujol, présente les fréquences suivantes 1.661, 1.640, 1.562 cm 1 (présenté sur la figure 2 des dessins cijoints). Sur la base des propriétés physiques et chimiques indi- quées ci-dessus, on considère que l'antibiotique A-130-A a une structure de cétone non saturée en a, et une structure de polyéther polycyclique ; il est différent de tout autre antibiotique connu disponible à titre de comparaison. On a confirmé par comparaison directe que l'antibiotique A-130-A est différent du produit dit Dianemycin qui contient une structure de cétone non saturée en a, dans la molécule et qui a les propriétés semblables à l'antibiotique A-130 A. (R. L. Hamill et collaborateurs, The Journal of Antibiotics, 22, 161, 1969). En conséquence, l'antibiotique A-130-A est un-nouveau composé. L'antibiotique A-130-A présente une activité contre un grand nombre de microorganismes. L'activité antimicrobienne in vi tro de l'antibiotique a été déterminée par le procédé de dilution sur bandes d'agar-agar ou par le procédé de dilution en tube. Les résultats sont présentés dans le tableau 4. TABLEAU 4 Organisme testé Concentration d'inhibition minima (} g/ml) Bacillus subtilis PCI 219 1,25 Bacillus anthracis 1,25 Staphylococcus aureus 209P JC-1 2,5 Staphylococcus aureus 60658 2,5 Streptococcus pyogenes C-203 0,625 Streptococcus faecalis 1,25 Viridans streptococci 0,625 Diplococcus pneumoniae type I 0,625 Corynebacterium diphteriae Tront 0,625 Escherichia coli NIHJ JC-? > 20 Escherichia coli 60368 > 20 Pseudomonas aeruginosa Denken > 20 Klebsiella pneumoniae > 20 Salmonella typhimurium z > 20 Mycobacterium tuberculosis H 37 Rv 2,5 Trichophyton rubrum > 20 Candida albicans M-9 > 20 Trichomonas vaginalis 4F 10 On voit d'après le tableau 4 que l'antibiotique A-130-A est fortement actif contre les bactéries gram-positives. Des études de toxicité aiguë sur l'antibiotique-A-130-A ont été réalisées sur des souris et la valeur de DL50 a été trouvée à 2,52 mg/kg par voie intrapéritonéale. Le nouvel antibiotique A-130-A est utile comme médicament pour inhiber la croissance de microorganismes pathogènes gram-positifs. I1 est aussi utile pour stériliser un équipement, par exemple des instruments chirurgicaux. En outre, l'antibiotique A-13Q-A est utile comme agent anticoccidiose pour la prophylaxie ou la thérapeutique. La coccidiose des aviens, due à l'Eimeria tenella, à l'Eimeria necatrix ou à l'Eimeria acervulina, induit des lésions dans les organes de digestion, une prostration générale, la mort et une inhibition de la croissance dans la volaille, telle que des poussins, des dindons ou des canards. Des composés précédemment utilisés comme agent anti coccidiose comprennent des médicaments sulfamidés, des nitrofuranes, des quinoléines, des agents antithiamines, des benzamides et des substances antibiotiques.Ces agents anticoccidiose connus présentent certains inconvénients dans leur degré d'activité anticoccidiose et par la présence de souches ayant une résistance vis-à-vis du médicament par suite de la mauvaise utilisation de ces médicaments pendant une longue période de temps. Ces facteurs ont généralement diminué la valeur des médicaments connus. Les avantages de la présente invention résident dans le fait que l'antibiotique A130-A présente une activité anticoccidiose très puissante pour la prophylaxie et pour le traitement de la maladie. Pour des compositions anticoccidiose comprenant l'antibiotique A-130-A, des préparations convenables qui peuvent être utilisées comprennent des poudres, des granulés, des solutions, des dispersions, des prémélanges, des capsules, des émulsions, des tablettes ou des comprimés, etc.. Le composé peut être utilisé seul ou en combinaison avec un support approprié, ordinairement utilisé dans ce domaine. On peut combiner des additifs ordinaires, des véhicules, des agents de désintégration, des lubrifiants et des matières de revêtement. En général, une concentration convenable de l'antibiotique A-130-A pour l'alimentation de la volaille est au moins 0,001 en poids.Pour l'utilisation prophylactique, la concentration convenable de A-130-A est environ O, 001 à environ 0,06 % en poids, plus favorablement environ 0,003 à environ 0,02 % en poids, et dans des buts thérapeutiques, une concentration convenable est environ 0,01 % en poids à environ 0,3 % en poids. Une solution, une suspension ou une émulsion peut autre ajoutée à l'eau de boisson ; les capsules ou les comprimés peuvent 8tre administrés oralement tels qu'ils sont. Si on utilise un support, on peut employer un diluant ordinairement ajouté pour l'alimentation pour la volaille, par exemple, liteau, le lactose, le saccharose, le talc, la pectine, la poudre de blé, le son de riz, le son de blé, la poudre de mats, la farine de soja, la poudre de grains écrasés et analogues. La présente composition anticoccidiose peut hêtre utilisée de manière facultative en combinaison avec des produits pharmaceutiques pour animaux, comprenant les autres antibiotiques ou d'autres anthelmintiques connus. En outre, le sel d'ammonium de l'antibiotique A-l30-A ou ses sels métalliques, tels que le sel de sodium, le sel de potes ,sium, le sel de calcium, le sel de magnésium, le sel d'aluminium et analogues, peuvent être également utilisés comme agents anticoccidiose pour la volaille. Les effets pratiques de l'agent anticoccidiose de la pré senté invention sont présentés par les expériences suivantes. EXPERIENCE 1 (a) Procédé expérimental : Plusieurs groupes d'animaux expérimentaux, chaque groupe se composant de dix poussins dits Leghorn Blanc, ont été infecté s par voie orale avec 50.000 oocystes sporulés d'Eimeria tenella par poussin. Les animaux expérimentaux ont reçu l'alimentation contenant l'antibiotique expérimental A-130-A pendant huit jours consé cutifs après l'infection. Le huitième jour, les animaux expérimentaux ont été disséqués, et on a observé des lésions au caecum. Durant la période d'administration du A-130-A, le nombre d'hématochésiens, le rapport de survie, le gain de poids relatif, le nombre d' oocystes et l'évaluation de lésion du caecum ont été déterminés. (b) Résultats Les résultats du test contre la coccidiose du caecum due à l'Eimeria tenella chez les poussins dits Leghorn Blanc sont présentés dans le tableau 5. EXPERIENCE 2 (a) Procédé expérimental Sept groupes d'animaux expérimentaux, chaque groupe se composant de dix poussins dits Leghorn Blanc ont été infectés par voie orale avec 500.000 oocystes sporulés d'Eimeria acervulina par poussin. Afin d'étudier l'effet de la prophylaxie pour la coccidiose des poussins, les animaux expérimentaux ont reçu une alimentation contenant l'antibiotique expérimental A-130-A pendant cinq jours consécutifs après l'infection. D'autre part, afin d'étudier l'effet de la théra x utique pour la coccidiose des poussins, les animaux expérimentaux ont reçu une alimentation contenant 1'A-130-A pendant deux jours consécutifs après trois jours d'infection. Le cinquième jour, les animaux expérimentaux ont été disséqués, et on a déterminé le nombre d'oocystes ou de gamatocytes dans la membrane muqueuse de l'intestin grêle.Durant la période d'administration du A-130-A, le nombre d'oocystes, le rapport de survie et le gain de poids relatif ont été déterminés. tes résultats du test contre la coccidiose due à l'Eimeria acervulina chez les poussins Leghorn Blanc sont présentés dans le tableau 6.. TABLEAU 5 Anti- Concentration Total Rapport Gain de Nombre Evalua biotique (%) dans 1' d'hémato- de sur- poids d'oo- tion de alimentation chésies* vie (%) relatif cystes lésion du (%)** (O.P.G.) caecum *** **** 0,025 0 100 4 0 0 A-130-A 0,0125 0 100 56 0 0 0,0063 9 100 91 1,4x105 3 (a) ) 0 70 81 3,4x105 40 C ontrele (b) 0 100 100 0 0 NOTES : * Présente le comptage total d'hématochésis pour 10 poussins et # signifie que le nombre était trop grand pour qu'on puisse le compter. t Présente le rapport entre le poids corporel augmenté des poussins dans les groupes traités ou le groupe de contrôle infecté et celui de poussins dans le groupe de contrôle non infecté. x Présente le comptage d'oocystes existant par gramme de matière fécale chez les poussins le septième jour après l'infenction (indique en abréviation par O.P.G.) **** Présente le degré de changement pathologique dans le caecum. Les poussins ayant survécu ont été disséqués le 8ème jour après infection et le degré de change ment pathologique dans le caecum a été observé par voie macroscopique. Les degrés de changement patholo gique dans le caecum ont été classés en cinq ordres de O à 4 (sérieux 4 ; considérable 3 ; modéré 2 ; 16- ger 1 ; presque sain 0). Le total (0 à 40) de l'éva- luation a été calculé pour chaque groupe de dix pous sins. (a) : cas d'infection (b) : cas d'absence d'infection TABLEAU 6 Antibiotique Concentration Période d'administration Rapport Gain de Nombre Nombre d'oocystes ou de (%) dans l' de sur- poids d'oo- gamatocytes dans une alimentation vie (%) relatif cystes membrane muqueuse d'un (%)* (O.P.G.) intestin grêle *** ** 0,01 Administration pendant 5 100 32 0 0/10 0,05 jours consécutif après 100 79 4x104 2/10 infection 0,0025 100 121 7,8x105 10/10 A-130-A 0,0013 100 111 1,6x106 10/10 0,02 Administration pendant 2 100 50 0 1/5 jours consécutif après 0,01 3 jours d'infection 100 92 8x104 3/5 (a) 100 53 1,2x107 10/10 Contrôle (b) 100 100 0 0/10 NOTES : * Présente le rapport entre le poids corporel augmenté des poussins dans les groupes traités ou le groupe de contrôle infecté et celui de poussins dans le groupe de contrôle non infecté. ** Présente le comptage d'oocystes par gramme de matière fécale le ciquième jour après l'infection (indique en abréviation par O.P.G.). *** Nombre d'oocystes ou de gamatocytes/animal expérimental (a) : cas d'infection (b): cas d'absence d'infection Comme montré clairement dans les résultats indiqués cidessus, 1'A-130-A présente une activité anticoccidiose très puissante à la fois pour la prophylaxie et le traitement de la maladie. Les exemples suivants ne sont donnés qu'à titre d'illustration et non de limitation. EXEMPLE 1 Le Streptomyces hygroscopicus A-130 ATCC nO 21840 est inoculé dans un milieu nutritif composé de 5 g d'extrait de viande, de 5 g de peptone, de 10 g d'amidon de pomme de terre, de 2,5 g d'extrait de levure, de 5 g de chlorure de sodium et de 1 litre d'eau distillée, et incubé à 280C pendant 48 heures. -Le bouillon ainsi cultivé est utilisé comme produit d'inoculation. 15 litres d'un milieu nutritif (pH 7,0) composé de 12 g d'amidon de pomme de terre, de 12 g de farine de soja, de 6 g de liqueur de mais macérée, de 6 g de glycérine, de 3,6 g de chlorure de sodium et de 4,2 g de carbonate de calcium sont stérilisés et inoculés avec le produit d'inoculation préparé ci-dessus. La culture est réalisée à 29"C pendant 65 heures avec agitation et aération de 15 litres/minute jusqu'à ce que la concentration de A-l30-A s'élève au rendement maximum. Environ 105 litres du bouillon de culture sont réglés à un pH de 4,0 avec 10 % d'acide chlorhydrique avec agitation vigoureuse et filtrés à l'aide du produit dit Hyflo Super Cel (3,5 kg). Le filtrat est extrait à l'acétate d'éthyle. D'autre part, le mycélium rassemblé est extrait à l'acétone et la solution acétonique est évaporée sous pression réduite. Le résidu est extrait à l'acétate d'éthyle. Les extraits d'acétate d'éthyle sont combinés, lavés avec une solution de soude à 2 % et ultérieurement avec de 1' eau, séchés avec du sulfate de sodium anhydre et évaporés sous pression réduite. Le résidu (environ 105 g) est dissous dans 500 ml d' un mélange de deux volumes d'éther et d'un volume de n-hexane, et on laisse la solution reposer à la température ambiante toute la nuit. La solution est filtrée, puis évaporée sous pression réduite. Le résidu (environ-66 g) est dissous dans le chloroforme, chromatographié sur 600 g d'acide silicique et élué avec le mélange chloroforme-méthanol (49 : 1) et ultérieurement avec le mélange chloroforme-méthanol (25 : 1). Les fractions contenant le produit A-130-A sont rassemblées et concentrées sous pression réduite. Le résidu résultant (environ 40,2 g) est dissous dans l'acétate d'é thyle. La solution est lavée avec 3 % d'acide chlorhydrique et ultérieurement avec de l'eau, séchée avec du sulfate de magnésium anhydre et puis évaporée sous pression réduite. Le résidu est dissous dans le n-hexane et puis la solution est filtrée pour retirer le précipité. Le filtrat est évaporé sous pression réduite.Le résidu est dissous dans l'acétate d'éthyle, lavé avec une solution de soude à2 ç et ultérieurement avec une solution de chlorure de sodium à 2 %, séché avec du sulfate de sodium anhydre et puis évaporé sous pression réduite pour donner 25,4 g de résidu. Le résidu est dissous dans l'acétone et précipité par addition d'eau pour donner 9,98 g de sel de sodium de A-130-A pur sous forme de cristaux aciculaires incolores. Le sel de sodium de A-130-A est dissous dans l'éther et agité avec de l'acide chlorhydrique à 2 %. La couche d'éther est prise, lavée à l'eau, séchée avec du sulfate de sodium anhydre et évaporée sous pression réduite pour donner le A-130-A pur en tant qu'acide libre sous forme de poudre amorphe incolore. EXEMPLE 2 Le- A-130-A est mélangé avec 10 fois son poids de lactose. Le mélange est dilué avec une alimentation pour poussins jusqu'à une concentration de 0,01 à 0,3 s de l'ingrédient efficace dans 1' alimentation avant utilisation. EXEMPLE 3 Le produit A-13O-A (10 parties en poids) est mélangé avec du saccharose ou de l'amidon (90 parties en poids) pour donner un mélange homogène. Le mélange est dilué avec une alimentation pour poussins Jusqu'à une concentration de 0,01 à 0,3 % d'i grédient ef Wicaee dans l'alimentation avant utilisation. EXEMPLE 4 Le produit A-130-A (25 parties en poids-) est mélangé avec une poudre de blé (75 parties en poids) pour donner un mélange homogène. Le mélange est dilué avec une alimentation pour poussins jusqu'à une concentration de 0,01 à 0,3 % d'ingrédient efficace dans l'alimentation avant l'utilisation. EXEMPLE 5 Le sel de Na de A-130-A (45 parties en poids) est mélangé avec du saccharose (12 parties en poids), de l'amidon (15 parties en poids), du talc (25 parties en poids), du stéarate de magnésium (2 parties en poids) et de l'acide stéarique (1 partie en poids). Le mélange est transformé en granulés qui sont alors comprimés pour donner des tablettes. La présente invention n'est pas limitée aux exemples de rbalisation qui viennent d'être décrits, elle est au contraire susceptible de variantes et de modifications qui apparattront à l'homme de l'art. REVENDICATIONS 1 - Procédé de production d'un antibiotique, caractérisé en ce qu'il consiste à cultiver une souche de Streptomyces produisant l'antibiotique dit A-130-A dans un milieu nutritif aqueux, dans des conditions aérobies, et à isoler l'antibiotique accumulé à partir du bouillon de culture. 2 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la culture du microorganisme est réalisée à une température d'environ 25 à 450C 3 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la culture du microorganisme est réalisée dans des conditions aérobies immergées 4 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'isolement de l'antibiotique est réalisé en réglant le bouillon cultivé à un pH acide, en filtrant le bouillon cultivé et en extrayant le mycélium et le filtrat avec un solvant convenable. 5 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la souche de Streptomyces produisant l'antibiotique A-130-A est le Streptomyces hygroscopicus A-130, ATCC nO 21840. 6 - A titre de produit industriel nouveau, antibiotique dit A-130-A, efficace pour inhiber la croissance de microorganismes gram-positifs et d'Eimeria, cet antibiotique étant une poudre amorphe incolore fondant entre 87 et 92"C, contenant les éléments carbone, hydrogène et oxygène sensiblement selon les proportions suivantes en poids Carbone 66,47 % Hydrogène 9,15 % Oxygène -24,07 [a]23 + 64,5 (c = 1,0 dans le chloroforme), ayant un poids moléculaire d'environ 850, et présentant le spectre d'absorption dans l'infrarouge tel qu'indiqué sur la figure 1 des dessins ci-joints et le spectre de résonance magnétique nucléaire tel qu'indiqué sur la figure 3 des dessins cijoints. 7 - A titre de produit industriel nouveau, antibiotique constitué par le sel de Na du produit dit A-130-A efficace pour inhiber la croissance de microorganismes gram-positifs et d'Eimeria, cet antibiotique étant formé de cristaux aeiculaires incolores,fondant entre 227 et 23l0C, contenant les éléments carbone, hydrogèhe, sodium et oxygène, sensiblement selon les proportions sui vantes en poids Carbone 64,71 ffi Hydrogène 8,90 % Sodium 2,92 % Oxygène 23,47 % ayant un pouvoir rotatoire optique ta]23 + 97,90 (c = 1,0 dans le chloroforme; ayant un poids moléculaire de 872 (par spectrométrie de masse) et de 954 (par osmométrie dans le chloroforme), ayant un spectre d'absorption dans l'ultraviolet présentant un pic de 235 m (t 14.700) dans le méthanol et un spectre d'adsorption dans l'infrarouge tel qu'indiqué sur la figure 2 des dessins ci-joints. 8 - Composition pharmaceutique pour la prophylaxie et le traitement de la coccidiose des aviens, caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité pharmaceutiquement efficace de l'antibiotique A-130-A sous la forme d'acide libre, ou de ses sels métalliques ou d'ammonium pharmaceutiquement acceptables, en tant qu'in- grédient actif mélangé avec des supports pharmaceutiquement acceptables. 9 - Composition pharmaceutique selon la revendication 8, caractérisée en ce que la quantité d'ingrédient efficace est dans la gamme de 0,001 % en poids à 1,0 % en poids de la composition.