Brevet FR2196792A1 — publié le 19740322

La présente invention, faite dans les services de la demanderesse, a pour objet un nouveau dérive de L-ornithine et son utilisation comme médicament hépatotrope. Il est constitué par le N-acétyl DL méthioninate de L-ornithine dont la formule est la suivante Ce sel peut être préparé en faisant réagir mole à mole la L-ornithlne base avec la N-acêtyl DL methionine dans un solvant; comme tel l'eau,par exemple, peut être utilisée. L'addition d'éthanol favorise la cristallisation de ce sel. A cet effet, il est avantageux en outre d'évaporer partiellement le solvant utilise. La préparation du produit est illustrée par l'exemple suivant, dans lequel les parties s'entendent en en poids, sauf men- tion contraire. A 17,30 parties de L-ornithine base dissoutes dans un volume d'environ 100 parties dteau distillée, on ajoute 25,4 parties de N-acétyl DL méthionine. Le volume de la solution est compléte jusqu'à 200 parties en volume par addition d'eau distillée. Le mélange est agité jusqu'à complète dissolution, filtré pour enlever les impuretés puis concentré sous vide à une température inférieure à 450C jusqu'à environ 50 à 70 parties en volume. On obtient un sirop qui est repris par 500 parties dtéthanol. Le N-acétyl DL méthioninate de L-ornithine précipite. I1 est filtré, lavé à l'éthanol puis à l'éther et séché. On obtient ainsi 39 parties de produit. Le rendement de la synthèse êst de 91%. L'analyse centésimale du produit obtenu est la suivante : C% H% N% Calculé % ...... 44,58 7,74 13,01 Trouvé ........ 44,69 7,70 12,61 Le noint de fusion sur un banc Kofler est de 205 C avec decomposition. Le pouvoir rotatoire spécifique est 23 (&alpha;)D = + 5 2 # 0 ,3 PROPRIETES TOXICOLOGIQUES ET PHARMACOLOGIQUES La toxicité aiguë du N-acétyl DL méthioninate de L ornithine a été déterminée chez la souris CD1 (Charles RIVER) par la voie orale et par la voie veineuse ; il a été administré en solution aqueuse sous un volume unitaire de 50 ml/kg. Le produit selon l'invention est atoxique aux très fortes doses de 9000 mg/kg p.o. et 800 mg/ks i.v chez la souris. La principale propriété pharmacologique du N acétyl DL méthioninate de L ornithine consiste en une remarouable activité anti-ammoniémique. La mise en évidence de cette activité a été réalisée chez la souris selon une technique adaptée de SHIYOA A., KURAISHI K. > KAKIMOTO M. et TAMANA Y. (i964), Jap. J. Fharmacol., 14, 210-214. Cette technique consiste à évaluer la protection exer c par un produit, préalablement administré à la souris, vis-à vi@ de la mor@alité provoquée par l'injection intra-péritonéale d'une dose d'acétate d'ammonium correspondant à la DL.50. Cette expérimentation a été menée chez la souris mâle de souche CD1 (Charles RIVER), d'un poids de 18 à 22 g. La DL 90 par voie intra-péritonéale de l'acétate d'ammonium a été déterminée selon la méthode statistique de LITCHFIELD et WILCOXON (1949), J. Pharmacol. Exp. Thér., 96, 99. L'acétate d'ammonium a été injecté i.p. en solution dans de l'eau distillée sous un volume unitaire de 25 ml/kg. L'évaluation des propriétés anti-ammoniémiques du produit à étudier est alors réalisée selon le protocole suivant Au temps t : administration par voie orale du produit à étudier à o diverses doses (mg/kg) sous le volume unitaire de 25 ml/kg. Au temps t + lh.30 : injection intra-péritonéale de la DL 50 d'acétate d'ammonium. On utilise 25 souris par dose du produit à étudier, 25 souris témoins recevant dans les mimes conditions le véhicule seul sous le même volume unitaire de 25 ml/kg. Dans ces conditions, on recherche la dose de produit capable de supprimer totalement la mortalité induite par l'acétate d'ammonium. La DL 50 par voie intra-péritonéale de l1acétate dwammonium chez cette souche de souris est comprise entre 736 et 827 mg/kg, limites de confiance pour p = 0,05. La symptomatologie due à l'hyperammoniémie provoquée consiste principalement en crises convulsives asphyxiques. La mort survient après une brève crise tonique et est due à un/arrêt respiratoire. La mortalité enregistrée apparait dans l'heure qui suit ltinjection et ntévolue pas après 24 heures. Compte-tenu des limites fiducielles de la DL 50 de l'acétate d'ammonium, la dose de 800 mg/kg IP a été choisie comme dose à antagoniser pour mettre en évidence un effet anti-ammoniémique, le délai d'observation des animaux étant de 24 heures. Les résultats obtenus dans l'étude du produit selon l'invention sont résumés dans le tableau ci-dessous dans lequel les doses stentendent par kg de poids d'animal. Nombre Mortalité 24 h. après Dose TRAITEMENT ORAL Dose de injection IP de (1h 30 avant injection souris 800 mg/kg d'acétate d'ammonium totale p. 100 Eau distillée 25ml 25 17/25 68 p.l00 700mg 25 6/25 24 p.100 N-acétyl DL méthioninate de1000mg 25 0/25 0 p.100 L ornithine 2000mg 25 0/25 0 p.100 En conclusion, le produit selon l'invention se présente comme dénué de toxicité aiguë chez la souris par voie orale et par voie i.v. Il possède chez cette espèce par voie orale une remarquable activité anti-ammoniémique puisqu'il protège totalement la souris vis-à-vis de l'intoxication ammoniacale dès la dose de 1000 mg/kg. APPLICATIONS THERAPEUTIQUES Le produit selon 11 invention peut être utilisé en thérapeutique humaine ou vétérinaire, comme protecteur de la cellule hépatique et anti-ammoniémique dans les insuffisances hépato-biliaires, les hépatites, les cirrhoses et les états hyperammoniémiques. I1 est alors administré sous forme de comprimés, de dragées, de gélules, de suppositoires, d'ampoules injectables ou buvables à des doses variant de 0,05 à 2 g. REVENDICATIONS 10) Le composé de formule 20) Procédé pour la préparation du composé défini sous 10) caractérisé en ce que l'on fait réagir mole à mole la L-ornithine base avec la N-acétyl DL méthionine dans un solvant. 30) Médicament hépatotrope comprenant ou constitué par le composé défini sous 10)