Brevet FR2181561A1 — publié le 19731207

La présente invention concerne des composés nouveaux qui sont des dérivés hydroxylés du nitro-2 benzofuranne. Elle a pour but , notamment, d'enrichir l1ar- senal des parasiticides, antibactériens et antifongiques en produits solubles dans l'eau de la série des nitro-2 benzofurannes. Un autre but est de fournir une voie d'accès à des composés qui ne paraissent pas pouvoir autre préparés par une synthèse directe. Les nouveaux dérivés sont les bz-hydroxy nitro-2 benzofurannes répondant à la formule dans laquelle 1'hydroxyle peut occuper l'une quelconque des positions 4 à 7. Pour préparer ces composés, on peut, selon l'invention, soumettre les composés méthoxylés correspondants à une désalcoylation à l'aide de chlorure de pyridinium. On a trouvé qu'il y avait intérêt à opérer au-dessous de la température d'ébullition, de préférence à une température de 180 à 200 , afin de faire obstacle à la résinification du nitro-2 bz-hydroxy benzofuranne produit ; la durée du traitement thermique est, en général, pour le meilleur rendement, 4tenviron une demi-heure à une heure. Les exemples suivants, non limitatifs, illustrent la préparation. EXEMPlE t: Nitro-2 hydroxy-4 benzofuranne (numéro de code R 5633). a) A une solution à 10 % en poids d'aldéhyde hydroxy-2 méthoxy-6 benzoSque (1 mole) dans de l'acétone, on ajoute du carbonate de potassium (2 moles) puis on porte à l'ébullition. On cesse le chauffage, on ajoute rapidement du bromo-nitro méthane (1,5 mole), on fait bouillir à reflux pendant 2 heures, on laisse refroidir, on filtre, on évapore 1'acétone, on reprend le résidu dans du chloroforme, on chromatographie la solution sur de l'alumine puis on élimine le chloroforme du liquide recueilli et on fait recristalliser le résidu dans un mélange de benzène et de cyclohexane à volumes égaux. On obtient le nitro-2 méthoxy-4 benzofuranne, qui est un composé nouveau, en paillettes jaunes fondant à 1190. Le rendement est de 58 %. Analyse Calculé % C = 56,01 H = 3,66 N = 7,26 Trouvé C = 56,03 H = 3,62 N = 7,43. b) On chauffe à 1800, pendant une heure, un mélange de nitro-2 méthoxy-4 benzofuranne (5 g) et de chlorure de pyridinium (20 g) dans une fiole conique d'Erlenmeyer de 50 cm . On verse ensuite le mélange réactionnel dans de l'eau, on épuise la solution au chloroforme, on filtre la solution chloroformique, puis on soumet le mélange à une chromatographie sur une colonne d'alumine en vue de séparer le composé hydroxylé de l'éther phénolique non transformé ; on récupère 28 % de ce dernier dans le chloroforme qui a traversé la colonne et on élue avec de l'éthanol pour recouvrer le nitro-2 hydroxy-4 benzofuranne. On l'obtient, avec un rendement de 30 %, en cristaux orangés, fondant à 1520, après recristallisation dans le benzène. Analyse Calculé % C = 53,63 H = 2,79 N = 7,82 Trouvé C = 53,46 H = 2,76 N = 7,73. EXEMPLES 2 à 4 En opérant comme dans l'exemple 1, on obtient les isomères présentant les caractéristiques physiques suivantes Exemp- N de , Posi- . F Analyse, Tr. %@ pIe code tion : N- de C H N Rdt(%) OH 2 R2526 5 158 53,77 2,76 7,64 76 3 R5732 6 225 53,51 2,73 7,56 24 4 R5588 7 164 53,88 2,81 7,87 45,5 . 4 R 5589 7 154 53,88 : 2,81 7,87 45,5 Les meilleurs rendements sont assurés à la même température de 1800 et pendant le même temps sauf dans le cas de l'exemple 4 où il suffit d'opérer à 2000 pendant un quart d'heure. La Demanderesse a trouvé que les nouveaux nitro-2 bz-hydroxy benzofurannes faisaient preuve d'activité contre les micro-organismes et les parasites et étaient utilisables, en considération de celle-ci, comme désinfectants et, en thérapeutique, comme parasiticides, bactéricides, bactériostatiques et fongicideS, Ils agissent particulièrement contre Trichomonas vaginalis, Entamoeba dysenteriae, ainsi que contre les colibacilles, les staphylocoques et les champignons pathogènes et pour certains d'entre eux, contre le bacille de Koch. L'activité antibactérienne a été évaluée in vitro par la détermination de la concentration minimale inhibitrice bactériostatique (C.M.I.) en milieu nutritif liquide, après un séjour de 18 heures à 370. Pour Mycobactérium tuberculosis le séjour à 370 est prolongé pendant une semaine. Les milieux de culture ont été le bouillon nutritif ordinaire et le milieu de Dubos pour M. tuberculosis. L'activité antimycosique a été déterminée, d'une part, en milieu nutritif solide (gélose de Sabouraud) pour une souche d'Aspergillus, d'autre part, en milieu nutritif liquide (milieu de Sabouraud) pour une souche de levure (Saccharomyces cerevisiae). La lecture a été effectuée après un séjour de 72 heures à 280 pour l'Aspergillus et de 18 heures à 370 pour la levure. Les milieux nutritifs ont été répartis dans des tubes à hémolyse à raison de 1,8 ml par tube pour les bactéries et les levures et dans des tubes à essai de 22 mm de diamètre à raison de 4,5 ml par tube pour M. tuberculosis. Des solutions de composés nitrobenzofuranniques, à concentrations décroissantes, préparées par la méthode des dilutions sériées, ont été ajoutées à raison de 0,2 ml dans des tubes contenant 1,8 ml et de 0,5 ml dans des tubes contenant 4,5 ml. L'inoculum était constitué par une goutte d'une culture mère agée de 18 heures à 370 en milieu liquide après dilution jusqu'à obtention d'une suspension très légèrement louche (environ i05 bactéries par ml). Pour M. tuberculosis, l'inoculum a été une goutte de culture homogène en milieu de Dubos. Pour l'Aspergillus les solutions des produits essayés ont été ajoutées à la gélose de Sabouraud à raison de 2 ml de solution pour 18 ml de gélose liquéfiée avant d'être coulées dans une boite de Pétri. L'inoculum était constitué par un petit fragment d'une culture de 72 heures. Les concentrations finales des substances essayées sont basses eu égard à leur très faible solubilité. Leur solution dans l'acétone est diluée dans l'eau de manière à ne pas dépasser une concentration finale en acétone dans le milieu nutritif de 1/20 pour les bactéries et les champignons, et 1/40 pour M. tuberculosis, concentrations compatibles avec la croissance normale des micro-organismes. Les résultats obtenus pour les composés étudiés sont réunis dans le tableau I ci-dessous. Ils sont exprimés en concentration minimale inhibitrice (C.M.I) en g/ml de milieu nutritif. TABLEAU I . Composés Gram + !Gram - : Bk Aspergillus Saccharomyces Niger Cervisiae R 5589 : 2c . 3,3 i 1 100 1 o R 5626 : 2b . 1 1 . 10 . 50 50 Deux sortes d'actions ont été recherchées en parasitologie. 1.- Action trichomonacide pour déterminer l'activité trichomonacide "in vitro" sur Trichomonas vaginalis on mesure l'inhibition au départ des cultures. Le milieu de culture (dit de Magara) est constitué par un bouillon de viande de foie de boeuf d'origine commerciale (bouillon VF ou milieu de Weinberg et Goy délivré par l'institut Pasteur) pour anaérobies, glucosé à 0,5 % et additionné de 5 à 10 % de sérum stérile de poulain. 7 nl de e milieu sont ensemencés avec 0,5 ml d'une culture de Trichomonas vaginalis correspondant à 400 000 flagellés et traités, en mêmes temps, par 0,5 ml d'une solution ou suspension aqueuse du produit à examiner.L'activité relevée est donnée par la concentration minimale de substance qui inhibe totalement le développement du Trichomonas vaginalis après un temps de contact de 48 heures, à l'étuve à 370 2.- Action amoebicide Les essais d'activité amoebicide "in vitro" contre Entamoeba dysenteriae ont été effectués de la même manière que les essais contre Trichomonas vaginalis mais le milieu utilisé est celui de Pavlova-Jones dont la composition est donnée ci-dessous P04NHa2 , 2 H20 4,45 g P04HK2 1,135 g CîNa 20 g Extrait de levure Difco 2,75 g Eau distillée 2750 ml L'action inhibitrice au départ de la culture est enregistrée après 72 heures, à ltétuve à 37 . Elle est exprimée en g/ml. Les résultats sont consignés dans le tableau II suivant. T A B L E A U II Trichomonas Entamoeba Syphacia Vaginalis Dysenteriae Obvelata : composés Inhibition Action Inhibition Déparasitage (%) au départ létale au départ à 200 mg/kg/jour (&gamma;) pendant 4 jours R 5633:2a 1 25 100 30 :R 5626 : 2b : 1 # 25 : 10 : 20 R 5732:2c 0,3 50 à 100 10 40 :R 5589 : 2d : l : 25 : 50 à 100 : 50 Les composés étudiés peuvent donc être utilisés en thérapeutique pour le traitement d'urétrites et vaginites à Trichomonas et d'amibiase intestinale ou hépatique. Ils peuvent aussi être employés pour la lutte contre les colibacilles et les staphylocoques pathogènes ainsi que contre la tuberculose. Ils peuvent être présentés, par exemple, en comprimés qui en contiennent de 5 à 800 mg, en ovules, en suppositoires ou encore en pommade. Ils peuvent aussi Aetre utilisés in vitro comme agents de désinfection et de stérilisation, en particulier sous forme de solutions aqueuses. REVENDICATIONS 1.- Les nitro-2 bz-hydroxy benzofurannes répondant à la formule dans laquelle l'hydroxyle occupe l'une quelconque des positions 4 à 7. 2.- Un procédé de préparation des composés de la revendication i, caractérisé en ce qu'on applique aux composés méthoxylés correspondants la méthode de désalcoylation à l'aide de chlorure de pyridinium. 3.- Un procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on opère au-dessous de la température d'ébullition. 4.- Un procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on opère à une température de 180 à 200 . 5.- Un médicament qui renferme un des composés de la revendication 1. 6.- Un produit de désinfection qui contient un des composés de la revendication 1. 7. - Le nitro-2 méthoxy-4 benzofuranne.