Brevet FR2147268A1 — publié le 19730309

La présente invention concerne un sel benzathinique de la méthylène ampicilline, en particulier celui de formule C50H58N808S2, son procédé de préparation et ses applications en thérapeutique. Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce qu'on fait réagir des solutions aqueuses de N,N'-dibenzyléthylène-diamine et de sels alcalins de méthylène ampicillines. Conformément à l'invention, le sel de N,N'-dibenzyléthylènediamine utilisé est l'acétate, tandis que la méthylène ampicilline est sous la forme de sel sodique; la réaction forme le sel faisant l'objet de l'invention, qui précipite du fait de sa faible solubilité dans l'eau. Le procédé de préparation du produit selon l'invention consiste notamment à faire réagir la méthylène ampicilline sodique de formule et le diacétate de benzathine, ou le diacétate de la N,N'-dibenzyléthylène diamine de formule Dans cette réaction (de double de'ccmpDsition), il se fonte un sel recul tant de l'union électrostatique entre les deux atcmes d'azote de la benzatine et les atomes correspondants d'oxygène du groupe carboxylique de la m6thvlbne ampicilline :: ta réaction s'effectue en fin de compte par addition d'une solution aqueuse refroidie d'acétate, de chlorhydrate ou d'un autre sel soluble quelconque de la N,N'-dibenzyléthylène diamine à une solution aqueuse refroidie de la méthylène ampicilline sodique (ou potassique), le sel benzathinique de la méthylène ampicilline précipite immédiatement. L'exemple non limitatif suivant est donné à titre d'illustration de l'invention. On décrira cet exemple en se référant au dessin annexé, donné uniquement à titre d'exemple dans lequel la Fig. unique est un graphique illustrant les niveaux sanguins d'activité antibiotique en mcg/ml observés, en fonction du temps en heures, en administrant par voie intramusculaire diverses ampicillines à un lot de cobayes à raison de 20 mg par animal. Exemple On dissout rapidement 70 g de méthylène ampicilline sodique dans 750 cm3 d'eau distillée préalablement refroidie entre 0 et 5 C, et sans perdre de temps, on ajoute à la solution, sous forte agitation, et en la faisant couler rapidement goutte à goutte, 400 cm3 d' une solution froide, entre 0 et 50C, à 12 % dans l'eau distillée de diacétate de N,N'-dibenzyléthylène diamine.On filtre sous vide le précipité obtenu, on le lave à l'eau très froide et on le sèche soit par lyophilisation soit à une température ne dépassant pas 250C sous vide sur gel de silice. te produit obtenu est le sel benzathinique de la méthylène ampicilline, et le rendement est de 80 ffi (environ 70 g). I1 s'agit d'une poudre blanche très insoluble dans l'eau, BO- luble dans le méthanol, l'éthanol et l'acétone; son point de fusion est de 155 -1560C avec décomposition. Le sel benzathinique de la méthylène ampicilline ainsi obtenu a été étudié pharmacologiquement par la Demanderesse, qui a observé des caractéristiques d'activité, de permanence des niveaux sanguins et de résistance à la pénicillinase, qui favorisent son utilisation clinique comme un excellent antibiotique à action prolongée en administration intramusculaire. Résumé des essais pharmacologiques I - Activité antibiotique Par la méthode de diffusion sur plaques d'agar ensemencées avec Staphylococcus aureus ÂTCC 6538; on a établi un pouvoir antibiotique correspondant à 768 mcg de métampicilline sodique/mg de produit. II - Résistance à la Pénicillinase En mettant 1 mcg de méthylène ampicilline benzathine en contact avec des concentrations croissantes de pénicillinase et en faisant l'évaluation par la méthode de diffusion sur plaque d'agar, on ne constate pas d'inactivation de l'antibiotique, pas même en présence de 500 U.I. de pénicillinase. III - Niveaux sanguins actifs On injecte par voie intramusculaire à des lots de 4 cobayes, de poids compris entre 250 et 350 g, des doses de 20 mg par animal d' échantillons du produit en cristaux de diverses grosseurs, et on prélève des échantillons de sang par fonction intracardiaque au bout de 1, 3, 5, 9 et 24 heures après l'administration du produit. La détermination de la concentration active d'antibiotique s'effectue par la meme technique que celle décrite au paragraphe I, ce qui donne les résultats suivants: niveaux sanguins d'activité antibiotique en mcg/ml de méthylène ampicilline sodique, en administrant intra-musculairement, par cobaye, 20 mg de produit d'une grosseur de cristaux comprise entre 5 et 130 microns Heures 1 3 5 ~ 9 24 3'8 2'2 1'4 0'7 0'2 Niveaux sanguins d'activité antibiotique en mcg/ml de produit dont les cristaux ont pour la plupart une grosseur de 5 microns. Heures 1 3 5 9 24 3'8 0'6 0'3 0'15 0'02 IV - Retard de la Permanence dans le sang Par la même méthode que celle décrite au paragraphe III, on a comparé la permanence dans le sang de l'activité antibiotique de la méthylène ampicilline benzathine, avec celle d'autres pénicillines du même groupe, à savoir A - Ampicilline sodique : 20 mg par animal C - Ampicilline benzathine : 20 mg par animal B - Méthylène ampicilline sodique : 20 mg par animal D - Méthylène ampicilline benzathine : 20 mg par animal. Le graphique en annexe résume les résultats obtenus. Sur ce graphique, on peut constater que le produit faisant l'objet de la présente invention produit des niveaux sanguins d'activité antibiotique plus élevés et plus prolongés que les autres pénicillines du même groupe auxquelles on l'a comparé, y compris l'ampicilline benzathine (forme retard de l'ampicilline). V - Toxicité aigue La DL50 de la méthylène ampicilline benzathine a été déterminée sur la souris; par voie intrapéritonéale, elle est de 470 mg/kg et par voie orale de 7200 mg/kg. REVENDICBTIONS 1 - Sel benzathinique de la méthylène ampicilline répondant à la formule brute C50H58N & 8S2. 2 - Procédé de préparation du sel benzathinique de la méthylène ampicilline, caractérisé en ce qu'on fait réagir, en solution aqueuse, un sel de N,N'-dibenzyléthylène diamine et un sel alcalin de méthylène ampicilline. 3 - Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que le sel de N,N'-dibenzyléthylène-diamine utilisé est l'acétate, tandis que la méthylène ampicilline est sous la forme de sel sodique, et en ce que par réaction entre les deux il se forme le sel benzathinique qui précipite du fait de sa faible solubilité dans l'eau. 4 - Sel benzathinique de la méthylène ampicilline tel qu'obtenu par un procédé suivant la revendication 2 ou 7. 5 - Médicament à activité antibiotique caractérisé en ce qu'il contient à titre de principe actif un composé suivant la revendication 1 ou 4. 6 - Médicament suivant la revendication 5, caractérisé en ce qu'il est présenté pour l'administration intramusculaire, le principe actif étant associé aux véhicules pharmaceutiques appropriés.