Brevet FR2200001A1 — publié le 19740419

la préserte invention concerne de nouveaux polypeptides de la formule dans laquelle X représente le reste d'un amino-acide ou d'un peptide linéaire de 2-6 anino-acides, et Q représente le reste de l'arginine ou de la lysine, tous les amino-acides ayant un centre d' asymétrie présentant la configuration L, et leurs sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement utilisables, ainsi que des procédés de préparation de ces composes. Pour les deux composés répondant à la formule I et il s'agit de dérivés d'analogues des hormones neurohypophysaires se trouvant dans la nature, par exemple de l'arginine-vasopressine et de la lysine-vasopressine, répondant aux formules et Par rapport aux vasopressines naturelles, les composés selon l'invention se distinguent, d'une part, par le remplacement des amino-acides phényl-alanine et glutamine par l'isoleucine et la leucine, et d'autre part par un reste additionnel d'aminoacide ou d'un peptide linéaire X, de sorte qu'on peint les désigner brièvement comme I-[11e3, Leu4]-arginine-vasopressine ou X-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. Les abréviations utilisées dans la présente description pour les différents amino-acides et leurs groupes protecteurs sont celles utilisées couramment dans la chimie des peptides et connues de l'homme de l'art (Littérature: Schröder, E. et Lübke, K.: The-Peptides, Academic Press, New York & BR London, Vol. I (1965) et Vol. il (1966) et règles IUPAC-IUB). Elles n'ont donc pas besoin d'!tre définies à nouveau. Sauf indication contraire, il s'agit pour les arnino- acides optiquement actifs toujours de la configuration L. Comme exemples de restes d'amino-acides représentés par le symbole X dans la formule generale I, on peut citer: les radicaux acyles d'acides a-amino-carboxyliques, en particulier de ceux de provenance naturelle, et ceci, d'une part, aussi bien à caractère neutre que basique ou acide, et d'autre part, du type aliphatique, aromatique ou hétérocyclique s tels que l'alanine, la valine, la leucine, l'isoleucine, la sérine, la thréonine, la méthionine, la cystéine; la lysine, l'arginine, l'asparagine, la grutamine; l'acide aspartique ou glutamique; la phénylalanine, la tyrosine; la proline, l'hydroxyproline, l'histidine ou le tryptophane.Les restes de peptide linéaire de 2-6 amino-acides représentés par le symbole X sont formés par liaison peptidique des amino-acides précités. Des exemples de sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement acceptables sont les sels avec des acides minéraux comme l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, acide phosphorique, l'acide sulfurique et l'acide perchlorique, ou avec des acides organiques comme l'acide acétique, l'acide oxalique, l'acide maléfique, l'acide malique, l'acide tartrique ou l'acide citrique. Les nouveaux polypeptides de la formule I et leurs sels d'addition d'acides peuvent être préparés selon un procédé caractérisé en ce que a) on scinde le ou les groupes protecteurs d'un peptide de la formule dans laquelle R1 représente le reste éventuellement protégé d'un amino-acide ou d'un peptide linéaire de 2-6 amino-acides, R2 représente un atome dthydrogène ou un groupe protecteur d'amides, Q' représente un reste de la formule -NH-CH[-CH2)-NH-C(=NH)-NHR ]-CO- ou -NH-CH[CH2)4-NH-R4]-CO-, R3 représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur du reste guanidine et R4 représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur d'anines protégeant le reste lysine, avec la conditicn qu'au moins un des restes R1, R et R3 ou R4 représente ou contient un groupe protecteur, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et convertit éventuellement le peptide libre, par traitement avec un acide organique ou minéral, en un sel d'addition d'acides non-toxique , pharmaceutiquement acceptable , ou b) on oxyde un peptide de la formule dans laquelle X et Q ont la signification donnée ci-dessus et R5 et R6 représentent chacun soit un atome d'hydrogène soit un groupe protecteur de sulfhydryle, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration X, en scindant simultanément ou préalablement des groupes protecteurs éventuellement présents, et on convertit le produit de la réaction, le cas échéant, en un sel d'addition d'acides non-toxique, pharmaceutiquement acceptable, par traitement avec un acide minéral ou organique, ou c) on oxyde, avec scission simultanée du ou des groupes protecteurs, un peptide de la formule dans laquelle Q' et R1-R6 ont la mEme signirication que ci-dessus mais au moins un des restesys R, R et R ou R4 représente ou contient un groupe protecteur, et tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et convertit, lecas échéant, le produit de la réaction, par traitement avec un acide minéral ou organique, en un sel d'addition d'acides non-toxique, pharmaceutiquement acceptable. On peut effectuer l'oxydation d'un composé des formules IV ou V de façon connue (voir par exemple Schröder-Lübke, Vol. I, p. 275.seq) de préférence en solution aqueuse ou aqueuseorganique par introduction d'-air ou d'oxygène, ou avec le l'eau oxygénée, de l'iode, du 1,2-diiodoéthane ou du ferricyanure de potassium. Des groupes protecteurs de sulfhydryle éventuellement présents peuvent être éliminés préalablement ou pendant l'oxydation.Un composé de la formule IV, avec R5 = R6 = hydrogène, trityle, benzhydrile, acétamidométhyle, benzylthiométhyle et isobutyloxyméthyle,peut par exemple être oxydé avec le sulfocyanogène [(SCN)2] en le peptide cyclique, qui est un composé de la formule IV, avec R5 = R6 =hydrogène, trityle ou acétamidométhyle, par exemple avec de l'iode. La scission de groupes protecteurs d'un peptide de la. formule III ou V peut également être effectuée de façon connue dans les conditions valables pour chaque groupe. On peut utiliser tous les groupes protecteurs connus dans les synthèses des peptides. Des exemples de groupes protecteurs d'amines sont les groupes du type acyle (tels que les groupes formyle, benzoyle, phtalyle, trifluoracétyle, p-tosyle, aryl- et alcoylphosphoryle, phényl- et benzylsulfonyle, trityl-sulfényle, o-nitrophénylsulfényle, y-chlorobutyryle ou o-nitrophénoxyacétyle), du type alcoyle (tels que les groupes trityle, benzyle, alcoylidène) ou du type uréthane (tels que les groupes carbobenzoxy; p-bromo-, p-chloro- ou p-méthoxyearbobenzoxy; tolyloxy-, allyloxy-, cyclopentyloxy-, cyclohexyloxy-, t-butyloxy- ou l,l-diméthylpropyloxy-, 2-(p-biphénylyl)-2-propyloxy-carbonyle; ou benzylthiocarbonyle). On peut aussi protéger des groupes amino par protonisation. Des exemples de groupes protecteurs d'amides sont les groupes xanthényle, 2 ,4-diméthoxybenzyle1 2,4,6-triméthoxybenzyle et 4,4'diméthoxybenzhydryle. Comme groupes protecteurs spéciaux pour le reste arginine, on peut citer, par exemple, les groupes p-tosyle, carbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy, t-butoxy-, adamantyloxy- ou isobornyloxycarbonyle, On peut aussi protéger le reste arginine par protonisation ou par nitration. Des exemples de groupes protecteurs de sulfhydryle sont les groupes alcoyl- ou arylthio comme les groupes éthylthio, t-butylthio, ou phénylthio; des groupes alcoyles ou alcoyles substitués comme les groupes t-butyle, 2-diéthoxycarbonyl- éthyle, benzyle, trityle, p-méthoxybenzyle, p-nitrobenzyle, ben zylthiométhyle, acétamidométhyle ou isobutyloxyméthyle; des groupes acyles comme les groupes carbobenzoxy, benzoyle, acé- tyle, p-méthoxybenzyloxycarbonyle ou éthylaminocarbonyle ou tétrahydropyran-2-yle. les composés de départ des formules III, IV et V sont des composés nouveaux et font également partie de l'invention. On peut préparer les composés de départ de façon connue en utilisant les groupes protecteurs habituels, en particulier les groupes cités. Des exemples pour des groupes protecteurs de carboxyles sont les O-esters et S-esters (tels que: esters méthylique, éthyle lique, t-butylique, benzylique, cyanométhylique, phtalimidométhy- lique, 4-picolylique, 2-p-tosyléthylique, phénylique, p-nitro- phénylique, thiophénylique, ou p-nitrobenzylique; des arides ou hyrdazides (tels que trityl-, phényl-, carbobenzoxy- ou butoxy carbonyl-hydrazide). On peut aussi protéger le groupe carboxyle par salification. Des exemples pour des groupes carboxyles activés sont les azides ou esters cyanométhylique, p-cyanophénylique, p-nitro phényliqle, thiophénylique, p-nitrothiophénylique, î-benztriazo- lylique, l-succinimidylique, l-pipéridylique, 8-quinoleylique, 5-chloro-8-quinolélique, 2-pyridylique ou thiopyridylique. On peut synthétiser un composé de la formule IV ou V par exemple par allongement successif de la chaine dtun dipeptide dtune unité d'un amino-acide, ou au moyen de deux ou plusieurs fragments. Par oxydation de façon connue, on peut convertir un canpos4de la formule V en un composé de la formule III. Un composé de départ de la formule III peut, par exemple, aussi être préparé par traitement d'un composé de la formule dans laquelle Q' a la même signification que ci-dessus, avec un amino-acide protégé ou un peptide linéaire protégé b 2-6 amino-acides et, lecas échéant, scission de groupes protecteurs. les composés selon l'invention de la formule I ont une activité hormonale, qui ressemble qualitativement à celle des hormones neurohypophysaires. Il faut souligner la forte activité natriurétique. les composés selon l'invention sont supérieurs du point de vue le l'intensité d'action ainsi que de la durée d'action à l'arginine-vasotocine naturell [(Ile )-arginine-vasopressine] et à la (Leu4)-oxytocine préparée par V.J. Hruby & al. (J. Biol. Chem. 244, 3890 (1969)], un analogue hormonal neurohypophysaire qui a l'activité natriurétique la plus forte connue à ce jour. L'effet sur l'augmentation de la pression sanguine des composées selon l'invention est plus faible que celui de l'arginine-vasotocine, de sorte que l'effet natriurétique du composé I est sélectivement augmenté par rapport à l'effet sur l'augmenta- tion de la pression sanguine. Un autre avantage des composés selon l'invention, par exemple par rapport à l'arginine-vasotocine et la (Leu4)-oxytocine,réside dans le fait que l'excrétion de sodium est augmentée sélectivement d'une.façon considérable par rapport à l'excrétion du potassium. Einalement, les composés de l'invention se distinguent de ceux déjà cités et de ceux de formule générale dans laquelle Q a la même signification que ci-dessus, par leur activité retardée; parmi les composés définis par la formule générale I, la Gly-[Ile , Leu4]-(lysine- ou arginine)vasopressine présentant une particulièrement bonne activité. le diacétate de Gly-[Ile , Leu4]-arginine-vasopressine présente une valeur TRFNa (Tubular Rejections Fraction du sodium, selon Cort et coll., A.J. of Physiol.215 (1968) 921) chez le chat de à à 20 pg/kg et une vie moyenne de la durée d'action de 140 minutes. Le diacétate de Leu-Gly-[Ile3LeuS]-lysine-vaso- pressine et le triac état e de 1eu-Gly-Gly-[Ile3,Leu4]-arginine- vasopressine présentant chacun une valeur TRFNa chez le chat de 3% à 50 Ag/kg. En raison des activités biologiques indiquées, composés conviennent au traitement d'oedèmes des genres les plus divers et des troubles généraux du métabolisme des électrolytes, en particulier de la rétention du sodium. Le dosage dépendra des besoins individuels et pourra varier entre 100 g et 10 mg par dose unique, administrée en une à plusieurs fois par jour. On peut administrer les polypeptides sous forme des bases libres ou sous forme de sels avec des acides minéraux ou organiques,ou avec des polymères contenant des groupes acides (comme par exemple la carboxyméthylcellulose ou l'acide tannique), soit seuls soit sous forme de préparations médicales appropriées pour l'application par voie orale, parentérale, topique ou intranasale. Pour la préparation des présentations médicales,on peut mélanger les substances actives avec des substances auxiliaires inorganiques ou organiques qui sont inertes et physiologiquement acceptables. Comme exemples de telles substances auxiliaires, on peut citer: pour les comprimés: le lactose, l'amidon, le talc et l'acide stéarique; pour les solutions d'injection: l'eau, les alcools, la glycérine et les huiles végétales; pour les suppositoiTes: les huiles et graisses naturelles et durcies; pour les solutions de vaporisation inttanasales: liteau, la glycérine et d'autres substances compatibles avec les muqueuses. Les préparations peuvent contenir en outre, par exemple, des agents de conservation, de stabilisation et de mouillage appropriés, ainsi que des edulcorants, colorants et substances gustatives. Exemple 1 a) Z--I-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-I,cysteinyl-I,prolyl- tosyl-L-arginyl-glycinamide 18,0 g de Z-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cycstéinyl-L-prolyl- NG-tosyl-L-arginyl-glycinamide [préparé selon R.l. Huguenin et R.A. Boissonnas, Helv. 4D, 695 ('966)] sont dissous dans 100 ml d'acide acétique glacial et mélanges avec 100 ml d'une solution 5N de HBr/acide acétique. le mélange est agité pendant 45 minutes à la température ambiante, puis versé goutte à goutte dans 1 litre d'éther. Le bromhydrate précipité du pentapeptide est lavé avec de l'éther, sur E0H et P205, et dissous dans 100 ml de méthanol.La solution est versée sur une colonne de Dowex 2 (forme OH), l'éluat concentré sous basse pression et le résidu dissous dans 100 ml de diméthylformamide. la solution est mélangée à Q avec 8,5 g de Z-L-Leu-OPhNO2 et le mélange conservé pendant 9 Jours à la température ambiante, puis l'hexapeptide protégé est précipité par addition de 1 litre d'acétate d'ethyle, lavé avec de l'éther et de l'acétate d'éthyle, puis séché. Rendement: 16,3 g; p.f. 183-185 ; [&alpha;]25n = -41,5 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). b) Z-L-isolecyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-L-arginyl-glycinamide. On élimine, de la manière décrite sous (a), le groupe de protection Z de 16,0 g de Z-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L- cytéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-L-arginyl-glycinamide et l'amine libre obtenue est mise en réaction avec 6,0 g de Z-L-Ile-OPhNO2 dans 100 ul de dtméthylformamide. On conserve le mélange pendant 2 jours à la température ambiante, précipite l'hexapeptide protégé en ajoutant 1 litre d'acétate d'éthyle, puis on lave et sèche le précipité avec le l'éther, de l'acétate d'éthyle et de l'isopropanol. Rendement: 13,1 g; p.f. 211-212 ; [a]25 = -41,9 (c = 0,5 dans le diméthylfoxnamide). (c) Z-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl-tyrosyl-L-is oleucyl-L-leucyl- G L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-L-argi nyl-glycinamide. Une solution de 0,44 g d'hydrazide de Z-glycyl-S-benzyl-Lcystéinyl-L-tyrosine ([préparée selon K. Jost et coll., Collection Czech. Chem. Commun. 26, 2496 (1961)] dans 5 ml de diméthylformamide est mise en réaction à 20 avec 2 ml d'acide chlorhydrique 2,5N dans du tétrahydrofuranne et 0,2 ml de nitrite isoamylique.Le mélange est agité pendant 30 minutes à -20 , refroidi à 300, puis après neutralisation avec 0,56 ml de N-méthylmorpholine, mis en réaction à cette température avec une solution de 0,76 g de L-isoleucyl L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-L-ar ginyl-glycinamide [obtenu par scission du radical benzyloxycarbonyle du Z-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl NG-tosyl-L-arginyl-glycinamide de la manière décrite sous (a)] dans 8 ml de diméthylformamide et conservé pendant 7 jours à 40. Le décapeptide protégé est précipité par addition d'acétate d'éthyle, filtré, lavé avec de l'acétate d'éthyle et de l'éther, séché,dissous à nouveau dans le diméthylformamide et précipité une deuxième fois par addition goutte à goutte à un mélange d'éthanol et d'eau (1:1), filtré et séché. Rendement: 0,8 g; point de fusion 238-241 , [a125 -35,30 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (d) Diacétate de Gly-[Ile , Leu4]-arginine-vasopressine. 400 mg de Z-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-Larginyl-glycinamide sont soumis à réduction dans 500 ml d'ammoniac liquide avec du sodium. Après élimination de l'ammoniac, le résidu est dissous dans 800 ml d'acide acétique 0,2N, et la solution est réglée au pH 7,4 avec de la soude caustique. Ensuite, on ajoute 60 ml d'une solution 0,01M de K3 [Fe(CN)6] et maintient le pH à 6,8-7,4 en ajoutant un peu de soude caustique.On conserve le mélange réaction nel pendant 15 heures à 40 et le verse sur une colonne d'Amberlite IR-45 (de forme C L'éluat est acidifié avec de l'acide acétique et adsorbé à de l'Amberlite CG-50 (de forme H+). Après lavage avec 500 ml d'acide acétique à 0,2%, on élue avec un mélange pyridine/acide acétique glacial/eau (30:4:66) et lyophilise deux fois l'éluat avec absorption intermédiaire dans de l'eau. Le produit de la lyophilisation est dissous dans 3mld'un tampon d'acétate d'ammonium 0,5M (pH = 6,4) et chromatographiée sur une colonne d'Amberlite CG-50 (forme H+) pour la purifier davantage. L'éluat est lyophilisé plusieurs fois. [&alpha;]25D = -62,8 (c = 0,5 dans l'acide acétique iN). Electrophorèse sur papier: Tampon de 2 ml d'acide acétique glacial et 20 ml de pyridine,complété avec de l'eau jusqu'à 1 litre (pH = 6,0); Rf(arginine) =0,65 + 0,05. Tampon de 37 ml d'acide forme et 25 ml d'acide acétique, complété avec de l'eau jusqu'à 1 litre (pH = 1,7); Rf(arginine) = 0,46 + 0,05. Exemple 2 (a) Ester méthylique de Boc-S-benzyl-L-cystéinyl-0-benzyl-l tyrosine. Une solution de 3,1 g de Boc-S-benzyl-L-cystéine, 3,2 g de chlorhydrate de l'ester méthylique d'O-benzyl-L-tyrosine et 1,23 ml de N-méthylmorpholine dans 40 ml de diméthylformamide est mélangée à O avec 2,47 g de dicyclohexylcarbodiimide, agitée pendant 30 minutes à 0 et encore2 heures à la température ambiante, puis conservée pendant 15 heures à 40 On élimine le précipité par filtration, concentre le filtrat sous pression réduite, dissout dans de l'acétate d'éthyle, lave trois fois avec de acide citrique 1M, des solutions saturées de chlorure de sodium, de bicarbonate de sodium et de chlorure de sodium, puis sèche et concentre sous pression réduite. Le résidu ést recristallisé dans l'acétate d'éthyle et l'éther de pétrole. Rendement: 4,3 g; point de fusion 119-121 ; [&alpha;]25n = -11,80 (c = 1 dans le méthanol). (b) Ester méthylique de Z-L-prolyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O- benzyl-L-tyrosine. Une solution de 1,2 g d'ester méthylique de Boc-S-benzyl B-cystdinyl-O-benzyl-L-tyrosine dans 20 ml d'acide chlorhydrique 1,6N dans de l'acide acétique glacial est agitée pendant 30 minutes à la température ambiante. Le chlorhydrate de l'ester dipeptidique est précipité par addition d'éther, filtré et séché sur P205/KOH.Ce résidu est dissous dans 15 ml de diméthylformamide, neutralisé par addition de 0,168 ml de N-méthylmorpholine et mis en réaction avec 0,55 g de Z-1-Pro-OPhN02. Le mélange est conservé pendant 18 heures à la température cambiste, le diméthylformamide est distillé sous pression réduite, le résidu est dissous dans l'acétate d'éthyle, et la solution est lavée avec une solution aqueuse de triéthylamine à 1 % environ, de l'acide chlorhydrique 1N et une solution de chlorure de sodium saturée,séchéeet concentrée. Le résidu est recristallisé dans 11 acétate d'éthyle/hexane. Rendement: 0,8 g; point de fusion 150-151 ; ra]25 = -52,5 (c = 0,5, dans le méthanol). (c) Hydrazide de Z-L-prolyl-S-benzyl-L-cysteinyl-O-benzyl-L-tyrosine. 0,5 g d'ester méthylique de Z-L-prolyl-S-benzyl-L-cystéinyl- O-benzyl-L-tyrosine sont dissous sous chauffage dans un mélange de 30 ml de méthanol et 2,5 ml de diméthylformamide. La solution est traitée avec 0,6 ml d'hydrate d'hydrazine, conservée pendant 20 heures à 500 et pendant 5 heures à 40; lthydrazide tripeptidique cristallisé est filtré, lavé avec de l'éther et séché. Rendement: 0,39 g; point de fusion 196-187 ; [a]25 = -56,60 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (d) Z-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl- N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide. 14,0 g de Z-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl- N8-tosyl-L-lysyl-glycinamide [préparé selon M.Bodanszky et coll. J. Amer. Chem. Soc. 82, 3195 (1960)] sont dissous avec chauffage dans 60 ml d'acide acetique glacial et additionnés, à la température ambiante, de 60 ml d'une solution 5N de HBr/acide acétique glacial. Le mélange est agité pendant 1 heure à la température ambiante, puis versé goutte à goutte dans 600 ml d'éther. Le bromhydrate précipité du pentapeptide est lavé avec de l'éther et séché sur KOH et P205, puis dissous dans 100 ml de méthanol. La solution est versée sur une colonne de Dowex 2 (forme OR). l'éluat concentré sous pression réduite et le résidu dissous dans 60 ml de diméthylformamide. On ajoute à à la solution, à 00, 6,55 g de Z-Leu-OPhN02, conserve le mélange pendant 2 jours à la température ambiante et précipite l'hexapeptide protégé par addition de 600 ml d'acétate d'éthyle, lave avec de l'éther et de l'acétate d'ethyle, et sèche. Rendement , 11,6 g ; p.f. 223-225 ; [&alpha;]25D = -43,9 (c = 1,0 dans le diméthylforma e) Z-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L De la manière décrite en a), on élimine le groupe de protection Z de 11,0 g de Z-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl- L-cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide, et l'hexapepti- de obtenu, dont le groupe amino terminal n'est pas protégé, est mis en réaction avec 5,0 g de Z-L-Ile-OPhNO2 dans 60 ml de diméthylformamide. Le mélange est conservé pendant 3 jours à la température ambiante, et l'hexapeptide protégé est précipité par addition de 600 ml d'acétate d'éthyle, puis on lave le précipité avec de éther et de l'acétate d'éthyles et sèche. Rendement: 9,6 g; p.f. 224-227 ; [&alpha;]25D = -43,3 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (f) Z-X-prolyl-S-benzyl-L-cystéinyi-O-benzyl-L-tyrosyl-X- isoleucyl-L-leucyl-I-asparaginyl-S-benzyl-L-cysteinyl-I- prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide. Une solution de 0,285 g dthydrazide de Z-L-proiyl-S-benzyl-L- cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine dans 3 ml de diméthylformamide est mise en réaction à -20 avec 1,5 ml d'acide chlorhydrique 1,6 N dans du tétrahydrofurante et 0,15 ml de. nitrite isoamylique.Le mélange est agité pendant 40 minutes à -20 et mélangé à cette température, après neutralisation au moyen de 0,27 ml de N-méthylmorpholine, avec une solution de 0,4 g de L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl N -tosyl-I-lysyl-glycinamide [ & tenu par élimination du groupe protecteur Z du Z-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L- cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl-glycinamide selon la méthode décrite sous (d)]1 dans 1,5 ml de diméthylformamide.Le mélange est agité pendant une heure à -15 et conservé pendant 3 jours à 40. Ensuite, on filtre, précipite le décapeptide protégé par addition goutte à goutte du filtrat à de l'eau, filtre, dissout à nouveau dans du diméthylformamide, reprécipite par addition goutte à goutte de cette solution à un mélange d'acétate d'éthyle et d'éthanol (1:1), filtre et sèche. Rendement: 0,4 g; point de fusion 230-233 ; [a]25 = - 52,40 ( c = 0,5 dans le diméthylformamide). (g) Diacétate de Pro-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. 250 mg de Z-L-prolyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L- trosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide sont convertis en le diacétate de Pro-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine désiré d'une manière analogue à celle décrite sous 10). Rendement: 92 mg; [&alpha;]25D= -55,0 (c = 1, dans de l'acide acétique à 95 %) Electrophorèse sur papier: Tampon de 2 ml d'acide acétique glacial et 20 ml de pyridine, complété avec de l'eau jusqu'à 1 litre (pH = 6,0); Rf(lysine)= 0,61#0,05 Tampon de 37 ml d'acide formique et 25 ml d'acide acétique, complété avec de l'eau jusqu'à 1 litre (pH = 1,7); Rf(lysine) = 0,41 - 0,05. Exemple 3 (a) Ester méthylique de O-benzyl-L-tyrosine. Une solution de 0,77 g de chlorhydrate d'ester méthylique de S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine (préparée à partir de 11 ester méthylique de Boc-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L- tyrosine de la manière décrite sous 2b), 0,168 ml de N-méthylmorpholine et 0,65 g de Z-N#-tosyl-L-lysine dans 15 ml de diméthylformamide est mélangée à o 0,35 g de dichlorhexylcarbodiimide, puis conservée pendant 15 heures à la température ambiante. Le mélange est filtré, le filtrat concentré sous pression réduite et le résidu dissous dans de l'acétate d'éthyle. Cette solution est lavée avec de l'acide chlorhydrique 1N, des solutions saturées de chlorure de sodium de bicarbonate de sodium et de chlorure de sodium, puis séchée et concentrée sous pression réduite.L'ester tripeptidique protégé est recristallisé dans l'éthanol. Rendement: 0,6 g; point de fusion 109-110 ; ###25 = -19,1 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (b) Hydrazide de Z-N#-tosyl-L-lysyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O- benzyl-L-tyrosine. 0,4 g d'ester méthylique de Z-N-tosyl-L-lysyl-S-benzyl-L- cystéinyl-O-benzyl-I-tyrosine sont dissous dans 15 ml de méthanol, traités avec 0,4 ml d'hydrate d'hydrazine et conservés pendant 20 heures à 500. La solution est ensuite conservée pendant 3 heures à 40, puis l'hydrazide tripeptidique cristallisé est séparé par filtration et recristallisé dans l'éthanol. Rendement: 0,29g; point de fusion 172-173 ; ###25 = -23,8 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (c) Z-N#-tosyl-L-lysyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosyl I-is oleucyl-L-leucyl-L-a sparaginyl-S-$ enz yl-L- cysteiny1- L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide. Une solution de 0,225 g d'hydrazide de Z-N#-tosyl-L-lysyl-S- benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine dans 3 ml de diméthylformamide est traitée à -20 avec 1 ml d'acide chlorhydrique 1,5N dans du tétrahydrofurane et 0,1 ml de nitrite isoamylique.Le mélange est agité pendant 40 minutes à ~200, et mélangé à cette température, après neutralisation au moyen de 0,17 mi de N-méthylmorpholine, avec une solution de 0,25 g de L-isoleucyl-L-leudyl- L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl glycinamide dans 1 mi de diméthylformamide, agité pendant une heure à -15 et conservé pendant 5 jours à 40. Le décapeptide protégé est précipité par addition goutte à goutte du mélange à de l'eau, filtré, et recristallisé dans le diméthylformamide. Rendement: 0,2 g; point de fusion 229-231 ; [a]25= 37,60 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (d) Triacétate de Lys-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. 160 mg de Z-N#-tosyl-L-lysyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl- L-tyrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl L-prolyl-N#-tosyl-L-leucyl-glycinamide sont convertis d'une manière analogue à celle décrite sous ld)en le-triacétate de Lys-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. Rendement: 44 mg; [&alpha;]25n= 34,70 (c = 0,75, acide acétique 95 %). Electrophorèse sur papier: Tampon de 2 ml d'acide acétique glacial et 20 ml de pyridine ; complété à 1 litre avec de l'eau (pH = 6); Rf(lysine) = 0,74-± 0,05 Tampon de 37 ml d'acide formique et de 25 mi d'acide acétique, complété à 1 litre d'eau (pH = 1,7); Rf(lysine) = 0,55 + 0,05. Exemple 4 (a) Ester méthylique de Z-#-t-butyl-L-glutamyl-S-benzyl-L- cystéine. 5,2 g de sel de dichlorhexalammonium de l'acide Z-#-t- butyl-L-glutamique et 2,6 g de chlorhydrate de l'ester méthylique de S-benzyl-L-cystéine sont mis en suspens ion dans 100 ml de diméthylformamide et agités pendant 30 minutes à la température ambiante. le mélange est filtré, le filtrat mélangé à 0 avec 2,2 g de dicyclohexylcarbodiimide, agité pendant 70 minutes à 00 et conservé pendant 2 jours à la température ambiante. Ensuite, on filtre, concentre sous pression reduite et dissout dans de l'acétate d'éthyle, puis lave successivement avec de l'acide citrique IN, puis des solutions saturées de chlorure de sodium, de NaHCO) et de chlorure de sodium, seche et concentre sous pression réduite. L'ester dipeptidique protégé est recristallisé dans un mélange acétate d'éthyle/hexane. Rendement: 2,6 g; point de fusion 92-93 ; [a]D = -43,5 (c = 1 dans le méthanol). (b) Hydrazide de Z-#-t-butyl-L-glutamyl-S-benzyl-L-cystéine. 1,5 g de l'ester méthylique de Z-y-t-butyl-L-glutamyl-S benzyl-L-cystéine sont dissous dans 25 ml d'éthanol et traités avec 0,5 ml d 1 hydrate d'hydrazine. Le mélange est conservé pendant 2 jours à la température ambiante,pendant une journée à 40, l'hydrazide est séparé par filtration et recristallisé dans un mélange ge éthanol/éther. Point de fusion 154-155 ; [&alpha;]25D = 20,40 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (c) Z-O-benzyl-L-tyrosyl-L,isoleueyl-L-leucyl-L-asparaginyl- S-benzyl-L-cystéinyl-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide. Selon la méthode décrite en 2d), on élimine le groupe de protection Z de 4,5 g de Z-L-isleucyl-L-leucyl--asparaginyl-S benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide et l'heptapeptide obtenu, dont-le groupe amino terminal n'est pas protége, est mis en réaction avec 2,1 g de Z-O-benzyl-L-Tyr-OPhNO2 dans 60 mol de diméthylformamide. Après avoir laissé reposer pendant 12 heures à la température ambiante, on verse goutte à goutte le mélange réactionnel dans de l'éthanol, filtre l'octa- peptide protégé précipité, puis lave avec de l'éthanol et de éther, et sèche. Rendement: 4,2 g ; p.f. 230-232 ; la]D5 Ps -18,5 (c = 1 dans le diméthylformamide). (d) Z-y -t-butyl-L-glutamyl-S-benzyl-L-cyste'inyl-L-tyrosyî-I- isoleucyl-L-leucyl-I-asparaginyl-S-benzyl-L-cysteinyl-L- prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide. Une solution de 0,38 g d'hydrazide de Z-z-t-butyl-L-glutamyl- S-benzyl-L-cystéine dans 3 ml de diméthylformamide est traitée à -200 avec 3 ml d'acide chlorhydrique 1,4N dans du tétrahydrofurane et 0,3 ml de nitrite isoamylique.Le mélange est agité pendant 4 minutes à -200 et traité à cette température,après neutralisation avec 0,47 ml de'N-méthylmorpholine,avec la solution des composés amines (préparée par dissolution de 0,965 g de Z-O-benzyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl L-cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-L-glycinamide dans 15 ml d'acide acétique glacial, addition de 15 ml de Hbr 5N dans l'acide acétique glacial, agitation pendant une heure à la température ambiante, précipitation du bromhydrate peptidique par addition goutte à goutte à de 11 éther, lavage du précipité avec de 11 éther, séchage et dissolution dans 4 ml de diméthylformamide et neutralisation par addition de N-méthylmorpholine). Le mélange réactionnel est agité pendant une heure à 150, conservé pendant 2 jours à 40 et filtré, puis le filtrat versé goutte à goutte dans de l'eau. Le décapeptide protégé qui précipite est séparé par filtration, recristallisé dans le diméthylformamide et l'acétate d'éthyle, filtré, digéré dans de l'éthanol bouillant et séché. Rendement: 0,56 g; point de fusion 220-223 ; [&alpha;]25D = -38,0 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (e) Z-I,glutamyl-S-benzyl-X-cystéinyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl-L- leucyl-L-asaraginyl-S-benyzl-L-cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl- L-lysyl-glycinamide. Une solution de 0,35 g de Z-#-t-butyl-L-glutamyl-S-benzyl- L-cystéinyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl L-cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl-L-leucyl-glycinamide dans 5 ml d'acide trifluoroacétique est conservée pendant 3 1/2 heures à la température ambiante. L'acide décapeptidiaue en partie protégé est précipité par addition de cette solution à de éther, filtré et recristallisé dans un mélange diméthylformamide/acétate d'éthyle. Rendement: 0,24 g; point de fusion 218-220 . (f) Acétate de Glu-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. 190 mg de Z-L-glutamyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-tyrosyl-L- isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl NE-tosyl-X-lysyl-glycinamide sont convertis d'une manière analogue à celle décrite sous lQ en acétate de Glu-[Ile , Leu]-lysine-vao- pressine, qui est ensuite chromatographié sur Amberlite CG-50 dans un tampon d'acétate d'ammonium 0,5M, puis sur une colonne Sephadex G-10 dans de l'acide acétique 0,2N. Rendement 30 mg; [&alpha;]25D = 33,70 (c =1 dans acide acétique à 95 %). Electrophorèse sur papier: Tampon de 2 ml d'acide acétique glacial et 20 ml de pyridine, complé té à 1 litre avec de l'eau (pH=6,0); Rf(ysine) =0,38#0,05 Tampon de 37 mi d'acide formique et 25 ml d'acide acétique, complété à 1 litre avec de l'eau (pH=1,7); Rf(lysine) = 0,40 + 0,05. Exemple 5 (a) Ester méthylique de Z-L-leucyl-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl- O-benzyl-B-tyrosine. Une solution de 1,03 g de chlorhydrate d'ester méthylique de S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine (préparée selon la méthode décrite sous 2b),0,23 ml de N-méthylmorpholine et 0,65 g de Z-L-leucyl-glycine préparée selon la méthode de R. Nagata et coll., Bull. Chem. Soc. Japan 40, 963 (1967)], dans 20 ml de diméthylformamide est mélagée à 0 avec 0,52 g de dicyclohexylcarbodiimide et agitée pendant 15 heures à la température ambiante. Le mélange est filtré, le filtrat concentré sous pression réduite et le résidu dissous dans de l'acétate d'éthyle. Cette solution est lavée avec de l'acide chlorhydrique IN, des solutions saturées de chlorure de sodium, de -bicarbonate de sodium et de chlorure de sodium, séchée et concentrée sous pression réduite.L'es- ter tétrapeptidique protégé est cristallisé dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'hexane, Rendement: 1,35 g; point de fusion 100-102 ; [&alpha;]25D = -19,7 (c = 0,5 dans le méthanol). (b) Hydrazide de Z-L-leucyl-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl- L-tyrosine. 1,1 g d'ester méthylique de Z-L-leucyl-glycyl-L-cystéinyl- O-benzyl-L-tyrosine sont dissous dans 25 ml de méthanol et traités avec 0,5 mi d'hydrate d'hydrazine. Le mélange est conservé pendant 15 heures à 500. L'hydrazide tétrapeptidique protégé est précipité par addition d'éther, séparé par filtration et recristallisé deux fois dans de méthanol. Rendement: 0,7 g; point de fusion 170-171 ; [&alpha;]25D = -29,7 D = -29,7 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (c) Z-I,leucyl-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosyl- I,isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L- prolyl-N#-tosyl-lysyl-glycinamide Une solution de 0,2 g d'hydrazide de Z-L-leucyl-glycyl-S- benzyl-L-cyste/inyl-O-benzyi-L-tyrosine dans 3 ml de diméthylforma mMe est mélangée à -20 avec 1 ml d'acide chlorhydrique 1,5N dans le étrahydrofurane et 0,1 mi de nitrite isoamylique.Le mélange est agité pendant 40 minutes à -20 et traité à cette température, après neutralisation au moyen de 0,17 ml de N-méthylmorpholine, avec une solution de 0,25 g de L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl- S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-L-glycinamide dans 1 ml de diméthylformamide, agité pendant une heure à -15 , conservé pendant 3 jours à 40 et filtrée. L'undécapeptide protégé est précipité par addition goutte à goutte du filtrat à de l'eau et reprécipitation dans un mélange diméthylformamide/acétate d'éthyle. Rendement: 0,36 g; point de fusion 238-242 ; [&alpha;]25D = -38,6 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (d) Diacétate de Leu-Gly[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. 250 mg de Z-L-leucyl-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl- L-tyrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl L-prolyl-N#-tosyl-L-lysyl-glycinamide sont convertis d'une manière analogue à celle décrite sous ld) en de diacétate de Leu-Gly-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. Rendement: 59 mg; [&alpha;]25D= -43,5 (c = 0,75 dans de l'acide acétique à 95 ). Electrophorèse sur papier: tampon de 2 ml d'acide acétiqueglacial et 20 ml de pyridine, complété à 1 litre avec de l'eau (pH=6,0): Rf(lysine) = 0,62 + 0,05 tampon de 37 ml d'acide formique et 25 mi d'acide acétique, complété à 1 litre avec de l'eau (pH=1,7): Rf(lysine) = 0,40 + 0,05. Exemple 6 (a) Ester méthylique de Boc-glycyl-L-cystéinyl-O-benzyl- B-tyrosine. Une solution de 0,65 g de chlorhydrate d'ester methylique de S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine, 0,141 ml de N-méthylmorpholine et 0,22 g de Boc-glycine dans 15 ml de diméthylformamide est mélangée à 0o avec 0,27 g de dichlorhexylcarbodiimide, agitée pendant 3 heures à la température ambiante et conservée pendant 15 heures à 40 Le mélange est filtré, le filtrat concentré sous pression réduite et le résidu est dissous dans de l'acétate d'éthyle. Cette solution est lavée avec une solution à 5 % de KHSO4/10 % de K2S04,des solutions saturéesde chlorure de sodium, de bicarbonate de sodium.et de chlorure de sodium, séchée et concentrée sous pression réduite.L'ester tripeptidique protégé est cristallisé dans un mélange acétate d'éthyle/hexane.Rendement: 0,38 g; point de fusion 114-115 ; [&alpha;]25D= -15,9 (c= 1 dans le méthanol). (b) Ester méthylique de Z-L-leucyl-glycyl-glycyl-S-benzyl-L cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine. 2,9 g d'ester méthylique de Boc-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl- O-benzyl-L-tyrosine sont dissous dans 35 ml d'acide chlorhydrique 1,5N dans de l'acide acétique glacial et agités pendant 30 minutes à la température ambiante. Le chlorhydrate de l'ester tripeptidique est précipité rar addition d'éther, filtré et séché sur P205/KOH. Le résidu est dissous dans 40 mi de tétrahydrofurane, neutralisé par addition de 0,46 ml de N-méthylmorpholine, mélangé avec 1,32 g de Z-L-leucyl-glycine et mélangé à C avec 0,93g de dicyclohexylcarbedi- imide. Le mélange réactionnel est conservé pendant 3 jours à 40 et filtré, le filtrat concentré sous pression réduite et le résidu dissous dans de l'acétate d'éthyle. Cette solution est lavée avec de l'acide chlorhydrique 1N, des solutions saturées de chlorure de sodium, de bicarbonate de sodium et de de chlorure de sodium, séchée et concentrée sous pression réduite. L'ester pentapeptidique protégé est cristallisé dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'hexane. Rendement: 2,9 g; point de fusion: 162-163 ; [&alpha;]25D= -22,5 (c= 1 dans le méthanol). (c) Hydrazide de Z-L-leucyl-glycyl-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl O-benzyl-L-tyrosine. 2,0g d'ester méthylique de Z-L-leucyl -glycyl-glycyl-S-beneyl- L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine sont dissous dans un mélange de 75 ml d'éthanol et de 10 ml de diméthylformamide, mélangés avec 1,5 ml d'hydrate d'hydrazine et conservés pendant 16 heures à 500. L'hydrazide pentapeptidique cristallise après addition d'éther au mélange réactionnel; il est filtré er recristallisé dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'hexane, puis dans le méthanol. Rendement: 1m4 g; point de fusion 196-197 ; [&alpha;]25D= -32,0 (c=1 dans le diméthylformamide). (d) Z-L-leucyl-glycyl-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl- I-tyrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl- inyl-glycinamide. Une solution de 0,73 g d'hydrazide de Z-b-leucyl-glycyl-gly- cyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl-L-tyrosine dans 10 ml de diméthylformamide est mélangée à -20 avec 2 ml d'acide chlorhydrique 2,7N dans du tétrahydrofurane et 0,4 ml de nitrite isoamylique. Le mélange est agité pendant 40 minutes à -20 et mélangé à cette température , après neutralisation au moyen de 0,605 ml de N-méthylmorpholine, avec une solution de 0,88 g de L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl Ndtosyl-l-argînyl-glycinamide dans 10 ml de diméthylformamide, agité pendant une heure à -20 et conservé pendant 4 jours à 40. Le dodécapeptide protégé est précipité par addition goutte à goutte du mélange réactionnel à de l'eau, séparé par filtration, dissous dans le diméthylformamide et recristallisé par addition goutte à goutte à un mélange d'acétate d'éthyle et d'éthanol (1:1).Rendement:0,93g; point de fusion 240-243 , [&alpha;]25D = -36,00 (c = 0,5 dans le diméthylformamide). (e) Triacétate de Leu-Gly-Gly-[Ile , Leu4]-arginine-vasopressine. 400 mg de Z-L-leucyl-glycyl-S-benzyl-L-cystéinyl-O-benzyl- L-tyrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl L-prolyl-NG-tosyl-L-arginyl-glycinamide sont covertis selon la méthode décrite sous ld) en triacétate de Leu-Gly-Gly-[11e3, Leu4]-arginine-vasopressine. Rendement: 68 mg; [&alpha;]25D = -52,50 (c = 1 dans de l'acide acétique à 95%).Electrophorèse sur papier : tampon de 2 ml d'acide acétique glacial et 20 mi de pyridine, complété à 1 litre avec ae 11 eau (pH=6,0); Rf(arginine) = 0,64 + 0,05 ; tampon de 37 ml d'acide formique et 25 ml d'acide acétique, complété à 1 litre avec de l'eau (pH=1,7), Rf(arginine) = 0,42 t 0,05. Exemple 7 (a) Ester éthylique de Boc-L-leucyl-glycine. Une solution de 4,62 g de Boc-L-leucine dans 20-ml de diméthylformamide est mélangée à -15 avec 2,24 ml de N-méthylmorpholine et 2,64 ml d'ester isobutylique de l'acide chloroformique, agitée pendant 1 minute à cette température et mélangée à une suspension de 2,8 g de chlorhydrate d'ester éthylique de glycine (refroidie à -15 ) et de 2,24 mi de N-méthylmorpholine dans 25 ml de diméthylformamide. Le mélange réactionnel est agité pendant une heure à -15 et pendant une heure à la température ambiante, concentré sous pression réduite, et le résidu dans l'eau. Cette solution est extraite plusieurs fois au moyen d'acétate d'éthyle.Les extraits d'acétate d'éthyle combinés sont lavés avec une solution KHSO4 (5%)/K2SO4 (10%), des solutions saturées de chlorure de sodium, de bicarbonate de sodium et de chlorure de sodium, séchés et concentrés sous pression réduite. L'ester dipeptidique protégé est cristallisé dans un mélange acétate déthyle/hexane. Rendement: 4,9 g; point de fusion 82-83 ; [&alpha;]25D= -29,3 (c = 1 dans le méthanol). (b) Boc-L-leucyl-glycine. 4,5 g d'ester éthylique de Boc-L-leucyl-glycine sont dissous dans un mélange de 20 ml de méthanol et de 20 mi d'acétone, traités avec 14 ml de soude saude caustique 2N et agitée pendant 75 minutes à la température ambiante. Le mélange réactionnel est dilué avec de l'eau, libéré sous pression réduite du solvant organique, acidifié avec un mélange d'une solution à 5 % de XHS04 et d'une solution à 10% de E2S04, et extrait avec de l'acide acétique. Les extraits d'acétate d'éthyle sont séchés, concentrés sous pression réduite, et l'acide dipeptidique protégé est cristallisé au moyen d'un mélange acétate d'éthyle/hexane. Rendement: 3,9 g; point de fusion 121-122 [a]25 = -28,40 ( c = 1 dans le méthanol). (c) Ester éthylique de Boc-L-leucyl-glycyl-glycine. Une solution de 3,6 g de Boc-L-leucyl-glycine dans 20 ml de diméthylformamide est traitée à -15 avec 1,4 ml de N-méthylmorpholine et 1,65 ml d'ester isobutylique de l'acide chloroformique, agitée pendant une minute à cette température et mélangée avec une suspension de 1,74 g de chlorhydrate d'ester éthylique de glycine (refroidie à à -15 ) et 1,4 ml de N-méthylmorpholine dans 25 ml de diméthylformamide. Le mélange réactionnel est agité pendant 30 minutes à -15 et pendant une heure à la température ambiante, et concentré sous pression réduite. Le résidu est élaboré selqn la méthode décrite sous aX L'ester tripeptidique protégé est obtenu sous forme d'huile. Rendement: 4,5 g. (d) Boc-L-leucyl-glycyl-glycine. D'une manière analogue à celle décrite sous b), on saponifie 3,5 g d'ester éthylique de Boc-L-leucyl-glycyl.glycine. L'acide tripeptidique protégé est obtenu sous forme huile. Rendement: 3, 1g. A des fins d'analyse,un échantillon de acide tripeptidique protégé est converti de la manière habituelle en son sel de dicyclohexylammonium. Point de fusion 165-166 ; [&alpha;]25D - 5,90 (c = 1 dans le méthanol). (e) Z-O-benzyl-L-tsrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-S benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-L-arginyl-glycinamide. De 10,0 g de Z-L-isoleucyl-L-leucyl-L-asparaginyl-Sbenzyl-L-cystéinyl-L-polyl-NG-tosyl-L-arginyl-glycinamide, on scinde le groupe protecteur- Z comme décrit sous la ) et on traite l'amine libre resultante avec 4,5 g de Z-O-benzyl-L Tyr-OPhNO2 dans 100 ml de IMF. Après avour laissée reposer 3 jours à la température ambiante, on precipite l'octapeptide protégé par addition d'acétate d'ehtyle, lave avec de l'acétate d.! éthyle et de l'étha- nol, reprécipite dans un mélange acide acétique glacial/éthanol, lave avec de. méthanol et sèche; Rendement: 8,4 g; point de fusion 237-2380; [a]24 = 36,20 (c0 0,5, dans le diméthylformamide). (f) Z-S-benzyl-L-cystéinyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-L-arginyl glycinamide. On dissout 7,0 g de Z-O-benzyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl-Lleucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-Larginyl-glycinamide dans 50 ml d'acide acétique glacial et on ajoute 50 ml d'une solution de HBr 5N dans l'acide acétique glacial. Après une agitation d'une heure,onverse goutte à goutte dans 1 litre d'éther, filtre le précipité, le lave avec de l'éther, reprécipite dans un mélange éthanol/éther et sèche sur P2O5 et KOH. On dissout le. bromhydrate obtenu de l'octapeptide dans 50 ml de DMF. On ajuste la solution à pH 7,5 par addition d'éthyldiisopropyl amine et ajoute 2,7 g de Z-S-benzyl-L-Cys-OPhN02. Après un repos de 3 jours à la température ambiante, on précipite le nonapeptide par addition d'éthanol, lave avec de l'acétate d'éthyle et de l'éthanol, puis sèche. Rendement: 4,7 g; p.f. 220-223 ; [&alpha;]25D= -42,60 (c = 0,5, dans le diméthylformamide). (g) Diacétate de [Ile , Leu4]-arginine-vasopressine. 500 mg de Z-S-benzyl-L-cystéinyl-L-tyrosyl-L-isoleucyl-Lleucyl-L-asparaginyl-S-benzyl-L-cystéinyl-L-prolyl-NG-tosyl-Larginyl-glycinamide sont convertis d'une manière analogue à celle décrite sous ld)en diacétate de [Ile , Leu4]-arginine-vasopressine. Rendement: 120 mg; [&alpha;]25D= +4,0 (c = 0,5, dans l'acide acétique 1N). Electrophorèse sur papier: tampon de 2 ml d'acide acétique glacial et 20 mi de pyridine, complété à 1 litre au moyen d'eau (pH=6,0): Rf(arginine) = 0,51#0,05; tampon de 37 ml d'acide formique et 25 mi d'acide acétique, complété à 1 litre au moyen d'eau (pH=1,7). Rf(arginine)= 0,52#0,05. (h) Triacétate de Leu-Gly-Gly[Ile , Leu4]-arginine-vasopressine. Une solution de 345 mg de Boc-L-leucyl-glycyl-glycine dans 5 ml de tétrahydrofurane est mélangée avec 115 mg de N-hydroxysuccinimide et 206 mg de dicyclohexylcarbodiimide, agitée pendant 2 heures à la température ambiante et filtrée. Le filtrat est concentré sous pression réduite et lister hydroxysuccinimidique obtenu de l'acide tripeptidique protégé est séché. Une solution de -25 mg de diacétate de [Ile , Leu]-arginine-vasopressine dans 0,5 ml d'eau est mélangée avec une solution de 31 mg d'ester hydroxysuccinimidique de B oc-L-leucyl-glycyl-glycine dans 0,5 ml de dioxane, le mélange est porté au pH 6,75 par addition de Nméthylmorpholine et conservé pendant 2 jours à la température ambiante. Le mélange réactionnel est ensuite porté au pH 2,9 par addition d'acide chlorhydrique 0,1N. filtré, dilué avec. 10 ml d'eau et extrait 3 fois avec de l'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est chromatographiée sur une colonne Sephadex G-10 avec de l'acide acétique 0,2N. L'éluat de la colonne est lyophilisé, le lyophylisat dissous dans 4 ml d'acide trifluoroacétique aqueux à 90 %, conservé pendant 30 minutes à la température ambiante, dilué avec 150 ml d'eau, concentré sous pression réduite, dilué à nouveau avec 150 ml d'eau, concentré à nouveau, puis lXophylisé. La substance est chromatographiée sur une colonne d'Amberlite CG-50 (forme H ) avec un tampon d'acétate d'ammonium (pH 6,4) pour purification. L'éluat est lyophilisé plusieurs fois avec absorption d'eau - intermédiaire. Le diacétate de Leu-Gly-Gly- [Ile , Leu4]-arginine-vasopressine ainsi obtenu montre,dans une analyse d'amino-acide, le rapport d'amino-acides attendu et et est identique selon chromatographie et électrophorèse sur papier, à la substance décrite sous 6e). Exemple 8 On prépare de ranièreconnue des comprimés sublinguaux ayant la teneur suivante: a) diacétate de Gly-[I1e3,Leu4]- arginine-vasopressine 5,83 mg lactose 66,17 mg sucre pulvérisé 20,00 mg polyvinylpyyrolidine 7,00 mg stéarate de magnésium 1,00 mg 100,00 mg b) diacétate de Gly-[Ile , Leu]- arginine-vasopressine 11,66 mg lactose 71,34 ng mannitol 60,00 mg hyroxypropyl-méthylcellulose 5,00 mg stéarate de magnésium 2,00 mg 150,00 mg Exemple 9 On prépare de manière connue une solution d'injection contenant par ml: diacétate Leu-Gly-[Ile , Leu4] lysine-vasopressine 0,12 mg NaCl 9,00 mg HCl O,lN ad pH 3,5 q.s. H20 ad inject. ad 1,0 ml Exemple 10 On prépare de manière connue un lyph contenant: diacétate de Leu-Gly-Gly-[Ile , Leu]- parties en arginine-vasopressine 11,60 arginine-vasopressine 11,60 acide L-malique D-mannitol 163,34 Pour obtenir une solution d'injection propre à l'a on dissout 163,34 mg de lyophiîisat dans 10 ml d'eau distillée. REVEIXDI^.CTIOtS 1. Polypeptide de la formule dans laquelle X représente le reste d'un amino-acide ou d'un peptide linéaire de 2-6 amino-acides, et Q représente le reste de l'arginine ou de la ly sine, tous les amino-acides ayant en centre d'asymé trie présentant la configuration L, et ses sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 2. Polypeptide de la formule dans laquelle X représente le reste d'un amino-acide -ou d'un peptide linéaire de 2-6 amino-acides, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et ses sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 3. Polypeptide de la formule dans laquelle X représente le reste d'un amino-acide ou d'un peptide linéaire de 2-6 amino-acides, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et ses sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 4. Diacétate de Gly-[I1e3 ,Leu4]-arginine-vasopressine. 5. Diacétate de Pro-[ île3 ,Leu4]-lysine-vasopressine. 6. Diacétate de Lys-[I1e3,Ieu4]-lysine-vasopressine. 7. Diacétate de Glu-[Ile , Leu4]-lysine-vasopressine. 8. Diacétate de Leu-Gly-[Ile , Leu4]-lysine-vasopresine. 9. Triacétate de Leu-Gly-Gly-[Ile , Leu[-arginine-vaso- pressine. 10. Procédé de préparation de polypeptides de la formule dans laquelle X représente le reste d'un amino-acide ou d'un peptide linéaire de 2-6 amino-acides, et Q représente le reste de 1'arginine ou de la lysine, tous les anino-acides ayant un centre- d' asymétrie présentant la configuration L, et de leurs sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement acceptables, caractérisé en ce que a) on scinde le ou les groupes protecteurs dans un peptide de la formule dans laquelle R1 représente le reste éventuellement protégé d'un amino-acide ou d'un peptide linéaire de 2-6 anino-acides, R2 représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur d'amides, Q' représente un reste de la formule -NH-CH[-CH2)-NH-C(=NH)-NHR ]-CO ou -NH-CH[-(CH2)4-NH-R4]-CO-, R3 représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur du reste guanidine et R4 représente un atome d'hydrogène ou un .groupe protecteur d'amines protégeant le reste lysine, au moins un des restes R1, R2 et R3 ou R4 représentant ou contenant un groupe protecteur, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et on convertit éventuellement le peptide libre, par traitement avec un acide organique ou minéral, en un sel d'addition d'acides non-toxique , pharmaceutiquement acceptable , ou b) on oxyde un peptide de la formule dans laquelle X et Q ont la signification donnée ci-dessus et R5 et R6 représentent chacun soit un atome d'hydrogène soit un groupe protecteur de sulfhydryle, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, en scindant simultanément ou préalablement des groupes protecteurs éventuelloment présents, et on convertit le produit de la réaction, le cas échéant, en un sel d'addition acides non-toxique, pharmaceutiquement acceptable, par traitement avec un acide minéral ou organique, ou c) on oxyde, avec scission simultanée du ou des groupes protecteurs, un peptide de la formule dans laquelle Q' et R -R6 ont la même signification que ci-dessus,au moins un des restes R1, R2 et R3 ou R4 représentant un groupe protecteur et tous les amino acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et on convertit,-le cas échéant, le produit de la réaction, par traitement avec un acide organique ou minéral, en un sel d'addition d'acides non-toxique, pharmaceutiquement acceptable. ll. Procédé selon ia revendication 10, caractérisé en ce qu'on prépare un polypeptide de la formule dans-laquelle X a la même s-ignification que ci-dessus, et tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et ses sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 12. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'on prépare un polypeptide de la formule dans laquelle X a la même signification que ci-dessus et tous amino-aicdes ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L, et ses sels d'addition d'acides non-toxiques, pharmaceutiquement acceptables. 13. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'on prépare le diacétate de Gly-[Ile3,1eu4]-arginine-vaso- pressine. 14. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'on prépare le diacétate de Pro-[Ile3,Leu4]-lysine- vasopressine. 15. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en se qu'on prépare le diacétate de Lys-[i1e3,Leu4]-lysine-vaso- pressine. 16. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'on prépare l'acétate de Glu-[Ile3,Leu4]-lysine-vaso- pressine. 17. Procéda selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'on prépare le diacétate de Beu-Gly-[Ile3,Leu4]-lysine- vasopressine. 18. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'on prépare le triacétate de Leu-Gly-Gly-[I1e3,Leu4]- arginine-vasopressine. 19. Peptide de la formule dans laquelle Q' et R1-R4 ont la même signification que dans la revendication 10, au moins un des restes R1, R2 et R3 ou R4 représentant ou contenant un groupe protecteur, et tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration. L. 20. Peptide de la formule dans laquelle X, Q, R5 et Rfi ont la même signification que dans la revendication 10, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L. 21. Peptide de la formule dans laquelle Q' et R1-R6 ont là même signification que dans la revendication 10, tous les amino-acides ayant un centre d'asymétrie présentant la configuration L. d'une 22. Les produits obtenus suivant le procédé/des revendications 1là18. 23. A titre de médicaments nouveaux, les composés selon l'une des revendications là9. 24. Compositions ayant une action natriurétique, caractérisées en ce qu'elles comprennent un composé suivant l'une des revendications 1à9,ainsi qu'on véhicule ou support pharmaceutique. 25. Compositions suivant la revendication 24, caractérisées en ce qu'elles se présentent sous forme d'unités de dosage contenant 100 pg à 10 mg de substance active par unité de dosage. 26. Compositions suivant la revendications 25, caractérisées en ce qu'elles se présentent sous forme de comprimés, capsules, cachets, ovules, ampoules, etc. 27. Procédé pour la fabrication de préparations ayant une action natriurétique, caractérisé en ce qu'un composé selon l'une des revendications 1à9 est mélangé, en tant que substance active, avec des supports solides ou liquides, non-toxiques, inertes et thérapeutiquement compatibles, usuellement utilisés dans de telles préparations, et/ou des excipients. l'une 28. Utilisation de composés suivant/des revendieations 1à9 comme agents natriurétiques.