Brevet FR2147834A1 — publié le 19730311

La présento invention a pour objet un procédé de préparation enzymatique d'extrait h6matopfétique dc foies de jeunes bevidés, contenant 25 % d'humidité (# 5%) et environ 8 gammas ds vitamine B 12 au gramme sur extrait sec. Conformément à l'invention, le procédé se caractérise en ce que les foies finement hachés sont soumis un agent enzymati@ que, savoir le suc de Papayer brut exeroant son activité afin d'obtenir une digestion des organes poussée au maximum,en ce qu'on procède alors à une déealbumination puis après refroidis- sement on procède A deux reprises par l'eau suivies d'un stockage è basse température pendant plusieurs jours, on soumet le produit à une évaporation dans le vide pour obtenir en fin d'opé- ration une masse piteuse contenant environ 25 % d'humidité (# 5 % et environ 8 gammas de vitamines B 12 au gramme sur extrait secc Dans certains cas, après ddsalbumination par ébullition des jas, on reprend l'extrait dans l'alcool è 600 et, après mélange intime, on laisse au repos pendant quelques heures. Diverses autres caractéristiques de l'invention ressortent d'ailleurs de la description détaillée qui suite OBSERVATION EONDAMENTALE Pour obtenir un extrait de foie pourvu de propriétés théra- pentiques, il est indispensable : 1) - de ne traiter que des organes d'animaux jeunes et ayant été soumis au préalable à une visite sanitaire, éliminant de ce fait tout organe pierreux, parasité ou tuberouleux, etc...); 2) - de refuser systématiquement les organes provenant de zones è ramassage défectueux et d'exclure les organes ayant subi des autolyses plus ou moins avancées. Le mode de préparation décrit ci-dessous dans ses moindres détails a de sérieux avantages sur ceux employés jusqu'à ce Jour. a) On utilise un agent enzymatique, le suc de Papayer brut préalablement dosé par la méthode du Codex 1949 et en quantité légèrement supérieure à la théorie, exerçant ainsi une activité accrue sur les liaisons peptidiques diverses, tant par son surdosage que par le temps de digestion maxima, ainsi que par une température judicieusement étudiée. b) Une purification est obtenue par l'ébullition des Jus en fin d'opération et, après refroidissement, on pratique deux reprises par l'eau suivies d'un stockage au frige à -5 C pendant 5 jours. c) On utilise des activateurs des hydrolyses enzymatiques Chlorure de Cobalt et Chlorhydrate de Cystéïne MODE DE PREPARATION lère opération 100 kg de foies congelés sont sortis du frigorifique la veille au soir pour obtenir une décongélation et favoriser le lendemain matin le découpage en plusieurs parties des foies et en prenant la précaution de pulvériser les dits organes de quelques centimètres cubes de chloroforme et de Toluène, pour éviter jusqu'au lendemain tout commencement dtautolyse possible, surtout en été. À ce moment, on introduit ces derniers, débarrassés desgraisses et des apondnoses, dans un hachoir mécanique à mailles fines. La masse ainsi pulpée est mise dans une cuve munie d'un agitateur automatique, avec 200 litres d'eau dans lesquels ont été dissous au préalable 0,50 g de Chlorure de Cobalt et 1 g de Chlorhydrate de Cystéine et l'on ajoute O kg 400 de suc de Papayer brut finement pulvérisé titre protéolytique Codex 1949 dgal à 350. On élève progressivement la température du mélange à 70GC et l'on maintient cette température pendant 4 heures, ce dit mélange étant touJours soumis à une agitation mécanique, le Ph ayant été au préalable porté à 70 Au bout de ce temps, qui, en pratique, est suffisant pour reconnat're que la digestion des organes est terminée par l'addition d'acide nitrique qui ne doit donner aucun précipité, on élève la température à 95 C pendant 1/2 heure afin d'éliminer l'action ultérieure de la papaïne mise en excès et on ajoute 0,400 litre à 0,500 litre d'acide chlorhydrique pour obtenir un Ph de 4,5 à 5,5 favorable à la conservation de la Vitamine B 12. On opère une première filtration et l'on évapore sous vide à une température de 50 C, Jusqu'd consistance pâteuse. 2ème opératio (lère reprise par l'eau) On reprend 100 kg de l'extrait pâteux obtenu dans la 1ère opération ci-dessus, par 100 litren d'eau et l'on filtre ln solution obtenue aussitôt. On évapore soae vide à 50 C cette solution Jusqu'd consistance pâteuse. 3ème opération (2ème reprise par l'eau) On reprend 100 kg de l'extrait obtenu dans la 2ème opération par 200 litres d'eau, on mélange intimement et l'on stocke à nouveau pendant 5 Jours à -5 C. ion de (Si l'extrait de foie est destiné à entrer dans la composition de formules pharmaceutiques alcooliques, on pourra remplacer la 3ème opération par une purification par reprise par l'alcool à 600 à la dose de 300 litres d'alcool à 600 pour 100 kg d'extrait, mais cette purification n'est pas à recommander, car des dosages de Vitamines B avant et après le traitement à l'alcool ont montré des baisses notables). 4ème opération Une nouvelle filtration, ainsi qu'une nouvelle évaporation sous vide à 50 C sont opérées, enm arrêtant cette dernière lorsque l'on a obtenu un extrait pâteux ne contenant plus que 25 * d'humidité (# 5 %), ce qui est obtenu grâce à des dosages successifs pratiqués extemporairement par des appareils appropriés. L'extrait ainsi obtenu, qui correspond pratiquement à un rendement d'environ 14 à 16 kg pour une mise en oeuvre de 100 kg de foies, répond très largement aux normes du Codex de 1965, à savoir : - Extrait pâteux contenant 25 % d'humidité (+ 5 %) - Solubilité dans l'eau parfaite à 15 % maximum - Albumine ... néant, par la méthode à l'acide nitrique - Azote total pas inférieur à 8 % - Azote aminé pas inférieur à 2 y - Vitamine B 12 au moins 8 gammas par gramme sur produit sec - Substance histaminique inférieure à 300 gammas par gramme de substance histaminique évaluée en chlorhydrate d'histamine au gramme d'extrait de foie. R E V E N D I C A T I O N S 1 - Procédé de préparation enzymatique d'extrait hématopoïtique de foies de jeunes bovidés, carcdtérisé en ce que t a) dans une première opération, 100 kg de foies finement hactés sont introduits dans une cuve chauffante à mélangeur automatique contenant au préalable 200 litres d'eau dans lesquels ont été dissous 0,50 g de chlorure de cobalt, 1 g de chlorhydrate de cystéïne et 0,400 kg de suc de Papayer, le Ph ayant été ajusté à 7, on soumet ce mélange à la température de 70 C pendant 4 heures, on filtre et on stocke; b) dans une deuxième opération, on reprerd 7.00 kg de l'extrait pâteux obtenu dans la phase a) par 100 litres d'eau et l'on filtre aussitôt la solution obtenue, on évapore sous vide à 50 c catte solution jusqu'à consistance pâteuse ; c) dans une troisième opération, on reprend par l'en 1 partie en poids de cet extrait par 2 volumes diau et on stocke dans un appareil frigorifique à -5 C pendant 5 joure; d) dans un quatrième opériation, on filtre de nouveau, et on opère une nouvelle évapoation à 500C dans le vide, qui est arrêtée lorsque l'onm a obtenu une masse pâteuse contenant environ 25 % d'humidité (# 5 %). 2 - Drocédè ue de préparation enzymatique, caractérisé en ce que s a') dans une première opération, 100 kg de foies finement hachés sont introduits dans une cuve chauffante à mélangeur automatique contenant au préalable 200 litres d'eau dans lesquels ont été dissous 0,50 g de chlorure de cobalt, 1 g de chlorhydrate de cystéïne et 0,400 kg de suc de Papayer, le Ph ayant été ajusté à 7, on soumet ce mélange à la température de 70 C pendant 4 heures, , on filtre et on stocke; b') dans une duxième opération, on reprend 100 kg de l'extrait pâteux obtenu dans la phase a) par 100 litres d'eau et l'on f litre auesitôt la solution obtenue, on évapore sous wide à 50 C cete solution jusqu'à consistance pâteuse; c') dans une troisième opération de purification, on reprend par l'alcool à 60 à la dose de 300 litres d'alcool pour 100 kg d'extrait ; d') dans une quatrième opération, on filtre de nouveau et on opère une nouvelle évaporation à 500C dans le vide, qui est arrêtée lorsque l'on a obtenu une masse piteuse contenant environ 25 % d'humidité (+ 5 %).