Brevet FR2196791A1 — publié le 19740322

La présente invention, faite dans les services de la demanderesse, a pour objet un nouveau dérivé de L-arginine et son utilisation comme médicament hépatotrope. I1 est constitué par le N-acétyl DL méthioninate de L-arginine dont la formule est la suivante Ce sel peut être préparé en faisant réagir mole à mole la L-arginine avec la N-acétyl DL méthionine dans un solvant comme tel on peut citer par exemple, l'alcool méthylique. Ce sel peut être obtenu anhydre après un temps de séchage prolongé sous vide. A l'air libre et à la température ambiante, il devient hygroscopique et peut absorber jusqu'à deux molécules d'eau. Sa préparation est illustrée par ltexemple suivant dans lequel les parties s'entendent en poids sauf mention contraire. Dans un réacteur muni d'un dispositif dtagitation, on dissout 12,73 parties de N-acétyl DL méthionine dans 70 parties en volume de méthanol. On ajoute ensuite 11,61 parties dtarginine et 80 parties en volume de méthanol. On agite jusqu'à complète dissolution, filtre pour enlever les impuretés et évapore à sec à une température inférieure à 400C. On obtient le N-acétyl DL méthioninate de L-arginine qui est ensuite séché sous vide. L'analyse centésimale du produit obtenu est la suivante C H N S Calculé % ...... 41,37 7,51 18,57 8,48 Trouvé % ....... 41,57 8,25 18,48 8,92 avec 3,2% d'eau d'hydratation. Le rendement de la synthèse est quantitatif. Le sel absorbe à l'air une molécule d'eau en un jour en restant solide et se stabilise à deux molécules d'eau après quatre à cinq jours. Le point de fusion au bloc maquenne est de 1880C avec décomposition. Le pouvoir rotatoire spécifique est de D a)23 = + 6,7 + 0,3 PROPRIETES TOXICOLOGIQUES ET PHARMACOLOGIQUES La toxicité aiguë du N-acétyl DL méthioninate de L arginine a été déterminée chez la souris CD1 (Charles RIVER) par la voie orale et par la voie veineuse ; il a été administré en solution aqueuse sous un volume unitaire de 50 ml/kg. Le produit selon l'invention est atoxique aux très fortes doses de 9000 mg/kg p.o. et 800 mg/kg i.v. chez la souris. La principale propriété pharmacologique du N acétyl DL méthioninate de L arginine consiste en une remarqAable activité anti-ammoniémique. La mise en évidence de cette activité a été réalisée chez la souris selon une technique adaptée ce SHIYOA A, KURAISHI K., KAKIMOTO M. et TAMANA Y. (1964), Jap. J. Pharmacol., 14, 210-214. Cette technique consiste à évaluer la protection exercée par un produit, préalablement administré à la souris, visà-vis de la mortalité provoquée par l'injection intra-péritonéale d'une dose d'acétate d'ammonium correspondant à la Du.50. Cette expérimentation a été menée chez la souris mole de souche CD1 (Charles RIVER), dtun poids de 18 à 22 g, La DL.5O par voie intra-péritonéale de l'acétate d'ammonium a été déterminée selon méthode statistique de LITCHFIELD et WILCOXON (1949), J. Pharmacol. Exp. Thér., 96, 99. L'acétate d'ammonium a été injecté i.p. en solution dans de l'eau distillée sous un volume unitaire de 25 ml/kg. L'évaluation des propriétés anti-ammoniémiques du produit à étudier est alors réalisée selon le protocole suivant Au temps t : administration par voie orale du produit à examiner o à diverses doses (mg/kg) sous le volume unitaire de 25 ml/kg. Au temps t + 1 h.30 : injection intra-péritonéale ae la DL 50 o d'acétate d'ammonium, On utilise 25 souris par dose de produit, 25 souris témoins recevant dans les mêmes conditions le véhicule seul sous le même volume unitaire de 25 ml/kg. Dans ces conditions, on recherche la dose de produit capable de supprimer totalement la mortalité induite par l'acétate d'ammonium. La DL 50 par voie intra-péritonéale de l'acétate d'ammonium chez cette souche de souris est comprise entre 736 et 827 mg/kg, limites de confiance pour p = 0,05. La symptomatologie due à lthyperammoniémie provoquée consiste principalement en crises convulsives asphyxiques. La mort survient après une brève crise tonique, et est due à un arrêt respiratoire. La mortalité enregistrée apparait dans l'heure qui suit l'injection et n'évolue pas après 24 heures. Compte-tenu des limites fiducielles de la DL 50 de l'acétate d'ammonium, la dose de 800 mg/kg a été choisie comme dose à antagoniser pour mettre en évidence un effet anti-ammoniémique, le délai d'observation des animaux étant de 24 heures. Les résultats obtenus dans l'étude du produit selon l'invention sont résumés dans le tableau ci-dessous dans lequel les doses s'entendent par kg de poids d'animal. Nombre Mortalité 24 h. après TRAITEMENT ORAL Dose Nombre injection I.P. de (lh 30 avant injection souris 800 mg/kg d'acétate d'ammonium totale .100 Eau distillée (temoins) 25ml 25 10/25 40 p.100 OOmg 25 3/25 12 p.100 N-acétyl î00Omg 25 2/25 8 p.100 DL méthioninate de L arginine 1400mg 25 0/25 O p.100 2000mg i 25 0/25 o p.100 En conclusion, le produit selon l'invention se présente comme dénué de toxicité aiguë chez la souris par voie orale et par voie i.v. Il possède chez cette espèce par voie orale une remarquable activité anti-ammoniémique puisqu'il protège totalement la souris vis-à-vis de l'intoxication ammoniacale dès la dose de 1400 mg/kg. APPLICATIONS THERAPEUTI;X7ES Le produit selon l'invention peut être utilisé en thérapeutique humaine ou vétérinaire, commue protecteur de la cellule hépatique et anti-ammoniémique dans les insuffisances hépato-biliaires, les hépatites, les cirrhoses et les étatshyperammoniémiques. I1 est alors administré sous forme de comprimés, de dragées, de gélules, de suppositoires, d'ampoules injectables ou buvables à des doses variant de 0,05 à 2 g. REVENDICATIONS 10) Le composé de formule 20) Procédé pour la préparation du composé défini sous 10) caractérisé en ce que lton fait réagir mole à mole la L arginine avec la N-acétyl DL méthionine dans un solvant. 30) Médicament hépatotrope comprenant ou constitué par le composé défini sous 10).