Brevet FR2166081A1 — publié le 19730810

Cette invention concerne des antibiotiques qui sont des céphalosporines utilisables dans le traitement de maladies provoquées par des micro-organismes Stapholococcus aureus résistants à la méthicilline. Plus particulièrement,cette invention fournit certains dérivés halogénés de phénylthioacétamidocéphalosporines permettant de traiter et d'inhiber la croissance de micro-organismes Staphylococcus résistants à la méthicilline. Divers articles techniques ont été écrits dans les dernières années qui décrivent les effets Ou le manque d'efficacité de divers antibiotiques sur diverses cultures résistantes à la méthicilline de Staphylococcus aureus. Ces cultures ne se produisent pas trop souvent. Toutefois,les infections provoquées par les souches résistantes à la méthicilline de Stapholococcus aureus sont dites avoir une nature hospitalière en ce qu'elles apparaissent la plupart du temps chez des patients alités ou affaiblis.On a observé ces organismes pathogènes dans des cultures prises chez des patients atteints d'infections virulentes, de troubles arthritiques chroniques des os et/ou des articulations, de troubles chroniques de la circulation ou de la conscience , ou de maladies pulmonaires chroniques De plus, les bactériologistes ont recherché des procédés de préparation de cultures permettant d'identifier séparément les cultures de Staphylococcus aureus résistantes à la méthicilline 6moelles sensibles à la méthicilline.Ils ont apparemment trouvé au moins deux procédés in vitro, l'un nécessitant des températures différentes d'incubation et l'autre nécessitant l'utilisation de concentrations différentes de chlorure de sodium dans le milieu de croissance de la culture, ces procédés permettant de distinguer les souches de Stapholococcus aureus résistantes à la méthicilline de celles qui ne le sont pas. Avec ces outils, les bactériologistes peuvent maintenant aider et conseiller les cliniciens de façon plus efficace dans l'identification et le traitement de ces états dus au Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline. Dans le brevet E.U.A. NO 3.335.136, Flynn décrit et revendique certains acides halophénylmercaptométhylcéphalosporaniques qui sont caractérisés par leur résistance 8 la pénicillinase, leur stabilité vis-à-vis des acides, et leur activité contre les organismes Gram-positifs et contre un certain nombre d'organismes Gram-négatifs. Toutefois, ce brevet ne parle pas des problèmes d'identification et des procédés de traitement des micro-organismes StaPhylococcus aureus résistants à la méthicilline. De plus, le brevet ne parle pas du choix des composés que l'on peut utiliser pour traiter les états provoqués par les micro-organismes Stahylo- cocus aureus résistants à la méthicilline. On a besoin de trouver les composés antibiotiques les plus efficaces pour le traitement des micro-organismes Staphyloccus aureus résistants à la méthicilline et les états maladifs causés par ces micro-organismes. Cette invention fournit certains dérivés monochlorés polychlorés et chloro-fluorés de phénylthioacétamidocéphalosporines qui sont particulièrement efficaces dans le traitement d'infections provoquées par des micro-organismes Staphylococcus aureus résistants à la méthicilline. On inhibe la croissance des micro-organismes Staphylococcus résistants à la méthicilline en traitant les micro-organismes par une quantité efficace d'un composé de formule dans laquelle X et Y sont chacun atome d'hydrogène ou un atome de chlore,choisis de façon que le noyau phényle soit substitué par un ou deux atomes de chlore et de façon que lorsqu'un atome de chlore est présent, il soit en position 3 et que quand seulement deux atomes de chlore sont présents, ils soient en position 3 et 4, 3 et 5, ou 2 et 5; Z est un atome d'hydrogène ou un atome de fluor, et quand Z est un atome de fluor il est en position 3 ou 4 du noyau phényle, soit comme seul substituant du noyau phényle soit associé à un ou deux atomes de chlore, dont l'un est en position 3 ou 4 du noyau phényle;; R est un atome d'hydrogène ou un groupement [(5-méthyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)thio], [(1-méthyl-1H-tétrazol-5-yl)thio] [(1H-tétrazol-5-yl)thio] [(5-phényl-1,3,4-oxadiazol-2-yl)thio], [(5-(p-nitrophényl)-1,3,4-oxadiazol-2-yl)thio], / (s- (p-méthoxyphényl) -1, 3,4-oxadiazol-2-yl) thi carbamyloxy [-O C(O)NH2], méthylcarbamoyloxy, N-pyridino, azido, dithiocarbamoyle, et R' est un atome d'hydrogène, un groupement dicyclohexylamine, ou un. cation pharmaceutiquement acceptable. En plus de leurs caractéristiques de résistance à la pénicillinase, de stabilité aux acides et d'activité contre un grand nombre de micro-organismes Gram-positifs et un certain nombre d'organismes pathogènes Gram-négatifs, On a trouvé que les composés précédents sont très efficaces comme antibiotiques contre divers organismes Staphylococcus aureus résistants à la méthicilline.On les prépare de façon commode et on les administre sous forme de sels du groupement carboxyle avec des cations pharma ceutiquement acceptables, comprenant par exemple les sels de sodium, de potassium, de lithium, d'ammonium et d'ammonium substitué comme de méthylammonium et d'éthylammonium, ainsi que les sels moins solubles dans l'eau comme les sels de calcium, de baryum, de procaïne, de quinine, de cyclohexylbis(méthylamine) et de dibenzylithylènediamine. Pour séparer le composé de son mélange réactionnel et pour l'essayer chez les animaux, on utilise parfois les sels de biscyclohexylamine.L'administration se fait de préférence par injection intramusculaire dans de l'eau, une solution saline isotonique ou une solution de dextrose stériles à une dose (pour des adultes) d'environ 0,25 à 0,5 g toutes les quatre à six heures. L'administration orale. de ces composés qui peuvent étre absorbés par le sang par cette voie, nécessite généralement une dose posologique quelque peu plus élevée, de 0,50 à 1,0 g toutes les quatre à six heures, et peut etre obtenue en utilisant un comprimé, des capsules de gélatine remplies ou des suspensions du type classique, etc. On a trouvé que la plupart des composés du type décrit précédemment dont des exemples sont indiqués ci-dessous ont une activité antibiotique /valeurs de la concentration inhibitrice minimale (CIM) z inférieure à 11 microgrammes/millilitre en l'absen- ce de sérum humain au cours d'un mode opératoire d'essai classique sur plaque à gradient contre Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline. La méthode utilisée est essentiellement celle décrite par Bryson et Szybalski en 1952 (Science 116:45-46). La méthode de traitement de l'inoculum utilisée pour les Staphylococcus résistants à la pénicilline est indiquée par Godzeski et al dans Antimicrobial Avents and Chemotherans, Mai 1969, pages 547-554. On utilise une boîte de Pétri carrée et en matière plastique de type Falcon normalisé. On verse dans l'une des boites carrées une couche de gélose (10 ml), on incline la boite à 5 mm de l'horizontale, et on laisse la couche de gélose durcir dans cette position. Cette couche inférieure de gélose continent l'antibiotique, le sérum, et/ou toute autre substance à tester. Le milieu est le milieu Difco Penassay Agar contenant 2 pour cent de gélose. On utilise en général 4 ml de sérum humain ou de sérum de cheval pour l'essai nd'inactivåtion par le sérum". On peut ajouter le sérum à la couche supérieure de sorte qu'il n'existe pas de gradient de sérum, mais après avoir testé de nombreux antibiotiques de cette manièreoenta trouvé aucune différence importante dans les résultats finaux entre les deux types de plaques de sérum. Donc on ajoute le sérum par routine seulement à la couche inférieure. Après durcissement de la couche inférieure inclinée de milieu gélosé, on remet la boîte à plat et on ajoute encore 10 ml de milieu que l'on laisse durcir. On prépare l'inoculum de Staphylococcus résistant , tel que décrit,en diluant la suspension aqueuse 50 fois dans de l'eau ou une solution saline stériles à 0,25 pour cent de gélose. Pour les organismes Gram-négatifs on dilue un bouillon de culture d'une nuit 50 fois dans de l'eau à ,25 pour cent de gélose. On agite signeusement cette dilution pour mettre les bactéries en suspension uniforme. Pour ensemencer la plaque en stries, on utilise une pipette de 1 ml contenant une partie aliquote de la dilution finale à 0,05 pour cent de gélose. Après un peu d'entraînement, on peut déposer très rapidement un trait égal et uniforme dtinoculum. L'important est l'uniformité de la strie - elle doit dtre obtenue de façon uniforme et rapidement. Après 24 heures d'incubation à 35-370C, on lit les plaques en mesurant simplement la longueur de la croissance bactérienne en pourcentage de la longueur totale de la strie, que l'on transforme ensuite en pourcentage de concentration d'antibiotique dans la plaque. On a réduit photographiquement une règle de 100 mm pour qu'elle corresponde exactement à l'intérieur de la botte, la mesure en millimètres est alors égale à la concentration en pourcentage. On calcule les valeurs moyennes de plusieurs mesures et les concentrations inhibitrices minimales indiquées sont les moyennes de 2 stries sur la plaque et de 2 ou 3 plaques reproduites.On peut facilement placer 8 stries sur chaque plaque. Si l'on n'obtint pas des extrémités nettes, on mesure la concentration moyenne entre le début de l'inhibition de la strìeet l'extrémité de la croissance. La concentration de l'antibiotique en examen varie de plaque en plaque selon la série suivante 200 pg/ml Plaque N 1 et 2 100 " " N 3 et 4 50 " n No 5 et 6 20 n " N 7 et 8 10 " " N 9 et 10 1 " n N ll et 12 Cette méthode de sélection des pénicillines et des céphalosporines est tout à fait satisfaisante.On utilise quotidiennement des plaques témoins contenant de la pénicilline et de la staphcilline ou de la prostaphline, ou un autre antibiotique témoin, pour la sélection de l'activité contre les Staphylococcus résistants. La méthode des plaques à gradient a révélé des différences entre les antibiotiques quinrapparaissent pas dans les autres méthodes de sélection. Les différences antibiotiques, quand on les examine plus précisément par d'autres méthodes, par exemple par thérapeutique sur les animaux, se sont révélées correctes. On pense que la sélection par plaques à gradient est plus sensible aux petites différences entre des antibiotiques apparentés que les autres procédés,et des dessins des plaques peuvent fournir un enregistrement permanent.La méthode permet également par elle même une modification facile pour des besoins spécifiques - par exemple on peut utiliser des gradients entrecroisés. Les composés indiqués dans la liste ci-dessous sont des exemples de composés utiles dans le procédé de cette invention. Après le nom du composé, on donne entre parenthèses, quand on l'a essayé, les concentrations inhibitrices minimales, (CIM) en microgrammes par millilitre (g/ml),pour le composé dans l'essai sur plaques à gradient décrit précédemment contre: Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (en l'absence de sérum sanguin/en présence de 20 pour cent de sérum sanguin). acide 3-carbamyloxyméthyl-7-/2'-(2",5"-dichlorophénylthio)- acétamido]-3-céphem-4-carboxylique (4,1/1,7), -(p-méthoxyphényl-1",3",4"-oxadiazol-5"-yl)thiométhyl]-7 [2'-(2",5"-dichlorophénylthio)acétamido]-3-céphem-4 carboxylate de sodium (4,4/zones sautées), '-(p-nitrophényl)-1",3",4"-oxadiazol-2"-ylthiométhyl]-7 [2'-(2",5"-dichlorophénylthio)acétamido]-3-céphem-4 carboxylate de sodium (3,9/20); sel de dicyclohexylamine de l'acide 3-[5'-phényl-1',3',4'- oxadiazol-2'-ylthiométhyl2-7- '-(2",5"-dichlorophényl- thio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, (0,8/ > 1); sel de dicyclohexylamine de l'acide 3- g '-méthyl-l'H-tétrazol- 5'-ylthiométhyl]-7-[2'-(3",5"-dichlorophénylthio)acétamido]-3 3-céphem-4-carboxylique, (2,2/zones sautées);; sel de dicyclohexylamine de l'acide 3-(1'-méthyl-l'E-tétrazol-5' ylthiométhyl)-7-z2'-(2',5'-dichlorophénylthio)acétamidov- 3-céphem-4-carboxylique, (2,3/zones sautées); sel de dicyclohexylamine de l'acide 3-(1'-méthyl-l'H-tétrazol 5'-ylthiométhyl)-7-[2'-(3,4-dichlorophénylthio)acétamido] 3-céphem-4-carboxylique, (2,4/ > 20); sel de dicyclohexylamine de l'acide 3-(1'-méthyl-1'H-tétrazol- 5' -ylthiométhyl) 7--'-(2*,4"-dichloro-5"-fluorophenyl- thio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, (1,9/ > 20); 3-(5'-méthyl-1',3',4'-thiadiazol-2'-ylthiométhyl)-7-[2' (3",5"-dichlorophénylthio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylate de sodium, (4,5/ > 20); ; 3-(5'-méthyl-1',3',4'-thiadiazol-2-ylthiométhyl)-7-[2' (2",5"-dichlorophénylthio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylate de sodium, (l,8/l); sel de dicyclohexylamine de l'acide 3-(5'-méthyl-1',3',4'-thia- diazol-2-ylthiométhyl)-7- 't3",4"-dichlorophénylthio)- acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, (1,2/ > 20); acide 3-(N-méthylcarbamyloxyméthyl)-7-t&num;'-(2 n ,5"-dichlorophé- nylthio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, (5,5/18,2);; d'autres composés utiles comprennent l'acide 3- (N-pyridinornéthyl) 7-/2 '-(2", 5"-dichlorophényl- thio) acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, l'acide 3-(N-pyridinométhyl)-7-[2'-(3"-fluoro-4"-chloro phénylthio)acétamido]-3-céphém-4-carboxylique, l'acide 3-(N-pyridinométhyl)-7-Zg'-(3",5"-dichlorophénylthio)- acétamido9-3-céphem-4-carboxyliquQ, l'acide 3-azidométhyl-7-[2'-(2",5"-dichlorophénylthio) acétamido7-3-céphem-4-carboxylique, l'acide 3-azidométhyl-7-[2'-(3",4"-dichlorophénylthio) acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, l'acide 3-(aminotlliocarbonylthiométhyl)-7-/2'-(2",5"-dichloro- phénylthio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, l'acide 3-(aminothiocarbonylthiométhyl)-7-[2'-(2",5"-dichloro phénylthio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, l'acide 3-(l'H-tétrazol-5'-ylthiométhy -7-/2'-(2 n, 5"-dichloro- phénylthio)acétamido]-3-céphem-4-carboxylique, (6,8/ > 1); et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. On peut préparer par des procédés classiques les composés utilisés dans la méthode de cette invention. La substance de départ pour leur préparation peut être la céphalosporine C obtenue par fermentation. On peut traiter la céphalosporine C par des procédés connus pour obtenir l'acide 7-aminocéphalosporanique (7-ACA),l'un de ce que l'on appelle les noyaux céphalosporine. Ce noyau (7-ACA) peut autre transformé par acylation du groupement amine en position 7, par des modes opératoires connus, avec l'agent d'acylation ayant la composition qui fournit la chaîne latérale désirée acyle en position 7. Un agent d'acylation commode est le chlorure ou le bromure d'acyle approprié ou l'anhydride mixte d'alkyle formé in situ. Des exemples des modes opératoires d'acylation sont donnés dans les exemples détaillés ci-dessous. De plus, les diverses conditions d'acylation sont décrites dans le brevet E.U.A. N 3.335.136, par exemple. On peut chauffer un acide halophénylthicacétamidocéphalos- poranique préparé comme décrit précédemment, à reflux avec de la pyridine à 6O0C pendant 5 heures, pour former le composé correspondant portant en position 3 un groupement N-pyridinométhyle que l'on peut recueillir dans le mélange réactionnel par des modes opératoires analogues à ceux décrits, par exemple, dans les brevets E.U.A. N 3.449.338 et 3.577.412. On peut transformer un acide halophénylthioacétamidocéphalosporanique en composé correspondant comportant en position 3 un groupement azidométhyle, en chauffant sa solution dans un solvant organique avec de l'azoture de sodium à un pH d'environ 7, maintenu grâce à un tampon approprié comme le phosphate disodique.De même, on peut chauffer une solution d' acide halophénylthioacStamidocéphalospora- nique avec du dithiocarbamate de sodium (Na-S--NH2) pour former le composé correspondant portant en position 3 le groupement aminothiocarbonylthiométhyle, par des modes opératoires analogues à ceux que l'on trouve dans la littérature, par exemple dans le brevet E.U.A. N 3.573.298. On peut préparer les composés ayant la chaîne latérale méthyle en position 3 en acylant l'acide 7-aminodésacétoxycéphalosporanique (7-ADCA) décrit dans le brevet E.U.A. NO 3.124.576. On peut également les préparer en acylant les esters de 7-aminodésacétoxycéphalosporine obtenus par réarrangement des esters de sulfoxyde de pénicilline comme indiqué, par exemple, dans le brevet E.U.A. de Hatfield n 3.591.585. On peut préparer les composés ayant les chaînes latérales thiométhyle en position 3 en faisant réagir la céphalosporine C, l'acide 7-aminocéphalosporanique, un de ses esters ou les formes à N protégé de ces composés avec les thiols appropriés, selon les modes opératoires de formation de thiols que l'on connaît actuellement. Voir par exemple les brevets E.U.A.N 3.516.996 et 3.530.123. On peut couper le groupement amino-adipoyle de la céphalosporine C et on peut acyler comme décrit précédemment le groupement amine en position 7 de l'acide ou de l'ester dont le noyau comporte une fonction thiol.Les groupements esters sont éliminés par des procédés de réduction, d'hydrogénolyse ou de coupure acide comme indiqué pour le groupe ester particulier, et on forme, si on le désire, les sels des acides pour aider à obtenir le composé désiré dans le mélange réactionnel, et pour augmenter la solubilité du composé dans le véhicule pharmaceutique choisi, si nécessaire. On peut utiliser pour améliorer les facilités d'absorption du composé les esters acétoxyméthyliques des acides halophénylthioacétamidocéphalosporaniques. Les modes opératoires ets exemples détaillés suivants ddnnent des exemples des techniques de préparation des substances de départ et des composés utilisés dans cette invention. Mode opératoire 1 A une solution de 7,1 g (30 mmoles) d'acide 3,4-dichlorophénylmercaptoacétique dans 100 ml de benzène sec, on ajoute 7,5 g (5,0 ml) (60 mmoles) de chlorure d'oxalyle et une goutte de N,N-diméthylformamide (DMF). On agite cette solution 3 heures à 250C. Puis on élimine le benzène dans un évaporateur rotatif, ce qui donne un sirop jaune que l'on reprend dans le benzène et que l'on fractionne de nouveau pour éliminer tout le chlorure d'oxalyle résiduel. On reprend ensuite ce sirop dans de l'acétone (50 ml) et on ajoute goutte à goutte en une heure à une solution froide (-50C) de 8,5 g de 7-ACA dans 200 ml d'acétone aqueuse à 50% contenant 8,5 g de bicarbonate de sodium. On agite ce mélange pendant 2 heures tout en le réchauffant lentement à 250C.Puis on élimine l'acétone dans un évaporateur rotatif, et on forme deux couches avec la solution aqueuse résultante et 100 ml d'acétate d'éthyle. On ajoute de l'acide chlorhydrique jusqu'à i 2, on mélange les couches et on les sépare. On extrait de nouveau la phase aqueuse avec deux fois 50 ml d'acétate d'éthyle, et on réunit les phases organiques et on les sèche sur sulfate de magnésium. On filtre la solution organique et on l'évapore dans un évaporateur rotatif, ce qui donne un sirop jaune clair que l'on reprend dans du méthanol (250 ml).A cette solution on ajoute 30 mmoles de 2-éthylhexanoate de sodium dans 100 ml d'éthanol. on refroidit la solution résultante et on réduit son volume pour obtenir des cristaux blancs du sel de sodium de l'acide 7-(3,4-dichlorophenylthioacétamido)cséphalospo- ranique. Le spectre d'absorption ultraviolette du produit a un maximum à 258 mp ( # =13.400) et son spectre infrarouge présente une bande à 1760 cml Mode opératoire 2 On prépare le selde sodium de l'acide 7-(2,5-dichlorophénylthioacétamido)céphalosporanique selon le mode opératoire décrit dans Mode opératoire 1 et dans les mêmes conditions. Le spectre d'absorption ultraviolette du produit a un maximum à 253 me ( # :12.550 > et son spectre infrarouge présente une bande à 1760 cm Mode opératoire 3 On prépare le sel de sodium del'acide 7-(3,5-dichlorophényl thioacétamidcJcéphalosporanique selon le mode opératoire décrit dans Mode opératoire 1 et dans les mêmes conditions. Le spectre d'absorption ultraviolette du produit a un maximum à 260 ( t = 15.600) et son spectre infrarouge présente une bande à 1760 cml. Mode oPératoire 4 On obtient le sel de sodium de l'acide 7-(2,4-dichloro-5fluoro-phénylthioacétamido)céphalosporanique selon le mode opératoire décrit dans Mode opératoire 1 et dans les mimes conditions. Le spectre d'absorption ultraviolette du produit a un maximum à 257 m (# = 17.500) et son spectre d'absorption infrarouge présente une bande à 1760 cm EXEMPLE 1 On dissout le 7-(3,4-dichlorophénylthioacétamido)céphalospora- nate de sodium, 4,34 g, dans 100 ml d'un tampon aqueux de phosphate de sodium de pH 7. A cette solution on ajoute 1,16 g de l-méthyl-5-mercaptotétrazole. Puis on chauffe ce mélange à 700C pendant 4 heures. Puis on refroidit la solution, on ajoute une couche d'acétate d'éthyle, on acidifie avec HCl à pH 2, et on sépare les phases.On sèche la phase organique sur sulfate de magnésium, on la filtre et on la réduit à une mousse. On reprend cette mousse dans de l'éthanol, et on ajoute de la dicyclohexylamine jusqu'à ce que le produit cristallise sous firme du sel de dicyclohexylammonium. Le spectre d'absorption ultraviolette du produit qui est l'acide 7-[2-(3,4-dichlorophénylthyo)acétamido]-3- (1-méthyltétrazol-5-yl-thiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, a un maximum à 260 m ( 8 =11.600) et son spectre infrarouge présente une bande à 1760 cm-1. EXEMPLE 2 En suivant le mode opératoire indiqué dans l'Exemple 1, on dissout 3,8 g du sel de sodium de l'acide 2,5-dtchlorophényl- thioacétamidocéphalosporanique et 1,1 g de 5-méthyl-1,3,4-thiadiazole-2-thiol dans 100 ml d'un tampon de phosphate aqueux à pH 7 et on chauffe à 700C pendant 4 heures. On refroidit la solution, on forme une couche en ajoutant de l'acétate d'éthyle, et on ajoute HCl pour ajuster le pH à 2. On sépare la couche organique, on la sèche sur sulfate de magnésium, et on la réduit à une gomme. On reprend cette gomme dans de l'éthanol,et le produit qui est l'acide 7-- (2,5-dichlorophénylthio)acétamido]-3-(5-méthyl 1,3,4-thiadiazole-2-yl-thiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, cristallise ensuite sous forme de l'acide par repos.Le spectre d'absorption ultraviolette du produit a un maximum à 254 =15.200) et son spectre infrarouge présente une bande à 1760 cm~l. EXEMPLE 3 On dissout 571 mg d'acide 2,5-dichlorophénylthioacétique dans 75 ml de chlorure de méthylène, et on ajoute à cette solution 0,31 ml de chlorure d'oxalyle et 2 gouttes de DMF tout en maintenant la température à 00-50C pendant une heure. On réduit le volume de la solution dans un évaporateur rotatif et on la reprend ensuite dans 15 ml d'acétone. On dissout 546 mg d'acide 7-amino-3-(N-méthylcarbamoyloxyméthyl)-# -céphalosporanique dans 20 ml d'eau contenant 605 mg de NaHCO3. On ajoute à la solution 5 ml d'acétone et on refroidit la solution à -50C. Puis on ajoute le chlorure d'acide goutte à goutte au noyau de céphalosporine et on agite 30 minutes à 0 C. On élimine l'acétone dans un évaporateur rotatif et on reprend le résidu dans 50 ml d'H2O et 100 ml d'un mélange d'acétate d'éthyle/acétone. On ajuste le pH de la solution à 2,5 avec HCl et on sépare la couche organique que l'on sèche sur sulfate de sodium. Le composé de l'Exemple 4 donne les concentrations inhibitrices minimales in vitro suivantes (valeurs de CIM) en microgramme/millilitre de gélose ( g/ml) contre les micro-organismes supplémentaires suivants. Organisme CIM ( g/ml) S. aureus 3055 (sensible à la pénicilline G) 0,031 S. aureus 3074 (résistant à la pénicilline G) 0,062 S. facalis X66 400 P. morganii, indole-positif > 128 S. typhosa SA12 32 H. pneumoniae KL14 64 E. aerogenes EB17 128 E. coli EC14 64 C. freundii CF17 > 128 P. aeroginosa X239 > 128 S. marcescens SE3 1 > 128 S. typhimurium 128 B. bronchiseptica ) 128 P. solenaecarum X185 > 128 E. amylovora 64 C. tropicalis A17 128 T. mentagrophytes 27 > 128 A. flavus > 128 C. ulmi ) 128 La CN pour le composé de l'Exemple 4 contre Streptococcus pyogenes C203 dans le bouillon est 0,008 pg/ml. La dose efficace moyenne contre S.pyogenes par voie sous-cutanée (valeur de DE50) est 0,28I g/ml pour une dose d'attaque de 1260 DL50 de bactéries. EXEMPLE 4 Synthèse du 7-[2-[(3-chloro-4-fluorophényl)thio]-acétamido]-3 [[5-méthyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)thio]méthyl]-3-céphem-4carboxylate de sodium. On dissout 2,20 g d'acide 3-chloro-4-fluorophénylthioacétique (10 mmoles) dans du benzène sec (50 ml)et on ajoute 10 ml de chlorure d'oxalyle et une goutte de DMF à la solution. On agite le mélange réactionnel une heure à 250C. Puis on élimine le benzène et l'excès de chlorure d'oxalyle sous vide, pour obtenir le chlorure d'acide sous forme d'un sirop jaunâtre.On reprend ce sirop dans du benzène et on le réduit de nouveau sous vide deux fois pour éliminer tout le chlorure d'oxalyle résiduel et HC1. Puis on reprend ce sirop dans 20 ml d'acétone sèche et on l'ajoute goutte à goutte à une solution agitée d'acide 7-amino-3 (5-méthyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)thiométhyl-3-céphem-4-carboxylique, 3,44 g (10 mmoles); de bicarbonate de sodium, 3,44 g; de 50 ml et de 50 ml d'acétone, à -100C. On agite le mélange réactionnel à la température d'un bain de glace pendant une heure. On élimine acétone sous vide et on forme une couche aqueuse et une couche de 50 ml d'acétate d'éthyle. On acidifie le mélange à pH 2 avec HC1. On extrait de nouveau la partie aqueuse avec 30 ml d'acétate d'éthyle.On réunit les couches organiques et on les sèche sur MgSO4 on filtre et on réduit sous vide, ce qui donne un sirop jaune. On reprend ce sirop dans de l'éthanol et on ajoute du 2-éthylhexanoate de sodium (3,4 mmoles), sur quoi apparaissent des cristaux de produit. On filtre le solide, on le lave avec de l'éthanol et on le sèche sous vide. Le spectre infrarouge du produit présente une bande à 1760 cm-1 (ss-lactame) et son spectre ultraviolet a un maximum à 270 ::ï (# = 14.200) Toutes les autres données physiques sont cohérentes avec la formule développée proposée. Le composé est soluble dans l'eau à des concentrations supérieures à 100 mg par millilitre de solution à la température ambiante. Par réchauffement, la solubilité du composé augmente. On essaie l'efficacité antibiotique contre diverses cultures de Staphylococcus aureus, du composé qui est le sel de sodium de l'acide 7-/2-(3-chLoro-4-fluorophényl)thioJact 5-méthyl- 1,3,4-thiadiazol-2-yl)thio]méthyl]-3-céphem-4-carboxylique. Le tableau suivant donne la concentration inhibitrice minimale (CIM) en microgrammes de composé par millilitre de culture ( g/ml), comparée aux valeurs semblables de la CIM pour les antibiotiques connus que sont la méthicilline, la céphalothine et la céphaloridine contre les mêmes souches de bactéries. Les numéros des cultures et les modes opératoires utilisés pour obtenir les données indiquées sont décrits par W.E. Wick et D.A. Preston dans leur article ZHeterogeneous Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus" qui apparait dans Progress in Antimicrobial And Anticancer Chemotherapv, comptes rendus du 6ème Congrès International de Chimiothérapie, Volume 1, U. of Tokyo Press, Tokyo, (1970), Dans ces essais de sensibilité par dilution sur gélose, les inoculums sont dilués à 103 bactéries par goutte. Les cultures 3055 (sensibles à la benzylpénicilline) et H232 (résistant à la benzylpénicilline) sont des témoins. Les autres cultures sont résistantes à la méthicilline, et sauf dans le cas de 3136, sont des produits isolés en clinique. La culture 3136 est un mutant de 4ème repiquage sélectionné en laboratoire. Les résultats sont donnés dans le tableau suivant. CIM de la dilution gélosée Composé de l'exemple 4 vis-à-vis de Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline CIM ( g/ml) pour cultures de S. aureus Méthicilline 1 2 4 4 4 2 8 4 4 8 8 2 4 8 4 Céphalothine 0,13 2,5 0,5 0,5 0,5 0,5 2 1 0,5 2 1 0,5 0,5 1 1 Céphaloridine 0,03 0,06 0,5 0,5 0,25 0,13 1 0,5 0,13 4 1 0,5 0,5 1 1 Exemple 4 0,03 0,06 0,5 0,25 0,13 0,13 1 0,5 0,25 1 1 0,25 0,25 0,5 0,5 Méthicilline 1 1 16 32 8 2 32 32 64 64 32 1 16 64 32 Céphalothine 0,25 0,25 1 1 0,5 0,5 1 1 1 1 2 0,25 0,25 1 1 Céphaloridine 0,13 0,13 1 1 0,5 0,25 1 4 4 4 4 0,13 0,13 8 1 Exemple 4 0,03 0,06 0,25 0,25 0,13 0,13 0,25 0,5 0,5 1 0,5 0,03 0,06 1 0,5 REVNDICAT IONS 1. Procédé de préparation de dérivés de halophénylthioacétamidocéphalosporines de formule dans laquelle X et Y sont chacun un atome d'hydrogène ou de chlore, choisis de sorte que le noyau phényle soit substitué par 1 ou 2 atomes de chlore et de sorte que, quand un atome de chlore est présent, il soit en position 3, et que quand deux atomes de chlore sont présents, ils soient en positions 3 et 4, 3 et 5 ou 2 et 5; Z est un atome d'hydrogène ou de fluor, et, quand Z est un atome de fluor, il est en position 3 ou en position 4 du noyau phényle, soit comme seul substituant du noyau phényle, soit avec un ou deux atomes de chlore, dont l'un est en position 3 ou 4 du noyau phényle;; R est un atome d'hydrogène ou un groupement 5-méthyl-1,3,4thiadiazolyl-2-thio, l-méthyl-5-tétrazolylthio, -2-tétrazolylthio, -5-phényl-1,3,4-oxadiazolyl-2-thio, -5- (p-nitrophényl) -1,3,4- oxadiazolyl-2-thio, -5-(p-méthoxyphényl)-1,3,4-oxadiazolyl-2-thio, carbamyloxy(-OC(O)NH2), méthylcarbamayloxy, thiométhyle, N-pyridinem azido ou dithiocarbamoyle, et R' est un atome d'hydrogène, un groupement dicyclohexylamine' ou un cation pharmaceutiquement acceptable, caractérisé en ce qu'il consiste A) à acyler un composé de formule dans laquelle Q est un groupement 5-méthyl-1,3,4-thiadiazo- lyl-2 -thie, 1-méthyl-5-tétrazolylthio, -2-tétrazolylthio, -5-phényl-1,3,4-oxadiazolyl-2-thio, -5(p-nitrophényl) 1,3,4-oxadiazolyl-2-thio, -5-(p-méthoxyphényl)-1,3,4oxadiazolyl-2-thio, carbamyloxy(-OC(O)NH2) t méthylcarbamyloxy, thiométhyle, N-pyridine, azido, ou dithiocarba moye; et R' est tel que défini précédemment,. avec un agent d'acylation qui est un acide de formule ou l'halogénure, l'anhydride ou l'anhydride mixte d'acyle correspondant; B) à faire réagir un composé de formule dans laquelle X, Y, Z et R' sont tels que définis précé demment; 1) avec un thiol de formule H-Q' dans laquelle Q' est un groupement 5-méthyl-1,3,4- thiadiazolyl-2-thio, l-méthyl-5-tétrazolylthio, -2-tétrazolythio, 5-phényl-1,3,4-oxadiazolyl-2 thio, -5-(p-nitrophényl)-1,3,4-oxadiazolyl-2-thio, -5- (p-méthoxyphényl) -1,3, 4-oxadiazolyl-2-thio, ou thiométhyle, ou 2) avec la pyridine, ou 3) avec un azoture de métal alcalin, ou 4) avec un dithiocarbamate de métal alcalin. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que X et Y sont chacun un atome de chlore, substitués sur le noyau phényle en positions 3 et 4, 3 et 5 ou 2 et 5, Z est un atome d'hydrogène, et R est un groupement 5-méthyl-l,3,4-thiadiazolyl-2- thio. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(3',4'-dichlorophénylmercaptoacétamido)-3-(5-méthyl-1,3,4-thiadiazolyl-2-thiométhyl)-3-céphem4-carboxylique, ou un de ses sels avec un cation pharmaceutiquement acceptable. 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(5'-méthyl-1',3',4'-thiadiazolyl-2-thiométhyl)-3-céphem-4carboxylique ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(1'-méthyl-1'H-tétrazolyl-5'-ylthiométhyl)-3-céphem-4carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 6. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est- l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacé- tamido)-3-(1'H-tétrazol-5-yl-thiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 7. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacéta- mido)-3-(5'-phényl-1,3,4-oxadiazolyl-2'-thiomEthyl)-3-céphem-4- carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 8. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(2', 5'-dichlorophénylthioacéta mido)-3-/5'-(4"-ithoxyphényl-1',3',4'-oxadiazolyl-2'-thio- méthyl]-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 9. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacéta- mido)-3-carbamoyloxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 10. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(3',5'-dichlorophénylthioacétamido) 3-(5'-méthyl-1^,3',4'-thiadiazolyl-2'-thiométhyl)-3-céphem-4- carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 11. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(3',5'-dicblorophénylthio- acétamido)-3-(1'-méthyl-1'H-tétrazol-5-yl-thiométhyl)-3-céphem-4carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 12. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(3',4'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(5'-méthyl-1',3',4'-thiadiazolylthiométhyl)-3 céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 13. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-(3',4'-dichlorophénylthioacéta mido) -3 - (1 '-méthyl-lhtétrazol-5-yl-thiométhyl) -3 -céphem-4- carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 14. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé préparé est l'acide 7-/2-/ (3-chloro-4-fluorophé- nyl)thio]acétamido]-3-[[(5-méthyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)thio]méthyl]-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 15. Antibiotique de type céphalosporine permettant de lutter contre les organismes résistants à la méthicilline, ayant la formule dans laquelle X et Y sont chacun un atome d'hydrogène ou de chlore, choisis de sorte que le noyau phényle soit substitué par 1 ou 2 atomes de chlore et de sorte que, quand un atome de chlore est présent, il soit en position 3, et que, quand deux atomes de chlore sont présents, ils soient en positions 3 et 4, 3 et 5, ou 2 et 5; Z est un atome d'hydrogène ou de fluor, et, quand Z est un atome de fluor, il est en position 3 ou en position 4 du noyau phényle, soit comme seul substituant du noyau phényle, soit avec un ou deux atomes de chlore, dont l'un est en position 3 ou en position 4 du noyau phényle; ; R est un atome d'hydrogène ou un groupement 5-méthyl-1,3,4thiadiazolyl-2 -thio, l-méthyl-5-tétrazolylthio, -2 -tétrazolylthio, -5-phényl-l, 3, 4-oxadiazolyl-2-thio, -5- (p-nitrophényl, 3,4- oxadiazolyl-2-thio, -5- (p-méthoxyphényl) -1,3, 4-oxadiazolyl-2- thio, carbamyloxy- /OC(O)FiH2g, méthylcarbamyloxy, thiométhyle, N-pyridine, azido et dithiocarbamoyle, et R' est un atome d'hydrogène, ou un groupement dicyclohexylamine, ou un cation pharmaceutiquement acceptable. 16. Antibiotique selon la revendication 15, caractérisé en ce que X et Y sont chacun un atome de chlore, substitués sur le noyau phényle en positions 3 et 4, 3 et 5, ou 2 et 5, Z est un atome d'hydrogène, et R est un groupement 5-méthyl-1,3,4thiadiazolyl-2-thio. 17. Antibiotique selon la revendication 15 ou 16, qui est l'acide 7-(3',4l-dichlorophényimercaptoacétamido)-3-(5-méthyl- 1,3,4-thiadiazolyl-2-thiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels avec un cation pharmaceutiquement acceptable. 18. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(5'-méthyl-1' r 3l,4l~ thiadiazolyl-2-thiométhyî)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 19. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(1'-méthyl-l'H-tétrazolyl- 5'-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 20. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(l'H-tétrazol-5-ylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 21. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(5'-phényl-1,3,4-oxadiazo- lyl-2'-thiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 22. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7- (2',5' -dichlorophénylthioacétamido) -3-L' - (4"-méthoxyphényl) - 1' ,3',4' -oxadiazolyl-2 '-thiométhyl-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 23. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(2',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-carbamoyloxyméthyl-3- céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 24. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(3',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(5'-méthyl-1',3',4'- thiadiazolyl-2 '-thiométhyl) -3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 25. Antibiotique selon la revendication 15, ,qui est l'acide 7-(3',5'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(1'-méthyl-1-tétrazol-5 yl-thiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 26. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(3',4'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(5'-mgthyl-1',3',4'- thiadiazolylthiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 27. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-(3',4'-dichlorophénylthioacétamido)-3-(1'-méthyl-1H-tétrazol-5yl-thiométhyl)-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 28. Antibiotique selon la revendication 15, qui est l'acide 7-[2-[(3-chloro-4-fluorophényl)thio]acétamido]-3-[[(5-méthyl1,3,4-thiadiazol-2-yl)thio]méthyl]-3-céphem-4-carboxylique, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables.