Brevet FR2128436A1 — publié le 19721020

La présente invention est relative à des antagonistes des prostaglandines et/ou de l'adénosine 3',5'-monophosphate (AMP cyclique), de faible poids moléculaire. Plus particulièrement, la présente invention est relative à des polymères de faible poids moléculaire de certains esters phosphoriques polymères, à leur procédé de préparation ainsi qu'à leur procédé de séparation à partir de polymères de poids moléculaire élevé. Les prostaglandines sont un groupe d'acides carboxyliques à longue channe hydroxy et hydroxycéto non saturés. Ces prostaglan-dines sont largement réparties dans les tissus des êtres humains et des animaux et possèdent une grande variété d'actions pharmacologiques. I1 semble probable que les prostaglandines jouent un ralle biochimique fondamental dans beaucoup de cellules, et même peut-etre dans toutes les cellules animales. Beaucoup d'articles ont été consacrés aux prostaglandines, spécialement les aspects biochimiques et pharmacologiques. Un récent article intitulé "Hypothesis on-Physiological Roles of Prostaglandins" par E.W. Horton, Physiological Review, volume 49, nO 1, janvier 1969, passe en revue les connaissances actuelles que l'on a sur la signification fonctionnelle des prostaglandines. Les prostaglandines d'origine naturelle sont des acides gras à 20 atomes de carbone contenant un noyau de cyclopentane. L'acide saturé dont elles dérivent a été appelé acide prostanot- que, et il répond à la formule suivante Acide prostanoeque Quatre séries de prostaglandines naturelles ont ainsi été décrites, elles sont désignées par les lettres B, E, F et A, ce qui correspond à des différences dans le noyau, comme on peut le voir ci-après Toutes les prostaglandines ont un substituant 15-hydroxyle. Le degré d'insaturation des channes latérales est indiqué par le chiffre se trouvant après la lettre : c'est ainsi que la prostaglandine El a une double liaison trans en position 13, la protaglandine E2 a , en plus, une double liaison cis en position 5, la prostaglandine E3 a une troisième double liaison en position 17, etc. Les formules structurales de 14 prostaglandines-d1origine naturelle sont représentées à la figure 3 de l'article de Horton, voir plus haut. Les prostaglandines ont une grande variété d'activités phamacologiques chez les êtres humains et chez les animaux, étant actives dans des domaines aussi divers que la fertilité, le transport de sperme, la menstruation, la parturition, la circulation du sang dans le placenta , la sécrétion gastrique, la contraction musculaire (y compris le muscle lisse vasculaire, le muscle lisse respiratoire, le muscle lisse gastrointestinal, le muscle lisse utérin et le muscle lisse capsulaire de la rate), le développement de tissus épidermiques et les organes de transmission , nerveux centraux.On croit que les prostaglandines modifient aussi la perméabilité , par exemple celle de la peau et de lsoeil.cest ainsi qu'on a suggéré que les prostaglandines peuvent agir comme intermédiaires de diverses formes d'inflammation.Ce rle dans l'inflammation est fortement confirmé par l'implication des prostaglandines dans le processus inflammatoire dans les yeux,la peau et les articulations. Par exemple, dans le domaine de la reproduction, un con trôle des prostaglandines pourrait mener à une activation ou à une inhibition directe de la fertilité soit chez l'individu mole, soit chez l'individu femelle étant donné que les prostaglandines sont normalement trouvées à des concentrations élevées dans la semence et qu'elles sont connues comme modifiant d'une façon importante les muscles lisses du tractus reproducteur de la femme ou de la femelle. De plus, l'association de teneurs en prostaglandines en dessous de la normale à la non fertilité chez l'homme laisse supposer que les prostaglandines ont un rOle favorisant la conception.C'est ainsi qu'un contrôle spécifique de ces prostaglandines pourrait mener à un changement ou à une normalisation de la fertilité ou de la non fertilité chez l'individu male ou femelle. En ce qui concerne la parturition, il est connu que le fluide amnionique au cours du travail contient une quantité sensiblement plus élevée de prostaglandines que le fluide amnionique avant le commencement du travail. C'est ainsi qucil est raisonnable de conclure que les prostaglandines contribuent aux contractions utérines au moment de l'accouchcement ou de la mise bas. Un contrôle spécifique de ces prostaglandines pourrait mener à des moyens anti-abortifs ou abortifs, thérapeutiques et être d'une grande valeur en obstétrique. Les prostaglandines ont été identifiées dans le système nerveux central et on sait qu'elles sont expulsées du cerveau et de la moelle épinière lors de la stimulation d'un nerf et elles sont les constituants normaux du fluide cérébro-spinal. Horton, voir plus haut, montre ( à la page 136) que la découverte d'un antagoniste spécifique des prostaglandines serait une aide énorme pour résoudre les questions qui ont été soulevées au sujet du rôle des prostaglandines dans le système nerveux central. Certaines prostaglandines sont considérées comme étant des vasodilatateurs puissants dans la plupart des lits vasculaires et doivent être considérées comme étant des médiateurs locaux possibles de la circulation du sang étant donné leur large distribution dans les tissus. De plus, l'identification d'une prostaglandine vasodilatatrice dans la moelle rénale fait supposer que les prostaglandines jouent un rôle dans le contrôle de la circulation sanguine rénale et en tant que facteurs étiologiques dans l'hypertension rénale. Des prostaglandines ont été trouvées dans les poumons et on suppose qu'il existe une certaine relation entre ces prostaglandines et l'asthme bronchique. Des prostaglandines sont présentes dans l'estomac et l'intestin et elles sont libérées spontanément de différentes parties du tractus gastrointestinal. I1 est évident que des prostaglandines en circulation peuvent provoquer la diarrhée. En ce qui concerne les domaines ci-dessus dans lesquels les prostaglandines jouent un r81e important, il est clair qu'un contrôle spécifique de l'activité des prostaglandines pourrait amener à contrôler des fonctions du corps qui jusqu'à présent ne pouvaient être atteintes. L'adénosine 3',5'-monophosphate (AMP cyclique) est sensible aux hormones, c'est-à-dire que lorsqu'une hormone atteint une cellule, la teneur en AMP cyclique associée à cette cellule s'accrott et agit de manière à exciter ou à amplifier l'activité hormonale. L' AMP cyclique est trouvé dans la plupart des cellules animales et a une importance dans la fonction musculaire, dans la sécrétion gastriqu et enzymatique, dans le système nerveux central, dans le métabolisme cellulaire ainsi que dans la production et l'émission d'hormones. L' AMP cyclique dérive de l'adénosine triphosphate (ATP), une substance clé pour l'apport d'énergie dans les cellules par une réaction qui est catalysée par l'adényl cyclase.On croit que les prostaglandines agissent comme régulateurs en retour pour 1' AMP cyclique car les prostaglandines semblent souvent devoir être libérées en réponse aux mêmes hormones qui stimulent l'adényl cyclase et dans de nombreux cas les prostaglandines agissent pour supprimer l'accumulation de AMP cyclique. De la sorte, comme avec les prostaglandines, le contrôle de l'activité de 1' AMP cyclique pourrait d'une façon similaire amener à contr8ler les fonctions du corps qui jusqu'à présent ne pouvaient être atteintes. En fonction de ce qui précède, l'expression "antagoniste des prostaglandines" telle qu'utilisée dans le présent brevet, se rapportera aux substances antagonistes des prostaglandines et/ou de 1' AMP cyclique. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique nO 2.962.515 de Diczfalusy et consorts ainsi que lesbrevetsdes Etats-Unis d'Amérique nO 2.962.495 et 3.317.383 de Ferno et consorts décrivent des esters phosphoriques polymères de poids moléculaires élevés (poids moléculaires de 2.000 à 50.000) obtenus par phosphorylation de flavones, flavanones, chalcones et dihydrochalcones contenant au moins un groupe hydroxyle phénolique, comme par exemple des substances telles que le polyphlorétine phosphate, le polyméthylphlorétine phosphate, le polyquercétine phosphate, le polynaringénine phosphate et le polyhespérétine phosphate. Les brevets de Diczfalusy et consort et de Ferno et consorts indiquent que les substances ont un effet anti-enzymatique accru sur llhyaluronidase. Certains esters phosphoriques polymères; notamment le polyphlorétine phosphate, agissent pour bloquer sélectivement les actions des prostaglandines. On considère que cette activité de blocage de prostaglandines n'est en aucune façon liée. à l'aptitude qu'ont ces substances phosphoriques polymères à inhiber lthyaluro- nidase. On a maintenant découvert que l'aptitudè de certains ester phosphoriques polymères à bloquer les prostaglandines est en fait uniquement une propriété des espèces à faibles poids moléculaires de ces polymères, ctest-à-dire les dimère, trimère, et tétramère et spécialement le dimère. De plus, comme indiqué dans les exemples ci-après, les polymères à faible poids moléculaire sont considérés comme ayant une activité anti-prostaglandines 26 fois plus élevée que l'activité de l'ensemble du polymère pris à la même concentration. De plus, comme montré dans les exemples ci-après, les polymères à faible poids moléculaire sont considérés comme n'ayant pratiquement aucune activité anti-hyaluronidase. La présente invention est relative à des composés comprenant des esters phosphoriques polymères dans lesquels les radicaux d'acide phosphoriques sont réticulés au moyen de liaisons esters par l'intermédiaire de groupes organiques, chaque groupe organique étant un résidu d'un glycoside d'un composé polyhydroxy choisi dans le groupe comprenant les flavones, les flavanones, les chalcones et les dihydrochalcones, ces esters phosphoriques polymères-étant des antagonistes des prostaglandines n' ayant pratiquement aucune activité anti-hyaluronidase et ayant poids moléculaire inférieur à environ 1400. La présente invention est aussi relative à un procédé de séparation des antagonistes de prostaglandines à faible poids moléculaire des esters phosphoriques polymères à poids moléculaire élevé dans lesquels les radicaux d'acide phosphorique sont réticulés au moyen de liaisons esters par l'intermédiaire de groupes organiques, chaque groupe organique étant un résidu d'un glycoside d'un composé polyhydroxy choisi dans le groupe comprenant les flavones, les flavanones, les chalcones et les dihydroclacones, ce procédé consistant à faire passer les esters phosphoriques polymères à poids moléculaire élevé à travers une matière capable d'un fractionnement moléculaire physique et à récupérer la portion des esters phosphoriques polymères ayant un poids moléculaire inférieur à environ 1400. La présente invention est de plus relative à un procédé de blocage des actions des prostaglandines chez les êtres humains et chez les animaux, ce procédé consistant à administrer aux êtres humains ou aux animaux une quantité efficace des composés à faible poids moléculaire décrits ci-dessus, en combinaison avec des supports ou véhicules pharmaceutiques convenables. La présente invention est aussi relative à des procédés de synthèse par voie chimique d'antagonistes de prostaglandines à bas poids moléculaire du type décrit précédemment, ces procédés consistant à dissoudre une quantité convenable de composé monomère générateur de polymère, comme décrit ci-dessus, dans un solvant, tel que de la pyridine, de la quinoline ou du benzène, capable d'activer la phosphorylation par un agent de phosphorylation, tel que l'oxychlorure de phosphore, le dichlorure méthylphosphoramidique ou le p-nitrophénylphosphorodichloridate, à ajouter l'agent de phosphorylation désiré avec ou sans addition d'agents traditionnels activant la phosphorylation, à laisser le mélange réactionnel réagir jusqu a ce qu'on ait obtenu le degré désiré de polymérisation, et à hydrolyser le produit de réaction. Les figures 1 à 6 représentent des graphiques relatifs aux découvertes expérimentales, comme décrit dans les exemples ciaprès Suivant l'invention, on prévoit des composés ayant les formules suivantes (1) AB-P04-BA (2) AB-P04-BA-P04-BA (3) AB-P04-BA-P04-AB-P04-BA et (4) P04 (AB)3 dans lesquelles A représente le groupe de la formule dans laquelle R1 est OH ou OX; R2 est H, C1, F3C, F ou X; R3, R4 et R sont des groupes quelconques qui ne sont pas assez grands pour 5 provoquer un empEchement stérique avec le reste de la molécule. Des exemples de groupes R3, R4 et R5 pouvant être présents, sont les halogènes, par exemple F ou C1, ainsi que les radicaux nitro, H, OH, X ou OX, X pouvant être du méthyle, de l'éthyle , du n-propyle ou du i-propyle; et dans lesquelles B représente le groupe de la formule dans laquelle R6 représente H, F ou le phényle, et le groppe AB est formé par liaison de la position 4 de B à l'atome de carbone terminal de la channe alkyle de A; les unités structurales AB ainsi formées étant reliées par un groupe phosphate attaché à la position de chaque groupe B. Les positions 2 ou 3 dans le noyau B peuvent être substituées par un groupe qui n'est pas suffisamment grand pour provoquer un empêchement stérique, tel que par exemple X, qù X a la définition donnée précédemment, H, F, C1, OH, CH2OH, ou C2H4OH. La position 5 du noyau B peut être substituée par des composés, tels que par exemple des groupes alkyles jusqu'a C6H13 , de préférence à chaine droite jusqu'à l'atome de carbone Y, OCOCH3, CH2Ph, C2H4Ph ou C3HPh. Un substituant convenant particulièrement bien en position 5 est le C3H6Ph, le noyau benzénique pouvant être substitué en position méta par un groupe hydroxyle. L'indole ou un autre noyau lipoplilique peut remplacer le noyau benzénique comme substituant en position 5. Bien que d'une manière générale chaque groupe AB dans le polymère soit substitué de la même manière, on comprendra que les substituants peuvent être identiques o différents dans chaque groupe AB dans le polymère. Des exemples de composés particuliers entrant dans le cadre de la présente invention sont les dimères, trimères et tétramères, comme décrit ci-avant, ayant les substituants suivants : (1) R1 est OH ou OX, ou X a la définition donnée précédemment; et R2, R3, R4, R5 et R6 représentent tous de l'hydrogène. (2) R1 est OX ,ou X a la définition donnée précédemment, ou de préférence OH, R2 est H, R3 est CH3, R4 est OCH3, R5 est H et R6 est H ou F. (3) le composé tel que défini sous (2) ci-dessus, ou R4 est OH ou CH2OH ou C H OH. Un composé préféré de Invention est le composé répondant à la formule suivante dans laquelle R1 est OH ou OX, od X a la définition donnée précédemment, et R2, R3, R4, R5 et R6 représentent de l'hydrogène. D'autres composés convenables sont les composés dans lesquels (I) R1, R3 et R5 sont OX, od X a la définition donnée précédemment, et R2, R4 et R6 représentent de l'hydrogène; (2) R1, R4 et R5 représentent OX, où X a la défintiion donnée pré cédemment, et R2,R3 et R6 représentent de l'hydrogène; et (3) R1 et R5 représentent OX, od X a la définition donnée précédemment, R4 est X et R2, R3~et R6 représentent de l'hydrogène. Les substituants peuvent être identiques ou différents dans les deux parties de la molécule. Si R1 est OH ou OX, alors R2 est de préférence l'hydrogène. De même, à cause de la symétrie, si R5 représente OX, R4 représente de préférence lthydrogène. D'autres composés de l'invention répondent à la formule suivante dans laquelle Z est un groupe phényle ou benzyle (les indices R et S caractérisent la configuration stéréochimique) et les substituants R1 à R ont la définition donnée précédemment. 6 Le noyau benzénique de Z peut 8tre substitué par t tel n que défini ci-après. D'autres composés de l'invention sont les dimères, trimères et tétramères ayant l'unité structurale monomère suivante dans laquelle Y1, Y5 et Y6 peuvent être -OH ou -H et dans laquelle Y2, Y3 et Y4 peuvent être -OH ou -H ou ou t est H, CH3, F, C1 ou OCH3, et n vaut 1 à 5, ou où tn a la définition donnée ci-dessus; ou ou tn est tel que défini ci-dessus; ou (7) des groupes alkyles ayant de 1 à 6 atomes de carbone (à channe droite ou branchée); ou (8) -(CH2)n~NR2, ou n vaut 1 à 6 et R est H, CH3 ou C2H5; Y1, Y2, Y3 et Y4, Y5 et Y6 pouvant être identiques ou différents. Les polymères à faible poids moléculaire de la présente invention peuvent être modifiés en remplaçant le \groupe P04 par un autre groupe de liaison compårable, tel que S04 ou On notera aussi que les divers groupes dans les réactifs peuvent avoir des substituants de noyau différents entre eux. La manière de fabriquer les esters phosphoriques polymères à poids moléculaire élevé ne fait pas partie de la présente inven tion Une description complète de ces polymères à poids moléculaire élevé et de leurs procédés de fabrication peut être trouvée dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique nO 2.962.515 de Diczfalusy et consorts et dans les brevets des Etats-Unis d'Amérique Nos 2962495 et 3317383 de Ferno et consork.Les parties du brevet des Etats Unis d'Amérique de Diczfalusy et consorts et des brevets des Etats Unis d'Amérique de Ferno et consorts qui sont relatives à des esters phosphoriques polymères à poids moléculaire élevé (au-dessus de 2000) et à leur procédé de fabrication sont ainsi incorporées par référence. Les polymères à faible poids moléculaire (en dessous d'environ 1400) de la présente invention peuvent être obtenus par les moyens suivants (1) fractionnement physique (a) Les polymères à bas poids moléculaire peuvent être séparés des polymères à poids moléculaire élevé comme décrit précédemment, par fractionnement physique en utilisant une filtration par gel. Le procédé de filtration par gel consiste à faire passer une solution de la matière à fractionner à travers une quantité convenable d'un gel-hydrophile. Les molécules de la matière fractionnée qui sont plus grandes que les plus grands pores du gel ne peuvent pas pénétrer dans le gel et passent par conséquent à travers la colonne dans la phase liquide à côté des particules de gel.C'est ainsi que les plus grandes molécules- (les polymères à poids moléculairisu- périeur) sont d'abord éluées. Les molécules plus légères pénètrent cependant le gel à différents degrés suivant leur taille et leur forme. C'est ainsi que les polymères restants sont élués à partir de la colonne dans le but d'abaisser le poids moléculaire. Des matières caractéristiques utilisables pour la filtration par gel sont des perles de polyacrylamide hydrophiles, sphériques, connues sous le nom de sio-Gel(R) P,fabriquées par Bio-Rad Laboratories ainsi que des perles polymères de dextran réticulées, hydrophiles, modifiées connues sous le nom de Sephadexe fabriquées par Pharmacia Fine Chemicals, Uppsala, Suède. (b) Les polymères à bas poids moléculaire peuvent être séparés à partir de polymères à poids moléculaire élevé par fractionnement physique, en utilisant une dialyse, cette opération étant réalisée avec des matières, des techniques et un appareillage de dialyse traditionnels. 2. Synthèse chimique (a) Les composés de l'invention peuvent être fabriqués par la polymérisation contrôlée de la flavone, flavanone , chalcone ou dihydrochalcone substituée de façon appropriée ,en présence de dichlorure méthylphosphoramidique et de triéthylamine ou d'éthyldiisopropylamine dans un solvant inerte, par exemple le benzène,de la façon suivante L'hydrolyse du phosphoramidate donne le phosphate dimère. Le trimère et le tétramère peuvent être obtenus en répétant 1 'opé- ration de couplage, mais dans de tels cas il est essentiel que R3 soit OH ou OX, tel que défini ci-avant. (b) Pour former la chalcone substituée de façon appropriée, on peut condenser une acétophénone substituée avec un benzaldéhyde substitué en présence d'un catalyseur basique de la façon suivante: Le produit de condensation peut ensuite être hydrogéné de façon sélective pour former la dihydrochaîcone correspondante de la façon suivante: Les molécules de la dihydrochalcone substituée ainsi for ruées peuvent être liées comme dans 2(a) ci-dessus. (c) D'une façon similaire, on peut utiliser autres composés de couplage, tels que par exemple l'oxychlorure de phosphore ou le p-nitrophénylphosphorodichloridate, qui peuvent être substitués par le dichlorure méthylphosphcraidique utilisé dans (a) ci-dessus. On admet que les polymères phosphorylés à faible poids moléculaire de la présente invention sont des agents de blocage des prostaglandines très puissants à cause de leur configuration, csest-à-dire un manque d'empêchement stérique du groupe phénol et de la channe carbonée attachée, ce qui permet la formation d'une configuration en hélice qui permet apparemment aux polymères phosphorylés à faible poids moléculaire de bloquer sélectivement les prostaglandines. La quantité efficace d'esters phosphoriques polymères à bas poids moléculaire varie avec le type d'activité de la prostaglandine qui est bloquée, la voie d'administration de l'agent de blocage, c'est-à-dire topiquement ou systématiquement ,et si le blocage se fait in vitro ou in vivo. Par exemple, pour ce qui est du produit à bas poids moléculaire dérivé du phosphate de polyphlorétine, environ 0,1 à 200 mgr/mlde fluide du bian d'organes bloquent l'effet des prostaglandines sur des tissus de muscle lisse in vitro; environ 0,01 ml ou une solution de 1 à 10% administrée topiquement in vivo à l'oeil d'un lapin antagonise l'effet des prostaglandines sur la pression intraoculaire; les effets in vivo des prostaglandines sur la pression sanguine et sur la matière fécale (formation de diarrhée) chez la souris sont bloqués par des injections intrapériton-ëales avec des quantités de 1 à 200 mgr/kg de poids de corps. La présente invention sera maintenant décrite et illustrée en se référant aux exemples suivants. I1 doit être entendu que l'invention est décrite ci-après uniquement à titre d'exemple non limitatif. EXEMPLE 1 Préparation du dimère de 3-hydroxy-40-méthoxydihydrochalcone (a) Le composé III est préparé de la façon suivante On ajoute 0,6 gr (0,004 mole ) de dichlorure méthyl phosphoramidique à 2, 2 gr (0,008 mole) de (I) dans 50 ml de benzène anhydre. On agite le mélange et on chauffe à reflux pendant 3 heures. La solution est refroidie et lavée trois fois avec 30 ml dteau. La couche organique est séchée (Na2S04) et évaporée à sec pour donner une huile jaune (1,4 gr) identifiée comme étant le produit III par R.M.N. (b) Le composé W est ensuite préparé par l'hydrolyse du dimère phosphoramidate (III): On dissout 0,8 gr de composé III dans 25 ml d'une solution aqueuse d'acide formique à 75% et on agite à la température de reflux pendant 15 minutes. La solution est réduite en une huile sous vide à la température de bain-marie de 650C. On ajoute à l'huile 30 ml de benzène etla solution au benzène est ensuite lavée avec 4 fois 20 ml d'eau. Les extraits au benzène sont séchés (Na2S04) et évaporés pour donner une huile de couleur sombre (0,6 gr) ,identifiée comme étant le produit W par R. M. N. EXEMPLE 2 D'autres produits analogues du composé obtenu dans l'exem- ple 1 sont préparés en faisant varier la position et la nature des substituants sur les noyaux. EXEMPLE 3 Préparation du sel sodique de diphlorétine phosphate (DPP) On suit les réactions 1 à 6 suivantes: EXEMPLE 4 (a) On répète les exemples 1 et 2, excepté quaon utilise du POC13 ou du p-nitrophénylphosphorochloridate à' la place du CH3NHPOC12. On obtient des résultats comparables. (b) Le sel sodique de diphlorétine phosphate de 11 exemple 3 est converti en diphlorétine phosphate par traitement avec HC1 à pH acide. EXEMPLE 5 Le trimère de phlorétine phosphate est formé en faisant réagir du diphlorétine phosphate sous les condition réactionnelles de l'exemple 3 avec le composé indiqué dans la phase (3) de ltexem- ple 3. EXEMPLE 6 Le tétramère de phlorétine phosphate est formé en faisant réagir ensemble deux molécules de diphlorétine phosphate sous les conditionsde l'exemple 3. EXEMPLE 7 Les activités stimulatrices du muscle lisse intestinal des protaglandinessont bien connues chez différentes espèces, in vitro et in vivo. Des matières fécales semi-liquides et de la diarrhée ont été observées comme effets secondaires après l'injection intraveineuse de prostaglandines en vue dtun avortement provoqué et pour réduire le travail. Le but de cet- exemple consiste à démontrer que le polyphlorétine phosphate x (PPP) et le diphlorétine phosphate x (DPP) peuvent s'opposer à la diarrhée produite par des prostaglandines chez la souris et que le DPP est un antagoniste plus puissant que le PPP. x A.B. Leo, Halsinborg, Suède Méthodes On utilise des souris suisses albinos des deux sexes pesant entre 20 et 25 gr. On permet aux animaux le libre accès à de la nourriture et à de l'eau. On provoque la diarrhée à des groupes de 12 souris par l'injection intrapéritonéale ou intraveineuse (veine de la queue) de prostaglandine E2 (PGE2). L'apparition de matières fécales semi-liquides endéans 30 minutes après l'injection de prostaglandine est considérée comme étant une réponse positive. La plus petite dose de PGE2 requise pour produire une ré- ponse positive sur 100% des animaux traités (ED100) est trouvée comme étant de 50 Agr/kg pour l'injection intrapéritoniale et de - 250 ssgr/kg pour l'injection intraveineuse.Différentes doses de PPP et de DPP sont données dans un volume unitaire de 0,5 ml 15 à 20 minutes avant l'administration du PGE2. Les tableaux I à III sui vants donnent les résultats. TABLEAU I Dose de PPP (mq/kg) Purqatif salin 50 10 200 Diarrhée provoquée 11/12 8/12 3/12 0/12 Le PPP donné par voie intrapéritonéale est suivi au bout de 15 min. par 50Ag/kg de PGE2 donné aussi par voie intrapénitonéale. TABLEAU II Dose de PPP (mg/kg) Purgatif salin 25 50 100 200 Diarrhée provoquée 11/12 10/12 9/12 3/12 0/12 Le PPP donné par voie intrapéritonéale est suivi au bout de 15 minutes par 250 Ag/kg de PGE2 donné par voie intraveineuse. TABLEAU III Purgatif salin Dose de DPP (mq/k) 10 10 15 20 25 30 35 Diarrhée provoquée 11/12 11/12 7/12 6/12 3/12 3/12 2/12 Le DPP donné par voie intrapéritonéale est suivi au bout de 20 minutes par 50 ssg/kg de PGE2 donné aussi par voie intrapéritonéale. Résultats 200 mgr/kg de PPP bloquent complètement la diarrhée qui autrement se serait manifestée suite à l'administration de PGE2, aussi bien par la voie intra-péritonéale que par la voie intraveineuse (Tableaux I et II). Les dosages inférieurs de PPP sont aussi efficaces proportionnellement aux concentrations administrées, le dosage correspondant à la valeur ED50 étant situé entre 50 et 100 mgr/kg.Le DPP est beaucoup plus puissant que le PPP dans le blocage de la diarrhée, la valeur de la dose efficace sur 50% des animaux traités (ED50) étant de tordre de 15 à 25 mgr/kg (Tableau III) Avec un groupe témoin à qui on a donné uniquement du DPP à raison de 20 mgr/kg, la réponse obtenue est la suivante : un seul animal a de la diarrhée tandis que trois autres montrent des signes beaucoup moins forts (défécation stimulée). Les souris réagissent de la même façon à l'administration de PGE2 quelle que soit la voie d'administration. Elles deviennent inactives, leurs poils se hérissent, et elles prennent généralement une position "allongée", cette position étant invariablement suivie par de la diarrhée.La diarrhée chez les groupes témoins traités au purgatif salin se produit endéans 5 à 15 minutes après l'administration de PGE2. Chez les groupes traités au DPP et au ppp, si la diarrhée se produit, elle apparat ordinairement après un certain retard. Lorsque la diarrhée est bloquée chez un animal, il ne montre aucun signe d'inactivité ou de piloérection. Ces expériences démontrent que le PPP et le DPP sont aptes à s'opposer à la diarrhée provoquée par le PGE2. Le DPP est approximativement 5 fois plus puissant que le PPP; cependant, le DPP peut être la cause de légères douleurs car il tend par lui-m8me à stimuler la défécation. Dans les exemples suivants1 la méthode d'essai pharmacologique utilisée est la suivante Des oiseaux (Meriones Shawwi) pesant entre 50 et 150 gr sont tués d'un coup sur la tête. La partie moyenne du colon ascendant est enlevée, et est mise dans un bain d'organes de 5 ml contenant une solution à base de colon de rat du type Jalon'- à 280C, passée à l'oxygène. On utilise un cycle de dosage de 3 à 4 minutes et un temps de contact de 1 à 2 minutes. Les contractions sont mesurées isotoniquement par un transducteur de muscles. isotoniques Brush , utilisé conjointement avec un enregistreur Brush 220. Avant l'essai, le tissu est laissé dans le bain d'organes pendant 30 minutes avec des changements répétés du fluide du bain. Au cours de cette période et au cours de la période qui suit l'introduction des premières doses de protaglandine, la tension résidu elle est ajustée de manière à obtenir un retour rapide au niveau de base avec une charge de levier minimum. La sensibilité est ajustée électroniquement de manière à ce que la contraction maximale donne une déviation du style légèrement inférieure à la totalité de l'échelle. L'activité de blocage de prostaglandine des fractions de polyphlorétine phosphate est déterminée vis-à-vis de la prostaglandine F2a en utilisant du polyphlorétine phosphate ayant un poids moléculaire moyen de 15000 comme étalon. EXEMPLE 8 On prépare un échantillon en dissolvant 0,5 partie de polyphlorétine phosphate (PPP) (A.B. Leo, Halsingborg, Suède) ayant un poids moléculaire moyen de 15000 dans 5 parties d'eau distillée. On neutralise laXolution à pH 7 avec de l'hydroxyde de sodium 1N. On remplit une colonne evverre de 1,5 cm x 80 cm avec du gel de polyacrylamide Bio-Gel (R) P-2 (50-100 mailles) hydraté. L'échantillon est ajouté au sommet du lit et est élué dans des fractions de 5 ml en utilisant de l'eau purifiée pour nettoyer la colonne. Ces fractions sont recueillies et testées pour leur activité pharmacologique. Après l'élution de tout l'échantillon précédent, on ajoute un composé ayant un poids moléculaire connu au sommet du lit et on l'élue dans des fractions de 5 ml en utilisant de l'eau purifiée pour nettoyer rapidement la colonne. Le composé connu utilisé est de l'idoxuridine ayant un poids moléculaire de 354. La figure 1 est un graphique montrant le pourcentage d'absorption dans l'ultraviolet et l'activité relative de blocage de prostaglandine des fractions recueillies dans l'exemple 8. La courbe du pourcentage d'absorption dans l'ultraviolet (W) est une mesure de la quantité de matière organique dans chaque fraction de 5 ml éluée à partir de la colonne. C'est ainsi que le pourcentage d'absorption de lumière W de la fraction de 5 ml entre les 40ème et 44ème ml est d'environ 60%, ce qui indique une concentration relativement élevée de matière organique. D'un autre côté, le pourcentage d'absorption de lumière W de la fraction de 5 ml prise entre les 95ème et 99ème ml est de l'ordre de 15%, ce qui indique une concentration relativement faible de matière organique. La courbe de l'activité de blocage de prostaglandine est présentée à une échelle qui montre l'activité relative des échantil lons de 5 ml successifs, où 1 est l'activité du polymère non frac tonné Par exemple1 l'activité de la fraction de 5 ml entre les llsème et 119ème ml est de l'ordre de 13 et l'activité de la fraction de 5 ml entre les 80ème et 84ème ml est de l'ordre de 18. La figure 3 montre l'activité relative des fractions recueillies dans l'exemple 8. L'activité relative est calculée en aivisant le chiffre obtenu pour l'activité de blocage de prostaglandine par le chiffre obtenu pour le pourcentage d'absorption dans l'ultraviolet. Le nombre obtenu (activité relative) est une mesure de l'activité de blocage de la prostaglandine du contenu de chaque fraction en tenant compte des différentes concentrations de matière organique dans chaque fraction. C'est ainsi que l'activité relative permet de comparer l'activité de chacune des fractions même si elles ont les mêmes concentrations de matière organique. La figure 3 montre aussi les points auxquels les composés de poids moléculaire connu sont élués à partir de la colonne ,ce qui permettra de confirmer les calculs théoriques obtenus et discutés ci-après. Le tableau lici-après se réfère à un calcul théorique qui montre l'ordre de grandeur des poids moléculaires auxquels on doit s'attendre en utilisant la méthode traditionnelle de calcul exposée par le fabricant du gel utilisé dans l'exemple 8. TABLEAU IV Poids molécalaire ml élués 350 107 700 93 1050 77 1400 64 En se basant sur le tableau 'v,la figure 1 et la figure 3, on peut voir que l'activité anti-prostaglandine est presque entièrement dans la gamme des poids moléculaires inférieurs à environ 1400. C'est ainsi que la figure 1 montre que l'activité anti-prostaglandine démarre à la fraction d'élution obtenue entre les 60ème et 64ème ml. Le tableau W montre que 64 est le point auquel un poids moléculaire de 1400 pourra apparattre et que cela correspondrait aussi au poids moléculaire du tétramère de polyphlorétine phosphate. Ce calcul théorique tend à être confirmé par la figure 3, où on élue un composé connu ayant un poids moléculaire de 350 entre les 110ème et 120ème ml. Le tableau W indique qu'un composé ayant un poids moléculaire de ordre de 350 devrait être élué au 107ème ml. EXEMPLE 9 On répète l'exemple 8 excepté qu'on utilise du polymère de dextran réticulé Sephadex G-25, de grandeur moyenne (diamètre des particules de 50 à 150 A) à la place du gel de polyacrylamide. On recueille des fractions de 5 ml et on les analyse pour reconnat- tre le pourcentage d'absorption dans l'ultraviolet. Les fractions sont combinées en échantillons de 10 ml (on rassemble les échantillons de 5 ml qui se suivent) et testés pour leur activité phar macologique. La figure 2 représente un graphique montrant le pourcentage d'absorption dans l'ultraviolet et l'activité de blocage de la prostaglandine des fractions recueillies dans l'exemple 9. La figure 4 est un graphique montrant l'activité relative des fractions recueillies dans l'exemple 9. On remarquera que l'activité relative de certaines des fractions de l'exemple 9 est très élevée. C'est ainsi que la fraction 20 a une activité de 26,7, ce qui indique que la matière dans cette fraction est 26,7 fois plus active que le polyphlorétine phosphate lui-même à la même concentration. La figure 5 est une superposition des figures 3 et 4, ce qui permet de montrer la grande similitude qualitative entre l'activité relative des fractions des exemples 8 et 9. EXEMPLE 10 On prépare un échantillon en dissolvant 500 mgr de polyphlorétine phosphate (A.B. Leo, Halsingborg, Suède) ayant un poids moléculaire moyen de 1500 dans 2,5 ml de tampon phosphate à pH 7. On remplit une colonne de verre de 1,5 cm x 90 cm avec du dextran réticulé Sephadex G-25, du type fin (diamètre des particules de 20 à 80 kil). On ajoute l'échantillon à la colonne hydratée et on élue avec de l'eau distillée et on recueille les fractions. La figure 6 illustre la séparation d'activité biologique dans des fractions de poids moléculaires différents. I1 est tout à fait clair que l'activité de blocage de prostaglandine est localisée dans les fractions à bas poids moléculaire. Différentes fractions sont ainsi rassemblées comme indiqué sur la figure 6, elles sont ensuite séchées par congélation et l'activité pharmacologique des poudres séchées par congélation (obtenues à partir des trois lots de fractions) est comparée à ltéchantillon original de polyphlorétine phosphate. Comme on peut le voir aussi à la figure 6, la poudre séchée par congélation obtenue à partir des fractions 15-21 a approximativement la moitié de l'activité de l'échantillon original de PPP. Par contre, le produit séché par congélation obtenu à partir des fractions 26 à 29 est 7,5 fois plus puissant que l'échantillon original de PPP (sur une base en poids). EXEMPLE ll Cet exemple donne des résultats montrant que l'activité anti-hyaluronidase dés esters phosphoriques polymères est localisée dans les fractions à poids moléculaire élevé qui possèdent une très petite activité de blocage de prostaglandine. Par contre, les fractions à bas poids moléculaire ayant une activité de blocage de prostaglandine élevée ne possèdent pas ou peu d'activité antihyaluronidase. Ceci est indiqué par les résultats suivants. L'essai opacimétrique de l'hyaluronidase (Meyer, Hoffman et Liner, the Enzymes, 4, 2me éd.,447, Academic Press, Inc., New York, 1960) basé sur celui de Tolksdorf et consorts (J. Lab. Clin. Med. 34, 74, 1949) est utilisé pour tester l'activité anti-hyaluronidase du polyphlorétine phosphate et des trois fractiom décrites dans l'exemple 10. Le PPP et les trois fractions sont testés à des concentrations de 0,01 mgr/ml. Leur puissance est comparée vis-à-vis de 0,0005 mgr d'hyaluronidase agissant sur 0,2 mgr de substrat (acide hyaluronique). Le tableau V donne les résultats obtenus. TABLEAU V Composé Activité anti-hyaluronidase Activité anti-prostaet et inhibition qlandine,djaprès fig.6 PPP 75,0 1 Fractions 1-11 90,0 O. Fractions 15-21 8,0 0,6 Fractions 26-29 3,5- 7,5 L'activité de blocage de prostaglandine du polyphlorétine phosphate peut être nettement séparée de l'activité anti-hyaluronidase en fonction du poids moléculaire. C'est ainsi qu'on trouve 90% de activité anti-hyaluronidase dans la région à poids moléculaire élevé de PPP qui n'a pas d'activité anti-prostaglandine tandis que la fraction à bas poids moléculaire de PPP ayant une activité anti-prostaglandine de 7,5 fois l'activité de PPP a une activité anti-hyaluronidase de seulement 3,5%. EXEMPLE 12 On répète l'exemple 8, excepté qu'on substitue les esters phosphoriques polymères suivants au polyphlorétine phosphate polyméthylphlorétine phosphate, polyquercettine phosphate, polynaringénine phosphate, et polyhespérétine phosphate. On obtient des résultats comparables. REVflND ICT TONS 1.Procédé de synthèse de composés comprenant des esters phosphoriques polymères dans lesquels les radicauxd'adde phospho- rique sont réticulés au moyen dc liaisons esters par l'intermédi- aire de groupes organiques, chaque groupe organique étant un résidu d::un glycoside d'un composé polyhydroxy choisi dans le groupe comprenant les flavones flavanones, chalcones et dihydrochalcones, ces esters phc;plloriques polymères étant des antagonistes des pros taglandines ntayant-pratiquement aucune activité anti-hyaluronidase et- ayant un poids moléculaire inférieur à environ 1400, ce procédé étant caractérisé en ce quton fait réagir des composés générateurs de polymère choisis dans le groupe comprenant les chacones, dihy drochaîcones, flavones, et flavanones substituées, avec un composé de couplage phosphorique sous des conditions suffisantes pour former un polymère ,et en ce qu'on hydrolyse le polymère pour former l'ester phosphorique à faible poids moléculaire. 2. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le composé générateur de polymère est un dimère et en ce que le polymère formé est le tétramère. 3. Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que le dimère est le diphlorétine phosphate. 4. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que les composés générateurs de'polymère sont des monomères et des dimères et en ce que le polymère formé est le trimère. 5. Procédé suivant la revendication 4, caractérisé en ce que le monomère est le phlorétine phosphate et en ce que le dimère est le diphlorétine phosphate. 6. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que les composés synthétisés ont des formules choisies dans le groupe comprenant AB-P04-BA; AB-P04-BA-P04-BA; AB-PO4-PMA-PO4-AB-PO4-BA; et P04(AB)3! dans lesquelles A représente le groupe de la formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant.OII et X, R2 est choisi dans le groupe comprenant H, C1, F3C, F et X, et R3, R4 et R5 sont chacun choisis dans le groupe comprenant H, C1, F, NO21 OH, X et OX, où X représente le méthyle, l'éthyleDen-propyle ou le i-propyle , et dans lesquelles B représente le groupe de la formule dans laquelle R6 est choisi dans le groupe comprenant H, F et le phényle, et le groupe AB est formé par liaison de la position 4 de B à l'atome de carbone terminal de la chatne alkylique de A; les unités AB ainsi formées étant liées par un groupe phosphate attaché à la position 1 de chaque noyau B. 7. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que les composés synthétisés sont des sels acceptables du point de vue pharmacologique des esters phosphoriques à bas poids moléculaire re. S. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le composé générateur de polymère est de la phlorétine et en ce que le polymère formé est le diphlorétine phosphate. 19. Procédé suivant la revendication 8-, caractérisé en ce que le polymère formé est un sel acceptable du point de vue pharmacologique du diphlorétine phosphate. 10. Procéde suivant la revendication 1, caractérisé en ce que les composés synthétisés répondent à la formule : dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant OH et OX, et R2, R3, R4, R5 et R6 représentent de l:hydrogène, où X est choisi dans le groupe comprenant le méthyle, méthyle, le n-propyle et le i-propyle, Z et Z représentant de l'hydrogène. r s 14 Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que les composés synthétisés répondent à la formule dans laquelle n est un nombre entier positif de 2 à 4, Y1, , Y5 et Y6 sont choisis dans le groupe comprenant OH et H, et Y2, Y3 et Y4 sont choisis dans le groupe comprenant OH, H et un groupe ayant la formule dans :.laquelle t est choisi danse groupe comprenant H, CH3, F, C1 et OCH3 et dans laquelle n est un nombre entier de 1 à 5; Y1, Y2, Y3, Y41 Y5 et Y6 pouvant être des radicaux identiques ou différents. 12. Procédé suivant la revendication 1I, caractérisé en ce que Y2, Y3 e t Y4 sont choisis dans le groupe comprenant OHI H, 13. Procédé suivant la revendication 11, caractérisé en ce que Y2, Y3 et Y4 sont choisis dans le groupe comprenant OH, H et les groupes allyliques ayant de 1 à 6 atomes de carbone. 14. Procédé dede séparation esters phosphoriques polymères à bas poids moléculaire-à partir d'esters phosphoriques polymères à poids moléculaire élevé dans lesquels les radicaux d'acide phos pboriquesont réticulés au moyen de liaisons esters par l'inter- médiaire de groupes organiques, chaque groupe organique étant un résidu d'un glycoside d'un composé polyhydroxy choisi dans le groupe comprenant les flavones, flavanones,chalcones et dihydrochalcones, ce procédé étant caractérisé en ce qu'on fait passer les esters phosphoriques polymères à poids moléculaire élevé travers d'une matière..capable d'effectuer un fractionnement moléculaire physique, et en ce qu'on récupère la portion des esters phosphoriques polymères ayant un poids moléculaire inférieur à environ 1400 , cette matière étant une matière utilisable en dialyse. 15. Composés comprenant des esters phosphoriques polymères dans lesquels les radicaux d'acide phosphorique sont réticulés au moyen de liaisons resteras par ltintermédiaire de de groupes organi- ques, chaque groupe organique étant un résidu d'un glycoside d'un composé polyhydroxy choisi dans le groupe comprenant les flavones', flavanones,chalcones et dihydrochalcones, ces composés étant caractérisés par le fait que les esters phosphoriques polymères sont des antagonistes des prostaglandines n'ayant pratiquRment aucune activité anti-hyaluronidase et ayant un poids moléculaire inférieur à environ 1400. 16 te polyphlorétine phosphate ayant un poids 'mbleculaire inférieur à environ 1400. 17. Composé comprenant le diphlorétine phosphate, ses ses sels acceptables du point de vue pharmacologique, ou leur mélange avec un support ou véhicule pharmaceutique convenable. 18. Composés suivant la revendication 15,caractérisés par le fait qu'ils répondent à la formule choisie dans le groupe comprenant : AB-PO4-BA: B-PO4-BA-PO4-BA; AB-P04-BA-P04-A-PO4-BA; et P04(AB)3 od A représente le groupe de la formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant OH et X, R2 est choisi dans le groupe comprenant H, Cl, F3C, F et X, et R3, R4, et R5 sont chacun choisis dans le groupe comprenant H, C1, F, NO2, OH, X et OX, où X représente le méthyle, l'éthyle, le n-pro- pyle ou le i-propyle, et où B représente les groupes de la formule dans laquelle R6 est cheisi- -dans le groupe comprenant -H, F et le phényle, et le groupe AB est formé par liaison de la position 4 de B à l'atome de carbone terminal de la chaîne alkylique de A; les unités AD ainsi formées étant reliées par un groupe phosphate atta ché à la position 1 de chaque noyau B, ainsi que les sels acceptables pharmacologiquement de ceux-ci. 19, Compost suivant la revendication 15,caractériséspar le' fait qu'ils répondent à la formule dans laquelle R1 est choisi dans le groupe comprenant OH et OX, où X représente le méthyle, l'éthyle, le n-propyle ou le 1-propyle, R2, R3, R4, R5 et R6 représentent de l'hydrogène, et Z r et Z représentent également de l'hydrogène. 20. Composés suivant la revendication 15, caractérisés par le fait qu'ils répondent à la formule dans laquelle n est un nombre entier positif de 2 à 4, Y1, Y5 et Y6 sont choisis dans le groupe comprenant OH et K, et Y2, Y3 et Y4 sont choisis dans le groupe comprenant OH, H et un groupe répondant à la formule dans laquelle t est choisi dans le groupe comprenant H, CH3, F, C1 et OCH3 et n est un nombre entier positif de 1 à 5; Y1, Y2, Y3, Y4, Y5 et Y6 pouvant être des radicaux identiques ou différents. 21. Composés suivant la revendication 20, caractérisés en ce que Y2, Y3 et Y4 sont choisis dans le groupe comprenant OH, 22. Médicaments, utiles notamment pour le blocage des actions des prostaglandines chez les êtres humains et chez les animaux, cr:sacterisés en ce qu'ils comprennent une quantité efficace de l'antagoniste des prostaglandines, à bas poids moléculaire, suivant l'une quelconque des revendications 15 à 21o