Brevet FR2117803A1 — publié le 19720728

l'Invention est relative à de nouveaux médicaments contenant, à titre d'agents actifs, des tungstoacides complexes ou les sels desdits acides. De tels médicaments trouvent des applications pour le traitement préventif ou curatif d'infections virales et 5 des processus pathologiques dus aux virus oncogènes» L'invention a pour objet, à titre de médicaments, des composés complexes du tungstène choisis parmi les acides et anhydrides slllcotungstiques et borotungstiques et les sels desdits acides. Les tungstoacides complexes, particulièrement les acides si-10 llcotungstlques et borotungstiques, sont des produits chimiquement connus mais ils n'ont pas encore été présentés comme médicaments. -à- titre de document illustrant la technique antérieure, on -peut citer notamment le Traité de Chimie minérale de Paul Pascal (Edition Masson,Paris)» Dans son édition de 1932, on trouve des 15 Indications sur les tungstoacides complexes au tome XI p. 164 et suivantes, avec les références bibliographiques correspondantes p. 175» ainsi qu'au tome IV p. 587 et suivantes (acides borotungstiques et borotungstates) avec les références bibliographiques, correspondantes p. 601 et 602. 20 Certains des composés complexes du tungstène peuvent être représentés par les formules générales |S102 . 12 W03 et ÎB„0, . 24 ÏÏO- 2R20 , n H20 25 où n est un nombre variable et R représente un atome d'hydrogène ou un métal. Le métal peut être monovalent, tel qu'un métal alcalin ou le radical ammonium, ou dlvalent, tel qu'un métal alcalino-terreux, auquel cas le groupe R2 représente dans son ensemble le métal dlvalent. Pour les métaux de valence supérieure,les propor-50 tions relatives varient en correspondance. Les anions complexes sont en effet respectivement 35 (si04 . 12 V/oJ [*>4 . 12 V/05J 4- 5- et On désigne parfois de tels composés complexes comme ceux appartenant à la "série 12", car leur molécule comporte 12 W0^« Toutefois dans le domaine de pH7i ces composés subissent une transformation et donnent naissance à des complexes dits de la 40 "série 11", c'est-à-dire dont la molécule contient 11 WO^ • 70 ^+58^3 2 2117803 L'invention couvre évidemment tous les composés complexes de la série 12 et de la série 11 ainsi que les mélanges desdits composés, selon le domaine de pH dans lequel ils sont utilisés. Dans les médicaments contenant les tungstoacides ou leurs 5 sels faisant l'objet de l'invention, ce sont les ions complexes ci-dessus décrits qui sont actifs. On a trouvé en effet que les silicates ou les borates seuls, d'une part, et les tungstates, d'autre part, sont inactifs. Ainsi, pour les valeurs de pH 9,9 et au delà, les complexes de la série 12 se décomposent et per-10 dent leur activité à titre de médicaments. La préparation des acides et anhydrides slllcotungstlques et borotungstiques ou de leurs sels est réalisée d'une manière connue. On peut à cet égard consulter les références bibliographiques qui sont citées au début de la présente description et 15 sur lesquelles il apparaît inutile de revenir en détails. Un procédé convenable dans la pratique pour l'obtention des slllcotungstates consiste à acidifier une solution aqueuse de tungstate neutre et de silicate. Un exemple purement illustratif de ce procédé sera donné ci-après. 20 Un procédé analogue peut être utilisé pour l'obtention des borotungstates, en partant de solutions aqueuses de tungstate neutre et de borate. Un exemple en sera également fourni ci-après. Les nouveaux médicaments contenant, à titre d'agents actifs, les composés slllcotungstlques et borotungstiques définis précé-25 demment, sont utiles pour le traitement préventif ou curatif des Infections virales et des processus pathologiques dus aux virus oncogènes. Des essais mettant en évidence les propriétés des composés en cause sont rapportés ci-après. "EXWPLE 1 Préparation du silicotungstate de sodium. 30 On utilise 126 ml d'une solution de silicate de sodium dans le glycérol (réactif Merck) à 10 g par 100 ml; ce volume correspond à 26,7 g soit 0,1 mole. On ajoute alors une solution de tungstate de sodium (NaWO^^H^O) à raison de 397 g dissous dans 2,5 litres d'eau, ce qui correspond à 1,2 moles et 75 ml d'acide sul-35 furique concentré ( d = 1,83). On porte à l'ébullition à reflux pendant 5 heures. Il se forme un gros précipité jaune. Après refroidissement, on filtre. Le liquide surnageant est complété à 5 litres, neutralisé par l'hydroxyde de sodium concentré jusqu'à pH = 7»0 et lyophilisé. 40 Le produit sec obtenu présente un spectre d'absorption 70 45843 2117803 ayant dans l'ultraviolet un maximum à 260 mp qui. correspond à l'ion conplexe silicotungstique (SiO^ . 12 W0-). . Le silicotung-state de sodium peut être représenté par la formule J_3I02 . 12 tfoj 2Iîa20 , 30H20 5 On peut préparer des sllicotungstates des métaux autres que le sodium en remplaçant le silicate et le tungstate de sodium par les silicates et tungstates correspondants, selon la nature du métal. EXEMPLE 2 10 Préparation du borotungstate de sodium On prépare une solution contenant 397 S cLe tungstate de sodium (WO^Ka^ » 2H20) et 38,1 g de borax (B^O^ÏÏa^ 10H20) dans 2,5 litres d'eau. On ajoute 75 ml d'acide sulfurique concentré ( d » 1,83). On porte à l'ébullition à réflux pendant 5 heures. On re-15 froldit à la température du laboratoire. On filtre sur papier pour éliminer le précipité abondant qui s'est formé.Le liquide filtré est porté a 5 litres„ On neutralise par l'hydroxyde de sodium N jusqu'à pH = 7,0 pour obtenir le borotungstate de sodium qui est consécutivement lyophilisé. 20 On peut opérer d'une manière équivalente pour préparer les borotungstates des métaux autres que le sodium . Propriétés pharmacologiques On a étudié, des virus leucémogènes et sarcomatogènes de la souris, déjà caractérisés antérieurement : voir en particulier les 25 articles suivants : - M. Raynaud, J.C. Chermann, C. Jasmin et G. Mathé Comptes Rendus, 270 S-jrie D, 1970, p. 578 - J.C. Chermann, M. Raynaud, C. Jasmin et G. Mathé Nature 227, 1970, p. 173 30 - C. Jasmin, J.C. Chermann, G. Mathé et M. Raynaud Rev. Europ. Et. Clin. Blol0 1£, 1970, p« 56 On a en particulier étudié le virus sarcomatogène de Moloney qui a été utilisé sous la forme d'une suspension obtenue à partir d'une culture cellulaire chronlquement infectée /"cellules 78A , 35 voir C. Bernard, ï;I. Boiron et J. Lasneret, Comptes Rendus, 264 , 1967, p. 170J. La suspension virale concentrée est conservée à -190°C.Elle est diluée de façon à contenir dans 0,5 ml, 100 à 500 unités formatrices de foyers. Les flbroblastes embryonnaires sont cultivés 40 en milieu 5A de McCoy additionné de 5 % cLe sérum de veau foetal , 70 k58k3 4 2117803 en boîtes plastiques de 25 cm2 de surface (boîtes disponibles sur le marché sous la dénomination "Falcon"). Le virus est ajouté le deuxième jour de la culture cellulaire, lorsque celle-ci est confluente. Le virus est laissé en contact avec les cellules pendant deux heures pour permettre 1' adsorption. On effectue alors un lavage avec du milieu sans sérum. On ajoute ensuite 5 ml de milieu contenant des doses variables de silico-tungstate ou de boro-tungstate. Les résultats obtenus avec le silicotungstate de sodium sont rapportés au tableau I Tableau I Effet inhibiteur du silicotungstate de sodium sur la transformation des fibroblastes embryonnaires de souris "par le virus du sarcome murin type Moloney 20 25 30 3E Moyenne de trois essais. Dans les essais dont les résultats sont rapportés au Tableau I, la préparation utilisée est le surnageant d'une culture 35 de fibroblastes de rat (78A), chroniquement infectée par le virus du sarcome murin type Moloney. Elle contient 3.800 FFU/ml et est conservée à -190°C. Après décongélation, on ajoute à une culture confluente de fibroblastes embryonnaires 1 ml d'une dilution appropriée de la préparation mère. Après 2 heures de contact et la-40 vage, on ajoute 5 ml de milieu de culture contenant des quantités 5 10 Dose de silico Nombre de foyers % du Taux tungstate par observés par Témoin d'inhibi boîte boîte * tion L%) Zéro 216 100 0 2 mg 0 0 100 1 mg 7,3 3,4 96,6 500 ^ig 16 7,4- 92,6 250 fig 52 24 76 Zéro 117 100 0 2 mg 0 0 100 1 mg 2,3 2 98 500 pg 7,3 6,2 93,8 âL R CM 23,7 20 80 , 70 45843 2117803 de sillcotungstate variables (1ère colonne),, Le nombre de foyers formés est compté après 6 jours d'incubation à 37°C • En opérant de la même manière avec le borotungstate de sodium, on obtient les résultats rapportés au Tableau II . 5 TABLEAU II Effet inhibiteur du borotungstate de sodium sur la transformation des fibroblastes embryonnaires de souris par le virus du sarcome murin type Moloney. 10 Nombre de foyers Taux observés -par boîte d'Inhibition % 1 15 Témoin (volume de milieu par boîte : 5 ml) 196 » j Culture additionnée de borotungstate Dose par boîte 2 mg 6 97 20 1 mg 19 90 0,5 mg 47 76 Les résultats des essais précédents montrent que les sillco-tungstates et les borotungstates ont un effet inhibiteur sur l'ao-25 tlvité transformante que les virus du sarcome murin exercent "In vitro" sur les cultures de fibroblastes embryonnaires normaux de la souris. Ainsi, d'après les résultats du Tableau I, qui sont caractéristiques, la culture témoin a été infectée avec une dose connue de virus sarcomatogène. Dans les cultures traitées préala-50 blement par le sillcotungstate de sodium, on observe une absence quasi-totale de formation de foyers sarcomateux. La dose limite active de sillcotungstate est de l'ordre de 100 microgramm.es pour 5 ml de milieu. On obtient des résultats analogues avec le borotungstate de sodium, comme le montre le Tableau II. 55 On a trouvé aussi que les nouveaux agents actifs inhibaient la transformation sarcomatogène des fibroblastes normaux de poulets par le virus de Rous. On a également mis en évidence l'action inhibitrice des sl-licotungstates et des borotungstates sur la croissance In vitro 70 45843 6 2117803 d'autres types de virus tels que, notamment, les virus de la rage, de la rubéole et de la stomatite vésiculaire. Les nouveaux médicaments sont donc applicables dans les cas d'infections et de tous autres processus provoqués par des virus. 5 Ces médicaments sont susceptibles d'être administrés par vole parentéra^e sous forme de leurs solutions aqueuses» 70 45843 7 2117803 REVENDICATIONS 1. Application, à titre d'agents actifs de médicaments,de composés complexes du tungstène choisis parmi les acides et anhydrides slllcotungstlques et "borotungstiques et les sels desdits acides. 2. Médicaments contenant,à titre d'agents actifs,des composés complexes du tungstène répondant aux formules générales 10 |^Sl02.12WoJ . 2R20, nH20 et |^B205.24W05~j ■. 5R20 ,nH20 où n est un nombre variable et R représente un atome d'hydrogène ou un métal. 3. Médicaments selon la revendication 2 caractérisés en ce 15 que R est un métal alcalin, en particulier le sodium. 4-. Médicaments selon la revendication 2 caractérisés en ce que R représente un métal ayant une valence supérieure à 1,auquel cas les proportions stoechiométriques sont modifiées en correspondance, les anioiis complexes du tungstène ayant respectivement 20 pour formules r "1 4- S10^.12W05 i I ?- et 5. Llédlcaments contenant"? à titre d'agents actifs,des compo-25 sés complexes du tungstène obtenus par transformation des composés selon l'une quelconque des revendications 2 à 4 sous l'effet des variations du pH. 6. Médicaments contenant, à titre d'-agents actifs, des mélanges de composés complexes du tyngstène définis à l'une quel- 30 conque des revendications 1 à 5» 7. Médicaments selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 pour le traitement préventif ou curatlf des infections virales et des processus pathologiques dus aux virus oncogènes. 8. Llédlcaments selon l'une quelconque des revendications 1 35 à 7 caractérisés en ce qu'ils sont administrés par voie parenté- raie sous forme de solutions aqueuses.