Brevet FR2108847A1 — publié le 19720526

La présente invention concerne de nouvelles compositions thérapeutiques ayant un effet thérapeutique sur le parkinsonisme (maladie de rarkinson). Plus spécialement, l'invention concerne des acides 5-butyl et 5-pentyl-picoliniques et leurs sels qui ont pour effet dlinhiber la-hydroxylase de dopamine, et leur formulation comme compositions thérapeutiquement utiles. Les composés actifs inhibant la ss -hydroxylation de la dopamine conformément à la présente invention peuvent être identifiés comme étant des acides 13-alcoylpicoliniques ayant la formule dans laquelle n est 3 ou 4. Selon les groupes acides et les groupes basiques ces composés actifs forment leunWsels, et dans la présente invention les "composés actif s" englobent également les sels desdits composés. Les composés de la présente invention sont actifs quand ils sont administrés par voie buccale, rectale ou parentérale. Pour en assurer l'absorption convenable et 1'effet thérapeutique favorable, ils sont de préférence incorporés dans des excipients cla-ssiques convenables tels que sucre raffiné, lactose, amidon, carbonate dd calcium, huile de copra, etc.. Ces composés, quand ils sont administrés en injections sous-cutanees ou intra-musculaires, provoquent de l'irritation dans la zone d'injection et l'utilisation des dits composés par voie buccale ou rectale est préférée a l'injection sous-cutanée ou intra-musculaire. En outre, ces composés sont efficaces quand ils sont administrés par voie buccale ou rectale. Dans l'utilisation clinique de ces composés, le dosage recommandable est de 20 à 100 mg de médicament actif 1 à 4 fois par jour.Donc dans la préparation de comprimés, capsules, élixirs, suppositoires ou autres formes de doses avec des excipients appropriés, la formulation doit de préférence contenir de 20 à ioe mg de médicament actif par dose unitaire. Dans les études d'examens systématiques de composés fongiques inhibant la ss -hydroxylase de dopamine, il a été découvert par la demanderesse que l'acide 5-butyl-picolinique a une forte activité d'inhibition de cette réaction d'enzyme. Ce composé a été connu comme un antibiotique appelé acide fusarique. La -hydroxylase de dopamine est un des enzymes travaillant à la biosynthèse de la norépinéphrine, et la demanaelrsse a trouvé que l'acide 5-butylpicolinique réduisait notablement la teneur en épinéphrine dans divers tissus, tels que le muscle cardiaque et les capsules surrénales. bien que la diminution de l'épi- néprhine dans le cerveau soit faible, ce composé présente également un faible effet sédatif. L'inhibition de la/3 hydroxylation de la dopamine peut provoquer une accumulation de dopamine qui peut réduire les symptômes de parkinsonisme tels que tremblement, rigidité, etc.. La demanderesse a également découvert que ce composé a une forte action hypotensive. Actuellement, l-DO1?A(3-( ,4-dihydroxy phenyl)-1-alanine est employée ppur le traitement du parkinsonisme. Ce composé, après avoir été absorbé par les cellules du cerveau, est converti en dopamine qui exerce l'effet thérapeutique. Toutefois, une certaine partie de la dopamine ainsi formée est oxydée parp -hydroxylase de la dopamine et la norépinéphrine ainsi formée élève la pression sanguine. L'acide fusarique (acide 5-butylpicolinique) qui inhibe la/3-hydroxylase de dopamine peut supprimer l'effet hypertensif de L-DOeA, et il peut également réduire la dose de L-DOPA utilisée pour le traitement du parkinsonisme.En fait, deux cas de parkinsonisme ont été traités avec succès sans aucun signe toxique, par l'acide fusarique (comprimé de 50 mg par voie buccale 3 fois par jour et comprimé de 250 mg de 1-DOEA 3 fois par jour, ou deux comprimés de 20 mg de L-DOeA 3 fois par jour). L'augmentation de la pression sanguine qui se produisait au cours de l'administration de L-DOPA seule n'a pas été observée dans le cas où de l'acide fusarique était administré en même temps que L-DOSh. En outre, la dose efficace de L-DOPA pouvait être ramenée à 0,75g ou 1,25g par jour. On a également observé que l'acide fusarique seul améliorait des symptômes de parkinsonisme, tels que tremblement et rigidité.Sur la base de ces découvertes, de nouvelles compositions thérapeutiques comportant l'acide de 5-butylpicolinique ou son sel comme agent thérapeutique contre le parkinsonisme ont été inventées. La LD50 de ce composé pour des souris était de 100 rg/kg par injection intraveineuse, et de 80mg/kg par injection intrapéritonéale. l'injection intramusculaire ou l'administration par voie buccale quotidiennement de 40mg/kg, 20mg/kg ou 10mg/kg n'a provoqué aucun signe toxique chez des chiens, sauf des vomissements chez certains chiens à la suite de l'administration par voie buccale. L'examen détaillé des toxicités de ce composé a montré que la mort provoquée par la dose mortelle était due a son effet de réduction de la pression sanguine mais non à d'autres types d'activités biologiques.Le sel de calcium de ce composé a présente le m & é effet. La LD > o du sel de calcium a été de 125 mg/kg, tant pour l'injec- tion intrapéritonéale que pour l'injection intramusculaire. L'administration de ce sel de calcium par voie buccale donne le même effet et les chiens peuvent recevoir du sel de calcium sans vomir. Avant la présente invention, il n'y a eu aucune observation sur l'effet thérapeutique de l'acide 5-butylpicolinique et de ses homologues sur le parkinsonisme. L'examen des effets des acides 5-alcoylpicoliniques a été effectué pour la première fois par la demanderesse. Préparant ces composés par synthèse chimique on a examiné leurs effets sur la./3 -hydroxylase de dopamine et sur la pression sanguine. De la /3 -hydroxylase de dopamine a été préparée à partir de moelle de surrénales de boeuf.Les surrénales ont été homogénéisées dans un tampon de phosphate 0,02 M de pH 6,5 contenant du sucrose a 8,5 %. Le rapport en poids tampon/ surrénales était 10/1. La solution homogénéisée a été centrifugée à 700 mg pendant 10 minutes et la portion surnageante a été centrifugée à 10.oOUg pendant 1 heure.Le précipité a été recueil et mis en suspension dans un tampon de phosphate Q,02 M de pH 6,5 contenant du sucrose à 8,5%. le poids du tampon utilisé était le même que celui des surrénales d'où l'enzyme était extrait Cette solution d'enzyme pouvait être conservée plus de plusieurs mois à l'état congelé sans diminution d'activité. Généralement, la solution d'enzyme était diluée 35 fois avec un tampog ae phosphate 0,0k M de pH 6,5 contenant du sucrose à 8,5%,et on incorporait 0,1 cm3 de cette solution diluée dans le mélange réactionnel de la réaction d'enzyme.Cette concentration de l'enzyme dans le mélange réactionnel était suffisante pour la poursuite linéaire de la réaction pendant 30 minutes. Le mélange réactionnel pour la réaction d'enzyme consistait en 0,2 cm3 de tampon de phosphate de potassium 1 M de pH 6,5 , 0,1 cm3 d'acide ascorbique 1/10 X, 0,05 cm3 d'acide fumarique 2/100 M dans NaOH 0,2 A, 0,05 cmf de catalase 4mg/cm3, 0,1cmy de tyramine 1/'10 X, 0,1 cm3 de N-éthyl-maléimide 1/lO X, 0,1 cm3 de solution d'enzyme 0,1cm3 de solution de la substance d'essai, et le volume total a été porté à 1,0cm3 avec de l'eau distillée.Après réaction sous agitation à 37 C pendant 25 minutes, on a ajouté 0,2cm3 de solution d'acide-trichloracétique à 130% pour arrêter la réaction et on a fait passer à travers une colonne (13cm de long et 0,6 cm de diametre) en résine diacide sulfonique (Amberlite IR-CG-120) en forme de H. Dix cm3 d'eau distillés ont été passés a travers la colonne et ensuite le produit de réaction (octopamine) qui était adsorbé sur la colonne a été élué avec 3,0 cm3 de NH4OH 4N. Le produit de réaction dans l'éluat a été oxydé en p-hydroxybenzaldehyde par addition de 0,3 cm3 de periodate de sodium à 2,0% et au bout de 6 minutes on a ajouté 0,3 cm3 de métabisulfite de sodium à 10%. La densité optique à 330 m a été déterminée .Les homologues examinés peuvent être représentés par la formule dans laquelle CnEn+1 signifie la chaîne hydrocarbonés droite. Les concentrations des homologues pour 50% d'inhibition de la ss-hydroxylase de dopamine étaient les suivantes : n = 0 3,5x10-6M ; n = 1 5,0 x 10-6M ; n = 2 2,2 x 10-6M ; n = 3 3,0 x 10-7M ; n = 4 7,5 x 10 ; n = 5 5,0 x 10-8M ; n = 6 1,3 x 10-7M ; n = 7 2,3 x 10 7M ; n = 8 6,8 x 10-7M ; n = 9 2,3 x 10-6X. Les toxicités de ces composés, exprimées en valeurs intrapéritonéales de LD50 (mg/kg de poids du corps) chez les souris ont été les suivantes n = 0 360 ; n = 1 175 ; n= 2 125 ; n = 3 120 ; n = 4 80 ; n =1370; n = 6 85 ; n = 7 45 ; n = 8 62 ; n = 9 75. Comme décrit ci-dessus, parmi les acides 5-alcoylpicoliniques l'effet d'inhibition de la ss-hydroxylase de dopamine a été trouvé être le plus fort chez les acides 5-butyl- et 5-pentylpicoliniques. L'acide 5-pentylpicolinique a été examiné en détail pour son effet sur la norépinéphrine et la dopamine dans le cerveau, le coeur et les surrénales et ses toxicités,et presque le même effet et les toxicités analogues que l'acide 5-butylpicolinique ont été confirmés. De nouvelles compositions thérapeutiques comportant de l'acide 5-butylpicolinique, l'acide 5-pentylpicolinique ou leurs sels sont donnés par la présente invention Les exemples qui suivent montreront comment les composés actifs de la présente invention peuvent etre préparés, ainsi que la préparation de formulations typiquement administrables buccalement ou rectalement de ces composés- actifs, mais il est bien entendu que ces exemples sont donnés à titre d'illustration et ne sont pas limitatifs. Exemple 1 Un mélange agité de 6,0g de 5-butyl-2-picoline, 50 cm3 de pyridine, et 7,3g de bioxyde de sélénium a été chauffé au reflux pendant 3,5 heures, clarifié, évaporé sous vide, et'le résidu a été pris dans 20 cm3 d'eau. Après décoloration au carbone actif, la solution a été concentrée, extraite à l'acétate d'éthyle, et cet extrait a été chromatographié sur 50 g de gel de silice avec de l'acétate d'éthyle pour donner 3,0g d'acide 5-butylpicolinique (acide fusarique) fondant à 99-100 O après recristallisation à partir d'acétate d'éthyle-hexane. Exemple 2 Par une méthode semblable à celle décrite dans ltexemple 1, 5,0g de 5-pentyl-2-picoline ont été oxydés avec 6,1g de bioxyde de sélénium dans de la pyridine et le produit a été recristallisé à partir d'éther isopropyle pour donner 3,3g d'acide 5-pentylpicolinique fondant à 104-101300. Exemple 3 De l'acide 5-butylpicolinique (150mg) a été dissous dans 3cm3 d'eau à 50 C et la solution chaude a été traitée avec 100mg de chlorure de calcium dans 1 cm3 d'eau et ajustée à pH 6,8 avec une solution aqueuse d'ammoniac à 3% pour déposer 160mg du sel de calcium sous forme de fines aiguilles. Exemple 4 Une solution de 150mg d'acide (5-pentylpicolinique dans 3cm3 d'eau et 0,5 cm3 de méthanol a été traitée avec du chlorure de calcium aqueux à 10% et amenée à pH 6,8 avec de l'eau ammoniaquée diluée pour déposer 17Omg du sel de calcium. Exemple 5 - Comprimés On prépare une granulation de lactose 68 parties amidon 32 parties eau quantité suffisante Cette granulation est séchée et tamisée. 130 g d'acide 5-butylpicolinique 197,5g de granulation de lactose 2,5g de stéarate de magnesium sont bien mélangés ensemble et comprimés en comprimés pesant 250mg et contenant 50mg de l'acide. Exemple 6 - Capsules On prépare un mélange contenant des parts égales en poids d'acide 13-pentylpicolinique et de lactose. Ce mélange est ensuite introduit, 100 mg jar capsule, dans des capsules standard en gélatine transparente, et après fermeture ces capsules sont de préférence saupoudrées de talc ou d'amidon. Les capsules ainsi obtenues contiennent 50mg de l'acide par dose unitaire. Exemple 7 - Suppositoires Une solution est confectionnée en chauffant à environ 40 C: 5g de 5-butylpicolinat de calcium 17g de polyéthylene-glycol (poids moléculaire moyen 600) 33g de polyéthylène-glycol (poids moléculaire moyen 1000) et cette solution est mélangée avec 2,7g de monooléate de sorbitan 2,7g de monooléate de polyoxyéthylène-sorbitan 233,0g d'nuise de copra hydrogénée (fondue) 1,6g d'eau. Ce mélange est versé dans des moules, donnant des suppositoires d'un poids de 3g et contenant 50mg du sel de calcium. Exemple 8 - Elixir Mélange 5mg/cm3. Une solution véhiculeuse est préparée en chauffant 7g de carboxylméthylcellulose sodée 775g de solution de sorbitol (N.F) îg de méthylparabène 3 Après refroidissement à la température du laboratoire on ajoute 25g de parfum de framboise et la solution véhiculeuse est mélangée avec Sg de 5-butylpicolinate de calcium 0,5g de monajéate de polyoxyéthylène-sorbitan et ce mélange est homogénéisé dans un homognéiseur en donnant un élixir contenant 5mg/cm3 du sel de calcium . Une dose unitaire de 15cm3 (1 cuiller de table) contient donc 75mg du sel de calcium. Dans les exemples précédents 5 à 8, il est bien entendu que l'acide 5-butylpicolinique, 1' acide 5-pentylpicolinique, ou leurs sels de calcium peuvent être substitués les uns aux autres comme constituant actif, et que la quantité de constituant actif peut, être variée convenablement dans l'intervalle de kU à 100 mg par dose unitaire. REVENDICAIIuN 1.- Composition thérapeutique hypotensive,caractérisée en ce qu'elle comporte comme agent inhibiteur de la,/? hydroxylase de dopamine, un acide ou un sel d'acide de la famille des acides 5-alcoylpicoliniques ayant pour formule dans laquelle n est 3 ou 4, ledit composé étant présent en quantité d'environ 20 à 100 mg par dose unitaire d'une composition avec un excipient classique. 2.- Composition thérapeutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'acide est l'acide 5-butylpicolinique. 3.- Composition thérapeutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'acide est l'acide 5-pentylpicolinique. 4.- Composition thérapeutique selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'excipient est un excipient administrable par voie buccale. 5.- Composition thérapeutique selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'excipient est un excipient administrable par voie rectale.