Brevet FR2126442A1 — publié le 19721006

Les infections provoquées par les virus à grosse enveloppe d'ADN telles que les infections herpétiques, sont courantes et difficiles à prévenir ou à traiter par manque de médicaments efficaces. Un médicament efficace contre les affections herpétiques pourrait être utilisé pour traiter 5 ou prévenir l'herpès cutané, l'herpès génital, la kératite herpétique, l'encéphalite herpétique et la maladie de Marek des volailles. Le virus de l'herpès est l'agent infectieux unique le plus important provoquant la cécité aux Etats-Unis d'Amérique. Bien que l'herpès cutané soit une maladie courante et bénigne, une lutte plus efficace contre l'herpès cutané diminuerait 10 le nombre de cas de kératite herpétique. Le traitement fondamental actuel de la kératite herpétique utilise 1'idoxuridine et il n'existe pas de médicament spécifique de l'herpès cutané. La maladie de Marek qui est provoquée par un virus de type herpétique appartient au groupe des leucoses aviaires. Ce groupe de maladies 15 est la cause la plus importante des pertes économiques dans l'industrie de la volaille aux Etats-Unis d'Amérique. La présente invention concerne un procédé pour empêcher ou traiter les effets des infections provoquées par des virus à grosse enveloppe d'ADN chez les animaux et en particulier un médicament pour traiter les effets 20 des infections herpétiques des animaux à sang chaud infectés, constitué par l'acide phosphonoacétique et ses sels; la structure de l'acide phosphonoacétique étant la suivante: ho-$-ch2-p(oh)2 25 Ces composés sont actifs contre les virus du groupe de l'herpès et en particulier les virus de types 1 et 2 de l'herpès simplex et le virus de la vaccine. On administre vies composés soit sous forme de l'acide soit sous forme de sels de métaux alcalins* en particulier de ses sels mono-, di- ou trisodiques ou du sel calcique. L'acti-30 vité contre le virus de l'herpès est limitée à l'acide phosphonoacétique et à ses sels. Il est nécessaire que les groupes carboxylique et phosphonique soient présents et réunis par un groupe méthylène non substitué. Les composés comportant un groupe méthylène substitué ou un groupe éthylène ou propylène par exemple, sont inactifs. L'acide phosphonoacétique et ses sels empêchent la réplication des 35 virus de type 1 et 2 de l'herpès simplex et du virus de la vaccine dans les cultures de-.tissu. Le phosphonoacétique disodique est actif contre le virus de la maladie de Marek dans des cultures de tissu à la concentration de 100^ug/ml . 72 06565 2 2126442 On administre de préférence les composés par voie locale mais on peut les administrer par voie orale ou intrapéritonéale. Comme exemples de l'activité in vivo, on peut citer l'action locale de l'acide phosphonoacétique sur la kératite herpétique de lapin infecté et l'action de l'acide phosphonoacétique 5 et de ses sels de sodium et de calcium sur l'herpès cutané par application locale à la souris infectée du virus du type 2 de l'herpès. Le composé disodique augmente de 60 à 100% la survie des souris infectées par l'herpès simplex. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention seront mieux compris à la lecture de la description qui va suivre de plusieurs 10 exemples de réalisation. EXEMPLE^l L'acide phosphonoacétique et son sel disodique sont actifs contre l'herpès cutané lorsqu'on les applique localement à la jouris infectée par voie cutanée du virus de l'herpès du type 2. L'acide est efficace à des 15 concentrations aussi faibles que 0,27=; le sel nécessite une concentration de 2%. L'herpès cutané chez la souris présente l'inconvénient, du fait que le virus est particulièrement neurotrope chez cette espèce, d'évoluer rapidement de l'état de lésion cutanée localisée à une atteinte du système nerveux central provoquant la paralysie et la mort. Il existe une bonne corrélation chez la souris entre 20 le développement de la lésion et la mort si bien qu'un composé qui diminue la mortalité diminue généralement également le nombre et la gravité des lésions cutanées. Par conséquent le critère utilisé pour déterminer l'activité in vivo d'un composé contre l'herpès cutané est la diminution du nombre des morts. Cette activité est mise en évidence lorsqu'on administre le composé par voie intra-25 péritonéale ou orale, mais dans ce -cas les doses doivent être élevées, l'indice thérapeutique est faible et l'efficacité est moindre que pour un traitement local. Les résultats obtenus in vivo sur l'herpès cutané sont les suivants : Composé Voie 30 mg/kg par jour Jours Pourcentage de diminution de la mortalité 35 Acide phosphonoacétkpe locale 0,5% sel disodique locale 27° Acide phosphonoacétique Acide phosphanoa c é t i qu e sel disodique intrapéritonéale orale orale 75 300 800 100 70-100 50 50 90 Les animaux témoins non traités meurent tous. 72 06565 3 2126442 10 EXEMPLE 2 On détermine de la façon suivante l'efficacité du phosphono-acétate disodique contre l'infection par l'herpès simplex chez la souris. On infecte les souris avec le virus de l'herpès simplex du type 2 on les traite comme indiqué avec le sel disodique deux heures après l'infection et chacun des cinq jours suivants. On inocule le virus en épilant le flanc et le dos des souris anesthésiées et en plaçant une goutte (0,05 ml) de virus de l'herpès à la surface de la peau épilée. On pique la peau de la souris avec une aiguille à travers la goutte de virus. On ne traite pas les souris utilisées comme témoins. Concentration Voie Témoins virus 15 2 % locale 20 25 800 mg/kg orale 1000 mg/kg orale 1200 mg/kg orale 1400 mg/kg orale 1600 mg/kg orale Pourcentage de survivants 0 100 100 100 100 100 60 Etats des survivants. 70% sans lésions herpétiques, 30% paralysés avec des bandes herpétiques 80% sans lésions herpétiques, 20% paralysés avec des bandes herpétiques 80% sans lésions herpétiques, 20%. paralysés avec des bandes herpétiques 90% sans lésions herpétiques, 10% paralysés avec des bandes herpétiques 90% sans lésions herpétiques, 10% paralysés avec des bandes herpétiques 90% sans lésions herpétiques, 10% paralysés avec des bandes herpétiques 30 L'examen des résultats montre que le phosphonoacétate disodique est actif lorsqu'on l'administre localement à une concentration de 2% et oralement à une concentration de 800 à 1400 mg/kg. Lorsqu'on l'administre à la dose journalière de 1 600mg/kg pendant 5 jours, le composé est toxique pour la souris et quatre animaux sur 10 meurent. A cette dose une souris de plus est paralysée 35 mais ne présente pas de lésion herpétique. L'état des survivants pendant la durée du traitement est indiqué. On doit noter que la paralysie est due au virus et non au médicament. 72 06565 4 2126442 10 15 20 25 30 35 EXEMPLE 3 On détermine l'activité antivirale contre le virus de la vaccine des composés de l'invention chez la souris. On détermine l'efficacité des composés par leur aptitude à supprimer la formation de lésions caudales selon la technique de Boyle, JJ. et coll. "Evaluation of Antiviral Compounds by Suppression of Tail Lésions in Vaccinia Infected Mice", Antimicrobial Agents and Chemotherapy, pages 536-539 (1966). On inocule des souris de 10 à 12 g par voie intraveineuse à environ 2 cm de la base de la queue avec 0,05 ml de virus de la vaccine non dilué.. On prépare tous les composés dans la gomme adragante et on en administre par voie sous- cutanée 0,5 ml dans la nuque en commençant 3 heures après l'infection et en poursuivant les injections à raison d'une fois par jour pendant 7 jours. Le huitième jour après l'infection, on badigeonne la queue des souris avec du bleu de méthylène à 0,25% et on compte le nombre des lésions. Le composé témoin est la méthisazone . Composé Témoin sain Témoin virus Méthisazone Acide phosphonoacétique EXEMPLE 4 Dose Nombre de lésions mg/kg par souris (N) 0,0,0,0,0,0,0,0,0,0, 14,30,23,20,20,9,10, 13,14,15,12 200 3,2,2,3,0,5,3,2,2,2 100 3,0,1,6,6,7,6,6,4,5 Moyenne de Vïï 4,0 1,4 Pourcentage de diminution 1,9 65 52 Kératite herpétique chez le lapin. Protocole expérimental: On anesthésie des lapins en inoculant par voie intraveineuse 0,6ml par lapin de pentobarbital sodique à 50mg/ml. On met à nu la cornée des deux yeux en utilisant un écouvillon stérile sec. On badigeonne la surface des deux yeux du virus de l'herpès simplex type 1 à 10% en suspension dans du cerveau de souris, correspondant à une DL^q souris. On utilise les yeux gauches des lapins comme témoins non traités et on commence à traiter les yeux droits deux Ijieures après l'infection et on poursuit en réalisant une application toutes les heures pendant trois heures. On poursuit le traitement comme suit: Premier jour après l'infection une fois par heure pendant 8 heures Deuxième jour après l'infection une fois par heure pendant 8 heures Troisième jour après l'infection une fois par heure pendant 4 heures soit au total 24 traitements 72 06565 5 2126442 On applique le médicament sous forme d'une solution à 0,1% d'acide phosphonoacétique. On examine les yeux des lapins pour mettre en évidence les lésions cornéennes du quatrième, jour au dixième jour après l'infection.. On 5 ajoute une goutte de colorant à la fluoresceine sodique dans chaque oeil et on examine dans l'ultraviolet avec une lampe à lumière de Wood. On note comme suit la gravité des lésions cornéennes. Taille de la lésion (mm) Note néant ' 0 1-3 1 4-7 2 8-10 3 oeil totalement infecté 4 15 Résultats Lapin Jour après 1'infection Notation de la kératite herpétique Témoin Traité (oeil gauche) (oeil droit) 1 5 >3 1 7 2 0 2 5 3 7 2 9 1 On peut utiliser les composés de l'invention dans des compositions constituées d'ingrédients actifs et d'excipients. La quantité d'ingrédient actif administrée quotidiennement dépend de nombreux facteurs tels que l'âge et 30 la taille des animaux à sang chaud et la gravité de l'infection. Une dose de 75 à 1 400 mg/kg de poids corporel convient et on peut l'administrer en une ou plusieurs prises quotidiennes ou à des doses plus petites en prises nombreuses. L'administration locale d'une pommade contenant de 0,2 à 10% d'ingrédient actif convient. On peut utiliser les composés dans des compositions classiques bien 35 connues de l'art avec des excipients pharmaceutiques tels que du lactose, de l'amidon, du stéarate de magnésium, du mono- ou distéarate de glycérile, du talc ou similaires. Bien entendu diverses modifications peuvent être apportées par l'homme de l'art aux dispositifs ou procédés qui viennent d'être décrits uniquement à titre d'exemples non limitatifs sans sortir du cadre de l'invention. 72 06565 6 2126442 REVENDICATION. S 1. Nouveaux médicaments utiles notamment pour prévenir ou traiter les infections provoquées par les virus à grosse enveloppe d'ADN, caractérisés en ce qu'ils consistent en l'acide phophonoacétique ou un de ses sels de métal alcalin. 5 2. Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que le sel alcalin est le sel mono-, di- ou trisodique. 3. Compositions thérapeutiques caractérisées en ce qu'elles contiennent comme ingrédient actif au moins un des médicaments selon l'une des revendications 1 ou 2. 10 4. Formes pharmaceutiques d'administration des compositions thérapeutiques selon la revendication 3, caractérisées en ce qu'elles sont constituées par des formes orales présentées comme des comprimés ou des capsules contenant l'ingrédient actif et un excipient, ledit ingrédient étant destiné à être absorbé à une dose journalière comprise entre 75 et 1400 mg/kg 15 de poids corporel. 5. 5. Formes pharmaceutiques d'administration des compositions thérapeutiques selon la revendication 3, caractérisées en ce qu'elles sont constituées par des formes topiques présentées comme des pommades contenant l'ingrédient actif et un excipient, ledit ingrédient étant destiné à être 20 absorbé à une dose journalière comprise entre 75 et 1400 mg/kg de poids corporel. 6. Formes pharmaceutiques d'administration locale des compositions thérapeutiques selon la revendication 3, caractérisées en ce qu'elles sont sous forme de pommades contenant de 0,2 à 10 % d'ingrédient actif.