Brevet FR2121746A1 — publié le 19720825

i 2121746 Cette invention concerne des nouveaux amides de phosphore pentalavent de composés de type pénicilline et de type céphalo-sporine qui contenaient des groupements aminé, et une méthode nouvelle et améliorée pour séparer et/ou récupérer ces composés 5 de type pénicilline et de type céphalosporine à l'aide des phosphoramides. Les nouveaux composés de phosphore pentavalent sont utilisés comme intermédiaires pour préparer les antibiotiques de type pénicilline et de type céphalosporine. 10 Les pénicillines qui contiennent ce que l'on appelle désor mais généralement le noyau penam, soit un cyle thiazolidine avec un p-lactame condensé, oit; été découvertes dans les années 1920. Une découverte plus récente est celle des céphalosporines qui contiennent ce que l'on appelle maintenant le noyau céphem, soit 15 un cycle dihydrothiazine avec un p-lactame condensé. Ces deux catégories d'antibiotiques ont une certaine parenté du point de vue structure, comme on peut le voir d'après les formules développées suivantes : 20 S\^CH3 CH_ (I) COOH 25 Conç>osés de type pénicilline 30 35 40 O tt •—c NH- x3 O N C (II) Ç CH2 O C CH3 c I C OOH Composés de type céphalosporine C dans lesquelles R représente essentiellement un radical organique quelconque tel qu'il est représenté par des centaines d'exemples dans la technique antérieure. Les composés du type de la céphalosporine C-du genre 72 00785 2 2121746 représenté par la formule (il) précédente sont souvent dérivés de la céphalosporine C préparée par fermentation selon la méthode décrite dans le Brevet E.U.A. No. 3.093.638, et que l'on connait désormais comme ayant la formule développée HOOC CH (CH2) 3 C NH i! /s\ o (m) NH. Il 2 /-Œ2-0—C—Œ3 10 O COOH La céphalosporine C est un antibiotique faible mais a une 15 importance plus grande comme source d'acide 7-aminocéphalospora-nique, dont le nom est courammant abrégé en 7-ACA. On prépare le 7-ACA par des procédés de coupure connus et on l'utilise comme intermédiaire dans les procédés de préparation de divers anti- f biotiques de type céphalosporine, par exemple céphalothine, 20 céphaloridine, et céphaloglycine, qui sont beaucoup plus actifs que la céphalosporine C. Etant donné que la céphalosporine C est tout à fait valable dans ces procédés de préparation d'antibiotiques, l'homme de l'art est à la recherche de méthodes plus efficaces pour extraire la 25 céphalosporine C dissoute de sa liqueur de fermentation, après séparation des solides de fermentation, ou de la solution constituant l'éluat de résine contenant la céphalosporine C. On obtient les solutions d'éluat de résine contenant la céphalosporine C en faisant passer la liqueur de fermentation filtrée sur des 30 colonnes de résine qui absorbent la céphalosporine C, et en lavant ensuite les colonnes avec des liquides aqueux qui dissolvent la céphalosporine C. Des méthodes efficaces pour extraire des pourcentages plus élevés de produits riches en céphalosporine C de bouillons 35 de fermentation et des solutions d'éluat de résine sont en cours de développement. Par exemple on connait un procédé de préparation du 7-ACA à partir de céphalosporine C consistant à acyler le groupement aminé dans la chaîne latérale adipamoyle par un groupement alcanoyle en a-halogéné ou c:,ci-dihalogéné, avant de protéger 40 les groupements carboxyle, à traiter par un agent halogénant pour 72 00785 3 2121746 transformer le groupement amide situé en position 7 en un imino-halogénure, à transformer 11imino-halogénure en un imino-éther, et à hydrolyser 1*imino-éther en acide 7-aminocéphalosporanique. Cette méthode améliorée est tout à fait intéressante mais est également une méthode qui destine l'opérateur du procédé à la 5 production d'acide 7-aminocéphalosporanique. Dans la technique de la pénicilline et de la céphalosporine on a besoin d'un autre procédé pour extraire la céphalosporine C et les autres pénicillines et céphalosporines contenant des groupements aminé de solutions impures ou complexes les renfermant, procédé qui per-10 mette de régénérer le composé du type pénicilline ou céphalosporine contenant le groupement aminé. Cette invention concerne un procédé qui consiste à faire réagir à un pH supérieur à environ 7,5 un mélange liquide contenant un composé de type pénicilline ou de type céphalosporine contenant 15 un groupement aminé primaire avec un composé qui est un halogénure de phosphore pentavalent ayant la formule 0 1 rj, p x 20 i2 dans laquelle X est un atome d'halogène, de préférence de chlore ou de brome,et chacun .de et R2 est choisi dans le groupe constitué de radicaux hydrocarbure et -O-hydrocarbure qui ont de 1 à 15 atomes de carbone et ne comportent pas d'insaturation 25 aliphatique, pour former 1*amide de phosphore pentavalent de la pénicilline ou de la céphalosporine contenant un groupement aminé et ensuite, si on le désire, à extraire le composé de type pénicilline ou de type céphalosporine amidé par la cyclohexanone. On peut utiliser les composés de type pénicilline ou cépha-losporine sous forme d'amides de phosphore pentavalent dans la cyclohexanone comme intermédiaires pour régénérer le composé de type pénicilline ou céphalosporine contenant un groupement aminé, libre, à partir de ses solutions impures. Si ceci est ce que l'on choisit, on laisse la solution de 1'amide de phosphore 35 pentavalent dans la cyclohexanone reposer ou bien on la traite à un pH acide ou alcalin par une substance génératrice de sel pour précipiter le se?.. Sinon, on peut transformer la solution d'amide de phosphore pentavalent du composé de type pénicilline 40 ou céphalosporine contenant un groupement aminé,dans la cyclohexanone, 72 00785 4 2121746 en sel de cyclohexylamine de 1'amide de phosphore pentavalent du composé de type pénicilline ou céphalosporine. On peut séparer le sel de cyclohexylamine précipité du filtrat à la cyclohexanone par des méthodes classiques et le mettre ensuite dans 5 un solvant ou un diluant approprié pour le faire encore réagir. Par conséquent on peut par exemple traiter les sels de cyclo hexylamine de l'arnide de phosphore pentavalent d'un acide de pénicilline ou de céphalosporine par le chlorure d'acétyle dans le chlorure de méthylène en présence d'une base pour former l'anhy-10 dride mixte du groupement carboxyle de la pénicilline ou de la céphalosporine, et l'on peut traiter l'anhydride par le penta-chlorure de phosphore pour former 1'imino-chlorure, on peut ajouter un alcanol inférieur pour former 11imino-éther, et on peut ajouter de l'eau pour couper la chaîne latérale pour obtenir 15 le composé respectif à noyau pénicilline ou céphalosporine. Ces composés à noyau sont des intermédiaires intéressants utilisables dans la préparation de substances antibiotiques de type pénicilline et de type céphalosporine telles que ampicilline, céphalothine, céphaloridine, et céphaloglycine. 20 Les nouveaux composés du phosphore pentavalent peuvent être représentés par la formule générale 25 (VI) dans laquelle chacun de et R^ est choisi dans le groupe constitué des radicaux -hydrocarbure et -O-hydrocarbure contenant de 1 à 15 atomes de carbone, lesquels radicaux ne possèdent pas d*insaturation aliphatique, et m est un entier correspondant au nombre de groupements aminé primaire dans le composé de pénicilline ou de céphalosporine mais n'est pas supérieur à trois et est généralement égal à un; la valence libre indiquée pour l'atome de phosphore pentavalent est reliée à l'azote dérivé du groupement araine primaire dans le composé de pénicilline ou de céphalosporine; Y est choisi dans le groupe comportant 35 72 00785 5 2121746 (a) un groupement de phosphore pentavalent de formule O R, P (VII) 1 R2 dans laquelle R^ et R2 ont les mêmes définitions que précédemment, et (b) le reste de la substance de départ de type pénicilline ou céphalosporine, qui pourrait contenir un amide de 10 phosphore pentavalent de n'importe quel groupement aminé libre dans ledit groupement acylamide; R^ est un atome d'hydrogène ou un groupement -OCH^; et R^ est choisi dans le groupe constitué des groupements -CH3 15 ^c: | CH3 (VIII) . c COORj. I 5 H 20 CH, 2 CH2 Rg (IX) C 25 COOR5 30 (X) O où R_ est un atome d'hydrogène, un cation de métal alcalin tel D 35 que sodium ou potassium, un cation ammonium ou aminé solubilisant, une charge négative, ou un groupement ester qui est facilement éliminé par réduction comme par le zinc dans l'acide chlorhydrique ou par des méthodes d'hydrogénation; et Rg est un atome d'hydrogène, un groupement-0-alkyle, -S-alkyle où dans chaque cas 40 le groupement alkyle possède 1 à 4 atomes de carbone. 72 00785 e 2121746 0 M -O-C-alkyle ayant de 1 à 7 atomes de carbone, -(CH_) CH (CH„) où n vaut de 1 à 3 2 m 2 n 5 - amino-pyridine substituée, ou O 10 NH P dans lequel R^ et R2 ont les mCmoa définitions que précédemment. La présente invention englobe également les sels de cyclo-hexylamine des précédents,sauf les lactones de formule X. Comme 15 on le décrit plus complètement ci-après, on a prouvé que les sels de cyclohexylamine des composés précédents sont relativement insolubles dans les solvants non hydroxyliques inertes et en particulier dans la cyclohexanone, ce qui permet une récupération simple et efficace de 1"amide de phosphore pentavalent dans une 20 fraction de cyclohexanone contenant cet amide. On récupère de préférence les composés de cette invention sous la forme de sels de cyclohexylamine étant donné qu'ils constituent un moyen facile de séparer la partie antibiotique sous une forme solide pure. 25 line ou céphalosporine contenant un groupement aminé peut être r.'importe quel composé thiazolidine-|J-lactame condensé (système cyclique de la pénicilline) ou dihydrothiazine-£-lactame condensé (système cyclique de la céphalosporine) qui contient un groupement aminé primaire et qui peut être solubilisé dans l'eau ou 30 dans un autre système solvant approprié pour réagir avec le réactif halogénurate de phosphore pentavalent. Juste avant emploi, le composé de pénicilline ou de céphalosporine peut être sous la forme de l'acide aminé libre, d'un de ses sels solubilisant dans l'eau, d'un sel zwitterionique (sel interne) ou d'un ester 35 de ce composé. On trouve souvent les composés de pénicilline ou de céphalosporine à utiliser dans le procédé de cette invention dissous dans les liqueurs de fermentation aqueuses ou dans leurs solutions complexes dont on souhaite séparer la quantité maximale de substances riches en pénicilline ou en céphalosporine. Il est 40 entendu que dans certains composés utilisés dans cette invention, La matière de départ constituant le composé de type pénicil- 72 00785 7 2121746 © le groupement aminé peut être présent sous forme de groupement-NH3 en tant que partie d'un sel avec une partie chimique correspondante, chargée négativement soit à l'intérieur du composé lui-même, par exemple un groupe (COO®) soit dans une source aniunique apportée 5 de l'extérieur. Les composés de type pénicilline et de type céphalosporine contenant un groupement aminé que l'on préfère utiliser dans le procédé de cette invention peuvent être représentés par la formule générale 10 15 dans laquelle Z est H, , ou f? MOOC CH (CH2) 3 C. nh2 où M est un atome d'hydrogène, un cation de métal alcalin, ou 20 un anhydride (alkyl C^-C^) carbonique d'acide carboxylique I , NH_ ®, ou un atome d'hydrogène lorsqu'il •LU £ «3 existe un groupement aminé dans une autre partie de la molécule, et les composés substitués sur les atomes de carbone du noyau phényle par le chlore, un groupement hydroxy, -NH^, /3-amino- (C^-C^) alkyle, nitro, etc, 30 CH CH O fi HC C CH \ / î S R, v10 5 6£ ou un groupement méthoxy, et R^est le reste du composé de type 35 où R^0 est défini comme précédemment, R3 est un atome d'hydrogène 72 00785 8 2121746 pénicilline ou céphalosporine, choisi dans le groupe comprenant les groupements : (A) \ CH_ XH„ ..COOR, (B) CH, 10 15 \ CH, _R, 20 25 V^' - I COOR-5 où Rçj est un atome d'hydrogène ou un cation de métal alcalin, un cation zinc ou cadmium, un cation ammonium ou aminé solubilisant une charge négative, ou un groupement ester qui est facilement déplacé par le zinc dans un milieu acide ou par des procédés d1hydrogénation; et Rg est un atome d'hydrogène, -X-alkyle où X est l'oxygène ou le soufre, et où le groupement alkyle possède de 1 à 4 atomes de carbone, p - un groupement - OC-alkyle ayant de 1 à 7 atomes de carbone dans la partie alkyle, - un groupement pyridyle, ou une partie du cycle céphalosporine C^ équivalente, - un groupement amino-pyridine substituée, ou -NH,, ou à 30 CH, .CH, I i I ! [ .0 35 De nombreux exemples de composés qui peuvent être utilisés dans le procédé de cette invention sont décrits dans la littérature relative à la technique et aux brevets. Les exemples de composés de type pénicilline qui peuvent être utilisés comprennent l'acide 6-aminopénicillanique, appelé noyau pénicilline, 40 couramment abrégé en 6-APA, et la pénicilline N 72 00785 9 2121746 /acide 2,2-diméthyl-6- (5 ' -aminoadipoylamido) -pénam-3-carboxylique/ qui est produite dans certains procédés de fermentation et l'am-picilline /zwitterion acide 2,2-diméthyl-6-(D-c;-phényl)-pénam- 3-carboxylique/- 5 Les exemples de composés de type céphalosporine contenant des groupements aminé qui peuvent être utilisés dans le procédé de cette invention comprennent l'acide 7-aminocéphalosporanique (7-ACA), l'acide 7-amino-désacétoxycéphalosporanique (7-ADCft), la céphalosporine C, la désacétylcéphalosporine C, la céphalospo-10 rine Cc, les composés de type céphalosporine tels que céphalosporine (pyridine), et d'autres composés de type céphalosporine apparentés décrits dans la littérature relative aux brevets. Parmi les composés qui peuvent également être utilisés dans le procédé de cette invention se trouvent les 15 antibiotiques A16884, A16886I, et A16886II qui sont connus comme ayant les formules développées s. 20 HO OC CH. NH. -(ch2)3- 0 II .c. 0CH- -NH (ix) N C_.CH2_0. -CH, 25 £16884 HOOC CH (CH2 ) 3_ NH, 30 0CH, _C NH. A16886I .n C00H Ç—CH„_ ^ 2 C I COOH (X) o II _0 C_ .NH, 35 O il HOOC CH (CH2) 3. C. NH„ .NH. .N^ C^C_CH O II 0_C- (XI) .NH, COOH A16886II Les exemples d'autres composés de type céphalosporine qui peuvent 40 être extraits de leurs solutions par le procédé de cette 72 00785 10 2121746 invention comprennent la céphaloglycine, la céphalexine, et leurs dérivés substitués tels que ceux indiqués dans les Brevets E.U.A. Nos 3.489.750; 3.489.751; et 3.489.752. Le Brevet E.U.A. No. 3.507.861, délivré le 21 Avril 1970, 5 revendique, entre autre, certains acides 3-méthyl-7-c;-aminoacyl-amido- /V-céphem-4-carboxyliques, par exemple l'acide 7-(D-a-amino- •o phénylacétamido)-3-méthyl- -céphem-4-carboxylique, connu , maintenant sous le nom générique de céphalexine, qui est un antibiotique. 10 Certains acides 7-(c;-aminoacylamido) -3-acétoxyméthyl-/\3- céphem-4-carboxyliques sont connus dans la technique. Les exemples comprennent l'acide 7-(D-ci-aminophénylacétamido) -3-acétoxyméthyl- n /\ -céphem-4-carboxylique, connu maintenant sous le nom générique de céphaloglycine, et l'acide 7-^D-c£-amino-cs-(2,-thiényl) -15 acétamidq7-3-acétoxyméthyl-/\ -céphem-céphalosporanique. Des autres dérivés de 7-aminoacylamido céphalosporine qui sont connus aujourd'hui comprennent l'acide 7-(D-c;-amino-ci-phénylacétamido) -3-méthoxyméthyl-/\ -céphem-4-carboxylique, et les composés apparentés révélés dans le Brevet belge No. 719.710, publié 20 le 2 Février 1969 et l'acide 7-(D-a-amino-oc-phénylacétamido)-3-méthylthiométhyl-/\ -céphem-4-carboxylique, et les composés apparentés révélés dans le Brevet belge No. 734.532 publié le 16 Décembre 1969.De même, les composés de type céphalosporine contenant des groupements aminé dans d'autres parties de la 25 molécule peuvent être séparés de leurs solutions complexes par le procédé de cette invention. On trouve des exemples de composés de type céphalosporine contenant des groupements aminé, connus, dans la littérature technique et les brevets. Quelques citations sont données ici. 30 Le Brevet E.U.A. No. 3.352.858 cite certains composés antibiotiques de 7-os-aminoacylcéphalosporine, tels que l'acide — — 3 7-^D-os-amino-ci-(2'-thiényl) acétamido/-3-méthyl-/\ -céphem-4- carboxylique. Le Brevet E.U.A. No. 3.364.212, délivré le 16 Janvier 1968 35 décrit quelques autres antibiotiques de type acide 7-amino-acyl substitué-céphalosporanique, tels que l'acide 7-(2-amino-octanamido) céphalosporanique, 1'acide 7-(5-carboxylique-2,4-diaminopentanamido) céphalosporanique, et l'acide 7-(1-aminocyclohexane-l-carboxyamido) céphalosporanique. D'autres exemples de céphalosporines contenant 40 des groupements aminé qui peuvent être utilisées comprennent : 72 00785 ii 2121746 (a) les composés de type 3-arainométhyl céphalosporine» tels que l'acide 3-aminométhyl-7-phényl-acétamido-3-céphem-4-carboxylique, et d'autres composés décrits par exemple dans le Brevet E.U.A. No. 3.274.186 délivre le 20 Septem- 5 bre 1966; (b) les acides 7-{aminophényl-acétamid (c) les composés de type acides 7-(2'-//4l'-(aminoalkyl)phényl7 10 acétamido]. -céphalosporanique et désacétoxycéphalospora- nique décrits dans le Brevet E.U.A. No. 3.382.241 publié le 7 Mai 1968; (d) les acides 7-/D-ei-amino-«-(acétamidophényl) acétamido7 céphalosporaniques indiqués par le Brevet E.U.A. 15 No. 3.464.985 délivré le 2 Septembre 1969, et les acides 7-(aminoalkyl) et 7-(4-aminophényl)thioacétamidocéphalospo-raniquea, désacétoxycéphalosporanique, désacétylcéphalospo-ranique et les composés apparentés, par exemple l'acide 7-/ct- (4-aminophénylthio-acétamido7céphalosporanique, 20 révélé dans le Brevet E.U.A. No. 3.422.100 délivré le 14 Janvier 1969. Ces composés de type acide dissous dans les milieux aqueux peuvent en être extraits par le procédé de cette invention. En outre, on peut également préparer des nouveaux amides 25 de phosphore pentavalent d'esters de composés de type pénicilline et céphalosporine contenant des groupements aminé. Par exemple, on peut amider les esters 2,2,2-trichloroéthylique, p-nitro-benzylique de la céphalexine ou du 7-ACA ou de l'acide 7-aminodé-sacétoxycéphalosporanique (7-ADCA) par la méthode de cette inven-30 tion. Les autres esters qui peuvent être transformés en amides de phosphore pentavalent selon cette invention sont les suivants i (a) les esters phénacyliques,phénacyliques substitués, N-phtalimidométhyliques et analogues,du 7-ACA, et les composés apparentés révélés dans le Brevet E.U.A. 35 No. 3.284.451 délivré le 8 Novembre 1966; (b) l'ester t-butylique du 7-ACA révélé dans le Brevet E.U.A. No. 3.262.939 délivré le 26 Juillet 1966, ainsi que les esters correspondants de l'un quelconque des composés de type pénicilline ou céphalosporine ci-dessus. 40 Dans ces cas, on dissout l'ester du composé de type 72 00785 12 2121746 pénicilline ou céphalosporine contenant le groupement aminé dans un solvant organique inerte appropié tel qu'un hydrocarbure halogène, par exemple chlorure de méthylène, dichloroéthy-lène, chloroforme, ou tétrachlorure de carbone, un alcanoate 5 d'alkyle tel que acétated'éthyle, acétate de propyle, un alca-nonitrile tel que acétonitrile, propionitrile, etc, et on le traite par l'halogénurate de phosphore pentavalent du type décrit précédemment. 72 00785 13 2121746 On prépare les nouveaux amides de phosphore pentavalent de la présente invention en faisant réagir le composé de type pénicilline ou céphalosporine correspondant ayant un groupement aminé avec un halogénurate de phosphore pentavalent de formule 5 R 1 X I p .0 k 2 10 dans laquelle R^ et R2 ont les mêmes définitions que précédemment et X est le chlore ou le brome. Les composés représentatifs des phosphorochlorurates qui peuvent être utilisés dans la pratique de l'invention sont le phosphorochlorurate de diëthyle,le phosphoro-chlorurate de diméthyle, le phosphorochlorurate de diphénvle, 15 le phosphorochlorurate de di-isopropyle, le phosphorochlorurate de di-isobutyle, le phosphorochlorurate de dibutyle, ainsi que divers autres composés. On peut utiliser les phosphorobroraurates correspondants. Cependant, on préfère les chlorurates pour des raisons d'économie sur le coût. 20 Les phosphonohalogénurates et les phosphinohalogénurates qui peuvent être utilisés sont représentés par exemple par le fnéthyl) phosphonochlorurate de méthyle, 1' (éthyl)phosphono-chlorurate d'éthyle, le(propyl)phosphonobromurate d'isopropyle, 1*(hexyl)phosphonochlorurate d'hexyle, le (décyl)phosphonobromu-25 rate de dodécyle, le (phényl)phosphonochlorurate de phényle, le (phényléthyl)phosphonochlorurate de phênylêthyle, le (naphtyl)-phosphonochlorurate de naphtyle, le (biphényl)phosphonochlorurate de biphényle, le (cyclohexyl) phosphonochlorurate de cyc.lohexyle, le phosphinochlorurate de diméthyle, le phosphinobromurate de 30 diéthyle, le phosphinochlorurate de diphényle, etc, ainsi que les composés ayant des radicaux organiques mixtes et des substituants non interférents sur les atomes de carbone du cycle phényle tels que substituants méthyle, éthyle, chlore, nitro, trifluoro-méthyle, etc. 35 Lorsqu'on prépare les amides de cette invention, on mélange la pénicilline ou la céphalosporine contenant un groupement aminé avec le chlorurate ou le bromurate de phosphore pentavalent dans des proportions au moins chimiquement équivalentes relativement au nombre de groupements aminé primaires à amider, 40 dans un solvant approprié, à un pH supérieur à environ 7,5, mais 72 00785 14 2121746 qui ne soï.t pas assez élevé pour détruire toute quantité importante de /3-lactame dans la composition de la pénicilline ou de la céphalosporine. Pour cette raison, on maintient le pH au-dessous de 12 environ et de préférence entre environ 8 et 10. On peut 5 obtenir cette gamme de pH et la maintenir en utilisant une solution tampon. Pour amider les acides et les sels des pénicillines ou de céphalosporines contenant des groupements aminé, on utilise de préférence un milieu contenant de l'eau. On peut ajouter à l'eau n'importe quel solvant organique inerte miscible 10 à elle. On préfère les systèmes solvants organiques lorsqu'on utilise les esters des composés de type pénicilline ou céphalosporine contenant des groupements aminé dans le procédé. On peut également utiliser des solvants alcooliques tels que méthanol, cyclohexanol, etc, lorsque la séparation de la phase aqueuse ne 15 constitue pas le but primaire de la pratique de ce procédé, par exemple, lorsqu'on désire faire l'amide de phosphore pentavalent d'une pénicilline ou d'une céphalosporine contenant un groupement aminé, déjà purifiée. Le solvant organique inerte qui peut être utilisé conjoin-20 tement avec, ou bien à la place de l'eau comme milieu de réaction, peut être un nitrile aliphatique tel que l'acétonitrile, etc, une cétone aliphatique, telle que l'acétone ou la méthyl-éthyl cétone, ainsi que divers autres composés. La température de réaction n'est pas cruciale et elle peut varier dans de larges 25 limites. Pour obtenir les résultats les meilleurs, on doit utiliser une température de réaction coirprise dans la gamme de -25°C à 80°C, et de préférence de 0°C à 30°C. Lorsqu'on met en pratique ce procédé pour séparer des antibiotiques de type pénicilline et de type céphalosporine 30 contenant des groupements aminé de mélanges aqueux impurs, on préfère utiliser une substance de départ sous forme d'un sel de métal alcalin ou d'ammonium étant donné que la forme sel est soluble dans l'eau. Cependant, si on le désire, on peut également utiliser l'acide libre. 35 Comme matières de départ ayant un intérêt particulier pour le procédé de cette invention on trouve les composés de type pénicilline et de type céphalosporine contenant des groupements aminé qui sont obtenus par fermentation et qui doivent être séparés des solutions de fermentation aqueuses ou des solutions 40 impures dans lesquelles ils sont dissous ou en suspension. 72 00785 15 2121746 Les exemples de ces composés sont la pénicilline N, la céphalosporine C, et ses analogues la céphalosporine Cc, la céphalosporine C (pyridine), la désacétylcéphalosporine C, les anti- n biotiques A16884, A16886I et A16C86II. Les composés amides de 5 cette invention qui sont des dérivés de substances obtenues par fermentation sont utiles comme intermédiaires pour extraire les substances antibiotiques des milieux de fermentation dans lesquels elles se forment. Cependant, cette invention peut également être appliquée aux procédés destinés à séparer une 10 pénicilline ou une céphalosporine contenant un groupement' aminé de mélanges dans lesquels on peut la trouver. Dans certains cas il peut donc être souhaitable de séparer des esters de pénicilline ou de céphalosporine contenant des groupements aminé des milieux de réaction dans lesquels on les trouve. La formation des amides de 15 ces amino-esters dans le solvant organique approprié selon cette invention peut être utilisée comme une étape du procédé global de fabrication de substances antibiotiques. Cette invention concerne également des nouvelles solutions dans la cyclohexanone des amides de phosphore pentavalent des 20 composés de type pénicilline et céphalosporine contenant des groupements aminé. Ces solutions peuvent être utilisées comme intermédiaires pour séparer des composés valables de leurs mélanges bruts,ou des précurseurs de composés à noyas?: antibiotiques intéressants. Par exemple, on peut les diluer par des substances 25 acides ou basiques telles que l'acide chlorhydrique aqueux à pH 1-2 ou l'hydroxyde de sodium aqueux à pH 8-10, et les traiter par un sel de métal alcalin basique tel que l'acétate de sodium pour reprécipiter ou régénérer le sel de métal alcalin du composé de type pénicilline ou céphalosporine contenant des 30 groupements aminé. Comme autre exemple, on peut traiter la solution dans lâ cyclohexanone de 1"amide de phosphore pentavalent de composés de type 6-acylamidopénicilline ou 7-acylamidocépha-losporine par la cyclohexylamine pour précipiter le sel de cyclohexylamine respectif de l'amide. On peut séparer le sel 35 de cyclohexylamine de l'amide par filtration ou centrifugation ou par d'autres méthodes classiques, le mélanger dans un solvant ou un diluant organique approprié, le traiter par un halogénure d'acyle carboxylique pour former l'anhydride mixte, et le traiter ensuite par le pentachlorure de phosphore en présence d'une base 40 pour former 1'imino-chlorure, puis ensuite le traiter par 72 00785 16 2121746 un alcanol en C-, - C- pour former l1 imino-éther, puis le traiter 1 6 le compose à noyau par l'eau pour couper la chaîne latérale acylée et obtenir/comme produit.on peut séparer les composés à noyau tels que 7-ACA de la céphalosporine C, 7-ADCA de la désacétoxycéphalosporine C, etc, 5 du mélange réactionnel par précipitation par l'acide p-toluène- sulfonique, sous forme de sel de celui-ci. On peut ensuite réacyler ces sels à noyau par des méthodes connues pour préparer divers composés antibiotiques com^us tels que céphalothine, céphaloglycine, céphalexine, etc. Cette réaction de coupure est 10 illustrée par l'équation chimique générale suivante : D HOOC I5 R-, -CH i NH I -P = (CHj). Protection du groupement ester 2) PCI-/base D 3) alcool R-OH 4) H20 20 2 5 par exemple, on effectue de préférence la réaction en faisant réagir l'anhydride de l'amide de phosphore pentavalent ou de son sel de cyclohexylamine avec PCl^ en présence d'une base organique pendant une durée suffisante pour que la réaction soit pratiquement complète, généralement d'un quart d'heure à trois 30 heures. Ensuite, on fait réagir le produit résultant successivement avec un alcanol inférieur (par exemple méthanol, éthanol, etc) et avec de l'eau. Comme base organique, on peut utiliser l'un quelconque de divers composés azotés organiques. Les bases préférées sont les 3 5 aminés secondaires et tertiaires ayant un pK inférieur à 8, cl telles que la pyridine ; la pipéridine ; les trialky lamines comme Ta triéthylamine, la tributylamine, etc ; les dialkylarylamines, comme la diméthylaniline, la diéthylaniline, etc, ainsi qu'un certain nombre d'autres composés bien connus de l'homme de l'art. 40 La durée de réaction avec 1"alcanol et l'eau n'est pas 72 00785 17 2121746 cruciale, et peut varier dans de larges limites. Généralement, on préfère utiliser des températures relativement basses pendant toute la réaction. Pour obtenir les meilleurs résultats, on doit utiliser une température de réaction comprise dans la gamme 5 de -50° à 20°C, et de préférence de -20° à 0°C. On pense que les sels de cyclohexylamine des amides de phosphore pentavalent sont uniques en ce qu'ils forment des précipités cristallins qui se manipulent facilement tandis que les sels des amides de phosphore pentavalent formés avec d'autres 10 aminés primaires, secondaires ou tertiaires diverses sont solubles à différents degrés, ou bien ont tendance à former des huiles et des gommes plutôt que des solides cristallins. Selon le dernier aspect de 11 invention, un composé de type pénicilline ou de type céphalosporine ayant un groupement 15 acylamide contenant un reste aminé, sous la forme de l'acide libre ou de préférence sous la forme d'un sel soluble dans l'eau (par exemple sel de métal alcalin ou d'ammonium tel que décrit précédemment) est récupéré dans un milieu aqueux par réaction du composé de type pénicilline ou de type céphalosporine avec un ou 20 plusieurs des halogénurates de phosphore pentavalent décrits précédemment à un pH supérieur à 7,5, et de préférence dans la gamme de 8 à 10, pour que la pénicilline ou la céphalosporine soit transformée en amide de phosphore pentavalent correspondant. On recouvre la cyclohexanone avec la solution aqueuse 25 résultante ou on la met en contact avec celle-ci par tout autre moyen, et on agite ou l'on mélange autrement l'ensemble et on ajuste à un pH inférieur à 5, de préférence tout en refroidissant à des températures voisines du bain glacé (par exemple environ -10° à environ 5°C) et dans ces conditions l'amide de phosphore 30 pentavalent est extrait dans la cyclohexanone. On a trouvé que dans la pratique de l'invention un volume de cyclohexanone aussi petit que 1/3 pour un volume de solution aqueuse est suffisant pour extraire pratiquement totalement l'amide de phosphore pentavalent de la solution aqueuse. Il est bien 35 entendu que l'on peut utiliser, si on le désire, un volume de cyclohexanone plus grand dans cette extraction bien qu'il en résulte une solution diluée d'amide de phosphore pentavalent. Pour obtenir les meilleurs résultats, on doit utiliser une quantité de cyclohexanone de 0,30 à 10 parties en volume par partie en volume 40 de la solution aqueuse de l'amide de phosphore pentavalent. 72 00785 18 2121746 Si on désire récupérer la substance de départ de type pénicilline ou céphalosporine, on sépare la solution de cyclohexanone contenant l'amide de phosphore pentavalent de la phase aqueuse et on la laisse reposer pendant une heure ou plus à la 5 température ambiante ce q.ii entraîne la précipitation de la substance de départ de type pénicilline ou céphalosporine de la solution. La récupération de la substance de départ de type pénicilline ou céphalosporine peut être facilitée par l'addition d'un sel basique tel qu'un acétate de métal alcalin (par exemple 10 acétate de sodium, acétate de potassium, etc). Sinon, la solution de cyclohexanone contenant l'amide de phosphore pentavalent de la substance de départ de type pénicilline ou céphalosporine peut, après séparation de la phase aqueuse, être traitée par la cyclohexylamine ce qui entraîne la 15 précipitation du sel de cyclohexylamine de l'amide de phosphore pentavalent de la solution, sel que l'on peut séparer de la suspension humide dans la cyclohexanone par des moyens connus. Dans certains cas, après des durées d'agitation prolongées (de l'ordre de 14 à 16 heures) de la suspension du sel d'amide 20 dans la cyclohexanone humide, on a observé que dans le cas des dialkylphosphoramides, l'un des groupements alkyle se trouve remplacé par de l'hydrogène, de sorte que l'on peut dire que le phosphamide résultant est partiellement hydrolyse. Comme il a été indiqué précédemment, lè sel de cyclohexyl-2 5 aminé de l'amide de phosphore pentavalent de la céphalosporine C, ou bien d'autres composés apparentés contenant un groupement 5-aminoadipoyle relié à l'azote aminé situé en position 6 ou 7 de la pénicilline ou de la céphalosporine, respectivement, peut être utilisé pour préparer le 6-APA, le 7-ACA, ou d'autres composés 30 ayant ces noyaux respectifs, ou pour régénérer la substance de départ de type pénicilline ou céphalosporine correspondante sous des formes plus pures. Parmi les composés représentatifs de la présente invention se trouvent les composés suivants : 35 acide 6- |^5 '-carboxy-5 '-/ethoxy- (éthyl) phosphonamido7valéra- mido^ 2,2-diméthyl-pénam-3-carboxylique acide 6-/5'-carboxy-5'-(di-isopropyIphosphoramido)-valéramido7-2,2-diméthyl-pénam-3-carboxylique 72 00785 19 2121746 sel de cyclohexylamine de l'acide 6-/5'-carboxy-5(di-isopropylphosphoramido)vale-ramido7-2,2-diméthyl-pénam-3-carboxylique acide 6- J 4,-carbox"-4'-/Dhénoxy-(phényl)p'hosphonamido7-L. \ ~ ~ - - 5 butyrylamido^ -2 , 'J-diméthyl-pénam-3-carboxylique r sel de cyclohexylamine de l'acide 6- ^6'-carboxv-6 /Benzyloxy-(benzyl)phosphonamidoThexanamido J -2,2-diméthyl-pénam-3-carboxylique acide 7-/5'-carboxy-51-(diphénylphosphoramido)valéramido7-10 3-acétoxyméthyl- /\ 3-céphem-4-carboxylique sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5"-carboxy-51- (diphénylphosphoramido) valéramido7-3-propionoxyméthyl- -cêphem-4-carboxylique acide 7- ^5'-carboxy-51-/phênoxy-(éthy 1)phosphonamido/-15 valêramido ^-3-acétoxyméthyl- -céphem-4-carboxvlique acide 7-/5'-carboxy-5'-(dipropylphosphoramido)valéramido7-3-isobutyryloxyméthy1- A3 -céphem-4-carboxylique acide 7-/5'-carboxy-5'-(diphényIphosphinamido)valéramido7-3-méthyl- A^-céphem-4-carboxy lique 20 acide 7-/51-carboxy-5'-(diéthyIphosphinamido)valéramido7- 3-hydroxyméthyl- -céphem-4-earboxylique acide 7-/5-os- (N-diphényl phoshporamido)-os-phénylacétamido7- 3-acétoxyméthyl- /\3-céphem-4-carboxy lique acide 7-/5'-carboxy-5'-(diphénylphosphoramidoWaléramido7-25 3-acétoxyméthyl- A3 -cêphem-4-carboxylique sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/6'-carboxy-6'-(diéthy1-phosphoramido)-hexanamido7-3-acétoxyméthyl- A -céphem- 4-carboxylique sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-30 (diméthylphosphoramido) -valéramido7-3-méthyl- A3-c =phem-4- carboxylique acide 7-/51 -carboxy-5 ' - (diéthylphosphoramido)'-valéramido7-3-méthyl- /\3-céphem-4-carboxylique acide 7-/4'-carboxy-4'-(diphénylphosphoramido)-butyry1-35 amido/-3-méthyl- A^-céphem-4-carboxylique 72 00785 20 2121746 acide 7-/51-carboxy-5(diphénylphosphoramido)-valéramido/-3-méthyl- A3-céphem-4—carboxy 1 ique acide 7-/51-carboxy-51-(diéthyIphosphoramido)-valéramido/- 3-hydroxyméthy1- A3 -céphem-4-carboxylique 5 sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/51-carboxy-5'-(diéthy1- phosphoramido)-valéramido7-3-hydroxyméthyl- A3 -céphem- 4-carboxy1ique sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diéthyl-phosphoramido)—valéramido7-3-méthyl- A3-céphem-4-carboxy-ÎO lique 7-/5 *-carboxy-5r-(diphénylphosphoramido)-valéramido7-céphalosporine Cc sel de cyclohexylaminde de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diéthy1-phosphoramido)valéramido/-7-méthoxy-3-acétoxyméthyl- A3-15 céphem-4-carboxylique sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5*-carboxy-5'-(diphénylphosphoramido) valéramido/-7-méthoxy-3-acétoxyméthyl- A3-céphem-4-carboxylique acide 7-/5'-carboxy-5'-(diphénylphosphoramido)valéramido7-20 7-méthoxy-A3-carbamyloxyméthyl- A3-céphem-4-carboxylique acide 7-/5'-carboxy-5'-(dipropylphosphoramido)valéramido7-7-méthoxy-3-carbamyloxyméthyl- A3-céphem-4-carboxylique sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diéthy1-phosphoramido)-valéramido7-3-carbamyloxyméthyl~ /\3-céphem-2 5 4-carboxylique = acide 7-/5'-carboxy-51-(diphénylphosphoramido)valéramido7-3-carbamyloxyméthy1- A3-céphem-4-carboxy1ique acide 6-/D-cs- (N-diéthoxyphosphoramido) -oi-phénylacétamido/-2,2-diméthyl-pénam-3-carboxylique 30 acide 7-(phénoxyacétamido)-3-(N-diméthylphosphoramido- aminomêthyl)- A 3-céphem-4-carboxylique Ayant exposé les idées de base de l'invention, on se reporte désormais aux exemples suivants qui sont donnés à titre illustratif, mais aucunement à titre limitatif, de la pratique de l'invention. 72 00785 21 2121746 EXEMPLE 1 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 1-/5'-carboxy-5'-(diphénylphosphoramido)valérami da7-3-acétoxy- céphem-4— carboxylique 5 On agite le sel monosodique de la céphalosporine C (68 g titrant à présent 84 pour cent) dans une solution de 1800 ml d'eau et de 450 ml d'acétonitrile à une température comprise dans la gamme de 13-16°C. On ajuste le pH de la solution à environ 9 en ajoutant 15 ml de tampon de borate de sodium ayant la composition 10 suivante t Borate de sodium 210 g Hydroxyde de sodium 63 g Eau 900 ml Ensuite, on ajoute au mélange de réaction du phosphorochloru-15 rate de diphényle (91 g, 3375 mM), et l'on agite vigoureusement la solution résultante tout en maintenant le pH dans la gamme de 8,6 à 8,8 en ajoutant tout d'abord 55 ml de la solution tampon de borate de sodium puis environ 90 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium à 25 pour cent. On règle la température de réaction 20 à 13-16°C pendant toute la durée de réaction ou pendant environ 40 minutes. Ensuite on ajuste le pH de la solution résultante à environ 6,8 en ajoutant de l'acide chlorhydrique concentré. On refroidit alors le mélange de réaction en l'agitant dans un bain glacé 25 et on ajoute au mélange résultant 600 ml de cyclohexanone. On abaisse le pH à environ 2 en ajoutant de l'acide chlorhydrique concentré tout en maintenant la température au-dessous de 5°C. Ensuite on maintient le mélange de réaction total dans un réfrigérateur pendant environ 20 minutes au bout desquelles on sépare 30 la couche organique supérieure de la couche aqueuse. On agite l'extrait contenant la cyclohexanone tout en ajoutant 44,5 g (450 mmoles, 3 équivalents molaires) de cyclohexylamine. Lorsque deux tiers environ de la cyclohexylamine ont été ajoutés au mélange de réaction, ce dernier devient trouble par suite de -35 l'addition de 1'aminé. On ajoute des germes cristallins d'un sel de cyclohexylamine du diphénylphosphoramide de la céphalosporine C provenant d'essais antérieurs faits à plus petite échelle, on finit d'ajouter la cyclohexylamine, et on laisse reposer le mélange résultant dans un bain glacé. 40 on abandonne alors le mélange réactionnel pendant une nuit 72 00785 22 2121746 dans un réfrigérateur et on sépare le sel du mélange réactionnel par centrifugation. On identifie le produit comme étant le sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diphénylphosphoramido) valéramido7-3-acétoxy- ^-céphem-4-carboxylique. 5 EXEMPLE 2 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-5'- ( diéthylphosphoramido ) valéramidoy'-3-acataxy- 12 *-céphem-4- carboxylique On dissout 22,7 g de sel monosodique de céphalosporine C dans 10 600 ml d'eau à une température de 13-16°C et l'on ajuste le pli de la solution à environ 8,8 à l'aide de 7 ml du tampon de borate de sodium décrit dans l'Exemple 1. On ajoute goutte à goutte 19,5 g de phosphorochlorurate de diéthyle en agitant tout en réglant la température du mélange de réaction à une 15 valeur comprise dans la gamme de 13-16°C et l'on règle le pH à 8,6-8,8. On ajoute encore un peu de tampon de borate de sodium (2o ml) et ensuite 30 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium à 25 pour cent pour maintenir le pH dans la gamme désirée. Ensuite, on ajuste le pH du mélange résultant à 6,5 en 20 ajoutant de l'acide chlorhydrique concentré (2 ml) et l'on refroidit l'ensemble du mélange de réaction dans un bain de glace tout en agitant. On ajoute 150 ml de cyclohexanone au mélange de réaction en même temps que l'on ajoute de l'acide chlorhydrique concentré pour abaisser le pH à environ 2. On 25 règle la température de réaction à environ -10°C à 5°C. Ensuite, on ajoute 2 ml de cyclohexylamine à l'extrait dans la cyclohexanone que l'on agite tout en refroidissant. On met le mélange dans un réfrigérateur pendant 2 heures après lesquelles on triture .l'huile résiduelle, après élimination de 30 la cyclohex&none, avec de l'acétone et on la sépare par filtration. On identifie le produit comme étant le sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diéthylphosphoramido)-valéramido7-3-acêtoxy- /\3-céphem-4-carboxylique. Si on laisse le mélange humide dans la cyclohexanone contenant le sel de 35 cyclohexylamine sous agitation à la température ambiante pendant 14-16 heures, le produit obtenu est le sel de cyclohexylamine du composé monoéthylphosphoramido. EXEMPLE 3 Préparation de l'acide 7-/5'-carboxv-5'-phénoxy(phényl)phosphofta-40 mido) valéramidci7-3-acétoxy-méthyl-Z-^^-céphem-3-carboxylique 72 00785 23 2121746 En utilisant le mode opératoire décrit dans les Exemples 1 et 2, on fait réagir le sel mcnosodique de la céphalosporine C avec le phénoxy(phényl)phosphonochlorurate à une température comprise dans la gamme de 13-16°C à un pH d'environ 8,7 en utilisant la 5 solution tampon de borate de sodium décrite dans l'Exemple 1. Lorsque la réaction est achevée (juste en quelques minutes) juste avant l'acidification, on refroidit le mélange à une température de -lo°C à lO°c, et on ajuste le pH du mélange de réaction résultant à environ 2 en ajoutant de l'acide chlorhydri-10 que concentré et on ajoute de la cyclohexanone au mélange de réaction. On sépare de la phase aqueuse la phase organique contenant le phosphonamide dissous dans la cyclohexanone, et on sépare le phosphonamide de la cyclohexanone. On identifie le produit 15 coitsne étant l'acide 7- -£/5'-carboxy-5'-phénoxy (phényl)phosphonamidgT-valéramido J -3-acétoxyfhéthyl- Z^-céphem-4-carboxylique. EXEMPLE 4 Préparation de l'acide 6-/5'-carboxy-5'-(diéthylphosphoramido)-valéramidq7-2,2-diméthyl-pénam-3-carbbxylique 20 En utilisant le mode opératoire de l'Exemple 3, on fait réagir le sel sodique de la pénicilline N avec le phosphorochloruw rate de diéthyle en solution aqueuse à un pH d'environ 8,7 en utilisant la solution tampon de borate de sodium décrite dans l'Exemple 1. 25 Lorsque la réaction est achevée, on refroidit le mélange à 0°C-5°C et l'on ajuste le pH à environ 2, et l'on ajoute de la cyclohexanone au mélange de réaction. On sépare ensuite la phase organique de la phase aqueuse, et on identifie le produit comme étant l'acide 6-/51-carboxy-5'-(diéthyIphospho-30 ramido) valéramido_7-2,2-diméthyl-pénam-3-carboxy3 ique. EXEMPLE 5 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 6-/5'-carboxy-5'-phénoxy(phényl)phosphonamidovaléramidg/—2,2-diméthyl-pénam-3-carboxylique 35 En utilisant les modes opératoires des Exemples 1 et 2, on fait réagir le sel monosodique de la pénicilline N avec le phénylphosphonochlorurate de phényle à une température comprise dans la gamme de 13-16°C et à un pH d'environ 9. Lorsque la réaction est achevée, on refroidit le mélange comme il est 40 décrit dans l'Exemple 4, et on ajuste le mélange de réaction avec 72 00785 24 2121746 de l'acide chlorhydrique concentré et on y ajoute de la cyclohexanone. Après avoir séparé la phase organique contenant les dérivés phosphonamido dans la cyclohexanone, on ajoute de la cyclohexylamine à l'extrait fait à la cyclohexanone. Il se 5 sépare un produit cristallin de l'extrait à la cyclohexanone et on l'identifie comme étant le sel de cyclohexylamine de 1'acide 6-/51-carboxy-5'-phénoxy(phényl)phosphonamido-valér amidq7-2,2-diméthyl-pénam-3-carboxylique. EXEMPLE 6 10 Préparation de l'acide 7-.15'-carboxy-5'-(dipropylphosphoramido)-valéramido7-3-méthvl- 3-céphem-4-carboxyliq ue En utilisant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 3, on fait réagir le sel monosodique de la désacétylcéphalosporine C avec le phosphorochlorurate de dipropyle à une température 15 d'environ 15°C et un pE d'environ 8,6 à 8,8. Lorsque la réaction est achevée, on refroidit le mélange comme dans l'Exemple 4, et on ajuste le pH du mélange de réaction résultant à environ 3 en ajoutant de l'acide chlorhydriqve concentré, et on ajoute de la cyclohexanone. La phase organique se sépare alors de la 20 phase aqueuse et on identifie le produit comme étant l'acide 1-/5'-carboxy-5'-dipropylphosphoramido)-valéramido/-3-méthyl- /\3-céphem-4-carboxylique _ EXEMPLE 7 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 1--/5'-carboxy-5 25 (diméthvlphosphoramido)valéramidg7-3-méthyl- 3-céphem-4-c arboxyl iq ue En utilisant le mode opératoire décrit dans les Exemples 1 et 2, on fait réagir la désacétylcéphalosporine c avec le phosphorochlorurate de diméthyle pour former le dérivé phosphoramido 30 correspondant, que l'on extrait ensuite par la cyclohexanone après refroidissement. On sépare ensuite le dérivé phosphoramide de la cyclohexanone en ajoutant de la cyclohexylamine, et on récupère le produit par filtration. On identifie le produit comme étant le sel de cyclohexylamine de l'acide 7-^5'-carboxy-5'-35 (diméthylphosphoramido)valéramidq7-3-méthyl- /\3-céphem-4-carboxy-lique. EXEMPLE 8 Préparation de 1* acide 7-Z51-carboxy-51-(diphénylphosphoramido)- ^ o valeramidQ7-3-hydroxyméthyl- -céphem-4-carboxylique 40 En utilisant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 3, on 72 00785 25 2121746 fait réagir le sel monosodique de la désacétylcéphalosporine C avec le phosphorochlorurate de diphényle à un pH d'environ 8,7. Lorsque la réaction est achevée, on refroidit le mélange à une température de -10°C à 5°C, et l'on ajuste le pH du mélange 5 réactionnel à 2. Ensuite, on ajoute la cyclohexanone au mélange réactionnel et on sépare la phase organique résultante de la phase aqueuse. On identifie le produit comme étant l'acide 7- EXEMPLE 9 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 7-^5'-carboxv-5'-( diéthy Iphosphinamido) valér amido.7-3-hydro xyméthyl- £» -céphem-4-c arboxy1ique 15 En utilisant le mode opératoire décrit dans les Exemplesl et 2, on fait réagir la désacétylcéphalosporine C avec le phosphinochlorurate de diéthyle pour former le dérivé phosphoramide correspondant. On refroidit le mélange comme dans l'exemple 7, et ensuite on extrait le dérivé phosphoramide par la cyclohexanone, 20 et on ajoute de la cyclohexylamine à la solution de cyclohexanone contenant le phosphoramide pour précipiter le phosphoramide sous la forme de son sel de cyclohexylamine. On identifie le produit comme étant le sel de cyclohexylamine de l'acide 1-/5'-carboxy-5'-(diéthylphosphinamido) valéramidq/^-S-hydroxymêthyl- -céphem-4-25 carboxylique. 72 00785 26 2121746 EXEMPLE IQ Préparation de l'acide 7-/5'carboxy-5'-(diphénylphosphoramido) valéramido7-3-propionoxyméthvl-A3 -céphem-4-carboxyliqae En utilisant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 3, 5 on fait réagir le sel monosodique de l'acide 7-^5'-carboxy-5'-(aminovaléramido)-3-propionoxyméthyl- A3 -céphem-4-carboxylique avec un phosphorochlorurate de diphényle dans un solvant inerte pour obtenir le dérivé phosphoramide correspondant. On refroidit le mélange à une température de -10° à 5°C, et on extrait ensuite 10 le dérivé phosphoramide par la cyclohexanone, et on identifie le produit comme étant l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diphénylphosphoramido) valéramido7~3-propionoxyméthyl- A3-céphem-4-carboxylique. EXEMPLE 11 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxv-5'-15 (dibenzvlphosphoramido)valéramido7-3-isobutvrvloxyroéthvl-A3-céphém-4-carboxylique En utilisant le mode opératoire décrit dans les Exemples 1 et 2, on fait réagir le sel de sodium de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(aminovaléramido) -3-isobutyryloxyméthyl-A3-céphem-4-carboxylique avec 20 le phosphorochlorurate de dibenzyle à une température d'environ 15°C et un pH d'environ 8,9. On refroidit ensuite le mélange réactionnel, on l'acidifie, et on ajoute ensuite de la cyclohexanone pour extraire le dérivé phosphoramide de la solution aqueuse. Après avoir éliminé la phase aqueuse, on traite la phase 25 à la cyclohexanone résultante par la cyclohexylamine ce qui entraîne la précipitation du produit du mélange de réaction, et on identifie ce produit comme étant le sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(dibenzylphosphoramido)valéramido7-3-isobutyryloxyméthyl- A3 -céphem-4-carboxylique. 30 EXEMPLE 12 Préparation de 1'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diéthylphosphoramido)valé-ramido7-7-méthoxy-3-a cétoxvméthyl-A3 -céphem-4-carboxylique En utilisant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 3, on fait réagir le sel de sodium de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(ami-35 novaléramido)/-7-méthoxy-3-scétoxvméthyl~/\ -céphem-4-carboxylique avec le phosphorochlorurate de diéthyle. On refroidit ensuite le produit résultant, on l'acidifie et l'extrait par la cyclohexanone et l'on identifie le produit comme étant l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(diéthylphosphoramido)valéramidg7-7-méthoxy-3-acétoxy-40 méthyl- /\3 -céphem-4-carboxylique. 72 00785 27 2121746 EXEMPLE 13 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-51 -( diphénylphosphoramido ) valéramido7-7 -méthoxy-3 -a cétoxyméthyl-A3-céphem-4-carboxylique 5 En utilisant le mode opératoire décrit dans les Exemples 1 et 2, on fait réagir le sel de sodium de l'acide 7-/51-carboxy-5'-(aminovaléramido) -7-méthoxy-3-acétoxyméthy1-A3-céphem-4-carboxylique avec le phosphorochlorurate de diphényle pour former le dérivé phosphoramide correspondant. On refroidit le mélange comme ci-10 dessus et ensuite on l'extrait du mélange de réaction aqueux par la cyclohexanone en l'acidifiant. On sépare le dérivé phosphoramide de la solution de cyclohexanone en ajoutant de la cyclohexylamine, et on le récupère sous la forme du sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-51 -(diphénylphosphorami-15 do)valéramido7~7-méthoxy-3-acétoxyméthyl-ZA3-céphem-4-carboxylique. EXEMPLE 14 Préparation de l'acide 7-/5'-carboxy-5*-phénoxy(phényl)phospho-namido-valéramido/-7-méthoxy-3-carbamyloxvméthvl-£r-céphem-4-carfegly^ En utilisant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 3, 20 on fait réagir le sel de sodium de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-amino-valéraraido7~7 -méthoxy-3 -carbamyloxyméthyl-A3 -céphem-4-carboxyli-que avec le phényl phosphonochlorurate de phényle pour former le dérivé phosphonamide correspondant que l'on sépare du mélange de réaction aqueux par extraction par la cyclohexanone après 25 refroidissement et acidification du mélange à un pH inférieur à 5. On identifie le produit comme étant l'acide 7-/5'-carboxy-51 -phénoxy(phényl)phosphonamido-valéramido7-7-raéthoxy-3-carbamyloxy-méthyl-céphem-4-carboxylique. EXEMPLE 15 30 Préparation du sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carbexy-5'-(diéthylphosphoramido)-valéramido7-3-carbamyloxyméthyl-céphem-4-carboxylique En utilisant le mode opératoire décrit dans les Exemples 1 et 2 on fait réagir le sel de sodium de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-35 (aminovaléramido)_7-3-carbamyloxyméthyl-/\>3-céphem-4-carboxylique en milieu aqueux avec le phosphorochlorurate de diéthyle pour former les dérivés phosphoramides correspondants. On extrait ensuite les phosphoramides du mélange de réaction aqueux par la cyclohexanone après refroidissement et après avoir ajusté 40 le pH au-dessous de 5 et on récupère le dérivé phosphoramide 72 00785 28 2121746 de la cyclohexanone en ajoutant de la cyclohexylamine. On identifie le produit comme étant le sel de cyclohexylamine de l'acide 7-/5'-carboxy-51-(diéthylphosphoramido)valéramido)-3-carbamyloxyméthyl- A3 -céphem-4-carboxylique 5 EXEMPLE 16 Séparation de la céphalosporine C On dissout le sel de sodium de la céphalosporine C (22,6 g) ayant un titre biologique de 84,2 pour cent dans un mélange contenant 600 ml d'eau et 200 ml d'acétonitrile. Ensuite on 10 refroidit la solution à une température d'environ 15°C et on ajuste le pH à environ 9 en ajoutant de la solution tampon de borate de sodium décrite dans l'Exemple 1. Ensuite on ajoute, en l'espace de 15 minutes, 23,89 g (88,6 mM)de phosphorochlorurate de diphényle tout en maintenant le pH à environ 9. On main-15 tient le mélange de réaction à un pH d'environ 9 pendant 1 heure. Ensuite, on neutralise le mélange de réaction à un pH d'environ 6,5 avec une solution de H^SO^ à 30 pour cent et on élimine 1'acétonitrile sous pression réduite. On ajoute 200 ml de cyclohexanone et on refroidit le mélange 20 à 5°C et on l'acidifie à un pH de 2,0 en ajoutant encore une solution de à 30 pour cent. On sépare la phase organique de la phase aqueuse et on la désigne sous le nom de Solution "A". Ensuite, on extrait de " nouveau la phase aqueuse restante avec 100 ml de cyclohexanone, 25 et on sépare la phase organique que l'on désigne sous le nom de Solution "B;l. On maintient alors séparément les solutions "A" et "B" à une température de 40°C pendant 4 jours après y avoir ajouté 34 ml d'une solution méthanolinue saturée d'acétate de sodium. 30 Dens chaque solution, on a obtenu lanternent un précipité et on l'a séparé en l'extrayant puis en le lavant par le méthanol et 1'isopropanol. La solution "A" donne 9,32 g d'un produit que l'on identifie comme étant le sel de sodium de la céphalosporine C et la solution"B 35 donne 2,25 g d'un produit que l'on identifie comme étant le sël de sodium de la céphalosporine C. EXEMPLE 17 Séparation de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(aminovaléramido)7-7-méthoxy-3 -a cet oxyméthvl-/V'-néphem-4 -carboxylique 40 On dissout un échantillon de 5 g d'acide 7-/51-carboxy-5'- 72 00785 29 2121746 (aminovaléramido)y-7-méthoxy-3-acétoxyméthyl-A3 -céphem-4-carboxylique ayant un titre biologique de 1750 ,u/mg dans 50 ml d'un mélange d'acétonitrile et d'eau dans un rapport de 1-3. Ensuite, on accroît le pH de la solution 5 résultante de 7,1 à 9,0 en ajoutant la solution tampon de borate de sodium décrite dans l'Exemple 1. Ensuite, on refroidit la solution à une température de 20°C et on ajoute 4,3 g (2,5m) de phosphorochlorurate de diphényle au mélange de réaction que l'on agite alors pendant 60 minutes tout en maintenant la tempé-10 rature à 15-20°C, et le pH est d'environ 9. Ensuite, on ajuste le pH de la solution à 1,8 en ajoutant HC1 5 N, et on extrait alors celle-ci par 23 ml de cyclohexanone. On sépare l'extrait à la cyclohexanone de la phase aqueuse et on le maintient pendant 5 heures à 30°C puis on ajoute 2 volu-15 mes d'une solution saturée d'acétate de sodium dans le méthanol à l'extrait de la cyclohexanone et on maintient le mélange résultant à une température de 4°C pendant une nuit. Il se forme ensuite un précipité que l'on sépare et que l'on identifie comme étant le 7-/5*-carboxy-5'-(aminovaléramidojy'-20 7-méthoxy-3-a cét oxyméthyl-A?-céphem-4-carboxy la te de sodium ayant un titre biologique d'environ 2900 p/mg. EXEMPLE 18 Séparation de l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(aminovaléramido)7-7-méthoxy-3-carbamvloxyméthvl- -céphem-4-carboxylique 25 En utilisant le mode opératoire des Exemples 16 et 17, on fait réagir un échantillon d'acide 7-/5'-carboxy-5'-(aminova-léramido^7-7-méthoxy-3-carbamyloxyméthyl-Z\3-céphem-4-carboxy-lique avec le phéiiylphosphoi*ochlorurate de phényle pour obtenir le dérivé phosphonamide correspondant que l'on extrait ensuite 30 du milieu de réaction aqueux dans la cyclohexanone après refroidissement à une température de -10°C à 5°C, et on acidifie le mélange à un pH d'environ 2. Ensuite on traite l'extrait à la cyclohexanone par une solution saturée d'acétate de sodium dans le méthanol, et on identifie 35 le précipité obtenu comme étant l'acide 7-/5'-carboxy-5'-(amino-valéramido)7-7-méthoxy-3-carbamyloxyméthyl-A?-céphem-4-carboxy-lique. Le titre biologique indique que la pureté du produit est comparable au cas de l'Exemple 17. 72 00785 30 2121746 EXEMPLE 19 Préparation de l'acide 7-amino-céphalosporanique On met un échantillon (12,7g) de sel extrait dans la cyclohexanone, sel de sodium de l'acide 7-/51-carboxy-5'-(diéthylphosphoramido) 5 valéramido7~3-acétoxyméthy1-A?-céphem-4-carboxylique, dans un mélange de réaction contenant 50 ml de chlorure de méthylène, 14,5 ml de diéthyl-aniline et 10,6 ml de chlorure d'acétyle. Ensuite on refroidit le mélange résultant à environ -15°C et on l'agite pendant 1 heure. Ensuite, on ajoute encore 14,5 g de 10 diéthyl-aniline. Ensuite, on ajoute une solution contenant 100 ml de chlorure de méthylène et 12,0 g de pentachlorure de phosphore au mélange et on refroidit le mélange résultant à -15°C pendant 90 minutes. Ensuite, on agite 50 ml de méthanol et le mélange de réaction résultant à une température inférieure 15 à -15°C pendant 60 minutes. Puis on ajoute 100 ml d'eau et on agite le mélange de réaction pendant 15 minutes dans un bain glacé. On sépare la phase aqueuse de la phase organique, et on ajuste le pH de la phase aqueuse à 0,4-3,6 avec 14 ml d'hydro-xyde d'ammonium concentré. On agite la solution pendant 30 minutes, 20 on la filtre et on la lave avec 20 ml d'une solution à 50 pour cent de méthanol dans l'eau, puis avec 20 ml d'acétone. Ensuite on filtre le produit, on le sèche, et on l'identifie comme étant l'acide 7-aminocéphalosporanique, désigné couramment par l'abréviation 7-ACA. 25 EXEMPLE 20 Préparation de l'acide 6-amino-pénicillanique En utilisant le mode opératoire décrit dans l'Exemple 19, on fait réagir le sel de cyclohexylamine de l'acide 6-/5'-carbo::y-5'-(diéthylphosphoramido)valéramido7-2,2-diméthyl-pénam-3-carboxy-30 lique préparé selon la méthode de cette invention, successivement avec PClg, du méthanol, et ensuite de l'eau. Après avoir séparé le produit, on l'identifie en mettant l'acide 6-aminopénicillanique, couramment désigné par l'abréviation 6-APA. EXEMPLE 21 35 Préparation de l'acide 7-amino-3-carbamvloxvméthyl-Z\3-céphem-4-carboxylique On fait réagir un échantillon de sel de cyclohexylamine de 1 'acide 7-/5 ' -carbo3«Y-5 ' -isopropoxy (isopropyl) phosphonamido-valéramido/-3-carbanyloxyaéthyl- Z\3-céphem-4-carboxylique avec 40 PClg# du méthanol et de l'eau selon le mode opératoire de 72 00785 31 2121746 de l'Exemple 19. On sépare le produit de la manière décrite dans l'Exemple 19 et on 1'identifie comme étant l'acide 7-amino-3-car-bamyloxyméthyl-A3 -céphem-4-carboxylique. Les halogénurates de phosphore pëntavalent ont ici un nom 5 provenant de ce qu ' ils dérivent de l'acide phosphorique, de l'acide phosphonique, ou de l'acide phosphinique. Dans les cas où deux radicaux organiques sont reliés au phosphore pentavalent par un oxygène, l'halogénate est appelé un phosphorohalogénate. Dans ces composés, en indique la présence d'oxygène en désignant 10 le composé comme étant un phosphoro-halogénate du radical organique. Ainsi le nom de phosphorochlorurate de diméthyle représente le composé O 15 CH30 P Cl och3 Toutefois, l'amide de phosphore pentavalent correspondant préparé selon cette invention serait désigné, par raison de commodité, 20 sous le nom de composé "diméthylphosphoramido". De même, un phosphonohalogénurate utilisé dans cette invention a un radical organique relié à l'atome de phosphore par l'intermédiaire d'un atome d'oxygène, et un radical organique relié directement à l'atome de phosphore par une liaison carbone-phosphore. Un 25 exemple est représenté par le phénylphosphonobromurate de phényle de formule développée O K C h_0 P Br 6 5 j 30 C6H5 L'amide de phosphore pentavalent correspondant obtenu à partir de celui-ci est appelé ici composé "phénoxy (phéiyl)phosphonarûido" De même, un réactif phosphinohalogénurate est un réactif ayant 35 deux radicaux organiques reliés directement à l'atome de phosphore pentavalent par des liaisons carbone-phosphore. 72 00785 32 2121746 Un exemple est le phosphinochlorurate de dicyclohexyle. O C6H11 -P C1 C6H11 L'amide de phosphore pentavalent correspondant est désigné ici sous le nom de composé "dicyclohexyIphosphinamido". Si on le désire 10 on pourrait également utiliser les halogénurites de phosphore trivalent correspondants qui sont oxydés dans le mélange de réaction à l'état de phosphore pentavalent. Il est bien entendu que l'on peut apporter diverses variantes et modifications dans les détails de formulation, de procédé et 15 d'utilisation sans s'écarter de l'esprit de l'invention, en particulier tel qu'il est défini dans les revendications annexées. 72 00785 33 2121746 REVENDICATIONS 1. Dérivé amide de phosphore pentavalent d'un composé de type pénicilline ou céphalosporine, qui contenait un groupement aminé primaire, ayant la formule générale 5 r~ 10 dans laquelle chacun de R^ et R2 est choisi dans le groupe comprenant les radicaux -hydrocarbure et -O-hydrocarbure 15 contenant de 1 à 15 atomes de carbone, radicaux qui ne comportent pas d'insaturation aliphatique; m est un entier correspondant au nombre de groupements aminé primaires dans le composé de type pénicilline ou céphalosporine; la valence libre de l'atome de phosphore pentavalent indiquée 20 est reliée à l'atome d'azote provenant du groupement aminé primaire située dans le composé de pénicilline ou céphalosporine; Y est choisi dans le groupe comportant (a) un groupement à phosphore pentavalent de formule 25 R-i R„ ont les mêmes définitions que précédemment, 30 dans laquelle R^ et R^ et (b) le reste d'un groupement acylamide de la substance de départ de type pénicilline ou céphalosporine, qui pourrait renfermer un amide de phosphore pentavalent de tout groupement 35 aminé libre dans ledit groupement acylamide; r3 est un atome d'hydrogène ou un groupement -0CH3; r^ est choisi dans le groupe constitué des groupements de formule 72 00785 34 2121746 :h„ \ \ CHn C — COORr H 10 ' 15 / COORr CH dans lesquelles R_ est un atome d'hydrogène, un cation de métal 3 alcalin, un cation ammonium ou aminé solubilisant, une charge 20 négative, ou un groupement ester qui est facilement éliminé par réduction par le zinc en milieu acide ou par des méthodes d'hydrogénation; et R est un atome d'hydrogène, un groupement -X-alkyle où X O est un atome d'oxygène ou de soufre et le groupement alkyle 25 comporte de 1 à 4 atomes de carbone, O If un groupement -o-C-alkyle ayant de 1 à 7 atomes de carbone 30 35 un groupement -(C^)^—^ CH 40 (CBq) où n vaut ^ n de 1 à 3, un groupement pyridyie, un groupement amino-pyridine substituée, O il un groupement -NH P R^ où R^ et ont les mêmes R_ 72 00785 35 2121746 définitions que précédemment, sels de cyclohexylamine de ces composés, et composés définis précédemment dans lesquels R^ est un groupement c CH2 10 C — o o 2. Composé tel qu'il est défini dans la revendication 1, dans lequel Y est le reste d'un groupement acylamide de formule 15 î HOOC — CH (CRj ) C N i i R p — O 20 | R„ 3. Composé tel qu'il est défini dans la revendication 2, dans lequel R^ est un groupement 25 O !l \ ✓ C C CH2 '' O C CH3 30 C00R5 ou 35 y c CH2 o C NH2 COOR- O où. est un métal alcalin. 40 4. Procédé de préparation d'un amide de phosphore pentavalent 72 00785 36 2121746 d'un composé de type pénicilline ou céphalosporine comportant un groupement aminé primaire, qui consiste à faire réagir ledit composé de type pénicilline ou céphalosporine contenant un groupement aminé à un pH d'approximativement 7,5 à 12 avec un 5 composé de phosphore pentavalent ayant la formule R, P X ! 10 R2 dans laquelle chacun de et R2 est choisi dans le groupe composé des radicaux -hydrocarbure et -©-hydrocarbure ayant de 1 à 15 atomes de carbone et ne comportant pas d'insaturation aliphatique, et X est le chlore ou le brome. 15 5. Procédé tel qu'il est défini dans la revendication 4, dans lequel le composé de type pénicilline ou céphalosporine contenant un groupement aminé a la formule O II 20 HOOC—CH (CH^ C NH2 6. Procédé tel qu'il est décrit dans la revendication 4 ou 5, 25 qui comporte en outre l'étape d'extraction de l'amide de phosphore pentavalent du composé de type pénicilline ou céphalosporine dans la cyclohexanone. 7. Procédé tel qu'il est défini dans la revendication 4, 5 ou 6, dans lequel ledit composé de type céphalosporine est un 30 sel de l'acide 7-(51-carboxy-5'-aminovaléramido)-3-acétox^méthyl-A3 '-céphem-4-carboxylique; un sel de l'acide 7-(5*-carboxy-5'-aminovaléramido)-3-carbamyloxyméthyl- /\3-céphem-4-carboxylique; un sel de l'acide 7-(5'-carboxy-5'-aminovaléramido)-7-méthoxy-3-acétoxyméthyl- /\3-céphem-4-carboxylique; ou un sel de l'acide 35 7-(5'-carboxy-5'-aminovaléramido)-7-méthoxy-3-carbamyloxyméthyl-/\ 3-céphem-4-carboxy1ique. 8. Procédé selon l'une des revendications précédentes, qui consiste à faire réagir le composé de type pénicilline ou céphalosporine contenu dans un milieu aqueux avec le composé 72 00785 2121746 phosphoré pour former le dérivé amide de phosphore pentavalent correspondant et ensuite à ajuster le pH de la solution aqueuse du dérivé amide de phosphore pentavalent résultante à une valeur in~ £4>&wara & 3'-at à extraire le dérivé phosphoramide par la 5 cyclohexanone. 9. Procédé tel qu'il est défini dans la revendication 8, qui comporte en outre l'étape consistant à séparer le dérivé amide de phosphore pentavalent de la solution de cyclohexanone en ajoutant de la cyclohexylamine ce qui fait précipiter l'amide 10 de phosphore pentavalent de la solution sous forme du sel de cyclohexylamine; 10. Procédé tel qu'il est défini dans la revendication 8 ou 9, qui comporte en outre l'étape consistant à transformer l'amide de phosphore pentavalent en composé de type pénicilline ou 15 céphalosporine en maintenant l'amide de phosphore pentavalent à la température ambiante dans des conditions acides ou basiques.