Brevet FR2123441A1 — publié le 19720908

la présente invention concerne de nouveaux 2'-0-esters et 2 1,5 ' -di-O-o^ Lers d'g.rn.-cyfcldine. répondant à'la" formule générale : dans laquelle Y représente : o 5 (1) un groupe R&- , dans lequel R est un radical choisi entre des groupes aliphatiques en 0^ à CgQ, des groupes aromatiques en Cg à des groupes hydrocarbonés à structure en cage en à ^es groupes aliphatiques mono cyclique s en G^ à C^, des groupes araliphatiques en 3^ à et des 10 groupes hétérocycliques monocycliques en à ces groupes pouvant être substitués par des halogènes, des groupes hydroxyle, carbonyle, nitro, allcoxyle ou rnercapto, ou 9 (2) un"groupe R'OC-, dans lequel R' est un radical 15 choisi entre des radicaux aliphatiques en à C^q, aromatiques en Gg à et araliphatiques en à C.^ ; et Z est choisi entre Y et un atome d'hydrogène ; ainsi que le3 sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique do ces composés. 20 les nouveaux 3'-0-e s ter s (III) et 3' ,5'- (IV) répondent à la formule : bad original c0py 72 02592 2 2123441 m, IV OY dans laquelle Z et Y onfyles définitions données ci-dessus ; ils se présentent également sous la forme de leurs sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique. Les nouveaux 2', 3'-â.i-0-esters (V) répondent à la formule : dans laquelle Y a la définition donnée ci-dessus ; ils se présentent également sous la forme de leurs sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique. eaux aliphatiques et araliphatiques peuvent être des radicaux saturés ou insaturéa, à chaîne droite ou ramifiée. nh2 V OY Dans les formules I à V données oi-dessus, les radi- « bao origine 72 02592 2123441 - Dans les formules données ci-dessus, des exemples 0 / if \ de groupe acyle (IiC-) comprennent les groupes acétyle, pyvaloyle, isobutyryle, octanoyle (caproyle), palmityle, stéaryle, 5 oléyle, (3-chloropivaloyle, p-nitrobenzoyle, o-toluoyle, benzoyle, 2,6-diméthylbenzoyle, 2,4,6-trim.éthylbenzoyle, 1-fluorène-carbonyle, 9-fluorènecarbonyle, 1-naphtoyle, 1-indènecarbonyle, p-anisoyle, 3,4,5-triméthoxybenzoylé, p-toluoyle, 1-norcamphane-carbonyle, exo- ou exo/endo- de norcamphanecarbonyle, 7-norcampha-10 necarbonyle, 2-adamantane-carbonyle, 1-adamantaneacétyle, a-chloro- 2 r 7 ri 3,5,7-triméthyl-1-adamantaneacétyle, pentacyclo[4.2.0.0 ' .0 * . A H 0 * ]-octanecarbonyle (cubanecarbonyle), cyclobutanecarbonyle, cyclopentanecarbonyle, cyclohexanecarbonyle, picolinyle, tétra-hydrofuroyle (tétrahydropyromuconyle), 10-xanthanecarbonyle, 15 nicotinyle, 6-méthoxy-4-quinoléine-carbonyle (quininyle), 4-cinnolinecarbonyle, 2-thiophènecarbonyle, 4-thionaphtène-acétyle, 2-furoyle, 5-bromo-2-furoyle, coumaryle, coumarine-3-carbonyle, isonicotinoyle, 2-quinuclidinecarbonyle, 3-quinu-clidinecarbonyle, 4-quinuclidinecarbonyle, F-triohloroéthoxy-20 carbonyl-2-pyrrolecarbonyle, N-trichloréth.oxycarbonyl-2-indole-carbonyle, lT-trichloréthoxycarbonyl-3-indolecarbonyle, hydroxy-benzoyle, 3-propylhygroyle, hémisuccinyle, hémifumaryle, hémiglu-tamyle, hémiglutaryle, hé mi- ( 3,3 - d imé t hy 1 )glutaryle, hémi-itaconyle, hémiaconityle et lévulinyle, ainsi que ceux dans 25 lesquels le radical E. répond à l'une des formules : JÙ 72 02592 2123441 CH(C1)- / / / ou 10 15 Les esters de l'invention s'obtiennent par un procédé nouveau d'acylation, à savoir un procédé d'estérification de composés intermédiaires nouveaux de 1'ara-cétidine. convenablement protégés» Une classe importante de ces composés nouveaux de l'invention comprend les composés que l'on obtient lorsque l'agent d'acylation utilisé est un halogénure ou un anhydride d1acyle d'un acide aliphatique en à par exemple le chlorure ou l'anhydride d'acétyle, le bromure ou l'anhydride d1isobutyryle, le bromure ou l'anhydride d'isobutyryle, le chlorure ou l'anhydride de caproyle, le chlorure ou l'anhydride de palmityle, le chlorure ou l'anhydride de sté-aryle-, le chlorure ou l'anhydride de lauryle, le chlorure ou l'anhydride d'oléyle, le chlorure ou l'anhydride myristique, leurs isomères, etc. Une classe importante des composés nouveaux de la présente invention comprend la classe des composés dans lesquels 0 ir le radical acyle BC- est celui d'un acide aliphatique dicarboxy-20 lique en à Cg, par exemple l'acide glutarique, un acide 3,3- 72 02592 5 2123441 dialkylglutarique, l'acide succinique, itaconique ou fumar ique, etc., l'agent d'acylation utilisé étant 3.'anhydride d'acide correspondant « lorsque le radical acyle attaché à l'atome d'oxygène 5 en position 3 de 1'ara-cytidine est un radical 0 0 If H R'O-C-, l'agent d'acylation. répond à la formule R'O-C-Cl et l'acylation est conduite sur de nouveaux composés intermédiaires protégés d'ara-cytidine, d'après des modes opéra-10 toires connus pour la préparation d'esters d'acide carbonique. Dans cette classe de composés, R' est un radical choisi dans le groupe comprenant des radicaux aliphatiques en G.j à C^q, aromatiques en. Cg à et araliphatiques en C^, à ^ • Des exemples d'agents d'acylation comprennent le chloroformiate 15 méthylique, le chloroformia.te éthylique, le chloroformiate butylique, le chlorure de carbobensozy,le chloroformiate d'octanoyle, le chloroformiate de palmityle, le chloroformiate phénylique, etc. Ces procédés de préparation des nouveaux esters 20 sont décrits ci-après : bad original 72 02592 2123441 Procédé À 0 — „ Procédé d'esterificatIon en 2*-0, 5'-0 et 2'?3'-di-0 (7 = RG-) On prépare les composés de foi-mules : W2 et HOCH KQCH III OCR HOC! (dans lesquelles R a la définition donnée ci-dessus) par les opérations qui consistent : (1) à mélanger un composé de formule : ^AD ORIGINAL 72 02592 7 2123441 avec un halogénure de trihalogénéthoxycarbonyle de formule 0 II CX3CH200X (dans laquelle X est choisi entre le chlore et le brome) pour obtenir un composé correspondant de formule : (2) à acyler le composé ainsi produit pour former les composés correspondants de formules : 72 02592 8 et 2123441 H-C-OCHaCX3 VII! H-C-QCHaCXa IX NH-C-OCHgCXa dans lesquelles X/ R ont les définitions données ci-dessus ; (3) à séparer l'un de l'autre les produits d'acylation ; et les 4 5 (4) à hydrolyser/positions 5'-0 et N pour obtenir les composés correspondants de formules I, III et V. A titre de variante, on peut intervertir les opérations (Ill)et (IV). La matière première utilisée dans l'étape (1), à sa-10 voir la 5'-O-trityl-ara-cytidine (VI), est préparée conformément 72 02592 9 21234W à l'exemple 6 du brevet des Etats-Unis d'Amérique ïT° 3 284 440. D'autres détails de ce procédé sont donnés ci-après : (1) La première étape du procédé A implique la réaction de quantités à peu près équirnolaires du composé de départ, 5 à savoir la 51 -O-trityl-ara-cytidine (VI) protégée en position 5j dan.3 un solvant (par exemple la pyridine anhydre) à une température basse ou moyenne avec un halogénure de trihalogénéthoxv-carbonyle, par exemple le chlorure dë trichloréthoxycarbonyle ou le chlorure de tribrométhosycarbonyle,pour former une 10 H^-trihalogénéthoxycarbonyl-51-O-trityl-ara-cytidine (VTl) correspondante, dont les positions 5'~0 et If^ sont protégées vis-à-vis de l'acylation subséquente dans l'étape (2). (2) L'étape suivante du procédé consiste à acyler A" la ÎT -trihalogénéthoxy-carbonyl-5 '-O-trityl-ara-cytidine (Vil) 15 pour former des acyl-N^-trihalogénéthoxycarbonyl-5'-O-trityl- ara-cyt idines (VIII, IX et X) correspondantes.La réaction peut être conduite aisément par mélange du composé de formule VII avec l'agent d'acylation approprié dans un solvant tel que la pyridine anhydre, à une température basse ou moyenne (ambiante),. 20 De nombreux agents d'acylation, à savoir des chlorures ou des anhydrides d'acides carboxyliques, peuvent être utilisés? on mentionne comme exemples l'anhydride acétique, l'anhydride propionique, le chlorure d'acétyle, le chlorure de pivaloyle, le chlorure de palmityle, le chlorure de benzoyle, le chlorure 25 de 9-fluorènecarbonyle, le chlorure de p-anisoyle, le chlorure de 1-norbornanecarbonyle, le chlorure de cubaaecarbonyle, le chlorure de cyclopentanecarbonyle, le chlorure de 1 Q-xanthane- carbonyle, le chlorure de 5-bromo-2-furoyle, le chlorure de 3- ' quinuclidinecarbonyle, l'anhydride succinique et d'autres décrits 30 ci-dessus, qui conviennent pour le groupe acyle 0 li RC- désiré. Les chlorures d'acides carboxyliqueq(itilisés comme agents d'acylation peiivent être préparés par des procédés clas-35 siques, par exemple par- réaction de l'acide RC00H (a) avec SOClg, (b) avec £C1,_ ou (c) avec POCl^. Le procédé (a.) convient pour la plupart des acides. Pour ceux dont le point d1ébullition s'écarte de plus ou moins 5 à 10°C de celui de SOCl^, il con- r 72 02592 '° 2123441 vient d'utiliser le procédé (c). Dans le procodé d'acylation décrit ci-dessus, 1'acy-lation est effectuée en position 2'-0 et/ou en position 3'-0. En général,la mono-estérification est avantagée par l'utilisa-5 tion de plus faibles rapports moD.aires de l'agent d'acylation au composé VII, d'environ 1,0 à environ 1,5, de préférence 1,1. La diestérification est avantagée par l'utilisation d'un agent d'acylation dans un rapport molaire supérieur à 2, variant d'environ 2,1 à environ 3 et de préférence égal à 2,3 environ. 10 la progression de la réaction d'estérification peut être suivie par chromâtographie en couche mince, en utilisant le gel de silice et des systèmes de solvant à base d'acétate éthylique, ou d'autres systèmes de chromâtographie en couche mince connus en pratique. 15 (3) les produits d'estérification VIII, IX et X sont séparés les uns des autres, ainsi que d'autres produits et de l'excès des corps réactionnels d'après des procédés connus en pratique tels qu'une distribution à contre-courant ou la chromâtographie. Parmi ces procédés, on préfère la chromâtographie 20 sur colonne, sur un support convenable. Un exemple de chromato-graphie sur colonne utilise du gel de silice comme support et, comme éluant, des mélanges d'acétate éthylique et de cyclohexane ou des mélanges de solvants analogues, qui conviennent pour les acylates en cours de traitement. Pour les esters de palmityle, 25 il convient d'utiliser des mélanges d'acétate éthylique et de cyclohexane à 20:80 ou 50:50. Il est intéressant d'ajouter de l'alcool éthylique, et d'utiliser par exemple un mélange à 5:.3:1 de cyclohexane, d'acétate éthylique et d'éthanol. D'autres systèmes de solvants seront illustrés dans les exemples. 30 l'acylation individuelle peut être décelée dans les fractions d'effluent par des essais de contrôle, par exemple par absorption des rayons ultraviolet s » En général, les vitesses de parcours sont les plus grandes pour les 2',3'-di-O-esters, plus faibles pour les 3'-0-esters et les plus faiblss pour les 2'-0-esters, 35 et, pour ces derniers, il est fréquent qu'elles ne soient que légèrement plus faibles que pour les 3'-0-esters. (4) Dans l'étape finale du procédé, l'hydrolyse Logénétl bad original simultanée dans les positions 5' et des H^-trihalogénéthoxy- 72 02592 " 2123441 carbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidinea (VIII, IX et X) acylées donnent 1'acyl-ara-cytidine (I, III ou V) correspondante. On effectue l'hydrolyse en mélangeant un composé de formule VIII, IX ou X avec du zinc (de préférence sous la forme d'une poudre) 5 et de l'acide acétique (par exemple un mélange à 80 ^ d'acide d ' eau) acétique cri3tallisable et 20 c,=j à une température allant d'une température moyenne (ambiante) à la température du bain-marie bouillant, pendant quelques heures à environ 24 heures, pour former 1'acyl-ara-cytidine (I, III ou V) correspondante. 10 À titre de variante, l'étape (3) de séparation, et l'étape (4) d'hydrolyse peuvent être interverties le cas échéant. A titre d'autre variante , des composés de formules VIII, IX et X peuvent être transformés en acyl-ara-cytidine (I, III ou V) correspondante dans deux étapes, par exemple par 15 mélange préalable desdits composés avec une solution diluée d'acide trifluoracétique dans un solvant tel que le chloroforme pour n'éliminer que le groupe 5'-0-trityle de manière à former 1'acyl-N^-trihalogénéthoxycarbonyl-ara-cytidine correspondante, puis élimination du groupe protecteur en position 20 d'un composé ainsi produit, par exemple par chauffage au reflux avec du zinc dans le méthanol, pour former 1'acyl-ara-cytidine (I, III ou V) correspondante. A titre de variante, le groupe ïï^-trihalogénéthoxycarbonyle peut être éliminé d'abord par hydrolyse avec de l'acétate de zinc et du méthanol ou avec 25 du chlorure de zinc et du méthanol pour former la 3'-0-acyl- 5'-O-trityl-ara-cytidine, et le groupe 5'-0-trityle est ensuite éliminé avec un mélange à 80 fo d'acide acétique cristallisable et 20 fo d'eau ou en utilisant environ 1 fô d'acide trifluoracétique dans le chloroforme. BAD QRîGltML 72 02592 2123441 Procédé B 0 M Procédé de 2'-0-, 3.'-0- et 2 ' ,3 '-di-O-estérification (Y = R'OC-) Les composés de formules : NHs HOÇH I ' et HOCHa HOCH OCOR 1 III' (dans lesquelles R1 a la définition donnée ci-dessus) sont préparés par les opérations qui consistent (1) à mélanger un composé de formule s BAD ORIGINAL 72 02592 13 2123441 VI avec -un halogénure de trihalo généthoxyc arb onyle de formule î 0 II CX^I^OCX (dans laquelle X est choisi entre le chlore et le brome) pour former un composé correspondant de formule î ?OCHaCXs Vf r (dans laquelle X a la définition donnée ci-dessus) î (2) à acyler le composé ainsi produit par mélange avec un composé de formule : 0 li H'OCCl (dans laquelle R' a la définition donnée ci-dessus) pour former les composés correspondants de formule : BAD ORIGINAL 72 02592 14 2123441 VIII' et WHCOCHgCXa IX' KHCOCHsCXa (dans lesquelles R' et X ont les définitions données ci-dessus) j (3) à séparer les uns des autres les produits d'acylation et (4) à effectuer l'hydrolyse en position 5'-0 et à éliminer ainsi le groupe 5'-0-trityle pour former des composés correspondants de formules : 1Md ORIGINAL 72 02592 15 2123441 NHÇOCH2CX3 NHCOCHaCXa BAD ORIGINAL 72 02592 « 2T23kkl (àans lesquelles R1 et X ont les définitions données ci-dessus) et (5) à hydrolyser en position les composés ainsi produits, pour obtenir des composés de formules I', III1 et V' 5 données ci-dessus. le cas échéant, l'étape (3) peut suivre les étapes (4) et (5). On donne ci-après d'autres détails de ce procédé : (1) la première étape du procédé B est identique à 10 la première étape du procédé A ci-dessus ; (2) la deuxième étape de ce procédé, c'est-à-dire 1'acylation d'une IT^-trihalogénéthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (YII) pour former les acyl-F^-trihalogénéthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidines(YIII'IX' et X') correspondantes, 15 est analogue à l'étape (2) du procédé A ci-dessus. Toutefois, le radical acyle attaché est un radical î R'OC-, dans lequel R' a la définition donnée ci-dessus, l'agent d'acylation répond à la formule 20 0 11 R'OCCl et l'acylation est conduite en suivant des modes opératoires connus en pratique pour la préparation d'esters d'acide carbonique ; par exemple, on.mélange un-composé de formule YII avec un agent d'acylation 25 R'OCCl (tel que'le chloroformiate de méthyle, le chloroformiate d'éthyle, le chloroformiate de propyle, le chlorure de carbo- benzoxy, le chloroformiate d'octyle, le chloroformiate de stéaryle, le chloroformiate de phényle, le chloroformiate de xylyle, 30 etc.) à une température modérée (ambiante) pour former des 4 ✓ « acyl-ÎT -trihalogenethoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidines (YIII', IX' et X') correspondantes. Pour la monoestérification, on utilise environ 1,0 à environ 1,5 mole, de préférence environ 1,1 mole de l'agent d'acylation, et pour la diestérification, 35 on utilise environ 2,1 à environ 3,0 moles par mole de composé YII, de préférence environ 2,3 moles. Dans l'opération d'acylation décrite ci-dessus, l'acylation a lieu en position 2!-0 et/ou BAD ORIGINAL 72 02592 2123441 en position 3'~0, comme décrit dans l'étepe (2) du procédé A ci-dessus; (3) la troisième étape de ce procédé consiste à séparer les produits d'acylation les uns des autres. On procode 5 à cette séparation conformément aux principes de l'étape équivalente de séparation décrite dans le procédé A. A titre de variante, cette étape peut être différée jusqu'à ce que les groupes protecteurs des positions 5'-0 et aient été éliminés dans les étapes (4-) et (5)î 10 (4) la quatrième étape de ce procédé consiste à effectuer l'hydrolyse en position 5'-0 pour éliminer le groupe 5'-0-trityle et pour former les acyl-N^-trihalogénéthoxycar'oonyl-ara-cyt idine s (YIII", IX" ou X") correspondantes. L'hydrolyse est effectuée, par exemple, par mélange de 11acyl-ir-trihalogené-15 thoxycarbony1-5'-0-trity1-ar a-cytidine (YIII', IX' ouX') avec un acide faible (par exemple l'acide acétique) à une température modérée (ambiante), pour former 1 ' acyl-Iï^-trihalogénéthoxy-carbonyl-ara-cytidine (YIII", IX" ou X") correspondantej (5) l'étape finale du procédé est une étape d'hydrolyse 20 et consiste à éliminer le groupe protecteur li^-trihalogénéthoxy-carbonyle pour former 1'acyl-ara-cytidine (I', III' et Yr) correspondante. L'hydrolyse est effectuée, par exemple, par chauffage (par exemple au reflux) de composés de formules YIII", IX" ou X" dans du méthanol avec du zinc, de l'acétate de zinc 25 ou du chlorure de zinc, etc., pour former 1'acyl-ara-cytidine (I', III' et Y') correspondante. rBAD ORIGINAL 72 02592 2123441 Procédé C Procédé de 2t.5>- et 315 '-di-O-estérifination (Y et Z = RC-) Les composés de formules : JHa RCOCHa et II RCOCHa IV OCR (dans lesquelles R a la définition donnée ci-dessus) sont préparés par des opérations qui consistent : (1) à acyler un composé de formule : nh3® w© HOCHa Xla BAD ORIGINAL 15 72 02592 19 2123441 (dans laquelle w ® est un anion d'un acide fort) pour former des composés correspondants de formules : NH3® w © i la NHa w© et RCOCHa 10 IVa (dans lesqelles fî et w® ont les définitions données ci-dessus) ; (2) à effectuer une neutralisation pour éliminer le proton en position d'un composé correspondant ainsi/produit, de formule Y donnée ci-dessus ; et (3) à séparër les produits d'acylation. On donne ci-après d'autres détails de ce procédé : (1) la première étape du procédé 0 consiste à acyler un sel d'acide (Xla) de 1'ara-cytidine connue, par exemple le chlorhydrate, le bromhydrâte, 11iodhydrate, le sulfate, le phosphate, le benzènesuifonate, -etc., pour former les sels de diacyl-ara-cytidine correspondants (lia et IYa). Cette réaction est facile à conduire par mélange d'un composé de formule Xla avec l'agent approprié d'acylation dans un solvant (par exemple BAD ORDINAL 72 0259? so ;U^^ 2123441 diméthylacétamide, diéthylformamide, propionamide, etc.) à une température modérée (ambiante). On peut utiliser de nombreux agents d'acylation, à savoir des anhydrides ou des chlorures d'acides carboxyliaues, par exemple les anhydrides acétique, 5 butyrique, valérique., adipique et suc c inique, les chlorures de cyclopentanêcarbonyle, isopicolinyle, isonicotinyle, xyloyle, m-toluoyle, o-anisoyle, 1 -naphtoyle,2,4,6-triméthylbenzoyle, etc. Pour obtenir la diacylation du sel d'ara-cytidine (Xla), on doit utiliser un rapport molaire de l'agent d'acylation au 10 composé de départ (Xla) supérieur à celui qui est requis pour une mono-acylation. le rapport doit être compris dans la gamme d'environ 2 à environ 2,5 moles (de préférence environ 2,5 moles) d'agent d'acylation par mole de composé protégé en (Xla). On doit éviter un plus grand excès de l'agent d'acylation pour 15 minimiser la production du composé 2',3',51-tri-O-acylé, qui est formé simultanément. (2) Dans l'étape suivante du procédé, une neutralisation visant à éliminer le proton en position des sels d'acyl-ara-cytidine obtenus dans l'étape (1) donne les diacyl-ara-' 20 cytidines (II et IV) correspondantes. On effectue la neutralisation en mélangeant des composés de formule (Ha et IYa) avec un agent d'alcalinisation d'activité modérée tel qu'un bicarbonate de métal alcalin (par exemple le bicarbonate de potassium ou de sodium), ou une base organique telle que la pyridine, 25 pour former les composés correspondants de formules II et IV. Toutefois, en raison des plus grandes solubilités dans l'eau de ces sels d'acides, le composé de formule lia ou IVa peut être préféré en tant que produit final dans certains cas où la solubilité dans l'eau est désirée. 30 (3) Dans la dernière étape du procédé, les di-0- acylates désirés sont séparés les uns des autres, et des monoacylates et triacylates formés en même temps, ainsi que des corps réactionnels ét d'autres produits, par des opérations de séparation connues en pratique, comme décrit ci-dessus, 35 par exemple par chromâtographie sur colonne. A titre de variante, les 3-iO-esters (III) et 31,5'-di-0-psters (IV) d'ara-cytidine de l'invention peuvent BAD ORIGINAL 72 02592 21 2123441 être préparés à partir de 2,2 ' -anhydro-ara-cyt idine- de formule (Xlla) : HO Ha XI la ou de ses sels d'addition d'acides de formule (Xllb) ; HOH2C Ho ©w © XHb (dans laquelle w ^ est l'anion d'un acide fort, par exemple 5 de l'acide chlorhydrique ou sulfurique), la 2,2'-anhydro~ara-cytidine (Xlla) et ses sels d'addition d'acides (Xllb) peuvent être préparés comme décrit dans "J, Org, Chem." 22., 1462 . L'utilisation de 2.2' - anhydro - ara-cyt id ine dans la synthèse des esters de l'invention est avantageuse, parce que 10 dans ce composé anhydro, le groupe 2'-OH de 1'ara-cytidine est déjà bloqué et n'est donc pas disponible pour 1'estérification, l'exposition à l'eau ou à m alcool, notamment en présence d'une base, tend à hydrolyser la liaison anhydro et doit être évitée BAD ORfGfNAL 72 02592 2123441 pendant la synthèse ou la purification des produits, ou bien pendant l'isolement des composés intermédiaires, si cette hydrolyse est indésirable. Lorsqu'on acyle la 2.21-anhydro-ara-cytidine de 5 la forme non protonée Xlla, par exemple par acylation de la la forme Xlla dans la pyridine, le groupe N^-imino tend à être acylé en plus de3 groupes 3'-et S'-OH, pour produire le N^,3'-OyS'-O-triacylate (XIII). Ce mode opératoire (procédé D.j ci-dessous) est néanmoins intéressant pour la préparation 10 de dérivés aromatiques, par exemple de dérivés de benzoyle, de 3*. 5 * -di- ( 0-acyl)-ara-cyt idine s. dans lesquels le groupe 1:1^-acyle peut aisément être éliminé de façon sélective par hydrazinolyse. Toutefois, à titre de variante, et comme on le préfère habituellement, la 2,2'-anhydro-ara-cytidine peut 15 être utilisée sous sa forme protonée (Xllb) comme sel d'addition d'acide (procédé D0). Cette fixation de protons A 4- bloque l'acylation indésirable en îT et elle est avantageuse par rapport à l'utilisation du composé Xlla en évitant la nécessité d'une hydrazinolyse ou d'une autre ÎT^-diacylation 20 sélective. La synthèse des esters d'acylation d'ara-cytidine de l'invention par l'utilisation d'un composé d1 anhydro-ara,-cytidine (Xlla ou Xllb) a lieu tout d'abord par acylation d'un composé d'anhydro-ara-eytidine. Le cas échéant, on peut isoler 25 ces produits intermédiaires d'acylation d ' anhydro-ara- c,y t idine . Toutefois, habituellement, les composés intermédiaires ne sont pas isolés et la synthèse est conduite par hydrolyse, pour des raisons d'ordre économique. Lorsqu'on utilise 1 '.anhydro-ara-cytidine pour la 30 production de 3'-0~esters (III) d'ara-cytidine, on utilise une forme convenablement protégée en 5'-0, par exemple la 5 '-0-trit.yl-anhydro-ara-cyt idine, dans la réaction d'acylation et on élimine ensuite le groupe protégeant la position 5'-0. BAD ORIGNAL 72 02592 23 2123441 Procédé D 1 Procédé de 3S'-di-O-ëstériflcation utilisant la 2.2'-anhydro-PT-a-rivtidine (Xlla) On prépare un. composé de formule : Y'OCHs IV» OY ' (dans laquelle Y' est un groupe acyle aromatique en Cg à C^) par des opérations qui consistent : (1) à acyler un composé de formule : / HOHgC X! la avec un agent d'acylation de formule/ Y'OY» ou Y'X 1 10 (dans laquelle Y' a les définitions données ci-dessus et X^ est un radical chloro, bromo ou iodo) pour obtenir un composé correspondant de formule : ,-fîAD ORIGINAL 72 02592 24 2123441 NY' (2) à éliminer sélectivement le groupe N^-acyle pour former un composé correspondant de formule : et 5 (3) à hydrolyser la liaison 2,2'-anhydro pour former le produit de formule IV1. D'autres détails de ce procédé sont donnés ci- après : (1) l'étape d'acylation est conduite par. réaction 10 d'une 2,2'-anhydro-ara-cytidine (XII) avec un agent d'acylation., à savoir un halogénure acylique aromatique correspondant, par exemple un chlorure, bromure ou iodure d1acyle, ou un anhydride d'acyle aromatique correspondant, dans un solvant convenable, habituellement basique, incapable d'hydrolyser la 15 'liaison 2,2'-anhydride, par exemple la pyridine (solvant préféré), BAD ORIGINAL 72 02592 5 2123441 la triéthylamine , la tributylamine ou la diméthylaminoaniline. Comme agents d'acylation, on préfère les chlorures d'acyle aromatiques,. bien qu'on puisse utiliser d'autres halogénures ou les anhydrides d'acyle. On doit utiliser environ 3 à environ 4, 5 de préférence environ 3,5 moles d'agent d'acylation par mole de composé Xlla. Habituellement, la réaction se développe convenablement à la température ambiante, mais des températures légèrement élevées, par exemple d'environ 55°» peuvent être utilisées pour accélérer la réaction. On pexit estimer la progression 10 de la réaction par des méthodes convenables de contrôle, par exemple par chromatographie en couche mince. Après la réaction, le solvant est évaporé. le cas échéant, le composé intermédiaire triacylique XIII peut être isolé par recristallisation, chromatographie sur colonne ou un autre procédé connu convenable; 15 (2) le produit intermédiaire XIII brut ou purifié est amené à réagir avec un corps réactionnel convenable pour 4 eliminer _te groupe î-T -acyle ; on utilise par exemple l{hydrazine dans un mélange de pyridine et d'acide acétique, par exemple dans un rapport de 4:1 à la température ambiante. Ce mode opéra-20 toire est particulièrement efficace poux des acyles aromatiques, par exemple des benzoates. Pour protéger les composés anhydro, on doit utiliser des conditions anhydres, le cas échéant, on peut isoler le composé intermédiaire XIV. Toutefois, habituellement, l'étape suivante est conduite sans isolement. 25 (3) la liaison anhydro est hydrolysée par réaction avec l'eau, de préférence avec catalyse par une base. l'ester de 3', 5-'-di-(O-acyl)-ara-c.ytidine résultant est purifié par des procédés classiques,par exemple par chromatographie ou par recristallisation. 30 être -A-titre de variante éventuelle, la liaison 2,2'-anhydro peut/hydrolysée avant l'élimination du groupe îT^-acyle, par réaction avec l'eau ou avec un alcool puis neutralisât ion. Dans ce cas, le Iî4-3'-0-, 5'-0-triacylate (XV)/pouf!trepar exemple par chromatographie ou recristallisation» BAO OB1Q'n^ 72 02592 26 2123441 Y'OÇHa XV Procédé ~ùr Procédé de 31,5'-di-O-estérification, utilisant la 2,2'-anhydro-ara-cytidine (Zllb) protonée Un composé de formule : Y0CHa IV (dans laquelle X a la définition donnée ci-dessus) est préparé par des opérations qui consistent : (1) à acyler un composé de formule î HOH: NH2 ©wO xrib BAD ORIGINAL 72 02592 27 2123441 (dans laquelle w ® est l'anion d'un acide fort) avec tin agent d'acylation de formule î YOY ou YX 1 (dans laquelle Y et X^ ont les définitions données ci-dessus) pour former un composé correspondant de formule : JJH? '® w 0 I Y0HsC XVI OY (dans laquelle Y et w Q ont les définitions données ci-dessus), (2) puis à hydrolyser la liaison 2,2'-anhydro pour former un composé de formule IV ou son sel d'addition d'acide. D'autres détails de ce procédé sont donnés ci- 10 après : (1) dans la réaction d'acylation, le forme protonée Xllb de la 2.2'-anhydro-ara-cytidine est amenée à réagir avec un agent d'acylation, à savoir un halogénure ou un anhydride d'acyle correspondant, dans un solvant qui convient pour main- 15 tenir 1'anhydro-ara-cytidine sous la forme protonée, par exemple un solvant non basique tel que le .diméthylformamide ou le diméthylacétamide. On doit utiliser environ 2,1 à environ 3,0 moles, de préférence environ 2,3 moles, d'agent d'acylation par mole de cortvoosé Xllb. le mélange réactionnel peut être , par exemple 20 chauffe/a environ 55°C, et la progression peut -être contrôlée, par exemple par chromatographie en"couche mince. le c as é ché arit, la- 3 ', 5 '-di-(O-acyl)-anhydro-ara-cytidine (XVI) intermédiaire, ou son dérivé ii -amino (c'est-à-dire la base libre du sel d'addition d'acide) peut être isolé 1 BAD ORIGINAL 72.02592 28 2123441 par des procédés classiques, par exemple par cristallisation ou chromatographie. Toutefois, le composé XVI ne nécessite pas si elle est catalysée par -une base, par exemple par neutralisation ou légère alcalinisation pour éliminer le proton en -|0 siques, par exemple par cristallisation ou chromatographie, le diester d'acide palimitique, par exemple, est facilement séparé par chromatographie sur gel de silice en utilisant comme système de solvants un mélange de-méthyléthylcétone, d'acétone et d'eau dans la proportion de 72:20:8, en recher-15 chant les composés dans l'éluat par absorption ultraviolette et en les identifiant par chromatographie en couche mince. Procédé E Procédé de 3'-O-estérification utilisant la 2.2'-anhydro-ara-cytidine (Xllb) protonée. 20 Un composé de formule : 5 d'être isolé; (2) l'hydrolyse est effectuée avec de l'eau ou un alcool et tend à avoir, lieu aisément, en particulier Le produit peut être purifié par des procédés claS' HOCHp OY (dans laquelle Y répond à la définition donnée ci-dessus) est préparé par des opérations qui consistent: BAD ORIGINAL 72 02592 29 2123441 (1) à mélanger un composé de formule : RHp® w ® Xllb (dans laquelle w^est un anion d'un acide fort) avec un halogénure de triphénylméthyle pour former un composé correspondant de formule : © w© XVII 5 (dan3 laquelle w® a les définitions données ci-dessus); (2) à mélanger un composé correspondant ainsi produit, résultant de l'étape (1), avec un agent correspondant d'acylation choisi entre des composés de formule : YX1 ou YQY 10 (dans laquelle Y a la définition donnée ci-dessus, et est bad oriqïnal. 72 02592 30 2123441 choisi entre le chlore, le brome et l'iode) pour former un composé correspondant de formule î XVf I (dans laquelle Y et ont les définitions données ci-dessus ; (3) à hydro3.ysex' en position 5f-Q le composé correspondant ainsi produit résultant de l'étape (2) pour former un composé correspondant de formule : HOCH. w® XfX (dans laquelle Y et t/® ont las définitions données ci-dessus) et (4) à hydrolyser un composé correspondant ainsi produit résultant de l'étape (3) pour former un composé cor-10 respondant de formule III donnée ci-dessus. BAD ORIGINAL 72 02592 31 2123441 D'autres détails de ce procédé sont donnés ci-aprèa : (1) On fait réagir des quantités à peu près équi-molaires d'halogénure de triphénylméthyle, également appelé halogénure de trityle, avec un sel d'addition d'acides (Xllb) 5 de 2.2'-anhydro-ara-cytidine. la réaction peut être conduite à la température ambiante, les périodes.de réaction pouvant atteindre environ une semaine. La réaction peut aussi être conduite à des températures élevées de 50 à 70°C. On peut utiliser soit le chlorure de triphényiméthyle, soit le bromure ou l'iodure 10 correspondant. Bien que la pyridine soit un excellent solvant pour cette réaction, on peut utiliser d'autres solvants tels que la tributylamine ou la- îT,IT-diméthylaniline. Lorsque la réaction est terminée, on chasse le solvant. (2) Dans la seconde étape, on fait réagir le sel 15 d'addition d'acide de 5'-O-trityl-ara-cytidine réstiltant, c'est-à-dire la forme protonée en avec l'agent correspondant d'acylation. Dans l'étape d'acylation, il importe que le groupe H^-imino de la portion cytosine de la molécule soit maintenu à l'état protoné sous la forme du sel d'imine d'un.acide fort 20 tel que l'acide chlorhydrique ou suifurique. Le diméthylformamide et le diméthylacétaraide, en tant que solvants réactionnels, dissolvent bien les produits. Il n'est habituellement pas nécessaire d'utiliser une quantité de solvant suffisante pour dissoudre complètement le produit, parce que, à mesure que la 25 réaction progresse, le produit se dissout et le mélange réactionnel final est homogène. Dans le cas de 11agent d'acylation YX.j, c'est-à-dire un halogénure d'acyle, il est possible d'utiliser, en tant que radical X^, un radical chlorure, bromure ou iodure. On peut aussi utiliser des anhydrides d'acides 30 (YOY). On doit utiliser, par"mole de composé XVTI, environ 1,0 à environ 1,5 mole, de préférence environ 1,1 mole, d'agent d'acylation. Habituellement, cette réaction se développe le plus rapidement à des températures légèrement élevées, par exemple à 40-50°C. Après l'élimination du solvant sous vide, 35 en utilisant une pompe à vide poussé et un bain-marie réglé à environ 45°, on peut purifier le produit intermédiaire désiré par chromatographie sur gel de silice. ■;'' 72 02592 32 . , , .. 2123441 ' (3) Le- groupe trityle-protecteur est éliminé dans la troisième étape,. Cette élimination sélective est effectuée de la façon la plus pratique' au fiioyen d'un réactif acide' contenant environ 80 parties d'-acide . acétique cristallisable et 20 5 parties d'eau. On peut utiliser de plus faibles proportions d'eau, mais des proportions plus fortes peuvent conduire à une insolubilité de la matière première dans le mélange réac-tionnel, et il en résulte une i-éaction hétérogène et indésirable. le groupe 5f-0-trityle peut aussi être éliminé au moyen 10 d'un mélange réactionnel dissolvant consistant en chloroforme contenant environ 1 à 3 $ d'acide trifluoracétique. Bien que les deux corps réactionnels puissent être utilisés à la température ambiante ou à une température plus basse, la réaction peut aussi être conduite à des températures légèrement élevées. 15 II en est ainsi, en particulier lorsqu'on utilise dans la réaction une solution aqueuse d'acide acétique comme solvant, bien que, dans ce cas, des réactions secondaires indésirables se manifestent parfois à des températures élevées. Les 2,2'-anh.ydro-3'-O-esters intermédiaires d'ara-20 cytidine (XIX) gardent une bonne stabilité en solution aqueuse tant que le groupe 4!-itaino reste protoné. Dans une solution neutre ou légèrement alcaline, le noyau anhydro est facile à hydrolyser en donnant des 3'-O-esters d'ara-cytidine. L'ester anhydro XIX intermédiaire peut être isolé par des procédés 25 classiques, par exemple par chromatographie ou par évaporation et cristallisation. (4) Dans la dernière étape, la liaison 2,2'-anhydro est hydrolysée par neutralisation ou alcalinisation dans des conditions douces, pour former l'ester de 3'-O-acyl-ara-cytidine 30 III. L'utilisation de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (XII) dans la synthèse de 3'--0~esters (III) d'ara-cytidine est décrite dans l'exemple 8. Tous les composés de l'invention répondant aux 35 formules I à Y données ci-dessus peuvent être isolés de leurs mélanges réactionnels respectifs par des moyens classiques, par exemple lorsqu'on utilise un solvant miscible à l'eau, en versant / BAD ORIGINAL 72 02592 55 2123441 1 le mélange réactionnel dans l'eau et en séparant le précipité résultant par filtration, ou en effectuant une extraction,dans le cas de solvants non miscibles à l'eau. Une purification complémentaire des produits peut être effectuée par des. moyens 5 classiques, par exemple par chromatographie avec élution sur une colonne adsorbante, en présence d'un solvant convenable tel que l'acétone, le cyclohexane, le chloroforme, le méthanol, l'éthanol, l'acétate éthylique, l'éther, le chlorure de méthylène et le "Skellysolve" B (hexanes), ainsi que des mélanges et des 10 combinaisons de ces solvants ; de même, par chromatographie avec un gradient d'élution, sur une colonne adsorbante, en présence d'un mé3.ange convenable de solvants, par exemple un mélange de chlorure de méthylène et de "Skellysolve" B, un mélange d'acétone et de "Skellysolve" B, etc. 15 La solubilité dans l'eau des monoesters et de3 diesters de l'invention peut être améliorée, et on peut ainsi favoriser leur polyvalence pharmaceutique en les transformant en un sel avec des acides acceptab3.es du point de vue pharmaceutique /ayant un pK égal ou inférieur à 2 environ. Ces 20 acides peuvent être considérés dans leur ensemble comme des acides minéraux ou organiques forts, et cette classe d'acides convient du fait que 1'ara-cytidine et ses esters, qui caractérisent la présente invention, sont des bases faibles. Des exemples d'acides forts co reprennent/le s acides chlorhydrique» glûtarique 25 suifurique, phosphorique/ glutamiaue, tartrique,• trihydroxy-benzoïque, formique, etc. On forme les sels en mettant en suspension les esters d'ara-cytidine désirés dans un milieu tel que le méthanol et en ajoutant de façon appropriée, un équivalent de l'acide désiré. On obtient une solution du 30 sel d'addition d'acide, que l'on peut séparer par l'addition de milieux appropriés tels que de l'éther diéthvlique. Les. sels peuvent être purifiés par recristallisation dans des mélanges de solvants, par exemple dans un mélange de méthanol et d'éther. L'halogénhydrate peut aussi être obtenu en omettant 35 simplement de neutraliser le mélange d'acylation qui résulte de la réaction de RC0C1 avant que le produit acylé ne soit isolé du solvant. BAD ORIGINAL 72 02592 54 2123441 Les composés de l'invention répondant aux formules I à ¥ sont intéressants comme agents supprimant l'imuiunité ; en conséquence, leur administration est intéressante dans la transplantation d'organes chez des êtres humains et des animaux 5 domestiques utiles, dans le cas de maladies auto-immunisantes et d'hypersensibilité retardée. Les composés (î) à (V) mentionnés ci-dessus sont également intéressants comme agents anti-néoplastiqueSd'indice thérapeutique supérieur, exerçant en particulier l'activité anti-leucémique caractéristique de 10 1rara-cytidine ; ils en possèdent également la libération soutenue et l'efficacité d'administration par voie orale. Les composés de l'invention, lora de leur administration, montrent les propriétés caractéristiques de 1'ara-cytidine. et, en outre, la propriété avantageuse de libération soutenue 15 de 1'ara-cytidine pendant des périodes de temps à la suite de l'administration. Ainsi, les modes d'administration et les doses à utiliser sont les mêmes que pour 1'ara-cytidine. Par exemple, on peut les utiliser par voie orale ou intramusculaire. Leur administration intraveineuse est réalisable, 20 mais la nécessité de dispositifs désavantageux tels que le goutte-à-goutte intraveineux est évité par la libération soutenue et l'effet de "retard" des nouveaux composés. En outre, les composés de l'invention ont des propriétés d'anti-bactériophageset, lorsqu'on les utilise con-25 jointement avec un inhibiteur de déaminase, ilspeuvent être utilisés pour protéger un milieu de fermentation menacé de contamination par un bactériophage. Les esters de la présente invention ont les activités et les applications qui caractérisent le composé non estérifié, 30 c'est-à-dire la cytarabine ou ara-cytidine. à savoir l'activité contre la leucémie aiguë chez les adultes et les enfants, et contre le lyraphosarcome chez les adultes, comme décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique IT° 3 444 294. Comme dans le cas de I'ara-cytidine. on peut préparer, en utilisant les 35 esters de l'invention, des solutions injectables stériles, par exemple dans l'huile de graine de coton, l'huile d'arachide et l'huile de sésame, ou des dispersions ou des solutions non aqueu- BAD ORIGINAL 72 02592 35 2123441 1 ses stériles dans l'eau, des solutions ou dispersions aqueuses salines qui conviennent pour la préparation extaraporanée de solutions ou dispersions injectables stériles» Ces solutions sont préparées par l'incorporation de l'estez' dans le solvant 5 ou le milieu de dispersion, en présence de particules d'agents convenables d'enrobage, d'agents tensio-actifs, d'agents anti-bactériens ou anti-fongiques, d'agents isotoniques, etc. On peut préparer des poudres par lyophilisation d'une solution ou dispersion convenablement préparée. On peut réaliser des formes 10 posologiques unitaires telles que des fioles et des ampoules. La posologie dépend de l'âge, du poids et de l'état du sujet, de la voie et de la fréquence d'administration, et peut varier de 0,1 à environ 50 mg/kg, ou bien une dose totale quotidienne d'environ 3 à environ 4 000 mg administrée en une seule dose ou 15 en doses divisées. Une dose unitaire peut contenir l'ester de l'invention en quantités d'environ 3 à environ 1000 mg par unité. L'ester peut représenter environ 0,5 à 25 ?° en poids/volume de la composition totale. Lorsqu'on utilise la caractéristique de libération soutenue des esters de l'invention, on peut 20 préparer de3 doses unitaires et les administrer par voie intramusculaire en quantités variant d'environ 0,5 à environ 10 ou plus de 10 g au total ou d'environ 10 à environ 50 mg/kg ou davantage. La quantité d'ester dans cette dose peut varier jusqu'à atteindre la quantité indiquée comme étant suffisante 25 pour permettre la régression et Ta palliation de la leucémie. Ainsi, xzne dose de 50 mg/kg peut être administrée une fois par semaine, ou bien des doses éventuellement plus grandes peuvent être administrées à des intervalles de temps plus espacés. Pour l'administration par voie orale, on peut préparer 30 des formes posologiques unitaires solides ou liquides. Pour la préparation de compositions solides telles que des comprimés,-le principal ingrédient actif est mélangé avec des ingrédients classiques tels que le talc, le stéarate de magnésium, le phosphate dicalciaue, le silicate de magnésium et d'aluminium, 35 le sulfate de calcium, l'amidon, le lactose, la gomme arabique, la méthylcellulose et des substances de comportement analogue telles que des diluants ou de3 véhicules pharmaceutiques. BAD ORIGWAÈT 72 02592 36 2123441 ; Les comprimés peuvent ou non être kératinisas. On prépare de3 cachets de la môme manière que les comprimé.", la seule différence résidant dans la forme et dans l'inclusion de saccharose ou d'un autre édulcorant et d'une substance aromatique. Dans 5 la. forme de réalisation la plus simple, des capsules, de môme que des comprimés, sont préparés par mélange du composé actif de la formulation avec un diluant pharmaceutique inerte et introduction du mélange dans une capsule de gélatine dure de dimensions appropriées. Dans une autre forme de réalisation, on 10 prépare des capsules en remplissant les capsules de gélatine dure avec des perles, enrobées dans un polymère, contenant le composé actif. On prépare des capsules de gélatine molle par encapsulation à la machine d'une suspension du composé actif avec une huile végétale acceptable, de la vaseline liquide 15 légère ou une autre huile inerte. BAD ORIGINAL 72 02592 37 2123441 ! Des formée posologiques unitaires liquides destinées à l'administration par voie orale,, par exemple des sirops, des elixirs et des suspensions, peuvent aussi être préparées, les formes liydr o s olubles du composé actif peuvent être dissoutes dans un peut / 5 véhiculé aqueux, on presence d'un aromate a structure arorn.ati.que» On/ préparer des suspensions de formes insolubles en utilisant un sirop comme véhicule, à l'aide d'un agent de mise en suspension tel que la gomme arabique, la gomme adragante, la méthylcellulose, etc. 10 l'invention est illustrée par les exemples suivants, donnés à titre non limitatif•. Préparation 1 N^-trichloréthoxycarhonvl-5'-O-trltyl-ara-cytidine (711) On dissout dans 4 1 de pyridine anhydre fraîchement distillée 15 mi échantillon de 193,69 g (0,40 mole) de 5'-O-trityl-ara-cytidine (VI) (également appelée 5'-O-triphénylméthyl-ara-cytidine et préparée comme décrit dans l'exemple 6 du brevet des Etats-Unis d'Amérique F0 3 284 440). On refroidit la solution à 3°C et on la traite avec 84,4 g (0,40 mole) de chlorure de trichloréthoxy- 20 carbonyle. On agite la solution à 3°C pendant environ 4 heures puis on la laisse se réchauffer à 25°C en 18 heures environ. On distille la pyridine à 40°C sous vide et on traite le résidu à consistance gommeuse avec 1 1 de chlorure de méthylène. Une substance solide (23,7 g) se sépare ; on l'isole par filtration. 25 La chromatographie en couche mince montre que la substance consiste en matière première. La solution dans le chlorure de méthylène est lavée trois fois avec de l'acide chlorhydrique 0,1 SF et une fois avec une solution saturée de sel. Après déshydratation sur du sulfate de sodium, on laisse le chlorure de méthylène 30 s'évaporer lentement, et des cristaux se déposent. On recueille les cristaux par filtration, on les lave avec du chlorure de méthylène froid et on les sèche, ce qui donne 64,5 g du produit (VII). La chromatographie en couche mince des liqueurs-mères de chlorure de méthylène montre des taches qui se déplacent plus 35 que le produit et qui correspondent probablement à des substances acylées en positions 2'-0 et 3'-0. On les hydrolyse par traitement du résidu de la liqueur-mère avec 1 1 de tétrahydrofuranne et BAD ORIGINE " 72 02592 js 2123441 ' 1 1 d'hydroxyde de sodium 0,3 H, Au bout de 1,5 heure, toutes les taches de chromatographie en couche mince qui se déplacent plus rapidement ont disparu. Le mélange réactionnel est acidifié à un pli égal à 6,5 avec de l'acide chlorhydrique concentré. Le 5 tétrahydrofuranne est distillé sous vide et le résidu aqueux est extrait au chlorure de méthylène. Le chlorure de méthylène est lavé et séché comme décrit ci-dessus et, là encore, chassé par évaporation. Des cristaux se déposent de nouveau. On les recueille et on les lave, ce qui donne 42,5 g de produit. On évapore encore 10 les liqueurs-mères et on obtient un nouveau dépôt de 45,5 g de substance qui consiste, à présent,en quantités à peu près égales de produit et de matière première, comme l'indique la chromatographie en couche mince. L'échantillon de 45,5 g est chauffé avec 500 ml d'acétone et le résidu est séparé par filtration. On 15 constate qu'il s'agit de 5'-O-trityl-ara-cytidine (VI). Les liqueurs-mères acétoniques sont évaporées à sec et cristallisées dans du chlorure de méthylène par lsnte évaporation, ce qui donne 19 g de produit (VII). Le rendement total est ainsi de 12.6 g de U^-trichloréthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (VII), soit 20 48 °/o de la théorie. On prépare un échantillon pour l'analyse par double cristallisation dans le chlorure de méthylène. Analyse : G f<> H c/o Cl Calculé pour C^HggCl^O 56,30 4,27 16,11 6,36 Trouvé 56,46 4,30 15,25 7,26 25 Spectre ultraviolet mjj. (e x 10~~^)] : 232 (11 ,8), 296 (5,38). Spectre infrarouge (v, pâte) : 3380, 3200, 3120 épaulement , 1765, 1650 , 1620, 1570, 1505, 1330, 1245, 1200, 1100, 1085, 1065, 810, 785, 770, 750, 740, 715 et 705. 50 Exe g.-oie 1 2'-0~ et 3 '-O-palmityl-ara-cyt idine (I et III) On ajoute 15g (30,3 millimoles) d'anhydride palmitique à une solution de 19,8 g (30 millimoles) de îT^-trichloréthoxy-carbony1-5'-O-trityl-ara-cytidine (VII) (obtenue comme dans la préparation 1) dans 150 ml de pyridine anhydre. On agite le mélan-35 ge pendant environ 16 heures à la température ambiante et il en résulte une solution claire. Le mélange réactionnel clair est soumis à un contrôle par chromatographie en couche mince en BAD ORIGINAL 72 02592 39 2123441 ' utilisant du gel de silice et un système de solvants à base ce d'acétate d'éthyle.Pans /sjrstène, deux produits apparaissent avec des vapeurs de de 0,89 et 0,75, ainsi qu'un peu do matière première (R„0,26). On ajoute un supplément de 1,4 g (2,8 milli-5 moles) d'anhydride palmitique et on poursuit la.réaction pendant 24 heures à la température ambiante. On concentre le mélange réactionnel sous vide pour obtenir environ '39,3 g d'un résidu sirupeux. On dissout le sirop dans 500 ml d'éther et on lave la solution avec 300 ml de solution à 1 fo de bicarbonate de sodium 10 (3 g de bicarbonate de sodium équivalent à 36 millimoles). On lave encore la phase d'éther avec 3 portions de 70 elL d'eau, on la déshydrate sur 70 g de sulfate anhydre de sodium et on la concentre de nouveau sous vide, ce qui donne 34,9-g d'un résidu sirupeux. On contrôle de nouveau le résidu par chromatographie 15 en couche mince avec un autre système de solvants (cyclohexane-acétate-éthylique - 1:1). Dans ce système, on obtient une tache se déplaçant rapidement (R^ 0,78), une tache double (R^ 0,39) qui se révèle être formée de deux composants non entièrement séparés,et un peu du composé de départ (YII ) (R^ 0,02). 20 les 34,8 g de produit brut sont adsorbés sur 2,5 kg de gel de silice et élues avec de l'acétate éthylique ; on recueille des fractions de 200 ml après le début de 1'élution des produits réactionnels. Les fractions 1 à 3 ne contiennent que la 2'—0-, 3'-O-dipalmityl-N^-trichloréthoxycarbonyl-51-O-trityl-ara-cytidine 25 (X) (R^ 0,79, acétate éthylique : cyclohexane - 1:1). Par évaporation sous vide, on obtient environ 3,9 g de résidu sirupeux. Le résidu peut encore être traité comme décrit dans l'exemple 9» pour donner la 2',3'-di-O-palmityl-ara-cytidine (Y). Les fractions 4 à 30 sont contrôlées par chromatographie 30 en couche mince dans le système de solvants composé d'acétate -éthylique et de cyclohexane (1:1) et on constate qu'il s'agit d'un mélange de trois composants. Les fractions rassemblées donnent, par évaporation,17,5 g de résidu sirupeux. On effectue une opération supplémentaire de purification par chromatographie 35 en utilisant une colonne de 2,5 kg de gel de silice (acide silicique) et en effectuant 1'élution avec un mélange d'acétate éthylique et de cyclohexanone. Après le passage d'environ 8 1 de BAD ORIQIWA^ 72 02592 40 2123441 ce mélange de solvants sur la colonne, 1'élution des produits commence. A ce stade, on recueille des fractions de 100 ml. Les fractions 1 à 60 contiennent environ 7,6? g de 2 '-0-, î'-O-dipalmityl-N^-trichloréthoxyearbonyl~5'-O-ara-cytidine (X). L'acétate éthy-5 lique est'alors utilisé pour 1*élution et on recueille les fractions 71 à 83. Ces fractions consistent principalement en un mélange de 2' -0~palmityl-îT/'-trich.loréthoxycarbonyl-5 ' -Q-trityl-ara 'i cytidine (VIII) et de 31 -O-palmityl-îî -trichloréthoxycarbonyl-5 O-trityl-ara-cytidine (IX). Par évaporation sous vide, les frac-10 tions 71 à 83 donnent environ 7,05 g d'un mélange des deux composés qui viennent d'être mentionnés, avec un peu de 2'-0-?3'-0-dipalmityl-l^-trichloréthoxycarbonyl-51-O-trityl-ara-cytidine (X). Les fractions 71 à 83 sont adsorbées sur une colonne de 500 g de gel de silice et éluées avec 20 $ d'acétate éthylique et 80 $ 15 de cyclohexane. Après passage de plusieursjlitres de solvant sur la colonne, une petite quantité du dérivé dipalmitylique se déplaçant plus rapidement commence à être éluée à vide et l'éluat est recueilli en fractions de 25 ml. Les fractions 1 à 120 consistent principalement en 2*-Or-, 3,-0-dipalmityl-N/:'-trichloréthoxy-20 carbony1-51-O-trityl-ara-cytidine (X). Les fractions 120 à 440 contiennent un peu du composé dipalmitylique et des traces d'impuretés .On rassemble les fractions 540 à 555 et on obtient 2,31 g de 3'-O-palmityl-H^-trichloréthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (IX) essentiellement pure (R^ = 0,65, système de solvants = 25 acétate éthylique:cyclohexane - 1:1, plaques de gel de silice). Les fractions 667 à 685 provenant de la même colonne sont rassemblées et donnent 0,668 g de 51-O-trityl-N^-trichloréthoxy-carbonyl-2'-O-palmityl-aja-cytidine (VIII) avec des traces du dérivé de 3'-O-palmityle correspondant. On rassembla les fractions 30 686 à 717, ce qui donne 2,07 g de 5'-O-trityl-ÎT^-trichloréthoxy-carbonyl-2'-O-palmityl-ara-cytidine (VIII) pure. (Rf 0,62, système de solvants cyclohexane :acétate éthylique : éthanol à 95 io -5:3:1). . On dissout la totalité (2,31 g) de la 3,-0-palmityl-ÎT':'-35 trichloréthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (IX) dans un 'mélange de 20 9® d'eau et de 80 ^ d'acide acétique cristallisable et on ajoute 3 g de poudre de aine. On agite le mélange pendant BAD ORIGINAL 72 02592 « 2123441 environ 16 heures à la température ambiante puis on sépare le zinc par filtration. le filtrat clair donne une seule tache par chromatographie en couche mince, qui vire au jaune lorsqu'on la traite par pulvérisation d'acide sulfurique dilué, après chauf-5 fage. Etant donné que cotte substance contient encore le substituant 5 '-0-tr.ityle, on chauffe le filtrat clair pendant environ 6 heures au bain-marie bouillant, après quoi l'essai effectué sur une plaque de chromatographie en couche mince avec de l'acide sulfurique dilué révèle l'absence du groupe trityle dans le pro-10 duit. Le mélange réactionnel clair est concentré sous vide et la substance solide résiduelle est purifiée par adsorption sur 200 g de silice et éluée d'abord avec un mélange de chloroforme et de méthanol à 98:2 puis avec un mélange de methyléthylcétone, d'acétone et d'eau à 72:20:8.On recueille 20 fractions de 30 ml. 15 On rassemble les fractions 2 à 16 et on les concentre sous vide, ce qui donne une substance solide. On cristallise cette dernière dans du méthanol puis dans de l'acétone et on obtient la 3'-0-palmityl-ara-cytidine (III) ayant un point de fusion de 174 à 176°C. Analyse : G % H i° % 20 Calculé pour C^ÏÏ^OgH^ 62,3 9,0 8,7 Trouvé 61,8 8,3 8,1 Spectre d'absorption ultraviolette : 215 mji (léger épaule-ment), e= 10 200 j 230 m[j. (épaulement accentué), e = 7900, ; 272 mp., e= 9100. 4 25 On dissout 0,89 g de 51-O-trityl-N -trichlorethoxycarbonyl- 2'-O-palmityl-ara-cytidine (VIII) dans 50 ml d'un mélange d'acide acétique cristallisable et d'eau à 80:20. On ajoute 2. g de poudre de zinc et on agite le mélange pendant environ 16 heures à la température ambiante. L'analyse par chromatographie en couche. 30 mince montre que l'hydrolyse des groupes 5'-0-trityl- et H4-trichloréthoxycarbony3.e (VIII) est complète. On sépare le zinc par filtration et on concentre le filtrat à sec $ous vide. On dissout le résidu dans un mélange de solvants composé de methyléthylcétone, d'acétone et d'eau dans la proportion de 72:20:8, 35 on adsorbe la solution sur 200 g de gel de silice et on l'élue avec le même système de solvants. Dès que la substance commence à être éluée de la colonne (UV), on recueille l'éluant par fractions de 50 ml. Les fractions 8 à 14 contiennent le produit ^BAD ORIGNAL 72 02592 42 2123441 35 désiré. On rassemble ces fractions,. on les évapore sous vide et on recristallise le résidu solide dans de 3.'acétone, ce qui donne 125 g de 2'-O-palmityl-ara-cytidine (II) fondant à 133-134°. 10 Analyse : 0 c/o H 1o N °A Calculé pour C25H43°6N3JI2° 60,09 9,08 8,41 Trouvé 60,07 8,90 8,69 W : 236 mp., e = 7300 270 mil, e = 7850. En suivant le mode opératoire de l'exemple çant l'anhydride palmitique par d' autres agents i que 15 20 25 (1 (2 (3 (4 (5 (6 (7 (8 (9 (10 (11 (12 (13 30 anhydride acétique, chlorure pivalylique, chlorure oléylique, chlorure de nicotinyle, chlorure de 1-naphtoyle, chlorure de 1-adamantane-acétyle, anhydride d'acide cyclobutane-carboxylique, chlorure de picolinyle, chlorure d'acide trans-3-n-propylhygrique, anhydride succinique, anhydride 3,3-diraéthylglutarique, anhydride itaconique anhydride aconitique, etc., on obtient respectivement les composés suivants : i'-0-acétyl-ara-cytidine (III), ■ '-O-pivalyl-ara-cytidine (III), >' -O-oléyl-ara^-cytidine (III), ;■ '-Q-nicotinyl-ara-cytidine (III), j'-Q-1 -naphtoyl-ara-cytidine (III), ;•_0-( 1 -adamantane—acétyl)-ara-cytidine (III), !'-Q-cyclobutane-carbonyl-ara-cytidine (III), i'-O-picoiinyl-ara-cytidine ' (III), '1-O-trans-3-(n~pr opyl)-hygr oy1-a ra-cyt idine (III), ;'-Q~succinyl-ara--cytidine (III), i'-0-(3,3-diméthyl-glutaryl)-ara-cytidine (III), (1) 3 (2) 3 (3) 3 (4) 3 (5) 3 (6) 3 (7) 3 (8) 3 (9) 3 (10) 3 (11) 3 BAD ORIGINAL 72 02592 43 2123441 (12) 3'-O-ltaconyl-arn-cytldlne (III), (13) 5'-O-aconityl-ara-cy tidine (III), etc. - et les 2'-0-acylates (î) correspondants de l'ara-cytidine. Exemple 2 2'-0 et 5'-O-stéaryl-ara-cytidines (I et III) 5 On ajoute 17 g (30,8 millimoles) d'anhydride stéariquè à une solution de 19,8 g (30 millimoles) de IT^-trichloréthoxy-carbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (VII) dans 150 ml de pyridine anhydre. On agite le mélange à la température ambiante et au bout d'environ 5,5 heures, la majeure partie de l'anhydride 10 stéariquè réagit en ne laissant qu'une petite quantité de matière insoluble. Au bout d'environ 48 -heures d'agitation, un peu d'anhydride stéariquè insoluble est présent et le mélange réactionnel est chauffé pendant environ 2 heures à environ 50°C. La réaction de la totalité de l'anhydride stéariquè a eu lieu, 15 mais des essais de chromatographie en couche mince (système de solvants-chloroforme:méthanol - 95:5) montrent encore qu'il y a une petite quantité de matière première (VII) et trois autres composants dans le mélange réactionnel. On concentre le mélange réactionnel sous vide, ce qui donne 20 un résidu solide qu'on dissout dans 100 ml d'acétate éthylique et on concentre de nouveau sous vide pour éliminer l'excès de pyridine. On répète deux fois le traitement à l'acétate éthylique et la concentration sous vide,et on dissout ensuite le résidu formé dans 300 ml d'éther. On élimine environ 2,9 g de substance 25 insoluble. La solution limpide dans l'éther est extraite plusieurs fois avec des portions de 300 et 150 ml d'une solution fraîchement préparée de bicarbonate de sodium à 1 jo pour éliminer l'acide stéariquè, et la phase d'éther est séchée sur 75 g de sulfate anhydre de sodium. Après filtration du sulfate de sodium, le 30 filtrat limpide de solution dans l'éther est concentré sous vide en donnant 33,1 g d'une substance résiduelle solide. On contrôle une partie de cette substance par chromatographie en couche mince (système de solvants - chloroforme: méthanol - 98:2), ce qui fait apparaître des taches de 3 produits différents à des 35 Rf de 0,53, 0,15 et 0,07. On sépare le mélange de produits par chromatographie avec élution sur 2,5 kg de gel de silice, en utilisant comme solvant t ' BAD QRîSîHAL 72 02592 2123441 un mélange à 98 a/o de chlorure de méthylène et 2 c/> de méthanol (chromatographie A), Après avoir recueilli Snviron 13 1 de solvant qui sont passés sur' la coïonne, on commence à éluer les produits : réactionnels et on recueille 30 fractions de 120 ml. Les fractions 5 1 à 4 consistent principalement en 2'-0-, 3'-0-diatéaryl-ïf/'- trichloréthoxycarbony1-5'-O-trityl-ara-cytidines (X), ' qui dorment par évaporation 6,67 g de substance. Les fractions 5 à 18 contiennent un mélange de 3 '-0-stéaryl-iT^-trichloréthoxycarbonyl--5 ' -0-trityl-ara-cytidine (IX) et de 2'-O-stéaryl-ïA-trichloréthoxy-10 carbonyI-5'-0-trityl-àra-cytidine (VIII) avec un peu de 2'-0-, 3'-0-distéaryl-î^-trichloréthoxycarbony1-5'-O-trityl-ara-cytidine (X). Par évaporation de ces fractions, on obtient environ 16,76 g de substance. Les fractions 19 à 30 contiennent environ 0,5 g de produit, consistant en un mélange de 2'-0-stéaryl-N/:'-trichlor-15 éthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidino (VIII) et de quelques composants se développant plus lentement. La substance provenant des fractions 5 à 18 et pesant 16,76 g est encore purifiée par chromatographie par élution à partir de 1 kg de gel de silice ; on utilise à cet effet d'abord environ 20 10 1 de chlorure de méthylène, puis 8 1 d'un mélange à 99 $ de chlorure de méthylène et 1 fa de méthanol (chromatographie B). A ce stade, 1'élution des produits commence (UV) et on recueille des fractions de 22 ml. On recueille environ 250 fractions et on les contrôle par chromatographie en couche mince (système de sol-25 vants - chloroforme:méthanol -98:2). Les fractions 1 et 2 sont constituées principalement par le dérivé disubstitué, à savoir la 21-0-, 3'-0-distéaryl-N^-trichloréthoxycarbonyl-5'-0-trityl-HEsL-cytidine (X). Les fractions 3 à 50 consistent en un mélange de cette substance distéarylique (X) et du taonostéarate ou 3'-0-30 stéaryl-IT^-trichloréthoxycarbonyï-51-O-trityl-ara-cytidine (IX). Par évaporation de ces fractions, on obtient 6,4 g de substance. Les fractions 51 à 70 consistent en 3'-0-stéaryl-lî^-trichloréthoxy-carbony1-5'-O-trityl-ara-cyt.idine(IX) très pure. On en obtient 720 mg par évaporation. Les fractions 71 à 90 sont également 35 constituées par ce composé (IX) ; on en obtient 380 mg par évaporation. Les fractions 91 à 22.0 consistent en un mélange des deux monostéarates, à savoir la 3'—0—stéaryl—trichloréthoxycarbonyl— BAD ORIGINAL 72 02592 45 2123441 51 -O-trityl-ara-cytidine (IX) et la 21 -O-stéaryl-ïï^-trichlorcthoxy-carbony1-5'-O-trityl-ara-cytidine (YIII). Les fractions 3 à 50, pesant 6,4 g sont rechromatographiées sur gel de silice puis éludes d'abord avec du chloroforme contenant 0,75 fi d'éthanol pour 5 éliminer la majeure partie de la 2'-C-,3'-O-distéaryl-ïî^'-tri-chloréthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (X) puis avec un mélange de 2,75 fi d'éthanol et 97,25 -fi de chloroforme, ce qui donne la 3'-0-stéaryl-N^-trichloréthoxycarbonyl-51-O-trityl-ara-cytidine (IX). Toutes ces fractions sont contrôlées par chroma-10 tographie en couche mince et celles qui contiennent le produit désiré (IX) sont rassemblées. La 3'-O-stéaryl-H^-trichloréthoxycarbonyl-51-O-trityl-ara-cytidine (IX) rassemblée, pesant 1,36 g, est dissoute dans 50 ml de chloroforme contenant 2 fi> en volume d'acide trifluoracétique 15 et on laisse reposer le .mélange réactionnel pendant environ 3,5 heures à la température ambiante. La chromatographie en couche mince montre qu'il ne reste pas de matière première, ce qui indique une élimination totale du groupe 5'-0-trityle. On lave le mélange réactionnel 2 fois avec des portions de 100 ml de solution 20 saturée de bicarbonate de sodium,fraîchement préparée, on le déshydrate sur du sulfate de sodium et on le concentre sous vide. Le groupe N^-trichloréthoxycarbonyle est éliminé par dissolution du résidu dans 100 ml de méthanol et chauffage au reflux avec 2 g de zinc pendant environ 0,5 heure. Après avoir séparé le zinc 25 par filtration, on évapore la solution sous vide, ce qui donne la 3'-O-stéaryl-ara-cytidine (III) brute. On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice. Après élution des impuretés avec du chloroforme et un mélange à 2 fi de méthanol et 98 fi de chloroforme, on élue le composé désiré (III) avec un mélange à 30 5 fi de méthanol et 95 fi de chloroforme en recueillant des fractions de 50 ml. On rassemble les fractions 4 à 8 et après recristallisation dans l'acétone, on obtient la 3'-O-stéaryl-ara-cytidine (III) purifiée. Analyse : G fi H fi ïF fi 35 Calculé pour C^H^Ogïï^ 63,62 9,30 8,24 Trouvé 63,30 9,18 8,47 " BAD ORIGNAL 72 02592 46 2123441 » UV : 215 mu léger épaulement 230 mp. e = 7900 (épaulernent) 272 mp, e = 9100 (épaulernent) Les fractions 19 à 30 de la chromatographie A et les frac-5 tions 91 à 220 de la chromatographie B sont rassemblées et évaporées. La substance résultante est rechromatographiée comme dans la chromatographie B et des fractions ne contenant essentiellement que le composé VIII (exempt des composés IX à X) sont séparées. 4 Le3 gï'oupes protecteurs K -trichlorethoxycarbonyle et 5'-0-trityle 10 sont éliminés comme pour le monoester de 3'-O-stéaryle (IX). Le produit brut (III) est purifié comme indiqué ci-dessus, ce qui donne la 2'-O-stéaryl-ara-cytidine (I) purifiée. En suivant le mode opératoire de l'exemple 2, mais en remplaçant l'anhydride stéariquè par d'autres agents d'acylation tels 15 que les suivants : (1) anhydride propionique, (2) anhydride valérique, (3) anhydride trifluoracétique, (4) anhydride phénylacétique, 20 (5) chlorure de p-anisoyle, (6) chlorure de 2-furoyle, (7) chlorure de 4-tih.anaphtène-acétyle, (8) chlorure de coumaryle, (9) chlorure de fumaryle, 25 (10) anhydride adipique, etc. on obtient respectivement les composés suivants : (1) 3'-O-propionyl-ara-cytidine (III), (2) 31-O-valéryi-ara-cytidine (III), (3) 3 -0-t r ifluora c é ty1-a ra ~ cyt id ins (III), 30 (4) 3'-0-phénylacétyl-ara-cytidine((lII), (5) 31 -O-p-anisoyl-ara-c.ytidine (III), (6) 3'-Q-1 -furoy 1-a ra-cyt id ine (III), (7) 31-0-4-thianapht ène-a c éty1-ara-cytid ine (III), (8) 3'-O-coumaryl-ara-cytidine (Iïl), 35 (9)3'-0-fumaryl-ara-cytidine (III), (10) 5'-Q-adipyl-ara-cytidine (III), etc. et les 2'-0-acylates (I) correspondants. Exemple 3 3'-O-benzoyl-ara-cytidine (III) ; qrigimaL / 72 02592 47 2123441 ■ On ajoute 2,8 g (12,7 millimoles) de chlorure de benzoyle à une solution de 6,6 g (10 millimo3.es) de ir •-1 r i c hl o r 6 thoxy c a r b ony 1-5'-O-trityl-ara-cytidine (VII) dans 75 tnl de pyridine anhydre. On agite le mélange à lr/bo tapera tare ambiante pendant environ 16 5 heures, puis on ajoute un supplément de 0,5 g de chlorure de benzoyle dans 10 ml de pyridine anhydre. Cri continue d'agiter pendant environ 4,5 heures à 50-55°C, on refroidit à la température ambiante et on agite pendant encore 16'heures environ. On concentre la solution sous vide, ce qui donne un sirop fluide. On dis-10 sout cette substance dans de l'acétate éthylique et on concentre la solution sous vide. On répète cette opération deux fois et on dissout dans 12 ml d'acétate éthylique 3_e résidu brut pesant 10,3 g. Après repos à 3.a température ambiante, on récupère 1 ,43 g de la substance de départ (VII) sous la forme d'une matière 15 solide cristalline, le filtrat consiste en un mélange d'au moins 3 composants, contenant un peu de matière première (VII). Par chromatographie sur du gel de silice en utilisant un mélange d'acétate éthylique et de cyclohexane à 80:20, on élimine la matière première (VII), ce qui donne 5,08 g de substance renfer-20 mant essentiellement deux composants (R^ 0,66 et 0;75) comme indiqué par chromatographie en couche mince (solvants : acétate éthylique ; gel de silice). On chromatographie cette substance sur gel de silice en effectuant 1*élution avec un mé3.ange d'acétate éthylique et de cyclohexane (40:60) et on recueille des fractions 25 de 1 5 ml. Les tubes 140 à 210 contiennent la 2'-0-^,3'-0- 4 dibenzoyl-ÎT -triciilorethoxycarbonyl-5 ' -O-trityl-ara-cytidine (X) et les tubes 310 à 360 contiennent la 2 '-0-ber.zoyl-n^-trichlor- éthoxycarbony3.-5'-O-trityl-ara-cytidine (VIII ) et la 3'-0-ben- 4 r autre zoyl-IÏ -trichloréthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine(IX).Une/chroma- 4 30 tographie sur gel de silice sépare 3.a 3 ' -0-bsnzoyl-H -trichloréthoxycarbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (IX), qui se déplace juste en avant du composé 2'-0-benzoyle VIII correspondant. Les fractions contenant le composé VIII peuvent aussi être recueillies séparément et traitées ensuite de la même manière 35 que ci-dessous, pour donner la 2'-G-benzoyl-ara-cytidine (i). La 3'-O-benzoyl-N^-trichloréthoxycarbony 1-5'-O-trityl-ara-cytidine (IX) purifiée est traitée avec un mélange de 80 i<> d'acide acétique et de 20 $ d'eau pour éliminer le groupe trityle ""bad 72, 02592 « 2123441 et pour donner là 3' -0~benzoyl-N^~-trichloréthoxycarbon.yl-ara~ cytidine (IX1). Ce traitement est suivi d'une réaction avec du zinc dans le méthanol au reflux, pour éliminer le groupe I^-trichlor-éthoxycarbonyle ; la substance brute résultante (III) est puri-5 fiée par chromatographie sur colonne de gel de silice, puis élution d'abord avec un mélange de cyclohexane, d'acétate éthylique et d'éthanol à 95 f° (5:3:1) puis avec un mélange de méthyl-éthylcétone, d'acétate et d'eau (72:20:8), Les fractions désirées sont rassemblées, évaporées pour donner un l'ésidu solide, puis 10 recristallisées dans l'acétone, ce qui donne la 3'-0-benzoyl-ara-cytidine (III) purifiée ayant un point de fusion de 208 à 210°C (avec légère décomposition). Analyse : C °/o H % H fo Calculé pour C^H^OglT^ 55,33 4,93 12,10 15 Trouvé 55,26 5,08 12,28 UV : 231 mjj. s = 21 600 272 m^t e = 10 700. En suivant le mode opératoire de l'exemple 3, mais en remplaçant le chlorure de benzoyle par d'autres agents d'acylation, 20 tels que les suivants : (1) chlorure de p-nitrobenzoyle, (2) chlorure de o-toluoyle, (3) chlorure de 2,4,6-triméthylbenzoyle, (4) chlorure de 3,4,5-triraéthoxybenzoyle, 25 (5) chlorure de 2,6~diméthylbenzoyle, etc., on obtient respectivement les composés suivants : (1) 3'-O-p-nitrobenzo.yl-ara-cytidine (III), (2) 3' -O-o-toluoyl-ara-c.yt idine (III), (3) 3'-0-2,4,6-triinéthylbenzoyl-ara-cytidine (III), 30 (4) 3'-0-3,4,5-triméthoxybenzoyl-ara-cytidine (III), (5) 3'-0-2,6-diméthylbenzoyl-ara-cytidine (III), etc. et, le cas échéant, les 2'-0-acylates correspondants de 1'ara-cytidine (î). Exemple 4 2 '-O-.-, 31-0~ et 2',5t~di-0-méthoxycarbonyl-ara-cytidines 35 (I, III et V) On ajoute 1 g (environ 10,6 rillimoles) de chloroformiate mé-thylique à une solution de 6,6 g (10 millimoles) de N4-trichlor-éthoxycarbony1-51-O-trityl-ara-cytidine (VII) dans 25 ml de BAD ORIGINAL 72 02592 49 2123441 pyridine anhydre. On agite le mélange à la température ambiante pendant environ 16 heures. On évapore le solvant sous vide, on dissout le résidu dans de 1*acétate éthylique, puis on chromâtographie la solution sur une colonne de gel de silice. 4 5 Après élimination de la 2 '-0-3 f~0-di(méthoxycarbcnyl)-lT '-tri-chloré thoxy carb ony 1-5 '-O-trityl-ara-cytidine (X') comme composant se déplaçant rapidement (point.A), on élue la 2'-0-méthoxycarbonyl--IT^~tric:iloréthozycarbonyl-5 '-O-trityl-ara-cytidine (VIII') et la 3'-O-méthoxycarbonyl-ïï^-trichloréthoxy-10 carbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (IX) sous la forme d'un mélange qu'on rechromatographie pour obtenir la séparation (point B). A la 3 1 -Q-méthoxycarbonyl-IÏ -tricliloréthoxycarbony 1-5'-O-trityl-ara-cytidine (IX1) purifiée est hydrolysée en position 5' par mélange avec environ 100 ml d'acide acétique (80 et d'eau (20 Ç) 15 à la température ambiante. la 3'-O-méthoxycarbonyl-N^-trichlor-éthozycarbonyl-ara-cytidine (IX") résultante est dissoute dans environ 50 ml de méthanol et la solution est chauffée au reflux avec environ 1 g de poudre de zinc jusqu'à ce que le groupe trichloréthoxy-carbonyle en position soit éliminé. On suit 20 la progression de la réaction par chromât o graphie en couche mince. lorsque la réaction est terminée, on élimine le zinc par filtration et on concentre le filtrat sous vide pour obtenir un résidu solide. On recristallise le produit dans du méthanol bouillant, ce qui donne la 5'-O-méthoxycarbonyl-ara-cytidine 2'-0 (VIIIf) au point B sont ensuite traités individuellement (comme dans le cas du dérivé 3'-0 (IX' ), ce qui donne la 2',3'-di-O-méthoxycarbonyl-ara-cytidine (V) et la 2'-0-30 méthoxycarbonyl-ara-cytidine (l) purifiées. en remplaçant le chloroformiate de méthyle par d'autres agents d'acylation, par exemple les suivants : 25 (III) pure. Le dérivé 2', 3'-di-0 (X') au point A et le dérivé En suivant le mode opératoire de l'exemple 4, mais 35 (1) chloroformiate d1éthyle, (2) chloroformiate de carbobenzoxy (3) chloroformiate d'ootyle, (4) chloroformiate de palmityle, 72 02592 2123441 (5) chloroformiate de phényle, etc., on obtient respectivement les composés suivants : ( 1 ) 31 -O-éthoxycarbonyl-ara-cytidine (III ), (2) 3 ' -O-carb o~b enzoxy carbony 1-ara-cytidine (III), 5 (3) 5 f-O-oc ty lo x.y c arb onyl-- ara-c yt idino (III), (4) 5 '-0~palmityloxycarbonyl-3.ra-cytidine (III.), (5) 3'-O-phényloxycarbonyl-ara-cytidine (III), etc. et les 2'-0- et 2',3'-di-O-acylates correspondants de 1'ara-cytidine. 10 Exemple 5A 31-O-, 5'-O-dipalmityl-ara-cytidine (IV) On agite tme suspension de 200 g (0,72 mole) du chlorhydrate d' ara-cyt idine (Xla) connu dans 1,5 litre de di-méthylacétamide jusqu'à ce que la majeure partie de la substan-15 ce solide soit dissoute. On ajoute goutte à goutte pendant environ une heure 393 g (1,43 mole) de chlorure de palmityle et on agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant ic , n , . qjie .l'on .verse environ 16 heures. On obtient une suspension blanche épaisse / dans 6 litres d'un mélange d'acétate éthylique et d'éther 20 (1:1). On filtre cette substance den.se (IVa) , on la lave avec un mélange d'acétate éthylique et d'éther (1:1) puis avec de l'éther, et on la sèche sous vide, ce qui donne 370 g de substance solide brute. Cette substance (IVa) est agitée avec quatre litres de solution de bicarbonate de sodium 0,5 I pendant 25 environ deux heures, filtrée, lavée à fond avec de l'eau et séchée par succion sur le filtre. Le résidu brut de filtration est recristallisé dans 5 litres de méthanol bouillant et après réfrigération pendant environ 16 heures, on obtient 180 g de substance solide. On recristallise de nouveau environ 10,5 g 30 de cette substance dans 700 ml de méthanol bouillant, ce qui donne 6,4 g de 3'-0-, 5'-O-dipalmityl-ara-cytidine (IV) partiellement purifiée, contenant un composant principal ( d'environ 0,45 dans un mélange de chloroformeîméthanol à 9:1, plaques de gel de silice) et une impureté (R^ égal à 0,87 dans 35 un mélange de chloroforme et de méthanol à 9:1» plaques de gel de silice). Cette substance (pesant 4,5 g)est purifiée par chromatographie sur colonne, en utilisant pour 1'élution un • v- j bâd original 72 02592 2123441 solvant composé de 99,25 CA de chloroforme et 0,75 A d'éthanol, jusqu'à ce qu'une substance solide commence à être éluée de la colonne. On utilise ensuite comme système de. solvants -un mélange à 98 de chloroforme et 2 r' d'éthanol et on recueille des frac-5 tions de 70 ml. On jette les fractions 1 à 22 contenant une substance de R^ égale à 0,87» Les fractions 36 à 60 contiennent très peu de la substance désirée et on utilise alors comme éluant un mélange à 3 A d'éthanol et 97 CA de chloroforme, et finalement un mélange à 5 CA d'éthanol et 95 CA de chloroforme, 10 avant que ne commence 1'élution du produit IV désiré. Le produit 17 récupéré pèse 3,2 g. On recristallise environ 2,2 g de ce produit dans 110 ml de méthanol bouillant et on obtient par refroidissement 2,1 g de 3'-0-, 5'-O-dipalmityl-ara-cytidine (IV) ayant un point de fusion de 111 à 112°G (le produit se 15 contracte à 88°,il devient vitreux à 98°C puis il s'écoule nettement à 111 --112 °G. Analyse : C $ H F Calculé pour O^ïI^O^N^ : 68,39 10,22 5,84 Trouvé : ' 68,37 10,21 5,97 20 R^ 0,42 (solvants = chloroforme:méthanol - 9:1, plaques de gel de silice). La structure du composé est confirmée par son spectre de résonance magnétique nucléaire. En suivant le mode opératoire de l'exemple 5, mais en remplaçant le chlorure de palmityle par d'autres agents 25 d'acylation, à savoir : (1) chlorure d'isobutyryle (2) chlorure d'octanoyle (3) chlorure de stéaryle (4) chlorure de p-chloropivaloyle, 30 (5) chlorure de p-toluoyle (6) chlorure de t é trahydro f uroyle (7) chlorure d'isonicotinyle, etc., on obtient respectivement les composés suivants : (1) 3 '-0-, 51 -O-diisobut,7ry 1-ara-cyt idine (17), -35 (2) 3'-0-, 5'-0-diootan o yl-a^a-cyt idine (17), (3) 3'-0-, 5'-O-distéaryl-ara-cytIdine" (17), (4) 3'-0-, 5 ' -0-di ( (3 - chlo r o p ival o y 3)- ara- c y t i-dine (17), BAD- 52 oi ?3441 72 02592 ' (5)..3'-0-, 5'-0-di(p-toluoyl)-ara-cytidine (IV), (6) 3'-0-, 5'-O-ditétrahydrôfuranoyl-ora-cytidine (IV), (7) 3'-0-, 5'-O-dlisonicotlnyl-ara-cytidine (IV), etc., Exemple 5B En suivant le mode opératoire de l'exemple 5A, mais 5 en procédant à un contrôle minutieux, par exemple par détermination en lumière ultraviolette de l'absorption sur gel de silice dans la chromâtographie en couche mince, comme décrit ci-dessus, on observe que les diacylates produits dans la réaction d'acylation sont élues suivant deux pics successifs 10 rapprochés. La substance du premier pic consiste en 31,5'~cli~0-palmityl-ara-cytidine et celle du second pic consiste en 2',5,~ di-O-palmityl-ara-cytidine. Les fractions contenant la 2',5'-di-O-palmityl-ara-cytidine sont séparées puis traitées conformément au mode opératoire décrit dans l'exemple 5A pour le 15 3',5'-di-0-ester, ce qui donne la 2',5'-di-O-palmityl-ara-cyt idine . Exemple 6 3',5'-di-(O-palmityl)-ara-cytidine (IV) obtenue à partir de 2.2'-anhydro-ara-cytidine (Xllb) protonée. 20 On met en suspension, sous agitation, 1,3 g de chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine (Xllb) dans 50 ml de diméthylacétamide et on ajoute une solution de 3,0 g de chlorure de palmityle dans 25 ml de dimcthylacétamide. On agite le mélange pendant environ 160 heures à une température de 55°0. 25 On sépare par filtration environ 0,2 g de substance insoluble et on concentre le filtrat sous vide, ce qui laisse un résidu solide. Par chromatographie sur gel de silice, en utilisant le système de solvants méthyléthylcétone:acétone:eau 72:20:8, on peut séparer la 3'-0-, 5'-O-dipalmityl-ara-cytidine (IV) 30 de trois autres composants du mélange réactionnel, ayant des valeurs plus faibles de R^. Exemple 7 Préparation de la 3 ',5'-di-(Q-benzoyl)-ara-cytidine (IV)' à partir de la 2,2'-anhydro-ara-cytidine (Xlla). 35 On met en suspension 5,22 g de 2,2'-anhydro-ara- cytidine (Xlla) dans 160 ml de pyridine anhydre, sous agitation» bad origfwaf 72 02592 2123441 On ajoute goutte à goutte 9 g de chlorure de "benzoyle, tout en agitant pendant environ deux heures, La substance solide réagit progressivement et, au bout de 16 heures, on obtient une solution limpide. Pour achever la réaction, on 5 chauffe la solution au bain-mari e b0ui.lJ.2nt pendant 1,75 heure et on obtient principalement une tache unique de IL, égal à 0,72 (CHCl^ rï-îeOE 90:10). On évapore' le mélange réactionnel à sec pour éliminer la pyridine. On dissout le résidu dans de l'éthanol absolu et on l'évaporé de nouveau pour chasser les 10 traces de pyridine. On répète ce processus trois fois. La substance semi-solide résultante est délayée avec 50 ml de méthanol et filtrée. La substance solide est lavée une fois avec du méthanol froid puis recristallisée dans du méthanol bouillant ; on obtient 4,33 g de substance fondant à 197,5-15 193,5°C.0n récupère dans les divers filtrats un supplément de 2,95 g. L'analyse montre que cette substance consiste en 3!-0, 5 ' -O-IT^tribenzoyl-ara-cytidine hydratée (XV). On dissout 1,5 g d'hydrate de 3'-0, 5'-0, IT'-tribenzoyl-ara-cytldine dans 15 ml d'un mélange de pyridine et d'acide acétique à 4:1 et on 20 ajoute 0,45 ml d'hydrate d'hydrazine. On agite la solution pendant une heure à la température ambiante puis on la refroidit pendant environ 16 heures. On chasse le solvant par évaporatinn et on chromatographie le résidu sur du gel de silice en utilisant un mélange de CH^Cl^ et d'alcool méthylique à 95:5. On 25 rassemble les fractions contenant le produit désiré et on les recristallise dans un mélange de méthanol et d'eau, ce qui donne 538 mg d'hydrate de 3'-0« 5'-Q-dibenzoyl-ara-cytidine (IV) fondant à 247-248°C en se décomposant. XJne petite quantité de substance jaune est séparée par une autre chromatographie, 30 comme décrit ci-dessus. L'hydrs,te de 3'-0, 5' -O-dlbenzo.yl-ara-cytidine (IV) purifié cristallise sous la forme de fines aiguilles blanches foiidant à 247-248°C en se décomposant. Analyse : C £ H # H cfo Calculé pour C^H^O^.E^O : 58,84 4,94 8,95 35 Trouvé : .59,28 4,61 9,11 72 02592 2123441 Spectre "ultraviolet (Et OH) m'i-i g 232 32 OOO 268 9 850 5 (large maximum) 282 6 950 (léger spaule-10 ment) Spectre de résonance magnétique des noyaux : conforme à la structure. Exemple 8 Préparation de la 3'-O-palmityl-ara-cytidine (III) à partir de 15 2,2'-anhydro-ara-cytidine (Xllb). On mélange 26,07 g (0,1 mole) de chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (Xlïb) avec 500 ml de pyridine. On ajoute environ 30,7 g (0,11 mole) de triphénylchlorométhane et on agite le mélange à la température ambiante pendant environ 20 120 heures. On chasse sous vide le solvant en excès et on triture convenablement le résidu avec du benzène, à plusieurs reprises, en effectuant une décantation pour éliminer l'excès de triphénylchlorométhane et de pyridine. On dissout ensuite diraéthyl^ orm-imide le résidu dans du dimethylforaamide anhydre, puis on évaporé le/ 25 sous vide (pression inférieure à 1 mm) pour éliminer le benzène-résiduel. Le chlgrhydrate de 5-0-trity1-2,2'-anhydro-ara-cyt idine (XVII)/que l'on obtient est mélangé avec 300 mg de diméthylformamide anhydre, puis on ajoute goutte à goutte en deux heures 30,24 g de chlorure de palmitoyle (0,11 mole) 30 en solution dans 200 ml de diméthylformamide anhydre. On laisse la réaction se développer pendant environ 24 heures. On chasse ensuite le solvant sous vide et on purifie le produit réactionnel résultant par chromatographie sur gel de silice. On dissout dans de l'acide acétique cristallisable le chlorhydrate de 5'-0-35 trityI-3'-0~palmityl-2,2'-anhydro-ara-cytidine (XVIII) purifié et on ajoute de l'eau en agitant, jusqu'à ce qu'un trouble apparaisse. La solution claire est ensuite chauffée à environ 40°C pendant 16 heures pour éliminer le substituant 5'-0-trityle. original 72 02592 2123441 Le mélange réactionnel résultant est concentré sous vide et le résidu résultant est extrait avec de l'éther pour éliminer tout chlorure de palmitoyle n'ayant pas réagi-et le triphényl-mothyl-carbinol, On fait ensuite macérer convenablement le produit 5 résultant avec u&g solution à 2 £ de bicarbonate de sodium pour effectuer l'hydrolyse totale en un cycle anhydro et pour neutraliser le chlorhydrate, La 3'-O-palmityl-ara-cytidine (III ) brute obtenue est séchse sous vide. On peut encore la purifier par recristallisation dans du méthanol. ou par purification prélimi-10 naire par chromatographie sur gel de silice, suivie d'une recristallisation dans du méthanol, ce qui donne la 3'-0-palmi-tyl-ara-c.ytidine (III) purifiée. Exemple 9 Préparation de la 2', 31 -di-O-palaityl-ara-cytiàine (V) par 15 le procédé A, On dissout 19,8 g (30 mmoles) de ïT^-trichloréthoxy- carbonyl-5'-O-trityl-ara-cytidine (VII) dans 150 ml de pyridine anliydre. On ajoute 16,4 g (33 mmoles) d1 anhydride palmitique, La suspension résultante est agitée pendant environ 16 heures 20 et on obtient une solution limpide à mesure que l'anhydride palmitique solide réagit. Le mélange réactionnel est concentré sous vide pour formai' une substance sirupeuse. Cette dernière est dissoute dans de l'acétate éthylique et la solution est évaporée sous vide, cette dissolution et cette évaporation étant répétées 25 deux fois. Le sirop final obtenu (environ 39 g) est dissous dans 500 ml d'éther et. la solution est lavée avec 300 ml de solution de sodium à 1 c/o de bicarbonate/fraîchement préparée,puis avec trois portions de 70 ml d'eau, La phasçA'éther est déshydratée sur du sulfate anhydre de sodium et le solvant est éliminé, ce qui 30 donne 34,8 g d'un résidu sirupeux, La chromatographie. en couche mince (gel de silice, cyclohexane-acétate éthylique 1 :1) révèle la présence de trois composants principaux avec des valeurs R^ égales à 0,78 et 0,39, cette dernière valeur corrospondant à une tache double, 35 Le sirop est chroaatographie sur 2,5 kg de gel de silice, au moyen d'acétate éthylique utilisé comme solvant d'élution, Aussitôt que la matière absorbant les rayons ultraviolets BAD 72 02592 55 ■ ^ : 2123441 commence à apparaître dans le courant sortant, on recueille des fractions de 200 ml. Sur -un total de 32 fractions, les frac- fi tiono 1 à 4 contiennent environ 5,07 g de lï'-trichloréthoxy-c arb ony 1-51 -0-tr ityl-213 3 *-di-( 0-palimityl ) -ara-cyt idine ( X ) 5 purifiée. Les fractions 4 à 32 contiennent environ 16,34 g de substances solides, trois composants pouvant être distingués par chromatographie en couche mince dans la plupart des fractions. Cette substance (16,34 g de substances solides) est rechromàtographiée sur du gel de silice, 1'élution étant 10 effectuée avec un mélange de solvants consistant en acétate éthylique et cyclohexane (1:1). Par élution (UV) des produits, on recueille des fractions de 100 ml. Les fractions 1 à 60 contiennent environ 6,98 g du composé X. Les fractions 1 à 14 de la première colonne (voir ci-dessus) sont rassemblées et 15 donnent 12,05 g de substance X. On dissout cette substance dans 200 ml de mélange à 80 c/o d'acide acétique et 20 £ d'eau et on ajoute 12 g de poudre de zinc. On agite le mélange pendant environ 16 heures. Le zinc résiduel est séparé par filtration et le filtrat est chauffé au bain-marie bouillant pendant deux 20 heures pour achever l'élimination du groupe 5'-0-trityle protecteur. La solution est ensuite concentrée à sec sous vide et le résidu sec est dissous dans du chloroforme puis la solution est lavée avec deux portions de 200 ml d'eau. La phase chloroformique est déshydratée sur du sulfate anhydre 25 de sodium puis concentrée sous vide pour donner un résidu solide. Le résidu est recristallisé deux fois dans de l'acétone, ce qui donne 3,4 g de cristaux de 2',3'-di-(O-palmityl)-ara-cytidine (Y), fondant à 144-145°C. Analyse : Q fo ■ E fo IT $ 30 Calculé pour C^H^O,^ : 68,39 10,22 5,84 Trouvé : 68,16 10,26 6,07 W : 238 m|i s = 7 800 271 niy. s = 8 250 Chromatographie en couche mince : plaques de gel de silice, 35 système de solvants = chloroforme : méthanol 95 : 5. R£ = 0,22 BAD ORIGINAL 72 02592 57 2123441 BgVBÏÏOTCATItW 1. Composé, caractérisé par le fait au'il répond à la formule : zoçho 0 I, Il 10 15 20 (ce composé existant également, sous la forme de ses sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique), formule dans laquelle T est choisi entre î 0 (1) un groupe ai- dans lequel R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiqties en C^ à C?Q, aromatiques en Cg à C.jq, des radicaux hydrocarbonés à structure en cage en C j à C^q, des radicaux aliphatiques monocycliques en C^ à C^, araliphatiques en C^ à C^ et hérérocy clique s mono cyclique s en C^ à C^q, y compris ces radicaux substitués par des halogènes, des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle ou mercapto, et ' i? (2) un groupe R'OC-, dans lequel S' est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C^ à C^,. aromatiques en C^ à C1(. /araliphatiques en C^ à C^2 et Z est. choisi entre Y et un atome d'hydrogène. 2. Composé suivant la revendication 1# caractérisé par le fait au'il consiste en 2'-O-palmityl-ara-cytidine, 2'-0-st éaryl-ara-cytidine ou 2'-0-méthoxycarbony1-ara-cytidine. 3• composé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que Y et Z sont choisis entre : BAB QRIC-',K-&-É- 72 02592 f 58 2123441 (1) un groupe RC- dans lequel P. est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en G, à des ra dicaux aromatiques en Cg à des radicaux hydrocarbonés à structure en cage en à G20, des radicaux aliphatiques mono-5 cycliques en à des radicaux araliphatiques en C^ à 0^ et des radicaux hétérocycliques no-no cyclique s en à C^q» y compris ces radicaux substitués par des halogènes et des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle ou mercapto et 0 II 10 (2) un groiipe R'OC- dans lequel R' est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en à G^q, des radicaux aromatiques en Gg à G^q et des radicaux araliphatiques en à C.J2 ; ce composé existant également sous la forme de ses sels d'addition d'acides acceptables du point de vue 1 5 pharmaceutique. 4. Composé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que Z et Y sont des groupes : 0 RG- , R étant un groupement (CHg^^CH^, le composé étant par 20 conséquent la 2',5'-di-0-palmityl~ara-cytIdine. 5. Composé caractérisé par le fait qu'il réjjond à la formule : nh2 .(ce composé existant également sous la forme de ses sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique) 25 formule dans laquelle Y est choisi entre : 0 . . H (1) un groupe RC- dans lequel R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C à C^q, des radicaux BAD ORIGINAL 59 72 02592 2123441 aromatiques en Cg à des radicaux hydroc arbonés à structure en cage en Cr. à Con, des radicaux; aliphaticmes monocycliques ( en C^ à CI.JQ, des radicaux araliphatiques en h C^ eJ,; dos radicaux hétérocycliques nonocycliques en à C.j ^,;y6ompris 5 ces radicaux substitués par des halogènes et des groupes hydroxyle, Carboxyle, nitro, alkoxyle ou mercapto ; et O H • (2) un groupe R'OC-, dans lequel R' est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C.j à C^o' ^es ra 6. La 31-0-méthoxycarbonyl-ara-oytidine, la 3'-0-palmityl-ara-cytidine. la 3'-O-stéaryl-ara-cytidine et la 3f-0-benzoyl-ara-cytidine. 15 7. La 3 ' »5 '-di-(0-palmityl)-ara-cytidine et la, 3 ', 5 ' -di- (0-benzo;yl ) -ara-cyt idine. 8. Composé caractérisé par le fait qu'il répond à la formule : M Ha HOCH (ce composé existant également sous la forme de ses sels 20 d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique), formule dans laquelle Y est choisi entre : î (1) un groupe RC- dans lequel R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en G^ à C^q, des radicaux aro-25 matiques en Cg à G^des radicaux hydrocarbonéa à structure en BAD OBlGiMAlr 72 02592 '2123441 cage en C^ à C^q, des radicaux aliphatiques monocycliques en 0^ à C^( des radicaux araliphatiques en 0r^ à 0^ et des radicaux hétc-rocycliques monocycliques en 0^ à C.|q> y compris ces radicaux substitués par des halogènes et des groupes hy-5 droxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle ou mercapto et 0 11 (2) un groupe R'OC- dans lequel R' est xm radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C^ à C^q, aromatiques en Cg à C^q et araliphatiques en C^ à C^ et Z est choisi '10 entre Y et un atome d'hydrogène. 9. la 21.31-di-(O-méthoxycarbonyl)-ara-cytidine et la 2',3'-di-(Q-palmityl)-ara-cytidine. 10. Procédé de préparation d'un composé répondant à l'une des formules : bad original ' 72 02592 61 2123441 et HOCK O 11 (dans lésquelles R du groupe RC- est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C^ à C^, des radicaux aromatiques en Gr a C,„, des radicaux hydro carboné s à structure en ca-fe en o 10 5 C y h C^q, des radicaux aliphatiques monocycliques .en C^ à C^ des radicaux araliphatiques en C^ à C^ et des radicaux hété-rocycliques monocyc 1 iaues en C^ à C^, y compris ces radicaux substitués pa.r des halogènes et des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle ou mercapto), procédé caractérisé par le fait 10 qu'il consiste (1) à mélanger un composé de formule : VI 72 02592 62 2123441 avec tin halogénure de trihalogcnéthoxycarbonyle de formule : O l! G CIL, OCX y 2 (dans laquelle X est choisi entre le chlore et le brome) pour fermer un comuosé correspondant de formule : nh~c-och2cx3 Vf I (dans laquelle X a la définition donnée ci-dessus) ; (2) à acyler un composé ainsi produit pour former un composé correspondant ayant l'une des formules respectives bad original 1 72 02592 2123441 i bad omoriat- 72 02592 64 2123441 (dans lesquelles X et R ont les définitions données ci-dessus) ; (3) à séparer les produits d'acylation les uns des autres ; et (4) à effectuer une hydrolyse dans les positions 5'-0 et pour obtenir un composé respectif correspondant à l'une des formules I, III et V données ci-dessus. 11. Procédé de préparation d'un composé répondant à l'une des formules respectives Ba° 72 02592 65 2123441 -et NHa O (dans lesquelles R du groupe R$- est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en à 0Oq, des radicaux aromatiques en Cg à C^q, des radicaux hydrocarbonés à 5 structure en cage en 0^ à C2Q, des radicaux aliphatiques monocycliques en à des radicaux araliphatiques en C^ à et des radicaux hétéro cyclique s raono cyclique s en 0^ à C^, y compris ces radicaux substitués par des halogènes, des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle ou. mercapto), 10 procédé caractérisé par le fait qu'il consiste : (1) à mélanger un composé de formule : BAD ORiGiNAU1 72 02592 2123441 avec un halogénure de trihalo génét hoxycarbony le de formule : O h (dans laquelle X est choisi entre le chlore et le brome) pour former un composé correspondant de formule : (0 ii -och2cx3 (dans laquelle 1 a la définition donnée ci-dessus)j (2) à acyler un composé ainsi produ.it pour former un composé correspondant à l'une des'formules respectives : 0 vi l oh 0 If Û nh-c-och2cx3 I coch* N viii oh BAD ORIGINAL 72 02592 67 2123441 •och2cx3 IX OCR et '0ch2cx3 (dans lesquelles X et R ont les définitions données ci-dessus) ; (3) à effectuer une hydrolyse dans les positions 5'-0 et pouf obtenir le composé, respectif correspondant 5 aux formules I, IÎI et Y données ci-dessus ; et (4) à séparer les uns des autres les produits d'acylation de formules I, III et Y. 12, Procédé suivant la'revendication 10, caractérisé 0 10 par le fait que RC- est un radical palmityi.e, stearyle ou benzoyle. !na(, 1 72 02592 68 2123441 13. Procédé suivant la revendication 10, caractérisé par le fait que le composé de formule "VIII est la N^-trichloréthoxycarbonyl-51-0-trityl-ara-cybidine. 14. Procède de préparation d'un composé répondant à l'une des formules respectives : hoch; ho çl-b I • I i I ' et bad original 72 02592 69 2123441 .0 H (dans lesquelles R' du groupb R'00- est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en à G^q, des radicaux aromatiques en G g à G^ et des radicaux araliphatiques en à procédé caractérisé par le fait qu'il consiste : (1) à mélanger un composé de formule r oh avec un halogénure de triaalogénéthoacycsrïjonylo de formule : O H CX-CIL^OGX BAD ORIGJMA^^ 72 02592 2123441 (dans laquelle X est choisi entre le chlore et le brome) pour obtenir >.m composé correspondant de formule : 0 (dans laquelle X a la définition donnée, ci-dessus) ; (2) à acyler un composé ainsi produit en le mélangeant avec un composé de formule : O II H'OCCl (dans laquelle .R' a la définition donnée ci-dessus) pour obtenir un composé correspondant ayant l'une des formules respectives : l NHCOCHaCXa C0CH2 O^N 0 hc VI oh BAD ORJGiiW 72 02592 71 2123441 et bap 72 02592 72 ' 2123441 (dans lesquelles il1 et X ont les définitions données ci-dessus) (3) à séparer les produits d'acylation les uns des autres,et (4) à. effectuer l'hydrolyse en position 5'-0 et à éliminer ainsi le groupe ' rj '-O-trityle pour former des composés correspondants de formules : HOÇH; NHC0CH2CX3 N IX" OR bad 72 02592 73 2123441 et NHCOCHaCXa 1 X" (dans lesquelles R' et X ont les définitions données ci-dessus), puis (5) à effectuer l'hydrolyse en position des composés ainsi produits pour obtenir un composé respectif correspondant de formules et V* données ci-dessus. 15. Procédé de préparation drun composé répondant à l'une des formules respectives : nha oh BAD 72 02592 74 2123441 HOÇH et mr o II (dans lesquelles R' du groupe R'GC- est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en à , des radicaux aromatiera.es en Gr à C,... et des radicaux araliphatiau.es en . "" Q 10 C^, à C-jg)* Procédé caractérisé par le fait qu'il consiste (î) à mélanger un coaposé de formule : VI BAD ORIGINAL 72 02592 2123441 avec un halogénure de trihaloA'onéthozcycarbonyle de formule : G'XX'ILOCX 0 ?- (dans laquelle X eu'; choisi entre le chlore et le brome) •oour obtenir un composé correspondant de formule ; ^ coch2cx3 vu 10 (dans laquelle X a la définition donnée ci-dessus) ; (2) à acyler un composé ainsi produit en le mélangeant avec un composé de fornule : 0 H ' ■ R'OCCl (dans laquelle RJ a la définition donnée ci-dessus) pour obtenir un composé correspondant ayant l'une des formules respectives : vi ! \ ' BAD QRîGîNAL 72 -02592 76 2123441 et HCOCHaCXs IX 1 NHCOCH2CX3 (dans laquelle R1 et X ont les définitions données ci-dessus) (3) à effectuer l'hydrolyse en position 5'-0 et à éliminer ainsi le groupe 5'-O-trityle pour obtenir des composés correspondants de formules : HOÇHa NHCOCHaCXs VIN" BAD ORIGINAL 72 02592 77 2123441 NHCOCHaCXa et HOCHs cloR« (dana lesquelles R' et X ont les définitions données ci-desaus) (4) à séparer les mis des autres les produits d'acylation ; et (5) à effectuer 1 'hydrolyse en position Ei^ des composés ainsi produits poiir obtenir ira. composé respectif correspondant de formules I', III1 et 7' données ci-dessus. 16. Procédé suivant la revendication 14-, caractérisé par le fait que R! est un groupe aéthyle. 17. Procédé de préparation d'un conposé de formules respectives : i NHCOCHaCXa i l OR^NAl*. 72 02592 78 2123441 11 et IV OCR 10 (dans lesquelles R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en à C^, des radicaux aromatiques en G g à G^, des radicaux hydro carboné s à structure en cage en à G^q, des radicaux aliphatiques monocycliques en à C-jq* des radicaux araliphatiques en CL, à 0^ et des radicaux hétérocycliques monocycliques en à C'jq» y compris ces radicaux substitués par des halogènea et des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alko:iyle ou mercapto), procédé caractérisé par le fait qu'il consiste ï (t) à acyler un composé de formule î ORlQiN^ 72 02592 79 2123441 HOCH © Ç) m s « w Xla (dans laquelle w ® est un anion d'un acide fort) pour obtenir un composé correspondant de fornules respectives : et H.,® w© RCOCHa Ma nh3w w tVa BAD ORIGINAL 72 02592 so 2123441 (dans lesquelles R "et w ^ont les définitions données ci-dessus) ; (2) à effectuer une neutralisation pour éliminer le proton en position II''" d'un coaposé respectif correspondant ainsi produit de formules II, IV et Y données ci-dessus,et (3) à séparer les produits d'acylation. 18. Procédé suivant la revendication 16, caractérisé 0 II par le fait que RC- est un radical palmityle. 19. Procédé de préparation d'un composé de formule : Y'OCHa IV' (dans laquelle Y' est im groupe acyle aromatique en Cg à pi-océdé caractérisé par le fait qu'il consiste ; (1) à acyler un composé de formule : HO H; X! la BAD ORIGINAL 72 02592 si 2123441 avec un agent d.'-acylation de formule î Y'OY* ou Y*X1 (dans laquelle Yr a las définitions données ci-dessus, et est choisi entre les radicaux cMoro, fcroïao, iedo) pour obtenir un composé correspondant de formule : NY* (2) à éliminer sélectivement le groupe ïï^-acyle pour obtenir un composé correspondant de formule : (dans laquelle Y' a les définitions données ci-dessus) et (3) à effectuer l'hydrolyse de la liaison 2,2'~anhyd.ro pour obtenir le composé de formule IV donnée ci-dessus. 20. Procédé suivant .la revendication 18, caractérisé G il par le fait que RC- est un radical benzoyle. BAD ORIGINAL 72 02592 82 2123441 21. Procédé do "préparation d'un conroosé de formule Y0ÇH2 ÎV 10 0 II (dans laquelle Y est choisi entre des groupes RC- dans lesquels R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C.j à C^q, aromatiques en Cg à C^Q, des radicaux hydrocarbonés à structure en cage en C^ à C0^, des' radicaux aliphatiques monocycliquas en C^ à ^q» araliphatiques en C^ à C^^ et hété-rocycliques mono cyclique s en (i ê à ^, y compris ces radicaux substitués par des halogènes, des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle et mercapto), procédé caractérisé par le fait qu'il consiste : (1) A acyler un composé de forsmle : / HOH tH£© w© Xf fb BAD QRiUilW 72 02592 63 2123441 (dans laquelle w eai l'anion d Hin acide fort*) avec un agent d'acylation choisi dans le groupe de ceux qui répondent aux f ormules : ÏOÏ et YX, 1 (dans lesquelles ;Y a la définition donnée ci-dessus, et est choisi entre le chlore, le brome et l'iode) pour obtenir on composé c o rre g pond ont de formule : OY (dans laquelle Y et v ont les définitions données ci-dessus) et (2) à effectuer l'hydrolyse de la liaison. 2,2'- anhydro pour obtenir un composé correspondant choisi dans le groupe comprenant les composés de formule IV donnée ci-dessus, et un sel d'addition d'acide de ce composé, 22. Procédé suivant la revendication 21, carac- 0 ii térisé psr le fait que KO- est un radical palmityle. 23» Procédé de préparation d'un composé de formule : ' ©AD ©B5SWÀL 72 02592 2123441 (dans laquelle Y est choisi entre 0 u (1) un groupe RC- , dans lequel B. est choisi entre des radicaux aliphatiques en à G^q, des radicaux aromatiques en Cg à q, des radicaux hydrocarbonés à structure 5 en cage en à C20, des radicaux aliphatiques mono cyclique s en à des radicaux araliphatiques «n 0^ à et des radicaux hé t é r o cy c lique s raonocycliques en G^ à 0, j/coiupris ces radicaux substitués par des halogènes et des groupes hydroxyle, carboxyle, "nitro, alkoxyle et marcapto ; et 10 ? (2) un groupe II'OC.- dans lequel R' est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C^ à C^q, aromatiques en Cg" à C^q .et araliphati que a en C^ à C^) > procédé caractérisé par le fait qu'il consiste : 15 (1 ) à mélanger un composé de formule : - BAD ORJGf*'*' 72 02592 85 2123441 MOCHa XI fb (dans laquelle "w^ est un anion d'un acide fort) avec un halogénure de triphenylaiéthyle pour obtenir un composé correspondant de formule : XV! I (dans laquelle w ^ a la définition donnée ci-dessus) 5 (2) à mélanger un composé correspondait ainsi produit résultant de l'étape (l) avec un composé correspondant choisi entre des composés de formule : ïXt ou YOY (dans laquelle Y a les définitions données ci-dessus et est 10 choisi entre le chlore, le brome et l'iode) pour obtenir un ■■i ■ ba0 ofoin*1- 72 02592 86 2123441 . composé correspondant de formule t 0 0 Wla w ^ XV H I (dans laquelle Y et w® ont les définitions données ci-dessus j (3) à effectuer l'hydrolyse en position 5'-0 d'un composé correspondant ainsi produit dans l'étape (2) pour obtenir un composé correspondant de formule : NH2 ® . w ® HO.CH XiX (dans laquelle Y et ont les définitions données ci- dessus) et (4) à effectuer l'hydrolyse d'un composé correspondant ainsi produit, obtenu dans l'étape (3) pour obtenir un 10 composé correspondant de formule III donnée ci-dessus, 24. Procédé suivant la revendication 23, caracté- .0 n risé par le fait que Y est un groupe RC- dans lequel R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en C.j à C^q, BAD OBlGiN 72 02592 87 2123441 , des radicaux aromatiques en G,- à C, des radicaux hydrocarbonés b 10' . à structure en cage en G„ à COA, des'radicaux"'aliphatiques mono- ( lL\J cycliques en .0^ à 0^, des radicaux araliphatique3 en à C et des radicaux hét''rQ'cycliq\iea monocyc?..iquec en G^ à C^q. 25. Procédé suivant la revendication 24, caractérisé 0 n , par le fait que UC~ est Un groupe palraityle. 26, Composé caractérisé "par le fait qu'il répond à la formule : w O XV 11 (p\ dans laquelle w^est l'anion d'un acide fort. 27. Composé caractérisé par le fait qu'il répond à la formule : ©,£> XVI M 72 02592 2123441 dans laquelle Y représente : O ti (1) un groupe RC- dans lequel R est choisi entre des radicaux aliphatiques en 0^ à 0 q, aromatiques en Cg à C^q, 5 des radicaux hydrocarbonés à structure en cage en à C^q, des radicaux aliphatiques monocycliaues en C. a 0.nf des radi- et " 4 i U eaux araliphatiques en 0^ à C^ ^/:i-e3 radicaux hétérocycliques monocycliques en C^ à Q, y compris ces radicaux substitués par des halogènes et des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, 10 alkoxyle et mercapto ; et 0 (2) un groupe R'OC- dans lequel R' est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques en à C2Q, aromatiques en Cg à et araliphatiques en 0^ à C^, et w® est 1*anion d'un acide fort. Î5 28. Composé suivant la revendication 27, caractérisé 0 li par le fait que RC- est un groupe palmityle. BAD ORlGINAl