Brevet FR2126228A1 — publié le 19721006

la présente invention concerne une nouvelle pénicilline semi-synthétique, la préparation de ce composé et les médicaments qui renferment cette pénicilline à titre de substance active. ^ Depuis que fût isolé l'acide amino-6 pénicillanique par Batchelor et ses collarorateurs, en 1960, on a préparé de très nombreux dérivés de l'acide pénicillanique doués d'une activité antimicrobienne. Une des conquêtes les plus importantes à laquelle ces recherches ont conduit est la création 10 de pénicillines semi-synthétiques capables de résister à la destruction par les pénicillinases, propriété qui augmente l'intérêt des pénicillines et qui les rend efficaces dans le traitement d'infections causées par des staphylocoques et par d'autres germes producteurs de ces en2ymes , infections 15 que l'on considérait alors comme échappant à l'action des pénicillines connues. Au cours des travaux qui ont conduit à la présente invention la Demanderesse cherchait un nouveau dérivé de l'acide amino-6 pénicillanique qui ait non seulement une bonne 20 résistance à l'égard de la pénicillinase mais aussi un large spectre antimicrobienlui ouvrant d'intéressantes perspectives en clinique. La Demanderesse est ainsi parvenue à préparer un nouveau dérivé de 1'ampicilline, en l'espèce l'acide C(a-25 p-chlorophénoxy-is obutyramido)-2 phényl-2 acétamidoJ-6 diméthyl-3,3 oxo-7 thia-4 aza-1 bicyclo[3,2,0j heptane-carboxylique-2, que l'on appellera pour abréger " a.(p-chloro-phénoxy)-isobutyryl ampicilline",qui a un spectre identique à celui de 1'ampicilline mais qui a, sur cette dernière, l'avantage de résister conve-30 nablement à la pénicillinase et d'être mieux résorbé, cette dernière propriété étant peut-être due à l'acylation du groupe ani-no libre de 1'ampicilline qui réduit son caractère polaire. En ce qui concerne la résistance à 1'inactivation par des lactamases, la Demanderesse l'attribue à l'empêchement 35 stérique causé par l'acylation du groupe am&no par un un groupe volumineux, en l'occurrence le radical p-chloro-phénoxy— isobutyryle, qui protège la liaison {3-lactanr du cycle et empêche la pénétration de l'enzyme au point d'attaque. t. * 2126228 72 05521 On peut attribuer la formule suivante "«V • COOH à la p-chloro-phénoxy-isobutyryl ampicilline qui fait l'objet de l'invention. Le sel potassique.,de la p-chloro-phénoxy 10 isobutyryl ampicilline est un solide blanc cristallisé.: il se ramollit à 130°, pour se décomposer totalement à 186°. Les résultats obtenus par spectroscopie montrent que l'on a bien affaire au composé ayant la structure repré.-sentée ci-dessus. 15 Ainsi le spectre infrarouge de la p-chloro- phénoxy-isobutyryl ampicilline montre une bande large centrée à 3350 cm"1 qui correspond à la vibration d'étirement du groupe N-H des groupements amides; une autre bande à 1775 cm""1 peut être attribuée à la vibration d'étirement du groupe C=0 du cycle 20 p-lactame, une autre à 1675 cm"1'correspond à la vibration d'étirement du groupe C=0 des groupements amides. La bande à 1230 cm"1 correspond à la vibration d'étirement de la liaison C-0 du groupe éther. On observe en outre, dans la région des 2.900 à 3.000 cm"1, les bandes correspondant aux 25 vibrations d'étirement des liaisons C-H des groupes alkyles et une autre bande à 840 cm"1 correspondant aux vibrations de flexion du noyau benzénique substitué en para. L'analyse quantitative portant sur C, H, N, S et Cl confirme 1'identité du composé. 30 La nouvelle pénicilline conforme à l'invention a montré un large spectre d'activité antibactérienne , tant contre les germes gram positifs que contre les germes gram négatifs. COPV 72 0552î 3 2126228 L'étude de son activité "in vivo".a confirmé les propriétés précédentes. Le nouveau composé sera administré par la voie orale, par la voie rectale ou par la- voie intramusculaire. Sa 5 toxicité est très faible, comme c'est le cas pour les autres pénicillinés semi-synthétiques. ■ " Les essais cliniques effectués dans trois centres hospitaliers ont montré l'efficacité du présent composé dans le traitement de diverses infections, en particulier .de celles 10 qui touchent l'arbre respiratoire. Les méthodes que l'on a* suivies pour préparer la p-chloro-phénoxy-isobutyryl ampicilline et ses sels-sont décrites dans les exemples suivants. EXEMPLE 1 : • 15 A une solution, agitée et refroidie,- de 20,2 g c (0,0625 :"'iole) d'ampicilline trihydratée dans 300 ml d'eau contenant 26,2 g (0,312 mole) de bicarbonate de sodium, on ajoute en 1 mn une solution de 18,7 S (0,081 mole) de chlorure d'a-fr-chloro-phénoxy)-isobutyryle dans 25 ml d'acétone anhydre. 20 On agite le mélange énergiquement pendant 20 minutes tout en maintenant la température entre 10-et 15°. On extrait la solution limpide à deux reprises avec de la méthyl-isobutyl-cétone. On recouvre la solution aqueuse par 125 ml de méthyl-isobutyl-cétone, on la refroidit 25 à 5-10° et on l'acidifie à pH 2 avec une solution 5M d'acide-sulfurique. On sépare les extraits, on les lave à l'eau et' on les sèche pendant 10 minutes sur sulfate de sodium. ■ On neutralise la solution acide avec une solution 30 d'un sel d'un acide organique liquide ou avec une solution de bicarbonate de sodium. On isole 1'a-(p-chloro-phénoxy)-isobutyryl ampicilline en la faisant précipiter dans sa solution avec de l'acétoné ou en lyophilisant la solution.. 35 EXEMPLE 2 : A une solution froide de 0,083 mole de chlorure d'a-(p-chloro-phénoxy)-isobutyryle dans du chloroforme ou dans un autre solvant inerte, on ajoute, tout en agitant continuellement, 0,083 mole du trihydrate d'ampicilline dans du chloroforme COPY 72 0552î 4- 2126228 ou dans un autre solvant inerte avec 0,083 mole de triéthyla-mine. L'addition terminée ion laisse le mélange revenir à la température ambiante et on continue d'agiter pendant 5 quelque temps. Lorsque la réaction est terminée on élimine la triéthylamine en ajoutant de 1' acide chlorhydrique 0,87 N jusqu'à ce que le pH soit égal à 1. On extrait la couche chloroformique, on la lave à l'eau et on la sèche sur MgSO^.. 10 Par élimination du solvant on. obtient le produit cherché. EXEMPLE 3 s A un mélange de 1 ml d'une solution de 10 mg/ml de NjN'-dicyclohexyl-carbodiimide dans du tétrahydrofuranne, 15 ou dans un autre solvant approprié, et de 1 ml d'une suspension de 10 mg/ml d'acide a-(p-chloro-phénoxy)-isobutyrique dans un solvant inerte on ajoute .une suspension de 20 mg du sel sodique de 1'ampicilline dans 1 ml d'un mélange à parties égales d'eau et de tétrahydrofuranne. 20 On agite le mélange pendant 2 heures à la. tempé rature ambiante. On le dilue avec de l'eau et on le filtre pour éliminer la dicyclohexyl-urée qui s'est formée et le dicyclo-hexyl-carbodiimide inaltéré. 25 On acidifie la solution à pH 2, on l'extrait rapi- - dement avec du butanol et on la lave à l'eau. On lyophilise la solution aqueuse : le solide qui reste est 1' 30 On refroidit à 0° une solution anhydre de 0,15 mole d'acide a-(p-chloro-phénoxy)-isobutyrique et de 0,15 mole de triéthylamine dans 330 ml de dioxanne et 65 ml d'acétone. On ajoute une solution de 0,15 mole de chloroformiate d'iso— butyle tout en maintenant la température entre 0 et 4°. On 35 ajoute goutte à goutte à cette solution un mélange de 0,1 mole de trihydrate d1 ampicilline et de 0,1 mole de triéthylamine dans 30 ml d'eau. On agite à 5° pendant 1 heure , puis on ajoute une solution de 0,13 mole de NaHCO^ dans 700 ml d'un mélange de 40 glace et d'eau. copy 72 05521 5 - 2126228 On extrait la solution deux fois avec 550 ml d'éther. On acidifie la solution aqueuse à pH 2 .avec de l'acide sulfu-rique 6N et on l'extrait avec de la méthyl-isobutyl-cétone- On lave les extraits cétoniques avec de l'eau et 5 on les sèche sur MgSO^. - On obtient le produit en évaporant le solvant. EZESCPIE 5 î Dans -un ballon à trois tubulures , d'une capacité de 1 litre, ballon qui est muni d'un agitateur, d'un thermo-10 mètre, d'un tube d'admission d'azote et d'un "tube à desséchant., on introduit 0,12 mole d'ampicilline ainsi qu'une aminé ali-phatique de poids moléculaire supérieur à 185, dans 640 ml de chlorure de méthylène ou.d'un autre solvant inerte. On ajoute à cette solution 8,3 g (0,08 mole) 15 de triéthylamine et 17,5 S (0,144- mole) de H",N-diméthylaniline. On refroidit le mélange et on lui ajoute goutte à goutte ,'à 12°0, 26,0 g (0,24 mole) de triméthyl-chlorosilane. On chauffe le mélange à reflux pendant 1 heure , après quoi on le refroidit à 20°. On lui ajoute une solution de 0,75 mole 20 du dichlorhydrate de la N,N-diméthyl-aniline dans 20 ml de chlorure d 'a-(p-chloro-phénoxy)-isobutyryle. On agite le mélange réactionnel à -10° pendant 30 minutes, puis on le maintient à 10° pendant une demi-heure. On verse le mélange réactionnel dans 900 ml d'eau 25 à 90°,tout en agitant, et on filtre le mélange qui comporte deux phases. Après avoir laissé décanté la couche aqueuse et l'avoir séparée, on ré-extrait la couche de chlorure de, méthylène, à deux reprises, avec des portions de 900 ml d'eau froide,. 30 en ajustant à chaque fois le pH du mélange à 1,8 — 2,6 au moyen d'acide chlorhydrique dilué. On extrait la couche aqueuse avec de la méthyl-isobutyl-cétone, on lave à l'eau et on ' sèche sur ï%S0^. On chasse le solvant par distillation à basse tempé-35 rature sous pression réduite et l'on obtient ainsi le produit cherché. COPY 6 2126228 72 0552T H E V E H D I 0 A I I 0 K S 1 •- Dérivé de 1 'ampicilline, en l'espèce l'oc-(p-chloro-phénosy)-isobutyryl ampicilline répondant à la formule suivante : -OH - CO - EH ! CH, y 10 2.- Procédé de préparation de l'ot-(p-chloro-phénoxy)- isobutyryl ampicilline spécifiée à la revendication 1, procédé caractérisé en ce qu'on fait réagir le sel sodique de 1'ampicilline avec le chlorure à' a-(p-chloro-phénoxy)-isobutyryl e, dans un milieu contenant du bicarbonate de sodium , à une 15 température comprise entre 5 et 15° • 3«- Procédé de préparation de l'a-(p-ch.loro-piiénox$-isobutyryl ampicilline selon la revendication 1, procédé caractérisé en ce qu'on fait réagir l'ampicilline avec le clilorure d'a-(p-ch.loro-ph.énoxy)-isobutyryle dans des solvants inertes, 20 tels que l'acétone, le chloroforme ou le dioxanne, en utilisant la triéthylamine ou d'autres aminés comme accepteurs d'acides. 4.- Procédé de préparation de ltc-(p-ciiloro-ph.énoxy)-isobutyryl ampicilline spécifiée à la revendication 1, procédé caractérisé en ce qu'on fait réagir 1'ampicilline avec l'acide 25 a-(p-chloro-ph.énoxy)-isobutyrique en utilisant le dicyclohexyl-carbod'iimide ou un autre imide comme agent de condensation. 5*- Procédé de préparation dë l'a-Cp-ctiloro-pliénoxy)-isobutyryl ampicilline spécifiée à la revendifation 1, procédé caractérisé en ce qu'on fait réagir un anhydride mixte, de l'aci-30 de a-(ch.loro-pîxénoxy)-isobutyrique avec 1'ampicilline• 6.- Procédé de préparation de l1 a-(p-ch.loro-phénoxy)-isobutyryl ampicilline spécifiée à la revendication 1, procédé caractérisé en ce qu'on fait réagir un dérivé silylé de 1'ampicilline avec le chlorure d'oc-(p-ch.loro—phénoxy)—isobutyryle en 35 utilisant des aminés aliplaatiquesde poids moléculaire supérieur 72 05521. 7 2126228 à 185. ' 7»- Médicaments qui renfermait^ -à titre de substance active , lla-(p-chloro-ptLénoxy)-isobutyryl .ampicilline. -