Brevet FR2108908A1 — publié le 19720526

La présente invention concerne des nouveaux sels de l'acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétinique. Elle concerne également leur procédé de préparation et leurs applications comme dicaments. La demanderesse a trouvé, selon l'invention que l'acide 3-acétyl-18p-glycyrrhétinique et ses sels avec certains métaux possèdent des propriétés cicatrisantes et des propriétés anti Lnflammatoires optimales qui sont très utiles dans le traitement des maladies du canal alimentaire telles que les ulcères gastriques et duodénaux, les gastrites et les gastro-duodénites, en par ticulier lorsque lesdites maladies sont dues à des médicaments. On peut, en outre, employer lesdites substances dans la thérapie des pharyngites, pharingo-trachéites, ulcères cornéens, colites Çen particulier, colites ulcératives), dermatites, ulcères de décubitus, ulcères dormants, ulcères variqueux, rhagades, hémorrotdes et érosions des conduits gdnitaux féminins. Les nouveaux sels de l'invention possèdent non seulement les propriétés cicatrisantes, anti-ulcéreuses et anti-inflam matoirs de l'acide libre mais également les propriétés pharmacologiques des métaux en question, en particulier l'action anti-acide. L'invention concerne, en particulier les sels de métaux de l'acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétinique avec le bismuth, les métaux alcalins, les métaux alcalino-terreux, et les métaux du groupe III de la Classification Périodique des Eléments. L'invention concerne également les préparations conte riant l'acide )-acétyl-18ss-glycyrrhétinique et les préparations pharmaceutiques contenant les sels de métaux précités. Lesdites préparations ou compositions comprennent un diluant ou véhicule pour les ingrédients actifs et elles peuvent, en outre, contenir d'autres médicaments. Les excipients utiles comprennent l'amidon, le talc, l'alginate de sodium et le stéaratede magnésium. On peut administrer les préparations sous la forme de comprimés ou de supposi oires ou en tant que poudres ou pommades. Les préparations pharmaceutiques peuvent également renfermer des anti-acides tels que l'hydroxyde d'aluminium, la glycine et le silicate d'aluminium. Les sels de métaux préférés de l'acide 3-acétyl-18ss-gly- egrrhétinique sont ceux de potassium, magnésium, calcium, alumi rium et bismuth. On peut préparer les nouveaux sels d'acide 3-acétyl18ss-glycyrrhétinique par réaction entre l'acide 3-acétyl-18ss-gly- cyrrhétinique et un alcoolate du métal en question. On utilise, de préférence, les alcoolates, c'-est-à-dire les alcoolates dans lesquels le groupe ou les groupes alkoxy ont de 1 à 4 atomes de carbone. On peut effectuer la réaction de salification à la température ambiante ou à une température élevée d'une manière courante, de préférence en présence de solvants organiques. Comme solvants organiques, on peut utiliser des alcools, des éthers, des cétones, des solvants chlorés (chlorure de méthylène, chloroforme), acétate d'éthyl et autres. Lorsque la valence du métal est supérieure à un, il est possible d'obtenir un sel neutre ou un sel basique selon la proportion des réactifs. Les sels basiques obtenus peuvent être représentés par la formule M(Glyc.)x (OR)m-x, dans laquelle M représente le métal, m est la valence du métal, x est un nombre entier inférieur à m, R est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle correspondant au groupe alkoxy de l'alcoolate utilisé dans la préparation du sel et " Glyc." représente un groupe 3-acétyl-18ss-glycyrrhé- tinate. On peut obtenir les sels basiques contenant dès groupes alkoxy en effectuant la réaction de salification en l'absence d'eau. Si cela est nécessaire, on peut convertirlesHffssEsbfises en sels basiquescontenant des groupes hydroxyle (à savoir, R = H dans la formule précitée) en mettant en contact les sels avec la quantité stoechtnétrique d'eau.D'une manière différente, on peut produire les sels basiques contenant des groupes hydrokyle en effectuant la réaction de salification en présence d'eau. Ainsi, par exemple avec l'aluminium, il a été possible d'obtenir le mono-, di- et tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium, les valences restantes de l'aluminium dans le cas des monoet di-sels pouvant être satisfaites par des groupes hydroxyle et/ou alkoxy. Dans de nombreux cas, la solubilité des nouveaux sels de l'invention dans les solvants organiques est très élevée.tandis que leur solubilité dans l'eau est généralement très faible En règle générale, la solubilité des sels de l'acide 3-acétyl-185-glycyrrhétinique avec les métaux polyvalents dans les solvants organiques augmente dans les sens des sels basiques vers les sels neutres: le tri-3-acétyl-18B-glycyrrhétinate d'aluminium est beaucoup plus soluble dans le chloroforme que le mono-3-acétyl-18B-glycyrrhétinate d'aluminium. On présente ci-après les résultats des essais pharma- cologiques concernant les nouveaux médicaments de l'invention. Dans les expériences effectuées, on se réfère aux publications suivantes par ordre numérique (1) Litchfield J.T. et Wilcoxon F.J. Pharmacol. exp. Ther. 96,99,1949 (2) Shay H., Kamarov S.A., Fels S.S., Meranze D., Gruenstein M. et Spilet M.; Gastroenterology 5, 43, 1945. (3) Keyriiainen T.O. et Eaasonen M.K.; Acta Pharmaeol. et toxicol. 1), 22, 1957 (4) Winter C.A., Risley E.A. et Nuss G.W.; Proc. Exp. Biol. Med. 3, 544, 1962 (5) Van Arman C.G., Bagany A.J., Miller L.M. et Pless H.H.; J. Pharm. Exp. Ther., 150, 328, 1965 (6) Cahen R., Pessonier A., C.R. Soc. Bicl. 157, 4i'J 1963 (7) Bonfils S., Lefooghe S., Rossi C, et Lambling A.; C.R. Soc. Biol. 151 1149, 1957. On présente tout d'abord les résultats des expérieu@es sur la toxicité desdits composés. On étudie la toxicité sur des rats mâles de souche Sprague-Dawley pesant chacun 220-290 g, par administration orale? et intrapéritonéale, les observations étant prolongées pendant- kne durée de 10 jours. On détermine la DL50 par la méthode de Litchfield et Wilcoxon (1) Les tableaux et II ci-après montrent les valeurs de la DL50 obtenues chez le rat par administration orale et intrapé- ritonéale, respectivement. TABLEAU I Prcduit Nombre d'ani- DL O maux traités ma/kg Acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétinique 20 > 3300 Tri-3-acétyl-18B-glycyrrhétinate d'aluminium 20 TABLEAU II Produit Nombre d'ani- DL 50 maux traités mg/kg Acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhéthique 40 > 3300 Tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium 40 > 3300 On présente comme suit les résultats des essais de l'activité anti-ulcéreuse. On étudie cette activité en comparant des ulcères expérimentaux produits par ligature du pylore, selon Shay (2). On effectue la ligature du pylore sous anesthésie légère à l'éther chez les rats maintenus en jeune pendant 48 heures dans des cages séparées en leur fournissant de l'eau à volonté. On place de nouveau les rats dans les cages sans nourriture et sans eau, puis on les sacrifie 17 heures plus tard.On ouvre l'estomac suivant la portion courbe inférieure et on l'examine pour déterminer la formation d'ulcères à l'intérieur selon le type suivant de classification proposé par Keyrilainen et Paasonen (3) Classe I - petits ulcères de 0,2 mm = note 1 Classe II - ulcères moyens de 2-5 mm = note 5 Classe III- grands ulcères de 5-10mm= note 10 Classe IV - très grands ulcères > 10mm = note 20 Perforation = note 20 On calcule ensuite l'indice d'ulcère = somme des notes de toutes les classes retenues/nombre d'animaux , les variations en pourcentage de l'indice d'ulcère des rats traités par rapport aux témoins et le nombre d'estomacs protégés contre la formation d'ulcères, en considérant parmi les estomacs ainsi protégés ceux qui ne présentent pas plus de deux petits ulcères. On effectue l'administration des substances par sonde gastrique et on la répète trois fois, 48 et 24 heures avant la ligature du pylore et immédiatement après l'opération. On administre chaque substance examinée en suspension dans-la gomme arabique à des groupes de 10-13 rats. Les résultats ainsi obtenus sont rassemblés dans le tableau m ci-après. On décrit ci-après l'activité des composés de l'invention dans la guérison des ulcères gastriques. On utilise à cet effet la technique de Cahen et Pessonier (6). On soumet des rats mâles, pesant chacun entre 180 et 230g, privés de nourriture pendant 16 heures à une immobilisation forcée pendant une durée de 24 heures selon la méthode de Bons ils et coll. (7). On administre les substances par voie orale aux doses déterminées et réparties en deux fois dans l'intervalle d'une journée: la moitié,le matin et l'autre moitié,le soir. On utilise comme témoins des rats auxquels on n'administre que le véhicule des substances placées sous examen qui est constitué par de la gomme arabique à la concentration de 10 dans l'eau. On poursuit les traitements pendant 1-8 jours. Dans des groupes de 8 rats à la fois, on sacrifie les animaux par décapitation 24 heures; 3, 6 et ajours après la cessation de l'immobilisation, 12 heures après la dernière administration des médicaments. On prélève l'estomac chez les animaux sacrifiés immédiatement après la période d'immobilisation (contrôle de l'activité ulcérogénique pendant cette période) ou aux temps indiqués cidessus après la cessation de l'immobilisation, on les lave avec une solution physiologique et on examine ensuite la membrane muqueuse. On compte le nombre d'ulcères non cicatrisés (u) et le nombre d'ulcères cicatrisés ou en voie de guérison (UH). On calcule un indice d'ulcère fondé sur le rapport entre le nombre d'ulcères présents dans les estomacs examinés et le nombre d'animaux sacrifiés à chaque temps indiqué ci-dessus. On présente ci-après les résultats des essais de l'activité antiinflammatoire des composés de l'invention On conduit I'étude i l'activité antSinflammatoire chez les rats en mesurant les oedèmes de la patte provoqués par la carraghénine selon Winter et coll. (4) et par la levure de bière selon Van Arman et colt, (5). On administre les substances placées sous examen par voie intrapéritonéale. On a rassemblé les résultats ainsi obtenus dans les tableaux suivants Inhibition des oedèmes provoqués. par la carraghénine Traitement Doses Nombre Oedèmes Inhibition Caractère nig/kg d'ani- (ml# écart type) des oedè- significatf (1) maux (2) mes % des résul tats (3) Témoins - 8 0,31 + 0,007 - Acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétini- + que 33 8 0,17 - 0,001 45 P 109 8 0,04 t 0,003 87 p Témoins - 8 0,28 t 0,007 Tri-3-acétyl18ss-glycyrrhétinate d'aluminium 33 8 0,17 + 0,007 39 P > 0,001 109 8 0.14 # 0,01 50 P > 0,001 (1) Dose administrée par voie intrapéritonéale à raison de deux fois 30 minutes avant et I heure après l'injection sous-plan taire de carraghénine (0,1 ml d'une suspension à 1%) (2) Volume moyen des oedèmes, mesuré 3 heures après l'injection de carraghénine, au moment où le volume maximal des oedémes se produit chez les témoins. (3) Déduit du coefficient "t" de Student, calculé par rapport à la moyenne obtenue avec les témoins. Inhibition des oedèmes provoqués par la levure de bière Traitement Doses Nombre Oedèmes Inhibition Caractère m/kg d'ani- (ml# écart type) des oedèmessignifica maux (2) % tif des ré sultats (3) + Témoins - 8 0,31 - 0,003 Acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétini- + que 33 8 0,16 - 0,01 48 P 109 8 0,07 + 0,003 77 P 0,001 Témoins - 8 0,29 - 0,003 Tri-3-acéthyl18ss-glycyrrhé tinate d aluminium 33 8 0,13 # 0,003 55 P 109 8 0,10 # 0,003 65 P 0,001 (1) Doses administrées par voie intrapéritonéale 30 mn avant l'injection sous-plantaire de levure de bière (0,1 ml d'une suspension à 2%). (2) Volume moyen des oedémes, mesuré 1 heure après l'injection de levure de bière, au moment où le volume maximal des oedèmes se produit chez les témoins. (3) Déduit du coefficient "t" de Student, calculé par rapport à la moyenne obtenue avec les témoins. Les exemples suivants sont destinés à illustrer la préparation des sels selon l'invention sans nullement limiter celle-ci dans son cadre et son esprit. EXEMPLE 1 Préparation du tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium: On ajoute 15, 38 g d'acide 3-acétyl-18ss -glycyrrhétini- que, dissous dans 500 ml de chloroforme, à une solution de 2,04g d'isopropylate d'aluminium dans 50 ml de chloroforme. Après une heure, on évapore la solution chloroformique à siccité et on obtient le tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium sous forme d'une poudre blanche, à point de fusion de 286-290 C, &alpha;D20 = 126 # 2 (c = 1, CHCl3). Exemple 2 Préparation du tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium: On ajoute 4,08 g d'isopropylate d'aluminium, dissous dans 50 ml de chlorure de méthylène, à 30,76g d'acide 3-acétyl18ss-glycyrrhétinique, mis en suspension dans 200 ml de chlorure de méthylène On agite le mélange à la température ambiante pour parachever la dissolution, on évapore ensuite à environ 50 ml et on verse dans 200 ml d'hexane. On filtre le tri-3-acétyl-18ss glycyrrhétinate d'aluminium sous forme d'une poudre blanche,légère amorphe. Exemple 3 Préparation du mono-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate de mono-méthoxymagnésium; On ajoute une solution de 0,48g de tournure de magnésium dans 100 ml de méthanol à 103g d'acide 3-acétyl-18ss-glycyr- rhétinique dans 500 ml de méthanol. Après chauffage au reflux pendant 30 minutes, on évapore à siccité le solvant et on obtient le mono-3-acétyl-185-gly- cyrrhétinate de mono-méthoxy-magnésium sous forme d'une poudre blanche ayant un point de fusion de 308-313 C, &alpha;D20= + 129 #2 (c = 1, CHC13). Exemple 4 Préparation du mono-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate de mono-hydroxy- magnésium On ajoute une solution de 0,48 g de tournure de magnésium dans 100 ml de méthanol à 103g d'acide 3-acétyl-185-glycyrrhé- tinique dans 500ml de méthanol. Après chauffage au reflux pendant 30 mn, on ajoute lOOml de méthanol contenant 4 ml d'eau et on chauffe la solution au reflux pendant 15 minutes. On évapore la solution à siccité et l'on obtient le mono-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate de mono-hydroxy magnésium sous forme d'une poudre blanche ayant un point de fusion de 320-325 C (avec décomposition). (a) DO + 1290 # 20 (c = 1, CHCl3). On indique comme suit des exemples de formulations pharmaceutiques contenant les composés de l'invention. Comprimés Tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium 50 mg Hydroxyde d'aluminium 400 mg Diluants choisis parmi l'alginate de sodium, le stéarate de magnésium, le talc 8 l'amidon, q.s.p. 1,2 g Comprimés Di-3-acétyl-18ss-glycyrrhdtinate de magnésium 75-mg Diluants choisis parmi l'alginate de sodium, le stéarate de magnésium, le talc et l'amidon, q.s.p. 0,8 g Poudre Tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium 3 g Hydroxyde d'aluminium 16 g Diluants choisis parmi l'alginate de sodium, le stéarate de magnésium, le stéarate de polyoxyéthylène, l'amidon -et le lactose, q.s.p. 100 g Suppositoires Tri-3-acetyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium 100 mg Tri-glycérides d'acides gras, q.s.p. 1,400 g Pessaires Esuppositoires vaginaux) Di-3-acétyl-18B-glycyrrhétinate de magnésium 100 mg Glycérine 200 mg Tri-glycérides d'acides gras, q.s.p. 2,400 g Pommade Tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium 2 g Chlorhydrate de lidocatne 2 g Eau distillée 14,8 g p-Hydroxybenzoate de méthyle 0,2 g Diluants choisis parmi le polyéthylèneglycol 4000, le propylèneglycol et l'alcool cétylique, q.s.p. 100 g TABLEAU III Traitement Doses/kg Nombre de Nombre d'ulcères pour les Indice Variation Nombre (1) rats diverses classes (2) d'ulcèrede l'indice d'estod'ulcère % macs non ulcérés % I II III IV V Témoins (gomme arabique aqueuse à 10%) 20ml 13 138 43 19 23 1 78,6 - (138) (215) (190) (460) (20) Acide 3-acétyl- 18ss-glycyrrhétinique 436mg 10 37 16 3 1 0 16,7 -78 30 (37) (80) (30) (20) Tri-3-acétyl-18ssglycyrr@étinate d'aluminium 436mg 13 72 9 0 0 0 9 -88 23 (72) (45) Notes (1) Les doses sont administrées trois fois: 48 et 24 h avant la ligature du pylore et immédiatement apràs l'opération. (2) Entre parenthèses figure le nombre d'ulcères multiplié par la note des diverses classes, selon le type de notation décrit dans la description du protocole opératoire. TABLEAU IV Action de l'acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétinique et du tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium sur la régression spontanée des ulcères provoqués par immobilisation. Traitement Doses orales Nombre Indice d'ulcère à la fin de l'immobimg/kg (1) d'animaux lisation et après le nombre de jours suivants (2) 0 1 3 6 9 Témoins (gomme arabi- U UH U UH U UH U UH U UH que en concentration de 10% dans l'eau) 2ml/100g 8 6,5 0 1,7 0,3 1,7 0,5 0,2 1,1 0 1,6 Acide 3-acétyl-18ssglycyrrhétinique 436 8 6,8 0 0,6 4,2 0,2 1,2 0 1,6 0 1,7 Tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium 436 8 6,0 0 0,1 3,0 0 1,6 0 1,5 0 2,3 U - Ulcères non cicatrisés UH - Ulcères cicatrisés (1) Doses administrées en deux portions: la moitié, le matin et l'autre moitié, le soir (2) Nombre d'ulcères présents dans les estomacs divisé par le nombre d'animaux sacrifiés. R E V E N D I C A T I O N S 1. A titre de produits industriels nouveaux, les sels de l'acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétinique avec les métaux chois@@ parmi le bismuth, les métaux alcalins, les métaux alcalin@-ter reux et les métaux du groupe III de la Classification Périodique des Eléments, ces sels étant représentés par la formule (Glyc.)xM(OR)m-x dans laquelle M représente le métal, m la valence du métal, x un nombre entier inférIeur à m, R est un atome d'hydr gène ou un groupe alkyle de C1 à C4, et 'Glyc. représente le groupe 3-acétyl-18ss-glycyrrhétinyle. 2. Sels de l'acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhétinique selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils derivent du potassium, du magnésium, du calcium, de l'aluminium et du bismuth. 3. Le tri-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate d'aluminium. 4. Les di-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinates basiques dgal- minium. 5. Les mono-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinates basiques d'alu minium. 6. Le dl-3-aeétl-18B-glycyrrhétinate de magnésium. 7. Les mono-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinates basiques de magnésium. 8. Le mono-3-acétyl-18ss-glycyrrhétinate de mono-hydroxymagnésium. 9. Procédé pour la préparation d'un sel de métal de l'acide 3-acétyl-188-glycyrrhétin9que, ledit procédé etant caractérisé en ce qu'on fait réagir l'acide 3-acétyl-18ss-glycyrrhéti- nique avec un alcoolate du métal considéré. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'alcoolate est un alcoolate inférieur. 11. Procédé selon la revendication 9 ou 10, caractérisé en ce qu'on effectue la réaction en présence d'un solvant organiques 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications 9 à 11, caractérisé en ce que le métal a une valence supérieure à l'unité et en ce que l'on obtient un sel basique en faisant réagir l'alcoolate et l'acide dans un rapport d'équivalence supérieur à 1 13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé e ce que l'on effectue la réaction dans des conditions anhydres. 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce qu'on met en contact le produit obtenu avec de l'eau pour remplacer les groupes alkoxy par des groupes hydroxyle. 15. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce qu'on effectue la réaction en présence d'eau. 16. Compositions pharmaceutiques renfermant comme produit actif, l'un des sels de l'acide 3 aeétylnl85-glycyrrhétinique de formule ç (Glyc.)xM(OH)m-x, dans laquelle les symboles sont définis selon la revendication 1 en association avec un diluant ou un véhicule pharmaceutique acceptable. 17. Compositions selon la revendication 16, caractérisées en ce qu'elles renferment en outre un agent anti-acide tel que l'hydroxyde d'aluminium, la glycine et le silicate d'aluminium. 18. Formes pharmaceutiques en vue de l'administration des compositions selon la revendication 16 ou 17, par voie orale, topique, rectale ou vaginale, et notamment comprimés, poudres, pommades, suppositoires, pessaires, renfermant notamment de 1 à 100 mg de composé actif par dose unitaire.