Brevet FR2137845A1 — publié le 19721229

L'invention, due à HA.ID Brich et LUDWIG- Walter, a pour objet un sel de baryum cristallisé de l'acide ribose-5-phosphorique• L'acide ribose-5-phosphorique est un composé qui joue un rôle important la chimie des nucléotides et qui trouve de nombreu- 5 ses utilisations aussi bien dans l'industrie que dans la recherche scientifique. Il est disponible dans le commerce sous la forme de son sel de baryum amorphe, ou sous celle de son sel de sodium, également amorphe et hygroscopique. Un inconvénient des sels déjà connus de l'acide ribose-5-phosphorique réside dans le fait qu'ils 10 contiennent, de par leur fabrication qui est effectuée habituellement par hydrolyse acide de nucléotide-5-phosphates à des températures supérieures à l'ambiante, de petites quantités de phosphates de sucres épiaères qu'il est difficile d'éliminer. La demanderesse a eu la mérite de trouver qu'il est possible 15 de fabriquer l'acide ribose-5-phosphorique sous la forme de son sel de baryum cristallisé de très grande pureté qui at contient plus les phosphates de sacres épimères non désirés. Le sel conforme à 1'invention est constitué peur le ribose-5-phosphate de baryum hexahydraté, cristallisé suivant le système 20 triclinique, présentant -un P.P. : 79 - 80°C, un pouvoir rotatoire spécifique =* + T3,6° (acide acétique 1 H) et les constantes de réseau suivantes : a = 12,20 + 0,02 I a = 91°35' ± 5' b = 8,77±0,02i P « 111*54' ±5* 25 c - T5,07 + 0,03 i Y - 93°05' ±5'. 0c. rappelle que la. ferme amorphe connue présente une valeur + 22,8 (BEL 0,2 S). Les cristaux conformes à l'invention sont, contrairement au ribose—5-phosphate de baryum amorphe connu jusqu'à présent, peu 30 solubles dans l'eau froide, mais bien solubles dans des acides dilués. Dans des solvants organiques, les cristaux sont insolubles. Ci-après, on indique les valeurs expérimentales de la maille élémentaire des cristaux conformes à l'invention, déterminées dans trois positions différentes. La figure unique représente la maille 35 élémentaire et ses angles indiqués ci-dessous : 72 17078 2 2137845 (1) Position quasi-monoclinique (Réseau A) a = 12,20 A + 0,02 A b » 8,77 A + 0,02 A p = 111054» + 51 c= 15,07 1 + 0,03 I Y - 93°05* ± 05' 5 triclinique ; 0, groupe spatial A1 V = 1494,27 A Z = 2 (pour f = 1,050) maclé (loi de rotation) autour de /~010J (2) Position triclinique (Réseau P) 10 a' = 12,20 A + 0,02 1 «r* = 119°15' ± 5' b» » 8,79 A + 0,02 A P' = 110°44r ± 5' c' = 8,64 A + 0,02 i * Y' » 73°12' + 5' triclinique ; 0_ groupe spatial P^ ~T * 747,14 A 15 Z = 1 (pour P * 1,050) maclé autour de /"Ollj/^ (3) Position triclinique (Réseau. P) a" » 12,80 A ± 0,03 ! * f 19#t5* + 5' b" = 8,79 A + 0,02 I » 90°00r ± 5' 20 c" = 8,64 A + 0,02 ! Y" = 114-°30« + 5' triclinique ; 0, groupe spatial P^ T"~ » T47,t4 A Z = 1 (pour f = 1,050) macrlé autour de ^01 \jf 25 On peut fabriquer les cristaux conformes à l'invention en dissolvant du ribose-5-phosphate de baryum amorphe du commerce dans de l'eau à une température légèrement supérieure à l'ambiante, d'environ 25 à 35°C, puis en refroidissant ensuite la solution lentement, avec précaution jusqu'à une température de 0 à 4°C, 30 en frottant de temps à autre la paroi du récipient en verre utilisé avec une baguette de verre. Dès l'apparition des premiers cristaux, on agite la solution en la maintenant durant plusieurs jours à orne température de 0 à 4°C. On obtient ainsi une cristallisation abondante. On lave les cristaux avec une petite quantité d'eau 35 froide et on les sèche. Lorsqu'on dispose déjà de germes de cristallisation, il suffit de préparer à une température légèrement supérieure à l'ambiante une solution concentrée du sel de baryum amorphe, d'en amorcer la cristallisation par introduction de quelques-Tins des 72 17078 5 2137845 germes sus indiqué s et de la refroidir jusqu'à une température de l'intervalle susindiqué, à laquelle on la laisse reposer, en agitant par intermittence, durant plusieurs jours. Si le produit cristallisé contenait encore de faibles quantités d'impuretés, on 5 peut le purifier par recristallisation à chaud dans un mélange mé thanol/eau. L'exemple suivant permettra de bien comprendre le procédé de fabrication des cristaux conformes à l'invention. Exemple.- 10 On dissout, à la température d'environ 30°C, une quantité de 10 g de ribose-5-phosphate de baryum commercial dans de l'eau de façon à obtenir une solution aussi concentrée que possible qu'on refroidit, après addition de quelques germes de cristallisation, jusqu'à une température de 0 à 4°C. On accélère la cristallisation 15 en agitant de temps à autre. Après environ 3 à 4 jours, on essore le produit de cristallisation, on le lave avec une faible quantité d'eau froide et on le sèche. Rendement : 9»5 - 10 g . On effectue la recristallisation du produit formé en dissolvant, à la température de 65°C et en agitant constamment, 10 g des 20 cristaux obtenus dans un mélange de 90# d'eau et de 10# de méthanol de façon & préparer une solution aussi concentrée que possible. On élimine par filtration un éventuel résidu insoluble, on refroidit le filtrat limpide jusqu'à la température de 0°0 et on amorce la cristallisation en frottant légèrement la paroi du 25 récipient ou en ajoutant à la solution quelques germes de cristallisation. On essore le produit de cristallisation formé, on le lave avec une faible quantité d'un mélange eau/méthanol = 9/1 et on le sèche à l'air. Rendement : 8,5 - 9»5 g de ribose-5-phosphate de ■baryum hexahydraté (R-5-P-Ba.6 H20) de poids moléculaire: 473,4. 30 P.F du produit : 79 - 80°C. Son pouvoir rotatoire : 13,6°C (dans de l'acide acétique 1 N). L'acide libre, fabriqué à partir du sel de baryum cristallisé, 25 présente un pouvoir rotatoire de = + 26,6°. Comme il va de soi et comme il résulte d'ailleurs déjà de ce 35 qui précède, l'invention ne se limite nullement à celui de ses modes d'application, non plus qu'à ceux des modes de réalisation, de ses diverses parties, ayant été plus particulièrement envisagés; elle en embrasse, au contraire, toutes les variantes. 72 17078 4 2137845 REVENDICATIONS 1. Ribose-5-phosphate de baryum hexahydraté, cristallisé suivant le système triclinique, présentant un P.F. : 79 - 80°C, un pc pouvoir rotatoire spécifique = + 13,6° (acide acétique 1 N) et 5 les constantes de réseau suivantes : a » 12,20 + 0,02 A t a = 91035» + 5» b = 8,77+0,02 1 P = 111°54' + 5" c = 15,07 + 0,03 A y = 93°05' + 5'. 2. Procédé de préparation du sel cristallisé de l'acide 10 ribose-5-phosphorique selon la revendication 1, caractérisé par le fait que successivement on dissout du ribose-5-phosphate de baryum amorphe commercial dans de l'eau à une température d'environ 25 à 35°0, on refroidit la solution lentement avec précaution jusqu'à une température de 0 à 4°C, on frotte de temps à autre la 15 paroi du récipient de dissolution constitué en verre avec une baguette de verre et, dès l'apparition des premiers cristaux, on agite la solution durant plusieurs jours en maintenant la susdite température de 0 à 4°C.