Brevet FR2134530A1 — publié le 19721208

' 2134530 La présente invention a pour objet un procédé de scission, de synthèse ou, dans l'ordre désiré, de synthèse ou de scission enzyma-tique d'antibiotiques particuliers appartenant à la classe des pénicillines dites "naturelles". Sous l'expression pénicillines "naturelles", on entend selon la présente invention, les pénicillines produites par fermentation de pénicillium chrysogenum en présence de précurseurs appropriés. Le procédé selon l'invention concerne également les produits ainsi obtenus. L'invention peut être utilisée par exemple, pour produire l'acide 6-amino-pénicillanique et pour obtenir à partir de cet acide, toujours de manière enzymatique, de nouvelles pénicillines semi-synthétiques stables au P-lactamase et ayant un spectre plus large d'action. Le procédé selon l'invention est également utilement employé pour la scission ou la synthèse de composés ayant des propriétés thérapeutiques analogues à celles des pénicillines. Le procédé de l'invention est basé sur l'emploi d'une préparation enzymatique insolubilisée dans une fibre qui permet d'obtenir une amélioration notable des qualités du produit final, une simplification appréciable des opérations et une réduction corrélative des prix. On sait que depuis des années, l'acide 6-amino-pénicillanique (appelé dans la présente description simplement 6-APA) est devenu une matière première précieuse pour la fabrication de pénicilline semi-synthétique. La préparation de 6-APA par fermentation directe avec le pénicillium chrysogenum, en l'absence de précurseur, est techniquement très complexe et donne des rendements très faibles. Récemment, on a proposé des méthodes chimiques qui sont relativement couteuses, requièrent une technologie particulière du fait de l'instabilité des matières premières et des produits finis et entrainent la formation de produits de décomposition entrainant des pertes sensibles. Les procédés enzymatiques, actuellement utilisés, emploient des cellules de micro-organismes appropriés qui produisent l'acylase de pénicilline . Comme ces cellules ne peuvent être utilisées qu'une fois et en concentration relativement élevée (pour réduire le temps 72 14799 2 2134530 d'hydrolyse), il est nécessaire, de temps en temps, de préparer par fermentation les cellules contenant l'enzyme. En outre, l'extraction du produit d'hydrolyse, 6-APA, du milieu réactionnel, est une chose très complexe et le produit qui en rê-5 suite nécessite des cristallisations répétées et, très souvent, contient des matières protéiques qui, si on ne les élimine pas, par exemple par digestion enzymatique, au moyen d'enzymes protéo-lytiques, provoque des phénomènes d'allergie quand on administre la pénicilline ainsi obtenue. 10 Naturellement, tout ceci augmente les prix et rend extrêmement complexe la technologie de production. Le procédé objet de l'invention réalise des améliorations notables. La préparation enzymatique enrobée dans des structures filamenteuses conserve son activité pendant une très longue durée : des échantil-15 Ions de ce type expérimentés sur des cycles de travail répétés, ont conservé presque sans changement leur activité sur une longue durée, dépassant par exemple 12 mois. L'activité prolongée des structures selon l'invention, outre les avantages évidents d'une ramarquable simplicité dans la mise en 20 oeuvre du procédé, rend très faible ou même insignifiante l'incidence du prix du catalyseur enzymatique sur le prix du produit fini. Le procédé selon l'invention comprend essentiellement le fait de mettre en contact un mélange contenant un antibiotique, choisi dans la classe des pénicillines naturelles, avec des structures filamen-25 teuses contenant une préparation enzymatique incorporée, à séparer les produits obtenus et à procéder sur ceux-ci de manière analogue pour obtenir les dérivés de pénicilline. La fibre contenant l'enzyme, dès qu'elle sort de l'étape de filature, est lavée pour éliminer les impuretés absorbées extérieurement. 30 Après ce lavage, on l'utilise pour catalyser la réaction et, comme la protéine ne peut pas se diffuser dans le milieu réactionnel, on obtient un produit extrêmement pur et, avant tout, débarrassé de polluants protéiques qui sont si dangereux dans les phénomènes d'allergie sus-mentionnés. 35 Le catalyseur, insolubilisé selon la technique de l'invention, peut être utilisé de manière discontinue ; il vient en contact avec le 72 14799 2134530 mélange réactionnel, hydrolyse sa pénicilline, et, quand l'hydrolyse est terminée, le mélange réactionnel est envoyé à l'étape de séparation et est remplacé par un mélange frais. Le même catalyseur peut être utilisé également de manière continue en colonne : la solution de pénicilline, convenablement tamponnée traverse une colonne contenant la fibre enzymatique ; en ajustant de manière appropriée la vitesse d'écoulement et la quantité de fibre, on peut maximiser le degré d'hydrolyse du mélange effluent. On sait également que le même enzyme agit en pH acide comme un a-gent d'acrylation du 6-APA afin de permettre la synthèse enzymatique de nouvelles pénicillines à partir de mélanges réactionnels contenant le 6-APA et un acide carboxylique ou un produit dérivé de celui-ci. Avec le même appareil utilisé pour l'hydrolyse on peut également réaliser la synthèse de pénicillines semi-synthètiques, en mettant en contact l'enzyme insoluble avec un mélange contenant le 6-APA et l'acide carboxylique désiré ou mieux, un de ses dérivés les plus réactifs comme une amide ou un dérivé N-acylé de glycine. Le catalyseur enzymatique est préparé suivant la technique d'inso- . lubilisation décrite dans le brevet italien N° 836 462. Comme selon ce brevet on peut préparer des fibres auxquelles est incorporé l'enzyme, à partir de solutions de départ d'un polymère capable de donner des fibres dans lesquelles on disperse des préparations en-zymatiques en très fines gouttelettes de l'ordre de grandeur de celle des émulsions. L'émulsion ainsi obtenue peut être filëé à l'état humide ou sec, pour donner une fibre comportant intérieurement de très petites cavités dans lesquelles sont diposés des enzymes qui sont séparés du milieu ambiant par une très fine membrane, _ ' empêchent l'enzyme de s'en aller et de se disperser dans la masse réactionnelle et permet cependant à l'enzyme d'assurer son action catalytique. Parmi les polymères pouvant enrober l'enzyme, on peut citer les polymères cellulosiques estérifiés, nitrates, polyoléfines, les polymères et copolymères obtenus à partir d'acrylonitrile, d'acrylates, méthacrylates, les esters vinyliques, le chlorure de vinyle, le chlo rure de vinylidène, le styrène et outre les polyamides, le butyral de polyvinyle et autres produits similaires. 72 14799 2134530 L'enzyme à incorporer peut être constitué par l'extrait brut obtenu à partir de cellules de moisissures ou d'actinomycètes (As-pergillus, Pénicillium, Botrytis cinerea, Fusarium, Mucor, Alter-naria, Streptomyces, etc...) en particulier pour la scission enzy-5 matique de pënici11ineV (oC -phénoxyméthylpénicilline) on peut dériver de cellules de bactéries (E. Coli, B. Megaterium, Aerobacter, Aerogènes, Alcaligènes faecalis, etc...) particulièrement pour la scission enzymatique de pénicilline G (benzyl pénicilline). En cas d'hydrolyse, pour obtenir le 6-APA, on peut partir d'une 10 solution aqueuse du sel de pénicilline utilisé, en concentration variant entre 1% et 6% p/v (en poids par volume), de préférence 2 à 3% (p/v). La solution est maintenue à un pHdénviron8,0 par addition automatique d'alcali. En travaillant en continu, on utilise pour contrôler les perturbais tions de pH à différentes hauteurs de la colonne, une solution de pénicilline convenablement tamponnée. En cas de synthèse, on peut partir d'une solution contenant le 6-APA à 1-3% (p/v) et l'acide désiré ou un de ses dérivés, de préférence le dérivé amide ou N-acylique de glycine. 20 Le pH est automatiquement maintenu autour de 6,0. L'hydrolyse comme la synthèse peuvent s'effectuer environ entre 15°C et 60°C, de préférence aux alentours de 37°C à 40°C. Pour la mise en oeuvre de l'invention, on peut choisir les pénicillines à hydrolyser parmi celles ayant les formules suivantes': Sv CH_ / \ / 25 R - C - NH - CH - CH C XCH3 C'o N~ CH - C00H où R est un radical alkyl ayant de 1 à 10 atomes de carbone, ou alkényl ayant de 3 à 10 atomes de carbone, ou » aralkyl, ou est 30 R'O CH2- ou R'SCH2- dans lesquels R' est un radical alkyl, alkényl, 35 phényl, 72 14799 5 2134530 ou phênyl monosubstituê par des halogènes, par NO2» des alkényls, alkoxy, etc... Les pénicillines à synthétiser peuvent être choisies parmi celles de larges utilisations thérapeutiques telles que par exemple : 5 la 6- ("C-phénoxypropionamido)-pénicilline, la 6- -phénoxybuty-ramido)-pénicilline, la 6-(2,6-diméthoxybenzoamido)-pênicilline, la 6 —(5 méthyl-3-phênyl-^-isoxasol-carboxy-amido)-pénicilline, la 6- (5 méthyl-3-o-chlorophényl-4-isoxasol-carboxy-amido)-pénicilline, la 6-(D (-)-°(-aminophénylacétamido)-pénicilline etc... 10 Comme on l'a dit ci-dessus, le procédé de la présente invention peut s'appliquer avantageusement à la scission enzymatique et à la synthèse enzymatique de composés ayant des propriétés thérapeutiques analogues à celles des pénicillines. En particulier, en travaillant selon le procédé sus-mentionné, on peut transformer des 15 dérivés de mildew et à nouveau obtenir des produits semi-synthéti-ques ayant des propriétés thérapeutiques analogues à celles des pénicillines et qui en même temps, ne donnent pas lieu à des phénomènes d'allergie. De cette manière, on peut effectuer la scission enzymatique ou la 20 synthèse de dérivés de céphalosporine qui, de plus, ont un champ d'application plus large. Les exemples suivants ont pour objet d'expliquer le procédé mais ne sont pas du tout limitatifs de celui-ci . EXEMPLE 1 i 25 On dissout sous agitation, dans un réacteur, 20g de triacétate de cellulose (Fluka) dans 280g de chlorure de méthylène (C.Erba). Séparément, on prépare la solution d'enzyme : des cellules de E. Coli (60g de poids humide), obtenues par fermentation dans un terrain approprié en présence d'acide phénylacêtique, sont placées 30 sous l'action d'ultra-sons dans un tampon de phosphate à 0,01M de pH 7,0. Le produit brut ainsi obtenu est traité pendant 3' à 50°C et ensuite précipité au sulfate d'ammonium d'un pH de 5,5 et on collecte une fraction â 25-75% de saturation. 35 Cette dernière fraction est dissoute dans 30 ml de tampon phosphate à 0,01M de pH 8,0 contenant 30% (v/v) de glycérine. 72 14799 2134530 La solution enzymatique ainsi obtenue est ajoutée à la solution de polymère. L'ém.ulsion des deux phases est favorisée en maintenant une vigoureuse agitation à 0°C pendant 30'. On verse l'émulsion dans un creuset maintenu à -6°C et ensuite on la file sous pressiond'azote. Le fil coagule dans le toluol à la température ambiante et on le collecte sur une quenouille. On le met à sécher sous vide pendant quelques heures pour éliminer le toluol. On place 37g de fibre dans une colonne de verre, à chemise thermostatique, de 70cm de haut et de 3cm de diamètre. On lave à l'eau et à la glycérine jusqu'à disparition des protéines contenues dans les eaux de lavage. Dans la colonne, on fait circuler 600ml d'une solution aqueuse à 2% (p/v) de pénicilline potassique G (Squibb). On maintient le pH à une valeur de 8,0 par addition continue de NaOH 0,5 N au moyen d'un régulateur de pH. La colonne est thermostatisée à 37°C. Après 5 heures, larsque la vitesse de consommation de là soude est réduite à 1/20 de la consommation initiale, on enlève le mélange réactionnel et on le refroidit à 3°C, on l'acidifie avec HC1 2N jusqu'à un pH de 3,0 (33,5 ml d'HCl 2N) et on l'extrait 2 fois avec 200 ml d'acétate de butyle. On a dosé la pénicilline dans deux extraits organiques suivant la méthode de 1rhydroxylamine donnant 298 mg dans la première extraction et 2 mg dans la seconde extraction. Comme la quantité totale de pénicilline est de 12g, il en résulte un rendement de conversion de 97%. L'examen chromatographique ne révèle pas la présence de produits de décomposition. La phase aqueuse (800ml) débarrassée de la pénicilline restante et de l'acide phénylacétique, est amenée à un pH de 7,0 par addition de 33ml de NaOH 2N et est évaporée sous vide à 37°C pour être ramenée à un volume d'environ 110ml. 72 14799 7 2134530 La solution concentrée de 6-APA est refroidie à 0°C et le pH est amené à 4,2 au moyen de HC1 3N. Le 6-APA précipite et ensuite est séparé par filtration et séché sous vide à 45°C jusqu'à obtention d'un poids constant. Ce poids s'élève à 6,6g. 5 La teneur en 6-Al'A des eaux-mères de cristallisation (130ml) s'élève à 0,4% (p/v) . Le titre en 6-APA du produit cristallin, déterminé par la méthode à 1'hydroxylamine s'élève à 97,5%. Le spectre infra-rouge, l'examen chromatographique et le pouvoir 10 optique rotatoire montrent que le produit est pratiquement pur. En procédant de manière absolument identique à celle décrite ci-dessus, on a réalisé en six mois une centaine de préparations de 6-APA en utilisant toujours la même fibre enzymatique et ceci sans perte notable de productivité. 15 EXEMPLE 2 En travaillant dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1, on prépare une filature, en incorporant dans un filament une préparation enzymatique de cellules de E.Coli purifiées 15 fois suivant la méthode indiquée à l'exemple 1. 20 Le filament enzymatique ainsi obtenu possède, à poids égal, une activité 10 fois supérieure à celle du filament de l'exemple précédent. Dans la même colonne qu'à l'exemple 1, (Volume de 480ml), on introduit 37g de fibre. La fibre est lavée à l'eau et la glycérine jusqu'à ce que les protéines disparaissent des eaux de lavage. 25 Dans un container de 5 litres, on introduit au début 3 litres d'une solution aqueuse à 2% (p/v) de pénicilline G potassique (Squibb). Au moyen d'une pompe péristaltique la solution est continuellement envoyée dans la colonne contenant la fibre et va au container d'alimentation. 30 Pour limiter considérablement l'hydrolyse de la pénicilline, il est nécessaire d'assurer une homogénéité parfaite des milieux réac-tionnels, par suite la charge du container est vigoureusement mélangée et la quantité recirculée est fixée à 500 ml/1'. Le pH est maintenu constant à une valeur de 8, par adjonction 35 d'une solution aqueuse de NaOH 0,5 N réglée par régulateur de pH. La température des milieux réactionnels est automatiquement réglée 72 14799 2134530 à 37°C au moyen d'une colonne thermostatique. La consommation de solution de NaOH, enregistrée sur papier, permet de suivre le cours de la cinétique d'hydrolyse. Après 2heures et 10' la vitesse de consommation de soude est rédui-5 te à moins de 5% de la vitesse initiale. A ce point, on arrête la réaction en évacuant le circuit. On enregistre une consommation de 310ml de solution à 0,5 N de NaOH. De l'effluent du circuit, on récupère environ 3.300 ml d'une solution aqueuse contenant le 6-APA d'acide phênylacétique formé par 10 hydrolyse de la pêniiilAim; j^^^uVlYe6. L'acide phênylacétique et la pénicilline sont éliminés du milieu réactionnel par extraction à l'acétate de butyle. On procède à deux extractions consécutives, chacune avec 1.100 ml de solvant frais. Le milieu réactionnel recueilli dans un container de 6 litres, muni 15 d'un agitateur, est refroidi à 5°C et amené à un pH de 3, par addition d'une solution aqueuse de HC1 1 N. On ajoute 1.100 ml d'acétate de butyle et on agite de manière à avoir une bonne dispersion entre les phases (aqueuse et organique). Pendant l'agitation, qui se prolonge 15', on continue à ajouter de 20 l'HCl 1 N de manière à maintenir le pH inchangé. On laisse décanter à 5°C pendant environ 20'. On obtient, au fond, une phase aqueuse légèrement trouble par suite de la présence de traces de solvant sous forme de nombreuses petites gouttelettes : au sommet, la phase organique est claire. 25 Au moyen d'un entonnoir de séparation on sépare trois phases et, par centrifugation, on récupère la phase aqueuse de l'émulsion d'acétate de butyle dans l'eau. Toute la phase aqueuse est à nouveau traitée avec 1.100ml de solvant frais selon les mêmes modalités que la première extraction et, de 30 manière analogue, on récupère la phase aqueuse. Au cours des deux extractipns, on utilise 180ml de solution aqueuse de HC1 1 N. Dans les deux fractions d'acétate de butyle on titre, par la méthode à 1'hydroxylamine, la présence de pénicilline. 35 Dans la fraction provenant de la première extraction, on a dosé une concentration de 3M/ml, dans la seconde fraction on n'a pas relevé la présence de pénicilline. 72 14799 2134530 La phase aqueuse dérivée de l'extraction est amenée à un pH de 6,9 par addition de 165 ml de solution aqueuse de NaOH I N et est évaporée sous vide dans un évaporateur tournant. Le bain thermostatique de 1'évaporateur est maintenu à 45°C ; on alimente le con~ 5 denseur en liquide de refroidissement à -5°C ? la prèssion mesurée dans la pompe à vide d'aspiration est de linm de mercure. En 5 heures, le volume de la phase aqueuse est réduit à 1/8 environ de son volume initial. Le résidu recueilli dans un container d'1 litre est refroidi à 2°C 10 et est amené à un pH de 4,2 par addition de HC1 6 N. Durant la correction du pH, le 6-APA précipite sous .forme cristalline. Le précipité est prélevé par filtration sous vide et est soumis à séchage sous vide (sous 0,5 mm de mercure et à 45°C) jusqu'à l'obtention d'un poids constant. La quantité mesurée de produit J5 est de 32,4gr. Les eaux de cristallisation (450ml), titrées par la méthode à 1'hydroxylamine, contiennent 180 mM/1 dé 6-APA également à 0,39% en poids. Le 6-APA cristallin obtenu est à nouveau dissous dans l'eau et titré par la méthode à 1'hydroxylamine. La comparaison avec une solution standard de 6-APA très pur (obtenue par des 20 opérations consécutives de cristallisation et de dissolution) révèlent un degré de pureté de 98,5%. Des 161 mM de pénicilline initiaux on obtient ainsi 32,4 x 0,985 = 147 mM de 6-APA. 216 En supposant pur le produit de départ, on obtient une récupération 25 totale de 6-APA correspondant à 91,4% de la théorie. Dans une installation continue, les eaux de cristallisation peuvent être recirculëes partiellement et ensuite renvoyées à 1'évaporation sous vide. De cette manière, la récupération totale de produit peut s'accroî-30 tre jusqu'à la valeur limite de 95% de la théorie. EXEMPLE 3 De manière analogue à l'exemple 1, on prépare un filament enzymatique en incorporant un extrait brut provenant d'environ 100g de mycélium humide d'une pénicilline de la famille du pénicillium 35 chrysogénum. On place 30g de fibre enzymatique ainsi obtenue dans la colonne de l'exemple 1, thermostatisée à 37°C. 72 14799 213^530 On fait circuler 600 ml d'une solution aqueuse de sel potassique de pénicilline "V , et par un régulateur de pH, on maintient le pH à 8,0. En 5 à 7 heures, on obtient l'hydrolyse d'environ 90% de la pénicilline "V" de départ. De nombreux essais ont été effectués en uti lisant la même fibre sans perte notable d'activité. EXEMPLE 4 En utilisant une colonne qui contient la même fibre enzymatique que celle décrite à l'exemple 1, on prépare de 1'ampicilline : - (D (-) - °^ - aminophénylacêtamido) -pénicilline ~J La solution aqueuse provenant de l'hydrolyse est réalisée comme à l'exemple 1, libérée de la pénicilline 6 résiduelle et de l'acide phênylacétique, cette solution qui contient environ 8,5mg/ml de 6-APA, est amenée aux environs d'un pH de 6,0 et est additionnée de bromhydrate de D-°^-aminophênylacétamide (concentration fi nale de 18mg/ml. On fait circuler la solution aqueuse dans la colonne thermostati-sêe à 37°C et on maintient le pH aux environs de 6,0. Apres 6 à 7 heures, la quantité d'ampicilline synthétisée est d'environ 90%. EXEMPLE 5 En travaillant comme à l'exemple 4 et en utilisant, au lieu de bromhydrate de D- -amino-phënyl-acêtàmide, la DL-mandélamine à une concentration de 12mg/ml et en maintenant le pH aux environs de 5,5 on obtient après 6 heures, 1 'c^£~ -hydroxy-benzyl-pénicilli-ne comme produit de synthèse avec un rendement de 90%. EXEMPLE 6 On dissout, sous agitation, dans un réacteur, 16g d'ëthyl-cellu-lose (Hercules type N-200) dans 184g de toluol. Séparément on prépare la^solution d'enzyme : 60g de cellules humides de E.Coli sont soumises aux ultra-sons, centrifugées ; on précipite la phase surnageante par le sulfate d'ammonium et le précipité est dissous dans 30ml de tampon contenant de la glycérine . La solution enzymatique ainsi obtenue est ajoutée à la solution de polymère. 72 14799 2134530 L'émulsion des deux phases est favorisée par une vigoureuse agitation à 0°C pendant 30'. On verse l'émulsion dans un petit creuset maintenu à -65C et on la file sous pression d'azote. Le filament se coagule dans l'éther de pétrole à 20°C. En utilisant 30g de fibre enzymatique et en travaillant comme décrit à l'exemple 1, on obtient en 5 heures une production presque constante de 5,15g d'acide 6-amino-pénicillanique. EXEMPLE 7 En travaillant comme dans l'exemple précédent, on incorpore une préparation enzymatique analogue dans un poly-^Zf -méthyl-glutamate (PLG-30 Kj owa Hakko Kogyo Co.Ltd). On réalise la coagulation dans le toluol à la température ambiante . En utilisant 30g de fibre enzymatique, dans les mêmes conditions qu'à l'exemple 1, on obtient une production d'environ 6g d'acide de 6-amino-pénicillanique toutes les 5 heures. EXEMPLE 8 : On fait passer dans le réacteur décrit à l'exemple 1, contenant 37g de fibres enzymatiques, 600 ml d'une solution aqueuse à 2% (poids/volume) de sel de potassium d'acide/7 - (2-phényl-acétami-do) céphalosporanique. Le pH est maintenu à 8,0 et la température à 37 ° C. Au bout de 5 heures, on réalise une hydrolyse à 98% et on récupère l'acide 7-amino céphalosporanique du mélange réactionnel. EXEMPLE 9 En utilisant la fibre enzymatique obtenue selon l'exemple 3, on prépare une colonne contenant 30g de cette fibre. On y fait passer 600 ml d'une solution aqueuse à 2% de sel de potassium de l'acide 7- (2-phénoxy acétamino) céphalosporanique. Après 6 heures on obtient une hydrolyse de 85% et on récupère l'acide 7-amino céphalosporanique du mélange réactionnel. EXEMPLE 10 On fait passer dans le même réacteur qu'à l'exemple 1, contenant 37g de fibre enzymatique, 600ml d'une solution aqueuse à 2% du sel de potassium de l'acide 7- (2-phényl-acétamido) déacétyl céphalosporanique. On maintient le pH à 8,0 et la température à 37°C. 72 14799 2134530 Au bout de 5 heures, l'hydrolyse du substrat est complète et le rendement en acide 7-amino déacetyl céphalosporanique s'établit à 85% . EXEMPLE 11 5 On fait passer dans le réacteur décrit à l'exemple 1, contenant 37g de fibre enzymatique, 500ml d'une solution aqueuse contenant 5g du sel de potassium de l'acide 7-ami.no céphalosporanique et 13,1g de chloi^drate de "D-oi. -phénylglycineméthylester . Le pH est réglé à 6,5 et maintenu â cette valeur par un régula-10 teur de pH. La température est maintenue à 37°C. Au bout d'une heure et demie, 40% de l'acide 7-amino céphalospo-, ranique sont convertis en acide 7-(2,D-amino phénylacétamido) céphalosporanique. 72 14799 13 2134530 REVENDICATIONS 1. Procédé de traitement enzymatique d'antibiotiques, caractérisé en ■ ce que l'on soumet dans une zone réactionnelle un mélange contenant l'antibiotique choisi dans la classe des pénicillines naturelles à l'action d'une préparation enzymatique incorporée à une fibre et en ce que l'on sépare ensui- 5 te-les produits obtenus du mélange sortant de la dite zone réactionnelle. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le mélange contenant l'antibiotique est envoyé dans la zone réactionnelle où il est soumis à l'action de scission hydrolytique produite par la préparation enzymatique incorporée à la fibre. 10 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on alimen te une zone réactionnelle en mélange contenant un produit obtenu par hydrolyse d'antibiotique et qu'on le soumet à l'action de synthèse d'un autre produit qui se trouve dans cette zone, au moyen d'une préparation enzymatique incorporée dans une fibre. 15 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on envoie dans plusieurs zonesréactionnelles dans n'importe quel ordre, le mélange contenant l'antibiotique et qu'on le soumet à la scission hydrolytique et à la synthèse enzymatique au moyen d'une préparation enzymatique incorporée et non solubilisée dans la fibre. 20 5. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le mélange d'alimentation contient un antibiotique de formule : 0 C0 N CH - C00H 25 où R est un radical alkyl ayant de 1 à 10 atomes de carbone, alkényl ayant de 3 à 10 atomes de carbone, aralkyl, ou est représenté par R'-OCH^- ou R'-SCH2-, dans lesquels R' est un radical alkyl, alkényl, phênyl ou phênyl monosubstituê par halogène, -N02, alkyls alkényls alkoxy. 72 14799 2134530 6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le mélange d'alimentation à envoyer à la zone d'hydrolyse contient l'antibiotique sous forme d'une solution aqueuse à une concentration de préférence supérieure à 1 % en poids d'antibiotique par volume de solvant. 7. Frocédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la concentration en poids d'antibiotique par volume de solvant est maintenue à un niveau n'excédant pas 6 %. 8. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la concentration de poids d'antibiotique par volume de solvant est maintenue de préférence entre 2 et 3 %. 9. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que la solution d'antibiotique est maintenue dans la zone d'hydrolyse à un pH proche de 8. 10. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que la solution antibiotique est envoyée dans la zone d'hydrolyse comme solution tampon. 11. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que la zone de réaction contient des préparations enzymatiques enrobées dans des fibres, les enzymes étant contenus dans l'extrait brut obtenu à partir de moisissures et de cellules actinomycètes ou contenus dans des extraits dérivés de cellules de bactéries, ou ayant été isolés à partir de sources citées ci-dessus, par purification et les fibres étant choisies parmi celles constituées de polymères cellulosiques estérifiés, de nitrates, polyoléfines méthacrylates, esters vinyliques, chlorure de vinyle, chlorure de vinylidène, styrène, polyamides et butyral de polyvinyle, l'enrobage se faisant par filage de la phase visqueuse constituée par l'enzyme et d'un matériau polymérique facile à filer. 12. Procédé de fabrication d'acide 6-amino-pénicillanique, caractérisé en ce qu'on alimente une zone réactionnelle en pénicilline naturelle de formule : s /CH3 R - C - NH - CH - CH ^C \ CH3 • CO N CH - C00H 72 14799 15 2134530 où R a les significations ci-dessus, introduite dans une zone réactionnelle comprenant une préparation enzymatique enrobée dans une fibre, cette préparation étant faite des produits sus-mentionnés et le polymère constituant la fibre étant choisi parmi ceux indiqués ci-dessus, et en ce qu'on isole des 5 produits d'hydrolyse, l'acide 6-amino-pénicillanique obtenu de formule : 10 13. Procédé selon l'une des revendications précédentes; caractérisé en ce que la solution de composés pénicilliniques ou une solution de produits d'hydrolyse de pénicilline alimente une zone réactionnelle où elle est soumise à une action de synthèse avec un autre produit au moyen d'une préparation enzymatique incorporée à une fibre. 15 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que le produit d'hydrolyse de la pénicilline est l'acide 6-amino-pénicillanique qui alimente une zone réactionnelle où il est soumis à l'action de synthèse avec l'acide carboxylique désiré ou son amide, au moyen d'une préparation enzymatique incorporée dans une fibre, dans laquelle l'enzyme et la fibre sont 20 tous deux choisis parmi ceux énumérés ci-dessus. . 15. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que la solution d'alimentation en composés pénicilliniques ou en produits d'hydrolyse de pénicilline à envoyer sur la zone réactionnelle est à une concentration du composé dans le solvant de préférence supérieure à 1 % en poids de composé par 25 volume de solvant. 16. Procédé selon la revendication 15, caractérisé en ce que la concentration de la solution d'alimentation est comprise de préférence entre 1 % et 3 % en poids de composé par volume de solvant. 72 14799 2134530 17. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que l'on contrôle le pH dans la zone de synthèse. 18. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que l'on maintient dans la zone de synthèse une valeur de pH proche de 6. 5 19. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que le pro duit d'alimentation est le 6-APA, celui avec lequel on réalise la synthèse est l'acide =*( -hydroxybenzylpénicillanique, la préparation enzymatique est dérivée de cellules de E. Coli et la fibre est faite de triaaétate de cellulose . 10 20. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que le pro duit d'alimentation est le 6-APA, celui avec lequel on fait la synthèse est 1'ampicilline, la préparation enzymatique est dérivée des cellules de E. Coli et la fibre est faite de triacétate de cellulose. 21. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé 15 en ce qu'on alimente en pénicilline naturelle au moins une première zone réactionnel où, par action d'au moins une préparation enzymatique, elle est soumise à la scission, les produits de scission sont séparés et celui qui est de nature pénicillinique, sert à alimenter au moins une deuxième zone réactionnelle où il réagit avec un autre composé au moins, on sépare les produits de 20 cette seconde zone et on isole ainsi la pénicilline de synthèse. 22. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que les zones d'hydrolyse et .de synthèse sont maintenues à une température n'excédant pas 60°C et de préférence comprise entre 37°C et 40°C. 23. Produits caractérisés en ce qu'ils sont obtenus en totalité 25 ou en partie par un procédé conforme à l'une des revendications précédentes. d'antibiotiques 24. Procédé de traitement enzymatique/caractérisé en ce qu'il compor-te l'alimentation en un mélangé contenant un antibiotique choisi dans la classe des céphalosporines d'une zone réactionnelle où il est soumis à l'action d'un composé enzymatique enrobé dans une fibre, suivie de la séparation 30 du produit obtenu du mélange sortant de la zone réactionnelle sus-mentionnée. 72 14799 2134530 25. Procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que le produit d'alimentation est le sel de potassium de l'acide 7-(2-phénylacétamino) céphalosporanique et le produit obtenu est l'acide 7-amino céphalosporanique. 26. Procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que le pro-5 duit d'alimentation est le sel de potassium de l'acide 7-(2-phénoxy acétamido) céphalosporanique et le produit obtenu est l'acide 7-amino céphalosporanique. 27. Procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que le produit d'alimentation est le sel de potassium de l'acide 7-(2-phénylacétamido-déacétyle céphalosporanique et le produit obtenu est l'acide 7-amino déacétyle 10 céphalosporanique. 28. Procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que le produit d'alimentation est constitué par un mélange du sel de potassium de l'acide 7-amino céphalosporanique et de chlorhydrate de D-'^-phénylglycineméthylester et le produit obtenu est l'acide 7-(2-D-«