Brevet FR2092021A1 — publié le 19720121

12^66 1 2092021 La présente invention concerne un nouvel époxy-bufadiénolide à activité cardiotrope et sa préparation. Les composés connus jusqu'à présent de la série des stéroïdes bufadiénolides et portant vin groupe époxy en 5 position 14-,15(3 de la molécule stéroïdique, par exemple la résibufogénine, la marinobufagine et la cinobufagine sont des bufadiénolides extraits du crapaud, qui ne contiennent pas la composante sucre présente dans les autres hétérosidas cardiaques. C'est pourquoi on ne les a pas utilisés dans la 10 thérapeutique cardiaque. Dans la demande de brevet déposée en République Fédérale d'Allemagne (DOS) publiée sous le 1 812 9^6» on a dé^jà proposé de préparer des 14,15P-époxy-cardadiénolides et -bufatriénolides qui ont une forte activité cardiotrope, 15 par exemple par réaction de 3-oxo-cardatriénolides et -bufatétra-énolides avec des N-halogéno-amides et séparation subséquente de l'hydracide halogéné. En poursuivant l'étude de ces composés, la Demanderesse a trouvé, que l'on obtenait l'ct-L-rhamnoside d'une 20 A^-anhydro-marinobufagine, à savoir le 3P—hydroxy-14-, 15P-époxy-14-(3-bufa-4-, 20,22-1riénolide, 3 P- ( a-L-rhamnopyranoside ) de formule en faisant réagir la proscillaridine (II) avec un agent acylant, en traitant le composé acylé (III) ainsi obtenu avec des agents déshydratants, en faisant réagir la Z^-oléfine (IV) avec des 30 N-halogéno-amides ou des acides hypohalogénés, en faisant réagir 1'halogénohydrine (V) avec des agents permettant d'éliminer les hydracides pour obtenir l'époxyde (VI) et en saponifiant ce dernier pour obtenir le L-rhamnoside libre. Les différents stades du procédé sont illustrés par le 35 schéma réactionnel suivant : 71 12466 2 2092021 (ii) R = acyle (III) Y OR % CH. OH OR (IV) 71 12465 3 2092021 71 12465 4 2092021 L'acylation de la proscillaridine pour obtenir le composé acylé (III) est effectuée de manière connue, par exemple par réaction avec des halogénures ou des anhydrides d'acides monocarboxyliques. Comme restes acyles d'acides 5 monocarboxyliques on peut citer, par exemple, les restes formyle, acétyle, propionyle, butyryle, benzoyle, ou p-nitrobenzoyle. La deshydratation (III IV) est effectuée par réaction des composés 14—hydroxy (III) avec des agents déshydratants. On utilise à cette fin, par exemple, le chlorure de 10 thionyle, 1 ' oxychlorure de phosphore ou le chlorure de sulfuryle, en présence de bases tertiaires, de préférence le chlorure de thionyle dans de la pyridine, le cas échéant avec addition d'un solvant inerte tel que le benzène, le toluène, l'éther diéthy-lique, le tétrahydrofuranne, le chloroforme ou le chlorure de 15 méthylène. On effectue la réaction à une température allant de -30°C à la température d'ébullition du mélange de solvants, de préférence à 0°C. La durée de la réaction va de 30 minutes à 20 heures. La déshydratation est effectuée par exemple avec un mélange de chlorure de thionyle et de pyridine à 0eC 20 en 2 heures. La préparation des halogénohydrines (V) à partir des oléfines (XV) se fait de manière connue pour des cas analogues avec des N-halogéno-amides ou des acides hypohalogénés, par exemple avec le N—bromo-acétamide en présence d'acide 25 perchlorique ou aussi, avantageusement, avec des N-bromo-sulfonamides aromatiques, par exemple le. K,N-dibromo-beûaène-sulfonamide, en milieu faiblement acide, par exemple en milieu acétique, dans des solvants inertes, par exemple dans du dioxanne. La réaction est effectuée à line température allant de -3P°C à 30 +30°C, pendant 30 minutés à quelques heures. Les halogénohydrines de formule (V) peuvent être converties soit directement dans le mélange réactionnel soit après isolement sans purification en composés portant un groupe époxy en position 14,15P de formule (VI). 35 On utilise pour cette étape du procédé des alcalis faibles, par exemple un mélange d'acétate de sodium et d'acide acétique glacial dans du méthanol, ayant une valeur pH de 7»4 ou on traite avec de l'oxyde d'aluminium basique, neutre ou acide, tel qu'il est utilisé par exemple pour la chromatographie, 40 dans un solvant inerte vis-à—vis de l'oxyde d'aluuinium, ou avec 2092021 71 12A66 5 des bases tertiaires telles que la pyridine, la collidine, la triéthylamine ou des 1,5-diaza-bicyclo-C4,3»0]-5-nones. La saponification des composés acylés de formule (VI) pour obtenir les composés (I) est effectuée selon la manière 5 connue dans la chimie de sucres ou dans la saponification des hétérosides cardiaques acylés, par exemple à l'aide d'ammoniaque méthanolique ou de bicarbonate de potassium dans du méthanol aqueux, avec un alcoolate alcalin ou alcalinoterreux. Le fait que le procédé de l'invention puisse être 10 réalisé est surprenant, car, d'une part ou pouvait s'attendre à ce que le reste sucre en position 3 serait éliminé et, d'autre part, il n'était pas prévisible que, dans les composés de formule (IV) , des deux liaisons doubles isolées en positions A^- et Al4, seule la liaison double enAl4 pouvait réagir sélectivement pour ^5 donner la 14,15-halogénohydrine. Le produit obtenu selon le procédé de l'invention se distingue par une forte activité inotrope positive et, par conséquent, par une activité cardiotrope fortement accentuée. Des essais sur des animaux peuvent être effectués 20 selon le test sur l'oreillette du coeur ou le test de l'excrétion du potassium sur le coeur isolé de cobaye. Comparativement à des aglycones comparables, le composé de l'invention possède^ comme hétérosidé, des propriétés plus favorables en ce qui concerne la solubilité, la distribution et la résorption dans l'organisme. 25 Pour cette raison, le composé est très approprié pour le traitement médicamentaux des maladies cardiaques, en particulier dans le cas de l'insuffisance cardiaque ou de tachycardie. On administre de préférence le produit sous la forme de comprimés ou de dragées, qui contiennent, en plus de la substance active, les 30 adjuvants et excipients usuels, par exemple du lactose, de l'amidon, de la gomme adraganthe, etc... La dose unique pour l'homme va de 0,1 à 3 mg par unité de prise. Le produit de l'invention peut aussi être utilisé comme produit intermédiaire dans la fabrication d'autres stéroïdês 35 cardiotropes, par exemple par formation de dérivés dans la partie hétérosidé. Par exemple, on peut préparer par acylation usuelle, par exemple avec l'anhydride acétique des dérivés 0-acylés ; par méthylation avec l'iodure de méthyle on peut préparer des composés méthoxylés.On peubaussi former des dérivés cycliques, tels que des 40 acétonides ou des orthocarbonates (réaction avec du chlorofoimiate avec les groupes OH en position 2' et 3' de la partie hétérosidé. 71 12466 2092021 L'exemple suivant illustré l'invention. Les points de fusion ont été déterminés avec l'appareil du Dr. Tottoli (Buchi). 7HYR1WPT ,~ff j a) Triacétate de proscillaridine. 5 On dissout 5 g de proscillaridinedans 62 ml de pyridine, on ajoute 33 ml d'anhydride acétique, on chauffe pendant 2 heures et demie à 100°0 et on laisse le tout reposer pendant 16 heures à la température ambiante. Le précipité obtenu par introduction du mélange réactionnel 10 dans 2 litres d'eau glacée est lavé avec de l'eau, séché sur du PgOc;, dissous dans une petite quantité de chlorure de méthylène pour le purifier à nouveau et filtré sur du gel de silice. Les résidus de l'élution purifiés, obtenus avec du chlorure de méthylène et de l'acétate d'éthyle, 15 sont cristallisés avec de l'éther de pétrole. On obtient 6 g de produit ayant un point de fusion de 135 à 145°C. PO [a] :-64.9° (chloroforme). ^ b) Triacétate du a-L-rhamno-pyrannoside en 3 0 du 3 0-hy dr oxy-buf a -4 ,14,20,22-tétraénolide. 20 On dissout 5 g de triacétate de proscillaridine dans 20 ml de benzène et 11 ml de pyridine et on ajoute, à 0°C, 23 ml d'un mélange de 30 ml de benzène, de 10 ml de pyridine et de 2 ml de chlorure de thionyle, en 10 minutes. On agite ensuite pendant 2 heures à 0°C. On verse le mélange 25 réactionnel dans 100 ml d'eau glacée, on extrait avec du chlorure de méthylène, on lave l'extrait successivement avec de l'acide chlorhydrique dilué, de l'eau, une solution 2ÎT de HagCOj et de l'eau, on sèche sur du sulfate de sodium et on évapore sous pression réduite. Pour la purification, 30 on dissout le résidu dans un mélange dé benzène et d'éther diéthylique et on le filtre sur du gel cLe silice. Le résidu obtenu après évaporation du filtrat est mélangé avec environ 25 ml d'eau, on sépare le produit cristallin par filtràtion et on le sèche sur fusion du 35 produit est de 106 - 112°C. [a]20 ï -46,4° (CHx0H). D ^ c)Triacétate du a-L-rhamnopyrannoside an. 3R du 33-hydroxy-14 ,150-époxy-14'0-buf a-4,20,22-triénolide. 40 On dissout 3 g du triacétate du a-L-rhamnopyrannoside 71 12k65 2092021 en 33 du 3(3-hydroxy-buf a-4, 14,20,22-tétraénôlide, dans 70 ml de dioxanne, et on ajoute ensuite successivement 14,4 ml d'eau, 1,5 ml d'acide acétique glacial et 1,2 g de NjH-dibromo-benzène-sulfonamide. On laisse reposer le mé— 5 lange réactionnel pendant 2 heures dans l'obscurité à 0°C et on le verse ensuite dans une solution glacée de thio- sulfate de sodium. On sépare le précipité par filtration et on le sèche sur ^ température ambiante sous vide poussé. La 14,15-bromohydrine ainsi obtenue est 10 utilisée directement. On dissout 2,8 g de bromohydrine dans 80 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 30 g d*oxyde d'aluminium neutre "Woelm" ayant un degré d'activité II et on agite le mélange réactionnel pendant 1 heure à la température 15 ambiante, à l'abri de la lumière. Après élimination de l'oxyde d'aluminium par filtration, qu'on lave plusieurs fois avec du chlorure de méthylène frais, on évapore la solution sous pression réduite, on fait cristalliser le résidu dans un mélange de méthanol et d'éther diéthy- 20 lique et on le recristallise dans du méthanol. Point de fusion : 147 - 151°C. on [oc] jj î -64,6° (chloroforme) Analyse élémentaire : C 66,4 % H 6,8 % O 27,1 %• d) a-L-rhamnopyrannoside en 33 du 33-hydroxy-25 14,153-époxy-140-bufa-4,20,22-triénolide. On dissout 800 mg du produit préparé selon c dans 60 ml de méthanol absolu et on ajoute 12 ml d'une solution méthanolique de IîH^ saturée à 0°C. On laisse reposer le mélange pendant 20 heures à 0°C, on l'évaporé 30 sous pression réduite à 40°C, on dissout le résidu dans un mélange de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle et on filtre le résidu, sur du gel de silice. L'éluat obtenu avec l'acétate d'éthyle est évaporé et on fait cristalliser le résidu ainsi obtenu avec du méthanol, 35 puis on le recristallise dans un mélange de méthanol et d'éther diéthyliqua. Point de fusion : 190 - 192°C. [a]2^ : -73»0° (chloroforme). 71 12455 8 2092021 — REVENDICATIONS 1L1a-L-rhamnopyrannoside en 33 du 33-hydroxy-14,153-époxy-14-3-buf a-4,20,22-triénolide « 5 2.- Procédé de préparation du a-L-rhamnopyrannoside en 33 du 33-hydroxy-14,1 53-époxy-14f3-bufa-4,20,22,triénolide 20 procédé carartérisé en ce qu'on fait réagir la proscillaridine avec un agent acylant, on traite le composé acylé obtenu avec des agents déshydratants, on fait réagir la Al4-oléfine obtenue avec des N-halogéno-amides ou avec 25 des acides hypohalogénés, on fait réagir l'halogénohydrine ainsi obtenue avec des agents permettant d'éliminer des hydracides pour ohtenir le 14,153-époxyde et on saponifie ce dernier pour obtenir le L-rhamnoside libre. 3«— Médicaments à activité cardiotrope, 30 caractérisés en ce qu'ils contiennent, comme substance active, l'a-L-rhamnopyrannoside en 33 du 33-hydroxy-14,153-époxy-14p-bufa-4,20,22-triénolide. 4.— Procédé d'obtention de préparations pharmaceutiques à activité cardiotrope, procédé caractérisé en ce 35 qu'on met 1'a-Lrrhamnopyrannoside en 33 du 33-hydroxy-14, 153-époxy-143-bufa-4,20,22-triénolide, le cas échéant avec des adjuvants et excipients usuels en pharmacie, sous une forme administrable en thérapeutique.