Brevet FR2059967A1 — publié le 19710611

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de rifamycine SV dans lesquels le groupe hydroxy en position 4 est absent. Plus particulièrement, les nouvelles rifamycines selon l'invention sont représentées par la formule suivante dans laquelle Me représente un groupe CH et X représente a) un atome d'hydrogène, # b) un groupe-CH2HB ou -CH = NB , dans lesquels le groupe NB est un reste anilino, mono- ou di-(alkyl inférieur)-amino, benzylamino, di-(alkyl inférieur)-amino-(alkyl inférieur)-amino, pyrrolidino, pipéridino ou morpholino, ou c) un groupe -CH = NR dans lequel R est un reste anilino, di-(alkyl inférieur)-amino, ou méthyl-4-pipérazino, R eest un atome d'hydrogène ou bien lorsque X est un reste -CH = NB, une charge négative. On prépare les nouvelles rifamycines selon l'inven- tion à partir de la désoxy-4-diazo-4-rifamycine S que l'on chauffe au reflux pendant 2 à 12 heures dans un solvant organique a-vec un excès de plus de trois fois la quantité équimoléculaire de formaldéhyde et une amine de formule HNB, dans laquelle le groupe -NB est tel que défini ci-dessus.On obtient ainsi des bases de Mannich de la désoxy-4-rifamycine SV, répondant à la formule que l'on transforme ensuite en composés de structure, partielle - CH = NB par réaction avec le bioxyde de manganèse à température ambiante : on obtient les composés de structure partielle - CH = NR par traitement de ceux-ci au moyen d'une hydrazine RNH2 dans laquelle R' est tel que défini ci-dessus, à température abîante dans un solvant inerte. Dans la première. étape de la synthèse décrite ci-dessus, c'est-à-dire dans la réaction de la désoxy-4-diazo-4-rifamycine S; il se forme toujours une certaine quantité de désoxy-4-rifamycine SV, c'est-à-dire des composés de formule générale I ci-dessus dans laquelle X est un atome d'hydrogène. D'autre part, on obtient cette substance seule lorsque lton dissout la désoxy-4-diazo-4- rifamycine S dans un solvant organique à -10 C et que l'on ajoute avec précaution à cette solution une solution aqueuse d'un agent réducteur doux. Parmi les agents réducteurs, les bisulfites, hydrosulfites et sulfites de métaux alcalins, l'hydrure de lithium aluminium et le borohydrure de sodium donnent les meilleurs résultats. Les nouvelles rifanycines selon l'invention possèdent une remarquable soitimité antibectérienne in vitre, particilièrement élevée contre Pseudomones aeruginosa et d'autres micro-organismes gram négatif tels que Escherichia coli et Klebsielle pneumoniae. Le tableau suivant donne un aperçu de cette activité pour, certain des composés de l'invention exprimée par la concentration. -ldhibi- trice minimale en Composé X dans la Concentration inhibitrice minimale &gamma;;/ml formule I -CH2NHCH3 0,1 0,1 0,1 10 20 5 5 0,5 -CH2NHC2H5 0,05 0,1 0,1 5 10 10 5 0,2 -CH2NHC(CH3)3 0,05 0,1 0,1 20 20 20 10 0,2 -CH2NHCH2C6H5 0,02 0,05 0,02 5 10 10 10 10 0,2 -CH2NH(CH2)2N(CH3)2 0,05 0,05 0,05 5 2 5 0,5 -CH2NH(CH2)2N(CH2H5)2 0,05 0,1 0,05 10 5 5 5 0,5 -CH2N(CH3)2 0,1 0,1 0,05 10 20 10 5 0,5 -CH2N(C2H5)2 0,05 0,2 0,2 10 20 10 5 0,5 -CH2N# 0,01 0,1 0,1 10 20 10 5 0,1 -CH2N# 0,05 0,1 0,05 10 10 10 5 0,5 -CH2N# 0,05 0,2 0,2 10 10 10 10 0,5 -CH=NC6H5 0,02 0,02 0,02 10 10 10 20 0,5 -CH=NNH2 0,02 0,02 0,02 10 10 10 5 0,5 Les composés de l'invention ont également une activité considérable Par administration in vivo par voie sous-cutanée contre l'infection par staphylocoques chez les souris, Le tableau ci-après indique les DE50 de quelques substances représentatives de l'invention0 Composté: dans DE50 a0 c, contre l'infection par la formule I 5 la formule I Staphylococcus aureus chez la souris wCH2NHCH3 9,2 -CH2NHC2H5 9,9 -CH2NHC(CH3)3 8,6 CH2NHCH2CH2N(C2H5)2 4,6 CH2"N 9* 3,7 / , CH2 N u 13,9 13,9 H 11,5 Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée, Exemple 1 Désoxy-4-rifamycine SV Dans 300 ml d'acétone on dissout 4 g de désoxy-4- diazo-4-rifamycine S, ou rifamycine X décrite par Sensi et Colt. dans Il Farmaco, Sci. Ed., 16, 766 1961, On refroidit la solution à -10 C et on ajoute ensuite avec soin en agitant une solution aqueuse de 4 g d'hydrosulfite de sodium dans 100 ml d'eau. Au bout de 10 minutes après la fin de l'addition, on verse le mélange dans 2000 ml d'eau glacée et on extrait avec 500 ml d'acétate d'éthyle On répète l'extraction de la phase organique par le même volume de solution tamponnée au phosphate à pH 7,3 et ensuite on la jette. On réunit les couches aqueuses, on lave- à l'acétate d'éthyle et après avoir ajusté à environ pH 2 par l'acide chlorhydrique à 10%, on extrait par l'acétate d'éthyle0 On concentre la solution organique sous vide et le produit cristallise sous forme de petits cristaux vert Jaunttre. On recueille ce précipité après environ 15 heures (en maintenant la solution à 4 C), on lave à l'acétate d'éthyle et on sèche sous vide à 450C. Rendement 2,05 g (54% de la théorie), F 160-1630C, maxima E1% = 306,3) #max 420 m (F1% 261,4) d'absorption ax 298 m/u ( 1cm max 1cm Exemple 2 N-(ss-diméthylaminoéthyl)-aminométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV On dissout 7,1 g de désoxy-4-diazo-4-rifamycine S dans 300 ml de tétrahydrofuranne, ensuite on ajoute 5,3 g de ss(diméthylamino)-éthylamine à la température ambiante puis 4,5 ml de solution aqueuse à 40% de formaldéhyde. On chauffe le mélange au reflux pendant 4 heures, puis on distille le solvant sous vide. On dissout le résidu dans 200 ml d'acétate d'éthyle. On lave au tampon phosphate à pH 7,3 et on distille l'acétate d'éthyle sous vide.On dissout le résidu dans environ 20 ml de chlorure de chloroforme et on fait passer sur une colonne de gel de silice. On élue ensuite la colonne par le chloroforme contenant 2, 4, 5 et 6% de méthanol. On combine les éluats, on concentre à un faible volume et on dilue par l'éther de pétrole. On recueille le précipité et on le sèche. Rendement 3,0 (38%), F 185-190 C (décomposition) maxima d'absorption 415 m/u (# = 16 220) et 300 m/u (# = 18 680) Analyse caloulé : C 64,51 H 7,60 N 5,37 Trouvé C 63,40 H 7,42 N 5,20 Exemple 2 Pipéridinométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV A une solution de 7,1 g de désoxy-4-diazo-4- rifamycine S dans 300 ml de tétrahydrofuranne, on ajoute 5,1 g de pipéridine et 4,6 ml de solution aqueuse à 40% de formule déhyde et on chauffe le mélange au reflux pendant 7 heures On évapore ensuite à siccissité sous vide et on dissout le résidu dans 200 ml d'acétate d'éthyle, on lave au tampon phosphate à pH 7,3 et on élimine le solvant. On dissout le résidu dans environ 20 ml de chloroforme et on absorbe la solution sur gel de silice, puis on élue par le chloroforme contenant 5, 10 et 15% d'acétone, on combine les éluats, on évapore à faible volume et on dilue par l'éther de pétrole. On recueille le précipité et on sèche. Rendement 2,9 g (37%) ; F 187-1900C , maxima d'absorption ; 410 m/u (8 = 16 740),287 m/u ( & 22820) et 237 m/u (e= 32480). Analyse Calculé : C 66,30 H 7,50 N 3,59 trouvé : C 66,22 H 7,60 N 3,45. Exemple 4 Pentaméthylèneiminométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV A une solution de 7,8 g de pipéridinomdthyl-3-désoxy- 4-rifamycine 8V dans 600 ml de chloroforme, on ajoute 39 g de bioxyde de manganèse en agitant à la température ambiante. On agite la suspension pendant 4 heures, puis on filtre et on concentre le filtrat sous vide à environ 30 - 40 mi et on fait passer sur un gel de silice. On effectue l'élution au moyen de chloroforme contenant 5 et 10% d'acétone, on concentre les eluats à un faible volume et on dilue par l'éther de pétrole. On recueille le précipité jaune clair et on sèche. Rendement 3,5 g (45%) ; F 166-169 C (décompsoition), maxime d'absorption #max 414 m/u (#= 16 780) et 288 m/u (# = 27 910) Analyse : Calculé : C 66,)9 H 7,38 N 3 Trouvé : C 66,13 H 7 08 N 3,80 Exemple 5 Diméthylhydrazone de la formyl-3-désoxy-4-rifamycine SV A une solution de 7,8 g de penteméthylèneiminométhyl- 3-désoxy-4-rifamycine SV dans 300 ml de tétrahydrofuranne, on ajoute une solution de N-N-diméthylhydrazine dans 20 ml de tétrahydrofurenne, on agite le mélange pendant 45 an à la température ambiante et ensuite on évapore à siccité sous vide.On dissout le résidu dans 30 mi de chloroforme, on adorbe sur gel de silice et on élue avec un mélange de 98 c 2, puis un mélange de 99 : 1 de chloroforme - méthanol. On combine les éluats et on évapore à siccité, puis on dissout le résidu dans 10 ml d'acétate d'éthyle, On laisse reposer pendant environ l0 heures à 4-50C et il préoi- pite un produit jaune orangé. Rendement 3,8 g (50%). F 167-1700C (décomposition); maxima d'absaption Amax 423 m/u ( # = = 23 950) et 254 mu (# = 37 650) Analyse Calculé : C 63,90 H 7,10 N 5,59 trouvé : C 62,94 H 7,15 N 5,52 Exemples 6 à 14 En suivant le procédé décrit dans les exemples 2 et X on prépare les composés suivants. Méthylaminométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV; F 287-2900C (déeom- position) ; #max 415 m (# = 17 830) et 298 m (#= 18 260) Analyse Calculé : C 64,62 H 7,23 N 3,86 Trouvé : C 63,23 H 7,16 N 3,48 Ethylaminométhyl-3-désoxy-4-rifamicyns SV, F 283-286 C (décom position), #max 415 m/u (# = 17 360) et 299 m/u (#= 18 400) et 241 m/u (# = 32 870). Analyse Calculé : C 65,02 H 7,36 N 3,79 Trouvé : C 64,74 H-7,50 N 3,73 rartiobutylaminométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV ; F 196-200 C, #max 412 m (# = 18,660) 300 m (# = 19 300) 244 m (# = 34 990) et 223 m (#= 37 260) Analyse Calculé : C 65,77 H 7,62 N 3,65 Trouvé : C 64,81 : H 8,04 N 3,40 Benzylaminométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV ; F 150 C (décompsoition) ; #max 415 m (#=17 460), 298 m (# = 18 420) et 239 m (# = - 31 t10) Analyse calculé : C 65,02 H 7,36 N 3,79 troUvé :C 64,57 H 7,75 N 3,66 Diéthylaminoéthylaminométhyl-3-désoxy-4-ri cine 8V, F 157-1770C (décomposition) Amax 415 m/u ( & 17 660) 300 m/u (# = 18 630) et 239 m/u (# = 32 720) Analyse calculé : C 65,24 H 7,84 N 5,19 Trouvé : C 65,02 H 8,o2 N 5,16 Diméthylaminométhyl-3-désoxy-4-rifamyoine SV, F 195-200 C (décomposition) Amax 412 m/u (#=19 730) 242 m/u (#=38 660) 298 m/u (e = 19 440) et 222 m/u (# = 39 600) Analyse Calculé : C 65,02 H 7,36 N 3,79 Trouvé :C 64,57 H 3,36 N 3,66 Diéthylaminométhyl-3-désoxy-4-rifamyoine SV, F 180-183 C (décomposition) #max 415 m (# = 16 870) 299 m (# = 16 870) et 243 m/u (# = 32 510) Analyse Calculé : C 65,77 R 7,62 N 3,65 Trouvé : C 65,76 H 7,54 N 3,54 Pyrrolidinométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV, F 205-2100C (dé composition) #max 415 m (# = 19 100) 298 m (# = 19 170) ét 240 m (# = 38 510) Analyse Calculé : C 65,95 H 7,38 N 3,66 Trouvé :C 65,95 H 6,98 N 3,80 Morpholinométhyl-3-désoxy-4-rifémyoine SV, F 185-188 C #max 415 m (# = 18 750) 298 m (# = 18 290) 242 m (# = 37 650) et 221 m (# = 37 555). Analyse Calculé : C 64,59 H 7,22 N 3,58 Trouvé : C 64,23 H 7,36 N 3,45 On prépare la diéthylminométhyl-3-désoxy-4-rifamyoine SV, par le procédé décrit dans l'exemple 4 à partir de diéthylaminométhyl3-désoxy-4-rifamycine SV. F 150-1520C (décomposition) #max 414 m/u (#=18 670) 291 m (# = 33 260) Analyse Calculé : C 65,86 H 7,50 N 3,66 Trouvé : C 65,45 H 7,70 N 3,70 Exemple 16 à 18 En suivant le procédé décrit dans l'exemple 5, on prépare les composés suivants Phényliminométhyl-3-désoxy-4-rifamycine SV, F 186-189 C (décomposition) #max 485 m (# = 4 820), 413 m (# = 15 570), ét 269 m/u (# = 35 150) Analyse Calculé : C 66,06 H 6,68 N 5,25 Trouvé : C 65,41 H 6,71 N 5,40 (Méthyl-4-pipérazinyl-1-iminométhyl)-3-désoxy-4rifamycine SV, F 155-160 C (décomppsition) Amax 423 m/u (# =11 920) et 257 m (#=32 000) Analyse Calculé : C 64,00 H 7,24 N 6,94 Trouvé : C 64,o5 H 7,03 N 6,82 Phénylhydrazone de la formyl)-3-desoxy-4-rifamycine SV, F > 200 C (décomposition) #max 350 m (# = 15 360) et 250 m (# = 33 500) Analyse Calculé C 66,06 H 6,68 N 5,25 Trouvé : C 65,41 H 6,71 N 5,40 REVENDICATIONS 1 - Dérivés de la désoxy-4-rifamycine SV, utiles comme antibiotiques, redondant à la formule dans laquelle Me représente un groupe CH3 et X représente a) un atome d'hydrogène, b) un groupe CH2NB ou CH = NB, dans lesquels le groupe NB est un reste anilino, mono- ou di-(alkyl inférieur)-amino, benzylamino, di-(alkyl inférieur)-amino-(alkyl infdrieur)-amino, pyrrolidino, pipéridino ou morpholino, ou c) un groupe CH = NR dans lequel R est un reste anilino, di-(alkyl inférieur)-amino, ou mét(hyî-4-pipérazino, R1 est un atome d'hydrogène ou bien, lorsque X est un reste CH = NB, une charge négative. 2 - La désoxy-4-rifamycine SV. 3 - La diméthylaminoéthylaminométhyl-3-désoxy-4- rifamycine SV. 4 - La pipéridinométhyl-3-désoxy-4-rifamyoine 8V. 5 - La diméthylhydrazone de la forzyl-3-désoxy-4rifamyeine SV. 6 - La (méthyl-4-pipérazinyl-1-iminométhyl)-3-désoxy- 4-rifamycine SV. 7 - Procédé de préparation de désoxy-4-rifamycine SV caractérisé en ce que l'on traite la désoxy-4-diazo-4-rifanycine S en solution dans un solvant organique à une température ne ddpas- sant pas la température ambiante, au moyen d'un agent réducteur doux bel que bisulfite, hydrosulfite, et sulfite de métaux alcalins, hydrure de lithium-aluminium ou borohydrure de sodium. 8 - Procédé de préparation de dérivés de la désoxy4-rifamycine SV de formule dans laquelle Me représente un groupe CH3 et NB représente un reste anilino, mono- ou di-(alkyl inférieur)-amino, benzylamino, di-(alkyl inférieur)-amino-(alkyl inférieur)-amino, pyrrolldino, pipéridino, ou morpholino, caractérisé en ce que lton chauffe au reflux la désoxy-4-dlazo-4-rlfamycine S avec un excès de plus de trois quantités équimoléculaires de formaldéhyde et une amine de formule HNB, dans laquelle le groupe NB est tel que défini cidessus, dans un solvant organique pendant 2 à 12 heures. 9 - Procédé de préparation de dérivés de la désoxy4-rifamycine SV dans laquelle Me représente un groupe CH3 et R représente un reste anilino, di-(alkyl inférieur)-amino, ou méthyl-4-pipéra zino, caractérisé en ce que l'on chauffe au reflux la désoxy 4-diazo-4-rifamycine S avec un excès par rapport à trois quantités équimoléculaires de formaldéhyde et une amine de formule HNB dans laquelle le groupe NB représente un reste anilino, mono- ou di-(alkyl inférieur)-amino, benzylamino, di-(alkyl inférieur)-amlno-(alkyl inférieur)-aminocpyrrolidino, pipéridino, ou morpholino, dans un solvant organique pendant deux à douze heures, on traite le dérivé aminométhyl-3 de la désoxy-4-rifamycine SV ainsi obtenu par le bioxyde de manganèse à la température ambiante et on met en contact le produit de réaction ainsi obtenu avec un excès moléculaire d'une hydrazine H2NR, dans laquelle R est tel que défini ci-dessus, à la température ambiante dans un solvant inerte. 10 - Compositions thérapeutiques contenant comme ingrédient actif l'un au moins des composés selon la revendication 4. 11 - Formes pharmaceutiques pour l'administration des compositions selon la revendication 10.