Brevet FR2077918A1 — publié le 19711105

L'invention a pour objet un nouveau médicament, et son procédé de préparation, spécialement utile pour provoquer une calcémie élevée et pour favoriser la recalcification. On connaît déjà plusieurs sels de Ca, minéraux ou orga-5 niques couramment utilisés en thérapeutique tels que le chlorure, l'acétate, le glucogalactogluconate, le glucoheptogluconate, le lactate de calcium. L'objet de l'invention est le dipropylacétate de calcium ayant la formule suivante : 10 C,H„ CLHr, 3 7 \ ^ 7 CH - COO - Ca - OOC - CH c3H? / ^ C3H? et une masse moléculaire de 326,1. Ce sel de calcium a la propriété quand il est administré, 15 par exemple en solution aqueuse par voie orale, de créer dans un temps assez court une calcémie élevée. En outre, quand il est admiiiistré pendant une durée prolongée il favorise la fixation et l'incorporation osseuse du calcium. Le sel de calcium de l'invention est particulièrement 20 recommendable pour la formation et la reconstitution du tissu osseux, spécialement pour la consolidation plus rapide des fractures. L'invention a aussi pour objet un procédé de préparation du dipropylacétate de calcium, principalement en vue de son usage comme médicament. Son obtention se fait conformément au schéma 25 général suivant : C„H„ / C„H. '3 7 ^ CH - COOH C3h7 / , , 37 \ + CaO —> ( CH - COO Ca + HgO C3H? J 2 Par exemple, dans un réacteur on mélange 4000 g d'eau 30 épurée et 29,5 g de chaux vive. On agite. On chauffe jusqu'à 70°C, puis on introduit 144 g (1 mole) d'acide dipropylacétique. On élève alors la température jusqu'à 80° à 90°G et on maintient cette température pendant 4 heures. On filtre alors sur un verre fritté et on concentre le filtrat à sec dans un évaporateur sous 35 vide (p = 100 mm Hg) - température du bain 80°C. On reprend alors le résidu sous agitation pendant 2 heures dans 120 g d'acétone. On essore. On rince par 30 g d'acétone. On sèche enfin à l'étuve sous vide jusqu'à poids constant (p = 200 mm Hg) - température 80°C. On obtient ainsi 107 g de dipropylacétate de calcium. 40 Rendement de la réaction î 65,5 %• 70 06583 2 2077918 Le sel de calcium de l'invention a été soumis aux essais pharmacologiques qui suivent. Au cours des explications relatives à ces essais, on se référera, à certains passages, aux dessins annexés dans lesquels : 5 - la figure 1 est un graphique qui correspond au tableau III donné plus loin et qui représente la calcémie en fonction du temps ; - 1b figure 2 est un graphique qui correspond au tableau II donné plus loin et qui représente le taux de calcium dans un fémur en fonction du temps après une fracture provoquée ; 10 - les figures 3> 4 et 5 sont des vues reproduisant une partie de la radiographie de trois fémurs le 7ème jour après une fracture provoquée, sur un animal témoin (fig. 3), sur un animal traité par le glucogalactogluconate de Ca (fig. 4), sur un animal traité par le dipropylacétate de Ca (fig. 5). 15 A) Etude comparative de la résorption du Ca++ et de la calcémie obtenue par rapport à différents autres sels de calcium. Dans ce qui suit, pour des raisons de commodité, on désignera le sel de l'invention par un numéro de code : B 39.65. Les produits adoptés pour la comparaison avec le B 39.65 20 sont les sels de calcium les plus couramment employés en thérapeutique : - chlorure de calcium, ôfc^O - acétate de calcium - glucogalactogluconate de calcium 25 - glucoheptogluconate de calcium - lactate de calcium On utilise des rats mâles de souche IFFA, d'un poids de 200 g environ, adaptés à la température (25°C) ainsi qu'à l'alimentation de l'animalerie, et soumis à une diète hydrique préala-30 ble de 24 heures. Tous les produits sont introduits à la sonde oesophagienne directement dans l'estomac, en solution aqueuse. On mesure la calcémie à différents moments après l'administration des différents produits. La méthode de dosage utilisée + + 35 consiste à faire le dosage du Ca sérique par le complexon III. Cette méthode de dosage qui fait appel à l'acide éthylène diamine tétracétique (EDTA) est décrite dans "les Méthodes de la Chimie Analytique" de C. Chariot - 1961 - 4ème édition (Masson et Cie) -pages 654-656. 70 06583 3 2077918 Au temps t(0), tous les animaux reçoivent les différents produits, sauf les témoins qui reçoivent 1 ml de sérum physiologique, La calcémie est mesurée aux temps t + 20 mn, t + 40 mn, 5 t + 1 h., t + 1 h.20, t + 1 h.40, t + 2 h., t + 2 h.20, t + 2 h.40. | | La dose de Ca élément choisie est de 5 mg par kg de poids soit pour les différents produits : ■ B 39.65 : 40,9 mg/kg ■ CaCl2, 6H20 : 27,3 mg/kg 10 - ■ acétate de Ca î 19,8 mg/kg ■ glucogalactogluconate de Ca : 2,5 ml de la solution commerciale par kg de poids • glucoheptogluconate de Ca : 1,8 ml de la solution commerciale par kg de poids 15 ■ lactate de Ca : 2,52 ml de la solution commerciale par kg de poids. Les résultats sont portés sur le tableau I qui suit. 70 06583 4 2077918 Tableau I -J— Calcémie en mg de Ca par litre de plasma après administration du produit Produit soumis' à la résorption par voie buccale au dosage de 5 mg/kg de Ca"1-1" élément Temps écoulé après l'administration (en mn) 20 40 60 80 100 120 140 160 Sérum physiologique 1 ml ANIMAUX TEMOI] \is 100 107 106 106 116 100 100 110 B 39.65 ANIMAUX TRAIT] LS 121 137,5 127 127 108 130 116 124 Chlorure de calcium, 6H20 106 127 127 120 115 106 110 100 Acétate de calcium 111 116 116 - «• 113 113 116 Glucogalactogluconate de Ca 119 110 95,4 116 - 108 96,4 111 Glucoheptogluconate de Ca 116 116 1l6 106 116 106 101 106 lactate de Ca 116 114 116 116 116 97,5 95,4 97,5 Il ressort de l'examen des chiffres de ce tableau que le sel de l'invention, le B 39.65, en solution aqueuse, adminis- j | tré à raison de 5 mg/kg de poids en Ca élément par voie orale permet d'obtenir une calcémie supérieure, sauf pour les vingt -H- premières minutes, à celle procurée par les autres sels de Ca minéraux ou organiques couramment employés en thérapeutique : chlorure, acétate, glucogalactoglucinate, glucoheptogluconate et lactate. 70 06583 5 2077918 Il est évident que la résorption du calcium administré sous forme de dipropylacétate est supérieure à celle qui a lieu quand le calcium est administré sous forme d'un sel minéral ou organique connu. , j, | 5 B) Etude comparative de la fixation du Ca au niveau osseux. La comparaison a été faite entre le B 39.65 et le glucogalactogluconate de calcium, sel de calcium le plus largement utilisé en thérapeutique à l'heure actuelle. On réalise chez le rat une fracture expérimentale du 10 fémur que l'on réduit ensuite à l'aide d'un appareil de maintien. Au cours de la réparation, on assiste à une mobilisation intense j j, du Ca au niveau osseux. Cette mobilisation se traduit (sans apport externe) par une chute de la calcémie et par une augmen- •H- tation du taux de Ca dans le fémur. 15 On utilise trois lots de vingt cinq rats n0ncinsn (souche IFFA) d'un poids moyen de 1Ô0 g en début d'expérience, adaptés à la température (25°C) et à la nourriture de l'animalerie: - le lot n° 1 sert de témoin et ne reçoit aucun traitement j | | - le lot n° 2 reçoit 5 mg/kg de Ca élément sous forme de 20 B 39.65, tous les jours, par voie I.P. (intra-péritonéale) ; | | - le lot n° 3 reçoit 5 mg/kg de Ca élément sous forme de glucogalactogluconate de calcium, tous les jours, également par voie I.P.. 70 06583 6 2077918 Tableau II | | Taux de Ca dans le fémur -j ,.| en mg de Ca pour 100 mg de fémur frais Jour de la fracture Nombre de jours après la fracture 0 4 11 15 18 25 29 35 Lot n° 1 Témoins 0,5 17,3 12 18,5 ô,5 12,2 8 11 Lot n° 2 B 39.65 40 mg/kg I.P. *,5 19,5 9,5 14 13 13 14 14 Lot n° ? Glucogalactogluconate 75 mg/kg I.P. *i5 17 Ô.5 11,8 11,8 12,2 10,5 12,3 70 06583 7 2077918 Tableau III ++ Calceraie en mg de Ca par litre de plasma Jour de la fracture Nombre de jours après la fracture 0 11 15 18 25 29 35 Lot n° 1 Témoins 100 93 98 112 100 104 103 Lot n° 2 B 39.65 40 mg/kg I.P. 100 98 94 90 100 102 109 Lot n° 3 Glucogalactogluconate de Ca 75 mg/kg I.P. 100 78 96 105 120 100 98 70 06583 8 2077918 Tableau IV Variation de la quantité de Ca++ incorporé au fémur au cours de la réparation de la fracture (en pourcentage) Réparation Consolidation Réparation précoce totale Temps en jour de la fracture au llème jour du llème au 35ème jour de la fracture au 35ème jour Lot n° 2 B 39.65 40 mg/kg I.P. + 5,7 + 38,9 + 24,-1 Lot n° 3 Glucogalactogluconate de Ca 75 mg/kg I.P. : - 15,2 - 13,3 - 14,1 Ce calcul est fait par rapport aux rats témoins du lot n° 1. + + On mesure et on note la calcémie et le taux de Ca dans le fémur le jour de la fracture et dans les jours qui suivent, soit le jour 0 (celui de la fracture) et les suivants : 4, 11, 15» 5 18, 25, 29, 35. Une vérification radiologique faite le 7ème jour permet d'apprécier l'importance et l'état de calcification du cal formé. Les résultats sont consignés sur les tableaux II, III et IV précédents. En outre, les chiffres du tableau III et du tableau 10 II ont servi à tracer des graphiques (figures 1 et 2). La figure 2 est le graphique du taux de Ca dans le fémur, en mg de Ca++ pour 100 g de fémur frais. La figure 1 est le graphique de la calcémie en mg de -i- + Ca par litre de plasma. 15 La première phase de réparation de la fracture, jusqu'au llème jour est marquée par une utilisation intense du Ca++ plasma-tique pour la recalcification. 31 l'on intègre les courbes de fixation du Ca dans le fémur de la figure 2 et les courbes de calcémie de la figure 1, on obtient avec le B 39.65 une calcémie 20 et un taux de Ca++ osseux supérieurs à ceux des témoins et à ceux des animaux traités avec le glucogalactogluconate. bad original 70 06583 9 2077918 Pendant la seconde phase (du llème au 35ème jour) l'in-| | corporation du Ca est plus forte chez les rats traités par le B 39.65 avec une calcémie qui reste normale. Les animaux témoins et les animaux traités au gluco-5 galactogluconate de calcium ont à ce stade une phase d'hypercalcémie, ce qui est le signe d'une moins bonne utilisation du -J. | Ca circulant. Au total, on peut dire que la fixation du calcium n'est pas augmentée par l'administration de glucogalactogluconate de 10 calcium, alors qu'elle est nettement accrue par l'administration du B 39.65. Un contrôle radiologique effectué le 7ème jour montre nettement un début de formation et de reconstitution du tissu osseux avec le lot n° 2 traité par le B 39.65 (voir figure 5), 15 alors qu'il est inexistant dans les lots n° 1 et n° 3 (voir respectivement les figures 3 et 4). Le sel de l'invention se montre donc supérieur au sel | | de Ca , le plus couramment utilisé (glucogalactogluconate de Ca ) pour la fixation et l'incorporation osseuse du calcium. 20 Ces essais confirment les résultats obtenus lors des essais de résorption qui montrent que sous forme de dipropyl-| | acétate l'ion Ca est résorbé beaucoup mieux que sous toutes les autres formes minérales ou organiques auxquelles il a été comparé. On donnera maintenant deux exemples d'application thé-25 rapeutique du sel de l'invention. f Exemple 1 Monsieur Hua... Georges, âgé de 27 ans, a été victime d'un accident de ski lui occasionnant une double fracture de la jambe droite (tibia + péroné). 30 Après réduction orthopédique, le malade a été traité tous les jours pendant 50 jours à l'aide de deux comprimés de B 39.65 dosés à 50 mg de produit. Au bout de ce temps, le contrôle radiologique ayant montré la formation d'un cal important et bien calcifié, un plâ-35 tre de marche a pu être posé pendant 30 jours au bout desquels la consolidation définitive a été obtenue. Exemple 2 Madame Mes... Yvonne, âgée de 55 ans, vient consulter pour des douleurs articulaires et osseuses diffuses des jambes. 40 L'examen radiologique montre une décalcification générale des WiMG GA 70 06583 10 2077918 membres inférieurs, suite probable de troubles endocriniens de la ménopause. On lui prescrit pendant 2 mois trois comprimés par jour de B 39.65 dosés à 50 mg. Au bout de ce temps, un nouvel examen radiologique montre une amélioration spectaculaire de la densité de la trame osseuse avec disparition de nombreuses zones d*ostéoporose. 70 06583 h 2077918 REVENDICATIONS 1°/ A titre de médicament nouveau, le dipropylacétate de calcium ayant la formule suivante : 5 CH - COO - Ca - OOC - CH et un poids moléculaire M = 326,1, ayant entre autres la propriété de favoriser l'incorporation et la fixation osseuses du calcium. 10 dication 1 caractérisé en ce qu'on mélange de l'eau et de la chaux vive, on- agite, on chauffe à moins de 100°C, on ajoute de l'acide dipropylacétique et on maintient plusieurs heures à une température inférieure à 100°G, on filtre, on recueille le filtrat et on le concentre puis on le traite à l'acétone en agitant, on élimine 15 l'acétone et on sèche jusqu,à poids constant pour obtenir du dipropylacétate de calcium. qu'on sèche le filtrat sous vide à une température de 80°C environ après traitement à l'acétone. ce qu'il est mélangé à au moins un produit actif constitué par ou comprenant du dipropylacétate de calcium. 2°/ Procédé de préparation du médicament selon la reven- 3°/ Procédé selon la revendication 2 caractérisé en ce 20 4°/ Tout véhicule acceptable en pharmacie caractérisé en