Brevet FR2108007A1 — publié le 19720512

-1- 2108007 La présente invention concerne une composition pharmaceutique ayant un pouvoir psychopharmacologique. Plus particulièrement, l'invention concerne une composition contenant des octa-peptides de formule générale : ï ■ — 1 5 H-Ii-Cys-L-Tyr-L-Plie-L-GIn-L-Asn-rL-Cys-L-Pro-Y-OR Cl) dans laquelle S représente un atome d'hydrogène ou un radical hydrocarboné et Y représente L-Lys ou 1-Arg, ainsi que levrs sels résultant de l'addition d'un acide. Ces peptides, bien que sous forme impure et dissoute, sont 10 connus par une publication de du Yigneaud et Coll., J.A.O.S. 75* 4880 (1953)» qui indique que la décomposition par la trypsine de la vasopressine dans des études expérimentales tendant à élucider la structure de cette substance, ne forme que deux composants, dont l'un semble être le glycinamide. On n'a à ce jour 15 attribué aucune activité biologique aux octapeptides de formule I. L'Int. J. Ueuropharmacol. 157* 4- ( 1965) indique que chez les rats ayant subi une hypophysectomie ou une lobectomie postérieure, la lysine vasopressine —tannate de zinc possède cer-20 taines propriétés pharmacologiques. Cette substance semble inhiber l'extinction de la réponse d'évitement conditionné et avoir Tin pouvoir pressif élevé. En plus de ce pouvoir pressif prévu, la lysine vasopressine- phosphate de zinc possède une certaine activité sur le comportement tandis que la lysine *va-25 sopressine seule provoque une telle élévation de la pression sanguine que l'on ne peut déterminer que très difficilement l'action sur le comportement. De façon surprenante, les octapeptides de formule générale I,ainsi que leurs sels résultant de l'addition d'un acide, 30 ont une activité sur le comportement très améliorée tandis que l'activité pressive a disparu. . Ces octapeptides sont très actifs à deux égards : d'une part ils stimulent l'acquisition de la réponse d'évitement conditionné ; d'autre part ils inhibent l'extinction de la réponse 35 d'évitement conditionné. Ils conviennent remarquablement au traitement de certains désordres mentaux tels que des formes de névrose,par exemple les névroses de contrainte, ou 1 ' hypsaryth-mie ou d'autres formes d'encéphalopathies, qui sont accompagnées de crampes. 71 34423 -2- 2108007 On peut préparer les peptides de formule générale I selon un procédé classique quelconque utilisé pour la synthèse des peptides analogues. Pour cela on associe aux amino-acides s'il est nécessaire des groupes protecteurs et/ou activeurs 5 puis on les couple dans l'ordre convenable, lorsque la synthèse est terminée, on élimine de façon connue les groupes protecteurs présents dans la molécule de peptide, après quoi si on le désire on peut transformer le peptide obtenu en un sel ou m complexe à action lente. 10 On prépare généralement les peptides : a) en condensant un amino-acide ou un peptide ayant un groupe oc-arc in o protégé et un groupe carboxyle terminal activé avec un amino-acide ou un peptide dont le groupe a-amino est libre* b) en condensant un amino-acide ou un peptide ayant un grou- 15 pe a-amino activé et un groupe carboxyle protégé, avec un ami- no-acide ou un peptide ayant un groupe carboxyle terminal libre et un groupe a-amino protégé ; c) en condensant un amino-acide ou un peptide ayant un groupe carboxyle libre et un groupe a-amino protégé, avec un amino- 20 acide ou un peptide ayant un groupe amino libre et un groupe carboxyle protégé. On peut activer le groupe carboxyle en le transformant en un halogénure d'acide, un azide, un anhydride ou un imida-zolide, ou en un ester activé tel qu'un ester cyanométhylique, 25 p-nitrophénylique, trichlorophénylique, H-hydroxyphtalimidique, N-hydr oxy suc c inimidi que ou N-bydr oxypipéridinique . On peut activer le groupe amino par exemple par un phosphitamide. les procédés les plus courants de condensation des amino-acides ou des peptides sont le procédé au carbodiimide, le pro-30 cédé à 1*azide, le procédé à l'anhydride, et le procédé utilisant des esters activés décrit par exemple dans MShe Peptides", volume I, 1965 (Academic Press). De plus, on peut utiliser pour préparer les peptides de l'invention le procédé en phase solide de Merrifield (J.A.G.S. 8£, 214-9 (1963)). 35 On protège de façon efficace les groupes fonctionnels li bres de 1'amino-acide ou du peptide, qui ne doivent pas participer à la réaction de condensation en utilisant des groupes protecteurs, qu'on peut éliminer très "facilement par réduction ou hydrolyse. Ainsi, par exemple, on peut protéger de façon effi-4-0 cace le groupe carboxyle par est édification avôc du méthanol,de 71 34423 "3" 2108007 l1 étkanol, du butanol tertiaire, de l'alcool benzylique ou de l'alcool p-nitrobenzylique. On protège généralement le groupe amino par des groupes acides, par exemple "un groupe acide dérivant d'un acide carboxylique aliph.a tique, aromatique aralipha-tique ou h.étérocyclique, tel que l'acide acétique, l'acide chlo-roacétique, l'acide butyrique, l'acide benzoïque, l'acide phé-nylcarboxalique, l'acide pyridinecarboxylique, ou par un groupe acide dérivant de l'acide carbonique tel qu'un groupe éth.oxy-carbonyle, un groupe benzyjoxycarbonyle, un groupe tert.-butyl-oxycarbonyle ou un groupe p-méthyloxybenzyloxycarbonyle, ou par un groupe acide dérivant d'un acide sulfonique tel qu'un groupe benzène sulfonyle ou p-toluènesulfonyle, mais on peut également utiliser d'autres groupes tels que des groupes arylès ou aral-kyles substitués ou non par exemple un groupe benzyle ou tri-ph.énylméthyle • le groupe tyrosyle (Tyr),présent dans l'octapeptide,contient un groupe hydroxyle fonctionnel supplémentaire. On peut également protéger ce groupe de préférence en le transformant en un groupe tert.-butyloxy, mais ceci n'est pas toujours indispensable. On élimine les groupes protecteurs de façon classique généralement par hydrolyse avec par exemple l'acide trifluoro-acétique ou l'acide bromhydrique, ou par réduction mértagée. On peut obtenir l'union directe entre les deux groupes cystéinyles de l'octapeptide par une liaison disulfure obtenue par oxydation du peptide correspondant avec des 'groupes mercap-to libres ou protégés. On peut conduire l'ôxydatiorï selon l'un quelconque des procédés classiques utilisés'pour la synthèse des peptides analogues par exemple, par- oxydation au ferricya-nure de potassium dans un gcide faible ou un milieu neutre, par oxydation avec l'iode dans l'acide acétique, ou par le diiodure d'éthyle dans un solvant organique ou par oxydation par l'air ou l'oxygène par exemple dans l'eau ou l'ammoniac liquide. On prépare de façon classique les esters et les sels résul-tant de l'addition d'un acide des octapeptides de formule générale I. Gomme sels résultant de l'addition d'un acide, on peut utiliser les sels dérivant d'un acide convenant à l'usage thérapeutique tel que l'acide chl or hydrique, l'acide acétique, l'acide propionique et plus particulièrement un di- ou polyaci-de tel que l'acide ph.osph.ori que, l'acide suc c inique, l'acide 71 34423 2108007 maléique, l'acide fumarique, l'acide citrique, l'acide glutarique, l'acide citracouique, l'acide glutaconique, l'acide tartrique, et l'acide ascorbique. De préférence, on utilise les peptides de l'invention sous forme d'un complexe à action lente. On prépare ces complexes en mélangeant les peptides ou leurs sels avec des substances organiques polymères appropriées ou des composés métalliques tels que des sels métalliques, des hydroxydes métalliques ou des oxydes métalliques. On préfère en particulier des composés métalliques peu ou très peu solubles tels que des phosphates métalliques, dés pyrophosphates métalliques et des polyphosphates métalliques. On entend ici par substances organiques polymères les substances précédemment utilisées ou proposées pour préparer des peptides ayant une activité lente, telles que la polyoxygélati-ne, la carboxymétbylcellulose, la polyvinylpyrrolidone, des po-lyphénols, des polyalcools et des polymères ou copolymères d'amino-acides, par exemple la protamine et l'acide polygluta-mique. Les composés métalliques qu'on peut utiliser dans ce procédé sont des composés de métaux appartenant aux groupes b de la classification périodique, par exemple le cobalt, le nickel, le cuivre, le fer et surtout le zinc, ou des métaux ayant un pouvoir chélatant et appartenant aux groupes principaux de la classification périodique tels que l'aluminium et le magnésium. On peut obtenir les complexes métalliques en ajoutant le peptide et un sel, un hydroxyde ou un oxyde métalliques faiblement solubles à un milieu aqueux. On peut également obtenir le complexe en ajoutant un milieu alcalin à une solution aqueuse du peptide et à un sel métallique soluble pour obtenir le complexe peptide-hydroxyde métallique insoluble. De plus, on peut obtenir lé complexe en ajoutant le peptide, un sel métallique soluble et un sel soluble à un milieu aqueux de préférence alcalin pour obtenir in situ un complexe peptide-sel métallique insoluble. On utilise de préférence les octapeptides de formule I,ainsi que leurs sels et esters sous forme de préparations injectables après les avoir dissous, mis en suspension ou émulsifiés dans un liquide. On peut également les utiliser sous forme de préparations intranasales,telles que des liquides et des pulvérisations ou sous une forme convenant à 1 ' a 71 34423 -5- 2108007 primés enrobés ou sous forme de suppositoires. Selon la forme d'administration choisie, on mélange les octapeptides avec une ou plusieurs substances convenant en pharmacie et ne réagissant pas avec les substances actives telles que la gélatine, le man-5 nitol, le sorbitol, le sel, 1'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, des polyalkylèneglycois, de l'eau apyro-gène, des mono- et polyalcools tels que l'éthanol, l'isopropa-nol, l'alcool benzylique ou la glycérine, des huiles végétales et d'autres esters d'acides gras tels que l'huile d'àrachide, 10 l'huile de ricin, l'oléate d'éthyle, le myristate d'isopropyle, un ester d'acide gras de sorbitane ou un monooléate de polyoxy-éthylène de sorbitane. Si on le désire", on peut stériliser les préparations et elles peuvent contenir des adjuvants tels que des arômes et des 15 colorants, des conservateurs et des stabilisants ainsi que des tampons ou des agents réglant la pression osmotique. De plus, les préparations de l'invention peuvent contenir d'autres composants actifs, par exemple des antibiotiques ou des antiseptiques. 20 les solutions, suspensions ou émulsions pour l'administra tion thérapeutique contiennent de préférence de 0,1 à 5 ag d'oc-tapeptide par ml. Pour les injections intraveineuses, intramusculaires ou sous-cutanées, on utilise de préférence de 0,1 à 5 ml ; pour l'administration intranasale les doses peuvent être 25 nettement supérieures. Les préparations pour acbninistration orale contiennent de préférence de 0,1 à 100 mg d'octapeptide par dose unitaire. Activité biologique des octapeptides. Extinction de la réponse d'évitement conditionné. 30 On conditionne des rats blancs mâles en utilisant une cage à mât. Le stimulus conditionné est une lumière éclairant le dessus de la cage pendant 5 secondes, après quoi on exerce le stimulus non conditionné qui est un choc électrique appliqué par le plancher grillagé de la cage. On réalise pendant trois 35 jours consécutifs dix essais par jour séparés par des intervalles de 60 secondes. On utilise les rats donnant plus de 10 réponses positives pendant ces trois jours pour mesurer le degré d'extinction de la réponse d'évitement conditionné. On étudie l'extinction pendant les trois jours, suivants 4-0 en utilisant la même technique que pendant la période d'appren 71 34423 -6- 2108007 tissage si ce n'est que le stimulus conditionné n'est plus suivi du stimulus non conditionné» On réalise dix essais par jour (soit 30 essais au total) avec ces rats conditionnés, qu'on a traité au dernier jour d'entraînement, immédiatement après la 5 dernière expérience par la substance à étudier, le nombre total des réponses positives de chaque rat pendant cette seconde période de trois jours permet de déterminer le degré d'extinction de la réponse d'évitement conditionné. Substance Nombre moyencb réponses positives par rat Dose de 5^i.g Dose de 1 jx.g Placébo 8 10 Lysine vasopressine, phosphate de zinc 15 14 Dèsglycinamidolysine vasopre ssine, phosphate de zinc 24 25 Acquisition de la réponse d'évitement conditionné. On entraîne des rats hypophysectomisés dans une cage à 20 compartiments. On débute le traitement une semaine gpèès l'opération. Dans ce cas, le stimulus conditionné est le bruit d'un vibreur actionné pendant 5 secondes et suivi du stimulus non conditionné qui est un choc électrique appliqué à travers le plancher grillagé de la cage. On réalise ces essais de condition-25 nement dix fois par jour pendant 9 jours . On administre l'octapeptide par voie sous-cutanée tous les deux jours à partir de la veille du premier jour drentraînement, soit les jours 0, 2, 4, 6 et 8. Le nombre total de réponses positives (dans cet essai 90 au maximum) permet de mesurer l'ac-30 quisition du réflexe conditionné. Substance Réponses positives 0,5yW2 jours 5>cg/2 jours 20 LLg/2 jours Placébo 25 27 Lysine vasopressine, phosphate de zinc 34 35 39 Dè sglyc inamidolysine vasopressine, phosphate de zinc 69 71 34423 -7- 2108007 Bemarque s c oncernant le s exemples suivants : X. l'absence d'indication sur la forme stérique correspond à la forme 1 ; les abréviations suivantes des groupes ainj.no- cystéinyle . tyrosyle phényl al anyle glutaminyle asparaginyle prolyle lysyle arginyle les abréviations suivantes des groupes protec- benzyloxyc arb onyle toluène-p-suif onyle benzyle hydrazide 20 Préparation des produits de départ» i. Synthèse de H-G-ln-Asn-Cys(Bzl)-Pro-lys (ffos)-OH,HCl A.1. Z-Pro-lys(Tos)-OCH^ On dissout 9»98 g de Z-Pro-OH dans 75 nil de tétrahydrofu-ranne purifié. On refroidit la solution à 0°C,après quoi on ^ ajoute 5,7 ml de triéthylamine. On refroidit la solution à -10°C après quoi on ajoute 3,8 ml de chloroformiâte d'éthyle. On agite alors le mélange réactionnel pendant 15 minutes. On ajoute à ce mélange réactionnel à -10°C une solution de 14,7 g de H-Lys (Tos)-0He,HCl (J.A.C.S, 81, 3051 (1959)) dans 100 ml de tétrahy-30 drofuranne, dont on a ajusté le pH à-7 avec de .la triéthylamine. On agite le mélange pendant quelques heures et on filtre. On évapore le filtrat à sec sous vide pour obtenir une substance mousseuse. On dissout ensuite le résidu dans 300 ml d'acétate d1 éthyle dilué et on le lave par de l'acide citrique à 5 de 35 l'eau, du carbonate de sodium à 5 % et à nouveau de l'eau. On sépare la couche organique et après l'avoir séchée sur sulfate de sodium, on l'évaporé à sec sous vide, le résidu est une substance huileuse, Hf dans le mélange benzène/éthanol (8/2) = 0,84 sur silice. II On utilise 5 acides : Cys Tyr Phe Gin 10 Asn Pro lys Arg . III.On utilise 15 teurs : Z : Œos : Bzl : ' w 71 34423 -8- 2108007 A.2, H-Epo-Iys(fos)-OCHj,HGl, On dissout 5 g du dipeptide-ester ci-dessus dans 50 ml de méthanol, On ajoute à la solution 10 % de palladium sur carbone et 1 équivalent d'acide chlorhydrique, On fait ensuite barboter 5 de l'hydrogène dans le mélange réaetionnel en agitant. On filtre le mélange réaetionnel, on sèche le filtrat sur sulfate de sodium et on l'évaporé à sec sous vide, puis on lave le résidu deux fois à l'éther, Ef dans le mélange benzène/éthanol (8/2) = 0,16 sur silice, 10 A,3« Z-Gln-Asn-Cys (Bzl)-Pro-lys (ïos)-OGH^, On dissout 7,9 g de Z-GluCHH^-Asp (Nl^^Cys (Bzl)-OH (Helv, 38, (1491 (1955) point de fusion 188 - 191°C) dans 110 ml de di-méthylf ormamide , On refroidit la solution à 0°0 après quoi on ajoute 1,86 ml de ff-éthylpipéridine, On refroidit alors la solu-15 tion à -10°G après quoi on ajoute au mélange 1,82 g de chloro- formiate de sec-butyle, Qa agite le mélange obtenu pendant 10 minutes à -10°C après quoi on ajoute une solution de 5,6 g de.H-Pro-Lys (Tos)-0GH^,H01 dans 35 al de diméthylformamide et 1,75 ial de H-éthylpipéridine (pH = 8), On agite le mélange réaetionnel 20 pendant une heure à 0°G,puis pendant 2 heures à 20°G et à nouveau pendant 2 heures à environ 4G°C, On chasse en partie le diméthylformamide par distillation sous vide et on cristallise le résidu dans 1'éthanol. Point de fusion 158 - 162°G 25 Bf : dans le mélange butanol/pyridine/acide acétique/eau (4/0,75/ 0,25/1) = 0,78 sur silice, A.4, Z-Gln-Asn-Gys(Bzl)-Pro-Iys(Tos)-GH, la saponification de l'ester protégé du pentapeptide ci-des-sus dans le méthanol fournit le pentapeptide acide. 30 Point de fusion 154 - 159°C (décomposition). A.5. Elimination du groupe-protecteur Z. On dissout 2 g du pentapeptide protégé obtenu selon l'un des exemples A,3. ou A.4, dans 50 ml de méthanol et on hydrogène selon le procédé décrit en A,2, On filtre le mélange obtenu et on 35 sèehe le filtrat par évaporation du solvant. On obtient : A.5.1. du H-Gln-Asn-Cys(Bzl)-Pro-Iflrs(ïos)-OH à partir de A.4, Rf = 0,27 dans le mélange butanol/pyridine/acide acétique/eau (4/0,75/0,25/1) sur silice. A,5»2, du H-&ln-Asn-Gys(Bzl)-Pro-lys(ïos)-QMe à partir de A,3, 40 Sf : dans le mélange "bmtanol/pyridine/acide acétique/eau (4/0,75/ 0,25/1) sur silice»? 0,33. 71 34423 2108007 l B. Synthèse de H-Gln-Asn-Cy s (B z 1 )-Ero - Ar g QPo s ) - OH,HC1. B.1. Z-Pro-Ârg(Tos)-OCH^ et H-R?o-Apg(!Eos)-OOH^,HCl. On prépare l'ester de dipeptide ci-dessus comme décrit en A.1. en condensant 1'H-Arg(Oîos)-OGH^,HCl (BCS Jap. ^Z, 1465» 5 1964) avec du Z-Pro-OH. Rf:dans le mélange benzène/éthanol (8/2) = 0,80 sur silice ; [a]p°=-44° (c=1 dans l'éthanol). On hydrogène le dipeptide comme décrit en A.2. pour obtenir le sel résultant de l'addition d'acide chlorhydrique de 10 l'H-Ero-Arg(Tos)-00H^. Rf = 0,44 dans le mélange alcool amyli-que/pyridine/eau (5/5/2) sur silice. On utilise cette substance immédiatement dans les réactions ultérieures. B.2. Z-Gln-Asn-Gys(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-(Me. On ajoute l'anhydride mixte obtenu en A.3 à une solution 15 de 5,2 g d'H-Pro-Arg(Tos)-OMe ,HC1 (B.1.) dans le diméthylforma-mide et 1,75 ml de N-éthylpipéridine. Après avoir agité le mélange une heure à -10°C, 2 heures à 0°G et 8 heures à la température ordinaire, on chasse le solvant (diméthylformamide) par distillation. On cristallise le 20 résidu huileux dans l'éthanol. Point de fusion : 109 - 113°C (décomposition) Rf s 0,59 dans le mélange butanol/pyridine/acide acétique/eau (4/0,75/0,25/1) sur silice. B.3. Z-Gln-Asn-Cys(Bzl)-Pro-Arg(Œos)-OH 25 On saponifie l'ester de pentapeptide B.2. avec 1,1 équiva lent d'hydroxyde de sodium d^ns le méthanol. Point de fusion 101 - 103°C. Rf = 0,35 sur silice (avec le même solvant qu'en B.2.), B.4. Elimination de Z 30 Qn dissout 1 g du peptide préparé selon B.2. ou B.3. dans 25 ml d'acide bromhyrrique 4ÏT dans l'acide acétique. Après 1 heure on introduit la solution rouge dans 250 ml d'éther diéthyli-que sec, on filtre le mélange et on lave le résidu à l'éther en obtenant : 35 B.4.1. H-Gln-Asn-Cys (Bzl)-Pro-Arg(Tos)-0Me Rf = 0,29 dans le mélange butanol/pyridine/acide acétique/eau (4/0,75/0,25/1) sur silice. B.4.2. H-Gln-Asn-Cys(Bzl)-Pco-Arg(!Iîos)-OH Rf = 0,27 sur silice dans le même solvant qu'en B.4.1. 40 L'invention est illustrée par les exemples suivants donnés 71 34423 -10- 2108007 à titre purement explicatif mais nullement limitatif» Exemple I t r Synthèse de H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-OH 1. On dissout dans 5 nil de diméthylf ormamide purifié 0,67 S 5 de Z-Cys(Bzl)-îyr-Phe-H2H5 (point de fusion 240 - 244°0; Helv. 45, 1421 (1956)). On refroidit la solution à -20°C après quoi on ajoute 0,4 ml d'acide chlorhydrique 5N dans le tétrahydrofu-ranne et 0,154 ml de nitrite d'isoamyle. On agite le mélange réaetionnel pendant 5 minutes après quoi on ajoute une solution 10 de 1,1 millimole d'H-Gln-Asn-Cys(Bzl)-Pro-lys(Tos)-OH,HC1 (A.5*1 •) et de triéthylamine (pH = 8). On agite le mélange réaetionnel à 0°G pendant environ 70 heures. Puis on dilue le mélange par de l'eau et on filtre. On sèche le résidu,puis on le cristallise dans un. mélange de diméthylf ormamide, d'acétate d'éthyle et 15 d'éthanol. Point de fusion 212°0 (décomposition). Ef = 0,85 dans un mélange d'alcool amylique, d'acide formique et d'eau (7/2/1) sur silice. 2. On dissout 100 mg du peptide protégé ci-dessus dans 25 ml 20 d'ammoniac liquide. On ajoute ensuite du sodium à la solution en agitant énergiquement, et en quantité telle que la solution reste colorée en bleu pendant au moins 5 minutes. On élimine alors l'excès de sodium en ajoutant du chlorure d'ammonium dans la solution. Ensuite, on chasse 1'ammoniac par évaporation et 25 on ajoute le résidu à de l'eau débarrassée de son oxygène,après quoi on ajuste le pH du mélange à 6,55. On fait alors barboter de l'air dans le mélange jusqu'à ee que la recherche des groupes SH- soit négative. Après filtration du mélange réaetionnel on lyophilise le filtrat. 50 Ef = 0,50 dans un. mélange de butanol, de pyridine, d'acide acétique et d'eau (4/0,75/0,35/1) sur alumine. Ef » 0,35 dans un mélange de butanol, de pyridine, d'acide acétique et d'eau (15/10/5/12) sur papier Vhatman 5MH. 5. A une suspension aqueuse du peptide préparé comme dans 2. 35 ci-dessus on'ajoute un excès d'acide chlorhydrique . On lyophilise alors le mélange et on isole le sel résultant de l'addition de l'acide chlorhydrique. De façon semblable, on prépare le sel résultant de l'addition de l'acide phosphorique et de l'acide maléique. 71 34423 -11- 2108007 les Hf de ces sels résultant de l'addition d'acides sont identiques à celui du peptide libre obtenu en 2. Exemple II Synthèse de : | 1 1 —=r 5 H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-QMe. Comme décrit en 1 dans l'exemple I, on couple 1'azide de tripeptide Z-Cystezl^Tyr-Phe-HgH^ à l'ester de .peptide obtenu en A.5«2. et on forme l'ester de peptide ci-dessus selon le procédé décrit en 2. dans l'exemple I. xjo Hf = 0,33 dans un mélange de butanol, de pyridine, d'acide acétique et d'eau (4/0,75/0,25/1) sur alumine. Exemple III , , Synthèse de H-Oys-ïyr-Phe-Gln-Asn-Gys-Ero-Arg-QH 15 1. Comme décrit dans l'exemple 1.1. on condense du Z-Cys- (Bz1)-Tyr-Phe(point de fusion 240 - 244°C) avec du H-Gln-Asn-Cys(Bzl)-Eeo-Arg(ïos)-OH,HBr (obtenu comme dans l'exemple B.4.2.). Ce composé a un point de fusion de 233°0 (décomposition) 20 Hf = 0,80 dans un mélange d'alcool amylique-, d'acide formique et d'eau (7/2/1) sur silice. 2. Comme décrit en 2, de l'exemple I on élimine les groupes protecteurs et on obtient le composé cysteinylique par oxydation par l'air à pH 6,55. 25 Bf = 0,32 dans tin mélange de butanol, de pyridine, d'acide acétique et d'eau (15/10/3/12) sur papier Whatman 3MM. On prépare de même l'ester méthylique du peptide en utilisant le peptide intermédiaire B.4.1..Hf ■ 0,35 sur silice (dans le même solvant qu'en 2.). 30 Exemple 17 On ajuste à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique 1IT une solution constituée de 10,5 mg/ml de l'octapeptide obtenu en 2. de l'exemple I, 8,33 mg/nlde zinc et 3,5 mg/ml de phosphate di-sodique dihydraté. On introduit le zinc sous forme de chlorure 35 de zinc. On ajoute simultanément 15 ml de cette solution et a 0,8 mol.e par litre, 2 ml d'hydroxyde de sodium/en agitant,à 25 ml d'un mélangé ayant la composition suivante : alcool benzylique 20 mg/ml - NaCl 4 mg/ml 40 On. amène le volume de la suspension à 50 ml avec de l'eau dis 71 34423 -12- 2108007 10 tillée. La composition finale de la suspension est : alcool benzylique 10 mg/ml HaCl 6,8 mg/ml octapeptide 3 mg/ml zinc 2,5 mg/ml P©4 0,5 mg/ml On prépare de façon identique le oomplexe de phosphate de zinc de l'octapeptide obtenu dans l'exemple II, ainsi que les complexes de phosphate de cobalt des octapeptides correspondants. Exemple Y On prépare une solution pour administration orale ayant la composition suivante : dèsglycinamidolysine vasopressine 0,5 mg 15 sorbitol 200 mg benzoate de sodium 1 mg éthanol à 100 % 0,05 ml eau (distillée et apyrogène) pour 1 ml Exemple 71 20 Qn prépare une solution injectable ayant la composition suivante : dè sglyc inamido-arginine vasopressine 1,0 mg chlorure de sodium 9,0 mg oxybenzoate de méthyle 1,2 mg 25 eau distillée apyrogène 1,0 ml Exemple 711 On prépare une solution ayant la composition suivante : dèsglycinamido-arginine vasopressine 0,5 mg mannitol 20 mg 30 eau 1 ml On lyophilise la solution après filtration stérile. On introduit le résidu lyophilisé dans une ampoule après l'avoir dissous dans 1 ou 2 ml de solution saline physiologique. On prépare de même une solution de : 35 dèsglycinamido-arginine vasopressine 10 mg mannitol 40 mg eau 2 ml On la lyophilise, et on la dissout dans 1 ou 2 ml de solution saline physiologique et on l'introduit dans une ampoule. 71 34423 -13- 2108007 Exemple VIII On prépare un granulé de base constitué de : c arb oxymé thylc ellulo se 2,5 mg amidon 20,0 mg 5 lactose 68,5 mg On mélange ce granulé à 7,5 mg de dèsglycinamidolysine vasopressine, 1 mg de talc et 0,5 mg de stéarate de magnésium, après quoi on comprime le mélange en comprimés de 100 mg. Exemple IX 10 On granule 287 mg de mannitol en utilisant un mélange d'é- thanol et d'eau dans lequel on a dissout 6 mg d'hydroxypropyl-méthylcellulose (Methocel de Dow Chemical). On ajoute alors 1 mg de dèsglycinamidolysine vasopressine dissoute dans l'éthanol. On mélange les substances,après quoi on chasse le liquide par 15 évaporation sous vide à 30°C. On ajoute alors 1 mg de stéarate de magnésium et 5 mg de talc au mélange, et on le façonne en comprimés de 300 mg. On peut utiliser ces comprimés comme pastilles. Exemple X 20 On prépare la composition suivante : dè sglyc inamidolysine vasopressine 10 mg eau distillée acidifiée par de l'acide acétique à pH 5,5 5 ml chlorure de sodium 45 mg 25 carboxyméthylcellulose 25 mg Cette composition convient pour l'administration intranasale. 71 3kk23 -14- 2108007 BEVEHDICAÏIONS 1.- Nouveaux médicaments utiles notamment pour traiter des troubles mentaux, caractérisés par le fait qu'ils consistent en un octapeptide de formule générale : H-L-Gys-L-Tyr-L-Phe -L-Gln-L-A sn-L- Cy s-L-Er o-X- OR dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un radical hydrocarboné et X représente un radical 1-lysyle ou L-arginyle, ou un de leurs sels résultant de l'addition d'un acide convenant en pharmacie. 2o- Compositions thérapeutiques caractérisées par le fait qu'elles contiennent comme ingrédient actif un médicament selon la revendication 1 et un support convenant en pharmacie. 3.- Compositions thérapeutiques selon la revendication 2 caractérisées par le fait que le support est constitué d'un sel, d'un hydroxyde ou d'un oxyde de zinc faiblement solubles. 4.- Préparation pharmaceutique caractérisée par le fait qu'elle est constituée d'une composition selon l'une des revendications 2 ou 3. V r î