Brevet FR2070124A1 — publié le 19710910

i 2070124 Cette invention concerne des nouvelles 2-décarboxamido-2-radical substituant-tétracyclines. En particulier, elle concerne un procédé de préparation de nouvelles 2-dêcarboxamido-2-imino-tétracyclines et de nouvelles tétracyclines 2-substituées qui en 5 dérivent. Les antibiotiques de type tétracycline constituent un groupe de dérivés d'hydronaphtacène biologiquement actifs. La formule développée et le système de numérotation (Chemical Abstracts) de ces composés est donné ci-après. 10 7 6 5 4 OH O OH O 20 Jusqu'ici, la préparation de tétràcycïines contenant des substituants autres que le groupement carboxamide en position 2, a été limitée principalement aux tétracyclines contenant le groupement cyano, N-alcoylcàrboxamide, ou acétyle en position 2. Voir par exemple les Brevets E.U.A. Jî° 3-028.409; 3.146.264 et 25 3.226.441. La difficulté dans la préparation de tétracyclines 2-substituées nouvelles et utiles contenant divers substituants en position 2 a existé en partie en raison du nombre limité de précurseurs de tétracycline 2-substituée disponibles, et également en raison de la difficulté d'introduire des groupements autres que 30 ceux mentionnés précédemment, en position 2 de la tétracycline. La présente invention fournit désormais une méthode générale pour introduire divers substituants en position 2 de la molécule de tétracycline, et fournit également une méthode de préparation de tétracyclines nouvelles et utiles. 35 La présente invention décrit un procédé de préparation de 2-décarboxamido-2-iminotétracyclines qui consiste à mettre une 2-décarboxamido-2-cyanotëtracycline en contact avec un catalyseur au nickel et une solution aqueuse d'un acide carboxylique alcanoî-que à une température d'environ -10 à 75° C jusqu'à ce que la 40 transformation soit sensiblement totale. 70 36947 2 2070124 La présente invention comprend également une série de tétracyclines 2-substituées choisies dans le groupe répondant aux formules : (CR3* 2 ÎO OH O OH Q 15 20 où : R*" est soit H soit un groupement OH; 2 25 R est soit H soit un'groupement OH; 3 . . 3 r est soit H soit un groupement CH,, pourvu que r soit un 1 groupement CH, lorsque R est un groupement OH; 2 3 R et R pris ensemble sont un groupement méthylène; 4 R est soit H, soit Cl, soit Br; et 30 X est soit H, soit un groupement CHO, -CH=NH, -CH2NH2, ou -CH20H. Les nouveaux composés de la présente invention possèdent une activité antibactêrienne et sont utiles pour prévenir et réduire la détérioration microbienne dans les fluides de coupe, les carburéacteurs et les gasoils. Ces composés sont également utiles 35 dans les savons, les shampooings, les liquides de rinçage, etc... On peut également les utiliser avec des préparations topiques pour traiter les blessures et les brûlures. En outre, les nouveaux composés de la présente invention sont ùtiles comme agents séquestrants et forment des complexes chélates 40 avec de nombreux cations, et en particulier avec le calcium et 70 36947 3 2070124 le magné sium. On a désormais découvert avec étonnement que l'on peut transformer les tétracycline-2-nitriles en 2-imines correspondantes par réduction par un catalyseur au nickel activé et une solution 5 aqueuse d'un acide alcanoîque. On transforme ensuite facilement les tétracycline-2-imines en une série d'autres dérivés de tétracycline. Par conséquent, le procédé de réduction de la présente invention fournit désormais une voie synthétique unique et commode pour l'obtention de nouveaux dérivés de tétracycline. une esquisse 10 de quelques-unes de ces réactions est représentée dans le schéma I. 70 36947 4 2070124 SCHEMA X 70 36947 5 2070124 où : R1 est soit H soit un groupement 0H? R2 est soit H soit un groupement 0H; R3 est soit H soit un groupement CH^, pourvu que R3 groupement CH3 lorsque R"'" est un groupement 0H; R2 . 3 et R pris ensemble sont le groupement méthylène; R4 est H, Cl ou Br. Dans un mode de réalisation préféré de la présente invention, on réduit le tétracycline-2-nitrile en 2-imine correspondante en 10 présence d'un catalyseur de nickel activé et d'une solution aqueuse d'un acide alcanoîque inférieur. On effectue de préférence la réduction à une température de -10° à 15° C, bien que cet aspect ne soit pas essentiel et on peut effectuer la réaction à une température extérieure à ces limites. On préfère, cependant, 15 une gamme allant de 40 à 65° C. A l'intérieur de ces limites la réaction est essentiellement totale au bout d'environ 15 à 45 minutes. On peut faire varier le rapport de 1'acide alcanoîque inférieur à l'eau, dans la solution aqueuse d'acide, dans des limites 20 plutôt larges et ce rapport n'est pas essentiel au succès de la réaction. Habituellement on effectue la réaction avec un rapport de l'acide à l'eau ayant une quelconque valeur allant d'environ 1 : 5 à 5 s 1 en volume; on préfère cependant un rapport acide alcanoîque : eau d'environ 3 : 1 en volume. On préfère les acides 25 alcanoîques inférieurs ayant jusqu'à 5 atomes de carbone, et parmi ceux-ci, les acides de choix sont les acides formique et acétique. Il faut noter que l'on peut également effectuer la réduction à la température ambiante avec vm catalyseur de nickel activé et 30 soit HCl dilué (0,5N) soit un mélange méthanol-:HCl IN (5:2;v/v). Néanmoins, on préfère utiliser un acide alcanoîque aqueux comme système solvant. Il faut faire remarquer que les catalyseurs au nickel varient dans leur efficacité à réduire les 2-décarboxamidotétracycline-2- 35 nitriles en 2-décarboxar;iiciotétracycline-2-imines correspondantes. On préfère un catalyseur d'activité W-2 ^/Urg.Synthèses, Coll. Vol.3,181 (1955^7. Les catalyseurs d'activité moindre ou l'alliage lui-même ne sont pas aussi souhaitables en raison des températures supérieures et/ou des durées de réaction plus longues nécessaires 40 à la disparation du nitrile, conditions qui ont tendance à entraîner une dégradation des tétracyclines. 70 36947 6 2070124 On effectue habituellement la réaction en ajoutant sous azote le tétracycline-2-nitrile à la solution aqueuse d'acide agitée. On ajoute ensuite le catalyseur de nickel et on chauffe le mélange de réaction sur un bain de vapeur jusqu'à ce que la 5 réaction soit achevée. On élimine le catalyseur par filtration, on ajoute de l'acide chlorhydrique, et on isole l'imine par des méthodes classiques telles que extraction ou transformation en un sel d'addition d'acide, que l'on peut ensuite séparer du mélange de réaction par filtration. 10 Généralement, alors qu'on utilise habituellement environ 0,1 à 5,0 g de catalyseur de nickel par gramme de 2-décarboxa-midotétracycline-2-nitrile, on préfère utiliser 0,5 à 2,0 gramme par gramme de nitrile. On a trouvé avec surprise que les' tétracycline-2-imines résistent à l'hydrolyse dans les conditions 15 de réaction acides. Bien que l'on ne s'explique pas totalement la raison à cela, on pense que le groupement imine forme une liaison hydrogène avec un groupement /J-céto énolisé, ce qui entraîne une résistance à l'hydrolyse en une fonction aldéhyde. On peut préparer les matières de départ 2-décarboxami-20 dotétracycline-2-nitriles par des modes opératoires décrits dans : J. Am. Chem. Soc., 75., 5468 (1953) ;'ifrid. '79, 2856 (1957)? ibid., 77, 1701 (1955)? et brevet S.U.A. 3.069.467, qui comprennent le traitement de la tétracycline correspondante par un halogénure d'alcoyl ou d'aryl sulfonyle en présence d'une base organique. 25 Dans certains cas on voit que ce mode opératoire fournit l'ester de 10-alcoyl ou aryl sulfonyle du 2-décarboxamidotétracycline-2-nitrile correspondant. Voir J. Am. Chem. Soc., 77./ 1701 (1955). On peut utiliser directement ces esters dans la réduction décrite ici, ou si l'on veut, on peut les transformer en tétracycline 30 10-phénolique correspondante en. les traitant par l'acide fluorhydr que anhydre. On sait bien que le groupement hydroxyle sur le carbone 6 des tétracyclines est très mobile en présence d'acides, et dans des conditions acides de nombreuses tétracyclines contenant un 35 tel groupement forment 11anhydro-tétracycline correspondante (voir D.L.J0 Clive, Quart. Rev., 22., 435 (1968)). On a également trouvé que ce phénomène avait lieu dans les conditions acides du présent procédé. Ainsi, lorsqu'on effectue la réaction à des températures supérieures le tétracycline-2-40 nitrile donne la 2-décarhoxamidoanhydrotétracycline-2-imine. 70 36947 7 2070124 Néanmoins, par une expérimentation de routine on peut choisir les conditions appropriées pour éviter la formation du produit anhydro.Généralement, on trouve que les températures inférieures et les durées de réaction plus courtes donnent 1'imine contenant 5 un hydroxyle sur le carbone 6. Par conséquent, dans ces conditions le tétracycline-2-nitrile donne la 2-décarboxamidotétracycline-2-imine. On peut également préparer la 2-décarboxamidotétracycline-2-imine œréduisant la 2-décarboxamido-7-chlorotétracycline-2-imine sur palladium sur charbon. 10 En outre, comme on le sait, les tétracyclines ont une tendance à se transformer partiellement en leurs 4-épimères en solution à pH acide. Par conséquent, les produits du nouveau procédé de la présente invention contiennent parfois une certaine proportion de 4-épimère. On désire habituellement transformer ce dernier 15 en diastéréoisomère correspondant de configuration normale, c'est-à-dire en la forme de l'antibiotique ayant la configuration stéréoch^ dqvio du produit obtenu par fermentation, ou bien, dans le cas d'analogues de tétracycline synthétiques, dans la forme qui est analogue du point de vue configuration stéréochimique 20 à la tétracycline obtenue par fermentation, etc... .On peut réaliser la transformation voulue du 4-épimère par le mode opératoire décrit dans le brevet E.U.A. N° 3.00S.956. Selon le mode opératoire contenu dans ce brevet, la tétracycline contenant une certaine proportion de 4-épimère est 25maintenue en solution sous la forme d'un sel ou d'un chélate métallique jusqu'à ce que 1'isomérisation de l'épimère en une configuration normale ait lieu. Les chélates de tétracycline tricalciques ou trimagnésiens sont des formes appropriées à cette transformation spontanée, comme le sont les dérivés dicalciques, 30dimagnésiens et tristrontiens. Ils se forment commodément dans une solution de la tétracycline par addition d'une proportion molaire appropriée d'un sel du cation choisi avec un anion compatible avec la réaction, par exemple le chlorure. On ajuste ensuite le pH de la solution de chélate métallique à 8,5-10 35 (mesuré après dilution d'un échantillon de la solution organique avec un égal volume d'eau) et on la maintient à une température de préférence comprise entre 50 et 115° C jusqu'à ce que la transformation désirée soit sensiblement totale. Comme il est révélé en outre dans le brevet ci-dessus, tous les solvants 40oxygénés inertes vis-à-vis de la réaction sont appropriés à cette 70 36947 8 2070124 réaction, y compris les alcanols inférieurs et les polyols liquides, particulièrement le propylène glycol, le butanol ou le butanol additionné d'environ 5% d'eau. On suit commodément les progrès de 1'isomérisation en prélevant périodiquement des 5 échantillons et en les analysant par chromatographie sur papier. On peut effectuer celle-ci, par exemple sur papier Whatman N° 4 saturé de tampon aqueux citrate-phosphate de pH 4,2 comme phase stationnaire, et en utilisant un mélange toluène:pyridine 20:3 en volume saturé d'eau comme phase mobile. En utilisant 10 des témoins appropriés on s'assure avec précision de la localisation de la tache du 4-épimère et on suit sa disparition. Les tétracyclines contenant des substituants sur le carbone 6 peuvent exister sous deux formes épimères, à savoir les variantes os et £ . Ce fait est sans conséquence pour 15 le succès de la présente invention, et la réduction du groupement 2-nitrile en groupement 2-imine n'est pas affectée par la stéréochimie de la position C-6. Comme il est indiqué dans le schéma I, on transforme facilement les 2-iminotétracyclines en d'autres nouveaux dérivés de 20 tétracycline. Ainsi, on prépare les r-formyZ.tétracyei.xu^ti à partir des 2-rmines correspondantes en craitant ces j.erniers composés par une base diluée pendant plusieurs minutes à la température ambiante. L'acidification du milieu de réaction entraîne la séparation des 2-formyltétracyclines. On isole 25 ensuite la 2-formyltétracycline et on la purifie généralement par des méthodes classiques, par exemple, en la transformant en un sel d'addition d'acide que l'on peut ensuite séparer par filtration et recristalliser dans un solvant approprié. On peut utiliser les 2-formyltétracyclines pour préparer les nouvelles 30 2-hydroxyméthyltétracyclines par réduction catalytique sur catalyseur d'Adam. L'élimination du groupement 2-formyle par mise au reflux des 2-formyltétracyclines dans un acide minéral sous azote fournit les 2-décarboxamidotétracyclines. On peut préparer les 2-décarboxamidotétracyclin.es à partir 35 des 2-imines correspondantes également en portant au reflux les derniers composés dans un acide minéral sous azote. Par refroidissement du mélange de réaction, la 2-décarboxamidotétra-cycline se sépare sous forme du sel d'addition d'acide et elle est facilement séparée du milieu. . . . 40 -une réduction catalytique des tétracyclines-2-imines sur 70 36947 e 2070124 catalyseur d'Adam ou sur platine sur charbon fournit facilement les analogues de 2-aminométhyle, Il est intéressant de noter que la réduction catalytique sur palladium sur charbon n'affecte pas le groupement imine. Ainsi, comme il est mentionné précédemment, 5 on transforme commodément la 2-décar?ooxamido-7-chlorotétracycline-2-imine en 2 -décarboxamidotétracycl ine---2 - imine par réduction catalytique sur palladium sur charbon. Les nouveaux composés de la présente invention manifestent une activité anti-bactérienne vis-à-vis de divers micro-10 organismes pathogènes lorsqu'on les essaie par la technique de dilution en série standard. Les composés de la présente invention sont utiles pour prévenir et réduire la détérioration microbienne dans divers produits industriels du pétrole tels que fluides de coupe, corburéacteure et gasoils. L1activité antimicrobienne 15 des présents composés les rend utiles coEtme agents désinfectants dans des préparations topiques, comme par exemple dans les traitements des blessures et des brûlures. Une préparation germicide topique typique comprend de 0005 à 0,001% en poids de l'antibiotique mélangé intimement à un mélange de 10,0 ml de 20 fiolv.ti'.oii d'acétate d'aluminium, U.S. P» ; 20,0 g de lanoline anhydre U.S.P.; et 30,0 g de pâte d'oxyde de zinc U.S.P. On peut également ajouter les composés de la présente invention à des savons et shampooings tels que le savon liquide à 1'hexachloro-phène, U.S.P. 25 La présente invention comprend tous les sels, y compris les sels métalliques et les sels d'addition d'acide, des antibiotiques récemment reconnus amphotères. Les modes opératoires bien connus pour préparer les sels des composés de tétracycline sont applicables ici et sont illustrés par les exemples donnés 30 ci-après. On peut former ces sels à la fois avec des métaux et des acides pharmaceutiquement acceptables et pharmaceutiquement non acceptables. Par "pharmaceutiquement acceptablé', on- entend les acides et les métaux formant des sels qui n'augmentent pas sensiblement la toxicité de l'agent antimicrobien amphotère. 35 Les sels préférés sont les sels d'addition d'acidss et les sels des métaux, pharmaceutiquement acceptables. Les sels d'addition d!acides pharmaceutiquement- acceptables ont une valeur particulière en thérapeutique. Ceux-ci comprennent les sels des acides minéraux tels que les acides chlorhydrique, 40iodliydrique, phosphorique, métaphosphorique, nitrique et sul fur ique, 70 36947 10 2070124 ainsi que les sels des acides organiques tels que les acides tartrique, acétique, citrique, malique, benzoïque, glycollique, gluconique, gulonique, succinique, arylsulfoniques, par exemple o-toluènesulfonique, etc... .Les sels d'addition 5 d'acide pharmaceutiquement non-acceptables, bien que non utiles en thérapeutique, sont intéressants pour 1'isolement et la purification des antibiotiques nouvellement reconnus. En outre, ils sont utiles dans la préparation des sels pharmaceutiquement acceptables. De ce groupe, les sels plus courants comprennent 10 ceux obtenus avec les acides fluorhydrique et perchlcrique. Les sels de l'acide fluorhydrique sont particulièrement utiles pour la préparation des sels pharmaceutiquement acceptables, par exemple le chlorhydrate, par mise en solution dans l'acide chlorhydrique et cristallisation du sel chlorhydrate formé. 15 Les sels de l'acide perchlorique sont utiles dans la purification et la cristallisation des nouveaux antibiotiques. Alors que l'on peut préparer de nombreux sels métalliques et qu'ils sont utiles dans divers buts,, les sels de. métaux pharmaceutiquement acceptables sont particulièrement intéressants 20 en raison de leur utilité en thérapeutique.; Les métaux pharmaceutiquement acceptables comprennent plus couramment le podium, le potassium et les métaux alcalino-terreux dont le numéro atomique va jusqu'à 20 y compris c'est-à-dire, les ché.lates métalliques, qui sont bien reconnus dans la technique de la 25 tétracycline. Les sels de mête^nx pharmaceutiquement non-acceptables comprennent les plus courants des sels de lithium et des métaux alcalino-terreux ayant un numéro atomique supérieur à 20, c'est-à-dire, baryum et strontium, qui sont utiles pour isoler et purifier l'antibiotique. Puisque le nouvel ar&i-30 biotique est amphotère, il forme également des sels avec les aminés de basicité suffisante. Il est évident que, outre leur valeur en thérapeutique, les sels des métaux et des acides pharmaceutiquement acceptables sont également utiles dans l'isolement et la purification . 35 Les exemples suivants sont donnés pour mieux illustrer le champd'application de la présente invention, mais ne doivent pas être considérés comme lui en fixant des limites. 70 36947 ii 2070124 EXEMPLE I A 30 ml d'acide formique à 75 %, sous atmosphère d'azote, on ajoute 2,00 g de 2-décarboxamide-6-désoxy-6-déméthyltétracy-cline-2-nitrile. On agite le mélange à la température ambiante et on 5 ajoute 2,0 g de nickel de Raney activé. On agite le mélange pendant 45 minutes sur un bain de vapeur, pendant lesquelles la température monte à environ 50°C. On filtre le mélange sur Super-Cel (Johns-Manville Co., New York, New York) et on lave la matière filtrée au méthanol. On évapore le filtrat, après 10 addition de 10 ml d'acide chlorhydrique 6N, pour obtenir un résidu mousseux verdâtre. On ajoute du toluène (15 ml) et ensuite on l'évaporé sous pression réduite» On répète l'addition de toluène et 1*évaporation pour être sûr que l'élimination de l*acide formique est totale. On dissout le résidu mousseux vert 15 dans 70 ml de n-butandsaturé par de l'acide chlorhydrique IN. On extrait le n-butanol avec trois portions de 25 ml d'acide chlorhydrique IN que l'on a saturé par le n-butanol. On réunit tous les extraits à l'acide chlorhydrique IN et on extrait par trois portions de 20 ml de n-butanol saturé d*acide chlorhydrique 20 IN. On réunit les extraits butanoliques avec la couche butanolique initiale et on évapore. Ensuite on traite le résidu deux fois avec du toluène tel qu'il est décrit précédemment pour être sûr que l'élimination du butanol est totale. On transforme la 6-désoxy-6-déméthyltétracycline-2-imine amorphe, jaune brute 25 du résidu, en sel d'addition p-toluènesulfonate en la dissolvant dans 15 ml de méthanol, en ajoutant 2,0 g d'acide p-toluènesulfonique et en chauffant la solution sur un bain de vapeur. Le fait de refroidir la solution à la température ambiante et de l'agiter pendant une nuit fournit des cristaux de p-30 toluènesulfonâte de 2-dL*carboxamido-6-désoxy-6-déméthyl- tétracycline-2-imine que l'on filtre et que l'on lave successivement au méthanol, à l'acétone, et à l'éther. Le rendement est de 2,09 g. On obtient sensiblement les mêmes résultats lorsqu'on effectue la réduction par l'acide acétique au lieu de l'acide formique. 35 Analyse : Calculé pour CjgH^QOgN^S: C= 58,93; H =5,29; N.= 4,91; S =5,61; Trouvé Ci= 58,56; H =5,59; N.= 4,79; S =5,55 . L'échantillon analytique a une A max. mji (£)264 (14.100), 40 302 (18.600) et 348 (16.400) dans le mélange méthanol HCl 0,0lN. 70 36947 2070124 EXEMPLE II On met 5 g de 7-chloro-2-décarboxamidotétracycline-2-nitrile en suspension dans 75 ml d'acide formique à 75 % à la température ambiante et sous atmosphère d'azote. A cette suspension on ajoute, 5 en agitant 2,5 g de catalyseur de nickel Raney activé. On agite le mélange résultant sur un bain-marie pendant une durée d'environ 20 minutes, la température du mélange de réaction atteignant environ 50°C. A la fin de cette période de chauffe, la dissolution du 7-chloro-2-décarboxamidotétracycline-2-nitrile est achevée. 10 On agite le mélange à 50°C pendant 20 minutes supplémentaires, on le refroidit à la température ambiante, et on filtre sur Super-Cel. On lave le résidu au méthanol et on dilue le filtrat avec deux fois son volume d'eau. On ajoute alors 10 g dîacide sulfosalicylique à la solution résultante. Après avoir agité 15 pendant une nuit, on filtre le sulfosalicylate de 7-chloro-2-décarboxamidotétracycline-2-imine cristallisé et on le lave successivement avec un mélange méthanol-eau de 1:1, de l'acétone et de l'éther. Le rendement est de 3,6 g; /\ max ^ 56 (15.700), 300 (21.800), 340 (10.300), 371 (14.000) dans le 20 mélange méthanol-HCl 0,OlN, Analyse r Calculé pour c = ^8,57, H = 4,64? N = 3,91? S = 4,48; Cl = 4,94; H20 = 5,0. Trouvé : C = 48,77; H = 4,70; N = 3,86; S = 4,43; CX = 5,06 ; H20 « 6,4. 25 EXEMPLE III On met 2,0 g de 2-décarboxamido-ot -6-dés:oxy-5-hydroxytétra-cycline-2-nitrile en suspension dans 30 ml d'acide formique à 75% à la température ambiante et sous atmosphère d'azote. On ajoute 1 g de catalyseur de nickel Raney à la suspension et on 30 chauffe le mélange de réaction sur le bain-marie. Lorsque la température du mélange atteint 40°C la dissolution du nitrile est achevée. Après encore 10 minutes de chauffage la température de* réaction est d'environ 50°C. On agite le mélange de réaction et on le chauffe encore 5 minutes au bout desquelles la température 35 atteint environ 58*0. On ajoute un autre gramme de catalyseur de nickel et on agite le mélange encore 3 minutes. On refroidit le mélange de réaction à la température ambiante et on le filtre sur Super-Cel. On ajoute de l'acide chlorhydrique (2ml) et on évapore la solution sous pression réduite. Au résidu mousseux 40 verdâtre on ajoute 30 ml de toluène et on évapore de nouveau 70 36947 13 2070124 le mélange. On répète le traitement au toluène pour être sûr que l'élimination de l'acide foreique est totale. On dissout le résidu dans tir; mélange de 70 ml de n-butanol que l'on a saturé par de l'acide chlorhydrique l&T et de 25 ml 5 de HCl IN saturé par le n-butanolc. Après avoir agité le mélange on sépare la couche n-butano1ique -rè on l'extrait deux fois par une petite quantité d'acide chlorh^/drigue N saturée par du n-butanol» On réunit les extraits à l'acide chlorhydrique et on extrait trois fois par le n-butanol saturé d'acide chlorhydrique IN. 10 On réunit les extraits butanoliques st on évapore et on traîte le résidu deux fois par le toluène comme il a été décrit précédemment pour éliminer tout le butanolœ Ls résidu, la 2-décarboxamido- ' * ÏÏ13X ' 15(15.700), 350 (14.300) dans le mélange méthanol-HCl 0,0lN. EXEMPLE IV En utilisant le mode opératoire des Exemples I à III, on réduit les 2-décarboxamidotétracycline-2-nitriles mentionnés dans le Tableau II en 2-décarboxamidotétracycline-2-imines 20 correspondantes. TABLEAU II N( CH3)2 25 _ 0H I— CN R 30 35 40 H H H H OH H H H OH H OH oh 0 R2 R3 R4 h ch h oh ch3 Br oh h Cl oh h h oh CH3 h h ch3 h h h Cl ch2= H ch2= H ch2= Cl ch2= Cl 70 36947 14 2070124 De la même manière, on prépare aussi les 2-imines suivantes en partant des 2-nitriles correspondants selon les modes opératoires des Exemples I-III. 4-hydroxy-4-desdiméthylaminotétracycline-2-imine 5 4-amino-4-desdiméthylaminotétracycline-2-imine 5-hydroxy-5a, 6-anhydrotétracycline-2-imine 4-amino-4-desdiméthyl-5 EXEMPLE V A 100 ml d'acide formique à 75% sous atmosphère d'azote et à la température ambiante on ajoute 10 g de 2-dêcarboxamidotétracycline-2 -nitrile. Après une agitation du mélange d'environ 5 minutes la dissolution du nitrile est achevée. On ajoute alors à la solution résultante 10,0 g de catalyseur de nickel activé. On chauffe le mélange au bain-marie pendant environ 15 minutes, 15 pendant lesquelles la température atteint environ 55°C. Ensuite on chauffe le mélange de 50 à 54°C pendant encore une 1/2 heure, on le refroidit dans un bain glacé, et on le filtre sur Super-Cel. On lave le résidu avec une petite quantité de méthanol froid et on évapore le filtrat à un volume d'environ 30 ml. On ajoute 2o ensuite environ 150 ml de n-butanol saturé de HCl N et on extrait la solution par trois portions de 50 ml de HCl N saturé de n-butanol. On réunit les extraits à ECl et on extrait par le n-butanol saturé de HCl N. On réunit les extraits n-butanoliques et on évapore à sec et on met en suspension les cristaux jaune - 25 orangé ainsi obtenus dans une petite quantité de toluène et on évapore le mélange résultant. On ajoute du méthanol au résidu et on maintient le mélange une nuit à la température ambiante. On filtre la 2-décarboxamidoanhydrotétracyc1ine-2-imine et on la lave par le méthanol, puis par l'éther. Le rendement est 4,89 g; 30 iaax, (0 272 (43.000), 298 (20.500), 421 (8.400) dans le mélange méthanol-HCl 0,01 N. Analyse s Calculé pour C22H2306N2C1*H20 : C = 56,83; H= 5,42 N = 6,02; Cl = 7,62; 1^0 = 3,9. Trouvé : C = 57,11; H = 5,39; N = 6,01; Cl = 7,66; 35 H20 = 5,2 Lorsqu'on effectue la réaction précédente une température de - 10° à 0°C on obtient des quantités importantes de la 2-décarboxamido-tétracycline-2-imine correspondante. EXEMPLE VI 40 A 50 ml d'éthanol on ajoute 0,5 g de 7—chloro-2-décarboxamido- 70 36947 15 2070124 tétracycline-2-imine. On ajoute ensuite à la solution résultante 0,212 ml de triéthylamine et 0,138 g de palladium sur charbon à 5 % (humidifié à 50 % d'eau). On agite le mélange sous une pression d'hydrogène de 3 atmosphères sur un appareil d'hydrogéna- 5 tion de Parr (Parr Instrument Company, Moline, Illinois) pendant 45 minutes. On filtre le mélange sur Super-cel et on lave le catalyseur avec de petites quantités de méthanol. On évapore le filtrat à froid et on fait cristalliser le résidu, une gomme jaune, en triturantavee du méthanol. On filtre le mélange 10 et on lave les cristaux jaunes au méthanol, puis à l'éther. Le rendement est 0,070 g de 2-décarboxamidotétracycline-2-imine sous forme de base libre, \ „ , mu ( C- ) 230 (11.600), 264 /\ max» ' (8.700), 301 (12.800), 360 (9.300) dans le mélange méthanol-HCl 0,01 N. \ \ \ \ \ \ \ \ \ 70 36947 16 2070124 EXEMPLE VII On porte 20 mg de 2-décarboxamidoanhydrotétracycline-2-imine au reflux sous azote dans 5 ml d'acide sulfurique IN pendant 3 heures. On refroidit le mélange de réaction et on le filtre pour 5 obtenir du sulfate de 2-décarboxamido-anhydrotétracycline sous forme d'un solide amorphe orangé. On lave le produit à l'eau et on le sèche; rendement 6 mg, ^ ma}c m/t( ) 273 (42.500), 430 (9.200) dans le mélange méthanol-HCl 0,01N. Sauf pour la 7-chloro-2-décarboxamidotétracycline-2-imine, 10 la 7-bromo-2-décarboxamidotétracycline-2-imine/ la 6-déméthyl-2-décarboxamidotétracycline-2-imine, la 5-hydroxy~2-décarboxamido-tétracycline-2-imine, et la 5-hydroxy-5a,6-anhydro-2-décarboxamido-tétracycline-2-imine, les 2-décarboxamidotétracycline-2-imines des Exemples I-V donnent les 2-décarboxamidotétracyclines correspon-15 dantes lorsqu'on les fait réagir selon le mode opératoire précédent. La 7-chloro-2-décarboxamidotétracycline-2-imine, la 7-bromo-2-décarboxamidotétracycline-2-imine, et la 6-démêthyl-2-décarboxami-do-tétracycline-2-imine donnent les 2-décarboxamido-5a,6-anhydro-tétracyclines correspondantes lorsqu'on les fait réagir selon le 20 mode opératoire ci-dessus, tandis que la 5-hydroxy-2-décarboxamido-tétracycline-2-imine et la 5-hydroxy-5a,6-anhydro-2-dêcarboxamido-tétracycline-2-imine sont dégradées dans les mêmes conditions. EXEMPLE VIII On agite 2,35 g de 2-déca.rboxamido-6-désoxy-6-déméthyl-25 tétracycline-2-imine-p-toluènesulfonate dans 94 ml d'hydroxyde de sodium à 1 % pendant environ 1 heure sous azote à la température ambiante. On acidifie la solution par l*acide chlorhydrique dilué jusqu'à ce que le pH soit de 4,5-5,0. Une matière cristalline précipite de la solution et on agite le mélange à la température 30 ambiante pendant une nuit sous azote. On filtre la 2-décarboxamido-6-désoxy-6-déméthyltétracycline 2-formylée jaune cristallisée et on la lave successivement à l'eau, à l'acétone et à l'éther. Le rendement est 1,01 g. Analyse : Calculé pour C2iH21°^N.^O : C = 60,42; H = 5,55; 35 N = 3,66 Trouvé : C = 59,9; H = 5,66; N = 3,45 L'échantillon analytique avait pour a _ mu- ( f ) 275 ' ' iricix « (18.200), 350(16.300) dans le mélange méthanol-HCl 0,01N. 40 On extrait le filtrat deux fois par le n-butanol. On réunit 70 36947 17 2070124 les extraits butanoliques, on les lave deux fois à l'eau et on évapore. On traite le résidu deux fois par le toluène comme il est décrit dans l'Exemple I pour éliminer les traces de butanol, ensuite on le met en suspension dans l'êther et on le filtre pour 5 obtenir 0,51 g supplémentaire de 2-dêcarboxaHiidQ-6-dâsoxy~6-déméthyltétracyclina 2-formyléa brute. De la même manière, sauf pour la 5-hydroxy-5a,S-anhydrc-2-décarboxamidotétracycline-2-imine, on prépare les dérivés 2-décar-boxamido-2-formylés des 2-décarboxarfddotétracycline-2-imines 10 énumérées dans les Exemples II-XV et. VI, selon le mode opératoire précédent. EXEMPLE IX On ajoute 3,0 g d'anhydrotétra.cycline-2-iraine à 120 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium à 1 % qui est à la température 15 ambiante et sous azote. Après environ 5 minutes la dissolution est complète. On agite la solution pendant une heure et on ajoute lentement de l'acide chlorhydrique 3N. Après addition d'environ 9 ml d'acide il apparaît un précipité amorphe lourd. Lorsqu'on a ajouté un total de 16,5 ml de HCl 3N le pH du milieu de réaction 20 est d'environ 4,5. A ce moment-là le précipité devient partiellement cristallin. On continue à ajouter de l'acide chlorhydrique jusqu'à en avoir ajouté une quantité totale d'environ 40 ml. On agite le mélange à la température ambiante pendant une nuit, on le filtre, et on lave la matière filtrée à l'eau jusqu'à ce que 25 les eaux de lavage soient neutres au tournesol. On lave ensuite la 2-décarboxamidoanhydrotétracycline 2-formylée à l'acétone et à l'éther; rendement 2,45 g. Analyse : Calculé pour : G = ® ~ 4,93; N = 3,13 Trouvé : C = 58,78; H = 5,47; H = 3,16 30 L'échantillon analytique avait pour A max ) 272 (49.700), 423 (10.100) dans le mélange méthanol-HCl 0,0lN. EXEMPLE X On porte 20 mg de 2-déaarboxamidoanhydrotétracycline 2-formylée au reflux sous azote dans 5 ml d'acide sulfurique In 35 pendant 3 heures. On refroidit le mélange, on le filtre, et on lave le sulfate de 2-déc:srbojcamidoanhydrotétracycline orangé amorphe à l'eau et on le sèche à l'air. Le rendement est de 11 mg, le produit ayant un spectre ultraviolet identique à celui du produit de l'Exemple VII. 40 A l'exception de la 7-chloro-2-décarboxamidotétracycline 70 36947 18 2070124 2-formylée, de la 7-fcromo-2-décarboxamidotétracycline 2-formylée, de la 6-déméthyl-2-décarboxamidotétracycline 2-formylée, et de la 5-hydroxy-2-décarboxàmidotétracycline 2-formylée, on hydrolyse aussi les 2-décarboxamido-2-formyltétracycline s prépa-5 rées dans l'Exemple VIII en 2-décarboxamidotétracyclines correspondantes selon le mode opératoire précédent. La 7-chloro-2-décarboxamidotétracycline 2-formylée, la 7-bromo-2-décarboxamidotétracycline 2-formylée, et la 6-déméthyl-2-décarboxamidotétracycline 2-formylée donnent les 2-dêcarboxamido-10 5a,6-anhydrotétracyclines correspondantes lorsqu'on les hydrolyse selon le .mode opératoire précédent, tandis que la 5-hydroxy-2-décarboxamidotétracycline 2-formylée est dégradée dans les mêmes conditions. EXEMPLE XI 15 On ajoute 0,50 g de p-toluènesulfonate de 2-décarboxamido- 6-désoxy-6-déméthyltétracycline-2-formyle à 5 ml de méthanol. On ajoute 3 ml de solution d'hydroxyde de sodium à 10 % et 1,0 g de chlorhydrate d'hydroxylamine. Lorsque la dissolution est complète, on ajoute 5 ml d'eau et on chauffe le mélange de réaction 20 pendant environ 15 minutes. La cristallisation commence et on ajoute 3 ml supplémentaires d'hydroxyde de sodium à lo %. A ce moment-là le pH est d'environ 7,0. On agite le mélange pendant une nuit à la température ambiante, ensuite on le filtre, et on lave les cristaux successivement à l'eau, à l'acétone, et ensuite à 25 l-'éther. Le rendement est de 160 mg de 2-décarboxamido-6-désoxy-6-dêméthyltétracycline-2-nitrile, dont les spectres infrarouge et ultraviolet sont identique à ceux de la substance authentique. EXEMPLE XII A 100 ml de méthanol on ajoute 0,500 g de p-toluènesulfonate 30 de 2-décarboxamido-6-désoxy-6-déméthyltétracycline-2-formyle. On agite le mélange et on le chauffe jusqu'à ce que la dissolution soit complète et ensuite on le refroidit à la température ambiante. A la solution résultante on ajoute alors 333 mg de bioxyde de platine sous atmosphère de gaz carbonique. On secoue le mélange 35 à la température ambiante sous une pression d'hydrogène de 3 atmosphères sur appareil d'hydrogénation de parr pendant 6 heures. On filtre le mélange de réaction et on évapore le filtrat pour obtenir le produit de 2-décarboxamido-6-désoxy-6-déméthyltétra-cycline-2-hydroxyméthyle sous forme d'un solide amorphe; 40 mJJL( £ ) 272 (13.200), 345 (10.200) dans le mélange 70 3694"? 19 2070124 méthanol-HCl 0,01N. On réduit de la même manière les autres 2-formyltétracyclines des Exemples VIII et IX en dérivés 2-hydroxyméthylés. . • EXEMPLE XIII 5 A 50 ml de méthanol on ajoute 2,0 g de chlorhydrate de 2-décarboxamido-6-désoxy-6-déméthyltétracycline-2-imine. A 1?. solution résultante on ajoute 1,0 g de bioxyde de platine sous atmosphère de gaz carbonique. On secoue le mélange à la température ambiante sous 3 atmosphères d'hydrogène sur un appareil d'hydrogé-10 nation de parr pendant environ 6 heures. On filtre le mélange de réaction sur Super-Cel et on évapore le filtrat pour obtenir 1,8 g de produit brut 2-décarboxamido-6-désoxy-6-déméthyltétracycline-2-aminométhylé que l'on cristallise sous forme de p-toluènesulfonate dans un mélange méthanol-eau contenant de l'acide p-toluènesulfo-15 nique. Analyse : Calculé pour : 02^2^0.C^HgO^S.H^O.CH^OH : C= 56,0; H= 6,14; N= 4,50; S= 5,15; ^0= 2,90. Trouvé : C = 55,88; H = 5,64; N= 4,36; S = 5,57? ^0= 3,5. On avait pour l'échantillon analytique \ max iyu- (£ ) 274 20 (14.100), 320 (15.000), 354 (17.000) dans le mélange méthanol-HCl 0,01N. De la même manière on réduit les 2-iminotétracyclines énumérées dans les Exemples II-V en dérivés 2-aminométhylés selon ce mode opératoire. 25 EXEMPLE XIV On prépare les sels d'addition d'acide chlorhydrique des tétracyclines amphotères décrites dans les Exemples précédents en les dissolvant dans du méthanol contenant une quantité équimolaire d'acide chlorhydrique. On précipite ensuite le sel chlorhydrate en 30 ajoutant de l'éther, et on le recueille par filtration et on le sèche. On peut recristalliser le chlorhydrate dans le butanol, dans le mélange butanol-acide chlorhydrique, dans l'acétone, dans le mélange acétone-chlorure ou dans le mélange méthanol-acide chlorhydrique. 35 De même, on prépare par le même procédé les sels d'addition d'acide des acides suivants : acides sulfurique, nitrique, perchlorique, bromhydrique, phosphorique, fluorhydrique, p-toluène-suif onique, iodhydrique, tartrique, acétique, citrique, malique, benzoïque, glycollique, gulonique, gluconique, succinique, sulfo-40 salicylique. 70 36947 20 2070124 EXEMPLE XV On prépare les sels de sodium des tétracyclines décrites dans les exemples précédents en dissolvant la substance amphotère dans de l'eau contenant une quantité équimolaire d'hydroxyde de 5 sodium et on lyophilise le mélange résultant. De cette manière, on prépare les sels de potassium et de lithium. On.prépare les complexes de sels métalliques des présentes nouvelles tétracyclines en les dissolvant dans un alcool alipha-10 tique inférieur, de préférence le méthanol, et en traitant par une quantité -équimolaire du sel métallique choisi, de préférence dissous dans l'alcool choisi. On isole les complexes dans certains cas par simple filtration, mais souvent, étant donné que beaucoup d'entre eux sont solubles dans l'alcool, par évaporation du 15 solvant ou addition d'un non-solvant tel que le diéthyl éther. De cette manière, on prépare les complexes de sels métalliques des présentes nouvelles tétracyclines consistant essentiellement en composés où le rapport du métal à la tétracycline est de 1:1, en utilisant les sels métalliques suivants : chlorure de 20 calcium, chlorure de cobalt, sulfate de magnésium, chlorure de magnésium, chlorure stanneux, chlorure de zinc, chlorure de cadmium, chlorure de baryum, nitrate d'argent, nitrate stanneux, nitrate de strontium, acétate de magnésium, acétate manganeux, chlorure de palladium, chlorure manganeux, chlorure de cérium, chlorure de 25 titane, chlorure de platine, chlorure de vanadium, acétate plom-beux, bromure stanneux, sulfate de zinc, chlorure chromeux et chlorure nickeleux. 70 36947 21 2070124 REVENDICATIONS 1. Un procédé pour préparer une 2-décarboxamidotétracycline-2-imine à partir de son 2-décarboxamidotétracycline-2«nitrile correspondant, caractérisé en ce que l'on met ledit 2- 5 décarboxamidotétracycline-2-nitrile en contact avec un catalyseur de nickel et une solution aqueuse d'un acide alcanoîque inférieur à une température d'environ -10° C à 75° C, de préférence à une température d'environ 40 à 65° C, et si l'on veut, en ce que l'on forme ses sels d'addition d'acide et de métaux en faisant 10 réagir le produit résultant avec un sel métallique ou un acide approprié. 2. Un procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que l'on effectue la réaction avec un rapport de l'acide à l'eau d'environ 1:5 à 5:1 en volume, de préférence d'environ 15 3:1. 3. Un procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé par le fait que l'acide est un acide alcanoîque inférieur contenant jusqu'à 5 atomes de carbone, dé préférence l'acide formique ou acétique. 20 4. un procédé selon l'une des revendications 1, 2 et 3, caractérisé par le fait que l'on effectue la réaction en utilisant 0,1 à 5,0 grammes de catalyseur de nickel, de préférence 0,5 à 2,0 grammes par gramme de nitrile. 5. Nouvelles tétracyclines 2-substituées ayant les formules ch3 n(ch3)2 oh oh o o 70 36947 22 2070124 OÙ : R"*" est soit H soit un groupement OH; 2 R est soit H soit un=groupement OH; 3 3 R est soit H soit un groupement CH,, pourvu que R soit 1 5 un groupement CH-, lorsque R est un groupement OH; et 4 R est soit H, soit Cl soit Br; X est H, un groupement -CHO, -CH=NH, -CH2NH2 °u -C^OH; et leurs sels d'addition d'acideset leurs sels de métaux pharmaceutiquement acceptables. 6. Un composé selon la revendication 5, caractérisé par le fait 10 que chacun de r\ R2, R^ et R^ est H. 7. Un composé selon la revendication 5, caractérisé par le fait 12 3 que R est H, R est un groupement OH, R est un groupement CH,, 4 et R est Cl. 8. Un composé selon la revendication 5, caractérisé par le fait 1 2 3 15 que R est un groupement OH, R est H, R est un groupement CH^, et R^ est H. 9. Un composé selon la revendication 5, caractérisé par le fait 1 2 3 que R est H, R est un groupement OH, R est un groupement CH., 4 et R est H. 20 lo. Le composé selon la revendication 5, caractérisé par le fait 12 4 3 que R , R et R sont l'hydrogène, R est un groupement CH^ et X est H, un groupement -CHO ou -CH-NH. 11. Une composition thérapeutiquement active comportant comme ingrédient actif un composé selon la revendication 5.