Brevet FR2059546A1 — publié le 19710604

La présente invention concerne le nouveau sel de magnésium de l'inosine et son procédé de préparation» L'inosine est l'une des substances importantes du point de vue biochimique et présente divers effets physiologiques et phar-macologiques intéressants lorsqu'on l'utilise par exemple comme rtabilisant pour conserver le sang, comme activateur pour les vitamines et pour intensifier la fonction du foie ou du coeur* On a constaté que le sel de magnésium de l'inosine selon l'invention possède les mêmes types d'effets pharmacologiques que l'inosine libre et est efficace en particulier comme médicament pour les maladies cardiaques ou pour en accélérer la convalescence» On a encore constaté que l'inosine administréesn. même quantité est plus efficace sous forme de..son sel de magnésium que sous forme d'un simple mélange avec un sel de magnésium connu, tel que le chlorure de magnésium» De plus, le sel de magnésium de l'inosine a l'avantage qu'on peut l'administrer par voie orale sans augmentation des doses et on peut facilement le presser en comprimés» D'autre part, le sel de calcium de l'inosine présente, comme médicament des maladies cardiaques, presque la même efficacité que l'inosine libre» En conséquence, on peut penser que les effets pharmacologiques renforcés* ci-dessus mentionnés, présentés par l'inosine sous forme de se: de magnésium sont spécifiques dudit sel de magnésium» L'invention a donc pour objet l'inosinate de magnésium qui, comme nouveau médicament, est un procédé simple et économique pour sa préparation à l'échelle industrielle» A la suite d'une étude approfondie des propriétés chimiques de l'inosine, la demanderesse a découvert : l/- que lorsque l'on fait réagir l'inosine. et une substance fournissant -.es ions magnésium dans un solvant aqueux à unpH de 7 à 10, on obtient un sel dans lequel le rapport aniont, inosinate/cations magnésium est de 2:1» 2/- que ce sel est faiblement soluble dans un solvant aqueux neu tre ou alcalin, 3/- que ce sel est bien cristallisé, et très facile à séparer de la liqueur» Sur la base de ces découvertes, la demanderesse a mis au point un procédé pour la productiond'inosinate de magnésium qui consiste à faire réagir l'inosine avec une substance fournissant 70 27086 2 2059546 des ions magnésium dans un solvant aqueux ayant un pH de J à 10. Dans la mise en oeuvre du procédé de l'invention, on peut utiliser l'inosine soit sous forme libre-, soit à l'état de sels 'solubles dans l'eau, tels que les sels de métaux alcalins„ - Comme substance fournissant les ions magnésium, on peut uti liser un sel de magnésium ou un autre composé de magnésium solu-ble dans un solvant aqueux à un pH de 7 ,à 10, tel que"glutamate de magnésium, aspartate de magnésium, hydroxjâe de magnésium, carbonate de magnésium, ou carbonate basique de magnésium. L'oxyde de 10' magnésium, le chlorure de magnésium, le sulfate de magnésium et les analogues sont eux-mêmes peu réactifs mais lorsqu'on les ajoute conjointement avec un alcali au système réactionnel maintenu à un pH de 7 à 10, ils donnent l'inosinate de magnésium» La nature du solvant réactionnel aqueux n'est pas capitale. 15 On utilise habituellement l'eau pure mais le solvant peut contenir des sels neutres ou des solvants organiques solubles dans l'eau tels que les alcools et des cêtones. On utilise habituellement l'inosine et une substance fournissant les ions magnésium dans un rapport molaire de 2:1, mais 20 l'inosinate de magnésium se forme en quantité correspondante même si l'on utilise seulement 0,1 mole de ladite substance par mole d'inosine. D'autre part, il n'est pas souhaitable d'utiliser un trop gros excès de la substance apportant les ions magnésium. La réaction entre l'inosine et la source d'ions magnésium 25 s'effectue à la température ambiante ou à température élevée, de préférence à une température de 40 à 60°C. L'addition de germes cristallins préparés séparément donne des résultats favorables. La réaction a lieu lentement au-dessous de la température ambiante. La réaction est habituellement terminée entre quelques •*C minutes et plusieurs dizaines de minutes. Si l'on veut préparer un inosinate de magnésium ayant un bon aspect cristallin, il est préférable de refroidir lentement, en une période de plus d'une heure, le système réactionnel ayant une température relativement élevée. On maintient le système réactionnel à un "pH de 7 à 10, de préférence à un pH de "j ,6 à 9/3 pendant le cours de la réaction. Pour effectuer la réaction entre l'inosine et la source d'ions magnésium, on mélange les réactifs, par exemple, de la ma- Bad opinai 70 27086 3 2059546 nière suivante : 1/- on mélange une solution ou suspension aqueuse d'un réactif avec une solution ou suspension aqueuse de l'autre réactif, ou bien cj 2/- on mélange une solution aqueuse d'un réactif avec l'au tre réactif sous forme solide0 Dans ces cas, la solution ou suspension aqueuse d'inosine peut provenir d'un bouillon de fermentation pour la production de l'inosine, Même si l'on utilise l'inosine et la source d'ions magnésiurr toutes deux sous forme de suspension ou de bouillie,, on obtient des cristaux purs l'inosinate de magnésium, tant que 1réactifs sont utilisés dans un rapport molaire de 2 s 1 ou davantage. On peut séparer les cristaux d'inosinate de magnésium formés du liquide restant par un procédé approprié de séparation solide- liquide, tel que filtration ou centrifugation. L'inosinate de magnésium obtenu par le procédé de l'invention n'était pas connu dans la technique antérieure et possède les propriétés physiques énumérées dans le tableau I ci-après,, 20 Les cristaux d'inosinate de magnésium préparés préparés selon l'invention peuvent contenir des quantités différentes d'eau de cristallisation si on les précipite dans des conditions différentes « Les exemples suivants illustrent l'invention sans toute-25 fois en limiter la portée EXEMPLE 1. On dissout 26,8 g d'inosine dans 250 ml d'eau par chauffage et on ajoute 2,92 g d!hydroxy3e de magnésium en poudre fine à la solution maintenue à 60°C et on mélange de façon appropriée, 30 Lorsque le solide commence à cristalliser après environ 10 mn, on ajoute au mélange 100 ml d'eau et on refroidit progressivement à la température ambiante. Après deux heures, on sépare par filtration l'inosinate de magnésium cristallise . Le pH de la liqueur mère est de 9,1. On lave les cristaux séparés par une solution aqueuse d'étha-55 nol à 80^ et on sèche à 70°C pendant une nuit» Les cristaux sé-ciiés pèsent 26 g - Rendement 80# - Point de ramollissement 158-160°C, auquel 1'échantillon commence à se ramollir comme une cire„ Point de décomposition, l85~19^°C auquel l'échantillon 70 27086 4 2059546 commence à brunir avec formation de bulles» On détermine ito points de ramollissement et de décomposition par la n-éthode au .tube capillaire avec élévation de la température de:5CG par minute. Les cristaux analyses.au moyen de leur spectre de diffraction aux 5 rayons X (radiation Ka du cuivre) à l'état pulvérulent mor/:varies mêmes pics intenses que les cristaux du type A d^ns le t&eleau I. On détermine ensuite"la teneur en inosine des cristaux par le taux d'absorption des radiations ultra-violet à la longueur £'onde de 250 m/* , on dose le magnésium par l'acide éthylènediamine» tétracétique et on détermine l'eau de cristallisation par la de de Karl Fischer. Les résultats, exprimés en pourcentages, sont donnés dans le tableau II ci-dessous-, avec les valeurs correspon- • dantes calculées pour HxR^ Mg s 5Hg0„ 15 TABLEAU II Calculé pour HxRg Mg , 51^0 82,4 HxRî 3,73 Kg; 1J,8 Trouvé 82,0 3,80 13 3^ 20 EXEMPLE 2» On dissout 2,68 g d'inosine dans 50 ml d'eau par chauffa-ge„ On ajoute à la solution 1,02 g de chlorure de magnésium '.i'iexahy-draté MgClg , ôHgO avec 2 ml de solution de soude caustique 3 M. On agite le mélange pendant une nuit et on filtre l'inosinate de magné-25 sium formé. Le pH de la liqueur mère est de 9,2. Après séchage comme dans l'exemple 1, les cristaux pèsent 2,5 g Rendement 76#» Point de ramollissement 147=150°C, auxquels l'échantillon commence à se déshydrater et à se contracter. En ce qui concerne le point de décomposition, l'échantillon se e 30 lore progressivement à 190°C et devient brun comme du café avec formation de bulles à 220°C. On analyse encore les cristaux comme dans l'exemple 1 et on obtient les résultats indiqués dans le tableau III ci-dessous TABLEAU III 55 Calculé pour HxRg Mg , 6,51^0 79,1 HxRj 3,59 Mg Trouvé 80,7 3,59 SAD ORfGfNAL 70 27086 5 2059546 EXEMPLE 5. On dissout par chauffage 10,7 S d'inosine dans 150 ml d'eau. On ajoute à la solution 0,806 g d'oxide de magnésium sous forme de poudre fine. On mélange maintenu à 55°C avec agitation, on ajoute une faible quantité de cristaux d'inosine de magnésium obtenu à l'exemple I, comme germes de cristallisation. On observe une cristallisation spontanée autour des germes au bout d'environ 10 mn. On refroidit progressivement le mélange à la température ambiante et on laisse reposer à la glacière pendant une nuit. On sépare par filtration les cristaux résultants. Le pH de la liqueur mère est de 8,9= Après séchage, les cristaux séparés pèsent 11,1 g. Rendement 87#» Le spectre de diffraction des rayons X est conforme à celui des cristaux du type A, du tableau I. EXEMPLE 4. On procède comme à l'exemple III, sauf qu'on utilise 1,69 E de carbonate de magnésium au lieu de 0,806 g d'oxyde de magnésium et on obtient 10,4 g d'inosinate de magnésium du type A. Rendement 82# . Le pH de la liqueur mère est de 7,4. EXEMPLE 5. On dissout par chauffage 2,68 g d'inosine dans 50 ml d'eau. On ajoute à la solution 1,02 g de chlorure de magnésium hexahydraté et 1 ml de solution de soude caustique 5 N pour ob-tenir une solution limpide. On laisse reposer cette solution pendant une nuit à la température ambiante. On sépare par filtration l'inosinate de magnésium précipité .Le pH de la liqueur mère'est de 8,0. Après séchage, le sel séparé pèse 2,6 g. Les cristaux sont du type A. Rendement 8o#„ TABLEAU -I- Type de cristaux B Rapport molaire H x R^1: Mg Forme cristalline, à l'examen à l'oeil nu, (2) Eau de cristallisation Spectre de diffraction des rayons X Point de fusion Point de ramollissement Point de décomposition 2 : 1 colonnes ou plaques [2( 5 HoO (5) 13,4 (M); 15,6 (M) 18,4 (S); 19,0 (M) 20,2 (S); 21,4 (S) 158 - 160°C 185 - 194°C Solubilité (5) Stabilité des cristaux 2 s 1 colonnes ou plaques 5 à 7. H20 0,0 (S); 9,2 (S) 16,0 (M); 16,7 (S) 147 - 150°C 220 °C 0,7g de HxR dans 100g d'eau, 1,3g HxR 0,5g HxR 0,5g HxR à 10°C à 30°C 100g d'eau, 100g d'éthanol à 30°C 100g d'acétone à 30°C Stable légèrement instable Note (1) (2) (3) (4) (5) "-4 O "*•4 O co o 1 On HxR représente le reste inosinate Mesurée car la méthode de Karl Fischer sur les cristaux après les avoir laissés- reposer pendant une nuit à 70°C, Pics dans le spectre de diffraction des rayons X par la poudre (29) à des angles de moins de 25°(Radiation K a du cuivre). M et S signifient des fractions moyennes et fortes respectivement. Mesuré par la méthode au capillaire avec élévation de température de 5°C par minute. On ajoute 2g de cristaux à 50 mî d'un solvant et on agite le mélansre oendant une nuit. On mesure ensuite la quantité d'inosine dissoute dans la liqueur surgagêant.- Kî O en en O 70 27086 7 2059546 BgJHDIÇAjJOgS 1) Nouveau dérivé de I!inosine caractérisé en ce qu'il—consiste en mosinate de magnésium contenant les anions inosinate st les cations magnésium dans le rapport 2.51. 2) Procédé pour la préparation de l'inosinate de magnésium ca-va "-"1se en ce que l'on fait réagir l'inosine avec une source d5 ions magnésium dans un solvant aqueux à un pH de 7 à 10o 5) Nouveau médicament utile notamment dans le traitement: des maladies cardiaques, caractérisé en ce qu'il consiste en inosinate de magnésium selon la revendication 1„ 4) Compositions thérapeutiques, caractérisées en ce qu'elles contiennent, comme ingrédient actif, le médicament de la revendication 5 en association avec un support pharmaceutique table. 5) Formes pharmaceutiques appropriées peur 11 administration des compositions selon la revendication 4„ BAD ORIQi