Brevet FR2105138A1 — publié le 19720428

La présente invention concerne un produit à usage thérapeutique et son procédé d'obtention. Ce produit nouveau se caractérise en ce qu'il contient un alcaloïde du type diméthoxy-oxindole de formule brute CH2806N2 extrait d'un Cabucala et plus particulièrement d'un Cabucala intermedia. Cet alcaloide nouveau présente les caractères suivants: Microcristaux blancs donnant les réactions des alcaloides. Point de fusion : 1620C Pouvoir rotatoire: (a)D = + 20 (c = 1,0 méthanol) P.M.: 428 Caractères spectrophotométriques: -Spectre Ultra-Violet: 235, 279 -Spectre Infra-Rouge: 3440, 3200, 2940, 3820,2835, 1720 large bande,1620, 1500, 1465, 1300, 1145, 1110,1100, 870, 790, 770 cm -Spectre RMN: doublet 3 protons centré sur 1,13, un singulet de 3 protons à 3,6; deux singulets de 3 protons chacun à 3,86 et 3,88; un multiplet de 1 proton centré sur 4,3 -Masse: M 428 et principaux pics à 411, 397, 223, 219, 208, 204, 190, 176, 162, 148,134, 123, 108, 94, 80 et 69. L!étude de l'ensemble de ces données ainsi que de celles du spectre NMR ont permis d'attribuer à cet alcaloïde le caractère de nouveauté avec la structure ci-dessous: Ce diméthoxy-oxindole présente des caractères pharmacodynamiques intéressants dont les suivants peuvent être notés: Toxicité: la DL 50 chez la souris est de 32 mg/kg. La tension artérielle est abaissée, chez le chien, dès la dose de 1/10ème de DL 50 - 7,5% pendant 14 minutes - mais plus intensément à la dose de 1/Sème de DL 50 - 22% en moyenne pendant 45 minutes. Action non significative sur la respiration. Pas d'effet sur le coeur, ni tonique ni dépresseur. Pas d'effet sur la formule sanguine par administration de doses subléthales pendant 30 jours tous les 2 jours. Action légèrement sédative chez la souris, d'origine centrale. L'ensemble des caractères confère à cet alcaloide des propriétés sympatholytiques intéressantes en ce qu'on note extrémement peu d'effets secondaires. L'administration à lthomme peut être effectuée par voie orale au moyen de formes galéniques sèches ou aqueuses aux doses de 10 à 60 mg. par jour; par voie rectale aux doses de 15 à 75 mg par jour; par voie parentérale, par dose unitaires de 10 mg. en solution aqueuse stérile. Le procédé d'obtention de cet alcaloide est du type usuel consistant à épuiser une drogue végétale par un solvant en milieu alcalin, à séparer les bases contenues dans le solvant au moyen d'eau acide, à traiter cette eau acide afin d'en extraire les alcaloïdes totaux et à isoler l'alcaloide désiré par chromatographie. Comme il sera exposé ci-après plus en détail, le procédé selon l'invention se distingue de par le choix de la drogue végétale de départ ainsi que dans la conduite du processus chromatographique.. Un exemple pratique de mise en oeuvre d'un tel procédé pour l'obtention du produit selon l'invention est décrit ci-après en détail, à titre purement illustratif. On pèse 5 kg. de poudre de feuilles sèches de Cabucala Intermedia que l'on humecte par 5 1. d'une solution aqueuse de carbonate de sodium à 10%. La masse alcaline est laissée au repos pendant 1 h.30 puis elle est introduite dans un corps de Soxhlet où on l'épuise à l'éther éthylique pendant 3 h. On soutire 17 1. d'éther d'extraction que l'on filtre pour l'envoyer ensuite dans une cuve de 30 1. aux fins d'épuisement par eau acide. On effectue 6 lavages au moyen de chaque fois 2,5 1. d'eau acétique à 4%. Environ 15 1. d'eau acide sont ainsi obtenus que l'on désolvante par agitation sous vide pendant 30 minutes. L'eau acide est additionnée de 75 g. de noir animal et agitée à nouveau pendant 30 minutes. On filtre rapidement et on alcalinise par addition de 5 1. d'ammoniaque à 4%. Cette opération est effectuée en refroidissant et par additions ménagées de l'agent d'alcalinisation. Les bases ainsi libérées sont reprises par échange liquide-liquide dans 12 1. de dichlorométhane répartis en 4 lavages. Le solvant contenant les bases totales est lavé à l'eau puis séché sur 2 kg. de sulfate de sodium sec. Après filtration, le solvant est concentré et finalement amené à sec sous vide. On recueille ainsi 50 g. de bases constituant les alcaloides totaux. L'isolement de l'alcaloide principal est effectué par chromatographie. A cet effet, on dissout les alcaloides totaux dans 3 1. de benzène et cette solution est introduite sur une colonne de 1.500 g. d'alumine à 2% d'eau. L'élution est effectuée successivement par le benzène, le dichlorométhane, le dichlorométhane additionné de 1% de méthanol, puis de 2% et de 5% de méthanol. La base nouvelle se localise principalement dans les fractions à 1% de méthanol. Ces fractions réunies sont évaporées à siccité et par reprise au méthanol, on obtient 10 g. de l'alcaloide qui répond aux caractères décrits plus haut. I1 est évident que de nombreuses variantes du procédé susdécrit peuvent être appliquées sans pour autant sortir du cadre de l'invention. Ainsi, l'extraction peut être effectuée dans un simple percolateur par le procédé de la lixiviation. De même, le solvant employé peut être un solvant chloré tel le chloroforme ou le dichlorométhane ou encore un solvant de la série aliphatique ou l'acétate d'éthyle. REVENDICATIONS. 1.- Produit à usage thérapeutique, caractérisé en ce qu'il contient un alcaloide du type diméthoxy-oxindole de formule brute C23H280 6N2 extrait du Cabucala Intermedia. 2.- Produit selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit diméthoxy-oxindole présente la structure suivante: 3.- Procédé d'obtention d'un diméthoxy-oxindole selon la revendication 1, du type consistant à épuiser une drogue végétale par un solvant en milieu alcalin, à séparer les bases contenues dans le solvant au moyen d'eau acide, à traiter cette eau acide afin d'en extraire les alcaloides totaux et à isoler l'alcaloide recherché par chromatographie, caractérisé en ce que ladite drogue végétale est le Cabucala, variété Intermedia. 4.- Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'on part de poudre de feuilles séchées dudit Cabucala. 5.- Procédé selon la revendication 3, caractérisé-en ce que durant l'opération de chromatographie, on élue successivement par le benzène, le dichlorométhane, le dichlorométhane additionné de 1% de méthanol, puis de 2% et de 5% de méthanol et en ce que l'on reprend au méthanol les fractions à 1% de méthanol préalablement amenées à siccité par évaporation, pour obtenir le diméthoxy-oxindole. 6.- A titre de produit industriel nouveau un diméthoxyoxindole selon la revendication 1 ou 2.