Brevet FR2073345A1 — publié le 19711001

i 20733^5 La présente invention concerne des composés de formule générale : O H2N-ÇH-C-NH-CH-COOR1 5 CH. (ifr, )„ I 2 | 2 n COOH R2 dans laquelle n est un entier de o à 5, R^ est un radical alcoyle ayant jusqu'à 6 atomes de carbone, un radical alcoyl-aryle ou alicyclique ayant jusqu'à 10 atomes de carbone, et R2 est un 10 radical cycloalcényle, et, en outre, peut être un radical phényle lorsque n est égal à O. Le carbone marqué du signé * a toujours la configuration L. Les nouveaux composés de la présente invention sont des dipeptides qui possèdent un goût sucré. Cette propriété est inté-15 ressante en ce que ces dipeptides sont susceptibles de transmettre un goût sucré à divers produits comestibles. Les exemples de quelques produits comestibles que l'on peut sucrer à l'aide des dipeptides de la présente invention sont les suivants : fruits, jus de fruits, légumes, assaisonnements pour salades, glaces, 20 sorbets, gélatine, sirops, mélanges pour pâtisseries, vins, boissons gazeuses et non gazeuses, chewing-gums, et bonbons. Les composés de la présente invention ont un rapport de la teneur en sucre à la teneur en calories qui est favorable et ils peuvent être utilisés isolément, ou en combinaison avec des agents 25 édulcorants naturels ou artificiels comme, par exemple, le saccharose ou la saccharine. Les agents édulcorants constitués de dipeptides de la présente invention sont des substances stables, solubles dans l'eau que l'on peut utiliser sous diverses formes physiques, par exemple, 30 sous forme de poudres, de comprimés, de sirops, etc... On peut également les utiliser dans des excipients liquides ou solides, tels que eau, glycérine, sorbitol, amidon, sel, acide citrique et autres substances non toxiques appropriées. Alors qu'il n'est pas possible de prédire si une structure de dipeptides donnée 35 aura ion goût sucré ou même n'aura pas de goût du tout, on a établi que la propriété d'avoir un goût sucré est influencée par la stéréochimie des. amino-acides entrant dans la structure du dipeptide. Afin de donner l'effet édulcorant maximal, l'atome de carbone marqué par le signe -f dans la formule générale a toujours 70 40874 2 2073345 la configuration L. Les agents édulcorants de la présente invention sont particulièrement intéressants comme succédanés du sucre pour les diabétiques, les personnes obèses, et les personnes chez lesquelles 5 l'absorption de calories est surveillée. En outre, ils ne possèdent pas l'arrière-goût désagréable qui est présent dans les édulcorants synthétiques. En tant que dérivés d'amino-acides utilisés dans l'organisme humain dans la synthèse des protéines essentielles, ils sont exempts de propriétés toxiques. 10 Dans les composés de la présente invention, le radical peut être un radical alcoyle ayant jusqu'à 6 atomes de carbone, un radical alcoyl-aryle ou alicyclique ayant jusqu'à 10 atomes de carbone. Les chaînes de radicaux alcoyle peuvent être droites ou ramifiées. Les exemples de ces radicaux alcoyle sont les 15 suivants î méthyle, éthyle, n-propyle, i-propyle, n-butyle, 1-butyle, n-pentyle, 2-méthylbutyle, néopentyle, n-hexyle, 2-méthylpentyle, 3-méthylpentyle, 2,2-diméthylbutyle et , 2,3-diméthylbutyle. Les exemples de radicaux alcoyl-aryle sont des radicaux benzyle, phènéthyle, isopropylphényle, 3-phényl-20 propyle, et isopropylbsnsyle. Les exemples de radicaux alicycliques sont les radicaux cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclo-hexyle, cycloheptyle et cyclooctyle. R2 peut être un radical alicyclique mono- ou di-insaturé ayant jusqu'à 8 atomes de carbone, et, en outre, ce peut 6-ire un radical phényle lorsque 25 n est égal à O. Les ©xemples de radicaux alicycliques spécifiques sont les suivants s cyclopropényle, cyclobutényle, cyclopentényle, cyclohexènyle, cycloheptényle, cyclooctényle, cyclobutadiényle, cyclopentadiényle, cyclohexadiényle, cycloheptadiényle et cy clooctadiényle. 30 On prépare les produits de la présente invention en faisant réagir vin composé de formule * CH- sont tels que décrits précédemment. H2N-CH-C00R1 (CHn ) I R I 2 n 2 35 dans laquelle R^, r2,n et -avec un acide de formule 70 40874 3 2073345 Y-HN-CH-CO„H coor3 ou une de ses formes activées, dans laquelle y et sont des 5 groupements protecteurs, et ensuite en éliminant les groupements protecteurs pour former le produit dipeptide. Par forme activée de l'acide précédent on entend toute combinaison ou tout groupe qui font que la fonction acide de 1'amino-acide devient plus réactive. On effectue cette activation 10 en transformant le groupement acide carboxylique de l'acide précédent, par exemple, en son dérivé ester ce nitrophényle. Parmi les formes activées appropriées en lesquelles on peut transarma: le groupement acide carboxylique on peut mentionner les anhydrides mixtes, les azides, les chlorures d'acide, les produits de réaction 15 avec les carboximides, les composés N-acylés réactifs, les dérivés hydroxylamine O-acylés et les esters actifs tels que les esters d'alcoyle avec des substituants arrachant les électrons, les esters vinyliques, les esters énoliques, les esters phényliques, les esters thiophényliques, les esters nitrophényliques, les esters 20 2,4-dinitrophényliques, les esters trichlorophényliques, et les esters de nitrophényl-thiol. On préfère particulièrement utiliser les esters nitrophényliques. Lorsqu'on forme les peptides de cette invention, on protège la fonction aminé et la fonction acide carboxylique du co-réacfcif 25 acide précédent avec les groupements protecteurs Y et R^ respectivement. On peut protéger la fonction aminé avec les groupements protecteurs (Y) du groupement aminé, communément utilisés, tels que les groupements benzyloxycarbonyle, nitrobenzylcarbonyle, méthoxybenzylcarbonyle, tert-butyloxycarbonyle, phtalyle, 0-nitro-30 phénylsulfényle, tosyle, etc... Les groupements protecteurs R^ peuvent être du type hydrogénolytique acide comme par exemple les groupements tert-butyle, benzyle, triméthylbenzyle, etc... On élimine les groupements protecteurs par des réactions connues telles que réduction par le sodium dans l'ammoniac liquide, 35 hydrogénolyse, traitement par un acide halohydrique (comme les acides bromhydrique ou chlorhydrique) dans, l'acide acétique en. traitement par l'acide trifluoroacétique. Les exemples suivants illustrent la présente invention sans toutefois la restreindre à eux-mêmes : 70 40874 4 2073345 Exemple 1 Chlorhydrate de l'ester méthyligue de la 2,5-dihydro-L-phénylalanine On ajoute du chlorure de thionyle (15 ml) à du méthanol (150ml) tout en agitant dans un bain de carboglace. On laisse le mélange 5 atteindre la température ambiante et on ajoute de la 2,5-dihydro-L-phénylalanine (5,0 g). Après avoir laissé au reflux pendant 30 minutes, on élimine le solvant sous vide et on cristallise le résidu dans l'éther et ensuite on le recristallise dans l'acéto-nitrile. Rendement : 4,95 g. 10 Exemple 2 Ester méthyligue de la fi-tert-butyl-Na-tert-butyloxycarbonyl-L-aspartyl-2.5-dihvdro-L-phénylalanine On ajoute de l'ester p-nitrophénylique de l'acide /l-tert-butyl-NC£-tert-butyloxycarbonyl-L-aspartique (26,7 g) à un mélange 15 de chlorhydrate de l'ester méthylique de la 2,5-dihydro-L-phénylalanine (11,8 g), de diméthylformamide (50 ml) et de triéthylamine (7,6 ml). Après avoir laissé le mélange réactionnel deux heures à la température ambiante on le dilue par l'acétate d'éthyle et on le lave par l'acide citrique aqueux à 20 %, de l'eau, une 20 solution de bicarbonate de sodium saturée et de l'eau. Après avoir séché sur sulfate de magnésium, on élimine le solvant sous vide. Rendement : 13,2 g. Exemple 3 Ester méthylique de la L-aspartyl-2,5-dihydro-L-phénylalanine 25 On dissout de l'ester méthylique de p-tert-butyl-N^-tert- butyloxycarbony1-L-asparty1-2,5-dihydro-L-phénylalanine (13 g) dans de l'acide trifluoroacétique (80 ml) et on maintient la solution sous azote pendant une heure. On concentre le solvant sous vide et on triture le résidu par un mélange éther-hexane 30 jusqu'à ce qu'il se solidifie. On dissout ce matériau dans l'eau (environ 30 ml) neutralisée sur DEAE sephadex (cycle OH), on le filtre et on concentre le filtrat sous vide jusqu'à un volume petit (environ 5 ml). On fait cristalliser l'ester dipeptide en abandonnant au réfrigérateur. 35 Exemple 4 Chlorhydrate de l'ester méthylique de la 1-cyclohexène-l-L-alanine Préparé à partir de 1-cyclohexène-l-L-alanine comme il est décrit dans l'Exemple 1. 70 40874 5 2073345 Exemple 5 Ester méthylique de la fi-tert-butvl-Ntf-tert-butvloxvcarbonvl-L-aspartvl-L-(1-cvclohexène-l)-alanine Préparé à partir du chlorhydrate de l'ester méthylique de la 5 1-cyclohexène-l-lr-aLaniiB comme il est décrit dans l'Exemple 2. Exemple 6 Ester méthylique de la L-aspartvl-L-(1-cyelohexène-l)-alanine Préparé à partir du dipeptide protégé de l'Exemple 6 par le mode opératoire décrit dans l'Exemple 2. 10 Exemple 7 fl-Benzvl-N06-tert-butyloxvcarbonyl-l-aspartyl-l- phénvlcrlvcine On ajoute de l'ester p-nitrophénylique de l'acide /3-benzyl-N -tert-butyloxycarbonyl-L-aspartique (5,3 g) à un mélange de L-phénylglycine (1,5 g), de triéthylamine (1,4 ml) et de diméthyl-15 formamide (15 ml). Après avoir abandonné le mélange réactionnel pendant une nuit à la température ambiante on le dilue par l'acétate d'éthyle, on le lave par l'acide citrique à 20 % et l'eau. Après séchage sur sulfate de magnésium, on élimine le solvant sous vide et on cristallise le résidu sous forme d'un sel de dicyclo-20 hexylammonium. Rendement :3,6g. Exemple 8 Ester méthylique de la L-aspartvl-L-phénylglycine On dissout le sel de dicyclohexylananonium de la jï-benzyl-N^-tert-butyloxycarbonyl-L-asparLyl-L-phénylglycine (3 g) dans 25 un mélange d'acétate d'éthyle (200 ml) et d'acide citrique aqueux à 20 % (50 ml). On lave la couche organique deux fois avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de magnésium, et on la concentre à sec sous vide. On dissout le résidu dans le méthanol, on le traite par le diazométhane jusqu'à obtention d'une couleur jaune 30 persistante. On fait disparaître la couleur par une goutte d'acide acétique au bout de dix minutes, et on élimine le solvant sous vide. On dissout le résidu dans de l'éthanol absolu (100 ml) et on l'hydrogène avec un catalyseur à 10 % de palladium sur charbon, à la pression atmosphérique pendant 5 heures. On sépare le cata-35 lyseur par filtration et on concentre le filtrat à sec sous vide.N On dissout le résidu dans l'acide trifluoroacétique (10 ml) et après 15 minutes à la température ambiante, on élimine l'acide trifluoroacétique sous vide et on isole l'ester méthylique du dipeptide comme il est décrit dans l'Exemple 3. Rendement ï 0,9 g. 70 40874 6 2073345 Exemple 9 Chlorhydrate de l'ester méthyligue de la L-2,5-dihvdrophénvl-qlvcine Préparé à partir de L-2,5-dihydrophénylglycine comme il 5 est décrit dans l'Exemple 1. Exemple 10 Ester méthylique de la fi-tert-butvl-N"-tert-butvloxycarbonyl-L-aspartvl-L-2,5-dihvdrophénylglveine Préparé à partir du chlorhydrate de l'ester méthylique de 10 la L-2,5-dihydrophénylglycine comme il est décrit dans l'Exemple 2. Exemple 11 Ester méthylique de la L-aspartvl-L-2,5-dihydrophénvlglveine Préparé à partir du dipeptide protégé de l'Exemple 10, comme il est décrit dans l'Exemple 3, 70 40874 7 2073345 10 REVENDICATIONS 1. Un dipeptide de formule : 0 * Il ^ H^N-CH-C-NH-CH-COOR, CH (CH) | 2 I 2 n COOH R2 dans laquelle le carbone marqué du signe * a la configuration L, n est un entier de O à 5, R^ est vin radical alcoyle ayant jusqu'à 6 atomes de carbone, un radical alcoyl-aryle, ou alicyclique ayant jusqu'à 10 atomes de carbone, et R2 est un radical alicyclique mono- ou di-insaturé ayant jusqu'à 8 atomes de carbone, ou bien, lorsque n est égal à o, un radical pnényle. 2. Un dipeptide selon la revendication 1, ayant le nom d'ester méthylique de la L-asparty1-2,5-dihydro-L-phénylalanine. 3. Un dipeptide selon la revendication 1, ayant le nom 15 d'ester méthylique de la L-aspartyl-L-(1-cyclohexène-l)-alanine. 4. Un dipeptide selon la revendication 1, ayant le nom d'ester méthylique de la L-£spartyl-L-phënylglycine. 5. Un dipeptide selon la revendication 1, ayant le nom d'ester méthylique de la L-asparty1-L-2,5-dihydrophénylglycine. 20 6. Une composition comestible comportant comme édulcorant vin dipeptide selon la revendication 1. 7. Un procédé pour préparer des dipeptides de formule 0 * H2N -ÇH-C-NH-ÇH - COOR1 25 £H0 (^H,) j £. i /. n COOH R2 dans laquelle l'atome de carbone marqué par le signe 4- a la configuration L, n est un entiar de O à 5, R- est un radical alcoyle ayant jusqu'à 6 atomes de carbone, ou un radical alcoyl- 30 aryle ou alicyclique ayant jusqu'à 10 atomes de carbone, et R2 est un radical alicyclique mono- ou di-insaturé ayant jusqu'à 8 atomes de carbone, ou bien, lorsque n est égal à 0, un radical phényle; caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule ^ 35 H~N - CH - C00R, £ \ i 'fVn *2 70 40874 8 2073345 dans laquelle les symboles sont tels qu'il a été indiqué ci-dessus, avec un acide de formule Y - HN - CH - CO_H I 2 5 COOR3 ou une forme activée de celui-ci, formule dans laquelle Y et sont des groupements protecteurs, et en ce que l'on élimine lesdits groupements protecteurs Y et R^ du produit ainsi formé pour former les produits dipeptides.