Brevet FR2101126A1 — publié le 19720331

La présente invention, faite dans les services de la FRANCAISE DES MATIERES COLORANTES S.A., concerne un nouveau médicament à activité amoebicide constitué par le sel d'antimoine de la fluoro-5 hydroxy-8 quinoléSne. Ce sel qui peut être représenté par la formule : possède un pouvoir amoebicide puissant et est pratiquement atoxique aux doses d'utilisation en thérapeutique humaine. Son application dans ce domaine est ainsi particulièrement avantageuse. Préparation Le sel d'antimoine de la fluoro-8 hydroxy-5 quinoléine peut entre préparé, par exemple, suivant le procédé ci-dessous dans lequel les parties indiquées sont en poids, sauf mention contraire On prépare une solution A de chlorhydrate de fluoro-5 hydroxy-8 quinoléine en dissolvant à 800C 18 parties de fluoro-5 hydroxy-8 quinoléine dans 2000 parties d'eau distillée additionnées de 18 parties en volume d'acide chlorhydrique pur à 76 . On dissout d'autre part à 40-50 C 23 parties de trichlorure d'antimoine dans 35 parties d'eau distillée additionnées de 10 parties en volume d'acide chlorhydrique pur à 36 L'analyse donne les résultats suivantes : % C H N F Sb Calculé pour C9H5F NO2Sb.... 36,05 1,68 4,67 6,33 40,60 Trouvé ..................... 37,26 2.06 4,78 6,50 40,66 Propriétés toxicologiques Chez la souris p.o le sel précité est atoxique à la très forte dose de 9000 mg/kg, alors que la D.L. 50 du sel de bismuth de l'hydroxy-8 quinoléine, pris comme terme de comparaison, est de l'ordre de 7,285 mg/kg. Propriétés bactériostatiques Les propriétés bactériostatiques du sel d'antimoine de la fluoro-5 hydroxy-8 quinoléine (composé A) et du sel de bismuth de l'hydroxy-8 quinoléine (composé B) ont été étudiées in vitro vis-àvis de cocei GRAM + et de bacilles GRAM 1 ) Conditions expérimentales a) Prénaration des suspensions En raison de leur insolubilité dans l'eau, les produits sont incorporés au sein d'un milieu solide Ils sont mis en suspension dans un mélange à parties égales d'eau distillée stérile et de propylène glycol à raison de 20mg pour 10 mi de mélange, Cette suspension-mère est diluée et 2 mi de chacune des dilutions sont déposés dans une boîte de Pétri stérile0 t) Milieu de culture On prépare des culots de 18 ml d'un milieu peptoné salé et gélosé de composition suivante Extrait de viande .............. 5 g Peptone .................... 10 g Cl a 5 g Gélose ..................... 20 g Eau distillée......q.s.p..... 1000 g pH : 7,2 Ce milieu, après liquéfaction au bain-marie et refroidissement à 45-500C, est coulé dans des boîtes de Pétri et fermement agité afin d'y assurer la diffusion du produits o) Souches bactériennes 'les espèces bactériennes suivantes ont été utilisées : Cocci GUI + : Streptococcus faecalis, souche ATCC 9790 (entérncoque). Bacilles GUI - : Escherichia coli, souche 416 LAUSANGE Pseudomonas aeruginosa, souche 414 LAYUSANNE (bacille pyocyanique) Ces souches bactériennes sont repiquées la veille de l'essai en bouillon peptoné salé de même composition que le précédent, à l'exclusion de la gélose. d) Ensemencement Après 24 heures d'étuve à 370C, le milieu coulé en botte de Pétri est ensemencé en stries en surface et les boites mises à l'étuve à 37 C. Une boite témoin reçoit 2 ml de mélange propylène glycol-eau pour vérifier que le solvant n'exerce aucune action inhibitrice sur la multiplication des souches microbiennes. tes lectures sont effectuées quotidiennement pendant 3 jours.Tous le essais sont réalisés en doublez 20) Résultats 'les concentrations bactériostatiques minimales après 72 heures d'incubation à 370C, exprimées en mg/litre, sont les suivantes : Produit Entéroccoque Eschorichia Pyocyanique Strept.faecalis coli Pseudomonas Aeruginosa A 25 40 200 B 25 50 inactif 500 Propriétés parasiticides 'les propriétés parasiticides des produits ont été étudiées d'une part in vitro vis-à-vis de cultures d'entamoeba dysenteriae, d'autre part in vivo chez la souris infestée soit par syphacia obvelata, soit par hymenolepis nana. a) Essais in vitro L'activité amoebicide a été étudiée vis-à-vis d'entamoeba dysenteriae (CAVIER, R. et colt. Thérapie 18, 1153 (1963). Cette amibe a été cultivée sur milieu de PAVLOVA-JONES (JONES, W.R., Experim. Parasitol2 , 118 (1952). Pour évaluer l'inhibition au départ, on détermine la concentration minimale qui empêche la reprise de la culture après un contact de 48 heures à l'étuve à 37 C. Pour apprécier l'action léthale on détermine la concentration minimale qui tue les amibes d'une culture de 3 jours en 48 heures à 370C. Produit activité amoebicide Inhibition au départ; Action léthale en 48 heures A 1,25 mg/1 10 mg/1 B 100 mg/1 sup. 100 mg/1 b) Essais in vivo L'activité anthelminthique a été étudiée sur les CUSTODES (CAVIER, R, et NOTTEGHEM, M.J., Ann. pharm. franç. 26, 603 (1968) plus particulièrement sur une souche d'hymenolepis nana var. fraterna. Des souris CD1 expérimentalement infestées par ingestion, 3 semaines environ auparavant, de 50 oeufs murs d'hymenolepis nana reçoivent le matin à jeun le produit à essayer à la dose de 200 mg/ kg p.o. sous la forme d'une suspension dans un mucilage de gomme arabique à 10 %. Puis 4 heures plus tard, elles reçoivent également une purgation saline de sulfate de sodium à raison de 25 mg/20 g de poids corporel, Le lendemain, les animaux sont autopsiés et l on détermine le pourcentage de souris déparasitées ainsi que le nombre de souris mortes au cours de l'essai4 lies résultats sont exprimés par le pourcentage de souris déparasitées par rapport aux souris vivantes à la fin de l'essai. L'activité anthelminthique a été étudiée d'autre part sur les NEMATODES (CAVIER, R., Bull Soc. Rath. exot. 55, 112 (1962) plus spécialement sur une souche de syphacia obvelata (oxyuridés). Des souris C1 expérimentalement infestées par syphacia obvelata reçoivent le produit à essayer quotidiennement du 8ème au 11ème jour qui suivent l'infestation, soit pendant 4 jours, à la dose de 200 mg/kg p.o. sous la forme d'une suspension dans un mucilage de gomme arabique à 10 %. L'autopsie est pratiquée 48 heures après l'arrêt du traitement et l'on recherche les oxyures encore vivants dans le caecum des animaux.On consigne le pourcentage de souris complètement déparasitées ainsi que le nombre de souris mortes au cours de l'essai.' 'les résultats sont exprimés par le pourcentage de souris déparasitées par rapport aux souris vivantes à la fin de l'essai0 Produit Syphacia obvelata Hymenolepis nana % % déparasitées mortes déparasitées mortes A 31 7/20 95 1/20 B 10 10/20 7,7 0/13 le sel d'antimoine de la fluore-5 hydroxy-8 quinoléine se présente donc comme un produit très peu toxique doLé à la fois de propriétés parasiticides puissantes et bactériostatiques marquées. In vitro il exerce une activité amoebicide remarquable environ 80 fois plus forte que celle du sel de bismuth de l'hydro- xy-8 quinoléine. In vivo, chez la souris p.o " ses effets enthelminthiques s'exercent à la fois vis-à-vis des oxyures e-t des taenias tout en étant plus sensibles vis-à-vis des cestodes, A cet égard il est de 3 à 12 fois plus actif, à dose égale, que le produit de référence. Applications thérapeutiques Be sel d'antimoine selon l'invention trouve ses ap;)lica- tions thérapeutiques dans le traitement des bilharzioses, des amibiases, des leishmanioses, des filarioses et des parasitoses intestinales à ïiéinatodes et à cestoses. il est également indiqué dans toutes les formes de diarrhée de l'adulte et de l'enfant qu'elles soient d'origine microbienne ou parasitaire. Ce produit peut être administré soit en poudre, soit en granulés, soit en comprimés dragéifiés dosés de 100 à 500 mg, à raison de 2 à 6 comprimés par jour. R E V E N D I C A T I O N S Nouveau médicament à activité amoebicide constitué par le sel d'antimoine de la fluoro-5 hydroxy-8 quinoléine ou contenant ce sel.