Brevet FR2070154A1 — publié le 19710910

La présente invention se rapporte à un nouveau sel de la cocarboxylase, à savoir l'arginate de cocarboxylase, et à son procédé de préparation. La cocarboxylase est la coenzyme de la carboxylase qui intervient dans les réactions d'oxydo-réduction pour décomposer l'acide pyruvique en acétaldéhyde et en gaz carbonique chez les êtres vivants et est une substance indispensable dans le métabolisme des sucres. Toutefois, la cocarboxylase est très instable en présence d'humidité et se décompose en absorbant de liteau pendant sa conservation tant sous la forme de poudre ou de pastilles que sous la forme d'une solution aqueuse, ce qui diminue son efficacité. Le résultat de diverses recherches faites pour remédier à cet inconvénient ont permis de découvrir que l'arginate de cocarboxylase obtenu en faisant réagir une mole de carboxylase avec une mole d'arginine est très stable, même en présence d'humidité, et quten outre l'action de la cocarboxylase est renforcée. En conséquence, le but de l'invention est de fournir de l'arginate de cocarboxylase qui est très stable, même en présence d'humidité. Un autre but est d'apporter un procédé pour préparer l'arginate de cocarboxylase. Selon l'invention, on prépare l'arginate de cocarboxylase en faisant réagir de la cocarboxylase avec de l'arginine ou avec ses sels. Plus précisément, il est préférable d'utiliser un léger excès d'arginine par mole de cocarboxylase. Pour exécuter la réaction, on met au contact la cocarboxylase et l'argiiine ou ses sels dans un solvant aqueux approprié, tel que liteau ou un mélange d'eau et d'un solvant organique, par exemple, d'alcool methylique, d'alcool éthylique, de glycol ou de glycérine. Il est préférable- d'utiliser la quantité minimale du solvant aqueux ci-dessus capable de dissoudrela cocgboxylase et l'arginine. On exécute la réaction à la température ambiante, ou sous un léger chauffage instantané. Pour séparer et purifier l'arginate de cocarboxylase contenu dans le mélange réactionnel obtenu ci-dessus, on y ajoute, par exemple, de l'alcool et on recueille un précipité qui cristallise en refroidissant. On dissout le précipité dans de l'eau et on ajoute de l'alcool, puis on laisse le mélange reposer dans un endroit frais pour que l'arginate de cocarboxylase se dépose et cristallise. On ne connaît pas en détail la structure chimique de l'arginate de cocarbO- xylase ainsi obtenu, mais il s'agit d'un composé unique dans lequel une mole de cocarboxylase est entrée en réaction avec une mole d'arginine comme il ressort du spectre d'absorption des rayons infra-rouges que montre la Fig. 1 et du spectre d'absorption des rayons ultra-violets de la Fig. 2, composé dont le point de fusion se situe à 110-1200C (décomposition). L'arginate de cocarboxylase obtenu par le procédé selon l'invention est très stable, même en présence d'humidité. La stabilité de l'arginate de cocarboxylase ressort du tableau ci-après qui rapporte les résultats obtenus en dissolvant dans de l'eau de l'arginate de cocarboxylase et de la cocarboxylase en tant que témoin de façon à produire séparément une solution de 25 mg/10 ml, et en laissant cette solution reposer à une température de 370C, de 450C ou de 60 C pendant plusieurs mois. TABLEAU mois (% ayant subsisté) Température ( C) 1 3 4 6 8 12 18 A 0 - - - - - 60 B 98 96 90 - - - A 30 0 - - - - 45 B 100 99 99 98,5 98 96,6 94 A 60 30 2 0 - - 37 B 100 100 100 100 100 99 97 A : Cocarboxylase B : Cocarboxylase arginate L'arginate de cocarboxylase exerce une excellente action pharmaceutique. Notamment, l'action de la cocarboxylase est considérablement renforcée dans l'arginate de cocarboxylase, dont l'activité est approximativement dix fois égale à celle de la vitamine B1 activée. D'excellents résultats cliniques sont obtenus, en particulier, dans les maladies pour lesquelles on ne note pas un effet remarquable à la suite d'un traitement avec la cocarboxylase et avec la vitamine B1 activée, telles que les séquelles de blessures craniennes externes, les chocs en retour, la surdité, l'hépatie aiguë et chronique, les séquelles d'apoplexie et la paralysie postopératoire des intestins. L'exemple qui suit est destiné à illustrer le procédé par lequel le nouveau composé de l'invention peut être préparé. Exemple : On dissout 200 g d'arginine dans 2000 ml d'eau chaude, on ajoute 493 g de cocarboxylase à cette solution et on laisse le mélange réagir pendant 30 minutes. On filtre le mélange réactionnel, on y ajoute 4000 ml d'alcool éthylique, puis on agite le mélange et on le laisse reposer dans un endroit frais. Il se dépose ainsi 630 g de précipité. On dissout ce précipité dans 200 ml d'eau chaude et, après filtration, on y ajoute 4000 ml d'alcool éthylique, puis on laisse le mélange reposer pendant la nuit dans un endroit frais. On obtient ainsi dépôt de cristaux incolores. On recueille ces cristaux par filtration et on les sèche pour obtenir 500 g (avec un rendement de 74,4%) d'arginate de cocarboxylase ayant un point de fusion de 110-1200C (décomposition). REVENDICATIONS 1. A titre de produit industriel nouveau, l'arginate de cocarboxylase. 2. A titre de médicament utilisable notamment dans le traitement des séquelles de blessures craniennes externes, des chocs en retour, de la surdité, de l'hépatite aigus et chronique, des séquelles d'apoplexie et de la paralysie post-opératoire des intestins, l'arginate de cocarboxylase. 3. Procédé de préparation de l'arginate de cocarboxylase caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir une mole de cocarboxylase avec une mole d'arginine ou d'un sel d'arginine.