Brevet FR2070049A1 — publié le 19710910

oV 07838 i 2070049 I*action médicinale des graines de marron drInde et de leurs extraits est due en premier lieu à l'escine qu'ils contiennent. Les extraits totaux de cette substance sont utilisés principalement pour les formes d'administration buccale ; pour 5 l'application parentérale, la substance active isolée offre souvent des avantages décisifs. Il est connu de séparer l'escine d'un extrait de marrons d'Inde par hydrolyse acide modérée. En outre, par le brevet allemand publié n° 1 044 359» il est connu de précipiter 10 des saponites d'extraits de marrons d'Inde au moyen d'hydroxyde de Baryum. On a parlé aussi de préparer les saponines de marron d'Inde sous forme de composés d'addition insoluble sapânine-stérol, à l'aide de cholestérol, par différents procédés (voir brevet suisse n° 410 283 et brevet allemand publié n° 1 045 597)» 15 En outre, par les brevets allemands publiés n° 1 095 989 et 1 125 117, il est connu d'obtenir l'escine à partir d'extraits de marron d'Inde en utilisant des échangeurs d'ions. Bans ces procédés connus, le rendement n'est pas satisfaisant. En outre, un fait frappant et qui complique l'utilisation ultérieure, en 20 particulier pour l'application médicale sous forme de solutions injectables, est que l'escine ainsi isolée est relativement peu soluble dans l'eau. On a trouvé maintenant que l'on peut résoudre de façon surprenante le problème consistant à préparer de l'escine 25 pur hydrosoluble, sans réactions de précipitation ni autres modes opératoires compliqués, lorsque, suivant l'invention, on dissout l'extrait de graines de marrons d'Inde - qui peut être obtenu suivant différents procédés - dans un mélange formé de propanol-n, d'acétate d'éthyle et d'eau à volumes à peu près égaux et qui 30 est saturé à froid de borate de sodium, que l'on met la solution en contact avec de l'alumine acide activée, (absorbant usuel en chromatographie constitué d'alumine traitée à l'acide chlor-hydrique et calcinée, correspondant au degré 1 d'activité), l'on dilue ensuite de façon fractionnée avec toi mélange de propanol, 35 d'acétate d'éthyle et d'eau dans lequel le propanol-n prédomine un peu, le rapport étant de préférence de 4s3:3, que l'on débaras-se de solvant la fraction limpide de produit élué et qu'on lave le résidu avec de l'acétone. Lors de l'élution, on jette la fraction initiale, j 2070049 légèrement colorée en jaune et pratiquement dépourvue d'escine et on retient seulement le produit élue incolore que l*on obtient ensuite» On peut avantageusement éliminer sous vide, avec ménagement, le solvant contenu dans ce produit élué qui contient de l'escine et il reste alors une poudre amorphe légèrement colorée en jaune* Après plusieurs lavages à l'acétone pure, on obtient une escine pure, blanche, présentant une solubilité surprenante dans l'eau et un point de fusion de 218° C. le rapport de mélange entre propanol, acétate d'éthyle et eau exerce une influence sur le pouvoir que possède la solution saturée de borate de sodium de .dissoudre l'extrait sec de marrons d'Inde. Si l'eau est absente ou si l'eau ou l'acétate d'éthyle sont présents en quantité notablement inférieure au propanol, on n'obtient pas une dissolution parfaite de l'extrait» Il se forme alors plutôt deux phases dont l'une présente des propriétés huileuses ou graisseuses de sorte que ces solutions sont inutilisables pour la chromatographie sur alumine» le rapport de mélange est particulièrement important aussi lorsqu'on élue l'escine absorbée sur l'alumine» Ici encore, il faut utiliser un mélange de solvants contenant les trois composants à peu près dans la mteae proportion en volume mais on obtient les meilleurs rendements avec une légère prédominance du propanol-n. Aussi, le rapport doit être de préférence de 3:3:3» On obtient aussi de très bons résultats avec un rapport de 5:4:4» Mais si la proportion de propanol s'élève jusqu'à 6:3:3, lé rendement d'escine pure diminue notablement ou la séparation- des impuretés est moins bonne» On expliquera plus précisément l'invention à propos de l'exemple suivant : On dissout 10 g d'extrait de marrons d'Inde contenant 31$ d'escine dans 50 ml d'un mélange de propanol-n, d'acétate d'éthyle et d'eau en un rapport de 4:3:3 qui est saturé à froid de borate de sodium* On délaie avec la solution 80 g d'alumine aeide activée et on tasse le tout dans une colonne de verre de 600 mm de longueur et environ 62 mm de diamètre dans laquelle on a préalablement introduit 800 g de la même alumine, de manière à ne pas obtenir de cavités» Ibsuite, on élue avec 2,5 litres du 69 07838 -3- 2070049 même mélange de propanol-n, d'acétate d'éthyle et d'eau, en vin rapport de 3:3:3» Les 200 ml initiaux du produit élue sont légèrement colorés en jaune, pratiquement dépourvus d'escine et on les jette» le produit éLué que l,on obtient ensuite ne contient d'escine que 5 jusqu'à un volume de 1,8 litre» On amène à siccité sous vâde à 30°0 cette fraction dé 1,8 litre, dans des conditions modérées» Il reste une poudre légèrement jaune; on la lave plusieurs fois à 1' acétone et ensuite, on la sèche à l'air» Selon cet exemple, on obtient 1,0 g d'escine 10 blanche amorphe hydrosoluble qui a un point de fusion de 218° C. Cette eseine pure est pratiquement insoluble dans l'éther, l'acétone et les hydrocarbures chlorés; elle est soluble non seulement dans l'eau mais encore dans les alcools inférieurs tandis qu'elle est difficilement soluble dans les alcools supérieurs» 15 Le rendement est de 32,2$. 69 07838 2070049 BÏTÏJICilIOS Procédé d'obtention d'escine hydrosoluble à partir de graines de marrons d'Inde et d'extraits de celle-ci, par àb-5 sorption chromatographique et élution, caractérisé par le fait que l'on dissout un extrait sec de marrons d'Inde dans un mélange de propanol-n, d'acétate d'éthyle et d'eau à volumes à peu près égaux, saturé à froid de borate de sodium, que l'on met la solution en contact avec de l'alumine acide activée et qu'ensui-10 te on effectue une élution fractionnée à l'aide d'un mélange de t propanol-n, d'acétate d'éthyle et d'eau dans lequel le propanol-n prédomine un peu, le rapport étant de préférence de 4 :3ï3, qu'on débarrasse de solvant la fraction limpide du produit élu.é et qu'on lave le résidu à l'acétonec