Brevet FR2092601A1 — publié le 19720128

La présente invention se rapporte à un milieu de consistance semi-solide -gel élastique- qui permet la conservation prolongée (de 6 à 12 mois) de l'os, du cartilage articulaire, des tendons et de la peau, tout en leur gardant leurs qualités, permettant ainsi leur bonne incorporation dans l'organisme humain. La technique de conservation des tissus comprend plusieurs procédés: 1 - La conservation par le froid dit "réfrigération", d'abord à -70" C, puis à -25 C, procédé qui permet la conservation des homo- et des hétérotransplants dans de bonnes conditions pendant quelques mois. te procédé nécessite une installation coûteuse de réfrigération rapide jusqu'à -70" C, ainsi que des réfrigérateurs pour la conservation à température constante entre -20 et -25" C. Dans la littérature, on ne trouve pas de donnée sur la conservation de la structure normale des cellules de la moëlle osseuse. Le temps de l'incorporation des transplants est de deux à trois fois plus long que celui des transplants. frais. 2 - La lyophilisation, procédé qui consiste à nettoyer, dégraisser et congeler rapidement soit dans des réfrigérateurs à -780 C, soit par immersion dans l'air liquide, en fermant les flacons sous vide, toutes les opérations étant rigoureusement aseptiques. L'inconvénient de cette méthode réside dans le fait qu'elle nécessite des appareils très compliqués et coauteur, de manipulation laborieuse, qui ne sont pas à la portée de toutes les banques de tissus conservés. Le tissu osseux conservé perd une grande partie de ses qualités et garde seulement sa structure de base. 3 - La conservation en milieux liquides (cyalite, béta-propiolactone) des transplants osseux, du cartilage articulaire, des tendons et des nerfs, après prélèvement, dans des solutions dosées oe 1/5000 et 1/10. l/lo.oOOjantiseptiques, remplacées d'abord tous les 15 jours, puis mensuellement. L'inconvénient de ce procédé réside dans le fait que le milieu liquide pose des problèmes de manipulation difficiles pour remplacer les solutions, ainsi que des problèmes de transport, tandis que la solution n'est pas inerte vis-à-vis de l'organisme humain, car elle garde un certain degré de toxicité. Les tissus mous s'altèrent et deviennent floconneux. Les solutions de conservation sont instables,ce qui oblige à les remplacer périodiquement. La présente invention n'a pas les inconvénients des procédés connus pour la conservation des tissus, et a de plus des qualités qui permettent aux tissus conservés une bonne intégration dans l'organisme humain: le milieu solide, gel élastique, est formé par un mélange de gélatine hydratée entre 15 et25 partiesvde glycérine de 3 à 7 partiespde miel polyflore quantum satis ad loe parties, de chlorure de déqualinium ou de chlorure de benzalkonium à raison de 1/5000 à 1/10000. Un exemple d'application de l'invention est donné ci-après 20 g de gélatine sont hydratés pendent 12 h avec de l'eau distillée dans laquelle on a solubilisé du chlorure de déqualinium ou du chlorure de benzalkonium à 1/5000; on fluidifie au bain-marie, on ajoute 5 g de glycérine et on stérilise le mélange dans l'autoclave pendant 30 mn à 1200 C; d'autre part, on chauffe au bain-marie 75 g de miel polyflore jusqutà +450 C, on mélange avec la gélatine hydratée glycérinée, cette dernière amenée également à la température de + 450 C; on homogénéise.Le milieu ainsi obtenu est stérile, de consistance gélatineuHe élastique; lors de l'incorporation des tissus et des organes soumis à la conservation, on fluidifie à +400 C Les colorations hystologiques de la moëlle osseuse prouvent sa conservation dans de bonnes conditions, mise en évidence par son aspect voisin de celui de la moelle fraîche. L'invention offre les avantages suivants 1 - Le milieu permet la conservation de certains organes et tissus à +4"C pendant très longtemps, sans nécessiter le remplacement des solutions ou d'autres manipulations supplémentaires. I1 maintient les tissus et les organes conservés, qualités qui permettent une bonne incorporation dans l'organisme humain récepteur. 2 - Les transplants osseux ainsi conservés peuvent s'intégrer dans l'or- ganisme, se comportant de la même façon que les homotransplants frais. 3 - Le procédé ne nécessite pas d'appareils coûteux; la technique de préparation est très simple, le milieu est facilement réalisable dans n'importe quel laboratoire pharmaceutique. 4 - Le procédé permet le transport des tissus et des organes conservés pendant environ 12 h à la température du milieu ambiant. 5 - Le milieu n'est pas nocif pour l'organisme récepteur dans lequel il peut être métabolisé. REVENDICATIONS 1.- Milieu pour la conservation de certains tissus et organes, caractérisé en ce qu'il est formé, afin de garder les qualités des tissus et des organes conservés et par là même de permettre leur bonne incorporation dans l'organis- me récepteur, d'un mélange de gélatine hydratée entre 15 à 25 parties,de glycérine entre 3 et 7 parties, de miel polyflore quantum satis ad 100 parties, de chlorure de déqualinium ou de chlorure de beazalkonium à raison de 1/5000 à 1/10000. 2.- Procédé de fabrication du milieu pour la conservation de certains tissus et organes, selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on hydrate la gélatine pendant 6 à 14 h avec une solution antiseptique, et fluidifie la gélatine hydratée au bain-marie, après quoi l'on ajoute la quantité nécessaire de glycérine, stérilise selon les procédés courants, amène-la température à 40 - 50 C et finalement ajoute la quantité de miel polyflore amené également à la température de 40-50 C, puis homogénéise le mélange obtenu.