Brevet FR2070051A1 — publié le 19710910

L'invention concerne la préparation d'hydroxy-4-p-D-ribofura- nosyl-1-pyrazolo-pyrimidine [3,4-d] par traitement à chaud d'un dérivé pyrophosphate. On trouve l'hydroxy-4-ss-D-ribofuranosyl-1-pyrazolo-pyrimidine [3,4-d] (appelé plus loin ribosyl-1-allopurinol) dans l'urine de patients auxquels on a administré de l'hydroxy-4-pyrazolo- pyrimidine [3,4-d] (appelé allopurinol). L'allopurinol sert à inhiber la xanthinéoxidase et est utile comme médicament pour le traitement de la goutte. Le dérivé ribosyle de l'allopurinol est le ribosyl-1-allopurinol; il présente des propriétés curatives similaires à celles de l'allopurinol. Le ribosyl-1-allopurinol est soluble dans l'eau et l'on pense qu'il est moins toxique que l'allopurinol. Le ribosyl-1-allopurinol peut Qtre préparé à partir de la purine nucléoside phosphorylase ("J. of Bio. Chem. 242, 2675-2682 (1967)"). Cependant cette méthode de pré parationn'est pas intéressante industriellement. L'hydroxy-4- pyrazolo-pyrimidine [3,4-d]-ss-D-ribofuranoside-1-pyrophosphate -5', (c'est-à-dire l'allopurinol-ss-D-ribofuranoside-1-pyrophosphate-5', appelé allopurinolribotide) peut être préparé par fermentation (brevet Japonais n 58.638/66). L'invention a pour obJet de fournir un procédé de préparation du ribosyl-1-allopurinol, qui est plus simple et meilleur marché que les méthodes antérieures. Selon cette invention, on prépare le ribosyl-1-allopurinol par déphosphorylation d'allopurinolribotide. Ce zen dernier composé est de préférence préparé pour cette invention, par le procédé de fermentation décrit dans le brevet déåà mentionné; mais on peut se servir de toutes autres métnodes classiques. Selon cette invention, la déphosphorylation de l'allopurinolribotide est effectuée en milieu aqueux à une température qui ne dépasse pas 1800C environ. On obtient une température convenable en effectuant la déphosphorylation sous reflux. L'allopurinolribotide peut être mise en oeuvre soit sous sa forme libre, soit sous sa forme de sel (par exemple de sodium, d'ammonium etc..) l'allopurinolribotide est chauffée selon l'invention, dans un milieu aqueux. Cette réaction peut être conduite en chauffant le composé sous reflux ou et le chauffant à moins de 1800C sous pression élevée. La température de chauffage se situe de préfé- rence entre environ 70 et 1800 et mieux entre 120 et 1400C. Il est souhaitable d'ajuster le pH du milieu aqueux de ltaliopurinol- ribotide à environ 4,0 - 9,0.Ce pH peut être ajusté par exemple à l'aide d'acides minéraux comme les acides chlorhydrique, sulfurique, phosphorique, etc, des bases minérales telles que la soude, la potasse, etc; des acides organiques comme l'acide foi mique, etc, ou des bases organique30 Le produit ribosylallopuri- nol peut être purifié de façon classique, par exemple, par passage sur une résine échangeuse d'ions. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description détaillée qui va suivre de quelques exemples non limitatifs de modes de réalisation suivant l'invention. Exemple n On prépare sept échantillons de solutions aqueuses d'allopurinolribotide; on ajuste leur pH avant réaction aux valeurs données dans le tableau, à l'aide d'acide chlorhydrique, soude ou solution à 10% de tampon "tris". Chacun des échantillons renferme 4,5 mg/ml d'allopurinolribotide. On les chauffe chacun à 140 C dans un tube scellé pendant des durées indiquées dans le Tableau. On refroidit ensuite les echantillons et détermine leur pH, ainsi que les quantités de ribosyl-1-allopurinol, allopurinolribotide et allopurinol présentes dans chacun des essais. On ajuste ensuite le pH de chaque solution à 8,5 et les fait passer dans une colonne de résine garnie de "Dowex 1x8" (résine échangeuse d'anions fortement basique du type styrène (vendue par "Dow Chemical Company, U.S.A.") sous sa forme acide.Après élution avec de l'acide formique 0,1N, le produit élué est concentré à seg sous pression réduite; -l'on obtient du ribosyl-1-allo purinol purifié. TABLEAU Echantillon pH avant pH après Durée de Allopurinol- Ribosyl-1- Allopurinol réaction réaction réaction (h) ribotide allopurinol (mg/ml) (mg/ml) (mg/ml) 1 2,0 2,0 6 0 0,05 0 2 4,2 5,0 6 0 3,27 0 3 5,0 5,0 6 0 3,19 0 4 6,0 5,0 6 0 3,08 0 5 7,0 5,8 6 0 3,03 0 6 9,0 6,8 6 0 3,00 0 7 8,27 8,9 4 0 3,08 0 D'après le tableau, on constate que presque tout l'allopuri- nolribotide est transformé en ribosyl-1-allopurinol, lorsque le pH de la solution aqueuse avant réaction est de 4,0 ou plus et est en particulier compris entre 4,0 et 9,0. Cependant, lorsque le pH de la solution aqueuse est 2,0 avant réaction, I'allopurinol est produit comme produit secondaire avec le ribosyl-1-allopurinol. Exemple 2 On prépare une solution aqueuse d'acide formique contenant 15 millimoles d'allopurinolribotide; le pH de la solution est rajusté à 5,0. On chauffe alors la solution sous reflux à 1000C pendant 20 heures. Après réaction, le mélange contient 5,4 millimoles de ribosyl-1-allopurinol. auprès réaction, on traite la so-lution de la façon décrite dans l'exemple 1. Bien entendu, l'invention n'est nullement limitée aux exemples décrits, elle est susceptible de nombreuses variantes accessibles à l'homme de l'art, suivant les applications envisagées et sans qu'on s'écarte pour cela du cadre ae l'invention. - REVENDICATIONS 1 - Procédé de préparation d'hydroxy-4-ss-D-ribofuranosyl-1- pyrazolo-pyrimidine [3,4-d] consistant-à chauffer de l'hydroxy4-pyrazolo-pyrimidine [3,4-d]-ss-D-ribofuranoside-1-pyrophosphate-5' en solution aqueuse, à une température inférieure ou égale à 180 C environ, puis à recueillir le produit formé 2 - Procédé suivant la revendication 1, dans lequel on opère à une température comprise entre 70 et 1800C environ. 3 - Procédé suivant la revendication 2,-dans lequel la température est comprise entre 120 et 140 C environ. 4 - Procédé selon les revendications 1 à 3 où le chauffage est effectué sous reflux. 5 - Procédé selon les revendications 1 à 3 où le chauffage est effectué sous pression élevée. 6 - Procédé suivant les revendications 1 à 5 où le pH du milieu aqueux est compris entre 4,0 et 9,Qénviron. 7 - Procédé suivant les revendications 1 à 6 où l'hydroxy-4- pyrazolo-pyrimidine [3,4-d]-ss-D-ribofuranoside-1-pyrophosphate-5' est mis en oeuvre sous forme de son sel de sodium. 8 - Procédé suivant les revendications 1 à 6 ou lthydroxy-4- pyrazolo-pyrimidine [3,4-d]-ss-D-ribofuranoside-1-pyrophosphate-5' est mis en oeuvre sous forme de son sel d'ammonium. 9 - Hydroxy-4-ss-D-ribofuranosyl-1-pyrazolo-pyrimidine [3,4d 7 préparé suivant un procédé tel que décrit dans les revendications 1 à 8.