Brevet FR2092726A1 — publié le 19720128

L'invention - -our objet de nouveaux dérivés polycycliques de l'indicie et leur - sels d'addition avec les acides non toxiques et pharmaceutiquement acceptables. Elle a eoalement pour objet ce nouveaux médicaments dont la ubstanec active est constituée de dérivés polycyoliques de l'indole. Les nouveaux dérivés seion l'invention sont constitués par la à-14 vincine, la @-14 4pi-16 vincine, et l'épi-16 vincine, dont les formules scnt respuctivement les suivantes étant entendu que la numérotaticn des atomes dans les cycles de ces formules correspond à la nomenclature adoptée par J. Le Men et W.l. Taylor, Experientia, 21, 5C8 (1965). L'invention vise également ~'application de la t-14 vincine, la t-14 épi-16 vincine, la vincine et l'épi-16 vincine, à la fabrication de médicaments présentant, notamment, des propriétés vaso-régulatrices au niveau cérébral. La vincine de formule a sera été décrite, en tant que produit chimique, par exemple, per d. Trojanek et al, Chem. Comm. 26, 867 (1961). L'invention vise enfin un procédé d'obtention de ces alcalol- des, caractérisé par ] 'extraction dans un solvart organique de la totalité des alcaloides, sous ieur forme basique, des feuilles d'une plante du genre Apocynacée Craspidospermum verticillAtl.m Boj. ex DC, ces alcaloldes pouvant alors être récupérés sous la forme d'un résidu solide, notamment par évaporation à sec de la phase organique, puis - pour obtenir la A-14 vincine (composé 1) - par la recristallisation du résidu obtenu dans l'alcool, et - pour obtenir l'épimère de la t-14 vincine, c'est-à-dire la t-14 épi-16 vincine (composé 2) - par chromatographie sur colonne d'alumine des eaux-mères de recristallisation de la #-14 vincine et - pour obtenir la vincine (composé 3) ou l'épi-16 vincine (composé 4) - par l'hydrogénation catalytique, selon le cas, de la t-14 vincine ou de la A-14 épi-16 vincine. La susdite extraction sera avantageusement appliquée à la plante Apocynacée Craspidospermum qui a été décrite par C. Kan Fan, B.C. Das, P. Potier, J. Le Men et P. Boiteau, Ann. Pharma. Fr., 1968, 26, 577. Pour réaliser cette extraction, on aura avantageusement recours à une alcalinisation des feuilles séchées et broyées de la plante susdite, notamment à l'ammoniaque, puis à un traitement de lixiviation de ces feuilles alcalinisées par un solvant chloré, tel que le chlorure de méthylène, le chloroforme, le trichloréthymène, etc. et, enfin, à une évaporation à sec de la solution obtenue pour obtenir les susdits alcaloldes. On obtiendra cependant les alcaloldes dans un état de pureté plus grand en reprenant au préalable la solution organique, le cas échéant après concentration, par une solution acide, notamment d'acide sulfurique, la solution aqueuse obtenue étant soumise à nouveau au cycle d'extraction précité par le solvant-chloré. L'invention consiste, mises à part les susdites dispositions, en certaines autres dispositions qui s'utilisent de préférence en même temps et dont il sera plus explicitement question ci-apres. Et elle pourra de toute façon être bien comprise à l'aide du complément de description et des exemples qui suivent ainsi que des dessins annexés dont les figures 1, 2, 3, 4 et 5 représentent les spectres d'absorption en infra-rouge des dérivés conformes à l'invention pris dans le nujol, et la figure 6 donne des courbes représentatives de la variation de certains facteurs physiologiques chez des animaux d'expérience préalablement traités avec l'une des substances selon l'invention. Se proposant d'isoler les quatre alcaloïdes décrits plus haut, à partir des feuilles de l'Apocynacée Craspidospermum verticillatum, Boj. ex DC, identifiée plus haut, on opérera avantageusement comme suit. Exemple 1 Extraction des alcaloïdes des feuilles de Craspidospermum verticillatum. 39 kg de feuilles de cette plante, séchées et broyées, sont alcalinisées par 15,6 litres drune solution à 25 % d'ammoniaque (d = C,92). L'extraction est effectuée dans un appareil du type "Turboextracteur" de 350 litres (du type de ceux fabriquéspar la maison Tournaine à Grasse), par 668 litres de chlorure de méthylène, en sept fois, et durant 30 minutes à chaque fois. Les solutions chlorométhyléniques sont concentrées à 90 litres par distillation sous pression réduite et extraites, par sept fois 20 litres,d'une solution aqueuse d'acide sulfurique à 2 =0 en volume. Les solutions acides, rassemblées, (140 litres) sont alcalinisées par une solution d'ammoniaque à 2C % (15 litres) et extraites par successivement 30 1., 15 1., 15 1., 15 1. et cinq fois 10 1., soit 125 litres au total de chlorure de méthylène. Après lavage par 20 1., puis 10 1. d'eau des phases chlorométhyléniques, le solvant organique est distillé sous vide. Le résidu obtenu (218 g) comprend la totalité des alcaloïdes initialement contenus dans les feuilles. Exemple 2 Obtention de la #-14 vincine (composé 1). les 218 o d'alcaloïdes obtenus dans l'exemple 1 sont repris par C,5 litre 'd'éthanol chaud. La solution est laissée au repos 14 heures. Cn obtient alors, par cristallisation spontanée, 8 g de cristaux. Par concentrations successives des eaux-mères, on obtient un second jet de erisballisation de 2,20 g de cristaux, puis un troisième jet de C,8 g. On obtient donc, au tctal, Il g de produit qui est constitué par la 8-14 vircine pure, ce qui représente C,28 g de la A-14 vincine par kg de matière végétale utilisée. La t-14 vincine est caractérisée par les constantes physiques suivantes PF : 211 C (après recristallisation dans l'acétone), d20 C = + 70 (à une concentration de 1 g pour 100 cm de chloroforme). Le spectre d'absorption infra-rouge (spectre I.R.) carac téristique de la #-14 vincine est représenté dans la fig. 1 dans laquelle on a reporté en abscisse, soit la longueur d'onde en microns ( ) soit le nombre d'onde en cm-1, et en ordonnée l'absorbance (log du rapport de l'intensité du rayonnement émergeant sur l'échantillon testé à l'intensité du rayonnement incidant). Exemple 3 Obtention de la t-14 épi-16 vincine (composé 2). La t-14 épi-16 vincine est obtenue par chromatographie des eaux-mères de cristallisation de la -14 vincine sur une colonne d'alumine. Pour réaliser la séparation du susdit dérivé on utilise, en particulier, l'alumine connue sous la désignation commerciale "alumine Merck d'activité (I-III)" en quantités égales à 20 fois le poids des eaux-mères de cristallisation. Par élution au chloroforme, on isole 6 g de la t-14 épi-16 vincine à l'état amor phe. Par dissolution dans le méthanol, puis par addition de quelques gouttes d'acide chlorhydrique concentré, on obtient le produit cristallisé sous la forme de son chlorhydrate dont les caractéristiques physiques sont les suivantes PF : 2500C -200C @@@@@@ 100 cm d'eau). La fig. 2 donne le spectre I.R. caractéristique du chlorhydrate de la #-14 épi-16 vincine, et la fig. 3 celui de la Q-14 épi-16 vincine base. Exemple 4 Fabrication de la vincine (composé 3). Ce dérivé est obtenu par hydrogénation catalytique de la t-14 vincine selon le procédé décrit ci-après. 200 mg de la t-14 vincine sont dissous dans 10 ml d'éthanol. On ajoute sous agitaticn en atmosphère d'hydrogène 20 mg de charbon palladié à 10 % ou d'oxyde de platine. Après 4 h. le catalyseur est filtré, la solution alcoolique distillée sous vide. On obtient 200 mg d'un résidu dont les caractéristiques physiques sont les suivantes PF = 2270C 20 C - 8 (à une concentration de 1 9 pour 100 cm de chlorioforme). La fig. 4 donne le spectre I.R. caractéristique de la vincine. Exemple 5 Obtention de l'épi-16 vincine (composé 4). Le procédé ce l'exemple 4 est répété de façon identique, mals appliqué cette fois à 200 mg de #-14 4pi-16 vincine. Le résidu cheteu (295 mg est alors traité par une solution ethanolique d'acide tartrique N c @ afin d'obtenir une valeur de pH de 4,5 environ. Le solvant est évaporé scus vide. Le tartrate obtenu est recristallisé dans l'éthanol. Ce dérivé présente les caractéristiques physiques suivantes FF = 2600C (éthanol) 20 C = -50 (à une concentration de 1 g pour 100 cm d'eau). Le spectre I.R. caractéristique de tartrate de l'épi-16 vincine est représenté dans la fig. 5. La #-14 vincine, la vincine et leurs épimères, présentent des propriétés thérapeutiques, notamment vaso-régulatrices au niveau cérébral, de grand intérêt, comme il résulte, notamment, des expérimentations pharmacologiques qui ont été réalisées sur le chien à l'aide de ces substances. Cn a ains été amené à observer une action de ces composés, administrés par voie intraveineuse, sur la circulation cérébrale, notamment sur les variations simultanées du débit de l'artère vertébrale, donc de l'apport de sang au cerveau, et de la pression veineuse maxillaire interne, qui traduit les modifications de la circulation cérébrale ; ces variations ont été mlses en évidence, au moyen d'un capteur électromagnétique, selon la méthode décrite dans les Annales de l'üniversité et de l'A.R.E.R.S., 196, T.7., pages 120-124, par M. Dupcnt, H. Eyraud, G. Albert et M.C. Lévy Appert-Collin. p la ose de 5 mq/kg, la 3-14 vincine (composé 1) augmente de manière importante le débit sanquln pendant 5 minutes. L'action, pi-s durable, de cette substance a la dose de 10 mg/ kp est illustrée par les courbes de la fig. 6. La courhe 1 est représentative de la variation du débit exprimée en 6 (axe des ordonnées, de l'artère vertébrale, et la courbe 11 de celle de la pression veinense maxillaire interne, en fonction du temps exprimé en minutes (axe des abscisses. Ces ceux courbes traduisent donc une amélioration notable de l'irrigation sanguine du cerveau, qui se maintient au-delà de 3C minutes. La t-14 épi-16 vincine (composé 2), à la dose de Z mg/kg produit également une augmentation notaple du débit cérébral. cours des 2 à 5 minutes qui suivent l'injection. observe sensiblement les mêmes phénomnes, bien qu'a un degré moindre, p.ur la vincine (composé 3) et pour l'épi-16 vincine (composé 4i administrées au chien à des aloses de 10 mg/kg. On a observé, en particulier pour les composés 1, 3 et 4 qu'ils restaient pratiquement sans action sur la pression artériel- le. Tout au plus observe-t-on au momen-t de l'inJection pour les composés 1 et 4, une diminution légère et fugace suivie d'un retour rapide à la normale. Ces produits se caractérisent, par ailleurs, par une toxicité très faible. La DL 50 par voie intra-veineuse sur la souris s'est révélée être de 120 mg/kg pour la t-14 vincine 95 mg/kg pour la -14 épi-16 vincine 180 mg/kg pour la vincine, et de l'ordre de 100 mg/kg pour l'épi-16 vincine. Ces substances sont donc de nature à être administrées à l'homme par voies intraveineuse et/ou orale, à des doses unitaires d'environ 5 à environ 10 mg/kg du corps humain. Elles doivent pouvoir être administrées sous les formes utilisées couramment pour les médicaments notamment vaso-régulateurs au niveau cérébral, tels par exemple que la vincamine. Comme il va de soi, et comme il résulte d'ailleurs déjà de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes d'application, non plus qu'à ceux des modes de réalisation de ses diverses parties, ayant été plus spécialement indiqués ; elle en embrasse au ccntraire toutes les variantes. REVENDICATIONS 1. A titre de produits industriels nouveaux, laiN-l4 vincine, lai-14 épi-16 vincine et l'épi-16 vincine, de formule respectivement 2. A titre de médicament, la L -14 vincine de formule utilisable pour le traitement des maladies humaines ou vétérinaires, notamment pour la vaso-régulation au niveau cérébral. 3. A titre de médicament, la#-14 épi-16 vincine ae formule utilisable pour le traiement des mal@dies humaines ou vétérinaires, notamment pour la vaso-régulation au niveau cérébral. 4. A titre de médicament, la vincine de formule au traitement de maladies humaines ou vétérinaires, notamment a la vaso-régulation au niveau cérébral. 5. A titre de médicament, la n-14 épi-16 vincine de formule au traitement de maladies humaines ou vétérinaires, notamment à la vaso-régulation au niveau cérébral. 6. Procédé de préparation de nouveaux dérivés polycycliques de l'indole, caractérisé par l'extraction dans un solvant organique de la totalité des alcaloïdes sous leur forme basique, des feuilles d'une plante du genre Apocynacée Craspidospermum verticillatum, Boj. ex DC, la récupération de ces alcaloïdes hors de la phase organique sous la forme d'un résidu solide et le traitement du résidu à l'alcool pour en extraire de la#-14-vincine et la n -14 épi-16 vincine. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé par la concentration de la phase alcoolique pour récupérer la quasi totalité de la-14 vincine sous forme de cristaux. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé par l'étape supplémentaire que constitue la chromatographie sur alumine de la solution de recristallisation de la#-14 vincine, pour obtenir la A -14 épi-16 vincine. 9. Procédé selon la revendication 7,caractérisé par l'étape supplémentaire que constitue l'hydrogénation catalytique de la t -14 vincine pour obtenir la vincine. 10. Procédé selon la revendication 8, comprenant l'étape supplémentaire que constitue l'hydrogénation catalytique de la -14 épi-16 vincine pour obtenir l'épi-16 vincine. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 10, caractérisé par le fait que ltextraction de la totalité des alcaloïdes est réalisée par alcalinisaticn des feuilles séchées et broyées de la susdite plante à l'ammoniaque, par un traitement de lixiviation de ces feuilles alcalinisées par un solvant chloré et par une concentration de la solution organique. 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé par la reprise de la phase organique par une solution acide, par la réalcalinisation de la phase aqueuse, par l'extraction de cette phase aqueuse par le susdit solvant chloré et, enfin, par évaporation à sec de la phase organique.