Brevet FR2073263A1 — publié le 19711001

L'objet de l'invention concerne à titre de nouveau médicament un facteur anti scléreux vasculaire destiné à prévenir et à traiter l'artério sclérose I1 a été constaté jusqu'à ce jour que l'épaississement de la tunique des artères- avec durcissement de leur paroi et tendance ê leur oblitération ne se produisait pas dans les veines qui ne présentaient pas d'imprégnation de dépôts de cholestérol , de sels calcaires et autre , et conservaient ainsi leur élasticité et leur absence de durcissement . Seules les artères par ces phénomènes provoquaient des troubles consécutifs de l'hypertension vasculaire à savoir les vertiges , hémiplégie , néphrite interstitielle , myocardie chronique , etc.. Le remède suivant l'invention permet d'assurer le traitement des artères contre î'athéroscle'ose, et également des maladies en étant la conséquence I1 se caractérise par le dégagement et la découverte du du facteur anti scléreux contenu dans les tuniques moyennes et externes des veines et par les moyens mis en oeuvre pour permettre l'extraction de ce facteur actif afin de l'utiliser par injection ou autre pour le traitement de l'artério sclérose Suivant un mode opératoire utilisé pour l'obtention de ce facteur actif et donné b titre d'exemple non limitatif d'une des formes de réalisation de l'objet de l'invention on isole ce facteur anti scléreux par précipitation Sac tionnée présentant les caractéristiques d'un enzyme particulièrement actif sur les lipides et en particulier sur le métabolisme du cholestérol. Les veines animales , mais pouvant être de provenance diverses sont perfusées avec une solution de sérum physiologique pour éliminer toutes traces de sang. Elles sont ensuite dégraissées par quatre volumes d'acétone , puis broyées à haute vitesse pendant un temps bref jusqu'à l'obtention d'un fractionnement total. Ce produit du broyage est filtré sur un filtre Büchner et'le résidu est extrait à nouveau avec des mélanges d'acétone et d'ether La poudre ainsi obtenue est mise à sécher sous vide et après dessiccation est stockée à- 200 au congélateur Ce produit est repris , et le traitement se poursuit par un double fractionnement au sulfate d'ammonuum. La poudre est mise préalablement en suspension dans l'eau distillée , agitée pendant un quart d'heure et centrifugée à I0.000 tours minute Lé pH du surnagement recueilli est ajusté entre pH 7 , et pH 7,2 avec de la soude normale . On ajoute du sulfate d'ammonium à raison de 209 milligrammes par litre, soit avec une conventration de 0,35 S .Le mélange est ensuite agité pendant 30 minutes et centrifugé à I0.000 tours minute / Au surnagement recueilli on ajoute du sulfate d'ammonium pour obtenir une conceutration de 0,605, soit 164 grammes par litre On agite pendant une demi-heure , et on centrifuge à haute vitesse la solution ainsi réalisée . Le précipité est dissous dans du tampon Tri H.C.L. 0,05 M , pH 7,25. le surnagement est mis à dyaliser huit heures environ contre de l'eau dé sionisée à une température de + 40 C, puis lyophilisé La substance ainsi obtenue constitue le facteur anti scléreux vasculaire destiné à prévenir et traiter l'artério- sclérose par injections sous-cutanées L'éxpérimentation a montré que les sujets ( lapins et rats) soumis à un régime athérogène meurent dans les deux à trois mois avec des lésions histologiques d'artério-sclérose . Par contre les animaux traités par le facteur anti scléreux veineux et soumis au meme régime restent indemnes d'a rtério-sclérose L'expérimentation clinique confirme que les mêmes phénomènes se produisent chez l'homme , à savoir qu'il existe bien dans la paroi veineuse une substance qui empêche l'arSbio -sclérose artérielle , et que ce facteur isolé injecté , agit sur les tuniques abtérielles , étant précisé que l'injection s'effectue par I cm3 ou 2 cm3 avec support approprié pour la diffusion , l'assimilation du produit médicamenteux REVEN1CÂTI0NS IO) Remède destiné à prévenir et à traiter l'artério-sclérose se caractérisant par la découverte et l'extraction du facteur anti scléreux se trouvant dans les tantques moyennes et externes de la veine , et son isolation par précipitation fractionnée permettant d'obtenir un produit médicamenteux présentant les carac téristiques biochimiques d'un enzyme particulkèrement actif sur les lipides et en particulier sur le métabolisme du cholestérol. 20) Procédé suivant la revendic ation I se caractérisanr par l'extraction du facteur anti scléreux au moyen d'une perfu sion des veines animaley6u autres aec une solution de sérum physiologiqUE pour leur enlever toute trace de sang !' opérer leur dégraissement par quatre volumes d'acétone ; un broyage est ensuite opéré à haute vitesse , et le produit est filtré avant d'extraire le résidu par mélange d'acétone et d 'éther , la solulion obtenue étant soumise à une dessiccation sous vide et s tockée à -200 au congélateur 30) Procédé suivant la revendication I se caractérisant par le fait que le produit saché est soumis à une seconde étape comportant un dable fractionnement au sulfate d'ammonium , la poudre étant mise préalablement en suspension dans de l'eau distillée , agitée pendant un quart d'heure et centrifugée à I0.000 tours minute , alors que le pH du surnagement recueilli est ajusté entre pH 7 , et Ph 7,2 par de la soude normale ; le sulfate d'ammonium est ajouté à raisonde 29 milligrammes par litre, soit une conuentration de 0,35 S , le mélange est alors agité pendant 30 minutes et centrifugé à I0.000 tours minute ; au surnagement recueilli on ajoute du sulfate d'ammonium pour obtenir une concentration de 0,605 , soit I64 Grammes par litre , on agite pendant une demi heure , et on centrifuge à haute vitesse , le précipité est dissous dans du tampon Tri H.C.L. , 0,05 M, pH 7,25 , le surn agement est mis à dyaliser toute la nuit contre de l'eau désionisée à une température de + 4+ C , puis lyophilisé pour être prêt à l'emploi