Brevet FR2081585A1 — publié le 19711210

La présente invention concerne des dérivés du benzofuranne et des médicaments à base de drivés du benzofuranne. Elle a pour but, notamment, de procurer de nouveaux médicaments agissant contre les micro-organismes et les parasites, Elle se rapporte, en pre,nier lieu, à des composés nouveaux répondant à la formule dans laquelle R1 désigne un atome d'hydrogène ou un alcoyle et chacun des symboles R2 et R5, individuellement, représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène ou un alcoyle, à 11 exclusion de la signification R = R = R3 = H, chacun des alcoyles ayant 1 à 6 atomes de carbone, en chaîne droite ou ramifiée. L'invention comprend plus particulierement le nitro-2 triméthyl-3,5,6 benzofuranne, le nitro-2 méthyl-3 chloro-6 benzofuranne et le nitro-2 chloro-5 diméthyl-3,ó benzofuranne. On peut, selon l'invention, préparer ces composés par nitration directe des composés correspondants au moyen d'acide nitrique concentré dans de l'acide acétique. Les exemples suivants, dans lesquels les températures sont en degrés centigrades, illustrent la préparation des nouveaux composés. EXEMPLE 1 a) (Acétyl-2 diméthyl-4,5 phénoxy) acétate dséthyle. On maintient à l'ébullition, pendant 58 heures, un mélange d'acétyl-6 xylénol-1,3,4 (620 g), de chloracétate d'éthyle (550 g) et de carbonate de potassium (550 g) dans de l'acétone (2 litres). On distille sous une pression de 9 mm de mercure. A 2010, on recueille lester cherché (785 g soit un rendement de 85, par rapport au xylénol) ; dans le cyclohexane, il forme des aiguilles incolores fondant à 860. Analyse pour Cl H1O4 Calculé C = 67,20 H = 7,20 Trouvé C = 66,87 H = 7,18 b) Acide (acétyl-2 diméthyl-4,5 phénoxy) acétique. Après chauffage de l'ester a pendant 1 heure à l'ébullition dens une solution hydroalcoolique de soude, on obtient l'acide correspondant qui, dans l'éthanol, forme des paillettes incolores fondant à 189 Analyse pour C12H14O4 Calculé ;- C = 64,92 H = 6,36 Trouvé . C = 65,15 H = 6,08 c) Triméthyl-3,5,6 benzofuranne. On maintient pendant 3 heures au bain d'huile à 1700 un nélange de l'acide b (600 g), d'acétate de sodium sec (*50 g) et d'anhydride acétique (1700 g). On verse ensuite le mélange dans de l'eau, on effectue une extraction avec du benzène, on lave à la soude diluée et l'on distille. Sous une pression de 10 mm de mercure, on recueille à 1130 du trimethyl-3,5,6 benzofuranne (336 g soit un rendement de 78%) ; dans l'éther de pétrole, il donne-des prismes incolores fondant à 410. Analyse pour C11H12O Calculé @ C = 82,57 H = 7,56 Trouvé C = 82,23 H = 7,44 d) Triméthyl-3,5,6 nitro-2 benzofuranne (numéro de code R 4906) A une solution du triméthyl benzofuranne c dans 10 fois son poids d'acide acétique pur, on ajoute de l'acide nitrique de densité 1,49, à raison d'un ml par gramme de ce composé c, en maintenant la température à 200. On abandonne le mélange pendant 15 minutes, on verse dans de l'eau, pn extrait au benzène, on lave soigneusement la phase organique avec de l'eau puis avec de la soude normale et, de nouveau, avec de l'eau et on évapore le benzène.On fait recristalliser le résidu dans de l'éthanol. Le triméthyl-3,5,6 nitro-2 benzofuranne se présente en paillettes fondant à 172 Analyse pour C11H11NO3 Calculé À C = 64,39 H = 5,36 N = 6,82 Trouvé , C = 64,60 H = 5,5 N = 6,64 Le spectre de Ri'iN, déterminé en solution dans du deutéro chloroforme avec du tétraméthyl silane comme référence interne montre les déplacements suivants (en ppm) CH3(3) 2,6 ; CH3 (5,6) 2,4 ; H (4,7) 7,25 à 7,35. EXEMPLE 2 Nitro-2 méthyl-3 chloro-6 benzofuranne (numéro de code R 4857) On part de méthyl-3 chloro-6 benzofuranne obtenu par cyclisation d'acide acétyl-2 chloro-5 phénoxy acétique, lui-mEme préparé par la même suite de réaction que l'acide b de l'exemple 1. Le méthyl-3 chloro-6 benzofuranne, obtenu ainsi avec un rendement de 20 85 %, bout à 1160/18 mm ; nD = 1,5687. On le soumet à une nitration comme dans l'exemple 1 mais avec de l'acide nitrique de densité 1,52 et en laissant la température monter jusqu'à 500 (au maximum). On obtient ainsi du nitro-2 méthyl-3 chloro-6 benzofuranne qui, après cristallisation dans l'éthanol, fond à 1440. Analyse pour C9H6 O3NCl Calculé % : C = 51,12 H = 2,86 N = 6,62 Cl = 16,76 Trouvé % : C = 50,70 H = 2,93 N = 6,54 Cl = 16,98. Le spectre de RMN confirme la structure indique. EXEMPLE 3 Nitro-2 diméthyl-3,6 chloro-5 benzofuranne (numéro de code R 4942). On part de diméthyl-3,6 chloro-5 benzofuranne et l'on opère comme dans l'exemple 2. Le nitro-2 diméthyl-3,6 chloro-5 benzofuranne ainsi obtenu fond à 184 après recristallisation dans l'éthanol. Analyse pour C9H8O3N Cl Calculé % C=53,26 H = 3,57 N = 6,21 Cl = 15,75 Trouvé % 53,28 3,33 5,94 15,51 Le spectre de RMN, déterminé comme dans l'exemple 1, a révélé les déplacements chimiques suivants (en ppm) CH3(3) 2,65 CH3 ( 6) 2,55 H (4) 7,65 H (7) 7,4 On peut également obtenir le nitro-2 diméthyl-3,6 chloro-5 benzofuranne par nitration du triméthyl-2,3,6 chloro-5 benzofuranne, le rendement (16 %) étant légèrement supérieur à celui de la nitration du diméthyl-3,6 chloro-5 benzofuranne. Les composés définis sous a, b et c dans ltexemple 1 et le méthyl-3 chloro-C benzofuranne de l'exemple 2 sont nouveaux. La Demanderesse a trouvé que les trois composés indiqués ci-dessus ainsi que le nitro-2 benzofuranne (numéro de code R 5144) faisaient preuve d'activités contre les microorganismes et les parasites et étaient utilisables, en considération de celles-ci, comme désinfectants et, en thérapeutique, comme parasiticides, bactéricides, bactériostatiques et fongicides. L'activité antimicrobienne in vitro a été particulièrement étudiée pour les composés R 4906 et R 5144. L'activité antibactérienne a été évaluée in vitro par la détermination de la concentration minimale inhibitrice bactériostatique (C.M.I.) en milieu nutritif liquide, après séjour de 18 heures à D7 . Pour Mycobactérium tuberculosis le séjour à )7 est prolongé pendant une semaine. Treize souches bactériennes appartenant à huit espèces différentes ont été mises en oeuvre. Les milieux de culture ont été le bouillon nutritif ordinaire pour les espèces peu exigeantes, le milieu tamponné glucosé pour le streptocoque et le milieu de Dubos pour M. tuberculosis. L'activité antimycosique a été déterminée, d'une part, en milieu nutritif solide (gélose de Sabouraud) pour une souche d'Aspergillus (A. fumigatus) et deux souches de dermatophytes (Microsporum gypseum et Trichophyton mentagrophytes), d'autre part, en milieu nutritif liquide (milieu de Sabouraud) pour deux souches de levures (Candida albicans). La lecture a été effectuée après un séjour de 72 heures à 280 pour l'Aspergillus et les dermatophytes et de 18 heures à D7 pour les levures. Les milieux nutritifs ont été répartis dans des tubes à hémolyse à raison de 1,8 ml par tube pour les bactéries et les levures et dans des tubes à essai de 22 mm de diamètre à raison de 4,5 ml par tube pour M. tuberculosis. Des solutions de composés nitrobenzofuranniques, à concentations décroissantes, préparées par la méthode des dilutions sériées, ont été ajoutées à raison de 0,2 ml dans des tubes contenant 1,8 ml et de 0,5 mi dans des tubes contenant 4,5 ml L'inoculum était constitué par une goutte d'une cul-- ture mère agée de 18 heures à D7 en milieu liquide après dilution jusqu a obtention d'une suspension très légèrement louche (environ 105 bactéries par ml). Pour le streptocoque et le Candida l'inoculum a été une goutte de la culture mère agée de 18 heures sans dilution (onviron 1OS bactéries par ml) et pour II. tuberculosis une goutte de culture homogène en milieu de Dubos. Pour l'Aspergillus et les dermatophytes les solutions des produits essayés ont été ajoutées à la gélose de Sabouraud à raison de 2 ml de solution pour 18 ml de gélose liquéfiée avant d'être coulées dans une boîte de Pétri. L'inoculum était constitué par un petit fragment d'une oulture de 72 heures. Les concentrations finales des substances essayées sont basses eu égard à leur très faible solubilité. Leur solution dans l'acéto- ne est diluée dans l'eau de manière à ne pas dépasser une concentration finale en acétone dans le milieu nutritif de 1/20 pour les bactéries et les champignons, et 1/40 pour M. tuberculosis, concentrations compatibles avec la croissance normale des illicro-organis- mes. Les résultats obtenus pour les composés R 4;06 et R 5144 sont réunis dans le tableau I ci-dessous. Ils sont exprimés en concentration minimale inhibitrice (C.M.I) an microgrammes par millilitre de milieu nutritif. TABLEAU I Bactéies R.4906 R.5144 Escherichie coli 17 5 10 32 5 25 Rettgerella 3 sup. à 5 100 Salmonelle typhi murium 17 sup. à 5 25 Pseudotnonas aeruginosa 34 sup. à 5 sup. à 100 " " 181 sup. à 5 sup. à 100 Streptococcus foecalis 35 sup. à 5 sup. à 100 " " 56 sup. à 5 sup. à 100 pyogenes 91 sup. à v sup. à 100 96 sup. à 5 sup. à 100 Staphylococcus aureus 19 sup. à 5 100 T? " 153 sup. à 5 100 Mycobacterium tuberculosis 2,5 2,5 Champignons Aspergillus fumigatus sun. à 2,5 25 microsporum gypseum sup. à 2,5 10 Trichophyton mentagrophytes sup. à 2,5 10 Candida albicans 1 sup. à 5 sup.à 100 2 sup. à 5 25 Trois sortes d'actions ont été recherchées en parasitologie. 1 / Action exyuricide L'évaluation des propriétés anthelminthiques a été réalisée "in vivo chez la souris expérimentalement infestée par Syphacia obvelata (nématode oxyuridé). Des souris de cinq à six semaines sont infestées par contact avec des souris très parasitées par Syphacia obvelata. Pour cela, on réunit dans un cristallisoir une vingtaine de souris neuves et quatre ou cinq souris parasitées. On laissa les animaux en contact pendant cinq jours. Du brème au 11ème jours qui suivent le début de l'infestation, soit pendant quatre jours, les souris reçoivent, par la voie buccale, une seule fois par jour, le produit à essayer en solution ou en suspension dans un volume d'eau n'excédant pas 0,25 ml. L'autopsie est pratiquée le treizième jour, soit 48 h après l'arrêt du traitement. On recherche alors, dans le gros intestin, les oxyures vivants en ne tenant pas compte des jeunes larve dont la longueur est au plus égale à 0,5 ricin et dont la présence éventuelle témoignerait d'une réinfestation postérieure au début du traitement On opère sur des lots d'au moins dix animaux et on détermine pour chaque substance, le pourcentage de souris complètement débarrassées de leurs parasites ; la dose administrée est uniformément de 200 mg/kg de poids corporel et par jour. Pour chaque série d'essais, on conserve dix à vingt souris témoins ne recevant aucun traitement. 20/ cation trichomonacide La détermination de l'activité trichomonacide "in vitro" sur Trichomonas vaginalis est effectuée selon deux modalités a) Inhibition au départ des cultures. Le milieu de culture (dit de Tagare) est constitué par un bouillon de viande et de foie de boeuf d'origine commerciale (bouillon VF ou milieu de Weinberg et Goy délivré par l'Institut Pasteur) pour cnaérobies, glucosé à 0,5,. et additionné de 5 à lQ de sérum stérile de poulain. 9 ml de ce milieu sont ensemencés avec 0,5 ml d'une culture de Trichomonas vaginalis correspondant à 400 000 flagellés et traitées, an même temps, par 0,5 ml d'une solution ou suspension aqueuse du produit à examiner. L'activité relevée est donnée par la concentration minimale de substance qui inhibe totalement le développement du Trichomonas vaginalis après un temps de contact de 48 h, à l'étuve à 370 b) Action létale sur une culture de deux jours. Dans cet essai, on recherche la plus petite quantité du pro- duit à examiner qui tue tous les flagellés d'une culture dè deux jours, après un temps de contact de 48 h à l'étuve à 37 . Dans les deux cas, à la fin de ltexpérience, on vérifie, dans les tubes de culture, la présence ou l'absence de Trichomonas, éventuellement leur aspect et leur mobilité ; lorsque les flagellés sont absents ou immobiles, on complète ltessai en pratiquant une subculture. 3 / Action amoebicide Les essais d'activité amcebicide "in vitro contre Entamoeba dysenteriae ont été effectués de la même manière que les essais contre Trichomonas vaginalis mais le milieu utilisé est celui de Pavlova-Jones dont la composition est donnée ci-dessous PO;NHa2 , 2 H20 4,45 g PO;HK2 l,135 g ClNa 20 g Extrait de levure Difoc 2,75 g Eau distillée 2.750 ml L'action inhibitrice au départ de la culture est enregistrée après 72 h, à l'étuve à 370. Pour déterminer l'action létale, on utilise une culture d'amibes âgée de deux jours, la lecture étant faite après 48 h, à l'étuve à 370 Comme pour l'essai contre Trichomonas vaginalis, on pratique une subculture si cela est nécessaire. Les résultats sont consignés dans le tableau suivant. (Tableau II page suivante) TAtiLEAU I N T. vaginalis Entamoeba de dysenteriae Syphacia obvelate Code Inhibi- Action Inhibi- Action Souris tion au létale tion au létale départ en départ en déparasitées mortes Nbre % 0,6 2,5 R4906 (légère (légère 27/28 96,4 2/30 action action à 0,3) à 1,25) R4857 10 0 50 à 100 0 24/28 85,7 2/30 R4942 2,5 0 50 à 100 0 6/9 66,6 1/10 Des essais complémentaires avec le R 4906 sur Syphacia obvelata ont conduit aux résultats suivants 200 mg/kg en une saule dose : sur 20 animaux : 100% déparasités 100 mg/kg en une seule dose : sur 20 animaux : déparasités. Des essais complémentaires avec le R 4906 et le R 5144 sur diverses souches de- Trichomonas à 370 pendant 48 heures ont donné les résultats suivants pour l'activité parasiticide Souche R 4906 R 5144 Beligon 1 1 Fournier 0,25 0,1 Théodas 1 0,5 Les composés K 4906 et R 5144, le premier étant le composé préféré, peuvent être utilisés en thérapeutique pour le traitement d'urétrites et vaginites à trichomonas et d'amibiase intestinale ou hépatique. Ils peuvent aussi être employés pour la lutte contre les colibacilles pathogènes et et dans le traitement des infections à dermatophytes de la peau, des ongles et du cuir chevelu ainsi que contre la tuberculose. Enfin le composé R 4906 peut être utilisé contre les oxJures.Ils peuvent être présentés, par exemple, en comprimés qui en eontiennent de 5 à 800 mg ou en ovules ou encore en pommade. Les composés R 4857 et R 4942 peuvent être utilisés dans le traitement des affections à Trichomonas ; ils peuvent être présentés, en particulier, en comprimés ou ovules. R E V E N D I C A T I O N S 1.- Les dérivés du benzofuranne caractérisés par le fait qu'ils répondent à la formule dans laquelle R1 désigne un atome d!hydrogène ou un alcoyle et chacun des symboles R2 et R3, individuellement, représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène ou un alcoyle, à l'exclusion de la signification R1 = R2 = R3 = H, chacun des alcoyles ayant 1 à 6 atomes de carbone, en channe droite ou ramifiée. 2.- Le nitro-2 triméthyl-3,5,6 benzoPuranne. 3.- Le nitro-2 méthyl-3 chloro-6 benzofuranne. 4.- Le nitro-2 chloro-5 diméthyl-3,6 benzofuranne. 5.- Un procédé de préparation des composés de l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait qu'on soumet les composés non nitrés correspondants à une nitration au moyen d'acide nitrique concentré dans de l'acide acétique. 6.- Un procédé de préparation du nitro-2 chloro-3 diméthyl-3,6 benzofuranne, caractérisé par le fait qu'on soumet du triméthyl-2,3,6 chloro-5 benzofuranne à une nitration selon le procédé de la revendication 5. 7.- Un produit agissant contre les micro-organismes, notamment comme parasiticide et/ou bactéricide, caractérisé par le fait qu'il comprend, à titre de principe actif, un composé répondant à la formule dans laquelle R1 désigne un atome d'hydrogène ou un alcoyle et chacun des symboles R2 et R3, individuellement, représente un atome d'hydrogène, un atome d'halogène ou un alcoyle, chacun des alcoyles ayant de 1 à 6 atomes de carbone, en channe droite ou ramifléef 8. Un produit agissant contre les micro-organismes, notamment comme parasiticide et/ou bactéricide, caractérisé par le fait qu'il comprend, à titre de principe actif, un composé du groupe constitué par le nitro-2 triméthyl-3,5,6 benzofuranne, le nitro-2 méthyl-3 chloro-6 benzofuranne, le nitro-2 chloro-5 diméthyl-3,6 benzofuranne et le nitro-2 benzofuranne. 9.- Un médicament, en particulier un médicament parasiticide et/ou bactériostatique, qui contient du nitro-2 triméthyl-3,5,6 benzofuranne. 10.- Un médicament, en particulier un médicament parasiticide, qui contient du nitro-2 méthyl-3 chloro-6 benzofuranne. 11.- Un médicament, en particulier un médicament parasiticide, qui contient du nitro-2 chloro-5 diméthyl-3,6 benzofuranne. 12.- Un médicament, en particulier un médicament parasiticide et/ou bactériostatique, qui contient du nitro-2 benzofuranne. 13.- Lt(acétyl-2 diméthyl-4,5 phénoxy)acétate d'éthyle, l'acide (acétyl-2 diméthyl-4,5 phénoxy)acétique, le triméthyl-3,5,6 benzofuranne et le méthyl-3 chloro-6 benzofuranne.