Brevet FR2074632A1 — publié le 19711008

La présente invention, à la réalisation de laquelle ont participé MM. HAGEMANN Guy et CLEMENCE François, a pour objet de nouveaux sels d'acide aminé. Elle concerne plus particulièrement les sels de l'acide N-succinylglutamique avec une base minérale ou organique. 5 L'invention se rapporte également à l'application comme médi cament de l'acide N-succinylglutamique ou un de ses sels avec une base minérale ou organique. Il a été trouvé que l'acide N-succinylglutamique et ses sels présentent des propriétés thérapeutiques intéressantes. Ils per- 10 mettent d'assurer une protection certaine contre les effets toxiques de diverses toxines bactériennes, ainsi que vis-à-vis des infections aiguës dues à des staphylocoques. Ils possèdent également la propriété de diminuer les effets toxiques de certains antibiotiques administrés a fortes doses. 15 Cet effet détoxifiant peut également être mis à profit pour une association avec un tel antibiotique en vue de réduire les effets de fatigue de l'organisme attribuables a une administration prolongée de ce médicament et à la libération de toxines résultant de son action sur les bactéries responsables de l'infection. 20 L'invention s'étend en outre aux compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif l'acide N-succinylglutamique ou un de ses sels et tua antibiotique. Ces compositions sont utilisables en thérapeutique en particulier pour le traitement d'infections microbiennes graves ou résis- 25 tant aux antibiotiques seuls. Elles conviennent notamment pour le traitement des broncho-pneumonies, des pyélonéphrites, des infections intestinales dues a des entérocoques, des méningococcies, des pneumonies a pneumocoques, des dysenteries bactériennes et des brucelloses. 30 Le terme antibiotique désigne ici et dans ce qui suit un compo sé doué de propriétés antibactériennes appartenant à la famille chimique des tétracyclines, des pénicillines, de 1'érythromycine, du chloramphénicol, de la streptomycine, de la gentamycine et des céphalosporines. 35 On pourra citer comme représentants préférés de la famille des tétracyclines, 1'oxytétracycline, la chlorotétracyeline, la 6-déméthyl 7-chlorotétracycline, la N-pyrrolidinométhyl tétracycline ou des sels de tétracycline comme par exemple le chlorhydrate, le 70 01040 2 2074632 théophylline éthanesulfonate, l'hexamétaphosphate le lauryl-sulfate ou le fusidate. On pourra citer également comme représentants préférés de la famille des pénicillines, la pénicilline G- (sel de sodium), la pénicilline K, le phénoxyméthyl pénicillinate de potassium ou le 1-(2'-benzyl 1 ' ,2' ,3' ,4'-tétrahydroisoquinoléinyl) carbonylaari.no pénicillinate de sodium. Ces compositions présentent un grand intérêt en thérapeutique en raison de leur action détoxifiante vis-à-vis des effets secondaires liés a l'emploi prolongé de certains antibiotiques. En effet le traitement prolongé par les antibiotiques usuels comme les pénicillines ou les composés de la famille des tétracyclines, rendus nécessaires par des infections bactériennes généralisées, entraîne souvent une fatigue importante de l'organisme que l'on peut attribuer, entre autres, à des effets toxiques de l'antibiotique administré pendant plusieurs jours a doses élevées ou répétées et surtout aux effets des toxines bactériennes libérées par suite de l'action plus ou moins rapide du médicament sur les germes responsables de 1infection. Il apparaissait donc désirable de pouvoir réaliser line chimiothérapie efficace à la fois par son action antimicrobienne et anti-toxinique grâce à l'association d'un antibiotique et d'une substance considérée comme "détoxicante" c'est-à-dire capable de neutraliser rapidement l'influence nocive des endotoxines bactériennes ou les effets secondaires dus à la toxicité propre de l'antibiotique, sans en réduire l'efficacité. On .a déjà signalé à cet effet l'action détoxicante des glucu-ronates d'aminoacides du cycle de Krebs vis-à-vis de certains médicaments et notamment de 1'isoniazide. L'acide M-suecinylglutasique ou un de ses sels avec une base minérale ou organique, quoique tout-à-fait dépourvu de propriétés baotériostatiques ou bactéricides propres, possède un net effet détosicaat vis-à-vis des toxines microbiennes et son association avec un antibiotique, a pour effet d'éviter l'apparition de phénomènes toxiques tout on maintenant au moins égale l'activité antibiotique lors de traitements massifs ou prolongés par de tels médicaments. 70 01040 3 2074632 On peut utiliser indistinctement l'acide N-succinyl L-glutami-que ou l'acide N-succinyl D-glutamique ou l'acide N-succinyl DL-glutamique. Comme sels de ces acides on pourra utiliser soit un sel d'une 5 des fonctions carboxyliques, soit un sel de plusieurs fonctions carboxyliques. . , , minéraux/ Parmi les sels/thérapeutiquement utilisables, on peut citer les sels de métaux alcalins et plus particulièrement les sels de sodium, de potassium ou d'ammonium, les sels de métaux alcalino 10 terreux et plus particulièrement les sels de calcium ou de strontium, les sels de magnésium et les sels d'aluminium. Parmi les sels de bases organiques, thérapeutiquement utilisables, on peut citer les sels d'alcoylamines comme 1*éthylamine, la diisopropyl-amine, l'aminoéthanol ou le diéthylaminoéthanol, les sels d'aryl-15 aminés comme la NN-diméthylphényléthylamine ou la gramine ou les sels avec les aminoacides comme la leucine, la sérine, la valine, l'histidine, l'arginine, la phénylalanine ou la lysine. Les nouvelles compositions contiennent donc un antibiotique appartenant à l'une des familles mentionnées ci-dessus et de 20 l'acide N-succinylglutamique ou un de ses sels en des proportions qui peuvent varier dans des limites très larges, pouvant aller de dix parties d'antibiotique pour une partie d'acide N-succinylglutamique à line partie d'antibiotique pour dix parties d'acide N-succinylglutamique en poids. 25 Les nouvelles compositions contiennent de préférence des pro portions égales d'antibiotiques et d'acide N-succinylglutamique. Néanmoins, on peut obtenir une efficacité du même ordre avec des compositions renfermant une proportion inférieure d'acide N-succinylglutamique comme par exemple un mélange contenant deux parties d'antibiotique pour une partie d'acide N-succinylglutamique. Inver-30 sement on pourra sans inconvénient préparer des compositions renfermant des proportions plus élevées d'acide N-succinylglutamique. Ces compositions possèdent une activité voisine ou égale à celle du mélange optimum. Les nouvelles compositions, objet de l'invention, sont desti-35 nées a l'usage parentéral, buccal ou rectal. Elles peuvent être présentées sous forme de solutés ou de suspensions injectables, de comprimés, de comprimés enrobés, de gélules, de granulés, de poudres 70 01040 4 2074632 aromatisées, de sirops, d'émulsions buvables ou de suppositoires. La posologie est fonction de la teneur en antibiotique de la composition, de la voie d'administration et de l'infection microbienne à traiter. Elle est du même ordre que celle des compositions 5 contenant seulement un antibiotique. La posologie en acide N-succinylglutamique ou en un de ses sels est de préférence égale à celle de l'antibiotique mais elle peut également varier du simple au décuple de la quantité d'antibiotique. On pourra adjoindre en outre aux principes actifs contenus 10 dans ces compositions d'autres principes actifs tels qu'agents eupnéiques et notamment la théophylline et ses dérivés, désinfectants ou bactéricides, agents adsorbants tels que le polycapro-lactame commercialisé sous le nom de "Divergan SZ 9010" par la B.A.S.F., la polyvinylpolypyrrolidone commercialisée sous le nom de 1 5 "Polyclar AT" ou la caséine formolée commercialisée sous le nom de "Capillact" par la Société S.P.C.I. en France, agents analgésiques comme la lignocaïne ou antalgiques comme la glafénine, agents antispasmodiques comme l'iodure de tiéfonium ou agents anti-inflammatoires dont l'activité peut renforcer ou s'ajouter à celles déjà 20 mentionnées. Les sels de l'acide N-succinylglutamique sont obtenus par les procédés usuels de salification oude double décomposition. Selon les proportions de base ou d'agent basique employé on peut salifier une ou plusieurs des fonctions carboxyliques. Pour former un sel 25 de base minérale on préfère effectuer une neutralisation de l'acide N-succinylglutamique par un hydroxyde, un carbonate ou un bicarbonate en milieu aqueux. Pour les sels de bases organiques, il est plus commode d'opérer dans un solvant organique en présence ou en l'absence d'eau. 30 Les sels d'aminoacide se forment aisément en milieu aqueux. L'invention s'étend enfin à un nouveau procédé d'obtention de l'acide N-succinylglutamique qui consiste à soumettre un ester alcoylique d'acide gLutamique à l'action de l'anhydride succinique pour obtenir le N-succinylglutamate d'alcoyle, à estérifier au 35 moyen d'un alcanol en présence d'un catalyseur acide ledit composé pour obtenir un alcoxycarbonylpropionyl glutamate d'alcoyle et à saponifier l'ester obtenu en milieu alcalin. Les exemples suivants illustrent l'invention. Ils ne la limi- 70 01040 5 2074632 tent en aucune façon. Exemple : Acide N-succinyl L-glutamique Stade A : N-( p-carbéthoxypropionyl) L-glutamate d'éthyle On met en suspension 13,10 g d'anhydride succinique dans 5 100 cm3 de benzène, ajoute une solution de 25,4 g de L-glutamate d'éthyledans 100 cm3 de benzène et agite pendant quatre heures, à température ambiante ; on évapore le solvant sous pression réduite, reprend le résidu constitué par le N-(hydroxycarbonylpropionyl) L-glutamate d'éthyle à l'éthartaL et chauffe au reflux pendant quatre 10 heures, en présence de quelques gouttes d'acide sulfurique, on évapore l'alcool et recristallise le résidu dans 1'isopropanol ; on obtient le N-(f3-carbéthoxypropionyl) L-glutamate d'éthyle, sous forme de cristaux incolores, fondant à 45SC (rendement : 87 i°). Analyse : C.J ^H^NO^ = 331,36 15 Calculé : N £ 4,22 Trouvé : 4,1 7 Spectre I.R. Bandes à 3310, 1740, 1175 et 1025 cm"1. Stade B : Acide N-succinyl L-glutamique 20 On chauffe à 302C 15 g de N-(p-carbéthoxypropionyl) L- glutamate d'éthyle dans de la soude N pendant deux heures, passe la solution sur une résine sulfonique échangeuse de cations commercialisée sous le nom de Dowex, évapore l'eau sous vide et recristallise le résidu dans un mélange benzène-éther ; on obtient l'acide N-25 succinyl L-glutamique sous forme de cristaux incolores solubles dans l'eau et l'alcool, insolubles dans l'éther, fondant à 76se — PR (rendement : 90 9£) ; son pouvoir rotatoire est /jzJ-q = -14e (ç = 4 $, eau). Analyse : CgH^NO^. = 265,20 30 Calculé : C 96 40,76 H £ 5,70 N $ 5,27 Trouvé : 40,4 5,8 5,4 Spectre I.R. KBr Bandes à 2020, 1700, 1540, 1000 et 800 cm"1. Ce composé est identique à celui obtenu par J.P. AUBERT et 35 coll., C.R. Ac. Sci., 2^â, 1959, p. 1956-1958. Préparation du N-succinyl L-glotflmatfi de sodium On dissout 1 ,32 g d'acide N-succinyl L-glutamique dans 30 cm3 70 01040 6 2074632 d'eau. On ajoute progressivement et en refroidissant pendant toute l'addition 5 cm3 d'une solution 3 N d'hydroxyde de sodium. On amène à sec ensuite, sous pression réduite, le mélange réactionnel, Le résidu est repris par le minimum d'alcool à 90 % 5 chaud. Par refroidissement le sel de sodium précipite sous forme cristalline. On obtient ainsi, après essorage et séchage, 1,25 g de H-succinyl L-glutamate de sodium. Ce composé est nouveau. 1O Préparation du N-succinyl L-glutamate de lysine En opérant selon la préparation précédente au départ de 1,32 g de/ d'acide N-succinyl L-glutamique et/"5725 g de dl-lysine, on obtient le N-succinyl L-glutamate de dl-lysine. Ce composé est nouveau. ! 5 Etude pharmacologique de l'acide N-succinyl L-glutamique a) Action protectrice chez l'animal vis-à-vis d'endotoxines d ' Escherichia Poli On injecte par voie intrapéritonéale à des lots de 20 souris 0,5 mg d'endotoxine extraite d'Escherichia Coli 026B6 par la m®~ 20 thode de Westphal (Difco 3121) ; aussitôt après l'injection de la toxine, on administre 8 mg d'acide N-succinyl L-glutamique en solution dans 0,5 cm3 d'eau, par voie intrapéritonéale et on détermine le pourcentage de survivants après vingt-quatre heures et après sept jours. 25 On a obtenu les résultats suivants. Lots Nombre de survivants à la 24e heure après 7 jours Témoins 30 10 1o Traités 80 % 80 1o Dans un deuxième essai, on injecte 0,8 cm3 d'endotoxine par voie intrapéritonéale et administre aussitôt après, 15 mg d'acide H-suecinyl L-glutamique par voie orale; on obtient les résultats 50 suivants s 70 01040 7 2074632 Lots Nombre de survivants a la 24e heure après 7 jours Témoins 6,6 io 6,6 io Traités 60 io 53,5 ^ Dans un troisième essai, on injecte 1,5 mg d'endotoxine lipo-polysaccharide d'Escherichia Coli 0-|27B8 par voie intrapéritonéale et administre aussitôt après, 12 mg d'acide N-succinyl L-5 glutamique par voie orale ; on a obtenu les résultats suivants : Nombre de survivants Lots i à la 24e heure après 7 jours Témoins 7,15 $ 7>15 i° i ■■■■■■■ l --- Traités 85,7 i 57,2 \ i i ■ ' b) Action protectrice chezl'animal vis-a-vis d1endotoxines de Salmonella enteritidis On injecte a des lots de dix souris, par voie intrapéritonéale 10 1 mg d'endotoxine lipopolysaccharide extraite de Salmonella enteritidis ¥ par la méthode de Westphal et simultanément, par voie orale, 12 mg d'acide N-succinyl L-glutamique. On a obtenu les résultats suivants : Lots i Nombre de survivant s a la 24e heure | après 8 jours Témoins 22,2 i 5,5 i Traités 61 io 39 i c) Action protectrice chez l'animal vis-à-vis d'endotoxines de Salmonella_typhosa On injecte à des lots de dix souris, 0,9 mg d'endotoxine lipopolysaccharide extraite de Salmonella typhosa 0-901 par la méthode de Westphal et administre aussitôt après, 12 ng d'acide N-succinyl 20 L-glutamique par voie orale. On a obtenu les résultats suivants : 70 01040 8 2074632 Lots Nombre de survivants après 7 jours Témoins 28,6 io I Traités 64,4 i<> d) Action protectrice chez l'animal vis-à-vis des effets toxiques des antibiotiques On injecte à des lots de dix souris, par voie intrapéritonéale 5 11 mg de chlorhydrate de tétracycline en solution dans 0,5 cm3 d'eau distillée et aussitôt après, par la même voie, 8 mg d'acide N-succinyl L-glutamique ; on a obtenu les résultats suivants : Lots Nombre de survivants à la 24e heure après 8 jours Témoins 50 i 0 Traités 100 io 90 i Dans un deuxième essai, on administre l'acide N-succinyl L-10 glutamique, à la dose de 15 mg par voie orale; on a obtenu les résultats suivants : Lots Nombre de survivants à la 24e heure après 8 jours Témoins 50 i 0 Traités 100 io 50 i Ces résultats montrent que l'acide N-succinyl L-glutamique exerce une nette action protectrice contre les effets toxiques 15 d'endotoxines bactériennes, qu'il soit administré par voie intrapéritonéale ou par voie orale. On observe la même action de protection vis-à-vis des effets toxiques du chlorhydrate de tétracycline administré à forte dose par voie intrapéritonéale. Dans les deux cas, cet effet de protection se traduit par un retard et une impor-20 tante réduction de la mortalité des animaux traités. 70 01040 9 2074632 REVENDICATIONS 1° Les sels ae l'acide N-succinylglutamique avec une oase minérale ou organique thérapeutiquement compatible. z° Les sels de l'acide N-succinylglutamique avec une oase 5 alcaline, alcalinoterreuse, la magnésie ou l'alumine. 5° Les sels de l'acide N-succinylglutamique avec une base organique thérapeutiquement compatible choisie dans le groupe constitué par les alcoylamines et les arylalcoylamines 4° Les sels ûe l'acide N-succinylglutamique avec un amino-acide. 10 b° Un composé selon 2° à savoir le ft-succinylglutamate trisodique. 6° Un composé selon 4° à savoir le N-succinylglutamate de lysine. 7° L'application comme médicament de l'acide N-succinylglutamique 15 racémique ou optiquement actif. 8° L'application comme médicament de l'acide N-succinyl L-glutamique. 9° L'application comme médicament des sels de l'acide N-succinylglutamique avec une base minérale ou organique thérapeuti-20 quement utilisable. 10° Les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un composé selon 1°, 2°, 3° ou 4°. 11° Les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif l'acide N-succinylglutamique. 25 12° Les compositions pharmaceutiques renfermant ae l'acide N-succinylglutamique ou un de ses sels et un antibiotique. 13° Une composition selon 12° dans laquelle l'antibiotique est choisi parmie les composés ae la famille des té^racyclines, des pénicillines, de 1'érythromycine, de la streptomycine, •*0 de la gentamycine ,ûes céphalosporines et du chloramphénicol. 14° Une composition selon 12° et 1^° dans laquelle l'antibiotique de la famille des tétracyclines est notamment l'oxytétra- 70 01040 10 2074632 cycline, la chlorotétracycline, la 6-déméthyl 7-ehlorotétra-cycline, la N-pyrrolidinométhyltétracycline, le chlorhydrate de tétracycline, le théophylline-éthane sull'onate de tétracycline ou le rusidate de tétracycline. 15° Une composition selon 12° et I33 dans laquelle l'antibiotique ae la famille des pénicillines est la pénicilline G-, la pénicilline K, la phénoxyméthylpénicilline, ou le 1 —(21 — benzyl 1', 2', 4'-tétrahydroisoquinoléinyl) carbonylamino pénicillinate de sodium. 16° Une composition selon 12° dans laquelle les proportions d'acide N-succinylglutamique et d'antibiotique peuvent varier entre 1 pour 10 à 10 pour 1 en poids. 17° Un procédé de préparation de l'acide N-succinylglutamique qui consiste à soumettre un ester alcoylique de l'acide glutamique à l'action de l'anhydride succinique, à estérifier par un aleanol en présence d'un catalyseur aciae le N-suceinyl-glutamate d'alcoyle obtenu puis à saponifier le N-alcoxy-carbonylpropionyl glutamate a'alcoyle rormé.