Brevet FR2100732A1 — publié le 19720324

-i 2100732 La présente invention concerne un procédé de préparation de solutions de perfusion, utilisées avant tout comme succédané du plasma sanguin. les transfusions de sang et de plasma sanguin sont à 11 heure 5 actuelle un des moyens principaux et les plus efficaces du traitement d'hémorragies importantes, de "brûlures et d'états de choc. Dans des circonstances extraordinaires, cette intervention comporte cependant souvent des difficultés, dues surtout à celle de l'approvisionnement en sang et en outre éventuellement à l'insuf-10 fisance des quantités de sang du groupe nécessaire. L1impossibilité de constituer des réserves suffisantes à cause des délais de conservation restreints et de leur grande fragilité, les grandes exigences lors de leur transport aussi bien que lors de leur stockage, la nécessité de la détermination du groupe sanguin et 15 de l'exécution d'un essai croisé sont ensuite d'autres inconvénients qui se sont nettement manifestés déjà pendant la première guerre mondiale et ont inspiré des efforts en vue du remplacement du sang et du plasma sanguin par d'autres solutions, "bien que, déjà auparavant, de telles tentatives aient été entreprises, ce-20 pendant pratiquement sans succès (gomme arabique, gélatine et substances similaires). En 1878 déjà, Schâfer exprima la conviction qu'une importance seulement limitée revient dans la thérapeutique des hémorragies au remplacement du sang par un sérum physiologique. Puis 25 Starling souligna la différence fondamentale entre les effets de cristalloïdes et de sang ou de plasma et constata que l'efficacité thérapeutique dépend avant tout des propriétés colloïdo-osmo-tiques du liquide utilisé. Chez le malade qui perd son sang, c' est avant tout le rétablissement du volume sanguin qui importe et 30 non pas le remplacement des érythrocytes perdus. Ces connaissances ont influencé l'activité de recherche ultérieure des hommes de science dont les efforts ont visé à la préparation de solutions de remplacement du plasma sanguin à propriétés colloïdo-osmotiques supérieures à celles du sérum physiologique antérieu-35 rement utilisé. Au cours du temps, toute une série de "substances de remplacement " a ainsi pris naissance dont cependant quelques unes seulement ont fait leurs preuves. Tous les spécialistes sont aujourd'hui d'accord dans la conviction que des solutions de perfusion colloïdales représentent 40 une partie indispensable d'un service de transfusion moderne, et 71 20308 2 2100732 que leur disponibilité est une des conditions les plus importantes du succès, dans la thérapeutique de blessures et d'hémorragies intenses ainsi que dans la prophylaxie et le traitement d1 états de choc. 5 Par conséquent, la grande importance des solutions de perfu sion ne saurait aujourd'hui plus être mise en doute, surtout dans des circonstances exceptionnelles dans lesquelles on ne dispose pas immédiatement d'une quantité de sang suffisante (accidents, hémorragies imprévues, catastrophes et situations similaires). 10 Dans de tels cas, l'administration rapide d'une quantité suffisante d'une solution de perfusion détermine alors souvent le destin ultérieur des malades. La présente invention a pour objet un procédé de préparation de solutions de perfusion qui consiste à polymériser ou à copoly-15 mériser des monoesters de l'acide acrylique ou méthacrylique et de polyols comportant au moins deux groupes OH~ ou des amides de ces acides tels quels ou portant à l'azote comme substituants un à deux groupes alcoyle comportant 1 à 4 atomes de carbone ou des hydroxyalcoyles ou éventuellement des polyhydroxyalcoyles compor-20 tant jusqu'à 6 atomes de carbone, à précipiter ensuite la solution et à dissoudre le polymère obtenu dans du sérum physiologique pour former avantageusement une solution d'une concentration de 0,3 à 1 % et d'une viscosité de 2 à 3 cP. Une distribution des poids moléculaires qui rend la solution 25 apte à l'utilisation peut être obtenue par fractionnement qui élimine du polymère des fractions de poids moléculaire inférieur et supérieur. Pour préparer les solutions de perfusion à utiliser selon l'invention comme succédané du plasma sanguin, on part avantageu-30 sement de méthacrylates de glycols (à partir du monométhacrylate de diglycol), du méthacrylate de glycérol, de méthacrylamides portant un seul substituant en N, d'acrylamides portant deux substituants en H et d'acrylamides portant un seul substituant en N. 35 Des copolymères de ces substances ou leurs copolymères avec la N-vinyl-pyrrolidone ou des méthacrylamides portant deux substituants en N sont également utilisables pour la préparation de solutions de perfusion. Une condition indispensable est alors la solubilité du polymère obtenu dans l'eau. Les méthacrylates de 40 glycols peuvent aussi contenir le diester si la polymérisation 71 20308 3 2100732 s'effectue en forte dilution. Les polymères préparés selon la présente invention sont totalement dénués de toxicité, ne provoquent aucune réaction allergique ni d'autre nature, ne présentent pas d'effets antigènes, sont 5 très stables et ne font pas intervenir la détermination des groupes sanguins. Tous les types mentionnés de solutions de perfusion ont été essayés avec de bons résultats pour la guérison du choc hémorragique chez le lapin. 10 Dans un cas, on a par exemple utilisé le monométhacrylate de polytriglycol pour la sensibilisation de l'organisme. La sensibilisation a été effectuée chez 5 lapins du même sexe d'un poids moyen de 2,5 kg par cinq injections sous-cutanées d'une quantité de, chaque fois, 2 ml du polymère à quatre jours d'intervalle. 15 Les résultats de l'essai ont été évalués, d'une part par des tests biologiques, d'autre part à l'aide de méthodes sérologi-qu.es, et cela au bout de 30 jours après l'administration de la dernière dose sensibilisatrice. Comme témoins, on a utilisé pour les tests biologiques des lapins non sensibilisés et pour les mé-20 thodes sérologiques du sérum de lapins normaux et du sérum physiologique . Résultats : a) Tests biologiques : La réaction d'Arthus a été provoquée au bout de l'interval-25 le de 30 jours après la sensibilisation par injection intradermique de 1 ml de la substance respective. Lors de l'examen histo-logique de l'endroit de la piqûre, aucune différence n'a été décelée pendant 4 à 48 heures par rapport aux groupes témoins et la réaction a dû être considérée comme négative. 30 La réaction anaphylactique a été également provoquée par injection de 20 à 50 ml de la substance immédiatement dans le coeur. Aucune réaction ne s'est produite chez les animaux examinés. b) Méthodes sérologiques : 35 Parmi les méthodes sérologiques, on a utilisé les tests d' agglutination. Une goutte du polymère a été mélangée avec une goutte du sérum des animaux non sensibilisés. Gomme témoin, 1* essai a été effectué avec du sérum normal et du sérum physiologique. La lecture des résultats s'est effectuée au microscope 40 après 5» 10, 15 et 20 minutes. Dans aucun des tests effectués, 71 20308 4 2100732 on n'a pu observer d'agglutination. l'agglutination a été examinée en outre en tube à essai. Dans un tube à essai conique de 12 ml, on a introduit respectivement 0,5> 1» 2, 3 et 4 ml du sérum et chaque fois 3 ml-de la so-5 lution de polymère, le contrôle s'est effectué par comparaison avec du sérum normal et du sérum physiologique. Dans ces essais non plus, il ne s'est produit d'agglutination dans aucun des tubes à essai. Comme autre méthode de test, on a utilisé la double diffu-10 sion en deux directions (méthode d'Ouchterlony). Dans le réservoir central (de 16 mm de diamètre) d'une boîte de Pétri remplie de gélose, on a introduit la substance à tester, puis dans des réservoirs (de 12 mm de diamètre) disposés à une distance de 10 mm du réservoir central, du sérum de lapins non sensibilisés. Les 15 boîtes ont été conservées pendant 4 jours dans l'armoire frigorifique. Une diffusion d'anticorps n'a pas été observée. Dans un autre essai, on a recherché chez les animaux l'ana-phylaxie active après administration de monométhacrylate de poly-triglycol. Aucune des méthodes utilisées (agglutination sur la-20 melle couvre-objets, agglutination en tube à essai, diffusion dans un gel, réaction d'Arthus et provocation d'un choc anaphylactique) n'a permis de déceler la formation d'anticorps. le procédé de l'invention est expliqué ci-après plus en détail à l'aide de quelques exemples d'exécution qui sont cependant 25 uniquement destinés à illustrer le procédé sans restreindre d' aucune manière sa portée. Exemple 1 On pèse dans une ampoule de verre 10 g de monométhacrylate de triéthylèneglycol, 90 g d'eau et 0,009 g d'azo-diisobutyrate 30 de méthyle et l'on fait barboter pendant 1 heure de l'azote par le mélange. Puis l'ampoule est scellée et le contenu polymérisé pendant 10 heures à 60°C. Après le refroidissement, on précipite la solution en la versant dans dix fois sa quantité d'acétone, on essore le polymère par aspiration, on le lave à fond et on le sè-35 che. On dissout le polymère dans de l'eau et l'on effectue un fractionnement grossier en trois fractions dans le système acétone-eau. La fraction moyenne est utilisée pour la préparation d' un succédané du plasma sanguin. Le polymère est essoré par aspiration, lavé à fond et séché dans le vide. On dissout le polymère 40 séché, débarrassé de tous les solvants dans du sérum physiologi 71 20308 5 2100732 que pour former une solution à 0,5 % (viscosité 2,3 cP). Le produit est conservé dans l'armoire frigorifique et stérilisé par ébullition d'une durée de 20 minutes. Exemple 2 5 On pèse dans une ampoule de verre 20 g de N-éthylméthacryla- mide, 80 g d'eau et 0,02 g de percarbonate de diisopropyle et 1' on fait "barboter pendant 1 heure de l'azote par le mélange. 1' ampoule est scellée et le contenu polymérisé pendant "10 heures à 60°C. Après le refroidissement, la solution est précipitée à 1' 10 aide d'acétone et le produit essoré par aspiration, lavé et séché. On dissout le polymère débarrassé de tous les solvants dans du sérum, physiologique, en choisissant la, concentration de sorte à faire correspondre la viscosité de la solution obtenue à celle du plasma sanguin véritable. 15 Exemple 3 On pèse dans une ampoule de verre, 20 g d'un mélange de N-éthylméthacrylamide et de IT,N-di méthylméthacrylamide (rapport molaire 5 : 1)i 80 g d'eau et 0,02 g de percarbonate de diiso-propyle, on y fait barboter pendant une heure de l'azote et l'on 20 polymérisé finalement pendant quelques heures à 70° C. Le traitement ultérieur s'effectue comme décrit dans l'exemple 2. Exemple 4 Dans une ampoule de verre, on polymérisé pendant 10 heures à 60°C 15 g de ïï,ïï-diméthylacrylamide, 84 g d'eau et 1 g d'une 25 solution aqueuse de HgOg à 30 %. Le traitement ultérieur s'effectue comme décrit dans l'exemple 2. Exemple 5 20 g d'un mélange de monométhacrylate de triéthylèneglycol et de N-vinylpyrrolidone (rapport molaire 4 : 1), 80 g d'un mé-30 lange (1:1) d'alcool éthylique et d'eau et 0,01 g d'azo-bis-isobutyronitrile sont polymérisés pendant 10 heures à 60°G. Le traitement ultérieur s'effectue comme décrit dans l'exemple 2. Exemple 6 30 g de monométhacrylate de glycérol, 70 g d'eau et 0,01 g 35 de percarbonate de diisopropyle sont polymérisés pendant 10 heures à 60°G. Le traitement ultérieur s'effectue comme décrit dans l'exemple 2. Exemple 7 aTg d'un mélange de monométhacrylate de glycérol et de me-40 thacrylate de méthyle (rapport molaire 7 î "0» 80 g d'eau et 0,01g d'azo-bis-isobutyronitrile sont polymérisés pendant 10 h à 60° G. 71 20308 6 2100732 REVENDICATIONS 1) Procédé de préparation de solutions de perfusion utilisables notamment comme succédanés du plasma sanguin, caractérisé par le fait que l'on polymérisé ou copolymérise des monoesters de l'acide acrylique ou méthacrylique et de polyols comportant au 5 moins deux groupes OH~ ou des amides de ces acides tels quels ou portant comme substituants à l'atome d'azote un à deux groupes alcoyle comportant 1 à 4 atomes de carbone ou des hydroxyalcoyles, éventuellement des polyhydroxyalcoyles comportant jusqu'à 6 atomes de carbone, on précipite ensuite la solution et l'on dissout 10 le polymère obtenu dans du sérum physiologique, en formant de préférence, une solution d'une concentration de 0,3 à 1 % et d* une viscosité de 2 à 3 cp. 2) Procédé selon la revendication 1, caractérisé par l'ali-mination du polymère de fractions de poids moléculaire inférieur 15 et supérieur.