Brevet FR2081374A1 — publié le 19711203

La présente invention concerne, à titre de composé nouveau, l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique, qui peut être représenté par la formule de structure suivante : c-nh-ch2-co2h 10 HC sa préparation et son utilisation comme médicament utile, notamment comme inhibiteur de l'histamine. Il est bien établi que l'histamine intervient dans un certain nombre de fonctions physiologiques et, par exemple, dans le système nerveux, la circulation périphérique, 1'hyperacidité gastrique et des manifestations allergiques comme le rhume des foins. La décarboxylation de l'histidine 15 par l'enzyme spécifique, l'histidine décarboxylase, conduit à la formation d'histamine chez les mammifères. La demanderesse a maintenant trouvé que l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique était un inhibiteur puissant de l'enzyme histidine décarboxylase et provoquait donc une inhibition de la formation de l'histamine chez les 20 mammifères. Le mode d'action des composés de l'invention diffère donc de celui des composés antihistaminiques connus qui, habituellement, agissent simplement en s'opposant aux effets de l'histamine existante, par libération ou par formation. Le composé de l'invention peut être préparé par le procédé 25 suivant : on porte l'acide 4-bromo-3-hydroxy-benzoi'que au reflux dans l'éthanol acide ; on obtient le benzoate correspondant qu'on traite par un excès d'hydrate d'hydrazine, ce qui donne le dérivé hydrazide correspondant. Ce dernier est traité par l'acide chlorhydrique puis par le nitrite de sodium, ce qui donne le dérivé d'azide qui, par traitement avec la glycine en présence 30 d'hydroxyde de sodium, donne le produit recherché, l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique. L'invention comprend également les sels cationiques non toxiques et acceptables pour l'usage pharmaceutique de l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique. On citera, entre autres, les sels monobasiques et dibasiques. 35 Les cations de ces sels sont par exemple les cations métalliques non toxiques comme les cations sodium, potassium, calcium, magnésium ou encore les cations d'amines organiques comme les cations de triaIky lamine inférieure, par exemple de triéthylamine, de procatne, etc. 70 44542 2 2081374 L'efficacité des composés selon l'invention dans l'inhibition de l'activité de l'enzyme histidine décarboxylase a été mise en évidence par la méthode de Levine et Watts, Biochemical Pharmacology _15^ 841-849 (1966), modifiée selon Ellenbogen et Collaborateurs, Biochemical Pharmacology 18, 5 Mars 1969. Dans cette méthode, l'inhibition de l'activité gastrique de l'histidine carboxylase chez le rat est mise en évidence par mesure de la quantité d'anhydride carbonique radioactif libéré à partir de lïistidine marquée sur le carboxyle. Les tubes d'incubation utilisés dans la méthode sont décrits à la page 275 de l'ouvrage "Isotopes in Expérimental Pharmacology", L.J. Roth, 10 éditeur, University of Chicago Press (1965). On a mis en évidence l'efficacité des composés selon l'invention et de la brocrésine (phosphate de 4-bromo-3-hydroxybenzylaxyamine, inhibiteur connu de l'histidine décarboxylase) dans l'inhibition de l'activité gastrique de l'enzyme histidine décarboxylase chez le rat, in vivo, par les trois modes 15 opératoires différents décrits ci-après : (A) Mise en évidence de l'inhibition in vivo de l'histidine décarboxylase gastrique du rat après administration de doses intrapéritonéales de 200 mg/kg de poids du corps, pour les composés indiqués. La source de l'enzyme est la partie pylorique de l'estomac du rat adulte. Les résultats obtenus sont rapportés en 20 inhibition % dans le tableau I ci-après. TABLEAU I Durée, mn, après „ _ . Acide 4-bromo-3-hydroxy- Brocresme J J administration hippurique 25 30 60 26 % 33 % 30 % 30 (B) Inhibition in vivo de la sécrétion gastrique d'acide chlorhydrique libre chez des rats dont le pylore a été ligaturé selon le mode opératoire de Shay et collaborateurs, Gastroenterology 5, 43-51 (1945). On a administré les composés indiqués à des doses intrapéritonéales de 200 mg/kg de poids. Les résultats obtenus sont rapportés en inhibition % de l'acidité totale dans le tableau II ci-après. TABLEAU II 35 Durée, mn, après „ , . Acide 4-bromo-3-hydroxy- ' ' y Brocrésine ] J administration hippurique 30 60 35 % 62 % 19 % 70 44542 3 2081374 (C) Mise en évidence de l'inhibition in vivo de l'histine décarboxylase fétale du rat par le plasma de rat traité par voie orale selon le mode opératoire de Ellenbogen et collaborateurs, Biochemical Pharmacology 18, Mars 1969. On a administré les composés indiqués à des doses orales de 60 mg/kg de poids. Les résultats obtenus sont rapportés dans le tableau III ci-après, en inhibition %. TABLEAU III Durée, mn, après , . . . , , , -, u j Brocresme Acide 4-bromo~3-hydroxy administration hippurique 10 15 75 % 25 % 30 39 % L'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique et ses sels cationiques 15 non toxiques acceptables pour l'usage pharmaceutique constituent donc des agents très intéressants pour l'inhibition de l'activité de l'histidine décarboxylase chez les mammifères lorsqu'ils sont administrés en quantités d'environ 15 à 200 mg par kg de poids et par jour. Le régime de doses préféré et donnant les meilleurs résultats consiste en 15 à 100 mg environ 20 par kg de poids et par jour, par utilisation de doses unitaires conduisant à une administration totale d'environ 1,0 g à 7,0 g de substance active pour un sujet d'environ 70 kg de poids et par période de 24 heures. Les composés de l'invention peuvent être administrés par une voie quelconque appropriée, par exemple par voie orale, intrapéritonéale, sous-cutanée, intramusculaire ou 25 intraveineuse. On obtient des compositions qui possèdent les propriétés voulues de limpidité, de stabilité et d'aptitude à l'administration parentérale par dissolution de 0,10 à 10,0 °L en poids de composé actif dans un véhicule consistant en un polyol aliphatique ou un mélange de tels polyols. On obtient des 30 résultats particulièrement satisfaisants avec la glycérine, le propylèneglycol et les polyéthylèneglycols. Ces derniers consistent en un mélange de polyéthylène-glycols non volatils et liquides dans les conditions normales qui sont solubles à la fois dans l'eau et dans les liquides organiques et qui possèdent des poids moléculaires d'environ 200 à 1.500. Bien que la proportion de la 35 substance active dissoute dans ce véhicule puisse varier de 0,10 à 10,0 % en poids, on observera, de préférence, des concentrations d'environ 3,0 à 9,0 %. On peut également utiliser des mélanges variés des polyéthylèneglycols non volatils mentionnés ci-dessus mais on utilisera, de préférence, un mélange présentant un poids moléculaire moyen d'environ 200 à 400. 70 44542 4 2081374 En dehors des composés actifs, les solutions destinées à l'usage parentéral peuvent également contenir des préservateurs variés destinés à empêcher les contaminations bactériennes et fongiques. Parmi les préservateurs utilisables à cet effet, on citera entre autres l'alcool benzylique, 5 le chlorure de myristyl-gamma-picolinium, le nitrate phénylmercurique, le chlorure de benzalconium, l'alcool phénéthyLique, l'éther a-p-chlorophénylique du glycérol, les para-hydroxy-benzoates de méthyle et de propyle et le thimérosal. En pratique, il est également recommandé d'utiliser des antioxydants. Parmi les anti-oxydants qui conviennent, on citera le bisulfite 10 de sodium, le métabisulfite de sodium, et le formaldéhyde sulfoxylate de sodium. En général, ces anti-oxydants sont utilisés à des concentrations de 0,05 à 0,2 %. Lorsque les compositions sont destinées à l'administration par injection intramusculaire, les concentrations des composés actifs seront, 15 de préférence, de 25 à 50 mg par ml des compositions totales. On peut également préparer des compositions pour l'administration intraveineuse par dilution à l'eau ou à l'aide de diluants classiques pour laf thérapeutique intraveineuse, par exemple le glucose isotonique, aux proportions appropriées. Dans ce type d'application,, des concentrations initiales représentant au minimum d'environ 20 10 à 25 mg/ml de composé actif donnent satisfaction. Les composés selon l'invention peuvent également être administrés par voie orale, par dilution dans l'eau de boisson. Les composés selon l'invention peuvent être administrés par voie orale après mélange, par exemple, avec un diluant inerte ou avec un véhicule 25 alimentaire assimilable ; on peut également les introduire dans des capsules de gélatine dure ou molle ou les mettre sous forme de comprimés ; on peut aussi les incorporer directement dans les aliments. Pour l'administration thérapeutique orale, les composés de l'invention peuvent être incorporés dans des excipients et utilisés à l'état de comprimés, de pastilles, de 30 capsules, d'élixirs, de suspensions, de sirops, de cachets, de gommes à mâcher, etc. Ces compositions et préparations doivent contenir au moins 0,1 °L de composé actif. Naturellement, cette proportion de composé actif peut varier ; elle sera, de préférence, d'environ 5 à 75 % ou même plus par rapport au poids de la dose unitaire. D'autre part, la concentration du composé actif dans 35 ces compositions thérapeutiques doit permettre de parvenir à un dosage approprié. On obtient les compositions préférées selon l'invention en opérant à des concentrations telles qu'une dose unitaire pour l'administration par voie orale contienne, d'environ 10 à 200 mg de composé actif. 70 44542 5 2081374 Les comprimés, pastilles, pilules, capsules et formes d'administration analogues peuvent également contenir les constituants suivants : un liant tel que la gomme adragante, la gomme de caroube, l'amidon de maïs ou la gélatine ; un excipient comme le phosphate dicalcique , un agent de désinté-5 gration comme l'amidon de mai's, l'amidon de pomme de terre, l'acide alginique et les constituants analogues ; un lubrifiant comme le stéarate de magnésium et un agent édulcorant comme le saccharose, le lactose ou la saccharine ou un agent aromatisant comme l'essence de menthe poivrée, l'essence de wintergreen ou un parfum de cerise. Lorsque la dose unitaire consiste en une capsule, celle-10 ci peut contenir, en dehors des constituants du type ci-dessus, un véhicule liquide tel qu'une huile grasse. On peut faire appel à d'autres constituants variés présents à l'état de revêtement ou destinés à apporter d'autres modifications à la forme physique de la dose unitaire ; ainsi par exemple, les comprimés, pilules ou capsules peuvent être revêtus de gomme-laque, 15 de sucre ou des deux. Un sirop ou un élixir peuvent contenir les composés actifs, du saccharose comme agent édulcorant, du para-hydroxybenzoate de méthyle et de propyle comme préservateur, un colorant et un agent aromatisant tel qu'un parfum de cerise ou d'orange. Naturellement, toutes les matières utilisées pour la préparation d'une forme quelcorqie d'unité de dosage doivent 20 être pures pour l'usage pharmaceutique et pratiquement non toxiques aux quantités utilisées. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter ; dans ces exemples, les indications de parties et de % s'entendent en poids sauf mention contraire. 25 EXEMPLE 1 Préparation de l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique On porte au reflux 5,0 g (0,023 mole) d'acide 4-bromo-3-hydroxy-benzoîque / J.A.C.S. 68, 574 (1946) 7 dans 50 ml d'éthanol contenant 1,1 ml '.environ 5 °L) d'acide sulfurique concentré pendant 3 heures. On laisse refroidir 30 la solution, on ajoute 50 ml d'eau et on extrait le mélange à 3 reprises par l'éther. On sèche l'extrait éthéré sur sulfate de magnésium pendant 1 heure trente. On évapore la solution filtrée à sec ; le résidu est une matière solide blanche qu'on recristallise dans un mélange éthanol/eau, 50:50. On recueille les cristaux blancs par filtration et on les sèche ; rendement : 4,3 g (75,8 %) de 35 4-bromo-3-hydroxy benzoate d'éthyle fondant à 83-85°C. Les 4,3 g d'ester sont portés au reflux avec un excès molaire de 50 % d'hydrate d'hvdrazine pendant 30 mn ; on obtient un précipité blanc gommeux. On dissout la gomme dans l'eau et on refroidit ; on obtient 0,92 g de cristaux du dérivé d'hydrazide. 70 44542 6 2081374 On dissout le dérivé d'hydrazide (0,92 g) dans 15 ml d'eau contenant 0,5 ml d'HCl concentré. On refroidit la solution à 0°C et on ajoute lentement, sous agitation, 5 ml d'une solution à 10 % de nitrite de sodium refroidie à la glace. Le dérivé d'azide précipite ; on le filtre 5 et on le lave à l'eau froide. On met en "suspension le dérivé d'azide dans 8 ml d'une solution aqueuse froide à 7,5 % de glycine. On ajoute goutte à goutte de l'hydroxyde de sodium N en maintenant la température au-dessous de 15 °C. Lorsque tout l'azide s'est dissous, on réchauffe la solution de couleur jaune pâle à 10 température ambiante et on acidifie à p^ par l'acide chlorhydrique concentré. On extrait la solution par 3 portions de 10 ml d'acétate d'éthyle et on sèche l'extrait dans l'acétate d'éthyle sur sulfate de sodium. On élimine l'acétate d'éthyle sous vide ; le résidu est un sirop de couleur jaune qui, par réfrigération pendant une nuit, donne 178,34 mg de cristaux du produit 15 recherché, l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique , on recristallise dans l'acétate d'éthyle ; rendement : 170 mg P.F. 165-169°C. EXEMPLE 2 Préparation du 4-bromo-3-hydroxy-hippurate de sodium Dans 100 ml de méthanol, on dissout 27,4 g d'acide 4-bromo-3-20 hydroxy-hippurique et 5,4 g de méthylate de sodium ; on évapore la solution à sec. On obtient le 4-bromo-3-hydroxy-hippurate de sodium à l'état de poudre de couleur blanche. EXEMPLE 3 Préparation du 4-bromo-3-hydroxy-hippurate de potassium 25 Dans 100 ml d'eau, on dissout 27,4 g d'acide 4-bromo-3-hydroxy- hippurique et 5,6 g d'hydroxyde de potassium en granulés ; on évapore la solution à sec. On obtient le 4-bromo-3-hydroxy-hippurate de potassium à l'état de poudre de couleur blanchâtre. EXEMPLE 4 30 Préparation d'une composition en comprimés Constituants mg par comprimés Acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique 300' Lactose 200 Amidon de maïs (à mélanger) 50 35 Amidon de maïs (à empâter) 50 Stéarate de magnésium 6 70 44542 7 2081374 On mélange le constituant actif, le lactose et l'amidon de mats à mélanger. On met en suspension l'amidon de mats à empâter dans l'eau à raison de 10 g d'amidon pour 80 ml d'eau et on chauffe sous agitation de manière à former un empois. Cet empois est utilisé pour la mise en granulés 5 des poudres mélangées. Les granulés humides sont passés au travers d'un tamis à ouverture de mailles de 2,38 mm et séchés à la température de 49°C. Les granulés secs sont ensuite passés au travers d'un tamis à ouverture de mailles de 1 mm. Le mélange est lubrifié par du stéarate de magnésium et mis sous forme de comprimés dans une machine appropriée. Chaque comprimé contient 10 300 mg de constituant actif. EXEMPLE 5 Préparation d'une composition pour l'administration intramusculaire Constituants Quantités Acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique 2,5 % 15 para-hydroxybenzoate (mélange 4 : 1 de l'ester méthylique et de l'ester propylique) 0,1 % eau pour injections 100 °L Les para-hydroxybenzoates sont dissous dans la moitié environ du volume d'eau pour injections, à 80aC sous agitation. La solution est 20 refroidie au-dessous de 40°C ; on y dissout le constituant actif. On règle la solution refroidie au volume final par l'eau pour injections et on stérilise par filtration sur un filtre stérilisateur approprié. 70 44542 2081374 REVENDICATIONS 1. A titre de composés chimiques nouveaux, l'acide 4-bromo-3-hydroxy- hippurique et ses sels. 5 2. Composés selon la revendication 1, choisis parmi : l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique ; le 4~bromo-3-hydroxy-hippurate de sodium ; le 4-bromo-3-hydroxy-hippurate de potassium. 3. Procédé de préparation de l'acide 4-bromo-hydroxy-hippurique, 10 caractérisé en ce que l'on fait réagir l'azide de l'acide 4-bromo-3-hydroxy- benzoîque avec la glycine en présence d'hydroxyde de sodium. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que le produit de départ est lui-même préparé par réaction de l'acide 4-bromo-3-hydroxy-benzoîque avec l'éthanol en présence d'un acide, ce qui donne l'ester correspon- 15 dant qu'on traite par l'hydrate d'hydrazine ; on obtient l'hydrazide correspondant qu'on transforme en l'azide recherché par traitement au nitrite de sodium. 5. A titre de médicaments nouveaux, utilisables notamment comme inhibiteurs de l'histamine chez les mammifères, l'acide 4-bromo-3-hydroxy-hippurique et ses sels cationiques non toxiques acceptables pour l'usage 20 pharmaceutique. 6. Compositions thérapeutiques contenant comme composant actif un au moins des composés selon la revendication 5. 7. Formes d'administration des compositions selon la revendication 6.