Brevet FR2105287A1 — publié le 19720428

x 2105287 La présente invention est relative à un procédé de préparation d'une émulsion pour injection capable de transporter l'oxygène, qui est utilisée pour le sauvetage de malades souffrant d'hémorragies importantes. 5 Jusqu'ici, on a estimé suffisant pour le sauvetage, dans le cas où l'hémorragie de la personne humaine n'est pas supérieur à 1500 ml, de faire une transfusion contenant une substance ayant une pression osmotique en matière colloïdale, par exemple, le dextrane, ou une solution d'électrolyte telle qu'une solution de Ringer-10 lactate afin de prévenir un choc par hémorragie. Toutefois, dans le cas où l'hémorragie excède 1500 ml, la quantité d'oxygène- i transportée par les globules rouges du sang diminue et la respiration des tissus dans la périphérie devient insuffisante. Jusqu'ici, le sauvetage a été impossible sans effectuer de 15 transfusion sanguine. Des préparations capables de transporter de l'osygène chez les animaux ont été jusqu'ici étudiées par un certain nombre de personnes, mais il n'a pas été trouvé jusqu'à ces dernières années que les préparations auraient un effet pour le sauvetage 20 quand elles sont injectées chez les animaux. En 1966, l.C. Clark Jr. réussit à maintenir des souris en vie pendant un temps assez long en les immergeant dans certaines sortes de solutions de fluorocarbure /voir Science, 152. 1755 (1966)J, et les études sur l'utilisation des fluorocarbures comme transporteurs d'oxygène 25 dans les corps vivants ont démarré à cette époque. En 1968, R.P G-eyer rapporte que la totalité du sang d'une souris a été remplacée par une émulsion de fluorocarbure par une transfusion du sang et que la souris avait pu être maintenue vivante pendant quelques heures /"Organ Perfusion and Préservation" Appleton -30 Centry G-rafts, page 85 (1968)_7. Ainsi, Olark et al rapportent que la totalité du sang d'un chien avait été remplacée par une émulsion d'un fluorocarbure par une transfusion d'échange du sang et le chien avait été maintenu vivant avec succès pendant un temps assez long /Chemical and Engineering IJews, Dec. 15 (1969) 35 page 51_7* La demanderesse a fait des études sur un procédé d'obtention d'une préparation capable de transporter l'oxygène et elle a trouvé un nouveau procédé de préparation, à une échelle de production en série, d'une émulsion pour injections capable de 40 maintenir vivants des chiens et des singes pendant un temps assez COPY 71 31983 2 2105287 long par une transfusion d'échange du sang. L'objet de la présente invention est de fournir un procédé de préparation d'une éniulsion pour injection capable de transporter l'ozygène. 5 Selon la présente invention, on a conçu un procédé de prépa ration, à une échelle de production en série, d'une émulsion pour injection, capable de maintenir vivants des chiens et des singes pendant un temps assez long par transfusion d'échange du sang. Selon la présente invention, on a conçu également un procédé 10 de préparation d'une émulsion d'un fluorocarbure applicable comme sang artificiel et pour des perfusions pour certains organes. Selon la présente invention, on a encore conçu un procédé de préparation d'une émulsion d'un fluorocarbure ayant une teneur élevée en oxygène applicable comme un substitut provisoire du 15 sang en cas de transfusion. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention ressortiront de la description qui va suivre. Selon la présente invention, il a été fourni un procédé de préparation d'une émulsion d'un fluorocarbure pour injection 20 capable de transporter de l'oxygène, caractérisé par l'émulsifi- cation dans une solution aqueuse d'un sel, d'un fluorocarbure ayant le pouvoir de dissoudre au moins 30 $ vol/vol d'oxygène dans cette solution sous une atmosphère d'oxygène de 100 tfo, sôus la pression atmosphérique avec un surfactif non ionique, la-centrifugation 25 de 1' émulsion aqueuse résultante en vue de diviser les particules de fluorocarbure dans l'émulsion en des diamètres de particules compris entre 0,05 et 0,25yu et ensuite la stérilisation de l'émulsion sôus rotatico.. - Quand on utilise, par exemple, 20 % poids/volume de perfluo-30 rotributylamine comme fluorocarbure, 11 émulsion obtenue selon la présente invention peut contenir 12,5 ml d'oxygène par litre, mais comme résultats d'autres études pour obtenir une émulsion ayant une teneur plus élevée en oxygène, la demanderesse, a trouvé qu'une émulsion de fluorocarbure contenant, par exemple, 69,0 ml d'oxygène 35 par litre peut êtré obtenue par désaération âudit fluorocarbure et de la solution aqueuse du sel sous utie pression réduite avant émulsificatioh, l'insufflation de 1 'oxygène dans le fluorocarbure et la solution- aqueuse du sel désaéré -afin de dissoudre l'oxygène présent, la préparation eàsuite de ladite émulsificatian et la 40 séparation centrifuge: et la stérilisation de l'émulsion sous une 71 31983 3 2105287 atmosphère d'oxygène et sous rotation. La demanderesse a trouvé que l'émulsion d'un, fluorocarbure ayant une telle teneur élevée en oxygène est visiblement efficace pour améliorer la vitalité du corps vivant juste après une perte de sang. 5 Les fluorocarbures appropriés pour la présente invention comprennent le perfluorobutyltétrahydrofurane, le perfluorotri-butylamine, le perfluorooctane, la perfluorodécaline, la perfluoro-méthyldécâline et le 2-monohydrononacosanefluoro-3,6,9,12-tétraoxa-5,8,11-triméthylpentadécane. 10 Gomme surfactif non ionique de la série polyoxyéthylène- polyoxypropylène, capable d'émulsifier et de stabiliser lesdits fluorocarbures sous forme d'une émulsion aqueuse, les surfactifs bien connus jusqu'ici peuvent être utilisés, mais en raison de la toxicité, du poids moléculaire et de la stabilité de 1*émulsion, 15 les copolymères polyoxyéthylène-polyoxypropylène ayant un poids moléculaire de 5000 à 15000, particulièrement de 8200 à 10500, sont plus appropriés. La lécithine du jaune d'oeuf ou la lécithine des graines de soja peuvent également être utilisées comme surfactifs, qui contiennent des polyalcools tels que le glycérol ou le 20 sorbitol pour stabiliser 1'émulsion. L'émulsification est effectuée de la façon suivante : En premier, on dissout une quantité prédéterminée du surfactif dans une solution d'électrolyte aqueux appropriée et on y ajoute ■une matière transportant l'oxygène. On agite le mélange résultant 25 dans un mélangeur ou avec un. agitateur à hélice de façon à préparer une émulsion brute. Quand une petite quantité d'émulsion est à préparer, l'émulsion brute est émulsifiée ultérieurement dans un générateur d'ondes ultra s onique s à magnétostriction et quand une grande quantité d*émulsion est à préparer, elle est émulsifiée 30 ultérieurement dans un émulsionneur à injection du type Manton-G-aulin. Les conditions d'émulsification dans le premier cas sont que,tandis que l'émulsion brute est maintenue à 40°0 ou moins, l'onde ultrasonique de 19 kHz est envoyée dans 1'émulsion brute pendant 15 minutes et les conditions pour le dernier cas sont que, 35 tandis que 1'émulsioaa brute est maintenue à 50°C ou moins, 1'émulsion brute est injectée sous une pression de 140 kg/cm2 au premier stade, sous une pression de 500 kg/cm2 au second stade et troisième stade, sous une pression de 560 kg/cm2 au quatrième stade et sous une pression de 140 kg/cm2 au cinquième'stade. Les 40 particules de fluorocarbure et l'émulsion ainsi Obtenue sont dis 71 31983 4 2105287 tribuées dans une dimension de particules comprise entre 0,05yu et 1,0px quand on les observe au microscope électronique. Quand on injecte 1'émulsion telle quelle ainsi obtenue directement à un animal, on ne peut pas obtenir un bon résultat comme montré dans 5 le tableau III et il est nécessaire de diminuer la répartition de la dimension des particules dans un domaine plus étroit. Pour obtenir une émulsion ayant une teneur plus élevée en oxygène, (1) on désaère l1émulsion ainsi préparée sous une pression réduite et on insuffle de l'oxygène pur dans 1'émulsion désaérée 10 ou (2) la matière brute de fluorocarbure et la solution aqueuse de sel sont désaérées sous pression réduite avant l1émulsifioation, l'oxygène pur est insufflé dans la matière brute de fluorocarbure et la solution aqueuse de sel en vue de dissoudre seulement l'oxygène et la matière brute de fluortxarbure ainsi obtenue et la 15 solution aqueuse de sel sont émulsifiées sous atmosphère d'oxygène selon ledit procédé d'émulsifioation. Ledit procédé (l) est applicable à la préparation d'une petite quantité d'émulsion et l'oxygène peut être contenu dans 1'émulsion théoriquement à une concentration plus élevée. Toutefois, quand 100 1 ou plus de 1*émul-20 sion sont à préparer, ledit procédé (2) est plus efficace. Les différences dans les teneurs en oxygène dues aux différences de procédés sont données dans le tableau I. TABLEAU I Teneur en oxygène de l'émulsion de fluorocarbure. 25 Echantillon Procédé de rempla- Teneur en oxygène (ml) cernent de 1'oxygène par litre d'émulsion Emulsion à 20 fo poids/ Aucun remplacement de 12,5 volume de perfluoro- l'oxygène ou utilisa- tributylamine (A) tion de l'oxygène at- 30 mosphérique Emulsion à 20 $ poids/ id. 17,4 volume de perfluoro-tétrahydrofurane (B) (A) Procédé (1) - 1,00 ml 49,6 35 d'oxygène gaz est insufflé par litre d'émulsion pendant 1 minute (B) id» 68,1 40 (A) Procédé (2) 69,0 (B) id. 93,5 La demanderesse a trouvé qu'une séparation par centrifuga- 71 31983 5 2105287 tion est utile pour diviser finement les particules de fluorocarbure et la première condition pour la présente invention est d'ajuster la répartition du diamètre des particules dans un domaine plus étroit par l'opération de centrifugation. Une centri-5 fugeuse du type Délavai ou Saval est appropriée pour l'opération de centrifugation et il est avantageux à l'échelle de production en série d'effectuer en continu la séparation par centrifugation dans ladite centrifugeuse. Dans le premier cas de la centrifugeuse du type Délavai, on utilise le type BP 15 K et on fait passer 10 l'émulsion à travers la centrifugeuse avec un débit de 30 1 par heure et on récupère le liquide surnageant, tandis que l'on met le moteur et le rotor à 1500 t/mn et 9000 t/mn respectivement. Dans le cas de la centrifugeuse du type Saval, on y fait passer l'émulsion avec un débit de 6 l/h tandis que l'on met la centri-15 fugeuse à 1000 g. Les diamètres de particules du fluorocarbure après la séparation par centrifugation sont compris entre 0,05yu et 0,25yu. Les résultats d'essais sur des animaux révèlent que 1'émulsion ainsi préparée peut être utilisée de façon satisfaisante comme montré dans le tableau II. Pour obtenir une émulsion 20 ayant une teneur en oxygène plus élevée, on effectue ladite opération par centrifugation dans une atmosphère d'oxygène. Pour utiliser sans danger 1'émulsion ainsi préparée comme une matière d'injection, il est nécessaire de stériliser 1'émulsion. Quand on chauffe 1'émulsion, les particules de 1'émulsion 25 tendent généralement à adhérer les unes aux autres et à former des agrégats et en conséquence 1'émulsion subit une séparation de phases. La demanderesse a trouvé que, pour stériliser 1'émulsion sans qu'il y ait d'adhérence entre les particules et de formation d'agrégats, il est utile de faire tourner lentement l'émulsion 30 dans un stérilisateur. La seconde condition pour la présente invention est de stériliser 1' émulsion sous rotation. Quand on stérilise 1'émulsion par exemple à 155°C, pendant 15 minutes, tandis qu'on la maintient au repos dans un récipient, 1'émulsion subit une séparation de phases complète tandis que quand 1'émul-35 sion est soumise à une rotation de 12 t/mn dans les mêmes conditions que ci-dessus, on observe seulement une légère augmentation de la taille des particules. Le diamètre des particules, par exemple de 0,05yu à 0,25yu est augmenté seulement dans le domaine de 0,05yu à 0,375yu. Quand on injecte 1'émulsion à un animal après 40 ladite stérilisation sous rotation, on peut obtenir de meilleurs 71 31983 6 2105287 résultats, comme montré dans le tableau II. Pour obtenir une émulsion ayant une teneur en oxygène plus élevée, on effectue ladite stérilisation sous rotation et sous atmosphère d'oxygène» les dimensions des particules de fluorocarbure ont été déterminées au microscope électronique et un exemple de répartition de la taille des particules est donné dans le tableau II. TABLEAU II 10 ^Diamètre des particules Echantillon 0,05 ru 0,25 0,25 'V 0,375 0,375 A/0,5 0,5 /V0,75 0,75 ru 1,0 15 Emulsion obtenue par traitement ultrasonique w 73 18 6 2 1 20 Emulsion obtenue par émulsifioation par injection (30 72 21 6 1 0 Emulsion surnageante obtenue par centrifugation w 100 0 0 0 0 25 Emulsion obtenue par stérilisation sous rotation ($) 87 13 0 0 0 La même répartition du diamètre des particules peut être 30 observée dans le cas d'une émulsion ayant une teneur plus élevée en oxygène. Les résultats d'essais en fonction de la répartition de la taille des particules de fluorocarbure et du rapport des souris mortes aux souris soumises à l'essai sont montrés dans le tableau 35 III. Dans ces essais, chaque échantillon est préparé par mélange de 20 io poids/volume de perfluorotributylamine et de 4 poids/ volume de copolymère polyoxyéthylène-polyoxypropylène ayant un poids moléculaire de 8200 avec une solution de Ringer-làctate. On remplace le sang de circulation des souris par l'échantillon 40 jusqu'à une valeur hématocrite atteignant 3 $ ou moins et on observe l'état de vitalité des souris après 72 heures. 71 31983 7 2105287 TABLEAU III Répartition de la taille des particules et rapport de mortalité des souris. 5 Echantillon (répartition de la taille des particules) Nombre de souris mortes par rapport au nombre de souris soumises à l'essai 10 Emulsion obtenue par traitement ultrasonique (0,05 - 1, Oyu) 10/10 15 Emulsion obtenue par émulsifioation par injection (0,05 - 0,75yu) 8/10 Emulsion surnageante obtenue par centrifugation (0,05 - 0,25yu) 0/10 20 Emulsion obtenue par stérilisation sous rotation (0,05 - 0,375yu) 0/10 25 Pour vérifier l'effet dû à la différence de teneur en oxygène, le m&ne essai que dans l'exemple 3 est effectué avec 1'émulsion (A) du tableau I. les résultats sont donnés dans le tableau IT où. les essais sont effectués sur 70 rats (race Wister) pesant 120 - 150 g, à la place des souris. 30 TABLEAU 17 Teneur en oxygène et rapport de mortalité des rats. 35 Echantillon Procédé de remplacement de l'oxygène Teneur en oxygène (ml/1 d'é-mulsion) Rapport du nombre des rats morts au nombre des rats soumis à l'essai (A) Aucun remplacement 12,5 6/20 d'oxygène 40 (A) Procédé (l) 49,6 2/20 (A) Procédé (2) 69,0 0/20 71 31983 8 2105287 la présente invention est illustrée aux exemples non limitatifs ci-après. TiiTRiygLE 1 On dissout 52,6 g de chlorure de sodium, 3,7 g de chlorure 5 de potassium, 1,4 g de chlorure de magnésium, 22,2 g d'acétate de sodium et 50,2 g de glutamate de sodium dans 1000 ml d'eau distillée pour injection de façon à préparer une solution d'élec-trolyte aqueux, et on dilue la solution résultante à 8 1. On y dissout ensuite 60 g de polymère de polyoxyéthylène-polyoxypro-10 pylène ayant un poids moléculaire de 8200. On filtre la solution résultante et on ajoute 1,5 kg de perfluorotributylamine au filtrat. On agite vigoureusement le mélange avec un agitateur à. hélice pendant 30 minutes' de façon à obtenir une émulsion brute. On ajoute à 1'émulsion brute de l'eau distillée pour arriver au 15 volume total de 10 litres. On place 1'émulsion brute ainsi obtenue dans le réservoir à liquide d'un émulsionneur du type à injection Manton-G-aulin et on émulsifie par injection de 1'émulsion sous une pression de 140 kg/cm2 au premier stade, sous une pression de 500 kg/cm2 aux second et troisième stades, sous une pression 20 de 560 kg/cm2 au quatrième stade et sous une pression de 140 kg/, cm.2 au cinquième stade, tandis que l'on maintient la température N à 40 - 50°C. On fait passer la totalité de 1'émulsion ainsi obtenue à travers un centrifugeur du type Délavai, type BK 15 E ( moteur 1500 t/mn, rotor 9000 t/mn) avec un débit de 30 l/h 25 pendant environ 20 minutes et on recueille 1'émulsion surnageante. Toutefois, on retourne au centrifugeur les premiers 500 ml de _1'émulsion passée à cause du faible effet de centrifugation et on les recentrifugeo Par l'opération de centrifugation, environ 8 litres de 1' émulsion contenant 15 f° poids/volume de fluoro-30 carbure sont obtenus. On fractionne 1'émulsion ainsi obtenue dans des fioles à injection, on bouche les fioles et on les place dans un stérilisateur rotatif. On stérilise 1'émulsion à 115°C sous rotation à 12 t/mn pendant 15 minutes. D'émulsion, après la stérilisation sous rotation, contient environ 90 fo de fluorocarbure 35 ayant des dimensions de particules de 0,05yu à 0,25yu et environ 10 fo ayant des diamètres de particules de 0,25yu à 0,375yu, mais ne contient pas de fluorocarbure ayant des diamètres de particules plus grands, la teneur en oxygène de 1'émulsion ainsi obtenue est de 9,3 ml/l. \ COPY 71 31983 9 2105287 EXEMPLE 2 On chauffe 1,5 kg de perfluorotributylamine et on fait bouillir à 1C0°C pour chasser le gaz dissous puis on refroidit à température ambiante en y faisant passer de l'oxygène. Ensuite, 5 on soumet la perfluorotributylamine à une réduction de pression, à 40 mm de Hg à 5°C pour chasser le gaz dissous et on remplace le gaz dissous par de l'oxygène gazeux. On effectue 1'émulsifioation de la même manière que dans l'exemple 1, excepté que l'on utilise la perfluorotributylamine ainsi obtenue et que l'on 10 effectue toutes les opérations sous atmosphère d'oxygène, de sorte que l'on obtient une émulsion ayant la même répartition des diamètres des particules que dans l'exemple 1 et une teneur en oxygène de 52,8 ml/l. EZEMPLE 3 15 On dissout 40 g de copolymère polyoxyéthylène-polyoxypropy- lène ayant un poids moléculaire de 10500 dans 800 ml d'une solution de Ringer contenant du lactate de sodium. On filtre la solution ainsi obtenue et on ajoute 100 g de perfluorobutyl-tétrahydrofurane au filtrat. On agite le mélange résultant à 20 température ambiante dans un mélangeur pendant 15 minutes, à la suite de quoi, on obtient une émulsion brute. La solution de Ringer contenant du lactate de sodium est ensuite ajoutée à l'émulsion brute pour faire un volume total de 1 litre. On émulsifie 1'émulsion brute par portions de 100 ml chacune dans un générateur 25 ultrasonique à magnétostriction à 19 kHz pendant 15 minutes, tandis que l'on maintient la température à 40°C ou moins. On recueille les émulsions ainsi obtenues et on les place dans une centrifugeuse continue de type Saval. On centrifuge 1'émulsion à 1000 g en faisant passer toute la cuantité de 1'émulsion pendant 30 10 minutes, à la suite de quoi, on obtient environ 1 litre d'émulsion contenant environ 8 fo poids/volume de fluorocarbure. On stérilise 1'émulsion ainsi obtenue sous rotation dans les mêmes conditions que dans l'exemple 1, on obtient alors une émulsion ayant presque la même répartition des diamètres de 35 particules que dans l'exemple 1 et une teneur en oxygène de 8,7ml/l. SXEKPLS 4 On effectue 1'émulsifioation de la même manière que dans l'exemple 3, excepté que l'on désaère le perfluorobutyltétra-hydrofurane sous pression réduite et que l'on remplace le gaz 40 dissous par de l'oxygène de la même manière que dans l'exemple 2, COPY 71 31983 10 2105287 et on poursuit toutes les opérations sous atmosphère d'oxygène, de sorte que l'on obtient une émulsion ayant presque la même répartition des diamètres de particules que dans l'exemple 1 et une teneur en oxygène de 47,8 ml/l. 5 EXEMPLE 5 On émulsifie 1' kg de lécithine de jaune d'oeuf purifiée dans 40 litres d'une solution aqueuse d'un électrolyte contenant 0,9 g de chlorure de sodium, 1,94 g de chlorure de potassium, 2,24 g de lactate de sodium, 0,142 g de chlorure de magnésium 10 et 10 g desorbitol dans 1 litre d'eau distillée et on filtre l'émulsién • résultante. On ajoute ensuite 5 kg de perfluoro-octane au filtrat et on agite vigoureusement le mélange avec un agitateur à hélice de façon à préparer une émulsion "brute. On ajoute ultérieurement à la solution aqueuse de 1'électrolyte 15 ayant la composition susmentionnée 1'émulsion brute pour arriver à un volume total de 50 litres et on effectue 1'émulsifioation, la centrifugation et la stérilisation sous rotation de 1'émulsion brute de la même manière que dans 1'exemple 1, on obtient alors environ 40 litres d'une émulsion contenant 10 % de fluorocarbure 20 ayant des diamètres de particules de 0,05yu à 0,375yu et une teneur en oxygène de 7,3 ml/l. EXEMPLE 6 On place 40 kg de.perfluorotributylamine dans un récipient capable de résister à une réduction de pression et on les soumet 25 à une réduction de pression de 10 mm de Hg tandis que l'on refroidit à 0°C. On fait vibrer occasionnellement le récipient- et on le. maintient à pression réduite pendant au moins 20 minutes pour chasser complètement le gaz dissous de la perfluorotributylamine, toutes les opérations suivantes sont effectuées avec soin 30 sous atmosphère d'oxygène. On introduit ensuite l'oxygène gazeux dans la perfluorotributylamine liquide pour retourner de la pression réduite à la pression atmosphérique et dissoudre 1'oxygène dans le liquide. On ajoute au liquide ainsi obtenu 195 1 d'une solution physiologique contenant 4 fo poids/volume du copolymère 35 polyoxyéthylène-polyoxypropylène ayant un poids moléculaire de 10500, que l'on chauffe à 100°Q-en vue d'y chasser le gaz dissous et on le sature ensuite avec de l'oxygène gazeux puis on agite vigoureusement -le mélange résultant pendant environ 30 minutes avec un agitateur à hélice de façon à obtenir une émulsion brute. 40 On place 1'émulsion brute ainsi obtenue dans le réservoir à liquide 71 31983 h 2105287 d'un émulsionneur à injection du type Manton-ffaulin et on émulsifie par injection, de l1 émulsion sous une pression de 140 kg/cm2 au premier stade, sous une pression de 500 kg/cm2 aux second et troisième stades, sous une pression de 560 kg/cm2 au quatrième 5 stade et sous une pression de 140 kg/cm2 au cinquième stade, tandis que l'on maintient la température à 40 - 50°C. On fait passer la totalité de 1'émulsion résultante à travers une centrifugeuse du type Délavai type BK 15 K (moteur 1500 t/mn, rotor 9000 t/mn) avec un débit de 30 litres par 10 heure pendant environ 20 minutes et on recueille 1'émulsion surnageante. Toutefois, on retourne à la centrifugeuse les premiers 500 ml de 1'émulsion passée à cause du faible effet de centrifugation. et on les recentrifuge. Par l'opération de centrifugation, on obtient environ 200 litres d'une émulsion con-15 tenant 20 # poids/volume de fluorocarbure. On fractionne 1'émulsion résultante dans des fioles à injection sous atmosphère d'oxygène et on ferme les fioles puis on les place dans un stérilisateur rotatif, où l'on effectue la stérilisation à 121°C pendant 15 minutes sous rotation à 18 t/mn. L'émulsion résultante 20 après la stérilisation sous rotation a environ 90 $ poids/volume de fluorocarbure ayant des diamètres de particules de 0,05yu à 0,25yu et environ 10 fo ayant des diamètres de particules de 0,25yu à 0,375yu, mais ne contient pas de fluorocarbure ayant des diamètres de particules plus grands. La teneur en oxygène de 25 1'émulsion est de 69,0 ml/l. La demanderesse a remplacé le sang des chiens et des singes par des émulsions préparées dans les exemples précédents jusqu'à une valeur hématocrite atteignant 3 $ et 18 chiens et 7 singes dont la presque totalité du sang a été remplacée avec succès 30 par les émulsions par un procédé opérationnel basé sur la transfusion, ont survécu normalement pendant 3 mois et, après 3 mois, ils ont été sacrifiés et disséqués mais aucun état anormal n'a été observé à travers tous les tissus. Il a été reconnu à partir de ces résultats que 1'émulsion de fluorocarbure dont les diamètres 35 de particules sont réglés entre 0,05yu et 0,375yu ont un pouvoir de transporter l'oxygène et l'anhydride carbonique à travers le corps vivant comme une substance de remplacement des cellules rouges. 71 31983 12 2105287 - KE7EHPI0ATI0US - 1.- Procédé de préparation d'une émulsion d'un fluorocarbure pour injection capable de transporter l'oxygène, procédé caractérisé par le fait qu'il consiste à émulsifier dans une solution 5 aqueuse d'un sel un fluorocarbure ayant le pouvoir dé dissoudre au moins 30 volume/volume d'oxygène sous une atmosphère d'oxygène de 100 ^ à la pression atmosphérique avec un surfactif, à centrifuger l'émulsion aqueuse résultante de façon à diviser les particules de fluorocarbure dans 1'émulsion avec un diamètre 10 de particule compris entre 0,05yu et 0,25yu et à stériliser -1'émulsion résultante sous rotation. 2.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le fluorocarbure est le perfluorobutyltétrahydrofurane, la perfluorotributylamine, le perfluoro-octane, la perfluoro- 15 décaline, la perfluorométhyldécaline ou le 2-monohydrononacosane-f luoro-3,6,9,12-tétraoxa-5,8,11-triméthylpentadé cane. 3.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le surfactif est un copolymère polyoxyéthylène-polyoxy-propylène ayant un poids moléculaire de 8200 à 10500 ou la 20 lécithine du jaune d'oeuf ou la lécithine des graines de soja. 4.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que les particules de 1'émulsion après la stérilisation sous rotation ont des diamètres de particules compris entre 0f05yu et 0,375yu. 25 5.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que la stérilisation sous rotation est effectuée à 115°C avec 12 t/mn pendant 15 minutes ou à 121°0 avec 18 t/mn pendant 15 minutes. 6.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le 30 fait que 1'on désaère 1'émulsion aqueuse sous pression réduite et que l'on y insuffle de l'oxygène gazeux pur avant la centrifugation, les opérations successives étant toutes effectuées sous atmosphère d'oxygène de façon à obtenir une émulsion ayant une teneur en oxygène plus élevée. 35 7.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que l'on désaère le fluorocarbure et la solution aqueuse du sel sous pression réduite et que l'on y.insuffle de l'oxygène pour dissoudre seulement l'oxygène par avance, toutes les opérations étant effectuées sous atmosphère d'oxygène.