Brevet FR2073442A1 — publié le 19711001

La présente iention -concerne un produit pharmaceutique immunochimique destiné à la destruction des cellules cancéreuses et stdtend à un procédé de préparation de ce produit pharmaceutique. Pour lutter contre les tumeurs ou les cellules cancéreuses et les détruire, on connaft aussi -bien des produits pharmaceutiques chimiothérapeuttques que des méthodes de lutte physico-techniques Récemment il y a eu, dans de nombreuses publications, des rapports sur la thérapie cancéreuse en plusieurs étapes dans-laquelle, à l'aide doune suracidification optimisée des tumeurs à une valeur de pH denviron 6 à 6,5, on occasionne, gracie à une multiplication du niveau de glucose dans le sang, conjuguée à unehyperthermie à 400C, une instabilisation sélective des cellules cancéreuses dans le corps humain Cette double attaque sélective crée, dans les cellules cancéreuses, des conditions quasi-inflammatoires conduisant à un renforcement dans l'application des autres mécanismes destructeurs de cellules dans le cadre de la thérapie cancéreuse en plusieurs étapes. I1 est en outre connu que la destruction efficace des cellules cancéreuses dans le corps humain est un problème qui réclame une sélectivité extrdmement élevée de la thérapeutique. Tous les agents utilisés à la destruction des cellules cancéreuses doivent être appliqués à celles-ci sans endommager les cellules saines ni d'autres organes du corps humain. Les poisons destructeurs de cellules cancéreuses usuels jusqu'à maintenant ont 19inconvé- nient d'endommager non seulement les cellules cancéreuses, mais aussi, en même temps, les cellules saines. Pour surmonter ces difficultés, il a déjà été proposé un produit pharmaceutique immunochimique constitué par de l'hélixagglutinine anti-A chargée d'un poison cellulaire, en fait des acides galliques et notamment le désoxycholate. L'hélixagglutinine anti-A possède une affinité élevée vis-à-vis des cellules cancéreuses de certaines tumeurs, étant donné que celles-ci ont un profil antigène de l'espèce A. Cependant, en raison des propriétés A, ce principe n'est applicable qu'aux patients de groupe sanguin B et O. La présente invention a pcur but de procurer un produit pharmaceutique immunochimique ayant des propriétés de destruction hautement sélective pour les cellules cancéreuses. L invention a pour objet d apporter un poison cellulaire suivant le principe d accrochage aux cellules cancéreuses et de renforcer hautement son efficacité par une instabilisation sélective simultanée des cellules cancé- rieuses Le produit de l'invention est caractérisé en ce qui comprend une substance d accrochage comportant un poison cellulaire et 'iii corps contenu dans les bactéries ainsi que dans les streptocoques qui est combiné à un nouveau corps, ce nouveau corps étant constitué d'hélixagglutinines anti-A et diacides galliques ainsi que de polysaccharide de streptocoque Comme acide gallique, on emploie de préférence le désoxycholate dérivé de l'acide gallique. Le désoxycholate poison cellulaire est ainsi accroché aux cellules cancéreuses En même temps, lthélizagglutinlne anti-A (en abrégé Anti-AHp) acquiert la spécificité externe de groupe d'un streptocoque du groupe sérologique A, à cause du polysaccharide de la paroi cellulaire possédant la spécificité de groupe des streptocoques du groupe A qui s'y est additionné. Dans ce but, on peut aussi choisir dutiliser les constituants de parois cellulaires d'autres microorganismes porteurs d'un caractère de polysaccharide Ce nouveau corps possède une affinité élevée vis-à-vis des cellules cancéreuses en raison des propriétés d'allure A des cellules cancéreuses, et il s y additionne Ainsi la cellule cancéreuse acquiert un nouveau profil antigène Par suite de ce nouveau profil antigène et des propriétés pyrogènes du polysaccharide des bactéries, les anticorps appartenant à 1 organisme sont d'une part orientés vers les cellules cancéreuses étant donné qu'ils reconnaissent maintenant celles-ci comme des cellules constituant des corps étrangers et ilsles détruisent D'autre part, les cellules cancéreuses sont aussi anéanties par le poison cellulaire qui s'y est accroche. Si lCon utilise maintenant ce nouveau produit pharmaceutique immunochimique en combinaison avec une instabilisation des cellules cancéreuses grâce à une hyperthermie simultanée à une température de 400C et avec une suradification des tumeurs à un pH de 6,3 que l'on obtient par une perfusion intraveineuse prolongée de glucose à un taux de 3,8 grammes par kilo de poids du patient pendant cent minutes, il en résulte une attaque immunochimique hautement sélective et hautement efficace contre les cellules cancéreuses Dans les conditions de la double attaque, c'est-à-dire une suradification optimisée des tumeurs conjuguée à une hyperthermie à 400C, cette attaque immunochimique déclenche un mécanisme de réaction en channe par lequel, grâce à la libération et à l'activation d'enzyme lysosomatique provenant des cellules cancéreuse. mortes, de nouvelles cellules cancéreuses sont détruites, etc. Le procédé de fabrication du produit pharmaceutique immunochimique suivant la présente invention est caractérisé en ce que l'on met tout sabord en solution phosphatée 0,1 molaire tamponnée à un pH de 7,0 le polysaccharide bactérien du streptocoque et que, par addition de lessive de soude, on porte cette solution à un pH de 11,0 et qu'après cela on ajoute du bromure de cyanogène sous une forme solide. Après l'addition du bromure de cyanogène, on maintient pendant environ 10 minutes à 11,0 par addition supplémentaire de lessive de soude. Après cela, par addition d'acide, on ramène le pH à 8,6.Le mélange réactionnel ainsi obtenu est mis en réaction avec 19 anti-Axp qui est -iei dissous dans une solution phosphatée 0,1 molaire tamponnée à un pH de 8,6 Après la mise en présence des deux mélanges, on laisse reposer la solution ainsi obtenue pendant vingt-quatre heures à la température ambiante. Ensuite, cette solution est dialysée jusqu'à ce qu'elle soit exempte de bromure de cyanogène et ensuite, par passage dans une colonne remplie de gel de dextrane réticulée, elle est débarrassée de leanti-AHp qui n'a pas réagi. le produit de cet accouplement ainsi obtenu est ensuite dialysé en présence d'eau distillée jusqu'à ce qull soit exempt de sel et il est enfin lyophilisé. La présente invention a 1Davan- tage que, pour les patients de groupe sanguin B et O, les cellules cancéreuses se trouvant dans le corps humain sont détruites en un t.emps relativement court et de façon hautement sélective sans que les cellules saines ne soient endommagées. Cet effet est encore notamment appuyé par l'instabilisation préalable ou simultanée des cellules cancéreuses L'instabîli- sation par la double attaque indiquée peut alors être assez forte pour qu'une intensité relativement faible de l'attaque immunochimique cancérolytique suffise déJà à déclencher une réaction en channe d'endommagement des cellules cancéreuses avec un facteur de multiplicat.on élevé- dans les tumeurs et les métastasesO Grâce au nouveau profil antigène des cellules cancéreuses et l'attraction de celles-ci par les lysosomes de très nombreux anticorps, les conditions quasiinflammatoires créées dans la tumeur par la double attaque sont renforcées de manière significative et l'efficacité de la thérapeutique en est éminemment prolongée. A l'aide d'un exemple de mise en oeuvre et du dessin, on expliquera plus en détail l'objet de la présente invention. Le dessin montre une esquisse schéma- tique d'une partie d'une cellule cancéreuse à laquelle est fixée lBanti-AHp combinée au polysaccharide du streptocoque ainsi que des cellules de défense appartenant au corps humain. En raison de sa structure superficielle, la cellule cancéreuse ici indiquée schématiquement n'est pas considérée comme une cellule étrangère par les antl- corps du corps humain Lorsque l'on a réussi à lui donner la structure superficielle d'un corps étranger, alors les cellules de défense riches en lysosomes sont attirées par elle, et acquièrent ainsi la possibilité de la détruire Ceci se produit grâce au fait qu'il est conféré à la cellule cancéreuse la chimiospécificité d'un streptocoque ou d'un autre microorganisme du corps humain Dans le dessin, ceci est représenté de façon très schématique et simplifiée Le produit suivant la présente invention = l'hélixagglutinine anti-A chargée de polysaccharide du streptocoque et de désoxycholate - se combine à la cellule cancéreuse par suite de ses propriétés spécifiques anti-A I1 entrain en même temps le poison-cellulaire En raison de lganti-AEp lié au polysaccharide du streptocoque qui s'y est accouplé, la cellule cancéreuse acquiert une chimiospécificité de structure superficielle analogue à celle du streptocoque.Ainsi, les anticorps du corps sont également attirés à la cellule cancéreuse, étant donné que celle-ci est maintenant reconnue comme une cellule étrangère au corps humain En combinaison avec l'instabilisation des cellules cancéreuses par la thérapie cancéreuse en plusieurs étapes9 notamment en combinaison avec l'hyperthermie, les cellules cancéreuses sont détruites avec une sélectivité élevée sans causer de dommage aux cellules saines La préparation du produit pharmaceutique suivant la présente invention se fait ainsi on dissout 100 mg de polysaccharide -du streptocoque dans 10 ml l une solution tampon de phosphate, tel que du phosphate disodique, à un pH de 7,0 et par addition de soude 2 fois normale on règle le pH de la solution à une valeur de 11,0 A cette solution on ajoute 250 mg de bromure de cyanogène sous forme solide et on les y dissout Alors le pH tendant à s'abaisser par libération d'acide bromhydrique est maintenu à 11,0 par addition de soude Après environ 10 minutes de temps de réaction, on ramène le pH à 8,6 et on ajoute à la solution 50 mg d'hélixagglutinine dissoute dans 5 ml de solution de phosphate 0,1 molaire tampon- née à un pH de 8,6 On laisse reposer le mélange pendant 24 heures à la température ambiante et ensuite on dialyse pendant environ 48 heures en présence de 2 litres de solution phosphatée 0,1 molaire tamponnée à un pH de 7,0 que l'on renouvelle au bout de 24 heures afin d'éliminer le bromure de cyanogène en excès L'hélixagglutinine qui n'a pas réagi est éliminée par passage dans une colonne remplie de gel de dextrane rétlculeedans laquelle on peut aussi séparer le poly- sa.elharlde du streptocoque qui n'a pas réagi Le produit d'ac souplement est er.suEte dialysé en présence dUeau distillée jusqu'à ce qu'il soit exempt de sel et enfin lyophilisé Bien entendu, l'invention zest pas limitée. aux exemples ci-dessus décrits et représentés, à partir desquels on pourra procéder à des variantes de réalisation sans pour cela sortir du cadre de l'invention REVENDICATIONS 1 ) Produit pharmaceutique immunochimique destiné à la destruction sélective des cellules cancéreuses, produit caractérisé en ce qu'il se compose d'hélixagglutinine anti-A chargée de polysaccharide bactérien. et diacides galliques 20) Produit pharmaceutique immunochimique suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il contient, en tant que polysaccharide bactérien, le polysaccharide du streptocoque D 3 Produit pharmaceutique immunochimique suivant l9une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisé en ee qu'il continent, en tant qu'acide gallique, le désoxy cholate 40) Procédé de préparation du produit pharmaceutique immunochimique suivant l'une quelconque des reven dilations 1 i 3, caractérisé en ce que tout d'abord on dissout le polysaccharide bactérien du streptocoque dans une solution phosphatée 0,1 molaire tamponnée à un pli de 7,0, et on porte cette solution par addition de lessive de soude à un pH de 11,0, après quoi on ajoute du bromure de cyanogène sous forme solide tout en maintenant environ 10 minutes le pH à 11,0 par addition d'un supplément de lessive de soude, puis, par addition d'acdc, on ramène le pli à 8,6 et on fait réagir ce mélange réactionnel avec de lÙanti-AHp dissoute dans une solution phosphatée o,1 molaire tamponnée à un pH de 8,6, après quoi la solution ainsi obtenue que lion a laisséereposer vingt-quatre heures à la température ambiante est dialysée jusqu'à ce qu'elle soit exempte de bromure de cyanogène et on la débarrasse ensuite, par passage dans une colonne remplie de gel de dextrane, de l'anti-AHp qui nia pas réagi, après quoi le produit d'accouple- ment est dialysé en présence d'eau distillée jusqu'à ce qu'il soit exempt de sel et il est finalement lyophilisé