Brevet FR2081399A1 — publié le 19711203

La présente invention concerne un sel d'amino-acide basique de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique. L'acide 5,6,7,8-tetrahydrofolique qui a la formule suivante est un matériau de structure chimique amphotère et est un type ctif in vivo de l'acide folique. L'aide 5,6,7,8-tétrahydroflique est un matéiau important qui contribue à certaines fonctions in vivo telles que l'activité hémopoiétique et l'activité pro tectrice du foie. L'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique peut être dissous dans l'eau mais sa solution aqueuse est très instahle et l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique nta pas encore été isole sous forme de cristaux purs. Jusqutici pour produire une solution injectable de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique, on a procédé exp6rimentalement au réglage de la propriété d'une solution contenant l'acide 5,6,7,8-térahydrofolique par exemple à celui d'une solution réactionnelle contenant l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique avec un alcalin, mais ceci est indésirable clu point de vue de la pureté exigée d'un médicament t est un défaut important pour la commer cialisation. Comme sel de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofalique, seul le sulfate a été isolé sous forme de cristaux purs mais une solution aqueuse de ce sel ne convient pas comme solution injectable en raison Enfin, en présence d'un tel érat de la technique, on a cherché à isoler l'acide 5,6,7,8-tétranydrofolique sous une forme permettant de préparer facilement des sdutions ïnjectables, c'est-à-dire une forme qui soit stable et facilement soluble dans l'eau. La présente inventier a peut enet un sel d'amino-acide basique de l'aide 5,6,7,8-tétrahydrofolique qui est stahle, facilement soluble dans l'eau et cul peut être mis rapidement sous forme d'une rolution injectable. A la suite de diverses recherches, on a découvert qu'étant donné que le sel d'amino-acide basique de J acide 5,6,7,8-tétrahy- drofolique préparé par réaction de l?acide 5,6,7,8-tétrahydrofoli- que avec deux mol6cules d'un amino-acide basique est exceptionnel lement stable et est facilement soluble dans l'eau, ce sel est très intéressant pour produire des préparations, en particulier des solutions injectables, et safisfait aux exigences ci mentionnées, Pour produire le sel d'amino-acide basique de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique, objet de l'invention} de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique brut préparé en réduisant catalytique ment l'acide folique (voir Biochem.Prep., 7 89-92 (1960)), est mis en suspension dans un t solvant réactionnel et-une solution aqueuse contenant plus de deux équivalents d'un amino-acide basi que est ajoutée à la suspension, de préférence dans un courant d'azote. L'iselement du matériau recherché de-la solution réaçtionnelle obtenue est effectué en ajoutant à la solution un solvant organi que dans lequel le matéiau recherché est légèrement soluble ou insoluble et qui est librement miscible à l'eau, tel que l'6thanol, l'acétune, le dioxane ; etc. pour préclpiter le matériau recherché et en séparant les précipités ainsi formés de la manière-usuelle, par exemple par filtration ou séparation centrifuge.Le matériau recherché ainsi obtenu présente une pureté suffisante pour pouvoir être utilisé en l'état comme matière première ppur les prépara- tisons. Replus, il s'est avéré par chromatographie sur papier que le matériau recherché ainsi récupéré est un composé unique. Comme amino-acide basique à utiliser dans la présente invention on peut citer à titre d'exemple la L-arginines la L-ornithine, la L-lysine. Comme solvant réactionnel on peut utili ser de l'eau, des alcools contenant de l'eau, etc. et il est pré férable -d'eliminer au préalable l'air dissous dans ceux-ci ou d' ajouter un agent réducteur, tel qu'un sulfite, au solvant réac tionnel avant de ltutiliser pour la réaction. Des exemples de la présente invention seront donnés ci= après. EXEMPLE 1 Dans 20 ml d'eau desoxydée, on a mis en suspension 4,81g d'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique brut préparé par un procédé connu et, tout en brassant la suspension avec introduction d'azote, on a ajouté lentement à la suspension une solution de 3,48g de L-arginine dans 20 ml d'eau désoxydée, ce par quoi la solution réactionnelle est devenue une solution transparente jaune clair. Lorsque la solution a été brassée de plus pendant environ 20 mi- nutes avec adjonction à ce moment de 100 ml d'éthanol â la solution réactionnelle, on a obtenu un matériau huileux. Lorsque 50 ml d'éthanol ont eté ajoutés au matériau huileux de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique. L-arginine a été précipité sous forme d'une poudre jaune clair. La poudre a été récupérée par filtration sous pression en atmosphère d'azote et séchée pour fournir 8,29 du produit ayant un point de fusion de 195-107 C (decompo- sition). Analyse élémentaire pour C31H51N15010.2H20 Calculée : C : 44,87%, Hr 6,68%, N : 25,32% Trouvée : C: 45,08%, H: 6,47%, N: 25,12% Le produit présente une absorption ultra-violette présent tant un X maximum à 297 m et un A minimum à 243 mi, ce qui coïocide avec l'absorption ultra-violette de l'acide 5,6,7,8tétrahydrofolique. EXEMPLE 2 En répétant le même processus que dans l'exemple 1 mais en utilisant 2,92g de L-lysine au lieu de la L-arginine, on a obtenu presque quantitativement l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofoli- que-L-arginine, Point de fusion 109-191 C (décomposition). Analyse élémentaire pour C31H51N11010.2H20 Calculée : C: 48,12%, H: 7,16%, N: 19,91% Trouvée : C : 48,36%, lit 6,93%, N: 20,21% REVENDICATIONS 1.- Un nouveau composé chimique caractérisé en ce qu'il est constitué par un sel d'amino-acide basique.de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique, cet acide ayant pour formule 2.- Un nouveau composé chimique selon la revendication 1 caractérisé en ce que ltamino-acide basique est la L-arginine. 3.- Un nouveau composé chimique selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'amino~acide basique est la L-lysine. 4.- Un nouveau composé chimique selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'amino-acide basique est la L-ornithine. 5.- Un nouveau médicament caractérisé en ce que le principe actif est un sel d'amino-acide basique de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique. 6.- Un nouveau médicament selon la revendication 5- carac- térisé en ce que le sel d'amino-acide basique est un sel de L- arginîne de l'acide 5,6,7,8-t6trahydrofolique. 7,- Un nouveau médicament selon la revendication 5 caractérisé en ce que le sel dXamino-acide basique est un sel de L-lysine ae l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique. s.- Un nouveau médicament selon la revendication 5 caractérisé en ce que le sel d'amino~acide basique est un sel de L-ornithine de l'acide 5,6,7,8-tétrahydrofolique.