Brevet FR2068508A1 — publié le 19710827

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de l'adé- nine représentés par la formule où R est un groupe isobutyle, isoamyle ou l-méthyl-n-butyle. La Demanderesse a trouvé que l'on peut isoler une nouvelle substance hypocholestérolémique (désignée ci-après sous le nom de "Eritadénine") à partir du champignon comestible "Shiitake" (Lentinus edodes Sing.), sous forme de cristaux purs, et la Demanderesse ena confirmé la structure chimique (par des études de spectrométrie et de dégradation, et par une synthèse totale) comme étant celle de lI acide 4- ( 6-amino-9H-purin-9-yl) -2(R) 3 (R)-dihydroxybuty- rique (configuration D-érythro). La Demanderesse vient de réussir à préparer de nouveaux dérivés représentés par la formule (I) précitée, et dont l'activité hypocholestérolémique est plus puissante que celle de l'Eritadénine. Selon la présente invention, on peut préparer un composé répondant à la formule (I) par estérification composé répondant à la formule avec l'alcool correspondant en opérant d'une façon classique. On peut donc préparer le composé (I) en soumettant le composé (II) à une réaction de condensation avec un composé répondant à la formule R-OE (III) où R a le sens défini ci-dessus. On peut effectuer de préférence la réaction de condensation, selon la présente invention, en mélangeant le composé (II) et l'al cool (III) en présence d'un acide ou d'un halogénure de thionyle. Tes exemples appropriés de l'acide sont le gaz chlorhydrique sec, l'acide sulfurique concentré ou l'acide para-toluènesulfonique. Lorsqu'on utilise un halogénure de thionyle comme le chlorure de thio nyle, on préfère utiliser l'halogénure de thionyle selon un rapport équimolaire avec le composé de départ (III). Lorsqu'on utilise l'acide, on réalise de façon très appropriée la réaction à la température am biante ou sous 'effet d'un chauffage modéré. Lorsqu'on utilise L'halogénure de thionyle, on peut de préférence conduire la réaction à la température ambiante ou sous l'effet d'un refroidissement à l'aide de glace.En variante, on peut préparer le composé (I) en soumettant un sel de métal du composé (II) tel que le sel de sodium, de potassium ou de lithium, à la réaction de condensation avec l'ha- halogénure correspondant ou avec lester tosylique de l'alcool (III). On peut préparer le composé de départ, l'acide 4-(6-amino 9H-purin-9-yl)-2,3-dihydroxybutyrique en faisant réagir un acétal ou un cétal de la 2,5-dihydroxy-érythronolactone de formule (oÙ représente le radical acétal ou cétal défini cidessus) avec un sel de métal de l'adénine en position 9 pour obtenir le dérivé correspondant de l'acide 4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2,5- dihydroxybutyrique représenté par la formule le sens défini ci-dessus . On hyurolyse ensuite le composé (V) pour obtenir le composé(II) En variante, on peut préparer le composé de départ en faisant réagir une 4-halogéno-5-nitro-6-amino-pyrimidine avec l'acide 4-amino-2, 3-dihydroxybutyrique ; en réduisant le produit pour en transformer le groupe nitro en groupe amino ; et en soumettant " acide 4-[(5S6-diamino-4-pyrimidyl)-amino]-2,5-dihydroxybutyrique résultant à une réaction de cyclisation. lies réactions ci-dessus peuvent s'appliquer aux isomères optiques des composés (II) et (V) sans épimérisation. Par exemple, si l'on utilise l'acide 4-(6-auino-9E-purin-9-yl)-2(R),5(R)-dihydro- xybutyrique comme composé de départ (II), on peut obtenir l'ester optiquement actif correspondant ayant la même configuration de structure. lies expériences pharmacologiques effectuées par la Demanderesse ont montré que l'activité hypocholestérolémique de l'ester selon la présente invention est environ 1000 fois plus élevée que celle de "Clofibrate" (2-parachlorophénoxy-2-méthyl-propionate d'éthyle), qui est l'un des agents hypocnolestérolémiques les plus efficaces connus jusqu'à présent.Voici unicomparaison de l'activité d'abaissement du taux sanguin du cholestérol et du taux sanguin des triglycérides dans le cas de ce composé témoin et dans le cas des composés selon la présente invention ci-après On ajoute le composé indiqué au tableau/ aux aliments du commerce ache tes à la Compagnie Japonaise CLEA, et l'on nourrit dorant 7 jours des rats (mâles) de la souche Sprague-Dawley, pesant 140 à 160 g chacun, à l'aide de ces aliments (chaque groupe d'essai consistant en 8 rats). Après la période expérimentale on détermine le taux total de cholestérol et de triglycérides dans le sérum des rats par le procédé de Zak et par le procédé de Van-Handel et Zilversmit, respectivement. On calcule par la formule suivante le pourcentage de diminution du taux total de cholestérol et du taux total des triglycérides dans le sérum : Niveau moyen du cholestérol total ou des triglycérides totaux dans le groupe % de ayant reçu du médicament diminution = 1 - x 100 Niveau moyen de cholestérol total ou des triglycérides totaux dans le groupe témoin lie Les résultats obtenus sont présentés au tableau suivant./poids des aliments absorbés par les rats soumis aux essais est compris entre environ 16,5 et 17,5 g par jour et par rat). SlABIEAU Pourcen- Pourcentage de Pourcentage de tage diminution du diminution du Composés dans les taux total de taux total de aliments cholestérol du trigXycérides sérum du sérum Eritadénine Sel de Na hémihydraté 0,01 26 49 " " 0,001 8 19 Ester isobutylique 0,0002 27 37 Ester isoamylique 0,0002 29 14 Ester 1-méthyl n-butylique 0,0002 32 " " 0,0001 24 3-6 "Clofibratet'* 0,2 28 62 " 0,05 15 31 * lie " Clofibrate" est le 2-para-chlorophénoxy-2-méthyl-propionate d'éthyle. La toxicité des dérivés est extrêmement faible. Par exemple, lorsqu'on les administre par voie orale à des souris pesant 20 à 25 g, la dose léthale moyenne (li50) des esters selon la présente te invention exerçant un effet de toxicité aiguë est supérieure à 1000 mg par kg. lies 5 souris auxquelles on a administré par voie orale 2000 mg d'ester isoamylique ou 1-méthyl-n-butylique de L'"Eritadénine" (par kg d'animal) ont survécu au-delà de 48 heures. lies nouveaux dérivés selon la présente invention sont particulièrement avantageux pour traiter ou éviter l1hypercholestérolé- mie qui accompagne l'artériosclérose ou qui s'associe à des accidents vasculaires cérébraux. On peut utiliser ces nouveaux dérivés sous des formes convenant à l'administration perorale ou parentérale en association avec un excipient, véhicule ou support acceptable du point de vue pharmacologique. On estime que les doses quotidiennes à préférer pour l'administration à un être humain adulte sont d'environ 1 à 3 mg, bien qu'on puisse augmenter ou réduire les doses Eelo4ttintensité des symptômes ou le degré de gravité estimé. Exemple 1 On prépare une suspension de 550 mg d'acide 4-(6-amino-9Hpurin-9-yl)-2(R),3(R)-dihydroxybutyrique dans 55 ml dtisobutanol anhydre, et l'on fait passer du gaz chlorhydrique anhydre dans la suspension jusqu'à ce que la suspension soit saturée de gaz chlorhydrique à 400-500C. On laisse le mélange reposer durant 48 heures, et l'on concentre le mélange à siccité sous pression réduite. On sèche les cristaux bruts ainsi obtenus et on les dissout dans du méthanol. On fait ensuite passer la solution dans une colonne de "Amberlite IR-45" (forme OH) et l'on concentre l'éluat. On obtient un résidu que l'on fait cristalliser dans le méthanol.On obtient 328 mg de 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)-2(R) ,3(R) -dihydroxybutyrate d'isobutyle. Point de fusion : 177 à 1790C Point de fusion du chlorhydrate : 189 à 1920C (avec décom position) Exemple 2 On agite à 800-1000C durant 4 heures une suspension de 10 g d'acide 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)-2(R) , 3(R) dihydroxybutyrique et de 10 g d'acide sulfurique concentré dans 500 ml d'alcool isoamylique. Apres avoir refroidi le mélange jusqu'à 600 C, on le neutralise en ajoutant 80 g de résine "Amberlite IR-45t' (forme OH), et l'on filtre. On enlève le solvant du mélange par évaporation sous pression réduite. On obtient un résidu que Iron lave avec une faible quantité dtacétonitrile. On obtient 9,34 g de 4-(6-amino-9H-purin 9-yl)-2(R)5(R)-dshydroxybutyrate 1'isoamyle. Point de fusion : 1600 à 1680C. Une recristallisation dans un mélange d'éthanol et d'acétonitrile donne un échantillon purifié dont le point de fusion se situe entre 1610 et 1630C. Exemple 3 On traite de la même façon que celle décrite à l'exemple 2 une suspension de 10 g d'acide 4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2(R),3(R) dans dihydroxybutyrique,/10 g d'acide sulfurique concentré et 500 ml de 1-méthyl-n-butahol. On obtient 7,0 g de l'ester 1-méthyl-nbutylique de l'acide 4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2(R),3(R)-dihydroxy- butyrique. Point de fusion : 136 à 1420C. Une recristallisation dans un mélange d'éthanol et d'acétonitrile donne un échantillon purifié dont le point de fusion se situe entre 1420 et 14800. - REVENDICAUIONS - 1. Dérivés d'adénine caractérisés en ce qu'ils répDndent à la formule où R est un groupe isobutyle, isoamyle ou 1 -méthyl-n-butyle. 2. Isomère optiquement actif du dérivé d'adénine selon la revendication 1. 3. Isomère du type D-érythro du dérivé d'adénine selon la revendication 1. 4. Dérivé d'adénine selon la revendication 1, caractérisé en ce que R est un groupe isobùtyle. 5. Dérivé d'adénine selon la revendication 1, caractérisé en ce que R est un groupe isoamyle. 6. Dérivé d'adénine selon la revendication 1, caractérisé en ce que R est un groupe 1-méthyl-n-butyle. 7. Procédé pour préparer un dérivé d'adénine selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on estérifie l'acide 4-(6-amino9H-purin-9-yl)-2,3-dihydroxybutyrique par l'alcool de formule ROH où R a le sens précité.