Brevet FR2035765A1 — publié le 19701224

La présente invention a pour objet l'introduction en thérapeutique humaine et vétérinaire de l'héparinate de pyrido xine qui manifeste une activité à la fois anticoagulante, antiinflammatoire et clarifiante plasmatique et qui possède les propriétés biologiques et pharmacodynamiques de la vitamine B6. Dans le texte, on a traité de l'héparinate de pyridoxine mais on peut substituer à ce corps les héparinates des autres facteurs fitaminiques B6 : pyridoxamine - pyridoxal, ...., étant bien entendu qu'ils possèdent les mêmes propriétés thérapeutiques qu'énoncées ci-dessus. Lthéparinate de pyridoxine est conditionné au poids médicinal et présenté, seul ou en association compatible, sous une forme permettant qu'il soit administré chez l-'homme, par exemple en comprimés, en capsules, en solution, en pommade, en suppositoires0 On donne ci-après la formule de ce corps. Formule ddveloppée Les formules des sels correspondants de la pyridoxamine ou du pyridoxal sont obtenues en remplaçant dans la formule précédente la pyridoxine la pyridoxamine le pyridoxal I - MODE DE PREPARATION Principe. L'héparinate de sodium, par passage sur une colonne contenant une résine échangeuse de cations, est transformé en sa forme acide. A cette forme acide est ajoutée une quantité déterminée de pyridoxine base, fonction de @la teneur en sodium de l'héparinate de sodium utilisé. Mode opératoire, On dose le sodium dans l'héparinate de sodium à utiliser. - On passe sur colonne échangeuse de cations une quantité donnée d'héparinate de sodium en solution aqueuse, la colonne échangeuse contenant une quantité de résine de capacité d'échange suffisante. - On ajoute à l'éluat une quantité de pyridoxine base fonction du dosage du sodium de l'héparinate de sodium. - On soumet la solution aqueuse d'héparinate de pyridoxine à la lyophilisation. II - CARACTERES - Poudre cristalline, blanche, legère, ae saveur à la fois acidulée et amère, persistante. - soluble dans l'eau ; insoluble dans l'éthanol à 960, l'acétone, l'éther sulfurique. degré hygroscopique : 6,1 % humidité (Karl Fischer) : 2,46 % pH (solution aqueuse à5 %) compris entre 4 et 5,5 1 P. 100 spectre U.V. : maximum d'absorption :#=291 m 1 - 258 1 cm teneur en pyridoxine base : calculé trouvé 51 % 50,70 % III - PROPRI#T#S PHARMACOLOGIQUES On a démontré : 10 - l'activité anticoagulante, 20 - l'activité vitaminique (par le dosage microbiologique) de l'héparinate de pyridoxine. Activité anticoagulante La technique utilisée est celle indiquée par la Pharmacopée française, édition de 1965, page 560, pour l'héparine. Résultats Qs D1après la formule T = -----x 1.000 où Qs = la quantité d'héparine, exprimée en unités inter nationales, contenue dans le tube demi-coagulé de la série de l'étalon. Qx = la quantité d'héparine,exprimée en mierogrammes, dans le tube demi-coagulé de la série de l'héparine de ti tre inconnu. On a trouvé : Qs = 0,375 U.I. Qx = = 2,5 g d'héparinate de pyridoxine exprimé en héparine, soit T = 0,375 x 1.000 = 150 U.I /mg, 2,5 le titre théorique de l'héparinate de pyridoxine étant de 63.116 U.I. au gramme, le titre trouvé est de : 73.965 U.I. au gramme Activité vitaminique Principe On a appliqué le dosage par diffusion sur un milieu gélosé en utilisant comme microorganisme test : Saccharomyees carlsbergensis. Technique 10 - Le microorganisme test utilisé est saccharomyces carlsbergensis S 184 de la collection de la demanderesse. 20 - Le milieu de culture destiné à l'essai est le suivant Solutionsstock -solution 1 Phosphate bipotassique ............. 1,1 g) Chlorure de potassium .............. 0,85 g) Chlorure de calcium ................ 0,25 g) Sulfate de magnésium ............... 0,25 g Sulfate de manganèse ............... 0,005 g) Chlorure ferrique .................. 0,005 g) Eau distillée q.s.p. ...............100 mi ) -solution 2 Hydrolysat de caséine .............. 8 g ) Eau distillée q.s.p. ...............10O ml -solution 3 Biotine ............................ 0,004 g) Kau distillée q.s.p.................100 ml ) -solution 4 Pantothénate de calcium ......e.... 0,005 g) Inositol .. .. .. e........... .0,050 g) Acide nicotinique ................. 0,005 g) Eau distillée q.s.p. .............. 100 ml ) -solution 5 Thiamine ................. .... . . .. 0,005 g) Eau distillée q.s.p. .............. 10 ml ) -Solution 6 Citrate de potassium .............. 10 g) Acide citrique .................... 2 g) Eau distillés q.s.p................100 ml Milieu d'essai On prend 100 ml de la solution 100 ml de la solution- 2 0,4 ml de la solution 3 100 ml de la solution 4 1 ml de la solution 5 100 ml de la solution 6 puis on complète à 1.000 ml avec de l'eau distillée. On ajuste le pli à 5,5 On chauffe trente minutes à 100 C On refroidit. On filtre sur Millipore 0,22 On ajoute de la gélose glucosée stérile.............(600 ml) On refroidit à 450C avant l'ensemencement. 3 - L'ensemencement du milieu de culture se fait à partir d'une suspension de Saccharomyces obtenue sur milieu Sabouraud liquide à raison de 3 %. Le milieu est réparti à raison de 15 ml dans des boîtes de Pétri de 10 cm de diamètre. 4 - La courbe d'étalonnage comprend les points suivants : O,Ot - 0,02 - 0,04 - 0,08 - 0,16 g/ml de pyridoxine étalon. 50- L'échantillon est dilué à la concentration présumée de 0,04 g/ml. 6 - L'incubation des boîtes de Pétri ensemencées, contenant les cylindres aux différentes concentrations de pyridoxine étalon et de- pyridoxine échantillon, se fait à 280C pendant 48 heures. 7 - Au dessin annexé, on porte, sur l'axe des ordonnées, les concentrations des solutions et, sur l'axe des abscisses, les diamètres des zones de croissance. Le titre de l'échantillon est calculé en se reportant sur la droite de la courbe d'étalonnage. R#SULTATS Pyridoxine Diamètre des zones g/ml de croissance 0,01 14 0,02 17 0,04 19,74 0-,08 21,87 0,16 24,t2 Héparinate de pyridoxine 0,04 19,74 Exprimée en pourcentage d'activité, la zone de croissance de l'échantillon est égale à 100 % par rapport à l'étalon. EXEMPLES D'UTILISATION THERAPEUTIQUE CHEZ L"HOMME L'utilisation thérapeutique de l'héparinate de pyridoxine (ou de pyridoxamine ou de pyridoxal) est basée particulièrement sur ses propriétés anticoagulantes, hypolipémiantes et antiinflammatoires. ainsi par exemple : dans les manifestations thrombo-emboliques, les infarctus car diaques et pulmonaires, etc on injectera en moyenne, par voie intraveineuse, - à titre préventif : 6 à 8 mi par 24 heures (en quatre fois) - à titre curatif : 8 à 15 mi par 24 heures (en 8iX fois) d'une solution 10 % d'héparinate de pyridoxine. - dans le traitement de l'athérosclérose, on administrera pendant plusieurs semaines des comprimés dosés à 50 mg d'héparinate de pyridoxine, la posologie quotidienne moyenne étant de six comprimés à laisser se déliter sous la langue, ou des suppositoires dosés à ioe mg d'héparinate de pyridoxine à raison de un tous les deux jours en moyenne, ou bien l'on injectera en moyenne trois fois par semaine et, de préférence, par voie intraveineuse (mais la voie intramusculaire est possible), le contenu d'une ampoule de 1 ml dosée à 100 mg dthaparinate de pyridoxine. - dans le traitement des manifestations cutanées inflammatoires, en particulier d'origine veineuse (périphlébites, hémorroides, etc,...) on appliquera localement, une ou deux fois par jour, en favorisant la pénétration par un léger massage, une petite quantité de pommade ou de crème ou de gel dosés à 2,5 % d'héparinate de pyridoxine, ou l'on pulvérisera quelques milli litres d'une solution dosée à 5 % d'héparinate de pyridoxine. L'héparinate de pyridoxine peut être administré seul ou en association compatible ; par exemple, suivant les indications, on pourra lui adjoindre, ensemble ou séparément, un enzyme anti inflammatoire, comme l'alpha-chymotrypsine ; un corticostéroide un facteur vitaminique P ; un agent hypolipémiant, comme le principe lipocaïque du pancreas ; etc, REVENDICATIONS 1 - Médicament anticoagulant, anti-inflammatoire et clarifiant plasmatique, caractérisé en ce que le principe actif est l'héparinate de pyridoxine auquel peuvent être substitués les héparinates des autres facteurs vitaminiques B6, tels que l'héparinate de pyridoxamine et l'héparinate de pyridoxal. 2 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que sa formule est héparinate de pyridoxine : 500 mg excipient : q.s.p. une ampoule injectable de 5 mi. 3 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que sa formule est t héparinate de.pyridoxine : 100 100 mg excipient : q.s.p. une ampoule injectable de 1 ml. 4 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que. sa formule est : héparinate de pyridoxine : 50 mg excipient : q.s.p. un comprimé 5 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que sa formule est : héparinate de pyridoxine 100 -excipient : q.s.p. un suppositoire 6 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que sa formule est : héparinate de pyridoxine : 2,50 g excipient : q.s.p. 100 g de pommade. 7 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce que sa formule est : héparinate de pyridoxine : 5 g excipient : q.s.p. 100 ml. de solution à pulvériser localement. 8 - Médicament suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comporte en outre un enzyme anti-inflammatoire tel que 1'alpha-chymotrypsine, un corticostéroide, un facteur vitaminique P, un agent hypolipémiant tel que le principe lipocafque du pancréas. 9 - Médicament suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il est principalement utilisé pour ses propriétés anticoagulantess, hypolipémiantes et antiinflammatoires.