Brevet FR2035852A1 — publié le 19701224

, La présente invention est relative à de nouvelles compositions pharmaceutiques ou vétérinaires, à de nouvelles substances alimentaires pour les animaux ou à des adjuvants à la nourriture des animaux comprenant des combinaisons ^ a) d'un dérivé semi-synthétique de la rifamycine S, de la rifamycine SY ou de la rifamycine B ayant un effet antibiotique,' et b) d'un antibiotique choisi parmi les groupes des pénicillines, des céphalosporines, des streptomycines, des 10 kanamycines, des gentamycines, des tétracyclines, des macrolides, des polypeptides antibiotiques ou du chloramphénicol. De telles compositions ont un effet antibiotique synergique et sont, de ce fait, utiles comme antibiotiques, tandis que les préparations alimentaires pour les animaux sont utiles comme promoteurs de la croissance. l'invention vise, par suite, également, des méthodes pour la préparation et l'application des nouvelles compositions. Les dérivés semi-synthétiques de la rifamycine mentionnés ci-dessus sous a) sont des dérivés de la rifamycine S, 2o cLe la rifamycine SV ou de la rifamycine B, ayant un effet antibiotique, et qui peuvent être obtenus par synthèse partielle en partant des composés de la rifamycine basique. Les dérivés semi-synthétiques de la rifamycine S ou de la rifamycine SY ayant un effet antibiotique et utilisables pour 2^ les compositions synergiques de l'invention sont premièrement les 3-amino-dérivés, qui sont décrits par exemple dans le brevet Grande-Bretagne n° 1.161.908. Ces composés de la rifamycine S ou de la rifamycine SV ont en position 3 un groupe aminogène libre ou un groupe aminogène substitué par un radical aliphatique. Il y 20 a lieu de mentionner particulièrement ceux présentant un groupe aminogène aliphatique inférieur en position 3> tels que la 3-méthylamino—, la 3-éthylamino- ou la 3-isopropylamino-rifamy-cine SV, ou ceux ayant un groupe cyclo-alcoyle, comme la 3-cyclo-propylamino- ou la 3-cyclohexylamino-rifamycine SV, donc des dérivés comportant un groupe aminogène cyclique comme la 3-pyrro-lidino- ou la 3-pipéridino-rifamycine SV et spécialement la 3-morpholino-rifamycine SV, les sels métalliques, par exemple les sels de métaux alcalins, de ces composés et les dérivés quino-niques correspondants. 70 105Î1 2035852 Un autre groupe de dérivés semi-synthétiques de la rifamycine S ou de la rifamycine SV sont ceux comportant un groupe aminogène aromatique en position 3» par exemple ceux décrits dans le brevet français n° 1.567.071, spécialement la 5 3-anilino-rifamycine S et la 3-anilino-rifamycine SV. Un autre groupe est encore formé par les composés obtenus en faisant réagir de la rifamycine S ou de la rifamycine 0 sur une diamine aromatique ou sur un aminophénol. Par cette réaction, on obtient un dérivé de la rifamycine S ou de la rifa-10 mycine SV ayant un noyau aromatique condensé en position 3»4-. Ces composés sont, par exemple, décrits dans le brevet américain n° 3.338.888. Il y a lieu de faire remarquer tout particulièrement parmi ces dérivés le produit de condensation qui peut être obtenu en faisant réagir de la rifamycine S ou de la rifamycine 0 15 sur de 1'ortho-phénylène-diamine, et qui a été désigné sous le nom de rifamycine PH ou de rifazine. Un autre groupe remarquable de dérivés semi-synthétiques de la rifamycine SV est constitué par ceux pouvant être obtenus en condensant de la 3-formyl-rifamycine SV avec des aminés, des 20 hydroxylamines, des hydroxylamines O-substituées, l'hydrazine ou des hydrazines substituées. Ce groupe de dérivés est décrit dans le brevet Grande-Bretagne 1.109.631. Des composés particulièrement valables de cette série sont, par exemple, ceux obtenus en faisant réagir de la 3-formyl-rifamycine SV sur des hydrazines 25 substituées, comme la 1-amino-pipérazine ou la 4-amino-morpholine, ou spécialement la 4—méthyl-1-amino-pipérazine. Le composé obtenu avec l'hydrazine mentionnée en dernier lieu, en l'occurrence la 3-Z~/|-' -méthyl-pipérazinyl-imino-méthyl_7-rifamycine SV, désignée par le nom générique de rifampicine, est un dérivé 30 particulièrement précieux destiné à être utilisé conformément à la présente invention. Un autre groupe de dérivés, approprié pour la préparation des nouvelles compositions conformes à 1'invention,est constitué par les dérivés de la 3-aminométhyl-rifamycine SV 35 pouvant être obtenus en condensant suivant Mannich de la rifamycine S avec du formaldéhyde et une aminé aliphatique secondaire, et en réduisant, par exemple avec de l'acide ascorbique. Ces dérivés sont décrits, par exemple, dans le brevet américain n° 3.34-9.082. 70 lOStl 5 2035852 ?armi les dérivés semi-synthétiques de la rifamycine B qui peuvent aussi être utilisés comme composants pour les nouvelles compositions conformes à l'invention, il y a lieu de mentionner spécialement le diéthylamide de la rifamycine B qui a été désigné 5 sous le nom de rifamide. Finalement, on peut faire ressortir les 25-O-désacétyl-dérivés de* tous les dérivés semi-synthétiques indiqués ci-dessus, qui peuvent être obtenus, par exemple, suivant la méthode décrite dans la demande de brevet sud-africaine n° 67/64-75» et' qui 10 peuvent aussi être utilisés comme composant (a) dans les nouvelles compositions de l'invention. De tels 25-désacétyl-dérivés peuvent être obtenus en soumettant les composés correspondants de la rifamycine à une hydrolyse modérée en milieu alcalin, par exemple par traitement avec de l'hydroxyde de sodium à la température 15 ambiante. Les composants de rifamycine des nouvelles compositions conformes à l'invention sont également décrits dans la publication intitulée "Antimicrobial Agents and Chemotherapy" 1966, pages 352 à 358. 20 Les antibiotiques mentionnés ci-dessus sous b) sont également connus et sont décrits, par exemple, par Erhart-Ruschig dans la publication intitulée "Arzneimittel", pages 1571 et suivantes, Verlag Chemie, Weinheim 1968. Elles sont également décrites, par exemple, par Kirt Othmer dans la publication inti-25 tulée "Encyclopedia of Chemical Technology", 2e édition, volume II, page 535. La composition et les préparations alimentaires conformes à la présente invention renferment une quantité effective ou sub-effective des rifamycines telles que définies sous a) et 30 des autres antibiotiques tels que définis sous b), à un taux approprié, de préférence à un taux compris entre 1 : 10 et 10 : 1, par exemple entre 1 : 5 et 5 : 1 environ, spécialement entre 1 : 2 environ et 2 : 1 environ, et la quantité usuelle des excipients ou diluants conventionnels, tandis que la quantité de 35 chaque antibiotique simple ou la quantité totale des deux peut être inférieure à celle utilisée dans les préparations coimues des composants. Par quantité effective, il y a lieu d'entendre la quantité de l'antibiotique simple entrant dans la préparation lorsqu'il est utilisé seul et ayant un effet antibiotique, et 70 10511 4 2035852 l'on entend pair analogie, par quantité sub-effective, une quantité de'l'antibiotique simple utilisé seul qui est inférieure à la quantité effective et ne produit pas d'effet antibiotique. Les effets antibactériens des nouvelles combinaisons 5 peuvent être testés soit in vitro, soit in vivo. Par exemple, les dynamiques de croissance des bactéries à G-ram négatif ou à Gram positif peuvent être estimées dans les milieux qui les renferment avec les produits nutritifs, a) pas d'antibiotique (contrôle 0) 10 b) les rifamycines (A) ou d'autres antibiotiques CB) seuls c) les deux composants (A + B). Les quantités simples de A et de B qui sont utilisées suivant c) peuvent être la moitié de celles utilisées suivant b). 15 Les tests in vivo peuvent être effectués avec différents animaux d'expérimentation, avantageusement avec des mammifères tels que des souris, qui sont infectées avec une quantité létale ou sublétale d'agents pathogènes, après quoi les compositions de l'invention sont administrées. Leur effet peut être déterminé 20 soit par le taux de guérison des animaux infectés, soit en récupérant les éléments pathogènes vivants de leur organisme, par exemple d'organes particuliers tels que les reins. D'une façon surprenante, on a trouvé que les dynamiques de croissance des organismes pathogènes, plus particulièrement 25 les bactéries à Gram négatif moins traitables par les antibiotiques, telles que Aerobacter Brucella, Escherichia, Xlebsiella, Malleomyces, Neisseria, Pasteurella, Proteus, Pseudomonas, Salmonella, Shigella et Vibrio strains, de même que les bactéries à Gram positif telles que Actinomyces, Clostridia, Corynebacteria, 30 Diplococci, Mycobacteria, Staphylococci ou Streptococci, sont altérées de façon bénéfique par les compositions de l'invention. Par exemple, les dynamiques de croissance in vitro suivant les paragraphes a), b) et c) peuvent être dépeintes comme suit : 10511 5 2035852 0 Nombre n de bactéries survivantes 10 a) b) (A+B) c) Temps t (en heures) 5 0 5 0 ■5 Ces fonctions J (n,t) décrivant lesdites dynamiques de croissance indiquent que l'effet antibactérien d'une combinaison suivant l'invention est plus grand que celui pouvant être obtenu avec la même quantité des composants. De ce fait, les nouvelles compositions et les préparations alimentaires sont supérieures à celles des composants actuellement utilisés, et c'est pourquoi des doses plus faibles peuvent être utilisées. Toutefois, me suppression du développement de la résistance peut être atteinte. Par exemple, les organismes pathogènes attaqués par lesdits dérivés semi-synthétiques de la rifamycine apparaissent être plus sensibles aux autres antibiotiques mentionnés ci-dessus sous le paragraphe b), spécialement les pénicillines, les céphalosporines, les streptomycines, les kanamycines ou les gentamycines. Particulièrement utiles sont les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires, ainsi que les substances alimentaires pour les animaux et les adjuvants à la nourriture des animaux renfermant une quantité effective ou sub-effective de la) un dérivé de la rifamycine choisi parmi le groupe comprenant "une 3-alcoylamino-, une 3-dialcoylamino-, une 3-cyclo-alcoylamino-, une 3-alcoylène-amino- et une 3-aza- ou -oxa-alcoy-lène-amino-rifamycine S ou -SV, dont les groupes aminogènes renferment de un à 8 atomes de carbone, la rifazine, le rifamide et la rifampicine, ou un sel thérapeutiquement utilisable de ceux-ci, et 2a) un autre antibiotique choisi parmi le groupe comprenant la pénicilline (BT, D, F, G, K, L, MV, M", 0, S, V, W 70 10511 6 2035852 ou X), 1'ampicilline (A ou B), 1'ancilline, 1'azido-pénicilline, la bétacine, la carbénicilline, la quinacilline, la cloxacilline, la dicloxacilline, la flucloxacilline, la furfuryl-pénicilline, 1'hétacilline, la lévopropylcilline, la méthicilline, la nafcil-5 line, 11oxacilline, la phénoxy-isopropyl-pénicilline, la propi-cilline, la thiphencilline ; la céphalosporine C, la céphalexine, la céphaloglycine, le céphalorane, la céphaloridine, la cépha-lothine, la céphazoline, 11hétasporine ; la streptomycine (A ou B), la dihydro-streptomycine, 1'oxystreptomycine, 11aspartocine, 10 la capreomycine, la leukomycine, la neutramycine, la ranimycine, la rutamycine, la steffimycine, le streptonicozide, la stre,pto-thricinej la kanamycine (A, B ou G), la glébomycine, la genta-mycine, la néomycine, la paromycine, la phosphonomycine ; la tétracycline, la chloro-tétracycline, la déméthylchloro-tétra-15 cycline, la doxycycline, la lymécycline, la méclocycline, la méthacycline, la minocycline, la nitrocycline, 1'oxytétracycline, la rolitétracyçline, la sancycline ; le chloramphénicol, l'azido-amphénicol, le thiamphénicol, le fluophénicol ; la carbomycine (A ou B), 1'érythromycine, 11oléandomycine, la pikromycine, la 20 spiramycine, la troléandomycine, 11amphomycine, la bacitracine, la colistine, la gramicidine, la lincomycine, la novobiocine, la polymixine, la ristocétine, la tyrocidine (A, B ou C), la vanco-mycine et la siomycine, ou un sel thérapeutiquement utilisable de ces antibiotiques. 25 Particulièrement précieuses sont les compositions et les préparations alimentaires renfermant -une quantité pharma-cologiquement effective ou sub-effective de la) une 3-alcoylamino-, une 3-dialcoylamino-, une 3-cyclo-alcoylamino- et une 3-aza- ou 3-oxa-alcoylamino-rifa-30 mycine S ou -SY, dont les groupes aminogènes renferment de -un à 8 atomes de carbone, la rifazine, le rifamide et là rifàmpicine, ou m sel thérapeutiquement utilisable de ces antibiotiques, 2b) un antibiotique des groupes des pénicillines ou des céphalosporines, ou un sel thérapeutiquement utilisable de 35 celles-ci, et parmi ces composés possèdent une importance remarquable ceux dans lesquels l'un des dérivés de la rifamycine indiqués sous la) est combiné avec l'une des pénicillines ou céphalosporines suivantes : la pénicilline BT, G ou V, 1'ampicilline, la cloxacilline, la dicloxacilline, la méthicilline, 10511 7 2035852 la nafcilline, 1'oxacilline, la céphaloridine, 1a céphalotine, la céphalosporine C, la céphazoline, la céphaloglycine et la chéphalexine, particulièrement ceux dans lesquels le composant de rifamycine est représenté par la rifampicine. 5 D'autres groupes de compositions intéressantes sont ceux formés par un dérivé de la rifamycine choisi parmi le groupe la) ci-deôsus et par un antibiotique choisi parmi a) la streptomycine ou la dihydro-streptomycine, "b) la kanamycine, 0 c) la gentamycine, d) la tétracycline, la chloro-tétracycline, ou les sels thérapeutiquement utilisables de ces composés, spécialement les préparations constituées par de la rifampicine et les antibiotiques a) à d). 5 Lesdites compositions et les préparations alimentaires renferment avantageusement toutefois l'un des antibiotiques mentionnés ci-dessus sous les paragraphes a) et b), mais peut renfermer plus d'un d'entre eux, par exemple plus d'un des antibiotiques énoncés sous le paragraphe b). Les proportions préfé-D rées des ingrédients actifs desdites compositions, des préparations alimentaires, se situent entre 1 : 5 et 5 : 1 environ, avantageusement entre 1 : 2 et 2 : 1 environ. En plus des ingrédients actifs, elles renferment la quantité usuelle d'excipients ou diluants conventionnels. 5 Les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires suivant l'invention renferment deux desdits antibiotiques mentionnés sous a) et b) dans la même quantité environ ou dans une quantité moindre que celle utilisée dans les compositions conventionnelles connues des composants, en liaison ou en mélange D avec des excipients appropriés pour une application entérale, parentérale ou topique. Sont d'un intérêt particulier les compositions dans lesquelles les composants, par exemple le composant de rifamycine, est présent à des doses plus faibles que celles utilisées 5 dans les compositions connues pour un antibiotique simple, par exemple dans un rapport de 1 : 3 à 2 : 3 de la dose conventionnelle connue, et dans lesquelles l'autre composant est utilisé au dosage conventionnel. Les deux composants peuvent, à titre de variante, être présents à des doses sub-effectives ou à des 10511 8 2035852 doses plus faibles que les doses conventionnelles. Les formes préférées des préparations conformes à l'invention sont des comprimés, des capsules de gélatine, renfermant les ingrédients actifs conjointement avec 5 a) des diluants, par exemple du lactose, du dextrose, du sucrose, du mannitol, du sorbitol, de la cellulose et/ou de la glycine, b) des lubrifiants, par exemple de la silice, du talc, de l'acide stéarique, des sels de magnésium ou de calcium et/ou 10 un polyéthylène-glycol et, en outre, pour les comprimés, c) des liants, par exemple du silicate de magnésium et d'aluminium, de la pâte d'amidon, de la gélatine, de la gomme adragante, de la méthyl-cellulose, de la carboxy-méthyl-cellulose sodique et/ou de la polyvinyl-pyrrolidone, et si on le désire, 15 d) des agents de dissociation, par exemple des amidons, de la gélose, de l'acide alginique ou son sel de sodium, des enzymes, des liants ou des mélanges effervescents et/ou e) des adsorbants, des colorants, des agents améliorant le goût et des édulcorants. Les compositions injectables sont, 20 de préférence, des solutions ou suspensions aqueuses isotoniques et les suppositoires ou onguents sont avantageusement des émul-sions ou des suspensions graisseuses. Ces compositions peuvent être stérilisées et/ou renfermer des adjuvants tels que des agents de conservation, de stabilisation, des agents mouillants 25 ou émulsifiants, des solubilisants, des sels servant à régler la pression osmotique, et/ou des tampons. Lesdites compositions pharmaceutiques peuvent également renfermer d'autres substances thérapeutiquement précieuses. Elles sont préparées suivant des procédés conventionnels de mélange, de granulation ou de revête-30 ment, et elles renferment de l'ordre de 0,1 à 75 %» de préférence de 1'ordre de 1 à 50 % des ingrédients actifs énoncés sous a) et b). Les substances alimentaires pour les animaux ou les additifs à la nourriture ou à l'eau de boisson renferment deux 35 des antibiotiques mentionnés sensiblement dans la même quantité ou dans une quantité moindre que celle utilisée dans les substances alimentaires conventionnelles ou dans les additifs des composants qui sont destinés à provoquer la croissance et l'assimilation alimentaire des animaux domestiques. Les substances alimentaires 70 10511 9 2035852 ou les additifs indiqués renferment également les agents de coupage, les diluants et/ou les substances nutritives conventionnelles comme le sucrose, le glucose, les mélasses, des résidus de fermentation, de la farine de froment, de la farine 5 d'avoine et des flocons d'avoine, des déchets et recoupes de froment, des déchets de viande, des tourteaux d1oléagineux, de la farine *de soja et de la farine de poisson, de l'alfalfa, des déchets de trèfle ou d'herbe et analogues, des additifs minéraux tels que de la farine d'os, du carbonate, de calcium, un sel iodé 10 et analogue, des vitamines telles que les vitamines A, B, C et B, et d'autres substances appropriées, par exemple des agents de préservation tels que l'acide benzoïque. Les substances alimentaires renferment les ingrédients actifs avantageusement dans un domaine de dosage allant par exemple de 0,00001 à 0,01 % 15 environ, tandis que les additifs peuvent être constitués par des substances pures lorsqu'on les utilise, par exemple, pour l'eau de boisson, mais renferment habituellement entre 1 et 75 % environ de ces substances. L'invention est décrite plus en détail dans les 20 exemples non limitatifs qui suivent. Dans ces exemples, les parties s'entendent en poids et les températures sont indiquées en degrés centigrades. 10511 10 2035852 EXEMPLE 1 Des tubes à essai conventionnels sont remplis avec 10 ml d'un bouillon conventionnel de trypticase c) seul, ou de 5 celui contenant d) la rifampicine ou les autres antibiotiques, ou e) les combinaisons de ceux-ci à une concentration comprise entre 5 et 20 p.g/ml. On ajoute ensuite 0,1 ml d'une culture fraîchement 10 préparée et standardisée d'Escherichia Ooli aux 10 ml de la bouillie, de sorte qu'elle renferme approximativement 10^ organismes par ml. Après 20 heures d'incubation à 27°, on prélève des échantillons d'un millilitre et le nombre des cellules viables qu'ils renferment est déterminé suivant la méthode de 15 dilution sur plaque. Cela fournit à partir d'un nombre de bactéries cellulaires dans un spécimen dilué de manière convenable un nombre égal de colonies visibles qui peuvent être comptées. On obtient les résultats suivants : 20 25 50 55 Antibiotique aucun rifampicine (A) 1T H ampicilline (B) A + B 11 Conc entration Hg/ml 0 5 10 20 5 5 + 5 10 + 5 Nombre de cellules après zéro heure 1,2.106 lf5.106 1,1.106 1,5.106 1,4.106 1,4.106 1,4.106 20 heures 1,2.109 1.2.109 1,0.109 1,0.109 2,7.108 2,5.105 1,9.104 aucun 0 1,7.106 1,7.109 rifampicine (A) 5 l,7.io6 1,0.109 streptomycine (B) 10 1,6.106 1,0.109 I S> i + I bd ii 5 + 10 1,8.105 6,8.102 105 î 1 ii 2035852 EXEMPLE 2 Suivant la méthode décrite dans l'exemple 1, on obtient les résultats suivants avec Proteus mirabilis : Antibiotique G onc entrati on Hg/ml Nombre de cellules après zéro heure 20 heures aucun 0 1,8.10® 1,8.109 rifampicine (A) 5 2,4.106 1,2.109 fi 10 2,8.106 7,8.108 II 20 2,1.106 1,0.109 streptomycine (B) 5 1.6.106 i,5.io9 H 10 2,0.10e 1,2.109 ri 20 1,5.10e 1,1.109 A + B 5 + 5 2,3.10e 7,5.1G1 11 5 + 10 2,2.10e 1.5.101 11 10 + 5 2,1.10e 2,3.102 11 1 1 1 1 0 1 H 1 1 + 1 1 O 1 H 1 1 ! 1 1 1,5.10e 1,5.102 15 20 10 25 30 35 EXEMPLE 3 Préparation de 1.000 capsules renfermant chacune 300 mg des ingrédients actifs : Formule : 150 g 150 g 36 g 24 g 16 g 4 g Rifampicine Gentamycine Talc Amidon de froment Stéarate de magnésium Lactose 380 g Procédé On fait passer toutes les poudres à travers un tamis d'une largeur de maille de 0,6 mm et les mélange intimement. 10511 12 2035852 Ou remplit des capsules en gélatine dure de 0,5 ml avec 380 mg dudit mélange, en utilisant une machine à remplir les capsules. EXEMPLE 4 Préparation de 1.000 capsules renfermant chacune 150 mg des ingrédients actifs : Formule : Rifampicine 75 g Kanamycine 75 g Ethyl-cellulose 3 g Acide stéarique 3 g 156 g Préparation : On dissout 1 *éthyl-cellulose et l'acide stéarique dans 120 ml de chlorure de méthylène, ajoute les antibiotiques et fait passer la masse à travers un tamis d'une largeur de maille de 0,6 mm à une température de l'ordre de 40°, ce qui fait que le chlorure de méthylène s'évapore. On place 156 mg de la granulation obtenue dans des capsules en gélatine dure de 0,5 ml» en utilisant une machine à remplir les capsules. EXEMPLE 5 Préparation d'un aliment pour la volaille renfermant 0,005 °/° des ingrédients actifs. Mélange préalable : Rifampicine 25 g Ghloro-tétracycline 25 g Sucre de confiseur 50 g Aliment de soja extrait au solvant 275 g 375 g Formule alimentaire : Farine de froment 500,0 kg Farine de soja, 44 % de protéines 300,0 kg Farine d'alfalfa 13,5 kg Phosphate dicalcique 18,0 kg Calcaire en poudre 4,5 kg Sel 2,3 kg 10511 13 2035852 Farine de poisson, 60 % de protéines 18,0 kg Graisse stabilisée 27,0 kg Petit lait séché 18,0 kg Sulfate de manganèse 0,2 kg 5 Oxyde de zinc 1,3 kg d,l-méthionine 0,7 kg Mélange préalable de vitamines 4,5 kg 908,0 kg 4,5 kg de composition de vitamine renferment 16.000.000 d'imités internationales de vitamine A, 1.000.000 d'unités internationales de vitamine D^, 5.000 d'unités internationales d'acétate de vitamine E, 6 g de vitamine E^, 6 mg de vitamine B^, 3 g de riboflavine, 30 g de niacine, 5 g de pantothénate de calcium et 100 g d'éthoxyquine, le tout complété à 4,5 kg avec de la farine de froment. Procédé : On mélange intimement les antibiotiques et le sucre, tamise à travers un tamis d'une largeur de maille de 0,6 mm et mélange avec le fourrage de soja, le mélange préalable est ensuite ajouté au fourrage dans une quantité telle qu'on obtient la concentration indiquée et le mélange est homogénéisé dans un malaxeur horizontal à tambour. EXEMPLE 6 Des souris blanches de laboratoire sont infectées par l'application intra-péritonéale d'une quantité suffisante des agents pathogènes indiqués dans les tableaux suivants, en suspension dans une solution de chlorure de sodium, ce qui provoque dans les 48 heures la mort de 90 à 100 % des animaux de contrôle non traités. Trente à soixante minutes environ après l'infection, on traite des groupes de 10 souris chacun par les antibiotiques indiqués dans les tableaux ci-dessous, soit seuls, soit en combinaison, les antibiotiques étant administrés seulement sous la forme de solutions ou de suspensions aqueuses, soit par voie orale (p.o), soit par voie sous-cutanée (s.c). Lesdites expériences in vivo sont terminées vers le dixième au quatorzième jour après l'infection et on compte les survivantes. La plupart 70 10511 i4 2035852 des expériences ont été effectuées en double et on a estimé la valeur moyenne. On a obtenu les résultats suivants : Staphylococcus aureus Antibiotique Dose en mg/kg % de survivantes aucun O 5 rifampicine (A) 0,25 p.o. 100 pénicilline G (B) 0,25 s.c. 40 A + B 0,25 + 0,25 100 A 0 >• H •d • 0 • 5 B 0,2 s.c. 15 I» + bd 0,1 + 0,2 75 A 0,1 p.o. 5 B 0,1 s.c. 15 A + B 0,1 + 0,1 65 A 0,05 p.o. 10 B 0,2 s.c. 15 A + B 0,05 + 0,2 40 A 0,05 p.o. 10 • B 0,1 s.c. 15 A + B 0,05 + 0,1 20 A 0,1 p.o. 5 B 0,05 s.c. 0 A + B 0,1 + 0,05 20 10 15 20 25 30 35 70 10511 15 2035852 Esch.erich.ia coli Antibiotique Dose en mg/kg % de survivantes rifampicine (A) 50 p.o. 40 chlorotétracycline (B). 25 s.c. 60 A + B 50 + 25 100 A 50 p.o. 40 B 10 s.c. 10 A + B 50 + 10 100 A 25 p.o. 0 B 25 s.c. 60 A + B 25 + 25 100 A 25 p.o. 0 B 10 s.c. 10 A + B 25 + 10 90 A 25 p.o. 50 tétracycline (C) 25 p.o. 50 A + C 25 + 25 100 A 25 p.o. 50 C 10 p.o. 0 A + C 25 + 10 85 A 10 p.o. 0 C 25 p.o. 50 n n n n n n n n n n n O II n + n n II II II II 10 + 25 75 10 15 20 25 30 10511 16 2035852 Pseudomortas aeruginosa Antibiotique Dose en mg/kg % de survivantes 5 rifampicine (A) 50 p.o. 50 streptomycine (B) 10 s.c. 20 A + B 50+10 90 10 A 25 p.o. 0 B 10 s.c. 20 A + B 25 + 10 60 A 20 p.o. 0 15 B 10 s.c. 30 A + B 20 + 10 95 A 10 p.o. 0 B 5 s.c. 10"- 20 A + B 10 + 5 30 EXEMPLE 7 ^ Des groupes de 10 souris blanches de laboratoire sont chacun infectés par application intra-veineuse de suspensions appropriées dans une solution physiologique de Pseudomonas aeruginosa. La médication est appliquée par voie orale ou par voie sous-cutanée chaque fois dans l'heure après l'infection. -50 J Les animaux survivants sont sacrifiés 48 heures après l'infection et les deux reins de chaque souris sont enlevés aseptique-ment et mis à macérer dans un broyeur de tissu. Les dilutions appropriées sont faites avec le tampon de Soerebsens à un pH de 7 et le nombre des organismes présents dans l'homogénéisât, de reins dilué indiqué est déterminé en plaçant sur une plaque des portions égales dudit'homogénéisât sur un milieu gélosé imbibé de trypticase et en incubant pendant 48 heures à 37°. On obtient les résultats suivants montrant le nombre 70 10511 17 2035852 total d'organismes Pseudomonas aeruginosa récupérés à partir des reins d'une souris. 5 10 15 20 25 Contrôle « Rifampicine (A) 40 mg/kg p.o. Streptomycine (B) 10 mg/kg s.c. A + B 40 + 10 mg/kg 1,7 • 109 0 1,6 . 108 0 5,5 • 108 1,6 . 104 9,0 . 105 0 2,0 . 108 1,1 • 104 1,0 . 106 3,5 . io2 5,0 . 108 1,1 • 104 1,0 . 104 0 4,4 . 108 3,6 . 105 5,8 . 104 0 2,0 . 108 0 9,6 . 105 0 1,2 . 109 3,6 . 105 9,9 . 105 0 9,0 . 108 6,1 . 10 5 3,2 . 109 0 2,6 . 109 7,4 . 105 2,7 • H O 1 Vs 0 3,7 • 109 4,8 . 105 1,0 . 10^ 0 Contrôle 7.2 1.3 3.8 1,3 5.3 1.9 2,5 1,9 1.4 1,4 10' 10 10' 10£ 10' ioe 10^ 10C 10 10" 8 7 Rifampicine (A) 25 mg/kg p.o. 1,2 3,1 1.1 8,7 4.2 3,1 2,5 4,1 1,5 1,4 10-10: iol 10. 10- 10: 10' 10' 10- 10É 4 Gentamycine (B) 10 mg/kg s.c. 5 mg/kg s.c. 390 0 200 0 490 100 51 0 14 430 4,4 6,3 5,3 1.1 6.2 4,1 116 10' 10 10 10. 10' 10- 10 e 0 4,0.. 10-5,1 • 10( A + B 25+10 mg/kg 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 A + Ej 25+5 mg/kg 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10511 18 2035852 EXEMPLE 8 Suivant la méthode décrite dans l'exemple 7» des souris sont infectées par voie intra-veineuse avec un inoculum 5 constitué par 3 . 109 cellules de Staphylococcus aureus sensibilisé à la rifampicine et par 8 . 107 cellules de Staphylococcus aureus résistant à la rifamycine. Tous les animaux survivants sont sacrifiés le quatrième jour après l'infection. En plus de la détermination du nombre total de cellules viables dans les 10 homogénéisats dilués de reins., on détermine également le nombre de cellules résistantes sur le total de la population bactérienne. Cela est réalisé en comptant les cellules de Staphylococcus aureus capables de croître dans le milieu gélosé ensemencé à la trypticase et renfermant en plus 25 y de rifampi-15 cine par millilitre. On obtient les résultats suivants en récupérant les cellules viables dans les reins d'une souris: Contrôle Rifampicine (A) 25 mg/kg p.o. Kanamycine (B) 25 mg/kg s.c. A + B 25+25 mg/kg Nombre total A- résistaat Nombre total A-ré sis tant Nombre total A- ré sis tant Nombre total A- résisfcant l,8xl07 5,5xl05 0 0 3,9xl05 3,4xl05 0 0 l,3xl07 2,6xl04 l.lxlO5 l,0xl05 0 0 0 0 l,9xl07 2,4xl04 0 0 ^SxlO4 0 0 0 3,6xl07 2,8x107 l,9xl03 3,5xl04 2 xlO6 l,2xl07 2,2xl06 1,4-xlO7 0 2,7xl06 0 0 0 0 0 0 6,lxl07 2,5x10® 0 0 5,5x10^ 0 1,5x10e 0 l,2xl07 2, 6x104 5,9xl03 7,3xl03 0 0 0 0 3,2xl07 2,4x10° 3,7xl05 4,8xl05 l,8xl05 0 0 0 4,3xl07 2,5xl05 l,lxl05 1, 6x10 0 0 0 0 9,3xl07 6,1x10^ 3,9xl07 3,0xl07 0 0 0 0 70 10511 19 2035852 EXEMPLE 9 Suivant la méthode décrite dans l'exemple 1, on obtient les résultats suivants avec des cellules d'Escherichia 5 Coli rifampicino-résistantes. Antibiotique Conc entration mg/ml Nombre de cellules après 10 zéro heure 20 heures aucun 0 3,6 . 106 1,3 • 109 rifampicine (A) 20 3,3 • 106 1,2 . 109 15 streptomycine (B) 20 3,6 . 106 9,7 . 108 A + B i i i i o 1 OJ 1 1 + 1 O I OJ 1 1 1 1 1 3,8 . 106 i 1 v£> 1 O 1 | • 1 1 H 1 O 1 VJ 1 1 2Q EXEMPLE 10 Des résultats similaires à ceux indiqués dans les exemples 8 et 9 sont obtenus avec des souches de St aphylococ eus aureus et d'Escherichia Coli qui résistent aux pénicillines ou 2^ aux céphalosporines, plus particulièrement à la pénicilline G et la céphaloridine. Après traitement avec la rifampicine, lesdites cellules résistantes sont à nouveau sensibilisées auxdites pénicillines ou céphalosporines. 70 10511 20 2035852 REVENDICATIONS 1. Une préparation utilisable comme composition pharmaceutique ou vétérinaire, comme substance alimentaire pour 5 les animaux ou comme additif à la nourriture des animaux et comprenant a) un dérivé semi-synthétique de la rifamycine S, de la rifamycine SV ou de la rifamycine B ayant un effet antibiotique, ou un sel thérapeutiquement utilisable de celui-ci, et 10 b) un antibiotique choisi parmi les groupes des pénicillines, des céphalosporines, des streptomycines, des kanamycines, des gentamycines, des tétracyclines, des macrolides, des polypeptides antibiotiques ou du chloramphénicol, ou un sel thérapeutiquement utilisable de ces antibiotiques. 15 2. Une préparation telle que revendiquée dans la reven dication 1 et renfermant une quantité effective des composants (a) et (b). 3. Une préparation telle que revendiquée dans la revendication 1 et renfermant une quantité sub-effective des 20 composants (a) et (b). 4. Une préparation telle que revendiquée dans l'une des revendications 1 à 3, dans laquelle le composant (a) est une 3-alcoylamino-, une 3-dialcoylamino-, une 3-cycl0-alc0ylaadiJ0-, une 3-alcoylène-ami.no- et une 3-aza- ou -oxa-alcoylène-amino-25 rifamycine S ou -SV, dont les groupes aminogènes renferment de un à 8 atomes de carbone, de la rifazine, du rifamide ou de la rifampicine, ou un sel thérapeutiquement utilisable de ceux-ci, et où le composant (b) est un antibiotique des groupes des pénicillines ou des céphalosporines, ou un sel thérapeutiquement 30 utilisable de ces composés. 5. Une préparation telle que revendiquée dans la revendication 4, dans laquelle la pénicilline, ou un sel thérapeutiquement utilisable de celle-ci, est choisi dans le groupe comprenant la pénicilline BT, G ou V, 11ampicilline, la cloxa- 35 cilline, la dicloxacilline, la méthicilline, la nafcilline et 1'oxacilline. 6. Une préparation telle que revendiquée dans la revendication 4, dans laquelle la céphalosporine ou un sel thérapeutiquement utilisable de celle-ci est choisi dans le 10511 21 2035852 groupe comprenant la céphaloridine, la céphalotine, la céphalo-sporine C, la céphalozine, la céphalo glycine et la céphalexine. 7. Une préparation telle que revendiquée dans les revendications 1, 2 et 3 où le composant (a) est une 3-alcoy- 5 lamino-, une 3-dialcoylamino-, une 3-cyclo-alcoylamino-, une 3-alcoylène-amino- et une 3-aza- ou -oxa-alcoylène-amino-rifa-mycine S du -SV, dont les groupes aminogènes renferment de un à 8 atomes de carbone, de la rifazine, du rifamide et de la rifampicine, ou un sel thérapeutiquement utilisable de ces composés, 10 et où le composant (b) est un antibiotique choisi parmi la kanamycine, la gentamycine, la tétracycline, la chlorotétracycline ou un sel thérapeutiquement utilisable de ces composés. 8. Une préparation telle que revendiquée dans la revendication 5» où le dérivé de la rifamycine est la rifampicine 15 9' Une préparation telle que revendiquée dans la revendication 6, où le dérivé de la rifamycine est la rifampicine 10. Une préparation telle que revendiquée dans la revendication 7» où le dérivé de la rifamycine est la rifampicine 11. Une préparation telle que revendiquée dans l'une 20 quelconque des revendications 1 à 3» 5 ou 8, consistant en une combinaison de rifampicine et de pénicilline G. 12. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 5 ou 8, consistant en une combinaison de rifampicine et de pénicilline V. 25 13. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 6 ou 9» consistant en une combinaison de rifampicine et de céphaloridine. 14. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 13» comprenant les deuss 30 composants (a) et (b) dans une proportion comprise entre 1 : 10 et 10 : 1 environ. 15- Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 14, comprenant les deux: composants (a) et (b) dans une proportion comprise entre 1 : 5 35 et 5 : 1. 16. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 14, comprenant les deux composants (a) et (b) dans une proportion comprise entre 1 : 2 et 2 : 1. 10511 22 2035852 17« Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 16, renfermant les composants (a) et (b) sensiblement dans la même quantité que celle utilisée dans les préparations conventionnelles connues d'antibiotiques 5 simples. 18. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 16, contenant l'un des composants (a) et (b), ou les deux, dans une quantité moindre que celle utilisée dans les préparations conventionnelles connues 10 des antibiotiques simples. 19. Une préparation telle que revendiquée dans la revendication 18, comprenant l'un des deux composants (a) et (b), ou les deux, dans une quantité égale à un tiers au deux tiers de la quantité utilisée dans les préparations conventionnelles 15 connues des antibiotiques simples. 20. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 19, contenant entre 0,1 et 75 % environ des composants (a) et (b) dans un excipient pharmaceutique. 20 "21. Une substance alimentaire pour les animaux telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 20, et renfermant dans un aliment de 0,00001 à 0,01 % environ des composants (a) et (b). 22. Un additif à la nourriture des animaux tel que 25 revendiqué dans la revendication 1, renfermant entre 1 et 75 % environ des composants (a) et (b) dans un diluant. 25. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 20 pour l'administration orale. 24. Une préparation telle que revendiquée dans la 30 revendication 23, sous la forme de comprimés ou de capsules. 25. Une préparation telle que revendiquée dans l'une quelconque des revendications 1 à 20, pour l'administration parentérale.