Brevet FR2053035A1 — publié le 19710416

On sait que les phytostérols exercent une action favorable en thérapeutique artérielle et glandulaire, ainsi qu'en cosmétologie. On sait également que de nombreuses Apocynacées africaines, telles que les Funtumia latifolia, africana et elastica étaient une source de stéroïdes, les feuilles et les écorces contenant des alcaloïdes steroides du groupe prégnane. Les graines de ces plantes contiennent egalement des stéroïdes, principalement sous forme d'irehdiamines. Ces graines contiennent en outre une huile relativement abondante. L'auteur de la présente invention a découvert que l'insaponifiable de l'huile de graines d'Apocynacées pressentait une forte teneur en phytostérols et, principalement, en desmostérol 6 ou déhydrocholestérol de structure ainsi qu'en ss sitostérol ou dehydrostigmastérol de structure L'insaponifiable contient encore, en faibles quantités, le cycloarténol 1, le nor 31 lanostérol 4, le déhydro 24 lophénol 5 et le lanostérol. L'objet de la présente est donc l'application médicamentale de l'insaponifiable de graines d'Apocynacées, insaponifiable caractérisé par une série remarquable de stérols à chaîne insaturée, non ramifiée en 24 et à terminaison isopropylidénique. Parmi les Apocynacées, les espèces suivantes ont particulièrement été retenues: Les Funtumia (latifolia, africana, elastica), les Holarrhena, les Alstonia, les Hunteria (simii eburnea), les Picralima (nitida) les Rauwolfia (vomitoria), les Strophantus, les Tabernae montana et les Voacanga, espèces généralement récoltées en Afrique tropicale. Comme ces phytostérols ont une très grande similitude de structure, il n'est pas nécessaire de les séparer; I 1insaponifia- ble total peut être administré et ce par voie orale ou anale. La posologie recommandée est de l'ordre de O,lOOg par jour en traitement continu ou de 0,250g par jour, 10 jours dans le mois, par voie orale (dragées, comprimés ou pilules et, par voie anale, d'un suppositoire à 0,200g quotidien. I1 est évident que les valeurs ci-dessus ne sont données qu'à titre indicatif et peuvent être sensiblement modifiées en plus ou en moins selon les cas. D'une manière générale, une composition médicamentale selonl'invention est obtenue de la manière suivante. La récolte des graines est effectuée à maturité du fruit. Les graines sont isolées et débarrassées des matières étrangères. Elles sont séchées puis broyées et amenées à l'état de poudre fine. Cette poudre est épuise dans un appareil du type soxhlet au moyen d'éther de pétrole. L'éther est ensuite chassé et le résidu est redissous dans éther éthylique. L'éther est lavé à l'eau chlorurée puis bicarbonatée et enfin evaporé. L'huile formant résidu est traitée par la potasse alcoolique à reflux pendant 2 heures. L'alcool est éliminé et la masse résiduelle est reprise par l'eau bouillante. On lave le ballon avec un mélangealcool-éther, ou avec un solvant chloré. On réunit dans une ampoule les fractions aqueuses et les solvants et on ajoute de l'eau chlorurée sodique à 25%. On agite et on sépare la couche aqueuse; on lave ainsi deux fois encore les solvants à l'eau chlorurée. Ensuite, les eaux chlorurées réunies sont lavées deux fois à l'éther ou au chlorure de méthylène ou au chloroforme et ces lavages sont réunis aux solvants initiaux. La fraction solvant totale est évaporée à sec. Le résidu insaponifiable pèse environ llg au départ de 1 kg de drogue sèche. On purifie sur silice et la séparation est faite par élution ou sur plaques préparatives. L'identification est faite également sur plaque de silice, par chromatographie gazeuse et par spéctrométrie. A titre d'exemple, le détail d'une extraction est donné ci-après. 5 Kgs de graines de Funtumia elastica correctement séchées sont broyées passées au tamis de 0.5mm. La poudre est placée dans un appareil à épuisement continu du type soxhlet et est traitée pendant deux heures avec de l'éther de pétrole exempt de fractions de point d'ébullition dépassant 800C. Dans une autre forme de traitement, on peut procéder par agitation de la poudre ave 1 t éther de pétrole pendant une heure séparation du solvant, reprise de la poudre avec une nouvelle quantité de solvant frais, nouvelle. agitation d'une heure; apyre: une troisième agitation, les trois solvants sont réunis. Un tel traitement est applicable lorsqu'on ne dispose pas d'appareil à épuisement continu. Dans une autre forme de traitement, on peut utiliser le cyclohexane. Le solvant contenant l'huile est alors distillé jusqu'à obtenir une masse pateuse que l'on chauffe encore 30 minutes sous vide. On reprend la masse brune obtenue par 3 litres d'éther éthylique et cette solution éthérée est lavée par 500 ml d'eau contenant 25g/litre de chlorure de sodium, puis par 500ml de solution à lOg/litre de carbonate acide de sodium NaHCO3 ; l'éther est séché sur lOOg de sulfate de sodium et filtré; on l'évapore sous un léger vide L'huile ainsi isolée est saponifiée par traitement à reflux pendant deux heures, dans 500 ml de méthanol où l'on a préalablement dissous 80g de potasse anhydre. Après saponification, l'alcool est éliminé et la masse résiduelle est reprise par 11 eau bouillante. On transfère la solution dans une ampoule à décanter et on y ajoute le lavage du ballon de saponification qu'on a réalisé avec 400ml d'un mélange 50-50 d'alcool et d'éther. Dans une autre expérience, on a effectué ce lavage avec un solvant chloré tel que le chlorure de méthylène. L'ensemble solution aqueuse et solvant, réunis dans une ampoule à décanter de 2 litres, est additionné de 500 ml de solution à 258 de chlorure de sodium. On agite, on laisse décanter et on sépare la couche aqueuse; le solvant est encore lavé deux fois avec 250ml de solution chlorurée sodique. Les solutions salines sont alors lavées avec 100 à 200ml d'éther et cet éther est an dans l'ampoule contenant le sol- vant lavé. Après décantation soigneuse, l'éther ou le chlorure de méthylène contenant le résidu insaponifiable est séché puis évaporé à siccité, en terminant sous de. L'insaponifiable pèse entre 50 et 55g; aucune différence marquante n'a été observée entre les graines de Filationfolia et celles de F. elastica; le rendement est de 10 à llg/Kg. Aux fins de purification, l'insaponifiable est dissous dans 3 litres d'éther et passe sur une eolonne de 10cm de diametre contenant 2,5kg de sillce. L'élution est conduite selon les règles habituelles, par l'éther, le chlorure de méthylène, le chlorure de méthylène + 0,5% de méthanol et jusqu'à 8% de méthanol On identifie ainsi: - le desmostérol 6 ou déhydrocholestérol qui intervient pour plus de la moitié dans la composition que l'on cristallise dans le méthanol pF ; 120 5 &alpha; D : -42 (1%, chloroforme) - le sssitostérol ou déhydrostigmastérol pF : 1340 ar : -390 - le eyeloartérol 1 pF : 920 &alpha; D : +48 - le nor 31 lanostérol 4 pF : 110 &alpha; : +60 - le déhydro 24 lophénol 5 pF : 139 aD : Ces phytostérols-ayant des structures très voisines, l'insaponifiable peut être administré dans sa totalité, comme indiqué ci-avant. Il est évident que l'invention s'étend également de plein droit à toute composition médicamentale incorporant à titre principal ou secondaire, l'insaponifiable de l'huile de graines de Funtumia. REVENDICATTONS. 1.- A titre de médicament pour le traitement entre autre des troubles de métabolisme du cholestérol, du vieillissement cellulaire, de l'athérome, l'insaponifiable de 11 huile des graines d'Apocynacées, à administrer par voie orale ou anale. 2.- Un médicament selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est constitué par l'insaponifiable des graines de l'une ou plusieurs des Apocynacées suivantes: Funtumia (latifolia, africana, elastica), Holarrhena, Alstonia, Hunteria (simii et eburnea), Picralima (nitida), Rauwolfia (vomitoria), Strophantus, Tabernae montana et Voacanga. 3.- A titre de médicament pour le traitement entre autre des troubles du métabolisme du cholestérol, du vieillissement cellulaire, de l'athérome, une série de stérols à chaîne insaturée non ramifiée en 24 et à terminaison isopropylidénique, extraite de l'huile de graines d'Apocynacées. 4.- A titre de médicament, une composition contenant entre autre du desmostérol 6, du ss sitostérol, du cycloartérol, du nor 31 lanostérol 4 et du déhydro 24 lathénol 5, composition extraite de l'huile de graines de Funtumia. 5.- Toutes préparations médicinales, telles que dragées, comprimés, pilules, suppositoires, contenant une composition de phytostérols extraite de l'huile de graines d'Apocynacées, respectivement de l'insaponifiable de-cette huile.