Brevet FR2052972A1 — publié le 19710416

i 2052972 La présente invention concerne, à titre de produits nouveaux^ les dérivés thiophosphamidés d'alcaloïdes de la série de l'isoqui-noléine, leur procédé de préparation et leurs applications. Ces composés répondent à la formule générale s ! ^ N-R* HpC \ ch, / H2 H CH. ilp 1 dans laquelle e «= H ou CÏÏ^O i /, ^ ,, . P _ ïK | «2° S ®H2 n- H ou CH30 ; h ou qh3o ; R-^ + Er / h.-,g 2 X R + R-j 0 - s H2°N 0 io a H OH ou CH. 0 - et Rr + R6 - ^ , R^ + R^ et Rç + Rg = Hg | le cycle substitué naphtalénique ou Rg est absents n allant de 1 à 3» les nouveaux composés faisant 1'objet de l'invention se présentent sous la forme de poudres à cristaux fins de couleur jaunâtre et "brun clair, très solubles dans le suif oxyde ds diméthyle „ le 15 diméthylformamide, le chloroforme et d'autres solvants organiques, mais difficilement solubles dans l'eau. ies nouveaux composés manifestent une activité pharmaco logique et trouvent des applications en médecine humaine en tant que produits médicamenteux pour le traitement de néoplasies malignes, aus-20 si bien qu'en qualité de mutagènes lors de l'hybridation des plantes agricoles et des mioroorganismes, et coasse pesticides et insecticides » Les substances les plus actives parmi les composés en question sont le di-(éthylène-imido)-N-berbérinoléthylamide de l'acide thio-25 phosphorique et les dérivés thiophosphamidés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne, synthétisés par la grande chélidoine. Conformément à l'invention, le di-(éthylène-imido)-N-berbéri-noléthylamide de l'acide thiophosphorique, le tri-(M-sanguinarinol) -éthylamide de l'acide thiophosphorique et les dérivés thiophospha-30 midés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne synthétisés par la grande chélidoine sont les principes actifs des produits officinaux pour le traitement de néoformations malignes. les produits de 70 22029 2* 2052972 12 invention, trouvent des applications pour le traitement des tumeurs de la glande mammaire, des ovaires, du col de l'utérus, de la vessie urinaire, de le prostate, du larynx, de l'oesophage et autres. Le mécanisme à© leur action consiste à influer sur les méea-5 niâmes intimes de métabolisme e ellulaire qui provoquent des troubles dans la synthèse tes acides nucléiques et une accentuation de la phase aérobie de la respiration,, Dans les expériences sur les rats et les souris atteints de tumeurs induites expérimentalement, de structure histologique et 10 (1!origine différentes (carcinome de Guérin, c ar e ino s arcome de Wal-ker, sarcome de Croeker, hématome PC-1, oarsiname ascitique des ovaires 0 f\ ), tous les produits mentionnés conduisent à la résorption complète des tumeurs chez la plupart des animaux essayés, à l'exception de la 3cuche 0/1 . D'autre part9 on observe certaines 15 différences dans le spectre de l'action antitumorale. Ainsi, par exemple,, le di-(ét hylône-imido)-N-herhérinoléthylamide de l'acide thiophosphorique et le tri-(I\T-sanguinarinol )-éthylamide de l'acide thiophosphorique, en doses adéquates quant à la toxicité, sont doués d.«une acti viM^gtlga_jaarquas via-à-via..dfèa.„t.umeiîrs...Bxpérimen-20 taies du foie, ce qui est dû à l'action sélective connue des alcaloïdes qui entrent dams leur composition en faveur des tissus du foie. La particularité caractéristique de 1' action anti-tumorale exercée par les nouveaux produits consiste dans l'absence de la pé:-25 riode latente, de aorte que leur effet se manifeste déjà à la suite des premières injection», facteur particulièrement important pour le traitement des tumeurs à croissance intense, et qui exclut le développement de la résistance aux remèdes des cellules de la tumeur. L'effet anti-tumoral prononcé produit par les nouveaux compo-30 sés diffère sensiblement de l'action des produits de départ : les alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne et le thiophosphamide. Cest ainsi, par exemple, que le totum alcaloïque de la grande chélidoine ne provoque qu'une inhibition de 25,7 i° de la croissance du carcinome de G-uérin et de 28,5 $ du carcinome ascitique 0 des rats, 35 alors que le thiophosphamide le fait à 97 et 37 i° respectivement (en cas de leucopénie fortement prononcée). L'administration des nouveaux produits entraîne l'inhibition de ces mêmes tumeurs à 98 et 60 io respectivement. A 1'encontre de la plupart des produits anti-tumoraux exis- BAtD ORIGINAL 70 22029 3. 2052972 tants, les produits de l'invention, même engagés en doses maximales supportables, n'inhibent pas l'hématopoèse, ce qui permet de les utiliser en association avec d'autres produits antitumoraux, ainsi qu'en association avec des méthodes de traitement par irradiation. 3 Les produits de l'invention se distinguent par une plus faible toxicité en comparaison des produits de départ. La dose léthale du thiophosphamide (DL^q) est de 3 à 10 mg/kg, celle de l'alcaloïde berbérine est de 21 mg/kg,tandis que le produit de leur interaction présente une LL^q égale à 34,2 mg/kg en cas d'introduction intrapé-10 ritonéale pour les souris, et de 33 mg/kg pour les rats. La BL^q du produit d'interaction du thiophosphamide et de la sanguinarine est de 21 mg/kg, celle des dérivés thiophosphamidés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne synthétisés par la grande chélidoine est de 227,1 mg/kg et de 302,1 mg/kg. L'action des dérivés thio-15 phosphamidés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléine synthétisés par la grande chélidoine, en tant que produits médicamenteux, a été étudiée en clinique sur environ trois-cents sujets. Le produit a été administré pour le traitement des tumeurs de la glande mammaire, des ovaires, du col de l'utérus, de la prostate, du la-20 rynx, de l'oesophage et d'autres localisations. L'effet antitumoral objectif (résorption de la tumeur principale et des noeuds métasta-tiques) est constaté chez 35 à 45 i° des sujets souffrant des stades avancés (III et IY) de la maladie. Le produit a été administré sous la forme d'injections intra-25 musculaires en doses qui vont croissant de 0,25 à 1 mg/kg, ainsi que sous la forme d'onguents et de suppositoires. Le cours du traitement comprenait quinze à vingt injections intra-musculaires espacées de quarante-huit heures. A l'issue d'un abandon d'un mois, on a effectué une cure réitérative, puis après 30 trois, six et douze mois des cures antirécidives. Conformément à l'invention, les produits officinaux contiennent le principe actif en association avec un solvant. Il est préférable d'utiliser un solvant ayant la composition suivante où les parties s'entendent en poids : eau - 1,5; polyéthylène glycol à 35 masse moléculaire égale à 400 - 1,5; sulfoxyde cLe diméthyle - 2. Il est avantageux d'utiliser une solution contenant de 0,3 à 0,5 i° en masse de principe actif. Le produit médicamenteux peut contenir le principe actif en association avec une matière de base pour onguent. En qualité de 40 cette dernière, on utilise de la vaseline médicale et de la lanoli— 70 22029 4. 2052972 10 15 20 25 ne anhydre avec addition d'un solvant ayant la composition suivante exprimée en parties pondérales ; eau - 1,5» polyéthylène glycol à masse moléculaire égale à 400 - 1,5? sulfoxyde de diméthyle - 2„ On a intérêt à employer des onguents contenant de 0,3 à 0,5 # en masse de principe actif. Il est également recommandé d'employer un produit officinal comportant le principe actif en association avec une matière de base pharmaceutique pour suppositoires. On peut utiliser comme matière de base de 1'huile de cacao et de la lanoline anhydre avec addition d'un solvant présentant la composition suivante en parties pondérales : eau - 1,5; polyéthylène glycol à masse moléculaire égale à 400 - 1,5? sulfoxyde de diméthyle - 2. Il est préférable d'utiliser des suppositoires contenant de 0,03 à 0,05 $ en masse de principe actif. les contre-indications à l'emploi desdits produits sont les stades terminaux de la maladie, de graves affections des reins accompagnées de phénomènes d'insuffisance rénale, de graves affections du système cardio-vasculaire accompagnées de phénomènes d'insuffisance cardiaque. Les produits se prêtent à un stockage prolongé jusqu'à deux ans, à température basse et à l'abri de la lumière, tout en conservant pleinement leur activité. Conformément à l'invention, les nouveaux composés, c'est-à-dire les dérivés thiophosphamidés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne, s'obtiennent en faisant réagir le thiophosphamide sur les alcaloïdes individuels de la série de l'isoquinoléïne qui ont pour formule générale : IL -v L2 il3 où R = H, CH^O? R-l = H, CH30; R + B1 = H2C f R, R, 2 = h, cejo; r-l + r2 = hgc ^ = H, OH, CH^ ; R^ + Rç et R^ + Rg - Hgi 0 - 0 - .0 - -0 - le cycle naphtalénique substitué où Rg est absent, ou bien sur un 30 totum alcaloïdique au sein d'un solvant organique porté à la température d'ébullition, avec isolement ultérieur du produit visé. 70 22029 5 2052972 Pour augmenter le rendement en produit visé, il est avantageuse d'utiliser comme solvants organiques le benzène, le chloroforme9 le dioxanne. Pour obtenir le di-{éthylène-imido)»N-berbérinoléthylamide de : l'acide thiophosphorique. on fait réagir le thiophosphamide sur de la berbérine au sein du dioxanne porté à la température d'ébulli-iion, avec isolement ultérieur du produit visé» Pour préparer le tri-(N-sanguinarinol)-éthylamide de l'acide thiophosphorique, on fait réagir le thiophosphamide sur de la san-10 guinarine au sein du benzène porté à la température d'ébullition5 en isolant ultérieurement le produit visé. Le procédé faisant l'objet de l'invention est mis en oeuvre de la manière suivante. Le thiophosphamide et les alcaloïdes individuels de la série de l'isoquinoléïne ou leur totum9 qui servent de 15 produits de départs sont mis en réaction au sein d'un solvant organique porté à la température d'ébullition. Il y a alors aminolyse das cycles éthylène-iminiques du thiophosphamide conduisant aux produits visés. 20 ternaires, tels que la berbérine, la sanguinarine» 1'oxysanguinari-ne, la coptisine, etc, réagissent comme amino-alcools, car la réaction se déroule dans un milieu anhydre. Il est connu que ces alcaloïdes à l'état anhydre sont des amino-alcools» Ainsi, par exemples l'alcaloïde berbérine, appelée berbérinol dans vu milieu anhydre, 25 présente la structure suivante : Les alcaloïdes se classant parmi les bases ammoniacales qua- r-^N -OCH. 3 ^\-och3 /V/ ~0GH3 en milieu anhydre 70 22029 6. 2052972 Au cours de l'interaction, les alcaloïdes indiqués qui se comportent comme des amino-alcools font subir au thiophosphamide une réaction d1aminolyse, c'est-à-dire la rupture des cycles éthylène-iminiques selon le schéma : ^!-- h2c ^ avec formation de composés ioniques internes» - + - N - CH2 - OH2 - m3 5 Les produits visés résultant de la réaction d'interaction sont isolés en chassant par distillation le solvant contenu dans le mélange réactionnel, puis en éliminant par lavage les produits de départ non entrés en réaction et en recristallisant le produit final. Lorsqu'on obtient le produit d'interaction du thiophosphamide avec le 10 totum des alcaloïdes synthétisés par la grande chélidoine, on chasse par distillation le solvant contenu dans le- mélange- réactionnel, on lave le résidu en vue de l'élimination des produits de départ non entrés en réaction, pu.is on isole le produit visé. Le rendement en produit visé est compris entre 32 et 97 i° en 15 masse. L1invention est illustrée par les exemples suivants de réalisation du procédé de préparation de dérivés thiophosphamidés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne. exemple 1. 20 On dissout 7*5 mmole de s anguinarine (F = 267°C) et 14,27 mmo- le de thiophosphamide dans 700 ml de benzène et on fait bouillir le mélange pendant deux heures dans un ballon muni d'un réfrigérant à reflux. On décolore le mélange obtenu par du charbon, activé, puis on chasse le solvant par distillation. Le résidu sec est soigneuse-25 ment lavé à l'éther en vue de l'élimination des corps de départ non entrés en réaction. On obtient 1,5 g de tri-(N-sanguinarinol)-éthylamide de l'acide triphosphorique, corps cristallin jaunâtre très solubie dans le benzène, le chloroforme, le diméthylformamide, le dichloréthane, difficilement solubla dans l'eau, soluble à chaud 30 dans l'acide chlorhydrique à 10 , insoluble dans le méthanol et l'éther. Le rendement est de 50,8 $> en masse de la théorie. ¥ = 189 - 191°C (après recristallisation dans un mélange chlo 70 22029 7. 2052972 roforme-méthanol). Les maximums d'absorption se situent à 238, 338, 398 et 4-07 nm. Calculé en 56 : S = 2,59; N = 6,79; P = 2,50; C = 64,07; H = 4,6+. 066H57K6015PS. 5 Trouvé en $ : S = 2,70, 2,71; N - 6,82, 6,90; P = 2,45, 2,62; G = 63,90, 63,87; H = 4,60, 4,71. EXEMPLE 2. On fait bouillir pendant deux heures 8,86 mmoles de berbérine et 13,5 mmoles de thiophosphamide dans 600 ml de dioxanne anhydre 10 placés dans un ballon muni d'un réfrigérant ascendant. On décolore le mélange obtenu par du charbon activé, puis chasse le solvant par distillation sous vide, la pression résiduelle étant.de 10 mm de Hg. On lave le résidu sec avec de l'éther et du chloroforme, pour obtenir finalement 3,3 g de di-(éthylène-imido)-N-berbérinoléthyl-15 amide de l'acide thiophosphorique, corps cristallin jaune foncé, parfaitement soluble à chaud dans l'acide chlorhydrique, difficilement soluble dans les solvants organiques usuels. Le rendement est de 97 f° en masse de la théorie. E = 135°C (après recristallisation dans un mélange de benzène et de sulfoxyde 20 de diméthyle). Calculé en $ : s = 5,91; N = 10,37; P = 10,33; C = 57,55; H = 5,76. C26H3A05PS. Trouvé en $ : S = 5,90, 5,79; N = 10,52, 10,54; P =10,41, 10,39; C = 57,40; H = 5,84. 25 Les maximums d'absorption sont situés à 231, 282, 373 nm. EXEMPLE 3. On dissout dans 60 ml de chloroforme 3,5 g d'alcaloïdes isolés de 1-' extrait aqueux tiré de la grande chélidoine (Chelidonium majus L), (la masse moléculaire moyenne est de 331) et 3,8 g (20,1 mmo-30 les) de thiophosphamide, et on porte la solution à reflux pendant deux heures. On décolore le produit obtenu par du charbon activé et chasse le solvant par distillation. On lave soigneusement avec de l'éther le résidu sec en vue de l'élimination des substances de départ non entrées en réaction. On obtient 1,45 g de produit final 35 de couleur brun clair, parfaitement soluble dans le chloroforme, le sulfoxyde de diméthyle, le diméthylformamide, difficilement soluble dans le dichloréthane, le dioxanne et le méthanol, insoluble dans l'eau et l'éther. Le rendement est de 34,5 i» en masse. Pour une masse moléculaire moyenne d'environ 1120, calcul; en 70 22029 8. 2052972 $> : S = 2,86; N = 7,50. Trouvé en $ : S = 2,82; N = 7,60. Le maximum d'absorption se situe à 284 nm. EXEMPLE 4. 5 La réaction est opérée comme dans l'exemple 3, en utilisant comme solvant organique le benzène. Le rendement en produit visé est de 35 i° en masse. Pour une masse moléculaire moyenne d'environ 1180, calculé en i° S = 2,7.2; H = 7,12. 10 Trouvé en $ : S = 2,64, 2,62; N = 7,30, 7,25. Les maximums d'absorption se situent à 271, 375 nm. \ 70 22029 9. 2052972 - REVENDICATIONS » - 1 - les dérivés thiophosphamidés des alcaloïdes de la série d£ l'isoquinoléïne qui ont pour formule générale ; R, R- R-, \ vv N-Rg E2 h /n H2°N->CH2 H2BX ï /®2 I "N - P - N ' y il ^ ' h2c y ch2 où R = H ou OH^O; = II ou CH~Q ; R + R^ = B^G 0 - * 'o - 0- - E2 = H ou CE^O; R^ + Eg = E^O y \ o E* = H, OH ou CH^; R^ + et R^ + Eg = H2; le cycle naphtalénique substitué où Eg est absent, n allant de 1 à 3. 2 - Un procédé de préparation des dérivés tniophosphamidés des alcaloïdes de la série de 1'isoquinoléïne conforme à la revendication 1, caractérisé par le fait qu'on fait réagir le thiophosphamide sur les alcaloïdes individuels de la série de l'isoquinoléïne ayant pour formule générale : R •P 4 %-R. S i - a, R- Rl" r2 où R = H ou CH^O; R^ = H ou CH^O; 0 - R + R-, = ; R2 = H ou CH^O; \ R-j^ + R2 = H2C / \ 0 -0 - 0 - ; R? = H, OH ou CH^ï R^ +• R^ et R^ + Rg = H2; le cycle naphtalénique substitué ou 70 22029 10. 2052972 Eg est absent, ou bien-sur le totum des alcaloïde, au sein d'un solvant organique porté à la température d'ébullition, avec isolement ultérieur du produit visé. 3 - Un procédé selon la revendication 2, caractérisé par le 5 fait qu'on utilise comme solvant organique le benzène, le chloroforme ou le dioxanne. 4 - Un procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé par le fait que pour obtenir le di-(éthylène--imido)-N-berbérinoléthyl-amide de l'acide thiophosphorique, on fait réagir le thiophosphami™ ;,0 de sur de la berbérine au sein du dioxanne porté à la température d'ébullition, eh isolant ultérieurement le produit visé,, 5 - Un procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé par le fait que pour obtenir le tri-(N-sangiiinarino 1 ) -éthylamide de 1' -acide thiophosphorique, on fait réagir le thiophosphamide sur de la 15 sanguinarine au sein du benzène porté à la température d'ébullition, en isolant subséquemment le produit visé. 6 - Un procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé par le fait que pour obtenir les dérivés thiophosphamidés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne élaborés par la grande chélidoi- 20 ne, on fait réagir le thiophosphamide sur le totum des alcaloïdes isolés de la grande chélidoine» en opérant au sein du benzène ou du chloroforme portés à la température d'ébullition, avec isolement subséquent dû produit visé. 7 - Un médicament pour le traitement de néoplasies malignes, 25 caractérisé par le fait qu'il contient comme principe actif un dérivé de la revendication 1. 8 - Un médicament pour le traitement de néoplasies malignes, caractérisé par le fait qu'il contient comme principe actif le di-(éthylène^imido)-N-berbérinoléthylamide de l'acide thiophospho- 30 rique. 9 - Un médicament pour le traitement de néoplasies malignes, caractérisé par le fait qu'il contient comme principe actif le tri-(N-sanguinarinol)-éthylamide de l'acide thiophosphorique. "10 - Un médicament pour le traitement de néoplasies malignes, 35 caractérisé par le fait qu'il contient comme principe actif les dérivés thiophosphamidés des alcaloïdes de la série de l'isoquinoléïne élaborés par la grande chélidoine. 11 - Un médicament selon l'une quelconque des revendications 7 à 10, caractérisé par le fait qu'il contient le principe actif en 40 association avec un solvant. 70 22029 u 2052972 12 - Un médicament selon la revendication 11, caractérisé par le fait qu'en tant que solvant, on utilise un solvant de la composition suivante exprimée en parties pondérales : eau - 1,5; polyéthylène glycol à masse moléculaire égale à 400 - 1,5; sulfoxyde 5 de diméthyle - 2. 13 - Un médicament selon la revendication 11, caractérisé par le fait qu'il contient le principe actif à raison de 0,3 à 0,5 f° en masse. 14 - Un médicament selon l'une quelconque des revendications 10 7 à 10, caractérisé par le fait qu'il contient le principe actif en association avec une matière de base pour onguents. 15 - Un médicament selon la revendication l!{.", caractérisé par le fait qu'en tant que matière de base pour onguents, on utilise la vaseline médicale, la lanoline anhydre avec addition d'un sol- 15 vant présentant la composition suivante en parties pondérales : eau - 1,5; polyéthylène glycol à masse moléculaire égale à 400 -1,5; sulfoxyde de diméthyle - 2. 16 - Un médicament selon la revendication 14, caractérisé par le fait qu'il contient le principe actif à raison de 0,3 à 0,5 20 en masse. 17 - Un médicament selon l'une quelconque des revendications 7 à 10, caractérisé par le fait qu'il contient le principe actif en association avec une matière de base pharmaceutique pour suppositoires. 25 18 - Un médicament selon la revendication 17, caractérisé par le fait qu'en tant que matière de base pharmaceutique pour suppositoires, il contient de l'huile de cacao, de la lanoline anhydre avec addition d'un solvant présentant la composition suivante en parties pondérales : eau - 1,5, polyéthylène glycol à masse molécu- 30 laire égale à 400 - 1,5; sulfoxyde de diméthyle - 2* 19 - Un médicament selon la revendication 17, caractérisé par le fait qu'il contient le principe actif à raison de 0,03 à 0,05 i° en masse.