Brevet FR2034572A1 — publié le 19701211

La présente invention concerne de nouveaux sels de l'acide ellagique qui sont hautement solubles dans l'eau et leur usage comne. agents hémostatiques administrables par voie parentérale. Elle concerne en particulier les sels solubles de l'acide ellagique (2, 3, 7, 8-tétrahydroxy-[1] benzopyrano [5,4,3-cde] [1] benzopyran-5, lO-dione) représenté par la formule développée suivante avec un amino-acide basique choisi dans le groupe comprenant la lysine, l'ornithine, l'arginine et sinilaires et les compositions aqueuses contenant de tels sels solubles avec, de plus, de la polyvinylpyrrolidone qui sont administrables à l'homme par injection. Un objet de la présente invention est de fournir de nouveaux sels de l'acide ellagique avec des amino-acides basiques, tels que la lysine, l'ornithine, l'arginine et similaires, qui sont hautement solubles dans l'eau. Ùn autre objet de la présente invention est de fournir des compositions aqueuses contenant des sels d'amino-acide basique de l'acide ellagique qui, en raison de la polyvinylpyrrolidone qui yest ajoutée, sont stabilisés et permettent l'administration de 1 acide ellagique, le composé à action hémostatique puisante, à 1' humain, sous une quantité et une concentration convenables, sans produire d'effets latéraux défavorables. L'acide ellagique a, par luimeme, une activité hémostatique très puissante et, de ce fait, on risque de provoquer un ac- cident imprévisible dû à un thrombus et similaire lorsqu'on l'administre à l'humain sous une quantité dépassant 5 mg/kg. D'autre part, étant donné que l'acide ellagique en lui-meme est difficilement soluble dans l'eau, il nty a pas ou peu d'absorption de l'aci- de par administration orale. On préfère donc administrer l'acide par la voie parentérale. Toutefois jusqu'ici les sels connus de 1' acide ellagique, tels que les sels des métaux alcalins ou alcalinoterreux, sont insuffisamment solubles pour permettre leur usage comme agent hémostatique.De plus, les solutions aqueuses de ces sels connus ne sont pas satisfaisantes, également en ce qui concerne la stabilité. Certains précipités se trouvent formés dans les solutions très rapidement apres quelles aient été préparées. De ce faitS il a été considéré comme difficile d'utiliser pratiquement l'acide ellagique dans un but thérapeutique à défau-t de trouver une méthode ou une voie pour l'administrer sous une quantité et sous une concentration convenables. Dans le brevet anglais NO 1.125.349 du 12 Avril 1967 on a exposé que les sels de dicholine et de bis~triéthylamine de l'acide ellagique sont suffisamment solubles pour permettre d' utiliser en pratique leurs solutions comme agent hémostatique injectable. Lorsque les sels de dicholine et de bis-triéthylamine de l'acide ellagique sont mélangés avec une solution de Ringer, du sérum, du sang ou similaire, il se forme toutefois un sel de calcium de l'acide ellagique qui est hautement insoluble et est considéré comme pouvant provoquer un thrombus. En conséquence ces sels également ne peuvent être utilisés en pratique pour la prépa- ration d'agents hémos;t.atiques injectables. Il a maintenant été trouvé que les sels d'amino-acide basique de acide ellagique sont hautement solubles dans liteau et que leur solubilité est plus élevée que celle des sels de l'acide ellagique connus jusqutici et permet lladDinistration par voie parentérale de l'acide ellagique sous une quantité et sous une concentration convenables. De plus, il a également été trouvé qu' une solution aqueuse des sels d'amino-acide basique de l'acide ellagique présente une stabilité extrêmement élevée lorsqu'on ajoute à celle-ci de la polyvinylpyrrolidone. Avec la solution aqueuse, conforme à la présente invention, d'acide ellagique contenant de la polyvinylpyrrolidone, la précipitation de l'acide ellagique libre ne se produit pas même lorsqu'elle est diluée sous une concentration faible telle que celle qui est préférable pour l'usage thérapeutique. De plus, la formation de llellagate de calcium, lequel est difficilement soluble dans l'eau et peut provoquer un thrombus, ne se produit pas avec une telle solution aqueuse même lorsqu'elle est mélangée avec une solution de Ringer, du sérum, du sang ou similaire.En conséquence, la solution aqueuse peut avantageusement être utilisée pour l'administration à lshumain de acide ellagique, lequel a un effet extrêmement puissant comme agent hémostatique, tout en évitant les réactions latérales telles que les thrombus, etc. Un tel effet de la combinaison d'un sel d'amino-acide basique de l'acide ellagique avec la polyvinylpyrrolidone a été trouvé pour la pre mière fois à l'occasion de la présente invention. Les sels d'amino-acide basique de l'acide ellagique conforme à l'invention peuvent être préparés en ajoutant un armno- acide basique tel que la lysine, ltornithine, l'arginine ou similaire, ou une solution de ceux-ci dans un solvant convenable tel que le méthanol ou similaire, à une solution d'acide ellagique dans un solvant inerte tel que le méthanol bouillant, sous un rapport quantitatif de 2 moles ou de préférence légèrement plus de deux moles d'amino-acide basique par mole d'acide ellagique. L'isolement et la purification du sel d1amino-acide basique de l'acide ellagique en résultant peuvent être effectués par un procédé conventionnel. La solution aqueuse de ces sels, conforme à la présente invention, peut être préparée en les dissolvant, ensemble avec de la polyvinylpyrrolidone, dans de l'eau distillée. Toutefois elle peut être obtenue d'une manière plus avantageuse en ajoutant de l' acide ellagique libre, un amino-acide basique et de la polyvinylpyrrolidone à de l'eau distillée et en les dissolvant dans celleci. Dans ce dernier cas, par exemple, 100 mg d'acide ellagique, une quantité deux fois molaire ou légèrement plus que deux fois molaire de l'amino-acide basique par rapport à l'acide ellagique, et I à 10 g de polyvinylpyrrolidone sont dissous dans de l'eau distillée et le volume total est amené à 100 ml.Il est préférable que la polyvinylpyrrolidone soit présente dans la solution aqueuse de la présente invention sous une concentration de 1 à 10 0 en poids, plus spécialement de 3,5 à 10 % en poids. A la solution aqueuse ainsi obtenue, des additifs tels que le mannitol, le sorbitol, l'inositol, etc, peuvent être ajoutés, et le pH de la solution en résultant peut être réglé entre 8 et 9 afin de la rendre isotonique du plasma, Les tableaux I et II ci-après sont donnés pour démontrer la bonne stabilité des solutions aqueuses, conformes à l'invention, de l'acide ellagique. Les solutions aqueuses de l'acide ellagique obtenues dans les exemples 1 et 2 décrits ci-après ont été chauffées à IOOOC pendant 5 et 10 heures et on a ensuite observé à 1' oeil nu, s'il se formait des précipités ou non4 Les résultats sont donnés dans le Tableau I ci-après. Tableau I Durée du chauffage (en heure) 5 10 Echantillon 1 pas de précipité pas de précipité Echantillon 2 pas de précipité pas de précipité Dans le Tableau I, les échantillons 1 et 2 représentent la solution obtenue dans ltexemple 1 et celle obtenue dans ltexem- ple 2, respectivement. 20 ml ou 25 ml des solutions aqueuses d'acide ellagique préparées selon les exemples 6, 7 et 8 décrits ci-après et 20 ml d'une solution aqueuse du sel de dicholine de l'acide ellagique ont été mélangés avec 500 ml de solution de Ringer et on a ensuite observé à l'oeil nu s > il se formait ou non des précipités dans le mélange en résultant.Les resultats sont donnés dans le Tableau Il ci-après Tableau 11 Volume (mil) de Résultat de ltéchantillon : itobservation ou du contrôle Echantillon 3- 25 pas de précipité Echantillon 4 20 pas de précipité Echantillon 5 25 pas de précipité Contrôle 20 précipités importants Dans le Tableau II, les échantillons 3, 4 et 5 représentent les solutions préparées selon les exemples 6, 7 et 8 respectivement et le contrôle représente une solution du sel de dicholine de l'acide ellagique. La dose clinique journalière des sels dramino-acide basique de l'acide ellagique, conformes à l'invention,correspond à une quantité de 0,1 à 5,0 mg d'acide ellagique libre par kilo de poids L'invention sera décrite plus en détail dans les exemples ci-après. Exemple 1 Ellagate de di-L-lysine A une solution de 226 mg d'acide ellagique dans 200 ml de méthanol bouillant on a ajouté goutte à goutte une solution de 219 mg de L-lysine dans 20 ml de méthanol, ce qui a donné naissance à des précipités. Les précipités ont été recueillis par centrifugation, lavés avec 30 ml de méthanol et ensuite séchés à 60-700C sous 0,1 mm de mercure, pendant 8 heures, dans un courant d'azote. Le rendement en cristaux d'ellagate de di-L-lysine a été de 273 mgt Point de fusion 267-272 C. Analyse calculée pour C26H34N4012 C : 52,52 ; H : 5,76 ; N : 9,42 Trouvée s C : 52,31 ; H : 5,60 ; N : 9,56 Exemple 2 Ellagate de di-L-ornithine 528 mg de L-ornithine ont été dissous dans .20 ml de méthanol et la solution en résultant a été versée goutte à goutte dans une solution de méthanol bouillant contenant 302 mg diacide ellagique, ce par quoi des précipités se sont trouvés formés. Le mélange ainsi obtenu a été laissé au repos pendant une nuit et ensuite les précipités ont été recueillis par filtration, lavés avec 30 ml de méthanol et séchés à 60-700C sous une pression de 0,1 mm de mercure, pendant 8 heures. Le rendement en cristaux d'ellagate de di-Lornithine a été de 221 mg. Point de fusion 239-941 C. Analyse calculée pour C24H30N4012 C : 50,88 ; H : 5,34 ; N : 9,89 Trouvée s C : 50,59 ; H t 5,16 ; N : 9,63 Exemple 3 Ellagate de di-L-arginine A une solution de 302 mg d'acide ellagique-dans 200 ml de méthanol bouillant a été ajoutée une solution de méthanol contenant 348 mg de L-arginine. Les cristaux précipités ont été recueillis par centrifugation, lavés avec 30 ml de-méthanol et séchés à 60-700C sous 0,1 mm de mercure, pendant 8 heures. Le rendement en ellagate de di-L-arginine a été de 128 mg. Point de fusion 210 2250C. Analyse calculée pour C26H3-8812 C : 48,oe ; H : 5,27 ; N : 17,22 Trouvée : C : 47,78 ; H : 5,32 ; N : 17,00 Exemple 4 100 mg d'acide ellagique et 120 mg de L-arginine ont été ajoutés à et dissous dans 80 ml d'eau distillée. A la solution obtenue, on a de plus ajouté 3,5 g- de polyvinylpirrolydone et 5,0 g de mannitol. Le pH de la solution ainsi obtenue a été réglé à 8,5 en y ajoutant de la L-arginine et le-voluse total de la solution a ensuite été porté à 100 ml par adjonction d'eau distillée. Exemple 5 100 mg d'acide ellagique et 90 mg de L-ornithine ont été dissous dans 80 ml d'eau distillée et, à la solution obtenue, on a de plus ajouté 3,5 g de polyvinylpyrrolidone et 5,0 g de mannitol. A la solution ainsi obtenue, on a ajouté par parties de la L-ornithine jusqu'à ce que le pH ait été réglé à 8,5 et le volume total a ensuite été porté à 100 ml par adjonction d'eau distillée. Exemple 6 100 mg d'acide ellagique et 120 mg de L-arginine ont été dissous dans 80 ml d'eau distillée et on a ajouté de plus à la solution obtenue 10 g de polyvinylpyrrolidone et 5,0 g de sorbitol. Le pH de la solution ainsi obtenue a été réglé à 8,5 en y ajoutant par parties de la L-ornithine et le volume total de la solution a été ensuite porté à 100 ml par adjonction d'eau distillée. Exemple 7 125 mg d'acide ellagique et 140 mg de L-arginine ont été dissous dans 80 ml d'eau distillée et on a de plus ajouté à la so lution obtenue 9,0 g de polyvinylpyrrolidone et 5,0 g dwinositol. A la solution ainsi obtenue, on a ajouté de la L-arginine jusqu'à ce que le pH de la solution ait été réglé à 8,5 et le volume total de la solution a ensuite été porté à 100 ml par adjonction d'eau distillée. Exemple 8 100 mg d'acide ellagique et 100 mg de L-lysine ont été dissous dans 80 ml d'eau distillée et on a ajouté à la solution obtenue 10 g de polyvinylpyrrolidone et 5,0 g de sorbitol. Le pH de la solution ainsi obtenue a été réglé à 8,5 en y ajoutant une solution d'hydroxyde de sodium aqueuse et le volume total de la solution a été ensuite porté à 100 ml par adjonction d'eau-distillée-. R EVRND I CATI ONS 1.- Un sel de l'acide ellagique avec un acide amino-basique choisi dans le groupe comprenant la lysine, ltornithine et 1' arginine. 2.- Un sel d'acide ellagique selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'amino-acide basique est de la L-lysine. 3.- Un sel de l'acide ellagique selon la revendication 1 caractérisé en ce que l'amino-acide basique-est de la L-ornithine. 4.- Un sel de Itacide ellagique selon la revendication 1 caractérisé en ce que l1amino-acide basique est de la L-arginine. 5.- Une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu t elle est constituée par un sel d'un amino-acide basique de l'acide ellagique qui est dissous dans un support aqueux pharmaceutiquement acceptable, ensemble avec de la polyvinylpyrrolidone, la polyvinyl pyrrolidone étant présente sous une concentration de 1 à 10 g en poids de la composition.