Brevet FR2025217A1 — publié le 19700904

La présente invention a pour objet un nouvel excipient pour produits pharmaceutiques ou vétérinaires, et en particulier pour vaccins, les produits pharmaceutiques et vétérinaires comportant ledit excipient et leurs procédés de préparation. I1 est déjà connu de réaliser des vaccins de type huileux dans lesquels l'antigène se trouve dispersé dans une solution aqueuse, elle-même émulsionnée dans une phase huileuse. De tels vaccins huileux présentent l'avantage de permettre un effet retard en libérant progressivement l'antigène dans l'organisme. Par contre, ils présentent des intonvénients qui rendent quelquefois leur utilisation impossitle car, d'une part, l'injection d'une masse huileuse importante provoque des réactions dans l'organisme qui peuvent avoir des eonséquences sérieuses et d'autre part, le volume de solution ou de suspension antigénique qui peut être -administré est relativement limité, ce qui exclut l'utilisation de tels eluipients huileux pour un certain nombre de vaccins qu'on ne peut préparer à l'état vraiment concentré. La présente invention permet d'obtenir un excipient pour produits pharmaceutiques ou vétérinaires, et en particulier pour vaccins; qui présente les avantages des excipients huileux sans en présenter les inconvénients. la présente invention a pour objet le produit industriel nouveau que constitue un excipient pour produits pharmaceutiques ou vétérinaires, et plus spécialement pour vaccins, cet excipient étant essentiellement caractérisé par le fait qu'il est constitué par une émulsion de type eau-dans-l'huile elle-même dispersée dans une phase aqueuse sous forme d'une émulsion huiledans-l'eau, le produit actif étant contenu à la fois dans la phase aqueuse discontinue de ltémulsion eau-dans-l'huile, et dans la phase aqueuse continue de I1 émulsion huile-dans-l'eau. La présente invention a également pour objet les produits pharmaceutiques et les produits vétérinaires en particulier les vaccins, comportant un excipient tel que défini oi-dessus. L'excipient selon l'invention, qui se présente sous la forme d'une émulsion huile-dans-l'eau, présente l'avantage de posséder une fluidité élevée du fait que sa phase continue est une phase aqueuse. I1 en résulte qu'il est d'une injection facile et que les composés actifs tels que les antigènes contenus dans la phase aqueuse continue sont libérés rapidement dans l'organisme avec obtention d'un effet immédiat. De plus, l'existence d'une seconde phase aqueuse qui se trouve elle-même dispersée tout en étant entourée d'une phase huileuse, permet d'obtenir un effet retard important en libérant progressivement dans l'organisme les composés actifs qu'elle contient. Un tel excipient est particulièrement bien approprié à la réalisation d'un vaccin car il permet à l'aide d'une seule injection d'obtenir un effet immédiat et un effet retard, qui provoquent dans l'organisme la formation d'un taux élevé d'anticorps pendant une durée relativement longue. De plus, la phase huileuse qui est utilisée présente l'avantage d' agir comme ad juvant aussi bien vis-à-vis des antigènes présents dans la phase aqueuse. discontinue que des antigènes présents dans la phase aqueuse continue. On obtint ainsi un vaccin qui peut être injecté avec la même facilité qu'un vaccin conventionnel en phase aqueuse, mais qui presente tous les avantages d'un vaccin en phase huileuse, en particulier en ce qui concerne l'action~adjurante de la phase huileuse. tes proportions de composés actifs que l'on place dans la phase aqueuse discontinue et--dans la phase aqueuse continue dépendent dans une assez large mesure de l'importance que lton veut donner à l'effet retard. tes composés actifs placés dans les phases aqueuses peuvent être des antigènes, des produits chimiques, des anti-biotiques, des agents de nutrition, des agents opacifiants ou des agents de contraste pour radiographie, sans que cette liste soit li imitative. Conformément à l'invention, la phase huileuse dé l'excipient est une huile ou un mélange d'huiles susceptibles d'être introduits dans un organisme vivant, constituée par exemple par une huile minérale telle que l'huile de paraffine, une huile végétale telle que l'huile d'olive, l'huile d'arachide ou l'huile le de noy, ou une huile animale telle que la lanoline, l'huile considérée étant de préférence peu oxydable-, ou contenant des anti-oxydants tels que la vitamine E. Pour réaliser l'émulsion de type eau-dans l'huile, on peut utiliser tout émulsionnant de ce type compatible avec un usage médical ou pharmaceutique, et en partioulier un ester de prepylène-glycol et d'acide gras, du mono-oléate de sorbitol, du mono-oléate de manitol, du mono-oléate de propylène-glycol, des esters de propylène-glycol et d'acide gras, etc... L'émulsionnant eau-dans-l'huile qui est mis en solution dans la phase huileuse peut être présent à une concentration pondérale correspondant au degré HLE (balance hydrophile/lyophile) nécessaire en fonction de l'huile choisie p-our préparer une émulsion stable. L'émulsion de type eau-dans-l'huile est géneralement réali sée avec 4Oà 40 % de phase aqueuse et 90 à 60 % de phase huileuse. Pour réaliser l'émulsion huile-dans-l'eau qui permet la dispersion de l'émulsion eau-dans-l'huile dans une phase aqueuse continue, on utilise un émulsionnant du type huilè-dans- l'eau compatible avec une utilisation pharmaceutique ou vetéri- naire. On peut, par exemple, utiliser un cétyléther polyoxyéthyléné, du tristéarate de sorbitol polyoxy-éthyléné, ou du mono-ol-éate de sorbitol polyoxy-éthy'téné. Cet émulsionnant huile-dans-l t eau est dissous dans la phase aqueuse continue à une concentration pondérale correspondant au RIJ nécessaire en fonction de l'huile choisie pour préparer une émulsion stable de ce type. Pour realiser l'émulsion huile-dans-l'eau, on utilise gené- ralement une proportion de 3 à 8 parties de phase aqueuse pour une partie d'émulsion eau-dans-lrhuile. Pour obtenir une stabilité convenable de la double émulsion utilisée selon l'invention, il est souhaitable de choisir la nature et la concentration des émulsionnants compte tenu de la nature des différentes phases à émulsionner. C'est ainsi que selon l'invention le degré RlB de l'émulsionnant peut être choisi de 4 à 8 dans le cas des émulsions eau-dans-l'huile, et de 10 à (cpte tenu de la présence des autres constituants de la phase aqueuse, dans le cas de l'émulsion huile-dans-l'eau. la phase aqueuse peut être, par exemple, constituée par une solution physiologique contenant les substances actives. Ces dernières peuvent être de types divers tels que produits chimiques à action physiologique, antibiotiques, agent de nutrition, agent de contraste ou d'opacification pour radiographie, etc... mais l'invention convient tout particulièrement à la préparation de vaccins constitués, par exemple, par des micro-organismes vivants appartenant à des souches atténuées ou avirulentes, par des micro-organismes inactivés, par les extraits de tels microorganismes, ou encore par des micro-organismes à base de toxines modifiées par des agents chimiques. C'est ainsi que les vaccins selon l'invention peuvent comporter dans les solutions aqueuses des bactéries inactivées telles que E. Coli, Brucella, Salmonella; des virus inactivés tels que le virus de Newcastle, le virus de la rougeole, ou des to vines inactivées telles que la toxine tétanique, la toxine welchia, la toxine staphylococcique, ou encore des suspensions de protozoaires tels que les leptospires. ~ Bien que-l'invention soit décrite en se-référant plus particulièrement à son utilisation dans le cadrc des vaccins, il est clair que l'excipient selon-l'invention peut aussi être utilisé pour contenir tout type-de produit pharmaceutique, parapharmaceutique ou vétérinaire. Conformément à l'invention, il n'est pas nécessaire que la phase aqueuse discontinue et la phase aqueuse continue contiennent les mêmes substances actives, et il est clair que l'on peut aussi, selon l'invention, placer dans ces deux phases, soit des composés actifs différents, soit des composés actifs identiques à des concentrations différentes. Pour préparer les produits selon l'invention, on réalise tout-d'abord la ou les phases aqueuses, si la phase aqueuse continue est différente de la phase aqueuse discontinue. On procède ensuite à l'émulsion de la phase aqueuse discontinue dans la phase huileuse, dans laquelle a été dissous l'émulsionnant eaudans-l'huile. La préparation de cette émulsion s'effectue selon les procédés conventionnels de préparation des émulsions. On introduit ensuite l'émulsionnant huile-dans-l'eau dans la phase aqueuse continue, et I'on.réalise la double émulsion finale en émulsionnant dans la phase aqueuse continue l'émulsion eau-dans-l'huile qui a été précédemment réalisée. Dans le but de mieux faire comprendre l'invention on va en décruse maintenant, à titre d'illustration, plusieurs modes de mise en oeuvre. Exemple 4 Préparation dkun vaccin anti-brucellique. Pour préparer un vaccin anti-brucellique selon l'invention, on réalise tout d'abord une émulsion de type eau-dans-l'huile à l'aide d'une phase aqueuse constituée par 300 ml d'une suspen sion de Brucella abortus inactivé, à une concentration de 400 milliards par ml. La phase huileuse est constituée par 700 ml d'huile de vaseline Codex contenant 8 % en poids de mono-oléate de sorbitol. Cette émulsion eau-dans-l'huile est obtenue par homogénéisation énergique des deux constituants. On incorpore ensuite à 300 ml de la même suspension de Brucella abortus que celle utilisée ci-dessus, 2 % en poids de dérivé polyoxy-éthyléné de mono-oléate de sorbitol, ce qui donne une phase aqueuse correspondant à ur e#malsionnant ayant degré BIB de 45. Cette incorporation se fait à 37t en aJotant' 2 000 ml de sérum physiologique stérile. Pour obtenir la double émulsion selon lrnvention, on mélange énergiquement dans un récipient ltémuision eau-dansl'huile obtenue comme indiqué précédemment avec la suspension aqueuse de Brucella abortus et d'émulsionnant, dans des proportions d'un litre d'émulsion huileuse pour deux litres de solutison aqueuse. On obtient ainsi une émulsion huile-dans-l'eau stable, qui constitue un excellent vaccin anti-brucellique. Exemple 2 Préparation d'un vaccin anti-virus de Ncwcastle. Pour préparer un vaccin anti-virus de Newcastle inactivé, selon l'invention, on réalise tout d'abord une émulsion de type eau-dans-l'huile, à l'aide d'une phase aqueuse constituée par 400 ml de suspension virale inactivée par la -propiolactone. La phase huileuse est constituée par 600 ml d'huile de vaseline Codex contenant 5 % de mono-stéarate de sorbitol. Cette émulsion eau-dans-l'huile est obtenue par homogénéisation énergique des deux constituants. On incorpore ensuite à 3 litres de virus de Newcastle inac tiré, 2,5 % de dérivé polyoxy-éthyléné de mona-stéarate de sorbitol, Cette incorporation se fait à 37 C sous agitation énergique. Pour obtenir la double émulsion de l'antigène, on mélange énergiquement dans un récipient l'émulsion eau-dans-lthuile obtenue comme indiqué précédemment avec la suspension antigénique contenant le dérivé polyoxy-éthyléné de mono-stéarate de sorbitol. Exemple 3 Préparation d'un vaccin anti-typhus des chats. Pour préparer UI1 vaccin anti-typhus dos chats selon l'inven- tion, on réalise tout d'abord une émulsion type eau-dans-l'huile à l'aide d'une phase aqueuse constituée par 350 ml de suspension virale inactivée. La phase huileuse est constituée par 650 ml d'huile d'arachide de bonne qualité contenant 8 % de mono-oléate de sorbitol. Cette émulsion eau-dans-l'huile est obtenue par homogénéisation-énergique des deux constituants. On incorpore ensuite cette émulsion dans 5 litres de virus inactivé contenant 2 % de dérivé polyoxy-ethyléné de mono-oléate de sorbitol. Le mélange ainsi obtenu est émulsionné et homogénéisé à l'aide d'un appareil de type Gumix, ou pour les préparations industrielles à-l'aide dfun broyeur colloldal. Exemole 4 Préparation dtun vaccin anti-welchia. Pour préparer un vaccin anti-welchia on réalise tout d'abord une émulsion type eau-dans-l'huile à l'aide d'une phase aqueuse constituée par 300 ml d'anatoxine welchia concentrée. la phase aqueuse est constituée par 700 ml d'huile de vaseline fluide Codex contenant 7 % de mono-oléate de sorbitol. Cette émulsion eau-dans-l'huile est obtenue par homogénéi sation ènergique des deux constituants. On incorpore ensuite cette émulsion dans 4 litres de phase aqueuse, constituée par 49 % de tampon phosphate, 49 % d'anatoxine welchia concentrée, et 2 % de dérivé polyoxy-éthyléné de mono-oléate de sorbitol. REVENDICATIONS 1.- Excipient pour produits pharmaceutiques ou vétérinaires, et en particulier pour vaccins, caractérisé par le fait qu'il est constitué par une émulsion de type eau-dans-l'huile dispersée dans une phase aqueuse continue sous forme d'émulsion huile-dans-l'eau, des produits physiologíquement actifs étant contenus à la fois dans la phase aqueuse discontinue et dans la phase aqueuse continue. 2.- Excipient selon la revendication 1 oaractérisé par le fait que la phase huileuse est une huile susceptible dtêtre introduite dans un organisme vivant, constituée par exemple par une huile minérale telle que l'huile de paraffine, une huile végétale telle que l'huile d'olive, l'huile d'arachide ou l'huile de noyau, ou une huile animale telle que la lanoline, l'huile considérée étant, de préférence, peu oxydable, o;u contenant des anti-oxydants tels que la vitamine E. 3.- Excipient selon l'une quelconque des revendications 4 et 2, caractérisé par le fait que le degré RIB de l'émulsionnant eau-dans-l'huile est compris entre 4 et 8. 4.- Excipient selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que l'émulsionnant eau dans-lthuile est constitué, par un ester de propylène-glycol et d'acide gras, par du mona-oléate de sorbitol, par du mono-oléa- te de manitol, par du mono-oléate de propylène-glycol ou par des esters de propylène-glycol et d'acide gras. 5.- Excipient selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que le degré HIB de l'émul- sionnant huile-dans-lteau est compris entre 10 et 45. 6.- Excipient selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que l'émulsionnant huile dans-l'eau est constitué, par un mono-oléate de sorbitol polyoxy-éthyléné, par un cétyléther polyoxy-éthyléné, par du tristéarate de sorbitol polyoxyeéthyléné, ou par du mono-oléate de sorbitol polyoxy-éthyléné. 7.- Excipient selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que l'émulsion eau-dansl'huile comporte en volume de 40 à 40 % de phase aqueuse et 90 à 60 % de phase huileuse. 8.- Excipient selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que l'émulsion huile-dans L'eau comporte de 3 à 8 volumes de phase aqueuse continue pour 4 volume d'émulsion huileuse. 9.- Produit pharmaceutique ou vétérinaire caractérisé par le fait qu'il est constitué par au moins un produit physiologi quement actif dissous ou dispersé dans la phase aqueuse continue et dans la phase aqueuse discontinue de l'excipient selon l'une quelconque des revendications 4 à 8. 10.- Produit pharmaceutique ou vétérinaire selon la revendication 9, caractérisé par le fait qu'il est un vaccin. 11.- Produit selon ltune quelconque des revendications 9 et 40, caractérisé par le fait que le produit actif contenu dans la phase aqueuse est un produit chimique, un antibiotique, un agent de nutrition, un agent opacifiant, ou un agent contrastant. 42.- Produit selon l'une quelconque des revendications 9 à caractérisé par le fait que le produit actif contenu dans la phase aqueuse discontinue est le même que le produit actif contenu dans la phase- aqueuse continue. 13.- Produit selon l'une quelconque des revendications 9 à 41, caractérisé par le fait que le produit actif contenu dans la phase aqueuse discontinue est de nature différente du produit actif contenu dans la phase continue. 14.- Procédé de préparation pour réaliser un produit selon l'une quelconque des revendications 4 à 13, caractérisé par le fait qu'on réalise une première phase aqueuse contenant un produit actif, qu'on émulsionne cette phase aqueuse dans une phase huileuse continue contenant un émulsionnant de type eau-dans l'huileX qu'on prépare une seconde phase aqueuse contenant un produit physiologiquement actif et un émulsionnant de type huiledans l'eaux et qu'on disperse sous forme d'émulsion dans cette phase aqueuse continue l'émulsion huileuse préalablement obtenue.