Brevet FR2047873A1 — publié le 19710319

La présente invention est relative à un nouveau produit à action thérapeutique. Le produit actif nouveau à action thérapeutique objet de llinvention constitue un nouveau facteur exerçant une action protectrice préventive et curative spécialement au niveau des cellules hépatiques. On sait que le foie exerce une fonction protectrice contre les éléments toxiques ingérés par llorganismetnotamment en élaborant des composés dits "glycuro conjugés" à partir des éléments toxiques, ces composés étant plus facilement assimilables ou évacués par llorganisme. Cependant la capacité d'absorption et de détoxication du foie peut se trouver considérablement diminuée par une dégénérescence pathologique de la cellule hépatique ; de meme un excès de produit toxique ou un afflux accidentel ou permanent de produits à éliminer, par exemple de lipides d'origine alimentaire, au niveau du foie, peut aboutir en raison de llincapacité du foie à répondre aux besoins excessifs pour lesquels il est sollicité, à lia formation de particules graisseuses ou stéatoses au sein de cet organe. Ce problème a pris une particulière actualité avec le développement notamment dans les civilisations occidentales d'une surconsommation alimentaire et notamment d'une consommation hypercalorique et trop riche en matière grasse ; une consommation alcoolique exce s3ive aboutit au meme résultat, d'une part en provoquant une dégénérescence des cellules hépatiques et leur moindre aptitude à assumer leur fonction d'élimination et de défense et d'autre part en surchargeant ces cellules de produits steatogènes. Le nouveau produit actif de l'invention exerce une action préventive et curative vis à vis des cellules hépatiques, leur permettant de conserver leur aptitude à assurer une fonction d'élimination et anti toxique et s'opposant à la formation de stéatose au niveau du foie. Le produit actif de l'invention a également d'autres vertus thérapeutiques qui seront précisées et exposées dans la suite du présent mémoire descriptif. Le produit actif de ltinvention ne peut entre défini par sa formule chimique précise celle-ci n'étant pas connue avec précision. Le produit actif conformément à l'invention sera défini par son procédé de fabrication et ses caractéristiques chimiques et biologiques. Le produit de l'invention est extrait de vésicules biliaires ; plus spécialement la substance nouvelle objet de l'invention est de constitution amino-lipidique elle est extraite des parois de vésicules biliaires. Le procédé de préparation part d'un broyat de vésicules débarrassées de la bile et soumis à dessication à faible température et sous vide, le broyat sec étant soumis à extraction acétonique le liquide acétonique est éliminé après filtration et le filtrat est traité par l'alcool, ce dernier après filtration étant concentré sous vide pour laisser un extrait sec contenant la substance objet de l'invention Un exemple d'un processus opératoire conforme au procédé ci-dessus est indiqué ci-après La matière première de départ est constituée de vésicules biliaires de porc débarrassées de la bile et rincées à l'eau froide.On broie les vésicules éventuellement décongelées, jusqu?à 1' obtention d'une p te lisse ; on utilise pour cela de préférence des hachoirs a' viande de type connu alimentés par vis sans fin. Le produit disposé en plaques minces est soumis à dessication dans une étuve sous vide à circulation d'eau chaude, à une température de 40 à 50 , la température de l'eau de circulation étant maintenue aux environs de 70". Lorsque la p te est desséchée on-retire les plaquettes qui sont soumises à un concassage et font l'objet d'une extraction par acétone à froid, soit par trempage et essorage successifs, soit par circulation du solvant d'extraction, On élimine alors les filtrats et on conserve les résidus qui sont épuisés par de l'alcool à chaud ctest-à-dire aux environs de 60". Les liquides d'épuisement sont réunis et après refroidissement sont filtrés les liqueurs claires sont concentrées sous vide et desséchées. On retrouve un extrait sec représentant sensiblement 3, 5% de la matière initiale, cet extrait contient la substance, objet de l'invention. On peut encore préciser les données quantitatives suivantes précisant le bilan de l'opération. matière première (vésicules fraiches) 150 kg acétone d'extraction 60 kg alcool d'extraction 60 kg produit sec obtenu 5, 250 kg L'analyse chimique quantitative du produit donne une composition suivante azote total 3, 36 % phosphore 0, 64 % acides gras totaux 40, 40 % acides aminés 21 % La composition du produit en acide gras a été déterminée par chromatographie en phase gazeuse des esters méthyliques sur phase apolaire (caoutchouc ou silicone SE 30) et sur phase polaire (succinate de diethylène glycol). Les acides gras ont été obtenus par saponification à l'aide de potasse méthanoli que normale pondant une heure suivie dtacidification et extraction. La composition des acides gras dans le produit Rst résumée- dans le tableau qui suit C 12 0.5 % C 14iso -0.2 % C 14 totaux 7.0 % dont C 14' 1.0 % -C 15 totaux 2.3 % C 16 iso 0.3 % C 16 totaux 25.4 % dont C 16' 2.2 % C 17 totaux 3.1 % C 18 iso 0.3 % C 18 totaux 57.2 % dont C 18' 23.7 % et C 18" 13.5 % C 20 3.7 % Pour l'étude toxicologique du produit, on a déterminé la dose léthale aiguë à 50% sur la souris albinos et les résultats sont repris dans le tableau qui suit Doses g/kg Décès Mortalité % 0, 1 o/îo 0 0, 5 0/10 0 1, 0 2/10 20 5, 0 îo/îo 100 On constate ainsi que la dose léthale aiguë à 50% se situe à 1, 6 gramme par kilo, ce qui confirme l'absence de toxicité du produit. Les expérimentations et essais effectués par la demanderesse ont permis de situer les caractéristiques pharmacologiques du produit de 1'invention; ce produit que 1'on désignera ci-après sous le terme d'aminolipide vésiculaire ou "A L V" possède une activité cholérétique, une activité anti-lithogène et surtout une activité hépatoprotectrice. L'activité cholérétique de l'aminolipide vésiculaire a été étudiée chez le rat albinos en mesurant le débit biliaire des animaux soumis à expérimentation; on a constitué trois lots d'animaux testés, l'un absorbant l'aminolipide vésiculaire de l'invention, un second lot absorbant de l'acide déhydrocholique-à titre de comparaison et un troisième lot témoin étant soumis à un régime normal. L'acide déhydrocholique, généralement pris comme terme de comparaison, élève rapidement le débit biliaire. L'augmentation maximum atteint plus de 100% au cours des dix minutes suivant l'administration de 50mg/kg du produit. A cette dose, l'action est assez fugace, le débit retournant à sa valeur initiale en 70 à 80 minutes. Dans des conditions identiques, l'aminolipide vésiculaire à la dose de 500mg/kg élève lentement et modérément le débit de bile. Le maximum, en moyenne 55%, est atteint au bout de 40 minutes. Le débit biliaire retourne lentement à sa valeur de départ en 90 à 100 minutes. Les conclusions de ces expérimentations démontrent qu'il existe une activité cholérétique nette provenant par 1' A L V ; comparée à action de l'acide déhydr o cholique, l'action cholérétique de 1' aminolipide- vésiculaire est lente et modérée. L'étude pharmacologique dé l'aminolipide vésiculaire a également montré l'existence d'une action anti-lithogène. Des lithiases vésiculaires ont été provoquées artificiellement chez la souris par un régime lithogène approprié. Sous l'effet de ce régime, les souris ont développé en quelques semaines des calculs vésiculaires nombreux avec modification anatomique des parois vésiculaires. Un deuxième lot de souris a reçu à la fois le régime lithogène et l'aminolipide vésiculaire. Chez ce lot de souris, on a constaté une activité anti-lithogène modérée portant sur la quantité de calculs présents mais surtout ce qui a frappé chez les souris appartenant à ce lot c'est la diminution nette et franche de la mortalité globale des animaux. En effet, dans le lot de souris n'absorbant que le régime lithogène, la mortalité globale a été de 43% alors que dans le lot de souris absorbant à la fois le régime lithogène et l'aminolipide vésiculaire ce taux de mortalité est tombé à 11%. Ces constatations ont permis de découvrir les vertus hépatoprotectrices de 1' aminolipide vésiculaire de 1' invention, Des expérimentations ont été développées afin de préciser et de vérifier cette activité hépatopr ote ctrice de 1' aminolipide vésiculaire. Ces expérimentations ont porté sur des rats blancs de souche Wistar pesant au départ de l'expérience environ 250 g. chacun et l'on a constitué deux lots de dix animaux chacun comprenant moitié mâles et moitié femelles, les animaux étant pesés individuellement au départ de l'expérience. Chacun des animaux appartenant aux deux lots a été soumis à un régime stéatogène riche en lipides et glucides. Le premier lot servant de lot témoin nua pas reçu de substance médicamenteuse tandis que chaque animal du second lot a reçu 250 mg par kg et par jour d'aminolipide vésiculaire. Après 20 jours, les animaux ont été pesés individuellement et sacrifiés, le foie de chaque animal étant prélevé et pesé ; on a procédé enfin au dosage des lipides totaux contenus dans le foie de chaque animal. L'étude des résultats de ces expérimentations démontre que si le régime alimentaire stéatogène entraine une augmentation relative du poids du foie de l'animal d'environ 28%, par contre l'administration de ltaminolipide vésiculaire de ltinvention limite cette augmentation à un taux de 11%. Par ailleurs, si le régime stéatogène entraine une augmentation relative du poids des lipides totaux contenus dans le foie de 170%, l'administration de l'aminolipide vésiculaire de l'invention limite cette augmentation à un taux de 84%. Les essais ci-dessus révèlent que ltaminolipide vésiculaire obtenu conformément à l'invention s'oppose au développement du foie consécutif à un régime alimentaire stéatogène et stoppose à la surcharge lipidique du foie consécutive --à ce régime. On constate ainsi que l'aminolipide vésiculaire objet de l'invention est un facteur hépatoprotecteur dont l'action se révèle, dans les conditions de l'expé- rience, supérieure au facteur lipocaique. L'administration du produit peut se faire par voie orale; la demanderesse a constaté en effet que ltaminolipide vésiculaire n'est pas détruit par le suc gastrique. L'absorption du produit se fait au niveau du jejunum; cette absorption du produit est facilitée car le produit est soluble bien que contenant des acides gras; l'aminolipide vésiculaire est ensuite capté par la cellule hépatique qui y trouve les éléments nécessaires à sa vie cellulaire et/ou à sa régénération. L'aminolipide vésiculaire de ltinvention peut encore etre administré par injection grâce à la grande solubilité du produit; cette voie permet notamment sous forme d'injection intramusculaire un apport massif au niveau de la cellule hépatique. En ce qui concerne la voie orale, on peut envisager une présentation sous forme de comprimés drageifiés, d'ampoules buvables ou de granulés. Les indications du produit de l'invention découlent de ses propriétés biologiques et pharmacologiques précédemment analyses. L'aminolipide vésiculaire sera indiqué dans les affections suivantes - Stéatoses hépatiques quelle qu'en soit l'origine, alcoolique en particulier - Hépatites virales à la phase aiguë et à la phase de convalescence - Cirrhoses - Lithiases vésiculaires, d'autant que le produit ne risque pas de déclencher de crises de coliques hépatiques. - Toutes les séquelles des interventions sur les voies biliaires, en particulier, les constipations observées après cholecystectomie. - Enfin, l'aminolipide vésiculaire peut être indiqué sur certains terrains, obésité, état de suralimentation, alimentation hypercalorique et riche en matières grasses. La posologie peut etre précisée à partir des indications suivantes : la dose léthale aiguë étant égale à 1, 6 gr/kg permet de prévoir l'administration sous forme de comprimés dosés à 250 milligrammes par unité ; le traitement comprendrait entre 4 et 6 comprimés par jour pendant une durée de 15 à 20 jours par mois avec des cures discontinues pendant le cours de l'année ; les comprimés seraient à absorber avant le repas. La description qui précède n'ayant été donnée qu'à titre d'exemple d'une forme de réalisation de l'invention n'a aucun caractère limitatif, et l'on pourra sans franchir les limites de l'invention réaliser à partir des éléments décrits plusieurs variantes ou formes de- réalisation de l'invention. REVENDICATIONS 1 - Nouveau produit à action thérapeutique de constitution amino lipidique extrait de parois de vésicules biliaires, le produit étant défini par le procédé suivant : on part d'un broyat de vésicules débarrassées de la bile et soumis à dessication à faible température et sous vide, le broyat sec est soumis à extraction acétonique puis alcoolique. Le liquide d'extraction acétonique est éliminé après filtration; le liquide alcoolique est concentré sous vide et éliminé pour laisser un extrait sec contenant la substance objet de l'invention. 2 - Nouveau produit thérapeutique tel que défini en 1 et obtenu plus particulièrement par le procédé suivant : la matière première de départ est constituée de vésicules biliaires de porc débarrassées de la bile et rincées à l'eau froide. On broie les vésicules, éventuellement décongelées,jusqu'à l'obtention d'une pâte lisse ; on utilise pour cela de préférence des hachoirs à viande de type connu alimentés par vis sans fin. Le produit est soumis à dessication, étant disposé en plaques minces, dans une étuve sous vide à circulation d'eau chaude à une température de 40 à 500 , la température de liteau de circulation étant maintenue aux environs de 70 . Lorsque la pâte est desséchée, on retire les plaquettes qui sont soumises à un concassage et font l'objet d'une extraction par acétone à froid, soit par trempage et essorage successifs, soit par circulation du solvant d'extraction. On élimine alors les filtrats et on conserve les résidus qui sont épuisés par de l'alcool à chaud c'est-à-dire aux environs de 60 . Les liquides d'épuisement sont réunis et après refroidissement sont filtrés les liqueurs claires sont concentrées sous vide et desséchées. On retrouve un extrait sec représentant sensiblement 3, 5% de la matière initiale, cet extrait contient la substance, objet de l'invention. 3 - Produit thérapeutique selon 1 et/ou 2 caractérisé encore par une composition élémentaire suivante: azote total 3,36% phosphore 0,64% acides gras totaux 40, 40% acides aminés 21, 00% 4 - Produit thérapeutique selon les revendications ci-dessus comportant une action cholérétique, une action anti-lithogène et principalement une action hépatoprotectrice contre la surcharge lipidique du foie.