Brevet FR2034560A1 — publié le 19701211

i 2034560 La présente invention concerne dey nouveaux dérivés du 5-formamido-4-thiocarbamoyl~l-^-D-ribofuram>syl-imidazole. Elle concerne également leur procédé de préparation. Elle concerne enfin les applications desdits composés comme agents inhibiteurs de tumeurs, notamment comme antimétabolites. On a déjà décrit des composés de formule générale suivante, dérivés de l'imidazole. 10 H CHO-N' H 15 20 25 30 Lesdits composés connus font l'objet de la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique n° 173 217 du 8 Novembre 1968, au nom de la demanderesse. Selon l'invention, la demanderesse propose maintenant des composés qui n'avaient pas été décrits jusqu'à présent, à savoir des dérivés de 5-formamido-4-thiocarbamoyl-l-/}-D~ribofura-nosyl-imidazole, tels que les suivants : 5-formamido-4-thiocarba.>-moyl"1— 1- (21,31, 5 ' -tri-O-f ormyl-$-D-ribofuranosyl) imidazole (désigné ci-après sous le nom de F^-TAICAR), 5-formamido-4-thiocar-bamoyl-1-(2 ', 3 ', 5 ' -tri-0-acyl-/5-D-ribof uranosyl-)imidazole, 5-for-mamido-4-thiocarbamoyl-l-(2 ', 3 '-0-alkylidène-5'-O-acyl-^-D-ribo-furanosyl)imidazole, 5-formamido-4-thiocarbamoyl-l-(2',3r>-0-al-kylidène-S'-O-formyl-^-D-ribofuranosyl) imidazole. Les nouveaux composés de l'invention peuvent être représentés par la formule générale suivante (l) : S I \ CHCHN^Am / (I) R1"0-H2Ç 35 dans laquelle R^ représente un groupe formyle ou acyle,et R^ et R^ représentent chacun un groupe formyle ou acyle, ou sont combinés avec un groupe alkylidène. Le groupe acyle précité comporte au minimum 2 atomes.de earbone. 70 06150 2 2034560 Les nouveaux composés que l'on peut obtenir selon l'invention présentent des activités inhibitrices de tumeurs notables, accompagnées d'une faible toxicité. Le procédé de préparation des composés de formule (i) 5 consiste en ce qu'on fait réagir, selon l'invention, un composé de formule générale (II) suivante : dans laquelle X est un atome d'hydrogène ou un groupe acyle, et Y 15 et Z représentent chacun un atome d'hydrogène, un groupe acyle ou sont combinés avec un groupe alkylidène, avec-de l'acide formique, en formant ainsi un dérivé de 5-formamido-4-tHiocarbamoyl-l-fi-D-ribofuranosyl-imidazole de formule générale (I) avec un rendement très élevé„ Dans la formule (II), le groupe acyle est défini 20 comme spécifié ci-dessus. La substance- de départ de formule (II), utilisée dans le procédé selon l'invention, comprend le 5-amino-4-thiocarbamoyl-1-P-D-ribofuranosyl-imidazole connu (désigné ci-après sous le nom de TAICARl le 5-&mino-4-thiocarbamoyl-l-(2'#3'-O-isopropylidène-25 P-D-riboftlranosyl)imidazole connu, le nouveau 5-amino-4-thiocarba-moyl-l-(2',3*-O-isopropylidène-51-0-acétyl-(3-D-ribofuranosyl) imidazole et le nouveau 5-amino-4-thiocarbamoyl-l-(2',3*5'-tri-0-acétyl-f3-D-ribofuranosyl )imidazole (désigné ci-après sous le nom de AcyTAICAR). 30 Selon le procédé de l'invention, on fait réagir la subs tance de départ de formule (il) avec l'acide formique ou avec un sel d'acide formique et un acide plus fort que l'acide formique. Des exemples de sels de l'acide formique sont constitués par les sels des'' métaux alcalins, les sels des métaux alcalino-terreux et 35 le sel d'ammonium. Les acides plus forts que l'acide formique comprennent l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique et l'acide phosphorique. On peut effectuer la réaction en pré (II) 10 Y Z 70 06150 3 2034560 sence d ' un. solyant déshydratant convenable tel que l'anhydride acétique. On effectue la réaction, selon l'invention, de 5 à- 30°C, par ..exemple à la température ambiante, en présence- d'un solvant déshydratant, ou on l'effectue par chauffage, par exemple, au 5 reflux en l'absence de solvant. On utilise l'acide formique ou un sel de l'acide formique en une quantité en excès par rapport à aile du composé de formule II. Par exemple, on doit utiliser plus rie 4 moles d'acide formique dans le cas du TAICAR, et plus de 2 molesdans le cas du 5-amino-4~thiocarbamoyl-l-(2l,3'-O-isopropyli-10 dène-f3-D-ribofuranosyl)imidazole. On peut facilement isoler le produit final de formule I formé par le mélange réactionnel et le purifier par précipitation, par extraction par solvant, ou par chromatographie. Par exemple, on sépare le précipité par mélange réactionnel, par filtration et 15 sa le lave ensuite avec un solvant convenable, ou on concentre un mélange réactionnel en présence d'alcool et on le traite ensuite avec de l'alumine. Les produits finals de l'invention montrent des activités antitumorales beaucoup plus puissantes, et des toxicités 20 beaucoup plus faibles, que tous les composés antitumoraux connus, comme cela résulte du tableau suivant I. TABLEAU I Composé inhibiteur de tumeurs Dose Taux d'inhibition (mg/kg/jour) des tumeurs {%) 25 F^-TAICAR 30 mg/kg x 5 3 F-TAICA " 15 Ac^-TAÏCAR " 127 6-SH-purine "9 30 Ac^-TAICAR . " 5 Notes : (1) taux d'inhibition des tumeurs î taux du poids des tumeurs des souris traitées par rapport au poids des tumeurs des souris non 35 traitées. (2) On traite des souris albinos suisses par des injections sous-cutanées de Sarcome NF j 24 heures après l'injection et ensuite, 70 06150 4 2034560 quotidiennement pendant une durée totale de 5 jours, on administre aux souris des -injections intrapéritonéales de chaque composé inhibiteur de tumeur à la dose d'administration de JO mg par kg de poids du corps de la souris. Après 10 jours, on excise les tumeurs 5 et on les pèse, puis on évalue l'effet d'inhibition des tumeurs d'après le taux d'inhibition des tumeurs. (3) F-TAICA : 5-formamido-4-thiocarbamoylimidazole Ac^-TAICAR : 5-acétylamino-4-thiocarbamoyl-1-(2' 35*,5'-tri-O-acétyl-P-D-ribofuranosyl)imidazole 10 6-SH-purine : 6 mercaptopurine. Acj-TAICAR : 5-formamido-4-thiocarbamoyl-1-(2', 3* * 5'-tri-O-acétyl-P-D-ribofuranosyl)imidazole. On calcule la DL,_0 (dose létale moyenne) du F^-TAICAR chez les souris, en relevant le nombre de souris qui survivent 15 au quatorzième jour après l'injection par voie intrapéritonéale, et on trduve une vaïeur de 3,11 millimoles par kg (1200 mg/kg), tandis qu'elle est de 1,20 millimole par kg (205 mg/kg) dans le cas de la 6-mercaptopurine. Les exemples suivants illustrent l'invention sans 20 nullement la limiter dans son cadre et son esprit. Dans les deux premiers exemples, on décrit respectivement la préparation des deux nouveaux intermédiaires de formule (II), servant de substances de départ dans la préparation des composés de formule (I). 2-5 EXEMPLE 1 Préparation du 5-amino-4-thiocarbamoyl-l-(2' ,3', 5f -tri-0-acétyl-3-D-ribofuranosyl)imidazole. On dissout 3,2 g de 5-amino-4-carbamoyl-l-(2',3*,51 -tri-O-acétyl-P-D-ribofuranosyl)imidazole dans 40 ml de pyridine, 30 J en chauffant, on ajoute graduellement à la solution résultante 1*97 g de pentasulfure de phosphore, en agitant et en chauffant au bain d'huile à 120°C, et on poursuit l'agitation du mélange pendant 2 heures supplémentaires. On évapore la pyridine sous pression réduite, on dissout le résidu obtenu dans 50 ml d'eau et, 35 après traitement avec du charbon de bois actif, on effectue une recristallisation à partir d'eau, répétée deux fois. On obtient des cristaux purs de 5-amino-4-thiocarbamoyl-l-(2',3',5'-trl-0-acétyl- 70 06150 5 2034560 (3-D-ribofuranosyl) imidazole, pesant 1,05 g. Les propriétés des cristaux sont les suivantes : 1. Point de fusion : 164 - 165°C (avec décomposition) 2. Spectre UV : SL1 278 et 327 nyu Sax13 240' 275 efc 524 m/U 3. Indice Rf i 0,69 sur un chromatogramme papier développé avec un système n-butanol : acide acétique : eau 4 t 1 : 1 (partiesen volumes) 4. Analyse élémentaire : 0(%) H(#) N(JÉ) Trouvé 45,18 5,04 13,84 Calculé pour 44,99 5,03 13*99 c15K20°7N4s EXEMPLE 2 Préparation du 5-amino-4-thiocarbamoyl-l-(2',3'-0-isopropylidène-5' -0-acétyl-{3-D-ribofuranosyl)imidazole. On dissout 11,98 g de 5-aniino-4-»carbamoyl-l-(2r,3r- 0-isopropylidène-5'-0-acétyl-fî-D-ribofuranosyl)imidazole dans 170 ml de pyridine, on y ajoute 8,29 g de pentasulfure de phosphore et on fait réagir de la même manière qu'à l'exemple 1. On évapore le solvant à partir du mélange réactionnel. On dissout le résidu obtenu dans 200 ml d'eau et on traite avec 200 ml de chloroforme. On lave la couche chloroformique avec de l'eau, on évapore le chloroforme et on dissout le résidu résultant dans 100 ml de méthanol. On ajoute 10 ml d'ammoniaque concentrée à la solution méthanolique et on agite le mélange pendant 2 heures à la température ambiante. On évapore le méthanol et on ajoute au résidu une solution saturée d'acide picrique dans l'éthanol contenant 2,5 g d'acide picrique, et on isole par filtration les cristaux ayant précipité. On recristallise les cristaux à partir d'éthanol et on obtient le picrate de 5-amino-4-thiocarbamoyl-l-(2',3', -0-isoporpylidène-5'-0-acétyl-3-D-ribofuranosyl)imidazole, cristallisé pur, en une quantité de 5,36 g. Les cristaux fondent à 194-195°C (avec décomposition). 70 06150 6 2034560 EXEMPLE ."3 On dissout 10 g de TAIGAR dans un mélange de 147 ml d'aoide formique et 73 ml d'anhydride acétique, en refroidissant, et on laisse au repos la solution résultante à la température' am-5 biante pendant 24 heures. On isole par filtration les cristaux soyeux, jaune^/ ayant précipité, on les lave avec du méthanol et, après séchage, on obtient 12,6 g de cristaux purs de F^-TAICAR (rendement 90%), Les propriétés physiques et les valeurs de l'analyse 10 élémentaire du eomposé sont les suivantes : 1. Point de fusion : 172°C (avec décomposition) 2. Spectre d'absorption ultraviolet X ™ 289 337-5 "yu 15 3. Spectre d'absorption infrarouge v^max 1700 cm ^ : (œC=0) J max 1474 cm-1 : (NH2-C=S) 4. /à? 28,6° = 15,5° (0=1, pyridine.) D 20 5. Analyse élémentaire : C{%) H(£) N( calculé pour C^H^N^OgS 40,41 3,65 14,50 trouvé 40,66 3,42 14,35 25 EXEMPLE 4 On ajoute 1 g de Ac^-TAICAR à un mélange de 40 ml d'acide formique et de 20 ml d'anhydride acétique, et on laisse reposer la solution résultante pendant une nuit à la température ambiante. On ajoute du méthanol au mélange réactionnel et on concen-30 tre la solution obtenue, à siccité sous pression réduite. On dissout le résidu obtenu dans du méthanol et on concentre de nouveau la solution, puis on répète le traitement plusieurs fois consécutives. On dissout le résidu final dans 10 ml de chloroforme, on fait passer la solution chloroformique à travers une colonne garnie 35 d'alumine active, et on élue ensuite le produit final; absorbé sur l'alumine, avec un solvant mixte formé de benzène et d'acétate d'éthyle. On concentre l'éluat à siccité sous pression réduite, et 70 06150 7 2034560 on obtient 519 mg de 5-formamido-4-thiocarbamoyl-l-(2',3',5*-tri-0-acétyl-p-D-ribofuranogyl-imidazôle vitreux (rendement 42 %). Les propriétés physiques et les valeurs de l'analyse élémentaire du composé, vitreux sont les suivantes : 5 1. Point de fusion : 58°C 2„ Spectre UV : * maSH 290 et 329 m/u 3. /ôj g6,8° = + 90°(C=1 pyridine) 10 4. Analyse élémentaire r C(*) H(*) N(£) calculé pour C-^H^OgN^S 44,65 4,71 13*08 trouvé 44,95 5,06 13# 42 70 06150 8 2034560 REVENDICATIONS 1 - A titre de produits industriels nouveaux, les composés de formule générale suivante (I) iï2 CHOHN Ri-°-H2ckL! IL 10 t f R« R-i (I) dans laquelle R^ est un groupe formyle ou acyle ayant au minimum 2 atomes de carbone, et R^ et R^ représentent chacun un groupe formyle, acyle, ayant au minimum 2 atomes de carbone, ou sont , , pour former 15 combinés -avec un groupe alkylidene. 2 - Le 5-formamido-4-thiocarbamoyl-l-(2',3',5,-tri-0-formyl-^-D-ribofuranosyl)imidazole. 3 - Le 5-formamido-4-thiocarbamoyl-l-(2,,3',5,-tri-0-acétyl-P-D-ribofuranosyl)imidazole. 20 4 - Procédé pour préparer un composé de formule (I) selon la revendication 1, dans laquelle les substituants R^,R2 et R^ sont définis comme spécifiés à ladite revendication 1, ledit procédé étant caractérisé en ce qu'on fait réagir un composé de formule générale (II) : 25 30 (II) XOHgC ^ 0 0 0 Y z dans laquelle X est un atome d'hydrogène ou un groupe acyle défini comme spécifié à la revendication 1 et Y et Z représentent chacun ■55 un atome d'hydrogène, un groupe acyle défini comme spécifié à la revendication ! ou un groupe alkylidène, lorsqu'ils sont réunis ensemble avec l'acide formique ou avec un sel de l'acide formique un acide plus fort que l'acide formique. 70 06150 9 2034560 5 - Procédé selon la revendication 4, caractérisé • t * en ce qu on effectue la réaction en présence d un solvant deshydratant de 5 à 30°C. 6 - Procédé selon la revendication 5> caractérisé en ce 5 que le solvant deshydratant est l'anhydride acétique. 7 - Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'on effectue la réactibn en chauffant. 8 - Compositions pharmaceutiques renfermant un ou plusieurs composés actifs selon la revendication 1. 10 9 - Formes pharmaceutiques convenables pour l'adminis tration des compositions pharmaceutiques selon la revendication 8, par voies buccale ou parentérale. 10 - A titre d'intermédiaire nouveau, le 5-amino-4-thiocarbanioyl-l-(2' ,3f, 5 ' -tri-0-acétyl-f3-D-ribofuranosyl) imidazole. 15 11 - A titre d'intermédiaire nouveau, le 5-amino-4- thio.carbamoyl-1- (2 ', 3' -O-isopropylidène-5 ' -acétyl-p-D-ribofuranosyl) imicïazole. 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