Brevet FR2034499A1 — publié le 19701211

La présente invention concerne un médicament doué notamment d'une activité bactériostatique, qui comprend comme matière active un dérivé de la ptéridine. La Demanderesse a trouvé que la 2-amino-4--hydroxy-6-5 hydroxyméthyl-7.7-diméthyl-7.8-dihydro-ptéridine, répondant à la formule I ci-dessous CH20H 10 (I) 15 ainsi que les formes tautomères de cette substance et leurs sels utilisables pour des usages pharmaceutiques, constituaient des agents bactériostatiques très intéressants, en particulier dans des produits anti-microbiens qui se sont avérés être spécialement efficaces contre les organismes Cl. perfringens 20 et Derm. dermatonomous. Ce dérivé de la ptéridine, ses formes tautomères et leurs sels,peuvent aisël être utilisés en solution pour stériliser des instruments médicaux et chirurgicaux. Ainsi, le composé de formule I ci-dessus peut être 25 utilisé comme agent bactériostatique à une concentration de 90 à 160 mg par millilitre de la solution dans laquelle l'organisme peut se multiplier en l'absence de ce composé. Si l'on utilise un sel du composé, ce sel devra être celui d'un acide ou d'un alcali utilisable en pharmacie, 30 par exemple un sel de l'acide chlorhydrique, sulfurique, tartrique ou maléique ou bien de l'ammoniaque, de l'hydroxyde de sodium ou de l'hydroxyde de tétraméthylammonium. Le dérivé de la ptéridine de formule I peut être préparé par la méthode de synthèse qui est illustrée ci-dessous 35 CH I 5 40 i H„ÏT - C - COOH 2 I CH-, 70 02913 2034499 co \ N - ÎH3 - COOH Xvco-/' 1- CH, (II) 10 15 .CO^ ?H3 s - C - COCl \q/ 1 (III) CEL l csh, cox j * ÎT - C - CO - CHNQ (IV) - ! 2 co CH- 20 25 CO. N - CO CHZ I 3 C - CO CH-, CH20H (v) 30 ^^COOH KjJ \^XîOOH + . h3N f-' 3 C - CO Ah, CH20H.C1~ (VI) 35 + H2N.im.C0.NH2 V 4-0 70 02913 2034499 10 15 20 25 30 Cl" H-.N 3 CH, i 3 C - A il CH20H (VII) H5 N.NH.go.NH2 OH NO, V H2IÎ " Cl S- h2N jsto2 CH, - c - c - CH20H CH^ N.UH.CO.MH2 i OH NO. - C - CO - CH20H ?H3 H2N CH, (VIII) (IX) 35 40 OH 'y ^V\ H2N ?H3 m - (j - CO - CHgOH CH, A (X) 70 02913 4 2034499 On suppose qu'il se forme intermédiairement le composé X. La conversion du composé IX en composé I se fait le plus avantageusement par une cyclisation avec réduction , laquelle peut être réalisée au moyen d'agents réducteurs 5 capables de réduire le groupe nitro sans attaquer d'autres parties de la molécule, par exemple avec le dithionite de sodium avec lequel la réaction est facile, ou encore par une hydrogénation catalytique avec des catalyseurs comme le charbon palladié, le platine ou le nickel Raney. 10 Le composé IX est lui-même commodément obtenu par réaction de la 3-hydroxy-acétonyl-semicarbazone correspondante VIII avec un acide, de préférence un acide modérément fort, qui peut être,par exemple, un acide organique comme l'acide trifluoro-acétique ou l'acide benzène-suifonique ou bien 15 un acide minéral, en particulier ion acide minéral dilué, tel que l'acide chlorhydrique ou l'acide sulfurique. La préparation de la 3-hydroxy-avétonyl-semi-carbazone VIII se fait facilement par réaction de la semi-carbazone de la 3-amino-1-hydroxy-3-méthyl—butane-2-one ou 20 d'un sel de cette substance avec une 2-amino-4~halogéno-6-hydroxy-5-nitro-pyrimidine, de préférence le dérivé chloré ; quant au sel de la semicarbazone, ce sera de préférence le chlorhydrate de formule VII. Cette réaction est avantageusement effectuée en présence d'un accepteur d'acides,par 25 exemple le carbonate de sodium ou une ami rie tertiaire telle que la triéthylamine. La semicarbazone de la 3-amino—1-hydroxy-3-méthyl-butane-2-one ou son sel peuvent être obtenus par réaction de la 3-amino-1-hydroxy-3-méthyl-butane-2-one ou d'un sel 30 de celle-ci, par exemple le chlorhydrate de formule VI, avec le semicarbazide ou un sel du semicarbazide, réaction qui est commodément effectuée en présence d'un agent tampon tel que l'acétate ou le carbonate de sodium. La réaction de la 1-hydroxy-3-méthyl-3-phtalimido-35 butane-2-cne de formule V avec un acide, de préférence un acide fort, conduit à la 3-amino-1-hydroxy-3-méthyl-butane-2-one ou à un sel et dé ce composé, 1'acide pouvant être , par exemple,l'acide chlorhydrique, bromhydrique où sulfurique. 40 La 1-hydroxy-3-méthyl-3-phtalimido-butane-2-one 70 02913 5 2034499 de formule V peut être elle—même préparée par réaction, de la 1-diazo-3-phtalimido--butane-2-one de formule IV avec un acide minéral, qui sera avantageusement un acide minéral dilué, de préférence l'acide sulfurique. 5 Le composé de formule IV peut être obtenu par réaction du diazo-méthane avec un dérivé fonctionnel réactif de l'acide ÏT-phtalyl-2— amino-isobutyrique, de préférence le chlorure d'acide de formule III» Le diazo-méthane sera avantageusement utilisé en excès, normalement dans une 10 proportion qui sera au moins le double de la proportion stoechiométrique, ceci pour que l'excès se lie avec l'acide qui se forme comme sous-produit de la réaction. Ainsi,la présente invention a pour objet un médicament qui comprend comme matière active le dérivé de la ptéridine 15 de formule I ou bien une forme tautomère de ce composé ou un sel utilisable en pharmacie, matière active qui est associée avec un véhicule pour usâgespharmaceutique. Le médicament peut être avantageusement présenté sous forme de dosesunitaires individuelles, par exemple sous forme de 20 comprimés, capsules, cachets ou ampoules, contenant chacun une quantité déterminée de la matière active. Il peut aussi être présenté sous forme de poudres ou en granulés, en solutions ou en suspensions dans un liquide aqueux ou non aqueux pouvant être émulsionné, ou encore sous forme de 25 pommades. Pour l'administration par la voie parentérale, le médicament doit être stérile et il est présenté en ampoules scellées. Le présent médicament peut être préparé suivant toutes les méthodes de la pharmacie et il peut comprendre un ou plusieurs des adjuvants suivants : diluants, solutés, 30 tampons, parfums, agents liants, dispersants, tensio-actifs, épaississants, lubrifiants et matières d'enrobage, agents de conservation, anti-oxydants et bases pour pommades et tous autres excipients appropriés. L'invention comprend aussi Ton produit de stérilisation, 35 notamment d'instruments médicaux ou chirurgicaux, qui comprend le dérivé de ptéridine de formule I, les formes tautomères de ce composé ou leurs sels. Les exemples suivants ne sont donnés que pour décrire plus en détail la présenté invention, dont ils ne limitent 4-0 pas la portée, les températures étant données en degrés centigrade. 70 02913 2034499 EXEMPLE 1 î Synthèse du composé de formule I a) Acide N-phtalyl-2-amino-isobutyrique (composé II). On chauffe à 180-185° un mélange de 80 g d'anhydride 5 phtalique et de 40 g d'acide 2-amino-isobutyrique puis on maintient la température à 180° pendant 20 minutes et on laisse ensuite refroidir le mélange pendant une nuit. On le dissout alors dans 1 litre environ d'une solution à 10 % de bicarbonate de sodium, on filtre et on acidifie aveo de l'acide chlorhydrique 10 concentré puis on refroidit le mélange, on sépare par filtration les cristaux blancs formés, on les lave à l'eau et on les sèche à 60°C. Point de fusion 153-154°. b) Chlorure de l'acide N-phtalyl-2-amino-isobutyrique (composé III). ✓jcj On traite au reflux pendant 1 heure 75 g d'acide N— phtalyl-2-amino-isobutyrique avec 200 ml de chlorure'de thionyle puis on évapore le chlorure de thionyle sous pression réduite, on ajoute de l'éther et on effectue ensuite trois évaporations successives en ajoutant chaque fois de l'éther, 2o afin d'éliminer les traces résiduelles de chlorure de thionyle. On recristallise alors la matière restante dans de l'éther de pétrole (ébullition 60-80°) , ce qui donne des cristaux incolores fondant à 79°• c) 1-diazo-3-méthyl-3-phtalimido-butane-2-one (composé XV"). On prépare une solution de diazo-méthane dans de l'éther , sans alcool, en ajoutant 136 g du produit "Diazald" en solution dans 950 ml d'éther, goutte à goutte, dans un ballon contenant une solution de 40,9 g d'hydroxyde de potassium dans 70 ml d'eau, 240 ml d'éthyl digol et 70 ml d'éther, ballon qui est chauffé sur un bain-marie à 65-70°. Le diazo-méthane formé est recueilli par distillation et on lui ajoute lentement, tout en secouant, une solution de 51,1 g du chlorure de 1'acide N-pht aly1-2-amino-isobutyrique dans 700 ml d'éther puis on laisse reposer le mélange pendant une nuit à la température ordinaire et on évapore ensuite l'éther sous pression réduite, ce qui laisse une substance cristallisée jaune pâle qui est suffisamment pure pour pouvoir être utilisée dans la réaction suivante. d) 1-hydroxy-3-méthyl-3-phtalimido-butane-2-one z'-0 (composé Y). 25 30 35 70 02913 7 2034499 On met 50 g de la diazocétone qui a été préparée ci-dessus en c) en suspension dans 500 ml d'acide sulfurique demi-normal et -->n chauffe la suspension à 80° pour amorcer l'hydrolyse. Après que toute effervescence a cessé, 5 on verse le mélange dans 1 litre d'eau glacée, ce qui donne 1'hydroxy-raéthyl-cétone sous la forme d'une matière solide brute. On sépare celle-ci par filtration, on la lave avec 50 ml d'eau environ et on la recristallise dans de l'éthanol aqueux, tout en effectuant un traitement avec du charbon 10 actifj on obtient ainsi une substance cristallisée jaune pâle ; point de fusion 118°. e) Chlorhydrate de la 3-amino-1-hydroxy-3-méthyl-butane-2-one (composé YI). On traite au reflux,pendant 2 heures et demie, 30 g ^ dô la phtalimido-cétone ci-dessus avec 400 ml d'acide chlorhydrique 6 fois normal puis on refroidit la solution et on sépare par filtration 19 g d'acide phtalique qui cristallisent. On évapore ensuite le filtrat à siccité sous pression réduite et on ajoute 50 ml d'éthanol puis 250 ml 20 d'éther pour précipiter 1'amino-cétone à l'état de chlorhydrate. On transforme ce chlorhydrate en semicarbazone, point de fusion 208°, de la manière suivante î f) On dissout un équivalent de chlorhydrate du semicarbazide dans le minimum d'eau, on ajoute à la solution 2^ un équivalent de bicarbonate de sodium, tout en agitant, jusqu'à ce que toute effervescence ait cessé puis on ajoute en plusieurs fois un équivalent du chlorhydrate de 1'amino-cétone, toujours en agitant et on chauffe le mélange au bain de vapeur pendant 30 minutes. La semicarbazone du 20 chlorhydrate de 1'amino-cétone (composé YII) se sépare par refroidissement sous la forme d'une masse cristallisée incolore que l'on isole par filtration puis qu'on lave avec de l'alcool et de l'éther; point de fusion 208°. Ce composé, préparé de cette manière, est suffisamment pur pour permettre d'effectuer la réaction suivante. g) 2-amino-4-(1•.1,-diméthyl-3l-hydroxy-acêtonyl)-amino—5-hydroxy-5-nitro-pyridmidine (composé IX). On chauffe au reflux dans 450 ml d'éthanol, pendant 16 à 20 heures, un mélange de 6,8 g de la semicarbazone du chlorhydrate d'amino-cétone (composé VII), 6 g de 2-amino-^ 4-chloro-6-hydroxy-5-nitro-pyrimidine et 10 ml de triéthylamine 70 02913 2034499 puis on refroidit le mélange de réaction et on l'évaporé à 200 ml pour précipiter la semicarbazone de la pyrimidinyl-amino-cétone (composé VIII) sous la forme d'une matière solide de couleur beige. On obtient 6 g de cette matière ; point 5 de fusion 206-2*10°. On élimine ensuite le groupe de semicarbazone par un traitement de 10 minutes au reflux avec 100 ml d'acide chlorhydrique binormal puis on refroidit la solution, on la filtre et on la neutralise avec de l'ammoniaque de densité 0,880, qu'on ajoute goutte à goutte et tout en 10 agitant, pour précipiter la pyrimidinyl-amino-cétone sous la forme d'une substance solide blanc jaune, qu'on lave avec de l'eau, de l'éthanol et de l'éther. h) 2-amino-4-hydroxy-6-hydroxy-méthyl-7•7-diméthyl-7•8-dihydro-ptéridine (composé I). ^ On met 4 g de la pyrimidiny 1-amlno-cétone en suspension dans 50 ml d'eau, on chauffe la suspension au bain de vapeur et on la traite avec du dithionite de sodium solide jusqu'à ce que la substance solide initiale soit dissoute. Au bout de 5 à 10 minutes, la dihydro-ptéridine 2q formée commence à se séparer. On poursuit alors le chauffage pendant encore 10 minutes puis on refroidit le mélange pour parfaire la séparation du produit isole par filtration et qu'on lave avec de l'eau, de l'éthanol et de l'éther. On le purifie en le dissolvant dans de l'acide chlorhydrique 25 binormal, en filtrant et en ajoutant goutte à goutte au filtrat de l'ammoniaque de densité 0,880 jusqu'à pH 8,0 pour le reprécipiter. Les examens des spectres IR, UV et EMET,ainsi que les mobilités dans une chromatographie sur papier, indiquent tous jO 1 m ji 254 C 15 500 55 271 7 440, inflexion 352 6 740. Les résultats analytiques pour la formule brute GgHyj ^^2 sont les suivants : Elément : Carbone Hydrogène Azote 40 Valeurs théoriques : 48,42 % 5,87 % 31,38 % Valeurs trouvées : 48,20 % 6,27 % 32,07 %. 70 02913 9 2034499 EXEMPLE 2 î Comprimés contenant le composé de formule I a) Ingrédients 2-amino-4~hydr oxy-6-hydr oxy-mé thyl-7 • 7-dimé thyl-7 • 8-dihydro-ptéridine ( composé I) 500 mg Cellulose microcristalline 100 mg Amidon 40 mg Stéarate de magnésium 10 mg Méthyl-hydroxyéthyl-cellulose 3 mg 653 mg 10 b) Procédé. On granule le dérivé de ptéridine de formule I avec la cellulose microcristalline et l'amidon au moyen ^ d'une solution de la méthyl-hydroxyéthyl-cellulose dans de l'alcool éthylique aqueux à 50 % puis on ajoute le stéarate de magnésium aux granules séchés et on comprime le mélange pour former les comprimés. EXEMPLE 3 : 20 Pommade contenant le composé de formule I a) Ingrédients 2-amino-4~hydroxy-6-hydroxyméthyl-7•7-diméthyl-7•8-dihydro-ptéridine (composé I) 2g Paraffine blanche molle q.s. pour, 100 g. 25 b) Procédé. On incorpore le dérivé de ptéridine dans une partie de la paraffine qui a été préalablement ramollie par la chaleur puis on ajoute le reste de la paraffine et on 30 mélange le tout intimement. 70 02913 10 2034499 REVENDICATIONS 1Médicament contenant comme matière active la 2-amino-4-hydroxy-6-hydroxyméthyl-7•7-diméthyl-7.8-dihydro-ptéridine ou une forme tautomère de cette substance, 5 associée avec un véhicule pour usages pharmaceutiques. 2.- Médicament selon la revendication 1, caractérisé en ce que la .matière active est sous la forme d'un sel formé avec un acide ou un alcali utilisable en pharmacie. 3«- Médicament selon la revendication 2, caractérisé 10 en ce que l'acide est l'acide chlorhydrique, sulfurique, tartrique ou maléique. 4-.- Médicament selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'alcali est l'ammoniaque, l'hydroxyde de sodium ou l'hydroxyde de tétraméthylammonium. "15 Produit destiné à la stérilisation, notamment d'instruments médicaux et chirurgicaux, caractérisé en ce qu'il contient,en particulier sous la forme d'une solution, la 2-amino-4~hydroxy-6-hydroxyméthyl-7 • 7-diméthyl-7 » 8-dihydro-ptéridine, une forme tautomère de cette substance 20 ou un sel de ces composés.