Brevet FR2035775A1 — publié le 19701224

La présente invention concerne un produit pharmaceutique d'immunisation chimique pour la dévitalisation sélective de cellules cancereuees d'êtres humaine des groupe sanguin B et O et un procédé pour la fabrication de ce produit. Pour combattre et dévitaliser des tumeurs ou des cellules cancéreuses, on connait aussi bien des prodùits- pharmaceutiques chimico-thérapeutiques que des méthodes curatives physico-techniques. Pans la thérapeutique progressive du cancer que l'on connaît depuis peu, on effectue un affaiblissement Électif des cellules cancéreuses du corps humain en suracidifiant à l'extrime la tumeur avec une valeur de Ph d'environ 6-,0 à 6,5 en faisant augmenter le taux en glucose du sang et par hyperthermie. I1 eEt en outre connu, que la dévitalisation efficacedes cellules cancéreuse du corps humain pose un problème, qui nécessite une sélectivité particulièrement élevée de la thérapeutique. Tous le moyen qui sont utilisés pour dévitaliser les cellules cancéreuses doivent être acheminés vers ces cellules EanE pour cela engendrer un effet néfaste Eur les cellules Eaines ou sur les autres organes du corps humain.Les poisons couramment utilisés jusqu'à ce jour pour dévitaliser les cellules cancéreuses présententl1inconvénient qu'ils attaquent non seulement les cellules cancéreuses mais aussi les cellules saines. I1 et déjà connu pour surmonter cette difficulté, d'acheminer ou d'entrainer de tels poisons vers les cellules cancé refuses au moyen d'un excipient. La présente invention a pour but de créer un produit pharmaceutique immunochimique présentant des propriétés caractéristique dévitalisantes sélectives à fort rendement pour les cellules cancéreuses. La présente invention vise à acheminer un poison en le faisant entraîner vers les cellules cancéreuses et à augmenter fortement son efficacité par un affaiblissement sélectif simultané des cellules cancéreuses. Ce résultat est obtenu par le fait que 11 excipient est lié au poison pour former une substance nouvelle. Cette nouvelle substance se compose d'anti-A-helixagglutinines et d'acide cholique, comme par exemple le désoxycholate dérivé de l'acide Mo- lique. Be désoxycholate constitue le oison acheminé par l'excipient d'anti-A-hélixagglutinine, Il et avantageux que la charge en déeoxycholate soit de trois à dix, de préférence, de cinq pour cent en poids de l'anti-A-hélixagglutinine.Si l'on utilise ces anti-A-hélixagglutinines chargés en désoxycholate en liaison avec une dévitalisation des cellules cancéreuse par une hypothermie simultanée à une température de 400 C et une suracidification optimale de la +umeur à une valeur de Ph de 6,3, qui est obtenue par une infusion intraveineuse de longue durée de glucose à un taux de 3,8 g par/kg du poids du patient pendant 100 minutes, il résulte de cela une attaque immunochimique trèE efficace et bries élective des cellules cancéreuse.Cette attaque immunochimique déclenche un mécanisme de réactif en chaîne de dévitalisation des cellules cancéreuses -, au cours duquel -les nouvelles cellules cancéreuses ont dévitalisée par activation des enzymes lysosomales venant dee cellules cancéreuse mourantes, etc. Le procédé pour la fabrication de produit pharmaceutique réside dans le fait que l'on dissout d'abord , selon l'invention, une partie de l'anti-A-hélixagglutinine dans 10 parties d'une solution de chlorure de sodium tamponnée au phosphate ayant un Ph d'environ 7,4 sous agitation pendant 2 à 3 heures à la température ambiante. Les résidus insolubles de l'anti-Ahélixagglutine sont ensuite séparés par centrifugation. Puis on ajoute à la solution ainsi obtenue -l'acide désoxycholique et on agite pendant plusieurs heures à la température--ambiante. On a prévu ce dérivé et d'autres dérivés de l'acide cholique, parce qu'ils agissent sur le tumeurs suracidifiées à l'extrême particulièrement pour des valeurs de Ph inférieures à 7,0 et parce qu'ils rendent possible une forte charge des anti-A hélixagglutinines de par exemple 5 % en poids. Enfin la partie du désoxycholate non lide-à ltanti-Ahélixagglutinine se trouvant dans la solution de chlorure de sodium tamponnée au phosphate est séparée par dialyse selon le procédé d'écoulement. L'invention présente l'avantage, que lorsqu'il -s'agit de patients appartenant aux groupe sanguin O et B, le cellules cancéreuse se trouvant dans le corps humain peuvent être dévitalisées de façon hautement sélective et dans un temps relati vement court sans pour cela nuire aux cellules saines. Cet ef fet est notablement accru par l'affaiblissement préalable ou simultané des cellules cancéreuses. 'l'affaiblement peut être tel que même une attaque cancérolytique relativement faible de nature quelconque suffise pour déclencher une réaction en chat- ne très efficace de la destruction des cellules cancéreuses dans les tumeurs et métastases. Une forme de réalisation de l'objet de l'invention est représentée, à titre d'exemple non limitatif, au dessin annexé. La fig 1 représente schématiquement une cellule cancéreuee et le poisson acheminé par le corps d'anti-A-hélixaggluti- nine. La fig. 2 représente un diagramme de la destruction des cellules cancéreuses par rapport au temps avec et sans le produit pharmaceutique conforme à l'invention. Lors de la destruction des cellules cancéreuses le problème réside en premier lieu dans la destruction des membrane cellulaires et notamment de la membrane extérieure. La condition préalable consiste dans le fait connu, que le cellules cancéreuses possédant une surface du type A du point de vue immunologique, attirent et lient des anti-corps A comme par exemple du type anti-A-hélixagglutinine (agglutinine du genre anti-A sécrété par l'escargot de vigne). On a maintenant trouvé que les anti-corps extraits de l'albumine de l'escargot de vigne (Helix pomatia) possèdent des propriétés anti-A et de ce fait une affinité particulièrement élevée avec les cellules cancéreuses.Si on charge ces anti-h-hélixagglutinines (anti AHp) de poison anti-cellulaire, c'est-à-dire Si on crée une nouvelle substance on parvient à acheminer celle-ci d'une manière très élective vers la cellule cancéreuse. On a trouvé que l'acide cholique et par exemple le désoxycholate sont particulièrement approprié. La nouvelle substance - l'anti-Ahélixagglutinine chargée en acide cholique- représente donc un produit pharmaceutique pour une thérapeutique chimique, qui et d'une grande efficacité contre les cellules cancéreuses. La fig. 1 représente schématiquement î'achemineent de cette subs- tance vers les cellules cancéreuses. Si l'on affaiblit maintenant la cellule cancéreuse contre le attaque extérieures, comme cela eEF oille au moyen de la thérapeutique progressive contre le cancer par l'administration, par exemple de glucose dans le tut d'obtenir une suracidification à un pH de 6,3 et par un échauffement de la cellule cancéreuse à 400 C le poison anti-cellulaire trouve des conditions Iarticulièrement favorable pour la destruction ues cellules cancéreuse. Be produi+ pharmaceutique corforme à la fréènte invention peut être fabriqué, par exemple, par le procédé suivant. On dissout l'anti-A-hélixagglutinine se présentant à l'état solide (une partie, dans dix parties d'une solution de chlorure de sodium tamponnée au phosphate. Be pH de cette solution est d'environ 7,4. Pour dissoudre l'anti-A-hélixagglutinine on agite pendant deux à trois heure à la +empéra+ure ambiante. Ensuite on procède à la séparation des anti-A-hélixag- glutinines non dissoutes ou insolubles par centrifugation. A la Eolution obtenue de cette façon on ajoute de l'acide désoxycholique et on agite ensuite encore plusieurs heures à la température ambiante. La teneur en protéines (teneur en albumine) de la solution est déterminée avant l'addition de l'acide désoxycholique.Elle doit entre d'environ 9 g par 100 ml. 15 mg d'acide désoxycholique par ml ònt ajoutée à la solution de protéine. Ensuite on sépare par dialyse selon le procédé par écoulement la partie du désoxycholate se trouvant dans la solution de chlorure de sodium tamponnée au phosphate à l'état non lié aux anti-A- hélixagglutinines. La fig. 2 représente le taux de destruction L dee cellules cancéreuses à un pH de 6,3 et à 400 C exprimé en pour-cent par rapport au temps t mesuré in vitro. On peut voir à la courte 1 que l'on obtient une destruction de 100 des cellules cancéreuses après 300 minutes en utilisant le produit pharmaceutique en combinaison avec une suracidification extrme de la tumeur et une hyperthermie à 400 C. Pour cet exemple on a utilisé des cellules cancéreuses d'ascite de souris d'Ehrlich. Afin de prouver la destruction effective des cellules cancéreu ses,on a utilisé un test par coloration au bleu de trypan. A la courbe 2 on compare le taux de destruction des cellules cancéreuses obtenu par suracidification extrême de la rumeur et d'une hyperthermie sans utilisation du produit Sharmaceutique de l'invention. A cause des propriétés anti-A des anti-A-hélixagglutinines l'application de ce produit pharmaceutique se limite à des groupes sanguins O et B. R E V E N D I C A T I O N S 1 - Produit pharmaceutique d'immunisation chimique pour la déviWalisation Eélective de cellules cancéreuses, caractérisé en ce que des anti-A-hélixagglutinine sont chargées d'acide cholique. 2 - Produit pharmaceutique suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il contient comme acide cholique du déso- xycholate. 3 - Produit pharmaceutique suivant le revendications 1 et 2, caractérisé en ce que la charge en désoxycholate est de trois à dix, de préférence de cinq pour-cent en poids de l'anti A-hélixagglutinine. 4 - Procédé pour la fabrication du produit pharmaceutique d'immunieation chimique suivant les revendicatione 1 à 3, c- ractérisé en ce que l'on dissout d'abord, selon l'invention, une partie de l'anti-A-hélixagglutinine dans 10 parties d'une Eolution de chlorure de sodium tamponnée au phosphate ayant un Ph d'environ 7,4 sous agitation pendant 2 à 3 heures à la température ambiante, les résidus insolubles de l'anti-A-héli- xagglutine sont ensuite séparés par centrifugation, puis on ajoute à la solution ainsi obtenue l'acide désoxycholique et on agite pendant plusieurs heure à la température ambiante et la partie du désoxycholate non liée à l'anti-A-hélixagglutinine s. trouvant dans la solution de chlorure de Eodium tamponnée au phosphate est séparée par dialyee selon le procédé d'écoulement.