Brevet FR2007253A1 — publié le 19700102

i 2007253 La présente invention a pour objet de nouveaux composés synthétiques intéressants comme agents antibactériens, comme compléments nutritifs dans l'alimentation animale, comme agents de traitement de la mamiiite du bétail et comme agents thérapeu-5 tiques pour le traitement chez les volailles et les animaux, ainsi que chez l'être humain des maladies infectieuses causées par des bactéries Gram-positives et certaines bactéries Gram-négatives. L'invention, concerne plus particulièrement des agents anti-bactériens qui sont des dérivés de substances antibioti-10 ques, la coumermycine A-^ et la coumermycine Aj ainsi que des procédés pour leur préparation. Il existe un besoin pour de nouveaux agents perfectionnés pour traiter les infections causées par des bactéries Gram-positives (comprenant celles qui résistent à la benzylpénicil-15 line) et par des bactéries Gram-négatives, et pour décontaminer les objets porteurs de ces organismes, par exemple l'appareillage des hôpitaux, les murs des salles d'opérations, etc... Il existe un besoin tout particulier pour des agents anti-bacté-riens qui peuvent être convenablement absorbés par les animaux 20 par voie orale. Les antibiotiques, la coumermycine (formule I dans laquelle H est le groupe méthyle) et la coumermycine Ag (formule I dans laquelle H est l'hydrogène) ont été lécrits dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique 3.201.386. 25 hoç ch-a cho cho So ». o XjLc. OH o CH- Ô 30 ' J .0 " JL' Lf w " H^_ 35 Ces deux ecumermycines sont efficaces pour empêcher la croissance des bactéries Grain-positives, elles ne sont pas toxiques et ont une activité thérapeutique sur les souris contaminées avec des bactéries Gram-positives. Toutefois, l'un des 4-0 principaux inconvénients des coumermycines eut leur faible 69 13714 2 2007253 absorption et par suite leur taux peu élevé dans le sang. lies efforts réalisés pour corriger ces inconvénients ont abouti à la présente invention et ont donné de nouveaux produits N-aey-lés de clivage des coumermycines apparentées ces nouveaux com-5 posés .étant des agents anti-bactériens actifs vis-à-vis de la bactérie Staphylococcus aureus-Smith. la présente invention fournit un procédé de préparation de composés ayant la formule : 10 15 h3c ch- m - c -x II 0 ii (dans laquelle R est l'hydrogène ou le groupe méthyle, et X est un groupe de formule : - CnH2n-l ,ÏT or 30 c H „ . m 2m-l 35 dans laquelle ri est un nombre entier valant -1 a 21, m 1 2 est un nombre entier valant 2 à 21, E et R sont identiques ou différents, et sont chacun un atome d'hydrogène, le radical cyclohexyle ou un radical de formule *: 40 69 13714 3 2007253 dans laquelle et R^' sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène, de fluor, de chlore, de brome, 10 ou d'iode, un radical trifluorométhyle, amino, îf,N-di-alkyl (inf.)amino, nitro, cyano, alkyle inférieur alcényle inférieur, aleynyle inférieur, alcoxy inférieur, hydroxy, carboxy, carbal-coxy inférieur, aeétoxy, mercapto, thioacétoxy ou alkyl (inf.) thio), ainsi que les sels cationiques non toxiques et accepta-15 blés en pharmacie de ces composés ; ce procédé consistant à faire réagir un composé de formule : H30 OH3 ft ÇHj 20 - ï -0-° - *■ ° o*2 o ch« ô or^oy° o l-P CL 1 25 Cf18 iii 30 (dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle* 2 3 et.R et R^ sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène)ou 35 O 40 .ou un mélange de ces qomposés, avec au moins une quantité 69 13714 4 2007253 10 15 20 équimolaire d'un agent d'acylation de formule 0 X - C - Z dans laquelle X est tel que décrit ci-dessus et Z est un halogène ou un groupe de formule : O .0 H I — 0 — C — X ou — 0 — C — alkyle (inférieur) à une température comprise entre -25°C et +150°C, dans un système solvant accepteur de protons, en vue de produire un éther tétrahydropyranylique intermédiaire de formule : h3c ch3 ■e ira?;:. i X) c -x y 0 IV dans laquelle H et X sont tels que décrits ci-dessus, puis à 25 laisser le composé dans un solvant polaire en présenoe d'une quantité catalytique d'un acide, à une température supérieure à 0°C afin de couper la liaison éther tétrahydropyranylique et produire le composé de formule II désiré. Un groupe préféré de composés préparés par le procédé 30 de l'invention englobe ceux ayant la formule II dans laquelle R est le groupe méthyle, x est un groupe de formule : 35 .r1 R2 1 2 dans laquelle n est un nombre entier valant 1 à 8, et II et R sont tous les deux des atomes d'hydrogène., ainsi que leurs sels 69 13714 5 2007253 non toxiques acceptables en pharmacie. le composé préparé au moyen du procédé de l'invention et que l'on préfère le plus est le composé ayant la formule II dans laquelle R est le groupe méthyle, et X est 10 ainsi que ses sels non toxiques acceptables en pharmacie. . L'expression "alkyle inférieur" telle qu'utilisée ici signifie des radicaux hydrocaj-bonés aliphatiques à chaîne droite et aussi ceux à chaîne ramifiée contenant 1 à 8 atomes de carbone, tels que les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropy-15 le, butyle, isobutyle, butyle tertiaire, amyle et hexyle. Quand le terme "inférieur" est utilisé pour décrire un, autre groupe, par exemple "alpoxy inférieur", il se rapporte à la partie alkyle de ce groupe qui est telle que définie ci-dessus pour l'expression "alkyle inférieur" et comprend ainsi des radieaux tels 20 que méthoxy, éthoxy et isopropoxy. On entend par l'expression "alçéRyle inférieur" telle qu'utilisée ici des radicaux hydro-carbonés non saturés à chaîne droite ou à chaîne ramifiée de formule ~(cnH2n-l^ àans laquelle n est un nombre entier valant 2 à.8, c'est-à-dire -CH2-CH = c(CH^)2, -CH = CH2, etc... D'une 25, maaièrç.-semblablé, on entend par l'expression "alcynyle inférieur"' telle qu'utilisée ici, des radicaux hydrocarbonés non saturés à chaîne droite ou à chaîne ramifiée de formule *"^n^2n-3^ ' àans laquelle n est un nombre entier valant 2 à 8, eVejgt-à-dire -CH2 - C = C - CH3, -0 = 0- OH(OH^)2 etc... 30 Les composés ayant la formule générale II possèdent tous une fonction hydroxyle acide en position 4 du segment coumarine. La pâture acide du groupe hydroxyle permet de préparer facilement des sels cationiques non toxiques acceptables en pharmacie 'des.composés ayant la formule I, par exemple les sels de sodium, 35 4-e potassium, de calcium, d'aluminium et d'ammonium et leurs ' ,$ele d'ammonium substitués non toxiques, avec une aminé telle qu'une trialkylamine, la procaîne, la dibenzylamine, la N-bensyl-bêta-phénéthylamine, la -1-éphénamine, la H,JJ'-dibenzy-léthylènediamine, la déhydroabiétylaminc, la N,N'-bis-déhydro-4-0. abiéthyléthylènediamine et une K-alkyl(inf. )piperidine, par 5 CH. 3 69 13714 6 2007253 exemple la N-éthylpipéridine. Le système de solvarrt accepteur de protons mentionné ci-dessus.pomme po.uvant être utilisé dans le stade de clivage par acylation comprend dos systèmes homogènes et des systèmes hété-5 rogènes contenant une base organique ou minérale telle qu'un carbonate ou un bicarbonate de métal alcalin, un carbonate ou un bicarbonate de métal alcalino-terreux ou une aminé tertiaire telle que la pyridine ou une tri-alkyl-(inf.)aminé, seule ou en combinaison avec un solvant organique inerte tel que le té-10 traljydrofuranne, le benzène, le toluène, le xylène, 1*éther di-éthyliq^e ou le chloroforme. Le système de solvant proféré est la pyridi'ne ou une tri-alkyl(inf. )aminé, utilisée seule ou en combinaison avec un solvant organique inerte. La gamme de température dans laquelle la réaction de clivage par acylation 15 peut être réalisée est de -25 °C à +150°C. Toutefois, il est préférable de réaliser la réaction à une température comprise entre -5°C et jusqu'au point d'ébullition du système solvant. les solvants polaires pouvant être utilisés pour couper la liaison éther tétrahydropyranylique en vue de produire les 20 composés de formule II comprennent les alcanols inférieurs, les.alçools cycliques tels que le cyclohexanol, et les aralca-nols,. tels que l'alcool benzylique. Pour des raisons de facilité et d'économie, il est préférable d'utiliser un alcanol inférieur tel que le méthancl, l'éthanol ou le propancl. Le stade 25 de clivage est habituellement réalisé à une température compri-'' se entre 0°c et le point d'ébullition du système solvant utilisé . L'agent d'acylation utilisé dans le stade de clivage par acylation du procédé de l'invention peut se trouver sous la fer* 30 me d'un halogénure d'acide, d'un anhydride d'acide ou d'un anhydride mixte d'acides. Pour plus de facilité, il est souvent préférable d'utiliser un chlorure d'acide. Les agents d'acylation utilisés ici, quand ils ne sont pas disponibles dans le commerce, sont préparés à partir de l'acide 35 correspondant au moyen de techniques généralement connues. a) - On prépare les halogénures d'acide en mélangeant l'acide avec un halogénure de thionyle, avec ou sans l'aide de la chaleur, puis l'on purifie par distillation ou- par cristallisation au sein d'un solvant inerte, c'est-à-dire, le benzène, 4-0 le "SkellysolvéB" (solvant dérivant du pétrole, essentiellement BAD ORIGINAL 69 13714 7 2007253 du n-hexane, point d'ébullition s 60 - 80°C). b) - On prépare les anhydrides d'acide en mélangeant l'acide avec l'anhydride acétique, avec ou sans l'aide de la chaleur et puis habituellement on purifie par cristallisation 5 à partir d'un solvant inerte, c'est-à-dire le benzène, le "Skellysolve B", l'acétate d'éthyle, etc... c) - On prépare les anhydrides mixtes d'acide en mélangeant l'acide avec du ehloroformiate d'éthyle en présence de pyridine avec ou sans l'aide de la chaleur et habituellement 10 on p.eut les utiliser ensuite in situ sur la tétrahydropyranyl-coumermycine ou A2 désirée. Ces procédés conviennent pour préparer une grande variété d'agents d'acylation, comme montré dans les exemples. Pour transformer les composés de formule IV en-composés 15 de formule II, il est nécessaire d'ajouter un acide approprié pour catalyser la réaction de séparation du groupe tétrahydro-pyranyle du composé II. L'acide utilisé est habituellement choisi dans les groupes suivants : . Ie) - Les acides minéraux concentrés, tels que l'ae-ide 20 sulfurique, l'acide phosphorique, l'acide phosphoreux, l'acide chlorhydrique. 2°) - Les acides arylsulfoniques ayant la formule : a 30 dans laquelle A, B et C identiques ou différents sont chacun ~ un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un radical alkyle inférieur, alcoxy inférieur, nitro, aryle ou cyano,. 3°) - Les.acides de Lewis, tels que SnCl^, AlCl^, ZnCl2 ou PeCl^. 35- . 4°) - Les résines acides sous leur forme acide (H+) telles que les acides phénol sulfoniques, les acides polystyrène eulfoniques, les acides polystyrène phosphoreux, les acides polystyrène phosphoniques, les acides carboxyliques acryliques, les acides sulfoniques nucléaires de polystyrène, l'acide mé-40 thacrylique carboxylique et en particulier l'acide sulfonique 69 13714 8 2007253 de polystyrène macroréticulaire ("Amberlyst 15" - Rohm et Haas). 5°) - les acides carboxyliques activés, tels que F3G-C02H, PgCHGOgH ou 10 dans laquelle A', B' et C identiques ou différents sont chacun un radical nitro, fluoro, cyano, ou hydrogène. 6°) - Les acides alkylsulfoniques ayant la formule R-(CH2)xS0^H dans laquelle R est un radical aryle, aryle eubs-15 titué, alkyle inférieur, alkyle inférieur substitué, et X est un nombre entier valant 0 à 6 inclus. Les matières premières utilisées dans le procédé de l'invention c'est-à-dire une 2',2',4,4-0,0,0,0-tétra-tétrahydropy-ranylcoumermycine, ou une 21,2',4-0,0,O-tritétrahydropyranyl-20 coumermycine, ou une 2«^'-OjO-ditétrahydropyranylcoumermyeine ou leurs mélanges sont connus dans la technique, leur préparation et leurs propriétés sont décrites par exemple dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique K° 3.380.994 et dans le brevet belge N° 713.748. 25 Le procédé de la présente invention peut être réalisé dans des conditions variables, la condition la plus critique étant la température à laquelle le stade de clivage par acylation est réalisé. Quand on utilise des températures inférieures comprises entre -25°C et 25°C, il est possible d'isoler du procédé 30 des intermédiaires que l'on n'isole pas quand le procédé est réalisé à températures élevées, ces intermédiaires étant facilement convertibles en composés désirés en utilisant la chaleur et un réactif nucléophile organique, tel que la pyridiae. 35 25°C, est habituellement réalisé en dissolvant ou en mettant en suspension la 2',2*,4,4-0,0,0,0-tétratétrahydropyranyl-coumermycine ou la 2',2'-0,0-ditétrahydropyranylcoumermyoine, ou leurs mélanges, (un composé de formule III) dans un solvant accepteur de protons (un réactif nucléophile organique) de pré-40 férence une pyridine, ou une trialkyl(inf.)aminé telle que la 5 a' c» Le procédé, aux températures comprises entre -25°C et 69 13714 9 2007253 triméthylaraine, la triéthylamine, ou un de ces solvants en combinaison avec un solvant inerte, par exemple le tétrahydro-furanne, le benzène, le toluène, le xylène, le chloroforme, ou 1'éther. Cn refroidit le mélange à 10°C environ par un bain 5 d'eau et de glzce. On ajoute tout en agitant fortement, un excès d'un halogénure d'acide ou d'un anhydride d'acide substitué ou non substitué, ou son équivalent fonctionnel, de préférence dans un rapport de 2 à-4 moles d'agent d'acylation pour 1 mole d'éther tétrahydropyranylique de la coumermycine. On continue 10 à agiter pendant plusieurs heures, puis on concentre la solution en un sirop par évaporation sous vide à des températures inférieures à 25°C. Le produit isolé par cette technique est caractérisé comme étant un bisimide, de formule : 15 h3c h3co 20 iWwj: o oh c « 0 Am 0 n c 1 H c»0 0 3 CH3 1 J ï ch3 0 o-ç oh £ûjo o x 0 ■ ç «tl 25 dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le radical méthyl et X e-st tel que défini ci-dessus. En chauffant le bis-imide isolé dans un solvant organi- 30 que accepteur de protons et contenant de l'eau, choisi dans le groupe décrit ci-dessus, à 50°C pendant 16 heures, ou en le chauffant au reflux dans ce solvant pendant une durée minimale de trois heures-, on obtient la formation deo composés de formule IV. 35 En mélangeant le composé IV ci-dessus dans un solvant po laire tel qu'un alcanol inférieur, c'est-à-dire le méthanol, l'éthanol, le propanol, etc... en présence d'une quantité cata-lytique d'un acide avec ou sans l'aide de chaleur, on obtient les composés désirés ayant la formule II. 40 On réalise habituellement le procédé, à des températures 69 13714 10 2007253 supérieures à 25°C, et jusqu'au point d'ébullition du solvant utilisé, en dissolvant ou en mettant en suspension la 2',2'-4,4.-0,0,0,O-tétratétrahydropyranylcoumermycine, la 2',2',4-0,0,0-tritéti,ahydropyranylcoumermycine ou la 2',2'-0,0-5 ditétrahydropyranylcoumermycine, ou leurs mélanges dans un solvant accepteur de protons (réactif nucléophile organique) qui est habituellement une pyridine, une trialkyl(inf.)aminé, par exemple, la triméthylamine, la triéthylanrine, ou un de ces solvants en combinaison avec un solvant inerte, par exemple le té-10 trahydrofuranne', le benzène, le toluène, le xylène, le chloroforme, ou 1'éther. On ajoute au mélange contenant le ou les éthers tétrahydropyranylique s, tout en agitant fortement, un excès d'un halogénure d'acide ou d'un anhydride d'acide de la série des al-15 canes^ ou des alcènes, substitué ou non substitué, ou. son équivalent fonctionnel, de préférence dans un rapport de 2 à 4 moles, d'agent d'acylation pour 1 mole de 1*éther tétrahydropyranylique de coumermycine. On rechauffe lentement le mélange résultant à des températures allant jusqu' au point d.' ébullition 20 du solvant utilisé pendant une période de temps habituellement supérieure à 30 minutes, mais rarement supérieure à 40-heures, pendant lesquelles la solution passe à l'orangé et au brun. On évapore la solution sous vide en un sirop et on la verse dans un mélange d'eau et de glace fortement agité, le produit cris-25 tallin recueilli est caractérisé comme étant un mélange constitué du produit de formule IV et de quantités faibles d'une substance caractérisée comme répondant aux formules : 30 HO - C 0 « 3 VI 0 = C r 40 et/ou BAD ORIGINAL 69 13714 ii 2007253 20 h3c ch3 H3C ^OY^K^V'0'!- 0 h3°° ^Ao^t-L 0 1 c = 0 viii 25 30 dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le groupe méthyle, - R^ est un atome d'hydrogène ou -f N et X est tel que défini ci-dessus. 0b sépare ultérieurement le mélange en ses constituants 35 par une cristallisation fractionnée, par chromatographie, ou autre méthode équivalente. On dissout ensuite le produit de formule IV dans un solvant polaire, tel qu'un alcanol inférieur, c'est-à-dire le méthanol, l'éthanol, le propanol, etc.,. en présence d'une quantité catalytique d'un acide choisi dans le 40 groupe décrit ci-dessus, avec ou sans l'aide de la chaleur, en 69 13714 12 2007253 vue de produire un composé de.formule II, Bien que le clivage par acylation se produise facilement lorsqu'on utilise les deux techniques détaillées ci-dessus, on a observé que le procédé a lieu le plus rapidement avec les 5 pourcentages les plus élevés de rendement en pro.duit désiré et une quantité minimale de produits de décomposition, c'est-à-dire formation a'oxyazole et coloration, quand on .ajoute une faible quantité d'eau au mélange contenant 1»éther tétrahydropyranylique de coumermycine juste avant d'ajouter l'agent d'a-10 cylation. 3n outre, on a observé que quand le rapport agent d'acylation/éther tétrahydropyranylique de la coumermycine est maintenu en-dessous de 5/1} la quantité d'oxazole, composé VIII, formé est minimale. On peut également préparer les composés de formule II par 15 un autre procédé. On dissout la 3-amino-4—hydroxy-8-méthyl-7-Z?-0-(5 -méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)-noviosylox£7eoumarine, un composé ayant la structure HjC CH3 i C «s o Y ix W" R 20 25 30 dans de la pyridine et on l'acyle directement en utilisant un petit excès molaire de l'agent d'acylation approprié de formule 0 35 X - C - hal dans laquelle X est toi que décrit ci-dessus et "hal" est un halogène tel qu'un chlore, un brcme ou un iode, ou son équivalent fonctionnel, en vue de produire les composés de formule II. Le composé de formule IX est connu dans la technique ; voir 4-0 par exemple le brevet belge N° 711.686. 69 13714 i3 2007253 Les composés préparés par le procédé décrit ci-dessus sont facilement modifiés en composés contenant des fragments autres que ceux attachés au noyau phényle du groupe X décrit ci-dessus dans la formule II. Ces composés sont également consi-5 dérés comme faisant partie de la présente invention. Quand des composés de formule II contiennent une fonction nitro, cyano, acétoxy, thioacétoxy (-S-C-CH^) ou carbalcoxy(inférieur) dans le groupe Xj il est possible de changer les fonctions ci-dessus en une nouvelle espèce. Une hydrolyse douce des fonctions acé-10 toxy, thioacétoxy, et carbalcoxy(inférieur) produit des groupes X contenant respectivement des fonctions hydroxy, mercapto ,et carboxy. L'une manière semblable, la réduction d*une fonction nitro produit un groupe X contenant une fonction amino. L'ami-nation de la fonction carboxy résultante peut produire sur le 15 groupe X des fonctions carboxamido H-substituées ou non substituées. La ïi-alkylation de la fonction aminé ci-dessus peut produire. sur le groupe X des fonctions N-alkyl(inf.)amino .ou N,N-di-alkyl(inf.)amino. , Les produits obtenus dans la présente invention ici dé-20 crite existent sous divers stades d'hydratation, c'est-à-dire sous forme anhydre, monohydratée et polyhydratée. Pour la présente description, l'invention est considérée comme englobant toutes ces formes qui en font parti-3 intégrante. Les composés de la présente invention sont actifs vis-à-^ 25 vis.d'une grande variété de bactéries uram-positives et de certaines, bactéries G-ram-négatives. Ils sont les plus efficaces quand on les administre par voie parentérale, car, par cette ▼oie, on peut obtenir dans le sang des taux maxima de composé actif.. Toutefois, les composés de l'invention sont également 30 titès efficaces quand on les administre par voie orale. En particulier, le composé 3-isobutyramido-4-hydroxy~8-méthyl-7-^?-Q(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)-no.viosylox£7coumarine (BL-C43) donne dans le sang des taux de composé actif convenables et prolongés quand on l'administre à des chiens par voie orale. 35 Dans le tableau I donné à titre illustratif on compare les • taux dans le sang de BL-C43 avec ceux obtgrrus avec la novobio-cine. 40 69 13714 14 2007253 TABLEAU I - BL-C43 Taux dans le sang (mcg/ml) aux heures indiquées après l'administration 10 N° du chien 1 2 4 1 24 • . 1 26 33 35 ' •14 1,4 2 45 40 36 14 1,6 3 52 59 36 14 3,1 4 48 52 34 13 Moyenne 43 46 35 ■ 14" Dose/kg. 25 mg./kg. Y Novobiocine Taux dans le sang (mcg/ml) aux heures indiquées après administration 15 N° du chien 1 2 4 7 ' 24 . 1 39 80 37 6,4 2 76 80 36 4,4 3 90 82 38 7,4 4 88 82 46 8,8 1,9 20 5 78 93 31" 7,5 Moyenne . 74 83 38 6,9 Dose/kg. 25 mg./kg. V Dans le traitement des infections bactériennes chez les anima#ux et chez l'être humain, les composés de la présente in-25 vention sont administrés par voie "orale ou parentérale à des dosés d'environ 5 à 125 mg/kg/j our, mais de préférence à des doses comprises entré 5 et 50 mg/kg/jour, Danâ( le traitement des infections bactériennes de l'être humain3 on préfère administrer les composés de la présente invention à des doses de 30 100 à 500 mg, 3 à 4 fois par jour. • , le titrage utilisé dans les exemples ci-après est un titrage de coumermycine A-^ modifié, effectué sur des plaques de Pétri'préparées en utilisant 10 ml d'une couche de base d'agar-agar provenant des Laboratoires Biologiques de Baltimore- (BBl) 35 et une couche supérieure de 4 ml d'aga-r-agar d'ensemmencement (BBl) inoculé avec la bactérie Staph„ aureus ATCC 6538 P. On fait incuber les plaques pendant 18 heures à 30°C. Le composé utilisé comme témoin pour titrer les composés de la présente invention est" la 3-benzamido-4-hydroxy-8-méthyl-7-/3-0-(5-mé-40 thyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosylox27-coumarine (BL-C3)» -et on BAD ORIGINAL 6,9 13714 15 2007253 lui attribue une activité de 1000 mcg/mg. L'activité dea composés de la présente invention est exprimée ci-après en unités de EL-C3. Les exemples suivants illustrent la présente invention. 5 - EXEMPLE 1 - 3-Isobutyramido-4-hydroxy-8-méthyl-7-/5-0-(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosyloxyjcoumarine 10 15 O II C - CH CHj On dissout 50 g de 2,2,-ditétrahydropyranyl-coumermycine 20 A2(39»ll millimoles) dans 600 ml de tétrahydrofuranne à 25®C tout en agitant. On ajoute 5 équivalents de triéthylamine (19»7 27-f15 ml, 195,5 millimoles) avec 4 équivalents d'anhydride iso-butyrique (24,7 g» 26,05 ml ; 156,4 millimoles) à 25°C tout en continuant à agiter. On chauffe au reflux le mélange 25 (65°C); pendant 7-8 heures. On évapore sous vide le mélange de la réaction jusqu'à environ 200 ml et on le verse directement dans 2.000 ml de *Skellysolve-BH fortement agité. On filtre le solide blanc, on le lave avec du "Skellysolve-B", et on le sèche. On obtient v 30 72 g de produit. On dissout ce mélange d'imides dans 1440-ml (20 ml/g) de pyridine et on l'agite dans un bain d'huile à 55-60°C pendant 24-36 heures. On concentre sous vide la pyridine jusqu'à un volume de 200 - 300 ml environ et on la verse dans 3*000 ml d'un 35 mélange d'eau et de glace fortement agité. On règle le pH à 1,5 en utilisant de l'acide chlorhydrique 65f. Après agitation pendant .30-45 minutes, on:filtre sous vide les solides, on les lave avec de l'eau et on les sèche. Rendement : 65-70 g. On dissout le mélange d'amides bruts dans 1400 - 1500 ml 40 de méthanol tout en agitant et on ajoute suffisamment d(acétone 69 13714 16 2007253 (environ "150 ml) pour obtenir une solution limpide. On ajoute 14,0 g (20 # de l'équivalent) d'acide p~toluènesulfonique mono-hydraté et on agite le mélange réactionnel à 25°C pendant 48 heures. 5 On filtre la solution de la réaction afin d'éliminer la substance insoluble et on concentre sous vide la partie surnageante, à environ 1/3 - 1/2 de son volume (si nécessaire» il est recommandé de filtrer la solution à ce stade). On verse le concentré dans 3.000 ml d'eau tout en l'agitant fortement, et après 10 30-45 minutes, on filtre sous-vide les solides, on les lave à l'eau et on les sèche. On récupère 35 g environ de produit. . On dissout ces solides dans 1500 ml d'acétate d'éthyle chaud et l'on filtre afin d'éliminer toutes les matières insolubles. On extrait la solution d'acétate d'éthyle avec 1 fois 15 1000 ml et 2 fois 500 ml d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium. La fraction d'acétate d'éthyle contient le produit désiré indiqué ci-dessus d'ans le titre. Après déshydratation sur du sulfate de sodium anhydre et après évaporation à 300 - 500 ml 20 environ, on obtient au moyen d'une précipitation fractionnée avec du "Skellysolve-B", 4,5 - 5,0 g de produit cristallin blanc. Point de fusion (non corrigé) : 173 - 175°C avec effervescence. Titrage sur plaque : 450 unités (BL-C3)• Analyse : Calculé pour C28H34^10N2 : C : 60,20 » H ! 6,14 25 N : 5,01. Trouvé : C : 60,15 ; H : 6,31 5 N : 4,80 - EXEMPLE 2 - 3-(N-Benzoyl-j de 3-amino-4-hydroxy-8-méthyl-7-/3-0(5-méthyl-2-pyrrolylcarbo-nyljnoyiosylox^j-coumarine (PNC-NHg). On y ajoute 0,31 g (3,06 millimoles, 0,43 ml) de triéthylamine, et on refroidit la solution à 0 - 5°C. 35- .. On prépare-une solution de 0,735 g (4,1 millimoles, équi-"ïa'lan^t à un excès deux fois molaire) de K-benzoyl-y^-alanine dans 20 ml d'acétone et on la refroidit à 0 - 5°C. On y ajoute 0*752 g (7,43 millimoles, 1,04 nil) de triéthylamine, puis 0,673 g (6 ,20 millimoles, 0,59 ml) de chloroformiate d'éthyle, 40 puis on continue à refroidir et à agiter à 0 - 5°C, Lors, de 2007253 69 13714 " l'addition de chloroformiate d'éthyle, on obtient immédiatement un pré.cipité épais blanc. On ajoute donc 2,0 ml d'eau afin de solubiliser le précipité et l'on continue à agiter à O - 5°C pendant;45 minutes. 5 * On ajoute ensuite avec précaution la solution de PNC-NHj à l'anhydride mixte à 0 - 5°C, et on continue à agiter à cette température pendant une heure. On agite ensuite le mélange de la réaction à 25°C pendant deux heures. .On verse le mélange de la réaction dans 500 ml d'un mé-10 lange .d'eau et de glace tout en agitant fortement et on règle le pH à 1 - 2 environ avec de l'acide chlorhydrique 6 H. Une heure après, on filtre les solides (légèrement colorés en li-laa) on les lave à l'eau et on les sèche. On obtient (produit brut) : 1,123 g. 15 Par recristallisation fractionnée dans un mélange d'acé tate d.'éthyle et de "Skellysolve-B", on obtient 562 mg de produit pur. Analyse. Calculé pour C34H37°11N3 1/2H2° : C : 60,71 5 H : 5,69 5 N Î 6,25 20 /Prouvé : C : 60,68 ; H : 6,05 ; N : 6,09». •Le spectre dans 1'infra-rouge (IR) et le spectre de résonance, jaagné tique nucléaire (RMN) correspondent bien'au composé cité dans le titre. Titrage (plaque de Pétri) : 50 unités (BL-G^, - EXEMPLE 3 - 25 5-(3,3-Liméthylbutyramido)-4-hydroxy-8-méthyl-7-Z3-0-(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyi)noviosylox^7coumarine On ajoute lentement et goutte à goutte une solution de 10,81 ml (10,53 g; 78,2 millimoles) de chlorure de 3>3-dimé-thyîbutyryle dans 45 ml de tétrahydrofuranne, à une solution, 30maintenue sous agitation, de 25,0 g (19,55 millimoles) de di-tétrahydropyranyl-coumermycine A1 dans 500 ml de pyridine à 25"C. On agite le mélange de la réaction à 25°C pendant 94 heures. On verse directement le mélange réactionnel dans 2500 ml d'un jnélange d'eau et de glace maintenu sous agitation, on rè-35.gle le pH à 1,5 avec HC1 6 N et on agite le mélange aqueux pendant une heure» On filtre ensuite sous vide le solide,-on le lave à 1!eau et on le sèche. On redissout ensuite les solides sé-Cl|és "dans 750 ml de pyridine, on les met dans un bain d'huile t à-55 - 60°C et on les agite à cette température pendant 24- heu-40 rea»- On concentre sous vide le mélange de la réaction jusqu'à 69 13714 18 2007253 ce qu'on obtienne un sirop, on le transforme en bouillie plusieurs fois avec de l'acétone et on le concentre sous ride jusqu'à ce qu'on obtienne à nouveau un sirop. On redissout le solide dans 300 ml d'acétone et 1000 ml de .méthanol, on ajoute 5 6,0 g d'acide p-toluènesulfonique, et on agite le mélange à 25°C pendant 24 heures. On filtre sous vide le mélange réactionnel, on concentre sous vide la partie qui surnage jusqu'à 1/3 de son volume et on le verse dans 2500 ml d'eau fortement agitée. Après avoir agité pendant 45 minutes, on filtre sous vide le 10 produit, on le lave à l'eau et on le sèche ; on récupère 17,2 g de produit. On dissout le produit'brut dans 400 ml d'acétate d'éthyle chaud et l'on filtre afin d'éliminer les matières insolubles. On extrait la solution d'acétate d'éthyle avec 4 fois 500 ml d'une solution aqueuse à 5 i° de KaHOO^. On déshydrate la 15 solution sur du Na2S0^ anhydre et on la concentre sous vide jusqu'à siccité. On redissout le solide dans 60 ml de CHCl^ et l'on effectue une précipitation fractionnée avec du n-hexane afin de récupérer 6 fractions solides. Les spectres infra-rouge des fractions 5 et 6 présentent des pointes importantes à 2950 20 cm-1 pour (CH^)^ et/ou le groupe de protection de tétrahydropy-ranyle. On redissout à nouveau les fractions 5 et 6 dans 200 ml de méthanol avec 500 mg d'acide p-toluènesulfonique et on les agite à 25°C pendant 24 heures. On verse ensuite la solution danp 700 ml d'eau maintenue sous agitation^ on filtre sous vide, 25 et on lave à l'eau et l'on sèche, on obtient 2,0 g de solide. On redissout le solide dans 40 ml de CHCl^ et l'on effectue une précipitation fractionnée avec du n-hexane afin de récupérer 4 fractions. La dernière fraction totalisant 1,15 g, titre 950 -1100 unités (BL-C^). 30 Analyse Calculé pour C^qH^qO-^qI^ 5 c : 61,42 ? H î 6,53 » N : 4s77 Trouvé : C : 61,50 ; H î 6,62 ; N : 4,83- . Le spectre dans 1'infra-rôuge et le spectre de résonance magnétique nucléaire sont conformes à la structure mentionnée 35 ci-dessus dans le titre. - EXEMPLE- 4 - 3-(3-méthyl-2-butenamido)-4-hydroxy-8-méthyl-7-/5-0-(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosylox^7coumarine On ajoute goutte à goutte une solution de 4,64 g (39,12 40 millimoles) de chlorure de 3,3-diméthylacryloyle et 50 ml de BAD ORIGINAL 2007253 69 13714 19 tétrahydrofuranne à une solution maintenue sous agitation de 25,0 g (19,56 millimoles) de di-tétrahydropyranyl-coumermycine dans 500 ml de pyridine à 25°.C. L'addition de tétrahydrofu-ranhe terminée, on chauffe au reflux le mélange de la réaction 5 à 115°C pendant une heure. Après refroidissement à la température ambiante pendant 30 à 45 minutes, on verse le mélange réactionnel directement dans 2500 ml de mélange d'eau et de glace maintenu sous agitation-, on règle le pH à 1,5 avec HC1 6 N et l'on agite pendant une heure. On filtre sous vide le mélange, 10 on lave à l'eau et l'on sèche. On redissout le produit dans 800 ml de pyridine et on l'agite dans un bain d'huile à 50 -60°C pendant 25 heures, on concentre la solution sous vide jusqu'à 1/3 de son volume, on la transforme en bouillie en utilisant plusieurs fois de l'acétone, et l'on concentre chaque fois 15 sou? vide jusqu'à siccité. On redissout le sirop dans 600 ml d'acétone et 1400 ml de méthanol. On ajoute 7 g d'acide p-toluè-nesulfonique et l'on agite la solution à 25°C pendant 72 heures. On concentre ensuite la solution sous vide jusqu'à 1/2 environ de son volume et on la filtre dans 2500 ml d'eau mainte-20 nue sous agitation. Après avoir agité pendant 30- minutes, on filtre sous vide le solide, on le lave à l'eau et on le sèche. On redissout le solide séché dans 500 ml d'acétate d'éthyle chaud et l'on filtre afin d'éliminer la matière insoluble dans l'acétate d'éthyle. On extrait la solution d'acétate d'éthyle 25 avec 5 fois 500 ml d'une solution aqueuse à 5 % de NaHCOj, puis on la déshydrate sur du l^SO^ anhydre. On concentre sous vide la solution jusqu'à siccité, on la redissout dans 200 ml d'acétate d'éthyle chaud et l'on filtre afin d'éliminer une partie insoluble. On effectue une précipitation fractionnée de la so-30 lution dans l'acétate d'éthyle, avec du n-hexane, afin de récupérer 5 fractions. La troisième fraction, totalisant 780 mg est le produit indiqué dans le titre. Analyse : Calculé pour ^gH^O-j^î^ : C : 61,04 ; H : 6,01 ; N : 4,91. 35 Trouvé : C : 61,27 ; H : 6,36 ; M : 4,56. Le spectre dans 1'infra-rouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire sont conformes à la structure indiquée dans le titre. 40 2007253 69 13714 20 - EXEMPLE 5 - 3-(2-butenamido)-4-hydroxy-8-méthy1-7-/5-0-(5-méthy1-2-pyrrolylcarbonyl ) noviosylox^7covuaarine On ajoute goutte à goutte une solution de 6,55.g (62,6 5 millimoles) de chlorure de crotonyle dans 50 ml de tétrahydrofuranne à une solution, maintenue sous agitation, de 20,0 g (15,65 millimoles) de di-tétrahydropyranyl-coumermycine dans 400 ml de pyridine à 25°C. On agite le mélange réaotionnel pendant 70 heures à 25 °C. On concentre sous vide le mélange 10 réactionnel jusqu'à environ 1/3 de son volume et on le verse dans,2.000 ml d'un mélange d'eau et de glace maintenu sous agitation. On règle le pH à 1,5 avec. HC1 6 N. On agite le mélange pendant une heure, on le filtre sous vide, on le lave à l'eau et on le sèche. On dissout 28,0 g du produit "brut dans 560 ml 15 de pyridine et on les agite dans un bain d'huile à 50 - 60°C pendant 24 heures. On concentre la solution sous vide jusqu'à ce qu'on obtienne un sirop épais, on le transforme en bouillie avec de l'acétone et on l'évaporé jusqu'à siccité plusieurs fois sous vide. On redissout le solide dans 250 ml d'acétone et 20 1000 ml de méthanol. On ajoute 5»6 g (20 %5d'acide p-toluèner sulfonique et l'on agite la solution à 25°C pendant 24- heures. On concentre la solution sous vide jusqu'à 1/2 de son volume et on la filtre dans 2.000 ml d'eau maintenue sous agitation. Après avoir agité pendant une heure, on filtre sous vide le pro-25 duit, on le lave à l'eau et on le sèche ; on obtient 15,7 g de solide. On redissout le solide'dans 500 ml d'acétate d'éthyle chaud, on enlève par filtration la matière insoluble dans l'acétate d'éthyle. On extrait la solution d'acétate d'éthyle avec 4 fois 500 ml d'une solution aqueuse de NaHCO^ à 5 $. On déshy-30 drate.la solution d'acétate d'éthyle sur du Na2S0^ anhydre, on la filtre et on la concentre sous vide jusqu'à siccité puis on redissout dans 100 ml de CHCl^ chaud. On filtre la solution afin d'éliminer les matières insolubles dans CHCl^ puis on effectue une précipitation fractionnée avec du "Sleellysolve-B" afin d'ob-35 tenir 4 fractions. La troisième fraction totalisant 526 mg est le produit indiqué dans le titre. Analyse. Calculé pour C28H^2OioN2 : ® : 60,42 ; H : 5»80 ; M : 5,03. Trouvé : C : 60,64 ; H : 5 > 92 ; N, : 4,8.0. 4-0 Le spectre dans l'infra-rougeet le spectre de résonance , 2007253 69 13714 21 magnétique nucléaire correspondent au composé du-titré..^Titrage sur plaque -730 unités de BL-C^.- - - EXEMPLE 6 - 3-Undecanamido-4-hydroxy-8-méthy1-7-/3-0-(5-méthyl-2-5 pyr.rolylcarbonyl)noviosyIoxy7coumarine On dissout 500 mg de PNC-NH2 dans 15 ml de.pyridine à 25°C. On ajoute directement dans la solution de PITC-CHg maintenue sous agitation à'25°C, un excès 1,5 fois molaire (314>5 mg ; 1,536 millimoles) de chlorure d'undécanoyle dans 2,0 ml 10 de tétrahydrofuranne. On agite la solution à la température ambiante pendant environ 20 heures. On verse la solution dans 600 ml d'un mélange d'eau et de glace fortement agité. On règle le pH à 1,5 avec HG1 6 N et on agite la solution pendant environ 20 minutes. On recueille 15 le solide résultant par filtration,: puis par lavage et séchage, on obtient 589 mg de solide. On redissout le solide dans 10 ml d'acétate d'éthyle, et .l'on sature de n-hexane jusqu'à troubla. On récupère les solides et on les met de côté. On répète, à nouveau le procédé. On sursature le filtrat avec du n-hexane, et 20 on récupère ces solides afin d'obtenir 347 mg de solide, _dont on détermine qu'il s'agit bien du composé indiqué'dans le titre. Il fond à 209 - 210°C. Titrage sur plaque î 63 unités de BL-C^,. Analyse. Calculé pour C35H48^10N2 : C : 64,01 ; H : 7»37 î 25 ' N : 4,26. Trouvé : C : 63,62 ; H : 6,99 » N : 4,63. Le spectre dans 1'infra-rouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire correspondent bien au composé du titre. - EXEMPLE 7 - 30 3-/5- ( 3-n--butyl-4-hydroxyphényl ) propionamido7-4-hydroxy-8-: méthy1-7-/3-0-(5~méthy1-2-pyrrolylcarbonyl)noviosyioxyj- coumarine A.- On dissout dans 200 ml d'éthanol absolu, 4,9 g de 3-ZT4-hydroxy-3- oC -méthylallyl)-3-phénylpropionamido-l-4-hy- 35 droxy-8-méthyl-7-/3-0-(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosylox27 coumarine. On ajoute à cette solution-550 mg de catalyseur à 5 ^ de palladium sur du charbon. On hydrogène la solution au moyen d'un appareil d'hydrogénation Parr avec une pression d'hydrogène de 3,7 bars. On secoue la solution pendant 18:heures et pendant 40 ce temps l'absorption d'hydrogène est de 1,05 bar..On filtre la 69 13714 22 2007253 solution, puis on évapore sous -vide, l'éthanol. B.- On dissout le résidu du paragraphe A dans de l'ammoniac liquide. ,0n laisse ensuite l'ammoniac s'évaporer, et l'on dissout le résidu brun résultant dans 250 ml d'eauchaude. On 5 récupère par,filtration les solides insolubles on obtient 3,23 g de solide. On dissout ce solide dans 50 ml d'acétate d'éthyle et on le filtre. On dilue le filtrat-avec du n-hëxane jusqu'à trouble. On récupère les solides résultants sous forme de fractions séparées. On répète trois fois encore l'opération 10 de dilution avec du n-hexane et l'on obtient en tout 4 fractions, On fait évaporer le solvant du filtrat et l'on obtient une cinquième fraction. Cette fraction est le produit indiqué dans le titre, il fond à 130-- 135°C. - Analyse.. Calculé pour ^ s C : 64,15 5 H : 6,40 ; 15 N : 4,04. Trouvé î C : 64,13 ; H : 6,62 ; N : 4,37. - EXEMPLE 8 - Un grand nombre des composés de l'invention ont été pré-c-• parés en utilisant les divers procédés des exemples ci-dessus. -20 En^remplaçant dans les procédés indiqués l'agent d'acylation par l'agent approprié, on obtient les composés de formule : 25 30 1=0 H nh - G - X 35 40 69 13714 23 2007253 Dérivés aliphatiques semi-synthétiques de la coumermycine X Exemple Titrase Point de fusion Analyse BL-C3 - 3,4,5 800 0 vo ir\ eu • Cale, pour C2gH,0010N2: C, 58^86; H, 5,70; N, 5,28 Trouve • C, 59,04; H, 5,91; N, 5,34 '-cm.pq 1,5 120 120* Cale, pour GjgH^OioNg; C, 63^36; H, 5,65; N, 4,61 Trouvé : C> 63,78; H, 5,74; N, 4,26 -ch(ci^)2 1 ,3 700 173* Cale, pour CggHj^O^Ngt C, 60,20; H, 6,14; N, 5,01 Trouvé î C, 60,15; H, 6,31; N, 4,80 -C^CHj 1,3 44o 247° Cale; pour C H 0. N : 27 32 10 2 c, 59^55; H, 5/92; N, 5,14 Trouve s C, 59/24; H, 6,06; N, 5/32 -OH(^q)s 3,5 830 145* Cale ; pour C^gHjgO^QNgî C, 66,,85; H, 5^63; N, 4,11 Trouvé ; C, 66,54; H, 5,92; N, 4,12 50 35 40 69 13714 24 2007253 -ch2oh-0 5 chj 3, 5 2000 222' calc« pour C34Hjg010Ng: C, 64/34j H, 6>04; N, 4,43 Trouvé : C, 64,18;. H, 6,18; N, 4,44 1q -ohgohtohjjg 4 225° > —CH fcH 2 5 3, 5 l4oo 145° Calci" pour C^HjgO.^Ng: C, 64,34; H, 6,04; N, 4,43 "Trouvé : C, 63,89; H, 6,27; N, 4,23 -CH=CHCH5 20 3,5 720 260° Calci pour C28H32°10N2: C, 60,42; H, 5,80; N, 5,03 Trouve ï C, 60,64; H, 5,92; N, 4,80 -GH=C(chJ)2 25 4 1200 270* Calci pour C^H^O^l^: C, 61,04; H, 601; N, 4,91 • Trouve s C, 61,27; H, 6,36; N, 4,5 1 730 165° Calci' pour C^I^gO^; C, 60^83; 6^33; N, 4,89 Trouvé : C, 61,47; H, 6,59; N, 4,42 -ch2c(ci^)3 35 3,5 1025 170* Calci pour C^gO^N,,: C, 61,42; H, 6,53; N, 4,77 Trouvé : C, 61,50; H, 6,62; N, 4,8(3 40-(CH2)6CH5 . I 4 340 130° Calci pour C52H42010N2: c, 62,53; H, 6,99; N, 4,56 .Trouvé t C, 60,24; H, 6,97; N* 3^94 69 13714 25 200.7253 5 - 4 700 156° Calci pour C35H44010N2: C, 63,04; H, 7,05; N, 4,45. Trouvé ; C, 62,83; H, 7,03; N, 4,27. 4 500 195° Cale ® pour P^gO^s C, 63,,53; H, 7,21; N, 4,36. Trouve î C, 63,35; H, 7,07; N, 4,29. - CH=CH-^_ CH( cHj ) g 4 490 163° Cale i pour C^gH^O^Ng: C, 65,44; H, 6,10; N, 4,24. Trouvé s C, 65,47; H, 6,49; N, 4,05. -«Vu®? 20 4 ' 172° Cale» pour C^gH^O^Ng: C, 65,31; H, 7,79; N, 4,01. Trouvé : C, 66,45; H, 8,43; N, 3,72. -(CK^CHj 25 4 200° Cale, pour C^Hg^O-^Ng: Cj 67,16; H, 8,39; N, 3,64. Trouvé : C, 67,19; H, 8,45; N, 3,80. -(CH2)20CH5 30 4 50 175° Cale, pour C^gE^O-j^Ng: C, 67,98; H, 8,70; N, 3,45. Trouvé î C, 65,34; H, 8,55; N, 3,56. -(CH2)9CH5 35 6 120 209° Cale, pour Cj^H^gO^Ng : C, 64,01; H, 7,37; N, 4,26. Trouvé î C, 63,62; H, 6,99; N, 4,63. -(CH2)10C^. 40 6 40 207° Cale, pour CjgH^0010N2: C, 64,46; H, 7,51; N, 4,17. Trouvé : C, 62,75; H, 7,28; N, 4,44. 69 13714 2007253 26 C2H5 5 \K> 2 4 510 150* Cale, pour OjcjHjyO^gNj: C, 60,77) H, 5/39) N, 6,07. Trouvé : c, 61,06; H, 5,55; N, 6,09. 10 -OH(-OH2-HQ)2 4 260 ' 125* Cale, pour c40h42010N2: C, 67/59; H, 5,96; N, 3,94. Trouvé : C, 69,50; H, 6,06; N, 3/55. 15 -CH(CHgCHgCHj)g 4 940 138° C&lc • pour GjgHtygO^oNgî C, 62,53; H, 6/89; N, 4,56. Trouvé : C, 62,50; H, 7/24; N, 4,59. 20 -CHCCHgCHjJCHg-^ NH: 25 7 ) 720 165' Cale. P°^C35H4l010yH20: C, 61,66; H, 6,36; N, 6,16. Trouvé t C» .61,75; H, 6,41; N, 5,93. 30 - 5CH5 4 640 l4o# Calci pour C^H^O^Ng: C, 61,99; H, 6,71; N, 4,66. Trouvé 1 C, -60,52; H, 7/20; N, 4,36. 35 -(CE2)2CH(CU3)2 3,5 720 150* Cale, pour ÇjQHjgOiLoNg: C, 61,42; H,, 6,53; N, 4,77- Trouvé s C, 61,81; H, 6,99; N, 4,34. 40 -(CHgJg -(F) 4 — 164* 69 13714 27 2007253 HOH2)3-{S) 4 120° . —C=CH-CH 4 1850 1^0° Cale, pour Cg^H^O^Ngî C, 61,04; H, 6,01; N, 4,91. Trouvé x C, 60,74; H, 6,53; N, 4,79. -CHCCHgCH^CHgCHj 4 1100 222* Calci pour C^gO^: C, 61,42; H, 6,53; N, 4,77. Trouve : C, 60,85; H, 6,53; N, 4,34. —(CH2)ixCIi3 6 • 30 193* Cale. pour CjyH^gO^QNgt C, 64,89; H, 7,65; N, 4,09. Trouve s C, 62,70; H, 7,20; N, 4,21. -(CH2)2—O- OH Ctt( CHj) CH II > 2 1300 122° Cale, pour C57H420nN2: C, 64,?4; H, 6,13; N, 4,05. Trouve î C, 63,26; H, 6,52; N, 4,17. ~(CH2)2-^) OH 3 |H2 CH II CH 1 CH 3 6 560 o o » Cale, pour C^H^O^Ng! C, 64,^4; H, 6,13; N, 4,05. Trouve î C, 62,44; H, 6,22; N, 4,00. 40 69 13714 28- 2007253 5 -(CH2)2_0_OH IC çmcH,) CHo 1 CH? 7 840 100* Cale, pour OjfH^O^Ngî C, 64,15; H, 6,40; N, 4,04, Trouvé î C, 63,09; H, 4,93; N, 3/28. 15 —^H2—— OH COfCH^CH^ 2 70 145* Cale, pour CjgH^gO^gNg: c, 63,75; H, 6,31; N, 3,81. Trouvé t c, 62,89; H, 5/97; N, 5/92. 20 —( CH2J 2 —0H (ÇH2)3 7 800 130° Cale, pour C,„H44011N2: C, 64,15; H, 40; N, 4,o4. Trouvé S C, 64,13; H, 6,62; N, 4,37. Nota: (s) représente le noyau cyclohexyle (saturé). 30 \' 35 40 69 13714 29 2007253 " 2l ~* a.- Bis-carhobenzoximide de la coumermycine a-^ 10 5 oc». 15 , On dissout 60 g (0,053 mole) de coumermycine A^ monoso-dique. dans 1250 rçl de tétrahydrofuranne ( THF) en réchauffant légèrement sur un bain de vapeur d'eau. Après avoir laissé la solution jaune-doré foncé refroidir jusqu'à 25°C, on ajoute avec précaution 44,6 ml de triéthylamine (6 équivalents) tout 20 en agitant fortement. Le mélange commence immédiatement à se gélifier bien qu'une agitation rapide maintienne le gel mobile. Or, ajoute goutte à goutte 5 équivalents (36 ml) de chlo-roformiate de benzyle dilué à 250 ml avec du tétrahydrofuranne, à la solution-gel agitée fortement à 25°C pendant 30 minutes. Au bout d'une heure, le gel disparaît et on note la présence d'un précipité de chlorhydrate de triéthylamine. On continue à agiter la solution jaune à 25°C pendant encore 24 heures. On filtre la solution afin d'éliminer le chlorhydrate de triéthylamine, et on la concentre sous vide jusqu'à environ l/lO 30 de son volume initial. On verse la solution jaune-orange pâle dan,'s 3.000 ml de "Skellysolve-B" tout en agitant fortement. Un précipité d'un solide de couleur légèrement crème apparaît immédiatement. Après l'avoir agité pendant une heure à 25°C, on le filtre, on le lave quatre fois avec 100 ml de n-hexane à 35 chaque fois, et on le sèche ; on obtient 77,4 g de bis-carbo-benzoximidocoumermycine A-j_ semi-pure (comme illustré ci-dessus). Point de fusion : elle se ramollit à 145 - 150°C, et se décompose avec effervescence à 190 - 200°C. Il est probable que ce solide, constitué essentiellement du produit désiré est conta-40 miné par de faibles quantités de produits secondaires carbo- 69 13714 30 2007253 benzoxy tri- et tétra-substitués, car une fonction 4-hydroxyle (ou les deux) des motifs coumarine de la coumérmyciné A Le spectre infra-rouge (IR) du produit solide présente une bande très faible d'amide II voisine de 1530 cm~\ indiquant 10 la .présence d'une quantité très faible sinon nulle de matière première. Le titrage sur des plaques contaminées par la bactérie Staph. aureus est de 2,5 à 5>0 mcg/mg. B.- 3-Carbobenzoxamido-4-hydroxy-8-méthy1-7-/5-0-(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosylox%7coumarine 15 CH, %C I p - C - 0 - CHg — C=0 1^>H «s ;0n dissout 75 g du bis-carbobenzoximide de coumermycine obtenu dans l'exemple 1 dans 1200 ml de pyridine à 25°C, afin de former nzné'solution légèrement orange. On la réchauffe à 50 -30 55°C pendant au moins 24 heures, tout en l'agitant. On concentre sous vide la solution résultante marron orangé jusqu'à environ 1/5 de son volume initial et on la verse dans 3.000 ml d'un mélange d'eau et de glace tout en agitant fortement. On règle le pH à 1 - 2 avec HC1 6 N, puis on l'agite pen-35 dant encore une heure. On filtre la suspension et on'obtient 57>9 g de solides légèrement colorés en jaune-brun, que l'on sèche sous vide jusqu'à ce qu'on obtienne un poids constant. Le dérivé carbobenzoxamido est très soluble dans le chlo-40 roforme, tandis que les produits secondaires indésirés ne le 20 25 69 13714 31 2007253 sont pas. On met la totalité des solides (50,0 g) dans un appareil d'extraction Soxhlet et l'on effectue une extraction continue jusqu'à ce que la matière extraite devienne négligeable. En évaporant les extraits obtenus à l'aide de chlorofor-5 me, on obtient environ 15 g de matières solubles dans le chlo-rof.orme. On redissout ce résidu dans une faible quantité de chloroforme et on l'extrait avec une solution aqueuse à 5 # de bicarbonate de sodium afin d'éliminer toute trace d'impuretés acides. On déshydrate la solution chloroformique sur du 10 sulfate de sodium anhydre, on effectue une précipitation fractionnée à partir de la solution par addition de quantités croissantes de "Skellysolve-B" (solvant dérivé du pétrole, point d'ébullition 60 - 68°C, essentiellement du n-hexane), et l'on obtient une fraction pure, 4,5 gj du produit identique comme 15 étant la 3-carbobenzoximido-4-hydroxy-8-méthyl-7-(/3'-0-(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosyloxy7coumarine sous la forme d'un solide cristallin blanc ; point de fusion : il se ramollit à 110°C, se solidifie à 125°C et fond avec effervescence à 155 -160°C. . 20 Le spectre infra-rouge (IR) et le spectre de résonance magnétique nucléaire (HMR) sont conformes à la structure du composé indiqué dans le titre. Analyse. Calculé pour C32H34°llIir2 : C : 61»73 ; H : 5,51 ; . N : 4,50. 25 Trouvé : C : 61,14-5 H : 5,65 5 B : 4,83. C.- 3-Amino-4-hydroxy-8-méthyl-7-/3-0-(5-niéthyl-2-pyrrolyl- carbonyl)noviosyloxY7coumarine (catalyseur ; oxyde de platine) 30 35 40 69 13714 32 2007253 On dissout dans 150 ml d'acide acétique glacial, 1,8 g (2,90 millimoles) de 3-carbobenzoxamido-4-hydroxy-8-méthyl-7-3-0{5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosylox£7coumarine, obtenue dans l'exemple 4» afin de produire une solution jaune pâle. 5 On ajoute à cette solution 500 mg d'oxyde de platine catalyseur et l'on traite la solution-suspension résultante avec de l'hydrogène dans un appareil d'hydrogénation Parr avec une pression initiale de 3,67 bars. On réalise la réduction pendant 24 lettres à la température ambiante tout en agitant. La fixa-10 tion totale d'hydrogène est de 1,09"bar. On sépare le catalyseur par filtration sur un tampon favorisant la filtration sous une atmosphère d'azote, et l'on évapore immédiatement sous vide la solution. On ajoute 20 ml d'acétone au résidu et on l'évaporé à nouveau sous vide iusqtfà 15 siccité. On répète 4 fois encore ce procédé. On sèche sous vide le résidu résultant,sur de l'hydroxyde de sodium, et l'on obtient 1,0 g d'un solide légèrement jaune-doré qui fond à 196 -200°C. Les spectres infra-rouge et de résonance magnétique nucléaire de ce solide sont conformes à la structure du composé 20 indiqué dans le titre, là 3-amino-4-hydroxy-8-méthyl-7-/!5-0-(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviosyloxx7ccumarine. Ce composé est sensible à l'oxydation, en particulier quand il se trouve en solution. t Analyse. Calculé pour Cg^HggOgN^ C : 59»01 ; H :5>79 » N : 5,74-25 Trouvé ; C : 58,39 î H : 6,02 ; H : 5,70.- Analyse. Calculé pour C2^H2g0g-H2.1/2 H20 C : 57,94 ; H : 5,88 - EXEMPLE 10 - 3-Benzamido-4-hydroxy-8-méthy1-7-/3-0-(5-méthyl-2-pyrrolyl-30 carbonyl ) noviosylox^7comarine N : 5,63. 55 OH 0 |l jr-^ NH - C — 0 C=0 40 6'9 13714 33 2007253 t On dissout dans 10 ml de pyridine 250. mg (0,51 millimole) de 3-amino-4-hydroxy-8-méthy1-7-/3-0-(5-méthyl-S-pyrrolylcar-bonyl)noviosylox27coumarine, obtenue dans l'exemple 5. On ajoute à cette solution de l'anhydride benzolque 5 (13.9 mg, 0,613 millimole) tout en agitant fortement à 25°C. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 70 heures en tout sous une atmosphère d'azote puis on le verse dans 150-mg d'un mélange, d'eau et de glace contenant 20 ml d'acide chlorhydrique 6 N. On agite le mélange pendant une heure 10 et l'on recueille le précipité par une filtration sous vide, on obtient 253 mg d'un solide de couleur légèrement pêche identifié comme étant la 3-benzamido-4-hydroxy-8-méthyl-7-/3--0(5-méthyl-2-pyrrolylcarbonyl)noviC3ylox27coumarine, point de fusion : se colore en jaune brun et se ramollit à 190°C,.commence 15 à brunir à 210°C et finalement se décompose fortement, à 230- 235°C (devient noir). Le titrage vis-à-vis de la bactérie Staph. aureus est de 44/lg/mg (par rapport à la coumermycine A-^ comme étalon). On décide arbitrairement que ce composé est l'étalon ou norme de référence pour l'étude des dérivés semi-synthéti-20 ques de la coamermycine de la présente invention. Analyse. Calculé pour C3xH32°10N2 C : ®2,83 î H ï 5»4-5 î H : 4,73. Trouvé : C 63,49 .5 H : 5,78 ; N : 4,43. t Il va de soi que la présente invention n'a été décrite et 25 représentée qu'à titre explicatif, mais nullement limitatif, et qu'elle est susceptible de diverses variantes sans sortir de son cadre.' 69 13714 34 2007253 REVEND!GATION S 1°) - Procédé de préparation de composés ayant la formule s 10 h3c ch3 ■ b on OH I C - X I 0 r~\jH Lj 15 /dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le radical méthyle- et X est un groupe de formule : 20 — On^n-l ou 25 dans laquelle n est un nombre entier valent 1 à 21, m est un entiquee ou dif-le radical cyclo- 1 2 nombre entier valant 2 à 21, S et R sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène, 30 hexyle ou un radical de formule • -GC 35 dans laquelle B? et R^" sont identiques ou différents et représentent chacun un atome d'hydrogène, de fluoré, "de chlore, de brome ou d'iode, un radical trifluorométhyle, amino, N,N-di-alkyl(inférieur)amino, nitro, cyano, alkyle inférieur, alcé-40 nyle inférieur, alcynyle inférieur, alcoxy' inférieur, hydroxy, 69 13714 35 2007253 oarboxy, carbalcoxy inférieur, acétoxy, mercapto-thioacétoxy, ou alkyl(inf.)thio7 ainsi que leurs sels cationiques non toxiques et acceptables en pharmacie, ce procédé étant caractérisé par le fait qu'il consiste à faire réagir un composé de formule H3C CH3 CH3 Ch3 ^OYOv^fj^CK-i o HN ri O^Os1ASixOy0>/-C HoC -^0^0>vss-'0>p o , il 0»-0y,S]^)y®T"CH3 H-CO -vLi NH - C —C - KH-SyJs^' JJ-OCï^ 3 fyJ»2 » \ « bfilfÇ io l,oU 3 Cfi 15 ^ u o « ç "AH hk n r1 (dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou le groupe méthyle, et R^ et R^ sont identiques ou différents et sont chacun un atome d'hydrogène ou 20 "O ou un mélange de ces composés, avec au moins une quantité équi-molaire d'un agent d'acylation de formule : 25 0 S X - C - Z dans laquelle X est tel que décrit ci-dessus et Z est un halogène ou un groupe de formule : 30 0 0 •-0-C-X Ou - 0 - C - alkyle(inférieur) à une tempéra tur-e comprise entre -25 et 150°C, dans un système solvant accepteur de protons, en vue de produire un éther té-35 trahydropyranylique, intermédiaire de formule. : 40 69 13714 36 2007253 h3c ch3 hqc vr°vsr°r o o v0^ œ o C « 0 10 E^1 (dans laquelle R et' X sont tels que définis ci-dessus), et à laisser le composé reposer dans un solvant polaire en présence d'une quantité catalytique d'un acide, à une température 3upé-15 rieure à 0°C afin de couper la liaison éther tétrahydropyranylique et produire le composé désiré de formule II. 2°) - Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R est le groupe méthyle, X est un groupe de formule 20 — cn®2n-l R1 •R2 1 9 dans laquelle n est un nombre entier valant 1 à 8, et R et R sont t®us les.deux des atomes d'hydrogène. 25 3°) - Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que R est le .groupe méthyle et X est : CH, - CH ch3 30 4°) - Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 - 3, caractérisé par le' fait que le solvant accepteur de protons comprend la pyridine ou une trialkyl(inf.)aminé, et le solvant polaire est un alcanol inférieur. 5°) - Procédé selon la revendication 4, caractérisé par 35 le fait que l'agent d'acylation se trouve .sous, la forme d'un halogénure d'acide. 6°) - Procédé selon la revendication 4, caractérisé par le fait que le catalyseur acide est un acide arylsulfohique. 7°) - Composé ayant la formule : 40 69 13714 37 2007253 h3c ch3 wh - oh ôk c - x V o c ■ 0 10 •Cj" dans laquelle R est l'hydrogène ou le groupe méthyle, et x est un groupe de formule : 15 °An,l r1 ■R2 20 ou 25 dans laquelle n est un nombre entier valant 1 à 21, m est un 1 P nombre entier valant 2 à 21. H et R sont identiques ou dif- un férenta et sont chacun un atome d'hydrogène,/radical cyclohexyle ou dans laquelle et sont identiques ou différents et représentent chacun un atome d'hydrogène, de fluor, de chlore, de 35 brome, ou d'iode, ou un radical trifiuorométhyle, amino, N,N-dialkyl(inf.)amino, nitro, cyano, alkyle inférieur, aleény-le inférieur, alcynyle inférieur, alcoxy inférieur, hydroxy, carboxy, carbalcoxy inférieur, acétoxy, mercaptOy thioacétoxy, ou alkyl(inf.)thio , ainsi que leurs sels cationiques et notam-40 ment ceux non toxiques acceptables en pharmacie. 69 13714 38 2007253 8°) - Composé selon la revendication 7» caractérisé par le fait que R est le groupe méthyle, X est un groupe de formule î 10 ou dans laquelle n est un nombre entier valant 1 à 8, m est un 1 2 15 nombre entier valant 2 à 8, et R et R sont identiques ou différents et sont -H ou ■O r3 20 dans laquelle R^ est un atome d'hydrogène, de fluor, de chlore, de brome ou d'iode, ou un radical trifluorométhyle, amino* N,N-dialkyl(inf.)amino, nitro-cyano, alkyle inférieur, alcényle inférieur, alcynyle inférieur, aleoxy inférieur, hyd'roxy, mer-capto, carboxy, carbalcoxy inférieur, aeétoxy, thioaeétoxy, ou 25 alkyl(inf.)thio ; ainsi que ses sels non toxiques acceptables en pharmacie. 9°) - Composé selon la revendication 7S caractérisé par le fait que R est le groupe méthyle, X est un groupe de formule 30 - cnK2n-l R1 ■R2 •y g dans laquelle n est un nombre entier valant 1 à 8, R et R sont 35 tous les deux des atomes d'hydrogène, ainsi que ses sels non toxiques acceptables en pharmacie. 10°) -- Composé selon la revendication 7, caractérisé par le fait que R est la groupe méthyle et X est 40 BAD ORIGINAL 69 13714 39 2007253 - CH CH, CH, ainsi que ses sels non toxiques acceptables en pharmacie. 10