Brevet FR2008532A1 — publié le 19700123

la présent» invention est relative à un-proééiîé de traitement ae cellules àe microorganismes et -en5 particulier' à un procédé de traitement de cellules de microorganismes ou de protéines extraites de cellules de microorganismes, qui est 5 caractérisé par le fait qu'on traite ces cellules ou les protéines extraites par du peroxyde d'hydrogène. la couleur et le taux de digestion des cellules de microorganismes ou des protéines extraites dé cellules de micro-organismes varient selon les souches particulières utilisées,les 10 conditions de culture choisies, le fait qu'on les a soumises éventuellement à un traitement thermique, etc. Ces facteurs empêchent l'utilisation des cellules de microorganismes ou des protéines extraites de telles cellules* la présente invention a donc pour objet : 15 on procédé de traitement de cellules de microorga nismes ou de protéines extraites de telles cellules qui permet de les utiliser de la manière désirée ; un procédé de décoloration de cellules de microorganismes ou de protéines extraites de telles cellules j 20 l'obtention d'un taux de digestion amélioré des cel lules de mioroorganismes ou des protéines extraites de telles cellules ; l'olatention de cellules de microorganismes et de protéines extraites de telles cellules qui sont décolorées* 25 Ces caractéristiques et avantages de la présente in vention ainsi que d'autres apparaîtront aux techniciens à la lecture de la description qui va suivre et des revendications* Conformément à la présente invention, on fait réagir nne solution aqueuse ou une suspension aqueuse de cellules de 3© microorganismes, par exemple des cellules de Corynebacterium» de Streptomvoeg. etc.., ou de protéines extraites de telles cellules, aveo du peroxyde d'hydrogène, ce qui décolore oes substances tout en améliorant leur taux de digestion, l'utilité d'un tel procédé réside dans le fait qu'il est avantageux dans la produc-35 tion de matières alimentaires, fourragères, etc.. à partir de telles substances<> lia présente invention est mise en oeuvre de la manière qu'on va décrire. On utilise une solution aqueuse ou une suspension aqueuse de cellules (vivantes ou sèches) ou de proté-40 ines extraites de telles cellules* Les cellules sont de 69 11477 2 2008532 préférence des cellules "de' "Corygebaotegiiam ou de Streptomyces . On ajuste la solution aqueuse ou la suspension aqueuse à un pH compris entre 3 et 12, de préférence entre 5 ®t lie On y ajoute du peroxyde d'hydrogène en une quantité telle que sa coecentra-5 tion soît comprise entre 0,1 et 10 fe en poids, de préférence entre 1 et 10 $, "en poidsÔ On maintient la température de la solution ou de ia suspension entre O at 1Ô0°C, de préférence entre 5 et 30*C« De cette manière, les cellules en suspension ou en dissolution ou les protéines extraites des cellules se lO trouvent blanchies et, en même temps,leur taux de digestion est amélioré. Si la présence éventuelle de peroxyde d'hydrogène résiduel soulève tdes difficultés ou présente un inconvénient, on peut l'éliminer à l'aide d'un oatalase ou d'un agent rédue-15 teur« Sur le dessin annexé, on montre les avantages obtenus en mettant en oeuvre la présente invention. les courbes 7. de la figure 1 concernent le taux de digestion de la pepsiae*' obtenu avec des protéines extraites de cellules de microorga-20 nisaiss st les courbes de la figure 2 montrent le taux d« d,±— gestion de la pepsine obtenu avec les cellules de microorganismes. Oes figures sont décrites en détail dans les exemples qui vont suivre. Gomme on l'a noté ci-dessus, l'effet de décolora-25 tion et d'amélioration du taux de digestion que permet d'obtenir la présente invention est important. Ainsi, en ce qui concerne l'effet de décoloration, la réduction de la couleur par rapport à la couleur existant avant le traitement est d'environ 70-95 (cette réduction étant mesurée par absorption de lumière à une 30 longueur d'onde de 4-00 i^u ). En ce qui concerne le taux de digestion, on obtient une amélioration de 30 à 50 56 quand on mesure la digestion à l'aide de pepsine, par comparaison avec le taux de digestion avant ie traitement. Par conséquent, la présente invention est relative 35 à un pfocédé entièrement utile, dont les avantages se manifestent non seulement en ce qui concerne l'effet décolorant et l'amélioration du taux de digestion, comme mentionné ci-dessus,mais en outre en ce qui concerne le fait que la teneur en azote des protéines extraites n'est pas modifiée par le traitement par le 40 peroxyde d'hydrogène (la teneur en azote des protéines extraites 69 11477 3 2008532 étant mesurée paz la méthode de Kjeldahl). les exemples suivants sont donnés uniquement à titre IBAÉHpIlf et non limitatif de la portée de la présente invention. Exemple 1 On cultive le mioroorganisme Corynebaoterium gluta-5 micum dans un milieu constitué par de la mélasse et on le soumet à une oentrifugation» On ajoute ensuite de l'acide chlorhy-drique lï en une quantité égale à 5 à 10 fois (en poids) le volume des cellules vivantes, puis on préohauffe la suspension à 100*0 pendant 5 à 10 minutes* 0h ajoute à cette suspension une 1° solution de soude caustique 0,1 - ©,5Ï en une quantité égale à 10 fois celle des cellules (volume/poids), qui ont été préchauffas, puis on agite le mélange résultant entre 25 et 50®G pendant 2 à 3 heures* On extrait ensuite la protéine des cellules* On élimine le résidu par centrifugation, ce qui donne une solution ^■5 extraite* On ajuste le pH de cette solution extraite avec un aeide on. un alcali (comme indiqué dans le tableau 1),° on y ajoute du peroxyde d'hydrogène» On laisse la solution reposer à la température ambiante pendant 1 heure et demie, et oa mesure le 2® ta«x de réduction de sa couleur. Les valeurs obtenues sont données dans le tableau 1» Tableau 1 Réduction ue la couleur , J6 Concentration pH 3 pH 5 pH 7 pH9 pH 11 pH 12 25 de H202 io $ 60,1 74,6 89,4 92,3 97,2 98,7 5 36,7 42,8 54,6 64,4 73,4 81,6 3 * 32,9 38,2 50,8 62,7 72,2 79,5 1 * 28,8 31,3 35,5. 44,4 63,5 71,3 ©,1 * . 15,3 21,6 32,1 39,3 47,5 56,6 Les résultats d'un essai de digestion apparaissent dans la figure x« Sur cette figure, dans laquelle la durée de l'essai a été portée en abscisses en heures, et le taux 35 de digestion a été porté en ordonnée, la courbe inférieure a été obtenue avee un groupe de substances non traitées servant de témoin, tandis que la courbe supérieure a été obtenue avec un groupe de substances traitées par le peroxyde a'hydrogène. On effectue l'essai de digestion en utilisant 500 mg de protéine;-. 69 11477 4 2008532 extraite^, qai a été traitée par du peroxyde d'hydrogène à concentration de 5 f>t au pH 9, et 5 «g de pepsine, en faisant réagir au. pH 1>8, et en maintenant la température à 38*0 pendant 24 heureso Le taux de digestion est nettement amélioré par 5 comparaison avec le groupe non traité® La relation entre le temps de traitement par le peroxyde d'ûydrogène et la teneur en azote de la protéine extraite est donnée dans le tableau 2. gableau 2 10 Temps de traitement par le peroxyde d'hydrogène et teneur en azote de la protéine extraite» Temps de traite- a n K , K ~ n ot ment (heures) 0 °'5 x*5 3>° 24 15 Teneur en azote de 12,4 12,1 12,6 12,4 12»7 la protéine extraite (*) La teneur en azote de la protéine extraite est mesurée par la méthode de Kjeidahl. 20 Exemple 2 On met en suspension 100 g de cellules sèehes de StreptoBivoas gris eus dans 2 litres d'eau, puis on a}Mte le pH à 10o On ajoute 18 ml de peroxyde d'hydrogène à 30 jé, goutte à goutte, tout en agitant et en maintenant la température à 25 30*C, cette addition demandant 30 minutes* ■ Après avoir Achevé l'addition goutte à goutte, on laisse la solution reposer pendant 30 minutes et on compare sa couleur avant et après le traitement par le psxexyde d'hydrogène* Les résultats sont donnés dans le tableau 3o Les résultats de l'essai de digestion sont 30 donnés dans la figure 2 (la courbe supérieure correspondant aux cellules traitées par le peroxyde d'hydrogène et la courbe in«-férieure montrant les résultats obtenus avec des cellules non traitées au cours d'une expérience témoin)* L'essai de digestion est exécuté de la m$me manière que dans l'exemple 1* Les résul-35 tats apparaissant dans le tableau 3 et dans la figure 2 montrent nettement l'amélioration réelle obtenue en mettant en oeuvre la présente invention., 69 11477 5 2008532 10 gableau 3 Coeificient d'absorption (400 ma ) G- 1,94 Coefficient d'absorption (620 ma ) /. _ 1,78 0,3 Œémoin (suspension avant traitement) Solution traitée par le peroxyde d'hydrogène 83nasas8s8s:sss3ssssss3s3s3ss=sss:ssssssssss=ss=ss:=ssss3as Il est évident qu'on peut apporter de nombreuses modifications à la description qui précède sans sortir pour cela du cadre de la présente invention» 69 11477 2008532 uTiiiintiots l» Procédé da traitement de cellules de mi» croorganismes ou de protéines extraites de cellules, qui consiste à lormer une solution ou une suspension de ces cellules 5 ou de ces protéines, à ajuster le pH de la solution ou. suspen sion entra environ 3 et 12 et à y ajouter du peroxyde d'hydrogène es une quantité telle que sa concentration soit comprise entre environ 0,1 et 10 fa en poids® 2o Procédé coniorme à la revendication 1, 10 dans lequel les cellules précitées proviennent de microorga-nismes du genre Corynepacteriamo 3» Procédé conforme à la revendication 1, aans lequel les cellules proviennent de microorganismes du genre Streptomyceg» 15 4o Procédé conforme à la revendication 1, dans lequel la température de la goiution ou suspension est maintenue entre 0 et 100°Co 5. Procédé de traitement d® cellules de mi-croorganismes, qui consiste à former une solution aqueuse ou 20 une suspension aqueuse desditas cellules, puis à ajuster 1s pM de la solution ou suspension à une valeur comprise entre environ 3 et 12, et à ajouter du peroxyde d'hydrogène en unè quantité telle que sa concentration soit comprise entre environ 0,1 et 10 en poids» 25 6. Procédé coniorme à la revendication 5, dans lequel la température de la solution ou suspension est maintenue entre 0 et 100°G. 7. Procédé conforme à la revendication 6, dans lequel on ajuste le pH à une valeur comprise entre en-30 viron 5 et 11» 8» Procédé coniorme à la revendication 7, dans lequel la concentration du peroxyde d'hydrogène est com-prise entre environ 1 et 10 $ en poids0 9» Procédé conforme à la revendication 8, 35 dans lequel la température de la solution ou suspension est maintenue entre 5 et 30°G» 10. Procédé conforme à la revendication 9 dans lequel les cellules sont obtenues à partir de mieroor*-ganismes du genre Corynebacterium. 69 11477 7 2008532 11* Procédé conforme à la revendication 9» dans lequel les cellules sont obtenues à partir de microorganismes du genre Streptomyceso 12* Précédé de traitement de protéines ex-5 traites de cellules de microorganismes, qui consiste à former une solution ou une suspension aqueuse desdites protéines,à ajuster le pH de la solution ou suspension à une valeur comprise entre environ 3 et 12, et à y ajouter du peroxyde d'hydrogène de manière que sa concentration soit comprise entre envi-10 ré» 0,1 et 10 13. Procédé conforme & la revendication 12,' dans lequel la température de la solution ou suspension est maintenue entre 0 et 100*G« 14. Procédé conforme à la revendication 13, 15 dans lequel en ajuste le pH entre environ 5 et 11. 15. Procédé conforme à la revendication 14, dans lequel la concentration du peroxyde d'hydrogène est comprise entre environ 1 et 10 ^ en poids. 16. Procédé conforme à la revendication 15, 20 dans lequel la température de la solution ou suspension est maintenue entre 5 et 30*C. 17. Précédé conforme à la revendication 16, dans lequel les cellules proviennent de microorganismes appartenant au genre Cervnebacteriumo 25 18. Procédé conforme à la revendication 16, dans lequel les cellules proviennent de microorganismes du. genre Streptoarces.