Brevet FR2005229A1 — publié le 19691212

La présente invention concerne de nouvelles compositions pharmaceutiques utiles en pratique vétérinaire. 'invention concerne en outre un nouveau procédé de traitement de certains états pathologitues chez les animaux à sang chaud antres que l'homme. Un certain nombre d'états pathologiques qui peuvent affecter les animaux à sang chaud se traduit par un métabolisme anormal du calcium et du phosphate. Ces états peuvent être divisés en deux grandes catégories. (1) Les états qui se caractérisent par une accumulation anormale du calcium et du phosphate conduisant à une diminution des os générale ou particulière ou à des taux excessivement éle vés en calcium et en phosphate dans les fluides du corps. Ces états sont parfois appelés icidélinéralisations pathologiques des tissu. durs. (2) Les états qui provoquent ou proviennent d'un dépôt anormal du calcium et du phosphate dans le corps. Ces états sont parfois appelés ici calcifications pathologiques. Dans la première catégorie on peut citer l'ostéoporose dans laquelle les tissus durs des os diminuent en même temps que se développent de nouveaux tissus durs. La moelle et les espaces osseux deviennent plus importants, l'adhésion fibreuse diminue et les os compacts deviennent fragiles. la seconde catégorie, celle des états qui se manifestent par un dépôt anormal du calcium et du phosphate, englobe les affections telles que : arthrite, névrite, bursite, tendonite et autres états inflammatoires qui prédisposent les tissus mis en jeu à un dépôt de phosphates de calcium. Un autre état encore dans la catégorie (2) qui résulte d'un dépôt anormal du calcium et du phosphate est la formation de calculs dans le conduit biliaire, la vésicule biliaire, le pancréas, les glandes salivaires, les amygdales, les reins et la vessie. Bien que certains de ces calculs ne soient pas constitués essentiellement de phosphate de calcium, il est vraisemblable que le noyau originel est constitué de phosphate de calcium. La formation de calculs urinaires, c'est-à-dire l'urolithiase, représente chez le bétail un problème majeur en médecine vétérinaire. On estime que de 5 à 10 % des veaux sevrés souffrent de cette af- fection lorsqu'on leur retire le lait et qu'ils commencent à pyren dre d'autres nourritures. Butant qu'on le sache, on n'a pas développé de traitement médical satisfaisant pour les états de la catégorie (1) décrits ci-dessus, avant cette invention bien que le contrôle diététique les fluorures, les oestrogènes et l'hormone calcitonine (thyrocalcitonine) aient été suggérés ou utilisés pour ces états. Bien que certains phosphates minéraux comme les pyrophosphates et les phosphates condensés à longue chaîne aient été suggérés pour le traitement des états de la catégorie (2), ils n.' ont pas été largement utilisés par suite de leur tendance à s'hydrolyser en orthophosphates inefficaces lorsqu'ils sont administrés à des animaux importants coupe le bétail. L'invention a donc pour objet une composition pour eipScher le dépôt anormal et la mobilisation du phosphate de calcium dans les tissus animaux. Un procédé de traitement des états de calcifications pathologiques et de déminéralisations des tissus durs chez les ani maux. Description solaire de l'invention. L'invention est basée sur la découverte que certains acides polyphosphoniques et leurs sels pharmaceutiquement acceptables diminuent l'accumulation anormale et le dépôt des phosphates de calcium chez les animaux. L'invention fournit. donc une com position et un procédé de traitement des états de déminéralisation pathologique des tissus osseux et de dépôt pathologique du calcium dans les tissus mous des animaux. Du point de vue du procédé, l'invention consiste à administrer aux animaux une quantité eff i- cace d'un polyphosphonate tel qu'il sera caractérisé ci-aprè. Description détaillée de l'invention. Dans un de ses aspects, l'invention a pour objet une composition comprenant une quantité efficace mais non toxique d'un acide phosphonique conforme aux formules structurales suivantes dans laquelle R1 et R2 sont tous deux de l'hydrogène ou un groupe CH20H; n est un entier de 3 à 10, R3 est de l'hydrogène, un groupe alcoyle contenant de 1 à 20 atomes de carbone environ, cycloalcoyle contenant de 3 à 6 atomes de carbone environ, alcényle contenant de 2 à 20 atomes de carbone environ, aryle (P;e.phényle et napthyle), phényléthényle, benzyle, un halogène (p.e. chlore, brome et fluor), un groupe amino substitué (p.e. diméthylamino, diéthylamino, N-hydroxy-N-éthylamino, acétylamino), -CH2COOH, -CH2PO3H2, -CH(PO3H2) (OH) ou -CH2CH(PO3H2)2;R4 est de l'hydrogène, un groupe alcoyle inférieur (p.e. méthyle, éthyle, propane et butyle), un groupe amino, benzyle, un halogène (p.e.; chlore, brome et fluor), un groupe hydroxyle, -CH2COOH, -CH2PO3H2 ou -CH2CH2PO3H2, ou un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables cone les sels alcalins (p.e. sodium et potassium), alcalino-terreux (p.e. calcium et magnésium), un sel d'un métal lourd non toxique (p.e. sel stanneux et d'indium), un sel d'ammonium ou d'ammonium substitué de faible poids moléculaire (p.e. mono- di-et triéthanolammonium); et un support pharmaceutique. les acides polyphosphoniques décrits ci-dessus et leurs sels pharmaceutiquement aceeptables sont appelés collectivement ci-aprés: "polyphosphonates". Les polyphosphonates utilisables répondant à la formule pré cédente (I) sont les acides propane triphosphonique-1,2,3, butane tétraphosphponique-1,2,3,4, hexane hexaphosphonique-1,2,3,4,56, hydroxy-1-hexanepentaphosphonique-2,3,4,5,6, dihydroxy-1,6-hexane tétraphosphonique-2,3,4,5, pentane pentaphosphonique-1,2,3, 4,5, heptane heptaphosphonique-1,2,3,4,5,6,7, octane octaphospho- nique-1,2,3,4,5,6,7,8, noname nonaphonique-1,2,3,4,5,6,7,8,9, décane décaphosphonique-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10, et les sels pharmaceutiquement acceptables de ces acides p.e. les sels de Sodium, potassium, calcium, magnésium, ammonium, triéthanolammonium, diéthanolammonioum et monoéthanolammonium. Pari les polyphosphonates utilisables représentés par la formule précédente (II) on peut citer les acides hydroxy-1-6- thane diphosphonique-1,1, méthane diphosphonique, hgdroxy-n6thane diphosphonique, éthane triphosphonique-1,1,2, propane tétraphosphonique-1,1,3,3, phényl-2-éthane diphosphonique-1,1, naphtyl-2éthane diphosphonique-1,1, phénylméthane diphosphonique, amino-1éthane diphosphonique-1,1, dichlorométhane-diphosphonique, nonane diphosphonique-5,5, n-pentane diphosphonique-1,1, difluorométhane diphosphonique, dibromométhane diphosphonique, propane diphospho nique-2,2, carboxy-2-éthane diphossphonique-1s1, hydroxy-1 propane triphosphonique-1,1,3, hydroxy-2-éthane triphosphonique-1,1,2, hy droxy-1-éthane triphosphonique-1,1,2, diphényl-1,3-propane diphos phonique-2,2, nonane diphosphonique-1,1- hexadécane diphosphonique-1,1, hydroxy-1-pentène-4-diphosphonique-1,1, hydroxy-1-octadé cène-9-diphosphonique-1,1, phényl-3-diphosphono-1,1-propène-2, octane diphosphonique-1,1, dodécane diphosphonique-1s1, cyclobutyl-hydroxy-méthane diphosphonique, cyclopethylméthane diphosphonique, cyclohexylhydroxy méthane diphosphonique, phénylamino-mé- thane diphosphonique, naphtylamino méthane diphosphonique, N, Ndiméthylamino-méthane diphosphonique, N-(hydroxy-2-éthyl) aminométhane diphosphonique, N-acétylamino-méthane diphosphonique, aminométhane diphosphonique; et les sels pharmaceutiques acceptables de ces acides p.e. les sels de sodium, potassium, calcium, magnésium, les sels stanneux, les sels d'indium, ammonium, tri6- thanolammonium, diéthanolammonium et monoéthanolammonium. Des mélanges des acides phosphonique précédents et/ou des sels peuvent être utilisés dans l'invention. L'acide hydroxy-1-éthane diphosphonique-1,1, polyphosphonate particulièrement préféré, répond à la formule moléculaire suivante CH3C(OH) (PO3H2)2. (Selon la nomenclature par radieaux, l'acide peut aussi être appelé acide hydroxy-1-éthylidène, diphosphonique). Le sel le plus facilement cristallisable de cet acide ost obtenu lorsque 3 des hydrogènes acides sont remplacés par du sodium. Les sels préférés conformes à l'invention sont le sel a- cide trisodique qui répond } la formule et le sel acide disodique. Le sel acide trisodique cristallise normalement sous forme d'hexahydrate qui perd de l'eau pendant le séchage à l'air pour donner un mélange d'hexahydrate et de monohydrate ayant une moyenne de 3 à 4 molécules d'eau d'hydratation. Bien qu'on puisse utiliser n'importe quel sel pharmaceuti- quement acceptable de acide hydroxy-1-éthane diphosphonique dans l'invention, on préfère utiliser le sel tétrasodique, le sel acide trisodique, le sel acide disodique, le sel acide monosodique et leurs mélanges.Les autres sels de sodium, potassium, ammonium et 'mono-di- et triéthanolammonium et leurs mélanges sont aussi u- tilisables, pourvu qu'on fasse attention & régler la quantité totale d'espèce cationique dans la composition. Ces composés peuvent Stre préparés par n'importe quel procédé convenable; cependant un procédé particulièrement recommandé est décrit dans le brevet bel ge NO 699.203. L'acide hydroxynéthane diphosphonique et les composés apparentés utilisables ici peuvent être préparés par exemple en fai sant réagir le phosgène avec un dialcoyl phosphite alcalin. Une description complète de ces composés et de leur procédé de préparation se trouve dans le brevet belge NO 691.788. L'acide méthane diphosphonique et les composés apparentés utilisables ici sont décrits en détail dans le brevet des Etats Unis d'Amérique N 3.213.030 du 19 Octobre 1965. Un procédé préféré de préparation de ces composés est décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amerique N0 3.251.907 du 17 Mai 1966. L'acide éthane triphosphonique-I,1,2 et les composés apparentés qui peuvent être utilisés dans les compositions conformes à l'invention peuvent être préparés par alcoylation du carbanion du méthylène diphosphonate de tétraisopropyle par le étha- ne phosphonate de diisopropyle, avec formation de bromure de so- dium et du composé désiré de substitution de l'éthane. L'acide propane tétraphosphonique-1,1,3,3 et les composés apparentés utilisables ici ainsi qu'un procédé de préparation son crits dans le brevet belge N 712.773. L'acide pentane diphosphonique-2,2 et les composés apparen tds peuvent Stre préparés selon la méthode décrite par G.M. Kosolopoff dans J. Amer. Chem. Soc. 75 1500 (1953). L'acide propane triphosphonique-1,2,3 et ses sels peuvent outre préparés en faisant réagir dans des conditions bien définies un composé propargylique ayant p.e. la formule H-C=C-CH2Br, avec un phosphite acide de dialcoyle dans lequel le groupe alcoyle contient de 1 à 6 atomes de carbone et un promoteur de réaction p.e. un métal alcalin. L'acide butane tétraphosphonique-1,2,3,4 et ses sels peuvent être préparés par un procédé décrit dans la demande de brevet hollandais N0 6.703.771. Les polyphosphonates vicinaux aliphatiques supérieurs et leurs sels peuvent être préparés par le procédé décrit dans la demande de brevet hollandais N0 6.703.772. La dose nécessaire de polyphosphonate varie avec l'état particulier à traiter, la gravité de l'affection, la durée du traitement et le polyphosphonate particulier utilisé; néanmoins les doses uniques peuvent varier de 0,01 à 500 mg/kg de poids de préférence de 0,5 à 50 mg/kg (sauf indications contraires, l'unité désignée par Nmg/kg" telle qu'elle est utilisée ici représente les mg/kg de poids) avec jusqu'à 4 doses par jour. Les dosages supérieurs dans cet intervalle sont naturellement nécessaires dans le cas de l'administration orale par suite d'une absorption limitée. Des doses supérieures à 500 mg/kg environ peuvent donner des symptômes toxiques et doivent être évitées.En outre, des doses journalières supérieures à 2000 mg/kg environ ne sont pas nécessaires pour obtenir l'effet désiré et peuvent donner des ef- fets xecondaires toxiques. Des doses inférieures à 0,01 mg/kg environ n'affectent pas sensiblement la calcification ou la déminé- ralisation pathologiques mêmes lorsqu'elles sont administrées par voie intra-veineuse. Les doses de 0,5 à 50 mg/kg sont de préférence utilisées lorsque les polyphosphonates sont administrés par voie bubale. Les polyphosphonates peuvent aussi être administrés par voie parentérale en solutions aqueuses par injection sous-cutanée, intradermique, intramusculaire ou intraveineuse. La dose préférée varie pour ces modes d'administration comme suit sous-cutanée 0,1-10 mg/kg intradermique 0,1-10 mg/kg intramusculaire 0,05-- 5 Wg/kg intraveineuse 0,05- 5 mg/kg Pour l'administration orale, les polyphosphonates peuvent être formulés sous forme de capsules, comprimés ou granules. Pour les applicationg prophylactiques, les polyphoiphonates sont de préférence incorporés dans la nourriture des animaux ou cone additifs de nourriture. Ils peuvent aussi être préparrés en doses unitaires avec un support pharmaceutique, chaque dose unitaire contenant de 15 mg & 10 g de polyphosphonjate, de préférence de 1 à 5 g. Tel qu'il est utilisé ici le terme "support pharmaceutique" représente un diluant solide ou liquide ou une substance d'encapsulation. Comme exemples de substances qui peuvent -servir de supports pharmaceutiques on peut citer les sucres comme le lactose, glucose et eucrose; les amidons comme amidon de blé et amidon de pomme de terre; la cellulose et ses dérivés comme car boxyméthylcellulose sodique, éthylcellulose, acétate de cellulose; la poudre de tragacanthe; le malt, la gélatine, le talc, l'acide stéarique; le stéarate de magnésium; le sulfate de calcium; les huiles végétales comme huile d'arachide, huile de graine de coton, huile de césame, huile d'olive, huile de blé et huile de théobrome; les polyols comme propylène glycol; glycérine, sorbitol, mannitol et polyéthylène glycol; l'agar; l'acide alginique, l'eau non pyrogggénique, les solutions salines isotoniques et les solutions tampen à bases de phosphates ainsi que d'autres substan ces compatibles non toxiques utilisées dans les formulations pharmaceutiques. Des agents mouillants et des lubrifiants comme le laurylsulfate de sodium ainsi que des agents colorants, des parfums et des composés de proctection peuvent aussi être présents. Le support pharmaceutique utilisé avec les polyphosphona- tes est employé à une concentration suffisante pour obtenir une taille pratique en rapport avec la dose. Le support pharmaceuti- que représente de préférence de 0,1. & 99 % en poids de la compo- sition totale. Les compositions nutritives pour animaux auxquelles on peut ajouter les polyphosphonates conformes à l'invention englobent les matières nutritives comme les déchets cellule - ques tels que foin, paille, balle de graine de coton, pulpe de betterave, ensilage, épis de mais broyé, tige de mais, etc.Les composants contenant des protéines comme les grains entiers y compris le mais le blé, l'avoine, l'orge, le seigle, le millet et l'alfa; les graines traitées y compris la farine de graine de coton, la varie ne de mais, la farine de soja, la farine de graine de lin et d'autres produits usés de l'industrie oléagineuse; les protéines animales: caséine, gélatine, chair de poisson et déchets d'abat- toirs sont aussis matières nutritives nécessaires pour une com- position nutritive équilibrée.Les compositions nutritives pour animaux peuvent aussi contenir des huiles naturelles, y compris des graisses animales comme suif de boeuf, suif de mouton; des huiles de poisson, y compris de l'huile d'anguille, de hareng, de menhaden, de thon et de saumon et l'huile de baleine. Les huiles végétales comme huile de soja, huile de tournesol, huile d'olive, huile de carthame, huile de mais, huile d'arachide, huile de grai- ne de coton, huile de riz, huile de millet, huile de germe de blé st huile de palme peuvent aussi être utilisées. En plus des matibres-nutritives mentionnées ci-dessus, les compositions nutritives pour animaux peuvent comporter des sour- ces supplémentaires de minéraux : poudre d'os, sels et les divers oligoéléments.comme les sels de zinc, cuivre, manganèse, magnésium, cobalt, iode et fer. Des antibiotiques, des stéroides, des anti-helmintiques et d'autres médicaments ou substances de stimulation de la croissance peuvent être incorporés dans les nourritures pour animaux. Diverses vitamines peuvent être ajouttées aux compositions nutritives pour anis pour palier les déficiences inhérentes au choix des autres composants nutritifs. D'autres matières nutritives peuvent être incorporées comme la caséine, d'autres sous-produits du lait et sources synthétiques d'azote comme l'urée. Les polyphosphonates peuvent outre incorporés dans la compo- sition nutritive totale comme décrit ci-dessus ou dans des concentrats intermédiaires on dans des suppléments nutritifs pouvant être mélangés avec les déchets de base et les matières nutritives proténiques pour préparer la nourriture finale.Dans l'industire alimentaire le terme "concentrat" est souvent utilisé pour représenter un produit qui contiens une quantité relativement in- portante d'une ou plusieurs matières nutritives comme une protéine de bonne qualité, des minéraux, des vitamines, etc. et qui peut outre ajouté aux matières nutritives de base pour former une composition nutritive finale. Le terse "additif est aussi utilisé pour représenter une matière nutritive particulière ou un mélange qui est ajouté ou incorporé au concentras de la nourriture totale, ou dans la nourriture totale elle-même.Les polyphos- phonates peuvent être utilisés selon l'invention en les inoorpo- rant dans des additifs nutritifs, des concentrats ou dans la com- position nutritive totale (appelés par la suite "compositions nutritives"). Pour le but de cette invention, le terme "support pharmaceutique" est destin & représenter les compositions nutritives. Les compositions nutritives contenant une faible proportion d'un ou plusieurs des polyphosphonates décrits ici, incorports dans une proportion importante d'une nourriture pour animaux constituent une réalisation préférée de l'invention dans la mesure où elles fournissent une méthode efficace et pratique de propy laxie de l'urolithiase pour les troupeaux importants d'animaux, en particulier pendant les périodes de pâturage limité. La prophylaxie de l'urolithiase peut être effectuée pour les troupeaux qui paissent en incorporant les polyphosphonates dans le sel, La concentration des polyphosphonates dans les compositions nutritives varie également avec le poids de l'animal à traiter et la proportion du régime total que comporte la composition nutritive.Lorsqu'on doit traiter des troupeaux d'animaux, le taux de polyphosphonate dans la composition nutritive doit être suff i- sant pour fournir les doses spécifiées ici bases sur la consomma tion moyenne de nourriture et le poids des animaux. Dans toue les ouas, les polyphosphonates représentent une faible proportion de la composition nutritive totale. Bien qu'il soit entendu que cette invention n1 est pas limitée par une théorie particulière êe mise en oeuvre, dans le cas des états qui provoquent ou proviinnent d'un dépôt de calcium et de phosphate anormal dans le corps, on pense que les polyphospho mate s interfèrent avec la transformation de phosphate de calcium amorphe aux rayons x en hydroxyapatite de calcium cristallisé et diminuent fortement ou empêchent la formation des dépêts de phosphate de calcium.Bien que certains polyphosphates minéraux en- pêchent aussi la croissance cristalline aussitôt après adminis- tration à un animal, ils sont hydrolysés en orthophosphate qui n'a pas de propriété d'inhibition de la croissance des cristaux et qui peut lui-même prendre part à la formation d'hydroxylapati- te. Les polyphosphonates de l'invention sont par ailleurs stables & l'hydrolyse et restent actifs après administation même å des animaux importants comme le bétail. Test d'inhibition de la croissance des cristaux. L'efficacité des polyphosphonates conformes à l'invention pour empScher la croissance des cristaux est démontrée par le test d'inhibition de la croissance des cristaux, test qui .at effectué comme suit On dilue 1 ml d'une solution 0,1 M de NaH2PO4, H20 avec 22 ml d'eau distillée. On ajoute 1 ml d'une solution aqueuse du polyphosphonate à tester (d une concentration suffisante pour fournir la concentration finale désirée dans le mélange réactionnel) à la solution diluée de NaH2PO4 et on ajuste la solution à pff 7,4 au moyen de soude. On ajoute à cette solution 1 ml d'une solution 0,1 M de CaCl2, 2H20 préajustée à pff 7,4 au moyen de sou- de.On maintient ce mélange à un pH constant de 7,4 pendant toute la période de réaction. Après une durée de réaction suffisante déterminée par l'o pérateur, en général inférieure & 90 minutes, on filtre la solution & travers un papier filtre Millipores de 0,45 . On sèche à l'air le précipité et on l'analyse par diffraction aux rayons X Le phosphate de calcium solide précipité à partir de la solution décrite ci-dessus sans polyphosphonate donne un diagramme typique d'hydroxylapatite, alors que le phosphate de calcium précipite dans les mêmes conditions mais en présence de petites quantité des polyphosphonates conforme; à l'invention est amorphe aux ra yons I. Les composés qui sont efficaces pour empêcher la croissance des cristaux d'hydroxyapatite à des concentrations inférieures & 1,5 x 10 3 X dans les conditions de ce test ont empêché l'accumulation anormale et le dépôt des phosphates de calcium dans les tissus animaux, alors que plusieurs composés n'appartenant pas à l'invention et ayant peu ou pas d'effet dans ce test sont inefficaces in vivo. Le tableau 2 ci-dessous donne la concentration des divers polyphosphonates préférés nécessaires pour empêcher la formation d'hydroxyapatite de calcium dans les conditions spécifiées cidessus. Tableau 2. Concentration molaire Composé. d'inhibition Hydroxy-1-éthanediphosphonate-1, 1-trisodique 2,00 x 10-4 Méthanediphosphonate trisodique 1,82 r 10-4 Hydroxyméthane diphosphonate disodique 2,04 x 10-4 Ethane triphosphonate-1,1,2 tétrasodique 2,00 x 10-4 Propane tétraphosphonate-1,1,3,3-hexasodique 1,16 x Acide amino-1-éthane diphosphonique-1,1 1,00 x 10-4 Dichlorométhane diphosphonate trisodique 2,00 x 10-4 Acide nonene diphosphonique-5,5 2,00 x 10-4 Acide n-pentane diphosphonique-1,1 2,00 x 10-4 Acide dibromométhane diphosphonique 5,04 x Carboxy-2-éthane diphosphonate-1,1 tétrasodique 2,26 x 10-4 Nonane diphosphonate-1,1 disodique 2,01 x 10-4 Phényl-3-diphosphono-1, 1-propène-2, sel disodique 2,04 x 10-4 Hydroxy-1-propane triphosphonate-1,1,3 pentasodique 1,02 x 10-4 Tableau 2 (suite) concentration mo- Composé laire d'inhibition Hydroxy-1-éthane triphosphonate-1,1,2 pentasodique 1,13 x Hydroxy-2-4thane triphosphonate-1,1,2-pentasodique 1905 x Acide aminoéthane diphosphonique 2,00 x 10-4 Acide hydroxy-cyclohexylméthane diphosphonique 5,00 x Phénylaminoéthane diphosphonique 2,60 x 10-5 Acide N,N-diméthylaminoéthane diphosphonique 5,00 x 10-5 Acide N-(hydroxy-2-éthyl)-aminoéthane diphosphonique 5,20 x 10-5 Acide N-acétylaminométhane diphosphonique 5920 x Acide propane triphoaphonique-1,2,3 2,32 x 10- Acide butane tétraphosphonique-1,2,3,4 2,04 x 10-4 Acide hexane hexaphosphonique-1,2,3,4,5,6 2,22 x 10-4 La présence des quantités spécifiées des polyphosphonates au tableau 2 dans les solutions testées dans le test d'inhibibion de croissance des cristaux conduit & la formation d'un phosphate de calcium amorphe plutôt qu'à celle d'une hydroxyapatite de calcium cristalline comme c'est le cas avec le polyphosphonate et la formation totale d'orthophosphate de calcium est fortement diminuée. Le pouvoir des polyphosphonates de l'invention d'empêcher la calcification anormale a été aussi démontré in vivo comme suit Ce test est basé sur l'observation que des doses massives de vitamine D3 produisent une calcification importante dans l'aorte des rats voir Gillman et col. d, Exp. Path 40,1 (1960) On a divisé au hasard des rats Wixtar femelle pesant chacum 150 & 200 g en un groupe témoin de 60 animaux et en des groupes contenant chacun 10 animaux testés. Les animaux ont été maintenus dans une pièce thermostabilisée à 220C et ont reçu un régime normal et de l'eau du robinet ad libitum pendant tout le test.On a donné à tous les animaux des doses quotidiennes de 75.000 unités kg de vitamine D3 par un tube stomacal pendant 5 jours, en commen- çant le troisième jour et en finissant le 7 ème jour du test. En commençant le premier jour (avant la première dose de vitamine D33 jusqu'à la fin du test, on a administré aux groupes d'animaux tes- tés des dosages spécifiés de divers polyphosphonates respectivement par voie buccale par tube stomacal et par voie sous-cutanée une foie par jour. Dans chaque cas, les polyphosphonates ont été dissous dana une solution de NaCl & 0,9 % lorsqu'ils ont t administrés & la plus faible dose, et dans l'eau distillée lorsqu'ils ont été administrés aux doses supérieures.La solution a été ajustée & pH 7,4 et la quantité de solution administrée était de 2 ml/kg de poids. Le 15ème jour les animaux ont été sacrifiés et leur sortes ont été disséquées et séchées pendant 48 heures à 120 C. Après détermination du poids sec, les sortes ont été réduifes en cendres dans un four à moufle & 80000 pendant 6 heures. On a dissous le résidu dans HGl 0,2 N et on a titré le calcium au moyen de EDTA en utilisant du calcichrome comme indicateur dans un photomètre de titrage, selon les méthodes décrites par Irving et Col., Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 122, 3, 852 (1966). Les résultats de l'administration de polyphosphonates représentatifs conformes à l'invention sont consignés dans le tableau 3 ci-dessous. Tableau 3 Composé Dose Mode d'admi- Calcium dans mg/kg nistration l'aorte /mg Ca/ % de mg d'a- dimi orte nution sèche Méthane diphosphonate disodique 3,55 buccale 21 69,1 35,5 " 3 95,6 3,55 sous-cutanée 21 69,1 35,5 " " 2 97,1 Dichlorométhane diphosphonate disodique 4,66 buccale 43 36,8 46,6 " 2 97,1 4,66 sous-cutanée 5 92,6 46,6 " " 4 94,1 Amino-1-éthane diphosphonate-1,1 disodique 3,99 buccale 46 32,4 39,9 " 47 30,9 3,99 sous-cutanée 15 77,9 39,9 " " 4 94,1 Hydroxyméthane diphosphonate disodique 3,81 buccale 66 2,9 38,1 " 55 19,1 3,81 sous-cutanée 5 92,6 38,1 " " 5 92,6 Tableau 3 (suite) Composé Dose Mode d'admi- Calcium dans mg/kg nistration l'aorte gCa/ % de mg d'a- dimi orte sè nution che Hydroxy-1-éthane diphosphonate- : : s 1,1 disodique : 4,04 buccale : 61 :10,3 40,4 " 3 95,6 s 4,04 sous-cutanée 18 :73,5 40,4 " " 2 97,1 Hydroxy-1-éthane triphosphonate 1,1,2-tétrasodique : 4,02:buccale t 64 t 5,9 40,2 " : 54 :20,6 4,02 sous-cutanée 70 s40,2 : " " : 19 72,1 Propane tétraphosphonate-1,1,3,3 hexasodique : 4,00:buccale : 41 :39,7 :40,0 : " s 58 14,7 4,00 sous-cutanée 39 42,8 40,0 : " " : 11 :83,8 Témoin 0 68 Les taux de calcium et les pourcentages de diminution consignés dans le tableau ci-dessus sont des moyennes sur les valeurs établies pour chacun des 10 animaux dans le groupe particulier, sauf la valeur témoin qui est basée sur 60 animaux. Un second groupe témoin de 20 animaux normaux traités a été utilisé pour établir le taux de calcium de l'aorte dans des animaux normaux bien portants et il s'est élevé à 7 g Ca/mg de poids sec d'aorte. On peut voir que plusieurs compositions représentatives conformes à l'invention diminuent sensiblement la calcification induite par la vitamine D3 dans l'aorte des rats. Exemple I On a préparé des capsules par les méthodes habituelles comprenant les produits suivants Constituant mg/capsule Acide hydroxy-1-éthane diphosphonique-1,1 350,00 Amidon 55,60 Constituant (suite) mg/capsule Lauryl sulfate de sodium 2,90 Les capsules précédentes administrées par voie buccale 2 fois par jour diminuent sensiblement la décalcification des os chez un animal pesant environ 70 kg atteint d'ostéoporose.On obtient des résultats semblables en utilisant dans la capsule précédemment décrite, & la place de l'acide hydroxy-1-éthane diphosphonique-1,1 les acides suivants :méthane diphosphonique, dichlo rométhane diphosphonique, hydroxypéthane diphosphonique, amino-1éthane diphosphonique-1,1, phénylaminométhane diphosphonique, N,Ndiméthylaminométhane diphosphonique, N-(hydroxy-2-éthyl)-aminométhane diphosphonique, N-acétylaminométhane diphosphonique, amino méthane diphosphonique, hexaneheraphosphonique-1,22,3,4,5,6 et hydroxy-1-pentène-4-diphosphonique-1,1. Exemple II On prépare par les méthodes habituelles des comprimés formulés conme suit t Constituant mg/comprimé Acide méthane diphosphonique 25,00 Lactose 40,00 Amidon 2,50 Stéarate de magnésium 1,00 Administrée par voie buccale 4 fois par jour, la compo- sition précédente diminue notablement la formation des calculs rénaux ches des moutons en sevrage pesant environ 50 kg, ayant une prédisposition & cette formation. On obtient des résultats semblables avec des comprimés formulés comme ci-dessus mais en remplaçant l'acide méthane di phosphonique par le sel disodique de l'acide hydroxy-1-éthane diphosphonique-1,1, le sel trisodique de l'acide méthane diphosphonique, le sel disodique de l'acide hydroxy-méthane diphosphonique, l'acide amino-méthane diphosphonique, le sel monocalcique de l'a- cide dichlorométhane diphosphonique, l'acide naphtylaminométhane diphosphonique, l'acide cyclohexylméthane diphosphonique, l'acide hydroxy-oyclobutylmOthane diphosphonique, l'acide propane triphos phonique-1,2,3, le sel pentasodique de l'acide propane triphospho nique-1,2,3, le sel pentasodique de l'acide butane tétraphosphoni que-1,2,3,4, le sel de monoindium de l'acide hydroxy-1-octadécène 9-diphosphonique-1,1, le sel monostanneux de l'acide hexadecane diphosphonique-1,1 et l'acide propahe diphosphonique-1,1. Le lactose utilisé dans cet exemple est remplacé par le sucrose et le stéarate de magnésium par la carboxyméthylcellulose sodique sans modification des propriétés du comprimé. On prépare des compositions supplémentaires pour comprimés conformes à l'invention comme suit t mg/comprimé Constituant Ex. III IV V VI VII VIII IX Ethane triphosphonate-1,1,2 tétrasodique 80,0 Hydroxy-1-propane triphos phonate-1,1,3 pentasodique 100,0 Propane tétraphosphonate-1, 1,3,3 de dimagnésium 120,0 Hydroxy-1-éthane diphospho nate-1,1 trisodique 50,0 25,0 Hydroxy 1,1 trisodique 85,0 25,0 nate-1,1 trisodique 85,0 25,0 Acide nonane diphosphonique 5,5 30,0 Lactose 97,0 31,0 31,0 73,0 97,0 30,0 30,0 amidon 45,0 13,0 13,0 57,0 45,0 Acide stéarique 6,0 Tale 35,0 6,5 6,5 9,0 35,0 5,0 5,0 Stéarate de calcium 1,0 1,0 1,0 1,0 Ethylcellulose 16,0 16,0 15,0 15,0 On prépare des solutions pour administration parentêrale en dissolvant les phosphonates suivants dans de l'eau distillée à la concentration spécifiée, en ajustant le pH à 7,4 avec la ba- se correspondant à la forme saline indiquée, ou à la soude dans le cas des acides et en stérilisant le tout par les techniques normales de stérilisation. Exemple. Phosphonate Conc. mg/ml X Hydroxy-1-éthane diphosphonate-1,1 disodique 10,0 XI Hydroxy-1-éthane diphosphonate-1,1 monopo tassique 15,0 XII Hydroxy-1-éthane diphosphonate-1,1 de di ammonium 5,0 XIII Hydroxy-1-éthane diphosphonate-1,1 de bis Exemple. Phosphonate (suite) Conc. mg/ml (triéthanolammonium) 25,0 XIV Propane diphosphonate-2,2 disodique 13,0 XV Carboxy-2-éthane diphosphonate-1,1 de diammonium 18,0 XVI Acide n-pentane diphosphonique-1,1 8,0 XVII n-nonane-diphosphonate-1,1 disodique 24,0 XVIII Phényl-3-diphosphone-1,1-propène-2 6,0 XIX Hydroxy-1-propane triphosphonate-1,1,3 de monoammonium 17,0 XX Hydroxy-2-éthane triphosphonate-1,1,3 de monomagnésium 23,0 XXI Acide diphényl-1,3-propane diphosphonique-2,2 8,0 XXII Acide propane triphosphonique-1,2,3 25,0 Les solution des exemples précédents, administrées par injection à des animaux, en quantité suffi@ar@ pour donner les doses désirées commo spécifié précédemment, diminuent sensiblement la calcification pathologique et la déminéralisation des tis sus durs.Les solutions sont de préférence amballées dans des ampoules scellées pour des injections hypodermiques à dese unique. Exemple XXIII On prépare une composition nutritive complète selon la présente invention en broyant et en mélangeant les composés suivants: Composant Parties en poids Soin Tirothy 960 alfa déshydraté 40 mals jaune 500 amidon de blé 310 sel iodé 10 farine d'os 20 sel marin 2 farine de soja 30 biuret 28 hydroxy-1-éthane diphosphonate-1,1 disodique .694 Cette composition est donnée à des bouvillons en sevrage de 180 kg à raison de 5,4 kg environ par jour. La dose moyenne de polyphosphonate mise en jeu de cette manière est de 1,8 g environ par jour; les animaux soumis à cette expérience de nutrition subissent une urolithiase sensiblement inférieure à celle d'ani maux témoinsrecevant la même nourriture sans polyphosphonate. On obtient des résultats semblables avec un concentrat formulé comme ci-dessus mais en remplaçant l'hydroxy-1-éthane di phosphonate disodique par l'acide méthane diphosphonique, le méthane diphosphonate trisodique, l'hydroxy-méthane diphosphonate disodique, l'acide aminométhane diphosphonique, le dichlorométhane- ne diphosphonate monocalcique, 11 acide naphthylaminométhane diphosphonique, l'acide propane triphosphonique-1,2,3, le butane té- traphosphonate-1,2,3,4 pentasodique, l'hydroxy-1-octadécène-9-diphosphonate-1,1 de monoindium, l'hexadécane diphosphonate-1,1-monostanneux et l'acide propane diphosphoniQue-1,1. Exemple XXIV On prépara un concentrat nutritif supplémentaire en sé- langeant intimement les composés suivants : Composant Partie. en poids Biuret 400 Grains séchés de brasserie 25 Alfa déshydraté 43 Sel iodé 10 Phosphate tricalcique 2 Acide méthane diphosphonique 4 Cette composition est utilisable pour mélange avec le fourrage ensiloté, le foin en graine, les grains broyés etc. pour préparer des compositions nutritives totales pour les ruminant. Administrée à de jeunes moutons paissant à raison de 0,11 kg par jour, cette matière nutritive supplémentaire diminue fortement l'incidente de l'urolithiase. On obtient des résultats semblables avec un concentrat nutritive formúlé comme ci-dessus mais en replaçant l'acide méthane diphosphonique par l'hydroxy-1-éthane diphosphonate-1,1 disodique, le méthane diphosphonate trisodique, l'hydroxyméthane diphosphonate disodique, l'acide aminométhane diphosphonique, le dichlorométhane diphosphonate monocalcique, l'acide naphthylamino- méthane diphosphonique, l'acide propane triphosphonique-1,2,3, le butane tétraphosphonate-1,2,3,4 pentasodique, l'hydroxy-1-octadé cène-1-diphosphonate-161 de monoindium, l'hexadécare diphosphona- te-1,1 monostanneux et l'acide propane diphosphonique-1,1. REVEND I CAT IONS le A titre de produit industriel nouveau une composition pour empêcher le dépôt dt l'accumulation du phosphate de calcium dans les tissus animaux comprenant une quantité efficace mais non toxique d'un polyphosphonate de formules dans lesquelles R1 et R2 sont de l'hydrogène ou un groupe CH2OH, n est un entier de 3 à 10, R3 est de l'hydrogène, un groupe alcoy le contenant de 1 à 20 atomes de carbone environ, cycloalcoyle contenant de 3 t 6 atones de carbone environ, alcényle contenant de 2 & 20 atones de carbone environ, aryle, phényléthényle, ben style, un halogène, un groupe amino, amino substitué, -CH2COOH, -CH2-PO3H2, -CH(PO3H2) (OH), ou -CH2-CH(PO3H2)2;R4 est de l'hy drogèn, un groupe alcoyle inférieur, amine, benzyle, halogène hydroxyle, -CH2COOH, -CH2PO3H2, ou -CH2CH2PO3H2 et leurs sels pharmaceutiquement acceptables et un support pharmaceutique. 2. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide dichlorométhane diphosphonique. 3. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide hydroxy-1-éthane diphosphonique1,1. 4. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide hydroxyméthane diphosphonique. 5. La composition selon la revendication 1 dans laquelle' le polyphosphonate est l'acide amino-1-éthane diphosphonique1,1. 6. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide méthane diphosphonique. 7. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide hydroxy-1-éthane triphosphonique-1,1,2. 8. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide propane triphosphonique-1,2,3. 9. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide butane tétraphosphonique-1,2, 3,4. 10. La composition selon la revendication 1 dans laquel le le polyphosphonate est L'acide hexane hexaphosphonique-1,2,3, 4,5,6. 11. La composition selon la revendication 1 dans laquelle le polyphosphonate est l'acide phénylaminométhane diphosphonique. 12. Une composition nutritive pour animaux comprenant une faible proportion d'un polyphosphonate selon les revendications 1 à 11 et une proportion importante de matière nutritive pour animaux. 13. Une composition pharmaceutique à dose unitaire comprenant de 15 mg à 10 g d'un polyphosphonate selon les revendications 1 à 11 et leurs sels pharmaceutiquement acceptables et un support pharmaceutique.