Brevet FR2001727A1 — publié le 19691003

La présente invention a pour objet un procédé d'obtention d'antitoxines destinées aux diagnostics sérologiques/ qui permet leur conservation durant quelques années à la température ambiante (jusqu'à +50°C)/ sans qu'elles perdent leur propriété sérologique. Les procédés connus de conservation des propriétés sérologiques des antitoxines, consistent à stocker ces dernières à l'état congelé, ou desseché, ou sous forme d'antitoxines stérilisées, à l'état liquide. Les antitoxines stockées dans des congélateurs, peuvent être détériorées après plusieurs décongélations dûes, par exemple, à un prélèvement partiel d'antitoxines, ou à des pannes du congélateur. Par contre, le stockage d'antitoxines à l'état sec (lyophilisé) exige l'utilisation d'un appareil de lyophilisation garantissant une faible teneur en humidité des préparations désséchées. L'humidification des antitoxines lyophilisées provoque la chute de leur activité sérologique, notamment l'humidification à l'air libre. Après dissolution, les antitoxines lyophilisées présentent tous les inconvénients des antitoxines liquides. Enfin, le stockage des antitoxines à l'état liquide exige leur stérilisation ainsi que leur conservation, à une température constante de + 4°C +6°C. L'addition de produits antiseptiques selon ce mode de conservation, ne garantît pas la protection des antitoxines en cas d'infection par des micro-organismes. Ce mode de conservation assure aux antitoxines une garantie de 6 mois. Un autrë procédé connu est la conservation des antitoxines sous forme de gouttelettes sèches (cartes d'Eldone), mais ce procédé est différent de celui de l'invention. L'invention se propose de mettre au point un procédé d'obtention d'antitoxines sous forme stable, thermostabiles, réfractaires aux infections par les mi-cro-organismes, ainsi qu'aux effets de l'air ambiant, tout en leur assurant une activité sérologique convenable. Le but de l'invention est d'obtenir un procédé qui permettra de préparer un stock d'antitoxines de test pouvant subsister quelques années à la température ambiante. Le but proposé a été réalisé par l'élaboration d'un procédé consistant en la préparation des antitoxines selon des modes connus,leur lyophilisation et leur broyage en poudre ; ensuite, 1 ml de résidu sec d'antitoxines est dissous dans une quantité de 0,10 à 1,00 ml de glycérol, après quoi, on lyophilise, et on obtient une solution d'albumine d'antitoxines thermostabile, à activité sérologi- 03068 2 2001727 que stable. Selon le procédé suivant l'invention, on obtient une solution glycé-rolique d'albumine dans laquelle l'albumine n'est pas dénaturée et les immuno-globulînes restent actives. Les antitoxines réfractaires aux micro-organismes sont conservées sans 5 prendre garde à leur stérilité et leur propriété sérologique est conservée. L'invention est illustrée par l'exemple suivant : Après lyophilisation, le résidu sec de 1 ml d'antitoxines du système ABO, est dissous dans 0,33 ml de glycérol, et on obtient ainsi une solution thermostabi-le (jusqu'à environ + 50°C), dont l'activité sérologique peut durer plusieurs an-0 nées. L'intérêt technique et économique du procédé selon l'invention, consiste en la possibilité de préparer des stocks d'antitoxines de test thermostabil es étalon, sans les conserver dans des congélateurs ou des armoires frigorifiques. Un autre intérêt dudit procédé réside en la possibilité d'éliminer les pertes dues à la mau-15 vaise qualité des antitoxines sous la forme présentée jusqu'à présent, d'une part, et d'autre part, il est possible d'effectuer des essais sérologiques durant quelques minutes, dans n'importe quelles conditions. La dissolution d'antitoxines dans du glycérol arrête les réactions chimiques provoquant une chute d'activité des antitoxines, et, simultanément, elle permet 20 d'obtenir une solution anhydre thermostabile, réfractaire aux infections par les micro-organismes. La quantité de glycérol dissolvant l'antitoxine sèche, est fonction de la nature des antitoxines et de leur application. Le procédé selon l'invention peut être appliqué à des systèmes antigèni-ques divers. 25 Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux termes de la description qui précède, mais elle en comprend, au contraire, toutes les variantes à la portée d'un homme de métier. 6903068 3 2001727 REVENDICATIONS 1 °/ Procédé d'obtention d'antitoxines utilisées pour les diagnostics sérologiques, caractérisé en ce qu'après lyophilisation, on dissout 1 ml de résidu sec d'antitoxines dans une quantité de 0,10 à 1,00 ml de glycérol, à la suite de quoi on obtient une solution d'albumine d'antitoxines thermostabile, à activité sérolo-5 gique stable. / 2°/ Variante du procédé selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'on ajoute à 1 ml d'antitoxines liquides, de 0,10 à 1,00 ml de glycérol, après quoi on lyophilise, et l'on obtient une solution à activité sérologique stable. 3°/ Procédé selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'on ob- 10 tient une solution glycérolique d'albumine, dans laquelle l'albumine n'est pas dé-donc naturée/fes immuno-globulînes sont actives. 4°/ Procédé selon les revendications de l à 3, caractérisé en ce que les antitoxines réfractaires aux micro-organismes sont conservées, en leur assurant leurs propriétés sérologiques sans prendre garde à leur stérilité.