Brevet FR2009737A1 — publié le 19700206

La présente invention a' pour ob,}et la.:2-bromo-a-. ergokryptine répondant à la formule I 0 H?CX/CH> CH (I) 5 et ses sels, à titre de produits industriels nouveaux, ainsi que les procédés et les moyens propres à la préparation de ce composé et de ces sels et l'application thérapeutique du composé ou d'un sel approprié, à titre de principe actif d'un médicament. Selon le procédé de 11 invention, pour préparer la 2-0 .bromo-a-ergokryptine et ses sels d'addition d'acides, on brome 1'ergokryptine, dans un solvant inerte, au moyen d'un: agent de bromuration doux, tel que le N-bromo-phtalimide, le N-bromo-succinimide ou le N-bromo-caprolactame, on purifie la 2-bromo-a-ergokryptine ainsi obtenue et, le cas échéant, on la transforme 5 ensuite en ses sels par réaction avec des acides minéraux ou organiques. * Un mode d'exécution préféré du procédé de l'invention consiste à dissoudre 1'ergokryptine dans un solvant inerte et à ajouter un agent de bromuration doux dans un solvant inerte. 0 Comme agents de bromuration appropriés, on citera en premier lieu les amides ou imides d'acides carboxyliques ou sulfoniques alipha-tiques ou aromatiques halogénés à l'azote, comme par exemple le N-bromo-phtalimide, le N-bromo-succinimide ou le N-bromo-capro-lactame (de 1 à 5 moles) ou un complexe brome-dioxanne (à 0,5 i5 mole de Br2). On effectue la bromuration de préférence dans un solvant 17587 2 2009737 polaire inerte, tel que le dioxanne, 1'acétonitriie ou le chlorure de méthylène, à une température comprise entre io et 80°. On purifie la 2-bromo-a-ergokryptine brute ainsi obtenue selon des méthodes connues, par exemple par chromatographie 5 et/ou par recristallisation. La 2-bromo-a-ergokryptine-est une substance"cristallisée à la température ambiante qui forme,avec de£ acides minéraux ou organiques, des sels stables et cristallisés à la température ambiante. Comme acides appropriés pour la formation dé sels, on 10 utilisera par exemple des acides minéraux, tels que l'acide chlor&ydrique, l'acide bromhydrique ou l'acide sulfurique, ou des acides organiques, tels que l'acide oxalique, l'acide tartrique, l'acide méthane-sulfonique etc.. Les exemples suivants illustrent la présente invention 15 sans aucunement en limiter la portée. Les température sont toutes exprimées en degrés centigrades et sont données corrigées. EXEMPLE 1: 2-bromo-a-ergokryptine A une solution agitée et chauffée à 60° de 9,2 g 20 d'ergokryptine dans 180 ml de dioxanne anhydre, on ajoute goutte à goutte, dans l'obscurité et en l'espace de 5 minutes, une solution de g de N-bromo-succinimide dans" 60 ml de dioxanne anhydre. On agite le mélange réactionnel pendant 70 minutes à la même température et on le concentre jusqu'à une consistance siru-25 peuse dans un évaporateur rotatif et à une température du bain de 50°. On dilue ensuite avec 300 ml de chlorure de méthylène, on recouvre d'environ 200 ml d'une solution de carbonate de sodium'2N dans une ampoule a décante, et on agite convenablement. On extrait ensuite la phase aqueuse à trois reprises avec chaque jJO fois 100 ml de chlorure de méthylène. On lave" les phases organiques réunies une fois avec 50 ml d'eau, on sèche sur sulfate de sodium et on chasse le solvant sous pression réduite,; On chromatographie la mousse brune restante sur cinquante fois sa quantité d'alumine d'activité II-III en utilisant du chlorure de méthylène 55 à 0,2^ d'éthanol comme éluant, la 2-bromo-a-ergokryptine étant > éluée immédiatement après une tache secondaire qui se déplace un 69 17587 3 2009737 peu plus rapidement. En plus de la 2-bromo-a-ergokryptine, les dernières fractions contiennent encore des quantités variables de produit de départ que l'on peut soumettre directement, eomme fractions mixtés, à une bromuration ultérieure selon la méthode 5 décrite ci-dessus. On réunit les fractions pures et on les cristallise dans un mélange de méthyl-éthyl-cétone et d'éther isopro-pylique. Point de fusion: 215-218° (avec décomposition), [a]^°= -195° (c = 1 dans le chlorure de méthylène). Identification par chromatographie sur papier: 10 Phase stationnaire: 25$ de formamide Phase mobile: mélange à parts égales d'éther et de tétra chlorure de carbone Valeurs Rf: 2-bromo-a-ergokryptine: 0,88 a-ergokryptine: 0,70. 15 Le méthane-sulfonate fond .à 192-I960 avec décomposition après PO cristallisation dans la méthyl-éthyl-cétone, [o]D = +95° (c = 1 dans un mélange à parts égales de méthanol et de chlorure de méthylène). EXEMPLE 2: 20 2-bromo-a-ergokryptine On ajoute une solution de 9#2 g d1ergokryptine dans 200 ml de dioxanne anhydre à une solution de 5*1 g de N-bromo-caprolactame dans 300 ml de dioxanne et on agite le mélange réactionnel foncé ainsi obtenu pendant 6 heures à la température • 25 ambiante. Après évaporation du mélange réactionnel, on opère de la manière décrite à l'exemple 1. On chromatographie la mousse restante sur cinquante fois sa quantité de gel de silice en utilisant du chlorure de méthylène à d'éthanoi comme éluant. On obtient ainsi le composé cité dans le titre immédiatement à 30 l'état pur. Les données physico-chimiques correspondent à celles indiquées à l'exemple 1. EXEMPLE 3: 2-bromo-a-ergokryptine^ On ajoute une'solution de 92,5 mg d'ergokryptine dans 2 ml de dioxanne anhydre à une solution de mg de N-bromo- 35 phtalimide dans 2 ml de dioxanne et on agite le mélange réactionnel foncé ainsi obtenu pendant 6 heures a la température ambiante. Après évaporation du mélange réactionnel, 69 1.7587 4 2009737 on opère de la manière décrite à 1'exemple 1. On chromatographie la mousse restante sur cinquante fois sa quantité de gel de silice en utilisant du chlorure de méthylène à d'éthanol comme éluant. On obtient ainsi le composé cité dans le titre 5 immédiatement à l'état pur. Les données physico-chimiques correspondent à celles indiquées à l'exemple 1. EXEMPLE 4: . 2-bromo-a-ergokryptlné On ajoute une solution de 922 mg d'ergokryptine dans 10 l8 ml de dioxanne anhydre à une solution de 0,04 ml de brome dans 6 ml de dioxanne et on agite le mélange réactionnel foncé ainsi obtenu, pendant 2 heures à la température ambiante. Après évaporation du mélange réactionnel, on opère de la manière décrite à, 1.'exemple I. On chromatographie la mousse restante sur 15 cinquante fois sa quantité de gel de silice en utilisant du chlorure de méthylène à ~yjo d'éthanol comme éluant. On obtient ainsi le composé cité dans le titre immédiatement à l'état pur. Les données physico-chimiques correspondent à celles indiquées à. l'exemple 1. 20 La 2-bromo-a-ergokryptine et ses sels acceptables du point de vue pharmaceutique inhibent la sécrétion de l'hormone lutéotrope (prolactine), ils exercent une action inhibitrice sur la fertilité et se distinguent d'autres représentants similaires du groupe de l'ergotoxine, par exemple 1'a-ergokryptine ou l'ergo 25 cornine, d'une part par une plus grande spécificité d'action, et d'autre part par une meilleure tolérance. La 2-bromo-a-ergokryptine et ses sels peuvent être utilisés, par conséquent, en gynécologie. La dose quotidienne à administrer sera comprise entre environ 2 à 20 mg. 30 Les propriétés de la 2-bromo-a-ergokryptine peuvent être mises en évidence de la manière suivante: 1) Inhibition_de_la__fertilité On garde dans une cage pendant 19 jours, deux rates fertiles (un animal d'essai et un animal témoin)chacune avec un 35 rat mâle d'élevage. Le 5ème, le lOème et le 15ème jour de l'essai on injecte aux rates, par voie sous-cutanée, la substance à 69 17587 5 2009737 essayer, respectivement le solvant destiné à dissoudre la substance. Le 19ème jour, on sacrifie les animaux et on examine à la loupe les' cornes utérines pour déterminer les implantation ou* les résorptions. Chaque groupe posologique comporte 11 animaux 5 d'essais et autant de témoins. Pour évaluer les résultats, on exprime la diminution de la fertilité chez les animaux d'essais en $ par rapport à la fertilité des animaux témoins considérée comme 100$. On répète les essais avec des doses. différentes afin d'établir la relation dose-effet et de déterminer une DE,-,.. pO 10 Les résultats d'une telle série d'essais sont rassemblés dans le tableau I. Selon la méthode des probits décrite par Litchfield et Wilcoxon, J. Pharmacol. 96, 99 (1949), on peut déterminer une EE^q à partir des taux d'inhibition de la fertilité; la DE^q ainsi obtenue est de 0,75 mg/kg. 15 TABLEAUX Dose en mg/kg Inhibition de la fertilité en % Nombre de par animal gravide E foetus T Nombre de résorptions E T 0,25 0 10,3 10,3 5 8 0,5 0 10,9 11,3. 8. 10 0,65 40 11,2 10,4 4- - 8 0,75 50 12,2 9,3 0 9 0,85 55 11,6 11,3 11 6 1,0 80 12,0 10,7 • 3 9 1,25 91 12,0 10,6 1 4 2,5 100 - 10,9 0 3 20,0 100 — 11,2 0 9 30 E: animaux d'essais, T: animaux témoins 2) Mise en évidence_de_la_spécificité_de_l^inhibition_de_la fertilité Dans ce qui suit, les relations quantitatives de l'inhibition de l'implantation et de la lactation provoquée par la 35 2-bromo-a-ergokryptine ont été examinées et compai-ées à celles de l'a-ergokryptine. 69 17587 6 2009737 10 15 20 25 Pour déterminer l'inhibition de la lactation, on utilise la méthode décrite ci-après: Oh place des rates pesant entre l8o et 220 g,chacune avec un mâle d'élevage. Au bout d'environ 18.à .19 jours, c'est-à-dire juste avant les naissances, on place chaque femelle gravide dans une cuve fraîchement préparée. Par portée, on ne laisse que 8 petits à chaque mère.' A partir du premier jour, on pèse les portées chaque matin à 1 g près. Le 6ème, le 7ème ou le 8ème jour après la mise bas, on administre dans la soirée la substance à essayer par voie sous-cutanée à la mère qui allaite. Le lendemain, ( on pèse les portées le.matin et le soir, et les jours suivants uniquement le matin. Evaluation de la relation dose-effet Les jeunes animaux provenant des portées témoins, dont les mères n'ont été traitées que par le solvant, présentent à partir du jour de l'injection jusqu'au lendemain matin une augmentation de poids moyenne de 100$ à 114,2$. La différence de 14,2$ peut servir de mesure pour déterminer l'inhibition de la lactation. Une augmentation moyenne de poids de 14,2$ chez le jeune animal, à partir du matin du jour de l'injection jusqu'au premier pesage le lendemain matin, est considérée comme une inhibition de 0$ de la lactation.. Une augmentation de poids de 7,1$ seulement est considérée comme une inhibition à 50$ de la une lactation et/stagnation totale du développement de poids, durant la période en question, comme une inhibition à 100$ de la lactation. Les résultats obtenus avec la 2-bromo-a-ergokryptine et l'a-ergokryptine sont rassemblés dans le tableau II. T A B L E A U II 2-bromo-a- ergokryptine a-ergokryptine 30 Dose en Inhibition de Dose en Inhibition de mg/kg la lactation mg/kg la lactation en $ en $ 0,33 ii u il ii f ii ii h r 45" | i i i i i i - - 0,50 24 o,6o 58 35 0,75 28 - - 1,10 29 — 69 17587 7 2009737 TABLEAU II (suite) 1,70 46 1,15 71 2,50 40 1,50 69 3,80 45 2,1 89 Comme il ressort déjà du tableau 1, la 2-bromo-a-ergokryptine provoque une inhibition de la fertilité dépendant largement de la dose administrée. Le composé inhibe également la lactation en fonction de la dose administrée. Cependant, on 1° remarque que la relation dose-effet progresse plus lentement pour l'inhibition de la lactation que pour l'inhibition de la fertilité. Les valeurs de la DE^Q sont, par conséquent, différentes; après des essais répétés, on a trouvé que la est d'environ 0,7 à 0,8 mg/kg par voie sous-cutanée pour l'inhibition 15 de la fertilité et d'environ 3,5 mg/kg et plus par voie sous-cutanée pour l'inhibition de la lactation. Il est possible d'obtenir, par conséquent, une inhibition presque complète de l'implantation à des doses qui ne portent que peu de préjudice à l'approvisionnement en lait des petits. Autrement dit,, les deux 20 actions de la 2-bromo-a-ergokryptine, à savoir l'inhibition de l'implantation et l'inhibition de la lactation,dépendent d'une manière très différente des doses administrées. Pour l'a-ergokryptine, par contre, les doses qui inhibent la fertilité et la lactation sont très semblables. Dans le cas 25 de l'a-ergokryptine,les doses qui inhibent complètement l'implantation provoquent également une inhibition totale de la lactation. En revanche, la 2-bromo-a-ergokryptine présente une action inhi-bitrice spécifique sur l'implantation chez le rat. 3) Tolérance 30 a) toxicité aiguë On a déterminé la toxicité aiguë chez le lapin après administration de la substance par voie orale et intraveineuse. Le temps d'observation a été de 7 jours après une seule administration de la substance. Les résultats obtenus pour la DL^Q sont 35 indiqués dans le tableau III dans lequel figure également, à titre de comparaison, les valeurs obtenuesrpour l'a-ergokryptine. 69 17587 8 2009737 TABLEAU III Substance 2-bromo-a-ergokryptine a-ergokryptine DL^q en mg/kg (lapin) voie orale > 1000 voie intraveineuse 12,0 0,95 10 b) action émétique * Chez le chien éveillé, les alcaloïdes de l'ergot-de seigle exercent une action émétique lorsqu'ils sont administrés à certaines doses par voie parentérale. On peut provoquer le vomissement en administrant lentement, par voie intraveineuse,s 15 une DE^0 de 2,5 jug/kg d1ergotamine. L'a-ergokryptine se signale par une action identique; la est de 2,6 jïg/kg. Bien que la 2-bromo-a-ergokryptine exerce également une action émétique, sa DE50 n'est 9ue de 7,5 pg/kg. L'action émétique de la 2-bromo-a-ergokryptine est, par conséquent, 2,8 fois inférieure à celle de 20 l'a-ergokryptine et 3 fois inférieure à celle de 1'ergotamine. En comparaison des alcaloïdes connus de l'ergot de seigle,naturels ou accessibles par synthèse partielle, l'action vasotonique de la 2-bromo-a-ergokryptine est également faible. La 2-bromo-a-ergokryptine et ses sels acceptables du 25 point de vue pharmaceutique peuvent être utilisés comme médicaments, soit seuls, soit mis sous des formes médicamenteuses -appropriées pour l'administration par la voie orale, entérale ou parentérale. En vue de préparer des formes médicamenteuses appropriées, on travaille la substance active avec des excipients 30 minéraux ou organiques, Inertes du point de vue pharmacologique. Comme excipients on pourra envisager par exempleî pour des comprimés et des dragées: le lactose, l'amidon, le talc, l'acide stéarique etc.; pour des sirops: des solutions de saccharose, de sucre inverti, 35 de glucose etc.; pour des préparations injectables: l'eau, des alcools, des huiles 17587 9 2009737 végétales etc.; pour des suppositoires: des huiles" naturelles ou durcies, des cires etc.. Les préparations peuvent en outre contenir des agents de conservation, des stabilisants, des mouillants, des auxiliaires de dissolution, des édulcorants, des.colorants, des aromatisants, etc.. 17587 10 200973? REVENDICATIONS 1.- Nouveau dérivé de 11ergokryptine caractérisé en ce qu'il • répond à la formule I . _ V 15 c'est-à-dire la 2-bromo-a-ergokryptine, et les sels que ce composé forme avec des acides minéraux ou organiques. 2.- Un procédé de préparation de la 2-bromo-a-ergokryptine et de ses sels, spécifiés à la revendication 1, caractérisé en ce qu'on brome l'ergokryptine,dans un solvant inerte, au moyen d'un 20 agent de bromuration doux et, le cas échéant, qu'on transforme ensuite la 2-bromo-a-ergokryptine ainsi obtenue en ses sels par réaction avec des acides minéraux ou organiques. 3.- Un procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on utilise le N-bromo-succinimide, le N-bromo-caprolactame ou 25 le N-bromo-phtalimide comme agent de bromuration doux. 4.- Un procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on utilise le dioxanne ou 1'acétonitrile comme solvant inerte. 5.- Médicament utilisable comme inhibiteur de la sécrétion de prolactine et des états pathologiques ou physiologiques qui y 30 sont liés, caractérisé en ce qu'il contient, à titre de principe actif, la 2-bromo-a-ergokryptine répondant, à la formule I 35 (formule I voir page suivante) 10 5 (I) 69 17587 ii 2009737 10 H3C\/CH3 • CH HN. U -Br (I) ou un sel que ce composé forme avec des acides minéraux ou organiques acceptables du point de vue pharmaceutique. r