Brevet FR2007437A1 — publié le 19700109

-1- 2007437 L'invention concerne de nouveaux dérivés des mitomycines, qui sont des antibiotiques efficaces et trouvent en otitre une application dans le traitement des tumeurs. Elle concerne également leurs procédés de fabrication. 5 les mitomycines de formule : 0 10 H3C z (I) a ■! 15 où Z est un groupe méthoxy- ou amino- , T est un groupe méthoxy-ou hydroxy- et Z est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, sont des antibiotiques connus, également utilisables dans le traitement des tumeurs. Cependant ces mitomycines sont très toxiques et présentent des effets secondaires indésirables. 20 L'invention a pour objet de nouveaux dérivés de ces mitomycines, de toxicité réduite et présentant des effets secondaires atténués. On a jusqu'à présent considéré comme essentiel le rôle joué par le groupe CHgOCONELj ©n position 9, dans l'activité des mito-25 mycines de formule I ci-dessus. Cependant le remplacement de ce groupe, selon l'invention, permet d'obtenir des dérivés des mitomycines de formule I, de pouvoir antibiotique élevé, et efficaces dans le traitement des tumeurs, de formule générale : où Z est un groupe méthoxy- ou amino- ; 1 est un groupe méthoxy-, hydroxy- ou un atome d'hydrogène lorsque E^ est un hydrogène; ou 40 méthoxy- ou hydroxy- lorsque est un groupe EgCO; Z est tin hy30 0 y 8 (II) 3 2 69 1 -2- 2007437 15 20 drogène ou un groupe méthyle lorsque est un hydrogène; ou un groupe méthyle ou E2C0 lorsque E^ est- un groupe B2C0; E^ est un hydrogène ou tin groupe E2CO; et est un radical alkyle inférieur. Ces dérivés des mitomyciiies sont désignés ci-après sous la dénomination de décarbamoylmitosanes. Selon un premier mode de réalisation de l'invention, on obtient les décarbamoylmitosanes de formule générale : 0 10 CH2QH (III) où X est un groupe métboxy- ou amino-, Y est un groupe méthoxy-, hydroxy- ou un hydrogène, et Z est un groupe méthyle ou un hydrogène . Selon un deuxième mode de réalisation de l'invention, on prépare les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy- ou amino-, X est un groupe méthoxy- ou hydroxy-et Z est un groupe méthyle ou un hydrogène, en faisant réagir une mitomycine de formule I avec un agent alcalin, pour obtenir des 25 CHgOH 50 (IV) où X est un groupe méthoxy- ou hydroxy- et Z est un hydrogène ou un groupe méthyle. le groupe hydroxy- en position 7 des décarbamoylmitosanes de formule IV est transformé en un groupe 35 méthoxy- par méthylation, puis il peut être transformé en groupe amino- par réaction avec l'ammoniac. 5.. : - le brevet japonais n° 22.380/67 décrit un procédé de préparation de mitomycines de formule : 69 11086 -3- 2007437 CH20C0HH2 (V) 10 où T est un groupe méthoxy- ou hydroxy- et Z est un hydrogène ou un groupoâéthyle, selon lequel on fait réagir une mitomycine de formule I en présence d'alcali. Les décarbamoylmitosanes de formule 17 de l'invention sont obtenus en faisant réagir une mitomycine de formule Z avec un alcali de plus forte concentration, 15 ©t pendant un temps plus long, que ceux du procédé décrit dans le brevet japonais 22.380/67* Selon le deuxième mode de réalisation de l'invention, la réaction est préférablement effectuée en présence d'eau ou d'alcool «queux. Le tableau I indique les concentrations préférables 20 d'alcali et durées de réaction correspondantes. TABTiFAU I Concentration de l'alcali Durée de la réaction 0t2S 16 heures 0,52 3-4- heures 25 1,0H 2 heures On emploie de préférence le diazométhane pour méthyler les décarbamoylmitosanes de formule IV, qui sont très instables sous leur forme libre, et les convertir en décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy-, T est un groupe métho-30 xy- ou hydroxy-, et Z est un hydrogène ou un groupe méthyle. Pour effectuer la méthylation, on ajoute d'abord de la glace carbonique en excès par rapport à la quantité nécessaire pour la neutraliser, à la solution hydrolysée par l'alcali, du décaifea-moylmitosane de formule IV. La solution est ensuite concentrée 35 sous vide, et le pH du résidu est ajusté à 3,0 à 4,0 par addition d'acide. On extrait ce mélange par l'acétate d'éthyle, et l'extrait est mélangé avec une solution de méthylation comme le diazométhane dans l'éther. Sous l'effet de la méthylation, le groupe hydroxy- en position 7 du décarbamoylmitosane de formule 40 IV se transforme en groupe méthoxy-. Etant donné qu'une certaine 69 11086 -4- 2007437 quantité de mitomycine de formule I, où X est un groupe méthoxy-, se trouve présent dans la solution hydrolysée par l'alcali après la méthylation, il est nécessaire de purifier le mélange réac-tionnel après méthylation, par des moyens convenables, comme par 5 exemple par chromatographie sur gel de silice. Les décarbamoylmitosanes ainsi obtenus par méthylation correspondent aux décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy» T est un groupe méthoxy- ou hydroxy-, et Z est un hydrogène ou va groupe méthyle. Ces décarbamoylmitosanes peuvent être traités par 10 l'ammoniac pour transformer le groupe méthoxy-, en position 7» en groupe amino-, pour obtenir les 7-aï&ino-décarbamoylmitosano8 qui correspondent aux décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe amino-, Y est un groupe méthoxy- ou hydroxy- et Z est un hydrogène ou un groupe méthyle. 15 Selon le troisième mode de réalisation de l'invention, on obtient les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est tin groupe méthoxy- ou amino-, Y est un groupe méthoxy-, hydroxy- ou un hydrogène et Z est un hydrogène ou un groupe méthyle, en faisant réagir les mitomycines de formule I avec l'hydrure de lithium-20 aluminium. Au cours de cette réduction, le type du produit obtenu dépend de la nature des substituants Y et Z des mitomycines de formule I. Par exemple, les mitomycines de formule I, où X est un groupe amino-, Y est un groupe mé'thoxy-, et Z est un groupe méthyle, fournissent en"quantité prépondérante les décarbamoyl-25 mitosanes de formule III où X est un groupe ami.no-, Y est. de l'hydrogène, et Z est un groupe méthyle, ainsi que des traces de décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe amino-, Y est un groupe méthoxy- et Z est un groupe méthyle. D'autre part, les métomycines de formule I, où X est un groupe méthoxy-, 30 Y est un groupe méthoxy- et Z est un groupe méthyle, fournissent en quantité prépondérante les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy-, Y est de l'hydrogène et Z est un groupe méthyle, et seulement des traces de décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy-, Y est un grou-35 pe méthoxy- et Z est un groupe méthyle. Les mitomycines de formule I, où X est un groupe méthoxy-, Y est de l'hydrogène et Z est un groupe méthyle, peuvent fournir deux types de produits, à savoir les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy-, Y est de l'hydrogène et Z est un groupe méthyle, 40 ainsi que les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un 69 11086 -5- 2007437 groupe méthoxy-, Y est un groupe hydroxy- et Z est un groupe méthyle. Les mitomycines de formule I, où X est un groupe méthoxy-, Y est tin groupe méthoxy- et Z est de l'hydrogène, ainsi que celles où X est un groupe amino-, Y est un groupe méthoxy- et Z est 5 de l'hydrogène, fournissent les décarbamoylmitosanes de formule III, où Y est un groupe méthoxy-, Z est de 1'hydrogène, et X est un groupe méthoxy- ou amino-, selon la nature de la mitomycine de départ. Selon le troisième mode de réalisation de l'invention, on 10 dissout la mitomycine de formule I dans un solvant convenable, tel que tétrahydrofurane, éther, dioxane, diméthylformamide etc., dans lequel la réduction de la mitomycine par l'hydrure de lithium-aluminium est possible. Cet hydrure est alors ajouté à la solution de mitomycine, «n excès par rapport à la quantité né-15 cessaire pour réduire tous les groupes carbamoyles. La réaction est effectuée à température ambiante, ou entre la température du refroidissement à la glace et la température d'ébullition, pendant un temps variant entre quelques minutes et quelques heures. Après la fin de la réaction, on décompose l'hydrure en 20 excès et le composé complexe de lithium-aluminium formés, par l'acétate d'éthyle aqueux. Le mélange est ensuite oxydé par un oxydant convenable, comme par exemple une solution de nitrosodi-sulfonate, l'air, le trichlorure ferrique etc.. Par extraction du mélange réactionnel par un solvant organique et purification 25 par un moyen convenable, comme la chromatographie sur gel de silice, on obtient les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy- ou amino-, Y est un groupe méthoxy-, hydroxy- ou de l'hydrogène, et Z est de l'hydrogène ou un groupe méthyle. 30 Selon le quatrième mode de réalisation de l'invention, on obtient les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy- ou amino-, Y est un groupe méthoxy- ou hydroxy-, et Z est un groupe méthyle ou un hydrogène, en faisant réagir les mitomycines de formule I avec un alcoolate de métal alcalin 35 dans un solvant organique. Ce mode particulier de réalisation de l'invention présente l'avantage de fournir un procédé en une étape, permettant d'obtenir les produits cherchés avec un rendement élevé, et dans lequel le groupe amino- ou méthoxy-, de la position 7 de la mitomycine, n'est pas transformé en hydroxyle, 40 comme dans le procédé selon le deuxième mode de réalisation de 69 11086 -6— 2007437 10 15 20 l'invention. L'alcoolats d'alcool primaire, secondaire ou tertiaire est employé comme réactif nucléophile dans un solvant organique (tel que alcool, tétrehydrofurane, diôxane, diméthyl-formamide, benzène, etc.). La réaction est de préférence effectuée à température ambiante, pendant une durée d'environ 8 heures dans le cas du méthoxyde de sodium en solution dans le mélange méthanol-benzène, et d'environ 3 à 6 heures dans le cas d'une solution d'isopropoxyde de sodium 2N dans l'isopropanol. On ajoute de la glace carbonique en excès par rapport à la quantité nécessaire pour neutraliser la solution alcaline, puis on concentre sous vide. On extrait le résidu à l'acétone, puis on concentre et purifie le résidu, par exemple par chromatographie sur gel de silice, pour obtenir les décarbamoylmitosanes de formule III, où X est un groupe méthoxy- ou amino-, Y est un groupe méthoxy- ou hydroxy-, et Z est un hydrogène ou groupe méthyle. Selon le cinquième mode de réalisation de l'invention, on obtient les dérivés acyliques des décarbamoylmitosanes de formule générale : - 0 x. U 25 CH20C0E2 (VI) où X est un groupe méthoxy- ou amino-, Y est un groupe méthoxy-ou hydroxy-, Z est un groupe méthyle ou R2C0, et R2 est un al-kyle inférieur. 30 Selon le sixième mode de réalisation de l'invention, on obtient les dérivés acyliques des décarbamoylmitosanes de formule VI, où X, Y, Z et R2 ont la même signification que dans le cinquième mode de réalisation, selon un procédé qui consiste à acy-ler un décarbamoylmitosane de formule III, où X est un groupe 35 méthoxy- ou amino-, Y est un groupe méthoxy- ou hydroxy- et Z est un hydrogène ou groupe méthyle, pour transformer le groupe CHgOH, en position 9, en un groupe CÏÏ20C0R2, où R2 est ùn alkyle inférieur. La réaction d'acylation est effectuée en dissolvant le décarbamoylmitosane de formule III, défini, ci-dessus, dans 40 un solvant convenable, et en ajoutant un halogénure ou anhydride 69 11086 -7- 2007437 d'acide, ou eu condensant le décarbamoylmitosane avec un acide carboxylique inférieur, en présence d'un agent de condensation déshydratant, comme le dicyclohexylcarbodiimide. Un excès de base organique est ajouté au mélange pour empêcher la décompo-5 sition du produit obtenu par un acide qui pourrait se former au cours de la réaction d'acylation. Les décarbamoylmitomy®ines de formule III où X, T et Z ont la même signification que dans le premier mode de réalisation de l'invention, constituent encore des antibiotiques efficaces, 10 malgré que leur activité soit en général inférieure à celle des mitomycines de formule I. De plus ils servent d'intermédiaires dans la fabrication d'autres antibiotiques, comme par exemple les mitomycines de formule I. Le Tableau II indique l'activité antibiotique de décarbamoylmitosanes de formule III typiques. Il 15 indique aussi la concentration minimale du décarbamoylmitosane, en y/ml de solution, nécessaire pour inhiber la croissance de quatre types représentatifs de bactéries pathogènes, déterminée selon la méthode de dilution de plaque d'agar-agar. Tableau II 20 : Bacillus Sartina Eseherichia Pseudomonas x y z subtilus ATCC 6633 lutea ATCC 10011 coli ATCC 14948 aerginosa ATCC 15246 ch3o och3 h 0,78 1,58 0,195 3,125 25 ch3o och, ch3 3,125 3,125 6,25 6,25 ohjo oh ch5 >25 >25 >25 >25 ch3o h ch3 >25 >25 >25 >25 m2 och3 h 0,195 .3,125 6,25 1,56- nh2 och3 ch3 3,125 0,195 >25 >25 30 m2 h ch, 3 >25 >25 >25 >25 Le Tableau III indique l'activité antibiotique de décarbamoylmitosanes de formule VI typiques, ainsi que l'activité antibiotique des décarbamoylmitosanes de formule III.correspondants. 35 II indique aussi la concentration minimale des décarbamoylmitosanes, en % /ml de solution, nécessaire pour inhiber la croissance de deux types représentatifs de bactéries pathogènes.- è9 11086 -8- 2007437 Tableau III x t z R Bacillus subtilis atcc 6633 Escherichia coli atcc 14948 ch3o gh3o h h 0,78 0,19 ch3o ch3o cochj coch, 0,043 0,048 m2 ch^o h h 0,195 0,781 hh2 ch3o c0ch3 coch3 0,05 1,562 ch3o ch30 ch3 h 3,125 6,25 ch5o ch3o ch3 coch3 0,04 0,78 hh2 ch3o ch3 h 3,125 >25 ch3o ch3 coch3 0,048 0,78 ch3o oh ch3 h 6,25 >50 ch3o 0h ch, 3 coch, 3 0,78 12,5 10 15 20 25 30 35 40 On voit d'après le Tableau III que l'activité antibiotique des dérivés acylés des décarbamoylmitosanes de formule "VI est, en général, 10 à 50 fois plus élevée que celle des décarbamoylmitosanes de formule III.correspondants. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description détaillée qui suit et à l'examen des dessins annexés qui représentent à titre d'exemples non limitatifs plusieurs modes de réalisation de l'invention. Dans ces exemples, les produits obtenus sont identifiés par leurs spectres d'absorption dans 1*infra-rouge . Sur les dessins annexés, les figures 1 à 16 représentent les spectres d'absorption infra-rouge, (obtenus selon la méthode à la pastille de KBr) des composés suivants : N-aéthyl-7-méthoxy-9a-bydrodécarbamoylmitosane, N-méthyl-7-méthoxy-9a-hydroxydécar-bamoylmitosane, N-méthyl-7-méthôxy-9a-méthoxydécarbanioylmitosane, N-méthyl-7-amino-9a-méthoxy-décarbamoylmitosane, N-méthyl-7-amino-9a-hydxodécarbamoylmitosane, 7-niéthoxy-9a-méthoxy-décarba-moylmitosane, 7-aniino-9a-niéthoxy-déearbaiiioylmitosane, décarba-moylmitomycine a, décarbamoylméthyl-mitomycine a, décarbamoyl-mitomycine B, décarbamoylmitomycine C, décarbamoylporfiro-mitomycine, 1a-acétyl-7-méthoxy-9a-méthoxy-10-acétoxy-décarba-moylmitosane, 1a-acétyl-7-amino-9a-méthoxy-10-acétoxy-décarba-moylmitosane, 1a-méthyl-7-méthoxy-9a-méthoxy-10-acétoxy-décar-bamoylmitosane, et 1a-méthyl-7-méthoxy-9a-hydroxy-10-acétoxy- 69 11086 -9- 2007437 décarbamoylmitosane. Exemple 1 On dissout 500 mS de la mitomycine de formule I, où X = amino-» Y = méthoxy- et Z ■ H, dans 100 ml d'une solution 0,2îf de soude 5 dans le méthanol (50 % de méthanol et 50 % d'eau). Après avoir laissé reposer la solution pendant 16 heures à 30°C, on ajoute de la glace carbonique à la solution devenue pourpre«bleuâtre, pour ajuster le pH à 8,0, puis on la dessèche sous vide à plus de 40*0, poux obtenir une poudre impure. On ajoute 5 ml d'eau, 10 et on ajuste le pH à 4,0 par HC1, puis on extrait trois fois à l'acétate d'éthyle. Après déshydratation au ï^SO^, on ajoute à l'extrait un excès de diazométhane dissous dans l'éther et on laisse reposer pendant environ % heure. On sèche le mélange sous vide, et on dissout le résidu pourpre dans le chloroforme, puis 15 on le purifie par chromatographie sur gel de silice. Il se forme des bandes d'adsorption, par élution avec un mélange de chrrloroforme-acétone en volumes égaux. Les fractions du premier éluat sont concentrées pour donner une poudre amorphe pourpre, dont l'analyse par spectre infra-rouge confirme l'identité avec les 20 décarbamoylmitosanee de formule III, où ï = méthoxy-, T = métho-xy-, et Z « H, ainsi que la disparition de la bande d'absorption (à 1.700 cm"'') caractéristique du reste « 0 du groupe 0 -CHgOCHH^ . Le second éluat contient la mitomycine de départ. 25 Exemple 2 On obtient la décarbamoylmitomycine de formule III, où X = méthoxy-, T = méthoxy- et Z"« H, selon le même processus que celui de l'exemple 1, sauf que dans la mitomycine de formule I de départ, ï = amino-, Y = méthoxy- et Z = H. 30 Exemple 3 On traite comme dans l'exemple 1 une mitomycine de formule I, où X « méthoxy-, T = méthoxy- et Z = méthyle, pour obtenir, sous forme de cristaux ou aiguilles pourpres, un décarbamoylmitosane de formule III, où X ■ méthoxy-, Y = méthoxy et Z = méthyle. 35 Exemple 4 On traite comme dans 1'exemple 1, unemitomycine de formule I, où X « amino-, ï = méthoxy- et Z = méthyle, pour obtenir, sous forme de cristaux ou aiguilles pourpres, un décarbamoylmitosane de formule III, où X = méthoxy-, Y = méthoxy- et Z = méthyle. 69 11086 -10- 2007437 Exemple 5 On traite comme dans l'exemple 1, une mitomycine de formule I, où X « méthoxy-, Y = hydroxy- et Z » méthyle, pour obtenir sous forme de poudre amorph^ pourpre le décarbamoylmitosane de formule 5 III, où X = méthoxy-, Y » hydroxy- et Z = méthyle. Exemple 6 Le décarbamoylmitosane de formule III obtenu dans l'exemple 1, est dissous dans le méthanol et on ajoute de l'ammoniac en excès. Après repos à température ambiante pendant 1 heure, la solution 10 pourpre bleuâtre est concentrée sous vide, pour donner des aiguilles cristallines pourpre bleuâtre de décarbamoylmitomycine de formule III où X « amino-, Y « méthoxy- et Z « H# Exemple 7 Le décarbamoylmitosane de formule III obtenu dans l'exemple 3» 15 est traité comme dans l'exemple 6, pour obtenir sous forme de cristaux pourpre bleuâtre, le décarbamoylmitosane de formule III, où X = amino-, Y = méthoxy- et Z = méthyle. Exemple 8 On dissout 100 mg d'une mitomycine I où X « méthoxy-, Y = hy-20 droxy- et Z = méthyle, dans 10 ml de tétrahydrofurane anhydre, puis on ajoute 80 mg d'hydrure de Li - Al. On laisse réagir pendant 1 heure à température ambiante, tout en agitant, puis on ajoute de l'acétate d'éthyle pour décomposer l'hydrure en excès, ainsi que le composé complexe d'Al et de Li formé. Immédiatement 25 après, on verse le mélange dans une solution oxydante de 500 mg de nitrosodisulfonate de K, dissous dans 27 al d'éau et de 14 ml de KHgPO^, 1/6N. La couleur de cette solution vire immédiatement au pourpre bleuâtre, et on l'extrait par le chloroforme, puis on sèche l'extrait sur NagSO^ anhydre. Après évaporation du solvant, 30 le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice, un mélange de benzène-acétone-eau (8/2/5) servant d'éluant. Les premières fractions d'éluat sont réunies, et par addition d'acétone et d'éther, on y fait cristalliser des aiguilles pourpre sombre (de point de fusion « 147-149°C) de décarbamoylmito-35 sane de formule III, où X = méthoxy-, Y = H et Z = méthyle. Les fractions suivantes fournissent une poudre pourpre de décarbamoylmitosane de formule III, où X = méthoxy-, Y = hydroxy-et Z = méthyle. Les fractions pourpres, plus faibles, éluées en dernier, con-40 tiennent la mitomycine de départ. 69 110B6 2007437 Exemple 9 Par un traitement semblable à celui de l'exemple 8, sauf qu'on emploie l'air comme agent d'oxydation, on obtient des produits semblables, sauf qu'il se forme assez grande quantité d'un sous-5 produit jaune. Exemple 10 On opère comme dans l'exemple 8, sauf que le produit de départ est une mitomycine I, où Z = méthoxy-, T = méthoxy- et Z « méthyle. On purifie par chromatographie sur gel de silice, 10 un mélange de chloroforme-acétone (7/3) étant utilisé comme éluaat. Les premières fractions pourpres éluées à l'état de traces, contiennent le décarbamoylmitosane de formule III, où X = méthoxy-, Y = méthoxy- et Z « méthyle. Les fractions pourpres éluées ensuite sont additionnées d'acétone et d'éther de 15 pétrole, pour donner des cristaux pourpre sombre, en forme d'aiguilles, de décarbamoylmitosane de formule III, où X « méthoxy-, T » H et Z » méthyle, de point de fusion « 147-149°C. Exemple 11 On opère comme dans l'exemple 10, mais avec une mitomycine I 20 de départ, où X * amino-, T » méthoxy- et Z = méthyle. La première fraction pourpre, éluée à l'état de trace, contient le décarbamsylmitosane de formule III, où X « amino-, T « méthoxy-et Z = méthyle. Les fractions bleu fqjicé suivantes sont additionnées d'acétone, pour donner des cristaux en forme de prismes 25 noires, de point de fusion = 214-215°C, de décarbamoylmitosane de formule III, où X = amino-, Y « H et Z = méthyle. Exemple 12 On opère comme dans l'exemple 8, avec une mitomycine "I de départ, où X et î ■ méthoxy- et Z « H. On purifie par chromatogra-30 phie sur gel de silice, a^e&zozumélange -chloroforme-acétone (7/3) comme éluant. Les premières fractions pourpres éluées contiennent le décarbamoylmitosane de formule III, où X et Y « méthoxy- et Z = H. Les fractions pourpres suivantes contiennent la mitomycine de départ. 35 Exemple 15 On opère comme dans l'exemple 12, avec une mitomycine I de départ où X * amino-, Y = méthoxy- et Z « H. Les premières fractions pourpres éluées contiennent le décarbamoylmitosane de formule III, où X * amino-, Y = méthoxy- et Z = H. Les fractions 40 pourpres suivantes contiennent la mitomycine de départ. 69 11086 -12- 2007437 Exemple 14- On dissout 500 mg de mytomicine I, où X « amino-, Y = méthoxy-et Z = H, dans 170 ml d'une solution 28 dans le méthanol de mé-thoxyde de Ha, et on laisse reposer pendant 24 heures, en agi-5 tant à température ambiante. La solution bleu vert obtenue est additionnée de glace carbonique, jusqu'à ce que sa couleur vire au pourpre. Cette solution est concentrée à sec, sous vide, au-dessus de 40°C, poujp&onner une substance solide bleu-vert, qu'on extrait 5 fois par 60 ml d'acétone. Par concentration à sec des 10 extraits réunis, on obtient un résidu pâteux pourpre-noir, qu'on dissout dans un mélange chloroforme-acétone (1/2). Par chromatographie sur gel de silice, avec le mélange acétone-chloroforme (1/1) comme éluant, on forme une bande d'adsorption pourpre. L'é-luat de cette bande est concentré à sec, dissous dans une petite 15 quantité de méthanol et abandonné au repos à température ambiante, pour donner des aiguilles cristallines pourpres de décarbamoylmitosane de formule III, où X = amino-, T = méthoxy- et Z = H. Le spectre infra-rouge des cristaux confirme la dispari- —A tion de la bande" d'absorption (1.700 cm ) caractéristique du 20 reste ^ C = 0 du groupe _cho0CNHo * Exemple 15 On traite comme dans l'exemple 14 uiêmitomycine I où X = amino-, J = méthoxy- et Z = méthyle, pour obtenir des aiguilles cristallines pourpres de décarbamoylmitosane de formule III, où 25 X = amino-, T » méthoxy- et Z « méthyle, de point de fusion = 165-167°C. Exemple 16 On ajoute 500 mg de mitomycine I, où X * amino-, Y » méthoxy-et Z = H, à un mélange de 50 ml d'isopropoxyde de Na, 2F et de 50 85 ml d'isopropanol et on agite le mélange pendant 3 heures à température ambiante. La solution bleu-vert obtenue vire au pourpre, au repos. On la concentre à sec sous vide, au-dessus de 40°C, pour obtenir une matière solide bleu-gris qu'on extrait 5 fois par 60 ml d'acétone. Les extraits réuni s sont concentrés 35 pour donner un résidu pâteux pourpre-noir, qu'on dissout dans un mélange chloroforme-acétone (1/2). Par chromatographie sur gel de silice, avec le mélange acétone-chloroforme (1/1) comme éluant, on forme une bande d'absorption pourpre. L'éluat principal est évaporé à sec, dissous dans une petite quantité de 40 méthanol, et on laisse reposer à température ambiante pour obte M 11086 -13' 2007437 nir des aiguilles cristallines pourpres de décarbamoylmitosane de formule III, où X = amino-, Y = méthoxy- et Z = méthyle. Exemple 17 On dissout 500 mg de la mitomycine employée comme produit de 5 départ dans l'exemple 16, dans un mélange de 85 ml de méthoxyde de Na, 4N dans le méthanol et de 85 ml de benzène, et on agite pendant 8 heures à température ambiante. A la solution bleu-vert obtenue, on ajoute de la glace carbonique, et sa couleur vire au pourpre. La solution concentrée à sec Sous vide, au-dessus de 10 40°C, donne une substance solide bleu-gris, qu'on extrait 5 fois par 60 ml d'acétone. Les extraits réunis sont concentrés à sec, et le résidu pâteux pourpre-noir est dissous dans un mélange chloroforme-acétone (1/2). Par chromatographie sur gel de silice, avec un mélange chloroforme-acétone (1/1) comme éluant, on forme 15 une bande d'absorption pourpre. L'éluat principal est concentré à sec, le résidu est dissous dans une petite quantité de méthanol, et on laisse reposer à température ambiante pour obtenir des aiguilles pourpres du décarbamoylmitosane, identique à celui obtenu dans l'exemple 16. 20 Exemple 18 On dissout 1 g d'une mitomycine I, où X = méthoxy-, T = hydroxy- et Z = méthyle, dans un mélange de 50 ml d'une solution 3N de méthoxyde de Na dans le méthanol et de 50 ml de benzène, et on laisse réagir, sous agitation, pendant 20 heures à tempé-25 rature ambiante. Après la fin de la réaction, on ajoute de la glace carbonique pour neutraliser la solution, et on filtre le bicarbonate de sodium formé. Après concentration sous vide du filtrat, le résidu est traité par chromatographie, comme dans les exemples précédents. On obtient 426 mg d'une poudre amorphe 30 de décarbamoylmitosane de formule III, où X = méthoxy-, T = hydroxy- et Z = méthyle. Exemple 19 On dissout 50 mg d'un décarbamoylmitosane de formule III, où X = méthoxy-, Y = méthoxy- et Z = H, dans 0,5 ml de pyridine, 35 puis on ajoute 0,5 ml d,anhydride acétique. Après avoir laissé reposer pendant environ 1 heure à température ambiante, on verse le mélange dans de l'eau glacée pour décomposer l'anhydride-acétique, et on extrait par l'acétate d'éthyle. L'extrait est secoué avec une solution aqueuse à 10 % de NaHCO^, pour éliminer 40 l'acide acétique, puis séché sur Na2S0^ et concentré, pour donner -14- 69 11086 2007437 40 mg de poudre amorphe, qui est le décarbamoylmitosane de formule VI, où Z = méthoxy-, T = méthoxy-, Z = RgCO et Rg = méthyle. Exemple 20 On dissout 50 mg du décarbamoylmitosane de formule III, où 5 X « amino-, Y = méthoxy- et Z = H, dans 0,5 ml de pyridine, puis on ajoute 0,5 ml d'anhydride acétique et on laisse reposer pendant environ 1 heure. On verse ensuite le mélange dans de l'eau glacée et on laisse reposer pour décomposer l'anhydride acétique, puis on extrait par l'acétate d'éthyle. Après avoir secoué l'ex-10 trait avec une solution aqueuse à 10 % de NaHOO^ pour éliminer l'acide acétique, la solution d'acétate d'éthyle est séchée sur Na2S0^, puis concentrée, pour donner le décarbamoylmitosane de formule VI, où X = amino-, T = méthoxy-, Z = RgCO et Eg = méthyle. Exemple 21 15 On dissout 50 mg de décarbamoylmitosane de formule III, où X = amino-, Y = méthoxy- et Z « méthyle, dans 5 ml de tétrahydro-furane anhydre, on ajoute 1 ml de triéthylamine et 0,5 ml de chlorure d'acétyle, et on laisse reposer pendant la nuit à la chambre froide." On filtre ensuite le mélange, pour éliminer le 20 chlorhydrate de triéthylamine et on concentre le filtrat sous vide pour donner 40 mg de cristaux pourpres de décarbamoylmitosane de formule VI, où X = amino-, Y = méthoxy, Z = méthyle et R2 = méthyle. Exemple 22 25 On dissout 50 mg du décarbamoylmitosane de formule III , où X = méthoxy-, Y = méthoxy- et Z = méthyle, dans 5 ml de tétra-hydrofurane, on ajoute 50 mg de dicyclohexylcarbodiimide, 0,5 ml d'acide acétique et 0,5 ml de pyridine, et on laisse reposer pendant 12 heures à température ambiante. Après filtration du préci-50 pité de dicyclohexylcarbamide, le filtrat est concentré sous vide, et on ajoute au résidu une petite quantité d'un mélange d'éther de pétrole et d'éther, pour éliminer le dicyclohexylcarbodiimide en excès. On dissout ensuite le résidu dans l'acétate d'éthyle et on secoue avec une solution à 10 % de NaHCO^, 55 pour éliminer l'acide acétique en excès; par concentration sous vide, on obtient des cristaux pourpres de décarbamoylmitosane de formule VI, où X = méthoxy-, Y = méthoxy-, Z = méthyle et R2 = méthyle. Exemple 25 4D On dissout 50 mg de décarbamoylmitosane de formule III, où 69 11086 -15- 2007437 X » méthoxy-, Y = hydroxy- et Z = méthyle, dans un mélange de 0,5 ml de pyridine et 3 ml d'anhydride acétique, on laisse reposer pendant 30 minutes à température ambiante et on concentre sous vide pour obtenir 35 mg d'aiguilles cristallines pourpres, 5 de point de fusion « 184-186°C, de décarbamoylmitosane de formule VI, où X « méthoxy-, Y » hydroxy-, Z = méthyle et Eg = méthyle. Bien entendu, l'invention n'est nullement limitée aux exemples.décrits et représentés, elle est susceptible de nombreuses variantes accessibles à l'homme de l'art, suivant lés applica-10 tions envisagées et sans qu'on s'écarte pour cela du cadre de 1 ' invention. 69 11086 -16- 2007437 - REVENDICATIONS - 1 - Composé de formule ï CH^OK^ 10 où Z est un groupe méthoxy— ou amino—; Y est un groupe méthoxy—, hydroxyle, ou tu* hydrogène lorsque R^ est un hydrogène, ou un groupe méthoxy- ou hydroxy le, lorsque E^ = B2C0; Z est un hydro- 15 gène ou un groupe méthyle lorsque est un hydrogène, ou un groupe méthyle ou B^O lorsque = R2C0; R^ est un hydrogène ou un groupe R2C0; et R2 est un groupe alkyle inférieur, 2 - Composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que Z = méthoxy- ou amino-, T = siéthoxy- hydroxy- ou hydrogène, 20 Z * méthyle ou hydrogène et R^ = hydrogène. 3 - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que Z = méthoxy-, et T » méthoxy- ou hydroxyle. 4- - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que X = amino- et T = méthoxy- ou hydroxyle. 25 5 - Composé suivant la revendication 1, caractérisé en ee que Z = méthoxy- ou amino-, Y = méthoxy- ou hydroxyle, Z = méthyle ou E2C0, R^ = R2C0 et R2 = alkyle inférieur. 6 - Composé suivant la revendication 5 caractérisé en ce que R2 = méthyle. 30 7 - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que Z = méthoxy-, Y = méthoxy- et Z = H. 8 - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que Z = méthoxy-, Y = méthoxy- et Z = méthyle. . 9 - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que 35 Z = méthoxy-, Y = hydroxyle et Z = méthyle. 10 - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que Z = amino-, Y = méthoxy- et Z = I. 11 - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que Z = amino-, Y = méthoxy- et Z = méthyle. 69 11086 -17- 2007437 12 - Composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que X = méthoxy-, î = I et Z = méthyle. 13 - Composé suivant la revendication 2 caractérisé en ce que X » amino-, ï = H et Z = méthyle. 5 14 - Composé suivant la revendication 5, caractérisé en ce que X = méthoxy-, T = méthoxy-, Z = E2C0 et = méthyle. 15 - Composé suivant la revendication 5» caractérisé en ce que X = amino, Y « méthoxy-, Z = BgCO et E2 = méthyle. 16 - Composé suivant la revendication 5» caractérisé en ce 10 que X = amino-, T » méthoxy-, Z = méthyle et E^ » méthyle. 17 - Composé suivant la revendication 5» caractérisé en ce que X « méthoxy-, T = méthoxy-, Z = méthyle et E^ = méthyle. 18 - Composé suivant la revendication 5* caractérisé en ce que X = méthoxy-, T = hydroxyle, Z >■ méthyle et E2 = méthyle. 15 19 - Procédé de fabrication d'un composé suivant la revendication 1, selon lequel on fait réagir un composé de formule î 25 où T * méthoxy- ou hydroxyle et Z * H ou méthyle, avec un agent de méthylation. 20 - Procédé suivant la revendication 19» caractérisé en ce que le composé de formule : 0 est préparé en faisant réagir tua composé de formule 69 11086 -18- 2007437 GHgOCONHg où X = méthoxy- ou amino-, Y = méthoxy- ou hydroxyle et Z = H 10 ou méthyle, avec un agent alcalin,, 21 - Procédé suivant las revendications 19 ou 20, caractérisé en ce que l'agent de méthylation est le diazométhane. 22 - Procédé de fabrication d'un composé suivant la revendication 4, selon lequel on fait réagir un composé de formule ; 15 ch2oh 20 où Y « méthoxy- ou hydroxyle et Z » H ou méthyle, avec l'ammoniac. 25 23 - Procédé de fabrication d'un composé suivant la revendication 2, selon lequel on fait réagir un composé de formule : 30 CHgOCOHHg 35 où X « méthoxy- ou amino-, Y = méthoxy- ou hydroxyle et Z = H ou méthyle, avec l'hydrure de lithium-aluminium, dans un solvant organique, puis on fait réagir le produit obtenu avec un agent d'oxydation. 24 - Composé suivant la revendication 2 caractérisé en ce que 40 Y = méthoxy- ou hydroxyle. 69 11086 -19- 2007437 25 - Procédé de fabrication d'un composé suivant la revendication 24, selon lequel on fait réagir un composé de formule : 0 10 où X » méthoxy- ou amino-, J = méthoxy- ou hydroxyle et Z = H ou méthyle, avec un alcoolate de métal alcalin, dans un solvant organique. 26 - Procédé de fabrication d'un composé suivant la revendica-15 tion 5» selon lequel on fait réagir un composé de formule î où X = méthoxy- ou amino-, Y « méthoxy- ou hydroxyle et Z = H 25 ou méthyle, avec un agent d'acylation» 27 - Procédé suivant la revendication 26, caractérisé en ce que l'agent d'acylation est tin halogénure d'acide, et la réaction est effectuée en présence d'une base organique. 28 - Procédé suivant la revendication 26, caractérisée en ce 30 que l'agent d'acylation est un acide carboxylique inférieur, et la réaction est effectuée en présence d'un agent de condensation et de déshydratation. 29 - Procédé suivant la revendication 28, caractérisé en ce que l'agent de condensation et de déshydratation est le dicyclo- 35 hexylcarbodiimide.