Brevet FR2005110A1 — publié le 19691205

:Q L'invention est relative au procédé de fabrication l'un composé o-.'g2nicv.e du germain .es. qui peut agir- sur- des litles (?xc-ï-...°V.--s -v^nt poten* ic-i éï e'Hriqu; et en contré --.ut l'.-.v-s le net : c^ienent r co:..r-. ce r'.ti "f " combiné a?ec un acij- ë- -- C 0 - 'le ~ iu;e extrémité t .- une variante dans laquell e 1£acide cariJe cet aci.de gras est transiorné eu une amide acide. II. est dé^. bien conisu que le potentiel éîectri p.;e cen cellules anor-i:.ales d'-on corps vivant est différent de relu: des oeli'-'.1 es nornal es «, le gereani"^- dont le nombre atcaique _-st ;::â e ; lia aie....? p -v-.ar.t trende-deux électrons « Quatre élec trons etu" les treni e-detn: fcOi.t dispersés à une faible distance àa reste, soir, inyt^b" c.i; et ?;oni capables de s'échapper des autres -dans c-erlsines c étude des composants des substances végétales utilisées pour ce qu'on appelle les herbes médicinales chinoises5 dont l'efficacité est connue pour le contrôle des cellules anormales dans le corps vivant f et on a trouve qu:elles présentaient une teneur en 20 germanium très importante s par exemple 520 ppm dans le ginseng,. 257 ppia dans la chataigne d'eau* 124 ppm dans le box-thom-nui5 108 ppm dans le noeud de glycine„ 50 ppm dans l'orge perlés 58 ppm dans 1 ' érythrorhi ze ou galax., 76 ppm dans la consoude et 756 ppm dans l'ail. Ce fait semble indiquer que le germanium existe dans ces plantes sous forme de composés organiques. La présence de cette propriété du germanium et de ses caractéristiques particulières décrites précédemment ont conduit à la conclusion que si l'on pouvait trouver un composé organique du germanium qui ait la propriété d'absorber un électron 40 voisin en raison de l'échappement d'un électron et de l'apparition d'un creux positif de potentiel électrique, ce composé pourrait ^ BAD ORIGINAL t9 09416 2 2005110 être utilisé pour modifier le potentiel électrique des cellules anormales dans le corps vivant et contrôler leur fonctionnement. Vis à vis de ces phénomènes connus, l'invention concerne maintenant une substance caractérisée par ce qu'elle 5 est composée d'une combinaison du radical sesquioxyde de germaniumj de la formule suivante' s 0 = Ge «= ? 0 = Ge -10 et d'un acide gras. Suivant une caractéristique de 1'invent ion r le gi'c-upe carbcxylique de l'acide gras est transformé en un amide acide. L'invention concerne également les procédés 15 de préparation des présentes substances. L'invention concerne également l'application de la substance pour l'action sur des cellules vivantes anormales dans un organisme vivant, par modification de leur potentiel électrique pour contrôler ainsi-leur fonctionnement. 20 Des cellules traités avec des substances conformes à l'invention sont représentées,à titre d'exemple non limitatif, dans les figures ci-jointes, parmi lesquelles î - la figure 1 représente une cellule de tumeur ascitique d'Ehrlich, 25 - les figures 2a et b représentent des vues microscopiques de cellules traitées avec du sesquioxyde de bis-car boxyé tliylgermanium , - les figures 3a et b représentent une vue microscopique de cellules traitées avec du sesquioxyde de bis- 30 carbamyléthylgermaniumj - les figures 4a et b représentent des cellules traitées avec des doses plus fortes de sesquioxyde de bis-carba-mylé thylgermanium. Conformément à l'invention, on a constaté, 35 après des recherches étendues sur les activités de sels de composés variés du germanium, que cette propriété se manifeste dans le suivant composé du germanium s acide gras dont le chaînon terminal est le radical sesquioxyde de. germanium. Le procédé proposé pour fabriquer le présent 40 composé est le suivant î premièrement, on obtient le -cyanoéthyl- COPY 69 09416 3 2005110 trichlorogermane (cyanure de trichlorogermaniuméthylène), par l'action de 1'acrylnitrile sur le trichlorogermane (germanium-chloroforme ; ce p> -cyanoéthyltrichlorogermane (cyanure de trichlorogermaniuméthylène ) est converti en acide p -trichlorogermyl-5 propionique (acide trichlorogermaniumpropionique) par hydrolyse avec un acide ; il est transformé, sous l'effet de chlorure de thionyle en chlorure de trichlorogermylpropionyle ; l'hydrolyse de ce produit avec de 1'eau donne le sesquioxyde de bis-carboxylé-thylgermanium. Ou encore, par une autre voie, on obtient,par 10 l'action d'eau ammoniaquee sur le chlorure de trichlorogermylpropionyle, le sesquioxyde de bis-carbamyléthyl-germanium. On peut représenter ce procédé de la façon suivante : GeHCl^ + CH2 : CHCH >- Cl^Ge - CH^HgOT 15 Cl^Ge - CH20H2CÏÏ ^.Cl^GeGHgGHgCOOH hydrolyse Cl3GeCH2OH2COOH + S0C12 . ^ CljGeCHgGHgCOCl 0 = Ge - CïïgOHgOOOH 2Cl3GeCH2CH2C0Cl >- 0 ^ hydrolyse O = Ge - CH2CH2C00H ou 0 = Ge - CH2CH2CC1®2 2Cl3Ge0H20H2C0Cl > 0 25 eau 0 = Ge - GHgGHgCOHHg ammoniaquée Le sesqtlioxyde de bis-carboxyéthylgermanium et le sesquioxyde de bis-carbamaléthylgermanium obtenus par ces procédés ont été mis en essai sur des souris à qui on avait 30 greffé une tumeur ascitique d'Ehrlich. Les résultats de ces essais sont reportés dans le tableau suivant; [ JCOPY t Quantité î Nombre d'E.A.T. ■s d'ascites- Qualité sKumé-du pro- s ro duit et quantité A 1 Poids T.I.* Résumé Avant Jour| 21 ; 5 20.0 19.5 19.5 19.0 19.0 21.0 3ème 6ème {immédiat. 2210 21.5 19.0 2o;o 19.5 20.0 22.0 jour savant la diaaeotlong + 1*5. +i o 23.0 : 22Î5* î —+ TH5: V 22.0 j 20.0 + 0* 1 j. 19.5" : 18.0 + 0.5î +1.0 20.0 t 20.5 +2.0 s +0.5 21.0 s .19.5. î ml sunité*Total : t 1 .2 1.5 0.8 2.0 ÏYO +2.0 s 21.0 S 19.0 0.7 +0.5 * —2.0 21.5 S 19.0 s 0.5 8 7200 Moyenne : ?° i t 8 12000ï :■ 800 16000 7000 45400 1400 1000 45400 25.91 PSW.1 E.A.T.(++)Deg.(+++) PSW.1 E.A.T.(++)Deg.(+) PSW.1 E.A.T.(+) Deg.(+++) PSW.1 E.A.T.(++)Deg.(i) PSW.1 E.A.T. ( ++)Deg. (•¥++) PSW.1 E.A.T.(+) Deg.(+++) PSW.1 E.A.T,(+) Deg,(+++) -P Ô B 8 s 19s»5 520.0 : 11 ° 1 2 :13 +3 22.5 : 9 :19. o 19.0 +2 21.0 : 1o : 19-o -18.0 -1.5 17.5 :21.0 *22.5' +ÏÏ" 21.5 '20.5 .*20.5 +1 21.5 s20.0 *21.0 :14 :21.0 :21.5 +2 22.0 +6 27.0 +6.5 5 26.0 5 1.5 6000 +5.0 : 24.0 ! 3.0 8 24000 ÏÔ~ 19.0 E.A.T.(++)Deg.(+++) E.A.T.(+++)Deg.(—) PSW.1 1.0 7000 80300 46.85 +2 23.0 i.A.T.(++)Deg.(+++) 3.A.T.(+++)Deg.(+) 2.5 17500 18.5 ■1.5 1.3 8 12400 +4 24.0 0.7 8 5600 25.§4,5 * 1.3 7800 PSW.1 E.A.T.(+++)Deg.(—) E.A.T.(++)Deg.(+++) .PSW.1 ° E.A.T.(++)Deg.(+++) 80300 11470 KD cb c!> -§* Cp Deg. Degre de degenerescçnce PSw 1 - Un milliere de sérum physiologique E.A.T. -Tumeur ascitique d'Ehrlich aalité du roduit et uantité Numéro .Fôids Quantité d'ascite ml Nombre d'E.A.T. 1 T.I Résumé O O Avant 3ème jour 6ème jour immédiat, avant la dissection unité Total Moyenni 0 15 19.5 18.0 +1 20.5 ' +3 22.5 0.8 6 4800 53900 7 31.45 O E.A.T,(++)Deg.(+++)0 PSW.1 -Ê* E.A.T. (++)Deg. (+++)-1 PSW.1 o E.A.T.(+)Deg.(+++) E oA.To(++)Deg0(—) PSW.1 E.A.T.(++)Deg.(++) PSW.1 E.A.T.(+) Deg.(+++) E.A.T.{+)Deg.(+++) 16 21.0 22.5 -1 20.0 +3 24.0 0.5 6 3000 « 17 20.5 21.0 +1.5 22.0 +3.5 24.0 1.0 5 5000 18 20.0 21.5 +2.5 22.5 +5 25.0 2.5 7 17500 19 21.5 22.5 +1.5 23.0 +4 25.5 1.5 8 12000 20 21 .0 21.0 -0.5 20.5 ± o 21.0 1.0 6 6000 21 21.5 22.0 +1.5 24.5 +3 24.5 0.7 8 5600 53900 7700 Control 22 20.5 20.0 + 0 20.5 +2 22.5 1.2 17 24000 122400 7 100 E.A.T. (+++)Deg. (-») E0A. T. (+++)Deg. (•=>) PSW. 1 E«A.T.(+) Deg.(++) PSW.1 E.A.T.(++)Deg.(—) PSW.1 EoA.T. (+++^DesTo (**) 23 22.0 23.0 +4 26.0 +2 31.0 5.0 11 55000 24 20.5 21 .5 +0.5 21.0 +0.5 21.0 0.5 4 2000 25 20.5 20.5 +5 25.5 +1.5 22.0 1.2 7 8400 26 21 .0 21.5 -3.0 18.0 +1 22.0 3.0 11 33000 122400 24480 Deg, - Degré de dégénérescence PSW.1 - Un millitre de sérum physiologique ^ E.A.T, - Tumeur ascitique d'Ehrlich, ^ O 69 09416 6 2005110 Souris d'essai : DD Shiauoka, âgé de 4 semaines Conditions d'essai s 2»200c000 cellules de la tumeur ascitique d'Ehrlich ont été transplantées comme cellules anormales dans l'abdomen d1une souris. 5 Au bout de 24 Heures on a injecté dans l'abdomen 1ml du présent composé. L'injection a été renouvelée chaque jour pendant 7 jours etv,le 8ème .jour-, on a procédé à la dissection. Drogues administrées s A - sesquioxyde de bis-carboxyé thylgermanium 20 mcg/1ml 10 B - sesquioxyde de bis-carbamyléthylgermanium 20 mcg/1ml C - sesquioxyde de bis-carbamyléthylgermanium 40 mcg/lml Note î 1. 1.1. (indice de tumeur) : Nombre de cellules tumorales par groupe de souris traitées x 100 15 Nombre de cellules tumorales pour le groupe de souris de contrôle. 2. P.S.W.1. (Sérum physiologique 1 ml) s celui-ci a été introduit pour un lavage quand les cellules tumorales étaient impossibles à prélever en raison du manque d'ascite. 3. E.A.T. Tumeur ascitique d'Ehrlich. 20 4. Deg. (degré de dégénérescence) - inchangé, i très faible, + faible, ++ moyen, +++ important. En observant les résultats, on a constaté que le groupe traité se montrait très vigoureux et avait bon appétit comparativement au groupe de contrôle, ne montrant aucune trace 25 externe d'une réaction 5 le groupe de contrôle a conservé l'ascite sans évolutionr pendant que le groupe traité ne montrait ni stagnation de l'ascite ni saignement 5 le rapport du nombre des celliil.es tumorales dans les corps du groupe traité était d'environ 30 fo au lieu de 100 fô dans les corps du groupe de contrôle, ce 30 qui constitue une indication pour un contrôle efficace de la fissiparité. Dans les figures annexées, la figure 1 est une cellule de tumeur ascitique d'Ehrlich et est une vue microscopique d'un microscope à contraste de phase. 55 La figure 2a est une vue microscopique du micros cope à contraste de phase pour une dissection faite après continuation pendant une semaine de l'injection de liquide contenant 20 mcg (dans îml) de sesquioxyde de bis-carboxyéthylgermanium préparé suivant l'invention. On "peut se rendre compte que la 40 cellule a été modifiée en particulier par la présentation d'un 69 09416 7 2005110 noyau qui est cloisonné et des vacuoles l'entourant se trouvant en bon étato la figure 2 b montre comment les vacuoles se sont dialtees et les granules ont gonflée les figures 3a et 3b montrent les résultats obtenus 5 en injectant 20 meg de sesquioxyde de bis «earbamyléthylgermanium dans les mêmes conditions que dans la figure 2. Dans la figure 3a, le noyau a gonflé remarquablement;, le réseau de chromâtine est opaque, le corps des cellules est devenu creux et est près d'exploser, sa lisière ressemble à une éponge et le contenu de 10 la cellule est resserré sur un côté, la figure 3b est une variante^, 1!atrophie, montrant la dégénérescence de l'ensemble du corps de la cellule. les figures 4a, 4b donnent les résultats de l'injection de 40 meg de sesquioxyde de b is-oarbamylé thylgermanium « 15 Dans la cellule 4~a le réseau de chromâtine est désagrégé, les chromatides sont posées irrégulièrement,, et présentent des vacuoles^ et l'ensemble est incliné vers un côté. Dans la figure 4bs le corps de la cellule a changé d'une façon marquée représentant une importante modification. 20 Toutes les figures présentées peuvent illustrer que la multiplication des cellules tumorales est essentiellement arrêtée et que leur potentiel de croissance est à peu près complètement contrôlé. les deux types de produits, le sesquioxyde de bis-25 carboxyéthylgermanium et le sesquioxyde de bis-carbamyléthylgermanium se présentent sous forme d'une poudre blanche, cristalline, et susceptible de se polymériser par chauffage, le point de fusion est impossible à déterminer du fait que le chauffage à une température d'une certaine importance provoque la dissolution. 30 En solution dans l'eau, l'oxygène du sesquioxyde de germanium s'hydrate et l'hydrogène stimule le transfert de charge, ce qui. assure Ie activation. les composés chimiques ci-dessus^, qui peuvent S être préparés suivant-l'invention, n'ont aucun produit similaire ui puisse leur être opposé dans aucun rapport existant. Quand ois 2 njecte leur solution aqueuse dans le corps vivant 9 les radicaux libres font preuve d'une affinité pour les cellul.es anormales,, et l'hydrogène activé provoque un changement dans le potentiel électrique des cellules jusqu'à ce que leur fonctionne-40 ment soit réglé. Il est ainsi produit des effets qui n'ont jamais été constatés dans des traitements médicaux. 69 09416 8 2005110 Quand on a injecté 30 meg de sesquioxyde de bis carboxyéthylgermanium ou de sesquioxyde de bis-carbamyléthylgerma-nium dans l'abdomen d'une souris, cloaque jour, pendant 7 jours, l'ef fet secondaire ne s'est pas complètement manifesté» 5 l'invention est décrite, à titre non limitatif, dans les exemples ci=après s Exemple 1 - ■ A 18 grammes de germaniumchloroforme, on ajoute 6 grammes d8acrylnitrile, et, en faisant réagir à chaud sous azote, 1 O on obtient le -cyanoéthyltrichlorogermane. Celui-ci e3t transformé en acide ~trichlorogermylpropionique par addition d'acide chlorhydrique en solution accompagné d'une augmentation de la température» Cet acide se transforme, par réaction provoquée en introduisant 12 g de chlorure de thionyle, en chlorure de tri-15 chlorogermylpropionyle. On-fait subir à ce dernier une distillation sous pression réduite et, après avoir hydrolysé complètement aves de l'eau, on obtient les sesquioxyde de bis-carboxyéthylgerma-nium. Celui-ci est lavé jusqu'à disparition de la réaction du chlore, et on obtient une poudre blanche. Le rendement est d'environ 20 6 gr. • Analyse calculée pour CgH^QO^GregS Valeurs calculées C s 21,17 ; O 2 33,25, H t 2,94, G-e j 42,64 trouvées C s 21,00 , 0 : 32,91, H î 3,00, Ge î 42,41 Exemple 2 s 25 En ajoutant 22 ml d'eau ammoniaquee à 13 g de chlorure de trichlorogermylpropionyle, et en opérant l'hydrolyse, il se sépare un précipité blanc de sesquioxyde de carbamyléthyl-germanium. Celui-ci est lavé-avec de l'eau froide jusqu'à disparition de la réaction au chlore et séché. Le rendement est d'environ 30 6 g. Analyse calculée pour CgH^ gO^^CegS - - Valeurs calculées 1 0 % 21,18,H s 3»53, U ï 8,23. 0 s 23,53,Ces 42,70 trouvées s G g 21,20,H ; 3,6'0, N : 8,30 35 Os 23,63, G-e s 42,50 . Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation ci-dessus décrits et représentés, à partir desquels on pourra d'autres formes et d'autres modes de réalisation- sans pour cela sortir du cadre de l'invention» -Pourles référencesdu mémoire descriptif renvoyant aux figureslà 4b lesplanches l/3, Il/je't,Hl/3 déposées'au dossier peuvent être consultées 69 09416 9 2005110 RE 7 E I PIC A T 10 H S 1° ~ Substance caractérisée par ce qu'elle est composée d'une combinaison du radical sesquioxyde de germanium, de la formule suivante s e 0 s Ge - 0 0 = Ge -et d'un acide gras. 2° - Substance conforme à la revendication 1, ■jg caractérisée par ce que le groupe carboxylique de l'acide gras est transformé en un amide-acide. 3° - Substance conforme à la revendication 1, caractérisée par ce qu'elle est composée de sesquioxyde de bis-carboxyéthylgermanium.-•jçj 4° - Substance conforme à la revendication 2, caractérisée par ce qufelle est composée de sesquioxyde de bis-carbamyléthylgermanium. 5° - Procédé pour la préparation de sesquioxyde de bis-carboxyéthylgermanium, procédé caractérisé par ce qu'on fait 20 réagir de l'acrylnitrile sur du germanium-chloroforme afin d'obtenir le p -cyanoéthyltrichlorogermane, on soummet le p -cyanoéthyltrichlorogermane à une hydrolyse avec un acide, de façon à produire l'acide fi -trichlorogermylpropionique, on traite cet acide p -trichlorogermylpropionique avec du chlorure 25 de thionyle pour obtenir le chlorure de trichlorogermylpropionyle^ -ensuite on soumet ce chlorure à une hydrolyse avec de l'eau pour obtenir le sesquioxyde de bis-carboxyéthylgermanium. 6° « Procédé pour la préparation de sesquioxyde de bis-carbamyléthylgermanium, procédé caractérisé par ce qu'on ^0 fait réagir de l'acrylnitrile sur du germanium-chloroforme pour former le p> -cyanoéthyltrichlorogermane £ on procède à une hydrolyse de ce p> -cyanoéthyltrichlorogermane avec un acide pour produire l'acide^ -trichlorogermylpropionique; par traitement de cet acide p> -trichlorogermylpropionique avec du chlorure de 55 thionyle^ on obtient le chlorure de trichlorogermylpropionyle et enfin, par l'action de l'eau ammoniaquée sur le chlorure de trichlorogermylpropionyle, on obtient le sesquioxyde de bis-carbamyléthylgermanium. 7° - Application de la substance conforme aux 40 revendications 1 à 4 pour l'action sur des cellules vivantes 69 09416 2005110 10 anormales dans un organisme vivant » par modification de leur potentiel électrique pour contrôler ainsi leur fonctionnement.