Brevet FR2010574A1 — publié le 19700220

la présente invention se réfère à un procédé de culture et de purification d'un micro-organisme„ On a déjà donné, dans le métier, la description de procédés d'extraction au solvant de fractions contenant un micro-5 organisme, en vue de 1*élimination de lipides ou de souillures0 A la suite de l'extraction au solvant ou d'autres traitements ou méthodes de culture de micro—organisme, on peut obtenir un produit contenant le micro-organisme associé à de l'eau et une substance étrangère au micro—organisme proprement dit. 10 la présente invention a pour objet un procédé qui comprend la culture aérobie d'un micro-organisme croissant sur hydrocarbure, en présence d'un substrat contenant un hydrocarbure assimilable par le micro-organismej la récupération d'une fraction de produit contenant -un micro-organisme souillé par l'hydrocarbure, 15 puis, avec ou sans phase intermédiaire de récupération ou de purification, le passage du micro-organisme souillé d'hydrocarbure, en présence d'eau, par l'extraction au solvant à l'aide d'un solvant composé d'un mélange d'isopropanol et d'eau, l'extraction au solvant étant effectuée à contre courant en plusieurs phases? puis, 20 le traitement d'une substance contenant un mdc ro-organisme associé à 1'isopropanol et à l'eau, pour éliminer totalement ou partiellement l'isopropanol tout en conservant au moins 20$ d'eau, sur la base du poids sec du micro-organisme , en association avec ledit. micro-organismeo 25 Dans la phase de culture, les hydrocarbures à chaînes droites se présentent habituellement dans la matière première sous forme de paraffines? cependant, ils peuvent aussi se présenter sous forme d'oléfines; il est également possible d'utiliser un mélange contenant des paraffines et des oléfines à. chaînes droites. 30 les matières premières appropriées au procédé objet de l'invention comprennent le kérosène, les gas-oils et les huiles de graissage; ces matières premières peuvent être non raffinées ou peuvent avoir subi certaines opérations de raffinage, mais elles doivent contenir une certaine proportion d'hydrocarbures à 35 chaînes droites pour répondre à l'objectif de la présente invention. Il est conseillé d'utiliser une fraction pétrolière comprenant 3 à 45# en poids d'hydrocarbures à chaînes droiteso le procédé objet de l'invention est particulièrement précieux pour le traitement des fractions de gas-oil pétrolier 40 qui contiennent des hydrocarbures à chaînes èroites sous forme de 69 18908 2 2010574- cires car le procédé objet d'e 1*invention permet d'obtenir un gasoil à point d'écoulement amélioré tandis que les cires sont transformées en un produit de valeur la mise en oeuvre de ce procédé dans des con-5 ditions qui limitent la métabolisation des hydrocarbures à chaînes droites permet d' opérer en éliminant seulement la quantité voulue de ces hydrocarbures0 le terme "micro-organisme1' tel qu'il est utilisé ici recouvre aussi les mélanges de micro-organismes. De 10 préférence, le micro-organisme sera capable de se développer à partir de certaines paraffines normal es, au moinso les micro-organismes cultivés suivant la présente description peuvent être des levures, des moisissures ou des bactéries® 15 Dans la présente spécification, les levures sont classées suivant le système décrit dans Hïhe Yeasts, a Taxonomic Study", de J» lodder et W,,J.W0 Kreger-Van fiij, édité par North ïïolland Publishing Co.(Amsterdam) (1952). les bactéries mentionnées dans la présente 20 spécification sont classées suivant le système décrit dans "Bergey's Manual of Determinative Bacteriology" de R0S» Breed, E.GoDo Murray et N0R. Smith, édité par Baillière, Tindall & Cox (Londres), 7° édition (1957). Si l'on utilise une levure, on la choisit 25 de préférence dans la famille des Crypbococcaceae et, en particulier, dans la sous—famille des Cryptococcoideae'; cependant, on peut aussi se servir des levures ascosporogènes de la sous-famille des Saccharomycoideae, par exemple», les genres conseillés de la sous-famille des Cryptococcoideae sont Torulopsis (connu aussi sous 30 le nom de ïorula) et Candida. les souches de levures conseillées sont indiquées ci-dessous. Il est préférable d'utiliser les variétés qui portent un numéro de référence de Baam; ces numéros de référence renvoient au stock CBS du Centraal Bureau vor -Schimmel-culture, Bâarn, Hollande et au stock IÏÏHA de l'Institut National 35 de la Recherche Agronomique, Paris, France,, Souches conseillées Candida lipolytica Candida pulcherrima CBS 610 Candida utilis 40 Candida utilis, Yariati major CBS 841 69 18980 3 2010574 Candida tropicalis CBS 2317 CBS 133 CBS 11-0 Torulopsis colliculosa Hans enula anomala Oidiurn. lactis 5 Neurospora sitophila Mycoderma cancoillote USEA; STY 11 parmi celles-ci, Candida lipolytica et C« tropicalis sont spécialement re eommand é e s• 10 nisme0 les moisissures appropriées sont du genre Pénicillium et, de préférence, de la variété Pénicillium Ezpansum. le genre Asper-gillus convient aussi» 15 des ordres suivants : Pseudomonadales, Eubacteriales et Actynomy-cetales» nent aux familles suivantes : Corynebacteriaceae, Micrococcaceae, Aehromobacteraeeae, Actinomycetaceae, Khisobiaceae, Bacillaeeae et 20 Pseudomonadaceae. les espèces conseillées sont s Bacillus megate-rium, Bacillus subtilis et Pseudomonas aeruginosa. Parmi les autres espèces utilisables, citons : Bacillus amylobacter Pseudomonas natriegens 25 Arthrobacter sp. Micrococcus sp. Corynebacterium sp» Pseudomonas syringae Xanthomonas begoniae 30 Flavobacterium devorans Acetobacter sp. Actinomyces sp. ïocardia opaca. On peut choisir une moisissure comme micro-orga- le micro-organisme choisi peut être une bactérie, les bactéries appropriées appartiennent à l'un De préférence, les bactéries utilisées appartien- 35 nutritif aqueux Ces bactéries se développent dans le milieu suivant s 40 nh4CI CINa SO^Mg^HgO NaHP04.12H20 0,5 g 4 g 0,5 g 0,5 g 0,5 g 69 18988 4 ** f\ *3 A C "7 A' J s U 5 7 4 Eau q 5 KH2P04 0,5 g S04Mg.7H20 0,5g ClgCa 0,1 g CINa 0,1 g Eau q»s.p. 1o000 mlo 10 Voici la composition d'un milieu nutritif approprié pour la culture des levures et des bactéries t (NH4)2HP04 2 g C1K 1,15 g S04Mg.7H20 0,65 g 15 S04Zn 0,17 g S04Mno4H20 0,045 g S04Pe.7H20 0,068 g Eau ordinaire 200 ml Extrait de levure 0,025 g 20 Eau distillée q.s.p. 1„000 ml. Le développement du miero-organisme choisi est favorisé par l'addition au milieu de culture d'une très faible proportion d'extrait de levure (produit industriel riche en vitamines indispensables ou facteurs de croissance, obtenus par 25 hydrolyse d'une levure) ou plus généralement de vitamines indispensables. Les vitamines indispensables comprennent les corps suivants : biotine, acide pantothénique, acide nicotinique, thiamine, inositol et pyridoxine. La quantité d'extrait de -levure à ajouter est généralement de l'ordre de 25 parties par million» Pour chaque 30 vitamine, la quantité nécessaire varie entre 0,1 partie par million pour la biotine et 10 parties par million pour l'inositolo Il est préférable de maintenir le milieu nutritif aqueux au pH désiré par addition périodique ou continue d'un milieu aqueux de pH élevé. Habituellement, lorsqu'on cultive des 35 moisissures ou des levures, Candida lipolytica en particulier, on maintient le pH du milieu nutritif à une valeur comprise entre 3 et 6, entre 4 et 5 de préférence. Les bactéries sont besoin d'un pH plus élevé, habituellement compris entre 6,5 et 8o Les corps basiques que l'on peut ainsi ajouter au milieu de culture 40 sont la soude, la potasse, le phosphate disodique et l'ammoniaque, 69 18908 5 2010574 soit libres, soit en solution dans l*eau0 la température optimale du milieu de culture varie suivant le type de micro-organisme utilisé et se tient généralement entre 25 et 35°C. Pour une culture de Candida lipolytica, 5 on règle la température entre 28 et 32°C, de préférence» l'absorption d*oxygène est indispensable à la croissance du micro-organisme. L'oxygène est habituellement apporté sous forme d'air. Si l'on veut maintenir xm taux de croissance rapide, il faut que l'air, source d'oxygène, se présente sous 10 forme de fines bulles obtenues par agitation,, l'air peut être introduit à travers une surface frittée» On peut aussi utiliser le système d'aération connu sous le nom d'aération "vortex". la culture se fait généralement en continu mais on peut aussi employer la méthode discontinue. Après la phase 15 de croissance, il est habituellement possible de séparer de la masse de f raction de matière première non métabolisée, le micro-organisme souillé de matière première, non métabolisée et le milieu nutritif aqueux, la séparation se fait, de préférence, par décantation; on peut remplacer ou compléter cette opération par 20 une centrifugation. Il est conseillé de soumettre alors la f raction contenant le micro-organisme à xm traitement avec xm milieu aquexix renfermant un agent tensio-actifo De préférence, la fraction de micro-organisme est vigoureusement mélangée à l'agent tensio-actif aquexix et, 25 ftBTiB ménager au micro-organisme une nouvelle période de croissance, on procède à une nouvelle séparation, par centrifugation de préférence, pour récupérer une fraction de micro-organisme et une phase aquexise usée contenant les souillures (hydrocarbures) retirées du micro-organisme. Si nécessaire, on peut répéter une ou plusieurs 30 fois les opérations de lavage et de séparation, en se servant d'un agent tensio-actif aqueux pour les lavages. Après le lavage avec l'agent tensio-actif, il faut laver le produit dans un bain de milieu aquexix dépourvu d'agent tensio-actif; dans un bain d'eau de préférence, là encore, on peut, à volonté, procéder à une série 35 de bains et de séparationso De préférence, on poursuit les opérations de lavage jusqu'à ce que la teneur en hydrocarbures du micro-organisme soit inférieure à 1%, sur la base du poids sec du micro-organisme. De préférence, cette teneur en hydrocarbures doit être 40 infériexire à 5#o 69 18908 6 2010574 Pour le lavage,' on peut employer comme agent tensio-actif soit des agents tensio-actifs cationiques tels que le chlorure d1ammonium stéaryletriméthyle, soit des agents tensio-actifs nos ioniques tels que les cord ensats d'acide oléique et ds oxyde 5 d'éthylène , soit des agents tensio-actifs anioniques comme les sulfates alcoyle de sodium» Habituellement» la fraction contenant le miero-orga— niasse est alors soumise à l'extraction au solvant en plusieurs phases» De préférence, dans une première phase, la substance solide 10 souillée est extraite avec un mélange d'isopropanol et d'eau récupéré lors d'une phase d'extraction ultérieure# Dans une phase d'extraction suivante, la substance solide traitée qui provient de la première phase peut être extraite avec un mélange neuf d'isopropanol et a4 eau, puis on récupère la 15 substance solide traitée. La fraction provenant de la première phase d'extraction peut être dirigée vers un cycle de distillation composé d'une ou plusieurs opérations de distillation, pour récupérer séparément (a) un mélange azéotropique d'isopropanol et d'eau et (b) une fraction résiduelle0 20 La température appropriée, pour les opérations d'extraction, se situe dans la plage de 30 à 60°Co Le procédé objet de l'invention s'applique à un pétrole brut ou à un produit partiellement raffiné de la culture d'un microorganisme sur un substrat d'hydrocarbures, en présence 25 d'un milieu nutritif aqueux© Lorsqu'il est soumis à l'extraction au solvant, le microorganisme contient, de préférence, au moins 20JÈ d'eau, et plus particulièrement jOO à 200$ (sur la base du poids sec de levure pure5o 30 Si nécessaire, on peut mélanger la levure avec de l'eau avant 1'extraction® Dans la première phase daextraction, le rapport de l'eau et de 1'isopropanol est compris, de préférence, entre 1/4 et 1/10, en poids,, 35 . On peut répéter l'extraction précédemment décrite, si on le désire; il est préférable d'ajouter préalablement de l'eau à la levure pour obtenir la même teneur en eau que dans la première phase*, S'ils sont métabolisables, les hydrocarbures récu-40 pérés lors de l'extraction par solvant peuvent être recyclés vers 69 18908 7 2010574 la culture de micro-organisme» Au départ, on peut éliminer rapidement une partie de l'eau du micro—organisme à l'aide, par exemple, d'un pulvérisateur d e séchage, manoeuvré de façon à obtenir un produit 5 contenant au moins 20$ en poids d'eau associée au micro-organisme0 De préférence, on élimine l'isopropanol en maintenant le micro-organisme à proximité drune surface ehaufféé. Il est préférable que le micro-organisme soit en mouvement par rapport à la surface. 10 On peut utiliser une vis transporteuse chauffée» la vis transporteuse peut être calorifugée, si on le désire. Par une répartition judicieuse de la chaleur sur la vis, et sur l'enveloppe s'il y en a une, la vis transporteuse peut jouer un double rôle : élimination de l'isopropanol tout en '15 maintenant l'eau au niveau désiré dans le micro-organisme, ptis éliminâtle* totale ou partielle de l'eau résiduelle. I«. substance contenant le miero-organisme est maintenue en mouvement par rapport à la surface du convoyeur à l'aide de chicanes fixes, montées sur le convoyeur, dont l'aetion se com-20 bine à celle de la vis en hélice qui fait progresser la substance le long du tube qui enferme le tout, l'axe de la vis est creux et chauffé à la vapeur. Normalement, le convoyeur fonctionne en continu et son alimentation est assurée par une trémie. Il est préférable que l'ensemble soit fermé et sous pression de gaz inerte pour 25 empêoher, très largement sinon totalement, l'arrivée de l'oxygène atmosphérique. On peut faire disparaître l'isopropanol du microorganisme et même, ensuite, une partie au moins de l'eau résiduelle à l'aide d'un séchoir à plateau dont la surface chauffée est bala-30 yée par des racloirs-distributeursj habituellement, le séchoir à plateau fonctionne en discontinu. Tant que le micro-organisme est en association avec l'isopropanol, il est préférable qu'à aucun moment la quantité d'eau associée au micro-organisme ne tombe au-dessous de 20$ en 35 poids, sur la base du poids du micro-organisme sec. Par "micro-organisme sec", nous entendons un microorganisme dans l'état qui est obtenu par le séchage à 120°C. Par "poids sec" nous entendons le poids du micro-organisme dans cet état. 40 ' le produit ainsi obtenu peut être soumis à de nou 69 18988 8 2C10574 veaux traitements pour enlever une partie ou la totalité de l'eau résiduelle associée au micro-organisme. Ceci peut être réalisé par séchage par pulvérisation ou par le passage sur un convoyeur chauffé. • 5 On applique de préférence le procédé à une substance contenant le micro-organisme dans laquelle la quantité totale d'isopropanol ne dépasse pas 50$ du poids d'eau associée au micro-organisme (c'est-à-dire de l'eau en excès de l'eau de constitution du micro-organisme sec)e 1Q Une levure totalement ou partiellement libérée de ses lipides et des hydrocarbures qui la souillent, grâce à l'une des méthodes décrites ici, est un produit industriel nouveau® Suivant l'une de ses caractéristiques les plus intéressantes, la présente invention apporte un procédé qui comprend la 15 culture d'un micro-organisme comme il a été décrit, en présence d'une fraction pétrolière en partie composée d'hydrocarbures à chaînes droites, de poids moléculaire moyen correspondant à 10 atomes de carbone, au moins, par molécule, en présence d'un milieu nutritif aqueux et en présence d'un gaz contenant de l'oxy-20 gène à l'état libre; à partir du mélange, la séparation, d'une part, du micro-organisme et, d'autre part, d'une fraction pétrolière présentant une proportion moindre ou nulle d'hydrocarbures à chaînes droites; puis le traitement du micro-organisme comme il a été décrit plus haut» 25 Toutes les phases du procédé décrit ici, prises isolé ment ou à plusieurs, peuvent être mises en oeuvre en continu ou en discontinu,, les méthodes recommandées pour la culture du microorganisme et la récupération du produit sont décrites dans les 30 brevets britanniques n® 914567 et 914568, les demandes de brevets britanniques n° 36873 du 28 septembre 1962 et 44606 du 26 novembre 1962 au nom de la Société dite : The British Petroleum Company Limited, ainsi que dans le brevet français n® 1.361.910. . , , La présente invention est illustree mais non limitée par l'exemple suivant : 35 EXEMPLE 1 On introduit 40 litres d'un milieu minéral nutritif aqueux, dont la composition est donnée ci—dessous, dans un fermen— teur d'acier inoxydable d'une contenance réelle de 60 litreso Voici la composition du milieu nutritif : 69 18988 2010574 grammes Phosphate de diammonium. 2 Chlorure de potassim 1 -i 5 Sulfate de magnésium 7H20 0,65 Sulfate de zinc 0,17 5 Sulfate de manganèse, 4^0 0,068 Sulfate de fer 0,124 Extrait de levure 0,030 Eau ordinaire 200 Eau distillée q.s.p. 1.000 ml 10 On introduit alors 20 litres d'un inoculum de 24 heures de Candida tropicalis cultivée sur un mélange d'hydro— carbures normaux C^q- C^q, de sorte que la densité cellulaire soit d'environ 1 g. de matière sèche par litre. On introduit alors 1.030 litres de gas-oil lourd, 15 soit 15 g/litre, quantité suffisante pour porter la densité cellulaire à 2 g/litre. On maintient la température de la culture à 30+ 1°C par circulation dfeau dans l'espace annulaire ménagé entre deux cylindres concentriques, le plus petit étant le fermenteur0 20 l'aération et l'agitation sont calculées pour donner un taux de 3 millimoles de Og par litre de milieu, et par minuteo le pH est maintenu à 4 par addition d'une solution d'ammoniaque, grâce à un système de correction automatique» 25 lorsque le débit d'ammoniaque atteint 20 ml on commence à introduire le gas-oil. Voici quelles sont les caractéristiques du gasoil i Densité 0,870 Point d'écoulement + 15°C 30 Intervalle de distillation 300-390°C. le rythme d'introduction est déterminé par les besoins théoriques de la culture, en estimant à 10$ en poids le rendement sur gas-oil ( Ei^eStitxo^e^Ias-oxl0316 ^ à 3 heures le temps de division cellulaire. Cette addition se répète toutes 35 les heures jusqu'à ce que la quantité totale de gas-oil ait atteint 200 g/litre, c'est-à-dire 13,8 litres. Partant d'une densité cellulaire de 2 g/litre, à la 25è heure (fin de la phase exponentielle de la culture) la densité cellulaire est de 15 g/litre. 69 18988 10 2010574 Le fermenteur fonctionnant alors en continu à un taux de dilution de 0,2 vol/vol/heure, la densité cellulaire reste constamment à 15 g/litre pendant toute l'opération» le "bouillon est soutiré du ferment eur de façon 5 continue et mis à décanter; on retire 65$ du milieu usé et on le remplace dans le bouillon récupéré par 65$ d'eau ordinaire» On ajoute à la phase supérieure 0,5 g/litre de détergent non ionique vendu sous le nom "UI 29" et, après centrifugation, on récupère séparément s 10 milieu minéral "usé 840 g/litre gas-oil non métabolisé 110 g/litre pâte de micro-organisme 50 g/litre» La pâte de micro-organisme est alors rincée à l'eau à la température ambiante et centrifugée; la levure obtenue 15 contient de 65 à 70$ d'eau,, L'eau est éliminée en partie pour donner une pâte de levure composée de 50$ de levure sèche et de 50$ d'eau, en poids. Cette pâte de levure est séchée dans un pulvéri-20 sateuro A la sortie de ce pulvérisateur, la teneur en humidité da la levure est d'environ 5$, Cette levure est alors envoyée vers un train d'extraction composé de trois cycles opérant à contre-couranto Le solvant utilisé est le mélange azéotropique d'isopropanol et d'eau 25 (80$ en poids d'isopropanol et 12$ en poids d'eau) et du solvant frais est envoyé vers le cycle final à raison de 8 parties en poids de solvant pour une partie de levure séchée par pulvérisation introduite dans le premier cycle0 Pendant chaque cycle, on agite le mélange de levure et de solvant à 80°Co La levure récupé-30 rée à la sortie du train d'extraction continue présente la composition pondérale suivante : levure 37$ isopropanol 53$ eau 10$. 35 Cette ïâte de levure est alors mélangée à de l'eau, pour donner une substance contenant 25$ d'eau, en poids, laquelle est envoyée dans un séchoir à plateau Trappec. Cet appareil se compose de 11 plateaux empilés verticalement et chauffés par circulation intérieure d'eau chaudeo La levure est introduite par 40 le haut et se dirige vers le fond; les conglomérats qui se for 69 18908 11 2010574 ment pendant le séchage sont écrasés par un système de rouleaux associés aux plateaux» Le gradient de température est calculé de façon à donner 100°G pour le plateau inférieur, 75°C pour le plateau du milieu et 60°G pour le plateau supérieur. L'appareil fonc-5 tionne à la pression atmosphérique0 La levure récupérée à la sortie du dernier plateau du séchoir Trappec a la composition suivante : Eau Azote 1156 calculé sur la base du poids sec 10 Lipides 1# M _ " Isopropanol moins de 0,2# " " 69 18988 12 2010574 • BEVEHT3I CATIONS 1. Procédé de culture aérobie d'un micro-organisme croissant sur hydrocarbures, en présence d'un substrat contenant un hydrocarbure consommable par le micro-organisme, et caractérisé par le fait: qu'après avoir récupéré une fraction de produit comprenant un micro— 5 organisme souillé par l'hydrocarbure, on soumet ladite fraction, en présence d'eau, avec ou sans opérations intermédiaires de récupération et de purification, à l'extraction au solvant, à l'aide d'un solvant composé d'un, mélange d'isopropanol.et d'eau, en effectuant cette extraction à contre-courant en plusieurs phases | qu'on traite 10 ensuite la substance contenant le micro-organisme associé à de l'isopropanol et à de l'eau pour éliminer partiellement ou totalement l'isopropanol tout en conservant au moins 20 fo d'eau, sur la base du poids sec du micro-organisme, associée audit micro-organisme,, 2. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait 15 que ledit substrat est composé totalement ou partiellement d'une paraffine normale. 3. Procédé suivant la revendication 2, caractérisé par le fait que ledit substrat se compose d'un hydrocarbure ou d'un mélange d'hydrocarbures ayant un indice de carbone au moins égal à 10. 20 4. Procédé suivant la revendication 3, caractérisé par le fait que ledit substrat est une fraction pétrolière. 5o Procédé suivant l'une quelconque des revendications 3 et 4, caractérisé par le fait que ledit substrat est un gas-oilo 6. Procédé suivant l'une quelconque des revendications précé-25 dentes, caractérisé par le fait que ledit micro-organisme est un micro-organisme croissant sur une paraffine normale. 7. Procédé suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait que ledit micro-organisffie est une levure. 30 8o Procédé suivant la revendication 7 caractérisé par le fait que ladite levure appartient à la famille des Cryptococcaceae. 9. Procédé suivant la revendication 8, caractérisé par le fait que ladite levure appartient à la sous-famille des Cryptococcoideae. 10. Procédé suivant la revendication 9, caractérisé par le fait 35 que ladite levure est du genre Torulopsis. 11. Procédé suivant la revendication 9, caractérisé par le fait que ladite levure est du genre Candida. 12. Procédé suivant la revendication 11, caractérisé par le fait que ladite levure est Candida lipolytica. 69 18908 13 2010574 13» Procédé suivant la revendication 11, caractérisé par le fait que ladite levure est Gandida tropicalis. 14® Procédé suivant l'une quelconque des revendications t à 6, caractérisé par le fait que ledit micro-organisme est une bactérie. 5 15. Procédé suivant l'une quelconque des revendications pré cédentes, caractérisé par le fait que ledit solvant d'extraction est un mélange azéotropique d'isopropanol et d'eau. 16. Procédé suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait : qu'on ajoute de l'eau au produit ob-10 tenu par extraction au solvant^avant d'éliminer l'isopropanol associé audit micro-organisme. 17» Procédé suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé par le fait qu'on élimine l'isopropanol du microorganisme auquel il était associé, par évaporation. 15 18. Micro-organisme obtenu par la mise en oeuvre du procédé objet de l'une quelconque des revendications précédentes. 19. Hydrocarbure obtenu par la mise en oeuvre du procédé objet de l'une quelconque des revendications précédentes. 20. Produit contenant des lipides obtenu par la mise en oeuvre 20 du procédé objet de l'une quelconque des revendications précédentes.