雙光子激發顯微鏡

雙光子激發顯微鏡  是一種熒光成像技術 ， 可以對活體組織進行深度約1毫米的成像 。 它不同於傳統的熒光顯微鏡 ， 其中激發波長短於發射波長 ， 因爲兩個激發光子的波長長於所得發射光的波長 。 雙光子激發顯微術通常使用近紅外激發光 ， 其也可以激發 。 然而 ， 對於每次激發 ， 兩個光子的紅外光被吸收 。 使用紅外線可最大限度地減少組織中的散射 。 由於多光子吸收 ， 背景信號被強烈抑制 。 這兩種效果都會導致這些顯微鏡的穿透深度增加 。 由於其更深的組織穿透 ， 有效的光檢測和減少的光漂白 ， 雙光子激發可以是共聚焦顯微鏡的優越替代品 。 藉助於強聚焦激光束 ， 產生非線性光學效應 ， 其基於同時到達一個分子中的若干光子 （ 光粒子 ） 的相互作用 。 因此 ， 所產生的信號的強度不會隨着照射光子的數量而線性增加 ， 而是與平方率 （ 對於雙光子效應 ） 或立方率 （ 對於三光子效應 ） 一致 。 多光子顯微鏡的操作類似於共聚焦激光掃描顯微鏡的操作 。 然而 ， 雖然共聚焦激光掃描顯微具有50 - 80 μm的穿透深度 ， 取決於製劑 ， 可以與多光子顯微鏡一起使用更深的區域 ， 例如 ， 200 μm ， 在非常有利的情況下甚至可達到1000 μm （ = 1 mm ） 。 活體組織的這一圖像可能是用其它方法無法成像 。