Изпитваният химикал се прилага към конфлуетния слой от клетки, отглеждан върху апикалната страна на вложката.
Ispitivane kemikalije trebalo bi pripremiti u HBSS-u s kalcijem (u koncentraciji od 1,0 do 1,8 mM) bez fenolnog crvenila kako bi se spriječilo vezanje s proteinima seruma.