Най-високата допустима концентрация за изпитване може също да бъде определена чрез разделяне на острата 96 h LC50 на подходящо отношение остра/хронична (напр. подходящи отношения за някои вещества са около три, но някои са над 100).
Budući da čitav postupak uglavnom ovisi o točnosti, preciznosti i osjetljivosti analitičke metode koja se primjenjuje u odnosu na ispitivanu tvar, potrebno je pokusima provjeriti jesu li točnost, preciznost i obnovljivost analize tvari te izdvajanje ispitivane tvari iz vode i ribe zadovoljavajući za određenu metodu.