乙酰辅酶A（）是活化了的乙酸，由乙酰基（CHCO-）与辅酶A的巯基以高能的硫酯键相连。乙醯辅酶A是脂肪酸的β-氧化及糖酵解后产生的丙酮酸脱羧后的产物。在三羧酸循环的第一步，乙酰基转移到草酰乙酸中，生成柠檬酸，因此这个循环也称作「柠檬酸循环」。
生化意义.乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，它是丙酮酸脱羧、脂肪酸β-氧化的产物。当丙酮酸激进入线粒体的基质后，它会被丙酮酸脱氢酶复合体转化为乙酰辅酶A，因为在此过程中，丙酮酸会被氧化（氢原子转移到NAD生成NADH）及其羧基会以二