发酵液，高压蒸汽灭菌、冷却，然后加入纯丙酮-丁醇菌种，在36～37°C的温度下进行发酵。发酵过程会产生乙醇、丁醇和丙酮等（一般比例为1:6:3），同时产生二氧化碳和氢气。发酵产物经精馏后，可以得到丁醇。3、乙醛缩合法：两分子乙醛经羟醛反应产生丁醇醛，脱水后生成丁烯醛，再经加氢得正丁醇。
反应.正丁醇是一种一级醇，可以被重铬酸钾等氧化剂氧化，先得正丁醛，再氧化而制得丁酸。亦可跟其他羧酸在浓硫酸催化剂之下发生酯化反应，生成相应的酯类。例如丁醇跟乙酸反应，生成乙酸正丁酯：正丁醇跟三