斯德消毒法无法杀灭芽孢。这些孢子里面含有细菌的遗传物质、核糖体和大量的吡啶二羧酸（Dipicolinic Acid），吡啶二羧酸是一种内生孢子特有的化学物质，作用是帮助维持孢子处于休眠状态，在孢子里佔了高至10%的干重。内生孢子由德国科学家费迪南德·科恩发现。(使用高温高压消毒法)