原微生物的蛋白质合成。四环素对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、化脓性链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、大肠杆菌、产气杆菌、志贺菌属、耶尔森菌、单核细胞李斯特菌等有较强抗菌活性；对立克次体、支原体、衣原体、放线菌等也有较强作用。现在一般不用于细菌感染，主要用于立克次体病、布氏杆菌病、淋巴肉芽肿、支原体肺炎、螺旋体病、衣原体病等。
其他用途.四环素可以被骨头吸收，因此在活体组织切片的生理检查中，也被用来当成标记骨头生长速度之用。四环素可分泌到乳汁，可透过胎盘进入胎儿体内，引起子代的不良反应