链的一端，生成亮黄色的DNP-多肽或DNP-蛋白质，这个反应称为桑格反应（Sanger reaction）。由于DNP与氨基结合牢固，不易被水解，因此当DNP-多肽被酸完全水解以后，原来的N-端氨基酸成为黄色的DNP-氨基酸。DNP-氨基酸溶于乙酸乙酯或乙醚等有机溶剂，所以可以用乙酸乙酯或乙醚对其抽提后进行色谱分析，再以标准的DNP-氨基酸作为对照，就可鉴定出此氨基酸的种类。桑格当初确定出胰岛素两条链的N-端氨基酸就是用的这个方法。