截至2019年4月，马尔他骑士团已先后与全球114个国家建交（109个国家建立大使级外交关系，5个国家建立领事级外交关系），并与其中113国保持邦交，且其中大多数都不是以天主教为主要信仰之国家。除此之外，马尔他骑士团也于欧盟驻有大使。马尔他骑士团与欧盟及国际红十字会一样依照国际法以非国家身份参与国际组织。教廷为表示其主权独立地位，因此各国驻意大利大使不得兼为驻教廷大使；但马尔他骑士团的情形则更为特殊，通常各国驻教廷大使均兼为驻马尔他骑士团大使，而意大利也是全球唯一在自己首都派驻梵蒂冈和驻马耳他骑士团大使