服阕，留补礼科。改南京兵科给事中。正德十二年（1517年），出爲云南布政司左参议；此后出任广东参议，参与平定番禺盗，有功。嘉靖二年（1523年），任浙江按察司副使、山东按察司副使。嘉靖六年，升爲福建按察使；次年改河南右布政使。嘉靖八年，升爲右副都御史、南赣巡抚，召协理院事。此后历任吏部右侍郎、吏部左侍郎，因起废不当，尚书汪鋐诿罪下属，于是周用被降职，调为南京刑部右侍郎。后升右都御史。嘉靖十七年（1538年），任南京工部尚书；嘉靖十八年，任南京刑部尚书。九庙遇灾，自陈致仕归乡。周用为官端亮有节概。朝廷内外为之