1281年，首任妻子霍恩堡的格特鲁德逝世。1284年2月5日，鲁道夫一世娶了勃艮第公爵于格四世的女儿勃艮第的伊莎贝拉为第二任妻子。1291年，鲁道夫一世致力争取其子阿尔布雷希特能继承王位，但是在他逝世后德意志诸侯拒绝接受阿尔布雷希特继承王位，他们选出拿骚的阿道夫为罗马人民的国王。