合位可以与一个铁离子结合。在羧基端（carboxyl terminal）的结合位与铁离子有很高的亲和力，只会与铁离子结合。在胺基端的结合位则是可以与其他离子结合，亲和力高低如下：铁>铬>锰>镉>镍。三价铁离子与运铁蛋白的结合需要一个阴离子的存在，通常是碳酸氢盐。未与铁离子结合的运铁蛋白称为原运铁蛋白（apo-transferrin）。
运铁蛋白饱和度.运铁蛋白饱和度（transferrin saturation）是医疗上的一种指标，代表有多少百分比的运铁蛋白有结合两个铁离子(也就是