5年，西班牙人Jaume Ferran i Clua曾首次为人类接种霍乱疫苗，但其结果不被科学界和同行所接受，甚至有人怀疑他的疫苗杀死的人多于拯救的人。1892年7月18日，哈夫金在法国巴斯德研究院工作期间，在动物试验成功后转而在自己身上进行了首次人体试验，并向自己体内注射了低浓度的霍乱弧菌。他随后出现发烧，但几天内便完全恢复。此后，他又在三个俄国同事和其他志愿者身上进行了人体试验，获得了相似结果，进而确信他所研发的疫苗是可行的、可以进行更大规模的测试。1893年，全球第五次霍乱大流行期间，在获得“微生