必须经肝脏及肾脏的酶反应，最终生成骨化三醇，这才是其活性最高的形式，可以调节小肠、肾脏和骨骼对钙的吸收与代谢。会进一步被肾脏羟化形成维他命D的生物活性形式 — 骨化三醇（也称为1,25-二羟基胆钙化固醇）。骨化三醇在血液中作为激素循环，主要作用是调节钙和磷酸盐的浓度，并促进骨骼的健康生长和重塑。骨化三醇还具有其他作用，包括对细胞生长、神经肌肉和免疫功能以及减轻炎症的作用。在血清中测量两种维他命D代谢物（称为25-羟基维生素D或25(OH)D）的含量，以确定一个人的维他命D状况。可以反映UVB照射皮肤