动物、鸟类、蚯蚓及甲虫等为食。在城市中，灰林鸮主要猎食其他鸟类。灰林鸮一般会吞下整只猎物，会将不能消化的部份吐出唾余，在树下作为筑巢之用。较弱小的纵纹腹小鸮及长耳鸮不会与灰林鸮同住，并会生活在不同的环境。灰林鸮若到了城市中，很多时也会赶走了原住的仓鸮。
在文化中的角色.灰林鸮往往被看作是一种坏运气的征兆，而莎士比亚更在《恺撒大帝》第一幕第三场中这样描述灰林鸮：“昨天正午的时候，夜枭栖在市场上，发出凄厉的鸣声”。英国着名艺术评论家约翰·拉斯金被引述这样说：“无论聪明人如何形容