十九世纪的欧洲，人们普遍认为结核病是遗传性疾病，但科赫坚信结核病是由某种病原体引发的传染性疾病，他决定首先将研究重心放在结核病上。在柏林，他再次向科学界证明了他在沃尔斯顿时使用的染色和纯化技术、细菌培养介质（包括由其妻子协助研发的琼脂培养基），以及培养皿（德文：Petrischale，纪念其助手Julius Richard Petri）这些技术至今仍广泛应用于生物研究。之后于1882年3月24日更借此资源找出结核病的病原结核桿菌，为十九世纪七大死因找到元兇，也因此，他所累积的成就能与路易·巴斯德相提并论