Δ"S"°通常为合作而非分解反应，则演变成下式：formula_5, where [B] < [A].如上述所提到的，该方程是基于只有双链和随机卷曲两种状态参与了熔化的假设。然而，核酸还可以通过许多中间状态的融化。考虑到这类复杂的行为，必须结合统计力学，特别是长序列相关的复合物。此外还有Wallace methodFor 15-20 nucleotides primers
从核酸序列推定热力学性质.上段表示了熔化温度和热力学参数都是相互关联的(Δ"G"° or Δ"