为心腹，甚至在1526年将爱妾赏赐给道三。但斋藤道三为了实现自己的窃国大业，于1541年毒杀赖艺之弟土岐赖满，导致两人之间直接对抗。在逐渐肃清土岐赖艺的宗族后，1542年，斋藤道三出兵袭击土岐赖艺的居城大桑城，土岐赖艺与其次子土岐赖次被迫流亡至尾张投靠织田信秀，美浓落入斋藤道三之手。斋藤道三的窃国行为震惊了周边大名，他本人被冠以“美浓的蝮蛇”的绰号。朝仓孝景和织田信秀则分别拥立土岐赖纯和土岐赖艺进攻美浓，土岐赖纯占据，土岐赖艺占据革手城。斋藤道三一方面展开防御，一方面使用外交手腕。1546年，土岐赖纯与