约1.5-2.5岁就会达至性成熟。箭毒蛙可一年繁殖3、4次，一次能产下6至10颗卵，由于箭毒蛙亲代照护的行为，会将卵背在背上移动至靠近水源的栖地安置，因此大大提升了孵化的机率。要确定箭毒蛙的性别，可以透过其行为来观察。成熟的雄蛙在吃饱或大雨后会为交配而叫喊。幼蛙的性别可以从背部来观察。雄性的背部一般都是向下斜而不起折，雌性的背部较圆但有较大的折。另外可以从牠们的脚趾来确定性别。一些雌性箭毒蛙属的脚趾较窄，而雄性的较阔。一些物种的成熟雄性在颈上会有一灰带，这正是发出交配叫喊的部位。所有箭毒蛙都是源