其中最主要的途径是通过苹果酸脱氢酶氧化由丙酮酸及碳酸缩合而成的L-苹果酸(此过程需耗费ATP)：另外，草醯乙酸也可以借由降解天冬氨酸取得。
生化功能.草醯乙酸是柠檬酸循环的中间物：草醯乙酸借由柠檬酸合酶的催化与乙醯辅酶A合成柠檬酸。此外草醯乙酸也参与了糖质新生、尿素循环、乙醛酸循环、胺基酸合成和脂肪酸合成，同时它也是琥珀酸脱氢酶的抑制物。糖质新生糖质新生是一条由一连串11个酵素参与的代谢路径，能将非碳水化合物的基质转化为葡萄糖。糖质新生的反应由粒线体的基质开始。在此，丙酮