官，定居于吉水县。正德二年（1507年），毛伯温中举人，次年联捷进士，任浙江绍兴府推官。正德六年（1511年），擢河南道监察御史，先后巡按福建、河南，所至有政声。世宗登极，清理正德弊政，伯温上疏请斩宦官同党萧敬，中官屏气。嘉靖元年（1522年），任大理寺丞，升都察院右佥都御史，巡抚宁夏。因“李福达狱”牵连，被削职归里。嘉靖十一年（1532年）九月，官复原职，理都察院事。次年，进左副都御史。不久又因赵府宗人祜椋讦攻而解官。
征讨安南.嘉靖十五年（1536年）冬，礼部尚书夏言疏言安