卡普空将前作《生化危机4》中的无限子弹Thompson改为无限子弹系统，只要将武器升级至最大性能，即可用通关分数换取无限子弹功能。
开发.《生化危机5》最初由小林裕幸负责初期策划及开发工作，其后便将《生化危机5》交由曾经担任《鬼武者》监督及《失落的星球：极限状态》制作人的竹内润负责担任执行制作人。而曾经担任《生化危机2》宣传监督及《生化危机4》(PlayStation 2版本)执行制作人的稻船敬二亦负责监视整个游戏的开发进度。其后卡普空公司全资拥有的Clover Studio亦加入