临床上可以用来治疗心脏衰竭、高血压，也被用来处理及预防心绞痛，这包括因心肌梗死、服用可卡因或其他原因造成的心脏供血不足产生的心绞痛。硝酸甘油的使用方式包括口服、含在舌下经口腔黏膜吸收、涂佈在皮肤、或是经由静脉注射给药。硝酸甘油常见的副作用包括头痛以及低血压，硝酸甘油引起的低血压可能十分严重，因此特别值得注意。目前尚不清楚在怀孕期间是否能安全的使用硝酸甘油而不影响胎儿。由于药物交互作用可能造成严重的低血压，硝酸甘油不可与西地那非或其他第五型磷酸二酯酶抑制剂同时使用。硝酸甘油在分类上属于，虽然它的作用机制还不