经粉岭公路、上水（彩园邨、上水站）、粉岭南（百和路）、大窝西支路、太和、大埔墟、吐露港公路及源禾路。本线提供往返沙田区、大埔区及北区的深宵巴士服务，利便北区乘客接驳N271线往返九龙市区之余，同时方便两区过境乘客于深宵时段到落马洲公共交通转车站转乘皇巴士，经落马洲管制站（港方）及皇岗口岸（中方）往返中国大陆。本线为九巴一度是唯一提供常规服务的两位数字编号通宵路线。后来一年后已被N36、N39打破。本线已于2014年1月18日晚上起投入服务，取代同日起取消的N76及N270线，成为2013年「北区