NA单股断裂端，透过聚合反应的过程形成磷酸双脂键来黏合DNA。但是DNA聚合酶的黏合过程却只是聚合反应一个附带的功能而已，真正在细胞内扮演DNA黏合反应的工作还是以DNA连接酶为主。顾名思义，DNA连接酶的功能便是在黏合断裂的DNA，而细胞内只有DNA复制与DNA修复的反应牵涉到DNA断裂的合成，因此DNA连接酶就是在上述的两个机制扮演重要的角色。除了细胞内的黏合反应，随着分子生物学的进展，几乎大多数的分子生物实验室都会利用DNA连接酶来进行重组DNA的实验，或许这也可以被规类为其另一着重要的功能。