北京师范学校学习。1913年任教于北京市第二小学，同时随一位王姓民间画师学画。后来在《北京晨报》艺圃美术周刊当记者。1930年代任古物陈列所国画研究馆导师，并任教于北京师范学校、京华美专、华北大学、北平艺专。1949年起，历任北京中国画研究会副会长、中央美术学院民族美术研究所研究员、北京市文联常务理事、北京中国画院副院长等职务。于非闇自幼受到家庭和周边环境影响，喜爱书画、诗文，种植花草，钓鱼养鸟，直到40余岁时才将精力集中到工笔花鸟画上。从白描入手，先学的是赵子固、陈老莲的双勾花卉，随后上溯宋朝、五代，