可能是由OH基团攻击连接在Ni上的CO引发，因为在C簇周围有多个碱性残基（包括一个赖氨酸和多个组氨酸），使结合在Fe1上的水分子的pKa值显着降低，从而使水分子转变为活性的OH基团，对CO进行攻击。此外，在C簇附近还有一个保守的天冬氨酸，可以与组氨酸形成氢键连接，促进此酸碱反应的发生。反应生成的H离子通过组氨酸形成的质子通道传递到外部溶剂中。CO被氧化为CO后，C簇接受两个电子从C转变为C，随后两个电子一个接一个地被传递到B簇。传走第一个电子后，C簇转化为中间态C；两个电子都传到B簇后，C簇又重新转化为C，