同父异母的姐姐玛丽的母亲阿拉贡的凯瑟琳的婚姻被宣布无效而使玛丽失去了合法继承人的地位，因而伊丽莎白甫降生便是英格兰王位的推定继承人。亨利迎娶安妮的目的是希望她为自己诞下一个男性继承人，确保都铎王朝的延续。伊丽莎白于9月10日获得施洗，坎特伯雷大主教托马斯·克兰麦、埃克塞特侯爵、诺福克公爵夫人和多塞特侯爵太夫人分别以她的教父和教母的身份出席了受洗仪式。1536年5月19日，伊丽莎白的母亲在女儿只有两岁八个月大的时候受处决，阿拉贡的凯瑟琳也在四个月前自然死亡。伊丽莎白遭宣布为非婚生女，被从王位继承序列中排除