18是新霉素的类似物，其作用机理也与新霉素相似。即，G418可以通过阻断多肽合成（蛋白转译）杀死原核细胞或真核细胞。新霉素抗性基因"neo"可以编码一种能使G418失效的酶，进而使细胞获得对G418的抗性。在实验室中，利用上述机制，可以使用G418筛选基因工程改造后的细胞。
作用机理及抗性机理.G418是一种特殊的抗生素。G418既可以杀死真核细胞，也可以杀死原核细胞。G418的作用机理是通过与80S核糖体（真核细胞）或70S核糖体（原核细胞）结合，进而阻止蛋白转译过程中的延长过程