，分子内约有一百个酪氨酸残基。正常情况下只有10％左右的残基能够被碘化。甲状腺球蛋白在滤泡上皮细胞的粗面内质网中合成，以胞吐作用释放。
碘化.这一过程主要由分布在滤泡上皮细胞的游离面的甲状腺过氧化物酶（）催化。I在TPO催化下被过氧化氢氧化为新生态碘I或I（也可能是次碘酸根IO）。甲状腺球蛋白即将或刚刚释放时，又在TPO催化下与活性碘发生反应，最终生成一碘酪氨酸（）残基和二碘酪氨酸（）残基。TSH可调节过氧化氢的生成和甲状腺过氧化物酶的活性。
缩合.在T