北平协和医学院习医。随后，颜春辉于毕业该年3月前往厦门就读中学，并于数月后考取福建协和大学，后于9月入学；一年后，他再转往北京考进北平协和医学院。当时，协和医学院採取北美医学教育系统，学生必须完成医预科后方可进入协和医学院就读正科；因此，颜春辉先在燕京大学完成理学院课程，后于1928年取得燕京大学与纽约州大学理学士学位。1932年，颜春辉于协和医学院取得医学士（MD）学位，并在毕业后留校担任细菌免疫学助教。1937年，颜春辉获洛克斐勒基金会奖学金，前往多伦多大学卫生学院（School of Hygien