陈以闻是万历三十四年（1606年）的举人，次年（1607年）联捷进士，获授吴县知县，任内不畏强权；调任无钖，实行均田役法，押运需要兑状，判决案件有威严。之后他陞任礼部主客司主事、仪制清吏司主事，晋尚宝司司丞，因为和杨涟、高攀龙友好而被魏珰诬告削籍。崇祯初年他获重新起用，任光禄寺少卿、通政使司左通政、右通政，官至刑部左侍郎。