在新热带界及新北界的结合，最后形成美洲时发生。这次迁徙可以从地层学及新生物学中观察得知。其最明显的影响是哺乳动物的动物地理学，且给予了不懂飞行的鸟类、节肢动物、爬行动物、两栖动物及甚至淡水鱼类机会迁徙。
南美洲特有物种.大部份新生代时期的南美洲都由其他地方所没有的哺乳动物特有种所支配，这些特有种包含了有袋类、贫齿类（如犰狳科、食蚁兽及树懒等）及不同的南蹄目（如南方有蹄目、滑距骨目、闪兽目及焦兽目）。有袋类可能于上白垩纪或第三纪初经南极洲往来南美洲及澳洲。于南美洲的有袋目包括了负鼠目