塑造一个贤后的形象，她经常阅读圣经，并告诫宫庭中的女人行为及衣着要严肃、朴素、谨言慎行，还在怀孕期间大度地将侍女送给亨利。在此期间安妮曾残酷迫害许多反对她成为王后的人，包括折磨亨利八世与凯萨琳的女儿玛丽，安妮·博林与玛丽公主可谓是水火不容，在位期间对玛丽很苛刻，新王后打心眼儿里憎恨玛丽，主要是因为玛丽将对她和国王以后生养的孩子造成威胁，使亨利八世剥夺她「威尔斯公主」的称号，甚至是有传闻安妮企图毒死她。凯瑟琳给安妮写信发出了警告，当时已经18岁的玛丽对她的继母也不友善，她还顽固地坚持安妮·博林只不过是亨利