境下，蛋白质会完全被水解。若移除钙离子，蛋白酶K的稳定性会大幅降低，但其水解活性仍然存在。蛋白酶K对于钙离子具有两个结合位，都在活性中心附近，但都与催化反应无直接关联。在常用缓冲液中的蛋白酶K活性
应用.蛋白酶K时常应用于分子生物学领域。在制备核酸时，蛋白酶K可以将杂蛋白去除，并迅速使核酸酶失活，避免其降解目标产物DNA和RNA。另外，蛋白酶K还有其他优点，它在变性剂存在下仍能保有活性，如SDS、尿素、EDTA等等，这点与其他蛋白酶（如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶）相当不同。