平日活动于陆地上，喜欢躺在岩石上接触阳光以助增温。牠们几乎能活跃于任何季节，只有冬天时行动较为保守，仅于微晴或稍暖的日子时，会以近乎冬眠的姿态缓缓出现以吸收阳光温度。夏天时，是胎生的孪斑响尾蛇的交配期，雌蛇每次生产约能诞下9条幼蛇。孪斑响尾蛇主要捕食蜥蜴、鼠类及鸟类，亦会同类相食。牠们能透过尖长的管牙传送强力毒素，将被其咬中的猎物毒毙，然后再进行吞食。孪斑响尾蛇是相当危险的毒蛇之一，在美国当地的纪录中有很多人类被其咬伤并中毒的事故。虽然如此，在美国阿利桑那州牠们乃属于受保护动物，如果对孪斑响尾蛇作任何杀