若患者有多次特异性较高的事件发作，可能直接透过临床证据即可诊断多发性硬化症。但若仅有发作过一次，则必须进行其他测试来辅助诊断。最常见的工具有神经影像学、脑嵴髓液分析，以及诱发电位测试。核磁共振影像可以显示脑部喊嵴随脱髓鞘的区域，以及斑块等病灶。静脉输注含钆的可以标定活跃斑块，且也可以显影无症状性的斑块病灶。脑嵴髓液分析可以显示中枢神经系统是否存在慢性发炎，需透过腰椎穿刺採检取得。技术员会将脑嵴液进行电泳，检视电泳胶片上是否带有IgG的（oligoclonal band），75–85%的多发性硬化症患者的脑嵴