生物体中。1957年Westling首次从产黄青霉菌中提取出，该分子含有两个异氰基，现在用作抗生素。大多数存在于海洋生物体中的异腈都属于萜类，但从陆生植物体中分离出的异腈中，有些是α-氨基酸的衍生物。
合成.第一个制得的异腈是烯丙基异腈，由化学家Lieke在1859年通过烯丙基碘和氰化银反应制得。碱金属的氰化物发生烷基化一般都得到腈，但由于银离子对碳端的保护作用，上述反应得到异腈。伯胺与二氯卡宾反应或甲酰胺衍生物与三氯氧磷作用失水都可生成异腈，甲酰胺衍生物可由甲酸与胺缩合制得。