系列公路系统主要以401号公路和伊利沙伯皇后道（QEW）为骨干，其他400系列公路皆直接或间接与上述两条公路之一衔接。然而，安省政府并未规定编为400系列的高速公路必需与系统中其他公路衔接（如417号公路在1999年前并未与系统接驳），这一点与美国的州际公路系统有异。另外，由于省府的交通项目预算并未获联邦政府经常性注资，400系列公路系统的扩展速度亦颇为缓慢。400系列公路系统中的16条公路如下：
编号.400系列公路的编号有两种主要产生方法。第一种方法是从400号起顺序递增至