抗原-抗体复合物的形成将随着待测抗原量的增加而减少，而非结合的或游离的标记抗原则随着待测抗原数量的增加而增加（也就是所谓的竞争结合反应），因此测定标记抗原-抗体或标记抗原即可推出待测抗原的数量。抗原的放射性标记常常是利用碘发射γ射线的放射性同位素与酪氨酸结合来实现的。病人血清等标本之中所含的是未经放射性标记的抗原（亦可称为“冷”抗原），即待测抗原。总体上来说，特异性抗体之上抗原结合部位的数量是有限的。相对有限的抗原结合部位而言，标记抗原与待测抗原之间属于竞争关系。通过绘制结合曲线，即可计算出病人血清之中