1529年，西葡间又签订《萨拉戈萨条约》，规定了两国在亚洲的势力分界线。随着其他欧洲国家继取得海上霸权后，葡萄牙于欧洲的地位有所下降。
哈布斯堡王朝（1580－1640）与伊比利亚联盟.1578年，国王塞巴斯蒂昂在摩洛哥的三王战役中阵亡，叔公红衣主教恩里克一世被迫还俗即位，但亦于1580年逝世，造成。随后，西班牙哈布斯堡王朝的费利佩二世宣称他作为曼努埃尔一世的外孙，拥有葡萄牙的继承权、并成功继承之，成为西班牙和葡萄牙的共主，建立伊比利亚联盟。同西班牙的联合使葡萄牙卷入八十年战争