A的反密码子环与mRNA的密码子部分在核糖体的A位结合后，如果密码子-反密码子的配对是正确的，EF-Tu就会将GTP水解为GDP和磷酸。同时EF-Tu会发生构象变化，使其脱离tRNA（同时也从核糖体中脱离）。此时氨酰tRNA完整地进入A位点，其所携带的氨基酸在空间上接近P位肽酰tRNA上的多肽链。核糖体催化肽链与氨基酸的共价结合，并使在P位点的tRNA（此时已无多肽链）移动到E位置并被释放。 EF-Tu 对翻译的精确性有三个作用：1.如果rRNA处于核糖体的A位并不匹配mRNA密码子，它延迟GTP水解，