西洋奴隶贸易——由约翰·霍金斯爵士于1562年发起——获得伊莉莎白的支持，无视于西班牙政府的控诉，指霍金斯在加勒比地区西属殖民地的贸易实已构成走私。1568年9月，一支由霍金斯与法兰西斯·德瑞克爵士领导的奴隶买卖远征队遭到西班牙突击，造成数艘船舰于墨西哥韦拉克鲁斯沉船，即圣胡安战役。这场交战使英西二国关系迅速恶化，翌年英国便扣押了数艘西班牙派遣至荷兰支援军队的珍宝舰队。德瑞克与霍金斯则加强私掠以突破西班牙在大西洋贸易的垄断。为达成宣扬新教的人生宗旨，伊莉莎白提供法国宗教战争与荷兰革命的新教势力援助、