开来，南极洲的气温进一步受到影响，冰层开始出现。同时，在距今约3400万年前的中，温室气体二氧化碳的含量也降至760 ppm，低于较早地质年代中超过1000 ppm的水准。距今约2300万年前，南极洲与南美洲之间的德雷克海峡终于完全分离，这导致了南极绕极流的形成。这股强烈的沿纬线方向运行的海流最终将南极洲与低纬度温暖的海水完全分隔开来。模型显示，同期大气中二氧化碳含量的进一步下降也对南极大陆的气温产生了明显影响。由此，南极大陆的冰层覆盖面积开始扩大，原有的森林渐渐为冰盖所取代。