虫成虫及幼虫、锯蝇幼虫、多种半翅目及草蜢，并百足虫的体内。所以寄生蝇是害虫的天敌，一些物种甚至会作为生物性虫害控制。很多寄生蝇都因而被引入到北美洲。不过，某些寄生蝇却是蚕的害虫。
繁殖.寄生蝇的繁殖方法各有不同。雌蝇可以在寄主的皮肤上产卵、将卵透过产卵管放入寄主的体内、或是产在寄主栖息的环境让寄主自己吞下。一些寄生蝇会在毛虫巢穴之外产卵，待幼虫自行寻找寄主。另外一些寄生蝇会埋伏等待寄主经过，将之杀死，并在尸体上产卵，让幼虫吃寄主的组织。
食性.寄生蝇一般都