糖苷酶。它也被用来检测组织化学和细菌学各种酶的活性。X-gal可以透过许多吲哚酚糖苷和酯，经由酶催化水解产生类似于靛蓝色且不溶的蓝色化合物。
用途.X-gal的是一个模拟的乳糖，因此可以借由β-半乳糖苷酶来对裂解D-乳糖中的β-糖苷键中来进行水解。X-gal当由β-半乳糖苷酶裂解，则会产生半乳糖和5-溴-4-氯-3-羟基吲哚。后者然后自发地二聚化并氧化成5,5'-二溴-4,4'-二氯靛蓝，此化合物为一种不溶性的深蓝色产物。X-gal的本身是无色，但产生的产物为明显的蓝色，因此可被用作