习医，在校与孙中山同学。郑士良是基督徒，又曾加入三合会，为三合会地方首领。毕业后，郑士良在淡水墟开设同生药房，暗中联络会党，为日后起事作准备。1893年参加在广州广雅书局内南园广雅抗风轩的会议。1895年，在香港复设兴中会分部，准备袭取广州，然事机不密，清政府展开搜捕，陆皓东被捕，从容就义。第一次起义失败后偕陈少白流亡至日本。1899年郑士良参与成立兴汉会（兴中会、哥老会、三合会联合组成），推孙中山为会长。1900年6月，义和团运动爆发，八国联军攻打北京。郑士良受孙中山委托，于10月8日募集志士六百余人