1601年9月27日，荷兰战船“阿姆斯特丹”号和“戈乌达”号以及一只双桅小船出现在澳门水域，但被葡萄牙人击退，数名荷兰人被俘后被处死。第二次入侵发生在1604年，荷兰舰队司令韦麻郎（Wybrandt van Waerwijck）率领一支舰队，6月从马来半岛出发，7月中旬到达广东沿岸，准备侵略澳门，但遇上台风，把舰队吹至澎湖列岛一带，后来被明朝福建海军将领沈有容击退。第三次入侵在1607年，荷兰派出马特里也夫舰长到澳门侦察，被葡萄牙6艘军船赶走。1609年西班牙与荷兰签订了1609年安特卫普协议，同意