莱丝·达拉斯·霍华和詹姆斯·克伦威尔饰演新角色。电影设定于第二部剧情发生的三年后，彼得·帕克继续蜘蛛人英雄使命时，其恋人玛莉珍·华生则继续她的演艺事业，昔日挚友哈利·奥斯本变成新一代绿恶魔，开始追杀彼得来为父报仇。电影同时首次介绍两位蜘蛛人的新敌人：沙人和勐毒，同时介绍蜘蛛人的另一名恋人关·史黛西。电影上映后获得8.9亿美元的全球票房，作为整部系列的最高成绩。上映后获得中等评价，好评主要集中于动作场面、演出、特效、音乐方面，而批评主要集中于一部分无伸张的情节以及过度使用三位反派。票房成功本让哥伦比亚