变制裁中国共产党后，中国共产党第五次全国代表大会在武汉召开，8月7日共产党在汉口召开会议，提出枪杆子里面出政权，确立武装暴动反抗国民党统治的方针，第一次国共合作宣告失败。11月起，桂系军阀建立在武汉的统治，直到1929年被蒋介石军攻克。1920年代直至抗日战争前夜，武汉城市规模急速扩大，到1936年末有民营近代工厂516家，人口超过120万。抗日战争初期，南京国民政府将武汉作为战时首都据此抵抗日军入侵，为国民政府内迁争取时间。1937年11月，国民政府行政院军事委员会等部门陆续迁至武汉，蒋中正来到武汉指挥