赛的题目由各省分会在2月左右选出30至50题，包括单选题（4或5选一）和多选题（4或5选多），送到全国竞赛委员会选用，最后由命题小组选定联赛和竞赛试题。其中联赛试题难度大于高考，包含理论题和实验题。试题通常涉及的范围有细胞生物学、生物化学、微生物学、生物信息学、生物技术（25%）；植物和动物的解剖、生理、组织和器官的结构与功能 （30%）；动物行为学、生态学（20%）；遗传学与进化生物学、生物系统学（25%）。联赛一等奖获得者中通过选拔挑选8人组成各省（自治区、直辖市）代表队参加在每年8月举行的全国生物