ection::::过程.
制造目的基因.一般用PCR来制造目的基因。PCR中所用的Taq酶无3'-5'端外切活性，容易在3'端额外加上一个腺嘌呤（A）。因而PCR产物两条链3'端一般都多出一个腺嘌呤。如果PCR引物的5'端含有鸟嘌呤（G）的话，能使得3'端加上腺嘌呤的机率最大化。值得注意的是，制造用于TA克隆的目的基因的DNA聚合酶不能有3'-5'外切活性，否则产物的3'端不会多出一个额外的腺嘌呤。
制造载体.首先，将想要使用的载体用能产生平滑末端的限制酶