大公国正式改称俄罗斯沙皇国，伊凡四世加冕为俄罗斯沙皇。1550年，沙皇俄国先后攻打喀山汗国、阿斯特拉罕汗国、克里米亚汗国。其中，克里米亚汗国寿命最长，因为它是当代强大的奥斯曼土耳其帝国的封臣。
波兰-立陶宛联邦.1569年，卢布林联合，波兰立陶宛联邦诞生，乌克兰被纳入波兰的统治之下。由于联邦的创立及其对此地殖民的努力，这时期的发展相当迅速，有众多波兰的农民来到这里，连带使得许多新的城市及村庄在乌克兰地区形成，文艺复兴的观念也借由新建立的学校逐渐传播开来。这时期有许多乌克兰贵族改