片断的硷基排列顺序。如图A所示，该DNA片断的序列顺序为TAGGCTTCGTA。随着Sanger测序技术的发展，ddNTP的标记技术有了很大的提高。不同种类的ddNTP可以被不同荧光基团所标记，而这些荧光基团具有相同的激发波长和不同的发射波长，因而在光学上表现为不同的颜色。因此，测序反应可以在一个体系中进行，满足了业界对测序速度、自动化及通量不断提高的要求。如图B所示，原本四个不同的测序反应被单一测序反应所取代。
自动化测序仪.桑格法操作简便，因此被广泛使用，在其基础上衍生出荧