初任泾阳县知县，曾拒建魏忠贤生祠。崇祯四年（1631年）擢四川道监察御史。崇祯六年（1633年）巡按福建，海盗刘香勾结荷兰人入侵者犯边，振飞重用郑芝龙，平定刘香，驱逐荷兰舰队。崇祯十六年（1644年）秋，擢都察院右佥都御史，总督漕运，巡抚淮扬。明亡后致书南京兵部尚书史可法，谓“伦序当在福王，宜早定社稷主”。明绍宗即位，于振飞有旧恩，下诏封振飞为右都御史、太子太保、文渊阁大学士兼吏部尚书等职。路振飞三子路泽浓年方十七，随父亲谒见隆武帝，隆武帝赐其名为太平，授锦衣卫百户、改兵部职方司主事，不久，升广西按察使司佥