柱用无色苯胺蓝溶液染色并压片，在荧光显微镜(FM)下观察花粉管在花柱中的生长。成功的自花传粉植物的自然结实率约爲85%(Weinsetal.，1987)，而四药门花的自然结实率仅有4.79%±1.45%，远低于前者，也远低与同属同样具有自花授粉习性的檵木(未发表数据)。由于四药门花自交亲和并且花粉可以无障碍地传播到自花柱头上，所以结实率不受花粉量或传粉者的限制；自交与人工辅助异交的结实率差异不显着，说明资源限制应该是结实率的主要限制因素。四药门花的自然分布间断而狭窄，居群规模都很小，长期的自交可能导致其