道路，北起景德路，南到道前街，东西横贯古城的干道干将路将养育巷分割为南北两段。与养育巷交汇的东西向街巷有：慕家花园、海红坊、古吴路、长春巷、桂和坊、富郎中巷、花街巷、柳巷、庙堂巷、瓣莲巷等。养育巷上坐落着苏州两座重要的基督教堂，一座仍在开放的是由美南长老会开辟的思杜堂（现名使徒堂），另一座较晚恢复开放的是由美南监理会开辟的救世堂，也已被列为文物保护单位。