弗雷德·米尔斯基表示变性是一个可逆的，共存的过程， 致使许多化学基团能参与化学反应，包括裂解酶. 1929年，吴宪正确地假设变性相当于蛋白质打开，换句话说也就是一个纯粹的导致氨基酸侧链暴露在溶剂中的构象变化.. 吴的假设也在1936年分别被米尔斯基和莱纳斯·鲍林进一步完善. 然而，研究蛋白质的科学家不能排除变性是一个蛋白质结构化学变化的可能性，该假设知道20世纪50年代才被认为是有一定（相对较小的）可能性. 1911年，X射线晶体学才开始成为一门学科，同时相对迅速地推进了从简单的盐晶到复杂分子的晶体，比