之下，消耗ATP分子并转变成草酰乙酸（Oxaloacetate）。之后草醋酸又会经由磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶（Phosphoenolpyruvate carboxykinase）的催化，生成磷酸烯醇丙酮酸，在这个反应中，会消耗掉GTP，并生成GDP与二氧化碳。与前后反应不同的是，以上的两个反应是在粒线体中进行。而且除了直接转变之外，草醋酸还可以利用另一个需要更多步骤的途径，来生成磷酸烯醇丙酮酸。此外，从磷酸烯醇丙酮酸的生成直到果糖-1,6-双磷酸产生为止，中间的糖质新生过程皆是糖解作用的逆反应。S