给近江、赞岐、筑后等各地信徒表示跟织田信长为敌之意，一向一揆就此正式跟织田信长对立，当织田信长将朝仓义景、浅井长政包围在比叡山时（志贺之阵），伊势国北部的长岛一向一揆在愿証寺住持証意的领导下，蜂起进攻伊势、尾张两国边境的小木江城，作为城主的织田信长七弟织田信兴虽然奋战，但依然寡不敌众，最后于天守切腹自杀。
第一次长岛征伐.翌年元龟2年（1571年）5月，织田信长挥师5万进逼伊势长岛，企图攻打长岛一向一揆，织田信长将本阵设在津岛，全军分成三方发动攻势，除了信长本阵外，中筋口由佐久间信