公式化，并于1890年由柯霍独立修正后公诸于世，并以此为基础建立炭疽和结核的病原学，但这套思维已被广泛运用在其他许多疾病上。
柯霍氏法则.柯霍氏法则主要分为四个步骤：
理论缺陷.1893年发现有些霍乱带原者以及伤寒玛莉等案例并无任何症状表现，因此柯霍后来又将第一条原则后半删去。后来在小儿麻痺、疱疹、爱滋病、C型肝炎都有类似发现，甚至今日几乎所有医师和病毒学家都认同小儿麻痺病毒只会对少数感染者造成瘫痪。第三条原则也同样不尽完美，柯霍本身也在1884年发现