；1585年，两家分别攻击真田家在信浓、上野的领地。信浓上田城遭受德川家的鸟居元忠领军攻打，爆发第一次上田城之战（别称神川合战）。此役，真田军仅以2000兵，击退德川方面的7000大军，战后仍然与家康对立，并于同年攻击德川领地佐久郡。此后真田昌幸将次男真田信繁送至上杉景胜处做为人质，以取得上杉家的保护。
丰臣家大名.1586年，上杉景胜归顺羽柴秀吉，真田昌幸亦随同效忠。不久，德川家康亦臣服秀吉，于是，真田的威胁只剩北条。真田家与北条家为了上野沼田的领地，长年纷争不断，1589年终于