组成模板链并再进一步参与配对。DNA聚合酶以去氧核苷酸三磷酸（dATP、dCTP、dGTP、或dTTP，四者统称dNTPs）为底物，沿模板的3'→5'方向，将对应的去氧核苷酸连接到新生DNA链的3'端，使新生链沿5'→3'方向延长。新链与原有的模板链序列互补，亦与模板链的原配对链序列一致。已知的所有DNA聚合酶均以5'→3'方向合成DNA，且均不能「重新」（"de novo"）合成DNA，而只能将去氧核苷酸加到已有的RNA或DNA的3'端羟基上。因此，DNA聚合酶除了需要模板做为序列指导，也必需-{