·佛罗伦斯（Ezio Auditore da Firenze）前往到15世纪的西班牙，去解放那些跟随他的刺客们，这些刺客被西班牙宗教法庭所监禁。在解救之旅上，埃奇欧发现圣殿骑士团计划向西航行去发现新大陆。埃奇欧必须救下克里斯托弗·哥伦布，并且杀死托马斯·托尔克马达以消除圣殿骑士的威胁。 埃奇欧也必须暗杀掉一些其他的重要目标，如：加斯珀·马丁内斯，佩德罗·略伦特，圣殿骑士的间谍以及胡安·德·马里罗。一路上，埃奇欧也救了很多协助他的刺客，包括路易斯·圣地亚戈和拉斐尔·桑切斯。格拉纳达市在圣殿骑士们的围困之下