十一年（1593年），为赵用贤之事上疏指责首辅王钖爵，又与户部郎中杨应宿互相攻击，谪揭阳县典史，回乡家居近三十年。万历三十二年（1604年），与顾宪成等人于东林书院讲学，时称“高顾”。明熹宗即位，起用为光禄寺丞，官至左都御史。在铲除外戚、权贵及浙党方从哲的斗争中发挥很大作用。又主张澄清吏治，反对恢复征商。天启四年（1624年），因为揭露魏忠贤党人崔呈秀贪秽而被罢官，再归故里。天启六年，魏忠贤命人伪造织造太监李实的奏本，诬告高攀龙、周起元、周顺昌、缪昌期、李应升、周宗建、黄尊素七人贪污白银十余万两，高