担任中共江浙区委书记，1926年—1927年与周恩来、赵世炎等领导三次上海工人武装起义，第三次起义胜利后曾任上海特别市临时市政府主任委员。1927年中共五大上，当选为中央委员，后历任中共江西省委书记、中共湖北省委书记、中共中央长江局书记，1927年八七会议上当选为中共中央临时政治局委员，十一月扩大会议入选为政治局常务委员并兼任中共组织局主任，成为中共最高层领导人之一。1928年4月15日，罗亦农因秘书霍家新(何家兴），贺治华（贺芝华,与朱德离异后嫁霍）夫妇叛变出卖，在上海公共租界内戈登路（今江宁路）