交关系升格为大使级，并升格为大使馆。1921年，召开华盛顿会议，签署九国公约，再次确定通过「门户开放政策」以维持中国的领土完整，然而此次由美国、英国、日本、法国及中国共同签署的协定缺乏实施细则；1931年9月18日，日本发动「九一八事变」侵略满洲并建立满洲国，门户开放政策随之不存，使各国减少约束力。
南京政府时期（1928年－1937年）.1928年7月25日，美国驻华公使马慕瑞与国民政府代表财政部长宋子文在南京签订《中美关税新约》，条约签订意味着美国已正式承认南京政府。中国抗日战