2月10日卡洛斯一世的妹妹奥地利的凯瑟琳嫁给葡萄牙约翰三世。在1526年3月11日，卡洛斯一世与约翰三世的姐姐葡萄牙的伊莎贝拉结婚。这些相互之间的婚礼加强了两国之间的关系，有助于签署摩鹿加群岛的协议。1529年，条约签订。以“香料群岛”以东297.5里格处的经线为界，划出了两大帝国瓜分世界的另一条分界线。位于东经142度附近。