1927年1月，林育英经中共地下党调动，抵达汉口，任武汉国民政府军事委员会的副官兼特务队队长，七一五事变中，他开办了木器店，作为中共秘密联络处。1927年9月，他接受中共湖北省委的命令，与王觉新、施炳干组成中共鄂东特委（施炳干担任书记），领导大冶县、阳新县、鄂城县的秋收暴动，但暴动失败。1927年秋，林育英任中共硚口区委书记。10月，任中共武昌市委工委书记。11月10日，参加中共湖北省委召开的武汉区、市、县委书记会议。12月14日，参加扩大会议，被选为大会主席团成员。1928年1月，他与欧阳梅生、蒋宗