的门徒变成了教会的领导人。画中只有两位基督门徒的身份确定无疑：彼得和约翰。彼得穿着蓝黄两色的衣服，头发与胡须灰白。约翰是站在基督一旁的年轻弟子，没有胡须。约翰的头像让人联想到罗马雕塑。基督右侧的另一位门徒的面部与约翰非常相似。这位门徒旁边的人被认为是犹大，他面色黑暗、神情阴险，恰与一旁的税吏相似。瓦萨里最早猜测称，画面最右边的使徒是多默，也是马萨乔的自画像。