操作步骤为:三明治法分别以两种抗体对检体中的抗原进行两次专一性辨认，因此专一性相当高，但此待测抗原必须是多价抗原，如此才可获得两种以上的专一性抗体，以分别进行夹心；而且此法需要足够的表位空间以进行抗原抗体的夹心，所以并不适用于半抗原或小分子抗原等分子量较小之标的。
间接法.间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：
竞争法.竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原