马帝国的查理五世成为尼德兰17省的领主。1528年，乌得勒支主教的世俗行政权力也被收归查理五世。
乌得勒支同盟.1579年，北方7省缔结乌得勒支同盟，共同反抗西班牙统治。同盟的成立标志着荷兰联省共和国的开端。1580年，信奉新教为主的同盟废除了主教，包括乌得勒支总主教。在17世纪，乌得勒支成为荷兰水道上的重要堡垒。1713年，西班牙王位继承战争结束，在乌得勒支签订了乌特勒支条约。1843年，连接阿姆斯特丹和乌得勒支的铁路通车。乌得勒支逐渐成为荷兰铁路网的枢纽。随着工