0马力、“B”代表机车轴式为Bo-Bo。1961年，首批四台U25B型柴油机车交付圣路易斯－旧金山铁路（St. Louis–San Francisco Railway）。此后，联合太平洋铁路、宾夕法尼亚铁路、南太平洋铁路、纽约中央铁路、岩岛铁路、切萨皮克与俄亥俄铁路等铁路公司陆续订购了更多的U25B型柴油机车，还有一些公司订购了六轴版本的U25C型柴油机车。至1966年2月停产为止，通用电气公司共生产了478台U25B型柴油机车（包括最初的两台原型车）。同级的后继产品为U28B型柴油机车。