胁时，真田昌幸又背弃北条家，透过武田旧臣属曾根昌世的居中协调与德川家亲善，并派长子真田信幸（关原战后改名信之）至德川家成为人质。之后德川、北条两家和解；德川家康为了取信北条家，要求形式上属于己方的真田家将沼田城归还北条方。真田昌幸加以回绝，除了着手修筑上田城外，并倒向上杉。真田昌幸的反覆引来德川、北条的不满；1585年，两家分别攻击真田家在信浓、上野的领地。信浓上田城遭受德川家的鸟居元忠领军攻打，爆发第一次上田城之战（别称神川合战）。此役，真田军仅以2000兵，击退德川方面的7000大军，战后仍然与家康对立