作飞行员训练。首架载客航班于1964年2月1日由东方航空执行，设有28个头等位及66个旅游位。目前服役的波音727需要装上减音装置，以符合第三噪音等级限制。其中一款由联邦快递提供，并且有超过60家公司购买使用，而Valsan Partners亦提供翼尖小翼设计并在配置在不少波音727上，能在低速飞航时降低噪音和耗油量。
衍生型号.
727-100.第一架波音727-00（又称727-100）于1963年2月9日首飞，次年在美国东方航空执行首个载客航班，来往