DNA聚合酶III（），是原核生物进行DNA复制时主要使用的一种酶。该酶于1970年由发现。这种酶复合物具有很强的持续合成能力。作为DNA复制的主要酶，DNA聚合酶III能以外切酶的形式从3'端到5'端运作以纠正复制过程中的错误。DNA聚合酶III是复制体的组成成分之一，其位于复制分叉处。