回四线行车，相反方向车道之间亦从高墙护栏改以草坪分隔。温莎市和伦敦市之间的401号公路（特别是提尔伯里以西的路段）走线笔直且地势平坦，驾驶人士观感缺乏刺激，导致此处严重车祸频生。402号公路在伦敦市南部汇入401号公路，后者遂恢复来回六线行车，到胡士托以南与403号公路交汇，此后往东北伸延至滑铁卢区并与8号公路交汇，透过此公路连接滑铁卢、基秦拿和剑桥。401号公路此后继续往东伸延至荷顿区的苗顿镇，达至大多伦多地区的外围。
大多伦多地区.401号公路在大多伦多地区内的大部分路段