通过同源重组的方法替换掉内源的正常同源基因，从而使内源基因失活而表现突变体的性状的技术或方法。小鼠基因敲除技术首先由马里奥·卡佩奇、奥利弗·史密斯于 1987年 构建成功，他们因为这一成就于 2007 年同小鼠干细胞分离技术创始人马丁·埃文斯分享了2007年的诺贝尔生理学或医学奖。