南京市鼓楼幼儿园前身是鼓楼幼稚园，即国立东南大学教育科实验幼稚园，由南京高等师范学校和国立东南大学（后改为国立中央大学、南京大学）教育科（教育科即今南京师范大学）教授陈鹤琴在陶行知、徐养秋等人支持下于民国12年（1923年）创办。鼓幼在中国幼儿教育史上具有特殊的意义，是中国现代幼儿教育的诞生地，也是中国历史上第一所开展现代教育科学研究的幼稚园。民国早年作为南京高师与东大实验幼稚园的鼓楼幼稚园，和南高、东大附属小学、附属中学一起，构成了现代中国基础教育科学化研究的实验中心。1952年8月，鼓楼幼稚园改名为南京