守、左兵卫大夫。父亲是蒲生高乡，妻子是马渊山城守的女儿。
生平.永正五年（1508年）蒲生定秀出生。之后和父亲蒲生高乡一同仕任南近江的六角氏，而蒲生高乡则把蒲生氏分为两家，本家家督由定秀的兄弟蒲生秀纪继承。高乡和定秀两父子得到六角定赖的信任，后来定秀和六角氏重臣马渊氏的女儿结婚，蒲生氏在六角氏得到稳固的地位。大永二年（1522年）音羽城的蒲生秀纪遭遇攻击，大永三年（1523年）3月到8月的笼城战秀纪被降服，后来在六角定赖的仲裁下秀纪和定秀的蒲生家家督争让事件也从和睦下结束。大永