大青鲨的主要猎物，但也包括乌贼、章鱼、龙虾、虾、蟹等无嵴椎动物，以及大量硬骨鱼，小型鲨鱼和哺乳动物腐肉等。有时也以海鸟为食。在捕获的大青鲨的胃中有鲸脂发现，也有发现大青鲨从渔船拖网中取食鳕鱼的现象。
繁殖.大青鲨为胎生动物，有卵黄囊胎盘，每胎可生4—100只幼体。母鲨妊娠期为9—12个月。雌性个体在5—6岁时成熟，雄性则在4—5岁。目前普遍认为雄性在求偶过程中会咬雌性，因而成年大青鲨个体可根据其是否有啮痕来鉴定其性别，为适应这种交配方式， 雌性大青鲨进化出了比雄性厚3倍的皮层。