咪唑环的（1,5）或（3,4）键可在α-氨基二乙缩醛与亚氨酸酯作用生成脒再进一步生成咪唑的反应中生成。高温加热1,2-脂肪二胺与乙醇、乙醛或羧酸混合物可生成咪唑环的（1,2）和（2,3）键。此反应需要脱氢催化剂如铂或氧化铝的催化。工业上用邻苯二胺与甲酸反应生成苯并咪唑，用双氧水处理，开环转化为咪唑-4,5-二羧酸，最后与氧化铜混合加热，发生脱羧生成咪唑。或者也可用酒石酸与发烟硝酸和浓硫酸混合搅拌后，得到酒石酸二硝酸酯，然后与氨水、甲醛反应，生成的二羰基丁二酸未经分离便转化为咪唑-4,5-二羧酸