姐妹城市是指将地域或政治上没有关联的城市联系起来，以期促进相互间的人员接触和文化联系，并且这样的联系并不局限于城市之间，在县、地区、州（省）和其他国家以下的行政区之间都可以进行。佛罗里达州的各个司法管辖区经常通过国际姐妹城协会与他国城市结成伙伴关系，该组织的目标是“通过相互尊重、理解与合作促进和平”。各姐妹城市之间可以通过各种各样的活动互动，如医疗保健、教育、商业和艺术等。
佛罗里达的姐妹州、县和城市.</onlyinclude>除非另有说明，以下的列表中的信息都是根据国际姐