400系列公路（）是加拿大安大略省南部一系列高速公路，构成该省省道网络的一部分。此系列公路具有严谨的标准规格，部分设计特点更获北美其他交通部门建设高速公路时所仿效，当中包括局部苜蓿叶型交流道（）以及由纽泽西护栏设计演变而成的安大略高墙护栏（）。安省政府在探讨将某条交通走廊升格为400系列高速公路时，主要考虑该走廊的每日平均汽车流量是否达致10000架次，但偶然亦会考虑其他因素。某些交通走廊的车流低于上述门槛，但省府为了刺激该区经济会考虑将之升格至400系列公路资格（例如安省北部的400号公路延伸计划）。