对于一分子葡萄糖所进行的糖解作用来说，在此反应将会有两分子的NADH与两分子1,3-双磷酸甘油酸的诞生。接下来两分子的1,3-双磷酸甘油酸会经由磷酸甘油酸激酶（Phosphoglycerate kinase）的催化，而生成3-磷酸甘油酸，并且使两个ADP转变成ATP，这是糖解作用过程中第一个生成ATP的步骤。