。磷酸钙（磷灰石）晶体沉积在骨骼上，这些晶体中的钙离子和茜素结合在一起，使得骨头被染成红色。就像一样，茜素与金属离子结合，因此尽管只是骨骼骨骼系统的一部分的鱼鳞，仍会因为钙沉积被染成红色。
透明化.标本在硷性水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾或者是使用蛋白酶的水溶液的情况下，他们会水解蛋白质的肽键。在蛋白质分子和蛋白质分子之间，由于侧链氨基已经和福马林形成交叉链接，因此保留了分子间交叉链接的结构，并且组织变得适度地微弱而留下外形。最后，当用甘油置换该样品中的水时，软组织几乎呈现完全透明