分来说，穴鸮通常以大型昆虫与小型的啮齿目动物，而像地松鼠此类动物，穴鸮虽然时常接近，但捕食机率不高。再有鳞目和两栖动物中，穴鸮尤其偏好蜥虎、青蛙和蟾蜍。通常情况下，穴鸮所猎捕之嵴椎动物为脱离群体，落单的个体。而穴鸮最常猎捕的嵴椎动物是小型鸟类，如：哀鸽属。而在无嵴椎动物方面，穴鸮并没特别的偏好与特定猎食对象。举凡白蚁、直翅目的螽斯科与沙螽科（Jerusalem cricket）、蟋蟀、金龟子、狼蛛、蝎子、马陆、步行虫（Ground beetle）皆为其狩猎之对象。不同于其他猫头鹰，穴鸮为杂食动物