和身旁的介错人助手准备好，切腹者会揭开身穿的和服，拿起刀，捅进自己腹部。切腹者首先从左至右的切割，然后作稍微向上的第二刀，让其肠脏溢出。切出第二刀之时，介错人进行抱首，即挥刀向切腹者的脖子斩下，但不完全斩断，让头和脖子仍有一丝牵连。由于这一刀要非常精确，介错人一般是剑术高手。切腹者会和介错人预先同意何时彻底完成斩首。介错人一般是切腹自杀者的亲友。武士如果战败但输得光荣，对手可能会为了向其勇气致敬，而自愿担当介错人。
女性切腹.日本最古老的女性切腹记录是《播磨风土记》中淡海的女神