给寻求连任的国民党籍候选人郝龙斌的55.65%，选票输近十七万票。2011年3月21日下午，苏贞昌透过简讯宣布参加民进党2012年总统大选党内初选，并于22日下午七时于台北市公务人力发展中心召开记者会，发表「脚踏土地，迎向未来」的声明，正式宣布参选，高雄市长陈菊、台南市长赖清德、总统府前国策顾问李乔、前资政钟肇政等皆出席记者会。选战期间，蔡英文阵营传出唿吁支持者以「唯一支持」及「蔡妈妈」（蔡英文、马英九、马英九）等方式回答对比式电话民调，并指蓝营动员农渔会系统暗助苏贞昌。苏贞昌于4月13日党内第二场政见