胞是重要的考虑，其质粒必须包含的lacZ α，例如：pUC19和pBluescript中。该大肠桿菌细胞应含有突变的lacZ基因与已被删除的序列（即lacZΔM15）除此之外，JM109、DH5α和XL1-蓝亦为常用的细胞基因型。还必须了解的是，乳糖操纵子是受葡萄糖的存在影响。蛋白质EIIA 葡萄糖会参与糖输入和当葡萄糖被输送到细胞中关闭乳糖通透性酶。所以在培养基板上媒介不应包括葡萄糖。X-gal的对光是相当敏感敏感的，因此它的溶液和含有X-gal的培养基应放置于黑暗中。异丙基β-D-1-硫代半乳糖