安知县迁南京刑部主事。嘉靖二年（1523年）十一月，爆发大礼议事件，桂萼上疏请斥逐杨廷和，并率先与张璁支持明世宗立生父为皇考。嘉靖四年（1525年）升任詹事，仍兼翰林学士，因为屡次支持世宗，而受到廷臣反对，其与张璁接连成功弹劾费宏与石珤等人。此后屡次被给事中弹劾，但仍然留用，他亦请求世宗开言路并惩治奸臣浪费等，得到实行。嘉靖六年（1527年）三月，晋升为礼部右侍郎，仍然兼翰林学士。同年九月，改吏部左侍郎，又升礼部尚书兼翰林学士，明代尚书兼学士自桂萼始。嘉靖七年（1528年）正月，加太子太保。《明伦大典》