在1896年夏季奥林匹克运动会田径比赛中，男子400米本届奥运会田径项目第五项举行的项目，于1896年4月6日举行预赛，比赛共有来自4个国家的7名运动员参与预赛，其中5名运动员已经参加100米赛事。预赛将参赛选手分为两个小组进行，小组成绩最佳的两名选手则可晋身决赛，决赛于4月7日在进行。
赛果.
预赛.所有预赛于4月6日在帕那辛纳克体育场进行。Q - 小组首两名出线 
第1小组.美国选手Herbert Jamison以56.8秒的成