甾醇-27-羟化酶（，），是细胞色素P450超家族的一员，由"CYP27A1"基因编码，是定位于许多不同组织线粒体内膜的单加氧酶，能催化多种甾醇侧链上27号位以及其它位置的羟基化，如在胆汁酸合成中催化胆固醇生成27-羟基胆固醇，在维生素D合成代谢中催化胆钙化醇（维生素D）生成骨化二醇（25-羟基维生素D）。