溯机器「Animus」的强化版）以进入其另一刺客祖先的记忆，希望借由长期进入Animus 而带来之「血缘效果」（Bleeding Effect），于短时间内学会其刺客祖先的所有技能以对抗势力强大之现代圣殿骑士团。1476年文艺复兴时期，17岁的埃奇欧·奥狄托雷（Ezio Auditore da Firenze）是意大利佛罗伦斯之贵族，其家族因一场政治阴谋而受牵连，父亲（银行家，真实身份实为刺客）、兄长以及弟弟被判以叛国罪名而被处以绞刑。埃奇欧带着母亲及妹妹逃离佛罗伦斯至蒙特里久尼投靠伯父马力欧·奥狄托雷