帝国早期的印刷中心，它在知识与政治方面，对新教在德国西南部确立其地位产生了重大影响。1530年，在帝国奥格斯堡会议上， 斯特拉斯堡和另外4个自由城市一起呈递了一份表明他们新教信仰的信条，不过与他们呈交给查理五世的奥格斯堡信纲略有不同。16世纪初，神圣罗马帝国宪法改革以后，成立了帝国圈（），斯特拉斯堡成为帝国西南部的上莱茵循环的一部分，主要负责供养军队监督造币、确保公共安全。斯特拉斯堡自由市在三十年战争期间保持中立。1681年9月，斯特拉斯堡被法国国王路易十四夺取，这次吞并得到了1697年里斯维克和约