花鸟画的一大特色是题材上以状写岭南风物为主。在早于居巢的广东画家中，也有尝试描绘岭南特有物产的画家，但其所画的品种较少。居巢居廉则不同，其所画的花卉草虫、蔬果水族以及时令风俗等异常丰富，其中多为岭南独有的品种。画中所描绘的动植物超过两百种，其中包括荔枝、龙眼、香蕉、芒果、橄榄、菠萝蜜等，以及各类小花小草小虫。以往作画题材中罕见的水族动物也是居巢作画的题材之一，从草鱼、鲤鱼到螺、蚬等，都有涉及。此外居巢、居廉还喜画昆虫。邓秋枚称居巢“草虫尤胜”，高剑父在其《居古泉先生的画法》一文中首先介绍的也是其昆虫画。