子还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸到其氧化型的方式使得二羟丙酮磷酸转变成甘油-3-磷酸，其反应过程如图所示：
反向路径.在与膜结合的线粒体磷酸甘油脱氢酶的作用下，甘油-3-磷酸得以变回二羟丙酮磷酸，这回是还原一分子的与酶结合的黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）成为还原黄素腺嘌呤二核苷酸（FADH）。接着FADH还原辅酶Q（氧化型到还原型），而还原型辅酶Q进入氧化磷酸化。该过程是可逆的。
功能.甘油-3-磷酸穿梭可以使得在细胞质中由糖酵解所产生的NADH可以进入到线粒体