后，美国大使馆于3月21日关闭，大使则在4月6日离开，华盛顿改与伦敦的流亡政府建立外交关系，美国大使办事处也于1941年9月17日在伦敦开张，直到二战结束为止。1945年5月29日，美国大使馆重新在布拉格挂牌。1993年1月1日，随着捷克斯洛伐克的和平解体而生成两个独立国家。布拉格的美国驻捷克斯洛伐克大使馆，便直接改为驻捷克共和国大使馆，同时也在斯洛伐克首都布拉提斯拉瓦建立另一个新的美国大使馆。为，获得美国总统唐纳德·川普提名后，于2017年10月18日上任。