1年，日本突袭珍珠港后，第25步兵师随即奉命防守瓦胡岛南部地区。1942年8月，第161步兵团取代第298步兵团成为第25步兵师的第3个团，第298步兵团则归属夏威夷国民警卫队而担负保卫夏威夷的任务。二战中，第25步兵师参与的最重要的军事行动就是瓜达尔卡纳尔岛战役。这次战役从1942年8月展开，到1943年2月日本在瓜达尔卡纳尔岛全面溃退而结束，共经历了6个月的时间。直到战役后期，双方进入胶着状态时，第25步兵师才正式参战。1942年11月25日，美国第25步兵师师长劳顿·科林斯少将奉命率部通过船载前往南太