c acid, NTA)，此时胶体即可螯合二价或三价的金属离子，例如镍离子、钴离子、铜离子及铁离子。组氨酸标签亲和性层析胶体最常搭配的二价离子为镍离子，螯合上镍离子的胶体称为Ni-chelate, Ni-IDA 或 Ni-NTA 胶体。由于组氨酸上的咪唑官能基带有局部负电荷，故组氨酸标签能与被胶体螯合住的金属离子产生异性电荷相吸力，因此带有组氨酸标签的蛋白质即可被胶体吸附，其余宿主的蛋白质因无法吸附所以被流洗掉，接着用含有150-300mM的咪唑(Imidazole)溶液将重组蛋白洗出，达到纯化的效果。