单向运输载体的作用方式是一次结合一个受质的分子。单向运输通道会因为刺激而开启，并允许特定分子的单向运输。有几种开启单向运输通道的方式：在许多生物学过程中都有单向运输通道，例如神经元中的主动电位、在神经元的动作电位传输时，会用到电压调节的钠离子通道。在信号由一个神经元传到另一个一个神经元时，会透过电压调节的钙通道将钙离子输送到。也是由电压调节，在动作电位传输后会使得膜电位恢复到正常值。耳中的声音会开启耳中应力调节的运输通道，传送动作电位到前庭耳蜗神经（VIII）。