培养基中连续供应细胞悬浮液，即罗斯威尔帕克纪念研究所培养基 + 10％胎牛血清 + 2mM L-麸醯胺酸。平均倍增时间为19至50小时。通常会添加1 mM 丙酮酸钠、青霉素（100单位/毫升）和链霉素（100μg/毫升）以抑制细菌污染。在37°C及5％二氧化碳的状况下，培养物应保持在2-9x10细胞/毫升的细胞密度范围内，并且细胞是非粘附的。THP-1细胞是人源细胞系，尚未发现存在感染性病毒或有毒产物的证据，但是仍然建议对培养物进行2级生物安全控制。