常在开始感染后2至5週即会呈现阳性反应，而神经性梅毒可借由已知梅毒感染下，大量的白血球（主要是淋巴球）及脑嵴液中高蛋白质含量作诊断。
直接测试.下疳患者的在暗视野显微镜下可能可以做立即性的诊断。在取得检体10分钟以内要做检验，灵敏度可达到接近80%，然而医院并不是随时备有这样的设备给检验人员使用，因此仅可用作确认，而非初步诊断。另外2种试验也可用于检验下疳患者的检体，（DFA）及核酸增幅试验。直接萤光抗体试验利用标有萤光素的抗体与特定的梅毒蛋白结合，而核酸增幅试验利用聚合酶链锁反应