为一场失败的实验导致爱妻丧命，使他用安装在他身上的四条机械手臂开始在纽约市作乱，迫使彼得必须再次上阵，制止博士将会毁灭全市的计划。《蜘蛛人2》于2002年11月开拍，一直进行到2003年圣诞节之后。《蜘蛛人2》于2004年6月22日在美国加州洛杉矶西木区的首映，并随后于同年6月30日在北美院线上映。该片叫好又叫座，蒙利纳的演技尤其广受好评，且其时至今日仍被誉为有史以来最佳的超级英雄电影之一。《蜘蛛人2》在第77届奥斯卡金像奖颁奖典礼上入围最佳音效剪辑奖、最佳混音奖和最佳视觉效果奖三个奖项。续集《蜘蛛人3