（preparatory phase）与收益期（payoff phase）的分界，在甘油醛-3-磷酸之前的一系列反应中，每一分子的葡萄糖需要消耗2个ATP，之后则会得到4个ATP。
其它生成途径.除了在糖解作用中产生之外，果糖-1-磷酸（Fructose 1-phosphate）也可经由果糖-1-磷酸醛缩酶（Fructose 1-phosphate aldolase）的催化分成二羟丙酮磷酸与甘油醛（Glyceraldehyde），而这两个分子又可以分别在其他酵素的催化下转变成甘油醛