（末端加帽）。不同固定相的表面化学性质的微妙改变会导致选择性的改变，然而总体的保留机制依然相同。
流动相考量.水或缓冲液与有机溶剂的混合物常备用于从反相柱上洗脱分析物。这些有机溶剂必须与水互溶，故常用的有机溶剂是：乙腈、甲醇与四氢呋喃（THF）。其他溶剂如乙醇或2-丙醇（异丙醇）亦可被使用。洗脱的施行方法有：等强度洗脱（在分离过程中水-溶剂组分始终不变）或使用梯度洗脱（在分离过程中水-溶剂组分会变化）。流动相的pH在一种分析物的保留上起着关键的作用，并且会改变对于特定分析物的选择性