子上"S"位置的氢发生羟基基团取代反应生成，此反应由酶胆固醇24-羟化酶（CYP46A1）催化：
功能.24S-HC可与载脂蛋白结合，如apoE、apoJ和apoA1等，来形成高密度脂蛋白样复合物，因此比游离的胆固醇更容易通过血脑屏障。因此，24S-HC的生产是大脑合成胆固醇的几种平衡机制之一。在进入血液循环后，24S-HC转运至肝脏，24S-HC在此可发生硫酸化、葡糖醛酸化或转化为胆酸，最终排出体外。24S-HC也是肝X受体（LXR）的激动剂，肝X受体是一类感应氧化胆固醇的核