耶洛从小就在一个犹太家庭长大。耶洛于高中时期在纽约布朗克斯的就读。高中毕业后，耶洛就读免学费的女子学院亨特学院。耶落的父母希望她能成为一名教师，但相反地，耶落决定攻读物理领域。
学院时期.由于耶洛精通打字，因此最初得以在哥伦比亚大学医学院着名的生物化学家博士处兼职秘书。当时耶洛并不认为一间优秀的研究所可以为她提供完全经济援助，因此耶洛靠着速记法这门专长，同时在哥伦比亚大学另一位生物化学家处兼职秘书。1941年1月，罗莎琳·萨斯曼·耶洛于亨特学院毕业。几年过后，耶洛收到来自伊利诺