错误的胺基酸相连接，那么所形成胺酰tRNA会通过水解重新被打开。
反应式.胺酰tRNA合成酶所催化反应的反应式如下：总反应式：胺基酸 + tRNA + ATP → 胺酰-tRNA + AMP + PPi胺基酸是通过它们的羧基（-COOH）与腺苷上的羟基（-OH）连接。因此，连接反应是一个酯化反应。
分类.根据序列和活性位点的结构的不同，胺酰tRNA合成酶可以被分为两大类：无论胺酰基开始被连接到腺苷上的哪一个羟基上，最终都会连接到3'羟基上，因为