模拟早期胚胎发育的微环境，使胚胎干细胞维持不分化的状态。目前，在培养基内加入白血病抑制因子（LIF）等细胞信号分子就能够在无餵养层的培养基上培养胚胎干细胞。
分离、鑑定与培养.
胚胎干细胞的分离与培养.分离囊胚的内细胞群（ICM）细胞，再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前，取得胚胎干细胞的方法已有一定改进，但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成：处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化爲胚胎外的组织（胎盘等），而内细胞群则会分化爲胚