美南监理会牧师蓝柏和华人曹子实在十全街5号信徒殷勤山家中开设布道所并开办存养书院。此后，美南监理会在苏州陆续设立了3个主要教堂：天赐庄苏州圣约翰堂、宫巷乐群社会堂和养育巷救世堂；以及着名的东吴大学、景海女师和博习医院。1872年，美南长老会牧师杜步西夫妇亦来苏，在葑门城桥头设学，并在养育巷购地自建教堂（1925年重建，名思杜堂）。其他美国差会，包括美北长老会、美南浸信会和美国圣公会等也陆续抵达苏州，建立起自己的传教、教育和医疗事业。
民国.民国期间，苏州教会发展日益迅速