次飞行，一直到大战结束，此机与1941年中开始服役的Fw 190，成为纳粹空军的标准战斗机。此期间多国空军採用此机，包括芬兰、南斯拉夫、克罗埃西亚、罗马尼亚、匈牙利、义大利、瑞士。此机的应用超越其最初设计的目的，在战争中，此机衍生机型包括战斗轰炸机、夜间战斗机、和侦察机。是历史上生产数量最多的战斗机。它是德国在二次世界大战期间生产数量最大（不算战后生产的，超过三万架），生产时间最久（德国本身从1936年生产到1945年初），产生空战王牌最多（世界三大空战王牌皆是驾驶Bf-109出身：埃里希·哈特曼击落3