那亚共和国，圣约翰骑士团，托斯卡纳大公国，萨伏依公国，乌尔比诺公国，帕尔马公国等天主教国家加入了神圣同盟。西班牙为同盟提供了大部分资金，而威尼斯是同盟船只的主要供应者。经过同盟成员之间的漫长讨论，西班牙国王腓力二世的同父异母弟，其父查理五世的私生子奥地利的唐胡安被任命为同盟舰队司令。1571年8月14日，被教宗祝福的神圣同盟舰队旗帜到达了那不勒斯王国（当时受西班牙国王统治），在当地的圣嘉勒圣殿，旗帜被隆重地授予给唐胡安。7月至8月间，同盟舰队陆续抵达事先约定的舰队集结地墨西拿，唐胡安于8月23日抵达该地。9