术：PCR技术和限制性核酸内切酶（限制酶）酶切。除此以外，一项较新的亚克隆技术也已出现，即Infusion。该技术相比基于PCR和酶切的传统方法具有操作简便、快速等优点，可以实现传统方法难以做到的亚克隆。
过程简述.首先，使用限制酶将目的基因切下。切下来的目的基因需经过纯化（常用手法是）。之后，可以通过PCR来制造一定数量的该目的基因的拷贝。同时，需要用切割目的基因的那种限制酶切割载体，以让载体产生与目的基因互补的黏性末端，以使得它们能在后续步骤中被DNA连接酶连接。磷酸酯酶（