必须带有磷酸，借由DNA连接酶的作用促进磷酸双脂键的共价键，同时核苷酸序列以嘌呤—嘧啶两两对应的方式完成配对，这样才算完成反应。用下面这张图解来说明或许可以更清楚的说明反应过程：以黏性末端为例反应后DNA连接酶也可以处理钝端，即就算没有嘌呤—嘧啶配对的硷基对，也是可以进行上述的反应。
哺乳动物的连接酶种类.在哺乳类细胞，至少有四种黏合酶被发现与命名：
DNA连接酶在分子生物学上的应用.前面提到，随着分子生物学的进展，DNA黏合酶对于研究人员的