广泛存在于各种生物体中的酶，包括了植物与动物。乳酸脱氢酶存在于四种不同的酶分类中。其中两种是依赖细胞色素c的酶，它们各自作用于D-乳酸（EC 1.1.2.4）与L-乳酸（EC 1.1.2.3）。
反应.乳酸脱氢酶催化丙酮酸与乳酸之间的互变并伴随着还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸与其氧化型之间互变。此酶也可催化2-羟基丁酸的脱氢作用，但其为较乳酸劣势的底物。