招致秀吉的不信任。天正15年（1587年），被秀吉决定移封至伊予国，通过安国寺惠琼命令交出持有的藤原定家的『小仓色纸』。由于丰前是从父祖开始传来的领地，以及想守护家宝，于是拒绝接受朱印状，因此激怒秀吉，并且与新成为丰前6郡领主的黑田孝高有着不稳的气氛。毛利胜信提议镇房交出城井谷城，之后向秀吉求情，于是把城井谷城交出，但是数度被激怒的秀吉拒绝保持城井氏的领地，镇房终于下定决心，于同年10月急袭并夺回城井谷城，之后笼城以迎撃丰臣军。以地利并用游击战的方式，撃退前来攻撃的黑田长政率领的丰臣军，对着天险要塞城井