分子之间形成交叉链接。固定后自福马林溶液取出，以流动水源将福马林溶液洗净。
染色.接下来，用'染色软骨结构。'具有酸性多醣的结构，使其易和硫酸软骨素中的硫酸基结合的蓝色染料。硫酸软骨素是软骨中常含的一种黏多醣（醣胺聚醣）。所以，软骨部分被染成蓝色。然而，由于黏多醣（醣胺聚醣）不一定仅位于软骨，因此一些标本可能看起来是非特异性染色。例如，如果由于骨骼的钙质过度流失而导致磷酸钙（磷灰石）的损失，则需要花费很长时间才能让软骨染色溶液染色较为明显，而后者提到的骨染色失败，则是骨骼外基质