东安大略.401号公路从北面绕过科堡，并在此进一步缩窄至来回四线行车，沿线地势亦因安大略湖畔的山丘和河谷而高低起伏。公路在特伦顿（）跨越特伦特运河（）后从北面绕过贝尔维尔，并在此跨越莫伊拉河（）。公路其后往东伸延至纳潘尼，再抵达京士顿；京士顿一带的401号公路原称“京士顿绕道”，并是401号公路最早落成的路段之一。公路离开京士顿后途经圣罗伦斯河畔的农地再抵达加南诺奎（），而千岛园林路（）亦在此从401号公路分支，到布罗克维尔附近再汇入401号公路。401号公路余下路段大致与前2号