Tidigare tillkännagav regeringen 21 platser för företagsområden i England i ett försök att öka den ekonomiska tillväxten.
Gloucestershires bud fokuserade på Gloucester och Cinderford.
Men kommunminister Bob Neill sa att länet fortfarande kunde dra nytta av andra jobbskapande projekt.
"Det är ingen skam för Gloucestershire alls, de gjorde hårt arbete, jag vet det", sade han.
"Och vad jag skulle säga till dem är inte bli modfälld.
"Vi arbetar med lokala företagssamarbeten och lokala råd utanför företagszonsprojekten, till exempel genom att ge råden möjlighet att diskontera företagsräntor för att locka företag in i området, vilket ger möjlighet att inrätta förenklade planeringssystem."
Planer för 21 nationella zoner fastställdes först i mars månads budget.
Zoner har bekräftats för platser i Cheshire, Cornwall, Gosport, Norfolk, Hereford, Kent och Oxfordshire.
Andra platser är Essex, Suffolk, Northampton, Leicestershire, Cambridgeshire och Humber Estuary.
Ministrarna sade att 30 000 nya arbetstillfällen skulle skapas till 2015 genom att ge billigare företagsavgifter, supersnabbt bredband och lägre nivåer av planeringskontroll.
Gloucestershires misslyckande med att säkra en "företagszon" för länet är inte en reflektion över lokala företag, har regeringen sagt.