Mer än 80 personer deltog i Rädda Newcastle Wildlifes protest vid Havannah naturreservat i Hazlerigg för att motsätta sig Banks Groups planer för en ny egendom tvärs över vägen.
Campaigners sa att hemmen skulle betyda fler husdjur som attackerar ekorrarna.
Bankernas inspektörer föreslog flera system för att minimera eventuella effekter.
En talesman för Rädda Newcastle Wildlife sade: " En sådan utveckling med hög densitet kommer sannolikt att locka grå ekorrar till området, eftersom många människor matar grå ekorrar i sina trädgårdar, hotar den befintliga röda befolkningen och ökar sannolikheten för predation från husdjur.
"Om det godkänns, kommer denna utveckling att se en brant lutning i störningar från mänsklig aktivitet inom naturreservatet."
Amec Foster Wheeler gjorde en undersökning av ekorrarna för Banks.
Deras rapport kom fram till att ekorrarna redan lider av en del störningar från besökare till naturreservatet, och samtidigt som erkännandet av närliggande hem kan innebära att fler människor går till platsen, kan extra störningar lindras genom gångvägar som håller människor borta från ekorrarnas livsmiljöer.
Rapporten sade också att det inte skulle finnas någon "direkt inverkan" på ekorrarna, men det kan finnas "indirekta effekter" såsom ekorrarna som går till husen för att få mat.
Mätarna föreslog att man skulle plantera häckar som lämpar sig för röda ekorrar för att födosöka närmare reservatet för att förneka behovet av att de jagar längre bort för att få mat.
Omkring 290 personer har skrivit till rådet för att invända mot planen medan 29 har skrivit till stöd.
Mer än 6 500 personer har undertecknat en online petition mot utvecklingen.
Planerna övervägs av Newcastle City Council, men inget datum har fastställts för ett beslut.
Vildlivskämpar motsätter sig planer för 460 nya hem i närheten av Newcastle i rädsla för att de skulle kunna skada angränsande röda ekorrar.