Craig Douglas och Dylan Rigby, som båda är från Essex, anklagas för att främja ett lotteri och reklam olagligt spelande.
Mr Douglas gör spelvideor på YouTube under pseudonymen Nepenthez.
Han är också anklagad för att inbjuda barn att spela.
De två männen framträdde vid Birminghams magistratdomstol. Ärendet har ajournerats till den 14 oktober.
Gambling Commission, som förde åtalet, har tittat på uppkomsten av videospel spelande.
Det är varnande föräldrar att barn kan dras in i vadslagning med så kallade skinn - virtuella varor som vapen eller kläder som är ett inslag i många populära spel.
Man har beräknat att den globala marknaden för vadslagning på videospel är värd så mycket som 4 miljarder pund.
Två män har framträtt i domstol anklagad för brott enligt Gambling Act i vad som tros vara det första åtalet som involverar vadslagning på videospel.