Mediauppspelning stöds inte på den här enheten
Den 21-årige engelske simmaren fick sällskap på podiet av den skotske Ross Murdoch, 22, som gjorde anspråk på silver.
Peaty, Chris Walker-Hebborn, Siobhan-Marie O'Connor och Fran Halsall vann sedan blandat 4x100m medley relä guld.
Halsall, 26 år, tog också bronsmedalj i damfinalen 50m fjärilsfinalen, med 21-årige Ben Stolt efter tredje i herrevenemanget.
Mediauppspelning stöds inte på den här enheten
"Det var fantastiskt stöd i arenan ikväll och det är definitivt en av de bästa tävlingarna jag har haft", säger Peaty.
"Och att ha Ross bredvid mig är toppen."
Den regerande världen och europeiska mästare satte ett nytt mästerskap rekord på 58.36seks i sin final och tillade: "Det sätter mig i en stor plats att gå in i Rio."
Storbritanniens Adam Peaty vann guld i männens 100 m bröstsimfinal vid EM i London.