Gloucestershire Polisen sa att kraschen inträffade strax efter 11:45 GMT nära Northleach på A429 mot Cirencester nära A40 korsningen.
Föraren av en Jaguar, en 56-årig man från Staffordshire, fördes till sjukhus i Bristol med allvarliga men inte livshotande skador.
En 46-årig man från Cheltenham och en kvinnlig passagerare i en Ford Focus fick mindre skador.
Lastbilen från Moreton-in-Marsh bar en last av Cotswold sten. Föraren var oskadd, sa polisen.
Vägen stängdes tidigare men har nu öppnats igen för trafik.
En lastbil som bar sten kastade sin last på en bil i en krasch i Cotswolds.