Mediauppspelning stöds inte på den här enheten
Midfielder Stefano Mauri, 32 år, hölls tillsammans med före detta Genoa mittfältaren Omar Milanetto, sade polisen.
Juventus coach Antonio Conte, som just ledde klubben till Serie A titeln under sin första säsong som chef, är bland dem som förhörs av polisen.
Officerare besökte också Italiens träningsläger före Euro 2012 för att förhöra den vänstra delen av Domenico Criscito, 25.
Polisen söker mer än 30 hem, inklusive spelare, utbildare och administratörer av klubbar i Serie A, Serie B och lägre divisioner.
Under många månader nu denna undersökning av match-fixing i det italienska spelet har breddats och fördjupas. Även om mycket av misstanken hittills har fallit på lag och spelare i de lägre delarna av spelet, den prestigefyllda Serie A alltmer dras in i skandalen. Inget av detta kommer att komma som någon större överraskning för dem som följer denna skandal på nära håll. Mer smärtsamma och skadliga, anklagelser och avslöjanden ligger framför oss. Naturligtvis hatar fansen allt, men många kommer att fortsätta att tro att den stora majoriteten av spelarna är rena. Och vissa kommer att hävda att åtminstone Italien försöker ta itu med frågan om matchfixning - medan ligor i andra länder kan välja att titta bort.
Fem personer greps också i Ungern på grund av misstanke om att vara en del av en olaglig internationell vadslagningsring.
Polisen sa att Conte utreddes misstänkt för sportbedrägeri och falsk association över anklagelser om en match mellan hans tidigare klubb Siena och Novara i april 2011.
Men Contes advokat, Antonio De Rencis, sade: "Conte's reaktion är den av någon som är helt oskyldig och fast besluten att bevisa sin totala oskuld."
Senare på måndagen meddelade Italiens fotbollsförbunds vicepresident Demetrio Albertini att Cristico, en före detta Genoa- och Juventusförsvarare som nu är på Zenit St Petersburg i Ryssland, inte skulle väljas ut för Euro 2012 "för att rentvå sitt namn".
"Vi är besvikna men vi måste hålla oss nära spelaren," Albertini sade. "Arrester har gjorts idag men tills motsatsen bevisats talar vi om oskyldiga människor trots att de betraktas som misstänkta.
"Jag känner Domenico och han är okränkbar. Han är en enastående kille och han har redan träffat sina advokater i morse. Det är en konstig dag för oss.
"Det här är saker som vi inte skulle ha behövt gå igenom."
Måndagens operation var en del av en bredare undersökning som redan har sett ett antal arresteringar av nuvarande och tidigare italienska spelare. I juni förra året inrättade inrikesministeriet en särskild arbetsgrupp för att fastställa matcher som svar på ett antal uppmärksammade fall.
Juventus försvarare Leonardo Bonucci har också kopplats till matchfixning som vittnesmål från en sond i Bari, där han brukade spela, men är inte under formell utredning och kommer att gå till turneringen i Ukraina och Polen.
Före detta Atalanta kapten och Italien midfielder Cristiano Doni förbjöds i tre och ett halvt år i augusti för sin del i "Calcioscommesse" skandalen med Serie B matcher förra säsongen. Han greps också i december 2011 för matchfixning och vadslagning.
Atalanta, befordrad från Serie B, drogs sex poäng i toppflygningen den här säsongen som ett resultat av skandalen.
Tidigare Lazio och Italien strejkaren Giuseppe Signori förbjöds i fem år och 15 andra spelare förbjöds i mellan ett och fem år för sina delar.
Mauri, som gick med i Rom klubben från Udinese 2006 och har 11 caps för Italien, gjorde 16 liga framträdanden förra säsongen som Lazio slutade fjärde i Serie A.
Milanetto, 36, signerad för Serie B side Padova förra sommaren efter fem år i Genua och gjorde 15 starter förra säsongen.
Lazios kapten har gripits av polisen för att utreda anklagelser om matchfixning.