Jaguar Land Rover har avbrutit det berömda terrängfordonet, som har exporterats över hela världen.
Mer än två miljoner har gjorts sedan den ursprungliga Land Rover-serien började tillverkas i Solihull 1948.
Planer för att införa strängare åtgärder för nya bilar utsläpp till 2020 innebar att det fanns "vissa villkor Defender bara inte kommer att uppfylla", sade företaget.
Försvarare av de rika och berömda
Den sista försvararen: Är Land Rover off-road heyday över?
Mer om Defender och uppdateringar från Birmingham och Black Country
Ett "stort valdeltagande" av "glädjande arbetare och media överallt" åtföljde slutförandet av den sista Defender vid cirka 10:00 GMT, sade BBC Midlands Dagens transport korrespondent Peter Plisner.
"Det är döden av en ikon", sa Simon Collins, Warwickshire och West Midlands Land Rover Club sekreterare.
Det var jubel och sorg i morse när vi såg den sista Defender rulla av produktionslinjen efter nästan 70 år; den längsta produktionsbilen i världen.
Vi hörde talas om en familj där tre generationer hade arbetat på Defendern och serien av modeller innan. Vissa arbetare valde också idag att gå i pension i stället för att flytta till andra delar av anläggningen.
Alla 700 medarbetare som arbetade med Defender blev inbjudna till ett avskedsevenemang till den ikoniska modellen. Land Rover tog också in några av fordonen från det förflutna. Det var ett riktigt avsked.
Motorjournalisten Quentin Willson sa att Defender skulle leva vidare.
"Med ca 70% av Land Rovers någonsin byggt fortfarande runt kommer vi fortfarande att kunna mysa dem och se dem på vägen. Och medan vi kan fälla en tår, det finns fortfarande massor och massor av Land Rovers, sade han.
En ersättningsmodell för Defender håller på att utvecklas, säger tillverkaren.
Den sista Land Rover Defender har rullat av produktionslinjen mitt i jubel, som slutar 67 år av 4x4 görs.