Den anklagade ledarna för återkallelse av folkomröstningsrörelsen för bedrägeri.
I fredags förklarade det nationella valrådet mer än 600 000 underskrifter på en begäran om folkomröstning ogiltiga.
Oppositionen säger att valmyndigheterna är partiska mot dem.
Venezuela befinner sig på randen till ekonomisk kollaps, med hög inflation och brist på livsmedel och basvaror.
Oppositionen skyller Maduros och hans företrädare Hugo Chavez socialistiska politik på landets ekonomiska nedgång.
Regeringen säger att landets ekonomiska elit, uppbackad av konservativa krafter i USA och andra länder, har planerat att störta regeringen.
En av Joseph Maduros närmaste allierade, Jorge Rodriguez, har utsetts för att kontrollera om det finns några oegentligheter i processen för att återkalla folkomröstningen.
"Vi har hittat en enorm bedrägeri mot konstitutionen", sade han, efter att ha inlett rättsliga åtgärder i högsta domstolen.
"Sluta ljuga för världssamfundet och sluta ljuga för det venezuelanska folket", sade han.
Han betonade än en gång att det inte skulle vara möjligt att hålla folkomröstningen i år som oppositionen önskar.
På lördagen sade Maduro att folkomröstningen om återkallande skulle hållas 2017 om oppositionen uppfyllde de rättsliga kraven.
"Om de inte uppfyller kraven, kommer det inte att bli någon återkallelse folkomröstning, helt stopp", sade Maduro.
Tidpunkten är viktig för båda sidor. Om folkomröstningen äger rum den 10 januari 2017 och president Maduro förlorar, kommer ett nytt val att hållas.
Om det hålls efter detta datum och omröstningen går emot honom, tar hans vice ordförande över och behåller makten fram till slutet av mandatperioden, i januari 2019.
Oppositionen överlämnade framställningen den 2 maj.
Den sade att den hade samlat 1,85 miljoner väljares underskrifter som stödde en folkomröstning om återkallande, många fler än de 197,000 som behövdes i detta inledande skede. CNE sa att det fanns 1,97 miljoner underskrifter på listan.
De väljare vars underskrifter inte har slagits av CNE - mer än 1,3 miljoner människor - kommer att behöva dyka upp vid de regionala valkontoren för att bekräfta sina identiteter senare denna månad.
De kommer att ha fem dagar på sig från och med den 20 juni för att få sina underskrifter kontrollerade, meddelade president Tibisay Lucena på fredag.
Oppositionsledaren Henrique Capriles uppmanade väljarna att göra sig redo att gå till regeringens kontor för att få sina identiteter kontrollerade så att processen kan nå sitt nästa skede.
Venezuelas regering har bett Högsta domstolen att avvisa oppositionens förslag att hålla en folkomröstning om att avsätta president Nicolas Maduro från ämbetet.