RSPB Scotland sa att videofilmer från Perthshires egendom visade en osprey som försökte bygga upp ett bo.
Men festivalarrangören DF Concerts sade att videon inte motsvarade rapporter från deras ornitolog övervakning platsen.
Polisen kallades till platsen på måndag och utreder.
Samråd pågår kring en planeringsansökan för att vara värd för den årliga musikfestivalen på Strathallan, som har fått ett blandat svar från lokalbefolkningen.
Ospreys är en skyddad art och kan inte störas under häckning.
DF Concerts hade hoppats uppmuntra fåglarna att flytta till ett speciellt konstruerat nytt bo längre bort från festivalen platsen, har inte kunnat få tillgång till att ta bort det gamla boet helt.
Men gruppens taktik att hissa en flagga från en körsbärsplockare nära det gamla boet kritiserades av naturgrupper och lokala kampanjdeltagare.
RSPB Skottland ringde polisen efter videofilmen dök upp på måndagen och sa att boet nu var "aktivt", och körsbärsplockaren togs senare bort.
En talesman för DF Concerts sa att den hade tagits ner medan de väntade på ytterligare information.
Hon sade: "Vi har sett en kopia av videon som RSPB hänvisar till och den överensstämmer inte med den pågående övervakningen från vår ornitolog på plats.
"Vi är fullt medvetna om och följer det rättsliga protokollet och som sådana har vi bett polisen och RSPB att söka ytterligare information så att videons äkthet kan undersökas fullt ut."
Polis- och naturgrupper undersöker en video som påstås visa en osprey försöker bo nära den föreslagna T i parken platsen vid Strathallan slott.