Ett urval av baseball-relaterade tweets presenterades i annonsen, som visades under live-bevakningen av baseball säsong slut World Series.
Men texten framträdde så snabbt i den livliga sekvensen att somliga tog sig till nätet för att uttrycka förvirring.
Annonsen gjordes för att främja "Moments", som belyser trender på plattformen för sociala medier.
En Twitter-användare twittrade: "Twitterreklamen var *verkligen dålig*. Kan inte tänka sig att någon känner sig inbjuden att använda tjänsten eller se värdet efter att ha sett platsen."
Och bloggaren John Gruber beskrev det som "oförståeligt", och gick så långt som att säga: "Någon borde avskedas."
Några var dock positiva till sändningen. "Twitterreklamen är ganska cool", twittrade en tittare.
Twitter har nyligen kämpat för att fortsätta att locka ett stort antal nya användare till sitt nätverk - ett problem som vissa säger är på grund av den något esoteriska karaktären på plattformen.
"Jag är ett baseballfan [â €] Jag har varit på Twitter sedan 2007 och för att vara ärlig hade jag svårt att förstå det", säger digital entreprenör George Nimeh, på Berlin School of Creative Leadership.
"Jag kan inte föreställa mig hur det skulle vara för någon som är obekant med vad Twitter egentligen är. Det var riktigt snabbt, det var lite av en mish-mash av olika saker. "
Peter Nimeh tillade att medan Twitters användarsiffror visade en stark tillväxt från året innan för några år sedan, hade tillväxten sjunkit till mindre än 20 % i början av 2015.
"Jag tror att Twitter grundläggande problem är att de aldrig har kunnat mycket enkelt och koncist förklara för människor som inte är bekanta med Twitter vad det är - och denna annons denna reklam gör ingenting för att hjälpa," sade han BBC.
Twitters första reklamkampanj på TV har gjort några amerikanska tittare förvirrade.