Enligt reglerna kommer racegoers också att behöva bära kjolar eller klänningar av "modest längd" faller strax ovanför knät eller längre.
För män är en väst och slips obligatorisk i inhägnaden och kravater är inte tillåtna.
Organisatörerna sade att beslutet var en del av en åtgärd för att återställa formaliteten.
Den årliga veckolånga händelsen i juni lockar ca 300 000 besökare varje år.
Populariteten för avancerade fascinatorer, som är en korsning mellan ett hår tillbehör och en mini hatt, fortsatte förra året efter hertiginnan av Cambridge bar en fjäderklädd en på hennes första officiella engagemang i Anglesey.
I den mindre formella läktaren, som är öppen för allmänheten, blir det nu obligatoriskt för kvinnor att bära hatt eller fascinator.
Tidigare år, när kvinnliga racegoers helt enkelt fick rådet att "många damer bär hattar".
Strapless eller skir-strap toppar och klänningar kommer också att förbjudas.
För män blir kostym och slips nu obligatorisk.
Ascot talesman Nick Smith sade: " Det är förmodligen rimligt att säga att klädkoden inte nödvändigtvis har verkställts helt så rigoröst som vi kanske hade velat.
"Det råder ingen tvekan om att våra kunder vill komma tillbaka till en situation där det är allmänt erkänt att detta är ett formellt tillfälle och inte ett tillfälle där du kan klä dig som du skulle på en nattklubb."
Charles Barnett, Ascots verkställande direktör, sade att avsikten var att vara "så hjälpsam som möjligt" för besökare och att hjälpa tävlande att förstå vad som är "kysst" om klädkoden på Royal Ascot.
"Det är inte en fråga om elitism och inte vara modern i en värld där det finns mindre och mindre krav på att klä sig smart - långt därifrån", sade han.
"Vi vill se modern och snygg klänning på Royal Ascot, precis inom ramarna för formellt slitage."
Den mindre formella Silverringen påverkas inte av förändringarna.
Kvinnor måste bära hattar, inte fascinatorer, som en del av en skärpning av klädkoden i Royal Ascots kungliga inhägnade i sommar.