Affären för Pearson, 24, som gjorde nio mål i 51 framträdanden i alla tävlingar förra säsongen, är ett rekord för en Accrington försäljning.
Den mångsidiga försvararen är Barnsleys 11:e sommarsignering inför deras Championship säsongsöppnare på lördag.
"Matty har några exceptionella egenskaper som vi känner att vi kan arbeta med och göra bättre," chefen Paul Heckingbottom sade.
Pearson började sin karriär med Blackburn Rovers och spelade för Rochdale och Halifax Town innan han gick med i Stanley i maj 2015, på väg att göra 103 framträdanden.
Barnsley börjar sin mästerskapskampanj på Bristol City på lördag.
Hitta alla de senaste fotbollsöverföringarna på vår dedikerade sida.
Barnsley har undertecknat ett treårigt avtal för en hemlig avgift.