Smyth, 30, som är synskadad, hade redan vunnit 100m guld och förblir obesegrad i båda händelserna i varje Paralympics och världar sedan 2008.
Storbritannien misslyckades med att vinna en medalj på dag fem av mästerskapen - att ha vunnit guld på varje dag hittills.
GB: s T42 långa hoppare Luke Sinnott kom fjärde i sin debut vid en stor händelse.
Och det fanns en fjärde plats för lagkamrat Richard Chiassaro i T54 200m, med landsman Nathan Maguire sjätte.
På andra ställen för Storbritannien, Sabrina Fortune, som vann F20 skott sätta brons i Rio 2016, kunde bara komma sjätte, medan tonåring Polly Maton var femte i Ta46/47 100m.
Under morgonsessionen kom Sammi Kinghorn tvåa i sin hetta för att gå vidare till onsdagens T53 400m final, där hon kommer att titta på att lägga till 200m titeln hon vann på lördag.
GB är tredje i medaljbordet med 11 guld och 20 totalt, med USA ledande och Kina andra.
Smyth, född i Nordirland, innehar världsrekordet i T13 100m och 200m - hans gånger 10.46 och 21.05 sekunder är snabbare än posterna från någon annan klassificering.
En juridiskt blind idrottsman, han har vunnit 10 Paralympic och världstitlar och har tävlat i kompetenta evenemang på EM.
"Det här är otroligt. Idag får du faktiskt njuta av det. I 100m på söndagen visste jag att jag var tillbaka ut igen och var tvungen att tygla det, "han berättade BBC Radio 5 live.
"Jag är glad att vara tillbaka i London. Jag önskar att vi kunde ha världarna i London varje gång."
Sinnott, 36, förlorade båda benen i en improviserad sprängladdningsexplosion med Royal Engineers i Afghanistan 2011.
Han har gått för att tävla i segling och har tävlat på Invictus Games, innan han förbinder sig att långa hopp förra året.
Hampshire atletens bästa hopp på 6.15m kom efter fyra fouls från hans första fem försök och var 10cm kort av tredje plats tyska Leon Schafer, med Atsushi Yamamoto av Japan ta silver och Danmarks Daniel Wagner vinna med ett hopp på 6,50m.
"Jag var verkligen tvungen att gå in i en djup, mörk plats för att få vad jag behövde för det sista hoppet. Jag visste att om jag inte satte något på styrelsen i det sista hoppet då skulle jag bli mycket besviken, "sade han.
"Jag fattar inte att jag är här. De dagar du vaknar upp och känner ödet gav dig en dålig hand, det visar bara att om du tar vad som har getts till dig och du vänder det då kan du bli en del av fantastiska saker som detta.
"Det finns en känslig tipspunkt där du antingen hamnar här eller så slutar det med att du tycker synd om dig själv. Att spänna fast ett par blad var en av de bästa saker jag någonsin gjort."
Maton, 17 år, var åskådare i London 2012 och har öronmärkts som ett framtidsperspektiv för Paralympics i Tokyo 2020.
"Jag är ganska glad, tiden var inte bra men jag har haft kalvproblem de senaste dagarna. Man försöker bara vara i ögonblicket och glömma det, sa hon.
"Det är en komplett dröm att vara här - jag var här på London 2012 och jag kom tillbaka för Grand Prix senare år. Det är så skönt att vara på stadion och springa."
Chiassaro, tävlar i sin tredje av fyra händelser vid dessa mästerskap, spelade in en säsong bästa av 25.12 sekunder, medan Maguire satte in en personlig bästa av 25.86 sekunder. Båda loppet på 400m på torsdag.
Kanadas Brent Lakatos hävdade sitt andra guld i mästerskapen, lägga till T53 400m till sin 200m titel och 800m fortfarande kommer.
37-åringen är nu en niofaldig världsmästare.
"Jag har lite huvudvärk och kan inte andas genom näsan men jag gav det allt. Det känns fantastiskt att vinna detta, sa han. "Jag åkte till Rio full av självförtroende men vann inte. Jag fick min rumpa sparkad några gånger."
American Tatyana McFadden flyttade ett steg närmare att slutföra en T54 fyrdubbla genom att gå igenom hennes 800m värme. Den sjufaldiga paralympiska guldmedaljören har redan gjort anspråk på 200 meters, 400 meters och 1500 meters titlar i London.
Irlands Jason Smyth vann T13 200m guld för att slutföra en sprint dubbel på World Para-athletics Championships i London.