Hansons Auktioner sa att Gibson UB3 banjolee förväntas locka världsomfattande intresse vid försäljningen den 30 juni, i Etwall, Derbyshire.
2008 sålde en annan George Formby banjo ukulele för 72 000 pund på auktion till Queen's Brian May.
1936 förbjöd BBC Formbys låt "The Window Cleaner" för att vara snuskig.
John Croft, tidigare ordförande för George Formby Society och ukuleleexperten, sade: " Det finns ett enormt intresse för detta instrument. George Formby har fans över hela världen - unga och gamla."
Herr Croft, från Llanyblodwel i Shropshire, tillade att det var en "underbar social historia".
"I sin glansdag i slutet av 1930-talet tjänade George Formby mer än tre topp Hollywoodstjärnor tillsammans - Errol Flynn, Douglas Fairbanks och Clark Gable.
"Och vi får aldrig glömma Formbys bidrag till att öka moralen bland trupperna under andra världskriget.
"Han och hans fru Beryl flög ut till farliga krigszoner, inklusive El Alamein. Det här landet är de båda skyldiga en hel del.
"Jag hoppas att instrumentet stannar kvar i Storbritannien men det viktigaste är att det är älskat och spelat."
Denna banjole köptes ursprungligen av Bill Logan, George Formby Societys förste president.
Vem var George Formby?
Han föddes George Hoy Booth den 26 maj 1904 i Wigan och var äldst av sju barn
Skådespelaren, sångaren-låtskrivaren och komikerns affärskarriär började 1921 och varade i 40 år fram till sin död 1961
Han var känd för att spela banjole och 1939 var den mest populära och mest betalda underhållaren på Brittiska öarna - han uppskattades tjäna mer än £ 100 000 per år
Formby medverkade i 21 filmer, gjorde mer än 230 skivor, underhållna på scenen hundratals gånger, framförda två gånger av kungligt befäl och underhållde uppskattningsvis tre miljoner allierade män och kvinnor under andra världskriget.
År 1960 gjorde Formby sin sista skiva, Happy Go Lucky Me, och i december det året gjorde vad som var hans sista TV-program, The Friday Show
George Formby Society
Charles Hanson, ägare till Hansons Auktionsförrättare, sade: " Detta är en så sällsynt möjlighet. Detta var en av George Formbys favorit banjolees och chansen att äga och spela den är mycket speciell. Detta instrument är en ovärderlig skatt för Formby fans."
Formby sades ha ägt tre Gibson UB3-modeller.
En banjo ukulele som ägs av populära 1930- och 40-talsunderhållare George Formby ska auktioneras ut, med ett uppskattat försäljningspris på £30,000.