制备三到四种浓度的同一种溶液。使用分光光度计测量某种浓度的溶液对给定波长的吸光度。从浓度最低的溶液开始，由低到高地测量。顺序并不重要，但你必须记录好各溶液的吸光度，并将它们用于正确的计算。 使用分光光度计的测量值，在曲线图上标出每个点。具体到每个点时，以X轴代表浓度，以Y轴代表吸光度。 画线将各点连接起来。如果测量值准确，这些点的连线应该形成一条直线，表明吸光度与浓度成正比，与比尔定律相符。 为了计算斜率，你应该用上升值除以改变量。取两个数据点，用其中一个的X值和Y值减去另一个的X值和Y值，然后用Y值之差除以X值之差。  直线的斜率公式是(Y2 - Y1)/(X2 - X1)。有下标2的是较高的数据点，而标有下标1的则为较低的数据点。 例如：浓度为0.2摩尔时，吸光度为0.27，而浓度为0.3摩尔时，吸光度为0.41。吸光度是Y值，而浓度是X值。使用直线的斜率公式计算：(Y2 - Y1)/(X2 - X1) = (0.41-0.27)/(0.3-0.2) = 0.14/0.1 = 1.4，所以直线的斜率为1.4。 使用数据点计算摩尔吸光系数的最后一步是除以路径长度。路径长度指的是分光光度计中使用的试管深度。 继续解上述例题：如果直线的斜率为1.4，而路径长度为0.5 cm，则摩尔吸光系数等于1.4/0.5 = 2.8 L mol-1 cm-1。
测量穿透不同浓度的溶液的透射光强度。 在图表上标出浓度和吸光度的关系。 通过数据点来确定最佳拟合线的斜率。 用直线的斜率除以路径长度或试管深度，来计算摩尔吸光系数。
测量穿透不同浓度的溶液的透射光强度。 在图表上标出浓度和吸光度的关系。 通过数据点来确定最佳拟合线的斜率。 用直线的斜率除以路径长度或试管深度，来计算摩尔吸光系数。