标准的吸光度公式是 A = ɛ x l x c，其中A 是样品吸收的特定波长的光线量， ɛ是摩尔吸光系数，  l是光线通过溶液的距离，而c是吸收物质单位体积的浓度。   吸光度也可以用参考样品与未知样品之间的强度比来计算。计算公式为A = log10(Io/I)。  强度可以使用分光光度计测量得到。 溶液的吸光度会根据通过溶液的波长的变化而改变。溶液对某些波长的吸收能力会强于其他波长，具体取决于溶液的组成。记得说明计算中使用的是哪种波长。 根据代数原理，我们可以用吸光度除以长度和浓度，使公式的一边变成摩尔吸光系数：ɛ = A/lc。现在，我们可以使用基本公式来计算给定波长的摩尔吸光系数。 读数之间的吸光度可能因为溶液浓度和用于测量强度的容器形状而变化。摩尔吸光系数会抵消这些变化。 分光光度计是一种仪器，它可以让特定波长的光通过物质并检测透出的光线量。有些光会被溶液吸收，剩下的光会穿透溶液，可以用来计算溶液的吸光度。  制备一种浓度c已知的溶液，用于分析。浓度的单位是摩尔或摩尔/升。  为了求得l，请测量试管的长度，即在分光光度计中盛放液体样品的试管的长度。路径长度的单位是厘米。 使用分光光度计测量给定波长的吸光度A。波长的单位是米，但大多数波长都很小，实际是以纳米（nm）为单位进行测量的。吸光度没有单位。 使用得到A、c和l值，将它们代入公式ɛ = A/lc中。用l乘以c，然后再用A除以它们的积，求得摩尔吸光系数。 例如：使用长度为1 cm的试管测量密度为0.05 mol/L的溶液的吸光度。它对波长280 nm的吸光度为1.5。那么该溶液的摩尔吸光系数为多少？  ɛ280 = A/lc = 1.5/(1 x 0.05) = 30 L mol-1 cm-1
理解吸光度的朗伯-比尔定律：A = ɛ x l x c。 将朗伯-比尔公式变形，求摩尔吸光系数。 使用分光光度法取得公式中变量的值。 将值代入变量中，解方程，求出摩尔吸光系数。
理解吸光度的朗伯-比尔定律：A = ɛ x l x c。 将朗伯-比尔公式变形，求摩尔吸光系数。 使用分光光度法取得公式中变量的值。 将值代入变量中，解方程，求出摩尔吸光系数。