Influence de la lumière blanche et de ses rayons constituants sur le développement et les propriétés du "bacillus anthracis", par M. S. Arloing
Arloing, Saturnin (1846-1911)
impr. de Pitrat aîné, 1886


« mince dem lumière blameK ï DE 8 ES RAYONS C 0 X S T1TI.: A N ïSSUR LE DÉVELOPPEMENT ET LES PROPRIÉTÉS' PAR . ' ' '■■ ■■ '.:■ .M. s. arloing lyon
I M P R 1 M E R I E P I T R A T A I N É
4 , RU K '-• K SVll, <1886
Influence de la lumière blancheET DE SES RAYONS CONSTITUANTS
SUR LE DÉVELOPPEMENT ET LES PROPRIÉTÉSD UBacillus anthracisPrésente à la Société d’Agriculture, Histoire naturelle et Arts utiles de Lyon
dans sa séance du S novembre 1885Influence de là lumière blancheET DE SES RAYONS CONSTITUANTS(Wf£àE DÉVELOPPEMENT ET LES PROPRIÉTÉS^,. y DI ; bâcillus anthracis1"A RM. s. arloing lyon
IMPRIMERIE PITRAÏ AINE
4 , R U K G F. N T1 L, 4
1886
Influence de la lumiere blancheET DE SES RAYONS CONSTITUANTSSUR LE DÉVELOPPEMENT ET LES PROPRIÉTÉSDUBacillus anthracisPARM. S. ARLOINGIntroduction
L’attention est dirigée aujourd’hui sur les modifications
que les germes infectieux peuvent éprouver de la part des
milieux où on les oblige à vivre.

L’expérience a démontré que les microorganismes pathogènes
sont très sensibles à l’action des milieux ambiants. La
preuve est faite que quelques-uns sont assez profondément
modifiés par un changement apporté dans les conditions
extérieures pour être inoculés ensuite presque sans danger.

Dans cette voie, on a beaucoup étudié l’influence de la composition
du milieu organique vivant ou artificiel dans lequel
on cultive les microbes, celle de la température et de la pression
auxquelles on soumet les cultures ; j’en dirai autant de
l’influence du vide ou de la composition de l’atmosphère qui
règne dans les vases à éducation.
6 IÎNFUJENCE DE LA LUMIÈRE BLANCHE
Mais, à notre connaissance, on ne paraissait pas s’être
préoccupé de l’influence de la lumière blanche ou des rayons
colorés-(l).

Pourtant, la lumière est un puissant modificateur des êtres
vivants. Dans ses rapports avec les végétaux élevés et les
animaux vertébrés, elle a donné lieu à des travaux intéressants.
Si l’on parvenait à démontrer qu’elle influe sur les
propriétés des microbes pathogènes, la biologie de ces organismes
achèverait de se ranger sous les lois communes. Dès
lors, la physiologie des agents infectieux apparaîtrait débarrassée
de ce voile mystérieux sous les plis duquel elle s’est
trop longtemps dissimulée..

Il nous semblait donc utile de nous efforcer à combler cette
lacune. Nous avons dirigé nos tentatives sur le Bacillus
anthracis dont nous suivions le développement et les propriétés
depuis plusieurs années, soit en l’étudiant pour notre
instruction, soit en assistant aux travaux de notre maître,
M. Ghauveau.

Les premiers résultats que nous avons obtenus à l’aide de la
lumière du gaz n’ont pas répondu à toutes nos espérances.
Mais plus tard, lorsque nous avons pu employer les radiations
solaires, les effets que nous attendions se sont produits
avec une grande netteté. -

Les pages suivantes sont consacrées à leur description et
à une revue historique sommaire des connaissances que nous
possédions sur la lumière dans ses rapports avec les organismes
inférieurs.
(1) Jusqu’au 9 février 188b', époque à laquelle a paru notre première note sur ce sujet dans
les Comptes rendus de Vkcadémie des sciences.SUR LE ; DEVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS
CHAPITRE PREMIER
REVUE HISTORIQUE
La science est en possesion d’un certain nombre de documents
qui confinent à la question que nous étudions. Résumons-les
brièvement.

E. Strasburger (Wirkung des Lichtes und der Wàrme
auf Schwàrmsporen, Iéna, 1878) a montré que la lumière,
abstraction faite de tout effet thermique, exerce de l’influence
sur les mouvements de beaucoup d’organismes simples.

Th. W. Engelmann (Sur la perception de la lumière et de
la couleur chez les organismes les plus inférieurs, in Archives
néerlandaises des sciences exactes et naturelles, 5e livraison,
1882) , a constaté que l’influence de la lumière peut
s’exercer de trois manières sur les mouvements des Navicida,
Paramecium bursaria, Englena viridis :
,. « 1° Directement, par une modification des échanges gazeux,
sans intervention appréciable de quelque sensation ;

« 2° Par la modification de la sensation du besoin respiratoire,
à la suite d’une modification des échanges gazeux ;

« 3° Par l’intermédiaire d’un processus spécifique probablement
correspondant à notre perception lumineuse. »

La manière dont ces processus dépendent de la nature et de
8 INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHE
l’intensité de la lumière, ainsi que des autres circonstances
extérieures, est différente pour chacun d’eux. Par suite,, les
réactions produites sous l’influence de conditions diverses
peuvent différer notablement : Agitation violente et repos complet,
photophobie et photophilie, mouvement progressif en ligne
droite et rotation sans translation, changement de forme sans
changement de place et phénomène inverse, tout cela s’observe,
comme effet de la même lumière sur le même individu dans des
circonstances différentes.

Cet auteur (Couleur et assimilation, in Archives néerlandaises
des sciences exactes et naturelles, lre livraison, 1883.) 
reprenant les assertions de Pringsheim sur le rôle de la
chlorophylle dans le phénomène de la décomposition de l’acide
carbonique, fut conduit indirectement à observer l’influence de
la lumière sur les bactéries.

Engelmann employa comme réactif les bactéries de la putréfaction.
Il s’aperçut qu’en fournissant de l’oxygène à ces
microorganismes, on éveille chez eux des mouvements de
progression, d’autant plus rapides qu’on met à leur disposition
une plus grande quantité de ce gaz.

Par exemple, si l’on enferme dans une préparation microscopique
des cellules végétales colorées et des bactéries, celles -
ci se meuvent aussitôt que l’on fait tomber un pinceau de
lumière sur les cellules végétales. Preuve que, sous l’influence
de l’éclairage, les cellules colorées décomposent l’acide carbonique,
fixent le carbone et dégagent de l’oxygène. Les
rayons extrêmes, ultra-rouges et ultra-violets, restent sans
action ; le dégagement atteint son maximum dans les rayons
rouges.

S’il ressort nettement de ce travail que toute cellule colorée
dégage de l’oxygène, il ne s’en suit pas que les bactéries
soient sensibles à l’action exclusive de la lumière. Engelmann
lui-même rappelle d’abord, à l’Académie royale des sciences
SUR LE DÉVELOPPEMENT DU BACILIUS ANTHRACIS 9
d’Amsterdam (29 octobre 1881) , que rien n’avait démontré,
dans ses expériences sur le dégagement de l’oxygène par
les cellules colorées, que la lumière exerçât une influence
sur les mouvements des bactéries de la putréfaction, les vibrions
et les spirilles. Dans un cas où les spirilles avaient
paru se mouvoir en l’absence de cellules colorées, l’auteur
y est convaincu que la préparation renfermait une bactérie qu’il
a nommé Bacterium chlorinum et dont le contenu verdâtre
décomposait l’acide carbonique et émettait de l’oxygène.

Aussi affirme-t-il à la même époque qu’il n’existe pas d’influence
directe de la lumière sur les mouvements des bactéries.

(In Neue Méthode zur Untersuchung der Sauerstoffausscheidung
pflânzlicher und thierischer Organismen ; Archives
de Pflûger, 1881, p. 285.) 

Plus tard (25 mars 1882) M. Engelmann signale à l’Académie
un bacterium dont la rapidité des mouvements dépend
exclusivement de l’influence exercée par la lumière.
Ce Bacterium photometricum se meut d’autant plus rapidement
que l’intensité lumineuse est plus grande. Le maximum
s’observe dans l’ultra-rouge et l’orangé de la lumière du soleil
et du gaz. L’action prolongée d’une lumière intense fait entrer
la bactérie en repos. Tout changement dans l’intensité et la
couleur ranime les mouvements. La direction de ces mouvements
est modifiée par une diminution subite de l’intensité ou
de la qualité de la lumière ;

M. Engelmann n’a pu démontrer dans cette étude l’existence
d’un dégagement d’oxygène. Et, comme l’absorption des
rayons calorifiques de l’ultra-rouge n’a aucune influence sur
le déplacement de ces bactéries, il faut bien en conclure que
la lumière agit sur la nutrition de certaines d’entre elles et
produit des phénomènes réducteurs comparables à l’assimilation.


t.0 INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHE
(Puisé dans la Revue internationale des sciences biologiques,
1882.) 

La lumière blanche agit encore sur la végétation des Muoorinées.
M. Van Tieghem a observé que la lumière exerce
une influence accélératrice sur le développement du Pénicillium
glaucum.

En forçant ce champignon à végéter dans des flacons pleins
d’huile, on constate que le mycélium croît en s’élevant le
long de la paroi éclairée, contre laquelle il s’applique étroite-■
ment. Si le pénicillium est semé sur des fragments de terre
cuite imbibés d’eau, immergés ensuite dans l’huile, on. remarque
que c’est seulement sur les faces éclairées des fragments
que le mycélium forme un tapisr serré ; il ne se développe pas
ou se développe à peine sur les faces qui se trouvent dans
l’obscurité.

(Voyez : Action de la lumière sur la végétation du Pénicillium
glaucum dans l’huile, par M. Van Tieghem, in Bulletin
de là Société botanique de France, séance du 10 juin
1881.) 

Les Schizomycètes ou Schizophytes sembleraient se comporter
à la manière du Pénicillium, car Zopfa remarqué que le
Beggiatoa rosea persicina se développe mieux du côté d’où
vient la lumière que du côté opposé (Die Spaltpilze, in
EncyMopasdie dér Naturwissenschaften, erste Abtheilung,
3e Lieferung, 1883).

Voici maintenant des travaux qui se rattachent plus directement
à l’étude que nous avons entreprise.

MM, Arthur Downes et P. Blunt se sont demandé si la
lumière est favorable ou défavorable au développement des
bactéries. (Voyez Researches on the Effect of Light upon
Bacteria and other organisms ; in Proceedings ofihe Royal
Society, décembre 1877.) --:'
SUR LE DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 11
En se servant des bactéries ordinaires de la putréfaction
et du liquide de M. Pasteur, ils auraient observé :

1° Que la lumière retarde ou empêché le développement des
bactéries et des champignons microscopiques ;

2° Que cette influence est moins rapide sur les champignons
que sur les bactéries ;

3° Que l’action retardante appartient à la lumière diffuse
ordinaire, mais surtout aux rayons actiniques du spectre
solaire ;

4° Que l’aptitude d’un liquide à servir de milieu de culture
n’est pas diminuée par l’exposition au soleil ; tandis que les
germes présents dans ce liquide peuvent être entièrement détruits
par la seule action de la lumière ;

5° Enfin qu’un fluide putrescible peut être préservé par la
seule et même influence ;

6° Toutefois que l’action retardante de la lumière serait
supprimée par le vide.

Malheureusement, nous voyons tous les jours des phénomènes
de putréfaction s’établir en pleine lumière et se poursuivre
à l’abri de l’air. Par conséquent, une grande variété
dans le modus faciendi a dû produire les résultats contradictoires
contenus dans la note de MM. Downes et Blunt.
Si les conditions des expériences eussent été identiques, on
n’aurait pas vu la lumière agir d’une manière aussi variée sur
le développement des germes.

Tout récemment {Comptes rendus de VAcadémie des sciences,
12 janvier 1885) M. Duclaux s’est occupé de l’influence
de la lumière du soleil sur la vitalité des germes de certains
microbes.

Ses études ont porté sur le Tyrothrix scaber, agent destructeur
de la matière albuminoïde, que l’on peut faire vivre
dans le bouillon Liebig et dans le lait. En faisant sécher une
goutte de culture de ce microbe, prise au moment de la for-
12 INFLUENCE DE LA lUMlÈRE BLANCHE
mation des spores, dans des matras que l’on, exposait à la
lumière du soleil ou à la lumière diffuse dans une étuve convenablement
chauffée, M. Duclaux a constaté que les germes
desséchés à la lumière diffuse étaient capables de végéter au
bout de trois ans, tandis qu’après un laps de' temps variant de
quinze jours à deux mois, les germes exposés au soleil étaient
plus ou moins stérilisés. La lumière du soleil serait donc un
agent hygiénique d’une grande puissance.

Les expériences de M. Duclaux diffèrent de celles de
MM. Downes et Blunt en ce qu’elles ont été faites sur les
germes d’un microbe défini, au lieu de porter sur des espèces
multiples et à différents états d’évolution. Mais elles ne
sont pas plus concluantes au point de vue de l’atténuation pratique
des virus.

Quant aux ferments proprement dits, il semble, d’après
M. Schutzenberger, que leur action soit plus lente à l’obscurité.

Gomme on le voit, toutes les recherches que nous venons
d’analyser ont eu pour but un problème de science pure ou
un problème d’hygiène publique ; aucune ne s’applique aux
microbes pathogènes (1). Lorsqu’elles ont porté sur des ferments
comparables, jusqu’à un certain point, aux microbes
virulents, on s’est proposé de connaître la persistance de
leur vitalité plutôt que les changements survenus dans les manifestations
de leur activité.

L’intérêt de nos expériences découlera donc de ces deux
conditions, savoir : 1° qu’elles ont porté sur un microorganisme
virulent nettement déterminé ; 2° qu’elles ont fait
marcher de pair l’étude des modifications morphologiques et
végétatives du Bacillus anthracis et celle des changements
survenus dans ses propriétés pathogènes.
(1) Pendantque nous nous occupions du Bacillus anthracis, M. Duclaux a étendu ses premiers
travaux à quelques microcoques pathogènes. Le résumé de nos expériences parut huit
jours après le sien dans les Comptes rendus de l’Académie des sciences (juillet 1888).SUR LE DÉVELOPPEMENT DÛ BACILLUS ANTHRACIS 13
CHAPITRE II .
EXPÉRIENCES FAITES AVEC LE BACILLUS ANTHRACIS
Nous nous proposions, avons-nous dit, de rechercher l’influence
comparée de la lumière blanche et de ses diversrayons
constituants sur le développement et l’activité pathogène
du Bacillus anthrdcis. Les expériences ont été poursuivies
avec la lumière artificielle, puis avec la lumière du soleil.

ARTICLE Ier. — INFLUENCE DE LA LUMIÈRE DU GAZ

Cette étude dut être faite à l’abri de la lumière du jour,
dans un laboratoire obscur.

Les sources lumineuses étaient dé forts becs de gaz à double
courant d’air que nous disposions de la manière suivante :
Le tube de tirage était entouré d’une gaine métallique percée
d’un trou circulaire de 2 centimètres et demi de diamètre,
à la hauteur de la partie la plus éclatante de la flamme. Celleci
était amenée au foyer principal d’une lentille biconvexe
de trois dioptries environ fournissant, au delà, un faisceau
lumineux à rayons parallèles dans lequel on exposait les
cultures.
 ;14 ,- ;;,- INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHE .
Pour obtenir les rayons colorés,' nous avons renoncé à'
l’usage du prisme, à cause de la faible intensité de nos sources
lumineuses. Nous avons renoncé de même à l’interposition
des verres colorés, parce que la plupart de ceux que l’on
trouve dans le commerce ménagent de grandes surprises,
ainsi que l’on peut s’en convaincre au spectroscope. A part
les verres rouges, tous les échantillons qui nous ont été présentés
laissaient passer plus ou moins tous les rayons du
spectre.

Force était donc de nous rabattre sur les écrans colorés liquides.
Outre les matières colorantes dont l’usage est classique,
nous avons cherché dans l’arsenal de la teinture lyonnaise des
couleurs qui ne laisseraient passer que l’un ou l’autre des
rayons du spectre. Les résultats n’ont pas été très heureux.
Aussi avons-nous limité le champ de nos expériences à la
comparaison de l’obscurité avec la lumière blanche et les
rayons les plus réfrangibles du spectre.

Dans tous les cas, un examen spectroscopique préalable nous
faisait connaître les rayons absorbés par les écrans que nous
utilisions.

Nous avons essayé d’obtenir les rayons jaunes en plongeant
du chlorure de sodium fondu dans la flamme du brûleur du
saccharimètre de Laurent. Mais ces rayons avaient une
faible intensité ; aussi n’avons-nous pas persévéré à étudier
l’influence qu’ils pourraient exercer sur nos cultures.

Puisque nous voulions connaître l’influence de la lumière,
il fallait que toutes les conditions de l’expérience, même l’éclairage,
fussent aussi semblables que possible.

Pour cela, les cultures ont été faites dans des matras de
même forme et de même capacité, chargés d’une égale quantité
de bouillon incolore. En outre, comme nous devions toujours
procéder par comparaisons, deux matras étaient mis en
culture simultanément dans des compartiments isolés d’une
SUR LE DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 15
étuve. Nous avions choisi une étuve de Gay-Lussac, divisée
par une planchette verticale en deux compartiments distincts,
la porte pleine métallique avait été remplacée par une porte
vitrée ; des bourrelets de coton cardé interposés entre la porte
et la cloison, achevaient d’isoler les compartiments et empêchaient
toute filtration des rayons lumineux, aux bords de la
cloison. Les compartiments étaient tapissés de papier blanc.

Avant de commencer des cultures dans une étuve disposée
ainsi, il faut s’assurer que la température est uniforme dans
les deux loges. Le voisinage d’un mur, d’une porte, d’une
fenêtre, peut abaisser la température d’un compartiment ; inversement,
la proximité d’un poêle, d’un calorifère, en hiver,
d’une fenêtre qui admet les rayons du soleil, en été, peut
élever la température dans une partie de l’étuve.

Nous avons rétabli l’équilibre en appliquant du papier noir
ou blanc sur les parois du compartiment dont la température
était trop faible.

. Enfin, il faut veiller à ce que la distribution des flammes
du brûleur au-dessous de l’étuve, une fois bien établie pour
une température donnée, ne change plus ; autrement on devrait
recommencer les tâtonnements de la première heure.

Nous insistons longuement sur ce mince détail de technique,
parce que sa méconnaissance conduirait à des erreurs
fâcheuses.

§ I. — Influence de la lumière blanche sur la végétation
du Bacillus anthracis.'—La pratique journalière apprend
que les cultures de ce microbe réussissent très bien à la lumière
diffuse et à l’obscurité. Qu’arriverait-il si l’on augmentait
l’intensité de l’éclairage ?
• Si, à l’aide du procédé sus-indiqué, on éclaire vivement un
bouillon de culture fraîchement ensemencé, on s’aperçoit que
la lumière- retarde-la végétation du mycélium. Trente-six
16 INFLUENCÉ DE LA LUMIERE BLANCHE
heures après le début d’une expérience, si l’on compare une
culture faite sous la lumière du gaz à une culture faite dans
l’obscurité, on constate des différences à l’oeil mi et surtout
au microscope.

A l’oeil nu, on remarque un trouble moins abondant du
bouillon vivement éclairé.

Au microscope, on trouve dans ce bouillon de longs filament
mycéliques, libres et pauvres en spores, tandis que
dans le ballon maintenu à l’obscurité, l’examen révèle la
présence de mycélium déjà fragmenté et chargé de spores.

L’évolution du mycélium et le développement des spores
marchent donc plus vite à l’obscurité.

La différence est plus accusée quand on féconde les cultures
avec du mycélium que lorsqu’on la féconde avec des
spores. •

Mais elle devient surtout très manifeste lorsque la température
à laquelle se fait la culture est dysgénésique, c’est-àdire
peu favorable à la multiplication des bacilles. En élevant
la température à un degré voisin de celui où s’arrête la végétation
du bacille, la vie est comme suspendue dans le matras soumis
à la lumière blanche, tandis qu’elle apparaît dans le matras
placé dans l’obscurité.

La vie est simplement suspendue et non supprimée, car il
suffit d’intercepter les rayons lumineux qui frappent le matras
pour que la végétation s’établisse à son intérieur.

En résumé, la lumière du gaz dirigée sans discontinuité sur
des cultures du Bacillus anthracis dans un milieu liquide et
transparent gêne légèrement l’évolution du microbe. Cette
propriété s’exerce d’une manière insignifiante lorsque toutes
les autres conditions sont favorables au développement de
cet organisme, Elle est néanmoins réelle, puisqu’elle est
évidente si la température ambiante devient dysgénésique.
SUR LE DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 17
§ II…*-'. Influence des rayons colorés sur la végétation
du Bacillus anthracis. —- On a dit précédemment que cette
étude a porté seulement sur l’influence des rayons extrêmes
du spectre, les rayons calorifiques et les rayons actimiques.
On a comparé leur influence à celle de deux facteurs connus,
l’obscurité et la lumière blanche.
A. — Si l’on fait simultanément une culture dans l’obscurité
et une autre dans- les rayons rouges obtenus par le
passage de la lumière du gaz à travers une solution de coralline,
les résultats diffèrent peu l’un de l’autre à l’oeil nu. Mais
en recourant au microscope, on s’aperçoit que le nombre des
spores, leur netteté et leur réfringence sont plus considérables
dans la culture exposée aux rayons colorés.
B. — Si l’on compare l’influence de la lumière blanche à
celle de la lumière rouge, a fortiori l’avantage appartiendrat-i !
à la culture faite sous les rayons rouges. Nous avons pu
nous en convaincre sur des cultures en matras et sur des cultures
faites sous le microscope, dans la chambre humide de
Ranvier.

Ces dernières expériences étaient installées de la manière
suivante : En face de deux microscopes, sur la platine desquels
sont placées deux cultures de bacilles charbonneux dans des
chambres humides, avec rigole d’air, de Ranvier, on dispose
une bonne lampe à gaz pour observations microscopiques.
Entre la source lumineuse et le miroir, on interpose, au
devant d’un microscope, un vase à faces parallèles rempli d’une
solution concentrée d’alun, et au devant de l’autre, une solution
de coralline. Les observations peuvent se faire à chaque
instant. A partir du moment où les spores émettent du mycélium,
on s’aperçoit que celui-ci est plus avancé dans son évolution
sous les rayons rouges que sous la lumière blanche.
C. — Des cultures en matras ou des cultures dans la
chambre humide de Ranvier peuvent être exposées compara-

tivjement aux rayons rouges, calorifiques, et aux. rayons actiniques
situés à droite de la raie F de Fraunhofer.

Or, pendant que le mycélium se présente en nombreux filaments
courts et chargés de spores dans les cultures conduites
sous les rayons rouges, il est plus rare et ses filaments sont
allongés et pauvres en spores dans les cultures faites sous les
rayons bleus et violets. Nous avons même constaté sur quelques
filaments de ces derniers des articles terminaux renflés
en pseudothèques, indices certains de la lenteur de l’évolution
du mycélium.

Conséquemment, les rayons actiniques sont moins favorables
à la sporulation que les rayons calorifiques,

§ III. — Influence de l’absorption d’une partie des rayons
jaunes et orangés sur la végétation du Bacillus anthracis.

— L’hémoglobine oxygénée absorbe une partie des rayons
compris entre les raies D et E de Fraunhofer, c’est-à-dire
une partie des rayons les plus éclairants de la lumière du gaz.

Si l’on interpose un écran liquide, formé d’une solution
d’hémoglobine dans l’eau distillée, entre la source artificielle
de lumière et des cultures en matras, on constate que la
végétation du mycélium et la sporulation sont plus actives
dans ces cultures que dans celles qui sont faites sous les rayons
de la lumière blanche.

D’où l’on peut conclure que la faible action dysgénésique
qui appartient à la lumière blanche artificielle dépend principalement
de son intensité et des rayons lumineux proprement
dits.

§ IV. — Influence de la lumière blanche et des rayons
colorés sur les propriétés pathogènes du Bacillus anthracis.,

— Etudiée à ce point de vue, nous devions prendre pour
type la virulence des cultures faites dans l’obscurité et rap-
SUR LE DiVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 19
porter à elle les effets pathogènes des cultures faites sous les
rayons de la lumière blanche, sous les rayons actiniques et
calorifiques.

Un instant, nous avons cru que l’action prolongée de ces
rayons, même pendant plusieurs générations, produirait une
modification de ces effets dans un sens ou dans l’autre. Nous
espérions surtout parvenir à atténuer le bacillus anthracis par
l’un de ces procédés.

Les résultats n’ont pas répondu à cette attente.

Si l’on inocule comparativement, sur le cobaye, et par
injections sous-cutanées, des bacilles cultivés à l’obscurité et
des bacilles cultivés à la lumière blanche ou sous les rayons
rouges, on n’observe pas de différence entre l’intensité des
lésions locales et le moment de l’arrivée de la mort.

Si l’on poursuit la même comparaison entre les bacilles
cultivés à l’obscurité et les bacilles cultivés sous les rayons
actiniques, on constate, le plus souvent, 'que les cobayes
inoculés avec les seconds meurent plus vite que les autres.
Mais nous n’oserions pas donner cette différence comme
absolument constante.

Par conséquent, la lumière blanche artificielle fournie par
le gaz et ses principaux rayons constituants ne modifient pas
sensiblement la virulence du bacillus anthracis.

De même, l’absence ou la présence de la lumière artificielle
blanche ou colorée n’impriment pas de différences profondes
à la végétation de ce microorganisme. Pourtant, il est indéniable
que la lumière blanche exerce une légère action dysgénésique
sur les spores et principalement sur le mycélium.
Gomme celle-ci est supprimée par l’absorption des rayons les
plus lumineux du spectre, il était permis de supposer que cette
influence dysgénésique, exquissée ici en quelques traits, ressortirait
avec netteté en exposant les cultures à l’action des
radiations solaires.
'20 INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHE
ARTICLE II. — INFLUENCE DES RADIATIONS SOLAIRES

Pour entreprendre cette étude dans de bonnes conditions,
nous avons choisi une période de l’année où le soleil se montre
avec une régularité aussi grande que possible et où la température
qui l’accompagne est sensiblement la même, c’està-dire
la seconde quinzaine de juillet et la première quinzaine
d’août.

Elle a porté sur trois points principaux : 1° la végétabilité
des spores ; 2° La végétation et la végétabilité du mycélium
 ; 3° la virulence des cultures du bacillus anthracis.

Avant de commencer la description des expériences qui ont
été faites sur ces points, il est indispensable d’indiquer en
quelques mots les conditions générales qui furent observées
et la valeur des expressions usitées dans le cours de cet article.

Ainsi, on entend par végétabilité des spores ou du mycélium
le pouvoir que possèdent les spores ou le mycélium du Bacillus
anthracis de donner naissance à du mycélium nouveau, On
constate qu’elle est modifiée: parla rapidité plus ou moins grande
avec laquelle la végétation apparaît au sein des cultures et par
l’abondance du trouble qui accompagne l’établissement de toute
végétation microbienne.

A propos des conditions communes à toutes ces expériences,
nous devons dire que l’on a mis un soin scrupuleux à écarter
toutes les causes modificatrices de la végétation des bacilles,
autres que les changements apportés dans l’éclairage. Par
exemple, les cultures en matras étaient enfermées dans une
étuve vitrée, afin que la différence de température soit insignifiante
entre le matras ensoleillé et le matras maintenu dans
l’obscurité. Les matras étaient choisis de telle sorte qu’ils eussent
SUE LE DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 21
la même forme et la même capacité. On les chargeait uniformément
d’un bouillon clair et aussi incolore que possible.

Enfin, grâce à l’obligeance de notre collègue, M. le professeur
Péteaux, nous avons pu opérer dans un local et avec des instruments
appropriés au but que nous poursuivions. Le local
était’exposé au midi. Un héliostat recueillait constamment les
rayons solaires et les lançait, dansée laboratoire, sur les matras
à culture. Ceux-ci arrivaient directement sur les cultures, ou
bien après avoir traversé des écrans liquides chargés d’absorber
les rayons calorifiques ou. certains rayons colorés.

§ I. — Influence du soleil sur la végétabilité des spores du
Bacillus anthracis. — Prenons plusieurs ballons chargés de
bouillon de veau salé et phosphaté, semons dans chacun une
goutte d’une culture achevée où le microscope montre des
spores libres et des fragments de mycélium sporulés, portons
ensuite un ballon témoin dans le compartiment obscur d’une
étuve chauffée à -f 36°, les autres dans le compartiment ensoleillé,
où ils séjourneront une heure, deux heures, trois heures,
etc., après cela, plaçons-les successivement dans le compartiment
obscur, puis observons ; nous obtenons les résultats suivants :
deux heures d’exposition au soleil du mois de juillet, par une tem -
pérature comprise entre + 35° + 39°, supprime la végétabilité
dans ces cultures fraîchement ensemencées. Il s’agit réellement
d’une suppression, car aucun des ballons que nous avons ensoleillés
au moins pendant deux heures, du 19 au 27 juillet 1885,
ne présentait de traces de végétation au bout d’un mois, bien
qu’ils eussent été conservés dans une étuve sombre à température
eugénésique.

Quand les ballons sont soumis moins de deux heures à
l’influence des rayons solaires, la végétabilité n’est pas supprimée,
mais simplement ralentie. Dans ce cas, l’influence
dysgénésique du soleil est d’autant plus grande que la durée de
22 INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHE
l’exposition à la lumière se rapproche davantage de deux heures.
Ainsi, tandis que des traces de végétation deviennent évidentes
dans le matras témoin en huit à neuf heures, elles n’apparaissent
qu’après seize à dix-huit heures dans les matras
ensoleillés, au milieu du jour, pendant une heure ; après trente
heures, dans les matras ensoleillés une heure et demie, et
après trois à quatre jours, dans les matras ensoleillés une heure
quarante-cinq minutes.

§ II. — Quels sont les rayons constituants de la lumière
solaire qui agissent le plus efficacement sur la végétabilité
des spores du Bacillus anthracis ? — Les radiations solaires
atteignent donc profondément la végétabilité des spores du
Bacillus anthracis, puisqu’il suffit d’exposer des bouillons récemment
ensemencés pendant deux heures à ces radiations
pour les frapper de stérilité. Cette influence appartient-elle à
la lumière solaire tout entière où à certains rayons constituants ?
C’est une question intéressante dont nous avons cherché la
solution.

On arrive aisément à se convaincre que cette influence
n’appartient pas aux rayons calorifiques ou actiniques. Que l’on
place entre l’héliostat et la porte vitrée de l’étuve un flacon à
faces parallèles plein d’une solution qui n’admet que les rayons
rouges ou les rayons actiniques du spectre, on verra les matras
éclairés de cette manière se troubler à peu près autant et aussi
vite que les matras plongés dans l’obscurité.

Cette expérience peut être faite plus simplement. Il suffit
d’enfermer le bouillon ensemencé avec des spores dans une
série de tubes Pasteur, d’immerger ceux-ci sous des solutions
colorées contenues elles-mêmes dans des vases transparents,
comme des vases à foetus, et d’exposer directement au soleil.
Si les vases reçoivent les rayons solaires pendant une journée,
la culture commence quelquefois à leur intérieur ; dans tous les
SUR LE DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 23
cas, elle se poursuit normalement, quand les tubes sont portés
à l’étuve sombre.

Serait-elle donc l’apanage des rayons lumineux du spectre ?
On serait tenté de le croire par voie d’exclusion ; mais si l’on
entreprend une démonstration directe, on est bientôt désabusé.

Il est difficile de faire l’expérience nécessaire à cette démons -
tration, autrement, qu’en employant les rayons fournis directement
par la décomposition de la lumière solaire à l’aide du
prisme.

Pour cela, nous avons transformé un laboratoire en étuve
sombre, en fermant les ouvertures avec des écrans opaques et
en échauffant l’atmosphère jusqu’à -f- 35°. A travers une ouverture
ménagée dans le volet d’une fenêtre exposée au midi,
pénétrait un faisceau de lumière solaire recueilli par l’héliostat.
Ce faisceau était dirigé sur l’arête d’un prisme, de manière à
obtenir au delà un spectre fort étalé. Il devenait alors facile de
suspendre un tube Pasteur dans chacune des couleurs du
spectre.

Ce dispositif réalisé, nous avons réparti du bouillon fécondé
avec des spores dans sept tubes Pasteur stérilisés, puis nous
les avons exposés séparément pendant quatre heures, de onze
heures du matin à trois heures du soir, dans les sept teintes du
spectre. Au bout de ce temps, les tubes furent transportés dans
l’étuve sombre à température eugénésique. Le lendemain, tous
offraient des indices de culture et il était à peu près impossible.
de dire si le développement était moins avancé ou moins abondant
dans les tubes exposés aux rayons orangés et jaunes que
dans les tubes soumis aux rayons calorifiques et actiniques. Au
contraire, le tube exposé au soleil pendant le même temps, à
titre de témoin, était absolument stérile.

Conséquemment, il ne semble pas que l’action suspensive ou
destructive de la végétabilité des spores du Bacillus anthracis
appartienne à quelques-uns seulement des rayons du spectre
24 INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHE
solaire. Cette propriété est l’apanage de la lumière solaire complète.


§ III. — L’influence de la lumière solaire est en rapport
avec son intensité. — En effet, si les rayons solaires traversent
une couche d’eau distillée de deux centimètres d’épaisseur, la
semence qui les reçoit se développe à peu près aussi bien que
dans l’obscurité ou derrière un écran coloré rouge ou bleu.

Nous avons fait l’expérience plusieurs fois de la manière
suivante : deux ballons sont fécondés avec des spores identiques.
L’un est placé dans le compartiment obscur de l’étuve ; l’autre
dans le compartiment dont la porte est vitrée. Sur le trajet du
faisceau lumineux réfléchi par l’héliostat, on interpose un flacon
en verre à faces parallèles rempli d’eau distillée. Les cultures
sont maintenues dans ces conditions pendant plus de deux
heures. Puis on porte le matras exposé jusque-là aux rayons
solaires dans le compartiment sombre de l’étuve. Le lendemain
matin, le bouillon est presque également troublé dans les deux
matras.

Il suffit donc d’interposer un écran transparent, mais qui absorbe
une certaine quantité de lumière, entre l’héliostat et la
culture pour supprimer l’action destructive que le soleil exerce
sur la végétabilité des spores du Bacillus anthracis.

On peut supposer qu’en faisant diminuer graduellement
l’épaisseur de cet écran, on parviendrait à diminuer peu à peu
l’effet qu’il produit, c’est - à-dire que l’on assisterait d’abord à un
simple retard, puis à une suppression complète de la végétation.

Tous les écrans transparents ne se comportent pas comme
les écrans d’eau distillée. Ainsi, dans trois expériences que nous
avons faites avec une solution concentrée d’alun, nous avons
obtenu deux fois une suppression complète de la végétabilité et
une fois un retard de quarante-huit heures dans l’apparition
du développement des spores en mycélium.
SUR LE DEVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 25
On se demandera, sans doute, avec curiosité, la cause qui entraîne
une différence entre l’action de l’écran d’eau distillée et
celle de l’écran de la solution d’alun, écrans qui sont, en apparence,
aussi transparents l’un que l’autre. On sait que les solutions
d’alun retiennent les rayons calorifiques. Mais dans le cas
actuel, l’absorption des rayons calorifiques devrait être plutôt
favorable que nuisible à la culture, attendu que celle-ci était
plongée dans une étuve chauffée entre + 38" et + 39°, et
qu’une élévation notable aurait transformé la température
eugénésique en température dysgénésique.

Il est alors permis de supposer que la solution d’alun atténue
moins l’intensité de la lumière que l’eau distillée, sous la même
épaisseur.

Une semblable hypothèse devait être soumise au contrôle
expérimental. Nous choisissons deux flacons à faces parallèles
aussi semblables que possible et par la qualité du verre et
par l’écartement des faces. Nous en remplissons un avec de
l’eau distillée, l’autre avec une solution concentrée d’alun. Sur
une face de chacun des flacons, nous appliquons une feuille
de papier photographique ; par-dessus, nous disposons une
feuille de papier noir absolument opaque ; le papier noir
couvre, en outre, deux autres faces parallèles des flacons.
Ceux-ci sont exposés à la lumière au même instant et au
même lieu, de telle sorte que les rayons lumineux sont obligés
de traverser l’eau distillée ou la solution d’alun pour arriver
sur la face impressionnable du papier. Si on lave les feuilles de
papier pour enlever les sels d’argent en excès et si on fixe a
l’hyposulfite de soude, on constate que la réduction est un peu
plus forte sur la feuille de papier exposée en arrière de la solution
d’alun que sur l’autre. Toutefois, la différence n’est pas
considérable.

g IV. — Mécanisme de l’action de la lumière du soleil
26 INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHEsur la végétabilité des spores du Bacillus anthracis. — En
général, les spores passent pour opposer une résistance énorme
aux causes de destruction. On s’étonnera sans doute de voir
celles du Bacillus anthracis perdre si rapidement leur végétabilité
sous l’influence des rayons solaires.

M. Nocard a supposé, dans une revue critique qu’il a faite
à propos de notre communication préalable sur ce sujet (1) ,
queles spores que nous semions dans nos ballons commençaient
à végéter, en dépit des rayons solaires, et que le jeune mycélium
issu des spores était stérilisé par ces rayons en fort peu
de temps.

Nous ne connaissons pas le degré de résistance qu’un mycélium
naissant oppose à l’action de la lumière solaire ; mais
nous avons apprécié celui d’un mycélium âgé de dix-huit à
vingt-quatre heures, comme on le verra dans les paragraphes
suivants. Or, ce mycélium demande vingt-sept à trente heures
d’insolation pour être frappé de stérilité.

On peut objecter, il est vrai, que l’effet de la lumière était
considérablement amoindri par le trouble causé dans les bouillons
par la végétation .dont ils sont le siège.

Aussi ajouterons-nous, qu’a priori, il ne semble pas que
deux heures suffisent aux spores pour se transformer en
mycélium lorsqu’on les sème dans un bouillon dont la température
initiale est de 18° environ. De sorte qu’il est infiniment
probable que l’action modificatrice de la lumière s’exerce sur la
spore même.

Une expérience pourrait résoudre directement cette question.
Elle consisterait à exposer du bouillon fraîchement fécondé
avec des spores aux rayons du soleil, en ayant soin de le
faire reposer sur de la glace, afin de maintenir la température
au-dessous de celle qui se prête à leur évolution. Si les spores
(1) Recueil de médecine vétérinaire, n » du 18 septembre 188S.SUR LE DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 27
ne se développent pas ultérieurement, lorsque les cultures
auront été déposées dans une étuve obscure à température
eugénésique, c’est qu’elles auront été directement stérilisées
par les radiations solaires.

Or, l’état climatérique ne nous a pas permis de faire cette
expérience ; mais nous l’avons instituée en nous servant de
la lumière électrique.

Toutefois, il a fallu apporter un changement important à
la forme des vases à culture. Au lieu de ballons, nous avons
adopté de petites éprouvettes aplaties. Le bouillon se présente
ici sous une épaisseur qui ne dépasse pas deux à trois
millimètres. Dans ces conditions, la lumière électrique agit
avec autant et même plus de rapidité que les rayons du
soleil. Nous nous sommes assuré que les spores répandues
dans un bouillon refroidi par le contact médiat de la glace
étaient parfaitement frappées de stérilisation au bout de
deux heures d’exposition à la lumière électrique fournie par
le charbon.

En résumé, nous avions constaté que la lumière du gaz
ralentissait la végétation du Bacillus anthracis. Ici, nous
venons de démontrer que la lumière du soleil de juillet détruit
la végétabilité des spores de ce microorganisme, dans
un milieu liquide, en deux heures. Il ne faut pas perdre de
vue que le milieu liquide était contenu dans un matras
Pasteur dont il occupait à peu près le cinquième de la capacité
intérieure ; car, ainsi que l’on s’en convaincra plus tard,
l’épaisseur sous laquelle se présente le liquide nutritif modifie
directement les effets de l’insolation : plus la couche liquide
est mince, plus les effets de l’insolation sont rapides ou
prononcés.

Ces faits sont fort instructifs : 1° parce qu’ils renseignent
sur la puissance destructive du soleil vis-à-vis certains germes
pathogènes ; 2° parce que, en s’ajoutant à d’autres faits
28 INFLUENCE DE LA LUMIERE BLANCHE
déjà connus, ils démontrent que la spore n’est pas aussi résistante
qu’on s’est plu à le croire et que les tentatives d’atténuation,
que l’on a entreprises ou que l’on voudrait entreprendre
sur les virus à cet état, sont parfaitement légitimes.

§ V. — Influence du soleil sur la végétation du mycélium
du Bacillus anthracis. — Nous avons étudié dans les
paragraphes précédents, l’influence du soleil sur la végétabilité
des spores du bacille de la fièvre charbonneuse.
Passons maintenant à la description des modifications qu’il
imprime à la végétation du mycélium, dans des cultures
en voie d’évolution.

On a vu que la lumière blanche était la lumière modificatrice
par excellence. La germination des spores se fait
dans les rayons du spectre pris isolément. Par conséquent,
on se contentera d’examiner l’influence de la lumière solaire
complète. '

Si on fait germer des spores de Bacillus anthracis dans
une étuve sombre, à température eugénésique, et que, vingtquatre
à trente-six heures après, on transporte les matras,
pendant le jour, dans une étuve ensoleillée et pendant
la nuit dans une glacière, pour couper court aux progrès
du mycélium en dehors des périodes diurnes, on voit que
l’évolution des bacilles n’est pas arrêtée immédiatement
par l’action des rayons solaires. Ainsi, les filaments mycéliques
forment quelques spores, s’ils n’en renfermaient pas au
moment où les cultures ont été retirées de l’étuve sombre, ou
bien, le nombre des spores augmente notablement dans le mycélium,
si les filaments en présentaient déjà quelques-unes. On
constate, en outre, que le mycélium se fragmente, que certaines
spores deviennent libres ; en un mot, que les cultures
continuent leur évolution.

Toutefois, l’évolution s’achève avec lenteur et selon le
SUR LE ; DÉVELOPPEMENT DXT BACILLUS ANTHRACIS 29
mode qu’elle affecte habituellement dans les milieux nutritifs
peu favorables. Ainsi, les fragments de bacilles se'réunissent
souvent en amas irréguliers dans lesquels les spores se forment
comme dans des sortes de zoogleee,

§ VI. — Influence de la lumière solaire sur la végétabilité
du mycélium du Bacillus anthracis. — Nous venons
d’examiner l’influence que le soleil exerce sur l’évolution des
cultures ; nous allons maintenant étudier les effets de l’insolation
sur la végétabilité, propriété du mycélium de se multiplier
dans des milieux nouveaux.

Nous devons dire d’emblée que ces effets sont beaucoup
moins rapides^ que sur les spores fraîchement ensemencées
dans un bouillon transparent.

En transportant au soleil des matras’Pasteur qui renfermaient
des cultures en évolution depuis un ou deux jours, il
a fallu vingt-cinq à trente heures d’exposition aux rayons
solaires pour détruire la végétabilité du mycélium plus ou
moins sporulé qu’elles contenaient. Dans une première série
de matras, nous avons vu disparaître cette propriété à la
vingt-septième heure ; dans une autre série, à la vingthuitième
heure.

Nous rappellerons que ces expériences ont été faites sous le
soleil de juillet, quand le thermomètre oscillait, au voisinage
des matras, entre + 30° et + 36°.

La disparition de la végétabilité était constatée à l’aide de
la culture ou plutôt de cultures successives que l’on fécondait
avec le contenu de'la culture ensoleillée. On puisait la semenceà
un moment de plus en plus éloigné de l’heure où l’on avait
commencé à exposer la culture mère au soleil.

Ce procédé a permis de connaître le mode selon lequel la
végétabilité se retire des cultures ensoleillées. On a pu voir
que celle-ci disparaît graduellement.
30 .' INELUENCE DE LA LUMIÈRE BLANCHE
La modification se traduit de deux manières :

1° Par le degré de rapidité avec lequel la végétation.s’établit
dans les cultures d’essai ;

2° Par l’abondance de la végétation.

Or, l’apparition du développement dans les cultures filles
se fait attendre de plus en plus, au fur et à mesure que la
semence a été de plus en plus ensoleillée. Dans nos bouillons
et à là température de notre- étuve, une semence normale
offrait des indices de culture au bout de dix à douze heures.
Une semence ensoleillée quatre et huit heures ne donnait
des signes évidents de végétation qu’entre vingt. et vingtquatre
heures. Une autre exposée aux rayons solaires quinze
et vingt heures ne commençait à évoluer qu’entre trente-six
et quarante heures. En outre, plus les cultures évoluaient tardivement,
moins elles se troublaient. Si l’on disposait en file la
série'des cultures d’essai, on pouvait établir, sur le trouble
qu’elle présentait, une gamme descendante d’une régularité
presque parfaite. Elle aboutissait à un bouillon absolument
vierge ; Ce dernier correspondait à la semence de laquelle le
pouvoir végétatif s’était entièrement retiré.

§ VII. — La perte de la végétabilité marche de la même
manière dans une seule ou dans plusieurs générations
successives. — Les lignes précédentes démontrent que la
végétabilité diminue à peu près en raison de la durée de l’exposition
de la culture aux rayons du soleil.

La diminution obtenue par un certain temps d’insolation
est acquise à une culture. On peut l’augmenter successivement,
le lendemain, le surlendemain, jusqu’à disparition de
la végétabilité. Pour cela, il suffit d’exposer le ballon au
soleil pendant la période diurne et de le déposer à l’étuve pendant
les périodes nocturnes.

Bien plus, les résultats acquis partiellement se transmet-
SUR LE DÉVELOPPEMENT DÛ BACILLUS ANTHRACIS 31
tent aux générations suivantes, pourvu qu’elles se succèdent
à d’assez courts intervalles.

Par exemple, on anéantira, en huit à neuf heures, la végétabilité
d’une culture dont la semence a été ensoleillée pendant
vingt-cinq heures.

Une culture de troisième génération, dont les cultures mères
ont été exposées d’abord dix-sept heures, puis neuf heures
au soleil, perdra son pouvoir fécondant à la suite d’une insolation
de dix heures.

Ce fait est très intéressant. Il montre, avec netteté, la gradation
des effets de l’insolation sur les cultures du Bacillus
anthracis et donne immédiatement l’idée de chercher si les
propriétés pathogènes de ces cultures ne subiraient pas des
modifications parallèles, déterminées, et susceptibles de se
conserver par voie de génération.

On sera probablement frappé de la différence implicitement
signalée entre la résistance des spores et celle du mycélium à
l’action des radiations solaires. Il résulte des expériences rapportées
ci-dessus que, pour supprimer la végétabilité du mycélium,
il faut quinze fois plus de temps que pour anéantir celle
des spores au moment de l’ensemencement.
' Cette différence tient plus aux conditions dans lesquelles
s’exerçait l’action de la lumière qu’au degré de résistance à cet
agent, des deux états précités du Bacillus anthracis.

Lorsque le bouillon vient d’être fécondé avec une goutte
chargée de spores, l’intérieur du matras est d’une transparence
parfaite et l’intensité de la lumière ne subit presque aucune
diminution de la part des couches liquides qu’elle traverse.
Au contraire, lorsqu’on expose au soleil une culture datant de
vingt-quatre à trente-six heures, les rayons pénètrent difficilement
dans tous les points du bouillon, attendu qu’il est troublé
ou rendu fortement opalescent par le mycélium qu’il tient
en suspension. Nous avons montré que cette interprétation
32 INFLUENCÉ DE LA LUMIERE BLANCHE*
était fondée en faisant agir la lurnière électrique sur des cultures
plus ou moins riches ou en couches plus ou moins épaisses.
Nous reviendrons sur ce point dans un travail ultérieur.

§ VIII. — Influence du soleil sur la virulence des cultures
du Bacillus anthracis. — Quoi qu’il en soit, nous nous
sommes appliqué à déterminer la modification que le soleil peut
imprimer à la virulence des cultures faites dans les matras
Pasteur, cultures qui offrent, à peu de chose prèi, la même
opalescence, quand elles ont le même âge.

Nous avons vu, au paragraphe précédent, que si l’on expose
au soleil une culture datant de vingt-quatre à trente-six
heures et qu’on prélève une goutte, toutes les quatre à cinq
heures, pour la déposer dans des ballons vierges, on constate
un retard croissant dans le début de l’évolution des cultures
filles et une diminution graduelle de la récolte.

Si on divise, chaque fois, la quantité prélevée en deux
parties, dont une est inoculée à deux cobayes, on conduit simultanément
une double série d’expériences fort intéressantes.

Pendant que les matras se troublent de moins en moins et
font attendre de plus en plus les premières traces de végétation,
les cobayes succombent d’abord au charbon dans les délais
habituels, puis meurent plus tardivemement, enfin, résistent à
l’inoculation. Dans ce dernier cas, les survivants ont acquis une
immunité plus ou moins forte.

Indiquée sous cette forme générale, ce fait très important ne
pourrait servir de base à des tentatives régulières d’atténuation
du virus. Il faut donc en préciser les conditions et entrer dans
quelques détails:

Si l’on veut faire agir le soleil sur du mycélium dans le but
d’atténuer sa virulence, il faut prendre des cultures d’une
richesse moyenne, ou bien les étendre avec du bouillon ou de
l’eau stérilisée si elles sont trop abondantes. Le liquide virulent
SUR LE* DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 33
est déposé dans des matras Pasteur sur une épaisseur qui n’excède
pas un centimètre.

Les matras sont exposés directement au soleil, en ayant soin
. que l’air circule tout autour et que les corps du voisinage-ne
réfléchissent pas sur eux des rayons qui seraient capables d’élever
trop notablement leur température intérieure. Quand-le
soleil est voilé par un nuage, pendant l’opération, il faut tenir
compte du temps durant lequel les matras sont restés soustraits
aux radiations lumineuses. Lorsque le soleil se couche, on transporte
les matras à l’étuve,. et on recommence l’opération le
lendemain vers neuf heures, en été, c’est-à-dire au moment où
Tes rayons deviennent ardents.

En se conformant à ces indications, on obtient les résultats
ci-après : jusqu’à la dix-neuvième heure d’insolation, les cultures
donnent la mort à tous les cobayes qui en reçoivent une
goutte dans le tissu coujonctif sous-cutané. A la vingtième
heure, le mycélium ne lue plus qu’un cobaye sur deux ; semé
dans un excellent bouillon, il ne commence à végéter qu’au bout
de quarante-huit heures. A la vingt-cinquième heure, le mycélium
est encore capable de végéter, mais il ne tue plus les
cobayes auxquels on l’inocule. Enfin, à la vingt-huitième heure,
sa végétabilité a disparu.

Si on éprouve les cobayes survivants, huit jours après l’inoculation
du mycélium ensoleillé, on constate que les cobayes
inoculés avec le mycélium ensoleillé pendant vingt et vingt-cinq
heures résistent à l’insertion d’un virus très actif, tandis que
les cobayes inoculés avec le mycélium ensoleillé pendant vingthuit
heures succombent dans les délais ordinaires.

La virulence du mycélium disparaît donc en même temps
que la végétabilité. Mais, avant sa disparition, elle subit une
diminution parallèle à la perte graduelle de la végétabilité. De
sorte que » après vingt à vingt-cinq heures d’insolation, le
34 INFLUENCE DE LA LUMIÈRE BLANCHE . .
mycélium présente une virulence convenable pour conférer
l’immunité.

Il est inutile de dire que les rayons colorés qui modifient à
peine la végétabilité et la végétation n’atténuent pas la virulence
des cultures.

Quant au mycélium qui procède de spores ensoleillées pendant
un laps de temps insuffisant pour leur enlever le pouvoir
végétatif, il nous a paru doué d’une grande virulence.

On juge, par ces résultats, de la simplicité avec laquelle on
pourra préparer des vaccins charbonneux pendant la saison
d’été.

Une étude sur la persistance de l’atténuation obtenue par
l’action du soleil et sur sa trausmissibilité possible par voie de
génération compléterait heureusement ce travail. Il devrait
posséder un chapitre sur l’influence de la lumière sur des spores
ou du mycélium desséchés, sur du sang charbonneux frais ou '
sec. Enfin, il devrait être suivi d’une étude sur les effets de la
lumière électrique. Nous poursuivons les expériences qui permettront
de donner ces compléments au présent mémoire.
SUR LE DÉVELOPPEMENT DU BACILLUS ANTHRACIS 35Conclusions
Actuellement, les principales conclusions suivantes se dégagent
de notre travail :

1° La lumière du gaz nuit légèrement à la végétation du
Bacillus anthracis.

2° Le soleil de l’été supprime rapidement la végétabilité des
spores si ses rayons pénètrent facilement dans le milieu liquide
qui les tient en suspension.

3° Le soleil de l’été diminue graduellement la végétabilité du
mycélium et peut transformer les cultures en une série de vaccins,
aussi sûrement que la chaleur.

4° Ces effets sont obtenus avec la lumière complète et non
par l’un quelconque de ses rayons constituants.

5° Ils sont en raison de l’intensité des rayons et de la transparence
des milieux.

6" La lumière est un agent biologique très important dans
la vie des infiniments petits.

7° La lumière est probablement un facteur de l !a4ténuation
de plusieurs virus, sinon de tous les virus. / *x.-•-':'- ,/J\
,ÏO: ;. - mpiiiucRin PITHAT AIN« J, BUE OENTIL 4