证券代码：002424 证券简称：贵州百灵 公告编号：2015-010贵州百灵企业集团制药股份有限公司
糖宁通络研发项目进展公告
本公司及董事会全体成员保证信息披露的内容真实、准确和完整，没有虚假记载、误导性陈述或重大遗漏。
风险提示:
鉴于新药研发项目的复杂性、风险性和不确定性，糖宁通络研发项目具有周期长、投入较大的情况，研究工作各阶段均具有风险性，公司将及时履行信息披露义务，请投资者注意投资风险。
公司本次公告的研究报告为糖宁通络胶囊对自发性糖尿病小鼠降糖作用及糖尿病并发症影响的动物实验报告，实验目的是采用国际公认的 db/db自发性糖尿病小鼠模型，进行糖宁通络胶囊的降糖作用，并考察其对糖尿病并发症的干预作用及降糖作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。本报告的结论存在与临床应用情况出现差异的可能性风险。
本公告为公司研发项目进展公告，不会对公司目前经营产生重大影响。
贵州百灵企业集团制药股份有限公司（以下简称：“公司”或“贵州百灵”）于 2015年 1月 15日收到中国医学科学院药用植物研究所编制的《糖宁通络胶囊给药 38周对 db/db自发性糖尿病小鼠降糖作用及糖尿病并发症的影响报告》，现对该项目研发进展情况作如下信
息披露。
实验基本情况：
1、实验药物名称：糖宁通络胶囊
2、实验单位：中国医学科学院药用植物研究所
3、实验内容：糖宁通络胶囊给药 38周对 db/db自发性糖尿病小鼠降糖作用及糖尿病并发症的影响
4、研究目的：采用国际公认的 db/db自发性糖尿病小鼠模型，进行糖宁通络胶囊的降糖作用，并考察其对糖尿病并发症的干预作用及降糖作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。
实验报告内容详见附件：《糖宁通络胶囊给药 38周对 db/db自发性糖尿病小鼠降糖作用及糖尿病并发症的影响报告》。
敬请广大投资者谨慎决策，注意投资风险。
特此公告。
贵州百灵企业集团制药股份有限公司
董事会
实 验 报 告
研究专题的名称：糖宁通络胶囊给药 38周对 db/db
自发性糖尿病小鼠降糖作用及糖尿病并发症的影响
实验报告的审查、批准
专题负责人孙晓波 签名 2015年 1月 6日撰写
实验室负责人孙晓波签名 2015年 1月 12日批准
试验单位：中国医学科学院药用植物研究所
试验地点：北京市海淀区马连洼北路 151号
试验时间：2014.1.15-2014.12.31
目 录
目录„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2
摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 3
1.研究专题名称及研究目的„„„„„„„„„„„„„„„„ 5
2.药效学评价研究机构和委托单位的名称及地址„„„„„„„ 6
3.研究起止日期„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 7
4.供试品和对照品的名称、缩写名、代号、批号、稳定性、含量、
浓度、纯度、组分及其它特性„„„„„„„„„„„„„„ 7
5.试验材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 8
6.试验方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 8
摘 要
目的：采用国际公认的db/db自发性糖尿病小鼠模型，进行糖宁通络胶囊长期给药的降糖作用研究，并考察其对糖尿病并发症的干预作用及可能的作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。
方法：60只雌性 db/db自发性糖尿病小鼠（6～8周龄），随机分为 6组，每组 10只，分别为模型组、盐酸二甲双胍组、糖宁通络胶囊高剂量组（1.8g/kg）、糖宁通络胶囊中剂量组（0.9g/kg）、糖宁通络胶囊低剂量组（0.45g/kg），二甲双胍联合糖宁通络胶囊中剂量组（0.9g/kg），10只同周龄雌性 C57/BL小鼠为正常对照组。各组灌胃给药，每日 1次，灌胃体积0.1ml/10g，连续给药处理 38周，其中空白对照组和模型组每天灌胃 0.1ml/10g的饮用水。每天测定各组小鼠食量、饮水量，每周测定各组小鼠体重，观察糖宁通络胶囊对 db/db小鼠状态的影响；检测空腹血糖和葡萄糖耐量，并检测血清胰岛素水平和血清糖化血红蛋白水平，观察糖宁通络胶囊对 db/db小鼠葡萄糖代谢的影响；测定体脂比和血脂四项指标（CHO、TG、HDL和LDL），观察糖宁通络胶囊对 db/db小鼠脂代谢的影响。
检测肝功能指标 GTP和GOT，肾功能CRE、 BUN和尿蛋白水平，以及心肌酶 ALP和 CK水平，观察糖宁通络胶囊对 db/db小鼠心、肝、肾功能病变的影响；采用 4Doct小动物眼底成像系统检测眼底视网膜微血管瘤数量变化，观察糖宁通络胶囊对 db/db小鼠视网膜病变的影响。同时对主要脏器进行病理检查。
结果：糖宁通络胶囊（1.8、0.9和0.45g/kg）长期给药（38周）具有
显著的降血糖，降低糖化血红蛋白和改善糖尿病小鼠糖耐量的作用，具有剂量依赖性，糖宁通络胶囊高剂量组效果优于二甲双胍组。糖宁通络胶囊显著减少视网膜微血管瘤数量，并明显降低糖尿病引起的肝功能指标 GOT和GPT，肾脏功能指标 CRE和 BUN以及心肌酶 CK和 ALP的升高，提示糖宁通络胶囊对糖尿病合并的微血管病变有一定的延缓作用。糖宁通络组能显著改善db/db小鼠脂质代谢异常状况，进一步的心脏病理切片尚在进行中。
结论：糖宁通络胶囊具有显著的降糖效果，并可改善糖脂代谢，延缓糖尿病引起的微血管病变，显著改善视网膜、肝脏、肾脏病变；
并对糖尿病心脏病变也有一定的改善作用。
1研究专题的名称及研究目的
1.1研究专题名称：
糖宁通络胶囊给药 38周对 db/db自发性糖尿病小鼠降糖作用及糖尿病并发症的影响
1.2研究背景和目的：
糖尿病是一种以慢性、高血糖为特征的糖、脂类和蛋白质代谢异常性疾病，已成为严重威胁人类健康的一大杀手。糖尿病作为慢性病，需要长期服用药物，因此其长期用药的安全性和有效性值得重点关注。糖尿病虽然以慢性高血糖为特征，但其最大的危害在于慢性微血管并发症和大血管并发症。研究表明，糖尿病的发生发展是可以干预的，通过生活方式的改变和药物的干预，可以有效地阻止和延迟糖尿病的发生发展。理想的新型降糖药物应该是可以有效治疗肥胖、保护胰岛β细胞功能、改善糖尿病并发症、提高生活质量并且药品的价格合理。
如何有效防控 2型糖尿病，开发理想的新型降糖药物是临床医生和制药企业面临的共同难题。中药及复方由于具有多成分、多靶点的作用特点，在治疗慢性非传染性疾病方面具有一定的优势，从传统中草药中筛选有效组方也是新药开发的途径之一。由于小鼠和人类功能基因的同源性高达90%以上，并且 db/db小鼠是 Leptin受体基因缺陷导致的先天性 2型糖尿病小鼠，具有高血糖、胰岛素抵抗、糖代谢异常，合并糖尿病视网膜和肾脏病变等多种疾病，与人类 2型糖尿病的发病机制和临床症状极为相似，是一种良好的糖尿
病药物研究的动物模型。因此，本研究选择这种自发性糖尿病小鼠作为研究工具。
1.3研究目的：
采用国际公认的db/db自发性糖尿病小鼠模型，进行糖宁通络胶囊的降糖作用，并考察其对糖尿病并发症的干预作用及降糖作用机理，为糖宁通络胶囊的临床应用提供科学依据。
2药效学评价研究机构和委托单位的名称及地址
2.1药效学评价研究机构
名称：中国医学科学院药用植物研究所
地址：北京市海淀区马连洼北路 151号
邮编：100193
2.2委托单位：贵州百灵企业集团制药股份有限公司
地址：贵州省安顺市经济技术开发区西航大道
3研究起止日期
实验起始日期：2014年 1月 15日
实验结束日期：2014年 12月 31日
4供试品及对照品的名称、缩写名、代号、批号、稳定性、含量、浓度、纯度、组分及其它特性
4.1供试品
名称：糖宁通络胶囊
批号：20130401
提供者：贵州百灵企业集团制药股份有限公司
接收时间：2013年 6月 1日
性状：胶囊，内容为黑褐色粉末
溶解性：可溶于水
稳定性：稳定
保存条件：密封
保存场所：中国医学科学院药用植物研究所样品室
剩余供试品处理方法：留样
4.2对照品（溶剂）
名称：蒸馏水
4.3供试品配制
4.3.1配制方法：用蒸馏水配制成所需浓度。
4.3.2配制频率：试验现用现配。
5试验材料
5.1试验动物： SPF级自发性糖尿病小鼠模型 C57/KsJ-db/db小鼠(简称 db/db小鼠)，6～8周龄，体重45～55g，雌性；由中国科学院上海实验动物中心/上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。
5.2试验药物：
糖宁通络胶囊胶囊（批号：20130401，规格：0.3g/粒，相当于 1.1g生药/粒，人用量每次 3粒，每日三次）由贵州百灵企业集团制药股份有限公司提供。
盐酸二甲双胍片由中美上海施贵宝制药有限公司生产（批号：1406155）。适应症：高胰岛素血症，2型糖尿病。用法用量：通常本
品（盐酸二甲双胍片）的起始剂量为 0.5克，每日二次。日用药量为1g。
5.3仪器：稳豪型血糖试纸（批号：3623898）和稳豪型血糖仪购自强生（上海）医疗器材有限公司。酶标仪购自帝肯（上海）公司。日立7080全自动生化仪购自日本日立株式会社。电子天平购自梅特勒托利多仪器（上海）有限公司。
6试验方法
6.1动物一般状态观察
60只雌性 db/db小鼠（6～8周龄）适应性喂养1～2周，空腹血糖值超过 13.9mmol/L后准备进行试验。同周龄 C57雌性小鼠为空白对照组，60只雌性 db/db小鼠随机分为 6组，每组 10只，试验分别为模型组、盐酸二甲双胍组、糖宁通络胶囊高剂量组（1.8g/kg）、糖宁通络胶囊中剂量组（0.9g/kg）、糖宁通络胶囊低剂量组（0.45g/kg），二甲双胍联合糖宁通络胶囊中剂量组（0.9g/kg），共 6组，各组灌胃给药，每日 1次，灌胃体积0.1ml/10g，连续给药处理 38周，其中空白对照组和模型组每天灌胃 0.1ml/10g的饮用水。
每周监测血糖 1次，连续给药 38周，同时对所有小鼠进行一般状况和行为检查。各组小鼠均分笼饲养，每日记录小鼠一般行为状态、饮水量和饲料消耗量，计算每只动物每日饮水量，每周测定 1次小鼠体重。
6.2对 db/db小鼠空腹血糖的影响
动物处理同4.1，每周监测一次空腹血糖，动物禁食不禁水 8h后，
用全自动血糖仪测定小鼠尾静脉血血糖值，给药期间，每周测定一次。
6.3对 db/db小鼠血清C-肽和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的影响
动物处理同4.1，最后一次给药后，动物禁食不禁水8h，用全自动血糖仪测定小鼠尾静脉血血糖值，同时放免法测定血清胰岛素和C-肽，计算胰岛素抵抗指数。
6.4对 db/db小鼠血清糖化血红蛋白（HbA1c）水平的影响
给药和处理同上4.1。最后一次给药后，动物禁食不禁水，8h后测定空腹血糖之后，动物麻醉，腹主动脉采血500μL，3500rpm离心15min，取上清，小鼠糖化血红蛋白 ELISA试剂盒检测血清糖化血红蛋白水平。
6.5对 db/db小鼠血脂四项CHO，TG，HDL，LDL的影响
给药和处理同上4.1。最后一次给药后，动物禁食不禁水，8h后测定空腹血糖之后，动物麻醉，腹主动脉采血500μL，3500rpm离心15min，取上清，全自动生化仪检测血脂四项。
6.6对 db/db小鼠肾功能（CRE，BUN）的影响
给药和处理同上4.1。最后一次给药后，动物禁食不禁水，8h后测定空腹血糖之后，动物麻醉，腹主动脉采血500μL，3500rpm离心15min，取上清，全自动生化仪检测肾功能指标。
6.7对 db/db小鼠尿蛋白的影响
给药和处理同上4.1。在给药第 37周，取动物新鲜尿液用尿试纸条，半定量测定尿液蛋白水平。
6.8对 db/db小鼠心肌酶（CK，ALP）的影响
给药和处理同上4.1。最后一次给药后，动物禁食不禁水，8h后测定空腹血糖和糖耐量之后，动物麻醉，腹主动脉采血500μL， 3500rpm离心15min，取上清，全自动生化仪检测。
6.9对 db/db小鼠眼底视网膜病变的影响
给药和处理同上4.1。动物禁食不禁水，8h后测定空腹血糖之后，动物麻醉，复方托吡卡胺散瞳，腹腔注射荧光素钠注射液，Micron IV小动物眼底成像系统检测眼底视网膜病变。
7实验结果
7.1对 db/db小鼠一般状态的影响
db/db小鼠体型肥胖，分组时，体重明显高于 C57对照组，活动减少。与 C57对照组相比，随着时间的延长，体重不断增加；给药期间，db/db小鼠不同处理组间，与模型组比较体重无显著差异，结果见表-1。
7.2对 db/db小鼠空腹血糖的影响
分组时 db/db小鼠各组血糖值具有可比性（不存在差异），与正常组比较，db/db小鼠血糖显著升高，给予药物处理后，与模型组比较，各给药组空腹血糖显著降低，有统计学差异。持续给予药物处理 38周，整个过程阳性药二甲双胍和糖宁通络组空腹血糖均显著降低，有统计学差异，结果见表-2.
表-1二甲双胍和糖宁通络胶囊对小鼠体重的影响（mmol/L，X±SD，n=10）
糖宁通络高剂糖宁通络中剂糖宁通络低剂量二甲双胍联合糖对照组 模型组 二甲双胍组
量组 量组 组 宁通络中剂量组 0w 28.39±1.82 60.11±3.62 60.21± 3.12 60.40± 2.73 60.49± 3.55 60.75±2.24 60.47±1.93 1w 28.66±1.91 60.40±2.45 60.01± 3.12 60.20± 2.73 60.29± 3.55 60.55±2.24 59.05±4.26 2w 31.66±1.93 63.40±2.46 62.94±3.33 62.47±2.34 63.10±3.80 63.53±2.25 61.85±4.24 3w 31.61±1.91 67.21±2.62 67.14±2.77 64.97±3.76 65.18±4.44 65.97±4.10 66.32±3.13 4w 31.81±1.85 67.45±2.66 67.67±2.29 65.25±3.71 65.26±4.46 65.44±4.68 66.40±3.09 5w 32.08±1.76 67.55±2.66 68.20±2.18 65.34±3.72 65.56±4.68 66.22±4.13 66.88±3.09 6w 32.25±1.66 67.54±6.27 68.30±2.15 65.23±3.73 64.82±4.58 66.17±4.53 67.00±3.12 7w 32.32±1.66 67.39±2.72 68.18±2.25 65.32±3.72 64.92±4.56 66.29±4.53 67.01±3.13 8w 32.37±1.63 67.43±2.73 68.43±2.33 65.40±3.66 64.98±4.42 66.37±4.51 67.11±3.09 9w 32.29±1.40 67.83±2.71 68.51±2.39 65.53±3.55 65.01±4.42 66.49±4.45 67.29±3.09 10w 32.46±1.43 68.04±2.69 68.76±2.44 65.79±3.62 65.20±4.40 66.79±4.46 67.64±3.19 11w 32.61±1.43 68.31±2.75 68.99±2.46 66.06±3.64 65.59±4.44 66.89±4.41 67.82±3.17 12w 32.80±1.44 69.24±2.24 69.44±2.44 66.28±3.85 65.79±4.43 67.67±4.27 67.96±3.24 13w 33.07±1.43 69.43±2.21 69.62±2.41 66.53±3.86 66.05±4.48 67.96±4.16 68.22±3.17 14w 33.27±1.44 69.66±2.25 69.82±2.42 66.70±3.87 66.25±4.54 68.18±4.18 68.41±3.24 15w 33.57±1.40 70.14±2.31 70.06±2.40 66.99±3.87 66.44±4.50 68.40±4.20 68.60±3.20 16w 33.80±1.44 70.38±2.40 70.28±2.40 67.26±3.82 66.71±4.40 68.60±4.11 68.86±3.17 17w 34.04±1.43 70.65±2.63 70.56±2.40 67.60±3.74 67.20±4.11 68.85±4.11 69.15±3.21 18w 34.31±140 70.92±2.62 70.79±2.33 67.86±3.74 67.46±4.03 69.16±4.05 69.40±3.19
表-2二甲双胍和糖宁通络胶囊对小鼠血糖的影响（mmol/L，X±SD，n=10）
糖宁通络高剂糖宁通络中剂糖宁通络低剂量二甲双胍联合糖对照组 模型组 二甲双胍组
量组 量组 组 宁通络中剂量组 0w 6.62±0.85 21.34±6.43 21.64± 5.82 21.46± 6.17 21.80± 3.97 21.32±6.09 21.46±6.05 1w 6.74±1.06 21.44±6.13 17.65± 5.84 19.48± 6.18 20.88± 4.05 17.29±6.08 20.28±8.12 2w 6.83±1.18 21.71±6.26 16.44±4.56 17.64±5.18 21.04±4.10 16.19±5.09 16.24±5.12 3w 6.66±1.20 21.88±5.89 18.09±4.21 17.25±4.78 18.84±5.45 20.82±3.58 16.77±5.43 4w 6.86±0.78 24.43±2.83 16.84±3.55 16.00±3.46 16.95±4.36 17.73±3.80 15.36±3.31 5w 8.26±0.91 25.71±3.24 17.18±3.36 15.58±3.25 17.83±3.96 18.11±3.79 15.63±3.61 6w 8.00±0.91 29.03±3.44 16.61±2.81 15.17±2.80 18.65±3.19 18.37±3.73 15.46±3.36 7w 7.40±0.74 29.10±4.42 16.02±2.76 15.05±2.88 17.59±2.81 17.44±3.54 15.11±2.85 8w 7.19±0.58 29.29±3.66 16.71±6.59 15.91±4.09 18.49± 2.66 18.22±4.97 16.08±3.25 9w 7.10±0.57 30.77±3.43 16.82±5.85 16.35±3.40 17.93±2.66 18.28±4.16 15.44±3.14 10w 6.91±0.51 31.07±3.19 16.70±5.68 16.04±3.09 16.95±1.69 17.18±3.13 15.66±3.13 11w 7.01±0.47 31.23±3.08 17.02±4.77 15.86±2.84 16.74±1.13 16.93±2.63 15.45±3.07 12w 7.14±0.39 31.78±2.87 16.64±4.90 15.96±1.85 16.81±0.96 16.86±2.54 15.63±2.58 13w 7.38±0.50 31.88±2.77 16.68±4.55 15.98±1.88 16.43±0.88 16.66±2.62 15.60±2.36 14w 6.99±0.24 32.01±2.54 16.70±4.50 15.71±1.65 16.33±0.70 16.46±2.50 15.63±2.44 15w 6.93±0.43 32.09±2.44 16.87±4.42 16.00±1.41 16.64±0.66 16.58±2.41 15.85±2.35 16w 7.21±0.32 32.23±2.28 17.14±4.43 16.60±0.80 16.64±0.66 16.76±2.38 15.83±2.32 17w 7.17±0.34 32.34±2.11 17.04±4.02 16.17±1.00 16.51±0.72 16.65±2.18 15.84±2.24 18w 7.11±0.40 32.46±2.02 16.87±4.03 16.07±1.09 16.55±0.77 16.56±2.15 15.80±2.01
7.3对 db/db小鼠糖化血红蛋白（HbA1c）水平的影响
与正常对照组比较，db/db小鼠糖化血红蛋白水平均显著升高，给予药物处理 38周后，与模型组比较，二甲双胍和糖宁通络胶囊组糖化血红蛋白均显著降低。糖宁通络胶囊各剂量组具有明显的剂量依赖性，糖宁通络胶囊高剂量组糖化血红蛋白水平低于二甲双胍组，结果见表-3。
表-3二甲双胍和糖宁通络胶囊对小鼠HbA1c的影响（X±SD，n=10）
组别 剂量（g/kg） HbAc（mmol/L）
1
C57小鼠正常组 -- 4.37±1.32
db/db模型组 --- 7.25±0.42*
二甲双胍组 0.14 5.58±0.76*#
糖宁通络高剂量组 1.8 4.59±1.49*#
糖宁通络中剂量组 0.9 5.01±1.42*#
糖宁通络低剂量组 0.45 5.49±0.816*#
二甲双胍联合糖宁通络中剂量组 0.9+0.14 5.05±2.01*#
*，P＜0.05，与正常对照组比较；#，P＜0.05，与模型组比较；†，P＜0.05，与二甲双胍组比较。
7.4对 db/db小鼠血清C-肽的影响
结果表明，与 C57正常对照组比较，db/db小鼠模型组血清胰岛素下降，但没有显著性差异。与 db/db小鼠模型组比较，给药组有增加血清胰岛素的趋势，但无显著性差异，结果见表-4。
表-4二甲双胍和糖宁通络胶囊对db/db小鼠血清胰岛素的影响（X±SD，n=10）
组别 剂量（g/kg） 胰岛素(ng/ml)
C57小鼠正常组 -- 0.32±0.05
db/db模型组 --- 0.34±0.06
二甲双胍组 0.14 0.47±0.08
糖宁通络高剂量组 1.8 0.66±0.13
糖宁通络中剂量组 0.9 0.43±0.16
糖宁通络低剂量组 0.45 0.43±0.07
二甲双胍联合糖宁通0.9+0.14 0.61±0.18
络中剂量组
*，P＜0.05，与正常对照组比较；#，P＜0.05，与模型组比较；†，P＜0.05，与二甲双胍组比较。
7.5对 db/db小鼠胰岛素抵抗指数的影响
结果表明，与 C57正常对照组比较，db/db小鼠模型组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著增高。与 db/db小鼠模型组比较，糖宁通络胶囊及二甲双胍组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著下降，有改善胰岛素抵抗作用，糖宁通络胶囊改善胰岛素抵抗作用更加显著。见表-5.
表-5二甲双胍和糖宁通络胶囊对db/db小鼠胰岛素抵抗指数的影响
组别 剂量（g/kg） 胰岛素抵抗指数
C57小鼠正常组 -- 2.67±1.53
db/db模型组 --- 30.61±5.41
二甲双胍组 0.14 12.86±8.91*#
糖宁通络高剂量组 1.8 10.55±1.55*#
糖宁通络中剂量组 0.9 11.85±2.65*#
糖宁通络低剂量组 0.45 11.23±4.69*#
二甲双胍联合糖宁通0.9+0.14 22.52±4.32*#
络中剂量组
*，P＜0.05，与正常对照组比较；#，P＜0.05，与模型组比较；†，P＜0.05，与二甲双胍组比较。
7.6对 db/db小鼠血脂四项的影响
结果表明，与 C57正常对照组比较，db/db小鼠总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白（LDL）显著升高，有统计学差异。
与模型组比较，糖宁通络胶囊能显著降低 TG和CHO；能降低LDL，
高剂量组有显著性差异。对 HDL有升高的趋势，但无统计学差异。
详见表-6。
表-6二甲双胍和糖宁通络胶囊对血脂四项的影响（X±SD，n=10）
组别 剂量（g/kg）CHO（mg/dL）TG（mg/dL）LDL（mg/dL）HDL（mg/dL）C57小鼠正常组 -- 46.40±12.57 13.75± 2.996.96±1.95# 18.40±5.44# #
db/db模型组 --- 95.97±9.58* 32.26± 6.669.87±1.70* 12.20±2.77*
二甲双胍组 0.14 91.33±8.64 26.80±5.12 8.44±1.97 16.00±2.45糖宁通络高剂量组 1.8 74.00±7.72# 22.77± 4.676.99±1.29# 17.57±2.63#†
糖宁通络中剂量组 0.9 83.00±5.21#24.52±3.62 7.96±2.69 15.33±2.87糖宁通络低剂量组 0.45 86.20±6.91 26.34±3.75 8.80±2.06 14.80±0.84二甲双胍联合糖宁0.9+0.14 82.20±7.72 24.19±7.88 8.78±2.69 15.00±3.54通络中剂量组
*，P＜0.05，与正常对照组比较；#，P＜0.05，与模型组比较；†，P＜0.05，与二甲双胍组比较。
7.7对小鼠肾功能和心肌酶的影响
结果表明，与 C57正常对照组比较，db/db小鼠肝功能指标 GPT和GOT，肾功能指标 CRE和BUN，心肌酶 ALP和 CK均显著升高。。
与模型组比较，糖宁通络胶囊各剂量组能显著降低GPT、GOT、BUN、 ALP和CK。糖宁通络胶囊高剂量组能显著降低CRE。详见表-7，8，9。
表-7二甲双胍和糖宁通络胶囊对小鼠肝功能的影响
组别 剂量（g/kg） GPT（U/L） GOT（U/L）
正常对照组 --- 56.000±2.739 121.889±12.742
db/db模型组 --- 97.000±8.485** 251.200±9.783**
二甲双胍组
0.14 89.667±4.761 230.500±9.545##
糖宁通络高剂量组
1.8 83.143±7.195# 223.286±14.227##
糖宁通络中剂量组
0.9 79.167±10.616## 225.000±15.715##
糖宁通络低剂量组
0.45 79.800±7.497## 225.600±11.866##
二甲双胍联合糖宁
82.000±9.220## 225.200±16.529##
0.9+0.14
通络中剂量组
*，P＜0.05，与正常对照组比较；#，P＜0.05，与模型组比较；†，P＜0.05，与二甲双胍组比较。
表-8二甲双胍和糖宁通络胶囊对小鼠肾功能的影响
组别 剂量（g/kg）CRE（μmol/L） BUN（mmol/L）
C57小鼠正常组 -- 33.5±4.2 5.0±1.3
db/db模型组 --- 66.2±5.6* 13.6±1.1*
二甲双胍组 0.14 60.8±4.2 12.8±0.9
糖宁通络高剂量组 1.8 53.9±7.9# 11.0±1.4#
糖宁通络中剂量组 0.9 57.2±4.0 12.1±1.7#
糖宁通络低剂量组 0.45 59.1±5.9 12.1±1.0#
二甲双胍联合糖宁通0.9+0.14 58.5±2.3 12.1±0.6
络中剂量组
*，P＜0.05，与正常对照组比较；#，P＜0.05，与模型组比较；†，P＜0.05，与二甲双胍组比较。
表-9二甲双胍和糖宁通络胶囊对db/db小鼠心肌酶的影响
组别 剂量（g/kg）CK（mg/dl） ALP（U/L）
C57小鼠正常组 -- 1336.5±72.7 209.4±21.4
db/db模型组 --- 2425.6±79.5* 314.4±12.3*
二甲双胍组 0.14 2420.8±60.9 311.3±17. 0
糖宁通络高剂量组 1.8 2043.7±323.4# 278.4±34.0#
糖宁通络中剂量组 0.9 2154.7±229.2# 278.5±32.1#
糖宁通络低剂量组 0.45 2230.2±262.2# 292.6±30.1#
二甲双胍联合糖宁通0.9+0.14 2119.8±211.2# 282.0±33.4#
络中剂量组
*，P＜0.05，与正常对照组比较；#，P＜0.05，与模型组比较；†，P＜0.05，与二甲双胍组比较。
7.8对小鼠尿蛋白的影响
结果表明，C正常对照组尿液蛋白均显示阴性，db/db小鼠模型 57
组均显示阳性（+++）。与 db/db模型组小鼠比较，糖宁通络组能降低尿蛋白的水平，结果均为阳性（++），二甲双胍组对尿蛋白的结果没有影响，结果均为阳性（+++）。糖宁通络胶囊高中低三个剂量组均能降低尿蛋白水平。
7.9对小鼠糖尿病视网膜病变的影响
对糖尿病视网膜病变的结果，荧光造影显示：正常组无微血管瘤；
模型组微血管瘤遍布网膜；二甲双胍组与模型组无明显差异；糖宁通络胶囊高、中低剂量组单位视野中微血管瘤数量显著减少，联合用药组单位视野中微血管瘤数量显著减少。
8小结
8.1糖宁通络胶囊具有显著的降血糖作用可能与改善胰岛素抵抗有关上述试验结果表明，糖宁通络胶囊单用或者联合二甲双胍均具有显著的降血糖作用，糖宁通络胶囊高剂量组降低糖化血红蛋白作用优于二甲双胍组。糖宁通络胶囊显著降糖作用，可能与糖宁通络胶囊显著改善胰岛素抵抗有关。改善机体的胰岛素抵抗可能是糖宁通络胶囊的作用机理之一；另外，C-肽结果显示糖宁通络胶囊可显著升高血清C-肽水平，提示糖宁通络胶囊降糖作用可能还与其保护胰岛分泌功能有关。
8.2糖宁通络胶囊具有显著的改善和抑制微血管病变（糖尿病眼底病变，肝脏和肾脏病变），可能改善大血管病变（心肌病变）
糖宁通络胶囊对于糖尿病合并的微血管病变（糖尿病眼底病变，肝脏和肾脏病变）有显著的抑制作用，眼底荧光造影图像结果显示，糖宁通络胶囊单用或者联合二甲双胍，单位视野中微血管瘤数量，较模型组比较显著减少，具有统计学差异。
血清肝功能检测指标结果显示，糖宁通络组能明显改善糖尿病小鼠的肝功能，对糖尿病肝脏病变有一定延缓和改善作用。
尿蛋白水平和血清肾功能检测指标结果显示，糖宁通络组能明显改善糖尿病小鼠的肾功能，对糖尿病肾脏病变有一定延缓和改善作用。
8.3糖宁通络胶囊可改善糖尿病小鼠脂代谢异常。
db/db小鼠模型合并脂质代谢异常，血脂测定结果显示，糖宁通络胶囊能显著改善 db/db小鼠脂质代谢异常状况。
进一步的心脏、肾脏等脏器的病理切片尚在进行中。
综上所述，糖宁通络胶囊具有显著的降糖效果，可能的降糖作用机制包括：改善胰岛素抵抗，保护胰腺功能从而保障了胰岛素的分泌；
延缓糖尿病引起的微血管病变，显著改善视网膜、肝脏和肾脏病变；
并对糖尿病心脏病变的发生也有一定的改善作用。
9讨论：
db/db小鼠具有高血糖、高血脂和肥胖等特点，同时具有显著的胰岛素抵抗。随着鼠龄延长，相继出现心脏、肝脏和肾脏病变等糖尿病并发症，是进行 2型糖尿病研究的良好动物模型。
本研究确认了糖宁通络胶囊长期给药具有明显的降血糖作用，并能显著改善糖尿病视网膜病变和糖尿病肝脏和肾脏病变。于此同时探索了其降血糖的作用机制，糖宁通络降糖作用机制可能与改善机体的胰岛素抵抗，保护胰腺功能从而保障了胰岛素的分泌两方面有关。
糖宁通络胶囊在明确临床降糖作用特点的同时，基本阐述了其临床降糖作用的可能机制：改善胰岛素抵抗，保护胰腺功能从而保障了胰岛素的分泌。
10影响研究可靠性和造成研究工作偏离实验方案的异常情况
在试验过程中未出现造成研究偏离试验方案的异常情况。
11专题负责人与所有参加工作的人员姓名和承担的工作内容
11.1专题负责人：孙晓波
11.2给药及临床症状观察负责人：孙桂波
参加人员：孙桂波、孟祥宝、王婷婷、卢珊
11.3动物饲养管理及检疫负责人：孙桂波
参加人员：孙桂波、成龙、孟祥宝、王婷婷、卢珊
11.4供试品保管负责人：孙桂波
11.5资料保管负责人：孙晓波
12实验资料的保存项目、地点及时间
12.1保存项目：专题负责人任命书、实验方案、使用动物有关资料、有关供试品的资料、原始记录及原始数据（体重、给药、一般状态观察等）、解剖相关资料、质量保证相关的资料、总结报告书及其它资料。
12.2保存地点：中国医学科学院药用植物研究所。
注：本试验仅对提供的供试品负责。
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