DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 4. 讨论 4.1. 自尊量表中反向题目的使用 测验中是否该使用反向题目仍然是目前心理学界争论的热点。有人认为反向题目能起到认知减速器的作用，能促使被试在完全搞懂题目的意义后再作答。正向与反向题目的平衡使用可以抵消默认等反应偏差，相加得到的总分就较少包含测量误差，也就能更准确地计算与其它变量的关系 (Podsakoff， MacKenzie， & Podsakoff， 2012) 。 本研究从正向与反向自尊量表的信度、与外部效标的相关等方面都没有发现正向和反向自尊量表在信效度上的差异。而且有足够证据表明正向和反向自尊量表测量了同一种特质。尽管自尊量表中反向方法因素解释的总变异量大于正向方法因素，但二者对模型拟合的贡献又难分伯仲。只有同时纳入两种MF时模型拟合才能达到满意的水平。这些结果表明自尊量表及本研究所涉及的其他量表中反向题目的心理测量学性能并不比正向题目差。两类题目都会带来测量误差，都应该控制。综合以上分析我们赞同中国人的人格测量中应平衡使用正向和反向题目的结论 (Wu， 2008) 。 Table 4 Correlation between method factors and personality measure 一般健康 状态焦虑 特质焦虑 抑郁 幸福感 情商 外向 宜人 责任 神经质 开放 同情心 正向方法 −0.26 * −0.11 −0.10 0.25 * 0.06 −0.35 * −0.18 * −0.13 * −0.13 * −0.06 −0.24 * −0.11 反向方法 0.32 * 0.01 −0.21 * −0.37 * 0.20 * 0.14 * 0.04 0.20 * −0.07 −0.28 * 0.04 −0.16 * 表4. 方法因素与人格的相关 注： * p < 0.05。 4.2. 方法因素的性质 本研究发现不同人格量表中的MF具备同质性，MF与多个人格特质存在不容忽视的相关，说明MF不是随机误差而是系统误差，甚至是有用的人格变量。即不论测量的是哪些人格特质，只要采用反向(或正向)陈述的形式，有某些人格特征的人(如抑郁、神经质等)都会做出有规律性的、异常的应答模式。从被试在反向和正向陈述题目上得分的差异也能揭示出关于被试人格的有用信息。本研究发现正向和反向MF都与社会期望性量表(MCSD)存在低相关，这与以往研究是一致的。说明MF与社会赞许性不是同一种测验偏差。结合本研究和以往研究的发现，我们认为在抑郁、神经质、焦虑、回避动机、自我意识等方面表现出高分特点的被试容易受MF的影响，因此设计测验题目时要考虑这些被试的特点，对他们的测验分数要采用某种手段进行校正。 4.3. 中国人的自尊特征 Schmitt和Allik (2005) 的研究发现一个国家的文化特质会影响人们对反向自尊量表题目的理解，导致自尊量表得分的跨文化比较出现困难。几乎所有国家都存在反向题偏差，即正向自尊量表得分大于反向自尊量表。而且二者的差值越大测验信度越低。发达国家的差值都不大。比如差值最小的是德国(0)，然后是其他欧美国家和日本等。差值最大的是墨西哥(3.4)和玻利维亚(3.3)，非洲国家(如民主刚果为3.4)也比较大。集体主义强的国家趋中反应倾向明显，而且总分较低，比如日本(0.8)。尽管日本人的自尊得分低于美国人，自尊量表的心理测量学性能却与美国人相近。自尊量表的编写和标准化是在美国进行的，但却适用于与美国文化异质的日本。这显示了心理机制的普适性。但对非洲国家则不然。 本研究发现中国被试的自尊得分模式与10年前的香港和台湾有较大差异，但却更接近 Schmitt和Allik (2005) 研究中的发达国家。即中国人寻求自我统一性的需求增强了，另外在自尊量表的信效度、因素结构、正向与反向量表的相关上中国被试也接近发达国家。这应该能折射出几十年来中国人社会文化心态的变化。 同时中国被试在正向和反向自尊量表上的得分仍然体现了东方文化的特点。谦虚、含蓄，不直接承认自己的优点，也不掩饰自己的缺点，能辩证地认识自我的积极面和消极面等。
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user: 5. 结论 1) 自尊量表中的正向和反向题测量相同的因素，在信效度等心理测量学指标上没有实质性差异，因此应该平衡使用。而且这一结论可以推广到本研究所涉及到的人格测量工具。 2) 正向和反向MF在中国被试中都存在，但却没有破坏自尊的单维结构。用CTCM等技术将MF分离出来后就能估计自尊与其他研究变量间的真实关系。 3) 自尊及其他自陈式量表中的MF，可视为一种与测量工具有关的系统误差，或有用的人格变量。在抑郁、神经质、焦虑、回避动机、自我意识等方面表现出高分特点的被试容易受MF的影响。在解释测验结果时要考虑被试的人格特点，必要时应采用某种手段进行校正。 4) 对自尊量表进行跨文化比较时要考虑文化背景。中国被试在自尊量表上的得分体现了东方文化的特点，如谦虚、含蓄，能辩证地认识自我的积极面和消极面等。这一结论似乎也可以推论到其他自陈式人格测量。
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user: 摘 要 研究了红水河野生草鱼Ctenopharyngodon idellus上游、中游和下游3个群体29个个体的线粒体控制区(D-loop)和细胞色素b (Cyt b)基因序列，通过PCR扩增与测序，分别获得了长度为846 bp和1083 bp的D-loop和Cyt b基因片段。分析表明，D-loop序列共定义了9个单倍型，存在10个多态位点，发生转换4次，插入/缺失6次。Cyt b序列共定义了9个单倍型，存在9个多态性位点，发生转换1次，插入/缺失8次。两序列分析结果表明，群体间和群体内遗传距离较小，遗传变异的分子变异等级不显著。上、中、下游均有共享单倍型，3个群体间遗传分化不大。 关键词 :草鱼，红水河，D-Loop，Cyt b，遗传变异
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user: 1. 引言 草鱼(Ctenopharyngodon idellus)属鲤形目鲤科雅罗鱼亚科草鱼属。广西俗称鲩鱼，体长而扁圆，背部茶黄色，腹部呈银白色，无须、眼较小，天然生长的最大个体可达50 kg以上，池塘养殖亦可达10~15 kg，主食水生和陆生植物，尤以禾本科植物为多，兼食昆虫等动物性食料，常游弋在水的中上层觅食。 线粒体DNA控制区(control region， CR)，又称D-环区(displacement loop region， D-loop)，是线粒体DNA中的一段非编码区，位于tRNA Pro和tRNA Phe基因之间，分为3个区段：终止序列区、中央保守区和保守序列区，是线粒体DNA序列和长度变异最大的区域，也是线粒体基因中进化最快的部分，适用于种群水平差异的检测和种间分析[ 1 ] 。细胞色素b基因(Cytochrome b gene， Cyt b)是线粒体DNA上的蛋白质编码基因，其进化速度适中，适于种群水平差异的检测和种内群体遗传分化程度标记[ 2 ] 。长江流域已开展的四大家鱼线粒体DNA研究较多，对不同江段的四大家鱼遗传多样性进行了对比分析，可见报道的有长江中下游四大家鱼线粒体DNA多样性的分析[ 3 ] ，长江中游汉江和湘江水系鲢和草鱼群体的mtDNA遗传变异对比分析[ 4 ] ，赣州江段四大家鱼遗传多样性分析等[ 5 ] 。本文作者在红水河流域选择3个被水利工程相互分隔的区域，对四大家鱼进行了遗传多样性状况和群体遗传结构调查，为红水河流域物种的多样性保护提供数据支持。在本文中主要论述草鱼的遗传多样性分析结果。
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user: 2. 材料与方法 2.1. 材料 采集3个草鱼群体共29条，分别为上游岩滩水库群体(shang)、中游百龙滩水库群体(zhong)和下游来宾市区江段群体(xia)，三个群体采样区域有大坝分隔，大坝无过鱼设施，可认为群体间无遗传交流。每尾个体取0.1 g背部肌肉新鲜样品，于无水乙醇中保存。 2.2. 测序方法 通过液氮研磨、裂解液裂解、有机溶剂抽提，使进入水相的蛋白质与核酸分层，在RNA酶的作用下，降解RNA，得纯度较高的DNA样品并进行PCR测序。D-loop [ 3 ] 和Cyt b [ 6 ] 引物序列同有关文献报道。反应总体积50 μL，其中10 × Taq Buffer 5 μL，Taq Polymer-ase 0.5 μL (5 U∙μL −1 )，dNTPs (2.5 mmol∙L −1 ) 4 μL，Mg 2+ (25 mmol∙L −1 ) 2.5 μL，引物1和2 (10 umol∙L −1 )各μL，模板DNA 50 ng，无离子超纯水35.5 μL。经94℃预变性2 min后，再进行35个循环，每一循环包括：94℃ 45 s，58℃ 45 s，72℃ 1 min；最后72℃延伸7 min。每次PCR反应均设空白对照。扩增产物经1.5% TBE琼脂糖凝胶电泳分离，EB染色，紫外灯光下检测、拍照。 2.3. 分析方法 测序获得序列经SeqMan II软件拼接并人工校对后，用CLUSTAL-X程序比对[ 7 ] ，DAMBE软件统计单倍型并作图，检测转换、颠换是否达饱和。单倍型多样性(Haplotype diversity， H)和核苷酸多样性(Nucleotide diversity， π)由ARLEQUIN统计软件计算[ 8 ] ，分化指数(F-statistics， F st ) [ 9 ] 计算使用ARLEQUIN，群体间的基因流由公式N m = [(1/F st ) − 1]/2 [ 10 ] 计算得出，群体遗传变异的分子方差分析(AMOVA) [ 11 ] 在ARLEQUIN中完成。用MEGA4.1软件统计DNA序列的碱基组成[ 12 ] ，转换/颠换、插入/缺失位点数，单突变位点，简约信息位点；利用Kimura双参数模型计算个体间、群体内和群体间的遗传变异率；用NJ法进行聚类分析，构建聚类关系树。利用Network4610软件构建单倍型网络关系图。
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user: 3. 结果 3.1. D-Loop和Cyt b基因序列信息 由表1可见，在29个846 bp的D-loop基因序列中共检测出9个单倍型。检测到2个单突变位点，8个简约信息位点数；在10个突变位点中：转换位点4个，颠换位点0个，插入/缺失位点6个，转换高于颠换。基因片段中，A + T的含量(66.3%)明显高于C + G的含量(33.7%)。24个1083 bp的Cyt b基因序列中共检测出9个单倍型，检测到6个单突变位点，3个简约信息位点；在9个突变位点中：转换位点1个，颠换位点0个，插入/缺失位点8个，A + T的含量(58.2%)高于C + G的含量(41.8%)。对比分析可知：Cyt b单突变位点百分比为0.55%，大于D-loop的0.24%，而多态位点百分比和简约信息位点百分比分别为0.83%和0.28%，小于D-loop的1.18%和0.94%。 3.2. D-Loop和Cyt b基因序列的遗传变异分析 由表2可见，D-loop序列中，红水河3个草鱼群体内的遗传距离分别为0.0046、0.0050和0.0056。上游群体与中游群体间遗传距离为0.0042，上游群体与下游群体间遗传距离为0.0041，中游群体和下游群体间遗传距离为0.0040。Cytb基因序列中，群体内的遗传距离分别为0.0013、0.0020、0.0006。上游群体与中游群体间遗传距离为0.0015，上游群体与下游群体间遗传距离为0.0009，中游群体和下游群体间遗传距离为0.0012。群体间遗传距离和群体内遗传距离接近。D-loop序列得到的遗传距离高于Cytb基因序列得出的遗传距离。 3个群体的D-loop和Cyt b序列的单倍型多样性H、平均核苷酸变异数K、和核苷酸多样性π见表3，下游群体的Cyt b序列H值较低，k值和π值也低于其他群体的Cyt b序列分析结果。值得注意的是，上游采集到的样本较多，D-loop和Cyt b序列得到的单倍型数也相同，均为7个单倍型，而中游和下游样本较少，单倍型数则有所不同。 群体间的群体间的F st 和N m 值见表4，群体间的遗传变异的分子变异等级分析(AMOVA)见表5，从分析结果可见，3个群体间D-loop和Cyt b序列遗传差异不显著(F st = −0.14867或−0.10346，p > 0.05)。 Table 1 Composition and variability of the analyzed mtDNA of C. idellu 基因序列 单倍型 比对碱基位点数 多态位点数(比例/%) 简约信息位点数(比例/%) 单突变位点数(比例/%) 转换、颠换数 A + T/% C + G/% D-loop 9 846 10 (1.18%) 8 (0.94%) 2 (0.24%) 4/0 66.3% 33.7% Cyt b 9 1083 9 (0.83%) 3 (0.28%) 6 (0.55%) 1/0 58.2% 41.8% 表1. 草鱼线粒体D-loop及cyt b碱基组成及变异分析 Table 2 The intrapopulation， interpopulation and overall mean genetic distances of C. idellus in Hongshui River based on D-loop and Cyt b gen 遗传距离 上游(Shang) 中游(Zhong) 下游(Xia) 上游 (Shang) 0.0046 0.0013 中游 (Zhong) 0.0042 0.0050 0.0015 0.0020 下游 (Xia) 0.0041 0.0040 0.0056 0.0009 0.0012 0.0006 表2. 红水河草鱼D-loop和Cyt b基因序列群体内和群体间遗传距离 注：上面的代表D-loop，下面的代表Cyt b (下同)。 Table 3 Indexes of genetic diversity in the 3 populations of C. idellu 群体 样本数 多态位点 单倍型数 单倍型多样性H 平均核苷酸变异数K 核苷酸多样性π 上游 (Shang) 17 10 7 0.831 3.324 0.00397 21 7 7 0.752 1.419 0.00131 中游 (Zhong) 5 8 4 0.900 3.600 0.00430 5 5 5 1.000 2.200 0.00203 下游 (Xia) 3 7 3 1.000 4.000 0.00477 3 1 2 0.667 0.667 0.00062 表3. 3个草鱼群体相关遗传多样性指标 Table 4 Three population pairwise Fst and Nm value 上游(Shang) 中游(Zhong) 下游(Xia) 上游(Shang) −2.8830 −1.4186 −4.2842 −1.8067 中游(Zhong) −0.0950 −1.1675 −0.0620 −1.4767 下游(Xia) −0.2139 −0.2725 −0.1606 −0.2038 表4. 3个草鱼群体间的F st 和N m Table 5 Analysis of molecular variance (AMOVA) of 3 population 变异来源 自由度d.f 平方和 方差组分 变异百分率 F统计量 P值 群体间 2 1.482 −0.43958 Va −14.87 −0.14867 0.95015 2 0.605 −0.06944 Va −10.35 −0.10346 0.94526 群体内 22 74.718 3.39626 Vb 114.87 26 19.257 0.74066 Vb 110.35 总体 24 76.200 2.95667 28 19.862 表5. 3个草鱼群体间的遗传变异的分子变异等级分析(AMOVA) 3.3. 分子系统树 以草鱼D-loop和Cyt b基因序列为外群，用NJ法构建分子系统树，其拓扑结构见图1。可见，3个群体的个体混杂在一起，群体间未表现出聚类关系。
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user: 4. 讨论 单倍型多样性(H)、平均核苷酸差异数(K)和核苷酸多样性(π)是反映物种遗传变异水平的3个重要参数，本文的分析结果表明红水河3草鱼个群体的遗传多样性差别不大，群体间遗传距离较小，遗传变异的分子变异等级分析结果为不显著。29个样本分属9个单倍型，上、中、下游均有共享单倍型，NJ系统树也显示3个群体并未聚集为独立的分支．由于线粒体DNA为母系遗传，一般不发生重组，表明3个群体间遗传分化不大。本文作者对红水河鲢群体进行的研究与此有相似之处，即总体上群体间遗传分化均较小，但也有一些不同之处，鲢群体内两序列遗传距离均表现为上游高于中游，中游高于下游，而草鱼的两序列遗传距离表现不同，D-loop序列遗传距离为下游最高，Cyt b序列则为下游最低。 红水河综合利用规划实施后，红水河流域形成了9个首尾衔接的梯级水库，流水生境绝大部分已经萎缩，天然河道和库区流水江段大为缩短，产漂流性卵的鱼类需要流速0.2 m/s以上，在库区已不具备形成自然种群条件，笔者在红水河上游龙滩坝下调查时，禁渔期前，也即3月底采集到的四大家鱼均已性成熟，但在6月采集到的四大家鱼则可发现卵因无法产出而退化的现象。近十年来，针对产漂流性卵鱼类资源下降的问题，各地政府大力开展了增殖放流活动，由于其他土著性鱼类人工繁育技术成熟度相对较低，苗种获得不易，四大家鱼的放流数量占了各地放流比例的90%以上。但在调查中，除上游采集野生四大家鱼较为容易，样本获得量相对较多外，中游和下游都很难采集到草鱼样本，鲢在中游尚可，下游同样难以采集样本，可见，野生群体的资源量仍然偏低。 本文调查的草鱼3个群体间遗传分化不大，可能有两种可能，第一种可能是水库建成时为三十年以内，原本连通的群体分隔后尚未产生显著遗传分化。第二种可能，则是各地增殖放流的草鱼来源接近，流域原有的群体因繁殖环境丧失，已经完全被放流群体取代。由于缺乏红水河流域梯级开发前，草鱼的遗传多样性分析数据，笔者所在的研究团队拟开展红水河流域草鱼捕捞群体和各地放流群体间的遗传多样性对比分析，以明确红水河草鱼遗传多样性特征的形成机理。
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user: 5. 总结 对红水河上游、中游和下游3个野生草鱼群体的29个个体的D-loop和Cyt b基因序列分析表明，D-loop序列和Cyt b序列均定义9个单倍型，D-loop序列存在10个多态位点，而Cyt b序列为9个。群体 图1. 红水河3个草鱼群体D-loop (左)和Cyt b (右)基因序列的NJ分子系统树 间和群体内遗传距离较小，遗传变异的分子变异等级不显著。上、中、下游均有共享单倍型，3个群体间遗传分化不大。需进一步对草鱼放流群体的遗传多样性进行调查分析，以明确群体间遗传分化不大的具体原因。
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user: 摘 要 为研究通过人为控制香鱼性腺发育，2011~2012年在福井县内水面综合中心开展了循环流水电照培养香鱼亲鱼试验。试验结果表明：2011年和2012年通过循环流水电照培养获得成熟的雌性亲鱼487和580尾；雄性亲鱼108和131尾。用干导法人工授精，受精率95.30%和80.67%；发眼率47.18%和48.15%，孵化率均为80.00%，获得孵化仔鱼317万和351万尾。本研究表明香鱼亲鱼在人工培养关键技术确立及成熟应用。人工电照培养亲鱼采卵的授精率、发眼率及仔鱼孵化率不如天然捕获亲鱼，但是能解决天然亲鱼由于气候等自然条件原因造成亲鱼数量及采卵不稳定因素，且具有人为控制育苗规模及提前开展人工育苗的优势。 关键词 :香鱼，电照，天然海产，人工海产，性腺指数
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user: 1. 引言 香鱼(Plecoglossus altivelis Temminck et Sohlegel)为一种名贵的小型经济鱼类。是日本重要淡水鱼类种类，它作为研究对象已经有100年以上的历史[ 1 ] 。研究涉及香鱼生活史 [ 2 ] ；朔河仔鱼分布 [ 3 ] ；洄游习性 [ 4 ] ；繁殖生物学[ 5 ] [ 6 ] ；人工种苗发育及营养需求 [ 7 ] ；分子遗传学 [ 8 ] ；相关病害的研究 [ 9 ] 等等一系列基础性研究。香鱼其在日本早已成为一种重要的人工养殖和增殖鱼类，至今其每年增殖、养殖产量保持在2万吨左右，为日本淡水鱼产量之首 [ 10 ] 。香鱼在中国有文献记载已数百年，目前中国国内为香鱼资源恢复，开展了许多人工育苗和增殖放流有等相关研究，但是国内有关香鱼人工育苗所用亲鱼一般都采捕自河流，数量较少且香鱼性腺发育成熟度同步性不强。笔者于2012年至2013年在日本福井县内水面综合中心开展了香鱼亲鱼培养、人工采卵及孵化技术、仔稚鱼培育、仔稚鱼基础性饵料培养、香鱼冷水病病害检测等工作。现将香鱼亲鱼电照养成及人工采卵技术研究报告如下。
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user: 2. 材料及方法 2.1. 循环流水及育苗基础设施 循环流水设施如图1。亲鱼养成池面积100 m 2 ，水深1.2 m。实际水量为90 t。养成池四周及池底用黑色油漆漆黑，池底剩一条宽40 cm*50 cm的白漆漆成的带，用于观察鱼类生长及活动的情况。池底部四周像中央倾斜5%，排水口设置于池底的中央，排水口设置阀门及控制循环流水水位的装置、及设置防逃网的插槽。池内配有注水及充气(气石四个)的管道、即时水温测定探头。亲鱼养成池覆盖遮阴网调节光照。同时配备人工海水配水池，过滤池、高位水池、加热、棕毛采苗器等设施。 2.2. 亲鱼来源 2011年的亲鱼来源于2010年福井县国家一级河川九头龙川天然野生香鱼产卵孵化培育而成的F1代 图1. 香鱼稚鱼培养循环示意图 和2011年流刺网抓捕的天然亲鱼。2012年的亲鱼来源于2011年天然野生香鱼产卵孵化培育而成的F1代和2012年抓捕的天然香鱼。 2.3. 天然海产、人工海产及湖产香鱼区别方法 福井九头龙川每年都有约40，000~60，000 kg的香鱼苗放流，根据广岛大学大学院生物圈科学研究科的海野徹也(未发表)采用侧线上方横列鳞片数如图2。下颚侧线孔数如图3所示，根据鳞片数和下颚侧线孔数生物形态学和遗传分子相关性的研究相结合的区别方法对香鱼流刺网、垂钓的香鱼进行天然海产、湖产、人工海产来源加以区别。选择天然野生亲鱼也根据这一方法。 2.4. 亲鱼养成的方法 2011年亲鱼选择上年产卵孵化培育216日龄平均体重12.21 g，2012年亲鱼选择上年产卵孵化培育201日龄平均体重14.37 g；经过挑选健壮、检测无携带病菌的鱼苗各9000尾作为亲鱼来源。其中6000尾经过30天，用480瓦每天17:00~24:00电光照促熟养成；3000尾自然养成。培育用水为地下淡水DO为7.05~10.06、控制水温17℃~20℃、水位100 m、昼夜循环流水、循环流速控制在0.6~1.0 L/s，饲料投喂日配，投喂率控制在3.5%~4.0%。每15~20日龄取45尾测量体长、体重等生长指标。经过90日培养，肉眼观察香鱼出现婚姻色。雌亲鱼腹部较膨大、松软，生殖孔微红，雄性轻微挤压腹部有部分精液流出。测量其性腺发育指数；当雌性性腺指数值达到30%以上，准备开始采卵及授精。 2.5. 采卵及人工授精方法 采卵的时间选择分别参考电光照养成亲鱼的性腺指数和天然野生香鱼的采卵时间；同时对养成亲鱼的卵子进行镜检。 电光照亲鱼雌雄挑选，雄性亲鱼选择个体大、活力良好，轻微挤压腹部即有部分精液流出的个体。雌性亲鱼选择腹部柔和且大，用干毛巾挤出卵子在解剖镜下镜检，每种鱼类的卵质好坏评价方法不一，香鱼的卵半透明、小型的油球均匀分布于卵子表明是优质卵 [ 6 ] 。 图2. 侧线上方横列鳞片 图3. 下颚侧线孔 人工授精采用干导法，用干毛巾将雄性鱼体表水份擦干挤压精液入烧杯中，每次取精液10 ml，用20倍的森沢香鱼人工精浆 [ 11 ] 稀释，冷藏保存。选择镜检卵子发育优良的亲鱼，用干毛巾将鱼体表水份擦干，人工挤压卵子入白瓷钵内，水分及血液杜绝进入收集的卵子中，卵巢最后的卵子舍弃不用。每次挤压卵子150 g，同时取0.05 g的卵子进行计数。在收集的卵子中加入人工精浆10 ml，用羽毛轻轻搅拌1~2分钟，使精卵充分混合。每次人工授精完成取少许授精卵在水中受精并附着于载玻片悬挂于孵化池中进行受精率、附着率、发眼率、孵化率的计数。人工授精过程中避免太阳直射。 森沢香鱼人工精浆成份组成为：1000 ml蒸馏水、7.60 g NaCl、0.84 g KCl、0.8 g CaCl∙2H 2 O、0.12 g MgCl∙6H 2 O、1.68 g NaHCO 3 。注意应先溶解NaHCO 3 ，以调节人工精浆的pH值。 2.6. 受精卵附卵及孵化 在人工授精卵中舀一勺(4~5 g)放入10 L的地下水中进行受精，用棕毛附着器来回搅拌7~8次，使受精卵均匀附着棕毛上，完成附着。附着卵的棕毛悬挂于孵化池进行孵化，每150 g受精卵，悬挂40~44串棕毛附着器，每窜附苗器大约附着8450~10，750粒受精卵。孵化池水温17℃~19℃、DO 7.05~10.06。 2.7. 试验鱼的数据测定及计算 全长测量用游标卡尺，体重测量用药物天平精确到(0.01 g)。性腺指数(GSI) = (生殖腺重量/体重)*100，所测体重和全长数据用方差分析F检验。
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user: 3. 结果 3.1. 亲鱼培养 人工繁育的香鱼苗在室内经过周年养殖，可用于育苗生产。图4、图5表示2011年香鱼苗在6月开始，238日龄香鱼亲鱼经过电照处理30天的电照组和自然养殖组体重和全长生长情况。图6、图7表示2012年香鱼苗在6月201日龄的香鱼亲鱼在经过电照处理30天的电照组和自然养成组体重和全长得生长情况。 图4. 2011年电照组与自然组鱼体全长情况 图5. 2012年电照组与自然组鱼体全长情况 图6. 2011年电照组与自然组鱼体体重情况 图7. 2012年自然养成与电照养成鱼体体重 30天的电照组和自然养成组全长的生长情况。结果表明：从图4和图5所示，电照处理和自然养成的亲鱼在全长得生长情况相差不大，经过两个月的养殖，全长都是从85 mm生长到138 mm左右。根据所测的数据运用方差分析，F a = 1.0479，F 0.05 = 4.07。因为F < F 0.05 ，即2011年电照组和自然养成亲鱼体长差异不显著。2012年电照组和自然组体长方差分析F检验，F a = 1.5868，F 0.05 = 4.07。因为F < F 0.05 ，即差异不显著。 方差分析F检验，F a = 85.7591，F 0.05 = 4.02。因为F > F 0.05 ，表明2011年电照组和自然养成体重差异显著。从图6所示：2011年电照处理组在电照开始时的30日龄内电照组香鱼体重从7.68 g增加到13.14 g，增长率为：71.1%；自然组体重从5.44 g增长到8.36 g，增长率为53.7%。而到香鱼267日龄电照结束后，在相同的培养条件下电照组增重率达到了149.8%，自然组为149.6%。 2012年电照组和自然养成组方差分析F检验，F a = 95.9575，F 0.05 = 4.02。因为F > F 0.05 ，表明2011年电照组和自然养成体重差异显著。如图7所示2012年电照开始时电照组体重增长率为：43.2%，自然组为28.0%；电照结束后，在相同条件下30天培养电照组增重率为：77.8%，自然组增重率为：39.4%。结果表明：电照开始香鱼摄食增加，但是和自然养殖的相比体重增加不是很明显，随着电照处理结束，电照组亲鱼的体重比自然组要增加明显。分析认为随着电照时间增加，香鱼摄食时间增长，摄食量加大，摄食营养体现在香鱼自身体重的增加，而香鱼的体长增长不明显。 3.2. 香鱼性腺发育 如图8所示，2011年香鱼采卵前测定的雌性亲鱼性腺指数(GIS)表明：电照组亲鱼和自然养成组雌性性腺发育有显著性差异。电照亲鱼性腺发育明显比自然养成组发育要好，电照亲鱼的性腺指数都达到了30%以上，而自然组确在30%以下。同时也显示了香鱼电照培养后体重的增加主要表达在性腺的发育上，有利于卵子发育和同步性。 如图9所示，2011年雄性性腺指数表明，电照亲鱼和自然养成的雄性性腺发育有显著性差异，电照组的性腺发育明显比自然养成的发育迟。电照组的性腺指数在10%以下，而自然养成组的性腺发育指数在10%以上。电照处理对显然对雄性的性腺发育产生了抑制作用。 3.3. 2011年、2012年采用电照亲鱼和自然养殖亲鱼利用数、采卵数、受精率、发眼率、孵化率、孵化仔鱼数 如表1所示：2011年和2012年所采用的亲鱼，一部分为上年人工育苗的苗种经过电照处理，一部分为福井九头龙川河流里采捕获得。从表中可以看到2011年和2012年电照亲鱼雌性采用数量相差不大，分别为487尾和580尾，这表明人工促熟方法都可以保证生产的需求。而天然获得的亲鱼数量2011年比2012年多一倍。这源于天然采捕香鱼亲鱼数量受水环境、天气条件等自然因素和人为因素影响较大，每年获得的亲鱼数量变化较大。单纯靠天然采捕香鱼获得授精卵用于生产，风险较大。虽然天然获得亲鱼在受精率、发眼率、孵化率等关键数据明显高于电照亲鱼，如天然香鱼的受精率在96.95%至100%；孵化率在85.67%以上。而电照香鱼的受精率为80.67%至95.30%，孵化率在80%以上。但是在2011、2012年采用电照亲鱼分别获得317万和353万孵化仔鱼，而采用天然香鱼只有获得154万和50万的孵化仔鱼。 图8. 2011年香鱼雌性亲鱼性腺指数 图9. 2012年香鱼雌性亲鱼性腺指数 Table 1 Eggs collecting and hatching in 2011-201 亲鱼由来 2011年 2012年 电照 天然 电照 天然 采用♂尾数 108 68 131 24 采精后♂平均体重(g) 39.47 ± 5.94 70.70 ± 0.00 38.73 ± 2.80 122.60 ± 0.00 采用♀尾数 487 62 580 25 采卵后♀平均体重(g) 35.38 ± 3.17 52.58 ± 3.84 35.85 ± 2.87 70.8 ± 2.73 采卵总重量(g) 3984.43 758.87 4790.31 360.73 使用卵总重量(g) 1589.85 755.26 4768.4 358.03 受精率(%) 95.30 ± 2.62 100 ± 0.00 80.67 ± 22.21 96.95 ± 0.49 瞪眼率(%) 47.18 ± 16.11 96.45 ± 2.15 48.15 ± 25.07 68.37 ± 7.79 瞪眼卵数(N) 3，971，435 1，731，302 4，622，776 583，765 孵化率(%) 80.00 ± 0.00 89.30 ± 5.39 80.00 ± 0.00 85.67 ± 6.43 孵化仔鱼数 3，177，148 1，546，692 3，530，976 500，111 表1. 2011~2012年采卵及孵化情况表
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user: 4. 讨论 4.1. 亲鱼培养 日本福井县内水面综合中心开展香鱼亲鱼人工培养从1982年开始，已经有30多年的历史，山梨县香鱼的亲鱼培养已经繁育了近100代。人工海水苗种通过电照培养亲鱼能够获得计划内的受精卵，而天然采捕香鱼亲鱼由于受条件的限制增加了不稳定的因素，同时单单通过电照人工培养亲鱼，又会造成香鱼遗传因子退化，因此每年还需要补充天然海产亲鱼的采卵作业。国内柳学周 [ 12 ] 等陆续开展了半滑舌鳎的亲鱼培养及采卵技术研究。史会来 [ 13 ] 等开展了黄姑鱼亲鱼培育及产卵技术研究。郑春静等 [ 14 ] 开展了大黄鱼亲鱼培育及人工授精技术研究。李明云等 [ 15 ] 开展了鮸鱼亲鱼培育及人工繁殖研究。潘丽萍 [ 16 ] 开展了香鱼人工育苗饵料系列及投喂技术研究，单乐州 [ 17 ] 等开展了香鱼海水养殖的初步研究。在国内还未开展过香鱼人工苗种培育亲体及采卵技术研究。目前国内香鱼资源量日趋减少，开展亲鱼培养及采卵技术是香鱼资源恢复行之有效的手段。福井通过人工香鱼亲鱼培育及采卵技术每年对香鱼一定数量苗种放流，对香鱼资源的恢复具有非常大的意义。 4.2. 天然海产香鱼及人工海产香鱼、湖产香鱼的区别 根据日本广岛大学院生物圈科学研究科海野徹也(未发表)对天然海产香鱼、人工海产、湖产香鱼DNA遗传分析；耳石中sr/ca生化分析；耳石形状、日龄轮数、下颚侧腺孔数、侧线上方鳞数、脊椎骨数、胸鳍、腹鳍、背鳍等形态指标等相关性研究。从香鱼亲鱼的形态性状分析结果表明侧线上方鳞片数、上颚侧腺孔数与耳石sr/ca比和香鱼DNA有较高的相关性；且香鱼上方鳞片数在稚鱼110~133日龄、全长60 mm时已确定；下颚侧腺孔数在60日龄确定且不变。根据统计数据进行相关性研究结果得出：关于侧线上方鳞片数，天然海产范围在15~21片，人工海产在12~17片，琵琶湖产在15~21片。15片以下为人工海产，17片以上为天然海产香鱼的判定方法有效性较高。下颚侧腺孔(左右)数人工海产在0~5个范围，天然海产在3~6个范围，天然湖产在2~5个范围内；同时天然海产一般左右呈4对，出现的概率在90%以上。而人工海产一般左右不呈对；出现4对的概率在10%~75%之间。 4.3. 香鱼电照亲鱼性腺发育 1961年，白石芳一等 [ 18 ] 研究了光周期对香鱼成熟的影响。根据2011年和2012年对香鱼亲鱼电照培养，我们发现电照培养一般在6月份开展，这是根据夏天日照时间长，我们在17:00~24:00根据光照对香鱼的摄食生态影响，通过延长电照时间改变香鱼的摄食行为。结果表明香鱼摄食时间增长，但是香鱼体长增加不显著，而体重确有明显的增加。通过对香鱼的性腺指数分析表明香鱼的摄食宜于雌性性腺的发育，虽然由于养殖密度和饵料投喂等因素影响了个体间的性腺发育，这种性腺促熟跟天然采捕的性腺发育不能相比是因为天然香鱼卵子在受精率及发眼率和孵化率明显高于人工促熟的亲鱼，但是还是能通过这种方法提前获得足够量采卵亲鱼，因此可以提早10天时间进行香鱼采卵，从而使孵化仔鱼在适宜的温度下生长，减少了能源的浪费，同时又能按照指定计划保证香鱼孵化仔鱼的数量。
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user: 摘 要 氨氮(NH 3 -N)和亚硝酸盐(NO 2 -N)是养殖水质的主要污染物，对养殖水产动物具有一定的毒性效应。本研究在水温(25 ± 0.5)℃，盐度23，pH值为8.0 ± 0.1，溶解氧(DO)大于5.0 mg∙L −1 的条件下，研究全长90~ 120 mm 大黄鱼(Larimichthys crocea)幼鱼对NH 3 -N和NO 2 -N的急性毒性反应。NH 3 -N浓度梯度设置为3.00 mg∙L −1 、4.75 mg∙L −1 、7.54 mg∙L −1 、11.94 mg∙L −1 、18.93 mg∙L −1 和30.00 mg∙L −1 ，NO 2 -N浓度梯度设置为20.00 mg∙L −1 、34.37 mg∙L −1 、59.07 mg∙L −1 、101.55 mg∙L −1 、174.50 mg∙L −1 和299.99 mg∙L −1 。结果表明，总氨氮(NH 3 -Nt)的96 h半致死浓度(96 h-LC 50 )为6.35 mg∙L −1 ，安全浓度(CS)为0.64 mg∙L −1 ；非离子氨(NH 3 -Nm)的96 h-LC 50 为0.11 mg∙L −1 ，CS为0.011 mg∙L −1 ；亚硝态氮(NO 2 -N)的96 h-LC 50 为45.73 mg∙L −1 ，CS为4.57 mg∙L −1 。 关键词 :大黄鱼，氨氮，亚硝酸盐，急性毒性
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user: 1. 引言 大黄鱼(Larimichthys crocea)隶属硬骨鱼纲、鲈形目、石首鱼科、黄鱼属，为温暖性近海中下层鱼类，是中国现如今养殖规模最大的海水网箱经济鱼类[ 1 ] 。 氨氮(NH 3 -N)和亚硝酸盐(NO 2 -N)是养殖水体的主要污染物 [ 2 ] ，对养殖水产动物具有一定的毒性效应，它们在养殖过程中随着养殖密度及投饵的增加而不断积累，抑制鱼类正常生长，甚至危害鱼的健康 [ 3 ] - [ 6 ] 。其毒性主要表现为对摄食和生长的抑制 [ 7 ] [ 8 ] ，对血液指标的影响 [ 9 ] - [ 11 ] ，对生理指标和组织器官的影响 [ 12 ] - [ 19 ] ，以及降低机体免疫力 [ 20 ] 等。不同的水产动物以及同种动物的不同生长阶段对水质中NH 3 -N和NO 2 -N的耐受性不同 [ 21 ] 。近年来，关于NH 3 -N和NO 2 -N对鱼类 [ 22 ] - [ 25 ] 、虾 [ 26 ] - [ 28 ] 、蟹 [ 29 ] 等不同水产动物的毒性试验研究已多有见报，而关于NH 3 -N和NO 2 -N对大黄鱼苗种的急性毒性研究却尚不多见。为此，本试验研究了总氨氮(NH 3 -Nt)、非离子氨(NH 3 -Nm)和(NO 2 -N)对大黄鱼幼鱼的半致死浓度(LC 50 )和安全浓度(CS)，为大黄鱼苗种养殖的适宜水质环境调控提供科学依据。
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user: 2. 材料与方法 2.1. 试验条件与材料 试验地点位于福建官井洋大黄鱼原种场，试验时间为2012年6月，试验大黄鱼苗种全长为90~ 120 mm ，为幼鱼阶段，体质健壮，活力好。养殖容器为白色方形塑料箱(70 cm × 55 cm × 45 cm)，试验用水为过滤海水，充分曝气，盐度23，水温维持在(25 ± 0.5)℃，pH为7.9~8.1，溶氧量(DO)大于5.0 mg∙L −1 ，NO 2 -N质量浓度低于0.03 mg∙L −1 ，NH 3 -N质量浓度低于0.02 mg∙L −1 。 试验用药剂为氯化铵(NH 4 Cl)和亚硝酸钠(NaNO 2 ) (分析纯)，均配置成10 g∙L −1 的母液备用。 2.2. 试验方法 进行预试验，分别配置含NH 4 Cl和NaNO 2 不同浓度的水体，放入大黄鱼幼鱼；观察记录大黄鱼的死亡情况，经多次试验得到NH 4 Cl和NaNO 2 对大黄鱼的96 h 0%死亡质量浓度(90 h-LC 0 )和24 h 100%死亡质量浓度(24 h-LC 100 )，以确定NH 3 -N和NO 2 -N毒性试验中各试验组的浓度上下限，各自以等对数浓度区间设立7个试验浓度组，包括6个浓度梯度组及1个对照组，其所选取的试验质量浓度如表1所示，每个浓度组(含对照组)设2个平行。试验开始前一天备选幼鱼停食，试验期间不投饵。试验开始时，容器中放入 60 L 海水，不同浓度组分别加入相应剂量的药物，微曝气。每个浓度组放入幼鱼20尾，每24 h更换等药物浓度的试验用水一次，测量水温、溶解氧和pH各一次，并记录24 h、48 h、72 h和96 h大黄鱼幼鱼的死亡数，及时捞除死亡个体，鱼体死亡以鱼体被触动无任何死亡为准。 2.3. 试验数据处理 使用SPSS 15.0软件进行试验数据处理，采用直线内插法求出NH 3 -N和NO 2 -N对大黄鱼幼鱼24 h、48 h、72 h和96 h的LC 50 及95%置信区间，并求出NH 3 -N和NO 2 -N对大黄鱼幼鱼的CS。 (1) NH 3 -N的两种组成中，NH 3 -Nm对鱼体的毒害作用远高于离子氨NH 3 -N l ，是NH 3 -N中主要的毒性物质，因此计算NH 3 -N的LC 50 的同时要计算NH 3 -Nm的LC 50 ，NH 3 -Nm浓度的计算公式 [ 24 ] 为： (2) 式中 (3)
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user: 3. 试验结果 3.1. 在NH 3 -N急性毒性试验中的表现 在NH 3 -N急性毒性试验中，大黄鱼幼鱼有明显应激反应，在低浓度试验组中反应较为缓慢，在高浓度试验组中反应强烈。从NH 3 -N质量浓度3.00 mg∙L −1 开始，幼鱼在试验开始后即表现出不安窜游、时有浮头的症状，但总体较为正常，受惊程度低；NH 3 -N质量浓度大于11.94 mg∙L −1 试验组中，幼鱼在试验开始后即出现躁动、频繁浮头的症状，部分幼鱼有触击塑料箱的行为，6 h后部分幼鱼即活力降低，游动缓慢，并出现侧游、鳃盖微张甚至死亡。幼鱼因为受惊而产生的应激反应随时间而减缓，但由于大黄鱼极易受惊，因受惊而死亡的大黄鱼幼鱼数不可避免。 3.2. 对NH 3 -N的急性毒性反应结果 NH 3 -N对大黄鱼幼鱼的急性毒性试验结果显示，NH 3 -N浓度和其对大黄鱼的毒性呈正相关，和大黄鱼的死亡率呈正相关；在同一NH 3 -N浓度条件下，NH 3 -N对鱼体的作用时间与其毒性呈正相关、和大黄鱼死亡率呈正相关(表2)。经直线内插法求出NH 3 -Nt对大黄鱼幼鱼的24 h、48 h、72 h和96 h LC 50 及CS，显示结果为11.923 mg∙L −1 、8.600 mg∙L −1 、7.347 mg∙L −1 、6.348 mg∙L −1 和0.64 mg∙L −1 ，其相应的NH 3 -Nm的CS分别为0.208 mg∙L −1 、0.150 mg∙L −1 、0.128 mg∙L −1 、0.111 mg∙L −1 和0.011 mg∙L −1 (表3)。 3.3. 在NO 2 -N急性毒性试验中的表现 在NO 2 -N急性毒性试验中，大黄鱼对NO 2 -N的耐受性较之NH 3 -N大大升高，试验开始后，不同质量浓度试验组中的鱼体表现出不同程度的呼吸障碍现象，鱼体活力不同程度减弱直至死亡，中毒过程中未发现出躁动不安现象，死亡鱼体身鳃盖张大，倒翻于水面。整个试验过程中未发现因更换试验用水而引起鱼体应激死亡的情况。 Table 1 The mass concentration of NH3-N and NO2-N in this experiment (unit: mg∙L−1 化合物 compound 浓度1 concentration 1 浓度2 concentration 2 浓度3 concentration 3 浓度4 concentration 4 浓度5 concentration 5 浓度6 concentration 6 NH 3 -N 3.00 4.75 7.54 11.94 18.93 30.00 对照组 control 0 NO 2 -N 20.00 34.37 59.07 101.55 174.50 299.99 对照组 control 0 表1. NH 3 -N和NO 2 -N的试验质量浓度表(单位：mg∙L −1 ) Table 2 The acute toxic effect of NH3-N on the juvenile L. croce 组数 teams 氨氮/mg∙L −1 NH 3 -N 死亡率/% death rate 总氨氮NH 3 -Nt 非离子氨NH 3 -Nm 24 h 48 h 72 h 96 h 1 3.00 0.052 0 0 0 5 2 4.75 0.083 15 35 40 45 3 7.54 0.131 25 40 55 65 4 11.94 0.208 45 60 70 75 5 18.93 0.330 65 85 90 95 6 30.00 0.523 100 100 100 100 表2. 氨氮对大黄鱼幼鱼毒性试验结果 Table 3 The LC50 and CS values of NH3-Nt and NH3-Nm on the juvenile L. croce 化合物 compound 时间/h time 半致死浓度/mg∙L −1 LC 50 95%置信区间/mg∙L −1 95% confidence interval 安全浓度/mg∙L −1 CS 总氨氮 NH 3 -Nt 24 11.923 8.753~15.028 0.64 48 8.600 5.797~12.506 72 7.347 5.017~10.177 96 6.348 5.605~8.255 非离子氨 NH 3 -Nm 24 0.208 0.153~0.296 0.011 48 0.150 0.101~0.217 72 0.128 0.088~0.177 96 0.111 0.080~0.143 表3. 总氨氮和非离子氨对大黄鱼幼鱼的半致死浓度和安全浓度 3.4. 对NO 2 -N的急性毒性反应结果 NO 2 -N对大黄鱼幼鱼的急性毒性试验结果显示，NO 2 -N浓度和其毒性呈正相关，和大黄鱼的死亡率呈正相关；在NO 2 -N同一浓度条件下，NO 2 -N对鱼体的作用时间与其毒性、大黄鱼死亡率呈正相关(表4)。经直线内插法求出NO 2 -N对大黄鱼的24 h、48 h、72 h和96 h LC 50 及CS分别为115.675 mg∙L −1 、97.881 mg∙L −1 、73.107 mg∙L −1 、45.730 mg∙L −1 和4.57 mg∙L −1 (表5)。 Table 4 The acute toxic effect of NO2-N on the juvenile L. croce 组数 teams 亚硝酸盐/mg∙L −1 NO 2 -N 死亡率/% death rate 24 h 48 h 72 h 96 h 1 20 0 0 0 10 2 34.37 10 15 25 35 3 59.07 20 25 35 65 4 101.55 35 40 65 85 5 174.5 60 75 85 100 6 299.99 100 100 100 100 表4. 亚硝酸盐对大黄鱼幼鱼的毒性试验结果 Table 5 The LC50 and the safe concentrations of NO2-N on the juvenile L. croce 化合物 compound 时间/h time 半致死浓度/mg∙L −1 LC 50 95%置信区间/mg∙L −1 95% confidence interval 安全浓度/mg∙L −1 CS 亚硝酸盐 NO 2 -N 24 115.675 80.353~151.280 4.57 48 97.881 69.961~142.641 72 73.107 54.731~97.383 96 45.730 49.360~59.338 表5. 亚硝酸盐对大黄鱼幼鱼的半致死浓度和安全浓度
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user: 4. 讨论 4.1. NH 3 -N和NO 2 -N的毒性分析 养殖水体中的NH 3 -N主要以NH 3 -N l 和NH 3 -Nm两种形式存在，NH 3 -N l 不能进入细胞膜，无明显毒害。NO 2 -N对鱼体的毒性主要是由于水体中的NO 2 -N浓度达到一定程度后，通过鳃丝等组织进入到鱼体中并结合血红蛋白，将血红细胞中的Fe 2+ 氧化成Fe 3+ ，形成不具携氧功能的高铁血红蛋白，血液的载氧能力减弱，造成鱼体组织缺氧，神经麻痹，甚至窒息死亡 [ 19 ] 。NH 3 -Nm为不带电荷的脂溶性小分子，可透过细胞膜或结合血液中血红蛋白，引起鱼体组织中毒，对水生生物的毒性较NH 3 -N l 强百倍。 随着水环境中NH 3 -Nm浓度的上升，鱼体中的血氨含量和其他组织中的氨含量增加。NH 3 -Nm不但进入血淋巴对鳃细胞造成不可逆损伤，还破坏细胞膜，从而导致鱼体各组织中的细胞形态、结构和功能的异常，致使肾、肝等各组织器官出现不同程度的组织损伤 [ 18 ] 。洪美玲等 [ 13 ] 研究显示，NH 3 -Nm急性毒性试验中，鱼体的神经系统中毒，表现为抽搐、昏迷，并发生死亡。王志坚等 [ 14 ] 研究发现，NH 3 -Nm能破坏鳃上皮细胞引起窒息并渗进血液刺激糖酵解和三羧酸循环，引起鱼酸中毒和血液携氧量的降低，使水生动物呼吸代谢受阻。PARK等 [ 17 ] 研究发现在高浓度NO 2 -N组中鱼体体表、鳃、肝脏和肾脏己经发生病变。此外，BENLI等 [ 19 ] 指出，在高浓度的NO 2 -N水环境下，鱼体鳃丝基部的泌氯细胞增殖变大、胞内线粒体受损肿大，鳃丝肿大、鳃小片溶解、肝肾严重受损。 4.2. NH 3 -N和NO 2 -N对大黄鱼幼鱼的毒性比较 已有研究表明，氨氮中毒时鱼苗的反应较亚硝酸盐中毒更为剧烈。本试验中大黄鱼幼鱼在试验开始时NH 3 -N质量浓度3.00 mg∙L −1 后即表现出不安窜游、时有浮头的症状，而在NO 2 -N不同质量浓度试验组中的鱼体表现出不同程度的呼吸障碍现象，活力减弱直至死亡，整个过程中未发现出躁动不安现象。试验结果显示，NH 3 -Nt对大黄鱼的96 h-LC 50 为6.348 mg∙L −1 ，NH 3 -Nm的96 h-LC 50 为0.111 mg∙L −1 ；NO 2 -N对大黄鱼96 h-LC 50 为45.730 mg∙L −1 ，说明了同种条件下NH 3 -Nm对大黄鱼种的毒性远大于NO 2 -N和NH 3 -N。这与黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco) [ 7 ] 、鳜(Siniperca chuatsi)成鱼 [ 24 ] 、斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)幼苗 [ 25 ] 、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) [ 26 ] 、沼虾(Macrobrachium tenellum)幼体 [ 28 ] 、裸项栉虾虎鱼(Ctenogobius gymnauchen)仔鱼 [ 30 ] 、白梭吻鱸(Sander lucioperca)幼体 [ 31 ] 、岩原鲤(Procypris rabaudi)幼苗 [ 32 ] 等国内外相关研究结论相符。 4.3. NH 3 -N和NO 2 -N在大黄鱼养殖过程中的重要性及调控方法 大黄鱼是我国最大规模的海水网箱养殖鱼类和8大优势出口养殖水产品之一，其2012年养殖产量近10 × 10 4 t，直接产值70多亿元 [ 33 ] 。然而，大黄鱼养殖仍以传统的网箱养殖为主，网箱养殖面临着很大的局限性，抗台风能力差、污染严重，其高密度养殖模式和投高蛋白饵料，产生大量的残饵和粪便沉积水底，很容易使水体产生大量的NH 3 -N和NO 2 -N，对大黄鱼健康养殖业造成极大的危害，其幼苗对NH 3 -N和NO 2 -N的敏感度更强。该试验结果表明池中大黄鱼幼鱼对NH 3 -N和NO 2 -N的毒性反应与其在水中的浓度及其作用时间呈正相关关系。JI等 [ 34 ] 认为，网箱养殖致使底层有机沉积物堆积，底层微生物活动加剧造成缺氧环境，而无氧或缺氧又促使了微生物的脱氮和硫还原反应，沉积物还原形成具有毒性的硫化氢，毒害鱼体。与此同时，随着海洋港口的建设及相关港口经济产业的发展，致使大黄鱼养殖空间严重萎缩，海区的养殖环境负荷进一步加大。因此，大黄鱼产业亟需探索养殖新模式。目前国内正积极探索发展海水鱼类室内工厂化循环水养殖技术，以谋求产业出路。而NH 3 -N和NO 2 -N作为循环水养殖技术中水质调控的关键指标，是核心技术难题。 因此，笔者认为，根据本试验所得NH 3 -Nt、NH 3 -Nm和NO 2 -N的CS，实时监测水质指标，可通过以下3个方向对NH 3 -N和NO 2 -N进行调控： 1) 通过硝化菌群加快硝化转化。NH 3 -N和NO 2 -N可在硝化菌和亚硝化菌的作用下，转化为硝酸盐(NO 3 -N)，而生成的NO 3 -N对鱼体无明显毒性，并可被藻类等直接吸收利用。因此，可结合运用固定化技术和生物膜技术，加强微生物的硝化作用，有效降低水体中NH 3 -N和NO 2 -N的浓度指标。 2) 调节pH以降低NH 3 -N毒性。NH 3 在水体中存在电离平衡(NH 3 + H 2 O NH 3 ∙H 2 O + )，当pH升高时，水体中NH 3 -Nm浓度增大，NH 3 -N毒性增加。林忠婷等 [ 30 ] 研究表明，适当调低pH、升高盐度可使NH 3 在NH 3 -Nt中的比率降低，养殖环境中NO 2 -N的毒性降低。因此，可适度调节水中pH，以降低NH 3 -N和NO 2 -N毒性。 3) 调节溶氧以降低NH 3 -N和NO 2 -N毒性。REMEN等 [ 35 ] 对大西洋鳕鱼(Gadus morkua)幼鱼的研究发现，高溶氧条件下NH 3 -Nm对大西洋鳕鱼的毒性作用降低。李波等 [ 36 ] 指出，提高水中溶氧量可使黄颡鱼对NH 3 -N和NO 2 -N的96 h-LC 50 大大提高，即黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)对两者的耐受性大为提高。徐勇等 [ 37 ] 对半滑舌鳎(Cynoglossuss semilaevis)鱼苗在不同溶氧量条件下对氨氮和亚硝酸盐的耐受性研究也表明，过饱和氧可使鱼苗对非离子氨和亚硝酸盐的耐受浓度提高2倍以上。因此，在水中存在大量的NH 3 -N和NO 2 -N时加大充氧量，或改用纯氧增氧，保持水中较高的溶氧量，可以降低NH 3 -N和NO 2 -N的毒性，对大黄鱼幼鱼的生长和抗病力具有重要的作用。
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user: 5. 结论 本研究利用氨氮和亚硝酸盐这两种养殖水体中主要的污染物对全长90~120 mm的大黄鱼苗种的急性毒性反应。结果表明，在水温25℃ ± 0.5℃、盐度23、pH值为8.0 ± 0.1、溶解氧(DO)大于5.0 mg∙L −1 条件下，总氨氮(NH 3 -Nt)的96 h半致死浓度(96 h-LC 50 )为6.35 mg∙L −1 ，安全浓度(CS)为0.64 mg∙L −1 ；非离子氨(NH 3 -Nm)的96 h-LC 50 为0.11 mg∙L −1 ，CS为0.011 mg∙L −1 ；NO 2 -N的96 h-LC 50 为45.73 mg∙L −1 ，CS为4.57 mg∙L −1 。本试验结果表明池中大黄鱼苗种对水中NH 3 -N和NO 2 -N的毒性反应与其浓度及其作用时间呈正相关关系。
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user: 摘 要 研究了红水河野生鲢Hypophthalmichthys molitrix上游、中游和下游3个群体24个个体的线粒体控制区(D-loop)和细胞色素b (Cyt b)基因序列，通过PCR扩增与测序，分别获得了长度为820 bp和1117 bp的D-loop和Cyt b基因片段。分析表明，D-loop序列共定义了20个单倍型，存在74个多态位点，发生转换19次、颠换3次、插入/缺失52次。Cyt b序列共定义了9个单倍型，存在48个多态性位点，发生转换13次、颠换1次、插入/缺失34次。两序列分析结果表明，群体间和群体内遗传距离较小，遗传变异的分子变异等级不显著。上、中、下游均有共享单倍型，3个群体间遗传分化不大。 关键词 :鲢，红水河，D-Loop，Cyt b，遗传变异
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user: 1. 引言 鲢(Hypophthalmichthys molitrix)属鲤形目，鲤科，鲢亚科，鲢属。又名白鲢、跳鲢、鲢子。体侧扁、稍高，呈纺锤形，头大吻短，口宽、眼小，鳞细，体呈银白色，腹部有肉棱。鲢滤食浮游植物，生长速度快、产量高，在广西一般做为生态养殖品种。鲢属中上层鱼。春夏秋三季，绝大多数时间在水域的中上层游动觅食，冬季则潜至深水越冬。秋除浮游生物外，还大量地吃腐屑类饵料。其食欲与水温成正比，夏季水位越低，其摄食量越大：冬季则少吃少动。最适宜的水温为23℃~32℃。鲢性情活泼，喜欢跳跃，有逆流而上的习性。 线粒体D-环区(displacement loop region， D-loop)，是线粒体DNA中的一段非编码区，位于tRNA Pro和tRNA Phe基因之间，是线粒体DNA序列和长度变异最大的区域，也是线粒体基因中进化最快的部分，适用于种群水平差异的检测，也可用于种间分析[ 1 ] -[ 3 ] 。细胞色素b基因(Cytochrome b gene， Cyt b)是线粒体DNA上的蛋白质编码基因，其进化速度适中，适合种群水平差异的检测，也是探讨种内群体遗传分化程度的良好标记 [ 4 ] [ 5 ] 。对鲢线粒体DNA的研究多见于长江流域，如李思发等对长江中下游四大家鱼线粒体DNA多样性进行了分析 [ 6 ] 。张四明等对长江中游汉江和湘江水系鲢和草鱼群体的mtDNA遗传变异进行了对比研究 [ 7 ] 。朱日财对赣江赣州江段四大家鱼遗传多样性进行了研究 [ 8 ] 。珠江流域，尤其是广西境内区域尚未见相关研究报道，本文对红水河流域3个相互分隔的鲢群体进行遗传多样性状况和群体遗传结构分析，为红水河流域物种的多样性保护提供必要的遗传背景资料和数据支持。