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user: 3. 结果与讨论 3.1. 介质选择 图2为不同介质中相关体系荧光光谱。由图2可知：1) Allura red加入能猝灭CdTe QDs荧光强度(ΔF 1 = F QDs-H2O − F QDs--Allura red-H2O ) (曲线1，曲线2)；2) Tx-100介质中BPA对QDs猝灭值增加(ΔF 2 = F QDs-Tx-100 − F QDs-Tx-100-Allura red ) (曲线3，曲线4)；3) 猝灭值ΔF 2 大约是ΔF 1 的5倍。Tx-100对Allura red的测定具有增敏作用。 3.2. 条件优化 3.2.1. pH影响 按照试验方法，改变溶液的pH值，考察了pH对CdTe QDs-Tx-100-Allura red体系的荧光猝灭值(ΔF = F QDs-Tx-100 − F QDs-Tx-100-Allura red )的影响(图3)，由图3可知这是因为pH对ΔF = F QDs-Tx-100 − F QDs-Tx-100-Allura red 中F QDs-Tx-100 影响较大，对F QDs-Tx-100-Allura red 影响微弱，致使ΔF主要由F CdTe QDs-CTAB 的趋势决定(图3内插图)。随着pH增大，F QDs-Tx-100 逐渐增大，在pH = 6.5时ΔF达到最大值，但当pH继续增大，F QDs-Tx-100 逐渐减小。因此本实验选用pH = 6.5的NH4Cl-NH 3 .H 2 O缓冲溶液控制体系，pH用量为1.00 mL。 3.2.2. CdTe QDs浓度影响 按照试验方法，改变体系中CdTe QDs的用量，测定并记录荧光猝灭值ΔF变化。由图4可知，随着CdTe QDs浓度增大，体系ΔF不断增大，当CdTe QDs浓度为45.0 µg/mL时达到最大的猝灭值，继续增大CdTe QDs浓度体系荧光猝灭程度减小。由图4内插图可知：1) CdTe QDs用量在10.0~45.0 mg/mL内，当Tx-100浓度为45.0 mg/mL时体系的荧光强度均达到最大值，CdTe QDs-Tx-100体系荧光强度和CdTe QDs-Tx-100-Allura red体系荧光强度均增加，但CdTe QDs-Tx-100体系荧光强度增加比CdTe QDs-Tx-100-Allura red体系荧光强度均增加的大，导致ΔF增大(ΔF = F QDs-Tx-100 ↑↑ − F QDs-Tx-100-Allura red ↑)；2) CdTe QDs用量在45.0~55.0 mg/mL内，体系荧光强度都在减小，从而导致体系ΔF减小(ΔF = F QDs-Tx-100 ↓↓ − F QDs-Tx-100-Allura red ↓)。因此，本实验CdTe QDs最优浓度为45.0mg/mL。 3.2.3. Tx-100浓度影响 由图5可知，随着Tx-100浓度升高，体系ΔF不断增大，当Tx-100浓度在1.25 mg/mL时猝灭值最大，继续增大浓度时，ΔF开始减小。这是因为Tx-100浓度在0.25~2.0 mg/mL范围内，CdTe QDs-Tx-100体系荧光强度先增大后减小在1.25 mg/mL达到最大值，而CdTe QDs-Tx-100-Allura red体系荧光强度在1.25 mg/mL浓度达到最小值(图5内插图)。因此，本实验采取最佳Tx-100浓度为1.25 mg/mL。 3.2.4. 温度影响 由图6可知，温度对体系ΔF影响不大，在15℃~40℃范围内ΔF先增大后减小且在常温25℃时ΔF最大。因此，本实验采用最佳温度为25℃。 图2. 荧光光谱图 图3. pH值对荧光强度影响 图4. CdTe QDs浓度对荧光强度影响 3.2.5. 时间影响 按照试验方法，测定CdTe QDs-Tx-100-Allura red体系在不同时间点荧光猝灭值ΔF。由图7可知， 图5. Tx-100浓度对荧光强度影响 图6. 温度对荧光强度影响 随着静置时间增加，荧光猝灭值ΔF增大，20 min后猝灭值出现稳定平台后降低。因此本实验选择在20 min为最佳测量荧光猝灭时间。 3.3. 干扰实验 研究了不同干扰物质对检测20.0 µg/mL Allura red 的影响，允许相对误差范围(对荧光猝灭程度≤±5% 视为无干扰)。不同干扰物质误差范围如表1。结果表明他们没有对荧光猝灭造成干扰。 3.4. 分析性能 在最佳实验条件下，Allura red浓度在5.0-1000.0µg/mL浓度范围内与(CdTe QDs-Tx-100)荧光猝灭值 ΔF(ΔF = F CdTe QDs-Tx-100 − F CdTe QDs-Tx-100-Allura red )呈良好的线性关系(图8)，其线性回归方程为ΔF = 12.86C + 77.36(µg/mL)，线性相关系数为0.9939，检出限为0.35µg/mL(检出限定义为LOD = 3σ/k ，其中，σ是空白的标准偏差，k是校准曲线的斜率)。相对标准偏差为1.5%(c = 20.0µg/mL， n = 11)。 与其他文献比较，尤其是纸层色谱光度法对比 [ 30 ] ，该方法简单、检测限好，见表2。 3.5. 实际样品测定 在最佳实验条件下进行检测了软糖、硬糖、口香糖、果冻和夹心饼干。测定结果见表3，发现软糖 图7. 时间对荧光强度的影响 图8. 校准曲线 Table 1 Effect of foreign substances on determination of BP 共存物质 共存物质浓度/诱惑红浓度(W 1 /W) Cl − 100 Zn 2+ 、K + 、Na + 100 SO 4 2- 50 Mg 2+ 、Ca 2+ 20 Cu 2+ 10 胭脂红、藏红T 0.5 表1. 干扰物质对Allura red检测的影响 Table 2 Comparison with the results in other literature Method LR LOD RSD (%) Ref RP-HPLC 0.02-51.00μg/mL 7.46 μg/L 1.90-6.50 [ 26 ] SP 2-8 μg/mL 7.8 μg/L 1.79 [ 27 ] MWNT/GCE 50-600 μg/mL 25 μg/L 2.87 [ 28 ] HPLC 50-10000ng/mL 9.3ng/mL 5.50-7.80 [ 29 ] PC 0-12mg/L 5mg/L - [ 30 ] FP 0.6-60μg/mL 0.35µg/mL 1.50 This method 表2. 与其它文献比较 Table 3 Determination results of the sample 样品 加标量(µg/mL) 测得值(µg/mL) 回收率(%) 软糖 0 0.25 — 5.00 5.37 102.29 25.00 24.84 98.38 硬糖 0 1.71 — 5.00 6.62 98.66 25.00 26.46 99.06 口香糖 0 0.32 — 5.00 5.12 96.24 25.00 25.79 101.86 果冻 0 0.10 — 5.00 5.33 104.51 25.00 25.62 102.07 夹心饼干（1） 0 ND* — 5.00 5.16 103.20 25.00 25.43 101.72 夹心饼干（2） 0 ND — 5.00 5.23 104.60 25.00 25.41 101.64 表3. 样品检测 *未检测到。 中诱惑红0.25 μg/kg，硬糖中诱惑红1.71 μg/kg，口香糖中诱惑红0.32 μg/kg，果冻中诱惑红0.10 μg/kg，夹心饼干中没有测到，加标回收率为96.24%~104.60%。国家诱惑红限量标准为≤0.085 g/kg [ 30 ] 。因此本方法由于操作简单具有良好的应用性。 3.6. 机理探讨 3.6.1. 猝灭类型 荧光猝灭类型分为动态猝灭或静态猝灭两种。动态猝灭过程是碰撞过程，与扩散有关，温度升高时分子运动加速，分子扩散系数增大，从而增大猝灭常数。静态猝灭是猝灭剂与荧光物质分子发生配合反应，形成配合物。温度升高，配合物稳定性下降，猝灭常数降低 [ 31 ] 。可以用Stern-Volmer方程观察反应温度对猝灭常数影响进行判断荧光猝灭类型。 由图9及表4可知，在不同温度下F 0 /F对c呈良好的线性关系且在本实验浓度范围内呈单一猝灭类型。由图9可得Tx-100对CdTe QDs猝灭值随温度的增大而减小，这表明Tx-100对CdTe QDs的荧光猝灭为静态猝灭过程。 3.6.2. Tx-100增敏作用 荧光猝灭值ΔF = F QDs − F Allura red-QDs ，若QDs的荧光量子产率增加，必定会使荧光猝灭值ΔF增加。因此，本实验中考察了QDs分别在Tx-100和H 2 O介质中的荧光量子产率Yu。结果见表5。 由表5可知，QDs在Tx-100介质中的荧光量子产率是水介质中的3倍。这是因为表面活性剂的存在改变了“溶剂”的微观性质，提供了对务之激发单重态的一种保护性环境。这种保护性环境降低了QDs荧光质点自身的溶度猝灭以及外部猝灭剂的猝灭作用，大大降低了激发单重态非辐射去活化的速率常数，从而提高了QDs的Yu，即发生Tx-100对QDs的增敏作用，进而增加Allura red对QDs的荧光猝灭值。