DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
system: [SYSTEM]

user: 4. 讨论 本组研究临床观察，纹眼线患者OSDI值测出正常人群32例64眼(53.33%)，轻度干眼者8例16眼(13.33%)，中度干眼者15例30眼(25.0%)，重度干眼者5例10眼(8.33%)。OSDI值：干眼组(27.02 ± 14.35)分，正常组(7.29 ± 3.36)分，干眼组明显高于正常组(P < 0.001)；NIBUT：干眼组5.93 ± 3.07正常组：13.23 ± 4.89；泪河高度：干眼组(0.18 ± 0.04) mm，正常组(0.23 ± 0.03) mm，这两项指标在干眼组均明显低于正常组(P < 0.001)；角膜荧光素染色评分：干眼组(3.51 ± 1.67)分，正常组(1.23 ± 2.32)分；睑板腺缺失评分：干眼组(3.35 ± 1.25)分，正常组(0.65 ± 0.59)分，这两项指标在干眼组明显高于正常组(P < 0.001)；纳入的60例纹眼线患者的角膜荧光素染色评分与睑板腺的缺失评分呈正相关(rs = 0.838， P = 0.000)。 本组资料提示纹眼线患者的干眼发生率较高，但并不是每一位纹眼线患者都会发生干眼，根据纹眼线的年限分析，时间越长，眼表损害越明显，干眼的发生率越高，纹眼线对干眼是有一定的促进作用，但并不是单纯纹眼线就可能造成干眼的加重，它是一个综合因素所导致的干眼。分析其原因，纹刺的色素颗粒长期存在于眼睑内组织，会引起慢性炎症。本组资料中干眼的发病多集中在纹眼线10年之后、并非很快发生，随着纹刺时间的延长，色素颗粒会扩散至睑板腺附近，纹眼线患者可见色素颗粒的扩散甚至可接近睑缘的后唇，当其侵及睑板腺并引起附近的慢性炎症时，必然会损伤睑板腺的正常功能，从而 Table l Compares the ocular surface parameters of the dry eye group to the normal grou 指标 干眼组 正常组 P OSDI/分 27.02 ± 14.35 7.29 ± 3.36 <0.001 泪河高度(l/mm) 0.18 ± 0.04 0.23 ± 0.03 <0.001 NIBUT(t/s) 5.93 ± 3.07 13.23 ± 4.89 <0.001 角膜荧光素染色评分/分 3.51 ± 1.67 1.23 ± 2.32 <0.001 表1. 干眼组与正常组的眼表参数比较 Table 2 Compares the meibomlan gland function indexes of the dry eye group to the normal grou 指标 干眼组 正常组 P 睑板腺开口状况评分/分 2.31 ± 0.61 0.62 ± 0.51 <0.001 睑板腺脂质分泌物性状评分/分 1.44 ± 0.57 0.49 ± 0.37 <0.001 睑板腺缺失评分/分 3.35 ± 1.25 0.65 ± 0.59 <0.001 表2. 干眼组与正常组的睑板腺功能指标的比较 引发干眼。部分患者则是由于药物渗人到睑板腺内，引起睫毛毛囊周围组织的机械性损伤及化学刺激，破坏了正常组织结构，导致毛囊周围腺体功能障碍而发生炎症性病变及分泌障碍，部分患者是由于纹眼线时操作不得当，破坏睑板腺功能，导致泪液脂质层异常，眼部蒸发量增加，严重影响泪液分泌和泪膜的稳定性，进而引起不同程度的眼表损害 [ 8 ] [ 9 ] ，因此，睑板腺功能障碍是纹眼线患者发生干眼的重要病因。虽然本研究发现纹眼线会导致不同程度的眼表损害及干眼，但尚缺少进一步的基础研究。另一方面，纹眼线操作人员技术不同，纹眼线患者不良的用眼卫生习惯也会导致干眼的加重，因此，这类患者干眼的病程发展仍需进一步观察和探讨。 根据我国现有的流行病学研究显示，干眼在我国的发病率与亚洲其他国家类似，较美国及欧洲高，其发生率约在21%~30%。其危险因素主要有：老龄、女性、高海拔、糖尿病、翼状胬肉、空气污染、眼药水滥用、使用视屏终端、角膜屈光手术、过敏性眼病、眼睑手术(麦粒肿、纹眼线)和部分全身性疾病等 [ 10 ] 。传统的干眼检测指标包括：泪膜破裂时间、泪液分泌试验、泪河高度等。但这些检查受到了各种检查工具的限制，并不能准确的反映患者的真实情况，误差较大，本研究使用Keratograph眼表综合分析仪检查，自动检测非侵人性泪膜破裂时间和泪河高度，放大倍数为10倍，分辨率为0.2 ram，仪器使用Tear-film-scan软件自动测量，不会产生反射性流泪和泪膜干扰，测量值能够比较精确地反应泪膜的变化，因此非侵入性泪膜破裂时间(NITBUT)检测排除了检测者的主观判定标准，应较TBUT更精准。同时，Keratograph眼表综合分析仪通过红外照射睑板腺的形态及面积，研究睑板腺的缺失情况，利用图像处理软件准确的计算睑板腺的缺失面积及数量，使得检测数据更为可靠 [ 11 ] [ 12 ] 。 总之，纹眼线患者干眼发病率较高，睑板腺功能障碍是纹眼线患者发生干眼的重要病因之一，Keratograph 5M非侵入式眼表综合分析仪可无创性客观评价患者眼表状况。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 于2012~2013年5月、8月、10月份，对茅岭江入海口水质进行定点监测，通过分析该水域水体中总氮、总磷、无机氮、无机磷、化学需氧量、石油类等数据，研究该水域各水质指标的动态变化及趋势，并采用单因子评价法、氮磷比、富营养化指数法等方法对其结果进行水质分析和评价。结果表明：2012~2013年茅岭江入海口水质全年均有超标现象，其中总氮、总磷、石油类超标不严重，而无机氮和无机磷在2012年8月份和10月份超标最严重，超过了国家标准中的四类水质标准。2012~2013年茅岭江入海口水体氮磷比均处于不同程度的失衡状态，其中2012年各站位在5月份水体中磷是限制浮游藻类生长的主要因素，而2013年各站位水体中氮却成为了限制浮游藻类生长的主要因素。2012~2013年茅岭江入海口水体出现了不同程度的富营养化，其中2012年和2013年10月份富营养化程度最为严重，主要原因是水体COD含量严重超标，表明水体受到城镇生活污水及畜禽养殖业来源方面的有机物污染已经很严重。相关部门为此应制定好切实可行的方案，严格控制和治理茅岭江沿岸生活污水，生产废水和养殖废水的排放，降低各种人为因素对钦州茅岭江沿岸水质的影响与破坏。 关键词 :茅岭江，水质状况，评价，氮磷比，富营养化 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 近年来随着北部湾的开发，钦州工业生产水平迅猛发展，环境受到的污染也越来越严重。茅岭江是钦州的主要河流之一，与钦江、大榄江共同构成了茅尾海的入湾水系 [ 1 ] 。茅岭江入海口是多种鱼、虾、贝类的繁殖、索饵场所，是生态环境极其脆弱的海域。茅尾海与茅岭江相接邻，是我国南部沿海重要的海湾，在环北部湾地区的经济发展和我国与东盟之间的贸易往来中发挥着重要作用 [ 2 ] 。茅尾海是中国最大的近江牡蛎天然苗种产地，茅岭江的污染势必会影响到茅尾海的近江牡蛎苗种健康。茅尾海内还有钦州湾最大片的红树林群落—茅尾海红树林保护区，保护区内有由桐花树，白骨壤、秋茄等树种组成的红树林，保护区还是雁、鸭、鹬等禽类迁徙的驿站和越冬地，重要性不言而喻。茅岭江水质污染会使该保护区的生态系统遭到破坏，使一些珍惜濒危物种灭亡 [ 3 ] 。因此，为保护入海口生态环境，渔业资源，进行茅岭江入海口生态环境的研究刻不容缓。另外，茅岭江一带水质状况调查研究较少，缺乏比较全面的调查研究。再者，近年来随着钦州湾经济区的快速发展，陆源污染物在不断增加，使得茅岭江水质污染加重。因此，进行茅岭江入海口水质研究对于评价茅岭江的环境质量、控制环境污染、保护生态环境和为相关部门治理污染提供建议等都具有重要意义。
system: [SYSTEM]

user: 2. 材料与方法 2.1. 研究区域概况 茅岭江干流全长112 km，流域面积2959 km 2 。茅岭江河流水量极为丰沛，平均年径流量为25.9 × 10 8 m 3 。由于受降水变化的影响，河流流量的年内变化较大，在汛期(4~9月)，径流量为19.99 × 10 8 m 3 ，占年径流量的77.2%，最大月径流量一般出现于6~8月，约占全年的50%；枯季(10~翌年3月)径流量为5.9 × 10 8 m 3 ，占年径流量的22.8%，最小月径流量出现于12~2月，仅占全年的9%。茅岭江年输沙量为55.3 × 10 4 t [ 4 ] [ 5 ] 。 茅岭江入海口即为茅尾海，是以钦江、茅岭江为主要入湾径流的河口海滨区，面积约135 km 2 (见图1)。茅尾海位于钦州湾内湾，是一个典型的受径流影响的半封闭性海湾，位于钦州湾西海域最北部。海湾内宽口窄，呈椭圆形，东、西、北三面为陆地所包围，大部分为浅滩，平均水深小于2 m，属于南亚热带海洋性气候，年平均气温约22.1℃，年平均降雨量为2135 mm，潮汐为不规则全日潮，潮汐不等现象明显，平均潮差约2.5 m。该海域滩涂广布，沿海周围有大片红树林，现有广西茅尾海红树林自然保护区，总面积2784 m 2 。茅尾海中部建有国家海洋公园，属典型海洋生态系统，还是我国南方最大的近江牡蛎采苗基地，采苗区约2340 hm²，分布在茅尾海红树林外围滩涂、中北部和中南部海区，最高年产牡蛎苗种10亿串，为农业部水产健康养殖示范区，同时盛产鲈、鲻、鲷、黄鱼、青蟹等。此外，海湾内还生长有茂盛的菅草、水草和海榄树，盛产水鸭等野生水禽。一年四季，成千上万的野鸭、海鸥、沙螺鸠、蓑衣鹤在这里栖身出没。 研究水域为茅岭江入海口，设P1、P2、P3三个站位点，每个站位点分别于2012~2013年5月、8月、10月进行水质监测取样，共采样6次(见图2)。 图1. 茅岭江地理位置 图2. 茅岭江监测点站位 2.2. 样品采集与分析 在各监测点站位采集表层水样品(水面下0.5 m)，监测项目包括总氮、总磷、无机氮、无机磷、化学需氧量、石油类，其中总氮分析方法为中华人民共和国国家标准( GB 11894-89) 中“水质总氮的测定：碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法” [ 6 ] ；总磷分析方法为中华人民共和国国家标准( GB 11893-89) 中“水质总磷的测定：钼酸铵分光光度法” [ 7 ] ；其它各监测项目的样品采集、处理和分析方法均按照国家标准《海洋监测规范，第4部分：海水分析GB17378.4-2007》进行 [ 8 ] 。采样和分析过程均采取运输空白样、现场平行样、密码样和加标样等进行质量控制。 2.3. 数据分析方法 本次水质评价采用单因子评价法，即根据《海水水质标准 GB3097-1997》 [ 9 ] 和《地表水环境质量标准GB3838-2002》 [ 10 ] 选取相应类别标准，将实测值与国家标准值进行比较，进行茅岭江水质的评价。
system: [SYSTEM]

user: 4. 结论 1) 2012~2013年茅岭江入海口水质全年均有超标现象，其中总氮、总磷、石油类超标不严重，多数时期处于一类与三类水质标准之间；而无机氮和无机磷在2012年8月份和10月份超标最严重，超过了国家标准中的四类水质标准，2013年此两项水质指标恢复正常。 图7. 茅岭江2012~2013年水体中化学需氧量变化情况 图8. 茅岭江2012~2013年水体中石油类变化情况 2) 2012~2013年茅岭江入海口水体氮磷比均处于不同程度的失衡状态，其中2012年各站位在5月份水体中磷是限制浮游藻类生长的主要因素，而2013年各站位水体中氮却成为了限制浮游藻类生长的主要因素。 3) 2012~2013年茅岭江入海口水体出现了不同程度的富营养化，其中2012年和2013年10月份富营养化程度最为严重，主要原因是水体COD含量严重超标，表明水体受到城镇生活污水及畜禽养殖业来源方面的有机物污染已经很严重。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 N，N-二烷基乙醇胺是一种重要的精细化工中间体，在纺织、医药、农用化学品等方面具有广泛的应用。本文根据起始原料不同将其合成路线分为两大类，即：仲胺的羟乙基化和乙醇胺的N-烷基化，并较系统地归纳总结了各不同合成路线的特点，对N，N-二烷基乙醇胺的合成路线优化与生产工艺改进具有指导意义。 关键词 :N， N-二烷基乙醇胺，N-烷基化，羟乙基化 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 N，N-二烷基乙醇胺类化合物是重要的精细化工产品，广泛用于生产医药、涂料、表面活性剂等 [ 1 ] [ 2 ] ，也可作为脱碳、脱硫剂 [ 3 ] 等使用。常用的品种有N，N-二乙基乙醇胺、N，N-二丙基乙醇胺、N，N-二丁基乙醇胺等。近年来，关于它们的高效、清洁的合成工艺受到人们高度的重视。 N，N-二烷基乙醇胺类化合物合成方法可分为：仲胺的羟乙基化和乙醇胺的N-烷基化两大类。由于N，N-二烷基乙醇胺的合成研究工作进展总结并不多见，因此，本文分别对这两种常用的合成工艺及研究状况进行了分析总结。
system: [SYSTEM]

user: 3. 结论 本文介绍和总结了 N，N-二烷基乙醇胺化合物现有合成工艺与特点，其主要合成方法有：仲胺的羟乙基化和乙醇胺的 N-烷基化，对相关工艺的评价总结于表1。相比较而言，以环氧乙烷为原料合成N，N-二烷基乙醇胺在工业上应用较为广泛，但同时也存在一些问题，如原料较贵，生成危险系数较高等；而 Table 1 Summary of synthetic process of N，N-dialkylethanolamin 工艺路线 试剂 特点 仲胺的羟乙基化 卤乙醇 反应过程较简单，副产物卤盐，腐蚀强，排放大 乙二醇 采用负载型金属催化剂的固定床反应，技术要求较高。副产物为水，环境影响小 环氧乙烷 原子性经济高，生产成本较低，具有较好的应肜前景 乙醇胺的N，N-二烷基化 羰基物 催化加氢烷基化，副物为水，适合工业化生产，工艺较绿色 金属氢化物还原，成本较高，三废较多，多用于实验室制备。 甲酸还原剂，副产物仅为水和二氧化碳，较多应用于二甲基化反应 脂肪醇 对催化剂要求较高，醇来源广，价格低，副产物仅为水，发展前景良好。 卤代烃 反应过程较简单，副产物卤盐，腐蚀强，排放大 表1. N，N-二烷基乙醇胺的合成工艺特点总结 脂肪醇N-烷基化方法由于原料来源广、工艺简单和绿色环保等优点，在合适的催化剂作用下，即可代替环氧乙烷法，用于制备N，N-二烷基乙醇胺，是合成N，N-二烷基乙醇胺化合物的绿色化发展方向之一。 鉴于N，N-二烷基乙醇胺是一类重要的精细化工中间体，随着化学研究的不断深入，未来化工工艺必定向着绿色、高效的方向发展。合理地利用直接或间接的N-烷化方法来制取N，N-二烷基乙醇胺，在保证高选择性、高收率前提下，发展绿色经济的合成路线将会为该类化合物的进一步应用奠定重要基础。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 海域属于资源性资产，海域评估主要是将海域使用权作为一种特殊商品，采用合适的评估模式，达到资源合理体现价值的目的。目前，我国海域评估市场才刚起步，由于市场经济体系不够成熟，配套制度不够完善，海域评估工作实施中出现了一些问题。本文以海域评估理论研究和实践经验为基础着重分析了海域评估不同于土地评估的特点，进而分析了海域评估目前存在的不够完善的地方以及提出完善海域评估工作的一些建议。 关键词 :海域资源，海域价值评估，海域有偿使用，海域使用权 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 海域资源是海洋开发利用活动的重要空间，是海洋经济发展的基础载体 [ 1 ] ，浩瀚的海洋蕴藏着极其丰富的资源，具有巨大经济价值，为人类发展提供了广阔空间。随着陆域资源的日益紧缺，许多国家都将触角尽力向海洋延伸，发展海洋经济已成为各国中长期战略的重要组成部分。党的十八大报告明确提出“提高海洋资源开发能力，发展海洋经济，保护海洋生态环境，坚决维护国家海洋权益，建设海洋强国”。而随着我国海洋经济的发展壮大，对海域资源的需求势将增加。海域资源的具有鲜明的海洋特色，用途十分广泛，具有较高的经济价值，发展海洋经济必须解决的是海洋资源的价值评估问题。2013年11月13日。国家海洋局发布《海域评估技术指引》，其中明确了海域评估的概念：海域评估是指海域评估专业人员按照一定的原则、程序和方法，对特定海域的价值进行评定的活动 [ 2 ] ，目前我国海洋资源有偿使用制度已经初步建立，但是海域资源的市场化发育还不是很完善，需要探索并逐步摸清我国的海域资源价值，以市场化进行管理，因此，开展海域市场价值评估、确定海域价格，是我国完善海域资源市场化配置机制，推进海洋经济发展的客观需要。要全面实施海域有偿使用制度，实现海域资产保值增值，就必须通过科学的海域评估，来确保海域资源出让的公平和公正。
system: [SYSTEM]

user: 2. 海域评估的发展历史和目前的方法 2.1. 海域评估发展进程 我国实施海域有偿使用制度可以追溯到1991年。1991年10月，国家海洋局向国务院提交了《关于外商投资企业使用我国海域有关问题的报告》，提出了海域属国家所有，外商使用我国海域必须经我国海域主管部门批准并取得使用许可证，实行有偿使用等意见 [ 3 ] 。1993年财政部和国家海洋局制定并向沿海省、自治区、直辖市、计划单列市财政和海洋主管机构颁布了《国家海域使用管理暂行规定》，对海域使用权的转移，提出了一系列的要求，正式确认了国家对海域的唯一所有者地位，并将其作为实现国家对海域所有者权益的具体实施形式。之后各个省市也依据该文件相继颁布了海域使用金征收标准，2005年国家海洋局对全国海域使用金征收标准制定标准进行了完善，按照用海行为对海域属性的改变将海域进行了海域分类，并在此基础上采用综合分等制定海域使用金征收标准。近年来，我国学者也对海域资源分等以及以此为基础的价值评估工作进行了一系列探讨，苗丰民等对海域综合分等和海域使用金标准制定工作进行了系列总结，为之后海域质量、效益评定和价值评估提供了充实的理论基础和成熟的技术方法手段 [ 4 ] 。栾维新等实证研究了海域分等定级及特定用海类型的海域使用金测算体系，将用海类型划分为11类，制定出五个用海类型的分级指标体系和各因子的权重，应用收益还原法评估模型，实证研究了海域使用金的测算体系 [ 5 ] ；相慧等阐述了成本法及其在海域资源化配置一级市场价格评估中的测算过程，分析了成本法在海域资源化配置一级市场价格评估中的应用及完善 [ 6 ] ；梁相波对海域增值问题进行了深入研究，认为海域增值主要受投资、供求、用途的影响，存在空间和用海类型的差异，呈现波浪式上升的格局。海域增值能促进经济发展和集约用海，也易导致海域投机和增值收益分配不公，应从完善海域增值收益分配制度、建立海域评估制度和修订海域使用金标准等方面进行调控。 2.2. 海域评估的基本方法性 目前，海域评估市场比较成熟的评估方法有成本法、收益法、假设开发法、市场比较法和海域基准价修正法，这几种方法各有应用范围和特点，也各有优缺点，在二级市场评估中都有案例的应用，但目前在一级市场的评估中，成本法和海域基准价修正法应用的较多一些。 收益法是运用适当的还原利率将海域未来每年预期纯收益贴现到评估时点海域价格的方法。收益法只适用于有现实收益或潜在收益的海域及其附属用海设施和构筑物。由于海域资源一级市场的出让时，在海域开发不成熟地区所在的同地区同类型行业用海没有稳定的出租、出让收益可供参考，且还原利率难以准确确定，同时由于不同用海产业的差异较大，故在一级市场海域使用权的评估中收益法采用较少；假设开发法是在测算出海域开发完成后的总价值基础上，扣除预计的正常开发成本和利润来确定海域价格。假设开发法在二级市场以及填海造地后用于商业住宅等土地的开发行为中运用较多，对于海域使用权的评估中尤其是填海造地后用于工业用地的开发行为应用较少。因其海域开发成本的价值有时比周边工业用地基准价都高，这一是由于填海项目自身成本本来就高，且在海域使用权评估时不考虑其成陆后的海域增值行为，二是填海行为是由于土地资源和指标的稀缺性造成，有政策因素，因此，填海成本有时与成陆后的工业用地价格会出现倒挂，故在一级市场评估时假设开发法用的也较少。市场比较法是根据市场中的替代原则，将待估海域与具有替代性的，且在近期市场上已发生交易的实例比较，并对实例交易的成交价格做适当调整，以此估算价格的方法。由于目前海域市场尚不发达，一级市场出让交易较少，因此，同类用途的市场交易案例较少，故采用市场比较法评估在目前海域评估工作中受限较多；成本法是把对海域的所有投资包括海域取得费和开发费用两大部分作为“基本成本”，运用经济学理念等量资金应获等量收益的投资原理，加上这一块投资产生的利息、利润，组成海域价格的基础部分，加上海域增值收益，从而求得价格的方法。海域基准价修正法是在已有海域基准价格的地区，可用基准价格系数修正法评估海域价格，即针对评估对象价格影响因素的特殊性，利用海域价格修正系数，在同一地区同类用海的海域基准价格基础上做适当修正，以此确定海域价格。目前，在全国一些已推行招拍挂出让海域的省份都已经建立其自身的海域基准价格，同时由于在海域市场化配置的初期阶段，一些管理部门对海域评估的价格基本以高于海域基准价为参考标准，而成本法的组成中海域基准价是其中重要的一项，因此在一级市场出让的评估中成本法和海域基准价修正法的方法选择较为符合当前海域资源市场化配置的阶段。
system: [SYSTEM]

user: 3. 海域评估的特点 由于海域的开发活动起步较迟，尤其是海域的市场化出让是近年刚开始实施的行为，海域评估的实施在许多地方都借鉴了土地评估的特点和制度，但是由于海域具有流动性、复杂性的特点，海域的评估又具有自身的特点。 3.1. 海域评估的复杂性 海洋与土地相比，其最大的特点就是其水体的流动性和资源的未知性因素。由于水动力的原因，海域的资源开发不像土地一样固定和可知。不同海域同一时间有不一样的海域资源价值，同一海域不同时间也有不一样的海域开发价值。因此，海域评估就不像土地的评估那么单一，需要考虑整体、系统性的因素，比如：海域开发的环境影响、水动力影响以及因此所延伸的利益相关者群体需要的补充经费；还有海域生态资源与土地相比更为复杂，更难于鉴定完整，同时其生物的系统性更强，生态损失如何补充比土地相比难度更大，更具有不确定性因素，对于海域生态资源的评估目前缺少成熟的市场以及相应的配套措施，也缺少海域资源价值的标准和操作规程，难以统一与缺乏规范管理，这就造成海域评估工作中技术难度也更大；另外海域评估在实施中应用到许多海域审批的法律法规，对海域审批流程以及海域政策处理的把握对于海域评估的方法选择、价格导向等都有决定影响因素，这就对海域评估工作人员提出了更高的要求，对其专业背景、工作背景等要求更为严格。 3.2. 海域评估影响因素多样性 影响海域价值评估的因素总结起来有区位条件、自然因素（地质地貌特征、气象、气候条件、水文条件、生物因素、自然资源等）、社会经济因素（经济因素、技术因素、人口和城镇因素、文化因素、政治因素）、资源环境的变迁和因素量化的方法等。最终归于技术导则的体现则首先要明确的是其海域的分等，进而要明确其使用类型和用海方式。同一分等区域同一用海方式，如果用海的类型不同，其评估的价格也会不同，同一产业类型不同的用海方式，其价格也会不同。说明海域开发价值不仅与海域的产业类型有关，与海域出让时候采用的用海方式也息息相关，而海域的分类总共有9个一级类和30个二级类，用海方式则有5个一级类和20个二级类，，可见海域的开发无论从产业类型还是其构造方式来说都是十分复杂的。而海域使用金的收取标准除了反映区域性特征的用海等级以外就是用海方式的界定，这就导致出让海域的价值具有复杂性和多变性，与土地价值评估相比，土地的价值更多与土地的用地性质这一单一条件相关联。海域更多的体现个体价值差异而土地则更多体现区域价值差异。
system: [SYSTEM]

user: 4. 海域评估工作目前存在的问题 4.1. 海域评估的配套工作不够完善 我国的海域评估工作起步较晚，2013年11月13日，国家海洋局发布《海域评估技术指引》标志着我国的海域评估工作正式进入推进阶段。《海域评估技术导则》对海域价格的评估方法、原则等都做了细致的规定。但是，目前的评估指引中基本是针对海域在二级市场的出让中编制的，对于海域一级市场的配置考虑的较少，比如在成本法核算中，海域评估将工程可行性研究报告也纳入成本核算中，但在一级市场出让制度下，工程可行性研究应是出让结束立项阶段方才实施的专题，这就给海域一级市场的出让评估工作带来一定的困惑。以浙江省为例，该省在2013年出台《浙江省海域使用管理条例》后要求所有经营性的海域项目要海域招拍挂形式出让，同时要对海域进行价格评估。但是根据《浙江省海域使用管理条例》中的要求，海域在出让阶段是未立项阶段，因此就没有工程可行性研究和环境影响评价等工作的介入，但在海域评估指引中，在以成本法进行海域评估计算过程中则明确要求要讲这些专题都纳入到成本中。而《浙江省海域使用管理条例》中政府在出让时候唯一涉及的用海专题经费只有海域使用论证、海域价格评估等前期专题，如果将工可等专题纳入前期成本中势必导致产生资金的利息和利润，无形增加了后期竞拍企业的成本，同时政府对于利息、利润的产生经费也不易处理。因此，海域评估工作的配套法律法规及规范完善应该给予重视，同时也急待解决和提高。 总之，海域评估工作，需要海洋管理部门不仅在规范、制度的创新上有所突破，同时也需要抓紧完善海域评估技术导则规范等的配套完善，对于一些海域评估导则和规范要应给予进一步的修改，要与工程实施相结合，理论联系实施，扎实推进海域资源的市场化配置工作米。 4.2. 海域评估工作的独创性不够 我国的海域评估工作相对于土地评估工作来说起步较晚，很多经验和制度都是延用了土地评估工作的经验和制度。如评估工作的方法选择、评估工作的原则分析以及一些评估工作的研究思维等等，这能保证海域评估工作在前人的研究基础上快速地建立起自己的评估体系，但同时也带来了一些问题：由于海域审批和土地审批的制度在一定程度上存在异同，海域的审批和出让有自身的特点，因此照搬照抄土地评估的一些经验对于海域评估来说存在一些问题，尤其是在市场未发育的情况下，海域资源的稀缺性与土地资源的稀缺性不同，无法再价值上得到直接反映，很多地方的海域在一级市场出让或者是二级市场转让时受让方基本都是单一化的，其出让形式也基本以挂牌为主，而不是招标。这就让海域的价格评估很难达到预期的一个价值体现，因此，海域评估中成本法也是目前引用地较多的一种办法，一些地方在海域出让的价格评估中，也仅要求海域的评估价格和底价不得低于海域基准价即可。而海域收益的不确定性，海域市场的不成熟性以及海域审批流程与土地的差异性也导致海域评估的其他一些方法在现行阶段或多或少存在一定的局限性。因此，海域评估工作既要借鉴土地评估工作的丰富经验，同时又要考虑海域管理工作自身的独特性，要有所优化相关方法和制度，才能更好地完善海域评估工作，推进我国海域市场化配置工作的进程
system: [SYSTEM]

user: 5. 海域评估工作的完善 5.1. 完善海域评估的规范纲要编制工作 随着海域开发的全面推进和海洋经济的快速发展，海域使用权的出让和转让工作也日益增多。在海域使用权的招标、拍卖和转让、出租、抵押等海洋经济活动和海域资产处置中，海域评估的作用越来越为重要。但如前所述，海域的评估和土地的评估具有不同的特殊性，市场发育程度不同、方法选择基础不同、海域和土地审批流程不同，因此，如何在这样的思路下研究海域价格评估等基础工作的改进，编制与海洋资源市场化配置下相配套的，具有海域特点的海域评估导则、规范等显得有尤为重要。笔者认为应从海域评估的管理制度、海域评估机构、海域评估人员的整体素质提升等入手，探索建立起适应我国海域特点的海域评估制度。 5.2. 建立健全海域评估技术方法 海域资源的开发具有复杂性和不确定性因素，同时投资较大，风险较难以控制，因此在推进海域评估工作时，首先要建立健全海域基准价制度，根据各个地方的实际情况，制定海域基准价格，从一定时期内正确反映海域使用权价格的平均或者是最低价格水平，保证国有资产不流失，使得海域使用金的收取大体公正合理。对于宗海价格的评估要做到结合地方的特点和地方财政、国土等部门的相关意见对海域评估指引等规范进行优化完善，既符合技术要求和准则，又能让当地政府确实可行。以土地出让为例，一些地区在填海造地工程中要求达到“海域直通车”的要求，即海域一次出让后即可换发土地证，期间不再征收土地使用金。而一些县、区级的国土部门是设区的市直辖的，这就涉及到土地使用金的流失是市级财政还是县、区级财政的问题，在海域的评估中除了规范编制外，也要考虑海域评估工作实施推进中，这些历史遗留问题如何采纳解决的问题。 5.3. 完善海域使用金的收取制度 海洋资源的市场化出让要求从海域资源资产及其开发利用收益的角度去进行海域价值评估工作。目前，我国的海域一级市场出让的手段不够丰富，一些地方的规定基本上是海域评估的价格最低要求不得低于海域基准价格，也即以海域使用金为评估的一个标准。这就很难从海域资产和收益的层面去客观反映海域的价值性。另外，海域使用金的制定标准时间较早，当时海域资源的开发基本处于起步阶段，海域使用金已不能完全反映当前和今后一段时间内涉海行业的收益水平，因此，需要及早开展海域使用金的修订工作，在切实调研数据、定期更新的情况下，形成动态、真实的海域使用金标准化管理制度。
system: [SYSTEM]

user: 6. 结论 海域有偿使用制度改革的逐步推进使我国海域市场初步形成 [ 7 ] ，处于起步阶段的海域使用权价格评估工作虽然已取得显著成绩，但是仍存在很多问题，海洋资源的市场化配置是一个很短暂的过程，与土地相比，其制度存在一些问题，也有一些不足。但是海域评估工作对于进一步完善海域市场的出让，实现海域资源的经济效益最大化具有重要的作用，是政府通过宏观深化海域使用制度改革，建立统一、公平、规范有序的海域市场，充分发挥海域资源市场化配置的基础性作用，体现统一开发、统一用海，实现海域资源的可持续性发展的需要。因此分析我国目前的海域资源评估工作存在的问题及如何完善，对于不断深化提升我国海域资源市场化配置具有重要的意义。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 本文对煤炭上市公司资本结构与公司绩效的关系进行实证研究，选取2009~2011年相关数据，运用PASW Statistics 18软件进行统计分析，研究结果表明：煤炭上市公司资本结构对公司绩效存在显著负向影响。并针对煤炭上市公司优化资本结构提出了政策建议。 关键词 :煤炭上市公司，资本结构，公司绩效 Copyright © 2017 by author and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 煤炭作为我国的主要能源，不仅是燃料动力的主要来源，也是重要的化工原料和民用能源。煤炭行业在我国经济建设和社会发展中占据重要地位。 近年来，随着国家经济增速放缓，煤炭需求也受到影响。此外，受进口煤炭价格冲击，以及煤炭市场需求的整体萎缩和下滑，尽管国内主要产煤省份煤炭产量增加，但煤炭行业利润却在明显下滑。据国家统计局及中国煤炭运销协会相关数据统计显示，2012年1~7月份山西煤炭产量5.3亿吨，同比增加4932万吨，增长10.2%。但煤炭行业实现利润232.4亿元，同比减少7.6亿元，下降3.2%。中国7月份煤炭消费量仅为2.95亿吨，较上年同期下降2.7%。2012年5月以来，煤炭价格持续下跌，煤炭市场进入严冬时期。 为了促进煤炭企业顺利度过此次严冬，煤炭企业需要从各方面进行自我调整。据相关研究表明，资本结构会对公司绩效产生影响，煤炭企业可以考虑从资本结构出发，努力调整与优化资本结构，借助资本市场提高公司绩效。 本文以煤炭上市公司为研究对象，通过实证研究探讨煤炭上市公司资本结构与公司绩效的关系，旨在为促进煤炭企业度过此次严冬提出相关政策建议。
system: [SYSTEM]

user: 2. 资本结构与公司绩效关系研究文献综述 2.1. 文献综述 Frank和Goyal [ 1 ] (2003)通过分析美国1950~2000年公共贸易企业近20万个观测变量的庞大数据，结果发现账面价值财务杠杆比率与公司绩效之间呈正相关。Boyle and Eckhold [ 2 ] (1997)通过实证研究发现，资本结构对公司价值有正向影响。Booth [ 3 ] (2001)选取十个发展中国家的上市公司作为研究对象，结果表明资本结构和公司绩效之间都存在着高度显著的负相关关系。Hirota [ 4 ] (1999)实证研究也发现在大多数发展中国家中资本结构对公司价值呈负向影响。 李义超和蒋振声 [ 5 ] (2003)应用混合数据采用截面分析方法，对我国上市公司资本结构与企业绩效的关系进行了实证研究，得出它们之间负相关的结论。肖作平 [ 6 ] (2005)采用非金融上市公司面板数据，应用三阶最小二乘法，结果表明中国上市公司资本结构与公司绩效显著负相关。张兆国、何威风和梁志钢 [ 7 ] (2007)通过回归模型分析得出资产负债率、流动负债率以及长期负债比例均与全部样本公司绩效呈负相关关系。汪旭辉和徐健 [ 8 ] (2009)以我国流通服务业上市公司为研究样本，结果发现资产负债率对公司绩效存在显著负向影响。 汪辉 [ 9 ] (2003)选取1998~2000年A股上市公司数据，结论显示企业的负债率与公司价值正相关。王凤 [ 10 ] (2007)以24家旅游上市公司2003~2005年的年报数据为样本窗口，构建多元线性回归模型，结果表明其资本化率与公司绩效呈显著的正相关关系。李庚寅、阳玲 [ 11 ] (2010)以中小企业为研究对象，通过实证得出资产负债率与企业盈利能力正相关的结论。 赵英军、俞辉(2007) [ 12 ] 以浙江上市公司为例， 对企业负债如何影响企业绩效进行了实证分析。结果表明资本结构与公司绩效呈倒U型关系，即只是在一定负债率水平区间内，负债才有提高企业经营绩效的作用。 2.2. 文献评述 对于资本结构的研究以前主要集中在资本结构的影响因素以及资本结构的经济后果方面。由上可知，近年来，针对资本结构对公司绩效的影响研究日渐增多。但是，不管是国内研究还是国外研究，由于所选研究样本、研究方法和衡量指标的差异，资本结构与公司绩效之间究竟是何关系至今没有定论。 此外，资本结构对公司绩效的影响也会因行业不同而产生较大差异，因此，以行业作为研究对象，研究结果将更具针对性。与此同时，以煤炭上市公司作为研究对象的相关研究也颇少。本文以煤炭上市公司为研究对象，通过实证研究探讨资本结构与公司绩效的关系，并基于当前煤炭行业萧条背景下，提出相关政策建议。
system: [SYSTEM]

user: 3. 研究设计 3.1. 指标选取 一般而言，绩效衡量指标主要有净资产收益率与托宾Q值。由于净资产收益率存在盈余管理的可能性，并且考虑到中国上市公司的股票价格往往偏离其价值，托宾Q值不能真实反映公司的绩效。本文以总资产主营业务利润率来衡量公司绩效 [ 7 ] ，此指标可以在一定程度上缩小公司利用净资产收益率进行盈余管理的空间，同时可以避免负债融资在数学上与托宾Q值的同向变动。与此同时，选取资产负债率与长期负债率两个指标来衡量资本结构。该指标是评价公司负债水平的综合指标。同时也是一项衡量公司利用债权人资金进行经营活动能力的指标，也可以衡量企业在清算时保护债权人利益的程度。 此外，考虑到煤炭上市公司在生产经营过程中可能会产生规模效应，以及公司在不同成长机会下其资本结构对公司绩效的影响，本文引入公司规模、公司成长性这两个指标作为控制变量进行研究。具体变量释义见表1。 3.2. 假设提出 本文提出如下假设： H1：资产负债率对公司绩效存在负向影响。 H2：长期负债率对公司绩效存在负向影响。 Table 1 Variable definition tabl 变量类型 变量名称 变量代码 变量定义 因变量 总资产主营业务利润率(%) MAP 主营业务利润/平均总资产 自变量 资产负债率(%) DA 总负债/总资产 长期负债率(%) LDA 长期负债/总资产 控制 变量 公司规模(万元) SIZE 公司年末总资产的对数 公司成长性(%) GROW 总资产增长率 表1. 变量释义表 3.3. 模型构建 根据本文研究假设及选取的指标，建立回归方程以探讨资本结构与公司绩效之间的关系，回归方程如下： 模型中 、 、 、 分别代表第i家公司第t年的资产负债率、长期负债率、公司规模、公司成长性。 3.4. 样本选取及数据来源 本文所用财务数据来源于CSMAR系列研究数据库系统。本文以沪深两市煤炭上市公司为研究对象，通过剔除ST、数据不全以及上市未满3年的公司，最终选用26家煤炭上市公司进行研究。考虑到样本量较少，本文选取2009-2011年共三年的数据，最终确定52个样本数据。
system: [SYSTEM]

user: 4. 数据分析 本文采用PASW Statistics 18对样本数据进行统计分析。统计分析主要包括描述性统计、相关分析与回归分析。 4.1. 研究变量描述性统计 表2列出了变量的描述性统计结果。从资本结构看，资产负债率均值为50.49%，国际上一般公认不高于60%的资产负债率比较好，所以中国煤炭上市公司资产负债率均值表现相对较好。长期负债率均值为15.31%，说明中国煤炭上市公司相对偏好于短期负债。此外，资产负债率波动范围为17.44%~80.59%，长期负债率波动范围为0.18%~46.20%，这说明不同煤炭上市公司对资本结构的选择上也存在差异。 4.2. 相关分析 在控制了公司规模与公司成长性的基础上，中国煤炭上市公司资本结构与公司绩效的相关分析结果见表3。 Table 2 Descriptive statistics of variable 变量代码 N 极小值 极大值 均值 标准差 MAP 52 2.71 416.17 21.34 56.27 DA 52 17.44 80.59 50.49 15.47 LDA 52 .18 46.20 15.31 9.01 SIZE 52 4.56 7.60 6.18 .56 GROW 52 5.15 1804.39 74.93 253.87 表2. 变量的描述性统计 Table 3 Analysis results of capital structure and corporate performance correlatio 控制变量 变量代码 DA LDA SIZE & GROW MAP 相关性 −.424 ** −.463 ** 显著性(双侧) .002 .001 df 48 48 表3. 资本结构与公司绩效的相关分析结果 ** 在0.01水平上显著相关 如表3所示，资产负债率与公司绩效衡量指标总资产主营业务利润率的相关系数为−0.424，双侧检验的P值为0.002，因此资产负债率与公司绩效的关系在0.01的显著性水平上体现为显著负相关。长期负债率与总资产主营业务利润率的相关系数为−0.463，双侧检验的P值为0.001，因此长期负债率与公司绩效的关系在0.01的显著性水平上体现为显著负相关。因此，通过相关分析得出资本结构对公司绩效存在显著负向影响。 4.3. 回归分析 资本结构与公司绩效的回归分析结果见表4。 如表4所示，经回归分析得出的回归方程为： 资产负债率与总资产主营业务利润率的回归系数为-0.3，P值为0.047 (P < 0.05)，因此在0.05的显著性水平上两者呈显著负相关关系。长期负债率与总资产主营业务利润率的回归系数为−0.677，P值为0.029 (P < 0.05)，因此在0.05的显著性水平上两者呈显著负相关关系。整体而言，进一步佐证了中国煤炭上市公司资本结构对公司绩效的负向影响。
system: [SYSTEM]

user: 5. 结论及建议 5.1. 研究结论 在控制了公司规模、公司成长性这两个公司特征因素的基础上，通过以上对统计数据的相关分析与回归分析，分析结果表明：资产负债率对公司绩效存在显著负向影响，长期负债率对公司绩效存在显著负向影响，因此资本结构对公司绩效存在显著负向影响。本文研究假设得到证明。 5.2. 政策建议 基于以上研究结论，本文提出如下政策建议。 第一，创造良好的宏观环境。 首先，建立现代企业制度，鼓励煤炭上市公司自主经营、自负盈亏、自我发展。其次，完善法律法规体系，完善上市公司监管机制，建立有效的偿债保障机制，保护股东利益，促进融资活动开展。最后，完善和健全破产制度，破产机制会有利于提高公司经营动力，同时可以避免绩效很差情况下的无效率运营。 第二，优化融资结构与债务结构。 Table 4 Analysis results of capital structure and corporate performance regressio 指标 非标准化系数 标准系数 t Sig. β 标准误差 常量 −24.942 31.562 −.083 −.790 .433 DA −.300 * .177 −.108 −1.696 .047 LDA −.677 * .300 .088 −2.258 .029 SIZE 8.953 4.791 .992 1.869 .068 GROW .220 * .011 −.083 20.820 .000 表4. 资本结构与公司绩效回归分析结果 a. 因变量: MAP. * 在0.05水平上显著相关 合理安排融资结构，基于效益—成本—风险原则正确处理好内部融资、债务融资与权益融资之间的关系。煤炭上市公司在当前行业背景下，应适当降低负债，可以考虑权益融资与内部融资。并且，在现有负债水平上，应优化债务结构，提高负债资金的使用效率。 第三，提高财务管理水平，增强盈利能力。 煤炭上市公司应提高财务管理水平，能够根据自身需要与行业现行环境合理安排资本结构，并为资本结构的调整留有余地，保持财务灵活性。此外，还应主动引进吸收先进技术和管理经验，合理使用融通资金创造利润，提高煤炭上市公司盈利能力，实现可持续发展。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 为有效评价印染废水对海洋生物的毒性效应和代谢作用影响，本研究以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为受试生物，以不同浓度的亚甲基蓝溶液模拟印染废水，试验采用静水法分别研究其对菲律宾蛤仔的24 h急性毒性效应和9 h内对菲律宾蛤仔的呼吸代谢影响，以期为印染废水排放相关标准的制定提供参考。急性毒性研究表明：模拟印染废水对菲律宾蛤仔24 h的半数致死浓度LC 50 为8.56 mg/L。呼吸代谢研究表明：亚甲基蓝浓度与菲律宾蛤仔的耗氧率成反比，水体中氨氮含量随着时间的推移越来越高，相同时间段水体中的氨氮含量随着亚甲基蓝的浓度增加而增加。 关键词 :亚甲基蓝，菲律宾蛤仔，急性毒性，代谢作用 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 进入21世纪以来，我国染料和印染工业发展迅速，染料产品的年产量已达90万t，占全球总产量的60%左右 [ 1 ] 。随着染料废水排放量的迅速增加，大量难以生化降解处理的有机物污染物被排放进入水体，造成了严重的水体污染。据估计，在染料生产过程中，约有90%的无机原料和30%的有机原料被排放进入水体。染料废水具有成分复杂、有机物浓度和色度高、难生化降解等特点 [ 2 ] 。这不仅对水生生物的生存带来危险，同时也对当地居民的生活甚至是生命带来了很大的危害。目前学者在印染废水对海洋生物质量的影响方面已进行了探索研究 [ 3 ] [ 4 ] 。 亚甲基蓝在印染废水中大量存在，它是常见的染料和染色试剂。为探明这一大量存在于印染废水之中的有机物对生物的潜在威胁，国内外学者就亚甲基蓝在水生生物中的残留检测方面进行了报道，也在亚甲基蓝在动物体内的毒性作用及呼吸代谢影响进行了相关研究。主要集中在对水生生物的急性毒理研究，如刘建勇等 [ 5 ] 在亚甲基蓝对南美白对虾(Pemaeus vannamei)幼体的毒性研究中发现其24 h半数致死浓度为2.56 mg/L；徐亚超 [ 6 ] 进行了亚甲基蓝对孔雀鱼(Poecilia Reticulata)的急性毒性试验，殷华等 [ 7 ] 求得亚甲基蓝对水丝蚓(Limnodilus hoffineisteri)的24 h半数致死浓度为31.6 mg/L。此外，呼吸与排泄是动物进行能量代谢的基础生理活动，它不仅反映了动物的生理状态，也反映了环境条件的影响。耗氧率和排氨率及其变化规律作为呼吸代谢研究的重要内容，一直受到人们的重视 [ 8 ] 。有关印染废水或亚甲基蓝对菲律宾蛤仔的呼吸代谢作用影响尚未见报道。 随着纺织、印染产业的发展和印染废水泄露事故和不规范排放事件逐年增多，加强印染废水的生物毒性作用研究和试验生物的筛选具有十分重要的意义。本文通过静水试验研究亚甲基蓝对菲律宾蛤仔的急性毒性作用和呼吸代谢作用，既可为筛选适于监测水体中印染废水污染的受试动物提供依据，又可为贝类动物的食品安全影响提供参考。
system: [SYSTEM]

user: 2. 实验材料与方法 2.1. 实验材料 实验中使用盐度计(EUTEOH Instruments SAT6+)测量海水盐度、pH仪(Sartorius PB-10)测量实验溶液的pH和温度。 实验对象为菲律宾蛤仔，选择大小均匀、饱满、壳长(3.41 ± 0.2) cm、壳宽(2.30 ± 0.2) cm、湿重(8.60 ± 2.0) g范围内的健康个体进行分组实验，数量将近200个。实验前简单清洗，使用天然海水驯养2 h。挑选活性好的菲律宾蛤仔进行正式实验。 实验试剂为广泛应用于印染行业当中、在印染废水中大量存在的亚甲基蓝。 实验海水取自漳州港海域天然海水。 2.2. 实验方法 2.2.1. 菲律宾蛤仔24小时急性毒性实验方法 实验步骤如下： a.实验设置5个浓度组和1个对照组，每个浓度组设3个平行组。根据预实验结果，在最小100%死亡浓度与最大无死亡浓度范围内，按等间距设置，分别设置3 mg/L、6 mg/L、9 mg/L、12 mg/L和15 mg/L 5个浓度组。 b.正式实验时先配置亚甲基蓝标准储备液(浓度为100 mg/L)，而后分别添加天然海水稀释至上述5个浓度。使用一次性餐盒(500 mL)作为实验组的反应容器，实验在水温为(24.7 ± 2.0)℃、pH为8.09、盐度为24‰的条件下进行，每个平行组放置10只菲律宾蛤仔。实验期间保持观察，并于12 h通过应激行为和外壳的开张情况来判断实验对象是否死亡并记录，及时取出死亡个体。24 h染毒结束，对餐盒当中的菲律宾蛤仔进行生理活性观察，同时进行死亡记录。 2.2.2. 呼吸代谢实验方法 基于24 h急性毒性试验结果，9 h呼吸代谢实验中亚甲基蓝浓度分别设置为2 mg/L、4 mg/L、6 mg/L和8 mg/L，同时设置一组空白对照。溶解氧(DO)的测定采用碘量法，氨氮的测定采用纳氏试剂比色法，根据试验始末溶解氧及氨氮浓度变化计算耗氧率和排氨率。实验期间水体保持密闭，避免空气中的氧气对实验结果造成影响，实验过程中菲律宾蛤仔没有发生个体死亡的现象。实验在水温25℃ ± 0.5℃、pH为7.5、盐度24‰的条件下进行，分别在3 h、6 h和9 h这3个时间段对试验水样进行溶解氧和氨氮的测量，记录实验数据。
system: [SYSTEM]

user: 3. 实验内容与结果 3.1. 亚甲基蓝对菲律宾蛤仔的毒性作用 黄南建 [ 8 ] 在南海流花原油和0#柴油对3种水产经济种类的毒性效应研究中指出，菲律宾蛤仔的中毒表观症状有：双壳张开，斧足外伸，或出现假死状态。因此本研究观察时将双壳张开刺激后不再闭合、斧足伸出刺激后无法自由伸缩及双壳紧闭单独捡出放回自制的实验海水中也无生命反应的菲律宾蛤仔记为死亡个体。除了死亡，实验期间同时观察菲律宾蛤仔的其他肉眼可识别的生理反应，通过对菲律宾蛤仔的观察记录，将12 h及24 h的结果整理如下表1。 3.2. 亚甲基蓝对菲律宾蛤仔的致死效应及其与不同海洋生物的毒性效应比较 美国试验与材料学会(ASTM)提出了水生生物急性毒性试验质量控制要求：对照的死亡率 ≤ 10%，本 Table 1 Observation records and death statistics of Ruditapes philippinarum under 12 h， 24 污染物 浓度组(mg/L) 平均死亡率(%) 12 h观察 24 h观察 对照组 0 3.3% 斧足全部都伸出来，生命力活跃，无死亡个体 除死亡个体，其余生命力活跃，斧足伸出，溶液清澈 亚 甲 基 蓝 3 6.7% 斧足全部都伸出来，生命力活跃，无死亡个体 死亡个体双壳紧闭，内脏变蓝色，其余生命力活跃，斧足伸出 6 46.7% 斧足全部都伸出来，生命力活跃，无死亡个体 存活个体伸出斧足，活性较差，死亡个体双壳紧闭，足无法收回壳内，内脏变蓝色，半数个体死亡 9 40.0% 斧足全部都伸出来，生命力活跃，无死亡个体 存活个体伸出斧足，活性较差，死亡个体双壳紧闭，足无法收回壳内，内脏变蓝色，半数个体死亡 12 90.1% 伸出短斧足，反应慢，活性较差，无死亡个体 存活个体极少，活性极差，应激触碰，缓慢伸缩斧足，死亡个体大多双壳紧闭，足无法收回壳内，部分个体开壳死亡，内脏变蓝色 15 76.7% 伸出短斧足，反应慢，活性较差，无死亡个体 存活个体极少，活性极差，应激触碰，缓慢伸缩斧足，死亡个体大多双壳紧闭，足无法收回壳内，部分个体开壳死亡，内脏变蓝色，溶液发臭且浑浊 表1. 菲律宾蛤仔12 h和24 h活性及死亡情况 文的试验满足上述要求，对照组死亡率全部 ≤ 10%。利用Excel对菲律宾蛤仔的死亡个数和亚甲基蓝溶液不同浓度组作相关线性分析，结果如下图1及表2所示。通过直线内插法求得亚甲基蓝溶液对菲律宾蛤仔染毒24 h的半数致死浓度为—8.56 mg/L。进一步分析可知，随浓度的增加，死亡个数增长，变化趋势呈现正相关。结合实验过程中观察得知：亚甲基蓝的浓度在低剂量的条件下，其表现与对照组的菲律宾蛤仔的生理活性没有明显区别，但浓度达到一定的程度时，菲律宾蛤仔会出现大量的死亡。由此可见，亚甲基蓝本身具有毒性，该物质会对水生生物造成一定的危害，对于排放入水体应该给予特别注意。 本文研究结果表明亚甲基蓝混合溶液对菲律宾蛤仔24 h LC 50 为8.56 mg/L，高于其对南美白对虾(Pemaeus vannamei Boon) [ 5 ] 24 h毒性的半数致死浓度，而低于对水丝蚓的半数致死浓度（表2）。 3.3. 亚甲基蓝对菲律宾蛤仔代谢作用的影响 3.3.1. 亚甲基蓝对菲律宾蛤仔耗氧率的影响 根据碘量法测量水样中的溶解氧，标定硫代硫酸钠方法进行滴定并记录与计算，不同时间的水样中溶解氧浓度，试验结果如图2所示。 由图2可以看出各浓度组的起始溶解氧浓度大致相同。不同浓度组随时间推移，水样中溶解氧均逐渐下降。而在同一时间段内，高浓度亚甲基蓝的水样中溶解氧浓度下降速率低，表明高浓度亚甲基蓝溶液使菲律宾蛤仔的呼吸速率降低。 根据耗氧率的计算公式计算出耗氧率如图3所示。由图3可以看出在3 h、6 h和9 h相同时间段内浓度越高的亚甲基蓝所在的水样中的菲律宾蛤仔的耗氧率越低，表明在一定浓度范围下菲律宾蛤仔的耗氧速率和亚甲基蓝浓度成反比。 3.3.2. 亚甲基蓝对菲律宾蛤仔氨氮排放的影响 采用纳氏试剂分光光度法测定水样的氨氮含量，测定并记录空白组和2 mg/L、4 mg/L、6 mg/L和8 mg/L亚甲基蓝溶液下水样中的氨氮吸光度。由此计算出不同浓度组分别在3 h、6 h和9 h时水体中氨氮含量，根据试验结果绘制水体中氨氮含量的柱状图，结果如图4所示。由图4可以看出同一个时间段亚甲基蓝浓度越高菲律宾蛤仔的氨氮排放量越多，同一浓度的亚甲基蓝随着时间的推移菲律宾蛤仔的氨氮排放量越多。 Table 2 Comparison of acute toxicity of methylene blue on different specie 受试物 LC 50 参考来源及时间 菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum) 24 h LC 50 为8.56 mg/L 本文，2016 南美白对虾(Pemaeus vannamei Boon) 24 h LC 50 为2.56 mg/L 48 h LC 50 为4.06 mg/L 刘建勇等 [ 5 ] ，2005 孔雀鱼(Poecilia Reticulata) 96 h LC 50 为273.5 mg/L 徐亚超 [ 6 ] ，2014 水丝蚓(Limnodilus hoffineisteri) 24 h LC 50 为31.6 mg/L 殷华 [ 7 ] ，2007 表2. 亚甲基蓝对不同生物的急性毒性效应对比 图1. 亚甲基蓝混合溶液对菲律宾蛤仔的24 h急性致死效应 图2. 不同时间的水样中溶解氧浓度 图3. 不同浓度组在3 h、6 h、9 h时的耗氧率 图4. 不同浓度组分别在3 h、6 h、9 h时水体中氨氮含量