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user: 4. 讨论 NAFLD的发展是一个相对较复杂的过程，目前还没有有效的根治方法。根据其病变，由轻到重可以分为单纯性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis， NASH)和肝硬化三个不同的病理阶段。NASH是NAFLD的一个重要中间阶段，对NAFLD疾病的进展起着决定性的作用。如果NASH预后不佳时则可增加肝硬化的发病率，因此，NASH是药物干预和治疗的关键时期(施军平和范建高，2010) [ 9 ] 。许多膳食成分具有无毒无副作用的特点、同时能够通过多靶点进行有效的调控等优点，因此，膳食干预是目前最常用的控制NAFLD发生发展的手段。多酚类化合物是广泛分布于各种膳食如水果、蔬菜、谷物中的化合物，具有较强的抗氧化能力，同时还具有降血脂、降血糖、减肥、抗炎等多种调节作用(Molino et al.， 2016; Gato et al.， 2013; Luximon-Ramma et al.， 2006; Terra et al.， 2011) [ 3 ] [ 10 ] [ 11 ] [ 12 ] 。大量的研究表明，许多多酚类化合物如葡萄籽提取物、蓝莓多酚、肉桂多酚、白藜芦醇、大豆异黄酮、儿茶素以及姜黄素等对脂肪细胞的分化和脂质代谢具有重要的调节作用，但因其化合物结构不同所以效果也不一(Molino et al.， 2016; Xiao et al.， 2013) [ 3 ] [ 13 ] 。 最近的研究阐明，RES对许多种肝脏疾病都有治疗效果，对肝功能具有良好的保护作用。RES通过减少脂肪沉积、坏死以及由缺血所诱导的凋亡显著提高肝脏移植后大鼠的存活；RES能抵抗化学物质、胆汁郁积以及酒精所引起的损伤而保护肝脏；RES还能改善葡萄糖的新陈代谢和血脂，减少脂肪纤维化 Table 3 Effect of resveratrol on liver index and liver lipids in NAFLD mic 检测指标 空白对照组 高脂模型组 白藜芦醇预防组 肝脂指数(%) 3.86 ± 0.52 7.68 ± 0.29 a 5.74 ± 0.43 ab TG (mmol/L) 12.46 ± 2.23 43.32 ± 15.76 a 27.45 ± 12.3 ab TC (mmol/L) 19.54 ± 4.30 143.27 ± 35.49 a 97.58 ± 22.38 ab LDL-C (mmol/L) 10.39 ± 2.03 165.86 ± 56.39 a 128.41 ± 49.96 a HDL-C (mmol/L) 7.12 ±0.33 5.38 ± 0.63 a 5.89 ± 0.29 a 表3. 白藜芦醇对NAFLD小鼠肝脂指数和肝脂的影响 结果显示为平均值 ± 标准差，n = 6，其中上标a表示与正常组比差异显著(p < 0.05)，b表示与高脂模型组比差异显著(p < 0.05)。 Table 4 Effect of resveratrol on seral cytokines in NAFLD mic 检测指标 空白对照组 高脂模型组 白藜芦醇预防组 IL-2 (pg/mL) 10.32 ± 1.38 27.25 ± 7.54 a 16.33 ± 4.02 ab IL-6 (pg/mL) 84.70 ± 10.34 164.21 ± 25.31 a 105.21 ± 16.48 ab IL-1β (pg/mL) 60.29 ± 8.21 91.65 ± 19.67 a 86.35 ± 10.26 a TNF-α (pg/mL) 78.52 ± 14.92 186.45 ± 31.15 a 130.65 ± 19.67 ab 表4. 白藜芦醇对NAFLD小鼠血清中细胞因子的影响 结果显示为平均值 ± 标准差，n = 6，其中上标a表示与正常组比差异显著(p < 0.05)，b表示与高脂模型组比差异显著(p < 0.05)。 和脂肪变性；此外，RES还能改变脂肪细胞脂肪酸的组成(Wu et al.， 2005， 2006a and 2006b; Faghihzadeh et al.， 2015) [ 14 ] [ 15 ] [ 16 ] [ 17 ] 。因此，在本研究中，通过高脂饮食与腹腔注射四氯化碳相结合诱导建立小鼠NAFLD模型，通过一定剂量的RES干预研究了RES对NAFLD的预防作用。在NAFLD的发生及发展过程中常伴随有高脂血症，高脂血症是动脉粥样硬化和冠心病等心血管疾病的重要危险因素，因此降低血脂水平有着重要意义。本研究结果显示，灌喂RES可显著降低高脂模型组小鼠血清中的血脂成分，包括TC、TG和LDL-C，同时显著升高HDL-C的含量，虽与正常对照还存在差异，但说明RES在一定程度上调节血脂相关成分的水平，并降低发生高脂血症的风险。在其他的类似研究中，也均显示RES能显著降低血脂和/或肝脂水平(任平等，2011；Ali et al.， 2016) [ 18 ] [ 19 ] 。在王晓珂等人的研究中，先用高脂诱导大鼠NAFLD后，再用RES进行干预治疗，也能显著降低TC、TG和LDL-C的水平，升高HDL-C的水平(王晓珂等，2013) [ 20 ] 。由此可见，RES不仅对NAFLD具有预防作用，还可有效治疗高血脂症诱发所导致的其余症状。 转氨酶AST和ALT主要存在于肝细胞中，正常情况下AST和ALT在血液中的水平非常低，而当肝脏受到损伤时，肝细胞中的转氨酶被释放出来，从而导致血清转氨酶水平升高，而血清AST和ALT的活性是评价肝功能的两项重要指标。在本研究中，高脂动物模型组血清中的AST和ALT水平均显著升高一倍左右。经口给予RES显著降低了血清中AST和ALT的水平，这说明RES能在一定程度上降低高脂对肝脏造成的损伤，从而改善肝功能。 高脂诱导能导致炎性细胞因子的升高，肝内B (intrahepatic B， IHB)可诱导细胞因子IL-6、TNF-α等的分泌而参与NAFLD的发生(Zhang et al.， 2016) [ 21 ] 。脂肪肝发病过程中脂质大量堆积于肝脏，当脂质长期大量蓄积时则会发生脂肪变性，可诱发促氧化物质增多并使抗氧化物质减少，从而导致氧应激，使细胞内氧自由基显著增加导致脂质过氧化损伤。脂质过氧化过程中产生大量的活性氧(ROS)、脂质自由基及其降解产物丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯酸(HNE)等，这些物质可进一步诱发免疫反应，趋化中性粒细胞，导致炎症细胞的浸润而产生炎症反应。许多研究表明细胞因子在NSFLD的病理发生过程中起着重要作用，细胞因子作为一类重要的调节因子，参与调节机体对胰岛素的敏感性，肝脏脂质的蓄积，肝脏损伤及炎症，肝纤维化和肝硬化等(Carterkent et al.， 2008) [ 22 ] 。在本研究中，使用Luminex法对血清中的部分细胞因子进行了分析，高脂诱导能使细胞因子IL-2、IL-6、IL-1β和TNF-α显著升高，经口给予RES使上述细胞因子水平呈不同程度的下降，其中IL-2和IL-6下降显著。辅助性T细胞(Helper T cell， Th细胞)可分化为Th1、Th2、Th3和Th17细胞亚群，其中Th1细胞为CD4阳性细胞，主要分泌IL-2、TNF-β和IFN-γ等，参与调节细胞免疫，介导细胞免疫应答等。Th2主要分泌TNF-α、IL-6、GM-CSF、IL-3、IL-4、IL-5、IL-10和IL-13等因子，主要参与体液免疫，在诱发过敏反应中起着决定性的作用(Singh et al.， 1999) [ 23 ] 。因此，在本研究中，RES可能通过调节部分Th1/Th2细胞因子减少NAFLD发展过程中的炎症反应。