DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
system: [SYSTEM]

user: 4. 实验结果与分析 本课题组在2014年10月26日到27日于安徽省合肥市中国科学技术大学地空学院楼顶进行了24小时的水平大气消光系数观测，并对结果进行处理，得出了消光系数与能见度之间的关系。 本实验装置与传统532 nm能见度激光雷达不同，采用1548 nm种子光。以往很少使用1.5 μm激光进行大气能见度探测的原因是1.5 μm激光雷达为了保证信噪比，必须使种子光功率很大，造价比较昂贵，而且长时间连续观测容易出现机器故障；此外探测1.5 μm激光需要使用的铟镓砷探测器比532 nm激光使用的硅探测器的探测效率低得多。本实验采用图2的实验装置成功解决了这一难题，而且获得了精度极高的实验结果 [ 20 ] 。 图1. 1.5 μm波长四种模式消光系数随能见度变化关系 图2. 1.5 μm能见度激光雷达系统布局 图2中所用元件包括：AOM：声光调制器；AWG：任意波形发生器；TDFA：掺铥光纤放大器；LMAF：大模场光纤；SMF：单模光纤；WDM：多路波分复用器；PC：偏振控制器；OSA：光谱分析仪；DM：分色镜；L：透镜；SPF：短通滤波器；BPS：带通滤波器；VBG：体布拉格光栅；TEC：热电冷却器；PPLN-W：周期极化铌酸锂波导。 本实验所使用的1.5 μm能见度激光雷达基本工作流程为：1548 nm种子光经过处理发射到大气中，再通过望远镜接收后向散射信号，之后通过耦合器耦合到单模光纤，随后与1950 nm泵浦光一起进入波分复用器，然后转移到周期极化铌酸锂波导中 [ 21 ] ，由于满足了准位相匹配1548 nm激光转换为863 nm激光，863 nm激光通过体布拉格光栅后，用硅探测器探测，最后送入计算机处理。 根据参考文献 [ 19 ] 的初步分析，通过26日13:00到27日13:00的测量光子计数可以看出信号并非随着距离增加平滑下降，而是在3~6 km范围内出现了尖峰。这一现象产生的原因是激光水平探测的路径穿过了几条合肥市的主干道，主干道的汽车尾气排放使得这些位置的消光系数和后向散射系数增加，从而使光子计数出现尖峰。此外，由于水平路径上大气并不均匀，斜率法不再适用，必须采用Klett与Fernald反演法才能得到准确的大气消光系数。 此外通过分析实验过程中消光系数随时间的变化关系，可以看出消光系数的第一个高峰出现在18:30，这是由于下班高峰，道路拥堵，机动车尾气排放导致空气质量变差。随后连续的几个高峰是由于工厂间歇性排烟导致。27日早上2:00到8:00期间消光系数不断降低，这是由于晚间升起的灰霾随着日出逐渐退去。但是到了27日12:00左右消光系数逐渐平稳下来，且整体高于前一天中午，这是由于工厂的排烟并不会像灰霾一样随日出散去，而是持续停留在合肥大气中。 为验证上述推论，特别选取26日17:10，18:30，20:10和27日10:00四个时刻的光子计数随距离的变化进行详细分析如图3所示。从图3中可以看出26日17:10时，回波信号随距离增长而下降，7 km处的回波光子计数约为500个；而到了18:30，由于合肥晚高峰交通拥挤，在0.7 km，1.2 km，2.2 km，4 km等距离附近回波信号出现阶梯式下降，由于激光从中科大地空学院楼顶向北发射，从地图上可以看出，这几点分别对应于金寨路，南一环路，长江中路和濉溪路；到了20:10，在3.4 km处回波信号出现明显尖峰，这是由3.4 km附近两根烟囱持续排烟导致；到了27日10:00，回波信号在7 km处的光子计数只有约130个，明显低于图3(a)中的500个，说明工厂排烟并未随日出消散，而是持续停留在合肥大气中，使得27日整体空气质量不如26日。 利用实验测得的消光系数随时间变化曲线，可以通过三种模型进行反演合肥24 h的能见度变化，得到的能见度曲线如图4所示。本实验从26日13:00持续到27日13:00，在此期间合肥气象局给出了三个时间点的能见度值：26日13:30，27日7:30和9:30时分别为11 km，3.3 km，6.0 km (表1)。Grabner模型在三个时间节点均与实际情况有明显偏差，相对误差分别为37.8%，113.5%和68.7%，显然不适用。Kruse模型与Kim模型在能见度大于6 km时一样，但Kruse模型在实际能见度位于6 km附近时，往往无法得出准确的结果。特别是在27日9时之后，消光系数位于0.2 km −1 附近，恰好位于Kruse模型的断点位置，虽然计算出的能见度大于6 km，但计算时采用的却是能见度小于6 km的Kruse模型，发生矛盾；如果利用能见度大于6 km的Kruse模型进行计算会发现算出的能见度小于6 km，还是会发生矛盾。综合来看，Kim模型最符合合肥秋冬季节的天气情况，在三个时间点与实际值的平均相对误差只有7.8%。 图3. 四个时刻的回波信号 Table 1 Retrieved visibilities of three models and the real valu 26日13:30 27日7:30 27日9:30 Kruse模型 11.182 km 3.832 km 6.333 km Kim模型 11.182 km 3.741 km 5.495 km Grabner模型 15.163 km 7.054 km 10.119 km 实际值 11.0 km 3.3 km 6.0 km 表1. 三种模型反演能见度与实际值 图4. 三种模型反演能见度的对比
system: [SYSTEM]

user: 5. 总结与展望 针对现有几种能见度激光雷达的波长修正模型差异较大的问题，自行研制了1.5 µm能见度激光雷达，并在合肥地区进行了对比实验。本次探测持续24小时，有效探测距离在7 km以上，成功探测了汽车尾气排放、工厂排烟以及灰霾扩散等影响能见度大小的现象。通过对合肥地区连续24小时的观测数据进行后续处理，对现有的几种能见度波长修正模型进行了比较。发现Grabner模型反演的能见度明显与合肥实际情况不符；Kruse模型在实际能见度处于6 km附近时会给出自相矛盾的结果；综合来看Kim模型的反演结果与合肥初冬能见度一致，与实际值的偏差小于0.5 km，平均相对误差小于7.8%。因为不同地区气溶胶光学特性的差异，并不存在普适的波长修正模型。需要针对气溶胶在我国的时空分布特点，经过大量的实验观测，因时、因地给出经验修正模型。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 在世界经济一体化的大背景下，我国产业结构已呈现出由“工业型经济”向“服务型经济”的重大转变，服务业已经成为我国经济增长的重要组成部分，且经济增长方式由“粗放型”向“集约型”转变，R&D服务作为生产性服务业的一部分，是“集约型”经济增长方式中的重要一环，较好地缓解了资源消耗大和生态环境受损的弊端，呈现出节约性特征。本文从产业发展角度构建R&D产业的生产和消费节约性指标体系，并利用中关村、广州大学城“创业楼”和常用电子产品发展变化的数据进行节约性实证分析，得出结论并展望有关R&D产业“节约性”的下一步研究重点。 关键词 :R&D产业，生产节约性，消费节约性
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 众所周之，服务业已成为国民经济的重要组成部分，服务业的发展水平成为衡量现代社会经济发达程度的重要标志，成为决定国际竞争力的关键因素，在促进经济平稳较快发展、扩大就业等方面发挥了重要作用。但是，发展的同时，也是对资源需求的进一步增加，如何避免高资源消耗、环境恶化矛盾成为难题。因此，从中央到地方各级决策层都高度重视发展循环经济，“资源节约型、环境友好型社会”的“两型社会”建设热潮从未平息。 我国服务业发展水平总体相对落后，特别是有些服务行业，存在着资源消耗过大、节约意识淡泊、生产效率低下、恶化生态环境等问题，这与我国发展循环经济、建设节约型社会是格格不入的。由此在我国发展节约型服务业势在必行，意义深远。R&D服务作为生产性服务业的一部分，在节约性方面具有先天优势，对于条件具备的地区发展R&D产业是缓解经济发展过程中资源浪费、实现经济良性循环发展的重要选择，也是实现节约型的经济增长方式，促进我国经济结构调整和经济可持续发展的重要途径。 党的十八大以来，习近平总书记把创新摆在国家发展全局的核心位置，高度重视科技创新。2013年11月，习近平总书记到长沙威胜集团调研时强调：企业要加强R&D，不断创新。2016年5月30日习近平总书记在全国科技创新大会、两院院士大会、中国科协第九次全国代表大会上发表题为“为建设世界科技强国而奋斗”的重要讲话时强调：“企业是科技和经济紧密结合的重要力量，应该成为技术创新决策、R&D投入、科研组织、成果转化的主体。要制定和落实鼓励企业技术创新各项政策，引导企业加快发展R&D力量。要调整现有行业和地方的科研机构，充实企业R&D力量，支持依托企业建设国家技术创新中心，培育有国际影响力的行业领军企业。同时，科研院所和研究型大学是我国科技发展的主要基础所在，也是科技创新人才的摇篮。要优化科研院所和研究型大学科研布局。要加强科研院所和高校合作，使目标导向研究和自由探索相互衔接、优势互补，形成教研相长、协同育人新模式，打牢我国科技创新的科学和人才基础。”以致中共中央政策研究室经济局原副局长白津夫总结2016年两会时强调“‘十三五’的核心理念是强化创新与引领，‘十三五’最亮眼的词是创新与转型。五大发展理念第一位就是创新发展，所以创新是中国时代的最强音。”国家对R&D产业的重视程度可见一斑。 顺应时代潮流，本文试图在界定R&D产业节约性内涵的基础上，构建R&D产业节约性指标体系并利用现有数据进行实证分析，为R&D产业节约性研究提供一定的理论参考和为我国发展循环经济、生态经济提供借鉴思路，同时也对国家高度重视R&D产业的发展进行及时呼应。
system: [SYSTEM]

user: 2. R&D产业节约性概念界定 节约是一个古老而又不断深化的概念。在自然经济占主导地位的农耕社会，节约主要是指生活领域的省吃俭用。在资本主义发展的早期，节约主要是指劳动时间的节约。而在当代，对节约也有新的理解，“节约”一词由“节”和“约”两个汉字组成，“节”是指节制、限制，与浪费是相对立的；而“约”则是指控制、约束、集约，与粗放是相对立的。这样，节约就不仅仅是指消费领域的节俭和其他经济活动中对人、财、物的节省或限制使用，而且还包含如何使用才符合合理、恰当和高效的要求 [ 1 ] 。因此，节约应该是指人类在推动经济发展和社会进步的活动中，对稀缺性资源的合理使用和充分利用 [ 2 ] 。节约的实质就是提高资源的使用效率，增进人类福祉，是一种循环型、集约型的节约。 那么，节约型R&D产业的核心就是节约资源，其目的在于追求资源消耗的最小化、环境污染的最低化、经济和社会效益的最大化 [ 3 ] 。这里的“节约”既包括R&D生产过程中的生产节约，又包括R&D产品消费过程中的消费节约。生产节约最根本的不是数量上盲目减少，而是指生产资料(包括物力资源和人力资源)合理高效的使用，即用尽量少的资源创造最大的经济效益。消费节约主要是指避免无端的浪费和使用效率的提升，R&D出来的新产品不断更新换代，新产品更节能、更环保等，如家电产品，空调更加省电、电视省电的同时降低对眼睛的伤害、无氟利昂冰箱减少对臭氧层的破坏等等。 总而言之，所谓R&D产业节约性，就是指在以经济循环和实现可持续发展为目标的社会背景下，R&D产业在节约资源和保护环境为主旨中做到生产和消费都节约，实现综合成本最小化和综合收益最大化。
system: [SYSTEM]

user: 3. 构建R&D产业节约性指标体系 根据R&D产业节约性的含义，为充分体现“节”和“约”两大概念并较全面地解析R&D产业的节约性特征，本文从生产节约性和消费节约性两方面构建指标体系，其中，生产节约性指标体系由从经济、资源和环境三大类进构成。具体有：经济类指标，主要体现“约”的效率方面，如人均产值、人均利润率、户均利润率、投资回报率和经济增长贡献率等；资源类指标，主要体现“节”的资源消耗方面，如人均占地、户均占地、产值占地、单位成本、单位地区生产总值电耗和单位地区生产总值能耗等；环境类指标，主要体现生态环保方面，如空气质量等级、废气废水排放量、区域环境噪音、饮用水水质等。消费节约性指标从效率提升和资源节约两方面进行构建。具体有：效率类指标，主要体现在内涵方面，如运行速度、存储空间、使用功能、性能、平均电耗和视听觉效果等；资源类指标，主要体现在外观方面，如体积、重量、耗材和价格等方面。具体见表1。
system: [SYSTEM]

user: 5. 结论 总结而言，本文从节约理念中提出R&D产业节约性概念，并构建出R&D产业节约性评价指标体系，用当前各层次数据进行实证分析，总体数据显示，R&D产业的生产节约性和消费节约性特征较为突出。描述和分析R&D产业的节约性特征符合时代潮流，顺应了时代的要求，今后在数据不断补充完善的基础上有关R&D产业的节约性分析可从以下几个方面进行突破： 1) 不断丰富R&D产业节约性评价指标体系，利用时间序列进行主成分分析，把各类评价指标中的主要因素提取出来后对地区或行业R&D产业发展的节约性特征进行综合评价。同时构建因子模型进行评价指标体系内变量间的相关关系分析。 2) 利用各类数据，结合R&D产业节约性指标体系，对地区间和行业间R&D产业发展过程中的节约性特征进行深入比较分析，试图找出本地区R&D产业发展的比较优势，更好地促进适合本地区实际的R&D产业发展。 3) 利用完善的R&D产业生产节约性指标数据进行空间节约性分析，在空间节约性分析的基础上，构建R&D空间溢出效应模型，详细计算出R&D对经济增长的贡献率，并找出关键影响因素，为各级政府部门如何有效提高R&D资源配置效率提供一定参考。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 目的：分析湿性CAL临床技术的最新研究进展及未来发展趋势。方法：采用湿性CAL及相关技术多量大体积自体颗粒脂肪注射移植及远期随访。结果：与传统单纯湿性自体颗粒脂肪移植远期随访比较，湿性CAL及相关技术效果良好稳定。结论：湿性CAL及与其相关技术效果持久、安全、稳定，外形自然，可弥补干性CAL尚无法解决部分缺陷。 关键词 :自体颗粒脂肪移植，干细胞辅助，湿性CAL，干性CAL
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 近年来，自体颗粒脂肪(adipose granu1e， AG)注射填充移植(亦称脂肪雕塑) [ 1 ] 、脂肪干细胞(adipose derived stem cells， ADSCs) [ 2 ] 、ADSCs辅助AG注射填充移植术(cell-assisted lipotransfer， CAL) [ 3 ] 、血管基质片段(stromal vascular fraction， SVF) [ 4 ] 、新鲜分离培养的SVF辅助AG注射填充移植实验研究 [ 5 ] [ 6 ] 及分离培养的ADSCs和SVF临床前期与临床应用研究(干性CAL) [ 7 ] [ 8 ] 、新鲜原代不分离的SVF成分辅助AG注射填充移植术(湿性CAL及与其原理相近的技术方法) [ 9 ] [ 10 ] 等热点研究已越来越受到学界关注，湿性CAL及与其原理相近的技术基本突破了严重制约临床传统单纯多量大体积AG注射填充移植吸收率高和并发症多 [ 11 ] 的瓶颈问题，是当今脂肪整形领域应用最广泛和最重要的研究手段之一，文内全面介绍了国内外湿性CAL及与其原理相近(新鲜原代不分离SVF)临床技术的最新研究进展及未来发展趋势，供同道们商榷。
system: [SYSTEM]

user: 2. 湿性CAL技术演进 2008年，刘乃军针对CAL和SVF辅助AG注射填充移植技术，客观的创造性定义和分类为干性CAL和湿性CAL概念，对规范湿性CAL临床标准流程指南具有重要意义，同时采用湿性CAL技术成功进行了AG注射填充移植临床应用及远期随访研究，与八年前同等条件下采用传统单纯湿性AG注射填充移植完成的远期随访结果相比，取得明显提高和良好稳定的预期临床效果；单次注射AG混合注射填充移植物100 ml以下称少量小体积湿性CAL，100 ml以上称多量大体积湿性CAL，湿性CAL是一项十分受欢迎的脂肪整形技术，确切的湿性CAL定义是：不体外纯化、离心、浓缩、分离、提取、培养的新鲜原代SVF成分辅助AG组织注射填充移植术；目前临床上仍以湿性CAL及与其原理相近的技术方法应用广泛，是未来发展方向 [ 12 ] 。经临床循证医学严格对照研究结论：传统单纯湿性AG注射填充移植术是湿性CAL临床演进过程的发展基础，有30年稳定、可靠、丰富的临床研究经验可借鉴；由湿性肿胀技术到注射器吸脂法和湿性AG注射器注射填充移植术，一脉相承，逐渐演进到湿性CAL，湿性CAL及与其原理相近的临床技术日趋成熟，具有人工软组织注射填充代用品无可比拟的优点；进入21世纪，人类对医学美容的安全性及远期效果追求越来越高，对人工软组织注射填充代用品及假体的使用越来越慎之又慎，在保持了几十年的稳进势头后，人工假体美容手术及人工材料注射填充微整形数量似乎有了减退的趋势，许多女性随着年龄的增长，对求美的态度及整形美容手术并发症的认识也有了更加理性的提高和转变；美国FDA严格监管脂肪整形临床技术并对人工整形美容材料严格管控，制订了脂肪整形临床应用指南，迄今美国学者仍以采用湿性肿胀注射器吸脂，简单过滤而不离心处理AG，一次性使用所有注射器和移植针械巾单药物，一次性注射器注射填充移植为主流技术 [ 13 ] 。
system: [SYSTEM]

user: 3. 湿性CAL理论依据 采用湿性肿胀注射器吸脂所获取的AG组织(含液体部分)混合填充物内富含所有的新鲜原代SVF成分，新鲜原代SVF“微粒”系混合细胞群，含有包括ADSCs在内的多种类型多功能干细胞，所有的新鲜原代SVF成分直接存在于AG混合注射填充物中，勿需额外处理，完全可满足临床湿性CAL所需；对AG混合填充物较少人工处理，更能改善SVF和脂肪细胞活性，额外过多人工处理与SVF和脂肪细胞数量及活性无关，过多增加毫无意义的额外中间处理环节和延长体外操作时间，AG混合注射填充移植物操作流程中被损伤和污染的机率相应增加，摒弃复杂过多的体外处理流程而采用最简单快捷的湿性CAL及与其原理相近的技术方法更具合理性，可明显减少并发症发生机会；肿胀液不影响新鲜原代SVF的诱导成脂分化和脂肪组织再生能力，尽量避免AG移植物与空气接触和减少机械性损伤及缩短体外处理时间，选择正常健康合适供区采集AG，杜绝AG体外被污染和被损伤，加速受区AG早期再血管化，是湿性CAL成功的关键因素；SVF属于再生医学领域，新鲜原代SVF可显著改善提高AG再生能力 [ 14 ] 。Botti G等在应用离心方式处理AG一些年后，经长期临床验证认为，在脂肪移植时会选择简单过滤处理的AG，而不是离心处理过的AG，注射移植的AG细胞其吸收、存活情况与AG纯化离心浓缩分离技术无关，而与不同供区脂肪解剖生理特性及受区具体情况相关 [ 15 ] 。越来越多研究渐已达成共识：早期血供重建主要位于移植AG外周部，若移植AG中心长期处于缺血状态，则中央部分的AG组织由于缺血缺氧时间过长，会发生坏死、液化，继而被巨噬细胞清除，产生纤维囊性变，微囊的出现预示着移植体最终纤维化和吸收；在AG移植后临床转归过程中，移植AG尽早再血管化和建立充分及时的血供，是其成活体积加大扩增并减少纤维囊性变的关键；随着对SVF研究的不断深入，用细胞移植疗法辅助移植AG再血管化及脂肪组织再生，已显示出SVF在AG移植临床应用的美好前景。2013年，袁艺等通过SVF辅助AG移植早期移植物组织学变化及相关实验研究结论：在AG移植早期，SVF通过旁分泌生长因子促进移植脂肪血管生成，进而促进AG移植的早期存活，SVF辅助AG应用于面部软组织填充与单纯AG移植比较，能够有效地提高AG存活率，获得了满意临床疗效，且未发现远期并发症，SVF辅助AG 应用于隆乳术与单纯AG比较，能够有效地提高脂肪存活率 [ 16 ] 。2015年，鲁峰等深入研究证据表明，脂肪细胞不再是传统概念的终末细胞，体内的脂肪细胞能不断地更新代谢，新的脂肪细胞来源于脂肪组织中血管周边的基质细胞；研究脂肪组织的生理结构提出“葡萄串”学说，发现脂肪组织中主要存在两大细胞群，成熟脂肪细胞和位于脂肪细胞间隙的血管基质细胞部分；新鲜原代SVF成分被认为是一组混杂的细胞群，其中含有一定数量的ADSCs、血管内皮细胞及来自外周血液的白细胞、红细胞、T细胞、炎症细胞、造血干细胞和以成纤维细胞、免疫细胞为主的其他细胞群落相混杂的细胞群体；SVF在体内环境下能够分化为成熟脂肪细胞，促进宿主干细胞向受区的定向迁移，部分参与了构成新生血管内皮细胞，有助于移植脂肪组织早期血供的建立；因此，AG移植的关键在于如何有效诱导脂肪组织的再生，而脂肪组织特殊的组织结构(每一个成熟脂肪细胞都会有一枝毛细血管支配)，决定了早期血管化重建是AG注射填充移植后脂肪再生的关键；可见，脂肪再生的诱导决定了AG移植后的保存率，SVF诱导脂肪再生，可能通过旁分泌机制促进AG移植物尽快再血管化，并募集移植物内部的内源性间质干细胞及少量宿主血源性基质干细胞到达新生血管周围，定向成脂分化，促进脂肪组织再生(佐证了吸脂减肥后部分出现肥胖反弹临床问题的原因)；SVF辅助AG移植应用于面部软组织填充能有效地改善移植区域的皮肤色泽和质地，而SVF辅助脂肪移植应用于隆胸术能够有效地提高脂肪存活率，且减少远期并发症的发生，但大样本长期对照随访研究对评价这项技术的安全性和有效性非常必要 [ 17 ] 。
system: [SYSTEM]

user: 4. 湿性CAL临床适应症和并发症 湿性CAL主要适用于面部美颜及面形重塑和面部年轻化抗衰老，体表软组织或器官形态扩增、美化、衰老皮肤组织年轻化，各种体表软组织凹陷或缺损的修复、重建、再生及人体轮廓重塑；目前多量大体积和少量小体积湿性CAL临床技术已基本成熟，均获得安全持久良好临床效果，远期并发症甚少 [ 18 ] ；但术后早期仍有少数不同程度的局部或全身并发症发生，特别是多量大体积湿性CAL注射填充移植隆乳术后的临床事实也并非完全无远期并发症，因目前仍无法完全彻底杜绝术后钙化、假性脂肪瘤、囊性病变等极少数远期并发症发生；迄今脂肪整形临床严重并发症报道相对较少，与实际情况差距较大，缺乏实事求是，术后感染及交叉感染和肉芽肿的病例出现增多趋势，临床实践中“不科学”乱象堪忧，这些错误可能会产生相当严重的连锁反应而导致临床应用混乱，这些问题与手术室条件不规范、脂肪移植仪器、针械、巾单、药物等存在不合格现象及术前已污染或术中被污染和临床操作流程不符合标准等因素直接关联；防治的最新理念和方法就是手术室达标并科学简化操作流程，术中所有的注射器和移植针械巾单药物均一次性使用合格达标产品，这一观念看似简单，实则临床意义巨大，使施术医生对并发症防治意识步入一个新时代 [ 19 ] 。近期相关AG注射填充移植临床并发症报道逐渐增多，特别是眼底及脑血管栓塞(偏盲、失明、偏瘫、死亡)等严重并发症(几乎不可逆，眼科及神经科无有效疗法)己引起了国内外学术界高度重视，术后并发非典型性分枝抗酸杆菌感染问题己严重威胁到临床脂肪整形技术的健康发展，应加强科学监管 [ 20 ] [ 21 ] [ 22 ] 。目前许多AG移植“新仪器和针械及外源性生长因子”等并无新意，“三证”不全并缺乏相关法规政策及伦理道德支持，前景不乐观且价格昂贵，更有甚者违规发布非法广告信息误导求美者，伪劣人工注射美容材料被盲目非法滥用，许多人工注射产品的弱点及临床适应症被故意掩饰或违规扩大使用范围而变成“一锤子买卖”的现象令人震惊，如何严格高效监管尚有待商榷；一定要倡导科学研究的透明性与准确性，临床医学行为有些错误不可原谅，切勿让个别资本投机行为把中国整形美容学科推向深渊 [ 23 ] 。
system: [SYSTEM]

user: 5. 湿性CAL临床应用结论 长期临床实践证明，AG及其所包含的新鲜原代SVF成分，是当前最安全有效稳定的体表软组织填充材料，容易大量获取而不影响供区外形和功能，是理论和伦理上最理想的软组织填充材料来源，没有一种填充材料能与之相媲美，属于同一时间、同一供区、同一临床流程直接获取的AG复合所包含的全部新鲜原代SVF成分之湿性CAL注射填充混合移植物；刘乃军缔造了湿性CAL，技术关键是能避免干性CAL体外纯化、离心、浓缩、分离、提取、培养SVF和ADSCs过程中可能出现的细胞基因变异问题，规避了细胞移植的伦理问题；与此同时很少有人意识到“SVF细胞系在体外培养各环节过程中非常容易受到污染而发生细胞变异成为单细胞繁殖形成的细胞群”这一严重后果，湿性CAL及与其原理相近的临床技术可避免上述诸多问题，并能弥补干性CAL目前临床上许多尚无法解决的难题，可使求美者免受违反伦理道德的医疗服务侵害及不健康的心理误导，最大限度提高移植AG组织再生能力，防止SVF成分复合AG混合填充物在体外被人为因素损坏和污染；新鲜原代SVF成分能促进移植AG组织再生，SVF和ADSCs可直接分化为成纤维细胞，参与衰老面部皮肤组织修复和结构重建达到面部抗衰老年轻化，对改善身体受区皮肤组织质地起决定性作用，同时还能有效改善受区局部瘢痕质地和色泽，使老化或受损皮肤恢复至健康状态和衰老的皮肤年轻化，特别对面部脂肪萎缩症治疗作用显著；湿性CAL及与其原理相近的临床技术方法，效果持久安全稳定，手感良好且外形充盈自然；湿性CAL现代理念是：种子(SVF)、土壤(受区血运)、化肥农药(内源性生长因子)三要素应科学完美融合在一起而缺一不可 [ 24 ] 。吴志贤等利用与湿性CAL原理相近的临床技术，采用富含(新鲜原代不体外纯化离心分离提取培养)SVF的AG注射填充移植研究结论：是一种理想、简单、有效的治疗方法，值得推广应用 [ 25 ] ；易成刚等报告利用短时间低速离心(不体外纯化分离提取培养)方法可简单有效直接获取到包含所有新鲜原代SVF和ADSCs的复合AG移植物用于注射填充移植，临床效果明显提高，并发症明显减少 [ 26 ] 。
system: [SYSTEM]

user: 6. 湿性CAL发展趋势 湿性CAL及与其原理相近的临床技术是一项非常严肃的临床AG注射填充移植术，具有广阔的临床应用前景；新鲜原代SVF对休眠ADSCs诱导决定了AG移植后脂肪组织再生的临床问题，关键在于如何有效的保留新鲜原代SVF细胞群落组织生理结构不被破坏，以及诱导和旁分泌、自分泌等促脂肪组织再生功能完整，AG移植后脂肪细胞存活的概念应改为脂肪细胞再生或脂肪组织再生。湿性CAL临床研究充分遵循了科学、规范、公开、伦理和保护受术者权益的原则，远期效果良好持久、安全有效、可靠稳定、无细胞不断增殖(不稳定性)传代、标准操作、流程规范、无伦理问题、并发症极少，目前已是一项成熟的临床新鲜原代SVF辅助AG组织注射填充移植主流术式之一 [ 27 ] 。AG注射填充移植技术的可行性及可靠性己被国际学界所肯定并给予高度评价，脂肪整形是一项革命性创新技术，目前总体趋势仍是在传统技术上不断改良和完善；现今仍有部分学者对传统单纯多量大体积AG注射填充移植临床隆乳技术过于乐观，实际是方法陈旧，术后并发症问题突出，过于保守的观点其实已经过时了，十分有必要科学改良，并客观、公开、透明面对其并发症问题；在脂肪整形领域里，湿性CAL及与其原理相近的技术方法临床应用上替代干性CAL是未来发展趋势，目前主要问题是尚缺乏统一操作流程标准及临床应用指南不完全一致，进而导致临床远期效果存在一定差异。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 对近年来各期刊报道的心脏超声评价急性心肌梗死的血流动力学研究方面的文献进行归纳、整理和分析。通过检索万方、中国知网等大型数据库及国外数据库，查阅近年来有关心脏超声评价急性心肌梗死的血流动力学的研究文献，发现目前的心脏超声评价方法和手段主要集中于二维超声心动图、M型超声心动图、多普勒组织成像、应变率显像技术、实时三维超声心动图、三维斑点追踪成像技术等等众多方面。 关键词 :心脏超声，急性心肌梗死，血流动力学，研究进展
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 急性心肌梗死(acute myocardial infarction， AMI)是在冠状动脉病变的基础上，突然发生冠状动脉血供急剧减少或中断，使相应的心肌严重而持久地急性缺血缺氧导致心肌坏死的疾病。其原因通常为在冠状动脉内不稳定斑块破裂、糜烂的基础上继发急性血栓形成导致冠状动脉血管持续、完全或不完全闭塞。主要临床表现为持久的胸骨后剧烈疼痛、发热、血清白细胞计数、血清心肌坏死标志物(如肌红蛋白、肌钙蛋白、肌酸激酶)增高及心电图进行性改变，可伴发心律失常、心力衰竭、休克，属急性冠脉综合征(acute coronary syndrome， ACS)的严重类型，是严重危害人类健康的常见病 [ 1 ] 。AMI后机体通过一系列的复杂机制，主要涉及持续心肌受损、机械负荷刺激过重、炎症细胞因子过度表达、神经内分泌调节及氧化应激的过度激活等，使心肌结构、功能发生变化的动态过程。其主要病理过程是发生心肌细胞的增粗、增长，心肌质量的增加、间质成分的增多、毛细血管相对减少，心壁的增厚、心腔容积的扩大、心腔形状的改变等一系列的变化，使心功能由代偿转向失代偿最终导致慢性心力衰竭 [ 2 ] 。AMI后心肌受损，产生持续的机械负荷刺激，出现心肌梗死区的室壁膨胀、变薄、扩张等，室壁应力不均一，使心脏各部的舒缩活动不协调，导致心室收缩、舒张功能减退，心输出量减少等心功能障碍和血流动力学障碍 [ 3 ] 。这些血流动力学的改变进一步加重心脏的负荷，使心肌发生适应性的改建与重构，如此形成的恶性循环，促使心力衰竭的发生和发展。因此，及时了解和监测心肌梗死后血流动力学状态有助于更好的掌握病情、评估心功能和及时有效的诊治，为进一步改善患者远期预后具有重要的临床意义。当前，随着医疗技术的不断完善和发展，对于血流动力学监测的手段也是多样化，比如心导管技术的应用，但是很多技术手段为侵入性的有创操作，且操作过程中会出现不可避免的并发症，这在一定程度上也限制了很多技术在心肌梗死后血流动力学监测上的应用 [ 4 ] 。而心脏超声作为一种无创操作技术手段，具有安全、无创、直观、快捷、可重复性高等优势，临床应用得当，可以为我们提供更为全面、更为简便的血流动力学方面的信息。因此，当前，应用心脏超声技术在测定心肌梗死后血流动力学指标，评价心功能，已逐渐受到重视和关注。而近年来在研究心脏超声评价急性心肌梗死的血流动力学这一领域内，不断有新的探索和成果的出现。现将近年来心脏超声评价急性心肌梗死的血流动力学研究综述如进展下。
system: [SYSTEM]

user: 2. 急性心肌梗死后心脏右心房压的评价 心脏右心房压(Right atrium pressure， RAP)是反映心脏右心系统内容量负荷状态的指标，是心脏血流动力学指标的一项重要内容，目前临床上存在诸多的评价方法多是从不同的角度来估测RAP，从而进一步估测右心室收缩压及肺动脉压。在既往传统的心脏超声检测中，多可能会造成对健康人右心房压的高估，因此，对于急性心肌梗死的患者来说，传统的心脏多普勒超声亦会高估右心房压指标。有研究表明 [ 5 ] ，传统的二维心脏多普勒超声测定心肌梗死后患者的右心房压较侵入性导管检测方法明显偏高，其差异存在统计学意义(P < 0.05)；且两种方法的测定值之间具有显著的相关性。 2.1. 二维超声方法测定 评价心脏右心房压力最常用的在二维超声心动图条件下测定下腔静脉内径及其吸气时的变化曲线指标。在实际测定过程中，下腔静脉内径受患者的体位影响较大，其中仰卧位影响最小；同时它还受呼吸的影响，因此在吸气末影响最小，可获得一个较为准确的曲线指标。 2.2. 多普勒超声方法测定 所有房颤患者初始时均采用二维超声评估，可明确心脏结构、心房大小及血栓情况等。而近年来发现彩超是检查食管心脏特异性最高的检查方式，不仅可发现血栓形成的高危风险，还能观察心房血流动力情况、主动脉粥样硬化等。采用多普勒超声方法评价心脏右心房压力时，是建立在测定肝静脉血流动力学变化基础之上的。正常情况下，右心房收缩期前向血流(PVS)、右心房收缩期末逆向血流(PVV)、右心房舒张期前向血流(PVD)、右心房舒张期期末逆向血流(PVA)共同组成了肝静脉血流频谱。我们可以通过肝静脉收缩期充盈指数来预测右心房压力的变化。然而，在急性心肌梗死后，出现心房顺应性和弛张性的变化以及心脏瓣膜运动速度的变化均可能会影响右心房压力的测定值。其中，有研究表明 [ 6 ] ，急性心肌梗死合并心房颤动时，测定的右心房压力并不依赖于肝静脉收缩期的血流动力学数值。 2.3. 组织多普勒成像 组织多普勒成像(Doppler tissue imaging， DTI)与传统的二维 成像更具有优势，它不需要肋骨下成像，可直接一步成像，以提供患者右心室功能相关指标。其主要测量右心室节段等容弛张时间(RIVRT)，这一指标与右心房压力之间呈现出负线性相关性，同时它不受肺动脉压及右心室舒张末压的影响，因此测定右心房压力的敏感性和特异性均较高，有很好的可信度。但是因急性心肌梗死患者存在心肌的缺血坏死，影响心肌的节段性舒缩运动，这可能在一定程度上会影响测定值。
system: [SYSTEM]

user: 3. 急性心肌梗死后肺动脉压的评价 3.1. 肺动脉压的超声特点 不同的超声技术下，肺动脉压测定的突进和特点不同。传统二维超声在不同的血流动力学状态下，显示的情况不一，如在右心室血流动力学异常时可显示肺动脉扩张，右心室肥大，右心室收缩功能降低；M型超声则显示患者而肺动脉α波较小，收缩中晚期会出现肺动脉瓣关闭，肺动脉瓣舒张期斜率降低，与右心室流出道血流终止相一致；多普勒超声则显示右心室流出道血流频谱曲线由圆钝演变为尖峰，收缩中晚期右心室流出道多普勒血流终止，右心室流出道血流时间缩短。 3.2. 多普勒超声方法测定 目前，测定肺动脉压多采用多普勒超声技术，主要通过对三尖瓣反流速度的测定，再通过伯努力方程评价肺动脉收缩压。通常右心室和肺动脉间无血流梗阻时，肺动脉收缩压(Pulmonary artery syotolic pressure， PASP)与右心室收缩压等同。而在右心室和右心房存在压力差时，加上平均右心房压也可得出肺动脉收缩压。当三尖瓣存在反流时，测的三尖瓣反流最大速度(TRV max )，右心室收缩压则等于右心房压加上三尖瓣反流压差的值(PASP = 4TRV max 2 + RAP)。为避免误差，三尖瓣最大反流速度应在多切面测量取平均值。但是有相关研究指出 [ 7 ] ，运用超声造影剂微泡能使多普勒三尖瓣反流速度高估出实际值，因此，实际运用过程中应当避免出现此种情况。 当患者出现肺动脉压逐渐增加的情况时，右心室流出道的多普勒频谱形态会发生一定的变化，比如右心室达到峰值速度的加速时间等等。因此，肺动脉压与右心室达到峰值速度的加速时间呈负相关性，但因这一变化依赖于患者心率和心输出量的变化，所以我们需要注意肺动脉在一些特殊状态下的假性正常现象。
system: [SYSTEM]

user: 4. 急性心肌梗死后肺血管阻力的评价 4.1. 传统二维及M型超声 肺动脉压力及肺血管阻力的增高，会出现诸多的超声特点。肺动脉血管阻力的升高，早期可使进入肺动脉干的压力传播速度增加，其超声表现为收缩中晚期肺动脉瓣的关闭和凹陷，右心室射血时间的减少。 4.2. 多普勒超声 肺血管阻力的升高与多普勒超声的异常存在明显的相关性。多数情况下，肺动脉血管阻力的测定是采用多普勒超声测量三尖瓣反流速度及肺动脉前向血流而获得的，是目前公认的最佳测量技术手段。但Lee等 [ 8 ] 研究通过采用超声多普勒测定跨肺动脉血流积分及跨三尖瓣反流速度来估测肺动脉血管阻力，这一方法是建立在当前通用方法基础之上的改良，它有效的避免了肺动脉收缩期血流频谱和三尖瓣血流速度的时间变异性。
system: [SYSTEM]

user: 5. 急性心肌梗死后左心室舒张功能的评价 5.1. M型超声心动图 有学者提出房室平面位移(AVPD)可评价左心室舒张功能，其主要是运用M型超声心动图测量左心房主动收缩引起的房室平面位移值。有研究 [ 9 ] 应用M型超声证实正常人AVPD与二尖瓣血流频谱比值之间存在良好的正相关关系，但当左室舒张功能减退时，即可表现出二尖瓣血流频谱假性正常，因此，其评价左心室舒张功能容易受到心肌病变的影响。近年来，舒张早期左心室内血流播散速度(FPV)亦逐渐成为评价左心室舒张功能的一项新指标 [ 10 ] 。有研究 [ 11 ] 通过观察急性心肌梗死患者再灌注后的左心室舒张功能变化发现FPV是一个独立且敏感性较高的评价做临时舒张功能的指标。但其具体统一的测定方法，仍需进一步研究。 5.2. 二维超声心动图 因心脏左心房相关结构参数与左心室舒张功能之间存在良好的正相关关系，因此，可以通过测定左心房结构参数，如左心房内径、左心房舒张末期内径、左心房容积等，来估测评价左心室舒张功能。严萍萍等 [ 12 ] 研究指出，左心房相关结构参数可简单的估测左心室舒张功能同时还可鉴别左心室舒张功能假性正常化。在左心房收缩功能参数方面，有研究表明 [ 13 ] ，左心房射血力参数对左心室舒张功能的评价要优于二尖瓣血流频谱比值。 5.3. 多普勒组织成像 通过测定二尖瓣环运动速度来评价左心室舒张功能，其常用评价指标有舒张早期、晚期心肌峰值运动速度(Ea、Aa、Ea/Aa)。因其不受左心室收缩功能的影响，故可用于急性心肌梗死后患者的左心室舒张功能评价。但近年来也有报道指出，性别、年龄等因素也会对这一指标数值有影响 [ 14 ] [ 15 ] [ 16 ] 。近年来，应变率显像技术(SRI)技术也在逐步推广应用，因它能反应心肌局部的变形速率，能更加准确的反映和评价左心室的收缩与舒张功能，所以更加适用于评价急性心肌梗死后心肌舒缩功能障碍的患者 [ 17 ] 。 5.4. 实时三维超声心动图 实时三维超声心动图(RT-3DE)依据心室的整体几何形状来测量、计算心功能参数。近年来，有学者 [ 18 ] 认为RT-3DE是定量评价急性心肌梗死后左心室充盈率的最有效方法。但它亦有不足之处，如视野不够大，不能实时评价心脏的容积和功能。
system: [SYSTEM]

user: 6. 急性心肌梗死后左心室收缩功能的评价 6.1. 二维超声心动图 在二维平面上利用几何假设来计算左心室相关收缩参数来评价左心室收缩功能，但因其难以显示完整的心脏解剖结构，尤其在急性心肌梗死后出现心脏形态变化时，很难准确的测量出真实数值，误差较大。 6.2. 实时三维超声心动图 实时三维超声心动图(RT-3DE)可实时测量左心室收缩末期容积、每搏输出量、射血分数等指标来评价左心室整体及节段的收缩功能。有研究 [ 19 ] 应用RT-3DE和MRI对38例急性心肌梗死患者进行左心室容积测定，结果发现二者之间具有很好的相关性；还有研究 [ 20 ] [ 21 ] 发现RT-3DE与二维超声心动图均很好的测量出了左心室容积及功能，但二维超声心动图明显低估了左心室的容积，因此，对于急性心肌梗死后出现室壁运动障碍或异常的患者来说，RT-3DE较二维超声心动图能更加准确的评价左心室收缩功能 [ 22 ] 。 6.3. 三维斑点追踪成像技术 三维斑点追踪成像技术(3-dimensional speckle tracking imaging， 3D-STI)是建立在RT-3DE与STI基础上的一项新技术。通过标记心肌声学像素，采用分析软件自动追踪区域内的心肌斑点，以计算心肌运动速度和变化情况，从而来评价心肌的收缩功能 [ 23 ] [ 24 ] [ 25 ] 。有研究报道 [ 26 ] 发现急性心肌梗死患者左心室整体收缩功能明显降低，其研究结果显示左心室整体的横向、纵向、环向收缩期峰值应变与左心室射血分数之间呈高度的负相关性，说明患者的左心室射血分数越低、左心室整体应变能力也越低，心肌的变形能力也越差 [ 27 ] 。因此，3D-STI能直观、无创、敏感的定量评价左心室心肌的形变能力。
system: [SYSTEM]

user: 7. 结语与展望 心脏超声技术作为一种无创操作技术手段，具有安全、无创、直观、快捷、可重复性高等优势，在临床应用较为广泛。但随着医学技术的不断进步，心脏超声技术也在不断的更新与变革，除了常规的传统的超声技术之外，还衍生出了各种超声新技术包括M型超声心动图、多普勒组织成像、应变率显像技术、实时三维超声心动图、三维斑点追踪成像技术 等来评价急性心肌梗死后的血流动力学，每种超声技术都各有优缺点，各有不同的适用范围，其中实时三维超声心动图、三维斑点追踪成像技术具有较高的临床价值和发展潜力，但因其技术尚不成熟，还需进一步发展和改进，以不断发挥它们的诊断与检测潜能。如何合理利用各种超声技术的优势联合评价急性心肌梗死后血流动力学，指导临床治疗方案的选择和临床治疗效果的评价，也将是今后进一步研究的方向和目标。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 艾滋病是由HIV病毒感染机体CD4细胞后，损伤患者的免疫系统所引发的一种疾病。艾滋病具有传染性强、危害大、不可治愈的特点，给患者的家庭和社会都造成极大的负担。及早的发现病情，并积极的接受治疗可显著提升病人生活质量，降低传染风险。艾滋病的病程与患者的CD4阳性T细胞数量紧密相连，所以监测CD4细胞对于用药指导和药效评价都具有重大意义。 关键词 :艾滋病，HIV，CD4细胞，流式细胞术
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS，获得性免疫缺陷综合征)是由HIV (human immunodeficiency virus)感染所引起的一种免疫缺陷病。艾滋病于1981年被首次发现，我国在1985年报道首例病例。艾滋病在我国的传播可分为三个阶段：1985~1988年为第一阶段，为传入期或散发期，感染者主要为外来者，病例零星发现；1989~1994年是第二个阶段，为扩散期，此阶段感染率较低，6年内报道了1221例，疫情主要在局部地区流行；第三个阶段是1995年至今，艾滋病的发展进入了增长期或广泛流行期 [ 1 ] 。《2016年中国艾滋病防治进展报告》显示，2015年我国存活的艾滋病患者达到57.74万，其中新增患者为10.78万。 因为HIV病毒对于人体的免疫系统造成严重的破坏，不仅影响患者的劳动能力，而且大大降低了患者的寿命；此外，目前艾滋病者并没有治愈手段，需要长期服用药物抑制病毒扩增，给患者家庭和社会都带来沉重的经济负担。因此，艾滋病不仅是医学问题，也是严重的社会问题，给社会、经济、家庭和个人带来灾难性的结果 [ 2 ] 。
system: [SYSTEM]

user: 2. HIV感染 HIV病毒颗粒表面具有类似于细胞膜的膜结构。起吸附作用的糖蛋白穿透膜结构、通过与宿主细胞表面受体的结合而发挥作用。HIV病毒颗粒的核心由衣壳蛋白包裹，内部包含着HIV的遗传物质(两条RNA)和活性蛋白。 病毒的mRNA有三个开放读码框，分别为gag、pol和env多聚蛋白。gag蛋白翻译成熟为p24、p9和p17蛋白，它们组成HIV病毒颗粒的核衣壳。pol多聚蛋白成熟后分裂为蛋白酶、逆转录酶和整合酶。env多聚蛋白成熟为gp41和gp120蛋白，它们组成了HIV病毒的针形吸附糖蛋白结构。 与众多其他病毒类似，HIV病毒的扩增在宿主细胞中进行。在相当长的一段时间内，CD4被认为是HIV病毒唯一的受体。近期研究发现，趋化因子受体(CCR)发生缺失突变的HIV病毒感染者，其艾滋病病程发展较为迟缓；约有1%的高加索人因为携带δ32位置的突变而大大降低他们对于HIV的易感性，并且延缓了感染者发病进程。这些结果逐渐揭示了CD4受体附近的趋化因子受体也是HIV病毒入侵宿主细胞所必须的。 在人体中主要有CCR5 (一种β趋化因子受体)和CCR4 (一种α趋化因子受体)两种趋化因子受体涉及HIV的感染。在感染初期，病毒颗粒主要趋向于和CCR5结合，此类病毒体外扩增较慢，并不诱导合胞体的产生。在感染后期，病毒转变为合胞体诱导型，其主要识别的趋化因子受体为CCR4，这类病毒扩增病毒在体外的扩增速度较快。在HIV感染者体内，病毒数量巨大，通常既含有识别CCR4病毒也包含识别CCR5的病毒 [ 3 ] 。 当病毒颗粒通过CD4和趋化因子受体吸附在宿主细胞后，病毒的核衣壳及其内含物被注入宿主细胞内。在宿主细胞的胞浆中，病毒的逆转录酶以单链RNA为模板，合成双链DNA；双链DNA随后形成环形结构，并进入宿主细胞的细胞核中；在整合酶的作用下，病毒DNA整合进入宿主的基因组。 当HIV病毒的遗传信息整合进宿主的DNA中后，它将利用宿主细胞的转录和翻译机器，消耗宿主细胞氨基酸和能量，大量合成病毒扩增需要的糖蛋白和多聚蛋白。这些产物随后在病毒蛋白酶的作用下成熟为病毒外膜、核衣壳和活性蛋白的组成单元。结构单元组合产生大量的新HIV病毒颗粒。新病毒颗粒从宿主细胞中释放后将继续感染下一个宿主细胞。 HIV病毒是一种非常原始的病毒，其遗传物质在复制的过程中并不进行校正过程，这导致扩增产生的RNA与母体RNA相比，出现非常多的突变，而且突变的方向具有非常大的不确定性。高突变率在产生一些无活性病毒颗粒的同时，也为病毒颗粒适应环境中的各种应力(药物等)提供了可能性。同时，HIV的高扩增能力在一定程度上弥补了其遗传物质扩增时保真度低的缺点。据估计，一个艾滋病患者体内每天新生成约10 9 个病毒颗粒 [ 4 ] 。
system: [SYSTEM]

user: 3. 艾滋病病程 机体感染HIV病毒以后，体内病毒扩增和免疫状态处于不断的变化，并导致患者表现不同的临床症状。根据这些参数，艾滋病的病程可分为四个阶段，分别为急性感染期、潜伏期、潜伏末期和艾滋病期。 AIDS病毒进入体内后，快速的扩增对宿主细胞CD4 T细胞造成严重的破坏，部分病人CD4细胞降低至100/mm 3 [ 5 ] 。辅助淋巴细胞数量的急剧降低导致病人的免疫能力严重受损，并伴随着一系列症状。常见的症状有低烧、扁桃体炎、喉咙疼、皮疹、肌肉酸痛、头疼、持续腹泻、呕吐等。急性感染期持续时间一般为5~30天，最长可维持6个月之久。在急性感染期，高浓度的HIV病毒载量使得病人具有非常高的传染性，约有30%的传染发生在急性感染期。因此尽早的发现和诊断对于艾滋病的防治具有至关重要的作用 [ 6 ] 。 急性感染期后，病人的免疫系统开始发挥效应，产生针对AIDS的抗体，并对HIV病毒的扩增达到制约效果，将病毒的载量降至2000~6000拷贝/mL，这个时期称为潜伏期。潜伏期内HIV病毒载量越高，越容易导致患者的免疫机能衰退。统计数据显示，潜伏期内病毒载量超过100，000拷贝/mL时，患者在5年内发展为艾滋病期的概率将比病毒载量低的患者高10倍 [ 7 ] 。在潜伏期内，HIV病毒的扩增和患者免疫系统形成平衡状态，CD4细胞数目维持在正常生理范围之内，因此患者在此阶段无任何临床症状。一般而言，潜伏期可长达8~10年，大部分病人在这个阶段被确诊 [ 8 ] 。 潜伏期末期，HIV病毒与免疫系统的平衡逐渐被打破，HIV病毒载量逐渐上升并超过12，000拷贝/mL。与之对应，CD4淋巴细胞逐渐被破坏，其数目下降至正常生理水平下限500/mm 3 以下，这个阶段又称为艾滋病前期。在这个阶段，病人逐渐表现出艾滋病特异性的症状，包括：血细胞减少症、贫血症、嗜中性白细胞减少症、血小板减少症、牛皮癣、脂溢性皮炎、无菌性脑膜炎、顽固性头疼等。此外，很多患者在此阶段也表现出急性感染期中出现的诸多症状 [ 9 ] 。 HIV病毒的扩增持续对免疫系统造成破坏，当CD4细胞降至200个/mm 3 时，免疫功能受到极大的抑制，患者容易被各种机会性感染影响并出现以下并发症：痴呆，食管、气管、支气管、肺部真菌感染，腺病毒感染，单纯孢疹病毒感染，真菌感染，宫颈癌，卡波氏肉瘤，肺炎等。这个阶段，病人进入艾滋病期，各种并发症逐渐威胁到患者的生命 [ 9 ] 。 CD4+细胞的检测 如前所述，CD4淋巴细胞是HIV病毒的主要宿主细胞，也是HIV病毒抑制免疫系统活性的靶点。因此，CD4细胞数目与艾滋病病程密切相关，所以监测CD4细胞具有非常重要的临床意义。CD4细胞的检测可用于：筛查HIV感染者，特别是急性感染期的患者；根据CD4的绝对计数或者百分比计数对感染者进行分期；辅助判断ART用药时机；评价抗病毒药物的有效性。 目前市场上CD4细胞计数的产品种类繁多，其中大部分产品是基于流式细胞术开发的。流式细胞术也是CD4阳性T细胞计数的金标准方法 [ 10 ] 。 流式细胞术是一种结合了细胞生物学、流体力学、光学、电学等多种学科的临床检测技术。其原理是采用荧光分子偶联的单克隆抗体标记细胞表面或者细胞内部的目标分子，当单个悬浮细胞流过流动室时被激光激发并发射出相应的荧光信号，流式细胞仪的光学系统和电子系统对荧光信号进行收集、转化、分子、整合，最终完成对样本信号的采集和分析。流式细胞术的优点在于可以快速的单个细胞进行信号分子检测、以获取细胞整体的信息。在CD4阳性T细胞计数中，通常将荧光分子标记CD4抗体与其他表面抗原(CD45、CD3等)抗体联用，对CD4细胞进行染色识别，然后完成细胞的计数。 流式细胞术对CD4细胞计数，有双平台和单平台两种模式。双平台法涉及血细胞分析仪和流式细胞仪两个平台的综合应用：利用血细胞分析仪得到淋巴细胞或者白细胞的数量，通过流式细胞仪得到CD4细胞在淋巴细胞或者白细胞中的占比，再将两个结果相乘得到CD4细胞的浓度 [ 11 ] 。此方法因为涉及两个计数平台，增加了误差源，准确性质控难度较高；同时，血细胞计数仪和流式细胞仪的操作难度大，仪器成本高，不适用于经济落后的区域。目前临床较少采用此方法。 相对于双平台法，单平台法有诸多方面的优势：仅涉及单种仪器，减少了计数操作的复杂程度；减少引入误差机会、提高结果的准确性和可重复性；同时，此方法还大大降低报告结果的时间，提高临床检验的时效性。单平台方法中，一种方式是通过向临床样本中加入已知浓度的荧光微球以实现CD4细胞计数，BD的TruCount和Beckman coulter的PLG-CD4试剂均采用这一原理 [ 12 ] 。此方法因进入市场较早，在临床检验和疾病研究中都被广泛采用。但其缺点在微球的加入增加了耗材的成本，而且检测者在添加微球过程中极易引入误差，降低检测的准确性和可重复性；另一种方式则在计数过程中 同时准确测量血液样本体积，将CD4计数结果除于样本体积以获得CD4细胞浓度，规避了对微球的需求，迈瑞的Bright E6系统则利用了这一原理。
system: [SYSTEM]

user: 4. 展望 艾滋病对于患者的免疫系统造成严重损伤，艾滋病并发症极大的影响患者的生活质量，并造成非常高的死亡率。因此艾滋病的诊断和治疗逐渐引起越来越多的关注。 CD4淋巴细胞是HIV病毒的主要靶细胞。CD4细胞的绝对数量与患者体内的HIV病毒载量密切相关，所以对CD4细胞进行绝对计数具有重要的临床意义。根据患者CD4细胞浓度，可以筛查患者、对患者进行分析、辅助判断用药试剂、评估药效等。 目前，CD4细胞计数有双平台法和单平台法。双平台法因涉及血细胞分析仪和流式细胞仪，操作难度高，目前临床应用较少。单平台法中，BD的Trucount和Beckman Coulter的PLG-CD4采用荧光磁珠辅助细胞计数。但各自都有一定的缺点，Trucount的成本非常高，不适用于贫困地区的推广和使用；PLG-CD4中采用检验者添加荧光微球，导致增加了误差引入过程，影响结果准确性。迈瑞新开发的流式细胞仪采用测量样本体积的方式计算CD4细胞浓度，操作相对简单易行，具有非常大的优势。此方法的推广可有力的推动临床CD4细胞计数工作的开展。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 目的：研究对薄皮甜瓜采后病害具有防治作用的生防菌株浅黄假单胞菌的安全性，为微生物农药的开发提供安全的微生物资源。方法：将浅黄假单胞菌(Pseudomonas luteola)以3 × 10 9 cfu/mL的最大浓度、0.4 mL/10 g的最大体积，对小鼠二次灌胃给药，测定半数致死量和最大耐受量。结果：观察21 d，20只小鼠均状态良好，未出现任何不适现象，皮毛光亮、活动正常、摄食正常、无腹泻发生，无死亡病例。结论：该受试样品作为微生物农药使用是安全的。 关键词 :浅黄假单孢菌，急性毒性，安全性
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 由于薄皮甜瓜的大面积集中种植，成熟期也相对集中，再加上其不耐储运的特点，采后病害发生严重，成为目前制约甜瓜经济效益的主要障碍，亟待研究解决 [ 1 ] 。而对甜瓜采后病害防治主要以化学农药为主，虽然防效高，但存在环境污染和残留严重的弊端，因此市场上急需绿色环保和高效的生物农药产品 [ 2 ] 。 20世纪80年代以来，生物防治作为一种控制果蔬采后病害的新途径逐渐被人们接受、重视，并成为研究的热点 [ 3 ] [ 4 ] 。由于生物防腐不具有化学防腐保鲜带来的环境污染、农药残留及连续使用产生抗药性等缺点而将逐步取代化学杀菌剂，成为一种新的保鲜方法 [ 5 ] 。 笔者前期已筛选到一株具有防治薄皮甜瓜采后病害的生防菌株 [ 6 ] ，根据《微生物农药毒理学试验准则》 [ 7 ] [ 8 ] 进行生防菌株浅黄假单孢菌(Pseudomonas luteola)对小鼠的急性毒性试验，以确定其安全性。拟将生物防治技术这种极具前途的“绿色防腐”技术应用于薄皮甜瓜采后病害的防治中，为人们提供品质优良、绿色安全、可延长保存期的薄皮甜瓜。
system: [SYSTEM]

user: 2. 材料与方法 2.1. 试验材料 2.1.1. 药品 受试样品：浅黄假单胞菌(Pseudomonas luteola)，由黑龙江省生物工程重点实验室自薄皮甜瓜表面分离。 发酵初始培养基：葡萄糖20 g/L，MgSO 4 0.2 g/L，牛肉膏8.3 g/L，酵母膏6.9 g/L，K 2 HPO 4 1 g/L，CaCO 3 1 g/L，pH 7.2~7.5。湿热灭菌：121℃，20 min。 规格：3 × 10 9 cfu/ mL，菌剂使用浓度：3 × 10 7 cfu/ mL。 2.1.2. 动物 昆明种小鼠20只，清洁级，6~8周龄，体重20 ± 2 g，雌雄各半。 由黑龙江中医药大学药物安全性评价中心提供，合格证号：SCXK(黑)2008004，发证单位为黑龙江省科技厅。 2.2. 试验方法 按照中华人民共和国农业行业标准NY/T 2186.1-2012《微生物农药毒理学试验准则》中第一部分急性经口毒性/致病性试验的有关要求进行试验。 2.2.1. 半数致死量测定 取体重20 ± 2 g昆明种小鼠20只，每组10只，雌雄各半。试验前禁食不禁水12 h后，按25 mL/kg小鼠体重灌胃给药一次。根据小鼠死亡状况作适当调整，分别找出浅黄假单胞菌的LD 100 (100%死亡率)、LD 0 (0%死亡率)和相应的剂量组间距r值，进行LD 50 值的测定。 2.2.2. 最大给药量试验 根据预试验结果，试验样品内容物浅黄假单胞菌(Pseudomonas luteola)以最大浓度3 × 10 9 cfu/mL，最大体积0.4 mL/10 g对小鼠进行二次灌胃给药，无法测得浅黄假单胞菌的小鼠半数致死量(LD50)，故进行最大给药量试验。 取体重20 ± 2 g昆明种小鼠20只，每组10只，雌雄各半。先在实验室饲养2日，以适应实验室环境，禁食不禁水12 h后，以该药配制最大浓度3 × 10 9 cfu/mL，最大体积0.4 mL/10 g，间隔6 h二次给予各鼠口服灌胃，药后3 h正常给食给水喂养，观察21 d内小鼠有无行为活动异常及死亡，各鼠皮毛、二便、饮食状态等有无异常改变，并记录药后7、14、21 d内小鼠体重变化。 2.2.3. 观察方法 各组灌胃给药后，正常饲养，给药后2 h之内，每15 min观察1次；给药后2~4 h之内，每30 min观察一次；给药后4~8 h之内，每1 h观察一次，密切观察各小鼠的动度、进食、饮水情况及21 d内可能出现的动度、异常肌肉运动、对外反应、瞳孔改变、大小便异常、眼球凸出、眼睑下垂、呼吸异常、皮肤颜色改变等毒性反应和死亡情况。若有小鼠死亡，即刻解剖，肉眼观察其心、肝、脾、肺、肾脏器的改变，21 d观察期结束后，将每组存活的小鼠处死进行解剖，按上述同样方法对主要脏器大体病理变化进行肉眼观察。