DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 2. 材料和方法 2.1. 材料和仪器 本实验所用到的主要材料试剂为：DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、CCK-8试剂盒、青霉素–链霉素双抗溶液、Matrigel基质胶等。所用到主要仪器设备如表1所示。 Table 1 Main apparatus and equipment 仪器名称 品牌型号 生产商 恒温细胞培养箱 371 德国THERMO公司 倒置荧光显微镜 IX-71 日本Olympus公司 流式细胞仪 Cytomics FC 500 美国Beckman Coulter公司 超净工作台 SW-CJ-1FD 苏州净化设备有限公司 高速冷冻离心机 5810R 德国EPPENDORF公司 酶联免疫检测仪 VersaMax 美国Molecular Devices公司 表1. 主要仪器设备 2.2. 细胞培养 将从四川大学生物治疗国家重点实验室获得的SKOV3细胞和从华拓生物科技有限公司购买的HUVEC和CNLMG细胞系置于含有10%胎牛血清的DMEM培养基中，然后将其放入条件为5% CO 2 、37℃的培养箱中培养。 2.3. 体外诱导培养模型的建立 肿瘤细胞与环境细胞被置于同一环境中培养，肿瘤细胞分泌的细胞因子作用于环境细胞，使环境细胞的遗传物质发生改变。环境细胞表达出异常蛋白，最终被诱导成为肿瘤相关细胞。以HUVEC和SKOV3为例的诱导培养模型如图1所示。将HUVEC以5 × 10 3 个/孔的密度接种于上室中，同时，将SKOV3细胞以5 × 10 4 个/孔的密度接种于下室中。上室和下室分别加入1.5 mL/0.4 mL (6孔板/24孔板)和2.5 mL/0.8 mL (6孔板/24孔板) DMEM细胞培养基，然后将其放入培养箱中培养。次日，将上室转移至下室中，使两者在同一环境中培养。 图1. 细胞诱导培养模型 2.4. 细胞形态分析 将细胞进行消化计数后，按合适的密度种植于6孔板中，加入培养基呈十字摇匀，避免聚集于孔板中间，然后放入培养箱中继续培养直至细胞全部贴壁，于次日放于显微镜明场下观察细胞形态。随后，拿出培养板，PBS洗涤5 min，重复3次。吸干液体后，加入4%多聚甲醛，覆盖板底即可。静置30 min后，PBS清洗3次。Triton通透10 min，PBS清洗3次。将DAPI储存液用PBS缓冲液稀释成浓度为1~10 μg/mL工作液，加入工作液覆盖板底即可。关闭日光灯，静置染色5~10 min后，PBS洗涤3遍，加入封片剂。最后将其放置于荧光显微镜下观察，并且拍照记录。 2.5. 细胞增殖试验 CCK-8试剂盒检测在不同时间点的单独和诱导培养细胞的细胞活力以找寻最佳的共培养时间，随后测定最佳共培养时间点的细胞活性。将SKOV3、HUVEC和与两者共培养的细胞种植在24孔细胞培养板和24孔Transwell细胞培养板中。分别在第1，3，5，7和9天测量不同细胞的活性。实验组和对照组均设置6个平行孔。在指定时间用冷PBS洗涤细胞2遍，另注入新鲜培养基。接着，将40 μL和80 μL CCK-8分别加入上室和下室中，轻轻摇匀以充分混合。在恒温培养箱中放置2 h后，将上清液混匀转移到96孔板中，随后放入自动酶标仪，按照检测要求于450 nm处进行分光光度测量。 2.6. 肿瘤相关细胞标志性蛋白的测定 于共培养的最佳时间点将实验组中小室移出，PBS清洗3次后加入培养基，放入培养箱中单独培养一天，取出全部上清液于离心管中，加入新培养基后把小室移入继续进行共培养。将取出的上清液充分混匀，每根管取1 mL于离心管中，放入离心机以2500 rpm/min的速度在4℃条件下离心20 min，收集澄清上清。根据ELISA测试盒的操作说明测定上清液中的蛋白含量。用预冷PBS洗涤3次相关细胞和正常细胞，每瓶添加400 μL含有蛋白酶抑制剂混合物的蛋白质提取试液，几分钟后，用刮棒快速将培养瓶中的细胞刮下，将液体转移至EP管中于冰上裂解30 min，每隔10 min混匀一次。以12，000 rpm/min高速离心15 min，获取全细胞裂解物。将裂解物在SDS-PAGE凝胶中电泳并转移至PVDF膜。本研究中使用的一抗包括：抗-α-SMA，抗-FAP，抗-VEGF，抗-TEM。使用Super Signal West Dura化学发光底物显现结果。 2.7. 肿瘤细胞迁移和侵袭实验 细胞迁移和侵袭实验均采用孔径为8 μm的Transwell小室构建交互作用模型。上室底部滤膜预先铺盖100 μL以1:8稀释的matrigel基质胶，然后将孔板放入培养箱中孵育6 h充分凝固。将对数生长期的肿瘤细胞以5 × 10 5 个/mL的密度接种于凝胶上，每孔加200 μL。下室分为3组，每组加等体积的相关细胞、正常细胞和添加了胎牛血清的培养基，每组分别设置6个平行孔。24 h后，将小室装进对应的下室，上室用PBS清洗3次，添加不含血清的DMEM培养基再培养24 h后，用棉签小心地擦掉小室上的凝胶和细胞，Hoechst染色。显微镜100倍下计数膜上，下，左，右，中5个视野穿过膜的细胞个数，取每组的平均值进行统计学处理。细胞迁移实验则不用铺胶，装配小室后均改用无血清培养基继续培养12 h进行染色计数，其余步骤均相同。细胞侵袭实验如图2所示。 图2. 肿瘤细胞侵袭实验示意图 2.8. 流式细胞实验 实验分为单层培养SKOV3和共培养SKOV3两组，将培养至4天的细胞悬浮转移至离心管中，随后放入离心机收集细胞，倒掉上清，用冷PBS洗涤2~3遍，添加适量冷70%乙醇，放于室温固定1 h或者在4℃环境固定过夜。离心收集细胞，PBS洗涤细胞2次，注入500 μL 50 μg/mL浓度的碘化丙啶(Propidium Iodide， PI)，再加100 μg/mL RNase A，0.2% Triton X-100。4℃或者避光孵育30~50 min或者室温20 min。随后，弃上清，PBS洗涤2遍，500 μL PBS再次混匀细胞，转移至24孔板中，待流式检测细胞周期。 2.9. 肿瘤细胞耐药性检测 将共培养前后的SKOV3消化计数后，以2 × 10 4 个/mL的密度接种于96孔板中，每孔200 μL，分别设置不加药物的空白组，每组6个复孔。待细胞完全贴壁，往实验组加入药物溶液，空白组加入等量的无血清培养基，继续在37℃条件下培养箱中培养24 h。小心吸取旧的培养基，并用PBS洗涤3遍。采用倒置荧光显微镜在明场模式和暗场模式(固定曝光条件)下进行观察并拍照。 基于CCK8方法，检测药物抑制共培养前后肿瘤细胞增殖能力的程度。采用浓度为25 μg/mL为基准的药物DOX，将浓度为1 mg/mL药物储存液用无血清DMEM培养基稀释至25 μg/mL。 2.10. 数据处理及统计学方法 实验数据表示为平均值 ± 标准偏差(x ± s)。采用IBM SPSS Statistics统计软件包进行数据分析，使用单因素方差分析组内样本比较，使用t检验进行两组之间的样本比较。
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user: 4. 结论与展望 HUVEC和CNLMG与SKOV3细胞诱导培养后，两种正常细胞的细胞形态都朝着肿瘤细胞形态发展。增殖实验结果表明，相关细胞与肿瘤细胞是相互促进，互补的。诱导培养后的HUVEC细胞表达更多的VEGF和TEM1，诱导培养后的CNLMG细胞过表达α-SMA和FAP。通过比较诱导培养前后的肿瘤细胞形态，肿瘤相关细胞对卵巢癌细胞的形态几乎没有影响。细胞活力和流式细胞仪证实肿瘤相关细胞显着增强了SKOV3细胞的增殖能力。迁移和侵袭实验表明，肿瘤相关细胞可以大大增强肿瘤细胞迁移和侵袭能力。另外，在荧光图像中，与共培养前的肿瘤细胞相比，共培养后的肿瘤细胞吸收更少的药物并且具有更强的细胞活性。因此，共培养后肿瘤细胞的耐药性更强。在本研究中，采用Transwell技术构建的体外共培养系统可以有效地获得肿瘤相关细胞，并证实肿瘤相关细胞对卵巢癌细胞的生物学行为具有一定程度的影响。 尽管目前诱导培养出CAF和TEC并且鉴定了它们的肿瘤相关性，但是肿瘤微环境中的成分是复杂的。而本研究诱导培养出两种TME的组成部分，考虑可以涉及更多肿瘤微环境中的成分。因此，TME中肿瘤相关巨噬细胞的诱导培养也是重要的研究方向。
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user: 摘要 家庭教育、学校教育是孩子健康成长不可缺少的两个方面，二者的合作在孩子的发展中发挥着愈加重要的作用。但在新冠疫情发生后的在线教学实施过程中，农村小学的家校合作似乎遭到了一些考验，如：农村传统家校合作模式不能满足在线教学的需要，农村家校共育的合力出现偏差，农村家校合作双方的信息素养有待提升，合作内容的单一性与现实需求的丰富性相离等。文章通过文献研究和访谈调查等方法，把握农村家校合作出现的问题及原因，提出以下应对措施：转变教育观念为家校合作铺路，以生为本构建家校合作交流平台，提升信息素养破除家校合作技术门槛，增加“大生命教育”拓宽家校合作维度。
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user: 1. 引言 合作是一种社会互动形式，家校合作可以泛指家长与学校在教育孩子的过程中所发生的一切可能的互动行为。吴重涵等学者提出家校合作(school-family partnerships)是指：教育者与家长(和社区)共同承担儿童成长的责任，包括当好家长、相互交流、志愿服务、在家学习、参与决策和与社区合作等六种实践类型 [ 1 ]。其特点是：1) 互动的积极性，家长、学校双向互动交流；2) 目的的一致性——促进学生发展；3) 教育的协调性，家庭、学校、社会努力做到对孩子的教育相协调。据爱普斯坦提出的“重叠影响阈理论”可知，学生处在家庭、学校和社区三个关系网的中心，其成长所需要依托的家庭、学校与社区都树立有相同的目标，承担着共同的任务，且这三者之间经常进行有效的沟通和互动。从而学生就可以从各大组织中感受到关怀，并接受到相同的有关“学习重要、要努力学习”等信息——学校、家庭和社区就不约而同地对孩子以及三者的状况、关系就发生了重叠的影响 [ 2 ]。由此可见，高效率的家校合作、互动对孩子的成长、发展是有显著地影响的。 家校合作是教育发展的必然趋势，在新冠疫情的影响下，家校合作更是凸显出其重要作用。然而，在我国城乡二元制结构的历史影响下，农村的教育发展一直是个短板。这次疫情中的“在家上学”——一个活生生的家校合作实践案例，暴露了农村小学教育在家校合作中的矛盾和问题。在习总书记提出的“乡村振兴”口号下，我们积极回应教育一线实践、认真分析并解决这些问题，是教育工作者义不容辞的责任，亦是对“响应政府号召、促进乡村振兴”有着重大意义。
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user: 2. 后疫情时代农村小学家校合作的新问题 2.1. 农村传统家校合作模式不能满足在线教学的需要 目前来讲，在新冠疫情发生之前，在我国广阔地区的农村小学中，家长和老师们对家校合作的重视度是不够的，或者说相对于城市学校而言其重视程度是需要进一步提高的。新冠疫情发生后，在线教学的出现和普及更是呼唤传统家校合作模式的更新。站在家长角度：农村留守儿童居多，照看他们的监护人也是以爷爷奶奶等为主，再加上常年在外的父母突然回家陪孩子上学、听课，这对一直没在孩子身边的父母而言本就是一个新鲜事。传统的家校合作形式，如线下家长会、家访等，由于现实原因已经无法完整推行，农村家校合作就需要另谋出路。站在老师的角度：目前我国农村教师队伍是存在“老龄化”和“学历普遍不高”的现象。如：农村小学老师学历分布多是中师毕业、专科毕业、再加上少部分本科生层次。那么这样一批学历层次的老师对我们近几年才发展比较迅速的“互联网 + 家校合作”这一新理念的认识有待提高、对在线教学以及所需求的家校合作新模式的适应有待加强。 新冠疫情发生后，教育部实行的“在家上学”措施以保证停课不停学，为保证学生的学习效果，这就无形中倒逼了老师和家长双方去进行联络和沟通，并逐步探索新的家校合作模式以适应在线教学发展的需要。 2.2. 农村家校共育的合力出现偏差 家校合作过程中，从理论角度看，家长和老师都是合作行为过程中不可缺少的主体——两方的互动、衔接以及要求对孩子造成的影响都是深远的。新冠疫情发生后，学校传统的教育模式发生改变：其一，疫情下的“在线学习”，学生和老师、学生和学生之间是分离，学生的学习全部都是在家完成的，老师只能在网上给同学们授课、指导。在家庭中，家长对监督、指导孩子的学习、并和老师及时沟通孩子的学习进展就变得十分重要。其二，为保证每一位学生、每一门学科、每一个学段做到“停课不停学”，“在家上学”是超大规模的，基本上涵括了每一位学生和家长。这使得家校合作迎来了前所未有的覆盖面和参与度 [ 3 ]。笔者经过调查发现，家长普遍觉得孩子的在线学习劲头不足，比较散漫，甚至有的孩子不听课拿手机玩游戏。家长在这种情况下屡次提醒孩子，可是他们却总是屡教不改，亲子关系会因此变得紧张 [ 4 ]。同时，教师一旦发现孩子的学习情况不佳，就会告知家长、提醒家长敦促孩子学习。如此，家长和孩子的矛盾、家长和老师的矛盾长就十分容易爆发，家校共育不仅不能形成合力，反而会适得其反。 2.3. 农村家校合作双方的信息素养有待提升 教育系统中的家校协同，还离不开信息技术的有力支撑 [ 5 ]。从家校合作方式信息化的角度来看，家校合作的发展过程大致经历了三个阶段：第一个阶段是“传统的家校合作”，它一般发生在节假日，是学校通过电话、纸质媒体、家访等形式向家长进行单向传递信息的过程；第二阶段是“信息化教学的家校合作”，它一般发生在学校教学时间之外，是学校通过传统媒体、信息化媒体(如校讯通)、家访、家长会等形式向家长传递信息并期待收到家长反馈的过程；第三阶段则是“疫情期间在线教学的家校合作”，它一般发生于教学全过程，学校和老师通过在线教学平台(如云班课、钉钉等)、互动工具等形式和家长进行实时沟通、双向对话。 事实上，在疫情发生以前，农村小学的家校合作的方式一般还是以第一阶段为主，即是以传统的线下合作方式为主(如开家长会、发放家长通知单等)并逐步过渡到第二阶段，通过校讯通、家长微信群等方式进行家校沟通。新冠疫情发生后，农村家校合作不得不直接从第二阶段快步进展到第三阶段。就笔者而言，第二阶段和第三阶段的家校合作方式实质上都是对家长和老师的“信息化”素养提出了较高的要求。例如，老师需要学会使用电脑、平板等工具进行网络直播授课；家长需要为孩子提供电子设备并辅助孩子进行网络学习。因此，将信息技术、互联网平台适切地融入到农村家校合作中需要一个适应、学习、融通的过程。 2.4. 合作内容的单一性与现实需求的丰富性相离 家校合作内容，是指家长和学校老师在平时沟通的过程中，相互交流学生在家和在学校的不同发展状态，从而根据学生的个性特点来共同制定出有利于促进学生全面发展的一些方案和内容，以达到教育的目的——它包括但不限于学生的学习习惯、学习态度、品德发展、心理健康、身体素质、人际关系等。 在对农村小学家长和老师调查中发现，传统农村小学家校合作的内容普遍重视的是学生的学习成绩，比如家庭作业完成情况、考试成绩、课堂学习表现等。这就明显体现出家校合作内容的单一化。在疫情发生后，家校合作依托于“在线教学”场阈，但合作的内容并不仅仅局限于“学科教学”方面，还扩展到了“抗疫防疫等专题知识教育、家庭教育辅导、学生生命安全教育、学生心理健康教育”等方面。如此一来，新冠疫情前后家校合作的内容从单一、片面化逐渐走向多重、宽泛化，对学生的教育影响也是全方位的、多重的。学生是一个独立的人、需要多方面发展的人，只有家校合作的内容丰富多彩，才能照顾到学生多方面的发展需求，从而在完整的教育下成长为一个全面发展的人。因此，在新冠疫情后，老师和家长都不得不从教育实践的实际情况出发，改变往常沟通单一的内容常态，逐步过渡到与学生全面发展相关的各方面内容上来。
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user: 3. 后疫情时代农村小学家校合作的应对措施 3.1. 转变教育观念为家校合作铺路 理论指导实践，只有在思想上重视了，在实践中才有可能执行。首先，学校层面要做好“领头羊”作用，尤其是校长。比如，在学校政策方面，相关负责人制定有助于家校合作的政策条例以保障其正常开展和延续；在学校文化方面，学校积极创建家校合作文化氛围，让文化来感染、熏陶老师、学生和家长，在潜移默化中让家校合作在每个人心里扎根。其次，老师层面要积极促进自身专业发展。作为人民教师，应树立终身学习的精神并不断与时俱进，更新教育观念、积极学习家校合作相关理论，从而跟上时代、将最新的教育研究成果运用到教学实践中。当然，教师也要积极给家长普及家庭教育、家校合作的相关知识，促使家长们对合作有个更加清晰、理性的认识。最后，家长层面要在思想和行动两方面为家校合作打基础。在行动上，积极和学校配合、沟通，和老师保持联系、对老师和学校的信息及时进行反馈等；在思想上，父母(监护人)作为孩子的第一任老师，更加要重视家庭氛围、教育理念、教育方式、父母期望等——这些因素都影响着孩子一生发展，家长可以通过家长学校、家庭教育论坛、学校家长会等渠道，多方面提高自己的教育素养。 3.2. 以生为本构建家校合作交流平台 老师和家长的目的都是为了促进学生的全面发展，学校和家庭都是学生成长过程中不可缺少的两个成长空间。因此，家长需要了解学生在校的学习情况，老师需要了解学生在家的生活情况。为了改变以往“老师讲、家长听”的固化模式，我们可以从“家校合作组织、家校圆桌会议、家校交流信息平台”三方面着手。一是家校合作组织，后疫情时代，学校可根据农村家长的实际情况，组织云上家长委员会、云上家长学校和家长会等，从而促使学生家长们达成一致教育观念。二是家校线上圆桌会议，圆桌会议模式的好处是让众多家长和老师围在一起，在形式上更加平等、在合作氛围上也更显融洽，这为家长沟通、表达提供了很好的机会。比如：老师能了解学生在家学习的状态、困难，家长全方位了解老师的工作内容、特点。三是家校交流的信息平台，在线教学过程中，学校可将家校合作的平台整合到学校原有的教育信息系统中，老师、家长、学生各自使用独立的技术页面，从而做到教学、学习、沟通、分享、互动的无缝衔接。这也减轻了各自的负担和复杂操作流程，从而提高家校合作的效率和质量、促进老师、学生、家长之间的平等对话。 3.3. 提升信息素养破除家校合作技术门槛 后疫情时代，家校合作、家校互动更多的是以线上为主、线下为辅。那么“在线”对老师和家长的要求就极为重要，其信息素养也面临着巨大考验。农村老师也要学习如何在各种直播平台授课、如何与学生在电子课堂进行交流、如何与学生家长有效沟通、合作等——这对有一定知识水平的老师来说不是难事。可对农村家长来说，他们对信息时代的电子设备、网络沟通渠道等后知后觉，这对家校合作无疑是一个巨大的障碍。那么，为破解家校合作的技术门槛，提升家长的信息化素养，可以从以下几方面着手：一是发挥学校作用，学校专门组织相关主题的讲座、请信息技术方面的专家直播授课等，帮助家长学习提高；二是发挥学生作用，“00后”的一代是信息化的一代，他们对各类电子设备、软硬件较为熟悉，可以帮助家长学习数字资源的相关使用方法。三是发挥家长主观能动性，采用线上线下相结合的方式，利用丰富的网络资源和居住地周围的亲戚、邻居等相互学习。需要明确的是，随着社会信息化、智能化的发展，家长、老师、学生都要与时俱进，学习掌握信息化的学习工具，如此，家校合作方能与时俱进。 3.4. 增加“大生命教育”拓宽家校合作维度 疫情之下，“生命健康”成了大家最为关注的问题，如此，家校合作的内容便可顺势而为，增加“大生命教育”的相关内容。“大生命教育”的内容范围极广，包括：敬畏生命、爱护生命的教育；疫情防控知识的教育；感恩生命、感恩他人的教育；热爱国家、培养责任感和使命感的教育，形成人类命运共同体意识的教育等等。小学生正处于身心发展的基础阶段，其发展特点具有未完成性、可选择性等。在教育过程中，适时适当地选取生活中的具有典型性的事件来解读、引导学生，并保持家校教育的一致性，可以让学生体会到学习的重要性、实用性，从而让学生成长为德智体美劳全面发展的时代新人。陶行知先生曾说过：教育即生活，生活即教育。此次疫情本身就是一门课程，可以说对学生、老师、家长、乃至全人类都是一堂很好的教育课。站在提升家校合作维度来说，学校和家长可以发挥家校合作的力量来设计和开发的校本课程——这种校本课程兼具家校特色，针对现实需求和学生成长需要并融合“大生命教育”内容，是家校合作内容和维度拓宽的有力证明。
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user: 4. 结语 疫情逐渐好转，家校合作探索之路仍然长远。未来，“混合式教学”模式将是基础教育的发展方向，我们应该思考如何将家校合作做的更好。此次疫情下的“停课不停学”大规模在线教育实践反映出了农村教育的短板，作为教育者，我们要关注其出现的问题、探讨解决措施，并努力凝聚社会、学校、家庭三方力量，形成教育合力共同促进孩子的全面发展、促进农村教育的发展。
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user: 摘要 本文通过对长垣市药食同源发展的调研发现：药食同源产业在长垣有着较好的发展基础，接受度高，发展前景广阔。但发展中仍存在一些问题，如生产管理粗放、缺乏相关标准遵循、产品加工程度低、产业链短、自主创新和品牌意识淡薄等。本文就调研中发现的问题提出了相应的对策。
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user: 1. 引言 《黄帝内经太素》中写道：“空腹食之为食物，患者食之为药物” [ 1 ]，食药同源历史源远流长 [ 2 ]。随着我国经济的不断提高，国家越来越重视药食同源食品项目相关行业的发展；随着收入水平的不断提升，人们的生活正快速地由吃饱进入到高品质的食养食疗时代，为了做好药食同源食品植物的研究开发，开展高品质药食同源植物种植已然成为农业产业的新增长点。特对长垣地区药食同源的发展现状进行了调研。
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user: 2. 长垣市药食同源发展现状 2.1. 药食同源发展现状 长垣市位于豫东北地区，河南省省直管县级市，隔黄河与山东省东明县相望，与封丘县、兰考县、滑县、濮阳县接壤，县域面积1051平方公里。据统计，长垣市发展高效农业22.6万亩、设施农业2.6万亩。在现代农业发展方面，现已有“肉牛养殖、良种繁育、蔬菜、冬枣、食用菌”五大现代农业基地。对于药食同源植物的研究，部分药食同源品种已实现了规模化种植和加工，如河南荏叶农业有限公司种植的紫苏；武邱乡种植的金丝皇菊，佘家镇种植的虎杖、迷迭香；张三寨镇种植的白芷、花椒；赵堤镇种植的金银花等都已初具规模。红花、地黄、艾草等也有种植。与长垣市毗连的封丘陈固镇种植的金银花，年产300吨以上，种植面积4000余亩，是附近最大的金银花种植基地。特别是在2017年，河南省农科院在河南省建立了第一个县级直属分院——河南省农科院长垣分院，成立之后其中一个主要研究方向是药食同源植物栽培驯化及开发利用的研究，旨在对药食同源科技成果加大示范推广，进一步增强长垣市农业农村经济发展的能力。其中前期长垣分院已经对蒲公英、荆芥、小茴香、薄荷、薤白等药用植物的种质资源、栽培技术进行了研究。这对药食同源深入研究、资源整合、示范推广都具有很明显的引导和带动作用。 2.2. 药食同源产品的接受程度 近年来，随着我国经济不断增长，人们生活水平不断提高，大众的健康意识日益增强，人们愈加重视保健和养生。2019年，我国大健康产业的规模逼近9万亿，因为疫情的原因，2020年大健康产业走上快车道，药食同源产品增长迅猛，预计今年可突破10万亿。2016年国务院办公厅《关于进一步促进农产品加工业发展的意见》中有关于“重点支持果品、蔬菜、茶叶、菌类和中药材等营养功能成分提取技术研究，开发营养均衡、养生保健、食药同源的加工食品”的表述。2017年中央一号文件中“加强新食品原料、食药同源食品开发和应用”的提出，为药食同源产品开发，药食同源产业发展明确了方向。标志着药食同源产品开发被上升到国家战略。当今社会人群中处于亚健康状态者日益增多，后疫情时代的来临，大健康产业被充分激活，而药食同源产品在日常食疗与养生保健中扮演着重要角色。随着药食同源文化的被认同，必将给中医药产业发展带来新的发展机遇 [ 3 ]。药食同源产品不仅在我国有很大的发展空间，而且越来越受到西方国家的重视。据统计，美国是全球最大的药食同源产品生产国，美欧日药食同源产品占世界总量的90% [ 4 ]。 2.3. 药食同源发展前景 长垣市是中国厨师之乡，中华美食名城，拥有我国第一座以烹饪文化为主题的博物馆——中国烹饪文化博物馆。“长垣村妇，赛国之厨”，厨艺文化在长垣源远流长。药食同源养生理念认为食物既是食物也是药物，两者很难区分。通过长垣厨艺文化，能更好的将药食同源产业发展壮大。 长垣不是传统的农业大县，但是长垣经济发达，对药食同源接受度高，民间种植较多，发展药食同源具有得天独厚的条件。河南省农科院长垣分院的建立，使得在该领域已有专业科研机构，可以从功效、口感、外观多角度研发创新，拓展药食同源产品、提升产品功效，改变现有保健食品口感、包装缺乏吸引力的现状。另外，依托当地的知名农业食品和保健品生产企业，可以整合省内产业资源，精选优质原材料打造高端药食同源保健产品，打造特色品牌，建立药食同源龙头企业。药食同源将引领长垣市功能性食品和保健品大发展，成为长垣健康产业新的发力点，为长垣经济发展添加新动能 [ 5 ]。
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user: 3. 药食同源发展中存在的主要问题 长垣市药食同源研究尽管起源较早、种类多，但是药食同源产品加工种类较少、加工技术落后。长垣市种植的药食同源植物有蒲公英、金银花、白芷、花椒、紫苏、迷迭香、红花、艾草等，都侧重于种植–销售的模式，缺乏对其本身价值的进一步开发与挖掘，产品加工技术较落后，对药食两用植物研究宣传力度不够，对市场变化不够了解，局限了药食两用植物的开发利用。 企业缺乏自主创新和品牌意识。长垣境内做药食同源产品和保健品开发的企业人员学历层次混杂，人员专业技术水平亟待提高，企业中高层次管理人员重视程度不够，导致企业整体缺乏自主创新意识，没有一个具有特色和主导品牌的产品。在药食同源产品领域里，打不开市场。
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user: 4. 长垣市药食同源发展对策 应加强政策引导，营造创新氛围。对长垣市相关企业应加强政策的引导，对有创新成果、成长性的企业，应加大培育和扶持力度，带动企业的创新积极性。另外，长垣市应加强人才引进的力度，可以让学历高、有能力的毕业生到长垣就业，充实企业的中青年科技人员队伍，为企业注入新的发展活力，加强企业的技术水平力量。 应加强科研院所和企业的产学研合作。河南省农科院长垣分院作为服务长垣的科研院所，会加强在药食同源种质资源收集、育种栽培及产品加工方面的研究，并加强与企业的产学研合作，充分发挥各自优势，通过多种形式推进和企业的全面技术合作，为技术创新性提供了有力保障，推动该领域的发展进步。
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user: 5. 结语 药食同源产业是蓬勃发展的朝阳产业，我们应发挥传统优势，挖掘自身优势，政府、科研单位、企业三管齐下，加强政策引导，加快产品研发，加速拓展市场，从传承传统走到创新发展，使药食同源产业得以进一步发扬光大，从而促进长垣经济发展。
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user: 摘要 加强高校党外干部队伍建设关系到高校整体干部队伍的建设，对于中国特色社会主义体制下中国共产党领导的多党合作的政治协商制度有着重要的意义。本文以新时期统一战线理论、干部选拔任用理论为基础，分析了现阶段高校党外干部队伍建设的现状与特点，梳理出目前高校党外干部队伍建设中存在的普遍性、突出性等问题，结合新时期高校党外干部队伍建设的背景，从高校党委重视、制度保障、组织权责分工、梯度培训模式、民主党派自身建设和构建跟踪考核测评体系等方面提出相应的改进措施和解决途径。
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user: 1. 引言 高校党外干部是指担任了一定职务的民主党派或者无党派干部 [ 1 ]，具有层次高、觉悟高、能力强、群众基础好等特点，同时具有高校教师的显著特征：坚持求真务实，崇尚科学，追求真理；发扬学术民主，勇于开拓创新，积极开展学术研究与争鸣 [ 2 ]。高校作为育人的基地，也一直是培养和输送党外干部的重要场所，建设一支能与中国共产党“长期共存，互相监督，肝胆相照，荣辱与共”的党外干部队伍，有利于坚持中国共产党领导的多党合作和政治协商制度，有利于发展统一战线事业，有利于促进中国的稳定和发展。 党的十八大以来，以习近平同志为核心的党中央以党内法规(《中国共产党统一战线工作条例(试行)》)的形式对加强党外代表人士六支队伍(即统一战线六个领域)建设和党外代表人士发现、培养、使用、管理四个环节的工作做出明确规定 [ 3 ]。党的十九大报告明确指出要：“提拔重用牢固树立‘四个意识’和‘四个自信’、坚决维护党中央权威、全面贯彻执行党的理论和路线方针政策、忠诚干净担当的干部，选优配强各级领导班子”。2018年，在全国组织工作会议上，习近平总书记强调：“贯彻新时代党的组织路线，建设忠诚干净担当的高素质干部队伍是关键，重点是要做好干部培育、选拔、管理、使用工作”。为了更好地坚持和落实党管干部原则，解决干部工作中产生的新情况与新问题，2019年党中央重新修订了《党政领导干部选拔任用工作条例》，为领导干部选拔工作进行了更为科学理性的制度安排，为选拔机制的完善与创新提供了方向指导 [ 4 ]。习近平总书记正是站在巨人的肩膀上，顶着巨大的压力和阻力，付出了大量的心血，结合国际复杂局势、国内艰巨任务、新时代党的建设总要求，对党的干部队伍建设工作进行了深层次的改革和探索。
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user: 2. 高校党外干部队伍建设存在问题 近年来高校党外干部的综合素质整体有所提高，高校干部队伍建设中，坚持革命化、年轻化、知识化、专业化的方针和德才兼备的原则，培养和选拔了一批具有较高政治把握能力、参政议政能力、组织领导能力、合作共事能力的党外干部。他们基本上都具有硕士、博士学位，大多数具有副高级以上职称，部分党外干部还是学科或学术带头人，在国内外都有一定的影响力。 但是，高校党外干部的建设机制仍然存在一定的问题，包括在推荐、培养、考察、使用、管理等环节中存在相互脱节的现象，具体体现在组织建设、部门权责、制度建设、培养方式和输送渠道等方面 [ 5 ]。 2.1. “发现”不及时，导致党外干部队伍结构不合理 目前，很多高校没有意识到“发现”环节的重要性，在很多高校中出现了党外后备干部数量不足或者后备干部队伍“青黄不接”，没有形成干部梯队。具体表现在：部分高校中因为没有党外后备干部，民主党派在换届选举中出现了现找现用等现象；部分高校只注重从“旗帜性代表人物”中发现党外干部，束缚了发现人才的视野；部分高校不注重从基层教师中选拔，只从相对集中的部门进行选拔。这些都导致高校党派干部队伍连续性差，年龄结构不合理，没有形成梯队，不利于长期可持续发展。 2.2. 制度建设方面存在问题 高校中都建立的有干部培养选拔机制，但是针对于党外干部的制度还不够完善，没有规范和正式的培养、选拔、考核和管理制度。找其原因，主要是高校中党委组织部和统战部没有明确的职责分工，协调配合上也存在一定的问题。具体表现在：部分高校不注重后备干部的总体规划和常规培养，需要时才零时选拔，时间仓促、未尽其用；部分高校仅参考学术成果和学历、职称背景等，忽略政治素养和群众影响力，综合性不够；部分高校在考察过程中，仅选择考察期表现数据，全面性不够，忽视干部的继续教育，缺乏长效性。 2.3. 培养选拔部门间权责不明晰，党外干部输送渠道窄 培养和选拔高校党外干部，主要涉及高校中的民主党派组织、统战部和组织部等部门。统战部是党委主管统一战线工作的职能部门，反映统战对象的意见和诉求，是党委在统战工作方面的参谋和助手。组织部承担了培养选拔优秀干部的职责，对党外干部队伍建设发挥着重要作用。尽管有关文件对党委组织部和统战部门承担的责任有一些说明，但在执行过程中，仍然存在权责不明晰、流程也不够具体，同时也忽视了民主党派组织的自身作用，削弱了党派自身的自主权和发言权，不利于增强民主党派的凝聚力 [ 5 ]。 我国有八个民主党派，民主党派后备干部主要是选送到人大、政府、政协、企事业单位任实职的后备干部 [ 6 ]，目前，在培养、选拔、使用民主党派后备干部工作中普遍存在选配的总量不足，比例偏低，选配以副职为主，正职少，结构不合理，输送渠道窄等现象。 2.4. 培养方式单一，不分类不鲜明 高校党外干部由于工作职能的不同，应该分类培养，但是目前现状是培训缺乏针对性，培训重视理论、忽视实践，重视政治、忽视能力 [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ]。部分高校没有根据党外干部的类型，安排其参加不同形式的实践锻炼，进行定向培养，会导致某些党外干部在任职后不能适应自己的工作环境；部分高校只进行了理论培训，与党外干部的实际需求相差甚远，就会使培训的实际效果大打折扣。实践锻炼才是党外干部提高素质和能力无法替换的培养方式。 2.5. 缺乏科学合理的考核评价体系 目前，针对高校党外干部的考核，还是缺乏科学合理的考核评价体系。具体表现在：部分高校制定的考核评价体系仍然趋于形式化，考核结束后也就结束了，没有利用考核结果，没有形成有效的反馈机制；很多高校的考核指标都是定性考核，从“德、能、勤、绩、廉”几个方面打分，缺乏一定的定量考核，只能通过印象做出评价，缺少数据支持；很多高校中，针对党外干部，并没有区分考核评价体，但是党外干部由于工作职能不同，分为不同的类型，因此在考核的内容上也应该有所区分，但目前现状是用同一个标准来考核党外干部，这样就缺乏针对性 [ 2 ] [ 10 ] [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ] [ 14 ]。
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user: 3. 新时期加强高校党外干部队伍建设的对策和建议 建设好党外干部队伍，不仅需要高校中党委、统战部、组织部、人事处等多个行政部门的通力合作，更需要各个民主党派组织自身的积极努力和长期建设。为了适应新时期高校党外干部队伍建设的要求，充分发挥党外干部的作用，提出了以下几点对策和建议： 3.1. 高校党委必须重视党外干部队伍建设 党外干部队伍建设在中国共产党领导的多党合作的新型政党制度中极其重要，对于高校民主发展有着重要的意义。做好高校党外干部工作，有利于提高决策的民主化，是高校坚持科学治校、民主治校的一项重要工作。 高校党委要在政治上充分信任党外干部，对待干部，一视同仁，不分党内和党外，将政治素质好、有发展潜力的党外教师根据自身特点安排在不同的领导岗位上。例如，将具有领导和管理能力的党外教师安排实职，担任高校行政职能部门、二级学院的行政领导工作；将学术、科研有较深造诣的，而且有责任、有担当的党外教师，让其担任学术委员会等重要学术机构的领导工作；让一部分党外干部列席或参加学校的党代会、教代会，听取他们的意见和建议，还可以聘任一些党外干部，从事党风廉政建设和民主监督的工作；推荐优秀的党外干部担任各级人大代表、政协委员，充分发挥他们自身的特点。高校党委只有充分重视“发现”党外干部，将优秀的党外教师充实到后备干部队伍中，才能保证高校党外干部队伍建设工作的顺利开展 [ 9 ] [ 13 ]。 3.2. 建立完备制度保障，明晰关系权责 建立和健全高校党外干部队伍基本制度，是做好党外干部队伍建设工作的重要保障。首先，高校统战部一定要建立民主党派或无党派人士档案制度，尤其是针对党派中的骨干成员、核心力量。档案中的基础数据的应主要包括：思想政治素质、业务能力(科研、教学成绩和获奖)、工作经历、社会影响力、参政议政(社情民意、提案、建言献策)、社会服务等。数据要动态管理，及时更新信息，如职称职务晋升、重要获奖、先进事迹、参加各类培训等。只有把握准确的数据，做到手中有人，心里有数，才能唯才是举，知人善用。 其次，要建立党外干部选拔任用制度，对档案库中政治素质好，业务能力强，善于合作共事，有组织协调和管理能力的党外干部，选拔到高校各级行政领导岗位上担任领导职务，或者向省、市、区政府有关部门推荐担任领导职务。制度中，应该明确选拔任用的条件、原则，推荐、考察、提名、协商、讨论、任免决定等工作程序和各职能部门的职责、权限等。 民主党派中，也要建立干部自我教育制度，不断提高和完善思想政治素质和能力。自我教育制度可以形式多样，通过开展知识竞赛、演讲比赛、征文、节目演出等活动，或组织参观革命圣地、考察民俗故里，或通过举办研讨会、座谈会、报告会等，使各党外干部努力加强自身思想政治素质，增强参政议政的责任感，提高建言献策的水平和能力。 管理部门之间要实现权责分工明晰，在党管干部的原则下，充分运用民主党派的推荐权，由统战部行使考察权，由组织部向上级党委提出建议，由党委确定最终使用。在考察过程中，党派组织、组织部都应全力配合统战部开展调查工作，组织部在党外干部选用过程中遇有疑问，也需要与党派组织和统战部门做好沟通和协调。各部门在工作过程中，应相互尊重和配合，加强合作和协商，校党委行使最终的使用权。 3.3. 建立梯度培训模式，加强思想政治教育 高校加强党外后备干部和党外干部的思想政治建设工作，必须作为一项长期的政治任务抓紧抓实。针对各党派组织，协助党派领导班子提高政治觉悟，充分认识加强思想政治建设的重要性；协助各党派制定年度工作计划，支持开展形式多样，主题鲜明，内容丰富的活动，寓思想政治教育工作于各项活动之中；协助党派健全学习和组织生活会制度，健全党派干部和新成员的培训制度，通过不同形式构建梯度培训模式，提升政治素养、理论水平和业务能力。 培训在内容上要加强理论学习，增强统战方针政策、多党合作历史，着重思想政治素质和理论水平提升。在方法上，充分运用在线教育平台等资源，将集中培训与自我学习相结合，将理论学习与实地调研相结合，将请进来与走出去相结合。根据党外干部成长的特点，制定有效的培养措施，创新培养方式，形成梯队。培训中一定要强化实践锻炼，将党外后备干部队伍建设规划纳入到高校整体干部队伍建设的规划中来，充实数量，完善结构。通过挂职锻炼、轮岗交流等方式多途径、多渠道地输送干部参加基层锻炼，提高后备干部的参政意识、领导能力、组织协调能力、应对复杂局面和处理棘手问题的能力。同时，建立沟通机制，定期召开干部座谈会，关注思想动态，积极引导和帮助。 3.4. 加强民主党派自身建设，完善人才队伍结构 高校各民主党派要加强自身建设，深入学习习近平总书记提出新型政党制度的新思想，认真领会“四新”“三好”要求，把学习党派章程与贯彻落实新型政党制度相结合，加强民主党派革命史、多党合作历史的教育，提高政治觉悟。 高校民主党派后备干部队伍建设中，应该构建年龄、学科领域分布均衡的队伍结构。要坚持德才兼备原则，把品德、知识、能力和业绩作为衡量人才的主要标准，不唯学历、不唯职称、不唯资历、不唯身份，不拘一格选人才。对于政治素质好、具备参政议政潜能、组织管理和协调能力强的人才，可组成干部后备梯队。 高校统战部在统战工作中，应注意互相协商，平等待人，不能高居高临下，强加于人。在帮助民主党派加强自身建设方面，应该尊重民主党派的独立和平等，把握好帮助的“度”，切实做到“帮助而不包办”，“支持而不代替”，“指导而不指责”，“督促而不强迫”。高校统战部可以为各个盟主党派的活动提供合理的经费预算，积极组织党派教师参与统战理论课题的研究，提供调研的渠道和经费，组织民主党派教师深入基层进行调研。 3.5. 科学构建跟踪考核测评体系 高校应科学地建立健全一套针对党外后备干部的跟踪考核测评体系，通过指标变化和变量记录，客观反映其综合素质能力。培养部门可以运用测评结果考察发展变化过程，借以对选拔使用过程和使用效果进行认证，同时给予被评人一定压力，促使他们根据评价指标不断提高自身水平和工作能力。测评体系应依据测评对象的具体职位、工作复杂程度和平台类型建立不同的指标变量，要体现出不同类型党外干部的差异性。对政治安排的党外干部应多考核其政治理论水平、政策应用水平、敬业精神等方面，对实职安排的党外干部应重点考核其事业心、责任感、行政决策能力等方面。在设置指标权重的时候，也要根据不同类型党外干部的特点有所侧重。将定量评价和定性评价相结合，以定量为主，定性为辅。在设置指标时一定要简单易行，指标具有可操作性，数据有利于采集。应定期、定向追踪测评对象，通过个人自测、个别访谈、群体反馈、工作实绩鉴定等多种方式，全面记录党外后备干部培养、考察期各种能力特征的变化，并以此反映个人能力素质和整体绩效提升的关联，最终做出评价。科学合理的考核评价及制定出科学合理的考核评价体系，有助于提高党外干部的积极性、主动性、创造性，有利于党外干部的培养选拔，对于高校党外干部的奖惩、能力建设、工资分配等都有积极意义。
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user: 4. 结束语 高校党外干部队伍建设是是高校统战工作的基础性工作，对于发展统一战线事业，促进高校的民主和发展，有着重大意义。从高校党委重视、建立制度保障、明确管理部门的权责分工、建立梯度培训模式、加强民主党派自身建设、构建跟踪考核测评体系等方面做好党外干部工作，才能把高校内优秀的党外教师选拔出来，为学校的发展做贡献。
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user: 摘要 目的：探讨miR-1294在胃癌中表达的预后价值，及其对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法：通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测miR-1294在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达情况，分析其与患者临床病理特征的关系，并利用Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归分析对其在胃癌中的预后价值进行评估。在胃癌细胞中，通过MTT和Transwell实验检测miR-1294表达量对癌细胞生命活动的影响。结果：胃癌组织中miR-1294的表达水平显著低于癌旁正常组织(P < 0.05)，且与肿瘤组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期均显著相关(P < 0.05)。miR-1294低表达患者的总体生存率较差(log-rank P < 0.01)。多因素Cox分析表明，miR-1294是胃癌的独立预后因子。MTT和Transwell检测显示，胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力在miR-1294干扰组中较对照组显著增加(P < 0.01)。结论：低表达miR-1294促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移，与胃癌的不良预后相关。
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user: 1. 引言 胃癌是一种常见的恶性肿瘤疾病，严重影响患者的生命健康。在我国，胃癌的发病率和死亡率都较高，而且近年来，其发病时间有年轻化趋势 [ 1 ]。胃癌的侵袭性较高，且发病多比较隐匿，很多患者在初次确诊时已经发现远处转移，错过了手术治疗的最佳时机，是胃癌患者高死亡率的主要原因 [ 2 ] [ 3 ]。外科手术是目前最有效的胃癌治疗策略，随着医学技术的发展，胃癌的诊断和治疗有所改善，但是患者的预后仍较差，尤其是有远处转移的患者 [ 4 ] [ 5 ]。因此，研究更多有效的肿瘤防治手段，改善患者预后状况，对于提高胃癌患者的生存率及术后疗效意义重大。 MicroRNA (miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子 [ 6 ] [ 7 ]。大量研究已经证实 [ 8 ]，许多miRNA通过调控原癌或抑癌基因的表达，对肿瘤细胞的生物学行为进行调控。miRNA的异常表达与多种人类恶性肿瘤的发生、发展密切相关 [ 9 ]。近来有研究表明，miR-1294在食管鳞状细胞癌、卵巢癌、胶质瘤等肿瘤中存在差异性表达现象 [ 10 ] [ 11 ] [ 12 ]。同时，Shi等人 [ 13 ] 研究报道称，miR-1294在胃癌细胞中的表达水平显著降低，但目前对其与临床意义及对生物学功能的相关研究甚少。 本研究通过分析比较miR-1294在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况及其对胃癌细胞生命活动的影响，旨在探讨miR-1294表达的预后价值及其在肿瘤进展中的生物学功能。
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user: 2. 材料与方法 2.1. 一般资料 收集2006年10月至2010年10月在福州市第一医院收治的121例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁正常组织的标本。根据UICC的临床标准，所有标本均取得至少2名病理学专家明确的病理诊断。所有患者术前均未接受其他抗癌治疗，且临床资料完整。本研究经福州市第一医院伦理委员会的批准，所有患者均知情同意。对患者进行为期5年的术后随访，记录患者的生存情况及临床病理学资料。 2.2. 细胞培养与转染 人胃癌细胞系(SGC-7901，MGC-803，HGC-27，AGS)和正常胃粘膜细胞系(GES-1)购于中国上海细胞研究所。细胞系用含有10%胎牛血清的RPMI1640培养基培养，在37℃，5% CO 2 培养箱中进行。细胞培养至对数生长期后，进行细胞转染实验。转染载体为：miR-1294 mimic (miR-1294模拟物)和miR-1294 inhibitor (miR-1294抑制物)以及对应的阴性对照(mimic NC和inhibitor NC)。细胞转染实验使用Lipofectamine 2000 (Invitrogen，美国)完成。 2.3. RNA提取及实时荧光定量PCR (qRT-PCR) 使用TRIzol试剂(Invitrogen，美国)对胃癌组织和细胞中的总RNA进行提取，使用反转录试剂盒(TaKaRa，美国)将RNA反转录成单链cDNA，并保存于−20℃备用。以U6为内参，使用qRT-PCR检测组织和细胞中miR-1294的表达量，采用SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒(购自美国Biosystems公司)以及Applied Biosystems 7500 Sequence检测系统进行分析检测。PCR反应条件为：94℃预变性5 min，然后94℃变性40 s，60℃退火1 min，72℃延伸10 min，进行40个循环。反应结束后，使用2 −ΔΔCt 方法对miR-1294的相对表达量进行计算。引物序列如下：miR-1294 forward， 5’-TGTGAGGTTGGCATTGTTGTCTGT-3’， reverse， 5’-GTGCAGGGTCCGAGGTATTC-3’; U6 forward， 5’-GCTTCGGCAGCACATATACT-3’， reverse， 5’-GTGCAGGGTCCGAGGTATTC-3’。 2.4. MTT法检测细胞增殖能力 将对数生长期的各组细胞接种于96孔细胞培养板，使细胞浓度为5 × 10 3 /mL，放置于37℃，5% CO 2 培养箱中培养3天，每24 h向培养孔中加入20 μL MTT溶液(浓度为5 g/L)，并继续培养4 h。培养结束后，吸出上清液，向每孔再加入150 μl DMSO，水平震荡10分钟，避光下进行。最后使用酶标仪检测培养物在490 mm处的吸光度值，用来评估细胞的增殖能力。 2.5. Transwell方法检测细胞转移和侵袭能力 使用Transwell法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力。在细胞迁移实验中，将细胞接种于Transwell上室，而细胞侵袭实验则是将细胞接种于预先包被基质胶的Transwell上室。上室均使用无血清培养基填充，下室使用含有10%血清的培养基填充。接种稳定转染的细胞(细胞密度为2 × 10 5 /mL)于上室，并置于37℃，5% CO 2 培养箱，经过48 h孵育后，将下室中的细胞进行甲醇固定，结晶紫染色，显微镜下计数细胞量，评估细胞的转移和侵袭能力。 2.6. 统计学分析 使用SPSS 19.0和GraphPad Prism 5.0软件进行数据处理。使用Student’s t test或方差分析对组间差异进行比较。miR-1294表达量与患者临床病理特征之间的关系使用卡方检验分析，Kaplan-Meier法和log-rank检验对患者的生存率进行分析。多因素Cox回归分析对miR-1294在胃癌中的预后价值进行评估。P < 0.05表示差异具有统计学意义。
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user: 3. 结果 3.1. miR-1294在胃癌组织和细胞中的表达水平 通过qRT-PCR对胃癌组织和细胞中miR-1294的表达水平分别进行检测，结果显示，miR-1294在胃癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织，且差异显著(P < 0.001，图1(A))。此外，所检测四种胃癌细胞系中的miR-1294的表达水平均显著低于正常胃粘膜细胞系(P < 0.001，图1(B))。 图1. miR-1294在胃癌组织和细胞中的相对表达量( *** P < 0.001) 3.2. miR-1294表达量与癌症患者临床病理特征之间的关系 进一步对miR-1294表达量与胃癌患者临床病理特征之间的关系进行了分析。根据患者胃癌组织中miR-1294的平均表达量进行了分组：miR-1294高表达组(n = 52)和miR-1294低表达组(n = 69)。结果显示，miR-1294表达量与TNM分期、肿瘤组织分化程度及淋巴结转移均显著相关(P < 0.05)，而与患者年龄和性别无显著相关性(P > 0.05)，见表1。 Table 1 Relationship between miR-1294 expression and clinicopathological features of gastric cancer patient 特征 例数 n = 121 miR-1294表达量 P值 低表达(n = 69) 高表达(n = 52) 年龄(岁) 0.374 ≤50 45 28 17 >50 76 41 35 性别 0.656 男 67 37 30 女 54 32 22 TNM分期 0.012 * I-II 54 24 30 III-IV 67 45 22 组织分化程度 0.002 * 中高分化 68 47 21 低分化/未分化 53 22 31 淋巴结转移 0.017 * 阴性 57 26 31 阳性 64 43 21 表1. miR-1294表达量与胃癌患者临床病理特征的关系 注： * P < 0.05。 3.3. miR-1294在癌症患者中的预后价值 对121名胃癌患者进行术后5年随访，并根据其生存情况及miR-1294的表达量绘制生存曲线(图2)，发现miR-1294低表达的胃癌患者较高表达患者总体生存率更差，且该差异具有统计学意义(log-rank P < 0.01)。 图2. 不同miR-1294表达量的胃癌患者的Kaplan-Meier生存曲线 本研究进一步进行了多因素Cox回归分析，探讨miR-1294及其他临床病理特征指标对胃癌患者生存率的独立影响。结果显示，miR-1294是胃癌的独立预后因子(表2)。 3.4. miR-1294对胃癌细胞生命活动的影响 以SGC-7901，HGC-27两个胃癌细胞系为研究对象，对miR-1294在胃癌发展过程中的生物学功能进行了研究。两个胃癌细胞系分别转染miR-1294模拟物和抑制物(图3(A))，qRT-PCR结果显示，转染模拟物组的miR-1294表达量显著增加(P < 0.001)，而转染抑制物组的miR-1294表达量则显著降低(P < 0.05)。 Table 2 Multivariate Cox analysis for miR-1294 expression in gastric cancer patient 指标 多因素分析 HR 95% CI P值 miR-1294 2.668 1.084~6.569 0.033 * 年龄 1.353 0.694~2.641 0.375 性别 1.148 0.559~2.356 0.707 TNM分期 2.033 0.973~4.248 0.059 组织分化 1.223 0.593~2.522 0.586 淋巴结转移 1.273 0.625~2.591 0.506 表2. 胃癌患者miR-1294表达量的多因素Cox分析 注： * P < 0.05。 对转染后胃癌细胞的增殖能力进行检测，结果显示miR-1294模拟物组(miR-1294 mimic)细胞增殖能力显著降低，而miR-1294 inhibitor组细胞增殖能力显著增加(P < 0.05，图3(B))。 进一步利用Transwell侵袭实验对细胞转染后的胃癌细胞的迁移和侵袭能力进行了检测，结果显示，miR-1294 mimic组癌细胞迁移和侵袭能力显著降低，而miR-1294 inhibitor组癌细胞迁移和侵袭能力显著上升(P < 0.05，图3(C)，图3(D))。 结果表明，miR-1294对胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用。 图3. miR-1294表达量对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响
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user: 4. 讨论 胃癌是一种发病率较高的恶性肿瘤，具有诊断率低及复发风险高的特点。侵袭和转移是肿瘤恶性转变的一个重要标志，是影响胃癌患者预后的主要原因 [ 14 ]。癌细胞的迁移和侵袭是一个复杂的生物学过程，由多种因素综合调控 [ 15 ] [ 16 ] [ 17 ]。近期的研究发现，一些参与肿瘤进展的分子可以作为生物标记，用于癌症的诊断和预后 [ 18 ] [ 19 ]。越来越多的研究证明miRNA在肿瘤的侵袭和转移过程中发挥着重要的作用，其在各种恶性肿瘤中的临床意义备受关注 [ 20 ]。本研究通过临床分析和细胞实验，旨在探索miR-1294在胃癌中的表达水平、预后价值及其在肿瘤进展中的生物学功能，为胃癌的治疗提供新的研究思路。 MiRNA是一类内生的、长度约20~24个核苷酸的小RNA。MiRNA通过作用于靶基因调节其表达，进而参与生命活动的调控。据推测，miRNA调节着人类三分之一的基因。迄今为止，多种miRNAs已被报道与癌症的发生、发展及预后密切相关，因此，miRNA有望成为肿瘤诊断和预后的新的标志物或分子指标 [ 21 ] [ 22 ]。MiRNA-1294是miRNAs的一员，已有报道显示miRNA-1294在多种癌细胞中存在差异性表达。Wang等人报道，miRNA-1294通过靶向c-Myc抑制口腔鳞状细胞癌的生长 [ 23 ]。Liu等人也称，低表达miRNA-1294与食管鳞状细胞癌的不良预后显著相关 [ 10 ]。目前miRNA-1294与胃癌的相关研究并不多。Shi等人发现 [ 13 ]，miR-1294在胃癌细胞中的表达水平显著降低，miR-1294可能是胃癌的一个预后因子。 本研究对121例胃癌患者胃癌组织中及癌旁正常组织中的miR-1294表达水平进行了检测，结果证实，胃癌组织中miR-1294的表达水平显著低于癌旁正常组织，miR-1294可能发挥了抑癌基因的作用，与Shi等人的研究结果一致 [ 13 ]。此外，miR-1294表达量与肿瘤组织分化程度及淋巴结转移、TNM分期均显著相关，说明miR-1294可能参与了胃癌的发展过程。为了进一步分析miR-1294潜在的临床意义，本研究通过建立生存曲线及多因素Cox回归分析证实，miR-1294是胃癌的独立预后因子。miR-1294的预后价值在其它癌症中已有报道。例如，在口腔鳞状细胞癌中，癌细胞中的miR-1294表达水平显著降低，过表达miR-1294可抑制癌细胞的增殖和迁移 [ 23 ]。胶质瘤中同样发现低表达的miR-1294，miR-1294抑制肿瘤细胞的增殖，提高其化学敏感性，可以作为胶质瘤一个潜在的诊断和预后标记 [ 12 ]。以上研究均表明，miR-1294在人类肿瘤疾病中是一个潜在的生物标志物。 为了进一步明确miR-1294在胃癌进展中的生物学功能，本研究使用胃癌细胞系为研究对象，分析了miR-1294对癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。经过分析发现，miR-1294过表达能显著抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。总之，本研究阐明了miR-1294对胃癌进展的影响，但是其发挥生物学功能所涉及的分子机制尚不清楚，我们后期将做更加深入的研究。 综上所述，miR-1294在胃癌组织中的表达水平显著降低，低表达miR-1294促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移，并与胃癌的不良预后密切相关。miR-1294有望成为一个新的治疗靶点，为胃癌的靶向治疗提供新方法和新思路。
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user: 摘要 明确冬小麦新品种衡H116021的配套高产高效栽培技术措施，可为该品种推广应用提供理论依据，为此特进行不同播期和播量对该品种产量及其构成因素影响的研究。试验采用裂区设计，设5个播期和5个播量处理，于2016~2017年在河北省深州市莲花池村进行。结果表明：1) 播期对穗数、穗粒数及产量有显著影响，但对千粒重影响不显著；播量对穗数、穗粒数、千粒重及产量有显著影响。2) 产量随播期推迟呈现先升高后降低趋势，随播量增加亦呈现先升高后降低趋势；在一定范围内，衡H116021穗数随播期推迟而减少，随播量增加而增加，穗粒数随播期推迟而增加，随播量增加而减少，千粒重变化随播期变化不显著。综合分析表明：衡H116021的适宜播期为10月7日~19日，相应的合理播量为11万~23万/亩基本苗。