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user: 2. 迷迭香提取物的提取方法 迷迭香提取物的提取方法有水蒸气蒸馏法，有机溶剂萃取法等很多种。 2.1. 水蒸气蒸馏法 水蒸气蒸馏法是迷迭香精油的提取中使用的最多的方法。水蒸气蒸馏法可以简单分为两种：一种是直接把需要提取的物质原料放到盛满水的容器中，加热至沸腾后再进行蒸馏，最后得到需要制取的精油。另一种就需要借助多孔板，隔水加热，利用蒸汽对原料进行蒸馏，蒸汽被冷凝分离后得到的物质就是精油。水蒸气蒸馏法在使用过程中会被溶剂的浓度、配料比、蒸馏时间等因素影响，可以用来分离那些沸点比较高、不易溶于水的精油物质。 水蒸气蒸馏法虽然很容易进行实验操作、而且实验材料价格便宜，但是蒸馏需要的时间长，需要的提取温度也很高，这就容易使精油中的受热易分解的物质、以及容易被水解的物质挥发、水解 [ 10 ]。Okoh等采用传统水蒸气蒸馏法提取迷迭香精油，精油得率为0.31%，并且鉴定出了其中的24种芳香物质 [ 11 ]。张俊清等采用正交设计法探讨出了水蒸气蒸馏法提取迷迭香精油的最好的提取方法：一整株的迷迭香，添加30倍量的水，提取时间为四个小时，研究表明，在此条件下提取的精油最稳定有效 [ 12 ]。廖俊杰等通过水蒸气蒸馏法从广东生产的迷迭香的茎、叶中提取迷迭香精油，精油的提取率为1.1%，使用GC-MS气质联用仪分析迷迭香精油的化学成分，结果显示，从迷迭香精油中检测出32种化学成分 [ 13 ]。 2.2. 改进的水蒸气蒸馏法 传统的水蒸气蒸馏法制取迷迭香精油，虽然操作方法容易，但精油得率低，因此，人们在传统水蒸气蒸馏法的基础上，对水蒸气蒸馏法进行了优化。 2.2.1. 酶法辅助提取法 酶法辅助提取法是在水蒸气蒸馏法的基础上把材料捣碎后加入纤维素酶回流制得精油的一种方法。酶法辅助提取法所得的精油不仅得率高，品质好，而且操作简便，原料便宜，但是也存在着所用时间太长，提取所需温度过高的问题。于功明等采用酶法辅助提取法提取迷迭香精油，出油率比直接水蒸气蒸馏法提高了69.2% [ 14 ]。张琳琳，吕晓玲等在单因素试验的基础上，利用正交试验法优化了酶解的工艺条件进行实验，结果显示，出油率提高了68.8% [ 15 ] [ 16 ]。 2.2.2. 亚临界水萃取法 亚临界水萃取法，即在一种特定的状态下，使用一定的压力让水在100℃~374℃的条件下仍然保持着液体状态。当温度升高的时候，会使水分子之间的氢键作用变小，水的极性不断下降，由强变弱，这一方法可在萃取不同极性的目标物质时使用 [ 17 ]。亚临界水萃取法大多是在提取天然产物的时候使用的。 2.2.3. 瞬间降压法 瞬间降压法就是使用一台能承受很大压力的仪器，通水蒸气把盛有迷迭香原料的容器中的压力慢慢升高到2~3 MPa，迅速释放，精油会随着水蒸气的释放而被分离出来 [ 18 ]。瞬间降压法所得精油品质高，产率大，但是在高温高压的环境下，会把精油中的一部分热敏性成分降解。 2.2.4. 同时蒸馏萃取法 同时蒸馏萃取法就是把水蒸气蒸馏，萃取馏出液的溶剂这两步在实验时，放在了一起进行，一般只能用来提取植物中容易挥发的成分 [ 19 ]。同时蒸馏萃取法操作简单，提取所用时间短，精油产率高，而且不会使精油粘在器壁上，但是工业化应用困难，因此只能在实验室使用。 2.3. 有机溶剂萃取法 有机溶剂萃取法利用的是某一化合物，在两种互相不能溶解、或者只有特别少的物质会被溶解的溶剂中，由于溶解度以及分配系数的不同，让化合物在这两种溶剂内转换，一遍遍的萃取之后，再提取出里面超过80%的化合物。因为石油醚、乙醚这些有机溶剂的沸点低，所以用它们反复不间断的回流，或者浸在冷水中，提取迷迭香中的有效成分，得到提取液，再通过减压蒸馏法或者是直接蒸馏法除去其中的溶剂，就能够得到粗制的精油。 有机溶剂萃取法还可以细化分为：1) 煎煮法，可以用来提取耐高温的成分；2) 浸渍法，可以用来提取受热易分解的物质；3) 渗滤法，和浸渍法差不多，也被用来提取受热容易分解的物质，虽然提取效率高，但是浪费时间；4) 回流提取法，不能用来提取受热易分解的物质，虽然提取效率较高，但是会浪费很多的溶剂；5) 连续回流提取法，提取效率最高，所以不会造成溶剂的浪费，但是提取需要的时间长。 有机溶剂提取法一方面能够提取出来植物体中的脂和蜡等一起提出来，表面上看提高了精油的产率，实际上使精油中含有很多没有用的成分，造成精油的品质下降。另一方面使用有机溶剂法所需时间较长，而且溶剂会被溶解在精油中，必须要通过使用一些蒸馏装置除去残留溶剂 [ 9 ]。郑秋闿采用有机溶剂提取法提取迷迭香中的抗氧化成分，确定了迷迭香提取物的主要成分为精油和抗氧化剂，及其在提取物中所占的比重 [ 20 ]。 2.4. 超临界CO 2 萃取法 超临界CO 2 萃取法也可以叫做超临界流体萃取技术，这种高新化工分离技术源于20世纪70年代。其工作原理是在超临界状态下利用CO 2 等物质形成的流体，萃取并且分离植物中那些有效的成分。 超临界CO 2 流体萃取技术与传统的萃取技术不一样的地方是：它萃取得到的物质中残留的溶剂很少，而且萃取的速度很快、效率很高、选择性也很高；另外萃取需要的温度不是很高，所以大部分产品中的活性物质能够被完整的保留下来。现在的人们对产品大都要求要天然、无公害，超临界CO 2 流体萃取技术作为一种“绿色、可持续发展”的高新技术，满足了人们的这一要求，所以能够被大量的应用在医疗药品、食品、化妆品、生物、环保等领域中 [ 21 ] [ 22 ] [ 23 ]。毕良武等采用超临界CO 2 萃取法提取迷迭香精油和抗氧化剂，迷迭香精油的平均得率为1.80%，迷迭香抗氧化剂的平均得率为11.93% [ 3 ]。 2.5. 物理场强化提取法 物理场强化提取是指在一些常用的溶剂萃取中，加入如微波或超声波等物理场，能够起到强化萃取的作用，还能够减少萃取时间，降低活性物质的降解 [ 10 ]。 2.5.1. 微波辅助提取法 微波辅助提取法是依据微波辐射高频电磁波，细胞可以吸收微波，电磁波能够穿透萃取所需要的介质、萃取原料的内部维管束和腺胞系统的原理，此时细胞在微波的作用下受热膨胀，压力不断变大，大到细胞壁再也无法膨胀时，细胞就会被损坏裂开，流出大量有效成分，这些成分在温度较低的环境中会被介质溶解，从而得到需要的成分 [ 24 ] [ 25 ]。 微波辅助提取法的优点是工作效率高、仪器简单容易操作、重现性好、能够节省成本、而且绿色环保，被大量的使用在各行各业中。王乃馨利用单因素实验，使用Box-Behnken试验定量分析了液料比、提取时间、微波功率这三个因素对微波辅助提取迷迭香精油的影响，而且进行了优化，最终得到微波辅助提取法提取迷迭香精油的最佳提取工艺条件：利用12.3 mL/g的液料比、使用500 W的微波功率，对产品提取125 s，此时精油得率达到最大值4.05% [ 26 ]。 2.5.2. 超声波辅助提取法 超声波提取技术是最近几年来常常被用来提取中草药活性成分的方法之一，超声波具有空化作用，可以利用这一作用加强对植物中有效物质的浸出和提取，达到理想的提取效果 [ 27 ] [ 28 ]。超声波辅助提取法提取物质所需要的时间很短、所需要的温度也不高，而且使用的仪器很简单、操作起来也很方便，所以在提取受热易分解的物质方面大受欢迎。凌敏等研究了超声波辅助微波萃取法从迷迭香中提取迷迭香酸的工艺条件，迷迭香酸的提取率可达到94.54% [ 27 ]。 2.6. 迷迭香抗氧化剂的提取方法 迷迭香中抗氧化剂的提取方法除可采取上述方法外，还有针对迷迭香抗氧化剂热稳定性能好的特点设计的结晶法和过热水提取法。 2.6.1. 结晶法 结晶法是根据迷迭香抗氧化剂在丙酮、乙醚、乙醇、乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂中容易溶解，在水中微溶的原理来提取的 [ 29 ]。结晶法提取迷迭香抗氧化剂的优点是抗氧化剂的提取率高，仪器简单，花钱少，缺点是实验过程复杂，不容易在实验室中使用，而且实验制得的抗氧化剂的抗氧化性低。李海涛等探究了使用结晶法从迷迭香中提取天然抗氧化剂的方法，提取工序为：先提取精油，再粗提抗氧化剂，最后对抗氧化剂进行精提 [ 29 ]。 2.6.2. 过热水提取法 过热水提取法是指一定条件下保持水在100℃时不沸腾，此时向水中添加某些物质后，水立即暴沸。过热水提取法利用的就是一些有机物的溶解度在过热水中相比在室温下高很多的特点提取物质 [ 18 ]。过热水提取中产生大量可以循环使用的热量，水未气化，能耗的成本较低，但是要求仪器精密，需要大量的水，所以实验时要注意安全，防止发生意外事故。Basile等利用过热水提取迷迭香抗氧化剂，产率高于水蒸气蒸馏法 [ 30 ]。