DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 3. 结果与分析 3.1. 掌叶木种子特征及组成 掌叶木种子的千粒均重在306.9 g，果实长、宽范围分别为1.2~6.6、0.15~2.7，种子长、宽范围分别为0.05~1.3、0.05~0.9 (图1)。2016年7月到2019年11月调查期间，100个种子雨接收框共收集掌叶木种子3250粒，其中完好种子2116粒，仅占总雨量的65.12%；空壳种子603粒，占总雨量的18.56%；虫蛀种子489粒，占总雨量的15.04；霉烂种子21粒，占总雨量的0.64%；受损种子21粒，占总雨量的0.64% (图2)。种子雨密度从8月底~10月初变化呈抛物线，在九月份达到最高，收集的种子占种子雨总量的89.66%，仍有10.34%种子尚未完全掉落，2016~2019年完好种子、虫蛀种子和败育种子所占比例差异不显著(P > 0.05)；虫蛀种子及败育种子所占的比例以2017和2019年明显高于2016和2018年，差异均不 图1. 掌叶木果实、种子特征 显著(P > 0.05)。虫蛀率与种子产量成反比，虫蛀能显著降低种子产量及活力，在研究地，较高的虫蛀率与2017年及2019年种子产量歉收有关。有研究表明植物种子具有大小年结实现象，本研究中，经过连续四年观察，2016和2018年掌叶木种子雨密度和种子产量均明显高于2017和2019年，推测2016和2018年可能是掌叶木种子相对大年，2017和2019年种子歉收，为种子相对小年，表明掌叶木种子也可能有大小年结实现象。 图2. 掌叶木种子组成情况 3.2. 种子雨的时间分配动态 掌叶木为喜光树种，在茂兰保护区多分布于阳坡和半阳坡光照充足的疏林和林缘中的石沟、石缝、洞穴等，种子雨持续时间约一个半月。种子雨数量从每年8月下旬开始逐渐增多，到9月中旬达到平稳状态，9月底高峰结束，到10月中旬下落数量骤减接近零。调查的四十株掌叶木母树散落种子达到种子雨总量的89.66%，种子下落过程呈抛物线状态，主要分为前期、高峰期和末期三个阶段，前期种子主要以壳斗和败育种子为主；散落高峰期以完好种子为主，到10月初种子散布基本结束，但是植株上仍有10.34%左右未成熟或败育的种子宿存。掌叶木种子雨密度分别为(353.36 ± 9.48)粒·m −2 (2016年)、(214.55 ± 5.67)粒·m −2 (2017年)、(342.69 ± 9.20)粒·m −2 (2018年)、(198.29 ± 4.40)粒·m −2 (2019年)，2016和2018年掌叶木种子雨密度均明显高于2017和2019年，差异不显著(P > 0.05)。 3.3. 土壤种子库分布特征 土壤种子库是土壤中种子聚集和持续的结果，掌叶木种子呈圆形或椭圆形，果实成熟下落后易于散落聚集在母树周围。大多掉落存留于枯落物和苔藓层中，土层0~2 cm约有80%种子，2~5 cm约20%种子，5 cm以下没有发现掌叶木种子存在。掌叶木种子富含油脂淀粉，易遭受动物取食、真菌感染霉烂及虫蛀，调查二十个样方发现，散落的掌叶木种子易被动物不彻底啃食，也特别容易腐烂，土壤种子库中霉烂种子和虫蛀种子百分比均值依次为45.60%和36.62%，掌叶木属于易结实植物，但由于土壤种子库的损耗使该种群天然更新困难。 3.4. 实生苗动态特征 掌叶木原生境中种子每年3月开始出现萌动，4月幼苗开始出现。野外调查掌叶木林下幼苗发现，萌发率较低，幼苗数量较少，散落地下的掌叶木种子很难萌发成幼苗，萌发成功的幼苗长势较差，死亡率又高。每隔一个月对实生苗观察一次，通过比较发现，不同月份间存在显著差异，实生苗在7月以前死亡率较高，可达60%。其中土面的实生苗死亡率最高，可达50%以上，石缝、石沟等特殊小生境的幼苗死亡率较低。掌叶木为阳性树种，光照充足的地方实生苗较多，光照条件较差实生苗较少。掌叶木实生苗主要集中于距母树距离较近位置。 3.5. 掌叶木自然更新的障碍 掌叶木在茂兰保护区能正常开花结果，种子能在适宜的条件下萌发，但样地内的种群趋于衰退，调查结果显示散布的种子中仅有10%左右的饱满种子保存下来，实生苗萌发后仅有6%存活下来。主要有种子损耗障碍、干旱胁迫障碍、枯落物障碍及虫害感染障碍等。针对掌叶木天然更新困难的不同因素及存在的问题，综合分析，掌叶木发展前景不容乐观，应严格对该地掌叶木种群加以保护，并在繁殖方面进行研究，可以通过封山育林、建立保护小区、迁地保护、人工繁育、组织培养等办法解决自然条件下掌叶木有性繁殖困难的问题。
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user: 4. 结语 通过对掌叶木种子雨调查发现整体掌叶木的自然更新状况不容乐观，易受生境、鸟兽取食、虫蛀、真菌、人为破坏等方面影响。管理部门应当制定相关的措施，从建立保护小区、科普宣传、人工萌发、组织培养、迁地保护等方法进行保护，提高掌叶木种群增长速度，从而避免掌叶木濒临灭绝。
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user: 摘要 随着社会的进步，生活方式的改善，心脑血管疾病发生率逐年上升，如高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑梗死(Acute Cerebral Infarction， ACI)等慢性疾病。心脑血管疾病与长期血管壁慢性炎症后动脉粥样硬化相关，根据目前国内外研究证明，中性粒细胞与淋巴细胞比值(Neutrophil-Lymphocyte Ratio， NLR)与动脉粥样硬化的发生、发展及其转归有着密切的联系。但目前对NLR研究尚有争论，并且影响因素较多，对NLR具体数值还尚不确定，许多科研人员及临床医生对NLR逐渐重视，越来越多的关于NLR的文献相继出版，NLR必将更加适用于临床疾病的判断、治疗及其转归，为临床医生提供参考，从而让患者受益。
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user: 1. NLR的概述 NLR是一种新型组合型炎症标志物，中性粒细胞数目的增加与炎症反应的发生、发展的严重程度息息相关，淋巴细胞作为免疫调控屏障，其数目减少与机体应激相关 [ 1 ]。研究发现，NLR与多种疾病预后有着密切的联系，包括慢性阻塞性肺疾病、溃疡性结肠炎、胃肠道间质瘤、动脉粥样硬化及肝癌、胰腺癌等疾病，不同程度对疾病的发生、发展及其预后起着潜移默化的作用。并且此化验结果容易获得，价格较低，整合了两种白细胞亚型的信息，避免了单一白细胞亚型因感染、脱水等情况下绝对值受影响的缺点，与其他单一的炎症指标相比，NLR具有更高的临床意义 [ 2 ]。同时，NLR参与了血管内粥样硬化斑块形成、发展及预后的全过程。
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user: 2. 动脉粥样硬化的机制 动脉粥样硬化的发病机制主要有脂质浸润学说、内皮损伤–反应学说、血小板聚集和血栓形成假说、平滑肌细胞克隆学说等。其主要危险因素有年龄、性别、血脂异常、高血压、吸烟、糖尿病、糖耐量异常、肥胖及家族史等。在上述危险因素作用下，LDL-C通过受损的内皮进入血管内皮细胞，并氧化修饰成低密度脂蛋白胆固醇，加重血管内皮损伤；单核细胞和淋巴细胞表面特性发生变化，粘附在内皮细胞上，并从内皮细胞之间移入内膜下形成巨噬细胞，通过清道夫受体吞噬LDL-C，转变为泡沫细胞，形成早期的动脉粥样病变脂质条纹 [ 3 ]。 在动脉粥样硬化形成的病理生理过程中，包括内皮细胞功能障碍、血管平滑肌细胞异常增殖和泡沫细胞形成 [ 4 ]。其中，巨噬细胞吞噬LDL-C形成的泡沫细胞在内膜的聚集在早期动脉粥样硬化斑块的形成和稳定中起着关键的作用。巨噬细胞是涉及动脉粥样硬化病变的最重要的免疫细胞。在正常情况下，沉积脂质的清除依赖于单核巨噬细胞从血液循环迁移到动脉壁中。然而大量的研究证明，巨噬细胞不断吞噬LDL-C导致其转化为破坏性泡沫细胞，反而造成动脉粥样硬化斑块的不稳定、破裂和血栓形成 [ 5 ]。
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user: 3. NLR与冠状动脉粥样硬化的关系 冠心病是由多种高危因素及机制共同作用导致管腔狭窄，随着血管病变的逐步进展，病变血管所供应的心肌细胞发生缺血缺氧性损伤，长期缺血缺氧后心肌组织中形成侧支循环，若有心脏需氧量增加时就会发生心绞痛；若病变血管发生了急性斑块破裂、血栓形成，冠状动脉管腔发生急性不完全或完全堵塞，病变血管所供应的的心肌细胞发生急性缺血缺氧坏死，进而发生严重的急性炎症反应。但是冠脉硬化也是一种慢性炎症病变，炎症反应贯穿于动脉粥样硬化的发生、发展及其转归的全过程 [ 6 ]。急性心肌梗死炎症反应包括炎症期和增殖期。Beniteszapata等研究表明，心肌组织严重缺血时直接刺激心脏产生激活信号，通过神经传导通路刺激下丘脑，促进释放促肾上腺皮质激素，进而分泌大量糖皮质激素与儿茶酚胺，从而使机体在炎症状态下淋巴细胞计数减少，导致机体抗感染、保护血管内皮功能下降。梗死后的心肌组织中浸润大量的白细胞，其中中性粒细胞是最早出现在梗死区域的白细胞亚型。当冠状动脉内斑块破裂后大量白细胞、血小板和红细胞等形成血栓，从而减少远端微血管灌注和加重心肌组织的炎症反应，NLR越高提示炎症反应越严重 [ 7 ] [ 8 ]。在激活炎症反应过程中，中性粒细胞计数增加并释放炎症介质，包括过氧化物，组织凝血活酶，中性蛋白水解酶等物质损伤血管内皮及其周围心肌细胞，心肌组织梗死面积进一步扩大，并且抑制冠状动脉形成侧支循环，加重机体的炎症反应 [ 8 ]。在炎症晚期，淋巴细胞在心肌重构中起着重要作用。T淋巴细胞与新生心血管形成、巨噬细胞的募集和侧支动脉循环的形成紧密相关，B淋巴细胞则是通过CCL7通路参与单核细胞的募集 [ 2 ]。Blum等的研究结果表明，急性心肌梗死患者中CD4+淋巴细胞绝对数减少和CD4+/CD8+淋巴细胞比值降低，并且CD4+淋巴细胞较低的急性心肌梗死患者发生Mace事件的风险增加 [ 8 ]。急性心肌梗死后3~4天为增殖期，包括残存碎片的清除、成纤维细胞活化和胶原沉积形成瘢痕组织和新生毛细血管 [ 9 ]。 大量随访数据显示NLR可预测稳定型心绞痛患者发生心源性猝死的可能性，故对急性心肌梗死患者具有重要的早期预测、诊断及预后价值 [ 10 ]。研究 [ 11 ] 还显示，NLR与GRACE积分以及SYNTAX积分相似，均有较好的预测MACEs的能力，且优于另一非特异性炎症指标hs-CRP。研究发现 [ 12 ] 急性心肌梗死患者中性粒细胞数增加，淋巴细胞数明显降低，CD4+T细胞数量显著减少，提示NLR与急性冠脉综合征相关；在预测NLR与急性心肌梗死预后时，结论是NLR是心血管疾病死亡率的独立预测因子；在行冠脉内支架植入术的临床试验中，结论是NLR是患者行急诊PCI无复流的独立预测因子，冠脉多支病变和无复流的发生率与NLR数值呈正相关，MACE的发生率也较高；中重度的冠状动脉粥样硬化管腔狭窄可引起心肌纤维化，其可导致心律失常或心力衰竭，急性心肌梗死患者早期室性心律失常，其中室扑、室颤为高危组，室速为中危组，室性早搏为低危组。比较各组NLR平均值，结果显示高危组平均NLR明显高于中危组及低危组，中危组平均NLR明显高于低危组，证实NLR可反映急性心肌梗死早期室性心律失常的严重程度。Tahto等 [ 13 ] 研究，急性心肌梗死患者的NLR平均值显著高于不稳定性心绞痛患者，说明NLR在鉴别冠脉综合征的临床类型中的重要性。因此，冠心病发病、预后及其危险程度的评估，NLR可能比单独的白细胞亚型计数更具临床意义；但作为临床诊断依据，其具体诊断数值截点需大样本量的收集及分析。
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user: 4. NLR与高血压病的关系 近年来高血压的发病率逐年上升，并且有年轻化趋势，长期的高血压可导致血管壁压力增加，血管内皮细胞受损，LDL-C通过受损的内皮进入血管内皮细胞，并且通过各种炎症因子及炎症反应，使血管平滑肌细胞增生，长期的炎症反应使动脉发生动脉粥样硬化 [ 14 ]。刘建峰等 [ 15 ] 研究表明高血压病患者与正常血压人群相比，中性粒细胞与淋巴细胞比值差异显著(2.15 ± 0.97 vs 1.39 ± 0.44， P < 0.05)，高血压病3级NLR (2.91 ± 1.29)明显高于1、2级(P < 0.05)。Pearson相关性分析显示，高血压组患者NLR与收缩压SBP及高血压分级呈正相关(r分别为0.363，0.320，P < 0.05)，Logistic回归分析显示，NLR是高血压病并发症的危险因素之一，NLR越高，血管内皮炎症反应及粥样硬化程度越高，同时高血压的心脑血管并发症越严重。石晶晶等 [ 16 ] 研究认为，NLR比值增高与脉压增加有关，脉压的增加与MACE事件相关。 正常人血压有明显的昼夜节律，白天血压明显高于夜间血压，心率也较白天有所降低，全天血压呈“抛物线”，这是由于交感神经与迷走神经有关；但在特殊情况下，如睡眠呼吸暂停低通气综合征(SAHS)时，短时间内出现肺通气减少，继而肺换气降低，发生夜间短暂性缺氧和生物钟破坏，缺氧通过一系列的神经输入、传出，使交感神经兴奋，长时间处于睡眠呼吸暂停，夜间机体处于缺氧状态，使机体各类代谢出现障碍，尤其是脂质代谢紊乱，使血管内皮细胞炎症反应加快、血管硬化并形成粥样斑块 [ 14 ]。有研究证明，心血管疾病的发病率和死亡率与杓型高血压较非杓型高血压有明显的相关性 [ 17 ]。而张金强等 [ 18 ] 研究证明，非杓型高血压组与杓型高血压组相比，NLR、PLT、红细胞分布宽度(RDW)及血小板计数均显著升高，利用Logistic回归分析提示RDW和NLR为非杓型高血压发生的独立预测因子，利用ROC曲线表明NLR取1.9时，其ROC曲线在AUC的面积是0.704，敏感性为68.8%，特异性为83.3%，RDW ≥ 14.1%时，其ROC曲线的AUC面积为0.740，敏感性为70.6%，特异度89.2%，但是未能证实PLT是非杓型高血压独立预测因子(AUC < 0.7)。目前国内外研究均认为非杓形高血压的NLR高于杓形高血压。 高血压的主要并发症包括脑出血、脑梗死、心室肥大、心肌梗死、心力衰竭、慢性肾脏病等，同时也是心脑卒中最主要的危险因素，不但发病率、患病率、致残率高，而且给家庭和国家造成沉重的经济负担 [ 19 ]。根据研究发现NLR对含有高血压多种危险因素、家族史及糖尿病患者的发生、发展及其预后具有指导意义 [ 20 ]。Aydin M.等 [ 21 ] 研究发现随着NLR值的增加，高血压前期患者的人数也在增加。LiuX等 [ 22 ] 用调整后的Cox比例风险回归模型来评估NLR与高血压患病率之间的关系，发现NLR值与高血压发病有很大的关系。
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user: 5. NLR与脑梗死的关系 脑梗死严重影响患者的生活质量，具有起病急、并发症严重，死亡率高的特点 [ 23 ]。脑梗死主要是指脑血管血流供应障碍引起的脑组织神经细胞缺血性坏死，从而导致中枢神经系统无法逆转的病理改变，主要表现为中枢以及部分外周神经功能丧失 [ 24 ]。急性脑梗死梗死区域周围组织和血管水肿，使中性粒细胞变形性作用降低；黏附和聚集的作用增强，容易形成细小的血栓，造成梗死区域缺血缺氧的发生。发生急性脑梗死时，中性粒细胞快速迁移至损伤区域，活化的中性粒细胞能分泌相关炎症介质可扩大缺血部位的炎症反应，引起血脑屏障受损、脑水肿和颅内高压，加重神经元的死亡，活化的白细胞释放多种细胞因子、水解酶和生长因子，导致血管持续性损害 [ 25 ]。研究表明，白细胞亚型分布受自主神经系统调节，粒性白细胞分布着肾上腺素受体，而淋巴细胞分布着胆碱能受体 [ 26 ]。交感神经活性增加可以通过增加耗氧量，产生更多的促炎性介质，调节血管内皮的活动。动脉壁中的低水平炎症一直在动脉粥样硬化的发生、发展及其转归中起重要作用。Tokgoz S.等 [ 27 ] 人对151例ACI患者中共有20例在随访期间死亡。非存活组的NLR和梗死体积均显著高于存活组(P < 0.05)。在Cox回归分析中，梗死体积、NLR和国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)是死亡率的独立预测因子。NLR作为短期死亡率预测指标的最佳临界值确定为4.81。NLR与NIHSS和格拉斯哥昏迷量表均显示出中等相关性(P < 0.01)。在梗死体积最高的三分位数中，NLR值显着高于梗死体积最低的三分位数和中三分位数(P = 0.001)。NLR可能是独立于ACI患者的梗死面积的短期死亡率的预测指标。Ping等 [ 28 ] 研究发现PNR较PWR、PLR在急性缺血性卒中(AIS)预后更相关，是预后的独立的保护因子。Yefei等 [ 29 ] 研究发现NLR水平升高在急性脑梗死和周围性眩晕的鉴别中具有重要价值。林东等 [ 30 ] 人对新诊治ACI患者80例，记作ACI组。其中包含男性患者49例，女性患者31例，年龄52~80岁，平均年龄(61.33 ± 8.22)岁；另取同期于接受体检的健康人员80例作为对照组。ACI组NLＲ水平均高于对照组(P < 0.05)，ACI不稳定斑块组NLＲ水平高于稳定斑块组(P < 0.05)，经多因素Logistic回归分析可得：NLＲ是影响ACI患者斑块稳定性的危险因素(均P < 0.05)。因此，NLR对于颅内颅外动脉粥样硬化具有一定的预测价值，但对于动脉粥样硬化狭窄的NLR研究相对较少；针对其危险因素的研究，不同的试验结果尚未完全统一；需要更多大样本的研究去探索与证实。
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user: 6. 结论 综上所述：NLR对心脑血管疾病的发展及预后有重要的意义，但目前对NLR部分观点仍然存在争议，同时感染、血液系统疾病、恶性肿瘤，应用激素及免疫抑制剂等药物均会明显导致白细胞各亚型的波动；但有些研究将这些人群设立为排除标准，减小研究结果可能出现偏倚；况且NLR的范围也存在争议。此综述中所引用文献的病例量少，可增加病例数量，确定NLR具体值对各类疾病预后的参考，提前进行干预，使其预后更佳，减轻家庭及社会的负担。随着社会的进步及科研的发展，许多科研人员对NLR研究，NLR必将更加适用于临床疾病的判断、治疗及其转归，为临床医生提供参考，从而让患者受益。
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user: 摘要 目的：研究中药茯苓水提液对老年痴呆症(AD)小鼠模型治疗效果并与复方何首乌口服液对比铰。方法：首先建立AD模型。用17.78%氯化铝 + 1.2% D-半乳糖 + 0.9%亚硝酸钠混合给小鼠腹腔注射造模二个月，然后用两种中药分别灌胃治疗二个实验组，20天结束。测定实验前、中、后的血红蛋白，用水迷宫试验测定小鼠记忆力前、中、后的变化。结束，取血测定血清生化指标，处死小鼠，取大脑，用生理盐水制成10%脑匀浆，测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰基转移酶(chAT)等。结果：正常对照组、模型对照组、实验(治疗1，茯苓组) 1组、实验(治疗2，桂元复方组) 2组依次排列，脑自由基( )，19.12 ± 3.03 ▲▲ ，5.48 ± 5.36，16.64 ± 2.65 ▲▲ ，14.95 ± 1.87 ▲▲★ (清除率%)，F = 17.750，P = 0.000，差异有显著性意义；(GSH-px)；脑(GSH-px)，45.20 ± 4.42 ▲▲★ 、43.56 ± 8.73 ▲▲★ 、51.61 ± 3.46、54.14 ± 4.51 (活力/ml) F = 6.065，P = 0.004，差异有显著性意义；脑(chAT)活力，53.94 ± 24.09 ★▲▲ 、15.15 ± 5.91 ▲▲ 、62.15 ± 29.94 ★★▲ 、94.85 ± 33.12 ★★ (U/g组织湿重)，F = 9.544，P = 0.000， ★ P < 0.05， ★★ P < 0.01，差异有显著性意义；脑(AchE)活力为1.00 ± 0.21、1.12 ± 0.19、1.17 ± 0.28、1.06 ± 0.29 (U/mg∙prot)，P > 0.05，差异无显著性意义；水迷宫试验游水时间比较，正常对照组前、中、后差异无统计学意义；其余三组，造模后均明显延长，治疗后，模型对照组延长，实验1组、实验2组有一定程度缩短；血红蛋白(Hb)含量，正常对照组、模型对照组无明显变化，治疗两组均有升高。治疗后血清甘油三酯、尿素氮、总蛋白、(ALT/GPT)酶活力，各组间均有一定程度变化。结论：造模各组记忆力均明显下降，治疗后明显升高，疗效显著。
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user: 1. 引言 老年性痴呆症即阿尔茨海默病(AD) [ 1 ]，是德国医生阿尔茨海默首先描述的一个疑难疾病，它是大脑与记忆功能有关的神经系统退行性变化引起的认知能力迅速减退的病症，其发病原因还沒有完全研究清楚，发病过程相当复杂，提出有多个学说，如遗传学说、神经衰老学说、胆碱能学说、β-淀粉样蛋白沉淀学说、铝中毒学说等，尚处在学说阶段，因而尚无根治药物。本病在老年人中发病率较高，现在进入老龄化社会，本病尤为突出，给国家和个人都造成极大的负担，也给老年人生活带来诸多的不方便，因而引起各国政府的高度关注。本课题组曾用铝或D-半乳糖 + 亚硝酸钠建立小鼠模型，并用中药治疗，虽获得较好的效果，但有些指标并非十分满意，机理也还不清楚，因此还需继续深入研究。现将铝 + D-半乳糖 + 亚硝酸钠，混合腹腔注射 [ 2 ]，用两种不同配方的中药口服液治疗，对比治疗效果。现将结果报道如下。
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user: 2. 材料与方法 2.1. 材料 2.1.1. 中药 桂元、首乌、薏米、茯苓、白木耳等干品。由广西百色清醒科技有限公司研究中心实验室分别研制。中药经水提醇沉，浓缩，乙醇沉淀，过滤去沉淀物，去乙醇，定容，等精制步骤，装瓶，灭菌，待用。配制成茯苓抗痴呆1号口服液，由茯苓、薏米、白木耳等组成抗痴呆1号(专利号201210339742.8) (供治疗1组用)；桂元首乌抗痴呆2号(专利申请号：201210015422.7)口服液，桂元首乌中药组成(供治疗2组用)。 2.1.2. 药品 各种测试盒，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、胆碱乙酰基转移酶(chAT)、胆碱酯酶(AchE)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮、丙氨酸氨基转移酶等试剂盒，购自成都迈克试剂公和南京建成生物工程研究所有限责任公司。硝酸铝、三氯化铝、硝酸钠、半乳糖、过硫酸铵、氯化钾、氯化羟胺、对氨基苯甲酸、1-奈胺、氯化氢(HCL)、磷酸氢二钾、铁氰化钾、氰化钾、四甲基乙二胺(TEMED)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、均为国产分析纯。 2.2. 方法 1) 实验动物，由湖南省长沙市天勤生物技术有限公司提供小白鼠，昆明种(SPF级)，健康，雌雄各半，鼠龄55天，体重25~35克，共60只。物生产许可证号：SCXK(湘)209-0014。质量检测单位，湖南省动检二站，动物实验单位：使用许可证号SYXK桂2011-0010。右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室，放小白鼠饲养内空气净化鼠架装置上，温度25℃~30℃，湿度45%~65%，分笼喂养，每笼6只，雌雄分开，由学院动物室提供用标准饲料喂养，自由饮用自来水。 2) 动物模型的建立及分组先用三氯化铝 + D-半乳糖 + 亚硝酸钠混合后腹腔注射造模 [ 3 ]。D-半乳糖用生理盐水溶解，配成1.2g%浓度；亚硝酸钠用蒸馏水配成0.9%，氯化铝用蒸馏水配成17.78%，滤膜过滤除菌。放4℃冰箱保存待用。D-半乳糖按每天100 mg/kg体重剂量 [ 3 ]，0.9%亚硝酸钠按45 mg/kg体重剂量，三氯化铝按Al3 + 2 mg/kg体重剂量，三溶液混合后给小鼠作腹腔注射，每日1次，连续二个月结束。染毒结束后，将小鼠分成模型对照组12只、实验(治疗1，茯苓组) 1组18只、实验(治疗2，桂元复方组) 2组18只，另设正常对照组12只。 3) 动物治疗实验1组(茯苓组)用茯苓口服液、实验2组(桂元复方组)用桂元首乌复方口服液分别灌胃，以成人(50 kg体重)剂量折算，每次每只小鼠(40~45 g体重/只)用原液0.15 ML + 蒸馏水稀释成0.3 ML，灌胃，每日一次，治疗20天，模型对照组，正常对照组用等量蒸馏水代替灌胃直至实验结束。 4) 记忆力变化的判断，实验过程中，做水迷宫试验，测定实验前、中、后的记忆力变化；用Y型水迷宫试验。实验开始小鼠预先学习8~10天(d)游泳，使每只小鼠形成到达上岸终点记忆，熟识线路，逃避危险。然后测试(S，游水时间)：每鼠连续游泳3次，记录自下水至到达上岸终点的时间(S，游水时间)和错误次数，连续测定3天。统计时设定标准，错误率%，超过10秒/次为超时(计算超时率%)，超过40秒/次，为失败(计算失败率%)。实验过程中，测定实验前、中、后三次，作对比记忆力分析。测试方法按参考文献 [ 4 ]。 5) 测定实验前、中、后血红蛋白Hb含量，判断对造血功能的影响。用铁氰化钾(HiCN法)测定血红蛋白。用温水浸小鼠尾巴1分钟，使充血，刺破尾巴后让血滴到白瓷板上，取10 μl测定血红蛋白，具体操作参考文献 [ 3 ]。 6) 实验结束，从眼球后取全血，分离血清，放4℃冰箱保待用。处死小鼠，取大脑组织，用生理盐水洗去多除的血液，滤纸吸干，称重，匀浆器研磨5分钟，用生理盐水制成10%脑匀浆，放4℃冰箱保存待用。生化指标测定方法：血清测尿素、胆固醇、三酯酰甘油、谷丙转氨酶等；大脑匀浆测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力、自由基( )清除率%、胆碱乙酰基转移酶(chAT)、胆碱酯酶(AchE)等；血清尿素氮用脲酶波氏法测定；TC测定，依据血清中脂化的胆固醇经胆固醇酯酶水解成游离胆固醇，再被氧化酶氧化生成过氧化氢，经过氧化物酶催化，将4-氨基安替比林和酚氧化为红色醌型化合物，在510 nm波长比色测定，计算其含量；TG用测定，甘油三酯在脂肪酶催化下水解生成甘油，然后甘油在甘油激酶，3-磷酸甘油氧化酶等催化下生成过氧化氢，再经过氧化物酶催化，将4-氨基安替比林和酚氧化为红色醌型化合物，在510 nm波长比色测定计算其含量；谷丙转氨酶活力用2，4-二硝基苯肼测定；大脑匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力测定：GSH-px促进过氧化氢与GSH反应生成水及氧化型谷胱甘肽(GSSG)，GSH-px活力可以其催化GSH的反应速度来表示，测定此反应中还原型谷胱甘肽(GSH)的消耗量，可求出酶的活力。GSH和二硫代二硝基苯甲酸作用生成5-硫代二硝基苯甲酸呈黄色，在412 nm波长比色，参考文献 [ 4 ]。胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活力测定，是以乙酰辅酶A和胆碱为底物，在ChAT催化下，反应生成物与显色剂结合，在324 nm处比色测定吸光度，计算转移酶活力；乙酰胆碱酯酶(AchE)活力测定，乙酰胆碱酯酶水解乙酰胆碱生成胆碱及乙酸，胆碱可以与巯基显色剂反应生成TNB对称-三硝基苯黄色化合物，412 nm比色测定，水解产物胆碱的数量可反映胆碱酯酶的活力；具体操作按试剂盒说明书。( )清除率%测定利用比色法 [ 5 ]，利用过硫酸铵与Tris，TEMED混合反应生成( )，经与氯化羟胺，对氨基苯甲酸，á-萘铵一系列反应，生成黄色终产物，比色测定，可计算浓度和清除率 [ 5 ]。 2.3. 数据收集及统计学处理 数据均来自原始记录。按照原始记录要求，从实验一开始，根据实验设计方案，就做好原始记录，有专用实验记录本，封面，标明实验名称，课题负责人，课题成员，质量负责人，实验起止时间。内面第一页，记录实验方案，所需动物品种，数量，分组，体重等。实验每天均有原始记录，记录作到及时、准确、真实、完整；记录必需在本子上，不得记在一张纸上，过后转抄，记录必需是原始的，作到可塑源性；不得错记漏记，写错不得撕页，只能打叉，保留原样清晰可见，并在旁边签名，后面补写正确的，以保证记录的真实性；每天实验结束，实验者和记录者需签名确认，质控者签名，时间。实验室负责人或指导老师需经常检查。记录本不外借，不得带出实验室。课题实验结束，记录本上交统一归档保管，包括实验动物器官经甲醛处理上交归档保管，必要时作病理研究。本实验室(右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室，广西高校重点实验室，研究方向：中草药的开发与利用)自上世纪八十年代创立以来，所有的研究课题记录、动物标本，均完整保存。除本课题人员可借阅外，非本课题人员不借。根据以上记录的数据，在电脑上打开SPSS-13软件，分组输入，按设计的操作程序，统计，结果自动生成。记录显示F值、P值，各组比较，方差分析和Q检验结果。结果用( x ¯ ± s )表示。
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user: 4. 讨论 4.1. 一般情况 实验结束，正常组死亡率为8.33%；模型组死亡率为25.0%；治1组死亡率为0%；治2组死亡率为16.67%；模型组死亡率高于其他各组。各组体重均有增加，无论是治疗前或治疗后，正常组体重增加最多，平均体重从实验开始27.88 g到结来为50.02 g，增加了22.14 g；而模型组从31.44 g到50.10 g，增加了18.66 g，其他二组增加较小，说明造模对体重和死亡有一定影响。 4.2. 大脑胆碱乙酰基转移酶活力 实验结果显示，模型组活力明显低于其他三组，乙酰胆碱转移酶催化乙酰胆碱合成，酶活性降低，乙酰胆碱合成减少，乙酰胆碱减少，会影响到大脑记忆功能。血清中胆碱酯酶活力测定结果，模型组明显低于其他三组，治疗组最高，特别是治疗2组，表明两组中药均能明显提高胆碱乙酰转移酶和胆碱酯酶活力。目前研究表明，胆碱乙酰基转移酶和胆碱酯酶是公认的大脑中与记忆功能密切相关的关键酶。 4.3. 大脑自由基( )清除率%，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力 模型组明显低于其他三组。说明模型组抗氧化能力降低，自由基在大脑中增加，会影响大脑的功能，超氧阴离子自由基( )具有强的氧化能力，在线粒体呼吸链电子传递过程中漏出的电子与O 2 结合可产生超氧阴离子自由基( )，是体内( )的主要来源，胞质中的需氧脱氢酶也可催化产生自由基( )，感染、缺氧、药物等外源因素，也可使自由基产生增加。但体内自由基( )可迅速在超氧物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、过氧化氢酶等催化下转化为H 2 O 2 ，H 2 O 2 再转化为无毒的H 2 O而迅速消除，只有在某些病理情况下，使自由基产生增加或清除减少，对机体产生损伤。超氧阴离子自由基( )是体内主要的自由基，它与H 2 O 2 、羟自由基·OH，统称活性氧，或反应氧族，它们化学性质活泼，羟自由基·OH活性最强，可引起蛋白质、DNA等各种生物大分子氧化损伤，破坏细胞的结构与功能，如可使磷脂分子中的不饱和脂肪酸氧化成过氧化脂质，破坏生物膜。同时，过氧化脂质与蛋白质结合成复合物，累积成棕褐色的色素颗粒，称脂褐素，与组织老化有关 [ 6 ]，这是老年痴呆的自由基学说。本实验结果表明，模型组自由基( )清除率%低于其他三组，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力也低于其他三组，而且(GSH-px)活力，治疗1、2组高于正常组，说明治疗效果显著。 4.4. 水迷宫试验 结果表明，造模前，各组比较，正常对照组与桂元复方组比较，有显著性差异，P < 0.05，桂元复方组游得较快；造模后(治疗前)，茯苓组、桂元复方组与正常组比较，分别是 ★ P < 0.05， ★★ P < 0.01，造模后茯苓组、桂元复方组游水时间明显延长，速度明显减慢；模型组时间也延长但还不太明显；治疗后，模型对照组、桂元复方组与正常对照组比较， ▲ P < 0.05，游水时间明显延长，而且模型对照组比造模后(治疗前)时间还继续延长，速度继续减慢，但茯苓组、桂元复方组比治疗前游水时间有一定缩短，速度有加快；正常组前、中、后速度几乎不变，无显著差别，而且只出现很低的错误率，没有超时和失败；说明其记忆力前、中、后均无变化；而模型组、茯苓组、桂元复方组前、中、后速度发生明显改变，造模后变慢；治疗后，茯苓组、桂元复方组速度加快，模型对照组速度继续变慢，说明出现治疗效果。 4.5. 其他 造模对血红蛋白(Hb)有一定影响，造模前各组间无显著性差异，且均在正常范围内；造模后，除正常对照组(Hb)没有下降外，其他三组均有不同程度的下降，其中治疗组降低最多；治疗后，正常组没有明显变化，治疗组上升恢复，桂元复方组基本恢复到原有水平，模型对照组维持在治疗前水平。血清总胆固醇(TC)，各组间无显著性差异；但血清甘油三酯、尿素氮、谷丙转氨酶、总蛋白，各组间比较均有显著性差异 [ 7 ]，各组间由于实验对照条件不同，实验组注射造模药物，治疗组灌服二种不同中药复方，可能会对某些器官(如肝、肾)，或某些代谢产生影响，这些影响不一定是不良影响，也有良性作用，如本次实验组尿素氮低过正常组，血清总蛋白又高过正常组，而谷丙转氨酶治疗组却高过正常组，是误差造成？或其他原因？其原因、生理意义、与本病间的关系有待进一步探讨 [ 8 ]。
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user: 摘要 目的：基于数据挖掘分析出中医临床治疗创面的用药规律。方法：运用数据库技术对700余篇中医药创面愈合的相关文献进行整理，建立中医药促进创面愈合的数据库。通过对单味药物、药对及药物关联分析并归纳，提炼出中医临床促进创面愈合的主要用药规律。结果：全部文献包含方剂643个，共涉及中药234味，其中药物频次使用最高的为黄柏，其用药频率占54.43%。药物使用频次大于纳入方剂数15%的有15种。在聚类分析中共得到6个聚类方，分别适用于创面早期清热解毒以及中晚期活血化瘀及补气。结论：临床上主要运用清热解毒、活血化瘀、益气补血这三类中药辨证进行促进创面愈合的治疗。
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user: 1. 引言 创面愈合是创伤后引起的病理过程的总称，通常分为四个阶段，即止血、炎症、增殖和重塑阶段 [ 1 ]。其中任何一环出现了功能的异常与障碍均会导致创面的愈合困难，使其无法继续修复造成了创面修复的瓶颈。而中医药在治疗创面愈合问题上效果显著 [ 2 ]，但各医家均有自己特有用方用药，难以系统掌握，故而找出其中内在联系对于归纳总结中医药促进创面愈合治疗经验极为重要。数据挖掘可以分析方剂中方、证、药之间存在的复杂关系，为方剂研究提供了强有力的工具。常用的技术有关联规则、频数分析和聚类分析等 [ 3 ]。因此本文通过对中医药促进创面愈合相关文献资料进行整理，建立中医药促进创面愈合的专病专方数据库，并用如频数分析、聚类分析对之进行处理、分析，以发现临床用药规律及药物配伍的数据间隐含的对应联系和关系模式，希望为指导临床用药及新药研发等各项工作做出一丝微薄贡献。
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user: 2. 研究对象与研究方法 2.1. 处方来源 根据《中医外科学》中出现创面的病名以及外治法常用剂型 [ 4 ] 在知网、万方、维普数据库中以(“创面”or“溃疡”or“糖尿病足”or“压疮”or“烫伤”) and (“中药”or“方”or“汤”or“膏”or“油”or“散”or“酊”or“洗剂”)，检索2010至2020年所得文献中处方。 2.2. 纳入标准 中医治疗创面愈合的随机对照临床试验，中药服用方法为口服或外用，试验组样本量 ≥ 15例，所载文献须有明确的药物组成和剂量，且结果为有效。 2.3. 排除标准 文献综述或专家经验介绍；试验组应用中西医结合或西药治疗；试验组应用单味中药或中药注射剂；非药物治疗的中医药治疗，如针灸、穴位贴敷等；重复出现同一处方的文献。 2.4. 数据筛选 根据纳入和排除标准筛选文献，排除相同名称的文献，并整理得出所含方剂和中药。 2.5. 数据分析 使用Access2000构建中医药促进创面愈合的专病专方数据库，采用SPSS.19对643首方剂进行统计分析，使用频次法和频率(频率 = 中药出现的频次/总方剂数 × 100%)对药物进行描述性统计以及聚类分析，绘制树状图，根据树状图结果得到聚类方。
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user: 3. 结果 3.1. 文献及方剂概况 本次共检索到1899篇文献，根据纳入和排除标准，最终筛选出784篇文献，整理得到方剂643首，详细筛选过程见图1。 在纳入的784篇文献中，急性创面30篇，慢性创面754篇(包括肛瘘、下肢溃疡、烫伤、压疮、乳腺炎、糖尿病足等)。在643个方剂，其中内服方93剂，外用方550剂。 图1. 文献筛选流程及结果 3.2. 药物频次分析 全部文献包含方剂643个，共涉及中药234味，通过单味药频数分析，粗略推论中药促进创面愈合的用药规律。其中药物频次使用最高的为黄柏，其用药频率占54.43%。药物使用频次大于纳入方剂数15%的，有15种，占中药味数的6.41%。见表1。 Table 1 Frequency of drugs commonly used to promote wound healin 序号 药物 频次 频率(%) 1 黄柏 350 54.43 2 冰片 194 30.17 3 当归 193 30.02 4 大黄 174 27.06 5 血竭 168 26.13 6 紫草 162 25.19 7 黄连 143 22.24 8 白芷 137 21.31 9 乳香 130 20.22 10 地榆 125 19.44 11 没药 124 19.28 12 黄芪 121 18.82 13 甘草 117 18.20 14 丹参 117 18.20 15 炉甘石 99 15.40 表1. 促进创面愈合常用药物频次与频率 3.3. 药物聚类分析 通过对上述的高频药物进行聚类分析得到7个聚类方：① 黄柏；② 大黄；③ 冰片；④ 地榆、黄连、丹参、黄芪、炉甘石；⑤ 白芷、甘草、紫草、当归；⑥ 乳香、没药、血竭。冰片、大黄、黄柏三药均能清热解毒，用于治疗创面早期“热毒”较甚者。黄连、地榆清热解毒，丹参配伍黄芪，补气活血，炉甘石收湿敛疮，适用于创面中后期“热毒”“气虚”“血瘀”兼有。乳香、没药、血竭相配伍具有活血化瘀、生肌敛疮的功效，当归活血祛瘀，配合紫草、甘草、白芷化腐生肌，均用于创面中后期“血瘀”较甚者。见图2。 图2. 促进创面愈合中药聚类分析树状图
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user: 4. 讨论 影响创面愈合的因素有很多，如创面的感染、缺血、缺乏生长因子等 [ 5 ]。研究表明，感染会使创面难以从炎症期过渡到增殖期 [ 6 ]。而且长时间的炎症会增加伤口的疼痛感，导致愈合更加困难 [ 7 ]。在创面的增殖期主要依靠肉芽形成、伤口收缩和上皮化 [ 8 ]。而肉芽组织及毛细血管形成极度依赖丰富的血供，因此高血糖引起的血供不足容易使创面的肉芽和血管退化 [ 9 ]。各类生长因子参与了创面上皮化过程中角化细胞的增殖和迁移。因此促进创面的最佳愈合可以概括为快速止血、控制感染、促进上皮细胞的分化、增殖及向创面的迁移以及适当的血管生成 [ 10 ]。 中医认为，创面愈合是在创面形成之后，人体内正邪相争，正胜则邪退，邪毒渐清，瘀腐得去，经络通畅，正气得复，气血通畅的过程。通过本研究对于药物的使用频次，以及药物聚类分析可知，对于创面愈合效用较好的药物大致分为三类，清热解毒药(黄柏、黄连、大黄、冰片、炉甘石等)、活血化瘀药(当归、紫草、血竭、丹参、乳香、没药等)以及补气养血药(黄芪、当归、甘草等)，分别对应创面“热毒”、“血瘀”、“气虚”这三个病因病机 [ 11 ]。 清热解毒药可去除因血瘀经络，蓄而化热，所产生的热毒，降低创面温度，减轻创面红肿热痛程度，现代研究发现此类药物具有广谱抗菌、抗病毒作用，同时还可提高机体免疫力，外用可有效控制伤口感染，内服可清除体内毒素，加强免疫力 [ 12 ]。 活血化瘀药是治疗创面愈合中最重要的药物之一 [ 13 ]，中医认为化瘀才能生肌，瘀血去而经络通，经络通则精微物质可濡养肌肉，创面才可得复。现代研究发现，活血化瘀药也具有抗炎的作用，同时具有缓解创面疼痛的作用，能使创面毛细血管通透性增高，加快血液流速，并能及时清除坏死物质，促进创面成纤维细胞合成和分泌各种生长因子，加快创面血管化进程，更利于创面周缘皮肤干细胞增殖、迁移、分化，进而促进创面的愈合 [ 14 ]。 而补气活血药物在热毒、瘀血去除后，可针对外伤病耗伤气血，机体正气削弱，不能滋养创面的病因，促进人体正气的恢复。现代研究发现，补气活血药可有效调控血管的生成，具有双向的调控作用 [ 15 ]，而本次所统计的补气活血药，对于血管的生成在合适浓度类均具有促进的作用。 除此以外，这三类药物的配伍运用更显妙处。清热解毒药去除伤口处有毒物质，改善机内内环境；活血化瘀药去除伤口瘀血，疏通经络，此二类药相和，为新肉生长创造了良好的环境。而补气活血药加强人体正气，为新肉生长提供充分的精微物质，三类药相配伍，贯穿创面愈合的整个过程，环环相扣，为治疗创面愈合提供了明确的思路，值得临床借鉴使用，而其中高频药物、药对，更是多家临床医师经验总结，值得我们在进一步治疗创面愈合、研发新药时灵活运用。
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user: 摘要 通过文献研究发现鹅不食草具有明显的抗炎活性，但其药效物质基础和作用机制尚不清楚。因此利用分子对接技术对鹅不食草中具有抗炎作用的化学成分进行虚拟筛选。在TCMSP数据库中筛选出鹅不食草的化学成分组成配体数据库，选择4个与抗炎活性密切相关的蛋白靶点组成受体数据库，用SYBYL软件进行分子对接。通过对接打分函数(Total Score ≥ 5)筛选出6个活性成分，并分析了蛋白复合体的相互作用。本研究初步筛选了鹅不食草抗炎的活性成分和关键靶点，为鹅不食草的进一步研究提供了参考。
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user: 1. 引言 炎症是一种基本的病理生理过程，是机体在受到致炎因子刺激后产生的一种防御反应，其特点是会产生大量炎性介质和促炎因子，比如组胺、前列腺素E 2 (PGE 2 )、一氧化氮(NO)、白介素1 (IL-1)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)等 [ 1 ]。炎症反应是一些疾病的发病基础，如不及时干预治疗可能会造成严重后果 [ 2 ]。鹅不食草为菊科植物石胡荽(Centipeda minima (L.) A. Br. et Aschers.)的全草，被《中国药典》收载，其味辛、性温，具有发散风寒、通鼻窍、止咳、解毒、止痒等功效，传统上用于治疗鼻炎、疟疾、哮喘等，广泛分布于东亚和东南亚地区 [ 3 ]。鹅不食草中含有多种化学成分，如挥发油类、甾体类、黄酮类、萜类、有机酸等 [ 4 ]。近年来研究表明其药理活性主要包括抗炎、抗肿瘤等 [ 5 ]，但在鹅不食草中，哪些成分具有抗炎活性，以及其具体抗炎机制仍不清楚。计算机辅助药物设计(Computer-Aided Drug Design， CADD)是借助计算机原理，通过模拟药物与受体生物大分子的相互作用，预测其亲和力，实现基于结构的药物设计的一种重要方法 [ 6 ]，其应用极大地加快了新药研发的速度与效率，已成为现代药物研发的常规方法之一。而分子对接技术则是计算机辅助药物分子设计的重要手段之一 [ 7 ]。本研究即以分子对接技术为研究方法，对鹅不食草中所含成分进行研究，进一步明确鹅不食草中主要抗炎药效物质，并阐明其药理作用机制，也为中药多靶点研究提供新的参考。
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user: 2. 材料与方法 2.1. 程序系统 所有研究及计算工作均在SYBYL-X2.0 Windows版本中的Surflex-dock模块中完成。 2.2. 靶点的准备 本研究的靶点均从Protein Data Bank (PDB)数据库(http://www.rcsb.org/)中获取，根据文献 [ 6 ] [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ]，选取了4个蛋白进行研究，是目前抗炎药物设计的重点靶标，因此在本研究中选为代表靶点。在PDB数据库中下载这4个蛋白的晶体结构，具体蛋白靶点见表1。将下载的靶蛋白导入SYBYL软件中，进行蛋白晶体前处理，提取原配体，删除水分子以及非相关的蛋白质构象，对非完整的氨基酸残基进行补充，加极性氢原子，以原配体分子位置为中心，设置半径为5埃，将此范围作为活性口袋，其他参数为默认值。 2.3. 配体的准备和处理 以“鹅不食草”为关键词，在TCMSP (http://lsp.nwu.edu.cn/index.ph)数据库检索出鹅不食草所含的化学成分及其药动学参数。挑选出口服生物利用度(oral bioavailability， OB) ≥ 30%，类药性(drug-likenesses， DL) ≥ 0.18的化合物共21个，组成化合物数据库。从PubMed (http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)中下载相应化合物的平面结构，未能在PubMed下载的化合物用ChemDraw绘制结构式，保存为mol2格式，化合物具体名称见表2。在sybyl-X2.0中创建配体小分子数据库，将这些化合物导入后进行能量最小化处理，使每个化合物有最稳定的构象，最后导入数据库。 Table 1 Target protein informatio 序号 蛋白库编号 靶点名称 缩写 1 3NT1 环氧合酶2 COX-2 2 1M9T 诱导性–氧化氮合酶 iNOS 3 2ZOQ 细胞外调节蛋白激酶1 ERK1 4 4L8M p38丝裂原活化蛋白激酶 p38 表1. 靶点蛋白信息 Table 2 Information about compounds contained in Herba centipeda 序号 MOL ID 化合物名称 口服生物利用度 类药性 1 MOL011694 Plenolin 68.26 0.19 2 MOL011703 2β-hydroxyl-2，3-dihydrogen-6-O-angeloplenolin 39.36 0.4 3 MOL011704 1-[(Z)-2-(3，5-dimethoxyphenyl)vinyl]-3，5-dimethoxybenzene 41.69 0.21 4 MOL011716 8-Hydroxy-9，10-diisobutyryloxythymol 43.19 0.2 5 MOL011718 arnicolide D 85.85 0.33 6 MOL011722 arnicolide C 76.91 0.32 7 MOL011723 florilenalin angelic acid 105.11 0.39 8 MOL011724 florilenalin isobutyrate 55.53 0.38 9 MOL011726 senecioylplenolin 90.22 0.37 10 MOL011727 taraxasterol palmitate 33.84 0.3 11 MOL011728 (1R，3aR，5R，5aS，8aR，9S，9aS)-9-hydroxy-1，5，8a-trimethyl-3a，4，5，5a，6，7，9，9a-octahydro-1H-azuleno[7，6-d]furan-2，8-dione 70.36 0.19 12 MOL000359 sitosterol 36.91 0.75 13 MOL000449 stigmasterol 43.83 0.76 14 MOL004961 quercetin der. 46.45 0.33 15 MOL005828 nobiletin 61.67 0.52 16 MOL000596 taraxasterol acetate 43.08 0.74 17 MOL007415 aurantiamide acetate 58.02 0.52 18 MOL009042 helenalin 77.01 0.19 19 MOL000098 quercetin 46.63 0.28 20 MOL000358 beta-sitosterol 36.91 0.75 21 MOL006554 taraxerol 38.4 0.77 表2. 鹅不食草中所含化合物的相关信息
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user: 3. 结果 按默认参数进行分子对接后，分别得到每个化合物与4个靶点蛋白的对接得分Score值，Score值是用−log(KD)表示的，由于RT ln(KD) = G (配体与受体的结合自由能)，因此G值与Score值成反比。结合自由能越小，配体与受体结合的稳定性就越高，Score值越大，G值越小，配体与受体的结合越稳定。本研究将每个化合物与4个蛋白靶标对接后的Score加和，并根据总分值从高到低排列，具体结果见表3。由打分结果可知，总分高于阈值的化合物共6个，具体结构见图1。内在配体与靶点分子对接结果见图2。 Table 3 Molecular docking result 序号 3nt1 1m9t 2zoq 4l8m 总分 17 6.04 7.85 6.46 7.40 27.75 15 5.75 5.79 7.06 7.12 25.72 12 7.23 7.04 5.59 5.08 24.95 20 6.27 5.71 6.06 5.13 23.17 13 5.62 6.71 4.88 5.34 22.55 10 5.95 7.46 7.78 1.15 22.35 14 4.24 3.69 5.34 7.15 19.99 4 4.35 5.85 4.92 3.98 19.53 3 3.83 5.29 4.55 5.75 19.43 19 3.67 3.97 3.99 7.37 19.00 2 5.01 4.36 4.34 2.56 16.26 5 3.55 4.44 5.08 2.61 15.68 7 4.17 4.44 3.33 2.74 14.68 18 2.56 4.55 4.29 2.72 14.12 16 3.53 4.31 3.55 2.33 13.72 6 3.06 4.97 3.74 1.81 13.58 9 3.95 4.76 3.77 −0.73 11.74 11 3.00 3.52 2.59 2.48 11.59 8 3.05 4.10 4.26 −0.47 10.93 1 2.72 2.69 2.77 1.91 10.09 21 3.88 3.75 3.39 −5.89 5.14 表3. 分子对接结果 从表3可知，鹅不食草的21种化合物与3nt1、1m9t、2zoq、4l8m进行分子对接后，得分最高的化合物是化合物17金色酰胺醇酯；单个靶点得分最高的化合物除化合物17外还有化合物12谷甾醇、化合物10蒲公英甾醇棕榈酸酯。进一步分析化合物17金色酰胺醇酯与3nt1、1m9t、2zoq、4l8m蛋白相互作用模式。由图3~6可以看出化合物17与3nt1的Arg216、Tyr134和Tyr147氨基酸残基形成氢键，与Leu238、Asp239、His133等5个氨基酸残基有疏水相互作用；与1m9t的Trp366和Met368氨基酸残基形成氢键，与Gly196、Val346、Cys194等9个氨基酸有疏水相互作用；与2zoq的Arg87氨基酸残基形成氢键，与Lys220、Val205、Arg189等10个氨基酸残基有疏水相互作用；与4l8m的Gly110氨基酸残基形成氢键，与Asp112、Leu171、Leu167等10个氨基酸有疏水相互作用。如图7所示，3nt1靶点得分最高的化合物是化合物12谷甾醇，其与蛋白靶点的Leu224氨基酸残基形成氢键，与Leu145、Arg216、Ser143等7个氨基酸残基有疏水相互作用；2zoq靶点得分最高的化合物是化合物10蒲公英甾醇棕榈酸酯，其与蛋白靶点的Val205氨基酸残基形成氢键，与Glu203、Arg87、Thr202等7个氨基酸残基有疏水相互作用，见图8。正是因为这些残基与配体的相互作用，增强了配体与受体的结合能力，从而使该配体化合物的活性提高。 图1. 鹅不食草所含活性成分 图2. 内在配体与各靶点分子对接图 图3. 3nt1与化合物17对接 图4. 1m9t与化合物17对接 图5. 2zoq与化合物17对接 图6. 4l8m与化合物17对接 图7. 3nt1与化合物12对接 图8. 2zoq与化合物10对接
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user: 4. 讨论 由于中药成分复杂，其药理作用具有多靶点、多作用的特点，很难用传统方法详细阐述其药效学基础和药物作用机理 [ 11 ]。计算机虚拟筛选技术在分析有效成分和药物开发方面显示出其独特的优势。利用计算机辅助药物设计来解释特定小分子的反向药理机制已引起越来越多的关注，这为阐明天然产物的作用靶点和机制提供了一种新的方法，也为药物研究提供了新思路。本研究应用计算机虚拟筛选技术，以炎症信号通路的关键靶点COX-2、iNOS、ERK1、p38为靶蛋白，对鹅不食草中21个化学成分进行分子对接筛选，综合评价对接结果，筛选出6个活性较好的化合物。在筛选出的候选化合物里，其中一些化合物的生物活性已被报道。如李等 [ 12 ] 研究证明金色酰胺醇酯在脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症模型中显示出一定的抗炎活性。张等 [ 13 ] 证明化合物15川陈皮素对二甲苯所致小鼠耳肿胀具有明显的抑制作用。Gabay等 [ 14 ] 研究表明化合物13豆甾醇抑制多种炎症介质和基质降解。Tan等 [ 15 ] 报道β-谷甾醇能明显降低组胺诱发的小鼠毛细血管通透性增加，具有一定的抗炎的活性，这些报道为本研究结果提供了有力支撑。其中化合物10蒲公英甾醇棕榈酸酯在结果中也表现出较好活性，但其作用靶点及机制未见报道，程等 [ 16 ] 证明蒲公英甾醇可以通过调节p38和ERK 1/2 MAPKs的磷酸化水平抑制iNOS和COX-2的表达来发挥体外抗炎作用，而分子对接结果显示其侧链连接了棕榈酸之后仍有较强活性。从药物设计的角度讲，很多药物成酯后可以消除一些感官上的不良反应，提高药物安全性，这给下一步工作提供了新的研究思路，同时也说明分子对接技术在虚拟筛选中药活性方面具有一定的可行性并有助于找到所需要的先导化合物，为鹅不食草的开发利用提供了指导和借鉴。 本研究首次将分子对接应用到鹅不食草的抗炎化合物的筛选，这相对于传统筛选，节约了大量时间和精力。当然，此次研究只采用分子对接技术进行初步筛选是不够的，下一步还将结合药效团模型和分子动力学等其他技术进行综合研究和评价。利用这些计算机模拟方法探讨中药的作用机制，不仅可以弥补药理学实验方法的缺陷，而且能在中药新药研究领域引进新的理念和先进的研究方法，为现代中药研究提供新思路和新方法。
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user: 摘要 定义了点态化完备代数正规类中的低幂等根，证明了Boolean根β、正则根ν、遗传幂等根χ、λ-根λ、幂等代数根ι都是低幂等根，并且这5个低幂等根满足 β ≤ ν ≤ χ ≤ λ ≤ ι 。进一步，证明了低幂等根半单类包含所有0乘代数，幂等代数根ι半单类满足弱同态闭性质。
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user: 1. 引言 环及其它代数系统根理论的统一研究促使一般代数正规类根理论的建立 [ 1 ] - [ 15 ]，为了进一步统一的研究一般代数正规类中根性质，文献 [ 16 ] - [ 23 ] 分别引入了可积代数正规类、完备代数正规类，对特殊根等进行了研究，并对一类特殊的半环——大半环(可做单侧减法的半环)建立了相应的根理论；文献 [ 24 ] [ 25 ] [ 26 ] [ 27 ] 对完备代数正规类进行了点态化，研究了点态化完备代数正规类中的亚直既约代数类确定的上根——反单根、遗传幂等根、补根、对偶根、子幂等根、诣零根、 λ -根 λ 、正则根、 κ -根和 β -根的结构性质，文献 [ 28 ] 使用预根概念给出了根类的一个映射刻画。 本文在文献 [ 24 ] [ 25 ] [ 26 ] [ 27 ] [ 28 ] 建立的点态化完备代数正规类基础上，定义了点态化完备代数正规类中的低幂等根，证明了Boolean根 β 、正则根ν、遗传幂等根 χ 、 λ -根 λ 、幂等代数根 ι 都是低幂等根，并且这5个低幂等根满足 β ≤ ν ≤ χ ≤ λ ≤ ι ，其中Boolean根 β 、正则根ν、遗传幂等根 χ 是遗传的，从而是子幂等根， λ -根 λ 、幂等代数根 ι 不是遗传根，从而是非遗传低幂等根，故不是子幂等根。进一步，证明了低幂等根半单类包含所有0乘代数，幂等代数根 ι 半单类满足弱同态闭性质。