system: [SYSTEM]

user: 3. 结果与分析 3.1. 嫩茎的诱导 3.1.1. 植物生长调节剂对嫩茎的诱导 把峨眉拟单性木兰无菌嫩茎段接种至以MS为基本培养基的诱导培养基上进行诱导培养。10 d左右可见嫩茎的萌动，培养至20 d时观察统计。由表1可见，6-BA对诱导峨眉拟单性木兰嫩茎段产生萌动具有明显的促进作用。培养基中添加的6-BA的添加浓度由1.0 mg/L升高到2.0 mg/L时，嫩茎诱导率随之升高，但当6-BA的添加浓度由到2.0 mg/时升高到3.0 mg/L时，诱导率下降。添加浓度2.0 mg/L的6-BA能诱导74.27% ± 2.4%的嫩茎产生萌动。当添加6-BA升高至3.0 mg/L时，虽然也能诱导嫩茎萌动，但诱导率下降，再生力也变差。试验还表明，在培养基中添加0.02 mg/L IAA也能促进6-BA对材料再生能力的影响。在培养基添加不同浓度的KT发现，浓度1.5 mg/L的KT对峨眉拟单性木兰嫩茎萌动的诱导有促进作用。上述结果表明：MS+2.0 mg/L 6-BA+0.02 mg/L IAA+1.5 mg/L KT的组合是诱导峨眉拟单性木兰嫩茎萌动的理想培养基，其培养的诱导率高为80.95% ± 2.5% (表1)。 Table 1 Effect of plant growth regulators (PGRs) on induction from shoot of Parakmeria omeiensi 激素浓度/mg·L −1 Concentration of PGRs (mg·L −1 ) 诱导率/% Shoot induction rate (r/%) 嫩茎生长状态 Status of shoot 6-BA KT 1.0 0 46.15 ± 4.0 b 嫩梢生长较好 2.0 0 74.27 ± 2.4 a 嫩梢生长好 3.0 0 66.71 ± 4.2 a 嫩梢生长差 1.0 0.5 56.89 ± 1.4 b 嫩梢生长较好 2.0 1.0 75.58 ± 2.1 a 嫩梢生长好 3.0 1.5 69.42 ± 1.8 a 嫩梢生长差 1.0 1.0 50.64 ± 1.5 b 嫩梢生长差 2.0 1.5 80.95 ± 2.5 a 嫩梢生长好 3.0 0.5 66.87 ± 2.0 a 嫩梢生长差 表1. 植物生长调节剂对峨眉拟单性木兰嫩茎诱导的影响 The different letters in the same column mean the significant difference (P ≤ 0.05) by Duncan’s LSD Test. The same below. 表中不同字母表示邓肯氏最小显著差数测验差异显著(P ≤ 0.05)。下同 3.1.2. 光周期对嫩茎诱导的影响 将嫩茎组织置于诱导培养基上后，分组进行光培养和暗培养20天，观察发现光培养和暗培养都能诱导嫩茎的萌动。在暗培养条件下，嫩茎出现的萌动时间缩短，平均约7 d就能观察到变化；但嫩梢生长较差，如转移至光培养条件下，10 d后，才能和光培养的状态相当。在光培养条件下，至少需10 d才会有嫩茎产生萌动，但嫩梢生长状态较好；培养到40 d左右时转入分化培养基继续培养，20 d左右能够产生不定芽。 3.1.3. 继代次数对嫩茎诱导的影响 多次继代培养会使诱导材料发生可见的变化。表2显示，随着继代次数的增加，诱导组织生长能力逐渐下降，嫩茎生长状态变差，不定芽再生率也随之下降。试验发现，从第5次继代作为节点，之后的继代培养不定芽的形成率明显下降。 Table 2 Effect of subculture times on shoot induction and regeneration of Parakmeria omeiensi 继代次数 Subculture times 嫩茎状态 Status of shoot 不定芽再生率/% Frequency of adventitious shoot formation (r/%) 2 嫩梢生长力强 68.45 ± 9.2 a 3 嫩梢生长好 65.76 ± 5.5 a 4 嫩梢生长正常 53.55 ± 2.1 ab 5 嫩梢生长较好 37.10 ± 1.3 b 6 嫩梢生长较差 17.22 ± 6.1 c 7 嫩梢生长力弱 9.14 ± 3.8 c 表2. 继代次数对嫩茎诱导再生的影响 3.2. 激素对不定芽的影响 诱导不定芽的试验统计表明，植物细胞分裂素6-BA的最佳浓度为0.5 mg/L时，不定芽再生率高达51.36% ± 3.6%，每个组织平均产生3.65个芽。通过分别添加生长素IAA和NAA后发现，NAA与6-BA组合使用效果较好。MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.02 mg/L NAA是峨眉拟单性木兰的不定芽培养的最佳分化培养基；不定芽再生率高达70.85% ± 6.8%，每个组织平均产生4.30个芽(表3)。 Table 3 Effect of plant hormone on induction of adventitious shoots of Parakmeria omeiensi 植物激素/mg·L −1 Concentration 不定芽再生率/% Frequency of shoot formation (r/%) 平均芽数/个 Number of shoots 6-BA IAA NAA 0.1 0 0 15.13 ± 3.1 d 1.21 d 0.5 0 0 51.36 ± 3.5 a 3.65 a 1.0 0 0 30.12 ± 4.2 b 3.48a b 0 0.01 0 8.15 ± 2.8 d 0.85 d 0 0.02 0 10.31 ± 3.4 c 1.56 bc 0 0.1 0 12.56 ± 1.9 c 1.61 bc 0 0 0.01 8.74 ± 1.7 bc 1.22 d 0 0 0.02 12.42 ± 3.3 a 1.40 a 0 0 0.1 11.58 ± 2.4 bc 1.58 bc 0.5 0.02 0 58.57 ± 2.5 a 2.79 bc 0.5 0 0.02 70.85 ± 6.8 bc 4.30 a 0 0.1 0.1 19.47 ± 2.5 c 1.83 cd 表3. 植物激素对分化不定芽的影响 3.3. 诱导生根及再生分析 生长素IBA和NAA是组培诱导生根的常用激素，试验比较了不同浓度的IBA和NAA在对峨眉拟单性木兰组培苗生根率的影响(表4)。通过比较试验表明，MS+2.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA是峨眉拟单性木兰组培苗的理想培养基。培养生根率为74%以上。此外，试验结果观察还表明，在生根培养基中添加0.1%的活性炭对生根率的影响无显著差异，但添加活性炭的培养基中生长的根较为粗壮。移栽试验显示，生根苗在根系与茎的结合处，若产生大量愈伤组织，则该苗存活率极低。 Table 4 Effect of IBA or NAA on rooting of the regenerated shoots of Parakmeria omeiensi 激素浓度/mg·L −1 Concentration of PGRs (mg·L −1 ) 生根率/% Rooting percentage (r/%) IBA NAA 1.0 0 28.73 ± 2.0 d 1.5 0 45.82 ± 2.3 b 2.5 0 66.07 ± 2.4 a 4.0 0 44.65 ± 2.1 e 0 0.1 22.14 ± 2.1 bc 0 0.2 30.86 ± 1.9 a 0 0.5 48.51 ± 2.0 a 0 1.0 40.12 ± 2.2 bc 1.0 0.1 35.14 ± 2.1 bc 1.5 0.2 52.33 ± 1.9 a 2.5 0.5 74.85 ± 2.0 a 4.0 1.0 30.16 ± 2.2 bc 表4. IBA和NAA对再生苗生根的影响