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user: 3. 结果与分析 3.1. 天台乌药挥发油提取条件的优化 3.1.1. 浸泡时间对挥发油提取率的影响 在液料比为12:1，提取时间为3 h的条件下，不同的浸泡时间对乌药挥发油的提取影响如图1所示。从图中可知，浸泡时间对乌药挥发油提取率的影响趋势不明显。当浸泡时间低于6 h，浸泡3 h时的收油率最大；当浸泡时间超过6小时，收油率缓慢增大，但和浸泡3 h的收油率接近，可能是浸泡过程中有效成分挥发，导致收油率增加不明显。从实际应用角度出发，选择浸泡时间短且能达到较高收油率的时间作为提取挥发油的最佳浸泡时间，因此本实验选取浸泡时间为3 h。 图1. 浸泡时间对乌药挥发油提取率的影响 3.1.2. 提取时间对挥发油提取率的影响 在浸泡时间为3 h，液料比为12:1的条件下，不同的提取时间对乌药挥发油的提取影响如图2所示。从图中可知，随着提取时间的增加，收油率逐渐增大，当提取时间超过3 h，收油率增加不明显。因此本实验选取3 h作为最佳提取时间。 图2. 提取时间对乌药挥发油提取率的影响 3.1.3. 液料比对挥发油提取率的影响 在浸泡时间为3 h，提取时间3 h的条件下，不同的液料比对乌药挥发油的提取影响如图3所示。从图中可知，随着液料比的增加，挥发油提取率逐渐增大，当液料比为超过12:1时，挥发油提取率缓慢减小。在实验过程中，当液料比较小时，有效成分不能充分提取，影响实验结果；当液料比较大时，有效成分虽能充分提取，但提取过程中容易出现暴沸现象，有时液料会冲出圆底烧瓶，导致实验中断。因此本实验选取液料比为12:1。 图3. 液料比对乌药挥发油提取率的影响 3.2. 乌药挥发油的提取结果 通过单因素实验确定乌药挥发油的最佳提取条件为：浸泡时间3 h，提取时间3 h，液料比12:1。在最佳提取条件下采用水蒸气蒸馏法提取乌药挥发油三次，提取率依次为0.36%，0.35%。0.36%，平均提取率为0.357%。董岩 [ 18 ] 等采用微波–水蒸气回流法提取挥发油，将乌药粉碎后用适量去离子水浸泡12 h，微波加热10 min后，水蒸气回流法提取3 h，收油率为0.41%。但是此提取方法浸泡时间较长，可能会导致挥发油成分发生改变；周继斌 [ 19 ] 等对乌药根进行成分测定时，块根粗粉150 g，得油0.53 mL，提取率为0.35%；晏润纬 [ 6 ] 等将7.5 kg新鲜的乌药块根剪成小段，利用挥发油提取器水蒸汽蒸馏3 h后得到乌药根挥发油约22 mL，提取率为0.293%；晏润纬 [ 20 ] 等按常规的水蒸气蒸馏法提取乌药根的挥发油，收油率为0.31%。对比以上文献，本实验的提取率约为0.36%，提取效果较好。 3.3. 乌药挥发油有效成分的气质联用分析与鉴定 准确称取天台乌药粗粉100 g，加入1200 mL水，浸泡3 h，取适量沸石振摇混合后，置电热器中缓缓加热至沸，并保持微沸3 h，停止加热，按2.3.1.1的方法提取挥发油，并加入适量的无水硫酸钠进行脱水，通过2.3.3的气质联用方法对其进行分析，天台乌药挥发油有效成分的总离子流图如图4所示，可知挥发油中的化学成分有良好的分离效果。 按2.3.3的GC-MS条件对挥发油成分进行分析，结果如表1所示，共鉴定了天台乌药挥发油中的39个化学成分。在天台乌药块根的挥发油中，烃类占20.35%，醛类占28.53%，酯类占0.98%，酮类占14.87%，酸酚类占0.87%，醇类占0.22%，其它种类占7.06%。其中含量最高的为视黄醛，占挥发油总量的22.56%，其次为2-蒈烯，占挥发油总量的17.14%，再次为异长叶烯酮，占挥发油总量的13.45%，上述三种化合物占挥发油总量的53.15%。其它主要成分还有L-樟脑醌、萜品烯、1-萜品-4-基乙酸酯、桉叶油醇、4-萜烯醇、萜品油烯、黄樟脑等。从乌药挥发油化学成分的分类看，它们大多为萜类化合物。萜类化合物具有重要的生理活性，是研究天然产物和开发新药的重要来源。因此，研究乌药挥发油具有极高的价值。 图4. 乌药挥发油成分的总离子流图 Table 1 Constituent of the volatile oil from Lindera aggregata (Sims) Koster 序号 保留时间/min 化合物名称 分子式 相对百分含量/% 1 2.09 Acetone(丙酮) C 3 H 6 O 0.03 2 2.26 Acetic acid(冰乙酸) C 2 H 4 O 2 0.04 3 3.98 3-Furaldehyde(3-呋喃甲醛) C 5 H 4 O 2 0.15 4 5.04 Benzene， 1-methyl-3-(1-methylethyl)-(间异丙基甲苯) C 10 H 14 0.52 5 6.09 Benzaldehyde(苯甲醛) C 7 H 6 O 0.05 6 6.33 Eucalyptol(桉叶油醇) C 10 H 18 O 0.07 7 6.59 Phthalan(1，3-二氢异苯并呋喃) C 8 H 8 O 0.3 8 6.78 Undecanoic acid， hydroxy-， lactone(羟基十一烷酸内酯) C 11 H 20 O 2 0.03 9 7.15 3-Cyclohexen-1-ol， 4-methyl-1-(1-methylethyl)-(4-萜烯醇) C 10 H 18 O 0.04 10 7.23 Hexanal(正己醛) C 6 H 12 O 0.06 11 7.44 Bicyclo[2.2.1]heptane-2，3-dione， 1，7，7-trimethyl-， (1S)-(L-樟脑醌) C 10 H 14 O 2 1.45 12 7.71 1，6-Octadien-3-ol， 3，7-dimethyl-(芳樟醇) C 10 H 18 O 0.11 13 7.76 Cyclohexene， 1-methyl-4-(1-methylethylidene)-(萜品油烯) C 10 H 16 0.17 14 7.9 3-Cyclohexen-1-ol， 4-methyl-1-(1-methylethyl)-， acetate(1-萜品-4-基乙酸酯) C 12 H 20 O 2 0.91 15 8.27 Thymol(百里香酚) C 10 H 14 O 0.06 16 8.35 Benzene， butyl-(丁苯) C 10 H 14 0.24 17 8.56 Benzene， 1-methoxy-4-methyl-2-(1-methylethyl)-(2-异丙基-1-甲氧基-4-甲基苯) C 11 H 16 O 0.49 18 8.78 9-Tetradecen-1-ol， (E)- C 14 H 28 O 0.06 19 8.84 Benzene， 1，3-bis(1-methylethyl)-(1，3-二异丙苯) C 12 H 18 0.13 20 9.63 Bicyclo[4.1.0]hept-2-ene， 3，7，7-trimethyl-(2-蒈烯) C 10 H 16 17.14 21 9.91 Phenol， 2-methyl-6-(2-propenyl)-(2-烯丙基-6-甲基苯酚) C 10 H 12 O 0.2 22 10.8 Benzene， 2-ethyl-1，4-dimethyl-(2-乙基对二甲苯) C 10 H 14 0.74 23 10.94 Phenol， 2-methyl-5-(1-methylethyl)-(香芹酚) C 10 H 14 O 0.06 24 11.05 1，3-Benzodioxole， 5-(2-propenyl)-(黄樟脑) C 10 H 10 O 2 0.27 25 11.45 Vitamin A aldehyde(视黄醛) C 20 H 28 O 22.56 26 11.68 1，3，5-trimethyl-(均三甲苯) C 9 H 12 0.23 27 12.33 1，4-Cyclohexadiene， 1-methyl-4-(1-methylethyl)-(萜品烯) C 10 H 16 1.18 28 15.17 1，2，3，4，5，6-Hexahydro-1，1，5，5-tetramethyl-2，4a-methanonaphthalen-7(4aH)-one(异长叶烯酮) C 15 H 22 O 13.45 29 16.94 1，4-Methanoazulen-7(1H)-one， octahydro-1，5，5，8a-tetramethyl- C 15 H 24 O 1.71 30 19.56 Dodecanal(月桂醛) C 12 H 24 O 0.56 31 21.05 17à-Methyltestosterone(甲睾酮) C 20 H 30 O 2 1.39 32 21.6 Retinal， 9-cis-(视网醛) C 20 H 28 O 5.13 33 22.05 4a，7-Methano-4aH-naphth[1，8a-b]oxirene， octahydro-4，4，8，8-tetramethyl-(2，2，7，7-四甲基-5，6-环氧三环[2.2.1.01，6]十一烷) C 15 H 24 O 2.05 34 23.59 Gibberellic acid(赤霉酸) C 19 H 22 O 6 0.51 35 27.58 Benzaldehyde， 3-(4-methoxyphenoxy)-(3-(4-甲氧基苯氧基)苯甲醛) C 14 H 12 O 3 0.02 36 28.29 Cyclopropanecarboxylic acid， 3-(2，2-dichlorovinyl)-2，2-dimethyl-， (3-phenoxyphenyl)methyl ester， (1R-trans)-(生物氯菊酯) C 21 H 20 cl 2 O 3 0.04 37 34.02 9H-Pyrido(3，4-b)indole， 6-methoxy-1-methyl- C 13 H 12 N 2 O 0.67 38 38.78 Phenol， 4，4'-(1-methylethylidene)bis-(2，2-双对羟苯基丙烷) C 15 H 16 O 2 0.04 39 39.17 Benzene， 1-methoxy-4-(2-phenylethenyl)-(4-甲氧基二苯乙烯) C 15 H 14 O 0.02 表1. 乌药挥发油的化学成分分析结果 查阅乌药挥发油成分分析相关文献发现，何桂霞 [ 21 ] 等采用超临界CO 2 萃取法和水蒸气蒸馏法对乌药根挥发油进行了提取。以超临界CO 2 萃取方法提取时，鉴定出了46个成分，主要有1，1-二乙氧基乙烷、(2-[2-(2，4-二甲基苯基)环丙基]呋喃)、20-十四氢环十并[a]环十四烯等；当采用水蒸气蒸馏法提取挥发油时，通过GC-MS分析鉴定了36个化合物，主要有龙脑乙酸酯、长叶烯、桉叶4(14)，11-二烯、龙脑、β-愈创木烯等。董岩 [ 18 ] 等对广西产乌药的挥发油进行气相色谱-质谱分析，共分离出51种组分，鉴定出了41个化学成分，大多数化合物属于单帖类和倍半萜类物质，主要有愈创树-l(5)，7(11)-二烯、冰片醋酸酯、δ-3-蒈烯、琼脂螺醇、苎烯、莰佛精、2，4-二异丙基-1-甲基-1-乙烯基环己烷等。邓桂明 [ 22 ] 等通过水蒸气回流法提取湖南产乌药的挥发油，通过GC-MS共鉴定出了68个化学成分，大多数为单萜类物质，主要有(-)-马兜铃烯、β-桉叶油醇、4a-甲基-4，4a，9，10-四氢(-2(3H))菲酮以及1-甲基-1-乙基-2，4-二(1-甲基乙烯基)环己烷等。结合本文实验结果及上述文献研究内容可知，乌药挥发油化学成分十分复杂。由于产地、采集时间以及提取方法的不同，乌药挥发油的化学成分也存在较大的差异。