DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 5. VOCs减排措施及清洁生产方案 从上文分析可见，涂料行业仍存在着较大的VOCs减排和清洁生产潜力，结合企业的实际情况，参照已实施清洁生产审核的企业案例，可以采取一系列可行的VOCs减排措施或清洁生产方案，详见表3。
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user: 6. 结语 综上所述，在严峻的环保形势下，当前涂料行业面临着较重的降污减排任务，在VOCs减排和清洁 Table 1 Statistics of paint manufacturer implementing cleaner production audit in Shanghai， 2011~201 年份 2011年 2012年 2013年 2014年 2015年 2016年 2017年 清洁生产审 核企业总数 537 567 433 403 337 180 692 清洁生产审 核涂料企业 数量 12 12 12 8 10 5 19 涂料企业占(%) 2.23 2.12 2.77 1.99 2.97 2.78 2.75 代表企业 杜邦高性能涂 料(上海)有限 公司、杜邦华 佳化工有限公 司上海青浦分 公司、上海韩 盛化工涂料有 限公司 上海天地涂料 有限公司、上 海汇宇精细化 工有限公司、 上海长润化工 有限公司 立邦涂料(上海) 有限公司、佩特 化工(上海)有限 公司、大日精化 (上海)化工有限 公司 紫荆花涂料 (上海)有限公 司、威士伯涂 料(上海)有限 公司、上海开 林造漆厂 东来涂料技术 (上海)有限公 司、上海藤仓 化成涂料有限 公司、上海 造漆厂 亚士漆(上海) 有限公司、创 兴精细化学(上 海)有限公司、 卓利(上海)环保 材料有限公司 巴斯夫上海涂 料有限公司、 普锐涂料(上海) 有限公司、上海 茂益涂料 有限公司 表1. 2011~2017年上海市实施清洁生产审核的涂料企业统计 Table 2 Status quo of cleaner production level in Shanghai paint manufacture 企业 A B C D E F G H I 企业性质 中外合资 中外合资 外商合资 中外合资 中外合资 中外合资 台资企业 私营企业 私营企业 产品类型 溶剂型涂料 溶剂型涂料 UV涂料、 水性涂料 溶剂型涂料 水性涂料 溶剂型涂料 溶剂型涂料 溶剂型涂料 UV涂料、 溶剂型涂料 生产规模 (吨/年) 3400 1000 3100 5000 10000 500 7200 1500 22000 清洁生产 评价得分 71.0 85.0 84.0 87.7 90.6 84.0 71.8 77.4 97.0 表2. 上海市涂料生产企业清洁生产水平现状 Table 3 VOCs emissions reduction measures and other cleaner production program 方案/措施类型 方案/措施名称 方案/措施简介 VOCs减排措施 1.完善废气治理设施 增设废气治理设施，或对现有的废气处理设施进行升级改造， 提高VOCs的捕集及处理效率； 2.吸风/排风系统改造 增设吸风罩，加大风机功率； 粉料间和清洗区增加塑料门帘，控制VOCs在区域内的无组织排放， 提高抽排风效率 3.生产工艺调整 对生产设备(搅拌缸、调和缸、分散机、研磨机、灌装机等) 进行密闭化改造，加盖(如可自由拼合的盖子或气压驱动 可升降式桶盖)，或采用密闭式一体化操作系统，如封闭式色浆调漆系统， 灌装密封化改造：通过隔膜泵用管路将涂料从搅拌缸密封输送至灌装容器； 3.有毒有害原辅料替代 采用低毒、无毒的原辅料，如用甲基异丁基甲酮(MIBK)替换二甲苯， 用改性MDI替代TDI(甲苯二异氰酸酯，剧毒) 4.设备清洗调整 采用清洗剂代用品(如水基清洗剂)； 合理安排生产，同一类产品用一台设备生产，减少设备清洗次数， 同一台设备用专用清洗液清洗，重复利用； 采用高压清洗系统； 研究批量生产间取消清洗的可行性； 5.温度控制 夏季通过空调控制车间温度，采用带夹层的调和缸， 通过降温来减少VOCs的挥发 6.研发环保新产品 有研发能力的企业可以研发环保产品，如高固体分涂料、 水性涂料、粉末涂料和辐射固化涂料等新型涂料， 实现低 VOC 化，还可研发无铅化、无锡化产品； 7.完善VOCs专项管理制度 如VOCs末端控制维护保养制度，VOCs应急预案， VOCs物料的台帐登记制度，建立VOCs治理设施的运行台账。 其他清洁生产方案 1.投料系统升级改造 增设粉料输送自动投料系统，由人工投料改为管道输送， 实现密闭式投料，减少粉尘排放； 改进加料的吸料管和泵，减少桶内的物料残留，提高投料产率； 2.质检涂料回用 将质检留样的涂料分类存放或及时回用到生产中； 3.部分树脂进储罐 调整部分原料树脂的配方，改用粘稠度低、流动性好、 可进储罐的配方，提高自动化生产效率； 4.提高产品一次合格率 优化产品配方和工艺，提高产品质量， 从原材料采购检验到生产过程进行实时监控； 5.将阀门状况列入点检项目 混合釜、分散釜底部均设有卸料阀，将阀门列入点检项目， 每班点检，及时查漏，节约原料； 6.照明改造 办公区：将普通日光灯照明更换为LED节能灯； 仓库：对仓库的照明开关进行分路改造， 根据实际需要控制开关，减少电能的浪费 7.老旧高耗能设备淘汰更新 淘汰名录内的老旧高耗能设备应进行淘汰更新， 高耗能电机可进行高效再制造 8.罐区喷淋水回收 在罐区围堰处设置喷淋收集池，将喷淋用水回收至消防水池进行再利用； 9.实验室升级改造 改造喷房降低换水频率，改善水质，提高水利用率。 10.提高去离子水得水率，废水回用 更换去离子水制备装置中渗透膜、石英砂、活性炭等介质， 提高去离子水得水率，废水收集后可用于生产清洗用水； 11.车间地坪改造 在车间水泥地坪上刷环氧地坪，减少物料粘附，减少清洗用水量； 12.产品包装回收利用 对本公司的产品包装桶进行回收再利用； 13.加强设施设备的维护保养 定期维护保养，及时检修查漏，减少“跑冒滴漏”； 14.危废仓库整改 危废仓库应设有防渗漏措施，应分类、分区域存放， 有完善的二类、三类标识及出入库台帐； 15.完善污染物定期监测制度 定期对“三废”污染物进行监测，确保持续稳定达标排。 表3. VOCs减排措施及其它清洁生产方案 生产方面也有着较大的潜力，有诸多切实可行、环境效益和经济效益可观的方案和措施。因此，涂料企业要及时落实VOCs的减排工作，积极推行清洁生产，有效减少涂料生产带来的环境污染，降低企业生产运行成本，促进涂料行业的可持续发展。
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user: 摘 要 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌因其极强的传染性已经成为引起院内感染的重要致病菌之一，首选药物万古霉素近年来不断出现耐药株，这使得MRSA的治疗更加棘手。姜黄素是一种天然来源的抗菌药，在抗耐药性方面有无法比拟的优点。但是姜黄素由于性质不稳定，在水中溶解性差，生物利用度低等缺点限制其临床应用。纳米粒载体能够显著提高姜黄素的水溶性和生物利用度，延长药物在体内的滞留时间并降低药物的毒副作用。本课题通过开环聚合的方法制备PET-CL高聚物为载体材料，采用溶剂挥发法制备姜黄素纳米粒，并对姜黄素纳米粒粒径，PDI，包封率和载药量进行表征。姜黄素PET-CL纳米粒稳定，其体外释放表现出明显缓释特性。此外，姜黄素PET-Cl纳米粒还具有持续的抑菌作用。上述结果可为扩大姜黄素药用范围，丰富其治疗途径和对抗菌活性机制的深入研究提供理论依据。 关键词 :耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，姜黄素，纳米粒 Copyright © 2018 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus， MRSA)是一种流行范围广、致病力强、发病率和死亡率高的病原菌。MRSA可诱发各种疾病，包括骨髓炎，坏死性肺炎，菌血症，皮肤和组织感染，感染性心内膜炎等严重疾病都可由其导致 [ 1 ] ，它是临床手术后发生感染用药后最常见的致病菌 [ 2 ] ，常见于大面积烧伤病人，术后患者，长期住院患者和老年患者等 [ 3 ] ，使病人的健康和生命安全受到巨大威胁。随着各种各样的广谱抗菌药物陆续被研发和应用，以及在临床治疗上应用抗菌药物存在不合理性，从而导致MRSA对各种抗菌药物的耐药性越来越严重。据有关文献统计，2010年医院MRSA的感染率在所有致病菌感染中的比例44%左右 [ 4 ] ，并且更可怕的是它感染导致的病死率甚至高于AIDS导致感染的病死率 [ 5 ] 。现在对于MRSA感染的临床治疗主要以万古霉素与利奈唑胺为主，也有一些国家和地区用替加环素或替考拉宁进行治疗，其中万古霉素作为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床首选药物而被大量用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的治疗 [ 6 ] 。但万古霉素存在以下缺点：1) 万古霉素的广泛临床应用，使MRSA对万古霉素的敏感性越来越低。2) 万古霉素在肺部不能达到治疗所需药物浓度，无法治疗肺部感染，目前只能与其他抗菌药联用来达到治疗效果 [ 7 ] 。3) 万古霉素对组织的穿透能力是有限的，导致它杀灭MRSA的时间比较长，难以在短时间发挥疗效。4) 万古霉素具有肾毒性 [ 8 ] 。 姜黄素是一种从天然姜黄的根茎中提取的天然多酚类活性物质 [ 9 ] 。因姜黄常见且价格低，而其提取物姜黄素具有广泛的药理作用，毒副作用低，耐受性好等优点而逐渐被人们所关注。研究表明姜黄素在抗肿瘤，抗氧化，抗微生物，抗人类免疫缺陷病毒，抗炎，抗纤维化，抗血管 [ 10 ] [ 11 ] [ 12 ] 等方面有很好的药理作用。但由于其在水中溶解度差、活性低、口服生物利用度低、体外环境下易氧化、体内易代谢且碱性环境下易降解等缺陷的制约，使姜黄素在临床上得不到好的应用 [ 13 ] 。因此，姜黄素新制剂的研究旨在改善姜黄素溶解性，提高制剂的生物利用度。纳米剂型作为一种可显著提高姜黄素生物利用度的新剂型，可能会使其在临床得到大量推广，从而开辟MRSA治疗的新方向。 本研究采用开环聚合的方式合成两亲性高聚物(PET-CL)作为纳米粒载体材料，使用溶剂挥发法制备姜黄素PET-CL纳米粒，并对纳米粒的包封率、载药量、粒径、PDI进行表征。同时开展姜黄素PET-CL纳米粒体外释药研究和对MRSA抑菌效果的研究，以期为姜黄素的抗菌药用价值做出有益的理论研究。
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user: 2. 实验部分 2.1. PET-CL的制备及其表征 精密称量279.2 mg季戊四醇加入到50 mL三口烧瓶，用移液枪移取12.78 mL ε-已内酯和120 µL催化剂异辛酸亚锡加入到烧瓶中，之后烧瓶两边的瓶口用涂有凡士林的塞子塞紧，中间的瓶口接充有N2的气球以对烧瓶内反应进行保护，进行磁力搅拌，在N 2 保护下在140℃油浴中反应72 h。 反应后处理：将得到的产物冷却至室温，所得液体无色透明呈粘稠状，加入50 mL二氯甲烷使产物完全溶解。将溶有产物的二氯甲烷匀速逐滴滴加至400 mL的冰乙醚中，滴加结束后放置于−40℃的冰箱下进行静置1 h。抽滤，收集滤饼，得白色固体，即为粗产物，粗产物用50 mL的二氯甲烷溶解，得无色液体。将溶有产物的二氯甲烷匀速逐滴滴加至400 mL冰甲醇中，放置于−40℃的冰箱中2 h，抽滤，得白色固体，放置于真空干燥箱内干燥24 h，得到产物PET-CL。合成路线如图1所示。所得产物经红外光谱(IR)、核磁共振氢谱( 1 H-NMR)和凝胶渗透色谱(GPC)进行表征。 2.2. 姜黄素PET-CL纳米粒的制备及其表征 电子天平称取8 mg姜黄素置于10 mL容量瓶中，用丙酮定容备用。电子天平精密称取载体材料16 mg PET-CL放置于10 mL离心管中。电子天平称取100 mg泊洛沙姆-188置于100 mL容量瓶中，先加适量蒸馏水并超声至泊洛沙姆-188完全溶解，定容，备用。 用移液管移取1 ml姜黄素丙酮溶液加入到装有PET-CL材料的离心管中，振荡至材料完全溶解，备 图1. PET-CL合成路线 用。取一只100 mL锥形瓶，用量筒量取20 ml泊洛沙姆-188溶液加入100 mL锥形瓶中，搅拌。取一只1 mL的无菌注射器，吸取离心管中的溶液，逐滴滴入到泊洛沙姆-188溶液中，滴完后遮光搅拌2 h，之后放入真空干燥箱内抽真空半小时，得到的姜黄素纳米溶液放入50 mL螺口离心管中，在4℃的条件下6000 r/min离心30 min。抽取上清液放置在新的螺口离心管中，用激光纳米粒径测定仪测定粒径和PDI。 包封率和载药率分别表征药物被包载的程度和药物在载体中的含量。 1) 包封率(Encapsulation Efficiency， EE) 移取一定量的纳米粒溶液，将其在15，000 r/min的转数下高速离心30 min，收集上清液。紫外分光光度计分别测定原纳米粒溶液及上清液中姜黄素的含量，求出姜黄素的质量。根据以下公式计算包封率。 EE% = (W1 − W2)/W1 * 100 W1：姜黄素总投药量(mg)，W2：上清液中游离药物含量(mg)。 2) 载药量(Drug Loading， DL) 移取一定量的纳米粒溶液，将其在15，000 r/min的转数下高速离心30 min，收集沉淀物，冷冻干燥；精密称量冻干粉末，以适量丙酮溶解定容后，通过紫外分光光度计测定，求得纳米粒中姜黄素含量，根据以下公式计算载药量。 DL% = W3/W4 * 100 W3：冻干粉末包裹的药物含量(mg)；W4：冻干粉末总质量(mg)。 2.3. 姜黄素PET-CL纳米粒的体外释放研究 精密称取10.0 mg姜黄素于100 mL容量瓶中，并用丙酮定容，获得浓度为100 ug/mL的姜黄素丙酮溶液，用移液管分别移取不同体积的姜黄素丙酮溶液于10 mL容量瓶中，用释药介质定容，配制成浓度为0.06 ug/mL，0.08 ug/mL，0.1 ug/mL，0.4 ug/mL，0.6 ug/mL，0.8 ug/mL，1 ug/mL，2 ug/mL，4 ug/mL，6 ug/mL的不同浓度梯度的标准溶液。用紫外分光光度计测量吸光度绘制标准曲线。 将预先已经处理好的截留分子量14，000的透析膜再用蒸馏水洗净，每个透析袋中装入5 mL姜黄素纳米溶液并放入100 mL释放介质中，在37℃，100 r/min的全温振荡培养箱内进行体外释放。每种姜黄素纳米溶液设置3个平行试验，分别于12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h、96 h、120 h取样4 mL，同时补加等量的新鲜介质，样品以空白介质为对照，在420 nm处测定其吸光度，计算出累积释药率并绘制体外释放曲线。 2.4. 姜黄素纳米粒的稳定性测试 将6000 r/min离心所获得的姜黄素纳米溶液的上清液置于50 mL螺口离心管中避光密封保存，一周后用激光纳米粒径测定仪测定其PDI和粒径，并记录数据。 2.5. 姜黄素PET-CL纳米粒的抑菌研究 2.5.1. 菌液制备 将细菌在最适温度活化2小时，挑取4~5个菌落将其接入新鲜配置的活化培养基MH肉汤中，37℃恒温摇床培养6 h。用血球计数板进行计数，用MH肉汤稀释制得菌液浓度约为1 × 10 8 CFU/mL的菌液。 2.5.2. 体外抑菌试验 严格按照2016年美国临床实验标准委员会NCCLS/CLIS的标准 [ 14 ] 培养MRSA。在培养皿中分别接入1 × 10 8 CFU 1mL的MRSA菌种0.1 mL，再取适量的预先准备好的姜黄素溶液和载姜黄素纳米粒0.1 mL涂布于培养皿中，并分别按菌种最佳培养温度培养，48 h后观察结果，观察药敏平板菌落的生长情况。以经过无菌过滤的漱口水为阳性对照，以无菌生理盐水作为阴性对照。每个实验做3个平行。姜黄素用0.5 mL DMSO溶解，并依次用培养液倍比稀释，再加入MH培养基。
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user: 3. 结果与讨论 3.1. PET-CL的表征 PET-CL的FT-IR谱图如图2所示。出现在2945 cm −1 和2866 cm −1 的信号对应的是-CH 2 伸缩键的吸收峰，1726 cm −1 对应的为-C=O酯羰基的伸缩振动，1242cm −1 和1187cm −1 对应C-O的特征吸收，表明ɛ-已内酯发生了开环聚合。1108 cm −1 和961 cm −1 的信号则对应PET-CL中-OCH 2 CH 2 片段的拉伸振动。 PET-CL的 1 H-NMR谱图如图3所示，通过对氢谱上的峰分别进行化学位移归属分析我们可以进一步判定该聚合物的结构。4.08 ppm处的峰3.67 ppm处的峰分别对应于疏水性的开环的己内酯片段和亲水的季戊四醇片段的亚甲基特征吸峰。1.41 ppm，1.61 ppm和2.33 ppm处的峰分别对应于-CH 2 -CH 2 CH 3 、OCOCH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -和OCO-CH 2 -(CH 2 ) 4 这三个单元结构的亚甲基质子的化学位移。根据化学位移的推论结果可分析得出本研究中合成的聚合物结构与文献报道的一致。 PET-CL的GPC分析如图4所示，PET-CL高聚物对称的单峰，其数均分子量为(Mn) 13，889，重均分子量(Mw)为16，243，粒子分散度为1.17，这表明由季戊四醇与ɛ-已内酯发生开环聚合生成的高聚物其分子量分布较为均匀，符合预期理想的要求。 3.2. 姜黄素PET-CL纳米粒的表征 姜黄素PET-CL纳米粒表征结果如表1所示，姜黄素PET-CL纳米粒具有较好的PDI和包封率(0.101 图2. PET-CL的FT-IR谱图 图3. PET-CL的 1 H-NMR谱图 图4. PET-CL的GPC谱图 Table 1 The characterization of Cur-PET-NP PET-CL纳米粒 粒径 PDI 包封率 载药量 182.3 0.101 96.96% 4.91% 表1. 姜黄素PET-CL纳米粒特性表征 和96.96%)，表明纳米粒具有良好的稳定性，并有利于之后体外释放和抑菌研究的稳定进行。 3.3. 姜黄素PET-CL纳米粒的体外释放研究 3.3.1. 体外释放标准曲线 利用紫外分光光度计在420 nm处测定不同浓度的姜黄素介质标准溶液，并以浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为A = 0.1643C + 0.0074 (R 2 = 0.9997)，两者基本呈线性关系，如图5所示。 3.3.2. 体外释放标准曲线 由图6可知PET-CL姜黄素纳米粒溶液在120 h内释放量达到35%左右，释放趋势整体呈先速释后缓释的特性，72 h时已基本接近最终的累积释放量，值得注意的是该载药纳米粒在24 h内的释放量已经快达到了20%，说明药物在该段时间里释放较快，是药物起作用的黄金时段。 图5. 体外释放标准曲线图 图6. PET-CL姜黄素纳米粒的体外累积释放曲线 3.4. 姜黄素纳米粒的稳定性测试 由表2可知姜黄素PET-CL纳米粒溶液在避光存放一段时间后其粒子粒径略微会有所变小，PDI变化趋势不明确，但总体上来看，在7天的测量期间里，肉眼观察并无可见的药物或纳米粒子聚集析出，姜黄素PET-CL纳米粒的粒径与PDI的波动都不是很大，说明该纳米粒子不容易发生聚集，具有一定的稳定性。 3.5. 姜黄素PET-CL纳米粒的抑菌研究 表3、表4中显示姜黄素溶液和姜黄素纳米粒均对MRSA具有较好的抑制作用。相互比较显现，差别不是很大。37℃下培养24小时后，姜黄素的最低抑菌浓度在0.1 g/mL；姜黄素纳米粒的最低抑菌浓度相对来说略微低一点。这可能是纳米粒的入胞能力较姜黄素大。 Table 2 Stability of Cur-PET-NP 序号 时间 粒径 PDI 1 0 d 173.7 0.078 7 d 170.2 0.072 2 0 d 182.3 0.101 7 d 179.4 0.098 3 0 d 186.9 0.093 7 d 182.3 0.088 表2. 姜黄素PET-CL纳米粒的稳定性 Table 3 Curcumin Anti-MRSA in vitro (37˚C， 24 h 药品 MRSA 姜黄素0.200 mg/mL — 姜黄素0.100 mg/mL — 姜黄素0.050 mg/mL + 姜黄素0.010 mg/mL + + + + + 阴性对照 + + + + + 阳性对照 + 表3. 姜黄素体外抑菌(37℃培养24 h) Table 4 Anti-MRSA of Curcumin-PET-CI Nanoparticle in vitro (37˚C， 24 h 药品 MRSA 姜黄素PET-CI纳米粒体0.200 mg/mL — 姜黄素PET-CI纳米粒体0.050 mg/mL — 姜黄素PET-CI纳米粒体0.010 mg/mL — 姜黄素PET-CI纳米粒体0.005 mg/mL + + 阴性对照 + + + + + 阳性对照 + 表4. 姜黄素PET-CL纳米粒体外抑菌(37℃培养24 h)
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user: 4. 结论 本文采用开环聚合的方式合成PET-CL高聚物(Mn: 13，889， PDI: 1.17)作为姜黄素纳米粒的载体。用溶剂挥发法制备姜黄素PET-CL纳米粒，其包封率、载药量、粒径、PDI分别为96.96%、4.91%、182.3 nm和0.101。姜黄素PET-CL纳米粒体外释放表明：在120 h的释放时间内有缓释的现象，累积释放率约为35%。同时，PET-CL纳米粒溶液具有良好的稳定性。体外抑菌实验结果显示姜黄素和姜黄素纳米粒对MRSA具有一定的抑制和杀灭功效。姜黄素纳米粒具有一定的持续抑菌的作用。
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user: 摘 要 酪氨酸降解途径是动物中一条重要的代谢途径，而在植物中对该途径了解较少。我们前期研究发现：在模式植物拟南芥中，SSCD1基因编码酪氨酸降解途径最后一个酶——延胡索酰乙酰乙酸酶(fumaryl acetoacetate hydrolase)，该基因突变后导致拟南芥在短日照下出现细胞死亡。为了探讨SSCD1基因的组织表达特征，本研究构建了拟南芥SSCD1基因启动子与GUS的融合表达载体并转入拟南芥，得到其转基因植株，经GUS组织化学染色，发现SSCD1基因启动子驱动的GUS基因在下胚轴中表达较强，子叶和根中表达较弱，而在真叶中几乎没有表达。该研究结果表明SSCD1基因在下胚轴中发挥着更重要的作用，对深入探讨植物中酪氨酸降解途径具有重要的作用。 关键词 :拟南芥，SSCD1突变体，酪氨酸降解途径，GUS Copyright © 2018 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 酪氨酸降解途径在动物体内发挥着重要作用，在人类和动物中若被阻断将会造成很严重的损伤，甚至死亡 [ 1 ] 。延胡索酰乙酰乙酸酶(FAH)参与酪氨酸降解的最终途径，其主要作用是将延胡索酰乙酰乙酸水解成乙酰乙酸和延胡索酸进入三羧酸循环彻底分解 [ 2 ] 。在动物中，FAH合成中断会导致动物患上酪氨酸血症并引起死亡 [ 3 ] 。而在植物体内，编码FAH酶的SSCD1基因突变会导致拟南芥在短日照条件下发生细胞死亡，而长日照下表型正常 [ 4 ] ，因此利用基因工程技术来研究SSCD1基因的表达模式有助于了解酪氨酸降解途径在植物体内的作用机制。 启动子处于基因转录起始位点的上游，其作为重要顺式元件参与了一系列基因的表达和调控，并能被RNA聚合酶识别与结合 [ 5 ] 。将启动子与GUS基因融合，通过转基因实验验证基因的表达活性和组织特异性表达是研究基因表达模式的一种常用方法 [ 6 ] [ 7 ] 。 本试验以拟南芥为研究材料，通过构建SSCD1基因启动子以及GUS的融合表达载体，随后将其导入拟南芥植株内，通过抗性筛选得到稳定可遗传的转基因植株，进一步采用GUS组织化学染色，检测SSCD1基因的启动子是否成功转入和正常激活GUS基因。本实验的完成为后续该基因的研究提供一定借鉴与帮助。
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user: 2. 试验材料与方法 2.1. 试验材料 2.1.1. 植物材料及培养条件 拟南芥(Arabidopsis thaliana)野生型Col-0由湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室植物信号传导课题组提供。 使用消毒液(20% bleach + 0.1% Triton100)将拟南芥种子浸泡10 min，用无菌水于超净工作台上清洗3~4次，适当密度接种在MS固体培养基上。4℃黑暗春化3 d后，转入人工气候箱生长，培养温度为(22 ± 2)℃，光周期为长日照(16 h光照/8 h黑暗) [ 8 ] 。 2.1.2. 表达载体 本试验采用的载体为pCAMBIA1301，该载体的启动子为35S启动子，标记基因为GUS 基因，抗性基因为卡那霉素抗性基因，植物筛选标记基因为潮霉素抗性基因。 2.1.3. 菌株 本试验所用到大肠杆菌E. coli DH5α和根癌农杆菌GV3101均由湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室植物信号传导课题组提供。 2.1.4. 试剂 DNA提取试剂盒购自北京天根生化科技有限公司，PCR所用的反应体系以及卡那霉素和氨苄青霉素均购自于北京TaKaRa公司，质粒提取试剂盒和切胶回收试剂盒购自于AXYGEN公司，酶切连接用到的试剂以及PstI酶和NcoI酶均购自北京宝生物工程有限公司，其他试剂购自于国药集团化学试剂有限公司。 2.1.5. 培养基 LB培养基配方为胰蛋白胨10 g/L，酵母粉5 g/L，NaCl 10 g/L，琼脂粉15 g/L (固体培养基需要加)，调pH = 7.0；YEB培养基配方为胰蛋白胨10 g/L，酵母粉10 g/L，NaCl 5 g/L，琼脂粉15 g/L (固体培养基需要加)，调pH = 7.0。 2.2. 试验方法 2.2.1. 拟南芥总DNA的提取 根据DNA提取试剂盒中的说明书进行提取。 2.2.2. PCR引物的设计及SSCD1基因启动子的扩增 通过TAIR网站获取拟南芥SSCD1的基因启动子序列，经软件plantcare分析后选取ATG前2000 bp序列(启动子区域)，利用Primer Premier 5软件设计其特异性引物SSCD1-F/SSCD1-R，在5’端分别加上PstI和NcoI酶切位点，引物序列为: SSCD1-F，5’-AACTGCAGCTCTCCAACGACAACT-3’(下划线处为酶切位点PstI) SSCD1-R，5’- CATGCCATGGTGACGATACAGATAC-3’(下划线处为酶切位点NcoI) 使用高保真酶对试剂盒提取的拟南芥野生型Col-0基因组DNA进行PCR扩增。退火温度根据引物合成时的预测温度生成(退火温度为60℃)。将扩增得到的PCR产物经琼脂糖(1.0%)凝胶电泳检测，然后回收目的条带并纯化。 2.2.3. SSCD1启动子基因与GUS融合载体重组 将pCAMBIA1301质粒载体(参照质粒提取试剂盒说明书获得载体)和扩增得到的SSCD1启动子片段用PstI和NcoI限制性内切酶在37℃下双酶切过夜，得到的线性载体与启动子片段分别回收后在T4连接酶作用下连接至预期位点，载体构建如图1。体系为10 × T4 Buffer 2 μL，线性化载体6 μL，插入片段扩增产物1 μL，T4 ligase 0.5 μL，ddH 2 O 10.5 μL。将配置好的体系16℃过夜。从−80℃冰箱里取出大肠杆菌感受态细胞，置于冰上融化，加入20 μL连接产物混匀，在冰上放置30 min；42℃热击90 s，然后迅速转至冰浴，放置1~2 min，加入700 μL LB液体培养基，37℃摇床下振荡培养45 min，6000 g室温下离 图1. pSSCD1::pC1301载体构建 心2 min，去部分上清(剩100 μL)，然后混匀浓缩菌液，取50 μL菌液均匀涂布于含50 mg/L Kan的LB固体培养基上，于37℃恒温培养箱倒置，培养过夜 [ 9 ] [ 10 ] 。挑取阳性克隆并进行测序，将测序后验证正确的重组质粒通过电击转化至根癌农杆菌GV3101中 [ 11 ] [ 12 ] ，选取阳性克隆进行菌落PCR鉴定。 2.2.4. 重组质粒转化农杆菌与筛选 挑选单菌落溶于10 µL无菌水中，取1 µL进行菌落PCR，检测阳性克隆后，接种于含Kan (50 mg/L)、GEN (50 mg/L)、Rif (25 mg/L)的YEB液体培养基，黑暗条件下，28℃培养至菌液OD600值为0.5~0.6时取出，6000 g离心2 min后弃上清，加入适量悬浮液(5%蔗糖 + 1/2 MS + 0.02% Silwet-L77 + 0.01%6-BA)，控制悬浮液中农杆菌浓度(OD600)于0.6~1.0，浸染拟南芥幼嫩花蕾(花序浸染法) [ 13 ] 。收取T0代转基因种子，春化后，铺种于添加25 mg/L的Hyg抗性的MS培养基上，筛选出阳性转基因植株。 2.2.5. GUS组织化学检测 将转基因抗性植株浸到GUS染液中，置于37℃保温箱中避光过夜。用50%，70%，100%的浓度梯度乙醇依次漂洗样品，每次浸泡5 min，加入100%乙醇浸泡直至完全脱色，最后在体视显微镜下拍照记录。GUS染色液配制：将X-gluc溶于磷酸钠缓冲液中(含100 mmol/L pH 7.0的磷酸钠缓冲液，10 mmol/L EDTA，5 mmol/L铁氰化钾，5 mmol/L亚铁氰化钾)，终浓度为1 mmol/L。
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user: 3. 结果与分析 3.1. SSCD1基因启动子的克隆 将扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检测，电泳结果显示扩增产物符合预期大小(PCR产物预期大小为2000 bp)，且没有非特异性扩增条带(图2)，克隆所得目的片段可用于下一步实验。 3.2. pSSCD1::GUS重组载体的构建 对目的片段和pCAMBIA1301载体双酶切，回收的目的片段和目的载体，并进行连接转化。随机挑选阳性单菌落进行菌落PCR检测(图3)，挑选阳性单菌落进行扩大培养，提取质粒进行双酶切检测。结果发现(图4)选取与预期结果相符的目的片段(泳道1、2、3、5)进行测序，经比对分析发现目的基因与GUS之间的结合位点与预期一致，表明pSSCD1::GUS融合表达载体成功构建。(4号泳道由于菌污染导致出现三条带，所以舍弃。) 3.3. pSSCD1::GUS重组载体的遗传转化 将pSSCD1::GUS重组表达载体转入根癌农杆菌GV3101中，并进行PCR检测，结果如图5所示，在转入质粒的农杆菌样本中成功检测到大小为2000 bp左右与目的片段大小相似的条带，证明重组质粒成功转入到农杆菌中。挑选转入成功的农杆菌进行扩大培养，通过浸花法转入拟南芥Col-0野生型植株中，进行融合基因的稳定表达实验。潮霉素对融合表达载体拟南芥幼苗生长无抑制作用，将浸染的当代 图2. SSCD1基因启动子PCR扩增结果 图3. 菌落PCR检测 图4. SSCD1::GUS重组载体PstI与NcoI双酶切 图5. 农杆菌菌落PCR 图6. GUS染色检测结果 种子铺种在含有潮霉素(25 mg/L)的MS培养基上低温春化，在长日照下培养14 d发现具有融合表达载体的幼苗能正常生长即获得转基因植物，转化失败的拟南芥幼苗无法正常生长；而未进行浸染的拟南芥Col-0幼苗在潮霉素培养基上同样无法正常生长。这说明能正常生长的幼苗基因组中成功转入了融合表达载体。 3.4. GUS报告基因定性检测 将转基因植株种子铺种在含潮霉素的MS培养基上，长日照(16 h光照/8 h黑暗)条件下生长7 d。挑选抗性幼苗进行GUS组织化学染色，利用体式显微镜观察染色结果。结果表明：转入含35 S启动子pCAMBIA1301质粒的阳性植株(图6A)中GUS基因在各个部位都高度表达，而未在阴性对照植株中表达(图6B)，说明GUS染色方法可行。在同样方法染色的转入SSCD1基因启动子与GUS融合表达载体的转基因植株(图6C)中，GUS基因在下胚轴中表达较强，子叶和根中有表达，但表达比阳性对照弱，而在真叶中几乎没有表达。
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user: 4. 结论与讨论 随着基因工程技术飞速发展，基因克隆技术在遗传育种和形状改良等方面体现了十分重要的价值 [ 14 ] ，而启动子则是基因表达载体构建中必不可少的原件 [ 15 ] 。基因表达的特异性主要取决于该基因的特异性启动子，而启动子本身不具有基因特异性，可启动下游任何基因表达，因此启动子表达的部位可以推测该基因的表达部位。目前转基因工程的主要任务是寻找阻止基因沉默的有效途径和发展可诱导的启动子 [ 16 ] 。 本研究成功构建了拟南芥SSCD1基因启动子与GUS的表达载体，通过凝胶电泳图像与测序结果，证明该重组载体即为目的载体。将该重组载体顺利转入拟南芥中并对转化后代用潮霉素进行筛选，获得具有抗性的植株，进一步通过GUS染色法检测，结果表明，SSCD1基因启动子驱动的GUS基因在下胚轴中表达较强，子叶和根中表达较弱，而在真叶中几乎没有表达。该研究结果表明SSCD1基因在拟南芥的不同组织部位有着其特异性的表达，该基因可能在下胚轴中发挥着更重要的作用，但其特异性表达和在下胚轴中的功能有待进一步研究。
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user: 摘 要 本研究为了探讨气质类型与口味偏好之间的关系，采用问卷调查的方式对网上随机抽取的130名被试分别进行了气质类型和口味偏好的测试，并通过SPSS对已得到的数据进行分析得到四种气质类型与口味偏好之间的关系。研究结果表明：胆汁质、多血质、粘液质和抑郁质四种气质类型以及混合气质类型与口味偏好之间不存在显著的相关关系。本研究从全新的角度来看待气质类型与人们日常活动之间的关系，研究结果可以为指导人们的日常生活提供一些理论依据和科学建议。由于数据采集过程存在问题，未来研究在克服缺陷的同时可以采用脑电、功能性核磁共振成像等技术对气质类型与日常活动进行更深层次的研究。 关键词 :气质类型，口味偏好，相关性 Copyright © 2018 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 问题的提出 随着网络的普及和心理学影响力的日益增长，在许多网站上我们会看到这样的一些字眼将人们的气质类型或者个性性格与其在日常生活饮食中的口味偏好联系起来，例如，“从口味偏好看出你的个性”，“揭秘口味偏好与性格的关系”等。心理学家发现，人的个性表现受生理的影响，尤其是气质直接受生理制约(陆运青，翟洪昌，杨乃平，&赵秀芳，1992)。那么气质类型与口味偏好真的有关么？我们是否能够通过了解一个人的气质类型进而推知其口味偏好呢？本研究的目的就在于通过科学的方法来了解气质类型与口味偏好的关系。 关于气质类型，罗马医生盖伦根据希波克拉底的“体液说”，将人的气质分为了四种类型，即目前应用广泛的胆汁质、多血质、黏液质和抑郁质。其中，胆汁质的个体情绪强烈、爆发迅猛但平息较快，思维灵活却粗枝大叶，精力旺盛、争强好胜、勇敢果决，行动敏捷、刚毅顽强，但是这种类型的个体遇事欠考量，鲁莽冒失并且容易感情用事；多血质的个体情感丰富、外向却不稳定，活泼好动、热情大方、适应力强，这类人群的弱点是缺乏耐心和毅力，容易见异思迁；黏液质的个体情绪稳定、表情平淡，思维灵活性较差但是考虑问题细致周到，安静稳重、踏踏实实、沉默寡言，自制力强、内刚外柔，但是他们的行为主动性较差，缺乏活力，行动迟缓；抑郁质的个体情绪体验深刻、细腻持久，情绪抑郁、多愁善感，思维敏锐、想象力丰富，踏实稳重、自制力强，不善长交际、孤僻离群，他们的缺点是行动缓慢、软弱胆小、优柔寡断(彭聃龄，2004)。 关于口味偏好(在某些研究中也称为味道偏好)，本研究注重从两个维度来对被试进行考察，分别是口味程度偏好和口味类型偏好。在口味程度偏好中，我们将口味偏好区分为偏淡、适中和偏重三个层次；而在口味类型偏好中，我们将口味偏好区分为甜、咸、酸、辣和苦五个类别。通过对被试口味程度偏好和口味类型偏好两个方面的考察来了解被试整体的口味偏好。 目前已有的关于气质类型的研究大体可以分为三类：1) 关注儿童气质类型及其形成过程；2) 关注气质类型与成就动机、幸福感、延迟满足等心理因素的相关关系；3) 关注气质类型与音乐、体育相关因素的关系及其在特长生选拔过程中的应用(刘文，杨丽珠，&邹萍，2004)。另外，在气质类型与生理因素的相关研究方面，主要有2011年马丽娜的《大学生气质类型与微型轿车色彩偏好及意向研究》和一些关于气质类型与血型之间相关关系的研究。另一方面，关于口味偏好的研究数量较少且大多数都偏重生理方面。因此本研究可以说从一个新的角度来看待气质类型与我们的日常生活，并且对网络上流传的一些心理学相关问题进行了验证，为日常生活提供了一些有用的参考。
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user: 2. 研究方法 2.1. 研究被试对象 采用问卷调查的形式在相关网站上随机抽取130名网友作为被试进行调查， 共回收有效问卷 93份， 有效回收率为71.5%。 2.2. 研究工具 气质类型量表采用陈会昌编制的气质测验量表(陈会昌，1995)。本量表共60题， 每种气质类型各 15题。量表采用五级评分：“很符合”计2分；“较符合”计1分；“一般”计0分；“较不符合”计−1分；“很不符合”计−2分。得分计算方式如下：如果某一种气质类型的得分明显高于其他三种(均高出 4分以上)，则可定为该种气质；如果两种气质的得分接近(差异低于3分)且都明显高于其他两种 (均高出4分以上)，则可定为两种气质的复合质；三种或三种以上气质的得分接近 (差异低于3分)则可定为混合质。 口味偏好量表主要由口味程度偏好和口味类型偏好两大问题组成： 1) 您对饮食的口味有特殊的偏好？A 偏好较淡的味道 B 偏好中等的味道 C 偏好较重的味道 2) 您更喜欢下列哪一种口味？A 甜味 B 咸味 C 酸味 D 辣味 E 苦味 2.3. 研究程序 由主试人员采用统一的指导语， 在相关网站上发布问卷并及时对问卷进行回收和对数据进行处理， 所有被试全部匿名，所获得的数据采用统计软件 SPSS19.0进行进一步的统计和分析。
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user: 3. 结果与分析 3.1. 气质类型及其分布 表1显示，在93名被试中具有胆汁质、多血质、粘液质和抑郁质气质特征的人数分别有21人、61人、46人和43人，分别占总人数的22.6%、65.6%、49.5%和46.2%。表明参加调查的被试中胆汁质的个体较少，多血质的个体较多，粘液质和抑郁质的个体数量在中等水平。 表2显示，在93名被试中不同气质类型分别为3人、17人、10人、9人、5人、11人、6人、1人和31人，分别占总人数的3.2%、18.3%、10.8%、9.7%、5.4%、11.8%、6.5%、1.1%和33.3%。由此可见，参加调查的个体中，拥有胆汁质以及胆汁质混合的气质类型的个体数量较少，而拥有多种气质混合类型的个体在总体中所占比例较大。 Table 1 Percentage of the four temperament type 气质类型 胆汁质 多血质 粘液质 抑郁质 人数(%) 22.60 65.60 49.50 46.20 表1. 四种气质类型分布 Table 2 Temperament types of the 93 participant 气质类型 胆汁质 多血质 粘液质 抑郁质 胆汁— 多血— 粘液— 胆汁— 多种气质 多血质 粘液质 抑郁质 抑郁质 混合型 人数(%) 3.20 18.30 10.80 9.70 5.40 11.80 6.50 1.10 33.30 表2. 93名被试气质类型分布 3.2. 气质类型与口味偏好的关系 表3显示，胆汁质、多血质、粘液质、抑郁质四种基本气质类型与个体的口味程度偏好及口味类型偏好都没有显著相关。 3.3. 不同气质类型与口味偏好的关系 表4显示，上述九种不同气质类型与个体的口味程度偏好及口味类型偏好之间也不存在显著相关。
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user: 4. 结果讨论 4.1. 气质类型的种类及其分布 根据艾森克的个性理论，在两种单一气质类型的混合型中有且只有胆汁—多血质、胆汁—抑郁质、多血—粘液质、粘液—抑郁质，而在过去的研究中曾经出现过多血—抑郁质、胆汁—粘液质这两种气质类型。有研究者认为这种划分命名并不妥当，因为据艾森克的个性理论，多血质的个性特征为外向、情绪稳定，而抑郁质则为内向、情绪不稳定，二者的个性特征完全相反，同样胆汁质和粘液质的个性特征也完全不同。因此，不可能存在多血—抑郁质、胆汁—粘液质的气质类型(贾玉梅，2000)。因此本研究采用了这种观点，将气质类型划分为胆汁质、多血质、粘液质、抑郁质、胆汁—多血质、胆汁—抑郁质、多血—粘液质、粘液—抑郁质和多种气质混合型等九种类型。我们推测，本研究中胆汁质个体以及有关的混合气质类型数量较少，可能是由于性格等原因造成的，由于胆汁质个体思维灵活却粗枝大叶，难以长久地坐在电脑前完成问卷填写，导致成功收集到的问卷当中胆汁质个体数量明显较少。 4.2. 气质类型与口味偏好的关系 本研究结果表明，气质类型与口味偏好之间并无显著相关，也就是说我们不可能仅仅由一个人的气质类型来对其口味偏好进行推测，反之亦不可行。究其原因，我们认为这其中包含了许多因素：首先，气质是个人生来就具有的心理活动的典型而稳定的动力特征，普遍看法认为其生理机制是神经类型，也就是说，气质类型的形成过程中先天因素所占的比例较大。此外，有相关研究表明口味偏好的形成有众多影响因素，如地理环境、文化背景、自幼养成的饮食习惯和遗传基因等(周振华，李琳，陈明琴，周秀芳，&李燕，2009)。由此可见，个人的口味偏好会随着一系列因素的变化发生改变，其稳定性较之气质类型的稳定性要差一些。其次，气质类型与口味偏好的联系在于与神经类型相关的生理过程，而我们对于不同味道与机体之间的关系尚不明确，因此无法确定不同人群对于某种特定口味的偏好是否与气质类型相关(张根华，2007)。 Table 3 Correlation of the main temperament types and taste preferences (N = 93 Spearman (s) 胆汁质 多血质 粘液质 抑郁质 口味程度偏好 0.079 −0.016 −0.129 0.060 口味类型偏好 0.036 0.086 −0.026 −0.026 表3. 气质类型与口味偏好的相关关系(N = 93) Table 4 Relation between different temperament types and taste preferences in 93 subjects (N = 93 Spearman (s) 口味程度偏好 口味类型偏好 不同气质类型 −0.047 0.031 表4. 93名被试气质类型与口味偏好的关系(N = 93)
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user: 5. 结论与反思 5.1. 研究结论 综上所述，我们可以得出以下结论：四种基本气质类型与口味偏好无关，且九种气质类型与口味偏好之间也没有显著的相关关系。根据上述结论，我们可以推知，想要从单一气质类型或者不同气质类型来了解个人口味偏好是不太可能的，同样，由口味偏好对气质类型进行推理亦不可能。因此，“从口味偏好看出你的个性”，“揭秘口味偏好与性格的关系”等网络传言是不可信的。 当然，完全排除气质类型与所有生理因素的相关性也不合理，气质类型作为特殊神经类型的反映是以生理结构为基础的，因此，能够影响个体神经系统的发生和发展的生理因素可能间接地与气质类型之间具有某种联系，这些还仍待继续研究解决。在气质类型与血型的关系研究中，研究结果显示，O、A、B和AB四种血型人群的气质类型存在一定的差异。但是由于被试大多取自大学生，因此无法确定是否适用于更广泛的人群，这也说明我们在相关研究方面应该继续探索(陆运青等， 1992)。 针对研究结果的讨论，我们建议大家在日常生活中对于一些未经验证的理论持辩证的态度，不轻信也不能全部否定，利用科学的知识和方法对其加以验证和检验。 5.2. 研究反思 对于本研究的反思如下：一方面，与之前的研究相比，本研究从一个相对较新的角度对可能与气质类型相关的因素——口味偏好进行了研究。从研究结果来看，并没有很明显的成果，但是我们不能否定研究本身的价值。通过研究我们进一步明确了气质类型的相关因素的范围，为以后的研究省去了不必要的过程，可以说为之后的研究做了铺垫。另一方面，本研究并未得到预想中的结果可能有以下几个原因：首先，没有足够的研究资料作为参考，导致研究整体不够完善，细节部分不够严谨。其次，采用了在网络上收集数据的方式，回收得到的问卷有效率较低，并且无法保证数据的质量，对数据准确性影响较大。最后，知识水平有限使得对于研究课题无法做出更加深入细致的研究，因而就无法进一步确证本研究的准确性。 对于笔者来说，在更广泛的收集和阅读研究资料的基础上，还应该更多的涉猎与心理学相关的不同领域，增强自身的知识储备，以求在今后的研究中能够更加快速而准确地确定研究课题并对其进行全面的探讨。此外，有必要多加训练以达到对统计工具的熟练运用，减少研究的困难和所消耗的时间。 5.3. 未来研究展望 随着科学技术和研究手段的不断发展和完善，在未来气质类型与口味偏好等生理心理活动之间关系的研究中，我们可以采用脑电技术以及功能性核磁共振成像等技术来进行进一步的研究。由于气质类型是特殊神经类型的反映，我们可以对脑研究的方法和成果进行借鉴，进而更好地的探索气质类型和个体的生理活动偏好之间的关系。
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user: 摘 要 我国在全面二胎政策实施前即允许有残疾儿的家庭生二胎，因而目前有残疾儿的二孩家庭比例并不少。但是这方面的研究在我国极度缺乏。本文通过对国外研究文献进行系统的回顾与梳理，详细介绍了三方面的研究进展，包括：1) 身心障碍同胞对健康同胞的影响；2) 健康同胞对身心障碍同胞的作用；以及3) 父母在这类家庭中的作用。此外，深入分析了当前研究过程中可能遇到的挑战、讨论未来研究的方向，以期为国内未来开展相关实证研究和应用实践提供借鉴。 关键词 :二孩家庭，身心障碍，同胞，同胞关系，父母作用 Copyright © 2018 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 随着我国全面二胎政策的实施，越来越多的家庭开始关注或者计划生育二孩。尽管大多数家庭中儿童的身心发展是正常的，但是也会有一些家庭中儿童不幸患有身心疾病。例如，有些儿童得了自闭症、唐氏综合症等心理发展性障碍，还有儿童患有某些慢性疾病。这无疑对家庭来说是一种压力生活事件(Conger， Stocker， & McGuire， 2009)。在我国当前二胎政策的大背景下分析身心障碍的儿童在二孩家庭中的影响，以及父母如何让身心障碍的儿童和健康的儿童在家庭中更顺利地相互适应显得尤为重要。 迄今为止，国外已经积累了不少研究探讨和分析身心障碍同胞在整个家庭中的影响。本文通过对现有的实证研究文献进行系统的回顾与梳理，详细介绍了三方面的研究进展，包括：1) 身心障碍同胞对健康同胞的影响；2) 健康同胞对身心障碍同胞的作用；以及3) 父母在这类家庭中的作用。此外，深入分析了当前研究过程中可能遇到的挑战、讨论未来研究的方向。
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user: 2. 身心障碍同胞对健康同胞的影响 2.1. 负面作用 身心障碍的同胞会对健康同胞的适应带来影响。尤其是对于后出生的同胞来说，由于他们不能很好地理解比自己年长的同胞出现的身心健康问题，可能会为了父母过度关注而与年长的有健康问题的同胞竞争。这些后出生的同胞从小就生长在压力重重的家庭环境，y有可能不利于他们发展社会胜任的情感和认知能力(Dyson， Edgar， & Crnic， 1989)。其中有三种不同的理论解释身心障碍的同胞对健康的同胞产生负面作用背后的机制。 第一种理论为社会学习理论。根据Bandura (1977)的社会学习理论，个体通过观察模仿他人的行为或者强化去学习大量的社会行为、态度和信念。持这一理论观点的研究者认为，同胞在互动过程中互为对方提供各种机会去学习人际行为和技能，学会情感表达和管理，这些都会对同胞在家庭外的社会交往起到一定的作用(Kramer， 2014; Stauffacher & DeHart， 2006)。特别是对后出生的孩子来说，模仿和学习年长同胞能够帮助他们建立自我认同(Wong， Branje， Vander Valk， Hawk， & Meeus， 2010)，获得语言能力，学习社会交往(Pepler， Abramovitch， & Corter， 1981)。从社会学习理论的角度来说，正常的同胞社会化作用(例如，互惠的互动、模仿)可能在同胞有身心障碍的家庭中非常的有限。例如，发展障碍的自闭症儿童无法与健康同胞进行正常的交谈、无法进行互惠的交往。因此，这对后出生的同胞来说会产生一定的负面影响。他们可能会表现出尴尬、困惑、感到被忽视、受到父母差别对待等(Gray， 1998; Macks & Reeve， 2006)。相比没有发展障碍同胞的儿童来说他们可能会经历更多的孤独以及社交退缩(Petalas， Hastings， Nash， Dowey， & Reilly， 2009)。最近的一项研究调查进一步证明了这样一种观点。该研究想要分析发展正常的儿童如果他们有一位患有自闭症的同胞，是否会影响他们自身的心理发展。结果发现自闭症同胞的出生顺序是一个重要的影响因素，即在他们的研究中，如果自闭症的儿童先出生，并且表现出多外在行为问题，那么后出生的健康同胞也会出现更多的外在行为问题(Tomeny， Barry， & Bader， 2014)。还有一些类似的关于健康同胞不适应的研究证据还进一步发现，后出生的同胞面对先出生同胞的身心障碍，更容易出现不适应(Petalas et al.， 2009; Verté， Roeyers， & Buysse， 2003)。 第二种理论为家庭资源稀释(Blake， 1981)，从该理论角度来看，健康的同胞往往会因为身心有障碍或者疾病的同胞，而处于心理发展上的不利地位，表现出社会和心理的不适应，其根本原因在于，由于身心有障碍的同胞需要额外的或者特殊的照顾，那么就会稀释健康同胞获得父母照顾和关注等亲子投入的资源(Downey， 2001)。因此，这给健康的同胞带来一定的适应困难。如有些研究发现，同胞患有癌症会导致健康的同胞生活质量下降，表现出差的学业表现(Houtzager， Grootenhuis， Hoekstra-Weebers， & Last， 2005; Prchal & Landolt， 2012)。又如有研究发现，有学习障碍同胞的家庭比起没有学习障碍同胞的家庭，其健康同胞会出现更多的内化的和外化的行为问题(Lardieri， Blacher， & Swanson， 2000)，尤其是在内化的行为问题(例如，焦虑、抑郁)上出现的更多(Sharpe & Rossiter， 2002)。 第三种理论为家庭系统(Papero， 1990)，根据Bowen提出的家庭系统理论，家庭中成员的情绪因为家庭投射作用会通过核心家庭情绪系统互相传递。在障碍儿童家庭中，身心障碍同胞表现出来的情绪问题会直接地或者通过对养育者情绪的影响间接地对健康同胞造成一定的负面影响(Hanold， 1989)。例如，养育者因为身心障碍孩子的情绪问题而积蓄了很多担忧和压力，这种担忧会被健康儿童捕捉，从而让健康儿童因担心障碍同胞的问题扩展到自己身上而产生脆弱感和忧惧感(Sherman & Cocozza， 1984)。障碍儿童的情绪问题在家庭三角系统中会被放大，由于有波纹效应，经过投射的来回作用，容易引发健康儿童的怨恨、愤怒、自责、内疚等多种矛盾情绪，不利于健康儿童的发展(Featherstone， 1980)。但是，过去的一项元分析研究发现，同胞有身心障碍的负面效应可能被夸大了(Sharpe & Rossiter， 2002)。很多的测量都基于父母汇报，而父母由于子女患身心疾病产生心理痛苦，可能会在报告自己健康子女的各种心理状态时出现夸大严重性的问题(Alderfer et al.， 2015)。最新的研究发现，尽管家中有同胞患有癌症，但是健康的同胞与没有同胞患病的配对组进行比较，他们之间在社会行为、朋友数量、互惠友谊质量、同伴接纳等社会能力方面并没有很大的差异性(Alderfer et al.， 2015)。另外很重要的一点是慢性疾病本身的特点。不是所有儿童患任何疾病都会给健康同胞带来负面作用，这取决于这些疾病的某些特点(例如，是否威胁生命、需要父母照顾的程度)。有时候儿童疾病的严重性程度并不会影响同胞，但是儿童所患疾病影响他们的日常生活功能，他们需要密切的关注和照看，这就会对健康的同胞带来更大的负面作用(Sharpe & Rossiter， 2002)。 2.2. 积极作用 我们还需要注意，身心障碍的同胞有时候会给健康的同胞带来积极的作用。实际上，家庭中有身心障碍的同胞会对其他同胞共情能力的提升具有重要促进作用。例如，研究发现，对于那些其同胞有唐氏综合症的儿童，他们具有较高的共情能力，表现出更高的照顾行为(Cuskelly & Gunn， 2003)。这是因为共情是通过日常互动(包括与同胞之间的互动)过程中习得和形成起来的，个体学会如何通过站在他人的角度思考，并基于理解他人的需求来解决矛盾。尽管身心有疾病的同胞可能对健康同胞来说带来巨大的挑战，但是健康的同胞也更具有心理弹性。可见，实际上那些身心发展正常的同胞可以通过与身心有障碍的同胞互动促进他们社会能力和个人优秀品质的产生(Dykens， 2005)。 此外，尽管我们直觉上会觉得身心有障碍的儿童会阻碍他们与健康同胞建立良好的同胞关系，但实际的研究却发现，在大多数情况下，有身心障碍的同胞与其健康同胞之间的关系相比那些都是健康同胞之间的关系更积极、更加的亲社会性、也更具照顾人的特质、很少出现冲突(Stoneman， 2001)，这可能是因为在有身心障碍同胞的压力状况下，帮助他人能够提供一种压力状况的转移途径，从而使个人获得一种目标感(Midlarsky， 1991)。而且身心障碍的儿童与其健康同胞之间的互动卷入的程度并不会少。但是这也要考虑其身心障碍的程度，如果其自身互动的能力很弱或者很困难的话，那么同胞之间的互动水平就会很低(Byrne， Cunningham， & Sloper， 1988; Dallas， Stevenson， & McGurk， 1993)。