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user: 3. 结果与分析 3.1. DNA样品的纯度与浓度分析 用NanDrop 2000 Spectrophotometer仪器测得样品DNA含量，A260表示核酸在波长为260 nm时的吸光值，A280是蛋白质和酚类物质在最高吸收波长280 nm处的吸光值，A230是碳水化合物最高吸收峰的吸光值，纯DNA的A260/A230值约为2.5，纯DNA的A260/A280比值约为2.0，均能满足SSR分子标记需要。 3.2. SSR标记结果与分析 从表4可知，82个无花果叶片材料经8对引物共检测到48个多态性条带，平均每个引物可检测到6个条带，每个材料平均可检测到0.6个标记；8对引物扩增的条带范围集中在110 bp~320 bp之间。 引物WHG-6在82个材料中扩增得到13个条带(见表5)，为最多，引物WHG-4和WHG-5只有2条带最少。以引物WHG-3为例，82个材料中扩增得到的5个条带大小在118 bp~132 bp之间，每个材料的扩增结果见表5。通过对比发现，同一种材料采用不同的引物进行扩增，得到的条带数不同，大小分布情况有所差异。 Table 4 Primers amplify informatio 引物名称 扩增总条带数 条带片段大小(bp) WHG-1 5 173~190 WHG-2 11 155~190 WHG-3 5 118~132 WHG-4 2 214~218 WHG-5 2 126~138 WHG-6 13 289~316 WHG-7 6 142~158 WHG-8 4 171~175 表4. 引物扩增信息结果 Table 5 SSR fragment size distribution (Primer WHG-3 was taken as an example 品系 不同大小的SSR片段(bp) 品系 不同大小的SSR片段(bp) 118 120 122 124 132 118 120 122 124 132 H1 1 0 0 1 0 A16 0 0 0 0 1 H10 0 0 1 1 0 A24 0 0 0 0 1 H11 0 0 1 1 0 A25 0 0 0 0 1 H12 0 0 1 1 0 A29 0 0 0 1 1 H13 0 0 1 1 0 A30 1 0 0 1 0 H14 0 0 1 1 0 A31 0 1 0 0 1 H15 0 0 1 1 0 A32 0 0 0 0 1 H16 0 0 0 0 1 A34 0 0 0 0 1 H17 0 0 0 0 1 A36 0 0 0 0 1 H18 1 0 0 1 0 A37 0 0 1 1 0 H19 0 0 1 1 0 A38 0 0 1 1 0 H2 0 0 1 1 0 A43 0 1 0 0 1 H20 0 0 1 1 0 A44 0 1 0 0 1 H21 0 0 1 1 0 A48 1 0 1 1 0 H22 0 0 1 1 0 A49 1 0 1 1 0 H23 0 0 1 1 0 A50 0 0 1 1 0 H24 0 0 1 1 0 A51 0 0 1 1 0 H25 0 0 1 1 0 A52 1 0 0 1 0 H26 0 0 1 1 0 A53 1 0 0 1 0 H27 0 0 1 1 0 A54 1 0 1 1 1 H28 0 0 0 1 0 A55 1 0 1 1 1 H29 0 1 0 0 1 A56 0 1 1 0 1 H3 0 1 0 0 1 A57 0 1 1 0 1 H30 1 0 0 1 0 A58 1 0 0 1 1 H31 0 0 0 0 1 A59 1 0 0 1 1 H32 0 0 0 0 1 A60 0 0 0 0 1 H33 0 0 0 0 1 A61 0 0 1 1 0 H34 0 1 0 0 1 A62 1 0 0 1 0 H35 0 0 0 0 1 A63 1 0 0 1 0 H36 0 0 1 1 0 A64 1 0 0 1 0 H37 0 0 1 1 0 A65 1 0 0 1 0 H38 0 0 1 1 0 A66 1 0 0 1 0 H4 0 0 1 1 0 A67 0 0 1 1 0 H5 0 0 0 1 1 A68 1 0 0 1 0 H6 0 0 0 0 1 A69 0 1 0 0 1 H7 0 1 0 0 1 A70 0 0 1 1 0 H8 0 1 0 0 1 A71 0 0 1 1 0 H9 0 0 0 0 1 A72 0 0 1 1 0 A1 0 0 1 1 0 A75 0 0 1 1 0 A10 0 0 1 1 0 A77 0 0 1 1 0 A12 0 0 1 1 0 A78 0 0 1 1 0 表5. SSR片段大小分布情况(引物WHG-3为例) 3.3. 遗传相似性分析 根据8对引物扩增得到的48个SSR标记信息，有SSR标记片段记为“1”，无记为“0”，得到01矩阵，利用NTsys 2.10e聚类分析软件计算出94份无花果材料的遗传相似性系数(表6)及绘制聚类图，最大值为1.00，最小值为0.048 (移栽1~2、移栽1~6与阿图什8之间)，平均为0.377。 Table 6 SSR markers for genetic similarity coefficient between 82 fig material (14 cases 材料序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 1 1.00 2 0.32 1.00 3 0.32 1.00 1.00 4 0.29 1.00 1.00 1.00 5 0.32 1.00 1.00 1.00 1.00 6 0.32 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 7 0.32 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 8 0.33 0.33 0.33 0.33 0.33 0.33 0.33 1.00 9 0.35 0.16 0.16 0.11 0.16 0.16 0.16 0.29 1.00 10 1.00 0.32 0.32 0.29 0.32 0.32 0.32 0.33 0.35 1.00 11 0.32 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 0.33 0.16 0.32 1.00 12 0.32 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 0.33 0.16 0.32 1.00 1.00 13 0.26 0.92 0.92 0.91 0.92 0.92 0.92 0.27 0.17 0.26 0.92 0.92 1.00 14 0.32 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 0.33 0.16 0.32 1.00 1.00 0.92 1.00 表6. SSR标记得到82个无花果材料间的部分遗传相似系数(其中14个为例) 3.4. 聚类分析 依据表6的相似性系数，利用UPGMA聚类分析结果见图1，由图看出，82份种质共计40类，供试材料在相似系数为0.42时分为六个类群。第I类群包含1、10、24、59、60、61、45、69、70、71、72、75、73、58、64、65共16个；第II类群包含21、30、31、33、50共5个；第III类群包含9、25、27、29、35、38、28、36、49、42、43、48、67、63、34共15个；第IV类群包含37、52、53、76、44共5个；第V类群包含2、3、4、5、6、7、11、12、14、15、16、17、18、19、20、32、13、40、41、51、57、66、74、77、79、80、81、56、78、82、55、54、39、68、62共35个；第VI类群包含8、26、47、22、23、46共6个。 从图1可知，来自喀什、和田、阿图什、新和及塔大的本地无花果材料，如喀什1~7号、塔大1~3号、和田无花果王、新和5号、和田2、10号聚为第V类，虽然聚居地不同，但仍聚为一类，说明聚居地对无花果的遗传改良作用不大。 图1. 基于SSR标记数据绘制的UPGMA聚类图 新和采集的5份材料分布于I、III、V、VI类群，塔大移栽的28份无花果资源分布于I、III、IV、V类群，阿图什采集的无花果种质分布于I、II、III、V、VI类群，和田的10份无花果资源分布于I、II、III、IV、V、VI类群。可见，新和、阿图什、和田、塔大移栽的无花果类型丰富。