system: [SYSTEM]

user: 3. 人树突状细胞亚群与抗肿瘤免疫 3.1. Sipuleucel-T Sipuleucel-T (APC8015，商品名Provenge)是目前所知的第一个且唯一的一个以DC为基础的高级治疗性疫苗，被FDA批准用于治疗转移性且激素抵抗的前列腺癌 [ 18 ]。Sipuleucel-T是由多种抗原递呈细胞组成的疫苗，包含了血液中的所有DC亚群、B细胞和单核细胞等。疫苗的制备从获得大量自体PBMC开始，将PBMC与PA2024在体外培养36~44个小时。PA2024是一种融合蛋白，由肿瘤抗原前列腺酸性磷酸酶与免疫刺激细胞因子GM-CSF构成。经过以上同步抗原负载和激活步骤后，清洗并悬浮这些细胞，然后通过静脉回输给患者。在一项III期临床试验中，Sipuleucel-T将转移性激素抵抗的前列腺癌患者的总生存期延长了4.1个月 [ 19 ]。 3.2. MoDC 血液中自然生成的DC数量极少，很难获得足够数量的DC用于免疫治疗。因此，多数临床研究通过体外诱导生成大量的DC来实现免疫治疗的目的，被诱导分化成DC的起始细胞通常是单核细胞和CD34 + 造血祖细胞 [ 20 ]。以DC为基础的治疗性疫苗绝大多数树是单核细胞经体外刺激而分化成的DC，即单核细胞源性树突状细胞(monocyte derived dendritic cell， MoDC) [ 13 ] [ 20 ]。到目前为止，MoDC仍然是构建DC疫苗最常用的DC类型 [ 21 ] [ 22 ]。MoDC，尤其是IL-15诱导分化的MoDC能高效地将黑色素瘤特异性CD8 + T细胞活化成CTL，从而在抗黑色素瘤免疫应答中发挥重要作用 [ 23 ] [ 24 ]。 3.3. 人外周血DC亚群 血液DC约占PBMC总数的1% [ 25 ]，根据造血细胞来源可分为两群：髓系DC(mDC，亦称经典DC，髓系)和浆细胞样DC (pDC，淋系) [ 20 ] [ 26 ]。髓系DC以表达CD11C为特征，根据表面分子表达差异又可分成三个不同亚群：CD141 + (BDCA3) DC、CD16 + DC和CD1c + (BDCA1) DC [ 25 ] [ 27 ] [ 28 ]。CD141 + DC是人外周血中数量最少的DC亚群，仅占PBMC总数的0.05%左右 [ 25 ] [ 29 ]。未成熟CD141 + DC特异性表达C型凝集素受体CLEC9A，还表达toll样受体(Tolllikereceptor， TLR)如TLR1、TLR2、TLR3、TLR6、TLR8和TLR10；前者介导人CD141 + DC对抗原的摄取和(交叉)递呈，后者刺激DC成熟 [ 18 ] [ 21 ]。人CD141 + DC与小鼠CD8α + DC有很多相似的表型，两者都表达TLR3、Necl2 (Nectin-like protein2)和CLEC9A [ 30 ] [ 31 ] [ 32 ] [ 33 ] [ 34 ]。因此，有学者认为人CD141 + DC与小鼠CD8α + DC相对应，二者具有类似的功能特性。然而，值得注意的是人鼠DC之间还有很大的差异，如小鼠的mDC表达TLR9并分泌干扰素-α (Interferonα， IFN-α) [ 35 ] [ 36 ]，而在人身上这些是pDC独有的特征 [ 37 ]，其次是人的DC都不表达CD8α。CD16 + DC与CD1c + DC均表达TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6、TLR8、TLR9和TLR10，CD1c + DC还表达TLR3 [ 38 ]。这两种DC亚群经TLR激动剂刺激后都能分泌CXCL8 (IL-8)、TNF-α、IL-6、CCL3 (MIP-1α)、CCL4 (MIP-1β)、IL-1β，其中CD1c + DC主要分泌CXCL8 (IL-8)，CD16 + DC分泌的TNF-α量远远超过CD1c + DC [ 22 ]。CD16 + DC具有很强的促炎能力，而CD1c + DC似乎主要诱导趋化作用。pDC在血液中循环，通过高内皮静脉进入淋巴器官 [ 39 ]。pDC不表达CD11C，高表达IL-3Rα链(CD123)，还特异性表达BDCA2 (CD303)、ILT7和BDCA4 (CD304) [ 40 ]。pDC通过TLR7和(或) TLR9识别病毒片段后被激活，分泌大量I型IFN [ 39 ]。pDC接触病毒后能诱导抗病毒T细胞免疫应答 [ 41 ] [ 42 ]，从而在抗病毒免疫中发挥重要作用。 探索各DC亚群在抗肿瘤免疫应答中的作用的研究主要集中于免疫原较强的黑色素瘤。CD141 + DC、CD1c + DC、CD16 + DC和pDC都能摄取、加工可溶性黑色素瘤抗原，并向特异性CD8 + T细胞交叉递呈处理后的抗原表位肽，从而激活CTL发挥抗肿瘤作用 [ 27 ] [ 43 ] [ 44 ]。尽管摄取黑色素瘤抗原的能力弱于CD141 + DC、CD1c + DC及CD16 + DC，pDC能更有效地向CD8 + T细胞交叉递呈源于黑色素瘤细胞裂解产物的抗原 [ 47 ]。考虑到外周血中pDC的数量远远超过CD141 + DC，在交叉递呈肿瘤细胞来源的抗原时pDC至少拥有不弱于CD141 + DC的能力。 3.4. 皮肤DC亚群 皮肤DC主要包括两个亚群：表皮朗格汉斯细胞(LC)和真皮DC，真皮DC又分为两个亚群：CD1a + DC和CD14 + DC [ 19 ]。朗格汉斯细胞以表达CD1a和CD207为特征，还表达TLR1、TLR2、TLR3、TLR6及TLR10，通过分泌IL-15而有效地将CD8 + T细胞活化成CTL [ 20 ] [ 24 ] [ 26 ]。朗格汉斯细胞经CD40-CD40L通路活化后，仅分泌少量细胞因子，包括IL-15和IL-8；朗格汉斯细胞倾向于诱导CD4 + T细胞分泌Th2型细胞因子，但能有效地将naïve CD8 + T细胞活化成CTL [ 45 ]。CD14 + DC表达很多C型凝集素和TLRs，前者包括DC-SIGN、DEC205、LOX-1、CLEC-6及DCIR，后者主要是TLR2、TLR4、TLR5、TLR6、TLR8及TLR10 [ 26 ]。CD14 + DC经CD40-CD40L通路活化后，分泌大量细胞因子，包括IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p40、GM-CSF、MCP-1及TNF-α [ 38 ]。CD14 + DC极化naïve CD4 + T细胞向滤泡辅助性T细胞分化，后者诱导naïve B细胞发生表型转化并分化成浆细胞，从而促进体液免疫的发生 [ 38 ]。CD1a + DC表达CD1c，其表型与朗格汉斯细胞接近，但不表达朗格汉斯细胞特征性分子CD207和E-钙粘蛋白。CD1a + DC激活CD8 + T细胞的能力优于CD14 + DC而弱于朗格汉斯细胞，经CD40L激活后分泌大量的IL-15和IL-8 [ 38 ]，与朗格汉斯细胞类似。CD1a + DC可能是朗格汉斯细胞的前体细胞。表皮朗格汉斯细胞分泌的细胞因子主要是IL-15 [ 38 ]。朗格汉斯细胞递呈可溶性黑素瘤抗原的能力更强且能有效地促进抗黑色素瘤效应CTL产生 [ 37 ] [ 38 ]，CD14 + DC分泌IL-10和TGF-β抑制抗黑色瘤效应CTL的形成 [ 37 ]。 3.5. 炎性树突状细胞 在炎症时，机体内出现了一种新型DC，即炎性DC。炎性DC由募集到炎症部位的单核细胞分化而成 [ 46 ]，人的炎性DC首次发现于卵巢癌和乳腺癌患者的腹腔积液中，它们也出现于非肿瘤性炎性积液中 [ 32 ]。人的炎性DC表达TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9及TLR10，但不表达DC-SIGN [ 32 ]。人的炎性DC通过分泌IL-23等细胞因子诱导自体记忆性CD4 + T细胞及异基因naïve CD4 + T细胞分化成Th17型细胞 [ 20 ]，Th17型细胞在肿瘤免疫中兼具抗肿瘤与促肿瘤作用 [ 47 ] [ 48 ] [ 49 ] [ 50 ]。