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user: 3. 结果 在腹腔注射和浸泡感染环节中，通过观察实验鱼从发病至死亡阶段所表现的症状(图1~6)，与草鱼出血病症状极为相似，主要症状表现为摄食下降、活力减弱，随后出现为呼吸加速，感染部位红肿，死亡体表充血，眼眶充血，眼球突出，肛门红肿，肌肉出血，鳔壁充血，与王铁辉 [ 16 ] 、杜雄伟 [ 17 ] 、孙峰 [ 18 ] 的结果一致，因此可认定为感染嗜水气单胞菌和GCRV导致草鱼出血病。 3.1. GCRV感染结果 经腹腔注射和浸泡感染GCRV-104后，实时观察各组鱼从发病至生命活动区域稳定共7天内的情况，在腹腔注射和浸泡感染实验中，结果表明杂交F 1 对GCRV的抵抗力明显强于普通草鱼和赤眼鳟(表1、图7、图8)。 在腹腔注射感染实验中，通过记录实验鱼每天的死亡数情况(表2、图9)，草鱼每天均有死亡，第3天至第7天每天的死亡数量均超过7条，累计死亡数达到40，累计死亡率为80%；赤眼鳟第1天未出现死亡，从第2天持续至第7天每天出现死亡，第3天死亡数达到最高，随后死亡数逐天降低；正交F 1 只有第1、3、4、5天出现死亡，且死亡的实验鱼数量少，死亡数最多的一天为4条；反交F 1 第一天和第二天均出现1条死亡，第三天出现5条死亡，第四天出现死亡数达到最高，死亡数为6，统计结果表明，在腹腔GCRV感染实验中，草鱼累计死亡40条，赤眼鳟累计死亡25条，正交F 1 累计死亡10条，反交F 1 累计死亡15条，对照组中无死亡现象。 图1. 腹部充血 图2. 眼眶充血 图3. 肛门红肿 图4. 鳔壁充血 图5. 肌肉出血 图6. 鳃部出血 图7. 腹腔注射GCRV累计死亡率统计 图8. 腹腔注射GCRV累计死亡率统计 Table 1 The infection results among four species infected by GCR 种群 项目 腹腔注射10 ul/g 浸泡浓度10 5 TCID 50 空白对照 普通草鱼 死亡数 40 36 0 死亡率 80.00% 72.00% 0.00% 赤眼鳟 死亡数 25 28 0 死亡率 50.00% 56.00% 0.00% 正交F 1 死亡数 10 9 0 死亡率 20.00% 18.00% 0.00% 反交F 1 死亡数 15 16 0 死亡率 30.00% 32.00% 0.00% 表1. GCRV感染结果统计 Table 2 The results daily death statistics among four species by intraperitoneal inject GCR 剂量 种群 开始出现死亡时间(d)及死亡数量(条) 累计死亡数 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 10 ul/g 普通草鱼 2 3 8 7 7 6 7 40 赤眼鳟 0 3 7 6 3 2 4 25 正交F 1 2 0 4 3 1 0 0 10 反交F 1 1 1 5 6 0 1 1 15 表2. 腹腔注射GCRV每天死亡结果统计 图9. 腹腔注射GCRV每天死亡结果统计 在浸泡染实验中，通过记录实验鱼每天的死亡数情况(表3、图10)，攻毒后，草鱼和赤眼鳟从第1天开始每天均有死亡，第4天死亡数达到最高；草鱼、赤眼鳟分别死亡9条和10条；正交F 1 一共出现11条鱼死亡，发病时间主要集中在第3~4天，第3天死亡5条，第4天死亡4条，占死亡总数的81.82%；反交F 1 一共出现16条鱼死亡，发病时间同样主要集中在第3~4天，第3天死亡5条，第4天死亡8条，占死亡总数的81.25%。统计结果表明，在浸泡GCRV感染实验中，草鱼累计死亡36条，赤眼鳟累计死亡28条，正交F 1 累计死亡11条，反交F 1 累计死亡16条，对照组中无死亡现象。 以上结果初步说明杂交F 1 的抗GCRV的能力远远优于其父母本。 Table 3 The results daily death statistics among four species by bath exposure of bacteri 浸泡浓度 种群 开始出现死亡时间(d)及死亡数量(条) 累计死亡数 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 10 5 TCID 50 普通草鱼 3 5 8 9 5 3 3 36 赤眼鳟 1 3 8 10 3 1 2 28 正交F 1 1 0 5 4 0 0 1 11 反交F 1 0 0 5 8 2 1 0 16 表3. 浸泡感染GCRV每天死亡结果统计 图10. 浸泡感染GCRV每天死亡结果统计 3.2. 细菌感染结果 经腹腔注射和浸泡感染嗜水气单胞菌后，实时观察各组鱼从发病至生命活动区域稳定共7天内的情况。结果显示，在浸泡感染实验和腹腔注射感染实验中，杂交F 1 的累计死亡率均明显低于草鱼和赤眼鳟的累计死亡率，表明杂交F 1 对嗜水气单胞菌的抵抗力明显强于普通草鱼和赤眼鳟(表4、表5)。 在腹腔感染实验中，通过记录实验鱼每天的死亡数情况(表4、图11~13)，当浓度为3 × 10 8 CFU/mL时，普通草鱼的死亡率为58%，赤眼鳟的死亡率为44%，正交F 1 代的死亡率为22%，反交F 1 代的死亡率为24%；当浓度为3 × 10 7 CFU/mL时，普通草鱼的死亡率为54%，赤眼鳟的死亡率为38%，正交F 1 代的死亡率为18%，反交F 1 代的死亡率为12%；当浓度为3 × 10 6 CFU/mL时，普通草鱼的死亡率为48%，赤眼鳟的死亡率为34%，正交F 1 代的死亡率为12%，反交F 1 代的死亡率为8%；各对照组中均无死亡。在腹腔感染实验中，整个攻毒实验共进行7天，共计死亡186条鱼，死亡高峰期均集中在第3天和第4天，共计死亡114条，占死亡总数的61.29%。 在浸泡感染实验中，通过记录实验鱼每天的死亡数情况(表5、图14~16)，当浓度为3 × 10 8 CFU/mL时，普通草鱼的死亡率为54%，赤眼鳟的死亡率为38%，正交F 1 代的死亡率为20%，反交F 1 代的死亡率为32%；当浓度为3 × 10 7 CFU/mL时，普通草鱼的死亡率为50%，赤眼鳟的死亡率为36%，正交F 1 代的死亡率为8%，反交F 1 代的死亡率为30%；当浓度为3 × 10 6 CFU/mL时，普通草鱼的死亡率为42%，赤眼鳟的死亡率为28%，正交F 1 代的死亡率为10%，反交F 1 代的死亡率为25%，各对照组中均无死亡。在浸泡感染实验中，整个攻毒实验共进行7天，共计死亡184条鱼，死亡高峰期均集中在第3天和第4天，共计死亡126条，占死亡总数的68.48%。 Table 4 The results daily death statistics among four species by intraperitoneal inject Aeromonas hydrophil 细菌浓度 种群 开始出现死亡时间(d)及死亡数量(条) 累计死亡数 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 3 × 10 8 CFU/mL 普通草鱼 2 0 7 6 6 5 3 29 赤眼鳟 0 2 6 5 5 1 3 22 正交F 1 1 1 3 4 0 1 1 11 反交F 1 0 1 4 6 1 0 0 12 3 × 10 7 CFU/mL 普通草鱼 3 1 7 10 3 2 1 27 赤眼鳟 0 2 8 7 1 0 1 19 正交F 1 0 1 2 2 2 0 2 9 反交F 1 0 1 1 1 1 1 1 6 3 × 10 6 CFU/mL 普通草鱼 2 5 7 8 0 1 1 24 赤眼鳟 1 0 8 6 1 1 0 17 正交F 1 0 1 2 2 1 0 0 6 反交F 1 0 1 1 1 1 0 0 4 表4. 腹腔注射嗜水气单胞菌每天死亡结果统计 Table 5 The results daily death statistics among four species by bath exposure of bacteri 细菌浓度 种群 开始出现死亡时间(d)及死亡数量(条) 累计死亡数 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 3 × 10 8 CFU/mL 普通草鱼 2 4 6 8 4 2 1 27 赤眼鳟 0 0 7 6 3 1 2 19 正交F 1 0 0 4 5 0 0 1 10 反交F 1 0 0 8 7 1 0 0 16 3 × 10 7 CFU/mL 普通草鱼 1 1 6 11 1 2 3 25 赤眼鳟 1 2 7 8 0 0 0 18 正交F 1 1 1 1 1 0 0 0 4 反交F 1 2 0 5 6 0 1 1 15 3 × 10 6 CFU/mL 普通草鱼 1 1 4 7 5 2 1 21 赤眼鳟 0 4 5 4 0 1 0 14 正交F 1 1 0 1 2 1 0 0 5 反交F 1 1 2 4 3 0 0 0 10 表5. 浸泡水气单胞菌每天死亡数据统计 图11. 3 × 10 8 CFU/mL浓度，腹腔注射细菌每天死亡结果统计 图12. 3 × 10 7 CFU/mL浓度，腹腔注射细菌每天死亡结果统计 图13. 3 × 10 6 CFU/mL浓度，腹腔注射细菌每天死亡结果统计 图14. 3 × 10 8 CFU/mL浓度，浸泡感染细菌每天死亡结果统计 图15. 3 × 10 7 CFU/mL浓度，浸泡感染细菌每天死亡结果统计 图16. 3 × 10 6 CFU/mL浓度，浸泡感染细菌每天死亡结果统计 以上结果初步说明赤眼鳟的抗嗜水气单胞菌的能力优于草鱼，杂交F 1 代的抗嗜水气单胞菌的能力不但优于赤眼鳟，而且大大优于草鱼。