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user: 3. 结果与分析 3.1. 培养天数及盐胁迫浓度的确定 对中双11号在不同盐浓度下的发芽率进行统计，结果表明，从播种后第2天开始观察，到播种后第6天，种子已基本发芽完成，故实验观察天数定为7天。在不同浓度NaCl溶液处理下，中双11号种子的发芽受到不同程度的抑制(图1)。NaCl溶液浓度在1%~2%范围内，随着盐浓度升高，种子的发芽率明显下降，当NaCl浓度达2%以上时，种子已基本不发芽。当NaCl浓度在1%至1.5%之间时，种子受NaCl浓度影响变化程度最大，因此最终决定以1.2% NaCl溶液浓度作为胁迫浓度进行随后的实验。 3.2. 盐胁迫对耐盐指标的影响及各耐盐指标间的相关性分析 根据88份材料在盐胁迫处理及无胁迫对照下各耐盐相关性状的测定结果，计算出各性状的相对值，以各性状相对值作为耐盐指标进行表型变异分析(表1)。由表1可以看出，在1.2% NaCl盐胁迫下，4个耐盐指标的变异系数都在20%以上，说明不同品种甘蓝型油菜的四个耐盐相关性状均存在着较大的差异，且参试品种耐盐相关性状变异丰富，同时也表明这些性状指标对品种的耐盐性具有指示作用，可用于甘蓝型油菜的耐盐性鉴定。 图1. 中双11在不同盐浓度胁迫下的发芽情况 Table 1 Phenotypic variations of salt tolerance related trait 发芽率(%) seed germination rate 根长(%) root length 鲜重(%) fresh weight 发芽势(%) germination potential 最大值Max 99.00 61.57 66.97 91.96 最小值Min 35.07 5.55 13.77 0.00 极差Range 63.93 56.02 53.20 91.96 均值mean 77.94 19.00 36.25 54.11 变异系数CV 20.17 56.35 30.25 57.04 表1. 耐盐指标的表型变异 受盐胁迫的影响，各性状在盐胁迫下与对照相比都有明显下降，但不同性状受影响的程度不同，表1可以看出，根长受盐胁迫的影响较大，其均值仅为对照的19%，而发芽率受盐胁迫的影响最小，该性状的均值为对照的77.94%，且品种间的变异与其他性状相比较低，仅为20.17%。通过观察各性状相对值的频率分布也可以看出(图2)，发芽率的相对值主要分布在70%以上，而根长相对值主要分布在50%以下，表明在同等条件的盐胁迫下，发芽率所受影响最小，而根长对盐胁迫最敏感。 通过比较各耐盐指标间的相关性可以看出，除了根长与发芽率相关性未达到显著水平外，其他指标两两间的相关性均在0.05水平达到显著，其中发芽率与单株鲜重、发芽率与发芽势、根长与鲜重、鲜重与发芽势之间的相关性均在0.01水平达到显著(表2)。这表明，受盐胁迫后这4个耐盐指标之间存在一定联系。 3.3. 油菜萌发期耐盐指标主成分分析 通过对88份甘蓝型油菜进行盐胁迫处理，得出发芽率、根长、鲜重、发芽势的耐盐相对值。对这四个耐盐指标进行主成分分析，结果表明(表3)，第一、第二、第三和第四主成分的贡献率分别为47.29%、21.30%、17.28%、14.13%。为了达到数据简化的目的，按累计方差贡献率 ≥ 85%的原则提取主成分 [ 18 ] 。本研究中，前三个主成分的累计贡献率已经超过85%，这一结果表明，前三个主成分已经能代表所有生理指标的绝大部分信息，可以用这三个主成分建立的评价体系对甘蓝型油菜种子萌发期的耐盐能力进行综合评价。由表3中各测定指标的贡献率及所测指标的特征向量值可以看出，在第一主成分中，四个生理指标相对值所占比重没有明显差别，在第二主成分中，相对根长占主要作用，第三主成分中，相对根长和相对发芽势占主要作用。 3.4. 油菜萌发期耐盐性隶属函数分析 对88个材料的第一、第二、第三主成分进行隶属函数分析，获得这些材料的耐盐性差异，以加权隶 图2. 耐盐指标的频率分布 Table 2 Correlations of salt tolerance related traits under 1.2% NaC 发芽率 seed germination rate 根长 root length 鲜重 fresh weight 发芽势 germination potential 发芽率 seed germination rate 1.000 根长 root length 0.189 1.000 鲜重 fresh weight 0.342 ** 0.284 ** 1.000 发芽势 germination potential 0.417 ** 0.236 * 0.295 ** 1.000 表2. 1.2% NaCl胁迫下各耐盐指标间的相关系数 * 、 ** 分别表示在0.05和0.01水平显著性。 Table 3 Eigen values and variance contribution ratio of measured indicators and characteristic value of principal component 主成分 Principal component 特征值 Eigen value 贡献率(%) Variance contribution ratio 累计贡献率(%) Accumulated variance contribution ratio 所测指标的特征向量值 Eigen vector of measured indicators Var1 Var2 Var3 Var4 1 1.8915 47.29 47.29 0.5328 0.4166 0.5124 0.5291 2 0.8519 21.30 68.59 −0.450 0.8111 0.1581 −0.338 3 0.6912 17.28 85.87 −0.006 0.357 −0.793 0.4931 4 0.5654 14.13 100.00 0.7163 0.2031 −0.288 −0.602 表3. 各测定指标的特征值、贡献率和主成分特征向量值 注：Var1，Var2，Var3，Var4分别代表发芽率、根长、鲜重、发芽势。 属函数值的大小即RW值评价耐盐性强弱顺序，结果表明，SW190的耐盐性最强，而SW215的耐盐性最弱，其余材料根据其加权隶属值的大小排序见表4。 3.5. 聚类分析及综合评价 采用欧氏距离和离差平方和法对加权隶属值即RW值进行聚类分析，将88份材料划分为四类，如图3，SW190，SW188，SW183，3P001，SW178，SW140，SW147，SW144为第一类，共8个，占所有材 Table 4 Membership value of 88 Bassica napus varietie 材料编号 Variety code 主成分隶属值 membership value of principal component 加权隶属函数值 RW 排序sort 材料编号 Variety code 主成分隶属值 membership value of principal component 加权隶属函数值 RW 排序sort comp1 comp2 comp3 comp1 comp2 comp3 SW190 1.00 0.57 0.57 0.81 1 SW109 0.49 0.32 0.32 0.41 45 SW188 0.95 0.60 0.51 0.77 2 3P044 0.55 0.11 0.40 0.41 46 SW183 0.50 0.99 1.00 0.72 3 SW192 0.47 0.22 0.49 0.41 47 3P001 0.86 0.42 0.64 0.71 4 SW137 0.53 0.04 0.53 0.41 48 SW178 0.91 0.39 0.34 0.67 5 3B062 0.49 0.30 0.30 0.41 49 SW140 0.85 0.53 0.27 0.65 6 SW206 0.34 0.42 0.56 0.40 50 SW147 0.75 0.18 0.94 0.65 7 3P031 0.58 0.12 0.25 0.40 51 SW144 0.55 0.72 0.76 0.63 8 SW094 0.34 0.42 0.51 0.39 52 SW103 0.71 0.41 0.61 0.61 9 3B280 0.47 0.24 0.31 0.38 53 SW175 0.76 0.44 0.42 0.61 10 SW224 0.49 0.35 0.12 0.38 54 SW176 0.80 0.36 0.38 0.60 11 3B092 0.42 0.19 0.45 0.37 55 SW118 0.89 0.17 0.34 0.60 12 3B079 0.49 0.02 0.46 0.37 56 SW173 0.80 0.24 0.45 0.59 13 SW164 0.31 0.46 0.37 0.36 57 SW177 0.75 0.41 0.38 0.59 14 SW184 0.34 0.29 0.45 0.35 58 SW174 0.77 0.36 0.30 0.58 15 SW194 0.36 0.15 0.54 0.34 59 SW166 0.75 0.30 0.40 0.57 16 3P038 0.42 0.05 0.47 0.34 60 SW142 0.66 0.61 0.23 0.56 17 3P091 0.39 0.06 0.52 0.33 61 SW152 0.77 0.27 0.34 0.56 18 SW193 0.40 0.08 0.44 0.33 62 SW080 0.67 0.38 0.49 0.56 19 3P034 0.40 0.03 0.47 0.32 63 SW167 0.76 0.16 0.47 0.55 20 SW161 0.27 0.15 0.67 0.32 64 SW141 0.64 0.14 0.82 0.55 21 3B286 0.38 0.11 0.42 0.32 65 3B076 0.76 0.13 0.45 0.54 22 3P053 0.39 0.00 0.48 0.31 66 SW156 0.68 0.26 0.50 0.54 23 SW081 0.30 0.25 0.42 0.31 67 SW170 0.60 0.29 0.60 0.52 24 SW163 0.23 0.49 0.30 0.31 68 SW120 0.66 0.20 0.50 0.51 25 SW171 0.27 0.24 0.46 0.30 69 SW179 0.68 0.32 0.24 0.51 26 3P055 0.21 0.46 0.32 0.30 70 SW133 0.74 0.11 0.29 0.49 27 SW130 0.28 0.46 0.10 0.29 71 表4. 88份甘蓝型油菜隶属值值排序 Continued 注：Var1，Var2，Var3，Var4分别代表发芽率、根长、鲜重、发芽势。 料的9.1%，将这一类归为高度耐盐型材料，这类材料在筛选耐盐性甘蓝型油菜中具有重要意义；SW103，SW175，SW176，SW118，W173，SW177，SW174，SW166，SW142，SW152，SW080，SW167，SW141，3B076，SW156，SW170，SW120，SW179，SW133，3B043，SW200属于第二类，共21个，占所有材料的23.9%，为中度耐盐型材料；SW136，SW162，SW226，3P022，SW062，SW143，SW187，SW186，3P007，SW138，3P023，SW123，3P032，SW149，SW205，SW109，3P044，SW192，SW137，3B062，SW206，3P031，SW094，3B280，SW224，3B092，3B079，SW164，SW184，SW194，3P038，3P091属于第三类，共33个，占所有材料的37.5%，属于低度耐盐型材料；其余材料，SW193，3P034，SW161，3B286，3P053，SW081，SW163，SW171，3P055，SW130，3P086，3B082，SW101，SW172，3P040，SW092，SW157，3P019，3P012，3P048，SW212，3B103，SW055，SW075，3B325，3P013，SW215属于第四类，共26个，占所有材料的29.5%，属于盐敏感型材料。