DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 3. “药世界APP”项目现状分析 “五力模型”分析 在任何行业里，无论是在国内还是在国外，无论是生产一种产品还是提供一项服务，竞争规律都寓于如下五种竞争力量之中： 1) 现有竞争者之间的竞争 见表1。 Table 1 Comparison table of functions of similar APP competitor 软件 用药助手 药网 众康医线 自测用药 搜药 中华药膳 心理FM 心理云平台 壹心理 中药通 药品信息查询 √ √ √ 常见病例 √ √ √ 用药提醒 √ √ √ 药膳 √ √ √ 中医传统名方 √ √ √ 心理疾病测试 √ √ 心理宣泄室 √ √ √ 执业药师服务 √ √ √ √ 营养师服务 √ 心理咨询师服务 √ √ 病人专属档案 √ √ √ √ 表1. 同类APP竞争者功能对比表 2) 替代品威胁 本文产品的可能替代品主要为以下三类。分别具体分析替代产品威胁性： ① 药品信息查询类：在这一方面的替代品主要为用药助手、药网、众康医线、自测用药等替代软件，这些软件的功能主要集中在购药用药方面，使用人群较大的集中在患者群体中，适用面较小，很难大面积推广使用，用户使用的依赖度较低，这一情况并不符合互联网时代的营销理念与市场现状，软件未来发展有很大的局限性。② 心理咨询类：这一方面主要竞争者为心理FM、口袋心理测试、心理云平台、壹心理等心理类软件，这一类软件开发者的主要服务人群为上班族等高压力人群以及少数心理疾病人群，少有开发者将这种软件的服务人群转向为针对亚健康人群和术后康复人群。③ 药膳中药类：这类软件的开发者重在开发中药的治病作用和药膳的养生作用，没有将软件纳入大健康领域中，没有将对使用者的健康服务体系化。 综合对各种类型替代品的分析，本文产品在现有市场中尚无完全替代品，仅在部分功能上与市场中已有产品形成竞争，并且在健康服务市场中有特定需求的服务人群，因此具有开发空间和市场潜力。 3) 潜在进入者的威胁 国家对医药类企业有一定政策限制，医药行业的进入壁垒相对于普通的行业要高很多。首先是来自政府行政管理的壁垒，药品直接关系到使用者的生命安全，医药行业各环节受到国家监督管理部门的严格控制。在互联网医药方面，国家多次加强管理措施，将没有相应资质的经营者逐出以达到市场规范医药卫生市场的目的；其次，由医药产业的规模经济带来的壁垒，新进入的医药企业难免要面临巨大考验，即要么在规模经济上经营，投入巨额的资金，并与现有企业进行激烈的市场份额争夺战：要么在规模经济以下生产，成本居高不下，在竞争中处于劣势地位。这两方面会给医药企业带来巨大的压力；第三，来自资本需求的壁垒，医药行业中企业的生产经营不仅需要大量的资金，而且资金投资的风险也大，国家提高了医药产业的准入门槛，因此相关带来了在启动资金方面的更高要求。 4) 购买者的讨价还价能力 亚健康人群的规模大且购买不稳定，本文产品对于此类人群为非必需品，因此讨价划价能力较强，对于此类人群应加强促销推广力度，提高产品知名度，提高这类群体的购买倾向。并且针对这类群体推出一系列的促销手段，提高其购买欲望。对于患者来说，一款具有较高可信度的用药指导APP对其用药过程和康复过程具有较好的促进作用，在接受互联网服务的前提下对于这种软件的需求弹性小，讨价还价能力较低，对此类人群应提高产品的权威性，让使用者放心购买使用，通过合适的促销宣传提升产品的美誉度。 5) 来自供应商的压力 对于本文产品来说，上游供应商大致有两类： 提供互联网服务业务的供应商：对于互联网 + 医疗服务行业的产品来说，互联网服务的供应商作用显得尤为重要，只有开发出适销易用的互联网产品才能吸引更多的使用者 [ 7 ] ，因此合理的选用软件服务的供应商和互联网相关业务的供应商对于企业发展前景具有重大影响。 提供医药相关信息服务的供应商：本文开发的软件涉及大健康领域，因此对于各种医药信息的需求度较高，不仅应该建立自身的医药信息检索团队，而且应注意与医院、高校和研究所等机构的合作，从医药信息供给方面来说，这三类机构就是本文项目的上游供应商，只有产品具有影响力和权威性，才能取得高水平的可供给医药信息机构的合作，并为其提供合理的报酬，以激励其进一步进行合作的倾向。
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user: 4. “药世界APP”项目运营存在的问题及根源分析 本文产品将健康领域几项关键使用功能进行整合，使病理人群和亚健康人群有较大的使用空间，并且在用后康复之后不会立即卸载，使用个性化定制功能对仍需使用的板块进行选择，使用其中部分日常调理功能，并且可以用这款软件简单快捷的途径获取医药信息，提高顾客对产品的信赖感。针对健康服务市场。目前较多的健康服务软件都没有形成自身体系，而可以接受互联网的群体又较为急切的需要一款权威的软件以满足其对医药信息获取和健康服务的需求，因此这本文产品有较大的市场潜量。 相对于当前市场中已有软件，本文APP中的一些与之类似的功能会缺乏竞争性，市场上已经存在的软件由于已经上市了相当一段时间，其宣传力度、广度、深度都要比本文产品更具优势，顾客对其信任度也要比本文产品高，这方面本产品在竞争中处劣势。 随着社会的发展，居民对健康的关注度越来越高，这对于本款APP提供了广阔的发展平台。目前市场中健康类APP功能较为局限，本产品功能全面，市场潜量大。随着互联网时代的到来，本款APP的宣传广度、深度借助互联网得到扩大。目前健康类APP比较分散，还没有产品占据绝对优势市场份额，形成市场垄断，本文产品易于进入市场。 任何企业在社会上都会面临着诸多实际的风险，未来的诸多不确定因素都会给企业的生存带来问题与挑战，经过前期的分析，会有效的降低外部风险问题。经过分析，本文找出企业可能面临的问题，并提出了相关的解决方案。 4.1. 市场问题 决策者市场运营经验不足，对于市场信息灵活变动的较不敏感，在仅仅掌握较少信息情况下进行决策会导致决策失误，对未来的业务发展方向和服务目标人群的选择较不明确，会造成市场定位与市场环境把握不准确，都会对企业的经营带来风险。 4.2. 生产力问题 1) 人力资源问题 运营初期，由于流动资金不足，短期内在员工待遇福利方面可能无法得到迅速提升。基于现实因素影响，可能会导致一定的人才流失，技术人才对企业发展起到举足轻重的作用，人才流失会对企业造成极大的影响。 2) 财力资源问题 前期，由于网络使用花费相对较低，运营成本会比较小，相应的风险也会低，但由于前期 APP 的开发，会使流动资金减少，尽管运营成本不高，但也存在相应的财务风险。中期运营成本会较大幅度提高，此时极容易出现资金短缺，流动资金不足等财务风险。当进入项目运营后期，发生财务风险的可能性会降低，此时，可以进行其他业务领域的拓展。 4.3. 政策法规问题 由于本文产品属医药领域，因此国家的相关政策会对项目运营产生重大影响。若国家政策变动，而相关人员未发现并采取应对措施，会使企业受到巨大损失。在企业成立初期时，需要进行相关手续的办理，因此在法律方面需要一定的指导。 4.4. 安全隐私问题 处于市场占领阶段时，信息的权威性起着至关重要的作用。一旦相关工作未落实执行，APP 发布信息的准确度出现偏差，会极大地影响产品在用户心中的形象，对企业发展造成不良影响。企业以APP运营为主营业务，因此网络安全极为重要，一旦出现信息入侵，用户个人资料泄露等情况，会对企业的的形象造成恶劣影响，使运营陷入危机。
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user: 5. “药世界APP”项目运营的对策研究 基于市场分析以及一系列的调查，本文为以上问题制定了相关的解决方案，保证尽可能规避风险并将风险所带来的损失降到最低。 5.1. 市场问题解决方案 在进行决策前，进行大量且完备的市场调查与市场分析，利用所得到的数据为决策的依据。增强对于市场变化的敏感度，时刻关注市场环境，明确国家的经济政策，要定期进行具有计划性和目的性的市场调研，邀请专业人士为顾问，为企业高层及员工进行培训，对企业决策提供建议。 5.2. 生产力问题解决方案 1) 人力资源问题解决方案 由于企业的资金不足问题在成立初期难以得到解决，企业短期内无法提升员工的待遇福利，因此必须采取其他方案激励员工。可以考虑员工持股制度，增加企业的企业文化氛围，并提升员工的企业文化认同感，从而提升企业凝聚力。 2) 财力资源问题解决方案 针对不同的发展时期，企业应采取不同的解决方案。在前期，尽量节约成本，合理分配使用资金。而进入企业的发展中期，寻找新的资金来源进行融资，增加流动资金。当企业进入后期，尝试扩大企业的业务领域，进行新的技术开发。 5.3. 安全隐私问题解决方案 1) 安全问题解决方案 首先，企业应选择专业的负责团队进行APP录入信息的审核，相关负责人员必须了解相关国家政策的变动并具备医药行业信息的专业知识。若仍然出现信息录入错误的情况立即删除，同时及时通告，使顾客损失降到最低。 2) 隐私问题解决方案 对于以APP作为主营业务的企业，若想降低内部信息以及客户的隐私泄漏风险，就必须有专业的技术维护和研发人员，不断地增强网络服务的安全系数，预防黑客侵入与信息泄露的问题，防止发生各阶段可能遇到的各种网络问题。
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user: 6. 结论 我国目前处于经济稳步发展的大环境中，伴随着经济的发展，我国的亚健康状况十分普遍。而在互联网与大健康产业不断发展的情况下，居民对于身心健康的重视程度也有了显著提升。我国目前移动医疗APP领域产品专业性、权威性不够突出，基本没有形成具备较显著品牌效应的APP产品，但服务人群范围广泛，是具有前景的发展方向。APP作为一种新型的集方便、快捷、低成本等特性于一体的医疗载体，具有十足的发展潜力。当前在国际上，美国与欧盟均有移动医疗类APP运营，这表明以APP为平台的健康行业已被人们所接受。我国的移动医疗APP领域虽然起步较晚，但却有良好的发展前景。尽管移动医疗APP作为一种新兴的领域，但却能在处理医患双方信息沟通问题与用药安全信息传递方面发挥无可替代的作用，能够使有限的医疗资源发挥最大效用。
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user: 摘 要 目的：对药品包装趣味性设计的必要性进行阐述，结合实例分析趣味药味包装的设计表现手法，使患者在治疗过程中在情绪上得到最大的安抚，能够主动配合治疗、早日康复。方法：对病患的心理表现和情绪特征进行分析，在此基础上对药品包装的结构、造型、图形几个元素重点剖析，探索恰当有效的趣味性表现方法，将药品外包装与药品功能巧妙的结合起来，实现药品包装的趣味性设计。结论：药品包装与其它商品包装相较，存在一定的特殊性。要有保护药品的功能，也要满足患者的情感因素，市场中药品包装外观大多以理性表达的居多，在药品包装过程中，对于材料的研究和投入已经非常成熟，而对于患者的心理关怀却很少在包装中体现，“以物为本”过渡到“以人为本”是我们在药品包装设计中需要关注的新问题。 关键词 :病患心理，趣味性，包装结构，包装造型 Copyright © 2018 by author and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 药品作为一种特殊商品，在包装设计上有独特的要求，首先要在功能上满足对药品的保护，其次在外包装的设计上也要符合消费者的审美情趣和心理需求。现在市场中药品种类繁多，有处方药、非处方药、口服药、注射药、片剂、胶囊等，同样是药品由于分类不同也决定其包装设计的方式不同。药品面向的消费群体是广大患者，所以在设计药品外包装时，要充分考虑到病患特殊的心理特征，设计师需要根据这些具体情况区别对待，以便药品的使用者获得良好的心理体验。趣味性设计应用于药品包装中，能唤起消费者潜在的感性反应、关注消费者情感和心理变化，致力使广大患者在治疗过程中消极抵触的情绪得到最大缓解。
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user: 2. 药品外包装设计的原则 首先在包装材料上采用最新科技手段以保证药物品质的安全；其次，药品本身特殊属性决定了其外包装要遵循科学严谨的原则，这是出于对病患的保护，比如在设计过程中，对文字大小、字距、行距和字体的选用都要以方便用户阅读为前提，对图形和色彩的选择也要注重合理性，不能让用户对药品的功能和疗效产生错误的认知；再次，药品的包装还要具备便利性，要方便运输、携带、开启，这一特点在药品的打开方式上体现的尤为突出。以上的这三种设计原则是药品设计中最应普遍遵循的，在坚持这三个原则的基础上，可以把其他设计表现元素融合进去，本文着重论述趣味性设计元素在药品外包装设计中，如何有效、不着痕迹地应用。
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user: 3. 趣味性药品包装设计的必要性 3.1. 病患的心理特征和情感表现 广大的患者作为药品最主要的消费群体，他们的心理状态有阴郁、消极等特征。在现实生活中，患者因病情程度、个体心理差异等因素表现出的情绪反应都不尽相同，无论表现程度如何，普遍都会存在焦虑、恐惧、孤独、分离感、罪恶感等负面情绪，在一些绝症患者身上甚至会出现绝望和重度抑郁的表现 [ 1 ] 。这些负面消极的心理和抵触治疗的现象不仅在儿童身上出现，在成年人身上同样也会发生，不同的是儿童大多会用哭闹的方式来宣泄恐惧，而成人会把这些心理情绪压抑在心中，导致在生理和心理上都承受不同程度的痛苦。 3.2. 患者需求的多样性与发展性 由于消费者性别、年龄、病因和生活习惯不同，对于药品包装的需求自然会有很大区别。这种差异所表现出的结果就是消费需求多样性。随着社会不断发展和科技不断进步，消费者需求得到满足后会产生新的需求，以此产生的推动力促进社会的发展，消费者的需求总是呈现由低级向高级、由简单向复杂的发展趋势。 3.3. 趣味性药品包装对患者的心理影响 在药品包装中加入趣味性设计可以缓解病患在治疗过程中的一些抵触情绪，我们现有的绝大多数药品包装都是比较严肃理性的，适当融入一些趣味性设计可以缓解治疗过程中的冰冷无趣，也能减轻患者的心理压力，从而更好地配合治疗，实现缓解病情和早日康复的目的。
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user: 4. 药品包装的趣味性设计 4.1. 解读趣味性包装设计 产品包装设计的趣味性已为吸引消费者购买产品的一种有效手段 [ 2 ] 。包装设计中趣味元素的融入，使包装设计的重心从以物为本转移到了以人为本。通过对造型、色彩、结构、肌理等方面别具匠心的设计表现，使消费者获得愉悦轻松的审美体验。在商品高度同质化的经济环境下，消费者的需求已经从注重功能和用途方面慢慢发生转变，呈现出多元化趋势。在众多的消费需求中，商品包装作为连接消费者和产品之间的重要纽带，已经发展成独立的设计类别，是一门集理性思维和感性知觉为一体的学科。包装设计中的趣味性更偏向于感性，它以轻松快乐的形式为基础，达到吸引眼球的目的，给消费者带来愉悦的购物体验。 趣味性元素在包装中的应用，是以人本主义为主旨的设计方法，旨在对人的情感和精神需求给予最大关怀。趣味性设计可以增加商品本身的个性魅力和亲和力，也能激发与消费者之间的情感共鸣，符合不断变化的消费者心理，对促进销售有着积极作用。 4.2. 药品包装中趣味性设计的分类 药品不同于普通的商品，患者也不同于普通人群，作为药品和患者之间的桥梁，药品包装设计采用的趣味性元素，不能以单纯的“有趣”作为标准，设计师需要深入地了解趣味和恶趣味之间的不同，才能创作出适宜的趣味性包装作品。 结合病患的心理特点和趣味元素的一些特性，对适合药品包装设计采用的一些趣味设计进行分类，归纳如下。 1) 天性无邪的童真趣味 童趣不是儿童所独享，每个成年人都有稚嫩柔软的一颗童心。童趣类设计是从儿童的视角出发，用孩子的视觉语言激活人们内心对健康生活的向往。单纯无邪和浑然天成是其表现特点。表现的物象大多造型简洁概括、色彩亮丽跳跃，这样的药品包装不仅能减轻孩童对服药的恐惧感；也能感染成年人，给予遗忘童年世界的成人一抹童趣；同时暗示了在病痛面前，每一位病患都应该得到孩童一样的关怀与对待。 2) 恰到好处的幽默趣味 幽默是一种主观感受，表现方式含蓄、微妙、令人回味深长。幽默的设计无需让人捧腹大笑，会心一笑的同时就能领会设计者的意图。幽默的包装不仅让消费者有轻松愉悦的经历，而且能在消费者和产品之间建立一定的情感联系 [ 3 ] 。设计中存在的幽默，是以特定的消费人群为目标的，目标之外的群体往往难以理解和破译。 药品包装设计的幽默表达需要审慎推敲，如果使用不当，会使患者产生歧义和误解，从而导致完全相反的效果，使品牌或产品失去消费者。 3) 独具个性的新奇趣味 新、奇、特包装是彰显产品个性的设计方式，通常呈现出与常规包装差异较大的视觉效果。新奇和怪异只是设计的手段和方式，其最终目的还是“有趣”。与幽默的趣味不同，新奇之趣更为夸张和外露，有些甚至会表现的怪诞、魔幻，给人意料之外的感受，出其不意是创意的出发点。 新奇的药品包装形式，利用一些奇特怪异的创意把病患带入另一个世界，能分散患者的注意力，从而达到缓解焦虑与压力的目的。 4) 清新温暖的情感趣味 优秀的设计是设计人员和用户之间的交流，这种交流要靠产品来实现 [ 4 ] 。情感是不同层次、不同性别、不同年龄人群的共同需求，贯穿于人类的大多数活动中。结合目标群体的情感特征来设计包装，是体现人本主义的最好方式。因此，在药品包装设计中，需要挖掘病患的情感表现和心理需求，剔除不恰当的情感表达方式，借助适合的形象、色彩来营造温馨与关怀备至的气氛，使患者在情感上产生共鸣与联想。
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user: 6. 结语 药品包装中，为了使药物品质得到最大的保护，我们对药品包装材料和工艺都给予了足够的重视和投入，对包装的保护功能精益求精，其重点是以包装物为本进行的探索和实践，侧重体现包装的物质功能。而包装是物质功能和精神功能的统一，我们在追求包装物质功能完善的同时，不能忽略精神功能对包装和消费者的影响。药品包装设计面向的是大量患者，病患遭受病痛折磨的同时在心理上也经历着压抑与痛苦，患者作为特殊的消费人群，需要在心理上得到慰藉，但市场药物包装多以理性冰冷的形象占主导，在药品包装中同时兼顾物质和精神两方面的需求、满足患者心理的多样性和多变性的消费需求，是包装设计师要关注的新焦点。在生物医药科技高度发展的今天，许多疑难病症都可以得到缓解和治愈，在治疗过程中，不能一味地将注意力放在患者的病症上，对于患者的心理也要给予充分的关注。让患者在治疗过程中保持有一个良好的信心和心态，不仅影响治疗效果和病情转化，而且也是对人性关怀最好的体现。
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user: 摘 要 采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得一条虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus intermedius) SiTNFAIP3基因cDNA全长序列。实时定量PCR检测了SiTNFAIP3基因在组织中的分布及在经脂多糖(LPS)、肽聚糖(PGN)、聚肌胞苷酸(poly I: C)、强壮弧菌(Vibrio fortis)和葡聚糖(WGP)刺激后的表达情况。结果表明：SiTNFAIP3的cDNA全长为3990 bp，5’-UTR为209 bp，开放阅读框为3567 bp，3’-UTR为214 bp，编码1188个氨基酸，具有1个OTU结构域和8个ZnF-A20结构域；qRT-PCR结果显示SiTNFAIP3在检测的各组织中均有表达，卵巢中的表达量显著高于其它组织(p < 0.05)；经PGN、V. fortis刺激后，体腔细胞中SiTNFAIP3表达量显著上升，在刺激后12 h达到最高值(p < 0.05)；经LPS、poly I: C刺激后，体腔细胞中SiTNFAIP3表达变化较小；而经WGP刺激后，体腔细胞中SiTNFAIP3表达出现下调。研究表明，SiTNFAIP3基因参与了虾夷马粪海胆的NLR、TLR和RLR信号通路，但主要参与了NLR信号通路。SiTNFAIP3基因在海胆的先天免疫中发挥重要作用。 关键词 :虾夷马粪海胆，SiTNFAIP3，先天免疫，负调控 Copyright © 2018 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 虾夷马粪海胆原产于日本，1989年被引入中国，我国现已掌握室内人工育苗和海上养殖成商品胆技术，但海胆养殖中存在的病害问题尚较难解决。海胆隶属棘皮动物门，棘皮动物的免疫系统主要包括吞噬细胞、补体系统和转录因子等 [ 1 ]，海胆在受到外源物刺激后机体发生的反应不存在特异性，其免疫应答的机制主要依靠体腔细胞和体腔液中的各种免疫因子 [ 2 ]，因此对虾夷马粪海胆先天免疫分子水平的研究显得极其重要。先天免疫应答是通过病原性内源基序激活模式识别受体(pattern recognition receptors， PRR)而启动的。这些PRRs包括Toll样受体(Toll-Like receptors， TLRs)、NOD样受体(NOD-like receptors， NLRs)和RIG-I样受体(RIG-I-like receptors， RLRs) [ 3 ]。NLRs和TLRs可激活细胞内信号传导途径，引起机体先天免疫和炎症等效应机制 [ 4 ]。目前，虾夷马粪海胆NLR家族基因 [ 5 ] 和TLR家族基因 [ 6 ] 均有与先天免疫分子水平相关的研究，这些研究在一定程度上揭示了虾夷马粪海胆先天免疫机制，但并不十分完善。 TNFAIP3 (Tumor necrosis factor alpha-induced protein 3)基因又称A20基因，是一种具有泛素化和去泛素化双重功能的泛素编辑酶 [ 7 ]。TNFAIP3基因的特殊功能与其结构域密切相关，TNFAIP3基因编码的蛋白属于锌指蛋白家族，该家族蛋白具有1个OTU结构域和几个重复的ZnF-A20结构域 [ 8 ]，N末端OTU结构域是去泛素酶 [ 9 ]，它与其它去泛素酶家族一样有一个半胱氨酸蛋白酶催化三联体 [ 10 ]，ZnF-A20结构域赋予TNFAIP3蛋白E3泛素连接酶活性 [ 11 ]。TNFAIP3的去泛素酶活性，可以从TRAF2/6和RIP1中拆卸Lys63连接的多泛素链；随后，Lys48连接的多泛素链取代被拆卸掉的泛素链，重新泛素化TRAF2/6和RIP1 [ 7 ] [ 12 ]。TNFAIP3通过干扰TRAF和RIP1的泛素化水平，继而干扰NF-κB信号通路，并对NF-κB信号通路起负调控作用 [ 13 ] [ 14 ]，在机体的天然免疫过程具有非常重要的调控作用。我们在虾夷马粪海胆转录组测序数据 [ 15 ] 的基础上，发现了一个与免疫相关的基因SiTNFAIP3，采用RACE技术将筛选出的部分SiTNFAIP3基因片段进行克隆，扩增后获得一条SiTNFAIP3基因cDNA全长，通过qRT-PCR检测了该基因在虾夷马粪海胆各组织中的表达情况，利用5种不同病原物刺激海胆体腔细胞，分析了体腔细胞中SiTNFAIP3基因在刺激后的不同时间点的相对表达情况。分析讨论后推测该基因可能主要参与了虾夷马粪海胆的NLR信号通路，在先天免疫中发挥重要作用。
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user: 2. 材料与方法 2.1. 实验材料 虾夷马粪海胆购自大连市旅顺口区碧龙海珍品加工实业有限公司(平均质量40 g~80 g)，实验处理前于大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室水族箱中适应一个月，海水温度16℃~23℃，全天持续供氧，根据水温及水质情况及时更换过滤海水，以新鲜海带为饲料，取样前一天停止投喂。 2.2. 实验方法 2.2.1. RNA提取及第一链cDNA合成 参照动物RNA提取试剂盒(天根)说明，提取虾夷马粪海胆组织总RNA，用核酸蛋白检测仪检测RNA浓度，用1%的琼脂糖凝胶检测RNA的完整性。参照第一链cDNA合成试剂盒(全式金)说明反转录合成第一链cDNA。 2.2.2. 基因克隆 根据虾夷马粪海胆转录组数据 [ 15 ] 中筛选到的SiTNFAIP3基因部分片断设计3’和5’的RACE引物(表1)，以合成的第一链cDNA为模板，扩增TNFAIP3基因序列。反应体系为25 µL，其中2.5 µL LA PCR buffer (10×)，2 µL dNTPs，2.5 µL UPM，0.5 µL特异引物，2 µL RACE模板，0.25 µL LA Taq酶，加ddH2O补至25 µL。使用降落PCR进行扩增：94℃预变性5 min；94℃ 30 sec，72℃ 3 min共5个循环；94℃ 30 sec，70℃ 30 sec，72℃ 3 min共5个循环；94℃ 30 sec，65℃ 30 sec，72℃ 3 min共25个循环；72℃ 10 min；4℃保存。1%的琼脂糖凝胶电泳检测并回收与目的基因大小一致的条带，将目的基因与pEASY-T1载体(全式金)相连，并转化到DH5α大肠杆菌感受态细胞(全式金)，使用通用引物M13进行菌液PCR扩增，验证后挑选阳性克隆送至上海英骏生物技术有限公司进行测序。 Table 1 Primers and their sequence 引物名称 引物序列(5’-3’) Tm值 用途 TNFAIP3-3 GGCTTCACGCCCACCGAACTACC 71.7 3’ RACE引物 TNFAIP3-5 CCTTCCGCAGCCAGAGGTCAGTGT 71.8 5’ RACE引物 rTNFAIP3-s TGCGAGACTGTCGGGTTTAGA 63.2 实时定量引物 rTNFAIP3-a TCAACTGCTGCGTGCTCGT 64.4 实时定量引物 r18S_S GCGTTTAGCCAGGCGAGAT 62.7 内参 r18S_A GGAGGAGGTTCAGCGGATTA 61.2 内参 表1. 引物名称及序列 2.2.3. SiTNFAIP3基因的生物信息学分析 将测序结果进行序列拼接得到SiTNFAIP3基因cDNA全长，利用NCBI的blastx (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)在线工具进行序列比对，确认为目标序列后，将得到的目标序列提交到NCBI的ORF Finder (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/)查找开放阅读框，在线工具ExPASy (https://www.expasy.org/resources)预测SiTNFAIP3蛋白分子量和等电点，通过NCBI的Protein BLAST (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)对所得氨基酸序列进行同源检索，使用MEGA7.0与其它物种进行序列相似性比对并构建系统进化树，用SMART (http://smart.embl-heidelberg.de/)在线工具对SiTNFAIP3蛋白的保守结构域进行预测分析，用Clustal X2对锌指结构域的序列进行比对，做聚类分析。 2.2.4. 组织差异表达分析 选取10只健康的海胆(雌、雄各5只)，放入灭菌海水中快速剪下管足(GZ)，用无菌注射器抽取虾夷马粪海胆体腔液(CL)，4℃冷冻离心后弃上清，留体腔细胞沉淀，对海胆进行活体解剖，获取围口膜(WK)、肠道(GT)、精巢(TE)和卵巢(OV)，将组织浸没于RNAlater (Thermofisher)中，于4℃冰箱中浸泡过夜，第二天转移至−80℃超低温冰箱中保存。总RNA提取与cDNA第一链合成参见2.2.1。 采用qRT-PCR检测SiTNFAIP3基因在各组织中的相对表达量，以虾夷马粪海胆18S rRNA为内参基因，每个样品重复3次。qRT-PCR采用20 µL体系：2 × SYBR Realting PCR Master Mix 10 µL，正反向引物rTNFAIP3-s、rTNFAIP3-a (表1)均为0.8 µL，cDNA模板2 µL，RNase free H 2 O 6 µL。扩增程序采用二步法：95℃ 30 sec预变性；95℃ 5 sec，60℃ 34 sec，40个循环。 2.2.5. 免疫刺激 采用直接注射的方式对150只健康虾夷马粪海胆进行免疫刺激，选取强壮弧菌Vibrio fortis (革兰氏阴性菌)，脂多糖LPS、肽聚糖PGN、葡聚糖WGP、聚肌胞苷酸poly I: C为病原刺激物，磷酸缓冲液(PBS)作为对照组。强壮弧菌使用半致死量 [ 16 ] 进行注射，为防止虾夷马粪海胆死亡致实验数量不足，注射50只海胆。各免疫刺激物每组注射20只，免疫刺激物注射量依次为LPS：2 mg/只、PGN: 200 µg/mL、poly I: C：2 µg/mL、WGP: 600 µg/mL，PBS注射20只。在注射后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h五个时间点进行取样，分别取体腔细胞、肠道、围口膜、精巢、卵巢浸没于RNAlater (Thermofisher)中，于4℃冰箱中浸泡过夜，第二天转移至−80℃超低温冰箱中保存。总RNA提取与cDNA第一链合成参见2.2.1。 免疫刺激后，使用qRT-PCR检测SiTNFAIP3基因在体腔细胞中的表达情况，方法同2.2.4。 采用2 −ΔΔCt 法计算SiTNFAIP3基因在虾夷马粪海胆各组织和在免疫刺激后体腔细胞中的相对表达量，用SPSS19.0 (P < 0.05)检验显著性。
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user: 3. 结果 3.1. SiTNFAIP3基因cDNA全长克隆及生物信息学分析 RACE扩增后获得的序列经BLAST比对分析发现，其氨基酸序列与紫海胆、棘冠海星、囊舌虫的相似度最高，分别为89%、89%、88%，确认该基因为虾夷马粪海胆的肿瘤坏死因子α诱导蛋白3 (Tumor necrosis factor alpha-induced protein 3， TNFAIP3)基因，因此命名为SiTNFAIP3。 SiTNFAIP3基因cDNA全长为3990 bp，5’-UTR为209 bp，开放阅读框为3567 bp，3’-UTR为214 bp，共编码1188个氨基酸。ExPASy预测分子量为131.969 KDa，等电点为8.30，为碱性蛋白。SMART结构域预测结果表明，SiTNFAIP3具有1个OTU结构域，8个ZnF-A20结构域(图1)。利用进化树分析物种间(表2)亲缘关系(图2)，14个物种中所有脊椎动物聚为一支，所有无脊椎动物聚为一支，其中虾夷马粪海胆与紫海胆单独聚为一支，表明它们亲缘关系最近。Clustal X2对不同物种(表2) ZnF-A20结构域的比对和聚类(图3，图4)显示，所有物种TNFAIP3的蛋白结构域均具有1个OTU结构域和若干ZnF-A20结构域，各物种的OTU结构域高度保守，而不同物种的ZnF-A20结构域的数量和种类存在差异。 图1. 虾夷马粪海胆TNFAIP3基因cDNA序列和氨基酸序列。注：OTU结构域用阴影方框标识，ZnF-A20结构域用方框标识 图2. 基于TNFAIP3蛋白氨基酸序列构建的系统发育进化树(vertebrate为脊椎动物，invertebrate为无脊椎动物) 图3. 基于TNFAIP3蛋白ZnF-A20结构域的进化树分析(标尺表示遗传距离，A~F代表6种不同的ZnF-A20结构域) Table 2 NCBI receiver number of species TNFAIP3 protein used in evolutionary analysi 物种 物种拉丁文名 NCBI接收号 人 Homo sapiens NP_001257437.1 小鼠 Mus musculus CAJ18603.1 牛 Bos taurus NP_001179099.1 鸡 Gallus gallus XP_015139673.1 非洲爪蟾 Xenopus laevis NP_001087109.1 斑马鱼 Danio rerio XP_692922.3 紫海胆 Strongylocentrotus purpuratus XP_795196.1 棘冠海星 Acanthaster planci XP_022081813.1 刺参 Apostichopus japonicas PIK44277.1 囊舌虫 Saccoglossus kowalevskii XP_006816095.1 青岛文昌鱼 Branchiostoma belcheri tsingtauense AGQ17407.1 虾夷扇贝 Mizuhopecten yessoensis OWF55126.1 太平洋牡蛎 Crassostrea gigas EKC18030.1 表2. 进化分析使用的物种TNFAIP3蛋白的NCBI接收号 图4. 基于TNFAIP3氨基酸序列预测的蛋白结构域结果比较(A~F根据图3中ZnF-A20比对聚类结果标注，标尺为100个氨基酸长度) 3.2. 组织差异表达分析 采用qRT-PCR检测SiTNFAIP3基因在健康虾夷马粪海胆各组织中的表达情况(图5)。实验结果表明，SiTNFAIP3基因在检测的各组织中均有表达，卵巢中的表达量显著高于其它组织(P < 0.05)，相对表达量为36.779，其次是体腔细胞和管足，表达量最低的组织为精巢，仅为0.778。 图5. SiTNFAIP3基因在健康虾夷马粪海胆不同组织中的表达情况。注：GT， CL， WK， GZ， TE和OV分别代表肠，体腔细胞，围口膜，管足，精巢和卵巢；使用Duncan法进行多重比较，字母a、b、c...不同表示差异显著(p < 0.05) 3.3. 免疫刺激后SiTNFAIP3基因的相对表达量分析 qRT-PCR结果表明，经LPS刺激后(如图6(a))，SiTNFAIP3基因的表达量在12 h~24 h出现上调，12 h的表达量最高，24 h开始下降。PGN刺激后(如图6(b))，SiTNFAIP3基因在12 h表达量最高，表达量较 图6. 体腔细胞中SiTNFAIP3基因在不同免疫刺激物刺激后的表达：(a)~(e)分别表示在LPS、PGN、poly I: C、WGP、强壮弧菌刺激后SiTNFAIP3的表达情况，使用Duncan法进行多重比较，字母a、b、c...不同表示差异显著(p < 0.05) 0 h增加了6倍，12 h后开始下降，免疫刺激后5个时间点的表达量全部高于0 h。poly I: C刺激后(如图6(c))，SiTNFAIP3基因表达量在6 h~24 h呈上升趋势，12 h出现表达量最高峰，48 h下降到正常水平。WGP刺激后(如图6(d))，SiTNFAIP3基因出现表达下调的情况，48 h表达量最低。强壮弧菌刺激后(如图6(e))，6 h时出现表达上调，但是较0 h变化量很小，12 h出现表达量最高的峰值，表达量较0 h增加了6.5倍。体腔细胞中SiTNFAIP3在除WGP外的4种病原物处理后均出现表达上调，且经PGN、强壮弧菌处理后12 h显著高于其它时间点，PGN刺激后12 h的表达量为6.996，高于强壮弧菌刺激后12 h的表达量；而LPS、poly I: C刺激后，体腔液中SiTNFAIP3表达变化较小，仅在12 h略有升高。
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user: 4. 讨论 本实验克隆了虾夷马粪海胆TNFAIP3基因cDNA全长，发现该基因编码的蛋白质含有1个OTU结构域和8个重复的ZnF-A20结构域，这与其它物种TNFAIP3蛋白结构域非常相似。经比对分析可以看到TNFAIP3具有非常高的保守性(图2~4)。所有物种的TNFAIP3都具有1个OTU结构域和5~8个ZnF-A20结构域，这些ZnF-A20结构域在物种内和物种间都非常相似，尤其是都具有四个半胱氨酸。脊椎动物和无脊椎动物ZnF-A20结构域的数量和种类均存在差异，脊椎动物的ZnF-A20结构域相对无脊椎动物排布更加紧密，种类更加多样化，此外，在高等的脊椎动物中ZnF-A20结构域在TNFAIP3蛋白中的排列模式更趋向于保守，而在无脊椎动物中则表现出了多样化的特点。这可能与先天性免疫在高等的脊椎动物和低等的无脊椎动物中的不同进化地位有关。 SiTNFAIP3基因在健康虾夷马粪海胆6种组织中均有表达，精巢的表达量最低，卵巢中的表达量最高。卵巢是海胆繁殖的重要器官，取样时海胆正处于性腺发育成熟时期，TNFAIP3作为重要的免疫基因，在B细胞、T细胞等免疫细胞中表达 [ 17 ]，推测卵巢中SiTNFAIP3的高表达量可能和保护卵细胞有较大关系。 LPS是细菌内毒素的主要成分，当细菌入侵时作为抗原分子参与TLR信号通路，LPS可以诱导TNF-α参与的免疫过程，通过激活IL-8、趋化因子、抗菌肽等免疫作用，直接清除入侵的病原体，引起机体的免疫反应 [ 17 ] [ 18 ] [ 19 ]。经LPS刺激后体腔细胞中SiTNFAIP3表达呈轻微上调，推测SiTNFAIP3抑制了TLR信号通路，在TLR信号通路中起负调控的作用。最近的研究也证明了这一推测，LPS刺激虹鳟鱼的巨噬细胞后，TNFAIP3基因在6 h~24 h出现表达上调 [ 20 ]，说明LPS刺激可以提高机体免疫力。LPS刺激河豚鱼后，TNFAIP3基因的表达量在12 h后增加 [ 21 ]。PGN是NLR信号通路中NOD2的反应底物，可作为NOD1和NOD2的主要模式识别受体，当NOD1和NOD2配体识别PGN后通过细胞凋亡抑制剂激活RIP2，随后激活促炎症NF-κB信号通路 [ 22 ]。经PGN刺激后，虾夷马粪海胆体腔细胞中SiTNFAIP3表达量显著升高，推测SiTNFAIP3基因的高表达量可能是在NOD蛋白识别PGN后，作为细胞凋亡抑制剂抑制NF-κB信号通路，使机体产生免疫反应，清除易对自身造成伤害的物质，达到保护自身健康的目的。poly I:C作为一种模拟RNA病毒的免疫抑制剂刺激体腔细胞，经poly I:C刺激后，体腔细胞中SiTNFAIP3基因在12 h~24 h呈轻微表达上调，表明poly I:C可以诱导SiTNFAIP3基因的表达，我们推测这是SiTNFAIP3对由poly I: C引起的RLR信号通路中炎症反应的负调节作用。Li等证明TNFAIP3 在poly I: C触发的肝脏炎症中发挥保护作用 [ 23 ]，在人角质细胞中，TNFAIP3 显著抑制了poly I: C诱导的细胞因子的产生，这种作用与NF-κB信号传导的抑制有关，表明TNFAIP3的下调增加了角质形成细胞对外部刺激的易感性 [ 24 ]。WGP存在于真菌中，目前WGP作为一种免疫活性增强剂已被广泛应用于水产动物中 [ 25 ]。图6中WGP刺激后诱导SiTNFAIP3表达下调，说明SiTNFAIP3基因对WGP无免疫应答，SiTNFAIP3基因不参与由真菌引起的免疫应答的CLR信号通路的调控。强壮弧菌是虾夷马粪海胆的条件致病菌，强壮弧菌刺激海胆体腔细胞后，在12 h SiTNFAIP3基因表达量最高，证明SiTNFAIP3基因对强壮弧菌有免疫应答，由此推测SiTNFAIP3基因参与了由强壮弧菌引起的免疫信号通路的调控，说明SiTNFAIP3基因在先天免疫信号通路中具有调控作用。 本实验克隆获得了SiTNFAIP3基因cDNA全长，生物信息学分析表明该基因编码的蛋白属于锌指蛋白家族，是一个具有泛素化和去泛素化双重编辑作用的酶。实时定量结果表明，SiTNFAIP3在健康海胆的卵巢中表达量最高，免疫刺激后体腔细胞中SiTNFAIP3的不同相对表达量表明，SiTNFAIP3基因参与了虾夷马粪海胆的TLR、NLR、RLR信号通路的负调控，经PGN刺激后，SiTNFAIP3的表达量最高，推测该基因在NLR信号通路的负调控作用强于其它信号通路，即SiTNFAIP3主要参与了NLR信号通路的负调控，在虾夷马粪海胆先天免疫中发挥了重要作用。
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user: 摘 要 为了实现全民健身计划，引导广大人民群众积极向上的生活方式；为了更好地开展广场舞运动，有利于中老年的身心健康，让更多的人了解群众体育、参与群众体育；也为解决广场舞活动中的不足，为济南市广场舞的开展活动提供理论意义和实践意义，本人通过文献资料法、访谈法、观察法、问卷调查法等研究方法，发现济南市的广场舞活动内容将越来越丰富，参与人数也将愈来愈多。当然也存在着一些缺陷，比如：参与者性别比例不均、开展广场舞的场地设施不足等。针对开展广场舞活动引发的社会问题应该得到政府相关部门的重视，通过社会管理方面的知识得以解决。 关键词 :广场舞，群众体育，社会管理，济南市 Copyright © 2018 by author and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 前言 随着生活水平的提高，人们越来越关注自己的身心健康，特别是退休的中老年人闲暇时间很多，注重自己身体的保养。所以广场舞应运而生，参与的人数也越来越多。开展广场舞的人通过跳广场舞可以起到健体、健心、健脑、健美的效果 [ 1 ] ，不仅可以建立人与人之间的友好关系桥梁，引导人们追求其健康的生活方式，摒弃生活中的恶习，而且还具有促进社会的和谐、经济的发展等重要意义。现在济南市的广场舞开展比较分散，是自愿组织的一种群众体育项目，参与人员大都以中老年为主。在开展广场舞的过程中因为需要放音乐，尤其是早上和晚上常常造成扰民的现象，经常出现跳广场舞的大妈与附近居民发生冲突的新闻。本研究通过走访调查济南市几个小区的广场舞开展活动，找出了现在济南市广场舞开展活动存在的问题，从而使广场舞的形式和内容更丰富多元化，更适合各个年龄段的开展。也发现了存在的社会问题，通过调查研究找出这些社会问题的根源，从而解决这些社会问题，可以令更多的人参与广场舞，激发人们对于广场舞的兴趣。
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user: 2. 研究对象与研究方法 2.1. 研究对象 以山东省济南市6个区(市中区、历城区、历下区、槐荫区、天桥区、长清区)中的小区、公园、街道街边宽敞地等20个地方的广场舞参与者为研究对象，了解济南市广场舞发展现状和现存问题。 2.2. 研究方法 2.2.1. 文献资料法 通过中国知网、万方数据库、维普数据库下载近年来有一定研究价值的学术期刊论文和收集相关的杂志、报刊文章进行整理和分析获取文献资料为本论文的撰写提供理论依据。 2.2.2. 访谈法 根据研究的需要，定向对济南市参与广场舞群众和附近居民进行访谈，了解他们的需求与问题，广泛听取他们的意见，以便提出切实可行的解决办法。 2.2.3. 观察法 随机抽取济南市几个社区进行走访调查，针对济南市的几个不同社区参与广场舞人员，对他们进行观察，以实践来发现具体问题、结合理论知识，制定解决方案，巩固理论。 2.2.4. 问卷调查法 根据课题的需要设计调查问卷，在济南市随机抽取几个社区，并采取适当的方法对进行广场舞活动的人员发放调查问卷，并通过回收有效问卷，获得有效的调查结果。本人在2018年7月份对济南市几个小区开展广场舞活动的人群随机发放问卷，发放问卷200份，实际回收190份。经过对问卷的仔细筛查，有效率为93%。并对调查问卷效度和信度及时检验，以此来正确反映本次调查问卷的真实情况。
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user: 4. 结论和建议 4.1. 结论 综上所述，结合济南市六个区的调查情况，可以看出广场舞活动对于中老年人的身体起到健身、健体、健脑、健美的益处，是贯彻全民健身运动的号召，提升生活品位的运动之一。随着广场舞在全国的开展和普及，济南市也在积极开展和普及，参与广场舞的人数正逐步上升，人们也愿意追求形式更丰富和新颖的广场舞活动。但是济南市广场舞活动也存在着不足，参与者女性明显多于男性，且以中老年为主；济南市广场舞参与者以自学、自发为主，运动适中，规模大小不一，没有专业人士进行指导，开展广场舞活动的场地设施不足；济南市开展广场舞时常常会引起参与者与附近居民发生冲突与矛盾等社会问题。 4.2. 建议 4.2.1. 研究广场舞等群众体育项目的开展现状要做好调研工作 没有调查就没有发言权，根据对济南市广场舞的发展现状和问题研究，如果在研究广场舞的发展现状中没有进行走访调查及问卷调查，就会很难了解到开展广场舞活动中参与者的特征，影响广场舞开展的因素，开展广场舞面临的问题以及广场舞所引发的社会问题等一系列的情况。那么就会盲目猜测广场舞的开展现状，不能真切地反映广场舞的开展现状，更不能针对现有现状制定适宜的对策。 4.2.2. 针对广场舞面临的问题制定的对策要全面、因地适宜 通过对广场舞的开展现状进行调查，肯定会发现广场舞等群众体育活动中存在的缺陷和问题，针对不同的问题要制定不同的对策，制定的对策要适宜、全面，以保证解决出现的问题。此外，不同的地区存在的问题会有所差异，那么解决的方案就会有所不同。因此，针对广场舞活动面临的问题制定对策要因地适宜。 4.2.3. 群众体育的开展要与政府联合，共同实现全民健身计划 最近针对广场舞活动，国家体育总局推出12套广场舞健身操舞优秀作品，这是国家体育总局第一次制定出广场舞的规范动作。国家体育总局、文化部组织专家创编的12套广场健身操舞优秀作品，是为了给广大广场舞爱好者提供更多“跳舞、跳操”的选择，是本着引导、扶持、规范的方针，推动广场健身操舞健康有序发展。因此，群众体育要与政府联合，推动我国全民健身的进行。
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user: 摘 要 受气候变化和人类活动影响，鄱阳湖水文情势大幅波动、水生态环境有退化趋势。本文基于鄱阳湖水资源、水环境、水生态等相关实测资料分析，系统梳理鄱阳湖水生态现状，目前江西省对河湖生态环境保护持续推进，保护力度逐渐增强，鄱阳湖整体生态环境趋于稳定；凝练鄱阳湖水生态面临的主要问题，主要是湖泊生态调节能力不足，河湖连通性受阻，河湖水生生物多样性下降；结合社会经济发展趋势，提出水生态保护对策，包括提升河湖生态调节能力，实施重点区域生态保护和修复，增强水生生物多样性保护以及加强水土保持生态建设，为鄱阳湖生态环境可持续发展提供了决策参考依据。 关键词 :鄱阳湖，生态修复，保护对策，生物多样性 Copyright © 2018 by authors and Wuhan University. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 鄱阳湖位于长江中下游南岸、江西北部，是我国最大淡水湖、世界著名湿地，被誉为“长江之肾”、“鸟类天堂”，是长江重要的生态屏障。鄱阳湖纳“五河”来水，由湖口入长江，具有重要的调蓄功能，湖泊水域面积3706 km 2 (相应湖口站防洪控制水位22.50 m)，湖岸线总长1200 km 2 。湖泊形似葫芦，南部宽广，北部狭长，是一个过水型、吞吐型、季节性的湖泊，具有“洪水一片，枯水一线”的独特形态，由于其独特的地理环境和区域相对滞后的社会经济发展，鄱阳湖是目前我国为数不多的未受严重污染的重要湖泊 [ 1 ] 。 受气候变化和人类活动的双重影响，鄱阳湖出现水文情势大幅波动、水环境恶化和水生态功能退化等问题，引起人们对鄱阳湖生态系统健康走势的担忧 [ 2 ] 。随着湖区周边经济社会的发展，环境压力的不断加大，若维持现有的保护力度，则鄱阳湖水生态安全的变化趋势不容乐观 [ 3 ] [ 4 ] [ 5 ] [ 6 ] [ 7 ] 。应对环境压力的响应措施不足，主动保护水生态系统的行为或意识较为欠缺，导致鄱阳湖水生态安全有恶化风险。目前江西省政府针对鄱阳湖生态环境保护正在开展大量工作，保护效果、存在问题及其对策尚未总结凝练，因此，本文基于鄱阳湖水资源、水环境、水生态等相关实测资料分析，系统梳理鄱阳湖水生态保护现状，凝练鄱阳湖水生态面临的主要问题，并结合社会经济发展趋势，提出水生态保护对策，为鄱阳湖生态环境保护提供技术与对策支撑。
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user: 2. 鄱阳湖水生态现状 河湖生态环境保护持续推进，保护力度逐渐增强，生态环境趋于稳定。开展消灭劣V类水专项治理行动，对鄱阳湖2016年以来出现过劣V类水质的6个断面和2017年新出现劣V类水质的3个断面地区进行综合整治。着力打造河长制升级版，推动流域保护治理与农村绿色经济发展相结合，服务美丽宜居乡村建设，全面推进农村环境综合整治，启动流域生态综合治理，选择进贤县军山湖、德安县博阳河等9处试点。开展水库水环境专项整治，区内中、小型水库已全部退出承包养殖，实行人放天养，水库水质明显好转。划定生态保护红线，生态保护红线面积3926 km 2 ，占全省生态保护红线面积比例为8.4%。以水土流失综合治理、水源涵养区和33处生态敏感区的保护与修复为重点，加强水生态保护与修复。区域水环境质量总体良好，2016年鄱阳湖I~III类水质断面比例87.5%，国家级水功能区达标率100%，县级以上水源地水质全部优于或符合III类水标准。
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user: 3. 鄱阳湖水生态保护主要问题 河湖水生态保护存在瓶颈，生态调节能力亟待提高。湖泊生态调节能力不足，受长江影响，湖区退水加快，生态敏感区枯期低水位持续时间延长 [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ] ，湖区水环境容量、湿地植被与分布格局被动变化，生态系统稳定性下降 [ 11 ] [ 12 ] 。河湖连通性受阻 [ 13 ] [ 14 ] ，影响湖泊生态系统整体性，一是“五河”已开发梯级生态连通性欠佳，二是独立支流上中小水库较多，缺乏生态流量保障措施，三是军山湖、大明湖等内湖与鄱阳湖连通性减弱，内、外湖生境阻隔。河湖水生生物多样性下降，水生、湿生和沼生植物正在消失或严重退化；底栖动物数量、种类减少；虾、蟹类产量下降；草地动物河麂濒临灭绝；珍稀水生动物种类和数量显著减少；渔业资源衰退严重。 1) 河湖连通性不佳 鄱阳湖调蓄五河等支流来水后汇入长江，河、湖连通性是一个整体，支流的河流连通不畅，影响湖泊生态完整性。目前，鄱阳湖各支流已建水电站众多，部分已建大坝无过鱼设施，闸坝阻隔比较严重，水生态环境受到一定影响。水利工程建设对洄游鱼类通道有阻隔作用，工程调度对坝上、坝下河段水文情势的影响改变了鱼类的流水栖息、产卵、孵化生境条件，部分适应“四大家鱼”产卵场水文条件的水域已消失，产卵场位置发生变化，且其产卵所需要的流水条件受水库调度影响较大。 2) 河湖生态水量保障不到位 鄱阳湖五河等支流已建水电站众多，生态水量保障大多执行不到位，最小下泄流量要求未制定，监测措施缺乏。部分水电站规模较小，蓄水能力有限，且承担供水发电任务，未严格按照下游生态需求下放生态流量，坝下河段出现脱水、减水河段；已建引流式电站多未考虑下游生态环境用水需求，坝下常年形成严重减水及脱水河段。 3) 河流水生生物多样性下降 目前鄱阳湖生物多样性破坏十分显著，过去较常见的水生、湿生和沼生植物正在消失或严重退化；底栖动物数量、种类减少；虾、蟹类产量下降；草地动物河麂濒临灭绝；珍稀水生动物种类和数量显著减少；渔业资源衰退严重。由于生态环境变化等原因，特别是酷渔滥捕的人为因素，导致湖区鱼汛的种类和规模显著减小，洄游性鱼类在衰退，长江鲟鱼、鲥鱼、银鱼等珍贵鱼类濒临灭绝。 4) 湿地生态系统保护与修复需要加强 鄱阳湖湿地植被及分布格局发生变化。长期鄱阳湖湿地植被面积呈下降趋势，湿地植被带普遍下移，湿地植被物种组成和优势种发生变化，人类活动直接影响是主要原因；近期鄱阳湖湿地变化主要体现在洲滩湿地提前露出导致的湿地植被退化，水利工程引发江湖关系变化是主要原因。湿地植被带下移、湖区退水提前等湿地退化现象，导致湖区越冬水鸟栖息地面积萎缩，不利于湿地生态系统的稳定性。 5) 水土流失问题依然比较严重 鄱阳湖规划区水土保持工作已取得明显成效，但仍然存在问题，并出现了一些新情况：1) 水土流失面积大，范围广，治理难度大、见效慢；2) 人为水土流失现象仍然严重。建设项目生产建设过程中急功近利、破坏生态的情况仍有发生，水土保持监督监测管理中存在对象不全面、措施不到位等问题；3) 水土保持经费投入不足。财政资金投入与治理需求存在很大差距，财政补助型投资体制很难满足水土保持工作的需求；4) 部分已治理地区存在林相单一、林分结构简单，蓄水保土、抵御自然灾害的能力较差；5) 水土保持宣教和科研工作仍待加强。