DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
system: [SYSTEM]

user: 3. 关键技术与系统设计 3.1. 关键技术 为了开展医疗废弃物闭环管理模型研究，确定在物联网环境下的医疗废弃物标准化模型；开展医疗物联网实时定位技术(RTLS)的设计，形成高效安全的医疗废弃物追随管理解决方案；开展基于物联网技术的医疗废弃物云信息平台构建，结合大数据分析平台实现医疗废弃物的追溯、监控、查询、分析等全程管理。 1) 医疗废弃物闭环管理模型 传统医疗废物管理流程是指工人每天从医院各科室把医疗废物回收至暂存处，并定期转运给专业废物处理公司的过程。传统流程中所有交接记录由人工登记，以纸质登记本的方式进行处理，管理部门无法控制，存在着工人是否在规定时间去收集、交接废物情况、是否走污染专运路线、回收废物的数量是否正确等诸多弊端。医疗废物闭环管理模式可实现对工人收集时间、科室交接情况、废物分类收集、废物收集数量、废物运送路线、暂存处汇总、暂存处交接等所有过程都有计算机系统进行采集和记录，实现可追溯的闭环管理。 依据国务院2003年颁布的《医疗废物管理条例》、浙江省卫生厅2013年颁布的《关于切实加强和规范医疗废物管理的通知》等管理条例，需要开展在物联网环境下的医疗废弃物闭环管理模型研究，设计以感知技术为特点的管理流程，重点针对闭环管理模式中的5个活动关键点(收集时间点、科室交接人员、交接废物及种类、运送路径、转交暂存点时间及数量)开展研究，实现物联网与医疗废弃物闭环管理的紧密结合。 2) 实时定位技术(RTLS) 首先，利用3G/4G无线网络架构，将平面空间画分成许多子空间。然后，在系统架设阶段，量测在不同位置、不同方向所接收到不同RFID读取器的讯号，并根据各个讯号的强度建立无线电索引地图(RadioIndexMap)。之后，系统定位使用者便可从RFID读取器所接收到的使用者信号强度与无线电索引地图比对运算。最后，融合距离无关定位算法LANDMARC，通过比较参考点的信号强度值与待定位标签的信号强度值，求出离待定位标签距离最近的几个参考标签，并根据这几个最邻近参考标签的坐标加权求出待定位标签的坐标。 3) 医疗废弃物云信息平台及应用系统 首先搭建基于Hadoop集群的分布式存储平台，通过Apriori并行算法对信息检索的用户查询日志中的医院-点击频度关系、查询词相关性进行统计计算，得到科室、部门甚至医院为分析粒度的废物处理情况。其中，Aprior并行算法需要利用并行框架实现Apriori算法，同时将医疗废物生成图表与医疗物资消耗情况进行对比分析，通过MapReduce框架实现快速高效的分布式计算。 3.2. 系统架构设计 如图1所示，医疗废弃物由医院的工人通过移动终端PDA进行扫描回收，每个废弃物都打印条形码，并和垃圾箱上的RFID标签进行绑定，标签具备唯一的ID号，可重复数据写入，也可以同步获得重量信息。在回收的时候，同样需要收集重量、时间、医院信息等，这些信息也会通过物联网同步发送到医疗废弃物云信息平台。医疗废弃物回收之后，可以通过专用的医疗垃圾收集运送车，送往垃圾处理厂。每辆医疗垃圾车具备RFID标签，系统通过RFID实时定位技术监控垃圾的运行路径和位置。医疗废弃物处置中心可以对接收的废弃物与云信息平台里储存的数据进行对比，如果具体的类型数据、重量数据相同则允许接收，否则作报警处理。 图1. 医疗废物管理系统工作流程图 2) 运行环境设计 PC服务器四台：满足当前主流配置即可； EDA设备：Motorola MC55； 无线网络：建议802.11n规格； 物联网：满足ISO/IES18000； 其他：员工编码条码、回收垃圾车、条码打印设备、条码打印纸。 3) 系统技术框架与详细功能设计 本文设计的医疗废弃物智能管理系统采用分层设计思想(见图2)，包括信息采集层、数据服务层、应用层。其中，信息采集层包括FRID标签设备、视频监控设备、报警设备及移动车载设备，能够对医疗废弃物产生、中传、运输整个过程记录，有效防范管理盲区。数据服务层包括WIFI/3G/4G无线网络架构，分布式Hadoop集群搭建，以及物联网中间件系统和实时定位技术，有效实现信息获取、信息过滤和分布式存储与计算。应用层具体功能模块如表1所示。 图2. 系统技术框架图 Table 1 Function model on application laye 序号 功能模块 功能描述 1 废物管理模块 回收管理 2 暂存站入库管理 3 出库管理 4 运送管理 5 销毁管理 6 废物监管模块 监管处理功能 7 监管整改跟踪功能 8 统计查询模块 类型查询 9 时间查询 10 科室查询 11 废物处理报表 12 实施效果评估 13 系统管理模块 用户管理 14 权限管理 15 日志管理 16 数据接口管理 17 数据备份管理 18 联机手册 19 废物回收车 废物回收车 表1. 应用层功能模块
system: [SYSTEM]

user: 4. 总结 本文针对医疗废弃物的智能管理进行了详细的研究和方案设计，通过RFID标签实现对医疗垃圾箱的实时定位和监控，同时借助信息云平台框架和智能分析技术，实现医疗废弃物的全方位智能化安全管理。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 为保证系统软件的质量，弥补目前测试用例生成方法的不足，提高用例生成的准确性和完整性，本论文以某软件为典型代表和应用对象对国内外测试用例生成技术进行研究，并针对业务控制流、数据流和树形结构图的构造方法进行探索，结合深度优先搜索算法和实际应用要求，对传统的深度优先搜索算法进行优化改进，在每个分支节点增加加权参数，避免节点存在多条路径时丢失其他节点到该节点的路径覆盖数据，以便可以遍历到所有数据分支，使其快速搜索有效测试用例，覆盖测试需求。 关键词 :测试用例生成，业务逻辑，改进深度优先搜索算法，软件测试 Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 目前系统软件高端复杂，据统计设计测试用例的花费占到所有软件测试开销的40%左右，长期以来，大部分测试用例的生成仍通过手工完成，对参与测试的人员经验和专业水平都有着较高的要求，且在实际测试用例生成中也带有很高的盲目性。由于现代装备技术指标要求不断提升，软件的规模和复杂性正在以前所未有的速度增长，对其软件质量的要求也是随之高升，这就需要测试人员掌握一定的测试技术，设计有效的测试用例，尽可能的覆盖到所有项目指标，发现尽可能多的隐含缺陷。目前很多国内外的学者也纷纷踏入该领域，深入研究软件质量问题和测试用例生成方法。为了提高测试用例生成的准确性和完整性，减少测试时间成本和人力成本，论文中以某软件为典型代表和应用对象对国内外测试用例生成技术进行研究，并针对业务控制流、数据流和树形结构图的构造方法进行探索，结合深度优先搜索算法和实际应用要求，对传统的深度优先搜索算法进行优化改进并应用其中，使其快速搜索有效测试用例，覆盖测试需求，进一步保障软件质量。
system: [SYSTEM]

user: 2. 测试用例生成方法研究背景 随着计算机技术的不断发展，计算机软件占据着重要的地位，其保证软件高质量也成为重中之重，软件测试是保证软件质量的唯一有效的方法，而测试用例的生成又是软件测试的关键，测试人员需要设计、执行、分析大量的测试用例，测试用例设计的好坏也将直接影响软件测试的有效性。软件测试主要是查看其是否满足用户的需要，常常使用功能分解测试方法对其进行验证，完全不考虑程序内部结构，被测程序被当作打不开的黑盒，测试者输入数据驱动程序的执行，在只知道程序输入与输出之间关系的情况下，推断测试结果的正确性 [ 1 ]。有相关软件大部分均是基于用户界面操作，也常常只考虑软件的界面信息，而忽略了软件的具体需求和逻辑实现流程，这就导致产生的测试用例随意性较大，使得覆盖率降低。 软件测试就是描述一种用来促进鉴定软件的正确性、完整性、安全性和质量的过程。好的测试方案是极可能发现迄今为止尚未发现的错误的测试方案，测试并不仅仅是为了找出错误，通过分析错误产生的原因和错误的发生趋势，可以帮助项目管理者发现当前软件开发过程中的缺陷，以便及时改进。 软件缺陷是导致软件失效的最主要因素。在各类软件中，一个安全关键软件的缺陷可能会造成数千万的经济损失，甚至可能造成无法挽回的政治和社会后果。因此，提高软件系统的可靠性与安全性，最大程度的降低软件缺陷，一直是软件研制过程中最重要的工作之一。由于各行各业对软件技术指标要求不断提升，软件的规模和复杂性正在以前所未有的速度增长，而软件行业的统计结果表明，软件中的缺陷数量与规模和复杂性呈非线性增长的关系，如果不能有效的控制缺陷，软件质量无疑将成为设备质量的最严重的制约瓶颈，这一形势在当前新设备密集、多型号并举的情况下尤其严峻。这就需要测试人员掌握一定的测试技术设计有效的测试用例，尽可能的覆盖到所有项目需求，发现尽可能多的隐含缺陷，进一步保障软件质量。
system: [SYSTEM]

user: 3. 测试用例生成技术研究 3.1. 测试用例生成技术的缺陷 随着信息技术的高速发展，系统软件高端复杂，使得目前需要站在更高角度上对软件进行安全性和可用性测试，因而测试用例的生成也就成为软件测试的关键任务和难点。据统计设计测试用例的花费占到所有软件测试开销的40%左右，长期以来，大部分测试用例的生成仍通过手工完成 [ 2 ]，对参与测试的人员经验和专业水平都有着较高的要求。因此，实际情况中的测试用例生成带有很高的盲目性，结果测试用例不仅数量多，而且测试效果不佳，使得测试成本偏高 [ 2 ]。设备系统软件大部分功能的实现是通过复杂的人机交互完成的，目前的测试用例生成方法也常常只考虑软件的界面信息，而不考虑软件的具体需求和逻辑实现流程，这就导致产生的测试用例随意性较大从而导致生成的测试用例不能很好地覆盖需求。 3.2. 国内外对测试用例生成技术的研究 在20世纪80年代以来，软件测试用例的智能化生成问题逐渐成为国内外学者的研究热点。Jeff Offutt等人在软件测试领域著有多篇论文，在文献中他们提出一种从UML状态机生成测试用例的技术 [ 2 ] [ 3 ]。Marlong等人描述的基于规格说明的测试最初也以UML状态机图作为基础来自动化地生成测试驱动和测试脚本以及测试组件，并实现了一个原型系统，基于设计和规格说明的面向对象测试(Design And Specification-Based Object-Oriented Testing， DAS-BOOT) [ 2 ]。 数据流测试技术是一种基于代码的白盒测试技术，它能提供充分的代码覆盖，已经被广泛应用到面向对象软件测试中。Yogesh Singh等人提出的通过契约理念加强数据流分析，该技术通过规约得到类流 (Class Flow Graph)，然后应用传统的数据流技术选择测试用例 [ 4 ]。契约理念使我们可以只测试那些可行的方法或者方法序列，即只有当方法的前置条件得到满足后才执行相应的方法序列，由于程序中的许多条件都转换为前置条件的一部分，这样就大大减少被测数据流信息 [ 5 ]。Mary Jean Harrold等人提出的对类进行的数据流测试技术，通过生成控制流图(Control Flow Graph)辅助数据流计算 [ 4 ]，使用计算的数据流关系指导测试用例的选择，该技术的主要优势就是能对整个类进行数据流测试。 国内学者金虎将遗传算法与等价类思想，根据适应度值动态调整测试用例数量，确保了测试的准确性，避免了无效测试用例的生成 [ 4 ]。黄丽芬将传统遗传算法加以改进，提出一种遗传-蚁群算法的软件测试数据生成算法 [ 6 ]，充分发挥了遗传算法的全局搜索和蚁群算法的局部搜索优势，提高了测试数据的生成能力。相关文献提出利用符号执行方法去改善测试用例的路径覆盖率以及挖掘软件漏洞，利用符号执行生成测试用例，在不需要用户隐私信息的情况下，从开发者的角度重现用户在使用时发生的软件错误。还有学者利用软件系统模型来驱动产生测试用例的形式化方法，根据选择模型的不同，具体的实现方法不同，目前典型的软件系统模型有：有限状态机(FSM)、UML和马尔可夫链等模型 [ 7 ]。 论文中提出了一种基于业务逻辑的测试用例生成方法，以某软件为典型代表和应用对象，根据业务逻辑分析业务处理中数据的状态转变，得到业务控制流，在控制流的辅助下根据业务数据的流向和变化得到相应的数据流，再将数据流转换为对应的树形结构图。分析深度优先搜索算法实现的原理并结合实际需求对其进行算法改进，且应用于树形结构图中，生成覆盖所有流向及约束条件的用例集，通过该方法可以找到黑盒测试覆盖不到的错误，使生成的测试用例很好的覆盖测试需求。
system: [SYSTEM]

user: 5. 总结 论文中对生成测试用例的深度优先搜索算法的优化和改进，可为软件测试人员提供可靠指导和有效建议，缩短软件测试周期，可以提高测试人员对系统测试的充分性，降低测试验证周期，节约时间成本和人力成本，同时也可为开发人员提供参考，使其在软件研发过程中减少设计缺陷，确保软件高质量。论文中目前以某软件为例进行了验证，后续还需扩大范围进一步研究，并完善搜索算法。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 本文将“雨课堂”这一新的教学平台与慕课相结合，引入大学英语教学课堂，进行了混合式教学新的尝试，阐述了基于慕课和“雨课堂”的大学英语混合式教学的实施过程和教学策略。实践表明此混合式模式能激发学习者兴趣，同时本文还指出了“雨课堂”应用于课堂教学存在的问题，以期对于“雨课堂”平台的改进和其应用教学实践有一定的意义。 关键词 :雨课堂，慕课，混合式教学，大学英语课堂 Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 “互联网+”时代，学生们可以登微信查看各种有关英语的公众号的文章，也可以登手机刷微博学习，相较传统的语言学习环境，现在学习的途径变得多元化。信息技术的发展在很大程度上提升了教育信息化的进程。但是在这一进程中新的教学手段、新的教学模式、新的教学内容无一例外都受到了冲击。随着网络多媒体背景下课堂教学形式的多样化，“慕课”、“翻转课堂”、“微课”等智慧课堂逐步被应用在大学课堂上，为老师和学生提供了更多的教学平台和空间，如何把传统的教学实践与网络资源合理的结合，优化教学模式，建立新型的教学环境也成为国内教育者们共同的目标。
system: [SYSTEM]

user: 2. 混合式教学和“雨课堂” 混合式学习是指综合运用不同的学习理论、不同的技术和手段以及不同的应用方式来实施教学的一种策略 [ 1 ] ，目前国外对此的研究的学者众多，Driscoll [ 2 ] 主张将各种网络技术相结合，将多种教学方式和教学技术相结合，将教学技术与具体工作任务相结合。而Bonk & Graham [ 3 ] 还阐述了选择混合式学习的主要原因。混合式教学的重要性是随着在线教育的发展才得以被关注的。MOOC就是在线教育的主要形式之一，因其资源多元化、课程易用性、课程受众广等特点在在线教育领域的主流地位日益凸显 [ 4 ] 。2012年后，国内外的教育者们开始关注慕课资源与传统课堂教学结合的新的混合式教学模式，开始探索具体如何把数字化或者网络化教育和课堂教学相结合，以学生为主导，充分借力数字教学的优势，以期达到最佳的教学效果。不可否认的是，大多数学者的研究都肯定了慕课在混合式教学中不可替代的作用。但是关于如何开展混合式教学，却引发了关于教育改革的一场大讨论。无论什么教学方法的改革和完善，势必都需要一定的理论基础作为指导和支撑。鉴于目前我国大学英语课堂依然是老师为主导，我们认为认知学派理论分支的建构主义理论能较为有效的指导目前混合式教学模式的改革。建构主义认为，知识不是通过教师传授得到，而是学习者在一定的情境即社会文化背景下，借助包括教师和学习伙伴的帮助，利用必要的学习资料，通过意义建构的方式而获得的 [ 5 ] 。建构主义强调以学生为中心，不仅要求学生由外部刺激的被动接受者和知识的灌输对象转变为信息加工的主体、知识意义的主动建构者；而且要求教师要由知识的传授者、灌输着转变为学生主动建构意义的帮助者、促进者 [ 6 ] 。因此，在“互联网+”时代，课堂内外老师和学生都有了新的角色。学生除了传统的学习主体角色以外，还要开始重视协同学习，在于同伴和老师的讨论和相互学习中主动建构和内化新的知识。而老师除了精心准备课堂内容以外，要创立多元化的教学情境和教学设计，为学生提供丰富的教学资源以激发学生的学习热情和主动性。 “雨课堂”是清华大学教育办公室和MOOC平台“学堂在线”教育开发的一款混合式教学软件。2018年4月，安徽大学正式开始在全校范围内推广“雨课堂”这一新的教学软件，“雨课堂”将大数据、云计算等融入到日常教学中。在学习环境方面，它可以将应用于课堂教学的PPT课件植入移动互联网终端，将课件传输到手机微信，再利用微信公众号传输到学生手机微信。此外，老师还可以通过“雨课堂”推送MOOC、习题和预习资料等教学资源，学生则随时随地查看雨课堂上推送的资料，进行碎片化和自主化学习，并将遇到的问题实时反馈给老师。课上老师需要时可以随时布置习题，学生现场在网络平台答题提交，然后客户端会即可统计学生的答题情况，反馈到老师端，这样老师可以及时了解学生的学习情况。此外，弹幕功能也是课上老师的好助手之一。弹幕功能的开启可以较为有效的调动课堂气氛，帮助学生集中注意力。课后的作业和复习资料等也可以让学生线上查看并完成，便于老师掌握采集每个学生的学习行为数据。
system: [SYSTEM]

user: 3. 基于MOOC和“雨课堂”的大学英语混合式教学实践 3.1. 课前设计和准备阶段 笔者目前教授的是小语种专业的大学英语课程，课堂内的规定教材是《21世纪大学英语读写教程》 [ 7 ] ，这学期大三学生所使用的是该教材的第三册，笔者以其中的第二单元为例开展混合式教学课堂的实践研究。第二单元TEXT A的课文是“Titanic Puzzle”，其主题是女性地位和女权主义。老师根据课程大纲规定的进度和内容安排，在结合本班学生的英语水平之后在网络上搜索了慕课资源，最后在“中国大学MOOC”平台分别选取了国防科技大学的慕课课程《大学英语综合教程四》里的第五单元“Gender Studies”和中南大学的慕课课程《综合英语》第五单元“The Gender-Role Revolution”。《大学英语综合教程四》教程每一个单元包括五个部分，其中有三篇阅读文章，都和女性地位和女权主义相关。整个单元的课程涵盖在六节课内容中，慕课资源里提供课文原文，语言点分析和课文主旨分析和理解等部分，全程都由老师用英语讲解，课程的语言难度对于学生来说非常合适。除此之外，课程还设有单元测试题(共15题。学生可答题后提交并看到答案分析)和课外讨论题。中南大学的慕课课程《综合英语》每个单元包括四个部分，其中包含一篇阅读文章和相应的写作技巧分析。课程老师全英文授课，老师会带领学生分析女性角色转变的过程、阶段和课文中的语言点。课后也会有讨论题和测试题供学生自我检测。相比之下，此课程的语言难度和课文深度比前一个慕课课程降低一个等级，更易于学生消化吸收。选好慕课课程后，老师要求学生下载“中国大学MOOC”客户端，然后注册登录在线课程，开始自学任务。 在开始TEXT A的课文“Titanic Puzzle”之前，老师先和学生明确本单元的课程安排，具体如下：首先，学生扫描二维码加入教师创建的授课班级，在雨课堂平台老师会明确发布具体的学习步骤：1) 学生先登录“中国大学MOOC”客户端，开始中南大学的慕课课程《综合英语》第五单元“The Gender-Role Revolution”的学习，在线完成测试题并查看答案和分析，其中针对讨论题：What can we do to enhance gender equality in our society?，学生要求准备一段口语阐述，谈谈对这个问题的看法，以备老师在课堂教授环节的检查。2) 学生观看国防科技大学的慕课课程《大学英语综合教程四》里的第五单元“Gender Studies”，并在雨课堂全程记录自己的课程反思，提交给老师查看，老师以此作为课堂评价的依据之一。3) 针对教材的学习，老师会在“雨课堂”微信公众平台发布本单元的音频、课件和课后练习供学生预习。对于课文的理解，学生要求从难点重点、语言点理解和掌握、课文主题理解和延伸、篇章结构四个方面来解读课文。 3.2. 混合式教学课堂 课前，老师可以在“雨课堂”平台看到学生预习过程中的留言，借此可以了解学生理解中的难点和疑问，也便于及时调整自己的授课计划。课堂上，老师通过随机点名快速问答、全班发送弹幕信息、课件中插播限时单测试题等了解全班学生及学习个体对课文的生词意义、主题理解、篇章结构的理解程度。然后老师总结课文结构、写作方法和较难的语言点。其次，老师检查慕课课程《大学英语综合教程四》里的第五单元“Gender Studies”中的口头阐述作业；针对《大学英语综合教程四》里的第五单元“Gender Studies”的课程反思作业，老师组织 “优秀观点展”，老师在公共讨论区挑选有深度和独特见解的学生观点，通过适当的讲解分析以促进学生的发散性、创造性和批判性思维的发展 [ 1 ] 。 整个课程的教学评价采用形成性评价和终结性评价相结合的方式。授课内容结束后，老师基于对学生学习全过程的持续观察、记录、反思而做出发展性评价。一个教学阶段或者一学期结束后进行书面的终结性评价。学生的最终考核成绩是形成性评价与终结性评价之和。
system: [SYSTEM]

user: 4. 结果和讨论 本研究实践教学阶段结束后，在学生中开展了旨在调查学生对基于慕课和“雨课堂”的混合式教学课堂的态度的问卷调查和深度访谈。调查结果显示，绝大多数学生对混合式教学课堂是满意的，认为这类课堂相比传统课堂更能促进学习的积极性和主动性，也更有效提高自主学习能力，使得学习过程变得更加高效。但是作为教学实践的实施者，我们在实践过程中，还是发现了如下的问题和不足： 4.1. 手段是其次，教学效果才是重点 “线上”加“线下”、慕课和“雨课堂”的模式确实极大地促进了传统教学模式的变革，这种模式的优势已经得到很多学者和老师的认可。但是我们在教学实践中应该记住的是，“雨课堂”究其性质，只是一款教学工具，老师的课堂教学才是教学的主体。其实，“雨课堂”教学工具的使用增加了老师的工作量。从课前的准备工作来看，挑选出适合学生的学习资源就是一项耗费时间的工作。任课教师需要在课下大量接触此类网络新资源，结合自己的教学目标、教学对象的水平、教学进度等因素认真做出判断，筛选出有益于教学计划开展的教学资源。同时创建数字化的学习环境。此外，编辑准备预习课件和复习课件等都是需要老师用课堂外的时间来完成的。这些工作都只有一个目的：更好的教学成效。任何形式的教学其重心还是应该放在课堂。课堂的有效性不能单单依靠教学管理平台，如果老师没有做好教学设计这一环节，那么再先进的技术利用都是徒劳，可能还会导致学生上课时“正大光明”使用手机。因此教师在开展混合式教学时，只关注信息技术而忽略教学内容是本末倒置的做法。 4.2. 变革是开端，系统工程的长远发展需有各方的完善 和所有的教学变革一样，“雨课堂”作为新的教学手段，其长远的发展也是一项巨大的系统工程，需要各方面的同步完善和配合才得以实现。首先，基于“雨课堂”的混合式教学课堂在很大程度上依赖硬件设施和网络条件。虽然现在大多数高校在网络设施上都有大手笔的投入，但是依然不能保证其绝对的稳定性。而在经济欠发达的地区，校园的网络学习环境还没有完全搭建成功。如果课程中不能保证网络的稳定和连贯性，学生就不能及时跟着老师的步伐，也不能给老师及时的反馈，“雨课堂”的学习环境也就陷于瘫痪。因此在教学信息化方面，只有高校加大投入和重视的力度才能保证网络学习环境的通畅。其次，混合式教学背景下，学习的主体即学生面临着新的挑战。学生由被动的学习者转换为主动的学习者，学生的自控力、自律性和信息素养能力等将直接影响到教学的最终效果。如果学生缺乏自主学习能力，大量的课下学习任务将无法高质高效的完成，这势必会影响课上的师生互动，教学的质量也将无法保证。再次，从教学管理方面来说，目前国内的大学对于“手机进课堂”的做法还是颇有争议的，且主流的声音还是不允许学生在课堂随意使用手机，毕竟学生的自控能力一直是教育工作者的痛点。我们绝大多数的课堂，学生和老师的比例过大，导致老师无法直接监控每个学生使用手机的情况，这也给“雨课堂”的实施带来了难度。如果不能保证学生有效地使用手机开展第二课堂的学习活动，那么“雨课堂”将形同虚设。因此，教学管理者需要从教室规模设计、教室布局和出台课堂手机使用监管条例等方面做好配套工作。最后，从“雨课堂”本身来看，测试题型只有选择题和投票题，主观题无法在网上作答，这对于外语课堂来说是一个巨大的局限。且应用场景过于单一化，若系统能开发出动画展示的应用场景，老师上手会很快，学生也不会觉得枯燥单一，且有助于老师开发出更新的应用场景。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 本文在对沪深300指数基于服从正分布、学生t分布、有偏学生t分布、GED分布的假设，建立EGARCH模型对收益率波动性的杠杆效应进行建模，采用VaR模型进行回溯测试，研究表明，基于GED分布下的波动模型明显优于EGARCH在其他分布下的模型。 关键词 :沪深300股指，非对称性，EGARCH模型 Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 沪深300指数是中证指数公司编制并于2005年4月8日正式发布。沪深300指数是以在上海和深圳证券市场中选取300只规模大流动性好的股票A股作为样本，以流通股为权数加权计算编制发布的加权股价指数。其覆盖了沪深市场五成以上的市值，具有良好的市场代表性。沪深300的推出正是切合了市场需求，是反应沪深两个市场整体走势的晴雨表。因此研究沪深300波动率特点，准确预测波动率趋势对于投资者和市场具有重要作用。沪深300指数作为股指期货的标的得到越来越多的关注。我们用资产收益率的标准差或方差来衡量波动性，用资产收益率的标准差来衡量其大小。波动率越高，资产价格波动越剧烈，风险越大；波动率越小，资产价格波动越小，风险越低。 Bollerslev (1986) [ 1 ] 提出了广义的ARCH模型即GARCH模型，是在Engle [ 2 ] 的ARCH模型基础上对方差的表现形式进行了直接的线性扩展，GARCH模型应用更为广泛，解决了高阶ARCH模型待估参数过多导致模型不够精确的问题。建立基于正态分布、学生t分布、有偏学生t分布、和广义误差分布下指数EGARCH模型研究沪深300指数收益率序列的特点 [ 3 ] - [ 13 ]，对模型进行回溯检验，建立VaR风险度量模型对所拟合的一系列GARCH类模型进行评估，选择拟合效果较好的模型对波动率进行预测。
system: [SYSTEM]

user: 2. 模型设定 2.1. EGARCH模型 传统的GARCH模型对参数的约束非常严格，对正负扰动的反应是对称的，为了克服GARCH模型的弱点，Nelson于1991年提出了指数EGARCH模型，允许在模型中体现正负扰动对资产收益率的非对称效应，将新息进行加权，该模型的结构为 { r t = μ t + α t α t = σ t ε t ln ( σ t 2 ) = ω + ∑ j = 1 m β j ln ( σ t − j 2 ) + ∑ i = 1 n α i ∗ ( | ε t − 1 σ t − 1 | + γ i ε t − 1 σ t − 1 ) 这里 α i 表示的杠杆效应， α i ≠ 0 非对称效应就存在。 2.2. VaR模型基础理论 VaR关注资产损益的尾部特征，提高VaR计算的准确性。VAR通俗讲“有的把握在今后的N天内损失 Δ p 不会大于VaR”，公式表达为 prob ( Δ p ≤ VaR ) = α 。VaR是评价金融风险的度量，其定义为金融头寸在持有期内以某个概率发生的最大损失，所以损失函数的正负取决于金融头寸，空头的损失就是资产收益率，多头的损失为其相反数，VaR的计算公式为持有期内的 VaR = Z α σ t Δ t ( Δ t 为持有期)，其中 Z α 为置信度 对应的某种分布的分位数，收益率序列计算的标准差作为收益率的波动率。 要选择合适的条件异方差GARCH模型来改进VaR的估计精度，笔者基于对收益序列的分布与波动率两方面考虑，本文建立EGARCH-VaR模型，旨在着重分析期收益波动的厚尾性、价格变化的不对称性对市场风险变动的影响，并针对分析结果提出相应的对策建议。在估计VaR值时存在模型风险，目前处理模型风险最为常用的统计检验方法是KuPiec在1995年提出的似然比检验，这一检验过程实质是对模型预测效果的评价的回溯检验法，将实际发生的损失与计算得到的VaR进行比较，若实际亏损值低于VaR值，就把它看成一个成功的事件记为1，如果实际亏损值超过VaR值，则看成是一个失败事件记为0，如此观测值可构成一系列的独立的贝努里试验，观测天数为N，失败天数为n，则失败频率为 = n/N，Kupiec似然比率检验法的原假设为，构造j检验统计量为下式，且原假设成立的条件下，统计量LR服从自由度为1的卡方分布 LR = − 2 ln [ ( 1 − P ) N − n P n ] + 2 ln [ ( 1 − n N ) N − n ( n N ) n ]
system: [SYSTEM]

user: 4. 结论及政策建议 对收益波动性的实证研究表明了我国沪深300指数收益序列具有显著的波动集聚性和尖峰厚尾性。实证结果表明基于GED分布的EGARCH-VaR模型能更好地刻画沪深300收益的尖峰厚尾性、杠杆效应和市场风险。多头头寸在GED分布下的EGARCH较优，空头头寸在有偏学生t下的分布模型效果比较好。本文利用基于广义误差分布的VaR-EGARCH模型计算得到的日均VaR可作为描述市场风险的有效指标，所得结论如下：1) 沪深300指数市场风险呈现阶段性波动的特点，在这一背景下更应该密切注视现阶段和未来一段时期市场风险进一步上升的趋势。2) 收益波动的厚尾性说明了极端事件发生的概率大于正态分布下的概率，这种极端风险(如5%小概率)通常称之为尾部风险。对于交易者而言，尤其要注意减少尾部风险，减少极端风险事件发生的概率。3) 价格上涨或者下跌的不对称性，即坏消息对市场的影响大于好消息对市场的影响，沪深300股指的投资者对价格下跌是非常敏感的，较小的价格下跌就可能引起恐慌性的抛售，因为我国资本市场参与主体主要以中小投资为主，相对于西方投资市场略显不成熟，应当优化丰富市场参与主体，削弱中小投资情绪对市场波动的影响，引进西方先进的投资理念、风险管理技术，引导“散户”识别、抵抗风险的能力。而且金融衍生品等风险管理的欠缺使得国内A股呈现单边行情，加快金融衍生品的开发速度，为投资者提供丰富的风险对冲手段，满足机构投资者多样化的策略需求。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 心血管疾病严重威胁人类健康，其中心肌肥大和心肌纤维化是心血管疾病发展的主要表现。microRNA-29在心肌肥大和纤维化过程中都发生异常表达，并且参与纤维化、肿瘤增殖等过程。本研究通过建立肥大心肌细胞体外模型，研究miR-29a在心肌肥大过程中的变化水平及肥大心肌细胞细胞周期相关蛋白的表达模式变化。将常规培养H9C2心肌细胞系使用1 × 10 −5 、1 × 10 −6 和1 × 10 −7 mol/L浓度的AngII诱导48 h后，检测细胞面积、细胞总蛋白含量，确定肥大心肌细胞诱导结果；再利用qPCR方法检测不同组的miR-29a、Cyclin A2、Bcl-2、Plk-1表达水平。结果显示使用浓度为1 × 10 −5 、1 × 10 −6 mol/L的AngII对H9C2诱导48 h后，细胞面积明显增大，细胞的总蛋白含量也增加，并且miR-29a表达水平显著升高；细胞周期相关的CyclinA2、Bcl-2和Plk-1在高浓度(1 × 10 −5 mol/L) AngII诱导后表达水平上升，低浓度(1 × 10 −7 mol/L) AngII诱导后表达水平下降。在肥大心肌模型建立过程中，miR-29a可能能够对细胞周期相关基因产生抑制。 关键词 :心肌肥大，细胞周期，miR-29a Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 前言 心血管疾病患病人群逐年增加，不但严重威胁人群健康，而且严重消耗国家医疗资源，给家庭和社会造成沉重负担。心肌细胞肥大及纤维化是心血管疾病发展的主要病理表现，许多因素在这一病理过程中发挥不同作用。心肌肥大是许多心血管疾病共有的病理改变，是心脏对负荷增加、内分泌激活和能量代谢障碍体液因子改变、等多种刺激的一种适应性应答反应 [ 1 ] [ 2 ]。早期的心肌肥大有利于维持正常的心脏功能，但这种代偿并非是良性的，越来越多的研究证明长期的应激最终会导致心律失常、心力衰竭、猝死，这说明心肌肥大是多种心血管事件的独立危险因素 [ 3 ]。 microRNA是一种长度为22nt的短链RNA，能够通过调节基因表达来参与多种生命过程，包括早期发育，细胞增殖、凋亡和分化等。研究发现在心室重构、心力衰竭、心肌细胞凋亡等过程都受到miRNA的调控 [ 4 ] [ 5 ] [ 6 ] [ 7 ]。目前证实在心脏重构/心衰过程中表达下调的miRNAs主要有miR-1、miR-133、miR-30、miR-29、miR-10、miR-19、miR-101等 [ 8 ]。其中miR-29a可能参与心肌纤维化和心肌肥大的发生和发展。心肌梗死后心肌纤维化的形成伴随着miR-29a表达下调和Collagen 1A1基因表达增加 [ 9 ] ，而且心肌肥大患者的血浆miR-29a表达水平上升，能够作为心肌肥大和纤维化的分子标志物 [ 10 ]。同时，miR-29a还参与细胞周期的调节 [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ] ，但是目前仍未有研究阐明miR-29a如何调控心肌肥大及其表达变化是否能够影响心肌细胞周期。 本研究主要通过血管紧张素II构建H9C2体外肥大心肌细胞模型，比较正常心肌细胞和肥大心肌细胞中miR-29a、CyclinA2、Bcl-2、Plk-1的表达水平，确定肥大心肌细胞中miR-29a的表达变化和细胞周期的变化。
system: [SYSTEM]

user: 2. 材料与方法 2.1. 材料与设备 2.1.1. 材料 大鼠心肌细胞系H9C2，购自武汉普诺赛生命科技有限公司。 2.1.2. 主要设备 TE2000-U倒置显微镜(Nikon)；CO 2 培养箱(Thermo)；NanoDrop 2000微量分光光度计(Thermo)；PCR仪(Thermo)；Light Cycler ® 96 PCR仪(Roche)；高速低温离心机(Thermo)。 2.1.3. 主要试剂 胰蛋白酶、DMEM培养基、胎牛血清(FBS)、磷酸盐缓冲液(PBS)均购于以色列Biological Industries公司；DMSO、血管紧张素(AngII)购于美国SIGMA公司，TransZolUP、细胞蛋白提取试剂盒、无酶水购于北京全式金公司；异丙醇，无水乙醇，氯仿均购于天津凯通化学试剂有限公司；GoScript TM Reverse Transcription System，Go Taq® qPCR Master Mix购于普洛麦格(北京)生物技术有限公司；引物由上海生工生物技术有限公司合成，序列如表1所示。 Table 1 Sequences of primers for qPC 基因名称 Forward Primer Reverse Primer miR-29a AGCACCACGAAACGG — U6 CTCGCTTCGGCAGCACATATACT ACGCTTCACGAATTTGCGTGTC GAPDH TCGTGGAGTCTACTGGCGTCTT CATTGCTGACAATCTTGAGGGAG Cyclin A2 GTATTTGCCATCGCTTATTGCTG CTGTGGTGCTTTGAGGTAGGTCTG Bcl-2 CAGCGTCTGGAACAGTTGGTG CGAGGGACTTGAGCAGTTTGG Plk-1 GTCTGCCTATTACCTGCCTCACC CACTCGATGGCCTCATTTGTCTC 表1. qPCR引物序列 2.2. 方法 2.2.1. 细胞培养和肥大心肌细胞诱导 常规培养H9C2细胞。将常规传代的H9C2细胞以1 × 10 5 个/孔的细胞数量接种于6孔板中，使用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养液于37℃、5% CO 2 、饱和湿度培养箱中培养，待其生长至汇合度达到50%~70%后，添加终浓度为0、1 × 10 −5 mol/L，1 × 10 −6 mol/L，1 × 10 −7 mol/L的AngII诱导48 h，分别记作CTRL、105、106、107组。 诱导48 h后，对各组细胞进行拍照，使用ImageJ软件对细胞进行面积测量，比较各组间细胞面积差异。再将细胞重悬后，计数相同数量的细胞，使用试剂盒提取细胞总蛋白，使用BAC法测定总蛋白量。 2.2.2. 基因表达检测 使用全式金公司TransZol up总RNA提取试剂盒提取各组总RNA，分别按照反转录试剂盒说明书进行microRNA反转录和mRNA反转录，再使用qPCR技术检测各组miR-29a、Cyclin A2、Bcl-2、Plk-1相对表达量。 2.2.3. 统计学分析 采用GraphPad Prism 8进行统计学分析，数据使用ANOVA法进行单因素方差分析，比较各组与CTRL间的均数标准差差异，p < 0.05认为具有显著性差异。
system: [SYSTEM]

user: 3. 结果 3.1. 肥大心肌模型建立 正常H9C2心肌细胞呈梭形，折光性良好，细胞饱满；经过不同浓度AngII诱导48h后，细胞的表面积增加，向周围伸展较大，其中以1 × 10 −5 mol/L浓度的AngII处理后的细胞体积最大。经过诱导后的细胞蛋白总量上升(图1，表2)。 图1. H9C2细胞经AngII诱导48 h后生长状态(200×) Table 2 Contrast of cell surface areas and total protein concentrations after AngII induced for 48 h ( x ¯ ± S 组别 细胞表面积(Pixels) 细胞总蛋白量(mg/mL) CTRL 725.43 ± 250.47 1.28 ± 0.20 105 1686.09 ± 508.34 * 3.24 ± 0.44 * 106 1271.22 ± 284.96 * 2.64 ± 0.37 * 107 712.91 ± 224.59 2.22 ± 0.35 * 表2. 不同浓度AngII诱导48 h后H9C2细胞面积和蛋白总量比较( x ¯ ± S ) 注：*与CTRL比较，p < 0.05。 3.2. miR-29a，CyclinA2，Bcl-2，Plk-1的表达 使用qPCR方法对miR-29a、Plk-1、Bcl-2和Cyclin A2的表达情况进行检测后发现(图2)，与CTRL组相比，在使用1 × 10 −5 mol/L的AngII诱导后，miR-29a、Plk-1、Bcl-2和Cyclin A2的表达水平发生了显著上调；用1 × 10 −6 mol/L的AngII诱导后miR-29a表达水平上升最高，Bcl-2、Cyclin A2表达水平也上升，但较105组低，而Plk-1表达水平下降；107组的miR-29a表达水平与CTRL没有差异，而Plk-1和Bcl-2的表达水平降低，Cyclin A2表达水平较CTRL略有升高。 图2. 不同处理组基因相对表达量变化
system: [SYSTEM]

user: 4. 讨论 有研究证实miR-29a能够靶向Cyclin D2抑制细胞周期 [ 14 ] ，而且低表达水平的miR-29a与肿瘤的增殖相关 [ 15 ] [ 16 ] [ 17 ] [ 18 ] ，高表达miR-29a则可抑制肿瘤细胞的增殖。在肥厚型心肌病患者的外周血miRNAs中，miR-29a水平与心脏MRI显示的心肌肥厚及纤维化程度密切相关 [ 10 ] ，它对心肌成纤维细胞的活化增殖起抑制作用，最终抑制纤维化的发生和发展 [ 19 ] ，并且能够调节心肌细胞的代谢或引起心肌细胞的凋亡 [ 20 ] ，抑制心肌肥大。本研究中使用AngII诱导H9C2细胞后，miR-29a表达水平显著上升，这与其他研究人员的发现类似，其高表达miR-29a后可能能够抑制正常心肌细胞向肥大心肌细胞转变。 Plk-1是存在于哺乳动物中的丝/苏氨酸激酶，位于细胞周期运行的中心环节，是调节细胞周期的重要分子 [ 21 ]。Plk-1作为一种癌基因，在多种恶性肿瘤中高表达，参与了肿瘤的侵袭与转移 [ 22 ] ，抑制Plk-1表达后，可导致多种肿瘤细胞生长的显著抑制和大规模细胞凋亡 [ 23 ]。Plk-1表达水平在106组中下调，而105组中上调，这与肥大心肌细胞诱导后细胞活力下降相符。 Bcl-2是一种抗凋亡蛋白，对细胞凋亡有抑制作用 [ 24 ]。miR-29可以直接靶向Bcl-2增加肝癌细胞(HCC)细胞对凋亡的敏感性，而且引入外源的miR-29到裸鼠体内，能够抑制肝癌细胞在裸鼠体内形成肿瘤的能力。这些研究结果表明，miR-29可通过抑制Bcl-2在线粒体通路促进细胞凋亡 [ 25 ] [ 26 ]。本研究中Bcl-2的表达量水平在10 −5 mol/L，10 −6 mol/L AngII诱导后的H9C2细胞中分别是空白对照组的3.30倍，1.60倍，表达量水平上调，但Bcl-2在高表达miR-29a组(106组)中的表达水平比低表达miR-29a组(105组)低，有可能miR-29a的高表达会导致Bcl-2的表达量下调，降低细胞活力。 Cyclin A2与有丝分裂紧密相关，它具有正性调节细胞周期活动的作用。Chaudhry H W等的研究中曾指出，哺乳动物心肌细胞的Cyclin A2在出生后不久便沉默，也就导致了成年哺乳动物心肌细胞几乎丧失了增殖能力 [ 27 ]。但是最近不少相关研究表明成熟心肌细胞具有分裂增殖能力，可以重回细胞周期，分裂产生新细胞以适应负荷改变 [ 28 ] [ 29 ]。在研究心肌肥大机制时发现，在肥大初期Cyclin、CDK等细胞周期正性调节因子明显上调，CDKI等细胞周期负性调节因子明显下调 [ 30 ]。在本研究中，10 −5 mol/L、10 −6 mol/L、10 −7 mol/L AngII对H9C2细胞诱导48h后，心肌细胞CyclinA2的表达量水平分别是空白对照组的5.82倍、2.25倍、1.29倍，可能是多种心肌肥大的信号机制共同调节，使得心肌细胞中CyclinA2的表达量水平上调，促进细胞增殖，以满足细胞肥大时对合成蛋白的需要。可以推测诱导时给予的AngII浓度越大，心肌细胞受到的刺激越强，增殖表达越强。 综上所述，心肌细胞在肥大初期，心肌细胞增殖在多种因素形成的复杂网络调控机制协同调控下，使得心肌细胞启动细胞分裂和增殖。与正常心肌细胞相比较，miR-29a、Bcl-2和Cyclin A2的表达水平都上调，并且高表达的miR-29a能够对细胞周期相关基因产生抑制，但尚不足以控制细胞的肥大变化，这需要进一步调控miR-29a后观察。同时miR-29a通过直接还是间接地靶向细胞周期相关基因调节心肌细胞的肥大变化还不清楚，也需要进一步的研究证实。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 目前越来越多的证据表明，二甲双胍除了具有降低血糖的作用外，还可降低糖尿病患者的癌症发生风险，先前的研究表明二甲双胍可以单独作用或与某些抗癌药物协同作用，通过腺苷单磷酸活化蛋白激酶(Adenosine 5'-monophosphate (AMP)-activated protein kinase，AMPK)信号通路对各种类型的肿瘤产生抗肿瘤作用。然而，二甲双胍对胃癌的抗肿瘤作用研究较少。本文结合国内外文献，介绍了二甲双胍在胃癌抗肿瘤作用中的不同机制，从基因、信号通路到对胃癌细胞系和胃癌干细胞的功能影响以及肿瘤细胞与肿瘤微环境之间的相互作用，并综述如下。 关键词 :二甲双胍，胃癌，抗肿瘤作用 Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 介绍 胃癌(Gastric cancer， GC)是全球发病率第四位的恶性肿瘤，在肿瘤中致死率居第二位 [ 1 ] ，由于其恶性程度高，是最常见的癌症类型之一。胃癌的传统治疗方法有胃切除术和放化疗，即使在根治切除和辅助放化疗后，其复发率和死亡率也很高，5年总生存率(Overall survival，OS) < 25% [ 2 ] ，而且70%以上的胃癌发生在发展中国家，东亚的发病率占世界总量的一半，且主要发生在中国 [ 3 ] 。因此，在这种背景下开发新的有效的治疗方法是改善GC预后的必要条件。 二甲双胍是一种公认的降糖药物，也被认为是治疗2型糖尿病的一线药物 [ 4 ] [ 5 ] 。它通过抑制糖异生而降低肝脏葡萄糖的产生，改善骨骼肌对葡萄糖的摄取，降低胰岛素抵抗 [ 6 ] ，与其他降糖药物相比，二甲双胍不会导致体重增加和低血糖风险增加。除了降血糖特性，流行病学研究表明，接受二甲双胍治疗的糖尿病患者比未接受二甲双胍治疗的患者患癌症的风险明显降低 [ 7 ] 。Evans等 [ 8 ] 首先假设二甲双胍可以降低罹患癌症的风险，他们对糖尿病患者进行了试点病例对照研究，发现二甲双胍治疗的糖尿病患者的癌症发生率为36.4%，而其他降糖药物治疗糖尿病患者的癌症发生率为39.7%。Wu等人 [ 9 ] 在2015年的一项荟萃分析中评估了二甲双胍在2型糖尿病患者中的使用情况，结果显示，与未接受二甲双胍治疗的糖尿病患者相比，接受二甲双胍治疗的糖尿病患者的发病率降低了14%，死亡率降低了30%。此外，其他荟萃分析 [ 10 ] [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ] 也得到了类似的结果，表明二甲双胍总体上降低了患癌症的风险。虽然一些实验室和流行病学研究表明二甲双胍可能在糖尿病患者中发挥普遍的抗肿瘤作用，但二甲双胍是否能降低胃癌等特定类型癌症的风险仍不清楚。因此，本文综述旨在阐明二甲双胍在胃癌中抗肿瘤作用的研究进展。
system: [SYSTEM]

user: 2. 二甲双胍对胃癌细胞株具有抗增殖作用 Kato等 [ 14 ] 在体内外研究了二甲双胍对不同GC细胞株(MKN1、MKN45、MKN74)的影响。他们发现，随着二甲双胍剂量的增加及时间的延长降低体外细胞增殖的效应越强，在体内他们对裸鼠皮下注射了MKN74细胞，每日腹腔注射二甲双胍1或2 mg，连续4周，在治疗结束时，治疗组小鼠的肿瘤明显小于对照组小鼠。这是因为二甲双胍在体内和体外均阻断了G(0)-G(1)的细胞周期，这种阻断伴随着G(1)细胞周期蛋白的大量减少，尤其是在cyclin D1、周期蛋白依赖性激酶(Cdk) 4、Cdk6中，以及视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)磷酸化水平的降低。
system: [SYSTEM]

user: 3. 二甲双胍抑制上皮细胞向间质转化 Shiva等 [ 15 ] 发现二甲双胍通过对上皮–间质转化(Epithelial-mesenchymal transition，EMT)的抑制作用，对胃癌细胞的侵袭和迁移具有较强的抑制作用，其作用随着时间延长而增强，且不受培养基葡萄糖浓度的影响。单争争等 [ 16 ] 发现IL-6作为肿瘤炎症微环境的重要组成部分，能通过诱导胃癌细胞发生EMT而增强其侵袭转移能力，加重病情，而经二甲双胍处理后，这种效应能得到明显的抑制。Huang等 [ 17 ] 发现二甲双胍通过抑制Bmi-1来抑制EMT，Bmi-1是一种促进肿瘤细胞自我更新和上皮向间质转化的转录调控因子，其上调与肿瘤的进展有关。这种抑制作用是依赖于TNF-ɑ (LITAF)转录因子，LITAF被转移到细胞核中，在细胞核中诱导不同mi-RNA的表达：hsa-miR-15a、hsa-miR-194、hsa-miR-128、和hsa-miR-192，这些mi-RNA降低了Bmi-1的表达。Li等人 [ 18 ] 的研究通过长链非编码RNA (Long nincoding RNAs，lncRNA)分析了二甲双胍处理的AGS细胞系中长链非编码RNA (lncRNA)的表达水平。已知lncRNAH19在胃癌组织中过表达。他们发现，lncRNAH19在二甲双胍存在的情况下显著下调，在二甲双胍存在条件下的lncRNAH19下调可能是AMPK活化和MMP9表达降低的原因。经二甲双胍处理后lncRNAH19在体外对细胞迁移和侵袭的依赖减少，在体内抑制肿瘤的形成，当把lncRNAH19敲除后的效果与二甲双胍治疗的效果相同，因此lncRNAH19可能是二甲双胍抑制胃癌细胞侵袭过程中的关键成分。
system: [SYSTEM]

user: 4. 二甲双胍抑制超音hedgehog基因在胃癌细胞中的表达 已知超音hedgehog基因(Sonic hedgehog，Shh)信号通路异常激活可导致胃癌 [ 19 ] [ 20 ] [ 21 ] ，且通路的激活对维持胃(Cancer stem cell，CSC)特性(自我更新和耐药)至关重要。Song等 [ 22 ] 发现二甲双胍可以调节Shh信号通路，在胃癌细胞株中(HGC 27和MKN 45)，Shh经二甲双胍作用后降低，使用小干扰RNA (si-RNA)抑制腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)后，这种效应消失 [ 23 ] 。因此，二甲双胍是通过AMPK来抑制Shh信号通路。
system: [SYSTEM]

user: 5. 二甲双胍通过抑制HIF1ɑ/PKM2信号来抑制胃癌的发展 Chen等人 [ 24 ] 的研究发现缺氧诱导因子1ɑ (HIF1ɑ)和丙酮酸激酶M2 (PKM2)在胃癌组织中高表达，二甲双胍通过抑制HIF1ɑ和PKM2的表达来抑制恶性行为的GC细胞，从而诱导细胞凋亡，抑制细胞入侵和胃癌细胞的迁移。
system: [SYSTEM]

user: 6. 二甲双胍通过激活AMPK和抑制mTOR/AKT信号通路，在人AGS胃腺癌细胞中 触发固有的凋亡反应 LU等 [ 25 ] 研究报道发现二甲双胍对人AGS胃腺癌细胞具有较强的抗增殖作用和诱导凋亡特性。经二甲双胍处理后增加了腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化，降低了AKT、列帕霉素(mTOR)和p70S6k的磷酸化，用化合物C(AMPK抑制剂)抑制AMPK磷酸化后，显著消除二甲双胍对AGS细胞活力的影响。二甲双胍改变凋亡相关信号通路，通过下调AGS细胞中BAD磷酸化和Bcl-2、pro-caspase-9、pro-caspase-3、pro-caspase-7表达，上调BAD、细胞色素c和Apaf-1蛋白水平完成的。吴诗文等 [ 26 ] 研究发现二甲双胍呈时间-剂量依赖性抑制AGS细胞增殖，二甲双胍还可协同顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、紫杉醇(PTX)3种化疗药物促进AGS细胞凋亡。竹梦等 [ 27 ] 发现二甲双胍和奥沙利铂联合用药时抑制SGC-7901细胞的增殖，抑制SGC-7901细胞cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平，抑制SGC-7901细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2 的mRNA和蛋白表达水平，增加促凋亡蛋白Bax以及凋亡执行caspase3的mRNA和蛋白表达水平，两者联合应用时比单用药物时的调控力度大。二甲双胍与奥沙利铂能够抑制胃癌细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡，可能是通过促进Bax和caspase3的表达，抑制cyclin D1和Bcl-2 表达来实现的。
system: [SYSTEM]

user: 7. 二甲双胍通过Akt通路调控胃癌干细胞的增殖与凋亡 查璐琴等 [ 28 ] 研究报告称二甲双胍可通过抑制Akt信号通路抑制胃癌干细胞增殖并诱导其凋亡。他们发现，胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factors，IGFs1)可以提高胃癌干细胞中Akt和p-Akt蛋白表达，明显减弱二甲双胍对细胞中Akt和p-Akt的抑制作用，说明二甲双胍下调胃癌干细胞中p-Akt蛋白的表达是通过抑制Akt信号通路实现的。
system: [SYSTEM]

user: 8. 二甲双胍靶向胃癌干细胞 Courtois等 [ 29 ] 评估了二甲双胍对来源于患者的原发性肿瘤异种移植(Patient-derived xenograft，PDX)和胃癌细胞系(MKN45、AGS和MKN74)胃CSC增殖和致肿瘤特性的影响，对二甲双胍在传统的二维(2D)和三维(3D)培养体系(其中只有CSC能够形成肿瘤球)和小鼠异种移植模型体内的体外效果进行了评估。在三维培养系统中，二甲双胍可以减少肿瘤球的数量，显示其靶向CSC的能力，这种效应与CSC标志物(CD44和Sox2)表达下降和分化标志物(kruppel样因子4和MUC5AC)表达增加有关。最后，二甲双胍在体内治疗肿瘤异种移植(PDXs)导致肿瘤生长延迟，降低了CSCs的自我更新能力。
system: [SYSTEM]

user: 9. 二甲双胍对胃癌体外及腹膜转移的抗肿瘤作用 SEKINO等人 [ 30 ] 的研究发现二甲双胍抑制了所有GC系(MKN1、MKN45-GFP、KATO-III和SNU-1)的细胞增殖，并在体外低糖条件下提高了其敏感性，此外，二甲双胍通过抑制管理NF-kB信号来抑制腹膜转移，与AMPK信号途径无明显相关性。
system: [SYSTEM]

user: 10. 二甲双胍对ALDH+胃癌干细胞的抑制作用及其机制 王一等 [ 31 ] 研究发现乙醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase，ALDH)细胞具有肿瘤干细胞特性，即自我更新能力、分化能力、致瘤能力。他们发现，不同浓度二甲双胍均可降低胃癌细胞MKN45中ALDH+细胞的比例，且随着二甲双胍浓度的升高，ALDH+细胞的比例明显下降，表明二甲双胍对CSC具有抑制作用。他们还进一步探索了二甲双胍对干性相关基因Oct4和Sox2表达的影响，最终Oct4和Sox2基因表达量下降与干细胞量下降有关。
system: [SYSTEM]

user: 11. 二甲双胍可调节肿瘤细胞与肿瘤微环境的相互作用 Chen等 [ 32 ] 研究表明二甲双胍能够调节GC细胞与其微环境之间的相互作用。他们从胃癌患者中分离出胃肿瘤相关成纤维细胞(Tumor-associated fibroblasts，TAFs)，这些TAFs经二甲双胍预处理后与GC细胞一起培养，与未处理的TAFs共培养的GC细胞相比，预处理的TAFs共培养的GC细胞增殖明显减少。他们发现二甲双胍对胃TAFs培养基中32种蛋白(14种上调，18种下调)的分泌有显著影响，其中钙调素样蛋白3(Calml3)在二甲双胍处理后在胃TAFs培养液中上调2.88倍。将重组Calml3蛋白加入GC细胞培养液中，模拟二甲双胍治疗TAFs的培养液，结果表明Calml3抑制了这些胃癌细胞的克隆性和增殖，所以二甲双胍是通过刺激FATs中Calml3的分泌来抑制胃癌细胞的增殖。
system: [SYSTEM]

user: 12. 二甲双胍的潜在副作用 Aroda等人 [ 33 ] 对糖尿病前期个体(空腹血糖升高、糖耐量下降、超重/肥胖)进行了前瞻性对照研究发现长期服用二甲双胍与维生素B12缺乏和贫血有关，维生素B12缺乏在一定程度上又会引起外周神经病变，故应考虑对接受二甲双胍治疗的患者进行维生素B12水平的常规检测。目前认为是二甲双胍对钙依赖膜作用的干扰所引起的，钙依赖膜作用负责维生素B12内因子在回肠末端的吸收 [ 34 ] [ 35 ] [ 36 ] [ 37 ] 。尽管大量研究表明二甲双胍对胃癌等其他类型的癌症有一定的抗肿瘤作用，但同时了解二甲双胍治疗的潜在的不良后果也是至关重要的。