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user: 3. 结果与分析 3.1. 三种精油对扩展青霉抑菌率的影响 根据试验方法2.2.2测得三种精油不同体积下对扩展青霉的抑制情况，结果见表1。 Table 1 Colony growth of three essential oils under different volume condition 种类 μL 艾叶精油 紫苏精油 柠檬精油 菌落平均直径(cm) 抑菌率(%) 菌落平均直径(cm) 抑菌率(%) 菌落平均直径(cm) 抑菌率(%) 0 6.13 ± 0.35a - 6.13 ± 0.29a - 6.13 ± 0.29a - 50 6.12 ± 0.24a 0.18 ± 4.28 6.13 ± 0.14a 0.00 ± 4.21 3.37 ± 0.12b 49.02 ± 14.30 100 6.05 ± 0.18a 1.42 ± 8.45 5.86 ± 0.10a 4.80 ± 10.04 2.87 ± 0.06c 57.90 ± 1.94 150 6.04 ± 0.27a 1.60 ± 4.08 5.55 ± 0.10a 10.30 ± 5.48 2.00 ± 0.18c 73.36 ± 4.63 200 6.01 ± 0.35a 2.13 ± 5.59 5.00 ± 0.12a 20.07 ± 1.61 1.56 ± 0.13c 81.17 ± 2.71 250 5.57 ± 0.26a 9.95 ± 6.65 4.28 ± 0.23b 32.86 ± 0.78 1.38 ± 0.04c 84.37 ± 1.52 300 4.96 ± 0.18b 20.78 ± 6.89 2.84 ± 0.26c 58.44 ± 22.35 1.14 ± 0.17c 88.63 ± 3.05 表1. 三种精油不同体积条件下菌落生长情况 注：不同小写字母表示0.05水平差异显著。 如表1可知，三种精油随着体积的不断增高，菌落的直径逐渐变小，抑菌率不断增大，说明三种精油对扩展青霉菌苔具有一定的抑菌作用。艾叶精油在体积含量为50 μL~250 μL时菌落的平均直径无显著差异(P > 0.05)，在300 μL时菌落的平均直径为4.96 ± 0.18 (P < 0.05)。紫苏精油在体积含量为50 μL~200 μL时菌落的平均直径无显著差异，在250 μL、300 μL时菌落的平均直径有差异。柠檬精油在体积含量为50 μL、100 μL有差异，在150 μL、200 μL、250 μL、300 μL有显著差异，图1中可以看到精油使用体积从左向右依次增大，对青霉的抑菌率逐渐增高。经过对比可看出，柠檬精油的抑菌率最高，其次是紫苏精油，艾叶精油的效果最差。同时也发现精油会影响扩展青霉色素的分泌，随着精油体积含量的不断增高，培养基中菌苔的颜色由先前的青绿色逐渐变为灰白色。 图1. 不同体积含量下柠檬精油的抑菌圈 3.2. 三种精油对扩展青霉孢子萌发率的影响 根据2.2.3方法，测得不同精油不同体积下孢子的萌发个数并计算出萌发率，结果见表2。 由表2可知随着精油体积含量的不断增高，统计200个孢子，其萌发个数也在不断降低，萌发率也不断降低，说明艾叶精油、紫苏精油、柠檬精油对扩展青霉孢子的萌发具有抑菌的效果。在这三种精油中，在含有柠檬精油的培养基中的孢子的萌发率最低，其次是含有紫苏精油，最后是含有艾叶精油的培养基，这个试验结果说明在对扩展青霉孢子进行抑菌时，高浓度的精油比低浓度的精油抑菌效果要好，然而在所要抑菌的孢子数相同时，这三种精油中低浓度的柠檬精油就可以取得很好的抑菌效果。 Table 2 Spore germination of three essential oils at different volume level 种类 μL 艾叶精油 紫苏精油 柠檬精油 平均发芽个数(个) 发芽率(%) 平均发芽个数(个) 发芽率(%) 平均发芽个数(个) 发芽率(%) 0 156.33 ± 10.62a 78.17 ± 5.31 156.33 ± 10.62a 78.17 ± 5.31 156.33 ± 10.62a 78.17 ± 5.31 50 147.67 ± 2.68a 73.84 ± 2.05 135.00 ± 4.32b 67.50 ± 2.16 87.33 ±3.68b 43.67 ± 1.84 100 130.00 ± 1.42b 65.00 ± 1.22 125.00 ± 4.32bc 62.50 ± 1.53 73.00 ± 4.32c 36.50 ± 2.16 150 125.67 ± 5.51b 62.84 ± 3.47 101.00 ± 1.63c 50.50 ± 0.82 66.67 ± 2.87c 33.34 ± 1.43 200 113.67 ± 6.99bc 56.84 ± 3.70 89.00 ± 3.56cd 44.50 ± 1.78 60.67 ± 4.50c 30.34 ± 2.25 250 108.00 ± 6.60c 54.00 ± 3.56 73.30 ± 2.49d 38.17 ± 1.25 52.67 ± 3.30c 26.34± 1.65 300 98.00 ± 4.50c 49.00 ± 2.27 68.00 ± 3.27d 34.00 ± 1.63 37.33 ± 5.44d 18.60 ± 2.72 表2. 三种精油不同体积含量下孢子的萌发情况 注：不同小写字母表示0.05水平差异显著。 3.3. 三种精油对扩展青霉孢子生长速率的影响 根据2.2.4试验方法，测得扩展青霉的孢子在三种精油不同体积条件下生长时的直径，根据公式计算菌苔面积以及生长速度，结果见表3。 Table 3 Effect of different content of Artemisia argyi oil on the growth of Penicillium sp 天数 μL 3天 7天 9天 平均生长面积cm 2 /天 平均直径/cm 面积/cm 2 平均直径/cm 面积/cm 2 平均直径/cm 面积/cm 2 0 0.33 ± 0.06a 0.09 ± 0.03 0.85 ± 0.04a 0.57 ± 0.05 1.08 ± 0.08a 0.92 ± 0.15 0.0708 50 0.30 ± 0.08a 0.07 ± 0.04 0.73 ± 0.06ab 0.42 ± 0.07 0.98 ± 0.15a 0.76 ± 0.25 0.0560 100 0.28 ± 0.05a 0.06 ±0.02 0.62 ± 0.08b 0.30 ± 0.08 0.98 ±0.08a 0.76 ± 0.13 0.0492 150 0.28 ± 0.05a 0.06 ± 0.02 0.60 ± 0.08b 0.28 ± 0.08 0.93 ± 0.02a 0.68± 0.03 0.0456 200 0.23 ± 0.06a 0.04 ± 0.02 0.53 ± 0.10b 0.23 ± 0.08 0.93 ± 0.06a 0.68 ± 0.09 0.0406 250 0.20 ± 0.04a 0.03 ± 0.01 0.45 ± 0.04bc 0.16 ± 0.03 0.82 ± 0.06a 0.52 ± 0.08 0.0304 300 0.20 ± 0.04a 0.03 ± 0.01 0.33 ± 0.04c 0.09 ± 0.03 0.75 ± 0.04b 0.44 ± 0.05 0.0240 表3. 不同含量艾叶精油对扩展青霉孢子生长的影响 注：不同小写字母表示0.05水平差异显著。 Table 4 Effect of different content of Perilla essential oil on the growth of Penicillium sp 天数 μL 3天 7天 9天 平均生长面积cm 2 /天 平均直径/cm 面积/cm 2 平均直径/cm 面积/cm 2 平均直径/cm 面积/cm 2 0 0.33 ± 0.06a 0.09 ± 0.03 0.85 ± 0.04a 0.57 ± 0.09 1.08 ± 0.08a 0.92 ± 0.15 0.0708 50 0.28 ± 0.08a 0.06 ± 0.04 0.52 ± 0.08b 0.21 ± 0.07 0.98 ± 0.08a 0.76 ± 0.13 0.0451 100 0.27 ± 0.06ab 0.06 ± 0.03 0.48 ± 0.14bc 0.18 ± 0.11 0.77 ± 0.06b 0.46 ± 0.08 0.0320 150 0.22 ± 0.06b 0.04 ± 0.02 0.30 ± 0.04c 0.07 ± 0.02 0.57 ± 0.15c 0.25 ± 0.13 0.0168 200 0.17 ± 0.06b 0.02 ± 0.02 0.28 ± 0.14c 0.06 ± 0.06 0.52 ± 0.18c 0.21 ± 0.15 0.0131 250 0.13 ± 0.05bc 0.01 ± 0.01 0.20 ± 0.07d 0.03 ± 0.02 0.32 ± 0.13d 0.08 ± 0.07 0.0060 300 0.07 ± 0.05c 0.0035 ± 0.00 0.13 ± 0.06d 0.01 ± 0.01 0.23 ± 0.06d 0.04 ± 0.02 0.0026 表4. 不同含量紫苏精油对扩展青霉孢子生长的影响 Table 5 Effect of different contents of lemon essential oil on the growth of Penicillium sp 天数 μL 3天 7天 9天 平均生长 面积cm 2 /天 平均直径/cm 面积/cm 2 平均直径/cm 面积/cm 2 平均直径/cm 面积/cm 2 0 0.33 ± 0.06a 0.09 ± 0.03 0.85 ± 0.04a 0.57 ± 0.09 1.083 ± 0.08a 0.92 ± 0.15 0.0708 50 0.13 ± 0.05 b 0.01 ± 0.01 0.183 ± 0.08b 0.03 ± 0.03 0.217 ± 0.06b 0.04 ± 0.02 0.0181 100 0.01 ± 0.04b 0.01 ± 0.01 0.15 ± 0.04b 0.02 ± 0.01 0.183 ± 0.02b 0.03 ± 0.01 0.0027 150 0.07 ± 0.02b 0.0035 ± 0.00 0.10 ± 0.00b 0.01 ± 0.00 0.15 ± 0.04b 0.02 ± 0.01 0.0012 200 0.07 ± 0.02b 0.0004 ± 0.00 0.08 ± 0.02b 0.01 ± 0.00 0.10 ± 0.04b 0.01 ± 0.01 0.0009 250 0.02 ± 0.02b 0.0002 ± 0.00 0.05 ± 0.00b 0.002 ± 0.00 0.07 ± 0.02bc 0.0035 ± 0.00 0.0002 300 0.00 ± 0.00b 0.00 ± 0.00 0.02 ± 0.02b 0.0002 ± 0.00 0.02 ± 0.02c 0.0002 ± 0.00 0 表5. 不同含量柠檬精油对扩展青霉孢子生长的影响 注：不同小写字母表示0.05水平差异显著。 由表3~5中数据可知，扩展青霉孢子随着精油浓度的增大，生长速率逐渐下降，其中柠檬精油与紫苏精油、艾叶精油相比，在同样的体积含量下扩展青霉孢子生长速率最慢，其次是紫苏精油，最后是艾叶精油，而且三种精油在最小体积用量时，孢子的生长速率都比对照组不加精油的培养基培养的孢子的生长速率低，说明这三种精油对扩展青霉孢子的生长均有抑制的效果，三种精油中，低浓度的柠檬精油就可以对扩展青霉孢子的生长产生很强的抑菌作用，说明柠檬精油相对其它两种精油对扩展青霉孢子的生长抑菌效果最好。 3.4. 液体培养法测定三种精油最低抑菌浓度 根据2.2.5的方法，通过分光光度计OD值的测定，对试验组与对照组进行比浊后确定了艾叶精油、柠檬精油、紫苏精油的最低抑菌浓度(MIC)，结果见表6。 Table 6 Determination of minimum inhibitory concentration (MIC) of three essential oils against Penicillium expansu μL 种类 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 艾叶精油 +++ +++ +++ ++ + + - - - - 紫苏精油 +++ ++ ++ + - - - - - - 柠檬精油 + + - - - - - - - - 表6. 三种精油对扩展青霉最低抑菌浓度(MIC)的测定 注：“+”表示对照组的OD值是试验组的75%；“++”表示对照组的OD值是试验组的50%；“+++”表示对照组的OD值是试验组的25%；“-”表示对照组的OD值与试验组的相近。 由表6可知，在每15 mL PDB培养基中含艾叶精油的体积为5 μL、10 μL、15 μL时，扩展青霉大量生长，精油体积含量为20 μL、25 μL、30 μL时，有少量的扩展青霉生长，精油体积含量为30 μL、35 μL、40 μL、45 μL、50 μL时基本没有扩展青霉生长，所以艾叶精油对扩展青霉的最低抑菌浓度(MIC)为2.33 μL/mL；在每15 mL PDB培养基中含紫苏精油的体积为5 μL时扩展青霉大量生长，精油体积含量为10 μL、15 μL、20 μL时有少量的扩展青霉生长，精油体积含量为25 μL、30 μL、35 μL、40 μL、45 μL、50 μL时，基本没有扩展青霉的生长，所以紫苏精油对扩展青霉的最低抑菌浓度(MIC)为1.67 μL/mL；在每15 mL PDB培养基中含艾柠檬精油的体积为5 μL、10 μL时，有少量的扩展青霉生长，在体积含量为15 μL、20 μL、25 μL、30 μL、35 μL、40 μL、45 μL、50 μL时基本没有扩展青霉生长，所以柠檬精油对扩展青霉的最低抑菌浓度(MIC)为1 μL/mL。由此可知，三种不同的精油随着体积分数的逐渐增加，对扩展青霉的抑制效果也逐渐增强，且柠檬精油在低浓度(15 μL/mL)时即对扩展青霉的抑制效果就显现出来了，紫苏精油稍逊，最后是艾叶精油。