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user: 3. 结果 3.1. 组织病理学检查结果 切除肿物送组织病理学检查结果示，表皮角化过度，真皮浅层慢性炎性细胞浸润，HE染色镜下见肿物表面过度角化，边缘表皮增生向中央包绕，底部呈假上皮瘤样增生，形成不规则的上皮团块及角化物，肿物与周围界限清楚，周围间质内可见大量淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及组织细胞浸润(图2)。患者术后半年电话随访肿物未复发。 3.2. 基因测序结果 经基因序列分析发现，在XP基因外显子内，该患者cDNA碱基出现改变(图3~7)。检测到的突变分别位于cDNA的： XPB基因第14外显子的第260位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由A变为G，导致编码的氨基酸由赖氨酸(Lys， K)变成精氨酸(Arg， R) (图3)；第14外显子的第312位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由A变为G，突变前后编码的氨基酸不变，该突变为无义突变(图4)； XPC基因第8外显子的第39位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由T变为C，突变前后编码的氨基酸不变，该突变为无义突变(图5)；第9外显子的第506位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由T变为C，导致编码的氨基酸由亮氨酸(Leu， L)变成丝氨酸(Ser， S) (图6)；第16外显子的第211位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由A变为C，导致编码的氨基酸由丝氨酸(Ser， S)变成精氨酸(Arg， R) (图7)； XPD基因第6外显子的第108位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由C变为A，突变前后编码的氨基酸不变，该突变为无义突变(图8)； XPF基因第11外显子的第488位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由C变为T，导致编码的氨基酸由脯氨酸(Pro， P)变成亮氨酸(Leu， L) (图9)； XPG基因第2外显子的第50位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由C变为T，导致编码的氨基酸由苏氨酸(Thr， T)变成甲硫氨酸(Me) (图10)；第4外显子的第48位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由C变为T，突变前后编码的氨基酸不变，该突变为无义突变(图11)；第8外显子的第108位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由C变为G，导致编码的氨基酸由亮氨酸(Leu， L)变成缬氨酸(Val) (图12)；第15外显子的第346位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由C变为G，导致编码的氨基酸由苏氨酸(Thr， T)变成甲硫氨酸(Met) (图13)； XPI基因第3外显子的第33位碱基，患者该位点存在一个杂合的点突变，碱基由C变为T，突变前后编码的氨基酸不变，该突变为无义突变(图14)。 MutationTaster在线生物学信息软件对以上7个错义突变分析，得出“phylop”和“phastcons”值(phylop为正数即保守，数字越大越保守，负数即不保守。phastcons是一个0~1的值，越接近1越保守，越接近0越不保守。) XPB基因第14外显子，c. 260A > G (p. Lys 87 Arg)，“phylop”和“phastcons”值分别为“−0.609”和“0”。该位点序列不保守，变异对蛋白影响不大。 XPC基因第9外显子，c. 506T > C (p. Leu169Ser)，“phylop”和“phastcons”值分别为“0.207”和“0.995”。该位点序列保守，变异为有害突变。 XPC基因第16外显子，c. 211A > C (p. Ser 71 Arg)，phylop”和“phastcons”值分别为“0.897”和“1”。该位点序列保守，变异为有害突变。 XPF基因第11外显子，c. 488C > T (p. Pro 163Leu)，phylop”和“phastcons”值分别为“−4.574”和“0”。该位点序列不保守，变异对蛋白影响不大。 XPG基因第2外显子，c. 50C > T (p. Thr17Met)，phylop”和“phastcons”值分别为“−0.189”和“0.978”。该位点序列不保守，变异对蛋白影响不大。 XPG基因第8外显子，c. 706C > G (p. Leu 236Val)，phylop”和“phastcons”值分别为“0.122”和“0.058”。该位点序列低度保守，变异为轻度有害突变。 XPG基因第15外显子，c. 346C > G (p. Thr117Met)，phylop”和“phastcons”值分别为“0.178”和“0.053”。该位点序列低度保守，变异为轻度有害突变。 Table 1 Primer sequence of XPA gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 AGCCGAGGTGCAGCGAAGAA TGTTGGGCTCTATGACTGGCACT 2 AGAAAGAAGTAAAACAGCATC TCTGTGGCTTTAGTTACCCA 3 CCTTGTACATGGCTGGGATTCAGA AAGGCCCCACTCCTCTGACC 4 ACCATGAGAGTTGCAGGAAAAAGT TGTGAAGCATATGCAAAACTAGGGA 5 CCTGCAGATCAGAAGTCAAGTCG TGGTAAAACACAATCCTTCACGA 6 TTGCATACCACCAACCCACA TGACTTAGCCTTTCTCCAAGC 表1. XPA基因扩增的引物序列 Table 2 Primer sequence of XPB(ERCC3) gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 TAGAGAAATGAACAGTGGAGGACC CACCGCTTGGCAGCATTT 2 GGGATGCAGGTGGCTCTTAG TGTTGCCTTGGGCTGTTCC 3 CTGTGGTGTTGGGCAGCTTAT TGGCTACAATGGGCCTGAAT 4 AGGCACATCTGACCACTTTAGGA CCTTCGCCAAATCTGTACCAT 5 TGAGGCTTGTATTTCCAGACCAT AATGGGTGAAGTTGTAAAGGGTAG 6 CCTGCTGGTTCTACCCTTTACA AAAGCAATTCAGGGACCAACA 7 GTGTTGTTAGTCTGGGTTGCTTT TTGTTCTAGCCACCATAATACCC 8 TGTCGCTCAGATGTCAGCTATGT GAGGTGGAAGTTGTGGTGAGC 9 GAGGCCAGGAGTTCAAGACC GGTAGCAGGTGAGCCTAAGTCC 10 CAAGGGTTAGTTCAGGTGGTGTC CTAATCCTCACCCACAGAAATCC 11 TGCCTCAGCCTCCCAAACT CCTCTGACTCCAACCACCTACTT 12 CTACATGACGAGGGCTTTCTACT AGTCTGCTCCTTCCACTAACCC 13 ATAGACCCTGGTATAAAGAGGAGAA GAAATAATGATGGGCCATAAGGAT 14 AGTTCAGGTGGTAACCCCGAG CTAATGCTTGGTGCCTGCCT 15 TAAAGGCGGCTCCTGATGC CATCCTGGGCTTCAACATCAA 16 AACAATGCCTGAGACAGTAAGC CTCCATCTTACTCATCTGTGCTTG 表2. XPB(ERCC3)基因扩增的引物序列 Table 3 Primer sequence of XPC gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 AAACCTGTTGTGCTCTTTCCTG CTTCCTGGGACACAAATAACTGC 2 GGGTTTGGAGACAGGTCATAGAG CGTGCTTGAGGACAGTAGTATGA 3 ATGTTGATGGAGGAAGTGAGGC AAGCCTGTGCTCCTTCTCCTAA 4 GATTCAACCCAGTATCTCTATGCTT GGTAAGATAACGGATGACCTGCT 5 GAAGTGAGCTTTGAGGCATGTAG GCAAGTGCTCTTTATTTAGCCTCT 6 CCTTTGAAGGAATGAGTATACAGAG ATTACCTGGTATGTATTTGTCTCCC 7 GTGATGATAGGAGTTAGCTAGACGG GTACACCACAACTAGAGGCGATA 8 GGATGCTTTTTCAAATATACGTGTA TACAGAACAGAACAAAAGCAGCACT 9 TAGCCAATACATACATACAACCCTG TACCTCCAAGTCTTCTTTCTTCTCC 10 TATAGACCAGTGGCTAGAGGTGTTC ATGGGTTATTCCTTCTTTCACTCAG 11 TGCCACAAGCCACAGATTTATT TATTCCTTCCTTTTGTATGTTTTTG 12 GCAGAGGAGAAGAAAACCTATGAAG AATGCTCAGTGAACTGCCAAAC 13 CTGAGGCAGGAGAATTGCTTAAA GGTACACATTCCCAAACTCGTTC 14 GAGGAACTGGATGCCTTTGTTGTAA AGCCTCACCCATCATGGAACAG 15 AGTGAGCAAAAAACAGTCAGCATC CTGAAAGCCACAAAAACAGATAAC 16 TTCTGGAAGACCTCACCCACTAA TAAAAACAAGCGGCCTTAGAGAC 17 TGTCCTCCCAGAGTTACACAGCTT GCAAAGTGTTCTGTAGCTCAAAGG 表3. XPC基因扩增的引物序列 Table 4 Primer sequence of XPD(ERCC2) gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 GCTCTGCCCTAGCGGATTG CTCGCTATCACTGCTGCTCC 2 TCCTGAGGACCTGAGGGTTACC CCAGCCTATTCACCATTATTGTTT 3-4 TTCAAACCCACTGCCCAATC TCGCCCTCCTGCTTCTCATA 5 TGGAGGTGACCAAACTCATCTACT GGGCCACGATGAATGAGAAT 6-7 CTTGTATCCCTGCATTAAGTTCC CAGACTCACAGCAAGCAACAGAC 8-9 GGTGCCCGTATCTGTTGGTCT GGCAACCCTGGGGACAAG 10-11 CAACGTCTGCATCGACTCCAT CTCGCCCAGCTCACTCACT 12 CGGCAATGGCTATTTGTGAC TTACTCAAGAACTATGTATGGCTCC 13-14-15 GTCATGTTTGGTCGCATTTACTC ATCCCGAACCCAGCCTCTT 16 AGGCGGGATGGTCACTTGA GAAACTCTGGGCTGAGCAACT 17 TGCTGGGATTACAGGCGTG CAAGGAACCTAGAACGTGGG 18 CCCTTCTGCACTCATTTCATTG CTGCTTACACCCCATTCCTACAT 19 CCACCCTCCCTCACCACATC CCCAGGATGCTGTGTCTGAGTT 20-21 GACTTTGGTGAGTGGACTGGG ACAGAAGGTCATTCGGGGAG 22 CCAGGCTGTTTCCCGTTCA GGCACGTAGATGCACGATAAACT 23 TACGGACATCTCCAAATTCATTCA CTGTGCCTGTCTCCAGTTTCC 表4. XPD(ERCC2)基因扩增的引物序列 Table 5 Primer sequence of XPE(DDB1) gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 GAGTGAGCGACAGAGCCAGAC GTGCAGCTAACAAGCGTGACTA 2 GGAACCCTGCACGACTGTAT TCCAAGTCCTCCCACCAAA 3 TTGGTTCACCAGCTTGTCAGA CAGGCTGGAGTGTAATGGTGC 3’ AATGTCTTATGTTGTAAAGGTCCCA TTTTAGTAGAGACGGGGTTTCAC 4 AATTAGCTGGGCATGGTGG TAGTGAGGGTCAAGGTCCAGTC 4’ AAAGAAGTGAAGGCCCTGTAGAG TGAGGGTCAAGGTCCAGTCTAAT 5-6 ATCCACGGCAAGACAGTTATTC TAGACAGGAGCGGAAAGGAAG 7 CCCTGCCTGTCTGACCACTG GCTGAGAAGACAGAACAGAGGGT 8 GGGGTTTCACCATGTTAGCC TGAGCCAAGATCACGCCAC 9 CAAAGTGTTGAGATTACAGGTGTG CAAGACAAAGCCAGAGGAATG 10 GGCTCAATGCAAGCTCCG TCCCTCTGCTACCACCCACT 10’ TATTTTTAGTAGAGACAGGGTTTCG CTGAGAGGAGAAAAGTCATTTAGTT 表5. XPE(DDB1)基因扩增的引物序列 Table 6 Primer sequence of XPF(ERCC4) gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 CACGATCATCTCAGTCTCAGCTCT CTCCTAGCGACCCCTTACATAC 2 AAATGTAGACTGGTTGGCTGAA CAATTCACAACAAAGTAGTCAGGA 3 CTCATACATACTCCCTCTCCTCCTT CCTAAAGCTGTTGTATATGTGGGTC 4 GTAGTTTGCTGACCCTTTCCTTATC GCAAAAGTCAGAGTGATGCTTATAT 5 ATTAACTGAAATGTTCTAGCCACTT AACAACTAAACTTCCAGAACACAAC 6 GACAGATCACAGTAGTGGGAGG GCTCCTCATGTAGCATACTTTTG 7 TCACAGAAACAACTAACACAGAATG AAAACAACATCAAACGAACAGAA 8 TTTAAGTAATCTTGCCAGAGAGGAG GCAAACCAATACCCAAAGAATA 9 CGAGAAATAAGCAGTAGCCCAG CAAACCAATACCCAAAGAATAAAG 10 GAGAAGCCTCTAAAATTTGTGTGTT ATTTCTCGTGTTTTATCATACTGCT 11 AAATCAAGAAGTAGTATCCGACCAA AAGTACATTCTGAGTCTCAACCAAC 12 TTAGCAGGTATGTGTGGATTTATGA GGTCCACCGTACAATCATTAAGAG 表6. XPF(ERCC4)基因扩增的引物序列 Table 7 Primer sequence of XPG(ERCC5) gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 GCCATTCTCTGGACCTGTCTTT CGAGGGACGACTGTACTTAGAAAA 2 ACTTTAGGTAGATCCCATGAGAGCT GCCGCATCCTTGAAATAAATATA 3 TTAAGTAATAGATGGAAACTCTGGGT GCCACAACTCCAAATTACCAG 4 GACCTGGTAATTTGGAGTTGTG AGAGGAATAAGAATCATGAATCACC 5 TCCCTATTGCATCTCTAGTGACCT AGCCATCTGTCTTTACTTTTTATCA 6 TGAATGAATTAAAGAGTGAATGGCT AGTAAATGTCTATAGGCTCAAACGT 7 AAGGAAGCTGTAGTTTTTCTTGTTA CAGTTTTACAGTGTGACAATACGCT 8 ATTCTATAAACTAGCACCCCTGGAT ATTAGTGCTGGCTACGTGCTC TGACGATGACGAAGATGTAAAAGT TCTACGTCTCTCGTTCCTTATCTGT 9 AAAGACAGTGCCAGTTTACCTAATT TTTACAAAAAGCCTGCATTTAGTCT 10 TTTGTGTAGGTTACTGGCTGGG GTTCCTGCAGAGTGAGGGGTA 11 GGGTCACTGTGTGTCCCTAACTC TCCTATTCCTCTATATAAGCCAAAG 12 TGGTTCAGAGAGACTCAGGCTAG ACTGGCTTTGTACCCTTGAACTAG 13 TCTGTGAGGTGAGGGTAACGATA AACAACAACTGAGGAGAGGGAAG 14 TTATGCTGGAGTCATTTATTTTGT ATGTCTGCTCTATGCCCCAAA 15 TCATTTGAGATGTGGACTAAAGACT GACAAAGCCTGTGAATACAAGATAA AGAGAACTGGGTTTTGGGAGATA AGCTGTTCTCCTTTGTACATTCA 表7. XPG(ERCC5)基因扩增的引物序列 Table 8 Primer sequence of XPH(POLH) gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 TTTTGAGATTTCTGAACTGCTTTGT ATGGAGAACATGGGAATTGGTA 2 GCTTCTATTATTGACCATCTGCCT CCTTCCATGTGAGTCCTTGTGA 3 TGAGCTCTCTTATAATTGGTCTTCT CTCCTGAGTAGCTGGGACTGTAG 4 ATGTGGGAAGAACAGTGAGGATAA CAGCGTGTGTTTCAAAATGTTC 5 ATGCTCTCATTTGTCCTGAACCT ATAGTGACCCAAGATATTGAAGCA 6 AAAACCAGTGTTCTCATTGTCCA CCAAACTTGAAGCATAATATCCTAG 7 TCCTTTGATTATGGGGAGTCTTT GAGCCTAAGAGGTAGAGGTTGC 8 CTACTGTTTCCAAACCATTGTCAC TTACCTCATTGAAGGACTAATCTGT 9 GGTTCTCAAGACATAACATCAGCAT CTGTTGGTAAAGAGTTTGGTAATGC 10 CTCATTACCTTTTCAAACCAGTCA TACTTTATGACACTGCCTCCCTA 表8. XPH(POLH)基因扩增的引物序列 Table 9 Primer sequence of XPI(ERCC1) gene amplificatio 外显子 上游引物(5'-3') 下游引物(5'-3') 1 GACGCTATGGAGCTCTCGG CTCTGCCTTAGCCCTCTCTTA 2 CAACCAGTCCCCTGCAAAC GAGCTACACCAATACAGCCACA 3 TAGGAGGAGAGAGAAGCTGGAAA TCTCATAGAACAGTCCAGAACACTG 4 CTGAGCCCTTAGTATTCCAGTGA AAAGAAGAGATATTTAGGTGGCAGA 5 GATCTTGGCTCACTGCAACG GAAGGAGAAGGGAAGGGCT 6 TAGTAGAAACGAGGTTTCACCATG GAGGGTAGCAGCAGATTTGTG 7 GCCTCGAAAGTGCTGGGAT GAGACTGAAAGGTGAAAGCGAG 8 GTCACCCATTTCCTTCCATCTC CACCTCAGTCTCCCCAGTAGC 9 ATAAATGCTTGAGGGTATAGGGG GGGAAACTGAGGAACTAAAGAAAG 表9. XPI(ERCC1)基因扩增的引物序列 图1. 患者面部、肿物以及眼前节照片 图2. 肿物组织及病理切片 图3. XPB基因外显子14测序结果 图4. XPB基因外显子14测序结果 图5. XPC基因外显子8测序结果 图6. XPC基因外显子9测序结果 图7. XPC基因外显子16测序结果 图8. XPD基因外显子6测序结果 图9. XPF基因外显子11测序结果 图10. XPG基因外显子2测序结果 图11. XPG基因外显子4测序结果 图12. XPG基因外显子8测序结果 图13. XPG基因外显子15测序结果 图14. XPI基因外显子3测序结果