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user: 3. 结果与讨论 3.1. 不同硒水平对旧院黑鸡血清中抗氧化酶活性的影响 GSH-Px是血清中重要的抗氧化酶之一，对机体内强氧化性过氧化物对器官组织的损坏起到一定的保护作用，其活性的大小和含量与机体内有机硒含量有直接关系，机体内有机硒含量越高，GSH-Px活性越大。由表2可知，与基础日粮组相比，添加亚硒酸钠组和添加蛋氨酸硒组均能不同程度的提高旧院黑鸡血清中GSH-Px的活性，圈地散养组旧院黑鸡血清中GSH-Px的活性提高也较明显。其中添加蛋氨酸硒组GSH-Px的活性极显著高于基础日粮组，圈地散养组GSH-Px的活性显著高于基础日粮组；添加亚硒酸钠组GSH-Px的活性虽有所提高，但与基础日粮组相比不显著。 SOD是机体内一种抗氧化金属酶，主要与机体内超氧阴离子作用，从而避免器官组织免受伤害。赵先英 [ 11 ] 等人研究表明，机体内硒的含量对血清中SOD活性有一定的关系，硒含量越高，SOD活性相应的有一定的提高。由表2可知，与基础日粮组相比，其余三组旧院黑鸡血清中SOD活性有一定的提高，说明不同伴随着硒的添加，SOD活性有一定提升，但提升度不高，仅有添加蛋氨酸硒组才表现出一定的显著性，这与大多数研究者 [ 12 ] 观点一致，只有食物中硒的添加量足够多时，才能显著的影响机体内SOD活性，否则SOD活性与机体内硒含量无显著相关性。 T-AOC是由酶促和非酶促组成的机体抗氧化防御系统，对机体的功能性蛋白和细胞膜起到一定的保护作用，避免被氧化性物质损害。由表2可知，与基础日粮组相比，添加亚硒酸钠组和添加蛋氨酸硒组均能显著的提高旧院黑鸡血清中T-AOC的抗氧化能力，圈地散养组旧院黑鸡血清中T-AOC的抗氧化能力提高也较明显。其中添加蛋氨酸硒组和圈地散养组T-AOC的抗氧化能力极显著高于基础日粮组，添加亚硒酸钠组T-AOC的抗氧化能力显著高于基础日粮组，这与高爱琴 [ 13 ] 等人研究结论相一致，即日粮中硒含量的多少与T-AOC的抗氧化能力呈正相关，但本研究发现日粮中添加无机硒和有机硒的差异性，导致T-AOC的抗氧化能力也有所差异。 MDA是机体内氧自由基形成的一类过氧化物，其含量过多，会对机体细胞甚至遗传物质造成较大的损伤。由表2可知，与基础日粮组相比，其余三组中MDA均有不同程度的降低。其中圈地散养组MDA含量水平显示出极显著降低，添加蛋氨酸硒组MDA含量水平显示出显著降低，添加亚硒酸钠组MDA含量水平有所降低，但降低水平不显著。 Table 2 Determination of antioxidant enzyme activity in serum of Jiuyuan black chicke 指标 试验I组 试验II组 试验III组 试验IV组 GSH-Px (U/ml) 792.69 ± 67.30 1051.18 ± 97.52 1324.25 ± 115.57 ab 1287.36 ± 97.93 a SOD (U/ml) 301.27 ± 23.51 334.71 ± 27.63 366.77 ± 30.54 a 354.48 ± 33.85 T-AOC (U/ml) 5.32 ± 2.15 9.54 ± 2.52 a 19.87 ± 5.33 ab 20.11 ± 4.12 ab MDA (nmol/ml) 5.80 ± 1.11 5.03 ± 1.52 3.56 ± 2.04 a 3.06 ± 1.75 ab 表2. 旧院黑鸡血清中抗氧化酶活性测定 注：a表示差异显著(P < 0.05)，b表示差异极显著(P < 0.01)。 3.2. 不同硒水平对旧院黑鸡中黑色素含量的影响 研究报道，鸡组织中的黑色素具有抗氧化、调节内分泌和提高机体免疫力等作用，组织中黑色素含量越高其滋补功效越好，Christodoulopoulos [ 14 ] 等人研究表明，机体内黑色素的合成与硒含量有紧密关系。由表3可知，与基础日粮组相比，添加亚硒酸钠组的鸡胸肉和皮中黑色素含量均有增加，其中鸡胸皮中黑色素的含量差异性达到了显著水平；添加蛋氨酸硒组和圈地散养组的鸡胸肉和皮中黑色素含量增加较为明显，黑色素的含量差异性均达到了极显著水平。鸡胸肉和鸡胸皮中黑色素含量增加幅度相比，鸡胸皮中黑色素含量增加较为明显且含量相对比鸡胸肉中含量高。 Table 3 Determination of melanin content in Jiuyuan black chicke 指标 试验I组 试验II组 试验III组 试验IV组 鸡胸肉 0.063 ± 0.026 0.0913 ± 0.041 0.1619 ± 0.057 ab 0.1651 ± 0.055 ab 鸡胸皮 0.102 ± 0.052 0.189 ± 0.035 a 0.276 ± 0.043 ab 0.281 ± 0.038 ab 表3. 旧院黑鸡中黑色素含量测定 注：a表示差异显著(P < 0.05)，b表示差异极显著(P < 0.01)。 3.3. 旧院黑鸡不同组织中硒含量测定结果 由表4可知，与基础日粮组相比，添加亚硒酸钠组、添加蛋氨酸硒组和圈地散养组中鸡血清、鸡胸肉和鸡胸皮中硒含量水平均有很大的提升。同等试验条件下，鸡胸皮中硒含量高于鸡血清中硒含量水平，和鸡胸肉中硒含量相差不大。与基础日粮组相比，添加蛋氨酸硒组和圈地散养组中鸡血清、鸡胸肉和鸡胸皮中硒含量水平均达到极显著水平，说明硒含量增加幅度较高。 Table 4 Determination of selenium content in different tissues of Jiuyuan black chicke 指标 试验I组 试验II组 试验III组 试验IV组 血清(μg/L) 71.55 ± 4.84 115.32 ± 4.41 185.63 ± 6.36 ab 169.56 ± 5.78 ab 鸡胸肉(μg/L) 97.56 ± 4.23 133.22 ± 3.95 198.33 ± 5.73 ab 207.52 ± 6.75 ab 鸡胸皮(μg/L) 112.85 ± 4.52 154.62 ± 4.57 210.61 ± 6.75 a 218.56 ± 6.55 ab 表4. 旧院黑鸡不同组织中硒含量测定 注：a表示差异显著(P < 0.05)，b表示差异极显著(P < 0.01)。 3.4. 不同硒源对旧院黑鸡黑色素含量和抗氧化能力分析 研究分为的4个试验组，基础日粮组设置为对照组，饲料中只含有基本量的硒，添加亚硒酸钠组是在基础日粮组上添加最优量的无机硒源，添加蛋氨酸硒组是在基础日粮组上添加最优量的有机硒源，而圈地散养组饮食为自然界的青菜、各种虫子、本地谷物类等。设计4组试验组主要考察硒含量水平、硒的形态和圈地散养状态下鸡体内组织中抗氧化酶活性、黑色素含量和硒含量综合分析和评价。 研究结果发现，与基础日粮组相比，其余3组在血清、鸡胸肉和鸡胸皮中硒含量均有增加，但添加亚硒酸钠组中增加量不如其余2组，有可能补充的无机硒在鸡体内不能有效的转化成有机硒，甚至无机硒补充量过多对机体内产生一定的毒副作用；添加蛋氨酸硒组中硒含量增加较为明显，且各平行试验含量均相对稳定，说明有机硒的添加能有效提高机体内硒含量水平，从血清中抗氧化酶活性和组织中黑色素含量也能说明这一结果；圈地散养组中硒含量增加相对明显，但各平行试验含量有一定的差异性，这组试验对象食物来自富含有机硒的青菜、各种虫子、本地谷物类等杂粮及富含无机硒的砂砾等，从血清中抗氧化酶活性和组织中黑色素含量说明此试验组硒含量较高，但相比添加蛋氨酸硒组，活性和含量波动大，可能与进食硒不同含量的食物有一定的关系，也间接说明旧院地区硒含量高，通过散养等方式养殖的旧院黑鸡，有机硒和黑色素含量较高，有较大的补硒和滋补养生价值。