DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 4. 讨论 进水方式可以影响东风螺养殖池内沙层下方水体的更换。反渗进水可快速扰动沙层下的水，使沙层下不同区域的水基本同步完成更换，且用时最短；而单侧进水和雨帘进水对沙层下方水体的更换所需时间基本相同，均显著长于反渗进水时间。此外，单侧进水和雨帘进水沙层下不同区域水体变为澄清的时间不同，但不同区域水体变澄清的顺序相同，其所用时间与距离排水口远近，以及距离进水口和排水口连线远近相关，离排水口越近且靠近进排水口的连线上的区域，其水体更换速度越快，该区域透过的水量越大，其中I区颜色最先变化，但因其他区域的水补充而导致其观察到的时间长于II区和III区，由上可见，上进下排类型的不同沙层位置透过的水量不同。 在东风螺养殖生产中采用雨帘进水，可观察到雨帘各个进水位置的沙层干净未发黑。本研究发现，单侧进水和雨帘进水对沙层下不同区域水体更换速度基本相同，也就意味两种进水方式并未改变沙层下不同区域水体更换速度。水产养殖生产中，给水体增氧原理是增大水体与空气接触面积，从而加速空气中的氧气向水中溶解，提高水体的溶解氧，而增氧效果与水和空气接触程度成正比 [ 15 ] [ 16 ]。雨帘进水方式将进入养殖池的水分散开，增大了与空气的接触面积，提高了水体的溶解氧 [ 17 ]，同时增加了对水体的扰动，从而促进沙层中有机物的分解和矿化，这可能是维持东风螺的栖息沙层清洁而不变黑的原因。 排水方式也会影响东风螺养殖池内水体的更换速度。对于沙层下方水体的更换速度，在上进下排类型中，从快到慢依次为中间单孔排水、四孔排水和单角单孔排水，并呈显著性差异(P < 0.05)。其中，中间单孔排水模型和四孔排水模型沙层下方水体颜色变淡均是先四边后中间，四孔排水模型的四角快于中间单孔排水模型，但其中间区域水体更换速度则比中间单孔排水模型慢。在所有排水方式中，反渗进水侧壁排水方式对沙层下方水体的更换速度显著快于其他方式(P < 0.05)，这可能是由于反渗进水对沙层下方水体扰动较大，促进了沙层下方水体的更换速度。当对比不同排水模型对整个水体更换效果时，反渗进水的侧壁排水模型则显著低于单角单孔排水模型和中间单孔排水模型(P < 0.05)，其中，中间单孔排水模型对整个水体的更换速度最快(P < 0.05)。 海南东风螺养殖池大小以2.5 m × 6 m规格为主，其长：宽为2.4，远大于本实验模型的1.3。根据本研究结果，可以推测目前海南东风螺养殖池沙层下不同区域水体的更换速度更不均匀，也就意味着池内不同区域沙层滤过的水量存在显著差异，从而导致沙层中有机物累积，恶化养殖环境，对东风螺产生胁迫刺激。目前，鱼类工厂化循环水养殖以及高密度精养池塘，均采用四角呈弧线的正方形的中间排污模式，这种模式可以更好的将底层积累的有害物质排出，保持较好的水质，可有效防止养殖动物疾病发生 [ 18 ] [ 19 ]。综上所述，东风螺养殖池采用中间单孔排水的方式，可以更有效的利用流水将沙层中累积的排泄物、残饵等有机物及产生的氨氮和硫化氢等冲洗掉，保持东风螺栖息沙层洁净。此外，相同的养殖面积，正方向的水泥池比长方形更节省池壁等的建筑材料。
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user: 摘要 “十四五”时期是加快我国经济社会发展绿色转型的关键战略机遇期，也是实现碳达峰碳中和目标的重要起步阶段。加快推动绿色发展，构建人与自然和谐共生的现代化国家，必须立足新发展阶段的新形势新要求，全面贯彻新发展理念，融入新发展格局，不断推动生态文明建设迈上新台阶，充分发挥生态文明建设在构建新发展格局中的关键作用。
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user: 1. 引言 “十四五”时期开启了全面建设社会主义现代化国家新征程，我国经济社会发展形势面临深刻变化，全面建成小康社会成果需要不断巩固，现代化强国建设即将进入新的攻坚期，但国内发展的深层次矛盾日益尖锐，国际政治经济环境日益严峻，碳达峰碳中和目标压力巨大，这些无疑给发展之路带来了新挑战。只有立足新发展阶段、落实新发展理念、形成新发展格局才能顺利实现动能转换，为高质量发展赋能增效。2020年8月24日，习近平总书记在经济社会专家领域座谈会上发表重要讲话，指出“要推动形成以国内大循环为主体、国内国际双循环相互促进的新发展格局。这个新发展格局是根据我国发展阶段、环境、条件变化提出来的，是重塑我国国际合作和竞争新优势的战略抉择。” [ 1 ] 此后，新发展格局成为“十四五”时期我国经济社会发展的新逻辑主线之一。新发展阶段强调的是高质量发展 [ 2 ]，也是“五位一体”的全面发展。因此，构建新发展格局也必须形成经济建设、政治建设、文化建设、社会建设和生态文明建设全方位支撑的新格局。特别是在人类社会发展进入生态文明时代的背景下，用习近平生态文明思想指导新发展，探索出一条实现人与自然和谐共生、推动人类社会可持续发展的内涵式道路，对于提升我国自身发展能力、重塑国际合作和竞争优势都具有重要意义。加快生态文明建设、构建生态文明建设新格局，是形成新发展格局、推动我国实现高质量发展的必然要求。
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user: 2. 新发展格局的内涵与特征 构建新发展格局是以习近平总书记为核心的党中央立足中华民族伟大复兴战略全局和世界百年未有之大变局这“两个大局”，提出的全面塑造发展新动能、提升发展新优势的全局性战略安排，也是应对风险挑战、推动高质量发展的重要战略布局。这个新格局是能够解决当前和未来发展中的矛盾问题的新格局，是能够为全面建设社会主义现代化国家、实现中华民族伟大复兴奠定坚实基础的新格局。 结合当前发展中面临的风险挑战和一些深层次矛盾，我们认为新发展格局应该包含以下几个层面的含义：一是从发展方式上看，进入新发展阶段，改革初期制度、劳动、资源红利相继进入边际效益递减阶段，难以提供高质量发展所需的强大动力，因此迫切需要实现增长动力的转换，形成以绿色低碳为导向、以创新为驱动、以广阔的国内大市场为依托、以顺畅的国内国际双循环为基础的全新动力格局。二是从发展空间结构看，东中西部差距、南北差距并存成为当前中国区域不平衡发展的新特征，也是制约共同富裕和全面建设社会主义现代化国家的重要因素，迫切需要建立优势互补、合作共赢、全面发展的区域空间发展新格局。三是从发展的基础看，尽管中国拥有世界最全的工业体系，但个别产业链、产业环节薄弱，缺乏良好的现代产业生态，必须按照“产业基础高级化，产业链供应链自主可控”的要求，加快产业升级和产业链串并联，形成产业发展新格局，推动构建现代产业体系。四是从发展总体水平看，中国已经成为世界第二大经济体，但发展水平与全面建设社会主义现代化国家的目标还有差距，需要在持续推进供给侧结构性改革的同时，加快需求侧结构性改革，推动供需在更高水平上实现新的均衡。五是从发展成果共享看，人民美好生活需要与不平衡不充分的发展之间的矛盾依旧突出，迫切需要改进和完善收入分配格局，让人民群众更好地共享改革发展成果。六是从发展的开放性看，中国的发展离不开全球大市场，同时，金融危机和新冠疫情冲击下全球经济复苏也需要一个发展动力更强的中国，推动形成内外互促的双循环格局是符合中国内部发展需求和履行国际责任的重要战略部署。
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user: 摘要 目前大部分对植物氮营养和光合作用之间影响的研究表明，氮添加会引起叶片氮含量增加，使植物的净光合速率升高，过量的氮素水平则会降低光合速率。但是对叶片酶和氮添加的作用机制的研究不足。因此，本综述旨在总结氮添加对叶片酶的影响，叶片酶对光合作用影响的生理机制，以便为以后研究氮–叶片酶–光合作用相互作用的生理机制提供思路，引发思考。
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user: 1. 引言 随着人类社会的进步与工业的迅猛发展，能原材料燃烧及化学氮肥施用等导致了大气中含氮化合物增多 [ 1 ]，例如，氨气、二氧化氮、硝酸、铵态氮、硝态氮、HONO等 [ 2 ] [ 3 ]。中国是世界上最大的发展中国家，氮沉降量增加迅速，目前中国已经是世界上氮沉积量最高的三个地区之一。在过去的30年里，这一数字增长了大约60% [ 4 ]。虽然氮沉降可以让植物获得更多的氮营养，但其带来的负面影响不容小觑。长期的氮沉降可导致土壤酸化，植物多样性破坏，富营养化与氮饱和，光合作用减弱等 [ 5 ] [ 6 ]。植物在碳同化的同时，会把太阳能转换成化学能，将化学能储存在其产物中，这样的化学能除了供给植物自身营养和全部异养生物之外，更重要的是可作为人类的重要能量来源。光合作用可吸收CO 2 释放O 2 ，因此还可以稳定大气中的CO 2 和O 2 含量 [ 7 ]。 在光合同化碳素的途径中，最基本的同化途径便是C 3 途径，又称作卡尔文循环 [ 7 ]。C 3 途径是一系列酶促反应，参与反应的酶有许多，其中核酮糖-1，5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)在许多C 3 植物的叶片中蛋白质含量最高，是卡尔文循环的关键酶之一 [ 7 ]。由此可见，完成光合作用的过程，离不开其有关酶的贡献。因而，研究氮素营养和叶片酶与光合作用之间的响应机制尤为重要。
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user: 2. 国内外研究进展 2.1. 氮素与光合作用研究进展 Claussen & Lenz [ 8 ] (1999)，提出在NH 4+ 营养条件下，植物叶片中的NH 4+ 积累引起光合磷酸化过程中的电子传递在叶绿体中断裂，从而导致光合速率的下降。NakajiT等 [ 9 ] (2001)研究表明，在一定范围内，氮沉降会增加叶绿素含量及Rubisco的浓度和活性，从而使光合速率增加。当氮沉降过量后植物体内养分的平衡会被破坏，而养分失衡会对光合作用有不好的影响。李德军等 [ 10 ] (2004)研究发现，通过模拟氮沉降，中氮处理对三种幼苗的光合作用有促进作用，而高氮处理则对光合作用不利。张蕊等 [ 11 ] (2013)，通过模拟氮沉降研究对不同种源木荷幼苗叶片生理及光合特性的影响，发现在一定范围内，氮增加会引起叶片叶绿素含量、光合酶的浓度和活性增加，从而使光合速率增加。李红梅等 [ 12 ] (2014)，将NH 4 NO 3 作为外加氮源去模拟氮沉降，试验结果发现，随氮水平的增加，墨西哥柏幼苗的净光合速率先升高后降低。 2.2. 氮素与叶片酶研究进展 John R. Evans [ 13 ] (1989)研究发现，氮含量与Rubisco和叶绿素均有较强的线性关系。随着单位叶面积氮素含量的增加，在类囊体中叶片总氮量的占比保持不变，而可溶性蛋白质的占比增加。曹翠玲等 [ 14 ] (1999)提出，氮素水平及氮形态对作物的光呼吸强度包括乙醇酸氧化酶有明显的影响；氨基酸对硝酸还原酶参与的某一阶段(可能是吸收、硝酸分布或酶的合成)有显著影响，但对酶的代谢却没有影响。曹翠玲等 [ 15 ] (2004)表明，不同形态氮素使植物光合速率会有显著不同的最根本原因可能是，不同氮素的形态会使核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶的活性与含量发生不同的改变。在过氧化物酶体中，乙醇酸经乙醇酸氧化酶(glycolate oxidase)催化会形成乙醛酸和过氧化氢 [ 17 ]，产生的H 2 O 2 被过氧化氢酶降解为H 2 O和O 2 [ 16 ]。Martin， W. F. & Cerff， R. [ 18 ] (2017)研究指出，植物细胞的叶绿体和胞质溶胶分别与Calvin循环和有3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)参与的糖酵解过程有许多平行的生化反应。Arnold J. B. & Kyle M. L [ 19 ] (2018)研究表明，植物蛋白质浓度不仅取决于叶绿体中二氧化碳和氧的相对浓度，而且取决于镁和锰的相对活性。Tobias & Jan [ 20 ] (2018)提出，随着大气中O 2 浓度的上升，Rubisco为了区分CO 2 和O 2 ，降低了催化速率。Florian A. B.等 [ 21 ] (2018)认为，碳和氮代谢在光呼吸途径中的整合会导致二氧化碳同化率的增加，从而抵消光呼吸对光合作用的不利影响，光呼吸代谢可能有一定的好处。 2.3. 科学问题 基于这些文献所论述内容可见，氮素在一定范围内对光合作用、叶绿素及酶浓度和活性有促进作用，过了一定范围后有使之降低的趋势；部分研究了光呼吸和某些酶之间的相互影响；酶的浓度可能与某些离子相对活性有关，但对于氮素、酶、光合作用之间相互的影响机理研究不足。因此，探讨氮素对酶的作用机制和酶对植物光合作用的作用机制是一个非常重要且有意义的科学问题。
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user: 3. 核酮糖-1，5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco) 3.1. Rubisco的结构 在卡尔文循环这一系列酶促反应中，核酮糖-1，5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)是最关键的酶(图1)。大多的Rubisco都有8个大亚基(L)和8个小亚基(S)。Rubisco的大亚基由N、B和C三个结构域组成。N结构域从N端开始包含了137个氨基酸残基，并含有5股β折叠。B、C结构域多为α螺旋，且C结构域是一个α/β桶状的结构，包括8个平行的α螺旋和8个β折叠以及连接这两者的8个环。一个大亚基的羧基末端的α/β桶状区域与另一个大亚基的氨基的末端区域构成了活性中心，并有Mg 2+ 参与，活性中心和酶的三个氨基酸残基发生作用。小亚基远离活性中心，可以调控Rubisco的加氧酶的活性 [ 22 ]。 图1. 植物核酮糖-1，5-二磷酸羧化/加氧酶结构图 3.2. Rubisco的类型 按照Rubisco大亚基氨基酸序列同源性及空间结构的相似性来划分的话，可以将其分为4个类型，即I、II、III、IV型。I型它存在于细菌和真核生物的叶绿体间质中。它是一个十六进制，包含八个相同的大亚基，呈L 8 S 8 的结构每个都有一个金属结合位点 [ 22 ]。II型Rubisco由2~8个大亚基组成，呈L 2n 的结构，与I型的大亚基大约有30%的同源性。多数存在于一些细菌和海产甲藻中 [ 23 ] [ 24 ]。III型也仅由大亚基组成，呈L X 结构，存在于某些嗜热古生菌中。IV型又称为Rubisco类似蛋白，存在于非光合细菌、部分不依赖卡尔文循环的光合细菌和古生菌中 [ 25 ] [ 26 ] [ 27 ]。 3.3. Rubisco的功能 Rubisco是一个双功能酶，它既能在卡尔文循环中催化RuBP的羧化反应，同时又能在光呼吸中催化RuBP的加氧反应 [ 28 ]。一般的C3植物中Rubisco的这种加氧反应几率超过20%，因为光呼吸是耗能高的反应，它花费3.5ATP和2NADPH用于Rubp氧化和再生，但不产生糖的任何净生产 [ 29 ]。它消耗了光合产物并且不产生糖，因此光呼吸被认为是无用的循环 [ 30 ] [ 31 ]。 许多研究已证实，O 2 是Rubisco羧化反应的竞争性抑制剂，而CO 2 是Rubisco加氧反应的竞争性抑制剂。光合作用(光合碳还原)和光呼吸(光合碳氧化)两个方向相反但又相互连锁的循环反应。Rubisco同时处于两个反应中，是两者的交叉点。若CO 2 浓度与O 2 浓度的比值较高，此时会促进Rubisco羧化功能，光合作用会得到促进。这一过程为羧化反应一般分为5个阶段，即烯醇化、羧化、水合、C-C键断裂、质子化。Rubisco催化游离的CO 2 ，使其共价结合到底物RuBP上，得到两分子的3-磷酸甘油酸，推动了C 3 循环。若CO 2 浓度与O 2 浓度的比值较低，此时会促进Rubisco加氧功能，光呼吸会得到促进，RuBP将裂解生成的磷酸乙醇酸会进一步分解成乙醇酸和磷酸，参与叶片的光呼吸循环 [ 7 ]。 Rubisco的羧化和氧化反应之间的平衡取决于几个因素。第一个因素是进入Rubisco活性部位的CO 2 和O 2 的相对数量。第二个因素是Rubisco对每种气体的特异性。第三个因素也是一个通常被忽略的因素，就是Rubisco与Mn 2+ 或Mg 2+ 结合的程度 [ 32 ]。当Rubisco与Mn 2+ 结合时，羧化和氧化以相似的速度进行，Mn 2+ 在每一次氧化中都转移了一个电子 [ 33 ] [ 34 ] [ 35 ]；当Rubisco与Mg 2+ 结合时，羧化的速度比氧化快四倍，但是没有电子被转移 [ 36 ]。RuBP与Mn 2+ 结合的I型Rubisco氧化时，普遍的观点认为RuBP氧化过程中释放出的热(−319 kJ mol −1 )以废热的形式消散 [ 37 ]。
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user: 4. 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) 4.1. GAPDH的结构 在叶绿体中，光合GAPDH有两个亚基，即GAPA和GAPB。光合GAPDH可以利用NADH和NADPH作为辅酶，且优先利用NADPH，催化C 3 循环促进CO 2 的固定。不同于糖酵解的GAPDH的是，光合的GAPDH是细微的复杂的调控并且包含超分子复合物的形成。 植物叶绿体起源于蓝藻，所以光合GAPDH与蓝藻的GAP2是同源蛋白。在卡尔文循环中，GAP2会优先参与糖酵解的逆过程。与糖酵解GAPDH不同的是GAPA在卡尔文循环中对NAPDH有专一性。CP12是松散蛋白质复合体，由GAPDH以及PRK构成。作为陆地植物特有的GAPA的同源蛋白，GAPB的羧基端比起GAPA延长了30个氨基酸左右，而这些延长出的氨基酸与CP12调节酶同源。CP12负责在光暗周期中调节光合GAPDH。 一部分光合真核生物的GAPDH都是由4个亚基形成，例如细蓝藻。还有的光合生物比如，在菠菜中，它是由A和B按一定比例或形成A 2 B 2 ，或形成A 8 B 8 。在序列上尽管A和B很相像，但是B延长了一个独特的羧基末端。因此，杂聚肽(A 2 B 2 ， A 8 B 8 )是互相转变的，并且自动调节过硫氧化蛋白，吡啶核苷酸，ATP和GAPDH亚基和1，3-二磷酸甘油酸。而A 4 聚合体因为不具有B的特殊结构，所以其活性需要通过复合体CP12作为转换站来调节。在无光条件下CP12是氧化的，会在内部形成两个二硫化物的纽带，这个纽带会把GAPDH和PRK结合起来形成超分子复合体。最后，每两个GAPDH和两个CP12/PRK二聚体会构成GAPDH-CP12-PRK复合体，将四个单体互相关联，在嵌入到复合体中时GAPDH的活性会被强烈地抑制。而在光照条件下，过硫氧化蛋白会通过释放GAPDH和PRK调节CP12，这时被分离出来的GAPDH会恢复它所有的活性，这时GAPDH再与NAPDH特异结合，促进3-磷酸甘油醛脱氢氧化磷酸化产生1，3-二磷酸甘油酸 [ 38 ]。 4.2. GAPDH的功能 植物细胞的叶绿体和胞浆分别与卡尔文循环和糖酵解有许多平行的生化反应 [ 39 ]。甘油酸-3-磷酸被ATP磷酸化，在甘油酸-3-磷酸激酶催化下，形成甘油酸-1，3-二磷酸(DPGA)，然后在甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)作用下被NADPH + 还原，形成甘油醛-3磷酸(PGAld) [ 28 ]。通常除了GAPDH参与糖的利用中作为糖酵解的关键酶，叶绿体GAPDH也是加尔文循环光合固碳的重要的酶 [ 40 ]。
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user: 5. 果糖-1，6-二磷酸酶(FBPase) 5.1. FBPase的类型 植物中功能性的FBPase包括两种类型，一种为细胞质FBPase (cytosolic FBPase， cy FBPase)，与酵母FBPase作用相同，是糖异生途径的关键酶，同时也被认为是蔗糖生物合成的关键酶，其表达和活性受到光照和干旱等环境因素的影响 [ 41 ]。另一种类型是叶绿体FBPase(chloroplast FBPase， cp FBPase)，它定位于类囊体基质中，其催化的FDP与F-6-P之间的转化是卡尔文循环及淀粉生物合成途径的组成部分，因此也是绿色植物实现其自养功能的重要一环 [ 42 ]。研究发现，硫氧还蛋白(thioredoxin， TRX)以及光照引起的pH和Mg 2+ 浓度的变化能够调节cp FBPase活性 [ 43 ]。而后又在草莓中分离出一种新型的叶绿体FBPase-cp FBPase II，它不受硫氧还蛋白的激活，已被证实可补充酵母细胞中FBPase的缺失和非发酵碳源的生长缺陷，但对底物的亲和力较低 [ 44 ]。 5.2. FBPase的功能 绿色植物通过光合作用将大气中CO 2 首先固定成磷酸三碳糖，而叶绿体中的磷酸三碳糖有两种用途：一是送转到细胞质中合成蔗糖，二是在叶绿体中转变成淀粉。细胞质型FBPase和叶绿体型FBPase分别是蔗糖和淀粉合成的关键酶，叶绿体FBPase同时还是卡尔文循环的关键酶，因此这两种FBPase在光合碳同化和分配过程中起重要作用。 研究表明，改变叶绿体FBPase表达水平对植物的光合作用和淀粉及可溶性糖的分配都有着重要影响。利用反义RNA技术降低了拟南芥叶绿体FBPase的表达量，从而使植物中蔗糖含量提高，同时氮代谢也发生了改变 [ 45 ]。在其基因功能完全敲除的突变体中，光合作用和CO 2 固定速率等许多过程都受到影响，突变体比野生型明显生长迟缓；胞质型和叶绿体型FBPase的双突变体则表现为叶绿体FBPase突变体的表型 [ 46 ]。叶绿体FBPase的不同表达量对光合碳同化产生不同的影响：当叶绿体FBPase的活性被抑制20%以内会促进光合作用和碳同化，而被抑制80%以上将会对植物造成伤害 [ 47 ]。叶绿体FBPase的活性受f型及m型硫氧还蛋白调节 [ 48 ] [ 49 ]。
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user: 6. 光呼吸和乙醇酸氧化酶(GO) 6.1. 光呼吸 植物光合用碳代谢包括两种途径：还原性光合用碳循环(也被称为卡尔文循环)和氧化性光合用碳循环(即光呼吸 [ 50 ] )。光呼吸过去被认为是一种潜在的浪费过程，限制了植物的生产力，因为C 3 植物在正常情况下可能会对光合作用固定的碳的25%进行光固化 [ 51 ] [ 52 ]。到目前为止，已经提出了两个假设来解释这些不同光呼吸突变体光合抑制的机制 [ 50 ]。第一，光呼吸碳循环和/或氮再同化的损害导致C 3 循环中间体和光合蛋白的耗竭，导致光合抑制。第二，光呼吸途径的破坏导致代谢物的积累，这将抑制卡尔文循环 [ 53 ]。近年来研究的证据似乎更好地支持了第二种观点，因为据观察，当某些不同的光呼吸酶被破坏时，这些下游代谢物并没有明显的耗尽 [ 54 ] [ 55 ] [ 56 ] [ 57 ]。此外，Chastain和Ogren (1985年，1989年)进行的一系列研究表明，乙醛酸盐的积累，而不是其他代谢物降低Rubisco激活水平的主要效应物，从而导致光合抑制 [ 57 ] [ 58 ]。许多研究还表明，无论是在其钝化形式还是在分离的叶绿体中，乙醛酸盐能够有效地灭活Rubisco [ 58 ] - [ 64 ]。光呼吸途径在两个方面与氮同化有着内在的联系：第一，通过与氨重化相关的能量需求；第二，通过新氮的还原和同化，新氮通常以 NO 3 − 6 的形式进入叶片 [ 65 ]。氮在C 3 植物叶片中的同化可以通过光呼吸途径发生，在光合组织中，这一途径被认为是丝氨酸的主要来源，丝氨酸是其他几种氨基酸的前体 [ 66 ]。光呼吸的一个关键步骤是随着CO 2 和氨的释放，甘氨酸转化为丝氨酸。释放的CO 2 中有许多是从叶片中排出的，因此代表了C 2 的损失，而氨的回收在能量上是昂贵的，因为它需要ATP和减少铁氧还蛋白 [ 67 ]。光呼吸也被认为是浪费的，因为在加氧酶反应过程中，O 2 与CO 2 竞争Rubisco活性中心，消耗RuBP，降低净碳同化的能量效率 [ 68 ]。通常，在25℃的叶片温度下，光呼吸系统CO 2 的释放速率约为ATP的15%~20% [ 69 ]。之前这些研究已经导致了一个被广泛接受的观点，即光呼吸抑制了碳的增加，从而阻碍了生长和产量。然而，虽然在一定程度上有抑制作用，但光呼吸代谢也可能有益；例如，光呼吸消耗还原剂(每个氧合反应消耗4个电子)，因此是过量能量耗散的一个重要形式 [ 70 ]。 6.2. 乙醇酸氧化酶(GO) 乙醇酸氧化酶(glycolate oxidase， GLO/GOX)作为光呼吸过程中的关键酶之一，主要存在于叶片的过氧化物酶体，氧化乙醇酸产生乙醛酸和过氧化氢(H 2 O 2 )。植物在生长发育过程以及胁迫条件下均能产生H 2 O 2 ，并可以自发地被歧化或者在过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的作用下，形成H 2 O和O 2 [ 71 ]。当H 2 O 2 过度积累而不能及时清除，H 2 O 2 将跨过生物膜并在膜外金属螯合物的作用下生成有害的·OH，借助远距离运输，造成氧化损伤。而光呼吸产生的H 2 O 2 含量占植物H 2 O 2 含量的70%以上，因此GLO催化产生的H 2 O 2 能在信号物质抗性调控中起重要作用 [ 72 ] [ 73 ] [ 74 ]。
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user: 7. 讨论 卡尔文循环是光合碳固定的起始反应步骤，为了不使卡尔文循环的中间物处于缺乏状态，必须使消耗和再生之间维持平衡，要想达到这种平衡就需要参与卡尔文循环的一些关键酶的活性必须受到精确的调控，尤其是一些酶的活性，比如，Rubisco、GAPDH和FBPase等 [ 7 ]。 陈锦强等的试验证明，在适宜的范围内，氮素水平提高，黄麻的光合速率升高。但氮素过高，光合速率降低 [ 75 ]。Evans研究发现，小麦叶片含氮量增加，CO 2 同化速率增加。但超过一定值时，碳同化速率降低 [ 76 ]。这些研究表明，在一定氮素浓度范围内，随着光合部位的氮增加，光合速率总的呈上升趋势。在超过一定氮素浓度范围后，光合速率下降。因此，在超过一定氮水平后光合速率降低的可能原因是氮添加影响了参与卡尔文循环重要阶段的酶的活性，导致光合速率降低。 7.1. 氮添加影响了Rubisco的活性和光呼吸 Rubisco属于光调节酶，受Fd-Td系统调节。光调节酶中含有二硫键(-S-S-)，当被还原为2个巯基(-SH)时表现活性。光驱动的电子传递能使基质中Fd还原，进而使Td (硫氧还蛋白)还原，被还原的Td又使光调节酶等靶酶上相邻的半胱氨酸上的二硫键打开变成2个巯基，使靶酶活化。在暗中则相反，巯基氧化形成二硫键，酶失活 [ 7 ]。Claussen & Lenz [ 8 ] (1999)提出在NH 4+ 营养条件下，植物叶片中的NH 4+ 积累引起光合磷酸化过程中的电子传递在叶绿体中断裂，从而导致光合速率的显著下降。Nakaji T等 [ 9 ] (2001)研究表明，在一定范围内，氮沉降增加引起Rubisco的浓度和活性及叶绿素含量增加，从而光合速率增加。但是，过量的氮沉降对光合作用不利。由此可见，氮素增加过了一定程度会导致光合速率下降的原因可能是由于随着氮素增加，NH 4+ 增多，引起光合磷酸化过程中的电子传递在叶绿体中断裂，巯基被氧化形成二硫键，丢失半胱氨酸残基，使活性下降，导致光合作用下降。亦或是氮素过高，Rubisco的加氧作用升高，促进了有乙醇酸氧化酶参与的光呼吸，抑制了卡尔文循环，使光合速率降低。 7.2. 氮添加影响了GAPDH的活性 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)在光合作用的还原阶段第二步起作用，其中需要有ATP和NADPH的参与，并基本完成光合作用还原储能过程 [ 7 ]。随着光合部位氮素含量增加，氮同化得到了加强。氮同化增强后，就会与光合碳同化竞争抢夺光合作用光反应产生的ATP和NADPH(还原型辅酶II) [ 14 ]。超过一定氮浓度范围后，参与卡尔文循环的ATP和NADPH慢慢被氮同化抢夺，使3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的活性下降，还原作用降低，最后导致光合碳同化速率降低。 7.3. 氮添加影响了FBPase的活性 在一定范围内，氮添加使光合速率升高 [ 9 ]，其产物的蔗糖也会随之增多。在超过一定氮水平后，卡尔文循环的关键酶活性下降 [ 77 ]，过多的光合产物蔗糖会使光合作用受到抑制，进而导致光合速率降低，因而果糖-1，6-二磷酸酶(FBPase)的活性降低 [ 78 ]。
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user: 8. 展望 作为植物叶中主要含氮有机物之一，叶片酶必然与植物中氮素的吸收、利用及循环有着密切关系。大多关于光合作用的研究认为，大多数植物的光呼吸途径以余热的形式消散了30%以上的光合产物，而这一循环却是徒劳的 [ 7 ]。这是因为大多数植物已经到了进化的死胡同。植物体内的叶片酶可否被改造成减少参与光呼吸途径或者将光呼吸的途径改造为不利用光合作用的产物，有待进一步研究。
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user: 摘要 该研究基于社会支配理论，通过模拟招聘情境，采用实验法探究社会支配倾向高低和个体的内隐性别偏见对招聘选择的影响。结果显示，无论是慈善机构和证券公司，选择女性候选人的倾向显著高于男性；社会支配倾向高低对招聘选择没有显著影响；在为证券公司招聘人才时，性别偏见水平高分组和低分组被试选择女性候选人人数显著高于男性。该结果不但说明了职场招聘中存在职业性别隔离现象，并且阐明了女性角色在大学生群体中发生的变化。
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user: 1. 引言 十九大指出，城乡区域发展的收入差距依然较大，人民群众在很多方面都面临着难以解决的问题，其中包括居住、就业、教育、养老、医疗等。对于现今的就业形势，人民的就业问题仍然是急需解决的大事 [ 1 ]。要想人民得到充分的就业保障，男女性都得到应有的职位，对于女性就业的公平问题也就随之而来 [ 2 ]。这个问题绝非子虚乌有，1995年9月4日江泽民主席在联合国第四次世界妇女大会上明确提出的男女平等问题。2018年的3月7日，智联招聘发布的一份《2018中国女性职场现状调查报告》显示，女性整体收入低于男性22%。由此而来，女性的充分就业问题引起了学者们的关注，研究者们从不同方面对其进行了研究。 职业性别隔离指因为存在社会系统性因素，不同的工作职位将会选择招聘不同性别的人，使得另一性别的人被排除门外，是劳动力市场上性别歧视的主要方式之一 [ 3 ]。这种现象长期发展不仅会造成就业不充分，失业女性化和贫穷女性化，而且阻碍信息交流和创新的发展，更高程度的性别隔离也会对经济生产力造成危害 [ 4 ]。大量研究表明，在职业的招聘中，存在着较为普遍的职业性别隔离现象 [ 5 ]，其范围延展度扩展到各个国家 [ 6 ]。美国研究者通过对软件工程行业调查研究发现，在软件质量监督方面雇佣的员工中，女性占比显著高于其他软件子专业 [ 7 ]。对土耳其职场中存在的职业性别隔离研究的一项研究发现，土耳其女性更有可能被雇用在薪资较低的工作岗位和在整个阶层结构中排名较低的职业中 [ 8 ]。然而，职业性别隔离现象在不同年龄阶段的人群中却存在着不同的结果。对中国25个省/市/自治区儿童及青少年的职业期望信息进行调查，结果发现我国儿童和青少年的职业期望存在显著的性别分化，远高于劳动力市场中实际的职业性别隔离水平。女孩职业期望的平均社会经济地位和声望水平高于男孩，女性更多地希望冲破传统的职业性别隔离，可以从事“男性职业” [ 9 ]。大学生男性的职业性别隔离现象也在发生着变化，研究者调查一个特殊的语言病理学和听力学培训项目(偏公益性项目)中男生对性别失衡的看法。结果发现男性大学生不相信职业的性别特征，也不认为职业是“女性独有”的，更愿意参加到公益培训项目中 [ 10 ]。瑞典一项研究中对超过三百万不同出生时间(1985~1993; 1990~1998; 2003~2011)、年龄和时期的人群进行职业注册后八年的纵向追踪，结果显示从事性别隔离职业的男女在未来就业率和社会失业率方面的差异会随着时间的推移而减少。当年轻群体进入工作市场中，在不平等的职业中面临着较少的困难 [ 11 ]。从以上研究我们可以发现，青年一代在校期间男性和女性对职业的选择存在与真实职场中截然不同的现象，这对女性来说尤其如此，然而，她们在青春期表现出更倾向于在男性主导的职业中工作，而在之后的实际工作中却存在着较大差异。在一般水平上，成年期的职业比青春期的偏好更具性别隔离性 [ 12 ]。针对理想和现实之间的差距，至关重要的是如何解决职业性别隔离。大学生作为理想和现实接壤的群体，身为社会职场中新兴的一代，对其的研究对解决职业性别隔离问题具有重要意义。研究者大多从社会经济以及市场的角度着手来解决职业性别隔离问题，很少有学者从个人心理的角度来解决这个问题 [ 13 ]，也极少有研究者对此进行实验研究。然而，要想解决职业性别隔离问题，必须社会和个人共同努力。 社会支配倾向是从社会支配理论中衍生而来的，该理论试图解释以群体为基础的不平等是如何产生的，以及按阶层的形式组织的社会是如何延续下来的 [ 14 ]。社会支配倾向理论是一个概念上面的准则解释对于底部的社会的压迫和层次阶级，社会支配理论中最重要的观点是社会支配倾向不同水平，在社会群体中对于不同的阶层职位之间有不相同的态度和行为 [ 15 ] [ 16 ]。Pratto首次在1994年提出了社会支配倾向的概念，其内涵为个体心中希望隶属于自己的内群体优于和支配外群体的程度 [ 17 ]。即个体对社会中存在的不同层级之间差异的认同程度，其中较为明显的是认同优势的群体支配劣势群体的程度。对于职业性别隔离现象，西方心理学家们认为和个体存在的刻板印象和对男性(或女性)的偏见有关，研究者们证明出在大脑的传统印象中，存在男性能力高于女性的思想，从古到今，仍然有男女偏见 [ 18 ]。研究表明，社会支配倾向较高的人倾向于选择有利于维持和增加自己地位的组织，而社会支配倾向较低的人倾向于选择帮助弱势机构，进而减少社会的不平等。 那么这种现象到底是基于社会原因所造成的还是个人原因所造成的呢？研究者采用问卷法探究被试的个人职业选择和其社会支配倾向高低之间的关系。结果发现不同性别的被试将会选择不同社会阶层的招聘单位，男性倾向于进入高社会阶级的职业，而女性倾向于选择低社会阶层的职业。这是男女性自己选择的结果。除此之外，社会选择对其的影响也做出了进一步的实验证明。研究者模拟创建公司招聘场景，将被试作为招聘者，为公司选择出合适的人才，探究社会大环境的选择的影响。研究结果表明，社会阶层较高的公司(例如：证券公司)招聘者倾向于选择男性。社会阶层较低的公司(例如：慈善机构)则倾向于选择女性，这是社会大趋势下选择的结果 [ 19 ]。但是这种结果并没有达到显著的水平。 一系列的研究表明，对男性(或女性)的偏见在社会支配倾向和职业性别隔离中具有较大的影响 [ 20 ] [ 21 ]。Pratto的研究结果证明，高低社会支配倾向者对于性别和群体存在明显的偏见 [ 22 ]。但是，Dambrun等人的实验证明得到了相反的结果，即高低社会支配倾向者对特定群体之间的偏见并不显著 [ 23 ]。基于此，近年来关于两者之间的关系存在着争议， 因此，本研究尝试从社会支配倾向的角度出发，以大学生为被试群体，使用内隐联想测验的方式测量性别偏见、问卷测量社会支配倾向，招聘情境的模拟来测量职业性别隔离，将三者联系起来进一步探讨性别和社会支配倾向之间的关系以及他们两者对于女性充分就业的影响，以期从职场招聘、社会支配倾向以及性别偏见的角度来改善就业市场上的女性不充分就业现象。
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user: 2. 实验研究 2.1. 工具 2.1.1. 社会支配倾向量表 社会支配倾向量表(SDO)采用Sidanius等人编制，王垒等人修订的中文版 [ 24 ]。该量表主要包括反对平等主义、支持基于群体的支配和支持排外主义三个维度，共16题，该量表在本研究中信效度良好。 2.1.2. 内隐性别偏见 本实验采用内隐联想测验来测量个体的性别偏见。其中内隐材料词初步选定25个，经过收集问卷120份，选取得分高的10个词撰写进入内隐联想测验程序中进行实验。 内隐联想测验(IAT)实验程序：被试坐在计算机面前，根据屏幕显示的指导语进行操作，仅涉及“A”和“5”。整个内隐联想测验都在电脑上进行。施测共分为七个阶段：七个部分依此进行，被试需要按照指导语中的提示将所呈现的词进行归类反应。例如在第三个阶段中，要求被试在计算机屏幕上呈现无责任心(消极词)和张豪杰时按A键反应，在呈现有沟通力(积极词)和赵雅静时按5键反应。测验过程中被试在保证正确的基础上尽量较快的做出反应按键，由计算机记录其反应时和正确率。 2.1.3. 招聘材料 4份简历：2份男生，2份女生。简历均包括求职者的基本信息、自我评价、求职意向(两份应聘慈善机构，两份应聘证券公司)、教育背景、工作经验、以及大学期间获得的荣誉奖项。经科研小组12名学生以及四位老师的轮流建议下进行匹配使得4名求职者的能力处于同一水平线。 两家公司的介绍及招聘要求：慈善机构和证券公司。 2.2. 实验材料及研究程序 本研究招募的被试均来自周口某大学，在实验中随机将被试分为6组，其中每组各一人。实验共分为三个部分，第一部分是模拟招聘情境，分别为慈善机构和证券公司两个情境，让被试想像自己是公司主管，为公司招聘最合适的人员(各一名)；第二部分要求被试根据指导语，完成社会支配倾向问卷；第三部分要求被试打开电脑桌面上的内隐联想测验(IAT)实验程序，按照指导语完成该部分测验。其中，进行招聘任务时，将呈现在计算机上面的招聘要求通过ABBA法来减少由于不同公司的前后顺序因素而导致的误差。另外，为了减少噪音以及一些无关因素的影响，将被试分为六组，每组一个人，在实验室的六个单独的小房间中进行实验。 2.3. 被试 采用方便取样法在周口某大学随机招募被试80人，删除漏填的无效数据三人，最后剩下77人，数据回收率96.2%。年龄分布在18到24之间，其中男生40人(52.6%)，女生37人(47.4%)。 2.4. 研究结果 2.4.1. 不同性质机构的招聘偏见 Table 1 Recruitment bias of different types of organization 招聘单位 选择男性频次 选择女性频次 X 2 P 慈善机构 29 49 5.13* 0.024 证券公司 25 53 10.05* 0.002 表1. 不同性质机构的招聘偏见 注： * p < 0.05， ** p < 0.01， *** p < 0.001。 如表1所示，招聘者倾向于将女性应聘者招聘进入慈善机构(X 2 = 10.05， p < 0.05， df = 1)，在证券公司招聘中，被试也倾向于选择女性应聘者(X 2 = 5.13， p < 0.05， df = 1)。 2.4.2. 社会支配倾向对招聘偏见的作用 为了更好地使得社会支配的倾向与其他人招聘偏见之间的关系变得更加清楚明了，本课题研究通过基于统计学中33%的原理，把被试划分为社会支配的倾向高分组(n = 21)和社会支配的倾向低分组(n = 22)，从而可以考察到社会支配的倾向是否在招聘时有偏见的作用。 Table 2 Chi square test of social dominance tendency and recruitment choice (charities 社会支配倾向分组 选择男性频次 选择女性频次 X 2 P 高分组 6 15 0.72 0.396 低分组 9 13 表2. 社会支配倾向与招聘选择的卡方检验(慈善机构) 注： * p < 0.05， ** p < 0.01， *** p < 0.001。 Table 3 Chi square test of dominance tendency and recruitment choice (securities companies 社会支配倾向分组 选择男性频次 选择女性频次 X 2 P 高分组 9 12 0.19 0.663 低分组 8 14 表3. 社会支配倾向与招聘选择的卡方检验(证券公司) 注：*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001。 如表2和表3的研究结果表明，当被试为慈善机构合理地选用恰当的人才时，无论是对于社会支配倾向的高分组或者对于社会支配倾向的低分组都呈现出了一致的倾向性。慈善机构的选拔中引进了更多的女性候选人。证券企业公司的候选人中女性也占据了较大的比例，得到了与其他慈善部门相似的结果。另外，社会支配倾向高分组与低分组的招聘者在选择女性与男性候选人员之间的统计学上没有明显的差异。 2.4.3. 性别偏见对招聘影响 为了明了男性(或女性)偏见与招聘选择的联系，该研究根据统计学上33%的原则将招聘者分为两部分：性别偏见高分组(n = 26)以及性别偏见低分组(n = 19)，从而探究男性(或女性)偏见对招聘选择产生的影响。 Table 4 Chi square test of gender bias and recruitment choice (charity 性别偏见分组 选择男性频次 选择女性频次 X 2 P 高分组 7 19 1.14 0.286 低分组 8 11 表4. 性别偏见与招聘选择的卡方检验(慈善机构) 注： * p < 0.05， ** p < 0.01， *** p < 0.001。 Table 5 Chi square test of gender bias and recruitment choice (securities companies 性别偏见分组 选择男性频次 选择女性频次 X 2 P 高分组 12 14 4.55* 0.03 低分组 3 16 表5. 性别偏见与招聘选择的卡方检验(证券公司) 注：*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001。 表4和表5的结果说明，当被试为慈善机构合理地选用恰当的人才时，无论是对于性别偏见程度高分组，或者对于性别偏见的低分组都呈现出了一致的选择倾向性，相对于选择男性应聘者(n = 15)都倾向与选择更多的女性应聘者(n = 30)进入慈善机构，但是两者之间在统计学上并没有显著差异。为证券公司合理的选用恰当的人才时，无论是对于性别偏见高分组，或者对于性别偏见的低分组都更加倾向于把女性应聘人员纳入自己所需要的候补人员之中。并且男性(或女性)偏见分组中的低分组与高分组招聘者在选择男性应聘者(n = 3)或女性应聘者(n = 16)时卡方检验的结果显著(X 2 = 4.55， p < 0.05， df = 44)。
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user: 3. 讨论 关于职业性别隔离，过去的研究者多从社会地位、名声、阶层性质等视角来划分，本研究依然延续了乔志宏等研究者把职业划分为增加阶层差异的职业和减少阶层差异的职业的方法，因而将其分为证券公司和慈善机构两种类型 [ 19 ]。本文尝试从生理机制中的性别因素以及个人性格中的社会支配倾向角度出发来探讨外部原因中的社会因素对招聘选择的影响。关于性别因素多数研究者使用问卷法来进行测量，而此方法很明显会收到社会赞许效应的影响，即某一行为是社会大众人群所希望、期待、接受的，个人就会为了避免受到谴责而选择大众所喜欢的行为。本实验为了避免这种影响，选择采用内隐联想测验的方法来测量个人的性别偏见。 以往研究了不同的性别对招聘选择的影响，结果均显示招聘者倾向于将更多的女性招聘进入慈善机构作为候补人员，将更多的男性招聘进入证券公司作为候补人员。本研究探讨的不同性质机构的招聘偏见，结果发现无论是慈善机构还是证券公司都存在显著的性别差异，即均将女性选拔进入职业性别隔离程度较大的公司。此结果与李汪洋等人对青少年和儿童的期望职业调查结果——女性倾向于就职经济地位和声望较高的职业相似 [ 9 ]。与2020年对德国、美国和英国的职业性别隔离现象的调查研究发现女性开始比男性更倾向于从事更有声望和更高地位的职业也不谋而合 [ 8 ]。但与乔志宏等人的研究结果不同，与真正职业领域存在的现状也有些许不符 [ 13 ]。导致此结果的原因主要有以下几个方面。首先，社会大趋势的不断发展境遇下，女性在社会中彰显出愈加重要的作用，越来越多的女性杰出者出现在大众的视野中，导致大众对于女性的态度有所改观；其次，随着文化的普及教育，男尊女卑的思想逐渐淡化，这种现象尤其出现在95后一代，因而在这种平等的文化熏陶下，出现了对女性进入到增加阶层差异的职业表现出更为宽容和赞同的态度；再者，大学生群体作为即将踏入职场的群体，其尚未受到职场中潜移默化的对于性别偏见的影响，因而，其所具有的思想更为纯粹和积极。最后，在本研究中，虽然被试在性别上达到了匹配的水平，但是由于是在师范院校，女性的基数大，在各种活动中表现自我的机会显然大于男性，所以男性不可避免的要受到优秀女性的影响，因此也更为相信女性的各方面能力。由此可见，对于女性进入到增加阶层差异的职业被越来越多的人所接受。 Pratto研究发现，被试的社会支配倾向水平的高低和在招聘过程中选择男性或女性的偏见之间相关不显著 [ 6 ]。在本研究中，我们将被试的社会支配倾向水平分为高低两组后。在慈善机构组以及证券公司组，无论高分组还是低分组，招聘者倾向于选择女性应聘者作为自己公司的候补人员，但是这种选择并没有达到显著水平。与pratto [ 6 ] 和乔志宏 [ 19 ] 得出了相同的结果。这主要是因为男性所扮演的职业角色不成比例地加剧了基于群体的不平等，而女性所扮演的角色不成比例地削弱了基于群体的不平等，最后出现了大体平等的结果。出现了此结果和政府在整顿就业市场、建立了生育保障制度、创造女性接受教育的条件、增加女性自主就业的意识中建立的主导作用密切相关。 最后，在证券公司招聘过程中，性别偏见和招聘选择之间在统计学水平上存在了显著的差异。但是在慈善机构的招聘选择中，却未表现出显著差异。此结果与以往研究结果不同 [ 25 ]，在证券公司的招聘选择中，性别偏见地分组的招聘者倾向于选择女性应聘者作为公司候补人员，达到了0.03水平的显著差异，说明个体的偏见越低，对于女性就越持宽容的态度。慈善机构作为一种减少阶层差异的职业，不管是在性别偏见水平的高分组还是低分组的招聘者，在选择男女应聘者的人数无显著差异。此结果更加有利的证明了在大学生群体中对于男女性应聘者的平等态度。 该研究结果具有较大的社会意义。近年来，随着各种政策的发展、性别平等意识的不断普及、女性受教育水平的提高和公众对男女平等的倡导，其所表现的效果首先在大学生和儿童身上得到了彰显。我们的研究使用大学生为研究对象，得出对女性愈加平等的招聘选择，无不显示出新兴职场力量对职场性别平等发展所表现出的良好趋势。然而，职场真实情况为教育等行业女性占主导但男性比例略有提升，科研技术服务等行业女性比例上升较快但目前还是男性占比较大 [ 26 ]。对于真实职场和大学生理想中的招聘仍然存在的较大的差异，针对不同年龄段人群和不同社会阅历人进行对比研究是必要的。同时，此结果给予我们一个警示，尽管劳动力市场仍然存在性别隔离，但随着年轻一代的发展，趋向于更平等的平衡。然而，要想使得大学生的性别平等意识得到维持，避免从一个极端走向另一个极端。国家仍需出台相关政策来牵制职场招聘过程中的性别偏见现象，媒体传递的信息要能够使得青少年得到恰当的引导，不断提高女性的受教育水平。长此以往，在不远的将来，必将实现真正意义上的男女平等。
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user: 4. 结论 1) 在社会阶层不同的公司中存在招聘者对性别的偏见。无论是慈善机构还是证券公司都倾向于选择女性应聘者作为公司候补人员。 2) 社会支配倾向水平的高低和被试的招聘选择之间没有关系。 3) 在证券公司中，性别偏见对于招聘选择具有影响且倾向于选择女性应聘者，但是在慈善机构中，这种影响并不存在。
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user: 摘要 肌酐水解酶是一种存在于微生物中的酶，该文对肌酐水解酶的发现、分离纯化、理化性质、酶活测定方法、催化机理以及应用研究进行了总结，并对其前景进行了展望。
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user: 1. 引言 肌酐水解酶(Creatinine hydrolase， EC:3.5.2.10)是一种存在于微生物中的酶，可以可逆的催化肌酐水解为肌酸，在分解肌酐的体系中位于首位。主要作用是使含有此种代谢通路的微生物可以以肌酐为氮源，以进行生命活动。目前肌酐水解酶主要应用于血清肌酐、尿肌酐浓度的测定中，本文总结了其理化性质、催化机理及应用等。
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user: 2. 肌酐水解酶的发现、理化性质及其分离纯化方法 2.1. 肌酐水解酶的发现 肌酐水解酶最早在1950年被发现，和它同时被发现的还有其下游的肌酸水解酶 [ 1 ]；1974年，肌酐水解酶在节杆菌中被分离纯化出来，对其性质也有了初步了解 [ 2 ] [ 3 ]；此后1979年，Rikitake等在恶臭假单胞菌中分离纯化出一种肌酐水解酶，并对其性质进行了深入研究 [ 4 ]。 2.2. 肌酐水解酶的理化性质 在肌酐水解酶中，恶臭假单胞菌来源的肌酐水解酶研究比较充分，以下主要介绍恶臭假单胞菌来源肌酐水解酶的理化性质，并对其他来源的肌酐水解酶做简要介绍。恶臭假单胞菌来源的肌酐水解酶是一种酸性金属酶，等电点为4.7左右；在天然状态下一个亚基中存在两个锌离子，其中一个锌离子易被锰离子取代，取代后的肌酐水解酶酶活有所提高。肌酐水解酶为同源六聚体，每个肌酐水解酶亚基的分子量在27~29 KDa左右，由250~268个氨基酸组成，其中每两个亚基组成一个二聚体，三个二聚体再组成同源六聚体，即完整的肌酐水解酶。肌酐水解酶具有较强的稳定性：在pH 6~12的范围内较为稳定，并在pH 7~9的条件下保持较高的酶活；能耐高温，在75℃的条件下处理30 min仍能保持75%的酶活；具有较强的稳定性，对EDTA处理并不敏感，使用10 mM EDTA在pH 7.1的50 mM Tris-HCl缓冲液中30℃处理30 min，仍能保持80%~90%的酶活 [ 4 ]。肌酐水解酶可以可逆的催化肌酐水解为肌酸，此反应受反应体系温度及pH的影响，随着温度的升高、反应pH的上升，反应的平衡向生成肌酸的方向移动，反之亦然。 2.3. 肌酐水解酶的分离纯化 不同来源的肌酐水解酶具有类似的理化性质，因此其分离纯化步骤也基本相似，都使用了加热、盐析、阴离子层析和分子筛层析等方法进行分离纯化。来自Arthrobacter ureafaciens的肌酐水解酶通过55℃水浴加热、10%链霉素溶液除核酸、35%饱和度硫酸铵盐析、Sephadex G-200层析和DEAE阴离子层析5步操作得到了纯酶 [ 3 ]。来自Pseudomonas putida var. naraensis， strain C-83的肌酐水解酶使用了鱼精蛋白除杂、亲和层析、热处理、DEAE阴离子层析和Sephadex G-200五步得到了纯酶 [ 4 ]。来自Pseudomonas putida的肌酐水解酶基因被克隆至大肠杆菌BL21 (DE3)中后，在C端加入6 × HIS-tag，仅使用热处理、镍柱层析和分子筛层析3步就得到了纯酶，简化了分离步骤，并且提高了回收率 [ 5 ]。
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user: 3. 肌酐水解酶酶活测定方法、结构及催化机制 3.1. 肌酐水解酶酶活测定 肌酐水解酶酶活的测定有两种方法，其中较为常用的为使用Jaffé法的酶活测定方法，此法以肌酸为底物，在肌酐水解酶的催化作用下使肌酸转化为肌酐，肌酐在碱性条件下与苦味酸发生反应，生成橘黄色产物，在520 nm的可见波长下其浓度与吸光度成正比，因此可以通过测定肌酐的生成量来测定肌酐水解酶酶活。 另一种为以肌酐为底物，通过α-二乙酰萘酚法测定肌酸生成量来测定酶活。在肌酐溶液中加入酶液后，肌酐被酶催化为肌酸，肌酸同样可以在碱性条件下与二甲基乙二醛和α-二乙酰萘酚反应，其产物的吸光度值在540 nm的可见波长下进行测定，进而测定肌酐水解酶酶活。 3.2. 肌酐水解酶结构及催化机制 在2004年通过X射线衍射法解析了恶臭假单胞菌来源的肌酐水解酶的结构，分辨率达到了1.8 Å。确定了恶臭假单胞菌来源的肌酐水解酶含有6个相同的亚基，每个亚基由7个α螺旋和5个β链组成α/β-型结构，每两个亚基组成同源二聚体，三个同源二聚体组合最终形成三叶草形状的肌酐水解酶，其六聚体及亚基结构如图1 [ 6 ]。肌酐水解酶结构为亚基A和B、C和D、E和F各自形成一个二聚体，每个二聚体内部亚基间(即亚基AB间、CD间或EF间)的接触面积约为1928 Å 2 ，二聚体间亚基(即亚基BC间、DE间或FA间)的接触面积约为1473 Å 2 。 图1. 肌酐水解酶六聚体结构及亚基结构 肌酐水解酶的活性位点位于圆盘形六聚体酶的边缘。酶活位点由疏水性裂缝排列形成入口十分狭窄，这个疏水性裂缝由Trp174，Trp154，Tyr121，Phe182，Tyr153和Gly119组成，它们形成了底物结合位点。裂缝的底部存在着具有双核金属中心的催化位点。此外，双金属中心中的锌离子也与水分子接触共同催化底物发生反应 [ 6 ]。 Yamashita [ 7 ] 等人假设的肌酐水解酶催化肌酐水解为肌酸是一个具有两步过程的反应，首先，在第一步中，桥接在双核金属中心的水分子内部的氢氧根离子攻击肌酐的羰基碳；随后第二步中，四面体中间体稳定化之后，通过另一水分子同时使酰胺氮质子化来辅助碳–氮键的裂解。新形成的肌酸的羧酸盐基团与双核中心的两个金属离子结合。在产物释放后，活化的水分子恢复到初始状态，完成催化过程。
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user: 4. 肌酐水解酶的应用 目前肌酐水解酶主要应用于使用比色法的肌酐检测试剂盒中。早期的肌酐检测试剂盒主要通过Jaffé法进行检测，其特异性较差，易受到血清、尿液中非肌酐物质的影响导致测定的肌酐浓度偏高。随着酶法测定肌酐的方法被开发出来，Jaffé法已经被特异性更强的酶法所取代。在1979年 [ 8 ]，就有酶法测定肌酐试剂盒被发明，其包含四种酶：肌酐水解酶、肌酸激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶。血清或尿液中的肌酐首先被肌酐水解酶水解为肌酸；随后肌酸与ATP在肌酸激酶的作用下生成磷酸肌酸和ADP；ADP与PEP在丙酮酸激酶的作用下变为丙酮酸和ATP；最后丙酮酸与NADH + 和H + 在乳酸脱氢酶的作用下变为乳酸和NAD + 。每1mol的肌酐按照此反应过程变为1 mol NAD + ，在340 nm的紫外波长下测定生成的NAD + 的吸光度值即可测定肌酐浓度。 随后更多新型的肌酐检测试剂盒被发明出来，目前使用较多的为含有肌酐水解酶、肌酸水解酶、肌氨酸氧化酶和过氧化物酶的试剂盒。肌酐在肌酐水解酶的作用下水解为肌酸；随后肌酸被肌酸水解酶水解为肌氨酸；肌氨酸又被肌氨酸氧化酶催化为甘氨酸、过氧化氢；最后过氧化氢与4-氨基安替比林和2，4-DCP在过氧化物酶的作用下生成紫红色化合物醌亚胺，在546 nm处测定其吸光度值后，测定标准和空白样品后即可算出肌酐含量 [ 9 ]。 目前也有将肌酐水解酶固定在铂电极上制成电极以检测肌酐的方法，Yadav等 [ 10 ] 通过将肌酐水解酶、肌酸水解酶和肌氨酸氧化酶一同固定在氧化铁纳米颗粒/壳聚糖接枝聚苯胺复合膜，通过戊二醛偶合电沉积在铂电极表面。与上述酶法测定肌酐方法类似，每个肌酐在肌酐水解酶、肌酸水解酶和肌氨酸氧化酶的作用下产生过氧化氢，并在电压作用下分解产生两个电子，电子进入铂电极。测定时使用恒电位仪/恒电流仪连接工作电极，以Ag/AgCl作为参比电极，以Pt线作为辅助电极，构成肌酐生物传感器，通过固定电压，测定电流大小计算肌酐浓度。对比Jaffé法及酶法，使用电极可以改善生物传感系统的灵敏度，稳定性和抗干扰能力，从而使肌酐测定更加准确、可靠，并能够降低检测成本。
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user: 5. 总结与展望 肌酐水解酶出现于微生物，对微生物获取氮源具有一定意义。目前为止，肌酐水解酶主要应用于血清、尿液中肌酐的测定，但酶法测定肌酐仍有不足之处。而最新研究的酶电极具有较强的灵敏度，稳定性和抗干扰能力，具有广大的使用前景。
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user: 摘要 高尿酸血症(hyperuricemia， HUA)及痛风以往被认为是由于人体嘌呤代谢异常所导致的代谢性风湿病。2002年，Enomoto等人描述了第一个肾脏尿酸盐转运蛋白URAT1 (urate anion transporter 1)，之后，越来越多的尿酸盐转运蛋白被表征，高尿酸血症不再是一种代谢性疾病，而是一种“转运疾病”。本篇综述回顾了近几年与HUA及尿酸盐转运蛋白相关的国内外研究文献，对尿酸盐转运蛋白与HUA疾病的相关关系进行总结。