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user: 3. 方法与结果 3.1. 样品的制备 称取适量截叶铁扫帚，加入10倍量的75%乙醇回流提取4 h，减压蒸除溶剂得黑色浸膏状物。取上述浸膏，用75%甲醇溶解稀释成1 mg∙mL −1 ，高速离心(13，000 r∙min −1 *10 min)，取上清液待用。 3.2. 液质条件 液相条件：色谱柱BEH C18 (2.1 mm × 50 mm， 1.7 um， Waters ACQUITY)；进样量3 ul，柱温40℃，流速0.3 mL/min；流动相：0.01%甲酸水(A)-乙腈(B)，梯度洗脱程序：0~2 min 90% A；2~5 min 90%~70% A；5~8 min 70%~30% A；8~15 min 30%~20% A；15~28 min 20%~2% A；29 min 2%~90% A；29~30 min 90% A。 质谱条件：电喷雾离子源(ESI)，正负模式参数相同，采集模式为MS e 轮廓图。数据采集范围m/z 50~1200。碰撞气氩气；雾化气(N2)体积流量为600 L/h，脱溶剂气温度为350℃，锥孔气流量为50 L/h，离子源温度110℃，毛细管电压2.0 kV，高能量扫描电压30~40 V。 3.3. 结果 通过MassLynx V4.1软件进行数据采集，将所得数据在UNIFI平台中快速匹配数据库，选择误差小于10ppm的化合物通过对比对照品、查看二级质谱碎片离子信息、查阅文献、结合质谱裂解规律等方法推断鉴定化合物成分及来源。正模式下共推断和鉴定化合物82种，负模式共推断和鉴定化合物19种，结果分别见表1和表2。 正负模式下的色谱图及鉴定结果 采集的数据以时间(分钟)为横坐标，一级质谱峰高百分比为纵坐标绘图，分别得到图1和图2。对两张图上主要色谱峰进行数字标识，后结合该色谱峰的母离子峰和碎片离子峰进行结构确证。根据色谱峰保留时间，鉴定出的分子式、一级质谱、加合物的形式、真实值与理论值的误差、二级碎片和鉴定的化合物进行制表，分别得到表1和表2。 图1. 截叶铁扫帚醇提物UPLC-Q-TOF-MS E 正模式下的基峰离子流图 Table 1 Identification results of positive mode Lespedeza cuneat 峰号 保留时间(min) 分子式 观测m/z 加合物 误差ppm 碎片离子 鉴定 1 0.78 C 18 H 24 O 12 455.1165 +Na −1.5 127.039、97.028 车叶草酸 2 0.8 C 14 H 16 O 9 351.0692 +Na 2.1 163.060 多糖 3 0.83 C 5 H 5 N 5 O 152.0572 +H −2.7 85.027、111.043、135.030 鸟嘌呤 4 1.6 C 10 H 13 N 5 O 4 268.1046 +H −0.4 92.023、119.034、236.078 腺苷 5 1.75 C 14 H 18 O 9 348.1295 +NH 4 5.6 186.0786 1-O-vanilloyl-glucose 6 1.84 C 9 H 8 O 2 166.0868 +NH 4 −2.8 91.053、103.055 二氢香豆素 7 2.92 C 15 H 20 O 10 383.0954 +Na −1.6 140.046、181.049 1-O-(4-羟基-3，5-二甲氧基苯甲酰)-吡喃葡萄糖 8 3.65 C 8 H 8 O 2 137.0603 +H −5.1 122.036 对二甲基苯醌 9 3.97 C 32 H 38 O 19 727.2086 +H −0.5 430.085577.154 王不留行黄酮苷 10 4.0 C 27 H 30 O 16 611.1612 +H −6.6 130.064、287.053 槲皮素-3-O-鼠李糖苷-7-O-葡萄糖苷 11 4.14 C 15 H 14 O 6 291.0869 +H −1.8 123.043、139.039、153.055 儿茶素 12 4.21 C 33 H 40 O 19 741.2242 +H −1.5 433.112、595.165 山奈酚-3-O-鼠李糖基-芸香糖苷 13 4.55 C 19 H 30 O 8 409.1838 +Na −2.0 189.127、207.138 roseoside 14 4.6 C 23 H 22 O 13 524.1404 +NH 4 −0.7 202.046 iso-quercitrin 6’-acetate 15 4.67 C 23 H 22 O 11 475.1240 +H −2.2 163.038343.083 1，5-anhydro-glucitol 16 5.34 C 27 H 30 O 16 611.1612 +H −0.3 565.154 sophorin 17 5.55 C 33 H 24 O 10 581.1448 +H 2.7 137.022、475.101、565.150 三桉胶树黄酮 18 5.75 C 21 H 20 O 11 449.1084 +H −1.6 269.044、329.065、431.097 异荭草素 19 6.06 C 26 H 28 O 14 565.1557 +H −1.6 145.028547.144 异夏佛塔苷 20 7.18 C 26 H 36 O 12 563.2104 +Na 0.1 163.075399.103 1，3-dihydroxy-glucopyranoside 21 7.29 C 34 H 26 O 10 595.1604 +H 4.0 165.017、283.058 7，4，7”，4”-四甲基阿曼托黄素 22 7.8 C 26 H 28 O 14 565.1557 +H 0.6 271.060、415.102、433.112 夏佛塔苷 23 8.25 C 24 H 30 O 9 480.2234 +NH 4 −2.5 109.027、135.043 野马追内酯A 24 8.3 C 19 H 28 O 11 433.1710 +H −1.5 119.048 darendosideA 25 8.31 C 21 H 20 O 10 433.1135 +H −1.9 177.018255.065 阿福豆苷 26 8.93 C 25 H 26 O 13 535.1452 +H −0.5 271.06 茜根酸 27 9.53 C 21 H 20 O 10 433.1135 +H −1.0 271.060、313.071 牡荆苷 28 10.47 C 23 H 28 O 13 535.1428 +Na −3.1 121.027 胡黄连苦苷Ⅱ 29 10.54 C 27 H 30 O 15 595.1663 +H 0 119.048、269.045 芹菜素-6，8-二-C-半乳糖苷 30 10.78 C 20 H 26 O 7 401.1576 +Na 2.2 167.070、211.096 3-hydroxypropyl-1，3-proparediel 31 10.8 C 22 H 26 O 8 419.1706 +H −2.8 249.112、389.158、401.158 丁香脂素 32 10.82 C 22 H 22 O 11 463.1240 +H −1.4 299.055、328.057 异金雀花素 33 10.93 C 21 H 20 O 11 449.1084 +H −1.3 181.048、432.106 红蓼素 34 10.98 C 27 H 36 O 11 554.2601 +NH 4 −0.7 219.101、371.148 3-(hydroxymethyl)-mannopyranoside 35 11.08 C 28 H 32 O 15 609.1819 +H −6.2 146.059、271.059 iso-spinosin 36 11.24 C 11 H 16 O 3 219.0997 +Na 9.4 137.059 黑麦草内酯 37 11.45 C 15 H 10 O 6 287.0556 +H 0 118.041、119.048、163.039 异黄芩素 38 11.48 C 26 H 34 O 10 524.2496 +NH 4 −0.9 219.101、341.138 aviculin 39 11.57 C 21 H 20 O 11 449.1084 +H −1.8 95.048、109.027 cynaroside 40 11.76 C 31 H 42 O 18 725.2269 +Na 2.5 167.07 新女贞子苷 41 11.89 C 17 H 12 O 6 313.0712 +H −0.1 133.028、283.060 2-乙酰基大黄素 42 11.91 C 26 H 34 O11 540.2445 +NH 4 −3.7 146.059、389.159 7-methoxy-glucopyranoside 43 12.43 C 20 H 22 O 4 327.1596 +H −1.8 107.048、175.071、160.052 licarinA 44 12.47 C 15 H 10 O 6 287.0556 +H −0.5 137.059、153.018 木犀草素 45 12.71 C 15 H 12 O 6 289.0712 +H −0.7 123.043、270.050 3，5-Dimethoxy-1，6-dihydroxyanthone 46 12.78 C 20 H 24 O 6 361.1651 +H −2.9 137.059 (+)-isolariciresinol 47 12.83 C 17 H 24 O 5 331.1521 +Na −1.1 137.058、219.100 乙酰大花旋覆花内酯 48 13.08 C 30 H 34 O 15 657.1795 +Na −2.1 263.048 山奈素-7-O-鼠李糖苷 49 13.18 C 15 H 10 O 7 303.0505 +H 1.8 135.044、287.056 herbacetin 50 13.35 C 16 H 12 O 5 285.0763 +H 1.3 107.048、253.049 calycosin 51 13.48 C 20 H 22 O 6 359.1495 +H −2.7 269.082、325.107 isobutylshikonin 52 13.51 C 21 H 24 O 7 389.1600 +H −3.6 125.059、357.133 trachelogenin 53 13.63 C 21 H 22 O 7 387.1444 +H −2.3 151.039、345.096 floranol 54 13.95 C 15 H 10 O 5 271.0606 +H −6.0 167.033 大黄素 55 14.09 C 18 H 20 O 6 355.1158 +Na 5.8 148.050、151.075 3-duartin 56 14.19 C 15 H 10 O 6 287.0556 +H 1.3 229.049 3-羟基黄芩素 57 14.26 C 17 H 14 O 7 331.0818 +H 0.1 107.048、315.050 商陆素 58 14.32 C 17 H 16 O 7 333.0974 +H 1.3 151.039、167.034 1-羟基--四甲氧基黄酮 59 14.38 C 22 H 24 O 8 417.1549 +H −0.6 385.128 1-acetoxypinoresinol 60 14.62 C 20 H 18 O 7 371.1131 +H −2.8 149.023、181.049 sesamolin 61 14.64 C 20 H 30 O 5 351.2171 +H −1.6 167.070、235.171 14-去氧-12-羟基穿心莲内酯 62 15.04 C 15 H 10 O 4 255.0657 +H −8.2 107.048、151.038 1-羟基-3-甲氧基蒽醌 63 15.15 C 18 H 34 O 5 353.2304 +Na −0.8 111.08 天师酸 64 15.35 C 20 H 22 O 5 343.1545 +H −3.2 180.077 风藤素B 65 15.62 C 20 H 18 O 6 355.1182 +H 2.6 151.038 细辛脂素 66 15.64 C 17 H 14 O 6 315.0869 +H −0.4 131.049、283.060 尼泊尔鸢尾异黄酮 67 16.32 C 48 H 78 O 18 943.5266 +H −0.7 273.222、423.361 大豆皂苷І 68 16.85 C 20 H 20 O 6 357.1338 +H −0.8 123.043 三白酯酮 69 17.67 C 28 H 42 O 11 577.2625 +Na −0.4 93.056 11-methoxy-6-ylhexopyranoside 70 18.04 C 20 H 16 O 6 353.1025 +H 0.9 298.047 licoisoflavoneB 71 18.58 C 20 H 16 O 6 353.1025 +H −1.7 213.055、297.039 sophora-iso-flavoneA 72 19.42 C 20 H 16 O 5 337.1076 +H −1.3 283.06 猫尾草异黄酮 73 19.68 C 25 H 26 O 6 423.1808 +H −3.9 177.018、311.054 6，8-diprenylorobol 74 20.02 C 15 H 16 O 3 262.1443 +NH 4 −4.9 213.055 蛇床子素 75 20.2 C 20 H 22 O 7 392.1709 +NH 4 −1.8 167.072 1-羟基松脂酚 76 20.43 C 42 H 68 O 12 787.4608 +Na 3.2 133.086 柴胡皂苷E 77 23.11 C 20 H 34 O 3 323.2586 +H 2.6 261.223 豨莶精醇 78 23.85 C 29 H 46 O 411.3627 +H −3.3 107.049、175.111 4，22-二烯-3-酮豆甾烷 79 24.25 C 30 H 48 O 425.3783 +H −2.4 121.100、135.116 羽扇豆烯酮 80 24.57 C 30 H 46 O 3 455.3525 +H −2.9 439.322 (5xi，18xi)-3-oxolup-20-en-28-saure 81 24.64 C 29 H 50 O 4 463.3787 +H −5.6 97.100 tocospiroA 82 25.19 C 30 H 48 O 2 441.3773 +H −2.1 189.164、427.363 glochidonol 表1. 正模式下截叶铁扫帚鉴定结果 图2. 截叶铁扫帚醇提物UPLC-Q-TOF-MS E 负模式下的基峰离子流图 Table 2 Identification results of negative mode Lespedeza cuneat 峰号 保留时间(min) 分子式 观测m/z 加合物 误差ppm 碎片离子 鉴定 1 0.79 C 12 H 22 O 11 341.109 -H 0.2 129.020、177.039、267.072 蔗糖 2 0.82 C 7 H 14 O 7 209.0667 -H 0.3 149.046、177.039 景天庚酮糖 3 0.94 C 4 H 6 O 5 133.0151 -H 6.6 115.004 2-羟基-丁二酸 4 3.93 C 27 H 30 O 16 609.1485 -H 3.9 489.104、519.113 槲皮素-7-O-葡萄糖苷 5 5.63 C 21 H 20 O 11 447.0947 -H 3.1 133.030、268.037、325.035 红蓼素 6 5.63 C 21 H 18 O 11 445.O789 -H 2.8 299.056、369.062 黄芩苷 7 7.15 C 27 H 30 O 15 593.1541 -H 4.8 413.089、473.108 芹菜素-6，8-二-C-半乳糖苷 8 7.67 C 26 H 28 O 14 563.1438 -H 5.7 269.046、443.099 异夏佛托苷 9 8.07 C 21 H 20 O 10 431.0996 -H 2.8 269.045 牡荆苷 10 9.27 C 27 H 30 O 14 577.1583 -H 3.4 269.045、413.088 牡荆苷-2''-O-鼠李糖苷 11 11.05 C 28 H 32 O 15 607.1698 -H 4.8 312.062、353.066 2''-0-葡萄糖基当药黄素 12 11.18 C 20 H 18 O 11 433.0785 -H 2.0 300.027 avicularin 13 11.88 C 25 H 26 O 13 533.1316 -H 3.0 282.052、341.066 茜根酸 14 12.57 C 24 H 26 O 14 537.1278 -H 5.2 399.094、417.104、447.093 西伯利亚远志皂苷咕吨酮B 15 13.17 C 15 H 10 O 7 301.0358 -H 1.4 133.030、285.040 草棉黄素 16 13.32 C 15 H 8 O 7 299.0201 -H 1.2 285.04 1-羟基-3，7，8-三甲氧讪酮 17 14.28 C 16 H 14 O 6 301.0721 -H 1.2 165.019、271.024 decussatin 18 15.14 C 18 H 34 O 5 329.2337 -H 1.2 171.103、139.113 天师酸 19 18.05 C 18 H 34 O 4 313.2388 -H 1.1 201.113 癸二酸二丁酯 表2. 负模式下截叶铁扫帚鉴定结果