DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 3. 结果分析 3.1. 软土地区GPST盾构隧道结构上浮规律 模型共掘进80环长度，通过调整δ，将地表沉降值控制在规范要求内，掘进结束后，取衬砌结构拱顶垂直位移作为上浮观测值，如图4所示。 图4. 不同埋深条件下隧道上浮量 可以看出在0.6倍洞径埋深时上浮量最小约为20 mm，此后掘进过程中上浮量近似直线递增，并在0.3倍洞径埋深时到达峰值46 mm，之后随着埋深变小，上浮量逐步减小。 在不同埋深下，隧道结构上浮量有着明显的变化，呈现不同的变化规律，所以在超浅埋盾构隧道工程中，针对不同的埋深情况下应采用不同的抗浮措施来减小隧道上浮，针对该工程不同埋深工况拟采用如表2所示抗浮技术。 Table 2 Anti-floating technologies on Longshui South Roa 抗浮措施 隧道埋深 隧道内压重 0.6D-0.1D 地面堆载 0.6D-0.5D 钢筋混凝土抗浮板 0.5D-0.1D 表2. 龙水南路抗浮技术 3.2. 地面堆载对抗浮的影响规律 由于工程场地限制，地面堆载拟采用在隧道水平投影范围内堆载的方式，地面堆载可采用填土或者管片结构等堆载物，本模型采用在投影范围内施加均布荷载的方式模拟地面堆载的抗浮效果。 考虑到本工程坡度为5.9%，属于大坡度盾构，本文为对比地面堆载和内压重两种抗浮措施，选取埋深为0.6D至0.1D范围为地面堆载区，其中均布堆载选取10 kN/m 2 至60 kN/m 2 六种工况，模拟结果如图5和图6所示。 图5. 均布地面堆载下隧道结构上浮规律 图6. 均布地面堆载下隧道结构上浮量减小百分比 由图5可知，随着堆载重量的增加，隧道结构上浮量有显著减小，且在0.3D埋深时抗浮作用最为明显。此外，采用地面堆载的方式在0.3D埋深时虽可以有效减少隧道上浮量，但当堆载大于40 kN/m 2 时，每增加10 kN/m 2 时，隧道最大上浮量仅减少5 mm左右，在采用60 kN/m 2 堆载工况时，拱顶上浮量仍有20 mm，说明地面堆载的抗浮作用具有明显的局限性。 由图6可知地面堆载每增加10 kN/m 2 ，隧道上浮量可减少10%左右，且不同埋深下，抗浮效果差距较小，但随着荷载增大，上浮量减小百分比增量会逐步减小，说明抗浮作用逐步减弱。 3.3. 隧道内压重对抗浮的影响 隧道内压重设计范围为0.6D埋深至工作井处，数值模拟中，采用在衬砌结构下半部分结构面上施加竖直向下均布荷载的方式模拟内压重，见图7。 图7. 隧道内压重模拟示意图 本文结合实际工程，选取埋深为0.6D至工作井处为隧道内压重区域，其中内压重同样选取10 kN/m 2 至60 kN/m 2 六种工况。随着掘进过程中，衬砌安装完成后施加隧道内压重，模拟结果如图8所示。 图8. 隧道内压重对结构上浮量的影响 由图8可知，采用隧道内压重的方式可以显著减小隧道上浮量，当内压重到达50 kN/m 2 时，隧道结构上浮量可控制在10 mm以内，并且产生的隧道上浮变化较为平缓。 由图9可知，在不同埋深比下，同种荷载引起的隧道上浮量减小百分比没有明显不同，且每增加10 kN/m 2 ，隧道结构上浮量百分比约少20%，当采用50 kN/m 2 内压重时，隧道上浮量减少百分比可达80%以上。 图9. 隧道内压重对结构上浮量减小百分比的影响 由图10可以得知，无论是采取地面堆载还是隧道内压重，在软土地区大直径浅埋盾构隧道掘进过程中，结构上浮量减小百分比随压重重量近似线性变化，且同等荷载工况下，内压重的方式抗浮效果明显优于地面堆载，隧道上浮量减小百分比约为3倍关系。 图10. 地面堆载与隧道内压重抗浮效果对比 3.4. 抗浮板对隧道抗浮的影响 不影响施工前提下，在0.5D埋深至工作井处施加钢筋混凝土抗浮板，如图11所示，抗浮板和土体采用绑定约束，保证两者间变形协调。 盖板采用C40混凝土，厚度为0.7 m，宽度为14.36 m。不考虑塑性变形，采用线弹性本构模拟，参数如表3： 图11. 混凝土盖板模型(绿色区域) Table 3 Simulation parameters of reinforced concrete anti-floating boar 材料 γ (kN/m 3 ) E (kPa) μ 抗浮板 25 32.5 × 10 6 0.3 表3. 钢筋混凝土抗浮板模拟参数 由图12可知采用混凝土抗浮板时，隧道结构最大上浮量由46 mm降低至30 mm，并且在不同埋深比下，隧道上浮量减小百分比均在35%左右，但仅采用抗浮板并不能使上浮量达到规范设计要求。 图12. 混凝土盖板抗浮效果 实际工程中一般采用多种抗浮措施，从而起到高效经济的抗浮效果。本工程拟采用地面堆载、抗浮板、隧道内压重复合抗浮措施，如表2。 模拟结果图13表明，当采用地面堆载、抗浮板、隧道内压重复合抗浮措施时，隧道上浮量可有效控制在10 mm以内，隧道上浮量可减小80%以上，相对于单一抗浮措施，多种抗浮措施可以同时满足工程场地限制、经济性等要求。 图13. 复合抗浮措施
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user: 4. 结论 本文借助Abaqus有限元模拟软件，分析了软土地区大直径GPST盾构隧道在不同埋深条件下隧道结构的上浮规律，并研究了不同抗浮措施对隧道结构抗浮的影响规律，可得出以下结论： 1) 软土地区大直径盾构隧道在浅覆土工况下，当埋深比为0.3D时，隧道结构上浮量达到最大值。 2) 采用地面堆载或内压重等压重措施时，不同埋深比下，隧道结构上浮量减小值未有明显不同，但同等荷载工况下，内压重抗浮效果明显优于地面堆载，且引起的隧道上浮量减小值百分比约为3倍关系。 3) 在不同埋深比下，采用抗浮板的方式均能起到很好的抗浮效果，结构上浮量减小百分比约为35%。 4) 地面堆载以及隧道内压重虽均有很好的抗浮效果，但其适用条件也受到了工程场地、隧道结构等限制，为了达到高效经济的抗浮效果，建议采用复合抗浮措施。
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user: 摘要 氢能作为新能源的优势显著，广受发达国家支持，我国氢能燃料电池汽车研发、产业化进程逐步加快，加氢站具有广阔的发展前景，但安全生产与人民群众生命财产安全息息相关，本论文通过搜索大量法律法规、标准规范，对加氢站选址时定量风险分析——如外部安全防护距离可参考依据的适用性进行分析，我国关于加氢站选址的定量风险分析依据尚待明确和完善。
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user: 1. 引言 氢能利用的角色和价值在世界能源的转型过程中愈加显著，近年来，主要发达国家都大力支持氢能产业的发展，许多能源、汽车、金融公司都陆续开展有关氢能的业务。当前，我国燃料电池汽车产业整体仍处在研发、示范阶段，产业化进程处于起步阶段。氢能燃料电池汽车拥有环保和节能等显著优势，加氢站市场需求良好，有长远的发展前景。 但是，安全生产是与人民群众的生命财产息息相关的，经济社会的协调和健康发展离不开安全生产。挪威首都奥斯陆加氢站和韩国江原道江陵市氢气储罐爆炸事故更是为氢能发展敲响警钟。 同时依据《危险化学品建设项目安全监督管理办法》 [ 1 ]，国内将要大力发展的新建加氢站属于带新建危险化学品储存设施的建设项目，更应从严对待。 另外，依据《氢气站设计规范》(GB50177-2005) [ 2 ]，加氢站属于甲类生产，其火灾危险性高。因此针对加氢站选址时进行定量风险分析十分必要。
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user: 2. 加氢站现用定量分析方法局限性分析 目前针对加氢站可采用的定量风险分析方法有QRA、故障树(FTA)、事件树(ETA)等，其中QRA定量风险分析中的事故后果模拟结果更为直观。 在QRA分析中，根据物质属性、装置特性等选择事故后果模拟类型。氢气属于易燃气体，其泄漏后与空气混合，当达到爆炸极限时若遇到点火源就会立即发生燃烧或爆炸，加氢站储存压缩氢气的储氢瓶又属于压力容器，存在发生压力容器物理爆炸的可能性。因此在加氢站QRA分析中，火灾爆炸和物理爆炸事故后果模拟最具有代表性。 文章选取1台45 MPa、30 m 3 的储氢罐作为评价对象，模拟分析其发生泄漏并引发的蒸气云爆炸事故和物理爆炸事故后果。模拟分析采用南京安元科技有限公司的QRA定量计算方法进行计算，该软件以领先的安全风险管理模型及算法为核心(模型、算法等核心技术，已获得国家科技进步奖)，以自主云计算平台为支撑，基于风险管理，系统工程等综合学科理论研发而成，致力于安全风险专业评估。计算过程通过对企业及周边环境的基本信息、装置信息、工艺信息，管理信息等静态信息和动态信息进行数据采集挖掘，利用定量风险评估系统中的专业分析模型，进行计算模拟，准确度和精确度较高。 分析过程根据项目情况建立事故模型，并选取必要的参数输入软件，得出结果如下： 1) 蒸气云爆炸事故模拟分析结果：死亡半径：3.96 m；重伤半径：15.41 m；轻伤半径：29.97 m。 2) 压力容器爆炸事故模拟分析结果：死亡半径：28 m；重伤半径：36 m；轻伤半径：47.5 m。 由上述模拟结果可见，由于事故后果模拟一般仅仅针对一个装置或者就近的一组设备进行分析，其影响后果往往只涉及到该装置或装置组附近的区域，可预见的后果影响一般也只是分析到储氢瓶(罐)区附近或者其所在站区附近，难以预见新建加氢站在选址时其对周边可能存在的更远距离范围的影响。 而加氢站作为新能源的经营场所，且燃料电池在我国还处于起步阶段，良好且经济的运输条件和地理位置又很必要，所以针对加氢站选址时进行合理有效的外部安全防护距离预测十分重要。
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user: 3. 外部安全防护距离的适用性探讨 3.1. 个人和社会风险依据适用性的分析 进行外部安全防护距离确定时的必要前提是进行个人和社会风险分析。目前，个人风险和社会风险分析的依据是《危险化学品生产装置和储存设施风险基准》(GB36894-2018) [ 3 ]，该标准适用于危险化学品生产装置和储存设施个人风险和社会风险的可接受风险基准值以及选址和周边土地使用规划时的风险判定。 通过咨询该标准的相关起草人员，该标准适用于生产装置及为生产服务的储存设施，制定标准时未考虑加氢站等城市储存经营情况。 3.2. 外部安全防护距离依据适用性分析 目前，外部安全防护距离的依据有2个：《危险化学品生产装置和储存设施外部安全防护距离确定方法》(GB/T37243-2019) [ 4 ] 和《危险化学品生产、储存装置个人可接受风险标准和社会可接受风险标准(试行)》(原安监总局[ 2014 ]13号公告) [ 5 ]。具体适用性分析过程如下。 3.2.1. GB/T37243-2019适用性分析 1. 标准范围的界定分析 该标准规定和适用于确定危化品生产装置和储存设施的外部安全防护距离，但是不适用于汽车加油加气站，加氢站是为燃料电池进行氢气加注的，属于加气站的一种。 2. 标准流程确定分析 该标准在外部安全防护距离的流程确定中做出进一步的范围确定： 首先是针对爆炸物选取事故后果模拟法，根据《危险化学品目录》(2015年版) [ 6 ] 加氢站涉及的氢气不属于爆炸物。因此不适用标准中的事故后果法。 其次是针对涉及有毒气体或易燃气体，且其设计最大量不小于GB18218中规定的临界量时适用此标准中定量风险评价法。加氢站的氢气属于易燃气体，但是一般为氢能燃料电池汽车服务的城市加氢站的氢气设计最大量基本不会超过GB18218中的临界量。 最后标准规定了在上述两种情况均不涉及时，则依据相关标准确定相应危化品生产装置和储存设施外部安全防护距离，即相应标准规范中的防火间距。 因此，GB/T 37243-2019不适用于目前国内将大力发展的加氢站的外部安全防护距离确定。 3.2.2. 原安监总局[ 2014 ] 13号公告适用性分析 该公告公布和使用时间距今时间较长，该公告规定了定量风险评价和危险指数两种方法，其实际应用情况有所局限。具体分析如下： 1. 定量风险评价方法 该方法适用的范围需满足以下3个条件之一： ① 涉及国家重点监管危险化工工艺 [ 7 ] [ 8 ]； ② 构成一级、二级重大危险源且涉及国家重点监管危化品 [ 9 ] [ 10 ]； ③ 构成重大危险源且设计有毒气体(符合原安监总局40号令 [ 11 ] )规定的，按其规定执行)。 ① 加氢站不涉及国家重点监管化工工艺；②、③一般为氢能燃料电池汽车服务的城市加氢站基本不构成重大危险源，且氢气不属于有毒气体。 因此加氢站不适用该公告中定量风险评价法。 2. 危险指数法 该方法需同时满足以下3个条件：① 不属于国家重点监管危险化工工艺；② 不涉及重点监管危化品或涉及重点监管危化品但不构成一、二级重大危险源；③ 涉及毒性气体但不构成重大危险源。 一般为氢能燃料电池汽车服务的城市加氢站基本不构成重大危险源，且氢气不属于有毒气体。 因此加氢站不适用该公告中危险指数法。 通过以上分析可见，外部安全防护距离的确定更加适用于带危险化学品生产装置和储存设施的危险化学品项目。目前，仅带储存经营的加氢站未见进行个人风险和社会风险分析及计算外部安全防护距离的明确适用规范。
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user: 4. 其他可参考/引用定量分析依据探索 根据上述分析可知，目前已有的明确进行外部安全防护距离确定的定量分析方法不适用于新建加氢站，文章在此基础上进一步探索其他依据中关于定量风险分析参考的可能性。文章通过查找大量法律法规、标准规范，对加氢站选址时可以参考/引用的法律法规、标准规范进行分析，通过进一步分析，关于加氢站选址时可依据的法律法规、标准规范有很多，但是大部分强调的是建设项目安全管理、危险源辨识、定性或者半定量(HAZOP等)分析、安全仪表等方面的内容，未明确或包含加氢站选址时进行定量风险分析-如外部安全防护距离的依据或者说明。具体分析内容详见图1。
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user: 5. 结论 随着科技的发展，时代的进步，人类在不断寻求更加环保、经济的新型能源，以实现更加长远的可持续发展。但是在此过程中势必要面临发展、环保、安全等多方面问题的综合挑战，但是在发展中要始终贯彻“安全第一、预防为主、综合治理”的方针。近观多年，危险化学品事故频发，其中不乏有关氢气的安全事故，虽然已经发生的有关氢气的事故原因和后果不尽相同，但是不得不让我们警惕面对，在提倡新能源——氢能发展的同时，势必要坚守安全的红线，氢气属于危险化学品，虽然其可以作为新能源，但是不能忽视其危险性，要更加关注其作为新能源使用的同时可能存在更大的隐患，尤其是在化工安全事故、电动车自燃事故频发的当下。 加氢站是服务于氢能燃料电池汽车，一般周边环境比较复杂，因此更加应该引起重视。氢能的发展应在确保安全的基础上，稳步而有序的发展，不能追求快。 目前关于加氢站选址时可进行的定量风险分析——事故后果模拟又有所局限，因此，明确和完善加 图1. 加氢站选址时参考/引用的法律法规、标准规范说明 [ 12 ] - [ 18 ] 氢站在选址时进行合理的定量风险分析——如外部安全防护距离分析的依据对安全发展的意义重大。这也再次提示我们在新兴产业快速发展的同时，安全方面的法律、法规、标准、规范的更新速度略微滞后。
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user: 摘要 李思聪出使缅甸，是明朝初年的重要历史事件。过去，由于资料短缺，对其考证与解读非常有限。本文在已有的《明史》《明实录》基础上，结合新发现的李思聪诗作、《百夷传》研究新进展和笔者实地考察，考证并深度解析这一历史事件。简言之，李思聪的使缅活动，为期约一年，来回约8000公里。从南京出发，经湖南、贵州、云南，进入百夷，再至缅甸。同行者为钱古训。他劝谕缅王与百夷首领，使二者息兵修好，达到了罢兵安境的外交目标。归后所写的《百夷传》一书，可以纠正钱古训《百夷传》和张洪《南夷书》的错漏，具有很高的历史学、民族学、文学价值。对此历史事件的进一步分析表明，土司制的三个特征(即：强大的军事力量、完整的行政体系、文化的缺陷)，是导致少数民族土司政权的内乱与外战的根源。这些考证与解析将有助于我们理解当前的缅甸政局，预测缅甸政局和中缅关系的走向。
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user: 1. 引言 近来，缅甸政局大变，世界各国为之侧目。缅甸是我国山水相连的近邻，边境相连2000余公里。由于紧密相连的地理位置，缅甸与我国至少有2000年的交往史 [ 1 ]。古时，中国称缅甸一带为“朱波地”；而中缅的友好关系也被形容为“胞波友谊”，意即：兄弟般的友谊。 中缅之间的交往，可以追溯到公元前四世纪的商业往来。不过，正式邦交始于汉朝；宋宁宗时，其向我国进白象，始有“缅甸”之名。而真正密切的交往则发生在元朝，因为元朝将缅甸一带作为藩属国纳入其版图。这种情形一直延续到明朝、甚至清朝 [ 2 ]。一旦缅甸或中缅边境发生变故，中原皇帝即派使臣前往调停。明朝初年，李思聪出使缅甸、百夷 1 的就是一例。 近代学者江应樑对《百夷传》进行了深入的研究。但他坦言，对《百夷传》作者的生平，知之甚少，因此，李思聪使缅的具体过程尚不清晰。2016年，因中国传统村落建设，在李思聪的出生地，发现其大量珍藏的文史材料 [ 3 ]。本文拟通过文献、实物、实地的考证，对此外交事件进行深度解析。我们相信，这将有助于国人理解当前缅甸政局，预测缅甸政局和中缅关系的走向。
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user: 2. 主要文献依据 记录李思聪使夷缅的历史文献主要有四种，即：《明史》、《明实录》、李思聪著《百夷传》(图1)，以及李思聪使缅途中写下的诗作(图2)。 图1. 李思聪《百夷传》(书影) 图2. 筱塘村保存的李思聪《过怒江百夷叼孟傅典等来迎》诗(实物，左)、古井碑文(中)以及李思聪墓地(右) 《明史》 《明史·卷三百十四·列传第二百二·云南土司 2 二》“(洪武)二十八年，缅国王使来言，百夷屡以兵侵夺其境。次年，缅使复来诉。帝遣行人李思聪等使缅国及百夷。思伦发闻诏，俯伏谢罪，愿罢兵。适其部长刀干孟叛，思聪听朝廷威德，谕其部众，叛者稍退。思伦发欲倚使者服其下，强留之，以象、马、金宝为赂，思聪谕却之。归，述其山川、人物、风俗、道路之详，为《百夷传》以进，帝褒之”。《明史·卷三百十五·列传第二百三·云南土司三》“二十八年，卜剌浪遣使贡方物，诉百夷思伦发侵夺境土。二十九年复来诉。帝遣行人李思聪、钱古训谕缅及百夷，各罢兵守土，伦发听命”。《明史·卷九十七·志第七十三·艺文二》：“李思聪《百夷传》一卷”。 《明实录》 《明实录·太祖高皇帝实录·卷二百四十四》：洪武二十九年二月二日：“庚寅，遣行人李思聪、钱古训使缅国及百夷。诏缅国王曰……。思伦发闻诏恐惧，俯伏谢罪，愿罢兵。适其部酋刀干孟叛，思聪等以朝廷威德，谕其部众，叛者稍退。思伦发欲倚使者，以服其下，强留思聪等，又以象、马、金宝为馈。思聪等为书谕却之，谓：“中国不以象、马、金、玉为宝。所宝者，惟忠臣烈士、强兵勇将、孝子顺孙。宜送使者还朝，自此不为侵扰，斯可以明忠君之心”“思伦发大喜，邀思聪等设晏为乐，率其部众送之境上。思聪等还具奏其事，且著《百夷传》纪述其山川、人物、风俗、道路之详以进。上以其奉使不失职，谓其才可用，甚喜之，各赐衣一袭。”《明实录·太祖高皇帝实录·卷二百四十九》：洪武三十年正月十五日：“陞行人司副杨砥，为湖广布政使司左参议；行人钱古训为右参议；崔豫为江西布政使司左参议；李思聪为右参议。” 《百夷传》 《百夷传》是历史地理类的重要古籍，对于了解西南少数民族具有无可替代的价值。据《明史》《明实录》所载，《百夷传》作者应该是李思聪；但现在看到的《百夷传》，大多署名为钱古训所著。不仅作者名，连书名也有混乱之处。成书于乾隆年间的《直隶桂阳州志·二十八卷》说，李思聪所写的是《百夷纪略》。这种混乱的情形，从明清开始都未能解决。直到1978年，江应樑给予最完美的解答 [ 4 ]。 根据江应樑的观点，李思聪、钱古训归朝后，二人合写贡书，上呈朱元璋，这就是《百夷传》的呈贡本，后藏之于宫内。然后，二人根据各自构思，又撰写不同的《百夷传》：李思聪著《百夷传》(简称“李《传》”)和钱古训著《百夷传》(简称“钱《传》”)。李《传》系手抄本，被全文收载于《景泰云南图经志书·卷十》中。《景泰云南图经志书》初版刊于公元1455年(“景泰”年间)；随后，又被收入《续修四库全书》中，在李《传》中有“李思聪任行人”的表述(图1) [ 5 ]。而钱《传》则为单行书，一直被转抄、收藏，因此，见过此书的学者较多。于是，见到李《传》的学者，就说《百夷传》的作者是李思聪；见到钱《传》的学者，就说《百夷传》的作者是钱古训，各执一词。这种混乱的根源，就是由于过去信息不发达，没有一位学者，能同时获得《百夷传》的两个版本 [ 4 ]。现在，我们可以很轻松地收集两个版本进行对比，一判了然：李《传》和钱《传》，就是两个不同的版本。 在钱《传》后面，附有《杨砥百夷传序》。序文称“复与俱至御前，悉陈其所以，皇上览其书，大悦，即命有司付之史馆……，人各赐紫衣一袭，以旌其贤。居无何，升思聪江西参政；古训与砥湖广参政。一日，古训以其传出而见示，且属余序其简端”。杨砥(？~1418年，杨大用)作此序是在洪武戊寅年(1398年)仲冬，此时，杨钱二人已到湖广任参政，系同事关系；而李思聪则调至江西。因此，序中对钱古训的溢美，是可以理解的。文中提到的“书”，就是江应樑所说的呈贡本；文中提到的“传”，就是钱《传》。所以，《四库全书·百夷传提要》判定“今据砥序及夏原吉后序，则实古训所作”，是错误的。正是由于砥序的溢美，钱《传》才得到广泛地传播；客观上，钱《传》比李《传》内容更丰富，更易引起学者们的关注。所以，到目前为止，对钱古训以及钱《传》的研究，比对李思聪及李《传》的研究还要多 [ 1 ] [ 4 ] [ 6 ] [ 7 ]。
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user: 3. 李思聪出使缅甸的历史背景 缅甸是一个多民族国家，与我国云南接壤；缅甸北部的掸族，也就是云南的傣族。公元11世纪，缅甸统一，建立蒲甘王朝(1044~1297年)，国都在缅甸腹地蒲甘城，以上座部佛教为国教，后被元朝所灭。 蒲甘王朝的东北就是麓川 3 一带。此地，傣族建立了勐卯国雅鲁王朝(954~1330年)。雅鲁王朝曾与蒲甘王朝联姻示好，并臣服于汉人所建的大理国(937~1094年，1096~1253年)。1336年，傣族首领思可发接替雅鲁王朝 4 ，建立勐卯国思氏王朝。至明朝初年，思氏王朝已传三代，其时的国主为思伦发。思伦发被朱明王朝封为麓川平缅宣慰 5 司(平缅宣慰司、麓川平缅军民宣慰司) [ 4 ]。 蒲甘王朝被灭后，元朝采用土司–宣慰的治理模式。正如李《传》中所说，“皆设土官管辖，以大理金齿都元帅府总之，事有所督，则委官以往，冬去春回”。在这种间接松散的管理之下，土司权势很大。李《传》所说“各有土豪主之，不相统摄”。所以，缅甸腹地四分五裂，存在不少割据的土司政权。最大者就是阿瓦王朝(1364~1555年，位于今曼德勒，明朝设置缅中宣慰司)和勃固王朝(白古王朝，1287~1531年，位于蒲甘城，明朝设置大古剌宣慰司)。 这些土司政权拥有自身的军事力量，多以大象作为主要战斗工具。所以，李《传》载：“倚象为声势。每战，则用绳索自缚于象上”。当时，战象具有很强的战斗力，凭此，勐卯国能称霸麓川百余年，李《传》云：“洪武辛酉，天兵南下，犹负固未服”。此处“天兵”，指明朝军队。 相应地，这些土司政权还建立了的自身行政体系。麓川的土司政权就是一个典型的例子。在土著人看来，土司政权就是他们的国(勐卯国)；受明朝册封的宣慰使，本质上，就是其国主，具有无法挑战的绝对权威。李《传》：“其下称宣慰曰‘昭’，犹中国称主人也”“见宣慰莫敢仰视。凡有问对，则膝行以前，三步一拜，退亦如之”。换言之，所有的臣民必须对宣慰使行皇上的跪拜礼。正因为这样，所以，“虽纳贡赋，奉正朔；而服食器用之类皆逾制度，元不能制”。在中原使臣看来，这就是僭越，李思聪便说百夷“上下僭奢”。 更重要的一个方面是，这些土司政权没有深厚持久的文化。这与中原一带形成强烈的反差。至朱明王朝时，中原文化形成儒佛道鼎立的稳定格局，深入民心，国人整体的道德素质高，被誉为“礼仪之邦”。虽朝代时有更迭，但礼仪不失，民风淳朴，社会安定。而土司政权，特别是麓川土司，地处边方，山高水深，交通信息受阻，不利于文化传播。不论是蒲甘王朝时的佛教，还是北方宋朝的儒佛道，甚至大理国的佛教，都没有传至麓川百夷。所以，李《传》：“夷人无阴阳、医卜、僧道之流”“父母亡，不用僧道”。夷人不崇尚道义与礼仪，只注重眼前的权势。“凡子弟有职名，则父兄跪拜，受之自若”，缺乏孝敬之心；“后绝无祭扫之礼也”，也没有追荐先祖之礼数。中原使臣认为凡此“官制礼乐之属，皆与中国不侔”。不侔，是中原士大夫的委婉表述，实际上，就是没有达到中原的道德水准。所以，夷人的心心所念者，无非权势、名利。为争权夺利，猜疑忌恨在所难免；而刀枪相向、流血身死之事，时有发生。 拥有自身的军事力量和行政体系，以及缺乏浓厚持久的以道德为导向的文化，这三点导致土司正权导致内乱频发。据李《传》，将王位由思可发传至思伦发的过程，已有台扁、昭肖发、思瓦发三王相断被杀(图3)。可谓内乱频仍，血腥不断。与之对比，蒲甘王朝、大理国、朱明王朝都没有出现如此频繁的夺位残杀。 图3. 由思可发传至思伦发的世系与夺位残杀图 上述的三个特征也容易导致对外扩张的战争。据李《传》：“洪武丙寅，复寇景东。明年，部属刀斯郎复犯定边县 [ 8 ] ”。对景东、定边县(今南涧县)的侵犯就是对朱明王朝的外战。公元1388年，明朝将领沐英(1345~1392年)派兵讨伐，将刀斯郎斩首。至此，百夷对朱明王朝心悦诚服，不敢再侵犯云南省。于是，向南进犯属于缅甸阿的瓦王朝，其王为明吉斯伐修寄(Minkyswasawky， 1367~1400年在位) [ 6 ]。同样地，阿瓦王朝土司政权，要定期向朱明王朝纳贡。洪武二十八年(公元1395年)，阿瓦王使臣来南京朝贡，向朱元璋控告思仑发，侵夺其境，阻断了朝贡的道路。朱元璋决定派使臣前往调解。李思聪出使缅甸，就是明朝皇帝朱元璋作出的外交决定。
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user: 4. 李思聪出使缅甸的相关人物 李思聪(1363~1398年)，字仲谋，号石林。出生于湖南省桂阳县和平镇筱塘村。该村现被列入中国传统村落 [ 9 ]。据笔者实地考察，村中古井上镶有一块刻于明朝万历三十九年(公元1611年)石碑，其碑文有“且与石林公之名播华夷，相媲美”之句(图2)。村外有其墓地。其验之于古籍，李思聪出生于该村，确凿无误。 据族谱资料，李思聪从小好学，天性慈孝。洪武二十七年(公元1394年)参加甲戌科殿试，登金榜二甲第12名，赐“进士出身”，任职于行人司，后奉诏出使缅甸。归朝后，将其使缅的见闻，整理成书，上奏朝廷。朱元璋大喜，赐衣一袭，擢升为二品，升任江西承宣布政使司布(参)政。使缅途中，李思聪文思才涌，还创作了不少诗作，合称为《石林诗选》 [ 10 ]。 据《明史》《明实录》记载，李思聪的同行者是钱古训。钱古训，号坚斋，浙江余姚人，与李思聪同年参加甲戌科殿试，登金榜三甲第36名，赐“同进士出身”。李思聪《和钱公百夷宣慰拜诏韵》诗“天恩到处皆遵命，夷缅登时各罢师”，也可作为钱古训与李思聪同行的佐证。
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user: 5. 出使缅甸的行程 据《明实录》，洪武二十九年二月二日(农历)，朱元璋即命行人李思聪、钱古训出使缅甸国及百夷。受旨后，即同钱古训一道，从明朝首都南京出发。许多同僚赠诗饯行。如，景清《赠行人李思聪出使缅甸》诗：“使节驰驱出帝畿，手持纶綍畅皇威。一尊江上催交旆，万里滇中睹锦衣。羌焚山河都改色，瘴蛮草木总生辉。遥知绝域蒙新化，杨柳依依早赋归”；杨砥《赠行人李思聪出使缅甸》诗：“使节悠悠出凤城，春风闲逐马蹄轻。江淮绿柳摇金嫩，原隰皇华洒露明。西域立功朝汉室，南夷闻命慕神京。伫瞻四牡归来日，拜舞天颜喜质成”。诗中“杨柳依依”“春风”“绿柳摇金嫩”等，均印证了其出发的时节是初春。 离开南京后，取道江西，到达湖南汉寿县，写《过龙阳县》诗一首。西行至桃源县时，已是仲春，故其诗《抵桃源》诗云：“满地桃林红似锦，沿溪芝草绿成茵”。 出湖南，西行至贵州镇远县，再抵施秉县偏桥卫时，作别送行者房弟李思敬等三人，赠《偏桥卫示送者》诗一首：“故乡二三友，送我百里余。极知情义重，欲报将何知。愿言尽忠节，临敌思捐躯。立功圣明世，芳名耀简书。” 达云南昆明后，于滇池旁写下《滇池夜月》诗，内有“光含水面冰壶洁，影浸波心玉宇清”之句。经云南禄丰县炼象关，再抵云南洱海卫(今祥云县)。经蜀身毒道，至大理市定西岭。其岭原名昆弥山，西平侯沐英曾率大军西讨大理国和元朝的残余势力，得胜后，更今名，并于洪武十六年(公元1383年)建定西岭驿 [ 11 ]。山势险要，古籍形容其“高千余仞，设关其上”。据此可知，李思聪行至定西岭所写下的“旌旗摇曳过西关，万丈巍峨峭壁间”的诗句，应该是形容当年沐英率军西讨的盛况。 经古道，继续西行，到达云南保山，作《晓发金齿》诗；南下至保山的蒲缥镇。当地“阿昌蒲人皆远迎，花帽文身欢拜舞”(见《夜宿蒲漂》诗)。然后向西过怒江，越高黎贡山，到腾冲，南行进入南甸(今梁河县)，至此，已经跨入勐卯(百夷)的腹地。再向西南方向行进，入今瑞丽陇川县一带。 继续西行至蛮暮(今缅甸八莫市)，即顺着依洛瓦底江乘船而下，进入当时的缅甸阿瓦国。对缅国王明吉斯伐修寄“宣”谕 6 ，缅王表示愿意遵从朱明王朝的旨意，与百夷和好。 然后，李思聪又折回百夷，向思伦发“宣”谕 6 。“思伦发闻诏，伏谢”，愿罢兵与缅甸阿瓦国修好。刚好此时，有一名叫刀干孟部将欲反叛思伦发，思聪以朝廷的威德劝谕其部将，“叛者稍退“。思伦发“欲倚使者服其下，强留之，以象、马、金宝为赂，思聪谕却之”。李思聪说：“中国不以象、马、金、玉为宝。所宝者，惟忠臣烈士、强兵勇将、孝子顺孙。宜送使者还朝，自此不为侵扰，斯可以明忠君之心。” 成功劝谕缅国与百夷和好后，李思聪打道回朝，再过云南时，心态迥然不同。其《还过云南》诗有“缅夷事毕归中夏，驷騑复过滇城下”句，这也表明，李思聪使缅系乘坐马车。马车东行至四川泸州，遇旧友，心甚喜，“缅夷事毕喜东旋，暂向泸州夜泊船”；向东北方向行至万县时，已是冬天，所谓“使缅夷归来万水涯，正逢六出撒天花”。公元1396年农历十一月(或十二月)，李思聪一行回到南京。往返总计约8000公里。
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user: 6. 李思聪使缅的外交成果 第一，李思聪此番出使缅甸，是对缅甸使者的回应，但始作俑者是百夷的思仑发。因为是思仑发挑起了对缅甸阿瓦王朝的战争。恰好，思仑发部将刀干孟叛乱，李思聪利用这个机会，“谕其部众，叛者稍退”，暂时平安了勐卯国的内乱。所以，李思聪不仅促成了缅国与百夷息兵和好，而且，暂时平安百夷的内乱。 第二，《百夷传》的面世，客观上得益于使缅的外交活动。所以，《百夷传》也是李思聪使缅的外交成果。
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user: 7. 李思聪使缅的历史意义与实现意义 7.1. 安定了明初的边境并为后期成的功治理奠定了基础 李思聪使缅劝阻了百夷的外战，同时，也暂时地平定了内乱，但内乱是无法避免的，迟早而已。按其制度，思仑发即位时，要全部接受各部落所献的女子为妃，这引起了王后的猜嫉。新晋的妃子，大多被王后冤杀，弃于江中，引起部属不满。刀干孟借机作乱 [ 8 ]。不难看出，这起内乱是由于土酋制度本来的缺陷所致。王后为争权夺利而猜疑忌恨，却又缺乏一种平衡的措施。所以说，百夷的文化缺陷也是这其内乱的重要诱因。 据《明史·何福传》，洪武三十年(公元1399年)冬，明朝大将何福剿灭了刀干孟，将被逐的首领思伦发迎回麓川。此后，思伦发归心于朱明王朝，再没有向外发动征战。这种局面维持了10年，直到永乐四年(1406年)，行人张洪使缅夷为止 [ 8 ]。思伦发的归心与李思聪的劝谕不无关系。所以，李思聪出使缅甸具有“劝诫百夷，息兵安境”的历史意义。 7.2. 为今世乃至后世的外交家，树立了“使于四方，不辱君命”的忠臣义使的典范 过去，从中原到达南方蛮夷之地，路途遥远，自然条件非常恶劣。《明史·列传·卷二百零二云南土司二》“洪武六年，遣使田俨、程斗南、张祎、钱允恭赍诏往谕。至安南，留二年，以道阻不通。有诏召之，惟俨还，余皆道卒。”李思聪自己也说“路入西南万五千，怒江秋尽水如天”(《过怒江百夷叼孟傅典等来迎》，图2)。更重要的是，边境未定，夷民顽凶狡黠，吉凶难料。事实上，洪武五年(1373年)，朱明王朝的使臣王祎(字子充，1322~1373年)，来云南招谕劝降时，也被杀害；洪武十八年(1385年)思伦发反叛时，千户 7 王升阵前战死。所以，出使缅夷可能身死夷地。此时的李思聪作好为国捐躯的思想准备。在贵州镇施秉县偏桥卫作别送行者时，即表示“愿言尽忠节，临敌思捐躯。立功圣明世，芳名耀简书”。 此外，作忠臣义使，李思聪轻财重义。如前所述，他毅然拒绝了象、马、金宝的馈赠。以此，感化思伦发，使之归心于朱明王朝。总之，李思聪为今世乃至后世的外交家，树立了“使于四方，不辱君命”的忠臣义使典范。 7.3. 其著作《百夷传》具有历史学、文学价值、民族学价值 江应樑对钱《传》的历史学、民族学、文学价值，给予很高的评价 [ 4 ]。这些评价当然也适用于李《传》。本文要强调的是，李《传》可以更正《传》的错误。钱《传》著云：“是冬，思瓦发略于者阑、南甸。其属达鲁方等，辄立满散之子思仑发”。据此，立思仑发是在洪武十五年(1382年)冬；但实际上，思仑发于洪武十五年二月，即已被立为首领。李《传》：“洪武辛酉，……乃授思伦发为麓川平缅等处军民宣慰使司宣慰使”。这与《明实录·太祖洪武实录·卷一四三》记载是一样的，“洪武十五年闰二月乙巳，置平缅宣慰使司，以土酋思伦发为宣慰使”。不仅如此，李《传》还可以更正张洪《南夷书》之误。据《南夷书》，思伦发是思可发的儿子；但据李《传》，思伦发是思可发的孙子 [ 8 ]，其家族关系如图3。此处，江应樑也有详细的考证 [ 6 ]。 最后要说明的是，李《传》虽然是纪事类，却文字优美，用词精炼、生动，似铿锵有韵。如：“百夷，即麓川平缅也。地在云南之西南”“自汉以来，于中国或服或叛，各有土豪主之，不相统摄”“上下僭奢，虽微名薄职，辄系钑花金银宝带。官民皆用笋壳为帽，以金玉等宝为高顶，如宝塔状，上悬小金铃，遍插翠花翎毛之类，后垂红缨。贵者衣用红丝绫锦，以金花金钿饰之。出入或象或马，从者塞途。俗以坐象为贵，以银镜十数为络，银铃银钉为缘，鞍三面以铁为阑，漆以丹，籍以重烟，悬以铜铃。鞍后奴一人，铜帽花裳，执长钩为疾徐之节，招摇于道，自以为贵”“食不用箸，每客一卒跪座侧，持水瓶，食毕则盥帨”“驿路无邮亭，一里半里许构一小草楼，五人坐守，虽远千里，报在旦夕”“凡生子，贵者以水浴于家，贱者则浴于河”“三日后，以子授其夫，耕织自若”“赤脚而行，涉水登山，其疾如飞”。因此，也被认为是一篇优秀的散文。
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user: 摘要 为了构建高效谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)细胞工厂，需要开发出更多的高效基因表达元件。强启动子的使用是使基因高效表达的关键环节，然而关于谷氨酸棒杆菌强启动子鉴定的报道十分少见。本试验基于谷氨酸棒杆菌细胞全蛋白二维电泳，对其中分子量大小约为30 KDa、等电点约为4.0的斑点进行研究，分析其对应蛋白编码基因的启动子。根据试验结果表明，Cgl1937基因的启动子P1937具有更高的转录活性。将强启动子Ptac-M和启动子P1937分别连接到启动子探测载体pDXW-11上，通过电转化进谷氨酸棒杆菌C. glutamicum ATCC13032感受态细胞，以获得工程菌株C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M和C. glutamicum/pDXW-11-P1937。测试工程菌株对氯霉素的耐受性，实验结果表明，菌株C. glutamicum/ pDXW-11-Ptac-M和C. glutamicum/pDXW-11-P1937的耐受性分别为30 μg/mL和40 μg/mL；对报告蛋白氯霉素酰基转移酶CAT酶活进行检测，结果表明，C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M和C. glutamicum/ pDXW-11-P1937的酶比活力分别为0.85 U/mg蛋白质和9.53 U/mg蛋白质；通过荧光定量PCR检测两种工程菌株氯霉素乙酰基转移酶cat基因转录水平，实验结果显示，cat基因在启动子P1937的控制下，其转录水平是Ptac-M的2.07倍。以上结果表明，谷氨酸棒杆菌Cgl1937基因的启动子P1937为强启动子。
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user: 1. 前言 谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)在1957年首次被发现是作为谷氨酸的天然生产者 [ 1 ]。因其具有生长迅速 [ 2 ]，基因组稳定 [ 3 ]，代谢网络具有可塑性 [ 4 ] 等优点，谷氨酸棒杆菌成为了重要的工业微生物。研究作为基因转录调控元件的谷氨酸棒杆菌启动子具有重要的理论和应用价值。启动子活性的强弱在很大程度上影响着转录的起始、持续作用的时间以及外源基因的表达水平，进而宿主细胞中外源基因的表达程度也受到了影响。基因翻译区的上游区域是属于启动子序列的区域，通过其与对应的转录因子互作，可以精确调控下游基因的转录 [ 5 ]。 细菌启动子活性主要取决于启动子与一致序列的相似性，其活性会被−10区、−35区以及一些在致序列附近的非高度保守核苷酸所影响 [ 6 ]。研究表明，在−10区中心的TATAAT序列会增强启动子的活性，而−10-六聚体上游的TG二聚体则对启动子的强度有影响 [ 7 ]。且有研究数据表明，对启动子−10区和−35区的碱基进行突变会对启动子的转录水平造成较大影响，而改变−10区和−35区之间的碱基序列则对启动子的活性影响较小 [ 8 ]。谷氨酸棒杆菌中的内源启动子可通过以下3种主要的方法寻找：1) 基于随机序列合成启动子库，2) 启动子突变和3) 使用启动子预测软件，基于其转录组、基因组或蛋白质组来鉴定新的高效的启动子 [ 9 ]。值得注意的是，谷氨酸棒杆菌中启动子的−10区的碱基序列是高度保守的，-35区则相对保守 [ 10 ]。尽管大肠杆菌中的启动子P-tac和LacZ均被证明能在谷氨酸棒杆菌中使用，但低效率与泄露表达使这些外来启动子不能完美的表达目的蛋白 [ 11 ]。因此，选择高活性的内源启动子成为一大热点。然而关于谷氨酸棒杆菌高效内源启动子鉴定的相关报道很少，这限制了应用谷氨酸棒杆菌细胞工厂高效生产重组蛋白的研究。本研究望通过分析在谷氨酸棒杆菌细胞全蛋白二维电泳图上展现的高表达蛋白斑点，以鉴定谷氨酸棒杆菌内源强启动子序列，为构建高效的谷氨酸棒杆菌细胞工厂提供有力的基因表达元件。
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user: 3. 结果与分析 3.1. 二维电泳分离谷氨酸棒杆菌中蛋白 二维电泳技术的使用，使谷氨酸棒杆菌ATCC13032细胞中所含有的蛋白质得到分离，此步骤实验室前期工作中已经完成。二维电泳图如图1所示。详细内容参见张献 [ 13 ] 等文章。 图1. 二维电泳图(箭头所指的MW大小约为30 KDa，pI约为4.0的斑点) 选择图1中箭头所指出来的蛋白点作为鉴定强启动子的点的原因为该斑点颜色较深，该蛋白斑点的MW约为30 KDa，pI约为4.0。实验室前期工作中已将上述标注出的蛋白斑点中所含有的蛋白质的分子质量以及等电点进行了鉴定，与所选的蛋白斑点匹配后，发现有6种蛋白质与二维电泳上的高表达蛋白斑点在理论上相匹配。其分别为dapF、gluB、aftC、Cgl0148、Cgl0392、Cgl1937、Cgl2540。其中dap蛋白家族、glu蛋白家族和aft蛋白家族含有单个蛋白，即dapF蛋白、gluB蛋白以及aftC蛋白，多重转录元件控制着它们的转录，所以难以预测准确的启动子序列。因此，Cgl1937、Cgl0148、Cgl0392以及Cgl2540基因被选择用来预测其相应启动子序列。 3.2. 网站预测启动子序列 利用预测网站对上述筛选出的编码相关蛋白质基因的启动子序列进行预测，发现未能预测出编码Cgl0148以及Cgl0392、Cgl2540基因的相应启动子序列。Cgl1937基因预测出了相应启动子序列，其序列为GTAACGTGGCAAAACGAACAATGTCTCACTAGACTAAAGTGAGATCGACA。如图2所示，ATG为Cgl1937基因的开放阅读框的起始密码子，TAA则作为终止密码子，序列总长度为72 bp。由此获得了Cgl1937基因的启动子P1937。 图2. Cgl1937基因开放阅读框(灰色部分)及预测的启动子序列(划线部分) 3.3. 工程菌株的构建 通过电击将扩增得到的启动子P1937和Ptac-M的DNA片段与启动子探测载体pDXW-11连接后的重组载体转化进谷氨酸棒杆菌ATCC13032感受态细胞中，抽提转化子DNA，对其进行验证时采用双酶切法。如图3所示，酶切后质粒大小达到了预期，说明成功构建并得到了携带启动子P1937的重组工程菌菌株C. glutamicum/pDXW-11-P1937和携带启动子Ptac-M的重组工程菌菌株C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M。 图3. 双酶切结果图 3.4. 鉴定内源启动子P1937转录活性 首先初步判定所含有的启动子的转录活性，使用氯霉素分别对野生型谷氨酸棒杆菌C. glutamicum ATCC13032以及在本研究中构建成功的工程菌菌株C. glutamicum/pDXW-11-P1937、C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M进行耐受性实验。实验结果表明，以上三种菌株的氯霉素耐受浓度分别为3 μg/mL、40 μg/mL以及30 μg/mL。随后为进一步研究两种启动子的转录活性，对工程菌株C. glutamicum/pDXW- 11-P1937和C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M的氯霉素乙酰基转移酶的比活力值进行检测，得到C. glutamicum/pDXW-11-P1937的CAT蛋白酶比活力为9.53 U/mg蛋白质；C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M的CAT蛋白酶比活力为0.85 U/mg蛋白质，结果见图4。 通过荧光定量PCR技术来直观的表现构建的工程菌菌株C. glutamicum/pDXW-11-P1937中所含有的启动子P1937和C. glutamicum/pDXW-11-Ptac-M中所含有的强启动子Ptac-M，对氯霉素乙酰基转移酶基因cat的转录水平，结果表明，启动子P1937控制下的cat基因的转录水平高于启动子Ptac-M控制下的水平，是其2.07倍，结果见图5。 图4. 氯霉素乙酰基转移酶酶比活力检测 图5. qPCR检测结果
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user: 4. 结论与讨论 本实验室的前期工作中，二维电泳技术的应用，使谷氨酸棒杆菌C. glutamicum ATCC13032的细胞中所含蛋白质得到了分离，选取其中一些高表达的蛋白点进行质谱解析，并通过在线启动子预测网站，对选出的蛋白点处的编码相应蛋白质的基因的启动子进行预测，相关文章详见张献等 [ 13 ]。前期构建的启动子Ptac-M为本试验所用的对照启动子，且其经过验证是谷氨酸棒杆菌强启动子 [ 12 ]。基于以上成果，为检测启动子转录活性的强弱，本研究设计了氯霉素耐受性实验及报告蛋白氯霉素酰基转移酶酶活实验。试验结果表明预测出的编码Cgl1937蛋白基因的启动子P1937的转录活性高于谷氨酸棒杆菌强启动子Ptac-M。而qPCR实验的结果则更加直观的表明在启动子P1937调控下cat基因的转录水平明显大于在启动子Ptac-M的调控下的转录水平。以上结果均可证明启动子P1937在谷氨酸棒杆菌中为强启动子。 为了更深入研究细菌的启动子，就需要人们识别和发现新的启动子，以满足人们的各种需求。本试验寻找谷氨酸棒杆菌内源启动子的方法为基于谷氨酸棒杆菌蛋白组的基础，通过启动子预测网站进行预测，以寻找更高效的内源启动子。此方法可以更加广泛的寻找启动子序列，为人们提供更多选择。除了通过上述方法寻找启动子，还可以基于启动子的结构特征、启动子在基因组中的分布特征、计算机建模、RNA聚合酶的特殊亚基等方式寻找新的启动子 [ 19 ]。 目前，对谷氨酸棒杆菌启动子的研究是一大热点，因其控制着转录的起始，且影响着谷氨酸棒杆菌蛋白表达系统能否高效表达目的蛋白。虽然目前关于谷氨酸棒杆菌内源强启动子的相关报道较少，但是会有越来越多的启动子元件被识别、被赋予功能，独特的启动子序列和有调控功能的元件可以被更合理的设计出来 [ 20 ]。本研究成功鉴定出高活性内源启动子P1937，为之后通过建立谷氨酸棒杆菌细胞工厂，利用其高效表达目标蛋白奠定了坚实的基础。
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user: 摘要 本文基于多因子模型和CART分类回归树算法，利用因子分析法，研究了证券市场的预测问题。首先依据Fama和French因子分析方法选取了8大类公司财务指标建立了多因子分析模型，其次利用统计学中的因子分析法对所选因子进行了特征提取，得到贡献最大的五个特征，并分析了所得市场特征的市场意义，然后根据提取的市场特征及其市场技术指标建立了预测市场季收益率的CART分类回归树模型，并随机选取了了上交所20家公司进行了实证分析，结果表明预测模型具有较好的预测精度，其次，依据预测结果构造了顺势投资策略，获得了优于市场平均收益的良好回报。
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user: 1. 引言 证券市场在现代社会中发挥着重要作用，并且影响着国家的经济发展 [ 1 ]。一直以来，对证券市场收益预测的研究是金融统计研究领域的热点问题，寻找影响证券投资收益的因素并分析这些因素的作用对提高证券投资效率与防范市场风险具有十分重要的理论与实际意义。特别是，近十年来，相关研究得到金融工程和统计领域的广泛关注 [ 2 ]。 分析和预测证券市场行为的两种常用方法是基础分析和技术分析。这两种方法的主要目标都是依据已有的证券市场信息预测其未来走向及数值。前一种分析是依据影响市场走势的经济因素，如公司经营数据等，它较适合于长期的预测。而技术分析主要依据证券市场的交易数据去分析预测市场未来的变化 [ 3 ]，一般依据多个技术指标，对某只股票或市场指数的历史数据进行整理和分析，从而预测该金融资产的未来价值。 近来，人工智能(AI)在各个领域获得了极大成功 [ 4 ]，其被认为是解决许多金融问题的有力工具，如利用人工神经网络 [ 5 ] [ 6 ] [ 7 ]、决策树(DT) [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ] [ 11 ]、深层神经网络 [ 12 ]、梯度树(GBDT)、随机森林(RF) [ 13 ] 和CART树 [ 14 ] 等，对股票进行分类或预测，取得了不错的预测效果。尽管中国股市已经发展了几十年，但与股票回报相关的特征研究仍显不足。因此，借助于机器学习来说明证券收益及其潜在影响因素之间的关系是很有价值的。为了对股票进行预测，本文通过使用CART分类回归树和多因子模型，通过基本分析面和技术分析相结合研究证券市场的预测及其应用。首先依据Fama和French因子分析方法选取了8大类指标给出了因子得分，其次利用因子分析法提取了五个重要因子，并分析其市场意义，最后根据提取的市场特征及其市场技术指标建立了预测市场季收益率的CART分类回归树模型，并进行了仿真模拟投资。 论文组织如下：第二部分是数据及其处理方法，第三部分是数据建模，第四部分是预测结果及其分析，第五部分给出了模拟投资结果，最后是结论。
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user: 3. 模型 3.1. 多CART分类回归树 这里借鉴集成学习思想，提出多CART分类回归树模型，其基本思想是对不同的特征训练数据重复应用回归树算法，得到多个回归树，然后将这多个回归树预测值进行平均得到一个最终的预测值。结果表明此多CART分类回归树可以明显的提高回归树的预测准确性。 首先来回顾一下回归树的基本概念。回归树是数据挖掘和机器学习领域应用最广的算法之一，它在拟合数据时，先将预测变量X的联合空间划分成互不重叠的J个小区域R j ，称作树的终端节点(或叶子)；然后为每一个小区域拟合一个常数 γ j 作为这个小区域内响应变量Y的预测值: x ∈ R j ⇒ f ( x ) = γ j 因此一个回归树可以表示为： T ( x ; Θ ) = ∑ j = 1 J γ j I ( x ∈ R j ) ， Θ = { R j ， γ j } 1 J 回归树的两组基本参数是小区域R j 以及小区域上相应的常数 γ j ，将其统一记做 Θ ，参数估计的标准是： Θ ^ = arg min Θ ∑ j = 1 J ∑ x j ∈ R j L ( y i ， γ j ) 其中 L ( . ) 是损失函数。在回归树中，最常用的损失函数是平方损失函数， L ( y ， f ( x ) ) = ( y − f ( x ) ) 2 ，回归树的参数是使训练样本残差平方和最小的那一组。 为了防止数据的过拟合，回归树应该进行剪枝处理，通过剪枝处理可以提高模型的泛化能力。CART分类回归树的剪枝算法就是从完全决策树的底端减去一些子树，从而使模型变的简单。 本文将建立6棵CART分类回归树，每棵树的分类特征是前面得到的五个因子和市场因子，比如第一棵树是根据第一个因子前两季度的因子得分来预测当季度的收益率，其值也就是 T 1 ，同样的计算方法用其他五个因子预测当季的 收益率，即 T 2 ， T 3 ， T 4 ， T 5 ， T 6 ，于是得到最终的预测值T，T的计算方法如下： T = T 1 + T 2 + T 3 + T 4 + T 5 + T 6 6 3.2. 模型的实现 本文使用因子分析和多CART分类回归树算法来建立预测模。首先利用一元回归对多个财务因子进行分析筛选，得到筛选后的因子之后，并和Famma五因子合并一起进行因子分析，得到新的五因子，加上市场因子共六个因子，由它们作为分类特征，接着根据CART分类回归树算法对季收益率进行预测，然后给出相应的投资策略，对公司进行模拟投资。本文的算法基本思路如图1所示： 图1. 流程图
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user: 4. 实证分析 4.1. 模型评价 根据CART分类回归树模型和因子的构造，最后得到市场及公司的每个季度数据，分别用六个因子中每个因子前两天的数据对季收益率进行预测，接着求平均，得到此因子的预测结果。根据2002年12月31号到2019年12月31号的数据，是随机选取20家公司，分别对每家公司2002年12月31号到2015年12月31号的数据进行训练，剩下的数据进行测试，模型的训练结果由MAPE和RMSE进行评估，得到表7如下结果： Table 7 Model evaluation for 公司 MAPE RMSE 公司 MAPE RMSE 1 0.0681 0.0784 11 0.0787 0.1066 2 0.0484 0.0904 12 0.0830 0.1323 3 0.0547 0.0757 13 0.0767 0.0889 4 0.0516 0.0654 14 0.0421 0.0545 5 0.0315 0.0436 15 0.0727 0.1009 6 0.0667 0.1041 16 0.0446 0.0824 7 0.0435 0.0603 17 0.0411 0.0465 8 0.0595 0.0907 18 0.0622 0.0826 9 0.0503 0.0645 19 0.0533 0.0803 10 0.0454 0.0522 20 0.0777 0.1088 表7. 模型评价表 由表2可知，通过基于因子分析与回归树的模型预测得出的结果，RMSE最大值是0.1323，最小值是0.0436；MAPE最大值是0.0830，最小值是0.0411，与以往结果比较，预测模型表现良好。 4.2. 模拟投资 为了更好地说明本文因子构造的合理性，对数据进行预测之后再进行模拟投资。投资过程是：如果投资者有一元人民币，当预测结果(未来投资收益率)大于0，就进行买入；否则，就卖出股票。以下是对20家公司进行的模拟投资，用累计收益和夏普比率对收益和风险进行评价，其中累积收益计算过程如下： C R = ∏ i = 1 n ( 1 + R t ) 其中 R t 是t时间的季收益率。 夏普比率计算公式如下： sharperatio = E ( R p ) − R f σ p 其中 E ( R p ) 是投资组合的期望收益率， R f 是无风险利率， σ p 是投资组合的标准差。 20家公司四年的累计收益和夏普比率如表8： Table 8 Simulation investment evaluation tabl 公司 累计收益 夏普比率 公司 累计收益 夏普比率 1 5.5405 0.8618 11 5.4260 0.9006 2 6.0080 0.7621 12 7.7510 0.7670 3 6.4573 1.0585 13 5.8540 0.8984 4 5.7730 1.1779 14 7.4018 1.6251 5 3.1418 0.9745 15 6.4601 0.8199 6 4.5841 0.6780 16 5.1390 0.8393 7 2.9357 0.6788 17 4.6403 1.3952 8 3.3744 0.5524 18 3.8670 0.6265 9 3.3541 0.6932 19 6.9189 1.0417 10 4.8363 1.5570 20 4.3789 0.5992 表8. 模拟投资评价表 从表5可以看出来，随机挑选的20家股票都能获得相应的收益，四年收益最高达到了7.7510倍，最低也达到了2.9357倍。正如下面几家公司的累积收益和市场收益图展示，如图2，相比于市场收益，本文提出的方法获得的收益要比市场收益高很多，说明本文的方法是可行的。再来看夏普比率，最大值是1.6251，最小值是0.5524，说明相同的风险可以获得较高的收益。 图2. 投资收益对比图
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user: 5. 结论 本文提出了基于多因子得分的CART分类回归树预测模型。首先利用财务数据对市场的影响效果对财务因子进行筛选，得到五个综合反映公司运营状况的五大特征，此五大特征揭示出证券市场不同的波动状态，接着根据市场特征和证券交易的前期收益率建立了多CART分类回归树预测模型，并依据预测结果构造出趋势投资策略，对20家公司进行模拟投资，预测和模拟投资结果都说明本文选用的算法对市场投资有良好的指导作用。
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user: 摘要 本文基于经典梁理论，假设弹性模量与应变成线性关系(本构关系非线性)，推导了受铅垂均布载荷作用的两端固定铰支梁弯曲的基本方程。并对基本方程及边界条件无量纲化，以使其具有一般性。然后采用数值法求解该问题无量纲基本方程的数值结果。分析了大挠度和小挠度两种情况下本构关系非线性和铅垂分布载荷对梁弯曲变形以及中性轴位置的影响并进行比较。
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user: 1. 引言 经典力学研究方法中认为材料的弹性模量在变形过程中是不变的，但是大量研究表明有很多材料受拉和受压时具有不同的弹性模量。实际工程中构件可能存在受拉和受压交替变换的情况，因此对拉压不同弹性模量的研究是很有必要的。不少研究者在分析弹性体变形时将受拉和受压分成两个阶段，然后分别将两个阶段的弹性模量进行线性化处理，假定这两个阶段的弹性模量均为常数，并建立了双模量理论。1982年Ambartsumyan [ 1 ] 发表了关于双模量理论的著作《不同模量弹性理论》，其在该著作中总结了拉压不同模量概念，并提出了拉压不同模量问题的基本假定。经来旺 [ 2 ] 在考虑拉压弹性模量不等的条件下推导了弯曲时矩形截面梁弹性力学的解答。结果表明，如果不考虑不同弹性模量将会造成较大的误差。王铭惠、赵永刚等 [ 3 ] 基于不同弹性模量理论推导了自由振动时简支梁的应力应变计算公式，并解析了自由振动的前三阶频率和主振型。近年来，国内外诸多学者以不同弹性模量理论为基础研究了各种弹性构件的力学行为 [ 4 ] - [ 13 ]，但是该理论不够精确。本文研究过程中假定材料的弹性模量与应变的关系是线性的，在此基础上对两端固定铰支梁的弯曲问题进行了研究分析。