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user: 3. 纳米混悬剂物理稳定性的应对策略分析 3.1. 新型纳米混悬剂的稳定剂的探究 在纳米混悬剂制备和储存过程中为避免颗粒聚集和沉降，稳定剂是必不可少的。稳定剂分为传统稳定剂和新型稳定剂。传统稳定剂包括离子型稳定剂和非离子型稳定剂。离子型稳定剂的静电斥力稳定机理可用经典的Derjaguin-Landau-Verwey-Overbeek (DLVO)理论解释，是指胶体在溶剂中既有静电斥力又存在相互吸引。其静电斥力源于双电层的重叠(EDL)，从而防止胶体凝聚。双电层的作用分别是：1) 第一层吸引在粒子表面，具有中和体系电子的作用，2) 另一层是离子的扩散层，提供静电斥力 [ 12 ] 。常用的离子型表面活性剂包括十二烷基硫酸钠(SDS)、月桂硫酸钠(SLS) [ 15 ] ，卵磷脂(lecithin) [ 7 ] 。 非离子稳定剂的空间位阻稳定机理可以根据吉布斯自由能表示：ΔG = ΔH − TΔS。+ΔG表示稳定悬浮，而−ΔG表示粒子聚集。如果介质是一种维持稳定剂效应的溶剂，粒子碰撞时吸附在粒子上的稳定层 不能互相渗透，减少稳定剂的稳定层相互作用，产生+ΔG。另一方面，如果分散介质是一种破坏稳定剂效应的溶剂，吸附在粒子上的稳定层可能产生渗透动力并诱发粒子聚集(如图3) [ 12 ] 常用非离子表面活性剂包括泊洛沙姆 ® (Pluronic ® ) [ 16 ] 、吐温-80 [ 6 ] 、吐温-60 [ 15 ] 、聚乙烯醇(PVA) [ 17 ] 、聚乙二醇(PEG)、聚乙稀吡咯烷酮(PVP) [ 18 ] 、羟丙甲基纤维素(HPMC) [ 19 ] 。有研究表明在任何稳定剂存在的情况下，都可以制备药物的纳米混悬剂，但是PVA作为物理稳定剂时，仅起到维持理想黏度，减少纳米微粒沉降的作用 [ 5 ] 。当前研究 [ 20 ] 表明，开发和寻找新型稳定剂是解决纳米混悬剂物理稳定性最佳的方法。(及对于纳米混悬剂技术是很重要的一方面)。例如开发两亲性表面活性剂作为稳定剂，可以有效提高纳米混悬剂的稳定性，其作用机制主要是通过减小粒子的表面能，形成能量屏障，阻止粒子聚集与结晶生长 [ 21 ] 。 Weisan P等人 [ 22 ] 采用沉淀–超声法，制备卡维地洛纳米混悬剂，并检测其溶解度和生物利用度，实验证明维生素e琥珀酸酯(VES)是一种有效的联合稳定剂，可以进一步研究维生素e琥珀酸酯(VES)这种新型稳定剂是否可以用于制备其他药物的纳米混悬剂。Tang Xing等人 [ 3 ] 通过研究一种用于制备固体分散体的嵌段式聚合物soluplus ® ，探究其是否可以作为稳定剂用于制备非诺贝特(FBT)纳米混悬剂产品。研究结果表明：soluplus ® 可以有效提高纳米混悬剂的稳定性，其原因可能是Soluplus ® 内包药物FBT，使 图3. 空间位阻稳定机理 [ 12 ] FBT不直接暴露在水中，形成凝胶作用而缓慢释放，弱化了奥斯瓦尔效应。本实验证明：soluplus ® 可用于制备稳定性良好的纳米混悬剂，并能提高溶解度和生物利用度。羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)是一种高水溶性的表面活性剂，成本低廉，毒性小，可用于增加水难溶性物质的溶解度。Yan Xie等人 [ 23 ] 的实验证明羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)可制备出粒径大小为380 nm和电位为−28 mV的杨酶酮纳米混悬剂，其具有良好的稳定性。羟丙基-βb-环糊精(HP-β-CD)可以减少介质和药物之间的表面张力，开发其作为纳米混悬剂的稳定剂的新用途，增加制剂的多样性是很有价值的。由于因常见的稳定剂较弱的稳定作用和长期治疗的毒副作用的限制，Wua Wei等人 [ 24 ] 以吲哚美辛药物为模型，探究食物蛋白质(大豆蛋白、血清分离蛋白、乳球蛋白)作为纳米混悬剂的新型稳定剂的可能性。由于热变性和随后吸附在药物粒子表面的原因，包埋的疏水分子暴露有助于稳定药物纳米混悬剂。分析蛋白质稳定纳米混悬剂的机理包括静电斥力和空间位阻。但是，值得注意的是当pH值高于或低于等电点，两亲性食物的蛋白质可以作为稳定剂。而pH值在等电点时，蛋白质的电能为0，其纳米稳定作用受限制，此时导致粒子聚集。 当前研究 [ 20 ] 表明，开发和寻找新型稳定剂是解决纳米混悬剂物理稳定性最常用的方法，但稳定剂的选择是一个艰辛且很复杂的过程，需要药学工作者潜下心来深入研究。 3.2. 候选药物的本身性质对于制备纳米混悬剂的影响 Maya G等人 [ 19 ] 通过研究六种活性药物(naproxen， A， B， C， D and E)的物理性质和四种稳定剂(SLS， DOSS， TPGS and Pluronic F127)之间的效应，分析药物的性质，纵观药物和稳定剂之间相互作用以给制备稳定纳米混悬剂产品处方提供关键参数。研究表明，制备有效的纳米混悬剂产品，药物本身的油水分配系数(logP)、热函与制备稳定的纳米混悬剂产品处方的可行性直接相关。结果如图4所示：对于球磨法制备的候选活性药物，不论对于空间位阻稳定剂还是静电斥力稳定剂，可以看出logP和成功制备药物纳米混悬剂直接相关，若其有较高的热函、油水分配系数，既可以应用静电斥力也可以应用空间位阻稳定剂制备纳米混悬剂；当其具有较低的热函、油水分配系数，则不能成为制备稳定的纳米混悬剂产品的候选药物。 另外，静电斥力稳定剂是粒子表面静电团决定的，其由药物的官能团和离解度决定。此时球磨介质的PH和药物的pKa对于制备过程中的稳定有重大影响。 3.3. 非离子型聚合物稳定剂间氢键作用调控粒径大小 Yanping B等人 [ 25 ] 研究，采用沉淀法，制备无定形的白藜芦醇纳米混悬剂，研究应用PVA/PVP这一对高聚物制备粒径可控的固体纳米粒。研究分析，选择吐温和PVA作为纳米混悬剂的稳定剂时，此时非离子聚合物PVP是以一种非奥斯瓦尔成熟的机理控制纳米混悬剂的粒径大小。分析原因可能是PVA聚合度及流动性高于PVP，这样PVA具有更强大的结合白藜芦醇的趋势。因此，当PVP加入含有吐温和PVA的纳米混悬剂中，其与PVA相互作用嫁接成氢键桥，而非是与PVA竞争药物离子表面，其作用机理可以归结为氢键诱导的聚集和结块(图5、图6)。 3.4. 一种钠盐对稳定剂的影响 有研究 [ 26 ] [ 27 ] 表明：在霍夫梅斯尔的一列阴离子对聚合物的溶解度和对固体表面的吸附有重要影响。而聚合物的吸附作为自由能的补偿，可以减少熵损失 [ 28 ] 。有研究 [ 29 ] 指出固体表面聚合物的吸附，通过如空间位阻效应似的较弱的相互作用，是纳米混悬剂稳定的关键。Hassa A等人 [ 17 ] 的研究指出：以PVP作为磺胺甲嘧啶纳米混悬剂的稳定剂，利用钠盐(碘化钠、氯化钠、硫酸钠)的阴离子可以增加聚合物PVP对于药物粒子的吸附，以增加纳米粒的稳定性，减小粒径。机理可能是按霍夫梅斯尔的离子理论，其阴离子硫酸根离子可以破坏水中的氢键结构，降低药物离子的水合作用，增加PVP和粒子表面的吸附，硫酸离子在相对高的浓度，使得更多的PVP吸附于离子表面，因此增强纳米粒的稳定效应 [ 30 ] 。 图4. 基于药物性质制备纳米混悬剂处方的建议 [ 19 ] 图5. 透射电镜扫描图：白藜芦醇/吐温-80/PVA纳米混悬剂(a)；白藜芦醇/吐温-80/PVA纳米混悬剂(b)；白藜芦醇/吐温-80/PVA/PVP纳米混悬剂(c) [ 25 ] 图6. PVA-PVP相互作用诱导的纳米粒聚集的机理模拟 [ 25 ] 图7. 热重量分析图P188 (a)，甘露醇(b)，PTXNS (c)、PTX (d) [ 16 ] 3.5. 表征方式对稳定剂稳定纳米混悬剂的研究 研究纳米混悬剂的不同表征方式，推动纳米混悬剂的质量评价，从而建立适宜的开发手段。在分子水平上研究纳米混悬剂，可以帮助我们了解各种纳米粒的结构，为新的纳米混悬剂处方设计提供关键信息。Moribe K等人 [ 10 ] 采用湿磨法，以泊洛沙姆407 (P407)为稳定剂，制备吡罗昔康(PXC)纳米混悬剂，并通过先进的光谱技术评估药物与稳定剂的分子状态。应用核磁共振仪(NMR)检测溶液，探究纳米粒的层结构的构成。结合核磁共振(NMR)谱与拉曼(Raman)光谱研究混悬态的纳米粒，揭示PXC和P407的分子状态，阐明纳米混悬剂的结构。Yong L等人 [ 16 ] 结合高速分散和高压均质法，采用乳化法以泊洛沙姆188 (P188)和甘露醇制备紫杉醇纳米混悬液(PTXNS)，研究PTX和PTXNS热性能，以热重分析法(TGA)为检测手段，分析紫杉醇纳米混悬剂的性质及紫杉醇纳米混悬剂中紫杉醇的含量。紫杉醇原料药在217℃~276℃温度区间内，快速失重，紫杉醇纳米混悬剂中紫杉醇的快速失重是220到320℃(如图7)，这一结果说明，含有泊洛沙姆188和甘露醇的PTXNS展现了泊洛沙姆188和甘露醇的性质。也说明了PTXNS中的PTX因具有粒径较小，因此有更大的表面能，这使得PTX更容易失重挥发并且提前降解。PTXNS在323到407℃快速降解，是因为大多数的PTX在PTXNS中开始降解。结合TGA的结果进一步说明PTXNS中泊洛沙姆188的含量非常少，PTX在PTXNS中的含量仅有3.42%。