system: [SYSTEM]

user: 3. 结果 3.1. COPD大鼠模型鉴定结果 3.1.1. COPD模型大鼠症状改变及肺组织形态改变 1) 症状：造模前：毛发整齐，色泽光亮，体型圆润，精神饱满，活蹦乱跳，饮食正常；造模前期(1~10天)：毛发整齐，毛色变灰，体型圆润，烦躁好动，饮食基本正常；造模中期(11~20天)：毛发部分脱落，色泽变暗，身形渐瘦，精神逐渐萎靡，活动能力下降，部分呼吸急促，稍有喘息，听见些许喉间痰鸣音，饮食较对照组减少，体重增长缓慢；造模后期(20天以后)：毛发脱落，色泽晦暗无光，形体消瘦，精神萎靡，懒动，呼吸急促，喘息明显，喉间闻及明显痰鸣音，饮食减少，体重较健康对照组明显减轻。 2) 肺组织形态改变：健康对照组大鼠肺组织未见膨大，色泽粉红，表面光滑有弹性；COPD模型组两肺组织均可见到体积明显膨大，色泽灰白，弹性较差容易破损，表明凹凸不平，肺切面可以见到多个肺泡融合过后形成的大的肺泡空腔，部分可见散在的囊泡突起。 3.1.2. 病理切片(HE染色)结果分析 健康对照组：大鼠肺组织肺泡、支气管上皮、支气管管腔结构完整，纤毛排列整齐，支气管管壁未见增厚，无炎性细胞浸润(见图1)。 COPD模型组：大鼠肺泡细胞融合扩大，支气管管壁破坏、管腔显著增厚、管壁周围及肺泡腔内有大量炎性物质浸润，上皮细胞脱落，纤毛粘连、倒伏甚至脱落(见图2和图3)。 3.2. 灌胃治疗过程中各组大鼠症状改变 3.2.1. 健康对照组 毛发整齐，色泽光亮，体型圆润，精神饱满，活蹦乱跳，饮食正常，体重日渐增加，无呼吸急促、喘息等。 3.2.2. COPD空白组 毛发脱落严重，色泽晦暗无光，形体明显消瘦，精神萎靡，懒动，呼吸急促，喘息明显，喉间闻及明显痰鸣音，饮食明显减少，体重逐渐减轻。 3.2.3. 苗药组 苗药各组大鼠毛发脱落逐渐减轻，色泽发黄，形体消瘦逐渐改善，神情倦怠，活动能力增强，呼吸急促、喘息症状较空白组明显减轻，喉间痰鸣音逐渐减少，饮食改善，体重逐渐增加，尤以高剂量组症状改善最为明显。 3.3. 各苗药治疗组肺组织病理切片检查(HE染色)结果 各苗药治疗组肺泡细胞融合扩大现象均较空白组减轻，支气管管壁破坏、管腔增厚均较空白组有所改善，管壁周围及肺泡腔内炎性物质浸润亦较空白组减少，尤以苗药高剂量组改善最为明显(见图4、图5、图6)。 图1. 正常对照组(HE染色图片) 图2. COPD模型组(HE染色图片) 图3. COPD模型组(HE染色图片) 图4. 苗药高剂量组(HE染色图片) 图5. 苗药中剂量组(HE染色图片) 图6. 苗药低剂量组(HE染色图片) 3.4. Western Blot结果分析 3.4.1. 各组间Smad7、DCN、TGF-β1灰度值比较 首先，对健康对照组和COPD空白组进行成组t检验，Smad7、DCN、TGF-β1灰度值均满足正态分布，方差不齐，故读取方差不齐的校正t检验结果：三者P值分别为0.000、0.037、0.000，均<0.05，故以α = 0.05为水准，认为两组Smad7、DCN、TGF-β1表达均有明显差异，且从表1可以看出COPD空白组Smad7、DCN表达较健康对照组低，TGF-β1表达较健康对照组高，说明COPD大鼠模型Smad7、DCN、TGF-β1蛋白表达较健康对照组有改变。 Table 1 Gray values of Smad7， DCN and TGF-beta 1 in lung tissues of rats in each group ( x ¯ ± s 组别 灰度值 Smad7 DCN TGF-β1 健康对照组 1 1 1 COPD空白组 0.734 ± 0.05 0.879 ± 0.15 1.962 ± 0.44 苗药高剂量组 1.191 ± 0.08 1.252 ± 0.18 1.022 ± 0.26 苗药中剂量组 1.116 ± 0.11 1.176 ± 0.10 1.231 ± 0.27 苗药低剂量组 0.950 ± 0.09 0.997 ± 0.15 1.543 ± 0.16 表1. 各组大鼠肺组织Smad7、DCN、TGF-β1灰度值( x ¯ ± s ) 其次，对COPD空白组和苗药高、中、低剂量组大鼠肺组织Smad7、DCN、TGF-β1灰度值进行比较分析，并两两进行组间多重比较。 Smad7：服从正态分布，方差齐性，故用One-Way-ANOVA检验，P = 0.000 < 0.01，说明四组之间Smad7表达不全相等。经过LSD法进行组间多重比较得知：COPD空白组和苗药高、中、低剂量组比较P值均为0.000 < 0.01，均有显著性差异；苗药高剂量组与苗药中剂量组比较P值为0.067 > 0.05，无明显差异，与苗药低剂量组比较P值为0.000 < 0.01，有显著差异；苗药中剂量组和苗药低剂量组比较P = 0.000 < 0.01，有显著性差异。四组均数从高到低排列：苗药高剂量组1.191 > 苗药中剂量组1.116 > 苗药低剂量组0.950 > COPD空白组0.734，故可以认为在各COPD模型组大鼠肺组织中Smad7的表达苗药高剂量组最高，COPD空白组最低。 DCN：服从正态分布，满足方差齐性，进行One-Way-ANOVA检验，P = 0.000 < 0.01，说明四组之间DCN表达不全相等。经LSD法进行组间多重比较得知：COPD空白组和苗药高、中剂量组比较P值均为0.000 < 0.01，有显著性差异，和苗药低剂量组比较P = 0.098 > 0.05，无差异；苗药高剂量组和苗药中剂量组比较P值为0.282 > 0.05，无明显差异，与苗药低剂量组比较P = 0.001 < 0.01，有显著性差异；苗药中剂量组和苗药低剂量组比较P值为0.014 < 0.05，有明显差异。四组均数从高到低排列分别为：苗药高剂量组1.252 > 苗药中剂量组1.176 > 苗药低剂量组0.997 > COPD空白组0.879，故可以认为在各组大鼠肺组织中DCN的表达苗药高剂量组最高，COPD空白组最低。 TGF-β1：满足正态分布和方差齐性，进行One-Way-ANOVA检验，P = 0.000 < 0.01，说明四组之间TGF-β1表达不全相等。经LSD法进行组间多重比较得知：COPD空白组和苗药高、中、低剂量组比较，P值分别为0.000、0.000、0.004 < 0.01，均有显著性差异；苗药高剂量组和苗药中剂量组比较P = 0.134 > 0.05，无差异，和苗药低剂量组比较P = 0.001 < 0.05，有显著性差异；苗药中剂量组和苗药低剂量组比较P = 0.028 < 0.05，有明显差异。四组均数从低到高排列为：苗药高剂量组1.022 < 苗药中剂量组1.231 < 苗药低剂量组1.543 < COPD空白组1.962，故可以认为在各组大鼠肺组织中TGF-β1的表达苗药高剂量组最低，COPD空白组最高(Western blot部分结果见图7)。 图7. Western blot部分结果 3.5. Smad7、DCN、TGF-β1相关性分析 COPD模型组：COPD空白组、苗药高、中、低剂量组大鼠Smad7、DCN、TGF-β1蛋白含量均服从正态分布，对其两两进行总体相关性分析，用Pearson相关系数描述，结果如下： 1) Smad7与DCN之间的相关性：r = 0.621，P = 0.000 < 0.01，可以认为COPD大鼠模型肺组织中Smad7和DCN呈正性相关。 2) Smad7与TGF-β1之间的相关性：r = −0.650，P = 0.000 < 0.01，可以认为COPD大鼠模型肺组织中Smad7和TGF-β1呈负性相关。 3) DCN与TGF-β1之间的相关性：r = −0.542，P = 0.000 < 0.01，可以认为COPD大鼠模型肺组织中DCN和TGF-β1呈负性相关。