DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 4. 结束语 父亲职业影响成绩表现，父亲职业为农民的留守学生成绩表现总体上来看都是较好的，父亲对于留守学生来说是影响最大的。父亲职业为农民的特性体现在了留守学生学习生活中，教会了他们踏踏实实学习，勤勤恳恳读书，忠厚老实待人，本本分分做人。 和父母每个星期通话次数影响在校表现中的成绩表现，通话次数频繁的成绩表现较差。留守学生与父母通话次数越多，其一是影响自己的学习氛围；其二是影响父母的工作心境；其三从侧面可以看出这种小孩之所以让出门在外的父母时时牵挂不放心，是因为这种孩子普遍较为顽皮，难以管教，因此在校成绩表现自然不会太好。因此，留守学生应该学会独立自主，尽量都靠自己去解决问题，改掉自己过往的一些不良习惯，不能事事都依靠父母，这样才能从根本上改变自己的表现。 总之，社会、学校和家庭的强强联合，从各个方面为初中留守学生提供良好的生活学习环境，尽可能缓解初中留守学生心理问题、学习问题、生活问题、思想品德问题以及安全问题所带来的负面影响。学生是未来，十年树木百年树人，我们应尽全力为初中留守学生营造一个更好的生活和学习环境。
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user: 摘 要 先进陶瓷材料由于其精细的结构组成及高强度、高硬度、耐高温、抗腐蚀、耐磨等一系列优良特性被广泛应用于航空航天、电子、机械、生物医学等各个领域。陶瓷材料的烧结技术对材料本身的结构及性能有着重要影响。本文对陶瓷材料的烧结机理、研究进展及应用进行了总结，并提出了今后的研究方向。 关键词 :烧结技术，机理，研究进展，应用 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 概述 作为三大材料–无机非金属材料的重要一类，陶瓷材料发展至今天，已从最初的陶器、瓷器等传统陶瓷发展为可应用于国防、航空航天、电子、机械、医疗等各个领域的先进陶瓷材料，是知识技术密集性产品，可满足新技术产业的需求。 先进陶瓷材料的应用发展离不开烧结技术的发展，相同化学组成的陶瓷坯体，采用不用的烧结工艺将产生显微结构及性能差别极大的陶瓷材料，因此人们对陶瓷烧结工艺进行了大量的探索与研究。近些年来，发展了许多新型烧结技术，例如微波烧结、等离子体烧结、自蔓延烧结等 [ 1 ] 。这些新型烧结技术因其潜在的节能省时而成为当下陶瓷材料烧结技术研究的热点。未来的烧结技术一定是向着精细化、可控化、节能高效方向发展。
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user: 3. 结语 陶瓷烧结技术的发展直接影响着先进陶瓷材料的进展，是陶瓷制品成品中不可或缺的关键一步。近些年发展起来的烧结新技术都存在的各自的优势与劣势，与工业化、大规模应用存在着一定的距离。所以对于烧结技术的改进优化及新技术的研究还需要进一步深入。烧结技术的改进、创新等研究主要集中在以下几点：(1) 机理、工艺等基础理论研究需要加强；(2) 反应可控、可生成规定尺寸或功能的陶瓷、精细化生产；(3) 节能环保、成本低；(4) 可应用工业化大批量生产。
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user: 摘 要 本文制备传染性造血器官坏死病毒(Infectious haematopoietic necrosis virus， IHNV)、传染性胰脏坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus， IPNV)胶体金快速检测试纸，并对其性能进行检测。以柠檬酸三纳作为还原剂制备胶体金颗粒，标记IHNV、IPNV单克隆抗体，将羊抗鼠IgG、羊抗兔IgG、兔抗鼠和纯化后的2种单克隆抗体包被于NC膜上，作为质控线和检测线来检测样品中的IHNV和IPNV。结果表明所研制的试纸特异性良好，分别对鲤春血症病毒(SVCV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)等常见病原菌进行测试，未出现交叉反应；敏感度达到10 5 CFU/mL，反应时间仅需5 min~10 min，可以用于感染上述2种病原的病鱼腹水现场检测。 关键词 :传染性造血器官坏死病毒，传染性胰脏坏死病毒，胶体金，免疫层析，试纸条 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ 传染性造血器官坏死(Infectious haematopoietic necrosis， IHN)是严重危害我国鲤、鳟鱼苗种业的一种病毒性疾病 [ 1 ] 。而传染性胰脏坏死(Infectious pancreatic necrosis， IPN)是一种由传染性胰脏坏死病毒引起鲑科鱼类的病毒性传染病，以前称其为急性卡他性肠炎，分为急性、亚急性和慢性3种 [ 2 ] 。IHN、IPN被世界动物卫生组织(OIE)列为必须申报的动物疫病，被我国列为二、三类动物疫病 [ 3 ] 。为了预防和控制IHN、IPN的流行，对它们进行流行病学监测和诊断是十分重要的。因此，建立快速简便的IHN、IPNV检测方法，有利于对疫病爆发进行及时的监测、预防和控制，也是保证国内水产养殖业健康发展及促进出口贸易的有效手段。
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user: 1. 材料与方法
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user: 1.1. 实验所用的材料 氯金酸、碳二亚胺、兔抗鼠二抗购自Sigma公司，柠檬酸三钠(分析纯)、BSA购自上海惠世有限公司。硝酸纤维素膜、玻璃纤维、玻璃棉、吸水纸、支持板：德国S.S公司产品。实验用水均为经超纯水装置净化的二次去离子水，电阻率 ≥ 18.2 M Ω。IHNV、IPNV、SVCV、VHSV、EHNV、KHV等病毒均由本实验室保存
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user: 1.2. 主要溶液的配制 [ 4 ] 见2.1中的溶液名称。
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user: 1.3. 主要仪器设备 分析天平、直流(数显)无级调速搅拌器、恒温数显加热套、紫外可见光分光光度仪、透射电子显微镜、粒度测定仪。
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user: 1.4. 临床样本 临床62份鱼类样本：2014~2016年期间辽宁地区采集； 16份IHNV与IPNV的阳性样本：由本实验室分离、鉴定、保存。
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user: 1.5. 方法
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user: 1.5.1. 胶体金标记单克隆抗体的制备 [ 5 ] 以及检测线和对照线的制备 用Bio-Dot XYZ-3050自动喷膜机分别将2 mg/mL纯化的多抗和1 mg/mL SPA点在硝酸纤维膜上检测线和对照线位置，点样速度为0.75 μL/cm。 37 ℃ 干燥2 h后， 4 ℃ 密封保存备用。
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user: 1.5.2. 胶体金试纸条的组装及试验结果判定 将背衬、样品垫、吸水垫、硝酸纤维膜、金标垫粘在一起，利用Bio-Dot CM4000切条机将其切成3.5 mm宽的试纸条，于 4 ℃ 干燥保存备用。用试纸条检测，如果对照线和检测线均显色，则为阳性，如果仅对照线显色，而检测线不显色，则为阴性，如果对照线不显色，则检测无效，应换用另一根试纸条再次检测。
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user: 2. 结果与讨论
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user: 2.1. 抗体纯化 将制备好的抗体用20 mM PBS PH7.0的缓冲液进行10倍稀释，稀释后的样品过0.45um的针头滤器和Mabselect 5 ml的预装柱(平衡Buffer：20 mM PBS PH7.0、洗脱Buffer：100 mM Gly-HCL PH3.0)。制备出的目的蛋白加入 1 M Tris-HCL PH 9.0的溶液进行中和，中和后的目的蛋白再过G 25的柱子进行脱盐，置换溶液是20 mM PBS PH7.0。最后跑电泳，用BCA的方法测蛋白浓度。结果见图1。
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user: 2.2. 抗体标记 1m 胶体金中加入20 ug的待标记抗体，包被多克隆抗体，包被浓度为1.5 mg/mlL，样稀主要成分为10 mM PBS PH = 7.3。 经图2数据，得出结论：IHN、IPN抗体配对结果较好，符合使用要求。
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user: 2.3. 重复性试验 对实验室保存的16份IHNV、IPNV阳性样本进行检测显示试纸条具有较好的重复性；稳定性实验结果显示(见图3)，置于 37 ℃ 及 4 ℃ 保存的试纸条，在保存3个月后反应，结果无明显差异，置于 50 ℃ 保 图1. 电泳鉴定结果 存的试纸条从第2个月开始，敏感性下降，质控线和检测线变得模糊不清。
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user: 2.4. 灵敏性试验 试纸条可检出滴度为10 3.5 TCID 50/100 uL的病毒悬液，仅与IHNV、IPNV病毒悬液呈阳性反应，其余均为阴性，如图4所示。
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user: 2.5. 梯度加样测试 如图5所示，结果表明，样本加样量等差递减，然后补充样本稀释液后，产品显色成梯度变化。符合产品检测性能需求。
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user: 2.6. 特异性试验 特异性试验结果发现对相应抗原抗体的检测呈阳性，对PFRV、HRV、IPNV、VNNV、YAV、GCRV、KHV等病毒的检测均为阴性(表1、表2)。 图2. IHN、IPN试纸条 图3. 重复性实验结果 图4. 灵敏性试验结果 图5. 梯度加样测试IPN试纸条 Table 1 Specific test results of IHNV colloidal gold test stri
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user: 摘 要 本文建立快速检测和鉴定鮰爱德华氏菌、迟钝爱德华氏菌的基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测方法。采用副溶血性弧菌、鮰爱德华氏菌、迟钝爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌等菌株，进行MALDI-TOF-MS检测，以验证该方法的稳定性和重复性。对不同来源的菌株进行检测，以确认方法的准确性。通过MALDI-TOF-MS技术及传统生化鉴定方法进行比较，结果表明MALDI-TOF-MS在检测时间、重复性、稳定性、准确性等方面的总体表现均优于传统生化鉴定方法，可用于鮰爱德华氏菌、迟钝爱德华氏菌的日常检测。 关键词 :MALDI-TOF-MS，鮰爱德华氏菌，迟钝爱德华氏菌，检测，鉴定 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ 爱德华氏菌(Edwardsiella)属于肠杆菌科，目前分为迟钝爱德华氏菌、保科爱德华氏菌、鮰爱德华氏菌3个种。其菌体短杆状，具周鞭毛，革兰氏染色阴性，宿主范围很广，流行季节为夏季和秋初高温期。广泛分布于海水和淡水中，感染各种养殖水生动物，对水产养殖业危害极大。对鲤鱼、鲸鱼、鳝鱼和其他多种鱼类致病，可造成严重经济损失。引起鱼类发病的病原菌主要为鮰爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)和迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda) [ 1 ] 。爱德华氏菌可使鱼类发病，目前已报道的主要导致斑点叉尾鮰肠败血症，可以危害所有规格的斑点叉尾鮰，但主要影响苗种存活率 [ 2 ] ，己成为美国养殖斑点叉尾鮰最主要的疾病之一。 传统的细菌鉴定方法依据细菌的形态学和生理生化特性分析，不仅耗时长，而且由于生化特性容易受培养基、保存时间等因素的影响，常常给鉴定带来困难 [ 3 ] 。近年来快速发展的基因检测技术在微生物鉴定方面取得了一定的应用，但由于其敏感性高，容易出现假阳性 [ 4 ] ，而且对近似种的细菌鉴定还存在一些不足。因此，对一些与人和动物关系密切的病原菌还需要建立更加快速、准确、实用的检测和鉴定方法。本文应用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术建立了检测和鉴定鮰爱德华氏菌和迟钝爱德华氏菌方法。
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user: 1. 材料与方法 1.1. 材料与试剂 试验菌株：本文所用的鮰爱德华氏菌(HYDX-01)由大连海洋大学赠送，迟钝爱德华氏菌(CICC10497， CICC10630)购自中国工业微生物菌种保藏管理中心菌株，其他分离的菌株经生化及分子生物学方法确认。 细菌培养基和生化鉴定卡：营养肉汤、BHI琼脂、DHL琼脂和TSA琼脂等细菌培养基由北京陆桥技术有限公司提供；生化鉴定GN卡由法国生物梅利埃公司提供。 1.2. 仪器与设备 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI Biotyper)，德国布鲁克公司；全自动微生物鉴定仪VITEK 2 (Compact 30)，法国生物梅利埃公司。 1.3. 方法 菌株的复活与检测：用营养肉汤对细菌进行复活(36℃ ± 1℃，培养24 h)后，接种于BHI和DHL 37℃培养36 h，进行MALDI-TOF-MS检测。 样品处理：挑取可疑单个菌落于1.5 mL的离心管中，用生理盐水10，000常温r/min离心2 min洗涤二次；用75%的酒精固定细菌的表面蛋白；用等量的70%甲酸和乙腈溶解表面蛋白，10，000 r/min常温离心2 min。 点靶：吸取上清点靶。先点1 μL上清于样品靶板上，同时点1 μL标准品溶液(校准靶板)，待液体干后立即点1 μL基质溶剂。 质谱图的采集和分析：应用MALDI Biotyper仪器，选择BioTyper par的采集方法对细菌的图谱进行采集。用标准品对仪器进行校准后，采集样品质谱图。应用BioTyper软件对细菌质谱图进行分析和鉴定。 不同来源爱德华氏菌的MALDI-TOF-MS鉴定：将冷冻保存的从黄颡鱼、鳗鱼、大菱鲆、鲤鱼、六线鱼及甲鱼等水生动物中分离，并经形态和生化鉴定为鮰爱德华氏菌的9株菌株用肉汤培养液复活，进行MALDI-TOF-MS鉴定，并与菌株保存前的生化鉴定结果进行比较，判断MALDI-TOF-MS检测结果的准确性。 MALDI Biotyper的判断标准和鉴定结果：判断标准是待检细菌与数据库中标准菌株质谱图的符合度，用得分表示，得分越高，说明待测菌株的谱图同质谱库中某一标准菌株的谱图(质量和峰高)越相近。分值在2.300~3.000之间，标记为(+++)，可完全确认菌株鉴定结果；分值在2.000~2.299之间，标记为(++)，可基本确认菌株鉴定结果；分值在1.700~1.999之间，标记为(+)，该菌株鉴定为不确定结果；分值在0.000~1.699之间，标记为(-)，可判断不是该种细菌。
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user: 2. 结果与讨论 2.1. 菌株鉴定结果 两种爱德华氏菌经Biotyper数据库鉴定后，与数据库中相应的爱德华氏菌的匹配分值分别为：迟钝爱德华氏菌为2.495、鮰爱德华氏菌2.367，且两种爱德华氏菌的质谱图比较相似，即其具有相近的蛋白组成，以此可以与其它非爱德华氏菌进行区分。图1为两种爱德华氏菌在分子量5000~8500间的质谱图， 图1. 两种爱德华氏菌的质谱图 从图中可以看出，两种爱德华氏菌之间的质谱峰存在明显的差异，可以进行爱德华氏菌的种间鉴别。表1为两种爱德华氏菌在分子量5000~8500之间的峰值比较，从表中可以看出鮰爱德华氏菌在5000~8500区间有20个可读峰值，而迟钝爱德华氏菌只有16个，缺少5384、7273、7983、8382左右的峰值，而且两种细菌的重复性试验结果变化很小，表现出很好的重复性，迟钝爱德华氏菌与数据库中Edwardsiella tarda ATCC 36.1 EGS的匹配分值均在2.45~2.495之间，与Edwardsiella tarda HL 23.1 EGS的匹配分值均在2.35~2.392之间，与Edwardsiella tarda ATCC 35.1 EGS的匹配分值均在2.302~2.31之间；鮰爱德华氏菌与数据库中Edwardsiella ictaluri 885 EGS的匹配分值均在2.35~2.367之间，与Edwardsiella ictaluri DSM 13697 HAM的匹配分值均在2.046~2.1之间，说明MALDI-TOF-MS技术具有良好的重复性。 2.2. 特异性试验结果 采用鮰爱德华氏菌、迟钝爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌等菌株培养液，在同一条件下进行MALDI-TOF-MS检测，以验证该方法的特异性。结果表明，MALDI-TOF-MS方法可以快速、准确地鉴定出两种爱德华氏菌，具有很好的特异性，见图2。 2.3. 不同方法鉴定结果 GN TestKit鉴定卡可以对革兰氏阴性菌的48项生化指标进行鉴定，两株细菌的大部分生化结果一致，只在D-甘露醇、蔗糖、L-阿拉伯糖、柠檬酸应上有差异，上述2株爱德华氏菌经全自动微生物鉴定仪鉴定后，均能区分开来，符合率在95%~99%之间。冷冻保存两年后的菌株的生化与保存前的生化会有差异，符合率也低于90%，如鸟氨酸脱羧酶和赖氨酸脱羧酶保存前为阳性，保存后变为阴性，脂酶由阴性变为可疑等，说明用传统的生化反应来鉴定细菌存在一定的缺陷。 2.4. 临床样本鉴定结果 对复活的9株爱德华氏菌的菌株进行MALDI-TOF-MS鉴定，其质谱图变化很小，与数据库中迟钝爱德华氏菌的匹配分值均在2.35以上，可信度很高。说明MALDI-TOF-MS技术具有很好的准确性。而VITEK对9株爱德华氏菌的鉴定值有3株只有85%，在结果判断上可信度有所降低。
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user: 3. 讨论 目前，针对爱德华氏菌的鉴定方法报道的有分子生物学方法、酶联免疫法及传统的分离培养法，尚无应用MALDI-TOF-MS法鉴定爱德华氏菌的报道 [ 5 ] 。本文通过对水生动物中常见的两种爱德华氏菌分别应用MALDI-TOF-MS技术及传统生化鉴定方法进行检测，结果表明MALDI-TOF-MS在检测时间、重复性、稳定性、准确性等方面的总体表现均优于传统生化鉴定方法。 MALDI-TOF-MS技术以细菌表面蛋白为检测对象，通过量化分析每种细菌的表面蛋白组成，与标准参考菌株的MALDI-TOF-MS图谱进行比较，从而得出鉴定结果 [ 6 ] 。由于每种生物的蛋白组成经过长期 Table 1 Peak comparison table of two species of Edwardsiell 迟钝爱德华氏菌 鮰爱德华氏菌 24 2.461 2.367 36 2.560 2.432 48 2.465 2.441 72 2.432 2.381 表1. 两种爱德华氏菌的峰值比较表 图2. 爱德华氏菌特异谱图 的进化，具有很好的稳定性。细菌的蛋白组成也主要取决于遗传因素，受培养基、培养时间以及其它培养条件等外部因素的影响很小。因此，与其他技术相比，MALDI-TOF-MS具有很好的稳定性和重复性。
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user: 摘 要 本文从时间、空间两个维度出发，研究了贵州山区风电的出力特性，以提升风功率预测、调度计划编制等相关业务水平。时间维度包括以季节为单位的长期尺度和以分钟为单位的短期尺度，长期尺度上侧重于风电电量变化特性，短期尺度上侧重于其出力波动特性。空间维度则主要用于研究贵州风电富集地区内相邻风电场在电量和电力两个层面的耦合特性。最后从调度运行管理的角度出发给出了一些建议和意见。 关键词 :风电，时间维度，波动特性，空间特性，耦合特性 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 风电大规模接入，已成为当前我国电网调度运行中亟待解决的关键问题。近年来，贵州风电装机规模快速发展，也给调度运行带来严峻挑战。提升调度运行水平，确保风电消纳的重要前提是研究和掌握风电的出力特性。为此本文基于贵州风电管理相关经验，介绍了贵州山区风电出力特性的相关研究成果。
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user: 2. 贵州风电发展概况 贵州风电发展始于2011年，位于贵州毕节赫章县的韭菜坪风电场并网发电，拉开了贵州省风电发展的序幕。 2.1. 风资源概况 与甘肃、内蒙古等风资源丰富的地区相比，贵州风资源相对匮乏。整体上贵州处于四类风区，西部毕节、六盘水两地和中部的黔中部分地区风资源条件较好，达到三类风区标准，贵州风资源在我国整体情况如下图1所示 [ 1 ] 。 图1. 贵州风资源水平 据测算，贵州可开发风电资源储量456万千瓦，目前已开发风电资源达到352万千瓦 [ 1 ] 。特别是近5年风电快速发展，大量条件较好的风区均已开发。 2.2. 风电发展情况 截止2016年底，贵州省风电装机容量达到352万kW，风电装机发展趋势如表1所示。可以看出2013年至2016年为贵州风电发展的快速上升期，平均装机容量增长近60万千瓦。 同时随着传统电源的增速放缓，风电在电网装机中的比例越来越大，对电网调度运行的影响已不容忽视。至2015年，风电装机比例超过10%，电网低谷调峰、输电通道容量等方面的挑战更是日益凸显。 2.3. 风电分布特点 截止2017年初，贵州已投产风电场达23个，其分布如下图2所示。在地域分布上与贵州风资源分布一致，并呈现出如下两方面显著特点。 1) 集中于西部和中部两个风带 贵州风电场均处于贵州西部的毕节、六盘水地区和黔中的贵阳、都匀部分地区，风电场分布与风资源分布高度契合。 2) 均处于山区地形环境 图2. 贵州风电分布图 Table 1 Wind power installed capacit 年份 装机/MW 占比/% 2012年 96.5 3.07 2013年 134.8 3.15 2014年 232.6 6.31 2015年 297.5 10.01 2016年 352.2 12.10 表1. 风电装机容量 上述风电集中区域皆为山区地形环境。山区风电的出力受地形影响较大，和平原地区风电出力特性相比有显著差异，在风电的出力特性分析中必须考虑这一影响因素 [ 2 ] [ 3 ] 。
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user: 3. 时间维度出力特性 风电出力的时间维度特性是指风电发电量或出力与时间的相关性 [ 4 ] 。本文中所研究的风电时间维度出力特性主要包括以季节为单位的长期尺度和以分钟为单位的短期尺度。 3.1. 长期时间特性 在长期尺度上电力系统调度运行重点关注的是电量分配合理性，因此本文所研究的风电长期时间特性主要是分析不同季节风电的发电量特点。 3.1.1. 研究方法 我国春、夏、秋、冬四个季节分别对应3~5月，6~8月，9~11月，12~2月。考虑到风电发电量与其装机关系密切，且不同时期机组检修、故障情况不同对发电量影响较大，本文中将以等效利用率为研究对象，分析不同季节的发电量变化特点 [ 5 ] 。等效利用率计算公式如下： η w = W w + Δ W w S w (1) 如式(1)所示， η w 为风电等效利用率， W w 、 S w 分别为风电实际发电量和装机容量， Δ W w 为核准修正电量，对应由于出力受限、机组检修、设备故障等导致的风电可发电量修正值。 逐年计算各季节的风电等效利用率，由此计算其均值和方差，观察数据波动性，并对比不同季节的发电量差异，即可实现对风电季节发电量特性的分析。 3.1.2. 结果分析 由于2011年贵州风电处于起步阶段，装机规模过小。本文统计了2012年至2016年风电各季节等效利用率数据，如表2所示。 基于2012~2016年各年统计数据，可以直观发现贵州夏季和冬季风电发电量明显高于春季、夏季。同时夏季风电发电量波动较冬季较大，冬季风电发电较为稳定。 造成上述现象的原因在于贵州省地处亚热带季风气候区域，夏季盛行自东南季风，冬季盛行西北季风，因此上述两个季节的发电量优于春季、秋季。同时贵州夏季可能受到我国南部沿海的台风气候影响，因此夏季风电发电量波动性较冬季较强。 Table 2 Season characteristics of wind power generation in Guizho 年份 春季 夏季 秋季 冬季 2012年 0.07 0.23 0.11 0.32 2013年 0.07 0.27 0.08 0.33 2014年 0.05 0.32 0.07 0.31 2015年 0.02 0.19 0.04 0.29 2016年 0.09 0.34 0.08 0.32 均值 0.06 0.27 0.08 0.31 方差（×10 − 4 ） 5.6 30.8 5.1 1.8 表2. 贵州风电季节发电量变化特性 这一特性对电网调度运行的影响在于夏季汛期水电大发，风电和水电面临较为明显的协调矛盾。而冬季处于枯期，风电大发客观上符合贵州冬季负荷高的运行需求。 3.2. 短期时间特性 在短期尺度上电力系统调度运行重点关注的是电力平衡，确保频率稳定，因此本文所研究的风电短期时间特性主要是分析其分钟级波动特性 [ 6 ] [ 7 ] 。 由于当前电网频率与联络线偏差考核的时段要求为10分钟，因此本文重点分析风电10分钟的波动特性。 3.2.1. 研究方法 借鉴发电量的研究思路，本文通过等效波动率分析风电出力的波动性 [ 8 ] 。等效波动率计算公式如下： λ w = Δ P w max S w (2) 如式(2)所示， λ w 为风电的等效波动率， Δ P w max 为10分钟内风电出力最大波动量，满足 Δ P w max = P w max − P w min ，其中 P w max 、 P w min 分别为风电在10分钟尺度范围内的最大、最小出力， S w 为风电装机。 统计不同年份风电的等效波动率分布特性，能够用于计算风电发展对电网调频的影响。 3.2.2. 结果分析 本文统计了2014~2016年的等效波动率分布情况。如图3所示为三年的等效波动率分布图，不难发现三年间尽管风电装机增大，但其等效波动率基本保持稳定，其等效波动率期望依次为3.96%、4.27%和4.48%。这一现象的原因在于新建的风电场往往与原风电场位置相近，其短期气候环境相似，因此等效波动率变化不大。但同时也可以发现三年来等效波动率呈逐步上升趋势，其原因主要是风电装机增大，波动性上升。 图3. 等效波动率分布图 风电的短期波动性较负荷波动性更加显著，客观上要求电网需要匹配更多的调频容量，以满足风电波动下的调控要求。
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user: 4. 空间维度出力特性 风电出力的空间维度特性，是指位于同一区域内的风电场在发电量和出力两个层面的相关性 [ 9 ] [ 10 ] 。 从研究结论上看，贵州两个风电集中区域的分析结果是一致的，本文将以贵州西部山区风电为对象介绍研究结果。 4.1. 电量特性 4.1.1. 研究方法 风电场空间维度的电量特性是指处于同一区域的不同风电场逐日发电量的相关性。通过统计其逐日发电量，并计算其相关性指标即可分析其电量特性。 4.1.2. 结果分析 本文以贵州西部乌江源、麻窝山、马摆大山三个风电场为例介绍分析过程和分析结论，其分析结论同样适用于贵州两个风电富集区域的其他风电场，具有通用性。 上述三个风电场2016年夏季某月逐日发电量如图4所示。可以发现三个风电场逐日发电量呈高度相关性。将其发电量与装机容量的比值作为分析对象，乌江源、麻窝山、马摆大山发电量相关性指标分别为： { C o v 1 ， 2 = 0.645 C o v 1 ， 3 = 0.431 C o v 2 ， 3 = 0.453 (3) 如式(3)所示， C o v 1 ， 2 、 C o v 1 ， 3 、 C o v 2 ， 3 分别为乌江源与麻窝山，乌江源与马摆大山，麻窝山与马摆大山的逐日发电量协方差。 图4. 风电场逐日发电量 同一风资源富集区域内气候条件相似因此风电场发电量呈较高的相关性。由于风电接入区域相对偏远，因此送出通道容量有限，这一特点客观上限制了风电消纳。 4.2. 电力特性 4.2.1. 研究方法 借鉴电量研究的特点，分析同一区域不同风电场出力波动性的相关性。 4.2.2. 结果分析 仍以乌江源、麻窝山、马摆大山三个风电场为研究对象。2016年某日三个风电场出力曲线如图5所示。可以发现乌江源与麻窝山发电曲线相似性较强，呈较为明显的时滞特点，而马摆大山则与上述两个风电场出力相关性较差。 造成上述的原因在于尽管处于同一风电富集区域，但是由于山区影响，同一区域内风的规律变化较大。因此在较长时间尺度上发电量呈较高的相关性，而在短时间尺度上相关性明显下降。 这一特点启示在短期优化调度上，需要深入考虑不同风电场的出力波动特性，使其协同优化，提升运行效率。
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user: 5. 风电管理措施建议 1) 加强风电基础数据管理，全面掌握不同电压等级风电场实时数据。基础数据是运行分析的基础，风电与火电、水电不同，风机数量多，接入电压等级低等特点给其基础数据管理带来困难。结合贵州实际亟需加强基础数据管理，将不同电压等级风电场的实时运行数据接入调度中心自动化系统，包括发电功率、上网功率、无功功率、无功可调能力等。 2) 建立风功率预测管理机制，提升预测准确性。风功率预测是风电调度运行的重要依据。建立风功率预测管理机制，强化对风电场功率预测的考核和评价，推动其不断提升功率预测精确性，是确保可再生能源消纳的重要机制保障。 3) 落实无功电压管理要求，确保地区电网电压合格率。风电接入对地区电网冲击较大，特别是山区 图5. 风电场发电曲线 网架薄弱地区，风电接入可能造成局部电压不合格的问题。为此需要落实风电场无功电压管理要求，将其站内SVG等无功电压调控设备纳入自动电压控制系统，确保地区电网电压合格率。
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user: 6. 结论 开展风电出力特性研究是风功率预测、调度运行优化等调度业务的重要基础。本文从时间和空间两个维度出发深入分析了贵州山区的风电出力特性。时间维度从长期和短期两个尺度分析了风电的季节特性和波动特性，贵州夏季风电大发的规律可能与汛期水电消纳冲突，是时间尺度上需要重点关注的运行特性。空间维度从电量和电力两个角度出发，说明了由于山区地形影响，同一地区风电场发电量相似的前提下发电出力可能有较大差异。最后从加强数据管理、提升功率预测、落实无功电压考核三个层面提出了提高风电管理的措施建议。
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user: 摘 要 随着血液生化，细胞病理，超声、CT、MRI等检查水平的日益提高，各种数据指标在肝移植术前评估工作中的普遍应用，使外科医生能更清楚地了解患者的全身基本状况、肝脏相关血管结构、活体肝移植中供肝的功能情况和内部解剖特点，从而有助与对预后的判断。本文就肝移植术前评估的一些研究新进展进行综述，供临床医师参考。 关键词 :肝移植，术前评估 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 原发性肝癌(以下简称“肝癌”)是我国最常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率居国内恶性肿瘤第2位 [ 1 ] 。手术切除和肝脏移植是肝癌综合治疗的主要手段。对部分不能行常规手术切除的肝癌，肝移植是实现根治唯一手段。此外，肝移植的适应证包括终末期良性肝病，包括肝炎后肝硬化、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、多种代谢性疾病、暴发性肝功能衰竭、Budd-Chiari综合征、多囊肝等。 1963年，现代肝移植之父美国医生Starzl施行世界上第1例人体原位肝移植，现历经50余年的蓬勃发展，肝移植已在全世界步入成熟时期。1977年，我国开展了第一台肝移植手术的尝试，通过几十年经验的积累，现在我国的肝移植也已跻身于国际先进行列。 肝移植常见的有DCD肝脏移植和LDLT肝脏移植，两种方式各有其特点，都是重要的器官获取方式。LDLT肝脏移植多为亲体供肝，即切取成人部分肝脏供给婴幼儿患者，是肝移植的重要发展方向 [ 2 ] ，LDLT肝移植必须同时对供体和受体进行精准的术前评估，设计出最合理的手术方案。DCD肝脏移植是将公民死亡后的器官通过器官分配系统实现平等分配给受体的方案，供肝的短缺是制约DCD肝脏移植的因素。
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user: 2. 关于脂肪肝供肝的术前评估 脂肪肝的供体由于肝脏本身的脂肪变，植入受体后有可能导致肝功能的减退甚至无功能，且有可能对LDLT供肝的供体的安全产生影响 [ 3 ] 。因此对于供体的脂肪肝要给予重视，进行评估。研究发现，脂肪变性小于30%的供体临床上才可以选用 [ 4 ] 。肝脏穿刺活检术是诊断脂肪变性的金标准，是对供肝评估非常好的手段，但因其属于有创检查且存在出血风险，使其在LDLT肝移植中供体的应用受到了限制。而基于超声、CT、MRI的影像学检查对于脂肪变性大于30%的诊断特异性很高，成为广泛应用的评估手段。史瑞 [ 5 ] 等通过研究发现了综合影像学结果和体重指数的一个评估标准：体重指数小于25 kg/m 2 ，影像学脂肪肝小于30%的可以直接考虑成为供肝者。对于体重指数大于25 kg/m 2 的潜在供者进行下一步鉴别：如果影像学结果均为阴性，可以作为供者。只有体质量指数 ≥ 25 kg/m 2 ，且影像学结果中有一项为轻度脂肪肝诊断的患者，需要进行肝穿检查，来明确肝脏脂肪变程度。这种结合了体重指数和影像学的结果用以分析供体脂肪程度的方法具有非常好的借鉴意义。还有学者 [ 6 ] 提出了用肝、脾的CT值的比值作为评价脂肪肝的方法，即比值<1为轻度脂肪肝，<0.7为中度脂肪肝，<0.5为重度脂肪肝，对于平扫肝脾CT值比<1的供者应尽量避免使用。
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user: 3. 关于供受体肝脏体积方面的术前评估 LDLT肝移植手术中，一个关键环节是切取供体多大体积的肝脏。切取过大，供体保留的残肝太少，不能充分保证供体的肝功能，增大供体的风险；切取过小，则不能保证受体有足够的肝脏来维持代谢，受体的移植质量得不到保障。因此，肝脏的影像学评估是肝移植术前评估的核心环节。一般来说，移植的肝的重量为受体体重的1%~3%最合适，0.8%~1.0%也在安全范围，0.6%~0.8%则属危险范围。另外，移植肝的体积大小也可以采用移植肝的体积与受体标准肝体积的百分比来表示，此比值必须>32%。对于供体有报道提出供者残肝体积(RLV)占全肝27%是保证无脂肪肝供者安全的界限，但国际上公认的安全标准仍是RLV > 全肝的30%，或GRWR ≥ 0.5% [ 7 ] 。但是手术前评估的肝脏体积大小、重量和术中肝脏实际体积、重量常常有差异，可采用以下公式来推断术前和术中肝脏大小、重量的联系： V ( 术 中 ) = 0. 656 V ( 术 前 ) + 87 . 629ml W ( 术 中 ) = 0.678 W ( 术 前 ) + 143.704   g 运用这个公式，我们可以通过术前影像学检查和公式计算来判断需要切取肝叶的大小，会使我们术中的实际操作更顺利，从而达到更好的手术效果 [ 8 ] 。 关于肝中静脉的取舍： 一般来说，将供体RLV%为35%和评估GRWR为1.0%作为取舍MHV的重要参考界限。当RLV% > 35%和评估GRWR > 1.0%时，若V、VIII段存在多支静脉汇入MHV不利于搭桥重建时，可选取切取肝中静脉或部分肝中静脉方案，反之将MHV留给供者；若RLV% ≤ 35%或评估GRWR ≤ 1.0%时，则分别倾向于不切取MHV和切取MHV术式以增加术后供受体安全性。当RLV% ≤ 35%且评估GRWR ≤ 1.0%时，应评估MHV属支及供受体情况谨慎分配MHV [ 9 ] 。Marcos等把肝中静脉的分支类型分为3型，并提出根据分型决定肝切线的原则。对于II型供体，除非供体体重明显大于受体，否则我们倾向于切取肝中静脉给受体。对于I型供体，如果右半肝够大，则倾向于将肝中静脉留给供体；但如果供体体积明显小于受体，为避免搭桥，也应考虑切取肝中静脉给受体。对于III型，应考虑切取肝中静脉给受体 [ 10 ] 。
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user: 4. 关于受体血管解剖特点的术前评估 Nghiem [ 11 ] 等认为以下4种血管异常对肝移的术前评估很重要： 1) 腹腔干狭窄：移植肝的唯一血供来自腹腔干，如肝移植术前发现受体腹腔干狭窄，术中需断开膈肌的肌肉和纤维带缓解压力，若正常血供恢复不佳，需用供体的髂动脉做血管搭桥术。 2) 肝总动脉狭窄：如果发现受体肝总动脉狭窄，术中需用供体的髂动脉做血管搭桥术。 3) Michels IX型肝动脉：即肝动脉完全从肠系膜上动脉起源，术中需先重建肝动脉后重建门静脉，与常规肝移植手术的操作顺序相反。 4) 脾动脉瘤：肝移植术后门静脉压力的降低和相应脾动脉血流的增加，使脾动脉瘤破裂的危险性增高。通过术前对脾动脉瘤病人的筛检，发现脾动脉瘤的需要术中需结扎脾动脉以防术后出血并发症的发生。 对这些变异血管的评估有助与临床医师在术前进行分析选择最佳手术方案，规避风险。此外在肝癌肝内转移中，门脉系统受侵犯较为常见，而现在门静脉癌栓已经不是肝移植的禁忌症，但对门静脉癌栓长短的认识至关重要，如为长段门静脉癌栓，需从供体取下一段髂静脉进行搭桥式门静脉重建；如果门静脉癌栓较短，只需进行常规的门静脉吻合术或者切除血栓段后放置短的内置静脉移植片。这些也需要进行术前评估 [ 11 ] 。
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user: 5. 活体肝移植中关于供体血管解剖特点的术前评估 肝动脉存在很高的变异率 [ 12 ] 。移植肝叶存在副肝动脉时肝动脉至步要进行2次吻合且肝动昧的直径也较正常解剖的肝动脉小，动脉直径为2~3 mm或更小时移植术后受体发生肝动脉栓塞的风险就会增加，移植肝叶存在多点细小供血动脉时则认为其不适合作为供体。此外，肝Ⅳ段(肝左内页)通常作为手术切面，肝左内动脉可出自肝左或肝右动脉．术前显示其供血动脉能避免由于手术切断供血动脉而导致术后肝左内叶发生缺血坏死 [ 13 ] 。门静脉的变异往往是在肝门处分成几支，这就需要我们定位门脉分支的具体解剖结构，判断这些分支的离断面，如果需要多个吻合口吻合便会大大增加门脉血栓的形成。 肝静脉的变异也不容忽视，最重要的两种变异分别是肝右后下静脉及肝Ⅷ段静脉汇人肝中静脉供体存在肝右后下静脉时，移植前要测量肝静脉右支到肝右后下静脉的距离，如果距离 > 4 cm，移植过程中则必须用2个血管夹分别夹闭肝静脉才能较顺利地完成血管吻合。当行右半肝切取时，肝中静脉的取舍是关键的技术问题。若发现有肝Ⅷ段静脉汇入肝中静脉。将进行包括肝中静脉的右半肝切取，这样能扩大静脉流出道，保证供肝植入后肝静脉回流通畅 [ 14 ] 。详见上文对肝中静脉取舍的分析。
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user: 6. 对于肝癌行肝移植的患者的术前评估 根据米兰标准，肝硬化后肝脏肿瘤单发，直径 ≤ 5 cm；或多发肿瘤数目不超过3个且最大肿瘤直径 ≤ 3 cm者适合行肝移植治疗 [ 15 ] 。但是随着移植技术的不断发展，有学者认为米兰标准较为苛刻，提出了匹兹堡改良TNM分期标准、加州大学标准、活体肝移植京都大学标准等，也使患者取得了相当长的生存率。2008年，中国提出的杭州标准是国际上率先引入肿瘤生物学特性和病理学特征的移植标准：病人没有大血管受侵，肿瘤直径 < 8 cm，AFP水平 < 400和组织学分级为高/中分化时优先考虑行肝移植治疗；如果肿瘤直径 > 8 cm，则必须同时满足AFP水平 < 400和组织学分级为高/中分化，可考虑行肝移植治疗 [ 16 ] 。研究证实，无论是尸体肝移植还活体肝移植，符合杭州标准的肝癌受者均获得满意的术后生存率。肝癌肝移植受体的选择标准建议见表1 [ 17 ] 。
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user: 7. 其他评估 此外，近年来发现，中性粒细胞/淋巴细胞比率(NLR)作为一组简单的炎症指标，不仅在临床上简单易得，并且近来的研究发现，术前NLR水平与肿瘤预后密切相关，NLR是肝癌肝移植预后的独立危险因子。肝癌肝移植术前NLR升高往往提示较差的预后，有学者 [ 18 ] 认为(NLR > 6)将显著降低肝癌肝移植受者术后的长期存活，并增加肝癌肝移植受者术后肿瘤复发的风险。 Table 1 The standard advice of liver cancer liver transplant recipient 建议 证据级别 推荐强度 米兰标准是肝癌肝移植受体选择的参考基准 II 强 杭州标准是可靠的肝癌肝移植受者选择标准，符合杭州标准者接受肝移植可获得满意的术后生存率 II 强 某项标准，如经过多中心大样本研究证实，能取得与米兰标准相似的效果，可应用于临床 II 弱 肝癌切除术后肝内肿瘤复发且无法再次手术切除者，如无肝外播散及大血管侵犯，可行抢救性肝移植 II 弱 符合肝癌肝移植选择标准的患者接受活体肝移植，术前需要严格评估供者与受者的社会心理学状态 III 弱 对于符合肝癌肝移植选择标准的患者，实施活体肝一之后如出现移植物失功能，可行尸体肝移植 III 弱 对于超越肝癌肝移植选择标准的患者， 实施活体肝移植之后如出现肝癌复发导致的移植物失功能，不建议行尸体肝移植 V 强 为了最小化供者风险及最优化受者预后，活体肝移植的开展局限于具有肝移植技术的医疗单位。 V 强 表1. 肝癌肝移植受者选择标准建议 还有学者 [ 19 ] 将雌二醇/睾酮比值(E2/T)作为肝移植患者术前评估的指标之一，对E2/T降低且AFP < 400而临床不能明确原发性肝癌(HCC)患者，在肝癌的诊断方面具有参考价值。 涉及循环、呼吸、泌尿、神经系统的一般状况评估，这里不再一一赘述。
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user: 摘 要 漆酶作为一种绿色环保的多酚氧化酶类，对有机芳香化合物(尤其酚类)及衍生物均具有良好的降解效果，在生物质利用、工业废水的处理、污染环境的生物修复以及在食品和动物营养等领域应用方面具有优势和潜力。本文就自然界酚类化合物的来源及去除方法进行简单总结，旨在为进一步合理利用酚类化合物奠定基础。 关键词 :漆酶，生物转化，酚类化合物 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ 自然界酚类化合物来源广泛，一类是植物本身在生长发育过程中形成的次级代谢产物，另一类来源于工业、农业生产及环境中有机物的降解产物。酚类化合物是化学工业的重要原料，同时也是工业排放的重要污染物。由于酚类化合物在不同学科领域中具有“利”和“弊”的两面性，国内外学者对酚类化合物进行了广泛的研究，涉及面从传统的领域扩展到了农业、食品、药理、营养、生化、日化、植保、功能高分子材料等多个领域 [ 1 ] 。近年来，酚类化合物的利用和降解成为一个热点研究问题，受到了国内外学者的高度重视。
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user: 1. 自然界中酚类化合物的来源及存在形式 1.1. 环境中酚类化合物 环境中酚类化合物来源于三个方面：(1) 直接来源于工业合成的废弃物，诸如煤气、焦化、炼油、冶金、机械制造、玻璃、石油化工、木材纤维、化学有机合成工业、塑料、医药、农药、油漆等工业排出的废水中均含有酚类化合物，印染和纺织工业废水中含有大量芳香环染料，造纸工业的漂白废水中含有大量的氯化有机物，如氯苯酚、氯化脂肪酸、氯化树脂酸等 [ 2 ] 。(2) 来源于农业生产，如农药2，4-D(含有2，4-二氯酚)和2，4，5-T(含有2，4，5-三氯酚)的大量使用，杀菌剂和除草剂中氯酚类化合物被广泛应用等 [ 3 ] ；(3) 来自某些有机物在环境中的降解。酚类化合物具有毒性，对环境中的生物具有强烈的毒害、致畸、致多发性脑神经病变作用 [ 4 ] 。在环境中酚类化合物的含量虽然低，但其性质活泼，与土壤的相互作用复杂，具有难降解性和积累性。酚类化合物作为一类重要的环境污染物，许多国家已将其列入重点污染物的名单之中。因此，如何采取有效的方法控制酚类化合物对环境的污染是摆在人们面前急需亟待的问题。 1.2. 植物酚类化合物 植物酚类化合物也统称为植物多酚类化合物(Plant polyphenol)，是广泛存在于植物体内的多羟基酚类化合物的总称 [ 5 ] ，其含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素，主要存在于植物的皮、根、木、叶、果实等器官中 [ 6 ] 。目前发现多酚类化合物在自然界的储量非常丰富，含多酚类化合物较多的植物超过600种，在某些针叶树皮中多酚含量达20%~40% [ 7 ] ，根据苯环数量和结构组成可分为黄酮类、酚酸、酚醇、芪类和木脂素等五类 [ 8 ] 。植物体内的多酚类化合物主要以结合态的形式存在，常常有一个或多个糖基连接在它的羟基部位，也有以直接连接在芳香环碳原子上的形式存在，还可与其它化合物连接，如羧酸、有机酸、胺类、脂类和蛋白质等，此外，也很容易和金属离子形成络合物 [ 9 ] 。植物多酚类化合物通过适当降解得到的产物可作为工业生产的原料。如从水解类多酚可以得到酸或小分子的酸酯，它是制药行业重要的原材料 [ 10 ] 。另外，多酚类化合物的分解为更易人体吸收的酚酸小分子物质，增加了多酚的生物利用度和活性。这一特性在促进人体健康和食品加工方面有一定的应用潜力 [ 9 ] 。植物多酚类化合物因其独特的化学结构，具有抗肿瘤、抗氧化、抑菌、抗病毒等多种生理功能 [ 11 ] 。在医药、食品、保健品及日用化学品等方面得到了广泛应用 [ 12 ] 。随着天然产物开发的逐渐兴起，植物多酚类化合物成为当前研究的热点 [ 13 ] 。
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user: 2. 酚类化合物的降解方法 随着酚类化合物毒性研究的深入，其环境浓度的日趋增加和污染范围的日益扩大受到人们的普遍关注，也使得酚类化合物去除方法及其机理的研究成为全球性的热点。酚类化合物降解方式主要有生物和化学氧化降解两种。化学氧化降解的方法则因条件较强烈，得到的小分子会继续发生反应，最终产物很复杂。而生物降解的条件比较温和，所得小分子产物的产率较高，同时又不会引入其它杂质。 2.1. 化学氧化降解 化学氧化降解是利用氧化剂的氧化性能，使酚类化合物分解，从而转化为无毒或毒性较小的物质，化学氧化降解是传统的有机物降解技术，常见的化学氧化剂包括臭氧氧化、二氧化锰氧化、高铁酸盐氧化和零价铁氧化。如臭氧(O 3 )具有强氧化性，对许多酚类化合物具有极高的氧化效率 [ 14 ] 。去除酚类化合物的机理是臭氧与酚类化合物邻位和对位碳原子上的电子云发生亲电反应，从而达到降解的效果。但酚类化合物在臭氧作用下会生成有毒的苯醌类中间产物，进而生成甲酸、草酸等短链羧酸，最终被矿化为CO 2 和H 2 O。锰氧化物能有效促进环境中的多酚类物质发生聚合反应 [ 15 ] ，Stone等 [ 16 ] 利用锰氧化物与酚类化合物反应，提出了锰氧化物与酚类物质反应的“表面位点结合模型(Surface Site-Binding Model)”机理。高铁酸盐( FeO 4 2 − )作为一种强氧化剂，具有选择性的氧化剂，对酚类化合物具有明显的去除效果 [ 17 ] 。零价铁在降解有机物的过程中形成的Fe(OH) 3 对水中污染物具有一定的吸附和絮凝作用，因此被用于水中有机物的去除。研究发现，多金属氧酸盐 [ 18 ] 、腐植酸和富里酸 [ 19 ] 可作为加速电子传递的中介，能促进电子从FeO表面至O 2 的转移，加速H 2 O 2 的生成，促进对4-氯酚、4-溴酚、4-氟酚、4-硝基酚、2，4-二氯酚、2，4，5-三氯酚和双酚A的降解速率。 2.2. 生物酶促反应 研究表明，酶可催化酚类化合物发生氧化偶合反应 [ 20 ] [ 21 ] 。由于酶具有高度的专一性和高效的催化性，对酚类化合物具有很高的降解效率。催化酚类化合物降解常用的酶包括过氧化物酶(Peroxidases)和漆酶(Laccases)两大类。过氧化物酶和漆酶分别在过氧化物和氧气存在的条件下，可以氧化酚类化合物，形成苯氧自由基 [ 22 ] ；而苯氧自由基之间发生聚合反应，生成多聚物沉淀，从而将其中去除。与过氧化物酶相比，漆酶具有巨大的实际应用价值。首先，LiP和MnP是在限碳、限氮条件下产生的严格次级代谢产物，在工业废水处理过程中，碳、氮源营养物质的大量存在限制了细胞对酶的分泌。其次，LiP和MnP在降解有机污染物时，需要大量的H 2 O 2 作为辅助剂 [ 23 ] ，这限制了其在实际生产中的应用。漆酶可在没有H 2 O 2 存在下，直接对底物催化氧化。
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user: 3. 漆酶的来源及催化机理 3.1. 漆酶的来源 已有的研究证实，漆酶存在于植物、微生物、动物、昆虫的质体的各种器官或组织中。漆酶由日本人吉田 [ 24 ] 首次在紫胶漆树的渗出液中发现的，随后人们发现微生物(真菌、细菌)、动物、昆虫也能分泌这种酶。相对于植物和动物来讲，微生物漆酶来源相对丰富，主要分为真菌来源和细菌来源。漆酶在植物中主要起到合成木质素的作用，而真菌和细菌所分泌的漆酶作用恰恰相反，主要起降解木质素的作用 [ 25 ] 。目前真菌来源的漆酶研究比较广泛而且深入，为其他来源的漆酶研究积累了丰富的参考资料。 真菌漆酶最早由Bertrand [ 26 ] 发现，之后很长一段时间未受关注，直到白腐真菌的木质素降解功能被揭示，真菌漆酶的研究才倍受瞩目。真菌漆酶具备多种生理生化功能，广泛参与形态发生、与植物寄主相互作用、应激防御以及木质素降解等过程 [ 27 ] 。同时，漆酶也与菌体色素合成、孢子产生、子实体发育 [ 28 ] 、逆境防御和腐殖质形成 [ 29 ] 等多种生物学过程有关。另外，值得一提的是，真菌产漆酶具有以下几个优点：(1) 真菌分泌的漆酶都是胞外酶，使得漆酶的分离纯化相比胞内酶而言稍显容易，而且在胞外的稳定性也较好；(2) 真菌产酶效率高，产生漆酶酶系结构较合理，相互间可发生强烈的协同作用；(3) 真菌分泌漆酶可同时产生许多纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等，这些酶的协同效应可有效降解木质素，真菌被认为是能够有效降解木质纤维素类物质的资源 [ 30 ] 。 目前漆酶的最普遍来源是真菌，已知在多种真菌菌株分泌物中都检测到了漆酶的活性，有许多报道称子囊菌纲(Ascomycetes)的许多真菌产漆酶，例如Gaeumannomyces graminis、Magnaporthe grisea、Ophiostoma novoulmi、Melanocarpus albomyces、Monocillium indicum、Neurospora crassa、Podospora anserina等 [ 31 ] 。此外，漆酶在担子菌纲和半知菌纲中也分布广泛，例如研究较多的白腐菌、革菌属、栓菌属、蜜环菌属、多孔菌属、鬼伞属等 [ 32 ] ，近年来，课题组从高寒草地土壤环境中筛选获得小皮伞属真菌能够分泌耐低温、偏酸性漆酶 [ 33 ] 。但是，不同种类的真菌产生的降解木质纤维素酶的组分和用途不同 [ 34 ] 。因此，有必要对来自不同背景的不同种类的真菌产生的酶进行深入地研究，确证来自不同菌株的漆酶活性及其可利用性。 3.2. 漆酶生物转化酚类化合物的机理 酚类化合物是指芳香烃中苯环上的氢原子被羟基取代所生成的化合物，是芳径的含轻基衍生物。根据其分子中所含的轻基数目可分为一元酚和多元酚。酚类化合物有易被氧化的官能团-轻基，其氧化还原机理包括电子的转移、质子反应、氢键的形成、中间体自由基的产生等。漆酶(Laccase EC 1.10.3.2)，在木质纤维素类物质的生物降解方面有重要应用前景 [ 27 ] 。漆酶与木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase， LiP)和锰过氧化物酶(Manganese dependent peroxidase， MnP)共同构成木质素降解酶系 [ 35 ] 。就结构而言，漆酶是一种含铜的糖蛋白氧化酶，也称为多铜氧化酶；其催化特性和激活位点上的四个铜原子有关 [ 36 ] 。漆酶是单电子氧化还原酶，它催化不同类型底物氧化反应的机理主要表现在两方面。一方面是底物自由基中间体的生成。漆酶可催化氧化酚类和芳香胺类化合物，同时分子氧被还原为水。在这一过程中，漆酶从被氧化的底物分子中提取一个电子，使之形成自由基，该自由基不稳定，可进一步发生聚合或解聚反应。在O 2 存在下，还原态漆酶被氧化，O 2 被还原为水。另一方面，漆酶催化底物氧化和对O 2 的还原是通过四个铜离子协同传递电子和价态变化来实现的。漆酶催化4个连续的单电子转移氧化还原性底物，将分子氧还原为水。漆酶在氧化底物(例如单酚、二酚、多酚、氨基酚、甲氧基苯酚或芳香类化合物)过程中通过断开芳香基环或苯氧基的官能团，将分子氧(O 2 )还原为(H 2 O) [ 37 ] [ 38 ] 。但是，漆酶的低氧化电位限制了其对非酚型木质素化合物的氧化能力 [ 39 ] [ 40 ] 。然而，在合适的氧化还原介体存在时，可以增加漆酶对非酚型木质素化合物作用的底物范围，包括苯甲基和烯丙基醇类和醚类 [ 41 ] [ 42 ] [ 43 ] ，可催化氧化非酚型木质素化合物 [ 44 ] [ 45 ] [ 46 ] ；这些介质可以来源于木质素降解过程中形成的衍生物，也可以来源于真菌菌丝的此生代谢产物 [ 31 ] [ 47 ] 。研究发现，愈创木酚(Guaiacol)和1-羟基苯丙三唑(1-hydroxybenzotriazole， HBT)能够增加漆酶的活性 [ 48 ] ，在漆酶介导的降解木质素的过程中，氧化木质素中的酚型单元形成苯氧自由基，漆酶通过氧化底物形成中间产物而增加了氧化还原电位，从而进一步氧化了底物 [ 49 ] ，漆酶也可以催化多种酚类和芳香胺类化合物的氧化 [ 50 ] 。因此，漆酶可以有效降解和转化木质素相关结构 [ 51 ] [ 52 ] 。但漆酶具有其特异的氧化还原电位的机理仍不清楚。