DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
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user: 3. 实证分析 3.1. 研究窗口的确定 采用事件研究法，使用研究事件的事前估计窗日与事件窗口。将每只股票的股利公告日定为事件的第0日(即公告日)，为了更好地了解现金分红对股价的影响，事前估计窗口选取公告日前44天至前10天，即公告日前[−44， −10]一共35个交易日，把该时间段的股票收益率当作正常收益率。此外，事件窗口为公告日前10天以及公告日后10天，即公告日前后[−9， 10]，并计算出事件窗口这段时间内股票的平均超常收益率和累积平均超常收益率。 3.2. 正常收益的确定 事件研究法中采用市场模型来估计股票的正常收益。市场模型对先前常量—均值—收益模型加以改进，通过剔除股票收益中与市场收益变化相关的部分，使异常收益的方差值下降，即使得异常收益对股票收益波动的影响降低，增强了检测事件效应的能力。因此，采取市场模型来估计在正常条件下资本市场的股票期望收益率是一个最佳的选择。 假设资产收益服从正态分布，并构造相关的证券组合收益模型。估计α，β的公式如下： (1) 式(1)中 R i t 代表第i只股票在第t日的收益率； R m t 代表第t日市场证券投资组合(即上证指数)的收益率； α 表示第i只股票的α估计值； β i 代表第i只股票的β估计值； ε i t 是随机误差项。 采用事件研究法进行数据处理时，第一步，取事前估计窗口[−44， −10]共35个交易日的数据来计算每只股票的α、β估计值，即t是处于[−44， −10]的整数：第二步，在 R i t 的计算中进行了复权处理：第三步，运用SPSS16.0进行估计，并对估计出的α和β进行检验，其中 取上证指数。具体结果见表2。 Table 2 Estimates of alpha and bet 股票编码 α β 股票编码 α β 600017 0.009763 (3.132) 2.214787 (7.161) 601010 −0.001898 (−0.602) 1.140653 (3.650) 600019 0.001888 (0.723) 1.083488 (4.185) 601158 −0.001578 (−0.701) 0.978075 (4.383) 600035 −0.003765 (−1.966) 0.493283 (2.597) 601231 0.007311 (1.031) 0.848908 (1.207) 600037 0.0001234 (0.045) 1.1810074 (4.306) 603002 0.002653 (0.712) 1.778660 (4.811) 600048 −0.001221 (−0.562 ) 0.863656 (4.006) 603239 0.01722 (0.396) 7.11833 (1.649) 600235 0.004330 (1.106) 1.864872 (4.802) 603568 0.010993 (1.996) 2.953168 (5.404) 600352 −0.004179 (−1.803) 0.433609 (1.885) 603578 0.002591 (0.234) 2.069419 (1.882) 600378 0.003515 (0.389) 1.373982 (1.532) 603600 0.009579 (1.272) 2.433834 (3.258) 600398 −0.003133 (−1.072) 0.830770 (2.864) 600531 −0.003040 (−0.979) 0.814470 (2.644) 600436 0.001226 (0.248) 1.121257 (2.288) 600567 −0.0006392 (−0.284) 1.0431411 (4.676) 600017 0.009763 (3.132) 2.214787 (7.161) 601010 −0.001898 (−0.602) 1.140653 (3.650) 600019 0.001888 (0.723) 1.083488 (4.185) 601158 −0.001578 (−0.701) 0.978075 (4.383) 600035 −0.003765 (−1.966) 0.493283 (2.597) 601231 0.007311 (1.031) 0.848908 (1.207) 600037 0.0001234 (0.045) 1.1810074 (4.306) 603002 0.002653 (0.712) 1.778660 (4.811) 表2. α和β的估计值 3.3. 超常收益的计算与分析 第一步计算出样本中第i只股票在第t日的超额收益率 A R i t ： A R i t = R i t − E ( R i t ) (2) 其中t所取的时间为公告日(即第0天)的前9天至公告日的后10天共20天，即[−9， 10]。接下来，为了研究样本所在公司在股利分配公告日前后的超常收益，需计算AAR (AAR是指平均超常收益率)，其计算公式如下： A A R = 1 N ∑ A R i t (3) 最后，设CAAR为在事件窗口内的每一日所有样本上市公司平均超常收益率的累积值，即累积平均超常收益率，其计算公式如下： C A A R = ∑ A A R t (4) 根据以上的数据分析可以得出平均超常收益率(AAR)和累计平均超常收益(CAAR)在事前估计窗口及事件窗口的变化曲线(见图1)。 从图1可以看出，所选样本在公告发布日的前10天内，基本每日的平均超常收益率均大于0，仅有3天的平均超常收益率是负的，而且累计平均超长收益率在事件发生前的10天内呈现曲折上升。在事件日前四天，平均超常收益率达到了最大值2%，之后平均超常收益率开始递减，但累计平均超长收益率在 图1. AAR与CAAR的变化曲线 公告发布日之后仍呈现持续上升的趋势。在整个样本的事件窗口内累计平均超常收益率的变化说明上市公司的现金分红公告出台后，投资者对该公司股票持看好态度，最终表现出累计平均超常收益率的持续增加。 从图1中可以看出，在事件发生日前四天的样本股的平均超常收益率猛然上升达到了峰值，这说明有人知道了公告信息或者内幕消息，并进行了交易。公告发布日的前三天平均超常收益率出现了一段时间的降低，事件发生日后又出现回升，这说明可能还存在着在事件发生日之前或者公告日之前不清楚公考信息或者内幕消息的投资者，也说明分红送配对市场能产生一定影响，且这种影响是正向的，是比较受市场欢迎。
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user: 4. 结论与建议 研究表明，上市公司现金分红会对其股价造成显著的影响。在出现现金分红公告日后，投资者对即将进行现金分红的股票行情看好，因此累积平均超额收益率呈较大幅度上升的趋势。也就是说，发布现金分红公告后市场上的股票价格均有大幅上升。究其原因，主要有以下两个方面： 1) 上市公司的现金分红，被认为体现了上市公司的经营能力和水平。大多数投资者往往会对该事件抱有积极的预期，股票交易市价也会因此上升。 2) 我国的证券市场发展并不成熟，大部分投资者投资股票的动机是为了获取短期的利益，并不打算长期持股。因此，现金分红事件对大部分投资者来说充满了吸引力。 据此，建议有效引导上市公司进行现金分红决策，致力于形成持续稳定的分红市场。这有助于引导我国投资者改变原有的投机观念，也有利于形成长期投资股票的新理念，为我国资本市场的长远发展奠定良好的基石。
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user: 摘 要 本文基于中国利率市场化进程不断深化的背景，参照有关文献对利率市场化进程测度进行指标构建，使用50家商业银行2008~2016年的面板数据对商业银行利差的变动趋势及相关影响因素进行分析。并在此基础上对比分析了不同类型银行对利率市场化变动的敏感程度。实证结果显示，随着利率市场化进程的逐步加深，商业银行的利差变动呈逐渐缩窄态势。除此之外，中间业务盈利能力、银行管理质量与商业银行利差成负相关关系；风险厌恶程度、信用风险、交易规模与商业银行利差成正相关关系。地方性银行相比于大型国有、股份制银行对利率市场化变动更敏感。最后，本文针对商业银行如何面对利率市场化下利差逐渐缩减的趋势给出了建议。 关键词 :利率市场化，利差，商业银行 Copyright © 2019 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 为快速推进中国市场经济建设并顺应金融市场利率市场化的国际趋势，我国于1996年首次放开银行间同业拆借市场利率，我国银行商业化和利率市场化改革正式开始。在存贷款利率方面，2004年央行先后放开对金融机构贷款利率上限和存款利率下限的管制，并于2013年对金融机构的贷款利率全面“松绑”，直至2015年中国人民银行决定取消存款利率上限，我国的利率管制已基本放开。自此，我国商业银行的存贷款利率将完全取决于市场中资金供求情况，其资产方和负债方均已初步实现市场化。历时20余年的中国利率市场化的“渐进式”改革基本收官。同时，2016年10月，国际货币基金组织正式把人民币加入特别提款权，体现了对我国利率改革的认可。 作为我国货币政策传导的中介指标、宏观经济的重要杠杆，利差水平决定着我国宏观经济的发展。在利率市场化的背景下，商业银行有了存贷利率定价的自主权，提高了资金利用率，促进我国金融市场的稳健发展。但利率市场化也使资产定价透明化程度加深，使存贷款利率波动更为剧烈，并加剧了银行间的竞争程度，进而对商业银行的利差水平造成影响。对于我国以往主要以利差获得收入的传统银行等金融机构而言，净利差是其最重要的收入来源。它反映银行效率的同时，体现了银行所处的宏观金融环境和社会资源配置过程中的中介交易成本 [ 1 ] 。存贷款利率市场化引致的银行更为激烈的价格竞争，会加大城市商业银行收入波动和破产风险 [ 2 ] 。净利差水平的下降，将对我国商业银行以利差作为主要收入来源的传统经营模式造成一定程度的影响。利率市场化下，国内商业银行更加重视定价策略和改进息差水平，并促使商业银行的管理重点从传统的存贷比和资本充足率向全方位的资产负债管理转变，这促使商业银行的管理模式和经营活动发生巨大变化 [ 3 ] 。 综上，分析和研讨我国商业银行在利率市场化逐渐加深的背景下存贷款利差变化趋势，有利于了解不同类型银行的获利能力和吸储放贷的策略、推动各类银行更好地适应利率市场化，使其协调有序地改进和发展。基于此，本文在考虑基准利差变动和存贷款基准利率浮动范围变动等政策对利差变化造成的影响外，引入了风险厌恶程度、中间业务盈利能力等市场因素，利用面板数据对利率市场化下我国商业银行利差变化趋势进行实证分析和检验。为我国商业银行的利率决策提出可行建议，强化风险管理，完善资产结构和质量，帮助银行提高经营效率，为银行的转型提出合理建议。 下文的研究架构如下：第二部分为文献综述。第三部分为实证研究设计，提出变量并建立模型。第四部分为检验结果和实证结果分析。最后一部分为研究结论和对策建议。
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user: 2. 相关文献综述及假设 2.1. 国内外相关研究 国外学者针对商业银行净利差相关影响因素的研究方法主要有做市商模型，并不断加入其他因素对该模型进行拓展。Ho和Saunders建立了H-S模型研究商业银行的利差，提出商业银行能够获得最优利差的四个决定性因素：市场结构、平均交易规模、风险规避程度和存贷款利率变动差异 [ 4 ] 。Allen在模型中加入异质性贷款，提出如果将银行间贷款需求的交叉弹性纳入考虑，净利差将会缩窄 [ 5 ] 。Angbazo在H-S模型中引入了利率风险和信用风险以及这两种因素间的交叉作用，并运用美国的商业银行业在1989~1993年间的数据对该模型进行研究 [ 6 ] 。Schumacher和Saunders使用1988年至1995年的美国和6个欧洲发达国家的614家商业银行的数据对这个模型进行了估计 [ 7 ] 。Martinet和Mody引入了外国银行参与因素研究其与存贷款利差之间的影响，结论为外国银行进入一国的银行体系的过程中利差会经历先低后高的变化 [ 8 ] 。Carbo和Rodriguez在理论模型中进一步考虑了传统因素和非传统因素，建立了一个多因素模型并基于此分析了欧洲商业银行的存贷款利差，结果表明存贷款的错配效应是利差降低的直接原因 [ 9 ] 。Lepetit认为非传统业务开展过程中产生的手续费是银行净利差的隐性成本的组成成分之一 [ 10 ] 。Maudos和Sobs建立了综合模型，并考虑了经营成本和非传统业务两大因素对利差造成的影响 [ 11 ] 。 国内学者近年来研究商业银行存贷款利差的主要方法，多是基于H-S模型或对其进行拓展深入研究，并联系我国利率市场化逐步放开的现实背景进行实证研究。陈宗胜等选取2000年至2008年间的32个银行样本，利用固定效应模型和随机效应模型对政策变量、宏观经济变量和市场变量对我国商业银行利差产生的影响进行了估计，结果表明影响利差的主要因素为利率政策以及利率市场化政策显著扩大了存贷款利差 [ 12 ] 。张育红和张宗益在基础的H-S中模型引入了非传统货款、非利差收入和央行基准利差三个因素，并使用我国23家商业银行8年间的面板数据进行实证分析，得出我国商业银行应持续提升中间业务盈利能力并注重金融产品发展的多样化 [ 13 ] 。程茂勇等在H-S模型中加入银行中间业务变量，得出运营成本、前期净利差以及市场垄断程度等因素均对商业银行净利差变动造成了显著的影响，而中间业务对现阶段的净利差的影响并不显著 [ 14 ] 。刘雷从H-S模型出发，基于Maudos和Solis的优化模型，从静态和动态两方面分别进行了回归，得出净利差随着利率市场化进程的不断深化，呈现先扩大后不断变小的结论 [ 15 ] 。黄艳秋对16家上市银行2010年第二季度至2015年第一季度的面板数据的回归结果表明：逐步放开存款利率上限和贷款利率下限管制的改革举措确实对银行利差有负的影响，但并没有引起利差的大幅收窄 [ 16 ] 。彭建刚等对H-S模型进行调整，并运用45家商业银行在2003年至2014年间的面板数据分析利率市场化对商业银行存贷款利差产生的影响 [ 17 ] 。实证结果表明，利率市场化与利差之间呈倒U型关系。 本文基于以往学者对利率市场化对商业银行利差影响的相关研究，建立线性回归模型，引入信用风险、风险厌恶程度、银行管理质量、中间业务盈利能力及交易规模作为控制变量，对两种不同方式的度量的自变量利率市场化指标进行了控制与不控制时间哑变量的四次有效回归，并对国有银行、股份制银行及地方小型银行进行分组回归。实证结果表明：利率市场化与商业银行利差之间存在显著负相关，且地方性小型银行的利差对利率市场化变动更为敏感。 2.2. 模型假设 2.2.1. 利率市场化与商业银行存贷款利差的关系 随我国渐进式的利率市场化改革进程的不断推进，利率政策是影响利差的重要因素。随着我国金融市场的逐步放开，使商业银行传统信贷收入的盈利模式受到冲击 [ 18 ] ，更多企业采取直接融资的措施，致使银行的优质客源减少，从而加剧了同业竞争。因我国于2004年就已取消贷款利率上限，故贷款利率相较与存款利率自由化程度更高。得因于商业银行间吸引贷款优质客户的竞争不断加剧、经济呈现下行趋势和地方债务重组等诸多影响因素，贷款利率的上升空间受限。随着我国经济结构的调整和增长方式的转变，预计未来我国经济总体流动性将处于总体偏紧的状态，商业银行存款增速也将持续放缓 [ 19 ] 。同时，由于我国实行的紧缩性宏观政策，社会存款意愿下降，而存款是传统商业银行主要资金来源 [ 20 ] ，使得商业银行不得不通过提升存款利率以吸引存款，进而增加了银行的经营成本。低放贷收益和高吸储成本致使银行利差减小。 基于此，本文提出假设1： 假设1：利率市场化与商业银行存贷款利差呈负相关关系。 2.2.2. 利率市场化下不同类型商业银行受到的影响 在我国社会主义市场经济体制下，不同类型的银行的目标客户群体不同 [ 21 ] 。大型国有银行的客户多为政府、央企等大型集团公司，这些大型公司在定价谈判中掌握较强话语权和议价权，大型国有银行的业务对象高度集中于此类大型客户导致对其贷款利率定价能力受限；而相对于国有银行，股份制银行的大型客户的较为分散，新增客户也主要是中小企业，而中小企业由于自身规模较小、盈利能力有限、谈判能力不高，使得股份制银行经常能以较高的利率水平完成贷款投放。而相较小规模银行而言，规模以上的银行拥有更强的贷款议价能力，它们能将资金成本的压力部分转嫁给贷款客户，此外商业银行还通过增加零售贷款和小微信贷等措施主动对原有的信贷结构进行调整，以提高贷款的整体收益率水平 [ 22 ] 。国外关于利率市场化的部分经验显示，对信贷结构做出调整后，商业银行的利差水平在改革之后高于改革之前。因此，利率市场化背景下，由于自主定价权的获得商业银行将在贷款利率制定方面更具灵活性。并且大型银行和中小银行在资产规模、经营策略、创新能力、机构网点、市场影响力等都有较大差距。相较中小银行，大型国有银行更大程度依赖中间业务等非利息收入，所以净利差水平也将较中小银行更低 [ 23 ] 。而在吸储能力方面，不同类型的银行差距也有较大差异 [ 24 ] 。 基于此，本文提出假设2： 假设2：利率市场化政策对不同类型商业银行的影响存在着一定差异。
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user: 3. 实证设计 3.1. 数据来源 本文选取了50个商业银行作为样本并将其分为三类：第一类为大型国有银行：中国银行、中国工商银行、中国建设银行、中国农业银行；第二类股份制银行：渤海银行、中信银行、交通银行、中国民生银行等10家银行；第三类为城市商业银行：上海农商银行、重庆银行、兰州银行等36家银行。样本期间覆盖2008~2016年，有效观测值有370个。数据来源于国泰安CSMAR数据库、历年的《中国统计年鉴》及各银行官方网站。 3.2. 研究设计 本文研究的被解释变量为商业银行净利差(IRS)；解释变量则采用安辉和张芳在2017年提出的基于DEA方法构建的利率市场化进程测度(IRLI) [ 25 ] ，即依据中国人民银行所批准的利率浮动的范围，借鉴陶雄华、陈明珏的利率分类方法将我国的利率归纳为五大类总计14种利率 [ 26 ] ，将总体市场化进程以100%为目标，权衡参数的赋值条件对我国利率市场化进程进行测算所得到的测算结果；控制变量包括：1) 信用风险(CR)，指对方到指定期限拒绝履约的风险。本文用银行贷款可能发生的呆、坏账准备金的使用比率即拨备覆盖率来衡量商业银行所面临的信用风险。拨备覆盖率越大，银行信用风险越小，存贷款利差越小。预期信用风险与净利差成正相关关系。2) 风险厌恶程度(RA)。风险厌恶是投资者规避投资风险的态度。在商业银行资产结构中可体现为股本占总资本的比例，比例越高，表示投资者对银行的获利能力越乐观。故本文用资本充足率作为风险厌恶程度的度量指标：资本充足率越高，风险厌恶程度越高，存贷款利差越大，预计与净利差成正相关关系。3) 中间业务盈利能力(PIB)。商业银行经营业务除传统的存贷款外，还包括本、外币结算、银行卡、票据担保等一系列中间业务，随着我国利率市场化不断深化，中间业务收入在整体收入中所占的比重也逐渐扩大。本文用银行非利息收入与总收入的比值代理这一变量，并预期该变量与利差成负相关关系。4) 银行管理质量(QM)。管理质量高意味着银行的运营效率高同时负担成本低，从而使其在竞争中享有优势，所以商业银行的净利差会随管理质量的提高而提高。本文采用成本收益率来代理该变量，预计该变量与净利差成正相关关系。5) 交易规模(LnTS)。银行可能面临的利率风险、经营风险、信用风险和市场风险等各类风险均随交易规模的扩张而增大，因此银行倾向于提高利差作为风险溢价。本文采用银行总资产取对数的方法来代理该变量，预期与利差成正相关关系。具体变量和计算方法如表1。 Table 1 Variable selectio 具体变量 计算方法 解释变量 利差(IRS) (利息收入–利息支出)/总资产 被解释变量 控制变量 利率市场化进程测度(IRLI) 信用风险(CR) 风险厌恶程度(RA) 中间业务盈利能力(PIB) 管理质量(QM) 交易规模(LnTS) 拨备覆盖率 股本/总资本 中间业务收入/总收入 成本收益率 银行总资产取对数 表1. 变量选择 3.3. 建立实证模型 以IRS为因变量，考虑到利率市场化是逐年推进的以及影响商业银行存贷款净利差的其他因素，为控制这类因素对IRS产生的影响，本文建立如下实证模型： IRS it = α i + β 1 IRLI it + β 2 CR it + β 3 RA it + β 4 PIB it + β 5 QM it + β 7 LnTS it + μ it (1) 其中 ，表示银行的数目，t表示以年为跨度的时间变量，α和β为模型的待估参数，μ为随机干扰项。
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user: 5. 结论和政策建议 基于以上研究，本文得到结论如下：第一、中国利率市场化进程的逐步加深对我国商业银行存贷款利差产生显著影响，从2008年到2016年数据来看，随着利率市场化不断深化，商业银行存贷款利差逐渐缩小。第二、利率市场化的推进对不同类型的银行存在程度不一的影响，对大型国有银行的影响程度较弱，对股份制银行和地方性银行等中小型银行的影响较大，其对利率市场化的反应也更为敏感。 基于以上研究，本文提出如下建议：第一、增强金融创新能力，进行差异化发展。利率市场化下银行利差的缩小，使非利差中间收入逐渐成为银行新的利润增长点。尤其是股份制银行、地方性银行等中小型银行不能再局限于某种经营模式，而应根据业务特征选择适合自身的多元发展以及业务经营模式。比如地方性银行可充分利用其区域优势，提升其在地方项目的市场份额。第二、提升利率风险应对能力。利率市场化使影响商业银行存贷款利率的原因更为复杂，波动也将更为频繁。所以商业银行要有一定判断利率的能力。同时还应通过管理手段创新对利率风险进行规避、利用金融类衍生产品进行利率风险的分解或转移。第三、积极调整业务结构，提升中间业务竞争能力。尤其是中小型银行，在规模约束和利率市场化的两重影响下，须积极开展中间业务，提升非利息收入占比，降低对利差收入的依赖。
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user: 摘 要 为分析某潜没式液货泵密封口环间隙对泵性能的影响，建立泵的主流道模型和5种不同间隙流道模型并对其进行定常仿真计算。结果表明，随着密封口环间隙线性增大，泵的扬程、效率线性下降，表现为性能曲线整体下移；间隙内流体静压先陡降后增大然后线性减小，流速先上升后线性减小，间隙越小时压降的梯度越大，间隙内的流速也越低，密封效果越好。工程应用中为保证“密封”效果，密封口环磨损量超过0.2 mm时就应更换口环。 关键词 :潜没式液货泵，密封口环，间隙磨损量，仿真分析 Copyright © 2019 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 间隙研究一直是旋转机械研究领域内的热点问题，如叶轮与蜗壳间的间隙是研究动静干涉现象以及泵内部流动压力脉动的主要载体，有研究表明动静干涉是造成离心泵内部压力脉动并进一步引发泵的振动和噪声的主要原因 [ 1 ] [ 2 ] 。 密封口环间隙是泵内另一个重要的动静间隙 [ 3 ] ，通常口环作为静止部件固定在泵壳上，与叶轮的入口直段组成间隙密封，口环选取比叶轮材料硬度低一些的材料制作，从而保证泵在运转过程中，动静部件即使相碰也不会对叶轮造成损害。因此，由于泵运转过程中不可避免地发生振动，密封口环会随着泵运转时间增加而逐渐磨损，间隙会逐渐增大。此处的间隙增大一方面会使叶轮出口的高压流体更多的回流到进口造成容积损失增大，降低泵的效率 [ 4 ] [ 5 ] [ 6 ] ，另一方面会改变泵的内部流动状态，从而对泵的外特性产生重大影响，一些条件下会引起流体激振，并影响泵的受力和运转稳定性 [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ] 。 文中选取某潜没式液货泵为研究对象，建立了泵的主流道模型和密封口环间隙流道的水力模型，并保持主流道模型不变，对不同口环间隙值和偏心值下的间隙流道模型进行定常仿真计算，分析口环间隙对泵性能及流场的影响，探讨口环磨损后泵的性能变化规律。
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user: 2. 计算模型与边界条件 2.1. 间隙模型 所选取的潜没式液货泵泵头的结构如图1所示，该泵为单级悬臂式离心泵，上下各设计有一处密封口环，为了制造方便，两处密封口环间隙值保持一致，该泵的设计参数为流量300 m³/h，转速2620 r/min，扬程110 m，比转速为81.3。 图1. 潜没式液货泵泵头结构 水体模型分为主流道模型和密封间隙流道模型两部分。主流道模型分为入口段、叶轮、蜗壳、出口段四个部分，密封流道模型分为下密封间隙模型和上密封间隙模型，如图2所示。 图2. 水体仿真模型 在ICEM中对模型进行网格划分，其中入口段，间隙模型采用结构化网格，其他采用非结构化网格，网格数量保证网格无关性要求。 2.2. 对比方案 用δ表示研究用泵的密封口环间隙值，用ε表示偏心值，如图3所示，Φ D1为密封口环内壁面直径，ΦD2为叶轮入口直径。由于模型具有周向对称性，故只研究一个方向的偏心即可。 图3. 密封口环间隙与偏心定义 依据API610标准模型泵选用0.3 mm，但未考虑偏心。为考察不同间隙及偏心影响，泵的选取的δ和ε值分别如表1所示，共组成5种对比方案，其中方案1为设计方案。 Table 1 Contrast table of research program δ/mm ε/mm 方案1 0.3 0 方案2 0.5 0 方案3 0.7 0 方案4 0.5 0.1 方案5 0.5 0.2 表1. 研究方案对比表 2.3. 边界条件 采用CFX软件进行定常计算，选择SST湍流模型 [ 11 ] ，计算时设置入口条件为总压，出口条件为质量流量，壁面采用无滑移固壁边界，收敛精度设为10-5。间隙模型中与叶轮接触的壁面设置为旋转面，旋转速度与叶轮相同，其他壁面设为静止面。
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user: 3. 计算结果与分析 3.1. 试验验证 为验证数值计算方法的准确性，将数值计算结果与试验结果进行对比，如图4所示。 图4. 计算值与试验值对比 从图4可以看出，计算的扬程与试验结果基本吻合，但小流量工况下计算值与试验值的变化趋势不一致，主要原因是小流量工况回流明显，影响了计算结果的准确性，这是目前无法避免的；计算效率与试验效率变化趋势基本一致，二者间存在一定的误差，主要原因是计算模型进行了简化处理，如壁面条件无法反映真实情况，忽略了轴承等机械损失等，都是导致试验效率低于计算效率的原因；额定工况下计算和试验扬程相对误差为3.57%，计算和试验效率相对误差为3.12%，均未超过一般工程误差5%，因此，文中采取的计算方法与计算结果准确可靠。 3.2. 外特性分析 图5分别为不同研究方案下泵的扬程(图5(a))、效率(图5(b))外特性曲线。 图5. 不同研究方案下泵的外特性曲线 图5的规律表明，随着δ值从0.3 mm变化到0.7 mm，泵的扬程和效率均下降，说明密封口环间隙值增大会导致泵的性能下降，且文中的研究还表明，这一规律是呈线性变化的，即随着密封口环间隙线性增大，泵的扬程、效率线性下降，表现为性能曲线整体下移。 对比方案2、4、5的外特性计算结果发现，三种方案下泵的外特性曲线基本重合，说明偏心值基本不会影响泵的扬程和效率。 3.3. 间隙泄露量分析 表2为不同方案下泵上下密封口环间隙处的泄漏量，选取额定工况下的数据进行对比。 Table 2 Leakage of upper and lower sealing ring clearanc 上间隙泄露量 下间隙泄露量 方案1 2.745 2.687 方案2 4.776 4.361 方案3 6.840 5.901 方案4 4.765 4.414 方案5 4.784 4.475 表2. 上下密封口环间隙泄漏量 (单位：kg/s) 从表2看出，间隙值增大，泄漏量也增大，偏心值增大，泄漏量基本不变，说明泄露量的大小只与间隙值有关，与偏心值关系不大。泄漏量大造成泵的容积效率低，进而降低泵的总效率，这与前文的分析是一致的。 3.4. 受力分析 表3为不同方案下泵叶轮上所受力的大小，其中Z向为旋转轴向。 Table 3 Force of pump impelle Fx Fy Fz 方案1 32.38 16.20 2472.25 方案2 33.43 14.46 2484.03 方案3 34.21 15.15 2496.23 方案4 90.95 48.17 2482.73 方案5 141.56 80.38 2481.58 表3. 泵叶轮受力情况 (单位：N) 表3的对比结果表明，仅间隙变化且无偏心时泵的受力基本不变化；间隙不变且仅偏心变化时，随着偏心的增大，泵的轴向力基本不变，但径向力会明显增加，这对泵的运行不利，使泵运转过程中易产生振动和噪音。
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user: 4. 内部流动分析 4.1. 整体静压分布 为分析间隙值对整体模型流动状态的影响，选取x = 0截面分析额定工况下不同间隙时泵内的静压分布情况进行研究，如图6所示。 图6. 泵内静压分布云图 从图6看出，泵内静压从入口到出口逐步提高，三种间隙下的静压分布规律基本吻合，区别在于蜗壳腔室内的静压是随着间隙增大而降低的，由此也说明间隙增大会引起泵扬程下降。另外，随着间隙增大，经过间隙回流到叶轮入口的液体流量(或称泄漏量)增加，间隙内的高压流体冲击到叶轮入口的低压流体中，影响了叶轮入口区域的液体流动稳定性，间隙越大，受影响的区域就越大，入口流域内的漩涡数量增加，流动损失随之增加，进而引起泵的效率也下降。 4.2. 间隙内静压和速度分布 为分析间隙内的流动状态，选取额定工况下不同间隙时下密封口环间隙内的静压和速度分布情况为研究对象，如图7所示。 由图7看出，间隙流道内的静压分布在入口处(间隙右侧)变化比较剧烈，先减小后增大，然后缓慢减小，直至出口，这种变化趋势在小间隙时表现更明显；速度分布中流体在经过间隙入口后流速有陡升，高速区基本占据整个间隙流道，随后速度慢慢降低，高速区慢慢靠近间隙旋转的内壁侧，这是流体轴向速度和周向速度共同叠加的结果。轴向速度由于壁面摩擦力的作用呈两侧近壁面速度低，中间速度高的分布特点；周向速度由于内侧壁面旋转产生的剪切力的作用呈外侧壁面的速度低，内侧壁面高的分布特点，二者叠加使得高速区靠近内壁面侧。 图7. 下密封口环间隙内静压和速度分布云图 图8是间隙内同一长度截面内平均静压和流速随间隙轴向长度变化的曲线，Z = 0 mm表示间隙入口截面。图8(a)的规律说明在经过间隙入口处的剧烈变化后，静压呈线性减小，且间隙越小，压降的梯度就越大。图8(b)的流速曲线说明流速在经过间隙入口处的陡升后线性下降，不同间隙时下降的趋势基本一致，但间隙内流速随间隙增大而增大，主要原因是流体自身黏性和壁面摩擦力对间隙内流体的流速有阻碍，而随着间隙增大，这种阻碍作用会慢慢减少，即间隙增大到一定程度，“密封”效果会大大降低。 图8. 试验泵的性能曲线 从图8可以得出，当间隙δ = 0.3 mm (方案1)时，间隙内静压梯度最大，流速最小，“密封”效果最好，当间隙δ = 0.5 mm (方案2)和δ = 0.7 mm (方案3)时，间隙内静压和流速变化已相差不大，“密封”效果越来越低，因此结合工程实际情况考虑，当间隙值达到0.5 mm时就应更换密封口环，即密封口环磨损量不应超过0.2 mm。
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user: 5. 结论 基于对某潜没式液货泵密封口环间隙的研究，得出如下结论： 1) 随着密封口环间隙线性增大，泵的扬程、效率线性下降，表现为性能曲线整体下移；密封口环的偏心只对泵的径向受力情况有影响，偏心越大，径向力会显著上升，对泵的运行产生不利影响。 2) 间隙内流体运动存在规律性，静压先陡降后增大然后线性减小，流速先上升后线性减小，间隙越小时压降的梯度越大，间隙内的流速也越低，“密封”效果越好。工程上从保证“密封”效果的角度考虑，口环磨损量超过0.2 mm时就应更换密封口环。 3) 文中从密封口环磨损后间隙增大对泵性能的影响这一角度来确定磨损量，实际泵在运行过程中，密封口环间隙增大还会引起泵的振动和噪音增加，此规律有待试验研究来揭示。
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user: 摘 要 本文通过对汤姆·摩尔动画作品中装饰元素的归纳和总结，结合笔者的个人作品，总结出装饰性元素的组成及在动画作品中的运用。汤姆·摩尔轰动全球的代表作品《凯尔经的秘密》《海洋之歌》具有浓烈的个人风格，对装饰性元素的灵活运用则是其成功的关键。经过对动画角色造型设计、场景设计、道具与美术设计等方面的分析，主要归纳出几何形装饰性元素、线条形装饰性元素、色彩装饰性元素、民族装饰性元素。 关键词 :《凯尔经的秘密》，《海洋之歌》，装饰性元素，动画，汤姆·摩尔，几何形，线条形，色彩 Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 爱尔兰动画导演汤姆·摩尔动画作品《凯尔经的秘密》《海洋之歌》先后获得奥斯卡最佳长篇动画提名，他以纯手绘的创作方式及独树一帜的个人风格，谱写了优质二维动画作品的新篇章。其动画作品凭借精美的画面，民族风格的叙事方式，纯净的配乐，达到了艺术价值与商业价值的统一，并高于商业价值。装饰性元素在汤姆·摩尔作品中的运用给人以耳目一新的感觉，塑造了梦幻多彩的场景、灵动的角色设计、沁人心脾的听觉体验。
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user: 2. 几何形装饰元素 几何形是最基本的绘画元素，却也是最富有生命表现力的元素，是根据表现性原则或者生命形式原则对印象本身的塑造和定义，简单的几何线条往往能传达出神秘的精神力量。 [ 1 ] 汤姆·摩尔将这种最纯粹的图形运用到作品中，以返璞归真的表达方式，让观众透过简单的图形表现，更能直观的领会其情感表达和故事内涵。 《凯尔经的秘密》最突出的风格在于其角色和场景的几何形设计，画面无任何透视上的变化，却塑造了深刻的人物形象。如布兰登的人物角色头部接近于正圆形，耳朵则是半椭圆形；修道院的院长其头顶为圆弧形，身子则由等边三角形和长方形构成；强盗的角色设计以矩形为主，头部和身子为矩形的规律变化；其他角色设计也主要运用圆形、三角形、四边形等基本几何图形(图1)。几何形的灵活运用，塑造了不同个性的人物角色，造型夸张简洁，一个个性格鲜明的人物活跃于屏幕上。以圆形为主的布兰登和阿斯琳，可爱单纯，两个小主人公善良勇敢，圆形的运用，使其性格更加明显；三角形和长方形在院长身上的运用，体现了他刻板严肃的性格，固守传统，不易变通；维京人的矩形设计，象征了其邪恶、凶残的性格，矩形的身子和三角形的五官，体现了其冷酷无情的性格。 图1. 角色几何设计 同样几何形在其作品中场景设计中的运用也尤为突出，大面积几何形的运用，突出画面的完整性，给人以极大的视觉冲击力，印象深刻。《凯尔经的秘密》中较大的场景都以几何形呈现，例如布兰登和艾丹一起绘制经书的一个场景，半圆形的圆弧构成了房间。不断重复的圆弧墙壁则点缀了无数小圆，圆形的使用既塑造了梦幻的场景，又增加了其肌理效果。影片中还有一处经典的俯视镜头，既布兰登在森林中迷路的一幕，四周树木围成一个正圆，将布兰登困在中间(图2)。此处圆形的使用增加了森林的神秘色彩，同时激起了布兰登对森林的好奇心，层层铺垫之下，更好的引出故事，也反映出“神为中心，泽及四方”的哲学思想内涵。 图2. 场景几何设计 几何形作为装饰元素在作品中的灵活运用，既来了节奏的变化，又增加了画面的韵律感。《凯尔经的秘密》场景采用纯平面化，无任何透视的原则，在场景塑造上遵循“非正即侧”的原理，将几何形作为装饰性元素的特点运用到了极致。
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user: 3. 线条性装饰元素 在我国传统国画艺术中，认为线条是最具有生命力的美感表达形式。汤姆·摩尔在其作品中将线条作为装饰性元素，线条的流动性和生命力在作品中的运用也是其最大的风格特色。 《海尔经的秘密》《海洋之歌》两部作品同样采取无透视原则，以线条为载体，表现独特的视觉空间。苏珊朗格曾以“虚幻空间”来表示绘画的本质，她认为空间本身就是无形状、无定型的，空间是人类官能的感知，但无逻辑才是空间的本原 [ 1 ] 。线条性的空间构造，带来了独特的美感。在《海洋之歌》存储精灵的居所四处都是闪光的细线，男主人公小木沿着无数细线一路前进，才发现这些细线是精灵存储记忆的长发。画面几乎由线条铺满，闪光的垂直线发以及带有线条纹理装饰的石头，有魔法的泉水组成了一副充满魔力的神秘之境(图3)。影片的场景构图多采用斐波那契螺旋线构图，以黄金比例构图，聚焦角色为视觉中心。线条多元化的运用在《凯尔经的秘密》中同样突出，例如艾丹看布兰登写经文的一个场景，四周由一圈一圈的弧形装饰纹路延伸(图4)。墙壁中采用繁复的对数螺线线条，经过细分密铺，构成一幅精美绝伦的画面。 图3. 场景线条设计 图4. 场景线条设计 线条既构成了造型的形态，同时又通过反复、旋转、扭曲、变形等形成不同的肌理，增加造型的质感，表现角色的结构。直线的运用给人以冷静理智的感受，曲线的运用则给人以温柔梦幻的感受。对线条规律灵活的运用，可以产生节奏感和韵律美，是装饰性元素的组成单位之一。
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user: 4. 色彩装饰元素 色彩作为一种画面的表现手段，它不仅还原了现实世界真实的颜色，还表达人物和创作者的主观感受，渲染特定的环境和气氛，创造作品的象征意味 [ 2 ] 。一部动画给人最直观的感受同样是通过色彩来表现，不同的色彩给人以不同的情感体验，同一色彩的不同明度和饱和度也会带来不一样的视觉效果。汤姆·摩尔作品的独特之处很大程度上在于对色彩的运用，将简单的色彩有规律的搭配以线条和构图，呈现出别具一格的装饰感。 在《凯尔经的秘密》《海洋之歌》两部作品中，色彩使用并不复杂。两部作品主要运用黑白色无彩色，以及红黄蓝三原色，还有作为红色补色的绿色运用也较多。这六种颜色都来源于爱尔兰的凯尔斯书，充满浓郁的装饰感。例如在《凯尔经的秘密》中最开始呈现的修道院的画面，以嫩绿色为主，一片清新恬淡的景象，象征修道院祥和、稳定的生活状态。随着故事的展开，艾丹和布兰登开始绘画凯尔经纹，影片开始有更多的深黄色调，给人以希望和激动之感。以及后来强盗的到来，修道院开始变成一片火海，画面全部采用红色和黑色，描绘出一幅惊悚、恐怖的场景。故事发展到最后，布兰登开始一路描绘经文，历经四季变化，影片又将蓝色、绿色、黄色等不同的颜色并置，既体现了时空的变化，又营造出一幅未来可期的氛围。《海洋之歌》中蓝色运用较多，大部分蓝色运用到大海中，给人以神秘、宁静的感受。同时影片一开始就描绘了妈妈的消失，蓝色调也给人以悲伤、忧郁的感受。随着故事的展开，影片由暖变冷，由冷又再变暖，在颜色的变化中，达到了影片的两个小高潮。 色彩装饰元素的运用，既烘托了人物情感、渲染了环境氛围、奠定了情感基调，又赋予了影片以生命力和表现力。汤姆·摩尔对色彩装饰元素的运用，赋予了影片独特的风格和韵味。
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user: 5. 民族装饰元素 一部动画作品最有灵魂的除了其呈现出的视觉效果，更深刻的是其背后的文化内涵和韵味。民族元素则是特定地点和时期的人民生活方式和思想凝结的最好体现，将民族元素加入动画作品中，其作品本身就多了民族之魂，其情感也会达到升华。 《凯尔经的秘密》中场景和叙事都借鉴了爱尔兰的凯尔斯书，讲述了基督教传入爱尔兰之后，教会的崛起。影片也在对传统神话故事的引用上，对其素材进行了选择、提炼和加工。在场景设计中，随处可见线条形的民族图腾和宗教符号，例如单旋涡、双旋涡、十字架等带有宗教意义的图形元素运用。其次，影片整体的扁平化和无透视原则同样是由于古爱尔兰没有透视的概念，因此所有的场景都采用线条和色彩的变化来体现其空间感。《海洋之歌》中的神话元素也受其民族宗教文化所启发，作者对神话人物进行了修改，以几何形状和装饰性线条加以概括，更加符合现代人的审美。 民族音乐的运用也是两部影片的特色之一。竖琴和爱尔兰风笛“乌林管”作为凯尔特民族乐器，在《海洋之歌》作为配乐出现，给人以纯净、空灵的听觉享受。西尔莎无伴奏的优美歌声，同样是爱尔兰传统音乐的代表。《凯尔经的秘密》中也运用了凯尔特人民族乐器、歌曲等配乐，体现了凯尔特人勇敢、坚强的美好品质，又略带悲伤的忧郁情怀。 汤姆·摩尔对于民族元素的成功运用，启示我们应当注重将传统文化与现代文化相结合。吸收传统文化中优秀的成分，再借鉴现代文化的精髓，使之形成新的艺术形式，做到继承与创新。
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user: 6. 个人动画作品中的装饰元素 电影评论家萨里斯说过：“电影之美来自于表现风格，风格与创作者的个性相关。”风格造就作品的独一无二性与艺术感，观众在欣赏作品时倾向于注意并记忆那些改变我们皮肤温度的耀眼瞬间， [ 3 ] 一部作品是否能给观众以深刻印象，很大程度上是由电影的风格决定的。个人作品《旅程》短片讲述了一个小女孩接受外婆的神秘盒子而开始了一段旅程，在旅途过程中不断给予他人帮助，最后成长老去后又将盒子传递给新传承者的故事。故事表达了“爱的传递”的主题思想。短片中多运用线条和饱和度低的色彩来布景，采用平面构图，无较大透视变化的装饰风格。 6.1. 角色设计 《旅程》的角色设计中多以几何形为主，小女孩和小章鱼头部都接近于圆形，体现了两个小主人翁的善良单纯；乌龟老人头部则设计成椭圆形，在额头有一个倒三角的呈现，表现出老人的沉稳和睿智；章鱼妈妈的脚部则采用螺线形式，既能体现章鱼本身的质感，同时体现了妈妈的坚韧和对小章鱼的保护欲。 在角色的色彩运用上，运用饱和度较低的颜色，与繁复的背景更加融合。小女孩整体服饰采用浅粉色，符合其纯真温柔的性格；小章鱼的配色则选择了浅黄色，体现了其可爱、活泼的性格；乌龟老人全身采用深绿色，既符合龟的本来色彩，也塑造了一个智者形象。 角色的服饰、发髻、身体纹路等，都有线条性的小装饰，整体偏向于卡通装饰风格。 6.2. 场景设计 个人作品《旅程》的场景设计中则较多的使用装饰性线条，特别是对场景架构的肌理和结构塑造中，几乎全部采用线条。例如短片中主人公走过四季变换的时候，显示时间流动性的一个场景，外围运用了曲线作为装饰性线条(图5)。场景外轮廓曲线的运用体现了主人翁的成长及旅程时间的变迁，场景内的树木、云朵、房屋都采用曲线塑造，描绘出了一个充满童趣的美丽世界，暗含了这个小世界中浓浓的爱意；再如旅程中樱花大道的呈现，无数颗樱花盛开在道路两侧，樱花花瓣采用密铺的方式，树干则运用手绘的细直线去塑造其肌理。勾勒了一条美轮美奂的道路，既呈现了沿途的美景，也暗示主人公内心做好事后自然对她的“表扬”(图6)。 图5. 旅程场景设计 图6. 旅程场景设计 装饰性元素在动画作品中的成功运用对动画作品的表现形式具有突出贡献，对动画作品多样性的拓展和创新，具有积极的指导意义和实用价值。中华民族文化中不乏优秀的装饰性元素，我们在动画创作中应积极借鉴传统文化，一方面将传统艺术形式运用到动画作品中，例如：国画、戏剧、壁画等等装饰性元素，将传统与现代相结合，创造新的艺术形象；另一方面将我们的民族精神运用到动画作品中，例如：忠孝仁义、勤学好问、勤俭节约等优秀传统美德运用到动画创作中去，让动画艺术更好的服务人民。
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user: 摘 要 静止中心是高等植物根尖分生组织中一群重要细胞，在根尖生长点功能和干细胞调控中起关键作用。但由于缺少静止中心细胞特异性的基因表达工具，对该细胞群中基因功能的了解非常有限。本研究利用拟南芥WOX5基因的启动子片段和GAL4-VP16-UAS人工合成基因转录激活系统构建了一个可在拟南芥根尖静止中心细胞中特异性地驱动目的基因表达的转基因系统。通过绿色荧光蛋白基因证实了该表达系统的静止中心细胞特异性，并用两个已知根干细胞调控基因WOX5和FEZ检测了该表达系统用于研究静止中心基因功能的可行性及功效。研究结果表明所构建的表达系统具静止中心细胞特异性，可用来研究不同调控基因在该细胞群中的功能。 关键词 :拟南芥，静止中心，细胞特异性表达，WOX5，启动子 Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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user: 1. 引言 静止中心是高等植物根尖分生组织的控制中心，位于细胞分裂区和根冠区之间，由一群分裂缓慢的细胞所构成。在模式植物拟南芥中，静止中心通常含4个细胞，其外被一圈干细胞所包围 [ 1 ]。这些干细胞通过定期分裂进行自我更新，并同时为根中各组织提供生长发育所需的新细胞来源。静止中心细胞在根尖干细胞的维持和调控中担负重要作用，它们一方面提供维持干细胞特性所需的调控信号，如果任何一个静止中心细胞死亡或功能丧失，会导致与其直接接触的干细胞分化和失去干细胞特性 [ 2 ]。另一方面，当干细胞受损时静止中心细胞通过分裂补充新的干细胞，行驶其干细胞修复功能 [ 3 ]。由于静止中心细胞在根干细胞及根尖分生组织调控中的重要作用，其自身的调控也是植物学研究，特别是植物发育学研究的一个重要对象。 经多年研究，目前已经发现了一大批参与根尖分生组织和根干细胞调控的基因，如WUSCHEL-RELATED HOMEOBOX5 (WOX5) [ 4 ] ，SHORTROOT (SHR) [ 5 ] ，SCARECROW (SCR) [ 6 ] ，PLETHORAs (PLT1/2/3) [ 7 ] ，FEZ [ 8 ] ，RETINOBLASTOMA-RELATED (RBR) [ 9 ] ，ACR4 [ 10 ] 等。但由于其中大多数基因在多种细胞类型中表达，它们在静止中心细胞中的具体功能目前并不十分清楚。 WOX5是目前已知的参与根干细胞调控基因中唯一在静止中心细胞特异性表达的基因。它编码一个同源异型域(homeobox)转录因子家族蛋白，该家族的成员在动植物中广泛分布。WOX5与茎尖分生组织中的干细胞调控基因WUSCHEL同属于一个植物所特有的亚家族，且在功能上可相互替代。WOX5功能缺失导致柱干细胞分化和静止中心细胞分裂 [ 4 ] ，而其过量表达可在静止中心下方诱导产生多层未分化细胞。现已查明WOX5在静止中心细胞的特异性表达由其编码序列5’端上游的启动子决定 [ 4 ]。 本研究旨在利用WOX5启动子构建一个在拟南芥根尖静止中心细胞中驱动不同目标基因特异性表达的系统，为在该细胞群中开展基因功能研究奠定基础。该表达系统包含两套独立的载体，即驱动载体和目标基因表达载体。驱动载体含WOX5启动子和人工合成转录激活因子GAL4-VP16的编码序列。目标基因表达载体中包含有带多个GAL4结合位点的UAS启动子和目标基因的编码序列。该基因表达系统的特色是它可以用来驱动不同目标基因在静止中心细胞中表达。
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user: 3. 结果与分析 3.1. 载体构建和转基因植株验证与杂交 本研究所构建的载体如图1所示，包括由pFPL，pFP-WOX5p::GAL4-VP16，pFP-UAS::GFP，pFP-UAS::WOX5-GR和 pFP-UAS::FEZ-GR。通过花侵染法获得了每个载体的转基因单株，用种皮GFP蛋白的绿色荧光进行筛选，并用PCR 检测验证。通过杂交获得如下携带驱动载体和不同目标基因表达载体的转基因材料：pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::GFP，pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::WOX5-GR和pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::FEZ-GR。经分子检测验证后开展进一步分析。 3.2. 所构建的基因表达系统的静止中心细胞特异性验证 为了验证所构建的基因表达系统的确具有静止中心细胞特异性，我们用共聚焦显微镜对携带pFP-WOX5p::GAL4-VP16，pFP-UAS::GFP和pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::GFP载体的转基因幼苗的根尖进行了观察，发现只有携带pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::GFP的幼苗在静止中心细胞出现GFP绿色荧光(图2(D)，图2(E))，携带pFP-WOX5p::GAL4-VP16或pFP-UAS::GFP的幼苗的静止中心细胞无GFP绿色荧光(图2(C))，表明由pFP-WOX5p::GAL4-VP16驱动的目标基因表达的确具有静止中心细胞特异性。 图2. 所构建的表达系统的静止中心细胞特异性验证 3.3. 所构建的基因表达系统的功能性验证 为了验证所构建的表达系统在研究基因功能方面的功效，我们选择了两个已知根尖干细胞调控基因，WOX5和FEZ，为目标基因。这两个基因都对根干细胞有正调控功能，但表达区域不同 [ 4 ] [ 8 ]。WOX5在静止中心细胞中特异性表达，所编码蛋白从静止中心细胞移动进入周围干细胞行驶调控功能 [ 12 ]。FEZ主要在柱干细胞及由其分裂产生的子细胞，侧根冠与表皮原初细胞及其分裂产生的侧根冠细胞中表达 [ 8 ] ，其主要调控功能是促进柱干细胞和侧根冠原初细胞的不对称性分裂 [ 8 ]。我们将携带pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::WOX5-GR和pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::FEZ-GR的幼苗在萌发后第3天分别转移到了含人工合成糖皮质激素地塞米松(英文名dexamethasone，简称DEX)或不含DEX的培养基上培养5天，用共聚焦显微镜和光学显微镜对这些幼苗的根尖进行观察。就pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::WOX5-GR幼苗而言，在不含DEX的培养基上根尖分生组织中的细胞形态，排列方式及其分化状况与野生型幼苗根中的情况非常相似(图3(A)、图3(D))，但在含DEX的培养基上生长时静止中心细胞下方的未分化细胞层数增加(图3(B)和图3(C)，图3(E)和图3(F)，表3)，表明由该表达系统驱动产生的额外WOX5蛋白对柱细胞的分化有进一步抑制作用。除此以外，在含DEX的培养基上pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::WOX5-GR幼苗中静止中心细胞的分裂频率高于在不含DEX的培养基生长的幼苗(表3)，表明静止中心细胞中WOX5蛋白过量时也可促进其分裂。pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::FEZ-GR幼苗在不含DEX培养基上生长时其根尖分生组织中的细胞分裂及其分化状况与野生型幼苗中的情况相似(图3、表3)，但在含DEX的培养基上生长的幼苗中，静止中心及周围干细胞数量增加，且排列不规则，表明这些细胞的分裂调控出现异常。但光学显微镜观察发现静止中心下方未分化细胞层数并未增加。这些观察结果表明FEZ对静止中心及其周围细胞有促进分裂的功能，但不影响柱细胞分化。由于FEZ在静止中心表达，其对静止中心以外的细胞的调控可能是通过非细胞自主的调控模式的直接调控，或是通过影响静止中心细胞功能而产生的间接影响。 图3. WOX5和FEZ基因在静止中心特异性表达后的功能分析 Table 3 Impact of QC-specific expression of wox5 and FEZ on QC and columella stem cell 株系名称 DEX处理 静止中心细胞 柱干细胞层数 分裂频率 分化频率 pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::WOX5-GR − 12.2% 0 1.2 + 65.3% 0 2.23 pFP-WOX5p::GAL4-VP16/pFP-UAS::FEZ-GR − 8.5% 0 1.15 + 100% 0 1.17 表3. WOX5和FEZ在静止中心表达后对静止中心和柱干细胞的影响 注:表中数据收集所用幼苗先在1/2MS培养基萌发，萌发后3天转至含或不含DEX (5 µM)培养基上继续生长5天。细胞分裂频率数据通过共聚焦显微镜观察收集，细胞分化频率数据经碘液染色后通过光学显微镜观察数据。每个数据来自于40个单株。
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user: 4. 结论与讨论 本研究利用WOX5基因启动子和GAL4-VP14-UAS基因表达激活系统成功构建了一个可在静止中心细胞中特异性地驱动不同基因表达的系统，通过驱动报告基因GFP的表达验证了该表达系统的静止中心细胞特异性，并进一步通过驱动WOX5和FEZ两个已知调控基因的表达展示了利用该系统研究基因功能的可行性及功效。 多细胞生物体内有各种不同的组织和细胞，它们各自的特性和生物学功能在很大程度上取决于在其中表达和发挥作用的基因网络。因此，了解基因功能的细胞特异性是生物学研究的核心内容。由于大多数基因的表达区域跨越不同细胞和组织类型，构建细胞特异性的基因表达系统是研究细胞特异性基因功能的一条重要途径。鉴于静止中心在植物根系发育中的重要作用，本研究所构建的静细胞特异性基因表达系统为研究该细胞类群的调控及其生物学功能，以及根干细胞和根系发育的调控机理提供了一个重要的工具。 此前的研究发现缺失WOX5功能的突变体中出现柱干细胞分化和静止中心细胞分裂的表型 [ 4 ] ，表明该基因的正常功能是抑制静止中心细胞分裂和柱干细胞分化。本研究发现如果通过构建的表达系统在静止中心细胞中表达额外的WOX5基因产物，的确可抑制柱干细胞的分化，与上述结论一致。但同时发现额外的WOX5基因产物导致静止中心细胞分裂频率增加，与上述结论相反，这一结果表明WOX5对静止中心细胞分裂的影响与剂量相关且可能存在一个关键阈值，高于或低于这一阈值都可能导致细胞分裂频率升高。Willemsen 等发现FEZ的表达区覆盖柱干细胞及由其分裂产生的子细胞，侧根冠与表皮原初细胞及其分裂产生的侧根冠细胞 [ 8 ]。由于其调控功能与表达区基本重叠，推测其调控模式可能是细胞自主性的 [ 8 ]。目前不清楚FEZ对静止中心细胞是否有调控功能。本研究发现FEZ在静止中心细胞中表达后可以导致静止中心细胞分裂，表明其具有调控该细胞类群的功能。同时我们还发现FEZ在静止中心表达后导致其周围的干细胞(柱干细胞)不规则分裂，虽然目前无法确定这一种影响是细胞非自主性调控，或是对静止中心细胞调控的间接影响，但该观察为进一步研究FEZ的作用模式提供了一条重要线索。
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user: 致 谢 感谢日本奈良科技大学(Nara Institute of Science and Technology) Keiji Nakajima教授提供的35SSGVG/UAS::WOX5种子和法国格勒诺布尔大学François Parcy教授提供的pFP101载体。
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user: 摘 要 大麻二酚是药用植物大麻中的主要化学成分，具有重要的医学应用价值。近几年，欧美国家对于大麻二酚的应用处于领先地位，而我国对于大麻二酚的重视还远远不够。根据现有的关于大麻二酚的专利与技术，详细介绍了大麻二酚的制备与纯化的方法，包括植物提取法和化学合成法，并分析每种方法的优劣势，同时列出并比较了大麻二酚的检测方法。 关键词 :大麻二酚，制备方法，提取，研究进展 Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/