DreamBlooms/HansPub-15000-to-45000 huggingface dataset:
system: [SYSTEM]

user: 4. 转向超越论的现象学 科学一直声称其对自然的描述是不带任何预设的，但实际上科学行为的背后仍然涉及一些自明性的规定和规范性假设。对于实证科学而言，“实证性”的研究是建立在有效性与精确性的基础之上，同时提供给我们大量事实依据。往往一个科学家对于如何做胸有定见，然而对于回答科学是什么、为何这样做等问题未必能做到胸有成竹。在对于自己本身的行动都无法完全理解的情况下，科学家自然无法容忍在科学领域之外会有比科学更加正确、更加有效的理解世界的方式。于是一部分人拒绝通过“科学”之外的方式来解释世界，继而演变成一种与科学精神背道而驰的、狂热的唯“科学主义”，这种独断的、唯“科学主义”的后果便是造成人类科学的危机、精神的危机。 正如胡塞尔所描述的，“历史地来看，当代实证主义科学概念是一种残留的概念” [ 2 ] ，具有局限性和狭隘性，而非现代科学家认为的那样无所不能。 胡塞尔认为实证科学最大的谬误在于把世界中的存在(being)仅仅看做实在(real)，但对于胡塞尔而言，世界是具有超越性的，且这种超越性是内在的，意识方是绝对自明的基础，并非外在的世界，这一点与自然科学背道而驰，更重要的是，我们不能将此意识的绝对性理解为自然态度(natural attitude)意义之下的“经验主体性”(empiric subjectivity)，那样超越论的现象学就无法“超越”了，仅仅代表了某种心理主义。胡塞尔的现象学是通过对自然态度的悬置(epoch)，返回“超越的主体性”(transcendental subjectivity)。在胡塞尔的著作中，他不断强调意识的绝对性和意识的意向性是一切认识与感知活动的原则，假如我们想要澄清事物的意义，就必须返回到超验意识的层面上，指出构成意识的“意识行为”，因为超验意识是最终的“意识赋予者”(meaning-giver)。 胡塞尔把自然态度叫做人类意识的自发态度，他认为人多以自然态度与世界产生关联，这种态度的取向是外部世界，并且确认这一世界的存在。悬置法的作用是从意识中排除自然态度，把关于自然态度的存在命题放入括号中，使自然态度失去其效力。经过现象学的悬置后，自然态度中的自然世界就成为意识的纯粹材料，成为现象。 胡塞尔将“现象学态度”(或超验态度) (phenomenonological attitude)叫做反思态度。这种反思态度把意识生活、事物被给予意识的各种方法当作它的对象。现象学态度便是这种悬置的结果。对于胡塞尔而言，反思性彰显出了哲学与科学的差异，而超验态度(或反思态度)必然通过现象学的悬置与还原(reduction)得以可能。悬置的目的是要把自然态度中对应的对象转换为意识中显现的对象，并加以描述。因此悬置是为了确保我们作为旁观者能够保持中立的态度，在对象没有任何预设的前提下，以原初的方式显现在意识当中。在这种反思中，世界上所有存在的事物都成为纯粹的所思之物(cogitata)，即我们的意识纯粹的思考的东西。 因为超验的态度不将自己居于任何自然态度之中，根据现象学的悬置，将意识之外所有的事物存而不论，给它们加括号，超验的态度使我们能够从自然态度当中超脱出来。从现象学的视角看，很容易理解胡塞尔为何把自然态度称为“独断的态度”(dogmatic attitude)。当人们处于自然态度之中时是无法进行自我批判的，人们只是在无根据的接受自然态度所给予的东西，并且是根据自然所倾向的来接受。另一方面，我们必须强调相较于自然科学的态度而言，人的态度极其重要，人之所以与物不同是由于人拥有其态度并存活于世。相较之下，人文社会科学研究的对象是人文精神现象，自然科学则研究客观事物，并倾向于将一切事物自然化，这样就需要严格将二者的差异区别开来。但是，二者都归属于自然的态度，研究二者的关系必须依赖于“超验态度”的澄清，胡塞尔指出在超验的态度中我们可以在这些不同的态度之间进行轻易地转换。 括而言之，胡塞尔认为现象学比实证科学更为积极、更为彻底。因为诸实证科学的局限性在于仅能关注到可知觉的或透过理想化作用而形构的客体，相较于诸实证科学而言，现象学更能从根植于自然态度的认知状态中解放出来，有效地执行“无预设”原则，对自然的命题、自然态度的本体论承诺中立态度，这种中立的现象学态度可以形成绝对自明性的领域。胡塞尔认为实证科学实际上根本不够实证，他相信唯有超越论的现象学才能冠以实证之名，“拯救欧洲的危机的唯一出路，就是重新回到现代人所遗忘的经验世界，原始生活世界是一切存在的最终根基。” [ 10 ]
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 本研究采用酵母突变株K6001作为生物活性筛选系统，对韩国圃美多公司多个产品进行筛选，发现玛咖超临界提取粉末具有较好的抗衰老活性。因此对该原料中的抗衰老活性物质进行了研究并从中分离得到了两个活性化合物(1， 2)。这两个化合物都能显著延长酵母突变株的复制性寿命。通过波谱分析以及文献数据比对，推测活性化合物1的结构为n-benzyl-(9Z)-octadecenamide(1)，确定活性化合物2的结构为n-benzylmyristamide(2)。为了进一步确认化合物1的结构，合成了n-benzyl-(9Z)-octadecena- mide(1)，并且测定了其生物活性，结果表明合成得到的n-benzyl-(9Z)-octadecenamide的波谱数据及生物活性与天然来源的化合物1相同。 关键词 :玛咖，抗衰老，玛咖酰胺，K6001酵母 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 衰老是随着时间的推移，生物体出现的生理功能和形态结构退行性变化的过程，是人类生命进程中不可避免的。根据联合国世界人口及世界人口老龄化资料，全球超过60岁老龄人口的比例从1990年的9.2%升高至2013年的11.7%，并预计到2050年老龄人口将超过20亿，比例将占全球总人数的21.1% [ 1 ] 。其中，我国自从上个世纪实行计划生育以来，老年人口在总人口中占得比例相对提高，老龄化进展较其他发展中国家快，据世界卫生组织中国老龄化报告显示，预计中国超过60岁老龄人口的比例将从2010年的12.4%升高至2040年的28% [ 2 ] 。衰老过程在整体、组织、细胞乃至分子水平随处可见，导致衰老的原因又是多方面的，衰老机理也极为复杂。目前常见的衰老学说有衰老基因学说、端粒DNA缩短学说、自由基衰老学说 [ 3 ] 等。面对当下越来越严峻的社会人口老龄化趋势，如何延缓衰老、降低衰老相关疾病的发生率以及延长机体寿命受到越来越多人的重视。 拥有简单易操作的生物活性筛选模型对于从天然产物中探寻具有潜在抗衰活性的化合物具有重要意义。现阶段，用于抗衰老研究的主要生物模型有酵母、线虫、果蝇、小鼠等。其中小鼠属哺乳动物，亲缘关系与人类最近，用小鼠做实验所得的结果更具有可信度，但其繁殖饲养的费用较高，实验周期较长且不容易操作，因此更多地用于药物研究后期而很少在药物初筛阶段使用。酵母、线虫、果蝇虽属低等生物，与人类的亲缘关系较远，但是均有人类衰老调控子的同源基因，且由于其简单易操作的优势一直是抗衰老研究的主要模型。其中酵母衰老的重要调控子组蛋白去乙酰化酶Sir2和人类的SIRT1是同源蛋白，都对衰老有着重要的调控作用 [ 4 ] 。因其生命周期短，成本低，操作简单，便于大量培养而更适合实验室初步筛选抗衰老物质。 1996年Bobola等发现了酵母的突变株K6001，该突变株在葡萄糖培养基中，只有母细胞会分裂增殖，而子细胞不能持续分裂，因此单个母细胞产生子细胞的个数是能确定的 [ 5 ] ，此突变株的发现大大简化了传统测试酵母细胞复制性寿命的方法及操作。2004年，Jarolim等将这株酵母细胞应用于酵母复制性寿命的研究，并且发现其在白藜芦醇(10 µM)的条件下，其复制性寿命同样可以被显著延长 [ 6 ] 。本团队在酵母突变株K6001活性系统引导下，已从多种天然产物如天麻 [ 7 ] 、淡菜 [ 8 ] 、麦冬 [ 9 ] 、灵芝孢子粉 [ 10 ] [ 11 ] 等中提取分离出来多种结构类型不同的具有抗衰老活性的化合物。 玛咖(Lepidium meyenii Walp)原产于秘鲁海拔3500 - 4450米的安第斯山脉。玛咖在秘鲁当地作为药食两用的植物已经有2000多年的历史。传统上用于改善性功能、提高生育能力、抗疲劳、免疫调节等 [ 12 ] [ 13 ] ，而且无任何毒副作用，以玛咖为主要原料的各类保健品近年来受到越来越多人的青睐。韩国圃美多公司以秘鲁胡宁省栽培的玛咖为原料，在萃取压力为30 MPa，萃取温度为40℃的条件下进行超临界CO 2 萃取，之后，将糊精、阿拉伯胶与其混合最终使它成粉末状，最终得到玛咖超临界提取粉末。 本研究对韩国圃美多公司来源多个产品进行筛选，对玛咖超临界提取粉末的抗衰老活性物质进行了研究，在酵母突变株K6001活性系统引导下，分离得到两个玛咖酰胺(macamide)类化合物n-benzyl-(9Z)-octadecenamide(1)，n-benzylmyristamide(2)，且具有显著的延长酵母突变株K6001复制性寿命的作用。
system: [SYSTEM]

user: 2. 材料与方法 2.1. 材料与仪器 P-230型高效液相色谱仪(大连依利特公司)；6224A TOF 型液质联用(美国Agilent公司)；AVIII-500型核磁共振仪(瑞士布鲁克公司)；色谱柱Capcell PAK C18，色谱柱Develosil PH-HG-5(日本Nacalai tesque公司)；K6001菌株由奥地利萨尔茨堡大学的Breitenbach教授提供；玛咖超临界提取粉末由韩国圃美多公司提供；油酸(>85%，东京化成工业株式会社)；无水二氯甲烷(99.9%，北京百灵威科技有限公司)；新戊酰氯(99%，北京百灵威科技有限公司)；卞胺(99%，北京百灵威科技有限公司)；DMAP，4-二甲氨基吡啶(99%，阿拉丁)；其他试剂为色谱纯或分析纯。 2.2. 生物活性测定方法 2.2.1. 培养基的配制 1)半乳糖液体培养基的配置：1％酵母粉、2％蛋白胨、3％半乳糖(质量体积比)，121℃高压灭菌20分钟后，备用； 2)葡萄糖液体培养基的配置：1％酵母粉、2％蛋白胨、2％葡萄糖(质量体积比)，121℃高压灭菌20分钟后，备用； 3)固体培养基的配置：相应液体培养基加入2％琼脂(质量体积比)。 2.2.2. 活性测定方法 1)将冻存于−30℃冰箱中的K6001菌株取出，恢复至室温后，用PBS清洗三次，然后加入到5 mL无菌的半乳糖液体培养基中，28℃，160 rpm摇床中培养24~28 h至其生长至对数期后，从摇床中取出酵母菌株，混匀后取出1 mL，离心，用PBS洗涤三次，除去所含的半乳糖液体培养基，再用PBS稀释后，用血球计数板于显微镜下观察计数。 2)向直径6 cm的玻璃培养皿(已灭菌)中加入5 mL葡萄糖培养基(含2％琼脂)，待冷却成固体培养基后，分别向不同的培养皿加入用等体积乙醇溶解的阳性(10 µM白藜芦醇)或其他样品，待乙醇挥发后，分别加入约5000个酵母，用灭菌后的玻璃涂布器将其均匀地涂布于培养基表面，在28℃的条件下培养两天。 3)在10倍目镜，20倍物镜显微镜下观察酵母母细胞产生的子细胞个数：随机选取40个含单个酵母母细胞的菌落，观察其周围的子细胞个数并记录，通过和阴性、阳性对比，统计分析，评价样品活性。 2.3. 数据统计与分析 通过SPSS(Statistic Package for Social Science)统计软件，对每个样品的40个数据进行分析，计算各组的酵母平均寿命值，并对各加样组与阴性对照组进行一对一的T-检验，P值小于0.05则样品的活性与对照组相比具有显著性差异。
system: [SYSTEM]

user: 3. 结果与讨论 3.1. 玛咖超临界提取粉末中活性物质的分离、纯化 在玛咖超临界提取粉末(15 g)中加入120 ml 50%甲醇水混合溶剂，震荡后3000 rpm 离心10 min，上清液经ODS柱层析分离(溶剂体系体积比为甲醇:水= 5:5， 7:3， 10:0)，根据TLC结果合并得到4个组分。分别对这四个组分进行抗衰老活性测定，结果显示第3个组分(洗脱溶剂体系体积比为甲醇:水 = 10:0)具有显著延长酵母突变株复制性寿命的活性。故对该活性组分继续进行正相硅胶柱色谱分离(硅胶200 - 300目，溶剂体系体积比为正己烷:乙酸乙酯 = 10:0， 9:1， 8:2， 7:3， 3:7， 0:10)，根据TLC结果合并得到4个组分并进行了活性测试，随后对活性部位第2个组分(正己烷:乙酸乙酯 = 8:2)进行两次HPLC纯化，第一次纯化条件为：色谱柱Capcell PAK C18(f10/250 mm)，流速3 mL/min， 检测波长210 nm， 流动相90%甲醇-水混合溶剂，得到活性馏分(t R = 21.6 min)；第二次纯化条件为：色谱柱Develosil PH-HG-5(f10/250 mm)，流速2 mL/min， 检测波长210 nm， 流动相90%甲醇-水混合溶剂，得到活性化合物1(1.8 mg， t R = 9.3 min)(图1)，发现该化合物在浓度为3 μM和10 μM时均能显著延长酵母的复制性寿命(图2(a))。之后，对进行了正向硅胶柱色谱分离的第4个活性组分(正己烷:乙酸乙酯 = 7:3)进行反相ODS柱层析分离，得到活性化合物2(1.6 mg)(图1)，发现该化合物在浓度为3 μM时能显著延长酵母的复制性寿命(图2(b))。 3.2. 玛咖超临界提取粉末中活性物质的结构鉴定 活性化合物(1)：白色粉末，MS: m/z 372 [M+H] + 。根据其 1 H NMR(500 MHz， CDCl 3 )δ：7.28 - 7.35 (m， 5H)， 5.66 (s， 1H)， 5.35 (m， 2H)， 4.45 (d， 2H， J = 5.5 Hz)， 2.21 (m， 2H)， 2.02 (m， 4H)， 1.66 (m， 2H)， 1.27 - 1.30 (m， 20H)， 0.88 (t， 3H， J = 6.5 Hz). 将 1 H-NMR与文献 [ 14 ] 进行比对，基本一致，所以此化合物结构初步确定为n-benzyl-(9Z)-octadecenamide(图1)。 活性化合物(2)：白色粉末，MS: m/z 318 [M+H] + 。 1 H NMR(500 MHz， CDCl 3 )δ：7.27-7.35 (m， 5H)， 5.66 (br s， 1H)， 4.45 (d， 2H， J = 5.5 Hz)， 2.21 (t， 2H， J = 7.5 Hz)， 1.65 (m， 2H)， 1.25 - 1.30 (m， 20H)， 0.88 (t， 3H， J = 7.0 Hz). 将 1 H NMR与文献 [ 15 ] 进行比对，完全一致，所以此化合物结构确定为n-benzylmyristamide(图1)。 图1. n-benzyl-(9Z)-octadecenamide (1)及n-benzylmyristamide (2)的化学结构 3.3. 活性化合物1的合成 将油酸(141 mg，0.5 mmol)溶于5 mL无水二氯甲烷中，在0℃下加入新戊酰氯(181 mg， 1.5 mmol)，室温搅拌1 h后，加入DMAP(74 mg， 0.6 mmol)和苄胺(82 μL，0.75 mmol)，继续搅拌3 h后，加少量水停止反应(图3) [ 15 ] 。减压浓缩后将产物溶于30 mL乙酸乙酯中，分别用饱和碳酸氢钠，稀盐酸溶液洗涤，之后，有机层用无水硫酸钠干燥，经减压浓缩得无色透明油状物，该油状物经硅胶柱分离(正己烷:乙酸乙酯 = 7:3)得白色固体(102 mg)，该白色固体经HPLC纯化(甲醇:水 = 98:2)得无色固体(75 mg)。 1 H NMR (500 MHz， CDCl 3 ) δ: 7.27~7.35 (m， 5H)， 5.75 (s， 1H)， 5.34 (m， 2H)， 4.44 (d， 2H， J = 5.7 Hz)， 2.20 (t， 2H， J = 7.3 Hz)， 2.00 (m， 4H)， 1.65 (m， 2H)， 1.26 - 1.30 (m， 20H)， 0.88 (t， 3H， J = 6.9 Hz)。生物活性测试结果表明该合成化合物在浓度为3 μM和10 μM时能显著延长酵母的复制性寿命，与天然来源的化合物活性一致。因此确认活性化合物1的结构确定为n-benzyl-(9Z)-octadecenamide。
system: [SYSTEM]

user: 4. 结论 在K6001酵母活性筛选系统的引导下，对韩国圃美多公司来源的多个产品的抗衰老活性进行筛选，发现玛咖超临界提取粉末具有较好的抗衰老活性，因此对该原料中的抗衰老活性物质进行了研究，通过正、反相柱分离，以及HPLC纯化，得到两个具有显著抗衰老活性的化合物。通过波谱解析及有机合成，确定活性化合物1的结构为n-benzyl-(9Z)-octadecenamide(1)，活性化合物2的结构为n-benzylmyrista- mide(2)。本研究结果表明圃美多公司来源的咖超临界提取粉末具有显著的抗衰老活性，该活性化合物在更高级别生物模型中的作用效果及作用机制有待进一步的研究。 图2. n-benzyl-(9Z)-octadecenamide (1)及n-benzylmyristamide (2)的活性测定结果 ：阴性对照组(无水乙醇)； ：阳性对照组(白藜芦醇， 10 μM)； ：化合物1或者化合物2(3 μM)； ：化合物1或者化合物2(10 μM) 图3. n-benzyl-(9Z)-octadecenamide (1)的合成
system: [SYSTEM]

user: 致 谢 主要由韩国圃美多公司资助，部分获得国家自然科学基金(No. 21661140001)支持。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 随物联网科技蓬勃发展，各种创新应用如雨后春笋般涌现，无可避免地传统金融服务业正受此类新兴科技导向产业侵蚀服务市场，因此对于传统金融服务业者而言，如何保有客户，从服务中产生黏着，则扮演业务持续成长之关键角色，其中「智能客户服务」机制便是落实「金融科技」(FinTech)重要之一环；特别是进阶人形之咨询服务型机器人为着黏着客户，乃继工业用机器人之后，种种新颖应用更是方兴未艾，跃跃欲试潜在利基市场。本文以「服务科学」方法论为本，具体提出设计与实践双轴循环與整体创新流程落实理论，探索智能投顾服务所需之相关技术，从金融服务战略观点出发，分析智能客户服务机制需求，改善目前业界一般线上客户服务做法，提出结合行动商务新体验模式，运用文字输入并辅以口语辨识技术查询，一方面疏解线上客户等候焦虑情绪，另一方面提升客服服务品质与服务周转能力，并进而提出一套雏型设计框架供实务界参考，建立不同利害关系人面向对服务建构之共识，以拉近金融科技差距；同时本文更在理论上将服务设计与实用主义相结合，并透过实证为学术界指引金融科技相关潜在研究议题与方向。 关键词 :服务工程，服务设计，金融科技，智能投顾 Copyright © 2017 by author and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 在物联网科技方兴未艾与人工智能演算法突破之交互冲击下，使得机器人从工业制造应用迅速迈向服务机器人，不断地从中创新商业模式与提供各式多样服务，透过“破坏式创新”(Disruptive Innovation)创新者往往成功地在市场站稳脚步后，会日益重视与专注于有利可图之商业模式及其客群，从而可能忽略来自跨界之破坏性竞争者，而此破坏者则常以采取低阶商品服务或挖掘新顾客群策略，以期能逐渐地瓜分既有市场，破坏者之最终目的乃是与原有生态分庭抗礼，甚至取而代之 [ 1 ] —来势汹汹挑战既有服务之供给与消费方式。在“世界经济论坛”(World Economic Forum， WEF)研究报告中，借由探讨因金融科技(Financial Technology， FinTech)之发展所造成之冲击：1) 何种服务科技创新影响传统金融产业最钜；2) 现有金融服务方式与消费行为将会如何改变；及3) 服务科技创新对金融治理、金融机构，与整体产业之潜在意涵等，进而勾勒出未来金融服务科技之发展趋势与商业模式轮廓 [ 2 ] 。整合机电与资通讯综合技术之“智能型机器人”，可视为新一波产业生态圈之重组，在“工业4.0”(Industry 4.0)—利用大数据分析驱动制造策略，运用自动化设备提升生产效率与品质，创造差异化之资源基础与智慧资本 [ 3 ] —概念揭橥后，服务产业亦跃跃欲试，探索机器人所衍生可能之创新服务形式，“智能投顾”(Robo-Advisory)—运用大数据与人工智能演算法，以机器人形或一般资讯系统型式，为顾客提供各项金融服务建议即为一例。 以创新科技驱动新商业模式与服务作为，整个创新衍生过程必须始终聚焦于“有竞争性”之服务 (Competitive Services)，而欲掌握市场竞争与科技发展态势，便需要运用各种科学方法，提出理论与数据依据，确认此竞争性存在，否则贸然投入资源设计、制造，与销售一个已知无市场潜力之产品乃是一种“无谓创新”。工程设计者一方面掌握市场需求动态，另一方面不断地修正与精益产品设计规格与各项功能，以满足无止境之服务需求；同时，借由完善之计划支援管理，控制研发制造成本，确保产品问世如期如质。此种从策略到实践一体，以科学为发展核心观思维，结合服务、科学、管理及工程等领域，并以服务为顶点，与其他面向聚合为一锥体，彼此相互紧密扣合，方能知己知彼，使竞争居于有利形势，胜兵先胜 [ 4 ] ，决胜于有效创新实践之执行力。“服务设计”延伸传统工程方法，从过去产品规格多由设计者推想，演进为与使用者“共创价值”(Co-creation)，甚至“共同创作”(Co-production)，以确保面向使用者产品之可用性，因此服务设计思考应包含：1) 服务设计以使用者中心，从使用者同理心出发；2) 服务设计尊重使用者经验与习惯，以创新介面与功能引领使用习惯改变；3) 服务设计考量运作时之顺畅性与便利性；4) 服务设计落实无形价值于实质体验上，使用者借由实质体验体会服务之无形价值；及5) 服务设计整体思考，并兼顾正面与潜在负面外部效应，一方面避免不因服务运作而殃及他方，另一方面积极激发对环境之正向效果等设计原则 [ 5 ] 。
system: [SYSTEM]

user: 2. 服务工程 “服务科学–管理–工程暨设计”(Service Science， Management， Engineering and Design) (以下简称：服务科学) [ 6 ] ，是一新兴跨领域学门，其要旨在于着眼利基市场，透过具体“有价值”之服务作为营利手段，具体作法有二：1) 以商品做为各项服务载具，消费者购入商品时，运用所提供之服务延伸与创造自身之价值，例如行动装置与其软体商品城间关系；2) 以具体服务整合各项商品，消费者使用服务时，由所整合之商品群交互作用，产生服务价值，例如智慧家庭与感知器群间之关系。 延伸此一立基服务导向概念，衍生不同产业发展策略，包括：制造业服务化、服务业科技与国际化、传统产业特色化等。运用科技作为企业差异化实践手段，已成全球趋势；例如近来方兴未艾之“线上对应线下实体”(Online to Offline， O2O) 电子商务延伸商业模式，“扩增实境”(Augmented Reality)—透过装置产生之虚拟化情境，令使用者体验如实境般与之交互活动—在智慧商城应用等，均需要以服务设计为思考核心，经由服务工程实践各项有价值客户服务，方能得以落实企业营利目标。 为有效达成此一目的，本文提出“服务设计与实践双轴循环”模式，透过“规划”与“实践”双轴制动，以“持续精进”作为差异化手段之“孵蛋器”(Incubator)，如图1所示，图中双轴心机器人图示为 图1. 服务设计与实践双轴循环图 “有价值服务”，在规划轴中分别依次为：1) 概念启发—探讨与形塑服务价值与体现内涵；2) 参考援引—从文献与实务中，延伸服务应用与机制，并截长补短；3) 创新修正—透过多方利害关系人，进行多回合服务价值辩证，使服务更具体达成所设定之目标；4) 服务设计—以服务使用者为设计核心思考，并考量服务购买者与影响者心理设计有感服务；及5) 服务实践—选定商业模式，营造服务价值链，透过服务管理将不同价值链成员专长呈现于服务之中等阶段；而在实践轴中则分别依次为：1) 定义问题—探讨服务落实过程中之潜在问题与障碍，包括技术瓶颈与资源限制，并思考可采行之因应对策；2) 搜集资料—在服务机制中预埋如服务使用历程资料及服务可靠度指标所需资料；3) 分析资料—透过各种分析模型，解读所搜集之资料，作为服务机制改善依据；4) 衍生意涵—依据分析结果，进行综合讨论，探讨数字背后所能带来之价值，制定行动方案；及5) 管理作为—展开各项服务改善行动方案，追踪考核方案实施绩效，有序达成改善目标等阶段。
system: [SYSTEM]

user: 3. 实用主义 以“实用主义”(Practicalism) [ 7 ] —以实用导向实作，并从实作中应证理论与产生新知识—为宗之服务科学，种种服务潜在价值之呈现，必须透过服务设计与工程，方能具象服务内涵，并进一步探索种种潜在商机，因此运用“雏型设计”(Prototyping Design) [ 8 ] ，令服务使用者经由体验而激发震荡出真实需求，是当前常用手段，不仅在验证服务内涵(Proof of Concepts)，并为后续商务推动验证(Proof of Business) 提供具体指引；同时，在实作机器人应用中亦多采用此设计理念 [ 9 ] [ 10 ] 。即使从学术研究观点而言，缺乏质化观察分析具体服务实践所提出之理论，对于实务界后续理论应用亦恐有隔靴搔痒之虑。 本文之要旨在于实作—将创新服务内涵先行实作成雏型，后续具体改良与研究始能展开；同时点出金融服务业欲提升其客户服务品质与创新体验，包括采用人形服务型机器人与智能客户服务等具体作为时，应如何展开实作旅程，以缩短业者摸索时间，也期待能为相关产业(如资讯、机械，及智能分析等)带来新利基市场。本创新实作过程是以“敏捷式”(Agile) [ 11 ] 开发方法—成立跨组织服务设计团队，使用云端科技管理实作过程所衍生之需求设计相关文件、原始程式码，及情境设计分镜表等，以达到团队跨境即时通透沟通之目的，并且以测试主导(Test Driven) [ 12 ] 模组化设计，以提升服务工程品质—指导服务设计与工程活动，整体研究流程说明如图2所示：1) 在定期举行之创新服务脑力激荡会议中，分别由职司单位分享金融服务业市场动态与服务科技发展动态，由创新服务团队综视动态，并讨论潜在有价值之应用领域；2) 创新服务团队依据脑力激荡会议结论，进行潜在应用发想，分别举办专家会议，搜集并整理金融服务与创新科技专家学者意见，提出此潜在应用发想之价值论述(Value Propositions)；3) 创新服务团队依据价值论述，将发想概念具体化，提出服务设计与工程实施构想，分别访谈金融服务与科技实践业者，进行可行性评估；4) 从业者访谈过程中，探寻价值共创者，参与实作构想，并讨论智慧财产权归属与实作分工等；及5) 透过测试主导实作过程，由创新服务团队提出服务需求与科学模型设计；由金融服务业者验证服务；由创新服务团队与科技实践业者共同制作雏型系统，布署服务场域实证服务功效，作为下一轮实作改进之依据。
system: [SYSTEM]

user: 4. 服务需求 提高客户服务满意度与满足客户体验新颖性是服务设计之终极目的，是金融服务业纷纷探讨“金融科技”冲击与因应对策之着力点，因此从服务接触点(Touch-points)检视，延伸目前客户服务，兼顾新颖式服务体验，进而黏着客户持续消费或刺激新消费，是目前金融服务业思考之重点。传统客户服务以前台人工作业为主，搭配电话语音服务纾解一般简易服务所致之服务量压力；前台人工作业常困于客户居多询问重复性高制式资讯，例如本日金价若干，某币汇率若干，或是信用贷款流程等；而电话语音服务 图2. 整体创新实作流程 是最常为消费者所诟病之服务接触点，增加服务席次会大幅提高成本，减少则会常使消费者等候时间过久，同时电话服务导览往往时间过长，消费者对语意或是专有名词错误解读，往往还是等候专人接听提供服务，如此一来，非但电话语音系统绩效不彰，也未因设置此自动化服务而纾解服务量。 近来透过新兴科技发展，金融服务业纷纷导入服务网站及行动装置应用等，积极回应网路世代消费者之需求，电传统话语音服务则演变成数位落差者使用，或是网路替代支援性服务角色；事实上，从服务设计观点，进一步分析此类服务，其接触点间也未必互斥；因此，本文特别提出一套整合服务机制，将不同服务接触点内入，融合科技并运用相同机制提供多样服务，以同时满足消费者与企业经营绩效要求。如图3所示，依服务接触点区分：1) 客户访问网站，透过键盘输入介面提交表单，经由文字介面，资料处理等步骤，传回相对应资讯给服务请求者；2) 客户访问网站，透过语音介面，转换成文字，经由文字介面，语意分析，再资料处理等步骤，传回相对应资讯给服务请求者；3) 客户透过行动装置或是电话口语寻求客户服务，在等候客服人员时，借由智能服务口语问答方式，将互动过程如文字稿式纪录，倘服务目的已达成则挂线，否则俟客服人员接续服务时，已从互动纪录中了解客户服务请求意图，缩短真人互动时间；4) 人形服务机器人可透过行动装置设定服务模式，传达服务指令做出预设动作，同时接受在场来宾口语问答产品服务，除透过语音介面，转换成文字，经由文字介面，语意分析，再资料处理等步骤，回应对应资讯外，也累积来宾问项作为后续服务题库基础；及5) 对于非资料处理与语意分析之服务请求，将归于除外处理，或传回进一步缩小范围之问句，或通知服务人员人工处理，特别是客户紧急事务。 为此本文以前述整体创新实作流程为本，延伸目前传统金融网站与电话客户服务，提出口语互动导览服务型机器人之服务情境需求探索方式，并归纳出服务设计之各种考量因素，从口语语意分析，到“智能客服中心服务”之延伸应用等具体作法，同时结合影音与微系统实作服务概念，使利害关系人更能体会服务设计方法论之优越性，并进而提出一套雏型设计框架供实务界参考，以发展有竞争性之服务型机器人。
system: [SYSTEM]

user: 5. 服务设计 依前智能金融客户服务设计机制所述，人形服务机器人为新颖人机介面之一，其目的在于掌握科技 图3. 智能客服中心服务范例 金融服务之话语权，为金融服务创造话题，使消费者进而对品牌产生认同感；而如何减轻当前客户服务量之压力，则是投入服务设计之短期诱因；为此，延伸本服务设计至“智能客服中心服务”上，如图3所示，电话交换机触发“启动”功能听取客户询问，系统萃取询问口语中之关键字 (图中客户询问部分)，语意判断依照前述之对应机制，输出客户所关心之服务事项 (图中金融产品部分)，同时累记答询互动过程 (图中询问纪录部分)，由客服人员接手后续服务处理 (图中底下其他部分)，倘若客户服务需求已被满足，则进入客户亲合活动作业；若否，则可缩短了解客户来意之时间，将有限时间耗用于服务处理上，提升客服作业绩效；而“下一位”键通知交换机挂电线路，继续接听排队等候中之服务请求，同时记录服务处理时间。 服务处理纪录至少包含以下资讯：1) 客户识别码；2) 交换机接通来电时间；3) 客户等候开始时间；4) 客服人员服务处理开始时间；5) 客服人员服务处理结束时间；6) 口语辨识累记字词；7) 服务请求关键字；及8) 客服人员识别码等，绩效系统可进一步获取以下服务指标： (1) (2) (3) (4) 透过前述指标纪录服务历程，可进一步了解：1) 客户等候时间机率分布情形，“客户等候时间”过长时，具有电话线数不足、客服人员不足，或服务处理时间过长等管理意涵；2) 服务处理时间与服务事项间之关联性，“服务处理时间”过长时，具有服务事项分类过粗、客服人员沟通技巧待加强，或后台服务资讯不足以即时满足客户之服务请求等管理意涵；3) 口语辨识准确度与客户之关联性，“口语辨识准确度”偏低时，具有口语辨识能力待加强，或客户口齿不清等管理意涵，下次再来电时可免用“机器人”，循传统一般客服程序享受制式等候服务；及4) 不同客户服务历程与不同服务事项耗用资源间之关联性，“客户服务历程”透过服务频率统计，隐含该客户之服务特征，可启动主动式行销机制，刺激再次销售机会。
system: [SYSTEM]

user: 6. 服务讨论 运用“语音辨识”(Voice Recognition)做为“输入”来源，经过语音处理机制，将语音转换为“文字集合”(Character Set)，再针对此“字词集合”进行语意判断，然后对应用系统下达指令并控制(Command and Control)输出结果，已日益普及；尤其在各种先进服务应用中，乃是不可或缺之功能。在前述转换处理过程中，容易产生服务失效(Service Failure)之原因诸多，例如：1) 服务场域中杂音太大，致使语音无从辨识；2) 麦克风收音能力与品质较差，对噪音容忍度或是收音距离有限；3) 使用者字词发音方式与语音辨识基础不符，简单说就是口齿不清或是乡音过重者；4) 使用者说话时，抑扬顿挫不明，使语音辨识无法断句，影响后续处理品质；5) 使用者语汇与语意判断设定不合，通常是“同义异词”或“同词异义”所造成；6) 有效之控制指令需要多个词需要同在一句话中(逻辑AND语句)，但使用者叙述并未完整说出，或认为已足以有效下达指令；7) 复杂语意逻辑判断机制设计与使用者讲话出现顺序不符，当类似于传统电话语导向应用中，若使用者不依照预先“判断树”(Decision Tree)顺序进行对话时，便无法导出有效控制指令；8) 当语意判断机制无法及时“理解”使用者语意时，会辅以询问有效控制指令所需之字词，若询问过多，造成使用者不耐而中止服务；9) 使用者对专用词汇或用语并不熟悉，产生辞不达意，而语意判断机制也无从询问，此时便容易形成“鸡同鸭讲”现象；及10) 语音辨识在此趟(Session)过程中，积累许多无效字词，无从中断对话以重置服务时，便易发生服务“死当”窘境等。 传统客服中心接听客户来电时，无非答询产品问题及处理服务事项等；而客服电话外线数有其数量上限制，当各线占满后，再拨入之客户便需要排队等候，其等候时间将取决于在线答询与服务处理效率。一般评估客服绩效，常以处理时间长短做为绩效因子之一，然而，当企业愈来愈重视在服务接触过程中所产生之价值，包括企业印象、产品售后服务，与争取再次销售机会等，因此，处理时间愈短则客户感受愈不易生根附着于产品与服务。另外，当客户等候客服人员接听时，多半在线播放音乐或是广告，除易产生厌恶不耐感之外，对于客服确认服务事项之前置询问毫无助益，而客户来电洽询服务事项居多雷同，倘若于客户等候时间能透过简单“机器人”交谈，不但能解决雷同制式服务事项外，俟客服人员接听后，对于欲处理之服务已有清楚概念，更能缩短服务处理时间，并把剩余时间运用于客户亲合(Customer Intimacy)活动上。
system: [SYSTEM]

user: 7. 结论 全球金融产业均面临来自科技产业跨界服务之挑战，两造竞争决胜关键有：1) 服务创新能力；2) 科技创新能力；3) 跨界能力(Boundary Spanning)；4) 执行能力；及5) 价值共创能力等，具体表现在与客户服务接触点上之差异，例如：广泛运用行动装置，提供更便利服务；探索服务型机器人各式应用，以减轻临柜人员工作负荷，增加服务趣味性；运用口语互动增强客户黏着度，提供个人相关资讯等创新服务。同时，服务型机器人乃是一服务载具，透过多样感知器群与软体系统便能赋予机器人新样貌，进而营造以服务机器人为核心之新产业链，促进包括：1) 机器人硬体设计制造；2) 机器人服务价值软体设计；3) 与机器人介面相容之感知器；4) 多媒体内容制作；5) 机器人外型美学设计；6) 服务整合平台设计；7) 口语与手势辨识；8) 相关资通讯基础架构；及9) 大数据分析等蓬勃发展。 虽说前景看好，但金融业者仍应务实选择可行方案，了解科技之局限性，设计价值共创方法探索服务需求，了解使用者服务历程，分析成功关键因素，谨慎评估潜在效益，以避免因主观意志堕入无谓创新之窘境，方能在此轮以科技创新驱动获利竞赛中胜出；同时，对于服务科学研究而言，提供后续有趣可行之研究议题，例如：1) 消费者行为对新颖科技服务之满意度评量；2) 与消费者对新颖科技服务提供者之品牌认知改变；3) 服务机接触点场域规划与设计；4) 对服务型机器人学之自动化技术与相应机构开发；及5) 面向服务，自然语言解析演算法之研发等。 最后，关于创新值得一言之处，乃是厘清「创新理论」与「创新实务」间之先后关系，创新实务始于概念发想，概念发想则源于对市场趋势之理解，唯有落实实作并面向服务使用者，由使用者之采用方能验证创新实务是否经得起市场考验，在此之前，只能主观相信其具有服务价值而已。当创新实务之价值显著时，便会产生扩散效应，此时创新理论归纳此创新实务之成功要素，或提出更佳之实践方法，而并非创新前套用其他科技在不同时空背景下所衍生之创新理论，否则必无助于创新实作。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 目的：通过检测血管内皮生长因子(VEGF)在原发性翼状胬肉组织不同部位(头、颈、体)及正常结膜的表达，分析VEGF表达规律，探讨翼状胬肉病理机制及VEGF在翼状胬肉发生、生长过程中的作用。方法：收集在我科进行手术的初发性翼状胬肉组织35例，术中将翼状胬肉组织按头、颈、体分为3部分，并随机取5例患眼颞上方正常球结膜作对照。采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测VEGF mRNA在各样本中的表达水平，比较VEGF mRNA在翼状胬肉和正常结膜组织中表达的差异，并比较分析VEGF mRNA在翼状胬肉不同部位的表达水平差异。结果：1、在翼状胬肉各部位及正常球结膜中均存在VEGF的表达，且表达量自胬肉头部至体部呈逐渐升高趋势。2、VEGF在翼状胬肉体部的表达量明显高于头部和颈部，表达的差异均具有显著的统计学意义(P < 0.001)。3、翼状胬肉体部VEGF的表达较正常结膜明显增高，差异具有统计学意义(P < 0.05)。头部、颈部与正常结膜三者之间的表达差异无明显统计学意义(P > 0.05)。结论：VEGF在翼状胬肉各部位的表达量自头部至体部呈逐渐升高趋势，且体部表达量较正常结膜明显升高，VEGF在翼状胬肉体部呈过度表达状态，表明VEGF在翼状胬肉发生、发展过程中发挥重要作用。 关键词 :翼状胬肉，血管内皮生长因子，实时荧光定量PCR Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 翼状胬肉是一种常见的眼表疾病，由于其确切的发病和术后复发机制仍不是很清楚。目前其治疗方法主要为手术治疗，且术后复发率较高，故其病因和复发机制的研究仍是目前研究的热点方向，期望寻找到降低发病和减少复发的新方法。研究表明，翼状胬肉的病理组织学改变主要是纤维组织增殖和新生血管的增生。VEGF被认为是目前已发现的功能最强的新生血管形成促进因子，既往研究表明VEGF在翼状胬肉组织中总体表达增高 [ 1 ] [ 2 ] 。本研究采用RT-PCR技术检测35例原发性翼状胬肉头、颈、体不同部位和5例正常球结膜组织标本中VEGF mRNA的表达水平，分析VEGF在原发性翼状胬肉中的表达规律，进一步探讨VEGF在翼状胬肉发病机制中的作用，为寻找新的治疗方法提供理论依据。 1.1. 材料与方法 1) 临床资料 共收集2015年10月至2016年3月在我科行翼状胬肉切除手术的原发性翼状胬肉组织标本35例(35眼)，患者年龄40~70岁，并收集术眼颞上方正常球结膜标本5例(5眼)作对照。病例排除、纳入标准：翼状胬肉生长于鼻侧并长入角膜缘内2 mm以上，眼部及周围无明显炎症病变及新生血管性疾病，既往无角结膜外伤史及手术史等引起继发性翼状胬肉的因素。翼状胬肉组织术中按解剖位置分头、颈、体三部分，所有组织均用无液氮型RNA保存液−20℃低温保存。 2) 主要试剂 无液氮RNA样品储存液(上海捷瑞生物工程有限公司)，Trizol总RNA提取试剂盒(上海生工生物工程有限公司)，反转录试剂盒(普洛麦格北京生物技术有限公司)，RT-PCR检测试剂盒(大连宝生物工程有限公司)。 1.2. 实验方法 1) RNA提取及逆转录 采用常规Trizol提取总RNA，得到的总RNA提取液经微量分光光度计检测波长260 nm及280 nm的吸光值，浓度及纯度均符合逆转录要求，随即被逆转录成第一链cDNA。逆转录反应条件如下(20 μL反应体系)：总RNA 2 µg与Random Primer (10 μmol/L) 1 μL和RNase free dH 2 O共11 μL混匀，65℃热激5 min，立刻放于冰上3 min。然后依次添加10 mM dNTP Mixture 1 μL，MgCl 2 2 μL， M-MLV 1 μL，5×M-MLV Buffer 4μL，RNase Inhibitor 1 μL， 混匀，离心，放入42℃水浴中反应1 h，95℃灭活5min。−20℃冷冻备用。 2) mRNA表达检测 采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR， RT-PCR)技术，反应体系为SYBR Green I法20 μL反应体系：上下游引物(10 µmoL/L)各0.4 µL，2×SYBR Premix EX-Taq Mix 10 μL，cDNA 模板2 μL和RNase free dH 2 O 7.2 μL共20 µL。反应条件如下：95℃预变性30 s，95℃变性5 s、61℃退火40 s，共40个循环，最后产物经溶解曲线分析(95℃ 1 min，55℃ 30 s， 95℃ 30 s)，实验重复3次。VEGF引物序列：上游引物为5'-GCAGAATCATCACGAAGTGG-3'， 下游引物为 5'-ATCAGGGGCACACAGGAT-3'， 扩增141bp。内参照引物为human GAPDH，上游引物：5'- AATCCCATCACCATCTTCCA-3'，下游引物：5'-AAATGAGCCCCAGCCTTCT-3'，扩增122 bp。引物由上海生工生物工程有限公司合成。 3) 实验数据处理及分析 采用SPSS 17.0统计分析软件包进行数据分析处理。VEGF mRNA在翼状胬肉不同部位及正常球结膜组织之间的表达差异采用多个样本均数的方差分析，组间比较用LSD-t检验法，P < 0.05认为差异有统计学意义。
system: [SYSTEM]

user: 2. 实验结果 1) VEGF mRNA在翼状胬肉各部位及正常球结膜中均有表达，且自翼状胬肉头部、颈部至体部表达量呈逐渐增高趋势(见表1)。 2) VEGF mRNA在翼状胬肉体部的表达量明显高于头部和颈部，表达的差异均具有显著的统计学意义(P < 0.001)。 3) 翼状胬肉体部VEGF的表达较正常结膜明显增高，差异具有显著统计学意义(P < 0.01)。但头部、颈部与正常结膜三者之间的表达差异无明显统计学意义(P > 0.05)。 Table 1 Comparison of expression levels in different parts of pterygium and normal conjunctiva in VEGF mRNA ( 部位 n VEGF mRNA 正常结膜 胬肉头部 胬肉颈部 胬肉体部 F P 5 15 15 15 - - 1.18323 ± 0.702762 0.99526 ± 0.525440 1.38062 ± 0.715145 2.41824 ± 0.906681 △ ☆ 10.651 <0.001 表 1. VEGF mRNA在翼状胬肉各部位及正常球结膜中的表达水平比较( ) 注：与正常结膜比较 ☆ P < 0.01；与头、颈部比较 △ P < 0.001。
system: [SYSTEM]

user: 3. 讨论 翼状胬肉是一种向角膜表面生长的与球结膜相连的纤维血管样组织，多生长于鼻侧睑裂区，临床上典型的翼状胬肉可分为头、颈、体3部分。翼状胬肉的存在不仅影响眼部美观，而且会引起角膜散光导致视力和视觉质量下降，若胬肉遮挡视轴，会严重影响患者的视力。目前翼状胬肉的确切病因与发病机制尚未完全弄清，流行病学显示与环境因素密切相关，其他因素包括P53基因突变、DNA氧化损伤、细胞增殖和迁移、新生血管形成、遗传因素及病毒感染等被认为与翼状胬肉的发生有关 [ 3 ] 。处于进展期的翼状胬肉外观上充血肥厚，这一临床表现也提示我们翼状胬肉的增生可能与新生血管形成增多有关，而VEGF的过度表达是新生血管形成的重要直接因素之一，因此有关翼状胬肉中VEGF的表达规律的研究成为目前翼状胬肉病理机制研究的热点方向。有研究者在对手术切除的胬肉标本进行微血管密度(microvessel density， MVD)和VEGF的研究发现，翼状胬肉组织较正常球结膜组织的MVD和VEGF显著增高，两者的高表达呈正相关，提示了翼状胬肉组织具有异常的血管活性，具有很强的血管形成能力，表明新生血管的形成与翼状胬肉发生发展存在重要关系 [ 4 ] 。 VEGF是一种特异性血管内皮细胞结合生长因子，是目前认为功能最强的促新生血管生成因子。当组织缺血、缺氧时可刺激VEGF的产生，从而促进血管内皮细胞分裂增殖、迁移，增加毛细血管通透性，诱导新生血管形成。VEGF与多种眼部新生血管性疾病的发生及进展密切相关，如新生血管性青光眼、脉络膜新生血管、增殖性糖尿病视网膜病变等，相关临床与基础研究是目前研究的热点。既往学者对VEGF在翼状胬肉发生、发展中的作用进行了大量研究，研究表明VEGF在翼状胬肉组织中的总体表达量比正常结膜组织中明显增高，且与多种细胞因子的高表达呈正相关，包括Survivin、缺氧诱导因子−1、环氧化酶2、组织因子等 [ 5 ] [ 6 ] [ 7 ] [ 8 ] ，提示它们相互协同共同参与了翼状胬肉的发生、发展。 在本实验研究中，将翼状胬肉组织按解剖部位分为头、颈、体3部分进行检测，采用RT-PCR法检测翼状胬肉组织各部位及正常球结膜组织中VEGF mRNA的表达情况。主要结果显示：1. 在翼状胬肉和正常结膜中均存在VEGF的表达，且自胬肉头部、颈部至体部VEGF表达量呈逐渐增高趋势。2. 翼状胬肉体部VEGF的表达比头、颈部明显增高(P < 0.001)，且比正常结膜的表达也明显增高(P < 0.05)。而头部、颈部及正常结膜三者之间VEGF的表达差异无明显统计学意义(P > 0.05)。本实验结果进一步证实了既往实验得到的在翼状胬肉组织中VEGF表达量增高这一结果，肯定了VEGF的高表达及新生血管形成在翼状胬肉发生、发展过程中发挥重要作用的结论。同时本实验在设计上首次把翼状胬肉分头、颈、体三部分进行研究，进一步分析比较了翼状胬肉不同部位之间及与正常结膜之间VEGF表达的差异，得到翼状胬肉体部比头、颈部表达量明显增高这一新结论。根据实验结果，作者认为VEGF在翼状胬肉的体部存在过度表达状态，提示VEGF在原发性翼状胬肉的发生、发展过程中发挥重要作用。推测翼状胬肉增生始于体部，新生血管首先在翼状胬肉体部形成，为细胞的分裂增殖提供营养，体部过度增生的纤维组织及新生血管逐渐向角膜爬行，从而导致翼状胬肉的发生与发展。 研究翼状胬肉的发病机制是为了寻找新的、更好的治疗方法，翼状胬肉目前主要的治疗方法是手术治疗，但具有较高的术后复发率。抗VEGF药物已广泛应用于眼科临床治疗新生血管性眼病，且已取得明显的治疗效果。研究显示VEGF在原发性翼状胬肉中呈高表达，这一结论为抗VEGF治疗在翼状胬肉治疗中的应用提供了理论依据。翼状胬肉的抗VEGF治疗目前仍处于研究阶段，现有研究结果显示结膜下注射小剂量抗VEGF药物是安全的，无明显不良反应及副作用，但对抑制翼状胬肉发展及减少术后复发无明显统计学意义 [ 9 ] [ 10 ] 。抗VEGF治疗的作用仍需长期大量研究加以证实及明确，进一步研究如何有效调控VEGF的表达和抗VEGF药物的选择及用法、用量，将对翼状胬肉的预防、治疗及防止术后复发具有重要意义。
system: [SYSTEM]

user: 摘 要 目的：观察双芍护睛散抗大鼠外伤性视神经损伤的视网膜神经纤维层变化。方法：将实验SD大鼠60只随机抽取15只为空白对照组，其余45只造模后随机分为模型对照组、生理盐水组及中药治疗组，每组15只。空白对照组及模型对照组造模后24小时后，生理盐水组及中药治疗组(双芍护睛散)用药4周后取左眼观察视网膜神经节细胞及神经纤维层形态与神经纤维层厚度的变化。结果：模型对照组的视网膜中大量RGC肿胀，神经纤维层明显水肿增厚，其厚度与空白对照组比较有显著性差异(p < 0.05)。生理盐水组视网膜大量RGC呈空泡样变性、脱落，神经纤维层显著变薄；而中药治疗组视网膜少量RGC轻度肿胀，神经纤维层轻度变薄，其厚度与生理盐水组比较有显著性差异(p < 0.05)。结论：以养血行血法组方的双芍护睛散具有一定抗视神经的损伤，促进视网膜神经节细胞及视神经纤维修复的作用而保护视神经。 关键词 :双芍护睛散，视网膜神经纤维层，视神经/外伤，疾病模型 Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
system: [SYSTEM]

user: 1. 引言 视神经萎缩(optic atrophy， OA)是由于各种原因导致视网膜神经节细胞(RGC)及其轴突、视神经纤维损害的结果，是眼科常见的致盲眼病之一 [ 1 ] [ 2 ] 。本病以外伤性、炎症性居多 [ 3 ] 。外伤性视神经损伤导致的视神经萎缩的研究既往主要集中在解除视神经受压方面，而“神经保护”未得到足够的重视。临床上相当多的患者在视神经解压后已存在视功能的损害，表明在视神经受压时需及时对视神经进行保护性治疗，故本研究采用临床治疗视神经萎缩行之有效，以养血行血为法组方制成的双芍护睛散用于实验性外伤性视神经损伤，通过对视网膜神经纤维层的观察，以证实养血行血方有抗视神经损伤的作用，为开发有效治疗视神经萎缩中药制剂提供理论依据及实验数据。
system: [SYSTEM]

user: 2. 材料与方法 2.1. 材料 2.1.1. 实验动物 选用健康3月龄SD大鼠60只，雌雄不限，体重200~250 g，由贵州医科大学动物实验中心提供(合格证号：SCXK(黔)2013-017)。购进大鼠经手持裂隙灯检查双眼角膜透明，虹膜血管清晰，瞳孔对光反射灵敏，晶状体无混浊者纳入实验。动物实验室温度控制在20℃ ± 2℃，通风、干燥、清洁、光照充足，予自动喂食、饮水装置进行喂养。 2.1.2. 药物 以养血行血法组方(白芍、赤芍、茺蔚子、桑葚、泽兰、牛膝、鸡血藤、川芎等)，按现代中药制剂工艺制成双芍护睛散，由贵阳中医学院中药制剂室制备。 2.2. 方法 2.2.1. 动物分组及造模 参照秦川编写人民卫生出版社出版的2008版《医学实验动物学》动物实验标准，将60只大鼠抽取15只为空白对照组，其余45只采用左眼视神经钳夹法建立视神经挤压伤模型，造模后随机分为模型对照组、生理盐水组及中药治疗组，每组15只。造模参照李云琴 [ 4 ] 方法进行造模：将需造模的45只大鼠于造模前3天用0.25%氯霉素眼药水滴眼，每日3次。造模时以3.5%水合氯醛作右下腹腔注射麻醉，并以1%盐酸丙美卡因对大鼠左眼进行表面麻醉。麻醉后，将大鼠固定于动物手术台上，沿左眼颞侧角膜缘将球结膜环形剪开，分离球结膜和巩膜，分离时避开外直肌，然后继续向后分离，打开肌锥后将视神经暴露出来，用钳夹力相等的视神经钳夹器夹于球后视神经2 mm处，30秒后松开钳夹器，用8-0尼龙线缝合球结膜，造模完后以庆大霉素球做结膜下注射，以0.3%妥布霉素眼膏涂于结膜囊内，然后将大鼠保温至苏醒。观察造模眼的瞳孔情况，以瞳孔直接对光反射消失，间接对光反射存在者作为造模成功的实验动物纳入实验。 2.2.2. 给药方法 中药治疗组及生理盐水组造模成功24小时后开始每日给药，剂量参照徐叔云主编的《药理实验方法学》 [ 5 ] 中关于人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值表拟定，治疗组以混悬液(每100 ml含散剂30 g)灌胃，剂量为5 ml/Kg.d，每天2次；生理盐水组以等剂量生理盐水灌胃，每天2次。2周为一个疗程，停药2天后继续第二个疗程，共2个疗程。 2.2.3. 标本制作及观察 空白对照组及模型对照组在造模成功24小时后；中药治疗组以及生理盐水组给药2个疗程后采用完全随机法随机抽取各组中的10只大鼠以10%水合氯醛过量腹腔注射处死，摘取左眼眼球后，沿角膜缘剪开眼球后，去除晶体、玻璃体，保留球后视神经2 mm，取过视盘一约2 cm × 2 cm的全层眼球壁。将实验眼标本立即置于4%多聚甲醛磷酸缓冲液(pH7.4)内4℃固定24h，梯度酒精脱水和二甲本透明后，常规石蜡包埋。将包埋好的眼球标本以平行于视盘矢状且以其为平面的视网膜进行连续切片，厚约5 μm，置于预先用多聚赖氨酸处理的载玻片上，60℃温箱烤片过夜，HE染色后进行光镜观察，光镜观察采用四川大学图象图形研究所的Biomias 2001图象分析系统，视场面积：3.2728 mm 2 。在×200倍LONYPAS HB51型光学显微镜下，通过SONY摄像头将切片视网膜图像采集并输入本图像分析系统。其中每组5个标本观察视网膜神经节细胞及神经纤维层的形态学改变；另外每组5个标本测量视网膜神经纤维层厚度(RNFLT)，每个标本随机选取5个视场，每个视场随机选取5个不同的部位用鼠标分割系统自动测量法测量视网膜神经纤维层厚度，并取平均值。 2.2.4. 统计学分析 对于RNFLT应用SPSS16.0统计软件，采用重复测量资料的方差分析法评价双芍护睛散对实验性外伤性视神经损伤的影响，组间比较采用t检验，p < 0.05为有统计学意义。
system: [SYSTEM]

user: 3. 结果 3.1. 光镜下各组大鼠视网膜神经节细胞及神经纤维层的组织结构 如图1所示：空白对照组视网膜RGC排列整齐，胞浆丰富，染色均匀；神经纤维层结构清晰(图1A)。 图1. 视网膜光镜照片(HE染色 × 200)；A：为空白对照组；B：为模型对照组；C：生理盐水组；D：为中药治疗组 模型对照组视网膜大量RGC肿胀，排列不规则，层次欠清晰；神经纤维层明显水肿增厚(图1B)。生理盐水组视网膜RGC呈空泡样变性、脱落，染色不均匀，数量减少，神经纤维层显著变薄(图1C)。中药治疗组视网膜少量RGC轻度肿胀，层次尚清晰，数量略减少，神经纤维层轻度变薄(图1D)。 3.2. 光镜下各组大鼠视网膜神经纤维层厚度(RNFLT) 如表1所示，经析因设计的方差分析检验结果显示，组间差异明显(F = 0.132， P = 0.00)。大鼠RNFLT模型对照组较空白对照组增厚，组间平均值比较有显著性差异(p < 0.05)；经过4周的治疗，大鼠RNFLT生理盐水组与中药治疗组较空白对照组变薄，平均值比较均有差异，前者有极显著性差异(p < 0.01)，后者有显著性差异(p < 0.01)；生理盐水组变薄更为明显，与中药对照组比较有显著性差异(p < 0.05)。 Table 1 Average RNFLT in each group (， μm 组别 平均RNFLT 空白对照组 0.1562 ± 0.0056 模型对照组 0.1747 ± 0.0046 * 生理盐水组 0.0910 ± 0.0034 ＊ 中药治疗组 0.1247 ± 0.0067 △ ☆ 表1. 各组平均RNFLT ( ，μm) 注：模型对照组与空白对照组比较， * P < 0.05；生理盐水组与空白对照组比较， ＊ P < 0.01；中药治疗组与空白对照组比较， △ P < 0.05；中药治疗组和生理盐水组比较 ☆ P < 0.05。