Projet ANR-07-PCVI-0038 – G2O : Study of the molecular and cellular actions of oxysterols and oxaphosphinanes against glioblastoma
Programme : Physique et chimie du vivant (PCV) 2007
Année de financement : 2007
Coordinateur du projet : norbert BAKALARA (ECOLE NATIONALE SUPERIEURE DE CHIMIE DE MONTPELLIER)
Partenaires : École nationale supérieure de chimie de Montpellier; École nationale supérieure de chimie de Montpellier; Institut national de la santé et de la recherche médicale; Université de Bordeaux
Montant : 480000.0 euros
Date de début : 2007
Durée : 24 mois
Résumé : 1.Contexte scientifique et objectifs : Nous démontrons que l'injection in vivo de 7b-hydroxycholestéryl-3-oléate (forme ester) ou de 7b-hydroxycholestéryl-3b-O(éther)-oléyl (forme ether), sous forme liposomique, dans des tumeurs expérimentales de type C6 inhibe remarquablement leur développement; ce n'est pas le cas pour le 7b-hydroxycholestérol (7b-OHCH). Récemment, le Dr D. RICARD (Département de Neurologie, Hôpital d'Instruction des Armées du Val de Grâce, PARIS) a déjà présenté au Congrès de l'ANOCEF (22 Octobre 2004, PARIS) des résultats cliniques prometteurs pour la forme ester. Depuis, ce composé a obtenu l'autorisation (25 septembre 2005) de l'AFSSAPS pour entreprendre des essais cliniques de phase I et II et l'accord du CCPPRB (COCHIN, PARIS) est en cours d'obtention. Les effets anti-tumoraux des formes ester et éther ont été brevetés par le CNRS (N°PCT/FR91/00608) et l'invention reprise par INTSELCHIMOS (PARIS ; Licence exclusive de brevet N° L05183); la société finance tout le projet clinique (Phase I et II) qui sera conduit sous la responsabilité du Prof. F. RENARD (Directeur du service de Neurologie, Val de Grâce) assisté par le Dr D. RICARD. Nos recherches récentes nous ont conduit à synthétiser de nouvelles molécules, les oxaphosphinanes (OXP), qui sont cytotoxiques in vitro sur des glioblastomes (lignées C6) et non sur des cultures primaires astrocytaires. Une demande de valorisation auprès du CNRS est en cours. Nous proposons d'élucider les mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents aux effets antiprolifératifs des formes ester, et éther, du 7b-OHCH et des OXP. Une analyse approfondie des modulations des voies de signalisation et des modifications architecturales de la membrane plasmique par ces composés contribuera à : (1) mettre au point les protocoles, sur modèle animal, pour tester le potentiel anti-glioblastome des OXP ; (2) optimiser les essais cliniques faits avec les oxystérols ; en particulier, la forme éther. Il n'est pas exclu qu'au cours de nos recherches de nouveaux mécanismes d'action et cibles soient découverts. -  2. Projet de recherche et méthodologie : A. La signalisation cellulaire peut s'initier dans la membrane plasmique et en particulier dans des micro-domaines nommés cavéoles dont la molécule clé est la cavéoline. Cette protéine présente une haute affinité pour le cholestérol et ses esters et les véhicule du réticulum endoplasmique vers la membrane plasmique. Nous émettons l'hypothèse que les formes ester et éther du 7b-OHCH perturbent l'intégrité structurale et fonctionnelle des cavéoles du fait de leur analogie de structure avec celle des cholestéryl - esters. Par une approche biochimique, nous souhaitons analyser l'effet des oxystérols sur : (1) la teneur en cholestérol, en cholestéryl-esters, et le profil protéique de cavéoles purifiées à partir de modèles de glioblastomes in vitro ; (2) sur les variations de voies de signalisation majeures générées à partir de ces micro-domaines comme les voies Akt, MAPK et STAT3. Selon les résultats obtenus, nous développerons des souches isogéniques dont les points de mutation se retrouveront dans les voies de signalisation modulées par les oxystérols. Nous pourrons, ainsi, évaluer avec exactitude l'impact des oxystérols à l'échelle moléculaire. B. Le concept de thérapie ciblée est actuellement bien réel et, de ce fait, une drogue ne peut pas être dite inefficace si elle n'a pas été testée sur un nombre suffisant de modèles in vitro et in vivo. Des tumeurs primaires seront établies à partir de 20 biopsies différentes issues de glioblastomes humains. En effet, les tumeurs cérébrales contiennent une sous-population cellulaire (CD133+) capable de régénérer des tumeurs une fois réimplantées dans des souris. Ces cellules qualifiées de cellules souches cancéreuses contribuent grandement aux chimio- et radio-resistance. Nous testerons sur ce type cellulaire humain l'effet des oxystérols et des OXP déjà connus pour leur effet cytotoxique sur les.