Projet ANR-06-MRAR-0038 – PCSK9 and ADH : PCSK9, un nouvel acteur dans la physiopathologie de l'hypercholestérolémie autosomique dominante
Programme : Programme Pluriannuel de Recherche sur les Maladies Rares (MRAR) (MRAR) 2006
Année de financement : 2006
Coordinateur du projet : INSERM - DÉLÉGATION RÉGIONALE PARIS V (INSERM - Délégation régionale Paris V)
Partenaires : Institut national de la santé et de la recherche médicale; Institut national de la santé et de la recherche médicale; Institut national de la santé et de la recherche médicale; Institut Curie
Montant : 120000.0 euros
Durée : 24 mois
Résumé : L¿hypercholestérolémie familiale, transmise le plus souvent sur le mode autosomique dominant (ADH), est caractérisée par une élévation isolée des taux de cholestérol-LDL induisant des complications cardio-vasculaires graves. Les travaux  de Brown et Goldstein ont révélé le rôle important du gène LDLR et ceux d'Innerarity celle du gène APOB. D¿autres équipes, dont la nôtre, ont identifié des familles ADH non associée à des défauts de ces  gènes. Nous sommes les 1er à avoir formellement démontré l¿implication d¿autres gènes et localisé un 3è gène en 1p32, un 4è en 16q22 et revèlé l'existence d'un 5è. Nous avons identifié le 3è gène : PCSK9 (Proprotein Convertase Subtilysin Kexin type 9) qui code Narc-1. Comme les autres convertases, Narc-1 doit participer au clivage et à l'activation de pro-protéines. Depuis la découverte de son implication dans l'ADH, vers travaux ont montré que Narc-1 régule le métabolisme du récepteur LDL, mais ses cibles directes restent à identifier.*******************Avec l'expertise de l'équipe 2 (Transgénèse) de ce projet, nous construisons des souris transgéniques pour le gène PCSK9 humain porteur d'une mutation que nous avons récemment identifiée dans une famille HCF. En collaboration avec la clinique de la souris à Strasbourg, nous construisons aussi un modèle de souris Knock-in pour une mutation du gène PCSK9. Nous étudierons les défauts biochimiques dus à la mutation de Narc-1 dans ces modèles avec les expertises des 4 équipes de ce projet dans differents domaines (biochimie, biologie cellulaire et moléculaire). Dans le même temps, nous développons aussi des modèles cellulaires :transfections de formes mutées de Narc-1 dans des HepG2 et des hépatocytes humain et murin en culture primaire. Toujours avec l'expertise de chaque équipe, nous étudierons ces modèles cellulaires en nous focalisant sur l'implication de Narc-1 dans la sécrétion des lipoprotéines riches en apo B. De plus, les premiers résultats de l'équipe 3 sur l'étude des lymphoblastes des sujets atteints montrent que les mutations de PCSK9 n'affectent pas seulement l'endocytose du récepteur des LDL mais aussi celle du récepteur de la transferrine. Il semblerai que Narc-1 soit impliquée dans le mécanisme général de l'endocytose. Nous étudions plus en détails les cellules des sujets atteints ainsi que les premiers modèles de cellules HepG2 transfectées que nous venons de développer.*******************L¿objectif principal ce projet est de révéler le rôle que joue l'enzyme Narc-1 dans le métabolisme du cholestérol et la physiopathologie de l¿HCF. Pour cela, nous développons de nouveaux modèles animaux et cellulaires pour étudier cette nouvelle forme d¿HCF. D'autres équipes ont également rapporté des modèles animaux et cellulaires pour cette étude, mais nous avons choisi de construire nos modèles animaux avec une mutation du gène PCSK9 que nous avons récemment publiée, et de focaliser nos études sur l'implication de Narc-1 dans la sécrétion des lipoprotéines riches en apo B, alors que l'ensemble des autres équipes sont focalisées sur l'étude de Narc-1 dans le métabolisme du récepteur des LDL. L¿étude de ces nouveaux modèles pour cette forme rare d¿HCF doit permettre de mieux comprendre le rôle que joue la protéine Narc-1 dans la physiopathologie de la maladie. Ces travaux doivent permettre d¿ouvrir la voie pour le développement de nouveaux outils diagnostiques et thérapeutiques.