Projet ANR-07-PHYS-0008 – CLHTA : Anomalie du transport de chlore par le rein: une cause d'HTA sensible au sel
Programme : Physiopathologie des maladies humaines (PHYSIO) 2007
Année de financement : 2007
Coordinateur du projet : INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE - DELEGATION PARIS VI (INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE - DELEGATION PARIS VI)
Partenaires : Centre national de la recherche scientifique; Institut national de la santé et de la recherche médicale
Montant : 400000.0 euros
Durée : 36 mois
Résumé : L'homeostasie rénale du sodium est le principal déterminant de la régulation chronique de la pression artérielle. Néanmoins, le sodium doit être sous forme de NaCl pour exercer son effet presseur et une anomalie primitive de la réabsorption du Cl dans le canal collecteur pourrait entrainer une HTA. Dans cette partie du néphron les mécanismes de transport de Cl sont mal connus, mais semblent impliquer la Pendrine, un échangeur d'anion apical, et le canal Cl basolatéral CLC-KB. Nous faisons l'hypothèse que le transport de Cl pourrait être un facteur limitant de la réabsorption de Na au niveau du canal collecteur et à ce titre pourrait être un déterminant important de la régulation de la pression artérielle.
Nos objectifs sont donc : 1) d'évaluer l'importance de ces transporteurs dans la régulation de la balance sodée et de la pression artérielle ; 2) de déterminer les mécanismes de leur régulation 
//Notre programme de recherche combinera des approches de biologie moléculaire, transgenèse, physiologie, biochimie, et protéomique afin de déterminer le rôle de la réabsorption de Cl par les cellules intercalaires dans la physiopathologie de l'HTA.
La première partie du programme menée par le groupe de D. Eladari et R. Chambrey aura pour objectif d'évaluer l'impact physiologique in vivo d'un excès de réabsorption de Cl grâce à l'utilisation d'animaux transgéniques surexprimant la pendrine ou exprimant un canal CLC-KB portant une mutation activatrice. Cette approche in vivo sera complétée par une analyse des propriétés de transport du néphron distal de ces animaux par des approches ex vivo (microperfusion de tubules isolés et patch-clamp)
La seconde partie du programme menée par le groupe de J. Teulon, aura pour objectifs de caractériser les mécanismes de régulation de la pendrine et de CL-CKB. Cette partie incluera des expériences de patch-clamp sur tissu natif et d'expression hétérologue dans l'ovocyte de Xénope des protéines normales. Cette approche sera complétée par une étude structure-fonction des deux protéines (étude des effets de mutations ponctuelles sur les activités de transport) 
La troisième partie menée par les deux groupes participant en collaboration aura pour objectif l'identification et la caractérisation de protéines partenaires de ces transporteurs. Pour cela nous réaliserons un criblage par la technique du double hybride et par une approche protéomique d'une préparation hautement purifiée de tubules collecteurs isolés. 
//Nous pensons démontrer que: 1) les cellules intercalaires sont la voie principale de la réabsorption distale du Cl et que cette réabsorption nécessite la pendrine et CLC-KB ; 2) Qu'un transport excessif de Cl dans cette partie du néphron entraine une anomalie de l'homeostasie du NaCl et une susceptibilité à l'HTA. 3) nous espérons également décrypter les mécanismes de régulation de ce processus.
Si notre hypothèse s'avère correcte, il est prévu d'étendre ces études chez l'animal à l'homme par des études de génétique humaine utilisant la cohorte de patient hypertendus déjà disponible à l'HEGP. Nous espérons à terme pouvoir identifier de nouvelles cibles thérapeutiques contre l'HTA