Projet ANR-06-PHYS-0001 – ANG2-AT1R-MUT : Conséquences cardiovasculaires, endocrines et rénales de l'expression d'un mutant gain-de-fonction du récepteur AT1A de l'angiotensine II dans deux modèles de transgénèse substitutive et additive chez la souris
Programme : Physiopathologie des maladies humaines (Physio) (PHYSIO) 2006
Année de financement : 2006
Coordinateur du projet : INSERM - DÉLÉGATION RÉGIONALE PARIS V (INSERM - Délégation régionale Paris V)
Partenaires : Institut national de la santé et de la recherche médicale; Institut national de la santé et de la recherche médicale; Institut national de la santé et de la recherche médicale
Montant : 360000.0 euros
Durée : 36 mois
Résumé : RESUME PROJET – Contexte scientifique et objectifs:"Le système rénine angiotensine (SRA) joue un rôle majeur dans le développement et les conséquences de l'hypertension, comme le montrent de nombreuses situations pathologiques humaines et les modèles animaux inactivant ou surexprimant les gènes du SRA.
Il n'existe cependant pas d'altération qualitative (mutation) de l'un de ces gènes, responsables de formes familiales monogéniques d'HTA.
Le récepteur AT1 de l'angiotensine II, récepteur membranaire couplé à une protéine G (RCGP), est l'effecteur tissulaire essentiel du SRA. Des mutations ponctuelles de certains RCPG, qui activent de façon constitutive les voies de signalisation indépendamment du ligand, entraînent des maladies génétiques.
Nous avons donc créer deux modèles transgéniques de souris avec un tel mutant gain-de-fonction du récepteur AT1A afin:
- de prouver que de telles mutations entraînent une hypertension et ses conséquences
- d'étudier les conséquences de l'activation isolée de ce récepteur au niveau des tissus cibles.RESUME PROJET – Description:"Après avoir caractérisé in vitro un mutant du récepteur AT1A constitutivement actif (mutation N111S) et non désensibilisé (délétion C-terminale, delta329), nous avons obtenu deux modèles de souris transgéniques par knock-in (recombinaison homologue) et transgénèse additive visant une expression surrénalienne. Dans ce projet, ces deux modèles viables de souris seront caractérisés en
1. Identifiant l'expression et les caractéristiques pharmacologiques et de signalisation du récepteur mutant dans les tissus cibles, mais aussi l'expression des autres récepteurs de l'angiotensine II.
2. Identifiant l'existence d'une hypertension et ses caractéristiques phénotypiques à l'aide de traitements pharmacologiques et de modifications du régime sodé.
3. Etudiant les conséquences de cette expression sur les autres paramètres du SRA et en particulier l'apparition d'un hyperaldostéronisme primaire dans le modèle de transgenèse additive.
4. Investiguant les conséquences cardiovasculaires de l'expression de ce mutant. Une hypertrophie et une fibrose cardiaque et vasculaire seront recherchées et des marqueurs de ces deux phénomènes seront quantifiés par RT-PCR quantitative. Les fonctions cardiaques seront étudiées. Enfin, le rôle de l'activation du récepteur AT1 dans la progression de l'athérosclérose sera analysé après croisement des animaux knock-in avec des souris ApoE-/-.
5. Etudiant les fonctions rénales en situation basale et après traitements pharmacologiques ou modification des apports en eau et en sodium.
6. Enfin en recherchant l'existence suspectée de modifications de l'érythropoïèse et de l'état de sensibilité à l'insuline chez ces animaux.
RESUME PROJET – Resultats attendus:"Dans le modèle knock-in, le récepteur AT1A mutant s'exprime à la place du récepteur sauvage dans les tissus cibles de l'angiotensine II (rein, vaisseaux, coeur etc..). Cette expression doit logiquement entraîner une hypertension à rénine basse, hypersensible au sel et à l'angiotensine II,  proche d'une forme fréquente d'HTA chez l'homme. Les conséquences attendues de cette altération qualitative du récepteur sur les tissus cardiovasculaires sont dominées par la fibrose et éventuellement l'hypertrophie, ainsi qu'une accélération du développement de la plaque d'athérosclérose. Des troubles des fonctions cardiaques diastolique et/ou systolique sont possibles. Au niveau du rein, une concentration exagérée des urines et des troubles de la filtration glomérulaire sont attendus.
Le modèle de transgénèse additive à expression cortico-surrénalienne devrait créer le premier modèle génétique d'hyperaldostéronisme primaire, une autre cause fréquente d'hypertension.