Projet ANR-07-PHYS-0028 – COELIAC : Développement de modèles murins pour analyser les interactions entre immunité innée et adaptative dans la pathogénie de la maladie coeliaque
Programme : Physiopathologie des maladies humaines (PHYSIO) 2007
Année de financement : 2007
Coordinateur du projet : INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE - DELEGATION DE PARIS V (INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE - DELEGATION DE PARIS V)
Partenaires : Institut national de la santé et de la recherche médicale
Montant : 420000.0 euros
Date de début : 2008
Durée : 24 mois
Résumé : La maladie coeliaque (MC) est une entéropathie induite par le blé (gluten). Les premiers travaux ont conclu au rôle pathogène prépondérant de l¿immunité adaptative orchestrée par les molécules HLA-DQ2/8, principal facteur génétique et capables de présenter les peptides du gluten aux lymphocytes T intestinaux CD4+. Mais la majorité des sujets HLA-DQ2/8 ne développent pas de MC et aucune entéropathie n¿est induite chez les souris HLA-DQ8. D¿autres études ex vivo, dont les nôtres, suggèrent le rôle complémentaire de l¿immunité innée orchestrée par l¿IL-15. L¿IL-15 induit la survie et l¿activation anormale des lymphocytes de l¿épithélium (LIE), une caractéristique de la MC, et inhibe la voie Smad3 du TGFbeta, clé dans le rétrocontrôle de l¿inflammation intestinale. Notre objectif est de mettre au point des modèles murins pour confirmer que HLA-DQ2/8 et IL-15 suffisent à induire une entéropathie et valider l¿hypothèse que l¿IL-15 est une cible thérapeutique dans les formes graves de MC. 
//Nous testerons l¿effet combiné de la surexpression aigue ou chronique de l¿IL-15 et de l¿activation des lymphocytes T (LT) CD4+ dans l¿induction d¿une entéropathie.
Modèle 1: L¿utilisation de souris IL-15-/- ou surexprimant l¿IL-15 dans l¿intestin (IL15 Tg), et d¿un modèle de stimulation antigénique aigue par T. gondii, suggèrent que: 1) une stimulation antigénique est nécessaire pour révéler l¿effet pathogène de l¿IL-15; 2) la surexpression intestinale de l¿IL-15 convertit une réponse protectrice en iléite mortelle; 3) Les LIE activés par l¿IL-15 induisent une iléite chez les souris IL-15-/- infectées by T. gondii. Transfert de LIE et études fonctionnelles in vitro seront combinées pour confirmer que comme suggéré dans la MC: 1) l¿IL-15 intestinal induit une cytotoxicité innée des LIE contre les entérocytes 2) que celle-ci induit une entéropathie sévère.
Modèle 2: La collaboration entre IL-15 et réponse T CD4+ dans l¿induction d¿une entéropathie chronique sera d¿abord testée contre l¿antigène alimentaire ovalbumine (OVA). Les souris IL-15 Tg (vs B6) seront immunisées puis nourries avec de l¿OVA : a) directement, b) après transfert adoptif de LT CD4+ transgéniques anti-OVA provenant de souris OTII ; c) après irradiation et reconstitution avec de la moëlle de souris OTII, d) après croisement avec des souris OTII. L¿induction d¿une entéropathie sévère chez les souris IL15Tg par activation des LT CD4 conforterait les hypothèses émises dans la MC. Des tests fonctionnels (prolifération, production de cytokines) seront utilisés pour démontrer que les LT CD4+ T deviennent pro-inflammatoires dans un environnement riche en IL-15. 
Modèle 3: L¿impact de l¿IL-15 sera étudié dans un modèle plus pertinent mais plus difficile : les souris transgéniques pour HLA-DQ2 et un récepteur T spécifique du gluten. L¿induction d¿une entéropathie par l¿ingestion chronique de gluten sera étudiée quand les étapes successives pour les croiser avec les souris IL15Tg auront été réussies.//Ce projet est ambitieux. Mais son succès permettrait d¿affirmer que IL-15 et les LT spécifiques du gluten suffisent pour orchestrer l¿entéropathie de la MC. L¿enjeu de ce travail est non seulement de mieux comprendre la pathogénie de la MC mais aussi de valider l¿IL-15 comme cible thérapeutique dans les situations rares mais sévères où les patients deviennent résistants au régime sans gluten. En effet, l¿équipe 1 est associée avec l¿équipe clinique dirigée par le Pr C. Cellier (Hôpital Georges Pompidou) qui s¿est spécialisé dans la prise en charge de ces patients. Ce projet pourrait aussi permettre de disposer d¿un modèle pour tester de nouveaux traitements dans la MC non compliquée. Sous la pression des patients, de nombreuses stratégies sont envisagées pour remplacer le régime; toutes potentiellement plus risquées et moins efficaces. Un modèle préclinique serait très utile pour une première évaluation de leur faisabilité.