Projet ANR-06-EMPB-0025 – PlasmoSlide : Supports pour l’amplification du signal de fluorescence en bio-imagerie.
Programme : Emergence et maturation de projets de biotechnologie à fort potentiel de valorisation (EMPB) (EMPB) 2006
Année de financement : 2006
Coordinateur du projet : UNIVERSITE DE PARIS VII [DENIS DIDEROT] (UNIVERSITE DE PARIS VII [DENIS DIDEROT])
Partenaires : Centre national de la recherche scientifique; Université Paris Diderot; Université Paris Diderot
Montant : 149890.0 euros
Date de début : 2006
Durée : 18 mois
Résumé : Nous avons mis au point un nouveau type de lame de microscope, basé sur des propriétés plasmoniques, qui permet d’amplifier considérablement le signal de fluorescence. Les applications dans le domaine en pleine expansion de la biophotonique sont importantes en particulier dans les secteurs des biocapteurs, de l’imagerie biologique en recherche fondamentale et appliquée (cosmétique, pharmacologie,…) et du diagnostic clinique in vitro. Ces supports aux performances inégalées permettent d’amplifier le signal de fluorescence de pratiquement deux ordres de grandeur en phase sèche et d’un ordre de grandeur sur des étalements cellulaires ou des coupes tissulaires. L’accroissement du signal de fluorescence est le résultat de la conjugaison de plusieurs phénomènes : redirection de l’émission de lumière vers le détecteur, amplification du champ excitateur, augmentation du rendement de fluorescence des chromophores (couplage par les modes plasmons de la surface). Ces supports sont constitués de lames de microscope standards, recouvertes d’une couche métallique continue et possédant une rugosité nanométrique contrôlée. Cette couche peut être avantageusement isolée du matériel biologique par une couche transparente biocompatible. La fabrication de ces supports ne nécessite pas l’utilisation de techniques spécifiques, le prix de revient de ces lames reste faible. Ces lames présentent l’avantage considérable d’être compatibles avec les instruments d’imagerie et de détection standards (microscopes ou scanners). Elles s’utilisent exactement comme les traditionnelles lames de microscope. Leur utilisation ne nécessite donc aucun investissement nouveau en équipement. L’accroissement du signal de fluorescence est d’autant plus grand que l’angle de collection de la lumière est faible. Ce résultat est particulièrement intéressant car il permet de collecter un signal de fluorescence suffisant avec un objectif à air. Il est ainsi possible d’obtenir une diagnostic médical. De plus, l’amplification du signal s’accompagne d’un accroissement de la photostabilité des fluorophores permettant d’accroître les temps d’observation avant photodestruction. L’amplification du signal est indépendante du marqueur fluorescent (« quantum dots », colorants organiques, protéines fluorescentes,…) et est obtenue sur un large spectre ce qui permet un marquage multicouleur. Un prototype recherche a été réalisé et la preuve du concept obtenue pour les étalements cellulaires ainsi que pour les biocapteurs (en partenariat avec la société Genescore). Un brevet international a été déposé. Il reste maintenant une phase de développement pour la réalisation d’un prototype pré-industriel, soit pour accorder une licence à un partenaire industriel, soit pour créer une nouvelle entreprise et rechercher des investisseurs. Cette phase de développement et de valorisation est précisément l’objet de ce projet.