Projet ANR-07-PHYS-0026 – Skin TSLP : Role de la cytokine TSLP (Thymic Stromal Lymphopoietin) dans l'inflammation cutanée chez l'homme.
Programme : Physiopathologie des maladies humaines (PHYSIO) 2007
Année de financement : 2007
Coordinateur du projet : INSTITUT CURIE - SECTION DE RECHERCHE (INSTITUT CURIE - SECTION DE RECHERCHE)
Partenaires : Assistance Publique Hôpitaux de Paris; Institut Curie; Institut Curie
Montant : 550000.0 euros
Durée : 48 mois
Résumé : La TSLP est une cytokine apparentée à l'IL-7 et produite essentiellement par les cellules stromales et épithéliales. Chez la souris, elle favorise la lymphopoièse B adulte et foetale. Chez l'homme, nous avons été les premiers à montrer qu'elle activait fortement les cellules dendritiques myéloïdes et induisait par ce biais une réponse Th2 inflammatoire. Nous avons également montré que la TSLP était produite en grande quantité par les kératinocytes de dermatite atopique (DA). Des études chez la souris ont ensuite montré que l'expression transgénique de TSLP pouvait induire un phénotype d'asthme ou de DA en fonction du site d'expression. Dans ce projet, nous souhaitons effectuer une caractérisation très précise des voies de production de TSLP par les kératinocytes ainsi que des cellules cibles de la TSLP. En parallèle, il nous semble essentiel d'évaluer la fonction de la TSLP au sein d'un environnement inflammatoire complexe tel que la DA.//Nous nous proposons d'étudier le role de la TSLP dans l'inflammation cutanée chez l'homme de façon globale, avec une partie dédiée à l'étude de la TSLP dans des systèmes spécifiques in vitro, afin d'en caractériser notamment les voies de production par les kératinocytes, et une partie visant à étudier le role de la TSLP dans un environnement inflammatoire complexe. Nous allons utiliser l'exemple de la dermatite atopique (DA) afin de préciser le role de la TSLP au sein d'un réseau immunitaire complexe. La reconstitution de ce réseau passera par l'utilisation de systèmes de co-culture ou l'utilisation de surnageants de culture de cellules activées afin de mimer un dialogue intercellulaire. Le role spécifique de différents facteurs (dont la TSLP), sera apprécier par l'utilisation d'anticorps bloquants. Dans une dernière partie, nous allons stimuler des cellules dendritiques avec des extraits protéiques de DA et comparer le profile transcriptionnel induit (analyse sur puces Affymetrix) à celui induit par des stimuli isolés (par exemple TSLP seule). Cette étude sera réalisée en collaboration avec le département de bioinformatique de l'institut Curie (Dr E. Barillot). Les prélèvements cliniques nécessaires à chaque étape seront obtenus par une collaboration avec le service de dermatologie de l'hôpital Tenon (Pr S. Aractingi) et de l'université de Düsseldorf (Pr B. Homey). Les principaux réactifs nécessaires à l'étude de la TSLP sont disponibles dans notre laboratoire. La majorité des expériences in vitro utiliseront des cellules ou tissus humains primaires, afin d'assurer la meilleure relevance physiopathologique. Tous ces prélèvements seront obtenus dans la cadre de conventions réglementées ou de protocoles approuvées par les divers comités (CPP). //Notre étude devrait aboutir à des résultats essentiels pour la compréhension du rôle de la TSLP en physiologie et pathologie cutanée, notamment au niveau des voies moléculaires conduisant à sa synthèse par les kératinocytes. Les résultats devraient aboutir à desmodèles originaux concernant les cascades immunitaires impliquées dans la DA aiguë ou chronique et le rôle de la TSLP au sein de ces réseaux. Enfin, nos méthodes globales d'étude du role de la TSLP en milieu inflammatoire complexe devraient éclairé d'un oeil nouveau la fonction et le caractère pathogène de cette cytokine. Ces méthodes pourront être appliquées à d'autres cytokines ou à d'autres types d'inflammation. Elles pourront également être utilisées pour identifier des cibles thérapeutiques se situant à "noeuds" stratégiques au sein de réseaux cellulaire et/ou moléculaires.