Projet ANR-07-JCJC-0121 – FeSGrx : The role of organellar CGFS containing glutaredoxins in iron-sulfur clusters assembly and biogenesis in plants
Programme : Jeunes chercheuses & jeunes chercheurs (JCJC) 2007
Année de financement : 2007
Coordinateur du projet : (UNIVERSITE DE NANCY I [HENRY POINCARE])
Partenaires : Université de Lorraine
Montant : 150000.0 euros
Date de début : 2007
Durée : 36 mois
Résumé : Les protéines à centre fer-soufre sont essentielles pour de nombreux processus essentiels à la vie, tels que la photosynthèse, la respiration ou l'assimilation de l'azote et du soufre. Néanmoins, le fonctionnement des différents systèmes d'assemblage de ces protéines à centre fer-soufre est à l'heure actuelle peu détaillé chez les plantes bien que des protéines, homologues à celles trouvées chez Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae ou chez l'homme dans les machineries d'assemblage, aient été identifiées et quelquefois caractérisées. Ainsi, il a été démontré chez S. cerevisiae, qu'une glutarédoxine, une petite protéine généralement impliquée dans les réactions de réduction de ponts disulfures, était impliquée dans ce processus mais son rôle n'est pas encore clairement établi. Ce résultat ainsi que l'identification de glutarédoxines liant un centre fer soufre entre deux sous-unités identiques chez deux organismes différents (le peuplier et l'homme) suggère que le rôle des glutarédoxines dans la biogenèse des centres fer-soufre pourrait être conservé entre les règnes. Chez les plantes supérieures, près de 30 isoformes de glutarédoxines peuvent être classées en trois groupes différents essentiellement selon la séquence de leur site actif. Quatre glutarédoxines, possédant un site actif de la forme CGFS strictement conservé, appartiennent à la même classe que la protéine identifiée chez S. cerevisiae. Seules quelques études biochimiques et structurales ont été réalisées sur cette classe de glutarédoxine chez E. coli and S. cerevisiae mais toujours sur des protéines qui ne présentaient pas de centre fer soufre. Notre objectif est donc de développer un nouveau projet pour étudier le rôle des glutarédoxines possédant un site actif CGFS dans l'assemblage des centres fer-soufre chez les organismes photosynthétiques. Puisque deux machineries différentes existent dans les mitochondries et les chloroplastes, il s'agira de distinguer quelles isoformes sont impliquées et dans quels compartiments. Dans cette optique, une approche multidisciplinaire de génomique fonctionnelle sera développée en utilisant deux plantes modèles, le peuplier et Arabidopsis thaliana et quatre axes de travail. Le premier consistera à caractériser l'expression des gènes et des protéines et la localisation subcellulaire dans la plante. A l'aide d'une deuxième approche, ces glutarédoxines seront également caractérisées d'un point de vue biochimique et structural grâce à la production de protéines recombinantes. Dans un troisième volet, des protéines interagissant avec ces glutarédoxines seront recherchées par des approches protéomiques. Enfin, des approches de génétique réverse devraient permettre de comprendre la fonction jouée par ces glutarédoxines dans l'assemblage des centre fer-soufre chez les plantes et peut être plus généralement chez la plupart des organismes.                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               ...