Projet ANR-11-JSV3-0005 – Gene_Transfer_Tolerance : Bases moléculaires de la tolérance immunitaire après transfert de gène
Programme : JCJC - SVSE 3 - Microbiologie, immunologie, infectiologie (JCJC SVSE 3) 2011
Année de financement : 2011
Coordinateur du projet : Monsieur David A. GROSS (INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE - DELEGATION DE PARIS V)
Partenaires : Institut Necker Enfants Malades - Centre de Médecine Moléculaire
Montant : 280000.0 euros
Durée : 36 mois
Résumé : Résumé
L’acquisition d’une tolérance immunitaire vis-à-vis des protéines produites après transfert de gène est un enjeu majeur pour le succès de nouvelles modalités thérapeutiques dans le domaine de la thérapie génique des maladies rares monogéniques. Cela revêt une importance particulièrement élevée pour les transgènes thérapeutiques délivrés dans des tissus non lymphoïdes. Une connaissance approfondie des voies moléculaires et cellulaires qui initient les réponses immunitaires cytotoxiques (réponses des cellules T CD8+) fait actuellement défaut. Je souhaite ici à disséquer les composantes moléculaires qui contrôlent la présentation d’un transgène modèle exprimé dans le tissu musculaire, ainsi que les mécanismes permettant le  recrutement de lymphocytes T régulateurs et l’induction d’une tolérance immunitaire durable. 
Grâce à l’utilisation d’antigènes définis délivrés avec des vecteurs viraux provenant « d’adeno associated virus » (AAV) employés en clinique, je serais à même d’évaluer la contribution des voies de présentation du CMH de classe I conduisant à la tolérisation des réponses lymphocytaires T CD8. Pour ce faire, nous utiliserons des vecteurs AAV modifiés où a été inséré dans la partie 3’ du transgène des cibles du microRNA142.3p (miRNA exprimé fortement dans le système hématopoïétique) pour restreindre l’expression du transgène au tissu musculaire, en évitant l’expression directe dans les cellules présentatrices d’antigènes. Ce système me permettra de faire pour la première fois la différence entre les contributions des voies directe et indirecte de présentation du transgène in vivo. En utilisant 1) des souris génétiquement invalidés pour les différentes composantes des voies directes et indirectes de présentation du CMH de classe I, 2) l'ablation où l’injection de lymphocytes T régulateurs, et 3) de nouvelles approches d’immunomodulation transposables en clinique basées sur l’utilisation d’anticorps anti-CD3, nous définirons les règles qui régissent l'induction d'une tolérance vis-à-vis de transgènes étrangers exprimés dans des tissus périphériques. 
Les connaissances fondamentales acquises grâce à ce programme seront importantes pour élaborer des modalités d'induction de tolérance immunitaire applicables en thérapie génique mais également dans des maladies auto-immunes.
Publications de l’équipe
Chappert P, et al. Antigen-specific Tregs impair CD8 T cell priming by blocking early T cell expansion. Eur J Immunol. (2010) 40:339-50
Saveanu L, et al. IRAP identifies an endosomal compartment required for MHC class I cross-presentation. Science. (2009). 325:213-7
Chappert P, et al. Antigen-driven interactions with dendritic cells and expansion of foxp3+ regulatory T cells occur in the absence of inflammatory signals. J Immunol. (2008) 180:327-34
Lorain S, Gross DA, et al. Transient immunomodulation allows repeated injections of AAV1 and correction of muscular dystrophy in multiple muscles. Mol Ther. (2008) 16:541-7
Firat E, et al. The role of endoplasmic reticulum-associated aminopeptidase 1 in immunity to infection and in cross-presentation.  J Immunol. (2007) 178:2241
Gross DA, et al. Simple conditioning with mono-specific CD4+CD25+ regulatory T cells for bone marrow engraftment and tolerance to multiple gene products.  Blood. (2006) 108:1841-8
Saveanu L, et al. Concerted peptide trimming by human ERAP1 and ERAP2 aminopeptidase complexes in the endoplasmic reticulum.  Nat Immunol. (2005) 6:689
Saveanu L, et al.  Dendritic cells: open for presentation business Nat Immunol. (2005) 6:7 Review
Gross DA, et al. High vaccination efficiency of low-affinity epitopes in antitumor immunotherapy. J Clin Invest. (2004) 113:425-33
Gross DA, et al. CD4+CD25+ regulatory T cells inhibit immune-mediated transgene rejection. Blood. (2003) 102:4326-8